WO2018190358A1 - 目的物質検出チップ、目的物質検出装置及び目的物質検出方法 - Google Patents

目的物質検出チップ、目的物質検出装置及び目的物質検出方法 Download PDF

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target substance
substance detection
detection chip
light transmissive
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藤巻 真
裕樹 芦葉
雅人 安浦
集 田邉
高橋 進
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国立研究開発法人産業技術総合研究所
凸版印刷株式会社
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    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals

Definitions

  • the present invention relates to a target substance detection chip, a target substance detection device, and a target substance capable of optically detecting a target substance present in a liquid by using an evanescent field or an enhanced electric field generated by total reflection of light. It relates to a detection method.
  • a method using an evanescent field by total reflection is known.
  • Examples of the method using the evanescent field by total reflection include a total reflection illumination fluorescence microscope.
  • the total reflection illumination fluorescence microscope totally reflects incident light at the interface between a liquid sample and a cover glass or a slide glass, and uses the evanescent field generated thereby as excitation light to perform fluorescence observation with less background light as noise.
  • This technique is performed (see Patent Document 1).
  • this technique is a technique capable of realizing super-resolution, and enables single molecule observation.
  • a magnetic particle that binds to a target substance is used, and a combined body of the target substance and the magnetic particle is applied to the detection chip surface by applying a magnetic field based on a magnet disposed below the detection chip.
  • a method has been proposed in which the target substance is detected by irradiating the local region and irradiating the local region with the excitation light (see Patent Document 2). According to this proposal, by applying a magnetic field, adsorption or proximity of the target substance to the detection chip surface is promoted, and measurement in a short time becomes possible.
  • Non-Patent Documents 1 and 2 As a fluorescence detection method using the magnetic particles, detection by removing a noise signal from the optical signal before application of the magnetic field is performed by comparing and observing the state before and after application of the magnetic field by a magnetic field application unit (for example, a magnet). A method of performing this has been proposed (see Non-Patent Documents 1 and 2). According to this proposal, the target substance combined with the magnetic particles moves due to the application of the magnetic field, whereas noise generated due to scratches on the surface of the detection chip does not move due to the application of the magnetic field. The noise signal can be eliminated by performing detection based on the optical signal.
  • the optical prism is used, so that it is difficult to move the target substance due to the attenuation of the strength of the magnetic field, and the strength of the magnetic field is increased. If it tries to do so, the apparatus will become large and the manufacturing cost will increase.
  • a method for detecting and quantifying a minute substance existing in a solution in particular, a biological substance such as DNA, RNA, protein, virus, bacteria, etc., for example, a method using surface plasmon resonance, a waveguide mode (optical waveguide mode) Also known is a method using excitation of a waveguide mode or an optical waveguide mode.
  • a detection chip in which a silicon layer (semiconductor layer) and a SiO 2 layer are laminated in this order on a silica glass substrate is placed on a trapezoidal prism made of silica glass. Then, the enhanced electric field is obtained by irradiating light from the trapezoidal prism side under the condition of total reflection by the detection chip (see Non-Patent Document 3).
  • the detection chip when the light is irradiated at a specific incident angle while satisfying the total reflection condition from the back surface side (the silica glass substrate side) with respect to the detection chip, light of a specific wavelength propagates in the detection chip. Coupled with the guided mode, the guided mode is excited.
  • the semiconductor layer may be formed of a metal layer, and the waveguide mode excited in a detection chip in which the semiconductor layer is formed of the metal layer may be called a leaky mode, a leakage mode, or the like ( Non-patent document 5).
  • a magnetic particle that binds to a target substance is used, and a conjugate of the target substance and the magnetic particle is attracted to a local region on the surface of the detection chip by applying a magnetic field.
  • a method for detecting the target substance by irradiating the region with the excitation light has been proposed.
  • the application of the magnetic field promotes the adsorption or proximity of the target substance to the detection chip surface, thereby enabling measurement in a short time (see Patent Document 4).
