BR112012011181A2

BR112012011181A2 - ''estação de processsamento de peças corrediça automatizada e método de processamento de uma amostra''

Info

Publication number: BR112012011181A2
Application number: BR112012011181-7A
Authority: BR
Inventors: Brian Howard Kram; Austin Micheil Ashby; Christine Tse; Kevin David Marshall; Timothy James Keller
Original assignee: Ventana Medical Systems, Inc.
Priority date: 2009-11-13
Filing date: 2010-11-15
Publication date: 2020-10-13
Also published as: IL219086A0; US20150071833A1; US9618430B2; EP2499500B1; EP2499500A4; KR20120107074A; CA2778837A1; IN2012DN03245A; CN102687023B; US20130052331A1; WO2011060387A1; JP2013511048A; JP5611363B2; HK1175845A1; CA2778837C; JP5923145B2; IL219086A; US8911815B2; EP2499500A1; KR101358549B1

Abstract

ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA E MÉTODO DE PROCESSAMENTO DE UMA AMOSTRA A presente invenção refere-se em geral a métodos e aparelhos para processamento de amostras mediante a utilização de filmes finos. Mais especificamente, a invenção refere-se a métodos e aparelhos para fornecer acomodação de volume ajustável para processar amostras. A estação de processamento de peça corrediça (300, 1200, 1421, 1440) automatizada compreende um primeiro conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) que tem uma parte curvada, um mecanismo de acionamento (702, 1260, 1530) configurado para mover o primeiro conjunto de platina de uma posição de modo de espera para uma posição de processamento, um conjunto de dispensação de liquido (208, 540, 1540) para dispensar um líquido e um segundo conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) que compreende um dispositivo de posicionamento de peça corrediça (99, 316, 1230, 1457, 1510), sendo que o dito dispositivo de posicionamento de peça corrediça compreende um dispositivo de retenção de peça corrediça (330, 1240, 1402, 1511), o dispositivo de posicionamento de peça corrediça operável para posicionar uma peça corrediça retida pelo dispositivo de retenção de peça corrediça próximo ao primeiro conjunto de platina, sendo que o primeiro conjunto de platina e o segundo conjunto de platina que são configurados para causar um movimento girante longitudinal ou transverso da parte curvada do primeiro conjunto de platina em relação ao segundo conjunto de platina retiveram a peça corrediça para criar um intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570) entre a peça corrediça e a parte curvada suficiente para aplicar um líquido (86, 160, 560) a uma amostra (88, 187, 1317) na peça corrediça.

Description

A PS ee 2 o SN e MN — : “ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA E MÉTODO DE PROCESSAMENTO DE UMA AMOSTRA”

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se em geral a métodos e aparelhos para processamento de amostras mediante a utilização de filmes finos. Mais especificamente, a invenção refere-se a métodos e aparelhos para fornecer acomodação de volume ajustável para processar amostras. i ] ANTECEDENTES DA INVENÇÃO || " Uma ampla variedade de técnicas tem sido desenvolvida para preparar e analisar amostras biológicas. Exemplo de técnicas inclui microscópio, análises microarranjo de DNA (por exemplo, análise microarranjo de proteína e ácido nucleico), e métodos de espectrometria de massa. Amostras são preparadas para análise mediante aplicação de um ou mais líquidos às amostras. Se uma amostra é tratada com múltiplos líquidos, tanto a aplicação quanto à remoção subsequente de cada um dos líquidos pode ser importante para produzir amostras adequadas para análise.

Peças corrediças microscópicas que apoiam amostras biológicas, por exemplo, seções de tecido ou células, são geralmente tratadas com um ou mais pigmentos ou reagentes para adicionar cor e contraste para diferenciar células transparentes ou invisíveis ou componentes de células. Amostras podem ser preparadas para análise mediante imersão manual das peças - corrediças que apoiam amostras em recipientes de pigmentos ou outros reagentes, Este processo de trabalho intenso geralmente resulta em um processamento e transporte de líquidos entre recipientes inconsistentes.

Transporte de líquidos leva a contaminação e degradação do processo de líquidos. Esses tipos e processos manuais geralmente utilizam volumes excessivos de líquidos resultando em custos de processamento relativamente altos, especialmente se os pigmentos ou outros reagentes forem dispendiosos e propensos à degradação devido ao transporte.

Máquinas automatizadas de imersão e encharcamento (“dip and dunk”) imergem amostras em líquidos similarmente a técnicas de imersão manual. Essas máquinas automatizadas podem processar amostras em lotes —submergindo prateleiras portando peças corrediças microscópicas em banhos abertos. Infelizmente, proporções relativamente altas de reagentes estão em recipientes de banho das máquinas automatizadas de imersão, submersão e encharcamento. Similarmente aos processos manuais, se os líquidos forem reagentes caros, os custos de processamento podem ser relativamente altos, especialmente se proporções significantes de reagentes forem refugadas. Recipientes de banho de reagente podem ser geralmente esvaziados por causa da contaminação devido ao transporte. Recipientes abertos podem também ser propensos a perdas por evaporação, o que pode alterar significantemente a concentração dos reagentes, resultando em um — processamento inconsistente. Pode ser difícil processar amostras sem produzir volumes significantes de refugo que possam exigir manuseio especial e eliminação.

Processos de coloração imunohistoquímico e hibridização fluorescente in situ são geralmente usados para preparar espécimes. A taxa de coloração imunohistoquímica e de hibridização fluorescente in situ um tecido fixado em uma seção em uma peça corrediça microscópica é limitada pela velocidade na qual as moléculas (por exemplo, conjugando biomoléculas) podem dispersar em um tecido fixo de uma solução aquosa posta em contato direto com a seção do tecido. O tecido é geralmente “fixado” imediatamente — após excisão por meio da aplicação de 10% de uma solução de formaldeído, que preserva o tecido da destruição autocatalítica causada pela ligação cruzada de grande parte da proteína por meio de pontes de metileno. Esse tecido de ligação cruzada pode apresentar barreiras adicionais à dispersão,

i 3 . oo — o incluindo as membranas de bicamadas lipídicas que envolvem células individuais e organelas.

Biomoléculas conjugadas (anticorpos ou moléculas de sonda de DNA) podem ser relativamente grandes, variando em tamanho de alguns quilodaltons a muitos quilodaltons, o que os compele a dispersar vagarosamente em um tecido sólido com períodos típicos para dispersão que pode variar de minutos a algumas horas.

Condições de incubação típicas são de trinta minutos a 37 graus centígrados.

Ú “A taxa de incubação é geralmente conduzida por uma concentração de gradiente tal que a taxa de dispersão possa ser aumentada, aumentando a concentração de conjugado no reagente.

Infelizmente, conjugados são geralmente muito caros, então aumentar a concentração deles é desperdício e geralmente economicamente inviável.

Adicionalmente, a proporção excessiva de conjugado que é conduzida para o tecido, em que altas concentrações são usadas, fica presa no tecido, é difícil de enxaguar e causa altos níveis de coloração não específica de fundo.

Para reduzir o ruído devido ao nível de coloração não específica de fundo e aumentar o sinal de coloração específica, baixas concentrações de conjugado com longos períodos de incubação são geralmente usados para permitir ao conjugado ligar-se apenas aos locais específicos.

Instrumentos de coloração de histologia convencionais geralmente usam volumes de reagentes relativamente altos (100 pl) em uma - —------ poça de tipicamente 300 ul de tampão.

Isso produz uma concentração bastante baixa do reagente na poça que reside sobre o tecido.

Alguns instrumentos convencionais misturam o reagente alternando jatos aéreos tangenciais em uma camada de óleo sobreposta que gira e gira em movimento contrário quando entra em contato com os jatos de ar alternados, assim transmitindo movimento para dentro da poça aquosa tangencial.

Esta mistura é baixa e não é particularmente vigorosa e cria perdas de evaporação significantes.

Grandes volumes de líquido de enxague são usados para deslocar fisicamente as grandes poças de baixa concentração de reagentes que estão cobertas com óleo. Esse procedimento de enxague produz grandes volumes de líquido de refugo que pode ser resíduo perigoso, e pode romper fisicamente o tecido pela açãode lavagem vigorosa.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO Pelo menos algumas realizações são direcionadas a um método que leve uma amostra entrar em contato com um líquido, movendo uma i superfície curvada umedecida por um líquido na proximidade da amostra biológica. A distância separando a superfície curvada umedecida e a amostra biológica é suficiente para formar uma camada de menisco de líquido entre a superfície curvada e a peça corrediça. A camada de menisco entra em contato com pelo menos uma parte da amostra biológica. A camada de menisco pode ser um filme relativamente fino que é acomodado no intervalo. O substrato é movido para diferentes configurações para acomodar diferentes volumes de fluidos formando a camada de menisco. Ação capilar para movimentar a camada de menisco pode incluir, sem limitação, movimento da camada devido ao fenômeno: do líquido deslizar espontaneamente através do intervalo entre a superfície umedecida curvada e uma peça corrediça devido às forças adesivas, forças coesivas e/ou tensão da superfície.

SS Em algumas realizações, um substrato é movido entre uma configuração plana, uma configuração arqueada (por exemplo, uma configuração de arco simples, uma configuração de arco complexa, uma configuração composta, etc.), ou uma configuração angulada (por exemplo, uma configuração em forma de V, configuração em forma de W, ou similar), bem como qualquer outra configuração para acumular refugo e/ou tratar, incubar, ou senão tratar a amostra.

' .— : - - ' Em algumas realizações, uma estação para processar uma peça corrediça portando um espécime inclui um primeiro conjunto de platina, um segundo conjunto de platina, um mecanismo de acionamento configurado para mover o primeiro conjunto de platina de uma posição de modo de espera para 5 uma posição de processamento, e um dispositivo de posicionamento de peça corrediça. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça compreende um dispositivo de retenção de peça corrediça. O dispositivo de retenção de peça : corrediça é operável para posicionar uma peça corrediça segura pelo dispositivo de retenção de peça corrediça próxima ao primeiro conjunto de platina na posição de processamento e operável para posicionar a peça corrediça próxima ao segundo conjunto de platina em que o segundo conjunto de platina está em uma posição de modo de espera. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça está configurado para mover a peça corrediça ao longo de uma parte curvada de um do primeiro conjunto de platina eosegundo conjunto de platina para aplicar um líquido em uma amostra na peça corrediça.

Em outras realizações, um sistema de processamento compreende uma unidade de rolete, um dispositivo de retenção de peça corrediça, e um atuador. A unidade de rolete inclui uma parte curvada com uma região de aplicação de líquido. O atuador é acoplado ao dispositivo de retenção de peça corrediça e é configurado para mover a peça corrediça segura pelo «dispositivo de retenção de peça corrediça ao longo da parte (tal como uma parte curvada) para definir um intervalo capilar. Em certas realizações, o atuador inclui um ou mais mecanismos de acionamento, motores, sistemas de engrenagens, conjuntos de pistão, ou similares, Em ainda outras realizações, um método entrega a peça corrediça para o dispositivo de retenção de peça corrediça. Um primeiro líquido é entregue para pelo menos uma peça corrediça e uma primeira parte curvada ã 6 : da unidade de rolete. A peça corrediça se move ao longo da primeira parte curvada para aplicar o primeiro líquido em uma amostra entre a peça corrediça e a unidade de rolete. A parte curvada é usada para aplicar líquidos diferentes na amostra. Em certas realizações, a parte curvada é descartável e usada para desempenhar todo protocolo. A unidade de rolete, descartável e peça corrediça podem ser movidas juntas para qualquer quantidade de diferentes estações de processamento. Em outras realizações, a primeira parte curvada é removida de um segurador da unidade de rolete. Uma segunda parte curvada é posta no | segurador da unidade de rolete. Líquidos adicionais podem ser aplicados à amostra usando a segunda parte curvada. A peça corrediça é movida ao longo da segunda parte curvada da unidade de rolete para aplicar o segundo líquido a amostra. Em certas realizações, uma ou ambas as partes curvadas podem estar na forma de uma tampa que sobrepõe pelo menos uma parte da unidade de rolete. A tampa pode incluir uma lâmina relativamente fina de material.

Em algumas realizações, um aparelho para aplicar um líquido a uma amostra compreende um dispositivo de retenção de peça corrediça e um aplicador deformável móvel entre uma configuração plana e uma configuração curvada. O aplicador deformável na configuração plana é adaptado para estender através de uma peça corrediça segura pelo dispositivo de retenção de peça corrediça. O aplicador deformável na configuração curvada é adaptado para definir um intervalo capilar de altura variável com a peça corrediça segura pelo dispositivo de retenção de peça corrediça.

O aparelho pode ainda incluir um dispositivo de conversão configurado para mover o aplicador deformável entre a configuração plana e a configuração curvada e um mecanismo de acionamento mecanicamente acoplado a um aplicador deformador. O mecanismo de acionamento inclui um atuador para mover o aplicador deformável na configuração curvada ao longo da peça corrediça.

' Em ainda outras realizações, uma tampa para processar uma amostra em uma peça corrediça microscópica inclui um corpo, uma primeira pluralidade de elementos de intervalo, e uma segunda pluralidade de elementos de intervalo. O corpo tem uma primeira superfície não plana compreendendo uma região de aplicação de reagente e uma segunda superfície opondo-se a primeira superfície não plana. A primeira superfície não , plana e a segunda superfície definem a espessura do corpo, A região de aplicação de reagente, em algumas realizações, está substancialmente entre a primeira pluralidade de elementos de intervalo e a segunda pluralidade de elementos tal que a amostra na peça corrediça microscópica fica voltada para a região de aplicação de reagente em que a peça corrediça microscópica se estende através da pluralidade de elementos de intervalo e a segunda pluralidade de elementos de intervalo. Em certas realizações, a peça corrediça microscópica entra fisicamente em contato e rola e ao longo dos elementos de intervalo.

Em algumas realizações, uma estação de processamento de peça corrediça inclui uma unidade de base e uma tampa recebível pela unidade de base. A tampa inclui uma região de aplicação de líquido arqueada e elementos de intervalo. Os elementos de intervalo são posicionados fora da região de aplicação do líquido e são afastados um do outro ao longo da extensão da região de aplicação de líquido. Os elementos de intervalo são dimensionados -—- para afastarem uma peça corrediça da região de aplicação de líquido para definir um intervalo para conter um líquido.

Em outras realizações, um aparelho para processar espécimes compreende um mecanismo de acionamento móvel entre uma primeira configuração e uma segunda configuração e uma pluralidade de estações de aplicação de reagente acopladas a um mecanismo de acionamento, Pelo menos uma das estações de aplicação de reagente inclui uma superfície não plana e um dispositivo de posicionamento de peça corrediça. O dispositivo de acionamento de peça corrediça é configurado para portar uma peça corrediça e é móvel entre uma configuração de recebimento de reagente e uma configuração de aplicação de reagente. O dispositivo de posicionamento de peça corrediçaé movido d da configuração de recebimento de reagente para a configuração de aplicação de reagente quando o mecanismo de acionamento se move da primeira configuração para a segunda configuração. Em algumas realizações, a tampa compreende uma ou mais membranas elimináveis ou reusáveis, filmes, coberturas, ladrilhos ou similar.

Em algumas realizações, a tampa é uma membrana fina que é feita de um único material. Em outras realizações, a tampa é uma membrana fina feita de múltiplos materiais. Por exemplo, a membrana pode ter uma construção multicamada. Uma das camadas da membrana pode ser uma camada adesiva para acoplar à uma platina ou outras superfícies adequadas.

Se a tampa for um filme ou cobertura, a tampa pode ser descartada após processar uma única peça corrediça para prevenir ou limitar transporte de contaminação. Em algumas realizações, a superfície de suporte subjacente pode incluir um ou mais elementos de intervalo (por exemplo, reentrâncias, saliência, ou similar). Quando a tampa sobrepõe à superfície, os elementos de intervalo podem formar descontinuidades correspondentes ao longo da tampa. Em algumas realizações, um rolete. inclui um material dispensável, tal como uma lâmina, que é dispensada de maneira controlável para mover a lâmina através de uma peça corrediça microscópica. A parte da lâmina na peça corrediça forma uma tampa. Seções diferentes da lâmina —podem ser usadas para aplicar fluidos de processamento diferentes.

Em outras realizações, uma estação para processar uma peça corrediça portando pelo menos uma amostra inclui um conjunto de platina e um dispositivo de retenção de peça corrediça. O dispositivo de retenção de peça gm O 25 RU A RI SS SO o . o 9 corrediça é configurado para mover a peça corrediça ao longo da parte curvada do conjunto de platina para aplicar um líquido na amostra na peça corrediça onde o líquido está entre o conjunto de platina e a peça corrediça. Em algumas realizações, um método para misturar fluidos inclui dispensar um primeiro fluido em uma peça corrediça. Após dispensar o primeiro fluido, um segundo fluido é dispensado na peça corrediça. Um substrato se opondo a peça corrediça é usado para misturar o primeiro e segundo fluido para produzir um fluido misto. Um nível desejável de NS homogeneidade da mistura pode ser atingido devido à ação de mistura. Em certas realizações, o primeiro fluido é misturado antes de dispensar o segundo fluido.

Em algumas realizações, um aparelho de coloração tem um modo de rolagem tal que uma peça corrediça usa um descartável para aplicar um ou mais liquidos a um espécime. O descartável pode ser usado para aplicar os líquidos, durante incubação, e/ou remoção dos líquidos. Um aparelho de coloração, em algumas realizações, inclui uma ' unidade substituível que usa dois descartáveis para processar uma única peça corrediça. A unidade substituível pode aplicar líquidos, desempenha incubação, elou remover líquido para desempenhar um protocolo desejado. Em outras realizações, descartáveis adicionais podem ser utilizados para desempenhar coloração complexa. Como usado na presente invenção, o termo “descartável” eso “quando aplicado a um sistema ou componente (ou combinação de componentes), tais como uma tampa, um substrato, um líquido de processamento, ou similar, é um termo amplo e geralmente significa, sem limitação, que o sistema ou componente em questão é usado um número finito de vezes e é então descartado. Alguns componentes descartáveis, tais como ladrilho de plástico, são usados apenas uma vez e então descartados. Em algumas realizações, componentes múltiplos de um aparelho de processamento são descartáveis para assim prevenir ou limitar o transporte da contaminação. Em outras realizações, os componentes são não descartáveis e podem ser usados qualquer número de vezes. Por exemplo, tampas são não descartáveis e podem estar sujeitas a diferentes tipos de limpeza e/ou — processos de esterilização sem alterar consideravelmente as características da tampa.

Em algumas realizações, uma estação para processamento da : peça corrediça portando um espécime inclui um primeiro conjunto de platina, um segundo conjunto de platina, e um mecanismo de acionamento configurado paramovero primeiro conjunto de platina de uma posição de modo de espera para uma posição de processamento. Um dispositivo de posicionamento de peça corrediça compreende um dispositivo de retenção de peça corrediça e é operado para posicionar uma peça corrediça segura pelo dispositivo de retenção de peça corrediça próximo a um primeiro conjunto de platina na posição de processamento e operável para posicionar a peça corrediça próxima a uma segundo conjunto de platina quando o primeiro conjunto de platina está na posição de modo de espera. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça é configurado para mover a peça corrediça ao longo de uma parte curvada de um do primeiro conjunto de platina e um segundo conjunto de platina para aplicar um líquido em uma amostra na peça corrediça em que o líquido está entre aquele do primeiro conjunto de platina e do segundo conjunto - de platina e da peça corrediça. O mecanismo de acionamento, em algumas realizações, pode alternadamente posicionar o primeiro conjunto de platina no modo de espera e na posição de processamento. O segundo conjunto de platina tem uma superfície substancialmente plana. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça é móvel entre uma primeira configuração para pôr a peça corrediça através da superfície substancialmente plana e uma segunda configuração

: nu para manter a peça corrediça afastada da face substancialmente plana. O primeiro conjunto de platina inclui um segurador e uma tampa acoplável removível ao segurador. O segurador inclui pelo menos um elemento térmico configurado para receber energia elétrica e para gerar calor usando a energia elétrica A estação pode ainda incluir um aparelho de trilho retendo um primeiro conjunto de platina. O primeiro conjunto de platina é deslizável ao longo do aparelho de trilho entre a posição de modo de espera e a posição de | processamento. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça tem um modo de rolagem para mover a peça corrediça com relação à parte curvada para definir o intervalo de altura variável entre a peça corrediça e a parte curvada e um modo de não rolagem para pôr a peça corrediça na outra do primeiro conjunto de platina e o segundo conjunto de platina. No modo de rolagem, a peça corrediça pode girar longitudinalmente e/ou lateralmente com —relaçãoà parte curvada.

