BG62139B1

BG62139B1 - Съединения,съдържащи кондензиран бицикличен пръстен, и метод за получаването им

Info

Publication number: BG62139B1
Application number: BG98854A
Authority: BG
Inventors: Jeffrey Robl; David Kronenthal; Jun. Jollie Goderey
Original assignee: Bristol-Myers Squibb Company
Priority date: 1993-06-15
Filing date: 1994-06-14
Publication date: 1999-03-31
Also published as: TW329423B; ES2219644T3; US5670699A; PT629627E; NO942208D0; RO112870B1; EG20537A; US5672599A; UA39924C2; PL303832A1; EP0629627B1; FI942793A0; UY23787A1; JP3569550B2; HUT70842A; BG98854A; ATE266032T1; FI942793A; KR950000711A; CA2124375A1

Abstract

Съединенията с формула, в която х означава 0 или s-(0)т, n е 1 или 2, м е 0 или 1, y е сн2, 0 или s-(0)т, при условие, че y е 0 или s-(0)т само когато м е 1 и а означав, са полезни като двойни инхибитори на nер и асе. Съединенията, в които а означава или , са селективни асе инхибитори. Описани са методи за получаване и н а междинни съединения.

Description

Област на техниката

Настоящото изобретение се отнася до нови съединения, съдържащи кондензиран бициклен пръстен, които са полезни като инхибитори на превръщащите ангиотензина ензими. Някои от тези съединения притежават също така инхибиторна активност към неутрална ендопептидаза. Изобретението се отнася също така до фармацевтични състави съдържащи такива селективно или двойно действуващи инхибитори и метод за използване на такива състави. Настоящото изобретение се отнася също до метод за получаване на такива нови съединения, нови междинни съединения и метод за получаване на такива меж динни съединения.

Техническа същност на изобретението

Новите кондензирани бициклени инхибитори съгласно настоящото изобретение включват съединения с обща форм ул a

и техни фармацевтичноприемливи соли, в която

О

II

А означава R2-S-(СН2)_г-С - С /\

R12 R1

R7OOC-(СН₂) q-C /\

О

II с

^r12 R1

R7OOC - СН или

I ^Ri

о

II

R4 - Р - ;

I

OR₅

X означава О или S-(O)j·;

R| и R]2 независимо един от друг означават водород, алкил, алкенил, циклоалкил, субституиран алкил, субституиран алкенил, арил, субституиран арил, хетероарил, циклоалкил-алкилен-,арил-алкилен-, субституиран арил-алкилен- и хетероарилалкилен- или Rj и R]2 заедно с въглеродния атом, към които са свързани образуват циклоалкилов пръстен или бензокондензиран циклоалкилов пръстен;

О

II

R2 означава водорд, Rg - С - или R]j-S-;

R 3, R5 и Ry независимо един от друг означават Бсдзрод, алкил, субституиран алкил, арил-(С Ноiр-. субституиран арил - ( С Но) о, хете рсарил -1 С Но) _D -,

О

II — СН —О —С—Rg _и

R6 о л о о

R4 означава алкил, циклоалкил-(СН2)р-, субституиран алкил, арил-(СН2)р-, субституиран арил-(СН2)р- или хетероарил-(СН2)р-;

Rg означава субституиран алкил, циклоалкил-(СН₂)р-, арил-(СН2)р-, субституиран арил-(СН₂)р- или

хетероарил-(СН2)р-;
	^Rs	означава водород,	нисш	алкил,	циклоалкил или
фенил;
фенил;	Rg	означава водород,	нисш	алкил,	нисш алкокси или
	^R10	означава нисш алкил или арил-	(СН₂)_Р-;
	Rjl означава водород	, алкил, субституиран алкил,

циклоалкил-(СН₂)р-_г арил-(СН₂)р-, субституиран арил-(СН2)р хетероарил-(СН₂)р- или -S-Rj] образува симетричен дисулфид, където Rj j е о

I

-(СНД-С-С

m е нула или едно;

-4АI Ye CH₂, S - ( Ο ) _t, или O, с ограничението, че Υ е S- ( Ο ) _t или O само когато m е едно;

η е едно или две;

р е нула или число от 1 до 6;

q е нула или число от 1 до 3;

г е нула или едно и t е нула, едно или две,

Изобретението също включва и съединение с фармула (I) и неговата сол, когато А означава водород, а

X е О или S;

η е едно или две;

m е нула или едно;

Y е СН₂, О или S, с ограничението, че Y е О или S само когато m е едно;

R е водород, нисш алкил или арил - (СН )_р- и р е нула или число от 1 до 6;

при ограничението,че когато X е Ο, η е едно и Υ е СН₂, тогава m трябва да бъде едно.

Терминът алкил” се отнася до радикал с права или С разклонена верига с до 7 въглеродни атоми. Терминът “нисш алкил” се отнася до радикал с права или разклонена верига с до 4 въглеродни атоми и за предпочитане с подгрупа на алкиловата група.

Терминът “ субституиран алкил” се отнася до радикали с права или разклонена верига с 1 до 7 въглеродни атоми, в които един или повече, за предпочитане един, два или три водородни атома са заместени с хидрокси, амино, циано, хало, трифруорометил, -!ЧН(нисш алкил), -ЬЦнисш алкил)₂, нисш алкокси, нисш алкилтио или карбокси.

ЗАМЕСТВАЩА СТРАНКЦ

-4ВТермините” нисш алкокси” и “нисш алкилтио” се отнасят до нисши алкилни групи както са дефинирани по-горе, свързани с кислорода или сярата.

Терминът “циклоалкил” се отнася до наситени пръстени с 3 до 7 въглеродни атоми като циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклохексил, който е най-предпочитан.

Терминът ’алкенил” се отнася до радикали с права или разклонена верига с 3 до 7 въглеродни атоми, с една или две двойни връзки. Предпочитани “алкенил” групи са радикали с права верига с 3 до 5 въглеродни атоми с една двойна връзка.

Терминът “субституиран алкенил” се отнася до радикали

ЗАМЕСТВАЩА СТРАНИЦА

с права или разклонена верига с 3 до 7 въглеродни атоми с елна и\и две двойни връзки, където водородът е заместен с хидрокси, амино, хало, трифлуорометил, циано, -МН(нисш алкил), N (нисшалкил) 2- нисш алкокси, нисш алкилтио или карбокси.

Терминът алкиден се отнася до радикали с права или разклонена верига с до 7 въглеродни атоми, напр. -СН2-,

-(СН₂)2-. -(СН₂)₃-, -(СН₂)₄, - СН₂ - CH - , - СН - и т.н.

СН₃ СН₃

Терминът арил” се отнася до фенил, 1-нафтил и 2-нафтил. Терминът субституиран арил се отнася до фенил, 1-нафтил и 2-нафтил със субституент избран от нисш алкил, нисш алкокси, нисш алкилтио, хало, хидрокси, хидрокси, трифлуорометил, амино, -NH(hhciii алкил) или -Щнисш алкил)2 и ди- и три-субституиран фенил, 1-нафтил или 2-нафтил, където субституентите са избрани от метил, метокси, метилтио, хало, хидрокси и амино.

Терминът хетероарил се отнася до ненаситени пръстени с 5 или 6 атоми съдържащи един или два О и S атоми и/или един до 4 N атоми, с ограничението, че общият брой на хетероатомите в пръстена е 4 или по-малко. Хетероарилният пръстен се свързва посредством наличен въглероден или азотен атом. Предпочитани хетероарилни групи са 2-,3- или 4-пиридил, 4-имидазолил, 4-тиазолил, 2- и 3-тиенил и 2- и 3-фурил. Терминът хетероарил включва също бициклични пръстени, където пет или шест членният пръстен съдържащи О, S и N атоми както са дефинирани по-горе са кондензирани към бензеновия или пиридиловия пръстен. Предпочитани бициклични пръстени са 2- или 3-индолил и 4- и 5-хинолинил. Моно или бицикличният хетероари-лов пръстен може също така да бъде допълнително субституиран при ΗάΛΐΐ4-.·Η въглероден атом с нисш алкил, хало, хидрокси, сензил или циклохексилметил. Също така, ако моно или бицикличният пръстен имат наличен N-атом, този N-атом също може да бъде субституиран с N-защитна група като

2,4-динитрофенил, нисш алкил, бензил или бензхидрил.

Съединенията с формула I, където А означава

О О

II II

Rg - С - S - (СН2)_Г - С - С - , X означава О или S и Y означава / \ ^R12 ^ri

СН2> О или S могат да се получат чрез свързване на съединения съдържащи ацилмеркапто странична верига с формула (II)

О О

II II

Rg - С - S - (СН₂)_Г - С - С - ОН / \ ^r12 ^r1 със съединение с кондензиран бицикличен пръстен с формула (III)

като се получава продукт с формула (IV)

О

която R-з означава водород или карбоксизащитна група като метил, етил, трет.бутил или бензил. Горното взаимодействие може да се извърши в органичен разтворител като метиленхлорид и в присъствие на свързващо средство като 1-етил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид, дициклохексилкарбодиимид, бензотриазол-1 - илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофссфат или карбонилдиимидазол.Алтернативно, ацилмеркапто карбоксилната киселина с формула II може да се превърне в активирана форма преди да се свърже , като киселинен хлорид, смесен анхидрид, симетричен анхидрид, активен естер и т.н.

Съединението с формула IV може да се превърне в меркаптан с формула I, където Ro означава водород по известни методи. Например, когато Rg означава метил и R3 означава метил или етил , чрез обработване с метанолен натриев хидроксид и след това с водна киселина дава продукт, където R2 и R3 означават водород.

Съединенията с формула I, където Ro означава водород магат да се апилират с анилхалпд с формула (Vi

О

II

Rg - С - хало където хало означава F,

С1 или Вг или могат да се ацилират с анхидрид с формула (VI)

ОО

IIII

Rg - С - О - С - Rg като се получават други продукти с формула I, където R£ означава О

II Rg - С -.

Съединенията с формула I, където R2 означава - S - R|j и R11 означава алкил, субституиран алкил, циклоалкил-(СН2)р-, арил-( С Н2) р —, субституиран арил-(СН2)р- или хетероарил-(С Н2) рмогат да се получат чрез взаимодействие на съединения с формула I, където R2 означава водород, със сулфонилно съединение с формула (VII)

Н₃С - SO₂ - S - R_H в разтворител воден алкохол, като се получават желаните съединения. Съединенията с формула VII са известни в литературата или могат да се получат по известни методи, виж напр. Smith и сътр., Biochemistry, 14, с. 766-771 (1 975).

Съединение с формула I, където R2 означава SH може да се получи чрез взаимодействие на съединение с формула I, където R2 означава водород, със съединение с формула VII, където R}] означава трифенилметил или триалкилсилил, след което

трифенилметилната или триалкилсилилната група се отстраняват в кисела среда.

Симетричните дисулфиди с формула I могат да се п случат чрез директно окисление на съединение с формула I, където R2 означава водород с йод съгласно известни процедури, виж напр. Ondetti и сътр., САЩ патент № 4 105 776.

Съединенията с ацилмеркапто странична верига с формула II, където Rj2 означава водород са описани в литературата. Виж напр. Odetti и сътр. САЩ патент № 4 105 776 и 4 339 600, Haslanger и сътр. САЩ патент № 4 801 609, Delaney и сътр. САЩ патент № 4 722 810 и т.н.

Съединенията с ацилмеркапто странична верига с фор-

мула II, където Rj и R2 и двата имат други значения освен водород и г е нула, могат да се получат чрез взаимодействие на субституирана карбоксилна киселина с формула (VIII)

О

II

НС - С - ОН / \ ^r12 ^r1 с бис [(4-метокси)фенил]метилдисулфид в присъствие на литиев диизопропиламид като се получава съединение с формула

Обработването на съединенията с формула IX със силна киселина като трифлуорометансулфонова киселина води до отстраняване на метоксибензилната защитна група, след което извършва ацилиране с ацилхалид с формула V или анхидрид с формула VI като се получава съединение с формула II, където R[ и R_ и двата са различни от водород и г е нула.

Алтернативно, субституираната карбаксилна киселина с формула VIII може да взаимодейства с литиев диизопропиламид и сяра като се получава меркаптан с формула (X)

О

II

HS - с - с - он / \

R1 2 ^R1

Меркаптанът с формула X може след това да се ацили-

ра с ацилхалид с формула V или с анхидрид с формула

VI като се получава съединение с формула II, където Rj и Rj2 и двата са различни от водород и г е нула.

Съединенията с ацилмеркапто странична верига с формула II, където Rf и Rj2 ^и двата са различни от водород и г е едно могат да се получат чрез взаимодействие на субституирана карбоксилна киселина с формула (XI)

О

II но - сн₂ - с - с - он / \ ^R12 ^r1 с пара-толуенсулфонилхлорид в пиридин като се получава лактам с формула (XII)

Обработването на лактама с формула XII с цезиева тиокиселина с формула (ХШ) с>

II

Cs - S - С - Rg в присъствие на диметилформамид дава желаното съединение с

ацилмеркапто странична верига с формула II, където Rj и Rj₂ и двата са различни от водород и г е едно.

Съединенията с формула I, където А означава О

II

RyOOC - (CH₂)_q - С - С / \ ^r12 ^r1

X означава О или S и Y е СН_2> О или S могат да се получат чрез свързване на киселина с формула (XIV)

О

II

RyOOC - (CH₂)q - С - С - OH / \ ^r12 ^r1

където Ry е карбоксизащитна група, със съединение с кондензиран бицикличен пръстен с формула III, в присъствие на свързващо средство както е дефинирано по-горе като се получава съединение с формула (XV) о

I

R_?OOC-(CH₂) -с - с /\ ^R12 ^r1

Алтернативно, киселината с формула XIV може да се превърне в активирана форма като киселинен хлорид, преди реакцията на свързване.

Киселините с формула XIV са описани от Wars hawsky и сън·. в ЕР № 534 396 и 534 492.

Съединенията с формула I, където А е

RyOOC - СН I ^Ri

X е О или S и Y е СН2, О или S могат да се получат чрез взаимодействие на кетокиселина или естер с формула (XVI)

О О

II II

RyO - С - С - R_t със съединение с кондензиран бицикличен пръстен с формула

III при редукционни условия като се получава съединение с формула (XVII)

Кетокиселините и естерите с формула XVI са описани в литературата. Виж напр. Ruyle САЩ патент № 4 584 294 и Parsons и сътр. Сащ патент № 4 873 235.

Алтернативно, съединенията с кондензиран бицикличен пръстен с формула III могат да взаимодействат с трифлат с формула (XVIII)

О OSO2CF3

II I

RyO-С- CH - Rj като се получава съединение с формула XVII.

Съединенията с формула I, където А означава ο

II ^R4 ’ Ρ ’ ' X означава Ο или S и Y означава СН% О или S,

I

OR .5 могат да се получат чрез свързване на фосфонохлоридат с формула (XIX)

О

II

R-4 - Р - С1

I or₅ където R5 означава нисш алкил или бензил, със съединение с кондензиран бицикличен пръстен с формула III като се получава съединение с формула (XX)

За предпочитане, R3 в съединенията с формула III означава нисш алкил или бензил. R3 и R5 кар боксизащитните групи могат след това да се отстранят, например посредством хидрогениране като се получават съответните съединения с формула I, където R3 и R5 са водород.

Фосфонохлоридатите с формула XIX са познати от литературата. Виж напр. Karanewsky и сътр. САЩ патент № 4 432 97 1 и № 4 432 972 и Karanewsky и сътр. САЩ патент N° 4 460 579.

Съединенията с формула I, където или X или Y или и двата означават S-(O)t и t е едно или две могат да се получат чрез окисление на съединения с формули IV, XV, XVII или XX с познато окисляващо средство като мета хлорпербензоена киселина, пероцетна киселина,монопероксифталоьа киселина, магнезиева сол хексахилрат и т.н.. Чрез к ' нтролиране количеств ? г·? на окисляващото средство и времето на взаимодействие, се получават съединения,където t е едно или две.

където R5 или R7 е

Естерите с формула I,

могат да се получат чрез обработване на съответните съединения с формула I, където R5 или R? е водород и R₃ е карбоксизащитна група, със съединение с формула (XXI)

където L е отцепваща се група като хлоро, бромо или толилсулфо нилокси, след което карбоксизащитната група R₃ се отстранява.

Естерите с формула I, където R₃ е

О

II — CH — 0-С—Rg I ^а ^8

А о о

могат да се получат чрез обработване на съответните съединения с формула I, където R₃ е водород и R₂ е

Ο

Rg - C - , със съединение с формула XXI.

Съединенията с кондензиран бицикличен пръстен с формула III могат да се получат съгласно следните методи, които също са част от настоящото изобретение. Например, когато Υ е СН2 Νзащитена аминокиселина с формула (XXII)

X -Р2

I |СН₂)п

Ϊ

Р - N -СН-СООН могат да се свържат с естер на аминокиселина с формула (XXIII)

НС —fО - алкил) j (СН^ (СН₂)_т

Нф! -CH-COOR3 като се получава дипептид с формула (XXIV)

X - Р₇

I (СН₂)_П

P]-N -СН-С

НС —(О - алкил) 2 (СН₂)₂ т

N -CH-COOR3

А където Р] е аминозащитна група като бензилоксикарбонил или трет. бутилоксикарбонил или група, която заедно с N-атом образува защитна група като фталимидо, Ро е хидрокси или меркапто защитна група и R3 е лесно отцепваща се естерзащитна група.Предпочитани защитни групи Ро, когато X е S, са ацилни групи като ацетил или бензоил, по-специално ацетил. Предпочитани защитни групи Р2> когато X е О, са ацилни групи, тетрахидропирани, хидрирани силилни групи и тритили, по-специално трифенилметил и 1,1-диметилетилдиметилсилил. Тази реакция на свързване за пред-

почитане се провежда в присъствие на свързващо средство като бензотриазол-1 -илокситрис-(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат, етил-3-(3-диметиламино)-пропил карбодиимид или метансулфонилоксибензотриазол.

Защитната група Р2 може селективно да се отстрани от междинното съединение с формула XXIV например чрез обработване с натриев метоксид в метанол, когато ₽2 означава ацетил или бензоил или чрез обработване с киселина като р-толуенсулфонова киселина в метанол, когато ₽2 означава ацетил, бензоил, тритил, тетрахидропиранил или 1,1-диметилетилдиметилсилил. Полученият продукт след това се подлага на циклизация в присъствие на катализатор киселина, за предпочитане чрез обработване със силна киселина като трифлуорооцетна киселина, паратолуенсулфонова киселина или търговски достъпен полистирен сулфонат полимерен тип йонообменна смола като Amberlyst 15®. Циклизацията може да се осъществи в апротен разтворител като метиленхлорид или хлороформ като се получава междинно съединение с формула (XXV)

(СН₂)₂

I (CH₂) m

O COOR₃

Съединенията c формула XXIV след отстраняване на защитната група ₽2 и преди циклизацията, където X означава О, могат да се превърнат в съответните съединения където X означава S. Това може да стане по различни методи. Например, съединенията с формула XXIV след отстраняване на ₽2 групата може да се обработи с трифенилфосфин, диизопропил азодикарбоксилат и тиооцетна киселина. Полученият тиоацетат след това се обработва с натриев метоксид в метанол като се получава съответният меркаптан, който след това се циклизира както е описано по-горе.

Съгласно друг метод, съединението с формула XXIV след отстраняване на ₽2 групата се обработва по известни методи като се получава съединението с формула (XXVI)

(СН₂)_П

Т

Pj-N -СН-С НС -fО алкил) 2 (СН₂)₂ [СН₂)_т

Т

N-CH-COOR3 където L означава отцепваща се група като метансулфонилокси, пара-толуенсулфонилокси, йод или бром. Например, обработване на съединението с формула XXIV след отстраняване на защитната група ₽2 с метансулфонилхлорид дава съединението с формула XXIV,

където I. е метансулфонилокси.

Съединението с формула XXVI след това се обработва с цезнев тиоацетат като се получава съответният тиоацетат. Обработването с натриев метоксид в метанол води до получаване на съответния меркаптан, който след това може да се циклизира както е описано по-горе.

Алтернативо, съединението с формула XXIV, където X е О може да се превърне директно в междинното съединение с формула XXV чрез обработване със силна киселина като трифлуорооцетна киселина, пара-толуенсулфонова киселина или търговски достъпен полистирен сулфонат полимерен тип йонообменна смола като Amberlist 15® в подходящ разтворител като метиленхлорид или хлороформ.

N-защитната група след това се отстранява от съединението с формула XXV, например чрез обработване с хидразин монохидрат, когато Р| заедно с N атома образува фталимидо група или чрез обработване с йодотриметилсилан или паладий върху въглен и амониев формиат или водород, когато Р] е бензилоксикарбонил или чрез обработване със солна киселина в диоксан или друга силна киселина, когато Pj е трет.-бутоксикарбонил, при което се получава съединение с кондензиран бицикличен пръстен с формула III

Съгласно друг метод, когато Y е СН2> N-защитената амино киселина с формула XXII може да се свърже с естер на хидрокси амино киселина с формула (XXVII)

CH ₂ - OH

ICH₂)₂

T

H₂N - CH - COOR₃ като се получава дипептид с формула (XXVIII)

СН,-ОН I ² х-р₂ (снг)2

Iι |СН₂)_П (сн₂)„ т’

Р . - N- CH-C-N-CH- COOP.

¹ II I където Р] и ₽2 са дефинирани по-горе. Реакцията на свързване се осъществява за предпочитане в присъствие на свързващо средство като метансулфонилоксибензотриазол или етил-3-(диметиламино)пропил карбодиимид.

Хидрокси съединението с формула XXVIII след това се окислява до алдехид с формула (XXIX)

нс=о

I х-р₂ (сн₂)₂(СН₂)_П (сн_2)ю

I т

P.-N-CH-C-N-CH- COOR, ¹ II I ³ о н чрез обработване с оксалилхлорид/диметилсулфоксид и след това с третичен амин в апротен разтворител като метиленхлорид. Алдехидът с формула XXIX след това се обработва както е описано по-горе за отстраняване на Р2 защитната група и след това се подлага на циклизация в присъствие на катализатор киселина както е описано по-горе за получаване на междинното съединение с формула XXV.

Изходното съединение с формула XXIII, където m е едно μ ::ϊ.~ да се получи чрез селективна защита на N-атома на L-е-хидр : ; и н о рле в ц и н като се получава съединение с формула (XXX) *7^Н2

ОН сн₉

Р₃ - N - CH - СООН

където ₽з означава N-защитна група. Например, Р3 и N-атомът могат да образуват фталимидната част. N-защитеният Ь-е-хидроксинорлевцин с формула XXX след това се обработва за вкарване на R3 карбоксизащитната група с помощта на метилйодид в присъствие на база или брез обработване със силна киселина в метанол, където R3 е метил.Този естер след това се окислява като се получава алдехид с формула (XXXI)

Алдехидът с формула XXXI след това се обработва с ортоформиат с формула (XXXII)

НС ( О-алкил)з в присъствие на катализатор силна киселина и съответния алкохол,

т.е. НО-алкил, където алкилът е същият както ортоформиата с формула XXXII, като се получава съединение с формула (XXXIII) у С —·Ο - алкил) 2

CHk

I ² сн₉ <

P₃ - N - CH - COOR₃

Отстраняването на N-защитната група P3 посредством обработване с хидразин хидрат, когато Р3 и N-атомът образуват фталимидната част води до получаване на изходния продукт с формула XXIII,където m е едно.

Изходният продукт с формула XXIII, където m е нула може да се получи чрез защита на N- атома на γ-бензилглутамат до получаване на съединение с формула (XXXIV) соосн~

I ²сн₂

Р₃ - N - СН - СООН

където Р3 е N-защитна група като трет.-бутилоксикарбонил или Р3 и N-атомът могат да образуват фталимидна част. N-защитената глутаминова киселина с формула XXXIV след това се обработва с цел вкарване на R3 карбоксизащитна група, както е описано погоре като се получава съединение с формула (XXXV)

сн₂ ί

Р₃ - N - СН - COOR3

Хидрогенолиза, когато R3 означава нисш алкил води до отстраняване на бензилестерната група от съединение с формула XXXV

·) ο като се получава съединение с формула (XXXVI) соон

I сн₂ ?3 -Ν - СН - COOR3

Селективна редукция на съединение с формула XXXVI посредством обработване с етантиол, етил-3-(3-диметиламино)пропил карбодиимид и диметиламинопиридин и след това с триетилсилан, паладий върху въглен и ацетонитрил води до получаване на алдехид с формула XXXVII) нс=о

I сн₂ ί

Р₃ -Ν - СН - COOR3

Алдехидът с формула XXXVII след това се обработва с ортоформиат с формула XXXII както е описано по-горе и N-защитната група Р3 се отстранява както е описано по-горе като се получава изходния продукт с формула XXIII, където m е нула.

Изходният продукт естер на хидрокси амино киселина с формула XXVII може да се получи чрез взаимодействие на разтвор на диетилов естер на ацетамидомалонова киселина с разбърквана суспензия на натриев хидрид, и след това с халоалкилацетат с формула (XXXVIII)

О

II хало - (СН2)_га - (СН₂)2 ' ^сн2 - О - С - СН₃ където хало означава Br, I или С1 като се получава съединението с формула (XXXIX) с

II н₂с - о - с - сн₃ (^2½

J н₃с - С - NH - С - СООС₂Н₅

СООС₂Н₅

Разтвор от диетилов естер с формулаХХХ1Х се обработва с натриев хидроксид и се нагрява и след това се подкислява и се отново се нагрява като се получава хидроксиамино киселина с

формула (XL)

С - С - NH - CH - COOH

Хидрокси аминокиселината с формула XL след това се обработва с ацилаза от свински бъбрек или друг подходящ хидролизиращ ензим като се получава хидролизираната хидрокси аминокисе-

лина с формула (XLI)

Н₂С - он

H₂N- CH -COOH

Хидрокси аминокиселината c формула XLI след това се превръща в естер с формула XXVII по обичаен начин. Например, хидрокси аминокиселината с формула XLI може да се обработи в метанол с триметилсилилхлорид като се получава хлороводородната сол на метиловия естер с формула XXVII.

Изходният продукт с формула XXII може да се получи както следва. Когато X е О, хидрокси «-аминокиселината с формула (XLII)

ОН

I (сн₂)_п ·

h₂n-ch - СООН

взаимодейства за вкарване на Pj и Р₂ защитните групи. Например,обработването на киселината с формула XLII с N-карбетоксифталимид в присъствие на натриев карбонат и след това с хлоротрифенилметан и триетиламин води до получаване на изходния продукт с формула XXII, където X е Ο, Р] заедно с Х-атом образува фталимидо и Р₂ е тритил. Алтернативно, обработването на киселината с формула XLII с N-(бензилоксикарбонилокси)сукцинимид във воден разтвор на натриев карбонат и ацетон и след това с трет.-бутилдиметилсилилхлорид или ацилиращо средство с формула V или VI води до получаване на изходния продукт с формула XXII, където X е Ο, Р| ебензилоксикарбонил и Р₂ е трет.бутилдиметилсилил или ацилна група като ацетил.

Когато X е S и η е едно, N, N '-бис[ (фенилметокси)карбонил]-Ь-цистин може да се обработи с цинков прах и воден разтвор на сярна киселина като се получава меркаптан с формула (XLIII)

СН 2 - о - С - ΝΗ - СН - СООН .

SH

Меркаптанът с формула XLIII след това се обработва за вкарване на Р₂ защитна група. Например, обработването на меркаптана с формула XLIII с оцетен анхидрид дава изходния продукт с формула XXII, където X е S, η е едно, Р₂ е ацетил и Р| е бензилоксикарбонил.

Когато X е S и η е две, L-метионинът може да бъде защитен при N-атома. Например, взаимодействие с бензил хлороформиат или Ν-(бензилоксикарбонилокси)-сукцинимид дава Ν-[(фенилметокси)карбонил]-Ь-метионин, който след това се естерифицира чрез обработване с алкохол, алкил-ОН, в присъствие на катализатор киселина като р-толуенсулфонова киселина. Обработването с окисляващо средство като N-хлоросукцинимид във воден разтворител дава сулфоксид с формула (XLIV)

О

II

S - СНз _п I ° (СН₂)2

II I

СН₂-О -С - ΝΗ - СИ - СООалкил .

Сулфоксидът с формула XLIV след това се обработва с киселинен анхидрид като оцетен анхидрид като се получава съединение с формула (XLV)

О

II

S - СН₂ - О - С - СНз ⁰ (СН₂)₂

II I

СН₂-О-С-NH-CH-СООалкил .

След обработване с алкалнометален хидроксид и след това отстраняване на формалдехида напр. чрез оорасотване ^г ред\-'ццрашс средство като натриев борохидрид. посдедьано от обработване с киселинен анхидрид като оцетен анхидрид дава изходния продукт с формула XXII, където X е S, η е две, Р-т е ацетил и Р] е бензилоксикарбонил.

Кондензираните съединения с бипикличен пръстен с формула III, където Υ е S или О и m е едно могат да се получат чрез свързване на N-защитена аминокиселина с формула XXVI с естер на аминокиселина с формула (XLVI)

Н<^ -fΟ - алкил) 2 н₂с

Ύ <

H₂N-CH-COOR3 при което се получава дипептид с формула (XLVII)

X - Р₂ т

Р1-Ν·СН -

н₂с

Υ т -CH-COOR3 където Pj _и Р2 са дефинирани по-горе и R3 е карбоксизащитна група. Тази реакция на свързване за предпочитане се осъществява в присъствие на свързващо средство като бензотриазол-1илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат или етил-3-(3-диметиламино)пропил карбодиимид.

Защитната група Р2 може да се отстрани селективно от междинното съединение с формула XLVII напр. чрез обработване натриев метоксид в метанол, когато Ро е ацилна група кат? ацетил или бензоил и обработване с киселина като ртолтенсулфонова киселина в метанол, когато Ро е тритил, тетрахидргпиранил или възпрепятствувана силилна група. Полученият продукт след това се подлага на циклизация в присъствие на катализатор киселина както е описано по-горе до получаване на междинен продукт с формула (XLVIII)

Междинното съединение с формула XLVIII, където X е S и η е две може също да се получи чрез обработване на съединение с формула XLVII, където X е О и η е две до селективно отстраняване на Р2 групата и превръщане на хидрокси в меркаптан както е описано по-горе,след което се провежда циклизация в присъствие

на катализатор киселина.

N-защитната група след това се отстранява от съединението с формула XLVIII например чрез обработване с хидразин монохидрат, когато Pj заедно с N атома образува фталимидо група или чрез обработване с йодотриметилсилан или паладий върху въглен и амониев формиат или водород, когато Р| е бензилоксикарбонил като се получава съединение с кондензиран бицикличен пръстен с формула III.

Изходният продукт с формула XLVI, където Y е О, могат да се получат чрез взаимодействие на N-фталиминозащитен естер на аминокиселина с формула (XLIX)

c алил трихлороацетимидат в присъствие на тр ифлуор ом етансулфонова киселина като се получава съединение с формула (L)

Обработването на съединение с формула L с озон в метанол, след това диметилсулфид и после ортоформиат с формула XXXII в присъствие на р-толуенсулфонова киселина дава защитено съединение с формула (LI)

Отстраняването на N-защитната група напр. чрез обработване с хидразин хидрат дава изходния продукт с формула

XLVI, където Y е О.

Изходният продукт с формула XLVI, където Y е S може да се получи чрез взаимодействие на естер на цистеина с формула (LII)

Н₂К - CH - COOR3

с бромоацетал c формула (LIII)

Br - CH2- CH ( О-алкил)2 в присъствие на натриев хидрид и калиев йодид до получаване на естер на аминокиселина с формула (LIV)

HC-f-O - алкнл)₂

Н.С

H₂N - СН - COOR3

Съединенията с формула I съдържат три асиметрични центъра в кондензираната бициклична част на структурата с възможни допълнителни центрове в страничната верига. Тъй като оптически чистата форма на кондензираните бициклични продукти описани по-горе е предпочитана, всички такива форми са в обхвата на настоящото изобретение. При гореописаните процеси могат да се използват рацемати, енантиомери или диастереомери като изходни подукти. Когато се получават диастереомерни съединения, те могат да се разделят по обичайните хроматографски методи или методи на фракционна кристализация. За предпочитане, водородът прикрепен към мостовия въглероден атом е в ориентацията показана по-долу

Η

Съединенията с формула I, където R₃, R5 и/или R7 са водород, могат да се изолират под форма на фармацевтично приемлива сол. Подходящи соли за тази цел са алкалнометални соли като натриева и калиева, алкалоземнометални соли като калциева и магнезиева, соли получени от аминокиселини като аргинин, лизин и т.н. и соли получени от амини като алкиламини, напр. трет.бутиламин, трет.амиламин и т.н., субституирани алкиламини, напр. бензиламин, диалкиламини, субституирани диалкиламини, напр. N-метилглукамин, триалкиламини, субституирани триалкиламини и кватернерни амониеви соли. Тези соли могат да се получат чрез взаимодействие на съединението под форма на киселина с база доставяща желания йон в среда, в която солта се утаява или във водна среда и след това лиофилизиране.

Предпочитани съединения съгласно изобретението са тези, където О

II

А означава R2 - S - (CH₂)_r- С - С - ;

/ \

О R1 2 ^R1

II

R₂ означава Rg-C - , или R| j-S-;

R₃ означава водород или нисш алкил с 1 до 4 въглеродни атоми; г е нула или едно;

Rjj означава нисш алкил с 1 до 4 въглеродни атоми;

Rj ззначава арил-СНо-, сусетитупран арил-СНч-, хетероари\-С Н3-, ииклеа\кил-С Но-, където пиклеалкилът е с 3 л·:· 7 въглеродни атоми или алкил с 1 до 7 въглеродни атоми с права или разклонена верига и R-[2 ^е водород или R] и Rj2 взети заедно с въглеродния атом, с който са свързани образуват циклоалкилов пръстен с 5 до 7 въглеродни атоми;

Rg означава нисш алкил с 1 до 4 въглеродни атоми или фенил;

η е едно или две;

m е нула или едно;

X е О или S и

Y е СН2- О или S, с ограничението, че Y е Оили S само когато ш е едно.

Най-предпочитани от горните съединения са когато

О

II

R2 означава водород или Н3С-С - , по-специално водород;

R3 означава водород;

г е нула или едно; по-специално едно;

R] означава бензил, циклопропилметил или алкил с до 5 въглеродни атоми с права или разклонена верига, поспециално бензил;

R12 означава водород;

η е едно или две;

ш е нула или едно;

X е О или S и

Υ е СН2. О или S, с ограничението че Υ е О или S само когато ш е едно.

Най-предпочитанот з съединение е [ 4 - S - [ 4 a ( R/ j, 7 α, 1 Оа β ] ] о к т а х и д р о - 4 - [ ι 2 - м е р к а π т ο - 1 - о к с о - 3 - ф е н и л π р ο п и л) а м и н о ] - 5 о»ксо - 7 Н -пиридо [2, 1 - Ь ] - [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина,

т.е. съединението с формула

СН,

Съединенията с формула I, където А означава r₂-s- (CH₂)_r - c - c / \ ^r12 ^r1 или

II

RyOOC - (CH₂)q- С - С / \ ^r12 ^r1 са двойни инхибитори притежаващи способността да инхибират превръщащите ангиотензина ензими и неутрална ендопептидаза. Съединенията с формула I, където А означава

R7OOC - СН - или

R₄ - Р ^R1 са селективни инхибитори притежаващи способността да инхибират превръщащите ангиотензина ензими.По такъв начин, съединенията с формула1 включително техните фармацевтично приемливи соли са полезни за лечение на физиологични състояния, при които е показано ,че са полезни ин

ХИбИТмрИ Ha Пр^ЕрЪЩаЩИТс ά Η Γ ИО Г е Н 3 11 Η ά & Н 3 И М И . Т а К И Е ά състояния включват болестни състояния характеризиращи

се с отклонения в кръвното налягане, вътреочнотс- налягане и ренина включително сърдечносъдови заболявания, по-специално хипертония и застойна сърдечна недастатъчност, глаукома, и бъбречни заболявания като бъбречна недостатъчност, диабетична нефропатия и бъбречни увреждания вследствие лечение с циклоспорин или други имуносупресанти. Други състояния за които е съобщено, че са полезни инхибитори на превръщащия ангиотензина ензим включват чернодробна цироза, потискане напредването на атеросклерозата, предотвратяване или лечение на хипертензивна или диабетична ретинопатия, подобряване на миокардна дисфункция по време на, или вследствие на инфаркт на миокарда и за предотвратяване на рестеноза след пластична операция на съдовете. Двойните инхибитори са полезни също при лечение на физиологични състояния, за които е показано че са полезни инхибиторите на неутралната пептидаза.Такива състояния също включват сърдечносъдовата болест по-специално хипертензия, хипералдостеронемия, бъбречни болести, глаукома,както и за намаляване на остра или хронична болка.Следователно, съединенията с формула I са полезни за понижаване на кръвното налягане и двойните инхибитори с формула I са допълнително полезни за тази цел благодарение на техните диуретични и натриуретични свойства.Двойните инхибитори са особено полезни за лечението на застойна сърдечна недостатъчност.

