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La présente invention concerne des perfectionnements à la sépara-
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tion de 3-céto-A4stéro!des de mélanges de tels stéroldes et de 3-céto-4.:5- dihydro-stéroïde So Bien qu'une telle séparation a été exécutée précédemment dans la chimie des stéroides, par exemple pour la séparation de la ohùàastmone de la cholesténone, on a constaté qu'elle est particulièrement nécessaire dans la èftlt1:lè-se de la cortisone, où il est, dans certaines alromatancesq néces- saire de séparer la cortisone ou ses dérivés, par exemple. sas 21-esters ou 17:21-diesters, de la 4:5-dihydroallocortisone ou de ses dérivés correspon- . den'iss Ainsi, dans les demandes de brevet belge If) 4140585 et bP +14091:3, m a décrit, entre autres, un procédé pour la préparation des 21-esters et 17 t21-diesters de cortisone, des esters:
correspondants de 2.*44xUbromo-4.-5 dihydroallocortisone et on a constaté qu'une des principales difficultés du procédé est la quantité appréciable d'esters de 45 dihydroallooortisone, qui est présente dans mélange réactionnel brut. La séparation de ces deux composants peut offrir des Biffieultés pratiques considérables, car elle est compliquée à exécuter par des méthodes physiques, telles que cris- tallisation et chromatographie.
On a constaté à présent que les 3-céto- /:14- stérordes et 3 -céto- 4i5-àihydro-stéràÉdes peuvent être séparés dans une grande mesure des lane":, ges en contenant, en formant leurs dérivés de Girard et en soumettant ceux- ci à une décomposition sélective, de la manière décrite ci-après.
Ainsi, après la formation des dérivés par traitement des cétones mélangées à l'ai-
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de du réactif de Girard T ou'P, le dérivé de la cétone saturée est décompo- sé par traitement avec une aldéhyde hydrosoluble appropriée, telle que dé-
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finie plus loin, après qqebf le mélange réactionnel est dilué à l'eau et tamponné à un pH d'environ 7, de préférence avec du bicarbonate de sodium, la cétone saturée étant ensuite extraiteo Le pH de la solutiOE1< est alors abaissé, de préférence à une valeur comprise entre 1 et 2, de manière à provoquer la décomposition du dérivé de la cétone non saturée; ceci peut
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etre accéléré parll'addition diacide pymu:que.
Le nouveau procédé permet la séparation de stéroïdes du type défini plus haut de manière plus efficace qu'il n'était possible jusqu'à
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présent et, dans maints cas, une séparation sensiblement eds,t ?sn s pâaiale61s, i:m ; <5 1.#ration sensiblement complète est possible.
La présente invention concerne, dès lors, un procédé pour la sé- paration de 3-céto-A -stéroides à partir de mélanges de tels stéroides et de 3-céto-415-dihydroauostéroldes , dans lequel procédé on fait réagir des cétones mélangées avec un réactif de Girard T ouP, de manière à former leurs dérivés, on traite le mélange résultant à l'aide"d'une aldéhyde soluble dans' l'eau, qui peut déplacer la cétone saturée de son complexe de Girard, après quoi la cétone saturée libérée est séparée du mélange dans un milieu aqueux., le pH du milieu aqueux étant ensuite abaissé,'pour libérer et précipiter la cétone non saturéeo
Selon une particularité de l'invention, le pH du mélange résultant est abaissé à une valeur comprise entre 1 et 2
Selon une autre particularité de l'invention,
après le traitement précité à l'aide de l'aldéhyde soluble dans l'eau, le mélange réactionnel est dilué à l'eau et tamponné à un pH d'environ 7, après quoi le stéroide 'saturé est extraite
L'aldéhyde soluble dans l'eau doit, comme indiqué, réagir avec
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les dérivés de Girard des oéto-stéroïdes saturés,en question avec échange du réactif de Girard, les dérivés de Girard de l'aldéhyde appropriée étant
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formés et le céto-stérolde saturé étant libéré.