  • FIG. 13 is a cross-sectional view for explaining the outline of the optical device.
  • the optical device 200 is configured by arranging a detection chip 204 including a glass substrate 202 and a metal film 203 on an optical prism 201.
  • the glass substrate 202 has a box shape, and a liquid sample is introduced into the inner side where the metal film 203 is disposed.
  • the light irradiation part 205 and the magnet 206 as a magnetic field application part are provided.
  • the back surface side of the detection chip 204 (the surface side in contact with the optical prism 201) is irradiated with light from the light irradiation unit 205 under total reflection conditions, and the light irradiation region in the metal film 203 is defined as the local region.
  • An enhanced electric field is generated on the local region, and fluorescence from the target substance contained in the liquid sample is detected.
  • the target substance since the target substance is combined with the magnetic particles, it is attracted to the local region by application of a magnetic field from the magnet 206, and can be detected in a short time.
  • the optical prism 201 is present in the optical device 200, the distance between the metal film 203 serving as the local region and the magnet 206 cannot be sufficiently reduced, and the strength of the magnetic field applied by the magnet 206 is not sufficient. Is attenuated, and the target substance cannot be sufficiently attracted to the local region. In addition, if a strong magnetic field is applied to solve this problem, a problem arises that the apparatus becomes large and the manufacturing cost increases.
  • a noise signal is excluded from the optical signals before the magnetic field application by comparing and observing the state before and after the magnetic field application by the magnetic field application unit (eg, magnet).
  • a method for performing such detection has been proposed. According to this method, since the target substance coupled with the magnetic particles moves by applying the magnetic field, noise generated in a scratch on the detection chip surface does not move by applying the magnetic field.
  • the noise signal can be eliminated by performing detection based on the optical signal to be transmitted (see Non-Patent Documents 1 and 2).
  • the target substance is a substance that does not emit light such as fluorescence
  • a fluorescent substance that labels the target substance is bound to detect the emitted light.
  • the optical prism is used as in the optical device 200, the target substance is difficult to move due to the attenuation of the strength of the magnetic field, and the strength of the magnetic field is increased. If it is intended to increase the height, the apparatus becomes large and the manufacturing cost increases.
  • an electric field enhancement layer is formed in a groove such as a V-shape for introducing the liquid sample of the detection chip without using the optical prism, thereby forming the optical prism on the detection chip itself.
  • a method of assigning the role of see Patent Document 4.
  • the surface (back surface) side facing the surface (front surface) where the groove of the detection chip forming the detection surface is formed. Since the light irradiation part is arranged so as to irradiate the groove with light, it will compete with the magnet and the like arranged on the back surface side of the detection chip.
  • the liquid sample is introduced accordingly. And the distance between the magnet and the like is increased.
  • FIG. 14 assuming that magnets 306 a and 306 b are arranged on the back surface side of the detection chip 304 at a position out of the optical path of the light irradiated from the light irradiation unit 305, the metal film 303 of the detection chip 304. The distance between the surface side on which the magnet is formed and the magnets 306a and 306b is increased.
  • FIG. 14 is an explanatory diagram showing a state in which the distance between the surface side of the detection chip and the magnet or the like becomes longer. Accordingly, the strength of the magnetic field is attenuated, and it is difficult to attract and move the target substance. Further, if it is attempted to solve this problem by increasing the strength of the magnetic field, after all, the apparatus becomes large and the manufacturing cost increases.
  • the fluorescence observation method has a problem in detection accuracy, and further improvement in the detection accuracy is desired. That is, the optical signal detected by the fluorescence observation method includes not only fluorescence from the fluorescent molecules but also scattered light due to dirt and scratches on the surface of the detection chip, autofluorescence generated from components of the detection chip, Since a noise signal based on light emission or the like from contained impurities is included, the fluorescence observation method is required to eliminate the noise signal that causes a decrease in the detection accuracy.
  • the present inventors as a target substance detection method that eliminates the noise signal, binds a labeling substance such as a fluorescent labeling substance or a light scattering substance and magnetic particles to the target substance, and shows the state of the conjugate.