Съединенията с формула I, включително фармацевтично приемливите соли на същите, могат да се предписват за тези ефекти в количества подобни на тези използувани по-преди π μ и инхибиторите на ензима превръщаш ь. н г и : т - н s и на . Например, съединенията с формула 1 могат да се прилагат на приемник-бозайник като човека от около 0.1 гад до :кол: 100 гад за килограм телестно тегло, за предпочитане от ок-л? 0.5 mg до около 25 гад за килограм телесно тегло на ден. С ьединенията с формула1 се приемат за предпочитане орално, но парентерални пътища като подкожно, мускулно и венозно също могат да се използуват, както и локалния път на приложение .Дневната до-

за може да се даде като единична или да се раздели на две до четири дози разпределени през деня.

Инхибиторите с формула I могат да се прилагат в комбинация с човешки ANF 99-126. Такива комбинации съдържат инхибитора с формула I по около 1 до около 100 гад за килограм телесно тегло и човешки ANF 99 - 126 от около 0.001 до около 0.1 mg за килиграм телесно тегло.

Инхибиторите с формула I могатн да се приемат в комбинация с други класове фармацевтично активни съединения.Например с диуретик,с блокер на калциевия канал,с активатор на калиевия канал, с намаляващо холестерола средство, с βблокер и пр..

Инхибиторите с формула I или фармацевтично приемливите техни соли и други фармацевтично допустими съставки могат да се преработват в лекарствени форми за гореописаните фармацевтични приложения.Подходящите състави за орално приложение включват таблетки, капсули, и еликсири, а подхо дящите състави за парентерално приложение включват стерилни разтвори и суспензии.Подходящите състави за лечение на глаукома също включват локални състави като разтвори, унгвенти и твърди включения както е описано в патента на САЩ № се π ρ е ρ α -

44 2 08 9. ί..¹?·'. 10 до 500 mg ст активната съставка •*?тва в лекарствена форма с фи з и ? л гично приемлив носител, ексципиент, свързващо средство, консервант, стабилизатор, ароматизиращо средство и пр. в подходяща форма-единична доза както се изисква от възприетата фармацевтична практика.

Примери за изпълнение на изобретението Следващите примери илюстрират изобретението.

Температурите са дадени в целзиеви градуси. Тънкослойната хроматография (ТСХ) се извършва на силикагел, освен ако не е посочено друго.

ПРИМЕР 1 [4S-[4a(R*),7a,10aP]]-oKTaxHApo-4-[(2-MepKanTO-l-OKCo3-фенилпропил) амино ] -5-оксо - 7 Н-пиридо [ 2,1-Ь][1,3]оксазепин-

7-карбоксилна киселина;

a) (S)-2-фталимидо-4-хидроксибутанова киселина, триетиламиносол

Разтвор от L-хомосерин (3,0 д), 25,2 ммола) и натриев карбонат (2,670 д, 25,2 ммола) във вода (60 ml) се обработва с N-карбетоксифталимид (5,570 д, 25,4 ммола). След разбъркване при стайна температура в продължение на 2 часа, разтворът се подкислява с 6N солна киселина и се екстрахира с етилацетат. Етилацетатният екстракт се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат) и се филтрира в разтвор на триетиламин (4,0 ml) в метиленхлорид (40 ml). Мътният разтвор се концентрира и се обработва с етилацетат и етилов етер като се получава 5,11 g от съединението съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, т. на топене 142-144°С. ТСХ (5% оцетна киселина в етилацетат) Rf = 0,36. [а] р = - 6,2° (с = 0,8, хлороформ) .Анализ: Изчислено за CjgH26N2O5

С ύ 1 ,?0 Η 7,4 8 Ν -,··'

Намерен·: С 6 1, 4 5 Η 7 , 4 7 Ν ⁷,8 1.

b) ( S j - 2-фталим и до - 4 -1 тр иф енилметокс и) бутанова киселина, триетиламин·? сол

Хомогенен разтвор от продукта от част а) (1,890 д, 5,4 ммола) в хлороформ (20 ml) се обработва с триетиламин (80 μΐ) и след това с твърд хлортрифенилметан (1,590 д, 5,70 ммола). След разбъркване при стайна температура в продължение на 2,5 часа, разтворът се разпределя между етилацетат и 0,1 N солна киселина (150 ml). Органичният слой се промива с вода и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат) и се филтрира в разтвор на триетиламин 1,0 ml) в метиленхлорид (30 ml). Разтворът се концентрира до масло, разтваря се повторно в малко количество метиленхлорид и етилацетат и се обработва с етилов етер докато разтворът помътнее. Към сместа се прибавят зародиши на кристали и се оставя да стои при стайна температура. Получената утайка се събира чрез филтриране, промива се с

етилацетат и етилов етер и се суши под вакуум като се получава 2,538 g от съединението съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, т. на топене 165-170°С (разлагане). ТСХ (10% метанол в хлороформ), Rf = 0,23. fα]р> = +7,0° (с = 1,2, хлороформ).

с) (S)-2-фталим идо-6-хидроксихексанова киселина.

Разтвор от ( + )-L-е-хидроксинорлевцин [получен съгласно процедурата на Bodanszky и сътр., J.Med.Cem., 1978, 21, 10301035] (1,030 g 7,0 ммола) и натриев карбонат (745 mg, 7,0 ммола) във вода (12 ml) се обработва с N-карбетоксифталимид ( 1,495 д, 7,0 ммола) и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 2 часа. Разтворът се филтрира, ох лажда се до 0°С и се подкислява с 6N солна киселина като се получава бяла утайка. Твърдият продукт се събира чрез филтриране и се суши под вакуум при 80°С в продължение на един час като се получава 1,297 g от съединението съгласно заглавието^. на топене 162-163°С. [ а ] р> = -35,7 (с = 1,3, метанол).

d) метилов естер на (5)-2-фталимидо-6,6-диметоксихексанова киселина

Суспензия от продукта от част с) (3,752 д, 13,5 ммола) и цезиев карбонат (2,178 д, 6,7 ммола) в диметилформамид (44 ml) се обработва с метилйодид (3,0 ml, 6,84 g, 48,2 ммола). След разбъркване при стайна температура в продължение на 2 часа сместа се разрежда с етилацетат и се промива последователно с вода съдържаща малко количество натриев бисулфит, вода, 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид след това се суши (натриев сулфат), филтрира се и се дестилира като се получава междинният естер като безцветно масло (3,825 д). Маслото е хомогенно на ТСХ (1:1 ацетон:хексан) Rf = 0,37.

При -78°С разтвор от оксалилхлорид (1,37 ml, 2,00 g,

15,7 ммола) в сух метиленхлорид (58 ml) се обработва на капки с разтвор от сух диметилсулфоксид (2,24 ml, 2,47 g, 31,6 ммола) в метиленхлорид (2 ml). След 10 минути се прибавя разтвор на горния алкохол-естер (3,825 д, 13,1 ммола) в метиленхлорид (10 ml). След още 15 минути се прибавя триетиламин (8,0 ml) и сместа се разбърква при -78°С в продължение на 5 минути, след това се затопля до 0°С. Сместа се разрежда с етилацетат/етилов етер и се промива последователно с 1N солна киселина, вода, разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира се и се дестилира като се получава суров жела

ният алдехид. Сместа е хомогенна на ТСХ (1:1 ацетон:хексан | R_f = 0,48.

Разтвор на горния алдехид в метанол (17 ml) и метиленхлорид (17 ml) се обработва с триметилортоформиат (1,7 ml) и след това с р-толуенсулфонова киселина монохидрат (180 mg). Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1,5 часа, след това се разпределя между етилацетат и 50% наситен разтвор на натриев бликарбонат. Органичният слой се промива с вода и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира се и се дестилира. Остатъкът се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 1:1 етилацетат:хексан) и фракциите от чист продукт кристализират из етилацетат/хексан като се получава

аналитично чист продукт от съединението съгласно заглавието (3,452 g първи добив и 215 mg втори добив) като бели игли, т. на топене 60-70°С. ТСХ (1:1 етилацетат:хексан) Rf =0,35 (α]ρ =-27,4° (с = 1,5, хлороформ).

Анализ: Изчислено за Cfy^jNOg

С 60,89 Н 6,31 N 4,18

Намерено: С 60,80 Н 6,32 N 4,16.

е) метилов естер на [S-(R*,R*) ]-2-[[2-фталимидо-4-(трифенилметокси) -1 - оксобутил]амино ]-6,6-диметоксихексанова киселина.Суспензия от продукта от част d) (2,540 g, 7,57 ммола) в метанол (18 ml) се обработва с хидразин монохидрат (378μ1, 390 mg, 7,80 ммола). Сместа се хомогенизира за 10 минути. След разбъркване при стайна температура в продължение на 3 дни, получената суспензия се филтрира, дестилира, суспендира в метиленхлорид, филтрира се и отново се изпарява като се получава суров междинен продукт амин като безцветно масло.

Междувременно разтвор на триетиламино сол на продукта от част bi (4,622 g, 7,80 ммола) в метиленхлорид (50 nil) при 0°С се обработва с бензотриазол-1 -илокситрис-(диметиламино)фос-

фониев хексафлуорофосфат (3,519 д, 7,95 ммола). Сместа се разбърква в продължение на 35 минути, след това се обработва с разтвор на горния амин в метиленхлорид (15 ml). След 10 минути при 0°С и 2 часа при стайна температура, разтворът се разпределя между етилов етер и вода. Органичният слой се промива с 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира и дестилира.Остатъкът се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 6:4 етилацетат:хексан) като се получава 3,580 g чисто съединение съгласно заглавието като бяла пяна. ТСХ (6:4 етилацетат:хексан) Rf = 0,32 [ а ] р = +26,2° (с = 0,6, хлороформ).

f) метилов естер на [S-(R*,R*) J-2-[ (2-фталимидо-4хидрокси-1 -о кс обу тил) амино]-6,6-диметоксихексанова киселина Разтвор на продукта от част е) (5,420д, 8,0 ммола) в

метанол (60 ml) се обработва с р-толуенсулфонова киселина монохидрат (520 mg). След разбъркване при стайна температура в продължение на 1,5 часа сместа се разпределя между етилацетат и разреден натриев бикарбонат. Фазите се разделят и водният слой се екстрахира отново с етилацетат. Обединените органични екстракти се промиват с разтвор на натриев хлорид, сушат се (натриев сулфат), филтрират и дестилират. Остатъкът се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 8:2 етилацетат:хексан и след това 5% метанол в етилацетат) като се получава 2,860 g от продукта съгласно заглавието като безцветно масло. ТСХ (7:3 етилацетат:хексан) Rf = 0,26 [а]р> —

- 1 8,7 ⁰ (c = 1,3, хл ο p ο ф o p м ).

gi метилов естер на [4 S-[4а,7а, 1 0аβ ] ]-октахидро-4фтал и мид о-5-о ксо-7Н-пиридо[2,1-Ь][1,3]оксазепин7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част f) (2,10 д, 4,95 ммола) в метиленхлорид (100 ml) се обработва с Amberlyst® 15 йонообменна

смола (240 mg, предварително промита последователно с 6N солна киселина, вода, тетрахидрофуран и след това с метиленхлорид). След разбъркване при стайна температура в продължение на 2,5 часа, разтворът се филтрира, дестилира и подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 6:4 етилацетат:хексан и след това 100% етилацетат) като се получа

ва 1,40 g от продукта съгласно заглавието като бяла пяна.

h) (S)-2-(ацетилтио) бензенпропанова киселина

Натриев нитрит (10,3 д, 280 ммола) се прибавя към разтвор на D-фенилаланин (30,0 д, 181 ммола) и калиев бромид (73,5 д) в сярна киселина (2,5 N, 365 ml) за период от един час като температурата на реакционната смес се поддържа при 0°С. Сместа се разбърква в продължение още на един час при 0°С и след това още един час при стайна температура. Полученият разтвор се екстрахира с етер, етерът се екстрахира с вода и етерният слой се суши над натриев сулфат. Етерът се отстранява под вакуум и дестилирането на маслообразния остатък дава 25,7 g (Я)-2-бромо-3-бензенпропанова киселина, т. на кипене 141°С. (0,55mm Hg) [α]£> = +14,5° (с - 2,4, хлороформ).

Смес от тиооцетна киселина (7 ml, 97,9 ммола) и калиев хидроксид (5,48 д, 97,9 ммола) в ацетонитрил (180,5 ml) се разбърква под аргон при стайна температура в продължение на 1 3/4 часа. Сместа се охлажда в ледена баня и се прибавя разтвор

на (Rj-2-бромо-З-бензенпропанова киселина (20,4 д, 89 миела; в ацетонитрил 120 ml) за период от десет минути. Реакционната смес се разбърква при стайна температура под аргон в продължение на 5 часа, филтрира се и ацетонитрилът се отстранява под вакуум. Мслообрязният остатък се разтваря повторно в етилацетат и се промива с 10% калиев бисулфат и вода. Отстраняването на етилацетата под вакуум дава 19,6 g суров продукт. Суровият продукт се пречиства чрез неговата дициклохексиламино сол като се използва изопропилов етер като разтворител за кристализация. Аналитична проба от (8)-2-(ацетиламино)бензенпропанова киселина, дициклохексиламино сол се получава чрез прекристализация из етилацетат, т. на топене 1 46-1 47 ° С, [а] р = -39,6° (с = 1,39, хлороформ).

Анализ: Изчислено за С j j Н ] ₂О₃S.С | ₂Н₂₃N:

С 68,1 1 Н 8,70 N 3,45 S 7,91

Намерено С 67,93 Н 8,71 N 3,37 S 7,94.

Свободната киселина се получава когато дициклохексиламино солта се разпредели между 5% калиев бисулфат и етилацетат като се получава (S)-2-(ацетилтио)бензенпропанова киселина [а]р = -70,1° (с = 1,91, хлороформ).

Анализ: Изчислено за CiiHj₂O₃S:

С 58,91 Н 5,39 S 14,30

Намерено С 58,73 Н 5,41 S 14,53.

i) метилов естер на[4S-(4a(R‘) ,7a, 1 Оар ] ]-октахидро-4-[(2ацетилтио) -1-оксо-З-фенилпропил) амино ]-5-оксо-7Н-пиридо [2,1 Ь][1,3]оксазепин-7-карбоксилна киселина;

Продуктът от част д) (620 mg, 1,66 ммола) в метанол (10 ml) се обработва с хидразин монохидрат (85 μΐ, 88 mg, 1,75 ммола) и разтворът се разбърква при стайна температура в

продължение на 44 часа. Сместа се филтрира и твърдият продукт се промива с метанол. Филтратът се дестилира, обработва се с метиленхлорид, полученият твърд продукт се филтрира отново и се дестилира, при което се получава суров продукт амин като мътно масло (около 400 mg).

Охладен разтвор (0°С) от (Б)-2-(ацетилтио)-бензенпропанова киселина (410 mg, 1,83 ммола и триетиламин (250 μΐ, 182 mg, 1,80 ммола) в метиленхлорид (10 ml) се обработва с горния амин (като разтвор в 8 ml метиленхлорид) и след това с бензотриазол-1 -илокситрис- (диметиламино) фосфониев хексафлуорфосфат (808 mg, 1,83 ммола). Бистрият почти безцветен разтвор се разбърква при 0°С в продължение на 40 минути и след това при стайна температура в продължение на 2 часа. Сместа се разпределя между етилацетат/етилов етер и вода. Органичният слой се промива последователно с 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира и ддестилира. Остатъкът се подлага на флаш хроматография (Merck, силикагел 60-70% етилацетат в хексан) като се получава 602 mg чист продукт съгласно заглавието като бяла пяна, ТСХ (6:4 етилацетат:хексан ) Rf = 0,27.

j) [4S-[4a(R*),7a,10apj ]-октахидро-4- [(2-меркапто-1-оксо3-фенилпропил) амино ]-5-оксо-7Н-пиридо [2,1-Ь][1,3]оксазепин7-карбоксилна киселина

При 0°С, разтвор от продукта от част i) (590 mg, 1,32 ммола) в метанол (10 ml, деокислен посредством барботиране на аргон) се обработва с 1N натриев хидроксид (7 ml, деокислен чрез барботиране на аргон). След разбъркване в продължение на 15 минути разтворът се загрява до стайна температура и разбърк43

ванетс- под аргон продължава още 4,5 часа. Сместа се подкислява с 5 % калиев бисулфат, разрежда се с в-. ?да и се екстрахира с етилацетат. Етилацетатният екстракт се промива с вода и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат) 1 филтрира се и се концентрира до приблизително 3 ml. Остатъкът се разбърква в етилацетат и малко хексан и полученият твърд продукт се събира чрез филтриране и след сушене под вакуум се получава 413 mg от продукта съгласно заглавието, т. на топене 180,5°С (разлагане). ТСХ (2% оцетна киселина в етилацетат) Rf = 0,39.

[а]□ = -37,6° (с = 0,36, метанол).

ВЕТХ: YMC S3 ODS колона (6,0 х 150 mm) елуиране с 40% А: 90% вода-10% метанол-0,2% фосфорна киселина и 60% В: 10% вода90% метанол-0,2% фосфорна киселина, скорост на изтичане

1,5 mL/ мин, детекция при 220 nm, tj^ = 6,73 мин (95,7%).

Анализ: Изчислено за C20H28N2O4S . 0,12 етилацетат

С 58,05 Н 6,24 N 6,95 S 7,96

Намерено С 58,23 Н 6,34 N 6,83 S 7,81.

ПРИМЕР 2 [3R- [3a(S*) ,6a,9аβ ] ]-хексахидро-3 - [(2-меркапто-1-оксо3-фенилпропил) амино ]-4-оксо-2Н,6Н-пиридо [2,1-Ь][1,3]тиазин6-карбоксилна киселина;

а) Ν-[ (фенилметокси) карбонил j-L-цистеин Разтвор на Ν,N'-бис ((фенилметокси)-карбонил]- L-цистин (4,658 д, 9,16 ммола) в метанол (35 ml) се обработва с 2N сярня киселина (23 ml) след което се обработва на части с цинков прах (2,442 д, 37,3 ммола). Сместа се нагрява при 70°С в продължение на 1,5 часа, филтрира се докато е още гореща и се концентрира на роторен изпарител. Остатъчният разтвор се екстрахира с етилацетат и етерните екстракти се промиват с

кристализация, за да започне бавно утаяване. Твърдият продукт се събира чрез филтриране, промива се със студен тетрахлорметан като се получава 2,648 g продукт. Матерната луга се изпарява, подлага се на флаш хроматография (Merck силикагел, етилацетат, след това 4% оцетна киселина в етилацетат) като се получава допълнително количество продукт след кристализация (246 mg). Общ добив 2,894 g. ТСХ (5% оцетна киселина в етилацетат) R_f = 0,58.

b) S-ацетил-N - [ (фенилметокси) карбонил]-Ь-цистеин

Хомогенен разтвор от продукта от част а) (2,70 д, 10,6 ммола) във вода (30 ml, деокислена посредством барботиране на аргон) съдържаща калиев бикарбонат (2,140 д, 21,4 ммола) се обработва с оцетен анхидрид (8,0 ml, 8,66 g, 84,8 ммола). След 10 минути при стайна температура сместа се подкислява с 10% солна киселина и се екстрахира с етилов етер. Етилетерният екстракт се промива два пъти с вода и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира и дестилира като се получава масло. Остатъкът се обработва азеотропно три пъти с толуен и два пъти с етилацетат/хексан, след което маслото кристализира. Остатъкът се обработва с етилацетат/хексан и твърдият продукт се събира чрез филтриране като се получава 2,19 g чист продукт съгласно заглавието. ТСХ (5% оцетна киселина в етилацетат) Rf = 0,56.

c) метилов естер на (3)-2-ЦМ-(фенилметокси)карбонил-3ацетил-Е-цистеинил|амино]-6,6-диметоксихексанова киселина Суспензия от метилов естер на (в)-2-фталимидо-6,6- киселина описано в прихидразин монохидрат (176 μΐ, хомогенна за 10 минути.

След разбъркване при стайна температура в продължение на 67 часа, получената суспензия се филтрира, дестилира, суспендира в отново като се получава метиленхлорид, филтрира и ддестилира суров междинен продукт амин като безцветно масло. Междувременно частична суспензия от част Ь)

(1,185 д, 3,98 ммола) в метиленхлорид (14 mi) се обработва с триетиламин (555 μΐ, 403 mg, 3,98 ммола). Вече хомогенният разтвор се охлажда до 0°С, обработва се с горния амин като разтвор в

метиленхлорид (7 ml), след това се обработва с бензотриазол-1 илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (1,762 д, 3,98 ммола). Сместа се разбърква при 0°С в продължение на

2,5 часа, след това при стайна температура в продължение на 45 минути. Разтворителят се отстранява и остатъкът се разпределя между етилацетат и вода. Органичният слой се промива с 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат), филтрира и дестилира. Остатъкът се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 65:35 етилацетат:хексан) като се получава 1,15 g чист продукт съгласно заглавието като бяла пяна. ТСХ (75:25 етилацетат:хексан) R_f = 0,42.

Анализ: Изчислено за 022^32^208^

С 54,53	Н 6,66	N	5,78	S 6,62
Намерено С 54,79	Н 6,72	N	5,77	S 6,95.
d) метилов	естер	на	[3R-[	За,6а,9ар ] ]-хексахидро-3

[(фен илмето кси) карбон ил]амино]-4-оксо-2Н,6Н-пиридо[2,1b] [1,3]тиазин-6-карбоксилна киселина;

Деокислен разтвор (барботиране на аргон) на продукта от част с ί (1,040 g, 2,15 ммола) в метанол (12 mil при 0° С се обработва с натриев метоксид (25 тегловни % в метанол, 490j.il, 463 mg, 2,14 ммола). След 20 минути реакцията се спира с наситен разтвор на амониев хлорид., разрежда се с вода и се екстрахира с етилацетат. Етилацетатният екстракт се промива с вода и разтвор на натриев хлорид, след което се суши (натриев сулфат), филтрира и дестилира. Остатъкът се разтваря повторно в метиленхлорид (200 ml) и се разбърква при стайна температура с Amberlyst®15 йонообменна смола (820 mg, предварително промита последователно с 6N солна киселина, вода, тетрахидрофуран, след това метиленхлорид). След три часа разтворът се филтрира, разбърква и подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 65:35 етилацетат:хексан) като се получава 757 mg от продукта съгласно заглавието като безцветно масло. ТСХ (75:25 етилацетат:хексан) Rf = 0,58.

е) метилов естер на [3R-[3α,6α, 9ар ] ]-хексахидро-3-амино]4-оксо-2Н,6Н-пиридо[2,1-Ь] [ 1,3]тиазин-6-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част d) (752 mg, 1,99 ммола) в сух метиленхлорид (15 ml) се обработва при стайна температура с йодтриметилсилан (620μ1, 872 mg, 4,36 ммола). След разбъркване в продължение на 3 часа, реакцията се спира с вода, обработва се с малко количество 10%-на солна киселина и се екстрахира с етилов етер. Слоевете се разделят и етерният слой се екстрахира повторно с вода. Обединените водни слоеве се алкализират (pH 13) с 10%-ен натриев хидроксид и се екстрахират два пъти с метиленхлорид. Обединените метиленхлоридни екстракти се сушат (натриев сулфат), филтрират и дестилират като се получава 290 mg суров продукт съгласно заглавието като безцветно

масло. ТСХ ί 10% метанол в метиленхлорид) Rf = 0,38.

ίι метилов естер на [ 3 R-[ 3 ос f S* ί ,6α, 9αβ ] j-хексахи дро-3](2-(ацетилтио)-1 - оксо-3-фенилпропил]амино |-4-оксо-2Н,6Нпиридо[2,1-Ь][1,3]тиазин-6-карбоксилна киселина

Охладен (0°С) разтвор на (S)-2-цетилтио) бензенпропанова киселина (294 mg, 1,31 ммола) и триетиламин (180 pL, 131 mg,1,29 ммола) в метиленхлорид (8 ml) се обработва с продукта от част е) (287 mg, 1,17 ммола) като разтвор в 6 ml метиленхлорид. Прибавя се бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (575 mg, 1,30 ммола). Бистрият почти безцветен разтвор се разбърква при 0°С в продължение на 1 час и след това при стайна температура в продължение на 1 час. Разтворителят се отстранява с помощта на ротационен изпарител и остатъкът се разпределя между етилацетат и 5% калиев бисулфат. Органичният слой се промива последователно с вода, 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира и дестилира. Остатъкът се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 1:1 етилаце-тат:хексан) Rf = 0,27, ]α]ρ = -107,0° (с = 0,6, хлороформ).

g)(3R-[3a(S*),6a,9aP] ]-хексахи дро-3- ](2-меркапто-1-оксо3-фенилпропил) амино ]-4-оксо-2Н,6 Н-пир и до [2,1-Ь](1,3]тиазин6-карбоксилна киселина

Разтвор (0°С) от продукта от част f) (406 mg, 0,90 ммола) в метанол (5 ml, деокислен чрез барботиране на аргон) се обработва с 1N натриев хидроксид (5 ml, деокислен чрез барботиране на аргон). След разбъркване в продължение на един час, разтворът се затопля до стайна температура и се разбъркването под аргон продължава още 1,25 часа. Сместа се подкислява с 5% ка48

лиев бисулфат, разрежда се с вода и се екстрахира с етилацетат. Етилацетатният екстракт се промива с вода и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира и изпарява. Остатъкът се подлага двукратно на флаш хроматография (Merck силикагел, 2% оцетна киселина в етилацетат). фракциите с продукта се проверяват с помощта на ВЕТХ.Желаните фракции се обединяват, изпаряват и обработват азеотропно двукратно с етилацетат. Остатъкът се разбърква с малко количество етилацетат и се обработва с хексан като се получава твърд продукт. Разтворителят се изпарява и остатъкът се сус

пендира в хексан, изпарява и суши под вакуум като се полуачава 98,3 mg от продукта съгласно заглавието като твърда бяла пяна. ТСХ (2% оцетна киселина в етилацетат) Rf = 0,46, [<x]d — -57° (с = 0,4, хлороформ).

1,5 mL/ мин, детекция при 220 nm, = 8,33 мин (95,0%).

Анализ: Изчислено за С j βΗ22Ν2θ4$2·θ’2 етилацетат:

С 54,79 Н 5,77 N 6,80 S 15,56

Намерено С 54,59 Н 6,04 N 6,59 S 15,16.

ПРИМЕР 3 [4S-[4a(R*),7a,10ap] ]-октахидро-4 - [ (2-меркапто -1 - оксо3-фенилпропил)амино)-5-оксо-7Н-пиридо[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

а) метилов естер на [S-(R*,R*) ]-2-[ [2-фталимидо-4-(ацетилтио) -1-оксобутил]амино]-6,6-диметоксихексанова киселина

Студен (0°С) разтвор на трифенилфосфин (1,143 д, 4,36ммола) в тетрахидрофуран (20 ml) се обработва с диизо49

пропил аз идодикар бокс плат (860 μΐ, 883 mg, 4,37 ммола).

За пет минути се образува суспензия. След 30 минути се прибавя разтвор на метилов естер на [ S-(R*, R*) ]-2-[ (2-фталимидо4- хидрокси - 1-оксобутил)амино)-6,6-диметоксихексанова киселина (получена както е описано в пример If), 928 mg, 2,19 ммола) в тетрахидрофуран (8 ml), след което се прибавя чиста тиооцетна киселина (312μ1, 332 mg, 4,36 ммола). Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 1,25 часа, след това се разпределя между 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат и етилацетат. Етилацетатният екстракт се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат), филтрира и дестилира. Остатъкът се разтваря повторно в етилацетат и се обработва с малко количество хексан, за да се утаи трифенилфосфин оксид. Сместа се филтрира и филтратът се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 65:35 етилацетат:хексан) като се получава 894 mg от продукта съгласно заглавието като безцветно масло. ТСХ (75:25 етилацетат:хексан) Rf = 0,43.

Ь)метилов естер на [45-[4а,7а,10ар]]-октахидро-4фталимидо-5-оксо - 7 Н-пиридо [2,1 - b] {1,3 J тиазепин- 7-кар б ок силна киселина

Деокислен (барботиране с аргон) разтвор на продукта от част а) (814 mg, 1,65 ммола) в метанол (15 ml) при 0°С се обработва с натриев метоксид (25 тегловни % в метанол, 1,05 ml, 4,6 ммола). След 5 минути реакцията се спира с наситен разтвор на амониев хлорид, разрежда се с вода и се екстрахира с етилацетат. Етилацетатният екстракт се промива с вода и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира и дестилира. Остатъкът се разтваря повторно в метиленхлорид (180 ml) и се разбърква при стай на температура с Amberlyst® 1 5 йонообменна смола (285 mg, предварително промита последователно с 6N солна киселина, вода, тетрахидрофуран, след това с метиленхлорид) След 46 часа разтворът се филтрира, дестилира и подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 1:1 етилацетат.хексан) като се получава 314 mg от продукта съгласно заглавието като бяла пяна. Обработването на пяната с етилацетат води до полу-

чаване на продукта съгласно заглавието като бяло вещество, т. на топене 147-148°С. ТСХ (75:25 етилацетат:хексан) Rf — 0,56, (α][) = -143,2° (с = 0,6, хлороформ).

с)метилов естер на (4 5-[4а(Р*),7а,10а8]]-октахидро-4[ (2 - (ацетилтио) - 1-оксо-3-фенилпропил)амино]-5-оксо-7Н-пиридо [2,1-Ь][1,3]тиазе пи н-7-карбоксилна киселина

Продуктът от част Ь) (280 mg, 0,72 ммола) в метанол (8 ml) се обработва с хидразин монохидрат (42 μΐ, 43 mg, 0,86 ммола) и разтворът се разбърква при стайна температура в продължение на 67 часа. Сместа се филтрира и твърдият продукт се промива с метанол. Филтратът се дестилира, обработва с метиленхлорид, полученият твърд продукт се филтрира отново и дестилира като се получава суровият амин като жълто масло (около 205 mg).

Студен (0°С) разтвор на (S)-2- (ацетилтио)-бензенпропанова киселина (178 mg, 0,79 ммола) и триетиламин (111 μΐ, 80 mg, 0,80 ммола) в метиленхлорид (3 ml) се обработва с горния амин (като разтвор в 7 ml метиленхлорид) и след това с бензотриазол-1 - илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (353 mg, 0,80 ммола). Разтворът се разбърква при 0°С в продължение на 1 час и след това при стайна температура в продължение на 2 часа. Разтворителят се изпарява и оста

тъкът се разпределя между етилацетат и 5% калиев бисулфат. Органичният слой се промива последователно с вода, 5% наситен разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира и дестилира. Остатъкът се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 1:1 етилацетат:хексан) като се получава 272 mg чист продук съгласно заглавието като бяла пяна.

d) [4S-(4a(R*),7a,10aP|]-OKTaxHApo-4-[(2-MepKanTo-l-oKco3-фенилпропил) амино ]-5-оксо- 7 Н-пиридо (2,1 - Ъ][ 1,3] тиазепин-7карбоксилна киселина

Разтвор при стайна температура от продукта от част с) (227 mg, 0,49 ммола) в метанол (5 ml, деокислен чрез барботиране с аргон) се обработва с 1N натриев хидроксид (8 ml, деокислен чрез барботиране с аргон). След разбъркване в продължение на 1 час, сместа се подкислява с 10% солна киселина, разрежда се с вода и се екстрахира с етилацетат. Етилацетатният екстракт се промива с вода и разтвор на натриев хлорид, след това се суши (натриев сулфат), филтрира и концентрира. Полученият твърд продукт се суспендира в етилацетат и се събира чрез филтриране.Фиртратът се подлага на флаш хроматогряфия (Merck силикагел, 1% оцетна киселина в етилацетат) и желаните фракции се обединяват, дестилират и обработват с етилацетат/етилов етер като се получава допълнително твърд продукт. Твърдите продукти се обединяват като се получава общо количество 150 mg от продукта съгласно заглавието, т. на топене 216217°С (разлагане). ТСХ (2% оцетна киселина в етилацетат) Rf = 0,56, [α]£> ⁼ -72,6° (с = 0,28, диметилформамид).

ВЕТХ: YMC S3 ODS колона (6,0 х 150 mm) елуиране с 40% А: 90% вода-10% метанол-0,2% фосфорна киселина и 60% В: 10% вода52

90% метанол-0,2% фосфорна киселина, скорост на изтичане

1,5 ml./ мин, детекция при 220 nm, t ρ — 9,48 мин (97,4%). Анализ Изчислено за C19H24N2O4S2 · 0,14 етилацетат:

С 55,82 Н 6,02 N 6,66 S 15,24

Намерено С 55,53 Н 6,01 N 6,63 S 14,91.

ПРИМЕР 4 |4S - [4α( R*) ,7а,9ар ] ]-октахидро-4- [ (2-меркапто - 1-оксо3-фенилпропил) амино]-5-оксопироло [2,1 - Ь] [1,3]оксазепин-7карбоксилна киселина

а) (5)-2-фталимидо-5-оксо-5 -(фенилметокси)пентанова киселина

Към разтвор на у-бензил-Ь-глутамин (17,49 д, 73,70 ммола) във воден разтвор (180 ml) на натриев карбонат (7,81 д, 73,70 ммола) и диоксан (120 ml) се прибавя N-карбетоксифталимид (16,50 д, 75,27 ммола, 1,02 екв.). След разбъркване при стайна температура в продължение на 4,5 часа реакционната смес се подкислява с 6N солна киселина (30 ml) и се екстрахира с етилацтат (2 х 400 ml). Обединените етилацетатни екстракти се промиват с 50%-ен разтвор на натриев хлорид (200 ml), разтвор на натриев хлорид (200 ml), суши се над натриев сулфат, филтрира се, концентрира се и се суши под вакуум като се получава суров продукт като масло (41,4 д). Към разтвор на този суров остатък в етилов етер (100 ml) се прибавя дициклохексиламин (14 ml). След престояване в хладилник една нощ етиловият етер се отстранява на ротационен изпарител и маслообразният остатък кристализира из етилацетат/хексан. Получената утайка се събира чрез филтриране, промива се с хексан и се суши под вакуум като се получава 21,21 g от продукта съгласно заглавието като дициклохексиламино сол. Сус

пензия от тази дициклохексиламино сол в етилацетат (200 ml) се промива с 5% калиев би сулфат (3 х 50 mil, разтвор на натриев хлорид (50 ml) и се суши над магнезиев сулфат, филтрира и концентрира, като се получава 13,5 g от продукта съгласно заглавието като бяла пяна. ТСХ (3% оцетна киселина в 9:1 етилацетат:хептан) Rf = 0,30.

b) метилов естер на (S)-2-фталимидо-5-оксо-5-(фенилметокси)-пентанова киселина

Към разтвор на продукта от част а) (13,22 д, 36,0 ммола) и цезиев карбонат (5,86 д, 18,0 ммола) в диметилформамид (100 ml) се прибавя йодметан (18,1 ml, 129,6 ммола, 3,6 екв.).

Жълтият разтвор се разбърква в продължение на 2,5 часа и след това се разпределя между етилацетат (300 ml) и вода (250 ml). Етилацетатният екстракт се промива с 5% натриев бикарбонат (200 ml) и разтвор на натриев хлорид, суши се над магнезиев сулфат, филтрира и концентрира като се получава 13,68 g жълто масло. Остатъкът се пречиства чрез хроматография на 5 х 20 cm силикагелна колона като се елуира с 30% етилацетат/хексан. Желаните фракции се обединяват и концентрират като се получава 10,0 g от продукта съгласно заглавието. ТСХ (1:1 етилацетат:хексан), Rf = 0,45.

c) метилов естер на (S)-2-фталимидо-4-(кар бокси) бутанова киселина

Към разтвор на продукта от част Ь) (10,0 д, 26,22 ммола) в етилацетат (115 ml) се прибавя катализатор 20% паладиев хид роксид върху въглен (1,90 д) и получената суспензия се разбърква във атмосфера от водород (бутилка) в продължение на

2,5 часа. Сместа се филтрира, промива се изчерпателно с етилацетат, концентрира се и се суши под вакуум като се полу54 чава 7,29 g суров продукз съгласно заглавието като бяло твър до вещество, т. на топене 137-138°С. ТСХ (10% метанол/метиленхлорид) Rf = 0,4 3.

d) метилов естер на (8)-2-фталимидо-5-оксо-5-(етилтио)пентанова киселина

Към разтвор на продукта от част с) (7,27 д, 24,95 ммола) в метиленхлорид (125 ml) при 0°С под аргон се прибавя етантиол (4,81 ml, 64,92 ммола, 2,6 екв.), 4-диметиламинопиридин (609 mg, 4,99 ммола, 0,2 екв.) и етил-3-(3-диметиламино) пропил карбоди

имид хлороводородна сол (5,27 д, 27,47 ммола, 1,1 екв.). След разбъркване при 0°С в продължение на 2 часа и при стайна температура 1 час, реакционната смес се концентрира, разрежда се с етилацетат (400 ml) и се промива с 5% калиев бисулфат (200 ml), наситен разтвор на натриев бикарбонат (200 ml) и разтвор на натриев хлорид (200 ml), суши се над натриев сулфат, концентрира се и се суши под вакуум като се получава 8,30 g суров продукт съгласно заглавието като масло. ТСХ (1:1 етилацетат:хексан) Rf = 0,47.