On a constaté que la formal- déhyde, l'acétaldéhyde et le crotonaldéhyde donviennent à cet eff@t; la propionaldéhyde et l'aldéhyde furfurylique ne donnent, par contre, pas satisfactiono Il n'a pas été possible de classifier les types d'aldéhydes
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hydrosolubles, qui conviennent sur la base de leur structure i.ro0n sup- pose que le caractère approprié d'une aldéhyde particulière est lié à l'ac-
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fixité relative du groupement aldéhydique et ne peut donc être déterminé que par un essai préliminaireo On préfère utiliser de la formaldéhyde comme
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aldéhyde hydreqolublea
Les dérivés de Girard des cétones mélangées peuvent être formés de toute manière appropriée,
par exemple par chauffage du mélange de sté- roides et du réactif de Girard dans une solution à 10 % d'acide acétique dans ±le l'éthanol pendant 10 à 30 minuteso La solution est alors refroidie et une quantité, au moins équivalente à la quantité de réactif de Girard d@ utilisée, d'une aldéhyde hydrosoluble appropriée, telle que définie ci-des- sus, est ajoutéeo Ceci donne lieu à la libération de la cétone saturéeo Le mélange réactionnel est alors, de préférence, versé dans une solution aqueu- se de bicarbonate de sodium et la cétone sàturée est séparée par extraction, Dans certains cas, on constate que la séparation peut être compliquée-en rai- son de la solubilité relativement faible du complexe de Girard de la cétone non saturée;
dans ces cas, il est possible d'améliorer la séparation en ajou- tant au mélange aqueux un solvant organique miscible à l'eau., tel que l'étha- nol ou le dioxane,de manière à augmenter la différence entre les solubili- tés du complexe de Girard de la cétone non saturée et la cétone saturée dans le milieu.
Après extraction de la cétone saturée, le pH de la phase aqueuse est abaissé, de préférence à une valeur comprise entre 1 et 2, par exemple, par l'addition d'un acide organique ou minéral fort, de manière à provoquer la précipitation de la cétone non saturéeo
On peut utiliser dans le présent procédé l'un ou l'autre des ré- actifs de Girard P et T; on préfère, toutefois, utiliser le réactif P, car ce composé est le plus stable et peut être plus aisément stocké.
On a constaté qu'en exécutant le procédé suivant l'invention, il est possible d'obtenir la cétone non saturée à un état de pureté relative ment élevée En outre, le procédé présente l'avantage résidant dans le fait que les produits sont en contact avec des solutions acides pendant une cour- te période, ce qui réduit la possibilité d'hydrolyse des groupes esters, pré- sents, tandis .que la faible température à laquelle les réactions peuvent être exécutées rédmit à un minimum la destruction de matière.
Lors de l'utilisation du procédé suivant l'invention dans la syn- thèse de la cortisone, les composants à séparer peuvent être la cortisone
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elle-même et la 4-.5-dihydroallocortisone ou leurs 21-esters ou 17 121-diesters correspondants. On préfère, toutefois, séparer les composés non saturé et saturé, avant hydrolyse des groupes esters.
Selon une particularité spécifique de l'invention, le mélange à séparer contient, dès lors, un 21-ester ou 17:21 diester de cortisone et
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un ester ou diester correspondant de 485-dihydroalloeortisoneo
Les exemples suivants, donnés à seul titre illustratif, permet- tront de bien comprendre l'inventiono
EXEMPLE 1
Un mélange de 21-acétate de cortisone et de 21-acétate de 4:5-di-
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hydroallocortisone ( j Et0H23 u; 1% 289) ,3 grJ contenant 2,2 gr max lem d'acétate de cortisone, déterminé spectroscopiquemant) et de réactif P de Girard (3 gr) est dissous dans de l'acide acétique à 10% dans de l'éthanol (45 cc), la solution étant alors chauffée sous reflux pendant une heureOn ajoute de la formaldéhyde aqueuse (60%;
6 ce) à la solution refroidie qui est alors laissée au repos à température ambiante pendant 20 minutes. La solution est versée dans une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium (250cc) et extraite avec de l'acétate d'éthyle (3 x 150 ce). Les extraits combinés d'acétate d'éthyle sont lavés à l'eau, séchés sur sulfate de magnésium anhy- dre et évaporés jusqu'à siccité sous pression réduite.