Um sistema de processamento de amostra, em algumas realizações, inclui uma unidade de rolete, um dispositivo de retenção de peça corrediça, e um atuador, A unidade de rolete tem uma parte curvada que inclui uma região de aplicação de líquido. O atuador é acoplado a um dispositivo de retenção de peça corrediça. O atuador é configurado para mover uma peça corrediça segurada pelo dispositivo de retenção de peça corrediça ao longo da . parte -curvada para definir o intervalo capilar entre a peça corrediça e a parte curvada tal que o intervalo capilar tenha uma altura variável.

A unidade de rolete inclui uma primeira pluralidade de elementos de intervalo distintos e uma segunda pluralidade de elementos de intervalo distintos afastados da primeira pluralidade de elementos de intervalo distintos. Pelo menos a parte da região de aplicação de líquido está entre a primeira pluralidade de elementos de intervalo distintos e a segunda pluralidade de

= + 12 o elementos de intervalo distintos. A primeira pluralidade de elementos de intervalo distintos pode incluir pelo menos uma reentrância que tem uma altura de pelo menos 2,54x10* cm.

A unidade de rolete pode incluir uma tampa arqueada e um segurador com uma região de montagem para receber a tampa. A parte curvada inclui a tampa arqueada. A tampa arqueada pode ser maleável, semimaleável, ou rígida.

i O sistema de processamento de amostra pode ainda incluir um dispensador de fluido que tem um aporta posicionada para entregar líquido entre uma ponta da peça corrediça segura pelo dispositivo de preensão de ! peça corrediça e a parte curvada. A unidade de rolete pode incluir uma porta de refugo posicionada para remover líquido de um intervalo capilar. O atuador pode ser acoplado a um dispositivo de retenção de peça corrediça tal que o dispositivo de peça corrediça mova a peça corrediça ao longo da parte curvada tal que mova um líquido no intervalo capilar na direção da porta de refugo da unidade de rolete usando ação capilar.

Um método pode incluir a entrega de uma peça corrediça para um dispositivo de retenção de peça corrediça. Um primeiro líquido é entregue para pelo menos uma das peças corrediças e a uma parte curvada de uma unidade de rolete, A peça corrediça mantida pelo dispositivo de preensão de peça corrediça é movida ao longo da parte curvada da unidade de rolete para aplicar o primeiro líquido a uma amostra entre a peça corrediça e a unidade de rolete.

Um segundo líquido é aplicado a pelo menos uma das peças corrediças e a | parte curvada da unidade de rolete. A peça corrediça mantida é movida pelo | 25 dispositivo de preensão de peça corrediça ao longo da parte curvada da ' unidade de rolete para aplicar o segundo líquido à amostra entre a peça | corrediça e a unidade de rolete.

O método inclui mover o primeiro líquido em direção a uma porta

“ 13 de refugo da unidade de rolete mediante a rolagem da peça corrediça. O primeiro líquido é removido de um intervalo entre a peça corrediça e a parte curvada pelo uso da porta de refugo enquanto a peça corrediça cobre a porta de refugo. A peça corrediça mantida pelo dispositivo de retenção de peça corrediçae movida ao longo da parte curvada. Em algumas realizações, a peça corrediça é rolada na peça corrediça ao longo de uma primeira pluralidade de elementos formadores de intervalo e uma segunda pluralidade de elementos formadores de intervalo distanciados da primeira pluralidade de elementos formadores de intervalo. O método pode incluir adicionalmente remover o primeiro líquido de entre a peça corrediça e a parte curvada e remover a parte curvada de uma pega da unidade de rolete. Outra parte curvada é disposta na pega da unidade de rolete. Em algumas realizações, uma estação para processar uma peça corrediça que porta um espécime inclui um conjunto de platina que tem uma parte curvada e um dispositivo de retenção de peça corrediça. O dispositivo de retenção de peça corrediça é configurado para mover a peça corrediça ao longo da parte curvada do conjunto de platina para aplicar um líquido a uma amostra na peça corrediça quando o líquido está entre o conjunto de platina e a peça corrediça. Em algumas realizações, a estação pode incluir adicionalmente um dispositivo de posicionamento de peça corrediça que tem o dispositivo de retenção de peça corrediça. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça tem um modo de rolagem para mover a peça corrediça em relação à parte curvada para definir um intervalo de altura variável entre a peça corrediça e a parte curvada e um modo de não rolagem para depor a peça corrediça na parte curvada.

Em ainda outras realizações, um aparelho para aplicar um líquido em uma amostra pode incluir um dispositivo de retenção de peça corrediça e um aplicador deformável móvel entre uma configuração plana e uma

. 14 configuração curvada. O aplicador deformável na configuração plana é configurado para se estender através de uma peça corrediça mantida pelo dispositivo de preensão de peça corrediça. O aplicador deformável na configuração curvada é configurado para definir um intervalo capilar de altura — variável com a peça corrediça mantida pelo dispositivo de preensão de peça corrediça. Um dispositivo de conversão é configurado para mover o aplicador deformável entre a configuração plana e a configuração curvada; e um mecanismo de acionamento acoplado mecanicamente ao aplicador deformável. O mecanismo de acionamento inclui um atuador operável para mover o aplicador deformável na configuração curvada ao longo da peça corrediça mantida pelo dispositivo de preensão de peça corrediça. O aplicador deformável pode incluir uma pega e um revestimento configurado para encaixar com a pega. O revestimento inclui uma pluralidade de elementos formadores de intervalo posicionados para estar voltados para a peça corrediça mantida pelo dispositivo de preensão de peça corrediça. O aplicador deformável é móvel entre uma posição aberta e uma posição fechada. O aplicador deformável se move para longe do dispositivo de preensão de peça corrediça conforme o aplicador deformável se move da posição fechada em direção à posição aberta.

Em ainda outras realizações, um revestimento para processar uma amostra em uma peça corrediça de microscópio inclui um corpo que tem . ..uma primeira superfície não plana que compreende uma região de aplicação de reagente e uma segunda superfície que se opõe à primeira superfície não plana. A primeira superfície não plana e a segunda superfície definem uma —espessura do corpo. Em certas realizações, o revestimento inclui uma primeira pluralidade de elementos formadores de intervalo e uma segunda pluralidade de elementos formadores de intervalo. A região de aplicação de reagente está substancialmente entre a primeira pluralidade de elementos formadores de

: 15 intervalo e a segunda pluralidade de elementos formadores de intervalo de | maneira que uma amostra em uma peça corrediça de microscópio está voltada para a região de aplicação de reagente quando a peça corrediça de microscópio se estende através da primeira pluralidade de elementos formadores de intervalo e da segunda pluralidade de elementos formadores de intervalo.

A primeira pluralidade de elementos formadores de intervalo pode se estender ao longo de um primeiro lado longitudinal do corpo e a segunda pluralidade de elementos formadores de intervalo pode se estender ao longo deum segundo lado longitudinal do corpo. O segundo lado longitudinal se opõe ao primeiro lado longitudinal. A espessura do corpo pode ser maior do que uma altura de pelo menos uma da primeira pluralidade de elementos formadores de intervalo. A primeira pluralidade de elementos formadores de intervalo pode incluir reentrâncias dispostas linearmente que são distanciados entre si. À primeira pluralidade de elementos formadores de intervalo e a segunda pluralidade de elementos formadores de intervalo podem ser dimensionadas para definir um intervalo capilar entre a peça corrediça de microscópio e o corpo quando a peça corrediça de microscópio contata fisicamente pelo menos uma da primeira pluralidade de elementos formadores de intervalo e pelo menos uma da segunda pluralidade de elementos formadores de intervalo. O corpo pode ter um raio de curvatura em uma faixa de cerca de 12,7 centímetros - --- --—-—------(5 polegadas) a cerca de 101,6 centímetros (40 polegadas).

Em algumas realizações, uma estação de processamento de peça corrediça pode incluir uma unidade de base e um revestimento receptível pela unidade de base. O revestimento inclui uma região de aplicação de líquido arqueada. Uma pluralidade de elementos formadores de intervalo discretos pode ser posicionada fora da região de aplicação de líquido e distanciada entre si ao longo um comprimento da região de aplicação de líquido. A pluralidade de eo. elementos formadores de intervalo discretos pode ser dimensionada para espaçar uma peça corrediça da região de aplicação de líquido para definir um intervalo para conter um líquido entre a peça corrediça e a região de aplicação de líquido.

A estação de processamento de peça corrediça pode incluir adicionalmente um dispensador de fluído que inclui uma porta de saída posicionada para entregar líquido entre a peça corrediça e o revestimento para ' preencher pelo menos parcialmente o intervalo. A unidade de base pode incluir uma passagem de refugo. O revestimento pode incluir uma porta de refugo que encaixecoma passagem de refugo para definir uma trajetória de fluído através do revestimento e da unidade de base. Em uma realização, o revestimento inclui uma primeira superfície e uma segunda superfície que se opõe. À primeira superfície inclui a região de aplicação de líquido e a porta de refugo é um furo passante que se estende entre a primeira superfície e a segunda superfície Em uma realização, a unidade de base inclui um dispositivo de retenção de peça corrediça e um atuador. O dispositivo de retenção de peça corrediça é configurado para segurar uma peça corrediça. O atuador é móvel entre uma primeira posição e uma segunda posição para mover uma amostra na peça corrediça ao longo de um comprimento da região de aplicação de líquido enquanto a amostra está localizada no intervalo. A estação de processamento de peça corrediça pode incluir adicionalmente um dispositivo de pressurização acoplado fluidicamente a uma porta de refugo no revestimento. O dispositivo de pressurização é adaptado para aplicar vácuo para remover líquido do intervalo através da porta de refugo e pode incluir pelo menos uma bomba. O revestimento pode incluir uma lâmina de polímero. A unidade de base pode incluir um mandril a vácuo para segurar a lâmina de polímero.

Em ainda outras realizações adicionais, um aparelho para

. 17 processar espécimes inclui um mecanismo de acionamento móvel entre uma primeira configuração e uma segunda configuração, uma pluralidade de estações de aplicação de reagente acoplada ao mecanismo de acionamento, e um dispositivo de posicionamento de peça corrediça configurado para portar uma peça corrediça. Uma de mais das estações de aplicação de reagente inclui uma superfície não plana. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça é móvel entre uma configuração de recebimento de reagente e uma configuração de aplicação de reagente quando o mecanismo de acionamento se move a partir da primeira configuração para a segunda configuração. Pelo menos uma das estações de aplicação de reagente inclui uma unidade de dispensação que tem uma porta de saída posicionada para dispensar um reagente em pelo menos uma das superfícies não planas e a peça corrediça mantida pelo dispositivo de posicionamento de peça corrediça. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça pode ser posicionado para definir um intervalo capilar de altura variável entre a peça corrediça mantida pelo dispositivo de posicionamento de peça corrediça e a superfície não plana. Pelo menos uma das estações de aplicação de reagente inclui um dispositivo conversível que tem um modo de rolagem e um modo de não rolagem. À superfície não plana é móvel para a configuração substancialmente plana quando o dispositivo conversível está no modo de não rolagem.

Pelo menos algumas realizações de misturação de fluídos podem incluir dispensar um primeiro fluído em uma peça corrediça, dispensar um segundo fluído na peça corrediça após dispensar o primeiro fluído, e misturar o primeiro fluído e o segundo fluído pelo uso de um substrato que se opõe à peça corrediça para produzir um fluído misturado. O primeiro fluído e um segundo fluído pode estar em temperaturas diferentes quando entregue na peça corrediça, Em algumas realizações, uma estação de processamento de peça

- 18 corrediça automatizada compreende um primeiro conjunto de platina, um | segundo conjunto de platina, e um mecanismo de acionamento.

O primeiro conjunto de platina tem uma parte curvada.

O mecanismo de acionamento é configurado para mover o primeiro conjunto de platina de uma posição de espera para uma posição de processamento.

Um conjunto de dispensação de líquido é configurado para dispensar um líquido.

O segundo conjunto de platina inclui um dispositivo de posicionamento de peça corrediça.

O dispositivo de posicionamento de peça corrediça inclui um dispositivo de retenção de peça corrediça.

O dispositivo de posicionamento de peça corrediça é operável para posicionar uma peça corrediça retida pelo dispositivo de retenção de peça corrediça em proximidade ao primeiro conjunto de platina.

O primeiro conjunto de platina e o segundo conjunto de platina são configurados para ocasionar um movimento de rolagem longitudinal ou transversal da parte curvada retida do primeiro conjunto de platina em relação ao segundo conjunto de platina desliza para criar um intervalo de altura variável entre a peça corrediça e a parte curvada suficiente para aplicar um líquido em uma amostra na peça corrediça.

O primeiro conjunto de platina, em algumas realizações, inclui uma pega e um revestimento acoplado de maneira removível à pega.

O revestimento tem uma superfície saltada para o espécime relativamente maleável para contatar o líquido no intervalo de altura variável.

A pega é relativamente rígida.

Por exemplo, a pega pode ser mais rígida do que o revestimento.

O revestimento pode ser fabricado de um plástico ou elastômero maleável, e o pega pode ser fabricado de metal ou de um plástico duro.

Em outras realizações, o primeiro conjunto de platina inclui uma superfície voltada parao espécime que compreende um material semimaleável que é mais maleável do que a peça corrediça.

Por exemplo, o material que forma a superfície voltada para o espécime pode ser mais maleável do que vidro.

Em algumas realizações, um método compreende a entrega de

Ss 19 uma peça corrediça que porta uma amostra para um dispositivo de posicionamento de peça corrediça de uma estação de processamento de peça corrediça automatizada. Um líquido é entregue para pelo menos uma das peças corrediças e uma parte curvada de uma unidade de rolete da estação de processamento de peça corrediça automatizada. A parte curvada da unidade de rolete é movida (por exemplo, rolada) em relação à peça corrediça mantida pelo dispositivo de posicionamento de peça corrediça para aplicar o líquido na ' amostra na peça “corrediça. Em certas realizações, o líquido é aplicado enquanto este está localizado em um intervalo de altura variável definido pela peça corrediça e pela parte curvada.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS Realizações não limitantes e não exaustivas são descritas tendo como referência os seguintes desenhos. Os mesmos numerais de referência se referem a partes semelhantes ou age por todas as várias vistas, a menos que especificado de outra maneira.

As Figuras de 1 a 4 são vistas laterais de um par de substratos que processam uma amostra, de acordo com uma realização.

As Figuras 5 a 6 são vistas laterais de um par de substratos que processam duas amostras, de acordo com uma realização.

A Figura 7 é uma vista isométrica de um aparelho de processamento de peça corrediça capaz de aplicar fluídos em uma amostra portada em uma peça corrediça, de acordo com uma realização.

As Figuras de 8 a 13 são vistas laterais do aparelho de processamento de peça corrediça da Figura 7 que processa um espécime.

A Figura 14 é uma vista lateral de um aparelho de processamento de peça corrediça pronta para tratar um espécime portado em uma peça corrediça de microscópio em uma orientação geralmente vertical, de acordo com uma realização.

. 20 A Figura 15 é uma vista lateral do aparelho de processamento de peça corrediça da Figura 14 que aplica fluído ao espécime. A Figura 16 é uma vista isométrica de uma estação de processamento de peça corrediça pronta para tratar um espécime portado em uma peça corrediçade microscópio. A Figura 17 é uma vista superior da estação de processamento de J peça corrediça da Figura 16.

A Figura 186 uma vista isométrica da estação de processamento ' de peça corrediça da Figura 16 com um revestimento mostrado removido de um suporte. ' As Figuras de 19 a 22 são vistas superiores de retentores com diferentes configurações de canal.

| A Figura 23 é uma vista isométrica de um revestimento, de acordo | com uma realização.

A Figura 24 é uma vista superior do revestimento da Figura 23.

A Figura 25 é uma vista lateral do revestimento da Figura 23.

A Figura 26 é uma vista detalhada de um elemento formador de intervalo.

A Figura 27 é uma vista em seção transversal da estação de processamento de peça corrediça tomada ao longo de uma linha 27-27 da Figura 17.

NS A Figura 28 é uma vista em seção transversal da estação de processamento de peça corrediça que move uma peça corrediça para agitar um líquido de processamento.

A Figura 29 é uma vista em seção transversal da estação de processamento de peça corrediça com à peça corrediça posicionada para remoção de refugo.

A Figura 30 é uma vista em seção transversal detalhada de uma

. 21 | parte da estação de processamento de peça corrediça da Figura 29. | A Figura 31 é uma vista isométrica de um sistema de coloração | que inclui uma matriz circular de estações de processamento de peça corrediça. A Figura 32 mostra um sistema de processamento automatizado, de acordo com uma realização. Figura 33 é uma vista isométrica de uma estação de | processamento de peça corrediça que tem um par de conjuntos de platina, de ' acordo com uma realização. A Figura 34 é uma vista em seção transversal da estação de processamento de peça corrediça tomada ao longo de uma linha 34-34.

A Figura 35 é uma vista isométrica da estação de processamento de peça corrediça que segura uma peça corrediça de microscópio em uma , orientação inclinada para formar um intervalo entre uma extremidade da peça | 15 corrediçae um conjunto de platina inferior.

A Figura 36 é uma vista isométrica da peça corrediça posicionada . para impelir o refugo em direção à porta de refugo do conjunto de platina inferior, A Figura 37 é uma vista isométrica da peça corrediça mantida acimado conjunto de platina inferior. A Figura 38 é uma vista isométrica de um conjunto de platina ” superior posicionado entre a peça corrediça em uma posição elevada e o conjunto de platina inferior. A Figura 39 é uma vista isométrica da peça corrediça repousa de forma plana no conjunto de platina superior.

A Figura 40 é uma vista isométrica da peça corrediça posicionada para permitir a entrega de fluído entre a peça corrediça e o conjunto de platina superior.

: 22 A Figura 41 é uma vista isométrica da peça corrediça que repousa de forma plana no conjunto de platina superior.

A Figura 42 é uma vista isométrica da peça corrediça posicionada para impelir o refugo em direção à porta de refugo.

A Figura 43 é uma vista isométrica da peça corrediça mantida ' acima do conjunto de platina superior.

Figura 44 é uma vista isométrica do conjunto de platina superior movido para longe da peça corrediça. : o A Figura 45 é uma vista em seção transversal detalhada de uma porção da estação de processamento de peça corrediça da Figura 34. A Figura 46 é uma vista isométrica de um condutor para transportar as peças corrediças de microscópio entre uma estante de peça corrediça e uma estação de processamento de peça corrediça.

A Figurá 47 é uma vista isométrica do condutor da Figura 46 que carrega uma peça corrediça de microscópio na estação de processamento de peça corrediça.

A Figura 48 é uma vista isométrica de estações de processamento de peça corrediça, de acordo com uma realização.

A Figura 49 é uma vista lateral de uma estação de processamento de peça corrediça e um dispensador de fluído pronto para dispensar fluído em uma peça corrediça de microscópio.

Ú ADA A Figura 49A é uma vista de detalhe de uma porção da estação de processamento de peça corrediça da Figura 49, A Figura 50 é uma vista em seção transversal lateral da estação de processamento de peça corrediça da Figura 49, A Figura 51 é uma vista isométrica de um mecanismo conversível e um revestimento distanciado do mecanismo conversível.

