WO2020008821A1 - 男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物 - Google Patents

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    • C12R2001/665—Aspergillus awamori

Definitions

  • the present invention relates to a composition used for treating, preventing or ameliorating male infertility, a food using the composition, and the like.
  • Non-Patent Document 1 Approximately 80 to 90% of the causes of male infertility are spermatogenetic dysfunctions that have some problems in the process of sperm formation from spermatogonia or in the process of sperm maturation. Disease, azoospermia, teratospermia, asthenozoospermia and the like. Therefore, studies on impaired spermatogenic function are underway to treat this type of male infertility.
  • Patent Literature 1 and Non-Patent Literature 2 show that healthy sperm contains a large amount of phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase (PHGPx, GPx4), and the decrease in expression of GPx4 in sperm causes a remarkable decrease in total sperm count and sperm. It is described as causing a decrease in motor performance.
  • Non-Patent Document 2 reports that testis-specific GPx4 knockout mice show impaired spermatogenesis similar to human male infertility.
  • JP 2004-344164 A Japanese Patent No. 6111416 International Publication No. WO 2015/119036
  • testis-specific GPx4 knockout mice show the same impaired spermatogenic function as human male infertility. Therefore, testicular-specific GPx4 knockout mice were used as male infertility model mice to treat and prevent male infertility. Or, it is expected to develop and provide materials such as medicines and foods useful for improvement.
  • Patent Documents 2 and 3 each disclose a koji fermented product obtained by fermenting grains and tea leaves with koji mold.
  • the koji fermented product or koji mold itself is used for treating, preventing, or preventing male infertility. No studies have been conducted on its use, and its efficacy was unknown.
  • an object of the present invention is to provide a composition used for a medicine, food, supplement or beverage capable of treating, preventing or ameliorating male infertility. is there.
  • the composition for treating, preventing or ameliorating male infertility of the present invention contains a koji mold fermented with koji mold.
  • This fermented product of Aspergillus has the effect of increasing the total sperm count, reducing abnormal spermatozoa having a structural defect (such as an abnormal hairpin structure in the sperm tail), or suppressing the dropout of sperm-forming cells in testis tissue. As a result, it is useful for treating, preventing or ameliorating male infertility.
  • the “male” of male infertility in the present invention includes not only human males but also male non-human animals.
  • the fermented product of Aspergillus oryzae of the present invention preferably uses a raw material derived from tea leaves or rice as a fermentation raw material.
  • a suitable material for the koji mold fermented product is selected.
  • the above described koji mold is a black koji mold or a white koji mold.
  • a koji mold suitable for producing a koji mold fermented product as the active ingredient of the present invention is selected.
  • composition for treating, preventing or ameliorating male infertility of the present invention preferably further contains lactic acid bacteria.
  • lactic acid bacteria Aspergillus is promoted, fermentation by Aspergillus is performed stably, and a fermented product of Aspergillus having high activity is obtained, and when ingested, intestinal bacteria are prepared by lactic acid bacteria to improve immunity.
  • the male infertility in the present invention is oligospermia or teratosis. As a result, a condition suitable for treatment, prevention or improvement is selected.
  • the food for treating, preventing or ameliorating male infertility of the present invention contains the above-mentioned composition. Since the fermented product of koji mold used in food production is used as an active ingredient, it is highly safe and can be taken orally.
  • the method for producing a composition for treating, preventing or ameliorating male infertility of the present invention comprises a step of inoculating a fermentation material with a koji mold and a step of fermenting the fermentation material with the koji mold to obtain a koji mold fermented product. Or a step of inoculating a fermentation material with a koji mold and a lactic acid bacterium, and a step of fermenting the fermentation material with the koji mold and the lactic acid bacterium to obtain a koji mold fermented product.
  • the composition for treating, preventing or ameliorating male infertility according to the present invention can be obtained.
  • this fermentation raw material is a raw material derived from tea leaves or rice. It is also preferable that the koji mold is a black koji mold or a white koji mold.
  • a composition for treating, preventing or ameliorating male infertility having the following excellent effects can be provided.
  • the fermented product of koji mold used in food production is used as an active ingredient, it is highly safe and easy to ingest.
  • 9 is a graph showing the mating results of each control group and each test group in Example 2.
  • 9 is a graph showing the total number of spermatozoa in each control group and each test group in Example 3.
  • 10 is a graph showing the ratio of abnormal spermatozoa in each control group and each test group in Example 4. It is a graph which shows the ratio of the bending angle of the sperm tail part of the sperm of each control group in Example 4, and each test group.
  • 10 is a photograph showing testis tissue of each control group and each test group in Example 5.
  • a method for producing a koji mold fermented product includes a step S0 of preparing a fermentation raw material, a step S1 of adding water to the fermentation raw material to absorb water, a step S2 of steaming the fermentation raw material, It roughly comprises a step S3 of inoculating a koji mold with the obtained fermentation raw material, a step S4 of performing fermentation, and a step S5 of obtaining a koji mold fermented product.
  • Plant-derived materials are selected as the fermentation materials in the present invention, and leaves, stems, roots, flowers and fruits of plants can be used as fermentation materials.
  • tea leaves, grains or beans are preferably used, and from the viewpoint of excellent effect of improving male infertility, especially tea leaves or grains are suitably used as a fermentation raw material.
  • Grains include rice, corn, wheat, barley, rye, embroidery, sorghum, buckwheat, and other cereals widely, and rice is particularly preferred from the viewpoint of excellent effects.
  • Rice includes not only polished white rice but also brown rice.
  • the tea leaves include not only tea leaves but also stems and branches collected from tea plants.
  • Tea leaves used as a raw material of the fermented product of Aspergillus oryzae of the present invention are preferably used fresh tea leaves in a state as collected, but tea leaves heat-treated immediately after collection, oxidases contained in the tea leaves after collection.
  • Oolong tea or black tea in which tea leaves are oxidized and fermented, or post-fermented tea.
  • the tea residue after decocting these green tea, oolong tea or black tea can also be used.
  • it is preferable that the tea leaves and tea stems are crushed to a certain size so as not to be too large.
  • the water absorption treatment step S1 Next, the water absorption treatment step S1 will be described.
  • a process of adding water to the fermentation raw material or immersing the fermentation raw material in water to absorb water is performed.
  • the water absorption is adjusted so that the water content of the tea leaves is 20 to 60%, preferably 30 to 50%.
  • the fermented raw material absorbed in the above-mentioned process is put into a steamer, covered, and the steamer is heated by heating the steamer to apply steam to the fermented raw material.
  • the time for the steaming treatment is preferably about 30 minutes to 120 minutes, more preferably 45 minutes to 90 minutes, and particularly preferably about 60 minutes.
  • various bacteria in the raw material are sterilized, and in the subsequent fermentation step, fermentation using koji mold as the dominant species is performed.
  • various bacteria in the tea leaves are sterilized, and the oxidase contained in the tea leaves is inactivated.
  • Aspergillus can be efficiently propagated.
  • the steamed raw material is taken out of the steamer, spread evenly on a table, and cooled to about 30 to 40 ° C. This makes it possible to inoculate the koji mold on the fermentation raw material.
  • the step S3 of inoculating a koji mold on a fermentation raw material will be described.
  • a koji mold is inoculated to the fermented raw material cooled through the above-mentioned steaming step.
  • the koji mold is a microorganism mainly used in producing a koji fermented food, and specific examples include black koji mold, white koji mold and yellow koji mold.
