KR870002161B1 - 비루스 왁진의 제조방법 - Google Patents

비루스 왁진의 제조방법 Download PDF

Info

Publication number
KR870002161B1
KR870002161B1 KR8200136A KR820000136A KR870002161B1 KR 870002161 B1 KR870002161 B1 KR 870002161B1 KR 8200136 A KR8200136 A KR 8200136A KR 820000136 A KR820000136 A KR 820000136A KR 870002161 B1 KR870002161 B1 KR 870002161B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
virus
wax
immunoglobulin
solution
saccharide
Prior art date
Application number
KR8200136A
Other languages
English (en)
Other versions
KR830008686A (ko
Inventor
마사가즈 미하시
순사꾸 고야마
Original Assignee
하야시바라 겡
가부시기 가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겡뀨우죠
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 하야시바라 겡, 가부시기 가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겡뀨우죠 filed Critical 하야시바라 겡
Publication of KR830008686A publication Critical patent/KR830008686A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR870002161B1 publication Critical patent/KR870002161B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55516—Proteins; Peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6087—Polysaccharides; Lipopolysaccharides [LPS]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18111—Avulavirus, e.g. Newcastle disease virus
    • C12N2760/18134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18811—Sendai virus
    • C12N2760/18834—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24111—Flavivirus, e.g. yellow fever virus, dengue, JEV
    • C12N2770/24134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/805—Drug, bio-affecting and body treating compositions involving IgE or IgD
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/806—Drug, bio-affecting and body treating compositions involving IgM
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/806—Antigenic peptides or proteins
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/82—Proteins from microorganisms
    • Y10S530/825—Bacteria
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/863—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof involving IgM

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

내용 없음.