A Figura 52 outra vista isométrica do mecanismo conversível e do

: 23 revestimento da Figura 51. A Figura 53 é uma vista frontal de um aplicador deformável. A Figura 54 é uma vista lateral de um aplicador deformável em uma configuração curvada. A Figura 55 é uma vista isométrica de uma estação de processamento de peça corrediça em uma posição aberta. A Figura 56 é uma vista isométrica de uma pega de peça corrediça, de acordo com uma realização. NS A Figura 57 é uma vista isométrica de opositor em forma de sela. A Figura 58 é uma vista frontal do opositor da Figura 57. A Figura 59 é uma vista lateral do opositor da Figura 57. A Figura 60 é uma vista em seção transversal do opositor da Figura 58 tomada ao longo de uma linha 60-60. A Figura 61 é uma vista em seção transversal longitudinal de um opositor, de acordo com uma realização.

DESCRIÇÃO DE REALIZAÇÕES DA INVENÇÃO A Figura 1 mostra um primeiro substrato 80, um segundo substrato 82, e uma substância 86 entre o primeiro e segundo substrato 80, 82. O primeiro e segundo substrato 80, 82 podem ser movidos entre si para lidar coma substância 86, tal como um líquido de processamento. Lidar com a substância 86 pode incluir agitar a substância 86, espalhar a substância 86 ao longo de uma superfície superior 90 do primeiro substrato 80, mover a substância 86, ou de outra forma manipular a substância 86 para processar uma amostra biológica 88 na superfície superior 90.

Os protocolos podem ser executados pelo uso de volumes líquidos aperfeiçoados para minimizar ou evitar problemas com consumo de volume excessivo, que inclui custos de processamento elevados e administração de refugo. Em algumas realizações, um intervalo 91 pode ter

- 24 uma altura variável, por exemplo, uma altura que varia ao longo do comprimento e/ou da largura do intervalo, formado pelo primeiro e pelo segundo substrato 80, 82 para possibilitar o processamento de volume variável.

No processamento de volume variável, volumes aperfeiçoados de líquidos podem ser usados para processar para aumentar a eficiência e reduzir o volume de refugos e o custo quando comparado ao processamento de volume fixo (isto é, o processamento que usa apenas um volume constante de líquido . para cada aplicação de líquido). As reduções podem ter como base a redução | dos volumes de líquido consumido, assim como a redução dos custos de sistema mediante a redução ou por evitar custos relativamente altos associados com consumo maior de volume líquido, que inclui os custos de fabricação, custos de embalagem, custos de transporte, custos de administração de fluxo de trabalho do consumidor (por exemplo, custo de administração para inventário de entrada assim como administração de saída de refugo), e custos superiores de administração fluídica.

Volumes de líquido em excesso também podem levar a um volume excessivo de refugos ou disfunções (por exemplo, obstrução, vazamento, ou similares) de componentes fluídicos e pode requerer recalibragem frequente do equipamento.

Os substratos 80, 82 podem ser usados para processar eficientemente a amostra 88 enquanto evita ou limita pelo menos alguns dos problemas associados com volumes maiores de líquido. o oe O intervalo 91 pode acomodar uma faixa ampla de volumes de líquido, até mesmo sem mover os substratos 80, 82. Em algumas realizações, o intervalo 91 pode acomodar os volumes de líquido maiores do que cerca de 10 microlitros.

Em algumas realizações, o intervalo 91 pode acomodar volume de líquido em uma faixa de cerca de 10 microlitros a cerca de 200 microlitros.

O perfil de altura do intervalo 91 pode variar com base no volume de líquido ou nas propriedades a serem usadas.

Para tratar a amostra 88 com um volume

- 25 :

grande de líquido, o tamanho do intervalo 91 pode ser aumentado para evitar sobrepreenchimento.

Em algumas realizações, o sobrepreenchimento ocorre quando o volume do líquido dispensado é maior do que o volume do intervalo

91 (por exemplo, o volume entre o primeiro e o segundo substrato 80, 82). O

—sobrepreenchimento pode levar a condições indesejadas, que inclui depressão de líquido e/ou drenagem de fluído, especialmente se os substratos 80, 82 estiverem em uma orientação vertical.

Se volumes de líquido menores ou inferiores devem ser dispensados, o tamanho do intervalo 91 pode ser diminuído para evitar subpreenchimento.

O subpreenchimento pode levar ao contato inadequado entre o líquido 86 e a amostra 88 e as oclusões.

A Figura 1 mostra as extremidades 94a, 94b (coletivamente “94”) do intervalo 91 que podem ser preenchidas com o líquido 86 mediante a redução do intervalo altura, pela mudança do perfil de altura do intervalo, e/ou mediante a adição de líquido no intervalo 91. Vantajosamente, um volume significante de líquido pode ser convenientemente adicionado sem sobrepreenchimento.

Mediante a prevenção de sobrepreenchimento e de subpreenchimento, tipos diferentes de modos de falha fluídica (por exemplo, a degradação de desempenho de reagente), o refugo de reagente, ou similares podem ser evitados ou limitados.

Os protocolos de processamento podem requerer diferentes volumes de líquido com a finalidade de satisfazer vários critérios de processamento (por exemplo, requerimentos químicos, requerimentos de absorção, limitações de solubilidade, viscosidade ou similares). Se a amostra 88 é um espécime embebido em parafina, um volume relativamente pequeno de solução de desparafinação (por exemplo, 12 microlitros de xileno) pode ser entregue no intervalo 91. O substrato 82 é usado para aplicar o líquido na amostra 88. Por exemplo, o substrato 82 pode ser rolado (por exemplo, rolado ao longo de um plano imaginário distanciado da superfície superior 90, rolado ao longo da superfície superior 90, rolada lateralmente, rolada

- 26 : o o longitudinalmente, ou similares) ou de outra forma manipulado (por exemplo, girado, transladado, ou ambos) para aplicar o líquido 86. Uma superfície voltada para o espécime 92 do substrato 82 pode ser usado para manipular o volume de reagente. Após desparafinação, um volume relativamente grande de reagente pode ser entregue no intervalo 91. Por exemplo, um volume de cerca de 80 microlitros a cerca de 120 microlitros de corante pode ser entregue no o. intervalo 91. O corante é entregue para a amostra 88 e então subsequentemente removido. Os substratos 88, 82 podem então cooperar para segurar diferentes quantidades de fluído para enxaguar, corar, incubar, ou similares.

O intervalo 91 da Figura 1 pode ter uma capacidade de retenção mínima de cerca de 5 microlitros (mostrado na linha sólida na Figura 1) e uma capacidade de retenção máxima de cerca de pelo menos 5 microlitros, 50 microlitros, 100 microlitros, ou 200 microlitros (mostrado na linha tracejada na —Figura1). Outras capacidades de retenção mínimas e máximas são possíveis, se necessário ou desejado. A capacidade de retenção mínima é o volume menor de líquido que pode estar contido no intervalo 91 e aplicado efetivamente à amostra 88. A capacidade de retenção máxima é o maior volume de líquido que pode estar contido no intervalo 91 sem —sobrepreenchimento. O intervalo de altura variável 91 pode acomodar uma faixa mais ampla de volumes de líquido do que um intervalo de altura uniforme, pois a região estreitada do intervalo 91 pode acomodar um volume pequeno de líquido, enquanto a extremidade de intervalo ampliada 94 pode acomodar um volume grande de líquido. A extremidade de intervalo ampliada 94 também — pode fornecer acesso conveniente para entregar líquido ao intervalo 91.

O segundo substrato 82 pode mover o líquido 86 através de ação capilar. Quando a altura do intervalo 91 é suficientemente pequena, o intervalo 91 é um intervalo capilar que pode ser mantido sem levar em consideração a

- 27 presença ou a ausência de líquido. Um líquido com baixa viscosidade, tal como água, pode ser retida mediante ação capilar no intervalo 91. As substâncias com viscosidade elevada também podem ser retidas no intervalo 91 se desejado. Uma porção do intervalo capilar 91 pode ser mais estreita e ter capilaridade maior do que uma porção do intervalo capilar diferente 91. Um filme fino do líquido 86 pode tender a fluir para a porção estreitada do intervalo

91. A separação entre os substratos 80, 82 em qualquer dada localização nas superfícies 90, 92 pode variar ao longo do tempo. A Figura 1 mostra o substrato como um todo 82 distanciado do substrato 80. Se o substrato 82 contatar fisicamente a superfície superior 90, o líquido 86 pode tender a fluir ao longo da interface de contato. Até mesmo que o substrato como um todo 82 seja distanciado do substrato 80, os substratos 80, 82 podem efetivamente encerrar o líquido 86.

Em uma realização, os elementos formadores de intervalo podem ser reentrâncias protuberantes para fora posicionadas no substrato 82. Os elementos formadores de intervalo podem também incluir, sem limitação, um ou mais posicionadores, trilhos, espaçadores, ou outras características estruturais capazes de servir como espaçadores. Em algumas realizações, o substrato 82 inclui um ou mais trilhos (por exemplo, trilhos retos, trilhos arqueados, ou similares) configurado para se apoiar contra a superfície superior 90. Em ainda outras realizações, os elementos formadores de “intervalo pode ser componentes separados posicionáveis entre os substratos 80, 82, ou em qualquer outra localização adequada. Os elementos formadores de intervalo também podem ser ajustáveis em suas dimensões, posições ou orientações para ajustar o intervalo entre os substratos 80, 82. Para mover o líquido 86 através da superfície superior 90, uma primeira extremidade 96 do substrato 82 na Figura 1 pode ser movida em direção ao substrato 80 até que o líquido 86 esteja na posição mostrada na

- 28 Figura 2. O líquido 86 também pode ser movido para uma segunda extremidade que se opõe 98 do substrato 82 mediante o estreitamento da porção do intervalo 91 formado pela segunda extremidade 98, conforme mostrado na Figura 3. Dessa maneira, as extremidades 96, 98 podem ser —alternativamente erguidas e abaixadas para mover o líquido 86 através de, por exemplo, ação capilar ou qualquer tipo de força de mobilidade. Alternativamente, o substrato 80 pode ser movido em relação para um substrato estacionário 82 para mover de modo similar o líquido 86. A Figura 4 mostra o intervalo 91 que tem uma altura aproximadamente uniforme de maneira que o líquido 86 preenche um volume substancial do intervalo 91. O volume do intervalo 91 é o volume diretamente .

entre o primeiro e o segundo substrato 80, 82. A faixa das capacidades de retenção do intervalo 91 da Figura 4 é mais estreita do que a faixa das capacidades de retenção do intervalo de altura variável 91 na Figura 1. Por exemplo, ointervalo 91 da Figura 4 pode ter uma altura de intervalo nominal de cerca de 0,008 cm, uma largura de cerca de 2.5 cm, e um comprimento de cerca de 5 cm para acomodar efetivamente: 0,008 cm x 2.5 cm x 5 cm = 0,1 | cm? = 100 microlitros de volume líquido. Um excesso ou uma deficiência de cerca de 1 a 10 microlittos pode resultar em sobrepreenchimento ou —subpreenchimento. A diferença entre a capacidade de retenção mínima e a capacidade de retenção máxima do intervalo de altura variável 91 da Figura 1 pode ser de pelo menos cerca de 25 microlitros, 50 microlitros, 100 microlitros, ou 150 microlitros, ou faixas que abrangem tais volumes de líquido. O substrato 82 na configuração curvada (consulte a Figura 1) —pode expor uma área de superfície relativamente grande do líquido 86 para o meio ambiente circundante. Para reduzir perdas por evaporação, o raio de curvatura do substrato 82 pode ser aumentado para reduzir a área de superfície exposta do líquido 86. O substrato 82 na Figura 4 é especialmente

- 29 í — — ——. ——. ——+ — À — | bem adequado para minimizar ou substancialmente eliminar perdas por | evaporação e/ou perdas de amostra significantes.

Mediante o controle perdas por evaporação e de amostra, os substratos 80, 82 podem ser usados para executar tipos diferentes de procedimentos de incubação, assim como outros procedimentos de baixa evaporação.

Conforme usado no presente documento, o termo “substrato” é | um termo amplo e inclui, mas não é limitado, a um revestimento, uma peça ! corrediça, um lamínula, uma tira de material, uma placa, uma membrana, um = filme (por exemplo, um revestimento), um ladrilho, um carreador capaz de portar uma ou mais amostras, ou similares.

Os substratos podem ser substancialmente rígidos, semimaleáveis, e/ou maleáveis.

Em algumas realizações, o substrato 80 é uma peça corrediça de microscópio.

Um substrato também pode ser parte de outro componente.

Por exemplo, uma platina ou uma pega podem ter uma superfície externa que forma um substrato.

As dimensões, propriedades (que inclui propriedades mecânicas, propriedades químicas, propriedades de superfície, e/ou propriedades ópticas) e configurações de substratos podem ser selecionadas com base no protocolo de processamento e análises subsequentes a serem executadas.

Em algumas realizações, um substrato pode ser um substrato —planoou substancialmente plano. “Substrato substancialmente plano” se refere, sem limitação, a qualquer objeto que tem pelo menos uma superfície substancialmente plana, mas mais tipicamente qualquer objeto que tem duas superfícies substancialmente planas em lados opostos do objeto, e até mais tipicamente a qualquer objeto que tenha superfícies opostas substancialmente planas, cujas superfícies opostas são geralmente iguais em tamanho, mas maiores do que quaisquer outras superfícies no objeto.

Um substrato substancialmente plano pode compreender qualquer material adequado, que inclui plásticos, borracha, cerâmica, vidro, silício, materiais semicondutores,

. 30 metais, combinações disso, ou similares. Exemplos não limitantes de substratos substancialmente planos incluem tampas planas, peças corrediças (ambas as peças corrediças de microscópio 2,54 cm x 7,62 cm (1 polegada x 3 polegadas) e peças corrediças de microscópio com 25 mm x 75 mm), — microcircuitos SELDI e MALDI, tabletes de silício, ou outros objetos geralmente planos com pelo menos uma superfície substancialmente plana.

. O substrato 82 pode ser semimaleável, maleável, ou rígido com a finalidade de assumir ou manter uma faixa ampla de configurações. As Figuras de 1 a 3 mostram o substrato 82 em uma configuração de arco simples. Arcos simples incluem arcos que tem curvaturas geralmente uniformes. O raio de curvatura dos arcos simples pode ser de cerca de 1,27 cm (0,5 polegada), 2,54 cm (1 polegada), 12,7 centímetros (5 polegadas), 50, 8 cm (20 polegadas), 76,2 cm (30 polegadas), 88,9 centímetros (35 polegadas), 101,6 centímetros (40 polegadas), 114,3 centímetros (45 polegadas), ou faixas que abrangem tais | 15 raios de curvatura. Outros raios também são possíveis. Em algumas realizações, o raio de curvatura está em uma faixa de cerca de 12,7 centímetros (5 polegadas) a cerca de 101,6 centímetros (40 polegadas). Tal substrato pode ser bem adequado para aplicar um líquido pelo uso de um movimento de rolagem ou de balanço enquanto efetivamente administra as perdas por evaporação, se houverem, e controla o movimento do fluído. Em outras realizações, o substrato 82 pode assumir uma configuração complexa o de arco ou uma configuração de arco composta. Se o substrato 82 estiver em uma configuração complexa de arco, pelo menos uma porção do substrato 82 pode ter uma curvatura variável. Se o substrato 82 estiver em uma — configuração de arco composta, uma porção do substrato 82 pode ser um arco simples e outra porção do substrato 82 pode ser um arco complexo.

Múltiplos espécimes relacionados podem ser tratados na superfície superior 90 pelo uso de um único substrato. Os espécimes podem

: 31 ser tratados de maneira concorrente ou sequencialmente com o mesmo fluído. A Figura 5 mostra o líquido 86 que trata a amostra 88a (ilustrada na linha tracejada). O líquido 86 é então movido para outra amostra 88b. A Figura 6 mostra o líquido 86 que trata a amostra 88b (ilustrada na linha tracejada). Dessa maneira, o líquido 86 pode ser movido ao longo do substrato 80 para inúmeros espécimes relacionados.

Em alguns protocolos, ambos os espécimes relacionados 88a, 88b podem ser enxaguados com uma solução apropriada, tal como um fluído de transferência não volátil ou outro fluído, adequado para evitar a secagem.

Após estabilizar os espécimes 88a, 88b, o substrato 82 pode formar uma seção estreitada do intervalo 91 próxima à amostra 88a. Um reagente (por exemplo, um corante) pode ser entregue no intervalo 91. O substrato 82 pode ser movido para transladar uma camada do líquido 86 entre os espécimes 88a, 88b. O líquido 86 usado para processar a amostra 88a pode ser removido através de uma porta de refugo 104 (ilustrada na linha tracejada). Uma porta de refugo 106 (ilustrada na linha tracejada) pode ser usada para remover o líquido usado para processar a amostra 88b. Dessa maneira, o substrato 82 pode ser usado para tratar individualmente os espécimes 88a, 88b nas extremidades do substrato que se opõe 80, assim como quaisquer outros espécimes ou em qualquer outra localização adequada ao longo do substrato 80.

A Figura 7 mostra um aparelho de processamento de peça - . corrediça 100 que inclui um mecanismo de posicionamento 99, uma unidade de base 110, e um removedor de refugo 130. A unidade de base 110 porta um substrato opositor 140 usado para aplicar um líquido de processamento a um ou mais espécimes portados por uma peça corrediça microscópica 120. O líquido pode equilibrar e permanecer em uma condição estática por um período de tempo desejado, mesmo por longos períodos de tempo. O substrato 140 pode ser usado para agitar o líquido de processamento, a propagação do líquido de processamento, evaporação de controle, ou gerenciar de outra forma o líquido de processamento. A unidade de base 110 ilustrada engata uma face traseira 141 do substrato 140. Uma face frontal 200 (consulte a Figura 8) é um espécime voltado para a superfície Um filme fino 160 de fluido de processamento pode tratar uma amostra biológica 187. O mecanismo de posicionamento 99 inclui um atuador 194 e um mecanismo de pivô 196. O mecanismo de pivô 196 define um eixo geométrico ' de rotação 193 em torno do qual o substrato 140 gira. Para rolar o substrato 140 a partir da posição mostrada na Figura 8 para a posição mostrada na Figura 9, o atuador 194 pode se estender e o mecanismo de pivô 196 pode girar.

O líquido de processamento 160 pode ser eficazmente aplicado na amostra 187 para minimizar ou limitar o custo do(s) líquido(s) de processamento e para minimizar ou limitar a quantidade de líquido de refugo produzido. O substrato 140 pode ser manipulado (por exemplo, transladado, girado, vibrado, ou combinações dos mesmos) para mover o líquido 160. Para agitar o líquido 160, o substrato 140 pode ser rolado ao longo da peça corrediça 120. Por exemplo, o substrato 140 em uma configuração curva pode girar devido ão contato físico com a peça corrediça 120. Em outras realizações, osubstrato 140 pode correr ao longo da peça corrediça 120.

O líquido 160 pode ser movido ao longo da peça corrediça 120 eee devido a diferentes forças, como gravidade, forças capilares, e/ou uma mudança de pressão (por exemplo, uma pressão reduzida como um vácuo) em um intervalo 170. O substrato 140 na Figura 8 é adequado para mover o líquido 160 através da amostra 187 por, por exemplo, rolagem para frente e para trás através da amostra 187. O substrato 140 pode assumir uma configuração geralmente plana para formar um filme fino através da amostra 187 para, por exemplo, incubar a amostra 187.

: 33 O aparelho de processamento de peça corrediça 100 pode desempenhar diferentes processos de preparação de tecido e processos de montagem.

Os processos de preparação de tecido podem incluir, sem limitação, desparafinar um espécime, condicionar um espécime (por exemplo, | 5 condicionamento de célula), colorir um espécime, desempenhar recuperação antigênica, desempenhar identificação imunohistoquímica (IHC) ou outras reações, e/ou desempenhar identificação de hibridização (ISH) in situ ou outras " reações, assim como outros processos para preparar espécimes para métodos : fluorescentes, de microscopia, de microanálises, espectrométricos de massa, ou outros métodos analíticos.

Se o espécime é uma amostra embebida em parafina, a amostra pode ser desparafinada com o uso apropriado de fluido(s) de desparafinação.

Após o removedor de refugo 130 remover o(s) fluido(s) de desparafinação, inúmeros reagentes podem ser sucessivamente aplicados no espécime.

