CH647481A5 - Solutions concentrees stables de cisplastine dans un solvant. - Google Patents

Description

La présente invention concerne des solutions stables et concentrées de cisplatine dans du polyéthylèneglycol, du méthoxypolyéthylèneglycol aqueux ou leurs mélanges, contenant une source d'ions chlorure.

Les composés du platine constituent un groupe unique de composés dans le groupe d'un genre antinéoplasique. Rosenberg et al., en 1965 [Rosenberg, B. et al., «Nature» (Londres), 205, pp. 698-699 (1965)], ont d'abord remarqué qu'ils présentent un effet antibiotique, puis qu'ils constituent de puissants agents antitumoraux chez les animaux [Rosenberg, B., et al., «Nature» (Londres), 222, pp. 385-386 (1969)].

Du point de vue structure, ce sont des complexes formés par un atome central de platine, entourés de divers arrangements d'atomes de chlore ou de groupes ammoniac en position soit eis, soit trans par rapport au plan. Deux des composés du platine le plus couramment étudiés sont représentés par les diagrammes suivants:

Cl

Cl

Cisplatine-(II)- Cisplatine-(IV)-

diaminedichlorure diaminetétrachlorure

Ainsi qu'on peut le constater, le composé cisplatine-(II)-diamine-dichlorure présente tous ces groupes chloro et amino dans un seul plan. Ce composé, connu maintenant sous le nom de cisplatine selon la terminologie des United States Adopted Name (USAN), a été synthétisé selon la réaction suivante:

K2[PtCl4] + 2NH3 NH*C1 ► cis-[Pt(NH3) Cl2] + 2KC1

[voir Kaulfman, G.B. et al., dans «Inorganic Synthesis», J. Kreinberg (Ed.), pp. 239-245, McGraw-Hill Book Co., Inc., New York, 1963].

Y.G. Breusova-Baidala et al., dans «Akademia Nauk»,

U.R.S.S., N° 6, pp. 1239-1242 (juin 1974) décrivent la lente isoméri-sation en milieu aqueux du cis-(II)-diaminedichlorure en forme trans.

J.W. Reishus et D.S. Martin, dans le «Journal of the American Chemical Society», 83, pp. 2457-1462 (1961), indiquent l'hydrolyse acide du cisplatine à 25 et à 35° C. Ces études en solutions aqueuses aux concentrations de 1,5 x 10_3M, 2,5 x 10~3Met 5,0 x 10~3M, ce qui correspond respectivement à 0,45,0,75 et 1,5 mg/ml. Les auteurs indiquent qu'il y a une certaine ambiguïté dans la localisation de l'origine (c'est-à-dire le point zéro), pour les courbes d'hydrolyse, parce qu'il faut 10 à 30 min pour que l'échantillon se dissolve complètement, même à ces faibles concentrations.

M. Rozencweig et al., dans «Annals of Internai Medicine», 86, pp. 803-812 (1977), passent en revue les résultats des diverses études précliniques et cliniques mettant en œuvre l'utilisation de cisplatine dans les tumeurs expérimentales ches les animaux, ainsi que chez divers types de tumeurs de l'homme. Il faut remarquer que le médicament d'étude, disponible pour les chercheurs qualifiés par l'intermédiaire du Investigational Drug Branch of the Cancer Therapy Evalution Program of the National Cancer Institute, est fourni sous forme de poudre lyophilisée blanche dans des flacons contenant 10 mg de cisplatine, 90 mg de chlorure de sodium, 100 mg de manni-tol (U.S.P.) et de l'acide chlorhydrique pour ajuster le pH. Lorsque le produit est reconstitué avec 10 ml d'eau stérile pour injection (U.S.P.), chaque millilitre de la solution résultante devrait contenir 1 mg de cisplatine, 10 mg de mannitol et 9 mg de NaCl.

R.W. Talley et al., dans «Cancer Chemotherapy Reports», 57, pp. 465-471 (1973), décrivent les résultats obtenus dans la phase I de leur étude clinique concernant l'utilisation de cisplatine dans le traitement de 65 malades humains ayant toute une variété de néoplasmes. De même que dans la publication précédente, le médicament leur est fourni par le National Cancer Institute dans des flacons contenant 10 mg de cisplatine, 90 mg de chlorure de sodium et 100 mg de mannitol, de façon à pouvoir reconstituer le produit avec 10 ml d'eau stérile.

A.H. Rossof et al., dans «Cancer», 30, pp. 1451-1456 (1972), décrivent les résultats obtenus en utilisant le cisplatine pour traiter 31 malades humains ayant toute une gamme de tumeurs. Ils notent que le médicament fourni par le National Cancer Institute est fabriqué par Ben Venue Laboratories, Inc. et contient, par fiole, 10 mg de

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

3

647 481

cisplatine, 10 mg de mannitol et 9 mg de NaCl, et que la poudre blanc jaunâtre se dissout facilement dans 8 à 10 ml d'eau stérile.

Certaines informations concernant la chimie et la formulation pharmaceutique du cisplatine sont fournies dans les pages 1 à 5 et 31 à 32 de la publication intitulée «Clinical brochure, cisplatinum-(II)-Diaminedichlorure (NSC-119875)», H. Haldelsmann et al., «Investi-gational Drug Branch, Cancer Chemotherapy Evaluation Program, Division of Cancer Treatment, National Cancer Institute» (édition revue en août 1974). Aux pages 31 et 32 de celle-ci concernant la formulation du cisplatine fournie gratis par le N.C.I. aux cliniciens pour qu'ils effectuent leur évaluation clinique en chimiothérapie du cancer, on note les indications suivantes:

Feuille de données pharmaceutiques NSC-119875 - Cisplatine-(II)-diaminedichlorure Formulation de la dose

10 mg/fiole: Le contenu de chaque fiole de verre au plomb de 20 ml ressemble à un gâteau lyophilisé blanc. Chaque fiole contient 10 mg de NSC-119875, 90 mg de chlorure de sodium, 100 mg de mannitol et de l'acide chlorhydrique pour ajuster le pH.