  • black aspergillus is a fungus of the genus Aspergillus that forms black or black-brown conidia (a kind of asexual spore) used in the production of distilled spirits such as Awamori in Okinawa and sweet potato shochu in Kagoshima.
  • black aspergillus is a fungus of the genus Aspergillus that forms black or black-brown conidia (a kind of asexual spore) used in the production of distilled spirits such as Awamori in Okinawa and sweet potato shochu in Kagoshima.
  • Aspergillus awamori val Kawachi Kawachi (Kawachi black koji mold)
  • Aspergillus ryukyuensis Aspergillus awamori
  • Aspergillus cytoii Aspergillus inui
  • Aspergillus usami Aspergillus aures, and the like.
  • the white koji mold refers to a group of molds of the genus Aspergillus that form conifers of yellow-orange color, and specific examples include Aspergillus kawachii.
  • Koji mold refers to a group of Aspergillus molds that form yellow or yellow-green conidia, and is a microorganism that is mainly used in the production of sake, miso, soy sauce, and the like. Specific examples include, but are not limited to, Aspergillus oryzae, Aspergillus sojae, and the like. In the present invention, it is preferable to use Aspergillus niger or Aspergillus oryzae from the viewpoint of excellent effect of improving male infertility.
  • Aspergillus awamori var. Kawachii Aspergillus luchuensis or Aspergillus inui, which are black koji molds, Aspergillus inuii, and Aspergillus kawachi aspergillus kawachi, which are white koji molds Combinations are suitably used, and in particular, Aspergillus awamori var. Kawachii is preferred.
  • the koji molds are uniformly dispersed and mixed with the fermented raw materials spread on the table.
  • Aspergillus oryzae is preferably inoculated with its spores, and is preferably added so that the number of spores of koji mold becomes 500,000 or more, preferably 2,000,000 or more per 1 g (dry weight) of the fermentation raw material.
  • the number of spores contained in 1 g of seed koji is 2 billion, about 1.0 g (0.1% by weight) of seed koji may be added to 1 kg of fermentation raw material.
  • the step of inoculating the koji mold S3 it is also preferable to further inoculate a lactic acid bacterium and co-culture the koji mold and the lactic acid bacterium.
  • a lactic acid bacterium By co-culturing the koji mold and the lactic acid bacterium, the growth of the koji mold is promoted and a stable fermentation treatment is performed, and the inoculated bacteria become the dominant species, so that the propagation of other germs and the like is suppressed.
  • lactic acid bacteria used in lactic acid bacteria fermented foods can be used, for example, Lactobacillus casei (Lactobacillus casei), Lactobacillus fermentum or Lactobacillus bulgaricus (Lactobacillus bulgaricus), such as Lactobacillus, Bifidobacterium bifidum And Lactococcus genus such as Lactococcus lactis, and Enterococcus genus such as Enterococcus faecium.
  • the lactic acid bacteria to be inoculated may be those that have been cultured in advance, and about 0.1% by weight of cells may be added to 1 kg of the fermentation raw material.
  • the koji mold fermented product obtained by fermentation with koji mold and lactic acid bacteria contains various enzymes produced by koji mold and lactic acid bacteria, as well as koji mold and its spores and lactic acid bacteria. Since lactic acid bacteria have a probiotic function, their intestinal environment is prepared by ingestion, and an effect of improving male infertility by strengthening the immune function is expected.
  • the step S4 of culturing the koji mold inoculated to the fermentation raw material and performing fermentation will be described.
  • the koji mold is propagated on a raw material inoculated with the koji mold.
  • a fermentation raw material to which koji mold has been added is placed in a culture room maintained at about 30 ° C.
  • fermentation proceeds, and the temperature of fermented raw materials such as tea leaves rises.
  • the temperature of the raw materials is lowered by ventilating the fermented raw materials.
  • the amount of ventilation is adjusted so that the temperature is maintained at 30 ° C to 42 ° C, preferably 30 ° C to 40 ° C.
  • the fermentation temperature is appropriately adjusted depending on the type of koji mold used for fermentation. Specifically, when a black koji mold is selected as the koji mold, for example, the temperature of the fermentation material such as tea leaves is adjusted to 35 ° C. to 40 ° C. by ventilation for 12 to 30 hours from the start of the culture. Thereafter, the temperature is adjusted slightly lower to 30 ° C.
  • a machine capable of performing washing of the raw material, water absorption, steaming, inoculation of the koji mold and fermentation (koji making) in the same apparatus (for example, a drum-type automatic koji making apparatus or the like) ).
  • the obtained koji mold fermented product is a so-called "Koji” in which koji mold is propagated as a fermentation raw material.
  • the fermented product of Aspergillus oryzae obtained by the above-mentioned process contains a certain amount of water, but the water can be removed by natural drying or low-temperature dehumidifying drying. It is also possible to pulverize the fermented koji mold from which water has been removed to obtain a powder or a granule. Even after the water has been removed, the function as a koji mold fermentation product can be effectively maintained.
  • This fermented product of Aspergillus has therapeutic, preventive and ameliorating effects on male infertility.
  • tea leaves when used as a fermentation raw material, tea leaves originally have a cell growth inhibitory activity and are not suitable for oral ingestion, but the koji mold fermented product of the present invention has a reduced cell growth inhibitory activity. It can be taken orally.
  • the composition for treating, preventing or ameliorating male infertility of the present invention contains, as an active ingredient, a koji mold fermented with the above-described koji mold, oligospermia, azoospermia, teratogenic spermia, and sperm It has the effect of ameliorating, preventing or treating male infertility based on impaired dysgenesis such as asthenia, and suppressing the onset of dysgenetic dysfunction. Therefore, the composition containing the fermented product of Aspergillus oryzae of the present invention as an active ingredient can be used as pharmaceuticals, quasi-drugs, and food compositions for preventing, treating, or improving these diseases.
  • the cause of male infertility is often unspecified, and the composition according to the present invention treats, prevents or ameliorates male infertility due to various causes, particularly due to decreased expression of GPx4 in sperm.
  • Male infertility can be suitably treated, prevented or ameliorated.
  • the composition for treating, preventing or ameliorating male infertility of the present invention is intended mainly for human males, but also for veterinary drugs and animal supplements for non-human males, It can be widely used in the form of animal feed or pet food.
  • the dose of the composition for treating, preventing or ameliorating male infertility of the present invention cannot be defined unconditionally because it varies depending on the target preventive or therapeutic effect, administration method, age, body weight, etc.
  • the oral dose is about 0.1 to 1000 mg / kg body weight, preferably about 0.5 to 200 mg / kg body weight, more preferably about 1 to 50 mg / kg body weight as a fermented product of Aspergillus oryzae. It may be administered in 1 to 3 divided doses.
  • composition for treating, preventing or ameliorating male infertility of the present invention can be prepared in various forms by a conventionally used method.
  • the preparation can be prepared using additives that are generally accepted as additives for pharmaceuticals, such as carriers and excipients for preparations.
  • a drug delivery system including a formulation technology such as microcapsule, micronization, inclusion using cyclodextrin, or the like is used. You can also.
  • composition can be used in the form of tablets, granules, capsules or liquids for internal use, but is preferably used in a form suitable for absorption from the digestive tract.
  • a conventional formulation technique can be used to provide a formulation in a desired form for reasons such as distribution and storage.
  • composition for treating, preventing or ameliorating male infertility of the present invention includes tablets, capsules, granules, supplement forms such as syrups, beverages, confectionery, bread, gruel, cereal, noodles, jelly, soup, It can be used as a food composition in any form such as dairy products and seasonings.