A peça corrediça 120 pode então ser revestida com uma lâmina para produzir uma peça corrediça de montagem úmida, peça corrediça permanentemente montada, ou similares.

O condicionamento de célula pode tornar sítios antigênicos reticulados mais acessíveis por biomoléculas grandes como anticorpos e sondas de ácido nucleico.

O aparelho de processamento de peça corrediça 100 pode desempenhar protocolos de condicionamento de célula.

Aplicar calor na amostra é um meio de condicionamento de célula, portanto o calor pode ser a... - "abastecido na amostra 187. Calor pode ser aplicado através de aplicação direta (condução), condução indireta (através da peça corrediça microscópica), convecção (ar aquecido direcionado para a amostra), ou de forma radiante (infravermelho ou micro-ondas). O aparelho de processamento 100 pode ter inúmeros elementos térmicos para aquecimento.

O condicionamento de célula é tipicamente desempenhado ao incubar a amostra de tecido de 75 a 100 graus Celsius em uma solução aquosa e segurar a mesma durante um certo

- 34 período até que a antigenicidade adequada seja alcançada, tipicamente 30 a 90 minutos. i

Amostras podem ser processadas com uma faixa ampla de substâncias, como corantes, sondas, outros reagentes, enxaguantes, e/ou condicionadores.

As substâncias podem ser fluidos (por exemplo, gases, líquidos, ou misturas de gás/líquido), ou similares.

Os fluidos podem ser solventes (por exemplo, solventes polares, solventes não polares, etc.), i soluções (por exemplo, soluções aquosas ou outros tipos de soluções), ou similares.

Reagentes incluem, sem limitação, corantes, agentes umectantes, anticorpos (por exemplo, anticorpos monocionais, anticorpos policlonais, etc.), fluidos de recuperação de antígeno (por exemplo, soluções de recuperação antigênica com base aquosa ou não aquosa, tampões de recuperação de antígeno, etc.), ou similares.

Corantes incluem, sem limitação, pigmentos, corantes de hematoxilina, corantes de eosina, conjugados de anticorpos ou ácidos nucleicos com identificações detectáveis como haptenos, enzimas ou porções químicas fluorescentes, ou outros tipos de substâncias para transmitir cor e/ou para intensificar o contraste.

Em algumas realizações, líquidos de processamento na forma de reagentes são aplicados nas amostras, Para reduzir os volumes de líquidos consumidos durante o processamento, líquidos concentrados podem ser utilizados.

Por exemplo, reagentes concentrados podem ser aplicados uniformemente sobre amostras com grandes áreas de ' superfície para reduzir os custos de processamento e refugo.

Um filme reagente fino pode ser mantido em contato com a amostra para garantir absorção de reagente intensificada e ajudar a garantir que a mesma seja uniforme através de uma amostra.

Volumes excessivos de reagentes podem ser convenientemente removidos de maneira controlada.

A peça corrediça 120 é um substrato transparente em geral plano capaz de portar um espécime para exame com o uso de equipamento, como

E ,) Ú" i MO o. 35 equipamento óptico, por exemplo, um microscópio ou outro dispositivo óptico.

Por exemplo, a peça corrediça 120 pode ser uma peça em geral retangular de material transparente que tem uma face frontal 210 para suportar espécimes.

Em algumas realizações, a peça corrediça 120 tem um comprimento de cerca de75mm(3 polegadas)e uma largura de cerca de 25 mm (1 polegada) e, em certas realizações, pode incluir um identificador, como um código de barras.

Em algumas realizações, a peça corrediça 120 tem um comprimento de cerca — de 75 mm, uma largura de cerca de 25 mm, e uma espessura de cerca de 1 mm.

A peça corrediça 120 pode ser na forma de uma peça corrediça microscópica padrão feita de vidro ou outro material transparente.

A peça corrediça 120 pode incluir um código legível por máquina (como um código de barras uni ou multidimensional ou InfoGlyph, uma etiqueta RFID, uma rede de difração de Bragg, uma tira magnética ou um código de barras nano) com instruções codificadas que especificam o tipo, sequência, e temporização do(s) líquido(s) entregues para tratamento de um espécime em particular.

Com referência à Figura 8, um conjunto de atuação 180 da unidade de base 110 inclui atuadores 182a a e (coletivamente “182") que podem ser seletivamente estendidos e retraídos para mover o substrato 140. O conjunto de atuação 180 pode incluir, sem limitação, um ou mais acionadores (por exemplo, acionadores lineares, acionadores recíprocos, ou similares), motores (por exemplo, motores de passo, motores acionadores, ou similares), solenoides, conjuntos de pistão, trens de engrenagem, combinações dos mesmos, ou outros componentes acionados eletronicamente, mecanicamente, hidraulicamente, ou pneumaticamente capazes de mover o substrato 140. O — conjunto de atuação 180 pode ser na forma de um conjunto de platina com os atuadores 182 e um substrato 140. Em tais realizações, os atuadores 182 podem incluir acopladores para segurar de forma destacável o substrato 140. Os acopladores podem ser na forma de dispositivos de sucção, acopladores

: 36 mecânicos, ou outros tipos de acopladores para permitir um movimento relativo entre o substrato 140 e os atuadores 182. Os acopladores ilustrados são na forma de uma disposição de pino e apoio.

Em outras realizações, os atuadores 182 são permanentemente conectados ao substrato 140, O substrato 140 sobrepõe a maior parte de ou substancialmente toda a amostra 187. Se a peça corrediça 120 é uma peça corrediça microscópica padrão, o substrato 140 pode ter um comprimento em uma faixa “de cerca de 13 mm (0,5 polegada) a cerca de 76 mm (3 polegadas), uma Ú largura em uma faixa de cerca de 13 mm (0,5 polegada) a cerca de 25,5 mm (1 polegada), e uma espessura em uma faixa de cerca de 0,5 mm (0,02 polegada) a cerca de 2 mm (0,08 polegada). Em algumas realizações, o substrato 140 é uma lamela padrão com um comprimento de cerca de 50 mm, uma largura de cerca de 24 mm, e uma espessura de cerca de 0,2 mm.

Outras dimensões são também possíveis, se necessário ou desejado.

O substrato 140 pode ter um formato geralmente poligonal (por exemplo, quadrado ou retangular), formato elíptico, ou formato circular.

O formato do substrato 140 pode ser selecionado com base no formato e dimensões da peça corrediça 120, assim como o formato e dimensões da amostra 187 e/ou um segurador.

Um. ou mais elementos térmicos para aquecimento/resfriamento pode ser incorporado no substrato 140. Tais realizações são adequadas para desempenhar | processamento de IHC, processamento de ISH, ou similares.

Por exemplo, - elementos térmicos podem ser embebidos em ou acoplados ao substrato 140 e conectados a uma fonte de alimentação do conjunto de atuador 180. O aquecimento/resfriamento também pode ser alcançado por meio de uma | câmara de processamento.

Por exemplo, o aparelho de processamento de peça corrediça 100 pode ser posicionado dentro de uma câmara de processamento de temperatura controlada.

A câmara de processamento pode incluir elementos de aquecimento/resfriamento, mecânica dos fluídos, linhas de

. 37 vácuo, linhas de pressurização, mecanismos de válvula, combinações dos mesmos, ou similares. Evidentemente, o aparelho de processamento de peça corrediça 100 pode ser incorporado em instrumentos convencionais, equipamento de diagnóstico, ou similares.

Uma pluralidade de elementos formadores de intervalo 183a a | (coletivamente “183”) é posicionada ao longo da superfície inferior 200 do substrato 140. Os elementos formadores de intervalo 183 podem manter a superfície 200 espaçada da peça corrediça 120 para manter um intervalo É capilar. As alturas dos elementos formadores de intervalo 183 podem ser iguais aoumaioresdo que uma espessura da amostra 187. Se o substrato 140 é pressionado contra a peça corrediça 120, os elementos formadores de intervalo 183 podem cercar a amostra 187 e manter um intervalo adequado para manter um filme fino. Em certas realizações, os elementos formadores de intervalo 183 podem servir para limitar a compressão da amostra 187. Os elementos formadores de intervalo 183 podem ter alturas que são aproximadamente iguais a ou levemente menos do que uma espessura da amostra 187 de modo que a amostra 187 pode ser comprimida sem ser danificado.

O substrato 140 pode ser feito, por inteiro ou em parte, de um ou mais polímeros, plásticos, compósitos, vidro, combinações dos mesmos, ou outrosmateriais adequados que podem ser em geral rígidos, semirrígidos, e/ou maleável. Por exemplo, o substrato 140 pode ser uma placa de vidro rígida. Se - o substrato 140 é flexível, o substrato 140 pode ser feito de um ou mais polímeros, como poliéster, tereftalato de polietileno, polipropileno, borracha, fluoreto de polivinilideno, politetrafluoroetileno, ou combinações dos mesmos. À composição do substrato 140 pode ser selecionada com base em características desejadas, que inclui, sem limitação, energia de superfície, flexibilidade, molhabilidade, compatibilidade química, características de adesão, ou similares. Em algumas realizações, a peça corrediça 120 e o

: 38 substrato 140 podem ser feitos de um material hidrofóbico para garantir contenção o suficiente do líquido 160. O removedor de refugo 130 inclui um dispositivo de pressurização 220 e uma linha de recebimento 230 que se estende do dispositivo de pressurização 220, O dispositivo de pressurização 220 pode extrair o líquido 160 na linha de recebimento 230. O dispositivo de pressurização 220 pode incluir, sem limitação, uma ou mais bombas, dispositivos a vácuo, ou outros tipos de dispositivos capazes de pressurizar fluidos ou extrair a vácuo, ou ambos.

O dispositivo de pressurização 220 também pode incluir um ou mais reservatórios de refugo e/ou podem ser conectados a um reservatório de refugo separado.

Refugo pode ser entregue ao(s) reservatório(s) de refugo para armazenamento até o descarte subsequente, Em algumas realizações, um sistema de descarte é incorporado no dispositivo de pressurização 220. Em | outras realizações, o refugo recebido pelo removedor de refugo 130 é encaminhado para um sistema de descarte auxiliar.

O refugo pode ser convenientemente descartado sem expor operadores ou técnicos, assim como outro equipamento de processamento de peça corrediça, ao refugo.

A linha de recebimento 230 pode incluir, sem limitação, um ou mais condutos, tubos, ou outros componentes através dos quais o fluido pode fluir Em algumas realizações, a linha 230 é um conduto de lúmen único.

Se o removedor de refugo 130 entrega fluidos na peça corrediça 120, a linha 230 pode ser um conduto de múltiplos lúmens.

Líquidos podem ser entregues através de um lúmen para a peça corrediça 120 e o refugo pode ser retirado da peça corrediça 120 através de outro lúmen.

Uma entrada 185 da linha 230 — pode incluir uma ou mais aberturas, ou outros tipos de recursos, através dos quais líquidos podem fluir.

O aparelho de processamento 100 pode ter diferentes modos de operação.

Em algumas realizações, o aparelho 100 tem um modo estático e

' 39 um modo dinâmico. No modo dinâmico, o substrato 140 pode ser movido para agitar o líquido 160. Por exemplo, uma movimentação de rolagem pode fornecer em geral mesmo cobertura de líquido ao longo da amostra 187. O substrato 140 pode ser rolado para frente e para trás através da amostra 187 inúmeras vezes. Se o líquido 160 tem uma viscosidade relativamente baixa, o substrato 140 pode ser movido em uma velocidade relativamente alta. Se o líquido 160 tem uma viscosidade relativamente alta, o substrato 140 pode ser " movido em uma velocidade relativamente baixa. A velocidade do substrato 140 pode ser aumentada ou diminuída para aumentar ou diminuir a agitação do líquido 160. A agitação pode afetar taxas de absorção de fluido, assentamento de constituintes no líquido 160, mistura de constituintes, combinações dos mesmos, ou similares. O aparelho de processamento 100 também pode ser usado para desempenhar mistura na peça corrediça para misturar sequencialmente ou simultaneamente os fluidos descartados. Por exemplo, uma primeira alíquota do fluido 160 pode ser descartada na peça corrediça

120. Uma alíquota de outro fluido pode ser descartada no substrato 140 e misturada com o uso do fluido 160. Inúmeros fluidos podem ser descartados para produzir uma faixa ampla de misturas. Em alguns modos de operação, o substrato 140 pode ser usado para agitar o fluido 160. Após agitar o fluido 160, outro fluido pode ser descartado entre a peça corrediça 120 e o substrato 140. O substrato 140 então agita ambos os fluidos para produzir uma mistura. ' Alternativamente, os reagentes podem ser misturados fora da peça corrediça e descartados na peça corrediça em um estado de pré-mistura. No modo estático, o substrato 140 pode ser usado para minimizar, limitar, ou substancialmente evitar o movimento do líquido 160. O substrato 140 pode ser segurado de modo estacionário com relação à peça corrediça 120 e pode assumir uma configuração geralmente plana, ou uma configuração com um raio relativamente grande de curvatura, para evitar perdas de evaporação o - . 40 excessivas. O aparelho 100 pode estar em um modo estático para desempenhar a incubação ou outros processos podem exigir um espaço de tempo significativo. Vantajosamente, uma faixa ampla de diferentes volumes de líquido 160 pode ser usada para fornecer processamento dinâmico e processamento estático, que inclui volumes altos de fluido maiores do que cerca de 100 ul, e volumes baixos de fluido, como volumes de fluido menores do que cerca de 100 ul. Outros volumes de fluido são também possíveis, se necessário ou desejado.

Referindo-se à Figura 10, o substrato 140 está na configuração plana, que pode ser usada para processamento estático, O processamento estático pode incluir, sem limitação, incubação, processamento térmico, ou outros tipos de processos que envolvem uma quantidade mínima de líquido movimento.

Um protocolo pode incluir o uso do substrato 140 para formar camadas espessas, filme finos, camadas de menisco, ou similares. Para formar camadas espessas de líquido, o substrato 140 pode ser separado da peça corrediça 120 e amostra 187, conforme mostrado na Figura 8. Tais realizações são adequadas para tratar a amostra 187 com o uso uma substância de alta viscosidade, como um gel. Se o gel for inadvertidamente drenado, os elementos formadores de intervalo 183 podem proteger a amostra 187 de : - —------compressão indesejada e danos associados. Para formar um filme fino, os elementos formadores de intervalo 183 podem ser pressionados contra a peça corrediça 120. Se o substrato 140 está em uma configuração curva, uma camada de menisco pode ser formada.

As Figuras 10 a 13 mostram um método de processamento de uma amostra. O líquido 160 pode ser movido em direção a uma região 247 do intervalo 170 por meio de ação capilar como uma região opositora 249 do

. 41 intervalo 170 amplia. A Figura 11 mostra um bolus de líquido 160 na região 247 do substrato 140. O bolus de líquido 160 pode ser reaplicado na amostra 187 ao ampliar a região 247 e estreitar a região 249. Conforme a região 249 estreita, o líquido 160 acumula na extremidade 142. A Figura 12 mostra o líquido 160 acumulado na região estreita 249. O removedor de refugo 130 pode | então aspirar o bolus de líquido 160. | Para acumular adicionalmente o líquido 160 e/ou para reduzir as | forças capilares, a extremidade 142 do substrato 140 pode ser movida para longe da peça corrediça 120. Conforme a superfície inferior angular 200 na | 10 Figura 12 é girada para longe da peça corrediça 120, o líquido 160 é impelido mais próximo da abertura 215 da entrada 185. O substrato 140 pode ser movido para uma orientação em geral paralela com relação à peça corrediça 120 para mover o líquido 160 o mais próximo possível do removedor de refugo

130. O removedor de refugo 130 pode então extrair o líquido 160 para fora do intervalo 170.

O método das Figuras 10 a 13 pode ser empregado para acumular líquido em uma faixa ampla de locais, incluindo nos cantos, lados, e/ou extremidades do substrato 140 e/ou peça corrediça 120. A posição do removedor de refugo 130 pode ser selecionada com base no local desejado de acúmulo de refugo.

O aparelho de processamento 100 pode processar peças corrédiças em diferentes orientações, que inclui uma orientação em geral vertical, orientação horizontal, orientação inclinada, ou similares. As Figuras 14 e 15 mostram a peça corrediça 120 em uma orientação em geral vertical para promover o movimêénto de uma substância fluidizável 213 ao longo da peça corrediça 120. A extremidade 142 do substrato 140 da Figura 14 se estende para longe da peça corrediça 120 para formar um intervalo aumentado 209. Um conjunto dispensador 208 pode emitir a substância 213 através do intervalo relativamente grande 209 de modo que a substância 213 começa a coletar em uma região estreita 212 de um intervalo capilar 214. O conjunto dispensador 208 pode ser uma pipeta que dispensa a substância 213 que compreende reagente pré-misturado, O volume da substância descartada 213 pode ser de cercade 75 microlitros a cerca de 500 microlitros. O substrato 140 pode ser rolado para frente e para trás para mover a substância 213 que preenche a região estreita 212, enquanto a gravidade ajuda a impelir a substância 213 para - baixo.

A Figura 15 mostra o intervalo 214 preenchido com a substância

213.A extremidade inferior 192 do substrato 140 pode ser movido em direção à peça corrediça 120 para propagar adicionalmente a substância 213. A peça corrediça 120 e substrato 140 podem ser girados juntos sentido anti-horário (indicado por uma seta 220 na Figura 14) ou sentido horário (indicado por uma seta 224). Para desempenhar um processo de incubação, a peça corrediça 120 pode ser movida para uma orientação em geral horizontal, e o substrato 140 pode assumir uma configuração substancialmente plana. Para tratar a amostra 187 com outro fluido, a peça corrediça 120 pode ser movida para uma | orientação inclinada ou vertical. A orientação da peça corrediça 120 pode ser selecionada com base no processamento a ser desempenhado, como processos imunohistoquímicos (por exemplo, desparafinação, recuperação antigênica, e detecção (condicionamento de célula)). Para desparafinação com o uso do processo aquoso descrito na patente nº U.S. 6.544.798B1 (desparafinação aquosa com o uso de calor), incorporado no presente documento a título de referência, o calor pode ser abastecido para aquecer seja a substância 213 (por exemplo, uma solução aquosa), que banha a amostra biológica 187 acima do ponto de fusão de parafina, ou um aquecedor embutido no substrato 140 poderia aquecer diretamente a amostra 187. O calor pode ser suficiente para aquecer a amostra 187 acima do ponto de fusão de

. 43 parafina para liberar a parafina na fase aquosa imiscível em que a mesma é então removida.

Um ou mais aquecedores 211 pode ser ativado para aquecer o substrato 140. Adicional ou alternativamente, um aquecedor 217 pode entrar em contato e aquecer o lado posterior da peça corrediça 120. A peça corrediça 120 pode estar na orientação inclinada para promover a remoção da parafina elou quaisquer solventes, como xileno ou limoneno.

Em alguns protocolos, o volume de fluido cativado é mantido em uma faixa de cerca de 15 microlitros a “cerca de 25 microlitros.

Em certos protocolos, o volume de fluido é cerca de 15 — microlitros.

Inúmeras vezes durante o processamento, um volume de reagente, tampão reagente, ou água pode ser pipetado na peça corrediça 120 para restaurar o volume do fluido. . O aparelho de processamento 100 pode desempenhar mistura na peça corrediça.

Um primeiro reagente pode ser descartado.

O substrato 140 é rolado para absorver o reagente entre a peça corrediça 120 e o substrato 140. O substrato 140 é então posicionado para permitir acesso para dispensação de pipeta enquanto mantém a captura de fluido.

Outro reagente é descartado.

O substrato 140 é então rolado longitudinalmente, lateralmente, ou ambos para misturar os reagentes mediante consecutivos ciclos de rolagem.

A incubação pode ser desempenhada, se necessário ou desejado.