Préparation de la solution

10 mg/fiole: Lorsque le produit est reconstitué avec 10 mg d'eau stérile pour injection, USP, chaque millilitre de la solution résultante contient 1 mg de NSC-119875, 10 mg de mannitol et 9 mg de chlorure de sodium ayant un pH compris entre 3,5 et 4,5.

Stockage

Les fioles sèches non ouvertes doivent être stockées à des températures de réfrigération (4 à 8° C).

Stabilité

Les fioles intactes ont une stabilité provisoire d'une année lorsqu'elles sont stockées à une température de réfrigération (4 à 8° C). Des recommandations de stabilité peuvent être ajustées en attendant l'achèvement d'une étude d'une durée de conservation de deux ans.

La reconstitution réalisée de la façon indiquée fournit une solution jaune pâle qui est stable durant 1 h au maximum à la température ambiante (22° C) lorsqu'elle est exposée à un éclairage ambiant normal, et à un maximum de 8 h à la température ambiante (22° C) lorsqu'elle est protégée de la lumière. Les solutions reconstituées peuvent former un précipité, après 1 h, à la température de réfrigération (4 à 8° C).

Précaution

Les formulations de doses lyophilisées ne contiennent aucun conservateur et il est donc souhaitable de rejeter les solutions 8 h après les avoir reconstituées.

Le brevet britannique N° 2021946A décrit des solutions aqueuses stables de cisplatine ayant une concentration de cisplatine comprise entre environ 0,1 et 1,0 mg/ml et un pH compris entre 2,0 et 3,0. Les solutions peuvent également contenir une source d'ions chlorure minéral, acceptable du point de vue pharmaceutique et non toxique, telle que du chlorure de sodium, et un excipient tel que du mannitol.

La présente invention se rapporte à des solutions stables concentrées de cisplatine ayant des concentrations comprises entre environ 2,5 et 25 mg/ml. Plus particulièrement, la présente invention concerne des solutions concentrées stables de cisplatine dans un milieu solvant comprenant 30 à 95% en poids de polyéthylèneglycol, ayant un poids moléculaire moyen compris entre 150 et 9000, ou bien un méthoxypolyéthylèneglycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre 300 et 6000, ou un mélange de ceux-ci, et 5 à 70% en poids d'eau, ces solutions contenant également au moins une source d'ions chlorure acceptable du point de vue pharmaceutique et non toxique, en une quantité qui est au moins équivalente à la quantité de cisplatine présente dans la solution, et ces solutions ayant une concentration en cisplatine comprise entre 2,5 et 25 mg/ml.

Des solutions aqueuses stables de cisplatine ont été décrites dans la publication du brevet britannique N° 2021946A. Bien que des solutions stables contenant des concentrations de cisplatine atteignant environ 1 mg/ml puissent être obtenues dans un tel milieu aqueux à la température ambiante, il peut se produire une cristallisation du cisplatine à froid, pour des concentrations de cisplatine nettement supérieures à environ 0,5 mg/ml. Il n'est pas facile de redissoudre ce cisplatine cristallisé en secouant le système à la température ambiante, bien que l'on puisse obtenir à nouveau une solution en chauffant à environ 37° C. Comme les températures de transport et de stockage après vente ne peuvent pas être contrôlées, et qu'une cristallisation de cisplatine dans les fioles susciterait des problèmes indésirables pour le médecin qui l'utilise, la concentration pratique maximale de cisplatine dans de tels milieux aqueux est d'environ 0,5 mg/ml.

Les solutions de cisplatine selon l'invention peuvent contenir jusqu'à 25 mg de cisplatine par millilitre, bien que le maximum préféré soit d'environ 15 mg/ml. Les solutions selon l'invention contenant 15 mg de cisplatine par millilitre ont été maintenues à une température de 4° C pendant 12 mois sans que l'on observe une cristallisation de cisplatine. De telles solutions ont également été gelées à —60° C, puis dégelées à température ambiante sans que l'on observe de précipitation de cisplatine. Ainsi, des solutions pratiques selon l'invention peuvent offrir des concentrations en cisplatine au moins 30 fois supérieures à celles que peuvent avoir des solutions aqueuses pratiques préparées selon l'art antérieur.

On notera que les solutions concentrées de cisplatine fournies selon la présente invention entraînent des coûts de transport, de stockage et autres inférieurs par dose unitaire à ceux qui sont impliqués pour les solutions aqueuses connues. Bien que la forme solide lyophilisée connue requière des coûts de transport et de stockage inférieurs, cette économie est plus que compensée par le temps et les dépenses impliquées par la lyophilisation.

Selon un aspect préféré de la présente invention, le milieu solvant comprend pondéralement 80 à 95% (et de préférence encore,

environ 85 à 90%) en polyéthylèneglycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre 250 et 1600 (et plus particulièrement entre 250 et 650) et 5 à 20% (et de façon plus préférable 10 à 15%) d'eau.

Selon un aspect encore plus avantageux de l'invention, le milieu solvant compend pondéralement environ 90% de polyéthylèneglycol, ayant un poids moléculaire moyen compris entre 350 et 450, et environ 10% d'eau.

Il est préférable que la solution contienne 5 à 20 mg de cisplatine par millilitre, et de façon plus avantageuse encore 10 à 15 mg/ml. La source d'ions chlorure acceptable du point de vue pharmaceutique et non toxique est de préférence présente à la concentration d'au moins 2 Eq/Eq de cisplatine dans la solution. Des concentrations aussi élevées que 50 Eq ou davantage d'ions chlorure par équivalent de cisplatine peuvent être utilisées, en fonction de la concentration de cisplatine, du pourcentage d'eau présent et de la source particulière d'ions chlorure, mais des concentrations aussi élevées en ions chlorure ne sont généralement ni nécessaires ni désirables.

