BR112017027719B1 - Composto, zwitterion, composição farmacêutica, e, uso de um composto - Google Patents

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Shuzhi Dong
Xin Gu
Jack D. Scott
Haiqun Tang
Zhiqiang Zhao
Yuhua Huang
Dexi Yang
Katherine Young
Li Xiao
Zhibo Zhang
Jianmin Fu
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Abstract

composto, zwitterion, composição farmacêutica, métodos para inibir betalactamase em um indivíduo e para tratamento de uma infecção bacteriana, e, uso de um composto. a presente invenção refere-se a compostos inibidores de metalo-lactamase de fórmula i e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que z, ra, x1, x2 e r1 são como aqui definidos. a presente invenção também se refere a composições que compreendem um composto inibidor de metalo-beta-lactamase da invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável, opcionalmente em combinação com um antibiótico beta-lactâmico e/ou um inibidor de betalactamase. a invenção refere-se ainda a métodos para tratar uma infecção bacteriana compreendendo administrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto do invento, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais antibióticos beta-lactâmicos e opcionalmente em combinação com um ou mais compostos inibidores de betalactamase. os compostos da invenção são úteis nos métodos aqui descritos para superar a resistência aos antibióticos.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO
[001] Esta invenção refere-se aos novos inibidores de metalo-β- lactamase e aos seus usos. Um uso preferido dos inibidores de metalo-β- lactamase é para reduzir a resistência aos antibióticos bacterianos beta- lactâmicos.
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO
[002] A resistência aos antibióticos bacterianos tem tornado-se umas das mais sérias ameaças ao moderno cuidado da saúde. As infecções causadas por bactérias resistentes frequentemente resultam em internações hospitalares mais longas, mortalidade mais alta e custo de tratamento aumentado. Consulte, por exemplo, Cohen, Science 1992, 257:1051-1055. A necessidade de novos antibióticos continuará a aumentar porque as bactérias têm uma extraordinária capacidade para desenvolverem resistência aos novos agentes, tornando-os rapidamente ineficazes. Consulte, por exemplo, Neu, Science 1992, 257: 1064-1073. A disseminação de resistência aos antibióticos tem sido chamada de uma pandemia. Uma solução à ameaça à saúde pública crescente exigirá uma abordagem interdisciplinar. Consulte, por exemplo, Anderson, Nature America 1999, 5: 147-149. Consulte também Bush et al., Nature Reviews in Microbiology 2011, 9: 894-896; Levy e Marshall, Nature Medicine 2004, 10: S122-S129; Livermore, Clinical Infectious Diseases 2003, 36: S11-S23; e Roberts et al., Clinical Infectious Diseases 2009, 49: 1175-1184.
[003] A presente crise tem instigado vários esforços para elucidar os mecanismos responsáveis pela resistência bacteriana. O uso disseminado de penicilinas e cefalosporinas tem resultado no surgimento de β-lactamases, uma família de enzimas bacterianas que catalisam a hidrólise do anel β- lactama comum a numerosos antibióticos atualmente utilizados. Consulte, Coulton et al., Progress in Medicinal Chemistry 1994, 31: 297-349. Esta família de β-lactamases bacterianas é adicionalmente dividida em quatro subfamílias: as famílias A, C, e D, que compreendem β-lactamases que têm uma serina no sítio ativo que catalisa a hidrólise de antibióticos e-lactâmicos, e a família B, que compreende β-lactamases que são metaloenzimas de zinco. A resistência mediada pelas β-lactamases é um aspecto crítico no núcleo do desenvolvimento de resistência aos antibióticos bacterianos. Consulte, Dudley, Pharmacotherapy 1995, 15: 9S-14S. Ácido clavulânico, que é um metabólito de Streptomyces clavuligerus, e dois inibidores semissintéticos, sulbactam e tazobactam, são os produtos inibidores de β-lactamase semissintéticos ou naturais atualmente disponíveis. Inibidores sintéticos de β- lactamase também têm sido descritos. Consulte, Patentes U.S. n°s 5.698.577; 5.510.343; 6.472.406; Hubschwerlen et al., J. Med. Chem. 1998, 41: 3961; e Livermore et al., J. Med. Chem. 1997, 40: 335-343. Poole (Cell. Mol. Life Sci. 2004, 61: 2200-2223) apresenta uma análise da resistência de patógenos bacterianos aos antibióticos e-lactâmicos e abordagens para superar a resistência. Para uma análise de inibidores de metalo-β-lactamases, consulte Fast e Sutton, Biochimica et Biophysica Acta - Proteins and Proteomics 2013, 1834(8): 1648-1659.
[004] A Publicação de Pedido de Patente U.S. n° US 2003/0199541 revela determinados compostos azabicíclicos incluindo determinadas 7-oxo-6- diazabicíclico[3.2.1]octano-2-carboxamidas e seu uso como agentes antibacterianos. A Publicação de Pedido de Patente U.S. n° US 2004/0157826 revela compostos heterobicíclicos incluindo determinados derivados de diazepina-carboxamida e diazepina-carboxilato e seu uso como agentes antibacterianos e inibidores de β-lactamase. A Publicação de Pedido de Patente Internacional n° WO 2008/039420 revela 7-oxo-2,6- diazabiciclo[3.2.0]heptano-6-sulfooxi-2-carboxamidas e seu uso como inibidores de β-lactamase.
[005] Zheng et al. (PLOS One 2013, 8(5), e62955) revelam 2,5-bis- tetrazolilmetil-tiofenos substituídos e seu uso como inibidores de β-lactamase. A Publicação de Pedido de Patente Chinês n° CN103130686A revela N,N’- diaril-ureias e seu uso como inibidores de metalo-β-lactamases. A Publicação de Pedido de Patente Chinês n° CN103191091 A revela arilsulfonamidas substituídas e seu uso como inibidores de metalo-β-lactamases.
[006] As Patentes U.S. n°s 4.786.311; 4.746.353; 4.838.925; as Publicações de Pedidos de Patente Europeu n°s EP204513; EP244166; e a Publicação de Pedido de Patente Chinês n° CN1095549A revelam 2-(1 H- tetrazol-5-il)benzenossulfonamidas substituídas e seu uso como herbicidas.
[007] A Publicação de Pedido de Patente Internacional n° WO 2015/112441 revela compostos de 1H- e 2H-tetrazol-5-ilsulfonamidas substituídas como inibidores de metalo-β-lactamase.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[008] A presente invenção refere-se aos compostos de 1H- e 2H- tetrazol-5-ilsulfonamidas substituídas e aos compostos relacionados que são inibidores de metalo-β-lactamase. Os compostos, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, são úteis, por exemplo, em combinação com antibióticos e—lactâmicos, e opcionalmente inibidores de serina-β-lactamase, para o tratamento de infecções bacterianas, particularmente de infecções bacterianas resistentes aos antibióticos. Mais particularmente, a presente invenção inclui compostos de Fórmula I: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 é N ou CH; X2 é N ou CH; Z é tetrazolila, em que Z é ligado através de uma ligação de carbono-carbono ao anel de núcleo de seis membros tendo X1 e X2; RA é -(CH2)n-AriA1, -(CH2)n-HetA1, -(CH2)n-cicloalquilaC4- C6, ou -(CH2)n-cicloalquenilaC4-C6, em que as ditas -(CH2)n-cicloalquilaC4-C6 e -(CH2)n-cicloalquenilaC4-C6 estão opcionalmente substituídas com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados dentre -NH2, -OH,-F, e - NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -F, -CF3,-NRaRb, e -ORa; R1 é: 1) -NH2; 2) -NRa-alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados dentre -F, -CF3, alquilaC1-C6, -CH(NH2)C(O)NH2, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, -(CH2)1- 2NH2, -NRa(CH2)2-3NH2, -NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa, e -O(CH2)2-3NH2; 3) -NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -F, -CF3, - ab ab +ab C(O)NR R , -C(O)OH, -NR R , -N R R CH3, -NHCH2CH2OCH3, - ORa, e -O(CH2)2-3NH2; 4) -NRa(CH2)n-cicloalquilaC3-C6, em que a cicloalquilaC3-C6 está opcionalmente substituída com -CH2OH ou -NH2; 5) uma heterocicloalquila monocíclica de 4-6 membros ligada a nitrogênio com 0, 1, ou 2, átomos adicionais de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S, ou uma heterocicloalquila bicíclica de 6 a 10 membros ligada a nitrogênio com 0, 1, 2, ou 3 átomos adicionais de anel heteroatômico selecionados dentre N, O e S em que o anel bicíclico pode ser ligado por ponte, fundido ou espirocíclico, em que a heterocicloalquila monocíclica de 4-6 membros e a heterocicloalqula bicíclica de 6 a 10 membros estão opcionalmente substituídas com um a três substituintes, independentemente selecionados dentre: -F, -NRaRb, oxo, -(CH2)1-2OH, -CH2NH2, - SO2CH3, e alquilaC1-C6 e em que um átomo de enxofre do anel está opcionalmente substituído com um ou dois oxo; 6) -NRa-(alquilaC1-C3)n-AriB1, em que a alquilaC1-C3 está opcionalmente substituída com -NH2; e 7) -NRa-(alquilaC1-C3)n-HetB1; AriA1 é um sistema de anel aromático selecionado dentre: 1) um anel monocíclico de 5-6 membros com 0, 1, 2, ou 3 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O, e S, opcionalmente substituído com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados dentre: a) halogênio, b) -alquilaC1-C6, c) -CN, d) -CH2OH, e) -C(O)NRaRb, f) -C(O)NH(CH2)2-4NH2 opcionalmente substituído com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre - NRaRb e --(CH2)nORa, g) -C(O)ORa, h) -(CH2)pNHRa opcionalmente substituído com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb ou --ORa, i) -(CH2)pNRaC(=NH)NH2, j) -NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre - NRaRb ou --ORa, k) -NRaSO2-alquilaC1-C6, l) -NRaSO2-ciclopropila, m) -ORa, n) oxo, o) -S-alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb ou --ORa; p) -SO2Ra, q) -SO2NRaRb, r) -SO2NH-ciclopropila, s) -AriA2, t) -(CH2)nNRaAriA2, u) -C(O)NRaHetA2 e v) -HetA2, e 2) um anel bicíclico de 8 a 10 membros com 1, 2, 3 ou 4 átomos de anel heteroatômico selecionados dentre N, O e S, em que um átomo de S opcionalmente tem um ou dois substituintes oxo e um átomo de N está opcionalmente sob a forma de um N-óxido, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre: a) halogênio; b) alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com um a três substituintes independentemente selecionados dentre: -NRaRb, -F e -ORa; c) -(CH2)nCF3; d) -C(=NH)NH2; e) -CN; f) -C(O)CF3; g) -C(O)NRaRb; h) -C(O)NHCH2C(O)ORa; i) -C(O)NH-alquilaC2-C4-NH2, j) -C(O)ORa; k) -NRaRb; l) -NHCH2SO3H; m) -(CH2)nNHC(=NH)NH2; n) -NHC(O)alquilaC1-C6; o) -NHC(O)NH2; p) -NHC(O)ORa; q) -NHSO2CH3; r) -ORa; s) oxo; t) -SO2Ra, u) -CH2-fenil-OCH3; e v) -HetA2; HetA1 é di-hidrotiopiranila ou tetra-hidropiranila; AriA2 é um anel monocíclico aromático de 5-6 membros com 1, 2, ou 3 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, N como um sal quaternário, e S, ou 4 átomos de N no anel, opcionalmente substituído com -CH2OH, -COOH,-CONH2, -C(O)OalquilaC1- C6, e -(CH2)pNHRa opcionalmente substituído com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb e --ORa; HetA2 é um anel monocíclico saturado de 4-6 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S, em que o S está opcionalmente substituído com dois grupos oxo, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre alquilaC1-C6, -CN, -OH, e oxo; AriB1 é um anel aromático selecionado dentre: 1) um anel aromático monocíclico de 5-6 membros com 0, 1, 2, ou 3 átomos de N no anel, opcionalmente substituído com 1 substituinte selecionado dentre -CF3, alquilaC1-C6, -(CH2)nNH2 e -OCH3; ou 2) um anel bicíclico de 9 membros com 2 átomos de N no anel; HetB1 é um anel saturado selecionado dentre: 1) um anel monocíclico saturado de 4-6 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S, em que um átomo de N no anel está opcionalmente sob a forma de uma amina quaternária, em que o S está substituído com dois grupos oxo, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -F, alquilaC1-C6, hidroxialquilaC1-C6, -C(O)ORa,-(CH2)kNRaRb, -ORa, e oxo; ou 2) um anel bicíclico de 6-10 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N e O, opcionalmente substituído com -OH ou -NH2, em que o anel bicíclico é ligado por ponte ou fundido; Ra e Rb são independentemente H ou alquilaC1-C6; k é 0, 1, 2, 3, ou 4; cada n é independentemente 0 ou 1; e cada p é independentemente 0, 1, 2, ou 3.
[009] Os compostos de Fórmula I inibem metalo-β-lactamases e podem sinergizar os efeitos antibacterianos de antibióticos e-lactâmicos (por exemplo, imipenem, ceftazidima, ceftolozano, e piperacilina) contra micro-organismos normalmente resistentes ao antibióticos e-lactâmicos como um resultado da presença das metalo-β-lactamases. Os compostos da presente invenção são eficazes contra metalo-β-lactamases e sua combinação com um antibiótico e-lactâmico, como imipenem, ceftazidima, ceftolozano, ou piperacilina, podem fornecer um tratamento eficaz de infecções bacterianas causadas por micro-organismos produtores de metalo-β-lactamase. Consequentemente, em determinadas modalidades, a presente invenção fornece composições compreendendo um composto de Fórmula I, IA, ou IB com um antibiótico e-lactâmico, e opcionalmente um ou mais inibidores de β- lactamase adicionais, adequadas para uso contra bactérias produtoras de metalo-β-lactamase como Pseudomonas spp. e Klebsiella spp. Em algumas modalidades, o(s) um ou mais inibidor(es) de β-lactamase adicional(ais) é (são) um inibidor de serina-β-lactamase (das classes A, C e D). A invenção também inclui composições compreendendo um composto de Fórmula I, IA, ou IB ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um carreador farmaceuticamente aceitável. A invenção inclui, adicionalmente, métodos para o tratamento de infecções bacterianas e a inibição de crescimento bacteriano pela administração de um composto de Fórmula I, IA, ou IB, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um paciente que necessita da mesma, ou pela administração de uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula I, IA, ou IB ou seu sal e um carreador farmaceuticamente aceitável.
[0010] Modalidades, submodalidades, aspectos e características da presente invenção quer são adicionalmente descritos quer serão evidentes a partir da seguinte descrição, dos seguintes exemplos e das reivindicações em anexo.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
[0011] Conforme observado acima, a presente invenção inclui compostos de Fórmulas I, IA, e IB, em que os compostos são inibidores de metalo-β-lactamase adequados para uso em combinação com antibióticos β- lactâmicos e opcionalmente com inibidores de β-lactamase das classes A, C, e/ou D para o tratamento de infecções bacterianas.
[0012] A invenção é baseada, em parte, na presença de um grupo conector de S na posição-6 do anel de núcleo como uma sulfonamida. A presença de um enxofre nesta posição resulta em potência enzimática melhorada em comparação com quando o grupo conector é carbono e também fornece atividade melhorada em cepas bacterianas de Pseudomonas de difícil penetração. A atividade Pseudomônica melhorada é provavelmente devido a um decréscimo do efluxo das células como um resultado do grupo conector sulfonamida.
[0013] Em cada uma das várias modalidades dos compostos da invenção aqui descritos, cada variável incluindo aquelas das Fórmulas I, IA e IB e as várias modalidades da mesma, é selecionada independentemente das outras variáveis, salvo indicação em contrário.
[0014] A presente invenção inclui para cada uma das várias modalidades dos compostos da invenção aqui descritos, incluindo aqueles das Fórmulas I, IA e IB, e as várias modalidades da mesma e os compostos dos exemplos, todas as formas dos compostos como, por exemplo, quaisquer solvatos, hidratos, estereoisômeros, e tautômeros de ditos compostos e de quaisquer sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, salvo indicação em contrário. Adicionalmente, nos exemplos aqui descritos, os compostos da invenção são representados sob a forma de sal. Em tais casos, é para ser entendido que os compostos da invenção incluem as formas de ácido livre ou de base livre de tais sais, e qualquer sal farmaceuticamente aceitável de ditas formas de ácido livre ou de base livre. Além disso, nos casos nos quais um grupo ácido como tetrazol e um grupo básico como amina estão presentes dentro do mesmo composto, estes compostos podem ser aqui representados, por conveniência, como as formas de ácido livre e de base livre, mas deve ser entendido que estes podem ser, também, alternativamente, representados sob suas formas zwiteriônicas nas quais o tetrazol possui uma carga negativa e a amina possui uma carga positiva, que, outrossim, estão incluídas como os compostos da invenção.
Os Compostos de Fórmula (I):
[0015] Em um aspecto, a presente invenção inclui compostos de Fórmula I: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1, X2, Z, RA e R1 são conforme aqui definidos para os compostos de Fórmula (I) (isto é, conforme definidos no Sumário da Invenção); em que os compostos podem ser adequados para uso para o tratamento de infecções bacterianas.
[0016] Uma primeira modalidade da invenção (Modalidade E1) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1, X2, Z, RA e R1 são conforme definidos na Fórmula (I) no Sumário da Invenção.
[0017] Uma segunda modalidade (Modalidade E2) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é CH, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0018] Uma terceira modalidade (Modalidade E3) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é N, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0019] Uma quarta modalidade (Modalidade E4) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é CH, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0020] Uma quinta modalidade (Modalidade E5) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é N, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0021] Uma sexta modalidade (Modalidade E6) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é -(CH2)n-AriA1 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0022] Uma sétima modalidade (Modalidade E7) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é -(CH2)n-HetA1e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0023] Uma oitava modalidade (Modalidade E8) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é -(CH2)n-cicloalquilaC4-C6, em que a dita -(CH2)n-cicloalquilaC4-C6 está opcionalmente substituída com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados dentre -NH2, -OH, -F, e -NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre - F, -CF3,-NRaRb, e -ORa e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0024] Em uma submodalidade da Modalidade E8, -(CH2)n- cicloalquilaC4-C6 está não substituída. Em outra submodalidade da Modalidade E8, -(CH2)n-cicloalquilaC4-C6 está substituída com 1 substituinte. Em outra submodalidade da Modalidade E8, -(CH2)n-cicloalquilaC4-C6 está substituída com 2 substituintes. Em outra submodalidade da Modalidade E8, - (CH2)n-cicloalquilaC4-C6 está substituída com 3 substituintes.
[0025] Em outra submodalidade da Modalidade E8 -(CH2)n- cicloalquilaC4-C6 está substituída com pelo menos uma ocorrência de NH2.
[0026] Em uma submodalidade adicional da Modalidade E8 -(CH2)n- cicloalquilaC4-C6 está substituída com pelo menos uma ocorrência de -OH.
[0027] Em ainda outra submodalidade da Modalidade E8 -(CH2)n- cicloalquilaC4-C6 está substituída com pelo menos uma ocorrência de -F.
[0028] Em uma submodalidade da Modalidade E8 -(CH2)n- cicloalquilaC4-C6 está substituída com pelo menos uma ocorrência de - NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -F, -CF3,-NRaRb, e -ORa.
[0029] Uma nona modalidade (Modalidade E9) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é -(CH2)n-cicloalquenilaC4-C6, em que a -(CH2)n-cicloalquenilaC4-C6 está opcionalmente substituída com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados dentre -NH2, -OH,-F, e -NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre - F, -CF3,-NRaRb, e -ORa e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0030] Em uma submodalidade da Modalidade E9, -(CH2)n- cicloalquenilaC4-C6 está não substituída. Em outra submodalidade da Modalidade E9, -(CH2)n-cicloalquenilaC4-C6 está substituída com 1 substituinte. Em outra submodalidade da Modalidade E9, -(CH2)n- cicloalquenilaC4-C6 está substituída com 2 substituintes. Em outra submodalidade da Modalidade E9, -(CH2)n-cicloalquenilaC4-C6 está substituída com 3 substituintes.
[0031] Em outra submodalidade da Modalidade E9 -(CH2)n- cicloalquenilaC4-C6 está substituída com pelo menos uma ocorrência de NH2.
[0032] Em uma submodalidade adicional da Modalidade E9 -(CH2)n- cicloalquenilaC4-C6 está substituída com pelo menos uma ocorrência de -OH.
[0033] Em ainda outra submodalidade da Modalidade E9 -(CH2)n- cicloalquenilaC4-C6 está substituída com pelo menos uma ocorrência de -F.
[0034] Em uma submodalidade da Modalidade E9 -(CH2)n- cicloalquenilaC4-C6 está substituída com pelo menos uma ocorrência de - NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -F, -CF3,-NRaRb, e -ORa.
[0035] Uma décima modalidade (Modalidade E10) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é AriA1 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0036] Uma décima primeira modalidade (Modalidade E11) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é cicloalquilaC4-C6 opcionalmente substituída com -NH2 ou NHC(O)(CH2)1-3NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0037] Uma décima segunda modalidade (Modalidade E12) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é cicloalquenilaC4-C6 opcionalmente substituída com -NH2 ou NHC(O)(CH2)1-3NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0038] Uma décima terceira modalidade (Modalidade E13) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é HetA1 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0039] Uma décima quarta modalidade (Modalidade E14) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é: selecionado do grupo consistindo em: RD é F,-alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-C4-NH2, -NHRa ou - (CH2)xNHRa, cada x é independentemente 0, 1, ou 2, n é 0 ou 1, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0040] Uma décima quinta modalidade (Modalidade E15) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, m qu X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é: RD é F,-alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-C4-NH2, -NHRa ou - (CH2)xNHRa, cada x é independentemente 0, 1, ou 2, e todas as outras variávis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0041] Uma décima sexta modalidade (Modalidade E16) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, m qu X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é: RD é F,-alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-C4-NH2, -NHRa ou - (CH2)xNHRa, cada x é independentemente 0, 1, ou 2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0042] Uma décima sétima modalidade (Modalidade E17) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é: RD é -F,-alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-C4-NH2, -NHRa ou - (CH2)xNHRa, x é 0, 1, ou 2, n é 0 ou 1, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0043] Uma décima oitava modalidade (Modalidade E18) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é: RD é F, -alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-C4-NH2, -NHRa ou - (CH2)xNHRa, x é 0, 1, ou 2, n é 0 ou 1, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0044] Em submodalidades das Modalidades E17 e E18, n é 0.
[0045] Em outras submodalidades das Modalidades E17 e E18, pelo menos uma ocorrência de RD é NH2. Em outras submodalidades das Modalidades E17 e E18, pelo menos uma ocorrência de RD é -(CH2)xNHRa. Em submodalidades adicionais das Modalidades E17 e E18, pelo menos uma ocorrência de RD é metila. Em ainda outras submodalidades das Modalidades E17 e E18, pelo menos uma ocorrência de RD é -CH2NH2. Em submodalidades adicionais das Modalidades E17 e E18, pelo menos uma ocorrência de RD é -F. Em submodalidades ainda mais adicionais das Modalidades E17 e E18, pelo menos uma ocorrência de RD é -CONH- alquilaC2-C4-NH2. Em outras submodalidades das Modalidades E17 e E18, pelo menos uma ocorrência de RD é -alquilaC1-C6.
[0046] Uma décima nona modalidade (Modalidade E19) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é: RD é F,-alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-C4-NH2, -NHRa ou - (CH2)xNHRa, cada x é independentemente 0, 1, ou 2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0047] Uma vigésima modalidade (Modalidade E20) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é: RD é F,-alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-C4-NH2, -NHRa ou - (CH2)xNHRa, cada x é independentemente 0, 1, ou 2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0048] Uma vigésima primeira modalidade (Modalidade E21) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é: ou , e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0049] Uma vigésima segunda modalidade (Modalidade E22) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é um anel monocíclico aromático de 5-6 membros com 0, 1, 2, ou 3 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O, e S, opcionalmente substituído com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados dentre: halogênio, -alquilaC1-C6, -CN, - CH2OH, -C(O)NRaRb, -C(O)NH(CH2)2-4NH2 opcionalmente substituído com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb e -- (CH2)nORa, -C(O)ORa, -(CH2)pNHRa opcionalmente substituído com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb ou --ORa, - (CH2)pNRaC(=NH)NH2, -NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb ou --ORa, -NRaSO2-alquilaC1-C6, -NRaSO2-ciclopropila, -ORa, oxo, -S- alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb ou --ORa; -SO2Ra, - SO2NRaRb, -SO2NH-ciclopropila, -AriA2, -(CH2)nNRaAriA2, - C(O)NRaHetA2 e -HetA2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0050] Uma vigésima terceira modalidade (Modalidade E23) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é um sistema de anel aromático bicíclico de 8 a 10 membros com 1, 2, 3 ou 4 átomos de anel heteroatômico selecionados dentre N, O e S, em que um átomo de S opcionalmente tem um ou dois substituintes oxo e um átomo de N está opcionalmente sob a forma de um N-óxido, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre halogênio; alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com um a três substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb, -F e - ORa; -(CH2)nCF3; -C(=NH)NH2; -CN; C(O)CF3; -C(O)NRaRb; - C(O)NHCH2C(O)ORa; -C(O)NH-alquilaC2-C4-NH2, -C(O)ORa; -NRaRb; - NHCH2SO3H; -(CH2)nNHC(=NH)NH2; -NHC(O)alquilaC1-C6; -NHC(O)NH2; -NHC(O)ORa; -NHSO2CH3; -ORa; oxo; -SO2Ra, -CH2-fenil-OCH3; e -HetA2; e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0051] Uma vigésima quarta modalidade (Modalidade E24) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é di-hidrotiopiranila, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0052] Uma vigésima quinta modalidade (Modalidade E25) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é tetra-hidropiranila, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0053] Uma vigésima sexta modalidade (Modalidade E26) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é NH2 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0054] Uma vigésima sétima modalidade (Modalidade E27) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NRa-alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados dentre -F, -CF3, alquilaC1-C6, - CH(NH2)C(O)NH2, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, -(CH2)1-2NH2, -NRa(CH2)2-3NH2, -NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa, e -O(CH2)2-3NH2 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0055] Uma vigésima oitava modalidade (Modalidade E28) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -F, -CF3, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, - NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa, e -O(CH2)2-3NH2 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0056] Uma vigésima nona modalidade (Modalidade E29) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NRa(CH2)n-cicloalquilaC3-C6, em que a cicloalquilaC3-C6 está opcionalmente substituída com -CH2OH ou -NH2 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0057] Um trigésima modalidade (Modalidade E30) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é uma heterocicloalquila monocíclica de 4-6 membros ligada a nitrogênio com 0, 1, ou 2, átomos adicionais de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S, ou uma heterocicloalquila bicíclica de 6 a 10 membros ligada a nitrogênio com 0, 1, 2, ou 3 átomos adicionais de anel heteroatômico selecionados dentre N, O e S em que o anel bicíclico pode ser ligado por ponte, fundido ou espirocíclico, em que a heterocicloalquila monocíclica de 4-6 membros e a heterocicloalqula bicíclica de 6 a 10 membros estão opcionalmente substituídas com um a três substituintes, independentemente selecionados dentre: -F, -NRaRb, oxo, -(CH2)1-2OH, - CH2NH2, -SO2CH3, e alquilaC1-C6 e em que um átomo de enxofre do anel está opcionalmente substituído com um ou dois oxo e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0058] Uma trigésima primeira (Modalidade E31) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é -NRa-(alquilaC1- C3)n-AriB1, em que a alquilaC1-C3 está opcionalmente substituída com -NH2 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0059] Em uma submodalidade da Modalidade E31, Ra é H e AriB1 é um anel aromático monocíclico de 5-6 membros com 0, 1, 2, ou 3 átomos de N no anel, opcionalmente substituído com 1 substituinte selecionado dentre - CF3, alquilaC1-C6, -(CH2)nNH2 e -OCH3.
[0060] Em uma submodalidade adicional da Modalidade E31, Ra é H e AriB1 é um sistema de anel aromático bicíclico de 9 membros com 2 átomos de N no anel.
[0061] Uma trigésima segunda modalidade (Modalidade E32) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NRa-(alquilaC1-C3)n-HetB1 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0062] Em uma submodalidade da Modalidade E32, Ra é H e HetB1 é um anel monocíclico saturado de 4-6 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S, em que um átomo de N no anel está opcionalmente sob a forma de uma amina quaternária, em que o S está substituído com dois grupos oxo, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -F, alquilaC1-C6, hidroxialquilaC1-C6, -C(O)ORa,- (CH2)kNRaRb, -ORa, e oxo.
[0063] Em outra submodalidade da Modalidade E32, Ra é H e HetB1 é um anel bicíclico saturado de 6-10 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N e O, opcionalmente substituída com -OH ou -NH2, em que o anel bicíclico é ligado por ponte ou fundido.
[0064] Em outra submodalidade da Modalidade E32, Ra é H e HetB1 é: e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0065] Uma trigésima terceira modalidade (Modalidade E33) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NH-HetB1 opcionalmente substituído com NH2 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0066] Uma trigésima quarta modalidade (Modalidade E34) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é NH- alquilaC1-C3NH2, opcionalmente substituída com -CH3, -OH ou -NH2 e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0067] Uma trigésima quinta modalidade (Modalidade E35) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é NH- HetB1, em que HetB1 é um anel monocíclico saturado de 4-6 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N e O, opcionalmente substituída com -NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0068] Uma trigésima sexta modalidade (Modalidade E36) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NH(CH2)2NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0069] Uma trigésima sétima modalidade (Modalidade E37) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NHCH(CH2NH2)CH2NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0070] Uma trigésima oitava modalidade (Modalidade E38) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NHCH2CH(OH)CH2NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0071] Uma trigésima nona modalidade (Modalidade E39) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NHCH2CH(NH2)CH2NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0072] Uma quadragésima modalidade (Modalidade E40) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6-E25, R1 é - NHCH(CH2OH)CH2NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0073] Uma quadragésima primeira modalidade (Modalidade E41) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6- E25, R1 é -NHCH(CH3)CH2NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0074] Uma quadragésima segunda modalidade (Modalidade E42) é um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é definido na Modalidade E2 ou E3, X2 é definido na Modalidade E4 ou E5, RA é definido em qualquer uma das Modalidades E6- E25, R1 é -NH2, anel bicíclico saturado -NH-HetB1 opcionalmente substituído com -NH2, ou -NH-alquilaC2-C3NH2, opcionalmente substituída com -CH3, - OH ou -NH2, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0075] Uma quadragésima terceira (Modalidade E43) é um composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a Fórmula IA: em que: RA é AriA1, cicloalquilaC4-C6, ou cicloalquenilaC4-C6, em que as ditas cicloalquilaC4-C6 e cicloalquenilaC4-C6 estão opcionalmente substituídas com -NH2 ou NHC(O)(CH2)1-3NH2; AriA1 é um sistema de anel aromático selecionado dentre: 1) um anel monocíclico de 5-6 membros com 0, 1, ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N e S, opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre: a) F, b) -alquilaC1-C6, c) -CN, d) -CH2OH, e) -C(O)NRaRb, f) -C(O)NH(CH2)2-4NH2, g) -C(O)ORa, h) -(CH2)nNHRa, i) -NHC(=NH)NH2; j) -NHC(O)CH3; k) -NRaSO2-alquilaC1-C6, l) -NHSO2-ciclopropila, m) -ORa, n) -SO2NRaRb, o) -S-alquilaC1-C6, p) -SO2NH-ciclopropila, q) -AriA2, r) -(CH2)nNRaAriA2, s) -C(O)NRaHetA2 e t) -HetA2, e 2) um anel bicíclico de 8 a 10 membros com 1, 2, 3 ou 4 átomos de anel heteroatômico selecionados dentre N, O e S, em que um átomo de S está opcionalmente substituído com um ou dois substituintes oxo e um átomo de N está opcionalmente sob a forma de um N- óxido, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F, alquilaC1- C6, -CH2CF3, -CF2CH2NH2, -CF3, -C(=NH)NH2, -CH(NH2)CH3, - CN, -C(O)CF3, -C(O)NRaRb, -C(O)NHCH2C(O)ORa, -C(O)ORa, - (CH2)0-2NRaRb, -NHC(O)CH3, -NHC(O)NH2, -NHC(O)ORa, - NHCH2SO3H, -NHSO2CH3, -ORa, oxo, -CH2-fenil-OCH3, e - HetA2; em que todas as outras variáveis são definidas na Modalidade E1.
[0076] Uma quadragésima quarta modalidade (Modalidade E44) é um composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a Fórmula IB: em que: AriA1 é um sistema de anel aromático selecionado dentre: 1) um anel monocíclico de 5-6 membros com 0 ou 1 átomo de N substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F, -alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-4-NH2, ou - NHRa; ou 2) um anel bicíclico de 9 membros com 2 átomos de anel heteroatômico selecionados dentre N e S, em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F, alquilaC1-C6, e -(CH2)xNRaRb; R1 é: 1) -NH2; 2) -NRa-alquilaC1-6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes F e opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -CF3, -CH(NH2)C(O)NH2; ab a ab +ab -C(O)NR R ; -C(O)OH; -NR (CH2)2-3NH2, -NR R , -N R R CH3, - NHCH2CH2OCH3, -ORa, e -O(CH2)2-3NH2; 3) -NRa(CH2)n-cicloalquilaC3-C6, em que a cicloalquilaC3-C6 está opcionalmente substituída com -CH2OH ou -NH2; 4) -NRa-(alquilaC1-C3)n-AriB1; e 5) -NRa-(alquilaC1-C3)n-HetB1; Ra e Rb são H ou -CH3; x é 0, 1 ou 2, e todas as outras variáveis são definidas na Modalidade E1.
[0077] Uma quadragésima quinta modalidade (Modalidade E45) é um composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tendo a Fórmula (IB): em que: AriA1 é um sistema de anel aromático selecionado dentre: 1) um anel monocíclico de 5-6 membros com 0 ou 1 átomo de N substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F, -alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-4-NH2, ou - NHRa; ou 2) um anel bicíclico de 9 membros com 2 átomos de anel heteroatômico selecionados dentre N e S, em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F, alquilaC1-C6, e -(CH2)0-2NRaRb; R1 é: 1) -NH2; 2) -NRa-alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes F e opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -CF3, -CH(NH2)C(O)NH2; ab ab +ab a -C(O)NR R ; -C(O)OH; -NR R , -N R R CH3, -OR , e -O(CH2)1- 2NH2; 3) -NRa(CH2)0-1-cicloalquilaC3-6, em que a cicloalquilaC3-6 está opcionalmente substituída com -CH2OH ou -NH2; 4) -NRa-alquilaC0-3-AriB1; e 5) -NRa-alquilaC0-3-HetB1; HetB1 é: 1) um anel monocíclico saturado de 4-6 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S, em que o S está substituído com dois grupos oxo, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F, alquilaC1-C6, hidroxialquilaC1-C6, -NRaRb, -OH, alcoxilaC1-6, -C(O)ORa, e oxo; ou 2) um anel bicíclico de 6-8 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N e O, opcionalmente substituído com -OH ou -NH2, em que o anel bicíclico é ligado por ponte ou fundido; Ra e Rb são H ou -CH3, e todas as outras variáveis são conforme definidas na Modalidade E1.
[0078] Uma quadragésima sexta modalidade da invenção (Modalidade E46) é: (1) um composto tendo uma estrutura de qualquer um dos compostos de números 1-500 nos Exemplos aqui, (2) a forma de ácido livre ou a forma de base livre (quando um grupo básico amina está presente) de qualquer composto de números 1-500 aqui que é representado como um sal, (3) a forma zwiteriônica de qualquer um dos compostos 1-500 que contém um grupo básico amina e um grupo ácido tetrazol, em que o grupo ácido tetrazol possui uma carga negativa e o grupo básico amina possui uma carga positiva, ou (4) um sal farmaceuticamente aceitável dos compostos descritos em (1), (2), e/ou (3).
[0079] Uma quadragésima sétima modalidade da invenção (Modalidade E47) é um composto tendo a estrutura: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0080] Outras modalidades da presente invenção incluem as seguintes: (a) Uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I, IA, ou IB conforme definido acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um carreador farmaceuticamente aceitável. (b) A composição farmacêutica de (a), compreendendo, adicionalmente, uma quantidade eficaz de um antibiótico β- lactâmico e opcionalmente compreendendo, adicionalmente, uma quantidade eficaz de um composto que é um inibidor de β-lactamase da classe A, um inibidor de β-lactamase da classe C, e/ou um inibidor de β-lactamase da classe D. (c) A composição farmacêutica de (b), em que o antibiótico β- lactâmico é selecionado do grupo consistindo em imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcilina, ampicilina, amoxicilina, carbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina, ticarcilina, cefoperazona, cefotaxima, ceftriaxona, cefepima, ceftolozano, e ceftazidima, e o inibidor de β-lactamase das classes A, C e D é selecionado do grupo consistindo em relebactam, avibactam, vaborbactam, tazobactam, sulbactam, ácido clavulânico, ou CB-618. (d) A composição farmacêutica de (b), em que o antibiótico β- lactâmico é imipenem. (e) A composição farmacêutica de (b), em que o antibiótico β- lactâmico é ceftazidima. (f) A composição farmacêutica de (b), em que o antibiótico β- lactâmico é ceftolozano. (g) A composição farmacêutica de (b), em que o antibiótico β- lactâmico é piperacilina. (h) A composição farmacêutica de (a), compreendendo, adicionalmente, um composto que é um inibidor de β- lactamase da classe A, um inibidor de β-lactamase da classe C, e/ou um inibidor de β-lactamase da classe D. (i) A composição farmacêutica de qualquer um de (b)-(h), em que o composto inibidor de β-lactamase é relebactam. (j) A composição farmacêutica de qualquer um de (b)-(h), em que o composto inibidor de β-lactamase é tazobactam. (k) A composição farmacêutica de (a), compreendendo, adicionalmente, quantidades eficazes de um antibiótico β- lactâmico, um inibidor de desidropeptidase (DHP, “DeHydroPeptidase”) renal, e opcionalmente, um inibidor de β-lactamase das classes A, C e D. (l) A composição farmacêutica de (k), em que o antibiótico β- lactâmico é imipenem, o inibidor de DHP é cilastatina ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e o inibidor de β- lactamase das classes A, C e D é relebactam. (m) Uma combinação de quantidades eficazes de um composto de Fórmula I conforme definido acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, um antibiótico β- lactâmico, e opcionalmente, um inibidor de β-lactamase das classes A, C e/ou D. (n) A combinação de (j), em que o antibiótico e-lactâmico é selecionado do grupo consistindo em imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcilina, ampicilina, amoxicilina, carbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina, ticarcilina, cefoperazona, cefotaxima, ceftriaxona, cefepima, ceftolozano, e ceftazidima. (o) A combinação de (n), em que o antibiótico e-lactâmico é imipenem, opcionalmente em combinação com cilastatina, e o inibidor de β-lactamase das classes A, C, D é relebactam. (p) A combinação de (n), em que o antibiótico e-lactâmico é ceftazidima e o inibidor de β-lactamase das classes A, C, D é avibactam. (q) A combinação de (n), em que o antibiótico e-lactâmico é ceftolozano e o inibidor de β-lactamase das classes A, C, D é avibactam ou relebactam. (r) A combinação de (n), em que o antibiótico e-lactâmico é piperacilina. (s) Uma combinação de quantidades eficazes de um composto de Fórmula I, IA ou IB conforme definido acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um inibidor de e-lactamase das classes A, C e/ou D. (t) Uma combinação de quantidades eficazes de um composto de Fórmula I, IA, ou IB conforme definido acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, um antibiótico e- lactâmico, um inibidor de DHP, e opcionalmente um inibidor de e-lactamase das classes A, C e/ou D. (u) A combinação de (t), em que o antibiótico e-lactâmico é imipenem, o inibidor de DHP é cilastatina ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e o inibidor de β- lactamase das classes A, C e D é relebactam. (v) Um método para o tratamento de uma infecção bacteriana que compreende administrar a um indivíduo que necessita de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I, IA, ou IB conforme definido acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com uma quantidade eficaz de um antibiótico β- lactâmico e opcionalmente em combinação com um inibidor de β-lactamase das classes A, C e D. (w) Um método para o tratamento de uma infecção bacteriana que compreende administrar a um indivíduo que necessita de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I, IA, ou IB conforme definido acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com quantidades eficazes de um antibiótico β- lactâmico e um inibidor de DHP, e opcionalmente em combinação com um inibidor de β-lactamase das classes A, C e D. (x) Um método para o tratamento de uma infecção bacteriana que compreende administrar a um indivíduo que necessita de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição de (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), (h), (i), (j), (k), ou (l). (y) Um método para o tratamento de uma infecção bacteriana que compreende administrar a um indivíduo que necessita de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz da combinação de (m), (n), (o), (p), (q), (r), (s), (t), ou (u). (z) Um método de tratamento de uma infecção bacteriana conforme apresentado em (v), (w), (x), (y) ou (z) em que a infecção bacteriana é devido à Pseudomonas spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp., Escherichi spp.a, Morganella spp., Citrobacter spp., Serratia, spp. ou Acintetobacter spp.
[0081] A presente invenção também inclui um composto de Fórmula I, IA, ou IB, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, (i) para uso em, (ii) para uso como um medicamento para, ou (iii) para uso na preparação (ou fabricação) de um medicamento para, inibição da atividade de betalactamase ou tratamento de infecção bacteriana. Nestes usos, os compostos da presente invenção podem ser utilizados, opcionalmente, em combinação com um ou mais antibióticos e-lactâmicos, e podem ser utilizados, adicionalmente, em combinação com um inibidor de serina-β- lactamase das classes A, C, e/ou D e/ou um ou mais inibidores de DHP.
[0082] Modalidades adicionais da invenção incluem as composições farmacêuticas, combinações e métodos apresentados em (a)-(z) acima e os usos apresentados no parágrafo anterior, em que o composto da presente invenção utilizado nas mesmas (nos mesmos) é um composto de uma das modalidades, submodalidades, classes ou subclasses descritas acima. O composto pode ser opcionalmente usado sob a forma de um sal farmaceuticamente aceitável nestas modalidades. Além disso, o composto pode ser opcionalmente usado sob a forma de um pró-fármaco que libera o composto parental ativo após a dosagem por administração intravenosa ou oral.
[0083] Nas modalidades os compostos e sais aqui fornecidas, é para ser entendido que cada modalidade pode ser combinada com uma ou mais outras modalidades, na extensão que uma tal combinação forneça um composto ou sal estável e seja consistente com a descrição das modalidades. É para ser adicionalmente entendido que as modalidades de composições e métodos fornecidos como (a) até (z), acima, são entendidas para incluírem todas as modalidades dos compostos e/ou dos sais, incluindo tais modalidades como resultado de combinações de modalidades.
[0084] As modalidades adicionais da presente invenção incluem, cada uma, as composições farmacêuticas, combinações, e métodos e usos apresentados nos parágrafos anteriores, em que o composto da presente invenção ou seu sal utilizado nas mesmas (nos mesmos) é substancialmente puro. Com respeito a uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula I, IA, ou IB ou seu sal e um carreador farmaceuticamente aceitável e opcionalmente um ou mais excipientes, é para ser entendido que o termo “substancialmente puro” refere-se, por si mesmo, a um composto de Fórmula I, IA, ou IB ou seu sal; isto é, a pureza do ingrediente ativo na composição.
Definições e abreviações:
[0085] O termo “inibidor de β-lactamase” refere-se a um composto que é capaz de inibir a atividade enzimática das β-lactamases. Como aqui usada, a inibição da atividade de β-lactamases significa a inibição da atividade de uma β-lactamase das classes A, B, C, e/ou D. Para aplicações antimicrobianas a inibição em uma concentração inibitória de 50% é preferencialmente alcançada a ou abaixo de cerca de 100 microgramas/ mL (μg/ mL), ou a ou abaixo de cerca de 50 microgramas/ mL, ou a ou abaixo de cerca de 25 microgramas/ mL. Os termos “β-lactamase da classe A”, “β- lactamase da classe B”, “β-lactamase da classe C”, e “β-lactamase da classe D” são entendidos por aquelas pessoas versadas na técnica e são descritos em S. G. Waley, “β-Lactamase: mechanisms of action”, em “The Chemistry of β- Lactams”, M. I. Page, Ed.; Chapman and Hall, London, (1992) 198-228.
[0086] O termo “inibidor de metalo-β-lactamase” refere-se a um composto que é capaz de inibir a atividade de metalo-β-lactamase. Como aqui usada, a inibição da atividade de metalo-β-lactamase significa a inibição da atividade de uma metalo-β-lactamase da classe B. Para aplicações antimicrobianas a inibição em uma concentração inibitória de 50% é preferencialmente alcançada a ou abaixo de cerca de 100 μg/ mL, ou a ou abaixo de cerca de 50 μg/ mL, ou a ou abaixo de cerca de 25 μg/ mL
[0087] O termo “metalo-β-lactamase” denota uma metaloproteína capaz de inativar um antibiótico e-lactâmico. A β-lactamase pode ser uma enzima que catalisa a hidrólise do anel β-lactama de um antibiótico β- lactâmico. São de interesse específico aqui as metalo-β-lactamases microbianas. A metalo-β-lactamase pode ser, por exemplo, uma metalo-β- lactamase de zinco. β-Lactamases de interesse incluem aquelas reveladas, por exemplo, em S. G. Waley, “β-Lactamase: mechanisms of action”, em “The Chemistry of β-Lactams”, M. I. Page, Ed.; Chapman and Hall, London, (1992) 198-228. β-Lactamases de interesse específico aqui incluem as metalo- β-lactamases de Escherichia coli (como “metalo-β-lactamase de Nova Deli”, NDM), Serratia marcescens (como IMP), Klebsiella spp. (como “metalo-β- lactamase codificada pelo integron Verona”, VIM) e Pseudomonas spp. (como “metalo-β-lactamase codificada pelo integron Verona”, VIM). As metalo-β- lactamases, de interesse aqui, adicionais, incluem as enzimas dos tipos SPM, GIM, SIM, KHM, AIM, DIM, SMB, TMB, e FIM.
[0088] O termo “antibiótico” refere-se a um composto ou uma composição que decresce a viabilidade de um micro-organismo, ou que inibe o crescimento ou a proliferação de um micro-organismo. A frase “inibe o crescimento ou a proliferação” significa que aumenta o tempo de geração (isto é, o tempo necessário para que a célula bacteriana se divida ou para a população duplicar-se) em pelo menos cerca de 2 vezes. Os antibióticos preferidos são aqueles que podem aumentar o tempo de geração em pelo menos cerca de 10 vezes ou mais (por exemplo, em pelo menos cerca de 100 vezes ou mesmo infinitamente, como em morte total das células). Como usado nesta revelação, um antibiótico é adicionalmente pretendido para incluir um agente antimicrobiano, bacteriostático, ou bactericida. Exemplos de antibióticos adequados para uso com respeito à presente invenção incluem penicilinas, cefalosporinas e carbapenemos.
[0089] O termo “antibiótico e-lactâmico” refere-se a um composto com propriedades antibióticas que contém uma funcionalidade β-lactama. Exemplos não limitadores de antibióticos e-lactâmicos úteis com respeito à presente invenção incluem penicilinas, cefalosporinas, penemos, carbapenemos, e monobactamas.
[0090] O termo “cerca de”, quando modificando uma quantidade (por exemplo, kg, L, ou equivalentes) de uma substância ou composição, ou o valor de uma propriedade física, ou o valor de um parâmetro distinguindo uma etapa de processo (por exemplo, a temperatura na qual é conduzida uma etapa de processo), ou semelhantes, refere-se à variação na quantidade numérica que pode ocorrer, por exemplo, mediante típicos procedimentos de medição, manuseio e amostragem envolvidos na preparação, na caracterização e/ou no uso da substância ou da composição; mediante erro inadvertido nestes procedimentos; mediante diferenças na fabricação, na fonte, ou na pureza dos ingredientes utilizados para fabricar ou usar as composições ou para realizar os procedimentos; e semelhantes. Em determinadas modalidades, “cerca de” pode significar uma variação de ± 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, ou 5,0 da unidade apropriada. Em determinadas modalidades, “cerca de” pode significar uma variação de ± 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, ou 20%.
[0091] Outra modalidade da presente invenção é um composto de Fórmula I, IA, ou IB, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme originalmente definido em qualquer um(a) das(os) modalidades, submodalidades, aspectos, classes ou subclasses supracitadas(os), em que o composto ou seu sal está sob uma forma substancialmente pura. Como aqui usado “substancialmente puro(a)” significa, adequadamente, em pelo menos cerca de 60% em peso, tipicamente em pelo menos cerca de 70% em peso, preferencialmente em pelo menos cerca de 80% em peso, mais preferencialmente em pelo menos cerca de 90% em peso (por exemplo, de cerca de 90% em peso a cerca de 99% em peso), ainda mais preferencialmente em pelo menos cerca de 95% em peso (por exemplo, de cerca de 95% em peso a cerca de 99% em peso, ou de cerca de 98% em peso a 100% em peso), e com a máxima preferência em pelo menos cerca de 99% em peso (por exemplo, 100% em peso) de um produto contendo um composto de Fórmula I, IA ou IB, ou seu sal (por exemplo, o produto isolado de uma mistura de reação produzindo o composto ou sal) consiste no composto ou sal. O nível de pureza dos compostos ou sais pode ser determinado usando um método padrão de análise como cromatografia em camada fina, eletroforese em gel, cromatografia líquida de alta eficiência, e/ou espectrometria de massa. Se mais que um método de análise é utilizado e os métodos fornecem diferenças experimentalmente significativas no nível de pureza determinado, então prevalece o método que fornece o nível de pureza mais alto. Um composto ou sal de 100% de pureza é um que está isento de impurezas detectáveis conforme determinadas por um método padrão de análise.
[0092] Com respeito a um composto da invenção que tem um ou mais centros assimétricos e pode ocorrer como misturas de estereoisômeros, um composto substancialmente puro pode ser uma mistura substancialmente pura de estereoisômeros ou um diastereômero ou enantiômero individual substancialmente puro a não ser que seja expressamente descrito de outra maneira. A presente invenção abrange todas as formas estereoisoméricas dos compostos de Fórmulas I, IA e IB. A não ser que uma estereoquímica específica seja indicada, a presente invenção destina-se a compreender todas tais formas isoméricas destes compostos. Centros de assimetria que estão presentes nos compostos de Fórmulas I, IA e IB podem ter todos, independentemente uns dos outros, a configuração (R) ou a configuração (S). Quando ligações ao carbono quiral são representadas como linhas retilíneas nas Fórmulas Estruturais da invenção, é para ser entendido que ambas as configurações (R) e (S) do carbono quiral, e consequentemente ambos enantiômeros e misturas do mesmo, estão abrangidos dentro da Fórmula. Similarmente, quando um nome de composto é citado sem uma designação quiral para um carbono quiral, é para ser entendido que ambas as configurações (R) e (S) do carbono quiral, e consequentemente enantiômeros, diastereômeros individuais e misturas do mesmo, estão abrangidos pelo nome. A produção de estereoisômeros específicos ou misturas do mesmo pode ser identificada nos Exemplos nos quais tais estereoisômeros ou misturas foram obtidos(as), mas isto, em nenhuma maneira, limita a inclusão de todos os estereoisômeros e misturas do mesmo no escopo desta invenção.
[0093] A invenção inclui todos os possíveis enantiômeros e diastereômeros e misturas de dois ou mais estereoisômeros, por exemplo misturas de enantiômeros e/ou diastereômeros, em todas as proporções. Dessa forma, enantiômeros são um assunto da invenção sob forma enantiomericamente pura, tanto como antípoda levorrotatório quanto como antípoda dextrorrotatório, sob a forma de racematos e sob a forma de misturas dos dois enantiômeros em todas as proporções. No caso de um isomerismo cis/trans, a invenção inclui tanto a forma cis quanto a forma trans e, também, misturas destas formas em todas as proporções. A preparação de estereoisômeros individuais pode ser realizada, se desejado, pela separação de uma mistura por métodos costumeiros, por exemplo por cromatografia ou cristalização, pelo uso de materiais de partida estereoquimicamente uniformes para a síntese ou por síntese estereosseletiva. Opcionalmente uma derivatização pode ser realizada antes de uma separação de estereoisômeros. A separação de uma mistura de estereoisômeros pode ser realizada em uma etapa intermediária durante a síntese de um composto de Fórmulas I, IA e IB ou pode ser conduzida em um produto racêmico final. A estereoquímica absoluta pode ser determinada por cristalografia de raios-X de produtos cristalinos ou de intermediários cristalinos que são derivatizados, se necessário, com um reagente contendo um centro estereogênico de configuração conhecida. A não ser que seja indicado um isômero, sal, solvato (incluindo hidratos) ou sal solvatado específico de tal racemato, enantiômero, ou diastereômero, a presente invenção inclui todos os isômeros, e, outrossim, sais, solvatos (incluindo hidratos) e sais solvatados de tais racematos, enantiômeros, diastereômeros e misturas dos mesmos.
[0094] “Alquila” significa cadeias carbônicas saturadas que podem ser lineares ou ramificadas ou combinações das mesmas, a não ser que a cadeia carbônica seja definida de outra maneira. Outros grupos tendo o prefixo “alc”, como alcoxila e alcanoíla, podem ser, também, lineares ou ramificados, ou combinações das mesmas, a não ser que a cadeia carbônica seja definida de outra maneira. Exemplos de grupos alquila incluem metila, etila, propila, isopropila, butila, sec-butila e terc-butila, pentila, hexila, heptila, octila, nonila, e semelhantes.
[0095] “Aminoalquila” significa cadeias carbônicas saturadas que podem ser lineares ou ramificadas ou combinações das mesmas que estão substituídas com um grupo amino que pode ser terminal (-NH2) ou interno (- NH-).
[0096] “Hidroxialquila” significa cadeias carbônicas saturadas que podem ser lineares ou ramificadas ou combinações das mesmas que estão substituídas com um grupo hidroxila (-OH).
[0097] “Diaminoalquila” significa cadeias carbônicas saturadas que podem ser lineares ou ramificadas ou combinações das mesmas que estão substituídas com dois grupos amino (-NH2).
[0098] “Di-hidroxialquila” significa cadeias carbônicas saturadas que podem ser lineares ou ramificadas ou combinações das mesmas que estão substituídas com dois grupos hidroxila (-OH).
[0099] “Hidroxiaminoalquila” significa cadeias carbônicas saturadas que podem ser lineares ou ramificadas ou combinações das mesmas que estão substituídas com um grupo hidroxila (-OH) e um grupo amino (-NH2).
[00100] “Alquenila” significa cadeias carbônicas que contêm pelo menos uma ligação dupla de carbono-carbono, e que podem ser lineares ou ramificadas, ou combinações das mesmas, a não ser que sejam definidas de outra maneira. Exemplos de alquenila incluem vinila, alila, isopropenila, pentenila, hexenila, heptenila, 1-propenila, 2-butenila, 2-metil-2-butenila, e semelhantes.
[00101] “Sistema de anel aromático” significa sistema de anel ou anel aromático monocíclico, bicíclico ou tricíclico contendo 5-14 átomos no anel, em que pelo menos um dos anéis é aromático. O termo pode ser usado para descrever um anel carbocíclico fundido em um grupo arila. Por exemplo, uma cicloalquila de 5-7-membros pode estar fundida mediante dois átomos de anel adjacentes em uma heteroarila de 5-6 membros contendo 1, 2, ou 3 átomos de anel heteroatômico selecionados dentre N, O, e S. Em outro exemplo, um anel heteromonocíclico é fundido mediante dois átomos de anel em uma fenila ou uma heteroarila de 5-6 membros contendo 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados dentre N, O, e S. No caso de um anel heteromonocíclico contendo um ou mais átomos de N, o N pode estar sob a forma de amina quaternária. Em determinadas modalidades, um átomo de N do anel pode estar sob a forma de um N-óxido.
[00102] “Arila” significa um sistema de anel ou anel aromático carbocíclico monocíclico, bicíclico ou tricíclico contendo 5-14 átomos de carbono, em que pelo menos um dos anéis é aromático. Exemplos de arila include fenila e naftila. Em uma modalidade da presente invenção, arila é fenila.
[00103] “Cicloalquila” significa um anel carbocíclico saturado monocíclico, bicíclico ou ligado por ponte, tendo um número especificado de átomos de carbono. Exemplos de cicloalquila incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila, indanila, 1,2,3,4-tetra- hidronaftila e semelhantes. Em uma modalidade da presente invenção, cicloalquila é selecionada dentre: ciclopropano, ciclobutano, ciclopentano e ciclo-hexano.
[00104] “Cicloalquenila” significa um anel carbocíclico não aromático monocíclico ou bicíclico contendo pelo menos uma ligação dupla. Exemplos decicloalquenila incluem ciclopropenila, ciclobutenila, ciclopentenila, ciclo- hexenila, ciclo-heptenila, ciclooctenila e semelhantes.
[00105] “Ciclo-heteroalquila” ou “heterocicloalquila” significa um sistema de anel ou anel carbocíclico não aromático monocíclico, bicíclico (incluindo espirocíclico) saturado ou parcialmente insaturado ou ligado por ponte compreendendo 3 a cerca de 11 átomos no anel, contendo pelo menos um heteroátomo no anel selecionado dentre N, S e O e os átomos restantes no anel são átomos de carbono. O átomo de nitrogênio ou de enxofre da heterocicloalquila pode estar opcionalmente oxidado para o correspondente N-óxido, S-óxido ou S-dióxido. Um grupo heterocicloalquila pode ser unido via um átomo de carbono do anel, ou um átomo de nitrogênio do anel, a não ser que seja especificado de outra maneira. O anel ciclo-heteroalquila pode estar substituído nos carbonos do anel e/ou no(s) nitrogênio(s) do anel. Em uma modalidade, um grupo heterocicloalquila é monocíclico e tem de cerca de 3 a cerca de 7 átomos no anel (um “grupo heterocicloalquila monocíclico de 3 a 7 membros”). Em outra modalidade, um grupo heterocicloalquila é monocíclico e tem de cerca de 4 a cerca de 7 átomos no anel (um “grupo heterocicloalquila monocíclico de 4 a 7 membros”). Em outras modalidades, o grupo heterocicloalquila é bicíclico e tem 7-10 átomos no anel, 8-10 átomos no anel, ou 9 ou 10 átomos no anel (um “grupo heterocicloalquila bicíclico de 9 ou 10 membros”). Em ainda outra modalidade, um grupo heterocicloalquila é monocíclico e tem 5 ou 6 átomos no anel. Em uma modalidade, um grupo heterocicloalquila é monocíclico. Em outra modalidade, um grupo heterocicloalquila é bicíclico. Não há átomos de oxigênio e/ou de enxofre adjacentes presentes no sistema de anel. Exemplos de ciclo-heteroalquila incluem tetra-hidrofurano, piperazina, piperidina, morfolina, oxetano, tetra- hidropirano, indolinila, isoindolinila, azabiciclooctano, hexa-hidrofuro[3,2- b]furano, e 2,3,3a,5,6,6a-hexa-hidrofuro[3,2-b]furano. Se o sistema de anel ou anel contém um ou mais átomos de N, o N pode estar sob a forma de amina quaternária.
[00106] Como aqui usada, uma “heterocicloalquila ligada a nitrogênio” refere-se a uma heterocicloalquila contendo nitrogênio que é ligada ao restante do composto através de uma ligação de enxofre-nitrogênio a um grupo conector SO2, que é conectado ao anel de núcleo de 6 membros contendo X1 e X2. Por exemplo, os seguintes compostos da invenção contêm uma heterocicloalquila ligada a nitrogênio:
[00107] Uma heterocicloalquila ligada a nitrogênio pode ser um anel monocíclico de 4-6 membros, que pode conter 0, 1, ou 2, átomos adicionais de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S ou um anel bicíclico de 7 a 10 membros com 0, 1, 2, ou 3 átomos adicionais de anel heteroatômico selecionados dentre N, O e S. Uma heterocicloalquila bicíclica ligada a nitrogênio pode ser ligada por ponte, fundida ou espirocíclica. Uma heterocicloalquila ligada a nitrogênio pode estar opcionalmente substituída com um a três substituintes conforme aqui definidos.
[00108] Heteroarila” significa um sistema de anel ou anel monocíclico, bicíclico ou tricíclico contendo 5-14 átomos de carbono e contendo pelo menos um heteroátomo no anel selecionado dentre N, S (incluindo SO e SO2) e O, em que pelo menos um dos anéis contendo heteroátomo é aromático. No caso de um sistema de anel heteroarila no qual um ou mais dos anéis são saturados e contêm um ou mais átomos de N, o N pode estar sob a forma de amina quaternária. Exemplos de heteroarila incluem pirrolila, isoxazolila, isotiazolila, pirazolila, piridila, oxazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, tiazolila, imidazolila, triazolila, tetrazolila, furanila, triazinila, tienila, pirimidila, piridazinila, pirazinila, benzisoxazolila, benzoxazolila, benzotiazolila, benzimidazolila, benzopirazolila, benzofuranila, benzotiofenila (incluindo S-óxido e S-dióxido), benzotriazolila, furo(2,3-b)piridila, quinolila, indolila, isoquinolila, quinazolinila, dibenzofuranila, e semelhantes. Exemplos de anéis heteroarila bicíclica incluem:
[00109] “Halogênio” inclui flúor, cloro, bromo e iodo.
[00110] “Oxo” significa um átomo de oxigênio conectado a outro átomo por uma ligação dupla e pode ser representado por “=O”.
[00111] Se alguma amina está presente no composto, o átomo de N pode estar opcionalmente sob a forma de uma amina quaternária tendo uma ou mais substituições adicionais apropriadas, conforme adicionalmente aqui descrito.
[00112] Quando qualquer átomo do anel é especificado como estando opcionalmente substituído com, ou sob uma forma especificada, por exemplo, S substituído com grupos oxo, ou N sob a forma de um N-óxido, isto não exclui a substituição de qualquer átomo do anel com os outros substituintes opcionais listados quando não substituído com grupos oxo ou sob a forma de um N-óxido.
[00113] Quando qualquer variável (por exemplo, n, Ra, Rb, etc.) ocorre mais de uma vez em qualquer constituinte ou na Fórmula I, IA, ou IB, sua definição em cada ocorrência é independente de sua definição em todas as outras ocorrências. Também, combinações de substituintes e/ou de variáveis são permissíveis apenas se tais combinações resultam em compostos estáveis.
[00114] Uma linha ondulada, como aqui usada, indica um ponto de ligação ao restante do composto. Linhas traçadas para dentro de um sistema de anel, por exemplo: indicam que a ligação pode estar ligada a qualquer um dos átomos substituíveis do anel.
[00115] Com base na nomenclatura padrão usada em toda esta revelação, a porção terminal da cadeia lateral designada é descrita por último, precedida pela funcionalidade adjacente em direção ao ponto de ligação.
[00116] Na escolha dos compostos da presente invenção, uma pessoa comumente versada na técnica reconhecerá que vários substituintes, isto é, R1, RA, etc., são escolhidos conforme princípios bem conhecidos de conectividade e estabilidade de estruturas químicas.
[00117] O termo “substituído(a)” deve ser considerado como incluindo graus múltiplos de substituição com um substituinte nomeado. Se múltiplos substituintes são revelados ou reivindicados, o composto substituído pode estar independentemente substituído com uma ou mais das porções substituintes reveladas ou reivindicadas, unicamente ou pluralmente. Por independentemente substituído(a), quer-se dizer que os (dois ou mais) substituintes podem ser iguais ou diferentes.
[00118] Nos compostos de Fórmula I, IA, ou IB, os átomos podem apresentar suas abundâncias isotópicas, ou um ou mais dos átomos pode estar artificialmente enriquecido em um isótopo específico tendo o mesmo número atômico, mas uma massa atômica diferente ou um número atômico diferente da massa atômica ou do número atômico predominantemente encontrada(o) na natureza. A presente invenção destina-se a incluir todas as variações isotópicas adequadas dos compostos de Fórmula I, IA, ou IB. Por exemplo, formas isotópicas diferentes de hidrogênio (H) incluem prótio (1H) e deutério (2H ou D). Prótio é o isótopo de hidrogênio predominante na natureza. O enriquecimento em deutério pode fornecer determinadas vantagens terapêuticas, como aumento da meia-vida in vivo ou redução dos requisitos de dosagem, ou pode fornecer um composto útil como um padrão para a caracterização de amostras biológicas. Compostos isotopicamente enriquecidos representados pela Formula I, IA, ou IB, podem ser preparados sem experimentação indevida por técnicas convencionais bem conhecidas por aquelas pessoas versadas na técnica ou por processos análogos àqueles descritos aqui nos Esquemas e nos Exemplos usando intermediários e/ou reagentes isotopicamente enriquecidos adequados.
[00119] A não ser que seja expressamente declarado ao contrário em um contexto específico, qualquer um(a) das(os) vários(as) substituintes ou variáveis do sistema de anel e anel cíclico aqui descritos(as) pode estar ligado(a) ao restante do composto em qualquer átomo do anel (isto é, qualquer átomo de carbono ou qualquer heteroátomo) desde que resulte um composto estável.
[00120] A não ser que seja expressamente declarado ao contrário, todas as faixas aqui citadas são inclusivas. Por exemplo, um anel heteroaromático descrito como contendo de “1 a 4 heteroátomos” significa que o anel pode conter 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos. Também é para ser entendido que qualquer faixa aqui citada inclui dentro de seu escopo todas as subfaixas dentro daquela faixa. Dessa forma, por exemplo, um anel heterocíclico descrito como contendo de “1 a 4 heteroátomos” é intencionado para incluir como aspectos do mesmo, anéis heterocíclicos contendo 2 a 4 heteroátomos, 3 ou 4 heteroátomos, 1 a 3 heteroátomos, 2 ou 3 heteroátomos, 1 ou 2 heteroátomos, 1 heteroátomo, 2 heteroátomos, 3 heteroátomos, e 4 heteroátomos. Similarmente, C1-C6 quando usado com uma cadeia, por exemplo, uma cadeia alquila, significa que a cadeia pode conter 1, 2, 3,4, 5 ou 6 átomos de carbono. Também inclui todas as faixas contidas dentro da mesma incluindo C1-C5, C1C4, C1-C3, C1-C2, C2-C6, C3-C6, C4-C6, C5-C6, e todas as outras combinações possíveis.
[00121] Um composto “estável” é um composto que pode ser preparado e isolado e cujas estrutura e propriedades mantêm-se ou podem ser tornadas para permanecerem essencialmente inalteradas durante um período de tempo suficiente para permitir o uso do composto para os propósitos aqui descritos (por exemplo, administração terapêutica a um indivíduo). Os compostos da presente invenção são limitados aos compostos estáveis abrangidos pelas Fórmulas I, IA e IB.
[00122] O termo “composto” refere-se ao composto e, em determinadas modalidades, à extensão que eles são estáveis, qualquer hidrato ou solvato do mesmo. Um hidrato é o composto complexado com água, e um solvato é o composto complexado com um solvente orgânico.
[00123] Conforme indicado acima, os compostos da presente invenção podem ser utilizados sob a forma de sais farmaceuticamente aceitáveis. Aquelas pessoas versadas na técnica reconhecerão aqueles casos nos quais os compostos da invenção podem formar sais. O termo “sal farmaceuticamente aceitável” refere-se a um sal (incluindo um sal interno como zwiteríon) que possui efetividade similar à do composto parental e que não é biologicamente ou diferentemente indesejável (por exemplo, não é tóxico nem diferentemente prejudicial para o indivíduo recipiente do mesmo). Dessa forma, uma modalidade da invenção fornece sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da invenção. O termo “sal (sais)”, conforme aqui utilizado, denota qualquer um dos seguintes: sais de adição de ácido formados com ácidos inorgânicos e/ou orgânicos, e também sais de adição de base formados com bases inorgânicas e/ou orgânicas. Os sais dos compostos da invenção podem ser formados por métodos conhecidos por aquelas pessoas comumente versadas na técnica, por exemplo, pela reação de um composto da invenção com uma quantidade de um ácido ou de uma base, como uma quantidade equivalente, em um meio como um no qual o sal precipita ou em meio aquoso seguido por liofilização.
[00124] Sais de adição de ácido exemplificadores incluem acetatos, ascorbatos, benzoatos, benzenossulfonatos, bissulfatos, boratos, butiratos, citratos, canforatos, canforossulfonatos, fumaratos, cloridratos, bromidratos, iodidratos, lactatos, maleatos, metanossulfonatos (“mesilatos”), naftalenossulfonatos, nitratos, oxalatos, fosfatos, propionatos, salicilatos, succinatos, sulfatos, tartaratos, tiocianatos, toluenossulfonatos (também conhecidos como tosilatos) e semelhantes. Adicionalmente, os ácidos que são geralmente considerados adequados para a formação de sais farmaceuticamente úteis a partir de compostos farmacêuticos básicos são discutidos, por exemplo, por P. Stahl et al, Camille G. (eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use. (2002) Zurich: Wiley- VCH; S. Berge et al, Journal of Pharmaceutical Sciences (1977) 66(1) 1-19; P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33 201-217; Eerson et al, The Practice of Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, New York; e em The Orange Book (“Food & Drug Administration”, Washington, D.C., EUA, nas suas páginas da Internet). Estas revelações são aqui incorporadas como referências.
[00125] Sais de adição de base exemplificadores incluem sais de amônio, sais de metais alcalinos como sais de sódio, lítio, e potássio, sais de metais alcalinoterrosos como sais de cálcio e magnésio, sais como bases orgânicas (por exemplo aminas orgânicas) como diciclo-hexilamina, t- butilamina, colina, e sais com aminoácidos como arginina, lisina e semelhantes. Grupos contendo nitrogênio básico podem ser quaternizados com agentes como haletos de alquila inferior (por exemplo, cloretos, brometos e iodetos de metila, de etila, e de butila), sulfatos de dialquila (por exemplo, sulfatos de dimetila, de dietila, e de dibutila), haletos de cadeia longa (por exemplo, cloretos, brometos e iodetos de decila, de laurila, e de estearila), haletos de aralquila (por exemplo, brometos de benzila e de fenetila), e outros.
[00126] Todos tais sais de adição de ácido e sais de adição de base são pretendidos para serem sais farmaceuticamente aceitáveis dentro do escopo da invenção e todos os sais de adição de ácido e sais de adição de base são considerados equivalentes às formas livres dos compostos correspondentes para os propósitos da invenção.
[00127] Além disso, quando um composto da invenção contém tanto uma porção básica, como, mas não limitada a uma amina alifática primária, secundária, terciária ou cíclica, uma amina aromática ou heteroarilamina, piridina ou imidazol, e uma porção ácida, como, mas não limitada a tetrazol ou ácido carboxílico, zwiteríons (“sais internos”) podem ser formados e estão incluídos dentro do termo “sal (sais)” como aqui usado. É entendido que determinados compostos da invenção podem existir sob forma zwiteriônica, tendo ambos os centros aniônico e catiônico dentro do mesmo composto e uma carga total neutra. Tais zwiteríons estão incluídos dentro da invenção.
[00128] Os compostos de Fórmulas I, IA, e IB podem existir como tautômeros que se interconvertem rapidamente com diferentes pontos de ligação de hidrogênio acompanhados por um ou mais deslocamentos de ligação. Os tautômeros individuais, e, também, as misturas dos mesmos, são incluídos pela presente invenção. A proporção entre as formas tautoméricas variará dependendo das condições. Como é bem conhecido por uma pessoa comumente versada na técnica, tais compostos podem ser representados e nomeados em maneiras diferentes. Por exemplo, as seguintes estruturas representadas abaixo mostram maneiras diferentes nas quais um composto ilustrativo da invenção pode ser representado:
[00129] É para ser entendido que todas as possíveis formas tautoméricas dos compostos de Fórmulas I, IA, e IB são consideradas como estando dentro do escopo da presente invenção, assim como as misturas dos mesmos . É adicionalmente entendido que embora apenas uma dita forma tautomérica de cada composto exemplificador e de cada modalidade exemplificadora da invenção possa ser representada no relatório descritivo e nas reivindicações em anexo, tal representação inclui todas as formas tautoméricas dos ditos compostos, as quais estão incluídas dentro do escopo da invenção.
[00130] Conforme apresentado acima, a presente invenção inclui composições farmacêuticas compreendendo um composto de Fórmula I, IA, ou IB da presente invenção, opcionalmente um ou mais outros componentes ativos (por exemplo, um antibiótico e-lactâmico), e um carreador farmaceuticamente aceitável. As características do carreador dependerão da rota de administração. Por “farmaceuticamente aceitável” quer-se dizer que os ingredientes da composição farmacêutica precisam ser compatíveis uns com os outros, não interferir com a efetividade do(s) ingrediente(s) ativo(s), e não serem prejudiciais (por exemplo, tóxicos) para o indivíduo recipiente do mesmo. Dessa forma, as composições de acordo com a invenção podem, adicionalmente ao inibidor, conter: diluentes, cargas, sais, agentes tamponantes, estabilizadores, solubilizadores, e outros materiais bem conhecidos na técnica.