Description

비루스 왁진의 제조방법
본 발명의 비루스와 당류를 공유 결합시켜서 생성되는 비루스-당류 결합물을 채취하는 것을 특징으로 하는 비루스왁진의 제조방법에 관한 것이다.
일반적으로, 비루스왁진(이하 단순히 왁진이라 약칭한다)은 비루스를 포르말린, β-프로피오노락톤등에 의해 비루스가 갖고 있는 면역원성(免疫原性)을 저하시키는 일없이 불활성화 및 해독시키거나 또는 약독주를 분리한 것으로서, 비루스성 질병의 예방, 치료 및 진단등에 이용되어 왔다.
그러나 종래의 왁진은 일반적으로 감염방어농을 나타내는 면역글로불린 G, 면역글로불린 M 등의 항체산생농이 비루스의 경우보다도 저하되어 있을뿐만 아니라, 알레르기-질환이나 아나필락시 쇼-크(Anaphylactic-shock)를 야기시키는 면역글로불린E 항체 산생능도 가지고 있다는 결점이 있었다.
본 발명자들은 비루스 본래의 감염방어능을 나타내는 면역글로불린 G, 면역글로불린M 등의 항체산생량을 저하시킴이 없이 알레르기 질환이나 아나필락시 쇼-크를 야기시키는 면역글로불린E 항체산생량을 현저히 감소시킨 왁진을 제조함을 목적으로 예의 연구를 진행하였다.
그 결과 비루스와 당류를 공유 결합시켜서 생성하는 비루스-당류 결합물이 본 목적을 만족시킴을 발견하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명에서 사용가능한 비루스로는 사람 또는 동물에 질병을 일으키며 또한 면역항체유도능을 갖고 있는 비루스라면 어느것이나 사용될 수 있으며, 예를들면 종두비루스(Vaccinia virus), 회백염 비루스(Polio virus), 인푸렌자비루스, 일본뇌염비루스, 황열병비루스, 마진(麻疹)비루스, 풍진비루스, 유행성 이하선염(耳下腺炎)비루스, B형 간염비루스, 아데노비루스, EB(Epstein-Barr), 비루스, 디스템퍼(Distemper)비루스, 광견병비루스, 센다이비루스, 뉴캣슬비루스 등의 비루스가 전부 본 발명에서 사용될 수 있다. 이들의 비루스는 원상태 그대로, 또는 필요에 따라서는 예컨대 산, 알카리, 가열, 자외선조사, 유기용매 세척 등으로 처리한 후에 결합반응에 사용된다.
본 발명에서 사용 가능한 당류로는 예컨대 전분, 아밀로오스, 덱스트란, 폴리슈클로오스(상품명Ficoll), 풀루란, 엘시난, 커드란, 아라비아검, 트라가칸트검, 구아검, 트산린검, 가라기난, 펙틴, 셀룰로오스, 글루코만난, 키토산 등의 각종 다수당류와 이들 다당류의 유도체와 부분가수분해물 등을 자유로히 이요할수 있으며, 이들물질의 평균분자량은 통상 1,000-10,000,000, 특히 10,000-1,000,000의 범위의 것이 바람직하다.
이중에서도 특히 풀루란, 엘시난 또는 이들의 부분가수분해물은 비루스와 공유 결합시켜줌으로써 비루스를 불활성화, 무독화하고, 또 비루스 본래의 면역글로불린G, 면역글로불린M 등의 항체산생량을 현저히 증가시키며, 역으로 면역글로불린E 항체산생을 실질적으로 거의 없앨 수 있다는 점에서 특히 우수한 당류이다.
본 발명에서 사용되는 공유결합방법은 비루스와 당류가 공유 결합할 수 있는 각종 방법을 사용할 수 있으며, 예컨대 디아조결합법, 펩프티드법, 알킬화법, 가교법, S-S결합법 등이 있다.
디아조결합법으로서는 예를들어 p-아미노벤질기, p-아미노벤조일기, m-아미노벤질기, m-아미노벤조일기, m-아미노아니솔기, m-아미노벤질옥시메틸기, 3-(p-아미노펜옥시)-2-히드록시프로피오닐기, 또는 3-(p-아미노-m-메틸아닐리노)-5-크로로트리아지닐기 등의 방향족 아미노기를 공지의 방법에 따라 도입시켜 수득된 활성화 당류와 비루스를 반응시키는 방법을 들 수 있다.
펩프리티드법으로서는 예컨대 카르복실 당류로부터 수득된 산아지드, 산클로라이드, 카르보디이미드, 이소시아네이트유도체 등의 카르보네이트유도체 ; 또는 브롬시안활성화 당류등 이미노에스테르유도체 ; 를 비루스와 반응시키는 방법을 들 수 있다.
알킬화법으로서는, 예컨대 클로로아세틸기, 브로모아세틸기, 요오드아세틸기, 클로로트리아진일기 등의 할로겐화알킬기를 함유하고 있는 당류유도체와 비루스를 반응시키는 방법을 들 수 있다.
가교법으로서는, 비루스와 당류 공존하에서 예컨대 글루타르알데히드, 글리옥살, 숙신디알데히드, 헥사메틸렌 디이소시아네이트, 톨루엔2, 4-디이소시아네이트, 비스아조벤지딘, N-N'-에틸렌-비스-말레이미드등의 가교제와 반응시키는 방법을 들수 있다. 반응시의 비루스와 당류의 중량비는 통상은 1 : 1,000-1,000 : 1, 바람직하게는 1 : 100-100 : 1 범위에서 선정된다. 이때 비루스와 당류는 1종류로 한정되지 않으며 2종류 이상을 동시에 사용할 수가 있다. 즉, 1종류의 비루스에 2종류 이상의 당류를 결합시켜도 좋으며, 또 1종류의 당류에 2종류 이상의 비루스를 결합시켜 혼합왁진을 제조해도 상관없다.