Il sera noté par les spécialistes de l'art que, dans le cäs d'une forte concentration en cisplatine et d'une faible teneur en eau, il ne serait pas possible de dissoudre une quantité suffisante de source d'ions chlorure telle que de chlorure de sodium pour fournir 50 Eq d'ions chlorure par équivalent de cisplatine. De plus, une solution saturée ou pratiquement saturée d'un chlorure minéral serait indésirable étant donné qu'elle risque de se cristalliser dans la solution lorsqu'elle se trouve à froid.

Dans la situation décrite plus haut, 50 Eq d'ions chlorure par équivalent de cisplatine pourraient être obtenus à l'aide d'acide chlorhydrique en tant que source d'ions chlorure, mais cela pourrait donner une solution ayant une acidité beaucoup trop élevée, c'est-à-dire un faible pH.

On a constaté que des solutions excessivement acides sont quelque peu moins stables que des solutions plus modérément acides. La gamme de pH des solutions est comprise de préférence

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

647 481

4

entre 1,5 et 4,5. On préfère utiliser 2 à 10 Eq d'ions chlorure par équivalent de cisplatine, et de préférence encore 3 à 7 Eq d'ions chlorure par équivalent de cisplatine.

L'ion chlorure peut être fourni par l'addition d'acide chlorhydrique, d'un halogénure métallique non toxique du point de vue pharmaceutique tel que du chlorure de sodium, de potassium, de calcium ou de magnésium, ou un sel d'addition d'acide chlorhydrique d'une amine tertiaire acceptable du point de vue pharmaceutique et non toxique, telle que la triéthylamine, ou par des mélanges de ceux-ci. La source préférée d'ions chlorure est fournie par de l'acide chlorhydrique, du chlorure de sodium ou un mélange de ceux-ci.

Les polyêthylèneglycols et des méthoxypolyéthylèneglycols présentent respectivement les formules générales suivantes:

H(OCH2CH2)nOH et CH3(OCH2CH2)nOCH3

et sont disponibles industriellement sous les dénominations de polyêthylèneglycols Carbowax et de méthoxypolyéthylèneglycols Carbo-wax. On préfère utiliser les qualités Sentry de polyêthylèneglycols Carbowax, qui sont produites de façon à satisfaire aux spécifications U.S.P., N.F. et F.C.C, concernant les applications alimentaires et médicamenteuses. Les gammes de poids moléculaires typiques pour une variété de polyêthylèneglycols Carbowax et de méthoxypolyéthylèneglycols Carbowax sont fournies dans les tableaux I et II.

Tableau I

Polyêthylèneglycols

Gamme typique

Carbowax de poids moléculaires

200

190 à 210

300

285 à 315

400

380 à 420

600

570 à 630

1000

950 à 1050

1540

1300 à 1600

4000

3000 à 3700

6000

7000 à 9000

Tableau II

Méthoxypolyéthylène

Gamme typique glycols Carbowax de poids moléculaires

350

335 à 365

550

525 à 575

750

715 à 785

2000

1850 à 2150

On sait que les polyêthylèneglycols forment des complexes avec certains sels minéraux. Ainsi, la réaction des polyêthylèneglycols avec du cobalt thiocyanate d'ammonium formant un complexe bleu constitue la base d'une méthode colorimétrique de détermination de la concentration de polyêthylèneglycols dans divers mélanges. On pense que la stabilité unique du cisplatine dans les solutions selon l'invention peut être due à un complexe formé entre le cisplatine et le polyéthylèneglycol, mais cela relève de la théorie et ne constitue pas un élément de l'invention. La preuve de la formation d'un complexe n'a pas été notée dans les chromatographies en couches minces.

En utilisant les techniques décrites ci-après, le cisplatine aqueux produit une tache pour une valeur de Rf d'environ 0,65. Cependant, une solution de cisplatine dans 90% en poids de polyéthylèneglycol 400/10% en poids d'eau (ou 10% en poids de HCl à 0,5N) fournit une tache pour un Rf d'environ 0,3 qui s'étale jusqu'à un Rf d'environ 0,65. La dilution avec des quantités importantes d'eau semble briser immédiatement le complexe, puisque la dilution de la solution ci-dessus de PEG-H20 (ou HCl) avec cinq volumes d'eau montre alors seulement une tache correspondant au cisplatine pour un Rf d'environ 0,65.

Chromatographie en couche mince (CCM)

Appareillage et réactifs a) Plaques de CCM : 60 plaques de gel de silice des Laboratoires EM, Catalogue N° 5753, ou équivalent.

b) Eluent - acétone: Acide nitrique normal (9/1). Préparé fraîchement tous les jours.

c) Révélateur: dissoudre 5,6 g de chlorure stanneux dans 10 ml d'acide chlorhydrique concentré. Ajouter 90 ml d'eau ditillée et 0,2 g d'iodure de potassium. Bien agiter. Préparer un produit frais tous les jours.

d) Four de laboratoire réglé à 100° C.

Procédure a) On dilue l'échantillon avec 5 volumes de diméthylformamide (DMF) (provenant de Burdick et Jackson, et distillé dans du verre).

b) On tache une plaque de CCM avec 5 jj.1 de l'échantillon et 5 ni d'une solution standard contenant du cisplatine (et du transplatine et du platine B, si cela convient), à une concentration environ égale à celle qui est attendue dans l'échantillon à analyser. On relève une hauteur de 10 cm dans le réservoir de CCM préêquilibré avec l'éluant.

On pulvérise la plaque séchée avec la solution révélatrice fraîchement préparée et on l'introduit dans un four à 100° C pendant 10 min. On observe les zones jaune-pourpre.

c) Valeurs Rf approximatives 0,65: cisplatine;

0,76: transplatine;

0,90: platine B.

Les titrages par CLHP des solutions selon l'invention tendant à déterminer la teneur en cisplatine peuvent être réalisés selon la procédure décrite dans le brevet britannique N° 2021946A. La phase mobile préférée est constituée par un mélange d'acétate d'éthyle/ méthanol/diméthylformamide/eau distillée (25/26/5/5). Le standard est de préférence constitué par du cisplatine dissous dans du diméthylformamide à une concentration de 1 mg/ml. Les échantillons à analyser sont dilués avec du diméthylformamide jusqu'à une concentration approximativement en cisplatine de 1 mg/ml.