е) метилов естер на (S)-2-фталимидо-5-оксопентанова киселина

Суспензия на продукта от част d) (8,30 g, 24,75 ммола) и 10% паладий върху въглен (1,24 д) в ацетонитрил (150 ml) под аргон се обработва на капки с триетилсилан (7,91 ml, 49,5 ммола, 2 екв.). След разбъркване при стайна температура в продължение на 45 минути, сместа се филтрира, концентрира и суши под вакуум. Суровият остатък се пречиства с помощта на хроматография върху 5 х 25 cm силикагелна колона и елуиране с 25% етилацетат/хексан (4 л) и след това с 35% етилацетат (2 л) Желаните фракции се обединяват като се получава 5,60 g продукт съгласи·:· заглавието

ГСХ (1:1, етилацетат:хексан) Rf = 0,3 2.

f) метилов естер на (S) -2-фтал имидо-5,5-диметоксипентанова киселина

Разтвор на продукта от част е) (5,60 д, 20,34 ммола) в метанол (60 ml) и метиленхлорид (40 ml) се обработва с триметилортоформиат (3,8 ml, 34,59 ммола, 1,7 екв.) и р-толуенсулфонова киселина монохидрат (280 mg).След разбъркване при стайна температура в продължение на 1,5 часа реакцията се прекъсва с 2 ml наситен разтвор на натриев бикарбонат, канцентрира се и се разпределя между етилацетат (400 ml) и вода (100 ml). Етилацетатният екстракт се промива с наситен разтвор на натриев бикарбонат (100 ml), разтвор на натриев хлорид (100 ml), суши се над магнезиев сулфат, филтрира се и се концентрира като се получава суров продукт като масло. Този суров остатък се пречиства чрез хроматография върху 5 х 20 cm силикагелна колона при елуиране с 30% етилацетат/хексан (2 л). Желаните фракции се обединяват, концентрират и сушат под вакуум като се получава 6,20 g продукт съгласно заглавието. ТСХ (1:1 етилацетат:хексан) Rf — 0,40.

g) метилов естер на (5)-2-амино-5,5-диметоксипентанова киселина

Разтвор на продукта от част f) (6,16 g, 19,18 ммола) в метанол (125 ml) се обработва с хидразин монохидрат (0,98 ml, 20,14 ммола, 1,05 екв.). След разбъркване при стайна температура в продължение на 6 дни, получената суспензия се филтрира, концентрира, обработва с метиленхлорид, полученият твърд продукт се филтрира, концентрира се и се суши под вакуум като се получава 3,57 g продукт съгласно заглавието като без56 цветно масло .ТСХ (10% метанол в метиленхлорид) Rf hl метилов естер на [ S-( R*, R' | ]-2-[ (2-фталим идо-4 (трифенилметокс и) -1 - оксо бутил ]амино]-5,5-диметоксипентанова киселина

Разтвор на (8)-2-фталимидо-4-(трифенилметокси) бутанова киселина, триетиламино сол, (получена както е описано в пример 1Ь)) ,11,62 д, 19,60 ммола, 10,5 екв.) в метиленхлорид (100 ml) при 0°С се обработва с бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино) фосфониев хексафлуорофосфат (8,67д, 19,60 ммола, 1,05 екв.). Сместа се разбърква в продължение на 45 минути при 0°С, след това се обработва с разтвор на продукта от част д) (3,57 д, 18,67 ммола) в метиленхлорид (50 ml). След 10 минути при 0°С и 2 часа при стайна температура, разтворът се разпределя между етилацетат (300 ml и вода (100 ml). Етилацетатният слой се промива с 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат (100 ml) и разтвор на натриев хлорид (100ml), суши се над магнезиев сулфат, филтрира и концентрира. Остатъкът се пречиства чрез хроматография върху 5 х 25 cm силикагелна колона като се елуира с 1:1 етилацетат:хексан като се получава 8,58 g продукт съгласно заглавието. ТСХ (1:1 етилацетат.хексан) Rf = 0,20.

i) метилов естер на [S-(R*,R*) ]-2-[ [2-фталимидо-4хидрокси-1 - оксобутил|амино]-5,5-диметоксипентанова киселина

Разтвор на продукта от част h) (8,58 g, 12,91 ммола) в метанол (100 ml) се обработва с р-толуенсулфонова киселина монохидрат (850 mg). След разбъркване при стайна температура в продължение на 3,5 часа, сместа се разпределя между етилацетат (200 ml) и 10% наситен разтвор на натриев бикарбонат (100 ml), фазите се разделят и водният слой се екстрахира отново с

етилацетат ί 100 ml). Обединените етилацетатни екстракти се промиват с разтвор на натриев хлорид, сушат се над магнезиев сулфат, филтрират и концентрират. Остатъкът се пречиства с помощта на хроматография върху 5 х 20 cm силикагелна колона при елуиране с 8:2 етилацетат:хексан (1 л) и след това с 1% мветанол в етилацетат (2 л). Желаните фракции се обединяват, концентрират и сушат под вакуум като се получава 4,33 g продукт съгласно заглавието. ТСХ (8:2 етилацетат:хексан) Rf = 0,21.

j) метилов естер на [45-(4а,7а,9аР)]-октахидро-4фталимидо-5-оксопироло [2,1-Ь]{1,3]оксазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част i) l,89g, 4,48 ммола) в метиленхлорид (90 ml) се обработва с Amberlyst®15 йонообменна смола (400 mg, предварително промита последователно с 6N солна киселина, вода, тетрахидрофуран и метиленхлорид). След разбъркване при стайна температура в продължение на 3 часа разтворът се филтрира, концентрира и подлага на флаи хроматография върху 5x15 cm силикагелна колона при елуиране с 4:6 етилацетат:хексан като се получава 1,51 g продукт съгласно заглавието като бяла пяна. ТСХ (8:2 етилацетат:хексан) Rf = 0,32.

к) метилов естер на [45-(4а,7а,9аР)]-4-амино-октахидро-

5-оксопироло[2,1 - b]( 1,3]оксазепин -7-карбоксилна киселина

Продуктът от част j) (764 mg,2,13 ммола) в метанол (15 ml) се обработва с хидразин монохидрат (109 μΐ, 2,24 ммола, 1,05 екв.) и разтворът се разбърква при стайна температура в продължение на 4 дни. Сместа се филтрира и твърдият продукт се промива с метанол.Филтратът се концентрира, обработва се с метиленхлорид, филтрира се полученият твърд продукт и се

концентрира. Остатъкът се пречиства чрез хроматографиране на 2 х 15 cm силикагелна колона при елуиране с 3% метанол в метиленхлорид (3 л) и след това с 10% метанол в метиленхлорид (1 л). Желаните фракции се обединяват и концентрират като се получава 451 mg продукт съгласно заглавието като масло. ТСХ (10% метанол в метиленхлорид). Rf = 0,18.

1)метилов естер на [4S-[4a(R‘),7a,9aP]]-oKTaxHApo-4-[(2ацетилтио-1 -оксо-3-фенилпр опил) амино J-5-оксопироло [2,1 -

b] [ 1,3]оксазепин-7-карбоксилна киселина

Суспензия на дициклохексиламино сол на (S)-2-ацетилтио-3-бензенпропанова киселина (получена както е описано в пример lh), 870 mg, 2,14 ммола, 1,14 екв.) в етилацетат (70 ml) се промива с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (5 х 20 ml), 50%-ен разтвор на натриев хлорид (20 ml) и разтвор на натриев хлорид (20 ml), суши се (безводен натриев сулфат), филтрира, концентрира, суши се под вакуум една нощ като се получава (S) - 2- (ацетилтио) бензенпропанова киселина.

Свободната киселина се разтваря в сух метиленхлорид (10 ml), охлажда се до 0°С (баня лед-сол) и се обработва с триетиламин (298 μΐ, 2,14 ммола) и след това с разтвор на продукта от част к) (430 mg, 1,88 ммола) в метиленхлорид (10 ml) и бензотриазол-1 -илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорфосфат (947 mg, 2,14 ммола, 1,14 екв.) . Полученият разтвор се разбърква при 0°С в продължение на 50 минути и след това при стайна температура в продължение на 3 часа. Реакционната смес се концентрира, разрежда с етилацетат (150 ml), промива с 0,5 N солна киселина (50 ml), вода (50 ml), наситен разтвор на натриев бикарбонат (50 ml), вода (50 ml) и разтвор на натриев хлорид (50 ml), суши се (безводен магнезиев

сулфат), филтрира и изпарява до сухо. Суровият продукт се адсорбира върху Се1itе® и се хроматографира върху силикагелна колона (5 х 10 cm), като се елуира с 60% етилацетат/хексан (3 л). Желаните фракциисе обединяват и концентрират като се получава 779 mg чист продукт съгласно заглавието. ТСХ (6:4 етилацетат:хексан) Rf = 0,17.

m) [4S- [4a(R*) ,7tx,9ap ) ]-октахидро-4 - [ (2-меркапто - 1 оксо- 3-фенил пр опил) амино ] -5-оксопироло [2,1-Ь][1,3]оксазепин-7карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част 1) (754 mg, 1,74 ммола) в метанол (15 ml) се продухва с аргон в продължение на 30 минути, охлажда се до 0°С (баня лед-сол), след което се обработва на капки с предварително продухан (аргон, в продължение на 30 минути) разтвор на 1,0 N натриев хидроксид (12 ml) като барботирането с аргон се поддържа през време на прибавянето и продължава по време на реакцията. Реакционната смес се оставя при 0°С в продължение на 3 часа, подкислява се при 0°С с 5%-ен разтвор на натриев бисулфат до pH 1, след това се екстрахира с етилацетат (3 х 100 ml). Обединените органични екстракти се промиват с 50%-ен разтвор на натриев хлорид (100 ml), разтвор на натриев хлорид (100 ml), сушат се (безводен натриев сулфат), филтрират, изпаряват до сухо и сушат под вакуум като се получава бяла пяна. Остатъкът се пречиства чрез хроматография върху 2,5 х 15 cm силикагелна колона при елуиране с етилацетат (500 ml) и 0,3 % оцетна киселина в етилацетат (1 л). Желаните фракции се концентрират, дестилират с хлороформ и сушат под вакуум една нощ при 50°С върху фосфорен пентоксид като се получава съединение съгласно заглавието като бяла пяна, т. на топене 88-92°С

-63,8° (с — 1,0, м етан са ι. ТСХ (1% оцетна киселина е етилацетат) R f = 0,24 .

'Н-ЯМР: 400 МНг, CDC1_3:5 1,80-2,31 (m's,7H), 3,10 (m, ΙΗ), 3,27 (m, 1H), 3,63 (m, 1H), 4,0 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,49 (m, 1H).

4,75 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 7,19-7,30 (m's, 5H), 7,52 (d,lH, J = 6Hz). ¹³С-ЯМР: 100 MHz: CDCI3: δ 26,4, 32,0, 32,6, 41,2, 44,2, 53,0, 59,4, 70,6, 89,47, 126,9, 128,4, 129,3, 137,4, 171,2, 171,6, 174,8. Анализ: Изчислено за θ-θ5 Н2О

С 54,91 Н 6,07 N 7,12 S 8,14

Намерено С 54,85 Н 5,68 N 7,18 S 8,14.

ВЕТХ: t_R = 13,5 мин (96,7%р UV 220), YMC ODS (С-18) 6,0 х

150 mm, 30% В:А - 100% В:А , 25 мин линеен градиент (А = 90% вода/метанол + 0,2 % фосфорна киселина В = 90% метанол/вода +0,2% фосфорна киселина) скорост на изтичане

1,5 ml/мин.

ПРИМЕР 5

[4S-[4a(R’),7a,9aP] ]-октахидро-4- [(2-меркапто-1-оксо3-фенил пропил) амино]-5-оксопироло [2,1-Ь]|1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина;

а)метилов естер на |S-(R*,R*) J-2-[ [2-фталимидо-4(ацетилтио)-1 -оксобутил]амино]-5,5-диметоксипентанова киселина

Охладен при 0°С разтвор на трифенилфосфин (1,26 д, 4,79 ммола, 1,5 екв.) в сух тетрахидрофуран (15 ml) се обработва с диизопропил азодикарбоксилат (943 μΐ, 4,79 ммола). Получената бяла суспензия се разбърква в продължение на 30 минути и след това се обработва с разтвор на метилов естер на (S-(R*,R*) J-2- ([2-фталимидо-4-хидрокси-1 -оксобутил]амино]-5,5-диметоксипентанова киселина (получен както е описано в пример 4ι), 1,35 g, 3,20 ммола) в сух тетрахидрофуран (15 nil) и след това с чиста гиолоцетна киселина (343 μΐ, 4,79 ммолаг Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 1,5 часа и след това се разпределя между етилацетат (150 ml) и 50% разтвор на натриев бикарбонат (100 ml). Етилацетатният слой се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се над магнезиев сулфат, филтира, концентрира, адсорбира върху Celite® и суши във

вакуум. Суровият продукт се пречиства чрез хроматография върху 2,5 х 15 cm силикагелна колона като се елуира с 1:1 етилацетат:хексан (1 л) и 6:4 етилацетат:хексан (1 л). Желаните фракции се обединяват, концентрират и сушат под вакуум като се получава 1,35 g продукт съгласно заглавието като масло. ТСХ (8:2 етилацетат:хексан) Rf = 0,42.

Ь)метилов естер на [S-(R*,R*) ]-2-f (2-фталимидо-4-

меркапто-1 -оксобутил)амино]-5,5-диметоксипентанова киселина

Деокислен (барботиране на аргон) разтвор на продукта от част а) (1,33 д, 2,76 ммола) в метанол (25 ml) при 0°С се обработва с натриев метоксид (25 тегловни% в метанол, 1,52 ml, 6,63 ммола, 2,4 екв.). След 3 минути реакцията се прекъсва с наситен разтвор на амониев хлорид (3 ml), разрежда се с вода и се екстрахира с етилацетат (100 ml). Етилацетатният екстракт се промива с вода (50 ml) и разтвор на натриев хлорид (50 ml), суши се над натриев сулфат, филтрира и концентрира. Остатъкът се пречиства чрез хроматография върху 5x15 cm силикагелна колона като се елуира с 1:1 (3 л) и след това с 8:2 (2 л) етилацетат.хексан. Фракциите съдържащи желания продукт се обединяват и концентрират като се получава 853 mg съединение съгласно заглавието като масло. ТСХ (8:2 етилаце тагхексан) Rf = 0,43.

с)метилов естер Ha{4S-(4a,7a,9aP) )-октахидро-4фталимидо-5-оксопироло[2,1-b] [ 1 ,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част Ь) (847 mg, 1,93 ммола) в метиленхлорид (20 ml) се обработва с Amberlyst® 15 йонообменна смола (700 mg, предварително промита последователно с 6N солна киселина, вода, тетрахидрофуран и метиленхлорид). След разбъркване при стайна температура в продължение на 17 часа разтворът се филтрира, концентрира и подлага на флаш хроматография върху 2,5 х 15 силикагелна колона, която се елуира с 1:1 етилацетат:хексан като се получава 691 mg продукт съгласно заглавието като бяла пяна. ТСХ (8:2 етилацетат:хексан) Rf = 0,48.

d) метилов естер на[45-(4а,7а,9ар)]-4-амино-октахидро-

5-оксопироло[2,1 - b] [ 1,3 ]ти а зеп и н-7-карбоксилна киселина

Продуктът от част с) (899 mg, 2,40 ммола) в метанол (17 ml) се обработва с хидразин монохидрат (122 μΐ, 2,52 ммола, 1,05 екв.) и разтворът се разбърква при стайна температура в продължение на 3 дни. Сместа се филтрира и твърдият продукт се промива с метанол. Филтратът се концентрира, обработва се с метиленхлорид, полученият твърд продукт се филтрира отново, концентрира се и се суши под вакуум като се получава 572 mg продукти съгласно заглавието като мътно масло. ТСХ (10% метанол в метиленхлорид) Rf = 0,13.

e) метилов естер на(4S-[4<х(R*),7а,9ар ] ]-октахидро-4-[ (2(ацетилтио) -1 -оксо-3-фенил пр опил) амино ]-5-окс опи роло {2,1-

Ь][1,3{тиазепин-7-карбоксилна киселина

Суспензия на дициклохексиламино сол на (S)-2(ацетилтио) бензенпропанова киселина (получена както е опи-

сано е пример (100 mil ml),

h), 1,045 g, 2,58 ммола, 1,1екв.) в етилацетат re промива с 5- е н разтвор на калиев бисулфат (0 х 25 натриев хлорид (25 разтвор на ml), суши се (безводен натриев сулфат), филтрира се, концентрира се и се суши под вакуум в продължение на един час като се получава (S)-2-(ацетилтио) бензенпропанова киселина.

Тази свободна киселина се разтваря в сух метиленхлорид (10 ml), охлажда се до 0°С (баня лед-сол) и се обработва с триетиламин (360 μΐ, 2,58 ммола), бензотриазол-1илокситрис(диметиламино) фосфониев хексафлуорофосфат (1,141 д, 2,58 ммола) и след това с разтвор на продукт от част d) (572 mg, 2,34 ммола) в метиленхлрорид (10 ml). Полученият разтвор се разбърква при 0°С в продължение на 30 минути и след това при стайна температура в продължение на 2,5 часа. Реакционната смес се концентрира, разрежда се с етилацетат (100 ml) , промива се с 0,5 N солна киселина наситен разтвор на натриев бикарбонат (50 ml), вода (50 ml) и разтвор на натриев хлорид (50 ml), суши се (безводен магнезиев филтрира се и се изпарява до сухо. Суровият продукт се адсорбира върху Celite® и се хроматографира върху силикагелна колона (5 х 10 cm), елуира се с 25% (5 л), 30% (2 л), 35% (2 л) и 40% (2 л) етилацетат/хексан. Смесените фракции се обеди няват и хроматографират повторно като се елуира със същия градиент.Желаните фракции се обединяват и концентрират, като се получава 490 mg чист продукт съгласно заглавието. ТСХ (1:1 етилацетат:хексан) Rf = 0,16.

f) [4S-[4a(R*) ,7α,9ар ] ]-октахидро-4-{(2-меркапто- 1-оксо-

3-фенилпропил) амино ]-5-оксопироло [2,1-Ь][1,3]тиазепин64

7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част е) (490 mg, 1,09 ммола) в метанол:тетрахидрофуран (8 ml: 4 ml) се продухва с аргон в продължение на 30 минути, охлажда се до 0°С (баня лед-вода) и след това се обработва на капки с предварително продухан (аргон, 30 минути) разтвор на 1,0 N натриев хидроксид (10 ml) като барботирането с аргон продължава през време на прибавянето и продължава по време на реакцията. Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 3 часа, подкислява се при 0°С с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат до pH 2, след това се екстрахира с етилацетат (3 х 75 ml). Обединените органични екстракти се промиват с разтвор на натриев хлорид (75 ml), суши се (безводен натриев сулфат), филтрира се, изпарява се до сухо и се суши под вакуум като се получава бяла пяна (489 mg). Остатъкът се пречиства чрез хроматографиране върху 2,5 х 15 cm силикагелна колона, като се елуира с 9:1 етилацетат:хексан (400 ml) и 0,5 % оцетна киселина в 9:1 етилацетат:хептан (1 л). Желаните фракции се концентрират, дестилират се с метиленхлорид/хептан и се сушат под вакуум като се получава 428 mg от продукта. Чистият продукт се прекристализира из смес от етилацетат/метанол/хексан. Кристалите се събират чрез филтриране, промиват се изчерпателно с етилов етер и се сушат под вакуум една нощ при 40°С над фосфорен пентоксид като се получава 305 mg про дукт съгласно заглавието като бели кристали, т. на топене

206-208°С, [<х]£) = -96,3° (с = 1,0, метанол). ТСХ (5% оцетна киселина в 9:( етилацетат:хептан) Rf — 0,29.

^Н-ЯМР: 400 MHz: CDC1₃ w/ 2 капки CD3OD: δ 1,94 (m, 1Н), 2,02 (d, 1H, J= 9 Hz), 2,08 (m, 1H), 2,20-2,55 (m's, 4H), 2,95 (m, 1H),

3,08 (m, 1 Η), 3,23 (m, IH), 3,27 (m, IH), 3,59 (rn, IH), 4,54 (t, IH, = 7,3 Hz), 4,60 (m, IH), 5,23 im, IH). 7,18-7,34 jin's, 5H), 7,63 (d, IH, J = 6 Hz).

¹³С-ЯМР: 100 MHz: CDC1₃ w/2 капки CD₃OD: δ 27,6, 31,1, 32,1,

32,9, 4 1,1, 44,0, 52,8, 60,4, 62,2, 126,77, 128,3, 129,0, 137,4, 170,2, 171,4, 172,6.

Анализ: Изчислено за C]gH22N2C>4S2 · 0,08 Н2О:

С 54,60 Н 5,64 N 7,07 S 16,19

Намерено С 54,65 Н 5,54 N 7,02 S 15,80.

ВЕТХ t_R = 13,0 мин (98,8%, UV 220), YMC S-3 CDS (С-18)

6,0 η 150 mm, 40% В:А - 100% В:А 25 минути линеен градиент (А = 90% вода/метанол +0,2 % фосфорна киселина, В = 90% метанол/вода +0,2% фосфорна киселина) скорост на изтичане

1,5 ml/мин.

ПРИМЕР 6 [4S-(4a(R‘) ,7a,9ap ] )-октахидро-4- [(2-меркапто- 1-оксо3-фенилпропил)амино]-5-оксопироло[2,1-Ь] (1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина

Продуктът от пример 5 се получава и по следния начин:

a) N - ((фенилметокси) карбонил]- L-хомосерин N-бензилоксикарбонилокси) сукцинимид (23,57 д,

94,58 ммола) се прибавя към разтвор на L-хомосерин (10,24 д, 85,98 ммола) и натриев бикарбонат (7,95 д, 94,58 ммола, 1,1 екв.) в смес от вода (100 ml) и ацетон (100 ml). Сместа се разбърква при стайна температура една нощ.Ацетонът се отстранява под намалено налягане (роторен изпарител) и водният разтвор се промива с метиленхлорид (2 х 75 ml). Водният сбой след това се подкислява до pH 2 чрез добавяне на 6N

солна киселина и се екстрахира с етилацетат (2 х 250 ml). Обединените етилацетатни слоеве се промиват с вода (2 х 100 ml) и разтвор на натриев хлорид, сушат се над натриев сулфат, филтрират, концентрират и сушат под вакуум като се получава 19,54 g продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество. ТСХ (етилацетат:н-бутанол:оцетна киселина:вода 2:1:1:1) Rf = 0,74.

b) N- ((фенилметокси)карбонил)-О-(трифенилметил) -Lхомосерин

Към суспензия от продукта от част а) (19,51 д, 77,04 ммола) в хлороформ (250 ml) се прибавя триетиламин (12,35 ml, 88,59 ммола, 1,15 екв.). Хомогенната смес се обработва с трифенилметилхлорид (24,70 д, 88,59 ммола) и реакционната смес се разбърква в продължение на 3 часа. Реакционната смес се концентрира под намалено налягане (роторен изпарител), разпределя се между етилацетат (400 ml) и 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (200 ml). Етилацетатният слой се промива с 5%ен разтвор на калиев бисулфат (200 ml), вода (2 х 200 ml) и разтвор на натриев хлорид (200 ml), суши се над натриев сулфат, филтрира и концентрира като се получава 45,4 g продукт. Остатъкът се хроматографира върху 10 х 30 cm силикагелна колона, елуира се с 6:4 етилацетат:хексан (2 л), след това с 1% оцетна киселина в 8:2 етилацетат.хексан като се получава 8,76 g чисто съединение съгласно заглавието.

c) метилов естер на (8)-2-амино-5,5-диметоксипентанова киселина

Метилов естер на (8)-2-фталимидо-5,5-диметоксипентанова киселина (получен както е описано в пример 4 f), 3,35 g, 10,43 ммола] в метанол (70 ml) се обработва с хидразин

монохидрат (531 μΐ, 10,95 ммола, 1,05 екв.) и разтворът се разбърква при стайна температура в продължение на 6 дни. Сместа се филтрира и твърдият продукт се промива с метанол. филтратът се концентрира, обработва се с метиленхлорид, полученият твърд продукт се филтрира отново, концентрира, суши под вакуум до получаване на 1,89 д продукт съгласно заглавието като мътно масло. ТСХ (10% метанол в метиленхлорид), Rf = 0,39.

d) метилов естер на (S-(R*,R*))-2-Ц2-Ц(фенилметокси)карбонил]амино]-4-(трифенилметокси)- 1-оксобутил]амино)5,5-диметоксипентанова киселина

Разтвор на продукта от част b) (5,28 д, 10,65 ммола,

1,1 екв.) в сух метиленхлорид (50 ml) при 0°С се обработва с триетиламин (1,48 ml, 10,65 ммола) и след това с продукта от част с) (1,85 д, 9,68 ммола) в сух метиленхлорид (30 ml) и бензотриазол- 1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (4,71 д, 10,65 ммола, 1,1 екв.). Сместа се разбърква в продължение на 1 час при 0°С и след това се разбърква при стайна температура в продължение на 2 часа. Реакционната смес се разпределя между етилацетат (300 ml) и вода (150 ml). Етилацетатният слой се промива с 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат (200 ml) и разтвор на натриев хлорид (2 х 200 ml), суши се над магнезиев сулфат, филтрира, концентрира, адсорбира върху Celite® и се пречиства върху 7 х 20 cm силикагелна колона при елуиране с 40% етилацетат/хексан (3 л), след това с 50% (2 л) етилацетат/хексан като се получава 4,84 g продукт съгласно заглавието. ТСХ (етилацетат:хексан 1:1, Rf = 0,22.

е) метилов естер на (S-(R*,R*) }-2-Ц2-Ц(фенилметокси) карбонил]амино]-4-хидрокси-1 -окс о бутил] амино ]-5,5-дим е токсипентанова киселина

Разтвор на продукта от чяст d) (4,80 g, 7,18 ммола) в метанол (70 ml) се обработва с р-толуенсулфонова киселина монохидрат (300 mg). След разбъркване при стайна температура в продължение на 2 часа, сместа се разпределя между етилацетат (400 ml) и 25% наситен разтвор на натриев бикарбонат (200 ml).Фазите се разделят и водният слой се екстрахира отново с етилацетат (100 ml). Обединените етилацететни екстракти се промиват с разтвор на натриев хлорид, сушат се над магнезиев сулфат, филтрират и концентрират. Остатъкът се пречиствачрез хроматография върху 5 х 20 cm силикагелна колона като се елуира с 7:3 (1 л), 8:2 (1 л) етилацетат:хексан и след това с 10% метанол в етилацетат (2 л). Желаните фракции се обединяват, концентрират и сушат под вакуум като се получава 2,92 g продукт съгласно заглавието. ТСХ ( етилацетат:хексан 8:2), Rf = 0,09.

f) метилов естер на (S-(R*,R*)]-2-{[2-Ц(фенилметокси)карбонил]амино]-4-(ацетилтио)-1-оксобутил] амино]-5,5-диметоксипентанова киселина

Охладен при 0°С разтвор на трифенилфосфин (3,06 д,

11,65 ммола, 1,7 екв.) в сух тетрахидрофуран (40 ml) се обработва с диизопропил азодикарбоксилат (2,29 ml, 11,65 ммола). Получената бяла суспензия се разбърква в продължение на 30 минути и след това се обработва с разтвор на продукта от част е) (2,92 д, 6,85 ммола) в сух тетрахидрофуран и след това с чиста тиооцетна киселина (833 μΐ, 11,65 ммола). Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 2 часа и след това се разпределя между етилацетат (300 ml) и 50% разтвор на натриев бикарбонат

(200 ml). Етилацетатният слой се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се над магнезиев сулфат, филтрира, концентрира, адсорбира върху Celite® и се суши под вакуум. Суровият продукт се пречиства чрез хроматография върху 5 х 20 cm силикагелна колона при елуиране с етилацетат:хексан (3 л). Желаните фракции се обединяват, концентрират и сушат под вакуум като се получава 2,58 д продукт съгласно заглавието като белезникаво твърдо вещество. ТСХ (етилацетат:хексан 8:2) R_f = 0,40.

g) метилов естер на (8-(И‘,И‘)(-2-[[2-[[(фенилметокси)карбонил]ам ино ]-4-м еркапто- 1-оксобутил] амино j-5,5-диметоксипентанова киселина

Деокислен (барботиране на аргон) разтвор на продукта от част f) (2,56 д, 5,28 ммола) в метанол (50 ml) при 0°С се обработва с натриев метоксид (25тегловни% в метанол, 3,62 ml, 15,84 ммола, 3 екв.). След 10 минути реакцията се спира с наситен разтвор на амониев хлорид (40 ml), разрежда се с вода (100 ml) и се екстрахира с етилацетат (300 ml). Етилацетатният екстракт се промива с вода (100 ml) и разтвор на натриев хлорид (150 ml), суши се над магнезиев сулфат, филтрира и концентрира. Остатъкът се пречиства чрез хроматография върху 5 х 20 cm силикагелна колона, която се елуира с 1:1 (3 л) етилацетат:хексан. Фракциите с желаното съединение се обединяват и концентрират като се получава 1,99 g продукт съгласно заглавието като масло. ТСХ (етилацетат:хексан 8:2 R_f = 0,43.

Ь)метилов естер на (48-(4а,7а,9ар)]-октахидро-4[((фенилметокси )карбонил]амино(-5-оксопироло[2,1bJ[ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част g) (2,16 д, 4,88 ммола ) в метиленхлорид (50 ml) се обработва с Amberlyst®15 йонообменна смола (620 mg, предварително промита посмедователно с 6N солна киселина, вода, тетрахидрофуран и метиленхлорид). След разбъркване при стайна температура в продължение на 3 часа разтворът се филтрира, концентрира и подлага на флаш хроматография върху 5 х 20 cm силикагелна колона, която се елуира с 6:4 етилацетат:хексан като се получава 1,34 g продукт съгласно заглавието като бяла пяна. ТСХ (етилацетат:хексан 8:2) Rf = 0,51.

i) метилов естер на [4S-(4a,7a,9ap)J-4-aMHHOоктахидро-5-оксопироло[2,1-bJ [ 1,3|тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част h) (1,20 g, 3,17 ммола, дестилиран с толуен три пъти и сушен под вакуум една нощ) в сух метиленхлорид (40 ml) се обработва с йодотриметилсилан (632 μΐ, 4,44 ммола, 1,4 екв. ) и се разбърква при стайна температура под аргон в продължение на 1,5 часа. Реакцията се спира с вода (50 ml), обработва се с 10%-на солна киселина (5 ml, pH 1) и се промива с етилацетат (50 ml). Водната фаза се обработва с 10%-ен разтвор на натриев хидроксид и се екстрахира с метиленхлорид (три пъти). Обединените екстракти се сушат над натриев сулфат, филтрират, концентрират и сушат под вакуум като се получава 396 mg продукт съгласно заглавието като бистро масло. ТСХ (10% метанол в метилен хлорид), Rf = 0,10.

j) [4S- (4<x(R*) ,7<х,9ар ] ]-октахидро-4 - [(2-меркапто- 1-оксо3-фенилпропил)амино]-5-оксопироло[2,1-ЬЦ1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина

Разтвор на (3)-2-(ацетилтио)бензенпропанова киселина в сух метиленхлорид се обработва с триетиламин. След това се прибавя разтворът на продукта от част i) в метиленхлорид и след него бензотриазол-1 -илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат. Полученият разтвор се преработва както е описано в пример 5 е) като се получава метилов естер на [4S- ]4a(R*) ,7a,9ap J ]-октахидро-4- {]2-(ацетилтио)-1 -оксо-3фенилпропил] амино]-5-оксопироло] 2,1-Ь]|1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина.

Суспензия на този метилов естер на продукта в метанол.тетрахидрофуран, продухан с аргон, се охлажда до 0°С и се обработва с предварително продухан разтвор на 1,0 N натриев хидроксид. Преработва се както е описано в пример 5 f) като се получава продукт съгласно заглавието.

ПРИМЕР 7 ]4S-]4a(R*),7a,9ap] ]-октахидро-4- {(З-циклохексил-2меркапто-1 -оксо пропил) амино]- 5-оксопироло |2, l-b][ 1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина

а)метилов естер Ha(4S-(4a,7<x,9aP) ]-4-амино-октахидро5-оксопироло(2,1-Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина р-толуенсулфонатна сол

Разтвор на метилов естер на [4S-(4α,7α,9ββ) ]октахидро-4- Ц(фенилметокси)карбонил]амино]-5-оксопироло]2,1 Ь][1,3] тиазепин-7-карбоксилна киселина (получен както е описано в пример 6 h), 738 mg, 1,95 ммола, три пъти дестилиран с толуен и сушен под вакуум една нощ) в сух метиленхлорид (25 ml) се обработва с йодотриметилсилан (389 μΐ, 2,73 ммола,

1,4 екв.) и се разбърква при стайна температура под аргон. След два часа реакционната смес се обработва с допълнително

количество йодотриметилсилан (40 μΐ) и се разбърква в продължение на 30 минути. Реакцията се спира с 0,4 М разтвор на солна киселина в метанол:диоксан (9:1, 9,7 ml) и се разбърква в продължение на 5 минути. Летливите вещества се отстраняват под вакуум (роторен изпарител) и остатъкът се разпределя между вода и етилацетат. Отделеният етилацетатен слой се промива с вода и обединените водни фази се промиват с етилацетат. Водната фаза се охлажда до 0°С и pH се наглася на 10,3 ( определено с pH-метър) с 1,0 N разтвор на натриев хидроксид. Водната фаза се екстрахира с метиленхлорид (три пъти) и водната фаза след това се насища със сол и се екстрахира отново с метиленхлорид (три пъти). Обединените екстракти се сушат над натриев сулфат, филтрират, концентрират и сушат под вакуум като се получава 455 mg сводният амин като бистро масло. ТСХ (10% метанол в метиленхлорид) Rf = 0,28.

Свободният амин се разтваря в етилацетат (5 ml) и се обработва с разтвор на р-толуенсулфонова киселина монохидрат (354 mg, 1 екв.) в етилацетат (1 ml). Незабавно се образуват бели кристали . Кристалите се държат в хладилник (5°С) в продължение на 30 минути и след това се събират чрез филтриране, промиват се добре с етилацетат и се сушат една нощ под вакуум като се получава 639 mg продукт съгласно заглавието като бало твърдо вещество.

Ь) (8)-2-(ацетилтио)-3-циклохексилпропанова киселина дициклохексиламино сол

Разтвор на D-фенилаланин (5,20 д, 31,5 ммола) в 2М солна киселина (75 ml) в 500 ml колба на Рагг за хидриране се продухва с газ азот и се обработва с платинов оксид (640 mg,

2,82 ммола). Хидрирането започва при Р_о = 42,4 psi в затворена колба, ако е необходимо се зарежда повторно. Общо приетото количество водород е 83,4 psi (теоретически 83,8 psi) за период от 6 часа. Реакционната смес се продухва с газ азот и се филтрира през Celite®, филтърната утайка се промива с гореща вода. Филтратът се концентрира до около 40 ml и се съхранява при 5°С една нощ. Полученият твърд продукт се събира, промива се с малко количество студена вода и се суши под вакуум при 60°С като се получава 5,46 g (RJ-2-амино-Зциклохексилпропанова киселина хлороводородна сол.

Към разбъркван разтвор от тази хлороводородна сол (2,81 д, 13,5 ммола) в 2,5 N сярна киселина (32 ml) при стайна температура се прибавя калиев бромид (10,0 д, 84 ммола). Реакционната смес се охлажда до -4°С и на части, за период от един час се прибавя натриев нитрит (1,75 д, 25,4 ммола), като температурата се поддържа под 0°С. Реакционната смес се разпенва и започва да се образува масло. След като прибавянето завърши, реакционната смес се разбърква в продължение на един час и след това се затопля до стайна температура и се разбърква още един час. Реакционната смес след това се екстрахира два пъти с етер, екстрактите се сушат (магнезиев сулфат), филтрират и изпаряват като се получава

2,3 g (И)-2-бромо-3-циклохексилпропанова киселина като безцветно масло.