반응조건은 생성되는 비루스-당류 결합물이 비루스를 불활성화, 무독화시킬 수 있으며 또한 비루스 본래의 감염 방어능을 나타내는 면역글로불린G 및 면역글로불린M 항체 산생능을 실질적으로 저하시키는 일없이 알레르기-질환이나 또는 아나필락시 쇼-크를 야기시키는 면역글로불린E 항체 산생능을 현저하게 감소시킬 수 있는 조건이면 충분하며, 통상은 온도 약 0-100℃, pH 약 3-12에서 약 0.1-50 반응시간 범위가 선택된다.
이같이 해서 생성된 비루스-당류 결합물을, 통상 예컨대 여과, 세척, 원심분리, 염석, 투석, 흡탈착, 겔여과, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 전기영동 등의 방법으로 분리 정제한 후, 농축하여 액상 또는 페이스트상으로 채취하거나 바로 건조시켜서 분말상으로 채취해서 왁진제품을 수득한다.
본 왁진은 현상태 그대로, 또는 필요에 따라서는 예컨대 방부제, 보조제 등을 첨가해서 동물 또는 사람의 질병의 예방제, 치료제, 진단제, 제감작제(除感作劑), 인타페론유도제 등으로 유리하게 이용될 수 있다.
또 종래의 포르말린에 의해 제조된 왁진은 통상 20-90일이라는 장기간의 무독화 기간을 필요로 함에 불구하고 독성 복귀의 염려가 있음에 반해서, 본 발명 왁진의 경우, 무독화에 요하는 기간이 통상 1-2일이내로 짧고, 또 독성복귀의 염려없이 장기간 안정하다. 이에따라 감염증의 돌발적 발생에 대한 대처도 지극히 용이하게 행할 수가 있다.
또한 본 발명에 있어서는 왁진에 혼입되기 쉬운 배지 등으로 부터의 불순단백질 등에 의한 치명적 알레르기-질환이나 아나필락시 쇼-크를 방지할 수 있기 때문에 종래와는 달리 반드시 고순도의 비루스를 필요로 하지 않는다. 따라서 고도의 정제수단을 거칠 필요가 없고, 조비루스를 직접 불활성화, 무독화시킬수가 있기 때문에 왁진을 저렴한 가격으로 또 대량 공급한다는 것이 극히 용이하게 되었다. 그리고 조비루스로 부터 제조한 왁진은 고순도 비루스로 부터 제조한 왁진과 동등 또는 그 이상으로 우수한 면역능을 갖고 있음을 확인하였다.
본 발명의 2 내지 3개의 실시태양을 다음에 기술하였다.
[실시예 1] 일본뇌염 비루스 왁진
(1) 일본뇌염비루스의 제조
4주령의 마우스에 일본뇌염비루스 나까야마주(中山株)를 접종하여 약 80시간 사육해서 완전히 마비를 일으킨 마우스의 두부를 절개하고, 그 뇌를 채취하여 여기에 4배량의 M/15인산염 완충액(pH8.0)을 함유하는 생리식염수를 첨가해서 유화시키고, 3,000×g 으로 20분간 원심분리하여, 그 상충액에 농도 2mg/mℓ가 되도록 프로타민(Protamine) 황산염 수용액을 가하여 2시간 교반하고 다시 원심분리하여 수득되는 상충액을 비루스액으로 하였다. 본 비루스액은 일본뇌염비루스를 약 0.8w/v% 함유하고 있었다.
(2) 일본 뇌염비루스와 풀루란의 결합
풀루란(평균분자량 100,000) 5.2g을 디메틸포름아미드 110mℓ에 가온하면서 용해한 다음 실온으로 냉각하고, 여기에 100mℓ의 피리딘을 첨가한 후 교반하면서 4-니트로벤조일클로라이드 1.0g을 첨가해서 실온하에서 17시간 보관하였다. 여기에 2배용량의 n-플로필알코올을 첨가해서 침전물을 채취하고 디메틸포름아미드에 용해하였다.
이 조작을 3회 반복해서 수득한 침전을 5w/v%하이드로설파이드나트륨 수용액 100mℓ에 용해하고 80℃에서 30분간 보관시킨 후 활성탄으로 탈색해서 2배용량의 n-프로필알코올로 침전시킨 것을 물에 용해하고, 1야간 수도물로서 투석하였다. 이 용액을 2℃이하로 냉각하고 교반하면서 염산을 최종농도 약 0.1N가 되도록 가한 다음 아질산나트륨을 약 1w/v%가 되도록 가해서 30분간 반응시킨후, 이어 2℃ 이하의 증류수로 2시간 투석해서 활성화 풀루탄용액을 수득하였다.
이 용액에(1)에서 제조한 일본뇌염비루스액의 60℃, 3시간 처리물 100mℓ를 첨가하고, 탄산나트륨수용액으로 pH 8.5로 한후 4℃이하에서 교반하면서 2시간 결합반응시킨다. 이 반응액에 대하여 반응액 3배용량의 아세톤을 첨가해서 침전물을 채취하고 이것을 0.01M 인산염완충액(pH7.0)에 용해한 후 원심분리해서 불용물을 제거하고 상징액(上澄液)을 겔여과하여 일본뇌염비루스-풀루란결합물의 분획을 채취하고 다시 정밀여과하여 여액을 농축한 후 냉동건조시켜서 분말상 왁진제품을 수득하였다. 수율은 비루스당 약 60%이었다. 대조용으로 (1)에서 제조한 비루스액 50mℓ에 일본국 약전(藥典)에 규정된 포르말린용액 0.05v/v%를 첨가하고, 4℃에서 60일간 보관하여 불활성화시켜 3,000×g로 20분간 원심분리하고, 상징액을 정밀 여과한 후 농축, 동결건조하여, 분말상의 왁진제품을 수득하였다. 수율은 비루스당 약 50%이었다.
(3) 마우스에 대한 일본뇌염비루스 왁진의 투여시험
(DDD×BALB/C) F1마우스에 (1)에 제조한 비루스액을 1마리당 비루스로서 5×10-8g정맥주사 하였더니 발병하여 사망하였다.
이에 대하여 본 발명 왁진 또는 대조용 왁진은 비루스로서 10-3g 정맥주사하더라도 사망되는 일이 없었으며, 충분히 불활성화, 무독화되어있음이 판명되었다.
또 마우스에 본 발명와진 또는 대조용 왁진을 1마리당 비루스로서 5×10-5g 정맥주사하고 7일후에 재차 동일한 왁진을 동일하게 주사한 후 다시 10일후에 채혈하여 항체 산생량을 측정하였다.