Le résida est consti-
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tué par de l'acétate de 4'.5-dihydroaUàcortisone brut,XEtOH236 - 250 nylu, max "'*
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gls l em 95 La solution de bicarbonate, après acidification jusqu'à pH 1 avec de l'acide chlorhydrique concentré et de l'acide pyruv.que (40-60 %; 30 oc) est laissée à température ambiante pendant 4 heures. Le précipité est recueil- li, lavé à fond à l'eau et séché sous vide sur du P2O5. La matière solide
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(1,760 gr" EtOH 238 u 1 = 351 - quantité estimée d'acétate de cortisme 8 l,58 rendement g1rz) est cri..stalliée dans l'acétone, en sorte qu'on obtient du 21-acétate de cortisone pur, qui après séchage à 130 / 4 heures, fond à 244 - 24la, rd,, D : 219 (c = 1,8 dans fiC..3) , EtDH2.)8 ny' u, E am : 378" max..
EXEMPLE 2
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Un mélange de 17:21-diacétate de cortisone et de 17:21-diacétate de 4:5-dihydroallocortisone (19,25 gr; El 250) et de réactif P de Girard (19 25 gr) est dhauffé aux reflux dans une solution à 90% d'éthanol dans de l'acide acétique (400 ce) pendant 15 minutes, après quoi la solution est refroidie à température ambiante et une solution aqueuse de for.ma.ldéhyde (35%- 80 ce) est ajoutée.
Après 1/2 heuresà température ambiante, le mélange est versé dans une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium (2000 cc)
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et extrait à trois reprises avec desl'acétate d'é.thyle (Extrait A)m On ajoute de l'acide chlorhydrique concentré (75 cc) et de l'acide pyruvique (50 %; 50 ce) à la couche aqueuse et, après trois heures à température ambiante, la couche aqueuse est à nouveau extraite avec de l'acétate d'éthyle (Extrait B. ) EXTRAIT A Après lavage à l'eau et séchage sur du sulfate de magnésium, le solvant est chassé par distillation, en sorte qu'on obtient du 17 :21-di acé-
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tate de 4:5-dihydroallocortisone (7,65 gr) le 1 #= + 74 (CHCL3).
EXTRAIT B : L'extrait est lavé avec une solution de bicarbonate de sodium et avec de l'eau, séché sur du sulfate de magnésium anhydre et débarrassé du solvant sous pression réduite. Le résidu brut, dissous dans un mélange de chlo- rure de méthylène et d'éther (1:2) est filtré sur un petit tampon d'alumine (Brockmann - type II-III) et le solvant est chassé, en sorte qu'on obtient
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du 1 :21-d.ia etoyy:ll$20-tri étoalloré . ène (diacétate de cortisone) (10 ,31 gr ; PBF. 207-234 , ( J B : + 131 OH012) z 238 o/u, 1 cm a 3450
EXEMPLE 3 Un mélange brut d'acétate 1% cortisone et d'acétate de dihydroallo-
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cortisone (3,0 gr; h : 238 m/u, E1¯ 289) dissous dans une solution à 10% d'acide acétique dans"àg l'éthanol (40 cc) est traitée avec le réactif T de .
Girard (3 ,0 gr) et chauffée au reflux pendant 65 minutes. Après refroidisseir- ment, on ajoute de la formaldéhyde aqueuse (6,5 ce; solution à 36 %) et on' laisse le tout au repos à température ambiante pendant 27 minutes, On verse ensuite dans une solution (sensiblement saturée) de bicarbonate de sodium
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et on extrait le stéroïde avec de'11'aoétate d'éthyle (3 x 120 oc)' La couche d'acétate d'éthyle est lavée à l'eau ( x 200 cc) , séchée elévaporée jusqu'à obtention d'un résidu solide (1,0 gr), x : 238 iu, y El cm !:2l8. r La solution de bicarbonate est acidifiée jusqu'à pH 1,0 avec de l'@f
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acide chlorhydrique concentré et de l'acide pyrfzvique et laissée au repos à température ambiante pendant deux heureso La matière solide qui a précipi- té, est séparée par filtration (1,46 gr) , j :
237 /u, Eie : 335. Par' cristallisation dans l'acétone et séchage à sous vide, o0oubtient du monoacétate de cortisone, ).. max : 237 u9 Elle% : 358. max 1 cm 35e.