[00131] Também conforme apresentado acima, a presente invenção inclui um método para o tratamento de uma infecção bacteriana que compreende administrar a um indivíduo que necessita de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I, IA, ou IB, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um antibiótico e-lactâmico e opcionalmente um inibidor de DHP. O termo “indivíduo” (ou, alternativamente, “paciente”), como aqui usado, refere-se a um animal, preferencialmente um mamífero, e em particular um humano ou um animal não humano incluindo animais de fazenda e animais domésticos incluindo, mas não limitados a, gado bovino, cavalos, ovelha, suíno, cabras, coelhos, gatos, cães, e outros mamíferos que necessitam de tratamento. Em modalidade selecionada, o indivíduo é um humano. Em modalidades selecionadas, o indivíduo tem sido o objeto de tratamento, observação ou experimento. O termo “administração” e variantes do mesmo (por exemplo, “administrar” um composto) com referência a um composto de Fórmula I, IA, ou IB significa fornecer o composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ao indivíduo que necessita de tratamento. Quando um composto ou um seu sal é fornecido em combinação com um ou mais outros agentes ativos (por exemplo, um antibiótico carbapenem ou um inibidor de DHP ou ambos), a “administração” e suas variantes são, cada uma, entendidas para incluírem o fornecimento do composto ou do seu sal e dos outros agentes ao mesmo tempo ou em tempos diferentes. Quando os agentes de uma combinação são administrados ao mesmo tempo, podem ser administrados juntos em uma composição única ou podem ser administrados separadamente. É para ser entendido que uma “combinação” de agentes ativos pode ser uma composição única contendo todos os agentes ativos ou composições múltiplas cada uma contendo um ou mais dos agentes ativos. No caso de dois agentes ativos, uma combinação pode ser uma composição única compreendendo ambos os agentes ou duas composições separadas cada uma compreendendo um dos agentes; no caso de três agentes ativos uma combinação pode ser uma composição única compreendendo todos os três agentes, três composições separadas compreendendo, cada uma, um dos agentes ativos, ou duas composições uma das quais compreende dois dos agentes e a outra compreende o terceiro agente; e assim por diante.
[00132] As composições e combinações da presente invenção são adequadamente administradas em quantidades eficazes. O termo “quantidade eficaz”, quando usado com um inibidor de β-lactamase (incluindo um inibidor de DHP), significa a quantidade de composto ativo suficiente para inibir β- lactamase e, assim, produzir a resposta que é almejada (isto é, uma “quantidade inibitória eficaz”) em uma célula, um tecido, um sistema, um animal ou um humano. Em uma modalidade, a quantidade eficaz é uma “quantidade terapeuticamente eficaz” para o alívio dos sintomas da doença ou da condição sendo tratada (por exemplo, a cura das condições associadas com a infecção bacteriana, e/ou da resistência bacteriana ao fármaco) em combinação com um antibiótico e-lactâmico. Em outra modalidade, a quantidade eficaz é uma “quantidade profilaticamente eficaz” para a profilaxia dos sintomas da doença ou da condição sendo prevenida. Quando o composto ativo (isto é, o ingrediente ativo) é administrado como o sal, referências à quantidade de ingrediente ativo são à forma de ácido livre ou à forma de base livre do composto. Uma “quantidade eficaz” de um antibiótico e-lactâmico é uma quantidade suficiente para aliviar os sintomas da doença ou da condição sendo tratada (por exemplo, a cura das condições associadas com a infecção bacteriana, e/ou da resistência bacteriana ao fármaco).
[00133] A administração de uma composição da presente invenção é adequadamente parenteral, oral, sublingual, transdérmica, tópica, intranasal, intratraqueal, intraocular, ou intrarretal, em que a composição é adequadamente formulada para administração pela rota selecionada usando métodos de formulação bem conhecidos na técnica, incluindo, por exemplo, os métodos para preparação e administração de formulações descritos nos capítulos 39, 41, 42, 44 e 45 em “Remington - The Science and Practice of Pharmacy, 21st edition, 2006.” Em uma modalidade, os compostos da invenção são administrados intravenosamente em um ambiente hospitalar. Em outra modalidade, a administração é oral sob a forma de um comprimido ou uma cápsula ou semelhantes. Quando administrada sistemicamente, uma composição terapêutica é, por exemplo, adequadamente administrada em uma dosagem suficiente para alcançar um nível sanguíneo de inibidor de em pelo menos cerca de 1 μg/ mL, e em modalidade adicional em pelo menos cerca de 10 μg/ mL, e em pelo menos cerca de 25 μg/ mL. Para administração localizada, concentrações muito menores que esta podem ser eficazes, e podem ser toleradas concentrações muito maiores.
[00134] Administração intravenosa de um composto da invenção pode ser conduzida por reconstituição de uma forma em pó do composto com um solvente aceitável. Solventes adequados incluem, por exemplo, soluções salinas (por exemplo, Solução de Cloreto de Sódio 0,9% para Injeção) e água estéril (por exemplo, Água Estéril para Injeção, Água Bacteriostática para Injeção com metilparabeno e propilparabeno, ou Água Bacteriostática para Injeção com 0,9% de álcool benzílico). A forma em pó do composto pode ser obtida por irradiação-gama do composto ou por liofilização de uma solução do composto, após a qual o pó pode ser armazenado (por exemplo, em um frasco vedado) à temperatura ambiente ou abaixo da temperatura ambiente até ser reconstituído. A concentração do composto na solução reconstituída IV pode estar, por exemplo, na faixa de cerca de 0,1 mg/ mL a cerca de 20 mg/ mL.
[00135] A presente invenção também inclui um método para inibição do crescimento bacteriano que compreende administrar a uma cultura de células bacterianas, ou a uma cultura de células infectada por bactérias, a um tecido infectado por bactérias, ou a um organismo infectado por bactérias, uma quantidade inibitória eficaz de um composto de Fórmula I. Modalidades adicionais da invenção incluem o método de inibição de crescimento bacteriano anteriormente descrito, em que o composto da presente invenção utilizado no mesmo é um composto de uma das modalidades, submodalidades ou classes descritas acima. O composto pode ser, opcionalmente, usado sob a forma de um sal farmaceuticamente aceitável nestas modalidades. O método pode envolver a administração de um composto de Fórmula I, IA ou IB a uma cultura de células experimental in vitro para prevenir o crescimento de bactérias resistentes aos antibióticos e-lactâmicos. O método pode, alternativamente, envolver a administração de um composto de Fórmula I, IA, ou IB a um animal, incluindo um humano, para prevenir o crescimento de bactérias resistentes aos antibióticos e-lactâmicos in vivo. Nestes casos, o composto of Formula I, IA ou IB é tipicamente coadministrado com um antibiótico e-lactâmico.
[00136] Os compostos da invenção podem ser utilizados para o tratamento, a profilaxia ou a inibição de crescimento bacteriano ou infecções bacterianas devido às bactérias que são resistentes aos antibióticos e- lactâmicos em combinação com um antibiótico e-lactâmico. Mais particularmente, as bactérias podem ser cepas positivas para metalo-e- lactamase que são elevadamente resistentes aos antibióticos e-lactâmicos. Os termos “levemente resistente” e “elevadamente resistente” são bem entendidos por aquelas pessoas comumente versadas na técnica (consulte, por exemplo, Payne et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 38:767-772 (1994); Hanaki et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 30:11.2011.26 (1995)). Para os propósitos desta invenção, as cepas bacterianas que são elevadamente resistentes ao imipenem são aquelas contra as quais a CIM (Concentração Inibitória Mínima) de imipenem é >16 μg/ mL, e cepas bacterianas que são elevadamente resistentes ao imipenem são aquelas contra as quais a CIM de imipenem é >4 μg/ mL.
[00137] Os compostos da invenção podem ser usados em combinação com agentes antibióticos para o tratamento de infecções causadas pelas cepas produtoras de β-lactamase da classe B, adicionalmente àquelas infecções que são incluídas dentro do espectro antibacteriano do agente antibiótico. Exemplos de bactérias produtoras de metalo-β-lactamase da classe B são Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putida, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Escherichia coli, Serratia marcescens, Enterobacter aerogenes, Enterobacter asburiae, Citrobacter freundii, Proteus mirabilis, Morganella morganii, Providencia rettgeri, e Acinetobacter baumannii.
[00138] É, em geral, vantajoso o uso de um composto de Fórmula I, IA, ou IB misturado ou juntamente com um carbapenem, uma penicilina, uma cefalosporina, ou um outro antibiótico e-lactâmico, ou um seu pró-fármaco. É vantajoso o uso de um composto de Fórmula I, IA, ou IB em combinação com um ou mais antibióticos e-lactâmicos por causa das propriedades inibitórias de β-lactamase da classe B dos compostos. É, também, vantajoso o uso de um composto de Fórmula I, IA, ou IB em combinação com um ou mais inibidores de e-lactamase das classes A, C, e D para adicionalmente limitar a suscetibilidade à e-lactamase. Como já observado, o composto de Fórmula I, IA, ou IB e o antibiótico e-lactâmico podem ser administrados separadamente (ao mesmo tempo ou em tempos diferentes) ou sob a forma de uma composição única contendo ambos os ingredientes ativos.
[00139] Carbapenemos, penicilinas, cefalosporinas e outros antibióticos e-lactâmicos adequados para uso na presente invenção incluem tanto aqueles que conhecidamente mostram instabilidade na presença de β- lactamases da classe B quanto aqueles que são diferentemente suscetíveis às β-lactamases da classe B.
[00140] Quando os compostos de Fórmula I, IA, ou IB são combinados com um antibiótico carbapenem, um inibidor de desidropeptidase (DHP) pode ser, outrossim, combinado. Muitos carbapenemos são suscetíveis ao ataque por uma enzima renal conhecida como DHP. Este ataque ou esta degradação pode reduzir a eficácia do agente antibacteriano carbapenem. Os inibidores de DHP e seu uso com carbapenemos são revelados, por exemplo, nas Patentes U.S. n°s 4.539.208; 4.616.038; 4.880.793; e 5.071.843. Um inibidor de DHP preferido é ácido 7-(L-2-amino-2-carboxietiltio)-2-(2,2- dimetilciclopropanocarboxamida)-2-heptenoico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00141] Os carbapenemos adequados para a coadministração com os compostos da presente invenção incluem imipenem, ertapenem, meropenem, biapenem, ácido (4R,5S,6S)-3-[3S,5S)-5-(3-carboxifenil-carbamoil)pirrolidin- 3-iltio]-6-(1R)-1-hidroxietil]-4-metil-7-oxo-1-azabiciclo[3.2.0]hept-2-eno-2- carboxílico, cloreto de (1S,5R,6S)-2-(4-(2-(((carbamoilmetil)-1,4- diazoniabiciclo[2.2.2]oct-1-il)-etil(1,8-naftossultam)metil)-6-[1(R)- hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato, BMS181139 (ácido [4R- [4α,5β,6β(R*)]]-4-[2-[(aminoiminometil)amino]etil]-3-[(2-cianoetil)tio]-6-(1- hidroxietil)-7-oxo-1-azabiciclo[3.2.0]hept-2-eno-2-carboxílico), BO2727 (monocloridrato de ácido [4R-3[3S*,5S*(R*)],4α,5β,6β(R*)]]-6-(1- hidroxietil)-3-[[5-[1-hidroxi-3-(metilamino)propil]-3-pirrolidinil]tio]-4-metil- 7-oxo-1-azabiciclo[3.2.0]hept-2-eno-2-carboxílico), E1010 (cloridrato de ácido (1R,5S,6S)-6-[1(R)-hidroximetil]-2-[2(S)-[1(R)-hidroxi-1-[pirrolidin- 3(R)-il]metil]pirrolidin-4(S)-ilsulfanil]-1-metil-1-carba-2-penem-3- carboxílico) e S4661 (ácido (1R,5S,6S)-2-[(3S,5S)-5- (sulfamoilaminometil)pirrolidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1- metilcarbapen-2-em-3-carboxílico), cloreto de (1S,5R,6S)-1-metil-2-{7-[4- (aminocarbonilmetil)-1,4-diazoniabiciclo(2.2.2)octan-1il]-metil-fluoren-9-on- 3-il}-6-(1R-hidroxietil)-carbapen-2-em-3-carboxilato.
[00142] As penicilinas adequadas para a coadministração com os compostos da presente invenção incluem benzilpenicilina, fenoximetilpenicilina, carbenicilina, azidocilina, propicilina, ampicilina, amoxicilina, epicilina, ticarcilina, ciclacilina, pirbenicilina, azlocilina, mezlocilina, sulbenicilina, piperacilina, e outras penicilinas conhecidas. As penicilinas podem ser usadas sob a forma de pró-fármacos da mesma; por exemplo como ésteres hidrolisáveis in vivo, por exemplo os ésteres acetoximetílico, pivaloiloximetílico, a-etoxicarboniloxi-etílico e ftalidílico de ampicilina, de benzilpenicilina e de amoxicilina; como adutos de aldeído ou de cetona de penicilinas contendo uma cadeia lateral de 6-α-aminoacetamido (por exemplo hetacilina, metampicilina e derivados análogos de amoxicilina); e como ésteres de carbenicilina e de ticarcilina, por exemplo os a-ésteres fenílico e indanílico.
[00143] As cefalosporinas adequadas para a coadministração com o composto da presente invenção incluem cefatrizina, cefaloridina, cefalotina, cefazolina, cefalexina, cefacetrila, cefapirina, nafato de cefamandol, cefradina, 4-hidroxicefalexina, cefaloglicina, cefoperazona, cefsulodina, ceftolozano, ceftazidima, cefuroxima, cefmetazol, cefotaxima, ceftriaxona, cefepima, e outras cefalosporinas conhecidas, todas as quais podem ser usadas sob a forma de seus pró-fármacos.
[00144] Os antibióticos e-lactâmicos diferentes de penicilinas e de cefalosporinas que podem ser coadministrados com os compostos da presente invenção incluem aztreonam, latamoxefe (MOXALACTAM), e outros antibióticos e-lactâmicos conhecidos como os carbapenemos como imipenem, ertapenem, meropenem ou ácido (4R,5S,6S)-3-[(3S,5S)-5-(3- carboxifenilcarbamoil)pirrolidin-3-iltio]-6-(1R)-1-hidroxietil]-4-metil-7-oxo- 1-azabiciclo[3.2.0]hept-2-eno-2-carboxílico, todos os quais podem ser usados sob a forma de pró-fármacos dos mesmos.
[00145] Em uma modalidade, o antibiótico coadministrado com um composto da presente invenção é selecionado do grupo consistindo em imipenem, ertapenem, meropenem e ácido (4R,5S,6S)-3-[(3S,5S)-5-(3- carboxifenilcarbamoil)pirrolidin-3-iltio]-6-(1R)-1-hidroxietil]-4-metil-7-oxo- 1-azabiciclo[3.2.0]hept-2-eno-2-carboxílico.
[00146] Em outra modalidade, o antibiótico coadministrado com um composto da presente invenção é selecionado do grupo de penicilinas consistindo em ampicilina, amoxicilina, carbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina, e ticarcilina. Tais penicilinas podem ser, opcionalmente, usadas sob a forma de seus sais farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo seis sais de sódio. Ampicilina ou amoxicilina pode ser, alternativamente, utilizada sob a forma de partículas finas da forma zwiteriônica (em geral como ampicilina tri-hidrato ou amoxicilina tri-hidrato) para uso em uma suspensão injetável ou uma suspensão para infusão. Em um aspecto desta modalidade, a penicilina coadministrada com um composto da presente invenção é amoxicilina, opcionalmente sob a forma de seu sal de sódio ou de seu tri-hidrato.
[00147] Em outra modalidade, o antibiótico coadministrado com um composto da presente invenção é selecionado do grupo de cefalosporinas consistindo em cefotaxima, ceftriaxona, cefepima, e ceftazidima, que são opcionalmente usados sob a forma de seus sais farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo seus sais de sódio.
[00148] Em determinadas modalidades da invenção, o compostos da invenção em combinação com inibidores de serina-β-lactamase (que podem inibir betalactamases das classes A, C, D) adicionalmente aos antibióticos β- lactâmicos. Inibidores de serina-β-lactamase incluem mas não são limitados a avibactam, vaborbactam, relebactam, tazobactam, e ácido clavulânico.
[00149] Quando coadministrado com um antibiótico e-lactâmico, e opcionalmente um inibidor de β-lactamase, a combinação de o composto da invenção e o antibiótico pode fornecer um efeito sinérgico. Os termos “efeito sinérgico” e “sinergia” indicam que o efeito produzido quando dois ou mais fármacos são coadministrados é maior que seria predito com base no efeito produzido quando os compostos são administrados individualmente. Embora não haja o desejo de vincular-se à teoria, acredita-se que os compostos da presente invenção são inibidores de β-lactamase que atuam para prevenir a degradação de antibióticos e-lactâmicos, intensificando, assim, sua eficácia e produzindo um efeito.
[00150] As abreviações aqui utilizadas incluem as seguintes: Ac = Acetila = CH3C(=O); AcOH = Ácido acético; ACN = MeCN = Acetonitrila; aq = aquoso (aquosa); BH3-DMS = Complexo de borano-sulfeto de dimetila; BINAP = (2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil); BLI = Inibidor de β- lactamase; Bn = benzila; BOC (ou Boc) = terc-Butiloxicarbonila; Anidrido de Boc = Boc2O = Dicarbonato de di-terc-butila; pré-catalisador BrettPhos de 3a geração = Metanossulfonato de [(2-di-ciclo-hexilfosfino-3,6-dimetoxi-2‘,4‘,6‘- triisopropil-1,1‘-bifenil)-2-(2‘-amino-1,1‘-bifenil)]paládio(II); BPBD = N,N‘- {Bis(piridin-2-il)benzilideno}butano-1,4-diamina; CBZ (ou Cbz) = Carbobenzoxila (alternativamente, benziloxicarbonila); CH3CN = acetonitrila; CELITE® = terra diatomácea; conc. = concentrado; DBU = 1,8- diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno; DCM = Diclorometano; DEAD = Azodicarboxilato de dietila; DIAD = Azodicarboxilato de di-isopropila; DIBAL-H = Hidreto de di-isobutilalumínio; DIEA = N,N-Di- isopropiletilamina; DIPEA = Di-isopropiletilamina (ou base de Hünig); DMA = Dimetilacetamida; DMAP = 4-Dimetilaminopiridina ou N,N- Dimetilaminopiridina; DME = 1,2-Dimetoxietano; DMF = N,N- Dimetilformamida; DMSO = Sulfóxido de dimetila; DPPA = Azida de difenilfosforila; EA = AcOEt = EtOAc = Acetato de etila; EDC = 1-Etil-3-(3- dimetilaminopropil)carbodiimida; Et = etila; EtOH = etanol; HATU = (Hexafluorofosfato de 3-óxido de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3- triazolo[4,5-b]piridínio); hex = hexano; HOAt = 1-Hidroxi-7-azabenzotriazol; HPLC = Cromatografia líquida de alta eficiência; h ou hr ou hrs = horas; i-Pr = Álcool isopropílico; KOAc = Acetato de potássio; LCMS = LC-MS = Cromatografia líquida/Espectrometria de massa; LDA = Di-isopropilamida de lítio; mCPBA = Ácido meta-cloroperoxibenzoico; Me = metila; MeCN = Acetonitrila; MeOH = Metanol; CIM = Concentração inibitória mínima; min ou mins = minutos; MPLC = Cromatografia líquida de média pressão; Ms = Metanossulfonila; MsCl = Cloreto de metanossulfonila; n-BuLi = n-Butil- lítio; NCS = N-Clorossuccinimida; NIS = N-Iodossuccinimida; NMP = N- Metil-2-pirrolidona; RNM = Ressonância magnética nuclear; PCy3 Pd G2 = Pré-catalisador de PCy3 de 2a Geração = Cloro[(triciclo-hexilfosfina)-2-(2‘- aminobifenil)]paládio(II); Pd(dppf)Ch = [1,1‘- Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II); PE = éter de pet. = éter de petróleo; Ph = fenila; PMB = p-Metoxibenzila; Pré-catalisador de PPh3 de 2a Geração = Pré-catalisador de PPh3 2aG = Cloro(trifenilfosfina)[2-(2‘-amino- 1,1'-bifeml)]paládio(II); HPLC-prep = HPLC-preparativa; FFR = frasco de fundo redondo; RPLC = cromatografia líquida em fase reversa; RT = temp. ambiente = temperatura ambiente; SFC = Cromatografia em fluido supercrítico; MdP = Material de partida; TBAF = Fluoreto de tetrabutilamônio; Pré-catalisador tBuXPhos de 3a geração = Metanossulfonato de [(2-di-terc-butilfosfino-2‘,4‘,6‘-triisopropil-1,1 '-bifenil)-2-(2'-amino-1,1 ‘- bifenil)]paládio(II); TEA = Trietilamina; TFA = Ácido trifluoroacético; THF = Tetra-hidrofurano; TLC = Cromatografia em camada fina; TMS = Trimetilsilano; TMSN3 = Azidotrimetilsilano; Pré-catalisador XPhos-Pd-2G ou XPHOS Pd G2 ou Pré-catalisador Xphos de 2a geração = Cloro(2-diciclo- hexilfosfino-2‘,4‘,6‘-triisopropil-1,1 ‘-bifenil)[2-(2‘-amino-1,1 ‘- bifenil)]paládio(II), X-Phos = Pré-catalisador de cloreto de aminobifenilpaládio.
[00151] Os compostos da presente invenção podem ser facilmente preparados de acordo com os seguintes esquemas de reação e exemplos, ou modificações das mesmas, usando materiais de partida, reagentes prontamente disponíveis e procedimentos de síntese convencionais. Nestas reações, também é possível usar variantes conhecidas. Outros métodos para a preparação dos compostos da invenção serão facilmente evidentes para aquelas pessoas comumente versadas na técnica considerando os esquemas de reação e os exemplos. Esquema I:
[00152] Compostos de sulfonamida da presente invenção, ID, podem ser preparados de acordo com o Esquema Geral I. De acordo com o Esquema, intermediários de brometo 1a e 1b podem ser seletivamente reagidos na posição de bromo com 2-(trimetilsilil)etanotiol na presença de uma base (como carbonato de césio) para produzir sulfetos 2a e 2b. A oxidação, por exemplo pelo uso de ácido meta-cloroperoxibenzoico produz sulfonas 3a e 3b. O tratamento com fluoreto de tetrabutilamônio (TBAF)produz os ácidos sulfínicos correspondentes 4a e 4b. Os ácidos sulfínicos podem ser convertidos nos cloretos de sulfonila correspondentes em uma variedade de maneiras, por exemplo, pelo tratamento com N-clorossuccinimida. O tratamento dos cloretos de sulfonila resultantes 5a e 5b com uma amina na presença de uma base como trietilamina produz as sulfonamidas 6a e 6b. Alternativamente, os ácidos sulfínicos 4a e 4b podem ser diretamente convertidos dentro de um único reator nas sulfonamidas 6a e 6b pela reação com N-clorossuccinimida na presença do reagente aminado. Acoplamento mediado por metal, por exemplo, usando catalisadores de paládio, com ácidos alquil-borônicos, aril-borônicos, heteroaril-borônicos ou vinil-borônicos, ésteres borônicos, organoestananos, reagentes de organocobre ou de organozinco produz os intermediários 7a e 7b. A remoção final do grupo protetor PMB pode ser realizada sob condições ácidas como pelo uso de TFA na presença opcional de um sequestrador de carbocátions, como anisol ou trietilsilano, fornecendo os compostos-alvo ID. Esquema II:
[00153] Alternativamente, compostos de sulfonamida ID podem ser preparados de acordo com o Esquema II. De acordo com o Esquema, intermediários de iodo 3a e 3b são submetidos ao acoplamento mediado por metal, por exemplo usando catalisadores de paládio, com ácidos alquil- borônicos, aril-borônicos, heteroaril-borônicos ou vinil-borônicos, ésteres borônicos, organoestananos, reagentes de organocobre ou de organozinco para produzir intermediários 8a e 8b. Quando R’ contém grupos NH ativos, estes podem ser opcionalmente protegidos como terc-butoxicarbamatos usando anidrido de Boc e uma base como 4-dimetilaminopiridina, fornecendo 9a e 9b. A conversão das trimetilsililetanossulfonas nos cloretos de sulfonila correspondentes pode ser realizada em duas etapas (conforme descritas no Esquema I) para produzir 11a e 11b. O acoplamento dos cloretos de sulfonila com aminas pode ser, então, realizado na presença de uma base (como trimetilamina), produzindo 12a e 12b. A remoção final do grupo protetor PMB sob condições ácidas como pelo uso de TFA na presença opcional de um sequestrador de carbocátions, como anisol ou trietilsilano, fornece os compostos-alvo ID. De novo, quando os intermediários 12a e 12b contêm um grupo protetor lábil a ácido (como terc-butoxicarbonila), a remoção simultânea deste grupo protetor ocorre na remoção ácida final dos grupos PMB. Isto pode ser realizado em uma etapa, ou em um modo em etapas pelo tratamento com TFA à temperatura ambiente para remover um grupo como terc-butoxicarbonila, então aquecimento com TFA e anisol ou tioanisol para remover o grupo PMB. Esquema III:
[00154] Os intermediários 1a e 1b podem ser preparados de acordo com o Esquema III. De acordo com o Esquema, fluoreto de arila comercialmente disponível 13 pode ser convertido no ácido carboxílico 14 pelo tratamento com LDA, seguido por gelo seco. A funcionalidade ácido carboxílico pode ser transformada na nitrila correspondente 15 em numerosas maneiras conhecidas na técnica. Uma abordagem envolve a conversão no cloreto de ácido, por exemplo usando cloreto de oxalila, seguida pelo tratamento com hidróxido de amônio para produzir a carboxamida, e finalmente, desidratação, por exemplo usando tricloro-1,3,5-triazina, para produzir a nitrila 15. Substituição aromática nucleofílica do fluoreto usando benzil-mercaptan e uma base como hidreto de sódio fornece o sulfeto 16. A nitrila presente em 16 pode ser convertida no tetrazol 17 usando um de vários métodos, por exemplo pelo tratamento com azida de trimetilsilila e óxido de dibutilestanho. A conversão do sulfeto de benzila no cloreto de sulfonila pode ser realizada em várias maneiras, por exemplo, pelo tratamento com N- clorossuccinimida em ácido acético. O tratamento com hidróxido de amônio então produz a sulfonamida 18. A proteção concomitante do tetrazol e da sulfonamida para produzir a mistura de isômeros posicionais 1a e 1b pode ser realizada pelo tratamento com excesso de cloreto de para-metoxibenzila na presença de uma base, como carbonato de potássio, e NaI e cloreto de tetrabutilamônio como catalisadores. Tipicamente 1a e 1b são usados como uma mistura de regioisômeros, mas os isômeros podem ser opcionalmente separados e utilizados individualmente na mesma maneira. Nos exemplos abaixo, deve ser entendido que a mistura de regioisômeros ou os regioisômeros individuais pode(m) ser usada(os) intercambiavelmente (ocasionalmente apenas um isômero é mostrado com o propósito de simplificação). EXEMPLO DE REFERÊNCIA 1 6-bromo-3-iodo-2-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfonamida e 6-bromo-3-iodo-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) benzenossulfonamida Etapa A: ácido 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoico
[00155] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 3 bocas de 2.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio foi adicionada uma solução de (i-Pr)2NH (40,4 g, 400,00 mmol, 1,20 equiv) em THF (400 mL). Isto foi seguido pela adição de n-butil-lítio (146 mL, 1,10 equiv) por gotejamento com agitação a -20°C durante 30 minutos. A esta foi adicionada uma solução de 1-bromo-2-fluoro-4-iodobenzeno (100 g, 332,34 mmol, 1,00 equiv) em THF (600 mL) por gotejamento com agitação a -78°C. A solução resultante foi agitada durante 90 minutos a -78°C. A mistura de reação foi então derramada para dentro de 1,5 L de gelo seco. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com 2.000 mL de hidróxido de sódio aq. (4 M), então a solução foi lavada com 2x800 mL de éter. A solução aq. foi ajustada para pH 2 com HCl (2 M), então extraída com 3x800 mL de acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com 3x500 mL de água, secadas, e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título. Etapa B: cloreto de 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzofla
[00156] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 3.000 mL foram adicionados ácido 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoico (235 g, 681,35 mmol, 1,00 equiv) e cloreto de tionila (1175 mL). A solução resultante foi agitada durante 2 horas a 80°C em um banho de óleo. A mistura resultante foi esfriada e concentrada sob vácuo para produzir o composto do título. Etapa C: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzamida
[00157] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 10.000 mL foi adicionada uma solução de NH4OH (840 g) em THF (2.000 mL), seguida pela adição de uma solução de cloreto de 3-bromo-2-fluoro-6- iodobenzoíla (223 g, 614 mmol, 1,00 equiv) em THF (2460 mL) por gotejamento com agitação a 0°C. A solução resultante foi agitada durante 60 minutos à temperatura ambiente. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. Os sólidos foram coletados por filtração para produzir o composto do título. Etapa D: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzomtrila
[00158] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 10.000 mL foram adicionadas uma solução de 3-bromo-2-fluoro-6- iodobenzamida (223 g, 648 mmol, 1,00 equiv) em N,N-dimetilformamida (4460 mL), tricloro-1,3,5-triazina (840 g, 4,56 mol, 7,00 equiv). A solução resultante foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura de reação foi derramada para dentro de 10 L de bicarbonato de sódio aq. Os sólidos foram coletados por filtração para produzir o composto do título. Etapa E: 2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodobenzonitrila
[00159] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 5.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio foi adicionada uma solução de hidreto de sódio (14,8 g, 617 mmol, 1,20 equiv) em 1,4-dioxano (1.000 mL). Uma solução de fenilmetanotiol (38,1 g, 306,76 mmol, 1,00 equiv) em 1,4-dioxano (100 mL) foi adicionada por gotejamento com agitação a 0°C durante 20 minutos. A esta foi adicionada uma solução de 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzonitrila (100 g, 306,84 mmol, 1,00 equiv) em 1,4-dioxano (400 mL) por gotejamento com agitação a 0°C. A solução resultante foi agitada durante 60 minutos à temperatura ambiente e durante um adicional de 60 minutos a 60°C. A mistura de reação foi então inativada pela adição de 750 mL de HCl (1 M). A solução resultante foi diluída com 3 L de água, então extraída com 3x1 L de acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi aplicado em uma coluna de gel de sílica e eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1:4) para produzir o composto do título. Etapa F: 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodofenil]-1 H-1,2,3,4-tetrazol
[00160] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 3.000 mL foram adicionados uma solução de 2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6- iodobenzonitrila (54,0 g, 126 mmol, 1,00 equiv) em tolueno (750 mL), TMSN3 (43,4 g, 3,00 equiv) e óxido de dibutilestanho (6,3 g, 0,20 equiv). A solução resultante foi agitada durante 48 hour a 105°C em um banho de óleo. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente. A solução resultante foi diluída com 3 L de hidróxido de sódio aq., então extraída com acetato de etila. A camada aquosa foi ajustada para pH 3 com HCl (2 M), então extraída com 2x1 L de acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com 2x1 L de água, secadas com sulfato de sódio anidro e concentradas sob vácuo para fornecer o composto do título. Etapa G: 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodofenil]-1-[(4-metoxifenil)metil]- 1H-1,2,3,4-tetrazol e 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodofenil]-2-[(4- metoxifenil)metil]-2 H-1,2,3,4-tetrazol
[00161] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 3 bocas de 3.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio foram adicionados uma solução de 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodofenil]-1H- 1,2,3,4-tetrazol (84,4 g, 178 mmol, 1,00 equiv) em clorofórmio (700 mL), uma solução de carbonato de potássio (49,0 g, 355 mmol, 2,00 equiv) em água (520 mL), e cloreto de tetrabutilamônio (10,2 g, 0,20 equiv). Isto foi seguido pela adição de cloreto de para-metoxibenzila (42,2 g, 1,50 equiv) por gotejamento com agitação a 15°C. A solução resultante foi agitada durante 180 min a 50°C em um banho de óleo. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente. A solução resultante foi diluída com 200 mL de água, então extraída com 2x200 mL de DCM. as camadas orgânicas foram combinadas, secadas com sulfato de sódio e concentradas sob vácuo. O resíduo foi aplicado em uma coluna de gel de sílica e eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1:2), resultando no composto do título como uma mistura de dois isômeros. Etapa H: cloreto de 6-bromo-3-iodo-2-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5- il)benzeno-1-sulfonila e cloreto de 6-bromo-3-iodo-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1 - sulfonila
[00162] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 2.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio foi adicionada uma mistura de 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodofenil]-1-[(4- metoxifenil)metil]-1H-1,2,3,4-tetrazol e 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6- iodofenil]-2-[(4-metoxifenil)metil]-2H-1,2,3,4-tetrazol (50,0 g, 84,3 mmol, 1,00 equiv, 60%), DCM (750 mL), AcOH (12,7 g, 211 mmol, 2,50 equivalentes), e água (3,8 g, 2,5 equiv). SO2Cl2 (28,3 g, 2,50 equivalentes) foi então adicionado por gotejamento com agitação a 0°C. A solução resultante foi agitada durante 60 minutos à temperatura ambiente. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título como mistura de isômeros. Etapa I:6-bromo-3-iodo-2-( 1 -(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il) benzenossulfonamida e 6-bromo-3-iodo-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)benzenossulfonamida
[00163] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 2.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio foram adicionadas uma solução de cloreto de 6-bromo-3-iodo-2-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzeno-1-sulfonila e cloreto de 6-bromo-3- iodo-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1-sulfonila (mistura de isômeros, 50,0 g, 52,7 mmol, 1,00 equiv, 60%) em THF (300 mL) e uma solução de NH4OH (200 mL) em THF (200 mL). A solução resultante foi agitada durante 60 minutos à temperatura ambiente. A solução resultante foi extraída com 3x150 mL de acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas com sulfato de sódio anidro e concentradas sob vácuo. O produto bruto foi purificado com HPLC-Prep-FLASH sob as seguintes condições: Coluna, gel de sílica C18; fase móvel, H2O: MeCN = 25 aumentando para H2O: MeCN = 55 durante 30 min; Detector, UV 210 nm, para produzir o composto do título. 1H-RMN (DMSO-d6, 300MHz, ppm): δ 3,727-3,748 (3H, d), 5,001-5,068 (0,78H, m), 5,428-5,477 (0,75H, m), 5,941 (0,5H, m), 6,823-6,958 (2H, m), 7,148-7,363 (2H, m), 7,732-7,864 (1,6H, m), 7,993-8,117 (3H, m). EXEMPLO DE REFERÊNCIA 2
[00164] 6-bromo-3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfonamida e 6-bromo-3-iodo-N,N- bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) benzenossulfonamida Etapa A: ácido 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoico
[00165] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 5.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio, foram adicionados bis(propan-2-il)amina (121,2 g, 1,20 mol, 1,20 equiv) e THF (1.000 mL). Isto foi seguido pela adição de n-butil-lítio (440 mL, 2,5 M em hexanos, 1,10 mol, 1,10 equiv) por gotejamento com agitação a -78°C durante 20 minutos. Após 60 minutos, uma solução de 1-bromo-2-fluoro-4- iodobenzeno (300 g, 997 mmol, 1,00 equiv) em THF (2.000 mL) foi adicionada por gotejamento com agitação a -78°C durante 30 minutos. A solução resultante foi agitada durante 2 horas a -78°C em um banho de nitrogênio líquido. O progresso da mistura de reação foi monitorado por LCMS. A mistura de reação foi então inativada por derramamento para dentro de 5.000 g de gelo seco. Após a agitação durante 2 horas, a mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em 3.000 mL de solução aquosa de hidróxido de sódio 4 M. A solução resultante foi extraída com 2x1.000 mL de éter. O valor do pH da solução aquosa foi ajustado para 2-3 com solução aquosa de cloreto de hidrogênio (1 M). A solução resultante foi extraída com 4x1.000 mL de acetato de etila, e as camadas orgânicas foram combinadas e secadas com sulfato de sódio anidro e concentradas sob vácuo. O produto bruto foi purificado por recristalização em hexanos para produzir o composto do título. Etapa B: cloreto de 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzofla
[00166] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 3 bocas de 5.000 mL, purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio, foram adicionados ácido 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoico (273 g, 791,5 mmol, 1,00 equiv), THF (2730 mL), e N,N-dimetilformamida (27,3 mL). Isto foi seguido pela adição de cloreto de oxalila (110,9 g, 873,7 mmol, 1,10 equiv) por gotejamento com agitação a 20°C durante 20 minutos. A solução resultante foi agitada durante 1 hora à temp. ambiente O progresso da mistura de reação foi monitorado por LCMS. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título. Etapa C: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzamida
[00167] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 5.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio, foi adicionado NH4OH (1.200 g). Isto foi seguido pela adição de uma solução de cloreto de 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoíla (280 g, 771 mmol, 1,00 equiv) em THF (2800 mL) por gotejamento com agitação a 0°C durante 30 minutos. A solução resultante foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. O progresso da mistura de reação foi monitorado por LCMS. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. Os sólidos foram coletados por filtração, e lavado com H2O para produzir o composto do título. Etapa D: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzomtrila
[00168] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 10.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio, foram adicionadas 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzamida (270 g, 785,1 mmol, 1,00 equiv), N,N-dimetilformamida (5.400 mL). Isto foi seguido pela adição de tricloro-1,3,5-triazina (1.014 g, 5,50 mol, 7,00 equiv) em porções a 0°C. A solução resultante foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente. O progresso da mistura de reação foi monitorado por LCMS. A mistura de reação foi então inativada pela adição de 15.000 mL de solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. Os sólidos foram coletados por filtração para produzir o composto do título. Etapa E: 2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodobenzonitrila
[00169] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 5.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio, foram adicionados hidreto de sódio (34 g, dispersão 60% em óleo mineral, 850 mmol, 1,20 equiv) e 1,4-dioxano (700 mL). Isto foi seguido pela adição de uma solução de fenilmetanotiol (88,7 g, 714,2 mmol, 1,00 equiv) em 1,4- dioxano (950 mL) por gotejamento com agitação a 10°C durante 15 minutos. Após 30 minutos, a esta mistura de reação foi adicionada uma solução de 3- bromo-2-fluoro-6-iodobenzonitrila (230 g, 705,7 mmol, 1,00 equiv) em 1,4- dioxano (1.800 mL) por gotejamento com agitação a 10°C. A solução resultante foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente. A mistura de reação foi então inativada por derramamento para dentro de 5.000 mL de água/gelo. A solução resultante foi extraída com 5x1.000 mL de acetato de etila, e as camadas orgânicas foram combinadas. As camadas orgânicas foram lavadas com 2x1.000 mL de água e 2x1.000 mL de solução saturada de bicarbonato de sódio e 2x1.000 mL de salmoura. A mistura resultante foi secada com sulfato de sódio anidro e concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por recristalização em éter para produzir o composto do título. Etapa F: 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodofenil]-1 H-1,2,3,4-tetrazol
[00170] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 2.000 mL, foram adicionados 2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodobenzonitrila (66 g, 153,5 mmol, 1,00 equiv), tolueno (660 mL), azidotrimetilsilano (44,2 g, 383,6 mmol, 2,50 equiv), e dibutilestananona (7,7 g, 30,93 mmol, 0,20 equiv). A solução resultante foi agitada durante 48 horas a 105°C em um banho de óleo. O progresso da mistura de reação foi monitorado por LCMS. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica com tetra-hidrofuran:PE (100:1) como eluente para produzir o composto do título. Etapa G: cloreto de 6-bromo-3-iodo-2-(1 H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzeno-1- sulfonila
[00171] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 2.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio, foram adicionados 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-iodofenil]-1H-1,2,3,4-tetrazol (100 g, 211,4 mmol, 1,00 equiv), ácido acético (1.000 mL) e água (100 mL). Isto foi seguido pela adição de NCS (70,7 g, 529,5 mmol, 2,50 equiv), em porções usando um banho de gelo/água para controlar a exotermia que ocorre durante a adição de NCS, e manter a temperatura interna aproximadamente entre 20°C e 30oC. A solução resultante foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente usando um banho de gelo/água se necessário para manter a temperatura após a adição de NCS que é exotérmica. O progresso da mistura de reação foi monitorado por LCMS. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo e então foi diluída com 2.000 mL de EtOAc. A mistura resultante foi lavada com 2x1.000 mL de água e 2x1.000 mL de salmoura. A mistura foi secada com sulfato de sódio anidro e concentrada sob vácuo para produzir o composto do título. Etapa H: 6-bromo-3-iodo-2-(1 H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzeno-1-sulfonamida
[00172] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 3.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio, foram adicionados NH4OH (1180 mL) e THF (290 mL). Isto foi seguido pela adição de uma solução de cloreto de 6-bromo-3-iodo-2-(1H-1,2,3,4-tetrazol-5- il)benzeno-1-sulfonila (118 g, 262,5 mmol, 1,00 equiv) em THF (300 mL) por gotejamento com agitação a 0°C. A solução resultante foi agitada durante 2 horas a 0-25°C em um banho de gelo/sal (lentamente aquecendo para a temperatura ambiente). O progresso da mistura de reação foi monitorado por LCMS. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo, e diluída com 500 mL éter. Após agitação durante 30 minutos, os sólidos foram coletados por filtração para produzir o composto do título. Etapa I: 6-bromo-3-iodo-N,N-bis[(4-metoxifenil)metil]-2-[1-[(4-metoxifenil) metil]-1 H-1,2,3,4-tetrazol-5-il]benzeno-1-sulfonamida e 6-bromo-3-iodo- N2N-bis[(4-metoxifenil)metil]-2-[2-[(4-metoxifenil)metil]-2HL1222324ztetrazolz 5-il]benzeno-1 -sulfonamida
[00173] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 4 bocas de 3.000 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de nitrogênio, foram adicionados 6-bromo-3-iodo-2-(1H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzeno-1- sulfonamida (105 g, 244,2 mmol, 1,00 equiv), clorofórmio (1.050 mL), carbonato de potássio (168,9 g, 1,22 mol, 5,00 equiv), água (525 mL), NaI (11 g, 73,4 mmol, 0,30 equiv), cloreto de tetrabutilamônio (20,4 g, 73,4 mmol, 0,30 equiv), e 1-(clorometil)-4-metoxibenzeno (230 g, 1,47 mol, 6,00 equiv). A solução resultante foi agitada de um dia para o outro a 50°C em um banho de óleo. O progresso da mistura de reação foi monitorado por LCMS. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente. A solução resultante foi extraída com 2x1.000 mL de DCM. As camadas orgânicas foram combinadas e secadas com sulfato de sódio anidro e concentradas sob vácuo para produzir os compostos do título. 1H-RMN: (300 MHz, CDCl3, ppm): δ 7,956-7,928 (m, 0,5H), 7,852-7,824 (m, 1H), 7,656-7,612 (m, 1,5H), 7,323-7,282 (m, 1,5H), 7,195-7,224 (m, 2H), 6,944-6,908 (m, 6H), 6,8226,760 (m, 9H), 5,791 (m, 1H), 5,570-5,521 (m, 1H), 5,149-5,100 (m, 1H), 4,769-4,718 (m, 2H), 4,232-4,221 (m, 2H), 3,900-3,848 (m, 2H), 3,789-3,742 (m, 14H).
[00174] Nos procedimentos experimentais abaixo, o composto de EXEMPLO DE REFERÊNCIA 2 pode ser usado como uma mistura de regioisômeros de 4-metoxilbenziltetrazol. Alternativamente, os dois regioisômeros podem ser separados e cada um pode ser usado, conforme descrito abaixo, na mesma maneira. Em alguns EXEMPLOS DE REFERÊNCIA e EXEMPLOS abaixo, ambos os regioisômeros são explicitamente usados; entretanto em outros casos, com o propósito de simplificação, apenas um regioisômero é mostrado. Deve ser entendido que nestes casos a mistura de regioisômeros foi tipicamente utilizada. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 3
[00175] 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida e 3-iodo- N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida Etapa A: 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)-6-(2-(trimetilsilil)etiltio)benzenossulfonamida e 3-iodo- N, N-bis(4- metoxibenzil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil) tio)benzenossulfonamida
[00176] 2-(Trimetilsilil)etanotiol comercialmente disponível (por exemplo, junto à Sigma-Aldrich, pedido n° 364681), conhecido (Canadian Journal of Chemistry, 1994, 72(2), 325; Journal of Organic Chemistry, 2005, 70(14), 5611) (21,24 g, 158 mmol) foi adicionado a uma mistura de NaH (7,59 g, dispersão 60% em óleo mineral, 190 mmol) em DMF (350 mL). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 30 minutos. Após isto, 6-bromo- 3-iodo-N,N-bis[(4-metoxifenil)metil]-2-[1-[(4-metoxifenil)metil]-1H-1,2,3,4- tetrazol-5-il]benzeno-1-sulfonamida e 6-bromo-3-iodo-N,N-bis[(4- metoxifenil)metil]-2-[2-[(4-metoxifenil)metil]-2H-1,2,3,4-tetrazol-5- il]benzeno-1-sulfonamida (50 g, 63,4 mmol) foram adicionadas em porções. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A reação foi monitorada por LCMS, e foi inativada com água (500 mL). A mistura resultante foi extraída com EtOAc(2x300 mL). As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 844. Etapa B: 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)-6-(2-(trimetilsilil)etilsulfonil)benzenossulfonamida e 3-iodo-N,N-bis(4- metoxibenzil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trímetílsilil)etil)sulfoml)benzenossulfonamida
[00177] m-CPBA (654 g, 379 mmol) foi adicionado a uma solução de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-(2- (trimetilsilil)etiltio)benzenossulfonamida e 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2- (1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)tio) benzenossulfonamida (160 g, 190 mmol) em DCM (2.000 mL) a 0°C. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro sob uma atmosfera de nitrogênio. A reação foi monitorada por LCMS. A mistura resultante foi inativada com solução saturada de Na2S2O3 (150 mL), e lavada com solução saturada de Na2CO3 (1 L) e água (1 L). A camada orgânica foi coletada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica com EtOAc/PE (1/2) como eluente para produzir o composto do título: LCMS (ESI) calculado para C36H42IN5O7S2Si [M + H]+: 876, encontrado 876; 1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ 8,62 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,90-7,88 (m, 1H), 7,69-7,68 (m, 0,5H), 7,56-7,53 (m, 0,5H), 7,27-7,20 (m, 2H), 6,91-6,79 (m, 12H), 5,44-5,39 (m, 1H), 5,20-5,15 (m, 1H), 4,58-4,53 (m, 2H), 3,98-3,79 (m, 2H), 3,75-3,66 (m, 9H), 2,50-2,48 (m, 2H), 1,19-1,03 (m, 1H), 0,83-0,82 (m, 1H), 0,01 (s, 9H). EXEMPLO DE REFERÊNCIA 4 ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)benzenossulfínico e ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico
[00178] A uma solução de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida e 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (2,0 g, 2,28 mmol) em THF (23 mL) foi adicionado fluoreto de tetrabutilamônio (5,02 mL, 1,0 M em THF, 5,02 mmol) por gotejamento a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente sob N2 durante 30 minutos. A mistura resultante foi diluída com acetato de etila, lavada com solução aquosa saturada de KHSO4, secada com MgSO4, e concentrada sob vácuo para produzir o produto bruto como um sólido. O material bruto foi usado diretamente para preparar os compostos da invenção: LCMS [M + H]+: 776. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 5 cloreto de 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfonila e cloreto de 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)benzenossulfonila
[00179] Ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (800 mg, 1,031 mmol) em THF (10 mL) foi esfriado para 0°C. 1-Cloropirrolidina-2,5-diona (275 mg, 2,063 mmol) em THF (2 mL) foi adicionada durante 5 minutos. A mistura foi agitada à mesma temperatura durante 30 minutos, então diluída com acetato de etila, lavada com solução aquosa saturada de NaHCO3 e salmoura, secada com MgSO4, e concentrada para produzir o produto bruto: LCMS (ESI) [M + H]+: 810. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 6 (4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(clorossulfonil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2-il)(terc- butoxicarbonil)carbamato de terc-butila Etapa A: 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)tio)benzenossulfonamida
[00180] Uma suspensão de 6-bromo-3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)- 2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfonamida (10 g, 12,65 mmol), carbonato de césio (8,24 g, 25,3 mmol) e 2-(trimetilsilil)etanotiol (6,08 ml, 38,0 mmol) em DMF (100 mL) foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi diluída com éter e lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada (MgSO4), e concentrada para produzir 3-iodo- N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)tio)benzenossulfonamida bruta, que foi usada diretamente na etapa seguinte. LCMS [M+1]: 844,63. Etapa B: 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfoml)benzenossulfonamida
[00181] À 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)tio)benzenossulfonamida bruta (10,5 g, 12,5 mmol) foi dissolvida em DCM (100 mL), e esfriada para 0°C. m-CPBA (10,92 g, 63,3 mmol) foi adicionado em porções. A mistura foi agitada de um dia para o outro. O precipitado foi filtrado através de uma camada de CELITE, e o filtrado foi diluído com DCM (100 mL), lavado com NaOH 1N e salmoura. A camada orgânica foi secada e concentrada. O resíduo foi purificado em coluna ISCO (120 g, 0-50% de EtOAc em hexano, o hexano 50%). LCMS [M+1]: 876,49. Etapa C: 3-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)- N, N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida
[00182] Uma suspensão de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (9 g, 10,28 mmol), ácido (2-aminobenzo[d]tiazol-4- il)borônico (3,99 g, 20,55 mmol), TETRAQUIS(trifenilfosfina)Paládio(0) (1,187 g, 1,028 mmol) e carbonato de sódio (3,27 g, 30,8 mmol) em dioxano (75 ml) e Água (25 ml) foi desgaseificada e aquecida a 80oC durante 3 hr. A mistura foi diluída com AcOEt, lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada (MgSO4) e concentrada. O material bruto foi purificado em coluna ISCO (220 g, 0-50% então 50% de EtOAc em hexano: LCMS: 898,74. Etapa D: (4-(3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)benzo[ d ]tiazol-2-il)( terc - butoxicarbonil)carbamato de terc-butila
[00183] A uma mistura de 3-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N,N-bis(4- metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)benzenossulfonamida (7 g, 7,79 mmol), dicarbonato de di-terc-butila (5,95 g, 27,3 mmol) e TEA (3,80 ml, 27,3 mmol) em DCM (80 mL) foi adicionada DMAP (0,952 g, 7,79 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora, diluída com éter, lavada com solução aquosa saturada de KHSO4 e salmoura. A camada orgânica foi secada com MgSO4 e concentrada. O material bruto foi purificado em coluna ISCO (120 g, 0-30% então 30% de EtOAc em hexano). LCMS [M+1]: 1.098,56. Etapa E: ácido 2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-( N, N-bis( terc - butoxicarboml)amido)benzo[ d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol- 5-il)benzenossulfínico
[00184] Uma solução de (4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil) benzo[d]tiazol-2-il)(terc-butoxicarbonil)carbamato de terc-butila (6,9 g, 6,28 mmol) em THF (100 mL) foi agitada com fluoreto de tetrabutilamônio (25,1 mL, 25,1 mmol) à temperatura ambiente sob N2 durante 0,5 hora. A mistura foi diluída com AcOEt, lavada com solução aquosa saturada de KHSO4, então secada com MgSO4, e concentrada. O material bruto foi purificado em coluna ISCO (0-50% então 50% EtOH-EtOAc(1:3) em hexano: LCMS [M+1]: 998,51. Etapa F: (4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(clorossulfonil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetraz.ol-5-il)fenil)benz.o[ d ]tiazol-2-il)( terc-butoxicarbonil) carbamato de terc-butila
[00185] Uma mistura de acetato de sódio (0,789 g, 9,62 mmol), ácido acético (0,551 ml, 9,62 mmol) e ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(2-(N,N-bis(terc-butoxicarbonil)amido)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (3,2 g, 3,21 mmol) em THF (75 ml) foi esfriada para 0oC. NCS sólida (0,856 g, 6,41 mmol) foi adicionada. A mistura foi agitada à mesma temperatura durante 30 minutos, diluída com Et2O, lavada com KHSO4 e salmoura, então secada com MgSO4, e concentrada. O material bruto foi purificado em coluna ISCO (0-30% de EtOAc então 30% de EtOAc em hexano). LCMS [M+1]: 1.032,67. O material isolado continha uma quantidade pequena de composto mono-Boc. LCMS [M+1]: 932,57. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 7 ácido 2-amino-7-metilbenzo[d]tiazol-4-ilborônico Etapa A: N-((2-bromo-5-metilfenil)carbamotioil)benzamida
[00186] 2-Bromo-5-metilbenzenamina (10 g, 54 mmol) foi adicionada à solução de tioanidrido benzoico ciânico (8,8 g, 54 mmol) em acetona (100 mL) à temperatura ambiente e agitada a 80°C durante 1 hora. A solução de reação foi esfriada e filtrada. O filtrado foi lavado com EA e secado para produzir o composto do título como um sólido: LCMS (ESI) [M + 1]+ 349; 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHZ): δ 12,54 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,90 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,73-7,65 (m, 1H), 7,60-7,54 (m, 3H), 7,20 (dd, J = 8,0 Hz, 1H), 2,42 (s, 3H). Etapa B: 1-(2-bromo-5-metilfenil)tioureia
[00187] Uma solução de N-((2-bromo-5-metilfenil)carbamotioil) benzamida (5 g, 14 mmol) e NaOH (5,6 g, 140 mmol) em água (100 mL) e MeOH (100 mL) foi agitada a 80°C durante 3 hora. A mistura de reação foi diluída com água (80 mL) e extraída com DCM (3x80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x10 mL) e salmoura (3x10 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS (ESI): [M + 1]+ 245; 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHZ): δ 9,20 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,53 (s, 1H), 6,99 (dd, J = 1,2 Hz, 1H), 2,26 (s, 3H). Etapa C: 4-bromo-7-metilbenzo[ d] tiazol-2-amina
[00188] Br2 (4,20 ml, 82 mmol) em clorofórmio (50 mL) foi adicionado em gotas a uma solução agitada de 1-(2-bromo-5- metilfenil)tioureia (3,1 g, 13 mmol) em clorofórmio (200 mL) em um banho de gelo e então agitada a 80°C durante 4 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e lavada com EA (3x30 mL). A mistura foi filtrada e o bolo do filtro foi secado para produzir o composto do título como um sólido: LCMS (ESI): [M + 1]+ 243; 1H RMN (DMSO-d6, 300 MHZ): δ 7,81 (s, 2H), 7,34 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H). Etapa D: ácido (2-amino-7-metilbenzo[ d] tiazol-4-il)borônico
[00189] Uma solução de 4-bromo-7-metilbenzo[d]tiazol-2-amina (2,0 g, 8,3 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborinano) (2,79 g, 12,3 mmol), PCy3 Pd G2 (0,972 g, 1,645 mmol) e acetato de potássio (2,422 g, 24,7 mmol) em 1,4-dioxano (40 mL) foi agitada a 80°C durante 16 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o sólido foi dissolvido com EA (300 mL). A solução foi lavada com água (NaOH 15%) e a fase aquosa foi ajustada para pH 3 com HCl 2 M, e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas foram secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS (ESI): [M + 1]+ 209; 1H RMN (DMSO-d6, 300 MHZ): δ 7,84 (s, 2H), 7,33 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H). EXEMPLO DE REFERÊNCIA 8 ácido 2-aminobenzo[d]oxazol-4-ilborônico Etapa A: 4-bromobenzo[ d] oxazol-2-amina
[00190] Uma mistura de 2-amino-3-bromofenol (5 g, 26,6 mmol) e brometo de cianogênio (cianeto de bromo) (1,673 mL, 31,9 mmol) em DCM (25 mL) e MeOH (50 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura resultante foi inativada com solução aq. de hidrogenocarbonato de sódio (500 mL), diluída com água (20 mL) e extraída com DCM (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x10 mL) e salmoura (3x10 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS (ESI): [M + 1]+ 213; 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHZ): 7,70 (s, 2H), 7,35 (s, J = 7,6 Hz, 1H), 7,30 (s, J = 8,4 Hz, 1H), 6,936,89 (m, 1H). Etapa B: ácido 2-aminobenzo[ d ]oxazol-4-ilborônico
[00191] Uma solução de 4-bromobenzo[d]oxazol-2-amina (1,00 g, 4,69 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (0,686 g, 0,939 mmol), bis(neopentilglicolato) diboro (1,060 g, 4,69 mmol) e acetato de potássio (0,921 g, 9,39 mmol) em 1,4-dioxano (30 mL) foi agitada a 80°C durante 24 horas sob nitrogênio. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna, Sunfire C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: água (0,05% de TFA) e acetonitrila (Tempo de gradiente: 7 min, B%: 10%-20%); Detector, UV 220 e 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS (ESI): [M + 1]+ 179. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 9 ácido (2-aminoquinolin-8-il)borônico
[00192] Uma solução de 8-bromoquinolin-2-amina (500 mg, 2,241 mmol), Pd(dppf)Cl2 (328 mg, 0,448 mmol), bis(pinacolato)diboro (1.138 mg, 4,48 mmol) e acetato de potássio (440 mg, 4,48 mmol) em 1,4-Dioxano (20 mL) foi agitada a 80°C durante 2 horas sob nitrogênio. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna C18 eluindo com acetonitrila/água com 0,05% de TFA (15/85). As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS (ESI) [M + H]+: 189; 1H RMN (300 MHz, CD3OD): δ 8,32 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 8,20-8,10 (m, 1H), 7,94 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,64 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,0 Hz, 1H). EXEMPLO DE REFERÊNCIA 10 ácido 2-aminobenzo[d]tiazol-7-ilborônico
[00193] Uma mistura de 4-bromobenzo[d]tiazol-2-amina (comercialmente disponível, 2.000 mg, 8,73 mmol) e bispinacolatodiboro (6651 mg, 26,2 mmol), acetato de potássio (2570 mg, 26,2 mmol) e PCy3 Pd G2 (516 mg, 0,873 mmol) em dioxano seco (80 mL) foi desgaseificada, e aquecida a 80°C durante 48 horas. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi dissolvido em ácido clorídrico (2N, 100 mL). A fase aquosa foi lavada com acetato de etila (60 mL), e concentrada. O resíduo foi dissolvido em metanol (50 mL). O sólido foi filtrado e o filtrado foi concentrado para produzir um sólido que foi usado diretamente. LCMS (M+1): 195,12.
[00194] Os EXEMPLOS DE REFERÊNCIA 11 e 12, na Tabela imediatamente abaixo, foram preparados em uma maneira análoga conforme descrita para o ácido 2-aminobenzo[d]tiazol-7-ilborônico (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 10) a partir dos materiais de partida (MdP) brometo de arila indicados. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 13 ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico
[00195] Uma mistura de 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborinano) (5,59 g, 24,7 mmol), KOAc (4,86 g, 49,5 mmol), e comercialmente disponível (por exemplo, junto à Sigma-Aldrich pedido n° ARK379288552), conhecido (Pedido Internacional PCT n° WO 2015177367) 4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (3,50 g, 16,5 mmol) em 1,4-dioxano (82 mL) foi desgaseificada com N2 antes da adição de cloro(trifenilfosfina) [2-(2‘-amino-1,1‘-bifenil)]paládio(II) (945 mg, 1,65 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 80°C de um dia para o outro sob N2. Após esfriamento para a temperatura ambiente a mistura de reação foi filtrada através de CELITE, e enxaguada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob vácuo, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em fase reversa (coluna ISCO RediSep Rf Gold 150 g HP C18) eluindo com 0-100% de MeCN/água (sem aditivo ácido) para produzir o composto do título: LC/MS [M+1]+: 178,38. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 14 ácido 2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-ilborônico Etapa A: 3-bromo-N-metil-2-nitrobenzenamina
[00196] Uma solução de 1-bromo-3-fluoro-2-nitrobenzeno (10 g, 45,6 mmol) em NH2CH3 em THF (2 M, 100 mL) foi agitada a 80oC durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para produzir 3-bromo- N-metil-2-nitrobenzenamina. LCMS (ESI) [M + 1]+: 231, 1H RMN (CDCl3,400 MHZ): 7,21-7,16 (m, 1H), 6,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 2,94 (s, 3H). Etapa B: 3-bromo-N 1-metilbenzeno-1,2-diamina
[00197] HCl (12 M) foi adicionado em gotas para dentro de uma solução agitada de 3-bromo-N-metil-2-nitrobenzenamina (10,1 g, 44 mmol) e pó de Zn (14 g, 0,2 mmol) em metanol (200 mL) à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir 3-bromo-N1- metilbenzeno-1,2-diamina. LCMS (ESI) [M + 1]+: 201, 1H RMN (DMSO, 400 MHZ): 6,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,47 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,37 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,99 (s, 1H), 4,62 (s, 2H), 2,70 (s, 3H). Etapa C: 4-bromo-1-metil-1 H-benzo[ d ]imidazol-2-amina
[00198] Uma solução de 3-bromo-N1-metilbenzeno-1,2-diamina (3,2 g, 16 mmol) e BrCN (1,68 g, 16 mmol) em metanol (100 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura de reação foi derramada para dentro de uma solução saturada de NaHCO3 e filtrada. O bolo do filtro foi secado para produzir 4-bromo-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amina. LCMS (ESI) [M + 1]+: 226, 1H RMN (DMSO, 400 MHZ): 7,14-7,11 (m, 2H), 6,83-6,79 (m, 1H), 6,71 (s, 1H), 4,99 (s, 2H), 3,49 (s, 3H). Etapa D: ácido 2-amino-1-metil-1 H-benzo[ d] imidazol-4-ilborônico
[00199] Uma mistura de 4-bromo-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2- amina (3,5 g, 15,5 mmol), bis(pinacolato)diboro (4,7 g, 18,6 mmol) e acetato de potássio (4,5 g, 46,5 mmol) em 1,4-Dioxano (100 mL) foi agitada a 80°C durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para produzir o produto bruto. O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna, Sunfire C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: água (0,05% de TFA) e acetonitrila (Tempo de gradiente: 7 min, B%: 10%-20%); Detector, UV 220 nm e 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir ácido 2-amino-1-metil- 1H-benzo[d]imidazol-4-ilborônico: LCMS (ESI) [M + 1]+: 192. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 15 ácido (2-amino-6-fluoro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico.