면역글로불린G, 면역글로불린M 항체는 PHA 반응에 따라서, 면역글로불린E 면항체는 PCA 반응에 따라서 측정하였다. 그결과, 본 발명 왁진의 경우 면역글로불린 G, 면역글로불린 M 항체 산생량은 대조용 왁진의 약 16배이고, 면역글로불린E 항체 산생은 검출되지 않았다.
또, 대조용 왁진의 경우는 면역글로불린G, 면역글로불린M 항체산생량의 약1/2에 해당하는 량의 면역글로불린E 항체산생이 확인되었다.
또 방부제 일본국 약전(藥典) 포르말린 0.01v/v%를 함유하는 0.1M인산염 완충액(pH 7.0)에 용해하고 40C로 보관하여, 본 왁진의 활성반감기를 PHA 반응으로 비교한 결과 본 발명 왁진의 반감기는 대조용 왁진반감기의 약 8배가 되었다.
이상의 결과로 부터 본 발명 왁진은 알레르기 질환, 아나필락시 쇼-크가 없이 안정성이 양호한 일본뇌염 왁진으로서 바람직하게 사용될 수 있다.
[실시예 2] 일본뇌염 비루스 왁진
엘시난(평균분자량 약 700,000) 8g을 열수 200mℓ에 용해해서 실온으로 냉각한 다음 여기에 10%염화시아누르-디메틸포름아미드 용액 40mℓ를 첨가하고, 1N-탄산나트륨용액으로 pH 7.0으로 유지하면서 실온하에서 2시간 반응시킨후, 이 pH를 유지하면서 4℃의 물로 1야간 투석해서 활성화 엘시난용액을 수득하였다.
이 용액에 실시예 1 (1)에서 제조한 일본뇌염 비루스액의 자외선 조사물 45mℓ를 첨가하고 pH 9.0으로 하여 실온하에서 교반하면서 2시간 결합반응시킨후 실시예 1(2)와 동일하게 분리정제하고 동결건조해서 분말상 왁진제품을 수득하였다. 수율은 비루스당 약 60%이었다.
수득된 일본뇌염왁진을 실시예 1(3)의 방법에 따라 정맥주사 하였던바 충분히 불활성화, 무득화되어 있음을 확인하였다. 또 면역글로불린G, 면역글로분린M 항체 산생량을 측정하였던 바 실시예 1(2)에서 제조한 대조용왁진의 경우에서의 약 10배로서, 면역글로불린E 항체산생은 검출되지 않았다. 또 본 발명 왁진의 활성반감기는 대조왁진 활성반감기의 약 4배가 되었다.
전술한 시험 결과에 따라 본 발명 왁진은 일본뇌염 왁진으로서 바람직하게 사용될 수 있다.
[실시예 3] 일본뇌염 비루스 왁진
실시예 1(2)의 풀루란을 덱스트란(평균분자량 70,000)으로 바꿔서 동일한 방식에 따라 결합 반응시킨후 정제해서 일본뇌염왁진을 제조하였다. 수율은 비루스당 약 40%이었다. 수득된 왁진을 실시예 1(3)에 따라 투여 시험한 결과 충분히 불활성화, 무독화되어 있었음을 확인하였다. 또 면역글로불린G, 면역글로불린M 항체 산생량은 실시예 1(2)에서 제조한 대조용왁진의 경우의 약 16배이고, 면역글로불린E 항체산생량은 대조용왁진의 경우의 약 1/64에 불과하였다.
또 본 발명 왁진의 활성반감기는 대조용왁진 활성반감기의 약 2배가 되었다. 이상의 결과에 따라 본 발명 왁진은 일본뇌염왁진으로서 바람직하게 사용될 수 있다.
[실시예 4] 인푸렌자 비루스왁진
(1) 인푸렌자 비루스 제조
인푸렌자비루스(A/동경/6/73(H3N2))를 10일령의 발육계란에 접종해서 36℃에서 3일간 배양하고, 그 장뇨액(漿尿液)을 채용하여 2,000×g로 20분간 원심분리한 상충액을 평균구경 0.8μ의 필터로 여과한 여과액을 인푸렌자 비루스액으로 하였다.
(2) 비루스와 풀루란의 결합
풀루란 부분가수분해물(평균분자량 10,000) 5g을 물 400mℓ에 용해하고 1N-가성소오다액으로 pH 10.7로 한후, 이 pH를 유지하면서 브롬화시안 3g을 서서히 첨가하여 1시간 반응시킨다음 1N-염산액으로 pH 5.0으로 한후, 이 pH를 유지하면서 냉수로 투석해서 활성화 풀루란액을 제조하였다.
이 활성화 풀루란액을 0.05M탄산염 완충액을 사용해서 pH 8.0으로 한후, 이 액 (1)에서 제조한 인푸렌자 비루스액 200mℓ를 첨가하고, 실온하에서 24시간 반응시킨 다음, 계속해서 실시예 1(2)와 동일하게 분리정제, 농축, 건조해서 분말상 왁진제품을 수득하였다. 수율은 비루스당 약 70%이었다.
대조용으로 (1)에서 제조한 비루스액에 2배용량의 에테르를 첨가하고 4℃로 2일간 보관한 다음, 여과한 여과액을 동결 건조해서 분말상 왁진제품을 수득하였다. 수율은 비루스당 약 60%이었다.
(3) 마우스에 대한 인푸렌자 비루스왁진의 투여시험
수득된 인푸렌자 왁진을 실시예 1(3)의 방법과 동일하게 마우스에 정맥주사하였던바, 본 발명 왁진, 대조용왁진 다같이 모두 충분히 불활성화, 무독화되어 있음이 판명되었다.
또, 면역글로불린G, 면역글로불린M, 항체산생량은 본 발명 왁진의 경우, 대조용왁진의 약 8배이고, 면역글로불린E 항체 산생은 검출되지 않았다.
또 대조용 왁진의 경우, 면역글로불린G, 면역글로불린M 항체산생량의 약 1/2에 상당하는 량의 면역글로불린E 항체 산생량이 확인되었다.
전술한 시험 결과에 따라 본 발명 왁진은 인푸렌자 왁진으로서 바람직하게 사용될 수 있다.
[실시예 5] 센다이비루스 왁진
(1) 센다이비루스의 제조