As Figuras 16 e 17 mostram uma estação de processamento de peça corrediça 300 que inclui uma unidade de rolete 310 e um dispositivo de — posicionamento de peça corrediça 316. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça 316 inclui um dispositivo de retenção de peça corrediça 330 que segura uma peça corrediça microscópica 340 e um atuador 320 para ativar o dispositivo de retenção de peça corrediça 330 (um dispositivo de pega é mostrado, mas outras realizações que retêm peça corrediça serão aparentes aos técnicos no assunto, como através de encaixe por fricção de pelo menos uma porção da peça corrediça dentro de uma cavidade ou grampos ou

- 44 pregadores, por exemplo). A peça corrediça 340 se estende a partir do dispositivo de retenção de peça corrediça 330 de uma maneira em balanço e repousa na unidade de rolete 310. O atuador 320 é mecanicamente acoplado à unidade de rolete 310 e porta um dispositivo de retenção de peça corrediça 330, A peça corrediça 340 e um substrato 350 (ilustrado na forma de uma tampa) pode tratar um espécime (ilustrado em linha tracejada 260 na Figura 17) em uma superfície de fundo da peça corrediça 340. A peça corrediça 340 pode se mover ao longo da tampa 350 em uma movimentação de rolagem para agitar o líquido.

Um conjunto de platina 361 da Figura 18 incluí a tampa 350 e uma base 360. A base 360 inclui uma rede de canais 370 através das quais um vácuo pode ser aplicado para segurar a tampa 350 em relação à face 359 da base 360. Quando a tampa 350 sobrepõe a base 360, uma porta de refugo 374 da tampa 350 é alinhada com uma entrada 380 de uma passagem de refugo da base360.

A rede de canais 370 inclui um canal externo 394 que se estende ao longo da periferia da base 360. Um canal interior 396 se estende entre seções opositoras 397, 398 do canal externo 394, O canal externo 394 pode segurar a periferia externa da tampa 350 em relação à face 359, e o canal interior 396 pode segurar uma região central da tampa 350 em relação à face

359. Outras configurações de canal são também possíveis.

..-- minis O padrão, número, dimensões (por exemplo, largura, profundidade, ou similares) e configurações (por exemplo, formato de U, formato de V, ou similares) dos canais podem ser selecionados com base na interação desejada entre a tampa 350 e a base 360. A Figura 19 mostra um canal externo 400 e um canal interno transversal 402 que se estende entre os lados longitudinais 404, 406 do canal 400. O canal interno 402 é em geral a meio caminho entre uma porta de refugo 409 e uma seção de fundo 407 do

. | ! 45 canal externo 400. Um furo passante 408 pode conectar o canal externo 400 a uma linha de fluido de modo que um vácuo possa ser aplicado por meio do furo passante 408. A Figura 20 mostra um único canal externo contínuo 412. À Figura 21 mostra uma rede de canais que inclui um canal externo 416 e um canal 420 que conecta um inibidor de fluxo 418 ao canal externo 416. Um vácuo aplicado por meio de um furo passante 422 pode tanto segurar uma tampa em relação a uma face 423 quanto pode aspirar o inibidor de fluxo 418. A Figura 22 mostra uma base 442 com uma rede de canais 429 que inclui um canal externo 430 e um canal interno 432. O canal interno 432 se estende longitudinalmente ao longo de um corpo principal 440 da base 442. Uma extremidade 446 do canal interno 432 é espaçada a partir de um inibidor de fluxo 448 de modo a evitar que o fluido coletado no inibidor de fluxo 448 entre na rede de canais 429. O canal interno 432 é especialmente adequado para segurar a região central de uma tampa seguramente em relação ao corpo principal 440.

Adicional ou alternativamente, as bases podem incluir um ou mais grampos, camadas adesivas, prendedores mecânicos, ou similares capazes de seletivamente segurar e soltar a tampa 350. Em algumas realizações, a base 360 das Figuras 16 a 18 é um mandril eletrostático. Em ainda outras realizações, a base 360 pode incluir um ou mais receptores (por exemplo, furos, fendas, ou similares). A tampa 350 pode ter protrusões ou outros ..--- recursos que são recebidos por aqueles receptores. Referindo-se às Figuras 23 a 25, a tampa 350 inclui uma primeira fileira de elementos formadores de intervalo 450 e uma segunda fileira de elementos formadores de intervalo 452, A região 453 está entre as duas fileiras de elementos 450, 452. As bordas 454, 456 podem ser dimensionadas com relação à peça corrediça para fornecer a região de aplicação de líquido desejada 453 (por exemplo, toda a superfície superior da tampa 350, a maior

- 46 parte da superfície superior da tampa 350, a região entre os elementos 450, 452, ou similares). Em certas realizações, substancialmente toda a superfície superior da tampa 350 entra em contato com o fluido que é aplicado ao espécime. Como tal, a maior parte do espaço entre a tampa 350 e a peça corrediça pode ser preenchida com o líquido. Em algumas realizações, o espécime pode ser posicionado entre as fileiras de elementos 450, 452. Um líquido descartado por fluir através dos elementos 450, 452 em direção às " bordas 454, 456 da tampa 350. " Em algumas realizações, os elementos formadores de intervalo 450, 452 podem ajudar a processar um espécime com uma quantidade desejada de fluido (por exemplo, uma quantidade mínima de fluido). Os elementos formadores de intervalo 450, 452 também podem ser espaçados entre si para evitar, limitar, ou substancialmente evitar a absorção entre elementos adjacentes. Se um líquido alcança um dos elementos formadores de intervalo 450, 452, o líquido pode residir na interface de contato entre aquele elemento de intervalo e a peça corrediça 340 sem fluir para um elemento de intervalo adjacente. Os elementos formadores de intervalo 450, 452 são espaçados a partir das bordas 454, 456 da tampa 350 para manter o líquido próximo da região de aplicação de líquido 453. Adicionalmente, o líquido é mantido longe o suficiente das bordas 454, 456 para evitar o vazamento a partir de abaixo da peça corrediça mesmo se outro objeto entra em contato com as - - bordas 454, 456.

As fileiras de elementos formadores de intervalo 450, 452 se estendem longitudinalmente ao longo de um comprimento da tampa 350.

Elementos opositores formadores de intervalo de cada fileira 450, 452 são em geral lateralmente alinhados de modo que a peça corrediça 340 (consulte a Figura 16) pode entrar em contato com elementos lateralmente alinhados 450,

452. Conforme a peça corrediça 340 é movida ao longo da tampa 350, a peça

. 47 corrediça 340 é sucessivamente colocada em contato com elementos lateralmente alinhados formadores de intervalo 450, 452. Cada uma das fileiras 450, 452 pode ser em geral similares entre si. Consequentemente, a descrição de uma das fileiras 450, 452 se aplica igualmente à outra, exceto se indicado de outraforma.

A fileira 450 pode incluir cerca de 5 elementos formadores de intervalo a cerca de 60 elementos formadores de intervalo com uma distância média entre os elementos adjacentes formadores de intervalo em uma faixa de cerca de 1,27 mm (0,05 polegada) a cerca de 15,24 mm (0,6 polegada). Em algumas realizações, incluindo a realização ilustrada das Figuras 23 e 24, a fileira 450 inclui 19 elementos formadores de intervalo que projetam para fora a partir da superfície 460, ilustrada como um espécime voltado para superfície. Em outras realizações, a fileira 450 inclui cerca de 10 elementos formadores de intervalo a cerca de 40 elementos formadores de intervalo. Conforme visualizado a partir de cima (consulte a Figura 24), a fileira 450 tem uma configuração em geral linear. Em outras realizações, a fileira 450 tem uma configuração em ziguezague, configuração sinuosa, ou qualquer outra configuração ou padrão.

Os elementos formadores de intervalo 450 podem ser espaçados de modo uniforme ou não uniforme entre si e podem formar uma fileira aproximadamente reta ou pode ser alternada. A distância entre elementos adjacentes formadores de intervalo 450 pode ser maior do que as alturas dos elementos formadores de interválo e/ou menos do que uma espessura t (consulte a Figura 26) de um corpo 459 da tampa 350. Outros espaçamentos —são também possíveis, se necessário ou desejado. Uma largura W da tampa 350 pode ser em uma faixa de cerca de 15,24 mm (0,6 polegada) a cerca de 38 | mm (1,5 polegadas). Outras larguras são também possíveis. Em algumas realizações, a largura W é igual a ou maior do que uma largura da peça

: 48 corrediça 340. Se o fluido flui para fora para além da peça corrediça 340, o fluido pode, desse modo, permanecer na tampa 350. Referindo-se à Figura 24, a distância D entre as fileiras 450, 452 pode ser selecionada com base nas dimensões do espécime e nas dimensões da peça corrediça 340. Em algumas realizações, a distância D está em uma faixa de cerca de 6,35 mm (0,25 polegada) a cerca de 25 mm (1 polegada). Se a peça corrediça 340 é uma peça corrediça microscópica padrão, a distância D pode ser menos do que cerca de 12,7 mm (0,5 polegada). A Figura 26 mostra um dos elementos formadores de intervalo

450. A altura H do elemento de intervalo 450 pode ser selecionada com base na espessura do espécime a ser processado. O elemento de intervalo 450 pode ter uma altura H igual a ou menos do que cerca de 0,38 mm (0,015 polegada) se o espécime é uma seção de tecido com uma espessura que é menos do que cerca de 0,38 mm (0,015 polegada). Em algumas realizações, a altura H é em uma faixa de cerca de 0,025 mm (0,001 polegada) a cerca de 0,127 mm (0,005 polegada). Em certas realizações, a altura H é cerca de 0,076 mm (0,003 polegada) para processar seções de tecido fino com uma espessura de menos do que cerca de 30 mícrons, 20 mícrons, ou 10 mícrons. Uma razão da altura H dos elementos formadores de intervalo 450 até o raio de curvatura —Rdo corpo principal 459 pode ser maior do que cerca de 0,0001. Por exemplo, a razão da altura H para o raio de curvatura R pode ser em uma faixa de cerca : de 0,0001 a cerca de 0,0075. O padrão, número, dimensões, e configurações dos elementos formadores de intervalo podem ser selecionados com base na interação desejada entre o espécime e o líquido. Se a tampa 350 inclui um campo de elementos formadores de intervalo, os elementos formadores de intervalo podem ser distribuídos de modo uniforme ou não uniforme através da tampa 350 para formar diferentes padrões que podem incluir, sem limitação, uma ou

: 49 mais fileiras, disposições, formatos geométricos, ou similares. O elemento de intervalo 450 pode ser uma cavidade parcialmente esférica, cavidade parcialmente elíptica, ou similares. O elemento ilustrado 450 é uma cavidade substancial e parcialmente esférica especialmente adequado parao contato corrediço da peça corrediça 340 sem danificar (por exemplo, estrago ou arranhão) a peça corrediça 340. Se o espécime é suficientemente grande ou se move em direção a um lado da peça corrediça microscópica 340, o espécime pode correr sobre a cavidade esférica 450 sem danificar ou desalojar o espécime com relação à peça corrediça 340. Em outras realizações, o elemento de intervalo 450 pode ser na forma de uma protrusão em poliedro, uma protrusão cônica, uma protrusão frustocônica, ou outra combinação de formatos poligonais e arqueados.

O corpo principal 459 da Figura 25 é no formato de um arco simples com um raio de curvatura R em uma faixa de cerca de 5 em (2 polegadas) a cerca de 76 cm (30 polegadas). Em algumas realizações, o raio de curvatura R é cerca de 38 cm (15 polegadas) ou cerca de 74 cm (20 polegadas). Tais realizações são adequadas para misturar reagentes na peça corrediça. O raio de curvatura R pode ser selecionado com base no número de espécimes a serem processadas, quantidade de agitação de fluido, propriedades dos líquidos de processamento, a altura de elementos formadores de intervalo 450, 452, e similares. Em outras realizações, a tampa . 350 é no formato de um arco complexo (por exemplo, um arco elíptico), arco composto, ou similares. Em ainda outras realizações, a tampa 350 pode ser substancialmente plana.

A tampa 350 pode ser feita, por inteiro ou em parte, de polímeros, plásticos, elastômeros, compósitos, cerâmicas, vidro, ou metais, assim como qualquer outro material que é quimicamente compatível com os fluidos de processamento e espécime. Plásticos exemplificativos incluem, sem limitação,

: 50 polietileno (por exemplo, polietileno de alta densidade, polietileno linear de baixa densidade, mesclas, ou similares), fluoreto de polivinilideno (PVDF), politetrafluoroetileno (PTFE), perfluoroalcóxi (PFA), ou combinações dos mesmos. Se a tampa 350 é descartável, a tampa 350 pode ser feita, por inteiro ouem parte, de um material relativamente barato. Se a tampa 350 é rígida, a mesma pode ser feita, por inteiro ou em parte, de policarbonato, uretano, poliéster, uma placa revestida de metal, ou similares. A tampa 350 pode ter um | ou mais pinos, cavilhas, protrusões, receptores, ou outros recursos usados | para segurar a tampa 350.

A tampa 350 pode ser formada através de processos de moldagem por injeção, processos de moldagem por compressão, processo de extrusão, processo de usinagem, ou combinações dos mesmos. Por exemplo, um processo de moldagem por injeção pode ser usado para fabricar o corpo principal 459 e os elementos formadores de intervalo 450, 452. A porta de refugo 374 pode então ser usinada no corpo principal 440. Em outras realizações, a tampa 350 pode ser uma membrana de monocamada, multimembrana, filme, ou revestimento. Um componente subjacente pode ter um ou mais elementos formadores de intervalo ao quais a tampa 350 pode conformar para formar elementos formadores de intervalo correspondentes (por exemplo, bojos, protrusões, ou similares). Por exemplo, elementos formadores de intervalo podem ser posicionados na face 359 da base 360 da Figura 18. Quando a tampa 350 sobrepõe a base 360, a tampa 350 pode se conformar nos elementos formadores de intervalo. Como tal, a tampa 350 pode ser permissiva a elementos formadores de intervalo.

Se a tampa 350 estiver na forma de um filme, o filme pode incluir uma camada adesiva. A camada adesiva pode compreender, sem limitação, um ou mais adesivos sensíveis à pressão, géis adesivos, agentes de ligação ou similares. Em algumas realizações, o filme é uma lâmina que é dispensada

- 51 de um rolo. Cada peça corrediça pode ser processada com uma diferente seção da lâmina para prevenir a contaminação indesejada. Em outras realizações, lâminas individuais com uma camada adesiva são aplicadas a conjuntos de platina. Em algumas realizações não aderentes, uma lâmina é presa contra o conjunto de platina através de um vácuo. Em outras realizações, a lâmina é presa de maneira segura contra o conjunto de platina tanto por uma camada adesiva quanto pela aplicação de um vácuo.

“A tampa 350 pode também estar na forma de uma cobertura. Uma cobertura pode ser aplicada através de um rolete, um aspersor, uma escova ou qualquer outro aplicador adequado dependendo de se a cobertura compreende um material curável, um material termoplástico, um material termoestável, combinações dos mesmos ou similares. Em algumas realizações, um líquido é aplicado a uma superfície (por exemplo, uma superfície de um conjunto de platina) e subsequentemente curado. Uma superfície superior da cobertura pode definir uma região de aplicação. Se o conjunto de platina incluir elementos formadores de intervalo, a cobertura pode ser formada sobre os elementos formadores de intervalo. Referindo-se novamente à Figura 16, o dispositivo de retenção de peça corrediça 330 na forma de um dispositivo de pega inclui um grampo de mola 500 que segura a peça corrediça 340. O grampo de mola 500 é móvel entre uma posição de recepção ou aberta para receber a peça corrediça 340 e . . a posição de pega para segurar a peça corrediça 340. Quando a peça corrediça 340 é inserida entre os braços 502, 504 da pega 500, os braços 502, 504 podem segurar de maneira segura as bordas 472, 474. Após o processamento, a peça corrediça 340 pode ser puxada para fora da pega 500 sem danificar a peça corrediça 340 e/ou sem atrapalhar a lamela se a peça corrediça 340 foi coberta pela lamela. Adicional ou alternativamente, o dispositivo de retenção de peça corrediça 330 pode ter um ou mais grampos,

- 52 fendas ou outros componente ou atributos para reter seletivamente a peça corrediça 340. O atuador 320 das Figuras 16 e 17 inclui membros alongados 510, 512 acoplados de maneira rotativa à unidade de rolete 310 e ao dispositivo de retenção de peça corrediça 330. Os membros alongados 510, | 512 podem ser enlaces ou outros tipos de conectores. Para mover a peça corrediça 340 ao longo da tampa 350, um braço acumulador 580 é girado para empurrar pára cima no dispositivo de retenção de peça corrediça 330 fazendo com que os membros alongados 510, 512 girem sobre um eixo geométrico de rotação 520 para manter a peça corrediça 340 substancialmente tangente a tampa 350.

A estação de processamento 300 pode também incluir um conjunto dispensador 540 para emitir fluidos de processamento. O conjunto dispensador 540 inclui um par de unidades 544, 546, cada uma capaz de dispensar um fluido. As portas de saída 554, 556 das unidades 544, 546, respectivamente, podem ser voltadas para um intervalo entre uma extremidade 558 da peça corrediça 340 e a tampa 350. As portas de saída ilustradas 554, 556 estão na forma de condutos através dos quais as substâncias podem fluir. As unidades 544, 546 podem incluir, sem limitação, uma ou mais fontes de fluido, bombas, filtros ou combinações dos mesmos, assim como outros componentes fluídicos. Em algumas realizações, as unidades 544, 546 -.- recebem fluidos a partir de fontes de fluido remotas e podem dispensar esses fluidos. Em outras realizações, as unidades 544, 546 podem conter fontes de fluido, tais como reservatórios de fluido. As fontes de fluido podem ser convenientemente reenchidas ou recolocadas quando vazias.

As unidades 544, 546 podem controlar a temperatura dos fluidos. A unidade ilustrada 546 da Figura 16 inclui um elemento térmico 547 (ilustrado na linha imaginária) capaz de aquecer ou resfriar um fluido. O elemento térmico

- 53 547 pode incluir um ou mais dispositivos aquecedores (por exemplo, aquecedores resistivos) e/ou de resfriamento (por exemplo, dispositivos Peltier). Adicional ou alternativamente, as unidades 544, 546 podem incluir um ou mais dispositivos de mistura capaz de misturar reagentes.

Em alguns protocolos, dois ou mais reagentes são entregues independentemente para a unidade 544. A unidade 544 pode misturar os dois ou mais reagentes antes da dispersão.

Em outros protocolos, reagentes pré-misturados são entregues para as unidades 544, 546. i | " " : O conjunto dispensador 540 pode também estar na forma de um ou mais dispersores de fluido, pipetas capazes de carregar reagentes (por exemplo, reagentes pré-misturados, água, tampão, etc.) ou similares.

Se o conjunto dispensador 540 inclui pipetas, as pipetas podem ser movidas para entregar sequencialmente as substâncias.

Um volume de um fluido (por exemplo, 75 microlitros de uma substância, 100 microlitros de uma substância, 500 microlitros de uma substância) é pipetado para a tampa 350. A peça corrediça 340 é rolada para manipular o líquido.

Os elementos térmicos 680a, 680b podem ser ativados para aquecer a peça corrediça 340. Um ou mais tempos durante o processamento, um volume de reagente, tampão de reagente, água ou outra substância é dispensada para, por exemplo, restaurar ovolume, ajustar a concentração ou similares.

As Figuras 27 a 29 mostram um método de processamento de um ..-c— espécime.

Geralmente, a peça corrediça 340 é carregada para a estação de processamento 300. Uma substância é entregue entre a peça corrediça 340 e a tampa 350. A peça corrediça 340 é movida ao longo da tampa 350 para aplicar a substância ao espécime.

Após o processamento, a tampa 350 é convenientemente removida da base 360 e recolocada com outra tampa para continuar o processamento do mesmo espécime ou para processar outro | espécime.