  • a method of performing detection by removing a noise signal included in an optical signal before application of the magnetic field by performing comparative observation before and after application of the magnetic field by a magnetic field application unit (for example, a magnet) has been proposed.
  • the target substance combined with the labeling substance and the magnetic particles moves by the application of the magnetic field, whereas the noise signal due to scratches on the surface of the detection chip is Detection that excludes the noise signal can be performed using the fact that it does not move by application (see Non-Patent Documents 1 and 2).
  • the conjugate may be non-specifically adsorbed on the surface of the detection chip and may not move before and after application of the magnetic field, and the optical signal from the conjugate that does not move is the noise signal. Therefore, the detection accuracy may not be improved depending on the state of adsorption between the combined body and the detection chip. On the other hand, if a strong magnetic field is applied to reliably move the combined body in order to solve this problem, the apparatus becomes large and the manufacturing cost increases.
  • JP 2002-236258 A Japanese Patent No. 5301894 International Publication No. 2015/194663 Japanese Patent No. 5920692
  • the first invention relates to the above-mentioned problems in the prior art, and provides a target substance detection apparatus that can be used for detection of a target substance using magnetic particles and can be manufactured in a small size and at low cost, and the target substance detection apparatus. It is an object to provide a target substance detection method used.
  • the second invention relates to the above-mentioned problems in the prior art, and can be used for detection of a target substance using magnetic particles, and a target substance detection chip capable of manufacturing a target substance detection apparatus in a small size and at a low cost. It is an object of the present invention to provide a substance detection device and a target substance detection method.
  • the third invention relates to the above-mentioned problems in the prior art, and can be used for detection of a target substance using magnetic particles, improves the detection accuracy of the target substance, and makes the target substance detection apparatus small and low-cost. It is an object of the present invention to provide a target substance detection chip, a target substance detection device, and a target substance detection method that can be manufactured.
  • Means for solving the above-mentioned problems concerning the first invention are as follows. That is, ⁇ 1> With respect to the detection surface arranged on the surface on the upper surface side with respect to the bottom surface, the upward inclined surface that inclines in a direction away from the detection surface from the upper surface toward the bottom surface side with respect to the thickness direction, and the thickness direction An overall substantially plate having any one of the downwardly inclined surfaces inclined in a direction away from the detection surface from the bottom surface toward the upper surface side, and a main body portion that can receive light and be guided to the inside.
  • a light-transmitting member in the form of a light and the light-transmitting member is irradiated from the upper surface side and passes through the upward inclined surface, and the light is incident on the detection surface through the main body portion under total reflection conditions.
  • Has a light incident structure A detection chip, a light irradiator disposed on the upper surface side of the light transmissive member, and capable of irradiating the detection surface with total reflection conditions via the light incident structure, and the light transmissive And a magnetic field application unit disposed on the bottom side of the member.
  • At least one notch portion of the upper surface side notch portion having the upward inclined surface and the bottom surface side notch portion having the upward inclined surface and the light transmitting member formed on the upper surface is provided.
  • ⁇ 3> The target substance detection device according to ⁇ 2>, wherein a low refractive material having a lower refractive index than that of the main body is embedded in the notch.
  • ⁇ 4> The target substance detection device according to ⁇ 1>, wherein a side surface of the light transmissive member is an inclined surface.
  • the light incident structure reflects at least one of the light that has passed through the upward inclined surface in the first light incident structure and the light reflected by the downward inclined surface in the second light incident structure on the bottom surface
  • the target substance detection device according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 4>, wherein the target surface can be incident on a detection surface under total reflection conditions.
  • ⁇ 6> The target substance according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 5>, wherein the shortest distance between the light incident position on the inclined surface and the light irradiation position on the detection surface is 1.0 mm to 50.0 mm. Detection device.
  • ⁇ 7> The target substance detection device according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 6>, wherein the light transmissive member has a thickness of 0.1 mm to 10.0 mm.