[00200] A um FFR de 200 mL foi adicionada uma solução de 3-bromo- 5-fluorobenzeno-1,2-diamina (5 g, 24,39 mmol) em etanol (100ml), seguido pela adição de brometo de cianogênio (5,17 g, 48,8 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 80°C de um dia para o outro. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, concentrada em vácuo, então foi purificada por cromatografia em coluna (ISCO, 80g, 0-20% de MeOH em DCM) para produzir 4-bromo-6-fluoro-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (4,2g, 18,26 mmol), LC-MS [M+H]+: 230,08. O intermediário foi dissolvido em 50 mL de etanol anidro, seguido pela adição de 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborinano) (7,86 g, 34,8 mmol), acetato de potássio (3,41 g, 34,8 mmol), PCy3 Pd G2 (2,054 g, 3,48 mmol) e etanol anidro (50 mL). A mistura foi desgaseificada durante 20 minutos, e então foi aquecida a 80°C durante 18 horas. A mistura de reação foi acidificada com HCl 1,0 M para ~ pH 4, então foi lavada com EtOAc. O produto bruto foi cromatografado em coluna C18 para produzir o produto desejado ácido (2-amino-6-fluoro-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico: LC/MS (M+H)+: 196,07. EXEMPLOS DE REFERÊNCIA 16A e 16B
[00201] 3-Amino-3-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato de terc- butila racêmico foi separado em enantiômeros individuais A e B via SFC (Coluna: AD-H 50 mm x250 mm, detecção UV: 210 nm, Solvente: 25% de EtOH (com 0,2% de DIPA) em CO2, Fluxo: 230 g CO2/min a 120 bar (12.000 kPa)). Não foi confirmada a estereoquímica absoluta dos dois enantiômeros puros. Ambos os enantiômeros foram úteis para a preparação de inibidores de metalo-β-lactamase. EXEMPLOS DE REFERÊNCIA 17A e 17B
[00202] 6-Amino-2-azabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxilato de terc- butila racêmico, comercialmente disponível, foi separado em enantiômeros individuais A e B via SFC (Coluna: AD-H 50 mm x 250 mm, detecção UV: 210 nm, Solvente: 15% de EtOH (com 0,2% de DIPA) em CO2, Fluxo: 230 g CO2/min a 120 bar (12.000 kPa)). Não foi confirmada a estereoquímica absoluta dos dois enantiômeros puros. Ambos os enantiômeros foram úteis para a preparação de inibidores de metalo-β-lactamase. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 18 ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoxicarbonil) amino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico Etapa A: 3-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida
[00203] Uma mistura de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (5,0 g, 5,71 mmol), ácido (2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (2,02 g, 11,42 mmol), Na2CO3 (1,82 g, 17,13 mmol) e complexo de dicloreto de 1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno- paládio(II)-diclorometano (0,699 g, 0,856 mmol) em dioxano (60 mL) e água (15 mL) foi desgaseificada com N2 durante 5 minutos. A mistura resultante foi aquecida a 90°C durante 6 horas. A mistura de reação foi filtrada e extraída com EtOAc (2 x 100 mL). As fases orgânicas foram secadas (MgSO4) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 220 g de gel de sílica, eluindo com EtOAc/iso-hexano (0-100% durante 45 min) para produzir um sólido: LC/MS [M+H]+: 881. Etapa B: (4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1 H-benzo[d]imidazol-2- il)carbamato de terc-butila
[00204] À 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4- metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)benzenossulfonamida (6,22 g, 7,06 mmol) em DCM (60 mL) à temperatura ambiente, foram adicionados Anidrido de BOC (1,69 g, 7,77 mmol), TEA (2,46 mL, 17,65 mmol) e DMAP (0,86 g, 7,1 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, diluída com éter, lavada com solução aquosa de KHSO4 e salmoura. A camada orgânica foi secada com MgSO4 e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de 220 g de gel de sílica, eluindo com 0-80% de EtOAc em hexano para produzir produto puro: LC/MS [M+H]: 981. Etapa C: ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)benzenossulfínico
[00205] TBAF (10,1 mL, 10,1 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de (4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol- 2-il)carbamato de terc-butila (4,5 g, 4. 6 mmol) em THF (50 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 45 minutos. A mistura foi diluída com AcOEt, lavada com solução aquosa saturada de KHSO4 (3 x 60 mL), secada com MgSO4, e concentrada para obter o produto bruto como um sólido após concentração. O material bruto foi usado diretamente na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 881. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 19 ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoxicarbonil)amino) piridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico Etapa A:3-(2-aminopiridin-3-il)- N, N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida
[00206] 3-Iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 3; 2,69 g, 3,07 mmol), N-(3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-il)acetamida (1,610 g, 6,14 mmol), Na2CO3 (0,977 g, 9,21 mmol), complexo de dicloreto de 1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno-paládio(II)-diclorometano (0,376 g, 0,461 mmol) foram adicionados a um frasco de fundo redondo de 100 mL em dioxano (12 mL) e água (3 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada a 80°C de um dia para o outro. A mistura foi filtrada, lavada com EtOAc, diluída com água (50 mL), e extraída com acetato de etila (2x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (60 mL), secado (MgSO4) e filtrada e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 40 g de gel de sílica, eluindo com EtOAc/iso-hexano para produzir o produto como espuma após concentração: LC/MS [M+H]+: 842 Etapa B: (3-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)carbamato de terc-butila
[00207] Anidrido de Boc (0,31 mL, 1,33 mmol) e DMAP (0,148 g, 1,211 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de material de partida 3-(2-aminopiridin-3-il)-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (1,02g, 1,211 mmol) em DCM (10 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi diluída com água (50 mL), e extraída com DCM (2x50 mL). O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 24 g de gel de sílica, eluindo com EtOAc/iso- hexano para produzir uma espuma após concentração: LC/MS [M+H]+: 942. Etapa C: ácido 2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(( terc- butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico
[00208] Uma solução de (3-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)carbamato de terc-butila (0,92 g, 0,97 mmol) em THF (9 mL) foi agitada com TBAF (2,153 mL, 2,153 mmol) à temperatura ambiente sob N2 durante 30 minutos. A mistura foi diluída com AcOEt, lavada com solução aquosa saturada de KHSO4 (3x 50 mL), secada com MgSO4, e concentrada para produzir o produto bruto como um sólido. O material bruto foi usado diretamente na etapa seguinte. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 20 Etapa A: (S )-3-amino-2-(((benziloxi)carbonil)amino)propanoato de metila
[00209] A uma solução de ácido (S)-3-amino-2-(((benziloxi) carbonil)amino)propanoico (6 g, 25,2 mmol) em MeOH (60 mL) foi adicionado SOCl2 (9,19 mL, 126 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura resultante foi inativada com água (300 mL) e extraída com EA (3x300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (300 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto bruto (S)-3-amino-2-(((benziloxi)carbonil)amino)propanoato de metila como um sólido, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 253. Etapa B: (S)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-((terc-butoxicarbonil)amino) propanoato de metila
[00210] A uma solução de (S)-3-amino-2-(((benziloxi)carbonil) amino)propanoato de metila (4,0 g, 13,85 mmol) em MeOH (50 mL) foram adicionados (Boc)2O (6,4 mL, 27,70 mmol) e TEA (7,7 mL, 55,40 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 12 horas. A mistura resultante foi inativada com água (200 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (S)-2- (((benziloxi)carbonil)amino)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)propanoato de metila como um óleo: LC/MS [M + 1]+ : 353. Etapa C: (S )-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00211] A uma solução de (S)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)propanoato de metila (4,3 g, 12,2 mmol) em THF (45 mL) foi adicionado LiBH4 (0,8 g, 36,6 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com solução aquosa saturada de NH4Cl (200 mL) e extraída com EA (3x300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (300 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (S)-(3-hidroxipropano- 1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila como um óleo: LC/MS [M + 1]+: 325. Etapa D: metanossulfonato de (S)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)propila
[00212] A uma solução de (S)-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (4,0 g, 12,33 mmol) em DCM (40 mL) foram adicionados MsCl (1,9 mL, 24,66 mmol), TEA (5,2 mL, 37,0 mmol) e DMAP (0,301 g, 2,47 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada a 50°C durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com água (200 mL), e então extraída com EA (3x300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (300 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir metanossulfonato de (S)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)propila como um sólido: LCMS [M + 1]+ : 403. Etapa E: (S)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00213] A uma solução de metanossulfonato de (S)-2- (((benziloxi)carbonil)amino)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)propila (3,8 g, 9,44 mmol) em DMF (60 mL) foi adicionada 1,3-dioxoisoindolin-2-ida de potássio (3,5 g, 18,88 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi agitada a 60°C durante 3 horas. A mistura resultante foi inativada com água (200 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (300 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (S)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 454. Etapa F: (R )-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00214] A uma solução de (S)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano- 1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (3,0 g, 6,62 mmol) em EtOH (50 mL) foi adicionada N2H4.H2O (80%, 0,99 g, 19,85 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada a 70°C durante 2 h. A mistura resultante foi permitida esfriar para a temperatura ambiente. A mistura resultante foi inativada com água (200 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (R)-(3-aminopropano- 1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila como um sólido: LC/MS [M + 1]+: 324. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 21 cloridrato de (R)-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de benzila
[00215] HCl (4 mL, 1,25 M em dioxano, 5,00 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de material de partida (R)-(3-hidroxipropano-1,2- diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (1,0 g, 3,08 mmol) em DCM (10 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi concentrada. O produto foi usado como é. LC/MS [M+H]+: 225. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 22 (R)-(2-amino-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00216] A uma solução de (R)-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (1,05 g, 3,24 mmol) em MeOH (20 mL) em um FFR à temperatura ambiente sob N2, foi adicionado Pd-C (10% p/p, 0,689 g, 0,65 mmol) e a mistura foi hidrogenada a 1 atm (101,3 kPa) (pressão do cilindro) de um dia para o outro. A mistura de reação foi filtrada através de uma camada de CELITE, e lavada com EtOAc (3x50 mL). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O produto bruto foi usado como é. LC/MS [M+H]+: 191. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 23 (R)-(3-amino-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00217] A uma solução do epóxido (S)-(oxiran-2-ilmetil)carbamato de terc-butila (2,0 g, 11,55 mmol) em etanol (20 mL) foi adicionado hidróxido de amônio (20 mL, 114 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 2 horas, e concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (40 mL), a solução foi secada (MgSO4) e concentrada em vácuo. O produto bruto foi cromatografado em gel de sílica (40 g), eluindo com 0-10% de MeOH em DCM para produzir o produto desejado: LC/MS [M+H]+: 191. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 24 ácido (3-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)fenil)borônico
[00218] Acetato de potássio (1,232 g, 12,55 mmol) e PCy3 Pd G2 (0,371 g, 0,627 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (2,124 g, 8,37 mmol), foram adicionados a uma solução agitada de 3-(3-bromofenil)-1H-1,2,4-triazol-5-amina (1,0 g, 4,18 mmol) em sulfóxido de dimetila (15 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada a 90°C de um dia para o outro. A mistura de reação foi filtrada através de uma camada de CELITE, diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (3x100 mL). O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em fase reversa de C18 em 240 g de gel de sílica, eluindo com acetonitrila/água, 0-100% durante 45 minutos para produzir o produto desejado como um sólido após concentração: LC/MS [M+H]+: 205. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 25 (3R,4S)-3-amino-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila Etapa A: (3 S ,4 S )-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-hidroxipirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00219] A uma solução de (3S,4S)-3-amino-4-hidroxipirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (1.000 mg, 4,94 mmol) em dioxano (12,4 mL) e água (12,4 mL) foram adicionados carbonato de sódio (629 mg, 5,93 mmol) e Cbz-Cl (0,847 mL, 5,93 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. EtOAc (20 mL) foi adicionado. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica (0-10% de MeOH/DCM como eluente) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 337,38. Etapa B: (3 S ,4 S )-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-((metilsulfonil)oxi) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00220] À solução de (3S,4S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4- hidroxipirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (1200 mg, 3,57 mmol) em DCM (17,8 mL) foram adicionados trietilamina (0,796 mL, 5,71 mmol) e MsCl (0,445 mL, 5,71 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Após evaporação, o resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica (coluna “Gold®” de 40 g, 0-10% de MeOH/DCM como eluente) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 415,38. Etapa C: (3 R ,4 S )-3-azido-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00221] À solução de (3S,4S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4- ((metilsulfonil)oxi)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (1470 mg, 3,55 mmol) em DMF (17,7 mL) foi adicionada azida de sódio (922 mg, 14,19 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 100°C durante 4 horas. EtOAc (20 mL) e água (20 mL) foram adicionados. A camada orgânica foi separada, lavada com água e salmoura, secada, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 362,44. Etapa D: (3 R ,4 S )-3-amino-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00222] À solução de (3R,4S)-3-azido-4-(((benziloxi)carbonil)amino) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (1200 mg, 3,32 mmol) em THF (15,1 mL) e Água (1,51 mL) foi adicionada trifenilfosfina (1045 mg, 3,98 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 60°C de um dia para o outro. Após concentração sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica (0-10% de MeOH/DCM como eluente) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 336,36. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 26 (3S,4R)-3-amino-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00223] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga à do intermediário acima (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 25) usando (3R,4R)- 3-amino-4-hidroxipirrolidina-1-carboxilato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 336,42. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 27 ácido (1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)borônico
[00224] Uma mistura de 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborinano) (1.027 mg, 4,54 mmol), acetato de potássio (446 mg, 4,54 mmol), e 4-bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazol (300 mg, 1,515 mmol) em dioxano (7,6 mL) foi desgaseificada com nitrogênio antes da adição de cloro(trifenilfosfina)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paládio (II) (130 mg, 0,227 mmol). A mistura resultante foi depois desgaseificada por nitrogênio e aquecida a 80°C de um dia para o outro. Após esfriamento para a temperatura ambiente a mistura de reação foi filtrada através de CELITE, e enxaguada com EtOAc. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em fase reversa C18 eluindo com 0-100% de MeCN/água (sem aditivo ácido) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 164,05. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 28 ácido benzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-ilborônico
[00225] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 27 usando 4-clorobenzo[c][1,2,5]oxadiazol. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 29 (R)-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila Etapa A: anidrido (isobutil-carbônico) de ácido (S )-3-(((benziloxi)carbonil) amino)-2-(( terc-butoxicarbonil)amino)propanoico
[00226] A uma solução agitada de ácido (S)-3-(((benziloxi)carbonil) amino)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)propanoico (20 g, 59 mmol) em THF (200 mL) foram adicionados carbonocloridato de isobutila (9,60 g, 71 mmol) e 4-metilmorfolina (7,20 g, 71 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante 6 horas a 0°C. A mistura de reação foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir anidrido (isobutil-carbônico) de ácido (S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)propanoico como um óleo. O produto bruto foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. Etapa B: (S )-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00227] A uma solução agitada de anidrido (isobutil-carbônico) de ácido (S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-2-((terc-butoxicarbonil)amino) propanoico (15 g, 34 mmol) em THF (100 mL) foi adicionado NaBH4 (5,0 g, 136 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura resultante foi inativada com água (500 mL) e então extraída com EA (3x800 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x500 mL) e salmoura (3x500 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, e eluído com 5% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (S)-(3-hidroxipropano-1,2- diil)dicarbamato de benzila e terc-butila como um óleo: LCMS (ESI) calculado para C16H24N2O5 [M + 1]+: 325, encontrado 325. Etapa C: metanossulfonato de (S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-2-((terc- butoxicarbonil)amino)propila
[00228] A uma solução agitada de (S)-(3-hidroxipropano-1,2- diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (8,20 g, 25 mmol) em DCM (100 mL) foram adicionados TEA (10,4 mL, 75 mmol) e MsCl (2,38 mL, 30 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura resultante foi inativada com água (500 mL), e então extraída com EA (3x800 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x500 mL) e salmoura (3x500 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, e eluído com 5% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir metanossulfonato de (S)-3- (((benziloxi)carbonil)amino)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)propila como um óleo: LCMS [M + 1]+: 403. Etapa D: (S)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00229] A uma solução de metanossulfonato de (S)-3- (((benziloxi)carbonil)amino)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)propila (2,00 g, 4,97 mmol) em DMF (20 mL) foi adicionada 1,3-dioxoisoindolin-2-ida de potássio (1,38 g, 7,45 mmol). A mistura foi agitada a 60°C durante 2 horas. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (S)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2- il)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila como um sólido: LC/MS [M + 1]+: 454. Etapa E: (R )-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00230] A uma solução de (S)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano- 1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (1,80 g, 3,97 mmol) em EtOH (2 mL) foi adicionada N2H4.H2O (80%, 5 mL, 3,97 mmol). A mistura foi agitada a 80°C durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH e 1% de solução aquosa de NH3 em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (R)-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila como um sólido: LC/MS [M + 1]+: 323. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 30 (2-aminopropano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila Etapa A: (2-hidroxipropano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00231] A uma solução de 1,3-diaminopropan-2-ol (10,0 g, 11 mmol) e KOH (16,0 g, 28 mmol) em THF (50 mL) e água (50 mL) foi adicionado (Boc)2O (64 mL, 28 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), extraída com EA (2x300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-hidroxipropano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila como um óleo: LC/MS [M + 1]+: 291. Etapa B: metanossulfonato de 2,2,12,12-tetrametil-4,10-dioxo-3,11-dioxa-5,9- diazatridecan-7-ila
[00232] A uma solução de (2-hidroxipropano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila (20,0 g, 68,9 mmol) em DCM (200 mL) foi adicionado MsCl (8,1 mL, 103 mmol) por gotejamento a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com EA (400 mL), e então lavada com água (3x200 mL) e salmoura (3x150 mL). A camada orgânica coletada foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir metanossulfonato de 2,2,12,12-tetrametil-4,10-dioxo-3,11-dioxa-5,9-diazatridecan-7-ila como um óleo, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 369. Etapa C: (2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc- butila
[00233] A uma solução de metanossulfonato de 2,2,12,12-tetrametil- 4,10-dioxo-3,11-dioxa-5,9-diazatridecan-7-ila (20,0 g, 54,3 mmol) em DMF (200 mL) foi adicionada 1,3-dioxoisoindolin-2-ida de potássio (10,0 g, 54,3 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 16 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (300 mL). A camada aquosa foi extraída com EA (3x100 mL), e então as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x150 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila como um sólido, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 420. Etapa D: (2-aminopropano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00234] A uma solução de (2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano-1,3- diil)dicarbamato de di-terc-butila (14,0 g, 33,4 mmol) em EtOH (100 mL) foi adicionada N2H4.H2O (80%, 6,7 g, 167 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi permitida aquecer para 80°C. A mistura de reação foi agitada durante 4 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi esfriada para a temperatura ambiente. A mistura foi filtrada. O bolo do filtro foi lavado com EtOH (2x50 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi recristalizado com EA/PE (1:2) para produzir (2-aminopropano- 1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila como um sólido: LC/MS [M + 1]+: 290. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 31 (R)-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila Etapa A: (S )-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00235] A uma solução de (S)-2,3-bis((terc-butoxicarbonil)amino) propanoato de metila (comercialmente disponível ou preparado conforme descrito em WO 2006076706, 1,5 g, 4,71 mmol) em THF (15 mL) foi adicionado LiAlH4 (0,27 g, 7,07 mmol) em várias porções a 5°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada durante 2 horas a 5°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (30 mL) e extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x30 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (S)-(3-hidroxipropano- 1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila como um líquido: LC/MS/[M + 1]+: 291. Etapa B: metanossulfonato de (S )-2,3-bis(( terc-butoxicarbonil)amino)propila
[00236] A uma solução de (S)-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila (0,8 g, 2,76 mmol) e TEA (0,84 g, 8,27 mmol) em DCM (8 mL) foi adicionado MsCl (0,47 g, 4,13 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir metanossulfonato de (S)-2,3-bis((terc-butoxicarbonil)amino)propila como um sólido, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1 ]+: 369. Etapa C: (S )-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano-1,2-diil)dicarbamato de di- terc-butila
[00237] A uma solução de metanossulfonato de (S)-2,3-bis((terc- butoxicarbonil)amino)propila (1,1 g, 2,99 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionada 1,3-dioxoisoindolin-2-ida de potássio (0,83 g, 4,48 mmol) à temperatura ambiente. Então a mistura foi agitada a 60°C durante 16 horas. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o produto desejado como um sólido: LC/MS [M + 1]+: 420. Etapa D: (R )-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00238] A uma solução de (S)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano- 1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila (0,5 g, 1,19 mmol) em EtOH (5 mL) foi adicionada N2H4.H2O (80%, 0,12 g, 3,58 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi permitida aquecer para 80°C. A mistura de reação foi agitada durante 4 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi esfriada para a temperatura ambiente. A mistura foi filtrada. O bolo do filtro foi lavado com EtOH (2x50 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (R)-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila como um sólido, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 290. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 32 (S)-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila Etapa A: metanossulfonato de (R)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)propila
[00239] A uma solução de (R)-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (2 g, 6,17 mmol) em DCM (20 mL) foram adicionados TEA (2,6 mL, 18,50 mmol), MsCl (0,96 mL, 12,33 mmol) e DMAP (0,15 g, 1,23 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto bruto como um óleo, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+ : 403. Etapa B: (R)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00240] A uma solução de metanossulfonato de (R)-2- (((benziloxi)carbonil)amino)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)propila (3,0 g, 7,45 mmol) em DMF (50 mL) foi adicionada 1,3-dioxoisoindolin-2-ida de potássio (2,76 g, 14,90 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada a 60°C durante 12 horas. A mistura resultante foi permitida esfriar para a temperatura ambiente, diluída com água (200 mL) e extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, e eluído com 60% de EA em PE para produzir o composto desejado como um sólido: LC/MS [M + 1]+:454. Etapa C: (S )-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00241] A uma solução de (R)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano- 1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (3,0 g, 6,62 mmol) em EtOH (50 mL), foi adicionada N2H4.H2O (80%, 0,99 g, 19,85 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada a 70°C durante 2 horas. A mistura resultante foi permitida esfriar para a temperatura ambiente. A reação resultante foi inativada com água (200 mL) e extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 30% de EA em PE para produzir (S)-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila como um sólido: LC/MS [M + 1]+ : 324. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 33 (S)-2-(aminometil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila O I Etapa A: (R )-piperazina-1,2,4-tricarboxilato de 1,4-di-terc-butila e 2-metila
[00242] A uma solução de (R)-piperazina-1,2-dicarboxilato de 1-terc- butila e 2-metila (2,00 g, 8,19 mmol) e TEA (3,42 mL, 24,57 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionado (Boc)2O (2,28 mL, 9,83 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), e então extraída com EA (3x70 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x150 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o produto desejado como um óleo: LC/MS [M + 1]+: 345. Etapa B: (R )-2-(hidroximetil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila
[00243] A uma solução de (R)-piperazina-1,2,4-tricarboxilato de 1,4- di-terc-butila e 2-metila (2,00 g, 5,81 mmol) em THF (30 mL) foi adicionado LiAlH4 (0,44 g, 11,61 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com NaOH (1 M, 50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x70 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, e eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o produto desejado como um óleo: LC/MS [M + 1]+: 317. Etapa C: (S)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila
[00244] A uma solução de (R)-2-(hidroximetil)piperazina-1,4- dicarboxilato de di-terc-butila (1,00 g, 3,16 mmol), trifenilfosfina (0,83 g, 3,16 mmol) e isoindolina-1,3-diona (0,47 g, 3,16 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado DIAD (0,62 mL, 3,16 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL), e então extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x70 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto desejado como um sólido: LC/MS [M + 1]+: 446. Etapa D: (S )-2-(aminometil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila
[00245] A uma solução de (S)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil) piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila (1,30 g, 2,92 mmol) em EtOH (30 mL) foi adicionada N2H4.H2O (80%, 0,58 g, 14,59 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 1 hora. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (100 mL), a solução foi lavada com salmoura (3x80 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título como um óleo, que foi usada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 316. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 34 (R)-2-(aminometil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila o I Etapa A: (S )-piperazina-1,2,4-tricarboxilato de 1,4-di-terc-butila e 2-metila
[00246] A uma solução de (S)-piperazina-1,2-dicarboxilato de 1-terc- butila e 2-metila (2,0 g, 8,19 mmol) e TEA (2,28 mL, 16,37 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionado (Boc)2O (2,85 mL, 12,28 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL) e extraída com EA (3x70 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x150 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o produto desejado como um óleo: LC/MS [M + 1]+: 345. Etapa B: (S )-2-(hidroximetil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila
[00247] A uma solução de (S)-piperazina-1,2,4-tricarboxilato de 1,4-di- terc-butila e 2-metila (1,50 g, 4,36 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado LiAlH4 (0,33 g, 8,71 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com NaOH (1 M, 40 mL), e então extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x70 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (S)-2-(hidroximetil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc- butila como um óleo: LC/MS [M + 1]+: 317. Etapa C: (R)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila
[00248] A uma solução de (S)-2-(hidroximetil)piperazina-1,4- dicarboxilato de di-terc-butila (1,10 g, 3,48 mmol), trifenilfosfina (1,82 g, 6,95 mmol) e isoindolina-1,3-diona (1,02 g, 6,95 mmol) em THF (15 mL) foi adicionado DIAD (1,35 mL, 6,95 mmol) a 0°C. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x70 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto desejado como um óleo: LC/MS/[M + 1]+: 446. Etapa D: (R )-2-(aminometil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila
[00249] A uma solução de (R)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2- il)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila (1,20 g, 2,69 mmol) em EtOH (10 mL) foi adicionada N2H4.H2O (0,26 g, 8,08 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 1 hora. A mistura foi esfriada para a temperatura ambiente. A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi evaporado sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (100 mL), a solução foi lavada com salmoura (3x80 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto desejado como um óleo, que foi usada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 316. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 35 2,2,2-trifluoroacetato de (S)-(3-aminobutil)carbamato de benzila Etapa A: (S )-(4-hidroxibutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00250] A uma solução de ácido (S)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)butanoico (5,0 g, 24,60 mmol) em THF (30 mL) foi adicionado BF3.THF (49 mL, 49 mmol, 1 M) por gotejamento a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, e eluído com 25% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o produto desejado como um óleo: LC/MS [M + 1]+: 190. Etapa B: metanossulfonato de (S )-3-(( terc-butoxicarbonil)amino)butila
[00251] A uma solução de (S)-(4-hidroxibutan-2-il)carbamato de terc- butila (2,5 g, 13,21 mmol) e TEA (5,5 mL, 39,60 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionado MsCl (1,5 mL, 19,81 mmol) por gotejamento a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi diluída com EA (100 mL), lavada com salmoura (3x30 mL), secada com Na2SO4 e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto desejado como um óleo, que foi usada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 268. Etapa C: (S )-(4-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)butan-2-il)carbamato de terc-butila
[00252] A uma solução de metanossulfonato de (S)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)butila (3,0 g, 11,22 mmol) em DMF (40 mL) foi adicionada 1,3-dioxoisoindolin-2-ida de potássio (3,0 g, 16,83 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 3 horas. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, e eluído com 20% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto desejado como um sólido: LC/MS [M + 1]+: 319. Etapa D: (S )-(4-aminobutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00253] A uma solução de (S)-(4-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)butan-2- il)carbamato de terc-butila (2,7 g, 8,48 mmol) em EtOH (50 mL) foi adicionada N2H4.H2O (80%, 0,85 g, 16,96 mmol). A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 2 horas. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (S)-(4-aminobutan-2-il)carbamato de terc-butila como um óleo, que foi usada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 189. Etapa E : (S )-butano-1,3-diildicarbamato de benzila e terc-butila
[00254] A uma solução de (S)-(4-aminobutan-2-il)carbamato de terc- butila (1,4 g, 7,44 mmol) em DCM (15 mL) foram adicionados TEA (1,5 g, 14,87 mmol) e CbzCl (1,5 g, 8,55 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 0,5 hora. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (100 mL), a solução foi lavada com salmoura (3x30 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto desejado como um óleo, que foi usada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 323. Etapa F: 2,2,2-trifluoroacetato de (S )-(3-aminobutil)carbamato de benzila
[00255] Uma solução de (S)-butano-1,3-diildicarbamato de benzila e terc-butila (1 g, 3,1 mmol) em TFA (8 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir 2,2,2-trifluoroacetato de (S)-(3-aminobutil)carbamato de benzila como um óleo, que foi usada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1-TFA]+: 223 EXEMPLO DE REFERÊNCIA 36 (S)-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila Etapa A: metanossulfonato de (R )-2,3-bis(( terc-butoxicarbonil)amino)propila
[00256] MsCl (0,59 g, 5,16) foi adicionado a (R)-(3-hidroxipropano- 1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila (J. Med. Chem. 2010, 53(8), 3198-3213; 1,0 g, 3,44 mmol) e TEA (1,0 g, 10,34 mmol) em DCM (10 mL) a 0°C. A mistura de reação foi permitida aquecer para a temperatura ambiente e foi agitada durante 1 h. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto desejado, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1 ]+: 369. Etapa B: (R )-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano-1,2-diil)dicarbamato de di- terc-butila
[00257] A uma solução de metanossulfonato de (R)-2,3-bis((terc- butoxicarbonil)amino)propila (1,4 g, 0,38 mmol) em DMF (15 mL) foi adicionada 1,3-dioxoisoindolin-2-ida de potássio (1,41 g, 7,60 mmol) à temperatura ambiente. Então a mistura foi agitada a 60°C durante 16 h. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidroe filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto desejado como um sólido: LC/MS [M + 1]+: 420. Etapa C: (S )-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00258] A uma solução de (R)-(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propano- 1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila (1,0 g, 2,38 mmol) em EtOH (10 mL) foi adicionada N2H4.H2O (80%, 0,36 g, 7,15 mmol). A mistura foi agitada a 70°C durante 1 h. A mistura de reação foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para o composto desejado como um sólido, que foi usado para preparar os compostos da invenção sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 290. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 37 cloridrato de (R)-(2-aminobutil)carbamato de benzila Etapa A: (R )-(1-amino-1-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00259] TEA (13,7 mL, 98 mmol) e Boc2O (15,8 g, 72,2 mmol) foram adicionados a uma solução de cloridrato de (R)-2-aminobutanamida (5,0 g, 36,1 mmol) em MeOH (100 mL). A mistura foi agitada à temp. ambiente durante 3 horas. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução aquosa de HCl (1 M, 2x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto desejado como um sólido, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 203. Etapa B: (R )-(1-aminobutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00260] BH3.DMS (9,39 g, 124 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma solução agitada de (R)-(1-amino-1-oxobutan-2-il)carbamato de terc- butila (5,0 g, 24,72 mmol) em THF (50 mL) a 0oC. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 12 horas à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com solução aquosa de NaOH (1 M, 150 mL), e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro, e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 189. Etapa C: (R )-butano-1,2-diildicarbamato de benzila e terc-butila
[00261] Carbonocloridato de benzila (8,16 g, 47,8 mmol) e TEA (10 mL, 71,7 mmol) foram adicionados a uma solução de (R)-(1-aminobutan-2- il)carbamato de terc-butila (4,50 g, 23,90 mmol) em DCM (50 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (200 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro, e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 20% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LC/MS [M + 1]+: 323. Etapa D: cloridrato de (R )-(2-aminobutil)carbamato de benzila
[00262] Uma solução de (R)-butano-1,2-diildicarbamato de benzila e terc-butila (1,0 g, 3,10 mmol) em HCl (1M em dioxano) (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir cloridrato de (R)-(2-aminobutil)carbamato de benzila bruto como um sólido, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1 -HCl]+: 223. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 38 (S)-(2-(3-aminopirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila Etapa A: (S)-(1-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)pirrolidin-3-il)carbamato de benzila
[00263] (2-Bromoetil)carbamato de terc-butila (4,5 g, 20 mmol) e Na2CO3 (2,9 g, 27 mmol) foram adicionados a uma solução de (S)-pirrolidin- 3-ilcarbamato de benzila (3 g, 13,5 mmol) em DMF (15 mL). A mistura foi agitada durante 10 horas à temp. ambiente Então a mistura foi derramada para dentro de água (60 mL). A fase aquosa foi extraída com EA (2x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 364. Etapa B: (S )-(2-(3-aminopirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00264] A uma solução de (S)-(1-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil) pirrolidin-3-il)carbamato de benzila (4,8 g, 13 mmol) em MeOH (15 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% Pd, 2 g). A mistura foi desgaseificada com hidrogênio durante três vezes. Então a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob hidrogênio durante 16 horas. A mistura resultante foi filtrada através de CELITE. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LC/MS [M + 1 - 100]+: 130. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 39 (R)-(2-(3-aminopirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila Etapa A: (R)-(2-(3-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00265] (2-Bromoetil)carbamato de terc-butila (4,48 g, 19,98 mmol) foi adicionado a uma mistura de (R)-pirrolidin-3-ilcarbamato de benzila (2,2 g, 9,99 mmol) e K2CO3 (4,14 g, 30,0 mmol) em DMF (40 mL). A mistura de reação foi agitada durante 4 horas à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto desejado: LC/MS [M + 1]+: 364. Etapa B:( R )-(2-(3-aminopirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00266] Pd(OH)2/C (20% Pd, 0,30 g, 2,14 mmol) foi adicionado a uma solução de (R)-(2-(3-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidin-1-il)etil) carbamato de terc-butila (2,96 g, 8,14 mmol) em MeOH (30 mL). A mistura de reação foi desgaseificada com hidrogênio três vezes e agitada durante 6 horas à temperatura ambiente sob hidrogênio (cerca de 1,5 atm.). A solução resultante foi filtrada e o bolo do filtro foi lavado com MeOH (3x100 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto desejado como um óleo, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 230. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 40 cloridrato de (R)-(3-aminobutil)carbamato de benzila Etapa A: (R )-(4-hidroxibutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00267] BF3.THF (84 mL, 84,0 mmol, 1 M) foi adicionado por gotejamento a 0°C a uma solução de ácido (R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)butanoico (8,5 g, 41,8 mmol) em THF (10 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto desejado como um óleo: LC/MS [M + 1 - 56]+: 134. Etapa B: metanossulfonato de (R )-3-(( terc-butoxicarbonil)amino)butila
[00268] TEA (7,0 g, 69,7 mmol) e MsCl (2,7 mL, 34,9 mmol) foram adicionados a uma solução de (R)-(4-hidroxibutan-2-il)carbamato de terc- butila (4,4 g, 23,3 mmol) em DCM (100 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (300 mL), a solução foi lavada com salmoura (3x200 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir metanossulfonato de (R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 268. Etapa C: (R )-(4-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)butan-2-il)carbamato de terc-butila
[00269] 1,3-dioxoisoindolin-2-ida de potássio (5,7 g, 30,0 mmol) foi adicionada a uma solução de metanossulfonato de (R)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)butila (5,5 g, 20,0 mmol) em DMF (20 mL). A mistura foi agitada a 60°C durante 2 horas, diluída com água (100 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As frações orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto desejado como um sólido, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LC/MS [M + 1]+: 319. Etapa D: (R )-(4-aminobutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00270] N2H4.H2O (1,44 g, 28,30 mmol) foi adicionada a uma solução de (R)-(4-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)butan-2-il)carbamato de terc-butila (4,5 g, 14,10 mmol) em EtOH (2 mL). A mistura foi agitada a 80°C durante 1 hora, então foi permitida esfriar para a temperatura ambiente. A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (R)-(4- aminobutan-2-il)carbamato de terc-butila como um óleo, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 189. Etapa E: (R )-butano-1,3-diildicarbamato de benzila e terc-butila
[00271] TEA (4,4 mL, 31,90 mmol) e CbzCl (1,7 mL, 12,20 mmol) foram adicionados a uma solução de (R)-(4-aminobutan-2-il)carbamato de terc-butila (2,0 g, 10,60 mmol) em THF (10 mL) e água (10 mL) a 0°C durante 5 minutos. A mistura de reação foi agitada durante 30 minutos à temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x30 mL), solução aquosa saturada de NaHCO3 (3x30 mL) e salmoura (3x30 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (R)-butano-1,3-diildicarbamato de benzila e terc-butila como um sólido, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 323. Etapa F: cloridrato de (R )-(3-aminobutil)carbamato de benzila
[00272] A uma solução de (R)-butano-1,3-diildicarbamato de benzila e terc-butila (1,0 g, 3,10 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) foi adicionado HCl concentrado (1 mL, 12 M). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir cloridrato de (R)-(3-aminobutil)carbamato de benzila como um óleo, que foi usado na preparação de compostos finais sem purificação adicional: LCMS [M + 1 -HCl]+: 223. EXEMPLOS DE REFERÊNCIA 41 e 42 (R )-amino-3-(aminometil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (S )-amino- 3-(aminometil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00273] 3-Amino-3-(aminometil)pirrolidina-1-carboxilato de terc- butila (2,0 g, 9,29 mmol), preparado seguindo os detalhes descritos em Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2007, 17, 1181-1184), foi separado por HPLC-Prep. Quiral com as seguintes condições: Coluna: Chiralpak AD-H, 2 cm x 25 cm; Fase móvel A: CO2 (70%), Fase móvel B: MeOH (2 mmol/L NH3/MeOH): 30%; Taxa de fluxo: 40 mL/min; Detector: 210 nm; Tempo de retenção: TR1: 2,27 min; TR2: 3,30 min; Temperatura: 25°C. O enantiômero de eluição mais rápida 41 (R)-3-amino-3- (aminometil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila foi obtido a 2,27 min como um óleo: LCMS (ESI) calculado para C10H21N3O2 [M + 1]+: 216, encontrado 216. O enantiômero de eluição mais lenta 42 (S)-3-amino-3- (aminometil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila foi obtido a 3,30 min como um óleo: LCMS (ESI) calculado para C10H21N3O2 [M + 1]+: 216, encontrado 216. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 43 (S)-(3-amino-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00274] NH3.H2O 25% (20 mL) foi adicionada a uma solução agitada de (R)-(oxiran-2-ilmetil)carbamato de terc-butila (1,50 g, 8,70 mmol) em EtOH (5 mL) a 0°C. A solução de reação foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente, então foi concentrada sob vácuo para produzir (S)-(3- amino-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila como um sólido, que foi usado para preparar os compostos finais da invenção sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 191. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 44 (3S,4R)-amino-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila Etapa A: (3 R ,4R )-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-hidroxipirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00275] Cbz-Cl (10,12 g, 59,3 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma mistura de (3R,4R)-3-amino-4-hidroxipirrolidina-1-carboxilato de terc- butila (10,0 g, 49,40 mmol) e Na2CO3 (6,29 g, 59,30 mmol) em 1,4-dioxano (100 mL) e água (100 mL) a 0°C. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora sob nitrogênio. A solução resultante foi extraída com EA (3x100 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com solução aquosa de NaOH (1 M, 2x100 mL) e salmoura (2x100 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto desejado: LCMS [M + 23]+: 359. Etapa B: (3 R ,4 R )-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-((metilsulfonil)oxi) pirrolidina -1-carboxilato de terc-butila
[00276] MsCl (10,9 g, 95 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma solução de (3R,4R)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-hidroxipirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (16,0 g, 47,6 mmol) e TEA (13,2 mL, 95 mmol) em DCM (200 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob nitrogênio. A solução resultante foi inativada com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 32% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (3R,4R)-3-(((benziloxi)carbonil) amino)-4-((metilsulfonil)oxi)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila como um sólido: LCMS [M + 23]+: 437. Etapa C: (3 S ,4 R )-3-azido-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00277] NaN3 (12,8 g, 198 mmol) foi adicionada a uma solução de (3R,4R)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-((metilsulfonil)oxi)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (20,5 g, 49,5 mmol) em DMF (200 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 100°C durante 3 horas sob nitrogênio. A solução resultante foi inativada com água (200 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (3S,4R)-3-azido-4- (((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila como um óleo, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 23]+: 384. Etapa D: (3 S ,4R )-3-amino-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00278] A uma solução de (3S,4R)-3-azido-4-(((benziloxi)carbonil) amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (17,8 g, 49,30 mmol) em THF (200 mL) e água (20 mL) foi adicionada trifenilfosfina (15,5 g, 59,10 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada a 60°C durante 16 horas sob nitrogênio. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 5% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um óleo: LCMS [M + 23]+: 358. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 45 (S)-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00279] Pd(OH)2/C (20% de Pd, 0,46 g) foi adicionado a uma solução de (S)-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (2,10 g, 6,47 mmol) em MeOH (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com hidrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 12 horas à temperatura ambiente sob hidrogênio (1,5 atm (152 kPa)). A mistura resultante foi filtrada. O bolo do filtro foi lavado com MeOH (3x20 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, e eluído com 45% de MeOH e 5% de NH3.H2O em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 2-amino-3'-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)- 2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 191. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 46 2,2,2-trifluoroacetato de (S)-(2-amino-3-hidroxipropil)carbamato de benzila
[00280] TFA (3,3 mL) foi adicionado a uma solução agitada de (S)-(3- hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (1,20 g, 3,70 mmol) em DCM (10 mL) a 0°C. A solução de reação foi agitada durante 2 horas a 0°C. A solução foi concentrada sob vácuo para produzir 2,2,2- trifluoroacetato de (S)-(2-amino-3-hidroxipropil)carbamato de benzila como um sólido, que foi usado diretamente para preparar os compostos finais da invenção sem purificação adicional: LCMS [M + 1 -tFA]+: 225. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 47 2,2,2-trifluoroacetato de (R)-(2-aminopropil)carbamato de benzila Etapa A: (R )-(1-amino-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00281] A uma suspensão de cloridrato de (R)-2-aminopropanamida (100 g, 0,80 mmol) em MeOH (1.000 mL) foram adicionados TEA (244 g, 2,41 mol) e (Boc)2O (263 g, 1,20 mol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com água (1 L) e extraída com EA (3x1,5 L). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x2 L), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto desejado como um sólido: LCMS [M + 1]+: 189. Etapa B: (R )-(1-aminopropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00282] BH3-DMS (128 mL, 1,28 mol, 10 M) foi adicionado a uma suspensão de (R)-(1-amino-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila (120 g, 0,64 mol) em THF (200 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante 4 horas a 45°C. A mistura resultante foi inativada com solução aquosa de NaOH (1,0 M, 1,0 L) e extraída com EA (3x1 L). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x1,5 L), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (R)-(1- aminopropan-2-il)carbamato de terc-butila como um óleo, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 175. Etapa C: (R )-propano-1,2-diildicarbamato de benzia e terc-butila
[00283] TEA (7,20 mL, 51,70 mmol) e Cbz-Cl (5,87 g, 34,4 mmol) foram adicionados a uma solução de (R)-(1-aminopropan-2-il)carbamato de terc-butila (3 g, 17,2 mmol) em DCM (40 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica com 20% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (R)- propano-1,2-diildicarbamato de benzila e terc-butila como um sólido; LCMS [M + 1]+: 309. Etapa D: (R )-(2-aminopropil)carbamato de 2,2,2-trifluoroacetato de benzila
[00284] Uma solução de (R)-propano-1,2-diildicarbamato de benzila e terc-butila (1,10 g, 3,57 mmol) em TFA (15,0 mL, 214 mmol) e DCM (15,0 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título como um óleo, que foi usado para preparar os compostos finais da invenção sem purificação adicional: LCMS [M -tFA + 1]+: 209. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 48 cloridrato de (R)-(2-aminobutil)carbamato de benzila Etapa A: (R )-(1-amino-1-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00285] (Boc)2O (15,8 g, 72,20 mmol) e TEA (13,7 mL, 98,00 mmol) foram adicionados a uma solução de cloridrato de (R)-2-aminobutanamida (5,0 g, 36,10 mmol) em MeOH (50 mL). A mistura foi agitada à temp. ambiente durante 3 h. A mistura resultante foi inativada com H2O (100 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com HCl (1 M, 2x50 mL), secadas com Na2SO4 e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto desejado como um sólido, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 203. Etapa B: (R )-(1-aminobutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00286] BH3.Me2S (9,39 g, 124,0 mmol, 10 M) foi adicionado por gotejamento a uma solução de (R)-(1-amino-1-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butila (5,0 g, 24,7 mmol) em THF (50 mL) a 0oC. A mistura de reação foi agitada durante 12 horas à temperatura ambiente. A mistura de reação resultante foi inativada com solução aquosa de NaOH (1 M, 150 mL), e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (R)-(1-aminobutan-2- il)carbamato de terc-butila como um sólido, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 189. Etapa C: (R )-butano-1,2-diildicarbamato de benzila e terc-butila
[00287] CbzCl (8,16 g, 47,80 mmol) e TEA (7,26 g, 71,70 mmol) foram adicionados a uma solução de (R)-(1-aminobutan-2-il)carbamato de terc-butila (4,5 g, 23,90 mmol) em DCM (50 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x10 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 20% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (R)-butano-1,2-diildicarbamato de benzila e terc-butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 323. Etapa D: cloridrato de (R )-(2-aminobutil)carbamato benzila
[00288] Uma solução de (R)-butano-1,2-diildicarbamato de benzila e terc-butila (1,0 g, 3,10 mmol) em HCl (1 M em dioxano) (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1 - HCl]+: 223. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 49 cloridrato de (S)-(2-aminobutil)carbamato de benzila Etapa A: (S )-(1-amino-1-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00289] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo DE REFERÊNCIA 48, etapa A, usando cloridrato de (S)-2- aminobutanamida (10 g, 65,50 mmol): LCMS [M + 1]+: 203. Etapa B: (S )-(1-aminobutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00290] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo DE REFERÊNCIA 48. etapa B. usando (S)-(1-amino-1-oxobutan-2- il)carbamato de terc-butila (3 g, 14,83 mmol): LCMS [M + 1]+: 189. Etapa C: (S )-butano-1,2-diildicarbamato de benzila e terc-butila
[00291] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo DE REFERÊNCIA 48, etapa C, usando (S)-(1-aminobutan-2- il)carbamato de terc-butila (1,0 g, 5,31 mmol): LCMS [M + 1]+: 323. Etapa D: cloridrato de (S )-(2-aminobutil)carbamato de benzila
[00292] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo DE REFERÊNCIA 48, etapa D, usando (S)-butano-1,2- diildicarbamato de benzila e terc-butila(1 g, 3,10 mmol): LCMS [M + 1 - HCl]+: 223. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 50 (3R,4S)-3-amino-4-((terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila Etapa A: (3 R ,4 S )-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-(( terc-butoxicarbonil) amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00293] TEA (1,02 g, 10,10 mmol) e (Boc)2O (1,76 g, 8,07 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (3S,4R)-3-amino-4- (((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 44, 2,3 g, 6,72 mmol) em 1,4-dioxano (15 mL) e água (15 mL) em um banho de gelo. A mistura de reação foi agitada durante 16 horas à temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com Et2O (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução aquosa saturada de Na2CO3 (2x100 mL), salmoura (2x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 436. Etapa B: (3 R ,4 S )-3-amino-4-(( terc-butoxicarbonil)amino) pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00294] Pd(OH)2/C (20% de Pd, 0,35 g, 0,50 mmol) foi adicionado a uma solução de (3R,4S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-((tert- butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (2,20 g, 4,95 mmol) em MeOH (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com hidrogênio durante três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 16 horas à temperatura ambiente sob hidrogênio (1,5 atm (152 kPa)). A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (3R,4S)-3-amino-4-((terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila como um sólido, que foi usado para preparar os compostos da invenção sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 302. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 51 ácido (2-carbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico Etapa A: 4-Bromo-2-(triclorometil)-1 H-benzo[ d] imidazol
[00295] 2,2,2-Tricloroacetimidato de benzila (13,50 g, 53,50 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de 3-bromobenzeno-1,2-diamina (10,0 g, 53,50 mmol) em AcOH (50 mL) à temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada à temp. ambiente durante 4 horas. A mistura resultante foi derramada para dentro de água (300 mL) e o sólido foi precipitado. A mistura resultante foi filtrada. O bolo do filtro foi lavado com água (3x50 mL) e secado sob vácuo para produzir o produto desejado como um sólido, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 315. Etapa B: 4-Bromo-1 H-benzo[ d] imidazol-2-carbonitrila
[00296] 4-Bromo-2-(triclorometil)-1H-benzo[d]imidazol (10,00 g, 31,80 mmol) foi adicionado a uma solução de NH3 líquida (20 mL) a -78°C. A mistura foi agitada a -78°C durante 20 min. A mistura de reação foi permitida aquecer para a temperatura ambiente. Após amônia foi evaporada, o resíduo foi dissolvido em EA (300 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (3x200 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 4-bromo-1H- benzo[d]imidazol-2-carbonitrila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 222, 224. Etapa C: 4-Bromo-1 H-benzo[ d] imidazol-2-carboxamida
[00297] H2O2 30% (0,3 mL, 2,25 mmol) e KOH (0,63 g, 11,26 mmol) foram adicionados a uma solução de 4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2- carbonitrila (0,50 g, 2,25 mmol) em MeOH (10 mL) e água (5 mL). A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 4 horas. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o produto desejado como um sólido: LCMS [M + 1]+: 240, 242. Etapa D: ácido (2-carbamoil-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)borônico
[00298] KOAc (1,23 g, 12,50 mmol), Pd(dppf)Cl2 (0,51 g, 0,63 mmol) e 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborinano) (2,12 g, 9,37 mmol) foram adicionados a uma solução de 4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-carboxamida (0,75 g, 3,12 mmol) em 1,4-dioxano (6 mL). A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 16 h a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por RPLC com as seguintes condições: Coluna: C18; Fase móvel: ACN/água (0,5% de TFA); Taxa de fluxo: 60 mL/min; Gradiente: 5%-30% de ACN em água durante 30 min; Tempo de retenção: 20 min; Detector: UV 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir ácido (2-carbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico como um sólido: LCMS [M + 1]+: 206. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 52 (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2H-benzo[d][1,2,3]triazol- 2-il)etil)carbamato de terc-butila Etapa A: 4-bromo-1 H-benzo[ d ][1,2,3]triazol
[00299] Nitrito de sódio (1,7 g, 25,0 mmol) foi adicionado em várias porções a uma solução de 3-bromobenzeno-1,2-diamina (2,3 g, 12,5 mmol) em AcOH (10 mL) e água (4 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 4 h. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir 4-bromo-1H- benzo[d][1,2,3]triazol como um sólido, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 198, 200. Etapa B: (2-(4-bromo-2 H-benzo[ d] [1,2,3]triazol-2-il)etil)carbamato de terc- butila
[00300] Na2CO3 (2,6 g, 25 mmol) foi adicionado a uma solução de 4- bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazol (2 g, 10 mmol) e (2-bromoetil)carbamato de terc-butila (3,4 g, 15 mmol) em DMF (15 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 5 horas. A mistura resultante diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x80 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 15% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o produto desejado como um sólido: LCMS [M + 1]+: 341, 343. Etapa C: (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2 H-benzo[ d] [1,2,3]triazol-2-il)etil)carbamato de terc-butila
[00301] 4,4,4',4',5,5,5',5'-Octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (4,47 g, 17,58 mmol), KOAc (0,86 g, 8,79 mmol) e aduto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0,48 g, 0,59 mmol) foram adicionados a uma solução de (2-(4-bromo-2H- benzo[d][1,2,3]triazol-2-il)etil)carbamato de terc-butila (1,0 g, 2,93 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 16 horas a 80°C. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, e eluído com 20% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2H- benzo[d][1,2,3]triazol-2-il)etil)carbamato de terc-butila como um óleo: LCMS [M + 1]+: 389. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 53 ácido 2-amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-ilborônico Etapa A: 4-metilbenzo[ c ][1,2,5]tiadiazol
[00302] SOCl2 (18 mL, 246 mmol) foi adicionado por gotejamento muito lentamente a uma solução de 3-metilbenzeno-1,2-diamina (10,0 g, 82 mmol) e TEA (45,6 mL, 327 mmol) em DCM (200 mL). A mistura de reação foi refluxada durante 4 horas. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (700 mL), e a solução foi então extraída com DCM (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x200 mL), salmoura (2x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, e eluído com 1% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 4-metilbenzo[c][1,2,5]tiadiazol como um óleo: LCMS [M +1]+: 151. Etapa B: 4-bromo-7-metilbenzo[ c ][1,2,5]tiadiazol
[00303] Br2 (7,6 mL, 146 mmol) foi adicionado a uma solução de 4- metilbenzo[c][1,2,5]tiadiazol (11 g, 73,2 mmol) em solução aquosa de HBr 48% (120 mL, 1,06 mol). A mistura de reação foi agitada durante 16 horas a 80°C. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), e então extraída com DCM (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x200 mL) e salmoura (2x200 mL), secadas com MgSO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto desejado como um sólido, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M +1] +: 229, 231. Etapa C: 3-bromo-6-metilbenzeno-1,2-diamina
[00304] NaBH4 (1,3 g, 34,90 mmol) e cloreto de cobalto (II) hexa- hidrato (0,4 g, 1,75 mmol) foram adicionados a uma solução de 4-bromo-7- metilbenzo[c][1,2,5]tiadiazol (4,0 g, 17,46 mmol) em MeOH (80 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 3 horas. A mistura resultante foi esfriada para a temperatura ambiente, e então filtrada para remover o sólido. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em água (100 mL). A fase aquosa foi extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com 20% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 3-bromo-6- metilbenzeno-1,2-diamina como um óleo: LCMS [M +1]+: 201, 203. Etapa D: 4-bromo-7-metil-1 H-benzo[ d ]imidazol-2-amina
[00305] BrCN (1,05 g, 9,95 mmol) foi adicionado a uma solução de 3- bromo-6-metilbenzeno-1,2-diamina (2,00 g, 9,95 mmol) em MeOH (20 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 90 min. A mistura de reação foi derramada para dentro de solução aquosa saturada de NaHCO3 (50 mL). O sólido foi precipitado e filtrada. O bolo do filtro foi secado sob vácuo para produzir o produto desejado, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 226, 228. Etapa E: ácido 2-amino-7-metil-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-ilborônico
[00306] 5,5,5',5'-Tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborinano) (4,50 g, 19,91 mmol), pré-catalisador de PPh3 de 2a Geração (0,69 g, 1,19 mmol) e KOAc (2,3 g, 23,90 mmol) foram adicionados a uma solução de 4-bromo-7-metil- 1H-benzo[d]imidazol-2-amina (1,80 g, 7,96 mmol) em 1,4-dioxano (18 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por RPLC com as seguintes condições: Coluna: C18; Fase móvel: ACN/água (0,5% de TFA); Taxa de fluxo: 60 mL/min; Gradiente: 5%-30% de ACN em água durante 30 min; Tempo de retenção: 20 min; Detector: 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram concentradas sob vácuo para produzir o composto ácido do título como um sólido: LCMS [M + 1 192. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 54 (4-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2- il)carbamato de terc-butila Etapa A: (4-(3-bromofenil)-1 H-imidazol-2-il)carbamato de terc-butila
[00307] A uma solução de 2-bromo-1-(3-bromofenil)etanona (3 g, 10,79 mmol) em DMF (30 mL) foi adicionado N-carbamimidoilcarbamato de terc-butila (3,5 g, 21,59 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura resultante foi diluída com água (60 mL), e então extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x30 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 15% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)carbamato de terc-butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 338, 340. Etapa B: (4-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1 H-imidazol- 2-il)carbamato de terc-butila
[00308] A uma solução de (4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2- il)carbamato de terc-butila (1,5 g, 4,44 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL) foram adicionados 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (2,3 g, 8,87 mmol), aduto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0,6 g, 0,68 mmol) e KOAc (1,3 g, 13,31 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 16 horas sob nitrogênio a 80°C. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 386. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 55 ácido (1H-pirrolo[3,2-b]piridin-6-il)borônico
[00309] KOAc (1,5 g, 15,20 mmol), pré-catalisador XPhos de 2a Geração (1,2 g, 1,52 mmol) e 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (2,6 g, 10,15 mmol) foram adicionados a uma solução de 6- bromo-1H-pirrolo[3,2-b]piridina (1,0 g, 5,08 mmol) em 1,4-dioxano (4 mL). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com EA (30 mL), e então extraída com solução aquosa de NaOH (2N, 2x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo. O resíduo foi agitado em MeOH/DCM (1/10, 100 mL) durante 20 min. A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: [M + 1]+: 163. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 56 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzo[d]tiazol-2-amina Etapa A: N-((3-bromofenil)carbamotioil)benzamida
[00310] 3-Bromoanilina (3,50 mL, 32,1 mmol) foi adicionada por gotejamento a uma solução de isotiocianato de benzoíla (5,81 g, 35,7 mmol) em acetona (50 mL) a 70°C. A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 1 hora. A solução resultante foi derramada para dentro de gelo-água (100 mL), agitada durante 10 minutos, e filtrada. O bolo do filtro foi lavado com água (10 mL) e secado sob vácuo para produzir o produto desejado como um sólido, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 335, 337. Etapa B: 1-(3-bromofenil)tioureia
[00311] N-((3-bromofenil)carbamotioil)benzamida (10,0 g, 29,8 mmol) foi adicionada a uma solução de NaOH (10,0 g, 250 mmol) em água (100 mL) a 80°C. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 1 hora sob nitrogênio. A mistura resultante foi derramada para dentro de gelo solução aquosa de HCl (6M, 30 mL) e agitada durante 10 minutos. O valor do pH foi ajustado para 10 com NH^H2O 25%. O sólido foi precipitado e filtrado. O bolo do filtro foi lavado com água (10 mL) e secado sob vácuo. O sólido bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 1-(3-bromofenil)tioureia como um sólido: LCMS [M + 1]+: 231, 233. Etapa C: 5-bromobenzo[ d] tiazol-2-amina
[00312] Uma solução de bromo (0,86 mL, 16,79 mmol) em AcOH (17,5 mL) foi adicionada por gotejamento a 0°C a uma solução de 1-(3- bromofenil)tioureia (4,00 g, 17,31 mmol) em ACN (350 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi filtrada. O bolo do filtro foi lavado com EA (10 mL) e secado sob vácuo para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep. com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Select CSH Prep C18 OBD 19 mm x 150 mm, 5 μm, 13 nm, Fase móvel A: água com 0,05% de TFA, Fase móvel B: MeOH; Taxa de fluxo: 20; Volume de injeção: 200 μL; Gradiente: 30-100% de B; Tempo de retenção: 28 min (pico mais rápido). As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 5-bromobenzo[d]tiazol- 2-amina como um sólido: LCMS [M + 1]+: 229, 231. Etapa D: 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzo[ d ]tiazol-2-amina
[00313] KOAc (5,27 g, 53,70 mmol) e pré-catalisador de PCy3 de 2a Geração (2,11 g, 3,58 mmol) foram adicionados a uma solução de 5- bromobenzo[d]tiazol-2-amina (4,10 g, 17,90 mmol) e 4,4,4',4',5,5,5',5'- octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (9,09 g, 35,80 mmol) em 1,4-dioxano (100 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 4 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 277. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 57 2-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2H- benzo[d][1,2,3]triazol Etapa A: 4-bromo-2-metil-2 H-benzo[ d] [ 1,2,3]triazol
[00314] Iodometano (2,87 g, 20,20 mmol) foi adicionado a uma mistura de 4-bromo-2H-benzo[d][1,2,3]triazol (4,0 g, 20,20 mmol) e carbonato de potássio (5,58 g, 40,40 mmol) em DMF (40 mL) à temperatura ambiente durante 2 min. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h sob nitrogênio, então concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 7% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 4-bromo-2-metil-2H- benzo[d][1,2,3]triazol como um sólido: LCMS [M + 1]+: 212, 214. Etapa B: 2-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2H-benzo[d] [1,2,3] triazol
[00315] 4,4,4',4',5,5,5',5'-Octametil-2,2'- bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,72 g, 6,79 mmol), KOAc (1,67 g, 16,98 mmol) e aduto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0,46 g, 0,57 mmol) foram adicionados a uma solução de 4-bromo-2-metil- 2H-benzo[d][1,2,3]triazol (1,20 g, 5,66 mmol) em 1,4-dioxano (16 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 10% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um óleo: LCMS [M + 1]+: 260. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 58 ácido 3-oxociclo-hex-1-enilborônico Etapa A: trifluorometanossulfonato de 3-oxociclo-hex-1-enila
[00316] TEA (9,03 g, 89,4 mmol) e Tf2O (15,1 g, 53,6 mmol) foram adicionados a uma solução de ciclo-hexano-1,3-diona (5,00 g, 44,6 mmol) em DCM (50 mL) a -78°C durante 10 minutos sob nitrogênio. A mistura de reação foi agitada a -78°C durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (50 mL) e extraída com DCM (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 10% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir trifluorometanossulfonato de 3- oxociclo-hex-1-enila como um óleo: LCMS [M + 1]+: 245. Etapa B: ácido 3-oxociclo-hex-1-enilborônico
[00317] 4,4,4',4',5,5,5',5'-Octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (15,2 g, 60 mmol), KOAc (8,80 g, 90 mmol), aduto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (2,50 g, 3,0 mmol) foram adicionados a uma solução de trifluorometanossulfonato de 3-oxociclo-hex-1-enila (7,30 g, 30 mmol) em 1,4-dioxano (100 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 2 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com EA (100 mL) e extraída com solução aquosa de NaOH (2 M, 3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por RPLC com as seguintes condições: Coluna: C18; Fase móvel: ACN/água (1%c de TFA); Taxa de fluxo: 60 mL/min; Gradiente: 10%-40% de ACN em água durante 30 min; Tempo de retenção: 23 min; Detector: 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir ácido 3-oxociclo-hex-1-enilborônico como um óleo: LCMS [M + 1]+: 141. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 59 2-((2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4- il)metil)isoindolina-1,3-diona Etapa A: 2-((2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-il)metil)isoindolina-1,3-diona
[00318] 1,3-Dibromopropan-2-ona (2,2 g, 10 mmol) foi adicionada a uma solução agitada de 1-(3-bromofenil)tioureia (2,3 g, 10 mmol) em NMP (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 2 horas. A mistura resultante foi permitida esfriar para a temperatura ambiente. Isoindolina-1,3-diona (2,2 g, 14,9 mmol) e K2CO3 (2,8 g, 19,9 mmol) foram adicionados à temperatura ambiente à solução de reação. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 dias. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 2-((2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-il)metil)isoindolina-1,3-diona como um sólido: LCMS [M + 1]+: 414, 416. Etapa B: 2-((2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)amino) tiazol-4-il)metil)isoindolina-1,3-diona
[00319] 4,4,4',4',5,5,5',5'-Octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (2,5 g, 9,66 mmol), KOAc (1,4 g, 14,5 mmol) e pré-catalisador de PPh; de 2a Geração (0,57 g, 0,97 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de 2- ((2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-il)metil)isoindolina-1,3-diona (2,0 g, 4,83 mmol) em 1,4-dioxano (15 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir ((2-((3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4-il)metil)isoindolina- 1,3-diona como um sólido: LCMS [M + 1]+: 462. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 60 ácido imidazo[1,2-a]piridin-8-ilborônico Etapa A: 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina
[00320] Pd2(dba)3 (2,10 g, 2,30 mmol), 3-bromopiridin-2-amina (2,00 g, 11,56 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (5,87 g, 23,12 mmol) e KOAc (3,40 g, 34,7 mmol) foram adicionados a uma solução de triciclo-hexilfosfina (1,10 g, 4,10 mmol) em 1,4-dioxano (15 mL) à temp. ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada a 95°C durante 16 h. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 139. Etapa B: ácido imidazo[1,2-a ]piridin-8-ilborônico
[00321] 2-Cloroacetaldeído (13,7 g, 68,20 mmol) foi adicionado a uma solução de 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (1,00 g, 4,54 mmol) em EtOH (15 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 16 horas. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (100 mL) e extraída com solução aquosa de HCl (1 N, 3x30 mL). As camadas aquosas combinadas foram concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 163. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 61 ((4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2- il)metil)carbamato de terc-butila Etapa A: (2-((2-amino-3-bromofenil)amino)-2-oxoetil)carbamato de terc- butila
[00322] Ácido 2-((terc-butoxicarbonil)amino)acético (94 g, 535 mmol), HATU (610 g, 1,6 mol) e TEA (223 mL, 1,6 mol) foram adicionados a uma solução de 3-bromobenzeno-1,2-diamina (100 g, 535 mmol) em THF (1 L) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com água (500 mL) e extraída com EA (3x600 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x500 mL) e salmoura (3x500 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-((2- amino-3-bromofenil)amino)-2-oxoetil)carbamato de terc-butila como um sólido, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 344, 346. Etapa B: ((4-bromo-1 H-benzo[ d ]imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila
[00323] Uma solução de (2-((2-amino-3-bromofenil)amino)-2- oxoetil)carbamato de terc-butila (180 g, 523 mmol) em AcOH (250 mL) foi agitada durante 0,5 h a 60°C. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi cristalizado em EA/PE (50 : 1, 200 mL). O sólido foi coletado por filtração e secado sob vácuo para produzir ((4-bromo-1H- benzo[d]imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 326, 328. Etapa C: ((4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-1 H-benzo[d]imidazol-2- il)metil)carbamato de terc-butila
[00324] A uma solução de ((4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2- il)metil)carbamato de terc-butila (70,0 g, 215 mmol) em 1,4-dioxano (350 mL) foram adicionadas cloro(trifenilfosfina)[2-(2’-amino-1,1-bifenil)]paládio (II) (24,6 g, 42,9 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborinano) (72,7 g, 322 mmol) e KOAc (63,2 g, 644 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada a 80°C durante 16 h. A mistura resultante foi diluída com água (500 mL) e extraída com EA (3x400 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x800 mL) e salmoura (3x500 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir ((4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-1H-benzo[d] imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila: LCMS [M + 1]+: 360. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 62 (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-benzo[d][1,2,3]triazol- 1-il)etil)carbamato de terc-butila Etapa A: (2-((3-bromo-2-nitrofenil)amino)etil)carbamato de terc-butila
[00325] (2-Aminoetil)carbamato de terc-butila (3,3 g, 21 mmol) e Na2CO3 (2,9 g, 27 mmol) foram adicionados a uma solução de 1-bromo-3- fluoro-2-nitrobenzeno (3,0 g, 14 mmol) em DMF (15 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. A mistura resultante foi diluída com água (200 mL), e então extraída com EA (3x150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x150 mL), salmoura (3x150 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (2-((3-bromo-2-nitrofenil)amino) etil)carbamato de terc-butila como um óleo, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 360, 362 (1: 1). Etapa B: (2-((2-amino-3-bromofenil)amino)etil)carbamato de terc-butila
[00326] Pó de Zn (5,9 g, 84,0 mmol) foi lentamente adicionado em várias porções a uma solução de (2-((3-bromo-2-nitrofenil)amino)etil) carbamato de terc-butila (5,5 g, 14,0 mmol) em HCl concentrado e MeOH (1:4, 30 mL). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas a 50°C. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir N1-(2-aminoetil)-3-bromobenzeno-1,2-diamina bruta como um óleo, que foi usada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. À solução da N1-(2-aminoetil)-3-bromobenzeno-1,2-diamina bruta em DCM (50 mL) foram adicionados (Boc)2O (4,5 g, 21 mmol) e TEA (2,8 g, 28 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), e então extraída com DCM (3x250 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x250 mL) e salmoura (3x100 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir (2-((2-amino-3- bromofenil)amino)etil)carbamato de terc-butila como um sólido, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1 - 100]+: 230, 232. Etapa C: (2-(4-bromo-1 H-benzo[ d] [1,2,3]triazol-1-il)etil)carbamato de terc- butila
[00327] NaNO2 (1,9 g, 28,0 mmol) foi adicionada a uma solução de (2- ((2-amino-3-bromofenil)amino)etil)carbamato de terc-butila (5,0 g, 14,0 mmol) em AcOH e H2O (1:3, 15 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As frações orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 10% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-(4-bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazol- 1-il)etil)carbamato de terc-butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 341, 343. Etapa D: (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1 H-benzo[ d] [1,2,3]triazol-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00328] 4,4,4',4',5,5,5',5'-Octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (4,5 g, 17,70 mmol), aduto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0,5 g, 0,60 mmol) e KOAc (0,8 g, 8,70 mmol) foram adicionados a uma solução de (2-(4-bromo-1H- benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)etil)carbamato de terc-butila (1,0 g, 2,90 mmol) em 1,4-dioxano (15 mL). A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada a 80°C durante 16 horas. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-(4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1- il)etil)carbamato de terc-butila como um óleo: LCMS [M + 1]+: 389. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 63 (2-((2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)amino)etil) carbamato de terc-butila Etapa A: (2-((5-bromo-2-nitrofenil)amino)etil)carbamato de terc-butila ]
[00329] Cs2CO3 (22,2 g, 68,2 mmol) e (2-aminoetil)carbamato de terc- butila (8,74 g, 54,5 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de 4- bromo-2-fluoro-1-nitrobenzeno (10 g, 45,5 mmol) em NMP (35 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 100°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (200 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-((5-bromo-2- nitrofenil)amino)etil)carbamato de terc-butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 360, 362. Etapa B: (2-((2-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil) amino)etil)carbamato de terc-butila
[00330] Pd(dppf)Cl2 (1,22 g, 1,67 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil- 2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (4,23 g, 16,70 mmol) e KOAc (2,45 g, 25,00 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (2-((5-bromo-2- nitrofenil)amino)etil)carbamato de terc-butila (3,0 g, 8,33 mmol) em 1,4- dioxano (30 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 h sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-((2-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)fenil)amino)etil)carbamato de terc-butila como um óleo: LCMS [M + 1]+: 408. Etapa C: (2-((2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil) amino)etil)carbamato de terc-butila
[00331] Pd/C (10% em peso, 0,3 g, 0,28 mmol) foi adicionado a uma solução de (2-((2-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil) amino)etil)carbamato de terc-butila (3 g, 7,37 mmol) em MeOH (30 mL) à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura foi desgaseificada com hidrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas sob hidrogênio (1,5 atm (152 kPa)). O sólido foi removido por filtração. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título como um óleo, que foi usado para preparar os compostos da invenção sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 378. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 64 ácido (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)borônico
[00332] 4,4,4',4',5,5,5',5'-Octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (4,43 g, 17,46 mmol), KOAc (2,84 g, 28,90 mmol) e pré-catalisador de PCy3 de 2a Geração (1,03 g, 1,75 mmol) foram adicionados a uma solução de comercialmente disponível 4-bromobenzo[d]tiazol-2-amina (2,0 g, 8,8 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada a 90°C durante 24 h sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x300 mL) e salmoura (3x300 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por RPLC com as seguintes condições: Coluna: cromatografia em coluna C18; Taxa de fluxo: 60 mL/min; Gradiente: 25%-30% de ACN em água com 0,5% de TFA durante 20 min; Detector: 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir ácido (2- aminobenzo[d]tiazol-4-il)borônico como um sólido: LCMS [M + 1]+: 195. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 65 ((5-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2- il)metil)carbamato de terc-butila Etapa A: (terc-butoxicarbonil)glicinato de 2-(3-bromofenil)-2-oxoetila
[00333] A uma solução de ácido 2-((terc-butoxicarbonil)amino)acético (1,26 g, 7,20 mmol) em EtOH (20 mL) foi adicionado Cs2CO3 (1,17 g, 3,60 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente. A solução resultante foi concentrada sob vácuo para produzir um sal de césio. A uma solução de 2-bromo-1-(3-bromofenil)etanona (1,98 g, 7,20 mmol) em DMF (20 mL) foi adicionada o sal de césio. A mistura de reação foi agitada durante 2 horas à temp. ambiente. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 26% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 372, 374. Etapa B: ((4-(3-bromofenil)-1 H-imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila
[00334] A uma solução do (terc-butoxicarbonil)glicinato de 2-(3- bromofenil)-2-oxoetila (2 g, 5,37 mmol) em tolueno (20 mL) foi adicionado acetato de amônio (4,14 g, 53,70 mmol). A mistura de reação foi agitada a 110°C durante 16 horas. A mistura de reação foi então esfriada para a temp. ambiente, e então diluída com EA (50 mL). A solução resultante foi lavada com solução aquosa de NaHCO3 (5% p/v) (3x30 mL) e salmoura (3x30 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 352, 354. Etapa C: ((5-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1 H- imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila
[00335] A uma solução de ((4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2- il)metil)carbamato de terc-butila (1 g, 2,84 mmol) em 1,4-dioxano (30 mL) foram adicionados 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,44 g, 5,68 mmol), pré-catalisador de PCy3 de 2a Geração (0,50 g, 0,85 mmol) e KOAc (0,84 g, 8,52 mmol) à temp. ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir ((5-(3-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)metil)carbamato de terc- butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 400. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 66 ácido (2-(metilamino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico Etapa A: 7-bromo-N-metil-1 H-benzo[ d ]imidazol-2-amina
[00336] A uma solução de 7-bromo-2-cloro-1H-benzo[d]imidazol comercialmente disponível (0,50 g, 2,16 mmol) em THF (10 mL) foi adicionada metanamina (2 M em THF, 5,40 mL, 10,80 mmol). A solução de reação foi agitada durante 24 horas a 80°C. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 2% de MeOH em EA. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 7-bromo-N-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amina como um sólido: LCMS [M + H]+: 226, 228. Etapa B: ácido (2-(metilamino)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)borônico
[00337] A uma solução de 7-bromo-N-metil-1H-benzo[d]imidazol-2- amina (0,30 g, 1,33 mmol) em dioxano (4 mL) foram adicionados pré- catalisador de PPh3 de 2a Geração (76 mg, 0,13 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil- 2,2'-bi(1,3,2-dioxaborinano) (0,45 g, 1,99 mmol) e KOAc (0,39 g, 3,98 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 16 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi purificado por RPLC com as seguintes condições: Coluna: C18; Fase móvel: água (0,5% de TFA)/ACN; Gradiente: 5%-30% de ACN em água durante 25 min; Tempo de retenção: 18 min; Taxa de fluxo: 60 mL/min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir ácido (2-(metilamino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico como um sólido: LCMS [M + 1]+: 192. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 67 (2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila e (2-((2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00338] A uma solução de ácido 2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico e ácido 2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)benzenossulfínico (3 g, 3,87 mmol) em THF (38,7 mL) foram adicionados (2-aminoetil)carbamato de terc-butila (1,239 g, 7,74 mmol), trietilamina (1,078 mL, 7,74 mmol), e NCS (1,033 g, 7,74 mmol) em sequência a 0°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada à mesma temperatura durante 30 minutos. A mistura de reação foi diluída com EtOAc, lavada com solução de NaHCO3 e salmoura. A camada orgânica foi secada com MgSO4, evaporada, e o produto bruto foi purificado cromatografia em coluna de coluna de gel de sílica eluindo com 0-100% de EtOAc/hexano para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 934,53. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 68 (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)- 1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00339] A uma solução de uma mistura de cloreto de 2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzeno-1-sulfonila e cloreto de 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzeno-1-sulfonila (0,46 g, 0,48 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado (R)-3-aminopirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (90 mg, 0,48 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi mantida a 25°C durante 30 minutos. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (3x20 mL), lavado com salmoura (3x20 mL), secado e filtrado. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi aplicado em cromatografia em coluna de gel de sílica com acetato de etila/éter de petróleo (1:50 a 1:1) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+ 960; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,52 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,29-7,25 (m, 2H), 6,83-6,69 (m, 10H), 5,95 (brs, 1H), 5,55-5,50 (m, 0,5H), 5,24-5,19 (m, 0,5H), 4,58-4,53 (m, 1H), 4,05-3,81 (m, 5H), 3,85 (s, 9H), 3,48-3,35 (m, 4H), 2,02-1,82 (m, 2H), 1,44 (s, 9H). EXEMPLO DE REFERÊNCIA 69 (R)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)- 1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de terc-butila e (R)-(2- ((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de terc-butila
[00340] A uma solução de ácido 2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico e ácido 2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)benzenossulfínico (1,0 g, 1,289 mmol) em DCM (20 mL) foram adicionados (R)-(2-aminopropil)carbamato de terc-butila (0,337 g, 1,934 mmol), trietilamina (0,261 g, 2,58 mmol), e NCS (0,344 g, 2,58 mmol) em sequência a 0°C sob nitrogênio. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 30 minutos. A mistura de reação foi lavada com 10 mL de solução aq. sat. de NaHCO3. A fase orgânica foi secada com MgSO4, concentrada, e o produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica eluindo com 0-10% de MeOH em DCM para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 948,48. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 70 (3S,4R)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (3S,4R)-3-(((benziloxi) carbonil)amino)-4-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00341] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 67 usando (3R,4S)-3 -amino-4- (((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 1109,80. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 71 (3R,4S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-((2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (3R,4S)-3- (((benziloxi)carbonil)amino)-4-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00342] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 67 usando (3S,4R)-3-amino-4- (((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 1109,8.