센다이비루스를 10일령의 발육계란에 접종하고 실시예 4(1)과 동일하게 배양한후 분리정제하여 센다이비루스액을 제조하였다.
(2) 센다이비루스와 풀루란의 결합
풀루란(평균분자량 70,000) 10g을 200mℓ 증류수중에 가온하면서 용해하고 계속해서 실온까지 냉각시키고 여기에 핵사메틸렌디아민 5g을 첨가한후, 1N-수산화나트륨용액으로 pH 11.0으로 하고 이것을 빙수중에서 20℃ 이하로 냉각하고, 이 pH를 유지하면서 브롬화시안 5g을 첨가하고 교반하면서 30분간 반응시킨후 계속해서 4℃증류수로 1시간 투석하여 활성화 풀루란액을 제조하였다.
이 용액에 25w/v% 글루타르알데히드액 2mℓ와 (1)에서 제조한 센다이비루스액 60mℓ을 첨가하고, 다시 1M 식초산염 완충액(pH 5.0)을 10ml 첨가하고 4℃에서 24시간 교반하면서 결합반응시킨 다음 글리신을 농도 1M이 되도록 첨가하여 실온하에서 24시간 보관하고, 다시 원심분리한 후 상충액을 겔여과하여 센다이비루스-풀루란 결합물의 분획을 채취하고 농축한 후 정밀여과해서 그 여과액에 방부제로서 일본국 약전(藥典) 포르말린액을 0.01v/v%가 되도록 첨가해서 액상 센다이비루스 왁진제품을 수득하였다. 수율은 비루스당 약 50%이었다.
대조용으로 (1)에서 제조한 센다이비루스액에 일본국 약전(藥典)포르말린액 0.05v/v%를 첨가하고 4℃로 60일간 보관해서 불활성 시킨후 3,000×g으로 20분간 원심분리하고 상충액을 정밀여과하여 액상 왁진제품을 수득하였다. 수율은 비루스당 약 40%였다.
(3) 마우스에 대한 센다이비루스왁진의 투여시험
수득된 센다이비루스 왁진을 실시예 1(3)의 방법과 동일하게 마우스에 투여하였던바 본 발명왁진, 대조왁진 다같이 모두 충분히 불활성화, 무독화되어 있음이 판명되었다.
또 면역글로불린G, 면역글로불린M 항체산생량은 본 발명 왁진의 경우, 대조용왁진의 약 10배이며, 면역글로불린E, 항체산생은 검출되지 않았다.
또 대조용왁진의 경우, 면역글로불린G, 면역글로불린M 항체산생량의 약 1/2에 상당하는 량의 면역글로불린 E 항체산생이 확인되었다.
이상의 결과에 의하여 본 발명 왁진은 센다이비루스 왁진으로서 바람직하게 사용될 수 있다.
[실시예 6] 마진(麻疹)비루스왁진
(1) 마진비루스의 제조
마진비루스(Edmonston 주)를 5v/v%송아지혈청을 보충해준 Eagle배지 공존하의 vero세포(미도리 원숭이 신장세포)에 37℃에서 7일간 배양하였다. 그 배양액을 3,000×g으로 20분간 원심분리하고 그 상충액을 다시 110,000×g으로 30분간 원심분리한 침전부를 생리식염수로 약 2배용량이 되도록 현탁시켜서 마진비루스액을 제조하였다.
(2) 마진비루스와 카르복시메틸셀룰로오스의 결합
1w/v% 카르복시메틸셀룰로오스(평균분자량 20,000)의 수용액 200ml에 1-에틸-3-(3-디메틸아미노)프로필카르보디이미드-메티오디드 2g을 첨가하고 1N염산으로 pH 4.0으로 유지하여 교반하면서 실온하에서 2시간 반응시킨 후 증류수로 1야간 투석해서 활성화 카르복시메틸셀룰로오스액을 제조하였다.
이 용액에 (1)에서 제조한 마진비루스액 50mℓ을 첨가하고 pH를 4.5로 유지, 교반하면서 실온하에서 1야간 결합반응시킨후 원심분리하여 그 상충액을 겔여과해서 마진 비루스-카르복시메틸셀룰로오스 결합분획을 채취하고 정밀여과하여 그 여과액에 대한 방부제로서 티메로살(Thimerosal)을 0.01w/v%가 되도록 첨가해서 액상 마진비루스왁진제품을 제조하였다. 수율은 비루스당 약 50%이였다. 대조용으로 (1)에서 제조한 비루스액을 실시예 5(2)에 기재하는 대조왁진의 제조와 동일하게 처리해서 액상왁진을 제조하였다. 수율은 비루스당 약 40%이었다.
(3) 마우스에 대한 마진비루스왁진의 투여시험
수득된 마진비루스왁진을 실시예 1(3)의 방법과 동일하게 마우스에 투여하였던 바 본 발명왁진, 대조용 왁진 다같이 모두 충분히 불활성화, 무독화되어 있음이 판명되었다. 또 면역글로불린G, 면역글로불린M 항체 산생량은 본 발명왁진의 경우, 대조용 왁진의 약 4배이며, 면역글로불린E 항체산생은 검출되지 않았다.
또 대조용 왁진의 경우, 면역글로불린G, 면역글로불린M 항체산생량의 약 1/4에 상당하는 량의 면역글로불린E 항체산생이 확인되었다.
이상의 결과에 의하여 본 발명 왁진은 마진비루스 왁진으로서 바람직하게 사용될 수 있다.
[실시예 7] 뉴캣슬병 비루스왁진
독성을 약하게 만든 뉴캣슬병비루스 "이시이(Ishii)"주를 8일령의 발율계란에 접종하고, 실시예 4(1)와 동일하게 배양하여 그 장뇨액으로 부터 실시예 6(1)에 기재하는 방법으로 뉴캣슬병 비루스액을 제조하였다.
이 비루스액 100ml에 실시예 1(2)의 방법으로 제조한 활성화 풀루란액을 혼합하고 pH를 8.0으로 유지하면서 실온하에서 24시간 결합반응시킨후 실시예 1(2)와 동일한 방법으로 분리, 정제하고 동결 건조하여 분말상 뉴캣슬병 비루스 왁진제품을 수득하였다. 수율은 비루스당 약 50%이였다.
본 발명 왁진은 감염방어능이 크고 알레르기질환, 아나필락시 쇼-크가 없는 뉴캣슬병 비루스왁진으로서 바람직하게 사용될 수 있다.