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EXEMPLE 4
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134 gr d'un- mélange brut contenant de 1.' aèétate d@a'cortisone et de 1' acétate de dihydroallocortisoBe ( X- . 238 m/u., ëÍ!1""' 271),13' Slax 1.L.A.u1 de réactif PdeGirard, 200 cc d'acide acétique à 10 % dans de l'éthanol ab- solu sont chauffés au. reflux, pendant 1/2 heure, au bain de vapeuro
La solution est alors refroidie à température ambiante et 27 cc d'une solution aqueuse à 36 % de formaldéhyde sont ajoutes.
Le mélange est laissé au repos pendant 25 minutes, après quoi il est versé dans une solu- tion aqueuse saturée de -bicarbonate de sodium et extrait à trois reprises avec de l'acétate d'éthyle. L'extrait est lavé plusieurs fois avec de l'eau, séché sur du sulfate de magnésium et évaporé jusqu'à siccité sous pression
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sous pression réduite (4,53 gr) Absorption de lumière, >.. s 238 m/u, E1 cm1% :
90 (alcool) o Un spectre IoR révèle que le produit est constitué essentiellement par de l'acétate de dihydrocortisone avec environ 20 % d'acétate de cortisoneo
La solution de bicarbonate de sodium restante, après cette ex- traction, est acidifiée jusqu'à pH 1 à l'aide d'acide chlorhydrique concen- tré et laissée au repos pendant environ 2 heures, puis filtréeo La matière solide blanche ainsi obtenue est lavée à l'eau et séchée sous vide (7,22 gr).
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Absorption de lumière Max -. 237 e5 Wu 9 E m 3?0 (alcool) , [c(] ¯ + 215 (c = 1,0 CHCi3) , P.F. s 232 - 2369 (acétate de cortisone).
Le filtrat donne, au surplus, 1,48 gr de matière après extractif on avec de l'acétate d'éthyle. Absorption de lumière i À : g 237 rq/u, El cm 332 (alcool)
EXEMPLE 5
Un mélange brut d'acétate de cortisone et d'acétate de dihydroal-
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locortisone (2,0 gr; z g 238 mou, Eu 253) dissous dans une solu- tion à 10% d'acide acétique dans s l' éthao(30 ce) est traité avec le réac- tif T de Girard (2,0 gr) et chauffé aux reflux pendant 35 minute Se Après refroidisenef,,on ajoute de la formaldéhyde aqueuse (4 ce; solution à /+0) et on laisse le tout au repos à température ambiante pendant 25 minutes.
On verse ensuite dans une solution de bicarbonate de sodium (4%) et on ex- trait le stéroïde avec de l'acétate d'éthyle () x 25 ce) 0 La couche d'acéta- te d'éthyle est lavée à l'eau,séchée et évaporée jusqu'à obtention d'un ré-
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sidu solide (0,73 gr) révélant un À¯ g 238 m/u, El em g 85"
La solution de bicarbonate est acidifiée jusqu'à un pH de 1,0 avec de l'acide chlorhydrique concentré et est laissée au--repos à température am-
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biante pendant 2 heures.
La matière solide, qui récipité, est alors sé- parée par filtration (1,02 gaz max ô 23'ï m/u, Elcm g 376)" EXEMPLE 6 Un mélange brut de diacétate de 4g5-dydroallocorsone et de diacétate de cortisone ( À g 237 z2 rn/u;, E 250) (12 ,9 gr) est chauffée, au reflux pendant 3PEinutes dans de 1"'eEanol (340 ce) contenant de l'acide acétique (10%) et du réactif P de Girard, refroidi à température ambiante et additionné de formaldéhyde aqueuse (40%; 50 ce).
Après avoir laissé la solution au repos à température ambiante pendant 30 minutes, la solution est versée dans une solution aqueuse saturée de bicarbonate de so- dium (1500 cc) et extraite au moyen d'acétate d'éthyle (3 x 300 cc) La cou- che aqueuse est-acidifiée jusqu'à un pH de 1 avec de l'acide chlorhydrique concentré, laissée au repos pendant deux heures et extraite à l'aide d'acétate d'éthyle. La couche organique est lavée avec une solutuon de bicarbonate de sodium et avec de l'eau, puis évaporée jusqu'à siccité. Le produit obtenu
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(6,04 gr) présente les caractéristiques suivantes /\ 7 + 136] P'F' î8 - 2" 3 max z 237 m/u, Elem g 3410
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EXEMPLE 7.