Bien que leur présence ne confère aucun avantage particulier, les solutions selon l'invention peuvent éventuellement contenir un excipient classique acceptable du point de vue physiologique tel que le mannitol.

A partir des études de stabilité menées à l'heure actuelle, on prévoit que la stabilité des solutions selon l'invention (comme étant une perte de 10% de puissance) est supérieure à deux années à la température ambiante.

Selon un aspect préféré de l'invention, les solutions sont stériles et dépourvues de substance pyrogène; elles sont conditionnées dans des récipients stériles et dépourvues de substance pyrogène. De telles solutions peuvent être ensuite diluées avec, par exemple, de l'eau stérile pour injection, de qualité U.S.P., ou une solution saline normale stérile, de qualité U.S.P., et administrées par voie intramusculaire ou intraveineuse. Les moyens pour stériliser de telles solutions sont bien connus dans l'art. On préfère faire passer les solutions à travers un filtre Millipore de 0,22 |i, stérile et dépourvu de subtance pyrogène, en utilisant des techniques aseptiques, sous une pression d'azote stérile. Millipore est une dénomination commerciale de la Millipore Corporation pour les filtres à membrane. Le filtrat stérile est recueilli dans des récipients stériles et dépourvus de substance pyrogène, puis introduit finalement en quantité désirée, dans des récipients stériles convenables, dépourvus de substance pyrogène, bouchés avec des bouchons stériles et dépourvus de substance pyrogène (de préférence revêtus de Téfion) et fermés hermétiquement avec des capsules d'aluminium stérile.

Pour les utiliser dans le traitement du cancer, les solutions concentrées sont diluées à la concentration recherchée (généralement

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

5

647 481

1 mg de cisplatine par millilitre) avec par exemple de l'eau stérile pour injection, de qualité U.S.P., une solution saline normale stérile, de qualité U.S.P., ou une solution de glucose stérile, utilisées par injection intraveineuse ou intramusculaire, ou par perfusion intraveineuse, de la façon connue jusqu'à maintenant pour l'adminitration des préparations de cisplatine.

Des doses utilisées couramment, ayant une toxicité douce acceptable à modérément acceptable, sont comprises entre 60 et 100 mg/m2 par voie intraveineuse, adminitrées en une dose unique, ou réparties sur 3 à 5 d, cette dose devant être réadministrée à des intervalles de 4 semaines. Une dose de 60 mg/m2 est à peu près équivalente à une dose de 1,5 mg/kg qui, à son tour, est à peu près équivalent à une dose de 105 mg pour un malade pesant 70 kg. On prescrit fréquemment une thérapie concurrente avec d'autres agents chi-miothérapiques afin d'obtenir les meilleurs résultats.

Ainsi que cela est utilisé dans les revendications, des références à des équivalents d'ions chlorure par équivalent de cisplatine signifient des équivalents molaires. Ainsi, par exemple, lorsqu'on utilise la gamme préférée comprise entre 3 et 7 Eq d'ions chlorure par équivalent de cisplatine, on utiliserait 3 à 7 mol de NaCl par mole de cisplatine, mais 1,5 à 3,5 mol de CaCl2 par mole de cisplatine, etc.

Platine B est une désignation arbitraire utilisée ici pour le produit de réaction acide de cisplatine qui est la moitié du complexe rouge de Magnus connu et auquel on a essayé d'attribuer la structure suivante:

Cl

Pt^ _ H3N-^^ Cl _

L'invention est illustrée par les exemples suivants, les concentrations étant indiquées en % en poids.

Exemple 1:

Solution concentrée stable de cisplatine ( 10 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 400/10% de HCl normal

On fait une bouillie avec 500 mg de cisplatine dans une solution de 5 ml d'acide chlorhydrique normal et de 45 ml de polyéthylèneglycol 400. Après 2 'A d d'agitation à température ambiante (le récipient étant protégé de la lumière à l'aide d'une feuille d'aluminium), on obtient une solution jaune clair.

Les aliquotes de cette solution sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, fermées hermétiquement avec des bouchons enduits de Téflon, scellées avec des capsules d'aluminium et soumises à des tests de stabilité au stockage à diverses températures. Après un stockage de deux semaines à 56° C, la Chromatographie en couche mince (CCM) indique la présence d'une trace de transplatine et environ 1% de platine B. Après un stockage de deux semaines à 56° C, la CCM indique la présence de moins de 1% de transplatine et environ 3% de platine B.

Les échantillons stockés pendant deux semaines à 56° C, sont dilués avec, respectivement, 4, 9 et 19 volumes d'eau, et fournissent des solutions transparentes contenant, respectivement, 2,1 et 0,5 mg/ml de cisplatine. Il apparaît un léger trouble dans chacun des échantillons dilués après un repos d'environ 18 h à la température ambiante.

Exemple 2:

Solution concentrée stable de cisplatine ( 10 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 400/10% de HCl 0,5N

5 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. et 5,0 ml de HCl normal sont mélangés et addtionnés de 90,0 ml de polyéthylèneglycol 400. A 50 ml de la solution ci-dessus sont ajoutés 500 mg de cisplatine et le mélange est protégé de la lumière à l'aide d'une feuille d'aluminium et agité à température ambiante, durant 24 h, de façon à produire une solution claire. La CCM d'une solution fraîchement préparée ne montre qu'une zone de cisplatine avec une trace possible de transplatine.

Deux aliquotes de 2 ml de la solution sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, fermées avec des bouchons enduits de Téflon et scellées avec des capsules d'aluminium, puis soumises à des tests de stabilité au stockage à diverses températures.

Une fiole d'échantillon est lyophilisée dans un bain de glace car-bonique-acétone, durant 1 h, puis laissée se réchauffer à la température ambiante. On obtient une solution claire, et on ne constate pas la présence de précipité. Après des stockages de 3 mois à 37 et 45° C, la CCM indique la présence de 1 à 2% de platine B et d'une trace possible de transplatine.