  • a food composition it is also possible to combine various other active ingredients, nutrients such as vitamins, minerals and amino acids, etc., within a range that does not affect the efficacy of the active ingredients of the present invention.
  • Foods developed from the food composition of the present invention include supplements, health foods, functional foods, foods for specified health use, and the like.
  • the daily intake of the food composition of the present invention is preferably about 0.1 to 1000 mg / kg body weight, more preferably about 0.5 to 200 mg / kg body weight as the above-described fermented koji mold. More preferably, the dose is about 1 to 50 mg / kg body weight, and it is preferable to take this in 1 to 3 divided doses.
  • Example 1 Preparation of koji mold fermented product
  • raw tea leaves were used as a fermentation raw material. After water was added to the tea leaves so that the water content of the tea leaves became about 50% and water absorption treatment was performed, the tea leaves were put into a drum type koji making apparatus and steamed. The conditions of the steaming treatment were 95 ° C. for 60 minutes. After cooling the tea leaves to 30 ° C. in a drum type koji making apparatus, the seed koji of Aspergillus awamori var. Kawachii (aspergillus awamori var.
  • Lactic acid bacteria (Lactobacillus casei) was added to tea leaves so as to be 0.1% by weight and mixed, and koji was made in a drum type koji making apparatus for 3 days.
  • the koji making temperature was adjusted so that the temperature of the tea leaves would be 35 ° C. to 40 ° C. for 24 hours after the addition of the seed koji, and then for the next 48 hours, the amount of ventilation was similarly adjusted.
  • the temperature of the tea leaves was adjusted slightly lower so as to be 30 ° C. to 35 ° C.
  • the koji mold fermented product produced for 3 days in the apparatus was taken out and pulverized to obtain a powdery koji mold fermented product.
  • Example 2 Improvement of Male Infertility by Aspergillus Fermented Product
  • a male testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mouse was used as a male infertility model mouse (see Non-Patent Document 2).
  • the testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mouse is a mouse in which the non-mitochondrial phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase (cGPx4) is deficient in the testis, and has a phenotype shown in Table 1 below.
  • Three week-old male testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mice were placed one by one in each of the four groups shown in Table 2 below, and singly housed one per cage until the age of eight weeks.
  • the normal control group was fed with a feed for breeding and rearing mice CE-2 (CLEA / Rodent / Diet / CE-2; product of CLEA Japan) during the test period.
  • Vitamin E used for the treatment of male infertility (Non-Patent Document 1) was selected as a positive control substance, and the group to which the positive control substance was administered was fed with feed CE-2 mixed with vitamin E during the test period. .
  • the mixing ratio of vitamin E was 100 mg for 100 g of feed CE-2.
  • the test group was fed with feed CE-2 mixed with the koji mold fermented product obtained in Example 1.
  • the low-dose group contained a fermented koji mold of 0.5% by weight
  • the high-dose group contained a fermented koji product of 5.0% by weight.
  • Feed CE-2 mixed with the feed CE-2, the positive control substance or the koji mold fermented product was freely taken, and the drinking water was also made freely from a water bottle.
  • the animals were bred from the age of 3 weeks to the age of 8 weeks under the conditions described above.
  • FIG. 2 shows the results. * On the bar in the graph of FIG. 1 indicates that the p value was p ⁇ 0.05 when compared to the normal control group “CE-2”, and ** indicates that the p value was p ⁇ 0.01 is shown.
  • the dosage of the koji mold fermented product in the high dose group is 6 to 8 g / kg body weight / day
  • the dose of the fermented product of Aspergillus is 0.6 to 0.8 g / kg body weight / day. Therefore, in order to improve male infertility, the dosage of the koji mold fermented product is preferably less than 6 g / kg body weight / day, more preferably 3 g / kg body weight / day or less, and 1 g / kg body weight. / Day was considered to be more preferable.
  • Example 3 Improvement of sperm count by koji mold fermented product
  • the sperm count of testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mice is reduced to less than half that of normal mice.
  • the influence on the sperm count by the ingestion of the fermented product of Aspergillus oryzae of the present invention was examined as follows. After the mating period in Example 1, male testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mice in each control group and each test group were dissected, and the epididymis was excised from each individual. The recovery of sperm from each epididymis was performed as follows.
  • testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mice in the low-dose group “cha-koji 0.5%” of the koji mold fermented product showed higher spermatozoa than mice in the normal control group “CE-2”. It was found that the number increased about two-fold. In addition, the sperm count was also increased in the mice in the high-dose group “cha-koji 5%” of the koji fermented product, but the sperm count was higher in the low-dose group “cha-koji 0.5%”. . From these results, it was shown that the koji mold fermented product of the present invention can improve oligospermia of male infertility.
  • Example 4 Improvement of abnormal spermatozoa by fermented product of Aspergillus testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mouse has an abnormal hairpin structure in which the sperm tail is bent in more than half of sperm, and has abnormal sperm morphology. Therefore, the influence of the ingestion of the fermented product of Aspergillus oryzae of the present invention on the sperm morphology was examined as follows. The sperm sample solution collected in Example 3 was diluted 10-fold with PBS, 10 ⁇ L was taken on a slide glass, covered with a cover glass, and the sperm shape was observed with an all-in-one microscope (Keyence).
  • Photographs were taken for a plurality of visual fields under a microscope, and the number of normal and abnormal spermatozoa in each photograph was counted to calculate the average ratio of abnormal spermatozoa.
  • the sperm tail angle is “0 °” when the sperm tail has almost no bending angle (straight shape), and “90 °” when the sperm tail bending is recognized to about 90 °. ° ”and those with a bend of the sperm tail close to 180 ° were counted as“ 180 ° ”.
  • FIG. 4 shows the ratio of abnormal spermatozoa in each control group and each test group
  • FIG. 5 shows the ratio of the bending angle of the sperm tail.
  • the testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mice in the low dose group “cha koji 0.5%” of the koji mold fermented product were abnormal compared to the normal control group “CE-2” mice. It was found that the sperm ratio was significantly reduced. This remarkable decrease in the abnormal sperm ratio was an effect that was not observed in the mice in the positive control substance-administered group “VE-rich diet” administered with the positive control substance vitamin E. From these results, it was shown that the koji mold fermented product of the present invention can improve teratogenic spermosis of male infertility.
  • the dosage of the fermented product of Aspergillus is preferably smaller than the dosage of the high-dose group “cha-koji 5%”.
  • the testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mouse in the low-dose group “cha-koji 0.5%” of the koji mold fermented product has a particularly sperm tail bending angle of “90 °”. Structural abnormalities in the sperm tail classified into different degrees were suppressed, and it was confirmed that the fermented product of Aspergillus improved the structural failure of the sperm tail.
  • Example 5 Improvement of testis tissue by Aspergillus fermentation product Testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mice show loss of spermatocytes in testis tissue. Then, the influence on the spermatocytes by the ingestion of the fermented product of Aspergillus oryzae of the present invention was examined as follows. After the mating period in Example 1, male testis-specific non-mitochondrial GPx4 knockout mice in each control group and each test group were dissected, and testes were excised from each individual. Testis tissue was fixed in 10% neutral formalin solution, embedded in paraffin, sliced to a thickness of 4 ⁇ m, and observed by hematoxylin and eosin staining. FIG. 6 shows photographs of spermatocytes in the testis tissue of each control group and each test group.