Claims (6)

  1. 비루스와 당류를 공유 결합시켜서 생성되는 비루스-당류 결합물을 채취함을 특징으로 하는 비루스-왁진의 제조방법.
  2. 제 1 항에 있어서, 당류가, 덱스트란, 풀루란, 엘시난, 카루복시메틸셀룰로오스 및 그 부분 가수분해물로 구성되는 군으로 부터 선택되는 비루스-왁진의 제조방법.
  3. 제 1 항에 있어서, 비루스가, 인푸렌자비루스, 일본뇌염비루스, 마진(麻疹)비루스, 센다이비루스, 뉴캣슬병비루스 등으로 구성되는 군으로부터 선턱된 비루스인 비루스왁진의 제조방법.
  4. 제 1 항에 있어서, 당류의 평균분자량범위가 10,000 내지 700,000인 비루스 왁진의 제조방법.
  5. 제 1 항에 있어서, 비루스와 당류의 공유결합이 온도범위 약 0 내지 4℃, pH범위 약 4.5 내지 9.0에서 약 2 내지 24시간 진행되는 비루스왁진의 제조방법.
  6. 제 1 항에 있어서, 공유결합이 디아조결합법, 가교법 또는 팹프티드법에 따라 실시되는 비루스왁진의 제조방법.
KR8200136A 1981-02-09 1982-01-14 비루스 왁진의 제조방법 KR870002161B1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP81-17643 1981-02-09
JP56017643A JPS57136528A (en) 1981-02-09 1981-02-09 Preparation of viral vaccine