Après 1 mois de stockage à 56° C, la CCM indique la présence de plus de 5% mais moins de 10% de platine B et d'une trace de transplatine.

Les échantillons stockés à 37 et 45° C pendant 3 mois, et à 56° C pendant 1 mois, sont dilués avec quatre volumes d'eau purifiée de qualité U.S.P. pour donner des solutions claires contenant 2 mg/ml de cisplatine.

Les solutions diluées restent limpides après un repos de 24 h à la température ambiante.

Exemple 3:

Solution concentrée stable de cisplatine (10 mg/ml) + CaCl2 (20 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 400/10% de HCl 0,5N

On dissout 2 g de chlorure de calcium anhydre de qualité réactive dans un mélange de 5 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. et 5 ml de HCl normal. On ajoute 89 ml de polyéthylèneglycol 400 pour amener le volume à 100 ml. A 50 ml de cette solution, on ajoute 550 mg de cisplatine, et l'on protège le mélange de la lumière à l'aide d'une feuille d'aluminium; on agite le système à température ambiante durant 24 h pour obtenir une solution claire.

La CCM d'une solution fraîchement préparée indique uniquement la présence d'une zone de cisplatine avec une trace possible de transplatine. Des aliquotes de 2 ml de la solution sont placées dans des fioles d'ambre de 17 ml, fermées avec des bouchons revêtus de Téflon, scellées avec des capsules d'aluminium et soumises à des tests de stabilité au stockage à diverses températures.

Une fiole échantillon et placée dans un bain de glace carbonique-acétone pendant 0,5 h et lyophiliyée en un gel transparent. On laisse celui-ci se réchauffer à température ambiante et on recueille une solution limpide. Après un stockage de 3 mois à 37° C, la CCM indique la présence de 1 à 2% de platine B et d'une trace possible de transplatine.

Après un stockage de 3 mois à 45° C, la CCM indique la présence d'environ 5% de platine B et d'une trace possible de transpla-tine.

Après un stockage de 1 mois à 56° C, la CCM indique la présence de 8 à 10% de platine B et d'une trace de transplatine.

Les échantillons stockés à 37 et 45° C pendant 3 mois, et à 56° C pendant 1 mois, sont dilués avec 4 volumes d'eau purifiée de qualité U.S.P. pour donner des solutions claires contenant 2 mg/ml de cisplatine.

Les solutions diluées restent claires après un repos de 24 h à la température ambiante.

Exemple 4:

Solution concentrée stable de cisplatine (environ 22 mg/ml) -1- CaCl2 (25 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 400/10% de HCl 0,5N

3 ml d'une solution de 90% de polyéthylèneglycol 400/10% de HCl 0,5N sont additionnés de 45 mg de cisplatine, et le mélange est agité pendant 1 h à température ambiante pour donner lieu à une solution limpide.

On introduit une dose supplémentaire de 30 mg de cisplatine (faisant un total de 25 mg/ml) et on agite le mélange à environ 45° C pendant 1 h, puis à la température ambiante pendant 16 h, pour produire une solution pratiquement complète. La petite quantité de

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

647 481

6

matières insolubles est éliminée par filtration. La CCM du filtrat indique uniquement une zone de cisplatine avec une trace possible de transplatine. Le restant du filtrat est introduit dans une fiole d'ambre de 17 ml, fermée avec un bouchon revêtu de Téflon, scellée avec une capsule d'aluminium et maintenue à 45° C pendant 3 mois.

Après un vieillissement de 3 mois à 45° C, la CCM indique qu'il y a 1 à 2% de platine B et pas de transplatine dans la solution.

Une dilution de la solution vieillie avec de l'eau purifiée de qualité U.S.P. à une concentration de 2 mg/ml de cisplatine fournit des solutions limpides, qui le restent après le repos à la température ambiante pendant 24 h.

Exemple 5:

Solution concentrée stable de cisplatine ( 12 mg/ml) + NaCl (10 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 400/10% de HCl 0,5N

On dissout 100 mg de chlorure de sodium dans une solution de

5 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. et 5 ml d'acide chlorhydrique normal. Cette solution est additionnée de 90 ml de polyéthylèneglycol 400 et le mélange est agité pendant 15 min. 50 ml de la solution obtenue sont additionnés de 500 mg de cisplatine, et le mélange est agité dans l'obscurité à la température ambiante pendant 3 d, pour produire une solution claire. La CCM de la solution fraîchement préparée ne montre qu'une tache correspondant au cisplatine. Un titrage par Chromatographie liquide à haute performance (CLHP) de la solution fraîchement préparée indique que celle-ci renferme 12 mg de cisplatine par millilitre.

Des aliquotes sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, ces dernières étant scellées de la façon décrite dans l'exemple 3, et soumises aux tests de stabilité au stockage à diverses températures.

Après un stockage de 37° C pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a moins de 1 % de platine B et pas de transplatine.

Après un stockage à 56° C pendant 1 mois, la CCM indique qu'il y a 1 à 2% de platine B et pas de transplatine.

La dilution des échantillons vieillis avec de l'eau purifiée U.S.P. jusqu'à une concentration de 2 mg/ml de cisplatine fournit des solutions limpides qui le restent après un repos à la température ambiante pendant 24 h.

Des titrages par CLHP d'échantillons stockés pendant 3 mois à 45° C, 6 mois à 37° C et 8 mois à la température ambiante indiquent des pertes de puissance respectivement de 6,6, 6,1 et 2,3%.

Exemple 6:

Solution concentrée stable de cisplatine (11,4 mg/ml) + NaCl ( 10 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 400/10% d'eau

Une solution de 50 mg de NaCl dans 5 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. et de 45 ml de polyéthylèneglycol 400 est additionnée de 500 mg de cisplatine, et le mélange est agité, dans l'obscurité, à température ambiante, durant 6 h pour fournir une solution limpide.

La CCM de la solution fraîchement préparée ne révèle la présence que de la tache correspondant au cisplatine; un titrage par CLHP indique que cette solution contient 11,4 mg de cisplatine par millilitre.