  • the arrow in the photograph of the normal control group “CE-2” indicates the portion where the spermatocytes have fallen off.
  • the low-dose group of the koji mold fermented product “cha-koji 0.5%” indicates the dropout of spermatocytes.
  • the high-dose group of "Koji 5%" of the fermented product of Aspergillus dropout of spermatocytes was partially confirmed. From this result, it was found that the dosage of the fermented product of Aspergillus is preferably smaller than the dosage of the high-dose group “cha-koji 5%”.
  • the present invention provides a composition used for treating, preventing or ameliorating male infertility, and is widely used in the medical and food fields (including supplements, health foods, functional foods, foods for specified health use, etc.). It is useful.

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Abstract

男性不妊症を治療、予防又は改善することができる医薬品、食品、サプリメント又は飲料に用いられる組成物を提供する。　本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物は、麹菌で発酵された麹菌発酵物を含有する。

Description

男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物
　本発明は、男性不妊症の治療、予防又は改善のために用いられる組成物及びそれを用いた食品等に関する。
　現在、妊娠を望んでいるカップルの約１割が不妊であると報告されているが、晩婚化等による妊娠希望年齢の上昇の影響もあり、不妊の傾向が高まっていることが指摘されている。不妊の原因は、女性側、男性側、あるいはその両方にある場合があるところ、男性側に原因があるケースが４８％とされている（非特許文献１）。男性不妊症の原因の約８～９割は、精原細胞から精子が形成される過程または精子が成熟する過程に何らかの問題を有する造精機能障害であり、具体的な症状としては、乏精子症、無精子症、奇形精子症、精子無力症等がある。それゆえ、この種の男性不妊症を治療するため、造精機能障害に関する研究が進められている。
　特許文献１及び非特許文献２には、健康な精子にはリン脂質ヒドロペルオキシドグルタチオンペルオキシダーゼ（ＰＨＧＰｘ、ＧＰｘ４）が多量に存在しており、精子におけるＧＰｘ４の発現低下が総精子数の著しい減少と精子運動能の低下をもたらすことが記載されている。また、非特許文献２では、精巣特異的ＧＰｘ４ノックアウトマウスは、ヒト男性不妊症と同様の造精機能障害を示すことが報告されている。
　他方、近年、日本酒・焼酎・甘酒・味噌・醤油等の麹を利用した日本の伝統的な麹発酵食品の価値が再認識され、麹の人気が高まっている。麹とは、米、米ぬか、麦又は豆等を蒸して麹菌を繁殖させたものであり、たとえば、米に麹菌を繁殖させたものは米麹と呼ばれている。麹菌は、発酵食品の製造を可能とする多種類の酵素を生産する機能を有していることが知られているが、この種の分野に留まらず、麹菌のもつ新たな機能の研究及びそれに基づく用途の開発が本願発明者によって進められている。特許文献２では、穀物等を麹菌で発酵させて得られた飼料が動物の成長を促進させることが報告され、特許文献３では、茶葉に麹菌を接種し、培養して得られる麹発酵組成物が抗酸化活性を有することが報告されている。
特開２００４－３４４１６４号公報 特許第６１１１４１６号 国際公開第２０１５／１１９０３６号
日本産科婦人科学会編著，"ＨＵＭＡＮ＋　男と女のディクショナリー"，[online]，２０１４年９月，インターネット<URL:http://www.jsog.or.jp/public/human_plus_dictionary> 今井浩孝，"リン脂質ヒドロペルオキシドグルタチオンペルオキシダーゼ（ＰＨＧＰｘ）と男性不妊"，HORMONE FRONTIER IN GYNECOLOGY，2012年，Vol.19，No.2，p.59-70
　上述したように、精巣特異的ＧＰｘ４ノックアウトマウスはヒト男性不妊症と同様の造精機能障害を示すことから、この精巣特異的ＧＰｘ４ノックアウトマウスを男性不妊モデルマウスとして用い、男性不妊症の治療、予防又は改善に有用な医薬品や食品等の材料を開発し、提供することが期待されている。
　なお、特許文献２及び特許文献３には、麹菌で穀物や茶葉を発酵させて得られる麹発酵物がそれぞれ記載されているが、この麹発酵物や麹菌自体を男性不妊症の治療、予防又は改善に用いる検討はなされておらず、その有効性は不明であった。
　したがって、本発明は上述した点に鑑みてなされたもので、その目的は、男性不妊症を治療、予防又は改善することができる医薬品、食品、サプリメント又は飲料に用いられる組成物を提供することにある。
　上記課題を解決するため、本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物は、麹菌で発酵された麹菌発酵物を含有する。
　この麹菌発酵物は、総精子数を増加させ、構造不全（精子尾部の異常ヘアピン構造など）を有する異常精子を減少させ、又は、精巣組織における精子形成細胞の脱落を抑制させる作用を有しており、その結果、男性不妊症の治療、予防又は改善に有用である。また、本発明における男性不妊症の「男性」には、ヒトの男性のほか、非ヒト動物のオスも含まれる。
　また、本発明の麹菌発酵物は、茶葉又は米を由来とする原料を発酵原料とすることも好ましい。これにより、麹菌発酵物の原料として好適なものが選択される。
　また、上述した麹菌は黒麹菌又は白麹菌であることも好ましい。これにより、本発明の有効成分である麹菌発酵物をもたらす麹菌として好適なものが選択される。
　また、本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物には、さらに乳酸菌を含有することも好ましい。これにより、麹菌の増殖が促進されて麹菌による発酵が安定的に行われ、高い活性を有する麹菌発酵物が得られると共に、摂取した際に腸内細菌が乳酸菌により整えられて免疫力が向上される。
　また、本発明における男性不妊症が、乏精子症又は奇形精子症であることも好ましい。これにより、治療、予防又は改善する病態として好適なものが選択される。
　また、本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用食品が、上述の組成物を含んでいることも好ましい。食品製造でも用いられる麹菌による発酵物を有効成分とするものであるため、安全性が高く、経口摂取することができる。
　また、本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物の製造方法は、発酵原料に麹菌を接種する工程、及びこの麹菌で発酵原料を発酵させて麹菌発酵物を得る工程を有しており、または、発酵原料に麹菌と乳酸菌を接種する工程、及びこの麹菌と乳酸菌とで発酵原料を発酵させて麹菌発酵物を得る工程を有している。これにより、本発明に係る男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物を得ることができる。また、麹菌と乳酸菌とを共培養させることにより、麹菌の増殖が促進され、安定した発酵処理を行うことができ、発酵期間も短縮される。なお、この発酵原料は、茶葉又は米を由来とする原料であることが好ましい。また、この麹菌は黒麹菌又は白麹菌であることも好ましい。