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR830008686A KR830008686A (ko) 1983-12-14
KR870002161B1 true KR870002161B1 (ko) 1987-12-14

Family

ID=11949534

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR8200136A KR870002161B1 (ko) 1981-02-09 1982-01-14 비루스 왁진의 제조방법

Country Status (7)

Country Link
US (1) US4659569A (ko)
JP (1) JPS57136528A (ko)
KR (1) KR870002161B1 (ko)
CH (1) CH650683A5 (ko)
FR (1) FR2499412B1 (ko)
GB (1) GB2095552B (ko)
IT (1) IT1154270B (ko)

Families Citing this family (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS57136528A (en) * 1981-02-09 1982-08-23 Hayashibara Biochem Lab Inc Preparation of viral vaccine
JPS60258125A (ja) * 1984-06-06 1985-12-20 Hayashibara Biochem Lab Inc 蛋白性生理活性物質を含有する水溶性乾燥物
JPS6147185A (ja) * 1984-08-09 1986-03-07 Chemo Sero Therapeut Res Inst 日本脳炎ウイルスの精製方法
JPS6147186A (ja) * 1984-08-09 1986-03-07 Chemo Sero Therapeut Res Inst インフルエンザウイルスの精製方法
JPS6147187A (ja) * 1984-08-10 1986-03-07 Chemo Sero Therapeut Res Inst 狂犬病ウイルスの精製方法
JPH084508B2 (ja) * 1987-09-16 1996-01-24 国立予防衛生研究所長 組み換えワクチニアウイルス
EP0326111A3 (en) * 1988-01-29 1989-12-27 New York Blood Center, Inc. Peptide derivatives rendered immunogenic when administered with alum as an adjuvant
JP2896580B2 (ja) * 1989-08-25 1999-05-31 チッソ株式会社 アミロース―リゾチームハイブリッドと活性化糖およびその製造法
ATE150976T1 (de) * 1989-10-02 1997-04-15 Univ Arkansas Impfstoff-konjugate zur behandlung von vogelkrankheiten
US5397568A (en) * 1989-10-02 1995-03-14 Whitfill; Craig E. Method of treating infectious bursal disease virus infections
JP3522772B2 (ja) * 1991-05-21 2004-04-26 台糖株式会社 ワクチンの免疫効果増強剤
US5194280A (en) * 1991-07-15 1993-03-16 F & Mp Research & Development Laboratories, Inc. Method of manufacturing a juice concentrate
US6607727B1 (en) * 1991-08-26 2003-08-19 The Scripps Research Institute Peptides for inducing cytotoxic T lymphocyte responses to hepatitus B virus
US6235288B1 (en) * 1992-08-26 2001-05-22 The Scripps Research Institute Peptides for inducing cytotoxic T lymphocyte responses to hepatitis B virus
AUPM322393A0 (en) * 1993-12-24 1994-01-27 Austin Research Institute, The Mucin carbohydrate compounds and their use in immunotherapy
GB9419979D0 (en) * 1994-10-04 1994-11-16 Medeva Holdings Bv Vaccine compositions
US6309671B1 (en) * 1995-04-14 2001-10-30 Inhale Therapeutic Systems Stable glassy state powder formulations
GB9522351D0 (en) * 1995-11-01 1996-01-03 Medeva Holdings Bv Vaccine compositions
CN1216471A (zh) * 1996-04-22 1999-05-12 彼得·R·罗斯席尔德 稳定的抗乙型肝炎疫苗片
US6573079B1 (en) 1998-06-12 2003-06-03 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Methods and interferon deficient substrates for the propagation of viruses
DK1098961T3 (da) 1998-06-12 2008-05-26 Andrej Y Dr Egorov Gensplejsede svækkede vira, der inducerer interferon
US6544785B1 (en) 1998-09-14 2003-04-08 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Helper-free rescue of recombinant negative strand RNA viruses
US8715940B2 (en) * 1999-04-06 2014-05-06 Wisconsin Alumni Research Foundation Method of making recombinant influenza virus
US6896881B1 (en) * 1999-09-24 2005-05-24 Mayo Foundation For Medical Education And Research Therapeutic methods and compositions using viruses of the recombinant paramyxoviridae family
WO2001077394A1 (en) * 2000-04-10 2001-10-18 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Screening methods for identifying viral proteins with interferon antagonizing functions and potential antiviral agents
US6524586B2 (en) * 2001-05-18 2003-02-25 Albany Medical College Enhancement of oligomeric viral immunogenicity
US7465456B2 (en) 2002-04-26 2008-12-16 Medimmune, Llc Multi plasmid system for the production of influenza virus
WO2003091401A2 (en) 2002-04-26 2003-11-06 Medimmune Vaccines, Inc. Multi plasmid system for the production of influenza virus
WO2004112831A2 (en) * 2003-05-28 2004-12-29 Wisconsin Alumni Research Foundation High titer recombinant influenza viruses for vaccines and gene therapy
WO2005018539A2 (en) 2003-06-16 2005-03-03 Medimmune Vaccines, Inc. Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
ES2345492T3 (es) * 2003-12-23 2010-09-24 Medimmune, Llc Sistema multiplasmido para la produccion del virus de la gripe.
WO2005116260A2 (en) * 2004-05-25 2005-12-08 Medimmune Vaccines, Inc. Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
ES2694123T3 (es) * 2004-06-01 2018-12-18 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Virus de la gripe porcina modificado por ingeniería genética y usos de los mismos
US7968101B2 (en) 2004-11-19 2011-06-28 Wisconsin Alumni Research Foundation Recombinant influenza vectors with tandem transcription units
US8137676B2 (en) * 2005-02-15 2012-03-20 Mount Sinai School Of Medicine Genetically engineered equine influenza virus and uses thereof
EP2441471B1 (en) 2005-03-08 2014-10-08 MedImmune, LLC Reassortant influenza viruses
US20070111309A1 (en) * 2005-10-04 2007-05-17 Daelli Marcelo G Vero cell line adapted to grow in suspension
US9254318B2 (en) 2006-03-31 2016-02-09 Wisconsin Alumni Research Foundation High titer recombinant influenza viruses for vaccines
EP2049662A4 (en) * 2006-07-21 2009-12-30 Medimmune Llc METHODS AND COMPOSITIONS FOR INCREASING REPLICATION CAPACITY OF A FLU VIRUS
CA2659267C (en) * 2006-08-09 2016-12-13 Medimmune, Llc Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
JP5666905B2 (ja) * 2007-06-18 2015-02-12 メディミューン，エルエルシー ヘマグルチニンポリペプチド中に変化を有するインフルエンザｂウイルス
US9474798B2 (en) 2007-06-18 2016-10-25 Wisconsin Alumni Research Foundation Influenza M2 protein mutant viruses as live influenza attenuated vaccines
PL2227248T3 (pl) * 2007-11-26 2014-11-28 Novartis Ag Adjuwantowane glukany
ES2599908T3 (es) 2007-11-26 2017-02-06 Glaxosmithkline Biologicals Sa Glucanos beta-1,3-enlazados conjugados
JPWO2010001671A1 (ja) * 2008-06-30 2011-12-15 久光製薬株式会社 マイクロニードルデバイスおよびマイクロニードルデバイスによるインフルエンザワクチンの奏功性を上昇させる方法
SG192501A1 (en) * 2008-07-11 2013-08-30 Medimmune Llc Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
WO2010093537A2 (en) * 2009-02-12 2010-08-19 Medimmune, Llc Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
JP2013507990A (ja) 2009-10-26 2013-03-07 ダブリュエーアールエフ−ウィスコンシン アラムナイ リサーチ ファウンデーション ベロ細胞において増強された複製を有する高力価の組換えインフルエンザウイルス
US10130697B2 (en) 2010-03-23 2018-11-20 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Vaccines comprising mutant attenuated influenza viruses
JP5860480B2 (ja) 2011-01-11 2016-02-16 キャプシュゲル・ベルジウム・エヌ・ヴィ プルランを含む新しい硬カプセル
CN102423304B (zh) * 2011-11-24 2013-03-13 黑龙江大学 N-2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖/n,o-羧甲基壳聚糖新城疫减毒活疫苗纳米粒的制备方法
US9950057B2 (en) 2013-07-15 2018-04-24 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) High titer recombinant influenza viruses with enhanced replication in MDCK or vero cells or eggs
WO2015196150A2 (en) 2014-06-20 2015-12-23 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses
EP3261664A1 (en) 2015-02-26 2018-01-03 Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH Bivalent swine influenza virus vaccine
US10633422B2 (en) 2015-06-01 2020-04-28 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Influenza virus replication by inhibiting microRNA lec7C binding to influenza viral cRNA and mRNA
WO2017007839A1 (en) 2015-07-06 2017-01-12 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Improved influenza virus replication for vaccine development
CN109477074B (zh) 2016-02-19 2023-01-24 威斯康星旧生研究基金会 用于疫苗开发的改进的乙型流感病毒复制
US11576870B2 (en) 2017-04-14 2023-02-14 Capsugel Belgium Nv Pullulan capsules
CN110678555B (zh) 2017-04-14 2023-10-13 比利时胶囊公司 制作普鲁兰的方法
JP2022527235A (ja) 2019-01-23 2022-06-01 義裕 河岡 インフルエンザウイルスにおける付加的遺伝子に遺伝的安定性を付与する突然変異
JP2022522112A (ja) 2019-02-08 2022-04-14 ウィスコンシン アルムニ リサーチ ファンデイション ヒト化細胞系
US11390649B2 (en) 2019-05-01 2022-07-19 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Influenza virus replication for vaccine development
JP2022551805A (ja) 2019-08-27 2022-12-14 ウィスコンシン アルムニ リサーチ ファンデイション 卵内複製のための安定化されたｈａを持つ組換えインフルエンザウイルス