Към разбърквана суспензия от калиев тиоацетат (1,07 д, 9,36 ммола) в сух ацетонитрил (15 ml) при 0°С под аргон се прибавя разтвор на (И)-2-бромо-3-циклохексилпропанова киселина (2,20 д, 9,36 ммола) в ацетонитрил (3 ml) за период от 10 минути. Реакционната смес се затопля до стайна температура

и се разбърква 16 часа. Получената суспензия се филтрира и изпарява. Остатъкът се разтваря повторно в етилацетат, промива се с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат, суши се (натриев сулфат) и се изпарява. Маслообразният жълт остатък (2,21 д) се разтваря в етер и се обработва с разтвор на дициклохексиламин (1,8 ml, 9,0 ммола ) в 5 ml етер. При драскане на повърхността на колбата със стъклена пръчка се получават 2,38 g бели кристали от продукта съгласно заглавието, т. на топене 159-161°С, (<х]£> = -41,2° (с = 1,0, хлороформ).

Анализ: Изчислено за C23H41NSO3:

С 67,11 Н 10,4 N 3,40 S 7,79

Намерено С 66,95 Н 10,12 N 3,25 S 7,89.

с) метилов естер на [4S-[4a(R‘),7α,9ββ]]-октахидро-4({2-(ацетилтио)-3-циклохексил- 1 -оксопр опил) амино)-5оксопироло(2,1 -b] [ 1,3)тиазепин-7-карбоксилна киселина Суспензия на съединението (3)-2-(ацетилтио)-3-циклохексилпропанова киселина, дициклохексиламино сол (285 mg, 0,69 ммола, 1,05 екв.) в етилацетат (15 ml) се промива с 5% -ен разтвор на калиев бисулфат (3 х 10 ml), 50%-ен разтвор на натриев хлорид (10 ml) и разтвор на натриев хлорид (10 ml), суши се (безводен магнезиев сулфат), филтрира се, концентрира се, дестилира се с метиленхлорид (два пъти) исе суши под вакуум в продължение на един час като се получава (S)-2(ацетилтио)-3-циклохексилпропанова киселина като масло.

Тази свободна киселина се разтваря в сух метиленхлорид (5 ml), охлажда се до 0°С (ледена баня) и се обработва с триетиламин (96 μΐ, 0,69 ммола, 1,05 екв.), след това с продукта от част а) (275 mg, 0,66 ммола), триетиламин (92 μΐ,

0,66 ммола) и накрая с бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлруорофосфат (305 mg, 0,69 ммола). Полученият разтвор се разбърква при 0°С в продължение на един час и при стайна температура в продължение на 2 часа. Реакционната смес се концентрира, разрежда с етилацетат, промива се с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (20 ml), 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат (20 ml), разтвор на натриев хлорид (20 ml), суши се (безводен магнезиев сулфат), филтрира се и се изпарява до сухо. Суровият продукт се адсорбира върху Celite® и се хроматографира върху силикагелна колона (2,5 х 10 cm), елуира се с 40% (1 л) етилацетат:хексан. Фракциите с желания продукт се обединяват и концентрират като се получава 246 mg чист продукт съгласно заглавието. ТСХ (етилацетат:хексан 8:2) , Rf = 0,53.

d)|4S-|4a(R‘),7a,9ap]J-OKTaxHApo-4-|(3-4HKAOxeKCHA-2меркапто-1-оксопропил)амино]-5-оксопироло|2,1-b] [ 1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част с) (245 mg, 0,54 ммола) в метанол (6 ml), се продухва с аргон в продължение на 30 минути, охладен до 0°С се обр аботва на капки с предварително продухан (аргон, 30 минути) разтвор на 1,0 N натриев хидроксид (5 ml) като барботирането на аргон се поддържа през време на прибавянето и по време на взаимодействието. Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 2 часа, подкислява се при 0°С с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат до pH 2 и след това се екстрахира с етилацетат (3 х 20 ml). Обединените органични екстракти се промиват с 50%-ен разтвор на натриев хлорид (20 ml), разтвор на натриев хлорид (20 ml), сушат се (безводен магнезиев сулфат), филтрират и

изпаряват до сухо. Остатъкът се пречиства чрез хроматография върху 2,5 х 10 cm силикагелна колона, която се елуира с 7:3 етилацетат:хексан (300 ml) и 1% оцетна киселина в 7:3 етилацетат:хептан (500 ml). Фракциите с желания продукт се концентрират, дестилират с метиленхлорид и сушат под вакуум като се получава 172 mg продукт съгласно заглавието като бяла пяна, [<x)d = -116,9° (с = 0,5, метанол).

ТСХ (1% оцетна киселина в етилацетат ) Rf = 0,35.

^Н-ЯМР: 400 MHz: CDCI3: δ 0,91 (m, 2Н), 1,22 (m, ЗН),

1,44 (m, 1Н), 1,55 (m, 1H), 1,68 (m,'s, 5H), 1,83 (m, 1H), 1,97 (m's,2H), 2,12 (m, 1H), 2,19-2,40 (m's, 3H), 2,53 (m, 1H), 2,96 (m, 1H), 3,38 (m's, 2H). 4,62 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 4,70 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 7,55 (d, 1H, J = 6,4 Hz).

¹³С-ЯМР: 100 MHz: CDCI3: δ 26,0, 26,1, 27,5, 31,5, 32,3, 33,0,

33,3, 35,2, 40,7, 43,0, 52,9, 60,6, 62,5, 170,9, 172,7, 175,3.

Анализ: Изчислено за С ιθΗ28Ν2θ4^2:

С 53,98 Н 7,05 N 6,99 S 16,01

Намерено С 53,97 Н 7,18 N 6,84 S 15,75.

ВЕТХ t_R = 16 мин (>99%, UV 217), YMC S-3 ODS (С-18)

6,0 х150 mm, 50% В:А - 100% В:А 25 минути линеен градиент (А = 90% вода/метанол +0,2 % фосфорна киселина, В = 90% метанол/вода +0,2% фосфорна киселина) скорост на изтичане

1,5 ml/мин.

ПРИМЕР 8 (4S-|4a(R*).7a,9aP j ]-октахидро-4- [(2-меркапто-1оксохексил) амино )-5-оксопироло[2,1 - b] [ 1,3)тиазепин7-карбоксилна киселина

а) (8)-2-бромхексанова киселина

Калиев бромид (15,9 д, 133 ммола) се прибавя към

разбъркван разтвор на D-норлевцин (5,0 д, 38 ммола) в 2,5 N сярна киселина (77 ml) при стайна температура. Реакционната смес се охлажда до -10°С и на части се прибавя твърд натриев нитрит (3,94 д, 57 ммола), като температурата се поддържа под -10°С и -5 °C. След като завърши прибавянето, разпенената реакционна смес се разбърква в продължение на 1 час и след това се затопля до стайна температура и се разбърква в продължение още на един час. Реакционната смес след това се екстрахира двукратно с етер, етерният екстракт се промива един път с вода, суши се (магнезиев сулфат), филтрира се и се изпарява като се получава 3,3 g суров продукт съгласно заглавието.

Ь) (8)-2-(ацетилтио)хексанова киселина, дициклохексиламино сол

Към разбърквана суспензия от калиев тиоацетат (2,11 д, 18,5 ммола) в 50 ml сух ацетонитрил при стайна температура под аргон се прибавя разтвор на продукта от част а) (3,27 д, 16,8 ммола) в 26 ml ацетонитрил. Реакционната смес се разбърква 5 часа. Получената суспензия се филтрира и изпарява. Остатъкът се разтваря повторно в етилов етер, промива се веднъж с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат и един път с разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се изпарява. Остатъкът се разтваря в етер (64 ml) и се обработва с дициклохексиламин (3,4 ml, 16,8 ммола). Етерният разтвор се концентрира под вакуум и се обработва с хексан като се получава бяло твърдо вещество, което се прекристализира из етилацетат/хексан, при което се получава продукт съгласно заглавието. Матерната луга се концентрира и прекристализира като се получава общ добив 2,2 g от продукта съгласно загла78

вието, т. на топене 145-147°С, [ajp = -33,8° (с = 1,08, хлороформ).

с) метилов естер на {4S-[4a(R*),7a,9aP]]-OKTaxHApo-4{[2- (ацетилтио)-1 -оксохексил] амино ]-5-оксопироло{2,1 -

b] [ 1,3 ]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Суспензия на дициклохексиламино солта на продукта от част Ь) (255 mg, 0,69 ммола, 1,05 екв.) в етилацетат (15 ml) се промива с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (3x5 ml) и разтвор на натриев хлорид (10 ml), суши се (безводен магнезиев сулфат), филтрира се, концентрира се, дестилира се с метиленхлорид (двукратно) и се суши под вакуум в продължение на един час като се получава свободната киселина като масло.

Това масло се разтваря в сух метиленхлорид (6 ml), охлажда се до 0°С (ледена баня) и се обработва с триетиламин (96 μΐ, 0,69 ммола,1,05 екв.), след това се прибавя метилов естер на (4S-(4a,7a,9aP) ]-4-амино-октахидро-5-оксопироло[2,1 -

b)[ 1,3)тиазепин-7-карбоксилна киселина р-толуенсулфонатна сол (получен както е описано в пример 7 а), 275 mg, 0,66 ммола), триетиламин (92 μΐ, 0,66 ммола) и накрая бензотриазол-1илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (305 mg, 0,69 ммола). Полученият разтвор се разбърква при 0°С в продължение на един час и след това при стайна темпрература в продължение на 2 часа. Реакционната смес се концентрира, разрежда се с етилацетат, промива се с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (20 ml), 50%-ен разтвор на натриев бикарбонат (20 ml), разтвор на натриев хлорид (20 ml), суши се (безводен магнезиев сулфат), филтрира и изпарява до сухо. Суровият продукт се адсорбира върху Celite® и се хроматографира върху

силикагелна колона (2,5 х 10 cm), елуира се с 40% (1 л) етилацетат/хексан. Фракциите с желания продукт се обединяват и концентрират като се получава 258 mg чист продукт съгласно заглавието. ТСХ (етилацетат:хексан 8:2) Rf = 0,54.

d) (4S- (4a(R*) ,7а,9аР( ]-октахидро-4 - [(2-меркапто-1 оксохексил)амино]-5-оксопироло[2,1 -b] [ 1,3 ]тиазепин7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част с) (255 mg, 0,54 ммола) в метанол (5 ml), продухан с аргон в продължение на 30 минути, охладен до 0°С се обработва на капки с предварително продухан (аргон, 30 минути) разтвор от 0,1 N натриев хидроксид (5 ml) като барботирането на аргон се поддържа през време на прибавянето и по време на реакцията. Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 2 часа, подкислява се при 0°С с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат до pH 2 и след това се екстрахира с етилацетат (3 х 20 ml). Обединените органични екстракти се промиват с 50%-ен разтвор на натриев хлорид (20 ml) и разтвор на натриев хлорид (20 ml), сушат се (безводен магнезиев сулфат), филтрират се и се изпаряват до сухо. Остатъкът се пречиства чрез хроматография върху 2,5 х 10 cm силикагелна колона като се елуира с 7:3 етилацетат:хептан (300 ml) и 1% оцетна киселина в 7:3 етилацетат: хептан (500 ml). Желаните фракции се концентрират, дестилират се с метиленхлорид и се сушат под вакуум като се получава 170 mg продукт съгласно заглавието като бяла пяна, [ajp = -135,1°С (с = 0,5, метанол). ТСХ (1% оцетна киселина в етилацетат) Rf = 0,32.

^Н-ЯМР: 400 :MHz CDCI3: δ 0,89 (t,3H, J = 7 Hz), 1,32 (m, 4H), 1,73 (m, 1H), 1,96 (m, 2H), 2,00 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 2,11

(m, 1H), 2,32 (m's, 3H), 2,52 (m. 1H), 2,98 (m, 1H), 3,32 (in’s, 2H), 4,61 ( t,lH,J = 7,1 Hz), 4,72 (m,lH), 5,25 (m, 1H), 7,63 (d, 1H, J =

6.4 Hz).

¹³С-ЯМР: 100 MHz: CDC1₃ δ 13,8, 22,2, 27,6, 29,2, 31,4, 32,6, 33,1, 35,3, 43,0, 52,8, 60,5, 62,42, 170,7, 172,5, 174,0.

Анализ: Изчислено за Сj5H24O4N4S2O . 0,08 Н2О:

С 49,79 Н 6,73 N 7,74 S 17,72 Намерено С 49,90 Н 6,92 N 7,63 S 17,57. ВЕТХ t_R = 9,4 мин (>99%, UV 220), YMC S-3 CDS (С-18) 6,0 х150 mm, 50% В:А - 100% В:А 25 минути линеен градиент (А = 90% вода/метанол +0,2 % фосфорна киселина, В = 90% метанол/вода +0,2% фосфорна киселина) скорост на изтичане

1.5 ml/мин.

ПРИМЕР 9 |4S-[4a(R*),7a,9ap]J-OKTaxHApo-4-((2-MepKanTO-lоксо-4-метилпентил)амино )-5-оксопироло[2,1 - b] (1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина

а) (8)-2-бромо-4-метилпентанова киселина

Калиев бромид (9,5 д, 80 ммола) се прибавя към разбъркван разтвор на D-левцин (3,0 д, 23 ммола) в 2,5 N сярна киселина (47 ml) при стайна температура. Реакционната смес се охлажда до -10°С и се прибавя твърд натриев нитрит (2,4 д, 34 ммола) на порции, като температурата се поддържа между -10°С и -5° С. След като завърши прибавянето, реакционната смес се разбърква в продължение на 1 час и след това се затопля до стайна температура и се разбърква още един час. Реакционната смес след това се екстрахира двукратно с етер, етерните екстракти се промиват един път с вода, сущат се (магнезиев сулфат), филтрират и изпаряват като се получава

2,7 g суров продукт съгласно заглавието.

b) (5)-2-(ацетилтио)-4-метилпентанова киселина дициклохексиламино сол

Към разбърквана суспензия от калиев тиоацетат (1,7 g 15,0 ммола) в 50 ml сух ацетонитрил при стайна температура под аргон се прибавя разтвор на продукта от част а) (2,6 д, 13 ммола) в 17 ml ацетонитрил. Реакционната смес се разбърква 4 часа. Получената суспензия се филтрира и изпарява. Остатъкът се разтваря повторно в етилов етер, промива се един път с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат и един път с разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се изпарява. Остатъкът се разтваря в етер (64 ml) и се обработва с дициклохексиламин (2,7 ml, 14 ммола). От разтвора веднага започва да се утаява бяло твърдо вещество. Разтворът се филтрира и бялото твърдо вещество се събира като се получава 2,0 g продукт съгласно заглавието, т. на топене 153-158°С [а]£> = -54,5° (с = 0,61, хлороформ).

c) метилов естер на (4S-(4a(R*) ,7a,9ap ] )-октахидро-4(|2-(ацетилтио)- 1-оксо-4-метилпентил]амино]-5-оксопироло{2,1-

b][ 1,3)тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разбърквана суспензия от дициклохексиламино сол на продукта от част Ь) (234 mg, 0,63 ммола) в етилацетат (15 ml) се промива с 5%-ен воден разтвор на калиев бисулфат (3x5 ml). Органичният екстракт се суши (безводен магнезиев сулфат).филтрира и изпарява двукратно из хексан. Полученото масло се разтваря в метиленхлорид (6 ml) и се разбърква под азот при 0°С. Към този разтвор се прибавя триетиламин (88 μΐ, 0,63 ммола), след това метилов естер на|45-(4а,7а,9аР)]-4-аминооктахидро-5-оксопироло[2,1 - b ] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна

киселина р-толуенсулфонатна сол [получен както е описано в пример 7а), 249 mg, 0,6 ммола], допълнително количество триетиламин (84 μΐ, 0,60 ммола) и след 10 минути бензотриазол-

1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (279 mg, 0,63 ммола). След един час реакционната смес се затопля до стайна температура и се разбърква два часа. Полученият безцветен разтвор се изпарява при по-малко от 30°С и маслообразният остатък се разтваря повторно в етилацетат. Разтворът се промива един път с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат, един път с наситен разтвор на натриев бикарбонат и един път с разтвор на натриев хлорид. Органичният слой се суши (магнезиев сулфат), филтрира и изпарява върху 5 g силикагел. Пречистването с помощта на флаш хроматография (2,5 х 15 cm колона, елуирана с 1:1 етилацетат/хексан дава 203 mg продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, т. на топене 101-103°С. [а]р = -157,5° (с = 1,04 .хлороформ), ТСХ (етилацетат:хексан, 1:1) Rf = 0,19.

d) [4S- [4a(R*) ,7α,9ββ] ]-октахидро-4 - [(2-меркапто-1оксо-4-метилпентил) амино]-5-оксопироло[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част с) (184 mg, 0,44 ммола) в 5 ml метанол се продухва с азот в продължение на 10 минути и се охлажда до 0°С. Към този разтвор се прибавя на капки 5 ml продухан с азот 1М разтвор на натриев хидроксид. Азотът барботира бавно през разтвора по време на реакцията. След 2 часа реакционната смес се подкислява с 2 ml 6М солна киселина, екстрахира се двукратно с етилацетат и екстрактите се обединяват, сушат (магнезиев сулфат) и изпаряват. Повторното изпаряване из хексан и обработване на остатъка

в метанол/вода дава 132 mg продукт съгласно заглавието като кристално твърдо вещество, т. на топене 94-96°С, [а]р = -158,6° (с = 0,42, метанол). ТСХ (етилацетат:хексан:оцетна киселина, 4:4:0,1 ) Rf = 0,13.

Анализ: Изчислено за С j 5Н24 Ν2^2θ4· 0,75 Н2О:

С 48,17 Н 6,87 N 7,49 S 17,15

Намерено: С 48,33 Н 6,51 N 7,37 S 16,82.

ВЕТХ t_R = 17,6 мин (>99,2%, UV 217), YMC S-3 ODS (С-18)

6,0 х150 mm, 0% - 100% В:А 25 минути линеен градиент и 15 мин задържане, 1,5 mL/мин , А = 90% вода/метанол +0,2 % фосфорна киселина, В = 90% метанол/вода +0,2% фосфорна киселина,220 nm.

ПРИМЕР 10 [4S- [4a(R*) ,7а, 1 Оар )]-октахидро-4- [ (2-меркапто-1 -оксо3-фенилпропил) амино]-5-оксо[ 1,4 )оксазино(3,4-Ь] [ 1,3]оксазепин7-карбоксилна киселина

а) 2-пропенилов естер на 2,2,2-трихлороацетимидо киселина

Суспензия от 80% натриев хидрид (945 mg, 31,5 ммола промит двукратно с 25 ml хексан) в сух етер (30 ml) се обработва на капки с разтвор на 2-пропен-1-ол (21,4 mi, 18,3 g, 315 ммола) в сух етер (45 ml) разбъркван 20 минути при стайна температура под аргон и след това охладен до 0°С (баня лед-сол). За период от 15 минути се прибавя трихлороацетонитрил (30 ml или 42,3 д, 0,30 мола) и кафеникавият разтвор се разбърква при 0°С в продължение на 40 минути, при 10°С в продължение на 10 минути и при стайна температура в продължение на 10 минути. Реакционната смес се концентрира до сироп, обработва се с разтвор на метанол (1,2 ml) в пентан (30 ml) и се разбърква енергично в продължение на 5,0 минути. Леко кафявата утайка се филтрира, промива се с пентан (2 х 30 ml) и обединените филтрати се концентрират до леко кафява течност. Течността се разтваря в пентан (30 ml), разбърква се в продължение на няколко минути и получената суспензия се филтрира, а получената утайка се промива с пентан (30 ml), като процедурата се повтаря най-малко още един път. Бистрият филтрат се концентрира и суши под вакуум като се получава 54,0 g съединение съгласно заглавието като леко червено оцветена течност. Продуктът се съхранява като разтвор в хексан при 10°С.

Ь) Метилов естер на М-фталоил-Б-серин

Суспензия на метилов естер на L- серии хидрохлорид (25 д, 161 ммола) въвъ вода (350 ml) се разрежда с диоксан (250 ml) и полученият бистър разтвор се обработва с твърд натриев карбонат (17 д, 1,0 екв.) и след това с N-карбетоксифталимид (37 д, 1,05 екв.). Реакционната смес се разбърква при стайна температура в продължение на 2,5 часа под аргон. Сместа се екстрахира с етилацетат (3 х 500 ml) и обединените органични екстракти се промиват последователно с 5%-ен разтвор на натриев бикарбонат (250 ml), 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (250ml) и разтвор на натриев хлорид (250 ml), сушат се (безводен натриев сулфат), филтрират се, изпаряват се до сухо и се сушат под вакуум. Получената смес се хроматографира върху силикагелна колона ( Merck), колоната се елуира със смес етилацетат:хексан (1:3, 1:2) и желаните фракции се обединяват, изпаряват до сухо и сушат под вакуум като се получава 31 g съединение съгласно заглавието като гъст сироп. ТСХ (етилацетат:хексан 1:1) Rf = 0,52.

c) метилов естер на N-фталоил-О-(2-пропенил) - L-серин Разтвор на продукта от част b) (7,37 д, 29,5 ммола) сух мутиленхлорид (30 ml) се обработва с разтвор на продукта от част а) (11,97 д, 59,1 ммола, 2 екв.) в циклохексан (60 ml) и след това с трифлуорометансулфонова киселина (0,37 ml) и реакционната смес се разбърква при стайна температура в продължение на 20 часа под аргон. Утайката се филтрира, промива се с минимално количество метиленхлорид и обединените филтрати се промиват с 5%-ен разтвор на натриев бикарбонат (30 ml) и вода (30 ml), сушат се (безводен натриев сулфат), филтрират се, изпаряват се до сухо и се сушат под вакуум. Суровият продукт-смес се хроматографира върху силикагелна колона (Merck), колоната се елуира с етилацетат:хексан (1:9). Желаните фракции се обединяват, изпаряват се до сухо и се сушат под вакуум като се получава

7,56 g съединение съгласно заглавието като бистър гъст сироп. ТСХ (етилацетат:хексан 1:1) Rf = 0,70.

d) метилов естер на Г4-фталоил-0-(ацеталдехид)-1.серин

Разтвор на продукта от част с) (2,5 д, 8,64 ммола) в смес от сух метиленхлорид (46,4 ml) и метанол (4,6 ml) се охлажда до -78°С (баня сух лед - ацетон) и се обработва с озон докато се задържи син цвят (около 15 минути) Сместа след това се продухва с азот в продължение на 10 минути (докато се появи син цвят).обработва се с диметилсулфид (14,0 ml 0,19 ммола,

22,1 екв.), затопля се до стайна температура и се разбърква в продължение на 2,5 часа под азот. Реакционната смес се изпарява до сухо и полученият сироп се разтваря повторно в етилацетат (50 ml), промива се с вода (15 ml) и разтвор на

натриев хлорид 15 ml), суши се (безводен магнезиев сулфат), филтрира, изпарява до сухо и суши под вакуум.

Суровият продукт се хроматографира върху силикагелна колона (Merck), колоната се елуира със смес етилацетат: хексан (1:9, 1:4, 1:2 ) като се получава 1,54 g продукт съгласно заглавието. ТСХ (етилацетат-.хексан 1:1) Rf =0,33.

е) метилов естер на М-фталоил-0-(2,2-диметоксиетил)L-серин

Разтвор на продукта от част d) (1,54 g, 5,29 ммола) в смес от сух метиленхлорид (8,3 ml) и сух метанол (8,3 ml) се обработва с триметилортоформиат (0,84 ml,7,68 ммола, 1,45 екв.) и р-толуенсулфонова киселина монохидрат (92 mg). Реакционната смес се разбърква при стайна температура под аргон в продължение на 2,5 часа, след това се разпределя между етилацетат (50 ml) и наситен разтвор на натриев бикарбонат (15 ml). Органичната фаза се промива с вода (15 ml) и разтвор на натриев хлорид (15 ml), суши се (безводен натриев сулфат), филтрира се, изпарява се до сухо и се суши под вакуум. Суровият продукт се хроматографира върху силикагелна колона (Merck), колоната се елуира с етилацетат:хексан (1:4) като се получава 1,35 g продукт съгласно заглавието като гъст бистър сироп. ТСХ (етилацетат:хексан 1:1) Rf = 0,58.

f) метилов естер на 0-(2,2-диметоксиетил)-1.-серин Разтвор на продукта от част е) (2,0 д, 5,93 ммола) в сух метанол (14 ml) се обработва с хидразин хидрат (0,30 ml, 6,1 ммола) и се разбърква при стайна температура в продължение на 4 дни под аргон. Получената суспензия се филтрира, утайкато се промива с метанол (2 х 14 ml) и филтратът се концентрира до сухо. Сиропът се разтваря повторно в метиленхлорид и се филтрира повече от два пъти докато повече утайка не се образува. Бистрият филтрат се концентрира като се получава 1,17 g продукт съгласно заглавието като бледо жълт сироп. ТСХ (метиленхлорид:метанол 9:1) Rf = 0,54.

g) N- ((фенилметокси)карбонил]-0- [(1,1 -диметилетил) дим етил силил J-L-хомосерин

Разтвор на N-[(фенилметокси)карбонил]-Б-хомосерин (получен както е описано в пример 6а), 3,0 д, 11,85 ммола) в сух диметилформамид (65 ml) се обработва с ((1,1-диметилетил)диметилсилилхлорид (10,72 д, 71,1 ммола) и имидазол (9,65 д, 0,14 мола) и се разбърква при стайна температура под аргон в продължение на 24 часа. Реакционната смес се разрежда с метанол (207 ml), разбърква се в продължение на още 24 часа при стайна температура и след това се концентрира до сироп. Полученият сироп се разтваря в етилацетат (200 ml), промива се с 10% лимонена киселина (2 х 75 ml) и разтвор на натриев хлорид, суши се (безводен натриев сулфат), филтрира се, изпарява се до сухо и се суши под вакуум. Суровият продуктсмес се хроматографира на силикагелна колона (Merck), колоната се елуира с етилацетат:оцетна киселина (99,5:0,5). Желаните фракции се обединяват, концентрират и изпаряват наколко пъти из толуен като се получава 3,56 g съединение съгласно заглавието като восъкообразно твърдо вещество.

ТСХ (етилацетат:оцетна киселина, 95:5) Rf = 0,82.

h) метилов естер на М-(О-{(1,1-диметилетил)диметилсилил]-М-[(фенилметокси)карбонил)-Б-хомосерил]-0-(2,2диметоксиетил)-L-серин

Разтвор на продукта от част д) (2,18 д, 5,93 ммола) в сух метиленхлорид се охлажда до 0°С (баня лед-сол) и се

обработва последователно с разтвор на продукта от част f) (1,71 g, 5,65 ммола) в сух метиленхлорид (5 ml), триетиламин (0,78 ml, 5,65 ммола) и бензотриазол-1 -илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (2,63 д, 6,0 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 30 минути и при стайна температура в продължение на един час и 45 минути. Реакционната смес се разпределя между етилов етер (2 х 100 ml) и вода (30 ml) и обединените органични екстракти се промиват с 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат (20 ml) и разтвор на натриев хлорид (25 ml), сушат се (безводен натриев сулфат), филтрират, изпаряват до сухо и сушат под вакуум. Суровият продукт-смес се хроматографира на силикагелна колона(Мегск), колоната се елуира със смес етилацетат:хексан (1:4, 1:3, 1:1) като се получава 2,38 g продукт съгласно заглавието. ТСХ (етилацетат:хексан 1:1) Rf = 0,40.

1)метилов естер на [4S-(4a,7a, ΙΟββ) ]-октахидро-4[ |(фенилметокси)-карбонил)амино J-5-okco[ 1,4)оксазино[3,4-

b] [ 1,3]окс аз е пин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част h) (1,0 g, 1,8 ммола) в сух метиленхлорид (50 ml) се обработва с Amberlyst® 15 йонообменна смола( кисела форма) и метанол (0,1 ml) и получената смес се разбърква при стайна температура под аргон в продължение на три дни. Смолата се филтрира, промива с малко количество метиленхлорид и филтратът се концентрира до сироп. Суровата смес се хроматографира на силикагелна колона, колоната се елуира с етилацетат:хексан (1:1) като се получава 399 mg продукт съгласно заглавието. ТСХ (етилацетат:хексан 3:1) Rf = 0,53.

j) метилов естер на [48-(4а,7а,10ар)]-октахидро-489 амино-5-оксо(1,4]оксазино[3,4-Ь](1,3)оксазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта получен както е описано в част i) (771 mg, 2,04 ммола) в сух метанол (25 ml) се обработва с катализатор 10% паладий върху въглен (125 тд)и се хидрира (бутилка) при стайна температура в продължение на 16 часа. Реакционната смес се филтрира през Celite® подложка и подложката се промива с метанол (2 х 25 ml). Бистрият филтрат се изпарява до сухо и се суши под вакуум като се получава 448 mg продукт съгласно заглавието като сироп. ТСХ (метиленхлорид:метанол 9:1) Rf = 0,22.

к)метилов естер на {4S-[4a(R*),7a,10aP)J-OKTaxHApo-4[ |2-(ацетилтио)- 1-оксо-3-фенилпропил]амино]-5-оксо( 1,4)оксазино[3,4-Ь][1,3|оксазепин-7-карбоксилна киселина

Дициклохексиламино сол на (3)-2-(ацетилтио)бензенпропанова киселина (813 mg, 2,01 ммола) сеп суспендира в етилацетат (70 ml), промива се с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (5 х 9,3 ml) и разтвор на натриеви хлорид (9,3 ml), суши се (безводен магнезиев сулфат), филтрира се, изпарява се до сухо и се суши под вакуум. Свободната киселина се разтваря в сух метиленхлорид (12 ml), охлажда се до 0°С ( баня лед-сол) и се обработва последователно с разтвор на продукта от част j) (448 mg, 1,84 ммола) в сух метиленхлорид (4,0 ml), триетиламин (0,25 ml), 1,80 ммола) и бензотриазол- 1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (823 mg, 1,86 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на един час и при стайна температура в продължение на 2 часа под аргон. Реакционната смес се дестилира до сухо и полученият сироп се разтваря повторно в етилацетат (60 ml), промива се с 0,5 N солна кисе90

лина (2 х 11 ml), вода (11 ml) и разтвор на натриев хлорид (11 ml), суши се (безводен натриев сулфат), филтрира, изпарява до сухо и суши под вакуум. Суровият продукт-смес се хроматографира двукратно върху силикагелна колона (Merck), колоната се елуира със смес етилацетат:хексан (1:1, 1:2) като се получава 665 mg продукт съгласно заглавието като сироп. ТСХ (етилацетат:хексан 3:1) Rf = 0,30.

1) (4S-[4<x(R*),7a, 1 Οββ ] ]-октахидро-4 - ((2-меркапто- 1-оксо3-фенилпр опил) амино]-5-оксо] 1,4 ]оксазино[3,4-ЬЦ 1,3]оксазепин7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част к) (650 mg, 1,44 ммола) в метанол (13 ml) се продухва с аргон в продължение на 30 минути, охлажда се под 0°С (баня лед-сол) и се обработва на капки с разтвор на 1,0 N натриев хидроксид (5,84 ml, предварително продухан с аргон в продължение на 30 минути), като барботирането на аргон продължава през време на прибавянето и по време на реакцията. Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 5,0 часа и реакцията се прекъсва при 0°С с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (25,4 ml). Сместа се затопля до стайна температура, екстрахира се с етилацетат (3 х 50 ml) и обединените органични екстракти се промиват с разтвор на натриев хлорид (15 ml), сушат се (безводен натриев сулфат), филтрират, изпаряват до сухо и сушат под вакуум. Суровият продукт се обработва с хексан:метиленхлорид (130:7) и полученият твърд продукт се хроматографира върху силикагелна колона (Merck), колоната се елуира със смес етилацетат:хексан (1:2, 1:1) и след това с метиленхлорид:метанол:оцетна киселина (100:4:0,2). Желаните фракции се обединяват, изпаряват до сухо няколко пъти из толуен като се получава 364 mg от продукта съгласно заглавието, който се суши под вакуум в продължение на 9,0 часа. Полученият продукт след това се обработва с метиленхлорид:хексан (1:10), хексан (50 ml) и пентан (2 х 50 ml), първите 50 ml се разбъркват в продължение на 4 часа, а следващите 50 ml от пентана една нощ под аргон. Разтворителят

се декантира и твърдият продукт се суши под вакуум в продължение на 6,0 часа като се получава чист продукт съгласно заглавието под форма на твърда аморфна пяна, [а] = -49,1° (с = 0,48, метанол). ТСХ (толуен:оцетна киселина 5:1), Rf = 0,17. Анализ: Изчислено за Сj8^22^2^6^- θ,56 Н2О:

С 53,45 Н 5,76 N 6,93 S 7,92

Намерено С 53,45 Н 5,53 N 6,75 S 7,48.

ВЕТХ t_R = 10,45 мин (>98,3%,), YMS S-3 ODS (С-18)

6,0 х150 mm, 44% (10%вода - 90% метанол - 0,2 % фосфорна киселина)/56% (90% вода - 10% метанол - 0,2% фосфорна киселина), изократно, 1,5 ml/мин.

ПРИМЕР 11

[4S-[4a(R*),7a, Юар[]-октахидро-4-((2-меркапто)-1-оксо3-фенилпропил)амино]-5-оксо-7Н-пиридо[2,1 - b] (1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

Продуктът от пример 3 може да се получи и както следва:

a) N- [(фенилметокси)карбонил]-О- [(1,1 -диметилетил)диметилсилил]-Е-хомосерин ((1,1-диметилетил)диметилсилил)хлорид (37,5 д, 249 ммола) се прибавят към разтвор на Ь1-[(-фенилметокси)карбонил]-Е-хомосерин [получен както е описано в пример 6а),

41,56 ммола[ в диметилформамид (125 ml) и след това имидазол (33,95 д, 498 ммола). Полученият лекожълт разтвор се разбърква

при стайна температура в продължение на 22 часа. Прибавя се метанол (500 ml), реакционната смес се разбърква в продължение още на 6 часа и след това метанолът и по-голямата част от диметилформамида се отстранява под вакуум. Полрученият остатък се разбърква с етилацетат (800 ml), промива се с 10% лимонена киселина (2 х 300 ml) и обединените водни фази се екстрахират с етилацетат (300 ml). Обединените етилацетатни фази се промиват с вода и разтвор на натриев хлорид, сушат се (натриев сулфат), концентрират се и остатъкът се изпарява с хексан като се образува бял прах. Този прах се суши под вакуум като се получава 12,942 g продукт съгласно заглавието.

Ь) метилов естер на [S-(R*,R*) J-2-[ [4-([(1,1-диметилетил)диметилсилил]окси) - l-OKco-2- [ [(фенилметокси) карбонил|амино]бутил]амино]-6,6-диметоксихексанова киселина

Към разтвор на продукта от част а) (22,78 д, 61,97 ммола) в метиленхлорид (100 ml) охладен при 0°С се прибавя N-метилморфолин (6,81 ml, 61,97 ммола) и след това хидроксибензотриазол (8,37 д,61,97 ммола), метилов естер на (5)-2-амино-6,6-диметоксихексанова киселина {получена както е описано в пример 1е), 10,6 д, 51,64 ммола) в метиленхлорид (50 ml) и след това 1-етил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (11,88 д, 61,97 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на един час, след това при стайна температура една нощ. Реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се разрежда с етилацетат (600 ml), промива се с 5%ен разтвор на калиев бисулфат (200 ml), 0,5 N натриев хидроксид (200 ml), вода и разтвор на натриев хлорид и се суши (натриев сулфат). Филтратът се концентрира и остатъкът се разбърква с етилов етер (150 ml). Получената суспензия се

филтрира и събраният твърд продукт се промива изчерпателно с етилов етер. Филтратът се концентрира под вакуум до сухо като се получава 30 g суров продукт съгласно заглавието като маслообразно съединение, което може да се използва в следващия етап без пречистване. ТСХ (8:2 етилацетат:хексан) Rf = 0,55.