　本発明によれば、以下のような優れた効果を有する男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物を提供することができる。
（１）男性不妊症の治療、予防又は改善効果に優れ、精液中の精子数を増加させると共に異常精子割合を減少させることができる。
（２）食品製造でも用いられる麹菌による発酵物を有効成分とするものであるため、安全性が高く、摂取しやすい。
本発明の実施形態に係る麹菌発酵物の製造方法を概略的に示すフローチャートである。 実施例２における各対照群及び各試験群の交配結果を示すグラフである。 実施例３における各対照群及び各試験群の総精子数を示すグラフである。 実施例４における各対照群及び各試験群の異常精子割合を示すグラフである。 実施例４における各対照群及び各試験群の精子の精子尾部の折れ曲がり角度の割合を示すグラフである。 実施例５における各対照群及び各試験群の精巣組織を示す写真である。
　まず、図１を参照し、本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物に含有される、麹菌で発酵された麹菌発酵物の製造方法について説明する。
　図１に示すように、本発明の実施形態にかかる麹菌発酵物の製造方法は、発酵原料を準備する工程Ｓ０、発酵原料に水を加え吸水させる工程Ｓ１、発酵原料を蒸煮する工程Ｓ２、蒸煮された発酵原料に麹菌を接種する工程Ｓ３、発酵を行う工程Ｓ４、及び麹菌発酵物を得る工程Ｓ５から概略構成される。
　（発酵原料の準備）
　まず、図１に示す発酵原料を準備する工程Ｓ０について説明する。本発明における発酵原料としては植物由来原料が選択され、植物の葉、茎、根、花及び果実を発酵原料として用いることができる。このうち、茶葉、穀物又は豆類が好適に用いられ、男性不妊症の改善効果に優れる観点から、特に茶葉又は穀物が発酵原料として好適に用いられる。穀物には、米、トウモロコシ、小麦、大麦、ライ麦、えんばく、モロコシ、そば及びその他雑穀類が広く含まれるところ、その効果に優れる観点から、特に米が好ましい。米には精米された白米だけでなく、玄米も含まれる。また、茶葉には、茶の葉だけでなく、茶樹から採取される茎や枝等も含まれる。本発明の麹菌発酵物の原料として使用される茶葉は、採取されたままの状態の生の茶葉が好適に用いられるが、採取後すぐに加熱処理された茶葉、採取後茶葉に含まれる酸化酵素で茶葉を酸化発酵させたウーロン茶又は紅茶、さらに後発酵茶であってもよい。また、これら緑茶、ウーロン茶又は紅茶等を煎じた後の茶滓を使用することもできる。また、後の蒸煮処理や麹菌の培養効率を高めるために、茶葉や茶の茎は大き過ぎないよう、ある程度の大きさに破砕されていることが好ましい。
　（吸水処理）
　次に、吸水処理工程Ｓ１について説明する。本工程では、発酵原料に水を加えるか、発酵原料を水に浸漬させて吸水させる処理が行われる。吸水量は、たとえば、茶葉を発酵原料として用いる場合には、茶葉の水分が２０～６０％、好ましくは３０～５０％となるように調整する。
　（蒸煮処理）
　次に、蒸煮処理工程Ｓ２について説明する。上述の工程で吸水させた発酵原料を蒸し器に入れて蓋をし、蒸し器を加熱することにより水蒸気を発酵原料に当てて加熱する。蒸煮処理の時間は、３０分～１２０分程度が好ましく、４５分～９０分がより好ましく、６０分程度が特に好ましい。本工程を行うことにより、原料中の雑菌が殺菌され、後の発酵工程において、麹菌を優占種とした発酵が行われる。また、発酵原料として生の茶葉を用いる場合には、本工程を行うことにより、茶葉中の雑菌が殺菌されると共に、茶葉に含まれる酸化酵素が失活するので、後の工程において、茶葉に麹菌を効率よく繁殖させることができる。蒸煮が終了した原料は、蒸し器から取り出し、台の上に均等に広げ、３０～４０℃程度にまで冷却させる。これにより、麹菌を発酵原料に接種することが可能となる。
　（麹菌の接種）
　次に、麹菌を発酵原料に接種する工程Ｓ３について説明する。本工程では、上述の蒸煮工程を経て冷却された発酵原料に対し、麹菌を接種する。本発明において麹菌とは、主に麹発酵食品を製造する際に使用される微生物であり、具体的には、黒麹菌、白麹菌又は黄麹菌が挙げられる。このうち、黒麹菌とは、沖縄での泡盛や鹿児島での芋焼酎等の蒸留酒の製造に用いられている黒色又は黒褐色の分生子（無性胞子の一種）を形成するアスペルギルス属のカビの一群のことをいう。具体的には、特に限定されないが、アスペルギルス・アワモリ・ヴァル・カワチ（河内黒麹菌）、アスペルギルス・リュウキュウエンシス、アスペルギルス・アワモリ、アスペルギルス・サイトイ、アスペルギルス・イヌイ、アスペルギルス・ウサミ、アスペルギルス・アウレス等が挙げられる。また、白麹菌とは、白黄土色の分生子を形成するアスペルギルス属のカビの一群のことをいい、具体的には、例えば、アスペルギルス・カワチ（Aspergillus kawachii）が挙げられる。さらに、黄麹菌とは、黄色又は黄緑色の分生子を形成するアスペルギルス属のカビの一群のことをいい、主に清酒や味噌、醤油等の製造に用いられている微生物である。具体的には、特に限定されないが、アスペルギルス・オリゼ（Aspergillus oryzae）、アスペルギルス・ソーヤ（Aspergillus sojae）等が挙げられる。本発明においては、男性不妊症の改善効果に優れる観点から、黒麹菌又は白麹菌を用いることが好ましい。このうち、黒麹菌である河内黒麹菌（Aspergillus awamori var. kawachii）、アスペルギルス・リュウキュウエンシス（Aspergillus luchuensis）又はアスペルギルス・イヌイ（Aspergillus inuii）、白麹菌であるアスペルギルス・カワチ（Aspergillus kawachii）及びこれらの組み合わせが好適に用いられ、特に河内黒麹菌（Aspergillus awamori var. kawachii）が好ましい。これら麹菌の接種にあたっては、台上に広げた発酵原料に麹菌を均一に散布して混合する。麹菌はその胞子を接種することが好ましく、発酵原料１ｇ（乾燥重量）に対して、麹菌の胞子が５０万個以上、好ましくは２００万個以上になるように添加して接種することが好ましい。たとえば、種麹１ｇに含まれる胞子数が２０億個の場合には、発酵原料１ｋｇに対して、種麹を１．０ｇ（０．１重量％）程度を添加すればよい。麹菌を発酵原料に接種したのち、よく撹拌して麹菌を原料全体に分散させることが好ましい。
　また、麹菌の接種工程Ｓ３において、さらに乳酸菌を接種して、麹菌と乳酸菌とを共培養させることも好ましい。麹菌と乳酸菌とを共培養することにより、麹菌の増殖が促進されて安定した発酵処理が行われると共に、これら接種した菌が優占種となるため、他の雑菌等の繁殖が抑制される。乳酸菌としては、乳酸菌発酵食品に使用される乳酸菌を使用することができ、例えば、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）、Lactobacillus fermentum又はラクトバチルス・ブルガリクス（Lactobacillus bulgaricus）などのラクトバチルス属、Bifidobacterium bifidum等のビフィズス菌、Lactococcus lactis等のラクトコッカス属、Enterococcus faecium等のエンテロコッカス属が挙げられる。接種する乳酸菌は予め培養しておいたものを用い、発酵原料１ｋｇに対し、菌体として０．１重量％程度を添加すればよい。麹菌と乳酸菌とで発酵されて得られた麹菌発酵物には、麹菌及び乳酸菌が生産した多種の酵素が含まれるほか、麹菌やその胞子及び乳酸菌も含まれる。乳酸菌は、プロバイオティクス機能を有するため、摂取することによって腸内環境が整い、免疫機能が強化することによる男性不妊の改善効果が期待される。
　（発酵）
　次に、発酵原料に接種した麹菌を培養して発酵を行う工程Ｓ４について説明する。本工程では、麹菌を接種した原料に麹菌を繁殖させる。まず、麹菌を添加した発酵原料を３０℃前後に保った培養室に入れる。時間が経過するにしたがって発酵がすすみ、茶葉等の発酵原料の温度が上昇するが、麹菌は一般的に４０℃を超えると増殖し難くなるため、通風して原料の温度を下げ、発酵原料の温度が３０℃～４２℃、好ましくは３０℃～４０℃を維持するように通風量を調整する。なお、発酵温度は、発酵に用いる麹菌の種類によって適宜調整される。具体的には、麹菌として黒麹菌を選択した場合には、一例として、培養開始から１２～３０時間は通風により茶葉等の発酵原料の温度が３５℃～４０℃になるように調整する。その後、同様に通風量を調整するなどして、温度を３０℃～３５℃になるようにやや低めに調整し、培養開始から合計で１～４日間、好ましくは３６～７２時間、さらに好ましくは４０～６０時間程度培養した時点を麹菌発酵物の完成とする。