  • ⁇ 8> The detection chip according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 7>, wherein a liquid sample storage groove having at least a part as a detection surface is formed on an upper surface of the light transmissive member.
  • ⁇ 9> The target substance detection according to ⁇ 8>, wherein the liquid sample storage groove has an inclination detection surface that inclines in a direction away from the inclined surface as it goes from the upper surface to the bottom surface side with respect to the thickness direction of the light transmissive member as the detection surface. apparatus.
  • ⁇ 10> The above-described ⁇ 1, wherein a part of the upper surface of the light transmissive member is used as a detection surface and a side wall portion is provided around the detection surface so as to form a box-like body having the detection surface as a bottom.
  • ⁇ 11> A method for detecting a target substance using the target substance detection apparatus according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 10>, wherein the detection surface is entirely connected to the detection surface from the upper surface side of the light transmitting member via the light incident structure.
  • a target substance detection method comprising: a light irradiation step of irradiating light under reflection conditions; and a magnetic field application step of applying a magnetic field from the bottom surface side of the light transmissive member.
  • Means for solving the above-mentioned problem concerning the second invention are as follows. That is, ⁇ 12> An electric field enhancement layer in which an enhanced electric field is formed on the front surface side when light is applied to the back surface under total reflection conditions, a support surface capable of supporting the electric field enhancement layer from the back surface side, and a thickness direction In contrast, an upward inclined surface that inclines in a direction away from the support surface as it goes from the upper surface toward the bottom surface with the surface on which the support surface is formed as an upper surface, and the support as it goes from the bottom surface to the upper surface side with respect to the thickness direction.
  • a light transmission member having a substantially plate-like shape having any one of the downward inclined surfaces inclined in a direction away from the surface, and a main body portion that receives the light and can be guided to the inside; From the upper surface side and a first light incident structure in which the light transmissive member is incident from the upper surface side and incident on the rear surface through the main body portion under the total reflection condition the light that has passed through the upward inclined surface.
  • a target substance detection comprising: a light incident structure of any one of a second light incident structure in which the light reflected by the downward inclined surface is incident on the back surface through the main body portion under a total reflection condition. Chip.
  • ⁇ 13> At least one notch portion of the upper surface side notch portion having the upward inclined surface and the bottom surface side notch portion having the upward inclined surface and the light transmitting member formed on the upper surface.
  • ⁇ 14> The target substance detection chip according to ⁇ 13>, wherein a low refractive material having a lower refractive index than that of the main body is embedded in the notch.
  • ⁇ 15> The target substance detection chip according to ⁇ 12>, wherein a side surface of the light transmissive member is an inclined surface.
  • the light incident structure reflects at least one of the light transmitted through the upward inclined surface of the first light incident structure and the light reflected by the downward inclined surface of the second light incident structure on the bottom surface
  • the target substance detection chip according to any one of ⁇ 12> to ⁇ 15>, wherein the target substance can be incident on the back surface under total reflection conditions.
  • ⁇ 17> The object according to any one of ⁇ 12> to ⁇ 16>, wherein the shortest distance between the light incident position on the inclined surface and the light irradiation position on the electric field enhancement layer is 1.0 mm to 50.0 mm.
  • Substance detection chip is 1.0 mm to 50.0 mm.
  • ⁇ 18> The target substance detection chip according to any one of ⁇ 12> to ⁇ 17>, wherein the light transmissive member has a thickness of 0.1 mm to 10.0 mm.
  • ⁇ 19> The target substance detection chip according to any one of ⁇ 12> to ⁇ 18>, wherein a liquid sample storage groove having at least a part as a support surface is formed on an upper surface of the light transmissive member.
  • the liquid sample storage groove has an inclined support surface that inclines in a direction away from the inclined surface from the upper surface toward the bottom surface with respect to the thickness direction of the light-transmitting member as a support surface. Chip.
  • ⁇ 21> The above-described ⁇ 12, wherein a part of the upper surface of the light transmissive member is used as a support surface, and a side wall portion is provided around the support surface so as to form a box-like body having the support surface as a bottom.