[00343] Os EXEMPLOS DE REFERÊNCIA 68 (preparação alternativa) e 72 a 84, na Tabela abaixo, foram similarmente preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo DE REFERÊNCIA 67 usando ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (como uma mistura de dois regioisômeros de tetrazol-PMB) e as aminas correspondentes, que foram preparados conforme aqui descritos, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. Embora seja mostrado, com o propósito de simplificação, um regioisômero único do tetrazol protegido com PMB, deve ser entendido que os intermediários aqui preparados são, de fato, misturas de ambos os possíveis regioisômeros de tetrazóis substituídos com PMB. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 86 (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)- 1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de terc-butila e (S)-(2- ((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de terc-butila
[00344] Os compostos do título foram preparados na maneira igual à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando (S)-(2-aminopropil)carbamato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 948,45. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 87 (S)-(2-amino-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00345] A uma solução de (S)-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (1,5 g, 4,62 mmol) em 20 mL de etanol foi adicionado Pd/C (0,325 g, 0,231 mmol). A mistura foi agitada a 45 psi (310 kPa) de H2 durante 4 horas. O solvente volátil foi removido em vácuo e o resíduo foi dissolvido em 10 mL de EtOAc, então a solução foi concentrada de novo para produzir o produto desejado como um pó. LC/MS [M+H]+: 191,22. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 88 (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)- 1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00346] Os compostos do título foram preparados em uma maneira igual à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando (S)-(2-amino-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 964,58. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 89 (2S,4R)-4-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-2-(hidroximetil)pirrolidina- 1-carboxilato de terc-butila e (2S,4R)-4-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)- 2-(hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00347] Os compostos do título foram preparados em uma maneira igual à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando (2S,4R)-4-amino-2- (hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila comercialmente disponível. LC/MS [M+H]+: 990,31. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 90 ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoxicarbonil)amino) piridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico Etapa A. (5-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)carbamato de terc-butila
[00348] Ácido (6-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)borônico (0,707 g, 2,97 mmol) e carbonato de sódio (0,726 g, 6,85 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (0,373 g, 0,457 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de material de partida 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (2,0 g, 2,283 mmol) em dioxano (16 mL) e água (4 mL) à temp. ambiente e a mistura foi desgaseificada durante 5 minutos e então agitada a 90°C de um dia para o outro. A mistura foi diluída com água (50 mL), extraída com EtOAc (2x50 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (MgSO4) e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 120 g de gel de sílica, eluindo com 0-40% de EtOAc/iso-hexano, durante 30 minutos para produzir o produto como uma espuma. LC/MS [M+H]+: 942. Etapa B. ácido 2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc- butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico
[00349] Uma solução de (5-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil) piridin-2-il)carbamato de terc-butila (1,76 g, 1,87 mmol) em THF (16 mL) foi agitada com TBAF (4,11 mL, 4,11 mmol) à RT sob N2 durante 30 minutos. A mistura foi diluída com EtOAc, lavada (3x) com solução aquosa de KHSO4, secada com MgSO4, e concentrada para produzir o produto: LC/MS [M+H]+: 842. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 91 ácido 3'-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfínico Etapa A. ácido (3-(5-amino-1 H-1,2,4-triazol-3-il)fenil)borônico
[00350] Acetato de potássio (1,232 g, 12,55 mmol) e PCy3 Pd G2 (0,371 g, 0,627 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (2,124 g, 8,37 mmol), foram adicionados a uma solução agitada de material de partida 3-(3-bromofenil)-1H-1,2,4-triazol-5-amina (1,0 g, 4,18 mmol) em sulfóxido de dimetila (15 mL) à temp. ambiente e a mistura foi agitada a 90°C de um dia para o outro. A mistura de reação foi filtrada através de uma camada de CELITE, diluída com água (100 mL) e extraída com EtOAc (3x100 mL). O resíduo foi purificado por cromatografia líquida em coluna em fase reversa C18 em 240 g de gel de sílica, eluindo com 0100% de Acetonitrila/Água, durante 45 minutos para produzir o produto desejado: LC/MS [M+H]+: 205. Etapa B. 3'-(5-amino-1 H-1,2,4-triazol-3-il)-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[ 1,1 '-bifenil]- 3-sulfonamida
[00351] A mistura de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (1,0 g, 1,142 mmol), ácido (3-(5-amino-1H-1,2,4- triazol-3-il)fenil)borônico (0,419 g, 2,055 mmol), Na2CO3 (0,363 g, 3,43 mmol) e complexo de dicloreto de 1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno- paládio(II)-diclorometano (0,140 g, 0,171 mmol) em dioxano (10 mL) e água (2 mL) foi desgaseificada com N2 durante 5 minutos. A mistura resultante foi agitada a 95°C durante 16 horas. Esta mistura de reação foi filtrada e extraída com EtOAc (2 x 100 mL), a fase orgânica foi secada (MgSO4), e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 40 g de gel de sílica, eluindo com EtOAc/iso-hexano, B = 0-100% durante 45 min para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 909. Etapa C. ácido 3'-(5-amino-1 H-1,2,4-triazol-3-il)-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[1,1 '-bifenil]-4-sulfínico
[00352] TBAF (2,0 mL, 2,0 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de material de partida 3'-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)-N,N-bis(4- metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida (855 mg, 0,941 mmol) em THF a 0°C e a mistura foi agitada a 0°C durante 45 minutos. A mistura foi diluída com KHSO4 (solução saturada, 3x40 mL) e foi extraída com EtOAc (3x40 mL). A fase orgânica foi concentrada para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 809. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 92 (3-aminopropano-1,2-diil)(S)-dicarbamato de benzila e terc-butila
[00353] Este intermediário foi preparado em uma maneira análoga à do (R)-(3-aminopropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 20) usando (R)-(3-hidroxipropano-1,2- diil)dicarbamato de benzila e terc-butila. LC/MS [M+H]+: 324,42. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 93 (3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propano-1,2-diil)(R)-dicarbamato de benzila terc-butila e (3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propano-1,2-diil)(R)- dicarbamato de benzila e terc-butila
[00354] Os compostos do título foram preparados em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando (3-aminopropano-1,2- diil)(S)-dicarbamato de benzila e terc-butila. LC/MS [M+H]+: 1097,98. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 94 (3S,4R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-4-hidroxipirrolidina-1- carboxilato de terc-butila e (3S,4R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-4- hidroxipirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (3R,4S)-3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-4-hidroxipirrolidina-1- carboxilato de terc-butila e (3R,4S)-3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-4- hidroxipirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00355] Os compostos do título foram preparados em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando (3S,4R)-3-amino-4- hidroxipirrolidina-1-carboxilato de terc-butila comercialmente disponível. LC/MS [M+H]+: 976,44. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 96 (3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de terc-butila e (3-((2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de terc-butila
[00356] Os compostos do título foram preparados em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando (3- aminopropil)carbamato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 948,45. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 97 (R)-(1-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)- 1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila e (R)- (1-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila
[00357] Os compostos do título foram preparados em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando (R)-(1-aminopropan-2- il)carbamato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 948,49. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 98 (S)-(1-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)- 1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila e (S)- (1-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila
[00358] Os compostos do título foram preparados em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando (S)-(1-aminopropan-2- il)carbamato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 948,37. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 99 (3R,4R)-3-(((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-4-((terc- butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (3R,4R)-3- (((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00359] Os compostos do título foram preparados em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando ((3R,4R)-4-amino-1- benzilpirrolidin-3-il)carbamato de terc-butila comercialmente disponível. LC/MS [M+H]+: 1.065,77. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 100 (2S,4R)-4-amino-2-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila Etapa A: (2S,4R)-4-(((benziloxi)carbonil)amino)-2-(hidroximetil)pirrolidina- 1 -carboxilato de terc-butila
[00360] A uma solução de (2S,4R)-4-amino-2-(hidroximetil) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (2,0g, 9,25 mmol) em dioxano (20 mL) e água (20 mL) foram adicionados carbonato de sódio (1,176 g, 11,10 mmol) e Cbz-Cl (1,584 mL, 11,10 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 2 horas. EtOAc (20 mL) foi adicionado. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada (MgSO4), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica com 0-100% de EtOAc/hexanos para produzir o composto do título: LC-MS: [M+H-56]+: 295,28. Etapa B: (2S,4R)-4-(((benziloxi)carbonil)amino)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2- il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00361] A uma solução de (2S,4R)-4-(((benziloxi)carbonil)amino)-2- (hidroximetil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (2,67 g, 7,62 mmol), PPh3 (2,60 g, 9,91 mmol) e isoindolina-1,3-diona (1,345 g, 9,14 mmol) em THF (40 mL) foi adicionado DEAD (2,062 mL, 9,91 mmol) a 0°C por gotejamento. A mistura de reação foi completada em 30 min. A mistura de reação foi concentrada em vácuo e o resíduo foi cromatografado em gel de sílica eluindo com 0-60% de EtOAc em hexanos para produzir o produto desejado (2S,4R)-4-(((benziloxi)carbonil)amino)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2- il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS: [M+H]+: 480,29. Etapa C: (2 S ,4 R )-4-amino-2-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00362] A uma solução de (2S,4R)-4-(((benziloxi)carbonil)amino)-2- ((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (3,0 g, 6,26 mmol) em 20 mL de etanol foi adicionado Pd/C (0,44g, 0,313 mmol), a mistura foi agitada a 45 psi (310 kPa) de H2 durante 8 horas. O catalisador foi removido por filtração através de uma camada de CELITE. O filtrado foi concentrado e cromatografado em gel de sílica eluindo com 0-20% de MeOH em DCM para produzir o produto desejado: LC-MS [M+H]+: 346,41. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 101 (2S,4R)-4-(((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioxoisoindolin- 2-il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (2S,4R)-4-(((2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil) sulfinil)amino)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00363] Este intermediário foi preparado em uma maneira análoga à do Exemplo DE REFERÊNCIA 69 usando (2S,4R)-4-amino-2-((1,3- dioxoisoindolin-2-il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 1.120,07. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 102 ácido (3-(2-amino-1H-imidazol-4-il)fenil)borônico Etapa A: N-(4-(3-bromofenil)-1 H-imidazol-2-il)acetamida
[00364] 2-Bromo-1-(3-bromofenil)etanona (3.000 mg, 10,79 mmol) foi agitada com N-carbamimidoilacetamida (3274 mg, 32,4 mmol) em DMF (8995 μL) à temperatura ambiente durante 48 h. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com solução aquosa saturada de NH4Cl e salmoura. A camada orgânica foi separada e concentrada e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (eluindo com 0-100% de EtOAc/hexano) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 280,1, 282,1. Etapa B: 4-(3-bromofenil)-1 H-imidazol-2-amina
[00365] N-(4-(3-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il)acetamida (1,2 g, 4,28 mmol) foi dissolvida em MeOH (8 mL), e HCl em dioxano (4 N, 8 mL) e água (8 mL) foram adicionados. A mistura foi aquecida a 100°C em um frasco vedado durante 1 hora. LC-MS mostrou que o grupo acila foi removido. A mistura de reação foi esfriada e concentrada para remover os solventes. O resíduo resultante foi dissolvido em MeOH, e purificado por cromatografia em coluna (eluindo com 100% de hexano a 100% de EtOAc/EtOH (3/1) em hexano) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 238,1, 240,1 Etapa C: ácido (3-(2-amino-1 H-imidazol-4-il)fenil)borônico
[00366] 4-(3-Bromofenil)-1H-imidazol-2-amina (561 mg, 2,356 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborinano) (1331 mg, 5,89 mmol), Ph3PPdG2 (202 mg, 0,353 mmol), e acetato de potássio (925 mg, 9,43 mmol) foram adicionados em um frasco, Dioxano (3927 μL) foi adicionado. A mistura de reação foi desgaseificada durante 20 min, então aquecida a 90°C durante 1 h. A mistura de reação foi então esfriada para a temperatura ambiente, e filtrada. Os filtrados foram concentrados e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em fase reversa C18 eluindo com 060% de CH3CN/água. As frações corretas foram combinadas e liofilizadas. LC/MS [M+H]+: 204,2. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 103 ácido (3-(2-amino-5-(etoxicarbonil)tiazol-4-il)fenil)borônico Etapa A: 2-bromo-3-(3-bromofenil)-3-oxopropanoato de etila
[00367] 3-(3-Bromofenil)-3-oxopropanoato de etila (3,72 g, 13,72 mmol) foi dissolvido em DCM (35,4 mL), e 1-bromopirrolidina-2,5-diona (2,93 g, 16,47 mmol) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente sob N2 durante 6 horas. A mistura de reação foi particionada entre DCM e solução aquosa saturada de NaHCO3. A camada orgânica foi separada, concentrada e purificada por cromatografia em coluna (eluindo com 0-20% de EtOAc/hexano) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 351,2. Etapa B: 2-amino-4-(3-bromofenil)tiazol-5-carboxilato de etila
[00368] 2-Bromo-3-(3-bromofenil)-3-oxopropanoato de etila (3,26 g, 9,31 mmol) e tioureia (0,723 g, 9,50 mmol) foram aquecidos em etanol (74,5 mL) a 75°C durante 1 h. LC-MS mostrou a formação do produto desejado. A mistura de reação foi concentrada e particionada entre DCM e água. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, e concentrada para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 327,2, 329,2. Etapa C: ácido (3-(2-amino-5-(etoxicarbonil)tiazol-4-il)fenil)borônico
[00369] 2-Amino-4-(3-bromofenil)tiazol-5-carboxilato de etila (250 mg, 0,764 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborinano) (431 mg, 1,910 mmol), Ph3PPdG2 (65,6 mg, 0,115 mmol), e acetato de potássio (300 mg, 3,06 mmol) foram adicionados a um frasco de reação. Dioxano (5458 μL) foi adicionado. A mistura de reação foi desgaseificada e aquecida a 90°C durante 1 hora e 45 minutos. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, e o produto bruto foi usado na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 293,2. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 104 ácido (3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-5-(((terc-butoxicarbonil)amino) metil)tiazol-4-il)fenil)borônico Etapa A: 4-(3-bromofenil)-2-(( terc-butoxicarbonil)amino)tiazol-5-carboxilato de etila
[00370] 2-Amino-4-(3-bromofenil)tiazol-5-carboxilato de etila (Etapa B, Intermediário 103) (2 g, 6,11 mmol) foi suspenso em THF (30,6 mL). DMAP (0,075 g, 0,611 mmol) foi adicionada seguida por Anidrido de BOC (3,12 mL, 13,45 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente sob N2 durante 1 h. LC-MS mostrou que a mistura de reação foi completa. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc e água. A camada orgânica foi separada e concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (100% de hexano a 25% de EtOAc/Hexano) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 427,3,429,3. Etapa B: (4-(3-bromofenil)-5-(hidroximetil)tiazol-2-il)carbamato de terc- butila
[00371] 4-(3-Bromofenil)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)tiazol-5- carboxilato de etila (1,17 g, 2,74 mmol) foi suspenso em DCM (21,06 mL) e a suspensão foi esfriada para -78°C. DIBAL-H (8,21 mL, 8,21 mmol) (1,0 M em tolueno) foi adicionado por gotejamento sob N2. A mistura foi permitida aquecer para a temperatura ambiente durante 12 horas. LC-MS mostrou que cerca de 1/3 do material de partida permaneceu. A mistura de reação foi esfriada para -78°C, mais 1,5 eq de DIBAL (4 mL, 1,0M em tolueno) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada a -78°C durante 1 hora e então o banho frio foi removido e a mistura de reação foi aquecida para a temperatura ambiente. A mistura de reação foi inativada com EtOAc e MeOH. A mistura resultante foi agitada com CELITE e filtrada. O bolo do filtro foi lavado com MeOH. Os filtrados foram concentrados e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (100% de hexano a 40% de EtOAc/Hexano) para produzir o produto: LC/MS [M+H]+: 385,3, 387,3. Etapa C: (5-(azidometil)-4-(3-bromofenil)tiazol-2-il)carbamato de terc-butila
[00372] (4-(3-Bromofenil)-5-(hidroximetil)tiazol-2-il)carbamato de terc-butila (450 mg, 1,168 mmol) em DCM (1,17E+04 μL) foi tratado com DIEA (306 μL, 1,752 mmol) e esfriado para -78°C. Ms-Cl (109 μL, 1,402 mmol) foi adicionado sob N2. Após agitação a -78°C durante 5 minutos, a mistura de reação foi permitida aquecer para a temperatura ambiente e agitada à temp. ambiente durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada e redissolvida em DMF (4 mL). Azida de sódio (228 mg, 3,50 mmol) foi adicionada. A mistura foi aquecida a 80°C durante 20 minutos e a agitação continuou à temperatura ambiente durante 12 horas. LC-MS mostrou que a maior parte do material de partida foi convertida no produto. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc e água. A camada orgânica foi separada e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (100% hexano a 45% então a 80% de EtOAc/Hexano) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 410,2, 412,2. Etapa D: ((4-(3-bromofenil)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)tiazol-5-il)metil) carbamato de terc-butila
[00373] (5-(Azidometil)-4-(3-bromofenil)tiazol-2-il)carbamato de terc- butila (195 mg, 0,475 mmol) foi dissolvido em THF (1584 μL). Trifenilfosfina (249 mg, 0,951 mmol) e água (1 mL) foram adicionadas. A mistura foi agitada a 60°C durante 12 horas sob N2. LC-MS mostrou a massa desejada. Anidrido de BOC (221 μL, 0,951 mmol) e 1 mL de solução aquosa saturada de NaHCO3 foram adicionados. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente sob N2 durante 1 hora. LC-MS mostrou a formação do produto desejado. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc e água. A camada orgânica foi separada e concentrada e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (100% hexano a 100% de EtOAc/EtOH (3/1)) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 484,4, 486,4 Etapa E: ácido (3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-5-(((terc-butoxicarbonil) amino)metil)tiazol-4-il)fenil)borônico
[00374] ((4-(3-Bromofenil)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)tiazol-5- il)metil)carbamato de terc-butila (148 mg, 0,306 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil- 2,2'-bi(1,3,2-dioxaborinano) (173 mg, 0,764 mmol), Ph3PPdG2 (26,2 mg, 0,046 mmol), e acetato de potássio (120 mg, 1,222 mmol)foram adicionados a um frasco de reação. Dioxano (2.182 μL) foi adicionado. A mistura de reação foi desgaseificada e aquecida a 90°C durante 45 minutos. A mistura de reação foi esfriada para a temp. ambiente, e usada diretamente na reação seguinte. LC/MS [M+H]+: 450,5. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 105 ácido (3-(2-((terc-Butoxicarbonil)amino)-5-(((2-((terc-butoxicarbonil)amino) etil)amino)metil)tiazol-4-il)fenil)borônico Etapa A: (4-(3-bromofenil)-5-(((2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)amino) metil) tiazol-2-il)carbamato de terc-butila
[00375] (4-(3-Bromofenil)-5-(hidroximetil)tiazol-2-il)carbamato de terc-butila (Etapa B, EXEMPLO DE REFERÊNCIA 104) (320 mg, 0,831 mmol) em DCM (8306 μL) foi esfriado para -78°C e tratado com trietilamina (109 mg, 1,080 mmol), e Ms-Cl (78 μL, 0,997 mmol) foi adicionada sob N2. Após agitação a -78°C durante 20 minutos, a mistura de reação foi permitida aquecer para a temperatura ambiente. (2-Aminoetil)carbamato de terc-butila (266 mg, 1,661 mmol) foi então adicionado. Após a agitação da reação à temperatura ambiente durante 15 min, LC-MS mostrou a massa desejada, e o produto principal foi o intermediário reativo. Quantidade em excesso de (2- aminoetil)carbamato de terc-butila foi adicionada. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente sob N2 durante 40 min. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi purificado, duas vezes, por cromatografia em coluna (100% de hexano a 50% de EtOAc/Hexano) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 527,4, 529,4. Etapa B: ácido (3-(2-(( terc-butoxicarbonil)amino)-5-(((2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)amino)metil)tiazol-4-il)fenil)borônico
[00376] (4-(3-bromofenil)-5-(((2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)amino)metil)tiazol-2-il)carbamato de terc-butila (135 mg, 0,256 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborinano) (145 mg, 0,640 mmol), Ph3PPdG2 (21,97 mg, 0,038 mmol), e acetato de potássio (100 mg, 1,024 mmol) foram adicionados a um frasco de reação. Dioxano (1828 μL) foi adicionado. A mistura de reação foi desgaseificada e aquecida a 90°C durante 45 minutos. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, e usada diretamente na reação seguinte. LC/MS [M+H]+: 493,5. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 106 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(terc-butoxicarbonil)amino)- 1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato de terc-butila e 4-(3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(terc-butoxicarbonil)amino)-1H- benzo[d]imidazol-1-carboxilato de terc-butila Etapa A: 3-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2- (1-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida e 3-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)- N, N-bis(4- metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil) etil)sulfonil)benzenossulfonamida
[00377] Uma suspensão de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2-trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida e 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (2,0 g, 2,283 mmol), ácido (2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,808 g, 4,57 mmol), PdCl2(dppf) (0,251 g, 0,343 mmol) e carbonato de sódio (0,726 g, 6,85 mmol) em dioxano (30 mL) e água (6 mL) foi desgaseificada e aquecida a 100°C durante 2 horas. A mistura foi diluída com 20 mL de EtOAc, então filtrada através de uma camada de CELITE. A camada orgânica foi secada (MgSO4) e concentrada. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica eluindo com 0-20% de metanol em DCM para produzir o produto desejado: LC/MS [M+H]+: 881,53. Etapa B: 4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1 H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis( terc-butoxicarbonil) amino)-1 H-benzo[ d] imidazol-1-carboxilato de terc-butila e 4-(3-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(terc-butoxicarbonil)amino)-1 H-benzo [ d] imidazol-1-carboxilato de terc-butila
[00378] A uma solução de 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N- bis(4-metoxibenzil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida e 3-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (1,4 g, 1,589 mmol) em DCM (20 mL) foram adicionados N,N-dimetilpiridin-4- amina (0,582 g, 4,77 mmol) e dicarbonato de di-terc-butila (1,040 g, 4,77 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 30 minutos. RMN mostrou a conversão no produto desejado. O solvente volátil foi removido e o resíduo foi cromatografado em gel de sílica eluindo com 0100% de EtOAc em hexanos para produzir os produtos desejados. [M+H]+: 1.181,87. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 107 2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4- carboxilato de metila Etapa A: 2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-carboxilato de metila
[00379] A uma solução de 3-bromo-2-oxopropanoato de metila (3,96 g, 21,89 mmol) em MeOH (200 mL) foi adicionada 1-(3-bromofenil)tioureia (4,6 g, 19,90 mmol) à temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada a 70°C durante 3 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo, e o resíduo foi dissolvido em EA (200 mL). A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (3x200 mL), salmoura (3x200 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 313, 315. Etapa B: 2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol- 4-carboxilato de metila
[00380] A uma solução de 2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-carboxilato de metila (2 g, 6,38 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL) foram adicionados 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi (1,3,2-dioxaborolano) (3,24 g, 12,8 mmol), acetato de potássio (1,88 g, 19,2 mmol) e pré-catalisador de PCy3 de 2a Geração (0,75 g, 1,278 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 75% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 361. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 108 (2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4- il)metanol Etapa A: ácido 2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-carboxílico
[00381] À solução de 2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-carboxilato de metila (4,5 g, 14,37 mmol) em MeOH (50 mL) e THF (50 mL) foi adicionada solução aquosa de NaOH (2 N, 28,7 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 16 horas. O solvente orgânico foi evaporado sob vácuo. A fase aquosa restante foi ajustada para pH 5 com HCl 1N e um sólido foi precipitado. O sólido foi filtrado. O bolo do filtro foi lavado com água (2x10 mL), secado em um forno para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 299, 301 (1:1); 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 12,80 (s, 1H), 10,64 (brs, 1H), 8,04-8,01 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,59-7,51 (m, 1H), 7,26 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,16-7,11 (m, 1H). Etapa B: (2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-il)metanol
[00382] Uma solução agitada de ácido 2-((3-bromofenil)amino)tiazol- 4-carboxílico (1,2 g, 4,01 mmol) em THF (10 mL) foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. Então BH3.THF (20,06 mL, 1 M em THF) foi adicionado por gotejamento à mistura de reação a 0°C. A mistura resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada por água/gelo (100 mL). A solução aquosa de NaOH (8 mL, 1N) foi adicionada à mistura e agitada durante 2 h. A mistura resultante foi extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 285, 287 (1:1). Etapa C: (2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)amino) tiazol-4-il)metanol
[00383] A uma solução de (2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-il)metanol (0,9 g, 3,16 mmol) em 1,4-dioxano (9 mL) foram adicionados 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi (1,3,2-dioxaborolano) (1,6 g, 6,31 mmol), acetato de potássio (0,93 g, 9,47 mmol) e pré-catalisador de PPIn de 2a Geração (0,34 mg, 0,63 mmol) à temp. ambiente. A mistura resultante foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada a 80°C durante 16 horas. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 75% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 333. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 109 N-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-amina Etapa A: 2,2-dietoxi-N-(iminometileno)etanamina
[00384] A uma solução agitada da 2,2-dietoxietanamina (2,5 g, 18,8 mmol) em Et2O (20 mL) e hexano (20 mL) foi adicionado brometo de cianogênio (cianeto de bromo) (2,0 g, 18,8 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 5% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1 ]+: 159; 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 4,59 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 3,77-3,70 (m, 2H), 3,663,53 (m, 2H), 3,18-3,15 (m, 2H), 1,23 (t, J = 7,0 Hz, 6H). Etapa B: 1-(3-bromofenil)-3-(2,2-dietoxietil)guanidina
[00385] A uma solução de 3-bromoanilina (1 g, 5,81 mmol) em EtOH (16 mL) foram adicionados a solução de 2,2-dietoxi-N-(iminometileno) etanamina (1,8 g, 11,63 mmol) em Et2O (1,6 mL) e ácido metanossulfônico (1,1 g, 11,63 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 90°C durante 16 h. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título. O produto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 330, 332. Etapa C: N-(3-bromofenil)-1 H-imidazol-2-amina
[00386] 1-(3-Bromofenil)-3-(2,2-dietoxietil)guanidina (0,8 g, 2,42 mmol) foi dissolvida em HCl conc. (2 mL, 12,00 mmol). A solução de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Então solução aquosa de NaOH (25%) foi adicionada até a formação de um precipitado (pH = 14). A mistura foi agitada durante 30 minutos. A mistura resultante foi derramada para dentro de solução aquosa de NaOH (30 mL, 0,5 M), extraída com DCM (3x20 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 80 mL/min; Gradiente: 0% de B a 30% de B durante 30 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 238, 240. Etapa D: N-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1 H-imidazol- 2- amina
[00387] A uma solução de N-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-amina (0,6 g, 2,52 mmol) em 1,4-dioxano (12 mL) foram adicionados 4,4,4',4',5,5,5',5'- octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,3 g, 5,04 mmol), PCy3 cloreto de bifenil-2-amina-paládio(II) (0,3 g, 0,50 mmol) e acetato de potássio (0,05 g, 0,50 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 16 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 286 EXEMPLO DE REFERÊNCIA 110 ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((terc-butoxicarbonil) amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico
[00388] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga conforme descrita para ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6- ((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 90) partindo-se de 3- iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida e ((4-(5,5-dimetil-1,3,2- dioxaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 61). LCMS [M + 1]+: 895. EXEMPLO 1 4-(2-amino-3H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida Etapa A: 5-iodo -N1, N1 -bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida e 5-iodo- N1, N1-bis(4-metoxibenzil)- 6-( 1 -(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00389] A uma solução de cloreto de 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfonila e cloreto de 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfonila (síntese descrita acima, 400 mg, 0,741 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado hidróxido de amônio (78 mg, 2,222 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi mantida durante 30 minutos à temp. ambiente. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi então aplicado em coluna de gel de sílica com DCM/metanol (10:1) para obter o produto como uma mistura de regioisômeros do p-metoxibenziltetrazol: LCMS [M + H - 15]+: 791. Etapa B: 5-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)- N1, N1 -bis(4-metoxibenzil)-6- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida e 5-(2- amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)- N1, N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(1-(4- metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00390] A uma solução de 5-iodo-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida e 5-iodo-N1,N1- bis(4-metoxibenzil)-6-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (200 mg, 0,253 mmol) em 1,4-Dioxano (2 mL)/água (0,2 mL) (5:1) foram adicionados ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (90 mg, 0,506 mmol), carbonato de sódio (80 mg, 0,759 mmol) e pré- catalisador Xphos de 2a Geração (39,8 mg, 0,051 mmol) à temperatura ambiente. O frasco foi desgaseificado com nitrogênio três vezes. Então a mistura foi agitada durante 16 horas a 80°C sob uma atmosfera de nitrogênio. O sólido foi filtrado e o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi então aplicado em coluna de gel de sílica com DCM/metanol (10:1) para obter o produto como uma mistura de regioisômeros de tetrazol protegidos com PMB: LCMS [M + H]+: 796. Etapa C: 4-(2-amino-3 H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida
[00391] 5-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1,N1-bis(4- metoxibenzil)-6-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (100 mg, 0,126 mmol) foi dissolvida em ácido trifluoroacético (3 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi mantida a 80oC durante 1 hora. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi então aplicado em HPLC-prep com a condição (Coluna: X Bridge RP C18, 19 mm *150 mm, 5 Dm; Fase móvel A:água/10 mM de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 10-35% de B durante 10 min; Detecção: 254 nm; Tempo de retenção: 5,89 min) para obter o produto final: LCMS [M + H]+: 436; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,34 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62-7,33 (m, 4H), 7,11-6,94 (m, 2H), 6,78 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,33 (d, J = 7,6 Hz, 1H)
[00392] Os EXEMPLOS 2 a 7, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga conforme descrita no Exemplo 1, partindo-se de 5-iodo- N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida (Etapa A, ou a N-metilsulfonamida correspondente, 4- iodo-N2,N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1- metilbenzeno-1,2-dissulfonamida, preparada em uma maneira análoga) e acoplamento com ácidos borônicos ou ésteres borônicos que são preparados conforme aqui descrito ou que estão comercialmente disponíveis. EXEMPLO 8 ácido 4-(3,4-disulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2- carboxílico Etapa A: 2',3'-diamino-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1 '-bifenil]-3-sulfonamida
[00393] Para dentro de um FFR de 50 mL foram adicionados 3- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzeno-1,2-diamina (0,802 g, 3,43 mmol), 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (síntese descrita acima, 2,0 g, 2,3 mmol), Pd(PPh3)4 (0,528 g, 0,457 mmol) e carbonato de sódio (0,726 g, 6,85 mmol) em 1,4-dioxano (6 mL) e água (1,500 mL). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio durante 3 vezes e agitada a 80oC durante 16 hr. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (300 mL) e lavada com água (250 mL). Então a camada orgânica foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi aplicado em uma coluna de gel de sílica com acetato de etila/éter de petróleo (1/1) para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 856; 1H RMN (300 MHz, d-DMSO): δ 8,57-8,54 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,92-7,89 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06-6,73 (m, 13H), 6,52-6,39 (m, 1H), 6,23-6,10 (m, 1H),4,79-4,45 (m, 2H), 4,30-4,11(m, 2H), 4,08-3,88 (m, 4H), 3,724 (s, 12H), 1,09-0,80 (m, 2H), 0,029 (s, 9H). Etapa B: N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3- (2-(triclorometil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida
[00394] Para dentro de um FFR foram adicionados 2',3'-diamino-N,N- bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida (1,1 g, 1,285 mmol) e 2,2,2-tricloroacetimidato de benzila (0,324 g, 1,285 mmol) em ácido acético (6 mL). Então a mistura foi agitada a TR durante 6 horas. Então a mistura foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 982, 984,985(3: 4: 2). Etapa C: 4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1 H-benzol d ]imidazol-2- carboxilato de metila
[00395] Para dentro de um FFR de 50 mL foram adicionados N,N- bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(2- (triclorometil)-1H-benzold]imidazol-4-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (500 mg, 0,508 mmol) e carbonato de sódio (162 mg, 1,525 mmol) em metanol (0,5 mL). A mistura foi agitada a 80oC de um dia para o outro, então o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi extraído com acetato de etila (200 mL) e lavado com cloreto de hidrogênio (1 mol) em água (5x100 mL). A camada orgânica foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi aplicado em uma coluna de gel de sílica com acetato de etila/éter de petróleo (2/1) para produzir o composto do título: LCMS lM + H]+: 924; 1H RMN (300 MHz, d-DMSO): δ 8,70-8,58 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,14-8,11 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,74-7,40 (m, 3H), 7,10-6,79 (m, 12H), 5,66 (s, 1H), 5,07-4,51 (m, 2H), 4,09-3,87 (m, 7H), 3,73 (s, 9H), 3,21-2,90 (m, 2H), 1,09-0,81 (m, 2H), 0,03 (s, 9H). Etapa D: ácido2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5 -il)-4-(2-(metoxicarbonil)-1H-benzo [ d ] imidazol-4-il) benzenossulfínico
[00396] A uma solução de 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)- 1H-benzo[d]imidazol-2-carboxilato de metila (300 mg, 0,325 mmol) em THF (2 mL) foi adicionado fluoreto de tetrabutilamônio (1,623 mL, 1,623 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, então extraída com acetato de etila (50 mL) e lavada com água (50 mL). A camada orgânica foi secada com sulfato de sódio durante 2 horas e concentrada sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 824. Etapa E: 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)-1 H-benzo[ d] imidazol-2-carboxilato de metila
[00397] Para dentro de um FFR de 50 mL foram adicionados ácido 2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)- 4-(2-(metoxicarbonil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)benzenossulfínico (300 mg, 0,364 mmol) e 1-cloropirrolidina-2,5-diona (72,9 mg, 0,546 mmol) em THF (2 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, e amônia (0,350 mL, 0,699 mmol) foi adicionada. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, extraída com acetato de etila (50 mL) e lavada com água (50 mL). A camada orgânica foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi aplicado em uma coluna de gel de sílica com acetato de etila/éter de petróleo (1/1) para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 479; 1H RMN (300 MHz, d-DMSO): δ 8,70-8,51 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,12-8,03 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,74-7,40 (m, 3H), 7,10-6,65 (m, 12H), 5,66 (s, 2H), 4,12-3,98 (m, 2H), 3,97-3,80 (m, 5H), 3,80-3,59 (m, 9H). Etapa F: 4-(3,4-disulfamoil-2-(2 H-tetrazol-5-il)fenil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-2- carboxilato de metila
[00398] Para dentro de um FFR de 50 mL foram adicionados 4-(3- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)- 4-sulfamoilfenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-carboxilato de metila (90 mg, 0,107 mmol) e ácido trifluoroacético (2 mL). A mistura foi agitada a 60oC durante 2 horas, então concentradas sob vácuo. O pH do resíduo foi ajustado com carbonato de sódio (50 mg). Então foi purificado por cromatografia flash em sílica com metanol/DCM (percentagem de metanol: 5-60% durante 25 min) para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 465. Etapa G: ácido 4-(3,4-disulfamoil-2-(2 H-tetrazol-5-il)fenil)-1 H-benzo [d] imidazol-2-carboxílico
[00399] A uma solução de 4-(3,4-disulfamoil-2-(2H-tetrazol-5- il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-carboxilato de metila (40 mg, 0,084 mmol) em metanol (1 mL) foi adicionado hidróxido de sódio (13,38 mg, 0,334 mmol) em água (0,500 mL). A mistura foi agitada à temp. ambiente durante 1 hora e concentrada sob vácuo. O pH do resíduo foi ajustado com cloreto de hidrogênio (3 mol em metanol, 0,15 mL). A mistura foi dissolvida em N,N- dimetilformamida e purificada por HPLC-prep (condição: Coluna: Coluna XSelect CSH Prep C18 OBD, 5 Dm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 8% de B a 35% de B durante 8 min; 254/220 nm) para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 346; 1H RMN (300 MHz, d- DMSO): δ 8,59-8,50 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,07-8,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,56 (s, 2H), 7,51-7,49 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,30 (s, 2H), 7,20-7,15 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 6,75-6,72 (d, J = 7,8 Hz, 1H). EXEMPLO 9 N1-(2-aminoetil)-4-(1H-indazol-7-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida Etapa A:2-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etilcarbamato de terc-butila
[00400] A uma solução de cloreto de 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfonila e cloreto de 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfonila (síntese descrita acima, 1,4 g, 1,73 mmol) em THF (20 mL) foram adicionados (2-aminoetil)carbamato de terc-butila (0,554 g, 3,46 mmol) e trietilamina (0,525 g, 5,18 mmol) com agitação à temperatura ambiente. A solução resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o produto como um óleo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica 20 g, eluindo com EtOAc/éter de petróleo (2/1) para produzir o composto do título (como uma mistura de regioisômeros de tetrazol protegidos): LCMS [M + H]+: 934. Etapa B: 2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(1 H-indazol-7-il)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etilcarbamato de terc- butila
[00401] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (200 mg, 0,214 mmol) em dioxano (4 mL) e água (1 mL) foram adicionados Na2CO3 (91 mg, 0,857 mmol) ácido(1H-indazol-7-il)borônico (69,4 mg, 0,428 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (49,5 mg, 0,043 mmol) com agitação à temp. ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio 3 vezes. A mistura resultante foi aquecida para 80°C e agitada durante 3 horas. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com água (5 mL) e extraída com acetato de etila (2x10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir um óleo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluído com EtOAc/éter de petróleo (2/1) para produzir o composto do título como uma mistura de regioisômeros de tetrazol protegidos com PMB: LCMS [M + H]+: 924. Etapa C: N1-(2-aminoetil)-4-(1 H-indazol-7-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida
[00402] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (1H-indazol-7-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) etil)carbamato de terc-butila (120 mg, 0,130 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (0,100 mL, 1,299 mmol) com agitação à temperatura ambiente. A solução resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. O resíduo foi concentrado para produzir N1-(2- aminoetil)-4-(1H-indazol-7-il)-N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida como um óleo. A solução de N1- (2-aminoetil)-4-(1H-indazol-7-il)-N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (80 mg, 0,114 mmol) em TFA (0,876 mL, 11,37 mmol) foi agitada à temperatura ambiente. A solução resultante foi aquecida para 80°C e agitada durante 2 horas. O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge C18 OBD Prep, 100Â, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 15 mL/min; Gradiente: 10% de B a 35% de B durante 8 min; Detecção: 254 nm/220 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 464; 1H RMN (300 MHz, DMSO): δ 8,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 12 Hz, 1H), 7,917,89 (m, 6H), 6,80 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,16-3,14 (m, 2H), 3,05-3,01 (m, 2H).
[00403] Os EXEMPLOS 10 a 12, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga conforme descrita no Exemplo 9 partindo-se de 2- (2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etilcarbamato de terc-butil e ácidos borônicos ou ésteres borônicos preparados conforme aqui descrito ou disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 13 ácido 4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil) benzo[d]oxazol-2-carboxílico Etapa A : 4-bromobenzo[ d] oxazol-2-carboxilato de etila
[00404] 2-Amino-3-bromofenol (1,0 g, 5,3 mmol) foi adicionado a 2- cloro-2-oxoacetato de etila (1,1 g, 8,0 mmol) em 1,4-dioxano (12,0 mL) à temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada durante 1 hora a 150°C sob micro-ondas, esfriada, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluindo com acetato de etila/éter de petróleo (1/10). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 270/272. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,64 (dd, J = 8,4 Hz, 2H), 7,42 (dd, J = 8,0 Hz, 1H), 4,60-4,55 (m, 2H), 1,51-1,37 (m, 3H). Etapa B: ácido (2-(etoxicarbonil)benzo[ d] oxazol-4-il)borônico
[00405] Acetato de potássio (0,36 g, 3,7 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,9 g, 7,4 mmol), 4-bromobenzo[d]oxazol-2-carboxilato de etila (1,0 g, 3,7 mmol) e PdCl2(dppf) (0,54 g, 0,74 mmol) em 1,4-dioxano (15,0 mL) à temperatura ambiente sob condição de Ar. A mistura de reação foi agitada durante 1 hora a 80°C, monitorada por LCMS para encontrar o produto. A mistura de reação foi inativada com água (25,0 mL) e extraída com EA (3x30 mL). O produto foi purificado por MPLC-Prep com as seguintes condições: Coluna, C-18, 120g, Fase móvel: água (0,05% de TFA) e acetonitrila; Detector, UV 210 nm e 254 nm. As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 236. 1H RMN (400 MHz, DMSO d6) δ 8,27 (brs,2 H),7,95 (dd, J = 7,6 Hz, 1H), 7,87 (dd, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 7,6 Hz, 1H), 4,49-4,41 (m, 2H), 1,41-1,35 (m, 1H). Etapa C:4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(N-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenil)benzo[d]oxazol-2-carboxilato de etila
[00406] Na2CO3 (68 mg, 0,64 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (200 mg, 0,21 mmol), ácido (2-(etoxicarbonil)benzo[d]oxazol-4-il)borônico (100 mg, 0,42 mmol) e Pd(PPh3)4 (5 mg, 0,004 mmol) em dioxano (10,0 mL) à temp. ambiente sob condição de Ar. A mistura de reação foi agitada durante 13 horas a 80°C. A mistura de reação foi inativada com água (20 mL) e extraída com EA (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x20 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluindo com PE/EA (3/1). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+ : 997; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,45 (dd, J = 8,0 Hz, 1H), 7,89 (dd, J = 8,4 Hz, 1H), 7,70-7,65 (m, 2H), 7,537,34 (m, 5H), 7,05-6,91 (m, 4H), 6,81 (dd, J = 8,8 Hz, 3H), 6,70 (dd, J = 8,8 Hz, 2H), 6,67-6,46 (m, 1H), 5,43-5,40 (m, 1H), 5,10-4,90 (m, 1H), 4,50-4,40 (m, 2H), 4,30-4,20 (m, 2H), 4,15-4,10 (m, 2 H), 3,78 (brs, 9H), 3,40-3,10 (m, 3 H), 1,47 (brs, 9H), 1,38-1,24 (m, 3 H). Etapa D: 4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2 H-tetrazol-5- il)fenil)benzo[ d ]oxazol-2-carboxilato de etila
[00407] TFA (2,0 mL) foi adicionado por gotejamento a uma solução agitada de 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(N-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)benzo[d]oxazol-2-carboxilato de etila (160 mg, 0,16 mmol) em CH2Cl2 (2,0 mL) a 0oC. A solução de reação foi agitada durante 1 hora à temp. ambiente, então foi concentrada para produzir 4-(4-(N-(2- aminoetil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(N-(4- metoxibenzil)sulfamoil)fenil)benzo[d]oxazol-2-carboxilato de etila (200mg, bruto) como um óleo. TFA (1,5 mL) foi adicionado a uma solução agitada de 4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(N- (4-metoxibenzil)sulfamoil)fenil)benzo[d]oxazol-2-carboxilato de etila (160 mg, bruto) a 0oC. A solução de reação foi agitada durante 2 horas a 80°C, então foi concentrada para produzir o composto do título: LCMS [M +]+: 537. Etapa E: ácido 4-(4-( N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2 H-tetrazol-5- il)fenil)benzo [ d ] oxazol-2-carboxílico.
[00408] NaOH (54 mg, 1,3 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de 4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5- il)fenil)benzo[d]oxazol-2-carboxilato de etila (120 mg, 0,224 mmol) em MeOH (1,5 mL) a 0oC. A mistura de reação foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente, e ajustada para pH = 6,0 com HCl (~1M aq.). O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna, XBridge C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: água (0,05% de NH4HCO3) e acetonitrila (mantido a 34% de acetonitrila durante 8 min, mantido a 100% durante 2 min, abaixado para 34% durante 2 min); Detector, UV 220 nm e 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 509; 1H RMN (400 MHz, DMSO d6) δ 8,28-8,20 (m, 1H), 7,93 (dd, J= 8,4 Hz, 1H), 7,51 (dd, J= 8,0 Hz, 1H), 7,06 (dd, J= 8,0 Hz, 1H), 6,52 (dd, J= 7,2 Hz, 1H),3,25-3,21 (m, 2H), 2,96-2,92 (m, 2H). EXEMPLOS 14 a 84 Procedimento geral para a preparação paralela de sulfonamidas de Exemplos 14 a 84:
[00409] A um conjunto de frascos contendo, cada um, a amina necessária conhecida ou comercialmente disponível (0,13 mmol) foi adicionada uma solução do cloreto de sulfonila (45 mg, 0,044 mmol) seguida por Et3N (0,018 mL, 0,13 mmol). Os frascos foram tampados e as misturas foram agitadas à RT durante 5 horas. À mistura de reação foi então adicionado TFA (0,5 mL) e as misturas foram agitadas à RT durante 1,5 horas. Após este tempo, tolueno (1 mL) foi adicionado a cada frasco e as misturas foram concentradas em vácuo. A cada frasco foram, então, adicionados TFA (1,0 mL) e anisol (0,019 mL, 0,17 mmol). Os frascos foram tampados e as misturas de reação foram aquecidas para 80oC com agitação durante 45 minutos. Após este tempo, as misturas de reação foram concentradas em vácuo. Os resíduos brutos foram então dissolvidos em DMSO (1,0 mL) e a solução foi filtrada. Os produtos brutos foram purificados por “mass triggered preparative HPLC” (HPLC preparativa com recolhimento de fração cromatográfica acionado por detecção de massa) [coluna Waters Sunfire C18, 5μm, 19 mm x100 mm, usando uma faixa de gradiente a partir de 8-10% de MeCN inicial até 21-36% de MeCN final (0,1% de TFA) em água (0,1% de TFA), 25 mL/min, tempo de corrida de 8-12 min] para produzir os EXEMPLOS 14 a 84. EXEMPLOS 85 a 127 Procedimento geral para as preparações simultâneas de sulfonamidas dos Exemplos 85 a 127:
[00410] A um conjunto de frascos contendo, cada um, a amina necessária (comercialmente disponível, conhecida, ou preparada conforme aqui descrito, 0,13 mmol) foi adicionada uma solução do cloreto de sulfonila (45 mg, 0,044 mmol) seguida por Et3N (0,018 mL, 0,13 mmol). Os frascos foram tampados e as misturas foram agitadas à RT durante 5 horas. À mistura de reação foi então adicionado TFA (0,5 mL) e as misturas foram agitadas à RT durante 1,5 horas. Após este tempo, tolueno (1 mL) foi adicionado a cada frasco e as misturas foram concentradas em vácuo. A cada frasco foram, então, adicionados TFA (1,0 mL) e anisol (0,019 mL, 0,17 mmol). Os frascos foram tampados e as misturas de reação foram aquecidas para 80oC com agitação durante 45 minutos. Após este tempo, as misturas de reação foram concentradas em vácuo. Os resíduos brutos foram então dissolvidos em DMSO (1,0 mL) e a solução foi filtrada. Os produtos brutos foram purificados por “mass triggered preparative HPLC” (HPLC preparativa com recolhimento de fração cromatográfica acionado por detecção de massa) [coluna Waters Sunfire C18, 5 μm, 19 mm x100 mm, usando uma faixa de gradiente a partir de 8% de MeCN inicial até 30% de MeCN final (0,1% de TFA) em água (0,1% de TFA), 25 mL/min, tempo de corrida de 8 min]. Cada um dos produtos isolados foi dissolvido em MeOH (1 mL) e carregado em um cartucho de troca de íons [Agilent Bond Elut SCX (2 gramas)]. O TFA foi eluído da coluna com MeOH (20 mL). Os produtos foram então eluídos usando uma solução de NH3 em MeOH (7N, 20 mL). Esta fração foi então concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeCN:água destilada 1:1 (2 mL). Estas frações foram então congeladas e liofilizadas de um dia para o outro para produzir os Exemplos 85 a 127. EXEMPLO 128 (2R,4R)-4-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(1H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-2-carboxilato de metila
[00411] (4R)-4-({[4-(2-amino-1,3-benzotiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(1H- tetrazol-5-il)fenil]sulfonil}amino)-D-prolina (sal de TFA) foi dissolvida em MeOH (1 mL) e carregada em um cartucho de troca de íons [Agilent Bond Elut SCX (2 gramas)]. O TFA foi eluído da coluna com MeOH (20 mL). O produto foi então eluído usando uma solução de NH3 em MeOH (7N, 20 mL). Esta fração foi então concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeCN:água destilada 1:1 (2 mL). Estas frações foram então congeladas e liofilizadas de um dia para o outro. O produto bruto foi purificado por “mass triggered preparative HPLC” (HPLC preparativa com recolhimento de fração cromatográfica acionado por detecção de massa) [coluna Waters Sunfire C18, 5 μm, 19 mm x100 mm, usando uma faixa de gradiente a partir de 10% de MeCN inicial até 40% de MeCN final (0,1% de TFA) em água (0,1% de TFA), 25 mL/min, tempo de corrida de 12 min] para produzir o composto do título: LC/MS m/e [M+H]+ 579,9. EXEMPLOS 129 a 141
[00412] Procedimento geral para as preparações simultâneas dos Exemplos 129 a 141: A um conjunto de frascos contendo, cada um, o ácido/éster borônico necessário (comercialmente disponível, conhecido ou preparado conforme aqui descrito, 0,31 mmol) foi adicionado Pd(dppf)Cl2- CH2Cl2 (8,5 mg, 0,010 mmol). Os frascos foram tampados e transferidos para dentro de uma câmara de luvas sob uma atmosfera de nitrogênio. A cada frasco foi, então, adicionada uma solução do iodeto (100 mg, 0,104 mmol) em dioxano (1 mL). A cada frasco foi, então, adicionada uma solução de Na2CO3 (1M, 0,156 mL, 0,313 mmol). Os frascos foram tampados e posicionados dentro de um bloco de aquecimento preaquecido a 80°C. As misturas de reação foram agitadas naquela temperatura de um dia para o outro. A misturas foram removidas da câmara de luvas e foram permitiras esfriarem para a RT. A cada frasco foi adicionada água (2 mL) seguida por DCM (2 mL). As misturas foram transferidas para um conjunto de filtros de barril de vidro fritado e as camadas orgânicas foram drenadas para dentro de um conjunto de frascos.
[00413] À cada mistura foi adicionado mais DCM (1 mL). As camadas orgânicas foram de novo drenadas para dentro dos frascos para combinar os extratos. As misturas de reação foram então concentradas em vácuo. As misturas de reação foram dissolvidas em DMSO (1,0 mL) e filtradas. Os intermediários brutos foram purificados por “mass triggered preparative HPLC” (HPLC preparativa com recolhimento de fração cromatográfica acionado por detecção de massa) [coluna Waters XBridge C18, 5 μm, 19 mm x 100 mm, faixa de gradiente a partir de 50-55% de MeCN inicial até 80-90% de MeCN (0,1% de NH4OH) em água (0,1% de NH4OH) 25 mL/min, tempo de corrida de 8 min] para obter os intermediários necessários. A um conjunto de frascos contendo os intermediários foi adicionado TFA (1,0 mL) e as misturas foram agitadas à RT durante 1 hora. Após este tempo, as misturas foram concentradas em vácuo. A cada frasco foram, então, adicionados TFA (1,0 mL) e anisol (0,055 mL, 0,50 mmol). Os frascos foram tampados e as misturas de reação foram aquecidas para 80oC com agitação durante 1 hora. Após este tempo, as misturas de reação foram concentradas em vácuo. Os resíduos brutos foram, então, dissolvidos em DMSO (1,0 mL) e filtrados. Os produtos brutos foram então purificados por “mass triggered preparative HPLC” (HPLC preparativa com recolhimento de fração cromatográfica acionado por detecção de massa) [coluna Waters Sunfire C18, 5μm, 19 mm x100 mm, usando uma faixa de gradiente a partir de 5-8% de MeCN inicial até 15-35% de MeCN final (0,1% de TFA) em água (0,1% de TFA), 25 mL/min, tempo de corrida de 8 min] para produzir os Exemplos 129 a 141 EXEMPLO 142 3-(2-Aminobenzo[d]tiazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H-tetrazol-5- il)benzenossulfonamida Etapa A: 4-((2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-( N, N-bis( terc- butoxicarbonil)amido)benzo[ d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol- 5-il)feml)sulfoml)piperazma-1-carboxilato de benzila
[00414] Uma solução de piperazina-1-carboxilato de benzila (1,14 mL, 5,81 mmol)), e (4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(clorossulfonil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2-il)(terc- butoxicarbonil)carbamato de terc-butila (1,5 g, 1,45 mmol) em DCM (25 mL) foi agitada à rt durante 1 hr. A mistura foi diluída com EtOAc (50 mL), lavada com solução aquosa saturada de KHSO4 e salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. LCMS [M+1]: 1.216,71. Etapa B: 3-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2 H- tetrazol-5-il)benzenossulfonamida
[00415] O 4-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(N,N- bis(terc-butoxicarbonil)amido)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazina-1-carboxilato de benzila bruto foi dissolvido em DCM (10 mL), a solução foi agitada à rt durante 2 hr com TFA (3 mL) e umas poucas gotas de anisol. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi aquecido a 80oC em 2 mL TFA durante 40 minutos. TFA foi removido, e o material bruto foi purificado por RP-HPLC (7-42% de ACN em água com 0,1% de TFA). LCMS [M+1]: 522,28.
[00416] Os seguintes EXEMPLOS 143 a 154 foram preparados de acordo com o procedimento representativo descrito acima para o Exemplo 142 a partir de (4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(clorossulfonil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2-il)(terc- butoxicarbonil)carbamato de terc-butila e aminas correspondentes. As aminas podem ser opcionalmente protegidas como seus terc-butoxi-carbonil- carbamatos que são similarmente removidos sob as condições de desproteção final com TFA. O mesmo aplica-se quando carboxilatos estão presentes e estão protegidos como ésteres terc-butílicos. EXEMPLO 155 4-(6-Aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: 5-iodo-N1, N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00417] Sob N2, TBAF (9,13 mL, 9,13 mmol) foi adicionado a uma solução de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (2,0 g, 2,283 mmol) em THF (40 mL). A mistura foi agitada à temp. ambiente durante 1 hora sob N2. Acetato de sódio (1,873 g, 22,83 mmol) em água (10 mL) foi adicionado seguido por ácido (aminooxi)sulfônico sólido (2,58 g, 22,83 mmol). A mistura resultante foi agitada à temp. ambiente sob N2 durante 3 dias. 30% de material de partida não foi consumido. A mistura de reação foi diluída com EtOAc, lavada com salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. O material bruto foi purificado em coluna ISCO (0-100% de EtOAc em hexano) para produzir 5-iodo-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida. LCMS [M+1]: 791,57. Etapa B:5-(6-aminopiridin-3-il)- N1, N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00418] Uma suspensão de 5-iodo-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (0,1 g, 0,126 mmol), ácido(6-aminopiridin-3-il)borônico (0,035 g, 0,253 mmol), TETRAQUIS(trifenilfosfina)paládio(0) (0,015 g, 0,013 mmol) e carbonato de sódio (0,040 g, 0,379 mmol) em dioxano (2 mL) e água (0,6 mL) foi aquecida a 80oC durante 17 horas sob N2. A mistura foi filtrada através de uma camada de CELITE. O filtrado foi concentrado, e o resíduo foi dissolvido em EtOAc (30 mL), a solução foi lavada com salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. O material bruto foi diretamente usado para a seguinte desproteção: LCMS [M+1]: 757,80. Etapa C:4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida
[00419] 5-(6-Aminopiridin-3-il)-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (0,08 g, 0,106 mmol) foi aquecida a 80oC em 2 mL TFA durante 40 minutos. TFA foi evaporado em vácuo, e o material bruto foi purificado por HPLC em fase reversa (2-30% de acetonitrila em água com 0,05% de TFA). LCMS [M+1]: 397,23. EXEMPLO 156 3-(2-(metilsulfonamido)benzo[d]tiazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H- tetrazol-5-il)benzenossulfonamida
[00420] 4-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(N,N-bis(terc- butoxicarbonil)amido)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenil)sulfonil)piperazina-1-carboxilato de benzila (0,185 g, 0,116) foi dissolvido em DCM (30 mL), e agitado à temperatura ambiente durante 2 horas com 3 mL TFA e umas poucas gotas de anisol. A mistura foi concentrada. A uma mistura do resíduo obtido acima e cloreto de metanossulfonila (0,018 mL, 0,232 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado hidreto de sódio (4,64 mg, 0,116 mmol) a 0oC. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora, inativada com água, e diluída com éter. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada com MgSO4, e concentrada. O material bruto foi aquecido em 5 mL TFA a 80oC durante 40 minutos. TFA foi evaporado sob vácuo, e o resíduo foi purificado com HPLC em fase reversa (10-75% de água em AcCN com 0,1% de TFA. LCMS [M+1]: 600,28. EXEMPLO 157 3-(2-amino-3H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H- tetrazol-5-il)benzenossulfonamida Etapa A:4-((2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazina-1 -carboxilato de terc- butila
[00421] A uma solução de cloreto de 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) benzeno-1-sulfonila (1,8 g, 2,222 mmol) em THF (34 mL) foram adicionados piperazina-1-carboxilato de terc-butila (0,828 g, 4,44 mmol) e Et3N (0,619 mL, 4,44 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi mantida durante 30 minutos à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (300 mL), a solução foi lavada com salmoura (3x100 mL), secada e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi aplicado em cromatografia em coluna de gel de sílica com acetato de etila/éter de petróleo (1:1) para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 960;1H RMN (400 MHz, 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8,15-8,13 (m, 1H), 7,91-7,89 (m, 1H), 7,03-6,95 (m, 6H), 6,89-6,82 (m, 2H), 6,81-4,71 (m, 4H), 4,54-4,45 (m, 2H), 4,15-4,09 (m, 4H), 3,88-3,77 (m, 9H), 3,61-3,45 (m, 8H), 1,46-1,45 (m, 9H). Etapa B:4-((4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-7-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil) piperazina-1-carboxilato de terc-butila
[00422] A uma solução de 4-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazina-1- carboxilato de terc-butila (200 mg, 0,208 mmol) em dioxano (1,2 mL)/água (0,300 mL) (4:1) foram adicionados ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7- il)borônico (11,06 mg, 0,063 mmol), Na2CO3 (66,3 mg, 0,625 mmol) e Pd(Ph3P)4 (72,2 mg, 0,063 mmol) à temperatura ambiente. O frasco foi desgaseificado com nitrogênio três vezes. Então a mistura foi agitada durante 16 hr a 80°C sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi inativada com água (5 mL) e extraída com acetato de etila (3x15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (1 x 15 mL) e salmoura (1 x 15 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi aplicado em cromatografia em coluna de gel de sílica com CH2Cl2/MeOH (1:10) para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 965. Etapa C: 3-(2-amino-3H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2- (2 H-tetrazol-5-il)benzenossulfonamida
[00423] Para dentro de um FFR de duas bocas de 10 mL foram adicionados uma solução de 4-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonil)piperazina-1-carboxilato de terc-butila (200 mg, 0,207 mmol) em DCM (3 mL) e TFA (1 mL) a 0°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A solução de reação foi filtrada e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi adicionado ao TFA agitado, esfriado (4 mL). A mistura foi agitada a 80°C durante 1 hr. A mistura foi evaporada sob pressão reduzida. O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: X Bridge RP18, 19 mm x 150 mm, 5 μm; Fase móvel A: água (0,05% de NH4HCO3), Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 57% de B a 92% de B durante 10 min; Detecção: UV 254 nm. As frações coletadas foram concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M -h]+: 503; 1H RMN (400 MHz, DMSO): δ 8,09 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 7,93-7,91 (m, 1H), 7,58 (brs, 2H), 6,946,91 (m, 1H), 6,576,53 (m, 1H), 6,47 (brs, 2H), 6,12-6,11 (m, 1H), 3,45-3,42 (m, 4H), 3,16-3,13 (m, 4H).
[00424] Os Exemplos, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga conforme descrita para 3-(2-amino-3H-benzo[d]imidazol-4- il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzenossulfonamida (EXEMPLO 157) partindo-se de 4-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazina-1- carboxilato de terc-butila (EXEMPLO 157, Etapa A) e os ácidos borônicos ou ésteres borônicos apropriados que foram preparados conforme aqui descrito ou que estavam comercialmente disponíveis . EXEMPLO 161 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-3-((2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1 -carboxilato de terc-butila e (R )-3-((2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)feml)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00425] A uma solução de regioisômeros ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico e ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3- (1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 4, 0,45 g, 0,58 mmol) em THF (30 mL) foi adicionada uma solução de NCS (0,16 g, 1,2 mmol) em THF (10 mL) a 0°C sob nitrogênio. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 0,5 hora. À mistura resultante foram adicionados (R)-3-aminopirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (90 mg, 0,48 mmol) e TEA (0,16 mL, 1,2 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 0,5 hora à temperatura ambiente. A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com EtOAc/PE (1/1). As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 960. Etapa B: (R )-3-((4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)fenil) sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (R )-3-((4-(2-amino-1 H- benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1 -carboxilato de terc-butila
[00426] A uma solução de regioisômeros (R)-3-((2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (R)-3-((2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato terc-butila (0,20 g, 0,21 mmol) em 1,4-dioxano (3 mL) e água (0,5 mL) foram adicionados ácido (2-amino- 1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (92 mg, 0,52 mmol), Na2CO3 (66 mg, 0,63 mmol) e Pd(PPh3)4 (48 mg, 0,04 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com argônio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 3 horas sob argônio. A mistura resultante foi esfriada para a temperatura ambiente e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com MeOH/DCM (1/10). As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 965. Etapa C: 4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N1-((R )-pirrolidin-3-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00427] Uma solução de regioisômeros (R)-3-((4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (100 mg, 0,10 mmol) em TFA (2 mL) foi agitada durante 0,5 hora à temperatura ambiente. A solução resultante foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi coevaporado com anisol (3x10 mL) sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em TFA (2 mL) e a mistura de reação foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução resultante foi esfriada para a temperatura ambiente e derramada para dentro de água (50 mL). A fase aquosa foi lavada com EtOAc (2x30 mL). A fase aquosa foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC-preparativa com as seguintes condições: Coluna: XSelect CSH Prep C18 OBD, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 33% de B durante 8 min; Detector: UV 254 nm/220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 505; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,20 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,49 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,18 (brs, 2H), 6,07 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,13-4,06 (m, 1H), 3,29-3,04 (m, 4H), 2,15-2,04 (m, 1H), 1,94-1,85 (m, 1H).
[00428] Os EXEMPLOS, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga conforme descrita para (R)-4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (EXEMPLO 161) partindo-se de (R)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonami-do)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (Etapa A, ou a pirrolidina enantiomérica correspondente, preparada na mesma maneira) e os ácidos borônicos ou ésteres borônicos apropriados que foram preparados conforme aqui descrito ou que estavam comercialmente dis poníveis. EXEMPLO 165 4-(4-aminociclo-hexil)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(1-(4-metoxibenzil)-1 H- tetrazol-5-il)-4'-sulfamoil-2,3,4,5-tetra-hidro-[ 1,1'-bifenil]-4-il)carbamato de terc -butila
[00429] (4-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclo-hex-3-en- 1-il)carbamato de terc-butila (82 mg, 0,25 mmol) e carbonato de sódio (26,8 mg, 0,253 mmol), e TETRAQUIS(trifenilfosfina)paládio(0) (17,5 mg, 0,015 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de material de partida dos regioisômeros 5-iodo-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida e 5-iodo-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)- 6-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (Exemplo 1, Etapa A; 100 mg, 0,126 mmol) em dioxano à temp. ambiente e a mistura foi desgaseificada com N2 durante 10 minutos, então agitada a 80°C de um dia para o outro. Após o esfriamento da reação para a temp. ambiente, a mistura de reação foi filtrada através de CELITE. O líquido foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (12 g) e eluído com EtOEt/hexano para produzir o produto desejado. Etapa B: (4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1 H- tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[00430] Óxido de platina (IV) (46,5 mg, 0,205 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de material de partida (3'-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4'-sulfamoil- 2,3,4,5-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4-il)carbamato de terc-butila (176 mg, 0,205 mmol) em EtOAc(2 mL) e MeOH (0,5 mL) à RT. A solução foi desgaseificada sob pressão reduzida, então hidrogenada (usando cilindro pequeno) à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi filtrada através de CELITE e lavada com MeOH, concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluindo com EtOAc/iso-hexano para produzir como um sólido. Etapa C: 4-(4-aminociclo-hexil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il) benzeno-1,2-dissulfonamida
[00431] TFA (1,5 mL, 19,47 mmol) e anisol (1 mL, 9,15 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de material de partida (4-(3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4- sulfamoilfenil)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (160 mg, 0,186 mmol) em DCM à temperatura ambiente e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi redissolvido em EtOAc (3 mL) e tolueno (5 mL). A mistura foi concentrada de novo, e este procedimento foi repetido mais duas vezes. O resíduo foi deixado sob alto vácuo durante 3 horas e usado como é na etapa seguinte. Etapa D:4-(4-aminociclo-hexil)-3-(1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida
[00432] TFA (2 mL, 26,0 mmol) e anisol (1 mL, 9,15 mmol) foram adicionados ao material de partida 4-(4-aminociclo-hexil)-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida à temperatura ambiente e a mistura foi agitada a 80°C durante 2 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC Preparativa em Fase Reversa (C-18), eluindo com Acetonitrila/água + 0,1% de TFA para produzir para produzir o composto do título: LCMS: 402,35 [M+H]+ EXEMPLOS 166 e 167 (S)-5-(6-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(N-(1,1-dimetilpirrolidín-1- io-3-il)sulfamoil)-2-sulfamoilfenil)tetrazol-2-ida e (S)-5-(6-(2-amino-1-metil- 1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(N-(1,1-dimetilpirrolidín-1-io-3-il)sulfamoil)-2- sulfamoilfenil)tetrazol-2-ida Etapa A: 2,2,2-trifluoroacetato de (S )-3-((4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4- il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoxibenzil)sulfamoil) fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirrolidín-1-io e (S )-3-((4-(2-amino-1-metil- 1H-benzo[ d] imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4- metoxibenzil)sulfamoil)fenil)sulfonamido)-1,1 -dimetilpirrolidín-1 -io
[00433] TFA (23,5 g, 206 mmol) foi adicionado a uma mistura de (S)- 3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (da síntese do Exemplo 162, Etapa B, de acordo com os procedimentos para preparar o EXEMPLO 161; 1,99 g, 2,06 mmol) em DCM (10,3 mL) e anisol (1,13 g, 10,29 mmol) e a solução foi esfriada em um banho de gelo enquanto uma corrente de nitrogênio era borbulhada através da solução. Quando a adição foi completa, a mistura foi agitada durante 1 hora. Os compostos voláteis foram removidos sob pressão reduzida. Ao material bruto resultante (0,4 g, 0,27 mmol) em THF (1 mL) foi adicionado CH3I (114 mg, 0,8 mmol) seguido por Cs2CO3 (175 mg, 0,54 mmol) e a mistura foi agitada a 50oC durante 30 minutos. Após esfriamento, a mistura de reação foi filtrada e o solvente foi removido sob pressão reduzida do filtrado resultante para produzir a mistura de produtos. LC/MS [M+H]+: 773,55 e 787,57 Etapa B:(S )-5-(6-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(N-(1,1- dimetilpirrolidín-1-io-3-il)sulfamoil)-2-sulfamoilfenil)tetrazol-2-ida e (S)-5- (6-( 2-amino-1 -metil-1H-benzo [ d] imidazol-4-il)-3- (N-(1,1 -dimetilpirrolidín-1 - io-3-il)sulfamoil)-2-sulfamoilfenil)tetrazol-2-ida
[00434] Os produtos obtidos na Etapa A (acima) foram tratados com TFA a 80oC e o produto de reação bruto foi purificado por HPLC em fase reversa usando um gradiente de acetonitrila (contendo 0,1% de TFA) em água (contendo 0,1% de TFA) para produzir os compostos do título: LC/MS [M+H]+: 533,4 e 547,36 EXEMPLO 168 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-hidroxipirrolidin-3-il)- 3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: 3-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)- benzenossulfonamida
[00435] Uma suspensão de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (2,0 g, 2,283 mmol), ácido (2-amino-1H-benzo[d] imidazol-4-il)borônico (0,808 g, 4,57 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)- ferroceno]dicloropaládio(II) (0,251 g, 0,343 mmol) e carbonato de sódio (0,726 g, 6,85 mmol) em dioxano (30 mL) e água (6 mL) foi desgaseificada e aquecida a 120°C durante 2 horas. A mistura foi diluída com EtOAc, lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada (MgSO4) e concentrada. O produto bruto foi cromatografado via gel de sílica (coluna ISCO, 80 g, 0-20% de MeOH em DCM) para produzir o produto desejado: LC/MS (M+H)+: 881,53. Etapa B: 4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1 H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(( terc-butoxicarbonil) amino)-1 H-benzo[ d] imidazol-1-carboxilato de terc-butila
[00436] A uma solução do produto de acoplamento de Suzuki 3-(2- amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)- benzenossulfonamida (1,4 g, 1,59 mmol) em DCM (20,00 mL), foram adicionados N,N-dimetilpiridin-4-amina (0,582 g, 4,77 mmol) e dicarbonato de di-terc-butila (1,04 g, 4,77 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 30 minutos. Os compostos voláteis foram removidos em vácuo e o resíduo foi cromatografado em gel de sílica (ISCO 80 g, 0100% de EtOAc em hexanos) para produzir o composto do título: LC/MS (M+H)+: 1.181,87. Etapa C: 4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-( N-((3 S ,4 R )-1-( terc- butoxicarbonil)-4-hidroxipirrolidin-3-il)sulfamoil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1 H- tetrazol-5-il)fenil)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-1 H-benzo[ d ]imidazol-1- carboxilato de terc-butila
[00437] A uma solução do intermediário tri-Boc 4-(3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-1H-benzo[d] imidazol-1-carboxilato de terc-butila (0,2 g, 0,169 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado fluoreto de tetrabutilamônio (1,0 M em THF, 0,372 mL, 0,372 mmol) a 0°C sob N2. Após agitação durante 1 hora, a mistura de reação foi diluída com 20 mL de EtOAc, lavada sequencialmente com 5 mL de solução aq. sat. de KHSO4, 5 mL de salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. O resíduo foi dissolvido em 20 mL de DCM, a solução foi esfriada para 0°C, então à mistura de reação foram adicionados (3S,4R)-3-amino-4- hidroxipirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,034 g, 0,169 mmol), N,N- dimetilpiridin-4-amina (0,021 g, 0,169 mmol) e 1-cloropirrolidina-2,5-diona (0,045 g, 0,339 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas. Após a remoção dos compostos voláteis em vácuo, o resíduo foi cromatografado em gel de sílica (ISCO, 40g, 0-20% de EtOAc em hexanos) para produzir o produto desejado: LC/MS (M+H)+: 1.281,50. Etapa D:4-(2-amino-1H-benzo [ d] imidazol-4-il)-N1-((3 S ,4 R )-4- hidroxipirrolidin-3-il)-3-(1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00438] Uma solução de 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (N-((3S,4R)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-hidroxipirrolidin-3-il)sulfamoil)-2-(1- (4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-1H- benzo[d]imidazol-1-carboxilato de terc-butila (400 mg, 3,70 mmol) em DCM (200 μL) foi concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em anisol (400 mg, 3,7 mmol) e TFA (1.000 mg, 8,77 mmol) a 0°C. Após agitação à rt durante 0,5 hr, o composto volátil foi removido em vácuo. O resíduo foi dissolvido em 2 mL de TFA e agitada a 80°C durante 1,0 hora. Após a remoção dos compostos voláteis, o resíduo foi dissolvido em 4 mL de DMSO e a solução foi purificada diretamente por HPLC em fase reversa (3-60% de acetonitrila em água) para produzir o produto: LC/MS (M+2H)2+: 261,28.
[00439] Os seguintes EXEMPLOS 169 a 177 foram preparados de acordo com o procedimento geral descrito acima para o Exemplo 168 usando derivados de pirrolidina que estão comercialmente disponíveis, são conhecidos, ou preparados conforme aqui descrito. Observar que todas as porções aminas estão tipicamente protegidas com um grupo terc- butoxicarbonila, que é simultaneamente removido na etapa de desproteção de PMB final com TFA e anisol. Alternativamente, uma amina protegida com Boc pode ser desprotegida pelo tratamento com TFA à temperatura ambiente, seguida por desproteção do grupo PMB com aquecimento conforme aqui descrito. EXEMPLO 178 (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(piperidin-3-il)-3-(1H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa^A(R)-3z(2-(NN=bis(4-metoxibenzií)suífamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)piperidina-1 -carboxilato de terc-butila
[00440] A uma solução de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (1,0 g, 1,142 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado fluoreto de tetrabutilamônio (1,0 M em THF, 2,51 mL, 2,51 mmol) a 0°C sob N2. Após agitação durante 1 hora, a mistura de reação foi diluída com 20 mL de EtOAc, lavada sequencialmente com 5 mL de solução aq. sat. de KHSO4, 5 mL de salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. O resíduo foi dissolvido em 20 mL de DCM e a solução foi esfriada para 0°C. À mistura de reação foram adicionados (R)-3-aminopiperidina-1-carboxilato de terc-butila (0,343 g, 1,713 mmol) e N,N-dimetilpiridin-4-amina (0,209 g, 1,713 mmol), seguidos por 1-cloropirrolidina-2,5-diona (0,305 g, 2,283 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas. Após a remoção dos compostos voláteis em vácuo, o resíduo foi cromatografado em gel de sílica (ISCO, 40 g, 0-20% de EtOAc em hexanos) para produzir o produto desejado: LC/MS (M+H)+: 974,53. Etapa B: (R )-3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila
[00441] Uma suspensão de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) piperidina-1-carboxilato de terc-butila (935 mg, 0,960 mmol), ácido (2- amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (340 mg, 1,920 mmol), [1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloroPd(II) (0,157 g, 0,192 mmol) e carbonato de sódio (0,305 g, 2,88 mmol) em dioxano (10,00 mL) e água (2 mL) foi desgaseificada e aquecida a 120°C durante 2 horas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc, então foi lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada (MgSO4) e concentrada. O produto bruto foi cromatografado via gel de sílica (coluna ISCO, 40 g, 0-20% de MeOH em DCM) para produzir o produto desejado: LC/MS (M+H)+: 979,73. Etapa C: (R )-4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N 1-(piperidin-3-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00442] Uma solução de (R)-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-piperidina-1-carboxilato de terc-butila (520mg, 0,531 mmol) em DCM (200 μL) foi concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em anisol (400 mg, 3,7 mmol) e TFA (1.000 mg, 8,77 mmol) a 0°C. Após agitação à temp. ambiente durante 0,5 hora, o composto volátil foi removido em vácuo. O resíduo foi dissolvido em 2 mL de TFA e a solução foi agitada a 80°C durante 1,0 hora. Após a remoção dos compostos voláteis, o resíduo foi dissolvido em 4 mL de DMSO e a solução foi purificada diretamente por HPLC em fase reversa (3-60% de acetonitrila em água) para produzir o produto: LC/MS (M+2H)2+: 260,20.
[00443] Os seguintes EXEMPLOS 179 a 181 foram preparados de acordo com o procedimento geral descrito acima para o Exemplo 178 usando aminas que estão comercialmente disponíveis, são conhecidas, ou preparadas conforme aqui descrito. Quer ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)borônico quer ácido (2-amino-6-fluoro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico foi usado nas reações de acoplamento de Suzuki. Observar que todas as porções aminas estão tipicamente protegidas com um grupo terc- butoxicarbonila, que é simultaneamente removido na etapa de desproteção de PMB final com TFA e anisol. Alternativamente, uma amina protegida com Boc pode ser desprotegida pelo tratamento com TFA à temperatura ambiente, seguida por desproteção do grupo PMB com aquecimento conforme aqui descrito. EXEMPLO 182 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:(3-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-fenilsulfonamido)propil)carbamato de terc- butila
[00444] A uma solução de cloreto de 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzeno-1-sulfonila (1,50 g, 1,48 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado 3- aminopropilcarbamato de terc-butila (0,52 g, 2,96 mmol) à temp. ambiente A solução resultante foi agitada a 25°C durante 30 minutos e então concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com água (50 mL) e a solução foi extraída com acetato de etila (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentradas sob vácuo. O resíduo foi aplicado em cromatografia em coluna de gel de sílica com acetato de etila/éter de petróleo (1:50 a 1:1) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+ 948; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,57-8,52 (m, 1H), 8,12-8,07 (m, 1H), 7,357,21 (m, 2H), 6,99-6,81 (m, 10H), 5,99 (brs, 1H), 5,45-5,09 (m, 1H), 4,954,52 (m, 2H), 4,29-4,12 (m, 1H), 3,96-3,92 (m, 2H), 3,83-3,79 (m, 9H), 2,952,91 (m, 4H), 1,61-1,55 (m, 2H), 1,34 (s, 9H). Etapa B:(3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)propil)carbamato de terc-butila
[00445] Uma solução de (3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil) carbamato de terc-butila (0,30 g, 0,32 mmol), ácido (2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,14 g, 0,79 mmol), Na2CO3 (0,10 g, 0,95 mmol) e Pd(PPh3)4 (73 mg, 0,06 mmol) em 1,4-dioxano (3 mL) e água (0,5 mL) foi agitada a 80°C durante 3 horas sob argônio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x70 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x70 mL), secadas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluindo com metanol/DCM (1/10). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+ 953; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,82 (s, 1H), 8,46 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,09-6,80 (m, 12H), 6,77-6,75 (m, 2H), 6,45-6,42 (m, 1H), 6,35 (s, 2H), 5,76 (brs, 1H), 5,70 (brs, 1H), 4,704,52 (m, 2H), 4,10-4,08 (m, 4H), 3,73 (s, 6H), 3,70 (s, 3H), 3,02-2,98 (m, 4H), 1,63-1,61 (m, 2H), 1,36 (s, 9H). Etapa C: 4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N 1-(3-aminopropil)-N2,N2- bis(4-metoxibenzil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida
[00446] Uma mistura de (3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)-sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propil)carbamato de terc-butila (0,16 g, 0,17 mmol) em TFA (2 mL) foi agitada a 25°C durante 30 minutos. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+ 733. Etapa D: 4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N 1-(3-aminopropil)-3-(1 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00447] Uma mistura de 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3- aminopropil)-N2,N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (0,10 g, 0,09 mmol) em TFA (2 mL) foi agitada a 80°C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por HPLC-prep. Coluna, Bridge C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: acetonitrila em água (0,05% de NH4HCO3), 5%-40% durante 8 min; Detector, UV 254 nm. TR: 5,5 min. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+ 493; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,49 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,02 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,52 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,16-3,12 (m, 2H), 2,85 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,88-1,83 (m, 2H). EXEMPLO 183 4-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (3-(4-(2-amino-1-metil-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)propil)carbamato de terc-butila
[00448] Uma solução de (3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil) carbamato de terc-butila (100 mg, 0,106 mmol), ácido (2-amino-1-metil-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (60,5 mg, 0,317 mmol), Pd(PPh3)4 (24,38 mg, 0,021 mmol) e Na2CO3 (22,36 mg, 0,211 mmol) em 1,4-dioxano (1 mL) e água (0,3 mL) foi agitada a 80°C durante 2 horas sob argônio. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para produzir o produto bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com metanol/DCM (10/90). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 967; 1H RMN (CDCl3,400 MHZ): [sic] Etapa B: 4-(2-amino-1-metil-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)- N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida.
[00449] Uma solução de (3-(4-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol- 4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)carbamato de terc-butila (70 mg, 0,072 mmol) e TFA (1 mL, 12,98 mmol) em DCM (5 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título como um óleo: LCMS [M + 1]+: 967; Etapa C: 4-(2-amino-1-metil-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)- 3-(2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida.