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Un mélange de composé S de Reichstein et de 4:5 0,-c'.h dro- cétone correspondante, Pofo 216 227 , d, + 89Q (chloroforme) À *H, 240 .9 E 225 (2,43 gr) Eist chauffé aux reflux dans de l'éthanola hydre (J6 eote1fontenant de l'acide acétique (1,8 ce) et du réactif P de Girard d?3 gr) pendant 30 minutes. Le mélange réactionnel est alors refroidi à temp6catnre ambiante et additionné de formaldéhyde aqueuse (40%;5 ec)o Après repos pendant 30 minutes (pendant lesquelles il se sépare un précipité) , le mélange est versé dans du bicarbonate de sodium aqueux saturé (100 ce). L'
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extrgotion à l'aide d'acétate d'éthyle (3 x 10 cc) donne des émulsions, qui sont brisées par filtration. La décomposition de la matière solide séparée au moyen d'un acide dilué donne le composé S 4:5 0(, -dihydrogéné ,- P Fp 1 228 232 , . + 95 (chloroforme).
La couche aqueuse est acidifiée jusqu'à uns de 1 àDl'aide 1'acide chlidrhydrique concentré et laissée au. repos pen- dant 2 heures. La matière solide brune, qui s'est séparée, est extraite dans de l'acétate d'éthyle et isolée par évaporation des solvants. Par recristal- lisation dans de l'acétone, on obtient un produit enrichi en composé S@de
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Reichstein, P.F.., 235 - 23 EtOH 240 m/u, 1% - 386. L'augmentation de l'intensité d'absorption à 240u montre que cet enrichissement a eu lieu.
REVENDICATIONS
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1. Procédé pour la séparation de 3-céto- a4-stéroidea à partir de mélanges de tels stéroïdes et de 3-céto-4-5-dihydroallostéroldes, dans
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The present invention relates to improvements in the separation
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tion of 3-keto-A4steroid of mixtures of such steroid and of 3-keto-4 .: 5-dihydro-steroid So Although such a separation has been performed previously in steroid chemistry, for example for the separation of cholestenone ohùàastmone, it has been found to be particularly necessary in the treatment of cortisone, where it is, in certain alromatancesq, necessary to separate cortisone or its derivatives, for example. sas 21-esters or 17: 21-diesters, of 4: 5-dihydroallocortisone or its corresponding derivatives. den'iss Thus, in the Belgian patent applications If) 4140585 and bP +14091: 3, m has described, among others, a process for the preparation of the 21-esters and 17 t21-diesters of cortisone, esters:
corresponding 2. * 44xUbromo-4.-5 dihydroallocortisone and it has been found that one of the main difficulties of the process is the appreciable amount of dihydroallooortisone esters, which is present in the crude reaction mixture. The separation of these two components can offer considerable practical benefits, as it is complicated to perform by physical methods, such as crystallization and chromatography.
It has now been found that the 3-keto /: 14-sterord and 3-keto-415-aihydro-steroid can be separated to a large extent from the substances containing them, forming their Girard derivatives and forming them. subjecting them to selective decomposition, as described below.
Thus, after the formation of the derivatives by treatment of the ketones mixed with al-
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of Girard T or 'P's reagent, the saturated ketone derivative is decomposed by treatment with a suitable water-soluble aldehyde, such as de-
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finished later, after qqebf the reaction mixture is diluted with water and buffered to a pH of about 7, preferably with sodium bicarbonate, the saturated ketone then being extracted. The pH of the solutiOE1 <is then lowered, by preferably at a value between 1 and 2, so as to cause the decomposition of the derivative of the unsaturated ketone; this can
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be accelerated by the addition of pymu: that diacid.
The new process allows the separation of steroids of the type defined above more efficiently than was previously possible.
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present and, in many cases, a marked separation eds, t? sn s paaiale61s, i: m; <5 1. # substantially complete ration is possible.