　なお、麹菌発酵物の製造Ｓ１～Ｓ４にあたっては、原料の洗浄、吸水、蒸煮、麹菌の接種及び発酵（製麹）を同一装置内で行うことができる機械（例えば、ドラム式自動製麹装置等）により行うことも可能である。
　（麹菌発酵物）
　得られた麹菌発酵物は、発酵原料に麹菌が繁殖した、いわゆる「こうじ」である。上述の工程により得られた麹菌発酵物は、一定の水分を含んだ状態であるが、自然乾燥させたり、低温除湿乾燥させることにより、水分を除去することができる。また、水分を除去した麹菌発酵物を粉砕して粉末状としたり、顆粒状とすることも可能である。いったん水分を除去したものにおいても、麹菌発酵物としての機能は有効に保持され得る。この麹菌発酵物は、男性不妊症の治療、予防、改善効果を有している。また、発酵原料として茶葉を用いた場合には、元来、茶葉は細胞増殖阻害活性を有しており、経口摂取には不向きであるが、本発明の麹菌発酵物は細胞増殖阻害活性が低減されており、経口摂取することが可能である。
　本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物は、上述した麹菌で発酵された麹菌発酵物を有効成分として含むものであって、乏精子症、無精子症、奇形精子症、精子無力症等といった造精機能障害に基づく男性不妊症を改善、予防又は治療し、造精機能障害の発現を抑制する作用を有する。それゆえ、本発明の麹菌発酵物を有効成分として含む組成物は、これらの疾患を予防、治療又は改善するための医薬品、医薬部外品及び食品組成物として用いることができる。男性不妊症は発症原因が特定されていないものも多く、本発明にかかる組成物は、さまざまな原因による男性不妊症を治療、予防又は改善するが、特に、精子におけるＧＰｘ４の発現低下に起因する男性不妊症を好適に治療、予防又は改善することができる。また、本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物は、主にヒトの男性を対象とするものであるが、非ヒト動物のオスに対しても動物用医薬や動物用サプリメント、動物飼料又はペットフード等の態様で広く用いることができる。
　本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物の投与量は、目標とする予防又は治療効果、投与方法、年齢、体重などによって変化するので一概には規定できないが、通常一日の経口投与量は、麹菌発酵物として約０．１～１０００ｍｇ／ｋｇ体重であり、好ましくは約０．５～２００ｍｇ／ｋｇ体重であり、さらに好ましくは約１～５０ｍｇ／ｋｇ体重であり、これを１～３回に分割して投与すればよい。
　本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物は、従来慣用されている方法により種々の形態に調製することができる。この場合、通常製剤用の担体や賦形剤など、医薬品の添加剤として許容されている添加剤を用いて製剤化することができる。また、本発明に係る麹菌発酵物のバイオアベイラビリティーや安定性を向上させるために、マイクロカプセル、微粉末化、シクロデキストリン等を用いた包接化などの製剤技術を含むドラッグデリバリーシステムを用いることもできる。
　さらに、上記組成物は、錠剤、顆粒剤、カプセル剤又は内服用液剤等の形態で用いることができるが、消化管からの吸収に適した形態で用いることが好ましい。また、流通性、保存性などの理由により所望される形態での製剤を提供する場合にも従来の製剤技術を用いることができる。
　また、本発明の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物は、錠剤やカプセル剤、顆粒剤、シロップ剤などのサプリメント形態、飲料、菓子、パン、粥、シリアル、麺類、ゼリー、スープ、乳製品、調味料等のあらゆる形態にて食品組成物として用いることができる。このように食品組成物として用いる際には、本発明の有効成分の効能に影響を与えない範囲において、他の有効成分や、ビタミン、ミネラル若しくはアミノ酸等の栄養素等を種々組み合わせることも可能である。本発明の食品組成物から展開される食品には、サプリメント、健康食品、機能性食品、特定保健用食品等が含まれる。また、本発明の食品組成物の１日あたりの摂取量は、上述の麹菌発酵物として約０．１～１０００ｍｇ／ｋｇ体重とすることが好ましく、約０．５～２００ｍｇ／ｋｇ体重とすることがより好ましく、さらに約１～５０ｍｇ／ｋｇ体重とすることが好ましく、これを１～３回に分割して摂取することが好ましい。
　次に、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明は、これらの実施例によってなんら限定されるものではない。
　［実施例１］
　１．麹菌発酵物の調製
　本実施例では、発酵原料として生の茶葉を用いた。茶葉の水分が約５０％となるよう水を加えて吸水処理を施した後、ドラム式製麹装置に入れて蒸煮処理を行った。蒸煮処理の条件は９５℃で６０分とした。ドラム式製麹装置内で茶葉を３０℃まで冷却したのち、河内黒麹菌（アスペルギルス・アワモリ・ヴァル・カワチ：Aspergillus awamori var. kawachii）の種麹（胞子数２０億個／種麹１ｇ）を０．１重量％、乳酸菌（Lactobacillus casei）を０．１重量％となるように茶葉に添加して混合し、ドラム式製麹装置内で３日間製麹した。製麹温度は、種麹を添加してから２４時間は通風により茶葉の温度が３５℃～４０℃になるように調整し、その後の４８時間は、同様に通風量を調整するなどして、茶葉の温度を３０℃～３５℃になるようにやや低めに調整した。装置内で３日間製麹された麹菌発酵物を取り出して粉砕し、粉末状の麹菌発酵物を得た。
　［実施例２］
　２．麹菌発酵物による男性不妊の改善
　本実施例では、男性不妊モデルマウスとして、雄の精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスを用いた（非特許文献２参照）。この精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスは、精巣において非ミトコンドリア型のリン脂質ヒドロペルオキシドグルタチオンペルオキシダーゼ（ｃＧＰｘ４）が欠損したマウスであり、以下表１に示すフェノタイプを有している。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　３週齢の雄の精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスを以下表２に示す４つの群に１匹ずつ配し、８週齢となるまで１ケージあたり１匹ずつ単飼した。正常対照群には、試験期間中、マウス飼育繁殖用飼料ＣＥ－２（CLEA Rodent Diet CE-2；日本クレア株式会社製品）を給餌した。陽性対照物質として男性不妊症の治療に用いられるビタミンＥ（非特許文献１）を選択し、陽性対照物質投与群には、試験期間中、飼料ＣＥ－２にビタミンＥを混合したものを給餌した。ビタミンＥの混合割合は１００ｇの飼料ＣＥ－２に対し、１００ｍｇとした。他方、試験群には、試験期間中、飼料ＣＥ－２に実施例１で得た麹菌発酵物を混合したものを給餌した。低用量群には麹菌発酵物が０．５重量％含有され、高用量群には麹菌発酵物が５．０重量％含有されたものを用いた。飼料ＣＥ－２、陽性対照物質又は麹菌発酵物が混合された飼料ＣＥ－２は自由摂取とし、飲水も給水瓶からの自由飲水とした。上述した条件にて３週齢から８週齢まで飼育を行った。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　雄の精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスが交配可能となった８週齢で、各ケージに７週齢のＢＡＬＢ／ｃ　雌マウスを３匹ずつ配し、雄の精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウス１匹と交配させた。交配期間は３ヶ月とした。交配開始後も、各対照群又は各試験群のケージごとに、雄マウスが３週齢から給餌されていた飼料を引き続き給餌し、ケージ内に配された雌マウスも雄マウスと同じ飼料を摂取した。交配期間における雌マウスの妊娠回数及び産仔数について調べた。結果を図２に示す。図１のグラフのバー上に記載された＊は、正常対照群「ＣＥ－２」と比較したときのｐ値がｐ＜０．０５であることを示し、＊＊は、ｐ値がｐ＜０．０１であることを示している。