Des aliquotes sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml et celles-ci sont scellées de la façon décrite dans l'exemple 3, puis soumises aux tests de stabilité au stockage à diverses températures.

Après un stockage à 37 et 45° C pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a 1% de platine B et pas de transplatine.

Après un stockage à 56° C pendant 1 mois, la CCM indique qu'il y a 2 à 3% de platine B et pas de transplatine.

Une dilution des échantillons vieillis avec de l'eau purifiée de qualité U.S.P. à une concentration de 2 mg/ml de cisplatine fournit des solutions claires qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 h.

Des titrages par CLHP d'échantillons stockés 3 mois à 45° C,

6 mois à 37° C et 7 mois à température ambiante révèlent des pertes de puissance respectivement de 6,1, 7,0 et 0,9%.

Exemple 7:

Solution concentrée stable de cisplatine ( 10 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 600/10% de HCl 0,5N

Une solution de 2,5 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P., 2,5 ml de HCl normal et 45 ml de polyéthylèneglycol 600 est addtionnée de 500 mg de cisplatine et le mélange est agité dans l'obscurité à température ambiante, pendant 5 h, pour fournir une solution claire.

La CCM de la solution fraîchement préparée n'indique qu'une tache correspondant au cisplatine.

Des échantillons de la solution fraîchement préparée sont dilués avec respectivement 1, 2, 3, 4, 5 et 9 volumes d'eau purifiée U.S.P.; ces solutions diluées ne présentent aucune cristallisation après un repos de 16 h à température ambiante ou à 4° C.

Les aliquotes de la solution fraîchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans l'exemple 3, puis soumises aux tests de stabilité au stockage à diverses températures.

Après stockage à 37 et 45° C pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a 1 % de platine B et pas de transplatine.

Après un stockage à 56° C pendant 1 mois, la CCM indique qu'il y a 3,4% de platine B et pas de transplatine.

La dilution des échantillons vieillis avec de l'eau purifiée de qualité U.S.P. à une concentration de 2 mg/ml de cisplatine fournit des solutions claires, qui le restent après repos à la température ambiante pendant 24 h.

Exemple 8:

Solution concentrée stable de cisplatine ( 10 mg/ml) + NaCl ( 10 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 400/10% de HCl 0,2N

Une solution de 0,5 g de NaCl dans 4 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P., 1 ml d'acide chlorhydrique normal et 45 ml de polyéthylèneglycol 400 est additionnée de 250 mg de cisplatine, et le mélange est agité dans l'obscurité à la température ambiante, pendant 4 h, de façon à fournir une solution jaune clair. La CCM de la solution fraîchement préparée n'indique qu'une tache correspondant au cisplatine. Des dilutions de la solution fraîchement préparée avec 1, 2, 3, 4, 5, et 9 volumes d'eau purifiée fournissent des solutions claires, qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 h. Les dilutions avec 1,2, 3, 4 et 5 volumes ne présentent aucune cristallisation lorsqu'on les maintient à 4° C pendant 24 h. Des aliquotes de la solution fraîchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans l'exemple 3, et soumises aux tests de stabilité au stockage à diverses températures.

Après stockage à 37° C pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a 1 % de platine B et une trace possible de transplatine.

Après un stockage à 45° C pendant 3 mois, la CCM indique qu'il y a 5% de platine B et une trace possible de transplatine.

Après un stockage à 56° C pendant 1 mois, la CCM indique qu'il y a 2 à 3% de platine B et pas de transplatine.

La dilution des échantillons vieillis avec de l'eau purifiée de qualité U.S.P. à une concentration de 2 mg/ml de cisplatine fournit des solutions limpides, qui le restent après un repos pendant 24 h à température ambiante.

Exemple 9:

Solution concentrée stable de cisplatine (2,5 mg/ml), NaCl (9 mg/ml) et mannitol (12,5 mg/ml) dans 31% (poids/volume) de polyéthylèneglycol 6000 aqueux acidifié

On dissout 0,9 g de chlorure de sodium, 1,25 g de mannitol et 31,3 g de polyéthylèneglycol dans suffisamment d'eau purifiée de qualité U.S.P. pour disposer de 100 ml d'une solution, laquelle est acidifiée à un pH de 2,2 à l'aide d'acide chlorhydrique normal (0,7 ml). On ajoute 255 mg de cisplatine et l'on agite le mélange dans l'obscurité pendant 3 d à température ambiante pour obtenir une solution limpide.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

7

647 481

La CCM de la solution fraîchement préparée ne présente que la zone correspondant au cisplatine.

Des aliquotes de la solution fraîchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans l'exemple 3, puis soumises aux tests de stabilité au stockage à 45 et 56° C. Après 2 mois de stockage à 45 et 56° C, la CCM indique qu'il y a moins de 1 % de platine B et pas de transplatine.

La dilution des échantillons vieillis avec un volume égal d'eau purifiée de qualité U.S.P. fournit des solutions limpides, qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 h.

Exemple 10:

Solution concentrée stable de cisplatine ( 15,8 mg/ml) + NaCl ( 10 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 400 aqueux

On dissout 90 ml de polyéthylèneglycol 400 dans une solution de 1,0 g de NaCl dans 10 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. 60 ml de la solution obtenue sont additionnés de 900 mg de cisplatine, et le mélange est agité dans l'obscurité pendant 5 h à température ambiante pour obtenir une solution claire.

La CCM de la solution fraîchement préparée n'indique que la présence de la zone correspondant au cisplatine; un titrage par CLHP indique que celle-ci contient 15,8 mg de cisplatine par millilitre.

La dilution de la solution fraîchement préparée avec 4 volumes d'eau purifiée de qualité U.S.P. fournit une solution limpide, qui le reste après un repos à température ambiante pendant 24 h.

Des aliquotes de la solution fraîchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans l'exemple 3, puis soumises aux tests de stabilité au stockage à diverses températures.

Après 2 mois de stockage à 45° C, la CCM indique qu'il y a 1,5% de platine B et pas de transplatine.