. 54 Para carregar a estação de processamento 300, uma extremidade 555 (por exemplo, uma extremidade de identificação) da peça corrediça 340 pode ser deslizada para o dispositivo de retenção de peça corrediça 330. Em algumas realizações, a extremidade 555 é inserida manualmente no dispositivo | 5 de retenção de peça corrediça 330. Em outras realizações, um manípulo : robótico carrega a peça corrediça 340. O dispositivo de retenção de peça corrediça 330 alinha a peça corrediça 340 com a estação de processamento

300. Uma vez carregada, à peça corrediça 340 pode repousar em uma parte de " extremidade 563 da tampa 350. A extremidade 558 da peça corrediça 340 estende-se para cima para longe da tampa 350 para definir uma abertura 544. Referindo-se à Figura 27, o dispensador de fluido 540 pode entregar o fluido 560 para a abertura 544. O fluido 560 pode percorrer ao longo de um intervalo de altura variável 570. Um volume suficiente de fluido 560 pode ser dispensado para contatar o espécime sem mover a peça corrediça 340. Alternativamente, a peça corrediça 340 pode ser movida para colocar o fluido 560 em contato com o espécime. As Figuras 17 e 28 mostram o fluido 560 (ilustrado na linha l pontilhada na Figura 17) aplicado ao espécime 260. Se o fluido 560 alcançar os elementos de formação de intervalo 450, 452, o fluido 560 pode acumular os elementos de formação de intervalo 450, 452, através disso mantendo o fluido 560 sob a peça corrediça 340. SA Após o intervalo 570 da Figura 27 ser preenchido com um volume de fluido desejado 560, o braço atuador 580 é girado (indicado por uma seta 581) sobre um pino 582. Conforme uma extremidade 584 do braço atuador 580 move-se para cima (indicado por uma seta 590), o atuador 320 e o dispositivo de retenção de peça corrediça 330 cooperam para mover a peça corrediça 340 ao longo da tampa 350, O dispositivo de retenção de peça corrediça 330 pode girar livremente sobre o eixo geométrico de rotação 530 para manter a peça

. 55 corrediça 340 próxima à ou em contato com à tampa 350. A peça corrediça 340 pode flutuar no fluido 560. A tampa 350 pode ser presa de maneira segura contra a base 360 com o uso de vácuo e extraída através de uma porta 559 e uma linha de vácuo

557. lsso garante que a tampa 350 permaneça estacionaria conforme a peça corrediça 340 é manipulada. Em alguns modos dinâmicos de operação, a peça corrediça 340 é ' movida repetidamente para frente e para trás para agitar (por exemplo, misturar) o fluido 560. A maioria do fluido 560 é rolado para frente e para trás enquanto o residual pode ser deixado na superfície da amostra de tecido. À peça corrediça 340 pode mover parte do fluido 560 e misturar o mesmo com a camada que é deixada na superfície da amostra. Como tal, o fluido 560 é continua e vigorosamente misturado. A química de superfície da tampa 350 e/ou a peça corrediça 340 em contato com a amostra biológica pode ser selecionada com base nas propriedades hidrofóbicas/hidrofílicas que afetam a quantidade de líquido deixado nas superfícies da tampa 350 e/ou peça corrediça 340, A tampa 350 pode ser hidrofílica, hidrofóbica ou ambas. Nas realizações hidrofílicas, a tampa 350 pode ser feita principalmente de material hidrofílico para permitir a propagação conveniente do fluido aplicado. Nas realizações hidrofóbicas, a tampa hidrofóbica 350 e uma peça corrediça hidrofóbica podem ser usadas para limitar a propagação do fluido aplicado. Em outras realizações, a tampa 350 pode incluir uma ou mais regiões hidrofílicas e uma ou mais regiões hidrofóbicas. Por exemplo, a tampa 350 pode incluir uma | região central hidrofílica e uma região externa hidrofóbica que cerca a região central. Isso permite que um fluido seja propagado facilmente ao longo da região central enquanto a região externa circundante fornece gerenciamento de | fluido aprimorado. As características de superfície ótimas da tampa 350 podem | ser selecionadas com base na propagação desejada, contenção do líquido e/ou s 56 propriedades da peça corrediça 340. Ao usar uma solução aquosa, uma superfície de peça corrediça hidrofóbica e uma tampa menos hidrofóbica 350 podem cooperar para manter a solução dentro do espaço demarcado pela peça corrediça 340 e a tampa 350. A solução aquosa será repelida pela peça corrediça hidrofóbica 340 e propagada ao longo da tampa 350. De modo oposto, uma peça corrediça hidrofílica 340 irá propagar a solução mais sobre a superfície de peça corrediça 562, resultando em mais "poças" na peça corrediça 340. AS características de superfície ótimas da tampa 350 e/ou peça corrediça 340 podem ser selecionadas com base na contenção/propagação do líquido. Para a mistura na tampa, um primeiro reagente pode ser dispensado na tampa 350. A peça corrediça 340 é rolada para recolher o reagente. A peça corrediça 340 pode ser movida para uma posição sobre rolo para fornecer acesso entre a tampa 350 e a peça corrediça 340 enquanto mantém a captação de fluido. Um segundo reagente é dispensado na tampa

350. A peça corrediça 340 é rolada para misturar os reagentes em ciclos de rolo consecutivos. Para remover o fluido 560, um membro coletor de refugo 600 de uma posição de espera mostrada na Figura 27 para uma posição de remoção de refugo mostrada na Figura 29. Conforme o membro coletor de refugo 600 alcança a posição de remoção de refugo, uma entrada 609 de uma passagem 610 do membro coletor 600 é encaixado com uma saída 618. O membro coletor de refugo 600 move o braço atuador 580, que, por sua vez, move a peça corrediça 340 para uma posição de remoção de refugo, conforme “mostrado na Figura 29. A extremidade 558 da peça corrediça 340 das Figuras 29 e 30 sobrepõe a porta de refugo 374, de tal modo que o fluido 560 possa ser removido através da porta de refugo 374, Gravidade, um vácuo, materiais de | absorção ou similares podem ser usados para extrair o fluido para e através da |

-. 57 : porta de refugo 374. Em algumas realizações, o fluido 560 pode fluir através da porta de refugo 374 para um reservatório, membro absorvente ou similares.

O reservatório pode ser um recipiente de refugo, sistema de depósito ou similares.

O membro absorvente pode ser feito, pelo menos em parte, de um material altamente absorvente, incluindo material de espoja, material de absorção ou similares.

Se o fluido 560 passar através da porta de refugo 374 primariamente devido à gravidade, um membro absorvente (por exemplo, uma O almofada ou uma lâmina) pode ser posicionado abaixo da porta de refugo 374. Em algumas realizações, o membro absorvente é aderido diretamente à superfície inferior da tampa 350. Certamente, o membro absorvente pode estar em qualquer outra localização adequada, se necessário ou desejado.

Se um vácuo for aplicado através da passagem 610, o fluido 560 pode fluir ao longo do intervalo capilar 570 em direção e ultimamente através l 15 da portade refugo 374. A Figura 30 mostra o fluido F fluindo para baixo através | da porta de refugo 374 e através da entrada 380 da base 360. O fluido F procede ao longo de uma passagem 620 em direção à saída 618. Dessa maneira, o fluido F flui ao longo de uma trajetória de fluido através da tampa 350 e da base 360. Em algumas realizações, substancialmente nenhum líquido ' residual 560 permanece no intervalo 570 depois que o vácuo foi aplicado por uma extensão suficiente de tempo.

Acabamentos de superfície apropriados (por exemplo, lisura de superfície) e energia de superfície (por exemplo, a energia determinada pela quimica de superfície da tampa 350) podem ser selecionados para aprimorar a tendência do fluido 560 de fluir suave e completamente do intervalo 570. Um nível mais alto de lisura e uma energia de superfície mais baixa favorecerão a migração ao longo do intervalo 570, enquanto que mais imperfeições de superfície e energia de superfície mais alta o 58 tenderão a reter o líquido 560 no intervalo 570.

Um inibidor de fluxo 390 da Figura 30 pode minimizar, limitar ou substancialmente prevenir o fluxo do fluido para longe da entrada 380 ao longo da interface da tampa 350 e da base 360. O inibidor de fluxo 390 pode ser um canalde formato em U anular que cerca a entrada 380. Se o fluido migrar juntamente com uma interface 640, o fluido fluirá para o e coletará no inibidor . .- de fluxo 390. O inibidor de fluxo 390 pode, dessa forma, servir como um reservatório e pode ser esvaziado periodicamente. Qualquer quantidade de = ] inibidores de fluxo, membros de vedação, recursos de alívio ou similares pode ser usada para minimizar, limitar ou substancialmente prevenir o fluxo de fluido por baixo da tampa 350 devido à ação de absorção e/ou capilar.

Em algumas realizações, incluindo a realização ilustrada da Figura 27, a base 360 inclui elementos térmicos 680a, 680b (coletivamente “680”) adaptados para converter energia elétrica em energia térmica. Os elementos térmicos 680 podem suportar diferentes protocolos que exigem | ciclagem térmica, ciclagem térmica igualmente rápida para ISH, IHC ou similares. Quando os elementos térmicos 680 geram calor, o calor e transferido através da tampa 350 para o espécime. A quantidade de energia elétrica entregue para os elementos térmicos 680 pode ser aumentada ou diminuída para aumentar ou diminuir a temperatura dos espécimes e líquido de processamento.

| Os elementos térmicos 680 podem ser elementos de aquecimento resistivos. Diferentes tipos de elementos de aquecimento resistivos (por exemplo, aquecedores resistivos de placa, aquecedores resistivos de bobina, aquecedores de tiras ou similares) podem ser selecionados com base nos parâmetros operacionais desejados. Outros tipos de elementos térmicos, tais como elementos de resfriamento, elementos de aquecimento/resfriamento ou similares podem ser utilizados. Conforme usado na presente invenção, o termo

- 59 “elemento de resfriamento” é um termo amplo que inclui, sem limitação, um ou mais elementos capazes de absorver ativamente o calor de modo a resfriar eficazmente pelo menos uma parte da amostra, fluido de processamento e/ou peça corrediça 340. Por exemplo, um elemento de resfriamento pode ser um —tubooucanalde resfriamento através do qual um fluido resfriado flui.

Em algumas realizações, os elementos 680 são elementos de ANNA aquecimento/resfriamento, tais como dispositivos de Peltier. Os dispositivos de Peltier podem ser componentes de estado sólido que se tornam quentes em NS | um lado e frios em um lado oposto, dependendo de uma direção da corrente passada através dos mesmos. Simplesmente selecionando-se a direção da corrente o dispositivo de Peltier pode ser empregado para aquecer a peça corrediça 340 por uma extensão de tempo desejada. Comutando-se a direção da corrente, os elementos 680 resfriam a peça corrediça 340. Em outras realizações, os elementos de resfriamento/aquecimento 680 são canais através dos quais um fluido de trabalho flui. O fluido aquecido pode ser passado através dos canais para um período de aquecimento e um fluido resfriado pode ser passado através dos canais para um período de resfriamento. A posição, número e o tipo dos elementos de resfriamento/aquecimento 680 podem ser selecionados com base no perfil de temperatura desejado da base 360.

Adicional ou alternativamente, a tampa 350 pode incluir elementos térmicos, tais como elementos de aquecimento para produzir calor durante um período de aquecimento e elementos de resfriamento para absorver o calor durante um período de resfriamento. Por exemplo, a tampa 350 pode ter um ou mais elementos térmicos embebidos. Quando a tampa 350 é encaixada com a base 360, a conexão elétrica pode ser estabelecida de tal modo que a base 360 fornece energia elétrica para os elementos térmicos.

Os dispositivos térmicos podem também ser usados para transferir calor através da peça corrediça 340. Tais dispositivos térmicos podem

' 6o ser colocados no lado posterior da peça corrediça 340 para transferir calor através da peça corrediça 340 para o espécime.

Em algumas realizações, tanto a tampa 350 e quanto um dispositivo térmico no lado posterior da peça corrediça 340 cooperam para controlar a temperatura do espécime.

Em alguns — modos de operação, o dispositivo térmico que sobrepões a peça corrediça 340 pode transferir o calor através da peça corrediça 340 para um espécime.

Para resfriar o espécime, os dispositivos térmicos (por exemplo, canais de - resfriamento) na tampa 350 podem absorver o calor.

Dessa maneira, o espécime pode ser aquecido ou resfriado.

A Figura 31 mostra um sistema de coloração 700 com um arranjo das estações de processamento de peça corrediça.

O sistema de coloração 700 é mostrado com peças corrediças carregadas em cada uma das estações de processamento, Algumas estações de processamento de peça corrediça incluem dispensadores de fluido para processar automaticamente os espécimes.

Um operador ou um sistema de entrega de fluido externo pode entregar fluidos para as peças corrediças nas estações de processamento sem dispensadores de fluido.

O sistema de entrega de fluido externo pode ser um sistema de pipeta robótica.

Em outras realizações, todas as estações de processamento podem incluir dispensadores de fluido de tal modo que cada estação de processamento possa realizar um protocolo individual.

Leitores podem ser incorporados nas estações de processamento e podem adquirir informações da peça corrediça para determinar um protocolo apropriado.

Cada uma das estações de processamento pode ser conectada mecanicamente a um mecanismo de acionamento 702. O mecanismo de acionamento 702 pode ser movido verticalmente (indicado pelas setas 704, 706) para mover as peças corrediças.

Por meio de exemplo, uma extremidade 720 do atuador de braço 580 da Figura 27 pode ser acoplado a uma placa circular 730 do mecanismo de acionamento 702. A placa circular 730 é movida

61 ' para baixo (indicado pela seta 706 na Figura 31) para mover as peças corrediças radialmente para dentro e é movida para cima (indicado pela seta 704 na Figura 31) para mover as peças corrediças radialmente para fora. Os dispensadores de fluido permanecem estacionários conforme as peças corrediças são movidas. Para processar simultaneamente os espécimes, os dispensadores de fluido podem dispensar o fluido para as respectivas estações de processamento quando a placa 730 está em uma posição elevada. Após dispensar, a placa 730 pode ser movida para cima e para baixo repetidamente para oscilar cada uma das peças corrediças de microscópio para agitar os fluidos. A placa 730 pode ser girada sobre um eixo geométrico de rotação 731 para mover as peças corrediças para os dispensadores de fluido estacionários para realizar um protocolo inteiro sem remover as peças corrediças. Os líquidos aplicados podem ser removidos de cada peça corrediça em um tempo desejado. Isso permite que a peça corrediça individualizada processe em cada estação.

O mecanismo de acionamento 702 pode também incluir, sem limitação, um ou mais motores, trens de engrenagens, peças corrediças lineares, atuadores, conjuntos de pistão, combinações dos mesmos ou similares. Os componentes do mecanismo de acionamento 702 podem ser selecionados com base na disposição das estações de processamento.

Para fornecer o processamento paralelo independente, cada ---— estação de processamento - pode ser conectada a um mecanismo de acionamento operável independentemente. Diferentes protocolos podem ser realizados em diferentes estações.

Em algumas realizações, o sistema de coloração 700 é um colorante baseado em transportador. As peças corrediças podem ser carregadas manualmente ou pelo uso de um carregador separado. As peças corrediças podem ser carregadas em uma localização em particular, por

- 62 exemplo, a cada 15 a 20 segundos. O arranjo circular dos seguradores de peça corrediça (incluindo peças corrediças, pegas, grampos, descartáveis, partos superiores curvados, etc.) pode ser avançado periodicamente para um dispensador de fluído adjacente. Outros componentes da estação de coloração 700 podem permanecer estacionários (por exemplo, dispensadores de fluido, portas de refugo, etc.). Para coloração de hematoxilina e eosina (coloração H&E), as peças corrediças são movidas em volta da roda de modo que os espécimes recebem diferentes líquidos na ordem e sincronização apropriadas. Múltiplos líquidos podem ser propagados para acomodar diferentes protocolos. Na ultima estação, as peças corrediças podem ser cobertas com lamela e, então, removidas da roda. Dispensadores de fluido podem ser adicionados ou removidos do sistema de coloração 700 ilustrado para realizar diferentes tipos de protocolos. O sistema de coloração 700 fornece dessa forma flexibilidade para processar para realizar coloração primária, coloração especial, IHC, IHS, coloração H&E ou similares.

A Figura 32 mostra um sistema de processamento automatizado 1100 que inclui um sistema de coloração 1105, um sistema de manipulação de fluido 1110, um sistema de peça corrediça 1116, e um sistema de tampa 1118. O sistema de coloração 1105 pode processar peças corrediças do sistema de peça corrediça 1116 com o uso do fluido do sistema de manipulação de fluido 1110 e tampas a partir do sistema de tampa 1118. As peças corrediças podem ---- ser processadas sem intervenção humana para evitar problemas associados com manipular manualmente as peças corrediças e reagentes. Em algumas realizações, o sistema de coloração 1105 incluí um carrossel móvel com estações de processamento de peça corrediça, tal como o sistema de coloração 700 mostrado na Figura 31. Mecanismos de válvula, sistemas de controle de temperatura, sensores ou outros sistemas (por exemplo, aplicador de lamelas) podem ser incorporados no sistema de o. 63 TO " ENA o -

N | coloração 1105. As peças corrediças podem ser cobertas por lamela nas estações de processamento invertendo-se as peças corrediças de tal modo que um aplicador de lamela possa colocar uma lamela sobre os espécimes. À peça corrediça coberta por lamela pode ser removida do sistema de coloração. O sistema de manipulação de fluido 1110 pode incluir, sem limitação, um ou mais recipientes para segurar substâncias. Os recipientes podem ser conectados ao sistema de coloração 1105 por uma ou mais linhas de fluido. Solventes (por exemplo, solventes polares, solventes não polares, etc.), soluções (por exemplo, soluções aquosas ou outros tipos de solução), meiosde montagem, reagentes ou similares podem ser entregues através das linhas. As substâncias dos recipientes podem ser usadas para realizar diferentes protocolos, tais como protocolos de coloração (por exemplo, coloração primária, coloração especial, IHC, ISH ou similares), protocolos de restauração de antígeno ou similares. O sistema de manipulação de fluido 1110 pode também incluir uma ou mais bombas, filtros, bocais fixos (por exemplo, dispensadores de fluido de bocal fixo), sistemas de pipeta ou outros tipos de dispensadores de fluido. Os dispensadores de fluido de bocal fixo são especialmente bem adequados para entregar fluidos H&E, fluidos de corante avançado em massa ou similares. Os sistemas de pipeta são especialmente bem adequados para emitir fluidos de corante avançado não em massa.

O sistema de peça corrediça 1116 pode fornecer peças corrediças que carregam amostras prontas para o processamento. O sistema de peça corrediça 1116 pode incluir, sem limitação, aquecedores ou secadores de peça corrediça (por exemplo, secadores condutores, secadores de condução de calor, fornos, etc.), assim como outros tipos de componentes ou dispositivos usados para preparar amostras. O sistema de peça corrediça 1116 pode também incluir qualquer quantidade de prateleiras, bandejas, cartuchos ou outras estruturas adequadas para segurar uma quantidade desejada de peças

- 64 corrediças.

Uma ou mais transportadores de peça corrediça podem mover peças corrediças entre os componentes do sistema de peça corrediça 1116 e podem carregar e descarregar o sistema de coloração 1105. O sistema de tampa 1118 pode incluir, sem limitação, uma ou mais prateleiras, bandejas, cartuchos, receptáculos ou quaisquer outras estruturas adequadas para segurar uma quantidade desejada de tampas ou outros tipos de substratos.

Um ou mais transportadores podem carregar as tampas entre os componentes do sistema de tampa 1118. As tampas podem i ser tampas descartáveis ou tampas de múltiplos usos.

Para prevenir efeitos indesejados e outra contaminação, as tampas podem ser de uso único.

O sistema de processamento 1100 inclui adicionalmente um sistema de controle 1120 que se comunica com vários componentes.

O sistema de controle 1120 é acoplado comunicativamente ao sistema de coloração 1105 por uma conexão com fio 1122 e é acoplado comunicativamente ao sistema de manipulação de fluido 1110, sistema de peça corrediça 1116 e sistema de tampa 1118 pelas conexões com fio 1124, 1126, 1128, respectivamente.

A comunicação pode também ser realizada através de conexões sem fio (incluindo conexões de rede sem fio) e/ou conexões ópticas.

O sistema de controle 1120 pode geralmente incluir, sem limitação, um ou mais computadores, unidades de processamento central, dispositivos de processamento, microprocessadores, processadores de sinal digital, central unidades de processamento, dispositivos de processamento, microprocessadores, processadores de sinal digita (DSP), circuitos integrados específicos por aplicação (ASIC), leitores e similares.