　正常対照群「ＣＥ－２」では、雌マウス３匹の合計の妊娠回数は４回であり（図２ａ）、総産仔数は１０匹未満であった（図２ｂ）。そして、雌マウスの出産１回あたりの産仔数も２匹と少なかった（図２ｃ）。また、陽性対照物質であるビタミンＥを投与した陽性対照物質投与群「ＶＥ高添加食」の結果をみると、雌マウス３匹の合計の妊娠回数は８回であり（図２ａ）、総産仔数は６０匹であり（図２ｂ）、雌マウスの出産１回あたりの産仔数は７匹と多く（図２ｃ）、雄の精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスの不妊傾向の改善がみられた。他方、麹菌発酵物の低用量群「茶麹０．５％」では、雌マウス３匹の合計の妊娠回数は１２回であり（図２ａ）、総産仔数は１１０匹を超えたことが確認された（図２ｂ）。ＢＡＬＢ／ｃ　雌マウスの妊娠期間が３週間程度であり、交配期間が３ヶ月間であることを考慮すると、雌マウスの１匹あたりの妊娠回数は最大で４回であるが、本試験群のケージに配された雌マウス３匹全てが４回妊娠したことがわかった。また、雌マウスの出産１回あたりの産仔数は約９匹と多かった（図２ｃ）。この結果より、本発明の麹菌発酵物は、男性不妊モデルマウスの不妊傾向を大きく改善でき、男性不妊症を治療できることが示された。
　なお、麹菌発酵物の高用量群「茶麹５％」では、雌マウス３匹の合計の妊娠回数は３回に低下し（図２ａ）、総産仔数は１０匹程度と少なく（図２ｂ）、雌マウスの出産１回あたりの産仔数は約４匹であった（図２ｃ）。この結果より、麹菌発酵物の投与量は、高用量群「茶麹５％」の投与量程度とするよりも、少ない投与量とすることが好ましいことがわかった。なお、雄マウスの体重が２５ｇ程度、飼料の一日摂取量を３～４ｇ／ｄａｙとすると、高用量群における麹菌発酵物の投与量は６～８ｇ／ｋｇ体重／ｄａｙであり、低用量群における麹菌発酵物の投与量は０．６～０．８ｇ／ｋｇ体重／ｄａｙである。そのため、男性不妊症の改善のためには、麹菌発酵物の投与量を６ｇ／ｋｇ体重／ｄａｙ未満とすることが好ましく、３ｇ／ｋｇ体重／ｄａｙ以下とすることがより好ましく、１ｇ／ｋｇ体重／ｄａｙ以下とすることがより好ましいと考えられた。
　［実施例３］
　３．麹菌発酵物による精子数の改善
　精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスは、精子数が通常のマウスの半分以下に減少している。そこで、本発明の麹菌発酵物の摂取による精子数への影響について、以下のようにして調べた。実施例１での交配期間が終了した後、各対照群及び各試験群における雄の精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスの解剖を行い、各個体から精巣上体をそれぞれ摘出した。各精巣上体からの精子の回収は次のようにして行った。ＴＹＨ培地５００μＬを入れておいた２４穴シャーレに精巣上体を入れた後、精子が培地に移動するように切れ込みを入れ、３７℃で２時間培精した。精子懸濁液をチューブに回収し、４℃、２０００ｒｐｍで５分間遠心して上清を取り除いた。さらに、ＰＢＳを５００μＬ加え、４℃、２０００ｒｐｍで５分間遠心して上清を取り除くことを２回繰り返して洗浄を行った。その後、ＰＢＳを５００μＬ加えて精子検体液とした。この精子検体液をＰＢＳで５０倍に希釈し、血球計算盤を用いて精子数をカウントした。結果を図３に示す。
　図３に示すグラフによれば、麹菌発酵物の低用量群「茶麹０．５％」における精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスは、正常対照群「ＣＥ－２」のマウスと比べて精子数が約２倍に増加していることがわかった。なお、麹菌発酵物の高用量群「茶麹５％」のマウスも精子数の増加が認められたが、低用量群「茶麹０．５％」の方が精子数は多いことがわかった。この結果より、本発明の麹菌発酵物は、男性不妊症の乏精子症を改善できることが示された。
　［実施例４］
　４．麹菌発酵物による異常精子の改善
　精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスは、精子の半分以上について精子尾部が折れ曲がった異常ヘアピン構造を有しており、精子形態に異常を有している。そこで、本発明の麹菌発酵物の摂取による精子形態への影響について、以下のようにして調べた。実施例３で回収した精子検体液をＰＢＳで１０倍に希釈し、スライドガラスに１０μＬとり、カバーガラスをかけてオールインワン顕微鏡（キーエンス）で精子形状の観察を行った。顕微鏡下の複数の視野について写真を撮影し、各写真中の正常精子と異常精子の数をカウントして異常精子の平均割合を算出した。なお、精子尾部の角度については、精子尾部の折れ曲がりの角度がほぼないもの（ストレート形状）を「０°」、精子尾部の折れ曲がりが認められるもの～折れ曲がりの角度が９０°程度のものを「９０°」、精子尾部の折れ曲がりが１８０°に近いものを「１８０°」としてカウントした。図４に各対照群及び各試験群の異常精子割合を示し、図５に精子尾部の折れ曲がり角度の割合を示す。
　図４に示すグラフによれば、麹菌発酵物の低用量群「茶麹０．５％」における精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスは、正常対照群「ＣＥ－２」のマウスと比べて異常精子割合が著しく減少したことがわかった。この異常精子割合の顕著な減少は、陽性対照物質であるビタミンＥを投与した陽性対照物質投与群「ＶＥ高添加食」のマウスには認められなかった効果であった。この結果より、本発明の麹菌発酵物は、男性不妊症の奇形精子症を改善できることが示された。なお、麹菌発酵物の高用量群「茶麹５％」のマウスは正常対照群「ＣＥ－２」のマウスよりも異常精子割合が増加したことが確認された。この結果より、麹菌発酵物の投与量は、高用量群「茶麹５％」の投与量よりも、少ない投与量とすることが好ましいことがわかった。
　また、図５に示すグラフによれば、麹菌発酵物の低用量群「茶麹０．５％」における精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスは、特に、精子尾部の折れ曲がり角度が「９０°」程度に分類される精子尾部の構造異常が抑制されており、麹菌発酵物が精子尾部の構造不全を改善していることが確認された。
　［実施例５］
　５．麹菌発酵物による精巣組織の改善
　精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスは、精巣組織における精母細胞の脱落が認められる。そこで、本発明の麹菌発酵物の摂取による精母細胞への影響について、以下のようにして調べた。実施例１での交配期間が終了した後、各対照群及び各試験群における雄の精巣特異的非ミトコンドリア型ＧＰｘ４ノックアウトマウスの解剖を行い、各個体から精巣をそれぞれ摘出した。精巣組織を１０％中性ホルマリン液で固定し、パラフィンで包埋した後、４μｍの厚さにスライスし、ヘマトキシリン・エオジン染色して観察を行った。各対照群及び各試験群の精巣組織における精母細胞の写真を図６に示す。
　図６のうち、正常対照群である「ＣＥ－２」の写真中の矢印は、精母細胞の脱落が生じている部分を示している。他方、麹菌発酵物の低用量群「茶麹０．５％」は、陽性対照物質投与群「ＶＥ高添加食」と同様に、精母細胞の脱落が改善されており、細胞形状が一定であった。他方、麹菌発酵物の高用量群「茶麹５％」は、精母細胞の脱落が一部で確認された。この結果より、麹菌発酵物の投与量は、高用量群「茶麹５％」の投与量よりも、少ない投与量とすることが好ましいことがわかった。
　本発明は、上記の実施形態又は実施例に限定されるものでなく、特許請求の範囲に記載された発明の要旨を逸脱しない範囲内での種々、設計変更した形態も技術的範囲に含むものである。
　本発明は男性不妊症の治療、予防又は改善のために用いられる組成物を提供するため、医療や食品分野（サプリメント、健康食品、機能性食品、特定保健用食品等も含む）の産業において幅広く役立つものである。

Claims (10)

  1. 　麹菌で発酵された麹菌発酵物を含有することを特徴とする男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物。