Après 1 mois de stockage à 56° C, la CCM indique qu'il y a 2% de platine B et pas de transplatine.

Un échantillon vieilli à 56° C est dilué à une concentration de 2 mg/ml avec de l'eau stérile pour injection, et l'échantillon vieilli à 45° C est dilué à une concentration de 2,5 et 5,0 mg/ml de cisplatine avec de l'eau stérile pour injection. Ils fournissent chacun des solutions claires, qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 h.

Des titrages par CLHP d'échantillons stockés 3 mois à 45° C, 6 mois à 37° C et 8 mois à température ambiante indiquent des pertes de puissance respectivement de 7,6, 7,6 et 0%.

Exemple 11:

Solution concentrée stable de cisplatine ( 15 mg/ml) + CaCl (25 mg/ml) dans 90% de polyéthylèneglycol 400 aqueux

Une solution de 2,5 g de CaCl2 dans 10 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. est additionnée de 90 ml de polyéthylèneglycol 400 et la solution résultante est agitée pendant 10 min. A 50 ml de la solution ci-dessus, on ajoute 750 mg de cisplatine et l'on agite le mélange pendant 5 h dans l'obscurité, à température ambiante, pour obtenir une solution claire.

La CCM de la solution fraîchement préparée indique uniquement une zone correspondant au cisplatine. Des dilutions de la solution fraîchement préparée avec respectivement 1,2, 5 et 10 volumes d'eau purifiée de qualité U.S.P. fournissent une solution limpide.

Des aliquotes de solution fraîchement préparée sont introduites dans des fioles d'ambre de 17 ml, lesquelles sont scellées de la façon décrite dans l'exemple 3, puis soumises aux tests de stabilité au stockage à 45 et 56° C.

Après un stockage de 2 mois à 45° C, la CCM indique qu'il y a 1,5% de platine B et pas de transplatine.

Après un stockage de 1 mois à 56° C, la CCM indique qu'il y a 2,5 à 5% de platine B et pas de transplatine.

Un échantillon vieilli à 56° C est dilué à une concentration de

2 mg/ml et l'échantillon vieilli à 45° C est dilué à des concentrations de 2,5 et 5,0 mg/ml de cisplatine, avec de l'eau stérile pour injection.

Ils forment tous deux des solutions claires, qui le restent après un repos à température ambiante pendant 24 h.

Solution concentrée stable stérile de cisplatine dans 90% de polyéthylèneglycol 400/10% de HCl 0,5N (l'étiquette indique 15 mg/ml d'activité cisplatine)

Note: Le cisplatine est un agent carcinogène possible.

Il faut porter des vêtements, gants, masque, lunettes et bonnet de protection pendant toute la procédure.

Toutes les zones de travail et tout l'équipement doivent être soigneusement nettoyés pour éviter toute contamination future.

Formule

par millilitre par 10,0 millilitres

Cisplatine1 Chlorure de sodium Acide chlorhydrique 0,5N2 Polyéthylèneglycol 400 (qualité Sentry)

0,015 g 0,150 g 0,015 g 0,150 g 0,10 ml 1,0 ml q.s.p. 1,0 ml q.s.p. 10,0 ml

1 Ce poids de cisplatine assure une puissance de 1000 ng/mg.

Pour déterminer la quantité de cisplatine requise, on utilise la formule suivante:

1000 x 0,015 g , . , . .

= grammes de cisplatine requis puissance du cisplatine (ng/mg)

2 11 d'acide chlorhydrique 0,5N est préparé de la façon suivante:

1. On introduit 957,25 ml d'eau stérile pour injection, de qualité U.S.P. dans un erlenmeyer de 11.

2. En agitant rapidement, on introduit lentement et avec précaution 42,75 ml d'acide chlorhydrique concentré. On agite encore pendant 10 min. On ferme avec un bouchon de caoutchouc de butyle propre.

Instructions de fabrication pour préparer un litre de solution stérile

1. On place 100 ml d'acide chlorhydrique 0,5N dans un erlenmeyer propre calibré de 11, contenant un agitateur convenable tel qu'une barre d'agitation magnétique de 6 cm, enduite de Téflon.

2. On ajoute, en agitant modérément, 15,0 g de chlorure de sodium. On poursuit l'agitation jusqu'à dissolution complète.

3. En agitant rapidement, on introduit 750 ml de polyéthylèneglycol 400 (qualité Sentry) et l'on poursuit l'agitation pendant 5 min.

4. On enlève le barreau magnétique et on égoutte celui-ci pour que le fluide en excès retombe dans le flacon.

5. On ajoute avec précaution 15,0 g d'activité cisplatine.

6. On ajoute du polyéthylèneglycol 400 (qualité Sentry) jusqu'à la marque 11 (il faut au total 880 ml de polyéthylèneglycol 400).

7. On remet l'agitateur de Téflon dans le mélange et on ferme le système avec un bouchon propre de caoutchouc butyle.

8. On enveloppe le récipient d'une feuille d'aluminium pour le protéger de la lumière.

9. On agite rapidement pendant 24 à 48 h à température ambiante. On doit obtenir une solution limpide. Si l'on n'obtient pas une solution claire en 48 h, on peut chauffer le mélange à 37-40° C pendant 2 à 6 h, en l'absence d'air et de lumière, pour faciliter la mise en solution rapide du cisplatine restant. On refroidit à 23-27° C.

10. En utilisant une technique aseptique, on fait passer la solution jaune sombre sous une pression d'azote stérile convenable, à travers un filtre Millipore convenable de 0,22 |i, stérile et dépourvu de substance pyrogène. On recueille le filtrat stérile dans un erlenmeyer stérile et dépourvu de substance pyrogène. On ferme la fiole avec un bouchon stérile, dépouvu de substance pyrogène, en caoutchouc butyle. La solution doit être conservée dans l'obscurité.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

647 481

8

11. On introduit la quantité nécessaire de solution stérile dans des fioles d'ambre stériles dépourvues de substance pyrogène. Ces fioles sont fermées avec un bouchon en Téflon stérile et dépourvu de substance pyrogène. On ferme hermétiquement ces fioles avec des capsules d'aluminium stérile.