  • the target substance detection chip according to any one of ⁇ 18> to ⁇ 18>.
  • a target substance detection apparatus comprising: a light irradiation unit capable of irradiating light; and a magnetic field application unit disposed on a bottom surface side of the light transmissive member.
  • Means for solving the above-mentioned problem concerning the third invention are as follows. That is, ⁇ 24> A target substance detection chip having a concavo-convex structure configured by periodically arranging a plurality of convex portions on a light-transmitting substrate. ⁇ 25> A light transmissive substrate having a smooth surface, and a concavo-convex structure imparting layer laminated on the smooth surface of the light transmissive substrate and having a surface opposite to the light transmissive substrate side as a rugged surface. The target substance detection chip according to ⁇ 24>, wherein the uneven structure is formed on the uneven surface.
  • an electric field enhancement layer is formed that forms an enhanced electric field on the other surface when light is irradiated on at least one surface under total reflection conditions.
  • the enhanced electric field can be present in the vicinity of the surface when the light is irradiated from the back surface side to the one surface of the electric field enhancing layer under a total reflection condition from the back surface side.
  • the target substance detection chip according to any one of the above.
  • a light transmissive substrate having a smooth surface, a smooth electric field enhancing layer laminated on the smooth surface of the light transmissive substrate, and a concavo-convex structure imparting layer laminated on the electric field enhancing layer.
  • the target substance detection chip according to ⁇ 26>, wherein a concavo-convex structure is formed on the concavo-convex surface of the concavo-convex structure imparting layer.
  • a light transmissive substrate having a smooth surface, and a concavo-convex structure laminated on the smooth surface of the light transmissive substrate and having a surface opposite to the surface on the light transmissive substrate side as a first concavo-convex surface
  • a second layer having a shape in which the concave / convex pattern of the first concave / convex surface is transferred onto the first concave / convex surface of the concave / convex structure imparting layer while being laminated on the first concave / convex surface of the concave / convex structure imparting layer.
  • the target substance detection chip according to ⁇ 26> wherein the target substance detection chip is configured by an electric field enhancement layer that is an uneven surface, and an uneven structure is formed by the second uneven surface.
  • a light-transmitting substrate having a first uneven surface, and a surface opposite to the surface on the light-transmitting substrate side while being laminated on the first uneven surface of the light-transmitting substrate.
  • the target substance detection chip according to ⁇ 26> further comprising an electric field enhancement layer formed as a second concavo-convex surface having a shape to which the concavo-convex pattern is transferred, wherein the concavo-convex structure is formed on the second concavo-convex surface.
  • the convex portion is formed in two or more types, and at least one of the shapes is any one of a two-fold rotationally symmetric shape and a line symmetric shape.
  • the target substance detection chip described. ⁇ 31> Total reflection condition from the back surface side with the target material detection chip according to any one of ⁇ 24> to ⁇ 30> and a surface opposite to the surface on which the concavo-convex structure of the target material detection chip is formed as the back surface And a first light source that moves the magnetic particles contained in the liquid sample introduced onto the surface of the target substance detection chip in a direction parallel to the surface or away from the surface.
  • ⁇ 33> Light irradiation for irradiating light from the back side under total reflection conditions with the surface opposite to the surface on which the uneven structure of the target substance detection chip according to any one of ⁇ 24> to ⁇ 30> is formed as the back surface And a combination of a target substance and a magnetic particle contained in a liquid sample introduced on the surface of the target substance detection chip is moved in a direction parallel to or away from the surface by applying a first magnetic field. At least a first combined body moving step, and a second combined body moving step of drawing the combined body in the liquid sample onto the surface by applying a second magnetic field from a magnetic field applying unit disposed on the back surface side.
  • a method of detecting a target substance comprising: a conjugate transfer step performed in any one of the steps.