[00450] Uma solução de 4-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-N1-(3-aminopropil)-N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (40 mg, 0,054 mmol) em TFA (5 mL, 64,9 mmol) foi agitada a 80°C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para produzir o produto bruto. O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: XBridge Prep C18 OBD Coluna 19 mm x 150 mm, 5 Dm, 13nm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 30% de B durante 8 min; 254 nm/220 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 507; 1H RMN (DMSO- d6, 400 MHz): 8,16 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,70-7,20 (m, 3H), 6,92 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,50 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 6,43 (brs, 2H), 6,06 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,12 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,86 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,80-1,76 (m, 2H). EXEMPLO 184 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((S)-2-aminopropil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S) - (1-amino-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00451] Para dentro de um 2FFR de 50 mL, dicarbonato de di-terc- butila (13,14 g, 60,2 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma mistura agitada de trietilamina (12,18 g, 120 mmol), cloridrato de (S)-2- aminopropanamida (5,00 g, 40,1 mmol) em DCM (150 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com DCM (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x50 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/20) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 189. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6):7,20 (brs, 1H), 6,90 (brs, 1H), 6,70 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 3,90-3,85 (m, 1H), 1,40 (s, 9 H), 1,18 (d, J = 7,2 Hz, 3H) Etapa B: (S )-(1-aminopropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00452] Para dentro de um FFR de 250 mL, borano (6 mL, 60,0 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma mistura agitada de (S)-(1-amino-1- oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila (6,50 g, 34,5 mmol) em THF (100 mL) à temperatura ambiente. Após a agitação da mistura de reação a 70°C durante 4 horas, ela foi esfriada para a temperatura ambiente, inativada com água/gelo (100 mL), e extraída com acetato de etila (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x40 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/10) para produzir o composto do título como um óleo: LCMS [M + H]+: 175. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 4,97 (s, 1H), 3,46 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,39 (s, 9H), 1,28 (s, 6H). LCMS [M + H]+: 189. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6):7,22 (brs, 1H), 6,93 (brs, 1H), 6,58 (d, J = 1,2 Hz, 1H, 3,88-3,81 (m, 1H), 2,48 (d, J = 3,3 Hz, 2H), 1,37 (s, 9H), 1,16 (d, J = 5,7 Hz, 3H). Etapa C: (S )-(1-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)femlsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila
[00453] Para dentro de um FFR de 50 mL, 1-cloropirrolidina-2,5-diona (0,15 g, 1,160 mmol) foi adicionada uma mistura agitada de regioisômeros ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)benzenossulfínico e ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 4; 0,45 g, 0,580 mmol) em THF (20 mL) à temperatura ambiente. Após a agitação da mistura de reação à temperatura ambiente durante 1 hora, (S)-(1-aminopropan-2-il)carbamato de terc-butila (0,15 g, 0,870 mmol) foi adicionado à temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro e então diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x20 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/5) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 948. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8,238,12 (m, 6H), 7,33-7,26 (m, 4H), 6,96-6,86 (m, 4H), 5,80 (s, 2H), 4,10-3. 70 (m, 4H), 3,79 (s, 9H), 3,70-3,68 (m, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,16 (d, J = 3,0Hz, 3H). Etapa D: (S )-(1-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila
[00454] Para dentro de um FFR de 3 bocas de 50 mL, [1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II) (46,20 mg, 0,063 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de carbonato de sódio (0,10 g, 0,947 mmol), (S)-1-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-ilcarbamato de terc-butila (0,30 g, 0,316 mmol), ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)borônico (0,112 g, 0,632 mmol) em dioxano/água ((1:1)4/1) (12 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 2 horas sob nitrogênio. Os sólidos foram filtrados. O filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/1) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 953 1H RMN (300 MHz, MeOD): δ 8,32- (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,45-7,40 (m, 4H), 7,29-7,22 (m, 6H), 6,87-6,64 (m, 4H), 5,75-5,12 (m, 2H), 4,73-4,68 (m, 2H), 4,21-4,13 (m, 2H), 3,94-3,73 (m, 1H), 3,76 (s, 9 H), 3,73 (s, 2H), 1,43 (s, 9H), 0,85 (d, J = 6,9 Hz, 3H). Etapa E: 4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)- N1 -((S )-2-aminopropil)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00455] Para dentro de um FFR de 50 mL, 2,2,2-ácido trifluoroacético (2 mL) foi adicionado a uma mistura agitada de (S)-(1-(4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila (80,00 mg, 0,083 mmol) em DCM (1 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 1 hora e então concentrada sob vácuo para produzir o resíduo (bruto) que foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna, Bridge C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: Fase A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase B: MeCN durante 11 min, mantida 80% a 85% durante 11 min); Detector, UV 220 nm e 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 493. 1H RMN (300 MHz, CD3OD): 8,38 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,74-6,69 (m, 1H), 6,41 (d, J = 7,8Hz, 1H), 3,44-3,28 (m, 2H), 3,093,03 (m, 1H), 1,13 (d, J = 6,6Hz, 3H). EXEMPLO 185 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-2-aminopropil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-(1-amino-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00456] Para dentro de um FFR de 250 mL, dicarbonato de di-terc- butila (35,0 g, 161 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma mistura agitada de trietilamina (16,25 g, 161 mmol), cloridrato de (S)-2- aminopropanamida em MeOH (150 mL). Após a agitação da mistura resultante à temperatura ambiente de um dia para o outro, ela foi diluída com água (100 mL) e extraída com DCM (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/20) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 189. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 7,21 (brs, 1H), 6,89 (brs, 1H), 6,74 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 3,89-3,84 (m, 1H), 1,39 (s, 9 H), 1,18 (d, J = 7,2 Hz, 3H). Etapa B: (R )-(1-aminopropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00457] Para dentro de um FFR de 500 mL, borano (20 mL, 200 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma mistura agitada de (R)-(1- amino-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila (15,00 g, 80 mmol) em THF (150 mL) à temp. ambiente Após a agitação da mistura resultante a 70°C durante 4 horas, ela foi esfriada para a temp. ambiente, inativada com hidróxido de sódio (1N) e extraída com acetato de etila (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x40 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/1) para produzir o composto do título como um óleo: LCMS [M + H]+: 175. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 3,88-3,79 (m, 2H), 2,66-2,62 (m, 1H), 1,49 (s, 9H), 1,16 (d, J = 5,7 Hz, 3H). Etapa C: (R )-(1-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)femlsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila
[00458] Para dentro de um FFR de 50 mL, 1-cloropirrolidina-2,5-diona (172 mg, 1,289 mmol) foi adicionada a uma mistura agitada de ácido 2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (500mg, 0,645 mmol) em THF (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. (R)-1-Aminopropan-2-ilcarbamato de terc-butila (0,17 g, 1,289 mmol) foi adicionado à mistura de reação à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 x 60 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com acetato de etila/éter de petróleo (1/5) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 948. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8,42-8,24 (m, 4H), 7,33-7,26 (m, 4H), 6,96-6,86 (m, 6H), 5,80 (s, 2H), 4,10-3. 70 (m, 4H), 3,79 (s, 9H), 3,70-3,68 (m, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,16 (d, J = 3,0Hz, 3H). Etapa D: (R )-(1-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila
[00459] Para dentro de um FFR de três bocas de 50 mL, TETRAQUIS(trifenilfosfina)paládio(0) (36,60 mg, 0,032 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de carbonato de sódio (0,10 g, 0,950 mmol), (R)-(1-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila (0,40 g, 0,422 mmol, ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)borônico (0,11 g, 0,633 mmol) em dioxano/água(4/1) (4 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 2 horas sob nitrogênio. Os sólidos foram filtrados. O filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com metanol/DCM (1/10) para produzir o composto do título como um sólido. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ 7,97 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,48-7,42 (m, 1H), 7,32-7,26 (m, 1H), 6,94-6,90 (m, 4H), 6,82-6,75 (m, 6H), 5,75-5,12 (m, 1H), 4,73-4,68 (m, 2H), 4,21-4,13 (m, 2H), 3,94-3,89 (m, 1H), 3,76 (s, 9 H), 3,73 (s, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,26 (s, 6H). Etapa E: (R)-4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N 1-(2-aminopropil)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00460] Para dentro de um FFR de 50 mL, 2,2,2-ácido trifluoroacético (5 mL, 0,168 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de (R)-(1-(4-(2- amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila (0,16 g, 0,168 mmol) em DCM (3 mL) à temperatura ambiente. Após a agitação da mistura de reação à temperatura ambiente durante 1 hora, ela foi concentrada sob vácuo para produzir o resíduo. Então 3 mL de CF3COOH foram adicionados ao resíduo e a solução resultante foi agitada durante 1 hora a 80°C. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna Atlantis Prep T3 OBD 19 mm x 150 mm, 5 Dm 10nm; Fase móvel A: água com 50 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 28% de B durante 10 min; 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido.: LCMS [M + H]+: 493. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,91-7,10 (brs, 4H), 6,90 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,50-6,45 (m, 1H), 6,11-6,00 (m, 3H), 3,36-3,32 (m, 12H), 3,09-3,03 (m, 2H), 1,17(d, J = 5,4Hz, 3H). EXEMPLO 186 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((S)-1-aminopropan-2-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-propano-1,2-diildicarbamato de benzila e terc-butila
[00461] Para dentro de um FFR de 100 mL, carbonocloridato de benzila (2,94 g, 17,22 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma mistura agitada de trietilamina (1,16 g, 11,48 mmol) e (S)-(1-aminopropan-2- il)carbamato de terc-butila (1,00 g, 5,74 mmol) em DCM (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x25 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/10) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 309. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 7,29-7,21 (m, 5H), 5,03 (s, 2H), 4,63-4,55 (m, 1H), 3,69-3,51 (m, 1H), 3,25-3,18 (m, 1H), 1,35 (s, 8H), 1,06 (d, J = 6,9 Hz 3 H). Etapa B: 2,2,2-trifluoroacetato de (S )-(2-aminopropil)carbamato de benzila
[00462] Para dentro de um FFR de 50 mL, 2,2,2-ácido trifluoroacético (2 mL, 1,621 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de propano-1,2- diil(S)-dicarbamato de benzila e terc-butila (0,50 g, 1,621 mmol) em DCM (1 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 209. Etapa C: (S )-(2-((2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de benzila
[00463] Para dentro de um FFR de 50 mL, 1-cloropirrolidina-2,5-diona (0,15 g, 1,160 mmol) foi adicionada a uma mistura agitada de ácido 2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (0,45 g, 0,580 mmol) em THF (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Trietimina (2 mL), (S)-(2-aminopropil)carbamato de 2,2,2- trifluoroacetato de benzila (0,15 g, 0,870 mmol) foram adicionados à mistura de reação à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente 2 horas e então ela foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x30 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/5) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 982; 1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ 8,40-7,91 (m, 7H), 7,34-7,28 (m, 6H), 6,98-6,71 (m, 6H), 5,91 (s, 2H), 5,19-5,12 (m, 2H), 4,21-4,13 (m, 2H), 3,94-3,89 (m, 1H), 3,77 (s, 9 H), 3,68-3,51 (m, 2H), 3,31-3,28 (m, 2H), 0,91 (d, J = 6,6 Hz, 3H). Etapa D: (S )-2-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)propilcarbamato de benzila
[00464] Para dentro de um FFR de 3 bocas de 50 mL, TETRAQUIS(trifenilfosfina)paládio(0) (0,259 g, 0,224 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de carbonato de sódio (23,75 mg, 0,224 mmol), (S)-(2- ((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de benzila (0,22 g, 0,224 mmol), ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (39,70 mg, 0,224 mmol) em dioxano/água (4/1) (12 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 2 horas sob nitrogênio. Os sólidos foram filtrados. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com metanol/DCM (1/20) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H] +: 987; 1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ8,26 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,48-7,42 (m, 1H), 7,32-7,26 (m, 5H), 6,94-6,90 (m, 5H), 6,82-6,75 (m, 6H), 5,75-5,12 (m, 2H), 5,56-5,41 (m, 2H), 5,21-4,40 (m, 2H), 4,21-4,13 (m, 2H), 3,94-3,89 (m, 1H), 3,76 (s, 9 H), 3,73 (s, 2H), 1,24 (d, J = 7,2 Hz, 3H). Etapa E: (S)-4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-(1-aminopropan-2-il)- 3-(2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00465] Para dentro de um FFR de 50 mL, hidróxido de paládio sobre carbono (49,80 mg, 0,071 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de (S)- 2-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propilcarbamato de benzila (0,14 g, 0,14 mmol) em MeOH (3 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro sob hidrogênio (2 atm). O sólido foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o resíduo. 2,2,2-ácido trifluoroacético (2 mL, 0,094 mmol) foi adicionado ao resíduo e a mistura resultante foi agitada a 80°C. Após ser agitada durante 1 hora, a mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: XBridge Shield RP18 OBD Coluna, 5 Dm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 15% de B durante 15 min; 254/220 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 493. 1H RMN (300 MHz, CD3OD): 8,41 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,766,70 (m, 1H), 6,43-6,40 (m, 1H), 3,69-3,64 (m, 1H), 2,86-2,78 (m, 2H), 1,11 (d, J =6,9Hz, 3H). EXEMPLO 187 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-1-aminopropan-2-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-propano-1,2-diildicarbamato de benzila de terc-butila
[00466] Para dentro de um FFR de 100 mL, carbonocloridato de benzila (5,87 g, 34,4 mmol) foi adicionado por gotejamento a uma mistura agitada de trietilamina (5,23 g, 51,7 mmol), (R)-1-aminopropan-2-ilcarbamato de terc-butila (4,00 g,22,00 mmol) em DCM (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas e então foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x25 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/10) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 309. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 7,41-715 (m, 5H), 5,04 (s, 2H), 4,63-4,55 (m, 1H), 3,69-3,51 (m, 1H), 3,25-3,18 (m, 1H), 1,35 (s, 8H), 1,06 (d, J = 6,9 Hz 3 H). Etapa B: (R )-(2-aminopropil)carbamato de 2,2,2-trifluoroacetato de benzila
[00467] Para dentro de um FFR de 50 mL, 2,2,2-ácido trifluoroacético (2 mL) foi adicionado a uma mistura agitada de (R)-propano-1,2- diildicarbamato de benzila e terc-butila (1,2 g,3,8 mmol) em DCM (1 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e então ela foi concentrada sob vácuo para o composto do título como um óleo: LCMS [M + H]+: 209. Etapa C: (R )-(2-((2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de benzila
[00468] Para dentro de um FFR de 50 mL, 1-cloropirrolidina-2,5-diona (0,15 g, 1,160 mmol) foi adicionada a uma mistura agitada de ácido 2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (0,45 g, 0,580 mmol) em THF (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Trietilamina (2 mL), (R)-(2-aminopropil)carbamato de 2,2,2- trifluoroacetato de benzila (0,15 g, 0,870 mmol) foram adicionados à mistura de reação à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x20 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/5) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 982; 1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ 8,23 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,88 (d, J = 8,7 Hz, 4H), 7,48-7,42 (m, 4H), 7,32-7,26 (m, 1H), 6,95-6,85 (m, 4H), 6,766,74 (m, 4H), 5,81 (s, 2H), 5,21-5,12 (m, 2H), 4,21-4,13 (m, 2H), 3,94-3,89 (m, 1H), 3,68-3,51 (m, 2H), 3,76 (s, 9 H), 0,95 (d, J = 6,6 Hz, 3H). Etapa D: (R )-(2-((4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil) sulfonamido)propil)carbamato de benzila
[00469] Para dentro de um FFR de três bocas de 50 mL, TETRAQUIS(trifenilfosfina)paládio(0) (0,25 g, 0,224 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de carbonato de sódio (23,75 mg, 0,224 mmol), (R)-(2- ((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de benzila (0,22 g, 0,224 mmol), ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (39,70 mg, 0,224 mmol) em 12 mL de dioxano/água (4/1) à temperatura ambiente. Após a agitação da mistura de reação a 80°C durante 2 horas sob nitrogênio, os sólidos foram filtrados. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com metanol/DCM (1/20) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 987. Etapa E: (R )-4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N-(1-aminopropan-2-il)- 3-(2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00470] Para dentro de um FFR de 50 mL, HCl conc. (10 mL) foi adicionado a uma mistura agitada de (R)-(2-((4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de benzila (0,16 g, 0,162 mmol) em 20 mL de MeOH à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 80°C de um dia para o outro e então foi concentrada sob vácuo para produzir o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna, Coluna: XBridge Shield RP18 OBD Coluna, 5θm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A:água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 15% de B durante 15 min; 254 nm/220 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 493. 1H RMN (300 MHz, CD3OD): 8,42 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,766,70 (m, 1H), 6,50-6,42 (m, 1H), 3,77-3,71 (m, 2H), 2,99-2,83 (m, 2H), 1,19 (d, J = 9,0Hz, 3H). EXEMPLO 188 (2R)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propanamida Etapa A: (R )-(1-amino-3-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2- (4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oxopropan-2-il) carbamato de terc-butila
[00471] Uma solução de ácido (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- ((terc-butoxicarbonil)amino)propanoico (preparado em uma maneira análoga conforme descrita no Exemplo 189, Etapa A partindo-se de cloreto de 2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzeno-1-sulfonila e ácido (R)-3-amino-2-((terc-butoxicarbonil) amino)propanoico; 300 mg, 0,307 mmol), cloridrato de amônia (65,6 mg, 1,227 mmol), HATU (175 mg, 0,460 mmol) e DIEA (0,107 mL, 0,614 mmol) em DMF (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura de reação foi inativada com água (30 mL), diluída com água (70 mL) e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x10 mL) e salmoura (3x10 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 977. Etapa B: (R )-(1-amino-3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-( N, N- bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il) femlsulfonamido)-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00472] Uma solução de (R)-(1-amino-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1- oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila (300 mg, bruto), ácido (2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (36,2 mg, 0,205 mmol), Pd(Ph3P)4 (237 mg, 0,205 mmol) e Na2CO3 (21,7 mg, 0,21 mmol) em 1,4-Dioxano (3 mL) e água (0,6 mL) foi agitada a 80°C durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para produzir o produto bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com metanol/DCM (10/90). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 982. Etapa C: (S)-2-amino-3-(4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil- 3-(2 H-tetrazol-5-il)-fenilsulfonamido)-propanamida
[00473] Uma solução de (R)-(1-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d] imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila (200 mg, bruto) e TFA (2 mL, 26,0 mmol) em DMC (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para produzir 150 mg de (R)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4- metoxibenzil)sulfamoil)fenilsulfonamido)propanamida bruta como um óleo: LCMS [M + 1]+: 762. Este óleo foi adicionado a 20 mL de TFA e a solução resultante foi agitada a 80°C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X-Bridge BEH130 Prep C18 OBD 19 mm x 150 mm, 5μm, 13nm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 25% de B durante 8 min; 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido LCMS [M + 1]+: 522. 1H RMN (DMSO-d6/D2O, 400 MHZ): 8,22 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,59-6,55 (m, 1H), 6,13 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,64-3,53 (m, 1H), 3,35-3,30 (m, 1H), 3,21-3,16 (m, 1H). EXEMPLO 189 (2S)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propanamida Etapa A: ácido (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-(( terc-butoxicarbonil) amino)propanoico
[00474] Uma solução de cloreto de 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1-sulfonila (1,5 g, 1,85 mmol), ácido(S)-3-amino-2-((terc-butoxicarbonil)amino) propanoico (1,14 g, 5,56 mmol) e TEA (0,77 mL, 5,56 mmol) em THF (15 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reação foi inativada com água (40 mL), diluída com água (30 mL) e extraída com DCM (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x30 mL) e salmoura (2x30 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica e eluído com metanol/DCM (1/10). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 978; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) : δ 8,27-8,16 (m, 2H), 6,94-6,65 (m, 12H), 5,85-5,65 (m, 2H), 5,60-5,48 (m, 1H), 4,5-3,5 (m, 15H), 1,44 (s, 9H). Etapa B: (S)-(1-amino-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2- (4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oxopropan-2- il)carbamato de terc-butila
[00475] Uma solução de ácido (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- ((terc-butoxicarbonil)amino)propanoico (300 mg, 0,31 mmol), cloridrato de amônia (65,6 mg, 1,23 mmol), HATU (175 mg, 0,46 mmol) e DIEA (0,11 mL, 0,61 mmol) em DMF (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura de reação foi inativada com água (30 mL), diluída com água (70 mL) e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x30 mL) e salmoura (2x30 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 977; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) : δ 8,32-8,15 (m, 2H), 7,00-6,74 (m, 12H), 5,85-5,75 (m, 2H), 5,60-5,50 (m, 1H), 4,5-3,5 (m, 15H), 1,48 (s, 9H). Etapa C: (S )-(1-amino-3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-( N, N- bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00476] Uma solução de (S)-(1-amino-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1- oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila (200 mg, 0,21 mmol), ácido (2- amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (36,2 mg, 0,205 mmol), Pd(Ph3P)4 (237 mg, 0,205 mmol) e Na2CO3 (21,70 mg, 0,205 mmol) em 1,4-Dioxano (3 mL) e água (0,6 mL) foi agitada a 80°C durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluindo com metanol/DCM (10/90). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 982 Etapa D: (S)-2-amino-3-(4-(2-amino-1 H-benzo[d 1imidazol-4-il)-2-sulfamoil- 3-(2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propanamida
[00477] Uma solução de (S)-(1-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d] imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila (160 mg, 0,163 mmol) e TFA (2 mL, 26,0 mmol) em DCM (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título como um óleo: LCMS [M + H1+: 762.
[00478] A solução de (S)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d1 imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoxibenzil) sulfamoil)fenilsulfonamido)propanamida (120 mg, 0,158 mmol) em TFA (20 mL, 260 mmol) foi agitada a 80°C durante 1 hr. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo para produzir o produto bruto. O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge BEH130 Prep C18 OBD 19 mm x 150 mm, 5μm, 13nm; Fase móvel A:água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 25% de B durante 8 min; 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 977; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) : δ 8,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,97 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,64 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,50 (brs, 1H), 6,14 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,66-3,64 (m, 1H), 3,36-3,31 (m, 1H), 3,18-3,13 (m, 1H). EXEMPLO 190 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-2-amino-3-hidroxipropil)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-(1-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2- il)carbamato de terc-butila
[00479] TEA (248 mg, em 0,2 mL de THF) foi adicionada por gotejamento a uma solução agitada de ácido (R)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)propanoico (800 mg, 0,82 mmol) e carbonocloridato de isobutila (223 mg, 1,64 mmol) em 6,0 mL de THF a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente, e então NaBH4 (93 mg, 2,45 mmol) foi adicionado a 0°C. Após a agitação da mistura resultante durante 2 horas à temperatura ambiente, ela foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com DCM/MeOH (20/1). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como uma espuma: LCMS [M + 1]+: 964. Etapa B: (R )-(1-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)femlsulfonamido)-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00480] Pd(Ph3P)4 (27,0 mg, 0,023 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de (R)-(1-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2- il)carbamato de terc-butila (210 mg, bruto), e ácido (2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (83 mg, 0,47 mmol) e Na2CO3 (74,2 mg, 0,70 mmol) em 1,4-Dioxano (3,0 mL)/água (0,6 mL) à temperatura ambiente sob condição de Ar. Após a desgaseificação da mistura resultante duas vezes, ela foi aquecida durante 12 horas a 80°C. A mistura resultante foi esfriada para a temperatura ambiente, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC-Prep (DCM/MeOH = 20/1) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 969. Etapa C:(R )-4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)- N 1-(2-amino-3- hidroxipropil)- N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00481] TFA (1,0 mL) foi adicionado por gotejamento a uma solução agitada de (R)-(1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila (150 mg, bruto) em 1,0 mL de DCM a 0°C. A solução de reação foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente e então concentrada sob pressão reduzida para produzir 110 mg de (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-amino- 3-hidroxipropil)-N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida bruta como uma espuma: LCMS [M + 1]+: 749. 2,0 mL de TFA foram adicionados à esta espuma à temperatura ambiente. A solução resultante foi agitada durante 2 horas a 80°C e então foi concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC- prep com as seguintes condições: Coluna, XBridge C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: água (0,05% de NH4HCO3) e acetonitrila (mantida a 30% de acetonitrila durante 8 min, mantida a 100% durante 2 min, abaixada para 30% durante 2 min); Detector, UV 220 nm e 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 509. 1H RMN (MDOD, 400 MHZ): 7,62 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,21 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,005,90 (m, 1H), 5,62 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 2,78-2,75 (m, 2H), 2,49-2,40 (m, 1H), 2,30-2,20 (m, 1H). EXEMPLO 191 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((S)-2-amino-3-hidroxipropil)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila terc-butila
[00482] TEA (4,1 mL) foi adicionada por gotejamento a uma solução agitada de ácido (S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-2-((terc-butoxicarbonil) amino)propanoico (5,0 g, 14,9 mmol) e carbonocloridato de isobutila (2,42 g, 17,7 mmol) em THF (50,0 mL) a 0°C. A solução resultante foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente, e então foi esfriada para 0°C e NaBH4 (1,12 g, 29,6 mmol) foi adicionado. Após a agitação da mistura resultante durante 2 horas à temperatura ambiente, ela foi inativada com gelo/água (100 mL), diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x50 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com DCM/MeOH (15 /1). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como uma espuma: LCMS [M + 1]+: 325. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) :δ 7,67 (m, 5H), 5,53-5,33 (m, 2H), 4,07 (brs, 1H), 4,04-3,78 (m, 5H), 3,79-3,53 (m, 1H), 1,76 (brs, 9H), 1,38-1,16 (m, 1H). Etapa B: (S )-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00483] A uma mistura agitada de Pd(OH)2/C (0,46 g) em 20 mL de MeOH, (S)-(3-hidroxipropano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (2,1g, 6,47 mmol) foi adicionado à temperatura ambiente. A mistura resultante foi desgaseificada com nitrogênio 3 vezes e agitada sob hidrogênio (1,5 atm (152 kPa)) durante 12 horas à temperatura ambiente. A mistura foi filtrada. O bolo do filtro foi lavado com metanol (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com DCM/metanol (4/3). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como uma espuma: LCMS [M + 1]+: 191. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) : δ 5,76-5,23 (m, 3H), 4,02-3,79 (m, 2H), 3,80 -3,63 (m, 1H), 3,39-3,17 (m, 1H), 1,44 (brs, 9H). Etapa C: (S )-(1-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2- il)carbamato de terc-butila
[00484] 1-Cloropirrolidina-2,5-diona (207 mg, 1,55 mmol) foi adicionada em porções a uma solução agitada de ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (600 mg, 0,77 mmol) em THF (5,0 mL) a 0°C. Após a agitação da solução resultante durante 2 horas à temperatura ambiente, (S)-(1- amino-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila (294 mg, 1,55 mmol) foi adicionado e seguido pela adição de trietilamina (235 mg, 2,32 mmol) por gotejamento a 0°C. A mistura resultante foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente e então concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com metanol/DCM (1/50). As frações orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como uma espuma: LCMS [M + 1]+: 963. Etapa D: (S )-(1-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00485] Pd(PPh3)4 (73,1 mg, 0,06 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de (S)-(1-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2- il)carbamato de terc-butila (610 mg, 0,633 mmol) e ácido (2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (224 mg, 1,27 mmol) e Na2CO3 (201 mg, 1,90 mmol) em 1,4-Dioxano (5,0 mL)/água (1,0 mL) à temperatura ambiente sob condição de Ar. A mistura resultante foi aquecida durante 12 horas a 80°C, e então foi esfriada para a temperatura ambiente, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC-Prep (DCM/MeOH = 20/1) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 969. Etapa E:(S )-4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-N1 -(2-amino-3- hidroxipropil)-3-(2 H-tetrazol-5-il)-benzeno-1,2-dissulfonamida
[00486] TFA (2,0 mL) foi adicionado por gotejamento a uma solução agitada de (S)-(1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila (300 mg, bruto) em DCM (2,0 mL) a 0°C. A solução de reação foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente, e então concentrada para produzir (S)-4-(2- amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-amino-3-hidroxipropil)-N2-(4- metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida bruta como uma espuma: LCMS [M + 1]+: 749.
[00487] TFA (2,0 mL) foi adicionado à esta espuma e a mistura resultante foi aquecida durante 2 horas a 80°C. Após o esfriamento da mistura resultante para a temperatura ambiente, ela foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna, XBridge C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: água (0,05% de NH4HCO3) e acetonitrila (mantida a 34% de acetonitrila durante 8 min, mantida a 100% durante 2 min, abaixada para 34% durante 2 min); Detector, UV 220 nm e 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 509. 1H RMN (CD3OD, 400 MHZ): δ 8,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,79 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,74 - 3,67 (m, 1H), 3,63 (m, 1H), 3,30 - 3,20 (m, 3H). EXEMPLO 192 4-(3,4-disulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2- carboximidamida Etapa A: 5-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1 -bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00488] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 50 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de argônio, foi adicionada uma solução de 5-iodo-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida (1g, 1,01 mmol), Pd(dppf)Cl2CH2Cl2 (0,16 g, 0,20 mmol) e ácido (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)borônico (0,393 g, 2,024 mmol) em dioxano (10 mL). Isto foi seguido pela adição de carbonato de sódio (0,32 g, 3,04 mmol) em água (1,5 mL) à temperatura ambiente. Após a agitação da mistura resultante a 80°C durante 16 horas sob argônio, ela foi esfriada para 20°C e então inativada com água (50 mL), extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com EA/DCM (2/3) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 813,0 ; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,55 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (s, 2H), 7,53-7,51 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,4 Hz, 5H), 6,83 (d, J = 8,8 Hz, 5H), 6,76 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 6,64 (br, 1H), 6,48 (br, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,04-3,96 (m, 4H), 3,73 (s, 6H), 3,69 (s, 3H). Etapa B: 5-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1 -bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00489] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 25 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de argônio, foi adicionada uma solução de nitrito de terc-butila (81 mg, 0,79 mmol) e brometo de cobre (II) (0,13 g, 0,59 mmol) em acetonitrila (2 mL). Isto foi seguido pela adição de 5-(2- aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (0,40 g, 0,49 mmol) em acetonitrila (5 mL) a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 16 horas sob argônio, e então a mistura de reação foi inativada com água (30 mL) e extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x70 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com EA/PE (2/3) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H] +: 878 ; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8,4 Hz, 7H), 6,82 (d, J = 8,8 Hz, 5H), 6,71 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 5,99 (s, 2H), 5,47-05,45 (m, 2H), 4,31-4,05 (m, 4H), 3,77 (s, 6H), 3,75 (s, 3H). Etapa C: 5-(2-cianobenzo[d]tiazol-4-il)-N1, N1 -bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00490] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 25 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de argônio, foi adicionada uma solução de 5-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (0,40 g, 0,39 mmol) e cianeto de cobre (I) (0,10 g, 1,16 mmol) em DMSO (4 mL). A mistura resultante foi agitada a 100°C durante 6 horas sob argônio. A mistura de reação foi inativada com água (30 mL), extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x70 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com EA/PE (2/3) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 823,0 ; 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 8,74 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,15-6,95 (m, 8H), 6,82-6,68 (m, 5H), 6,57-6,55 (m, 1H), 5,99-5,94 (m, 2H), 5,41 (brs, 2H), 4,31-4,05 (m, 4H), 3,77 (s, 6H), 3,74 (s, 3H). Etapa D: 4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)benzo[ d] tiazol-2-carboximidamida
[00491] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 25 mL purgado e mantido com uma atmosfera inerte de argônio, foi adicionada uma solução de 5-(2-cianobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoxibenzil)-6-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (0,15 g, 0,18 mmol) em MeOH (3 mL) e THF (0,5 mL). Isto foi seguido pela adição de metanolato de sódio (0,02 mL, 0,02 mmol) à temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a 20°C durante 0,5 hora sob argônio, e então foi seguido pela adição de NH4Cl (0,98 g, 1,82 mmol) à temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada a 40°C durante 16 horas sob argônio. A mistura de reação foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x200 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por TLC-Prep, eluído com EA/PE (5/1) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+ : 840; 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 8,74 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,05-6,88 (m, 9H), 6,79-6,76 (m, 5H), 6,706,67 (m, 2H), 6,52 (brs, 1H), 5,39 (brs, 2H), 4,85-4,61 (m, 1H), 4,25-4,23 (m, 3H), 3,77 (s, 6H), 3,74 (s, 3H), 3,73-3,65 (m, 2H). Etapa E: 4-(3,4-disulfamoil-2-(2 H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[ d ]tiazol-2- carboximidamida
[00492] Para dentro de um frasco de fundo redondo de 25 mL, foi adicionada uma solução de 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)benzo[d]tiazol-2- carboximidamida (0,80 g, 0,10 mmol) em TFA (3 mL). A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 1 hora. O solvente foi evaporado e o resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge BEH130 Prep C18 OBD Coluna 19 mm x 150 mm, 5Dm, 13nm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 15% de B durante 8 min; TR: 5,0 min; 254 nm/220 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 480,0; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,47 (br, 3H), 8,32 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,72 (br, 2H), 7,48 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,35 (br, 2H), 7,07 (d, J = 7,6 Hz, 1H). EXEMPLO 193 4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-3-((4-(1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00493] A uma solução de (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (300 mg, 0,349 mmol) em dioxano (6 mL) e água (2 mL) foram adicionados Na2CO3 (148 mg, 1,396 mmol), ácido (1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (141 mg, 0,872 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (51,0 mg, 0,070 mmol) com agitação à temperatura ambiente. A mistura resultante foi aquecida para 80°C e agitada de um dia para o outro. Após o esfriamento da mistura de reação para a temperatura ambiente, ela foi diluída com água (15 mL) e extraída com acetato de etila (3x15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x30 mL), secadas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica 20 g, eluído com EtOAc/éter de petróleo (1/2) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 950. Etapa B: (R )-4-(1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-N1 -(pirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00494] A uma solução de (R)-3-((4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato terc-butila em DCM (5 mL) foi adicionado TFA (1 mL) com agitação à temperatura ambiente. A mistura resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora então foi concentrada sob vácuo para produzir um óleo. Ao óleo foi adicionado TFA (5 mL) com agitação à temperatura ambiente. A solução resultante foi aquecida para 80°C e agitada durante 1 hora. A solução foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge C18 OBD Prep, 100Â, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 8 min; 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido : LCMS [M + H]+: 490; 1H RMN (300 MHz, DMSO): δ 9,76 (s, 1H), 8,58-5,55 (m, 1H), 8,12-8,09 (m, 1H), 7,81-7,78 (m, 1H), 7,44-7,41 (m, 1H), 6,99 (s, 1H), 4,16-4,11 (m, 1H), 3,41-3,14 (m, 4H), 2,21-1,94 (m, 2H). EXEMPLO 194 (R)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A:(R )-3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato terc-butila
[00495] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (250 mg, 0,260 mmol) em dioxano (2,7 mL)/água (0,3 mL) foram adicionados 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (143 mg, 0,651 mmol), Na2CO3 (83 mg, 0,781 mmol) e PdCl2(dppf) (57,2 mg, 0,078 mmol) à temperatura ambiente. O frasco foi desgaseificado com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi irradiada com radiação de micro-ondas a 130°C durante 0,5 hora sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi inativada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (3x15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x15 mL) e salmoura (3x15 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica com CH2Cl2/MeOH (1:10) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 926; Etapa B: (R )-4-(6-aminopiridin-3-il)- N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00496] A uma solução de (R)-3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (140 mg, 0,151 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (1,00 mL) com agitação a 0°C. A solução resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. A solução de reação foi filtrada e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado TFA (4 mL) e a mistura foi agitada a 80°C durante 1 hora. A mistura foi evaporada sob pressão reduzida. O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Select CSH Prep C18 OBD, 5 Dm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 35% de B durante 8 min; 254 nm/220 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M -h]+: 464. 1H RMN (400 MHz, MeOD): δ 8,64 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,03-8,00 (m, 1H), 7,74-7,71 (m, 1H), 7,53 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,91-6,81 (m, 1H), 4,29-4,23 (m, 1H),3,45- 3,40 (m, 2H), 3,33-3,30 (m, 2H), 2,30-2,21 (m, 1H), 2,03-1,98 (m, 1H). EXEMPLO 195 (S)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A:(S )-3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00497] A uma solução de (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 72, 2 g, 2,084 mmol) em dioxano (9 mL)/água (3 mL) foram adicionados 5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (0,917 g, 4,17 mmol), Na2CO3 (0,663 g, 6,25 mmol) e PdCl2(dppf) (0,305 g, 0,417 mmol) à temperatura ambiente. O frasco foi evacuado e cheio de novo com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi inativada com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi aplicado em cromatografia em coluna de gel de sílica com CH2Cl2/MeOH (1:10) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 926 Etapa B: (S )-4-(6-aminopiridin-3-il)-N-(pirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida.
[00498] A uma solução de (S)-3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N, N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (150 mg, 0,162 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (1,00 mL) com agitação a 0°C. A solução resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. A solução de reação foi filtrada e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado TFA (4 mL) e a mistura foi agitada a 80°C durante 1 hora. A mistura foi evaporada sob pressão reduzida. O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge BEH130 Prep C18 OBD 19 mmx150 mm, 5θm, 13nm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 20% de B durante 8 min; 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M -h]+: 464. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,20 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,76-7,74 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53 (s, 1H), 6,68-6,67 (m, 1H), 6,15-6,13 (m, 1H), 5,99-5,96 (brs, 2H), 4,08-4,02 (m, 1H), 3,30-3,22 (m, 2H), 3,19-3,10 (m, 2H), 2,08-2,01 (m, 1H), 1,89-1,80 (m, 1H). EXEMPLO 196 N1-(2-aminoetil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida Etapa A: 2-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etilcarbamato de terc- butila
[00499] A uma solução de (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (250 mg, 0,260 mmol) em dioxano (2,7ml)/água (0,300 mL) foram adicionados 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (115 mg, 0,521 mmol), Na2CO3 (83 mg, 0,781 mmol) e PdCl2(dppf) (38,1 mg, 0,052 mmol) à temperatura ambiente. O frasco foi evacuado e cheio de novo com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi irradiada com radiação de micro-ondas a 80°C durante 3 horas sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi inativada com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x15 mL) e salmoura (3x15 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi aplicado em cromatografia em coluna de gel de sílica com MeOH/CH2Cl2 (1:10) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 900. Etapa B:N1 -(2-aminoetil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00500] A uma solução de (2-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (150 mg, 0,167 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (1,00 mL) com agitação a 0°C. A solução resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. A solução de reação foi filtrada e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado TFA (4 mL) e a mistura foi agitada a 80°C durante 1 hora. A mistura foi evaporada sob pressão reduzida. O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep, 100Â, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 20% de B durante 8 min; 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 440. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,18 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,537,52 (m, 1H), 6,71-6,68 (m, 1H), 6,15-6,13 (m, 1H), 5,99 (brs, 1H), 3,20-3,17 (m, 2H), 3,94-3,93 (m, 2H). EXEMPLO 197 4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((S)-pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: ácido 1H-benzo[ d ]imidazol-4-il)borônico
[00501] 4,4,4',4',5,5,5',5'-Octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (5,16 g, 20,30 mmol), Pd(dppf)Cl2 (1,485 g, 2,030 mmol) e acetato de potássio (2,99 g, 30,5 mmol) foram adicionados a uma mistura agitada de 4-bromo- 1H-benzo[d]imidazol (2 g, 10,15 mmol) em dioxano (10 mL) e a mistura foi desgaseificada 3 vezes com N2. A mistura de reação foi agitada a 80°C de um dia para o outro. A mistura resultante foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com acetato de etila (50 mL), lavada com salmoura (3x30 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com MeOH/AcOH para produzir o composto do título como um óleo: LCMS [M + H]+: 163; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,26 (s, 1H), 8,07-8,04 (m, 1H), 7,91-7,89 (m, 1H), 7,53-7,49 (m, 1H). Etapa B: (S )-3-(4-( 1H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato terc-butila
[00502] (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (300 mg, 0,313 mmol), Pd(dppf)Cl2 (45,7 mg, 0,063 mmol) e Na2CO3 (99 mg, 0,938 mmol) foram adicionados a uma mistura agitada de ácido (1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (152 mg, 0,938 mmol) em dioxano (10 mL) e água (2,5 mL). A mistura de reação foi desgaseificada 3 vezes com N2, e agitada a 80°C durante 16 horas. A mistura foi esfriada, diluída com acetato de etila (30 mL), lavada com salmoura (3x20 mL), secada com Na2SO4 anidro, filtrada e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com EA/PE (30-90%) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 950. Etapa C: (S )-4-(1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-N1 -(pirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol- 5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida.
[00503] (S)-3-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (220 mg, 0,232 mmol) foi adicionado a DCM (3 mL) e TFA (1 mL) a 0°C e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A solução de reação foi evaporada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado TFA (4 mL) e a mistura foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução de reação foi evaporada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge C18 OBD Prep, 100Â, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 8 min; 254 nm. As frações coletadas foram concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 490; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,71 (s, 1H), 8,54 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,79-7,77 (m, 1H), 7,42-7,38 (m, 1H), 6,97-6,94 (m, 1H), 4,17-4,10 (m, 1H), 3,38-3,26 (m, 2H), 3,18-3,11 (m, 2H), 2,14-2,06 (m, 1H), 1,96-1,87 (m, 1H). EXEMPLO 198 N1-(3-aminopropil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamid Etapa A: 3-(1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N, N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida
[00504] 3-Iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (1 g, 1,142 mmol), Pd(dppf)Cl2 (0,167 g, 0,228 mmol) e Na2CO3 (0,363 g, 3,43 mmol) foram adicionados a uma mistura agitada de ácido (1H-benzo[d]imidazol-4- il)borônico (0,555 g, 3,43 mmol) em dioxano (10 mL) e água (2,5 mL). A mistura foi evacuada e enchida de novo 3 vezes com N2, e agitada a 80°C durante 6 horas. A mistura foi esfriada, diluída com acetato de etila (30 mL), lavada com salmoura (3x20 mL), secada (Na2SO4), filtrada e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com EA/PE (30-90%) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 866. Etapa B: ácido 4-(1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico
[00505] TBAF (1M em THF) (3,00 mL, 3,00 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de 3-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4- metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)benzenossulfonamida (650 mg, 0,750 mmol) em THF (10 mL) a 0°C. Após a agitação da mistura resultante a 0°C durante 1 hora, ela foi diluída com acetato de etila (30 mL), lavada com solução aquosa saturada de KHSO4 (5 x 30 mL), secada com Na2SO4 anidro, então filtrada. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida para produzir o composto do título, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + H]+: 766. Etapa C: (3-(4-( 1H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil) carbamato de terc-butila
[00506] (3-Aminopropil)carbamato de terc-butila (150 mg, 0,862 mmol) e Et3N (0,160 mL, 1,149 mmol) foram adicionados a uma mistura agitada de ácido 4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (220 mg, 0,287 mmol) em THF (20 mL) a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 5 minutos e então NCS (77 mg, 0,575 mmol) foi adicionada. Após a agitação da mistura resultante a 0oC durante 16 horas, ela foi diluída com acetato de etila (40 mL), lavada com salmoura (3x30 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluído com EA/PE (0-80%) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 938. Etapa D: N1 -(3-aminopropil)-4-(1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00507] 3-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) propilcarbamato de terc-butila (220 mg, 0,235 mmol) foi adicionado a DCM (3 mL) e TFA (1 mL) a 0°C e a solução foi agitada à temp. ambiente durante 1 hora. A solução de reação foi evaporada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado TFA (4 mL) e a mistura foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução de reação foi evaporada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge C18 OBD Prep, 100Â, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 8 min; 254 nm. As frações coletadas foram concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 478; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,75 (s, 1H), 8,51 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,82-7,76 (m, 1H), 7,41-7,37 (m, 1H), 6,95-6,93 (m, 1H), 3,14-3,11 (m, 2H), 2,79-2,85 (m, 2H), 1,87-1,80 (m, 2H). EXEMPLO 199 N1-(2-aminoetil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A: (2-(4-( 1H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil) carbamato de terc-butila
[00508] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (300 mg, 0,321 mmol) em dioxano (6 mL) e água (2 mL) foram adicionados Na2CO3, ácido (1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico e Pd(dppf)Cl2 com agitação à temp. ambiente. A mistura resultante foi aquecida para 80°C e agitada de um dia para o outro. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com água (10 mL) e extraída com acetato de etila (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x20 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica 20 g, eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/1) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 924. Etapa B: N1 -(2-aminoetil)-4-(1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida.
[00509] A uma solução de (2-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (0,5 mL) com agitação à temperatura ambiente. Após a agitação da solução resultante à temperatura ambiente durante 1 hora, ela foi concentrada sob vácuo para produzir um óleo. Ao óleo foi adicionado TFA (2 mL) com agitação à temperatura ambiente. A solução resultante foi aquecida para 80°C e agitada durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo para produzir um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge BEH130 Prep C18 OBD 19 x 150 mm, 5 Dm, 13nm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 25% de B durante 8 min; 254 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 464; 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 9,43 (s, 1H), 8,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,10-8,08 (m, 1H), 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,25-7,24 (m, 1H), 3,46-3,41 (m, 2H), 3,24-3,20 (m, 1H). EXEMPLO 200 N1-((1R,3R)-3-aminociclobutil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: ((1R ,3 R )-3-(4-(1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)ciclobutil)carbamato de terc-butila
[00510] ((1R,3R)-3-Aminociclobutil)carbamato de terc-butila (107 mg, 0,575 mmol) e Et3N (0,160 mL, 1,149 mmol) foram adicionados a uma mistura agitada, esfriada para 0°C, de ácido 4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (0,19 mmol) em THF (10 mL) e a mistura foi agitada a 0°C durante 5 minutos. À mistura de reação resultante, NCS (77 mg, 0,575 mmol) foi adicionada, e a mistura foi agitada a 0°C durante 16 horas. A mistura foi esfriada, diluída com acetato de etila (30 mL), lavada com salmoura (3x30 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica Isolute Flash Si; 10 g pré-empacotada, eluindo com EA/PE (0-80%) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 950. Etapa B: N1 -((1R ,3 R )-3-aminociclobutil)-4-(1 H-benzo[ d 1imidazol-4-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida.
[00511] ((1R,3R)-3-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)ciclobutil)carbamato de terc-butila (230 mg, 0,242 mmol) foi adicionado a DCM (3 mL) e TFA (1 mL) a 0°C e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A solução de reação foi evaporada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado TFA (4 mL) e a mistura foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução de reação foi evaporada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge BEH130 Prep C18 OBD 19 mm x 150 mm, 5 Dm, 13nm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 23% de B durante 8 min; 254 nm. As frações coletadas foram concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H1+: 490; 1H RMN (400 MHz, MeOD): δ 9,43 (s, 1H), 8,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,56-7,52 (m, 1H), 7,26 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,45-4,41 (m, 1H), 3,85-3,83 (m, 1H), 2,59-2,47 (m, 4H). EXEMPLO 201 (S)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-(2-amino-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00512] A uma solução de ácido (S)-2-amino-3-((terc- butoxicarbonil)amino)propanoico (888 mg, 4,35 mmol) em THF (1,67E+04 μL), foi adicionada uma solução de BHs.THF (13 mL, 13,04 mmol). A mistura resultante foi agitada a 70°C durante 1 hora e então esfriada para a temp. ambiente A mistura de reação foi inativada por adição por gotejamento de MeOH, e a mistura foi agitada com CELITE e então filtrada. Os filtrados foram concentrados até a secura. O resíduo foi redissolvido em MeOH, passado através de um cartucho de troca de íons Agilent SCX. O cartucho foi lavado com solução de amônia em MeOH. Os eluentes foram concentrados para produzir um óleo, que foi liofilizado de CH3CN/água para produzir (S)- (2-amino-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila. Etapa B: (S )-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)feml)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e (S )-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)feml)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00513] Ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico e ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (4,25 g, 5,48 mmol) foram dissolvidos em THF (54,8 mL) e a solução foi esfriada para 0°C. NCS (1,464 g, 10,96 mmol) foi adicionada como sólido. A mistura foi mantida a 0°C durante 1 hora. A mistura de reação foi usada diretamente na etapa seguinte. A 18 mL da mistura de reação acima foram adicionados (S)-(2-amino-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (381 mg, 2,002 mmol) e DIEA (699 μL, 4,00 mmol). A mistura foi agitada à temp. ambiente sob N2 durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada e redissolvida em MeOH, e purificada por cromatografia em coluna (0-70% de EtOAc/Hexano) para produzir os compostos do título: LC-MS [M+H]+: 964,5. Etapa C:(S )-(2-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e (S )-(2-((4-(2- aminobenzo[ d] tiazol-4-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00514] Ácido (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)borônico (127 mg, 0,656 mmol), ((S)-2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (527 mg, 0,547 mmol), carbonato de sódio (116 mg, 1,094 mmol), Pd(dppf)Cl2 (40,0 mg, 0,055 mmol) foram adicionados a um frasco de reação. Dioxano (4101 μL) e água (1367 μL) foram adicionados. A mistura de reação foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 12 horas. A mistura de reação foi purificada por cromatografia em coluna de gel de sílica (0-15% de MeOH/EtOAc) para produzir os compostos do título: LC-MS [M+H]+: 986,7. Etapa D: (S)-N1 -(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[ d ]tiazol-4- il)-3-(1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00515] (S)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[d] tiazol-4-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida foi preparada em uma maneira similar à síntese de 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1- ((R)-pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (EXEMPLO 161, Etapa C) a partir de (S)-(2-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e (S)-(2-((4-(2- aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila. LC-MS [M+H]+: 526,4. EXEMPLO 202 (R)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00516] (R)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2- aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida foi preparada em uma maneira análoga à de (S)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2- il)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (EXEMPLO 201) pelo uso de ácido (R)-2-amino-3-((terc- butoxicarbonil)amino)propanoico: LC-MS [M+H]+: 526,4. EXEMPLO 203 4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1-(2-(2-aminoetoxi)etil)-3-(1H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00517] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga à dos EXEMPLOS 85 a 127 pelo uso de (2-(2-aminoetoxi)etil)carbamato de terc-butila. LC-MS [M+H]+: 540. EXEMPLO 204 2-amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-5'-sulfamoil-6'-(2H- tetrazol-5-il)bifenil-3-carboxamida Etapa A: 2-amino-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metila
[00518] A uma solução de 2-amino-3-bromobenzoato de metila (15 g, 65,2 mmol) em dioxano (150 mL) foram adicionados catalisador de PCy3 de 2a Geração (11,55 g, 19,56 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (33,1 g, 130 mmol) e acetato de potássio (19,20 g, 196 mmol) com agitação à temperatura ambiente. A mistura foi evacuada e enchida de novo com nitrogênio 3 vezes e agitada a 80oC durante 16 horas. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com água (200 mL) e extraída com acetato de etila (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x500 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 120 g de gel de sílica, eluído com EtOAc/éter de petróleo (1/20) para produzir o composto do título como um óleo: 1H RMN (300 MHz, CDCl3): δ 7,97 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 6,58-6,53 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 1,34 (s, 12H). Etapa B: 2-amino-5'-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-( terc- butoxicarbonilamino)etil)sulfamoil)-6'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)bifenil-3-carboxilato de metila
[00519] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (850 mg, 0,910 mmol) em dioxano (20 mL) e água (7 mL) foram adicionados Pd(PPh3)4 (210 mg, 0,182 mmol), 2-amino-3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metila (757 mg, 2,73 mmol) e Na2CO3 (289 mg, 2,73 mmol) com agitação à temperatura ambiente. A mistura resultante foi aquecida para 80°C e agitada de um dia para o outro. A mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com acetato de etila/éter de petróleo (1/1) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 957. Etapa C: ácido 2-amino-5'-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-( N-(2-(terc- butoxicarbonilamino)etil)sulfamoil)-6'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)bifenil-3-carboxílico
[00520] A uma solução de 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila (600 mg, 0,627 mmol) em THF (3,00 mL) e MeOH (3 mL) foi adicionado hidróxido de sódio com agitação à temperatura ambiente. A solução resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada de um dia para o outro. O valor do pH da solução de reação foi ajustado para 4 com ácido clorídrico (20%). A mistura foi filtrada e o filtrado foi lavado com água para produzir o composto do título bruto como um sólido, que foi usado na reação seguinte sem purificação adicional. LCMS [M + H]+: 943. Etapa D: N-[2-({[(4-{2-amino-3-[(2-{[( terc-butoxi)carbonil]amino}etil) carbamoil]fenil }-2-{bis[ (4-metoxifenil)metil] sulfamoil }-3-[( 2 E ,4 E)-11- metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il] fenil)-{3}-oxidane]sulfinil}amino)etil]carbamato de terc-butila
[00521] A uma solução de ácido 2-amino-3'-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)- 2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxílico (500 mg, 0,530 mmol), HATU (302 mg, 0,795 mmol) e (2-aminoetil)carbamato de terc-butila (340 mg, 2,121 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionada DIEA (0,139 mL, 0,795 mmol) com agitação a 0°C. A solução resultante foi desgaseificada com nitrogênio 3 vezes e então foi aquecida para 0°C e agitada durante 4 horas. A solução de reação foi esfriada para a temperatura ambiente, diluída com água (5 mL) e extraída com acetato de etila (3x10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x20 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com EtOAc/iso-hexano (1/1) para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 1.085. Etapa E: 2-amino- N-(2-aminoetil)-4'-( N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil- 2'-(2H-tetrazol-5-il)-[ 1,1'-bifenil]-3-carboxamida
[00522] A uma solução de N-[2-({[(4-{2-amino-3-[(2-{[(terc- butoxi)carbonil]amino}etil)carbamoil]fenil}-2-{bis[(4-metoxifenil)metil] sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca- 1(11),2,4,8(12),9-pentan-3-il]fenil)-{3}-oxidane]sulfinil}amino)etil] carbamato de terc-butila (300 mg, 0,276 mmol) em DCM (5 mL) foi adicionado TFA (1 mL) com agitação à temperatura ambiente. A mistura resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. A solução foi concentrada sob vácuo. Ao resíduo foi adicionado TFA (5 mL) com agitação à temperatura ambiente. A solução resultante foi aquecida para 80°C e agitada durante 1 hora. A solução foi concentrada sob vácuo para produzir um resíduo. O produto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm, 10 Dm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: MeCN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 8 min; 254 nm/220 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 525; 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 8,64 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,39-6,97 (m, 1H), 3,73-3,69 (m, 2H), 3,68-3,66 (m, 2H), 3,21-3,18 (m, 2H). EXEMPLO 205 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(((3R,4R)-3-amino-4- fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzenossulfonamida Etapa A: (4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(((3 R ,4R )-3-(( terc - butoxicarbonil)amino)-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)fenil)-1 H-benzo[d1imidazol-2-il)carbamato de terc-butila
[00523] Trietilamina (0,15 mL, 1,02 mmol), ((3R,4R)-4- fluoropiperidin-3-il)carbamato de terc-butila (149 mg, 0,681 mmol) e 1- cloropirrolidina-2,5-diona (91 mg, 0,681 mmol) foram adicionados a uma solução agitada, esfriada para 0°C, de ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (300 mg, 0,341 mmol) em DCM (3 mL) e a mistura foi agitada a 0°C durante 30 minutos. A mistura foi diluída com água (30 mL) e extraída com DCM (2x30 mL). As frações orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (MgSO4), filtradas e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. LC/MS [M+H]+: 1.097. Etapa B: 3-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(((3 R ,4R )-3-amino-4- fluoropiperidin-1 -il) sulfonil)-2- (2 H-tetrazol-5-il)benzenossulfonamida À solução de (4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (((3R,4R)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2- il)carbamato de terc-butila (222 mg, 0,202 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) à RT foram adicionados anisol (0,2 mL, 1,83 mmol) e TFA (2 mL, 28,3 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi redissolvido em tolueno e MeOH, e a solução foi concentrada de novo. O resíduo foi deixado sob alto vácuo durante 4 horas e redissolvido em anisol (0,2 mL) e TFA (2 mL) à RT e a solução foi agitada a 80°C durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-Preparativa em Fase Reversa (C-18), eluindo com Acetonitrila/Água + 0,1% de NH4OH para produzir o composto do título como um sólido após liofilização de um dia para o outro: LC/MS [M+H]+: 537. EXEMPLO 206 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(morfolin-3-ilmetil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00524] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga àquela descrita para 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(((3R,4R)-3- amino-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il) benzenossulfonamida, partindo-se de ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-1H-benzo[d] imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico e 3- (aminometil)morfolina-4-carboxilato terc-butila comercialmente disponível. LC/MS [M+H]+: 535. EXEMPLO 207 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(azetidin-2-ilmetil)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00525] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga àquela descrita para 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(((3R,4R)-3- amino-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il) benzenossulfonamida, partindo-se de ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-1H-benzo[d] imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico e 2- (aminometil)azetidina-1-carboxilato de terc-butila comercialmente disponível. LC/MS [M+H]+: 505. EXEMPLO 208 (S)-3-amino-N-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)butanamida Etapa A: (4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)-1 H-benzo[d]imidazol-2-il)carbamato de terc- butila
[00526] Trietilamina (0,351 g, 3,47 mmol) e amônia (0,496 mL, 3,47 mmol) foram adicionadas a uma solução agitada de material de partida ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (1,02 g, 1,158 mmol) em DCM (10 mL) a 0°C e 1- cloropirrolidina-2,5-diona (0,340 g, 2,55 mmol) foi adicionada. A mistura foi agitada a 0°C durante 1 hora. A mistura foi diluída com água (30 mL) e extraída com DCM (2x25 mL). O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 24 g de gel de sílica, eluindo com Heptano/Etanol de 0% a 40% durante 30 min para produzir o produto desejado como um sólido após concentração: LC/MS [M+H]+: 896. Etapa B: (S )-(4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(N-(3-(( terc - butoxicarbonil)amino)butanoil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol- 5-il)fenil)-1 H-benzol d] imidazol-2-il)carbamato de terc-butila
[00527] Cloridrato de N1-((etilimino)metileno)-N3,N3-dimetilpropano- 1,3-diamina (141 mg, 0,738 mmol) e N,N-dimetilpiridin-4-amina (30,1 mg, 0,246 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de ácido (S)-3-((terc- butoxicarbonil)amino)butanoico (50 mg, 0,246 mmol) em dimetilformamida (2 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada a 60°C durante 1 hora. A mistura foi esfriada para a RT. (4-(3-(N,N-Bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)-1H-benzo[d]imidazol- 2-il)carbamato de terc-butila (110 mg, 0,123 mmol) foi adicionado à mistura de reação e a mistura foi agitada durante 15 minutos antes da adição de solução de DBU em THF seco. A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro. A mistura foi diluída com água (30 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila (2x30 mL). O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluindo com EtOAc/iso-hexano de 0% a 100% durante 30 min para produzir o produto desejado como um sólido após concentração: LC/MS [M+H]+: 1.081. Etapa C: (S )-3-amino-N-((4-(2-amino-1 H-benzo[ d 1imidazol-4-il)-2-sulfamoil- 3-(2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)butanamida
[00528] À solução de (S)-(4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (N-(3-((terc-butoxicarbonil)amino)butanoil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d1imidazol-2-il)carbamato de terc-butila (112 mg, 0,104 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) à RT foram adicionados anisol (0,2 mL, 1,83 mmol) e TFA (2 mL, 26 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi redissolvido em tolueno e MeOH, e a solução foi concentrada de novo. O resíduo foi deixado sob alto vácuo durante 4 horas e redissolvido em anisol (0,2 mL) e TFA (2 mL) à RT e a solução foi agitada a 80°C durante 2 horas. O resíduo foi purificado por HPLC-Preparativa em Fase Reversa (C-18), eluindo com Acetonitrila/Água + 0,1% de NH4OH para produzir o composto do título como um sólido após liofilização de um dia para o outro: LC/MS [M+H1+: 521. EXEMPLO 209 (R)-4-(2-aminopiridin-3-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A:(R )-3-((2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(( terc - butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il) fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc -butila
[00529] TEA (0,100 mL, 0,720 mmol) e (R)-(+)-1-boc-3- aminopirrolidina (0,122 mL, 0,720 mmol) foram adicionadas a uma solução agitada de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico, (202 mg, 0,240 mmol) em DCM (2 mL) a 0°C e a mistura foi agitada a 0°C durante 30 minutos. A mistura foi diluída com água (40 mL), extraída com acetato de etila (2x50 mL). O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluindo com heptano/etanol para produzir o produto desejado como espuma após concentração: LC/MS [M+H]+: 1.026. Etapa B: (R )-4-(2-aminopiridin-3-il)- N1 -(pirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00530] À solução de (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (2-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (220 mg, 0,214 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) à RT foram adicionados anisol (0,2 mL, 1,83 mmol) e TFA (2 mL, 28,3 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi redissolvido em tolueno e MeOH, e a solução foi concentrada de novo. O resíduo foi redissolvido em anisol (0,2 mL) e TFA (2 mL) à RT e a solução foi agitada a 80°C durante 2 horas. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-Preparativa em Fase Reversa (C-18), eluindo com acetonitrila/água + 0,1% de NH4OH para produzir o composto do título como um sólido após liofilização de um dia para o outro: LC/MS [M+H]+: 466.
[00531] Os EXEMPLOS 210 a 216, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para a (R)-4-(2- aminopiridin-3-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (EXEMPLO 209) usando ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico, preparado conforme descrito acima, e as aminas protegidas indicadas na coluna à direita, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 217 N1-(2-(1H-imidazol-4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (5-(4-(N-(2-(1 H-imidazol-4-il)etil)sulfamoil)-3-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)piridin- 2-il)carbamato de terc-butila
[00532] Trietilamina (0,15 mL, 1,09 mmol), 2-(1H-imidazol-4- il)etanamina (81 mg, 0,732 mmol) e DMAP (44,7 mg, 0,366 mmol) foram adicionadas a uma solução agitada de material de partida ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (308 mg, 0,366 mmol) em CH2Cl2 a 0°C. 1-Cloropirrolidina-2,5-diona (107 mg, 0,805 mmol) foi então adicionada e a mistura foi agitada a 0°C durante 45 minutos. A mistura foi diluída com água (40 mL), extraída com EtOAc (2x30 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (MgSO4) e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluindo com Heptano/Etanol, de 0% a 60% durante 40 minutos para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 951. Etapa B: N1 -(2-(1H-imidazol-4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)- N2-(4- metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida
[00533] 1,4-Dimetoxibenzeno (129 mg, 0,936 mmol) e TFA (2 mL, 26,0 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (5-(4-(N-(2-(1H- imidazol-4-il)etil)sulfamoil)-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)piridin-2-il)carbamato de terc-butila (89 mg, 0,094 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) à RT e a mistura foi agitada à RT durante 2 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi usado como é na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 731. Etapa C: N1 -(2-(1 H-imidazol-4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2 H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00534] 1,4-Dimetoxibenzeno (111 mg, 0,804 mmol) e TFA (3 mL, 38,9 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de N1-(2-(1H-imidazol- 4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (68,4 mg, 0,094 mmol) à RT e a mistura foi agitada a 70°C durante 2 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-Preparativa em Fase Reversa (C-18), eluindo com Acetonitrila/Água + 0,05% de NH3 para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 491. EXEMPLO 218 N1-(2-(1H-imidazol-2-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00535] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga àquela descrita para N1-(2-(1H-imidazol-4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida a partir de ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico. A amina correspondente, 2-(1H-imidazol-2-il)etan-1-amina, estava disponível em fornecedores comerciais. LC/MS [M+H]+: 491. EXEMPLO 219 (R)-4-(5-aminopiridin-3-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A. (R )-3-((4-(5-aminopiridin-3-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00536] A mistura de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (588 mg, 0,613 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)piridin-3-amina (337 mg, 1,531 mmol), Na2CO3 (195 mg, 1,838 mmol) e complexo de dicloreto de 1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno- paládio(II)-diclorometano (100 mg, 0,123 mmol) em dioxano (3 mL) e água (0,7 mL) foi desgaseificada com N2 durante 10 minutos. A mistura resultante foi aquecida a 95°C durante 16 horas. Esta mistura de reação foi filtrada e extraída com EtOAc (2 x 50 mL), a fase orgânica foi secada (MgSO4), e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluindo com Heptano/Etanol, de 0% a 50% durante 25 minutos para produzir o composto do título como um sólido: LC/MS [M+H]+: 926. Etapa B. (R)-4-(5-aminopiridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)- N1 -(pirrolidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00537] Anisol (0,3 mL, 2,75 mmol) e TFA (3 mL, 38,9 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (R)-3-(4-(5-aminopiridin-3-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (377 mg, 0,407 mmol) em CH2Cl2 (3 mL) à RT e a mistura foi agitada à RT durante 90 minutos. A mistura foi concentrada e usado como é. LC/MS [M+H]+: 585. Etapa C. (R )-4-(5-aminopiridin-3-il)- N1 -(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00538] Anisol (0,3 mL, 2,75 mmol) e TFA (4 mL, 0,406 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (R)-4-(5-aminopiridin-3-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(pirrolidin-3-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (238 mg, 0,406 mmol) em TFA à RT e a mistura foi agitada a 80°C durante 90 minutos. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-Preparativa em Fase Reversa (C-18), eluindo com Acetonitrila/Água + 0,05% de NH3, de 0% a 30% para produzir o composto do título como sólido após liofilização de um dia para o outro: LC/MS [M+H]+: 466. EXEMPLO 220 (R)-4-(2-(piperazin-1-il)piridin-3-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00539] O composto do título foi preparado em uma maneira análoga àquela descrita para (R)-4-(5-aminopiridin-3-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida a partir de (R)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila. O ácido borônico correspondente, ácido (2-(piperazin-1-il)piridin-3-il)borônico, estava disponível em fornecedores comerciais. LC/MS [M+H]+: 535. EXEMPLO 221 (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(5-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A. (R )-(2-((4-(5-aminopiridin-3-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil) carbamato de terc-butila
[00540] (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)carbamato de terc- butil (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 69, 315 mg, 0,332 mmol), 5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-3-amina (146 mg, 0,665 mmol), Na2CO3 (106 mg, 0,997 mmol), complexo de dicloreto de 1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno-paládio(II)-diclorometano (54,3 mg, 0,066 mmol) foram adicionados a um FFR de 100 mL em dioxano (2 mL) e água (0,5 mL) à RT e a mistura foi agitada a 90°C de um dia para o outro. A mistura foi filtrada, lavada com EtOAc, extraída com EtOAc ( 2x50 mL). As frações orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (60 mL), secadas (MgSO4), filtradas e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluindo com Heptano/Etanol, de 0% a 50% durante 30 minutos para produzir o produto após concentração: LC/MS [M+H]+: 914. Etapa B. (R)-N1 -(1 -aminopropan-2-il)-4-(5-aminopiridin-3-il)- N2-(4- metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida
[00541] Anisol (0,2 mL, 1,831 mmol) e TFA (2 mL, 26,0 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de material de partida (R)-(2-(4-(5- aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)carbamato de terc- butil (240 mg, 0,263 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) à RT e a mistura foi agitada à RT durante 1 hora. A mistura foi concentrada e usada como é na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 694. Etapa C. (R)-N1 -(1 -aminopropan-2-il)-4-(5-aminopiridin-3-il)-3-(2 H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00542] Anisol (0,2 mL, 1,831 mmol) e TFA (2 mL, 26,0 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(5- aminopiridin-3-il)-N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida (182 mg, 0,263 mmol) em CH2Cl2 à RT e a mistura foi agitada à RT durante 1 hora. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC-Preparativa em Fase Reversa (C-18), eluindo com Acetonitrila/Água + 0,05% de NH3, de 0% a 30% durante 10 minutos para produzir o produto como um sólido: LC/MS [M+H]+: 454. EXEMPLO 222 (S)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(3-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A. (S )-(3-((4-(3-aminopiridin-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00543] 2-(4-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-3- il)hidrazinacarboxilato de terc-butila (250 mg, 0,747 mmol) e carbonato de sódio (119 mg, 1,120 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (61,0 mg, 0,075 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (S)-(3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 75, 360 mg, 0,373 mmol) em dioxano (2 mL) e água (0,5 mL) à RT e a mistura foi desgaseificada durante 10 minutos e então agitada a 90°C de um dia para o outro. A mistura foi diluída com água (50 mL) e extraída com EtOAc (2x50 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (MgSO4) e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluindo com Heptano/Etanol, de 0% a 90% durante 30 min para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 930. Etapa B. (S)- N1 -(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(3-aminopiridin-4-il)- N2-(4- metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida
[00544] 1,4-Dimetoxibenzeno (322 mg, 2,330 mmol) e TFA (2 mL, 26,0 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (S)-(3-((4-(3- aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (240 mg, 0,233 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) à RT e a mistura foi agitada à RT durante 90 minutos. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi usado como é na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 710. Etapa C. (S)-N1 -(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(3-aminopiridin-4-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00545] 1,4-Dimetoxibenzeno (321 mg, 2,323 mmol) e TFA (2 mL, 26,0 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (S)-N1-(3-amino-2- hidroxipropil)-4-(3-aminopiridin-4-il)-N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (165 mg, 0,232 mmol) à RT e a mistura foi agitada a 90°C durante 90 min. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC Preparativa em Fase Reversa (C-18), eluindo com Acetonitrila/Água + 0,05% de NH3, de 0% a 30% durante 10 minutos para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 470. EXEMPLO 223 (S)-4-(4-aminopiridin-3-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A.(S )-(3-((2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(4-(( terc - butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00546] À mistura de ácido (4-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-3- il)borônico (130 mg, 0,547 mmol) e (S)-(3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (300 mg, 0,273 mmol), Na2CO3 (87 mg, 0,820 mmol), e Pd(dppf)Cl2 (44,7 mg, 0,055 mmol) foram adicionados dioxano (2,4 mL) e água (0,6 mL) à RT e a mistura foi desgaseificada durante 10 minutos, e agitada a 90°C de um dia para o outro. A mistura foi diluída com água (50 mL), extraída com EtOAc (2x50 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (MgSO4) e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluindo com Heptano/Etanol, de 0% a 30% durante 30 min para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 1.163. Etapa B. (S )-4-(4-aminopiridin-3-il)- N1 -(2,3-diaminopropil)- N2, N2-bis(4- metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida
[00547] 1,4-Dimetoxibenzeno (166 mg, 1,203 mmol) e TFA (2 mL, 26,0 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (3-((2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(4-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propano-1,2-diil)(S)- dicarbamato de benzila e terc-butila (140 mg, 0,120 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) à RT e a mistura foi agitada à RT durante 90 minutos. A mistura foi concentrada e usado como é. LC/MS [M+H]+: 829. Etapa C. (S )-4-(4-aminopiridin-3-il)-N1 -(2,3-diaminopropil)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00548] 1,4-Dimetoxibenzeno (167 mg, 1,206 mmol) e TFA (2,5 mL, 32,4 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de material de partida (S)-4-(4-aminopiridin-3-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-N2,N2-bis(4- metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (100 mg, 0,121 mmol) à RT, e a mistura foi agitada a 80°C de um dia para o outro. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC Preparativa em Fase Reversa (C-18), eluindo com Acetonitrila/Água + 0,05% de NH3, de 0% a 25% durante 11 minutos para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 469. EXEMPLO 224 N4-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]- 3,4-dissulfonamida Etapa A: ácido (3-(1H-1,2,4-triazol-3-il)fenil)borônico
[00549] Acetato de potássio (1,314 g, 13,39 mmol) e PCy3 Pd G2 (0,395 g, 0,669 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (2,267 g, 8,93 mmol), foram adicionados a uma solução agitada de 3-(3-bromofenil)-1H-1,2,4-triazol (1,0 g, 4,46 mmol) em dioxano (10 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada a 90°C de um dia para o outro. A mistura foi filtrada através de uma camada de CELITE, diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (3x100 mL). O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em fase reversa C18 em 86 g de gel de sílica, eluindo com Acetonitrila/Água, de 0% a 50% durante 45 minutos para produzir o produto como um sólido após concentração: LC/MS [M+H]+: 190. Etapa B: N, N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-3'- (1H-1,2,4-triazol-3-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-ri,1,-bifenil1-3- sulfonamida
[00550] A mistura de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (2,0 g, 2,283 mmol), ácido (3- (1H-1,2,4-triazol-3-il)fenil)borônico (0,777 g, 4,11 mmol), Na2CO3 (0,726 g, 6,85 mmol) e complexo de dicloreto de 1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno- paládio(II)-diclorometano (0,280 g, 0,343 mmol) em dioxano (20 mL) e água (5 mL) foi desgaseificada com N2 durante 5 minutos. A mistura resultante foi aquecida a 95°C durante 16 horas. A mistura de reação foi filtrada e extraída com EtOAc (2 x 100 mL). As fases orgânicas combinadas foram secadas (MgSO4), e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 120 g de gel de sílica, eluindo com EtOAc/iso-hexano, de 0% a 100% durante 45 minutos para produzir o composto do título como um sólido: LC/MS [M+H]+: 893. Etapa C: ácido 3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)-3'-(1 H-1,2,4-triazol-3-il)-ri,1,-bifenil1-4-sulfínico
[00551] TBAF (0,719 mL, 0,719 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de material de partida N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)-3,-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)- [1,1,-bifenil1-3-sulfonamida (292 mg, 0,327 mmol) em THF (4 mL) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 45 min. A mistura foi diluída com AcOEt (30 mL), lavada com solução aquosa de KHSO4 (2 x 30 mL), secada com MgSO4, e concentrada. LC/MS [M+H1+: 793. Etapa D: (2-((3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)-3'-(1 H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,r-bifenil1)-4-sulfonamido)etil) carbamato de terc-butila
[00552] (2-Aminoetil)carbamato de terc-butila (100 mg, 0,626 mmol) e TEA (0,131 mL, 0,938 mmol) e NCS (92 mg, 0,688 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de ácido 3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3,-(1H-1,2,4- triazol-3-il)-[1,1,-bifenil1-4-sulfínico (248 mg, 0,313 mmol) em DCM (2 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 45 minutos, diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (2x50 mL). As fases orgânicas combinadas foram secadas (MgSO4) e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de 12 g de gel de sílica, eluindo com Heptano/Etanol, de 0% a 60% durante 45 minutos para produzir o produto do título como um sólido: LC/MS [M+H]+: 951. Etapa E: N4-(2-aminoetil)- N3-(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-3'-(1 H-1,2,4-triazol-3-il)-r1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida
[00553] Anisol (0,276 mL, 2,52 mmol) e TFA (2 mL, 26,0 mmol) foram adicionados a uma solução agitada de (2-(3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4- triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (240 mg, 0,252 mmol) em DCM (2 mL) à RT e a mistura foi agitada à RT durante 30 minutos. A mistura de reação foi concentrada. LC/MS [M+H]+: 731. Etapa F: N4-(2-aminoetil)-2-(2 H-tetrazol-5-il)-3'-(1 H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'- bifenil]-3,4-dissulfonamida
[00554] Anisol (0,3 mL, 2,75 mmol) e TFA (3 mL, 38,9 mmol) foram adicionados à N4-(2-aminoetil)-N3-(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida (184 mg, 0,252 mmol) à RT e a mistura foi agitada a 80°C durante 90 min. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC Preparativa em coluna de Fase Reversa (C-18), eluindo com acetonitrila/água + 0,05% de NH3, de 3% a 40% para produzir o composto do título como um sólido após liofilização de um dia para o outro: LC/MS [M+H]+: 491.