The present invention therefore relates to a process for the separation of 3-keto-A -steroids from mixtures of such steroids and 3-keto-415-dihydroauosteroids, wherein the process is reacted mixed ketones with a Girard T or P reagent, so as to form their derivatives, the resulting mixture is treated with a water soluble aldehyde, which can displace the saturated ketone from its Girard complex, after which the The liberated saturated ketone is separated from the mixture in an aqueous medium, the pH of the aqueous medium then being lowered, to release and precipitate the unsaturated ketone.
According to a feature of the invention, the pH of the resulting mixture is lowered to a value between 1 and 2
According to another feature of the invention,
after the aforementioned treatment with the aid of the water-soluble aldehyde, the reaction mixture is diluted with water and buffered to a pH of about 7, after which the saturated steroid is extracted
The water soluble aldehyde should, as indicated, react with
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the Girard derivatives of saturated oeto-steroids, in question with exchange of the Girard reagent, the Girard derivatives of the appropriate aldehyde being
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formed and the saturated keto-steroid being released.
Formaldehyde, acetaldehyde and crotonaldehyde have been found to do this effectively; propionaldehyde and furfuryl aldehyde, on the other hand, are not satisfactory o It was not possible to classify the types of aldehydes
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soluble, which are suitable on the basis of their structure i.ro0n assumes that the suitability of a particular aldehyde is related to the ac-
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relative fixity of the aldehyde group and can therefore only be determined by a preliminary test o It is preferred to use formaldehyde as
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aldehyde hydreqolublea
The Girard derivatives of mixed ketones can be formed in any suitable manner,
for example by heating the mixture of steroids and Girard's reagent in a 10% solution of acetic acid in ± ethanol for 10 to 30 minutes o The solution is then cooled and a quantity, at least equivalent to the amount of Girard reagent d @ used, of a suitable water soluble aldehyde as defined above is added o This gives rise to the release of the saturated ketone o The reaction mixture is then preferably poured into a solution aqueous sodium bicarbonate and the saturated ketone is separated by extraction. In some cases it is found that the separation can be complicated due to the relatively low solubility of the Girard complex of the unsaturated ketone;
in these cases, it is possible to improve the separation by adding to the aqueous mixture a water-miscible organic solvent, such as ethanol or dioxane, so as to increase the difference between the solubili- tees of the Girard complex of unsaturated ketone and saturated ketone in the middle.
After extraction of the saturated ketone, the pH of the aqueous phase is lowered, preferably to a value between 1 and 2, for example, by the addition of a strong organic or mineral acid, so as to cause the precipitation of unsaturated ketone
Either of the Girard P and T reagents can be used in the present process; it is preferred, however, to use the reagent P, since this compound is the most stable and can be more easily stored.
It has been found that by carrying out the process according to the invention, it is possible to obtain the unsaturated ketone in a state of relatively high purity. Further, the process has the advantage that the products are in contact with acidic solutions for a short time, which reduces the possibility of hydrolysis of the ester groups present, while the low temperature at which the reactions can be carried out minimizes material destruction.
When using the process according to the invention in the synthesis of cortisone, the components to be separated can be cortisone.
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itself and 4-.5-dihydroallocortisone or their corresponding 21-esters or 17,121-diesters. It is preferred, however, to separate the unsaturated and saturated compounds, before hydrolysis of the ester groups.
According to a specific feature of the invention, the mixture to be separated therefore contains a 21-ester or 17:21 diester of cortisone and
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a corresponding ester or diester of 485-dihydroalloeortisoneo
The following examples, given for illustrative purposes only, will allow the invention to be fully understood.
EXAMPLE 1
A mixture of 21-cortisone acetate and 21-acetate 4: 5-di-
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hydroallocortisone (j EtOH23 u; 1% 289), 3 grJ containing 2.2 gr max lem of cortisone acetate, spectroscopically determined) and Girard's reagent P (3 gr) is dissolved in 10% acetic acid in ethanol (45 cc), the solution then being heated under reflux for one hour. Aqueous formaldehyde (60%;
6 cc) to the cooled solution which is then left to stand at room temperature for 20 minutes. The solution is poured into saturated aqueous sodium bicarbonate solution (250cc) and extracted with ethyl acetate (3 x 150cc). The combined ethyl acetate extracts are washed with water, dried over anhydrous magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure.