Para armazenar informações, o sistema de controle 1120 inclui, sem limitação, um ou mais elementos de armazenamento, tais como memória volátil, memória não volátil, memória de somente leitura (ROM), memória de acesso aleatório (RAM) ou õ 65 similares. As informações armazenadas podem incluir programas de otimização, programas de preparação de tecido, programas de calibração, programas de indexação ou outros programas executáveis. O sistema de controle 1120 pode executar programas de otimização para otimizar o desempenho (por exemplo, reduzir o consumo de reagente em excesso, reduzir o tempo de aplicação de lamela, aumentar a produtividade, melhorar a consistência de processamento ou similares). O processamento pode ser | otimizado determinando-se, por exemplo, uma programação ótima para aumentar as velocidades de processamento, para aumentar o rendimento (por exemplo, uma quantidade de peças corrediças processadas em uma extensão de tempo) ou similares. Tal programação ótima pode ser uma programação de preparação e entrega de peças corrediças para o sistema de coloração 1105. Em algumas realizações, o sistema de controle 1120 determina sequências de carregamento para reduzir os tempos de espera de processamento. O sistema de controle 1120 pode também ser programado de tal modo que o carregamento das pipetas, bocais ou dispensadores de fluido para o próximo espécime pode iniciar durante o processamento do espécime atualmente carregado. Isso economiza tempo porque os fluidos podem ser dispensados no próximo espécime logo que o espécime de corrente é removido da estação.

O sistema de processamento 1100 pode incluir qualquer quantidade dos transportadores. Os transportadores podem incluir, sem limitação, um ou mais manípulos ou braços robóticos, sistemas de transporte X-Y-Z, condutores, combinações dos mesmos ou outros mecanismo automatizados capazes de carregar os itens entre as localizações. Os transportadores podem efetores finais para carregar itens. Os efetores finais podem incluir, sem limitação, pegas, dispositivos de sucção, seguradores, pinças ou similares. Os efetores finais podem ter sensores de temperatura, sensores de vácuo, sensores de superfície, sensores de posição ou similares.

po | : 66 Em algumas realizações, os sensores de vácuo de um efetor final são capazes de detectar a presença de um item, ou outras características das tampas, peças corrediças, espécimes ou similares.

Os efetores finais podem carregar ambas as peças corrediças e as tampas para o sistema de coloração 1105. ' 5 Apóso processamento, os efetores finais podem recuperar as peças corrediças e tampas.

A Figura 33 mostra uma estação de processamento 1200 para Ns processar um espécime com o uso de múltiplos conjuntos de platina.

A estação de processamento 1200 inclui um conjunto de platina mais baixo estacionário 1210 e um o conjunto de platina superior 1220 móvel.

Um dispositivo de posicionamento de peça corrediça 1230 inclui um dispositivo de retenção de peça corrediça 1240 e um mecanismo de rolete 1244. Uma amostra 1317 (ilustrada na linha pontilhada) pode ser processada através de alternação pelos conjuntos de platina 1210, 1220. Na configuração ilustrada, o conjunto de platinamais baixo 1210 está pronto para tratar o espécime 1317. O dispositivo de posicionamento de peça corrediça 1230 pode elevar uma peça corrediça 1242 que carrega o espécime 1317. Quando a peça corrediça 1242 é elevada, um mecanismo de acionamento 1260 pode transladar o conjunto de platina superior 1220 ao longo de um aparelho de trilho 1290 de uma posição de espera (mostrada na Figura 33) para uma posição de processamento (consulte a Figura 38) diretamente acima do conjunto de platina mais baixo 1210. A peça corrediça 1242 é, então, abaixada no conjunto de platina superior 1220. O aparelho de trilho 1290 inclui um par de trilhos 1292a, 1292b (coletivamente “1292”) e um suporte 1294 que se estende entre os trilhos 1292a,1292b.

O trilho 1292a retém um lado de um segurador de tampa 1266, e outro trilho 1292b retém o outro lado do segurador de tampa 1266. O segurador de tampa 1266 pode deslizar ao longo das fendas nos respectivos trilhos 1292 entre a posição de espera e a posição de processamento.

Os

: 67 tamanhos, configurações (por exemplo, configuração reta, configuração curvada ou similares) e recursos (por exemplo, fendas, trilhos, paradas ou similares) dos trilhos 1292 podem ser selecionados com base no movimento desejado do conjunto de platina superior 1220. Referindo-se às Figuras 33 e 34, o conjunto de platina superior 1220 inclui o segurador de tampa 1266 e uma tampa 1268. A tampa 1268 inclui uma superfície substancialmente plana1270 e duas fileiras de elementos de formação de intervalo 1280, 1282. O segurador de tampa 1266 inclui elementos térmicos 1281 que podem fornecer capacidades de aquecimento e resfriamento.

Em algumas realizações, os elementos térmicos 1281 podem ser dispositivos de resfriamento incluindo canais através dos quais o líquido resfriado flui.

A retroalimentação dos sensores (por exemplo, termistores) pode ser usada para controlar os elementos térmicos 1281. Em certas realizações, o segurador 1266 inclui uma placa com elementos térmicos embebidos 1281. À placa pode ser feita de metal ou outro material termicamente condutor para fornecer transferência de calor rápida à tampa 1268. Adicional ou alternativamente, os sensores de temperatura podem ser posicionados entre o segurador de tampa 1266 e a tampa 1268. Em ainda outras realizações, um ou mais sensores são incorporados na tampa 1268. Com referência continuada às Figuras 33 e 34, o conjunto de platina mais baixo 1210 inclui um segurador de tampa 1300 acoplado fixamente aos trilhos 1292. O suporte 1294 tem uma região rebaixada 1302 que recebe o segurador 1300. Um ou mais fixadores (por exemplo, parafusos, conjuntos de parafuso e porca ou similares), grampos, adesivos ou outros tipos de —acopladores podem acoplar o segurador 1300 ao suporte 1294. O mecanismo de rolete 1244 inclui um dispositivo de came 1250 e conectores 1252a, 1252b.

O dispositivo de came 1250 inclui um motor 1251 e um rolete 1257 montado excentricamente em um eixo de saída rotativo 1259

: 68 do motor 1251, conforme mostrado na Figura 34. O motor 1251 pode girar o rolete 1257 sobre um eixo geométrico de rotação 1253 para empurrar um seguidor 1254 do dispositivo de retenção de peça corrediça 1240. O motor 1251 pode incluir, sem limitação, um motor de passo, um motor de acionamento ou outro tipo de motor elétrico. As Figuras 35 a 44 mostram um método de processar o espécime

1317. A peça corrediça 1242 da Figura 35 é geralmente alinhada com uma superfície superior arqueada 1310 da tampa 1268 de tal modo que a peça corrediça 1242 é centralizada sobre uma região de aplicação de fluido 1316. O fluido pode ser entregue (por exemplo, manualmente entregue ou através de um dispensador de fluido) na região de aplicação de fluido 1316. Para facilitar a entrega de fluido, a estação de processamento 1200 pode estar em uma orientação inclinada ou vertical. Um intervalo de altura variável entre a peça corrediça 1242 e a tampa 1268 pode acomodar o fluido sem sobrepreenchimento e subpreenchimento. Em alguns protocolos, um volume de fluido em uma faixa de cerca de 10 ul para cerca de 100 ul pode ser dispensado e preso sob a peça corrediça 1242. Em um modo dinâmico de operação, a peça corrediça 1242 é movida ao longo da superfície superior arqueada 1310. Conforme a peça corrediça 1242 é movida para frente e para trás, o fluido pode ser aplicado ao espécime 1317. Em um modo estático de operação, a peça corrediça 1242 pode permanecer geralmente estacionária com relação à tampa 1268. Após o fluido ser aplicado ao espécime 1317, o dispositivo de posicionamento de peça corrediça 1230 ergue uma extremidade sobre a peça corrediça 1242 para mover o refugo (por exemplo, líquido não usado) em direção a uma porta de refugo 1330. Na realização ilustrada, o rolete 1257 pode ser girado para mover uma extremidade da peça corrediça 1334 para cima. À medida que a peça corrediça 1242 se curva, o fluido é movido em

[| A AM EO ASA Ot SSE9IÍIiianna>==)Sm7iâ 4“ .,:PANA MM o. 69 np Dr — - — — : ee — — SA | i direção à porta de refugo 1330. A Figura 36 mostra a peça corrediça 1242 em uma orientação angulada para impelir o refugo em direção à porta de refugo

1330. Após a remoção do fluido usado, o dispositivo de posicionamento de peça corrediça 1230 pode erguer a peça corrediça 1242 da Figura 36 para longe do conjunto de platina inferior 1210. A Figura 37 mostra, em geral, a peça corrediça horizontal 1242 em uma posição elevada. O mecanismo de acionamento 1260 empurra o conjunto de platina superior 1 220 para baixo da peça corrediça elevada 1242. Após o conjunto de platina superior 1220 alcançar a posição de processamento da Figura 38, a peça corrediça 1242 pode ser baixada sobre o conjunto de platina superior 1220, A Figura 39 mostra a peça corrediça 1242 que repousa sobre o conjunto de platina superior 1220. Uma extremidade 1322 da peça corrediça 1242 pode ser erguida para longe do conjunto de platina superior 1220 para entregar uma substância no conjunto de platina superior 1220. A Figura 40 mostra a extremidade 1322 angulada separada do conjunto de platina superior 1220. Após o fluido ser : introduzido para baixo da extremidade 1322, a extremidade 1322 pode ser abaixada para espalhar o fluido abaixo da peça corrediça 1242 por meio de ação capilar. Para formar um filme delgado, a peça corrediça 1242 pode repousar geralmente de modo plano sobre o conjunto de platina superior 1220, conforme mostrado na Figura 41. Após um período de tempo desejado, a peça — ' - corrediça 1242 pode ser curvada (consulte Figura 42) para mover o refugo em direção à porta de refugo 1350. Após o refugo ser aspirado, a peça corrediça 1242 pode ser erguida para longe do conjunto de platina superior 1220. A Figura 43 mostra a peça corrediça 1242 posicionada acima do conjunto de platina superior 1220. O conjunto de platina superior 1220 pode ser movido para trás para a posição de espera, conforme mostrado na Figura 44. O espécime 1317 pode ser processado novamente no conjunto de platina inferior

" 70 1210, se for necessário ou desejado.

O sistema de processamento de peça corrediça ilustrado 1200 tem dois conjuntos de platina. Entretanto, outras realizações podem ter qualquer número de conjuntos de platina móveis e conjuntos de platina estacionários. Por exemplo, uma estação de processamento de peça corrediça pode ter uma pluralidade de conjuntos de platina móveis, tal que cada conjunto de platina móvel possa aplicar uma substância diferente a fim de evitar o “ arraste, Esses conjuntos de platina podem ter configurações planas, configurações não planas ou similares.

A Figura 45 é uma vista detalhada de inibidores de fluxo 1360,

1362. Os inibidores de fluxo de sobreposição parcial 1360, 1362 podem minimizar, limitar ou substancialmente eliminar a ação de absorção e/ou capilar devido ao fato de a interface de contato 1376 ser posicionada bem afastada da porta de refugo 1350. O inibidor de fluxo 1360 é um canal em formato de U anular que circunda a porta de refugo 1350. Uma porção externa 1364 do inibidor de fluxo 1360 se estende através de uma porção interna 1365 do inibidor de fluxo 1362 (ilustrado com um canal em formato de V). Uma porção interna 1366 do inibidor de fluxo 1360 se estende através pelo menos de uma porção de uma entrada 1370 de uma passagem de refugo 1372. A porta de refugo 1350 pode ser geralmente concêntrica com a entrada 1370 para ajudar a guiar o refugo (representado pelo fluido F) através da passagem de refugo eo. 1372. Mesmo se a porta de refugo 1350 se tornar levemente desalinhada com a entrada 1370, o refugo ainda flui através da porta de refugo 1350 na entrada

1370.

Com referência à Figura 46, um aparelho de carga 1400 é configurado para carregar e descarregar um dispositivo de retenção de peça corrediça 1402 de uma estação de processamento 1421. O aparelho de carga 1400 incluí uma pega 1408 que pega uma peça corrediça 1409 de uma estante

' 71 1410 com prateleiras verticalmente espaçadas. A pega 1408 se move ao longo de um trilho 1420 para inserir a peça corrediça 1409 no dispositivo de retenção de peça corrediça 1402, conforme mostrado na Figura 47. Para descarregar a estação de processamento 1421, a pega 1408 pode deslizar sobre a extremidade da peça corrediça 1409, A pega 1208 puxa a peça corrediça 1409 para longe do dispositivo de retenção de peça corrediça 1402. Nesse modo, o aparelho de carga 1400 pode carregar e descarregar peças corrediças : microscópicas. B : = ' Uma roda de posicionamento 1430 das Figuras 46 e 47 pode girar para posicionar o aparelho de carga 1400 próximo às estações de | processamento. Em outras realizações, cada estação de processamento pode ter um aparelho de carga dedicado para evitar momentos de espera. A Figura 48 mostra as estações de processamento de peça corrediça 1440a-i (coletivamente “1440"”). A descrição de uma das estações de processamento 1440 pode se aplicar igualmente às outras, exceto, se indicado em contrário.

A estação de processamento 1440a inclui um conjunto de platina 1443 que inclui um segurador de tampa 1444 e uma tampa 1446 mostrada afastada do segurador 1444. A tampa 1446 está na forma de um azulejo geralmente rígido que pode ser colocado em um canal 1447 do segurador

1444. Uma porta de refugo 1450 pode ser alinhada com um refugo entrada SS 1451 no segurador 1444. O azulejo 1446 pode ser instalado (por exemplo, manual ou automaticamente) para o processamento dinâmico e desinstalado para o processamento estático.

A estação de processamento 1440g da Figura 48 está pronta para processar dinamicamente uma peça corrediça microscópica 1456. Um dispositivo de posicionamento de peça corrediça 1457 que segura a peça corrediça 1456 em uma moda de cantiléver pode usar uma superfície superior

| arqueada 1458 de um azulejo 1459 para aplicar um líquido em um espécime transportado sobre uma face inferior da peça corrediça 1456. Para desempenhar o processamento estático, o azulejo 1459 pode ser removido, e o dispositivo de posicionamento 1457 pode abaixar a peça corrediça 1456 sobre uma superfície superior geralmente plana de um segurador de tampa 1461. Os azulejos da Figura 48 podem ser substituídos para alterar a curvatura da superfície usada para aplicar o líquido, para ajustar os tamanhos e i configurações de elementos formadores de intervalo, ou similares. Com base == em um protocolo dado a ser desempenhado, o usuário pode selecionar e carregar um azulejo apropriado para processamento.

As Figuras 49 e 49A mostram um sistema de processamento automatizado 1500 que inclui um conjunto de platina 1509, uma unidade de rolete 1520 e um mecanismo de acionamento 1530. Um dispensador de fluido 1540 pode entregar um fluido sobre uma peça corrediça 1534 mantida por um dispositivo de posicionamento de peça corrediça 1510 do conjunto de platina

1509. A unidade de rolete 1520 pode adotar diferentes configurações para processar um espécime 1595 na peça corrediça 1534. O refugo pode ser removido por meio de uma linha de refugo 1532. As amostras podem ser rapidamente processadas sem problemas associados ao processamento manual.

Com referência à Figura 50, o dispositivo de posicionamento de -.. . .. peça-corrediça 1510 pode incluir um dispositivo de retenção de peça corrediça 1511 com um corpo principal 1538 conectado a uma linha 1536. Quando um vácuo é aplicado por meio da linha 1536, a peça corrediça 1534 pode ser seguramente mantida contra uma superfície superior 1541 do corpo principal

1538. O corpo principal 1538 pode incluir uma rede de passagens, furos atravessantes, canais ou quaisquer outros recursos adequados para a aplicação de um vácuo. Em algumas realizações, o dispositivo de retenção de

: 7 oo peça corrediça 1511 inclui um mandril mecânico e pode incluir um ou mais grampos, camadas adesivas, prendedores mecânicos (por exemplo, grampos), ou similares capazes de segurar e liberar seletivamente a peça corrediça 1534. Outros tipos de seguradores de peça corrediça também podem ser usados.

Por exemplo, o dispositivo de retenção de peça corrediça 1511 pode ser um mandril eletroestático.

A unidade de rolete 1520 de Figuras 51 e 52 inclui um conjunto de “platina 1521 que inclui um dispositivo de conversão 1577 e um aplicador | deformável 1544 móvel entre diferentes configurações, incluindo, sem limitação, uma configuração substancialmente plana (mostrada nas Figuras 51 a 53), uma configuração curvada (mostrada na Figura 54) ou qualquer outra configuração adequada.

Para processamento dinâmico, o aplicador deformável 1544 pode estar na configuração curvada, tal que uma tampa 1594 também esteja em uma configuração curvada, Para o processamento estático, o aplicador deformável 1544 pode estar na configuração substancialmente plana, tal que a tampa 1594 se apoie de modo plano sobre a peça corrediça 1534. Após a tampa 1594 ser usada, essa pode ser descartada ou reutilizada.

O aplicador deformável 1544 pode incluir um membro dobrável 1570 que se estende entre dois membros de suporte 1574, 1576 e um apoio 1572 fisicamente conectado ao membro dobrável 1570. Os conectores 1580a-d são acoplados de maneira pivotante ao membro de suporte 1574 da Figura 52, e os conectores 1582a-d são acoplados de maneira pivotante ao membro de suporte 1576. O apoio 1572 inclui um primeiro membro 1578a, um segundo membro 1578b, e um membro alongado 1577 que se estende entre o primeiro esegundomembros 1578a, 1578b.

O membro dobrável 1570 pode ser feito, em sua totalidade ou em parte, de metal (por exemplo, aço, alumínio, titânio, ou similares), compósitos, plásticos ou outros materiais resilientes capazes de superar deformações

S 74 elásticas relativamente grandes. O apoio 1572 pode ser soldado ou, de outra forma, acoplado ao membro dobrável 1570. Conforme mostrado na Figura 51, uma face externa 1596 do membro dobrável 1570 inclui uma rede de canais 1590 e uma porta de vácuo

1592. Quando a tampa 1594 sobrepõe a face externa 1596, um vácuo pode ser aplicado por meio dos canais 1590 para segurar a tampa 1594. Uma linha de mm — vácuo 1597 na Figura 50 está em comunicação fluida com os canais 1590 e pode aplicar o vácuo. RM o Um propulsor 1579 da Figura 49 está acoplado ao membro dobrável 1570 por meio dos membros 1578a, 1578b, tal que quando o propulsor 1579 gira, o meio do membro dobrável 1570 se dobra para baixo ou para cima. A Figura 54 mostra o membro dobrável 1570 com a face 1596 em uma configuração convexa ao mover o primeiro e segundo membros 1578a, 1578b para baixo, conforme indicado por uma seta 1600 (Figura 54). A tampa 1594tem uma curvatura que geralmente é compatível com a curvatura da face | 1596. A face convexa 1596 e a tampa curvada 1594 podem rolar juntas ao | longo da peça corrediça 1534. A Figura 55 mostra a face 1596 em uma configuração côncava ao mover o centro do membro dobrável 1570 para longe da peça corrediça 1534, conforme indicado por uma seta 1602 (Figura 54). A tampa côncava 1594 pode cooperar com a peça corrediça 1534 para fornecer | um confinamento eficaz de um espécime 1595 usando reagente 1599. o O sistema de processamento 1500 pode ser movido a partir de uma configuração fechada (Figura 50) para uma configuração aberta (Figura 55) para remover a tampa usada 1594 e/ou a peça corrediça 1534. Quando o sistema de processamento 1500 está na configuração fechada, o conjunto de platina 1521 está em uma posição de processamento. Quando o sistema de processamento 1500 está na configuração aberta, o conjunto de platina 1521 está em uma posição de espera. Um transportador ilustrado 1610 da Figura 55

- 75 pode carregar e descarregar tampas e/ou peças corrediças. Para mover o sistema de processamento 1500 para a posição de espera, o mecanismo de acionamento 1530 pode ser girado em torno de um eixo geométrico de rotação 1676 a partir da posição de processamento para a posição de espera. Após o carregamento de uma peça corrediça, o mecanismo de acionamento 1530 pode ser girado em torno do eixo geométrico de rotação 1676 para a posição fechada.