с) метилов естер на )S-(R*,R*) ]-2-[ [4-хидрокси- 1-оксо-2)[ (фенилметокси) карбонил ]амино]бутил] амино )-6,6диметоксихексанова киселина

Към разтвор на продукта от част Ь) (30 д) в метанол (150 ml) охладен при 0°С се прибавя пара-толуенсулфонова киселина монохидрат (1,96 д). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 2 часа преди реакцията да се прекъсне с воден разтвор на натриев бикарбонат (1,3 g натриев бикарбонат в 100 ml вода). Сместа се концентрира под вакуум и остатъкът се разпределя между етилацетат (400 ml) и вода (150 ml). Отделената водна фаза се екстрахира с етилацетат (2 х 150 ml). Обединените етилацетатни слоеве се промиват с 10%-ен разтвор на натриев бикарбонат, разтвор на натриев хлорид (2 пъти), сушат се (натриев сулфат), филтрират и изпаряват до сухо. Остатъкът се подлага на флаш хроматография върху 10 х 25 cm силикагелна колона като се елуира с 80% етилацетат в хексан ( 5 л), етилацетат (3 л) и 2% метанол в етилацетат (5 л). Желаните фракции се обединяват и концентрират и сушат под вакуум като се получава 17,45 g продукт съгласно заглавието като бледожълто масло. ТСХ (8:2 етилацетат:хексан) Rf = 0,17.

d) метилов естер на [S-(R*,R*)]-2-)[4[(метансулфонил)окси)- 1-оксо-2- (((фенилметокси)кар94

бонил]амино]бутил]амино]-6,6-диметоксихексанова киселина

Към разтвор на продукта от част с) (17,40 д, 39,50 ммола) (дестилиран с толуен три пъти и сушен под вакуум една нощ) в сух метиленхлорид (250 ml) охладен при -15°С (лед/ацетон) се прибавя триетиламин (8,26 ml, 59,28 ммола, прясно дестилиран) и след това метансулфонилхлорид (3,67 ml,

47,4 ммола) на капки. Реакционната смес се разбърква при -15°С в продължение на 30 минути, след което реакцията се прекъсва с наситен разтвор на амониев хлорид (100 ml). След разбъркване в продължение на 5 минути, сместа се разрежда с етилацетат (600 ml) и се промива с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат, разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат), филтрира и изпарява до сухо.Остътъкът се суши под вакуум като се получава 20,40 g съединение съгласно заглавието като жълтеникаво масло, което

се използва в следващата реакция без пречистване. ТСХ (8:2 етилацетат:хексан) Rf — 0,35.

е) метилов естер на [S-(R*,R*) ]-2-Ц4-(ацетилтио)- 1-оксо-

2-[ [^eHHAMeTOKCHjKapeoHHAjaMHHojeyTHAjaMHHoj-e.eAHMeTOKCHxeKcaHOBa киселина

Към разтвор на тиооцетна киселина (5,09 ml, 71,10 ммола) в метанол (100 ml) сеприбавя цезиев карбонат (10,81 д, 33,18 ммола). Полученият разтвор се концентрира под вакуум. Твърдият продукт се обработва със сух ацетон (3 пъти) и след това се суши под вакуум над фосфорен пентоксид една нощ като се получава цезиев тиоацетат.

Разтвор на прод.кта от част d) (20,40 g, 39,50 ммола) в сух диметилформамид (150 ml) се прибавя посредством канюла към суспензия на цезиев тиоацетат (10,576 д, 50,85 ммола) в диметилформамид (50 ml). Полученият жълт разтвор се раз95

бърква под аргон при стайна температура една нощ, след това се концентрира под висок вакуум за отстраняване на по-голямата част от диметилформамида. Остатъкът се разбърква с етилацетат (1 л) и се промива с 10%-ен разтвор на натриев бикарбонат (200 ml), вода (4 х 200 ml), разтвор на натриев хлорид (400 ml) и се суши (натриев сулфат). Филтратът се концентрира и остатъкът се изпарява с толуен (3 пъти), след това се суши под вакуум като се получава 20 g съединение съгласно заглавието като леко жълто твърдо вещество, което се използва за следващата реакция без пречистване. ТСХ (8:2 етилацетат:хексан)

Rf = 0,47.

f) метилов естер на ]S-(R*,R*) ]-2-Ц4-меркапто-1-оксо-2- [ [ (фенилметокс и) карбонил] амино ]бу тил] амино ]-6,6диметоксихексанова киселина

Разтвор на продукта от част е)(20 д, 39,50 ммола) в метанол (250 ml) охладен при 0°С се продухва с аргон в продължение на 15 минути. При непрекъснато продухване с аргон, на капки се прибавя 25% (тегло/тегло, плътност = 0,945 ) разтвор на натриев метоксид в метанол (9,17 ml, 40 ммола). След разбъркване в продължение на 5 минути, реакцията се прекъсва с наситен разтвор на амониев хлорид (200 ml) и сместа се разпределя между етилацетат (1 л) и вода (200 ml). Водната фаза се екстрахира с етилацетат (200 ml). Обединените етилацетатни екстракти се промиват с наситен разтвор на амониев хлорид (400 ml), разтвор на натриев хлорид (400 ml), суши се (натриев сулфат), филтрира и канцентрира под вакуум като се получава 17,5 g продукт съгласно заглавието като жълто масло, което се използва в следващата реакция без пречистване. ТСХ (8:2 етилацетат:хексан) Rf = 0,45.

g) метилов естер на [4S-(4α,7α, 1 Οββ) ]-октахидро-4[ [ (фенилметокси) -карбонил ] амино ]-5-оксо-7 Н-пиридо [2,1-Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Към разтвор на продукта от част f) (17,5 g, 38,3 ммола) в метиленхлорид (600 ml) се прибавя Amberlyst ® йонообменна смола (6 д, предварително обработена с 6N солна киселина, вода, тетрахидрофуран и метиленхлорид и изсушена). Суспензията се разбърква под аргон при стайна температура в продължение на 18 часа и се филтрира.филтратът се концентрира и остатъкът се адсорбира върху Celite®, пречиства се на 10 х 30 cm силикагелна колона като се елуира с 20-30% етилацетат в хексан. Желаните фракции се обединяват и изпаряват под вакуум до сухо като се получава 9,18 g продукт съгласно заглавието като жълто масло.

ТСХ (1:1 етилацетат:хексан), Rf = 0,32.

h) метилов естер на [45-(4α,7α,1θΒβ)]-οκτ3ΧΗΑρο-4- амино-5-оксо-7 Н-пиридо (2,1-Ь] [ 1,3]-тиазепин-7-карбоксилна

киселина

Към разтвор на разтвора на продукта от част д) (9,1 д, 23,19 ммола,изпарен с толуен три пъти и сушен под вакуум една нощ) в сух метиленхлорид (150 ml) се прибавя йодотриметилсилан (4,95 ml, 34,78 ммола) на капки. Полученият жълт разтвор се разбърква под аргон при стайна температура в продължение на 1,5 часа, след това реакцията се спира с 0,4 N солна киселина в метанол/диоксан (120 ml). Леките фракции се отстраняват под вакуум и остатъкът се разпределя между етер (500 ml) и вода (700 ml). Органичната фаза се екстрахира с 0,1 N солна киселина (150 ml) и обединените кисели водни екстракти се събират при 0°С, алкализират се с 0,1 N натриев хидроксид до pH 10,5 (измерено с pH-метър), след това се екстрахират с метиленхлорид (4 х 400 ml). Обединените органични екстракти се промиват с разтвор на натриев хлорид , сушат се (натриев сулфат), филтрират се и се концентрират като се получава 6,45 g продукт съгласно заглавието като жълто масло, което се използва в следващия реакционен стадий без

по-нататъшно пречистване.

ТСХ (1:9метанол:метиленхлорид), Rf = 0,20.

i) J4S-[4a(R‘) ,7<х, 10а₽] )-октахидро-4- [(2-меркапто-1оксо-3-фенилпропил)амино )-5-оксо-7Н-пиридо[2,1-b] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Охладен (0°С) разтвор на (8)-2-(ацетилтио)бензенпропанова киселина и триетиламин в метиленхлорид се обработва с разтвор на продукта от част h) в метиленхлорид и след това с бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат. Реакционната смес се преработва съгласно процедурата описано в пример 3 с) като се получава метилов естер на [48-[4а(Р*),7<х,10арП-октахидро-4-Ц2(ацетилтио) -1 - оксо-3-фенилпропил]амино)-5-оксо-7Н-пиридо[2,1 ЬЦ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина.

Разтвор на този метилов естер в деокислен метанол се обработва с 1N натриев хидроксид съгласно процедурата от пример 3 d) като се получава продукт съгласно заглавието.

ПРИМЕР 12 [48-(4а(Р*),7а,10аРП-октахидро-4-[[2-(меркаптометил)1-оксо-3-фенилпропил]амино)-5-оксо-7Н-пиридо(2,1-ЬЦ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

а) (8)-2-((ацетилтио)метил]бензен-пропанова киселина ефедринова сол

Разтвор на (1 R,2S)-(-)-ефедрин (17,3 g, 105 ммола) в диетилов етер (175 ml) се прибавя на една порция към разтвор на 2-[(ацетилтио)метил]бензенпропанова киселина (50,0 д, 210 ммола) в диетилов етер (175 ml). След престояване при стайна температура в продължение на 16 часа, кристализиралата сол на ефедрин се събира чрез филтриране (19,7 д), т. на топене 114-125°С , [а]р — -40,6° (с =1, метанол). Допълнително количество твърдо вещество [8,9 д, т. на тапене 121-126°С [а]р> ⁼ *47,2° (с = 1, метанол)[се събира от филтрата след престояване при стайна температура в продължение на 20 часа. Количествата твърд продукт се обединяват и се прекристали зират из ацетонитрил (1500 ml). След престояване 16 часа при стайна температура, се събира 20,8 g твърд продукт, т. на топене 125-130°С, [a]p = -48,9° (с = 1,метанол). Този продукт се прекристализира по същия начин из ацетонитрил (300 ml) като се получава 18,7 д, т. на топене 128-130°С, [a[р = -48,9° (с = 1, метанол). Трета прекристализация из ацетонитрил (225 ml) дава 17,4 g твърда (8)-2-[(ацетилтио)метил]бензенпропанова киселина ефедринова сол, т. на топене 128-129°С , [а]о= -50,1° (с = 1,метанол).

Анализ: Изчислено за Ci2^H14°3^s ^с 10^H15^NO:

С 65,48

Н 7,24

N 3,47

S 7,95

Намерено: С 65,46

Н 7,34

N 3,21

S 8,00.

b) метилов естер на [4S- [4a(R*) ,7a, 10аβ] ]-октахидро-4 [ [2- [ (ацетил-тио)метил]- 1 -оксо-3-фенилпропил]амино]-5-оксо -7Н пиридо[2,1-Ь] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разбърквана суспензия на ефедринова сол от част а) (333,1 mg, 0,822 ммола) в етилацетат (5 ml) се промива три пъти с 5 ml порции на 1N разтвор на солна киселина. Органичните

екстракти се обединяват, промиват с разтвор на натриев хлорид, сушат (магнезиев сулфат), филтрират, концентрират и сушат под вакуум в продължение на 30 минути. Полученото масло се разтваря в метиленхлорид (2 ml) и се разбърква под азот при 0°С . Към този разтвор се прибавя разтвор на метилов естер на [4S-(4a,7a, 10аР) ]-октахидро-4-амино-5-оксо7Н-пиридо[2,1 -b ] [ 1,3|тиазепин-7-карбоксилна киселина (200,0 mg, 0,774 ммола, получен както е описано в пример 3 с)) в метиленхлорид (6 ml), след това триетиламин (0,113 ml, 0,813 ммола) и накрая бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (360,0 mg, 0,813 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С и се оставя бавно да се затопли до стайна температура. След 19 часа реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се разтваря в етилацетат. Разтворът се промива един път с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (20 ml), един път с наситен разтвор на натриев бикарбонат (20 ml) и един път с разтвор на натриев хлорид. Органичният слой се суши (магнезиев сулфат), филтрира и концентрира като се получава жълта пяна. Пречистване с помощта на флаш хроматография (силикагел, 230-400 меша под 10-20 psi азотно налягане) и елуиране с 4:3 етилацетат/хексан дава 303 mg продукт като бистро масло.

с) 14S- (4a(R*),7a, Юар] ]-октахидро-4- Ц2-меркаптометил)-1 -оксо-3-фенилпропил)амино]-5-оксо-7Н-пиридо(2,1 Ь] [ 1,3jти-азепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част Ь) (303,1 mg,0,635 ммола) в метанол (6,5 т1,деокислен посредством барботиране на азот) се охлажда до 0°С и се обработва с 1N натриев хидроксид (6,5 ml, деокислен посредством барботиране на азот). След

100

разбъркване в продължение на един час при 0°С, при което продухването с азот продължава, реакционната смес се затопля до стайна температура. След обща три часа, реакционната смес се подкислява до pH 1 с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат и се екстрахира с етилацетат. Органичните слоеве се обединяват, промиват се с вода, разтвор на натриев хлорид, сушат се (натриев сулфат), филтрират се и се концентрират под вакуум като се получава 219 mg продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, т. на топене 200°С (разлагане).

ТСХ (6:0,01:3,99 етилацетат:оцетна киселина:хексан) ,

R f = 0,15.

ВЕТХ tR = 26,3 мин, онечистване при 27,0 мин, YMC S-3 ODS (С-18) 6,0 Х150 mm, 0% до 100% В:А , 30 мин линеен градиент и 10 мин задържане, 1,5 ml/мин, А= 90%вода:метанол + 0,2% фосфорна киселина, В= 90% метанол:вода +0,2% фосфорна киселина, 220 nm.

Анализ: Изчислено за C2oH260₄N2S2-0,1 1 C₄HgO2-0,07 CH2CI2:

С 56,22 Н 6,21 N 6,39 S 14,63

Намерено С 56,46 Н 6,28 N 6,31 S 14,59.

ПРИМЕР 13 [4S- [4a(R*) ,7a, 10ар]]-октахидро-4-((2-меркапто-4-метил1 -оксопентил) амино]-5-оксо-7Н-пиридо[2,1 - b] [ 1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

а) (Р)-2-бромо-4-метилпентанова киселина

Калиев	бромид (9,5 д, 80 ммола) се прибавя към раз-
бъркван разтвор	на D-левцин (3,0 д, 23 ммола) в 2,5 N сярна
киселина (47 ml)	при стайна температура. Реакционната смес

се охлажда до -10°С и на части се прибавя твърд натриев нитрит (2,4 д, 34 ммола), като температурата се поддържа

101 между -10°С и -5°С. След като завърши прибавянето, реакционната смес се разбърква в продължение ва 1 час и след това се затопля до стайна температура и се разбърква още един час. Реакционната смес след това се екстрахира двукратно

с етер, етерните екстракти се промиват един път с вода, сушат се (магнезиев сулфат), филтрират се и се изпаряват като се получава 2,7 g суров продукт съгласно заглавието.

Ь) (8)-2-(ацетилтио)-4-метилпентанова киселина дициклохексиламино сол

Към разбърквана суспензия от калиев тиоацетат (1,7 д, 15,0 ммола) в 50 ml сух ацетонитрил при стайна температура под аргон се прибавя разтвор на продукта от част а) (2,6 д, 13 ммола) в 17 ml ацетонитрил. Реакционната смес се разбърква 4 часа. Получената суспензия се филтрира и изпарява. Остатъкът

се разтваря повторно в етилов етер, промива се един път с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат и един път с разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се изпарява. Остатъкът се разтваря в етер (64 ml) и се обработва с дициклохексиламин (2,7 ml, 14 ммола). Из разтвора веднага започва да се утаява бяло твърдо вещество. Разтворът се филтрира и бялото твърдо вещество се събира като продукт съгласно заглавието 2,0 д, т. на топене 153-158°С , [а]р = -54,5°(с = 0,61, хлороформ).

с)метилов естер на (4S-[4a(R*),7a,10ap]]-OKTaxHApo-4| [2- (ацетилтио)-4-метил- 1-оксопентил]амино]-5-оксо-7Нпиридо[2,1 - b J [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разбърквана суспензия от продукта от част Ь) (403,3 mg, 1,09 ммола) в етилацетат (5 ml) порции на 5%-ен разтвор на калиев се промива три пъти с 5 ml бисулфат. Органичните

102

екстракти се обединяват, промиват се с разтвор на натриев хлорид, сушат се (натриев сурфат), филтрират се, концентрират се и се сушат под вакуум в продължение на 30 минути.

Полученото масло (179,4 mg, 0,943 ммола) се разтваря в метиленхлорид (2 ml) и се разбърква под азот при 0°С. Към този разтвор се прибавя разтвор на метилов естер на [4S-(4a,7a, 1 ОаР) [октахидро-4-амино-5-оксо-7Н-пиридо[2,1-Ь] (1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина [232,0 mg, 0,898 ммола, получен както е описано в пример 3 с)[ в метиленхлорид (6 ml), след това триетиламин (0,131 ml, 0,943 ммола) и накрая бензотриазол-1 илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (417,1 mg, 0,943 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на един час и 3,5 часа при стайна температура.

След общо 4,5 часа реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се разтваря в етилацетат. Разтворът се промива един път с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (20 ml), един път с наситен разтвор на натриев бикарбонат (20 ml) и един път с разтвор на натриев хлорид. Органичният слой се суши (магнезиев сулфат), филтрира и изпарява като се получава пяна. Пречистването посредством флаш хроматография (силикагел, 230-400 меша под 10-20 psi азотно налягане) при елуиране с 2:3 етилацетат:хексан дава 209,4 mg продукт съгласно заглавието като бистро масло.

d) [4S- [4a(R*),7a, 10ар[ ]-октахидро-4 - [(2-меркапто-4метил-1 -оксопентил) амино)-5-оксо-7Н-пиридо[2,1-Ь[[1,3[тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част с) (209,4 mg, 0,486 ммола) в метанол (5 ml, деокислен посредством барботиране на азот) се охлажда до 0°С и се обработва с 1N натриев хидроксид (5 ml, деокислен посредством барботиране на озот). След разбъркване

103

в продължение на един час при 0°С, при което продухването с азот продължава, реакционната смес се затопля до стайна температура. След общо 2,5 часа, реакционната смес се подкслява до pH 1 с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат и се екстрахира с етилацетат. Органичните слоеве се обединяват, промиват с вода, разтвор на натриев хлорид, сушат (натриев сулфат), филтрират и концентрират под вакуум. Пречистването с флаш хроматография (силикагел, 230-400 меша под 10-20 psi налягане на азот) при азотно насищане и елуиране с 6:0,01:3,99 етилацетат/оцетна киселина/хексан дава 142,0 mg продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество. ТСХ (6:0,1:3,9 етилацетат/оцетна киселина/хексан) Rf = 0,20. [<xlo =-103,0° (с = 0,43, хлороформ).

ВЕТХ t_R = 26,7 мин, YMC S-3 ODS (С-18) 6,0 х150 mm, 0% до 100% В:А , 30 мин линеен градиент и 10 мин задържане,

1.5 ml/мин, А= 90%вода:метанол + 0,2% фосфорна киселина, В= 90% метанол:вода +0,2% фосфорна киселина, 220 nm. Анализ: Изчислено за C15H26O4N2S2 ·

0,19 С₄Н₈О2. 0,18 С₇Н_1б . 0,9 Н₂О&

С 50,87 Н 7,63 N 6,58 S 15,07

Намерено: С 50,57 Н 7,20 N 6,83 S 14,75 =

ПРИМЕР 14 [4S-[4a(R*),7a,9apJ]-oKTaxHApo-4-((2-MepKanTO1-оксобутил)амино]-5-оксопироло[2,1-Ь][ 1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

a) (R)-2-6poM6yTaHOBa киселина

Калиев бромид (7,85 д, 65,94 ммола) се прибавя към разтвор на (К)-2-аминобутанова киселина (2,0 д, 19,40 ммола) в

2.5 N сярна киселина (25 ml) и се охлажда до 0°С. Бавно, на

104 няколко порции се прибавя натриев нитрит (2,06 д, 29,87 ммола) .Температурата се поддържа при по-малко от 2°С по време на прибавянето. Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на един час и при стайна температура в продължение на 16 часа, след това се екстрахира с етилацетат. Обединените етилацетатни слоеве се промиват с 2-50 ml порции вода, 1-50 ml порции разтвор на натриев хлорид, сушат се

(магнезиев сулфат) и се концентрират под вакуум като се получава 2,86 g продукт съгласно заглавието като сурово масло

Ь) (8)-2-(ацетилтио)бутанова киселина, дициклохексиламино сол

Към суспензия на 2,14 g (18,77 ммола) , калиев тиоацетат в 15 ml ацетонитрил, дестилиран при стайна температура, се прибавя на капки за период от 15 минути разтвор на (Я)-2-бромбутанова киселина (2,83 д, 17,07 ммола) в

ml ацетонитрил. Реакционната смес се разбърква при стайна температура в продължение на 16 часа, след това се филтрира. Филтратът се концентрира под вакуум и полученото масло се разтваря в 30 ml етилов етер. Етерният слой се промива с 2-20 ml порции 5%-ен калиев бисулфат, 2-20 ml порции вода, 2-20 ml порции разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и филтрира. Към филтрата се прибавя 3,4 ml (17,07 ммола) дицикрохексиламин. След разбъркване при стайна температура в продължение на 2 часа суспензията се филтрира като се получава 1,24 g дициклохексиламино сол на продукта. Второ количество от 724 mg дициклохексиламино сол на продукта се получава от филтрата.

с) метилов естер на [4S-]4a(R‘),7a,9ap]]-октахидро-4([2- ((ацетилтио) -1 - оксобутил]амино]-5-оксопироло[2,1 - b] [1,3]105

тиазепин-7-карбоксилна киселина

Циклопропиламино солта на продукта от част Ь) (227 mg, 0,66 ммола) се разтваря в 15 ml етилацетат и се промива с три 10 ml порции калиев бисулфат, една 10 ml порция разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира под вакуум като се получава 108 mg (Б)-2-(ацетилтио)бутанова киселина като бистро масло.

Към разтвор на тази свободна киселина (108 mg, 0,66 ммола) в 5 ml сух метиленхлорид, охладен до 0°С, се прибавя триетиламин (90 μΐ, 0,66 ммола) и след това метилов естер на [4S- (4α,7α, 1 Οββ) [-4-амино-октахидро-5-оксопироло[2,1 - b] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина р-толуенсулфонатна сол [250,0 mg, 0,66 ммола), получен от продукта описан в пример 5 d)J и втора порция триетиламин (90 μΐ, 0,66 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 20 минути, след това на порции се прибавя бензотриазол-1 -илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (292 mg, 0,66 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на един час, охлажда се в хладилник в продължение на 56 часа, след това се разбърква при стайна температура в продължение на 3 часа. Реакционната смес се концентрира под вакуум, разтваря се повторно в 30 ml етилацетат и се промива с 20 ml 5%-ен разтвор на калиев бисулфат, 20 ml наситен натриев бикарбонат, 20 ml разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира под вакуум като се получава сурово масло. Суровото масло се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел, 25 х 100 mm, 2:3 етилацетат:хексан) като се получава 208 mg продукт съгласно заглавието като бяла пяна.

106

d) [4S-[4a(R*),7a,9ap] ] - октахидро-4 - [ (2-меркапто -1 оксибутил) амино ]-5-оксопироло [2,1 - b] [1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част с) (225 mg, 0,559 ммола) в метанол (5 ml) се продухва с аргон в продължение на 30 минути и се охлажда до 0°С. Към този разтвор се прибавя на капки 5 ml 1М разтвор на натриев хидроксид, също продухан с аргон в продължение на 30 минути и се охлажда до 0°С. Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 3 часа при непрекъснато продухване с аргон, след това се подкислява до pH 2 с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат. Сместа се екстрахира с 3-40 ml порции от етилацетат и обединените органични слоеве се сушат (магнезиев сулфат) и концентрират под вакуум като се получава суров продукт под форма на пяна. Суровият продукт се подлага на флаш хроматография (Merck, силикагел, 25 х 180 mm, 3% оцетна киселина/етилацетат ) като се получава бяла пяна, която се разтваря в метиленхлорид и се обработва с хексан като се получава 176 mg от продукта съгласно заглавието като компактна бяла пяна, (<х][> — -125,4° (с = 1,0, хлороформ). ТСХ (метанол/метиленхлорид 1:9), Rf = 0,16.

ВЕТХ: t_R =15,5 мин (97% обща площ, UV 220 nM),YMC S-3 ODS (С-18,120 А) 6 х 150 mm, 0% В:А-100% В:А, линеен 25 минути градиент (А = 90% вода/метанол + 0,2% фосфорна киселина) В = 90% метанол/вода + 0,2% фосфорна киселина) скорост на изтичане = 1,5 ml/мин.

Анализ: Изчислено за С 13H₂oN₂S₂C>4 · 0,8 Н₂О · 0.2 CgHf4 . 0,1 СН₂С1₂:

С 46,10 Н 6,66 N 7,52 S 17,21

Намерено: С 46,00 Н 6,17 N 7,52 А 16,82.

107

ПРИМЕР 15 ]43-|4α(Ρ*),7α,93β] ] -октахидро-4 - [(2-меркапто1 -оксопентил) амино]-5-оксопироло [2,1-Ь]|1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

a) (И.)-2-бромпентанова киселина

Като се следва процедурата на пример 14 а), но като се D-норвалин вместо (И)-2-аминобутанова киселина, се получава (И)-2-бромпентанова киселина като бистра течност.

b) (Б)-2-(ацетилтио)пентанова киселина дициклохексиламино сол

Взаимодействието на (И.)-2-бромпентанова киселина с калиев тиоацетат в ацетонитрил и след това обработване с дициклохексиламин съгласно процедурата от пример 14 Ь), води до получаване на (5)-2-(ацетилтио)пентанова киселина дициклохексиламино сол като бяло твърдо вещество.

c) метилов естер на ]48-(4α(β.*),7α,93β]]-οκτβΧΗΑρο-4-

]]2-(ацетилтио)- 1 - оксопентил]амино]-5-оксопироло[2,1 Ь] [1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Взаимодействието на свободната киселина на дициклохексиламино солта от част Ь) с метилов естер на (4δ-|4α,7α,93β]]-4- амино-октахидро-5-оксопироло(2,1 - b] (1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина по процедурата описана в пример 14 с), води до получаване на продукт съгласно заглавието като бяла пяна.

d) ]4S - ]4a(R‘) , 7α,9ββ] ]-октахидро-4 - ](2-меркапто-

- оксопентил) амино ]-5-о кс опи р оло [2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част с) в метанол се обработва с 1М разтвор на натриев хидроксид съгласно процедурата на

108 пример 14 d) като се получава продуктът съгласно заглавието като компактна бяла пяна [а]= -122,8° (с = 1,0, CDCI3). ТСХ (метанол/метиленхлорид 1:9) Rf = 0,15.

ВЕТХ: t_R =20,5 мин (97% обща площ, UV 220 nM),YMC S-3 ODS (С-18,120 А) 6 х 150 mm, 0% В:А-100% В:А, линеен 25 минути градиент (А = 90% вода/метанол +0,2% фосфорна киселина) В = 90% метанол/вода + 0,2% фосфорна киселина) скорост на изтичане = 1,5 ml/мин.

Анализ: Изчислено за С j 4Η22Ν2$2θ4 · θ>65 Н2О . 0,20 CgH^:

C 48,63 H 7,01 N 7,46 S 17,08

Намерено: C 48,86 H 6,70 N 7,24 S 16,74.

ПРИМЕР 16

(4S - |4a(R‘) ,7a,9a8] |-октахидро-4 - [(2-меркапто-4,4-диметил-1 -оксопентил) ]амино]-5-оксопироло[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

а) (Р)-2-бромо-4,4-диметилпентанова киселина

Разтвор на (Р)-2-амино-4,4-диметилпентанова киселина (950mg, 6,55 ммола) в 2,5 N водна сярна киселина (13 ml, 33 ммола) се охлажда до -5°С и се обработва с калиев бромид (2,72 д, 22,9 ммола) на една порция. Безцветният разтвор се обработва с натриев нитрит (680 mg, 9,86 ммола) на порции като температурата се поддържа между 0°С и 3°С за период от около 25 минути. Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на един час и при стайна температура в продължение на 1,5 часа. Реакционната смес се излива във вода (10 ml). Продуктът се екстрахира с етер (60 ml), промива се с вода (20 ml) и разтвор на натриев хлорид (20 ml), суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира под вакуум като се получава продуктът съгласно заглавието като безцветна течност.

109

b) (5)-2-(ацетилтио)-4,4-диметилпентанова киселина

Суспензия от калиев тиоацетат (750 mg, 6,58 ммола) и ацетонитрил (10 ml, сушен с молекулно сито) се охлажда до 0°С и се обработва с разтвор на (R)-2-бромо-4,4-диметилпентанова киселина от част а) в ацетонитрил (2 ml) за период от 5 минути. Реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се разбърква в продължение на 2,5 часа. Суспензията се филтрира. Филтратът се концентрира под вакуум. Остатъкът се разрежда с етер (50 ml), промива се с две порции 5%-ен воден разтвор на натриев тиосулфат (50 ml) и разтвор на натриев хлорид (25 ml), суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира под вакуум. Бледо жълтото масло се пречиства посредством флаш хроматография (Merck, силикагел 12x3 cm, 10% метанол/ метиленхлорид) като се получава 575 mg продукт съгласно заглавието като бледо жълто масло.

c) [метилов естер на 4S-[4a(R*),7a,9apJJ-OKTaxHApo-4- [ [2-(ацетилтио)-4,4-диметил-1 -оксопентил[амино]-δοκέ опироло[2,1-Ь[[1 ,3 [тиазепин-7-карбоксилна киселина

Бистър разтвор на продукта от част Ь) (148 mg, 0,72 ммола) в метиленхлорид (5 ml, дестилиран от калциев хидрид) се охлажда до 0°С и се обработва с разтвор на метилов естер на [4S-(4a,7a, 1 Оар) [-4-амино-октахидро-5-оксопироло[2,1-b] [ 1,3|тиазепин-7-карбоксилна киселина р-толуенсулфонатна сол [250 mg,0,60 ммола,получен от продукта описан в пример 5d)J в метиленхлорид (3 ml, дестилиран от калциев хидроксид), триетиламин (122 mg, 1,2 ммола) и след това бензотриазол-1илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (319 mg, 0,72 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 24 часа и при стайна температура в продълже110

ние на 5 часа. Суровата реакционна смес се концентрира под вакуум. Остатъкът се разтваря в етилацетат (50 ml), промива се с 5%-ен воден разтвор на калиев бисулфат (50 ml), 50% наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (50 ml) и разтвор на натриев хлорид (50 ml), суши се (натриев сулфат) и се концентрира под вакуум. Суровият продукт се пречиства посредством флаш хроматография (20 g Merck, силикагел, етилацетат) като се получава 244 mg от продукта съгласно заглавието като бяла пяна.

d) [4S- |4a(R*) ,7α,9ββ ] ]-октахидро-4- [ (2-меркапто-4,4-диметил- 1-оксопентил)амино)-5-оксопироло[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

Бистър разтвор на продукта от част с) (240 mg, 0,56 ммола) в метанол (2 ml,наситен с азот) се охлажда до 0°С и се обработва на капки с 1N натриев хидроксид (2,27 ml, 2,24 ммола, наситен с аргон) с непрекъснато насищане при 0°С. Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 3 часа и при стайна температура в продължение на 3 часа. Сместа се подкислява до pH 1 с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (насищане с азот). Продуктът се екстрахира с метиленхлорид (50 ml, наситен с азот), промива се разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат) и се концентрира под вакуум. Суровият продукт се прекристализира из метиленхлорид/хексан като се получава 75 mg от продукта съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, т. на топене 124-126°С, [а]р> = -175° (с = 0,25, метанол). ТСХ (оцетна киселина/метанол/метиленхлрорид 1:5:94) R_f = 0,65.

ВЕТХ: t_R (YMC, S-3 ODS (С-18) 6,0 х 150 mm, 1,5 ml/мин линеен градиент 0-100% В над 30 мин, буфер А = метанол/вода/фос форна киселина (10:90:0,2), буфер В = метанол/вода/фосфорна киселина (90:10:0,2) = 24,4 мин, 95% обща площ на пика при 254 nm.

Анализ: Изчислено за C15H26N2O4S2 · 0,13 С5Н14:

С 52,24 Н 7,28 N 7,26 S 16,62

Намерено: С 51,97 Н 7,26 N 7,09 S 16,23.

ПРИМЕР 17

[4S-[4a(R*),7a,9aP] ]-октахидро-4- [(2-меркапто1 -оксопропил) амино J-5-оксопир оло [2,1- Ь]( 1,3 ]тиазепин-7карбоксилна киселина

a) (Р)-2-бромпропанова киселина

Като се следва процедурата от пример 14 а), но като се използва D-аланин вместо (И)-аминобутанова киселина, се получава (Р)-2-бромпропанова киселина като леко жълто масло.

b) (S)-2-(ацетилтио)пропанова киселина

Към слабо зелен разтвор на калиев тиоацетат (3,94 д,

34,5 ммола) в ацетонитрил (150 ml) се прибавя разтвор на (И)-2-бромпропанова киселина (4,8 д, 31 ммола) в ацетонитрил (12 ml) при стайна температура под атмосфера от аргон. Получената бяла суспензия се разбърква при стайна температура в продължение на 2 часа, след което се филтрира, филтратът се концентрира под вакуум. Остатъкът се разрежда с етилацетат (100ml), промива се с 10%-ен воден разтвор на калиев бисулфат (50 ml) и разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат) и се концентрира под вакуум. Суровият продукт (4,61 д) се пречиства с помощта на флаш хроматография (60 д Merck силикагел, 1:45:54 оцетна киселина/етилацетат/хексан) като се получава 3,7 д продукт съгласно заглавието като леко

112

жълто масло [ а ] £> — -114° (с = 0,50, метанол).

c) метилов естер на [4S-[4a(R*),7a,9aP ] ]-октахидро-4- [ [2 -(ацетилтио)- 1- оксопропил]амино]-5-оксопироло[2,1b] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Бистър разтвор на (5)-2-(ацетилтио)-пропанова киселина (86 mg, 0,58 ммола) в метиленхлорид (5 ml, дестилиран от калциев хидрид) се охлажда до 0°С и се обработва с разтвор на метилов естер на [4S-(4a,7a,9ap) ]-4-амино-октахидро-5оксопироло[2,1-b] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина ртолуенсулфонатна сол [200,0 mg, 0,48 ммола, получен от продукта описан в пример 5 d) ] в метиленхлорид (5 ml, дестилиран от калциев хидрид), триетиламин (98 mg, 0,97 ммола’ и след това бензотриазол-1-илокситрис(диетиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (255 mg, 0,58 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 22 часа и при стайна температура в продължение на 2 часа. Суровата реакционна смес се концентрира под вакуум. Остатъкът се разрежда с етилацетат (100 ml), промива се с 5%-ен воден разтвор на калиев бисулфат (30 ml), 50% наситен воден разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид.суши се (натриев сулфат) и се концентрира под вакуум. Суровият продукт се пречиства с помощта на флаш хроматография (40 gMerck силикагел, етилацетат) като се получава 180 mg от продукта съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, т. на топене 143-145°С.

d) [4S- [4oc(R*),7α,9ар)[-октахидро-4- [(2-меркапто-

-оксопропил) амино]-5-оксопироло [2,1-Ь[[1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

Бистър разтвор на продукта от част с) (180 mg, 0,48

113 м мола) (2 ml) под атмосфера от аргон се охлажда до -10 °C и се обработва на капки с 1N натриев хидроксид наситен с аргон (1,95 ml, 1,95 ммола), като температурата се държи под 0°С. Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 3 часа, като впръсква аргон. Сместа се подкислява до pH 1 с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат под атмосфера на аргон. Продуктът се екстрахира с етилацетат наситен с азот (100 ml), промива се с разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат) и се

концентрира под вакуум. Суровият продукт се пречиства с помощта на флаш хроматография (40 gMerck силикагел, 1:5:94 оцетна киселина/метанол/метиленхлорид) като се получава

154 mg продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество т. на топене 150-152°С, [ajp> = -156° (с = 0,50, метанол).

ТСХ (1:5:94 оцетна киселина/метанол/метиленхлорид), Rf = 0,28.

ВЕТХ: tR (YMC, S-3 ODS (С-18) 6,0 х 150 mm, 1,5 ml/мин линеен градиент 0-100% В над 30 мин, буфер А = метанол/вода/фосфорна киселина (10:90:0,2), буфер В = метанол/вода/фосфорна киселина (90:10:0,2)) = 14,69 мин, 95% обща площ на пика при 254 пт.

Анализ: Изчислено за 012^18^204^2 · θ-75 СН3СО2Н:

С 44,61 Н 5,82 N 7,71 S 17,64

Намерено: С 44,76 Н 5,71 N 7,81 S 17,76.

ПРИМЕР 18 [4S - [4a(R‘) ,7а,9ар] )-октахидро-4 - ((3-циклопропил-2меркапто- 1 -оксопропил) амино ]-5-оксопироло (2,1-Ь](1,3)тиазепин7-карбоксилна киселина

а) (Р)-2-[[(фенилметокси) карбонил]амино J-4-пентенова киселина

114

Смес от D-алилглицин (2,8 g,24,3 ммола), 1М воден разтвор на натриев хидроксид (25 ml) и тетрахидрофуран (10 ml,дестилиран от кетил), се разбърква при стайна темпе-ратура до хомогенизиране, след което се охлажда в ледена баня. Към получения енергично разбъркван разтвор се прибавя около 5mL 1М воден разтвор на натриев хидроксид и след това на капки около 1 g бензилхлороформиат. Това се повтаря още 4 пъти докато се прибавят общо 28 mL 1,0 М воден разтвор на натриев хидроксид и 4,80 g (95%, 27 ммола) бензилхлороформиат. Реакционната смес се разбърква в продължение на 15 минути при 0°С, след това 30 минути при стайна температура и и след това се екстрахира с 50 mL етер. Водният слой се подкислява (pH = 1,5) посредством прибавяне на 6N разтвор на солна киселина (около 10 mL), след това се екстрахира с три 50 mL порции етер. Трите етерни екстракта се обединяват, сушат (магнезиев сулфат) и концентрират под вакуум като се получава 6,01 дпродукт съгласно заглавието като безцветно масло.