The residency is
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killed by crude 4'.5-dihydroaUàcortisone acetate, XEtOH236 - 250 nylu, max "'*
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gls l em 95 The bicarbonate solution, after acidification to pH 1 with concentrated hydrochloric acid and pyruv.que acid (40-60%; 30 ° C.) is left at room temperature for 4 hours. The precipitate is collected, washed thoroughly with water and dried in vacuo over P2O5. Solid matter
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(1.760 gr "EtOH 238 u 1 = 351 - estimated amount of corticosteroid acetate 8.58 g1rz yield) is cri..stallie in acetone, so that we obtain pure 21-cortisone acetate, which after drying at 130/4 hours, melts at 244 - 24la, rd ,, D: 219 (c = 1.8 in fiC..3), EtDH2.) 8 ny 'u, E am: 378 "max ..
EXAMPLE 2
EMI3.3
A mixture of 17: 21-cortisone diacetate and 17: 21-diacetate of 4: 5-dihydroallocortisone (19.25 g; El 250) and of Girard's reagent P (19 25 g) is heated to reflux in a solution at 90% ethanol in acetic acid (400 cc) for 15 minutes, after which the solution is cooled to room temperature and an aqueous solution of for.ma.ldhyde (35% - 80 cc) is added.
After 1/2 hour at room temperature, the mixture is poured into a saturated aqueous solution of sodium bicarbonate (2000 cc)
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and extracted three times with ethyl acetate (Extract A) m Concentrated hydrochloric acid (75 cc) and pyruvic acid (50%; 50 cc) are added to the aqueous layer and, after three hours at room temperature, the aqueous layer is again extracted with ethyl acetate (Extract B.) EXTRACT A After washing with water and drying over magnesium sulfate, the solvent is distilled off, so that we get from 17: 21-di ac-
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4: 5-dihydroallocortisone tate (7.65 gr) on 1 # = + 74 (CHCL3).
EXTRACT B: The extract is washed with sodium bicarbonate solution and with water, dried over anhydrous magnesium sulfate and freed from the solvent under reduced pressure. The crude residue, dissolved in a mixture of methylene chloride and ether (1: 2) is filtered through a small pad of alumina (Brockmann - type II-III) and the solvent is removed, so that we obtain
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du 1: 21-d.ia etoyy: ll $ 20-tri starred. ene (cortisone diacetate) (10, 31 gr; PBF. 207-234, (J B: + 131 OH012) z 238 o / u, 1 cm a 3450
EXAMPLE 3 A crude mixture of 1% cortisone acetate and dihydroallo acetate
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cortisone (3.0 gr; h: 238 m / u, E1¯ 289) dissolved in a 10% solution of acetic acid in ethanol (40 cc) is treated with the T reagent.
Girard (3.0 gr) and heated at reflux for 65 minutes. After cooling, aqueous formaldehyde (6.5 cc; 36% solution) is added and the whole is left to stand at room temperature for 27 minutes. The mixture is then poured into a (substantially saturated) solution of sodium bicarbonate. sodium
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and the steroid is extracted with ethyl acetate (3 x 120 oc). The ethyl acetate layer is washed with water (x 200 cc), dried and evaporated until a mixture is obtained. solid residue (1.0 gr), x: 238 iu, y El cm!: 2l8. r The bicarbonate solution is acidified to pH 1.0 with @ f
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concentrated hydrochloric acid and pyrfzvic acid and left to stand at room temperature for two hours. The solid matter which has precipitated is separated by filtration (1.46 g), j:
237 / u, Eie: 335. By crystallization from acetone and drying in vacuo, cortisone monoacetate is obtained,) .. max: 237 u9 It%: 358. max 1 cm 35e.
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EXAMPLE 4
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134 gr of a raw mixture containing 1. ' aetate of a'cortisone and 1 'acetate of dihydroallocortisobe (X-. 238 m / u., ëÍ! 1 ""' 271), 13 'Slax 1.LAu1 of PdeGirard reagent, 200 cc of acetic acid 10% in absolute ethanol is heated to. reflux, for 1/2 hour, in a steam bath o
The solution is then cooled to room temperature and 27 cc of a 36% aqueous solution of formaldehyde are added.
The mixture is left to stand for 25 minutes, after which it is poured into a saturated aqueous solution of sodium bicarbonate and extracted three times with ethyl acetate. The extract is washed several times with water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under pressure.