  • ⁇ 34> A vector component in a direction parallel to the in-plane direction of the surface of the target substance detection chip, including the second combined body moving step, and in the state where the second combined body moving step applies the second magnetic field.
  • the target substance detection method according to ⁇ 33> which is a step of moving the combined body in a direction having a magnetic field application and moving the combined body following the movement of the magnetic field application unit.
  • One of the inclined surfaces of the downward inclined surface that inclines in a direction away from the support surface from the bottom surface toward the upper surface side with respect to the direction, and a main body portion that can receive light and be guided to the inside.
  • the first light incident structure that causes the light that has passed through the inclined surface to enter the support surface through the main body portion under a total reflection condition and the light that is irradiated from the upper surface side and reflected by the downward inclined surface.
  • the support through the body.
  • an electric field enhancement layer is disposed in which an enhanced electric field is formed on a surface opposite to the support surface side when the support surface is irradiated with light under total reflection conditions.
  • the evanescent field generation region is formed on a surface opposite to the surface on the support surface side when the support surface is irradiated with light under total reflection conditions on the support surface.
  • a target substance detection apparatus comprising: a light irradiator capable of irradiating; and a magnetic field applying unit disposed on a bottom surface side of the light transmissive member.
  • the detection chip allows the magnetic field applying units to be arranged close to each other in order to suppress the attenuation of the strength of the magnetic field applied by the magnetic field applying unit.
  • the first invention, the second invention, and the third invention have a corresponding relationship in that a detection chip suitable for detection of the target substance using the magnetic field application unit is used.
  • the fourth invention relates to a modification of the first to third inventions, and has the same problems, structures and effects as those of any of the first to third inventions.
  • a target substance detection device that can be used for detection of a target substance using magnetic particles and can be manufactured in a small size and at low cost, and the target substance A target substance detection method using a detection apparatus can be provided.
  • target substance detection that can be used for detection of a target substance using magnetic particles and can manufacture a target substance detection apparatus in a small size and at low cost.
  • a chip, a target substance detection device, and a target substance detection method can be provided.
  • the third invention in relation to the above-mentioned problems in the prior art, it can be used for detection of a target substance using magnetic particles, improving the detection accuracy of the target substance and reducing the size of the target substance detection apparatus.
  • a target substance detection chip, a target substance detection device, and a target substance detection method that can be manufactured at low cost can be provided.
  • the target substance detection apparatus of the first invention has a detection chip, a light irradiation unit, and a magnetic field application unit, and further includes a light detection unit as necessary.
  • the detection chip includes a light transmissive member described below.
  • the light transmissive member includes a detection surface arranged on a surface on an upper surface side with respect to a bottom surface, an upward inclined surface that is inclined in a direction away from the detection surface from the upper surface toward the bottom surface side with respect to a thickness direction, and Any one of the downward inclined surfaces inclined in a direction away from the detection surface from the bottom surface toward the upper surface side with respect to the thickness direction, and a main body portion that can receive light and be guided to the inside. It is an overall substantially plate-like member.
  • the light transmissive member has a first light incident structure that causes the light irradiated from the upper surface side and passed through the upward inclined surface to be incident on the detection surface through the main body portion under a total reflection condition; It has a light incident structure of any one of the second light incident structures in which the light irradiated from the upper surface side and reflected by the downward inclined surface is incident on the detection surface through the main body part under a total reflection condition.
  • the optically acting surface that is, the surface on which light is incident and the surface on which light is reflected are preferably optically smooth.
  • the light-transmitting member serves as an optical prism in a conventional detection chip and a role of forming an evanescent field based on total reflection of light on the detection surface, and a setting position of the detection surface in the detection chip
  • it has a role of guiding the light emitted from the upper surface side of the light transmissive member to the detection surface. That is, the light transmissive member has the light incident structure in which the light irradiated from the upper surface side is incident on the detection surface under a total reflection condition.
  • Plastic materials which can be mass-produced by injection molding such as polystyrene, a polycarbonate, a cycloolefin, an acryl, High transparency
  • a glass material such as silica glass capable of ensuring the above is preferable.