Ь) фенилметилов естер на (И)-2-{[(фенилметокси)карбонил]амино]-4-пентенова киселина

Цезиев карбонат (4,28 д, 13,1 ммола) се прибавя към разтвор на продукта от част а) (5,96 д, 23,9 ммола) в безводен диметилформамид (25 ml) при стайна температура. Реакционната смес се разбърква в продължение на 20 минути, след което бързо се прибавя бензилбромид (4,5 д, 26,3 ммола) (слабо екзотермична реакция). Сместа се разбърква 30 минути, след това се разпределя между 100 ml вода и 100 ml етер. Органичният слой се отделя, промива се с три 100 mL порции вода, 50 mL разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира под вакуум като се получава масло. Суровият

115

продукт се пречиства с помощта на флаш хроматография (Merck силикагел, 24 х 5,0 cm, 1:10 етилацетат/хексан, след това 1:4 етилацетат:хексан) като се получава 6,13 g продукт съгласно заглавието като безцветно масло.

c) фенилметилов естер на (R) - а-[ | (фенилметокси) карбонил]амино]циклопропанпропанова киселина

Паладиев(П)ацетат (65 mg, 0,29 ммола) се прибавя към разтвор на продукта от част b) (5,78 д, 17,1 ммола) безводен етер (60 ml) и се разбърква в продължение на 10 минути. Получената смес се охлажда до 0°С и се прибавя излишък от етерен диазометан (получен от 12 g Ν-μθτηλ-Ν'-ηητρο-Ν-ηητрозогуанидин/120 ml етер) на порции за около 15 минути. Реакционната смес се разбърква в продължение на 15 минути след което реакцията се спира посредством прибавяне на 1 mL ледена оцетна киселина. Разтворът се прехвърля в делителна фуния, промива се с 100 mL наситен воден разтвор на натриев бикарбонат, 50 mL разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира под вакуум като се получава жълто масло. Суровият продукт се пречиства с помощта на флаш хроматография (Merck силикагел, 20 х 5,0 cm, 1:4 етилацетат/хексан) като се получава 5,74 g продукт съгласно заглавието като безцветно масло.

d) (И)-(а-амино)циклопропанпропанова киселина

Катализатор паладий върху въглен (10%, 1,14 д) се прибавя към разтвор на продукта от част с) (5,71 д, 16,2 ммола) в метанол (75 ml) и се разбърква в атмосфера от водород (бутилка) при стайна температура в продължение на 48 часа. Реакционната смес се филтрира до отстраняване на катализатора и катализаторът се промива с топла вода, филтратът

116

след това се пропуска през филтър с 0,4 μΜ поликарбонатна мембрана, филтратът се концентрира под вакуум като се получава 2,03 g продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество.

е) (5)-а-(ацетилтио)циклопропанпропанова киселина Смес от продукта от част d) (2,00 g, 15,5 ммола) в 2,5 N водна сярна киселина (30 ml) се разбърква при стайна температура докато се хомогенизира и след това се охлажда до -5°С. Към този разтвор на една порция се прибавя калиев бромид (6,50 д, 54,6 ммола). Сместа се разбърква докато се хомогенизира. След това, на малки порции, за период от около 25 минути се прибавя натриев нитрит (1,60 д, 23,2 ммола), като реакционната температура се поддържа под 0°С. Реакционната смес се разбърква в продължение на още един час при 0°С и след това при стайна температура в продължение на 1,5 часа. Получената смес се разрежда с 30 ml вода и се екстрахира с три 30 mL порции етер. Обединените етерни екстракти се промиват с 25 mL разтвор на натриев хлорид, сушат се (магнезиев сулфат) и се концентрират под вакуум като се получава

2,82 g суров (К)-(а-бромо)циклопропанпропанова киселина като бледо жълто масло.

Разтвор на тази сурова (Я)-(а-бромо) циклопропанпропанова киселина в ацетонитрил (10 ml) се прибавяза период от 5 минути към разбърквана суспензия от калиев тиоацетат (1,83 д, 16,1 ммола) в ацетонитрил (20 ml) при охлаждане в ледена баня.Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 1 час, след това при стайна температура в продължение на 16 часа. Реакционната смес се филтрира и филтратът се концентрира под вакуум като се получава масло.

Това масло се разпределя между 50 mL етер и 50 mL 5%-ен воден разтвор на натриев тиосулфат. Органичният слой се отделя, промива се с 25 mL разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира под вакуум като се получава жълто масло. Суровият продукт се пречиства с помощта на флаш хроматография (Merck силикагел, 12 х 5,0 cm, 1:19 метанол/метиленхлорид) като сеполучава 1,52 g продект съгласно заглавието като жълто масло.

f) метилов естер Ha[4S-[4a(R*) ,7а,9ар] [-октахидро-

4- [ [2- (ацетилтио)-З-циклопропил- 1-оксопропил[амино]-5оксопироло(2,1-Ь[[1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Бензотриазол-1 -илокситрис(диметиламино) фосфониев хексафлуорофосфат (292 mg, 0,66 ммола) се прибавя на една порция към смес от метилов естер на [4S-(4а,7а,9ар) [-4амино-октахидро-5-оксопироло [2,1-Ь[[1,3[тиазепин-7карбоксилна киселина р-толуенсулфонатна сол [250 mg, 0,60 ммола, получен от продукта описан в пример 5 d)J в метиленхлорид (3 ml, дестилиран от калциев хидрид), триетиламин (121 mg, 1,20 ммола) и продукта от част е) (122 mg, 0,65 ммола) в метиленхлорид (3 ml, дестилиран от калциев хидрид). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 1 час , след това при стайна температура в продължение на 1,5 часа. Получената смес се разпределя между 20 ml етилацетат и 20 ml 1М воден разтвор на калиев бисулфат. Органичният слой се отделя, промива се с 20 ml 5%-ен воден разтвор на натриев б икарбонат, 20 ml разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира под вакуум като се получава масло. Суровият продукт се пречиства посредством флаш хроматография (Merck силикагел, 12 х 3,0 cm, 1:1 етил

118 ацетат/хексан) като се получава 191 mg продукт съгласно заглавието като твърда бяла пяна.

g) |4S-[4a(R*),7a,9ap] ]-октахидро-4-[(3-циклопропил-2меркапто-1-оксопропил)амино]-5-оксопироло[2,1-Ь][1,3]тиазепин 7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част f) (185 mg, 0,45 ммола) в метанол (3 ml) се насища с аргон в продължение на 10 минути при 0°С и след това се прибавя 1М воден разтвор на натриев хидроксид (3 ml, прясно наситен с аргон в продължение на 10 минути). Реакционната смес се разбърква в продължение на 2,5 часа при стайна температура при непрекъснато насищане с аргон, след това се подкислява посредством прибавяне на ml

1М разтвор етилацетат.

на калиев бисулфат и се екстрахира с 20 ml

Органичният екстракт се промива с 20 ml разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат) и се концентрира под вакуум промива с безводен етер като се получава смола. Смолата се след това се концентрира на маслена помпа като се получава 121 mg продукт съгласно заглавието като бяла пяна, [oJd = -103° (с = 0,23, метанол). ТСХ (1:10:90 оцетна киселина/метанол/метиленхлорид) Rf = 0,46.

ВЕТХ: (YMC, S-3 ODS (С-18) 6,0 х 150 mm, 1,5 ml/мин линеен градиент 0-100% В над 30 мин, буфер А = метанол/вода/фосфорна киселина (10:90:0,2), буфер В = метанол/вода/фосфорна киселина (90:10:0,2)) = 20,7 мин,повече от 95% обща площ на пика при 254 nm.

Анализ: Изчислено за С j 5H22N2θ4^2 · θ<20 Н₂О:

C 49,77 Η 6,23 Ν 7,74 S 17,71

Намерено: С 50,01 Η 6,27 Ν 7,50 S 17,40.

119

ПРИМЕР 19 [4S-(4a,7a,9aPJ ] -октахидро- 4 -[[(1-меркаптоциклопентил)карбонил]амино|-5-оксопироло[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

d) 1-меркаптоциклопентанкарбоксилна киселина Разтвор на литиев диизопропиламид се получава под азот от диизопропиламин (5,4 ml, 38,5 ммола) и н-бутиллитий (2,5 М в хексан, 15,4 ml, 38,5 ммола) в тетрахидрофуран (17,6 ml), като температурата се поддържа между -3°С до 0°С. След разбъркване в продължение на 15 минути, се прибавя циклопропанкарбоксилна киселина (2,0 д, 17,5 ммола) в тетрахидрофуран (2 ml) при 0°С до 3°С за период от 25 минути. След 15 минути при 0°С, банята се отстранява и реакционната смес се разбърква още 15 минути, при което температурата се покачва до 15°С. Млечнобелият разтвор се охлажда до -78°С и се прибавя сяра (Sq, 618,0 mg, 19,3 ммола) като твърдо вещество, като температурата се поддържа при -78°С. Реакционната смес се затопля бавно до стайна температура ин ситу. След 70 часа реакционната смес се охлажда до 0°С, реакцията се прекъсва с вода (pH 8-9) и бързо се подкислява до pH 1 с 6 N солна киселина. Водният разтвор се екстрахира с етилацетат (3 х 30 ml), промива се с разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат), филтрира се и се концентрира като се получава 2,62 g продукт съгласно заглавието като жълто масло.

Ь) 1-(ацетилтио)циклопентанкарбоксилна киселина

Към разтвор на продукта от част а) (1,44 д, 9,89 ммола) в наситен с азот разтвор на 1N натриев хидроксид (20 ml,19,7 ммола) при 0°С се прибавя оцетен анхидрид (0,93 ml,

120

9,89 ммола). За солюбилизиране на маслото, което се образува се прибавя тетрахидрофуран (13 ml). След разбъркване един час при 0°С (pH 7), реакционната смес се затопля до стайна температура и се прибавя допълнително оцетен анхидрид (0,47 ml, 4,9 ммола) както и твърд калиев карбонат (2,04 д, 14,8 ммола) до pH 10 и тетрахидрофуран (4 ml). След разбъркване една нощ при стайна температура, реакционната смес се подкислява до pH 1 с 1N солна киселина и се екстрахира с етилацетат. Етилацетатните екстракти се обединяват, промиват с разтвор на натриев хлорид, сушат (магнезиев сулфат), филтрират и концентрират под вакуум като се получава жълто твърдо вещество (1,61 д). Твърдият продукт се прекристализира двукратно из етилацетат/хексан като се получава 614 mg продукт съгласно заглавието като леко кафяво твърдо вещество, т. на топене 11 9,5-12 1,5°С.

с)метилов естер на[45-(4а,7а,9аР[]-октахидро-4-[[1[ (ацетилтио)-циклопентил [карбон ил[ ами но]-5-окс опи роло[ 2,1 b J [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Към разтвор на продукта от част b) (94,5 mg, 0,502 ммола) в метиленхлорид (3,6 ml) при 0°С под азот, се прибавя триетиламин (70 μΐ, 0,502 ммола) и след това метилов естер на [4S-(4a,7a,9aP) ]-4-амино-октахидро-5-оксопироло[2,1 b[ [ 1,3[тиазепин-7-карбоксилна киселина р-толуенсулфонатна сол [получен от продукта описан в пример 5 d), 198,9 mg, 0,478 ммола] в една порция, след това се прибавя триетиламин (66,6 μΐ, 0,478 ммола). Реакционната смес се разбърква в продължение на 5 минути при 0°С. След това се прибавя бензотриазол-1 илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (222,0 mg, 0,502 ммола) като твърдо вещество. Реакционната смес се

121

разбърква при 0°С в продължение на един час и след това при стайна температура в продължение на 2,25 часа. Реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се разпределя между етилацетат и 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (20 ml). Органичният слой се промива с полунаситен разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат), филтрира и концентрира до бистро масло. Пречистването с помощта на флаш хроматография при елуиране с 11:9 етилацетат/хексан даво 169,3 mg продукт съгласно заглавието като бистро масло.

d) [4S-(4a,7a,9ap] ]-октахидро-4- [ ((1-меркаптоциклопентил)карбонил]амино]-5-оксопироло[2,1-Ь][1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от пример с) (167,3 mg, 0,404 ммола) в метанол (4 ml, деокислен посредством барботиране на азот) се охлажда до 0°С и се обработва с 1N натриев хидроксид (4 ml, деокислен посредством барботиране на азот). След разбъркване в продължение на 1,5 часа при 0°С при непрекъснато продухване с азот, реакционната смес се затопля до стайна температура. След общо три часа, реакционната смес се подкислява до pH 1 с 5%-ен калиев бисулфат и се екстрахира с етилацетат. Органичните слоеве се обединяват, промиват се с вода (20 ml), разтвор на натриев хлорид, сушат се (натриев сулфат), филтрират се, концентрират се под вакуум и се изпаряват повторно из хексан като се получава бяло твърдо вещество. Съединението се разтваря в диоксан (безводен) и се лиофилизира като се получава 110 mg продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, (a]=-106,5° (с = 0,68, хлороформ). ТСХ (7:2,9:0,1, етилацетат/хексан/оцетна киселина)

122

R _f = 0,12.

BETX: t_R = 21,5 мин ,YMC S-3 ODS (C-18 6 x 150 mm, 0% -100%

B:A, 30 минути линеен градиент и 10 минути задържане

1,5 т!/мин.(А = 90% вода/10% метанол +0,2% фосфорна киселина) В = 90% метанол/10% вода + 0,2% фосфорна киселина) , 220 nm.

Анализ: Изчислено за С j 5Η22^2θ4^2 · С₄НдС>2 · 0,7 Н2О ·

0,08 С_бН₁₄:

С 49,37 Н 6,63 N 7,16 S 16,39

Намерено: С 49,03 Н 6,37 N 7,21 S 16,65.

ПРИМЕР 20 [4S-(4a,7a,9aP] )-октахидро-4 - [ (2-карбокси - 1-оксо-Зфенилпропил) амино ]-5-оксо-7Н-пиридо [2,1 - b][ 1,3 )тиазепин-7карбоксилна киселина

а) моноетилов естер на 3-(фенилметил)пропандикарбоксилна киселина

Диетилов естер на 3-(фенилметил)пропандикарбоксилна киселина (2,5 д, 10 ммола) в 10 ml тетрахидрофуран се разбърква една нощ с 10 ml IN литиев хидроксид. Реакционната смес се подкислява с 11 ml IN солна киселина и се екстрахира с две 50 ml порции етилацетат. Етилацетатните екстракти се промиват с разтвор на натриев хлорид, сушат се (натриев сулфат) и се концентрират под вакуум. Концентратът се хроматографира през силикагел (80 д) като се използва система разтворители 5% метанол.хлороформ. Подходящите фракции се обединяват и се концентрират като се получава 1,23 g продукт съгласно заглавието.

Ь) метилов естер на [45-(4а,7а,9аР))-октахидро-4-[[2(етоксикар бониил) -1 -оксо-3-фенилпропил] амино J-5-оксо - 7 Н123 пир и до [2,1-Ь](1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Продуктът от част а) (0,222 g , 1 ммол) и метилов естер на (48-(4а,7а,9ар])-октахидро-4-амино-5-оксо-7Нпиридо(2,1-Ь](1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина (0,258 g, 1 ммол, получен както е описано в пример 1 с)| се разтваря в метиленхлорид (5 ml) и се охлажда до 0°С. Прибавя се триетиламин (0,14 ml, 1 ммол) и реакционната смес се разбърква в продължение на един час. Прибавя се бензотриазол-1 - илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (0,442 g, 1 ммол) и разтворът се разбърква при 0°С в продължение на 1 час и при стайна температура в продължение на 2,5 часа. Реакционната смес се разрежда с 50 ml метиленхлорид и се промива с вода, 10%-ен натриев бисулфат, наситен воден разтвор на натриев бикарбонат, суши се (натриев сулфат), филтрира се и се концентрира под вакуум. Остатъкът се хроматографира върху силикагел като се използва 30% етилацетат в хексан. Подходящите фракции се обединяват и концентрират под вакуум като се получава 0,22 g продукт съгласно заглавието.

с) [48-(4а,7а,9ар}]-октахидро-4- [ (2-карбокси

-оксо-З-фенилпропил) амино]-5-оксо-7Н-пиридо [2,1 Ь] [ 1,3(тиазепин-7-карбоксилна киселина

Продуктът от част Ь) (0,22 g , 0,476 ммола) се разбърква с 1N литиев хидроксид (5 ml) в тетрахидрофуран (5 ml) при стайна температура в продължение на 3 часа.

Реакционната смес се подкислява до pH 2 с 1N солна киселина и се концентрира под вакуум. Остатъкът се разтваря в етилацетат и се промива с вода, разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат) и се концентрира под вакуум до 3 ml като в този

124

момент продуктът кристализира. След престояване една нощ при 0°С, твърдият продукт се филтрира и суши като се получава 0,16 g продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, т. на топене 159-162°С, [ajp = -84,92° (с = 0,7, метанол. ТСХ (хлороформ:метанол, 9:1), Rf = 0,23, 0,28.

ВЕТХ: t_R = 16,15, 16,35 мин, (UV 254 nm), YMC S-3 ODS (С-18) 6,0 х 150 mm, 3μ затворен край на колоната, линеен градиент 50-90% воден метанол съдържащ 0,2 % фосфорна киселина, 20 мин, 1,5 ml/мин (44,9%, 55,1% изомерна смес). Анализ: Изчислено за ¢20^24^2^06 θ·¹ ^2θ^:

С 56,89 Н 5,78	N 6,66	S 7,59
Намерено: С 56,98 Н 5,68	N 6,58	S 7,15.
ПРИМЕР 21

[4S-[4a(R*),7a,l Оар ] ]-октахидро-4- [ (2-меркапто- 1-оксо-

3-фенилпропил) амино]-5-оксо( 1,4 ]оксазино[3,4-Ь] [1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина

а) метилов естер на 0-(2,2-диметоксиетил)-М-[Ь1[ (фенилметокси)карбонил]-1--хомосерил[-1.-серин

Разтвор на метилов естер на М-[О-[(1,1-диметилетил)диметилсилил]-М - [(фенилметокси) карбонил]-1.-хомосерил]-0-(2,2диметокси-етил)-1.-серин [5,56 д, 10 ммола, получен както е описано в пример 10h)[ в метанол (65 ml) се охлажда до 0°С (баня лед-сол), обработва се с р-толуенсулфоно-ва киселина монохидрат (368 mg, 2,0 ммола) и се разбърква при 0°С в продължение на 1,5 часа. Реакцията се прекъсва с разтвор на натриев бикарбонат (198 mg в 20 ml вода), разбърква се 5 минути и след това се изпарява за отстраняване на метанола. Водната фаза се екстрахира с етилацетат (2 х 200 ml) и обединените органични екстракти се промиват с вода (110 ml), 5%-ен натриев

125

бикарбонат (80 ml) и разтвор на натриев хлорид (80 ml), сушат се (безводен натриев сулфат ), филтрират, изпаряват до сухо и се сушат под вакуум. Суровият продукт се хроматографира върху силикагел (Merck), колоната се елуира с тилацетат:хексан (2:1) и етилацетат:метанол(98:2) като се получава 3,975 g продукт съгласно заглавието като сироп.

ТСХ (етилацетат:хексан 4:1) Rf = 0,17.

b) метилов естер на метилов естер на О-(2,2диметоксиетил) -N - [0-(метилсулфонил)-1Ч-[(фенилметокси)карбонил]-к-хомосерил]-Ь-серин

Разтвор на продукта от част а) (3,975 д, 8,98 ммола) в сух метиленхлорид (52 ml) се охлажда до -15°С, обработва се с триетиламин (1,82 ml, 13,1 ммола) и метансулфонилхлорид (0,82 ml, 10,6 ммола) и се разбърква при -15° С в продължение на 30 минути. Реакцията се прекъсва с 25% амониев хлорид (19 ml), затопля се до стайна температура и се разрежда с етилацетат (750 ml). Органичната фаза се промива с 5% калиев бисулфат (100 ml), 50% наситен разтвор на натриев хлорид (100 ml) и наситен разтвор на натриев хлорид (100 ml), суши се (безводен натриев сулфат ), филтрира се, изпарява се до сухо и се суши под вакуум като се получава 4,9 g продукт съгласно заглавието като восъкоподобно твърдо вещество. ТСХ (етилацетат:хексан 4:1) R_f = 0,32.

c) метилов естер на М-[5-ацетил-1Ч-[(фенилметокси)карбонил]-1_-хомоцистеинил]-0- (2,2-диметоксиетил)- L-серин

Цезиев карбонат (5,56 д, 17,04 ммола) се прибавя към разтвор на тиолоцетна киселина (2,6 ml) в сух метанол (40 ml), разбърква се в продължение на 10 минути, след това се изпарява до сухо. Полученото твърдо вещество се оработва с

126 ацетон (7x8 ml) и полученото белезникаво твърдо вещество се суши под вакуум като се получава 4,39 д пезиева тиолоцетна киселина.

Суспензия от цезиева тиолоцетна киселина (2,43 д,

1,3 екв.) в сух диметилформамид (8,0 ml) се обработва с разтвор на продукта от част b) (4,9 д, 8,98 ммола) в сух диметилформамид (24 ml) и се разбърква в продължение на 16 часа при

стайна температура под аргон. Сместа се разрежда с етилацетат (1,0 л), промива се последователно с 5%-ен натриев бикарбонат (2 х 150 ml) , вода (2 х 150 ml) и разтвор на натриев хлорид (150 ml), суши се (безводен натриев сулфат), филтрира се, изпарява се до сухо и се суши под вакуум. Суровият продукт се хроматографира върху силикагелна колона (Merck), колоната се елуира с етилацетат: хексан (1:1, 2:1) като се получава 3,93 g продукт съгласно заглавието като восъкоподбно твърдо вещество. ТСХ (етилацетат:хексан 4:1), Rf = 0,63.

d) метилов естер на О-(2,2-диметоксиетил)-М,[М- [ (фенилметокси) карбонил j-L-хомоцистеинил]-L-серии

Разтвор на продукта от част с) (200 mg, 0,49 ммола) в метанол (8,0 ml) се продухва с аргон в продължение на 30 минути, охлажда се до 0°С (баня лед-сол) и се обработва с 25% натриев метоксид в метанол (0,11 ml, 0,5 ммола), като барботирането на аргон се поддържа по време на прибавянето и по време на взаимодействието. След 5 минути при 0°С реакцията се прекъсва с 25% амониев хлорид (2,3 ml) и сместа се разпределя между етилацетат (2 х 12 ml) и вода (2,3 ml). Обединените органични екстракти се промиват с 25% амониев хлорид (4,6 ml) и разтвор на натриев хлорид (4,6 ml), сушат се (безводен натриев сулфат), филтрират се, изпаряват се до сухо

127

и се сушат под вакуум като се получава 183,2 mg продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество. ТСХ (етилацетат:хексан 4:1, Rf = 0,62).

e) (45-(4а,7а,10аР)]-октахидро-5-оксо-4-[[(фенилметокси)-карбон ил]амино][1,4]оксазино](3,4-Ь][1,3]-тиазепин-7карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част d) (50 mg, 0,11 ммола) в сух метиленхлорид (2,0 ml) се обработва с Amberlyst® 15 (Н+ форма, 13 mg), разбърква се три дни при стайна температура под аргон, обработва се с още Amberlyst® (13 mg) и се разбърква още три дни. Разтворът се декантира и хроматографира върху силикагелна колона (Merck), колоната се елуира със смес от етилацетат:хексан (1:3, 1:1) като се получава 21,1 mg продукт съгласно заглавието като сироп. ТСХ (етилацетат:хексан 4:1) Rf = 0,70.

f) метилов естер на [45-(4а,7а,10ар)]-октахидро-4амино-5-оксо-[ 1,4 ]оксазино][3,4-Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част е) (421 mg, 1,01 ммола) в сух метиленхлорид (25 ml) се обработва с триметилсилилйодид (0,72 ml), 5,06 ммола) и се разбърква при стайна температура под аргон в продължение на 1,75 часа. Сместа се изпарява до сухо и полученият сироп се разпределя между етилов етер (50 mi) и 0,2 N солна киселина (2 х 25 ml). Водната фаза се довежда до pH 10 с наситен разтвор на натриев бикарбонат (25 ml), обработва се с твърд натриев хлорид (2,0 д) и се екстрахира с метиленхлорид (3 х 75 ml) като се получава 219 mg продукт съгласно заглавието като сироп. Втора обработка на водната фаза с натриев хлорид (2,0 д) и повторна екстракция с

128

метиленхлорид (2 χ 100 ml) дава още 3? mg от продукта съгласно заглавието. ТСХ (метиленхлорид:метанол 9:1) Rf — 0,23.

д)метилов естер на [4S-[4а( R*), 7α, 1 0аβ ] ]-октахидро-4[ |2-(ацетилтио) - 1-оксо-3-фенилпропил]амино]-5-оксо[ 1,4 ]оксазино [ 3,4-Ь] [ 1,3 ] тиазепин - 7-кар бокс илна киселина (Б)-2-(ацетилтио)бензенпропанова киселина дициклохексиламино сол (516 mg, 1,32 ммола, 1,2 екв.) се суспендира в етилацетат (42 ml), промива се с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (5 х 6,0 ml) и разтвор на натриев хлорид (6,0 ml), суши се (безводен магнезиев сулфат), филтрира се, изпарява се до сухо и се суши под вакуум.

Свободната киселина се разтваря в сух метиленхлорид (9,5 ml), охлажда се до 0°С (баня лед-сол) и се обработва последователно с разтвор на продукта от част f) (285,5 mg, 1,09 ммола) в сух метиленхлорид (4,2 ml), триетиламин (0,14 ml, 1,15 ммола) и бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (484 mg, 1,09 ммола). Реакционната смес се разбърква при стайна температура в продължение на 1,0 час и при стайна температура в продължение на 2,0 часа под аргон, след което се дестилира до сухо. Полученият сироп се разтваря в етилацетат (40 ml), промива се с 0,5 N солна киселина (2 х 6,6 ml), вода (6,6 mi) и разтвор на натриев хлорид (6,6 ml), суши се (безводен натриев сулфат), филтрира се, изпарява се до сухо и се суши под вакуум. Суровият продукт се хроматографира върху силикагелна колона (Merck), колоната се елуира със смес от етилацетат:хексан( 1:2,1:1) като се получава

382,9 mg продукт съгласно заглавието като сироп. ТСХ (етилацетат.хексан 1:1) Rf = 0,28.

129

h)[4S-(4a(R‘),7a,10ap]]-OKTaxHApo-4-[(2-MepKanTO-lоксо-3-фенилпропил)амино]-5-оксо-[1,4]оксазино[3,4b ] [ 1,3 ]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част g) (382,9 mg, 0,82 ммола) в метанол (9,0 ml) се продухва с аргон в продължение на 30 минути, охлажда се до 0°С (баня лед-сол), след това се обработва с 1,0 N натриев хидроксид (3,32 ml, 4,0 екв., предварително продухан с аргон в продължение на 30 минути), като барботирането с аргон се поддържа по време на прибавянето и през време на реакцията. Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 5,0 часа и при стайна температура в продължение на 1,0 час, pH се довежда до 2,0 с 5%-ен разтвор на натриев бисулфат (14,5 ml), затопля се до стайна температура и се екстрахира с етилацетат (2 х 50 ml). Обединените органични екстракти се промиват с разтвор на натриев хлорид (10 ml), сушат се (безводен натриев сулфат), филтрират се, изпаряват се до сухо и се сушат под вакуум. Полученият сироп се изпарява двукратно из хексан (25 ml) и получената твърда пяна се хроматографира върху силикагелна колона (Merck), колоната се елуира със смес толуен:оцетна киселина (100:1, 50:1, 20:1) като се получава 212 mg продукт съгласно заглавието като твърдо вещество, т. на топене 224226°С, |а]р = -50,2° (с = 0,45, метанол). ТСХ (толуен:оцетна киселина 5:1), Rf = 0,28.

ВЕТХ: t_R = 5,37 мин (UV 220 nm) (98,9%), YMC S-3 ODS (С-18) х 150 mm , 60% (10% вода-90% метанол-0,2% фосфорна киселина) / 40% (90% вода - 10% метанол -0,2 % фосфорна киселина), изократно.

Анализ: Изчислено за €ιθΗ₂2Ν2θ5^2 · Н₂О:

130

С 52,34 Η 5,44 Ν 6,78 S 15,53

Намерено: С 52,58 Н 5,57 N 6,44 S 15,16.

ПРИМЕР 22 |4S-[4a(R*),7a,10aP]]-OKTaxHApo-4-|(2-MepKanTO-l-OKCo3-фенилпропил)амино]-5-оксо-7 Н-пиридо- [2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

Продуктът от пример 3 и 11 се получава и по следния начин:

a) метилов естер на [4S-(4a,7a, 1 Оар) ]-октахидро-4амино-5-оксо-7 Н-пиридо- [2,1-Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина ,р- толуенсулфонатна сол

Метилов естер на [4S-(4a,7a, Юар) ]-октахидро-4-амино5-оксо-7Н-пиридо - [2,1 - b] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина (6,11 д) се разтваря в етилацетат (около 100 ml) и се обработва с разтвор на р-толуенсулфонова киселина монохидрат (4,52 д) в метанол (3 ml) и етилацетат (20 ml). Незабавно се образува утайка. Сместа се разрежда с допълнително количество етилацетет и твърдият продукт се събира чрез филтриране. Твърдият продукт се промива с етилов етер и се суши под вакуум като се получава 7,908 g продукт съгласно заглавието като бледо жълто твърдо вещество с 98% чистота, т. на топене 179-181°С (разлагане).

b) метилов естер на [4S-[4a(R‘) ,7a, 1 0аβ] ]-октахидро-4- [ [2- (ацетилтио) - 1 -оксо-3-фенилпропил] амино ] - 5-оксо-7 Н-пиридо[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Суспензия на продукта от част а) (636 mg, 1,48 ммола) в метиленхлорид (5 ml) и диметилформамид (1 ml) се обработва с N-метилморфолин (163 μΐ, 150 mg ,1,48 ммола) и след това с 1хидрокси-7-азабензотриазол (208 mg, 1,52 ммола). Светло жъл

131 тият разтвор след това се обработва с (5)-2-(ацетилтио)бензенпропанова киселина (333 mg, 1,48 ммола в метиленхлорид (5 ml) и се охлажда в ледена баня. Прибавя се етил-3-(диметиламино jпропил карбодиимид хлороводородна сол (2,88 mg,150 ммола) и сместа се разбърква при 0°С в продължение на 1 час и при стайна температура в продължение на 1,5 часа. Разтворителят се отстранява на ротационене изпарител и остатъкът се разпределя между етилацетат и 0,5 N солна киселина. Етилацетатният екстракт се промива последователно с вода (двукратно), 50% наситен разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид,след това се суши (натриев сулфат), филтрира и дестилира, като се получава 651,2 mg продукт съгласно заглавието като бяла пяна.

с) [4S-[4a(R*),?a,10ap] ]-октахидро-4- [(2-меркапто-1оксо-3-фенилпропил)амино]-5-оксо-7 Н-пиридо- (2,1Ь] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на метиловия естер на продукта от част Ь) в деокислен метанол се обработва с 1N разтвор на натриев хидроксид съгласно процедурата от пример 3 d) като се получава продуктът съгласно заглавието.

ПРИМЕР 23 [4S-[4a(R*),7a,10ap]]-oKTaxHApo-4-((2-MepKanTO-l-oKco3-фенил пропил) амино ] -5-оксо - 7 Н-пиридо - [2,1-Ь][1,3(тиазепин-7карбоксилна киселина

Продуктът от пример 3, 11 и 22 може също да се получи и както следва:

a) N - ((фенилметокси) карбонил]- L-метионин

В 2 L колба снабдена с механична бъркалка и вътрешен термометър, натриев хидроксид (61,65 д, 1,541 мола)

132 се разтваря в дестилирана вода (1000 ml). Към този разтвор се прибавя L-метионин (100,0 д, 0,670 мола) при стайна температура. Разтворът се охлажда в ледена баня (вътрешна температура 3°С) и за период от 10 минути се прибавя бензилхлороформиат (110 ml, 0,737 мола). След 15 минути индуукционен период, вътрешната температура се покачва от 3°С на °C за период от 30 минути и след това спада до 0°С зе период от 15 минути. Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 2 часа, през което време първоначално мътната реакционна смес започва да се хомогенизира. Ледената баня се отстранява и реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура за период от един час. Реакционната смес се прехвърля в делителна фуния и се промива с хексан (2 х 300 ml). Водният слой се подкислява с 6N солна киселина до pH 5 и се разрежда с етилацетат (600 ml). След това сместа се подкислява до pH 2. Органичният слой се отделя и водният слой се екстрахира с етилацетат (3 х 600 ml). Органичните екстракти се обединяват и промиват с разтвор на натриев хлорид (750 ml), сушат (магнезиев сулфат), филтрират и концентрират под вакуум като се получава леко жълто масло. Суровият продукт (масло) се разтваря в толуен (1500 ml) и разтворът се концентрира до половината обем. Прибавя се втора порция толуен (750 ml) и се концентрира повторно, така че да останат 630 ml толуен. Този разтвор се държи при 5°С една нощ, през което време част от продукта кристализира из разтвора. Твърдият продукт се разтваря повторно при затопляне до стайна температура. Прибавя се толуен (134 ml) ( остават зародишни кристали). При механично разбъркване се прибавя хептан (500 ml) на 30 ml порции при 10 минутен интервал

133 (приблизително 3 часа общо време на прибавяне). В този момент продуктът започва да кристализира из разтвора. Прибавя се допълнителна порция хептан (1020 ml) за период от 1,5 часа и получената суспензия се разбърква в продължение на 2 часа. Продуктът се събира чрез филтриране под вакуум, промива се с 1:2 толуен:хептан (3 х 150 ml) и хептан (3 х 500 ml) и се суши на въздуха като се получава 158,6 g продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, т. на топене 66°С, (а]0 = -1,5° (с — 1, 95% етанол). ТСХ (етанол:вода 3:1) R_f = 0,78.

Анализ: Изчислено за CjjHiyNC^S:

С 55,1 1 Н 6,05 N 4,94

Намерено: С 54,96 Н 6,20 N 4,83.

Ь) метилов естер на N-[(фенилметокси)карбонил]-Еметионин

В 3 L колба снабдена с механична бъркалка и вход за аргон, продуктът от част а)(100,0 д, 0,353 мола) се разтваря в метанол (2 L) и се прибавя р-толуенсулфонова киселина монохидрат (6,7 1 д, 0,035 мола). Реакционната смес се разбърква под аргон в продължение на 21 часа. Прибавя се триетиламин (4,9 ml, 0,035 мола) и реакционната смес се разбърква в продължение на още 15 минути. Реакционната смес се концентрирпа под вакуум като се получава бледо жълто масло. Маслото се разтваря в етилацетат (900 ml) и разтворът се промива с 1N солна киселина (740 ml), наситен разтвор на натриев бикарбонат (2 х 740 ml) и разтвор на натриев хлорид (740 ml). Органичният слой се суши, филтрира и концентрира под вакуум до бледо жълто масло. Маслото се концентрира из хексан (2 х 100 ml) като се получава 98,22 g продукт съгласно

134 заглавието като бяло твърдо вещество.

метионин сулфоксид

В 3 L колба снабдена с механична бъркалка, продуктът и дестилирана вода (215 ml). Разтворът се охлажда в ледена баня и се прибавя натриев бикарбонат (28,5 , 0,339

Прибавя се N-хлоросукцинимид (44,0д,

0,329 мола) на малки порции за период от 25 минути, така че вътрешната температура да се превишава 7°С. Сместа се разбърква в ледена баня в продължение на 1 час и след това се оставя да се затопли до стайна температура за период от 1 час. Сместа се концентрира под вакуум до около 75% отстраняване на метанола, разрежда се с етилацетат (1000 ml) и се промива с разтвор на натриев хлорид (500 ml). Слоят с натриев хлорид се екстра хира повторно с етилацетат (2 х 200 ml). Органичните екстракти се обединяват, сушат (магнезиев сулфат), филтрират и концентрират под вакуум до получаване на бистро, вискозно масло. Маслото се концентрира из толуен (3 х 100 ml) , а останалите разтворители се отстраняват при висок вакуум до получаване на суров продукт съгласно заглавието като бистро масло, което се втвърдява до бяло твърдо вещество (131,4 д). Суровият продукт съдържа 12 тегловни % сукцинимид и 9 тегловни % толуен, определено с ЯМР анализ. Продуктът е смес на сулфоксидни диастереомери.

d) метилов естер на 3-[(ацетокси)метил]-К1- [ (фенилметокси) карбонил]- L-хомоцистеин

Към еднолитрова колба съдържаща продукта от част с) (102,8 g корегирано тегло, 0,328 мола) се прибавя толуен

135 (480 ml), натриев ацетат (32,3 g, 0,394 мела) и оцетен анхидрид (186 ml, 1,970 мола). Получената смес се нагрява под обратен хладник (118°С) под аргон в продължение на 18 часа. Тъмнокафявата реакционна смес се оставя да се охлади до стайна температура.След един час при стайна температура реакционната смес става много плътно твърдо вещество.