[00555] Os EXEMPLOS 225 a 231, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para a N4-(2-aminoetil)- 2-(2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida partindo-se de ácido 3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-4- sulfínico (EXEMPLO 224, Etapa C) ou ácido 3'-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3- il)-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfínico, preparado conforme aqui descrito. As aminas protegidas indicadas na coluna à direita foram preparados conforme aqui descrito, ou estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 232 (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-metilpirrolidin-3-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-4-iodo- N2, N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-N1 -(1 -metilpirrolidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida e (R)-4- iodo-N2, N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)-N1 -(1- metilpirrolidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00556] A uma solução de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico e ácido 2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)benzenossulfínico (3 g, 3,87 mmol) em THF (38,7 mL) foram adicionadas (R)-1-metilpirrolidin-3-amina (comercialmente disponível junto à Synnovator) (0,775 g, 7,74 mmol), trietilamina (1,078 mL, 7,74 mmol), e NCS (1,033 g, 7,74 mmol) em sequência a 0°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada à mesma temperatura durante 30 minutos, e monitorada por LCMS. A mistura de reação foi diluída com EtOAc, e lavada com solução de NaHCO3 e salmoura. A camada orgânica foi secada com MgSO4, evaporada, e o produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica eluindo com 0-20% de MeOH/DCM para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 874,50. Etapa B:(R )-4-(2-Amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N2, N2-bis(4- metoxibenzil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-N1 -(1 -metilpirrolidin-3 - il)benzeno-1,2-dissulfonamida e (R)-4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)- N2, N2-bis(4-metoxibenzil)-3-( 1 -(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)- N1-( 1 - metilpirrolidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00557] Um frasco foi carregado com (R)-4-iodo-N2,N2-bis(4- metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirrolidin-3- il)benzeno-1,2-dissulfonamida e (R)-4-iodo-N2,N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(1- (4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirrolidin-3-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (2,2 g, 2,52 mmol), ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)borônico (0,891 g, 5,04 mmol), Na2CO3 (0,801 g, 7,55 mmol) e PdCl2(dppf) (0,184 g, 0,252 mmol). O frasco foi fechado, desgaseificado, e cheio com dioxano (21 mL) e água (4,2 mL). A mistura resultante foi aquecida de um dia para o outro a 80°C. A mistura de reação foi filtrada através de CELITE para remover paládio. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica usando (0-10)% de MeOH/DCM como fase móvel para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 879,58. Etapa C: (R)-4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1 -(1-metilpirrolidin-3- il)-3-( 2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00558] A uma solução de (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)- N2,N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1- metilpirrolidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida e (R)-4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-N2,N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirrolidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (250 mg, 0,284 mmol) em DCM (2,84 mL) foi adicionado TFA (2,19 mL, 28,4 mmol) à temp. ambiente. A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 1,0 hora. Após a remoção dos compostos voláteis, o resíduo foi purificado por HPLC em fase reversa (3-40% de MeCN/água como eluente, 0,1% de TFA como aditivo) para produzir o sal de TFA. O sal de TFA foi tratado com HCl em MeOH para produzir o composto do título como um sal de HCl. LC/MS [M+H]+: 519,47. EXEMPLO 233 cloreto de (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirrolidín-1-io Etapa A: cloreto de (R)-3-((4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil) sulfonamido)-1,1-dimetilpirrolidín-1-io e cloreto de (R)-3-((4-(2-amino-1 H- benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1,1 -dimetilpirrolidín-1 -io
[00559] A uma solução de (R)-4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)- N2,N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1- metilpirrolidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida e (R)-4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-N2,N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirrolidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (EXEMPLO 232, Etapa B; 250 mg, 0,284 mmol) em acetona (2,84 mL) foram adicionados K2CO3 (118 mg, 0,853 mmol) e MeI (0,021 mL, 0,341 mmol). A mistura resultante foi agitada à temp. ambiente durante 90 minutos. Após filtração e concentração o resíduo foi purificado por HPLC em Fase Reversa usando 10-100% de acetonitrila/água (0,05% de TFA como aditivo) para produzir o composto do título: LC/MS [M]+: 893,75. Etapa B: (R)-3-((4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1,1 -dimetilpirrolidín-1 -io
[00560] O composto do título foi obtido em uma maneira similar àquela do Exemplo 232, Etapa C partindo-se de trifluoroacetato de (R)-3-((4- (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirrolidín- 1-io e trifluoroacetato de (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirrolidín-1-io, exceto que o composto final foi tratado com excesso de HCl em MeOH (1,25 M) e então concentrado: LC/MS [M]+: 533,24. EXEMPLO 234 (R)-4-(2-amino-6-iodo-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00561] A uma solução de (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)- N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (200 mg, 0,396 mmol) em ácido tríflico (1,76 mL, 19,82 mmol) foi adicionada NIS (134 mg, 0,595 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 30 minutos. O uso de cartucho de troca de íons removeu o ácido tríflico, resultando no material bruto antes da purificação por HPLC. Após a remoção dos compostos voláteis, o resíduo foi purificado por HPLC em fase reversa (3-50% de MeCN/água como eluente, 0,1% de NH4OH como aditivo) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 631,16. EXEMPLO 235 (R)-4-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-3-((4-(1 H-benzo[ d] [1,2,3]triazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil) sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (R )-3-((4-(1 H- benzo[ d ][1,2,3]triazol-4-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4- metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00562] Um frasco foi carregado com (R)-3-((2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (R)-3-((2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,4 g, 0,417 mmol), ácido (1H-benzo[d1[1,2,31triazol-4-il)borônico (0,122 g, 0,750 mmol), Na2CO3 (0,133 g, 1,250 mmol) e PdCl2(dppf) (0,030 g, 0,042 mmol). O frasco foi fechado, desgaseificado, e cheio com dioxano (3,47 mL) e água (0,695 mL). A mistura resultante foi aquecida de um dia para o outro a 80°C. A mistura de reação foi filtrada através de CELITE para remover paládio. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica usando (0-10)% de MeOH/DCM como fase móvel para produzir o composto do título: LC/MS [M+H1+: 951,70. Etapa B: (R )-4-(1 H-benzo[ d] [1,2,3]triazol-4-il)-N1 -(pirrolidin-3-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00563] À solução de (R)-3-((4-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (R)-3-((4-(1H- benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (280 mg, 0,294 mmol) em DCM (2,9 mL) foram adicionados anisol (0,32 mL, 2,94 mmol) e TFA (2,27 mL, 29,4 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi permitida prosseguir a 0°C durante 30 minutos. Após a remoção dos compostos voláteis, o resíduo foi tratado em coluna de troca de íons SCX (carregar amostra e enxaguar com MeOH, remover o produto com NH3 7M em MeOH) para produzir uma amina livre. O resíduo foi dissolvido em TFA (2,27 mL, 29,4 mmol). A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 1,0 hora. Após a remoção dos compostos voláteis, o resíduo foi purificado por HPLC em fase reversa (3-40% de ACN/água como eluente, 0,1% de TFA como aditivo) para produzir o sal de TFA. O sal de TFA foi tratado duas vezes com HCl em MeOH para produzir o composto do título como um sal de HCl. LC/MS [M+H]+: 491,31.
[00564] Os seguintes EXEMPLOS 236 a 243, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 235, partindo-se do ácido borônico ou éster borônico correspondente (comercialmente disponível ou preparado conforme aqui descrito) e dos iodetos de arila indicados que foram preparados conforme aqui descrito. Os grupos protetores das aminas foram simultaneamente removidos sob as condições de desproteção final para os grupos protetores para-metoxibenzila. EXEMPLO 244 (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7-il)-N1-metil-N1-(pirrolidin-3-il)-3- (1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (3 S )-3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)- N-metilfenilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00565] A uma solução de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (6,0 g, 7,74 mmol) em THF (30 mL) foi adicionada NCS (2,0 g, 15,47 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora sob nitrogênio. À mistura de reação foi adicionada (S)-3-(metilamino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (1,0 g, 4,94 mmol) e TEA (0,25 g, 2,50 mmol) à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos sob nitrogênio. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 38% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 974. Etapa B: (3 S )-3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d 1imidazol-7-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)-N- metilfenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00566] A uma solução agitada de (3S)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N- metilfenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,50 g, 0,51 mmol) em 1,4-dioxano (3 mL) e água (0,50 mL) foram adicionados ácido (2- amino-1H-benzo[d1imidazol-7-il)borônico (0,27 g, 1,54 mmol), pré- catalisador Xphos de 2a Geração (81 mg, 0,10 mmol) e Na2CO3 (0,16 g, 1,54 mmol) sob nitrogênio à temperatura ambiente. A mistura agitada foi desgaseificada com nitrogênio à temperatura ambiente três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. Após esfriamento para a temperatura ambiente, a mistura resultante foi diluída com EA (50 mL) e lavada com água (3x80 mL). A camada orgânica separada foi lavada com salmoura (3x80 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 4% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 979. Etapa C : (S )-4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-7-il)- N 1-metil- N 1-(pirrolidin- 3-il)-3-(1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00567] Uma solução de (3S)-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7- il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol- 5-il)-N-metilfenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,23 g, 0,24 mmol) em TFA (5 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi coevaporado com anisol (3x3 mL) e usado na etapa seguinte sem purificação adicional. O produto bruto foi dissolvido em TFA (4 mL) e a solução foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: XBridge C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: ACN em água (10 mmol/L de NH4HCO3), de 5% a 35% durante 8 min; Detector: UV 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 519; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,53-6,49 (m, 1H), 6,07 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,69-4,64 (m, 1H), 3,30-3,17 (m, 2H), 3,09-3,05 (m, 2H), 3,02 (s, 3H), 2,112,03 (m, 2H). EXEMPLO 245 hidrogenocarbonato de 3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil- 3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1,1-dimetilazetidín-1-io Etapa A: 4-iodo-N2, N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-N1 -(1 -metilazetidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00568] A uma solução agitada de 1-metilazetidin-3-amina (0,32 g, 3,69 mmol) em THF (10 mL) foram adicionados ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (1,3 g, 1,68 mmol) e TEA (0,70 mL, 5,03 mmol) a 0°C sob nitrogênio. A solução foi agitada durante 15 minutos a 0°C, então NCS (0,45 g, 3,36 mmol) foi adicionada a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 1,5 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (100 mL) e a solução foi lavada com salmoura (3x100 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 860. Etapa B: 4-(2-Amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N2,N2-bis(4-metoxibenzil)- 3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-N 1-(1-metilazetidin-3-il)benzeno-1,2- dissulfonamida
[00569] A uma solução de 4-iodo-N2,N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilazetidin-3-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (1,1 g, 1,28 mmol) em 1,4-dioxano (7 mL) e água (3 mL) foram adicionados ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,34 g, 1,92 mmol), Na2CO3 (0,41 g, 3,84 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,15 g, 0,13 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 865. Etapa C: 4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-( N-(terc-butoxicarbonil)- N-(1-metilazetidin-3-il)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenil)-2-(bis( terc-butoxicarbonil)amino)-1 H-benzo[ d] imidazol-1- carboxilato de terc-butila
[00570] A uma solução de 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)- N2,N2-bis(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1- metilazetidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (0,67 g, 0,78 mmol), TEA (0,34 mL, 2,30 mmol) e DMAP (19 mg, 0,16 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionado Boc2O (0,85 g, 3,87 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi derramada para dentro de água (50 mL). A fase aquosa foi extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.265. Etapa D:3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4- (2- (bis( terc- butoxicarbonil)amino)-1-( terc-butoxicarbonil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-N- (terc-butoxicarbonil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)-1,1 -dimetilazetidín-1 -io
[00571] A uma solução de 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (N-(terc-butoxicarbonil)-N-(1-metilazetidin-3-il)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis(terc-butoxicarbonil)amino)-1H- benzo[d]imidazol-1-carboxilato de terc-butila (0,90 g, 0,71 mmol) em DMF (10 mL) foram adicionados iodometano (0,15 g, 1,07 mmol) e Cs2CO3 (0,70 g, 2,10 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi derramada para dentro de água (50 mL). A fase aquosa foi extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M]+: 1.279. Etapa E: hidrogenocarbonato de 3-(4-(2-Amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2- sulfamoil-3-(2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1,1-dimetilazetidín-1-io
[00572] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 244, etapa C, usando 3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2- (bis(terc-butoxicarbonil)amino)-1-(terc-butoxicarbonil)-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-N-(terc-butoxicarbonil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1,1-dimetilazetidín-1-io (0,7 g, 0,55 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Shield RP18 OBD, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 6,12 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M - HCO3-]+: 519; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,76 (s, 1H), 8,27-8,18 (m, 1H), 8,16-8,02 (m, 1H), 7,89 (brs, 3H), 6,92-6,88 (m, 1H), 6,44-6,42 (m, 1H), 6,21 (brs, 2H), 6,04-5,84 (m, 1H), 4,75-4,62 (m,1H), 4,44-4,39 (m, 4H), 3,17 (s, 3H), 3,16 (s, 3H). EXEMPLO 246 (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-(2-aminoetil)pirrolidin-3- il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-4-iodo-N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5 -il)-N1 -(pirrolidin-3-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00573] A uma solução agitada de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (4,0 g, 4,17 mmol) em DCM (40 mL) foi adicionado TFA (8 mL) a 0°C. A solução foi permitida aquecer para a temperatura ambiente e agitada durante 0,5 hora. O valor do pH da solução de reação foi ajustado para 8 com solução aquosa de NaHCO3 7% e a solução foi extraída com DCM (2x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x400 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 740. Etapa B: (R)-(2-(3-(4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4- metoxibenzil)sulfamoil)fenilsulfonamido)pirrolidin-1 -il)etil)carbamato de terc-butila
[00574] A uma solução de (R)-4-iodo-N2-(4-metoxibenzil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(pirrolidin-3-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (1,70 g, 2,30 mmol) e (2-oxoetil)carbamato de terc-butila (0,73 g, 4,60 mmol) em MeOH (20 mL) foi adicionado NaBH(OAc)3 (1,95 g, 9,19 mmol) a 0°C. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com solução aquosa saturada de NH4Cl (50 mL) e extraída com EA (3x40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 883. Etapa C:(R )-(2-(3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoxibenzil)sulfamoil) fenilsulfonamido)pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00575] A uma solução de (R)-(2-(3-(4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoxibenzil)sulfamoil)fenilsulfonamido)pirrolidin-1- il)etil)carbamato de terc-butila (0,40 g, 0,45 mmol) em 1,4-dioxano (5 mL) e água (1 mL) foram adicionados ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)borônico (0,20 g, 1,13 mmol), Na2CO3 (0,14 g, 1,36 mmol) e aduto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (74 mg, 0,09 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 888. Etapa D: (R )-4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-N1 -(1-(2-aminoetil) pirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00576] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 244, etapa C, usando (R)-(2-(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoxibenzil)sulfamoil) fenilsulfonamido)pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila (0,10 g, 0,11 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Select CSH Prep C18 OBD, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 8 min; 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 548; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,57 (brs, 3H), 6,94 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,54 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,40 (brs, 2H), 6,10 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,98-3,94 (m, 1H), 2,88-2,81 (m, 2H), 2,75-2,71 (m, 1H), 2,70-2,58 (m, 4H), 2,38-2,32 (m, 1H), 2,11-2,06 (m, 1H), 1,72-1,66 (m, 1H). EXEMPLO 247 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-amino-3-hidroxi-2- (hidroximetil)propan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (1,3-di-hidroxi-2-(hidroximetil)propan-2-il)carbamato de benzila
[00577] A uma solução vigorosamente agitada de 2-amino-2- (hidroximetil)propano-1,3-diol (25,0 g, 206 mmol) em EA (200 mL) e água (100 mL) foram adicionados NaHCO3 (52,0 g, 619 mmol) e Cbz-Cl (59 mL, 413 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com EA (300 mL), lavado com água (3x150 mL) e salmoura (3x150 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 256. Etapa B: (5-(hidroximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)carbamato de benzila
[00578] A uma solução de (1,3-di-hidroxi-2-(hidroximetil)propan-2- il)carbamato de benzila (35,0 g, 137 mmol) em DMF (100 mL) foram adicionados ácido 4-metilbenzenossulfônico (4,7 g, 27,41 mmol) e 2,2- dimetoxipropano (28,6 g, 274 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com EA (500 mL), lavada com água (3x250 mL) e salmoura (3x300 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 15% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 296. Etapa C: metanossulfonato de (5-(((benziloxi)carbonil)amino)-2,2-dimetil- 1,3-dioxan-5-il)metila
[00579] A uma solução de (5-(hidroximetil)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5- il)carbamato de benzila (14,0 g, 47,4 mmol) em DCM (200 mL) foram adicionados TEA (20 mL, 142 mmol) e MsCl (7,4 mL, 95 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi lavada com água (3x300 mL) e salmoura (3x300 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 374. Etapa D: (5-(aminometil)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)carbamato de benzila
[00580] A uma solução de metanossulfonato de (5-(((benziloxi) carbonil)amino)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)metila (13,0 g, 34,80 mmol) em DMF (170 mL) foi adicionada 1,3-dioxoisoindolin-2-ida de potássio (12,9 g, 69,60 mmol). A mistura de reação foi agitada a 65°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com EA (400 mL). A camada orgânica separada foi lavada com água (3x300 mL) e salmoura (3x300 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma solução de hidrazina hidrato (80%, 100 mL) e EtOH (100 mL). A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 3 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com EA (500 mL), e então lavada com água (3x300 mL) e salmoura (3x300 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: [M + 1]+: 295. Etapa E: N-[5-({[(terc-butoxi)carbonil]amino}metil)-2,2-dimetil-1,3-dioxan- 5-il]carbamato de benzila
[00581] A uma solução de (5-(aminometil)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5- il)carbamato de benzila (10,0 g, 34,0 mmol) em DCM (150 mL) foram adicionados TEA (4,8 mL, 34,0 mmol) e Boc2O (7,4 g, 34,0 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com DCM (300 mL), e então lavada com água (3x250 mL) e salmoura (3x250 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 20% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 395. Etapa F: ((5-amino-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)carbamato de terc-butila
[00582] A uma solução de N-[5-({[(terc-butoxi)carbonil]amino}metil)- 2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il]carbamato de benzila (2,6 g, 6,59 mmol) em MeOH (20 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% em peso, 0,93 g, 1,32 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 72 horas sob hidrogênio. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica, eluído com 33% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1] 261. Etapa G:((5-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5- il)metil)carbamato de terc-butila
[00583] A uma solução de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (1,73 g, 2,23 mmol) em THF (15 mL) foram adicionados ((5-amino-2,2-dimetil-1,3- dioxan-5-il)metil)carbamato de terc-butila (1,2 g, 4,46 mmol) e TEA (0,9 mL, 6,69 mmol) a 0°C durante 10 min. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. Então NCS (0,60 g, 4,46 mmol) foi adicionada e a mistura foi agitada a 0°C durante 1,5 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (300 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (3x200 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 25% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.034. Etapa H:((5-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)carbamato de terc- butila
[00584] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 246, etapa C, usando ((5-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2,2-dimetil- 1,3-dioxan-5-il)metil)carbamato de terc-butila (1,24 g, 1,20 mmol) e ácido (2- amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,53 g, 3,00 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.039. Etapa I: 4-(2-Amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-1-( 1 -amino-3-hidroxi-2- (hidroximetil)propan-2-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00585] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 244, etapa C, usando ((5-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)carbamato de terc- butila (0,50 g, 0,48 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge C18 OBD Prep, 100 Â, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 25% de B durante 9 min; Detector: 254 e 210 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 539; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,49 (brs, 2H), 6,92 (dd, J = 7,7 Hz, 1,1 Hz, 1H), 6,51 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,26 (s, 2H), 6,07 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 5,37 (brs, 2H), 3,57-3,39 (m, 4H), 3,19 (s, 2H). EXEMPLO 248 metanoperoxoato de (3R)-3-{[4-(2-amino-1H-1,3-benzodiazol-4-il)-2- sulfamoil-3-(2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzeno]sulfonamido}-1-(2-aminoetil)- 1-metilpirrolidín-1-io Etapa A: (R )-(2-(3-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00586] A uma solução de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (2,50 g, 3,22 mmol) em THF (40 mL) foi adicionada NCS (0,86 g, 6,45 mmol) à temperatura ambiente sob nitrogênio. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. À solução resultante foram adicionados (R)-(2-(3- aminopirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila (1,48 g, 6,45 mmol) e TEA (1,35 mL, 9,67 mmol) a 0°C. A mistura resultante foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente sob nitrogênio. A solução resultante foi diluída com EA (100 mL), e então lavada com solução saturada de Na2SO3 (2x50 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.003. Etapa B: iodeto de (3 R )-3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2- (4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)-1 - metilpirrolidín-1 -io
[00587] A uma solução de (R)-(2-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila (1,20 g, 1,20 mmol) em acetona (10 mL) foi adicionado iodometano (0,68 g, 4,79 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente sob nitrogênio. A solução resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS [M-I+H]+: 1.017. Etapa C: iodeto de (3R)-3-(4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-1-(2-(( terc-butoxicarbonil)amino)etil)-1-metilpirrolidín- 1-io
[00588] A uma solução de iodeto de (3R)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)-1-metilpirrolidín- 1-io (1,60 g, 1,40 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL) e água (5 mL) foram adicionados ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,62 g, 3,49 mmol), Pd(PPh3)4 (0,32 g, 0,28 mmol) e Na2CO3 (0,44 g, 4,19 mmol) à temp. ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 4 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL). A fase aquosa foi extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M-I+H]+: 1.022. Etapa D: metanoperoxoato de (3 R )-3-{[4-(2-amino-1 H-1,3-benzodiazol-4-il)- 2-sulfamoil-3-(2 H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzeno]sulfonamido}-1-(2- aminoetil)-1 -metilpirrolidín- 1-io;
[00589] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 244, etapa C, usando iodeto de (3R)-3-(4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoxicarbonil) amino)etil)-1-metilpirrolidín-1-io (1,40 g, 1,22 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 6,72 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M - HCO3-]+: 562; 1H RMN (400 MHz, DCl): δ 6,59 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,08-5,96 (m, 1H), 5,29 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,10-5,04 (m, 1H), 4,81 (d, J = 7,6 Hz, 0,5H), 4,65 (d, J = 7,6 Hz, 0,5H), 2,53 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,13-1,97 (m, 1H), 1,97-1,61 (m, 5H), 1,58-1,55 (m, 2H), 1,32-1,29 (m, 1H), 1,19-1,17 (m, 2H), 0,72-0,65 (m, 1H), 0,50-0,27 (m, 1H). EXEMPLO 249 metanoperoxoato de (3S)-3-{[4-(2-amino-1H-1,3-benzodiazol-4-il)-2- sulfamoil-3-(2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzeno]sulfonamido}-1-(2-aminoetil)- 1-metilpirrolidín-1-io Etapa A: (S )-(2-(3-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)femlsulfonamido)pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00590] A uma solução de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (2,00 g, 2,58 mmol) em THF (40 mL) foi adicionada NCS (0,69 g, 5,16 mmol) à temperatura ambiente sob nitrogênio. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. À solução resultante foram adicionados (S)-(2-(3- aminopirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila (1,18 g, 5,16 mmol) e TEA (1,10 mL, 7,74 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com EA (100 mL), e então lavada com solução saturada de Na2SO3 (2x50 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.003. Etapa B: iodeto de (3 S )-3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2- (4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)-1 - metilpirrolidín-1 -io
[00591] A uma solução de (S)-(2-(3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila (1,20 g, 1,20 mmol) em acetona (10 mL) foi adicionado iodometano (0,68 g, 4,79 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente sob nitrogênio. A solução resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M- I+H]+: 1.017. Etapa C: iodeto de (3S)-3-(4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-1-(2-(( terc-butoxicarbonil)amino)etil)-1-metilpirrolidín- 1-io
[00592] A uma solução de iodeto de (3S)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)-1-metilpirrolidín- 1-io (1,50 g, 1,31 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL) e água (5 mL) foram adicionados ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,58 g, 3,28 mmol), Pd(PPh3)4 (0,30 g, 0,26 mmol) e Na2CO3 (0,42 g, 3,93 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 4 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL). A fase aquosa foi extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M]+: 1.022. Etapa D: metanoperoxoato de (3 S )-3-{[4-(2-amino-1 H-1,3-benzodiazol-4-il)- 2-sulfamoil-3-(2 H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzeno]sulfonamido}-1-(2- aminoetil)-1 - metilpirrolidín-1 -io
[00593] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 244, etapa C, usando iodeto de (3S)-3-(4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoxicarbonil) amino)etil)-1-metilpirrolidín-1-io (1,00 g, 0,87 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 5% de B durante 2 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 6,72 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M - HCO3-]+: 562; 1H RMN (400 MHz, DCl): δ 6,60 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,04 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,31 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,13-5,04 (m, 1H), 4,83 (d, J = 8,0 Hz, 0,5H), 4,66 (d, J = 8,0 Hz, 0,5H), 2,55-2,53 (m, 1H), 2,12-1,97 (m, 1H), 1,97-1,61 (m, 5H), 1,581,55 (m, 2H), 1,32-1,29 (m, 1H), 1,19-1,15 (m, 2H), 0,72-0,65 (m, 1H), 0,50- 0,27 (m, 1H). EXEMPLO 250 (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3-aminopirrolidin-3-il)metil)- 3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: 3-(2-Amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-( (2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida
[00594] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 246, etapa C, usando 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (2,0 g, 2,28 mmol) e ácido (2- amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (1,62 g, 9,13 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 881. Etapa B: ácido 4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico
[00595] A uma solução agitada de 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (1,30 g, 1,48 mmol) em THF (13 mL) foi adicionado TBAF (1,54 g, 5,90 mmol) a 0°C. A solução de reação foi agitada durante 1 hora à temp. ambiente A solução resultante foi diluída com EA (100 mL), e então lavada com solução aquosa saturada de KHSO4 (5 x 100 mL). A fase orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 781. Etapa C: (S )-3-amino-3-((4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N- bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00596] A uma solução agitada de ácido 4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (0,50 g, 0,64 mmol) em THF (5 mL) foram adicionados (R)-3-amino-3-(aminometil)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (0,28 g, 1,28 mmol) e TEA (0,27 mL, 1,92 mmol) em um banho de gelo. A solução resultante foi desgaseificada sob nitrogênio três vezes e agitada durante 15 minutos. NCS (0,17 g, 1,28 mmol) foi adicionada lentamente à solução de reação. A mistura foi agitada durante 2 horas a 15°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 994. Etapa D: (S )-4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N1 -((3-aminopirrolidin-3- il)metil)-3- (2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00597] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 244, etapa C, usando (S)-3-amino-3-((4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (0,40 g, 0,40 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 7 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 534; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,72 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,32 (dd, J =7,2 Hz, 0,8 Hz, 1H), 7,15 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,84-6,81 (m, 1H), 3,83-3,80 (m, 1H), 3,73-3,70 (m, 1H), 3,633,60 (m, 4H), 2,58-2,55 (m, 1H), 2,43-2,40 (m, 1H). EXEMPLO 251 (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3-aminopirrolidin-3- il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-3-amino-3-((4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N- bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00598] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 250, etapa C, usando (S)-3-amino-3-(aminometil)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (0,21 g, 0,96 mmol) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1] 994. Etapa B: (R)-4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1 -((3-aminopirrolidin- 3-il)metil)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00599] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 244, etapa C, usando (R)-3-amino-3-((4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 7 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 5,81 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 534; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 7,2 Hz, 1,2 Hz, 1H), 7,15 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,82 (m 1H), 3,83-3,80 (m, 1H), 3,73-3,70 (m, 1H), 3,63-3,60 (m, 4H), 2,58-2,55 (m, 1H), 2,43-2,40 (m, 1H).
[00600] Os EXEMPLOS 252 a 268, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 244, partindo-se de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico e os ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes e as aminas protegidas (tipicamente protegidas com Boc) correspondentes, que foram preparados conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 269 2-amino-N-(4'-(N-((R)-pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol- 5-il)-3,4,5,6-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-3-il)acetamida Etapa A: (R )-3-(3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)-5'-oxo-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4- ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00601] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (5,0 g, 5,21 mmol) em 1,4-dioxano (12 mL) e água (3 mL) foram adicionados Na2CO3 (2,76 g, 26,00 mmol), ácido 3- oxociclo-hex-1-enilborônico (4,63 g, 33,07 mmol) e Pd(PPh3)4 (1,20 g, 1,00 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada a 80°C durante 6 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (150 mL) e extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x500 mL) e salmoura (3x500 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 928. Etapa B: (3 R )-3-(3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-5'-hidroxi-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1 '-bifenil]-4-il- sulfonamido)pirrolidina -1-carboxilato de terc-butila
[00602] A uma solução de (R)-3-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-oxo-2',3',4',5'-tetra- hidro-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (3,80 g, 4,09 mmol) em MeOH (20 mL) foi adicionado NaBH4 (0,93 g, 24,60 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (150 mL), e então extraída com EA (3x150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x300 mL) e salmoura (3x300 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 930. Etapa C: (3 R )-3-(5'-azido-3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1 '-bifenil]-4-il- sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00603] A uma solução de (3R)-3-(3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-5'-hidroxi-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)- 2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (2,60 g, 2,80 mmol) em tolueno (15 mL) foram adicionados DBU (3,80 g, 25,20 mmol) e DPPA (4,60 g, 16,77 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL), e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 20% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: [M + 1]+: 955. Etapa D: (3 R )-3-(5'-amino-3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1 '-bifenil]-4-il- sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00604] A uma solução de (3R)-3-(5'-azido-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'- tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc- butila (2,0 g, 2,09 mmol) em THF (9 mL) e água (3 mL) foram adicionados trifenilfosfina (0,72 g, 2,7 mmol) e hidróxido de potássio (0,18 g, 3,1 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 20% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 929. Etapa E:(3 R )-3-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-5'-(2-(( terc- butoxi carbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- 2',3',4',5'-tetra-hidro-[ 1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00605] A uma solução (3R)-3-(5'-amino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'- tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc- butila (1,50 g, 1,61 mmol) em THF (15 mL) foram adicionados TEA (0,70 mL, 4,84 mmol), ácido 2-((terc-butoxicarbonil)amino)acético (0,28 g, 1,61 mmol) e HATU (1,80 g, 4,80 mmol) à temp. ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 16 horas à temp. ambiente. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.086. Etapa F: 2-amino- N-(4'-(N-((R )-pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2 H- tetrazol-5-il)-3,4,5,6-tetra-hidro-ri, 1 '-bifenil]-3-il)acetamida
[00606] O composto do título foi preparado conforme descrito para o Exemplo 244, etapa C, usando (3R)-3-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 5'-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[i,i'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-i- carboxilato de terc-butila (i,40 g, i,30 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna C18 OBD, 130 Â, 5 μm, 30 mm x 50 mm; Fase móvel A: água com i0 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 50 mL/min; Gradiente: 5% de B a 17% de B durante 5 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 526; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,51 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,36-5,35 (m, 1H), 4,27-4,16 (m, 2H), 3,66 (s, 2H), 3,40-3,38 (m, 4H), 2,22-2,20 (m, 1H), 2,05-1,92 (m, 3H), 1,73-1,67 (m, 2H), 1,57-1,56 (m, 1H), 1,49-1,39 (m, 1H). EXEMPLO 270 2-amino-N-((3R)-3-(4-(N-((R)-pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H- tetrazol-5-il)fenil)ciclo-hexil)acetamida Etapa A: 2-amino-N-((3 R )-3-(4-(N-((R )-pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil- 2-(2 H-tetrazol-5-il)fenil)ciclo-hexil)acetamida
[00607] A uma suspensão de 2-amino-N-(4'-(N-((R)-pirrolidin-3- il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-3,4,5,6-tetra-hidro-[1,1'- bifenil]-3-il)acetamida (0,30 g, 0,57 mmol)) em MeOH (15 mL) foram adicionados PtO2 (38,9 mg, 0,17 mmol) e HCl conc. (2,50 mL). A mistura foi agitada a 45°C durante 16 horas sob hidrogênio (20 atm (2.027 kPa)). A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge BEH130 Prep C18 OBD 19 mm x 150 mm, 5 μm, 13 nm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 4% de B durante 10 min, 4% de B a 15% durante 6 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 528; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,53 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,18-4,10 (m, 1H), 3,69-3,59 (m, 2H), 3,59-3,31 (m, 5H), 2,29-2,12 (m, 1H), 2,10-1,60 (m, 6H), 1,60-1,38 (m, 2H), 1,38-1,10 (m, 2H). EXEMPLO 271 (R)-4-(4-(N-(pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)- 1H-benzo[d]imidazol-2-carboxamida Etapa A: (R )-3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-carbamoil-1 H- benzo [ d ] imidazol-4-il)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5 - il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00608] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (0,50 g, 0,52 mmol) e ácido (2-carbamoil-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,21 g, 1,04 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 993. Etapa B: (R )-4-(4-( N-(pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2 H-tetrazol-5- il)fenil)-1H-benzo [ d ] imidazol-2-carboxamida
[00609] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(2-carbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,24 g, 0,24 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 150 mm, 5 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 22% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 533; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,25 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,99 (brs, 3H), 7,78-7,76 (m, 1H), 7,37-7,35 (m, 1H), 6,97 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,44-6,42 (m, 1H), 4,13-4,09 (m, 1H), 3,33-3,29 (m, 2H), 3,19-3,12 (m, 2H), 2,18-2,09 (m, 1H), 1,95-1,87 (m, 1H). EXEMPLO 272 4-(2-((S)-1-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirrolidin-3-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)3-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[1,r-bifeml]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00610] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (1,80 g, 1,88 mmol) em 1,4-dioxano (12 mL) e água (3 mL) foram adicionados 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzeno-1,2-diamina (1,76 g, 7,50 mmol), Na2CO3 (0,56 g, 5,63 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,43 g, 0,36 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi irradiada com radiação de micro-ondas a 100°C durante 0,5 hora sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (200 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 940. Etapa B: (R )-3-(2'-amino-3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3'-(( S )-2- ((terc-butoxicarbonil)amino)propanamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-[1,r-bifeml]-4-il-sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc- butila
[00611] A uma solução agitada de (R)-3-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]- 4-il-sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,55 g, 0,59 mmol) em THF (5 mL) foram adicionados ácido (S)-2-((terc-butoxicarbonil) amino)propanoico (0,13 g, 0,70 mmol), TEA (0,18 g, 1,76 mmol) e HATU (0,45 g, 1,17 mmol). A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 5 horas à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido com EA (50 mL), a solução foi lavada com salmoura (3x50 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.111. Etapa C^(R)-3-(2-(NN-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-1-((terç- butoxicarbonil)amino)etil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00612] Uma solução de (R)-3-(2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3'-((S)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)propanamido)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (0,45 g, 0,41 mmol) em AcOH (5 mL) foi agitada a 60°C durante 30 minutos. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.093. Etapa D: 4-(2-(( S )-1-aminoetil)-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N1-((R )-pirrolidin- 3-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00613] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(2-((S)-1-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,35 g, 0,32 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Select CSH Prep C18 OBD, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 10% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M - 1]-: 531; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,72 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,83-7,81 (m, 1H), 7,52-7,48 (m, 1H), 7,17-7,15 (m, 1H), 5,18-5,15 (m, 1H), 4,34-4,31 (m, 1H), 3,59-3,40 (m, 4H), 2,37-2,34 (m, 1H), 1,97-1,95 (m, 4H). EXEMPLO 273 4-(2-((R)-1-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirrolidin-3-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-3-(2'-amino-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3'-(( R )-2- ((terc-butoxicarbonil)amino)propanamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-[1,r-bifeml]-4-ilsulfonamido)pirrolidma-1-carboxilato de terc- butila
[00614] A uma solução agitada de (R)-3-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]- 4-il-sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,55 g, 0,59 mmol) em THF (5 mL) foram adicionados ácido (R)-2-((terc-butoxicarbonil) amino)propanoico (0,11 g, 0,59 mmol), TEA (0,18 g, 1,76 mmol) e HATU (0,45 g, 1,17 mmol). A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 5 horas à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em EA (50 mL), e então lavado com salmoura (3x50 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.111. Etapa B: (R)-terc-3-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((R )-1-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de butila
[00615] Uma solução de (R)-3-(2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3'-((R)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)propanamido)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (0,48 g, 0,43 mmol) em AcOH (5 mL) foi agitada a 60°C durante 30 minutos. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.093. Etapa C: 4-(2-((R )-1-aminoetil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)- N 1-(( R )- pirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00616] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(2-((R)-1-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,38 g, 0,35 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Select CSH Prep C18 OBD, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 10% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 533; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,72 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,83-7,81 (m, 1H), 7,52-7,48 (m, 1H), 7,17-7,15 (m, 1H), 5,18-5,15 (m, 1H), 4,34-4,31 (m, 1H), 3,59-3,40 (m, 4H), 2,37-2,34 (m, 1H), 1,97-1,95 (m, 4H). EXEMPLO 274 (R)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-3-(3',4'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[1,r-bifeml]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00617] composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de (1,50 g, 1,56 mmol) e 4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzeno-1,2-diamina (0,55 g, 2,34 mmol), Na2CO3 (0,50 g, 4,69 mmol): LCMS [M + 1]+: 940. Etapa B: (R)-3-(3'-amino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,r-bifeml]-4-ilsulfonamido)pirrolidma-1-carboxilato de terc-butila
[00618] A uma solução de ácido 2-((terc-butoxicarbonil)amino)acético (0,22 g, 1,23 mmol) em DMF (15 mL) foram adicionados (R)-3-(3',4'- diamino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc- butila (1,49 mL, 1,17 mmol), HATU (0,53 g, 1,40 mmol) e DIEA (0,23 g, 1,76 mmol) à temp. ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 2 horas à temp. ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), e então extraída com EA (3x80 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (100 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.097. Etapa C:(R)-3-(2-£N2N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((terç- butoxicarbonil)amino)metil)-1 H-benzoi d ]imidazol-5-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1 -carboxilato de terc-butila
[00619] Uma solução de (R)-3-(3'-amino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)acetamido)-2-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina- 1-carboxilato de terc-butila (0,55 g, 0,50 mmol) em AcOH (10 mL) foi agitado durante 2 horas a 55°C. A solução resultante foi diluída com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (50 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.079. Etapa D: (R)-4-(2-(aminometil)-1 H-benzo[d]imidazol-5-il)-N1 -(pirrolidin-3- il)-3-( 2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00620] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-(((terc-butoxicarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-5- il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (0,38 g, 0,35 mmol) em DCM (6 mL) foi adicionado TFA (3 mL). A mistura de reação foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. A mistura de reação foi coevaporada com anisol (3x5 mL) sob vácuo. O produto bruto foi dissolvido em TFA (10 mL). A solução foi agitada a 80°C durante 1 hora. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo até a secura, então foi dissolvida em EA (30 mL), a solução foi extraída com solução aquosa de HCl (1,0 M, 3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo até a secura. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições. Coluna: Coluna X Bridge Prep OBD C18 30 mm x 150 mm, 5 μm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3 + 0,1% de NH3.H2O), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 30 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 6 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 519; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 + DCl): δ 8,50 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,63-7,52 (m, 1H), 7,11 (dd, J = 8,5 Hz, 1,6 Hz, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,08-4,06 (m, 1H), 3,36-3,18 (m, 2H), 3,13-3,07 (m, 2H), 2,141,96 (m, 1H), 1,87-1,82 (m, 1H). EXEMPLO 275 (R)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00621] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (4,10 g, 4,27 mmol) e 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzo[d]tiazol-2-amina (2,36 g, 8,54 mmol): LCMS [M + 1]+: 982. Etapa^^(R)z32(2z(N2N=bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)z4z(2zbromobenzo[dl tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00622] A uma solução de (R)-3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-5-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (3,3 g, 3,36 mmol) em ACN (40 mL) foi adicionado CuBr2 (0,90 g, 4,03 mmol). Nitrito de terc- butila (0,55 g, 5,38 mmol) foi então adicionado por gotejamento a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante 2 horas à temp. ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL), e então extraída com EA (3x80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.045, 1.047 (1:1). Etapa C: (R )-3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-cianobenzo [ d] tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00623] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (1,50 g, 1,43 mmol) em DMF (20 mL) foram adicionados mesilato de t-BuXPhos- paládio(II)-bifenil-2-amina (0,46 g, 0,57 mmol) e Zn(CN)2 (0,51 g, 4,30 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 16 horas a 55°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com solução saturada de Na2CO3 (100 mL), e então extraída com EA (3x80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução aquosa saturada de FeSO4 (3x50 mL) e salmoura (2x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 992. Etapa D: (R )-3-(4-(2-(aminometil)benzo[ d ]tiazol-5-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00624] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,85 g, 0,86 mmol) em MeOH (10 mL) e EA (5 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% de Pd, 0,12 g, 0,86 mmol) à temperatura ambiente. Então 4 gotas de HCl conc. foram adicionadas. A mistura de reação foi desgaseificada com hidrogênio três vezes e agitada durante 16 horas a 25°C sob hidrogênio (30 atm (3.040 kPa)). A solução resultante foi filtrada. O bolo do filtro foi lavado com MeOH (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 996. Etapa E: (R )-4-(2-(aminometil)benzo[ d] tiazol-5-il)-N1 -(pirrolidin-3-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00625] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 274, etapa D, usando (R)-3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,70 g, 0,70 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições. Coluna: Coluna XBridge Prep Amida OBD 19 mm x 150 mm, 5 μm, 13 nm; Fase móvel A: água com 10 mmol de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 90% de B a 65% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 6,43 min. As frações foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 536; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,27 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,40 (s, 1H), 6,88 (dd, J = 8,3 Hz, 1,7 Hz, 1H), 6,70 (brs, 3H), 4,13 (s, 2H), 4,09-4,03 (m, 1H), 3,27-3,15 (m, 2H), 3,14-2,97 (m, 2H), 2,10-2,01 (m, 1H), 1,89-1,81 (m, 1H). EXEMPLO 276 (R)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00626] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (3,0 g, 3,13 mmol) em 1,4-dioxano (30 mL) e água (6 mL) foram adicionados ácido (2-aminobenzo[d]tiazol-4- il)borônico (1,52 g, 7,81 mmol), Na2CO3 (0,99 g, 9,38 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,72 g, 0,63 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 h sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (70 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 982. Etapa^B^(R)z3z(2z(N2N=bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4z(2zbromobenzo [ d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00627] A uma solução de (R)-3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenila sulfonamida)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (2,30 g, 2,34 mmol) em ACN (20 mL) foram adicionados brometo de cobre (II) (0,63 g, 2,81 mmol) e nitrito de terc-butila (0,39 g, 3,75 mmol) por gotejamento a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo [d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila como um sólido o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1045, 1.047. Etapa C: 3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[d]tiazol- 4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00628] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (1,80 g, 1,72 mmol) em DMSO (8 mL) foi adicionado cianocobre (0,46 g, 5,16 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 100°C durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com solução aquosa saturada de Na2CO3 (100 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 992. Etapa D: (R )-3-(4-(2-(aminometil)benzo[ d ]tiazol-4-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00629] A uma solução de 3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (2-cianobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,70 g, 0,71 mmol) em EA (5 mL) e HCl conc. (2 gotas) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% em peso, 0,14 g, 0,20 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com hidrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 16 horas sob hidrogênio (20 atm (2.027 kPa))). A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 996. Etapa E: (R )-4-(2-(aminometil)benzo[ d] tiazol-4-il)-N1 -(pirrolidin-3-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00630] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,30 g, 0,30 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna X Bridge Prep C18 OBD, 19 mm x 150 mm, 5 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 536; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ 8,28 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,10 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,15-4,12 (m, 1H), 4,09 (s, 2H), 3,35-3,24 (m, 2H), 3,17-3,09 (m, 2H), 2,20-2,06 (m, 1H), 1,94-1,86 (m, 1H). EXEMPLO 277 (R)-4-(6-aminopiridin-2-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2- il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00631] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (0,50 g, 0,52 mmol) e ácido (6-bromopiridin-2- il)borônico (0,21 g, 1,04 mmol): LCMS [M + 1]+: 989, 991 (1:1). Etapa B:(R)-3-(2-(N1N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terç- butoxicarbonil)amino)piridin-2-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00632] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,30 g, 0,30 mmol) em 1,4-dioxano (3 mL) foram adicionados carbamato de terc-butila (0,07 g, 0,61 mmol), BrettPhos Pd G 3 (0,06 g, 0,06 mmol) e K3PO4 (0,19 g, 0,91 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (R)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-2-il)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 1.026. Etapa C: (R )-4-(6-aminopiridin-2-il)- N1 -(pirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00633] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(6-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-2-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,18 g, 0,18 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna X Bridge Prep C18 OBD, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 5% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 466; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,97 (brs, 3H), 6,99 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,27 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,93 (brs, 2H), 5,50 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,19-4,13 (m, 1H), 3,27-3,16 (m, 2H), 3,09-3,00 (m, 2H), 1,92-1,85 (m, 1H), 1,79-1,71 (m, 1H).
[00634] Os EXEMPLOS 278 a 291, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 277, partindo-se de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. Nos casos nos quais os intermediários ácido borônico ou éster borônico têm aminas protegidas com Boc, os grupos Boc foram removidos durante a desproteção final, com TFA, dos grupos PMB conforme descrito para o Exemplo 244, Etapa C. EXEMPLO 292 (S)-4-(4-(N-(pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)- 1H-benzo[d]imidazol-2-carboxamida Etapa A: (S )-3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-carbamoil-1 H- benzo [ d ] imidazol-7 -il)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5 - il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00635] A uma solução de (S)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,60 g, 0,63 mmol) em 1,4-dioxano (5 mL) e água (1 mL) foram adicionados ácido (2- carbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,26 g, 1,25 mmol), Na2CO3 (0,23 g, 2,19 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,14 g, 0,13 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 3% de MeOH em EA. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 993. Etapa B: (S )-4-(4-(N-(pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2 H-tetrazol-5- il)fenil)-1H-benzo [ d ] imidazol-2-carboxamida
[00636] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (2-carbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,20 g, 0,20 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 150 mm, 5 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 533; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,25 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,03 (brs, 3H), 7,79 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 6,45 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,14-4,11 (m, 1H), 3,32-3,20 (m, 2H), 3,15-3,09 (m, 2H), 2,19-2,08 (m, 1H), 1,97-1,89 (m, 1H).
[00637] Os EXEMPLOS 293 a 295, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 292, partindo-se de (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparados conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 296 (S)-N1-(2-amino-3-hidroxipropil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-(1-(4-(1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00638] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (S)-(1-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila (1,1 g, 1,14 mmol) e ácido (1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,37 g, 2,30 mmol) para produzir o composto do título: LCMS (ESI) [M + 1]+: 954. Etapa B: (S)-N1 -(2-amino-3-hidroxipropil)-4-(1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00639] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (S)-(1-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila (0,64 g, 0,67 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi dissolvido em TFA (4 mL). A solução foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: X Bridge C18, 19 mm x 150 mm, 5 μm; Fase móvel A: água (0,05% de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 30% de B a 70%B durante 10 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 8,25 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 494; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,25 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,00 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 7,77 (brs, 3H), 7,28 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 6,85 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,38 (s, 1H), 3,64-3,53 (m, 2H), 3,28-3,20 (m, 3H). EXEMPLO 297 (S)-N1-(2-amino-3-hidroxipropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:(S)-(1 -(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00640] A uma mistura de (S)-(1-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila (0,80 g, 0,83 mmol), 5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (0,46 g, 2,08 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,20 g, 0,17 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) foi adicionada uma solução de Na2CO3 (0,27 g, 2,49 mmol) em água (2,5 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 12 horas a 80°C. A mistura resultante foi permitida esfriar para a temperatura ambiente, diluída com água (150 mL), e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em EA para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 930. Etapa B: (S)- N1 -(2-amino-3-hidroxipropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00641] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (S)-(1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila (0,61 g, 0,66 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 2% de B a 20% de B durante 10 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 8,3 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 470; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H ), 7,75 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,49 (brs, 3H), 6,71 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,15 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 5,99 (brs, 2H), 5,29 (brs, 1H), 3,59-3,46 (m, 2H), 3,213,01 (m, 3H). EXEMPLO 298 (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-3- (2H-tetrazol-5-il)-benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-(3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00642] A uma solução agitada de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,0 g, 1,00 mmol) em 1,4-dioxano (5 mL) e água (1 mL) foram adicionados ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol- 4-il)borônico (0,37 g, 2,10 mmol), Na2CO3 (0,33 g, 3,10 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,12 g, 0,10 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 12 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 5% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 969. Etapa B:(R )-4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-N1 -(3-amino-2- hidroxipropil)-3-(2 H-tetrazol-5-il)-benzeno-1,2-dissulfonamida
[00643] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,55 g, 0,57 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 5% de B a 35% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 6,8 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 509; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,64 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,11-7,97 (m, 1H), 7,33 (dd, J = 8,0 Hz, 1,0 Hz, 1H), 7,28-7,12 (m, 1H), 6,89 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,16-3,92 (m, 1H), 3,31-3,16 (m, 3H), 2,98-2,80 (m, 1H). EXEMPLO 299 (R)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: N-{[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-{[(2R)-3-{[(terc- butoxi)carbonil] amino} -2-hidroxipropil] sulfamoil} -2- [(2 E ,4 E)-11 -metoxi- 2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H- 1,3-benzodiazol-2-il]metil}carbamato de terc-butila
[00644] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,70 g, 0,73 mmol) e ((4-(5,5-dimetil- 1,3,2-dioxaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)carbamato de terc- butila (0,53 g, 1,48 mmol): LCMS [M + 1]+: 1.083. Etapa B: (R)-N1 -(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)-1 H-benzo[d] imidazol-4-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00645] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-{[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}- 4-{[(2R)-3-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}-2-hidroxipropil]sulfamoil}-2- [(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}carbamato de terc-butila (0,60 g, 0,55 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: X bridge C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: ACN em água (10 mmol/L de NH4HCO3), 5%-30% durante 7 min; Detector: UV 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 523; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ 8,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,84 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 3,97 (s, 2H), 3,90-3,81 (m, 1H), 3,17-3,12 (m, 1H), 3,09-3,03 (m, 1H), 2,96-2,93 (m, 1H), 2,76-2,71 (m, 1H). EXEMPLO 300 (R)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-(3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00646] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (2,0 g, 2,08 mmol) e ácido (2- aminobenzo[d]tiazol-4-il)borônico (1,01 g, 5,19 mmol): LCMS [M + 1]+: 986. Etapa B: (R )-(3-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo [ d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00647] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 275, etapa B, usando (R)-(3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,37 g, 1,39 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.049, 1.051 (1:1). Etapa C: (R )-(3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[ d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00648] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 275, etapa C, usando (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,86 g, 0,82 mmol): LCMS [M + 1]+: 996. Etapa D: (R )-(3-(4-(2-(aminometil)benzo[ d] tiazol-4-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00649] A uma solução de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,60 g, 0,60 mmol) em EA (4 mL) e MeOH (8 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% de Pd, 0,40 g, 0,60 mmol) à temperatura ambiente. Então 4 gotas de HCl conc. foram adicionadas. A mistura de reação foi desgaseificada com hidrogênio três vezes e agitada durante 16 horas a 25°C sob hidrogênio (cerca de 30 atm (3.040 kPa)). A mistura resultante foi filtrada e o bolo do filtro foi lavado com MeOH (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.000. Etapa E: (R)-N1 -(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol- 4-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00650] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 274, etapa D, usando (R)-(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,55 g, 0,55 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições. Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD, 30 mm x 100 mm, 5 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 10 min; Detector: 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 540; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,93-7,74 (m, 2H), 7,02 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,54 (dd, J = 7,6 Hz, 1,2 Hz, 1H), 6,31 (brs, 3H), 4,04 (s, 2H), 3,84-3,78 (m, 1H), 3,173,13 (m, 1H), 3,06-3,01 (m, 1H), 2,96-2,92 (m, 1H), 2,74-2,69 (m, 1H).
[00651] Os EXEMPLOS 301-303, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 298, partindo-se de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 304 (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-3- (2H-tetrazol-5-il)-benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-(3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00652] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 298, etapa A, usando (S)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,00 g, 1,00 mmol): LCMS [M + 1]+: 969. Etapa B: (S )-4-(2-amino -1H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N 1-(3-amino-2- hidroxipropil)-3-(2 H-tetrazol-5-il)-benzeno-1,2-dissulfonamida
[00653] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (S)-(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 5% de B a 35% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 509; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,64 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,11-7,97 (m, 1H), 7,33 (dd, J = 8,0 Hz, 1,0 Hz, 1H), 7,28-7,12 (m, 1H), 6,89 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,16-3,92 (m, 1H), 3,31-3,16 (m, 3H), 2,982,82 (m, 1H). EXEMPLO 305 (S)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: N-{[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-{[(2S)-3-{[(terc- butoxi)carbonil] amino} -2-hidroxipropil] sulfamoil} -2- [(2 E ,4 E)-11 -metoxi- 2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H- 1,3-benzodiazol-2-il]metil}carbamato de terc-butila
[00654] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (S)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,56 g, 0,58 mmol) e ((4-(5,5-dimetil- 1,3,2-dioxaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)carbamato de terc- butila (0,52 g, 1,45 mmol): LCMS [M + 1]+: 1.083. Etapa B:(S)-N1 -(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)-1 H- benzo [ d ] imidazol-4-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00655] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-{[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}- 4-{[(2S)-3-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}-2-hidroxipropil]sulfamoil}-2- [(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}carbamato de terc-butila (0,5 g, 0,46 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: X bridge C18, 19 mm x 150 mm; Fase móvel: ACN em água (10 mmol/L de NH4HCO3), 5%-30% durante 7 min; Detector: UV 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 523; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8,23 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,81 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,30 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,91 (s, 2H), 3,82-3,76 (m, 1H), 3,18-3,13 (m, 1H), 3,06-3,00 (m, 1H), 2,92-2,89 (m, 1H), 2,73-2,68 (m, 1H). EXEMPLO 306 (S)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S)-(3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00656] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (S)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (2,00 g, 2,08 mmol) e ácido (2- aminobenzo[d]tiazol-4-il)borônico (1,01 g, 5,19 mmol): LCMS [M + 1]+: 986. Etapa B: (S)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00657] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 275, etapa B, usando (S)-3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,50 g, 1,52 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.049, 1.051 (1:1). Etapa C: (S )-(3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[ d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00658] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 275, etapa C, usando (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,98 g, 0,93 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 996. Etapa D: (S )-(3-(4-(2-(aminometil)benzo[ d] tiazol-4-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00659] A uma solução de (S)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,60 g, 0,60 mmol) em EA (4 mL) e MeOH (8 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% de Pd, 0,40 g, 0,60 mmol) à temperatura ambiente. Então 4 gotas de HCl conc. foram adicionadas. A mistura de reação foi desgaseificada com hidrogênio três vezes e agitada durante 16 horas a 25°C sob hidrogênio (cerca de 30 atm (3.040 kPa)). A mistura resultante foi filtrada e o bolo do filtro foi lavado com MeOH (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo para produzir (S)-(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila como um sólido, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.000. Etapa E: (S)-N1 -(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol- 4-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00660] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 274, etapa D, usando (S)-(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,58 g, 0,57 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições. Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 30% de B durante 10 min; Detector: 254 nm. As frações foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 540; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,94-7,78 (m, 2H), 7,02 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,54 (dd, J = 7,4 Hz, 1,2 Hz, 1H), 6,51-5,45 (brs, 5H), 4,04 (s, 2H), 3,84-3,81 (m, 1H), 3,18-3,12 (m, 1H), 3,08-3,02 (m, 1H), 2,98-2,92 (m, 1H), 2,75-2,71 (m, 1H).
[00661] Os EXEMPLOS 307 a 309, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 299, partindo-se de (S)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 310 (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(piperazin-2-ilmetil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-2-((4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila
[00662] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (S)-2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila (1,00 g, 0,92 mmol) e ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,41 g, 2,30 mmol): LCMS [M + 1]+: 1.094. Etapa B: (S )-4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N1 -(piperazin-2-ilmetil)- 3-(2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00663] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (S)-2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila (0,70 g, 0,64 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm 10 μm; Fase móvel A: água com 5 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 7 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 534; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,17 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,55 (brs, 3H), 6,90 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,48 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,15 (brs, 2H), 6,04 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,23-3,16 (m, 1H), 3,06-2,89 (m, 5H), 2,73 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 2,69-2,53 (m, 1H). EXEMPLO 311 (S)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-(piperazin-2-ilmetil)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (2 S )-2-((2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((( terc- butoxicarbonil)amino)metil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-3-(1-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4- dicarboxilato de di-terc-butila
[00664] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (2S)-2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil) piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila (0,50 g, 0,46 mmol) e ((4-(5,5- dimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila (0,66 g, 1,84 mmol): LCMS [M + 1 ]+: 1.208. Etapa B: (S)-4-(2-(aminometil)-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N 1-(piperazin-2- ilmetil)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00665] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (2S)-2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(2-(((terc-butoxicarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(1-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4- dicarboxilato de di-terc-butila (0,3 g, 0,25 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 25% de B durante 7 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 548; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,22 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,80 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 6,30 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,97 (s, 2H), 3,22-2,80 (m, 5H), 2,71-2,67 (m, 2H); 2,55-2,51 (m, 2H).
[00666] Os EXEMPLOS 312 e 313, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 310, partindo-se de (S)-2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4- dicarboxilato de di-terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 314 (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(piperazin-2-ilmetil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-2-((4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila
[00667] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila (1,00 g, 0,92 mmol) e ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,33 g, 1,84 mmol): LCMS [M + 1]+: 1.094. Etapa B: (R )-4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N1 -(piperazin-2-ilmetil)- 3-(2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00668] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di-terc-butila (0,60 g, 0,55 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 5 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 7 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 534; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,17 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,50 (brs, 3H), 6,90 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,48 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,15 (brs, 2H), 6,04 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,19-3,09 (m, 1H), 3,06-3,03 (m, 3H), 2,982,89 (m, 2H), 2,76-2,72 (m, 2H), 2,58-2,54 (m, 1H).
[00669] Os Exemplos 315 e 316, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 314, partindo-se de (R)-2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazina-1,4-dicarboxilato de di- terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 317 (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:(R )-(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil) carbamato de benzila
[00670] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propil)carbamato de benzila (0,70 g, 0,71 mmol) e 4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (0,39 g, 1,78 mmol): LCMS [M + 1]+: 948. Etapa B: (R)- N1 -(1 -aminopropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2 H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00671] Uma solução de (R)-(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)propil)carbamato de benzila (0,40 g, 0,42 mmol) em TFA (5 mL) foi agitada a 80°C durante 3 horas. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: X Bridge Prep C18, 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 20% de B durante 6 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 454; 1 H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,74 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,54 (dd, J = 6,4 Hz, 1,6 Hz, 1H), 3,92-3,87 (m, 1H), 3,15-3,11 (m, 1H), 3,05-3,00 (m, 1H), 1,13 (d, J = 6,8 Hz, 3H). EXEMPLO 318 (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2- il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)carbamato de benzila
[00672] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propil)carbamato de benzila (0,65 g, 0,66 mmol) e ácido (6-bromopiridin-2-il)borônico (0,13 g, 0,66 mmol): LCMS [M + 1]+: 1.011, 1.013. Etapa B:(R )-(2-(4-(6-aminopiridin-2-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil) carbamato de benzila
[00673] A uma solução de (R)-(2-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)carbamato de benzila (0,20 g, 0,15 mmol) em 1,4-dioxano (2 mL) foram adicionados 2,2,2-trifluoroacetamida (0,08 g, 0,74 mmol), iodeto de cobre (I) (14,11 mg, 0,07 mmol), Cs2CO3 (0,15 g, 0,45 mmol) e N1,N2-dimetiletano-1,2-diamina (13,07 mg, 0,15 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 948. Etapa C: (R)-N1 -(1 -aminopropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2 H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00674] Uma solução de (R)-(2-(4-(6-aminopiridin-2-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)propil)carbamato de benzila (0,12 g, 0,13 mmol) em TFA (3 mL) foi agitada a 80°C durante 2 horas. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 7 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 5,51 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 454; 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,26 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,19 (brs, 3H), 6,97 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,25 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,88 (brs, 2H), 5,49 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,61-3,51 (m, 1H), 2,85-2,83 (m, 2H), 1,05 (d, J = 6,4 Hz, 3H). EXEMPLO 319 N1-((3R,4S)-4-aminopirrolidin-3-il)-4-(2-aminoquinolin-8-il)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:(3 R ,4 S )-3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4-(2-((4-metoxibenzil)amino)quinolin-8- il)fenilsulfonamido)-4-(( terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00675] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (3R,4S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,45 g, 0,42 mmol) e ácido (2-((4-metoxibenzil)amino)quinolin-8-il)borônico (0,15 g, 0,50 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.211. Etapa B: N1 -((3 R ,4 S )-4-aminopirrolidin-3-il)-4-(2-aminoquinolin-8-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00676] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (3R,4S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(2-((4-metoxibenzil) amino)quinolin-8-il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoxicarbonil)amino) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,29 g, 0,24 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: X Bridge C18 OBD, 100 Â, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 7% de B a 30% de B durante 7 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 531; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 6,84-6,79 (m, 1H), 6,75-6,72 (m, 2H), 6,32 (brs, 2 H), 3,86-3,77 (m, 1H), 3,52-3,23 (m, 4H), 2,90-2,83 (m, 1H). EXEMPLO 320 N1-((3R,4S)-4-aminopirrolidin-3-il)-4-(1H-pirrolo[3,2-b]piridin-6-il-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:(3 R ,4 S )-3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4-(1 H-pirrolo[3,2-b ]piridin-6- il)fenilsulfonamido)-4-(( terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00677] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (3R,4S)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,80 g, 0,74 mmol) e ácido (1H-pirrolo[3,2-b] piridin-6- il)borônico (0,27 g, 1,64 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.065. Etapa B: N1 -((3R,4S)-4-aminopirrolidin-3-il)-4-(1 H-pirrolo[3,2-b]piridin-6- il)-3-( 2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00678] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 274, etapa D, (3R,4S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(1H-pirrolo[3,2-b]piridin-6- il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,49 g, 0,46 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado com as seguintes condições: Coluna: Coluna Sunfire Prep C18 OBD, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 6% de B a 22% de B durante 9 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 505; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,42 (s, 1H), 8,27 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,96-7,76 (m, 2H), 7,58 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,45-6,41 (m, 1H), 3,77-3,72 (m, 1H), 3,54-3,37 (m, 1H), 3,23-3,07 (m, 3H), 2,79-2,74 (m, 1H). EXEMPLO 321 N1-((3R,4S)-4-aminopirrolidin-3-il)-4-(2-aminotiazol-5-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (3 R ,4 S )-3-(4-(2-aminotiazol-5-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-(( terc- butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00679] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (3R,4S)-3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,80 g, 0,74 mmol) e (5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)tiazol-2-il)carbamato de terc-butila (0,36 g, 1,12 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.147. Etapa B: N1 -((3 R ,4 S )-4-aminopirrolidin-3-il)-4-(2-aminotiazol-5-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00680] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 274, etapa D, usando (3R,4S)-3-(4-(2-aminotiazol-5-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,56 g, 0,54 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep Amide OBD 19 mm x 150 mm, 5 μm, 13 nm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 90% de B a 60% de B durante 10 min; Detector: 254 nm. As frações foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 487; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 + DCl): δ 8,13 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,68 (s, 1H), 3,68-3,60 (m, 1H), 3,46-3,40 (m, 1H), 3,22-3,09 (m, 3H), 2,80-2,76 (m, 1H). EXEMPLO 322 4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-aminopirrolidin-3-il)- 3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (3 5,4 R )-3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00681] A uma solução de (3R,4S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4- (2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (9,50 g, 8,60 mmol) em 1,4-dioxano (100 mL) e água (25 mL) foram adicionados ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (3,79 g, 21,4 mmol), Na2CO3 (2,72 g, 25,7 mmol) e Pd(PPh3)4 (1,98 g, 1,70 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada a 80°C durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.114. Etapa B:4-(2-amino-1H-benzo [ d ] imidazol-4-il)-N1 -((3 S ,4 R )-4- aminopirrolidin-3-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00682] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 274, etapa D, (3S,4R)-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (5,80 g, 5,20 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna Atlantis Prep C18, Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3; Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 100 mL/min; Gradiente: 5% de B a 5% de B durante 5 min, 5% de B a 20% de B durante 15 min; Detector: 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 520; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,89 (dd, J = 7,7 Hz, 1,1 Hz, 1H), 6,46 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,13 (brs, 2H), 6,03 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 3,79 (q, J = 5,9 Hz, 1H), 3,52 (q, J = 6,2 Hz, 1H), 3,30-3,21 (m, 3H), 2,94-2,82 (m, 1H). EXEMPLO 323 4-(2-((S)-1-amino-2-hidroxietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4- aminopirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (3 R ,4 S )-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-(2',3'-diamino-3-(N, N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1'- bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00683] A uma solução de (3R,4S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4- (2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (2,0 g, 1,80 mmol) em 1,4-dioxano (12 mL) e água (3 mL) foram adicionados 3- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzeno-1,2-diamina (1,67 g, 7,21 mmol), Na2CO3 (0,57 g, 5,41 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,42 g, 0,36 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi irradiada com radiação de micro-ondas a 100°C durante 0,5 hora sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL), e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS ([M + 1]+: 1.089. Etapa B: (3S,4R)-3-(2'-amino-3'-((R)-3-(benziloxi)-2-((terc-butoxicarbonil) amino)propanamido)-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1 '-bifenil]-4-ilsulfonamido)-4- (((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00684] A uma solução agitada de (3R,4S)-3-(((benziloxi)carbonil) amino)-4-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (0,75 g, 0,69 mmol) em THF (7 mL) foram adicionados ácido (R)-3-(benziloxi)-2-((terc-butoxicarbonil)amino) propanoico (0,22 g, 0,76 mmol), HATU (0,52 g, 1,38 mmol), TEA (0,29 mL, 2,07 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 3 horas a 50°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.366. Etapa Ç^(^S,4R)-3z(4-(2-((S)-2-(benziloxi)-1-((terc-butoxiçarbonil)amino) etil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloxi)carbonil) amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00685] Uma solução de (3S,4R)-3-(2'-amino-3'-((R)-3-(benziloxi)-2- ((terc-butoxicarbonil)amino)propanamido)-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4- ilsulfonamido)-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,70 g, 0,51 mmol) em AcOH (8 mL) foi agitada a 60°C durante 30 minutos. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir (3S,4R)-3-(4-(2-((S)-2-(benziloxi)-1-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloxi)carbonil) amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila como um sólido, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.348. Etapa D: (3 R ,4 S )-3-amino-4-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(( S )1-(( terc-butoxicarbonil)amino)-2-hidroxietil)-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-3-(2- (4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00686] A uma solução de (3S,4R)-3-(4-(2-((S)-2-(benziloxi)-1-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloxi)carbonil)amino)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,55 g, 0,48 mmol) em MeOH (7 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% de Pd, 0,8 g, 1,05 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada hidrogênio três vezes. A mistura foi agitada durante três dias sob hidrogênio à temperatura ambiente. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.124. Etapa E: 4-(2-(( S )-1-amino-2-hidroxietil)-1H-benzo [ d] imidazol-4-il)-N1 - ((3 S ,4 R )-4-aminopirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida
[00687] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (3R,4S)-3-amino-4-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-1-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,30 g, 0,27 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Shield RP18 OBD 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 1% de B a 23% de B durante 16 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 14,0 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 4-(2-((S)-1-amino-2- hidroxietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-aminopirrolidin-3-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida como um sólido: LCMS [M + 1]+: 564; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,79 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,50 (m, 1H), 7,16 (m, 1H), 4,61 (m, 1H), 4,22 (m, 3H), 3,89 (m, 1H), 3,80 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,35 (m, 2H).
[00688] Os EXEMPLOS 324 a 328, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 323, partindo-se de (3R,4S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 329 4-(2-amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (2-(4-(2-amino-7-metil-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00689] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,9 g, 0,96 mmol) em 1,4-dioxano (6 mL) e água (2 mL) foram adicionados ácido (2-amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,33 g, 1,73 mmol), Pd(PPh3)4 (0,17 g, 0,15 mmol), Na2CO3 (0,31 g, 2,89 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi irradiada com radiação de micro-ondas a 100°C durante 50 minutos. A mistura resultante foi diluída com água (30 mL), e então extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x30 mL) e salmoura (3x30 mL), secadas com Na2SO4 e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-(4-(2-amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila como um sólido: [M + 1]+: 953. Etapa B : 4-(2-amino-7-metil-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-N1 -(2-aminoetil)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00690] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (2-(4-(2-amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol- 4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,50 g, 0,53 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm: As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 493; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8,17 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,03 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,20 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,92 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,19 (s, 3H). EXEMPLO 330 (S)-4-(2-(1-amino-2-hidroxietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)- 3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-(1 -((2-amino-3'-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfoml)-[1,r- bifenil]-3-il)amino)-3-hidroxi-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila
[00691] A uma solução agitada de 2',3'-diamino-N,N-bis(4- metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil) etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida (2,0 g, 2,34 mmol) em DCM (20 mL) foram adicionados ácido (R)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3- hidroxipropanoico (0,53 g, 2,57 mmol), HATU (1,78 g, 4,67 mmol), TEA (0,98 mL, 7,01 mmol). A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura foi agitada durante 5 horas à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (200 mL), e então extraída com DCM (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.043. Etapa B:(S)-(1 -(4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1 H- benzo[ d ]imidazol-2-il)-2-hidroxietil)carbamato de terc-butila
[00692] Uma solução de (R)-(1-((2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-3-hidroxi-1-oxopropan-2-il)carbamato de terc-butila (2,0 g, 1,92 mmol) em AcOH foi agitada a 60°C durante 30 min. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.025. Etapa C: ácido 2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(( S )-1-(( terc- butoxicarbonil)amino)-2-hidroxietil)-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico
[00693] A uma solução agitada de (S)-(1-(4-(3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-hidroxietil) carbamato de terc-butila (1,50 g, 1,50 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado TBAF (1,90 g, 6 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi diluída com EA (100 mL), lavada com solução aquosa saturada de KHSO4 (5 x 100 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 925. Etapa D: N-[(1S)-1-[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc- butoxi)carbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2 E ,4 E )-11-metoxi-2,4,5,6- tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1 H-1,3- benzodiazol-2-il]-2-hidroxietil]carbamato de terc-butil
[00694] A uma solução agitada de ácido 2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-1-((terc-butoxicarbonil)amino)-2- hidroxietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (0,50 g, 0,54 mmol) foram adicionados (2- aminoetil)carbamato de terc-butila (0,17 g, 1,10 mmol), TEA (0,22 mL, 1,60 mmol) a 0°C durante 10 minutos. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. Então NCS (0,15 g, 1,10 mmol) foi adicionada à mistura. A mistura foi agitada a 0°C durante 1,5 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido com EA (50 mL), a solução foi lavada com salmoura (3x50 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 75% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.083. Etapa E: (S)-4-(2-(1-amino-2-hidroxietil)-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N 1-(2- aminoetil)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00695] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-[(1S)-1-[4-(3-{bis[(4- metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil) sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca- 1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2- hidroxietil]carbamato de terc-butila (0,50 g, 0,46 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 10 min; Detector: 254 nm e 220 nm;. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 523; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,698,67 (m, 1H), 8,15-8,10 (m, 1H), 7,83-7,77 (m, 1H), 7,51-7,44 (m, 1H), 7,337,14 (m, 1H), 4,90-4,81 (m, 1H), 4,21-4,17 (m, 2H), 3,46 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,20 (t, J = 6,0 Hz, 2H). EXEMPLO 331 (R)-4-(2-(1-amino-2-hidroxietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)- 3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: N-[(1S)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4- [(2-{[ (terc-butoxi)carbonil]amino }etil)sulfamoil]-2-[(2 E ,4 E )-11-metoxi- 2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8( 12),9-pentaen-3- il]fenil)fenil]carbamoil}-2-(benziloxi)etil]carbamato de terc-butila
[00696] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 274, etapa D, usando (2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]- 4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila e ácido (S)-3-(benziloxi)-2- ((terc-butoxicarbonil)amino)propanoico para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 1.191.