  • the polystyrene and the cycloolefin have less autofluorescence and can reduce noise, and the polycarbonate can realize a high refractive index, and thus can be miniaturized.
  • the acrylic since the acrylic has high transparency, it is possible to suppress light attenuation during light guiding.
  • the thickness of the light transmissive member is not particularly limited, but is preferably 0.1 mm to 10.0 mm from the viewpoint of rigidity, light guide performance, and degree of magnetic attenuation. If the thickness is less than 0.1 mm, cracking, distortion, etc. are likely to occur and handling may be difficult. Further, if the thickness is smaller than the beam diameter of the incident light, light loss occurs at the time of incidence and noise light is generated. Therefore, the thickness is preferably larger than the beam diameter. In addition, since the magnetic field is applied from the bottom surface side, when the thickness exceeds 10.0 mm, it may be difficult to apply a suitable magnetic field on the detection surface due to attenuation. Moreover, if the said thickness is 5.0 mm or less, attenuation
  • a liquid sample is introduced into a region where the detection surface is formed to verify whether the target substance exists.
  • maintaining the said liquid sample introduced It is preferable to apply the following structure. That is, as one configuration, a side wall portion stands around the detection surface so that a part of the upper surface of the light transmissive member serves as the detection surface and forms a box-like body with the detection surface as a bottom. The structure to be provided is mentioned. In this configuration, the liquid sample is held in the box.
  • said side wall part it can form with the same material and formation method as the said light transmissive member, for example.
  • Another configuration includes a configuration in which a liquid sample storage groove having at least a portion as the detection surface is formed on the upper surface of the light transmissive member.
  • the liquid sample is held in the liquid sample storage groove.
  • the liquid sample storage groove may be formed by a molding process when the plate-like member constituting the light-transmitting member is formed, or may be formed by a cutting process after the plate-like member is formed.
  • the liquid sample storage groove is drilled from the side surface of the light transmissive member opposite to the side surface on which the inclined surface is formed toward the inclined surface side. The structure formed as an installation groove is mentioned.
  • the surface facing the bottom surface closest to the bottom surface constitutes the detection surface.
  • the opening of the liquid sample storage groove can be sealed with a cover such as a cover glass as necessary.
  • the liquid sample storage groove As the shape of the groove, an arbitrary shape such as a concave shape, a V shape, and a trapezoidal shape can be applied in a cross-sectional view. Such a shape is excluded because the detection surface cannot be formed if the shape is not present.
  • the liquid sample storage groove is not particularly limited, but an inclination detection surface that inclines in a direction away from the inclined surface as it goes from the upper surface to the bottom surface side with respect to the thickness direction of the light transmissive member as the detection surface. It is good also as a structure to have.
  • the incident angle of the light with respect to the tilt surface set to irradiate the detection surface with the light propagating in the main body portion under a total reflection condition. It can be set in a wide range and the setting flexibility can be expanded.
  • the detection chip is irradiated with the light from a light irradiation unit disposed on the upper surface side of the light transmissive member based on a viewpoint of avoiding competition with the magnetic field application unit disposed on the bottom surface side of the light transmissive member. It is assumed that this is done. That is, in the light incident structure, the light can be incident on the detection surface under total reflection conditions by changing the traveling direction of the light irradiated from the upper surface side of the light transmissive member by the inclined surface. And As long as the inclined surface plays such a role, it may be formed as a side surface of the light transmissive member, and a notch formed in at least one of an upper surface and a bottom surface of the light transmissive member. It may be formed as a component surface.
  • the cutout portion is formed on the upper surface of the light transmissive member and has a top side cutout portion having the upward inclined surface and the bottom surface formed on the bottom surface of the light transmissive member and having the downward inclined surface. It is formed as at least one of the side notches.
  • the cutout portion may be a gap, but it is difficult to clean when the liquid sample enters this portion, so that the lower refractive index is lower than that of the main body portion.