Твърдият продукт се разтваря с етилацетат (100 ml) и сместа се концентрира частично под вакуум до вискозен кафяв остатък. Остатъкът се концентрира из толуен (240 ml) до отстраняване на оцетния анхидрид, разрежда се с етилацетат (1000 ml) и внимателно се промива с наситен разтвор на натриев бикарбонат (4 х 680 ml). Органичният слой се промива с разтвор на натриев хлорид (450 ml), суши (магнезиев сулфат), филтрира и концентрира под вакуум. Останалите разтворители се отстраняват под висок вакуум като се получава леко кафяво твърдо вещество. Суровият продукт се разтваря в н-бутилацетат (450 ml) при затопляне (35°С) и разбъркване. След охлаждане до стайна температура към разтворасе прибавя бавно хексан (200 ml) при разбъркване за период от 15 минути. В този момент продуктът кристализира из разтвора Прибавя се допълнителна порция хексан (700 ml) за период от 30 минути и получената суспензия се разбърква в продължение на 3 часа. Продуктът се събира чрез филтриране и се промива с 1:2 нбутилацетат:хексан (200 ml), 1:4 н-бутилацетат:хексан (2 х 240 ml) и хексан (2 х 250 ml). Продуктът се суши на въздуха, след това се суши под висок вакуум като се получава 87,7 g продукт съгласно заглавието като слабо кафяво твърдо вещество, т. на топене 73°С, (ajp, = -1,6° (с = 1, 95% етанол). ТСХ (5% метанол/метиленхлорид), Rf = 0,80.

136

Анализ: Изчислено за C^HojNOgS:

С 54,07 Н 5,95 N 3,94

Намерено: С 53,48 Н 5,74 N 3,82.

е) S-ацетил- N- [ (фенилметокси) карбонha]-L-

хомоцистеин

В 1 L колба разтвор на продукта от част d) (83,0 g, 0,233 мола) в тетрахидрофуран (415 ml) се насища с аргон в продължение на 30 минути. В друга 2L колба снабдена с механична бъркалка и вход за аргон, разтвор на 86,8% калиев хидроксид (62,7 д, 0,969 мола) в дестилирана вода (280 ml) се насища с аргон в продължение на 15 минути.

Към разтвора на калиевия хидроксид бързо се прибавя тетрахидрофурановият разтвор (вътрешна температура 20°С) през канила, при енергично разбъркване под аргон. Колбата съдържала продукта от част d) се промива с 20 ml тетрахидрофуран ( наситен с аргон в продължение на 15 минути) и промивката се прибавя към реакционната смес. След 30 минути реакционната смес е бистра и двуфазна и настъпва екзотермично повишаване на температурата до 28°С.

След още 2 часа реакционната смес се охлажда до 1°С (вътрешна температура) и се прибавя натриев борохидрид (2,75 д, 0,073 мола) на една порция (екзотермично повишаване на температурата до 6,8°С). Реакционната смес се разбърква в продължение още на 20 минути при 0°С и след това се оставя да се затопли до 11°С за период от 30 минути. Реакционната смес се охлажда до 1°С и се прибавя оцетен анхидрид (68,6 ml, 0,727 мола) за период от 10 минути. Настъпва екзотермично повишаване на температурата до 10°С по време на прибавянето. Вътрешната температура пада обратно до 4°С преди да

137

завърши прибавянето. Охлаждащата баня се отстранява и реакционната смес се се разбърква при стайна температура в продължение на 45 минути.

Реакционната смес се концентрира под вакуум до приблизително половината от обема, подкислява се до pH 2 с 6N солна киселина (175 ml) и се екстрахира с етилацетат (2 х 1,1 L). Обединените органични екстракти се промиват с разтнвор на натриев хлорид (560 ml). Органичният слой се обработва с активен въглен и безводен магнезиев сулфат, филтрира се и се концентрира под вакуумп до жълто масло. Прибавя се н-бутилацетат (380 ml) и разтворът се концентрира под вакуум (45°С) до половината от обема. Прибавя се втора порция н-бутилацетат (190 ml) и се концентрира отново така че 190 ml н-бутилацетат да останат. Бавно се прибавя хептан (300 ml) при разбъркване до помътняване и се прибавят зародишни кристали. След 15 минути из разтвора кристализира бяло твърдо вещество. Прибавя се бавно втора порция хептан (570 ml) за период от 30 минути и получената суспензия се разбърква при стайна температура една нощ. Продуктът се събира чрез филтриране, промива се с 1:3 н-бутилацетат:хептан (2 х 275 ml), и хексан (2 х 275ml),суши се на въздуха и след това се суши под висок вакуум като се получава 50,1 g продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, т. на топене 73-74°С, [а] j) = -1,3° (с = 1, 95%етанол) .ТСХ (етанол:вода 3:1) Rf = 0,83. Анализ: Изчислено за Cj^ HJ7NO5S:

С 54,01 Н 5,50 N 4,50

Намерено: С 53,88 Н 5,45 N 4,44.

Филтратът се концентрира така че да останат 100 ml бутилацетат. Този разтвор се обработва с 310 ml хептан както

138

е описано по-горе като се получава второ количество 8,4 д от продукта съгласно заглавието катс· бяло твърдо вещество, общ добив 58,5 д.

f) метилов естер на [S-(R*,R*)-2-[[4-(ацетилтио)-1 -оксо2-[[(фенилметокси)карбонил[амино]бутил]амино]-6,6-диметоксихексанова киселина

S-ацетил-М- { (фенилметокси) кар бонил] - L-хомоцистеин (0,456 мола) се разтваря в смес от метиленхлорид (600 ml) и диметилформамид (90 ml) и се прибавя хидроксибензотриазол хидрат (64,72 д, 0,479 мола) .Сместа се охлажда в ледена баня и се прибавя разтвор на метилов естер на (5)-2-амино-6,6диметоксихексанова киселина [получен както е описано в пример 1 е), 93,7 д, 0,456 мола)} разтворен в метиленхлорид (600 ml). Накрая се прибавя етил-3-(диметиламино)пропилкарбодиимид хлороводородна сол (91,83 д, 0,479 мола) и реакционната смес се разбърква един час при 0°С, след това в продължение на 2 часа при стайна температура. В края на това време, реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се разпределя между етилацетат (3 L) и наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (1 L). Органичният екстракт се промива с вода (1 L), 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (1 L), вода (1 L) и разтвор на натриев хлорид (1 L), след това се суши (натриев сулфат) и концентрира под вакуум до 238 g суров продукт. Суровият продукт се разтваря в етилацетат.метиленхлорид (1:1, 300 ml) и се пропуска през слой от 10 х 15 cm Merck силикагел. След елуиране с 8:2 етилацетат:хексан (7L) и след това етилацетат (4 L) се получава 205,28 g продукт съгласно заглавието.

д) метилов естер на [4S-(4a,7a, 1 ОаР) ]-октахидро-4139

Ц(фенилметокси)карбонил]амино]-5-оксо-7Н-пиридо-[2,1Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част f) (205,28 g, 0,412 мола,сушен чрез изпаряване в метиленхлорид/толуен) в метанол (2 L) се охлажда до 0°С (ледена баня) и се продухва с аргон в продължение на 30 минути. Прибавят се бързо 25 тегловни % разтвор на натриев метоксид в метанол (95,1 ml, 1,01 екв.) при непрекъснато продухване с аргон и реакционната смес се разбърква 10 минути и след това реакцията се спира посредством допълнително прибавяне на 1L наситен разтвор на амониев хлорид, разрежда се с 0,5 L вода и се обработва с 3 L етилацетат. Получената смес се разделя на две порции, които поотделно се концентрират под вакуум като се атстраняват органичните компоненти (етилацетат и метанол). Концентрираните остатъци се обединяват и се обработват с (1 L) етилацетат. Органичният слой се отделя и се промива с 0,5 L наситен разтвор на амониев хлорид. Обединените водни разтвори се екстрахират повторно с 1 L етилацетат. Органичните екстракти се обединяват и се промиват с 1 L вода и две 1 L порции разтвор на натриев хлорид, сушат се (натриев сулфат), филтрират се и се концентрират. Остатъкът след това се изпарява с метиленхлорид и се суши под вакуум като се получава 182,65 g свободен сулфхидрил на продукта от част f).

Този междинен свободен сулфхидрил (0,400 мола) се разтваря в метиленхлорид (4 L) и се обработва с 30,8 ml (0,400 мола) трифлуорооцетна киселина. Реакционната смес се нагрява под обратен хладник в продължение на 16 часа, след това се охлажда и концентрира под вакуум. Полученият остатък се разтваря в 2 L етилацетат, след това се промива с 400 ml 0,1

140

N солна киселина, 1 L. вода, 1 L наситен разтвор на натриев бикарбонат, 1 L вода и 1 L разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат), филтрира и концентрира. Остатъкът се изпарява с метиленхлорид и се суши под вакуум като се получава 166,24 д продукт съгласно заглавието.

h) метилов естер на [4S-(4α,7α, 1 0аβ) ]-октахидро-4амино-5-оксо-7Н-пиридо - [2,1-b] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Йодотриметилсилан (76,6 ml, 0,538 мола) се прибавя към разтвор поддържан под аргон продукт от част д) (162,43 д, 0,414 мола) разтворен в метиленхлорид (1,5 L). След разбъркване в продължение на 1,5 часа реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се разпределя между 1L етилацетат и 700 ml IN солна киселина ( наблюдава се отделяне на CO_2j pH 1,2). Етилацетатният слой се отделя и се екстрахира с 300 ml IN солна киселина Обединените кисели водни екстракти се промиват след това с 1 L етилацетат, след това се охлаждат до 0°С и се алкализират с 4 N натриев хидроксид (около 275 ml) до pH 10,0. Водният слой се насища с твърд натриев хлорид, след това се екстрахира с пет 1L порции метиленхлорид. Обединените органични екстракти се сушат (натриев сулфат), филтрират и концентрират под вакуум. Остатъкът се разтваря повторно в 1 L метиленхлорид и се промива с 0,5 L разтвор н натриев хлорид, суши се (натриев сулфат), филтрира се и се концентрира като се получава

98,8 g продукт съгласно заглавието.

i) метилов естер на [4S-(4a(R*) ,7a, 1 Оар ] ]-октахидро-4- [ [2-(ацетилтио)-1 - оксо-3-фенилпропил]амино]-5-оксо-7Н-пиридо[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

141 (S)- 2-ίацетилтио)бензенпропанова киселина дициклохексиламино сол (173,1 д, 0,427 мола) се разпределя между етилацетат (1 L) и 10%-ен разтвор на калиев бисулфат (800 ml). Органичният слой се отделя и промива с 5%-ен разтвар на калиев бисулфат (1 L), 50%-ен разтвор на натриев хлорид (1 L), и разтвор на натриев хлорид (1 Ц,суши се (натриев сулфат), филтрира и концентрира под вакуум. Остатъкът се изпарява

няколко пъти с метиленхлорид, след това се суши под вакуум една нощ като се получава 97,3 g суров (S)-2-(ацетилтио) бензенпропанова киселина.

Разтвор на тази (S)-2-(ацетилтио) бензенпропанова киселина (0,427 мола) се разтваря в метиленхлорид (900 ml), охлажда се в ледена баня и се обработва с разтвор на продукта от част h) (100,28 g, 0,388 мола) в метиленхлорид (600 ml), триетиламин (154,1 ml, 0,388 мола) и накрая на една порция се прибавя бензотриазол-1 -илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (188,9 д, 0,427 мола). След един час при 0°С и 2 часа при стайна температура реакционната смес се концентрира под вакуум и се разтваря в 2 L етилацетат. Органичният разтвор се концентрира под вакуум и се разтваря в 2 L етилацетат. Органичният разтвор се промива с 0,5 L разтвор на натриев хлорид, 1 L 0,5 N солна киселина, 1 L вода, 2L наситен разтвор на натриев бикарбонат, 1 L вода и 1 L разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат), филтрира и концентрира. В този момент, водните промивки, които съдържат продукта (определено с ТСХ) се екстрахират повторно с етилацетат. Етилацетатните екстракти се преработват по обичаен начин, обединяват се като се получава продукт като жълто масло. Жълтото масло в 1:1 етилацетат:хексан се нанася на 15 х

142 силикагелна колона и се елуира с 7L 1:1 етилацетат:хексан и

след това с	4L 6:4 етилацетат:хексан и накрая с 2 L 7:3 етилаце-
тат:хексан.	Филтратът съдържащ желания продукт се концен-
трира като	се получава 123,5? g продукт съгласно заглавието.
j)	[4S-[4a(R*),?a,10ap] [-октахидро-4 - [ (2-меркапто-1 -

оксо-3-фенилпропил)амино[-5-оксо-7Н-пиридо- [2,1Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

В 12 L тригърла колба, снабдена допълнително с

фуния и механична бъркалка, се поставя разтвор на продукта от част i) (96,0 д, 0,207 мола) в метанол (1,1 л). Разтворът се продухва с аргон 30 минути, след което се охлажда на ледена баня докато вътрешната температура достигне +7°С. За период от 1 часа се прибавя обща 1,45 L 1 N разтвор на натриев хидроксид (предварително наситен с аргон в продължение на 30 минути). Реакционната смес се продухва непрекъснато с аргон

по време на прибавянето. Реакционната температура се покачва до + 12°С и се поддържа така по време на прибавянето. Реакционната смес се разбърква още 30 минути, след това се затопля до стайна температура с водна баня със стайна температура и се разбърква с насищане в продължение на 2,5 часа. Около 250 ml 6N солна киселина се прибавя на капки за период от 15-20 минути като pH се наглася на 2. По време на подкисляването се образува смолиста утайка. След непрекъснато разбъркване в продължение на още 2 часа утайката се променя във фино бяло твърдо вещество, с присъствие на на някои по-големи късове твърд продукт.

Продуктът се събира в 600 ml фуния от синтеровано стъкло. Събраното твърдо вещество се промива с 1 L вода и след това с 2 L безводен етер и накрая се суши под вакуум като се получава 70,3 g продукт съгласно

143

заглавието като фино бяло твърдо вещество, т. на топене 218220°С ⁰ (разлагане). ТСХ (1:99 оцетна киселина/етилацетат), R_f = 0,48.

ВЕТХ: t_R (YMC S-3 ODS 6,0 х 150 mm, l,5mL/MHH, изократно 60% В, Буфер А = метано/вода/фосфорна киселина (19:90:0,2), буфер В = метанол/вода/фосфорна киселина (90:10:0,2) = 9,33 мин., 99,3% от площта на общия пик при 220nm.

Анализ: Изчислено за С j 9H24N2O4S2:

С 55,86 Н 5,92 N 6,86 S 15,70

Намерено: С 55,83 Н 5,83 N 6,96 S 15,70.

ПРИМЕР 24

Метилов естер на [4S - (4a(R‘) ,7α, 1 Оар ] ]-октахидро-4 - ((2 (ацетилтио) -1 -оксо-3-фенилпропил]амино]-5-оксо-7Н-пиридо- [2,1-

b] [ 1,3 ]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Реакцията на свързване описана в примери Зс), 11 i),

22b) и 23 i) може да се проведе и по следния начин:

Разтвор на (5)-2-(ацетилтио)бензенпропанова киселина (1,83 д, 8,14 ммола) и метилов естер на (4S-(4a,7a,10aP)Jоктахидро-4-амино-5-оксо-7Н-пиридо- [2,1-Ь][1,3]тиазепин-7 карбоксилна киселина (2,11 д, 8,17 ммола) в сух метиленхлорид (20 ml) се охлажда до 0°С и на една порция се прибавя етил3-(диметиламино)пропил карбодиимид хлороводородна сол (1,77 д, 9,32 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 6 часа и след това се концентрира до маслообразна пяна. Този остатък се разпределя между етилацетат (100 ml) и 1N солна киселина (50 ml), наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (2 х 50 ml) и наситен воден разтвор на натриев хлорид (50 ml) , суши се (безводен натриев

144 сулфат), филтира и концентрира под вакуум като се получава

3,43 g продукт съгласно заглавието като бяла пяна.

ПРИМЕР 25 {4S-|4a(R*),7a,10ap]j-OKTaxHApo-4-[(2-MepKanTo-l-OKCo3-фенилпропил) амино]-5-оксо-7Н-пиридо- [2,1-Ъ][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина 1,1-диметилетиламино сол ml тригърла колба снабдена с обратен хладник се евакуира и три пъти се зарежда с аргон. След това колбата се зарежда с (4 S-[4а( R*),7α, 1 Оаβ ] ]-октахидро-4-[ (2-меркапто-1оксо-3-фенилпр опил) амино ]-5-оксо- 7 Н-пиридо- [2,1-Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина (0,20 д) и 1:1 разтвор на подложен на суха дестилация абсолютен етанол и ацетонитрил (1,0 ml) .При разбъркване на хетерогенната смес на капки се прибавя трет.бутиламин . Разтворът става хомогенен за три минути след като завърши прибавянето на амина. Разтворът (вътрешна температура 20°С) се разрежда бавно чрез прибавяне на капки на ацетонитрил до краен обем от 10 ml. След още 2 часа разбъркване твърдото вещество се филтрира, промива се един път с 100% ацетонитрил (5 ml), суши се на въздуха и се премества под висок вакуум в продължение на 2 часа за отстраняване на останалите разтворители като се получава 0,2 g продукт съгласно заглавието като бяло кристално твърдо вещество.

Горният продукт се обединява с продукта от други цикли и се прекристализира както следва. 25 ml тригърла колба снабдена с обратен хладник, магнитна бъркалка , фуния за евакуиране се пълни три пъти с аргон. В колбата се внасят 1,1-диметиламино сол на продукта (0,37 д) и 59% ацетонитрил/етанол (2,28 ml). Колбата и съдържанието се

145 затоплят до 29-32°С за разтваряне на твърдите продукти.Разтворът се разрежда с ацетонитрил се отстранява и колбата се оставя да се охлади до стайна темсместа се филтрира и твърдият продукт се промива един път с ацетонитрил (10 ml), суши се на въздуха и се премества под висок вакуум за отстраняване на останалите разтворители като се получава 0,29 g продукт съгласно заглавието като бяло кристално твърдо вещество,

т.

на топене,свива се при 160°С и

бавно се топи и разлага, когато температурата се

190-191°С (при 190-191°С останалият стъкловиден повиши до продукт

ПРИМЕР 2.6

Метилов естер на [4S-(4a,7a, ЮаР) ]-октахидро-4-амино5-оксо-7Н-пиридо - [2,1-b] [ 1,3]тиазепин- 7-кар бокс или а киселина

Този междинен продукт от примери Зс), 1 lh) и 23h) се получава също и както следва:

а) Диетилов естер на 2-(ацетиламино)-2-[4(ацетокси) бутил]пропандикарбосдилна киселина

Разбърквана суспензия от 95% натриев хидрид (60,8 д,

2,532 мола) в безводен диметилформамид (500 ml) под атмосфера от аргон се охлажда до 0°С (ледена баня). За период от 45 минути се прибавя разтвор на диетилов естер на ацетамидомалонова киселина (500 д, 2,302 мола) в безводен диметилформамид (1,2 л), като реакционната температурата се държи под 18°С. След като завърши прибавянето, мътният разтвор се затопля постепенно до стайна температура, прибавя се 4-бромобутилацетат (471,5 д, 2,417 мола). Сместа след това се разбърква при 59-60°С в продължение на 18 часа. По

146 лучената сеуспензия се охлажда до стайна температура, реакцията се спира с абсолютен етанол (40 ml) и ледена оцетна киселина (4 ml), разбърква се в продължение на около 15 минути, излива се в 10% -ен разтвор на литиев хлорид и се екстрахира с етилацетат (2x3 л). Обединените етилацетатни екстракти се промиват с 10%-ен разтвор на литиев хлорид (3x3 л), сушат се (безводен натриев сулфат) и се изпаряват под вакуум като се получава 750 g продукт съгласно заглавието като масло.

Ь) 2-(ацетиламино)-6-хидроксихексанова киселина

Продуктът от част а) (730 д, 2,2 мола) се зарежда в 5 литрова тригърла колба( снабдена с термометър, магнитна бъркалка и въздушно охлаждан хладник) и се разрежда с абсолютен етанол (300 ml) и след това се прибавя 6N воден разтвор на натриев хидроксид (1,6 л, 9,6 мола). Реакционната смес се нагрява при 68-70°С в продължение на 5 часа като се получава хомогенен разтвор. Реакционната температура се охлажда до стайна температура и бавно се прибавя 6N солна киселина (1,32 л) до pH 1,3. Колбата е снабдена с къса връзка с дестилатор за дестилиране на етанола когато температурата се повиши бавно до 87-90°С и се поддържа при тази температура в продължение на 8,5 часа. Наблюдава се бавно отделяне на въглероден диоксид. Общият обем на дестилата е 600 ml. pH на крайния разтвор е 3,0. Реакционната смес се концентрира под вакуум докато се изпари цялото количество вода и след това се концентрира из толуен (2 х 500 ml). Полутвърдата маса се обработва с абсолютен етанол (1 л), филтрира се и се промива с допълнително количество абсолютен етанол (500 ml). Филтратът се концентрира под вакуум като се получава 509 g сурово масло (82% чистота), което съдържа

147

етанол и толуен.

с) (S)-2-амино-6-хидроксихексанова киселина

Суровият продукт от част Ь) (443 д, съдържащ малко толуен и етанол, изчислено тегло за изходния продукт 394 д) се разтваря във вода (3,3 л) и се прибавя 1 N литиев хидроксид докато pH стане 7,5 (необходим е 1,53 л). Сместа се нагрява до 35°С и се прибавя ацилаза (качество 1 от свински бъбрек, 0,4 д) и реакционната смес се разбърква в продължение на 24 часа. В края на този период pH е 7,33. Стойността на pH се наглася на 7,5 с 1N литиев хидроксид (около 2 ml), прибавя се още ацилаза (0,4 д) и реакционната смес се разбърква в продължение още на 17 часа (pH 7,3). Стойността на pH на разтвора се наглася на 5,9 с оцетна киселина. Прибавят се Celite® (20 g) и въглен (20 д) и реакционната смес се нагрява до 92°С и се поддържа при тази температура 5 минути. Реакционната смес се филтрира през слой Celite® и се концентрира под вакуум до полупастообразно вещество (441 д). Този продукт се обработва

с 900 ml 1:5:10 вода:етанол:диметилформамид. Необходимо е малко нагряване, за да се раздроби първоначалната маса. Реакционната смес стои в хладилник една нощ, филтрира се и се промива с 200 ml от горната смес от разтворители като се получава 214 g суров продукт (около 40% N-ацетилен продукт). Този продукт се суспендира в метанол (500 ml), нагрява се на парна баня, оставя се да стои в продължение на 2 часа и се филтрира. Тази процедура се повтаря втори път като се получава 108 g продукт съгласно заглавието, [а)р = +22° (с —

1,44, 6N солна киселина).

Алтернативно, етап Ь) и с) могат са проведат и както следва:

148

В 5 литрова тригърла колба, снабдена с механична бъркалка и термометър с термодвойка се зарежда с продукта от част а) (631 д, 1,933 мола) и тетрахидрофуран (259 ml). Към разбърквания разтвор сеприбавя 6N разтвор на натриев хидроксид (1385 ml, 8,31 мола) , за период от 40 минути. Реакцията става силно екзотермична и е необходимо охлаждане на реакционната смес в ледена баня, за да се запази температурата под 60°С. Реакционната смес след това се нагрява до като започне лека кондензация (температура в съда 67-68°С) в продължение на 5,5 часа.

Сместа се разбърква при стайна температура една нощ (16,5 часа). Стойността на pH се довежда от 12,75 до 1,30 посредством степенно прибавяне на 6N разтвор на солна киселина (1150 ml, 6,9 мола), като температурата се поддържа при около 25°С. Сместа се нагрява постепенно с къса дестилаторна глава докато започне дестилация и отделяне на газ (въглероден диоксид) (72,3° С температура в съда, 70°С температура на главата) и докато спре дестилацията и отделянето на газ стане много бавно (94,1°С температура на съда, 50°С температура на главата). Събраното количество общ дестилат е 410 ml , а остатъкът в съда има pH 3,9. Нагряването продължава още десет минути без повече да се отделя газ. Общото време за нагряване от началото на дестилацията е 7,5 часа.

След разбъркване при стайна температура една нощ, бистрата реакционна смес (pH 3,50) се дестилира на ротационен изпарител под вакуум в 60°С баня и пастообразният остатък се разбърква с абсолютен етанол (750 ml). Получената кристална суспензия се дестилира на ротационене изпарител (вакуум

149 помпа, 60°С баня) и пастообразният остатък се промива с абсолютен етанол (2 х 750 ml). Към крайния остатък се прибавя абсолютен етанол (1500 ml) и сместа се разбърква в 60°С баня докато се превърне в кристална суспензия, около 20 минутни след това се разбърква при стайна температура в продължение на 20 минути. Суспензията се филтрира и утайката се промива с абсолютен етанол (2 х 300 ml). Филтратите изглеждат мътни и по-нататък се избистрят чрез филтриране през слой Celite®.

Новият бистър разтвор се дестилира на ротационен изпарител като се получава 434,6 g продукт съгласно заглавието гъст сироп с кехлибарен цвят. ТСХ (10:1:1, метанол:оцетна киселина.вода), Rf = 0,59.

с) (8)-2-амино-6-хидроксихексанова киселина

Петлитрова тригърла колба, снабдена с механична бъркалка и термометър се зарежда с продукта от част Ь) (434 д,1,93 мола) и вода (3 л). Посредством прибавяне на 1N разтвор на литиев хидроксид (705 ml), pH на мътния разтвор се наглася от 4,05 на 7,50. Разтворът се затопля до 36°С и се прибавя ацилаза I от свински бъбрек (0,710 д). Сместа се разбърква при 35°С до 36°С в продължение на 23,5 часа. Реакционната температура се охлажда до стайна температура и pH се довежда от 7,0 на 5,9 посредством прибавяне на ледена оцетна киселина (4,4 ml). Прибавят се Celite® (29 g) и въглен (29 д) и темпера турата се повишава с дестилиране при 91°С. Нагряването се отстранява и сместа се оставя да се охлади до стайна температура. Суспензията се филтрира през 18,5 cm диск филтърна хартия и утайката се промива с вода. Безцветният филтрат (около 3,9 л) се концентрира на роторен изпарител при 60°С като се получава 476 g бистро гъсто масло. Прибавя се абсо150

лютен етанол (720 ml) и сместа се разбърква докато кристалната суспензия се хомогенизира. Разтворителят се изпарява отново и към получения бял твърд остатък се прибавя абсолютен етанол (1584 ml). Суспензията се върти на ротационен изпарител при стайна температура една нощ (15 часа) и се филтрира през 18,5 cm хартия. Утайкато се промива с абсолютен етанол (7 х 100 ml) и се суши до постоянно тегло под вакуум като се получава 85,8 g бял кристален продукт съгласно заглавието. ТСХ (метанол:вода:оцетна киселина, 10:1:1).

Rf =0,62.

Анализ: Изчислено за C15H13NO3:

С 48,25 Н 8,94 N 9,38

Намерено: С 48,66 Н 8,77 N 9,43.

d) метилов естер на [S-(R*,R*)-2-[[4-(aneTHATHo)-lоксо- 2 - [ [ (фенилметокси) карбонил]амино] бутил [амино]-6хидроксихексанова киселина

Суспензия от (5)-2-амино-6-хидроксихексанова киселина (1,0 д, 6,8 ммола) в метанол (20 ml) се разбърква под аргон при стайна температура и се обработва с триметилсилилхлорид (1,9 ml, 15 ммола). Полученият разтвор се разбърква при стайна температура в продължение на 18 часа. Обемът на разтворителя се намалява до около 3,5 ml под намалено налягане. Прибавя се ацетонитрил (5 ml) и разтворът се охлажда да -10С. След това се прибавя Ν,Ν-диизопропилетиламин (4,15 ml, 23,8 ммола) и разтворът се охлажда да -40°С като се получава разтвор съдържащ метилов естер на (3)-2-амино-6-хидроксихексанова киселина.

В отделна колба, разтвор на З-ацетил-N-[ (фенилметокси)карбонил [хомоцистеин [получен както е описано в при

151 мер 23 е), 2,117 g, 6,8 ммола) в ацетонитрил (5 ml) при 0°С се обработва с N, N - дии зопропилетилам ин (1,20 ml, 6,8 ммола/.

В друга колба, хидроксибензотриазол хидрат (0,104 д, 0,68 ммола) и метансулфонилоксибензотриазол (1,450 д, 6,8 ммола) се разтваря в ацетонитрил и се охлажда до -18°С. Първоначално образуваният Б-ацетил-N- [(фенил мето кси) карбонил[хомоцистеин

след това се прибавя на капки към този разтвор като вътрешната температура се поддържа по-ниска от -10°С. След разбъркване при -18°С до -12°С в продължение на 3 часа, полученият разтвор се прибавя на капки към горния разтвор съдържащ метилов естер на (Б)-2-амино-6-хидроксиексанова киселина при -40°С. Сместа се оставя бавно да се затопли до 16°С за около 18 часа. Реакционната смес след това се излива в етилацетат (50 ml) hIN солна киселина (50 ml). Сместа се прмества в делителна фуния и слоевете се разделят. Водният слой се екстрахира с етилацетат (2 х 50 ml). Органичните слоеве се обединяват и след това се промиват с 1N солна киселина (100 ml)., наситен разтвор на натриев бикарбонат (100

ml) и наситен разтвор на натриев хлорид (100 ml). Разтворът се суши над магнезиев сулфат, филтрира се и се концентрира до бяло твърдо вещество. Към това твърдо вещество се прибавя трет.бутилметилов етер (20 ml) и получената суспензия се разбърква при стайна температура в продължение на 4 часа и се филтрира

Продуктът се промива с трет.бутилметилов етер и се суши като се получава 2,087 g продукт съгласно заглавието

т. на топене 89-90°С.

е) метилов естер на [S-(R*,R*)-2-[ [4-(ацетилтио) -1-оксо2- [ [(фенилметокси)карбонил)амино[бутил]амино[-6-оксо хексанова киселина

152

Към разтвор на оксалилхлорид (546 μΐ, 6,27 ммола) в сух метиленхлорид (16 ml) при -65°С (вътрешна температура) се прибавя на капки разтвор на диметилсулфоксид (905 μΐ, 12,54 ммола) в метиленхлорид (13 ml) за период от 12 минути като вътрешната температура се поддържа между -65°С и -60°С. Разтвор на продукта от част d) (1,90 g, 4,18 ммола) в метиленхлорид (7 ml) се прибавя в реакционната колба за период от 20 минути като се получава мътна смес. Използва се допълнително количество метиленхлорид (1 ml), за да завърши прехвърлянето на алкохола в реакцонната колба и реакционната смес се разбърква при -65°С в продължение на 40 минути. Прибавя се друго количество Ν,Ν-диизопропилетиламин (3,7 ml, 20,90 ммола) като по този начин се получава бистър разтвор. След разбъркване в продължение още на 30 минути при -65°С, реакционната смес се оставя да се затопли до -18°С за период от 2 часа. Реакцията се прекъсва с 10%-ен воден разтвор на калиев бисулфат (30 ml) и след това се затопля до стайна температура. Реакционната смес се разрежда с 25 ml вода, разбърква се и фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира повторно с метиленхлорид (2 х 25 ml). Обединените органични екстракти се промиват с 10%-ен воден разтвор на калиев бисулфат (25 ml), наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (2 х 25 ml), разтвор на натриев хлорид (25 ml), сушат се (магнезиев сулфат), филтрират се и се концентрират под вакуум като се получава 1,84 g продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество.

f) Метилов естер на (4S-(4a,7a, 1 ОаР) ]-октахидро-4[ [ (фенилметокси) карбонил] амино ]-5-оксо-7 Н-пиридо - (2,1 -

Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

153

Суха колба под аргон се зарежда с продукта от част е) (1,76 д, 3,89 ммола) и метанол (17 ml). Разтворът се охлажда до 0°С и се насища с аргон в продължение на 25 минути. Към реакционната смес се прибавя разтвор на натриев метоксид (25 тегловни % в метанол, 983μ1, 4,28 ммола) за период около 15 секунди. Реакцията се прекъсва след един час с 1Ν разтвор на солна киселина (20 ml) и след това се оставя да се затопли до стайна температура. Прибавя се етилацетат (35 ml) и след разбъркване слоевете се разделят. Водната фракция се екстрахира отново с етилацетат (2 х 15 ml). Обединените органични фракции се промиват с 1N разтвор на солна киселина (15 ml), разтвор на натриев хлорид, сушат се (магнезиев сулфат), филтрират и концентрират под вакуум като се получава 1,69 g метилов естер на [S-(R*,R*)-2-[[4-MepKanTO-lоксо-2-[ [(фенилметокси) карбонил|амино] бутил]амино]-6-оксохексанова киселина като бяла пяна.

Разтвор на тази бяла пяна и трифлуорооцетна киселина (305 μΐ, 3,95 ммола) в метиленхлорид (17 ml) се нагряват под обратен хладник в продължение на 2,25 часа. След охлаждане до стайна температура реакционната смес се концентрира и остатъкът се разтваря в етилацетат (25 ml), промива се с наситен разтвор на натриев бикарбонат (2 х 20 ml) и разтвор на натриев хлорид, суши се (магнезиев сулфат), филтрира и концентрира под вакуум като се получава 1,50 g продукт съгласно заглавието като бяла пяна.

д) Метилов естер на [43-(4а,?а,10аР)]-октахидро-4амино-5-оксо-7Н-пиридо-[2,1 -b] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Обработването на продукта от част f) с йодотриметил

154 силан съгласно процедурата от пример 23h) или 1 lh) води до отстраняване на N-защитната група и се получава желаният 4ам и.

ПРИМЕР 27 (8)-2-фталимидо-6-хидроксихексанова киселина

Междинният продукт от пример 1 с) се получава и по следния начин:

Към разтвор на диетилов естер на 2-(ацетиламино)-2[4-(ацетилокси) бутил]пропандикарбоксилна киселина [730 д, 2,2 мола, получен както е описано в пример 24 а)] в абсолютен етанол (300 ml) се прибавя 6N разтвор на натриев хидроксид (1,6 л). Реакционната смес се нагрява при 70-75°С в продължение на 5 часа, след това при 90° до 95°С, за да дестилира по-голямото количество етанол. Реакционната смес се охлажда и подкислява до pH 1,3 като се използва 6N солна киселина (около 1,3 л), след това се нагрява до 95° 100°С, за да се осъществи декарбоксилиране. След завършване, реакционната смес се охлажда до стайна температура. Горната сурова реакционна смес се нагрява до 35°С и се обработва с около 600 ml 6N натриев хидроксид и след това с 1N натриев хидроксид като pH се наглася на 7,5 (краен обем около 5,3 л). Към тази смес се прибавя 0,6 g ацилаза I от свински бъбрек. След разбъркване една нощ при 35°С pH е 7,25. pH се наглася на 7,5 и се прибавя допълнително 300 mg ацилаза. След разбъркване една нощ реакцията е завършила около 90%. Реакционната смес след това се обработва с 20 g въглен и 20 g Celite®, след това се нагрява до 85°С и се поддържа при тази температура в продължение на 10 минути, след това се охлажда до 50°С и се филтрира. В този момент общият обем на филтрата е около

155

4,9 л. Филтратът се охлажда до 5° С и се прибавя твърд натриев карбонат за корекция на pH до 9,3. Прибавя се N-карбетоксифталимид (263,04 д, 1,2 мола) на една порция и натриев карбонат тъй като е необходимо pH да се държи на 9,3. След 2 часа при 5°С и след това 3 часа при стайна температура, pH спада до 8,5 и повечето от реагентите са разтворени. Реакционната смес се филтрира, охлажда се до 5°С и се подкислява до pH 2,3 с 6Ν солна киселина. Утаеният твърд продукт се събира чрез филтриране, промива се с 200 ml студена вода и след това се суши под вакуум като се получава 220 g продукт съгласно заглавието.