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under reduced pressure (4.53 gr) Light absorption,> .. s 238 m / u, E1 cm1%:
90 (alcohol) o An IoR spectrum reveals that the product consists essentially of dihydrocortisone acetate with approximately 20% cortisone acetate
The sodium bicarbonate solution remaining, after this extraction, is acidified to pH 1 with concentrated hydrochloric acid and left to stand for about 2 hours, then filtered. The white solid material thus obtained is washed with water and dried under vacuum (7.22 g).
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Max light absorption -. 237 e5 Wu 9 E m 3? 0 (alcohol), [c (] ¯ + 215 (c = 1.0 CHCi3), m.p. s 232 - 2369 (cortisone acetate).
The filtrate gives, in addition, 1.48 g of material after extracting it with ethyl acetate. Light absorption i À: g 237 rq / u, El cm 332 (alcohol)
EXAMPLE 5
A crude mixture of cortisone acetate and dihydroal acetate
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locortisone (2.0 gr; zg 238 soft, Eu 253) dissolved in a 10% solution of acetic acid in ethao (30 cc) is treated with Girard's T reagent (2.0 gr ) and heated under reflux for 35 minutes. After cooling, aqueous formaldehyde (4 cc; solution at / + 0) is added and the whole is left to stand at room temperature for 25 minutes.
The mixture is then poured into a solution of sodium bicarbonate (4%) and the steroid is extracted with ethyl acetate () x 25 cc). The ethyl acetate layer is washed with l. 'water, dried and evaporated until a re-
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solid sidu (0.73 gr) revealing a g 238 m / u, El em g 85 "
The bicarbonate solution is acidified to a pH of 1.0 with concentrated hydrochloric acid and is allowed to stand at room temperature.
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biante for 2 hours.
The solid matter, which recipitates, is then separated by filtration (1.02 gas max ô 23'ï m / u, Elcm g 376) "EXAMPLE 6 A crude mixture of 4g5-dydroallocorsone diacetate and cortisone diacetate ( At g 237 z2 rn / u ;, E 250) (12, 9 g) is heated at reflux for 3 PEinutes in 1 "eEanol (340 cc) containing acetic acid (10%) and reagent P of Girard, cooled to room temperature and added with aqueous formaldehyde (40%; 50 cc).
After leaving the solution to stand at room temperature for 30 minutes, the solution is poured into saturated aqueous sodium bicarbonate solution (1500 cc) and extracted with ethyl acetate (3 x 300 cc). The aqueous layer is acidified to pH 1 with concentrated hydrochloric acid, left to stand for two hours and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with sodium bicarbonate solution and with water, then evaporated to dryness. The product obtained
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(6.04 gr) has the following characteristics / \ 7 + 136] P'F 'î8 - 2 "3 max z 237 m / u, Elem g 3410
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EXAMPLE 7.
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A mixture of Reichstein's compound S and the corresponding 4: 50, -c'.h dro- ketone, Pofo 216 227, d, + 89Q (chloroform) AT * H, 240.9 E 225 (2.43 gr) Eist heated to reflux in ethanola hydra (J6 eote1containing acetic acid (1.8 cc) and Girard's reagent P of 3 g) for 30 minutes. The reaction mixture is then cooled to room temperature and added with aqueous formaldehyde (40%; 5 ec). After standing for 30 minutes (during which a precipitate separates), the mixture is poured into saturated aqueous sodium bicarbonate (100%). this). The
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Extraction with ethyl acetate (3 x 10 cc) gives emulsions, which are broken up by filtration. Decomposition of the separated solid material with dilute acid gives compound S 4: 50 (, -dihydrogenated, - P Fp 1228 232,. +95 (chloroform).
The aqueous layer is acidified to 1 to 1 with concentrated hydrochloric acid and left to stand. rest for 2 hours. The brown solid, which separated, is extracted into ethyl acetate and isolated by evaporation of the solvents. By recrystallization from acetone, a product enriched in compound S @ of
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Reichstein, P.F .., 235 - 23 EtOH 240 m / u, 1% - 386. The increase in absorption intensity at 240u shows that this enrichment has taken place.
CLAIMS
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1. Process for the separation of 3-keto-a4-steroidea from mixtures of such steroids and 3-keto-4-5-dihydroallosteroids, in