" i A Figura 56 mostra o dispositivo de posicionamento 1510 na forma de um mandril de peça corrediça de vácuo ou segurador que inclui um o corpo principal 1715 e uma porta 1717. Uma linha de vácuo pode ser acoplada aum conector 1718. Um vácuo pode ser retirado para segurar a peça corrediça contra uma face 1719 do corpo principal 1715. O corpo principal 1715 pode incluir um ou mais elementos térmicos para controlar a temperatura da peça corrediça. Alternativamente, um ou mais elementos térmicos podem ser acoplados a um lado posterior 1720 do corpo principal 1715.

Para processar um espécime, o dispensador 1540 da Figura 49, ilustrado na forma de uma pipeta, entrega um fluido de lavagem sobre a peça corrediça 1534. O fluido de lavagem pode ser removido para aplicar um reagente. A unidade de rolete 1520 pode ser movida para uma configuração aberta ou de espera. O dispensador 1540 se move acima da peça corrediça 1534 (por exemplo, acima do meio da peça corrediça 1734) e dispensa um reagente sobre a peça corrediça 1534. A unidade de rolete 1520 se fecha para “iniciar a incubação no volume desejado, distância de rolete, temperatura e CPM (velocidade). A unidade de rolete 1520 pode rolar periodicamente (por exemplo, longitudinalmente, lateralmente ou ambos) para agitar o reagente. Em —alguns protocolos, o movimento de rolamento longitudinal ou transversal (por exemplo, movimentos de rolamento longitudinal e/ou movimentos de rolamento transversal) da superfície voltada ao espécime 1593 (Figura 51) do conjunto de platina 1521 em relação à peça corrediça 1534 retida pode criar um intervalo

' 76 de altura variável.

O mecanismo de acionamento 1530 pode incluir, sem limitação, um ou mais atuadores lineares, conjuntos de pistão, mecanismos de came, motores, solenoides e/ou outros componentes adequados para fornecer o movimento desejado da tampa 1594. A mistura na peça corrediça também pode ser realizada, se for necessário ou desejado.

Na extremidade da incubação de reagente, o reagente é removido após movimentar a unidade de BR rolete 1520 para uma posição aberta.

O fluido de lavagem é dispensado de um dispensador de volume para lavar a peça corrediça 1534. A unidade de roleta 1520 se fecha e inicia o ciclo de lavagem.

A tampa 1594 pode incluir uma porta de refugo 1589 (mostrada na Figura 51 em linha imaginária) que pode ser compatível com uma passagem de refugo ou porta 1587 para definir uma trajetória de fluído.

A linha de refugo 1532 | (Figuras 49 e 50) pode retirar substâncias de refugo para longe da peça corrediça 1534 por meio das portas 1589, 1587. Um dispositivo opcional 1630 (consulte a Figura 55) pode funcionar como um removedor de refugo para remover substâncias da peça corrediça 1534. O dispositivo 1630 pode operar de forma similar ao removedor de refugo 130 discutido em conexão com as Figuras 7 a 13. Em alguns protocolos, as substâncias de refugo são removidas com o uso da linha de refugo 1532 e do removedor de refugo 1630. Adicional ou alternativamente, o dispositivo 1630 pode servir como um dispensador de líquido.

A unidade de rolete 1520 pode incluir outros tipos de conjuntos de l platina, incluindo o conjunto de platina 180 (consulte a Figura 7), o conjunto de platina 361 (consulte a Figura 16), o conjunto de platina 1210 (consulte a Figura 33), o conjunto de platina 1220 (consulte a Figura 33), e o conjunto de platina 1443 (consulte a Figura 48). Os componentes dos conjuntos de platina (por exemplo, bases, tampas, etc.) podem ser misturados e combinados com base nas capacidades de processamento desejadas.

As tampas maleáveis, semimaleáveis e rígidas ou outros tipos de componentes podem ser

- 7 empregados com os tipos diferentes de conjuntos de platina.

As Figuras 57 a 60 mostram um opositor em formato de sela 1730 que é convexo em uma primeira direção e convexo em uma segunda.

O opositor ilustrado 1730 tem uma superfície 1738 que é côncava em uma direção (por exemplo, côncava conforme visualizada ao longo de um eixo geométrico de concavidade 1732 da Figura 57), e convexa em outra direção - (por exemplo, convexa conforme visualizada ao longo de um eixo geométrico de convexidade 1734 da Figura 57). i A curvatura (por exemplo, um raio de curvatura R1) pode ser aumentada ou reduzida para reduzir ou aumentar uma altura H de um intervalo entre uma região central 1740 da superfície 1738 e uma peça corrediça 1744 (mostrada em linha imaginária nas Figuras 58 e 59). A curvatura R, também pode variar ao longo de um comprimento do opositor 1730. O raio de curvatura R2 pode ser selecionado com base na ação de rolamento desejada.

O opositor 1730 pode ser usado com as realizações reveladas no presente documento.

Por exemplo, o opositor 1730 pode ser usado como o substrato 140 das Figuras 16 a 18, a tampa 1268 das Figuras 35, tampa 1446 da Figura 48 ou tampa 1594 da Figura 51. O opositor 1730 pode ser maleável, semimaleável ou rígido.

Com referência à Figura 60, um vácuo pode ser extraído através de uma porta de refugo 1741 e uma passagem 1743 para remover substâncias.

Qualquer quantidade de portas de refugo e passagens pode ser posicionada ao i longo do opositor 1730. A Figura 61 mostra um opositor em formato de sela 1770 que inclui uma base 1772 e uma tampa 1774. A tampa 1774 pode ser descartável ou reutilizável, Em realizações descartáveis, a tampa 1774 pode ser feita de um material altamente maleável.

Em realizações reutilizáveis, a tampa 1774 pode ser feita de um material rígido capaz de suportar o contato repetido com peças corrediças.

Em ainda outras realizações, a tampa 1774 pode ter uma

- 78 seção feita de um material maleável e outra seção feita de um material rígido.

As realizações reveladas no presente documento podem realizar uma ampla faixa de tipos diferentes de processamento, incluindo processamento de modo plano, processamento de modo curvo Ou combinações dos mesmos.

Em um processamento de modo plano, um substrato pode estar em uma configuração geralmente plana.

O substrato pode ser mantido por um componente (por exemplo, um segurador) e pode ou não Na pode flutuar no fluido aplicado.

O pedido de patente nº U.S: 61/222.046, depositado em 30 de junho de 2009, que é incorporado por referência em sua totalidade, revela aparelhos, métodos e componentes .adequados para a flutuação de um substrato em um líquido.

Em algumas realizações, um substrato pode estar em uma configuração curvada e usado para espalhar um fluido ao longo de uma peça corrediça.

O substrato pode, então, ser movido a uma configuração geralmente plana e é permitido que o mesmo flutue no fluido.

Em determinadas realizações, o substrato é separado de um segurador para permitir que o substrato flutue.

Em outras realizações, um segurador segura continuamente o substrato à medida que o substrato flutua.

As realizações, recursos, sistemas, dispositivos, materiais, métodos e técnicas descritos no presente documento podem, em algumas realizações, ser similares a qualquer uma ou mais das realizações, recursos, sistemas, dispositivos, materiais, métodos e técnicas descritos no pedido de patente nº U.S. 11/187.183 (publicação nº 2006/0019302) e no pedido de patente nº U.S. 61/222.046, os quais são incorporados por referência em suas totalidades.

Ainda, as realizações, recursos, sistemas, dispositivos, materiais, — métodos e técnicas descritos no presente documento podem, em determinadas realizações, ser aplicados ou usados em conexão com qualquer uma ou mais das realizações, recursos, sistemas, dispositivos, materiais, métodos e técnicas revelados no pedido de patente nº U.S. 11/187.183 mencionado acima.

e ..

As inúmeras realizações descritas acima podem ser combinadas para fornecer realizações adicionais. Todas as patentes U.S., publicações de pedido de patente U.S., pedidos de patente U.S., patentes estrangeiras, pedidos de patente estrangeiros e publicações de não patente referidas nesse relatório descritivo e/ou listadas na Planilha de Dados de Pedido de Patente são incorporadas no presente documento por referência, em sua totalidade. Os aspectos das realizações podem ser modificados, se necessário, para Ns empregar conceitos das inúmeras patentes, pedidos de patente e publicações para fornecer ainda realizações adicionais.

Essas e outras alterações podem ser feitas para as realizações à luz da descrição detalhada acima. Em geral, nas reivindicações seguintes, os termos usados não devem ser interpretados como limitadores das reivindicações às realizações específicas reveladas no relatório específico e nas reivindicações, mas devem ser interpretados como incluindo todas as possíveis realizações juntamente com o escopo completo de equivalentes ao qual tais reivindicações são designadas. Em conformidade, as reivindicações não são limitadas pela revelação.

Claims

. | 1 REIVINDICAÇÕES

1. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, caracterizada por compreender: um primeiro conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) quetem uma parte curvada; um mecanismo de acionamento (702, 1260, 1530) configurado para mover o primeiro conjunto de platina de uma posição de modo de espera NS para uma posição de processamento; = — um conjunto de dispensação de líquido (208, 540, 1540) para dispensar um líquido; e um segundo conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) que compreende um dispositivo de posicionamento de peça corrediça (99, 316, 1230, 1457, 1510), sendo que o dito dispositivo de posicionamento de peça corrediça compreende um dispositivo de retenção de peça corrediça (330, 1240,1402,1511), o dispositivo de posicionamento de peça corrediça operável para posicionar uma peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) retida pelo dispositivo de retenção de peça corrediça próximo ao primeiro conjunto de platina, sendo que o primeiro conjunto de platina e o segundo conjunto de platina, que são configurados para causar um movimento girante longitudinal ou transversal da parte curvada do primeiro conjunto de platina em relação ao segundo conjunto de platina, retêm a peça corrediça para criar um : intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570) entre a peça corrediça e a parte curvada suficiente para aplicar um líquido (86, 160, 560) a uma amostra (88, 187, 1317) na peça corrediça.

2. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que pelo menos um dentre o primeiro conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) e o segundo conjunto de platina

- 2 (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) incluí pelo menos um elemento térmico (547, 680, 1281) configurado para receber energia elétrica e gerar calor com a utilização da energia elétrica. 3, ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o conjunto de dispensação de líquido (208, 540, : — 1540) inclui pelo menos um elemento térmico (547, 680, 1281) configurado para receber energia elétrica e gerar calor com a utilização da energia elétrica SS para aquecer o líquido (86, 160, 560).

4. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por compreender ainda: 4a) um dispositivo de pressurização (220) acoplado de maneira fluídica a uma porta de refugo (104, 106) na parte curvada, o dispositivo de pressurização é adaptado para extrair o líquido (86, 160, 560) do intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570) por meio da porta de refugo; ou 4b) um removedor de refugo (130) que inclui uma entrada afastada da parte curvada e da peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744), o mecanismo de acionamento (702, 1260, 1530) é configurado paramover o primeiro conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) em relação ao segundo conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, Ns 1521) para mover o líquido (86, 160, 560) para a entrada com a utilização de ação capilar.

5. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o conjunto de dispensação de líquido (208, 540, 1540) é configurado para dispensar o líquido (86, 160, 560) de uma pipeta em pelo menos uma dentre a peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534,

" 3 1744) e a parte curvada e/ou para dentro do intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570).

6. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o conjunto de dispensação de líquido (208, 540, 1540) inclui: : — 6a uma unidade de dispensação (544, 546) acoplada ao segundo conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521), a unidade de dispensação tem uma porta de saída (554, 556) posicionada para dispensar um líquido (86,160, 560) entre a parte curvada e a peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) segura pelo dispositivo de posicionamento de peça corrediça (99, 316, 1230, 1457, 1510); ou 6b) uma porta de saída (554, 556) posicionada para entregar líquido (86, 160, 560) entre a peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) e a tampa (350, 1268, 1446, 1594, 1774) para, pelo menos parcialmente, preencher o intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570). |

7. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA | CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o dispositivo de retenção de peça corrediça | 20 (330,1240,1402,1511) é móvel entre uma posição aberta para receber a peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) e uma posição de o preensão para prender a peça corrediça, ou em que o dispositivo de retenção de peça corrediça (330, 1240, 1402, 1511) inclui um mandril de vácuo para segurar a peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744). l 25

8. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o primeiro conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) inclui:

SJ 4 8a) um segurador (1266, 1300, 1444, 1461) e uma tampa (350, 1268, 1446, 1594, 1774) acoplada de maneira removível ao segurador, sendo que a tampa define pelo menos uma parte da parte curvada; ou 8b) um segurador (1266, 1300, 1444, 1461) e uma tampa (350, 1268,1446,1594, 1774) acoplada de maneira removível ao segurador, sendo que a tampa tem uma superfície de revestimento de espécime relativamente 7 o maleável para entrar em contato com o líquido (86, 160, 560) no intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570), e em que o segurador é relativamente o rígido; ou 8c) uma superfície de revestimento de espécime que compreende um material semimaleável que é mais maleável do que a peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744); ou 8d) uma superfície de revestimento de espécime para entrar em contato com o líquido (86, 160, 560) no intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570), sendo que a superfície de revestimento de espécime compreende um material rígido; ou 8e) uma região de aplicação de líquido (453, 1316) e uma pluralidade de elementos formadores de intervalo (183, 450, 452, 1280, 1282) distintos posicionados fora da região de aplicação de líquido e afastados um do outro ao longo de um comprimento da região de aplicação de líquido, a — Pluralidade de elementos formadores de intervalo distintos é dimensionada para espaçar a peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) da região de aplicação de líquido para criar o intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570).

9. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que pelo menos um dentre o primeiro e segundo conjuntos de platinas (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) inclui um elemento

" 5 formador de intervalo (183, 450, 452, 1280, 1282) dimensionado para definir o intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570) entre a peça corrediça (120, 340, ' 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) e a parte curvada.

10. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por compreender ainda uma pluralidade de elementos - formadores de intervalo (183, 450, 452, 1280, 1282) para manter o intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570), e em que pelo menos um dentre os | elementos formadores de intervalo tem uma altura de pelo menos 0,025 mm | 10 (0,001 polegada). |

11. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que pelo menos uma parte da parte curvada tem um raio de curvatura de 38,1 cm (15 polegadas) até 50,8 cm (20 polegadas).

12. ESTAÇÃO DE PROCESSAMENTO DE PEÇA CORREDIÇA AUTOMATIZADA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o mecanismo de acionamento (702, 1260, 1530) é operável para mover o primeiro conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443, 1509, 1521) em relação ao segundo conjunto de platina (361, 1210, 1220, 1443,1509,1521) para mover o líquido (86, 160, 560) ao longo do intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570) com a utilização de ação capilar. 138 MÉTODO DE PROCESSAMENTO DE UMA AMOSTRA, caracterizado por compreender: entregar uma primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) que carregar uma primeira amostra (88, 187, 1317) a um | dispositivo de posicionamento de peça corrediça (99, 316, 1230, 1457, 1510) | de uma estação de processamento de peça corrediça (300, 1200, 1421, 1440) automatizada; |

J [5] entregar um primeiro líquido (86, 160, 560) a pelo menos uma dentre a primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) e uma parte curvada de uma unidade de unidade de rolete (310, 1244, 1250) da estação de processamento de peça corrediça (300, 1200, 1421, 1440) automatizada;e rolar a parte curvada da unidade de rolete (310, 1244, 1250) em mea relação à primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) segura pelo dispositivo de posicionamento de peça corrediça (99, 316, 1230, 1457, 1510) para aplicar o primeiro líquido (86, 160, 560) à primeira amostra | 10 (88,187, 1317) na primeira peça corrediça enquanto o primeiro líquido está localizado em um intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570) definido pela primeira peça corrediça e a parte curvada.

14. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por compreender ainda: 14a) entregar um segundo líquido (86, 160, 560) a pelo menos uma dentre a primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) e a parte curvada da unidade de rolete (310, 1244, 1250) após aplicar o primeiro líquido (86, 160, 560) à primeira amostra (88, 187, 1317); e aplicar o segundo líquido (86, 160, 560) à primeira amostra (88, 187, 1317) mediante a “movimentação da parte curvada em relação à primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) para mover o segundo líquido ao longo do intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570); ou 14b) mover o primeiro líquido (86, 160, 560) para uma porta de refugo (374, 409, 1330, 1350, 1450, 1589, 1741) da unidade de rolete (310, 1244,1250) mediante a movimentação da parte curvada em relação à primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744); e remover o primeiro líquido (86, 160, 560) do intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570) com a utilização da porta de refugo (374, 409, 1330, 1350, 1450, 1589, 1741)

N 7 enquanto pelo menos uma parte da primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) se estende através da porta de refugo; ou 14c) rolar da parte curvada ao longo da primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) com a utilização de um elemento formador de intervalo (183, 450, 452, 1280, 1282) da parte curvada; ou 14d) remover o primeiro líquido (86, 160, 560) dentre a primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) e a parte curvada; remover uma tampa (350, 1268, 1446, 1594, 1774) de um : segurador (1266, 1300, 1444, 1461) da unidade de rolete (310, 1244, 1250), sendo que a tampa define a parte curvada; e colocar outra tampa no segurador da unidade de rolete antes de processar uma segunda amostra (88, 187, 1317)na segunda peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744);ou 14e) entregar uma segunda peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) que carrega uma segunda amostra (88, 187, 1317) para o dispositivo de posicionamento de peça corrediça (99, 316, 1230, 1457, 1510) após a remoção da primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) do dispositivo de posicionamento de peça corrediça; e aplicar um segundo líquido (86, 160, 560) ao segundo espécime na segunda peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) com a utilização de uma superfície da parte curvada que entrou em contato com o primeiro líquido (86, 160, 560); ou i 14f) dispensar um segundo líquido (86, 160, 560) sobre pelo menos uma dentre a parte curvada e a primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) após dispensar o primeiro líquido (86, 160, 560); e misturar o primeiro líquido e o segundo líquido com a utilização de movimento longitudinal ou lateral da parte curvada em relação à primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744); ou 14g) entregar um segundo líquido (86, 160, 560) sobre pelo

S 8 menos uma dentre a parte curvada e a primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) após entregar o primeiro líquido (86, 160, 560); e misturar o primeiro líquido e o segundo líquido com a utilização de movimento longitudinal ou lateral da parte curvada em relação à primeira peça corrediça (120,340,1242,1409,1456, 1534, 1744); ou 14h) misturar uma primeira substância e uma segunda substância para produzir o primeiro líquido (86, 160, 560); e emitir o primeiro líquido de um conjunto de dispensação de líquido (208, 540, 1540) para entregar o primeiro l líquido a pelo menos uma dentre a primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409,1456, 1534, 1744) e a parte curvada; ou 14i) aquecer o primeiro líquido (86, 160, 560) com a utilização de pelo menos um dentre o dispositivo de posicionamento de peça corrediça (99, 316, 1230, 1457, 1510) e a unidade de rolete (310, 1244, 1250); ou 14j) ajustar um perfil do intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570) mediante a rolagem da parte curvada em relação à primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) para mover o primeiro líquido (86, 160, 560) ao longo do intervalo de altura variável; ou 14k) rolar a parte curvada para longe da primeira peça corrediça (120, 340, 1242, 1409, 1456, 1534, 1744) de tal forma que o primeiro líquido —(86,160,560)&é entregue entre a primeira peça corrediça e uma seção da parte curvada que foi afastada mediante rolamento da primeira peça corrediça. | 15. — MÉTODO, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que: 15a) entregar o primeiro líquido (86, 160, 560) compreende dispensar menos do que 200 microlitros do primeiro líquido; ou 15b) entregar o primeiro líquido (86, 160, 560) compreende dispensar de 50 microlitros a 120 microlitros do primeiro líquido no intervalo de altura variável (91, 170, 470, 570).

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