[00697] Etapa B: N-[(1R)-2-(benziloxi)-1-[4-(3-{bis[(4-metoxifenil) metil] sulfamoil }-4-[(2-{[( terc-butoxi)carbonil] amino} etil)sulfamoil] -2 [(2 E ,4 E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il1etil1carbamato de terc-butila
[00698] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 323, etapa C, usando N-[(1S)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoxifenil) metil1sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil1amino}etil)sulfamoil1-2- [(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il1fenil)fenil1carbamoil}-2-(benziloxi)etil1carbamato de terc-butila para produzir o composto do título: LCMS [M + 11+: 1.173. Etapa C: N-[(1R)-1-[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil1sulfamoil}-4-[(2-{[(terc- butoxi )carbonil]amino}etil)sulfamoil1-2-[(2 E ,4 E)-11 -metoxi-2,4,5,6- tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il1fenil)-1 H-1,3- benzodiazol-2-il1-2-hidroxietil1carbamato de terc-butila
[00699] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 323, etapa D, usando N-[(1R)-2-(benziloxi)-1-[4-(3-{bis[(4- metoxifenil)metil1sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil1amino}etil) sulfamoil1-2-[(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca- 1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il1fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il1etil1carbamato de terc-butila para produzir o composto do título: LCMS [M + 11+: 1.083. Etapa D: (R)-4-(2-(1-amino-2-hidroxietil)-1 H-benzo[dimidazol-4-il)-N 1-(2- aminoetil)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00700] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-[(1R)-1-[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil1 sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil1amino}etil)sulfamoil1-2-[(2E,4E)- 11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il1fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il1-2-hidroxietil1carbamato de terc-butila para produzir o composto do título: LCMS [M + 11+: 523; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,69 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,90-4,81 (m, 1H), 4,21-4,18 (m, 2H), 3,46 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,19 (t, J = 5,6 Hz, 2H). EXEMPLO 332 (R)-2-amino-N-(2-amino-3-hidroxipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'- sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida Etapa A: 2-amino-3'-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-( N-(2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila
[00701] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,85 g, 0,91 mmol) em 1,4-dioxano (6 mL) e água (1,5 mL) foram adicionados Pd(PPh3)4 (0,21 g, 0,18 mmol), 2-amino-3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metila (0,76 g, 2,73 mmol, preparado seguindo os detalhes descritos em Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2012, 22: 3327-3331) e Na2CO3 (0,29 g, 2,73 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura resultante foi aquecida para 80°C e agitada durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 2-amino-3'-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)- 2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 957. Etapa B: ácido 2-amino-3'-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-( N-(2- ((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-[1,1 '-bifenil]-3-carboxílico
[00702] A uma solução agitada de 2-amino-3'-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)- 2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila (0,6 g, 0,63 mmol) em THF (3 mL) e MeOH (3 mL) foi adicionado NaOH (0,40 g, 10 mmol) à temp. ambiente A solução de reação foi agitada durante 16 horas. O valor do pH da solução foi ajustado para 4 com HCl (20%). A mistura foi filtrada. O filtrado foi lavado com água para produzir ácido 2- amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil]-3-carboxílico como um sólido: LCMS [M + 1]+: 943. Etapa C: N-[(2R)-1-{[2-ammo-3-(3-{bis[(4-metoxifeml)metirisulfamoil}-4- [(2-{[ (terc-butoxi)carbonil]amino }etil)sulfamoil]-2-[(2 E ,4 E )-11-metoxi- 2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8( 12),9-pentaen-3- il]fenil)fenil]formamido}-3-hidroxipropan-2-il]carbamato de benzila
[00703] A uma solução de ácido 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxílico (0,48 g, 0,51 mmol) em DMF (5 mL) foram adicionados (R)-(1-amino-3-hidroxipropan-2- il)carbamato de benzila (0,23 g, 1,02 mmol), HATU (0,39 g, 1,02 mmol) e DIEA (0,13 g, 1,02 mmol) com agitação a 0°C. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 3 horas à temp. ambiente. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 67% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.149. Etapa D: (R )-2-amino- N-(2-amino-3-hidroxipropil)-4'-(N-(2-aminoetil) sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2 H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida
[00704] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-[(2R)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoxifenil) metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil)sulfamoil]-2- [(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]fenil)fenil] formamido}-3-hidroxipropan-2-il]carbamato de benzila (0,29 g, 0,25 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; 0°C Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 3% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 5,6 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 555; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,63 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,73 (dd, J = 7,6 Hz, 1,6 Hz, 1H), 7,08-7,00 (m, 2H), 3,82 (dd, J = 11,6 Hz, 4,0 Hz, 1H), 3,70 (dd, J = 11,6 Hz, 6,0 Hz, 1H), 3,66-3,63 (m, 2H), 3,50-3,48 (m, 1H), 3,43-3,39 (m, 2H), 3,18 (t, J = 6,0 Hz, 2H). EXEMPLO 333 (S)-2-amino-N-(2-amino-3-hidroxipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'- sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida Etapa A: N-[(2S)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4- [(2-{[ (terc-butoxi)carbonil]amino }etil)sulfamoil]-2- {2-[(4-metoxifenil)metil1- 2 H-1,2,3,4-tetrazol-5-il}fenil)fenil]formamido}-3-hidroxipropan-2- illcarbamato de terc-butila
[00705] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 332, etapa C, usando (S)-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc-butila para produzir o composto do título: LCMS [M + 11+: 1.115. Etapa B: (S )-2-amino- N-(2-amino-3-hidroxipropil)-4'-(N-(2-aminoetil) sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2 H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida
[00706] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-[(2S)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoxifenil) metil1sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil1amino}etil)sulfamoil1-2-{2- [(4-metoxifenil)metil1-2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il}fenil)fenil1formamido}-3- hidroxipropan-2-il1carbamato de terc-butila para produzir o composto do título: LCMS [M + 11+: 555; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,84-7,82 (m, 1H), 7,14-7,13 (m, 2H), 3,85-3,81 (m, 1H), 3,74-3,66 (m, 3H), 3,53-3,40 (m, 3H), 3,19-3,18 (m, 2H). EXEMPLO 334 N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5- il)-[1,1'-bifenil1-3-carboxamida Etapa A:3'-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-( N-(2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila
[00707] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,6 g, 0,64 mmol) em 1, 4-dioxano (20 mL) e água (7 mL) foram adicionados Pd(PPh3)4 (0,15 g, 0,13 mmol), ácido (3- (metoxicarbonil)fenil)borônico (0,35 g, 1,93 mmol, preparado seguindo os detalhes descritos em Organic Letters, 2006, 8: 305-307) e Na2CO3 (0,20 g, 1,93 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (200 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 942. Etapa B: ácido 3'-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-( N-(2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,1 '-bifenil]-3-carboxílico
[00708] A uma solução agitada de 3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila (0,5 g, 0,53 mmol) em THF (5 mL) e MeOH (5 mL) foi adicionada solução aquosa de LiOH (1 M) (5 mL, 5,00 mmol) à temperatura ambiente. A solução foi agitada durante 16 horas à temperatura ambiente. O valor do pH da solução de reação foi ajustado para 4 com solução aquosa de HCl (20%). A mistura resultante foi filtrada. O bolo do filtro foi lavado com água e secado em um forno para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 928. Etapa C: N-[2-({[(2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-{3-[(2-{[( terc- butoxi)carbonil]amino}etil)carbamoil]fenil}-3-[(2 E ,4 E)-11-metoxi-2,4,5,6- tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1( 11 ),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1 {3}- oxidano]sulfinil}amino)etil]carbamato de terc-butila
[00709] A uma solução agitada de ácido 3'-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)- 2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxílico (0,2 g, 0,22 mmol), HATU (0,12 g, 0,32 mmol) e (2-aminoetil)carbamato de terc- butila (0,14 g, 0,86 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionada DIEA (0,06 mL, 0,32 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A solução foi agitada a 0°C durante 4 horas sob nitrogênio. A solução resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 45% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.070. Etapa D: N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H- tetrazol-5-il)-[1,1 '-bifenil]-3-carboxamida
[00710] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-[2-({[(2-{bis[(4-metoxifenil)metil] sulfamoil}-4-{3-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil)carbamoil]fenil}-3- [(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]fenil)-l{3}- oxidano]sulfinil}amino)etil]carbamato de terc-butila (0,2 g, 0,20 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep, 100 Â, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (0,05% de TFA ), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 8 min; Detector: 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5- il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida como um sólido: LCMS [M + 1]+: 510; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,58 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,84-7,82 (m, 1H), 7,69-7,68 (m, 1H), 7,41-7,37 (m, 1H), 7,21-7,19 (m, 1H), 3,67-3,64 (m, 2H), 3,67-3,64 (m, 2H), 3,18-3,12 (m, 4H). EXEMPLO 335 (R)-N1-(2-aminoetil)-4-(2-(1,2-diaminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (2-(2',3'-diamino-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1 '-bifeml]-4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00711] A uma solução de 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzeno-1,2-diamina (2,51 g, 10,71 mmol, preparado conforme descrito em WO2006/005915 ou comercialmente disponível) em 1,4-dioxano (25 mL) e água (12 mL) foram adicionados Na2CO3 (1,70 g, 16,06 mmol), (2-(2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (5,00 g, 5,35 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,62 g, 0,54 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (200 mL) e extraída com EA (3x250 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x500 mL) e salmoura (3x500 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 65% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+ : 914. Etapa B: N-{2-[(4-{2-amino-3-[(2R)-2,3-bis({[(terc-butoxi)carbonil]amino}) propanamido]fenil} -2- {bis [ (4-metoxifenil)metil] sulfamoil }-3-[ (2 E ,4 E) -11- metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il]benzeno)sulfonamido]etil}carbamato de terc-butila
[00712] A uma solução de (2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]- 4-il-sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (1,10 g, 1,20 mmol) em THF (15 mL) foram adicionados ácido (R)-2,3-bis((terc-butoxicarbonil)amino) propanoico (0,55 g, 1,8 mmol), TEA (0,5 mL, 3,60 mmol) e HATU (1,60 g, 4,21 mmol) a 0°C durante 10 minutos. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e foi agitada a 0°C durante 1,5 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (100 mL), e lavado com água (3x40 mL) e salmoura (40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.200. Etapa C: N-[(2R)-2-[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc- butoxi)carbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2 E ,4 E )-11-metoxi-2,4,5,6- tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1 H-1,3- benzodiazol-2-il]-2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil]carbamato de terc- butila
[00713] Uma solução de N-{2-[(4-{2-amino-3-[(2R)-2,3-bis({[(terc- butoxi)carbonil]amino})propanamido]fenil}-2-{bis[(4-metoxifenil)metil] sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca- 1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzeno)sulfonamido]etil}carbamato de terc- butila (1,10 g, 0,92 mmol) em AcOH (10 mL) foi agitada durante 0,5 hora a 60°C. O solvente foi removido sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.182. Etapa D: (R)- N1 -(2-aminoetil)-4-(2-( 1,2-diaminoetil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4- il)-3-( 2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00714] Uma solução de N-[(2R)-2-[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil] sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)- 11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil] carbamato de terc-butila (1,00 g, 0,85 mmol) em TFA (10 mL) foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi coevaporado com anisol (3x8 mL) sob vácuo e usado na etapa seguinte sem purificação adicional. O produto bruto foi adicionada a TFA (10 mL). A solução foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo e usada na etapa seguinte sem purificação adicional. O produto bruto foi dissolvido em THF (10 mL) e água (10 mL). À mistura foi adicionado NaOH (0,40 g, 10 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas à temp. ambiente A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: X Bridge BEH C18 OBD Prep Coluna, 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 20% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 522; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,58 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,62-7,55 (m, 1H), 7,33-7,24 (m, 1H), 7,04 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 4,86-4,81 (m, 1H), 3,69-3,64 (m, 1H), 3,54-3,47 (m, 1H), 3,43-3,40 (m, 2H), 3,18-3,12 (t, J = 5,6 Hz, 2H). EXEMPLO 336 (S)-N1-(2-aminoetil)-4-(2-(1,2-diaminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: N-{2-[(4-{ 2-amino-3-[(2 S )-2,3-bis({[( terc-butoxi)carbonil] amino} )propanamido]fenil }-2-{bis[ (4-metoxifenil)metil] sulfamoil }-3- [(2 E ,4 E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]benzeno)sulfonamido]etil}carbamato de terc-butila
[00715] A uma solução de (2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil) sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'- bifenil1-4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (1,00 g, 1,10 mmol) em THF (15 mL) foram adicionados ácido (S)-2,3-bis((terc-butoxicarbonil) amino)propanoico (0,50 g, 1,60 mmol), TEA (0,45 mL, 3,30 mmol) e HATU (1,45 g, 3,80 mmol) a 0°C durante 10 minutos. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e foi agitada a 0°C durante 1,5 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi diluído com EA (100 mL). A fase orgânica foi lavada com água (3x60 mL) e salmoura (3x40 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.200. Etapa B: N-[(1S)-1-[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc- butoxi)carbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2 E ,4 E )-11-metoxi-2,4,5,6- tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1 H-1,3- benzodiazol-2-il]-2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil]carbamato de terc- butila
[00716] Uma solução de N-{2-[(4-{2-amino-3-[(2S)-2,3-bis({[(terc- butoxi)carbonil]amino})propanamido]fenil}-2-{bis[(4-metoxifenil)metil] sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca- 1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzeno)sulfonamido]etil}carbamato de terc- butila (1,00 g, 0,83 mmol) em AcOH (10 mL) foi agitada durante 0,5 hora a 60°C. O solvente foi removido sob vácuo para produzir o composto do título bruto, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.182. Etapa C: (S)- N1 -(2-aminoetil)-4-(2-( 1,2-diaminoetil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4- il)-3-( 2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00717] Uma solução de N-[(1S)-1-[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil] sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)- 11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil] carbamato de terc-butila (0,90 g, 0,76 mmol) em TFA (10 mL) foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi coevaporado com anisol (3x8 mL) sob vácuo e usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. Ao produto bruto foi adicionado TFA (10 mL). A solução foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo e usada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. O produto bruto foi dissolvido em THF (10 mL) e água (10 mL). À mistura foi adicionado NaOH (400 mg, 10 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge BEH C18 OBD Prep, 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 20% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1] +: 522; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,57 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,28 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 4,72-4,70 (m, 1H), 3,64-3,59 (m, 1H), 3,42-3,40 (m, 2H), 3,20-3,18 (m, 3H). EXEMPLO 337 N1-(2-aminoetil)-4-(2-(2-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (3-((2-amino-3'-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfoml)-[1,r-bifeml]- 3-il)amino)-3-oxopropil)carbamato de terc-butila
[00718] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 331, etapa A, usando ácido 3-((terc-butoxicarbonil)amino) propanoico para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.027. Etapa B: (2-(4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5 -il)-4-(( 2-(trimetilsilil)etil) sulfoniDfenil)-1H-benzo [ d] imidazol- 2-il)etil)carbamato de terc-butila
[00719] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 331, etapa B, usando (3-((2-amino-3'-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'- bifenil]-3-il)amino)-3-oxopropil)carbamato de terc-butila para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 1.009. Etapa C: ácido 2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5 -il)benzenossulfínico
[00720] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 331, etapa C, usando (2-(4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)- 1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)carbamato de terc-butila para obter o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 909. Etapa D: N-{2-[~4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-[~(2-{[~( terc- butoxi)carbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2 E ,4 E )-11-metoxi-2,4,5,6- tetraazabicicloF6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1 H-1,3- benzodiazol-2-il]etil}carbamato de terc-butila
[00721] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 331, etapa D, usando ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (2-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 1.067. Etapa E: N1 -(2-aminoetil)-4-(2-(2-aminoetil)-1 H-benzo[d 1imidazol-4-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00722] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usandoN-{2-[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil1 sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil1amino}etil)sulfamoil1-2-[(2E,4E)- 11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il1fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il1etil}carbamato de terc-butila para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 11+: 507; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 3,67-3,62 (m, 2H), 3,58-3,53 (m, 2H), 3,47-3,43 (m, 2H), 3,20-3,16 (m, 2H). EXEMPLO 338 5'-amino-N4-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'- bifenil1-3,4-dissulfonamida Etapa A: (2-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-5'-oxo-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil) carbamato de terc-butila
[00723] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (3,00 g, 3,20 mmol) em 1,4-dioxano (35 mL) e água (8 mL) foram adicionados ácido (3-oxociclo-hex-1-en-1-il)borônico (1,80 g, 12,80 mmol), Na2CO3 (1,02 g, 9,60 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,74 g, 0,64 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 24 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)-5'-oxo-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 902. Etapa B:(2-(3 -(N, N-bis( 4-metoxibenzil)sulfamoil)-5'-((S )-1,1- dimetiletilsulfinamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'- tetra-hidro-[1,1'- bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00724] A uma solução de (2-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-oxo-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'- bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (2,50 g, 2,80 mmol) em THF (20 mL) foram adicionados (S)-2-metilpropano-2-sulfinamida (1,68 g, 12,80 mmol), Ti(OiPr)4 (40 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 2 horas. Então a mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente. NaBH4 (0,42 g, 11,10 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 30% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir (2-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-5'-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)- 2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4- ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila como um óleo: LCMS [M + 1]+: 1.007. Etapa C: 5'-amino-N4-(2-aminoetil)-2-(2 H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro- [1,1 '-bifenil]-3,4-dissulfonamida
[00725] A uma solução agitada de (2-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-5'-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil) carbamato de terc-butila (1,15 g, 1,31 mmol) em 1,4-dioxano (5 mL) foi adicionada uma solução saturada de HCl em dioxano (20 mL). A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi coevaporado com anisol (3x3 mL) sob vácuo e usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional. Ao produto bruto foi adicionado TFA (10 mL). A solução foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 5% de B a 35% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 6,51 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir 5'-amino- N4-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-3,4- dissulfonamida como um sólido: LCMS [M + 1]+: 443; 1H RMN (400 MHz, D2O + DCl): δ 6,42 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,85 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 3,48 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 1,77 (s, 1H), 1,37 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 1,21 (t, J = 5,6 Hz, 2H), - 0,38- -0,14 (m, 6H). EXEMPLOS 339 e 340 (R)-5'-amino-N4-((R)-pirrolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro- [1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida e (S)-5'-amino-N4-((R)-pirrolidin-3-il)-2- (2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida Etapa A: (R )-3-(3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)-5'-oxo-2',3',4',5'-tetra-hidro-n,1'-bifenil]-4- ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00726] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 338, etapa A, usando (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila (1,00 g, 1,04 mmol) para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 928. Etapa B:(3 R )-3-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-5'-(( S )-1,1- dimetiletilsulfinamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'- tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc- butila
[00727] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 338, etapa B, usando (R)-3-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-oxo-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'- bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,60 g, 0,65 mmol) para produzir o composto do título como uma espuma: LCMS [M + 1]+: 1.033. Etapa C: (R)-5'-amino-N4-((R)-pirrolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'- tetra-hidro-[ 1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida e (S )-5'-amino- N4-((R )-pirrolidin- 3-il)-2-(2 H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-3,4- dissulfonamida
[00728] Os compostos do título foram preparados conforme descrito para o Exemplo 338, etapa C, usando (3R)-3-(3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-5'-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-4- ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,50 g, 0,50 mmol) para produzir os isômeros brutos. Os isômeros foram separados por HPLC- prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 2% de B a 18% de B durante 12 min; 254 nm/220 nm; Tempo de retenção 6,50 min e 6,80 min; Temperatura: 25°C. O enantiômero de eluição mais rápida (R)-5'-amino-N4-((R)-pirrolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro- [1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida foi obtido: LCMS [M + 1]+: 469; 1H RMN (400 MHz, D2O + DCl): δ 5,91 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 2,93 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 1,65-1,60 (m, 1H), 1,20 (brs, 1H), 0,96-0,72 (m, 4H), -0,34- -0,39 (m, 1H), -0,41- -0,43 (m, 4H), -0,80- -1,20 (m, 3H). O enantiômero de eluição mais lenta de (S)-5'-amino-N4-((R)-pirrolidin-3-il)-2- (2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida foi obtido: LCMS [M + 1]+: 469; 1H RMN (400 MHz, D2O + DCl): δ 5,91 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 2,93 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 1,67-1,61 (m, 1H), 1,23 (brs, 1H), 0,95-0,91 (m, 2H), 0,90-0,72 (m, 2H), -0,34- -0,41 (m, 1H), -0,49- -0,59 (m, 2H), -0,61- -1,30 (m, 5H). EXEMPLO 341 4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-N-(3-aminopropil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol- 5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida Etapa A: N-{2-[(2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-{ 3-[(3-{[( terc- butoxi)carbonil]amino }propil)carbamoil]fenil}-3-[(2 E ,4 E )-11 -metoxi-2,4,5,6- tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11 ),2,4,8( 12),9-pentaen-3- il]benzeno)sulfonamido]etil}carbamato de terc-butila
[00729] A uma solução agitada de ácido 3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxílico (0,20 g, 0,22 mmol) em DMF (2 mL) foram adicionados (3-aminopropil)carbamato de terc-butila (0,15 g, 0,86 mmol), HATU (0,12 g, 0,32 mmol) e DIEA (0,06 mL, 0,32 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura foi agitada durante 4 horas à temp. ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.084. Etapa B: 4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-N-(3-aminopropil)-3'-sulfamoil-2'- (2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1 '-bifenil]-3-carboxamida
[00730] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-{2-[(2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}- 4-{3-[(3-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}propil)carbamoil]fenil}-3-[(2E,4E)- 11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il]benzeno)sulfonamido]etil}carbamato de terc-butila (0,15 g, 0,14 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Select CSH Prep C18 OBD, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 0,05% de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 35% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 6,78 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 524. 1H RMN (300 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,60 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,81-7,78 (m, 1H), 7,60-7,58 (m, 1H), 7,43-7,38 (m, 1H), 7,26-7,23 (m, 1H), 3,54-3,47 (m, 2H), 3,51-3,38 (m, 2H), 3,20-3,16 (m, 2H), 3,08-2,98 (m, 2H), 2,09-1,93 (m, 2H). EXEMPLO 342 4-((3S)-3-aminociclo-hexil)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A: 4-((3 S )-3-aminociclo-hexil)- N1 -(2-aminoetil)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00731] A uma solução agitada de 5'-amino-N4-(2-aminoetil)-2-(2H- tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetra-hidro-[1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida (0,10 g, 0,22 mmol) em HCl conc. (1 mL) e MeOH (6 mL) foi adicionado PtO2 (30 mg, 0,13 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com hidrogênio três vezes e agitada durante 18 horas a 45°C sob hidrogênio (20 atm (2.027 kPa))). A solução resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 5% de B a 35% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M - 1]-: 443; 1H RMN (400 MHz, D2O + DCl): δ 6,41 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,03 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 1,67 (s, 1H), 1,32 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 1,17 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 0,10 (s, 1H), -0,08 (s, 2H), -0,25 (s, 2H), -0,37 (d, J = 17,0 Hz, 3H), -0,60 (d, J = 12,8 Hz, 1H). EXEMPLO 343 N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: 2',3'-Diamino-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfoml)-[1,1 '-bifenil]-3-sulfonamida
[00732] A uma solução agitada de 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzeno-1,2-diamina (2,7 g, 11,4 mmol) em dioxano (30 mL) e água (10 mL) foram adicionados Na2CO3 (1,8 g, 17,13 mmol), 3-iodo- N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (5,00 g, 5,71 mmol) e Pd(PPh3)4 (1,98 g, 1,71 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (200 mL), e então extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 856. Etapa B: (2-((2-amino-3'-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]- 3-il)amino)-2-oxoetil)carbamato de terc-butila
[00733] A uma solução de 2',3'-diamino-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'- bifenil]-3-sulfonamida (2,00 g, 2,34 mmol) em DMF (10 mL) foram adicionados ácido 2-((terc-butoxicarbonil)amino)acético (0,82 g, 4,67 mmol), HATU (1,33 g, 3,50 mmol) e DIEA (1,83 mL, 10,50 mmol) com agitação a 0°C. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL), e então extraída com EA (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x20 mL) e salmoura (3x20 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 75% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.013. Etapa C: ((4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H- tetrazol-5 -il)-4-(( 2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)fenil)-1H-benzo [ d] imidazol- 2-il)metil)carbamato de terc-butila
[00734] Ao AcOH (20 mL) foi adicionado (2-((2-amino-3'-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-2-oxoetil)carbamato de terc-butila (2,4 g, 2,37 mmol) com agitação à temp. ambiente. A mistura de reação foi agitada a 60°C durante 30 minutos. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 995. Etapa D: ácido 2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((( terc- butoxicarbonil)amino)metil)-1 H-benzo[ d ]imidazol-4-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico
[00735] A uma solução de ((4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)- 1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila (1,20 g, 1,21 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado TBAF (solução1 M em THF) (4,84 mL, 4,84 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 1 hora. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com KHSO4 (solução saturada, 5 x 30 mL) e salmoura (3x20 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 895. Etapa E: N-{[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi) carbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2 E ,4 E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo [6.3.1]dodeca-1(11 ),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1 H-1,3-benzodiazol-2- il]metil} carbamato de terc-butila
[00736] A uma solução de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(2-(((terc-butoxicarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (0,5 g, 0,56 mmol) em THF (20 mL) foram adicionados NCS (0,12 g, 1,12 mmol), TEA (0,24 mL, 1,68 mmol) e (2-aminoetil)carbamato de terc-butila (90 mg, 0,56 mmol) com agitação a 0°C. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada à temp. ambiente durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 90% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.053. Etapa F: N1 -(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)-1 H-benzo[ d 1imidazol-4-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00737] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-{[4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil1sulfamoil}- 4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil1amino}etil)sulfamoil1-2-[(2E,4E)-11-metoxi- 2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il1fenil)-1H- 1,3-benzodiazol-2-il1metil}carbamato de terc-butila (0,37 g, 0,35 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep, 100 Â, 5 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (0,05% de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 8 min; Detector: 254 nm; Tempo de retenção: 6,82 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 11+: 493; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,84-7,81 (m, 1H), 7,50-7,48 (m, 1H), 7,18-7,16 (m, 1H), 4,75 (s, 2H), 3,463,44 (m, 2H), 3,30-3,19 (m, 2H). EXEMPLO 344 4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-N-((3R,4R)-4-hidroxipirrolidin-3-il)-3'- sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil1-3-carboxamida Etapa A: (3R,4R)-3-(3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil]-3-ilcarboxamido)-4-hidroxipirrolidina-1-carboxilato de terc- butila
[00738] composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 341, etapa A, usando (3R,4R)-3-amino-4-hidroxipirrolidina-1- carboxilato de terc-butila para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 1.112. Etapa B: 4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-N-((3R,4R)-4-hidroxipirrolidin-3-il)- 3'-sulfamoil-2'-(2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1'-bifenil]-3-carboxamida
[00739] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (3R,4R)- 3-(3'-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)- 2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-ilcarboxamido)-4- hidroxipirrolidina-1-carboxilato de terc-butila para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 552; 1H RMN (400 MHz, CD3OD+ DCl): δ 8,58 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,33 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,484,32 (m, 2H), 3,78-3,50 (m, 3H), 3,40-3,37 (m, 2H), 3,33-3,31 (s, 1H), 3,163,13 (m, 2H). EXEMPLO 345 N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (2-(4-(2-aminobenzo[ d] tiazol-4-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil) carbamato de terc-butila
[00740] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (3,0 g, 3,21 mmol) em 1,4-dioxano (30 mL) e água (6 mL) foram adicionados ácido (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)borônico (1,56 g, 8,03 mmol), Na2CO3 (1,02 g, 9,64 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,74 g, 0,64 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (70 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 956. Etapa B: (2-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[ d ]tiazol- 4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00741] A uma solução de (2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (2,0 g, 2,09 mmol) e Cu2Br (0,56 g, 2,51 mmol) em ACN (20 mL) foi adicionado nitrito de terc-butila (0,35 g, 3,35 mmol) por gotejamento a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.019, 1.021 (1:1). Etapa C: (2-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[ d ]tiazol- 4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00742] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (1,20 g, 1,18 mmol) em DMSO (8 mL) foi adicionado cianocobre (0,32 g, 3,53 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 100°C durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com solução aquosa de Na2CO3 (100 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 966. Etapa D:(2-(4-(2-( aminometil)benzo [ d ] tiazol-4-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00743] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (2-cianobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,55 g, 0,57 mmol) em EA (5 mL) e HCl conc. (2 gotas) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% em peso, 0,11 g, 0,16 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com hidrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 16 h sob hidrogênio (20 atm (2.027 kPa)). A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 970. Etapa E: N1 -(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)benzo[ d] tiazol-4-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00744] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,20 g, 0,21 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna X Bridge Prep C18 OBD, 19 mm x 150 mm, 5 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 510; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ 8,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,88 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 7,05 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,06 (s, 2H), 3,26 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,98 (t, J = 6,0 Hz, 2H). EXEMPLO 346 (R)-N-(3-amino-2-hidroxipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil- 2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida Etapa A: N-{2-[(2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-(3-{[(2 S )-3-{[( terc - butoxi)carbonil]amino}-2-hidroxipropil]carbamoil}fenil)-3-[(4 E) -11 -metoxi- 2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8( 12),9-pentaen-3-il]benzeno) sulfonamido]etil}carbamato de terc-butila
[00745] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 341, etapa A, usando (S)-(3-amino-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 1.100. Etapa B: (R)-N-(3-amino-2-hidroxipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'- sulfamoil-2'-(2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1'-bifenil]-3-carboxamida
[00746] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 341, etapa B, usando N-{2-[(2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}- 4-(3-{[(2S)-3-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}-2- hidroxipropil]carbamoil}fenil)-3-[(4E)-11-metoxi-2,4,5,6- tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il]benzeno)sulfonamido]etil}carbamato de terc-butila para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 540; 1H RMN (300 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,61 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,83-7,80 (m, 1H), 7,64-7,63 (m, 1H), 7,43-7,37 (m, 1H), 7,28-7,24 (m, 1H), 4,05-3,99 (m, 1H), 3,54-3,52 (m, 2H), 3,49-3,41 (m, 2H), 3,25-3,08 (m, 3H), 2,91-2,85 (m, 1H). EXEMPLO 347 (S)-N-(3-amino-2-hidroxipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil- 2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida Etapa A: N-{2-[(2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-(3-{[(2 S )-3-{[( terc- butoxi)carbonil]amino}-2-hidroxipropil]carbamoil}fenil)-3-[(2 E ,4 E)-11 - metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il]benzeno)sulfonamido]etil}carbamato de terc-butila
[00747] A uma solução de ácido 3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxílico (0,25 g, 0,26 mmol) em DMF (5 mL) foram adicionados (R)-(3-amino-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,2 g, 1,08 mmol) e HATU (0,2 g, 0,54 mmol). DIEA (70 mg, 0,54 mmol) foi adicionada a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 50°C durante 3 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + 1]+: 1.100. Etapa B: (R)-N-(3-amino-2-hidroxipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3‘- sulfamoil-2'-(2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1'-bifenil]-3-carboxamida
[00748] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-{2-[(2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}- 4-(3-{[(2S)-3-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}-2-hidroxipropil]carbamoil} fenil)-3-[(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca- 1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzeno)sulfonamido]etil}carbamato de terc- butila (0,27 g, 0,25 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge Prep C18 OBD 19 mm x 150 mm, 5 μm; Fase móvel A: água (50 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 540; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,41-8,39 (m, 1H), 8,27 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,21 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,50 (brs, 3H), 3,89-3,69 (m, 1H), 3,32-3,28 (m, 3H), 3,04 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,91-2,82 (m, 1H), 2,75-2,58 (m, 2H). EXEMPLO 348 N1-(2-aminoetil)-4-(1-(2-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (2-((4'-amino-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3'-((2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)amino)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00749] A uma mistura agitada de (2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido) etil)carbamato de terc-butila (2 g, 2,14 mmol) em 1,4-dioxano (15 mL) e água (4 mL) foram adicionados Pd(PPh3)4 (0,50 g, 0,43 mmol), (2-((2-amino-5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)amino)etil)carbamato de terc- butila (2,02 g, 5,35 mmol) e Na2CO3 (0,68 g, 6,43 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.057. Etapa B:(2-((2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(1-(2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)-1 H-benzo[d]imidazol-6-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00750] A uma mistura agitada de (2-((4'-amino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3'-((2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)amino)-2-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4- sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,7 g, 0,66 mmol) em ortoformiato de trimetila (5 mL, 45,2 mmol) foram adicionadas umas poucas gotas de AcOH à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 60°C durante 1 hora. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 65% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.067. Etapa C: N1 -(2-aminoetil)-4-(1-(2-aminoetil)-1 H-benzo[d]imidazol-6-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00751] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (1-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,5g, 0,47 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 1% de B a 3% de B durante 10 min; Detector: 254 e 210 nm; Tempo de retenção: 6,31 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 507; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 9,64 (s, 1H), 8,62 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,77 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,90-4,80 (m, 2H), 3,60-3,56 (m, 2H), 3,47-3,44 (m, 2H), 3,17-3,13 (m, 2H).
[00752] Os EXEMPLOS 349 a 361, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 329, partindo-se de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 362 (R)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:(R )-(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00753] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,0 g, 1,04 mmol) e 4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (0,46 g, 2,08 mmol): LCMS [M + 1]+: 930. Etapa B: 2,2,2-trifluoroacetato de (R )-3-amino-2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2- sulfamoil-3-(2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propila
[00754] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,39 g, 0,42 mmol) para produzir o produto bruto de 2,2,2-trifluoroacetato de (R)-3- amino-2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 806. Etapa C: (R)- N1 -(1 -amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00755] A uma solução de 2,2,2-trifluoroacetato de (R)-3-amino-2-(4- (2-aminopiridin-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propila (0,15 g, 0,265 mmol) em MeOH (3 mL) foi adicionada uma solução de NaOH (42,4 mg, 1,061 mmol) em água (3 mL) a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: XBridge Shield RP18 OBD Coluna, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 2% de B a 19% de B durante 8 min; Detector: 254 nm; Tempo de retenção: 6,67 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 470; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl) δ 8,37 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 5,6Hz, 1H), 6,15 (s, 1H), 6,05 (d, J = 5,6Hz, 1H), 3,76-3,62 (m, 1H), 3,49-3,41 (m, 1H), 3,39-3,31 (m, 1H), 3,11-3,01 (m, 1H), 3,01-2,89 (m, 1H). EXEMPLO 363 (R)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)- 3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-(2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00756] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)- (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (2,80 g, 2,90 mmol) e ácido 2- aminobenzo[d]tiazol-4-ilborônico (1,60 g, 5,81 mmol): LCMS [M + 1]+: 986. Etapa B: (R )-(2-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo [ d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,65 g, 0,62 mmol) em 1,4-dioxano
[00757] A uma suspensão de nitrito de terc-butila (0,22 g, 2,11 mmol) e brometo de cobre (II) (0,36 g, 1,58 mmol) em ACN (15 mL) foi adicionado (R)-(2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,30 g, 1,32 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.049, 1.051 (1:1). Etapa C: (R )-(2-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[ d ] tiazol-4-il)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00758] A uma solução de (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,65 g, 0,62 mmol) em 1,4-dioxano (6,0 mL) foram adicionados Zn(CN)2 (0,22 g, 1,86 mmol), pré-catalisador de t -BuXPhos de 3a Geração (98 mg, 0,12 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 55°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 996. Etapa D: (R )-(2-(4-(2-(aminometil)benzo[ d ]tiazol-4-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00759] A uma solução de (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,20 g, 0,20 mmol) em MeOH (2,5 mL) e EA (2,5 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% em peso, 28,2 mg, 0,04 mmol). A mistura foi desgaseificada com hidrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas sob hidrogênio. A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 91% de EA em MeOH. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.000. Etapa E: 2,2,2-trifluoroacetato de (R )-3-amino-2-(4-(2-(aminometil) benzo[ d ]tiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propila
[00760] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-(2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,10 g, 0,10 mmol) para produzir o produto bruto de 2,2,2-trifluoroacetato de (R)-3- amino-2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propila como um sólido: LCMS [M + 1]+: 636. Etapa F: (R)-N1 -(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)benzo[d] tiazol-4-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00761] A uma solução de 2,2,2-trifluoroacetato de (R)-3-amino-2-(4- (2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propila (75 mg, 0,12 mmol) em MeOH (1 mL) foi adicionada uma solução de NaOH (19 mg, 0,47 mmol) em água (1 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 4% de B a 23% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 540; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6 + DCl): δ 8,24 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,87-7,82 (m, 2H), 7,02 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,06 (s, 2H), 3,20-3,15 (m, 2H), 2,90-2,80 (m, 2H), 2,68-2,72 (m, 1H). EXEMPLO 364 (R)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:( R )-(2-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2- il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil) carbamato de terc-butila
[00762] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,50 g, 1,56 mmol) e 2-bromo-6- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina (0,89 g, 3,11 mmol): LCMS [M + 1]+: 993, 995 (1:1). Etapa B: (R )-(2-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)-4-(6-(2,2,2-trifluoroacetamido)piridin-2- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00763] A uma solução de (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,72 g, 0,72 mmol) 1,4-dioxano (6 mL) foram adicionados 2,2,2-trifluoroacetamida (0,41 g, 3,62 mmol), N1,N2-dimetiletano-1,2-diamina (63,9 mg, 0,72 mmol), CuI (69,0 mg, 0,36 mmol) e Na2CO3 (0,23 g, 2,17 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e irradiada com radiação de micro-ondas a 120°C durante 1,5 horas. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.026. Etapa C: (R)-N1 -(1 -amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00764] Uma solução de (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(6-(2,2,2-trifluoroacetamido) piridin-2-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,23 g, 0,22 mmol) em TFA (2 mL) foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi coevaporado com anisol (3x5 mL) sob vácuo e usado na etapa seguinte sem purificação adicional. TFA (2 mL) foi adicionado ao produto bruto. A solução foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em THF (2 mL), e à mistura foi adicionado NaOH (2 mL, 2 M). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio 3 vezes e agitada durante 2 horas à temperatura ambiente. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 7 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 470; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl) δ 8,46 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,15 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,39 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,01 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 3,74-3,71 (m, 1H), 3,57-3,39 (m, 2H), 3,05 (d, J = 8,3 Hz, 2H). EXEMPLO 365 (R)-N1-(2-amino-3-hidroxipropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:(R)-(1 -(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropan-2-il)carbamato de benzila
[00765] A uma mistura de (R)-(1-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropan-2-il)carbamato de benzila (0,8 g, 0,8 mmol), 5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina-2-amina (0,44 g, 2,0 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,19 g, 0,16 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) foi adicionada uma solução de Na2CO3 (0,26 g, 2,4 mmol) em água (2,5 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 12 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi permitida esfriar para a temperatura ambiente, diluída com água (150 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em EA para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 964. Etapa B: (R)-N1 -(2-amino-3-hidroxipropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00766] Uma solução de (R)-(1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropan-2-il)carbamato de benzila (0,54 g, 0,56 mmol) em TFA (5 mL) foi agitada a 80°C durante 1 hora. A mistura resultante foi permitida esfriar para a temperatura ambiente. O resíduo foi dissolvido com HCl (30 mL, 1 mol/L). A fase aquosa foi extraída com EA (10 mL) e foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 20% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm, para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 470; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,49-7,15 (brs, 3H), 6,72(d, J = 6,0 Hz, 1H), 6,15 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 5,99 (brs, 2H), 5,29-5,09 (brs, 1H), 3,59-3,42 (m, 2H), 3,21-3,15 (m, 2H ), 3,11-3,02 (m, 1 H). EXEMPLO 366 (S)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1-((3-aminopirrolidin-3-il)metil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: 3-(2-aminobenzo[ d] tiazol-4-il)- N, N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida
[00767] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa A, usando ácido (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)borônico (2,99 g, 15,41 mmol) para produzir o composto desejado como um sólido: LCMS [M + 1]+: 898. Etapa B: ácido 4-(2-Aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico
[00768] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa B, usando 3-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N,N-bis(4- metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (3,0 g, 3,34 mmol): LCMS [M + 1]+: 798. Etapa C: (S )-3-amino-3-((4-(2-aminobenzo[ d ]tiazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00769] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa C, usando ácido 4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (0,50 g, 0,63 mmol): LCMS [M + 1]+: 1.011 Etapa D: (S )-4-(2-aminobenzo[ d] tiazol-4-il)-N1 -((3-aminopirrolidin-3- il)metil)-3- (2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00770] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa D, usando (S)-3-amino-3-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4- il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,35 g, 0,35 mmol) para produzir o composto desejado como um sólido: LCMS [M + 1]+: 551; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,73 (dd, J = 8,2 Hz, 2,4 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,78 (dd, J = 8,1 Hz, 1,0 Hz, 1H), 7,29-7,26 (m, 1H), 7,10-7,16 (m, 1H), 3,86-3,55 (m, 6H), 2,58 (m, 1H), 2,41 (m, 1H). EXEMPLO 367 (R)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1-((3-aminopirrolidin-3-il)metil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-3-amino-3-((4-(2-aminobenzo[ d ]tiazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00771] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa C, usando ácido 4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (500 mg, 0,627 mmol) e (S)-3-amino-3- (aminometil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (202 mg, 0,940 mmol): LCMS (ESI) [M + 1]+: 1.011. Etapa B: (R )-4-(2-aminobenzo[ d] tiazol-4-il)- N 1-((3-aminopirrolidin-3- il)metil)-3- (2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00772] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa D, usando (R)-3-amino-3-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4- il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,35 g, 0,35 mmol) para produzir o composto desejado como um sólido: LCMS [M + 1]+: 551; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,73 (dd, J = 8,2 Hz, 2,3 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,78 (dd, J =8,1 Hz, 1,0 Hz, 1H), 7,29-7,25 (m, 1H), 7,13-7,04 (m, 1H), 3,81 (dd, J = 13,4 Hz, 3,6 Hz, 1H), 3,72-3,69 (m, 1H), 3,68-3,53 (m, 4H), 2,65-2,49 (m, 1H), 2,42-2,38 (m, 1H). EXEMPLO 368 (S)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-((3-aminopirrolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:3-(6-aminopiridin-3-il)- N, N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida
[00773] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa A, usando 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)piridin-2-amina (2,83 g, 12,84 mmol): LCMS ( [M + 1]+: 842. Etapa B: ácido 4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico
[00774] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa B, usando 3-(6-aminopiridin-3-il)-N,N-bis(4- metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)benzenossulfonamidato (2,4 g, 2,85 mmol): LCMS [M + 1]+: 742. Etapa C: (S )-3-amino-3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00775] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa C, usando ácido 4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (0,40 g, 0,54 mmol) para produzir o composto desejado como um sólido: LCMS [M + 1]+: 955. Etapa D: (S )-4-(6-aminopiridin-3-il)- N1 -((3-aminopirrolidin-3-il)metil)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00776] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa D, usando (S)-3-amino-3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,28 g, 0,29 mmol): LCMS [M + 1]+: 495; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,51 (dd, J = 9,2 Hz, 2,0 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,78 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,59 (m, 4H), 2,54 (m, 1H), 2,41 (m, 1H). EXEMPLO 369 (R)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-((3-aminopirrolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-3-amino-3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00777] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa C, usando ácido 4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico (0,40 g, 0,54 mmol) e (S)-3-amino-3-(aminometil) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,17 g, 0,81 mmol) para produzir o composto desejado como um sólido: LCMS [M + 1]+: 955. Etapa B: (R )-4-(6-aminopiridin-3-il)- N 1-((3-aminopirrolidin-3-il)metil)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00778] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 250, etapa D, usando (R)- 3-amino-3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,26 g, 0,27 mmol): LCMS [M + 1]+: 495; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,73-7,70 (m, 1H), 7,51 (dd, J = 9,2 Hz, 2,0 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,78 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,64-3,54 (m, 4H), 2,54 (m, 1H), 2,46-2,35 (m, 1H). EXEMPLO 370 (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-(3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila
[00779] A uma solução de (S)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (1,0 g, 0,91 mmol) em 1,4-dioxano (7 mL) e água (3 mL) foram adicionados ácido (2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,32 g, 1,82 mmol), Na2CO3 (0,29 g, 2,73 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,21 g, 0,18 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL) e salmoura (3x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.102. Etapa B: (S)-4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N 1-(2,3-diaminopropil)- 3-(2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00780] A uma solução de (S)-(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila (0,68 g, 0,62 mmol) foi adicionado HCl conc. (1 mL, 12,3 mmol). A mistura foi agitada a 80°C durante 3 horas. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 5% de B durante 12 min; Detector: 254 nm; Tempo de retenção: 6,54 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 508; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ 8,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,96-7,81 (m, 1H), 6,95 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,62-6,53 (m, 1H), 6,13-6,07 (m, 1H), 3,14-2,80 (m, 4H), 2,54-2,53 (m, 1H). EXEMPLO 371 (S)-4-(2-aminoquinolin-8-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-(3-(4-(2-aminoquinolin-8-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propano- 1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00781] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (S)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propano-1,2- diil)dicarbamato de di-terc-butila (0,80 g, 0,75 mmol) e ácido (2- aminoquinolin-8-il)borônico (0,35 g, 1,80 mmol): LCMS [M + 1]+: 1.079. Etapa B: (S )-4-(2-aminoquinolin-8-il)- N1 -(2,3-diaminopropil)-3-(2 H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00782] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (S)-(3-(4-(2-aminoquinolin-8-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila (0,17 g, 0,16 mmol) em DCM (6,0 mL). O produto bruto foi purificado por HPLC- prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 30% de B durante 8 min; 254 nm/220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 519; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,10 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,41 (dd, J = 7,9 Hz, 1,5 Hz, 1H), 6,77 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,676,58 (m, 1H), 6,39-6,27 (m, 2H), 5,85 (brs, 3H), 3,12-2,64 (m, 3H), 2,66-2,51 (m, 2H).
[00783] Os EXEMPLOS 372 a 374, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 371, partindo-se de (S)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propano-1,2- diil)dicarbamato de di-terc-butila ou de (S)-(3-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propano-1,2-diil)dicarbamato de benzila e terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 375 (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-(3-(4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00784] A uma solução de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) propano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila (1,0 g, 0,94 mmol) em 1,4- dioxano (10 mL) e água (2,5 mL), foram adicionados ácido (2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)borônico (0,5 g, 2,82 mmol), Na2CO3 (0,29 g, 2,81 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,22 g, 0,20 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 x 100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em EA. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.068. Etapa B: (R)-4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1 -(2,3-diaminopropil)- 3-(2 H-tetrazol-5 -il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00785] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (R)-(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)propano-1,2-diil)dicarbamato de di-terc-butila (0,80 g, 0,75 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi adicionada a TFA (4 mL). A mistura foi agitada a 80°Cdurante 1 hora. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna Atlantis Prep T3 OBD, 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 50 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 5% de B durante 5 min; 254 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 508; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,17 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,44 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,20 (brs, 3H), 6,02 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,09-2,83 (m, 4H), 2,65-2,61 (m, 1H).
[00786] Os EXEMPLOS 376 a 378, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 375, partindo-se de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propano-1,2- diil)dicarbamato de di-terc-butila e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes, que foram preparadas conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 379 (S)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S)-((4-(4-(N-(1-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-hidroxipropan-2- il)sulfamoil)-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)fenil)-1 H-benzo[ d] imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila
[00787] A uma solução agitada de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-(((terc-butoxicarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (0,60 g, 0,89 mmol) em THF (6 mL) foram adicionados (S)-(3-hidroxi-2-(2,2,2- trifluoroacetamido)propil)carbamato de benzila (0,43 g, 1,33 mmol) e TEA (0,37 mL, 2,67 mmol) a 0°C. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 10 min 0°C. Então NCS (0,24 g, 1,78 mmol) foi adicionada e a mistura foi agitada a 0°C durante 1,5 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido com EA (100 mL), a solução foi lavada com salmoura (3x1 00 mL), secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.117. Etapa B: (S)-N1 -(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)-1 H- benzo [ d ] imidazol-4-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00788] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (S)-((4-(4-(N-(1-(((benziloxi)carbonil)amino)- 3-hidroxipropan-2-il)sulfamoil)-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2- il)metil)carbamato de terc-butila (0,35 g, 0,31 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Gradiente: 3% de B a 15% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1] 523; 1H RMN (400 MHz, CD3COCD3 + DCl): δ 7,22 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,15-6,12 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,83-5,80 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,58-5,56 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 2,89 (s, 2H), 2,55-2,53 (m, 1H), 2,34-2,32 (m, 1H), 2,28-2,22 (m, 1H), 1,97-1,94 (m, 1H), 1,88-1,85 (m, 1H). EXEMPLO 380 (S)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:(S )-(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de benzila
[00789] A uma solução de (S)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de benzila (1,0 g, 1,00 mmol) em 1,4-dioxano (7 mL) e água (3 mL) foram adicionados 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (0,41 g, 2,0 mmol), Na2CO3 (0,32 g, 3,01 mmol) e Pd(PPh3)4 (0,23 g, 0,20 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2CO3 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 964. Etapa B: (S)-N1 -(1 -amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00790] Uma solução de (S)-(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de benzila (0,50 g, 0,52 mmol) em TFA (5 mL) foi agitada a 80°C durante 2 horas. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Select CSH Prep C18 OBD, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 35% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 470; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,47 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,23 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,15 (dd, J = 5,6 Hz, 1,6 Hz, 1H), 3,74-3,71 (m, 1H), 3,55-3,52 (m, 1H), 3,45-3,42 (m, 1H), 3,18-3,14 (m, 1H), 3,08-3,03 (m, 1H). EXEMPLO 381 (S)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)- 3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S)-(2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de benzila
[00791] À solução de (S)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de benzila (1,7 g, 1,70 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) e água (2,5 mL) foram adicionados ácido (2-aminobenzo[d]tiazol-4- il)borônico (0,66 g, 3,41 mmol), aduto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,28 g, 0,34 mmol) e Na2CO3 (0,54 g, 5,11 mmol). A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE . As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1 ]+: 1.020. [Etapa B: (S )-(2-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo [ d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de benzila
[00792] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 275, etapa B, usando (S)-(2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de benzila (0,90 g, 0,88 mmol): LCMS [M + 1]+: 1.083, 1.085 (1:1). Etapa C: (S )-(2-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-cianobenzo [ d] tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de benzila
[00793] A uma solução de (S)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de benzila (0,60 g, 0,55 mmol) e pré-catalisador de t-BuXPhos de 3a Geração (0,09 g, 0,11 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado dicianozinco (0,13 g, 1,11 mmol). A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi irradiada com radiação de micro-ondas a 55°C durante 6 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.030. Etapa D: (S )-(2-(4-(2-(aminometil)benzo[ d] tiazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de benzila
[00794] A uma solução de (S)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de benzila (0,20 g, 0,19 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% de Pd, 1,48 mg, 9,71 μmol). A mistura foi desgaseificada com hidrogênio três vezes e agitada à temperatura ambiente durante 6 horas sob hidrogênio (30 atm (3.040 kPa)). A mistura resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 900. Etapa E: (S)-N1 -(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(2-(aminometil) benzo[d] tiazol-4-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00795] Uma solução de (S)-(2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de benzila (0,14 g, 0,13 mmol) em TFA (4 mL) foi agitada a 60°C durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 21% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 540; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,25 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,93-7,82 (m, 2H), 7,02 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,07 (s, 2H), 3,82-3,39 (m, 3H), 2,96-2,79 (m, 2H). EXEMPLO 382 (S)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2- il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil) carbamato de benzila
[00796] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 246, etapa C, usando (S)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de benzila (1,50 g, 1,50 mmol) e ácido (6- bromopiridin-2-il)borônico (0,61 g, 3,01 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.027, 1.029. Etapa B: ((2 S )-2-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2- il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-((tetra-hidro- 2 H-pirano-2-il)oxi)propil)carbamato de benzila
[00797] A uma solução de (S)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de benzila (1,10 g, 1,07 mmol) em DCM (10 mL) foram adicionados 3,4-di-hidro-2H-pirano (0,18 g, 2,14 mmol) e ácido 4-metilbenzenossulfônico (37 mg, 0,214 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 3 horas à temperatura ambiente. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo e diluída com EA (200 mL). A camada orgânica foi lavada com água (3x150 mL) e salmoura (150 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.111, 1.113 (1:1). Etapa C: ((2 S )-2-(4-(6-aminopiridin-2-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-((tetra- hidro-2 H-pirano-2-il)oxi)propil)carbamato de benzila
[00798] A uma solução de ((2S)-2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-((tetra-hidro-2H-pirano-2-il)oxi)propil)carbamato de benzila (0,60 g, 0,540 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) foram adicionados 2,2,2-trifluoroacetamida (0,61 g, 5,40 mmol), CuI (0,10 g, 0,54 mmol), Cs2CO3 (0,88 g, 2,70 mmol) e N1,N2-dimetiletano-1,2-diamina (95 mg, 1,08 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e irradiada com radiação de micro-ondas durante 3 horas a 100°C. A mistura de reação resultante foi concentrada sob vácuo, diluída com EA (150 mL). A camada orgânica foi lavada com água (3x100 mL) e salmoura (150 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir_o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.048. Etapa D: (S)- N1 -(1 -amino-3-hidroxipropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00799] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando ((2S)-2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-3-((tetra-hidro-2H-pirano-2-il)oxi)propil)carbamato de benzila (0,40 g, 0,360 mmol). O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 7 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 4,75 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 470; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl) δ 8,46 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,15 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,02 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 3,70-3,69 (m, 1H), 3,56-3,40 (m, 2H), 3,14-2,97 (m, 2H). EXEMPLO 383 (R)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-aminopropan-2-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: N-[(2R )-2-[(2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-[2-({[( terc- butoxi )carbonil]amino}metil)-1H-1,3-benzodiazol-4-il]-3-[(2 E ,4 E)-11- metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il]benzeno)sulfonamido]propil]carbamato de benzila
[00800] A uma solução agitada de ácido 4-(2-(aminometil)-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4- metoxibenzil)sulfamoil)benzenossulfínico (0,60 g, 0,89 mmol) em THF (6 mL) foram adicionados (R)-2-aminopropilcarbamato de benzila (0,28 g, 1,34 mmol) e TEA (0,36 mL, 2,67 mmol) a 0°C. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada durante 10 minutos a 0°C. Então NCS (0,24 g, 1,78 mmol) foi adicionada e a mistura foi agitada a 0°C durante 1,5 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido com EA (100 mL), e então a solução foi lavada com salmoura (3x1 00 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.101. Etapa B:(R )-4-(2-(aminometil)-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)-N1 -(1- aminopropan-2-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00801] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-[(2R)-2-[(2-{bis[(4-metoxifenil) metil]sulfamoil}-4-[2-({[(terc-butoxi)carbonil]amino}metil)-1H-1,3- benzodiazol-4-il]-3-[(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca- 1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzeno)sulfonamido]propil]carbamato de benzila (0,30 g, 0,27 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Shield RP18 OBD, 5 μm, 19 mm x 150 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 5% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 5,4 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 507. 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,48 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,03-7,01 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,75-6,72 (m, 1H), 3,97 (s, 2H), 3,95-3,92 (m, 1H), 2,99-2,98 (m, 1H), 2,92-2,86 (m, 1H), 1,18 (d, J = 6,8 Hz, 3H). EXEMPLO 384 (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-(2-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(imidazo[1,2- a]piridin-8-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil) carbamato de benzila
[00802] A uma solução de (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) propil)carbamato de benzila (0,75 g, 0,76 mmol) em 1,4-dioxano (10,0 mL) e água (2,5 mL) foram adicionados ácido imidazo[1,2-a]piridin-8-ilborônico (0,25 g, 1,53 mmol), Na2CO3 (0,24 g, 2,29 mmol) e aduto de Pd(dppf)Cl2- CH2Cl2 (0,13 g, 0,15 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi irradiada com radiação de micro-ondas a 130°C durante 1 hora sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com EA. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 972. Etapa B: (R)-N1 -(1-aminopropan-2-il)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00803] Uma solução agitada de (R)-(2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)propil)carbamato de benzila (0,30 g, 0,31 mmol) em TFA (2 mL) foi agitada durante 1 hora sob nitrogênio. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi coevaporado com anisol (3x3 mL) sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep Amide OBD 19 mm x 150 mm, 5 μm, 13 nm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 90% de B a 80% de B durante 8 min; Detector: 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 6,15 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 478; 1H RMN (300 MHz, CD3OD + DCl) δ 8,40 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,39 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,93-7,91 (m, 1H), 7,61-7,58 (m, 1H), 6,95-6,79 (m, 2H), 3,98-3,69 (m, 1H), 3,10 (dd, J = 13,2 Hz, 4,2 Hz, 1H), 3,06-2,91 (m, 1H), 1,18 (d, J = 6,9 Hz, 3H). EXEMPLO 385 4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (2-(2',3'-diamino-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)propano-1,3- diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00804] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propano-1,3- diil)dicarbamato de di-terc-butila (4,00 g, 3,80 mmol) em 1,4-dioxano (40 mL) e água (10 mL) foram adicionados Pd(PPh3)4 (0,87 g, 0,75 mmol), 3- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzeno-1,2-diamina (2,20 g, 9,41 mmol) e Na2CO3 (1,20 g, 11,3 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio durante 3 vezes e agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL) e extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x400 mL) e salmoura (3x400 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.043. Etapa B: N-[2-({4-[2-amino-3-(2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}acetamido) fenil] -2- {bis [ (4-metoxifenil)metil] sulfamoil} -3-[(2 E ,4 E)-11 -metoxi-2,4,5,6- tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11 ),2,4,8( 12),9-pentaen-3-il]benzeno} sulfonamido)-3-{[( terc-butoxi)carbonil]amino}propil]carbamato de terc- butila
[00805] A uma solução de (2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]- 4-ilsulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila (1,0 g, 0,96 mmol) em THF (10 mL) foram adicionados ácido 2-((terc- butoxicarbonil)amino)acético (0,17 g, 0,96 mmol), HATU (1,10 g, 2,9 mmol) e TEA (0,40 mL, 2,88 mmol) à temp. ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio 3 vezes e agitada de um dia para o outro à temp. ambiente. A mistura resultante foi inativada com água (100 mL), e então extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.200. Etapa C: N-{[4-(4-{ [ 1,3-bis( {[(terc-butoxi)carbonil]amino})propan-2- il] sulfamoil }-2-[( 2 E ,4 E)-11 -metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo [6.3.1] dodeca- 1(11),2,4,8( 12),9-pentaen-3-il]-3-{ [ (4-metoxifenil)metoxi] ({[(4- metoxifenil)metil] amino} )sulfinil} fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2- il]metil}carbamato de terc-butila
[00806] Uma solução de N-[2-({4-[2-amino-3-(2-{[(terc-butoxi) carbonil]amino}acetamido)fenil]-2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-3- [(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]benzeno}sulfonamido)-3-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}propil] carbamato de terc-butil (0,89 g, 0,74 mmol) em AcOH (8 mL) foi agitada durante 0,5 hora a 60°C. O solvente foi removido sob vácuo para produzir o produto bruto, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.182. Etapa D:4- (2-(Aminometil)-1H-benzo [ d ] imidazol-4-il)-N1 -(1,3- diaminopropan-2-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00807] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando N-{[4-(4-{[1,3-bis({[(terc-butoxi)carbonil] amino})propan-2-il]sulfamoil}-3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-2- [(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}carbamato de terc-butila (0,85 g, 0,72 mmol). O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 17,5% de B durante 6 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 522; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,49 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,02 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 4,02 (s, 2H), 3,68 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 2,93-2,75 (m, 4H). EXEMPLO 386 N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(imidazo[ 1,2-a]piridin- 8-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propano-1,3- diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00808] A uma solução de (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propano-1,3- diil)dicarbamato de di-terc-butila (0,70 g, 0,66 mmol) em 1,4-dioxano (8 mL) e água (2 mL) foram adicionados ácido imidazo[1,2-a]piridin-8-ilborônico (0,11 g, 0,66 mmol), Na2CO3 (0,21 g, 1,98 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (0,11 g, 0,13 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi irradiada com radiação de micro-ondas a 130°C durante 1,5 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL), e então extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL). A camada orgânica foi secada com Na2SO4 anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.054. Etapa B: N1 -(1,3-diaminopropan-2-il)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00809] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 244, etapa C, usando (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- (imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila (0,24 g, 0,23 mmol). O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água com 10 mmol/L de NH4HCO3, Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 3% de B a 33% de B durante 10 min; Detector: 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 493; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6+ DCl): δ 8,88-8,84 (m, 1H), 8,69 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,43 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 8,29-8,12 (m, 2H), 7,41-7,27 (m, 2H), 4,09-4,18 (m, 1H), 3,14-3,09 (m, 2H), 2,98-2,90 (m, 2H). EXEMPLOS 387 a 392
[00810] Procedimento geral para a preparação paralela de sulfonamida Exemplos 387-392: anisol
[00811] A um conjunto de frascos contendo, cada um, a amina necessária conhecida ou comercialmente disponível (0,13 mmol) foi adicionada uma solução do cloreto de sulfonila (45 mg, 0,044 mmol) seguida por Et3N (0,018 mL, 0,13 mmol). Os frascos foram tampados e as misturas foram agitadas à RT durante 5 horas. À mistura de reação foi então adicionado TFA (0,5 mL) e as misturas foram agitadas à RT durante 1,5 horas. Após este tempo, tolueno (1 mL) foi adicionado a cada frasco e as misturas foram concentradas em vácuo. A cada frasco foram, então, adicionados TFA (1,0 mL) e anisol (0,019 mL, 0,17 mmol). Os frascos foram tampados e as misturas de reação foram aquecidas para 80oC com agitação durante 45 min. Após este tempo, as misturas de reação foram concentradas em vácuo. Os resíduos brutos foram, então, dissolvidos em DMSO (1,0 mL) e filtrados. Os produtos brutos foram então purificados por “mass triggered preparative HPLC” (HPLC preparativa com recolhimento de fração cromatográfica acionado por detecção de massa) [Coluna Waters Sunfire C18, 5μm, 19 mm x100 mm, usando uma faixa de gradiente a partir de 8-10% de MeCN inicial até 21-36% de MeCN final (0,1% de TFA) em água (0,1% de TFA), 25 mL/min, tempo de corrida de 8-12 min] para produzir os Exemplos 387 a 392. EXEMPLO 393 (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-(2-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil) carbamato de terc-butila e (R)-(2-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil) sulfonamido)propil)carbamato de terc-butila
[00812] Um frasco carregado com (R)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido) propil)carbamato de terc-butila e (R)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido) propil)carbamato de terc-butila (4 g, 4,22 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (1,857 g, 8,44 mmol), carbonato de sódio (1,342 g, 12,66 mmol) e PdCl2(dppf) (0,689 g, 0,844 mmol), dioxano (20 mL) e água (5 mL) foi fechado e desgaseificado. A mistura resultante foi aquecida de um dia para o outro a 80°C. A mistura de reação foi filtrada através de CELITE para remover paládio. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica usando (0-10)% de MeOH/DCM como fase móvel para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 914,80. Etapa B: (R)-N1 -(1 -aminopropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2 H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00813] À solução de (R)-(2-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil) sulfonamido)propil)carbamato de terc-butila e (R)-(2-((4-(6-aminopiridin-3- il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenil)sulfonamido)propil)carbamato de terc-butila (3,5 g, 3,83 mmol) em DCM (2 mL) foram adicionados anisol (2 g, 18,5 mmol) e TFA (10 g, 87,7 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 30 minutos. Após a remoção dos compostos voláteis o resíduo foi tratado em coluna de troca de íons SCX (carregar amostra e enxaguar com MeOH, remover o produto por lavagem com amônia 7 N em MeOH) para produzir uma amina livre. O resíduo foi dissolvido em TFA (10 g, 87,7 mmol). A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 1,0 hora. Após a remoção dos compostos voláteis, o resíduo foi purificado por HPLC em fase reversa (0-30% de ACN/água como eluente, 0,05% hidróxido de amônio como aditivo) para produzir o produto desejado: LC/MS [M+H]+: 454,30.
[00814] Os seguintes EXEMPLOS, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 393, partindo-se do ácido borônico ou éster borônico correspondente e do iodeto de arila correspondente, que foram preparados conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 425 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3R,5S)-5-(aminometil)pirrolidin- 3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (25,4R)-4-(((4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila e (2 S ,4R )-4-(((4-(2-amino-1 H-benzo[ d ]imidazol-4- il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol- 5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila
[00815] Uma suspensão de (25,4R)-4-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- ((1,3-dioxoisoindolin-2-il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (2S,4R)-4-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2- il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 101, 1.400 mg, 1,251 mmol), carbonato de sódio (398 mg, 3,75 mmol), ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (332 mg, 1,877 mmol) e PdCl2(dppf) (204 mg, 0,250 mmol) em dioxano (10 mL) e água (2,5 mL) foi aquecida a 100°C durante 17 horas. A mistura foi diluída com EtOAc, lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada (MgSO4) e concentrada. O bruto material foi cromatografado via gel de sílica eluindo com 0-20% de MeOH em DCM para produzir os produtos desejados. LCMS: 1.124,9. Etapa B: 3-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-((((3R,5S)-5-(aminometil) pirrolidin-3-il)amino)sulfinil)-2-(2 H-tetrazol-5-il)benzenossulfonamida
[00816] A uma solução de (2S,4R)-4-(((4-(2-amino-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioxoisoindolin- 2-il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (2S,4R)-4-(((4-(2-amino- 1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioxoisoindolin- 2-il)metil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (200 mg, 0,179 mmol) em EtOH (10 mL) foi adicionada hidrazina (17,18 mg, 0,536 mmol). A mistura de reação foi aquecida para 60°C durante 2 horas. O solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi dissolvido em 5 mL de metanol e a solução foi filtrada através de uma coluna de troca de íons Agilent BE-SCX de 10 mL e a coluna foi lavada com amônia 7N em metanol. O filtrado foi concentrado, então foi dissolvido em TFA (5 mL), a solução foi aquecida para 80°C durante 1 hr. LC-MS mostrou que a desproteção estava completa. A mistura de reação foi concentrada e purificada via Gilson (“Gilson’s RP-HPLC”) (360% de acetonitrila em água com 0,1% de amônia) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 534,37. EXEMPLO 426 (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2- il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-(2-((4-(2-amino-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)fenil) sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e (S )-(2-((4-(2-amino- 1H-benzo [ d] imidazol-4-il)-2- (N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3- (2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00817] Ácido (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)borônico (445 mg, 2,51 mmol), (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (EXEMPLO DE REFERÊNCIA 88; 1.010 mg, 1,048 mmol), carbonato de sódio (222 mg, 2,096 mmol), Pd(dppf)Cl2 (153 mg, 0,210 mmol) foram adicionados a um frasco de reação. Dioxano (7.859 μL) e água (2.620 μL) foram adicionados. A mistura de reação foi desgaseificada e então aquecida a 80°C durante 12 horas. A mistura de reação foi purificada por cromatografia em coluna (0-100% de EtOAc/EtOH (3/1) em hexano) para produzir os compostos do título (mistura de dois regioisômeros de tetrazol). LC/MS [M+H]+: 969,8. Etapa B:(S )-4-(2-Amino-1H-benzo [ d]imidazol-4-il)- N1-( 1 -amino-3 - hidroxipropan-2-il)-3-(1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00818] Uma solução de (S)-(2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4- il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol- 5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroxipropil)carbamato de terc-butila e (S)-(2-((4- (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (283 mg, 0,292 mmol) foi agitada em TFA/DCM (1/1, 2 mL) à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada e coevaporada com tolueno 3 vezes. O resíduo foi redissolvido em TFA e a solução foi aquecida a 80°C durante 1 hora, e então foi esfriada para a temperatura ambiente e concentrada. O resíduo foi dissolvido em DMSO (4 mL) e a solução foi purificada por Gilson (“Gilson’s RP-HPLC”) (3-45% de CH3CN/água com 0,05% de TFA). As frações corretas foram combinadas e concentradas, redissolvidas em CH3CN, e 300 μL de HCl 1,25 M em MeOH foram adicionados. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e então água foi adicionada. O produto foi liofilizado para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 509,3.
[00819] Os Exemplos, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para a (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol- 4-il)-N1-(1-amino-3-hidroxipropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2- dissulfonamida (imediatamente acima), partindo-se dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes e das iodoarilsulfonamidas correspondentes, que foram preparados conforme aqui descrito, ou que estavam disponíveis em fornecedores comerciais. EXEMPLO 437 4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3- (1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A : (2-((2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-cloropiridin-4-il)-3- (1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propano-1,3- diil)dicarbamato de di-terc-butila e (2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-cloropiridin-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00820] Pd(dppf)Cl2 (103 mg, 0,141 mmol), carbonato de sódio (299 mg, 2,82 mmol), ácido (2-cloropiridin-4-il)borônico (244 mg, 1,552 mmol) e (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila e (2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc- butila (1500 mg, 1,411 mmol) foram adicionados a um frasco de reação. Dioxano (10 mL) e água (3,5 mL) foram adicionados. A mistura de reação foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 4 horas. A mistura de reação foi purificada por cromatografia em coluna (0-60% de hexano/EtOAc) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 1.048,9. Etapa B: 3-(Tributilestanil)imidazo[1,2-a ]pirimidina
[00821] 3-Bromoimidazo[1,2-a]pirimidina (1,27 g, 6,41 mmol) foi dissolvida em THF anidro (32,1 mL) e a solução foi esfriada para -78°C. Cloreto de isopropilmagnésio (3,53 mL, 7,05 mmol) foi adicionado por gotejamento. A mistura resultante foi agitada a -78°C durante 10 minutos, então tributilcloroestanano (2,422 g, 7,44 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada a -78°C durante 10 minutos, então permitida aquecer para a temperatura ambiente. A mistura de reação foi purificada por cromatografia em coluna (100% de hexano a 90% de EtOAc/EtOH (3/1) em hexano) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 410,4. Etapa C: (2-((2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2- a ]pirimidin-3-il)piridin-4-il)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila e (2-((2- (N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2-a ]pirimidin-3- il)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila
[00822] (2-((2-(N,N-Bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2- a]pirimidin-3-il)piridin-4-il)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila e (2-((2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2-a]pirimidin-3- il)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila (0,899 g, 0,857 mmol) em DMF (3 mL) foram adicionados à 3- (tributilestanil)imidazo[1,2-a]pirimidina (0,25 g, 0,612 mmol) seguido por PaládioTETRAQUIS (0,071 g, 0,061 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada e aquecida a 90°C durante 3 horas. A mistura de reação foi purificada por cromatografia em coluna (100% de hexano a 90% de EtOAc/EtOH (3/1) em hexano) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 1.132,1. Etapa D: (2-((4-(2-(2-amino-1 H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)fenil) sulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila e (2-((4-(2-(2- amino-1 H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propano-1,3-diil) dicarbamato de di-terc-butila
[00823] (2-(2-(N,N-Bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2- a]pirimidin-3-il)piridin-4-il)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila e (2-((2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2-a]pirimidin-3- il)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido) propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila (89 mg, 0,079 mmol) foi dissolvida em EtOH (1 mL). Hidrazina (24,69 μL, 0,787 mmol) e água (25 μL) foram adicionados. A mistura foi aquecida a 80°C durante 30 minutos. A mistura de reação bruta foi concentrada e usada diretamente na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 1.096,1. Etapa E:4-(2-( 2-amino-1H-imidazol-5 -il)piridin-4-il)-N1 - (1,3- diaminopropan-2-il)-3-(1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00824] (2-(4-(2-(2-Amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila e (2-((4-(2- (2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propano- 1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila (86 mg, 0,079 mmol) foram agitados em DCM/TFA (2 mL/1 mL) à temp. ambiente durante 0,5 hora. A mistura de reação foi concentrada e coevaporada com tolueno 3 vezes. O resíduo foi aquecido em TFA puro (2 mL) a 80°C durante 45 minutos. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi purificado com Gilson (“Gilson’s RP- HPLC”) (2-30% CH3CN/água com 0,1% de TFA), e as frações corretas foram concentradas e purificadas de novo com Gilson (“Gilson’s RP-HPLC”) (230% CH3CN/água com 0,1% de NH4OH). As frações corretas foram concentradas e liofilizadas para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 535,7. EXEMPLO 438 4-(6-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-2-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3- (1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00825] O composto do título foi preparado em uma maneira similar à síntese de 4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(1,3- diaminopropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (EXEMPLO 437) partindo-se de ácido (6-cloropiridin-2-il)borônico e (2-(2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc-butila e (2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propano-1,3-diil)dicarbamato de di-terc- butila. LC/MS [M+H]+: 535,4. EXEMPLO 439 (R)-4-(6-(2-Amino-1H-imidazol-5-il)piridin-2-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(1H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00826] O composto do título foi preparado em uma maneira similar à síntese de 4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(1,3- diaminopropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida, partindo-se de ácido (6-cloropiridin-2-il)borônico e (R)-3-((2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (R)-3-((2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 532,5. EXEMPLO 440 (R)-4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(pirrolidin-3-il)-3-(1H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00827] O composto do título foi preparado em uma maneira similar à síntese de 4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(1,3- diaminopropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida (Exemplo 12), partindo-se de ácido (2-cloropiridin-4-il)borônico e (R)-3-((2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila e (R)- 3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 532,2. EXEMPLO 441 4-(2-((S)-2-aminopropil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirrolidin-3-il)- 3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: 2',3'-diamino-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etíl)sulfoml)-[1,1 '-bifenil]-3-sulfonamida
[00828] Uma suspensão de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (8 g, 9,13 mmol), 2-nitro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)anilina (7,24 g, 27,4 mmol), TETRAQUIS(trifenilfosfina) paládio(0) (1,055 g, 0,913 mmol) e carbonato de sódio (2,90 g, 27,4 mmol) em dioxano (100 mL) e água (30 mL) foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 17 horas. A mistura foi diluída com AcOEt. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada (MgSO4) e concentrada para produzir uma mistura de cerca de 1:1 de 3'-amino-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2'-nitro-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'- bifenil]-3-sulfonamida e 2',3'-diamino-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]- 3-sulfonamida que foi separada por coluna ISCO (220 g, 0-30%, 30%, 30-100% de EtOAc em Hexano). LC/MS [M+H]+: 856 e 886. Etapa B: (S)-(4-((2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfoml)-[1,r-bifeml]- 3-il)amino)-4-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butila
[00829] 2',3'-Diamino-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida (1,5 g, 1,752 mmol), ácido (S)-3-((terc-butoxicarbonil)amino)butanoico (0,5 g, 2,46 mmol) e EDC (0,381 g, 2,452 mmol) foram adicionados a um frasco de 100 mL com 50 mL de DCM com a exceção de que N,N-dimetilpiridin-4- amina (0,321 g, 2,63 mmol) foi adicionada após um minuto de agitação. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Então a solução de reação foi lavada com solução aquosa de KHSO4 e secada com sulfato de magnésio. O solvente foi removido para produzir um sólido que foi usado na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 1.042.
[00830] Etapa C: (S)-(1-(4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)- 1H-benzo[d]imidazol-2-il)propan-2-il)carbamato de terc-butila
[00831] (S)-(4-((2-Amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'- bifenil]-3-il)amino)-4-oxobutan-2-il)carbamato de terc-butila (1,752 g, 1,824 mmol) foi dissolvido em ácido acético (40 mL) e a solução foi agitada a 60°C durante duas horas. O solvente foi removido e o material bruto foi purificado via cromatografia em coluna eluído com hexano/EtOAc. LC/MS [M+H]+: 1.024. Etapa D: ácido 2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-2-(( terc - butoxicarbonil)amino)propil)-1H-benzo [ d] imidazol-4-il)-3- (2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico
[00832] (S)-(1-(4-(3-(N,N-Bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H- benzo[d]imidazol-2-il)propan-2-il)carbamato de terc-butila (1,43 g, 1,397 mmol) foi dissolvido em 40 mL de THF aos quais TBAF 1 M (7 mL, 7 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reação foi lavada com solução aquosa de KHSO4 e extraída com acetato de etila e secada (MgSO4). O solvente foi removido para produzir um sólido: LC/MS [M+H]+: 924. Etapa E: (R )-3-((2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-(( S )-2-((terc- butoxicarbonil)amino)propil)-1H-benzo [ d] imidazol-4-il)-3- (2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1 -carboxilato de terc -butila
[00833] Ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-2- ((terc-butoxicarbonil)amino)propil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (0,2 g, 0,217 mmol), (R)-3- aminopirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,121 g, 0,65o mmol), TEA (0,091 mL, 0,650 mmol), e NCS (0,087 g, 0,650 mmol) foram adicionados a um frasco de 50 mL com 15 mL de THF e a mistura foi agitada durante 30 minutos à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada com solução aquosa de Na2S2O3 durante 30 minutos, diluída com éter. A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa de KHSO4 e secada com MgSO4 e concentrada para produzir um sólido que foi usado na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 1.108. Etapa F: 4-(2-(( S )-2-aminopropil)-1 H-benzo[d]imidazol-4-il)- N1 -((R )- pirrolidin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00834] (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-2- ((terc-butoxicarbonil)amino)propil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (240 mg, 0,217 mmol) foi dissolvido em 10 mL de DCM aos quais 3 gotas de anisol foram adicionadas. Após isto, 2 mL de TFA foram adicionados e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante duas horas as uma solução. O solvente foi removido e tolueno foi adicionado e o solvente foi removido de novo sob vácuo. 5 mL de TFA foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 80°C durante 1 hora. O solvente foi removido para produzir o produto bruto como uma lama que foi purificado via “Gilson’s RP- HPLC” (3-37% de água em acetonitrila com 0,05% de NH4OH). LC/MS [M+H]+:274 (dicátion).