12. Les fioles doivent congtenir l'étiquette suivante de mise en garde:

Produit ne devant pas être utilisé directement par voie intramusculaire ou intraveineuse*

* La solution de PEG 400 peut être diluée avec 14 parts d'eau stérile pour injection de qualité U.S.P. ou de solution saline normale stérile de qualité U.S.P. pour fournir une solution de 1 mg/ml de cisplatine. S'il faut des concentrations supérieures, on peut utiliser des quantités proportionnellement moindres d'eau stérile ou de solution saline. Les solutions diluées peuvent être utilisées par voie intraveineuse et elles sont stables à température ambiante (22 à 26° C) pendant au moins 48 h. Ne pas mettre de solutions diluées au réfrigérateur, car des cristaux peuvent apparaître.

13. Conserver les fioles dans l'obscurité.

Exemple 12:

Solution concentrée stable de cisplatine (2,5 mg/ml), NaCl (9 mg/ ml), CaCl2 ( 15 mg/ml) et mannitol ( 10 mg/ml) dans 31% de polyéthylèneglycol 400 aqueux acidifié

On dissout 0,9 g de chlorure de sodium, 1,5 g de CaCl2 et 1,0 g de mannitol dans un mélange de 31,25 ml de polyéthylèneglycol 400 et de 40 ml d'eau purifiée de qualité U.S.P. On acidifie la solution à un pH de 2,2 à l'aide d'acide chlorhydrique normal (0,4 ml), puis on ajoute 255 mg de cisplatine et porte le volume à 100 ml avec de l'eau purifiée de qualité U.S.P. On agite le mélange dans l'obscurité

pendant 5 h, à température ambiante, pour obtenir une solution limpide.

La CCM de la solution fraîchement préparée n'indique qu'une zone correspondant au cisplatine.

5

Exemple 13:

On répète la procédure générale décrite dans l'exemple 5, si ce n'est que le chlorure de sodium est remplacé par une quantité équivalente de chlorure de magnésium; on obtient ainsi une solution io concentrée stable de cisplatine.

Exemple 14:

On répète la procédure générale décrite dans l'exemple 5, si ce n'est que l'on remplace le chlorure de sodium par une quantité équi-15 valente de chlorhydrate de triéthylamine; on obtient ainsi une solution concentrée stable de cisplatine.

Exemple 15:

On répète la procédure générale décrite dans l'exemple 5, si ce 20 n'est que l'on remplace le polyéthylèneglycol 400 par un volume égal de polyêthylèneglycols respectivement 200 et 300. On obtient des solutions concentrées stables de cisplatine.

Exemple 16:

25 On répète la procédure générale décrite dans l'exemple 9, si ce n'est que l'on remplace le polyéthylèneglycol 6000 par un poids égal de polyêthylèneglycols respectivement 1000 et 4000. On obtient des solutions concentrées stables de cisplatine.

Bien entendu, la présente invention est susceptible de nombreu-30 ses variantes accessibles à l'homme de l'art, suivant les applications envisagées et sans que l'on ne s'écarte de l'esprit de l'invention.

R

Claims (7)

647481

1. Solution concentrée stable de cisplatine dans un milieu solvant, caractérisée en ce qu'elle comprend de 30 à 95% en poids de polyéthylèneglycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre 150 et 9000, ou d'un méthoxypolyéthylèneglycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre 300 et 6000, ou bien d'un mélange de ceux-ci, et de 5 à 70% en poids d'eau, et de plus également au moins une source d'ions chlorure non toxique et acceptable du point de vue pharmaceutique, en une quantité qui est au moins équivalente à la quantité de cisplatine présente dans la solution, cette solution ayant une concentration en cisplatine comprise entre 2,5 et 25 mg/ml.

2. Solution selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend 80 à 95% en poids de polyéthylèneglycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre 250 et 1600, ou d'un méthoxypolyéthylèneglycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre 300 et 800, ou bien d'un mélange de ceux-ci, et 5 à 20% en poids d'eau, ainsi qu'au moins une source d'ions chlorure non toxique et acceptable du point de vue pharmaceutique, en une quantité qui est comprise entre 2 et 10 Eq par équivalent de cisplatine dans la solution, cette solution contenant 5 à 20 mg de cisplatine par millilitre.

2

REVENDICATIONS

3. Solution selon la revendication 2, caractérisée en ce que la source d'ions chlorure non toxique et acceptable du point de vue pharmaceutique est constituée par l'acide chlorhydrique, le chlorure de sodium, de calcium, de magnésium, ou le chlorhydrate de triéthylamine, ou bien par un mélange de ceux-ci.

4. Solution selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend 85 à 90% en poids de polyéthylèneglycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre 250 et 650, et 10 à 15% en poids d'eau, ainsi qu'une source d'ions chlorure choisie dans le groupe formé par l'acide chlorhydrique, le chlorure de sodium ou leurs mélanges, en une quantité qui est comprise entre 3 et 7 Eq par équivalent de cisplatine dans la solution, cette solution ayant une concentration en cisplatine comprise entre 10 et 15 mg/ml.

5. Solution selon la revendication 4, caractérisée en ce qu'elle est stérile et se trouve dans un récipient fermé hermétiquement, tel qu'une fiole.

6. Solution selon la revendication 5, caractérisée en ce qu'elle renferme de 10 à 15 mg de NaCl par millilitre du milieu solvant comprenant environ 90% en poids d'un polyéthylèneglycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre 350 et 450, et environ 10% en poids d'eau.

7. Solution selon la revendication 5, caractérisée en ce qu'elle renferme de 10 à 15 mg de NaCl par millilitre du milieu solvant comprenant environ 90% en poids d'un polyéthylèneglycol ayant un poids moléculaire moyen compris entre 350 et 450, et environ 10% en poids d'acide chlorhydrique dilué, dont la concentration peut aller jusqu'à 0,5N.