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1174854A (en) * 1967-07-07 1969-12-17 Miles Lab New Biologically Active Conjugates
US4003792A (en) * 1967-07-01 1977-01-18 Miles Laboratories, Inc. Conjugates of acid polysaccharides and complex organic substances
FR1604982A (en) * 1968-03-29 1972-06-26 Active protein product - with polymeric carrier
JPS5035325A (ko) * 1973-07-30 1975-04-04
JPS5639022A (en) * 1979-09-05 1981-04-14 Hayashibara Biochem Lab Inc Preparation of vaccine
JPS5823847B2 (ja) * 1981-02-06 1983-05-18 株式会社 林原生物化学研究所 抗ヒト蛋白質抗体の製造方法
JPS57136528A (en) * 1981-02-09 1982-08-23 Hayashibara Biochem Lab Inc Preparation of viral vaccine

Also Published As

Publication number Publication date
FR2499412A1 (fr) 1982-08-13
GB2095552B (en) 1985-01-09
IT8247706A0 (it) 1982-02-02
US4659569A (en) 1987-04-21
KR830008686A (ko) 1983-12-14
IT1154270B (it) 1987-01-21
GB2095552A (en) 1982-10-06
CH650683A5 (fr) 1985-08-15
JPS6140211B2 (ko) 1986-09-08
FR2499412B1 (fr) 1985-10-04
JPS57136528A (en) 1982-08-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR870002161B1 (ko) 비루스 왁진의 제조방법
KR100234792B1 (ko) 제감작제
CA1223201A (en) Process for the preparation of the c1 inactivator and its use
Zhang et al. Synthesis, characterization and immunogenicity of silk fibroin-L-asparaginase bioconjugates
US3980772A (en) Methods of dissolving blood clots and the like with streptokinase chemically bonded to a carbohydrate matrix
AU618157B2 (en) Viral inactivation process
KR0155383B1 (ko) 감감작제
KR870002162B1 (ko) 항인체단백질 항체(抗人體蛋白質抗體)의 제조방법
CA1156553A (en) Process for the production of vaccine
US5372942A (en) Protease K resistant arginine deiminase, its method of preparation and its use as an anti-neoplastic agent
JP2549225B2 (ja) 百日咳菌外膜蛋白質の精製方法
JPH0648956A (ja) ヒト免疫不全ウィルス感染・増殖抑制剤
US4041152A (en) Pharmaceutical formulation of interferon insolubilized by fixation on a support
JPH0662436B2 (ja) 静注用免疫グロブリン製剤の製造方法
US4322403A (en) Method for the preparation of an immune globulin solution suitable for intravenous use
EP1221317A1 (en) Vaccines containing hybrid polypeptides consisting of at least two different allergenic proteins
JPH07188291A (ja) 蛋白質とその製造方法並びに用途
CN105944094B (zh) 一种基于菊粉-壳聚糖修饰的结核分枝杆菌亚单位疫苗及其制备方法
US4264764A (en) Meningitis vaccine
EP0221505B1 (en) Method for the preparation of immunoglobulins suitable for intravenous administration
RU2073016C1 (ru) Способ получения низкомолекулярного водорастворимого хитозана
JPS61103824A (ja) ポリリボイノシン酸・ポリリボシチヂル酸・ポリ−レ−リジン複合体の注射用製剤の新規調製法
JP2739232B2 (ja) 生物学的親和性を有するセルロースゲルの使用方法
JP2672303B2 (ja) 馬用感染予防治療剤
JPS63164895A (ja) 培養細胞由来のレクチン様蛋白質及びその製法並びに該物質を主成分とする抗腫瘍剤