ПРИМЕР 28 [4S-(4a,7a,10aP) ]-октахидро-4 ][2-меркапто-3-(1нафталенил)-1 - оксопр опил] амино]-5-оксо - 7 Н-пир и до- [2,1 b] [ 1,3 ]тиазепин-7-карбоксилна киселина

а) диетилов естер на (ацетиламино) (1-нафталенилметил)пропандикарбоксилна киселина

Към разтвор на натриев етоксид (21% в етанол, 4,613 gm, 67,8 ммола) в етанол (100 ml) се прибавя диетил ацетамидомалонат (14,74gm, 67,8 ммола), след това 1 - (бромометил)нафтален (10,0 gm, 45,2 ммола). Разтворът се разбърква при стайна температура в продължение на един час. Реакционната смес след това се концентрира до оранжево масло. Маслото се разтваря в етилацетат и се промива с 50% наситен разтвор на амониев хлорид , вода и разтвор на натриев хлорид, след това се суши над натриев сулфат, филтрира се и се концентрира като се получава оранжево твърдо вещество Твърдото вещество се прекристализира из етилацетат и хексан като се получават бежови кристали онечистени с диетилацетамидо малонат. Твър дият продукт се разтваря в -50% -тилацетат в хексан и се п г - ч и : т е а с помощта на флаш хроматография върху Merck, силикагел в 50% етилацетат в хексан. Фракциите съдържащи

чистия продукт се обединяват и концентрират като се получава 10,225 g продукт като бяло твърдо вещество, т. на топене 105108°С, Rf = 0,57 (50% етилацетат в хексан).

b) α,-амино-1-нафталенпропанова киселина

Разтвор на продукта от част а) (16,182 gm, 47,5 ммола) се суспендира в 48% бромоводород (100 ml) и се нагрява под обратен хладник под аргон в продължение на 14 часа.

Бромсводородната сол на продукта се филтрира от разтвора като бяло твърдо вещество, след това се разбърква с гореща (50°С1 вода (500ml) и разтворът се неутрализира с концентриран амониев хидроксид. Продуктът се утаява из разтвора като фино бяло вещество. След филтриране и сушене под висок вакуум една нощ (18 часа), се получава 8,335 g продукт като прахообразно бяло твърдо вещество, т. на топене 264°С.

c) α-бромо-1-нафталенпропанова киселина

Към разтвор на продукта от част Ь) (4,000 д, 18,6 ммола, и калиев бромид (7,63 д, 63,2 ммола) в 2,5N сярна киселина (35 ml) държан при 0°С се прибавя натриев нитрит (1,92 д, 27,8 ммола) за период от един час. Сместа се разбърква още един час при 0°С, след това се затопля до стайна температура и се разбърква в продължение на 2,5 часа. Реакционната смес след това се екстрахира с етер (Зх). Етерните слоеве се обединяват и се промиват с вода и разтвор на натриев хлорид, след това се сушат над натриев сулфат, филтрират и концентрират като се получава оранжево масло. Маслото се пречиства с помощта на флаш хроматография върху

157

Merck силикагел в 70% етилацетат в хексан с добавка на 17, оцетна киселина, за да се намали образуването на опашка. Фракциите съдържащи бромида се обединяват и концентрират като се получава леко онечистен продукт като оранжево масло, което се втвърдява при стоене една нощ. Rf = 0,40 (40% етилацетат в хексан с 1% оцетна киселина).

d) а-(ацетилтио) -1 -нафталенпропанова киселина Към суспензия от калиев тиоацетат (0,912 g 8,00 ммола) в ацетонитрил (300 ml) при 0°С се прибавя продуктът от част с) (2,030 д, 7,27 ммола) като разтвор в ацетонитрил (3 ml) Разтворът се разбърква в продължение на един час при 0°С, след това се затопля до стайна температура и се разбърква 15 часа. Калиевият бромид се филтрира от реакционната смес и филтратът се концентрира като се получава оранжево масло. Маслото се разтваря в етилацетат и се промива с 10%-ен разтвор на калиев бисулфат и разтвор на натриев хлорид, след това се суши над натриев сулфат, филтрира и концентрира като се получава оранжево масло. Това масло се пречиства с помощта на флаш хроматография върху Merck силикагел в 50% етилацетат в хексан с добавка на 1% оцетна киселина, за да се намали образуването на опашка. Фракциите съдържащи продукта са онечистени със съединение с Rf — 0,43. Тези фракции се събират и концентрират до оранжево масло. Суровият продукт се пречиства през дициклохексиламино солта чрез разтваряне на оранжевото масло в етер и прибавяне на еквивалентно количество дициклохексиламин (1,32 д, 7,27 ммола) към разтвора. Дициклохексиламино солта се получава на две количества като кафяви кристали (1,450 gm) още леко онечистени с нежелателни примеси. Кристалите се суспендират

58 в етилацетат и се разклащат с 10%-ен разтЕор на калиев бисулфат i Зх |. Органичният слой след гева се прс-мша с в·;.· да и разтвор на натриев хлорид, след това се суши над натриев сулфат, филтрира и концентрира като се получава 875 mg продукт като жълто масло, Rf = 0,40 (40% етилацетат в хексан с 1% оцетна киселина).

e) метилов естер на [ 4 S-(4α, 7α, 1 0а β) ]-октахидро-4-[ [2(ацетилтио) - 3 - (1-нафталенил)-1 - оксопр о пил ]ам ино ]-5-оксо-7Нпиридо [2,1 -b] [ 1,3}тиазепин -7-карбоксилна киселина

Разтвор на рацемичната киселина от част d) в метиленхлорид и разтвор на метилов естер на {4S-(4а,7α, 10аβ) ]октахидро-4-амино-5-оксо-7Н-пиридо[2,1-Ь](1,3]-тиазепин-7карбоксилна киселина в метиленхлорид взаимодейства в присъствие на триетиламин и бензотриазол-1 илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат съгласно процедурата от пример 23 i) като се получава продуктът съгласно заглавието.

f) [4S-(4α,7α,10aβ) ]-октахидро -4- [ [2-меркапто-З - ( 1 - н афтале н ил) -1 - о кс о пр опил ] ам ин о ] - 5-окс о - 7 Н - пири до [ 2, ΙΕ ] [ 1,3 ]тиаз епин-7-кар бо кс илна киселина

Разтвор на продукта от част е) в метанол се обработва с 1Ν натриев хидроксид съгласно процедурата от пример 23 j) като се получава продуктът съгласно заглавието.

ПРИМЕР 29 [45-[4α.(Ρ^>),?α.,10αβ)]-οκτάΧΗΑρο-4-[[2-Μθρκάπτο-1-οκΰθ3-(2-тиенил)пропил]амино]-5-оксо-7Н-пиридо[2,1-Ь][1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина

а) (5)-а-(ацетилтио)-2-тиофенпропанова киселина

Калиев хлорид (3,0 д, 40,1 ммола) се прибавя към

159 разтвор на β-1 2-тиенил) - D-аланин (1,37 д, 8,0.5 ммола) в 2,54 солна киселина <25 rail, при стайна температура под аргон. След разбъркване в продължение на 10 минути, получената смес се охлажда до 0°С и се обработва с натриев нитрит (720 mg, 10,44 ммола). След 2,5 часа, получената смес се затопля д: стайна температура и се разбърква един час. Сместа се разпределя между вода и етилацетат и органичният слой се суши (натриев сулфат), филтрира и концентрира. Остатъкът се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел), елуира се с 1% оцетна киселина в 3:1 хексан:етилацетат като се получава 760 mg (R)-а-хлоро-2-тиофенкарбоксилна киселина като жълт : масло.

Към разтвора съдържащ горния хлорид (750 mg, 4,73 ммола) в диметилформамид (15 ml) се прибавя цезиев тиоацетат (2,95 д, 14,19 ммола) при стайна температура под аргон. След разбъркване в продължение на 2 часа реакционната смес се разпределя между 10%-ен калиев бисулфат и етилацетат. Органичният слой се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат), филтрира и концентрира и остатъкът се подлага на флаш хроматография (Merck силикагел) като се елуира с 1% оцетна киселина в 4:1 хексан/етилацетат до получаване на 500 mg продукт съгласно заглавието като маел:. R_f = 0,73.

Ь)метилов естер на [4S-[4a(R‘) ,7α, 10&β) ]-октахидрс-4[ [2-ацетилтио)· 1-оксо-3-(2-тиенил)пропил]амино]-5-оксо-7Нпиридо[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на киселината от част а) в метиленхлорид и разтвор на метилов естер на [45-(4а,7а,10ар)|-октахидро-4амино-5-оксо-7Н-пиридо(2,1-Ь](1,3]-тиазепин-7-карбоксилна киселина в метиленхлорид взаимодействат в присъствие на триетиламин и бензотриазол-1ил : к/. итрис (диметиламино) фосфониев хексафлуорофосфат съгласно процедурата от пример 23 i) като се получава продукт съгласно заглавието.

с) [45-[4а)И‘),7а,10аР)]-октахидро-4-[[2-меркапто-1окс о - 3- (2-тиенил) пропил] ам ино ] - 5-оксо - 7 Н-пиридо (2,1b][ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част Ь) в метанол взаимодейства с 1N натриев хидроксид съгласно процедурата от пример 23

j) като се получава продукт съгласно заглавието.

ПРИМЕР 30 [4S-[4a(S*),7a,10ap)] - октахидро - 4- [(2-меркапто-1-оксо3- фенилпр опил) амино ]- 5-оксо - 7 Н-пиридо [2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

a) (R) -2-(ацетилтио) бензенпропанова киселина дициклохексиламино сол

Като се следва процедурата от пример 1 h) но като се използва L-фенилаланин вместо D-фенилаланин, се получава (Ri- 2-(ацетилтио)бензенпропанова киселина дициклохексиламино сол.

Ь) метилов естер на [4 S-[4a( S*),7а, 1 0а β) ]-октахидро-4[ [2 -(ацетилтио)-1-оксо-З-фенилпропил] амино]-5-оксо-7 Нпиридо[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разбърквана суспензия от (R)-2-(ацетилтио) бензенпропанова киселина дициклохексиламино сол (353,5 mg, 0,872 ммола) в етилацетат (5 ml) се промива с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат (3 х 5 ml). Органичните екстракти се обединяват, промиват с разтвор на натриев хлорид, сушат се (магнезиев сулфат^ филтрират, концентрират, сушат под

ва ку у м идес т и л и р а т двукратно и з хе к с а н кат о се получава ( R) - 2-1 аце тилтио) бензенпропа нов а киселина като масло.

Получената свободна киселина (181,4 mg ,0,809 ммола) се разтваря в метиленхлорид (2 ml) и се разбърква под азот при 0°С. Към този разтвор се прибавя разтвор на метилов естер на [45-(4а,7а,10аР)]-октахидро-4-амино-5-оксо-7Н-пиридо[2,1b ] [ 1,3 ]-тиазепин-7-карбоксилна киселина (200 mg, 0,774 ммола) в метиленхлорид (6 ml), след това триетиламин (0,113 ml, 0,813 ммола) и накрая бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфониев хексафлуорофосфат (360 mg,0,813 ммола). Реакционната смес се разбърква при 0°С и след това бавно се оставя да се затопли до стайна температура. След обща 20 часа, реакционната смес се концентрира под вакуум. Остатъкът се разтваря в етилацетат и разтворът се промива с 5%-ен разтвор на калиев бисулфат, наситен разтвор на натриев бикарбонат и разтвор на натриев хлорид. Органичният слой се суши (магнезиев сулфат), филтрира и концентрира къто се получава жълто твърдо вещество. Пречистването с помощта на флаш хроматография (елуиране с 2:3 етилацетат:хексан) дава 261,7 mg продукт съгласно заглавието като бистро масло.

с) [4S- (4a(S*) ,7α, 1 Оар ] |-октахидро-4 - [(2-меркапто-1 окс о-З-фенилпр опил) амино]-5-оксо-7Н-пиридо[2,1-Ь][1,3|тиазепин-7-карбоксилна киселина

Разтвор на продукта от част b) (261,1 mg,0,562 ммола) в метанол (6 ml, деокислен посредством барботиране на азот) се охлажда до 0°С и се обработва с 1N натриев хидроксид (6 ml, деокислен посредством барботиране на азот). След разбъркване в продължение на 1 час при 0°С като продухването с азот

162 продължава, реакционната смес се затопля до с та и н а температура. След разбъркване в продължение на 30 минути при стайна температура, се получава бистър разтвор. След

5,5 часа реакционната смес се подкислява до pH 1 с 5%-ен калиев бисулфат и се екстрахира с етилацетат. Органичните слоеве се обединяват, промиват се с вода и разтвор на натриев хлорид, сушат се (натриев сулфат), филтрират и канцентрират под вакуум. Пречистването с флаш хроматография (6:0,01:3,99 етилацетат:оцетна киселина:хексан) дава 190 mg продукт съгласно заглавието като бяло твърдо вещество, [а] р> = -87,5° (с = 0,51, хлороформ). ТСХ (6:0,01:3,99, етилацетагопетна киселина:хексан), Rf = 0,20.

ВЕТХ: t_R = 25,3 мин, YMC S-3 ODS (С-18) 6,0 х 150 гат,0% до 100%: А 30 мин линеен градиент и 10 мин задържане, 1,5 ml/мин, А= 90% вода:м иетанол + 0,2% фосфорна киселина, В = 90% метанол.ъода + 0,2% фосфорна киселина, 220 nm.

Анализ: Изчислено за С j gH24C>4N2S2 · 0,15 СдНдС^ .0,15 С_?Н₁₆ . 0,39 Н₂О

С 55,89 Н 6,45 N 6,31 S 14,45

Намерено: С 56,19 Н 6,50 N 6,71 S 13,96.

ПРИМЕР 31 (45-(4а,7а,9аР]]-октахидро-4-[[2-меркапто-1-оксо-3-(4тиаз ол ил) пропил }амино]-5-оксопироло[2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина

а) (Р)-2-амино-3-(4-тиазолил)пропанова киселина

Разтвор на 4N солна киселина в диоксан (10 ml) се прибавя към разтвор на (R)-2-[ [ (1,1 -диметилетокси)карбснил]амино]-3-(4-тиазолил)пропанова киселина (2,0 д, 7,3 ммола) в диоксан (2 ml). Реакционната смес се разбърква при стайна

163 температура в продължение на 3 часа, концентрира се под вакуум и с-статькът се разтваря във вода <3 ml ι. pH се наглася до 6,5 с 1N натриев хидроксид и този разтвор се пропуска през 20 ml Dowex® AG50(H + ). Колоната се елуира с вода (250 ml) и след това с 2% пиридин във вода (300 ml). Фракциите съдържащи продукта се концентрират под вакуум като се получава 0,94 д продект съгласно заглавието.

b) (R) -2-бромо-З- (4-тиазолил)пропанова киселина

Разтвор на продукта от част а) (0,516 д, 3 ммола) и калиев бромид (1,19 д, 10,1 ммола) във вода (5,94 ml) и сярна киселина (0,43 ml) се разбърква при -10°С в продължение на 5 минути последвано от прибавяне на части на натриев нитрит (0,318 д, 4,61 ммола) за период от 10 минути. Реакционната смес се разбърква още 10 минути при 0°С и при стайна температура в продължение на един час и след това се екстрахира с етер (3 х 100 ml). Етерните екстракти се промиват с разтвор на натриев хлорид (2 х 20 ml), сушат се (натриев сулфат), филтрират и концентрират под вакуум като се получава 0,37 д продукт съгласно заглавието, [а]р> = + 37,35° (с =0,7, метанол). Превежда се втори цикъл като се излиза от 2,67 ммола от продукта от част а) и като се използва същата процедура до получаване на допълнително 0,35 g продукт съгласно заглавието.

c) (3)-2-(ацетилтио)-3-(4-тиазолил)пропанова киселина

Продуктът от част b) (0,72 д, 3,05 ммола) и калиев тиоацетат (0,35 д, 3,05 ммола) се разбъркват в ацетонитрил (9 ml) една нощ при стайна температура и при 30°С в продължение на един час. Реакционната смес се разрежда с етилацетат (100 ml) и се филтрира. Филтратът се концентрира под вакуум. Остатъкът се разтваря повторно в етилацетат ί 10¹.¹ ml ί, промива се c вода (2 x 50 nil) и разтвор на натриев ХА.рид ί 20 ml), суши се ι натриев сулфат), .филтрира и концентрира под вакуум като се получава 0,52 g продукт съгласно заглавието, [ot.Jp) ⁼ -15,89° (с = 0,6, метанол).

<4)метилов естер на [ 4 S-(4α, 7а, 9а β ] ] - октахидро-4 - [ [2(ацетилтио) -1-оксо-3-(4-тиазолил)пропил]амино]-5оксопироло[2,1-Ь][1,3]-тиазепин-7-карбоксилна киселина

Метилов естер на [ 4 S-(4а, 7а, 9а β ] ] - 4 - амино-5оксопироло[2,1-Ь][1,3 ] - ти аз епин - 7-кар бокс илна киселина р-толуенсулфонатна сол [0,367 д, 0,882 ммола, получен от продукта описан в пример 5d) се разтваря в метиленхлорид (5 ml) при 0°С и след това се прибавя триетиламин (0,12 ml, 0,868 ммола). Продуктът от част с) (0,2 д, 0,865 ммола) се прибавя към този разтвор, след което се прибавя втора порция триетиламин (0,12 ml, 0,865 ммола). Прибавя се бензотриазол-(им скситрис (диметиламино) фосфониев хексафлуорофосфат (0,383 д, 0,865 ммола) и реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на един час и при стайна температура в продължение на 4 часа. Реакционната смес се концентрира под вакуум и остатъкът се разтваря в етилацетат (60 ml). Органичният екстракт се промива с 5%-ен воден разтвор на калиев бисулфат (10 ml) и разтвор на натриев хлорид (2 х 10 ml), суши се (натриев сулфат), филтрира и концентрира под вакуум. Този суров продукт се хроматографира през 100 g Merck силикагел като се използва 0,2% метанол в етилацетат. Фракциите обогатени на по-бавно изтичащия от колоната изомер се концентрират под вакуум като се получава 0,134 g продукт съгласно заглавието.

е) [45-(4α,7α,93β] ]-октахидро-4 - [[2-меркапто-1-оксо-3

I 4 - г и а з : ·> и Μ π ρ опил) амино ] - 5· оксопирсло [ 2,1 - b ] [ l ,3 ]- тиа з епин-7карбоксилна киселина

Продуктът от част d) (0,135 g, 0,29 ммола) се разтваря в метанол (3 ml) и през разтвора се барботира аргон в продължение на 30 минути при 0°С.Към горния разтвор се прибавя 1N натриев хидроксид (1,32 ml), също продухан с аргон и реакционната смес се разбърква при 0°С като през реакционната смес барботира аргон в продължение на един час и при стайна температура в продължение на 2 часа. Реакцията се прекъсва чрез прибавяне на 5%-ен воден разтвор на калиев бисулфат (20 ml) и органичните компоненти се екстрахират с етилацетат (3 х 50 ml). Етилацетатният разтвор се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат), филтрира и концентрира под вакуум. Концентратът се хроматографира през 40 g Merck силикагел като се използва хлороформ съдържащ 5% метанол и 0,5 % оцетна киселина. Подходящите фракции се обединяват, концентрират и разпределят между 20 ml етилацетат и 5%-ен воден разтвор на калиев бисулфат. Етилацетатният разтвор се промива с вода и разтвор на натриев хлорид, суши се (натриев сулфат) и концентрира под вакуум. Остатъкът се лиофилизира из диоксан (4 ml) като се получава 36 mg продукт съгласно заглавието като 70:30 смес от изомери, т. на топене 95-115°, [α]р = -191,7° (с = 0,06, хлороформ). ТСХ (хлороформ :метанол:оцетна киселина 8:2:0,2), Rf - 0,59. ВЕТХ: t_R = 3,06 мин, YMC S-3 ODS (С-18) 6,0 х 150 тга.Зр затворен край на колоната, изократен 60% метанол съдържащ 0,2% фосфорна киселина, 25 мин, 1,5 ml/мин (95,4%).

Анализ: Изчислено за Cf5HjgN3O4S3 . 0.9 CzjHgC^ 0,9 Н2О:

С 43,59 Н 5,19 N 9,65 S 22,09

Ιου

Напере н ο: С 4 3,54 Fl 4,89 Ν 9,44 S 21,90.

ПРИМЕР 3 2

1000 таблети всяка съдържаща следните компоненти:

[48-[4а(5'),7а,10ар]]-октахидро-4[(2-меркапто- 1-оксо-З-ф енилпропил) амино]-5-оксо-7Н-пиридо[2,1-Ь][1,3]-

тиазепин-7-карбоксилна киселина	100 mg
Царевично нишесте	100 mg
Желатин	20 mg
Avicel (микрокристална целулоза)	50 mg
Магнезиев стеарат	5 mg

5 mg се приготвят от достатъчно количество обща маса чрез смесване на продукта от пример 3 и царевично нишесте с воден разтвор на желатина. Сместа се суши и се смила до фин прах. След това се прибавят Avicel и магнезиевия стеарат и се гранулира. Накрая сместа се пресова на таблетна преса като се получават 1000 таблети, всяка съдържаща по 100 mg от активната съставка.

По подобен начин могат да се приготвят таблети съдържащи по 200 mg от продукта от примерите 12, 4 до 23,25 и 28 до 3 1.

Подобни процедури могат да се използуват,за да се получат таблетки или капсули съдържащи от 10 mg до 500 mg от активната съставка.

Claims

1.Съединения с формула и техни фармацевтичноприемливи соли, в която формула

О

II

А означава R2-S-(CH2)_r-C - С /\ ^r12 ^r1

Ο

II

R₇OOC-(CH₂)_q-C - C /\ ^r12 ^r1

R7OOC - CH -, или I ^Ri

II

R₄ - P - ;

I

O^r ₅

X означава O или

R] и Rj2 независимо един от друг означават водород, алкил, алкенил, циклоалкил, субституиран алкил, субституиран алкенил, арил, субституиран арил, хетероарил, циклоалкил-алкилен-,арил-алкилен-, субституиран арил-алкилен- и хетероарил

168 алкилен- или R] и Rj2 заедно с въглеродния атом, към който са свързани образуват циклоалкилов пръстен или бензокондензиран циклоалкилов пръстен;

О

II

R2 означава водорд, Rg - С - или R|]-S-;

R3, R5 и R7 независимо един от друг означават водород, алкил, субституиран алкил, арил-(СН2) р-, субституиран арил-(СН2)_о, хетероарил-(СН2)о‘»

О

II — СН —О-С—R_{9 и}

Rs

R4 означава алкил, циклоалкил-(СН2)р-> субституиран алкил, арил-(СН2)р-, субституиран арил-(СН2)р- или хетероарил-(СН2) р-;

Rg означава субституиран алкил, циклоалкил-(СН2)р-, арил-(СН2)р-, субституиран арил-(СН2)р- или хетероарил-(С Н₂) _р-;

Rg означава водород, нисш алкил, циклоалкил или фенил;

Rg означава водород, нисш алкил, нисш алкокси или фенил;

R 1 0 означава нисш алкил или арил-(С Н2) р-;

R]] означава водород, алкил, субституиран алкил, циклоалкил-(СН₂)р-, ар ил-(С Н2) р -, субституиран ар ил-(С Н2) р-. хетероарил-(СН2)_р- или -S-Rj] образува симетричен дисулфид, където R]j е

169

-(CH^r-C-C-N l\ I

R(₂Ri H

I (CH2)_m

COOR₃ m е нула или едно;

Y e CH₂₁ S - (О) _t или О, с ограничението, че Υ е S - (О) _tили О, само когато m е едно;

η е едно или две;

р е нула или число от 1 до 6;

q е нула или число от 1 до 3;

г е нула или едно и t е нула, едно или две.

2.Съединение, съгласно претенция 1, с обща формула

А означава R₂ - S - (CH₂)_r-С - С - ; / \

О R-12 Ri

II

R₂ означава R₆ - С -, или R_n - S - ;

R₃ означава водород или нисш алкил и 1 до 4 въглеродни атоми; г е нула или едно;

R_n означава нисш алкил с 1 до 4 въглеродни атоми;

R-i означава арил - СН₂ -, субституиран арил - СН₂хетероарил-СН₂-, циклоалкил - СН₂-, където циклоалкилът с 3 до 7 въглеродни атоми или алкил с 1 до 7 въглеродни атоми с

170 права или разклонена верига и R12 е водород или Ri и R₁₂ взети заедно с въглеродния атом, с който са свързани, образуват циклоалкилов пръстен с 5 до 7 въглеродни атоми;

R₆ означава нисш алкил с 1 до 4 въглеродни атоми или фенил;

η е едно или две;

m е нула или едно;

X е О или S и

Υ е СН₂, О или S, с ограничението, че Υ е О или S само когато m е едно.

3. Съединение , съгласно претенция 2, при което

О

II

R₂ означава водород или Н ₃ С - С -,

R₃ означава водород;

г е нула или едно;

Ri означава бензил, циклопропилметил или алкил с 3 до 5 въглеродни атоми с права или разклонена верига,

Ri₂ означава водород;

η е едно или две;

m е нула или едно;

X е О или S и

Y е СН₂, О или S, с ограничението, че Y е О или S само когато m е едно.

4. Съединение съгласно претенция 3, ^ПР^{И което}

Хе S;

Y е СН_2;

171 η е две; m е едно;

г е нула или едно;

R.2 θ водород;

Rj е бензил или изобутил и

R|2 ^е водород; или

X е S;

Y е СН₂;

η е едно;

m е едно;

г е нула;

R2 е водород;

Rf е бензил и

R12 ^е водород; или

X е S;

Y е СН₂;

η е две;

m е нула;

г е нула;

R2 θ водород;

R] е бензил, циклопропилметил, н-бутил, изобутил, н-пропил или -СН2С(СНз)з и

Rj2 ^е водород; или

X е О;

Y е СН₂;

η е две;

m е едно;

г е нула;

R2 θ водород;

172

Rf е бензил и

Rf2 ^е водород;

X е Ο;

Υ е СН₂;

η е две;

m е нула;

г е нула;

R2 θ водород;

Rj е бензил и

Rj2 θ водород;

X е О;

Υ е О;

η е две;

m е едно;

г е нула;

R2 θ водород;

R] е бензил и

Rf2 ^е водород;

X е S;

Y е О;

η е две;

m е нула;

г е нула;

R2 е водород;

R| е бензил и

Rf2 ^е водород.

5. Съединение съгласно претенция 4 , което представлява:

[4S-[4a(R*),7a,10ap] ]-октахидро-4- ((2-меркапто-1-оксо

173

3-фенилпропил) амино]-5-окс о-7Н-пир идо [2,1 - b ] [1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина;

[4S-[4a(R*),7a, 1 Οδβ J ]-октахидро-4- [ (2-меркапто- 1-оксо3-фенилпропил) амино]-5-оксо-7Н-пиридо [2,1-Ь]]1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина, 1,1-диметиламино сол;

[4 5-[4α(5*),7α,1θ3β]]-οκτ3ΧΗΑρο-4-[(2-ΜθρκΒπτο-1-οκοο3-фенилпропил) амино ]-5-оксо-7 Н-пиридо [2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина;

[4 5-[4α^*),7α,10άβ]]-οκτΒΧΗΑρο-4-[[2-(Μθρκ3πτοΜθΤΗΛ)1 - оксо-3-фенилпропил] амино ]-5-оксо-7 Н-пиридо [2,1 - ] [ 1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина;

[4S-[4a(R*),7a,l Οββ ] ]-октахидро-4- [(2-меркапто-4-метил

1-оксопентил) амино]-5-оксо-7Н-пиридо [2,1-Ь][1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина;

]ЗR-[Зa(S‘),6a,9аβ] ]-хексахидро-3- ] (2-меркапто- 1 -оксо3-фенилпропил) амино ]-4-оксо-2Н,6 Н-пиридо [2,1-Ь][1,3]тиазепин-

6- карбоксилна киселина;

[4 S- [4a(R*) ,7a,9аβ] [-октахидро-4- [ (2-меркапто - 1-оксо-

3- фенилпропил)амино]-5-оксопироло[2,1-Ь][1,3]тиазепин-

7- карбоксилна киселина;

[45-[4α(Η*),7α,93β] ]-октахидр о-4- [ (3-цикло пропил-2мepκаπτo-l-oκcoπpoπил)аминo]-5-oκcoπиpoлo[2,l-b][l,3]τиазeπин7-карбоксилна киселина;

[4S- [4а(R*),7α,9ββ ] ]-октахидро-4 - [(2-меркапто-1-оксохексил) амино ]-5-оксопироло [2,1 - Ь] [ 1,3 ]тиазепин-7-карбоксилна киселина;

[4 S- [4a(R*), 7 a, 9а β] J-октахидр ο-4- [ (2-меркапто- 1-оксо-

4- метилпентил) амино ]-5-оксопироло [2,1-Ь](1,3]тиазепин-7карбоксилна киселина;

174 ]4S-[4a(R*),7a,9ap] ]-октахидро-4- |(2-меркапто-1 - оксопентил) амино]-5-оксопироло [2,1-Ь]]1,3]тиазепин-7-карбоксилна киселина;

[4S-]4a(R*),7a,9ap] ]-октахидро-4 - ((2-меркапто-4,4-диметил1 - оксопентил) ами но]-5-оксопироло [2,1-Ь]]1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина;

[4S- |4a( R*) ,7 а, Юар] ]-октахидро-4 - {(2-меркапто- 1 -оксо3-фенилпропил) амино]-5-оксо-7Н-пиридо [2,1-Ь][1,3]оксазепин7-карбоксилна киселина;

[4S-[4a(R*),7a,9ap] ]-октахидро-4-[(2-меркапто-1-оксо3-фенилпропил) амино]-5-оксопироло [2,1-Ь][1_гЗ]оксазепин-7карбоксилна киселина;

[4S-[4a(R*),7a, 1 Оар ] ]-октахидро-4 - [(2-меркапто - 1-оксо3-фенилпропил) амино ]-5-оксо-( 1,4 ]оксазино[3,4-Ь ][1,3]оксазепин7-карбоксилна киселина; или [4S- ]4a(R*) ,7 a, 1 Оар ] ]-октахидр о-4 - ] (2-меркапто- 1-оксо3-фенилпропил)амино]-5-оксо- [1,4]оксазино[З_г4-Ь]{1,3]тиазепин7-карбоксилна киселина.

6. Съединение с формула включително негова фармацевтично приемлива сол.

175

7. Фармацевтичен състав за лечение на кардиоваскуларни заболявания нато хипертония и застойна сърдечна недостатъчност, характеризиращ се с това, че съдържа фармацевтично приемлив носител и едно или повече съединения с формула включително техните фармацевтично приемливи соли, където A, X, Y, n, m и R₃ са дефинирани в претенция 1.

8. Съединение с формула включително неговата сол, където

X е О или S;

η е едно или две;

m е нула или едно;

Y е СН₂, О е S, с ограничението , че Y е О или S само когато m е едно;

R₃ е водород, нисш алкил или арил -(СН₂)р- и р е нула или числото от 1 до 6, при условие, че когато X е Ο, η е едно и Υ е СН₂, тогава m трябва да бъде едно.

9. Метод за получаване на съединения с формула

176 характеризиращ се с това, че

О

II

а) когато А е HS - ( СН₂) _г - С - С / \

Rl2 Rl и R₃ е водород, съединения съдържащи ацилмеркапто странична верига с формула

О О

II II

R₆ - С - S - (СН₂ )_r - С - С - ОН / \

Rl2 Rl или неговата активна форма, се свързват с амин с формула в присъствието на свързващо средство, в която формула X, Y, m, n, R₆, г, R-i и R₂ са дефинирани в претенция 1 и R₃ е водород или карбоксизащитна група, след което ацилната група

177

Ο

II

R₆ - с и R3 карбоксизагцитната група се отстраняват;

Ь) когато А означава

R7OOC - (CH₂)_q - С ^r12 ^r1 карбоксилна киселина с формула

О

II R7OOC - (СН₂)п - с - с / \ ^r12 ^r1

OH или нейна активна форма, се свързва с амин с формула ^R1 ^{и r}12 ^са дефинирани в претенция и R3 и R7 са карбоксизащитни групи;

с) когато А означава

R7OOC - СН I ^R1 и R3 е водород, или кетокиселина или естер с формула

О О

II II

R_?O - С - С - Rf взаимодейства при редукционни условия или трифлат с формула

178

Ο

II r₇o-cOSO2CF3

I

CH - R_t взаимодействат c амин c формула където X, Y, m, n, R₇ и Rj са дефинирани в претенция 1 и

R3 е карбоксизащитна група, след което карбоксизащитната

груп а се отстранява и d) когато А означава О II R₄ - Р - и R3 е водород, фосфонохлорид с формула 1 ОН О I r₄ - 1 Р - С1

OR₅ взаимодейства с амин с формула където X, Y, m, η и R4 са дефинирани в претенция , и R3 и

R4 са карбоксизащитна група, след което R3 и R4 карбокси179 защитната групи се отстраняват.

10. Метод за получаване на съединения с формула

където X е О или S; η е едно или две; m е нула или едно; Y е СН₂, О или S, < когато m е едно и

с ограничението че Y е О или S само

R3 е карбоксизащитна група, характеризиращ се с това, че аминокиселина с формула (СН21п т

се свързва с естер на аминокиселина с формула

НС —(О - алкил) 2

СН,

I ²

Ύ (CHj )ш

Т

Нф1 -CH-COOR3 като се получава дипептид с формула

180 където

Х-Р₇

I (CH₂)_n

T

PpN - CH-CHC -[Ο - алкил) 2

СН^

I ^х

Y «п

Т

N - СН - COOR3 i

Pje аминозащитна група или група, която заедно с Nатом образува защитна група и ₽2 е хидрокси или меркаптозащитна група,

Ь) от продукта на част а) селективно се отстранява

Р2 защитната група, продуктът от част Ь) се циклизира като се получава съединение

d) от продукта от част с) се отстранява Р] защитна- та група като се получава желаният продукт.

11. Метод съгласно претенция 10, където

X е S;

η е едно или две;

Υ е СН₂;

m е нула или едно характеризиращ се с това, че

а) аминокиселина с формула

181

-Р2 |СН 2)п т

- N - СН - СООН ie свързва с естер на аминокиселина с формула

НС —(О - алкил) 2 (СН^₂ (^СН2к

- СН - COOR3 като се получава дипептид с формула

НС —(О - алкил) 2 °'^Р2 (СН₂)_П (СН^ ! Т

Pl-N-CH-C- N-CH-COOH <5 А където Pj означава аминозащитна група или група, която заедно с

N-атом образува защитна група и ₽2 θ хидроксизащитна група

b) от продукта от част а) селективно се отстранява ₽2 защитната група като се получава съответното хидрокси съединение,

c) хидрокси продуктът от част Ь) се превръща в меркаптан с формула

SH

I (CHjk

Pj-N-CH-C- N-CH-COOH <5 A

НС —fO - алкил) 2 ψΗ ₂) 2 (CH2U

Τ

182

d) меркаптанът от част с) се циклизира като се получава съединение с формула

е) от продукта от част d) се отстранява Pj защитната група като се получава желаният продукт.

12. Метод съгласно претенция 10, където

Хе S, η е две,

Υ е S или О и m е едно, характеризиращ се с това, че

а) аминокиселина с формула

О -Р2

I¹

1СНЙ2

I

Pl - N - СН - СООН се свързва с естер на аминокиселина с формула

Н(^ —(О - алкил) 2 СН,

I ^ί

Υ сн₂

Н /4 - СН - COOR₃ като се получава дипептид с формула

183

НС -уО - алкил) ₂?^Н2 О-Р₂ Y (СН₂)п Т сн₂т

Pl- Ν - CH - С - Ν - CH - COOR3

с) хидроксисъединението от част b) се превръща в меркаптан с формула

НС - (О -алкил)₂

СН₇

I ^L

Y

СН₂

Т

N - CH - COOR3 i

е) от продукта от d) се отстранява Р] защитната група като се получава желаният продукт.

13.Метод за получаване на съединение с формула

О

184 където X означава О или S, η е едно или две, m е нула или едно и

R3 е карбоксизащитна група, характеризиращ се с това, че

а) аминокиселина с формула (СН₂)п

I

Pj - N - CH - СООН взаимодейства с хидрокси аминокиселина с формула

СИ₂-ОН

I (СН^₂ (CH2U т

h₂n-ch-coor₃ като се получава дипептид с формула снг* он

X - ^Р2 (СН212 (СН₂)_П (СНг^

Т Т

Рр N -СН-С- N - CH -COOR3

11 I о н където Pf е аминозащитна група или група, която заедно с Nатом образува защитна група и ₽2 е хидрокси или меркапто защитна група

Ь) продуктът от част а) се окислява като се получава алдехид с формула

185

НС=О I

Х-Р₂ (СН₂)₂

I I <θ^Η2)η <7^Η2*η

- N - CH -С - N -CH - COOR₃II I

О Н

c) от алдехида от част Ь) селективно се отстранява Р₂защитна група

d) продуктът от част с) се циклизира като се получава съединение с формула

е) от продукта от част d) се отстранява Pi защитната група като се получава желания продукт.