  2. 　前記麹菌発酵物が茶葉又は米を由来とする原料を発酵原料とするものであることを特徴とする請求項１に記載の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物。
  3. 　前記麹菌が黒麹菌又は白麹菌であることを特徴とする請求項１又は２に記載の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物。
  4. 　さらに乳酸菌を含有することを特徴とする請求項１～３のいずれか１項に記載の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物。
  5. 　男性不妊症が、乏精子症又は奇形精子症であることを特徴とする請求項１～４のいずれか１項に記載の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物。
  6. 　請求項１～４のいずれか１項に記載の組成物を含むことを特徴とする男性不妊症の治療、予防又は改善用食品。
  7. 　発酵原料に麹菌を接種する工程、及び該麹菌で前記発酵原料を発酵させて麹菌発酵物を得る工程を有することを特徴とする男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物の製造方法。
  8. 　発酵原料に麹菌と乳酸菌を接種する工程、及び該麹菌と該乳酸菌で前記発酵原料を発酵させて麹菌発酵物を得る工程を有することを特徴とする男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物の製造方法。
  9. 　前記発酵原料が茶葉又は米を由来とする原料であることを特徴とする請求項７又は８に記載の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物の製造方法。
  10. 　前記麹菌が黒麹菌又は白麹菌であることを特徴とする請求項７～９のいずれか１項に記載の男性不妊症の治療、予防又は改善用組成物の製造方法。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020226022A1 (ja) * 2019-05-07 2020-11-12 一般社団法人夢源 育毛・発毛用外用剤
JP2022151047A (ja) * 2021-03-26 2022-10-07 鹿児島県 後発酵茶並びにそれを利用した飲料及び食品

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6111416B2 (ja) 1979-06-06 1986-04-02 Fujikura Cable Works Ltd
JP2003026570A (ja) * 2001-07-09 2003-01-29 Nichimo Co Ltd 性的機能向上作用を有する素材
JP2004344164A (ja) 2003-04-28 2004-12-09 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 男性不妊症の診断のための検査方法
CN104524024A (zh) * 2014-12-15 2015-04-22 江瀚生物科技（上海）有限公司 一种用于改善男性精子质量的复合微生物制剂及其制备方法
WO2015119036A1 (ja) 2014-02-10 2015-08-13 霧島高原ビール株式会社 麹発酵組成物及びそれを用いた調味料、抗酸化剤、食品又は飲料
KR20160117034A (ko) * 2015-03-31 2016-10-10 주식회사 벤스랩 정자수 증가와 환경호르몬 예방효과를 갖는 성기능 개선용 조성물 및 그의 제조방법
JP2017025092A (ja) * 2016-09-27 2017-02-02 ビーエイチエヌ株式会社 テストステロン分泌促進剤、抗疲労剤及びその製造方法と利用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH05317026A (ja) * 1992-05-20 1993-12-03 Toshiki Ooshiro ブッソウゲ風味の泡盛
JP4616413B1 (ja) * 2010-04-09 2011-01-19 株式会社千草物産 発酵食材の製造方法および発酵食品

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6111416B2 (ja) 1979-06-06 1986-04-02 Fujikura Cable Works Ltd
JP2003026570A (ja) * 2001-07-09 2003-01-29 Nichimo Co Ltd 性的機能向上作用を有する素材
JP2004344164A (ja) 2003-04-28 2004-12-09 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 男性不妊症の診断のための検査方法
WO2015119036A1 (ja) 2014-02-10 2015-08-13 霧島高原ビール株式会社 麹発酵組成物及びそれを用いた調味料、抗酸化剤、食品又は飲料
CN104524024A (zh) * 2014-12-15 2015-04-22 江瀚生物科技（上海）有限公司 一种用于改善男性精子质量的复合微生物制剂及其制备方法
KR20160117034A (ko) * 2015-03-31 2016-10-10 주식회사 벤스랩 정자수 증가와 환경호르몬 예방효과를 갖는 성기능 개선용 조성물 및 그의 제조방법
JP2017025092A (ja) * 2016-09-27 2017-02-02 ビーエイチエヌ株式会社 テストステロン分泌促進剤、抗疲労剤及びその製造方法と利用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"HUMAN + Men and Women Dictionary", September 2014
HIROTAKA IMAI: "Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase (PHGPx) and male infertility", HORMONE FRONTIER IN GYNECOLOGY, vol. 19, no. 2, 2012, pages 59 - 70
NIWA, Y. ET AL.: "Successful treatment of severe atopic dermatitis-complicated cataract and male infertility with a natural product antioxidant", INTERNATIONAL JOURNAL OF TISSUE REACTIONS, vol. 20, no. 2, 1998, pages 63 - 69, XP008108012, ISSN: 0250-0868 *
See also references of EP3818986A4
YAMAMOTO, BUNSEI ET AL.: "Cha-Koji, comprising green tea leaves fermented with Aspergillus luchuensis var kawachii kitahara, increases regulatory Tcell production in mice and humans", BIOSCIENCE , BIOTECHNOLOGY, AND BIOCHEMISTRY, vol. 82, no. 5, March 2018 (2018-03-01), pages 885 - 892, XP055672502, ISSN: 1347-6947, DOI: 10.1080/09168451.2018.1443789 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020226022A1 (ja) * 2019-05-07 2020-11-12 一般社団法人夢源 育毛・発毛用外用剤
JP2022151047A (ja) * 2021-03-26 2022-10-07 鹿児島県 後発酵茶並びにそれを利用した飲料及び食品

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