[00835] Os compostos, na Tabela abaixo, foram sintetizados usando o procedimento descrito acima para 4-(2-((S)-2-aminopropil)-1H- benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirrolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida usando os ácidos carboxílicos indicados como MdP. EXEMPLO 447 2-amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-5-cloro-3'-sulfamoil- 2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida Etapa A:2-amino-3'-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,r-bifenil]- 3-carboxilato de metila
[00836] Uma suspensão de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (7 g, 7,99 mmol), 2-amino-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzoato de metila (6,64 g, 23,98 mmol), TETRAQUIS(trifenilfosfina)paládio(0) (0,924 g, 0,799 mmol) e carbonato de sódio (2,54 g, 23,98 mmol) em dioxano (120 mL) e água (40 mL) foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 17 horas. A mistura foi diluída com AcOEt. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. O resíduo foi purificado por coluna ISCO (220 g, 0-30%, 30%, 30%-100% de EtOAc em Hexano). LC/MS [M+H]+: 899,53. Etapa B: ácido 2-amino-3'-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfoml)-[1,r-bifeml]- 3-carboxílico
[00837] A uma solução de 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila (1,8 g, 2,002 mmol) em THF (20,00 mL) e MeOH (20 mL) foi adicionada LiOH (10,01 mL, 20,02 mmol) com agitação à temperatura ambiente. A solução resultante foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada de um dia para o outro. A mistura foi diluída com EtOAc (100 mL), A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa de KHSO4 e salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. O material bruto foi usado diretamente na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 885,52 Etapa C: (2-(2-amino-3'-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfoml)-[ 1,1 '-bifenil]- 3-carboxamido)etil)carbamato de terc-butila
[00838] A uma solução de cloridrato de N1-((etilimino)metileno)- N3,N3-dimetilpropano-1,3-diamina (0,650 g, 3,39 mmol), ácido 2-amino-3'- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)- 4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-carboxílico (1,5 g, 1,695 mmol) e (2-aminoetil)carbamato de terc-butila (0,543 g, 3,39 mmol) em DCM (30 mL) foi adicionada N,N-dimetilpiridin-4-amina (0,207 g, 1,695 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas, diluída com éter (80 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa de KHSO4 e salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. O material bruto foi usado diretamente na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 1.027,73. Etapa D: ácido 2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3'-((2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)carbamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,1 '-bifeml]-4-sulfínico
[00839] Uma solução de (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-ilcarboxamido)etil)carbamato de terc-butila (1,73g, 1,684 mmol) em THF (50 mL) foi agitada com fluoreto de tetrabutilamônio (6,74 mL, 6,74 mmol) à temp. ambiente sob N2 durante 0,5 hora. A mistura foi diluída com AcOEt. A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa de KHSO4 duas vezes, e com salmoura, secada com MgSO4 e concentrada. O material bruto foi usado diretamente na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 927,59. Etapa E: (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-5-cloro-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamido)etil)carbamato de terc-butila
[00840] A uma solução de ácido 2'-amino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3'-((2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)carbamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfínico (0,8 g, 0,863 mmol), (2-aminoetil)carbamato de terc-butila (0,415 g, 2,59 mmol) e trietilamina (0,361 mL, 2,59 mmol) em THF (20 mL) foi adicionada NCS (0,346 g, 2,59 mmol) a 0°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada à mesma temperatura durante 30 minutos. A mistura de reação foi diluída com éter (60 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa de Na2CO3 1 M, solução aquosa de KHSO4 e salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. LC/MS [M+H]+:1.085,75. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (80 g ISCO, 0-40%, 40%, então 40-100% de EtOAc em Hexano). O composto purificado mostrou LC/MS [M+H]+: 1.119,79: o excesso de NCS foi reagido em coluna com (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamido)etil)carbamato de terc-butila para formar (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4'-(N-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-5-cloro-2'-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamido)etil)carbamato de terc-butila. Etapa F: 2-amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-5-cloro-3'- sulfamoil-2'-(2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1'-bifenil]-3-carboxamida
[00841] (2-(2-Amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2- ((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-5-cloro-2'-(2-(4-metoxibenzil)- 2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamido)etil)carbamato de terc-butila (0,41 g, 0,366 mmol) foi dissolvido em DCM (20 mL) e a solução foi agitada com 5 mL TFA na presença de 0,2 mL de anisol durante 3 horas. Os compostos voláteis foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi separado em uma coluna de troca de íons (lavada primeiro com metanol, então lavada com NH3 7N em metanol para coletar o produto desejado). O composto da coluna de troca de íons foi aquecido a 90°C em TFA (10 mL) em um tubo fechado durante 60 minutos. O TFA foi removido, e o material bruto foi purificado por Gilson (“Gilson’s RP-HPLC”) (5-47% de AcCN em água com 0,05% de TFA) para produzir uma mistura de 2-amino-N-(2- aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-5-cloro-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol- 5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida e N1-(2-aminoetil)-4-(3-(2-aminoetil)-6- cloro-4-oxo-2-(trifluorometil)-3,4-di-hidroquinazolin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida. A solução foi concentrada. O resíduo foi separado por TLC preparativa (DCM : NH3 7 N em metanol, 1:1). LC/MS [M+H]+: 559,38 e 637,43. EXEMPLO 448 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((1R,2R)-2-aminociclopropil)-3- (1H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: 4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-((((1 R ,2 R )-2-(( terc- butoxicarbonil)amino)ciclopropil)amino)sulfonil)-2-( 1-(4-metoxibenzil)-1 H- tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis( terc-butoxicarbonil)amino)-1 H-benzo[ d] imidazol-1- carboxilato de terc-butila e 4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- ((((1R ,2 R )-2-(( terc-butoxicarbonil)amino)ciclopropil)amino)sulfonil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-1 H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis( terc-butoxicarbonil)amino)-1 H- benzo[ d ]imidazol-1-carboxilato de terc-butila
[00842] A uma solução de 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (1-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2- (bis(terc-butoxicarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato de terc- butila e 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-1H- tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(terc- butoxicarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato de terc-butila (0,2 g, 0,169 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado fluoreto de tetrabutilamônio (0,372 mL, 0,372 mmol) (1,0 M em THF) a 0°C sob N2. A mistura de reação foi diluída com 10 mL de EtOAc, lavada com salmoura, secada com MgSO4, e concentrada. O resíduo foi dissolvido em 20 mL de DCM, seguido pelas adições sequenciais de ((1R,2R)-2-aminociclopropil)carbamato de terc-butila (0,044 g, 0,254 mmol), trietilamina (0,034 g, 0,339 mmol), N,N- dimetilpiridin-4-amina (4,14 mg, 0,034 mmol) e 1-cloropirrolidina-2,5-diona (0,045 g, 0,339 mmol). A mistura de reação foi concentrada e cromatografada em gel de sílica eluindo com 0-10% de Metanol em DCM para produzir os compostos do título. [M+H]+: 1.251,56. Etapa B:4-(2-amino-1 H-benzo[ d] imidazol-4-il)- N1-((1 R ,2 R )-2- aminociclopropil)-3-(1 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00843] À solução de 4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- ((((1R,2R)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclopropil)amino)sulfonil)-2-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis(terc-butoxicarbonil)amino)-1H- benzo[d]imidazol-1-carboxilato de terc-butila e 4-(3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-((((1R,2R)-2-((terc-butoxicarbonil)amino) ciclopropil)amino)sulfonil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)-2- (bis(terc-butoxicarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato de terc- butila (98 mg, 0,078 mmol) em DCM (0,5 mL) foram adicionados anisol (85 mg, 0,783 mmol) e TFA (893 mg, 7,83 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 30 minutos. Após a remoção dos compostos voláteis, o resíduo foi tratado em coluna de troca de íons SCX (carregar amostra e enxaguar com MeOH, remover o produto por lavagem com amônia 7 N em MeOH) para produzir uma amina livre. O resíduo foi dissolvido em TFA (893 mg, 7,83 mmol). A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 0,5 hora. Após a remoção dos compostos voláteis o resíduo foi purificado por HPLC em fase reversa (0-30% de ACN/água como eluente, 0,05% de hidróxido de amônio como aditivo) para produzir o produto desejado: LC/MS [M+H]+: 491,37. EXEMPLO 449 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)-N1-metil-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00844] Este composto foi preparado em uma maneira análoga à do Exemplo 448, partindo-se de (2-(metilamino)etil)carbamato de terc-butila. LC/MS [M+H]+: 493,38. EXEMPLO 450 (R)-2-amino-N-(2-aminoetil)-5-cloro-4'-(N-(pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3'- sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida
[00845] Este composto foi preparado seguindo o mesmo procedimento usado para o Exemplo 447 usando (R)-3-aminopirrolidina-1-carboxilato terc- butila para produzir a sulfonamida. LC/MS [M+H]+: 586. EXEMPLO 451 4-amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H- tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxamida Etapa A: 4-amino-3'-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-( N-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila
[00846] (2-((2-(N,N-Bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (1 g, 1,071 mmol), TETRAQUIS(trifenilfosfina)paládio(0) (0,025g, 0,021 mmol), carbonato de sódio (0,34 g, 3,21 mmol) e metil 2-amino-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de (0,891 g, 3,21 mmol) foram adicionados a um frasco de 50 mL equipado com uma barra de agitação e um condensador de refluxo. O frasco foi então posto sob nitrogênio e solvente foi adicionado. A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro a 80°C. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com água. A camada orgânica foi secada com sulfato de magnésio e o solvente foi removido para produzir uma lama que foi purificada via coluna (acetato de etila em hexano 0%-30% mantido 30%-100%) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 958 Etapa B: ácido 4-amino-3'-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-( N-(2- ((terc -butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)-[1,1 '-bifenil]-3-carboxílico
[00847] 4-Amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2- ((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxilato de metila (1 g, 1,025 mmol) foi dissolvido em metanol e dioxano e LiOH 1 M (5,22 mL, 5,22 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 70°C de um dia para o outro. A solução foi acidificada com HCl 2 M e o solvente orgânico foi removido sob vácuo. Os compostos orgânicos foram então extraídos com acetato de etila, secados e o solvente foi removido para produzir um sólido: LC/MS [M+H]+: 943. Etapa C: (2-((4'-amino-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3'-((2-(( terc - butoxicarbonil)amino)etil)carbamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,r-bifeml])-4-sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00848] Ácido 4-amino-3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N- (2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-carboxílico (0,13 g, 0,138 mmol), (2- aminoetil)carbamato de terc-butila (0,055 g, 0,345 mmol), N,N-dimetilpiridin- 4-amina (0,025 g, 0,207 mmol), N1-((etilimino)metileno)-N3,N3- dimetilpropano-1,3-diamina (0,053 g, 0,345 mmol) foram adicionados a um frasco de 50 mL com 20 mL de DCM com a exceção de que N,N- dimetilpiridin-4-amina foi adicionada após um minuto de agitação. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Então a solução de reação foi lavada com solução aquosa de KHSO4 e secada com sulfato de magnésio. O solvente foi removido sob vácuo para produzir o produto que foi usado na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 1.086. Etapa D: 4-amino- N-(2-aminoetil)-4'-( N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil- 2'-(2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1'-bifenil]-3-carboxamida
[00849] (2-((4'-amino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3'-((2- ((terc-butoxicarbonil)amino)etil)carbamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,15 g, 0,138 mmol) foi dissolvido em 10 mL de DCM aos quais 3 gotas de anisol foram adicionadas. Após isto, 2 mL de TFA foram adicionados e a solução foi agitada à temp. ambiente durante duas horas. O solvente foi removido, tolueno foi adicionado, e o solvente foi removido de novo. 5 mL de TFA foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 80°C durante 1 hora. O solvente foi removido para produzir o produto bruto como uma lama que foi purificada via “Gilson’s RP-HPLC” (3-37% de água em acetonitrila com 0,05% de NH4OH) para produzir o composto do título: LC/MS [M+H]+: 263 (dicátion). EXEMPLO 452 2-amino-N-(4'-( N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2 H-tetrazol-5-il)- [1,1 '-bifenil]-2-il)acetamida Etapa A: (2-((2'-amino-3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1 '-bifenil])-4-sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00850] Carbonato de sódio (0,17 g, 1,606 mmol), (2-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,50 g, 0,535 mmol), ácido (2-aminofenil)borônico (0,220 g, 1,606 mmol), e TETRAQUIS(trifenilfosfina)paládio(0) (0,0069 g, 0,0054 mmol) foram adicionados a um frasco de 50 mL equipado com uma barra de agitação e um condensador de refluxo. O frasco foi então posto sob nitrogênio e solvente foi adicionado. A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro a 80°C. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com água. A camada orgânica foi secada com sulfato de magnésio e o solvente foi removido para produzir uma lama que foi purificada via coluna (acetato de etila em hexano 0%-30% mantido 30%-100%) para produzir o produto puro como um sólido: LC/MS [M+H]+: 899. Etapa B:(2-((3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(( terc - butoxicarbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00851] Ácido 2-((terc-butoxicarbonil)amino)acético (0,146 g, 0,834 mmol), N1-((etilimino)metileno)-N3,N3-dimetilpropano-1,3-diamina (0,13 g, 0,834 mmol), e (2-(2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,25 g, 0,278 mmol) foram adicionados a um frasco de 50 mL com 25 mL de DCM com a exceção de que N,N-dimetilpiridin-4-amina (0,051 g, 0,417 mmol), foi adicionada após um minuto de agitação. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante o final de semana. A solução de reação foi lavada com solução aquosa de KHSO4 e secada com sulfato de magnésio. O solvente foi removido para produzir líquido que foi purificado por cromatografia em coluna para produzir o produto puro LC/MS [M+H]+: 1.056. Etapa C: 2-amino- N-(4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2 H- tetrazol-5-il)- [1,1 '-bifenil] -2-il)acetamida
[00852] (2-((3-(N,N-Bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2'-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,206 g, 0,195 mmol) foi dissolvido em 10 mL de DCM aos quais 3 gotas de anisol foram adicionadas. 2 mL de TFA foram adicionados e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante duas horas. O solvente foi removido, tolueno foi adicionado, e o solvente foi removido de novo. 5 mL de TFA foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 80°C durante 1 hora. O solvente foi removido para produzir o produto bruto como uma lama que foi purificada via “Gilson’s RP-HPLC” (3-37% de água em acetonitrila com 0,05% de NH4OH) para produzir um sólido: LC/MS [M+H]+: 248 (dicátion). EXEMPLO 453 (S)-2,3-siamino-N-(4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol- 5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)propanamida Etapa A: (2-((3'-amino-3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1 '-bifeml])-4-sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00853] Carbonato de sódio (0,34 g, 3,21 mmol), (2-(2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (1 g, 1,071 mmol), ácido(3- aminofenil)borônico (0,440 g, 3,21 mmol), e TETRAQUIS(trifenilfosfina) paládio(0) (0,012 g, 0,0107 mmol) foram adicionados a um frasco de 100 mL equipado com uma barra de agitação e um condensador de refluxo. O frasco foi posto sob nitrogênio e solvente foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 5 horas a 80°C. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com água. A camada orgânica foi secada com sulfato de magnésio e o solvente foi removido para produzir uma espuma que foi purificada via coluna (acetato de etila em hexanos 0%-30% mantido 30%- 100%) para produzir um sólido LC/MS [M+H]+: 899. Etapa B:(3-((3'-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-( N-(2-(( terc - butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil]-3-il)amino)-3-oxopropano-1,2-diil)(S)-dicarbamato de di-terc- butila
[00854] Ácido (S)-2,3-bis((terc-butoxicarbonil)amino)propanoico (0,169 g, 0,556 mmol), N1-((etilimino)metileno)-N3,N3-dimetilpropano-1,3- diamina (0,080 g, 0,556 mmol) e (2-(3'-amino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]- 4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,2 g, 0,222 mmol) foram adicionados a um frasco de 50 mL com 25 mL de DCM com a exceção de que N,N-dimetilpiridin-4-amina (0,041 g, 0,334 mmol), foi adicionada após um minuto de agitação. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A solução de reação foi lavada com solução aquosa de KHSO4 e secada com sulfato de magnésio. O solvente foi removido para produzir um óleo: LC/MS [M+H]+: 1.186. Etapa C: (S )-2,3-diamino- N-(4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2‘- (2H-tetrazol-5-il)-[ 1,1 '-bifenil]-3-il)propanamida
[00855] (3-((3'-(N,N-Bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil]-3-il)amino)-3-oxopropano-1,2-diil)(S)-dicarbamato de di-terc- butila (0,263g, 0,222 mmol) foi dissolvido em 10 mL de DCM aos quais 3 gotas de anisol foram adicionadas. 2 mL de TFA foram então adicionados e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante duas horas. O solvente foi removido, tolueno foi adicionado, e o solvente foi removido de novo. 5 mL de TFA foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 80°C durante 1 hora. O solvente foi removido para produzir o produto bruto como uma lama. LC/MS [M+H]+: 263 e 291. O produto foi purificado com “Gilson’s RP HPLC” (3-37% de água em acetonitrila com 0,05% de NH4OH) para produzir o produto como um sólido.
[00856] O composto, na Tabela abaixo, foi sintetizado usando o procedimento descrito acima e o ácido carboxílico indicado. EXEMPLO 455 N1-(2-aminoetil)-4-(1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-5-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,2,3,4-tetra- hidroquinolina
[00857] Uma mistura de 5-bromo-1,2,3,4-tetra-hidroquinolina (1,5 g, 7,07 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (5,39 g, 21,22 mmol), PCy3 PdG2 (0,835 g, 1,415 mmol) e acetato de potássio (2,082 g, 21,22 mmol) em dioxano (150 mL) foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 17 horas. A mistura foi filtrada e ao filtrado foram adicionados 100 mL água, e éter (100 mL). A fase orgânica foi separada, secada (MgSO4), e concentrada. LC/MS [M+H]+: 260 (dicátion). Etapa B: N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3- (1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida
[00858] Uma suspensão de 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)-1,2,3,4-tetra-hidroquinolina (1,775 g, 6,85 mmol), 3-iodo-N,N-bis(4- metoxibenzil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)benzenossulfonamida (3 g, 3,43 mmol), TETRAQUIS(trifenilfosfina) paládio(0) (0,396 g, 0,343 mmol) e carbonato de sódio (1,089 g, 10,28 mmol) em 1,4-dioxano (80 mL) e água (25,00 mL) foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 17 horas. A mistura foi diluída com AcOEt. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada (MgSO4) e concentrada. O material bruto foi purificado por coluna (80 g, 0-30% EtAOc, então 30% de EtOAc e 30-100% de EtOAc em Hexano). LC/MS [M+H]+: 811,85. Etapa C: ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)-4-(1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-5-il)benzenossulfínico
[00859] Uma solução de N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-5-il)-6-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)benzenossulfonamida (2,3g, 2,61 mmol) e THF (100 mL) foi agitada com fluoreto de tetrabutilamônio (7,83 mL, 7,83 mmol) à temp. ambiente sob N2 durante 0,5 hora. A mistura foi diluída com AcOEt, lavada com solução aquosa de KHSO4 e salmoura, secada com MgSO4 e concentrada. O material bruto foi usado diretamente na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 781. Etapa D: (2-((2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)-4-(1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-5-il)fenil)sulfonamido)etil) carbamato de terc-butila
[00860] A uma solução ácido de 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-5- il)benzenossulfínico (0,2 g, 0,256 mmol), e (2-aminoetil)carbamato de terc- butila (0,123 g, 0,768 mmol) em THF (30 mL) foi adicionada NCS (0,103 g, 0,768 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reação foi agitada com solução aquosa de Na2S2O3 durante 30 minutos e diluída com éter 60 mL. A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa de KHSO4 e salmoura, secada com MgSO4 e concentrada. LC/MS [M+H]+: 939,94. Etapa E: N1 -(2-aminoetil)-4-( 1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-5-il)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00861] (2-(2-(N,N-Bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(1,2,3,4-tetra-hidroquinolin-5- il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,21 g, 0,224 mmol) foi dissolvida em DCM (10 mL). A solução foi agitada à temp. ambiente durante 2 horas com TFA (10 mL) e duas gotas anisol e concentrada. O resíduo foi aquecida a 80°C em 10 mL de TFA durante 40 minutos. O TFA foi removido, e o material bruto foi purificado por “Gilson’s RP-HPLC” (5-42% de AcCN em água com 0,05% de NH4OH). A solução foi concentrada. O produto foi secado sob vácuo (0,010 psi, (68,95 Pa)). LC/MS [M+H]+: 479,33. EXEMPLO 456 N1-(2-aminoetil)-4-(2-((2-aminoetil)amino)piridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (2-((4-bromopiridin-2-il)amino)etil)carbamato de terc-butila
[00862] 3-Bromo-2-fluoropiridina (3,46 g, 19,66 mmol), (2- aminoetil)carbamato de terc-butila (3,15 g, 19,66 mmol) e K2CO3 (8,15 g, 59,0 mmol) em DMSO (40 mL) foram agitados a 80°C de um dia para o outro. O excesso de carbonato foi removido por filtração, e a mistura de reação filtrada foi lavada com EtOAc. A mistura lavada foi diluída com água (60 mL), extraída com éter (100 mL). O extrato foi lavado com salmoura, secado com MgSO4, e concentrado. O material bruto foi purificado por coluna (ISCO de 120 g, 0-30%, 30%, 30-100% de EtOAc em Hexano). LC/MS [M+H]+: 375,20, 373,25. Etapa B: ácido (2-((2-(( terc-butoxicarbonil)amino)etil)amino)piridin-4- il)borônico
[00863] Uma mistura de (2-((4-bromopiridin-2-il)amino)etil)carbamato de terc-butila (4,515 g, 14,28 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (10,88 g, 42,8 mmol), PCy3 PdG2 (1,686 g, 2,86 mmol) e acetato de potássio (4,20 g, 42,8 mmol) em dioxano (100 mL) foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 17 horas. A mistura foi filtrada, e ao filtrado foram adicionados 100 mL de solução aquosa saturada de KHSO4, e éter (100 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada (MgSO4, e concentrada. LC/MS [M+H]+: 282,39. Etapa C: (2-((4-(3-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)amino)etil) carbamato de terc-butila
[00864] Uma suspensão de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (7,45 g, 8,51 mmol), ácido (2-((2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)borônico (7,17 g, 25,5 mmol), carbonato de sódio (2,70 g, 25,5 mmol) e TETRAQUIS(trifenilfosfina) paládio(0) (0,983 g, 0,851 mmol) em dioxano (100 mL) e água (30 mL) foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 17 horas. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com solução aquosa de KHSO4, e salmoura. A camada orgânica foi secada (MgSO4) e concentrada. O resíduo foi purificado em coluna ISCO (120 g, 0-30%, 30%, 30-100%, 100% de EtOAc em Hexano). LC/MS [M+H]+: 986,09. Etapa D: ácido 2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)benzenossulfínico
[00865] Uma solução de (2-((4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil) piridin-2-il)amino)etil)carbamato de terc-butila (5,6 g, 5,68 mmol) e THF (100 mL) foi agitada com fluoreto de tetrabutilamônio (17,05 mL, 17,05 mmol) à temp. ambiente durante 0,5 hora. A mistura foi diluída com AcOEt, lavada com solução aquosa saturada de KHSO4 e salmoura, secada com MgSO4, e concentrada. LC/MS [M+H]+: 885,86. Etapa E:(2-((2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((2-(( terc - butoxicarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00866] (2-Aminoetil)carbamato de terc-butila (0,0543, 0,339 mmol), NCS (0,0453 g, 0,339 mmol), e ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-(2-((2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)-3-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (0,1 g, 0,113 mmol) foram adicionados a um frasco de 50 mL com 15 mL THF e a mistura foi agitada durante 30 minutos à temp. ambiente. A mistura de reação foi agitada com solução aquosa de Na2S2O3 durante 30 minutos e diluída com acetato de etila. A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa de KHSO4, secada com MgSO4 e concentrada para produzir um sólido que foi usado na etapa seguinte. LC/MS [M+H]+: 1.044. Etapa F: N1 -(2-Aminoetil)-4-(2-((2-aminoetil)amino)piridin-4-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00867] (2-((2-(N,N-Bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H- tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (0,118 g, 0,113 mmol) foi dissolvida em 10 mL de DCM aos quais 3 gotas de anisol foram adicionados. 2 mL de TFA foram adicionados e a mistura foi agitada à temp. ambiente durante duas horas. O solvente foi removido, tolueno foi adicionado, e o solvente foi removido de novo. 5 mL de TFA foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 80°C durante 1 hora. O solvente foi removido para produzir o produto bruto como uma lama que foi purificada via HPLC para produzir um sólido: LC/MS [M+H]+: 242 (dicátion).
[00868] Os compostos, na Tabela abaixo, foram sintetizados usando o procedimento descrito acima para o Exemplo 456, e os intermediaries correspondentes preparados conforme aqui descrito. EXEMPLO 461 N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)piridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A: ácido (2-((( terc-butoxicarbonil)amino)metil)piridin-4-il)borônico
[00869] Uma mistura de ((4-bromopiridin-2-il)metil)carbamato de terc-butila (0,8 g, 2,79 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (2,122 g, 8,36 mmol), PCy3 Pd G2 (0,329 g, 0,557 mmol) e acetato de potássio (0,820 g, 8,36 mmol) em dioxano (40 mL) foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 17 horas. A mistura foi filtrada e 100 mL de solução aquosa saturada de KHSO4, e éter (100 mL) foram adicionados ao filtrado. A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada (MgSO4), e concentrada. LC/MS [M+H]+: 253,28. Etapa B: ((4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)- 2 H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)metil) carbamato de terc-butila
[00870] Uma suspensão de 3-iodo-N,N-bis(4-metoxibenzil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzenossulfonamida (2 g, 2,283 mmol), ácido(2-(((terc-butoxicarbonil) amino)metil)piridin-4-il)borônico (1,727 g, 6,85 mmol), TETRAQUIS (trifenilfosfina)paládio(0) (0,264 g, 0,228 mmol) e carbonato de sódio (0,726 g, 6,85 mmol) em dioxano (70 mL) e água (20 mL) foi desgaseificada e aquecida a 80°C durante 17 horas. A mistura foi diluída com AcOEt e lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada (MgSO4) e concentrada. O resíduo foi purificado por coluna ISCO (80 g, 0-30%, 30%, 30-100% de EtOAc em Hexano). O produto desejado foi eluído com EtOAc 100%. LC/MS [M+H]+: 956,96. Etapa C: ácido 2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-((( terc- butoxicarbonil)amino)metil)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)benzenossulfínico
[00871] Uma solução de ((4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2- (2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2- (trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)metil)carbamato de terc-butila (0,6 g, 0,627 mmol) em THF (20 mL) foi agitada com fluoreto de tetrabutilamônio (1,882 mL, 1,882 mmol) à temp. ambiente durante 0,5 hora. A mistura foi diluída com AcOEt, lavada com solução aquosa saturada de KHSO4 e salmoura, secada com MgSO4, e concentrada. LC/MS [M+H]+: 856,85. Etapa D: N1 -(2-Aminoetil)-4-(2-(aminometil)piridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00872] A uma solução de ((4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-hydrosulfonil-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)piridin-2- il)metil)carbamato de terc-butila (0,15 g, 0,175 mmol) e (2- aminoetil)carbamato de terc-butila (0,112 g, 0,701 mmol) em THF (20 mL) foi adicionada NCS (0,068 g, 0,508 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reação foi agitada com solução aquosa de Na2S2O3 durante 30 minutos e diluída com éter 60 mL. A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa de KHSO4 e salmoura, secada com MgSO4 e concentrada. LC/MS [M+H]+: 1.015,11. O resíduo foi dissolvido em DCM (5 mL), e a solução foi agitada à temp. ambiente com 2 mL de TFA e duas gotas anisol durante 2 horas e concentrada. O resíduo foi aquecido a 80°C em 2 mL de TFA durante 40 minutos. O TFA foi removido, e o material bruto foi purificado por “Gilson’s RP-HPLC” (3-37% de AcCN em água com 0,05% hidróxido de amônio). A solução foi concentrada. LC/MS [M+H]+: 454,25. EXEMPLO 462 (R)-3'-(2-(aminometil)-1H-imidazol-4-il)-N4-(2-aminopropil)-2-(2H-tetrazol- 5-il)-[1,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida Etapa A:(3 R ,4 S )-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4-(3-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3'-(2-((( terc-butoxicarbonil)amino)metil)-1 H- imidazol-4-il)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[1,1 '-bifenil]-4- ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00873] A uma solução de (3R,4S)-3-(((benziloxi)carbonil)amino)-4- (2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,9 g, 0,81 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) e água (2,5 mL) foram adicionados ((5-(3-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)metil)carbamato de terc-butila (0,5 g, 1,21 mmol), Na2CO3 (0,26 g, 2,43 mmol) e aduto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (132 mg, 0,16 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (25 mL) e extraída com EA (3x15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x20 mL), secadas com Na2SO4 e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 60% de EA em PE para produzir o composto do título: LCMS [M +1]+: 1.254. Etapa B: 3'-(2-(aminometil)-1 H-imidazol-4-il)-N4-((3 S ,4 R )-4-aminopirrolidin- 3-il)-2-(2 H-tetrazol-5-il)—ri,1'-bifenil]-3,4-dissulfonamida
[00874] A uma solução agitada de (3R,4S)-3-(((benziloxi)carbonil) amino)-4-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3'-(2-(((terc-butoxicarbonil) amino)metil)-1H-imidazol-4-il)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'- bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,48 g, 0,38 mmol) em DCM (5 mL) foi adicionado TFA (2 mL) a 0°C. A solução foi permitida aquecer para a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi coevaporado com anisol (3x3 mL) sob vácuo e usado na etapa seguinte sem purificação adicional. O produto bruto foi dissolvido em TFA (4 mL). A solução foi agitada a 80°C durante 1 hora. A solução resultante foi concentrada sob vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 6 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M +1]+: 560; 1H RMN (400 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,74 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,81 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,66 (s, J = 1,7 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,21-7,17 (m, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,63-4,59 (m, 1H), 4,26-4,21 (m, 1H), 3,93-3,88 (m, 1H), 3,73-3,68 (m, 1H), 3,60-3,55 (m, 1H), 3,51-3,46 (m, 1H).
[00875] Pelo uso dos mesmos procedimentos utilizados no Exemplo 462, substituindo os agentes reativos e reagentes apropriados, preparados conforme aqui descrito ou comercialmente disponíveis, os seguintes compostos foram sintetizados e distinguidos por LC/MS. EXEMPLO 463 (R)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-3- (2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R)-(3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00876] A uma solução de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (2,5 g, 2,59 mmol) em 1,4-dioxano (30 mL) e água (7 mL) foram adicionados 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzo[d]tiazol-2-amina (1,3 g, 4,67 mmol), Na2CO3 (0,83 g, 7,78 mmol) e aduto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,43 g, 0,52 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio 3 vezes e agitada durante 12 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi permitida esfriar para a temperatura ambiente, inativada com água (150 mL) e extraída com EA (3x150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentrada para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 986. Etapa B: (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d] tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00877] A uma solução de (R)-(3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-5-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (2,0 g, 2,03 mmol) em ACN (20 mL) foram adicionados CuBr2 (0,54 g, 2,43 mmol) e nitrito de terc-butila (0,34 g, 3,24 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura resultante foi inativada com água (150 mL) e extraída com EA (3x150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (150 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com 35% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentrada para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.049, 1.051. Etapa C: (R )-(3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[ d] tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00878] A uma solução de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,85 g, 0,81 mmol) em DMF (10 mL) foram adicionados Zn(CN)2 (0,19 g, 1,62 mmol) e pré-catalisador t-BuXPhos G3 (0,13 g, 0,16 mmol) à temperatura ambiente. A mistura resultante foi desgaseificada com nitrogênio 3 vezes e agitada durante 1 hora a 55°C. A mistura resultante foi permitida esfriar para a temperatura ambiente, inativada com água (100 mL) e extraída com EA (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução aquosa saturada de Na2CO3 (2x100 mL) e FeSO4 (2x100 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentrada para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 996. Etapa D: (R )-(3-(4-(2-(aminometil)benzo[ d ]tiazol-5-il)-2-( N, N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il) femlsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00879] A uma solução de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-(2-cianobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol- 5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,54 g, 0,11 mmol) em MeOH (6 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% em peso, 0,3 g, 2,14 mmol, 20%) sob nitrogênio. Esta mistura foi desgaseificada com hidrogênio três vezes. A mistura foi agitada a 25°C durante 2 horas sob hidrogênio a 15 atm (1.520 kPa). A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: LCMS [M + 1]+: 1.000. Etapa E: (R)-N1 -(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol- 5-il)-3-(2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00880] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 462, etapa B, usando (R)-(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)- 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,34 g, 0,34 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge C18 OBD Prep 100Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L, NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 5% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 540; 1H RMN (400 MHZ, DMSO-d6 + DCl): δ 8,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,2-8,05 (m, 2H), 7,63 (s, 1H ), 7,2 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,58 (s, 2H), 3,97-3,85 (m, 1H), 3,19-2,91 (m, 3H), 2,74 (t, J = 10,8 Hz, 1H).
[00881] Pelo uso dos mesmos procedimentos gerais utilizados no Exemplo 463, substituindo os agente reativos e reagentes apropriados, preparados conforme aqui descrito ou comercialmente disponível, os seguintes compostos foram sintetizados e distinguidos por LC/MS. EXEMPLO 464 (R)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-5- il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-(3-(3',4'-diamino-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1 '-bifenil]-4-ilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00882] A uma solução de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,50 g, 1,56 mmol) em 1,4-dioxano (15 mL) e água (3 mL) foram adicionados aduto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,25 g, 0,31 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzeno-1,2- diamina (0,55 g, 2,33 mmol) e Na2CO3 (0,50 g, 4,67 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentrada para produzir o composto do título como um sólido: LCMS [M + H]+: 944. Etapa B: N-[(2 R )-3-({4-[3-amino-4-(2-{[( terc-butoxi)carbonil]amino} acetamido)fenil] -2- {bis [ (4-metoxifenil)metil] sulfamoil }-3-[ (2 E ,4 E)-11- metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il]benzeno}sulfonamido)-2-hidroxipropil]carbamato de terc-butila
[00883] A uma solução de ácido 2-((terc-butoxicarbonil)amino)acético (0,23 g, 1,28 mmol) e HATU (0,53 g, 1,40 mmol) em DMF (10 mL) foram adicionados (R)-(3-(3',4'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2- (4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,10 g, 1,17 mmol) e DIEA (0,31 mL, 1,75 mmol) à temp. ambiente. A mistura foi agitada à temp. ambiente durante 2 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentrada para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 1.101. Etapa C: N-{[5-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-{[(2R)-3-{[(terc- butoxi)carbonil] amino} -2-hidroxipropil] sulfamoil} -2- [(2 E ,4 E)-11 -metoxi- 2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8( 12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H- 1,3-benzodiazol-2-il]metil}carbamato de terc-butila
[00884] Uma solução de N-[(2R)-3-({4-[3-amino-4-(2-{[(terc-butoxi) carbonil]amino}acetamido)fenil]-2-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-3- [(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]benzeno}sulfonamido)-2-hidroxipropil]carbamato de terc-butila (0,70 g, 0,64 mmol) em HOAc (10 mL) foi agitada durante 2 horas a 55°C. A mistura resultante foi inativada com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x50 mL), secadas com sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 1.083. Etapa D: (R)-N1 -(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(2-(aminometil)-1 H-benzo[d] imidazol-5-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1, 2-dissulfonamida
[00885] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 462, etapa B, usando N-{[5-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}- 4-{[(2R)-3-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}-2-hidroxipropil]sulfamoil}-2- [(2E,4E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.1]dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}carbamato de terc-butila (0,50 g, 0,46 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 3,5 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 523; 1 H RMN (300 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,58 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,34 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,00-3,95 (m, 1H), 3,29-3,22 (m, 3H), 2,95-2,87 (m, 1H).
[00886] Os compostos, na Tabela abaixo, foram sintetizados usando o procedimento descrito acima para o Exemplo 464, e os intermediários correspondentes preparados conforme aqui descrito. EXEMPLO 466 N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (2-(3',4'-diamino-3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1 '-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila
[00887] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 464, etapa A, usando (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (1,40 g, 1,50 mmol): LCMS [M + H]+: 914. Etapa B: 2-Metoxibuta-1,3-dieno; N-({[2-amino-4-(3-{bis[(4-metoxifenil) metil] sulfamoil }-4-[(2-{[( terc-butoxi)carbonil] amino} etil)sulfamoil] -2[(2 E ,4 E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9- pentaen-3-il]fenil)fenil]carbamoil}metil)carbamato de terc-butila
[00888] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 464, etapa B, usando (2-(3',4'-diamino-3-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]- 4-ilsulfonamido)etil)carbamato de terc-butila (1 g, 1,09 mmol): LCMS [M + H]+: 1.071. Etapa C: N-{[5-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi) carbonil]amino}etil)sulfamoil1-2-[(2 E ,4 E)-11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo [6.3.11dodeca-1(11 ),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1 H-1,3-benzodiazol-2- illmetil} carbamato de terc-butila
[00889] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 464, etapa C, usando N-({[2-amino-4-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil1 sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil1amino}etil)sulfamoil1-2-[(2E,4E)- 11-metoxi-2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3- il1fenil)fenil1carbamoil}metil)carbamato de terc-butila (0,65 g, 0,61 mmol): LCMS [M + H1+: 1.053. Etapa D: N1 -(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d 1imidazol-5-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00890] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 462, etapa B, usando N-{[5-(3-{bis[(4-metoxifenil)metil1sulfamoil}- 4-[(2-{[(terc-butoxi)carbonil1amino}etil)sulfamoil1-2-[(2E,4E)-11-metoxi- 2,4,5,6-tetraazabiciclo[6.3.11dodeca-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il1fenil)-1H- 1,3-benzodiazol-2-il1 metil}carbamato de terc-butila (0,46 g, 0,44 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge Prep C18 OBD 19 mm x 250 mm, 5 μm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 1% de B a 20% de B durante 7 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 493; 1 H RMN (300 MHz, CD3OD + DCl): δ 8,61 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,33 (dd, J = 8,7 Hz, 1,5 Hz, 1H), 4,75 (s, 2H), 3,39 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,15 (t, J = 6,0 Hz, 2H). EXEMPLO 471 (R)-2-((4'-(N-(pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-carboxamida Etapa A: (R )-2-((3'-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-( N-(1-( terc- butoxicarbonil)pirrolidin-3-il)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol- 5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-carboxilato de metila
[00891] A uma solução de (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (2,0 g, 2,084 mmol) em 1,4-dioxano (16 mL) e água (4 mL) foram adicionados 2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4-carboxilato de metila (0,75 g, 2,08 mmol), Na2CO3 (0,221 g, 2,08 mmol) e aduto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (1,7 g, 2,084 mmol)) à temperatura ambiente. A mistura foi desgaseificada com nitrogênio três vezes. A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 16 horas sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (200 mL) e extraída com EA (3x200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x200 mL) e salmoura (3x200 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 70% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 1.066. Etapa B: ácido (R)-2-((3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(1-(terc- butoxicarbonil)pirrolidin-3-il)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol- 5-il)-[1,1 ,-bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-carboxílico
[00892] A uma solução de (R)-2-((3'-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4,-(N-(1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-3-il)sulfamoil)-2,-(2-(4- metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1,-bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-carboxilato de metila (0,89 g, 0,84 mmol) em THF (4 mL) e MeOH (4 mL) foi adicionada lentamente solução aquosa de NaOH (2 N, 1,67 mL, 3,34 mmol). A solução de reação foi agitada durante 5 horas à temperatura ambiente. O valor do pH da solução foi ajustado para 6-7 com solução aquosa de HCl 1 N. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para produzir um sólido. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge Prep C18 OBD, 30 mm x 100 mm, 5 μm; Fase móvel A: água (10 mmol/L NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 40 mL/min; Gradiente: 0% de B a 100% de B durante 30 min; Detector: UV 254 nm e 280 nm; Tempo de retenção: 8 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 1.052. Etapa C: (R )-3-(3-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3'-((4-carbamoiltiazol- 2-il)amino)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)-[ 1,1 '-bifenil]-4- ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila
[00893] A uma solução agitada de ácido (R)-2-((3,-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-4,-(N-(1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-3- il)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3- il)amino)tiazol-4-carboxílico (0,4 g, 0,38 mmol) em THF (4 mL) foram adicionados cloreto de amônio (0,10 g, 1,90 mmol), HATU (0,29 g, 0,76 mmol) e TEA (0,16 mL, 1,14 mmol) em um banho de gelo. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x50 mL) e salmoura (3x50 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica e eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 1.051. Etapa D: (R )-2-((4'-(N-(pirrolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2 H-tetrazol- 5-il)-[1,1'- bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-carboxamida
[00894] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 462, etapa B, usando (R)-3-(3-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 3'-((4-carbamoiltiazol-2-il)amino)-2-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)- [1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (0,32 g, 0,30 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna Atlantis Prep T3 OBD, 19 mm x 250 mm, 10 μm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 15% de B a 30% de B durante 8 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 591; 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 8,61 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,37-7,34 (m, 2H), 6,91 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 4,33-4,18 (m, 1H), 3,55-3,42 (m, 2H), 3,43-3,34 (m, 2H), 2,27-2,24 (m, 1H), 2,05-1,94 (m, 1H). EXEMPLO 477 (R)-N1-(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(6-amino-5-metilpiridin-3-il)-3-(2H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-(3-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)femlsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00895] A uma solução de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (2,20 g, 2,84 mmol) em THF (20 mL) foi adicionada NCS (0,78 g, 7,51 mmol) a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente sob nitrogênio. À mistura de reação foram adicionados (S)- (3-amino-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,10 g, 5,79 mmol) e TEA (1,46 mL, 8,74 mmol) por gotejamento a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante mais 1 hora à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluindo com 50% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentrada para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 964. Etapa B: (R)-(3-(4-(6-amino-5-metilpiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila
[00896] A uma solução de (R)-(3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2- hidroxipropil)carbamato de terc-butila (1,10 g, 1,14 mmol), 3-metil-5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (0,40 g, 1,72 mmol) em 1,4-dioxano (8 mL) e água (2 mL) foram adicionados aduto de Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0,19 g, 0,23 mmol) e Na2CO3 (0,36 g, 3,42 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 4 horas a 80°C. A mistura resultante foi diluída com água (20 mL), extraída com EA (3x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x30 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 80% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentrada para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 944. Etapa C: (R)-N1 -(3-amino-2-hidroxipropil)-4-(6-amino-5-metilpiridin-3-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00897] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 462, etapa B, usando (R)-(3-(4-(6-amino-5-metilpiridin-3-il)-2- (N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)-2-hidroxipropil)carbamato de terc-butila (0,69 g, 0,73 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 30% de B durante 8 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 5,82 min. As frações coletadas contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 484; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,17 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,35 (m, 4H), 6,63 (s, 1H), 5,79 (s, 2H), 3,78 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,12-3,04 (m, 1H), 3,03-2,82 (m, 2H), 2,74-2,67 (m, 1H), 1,86 (s, 3H). EXEMPLO 479 (S)-N1-(2-aminopropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A: (S )-(1-(2-( N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)femlsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila
[00898] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 477, etapa A, usando (S)- (1-aminopropan-2-il)carbamato de terc- butila (0,27 g, 1,55 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 2]+: 949. Etapa B:(S)-(1 -(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2- il)carbamato de terc-butila
[00899] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 477, etapa B, usando (S)-(1-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2- il)carbamato de terc-butila (0,81 g, 0,68 mmol) e 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)piridina-2-amina (0,28 g, 1,28 mmol). LCMS [M + H]+: 914. Etapa C: (S)-N1 -(2-aminopropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00900] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 462, etapa B, usando (S)-(1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila (0,70 g, 0,76 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 25% de B durante 8 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 6,67 min. As frações coletadas contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 454; 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 8,42 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 8,5 Hz, 1,5 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,97 (dd, J = 8,6 Hz, 2,4 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 3,25-2,88 (m, 1H), 3,28-3,11 (m, 2H), 1,30 (d, J = 6,5 Hz, 3H). EXEMPLO 480 (R)-N1-(2-aminopropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzeno- 1,2-dissulfonamida Etapa A: (R )-(1-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)femlsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila
[00901] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 477, etapa A, usando ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (1,00 g, 1,29 mmol) e (R)-(1-aminopropan-2-il)carbamato de terc-butila (0,34 g, 1,94 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 948. Etapa B:(R)-(1 -(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-( N, N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2- il)carbamato de terc-butila
[00902] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 477, etapa B, usando (R)-(1-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2- il)carbamato de terc-butila (0,9 g, 0,95 mmol) e 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)piridina-2-amina (0,39 g, 1,78 mmol). LCMS [M + 2]+: 915. Etapa C: (R)-N1 -(2-aminopropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2 H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00903] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 462, etapa B, usando (R)-(1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)propan-2-il)carbamato de terc-butila (0,84 g, 0,92 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 35% de B durante 8 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm. As frações coletadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 454; 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 8,42 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,97 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,45 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 3,33-3,13 (m, 2H), 1,30 (d, J = 6,6 Hz, 3H). EXEMPLO 482 N1-(2-(-2-aminaoetilamino)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5- il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A:(2-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)(2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)carbamato de terc-butila
[00904] A uma solução de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)- 4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico (1,0 g, 1,29 mmol) em THF (4 mL) foi adicionada NCS (0,35 g, 2,59 mmol). A mistura agitada foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora sob nitrogênio. À mistura de reação foram adicionados (2-aminoetil)(2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)carbamato de terc-butila (0,59 g, 1,94 mmol) e TEA (0,35 g, 3,43 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura resultante foi filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 40% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentrada para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.077. Etapa B: (2-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3- (2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil) (2-(( terc- butoxicarbonil)amino)etil)carbamato de terc-butila
[00905] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 477, etapa B usando (2-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil-4- iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)(2-((terc- butoxicarbonil)amino)etil)carbamato de terc-butila (0,90 g, 0,86 mmol) e 5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (0,27 g, 1,34 mmol) para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 1.043. Etapa C: N1 -(2-(-2-aminaoetilamino)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2 H- tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00906] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 462, etapa B, usando (2-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4- metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)etil)(2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)carbamato de terc-butila (0,60 g, 0,58 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna XBridge Prep C18 OBD, 30 mm x 100 mm, 5 μm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 30% de B durante 11 min; Detector: UV 254 e 210 nm; Tempo de retenção: 9,73 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 483; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6 + DCl) δ 8,50 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,35 (dd, J = 9,3 Hz, 2,3 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 3,30-3,13 (m, 8H).
[00907] Os EXEMPLOS 483 a 499, na Tabela abaixo, foram preparados em uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 482, partindo-se de ácido 2-(N,N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(1-(4- metoxibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzenossulfínico e dos ácidos borônicos ou ésteres borônicos correspondentes e das aminas correspondentes e diaminas Boc-protegidas correspondentes diaminas, que foram, todos, preparados conforme aqui descrito, ou estavam disponíveis junto aos fornecedores comerciais. EXEMPLO 500 (R)-N1-(1-(2-aminoetil)pirrolidin-3-il)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol- 5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida Etapa A: N-[(3 R )-1-(2-{[(terc-butoxi)carbonil]amino}etil)pirrolidin-3- il]carbamato de benzila
[00908] A uma mistura de (R)-pirrolidin-3-ilcarbamato de benzila (1,92 g, 8,72 mmol) e K2CO3 anidro (3,61 g, 26,2 mmol) em DMF (35 mL) foi adicionado (2-bromoetil)carbamato de terc-butila (4,88 g, 21,79 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 18 horas à temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi derramada para dentro de água (100 mL). A fase aquosa foi extraída com EA (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2x30 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 75% de EA em PE. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 364. Etapa B: (R)- (2-(3-aminopirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00909] A uma solução de N-[(3R)-1-(2-{[(terc-butoxi)carbonil] amino}etil)pirrolidin-3-il]carbamato de benzila (2,28 g, 6,28 mmol) em MeOH (35 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (20% em peso, 0,42 g, 2,95 mmol) sob nitrogênio à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 24 horas à temperatura ambiente sob hidrogênio (1,5 atm (152 kPa)). A mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir o composto do título, que foi usado na etapa seguinte sem nenhuma purificação adicional. LCMS [M + 1]+: 230. Etapa C: (2-((3 R )-3-(2-(N, N-bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4- metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5-il)fenilsulfinamido)pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00910] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 477, etapa A, usando (R)- (2-(3-aminopirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila (1,38 g, 6,02 mmol). LCMS [M + 1]+: 1.003. Etapa D: (R )-(2-(3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2 H-tetrazol-5- il)fenil)sulfonamido)pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila
[00911] A uma solução de (2-((3R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoxibenzil) sulfamoil)-4-iodo-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfinamido) pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila (0,70 g, 0,70 mmol), 5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (0,38 g, 1,74 mmol) em 1,4-dioxano (8,5 mL) e água (1,5 mL) foram adicionados Pd(PPh3)4 (0,16 g, 0,14 mmol) e Na2CO3 (0,22 g, 2,09 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio três vezes e agitada durante 4 horas a 80°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi diluída com água (15 mL), extraída com EA (3x20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3x30 mL), secadas com Na2SO4 anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluído com 10% de MeOH em DCM. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + 1]+: 969. Etapa E: (R)-N1 -(1 -(2-aminoetil)pirrolidin-3-il)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3- (2 H-tetrazol-5-il)benzeno-1,2-dissulfonamida
[00912] O composto do título foi preparado conforme descrito no Exemplo 462, etapa B usando (R)-(2-(3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N- bis(4-metoxibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoxibenzil)-2H-tetrazol-5- il)fenilsulfonamido)pirrolidin-1-il)etil)carbamato de terc-butila (0,68 g, 0,70 mmol) para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC-prep com as seguintes condições: Coluna: Coluna X Bridge C18 OBD Prep 100 Â, 10 μm, 19 mm x 250 mm; Fase móvel A: água (10 mmol/L de NH4HCO3), Fase móvel B: ACN; Taxa de fluxo: 20 mL/min; Gradiente: 0% de B a 25% de B durante 9 min; Detector: UV 254 nm e 220 nm; Tempo de retenção: 8,05 min. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto do título: LCMS [M + H]+: 509; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ 8,25 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,78-6,67 (m, 1H), 6,17 (dd, J = 8,8 Hz, 2,0 Hz, 1H), 2,76-2,70 (m, 2H), 2,65-2,58 (m, 1H), 2,56-2,48 (m, 3H), 2,42-2,36 (m, 2H), 2,32-2,21 (m, 1H), 2,09-1,93 (m, 1H), 1,58-1,54 (m, 1H).
ENSAIOS BIOLÓGICOS Atividade enzimática: Determinação de CI50
[00913] As atividades das enzimas da classe B foram medidas na presença do inibidor de teste em um ensaio de fluorescência contra um substrato comercialmente disponível consistindo em um núcleo de cefalosporina que liga 7-hidroxicumarina à fluoresceína (CCF2-FA). A enzima (NDM-1, IMP-1 ou VIM-1; para uma análise, consulte, Meine, M.-R.; Llarrull, L. I.; Vila, A. J. Antibiotics, 2014, 3, 285-316) e o substrato foram diluídos em tampão KH2PO4 100 mM (pH 7) contendo 0,005% de Tween-20 e ZnSO4 10 DM. No ensaio, a concentração final de enzima foi 1 pM, 2 pM e 30 pM para NDM-1, IMP-1 e VIM-1, respectivamente, e a concentração final de CCF2-FA foi 1,25 DM. O inibidor de teste foi dissolvido em sulfóxido de dimetila e a solução foi diluída 1:50 no ensaio, resultando em uma faixa de concentração final de 20 DD a 0,00063 DD. Em uma placa de microtitulação de 384 poços, o inibidor de teste foi incubado com a enzima metalo-β- lactamase e o substrato durante 2 horas a 25oC. Fluorescência a 460 nm após excitação a 405 nm foi medida. O valor de CI50 foi determinado a partir de gráficos semilogarítmicos da inibição de enzima em função da concentração do inibidor, com uma curva gerada usando um ajuste de 4 parâmetros.
[00914] Os compostos representativos da presente invenção apresentam inibição de β-lactamases da classe B neste ensaio. Por exemplo, foram testados neste ensaio os compostos dos EXEMPLOS 1 a 500, e foi descoberto que têm os valores de CI50 mostrados na Tabela de Ensaio 1.
Atividade de potencialização antibiótica: Determinação de concentração sinérgica
[00915] As concentrações de inibidores de metalo-β-lactamase necessárias para restaurar a suscetibilidade de várias cepas bacterianas às concentrações inativas de antibióticos foram determinadas em um ensaio que avaliou o crescimento bacteriano pela medição da densidade óptica a 600 nm (DO600). As cepas bacterianas testadas incluíram as cepas clínicas Escherichia coli que expressa NDM-1 (CLB30005, CLB30016), Serratia marcescens que expressa IMP-1 (CL5741), e Klebsiella pneumoniae que expressa VIM-1 (IHMA599644). A atividade do composto inibidor foi medida na presença ou ausência do antibiótico imipenem em uma placa de microtitulação de 384 poços.
[00916] As cepas clínicas CLB30016, CL5741 e IHMA599644 foram crescidas sobre ágar de soja Trypticase™ contendo 5% de sangue ovino. As bactérias sobre as placas de ágar foram incubadas a 35°C, com umidade, de um dia para o outro. No dia seguinte, as colônias individuais de cada cepa clínica foram selecionadas e ressuspensas em 5 mL de solução salina para alcançar uma DO600 de 0,14, 0,11, 0,15 e 0,13, para CLB30016, CL5741 e IHMA599644, respectivamente. Estas foram adicionalmente diluídas a 1:100 em CAMHB 1,1X e usadas para inocular os poços de teste conforme descrito abaixo.
[00917] O antibiótico imipenem em solução de ácido 3-(N- morfolino)propanosulfônico (MOPS, pH 7) a 10 mM foi armazenado em alíquotas de uso único a -80oC. Os compostos inibidores de teste foram dissolvidos em sulfóxido de dimetila e diluídos a 1:50 no ensaio, resultando em uma faixa de concentração final de 200 μ □ a 0,195 μM. No dia do ensaio, 4 μL de solução de antibiótico foram adicionados a 45 μL solução de bactérias seguido por 1 μL de solução de composto de teste e misturados por pipetação e com um vascolejador orbital. A concentração de antibiótico usada no ensaio foi de 1 μg/mL. As placas de microtitulação foram cobertas e incubadas a 35oC durante 22 horas a 24 horas. No término da incubação, a absorbância foi determinada usando um espectrofotômetro. A concentração sinérgica de MBLI foi determinada pela identificação da concentração mais baixa de composto de teste na presença de uma determinada concentração de antibiótico que foi necessária para inibir 95% do crescimento das bactérias. Os resultados dos Exemplos 1 a 500 estão relatados na Tabela 1, expressados como a concentração de composto que potencializou a ação do antibiótico (imipenem) realizando a inibição de 95% de crescimento bacteriano (MITC95).
[00918] Os compostos representativos da presente invenção têm mínima ou nenhuma atividade antibacteriana intrínseca mas desempenham um efeito sinérgico quando usados em combinação com um antibiótico beta- lactâmico. Por exemplo, em geral, foi determinado que os compostos dos Exemplos 1 a 500 restauram a suscetibilidade ao antibiótico imipenem de um ou mais dos micro-organismos de teste em concentrações de 100 μM ou menores. Tabela de Ensaio 1. Inibição de metalo-β-lactamases (IMP-1, NDM-1, VIM-1) de bactérias que expressam metalo-betalactamases (MBL) e potencialização antibiótica pelos Compostos Exemplificadores 1 a 500.
Efluxo
[00919] Com a finalidade de avaliar a contribuição de efluxo para a falta de inibição de célula inteira dos inibidores de Fórmula I de metalo- betalactamases, foram construídas cepas-ferramenta (“tool strains”). A cepa fundamental foi Pseudomonas aeruginosa PAO1. Foram usadas uma cepa de tipo selvagem (MB5919) e uma cepa isogênica na qual múltiplas bombas de efluxo haviam sido geneticamente desativadas. A “MBL imipenem betalactamase-1” (IMP-1), obtida de uma cepa isolada clínica, foi introduzida no par de cepas pelo seguinte processo:
[00920] DNA plasmídeo (que codifica IMP-1) foi extraído de CL 5673 (IMP-1, cepa clínica de P. aeruginosa) por técnicas padrão. O DNA plasmídeo foi transferido, por eletroporação, para dentro de cepas original MB5919 (oprD+, efluxo+, AmpC induzível) e isogênica MB5890 (oprD+, efluxo-, AmpC induzível). Estas cepas transformadas foram plaqueadas em placas de ágar Müller-Hinton cátion-ajustado contendo ceftazidima a 32 μg/mL (MB5919) e a 16 μg/mL (MB5890) para selecionar aquelas células nas quais o plasmídeo que expressa IMP-1 foi introduzido com sucesso, resultando na resistência à ceftazidima. A eletroforese em gel de agarose do produto da PCR para IMP-1 proveniente dos transformantes bem sucedidos foi usada para comparar com a cepa de controle e a cepa original da qual o plasmídeo foi obtido, confirmando a transferência do gene IMP-1 (dados não mostrados).
[00921] As concentrações inibitórias mínimas (CIMs) de antibióticos sentinelas foram determinadas para controlar a qualidade das cepas. A CIM de imipenem aumentou enormemente, conforme previsto, devido à presença de IMP-1, também a CIM de meropenem (MEM) e a CIM de ceftazidima (CAZ). O grupo de efluxo +/- comportou-se similarmente aos grupos com antibióticos não BL (não beta-lactâmicos) porque devem com a cepa efluxo- apresentar sensibilidade aumentada ao cloranfenicol (CAM) e à ciprofloxacina (Cipro).
[00922] O grupo de cepas foi, então, usado como um par para determinar o efeito dos inibidores de metalo-β-lactamase de Formula I sobre a CIM de imipenem e/ou a CIM de ceftazidima. Uma concentração fixa de antibiótico foi incluída nos testes padrão de CIM em microcaldo na concentração de ponto de corte de sensibilidade do CLSI (“Clinical and Laboratory Standards Institute”). Uma quantidade fixa de um inibidor de betalactamase das classes A/C foi também incluída para inibir a enzima AmpC de Pseudomonas residente. Uma titulação serial do inibidor de metalo- β-lactamase foi incluída e foi registrada a concentração de inibidor de metalo- β-lactamase que restaura a suscetibilidade da cepa ao antibiótico incluído. Aquela concentração de inibidor de metalo-β-lactamase foi então comparada entre as duas cepas para determinar a diferença de vezes entre as cepas efluxo+ (MB9798) e efluxo- (MB9799). Isto foi considerado como uma indicação da extensão na qual o inibidor de MBL é dependente de efluxo. Tabela de Ensaio 2: Concentração de inibidores de metalo-β-lactamase de Formula I que restaura a suscetibilidade de cepas efluxo+ (MB9798) e efluxo- (MB9799) ao imipenem a 2 μg/ mL na presença de um inibidor de serina-β-lactamase das classes A, C, D intimamente relacionado ao relebactam. Na Tabela abaixo, a Razão de Efluxo é a razão de MITC95 PA_9798/MITC95 PA_9799
[00923] Os compostos representativos de Fórmula I da presente invenção têm, em geral, uma razão de efluxo de Pseudomonas mais baixa do que a dos compostos nos quais o átomo ou grupo conector à posição C-6 é um carbono ou hidrogênio ao invés de -SO2-.

Claims (33)

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 é N ou CH; X2 é N ou CH; Z é tetrazolila, em que Z é ligado através de uma ligação de carbono-carbono ao anel de núcleo de seis membros tendo X1 e X2; RA é -(CH2)n-AriA1, -(CH2)n-HetA1, -(CH2)n-cicloalquilaC4- C6, ou -CH2)n-cicloalquenilaC4-C6, em que as ditas -(CH2)n-cicloalquilaC4-C6 e -CH2n-cicloalquenilaC4-C6 estão opcionalmente substituídas com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados dentre -NH2, -OH,-F, e - NRaCOalquilaC1 -C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -F, -CF3,-NRaRb, e -ORa; R1 é: 1) -NH2; 2) -NRa-alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados dentre: -F, -CF3, alquilaC1-C6, -CH(NH2)C(O)NH2, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, -(CH2)1-2NH2, - NRaCH22-3NH2, -NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa, e - OCH22-3NH2; 3) -NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre: -F, -CF3, - ab ab +ab a CONR R , -C(O)OH, -NR R , -N R R CH3, -NHCH2CH2OCH3, -OR , e - OCH22-3NH2; 4) -NRa(CH2)n-cicloalquila C3-C6, em que a cicloalquilaC3-C6 está opcionalmente substituída com -CH2OH ou -NH2; 5) uma heterocicloalquila monocíclica de 4-6 membros ligada a nitrogênio com 0, 1, ou 2, átomos adicionais de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S, ou uma heterocicloalquila bicíclica de 6 a 10 membros ligada a nitrogênio com 0, 1, 2, ou 3 átomos adicionais de anel heteroatômico selecionados dentre N, O e S em que o anel bicíclico pode ser ligado por ponte, fundido ou espirocíclico, em que a heterocicloalquila monocíclica de 4-6 membros e a heterocicloalqula bicíclica de 6 a 10 membros estão opcionalmente substituídas com um a três substituintes, independentemente selecionados dentre: -F, -NRaRb, oxo, - (CH2)1-2OH, -CH2NH2, -SO2CH3, e alquilaC1-C6 e em que um átomo de enxofre do anel está opcionalmente substituído com um ou dois oxo; 6) -NRa-(alquilaC1-C3)n-AriB1, em que a alquilaC1-C3 está opcionalmente substituída com -NH2; e 7) -NRa-(alquilaC1-C3)n-HetB1; AriA1 é um sistema de anel aromático selecionado dentre: 1) um anel monocíclico de 5-6 membros com 0, 1, 2, ou 3 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O, e S, opcionalmente substituída com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados dentre: a) halogênio, b) -alquilaC1-C6, c) -CN, d) -CH2OH, e) -C(O)NRaRb, f) -C(O)NH(CH2)2-4NH2 opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb e -- (CH2)nORa, g) -C(O)ORa, h) -(CH2)pNHRa opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb ou --ORa, i) -(CH2)pNRaC(=NH)NH2, j) -NRaC(O)alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb ou -ORa, k) -NRaSO2-alquilaC1-C6, l) -NRaSO2-ciclopropila, m) -ORa, n) oxo, o) -S-alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb ou --ORa; p) -SO2Ra, q) -SO2NRaRb, r) -SO2NH-ciclopropila, s) -AriA2, t) -(CH2)nNRaAriA2, u) -C(O)NRaHetA2 e v) -HetA2, e 2) um anel bicíclico de 8 a 10 membros com 1, 2, 3 ou 4 átomos de anel heteroatômico selecionados dentre N, O e S, em que um átomo de S opcionalmente tem um ou dois substituintes oxo e um átomo de N está opcionalmente sob a forma de um N-óxido, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre a) halogênio; b) alquilaC1 -C6 opcionalmente substituída com um a três substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb, -F e -ORa; c) -(CH2)nCF3; d) -C(=NH)NH2; e) -CN; f) -C(O)CF3; g) -C(O)NRaRb; h) -C(O)NHCH2C(O)ORa; i) -C(O)NH-alquilaC2-C4-NH2, j) -C(O)ORa; k) -NRaRb; l) -NHCH2SO3H; m) -(CH2)nNHC(=NH)NH2; n) -NHC(O)alquilaC1-C6; o) -NHC(O)NH2; p) -NHC(O)ORa; q) -NHSO2CH3; r) -ORa; s) oxo; t) -SO2Ra, u) -CH2-fenil-OCH3; e v) -HetA2; HetA1 é di-hidrotiopiranoíla ou tetra-hidropiranoíla; AriA2 é um anel monocíclico aromático de 5-6 membros com 1, 2, ou 3 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, N como um sal quaternário, e S, ou 4 átomos de N no anel, opcionalmente substituído com -CH2OH, -COOH,-CONH2, -C(O)OalquilaC1- C6, e -(CH2)pNHRa opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados dentre -NRaRb e --ORa; HetA2 é um anel monocíclico saturado de 4-6 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S, em que o S está opcionalmente substituído com dois grupos oxo, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre alquilaC1-C6, -CN, -OH, e oxo; AriB1 é um anel aromático selecionado dentre: 1) um anel aromático monocíclico de 5-6 membros com 0, 1, 2, ou 3 átomos de N no anel, opcionalmente substituído com 1 substituinte selecionado dentre -CF3, alquilaC1-C6, -(CH2)nNH2 e -OCH3; ou 2) um anel bicíclico de 9 membros com 2 átomos de N no anel; HetB1 é um anel saturado selecionado dentre: 1) um anel monocíclico saturado de 4-6 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N, O e S, em que um átomo de N no anel está opcionalmente sob a forma de uma amina quaternária, em que o S está substituído com dois grupos oxo, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -F, alquilaC1-C6, hidroxialquilaC1-C6, -C(O)ORa,-(CH2)kNRaRb, -ORa, e oxo; ou 2) um anel bicíclico de 6-10 membros com 1 ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N e O, opcionalmente substituído com -OH ou -NH2, em que o anel bicíclico é ligado por ponte ou fundido; Ra e Rb são independentemente H ou alquilaC1-C6; k é 0, 1, 2, 3, ou 4; cada n é independentemente 0 ou 1; e cada p é independentemente 0, 1, 2, ou 3.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que que X1 e X2 são CH.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser da Fórmula IA em que: RA é AriA1, cicloalquilaC4-C6, ou cicloalquenilaC4-C6, em que as ditas cicloalquilaC4-C6 e cicloalquenilaC4-C6 estão opcionalmente substituídas com -NH2 ou NHC(O)(CH2)1-3NH2; AriA1 é um sistema de anel aromático selecionado dentre: 1) um anel monocíclico de 5-6 membros com 0, 1, ou 2 átomos de anel heteroatômico independentemente selecionados dentre N e S, opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre: a) F, b) -alquilaC1-C6, c) -CN, d) -CH2OH, e) -C(O)NRaRb, f) -C(O)NH(CH2)2-4NH2, g) -C(O)ORa, h) -(CH2)nNHRa, i) -NHC(=NH)NH2; j) -NHC(O)CH3; k) -NRaSO2-alquilaC1-C6, l) -NHSO2-ciclopropila, m) -ORa, n) -SO2NRaRb, o) -S-alquilaC1-C6, p) -SO2NH-ciclopropila, q) -AriA2, r) -(CH2)nNRaAriA2, s) -C(O)NRaHetA2 e t) -HetA2, e 2. um anel bicíclico de 8 a 10 membros com 1, 2, 3 ou 4 átomos de anel heteroatômico selecionados dentre N, O e S, em que um átomo de S está opcionalmente substituído com um ou dois substituintes oxo e um átomo de N está opcionalmente sob a forma de um N-óxido, e em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F, alquilaC1-C6, -CH2CF3, - CF2CH2NH2, -CF3, -C(=NH)NH2, -CH(NH2)CH3, -CN, -C(O)CF3, - ab a a ab C(O)NR R , -C(O)NHCH2C(O)OR , -C(O)OR , -(CH2)0-2NR R , - NHC(O)CH3, -NHC(O)NH2, -NHC(O)ORa, -NHCH2SO3H, -NHSO2CH3, - ORa, oxo, -CH2-fenil-OCH3, e -HetA2; e todas as outras variáveis são definidas na reivindicação 1.
4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que RA é AriA1.
5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que RA é: em que: indica o ponto de ligação ao restante do composto, e RD é F,-alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-C4-NH2, -NHRa ou - (CH2)xNHRa, cada x é independentemente 0, 1, ou 2, e n é 0 ou 1.
6. Composto de acordo com a reivindicação 4, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que AriAl é 1) piridila opcionalmente substituída com -NH2, 2) benzoimidazolila substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F, -CH3 e -(CH2)nNH2; ou 3) benzotiazolila substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -CH3 e -(CH2)nNH2.
7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é: 1) -NH2; 2) --NRa-alquilaC1-C6 opcionalmente substituída com 1, 2, 3 ou 4 substituintes independentemente selecionados dentre -F, -CF3, alquilaC1- C6, -CH(NH2)C(O)NH2, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, -(CH2)1-2NH2, -NRaRb, - N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa, -NRa(CH2)2-3NH2, e -O(CH2)2-3NH2; - NRa(CH2)n- 3) -NRa(CH2)n-cicloalquilaC3-C6, em que a cicloalquilaC3-C6 está opcionalmente substituída com -CH2OH ou -NH2; 4) -NRa-(alquilaC1-C3)n-AriB1, em que a alquilaC1-C3 está opcionalmente substituída com -NH2; e 5) -NRa-(alquilaC1-C3)n-HetB1.
8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é: -NH2, -NH-HetB1 opcionalmente substituído com -NH2, ou -NH-alquilaC2-C3NH2, opcionalmente substituída com -CH3, -OH ou -NH2.
9. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser da Fórmula IB: em que: AriA1 é um sistema de anel aromático selecionado dentre: 1) um anel monocíclico de 5-6 membros com 0 ou 1 átomo de N substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F,-alquilaC1-C6, -CONH-alquilaC2-4-NH2, ou -NHRa; ou 2) um anel bicíclico de 9 membros com 2 átomos de anel heteroatômico selecionados dentre N e S, em que o anel está opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre F, alquilaC1-C6, e -(CH2)xNRaRb; R1 é: 1) -NH2; 2) -NRa-alquilaC1-6 opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes F e opcionalmente substituída com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre -CF3, -CH(NH2)C(O)NH2; - ab a ab +ab C(O)NR R ; -C(O)OH; -NR (CH2)2-3NH2, -NR R , -N R R CH3, - NHCH2CH2OCH3, -ORa, e -O(CH2)2-3NH2; -NRa(CH2)n- 3) -NRa(CH2)n- cicloalquilaC3-C6, em que a cicloalquilaC3-C6 está opcionalmente substituído com -CH2OH ou -NH2; 4) -NRa-(alquilaC1-C3)n-AriB1; e 5) -NRa-(alquilaC1-C3)n-HetB1; Ra e Rb são H ou -CH3; e x é 0, 1 ou 2.
10. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ter a estrutura: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
11. Zwitterion, caracterizado pelo fato de que é um composto como definido na reivindicação 10.
12. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um carreador farmaceuticamente aceitável.
13. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que compreende, adicionalmente, uma quantidade eficaz de um antibiótico e-lactâmico.
14. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 12 ou 13, caracterizada pelo fato de que compreende, adicionalmente, uma quantidade eficaz de um ou mais compostos inibidores de betalactamase.
15. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 14, a dita composição, caracterizada pelo fato de que compreende um composto inibidor de betalactamase selecionado do grupo consistindo em: relebactam, avibactam, vaborbactam, tazobactam, sulbactam, e ácido clavulânico.
16. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 15, caracterizada pelo fato de que o composto inibidor de betalactamase é tazobactam e o antibiótico e-lactâmico é ceftolozano.
17. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 15, caracterizada pelo fato de que o composto inibidor de betalactamase é relebactam.
18. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 16, caracterizada pelo fato de que o antibiótico β- lactâmico é selecionado do grupo consistindo em imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcilina, ampicilina, amoxicilina, carbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina, ticarcilina, cefoperazona, cefotaxima, ceftriaxona, cefepima, ceftolozano, e ceftazidima.
19. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 15 e 17 a 18, caracterizada pelo fato de que o antibiótico e-lactâmico é imipenem.
20. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 19, caracterizada pelo fato de que compreende, adicionalmente, cilastatina ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
21. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo opcionalmente em combinação com um antibiótico e-lactâmico ou de uma composição farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 12 a 20, caracterizado pelo fato de ser para manufatura de um medicamento para inibir betalactamase em um indivíduo.
22. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um antibiótico e-lactâmico ou de uma composição farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 12 a 20, caracterizado pelo fato de ser para manufatura de um medicamento para tratar uma infecção bacteriana.
23. Uso de acordo com a reivindicação 21 ou 22, caracterizado pelo fato de que o antibiótico e-lactâmico é selecionado do grupo consistindo em imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcilina, ampicilina, amoxicilina, carbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina, ticarcilina, cefoperazona, cefotaxima, ceftriaxona, cefepima, ceftolozano, e ceftazidima.
24. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 23, caracterizado pelo fato de que o antibiótico e-lactâmico é imipenem.
25. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e imipenem, cilastatina, e relebactam, caracterizado pelo fato de ser para manufatura de um medicamento para tratar uma infecção bacteriana.
26. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 25, caracterizado pelo fato de que a infecção bacteriana é devido à Pseudomonas spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp., Escherichi spp., Morganella spp., Citrobacter spp., Serratia, spp. ou Acintetobacter spp.
27. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a estrutura ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
28. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a estrutura ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
29. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a estrutura ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
30. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a estrutura ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
31. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a estrutura ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
32. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a estrutura ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
33. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 27 a 32, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.
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