  • a refractive material may be embedded. That is, when the upper surface side notch is embedded with the low refractive material, the liquid sample can be prevented from entering the upper surface side notch.
  • the low refractive material since the low refractive material is used, the light can be guided to the detection surface by using refraction at the interface between the upward inclined surface of the upper surface side notch and the main body.
  • the light transmissive member When embedding the low refractive material in the upper surface side notch, for example, a known plastic material having a refractive index of about 1.4 is embedded in the upper surface notch, and the body portion has a refractive index. By forming it with a known plastic material of about 1.6, the light transmissive member can be configured.
  • the bottom surface side notch portion is formed on the bottom surface of the light transmitting member, the liquid sample introduced into the top surface side does not enter the notched portion.
  • the shortest distance is 1.0 mm to 50.0 mm.
  • the number of times can be set to one.
  • the inclined surface is formed as the downward inclined surface, it is preferable to reduce the number of times the light is reflected by the main body, and the number of times the light is reflected by the main body is set to be zero. It is optimal that the light is incident on the detection surface with only one reflection on the inclined surface.
  • “light transmittance” indicates that the visible light transmittance is 0.5% or more.
  • a coating layer may be formed on the detection surface.
  • the material for forming the coating layer is not particularly limited as long as it has light transmissivity, like the light transmissible member, and examples thereof include known resin materials and glass materials. There is no restriction
  • the coating layer is formed so as to cover the detection surface of the light transmissive member, and the upper surface of the coating layer serves as the detection surface.
  • the coating layer when the light transmissive member is formed of a relatively soft resin, the detection surface of the light transmissive member is scratched by coating with a hard resin or glass material that is not easily scratched. It can prevent sticking. Further, when the coating layer is formed of a fluororesin or the like, an antifouling effect for preventing the detection surface from being stained can be obtained. In addition, the antifouling effect can prevent the target substance and magnetic particles from being adsorbed on the upper surface of the coating layer, and the target substance combined with the magnetic particles by a magnetic field application unit described later. In the case of detecting by moving, it is possible to prevent the combined body of the magnetic particles and the target substance from adsorbing on the surface of the coating layer and not moving.
  • the coating layer reduces the roughness of the detection surface and suppresses light scattering during total reflection. , Noise can be reduced.
  • a thin glass film is selected as the coating layer and laminated on the detection surface of the light transmissive member from the viewpoint of obtaining the detection surface excellent in smoothness.
  • the glass coating layer is formed on the detection surface of the resin-made light transmissive member, a detection chip having high chemical resistance and strong resistance to organic solvents, strong acids, and strong alkalis can be obtained.
  • the light incident structure includes an inclination angle of the inclined surface, an irradiation angle of the light with respect to the inclined surface, a material (refractive index) of the light transmissive member, a light incident position on the inclined surface, and a detection surface.
  • a known optical calculation method for giving a path to the detection surface of the light irradiated from the upper surface side of the light transmissive member by giving conditions such as a distance to the light irradiation position and a thickness of the light transmissive member It can be set by calculating with
  • the light irradiation part is a part that is arranged on the upper surface side of the light transmissive member and that can irradiate the detection surface with the light on the detection surface through the light incident structure of the light transmissive member. .
  • the light source of the light irradiation unit is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include known lamps, LEDs, and lasers.
  • the evanescent field is formed in the vicinity of the surface of the detection surface by irradiating the detection surface with the light under the total reflection condition, and from a combined body including the target substance and magnetic particles.
  • the detection principle is to generate an optical signal. Therefore, the role required of the light irradiation unit is only to irradiate the detection surface with the light under the total reflection condition, and there is no limitation on the selection of the light source as long as it plays such a role.
  • the irradiation light may be incident on the light incident portion using a guide portion such as a collimator lens that restricts the irradiation direction of the irradiation light to a specific direction. it can.
  • the light incident on the light incident portion may be monochromatic light having a wavelength that can excite fluorescence or light from a light source having a wide wavelength band such as a lamp or LED. It is preferable that the light is transmitted through an optical filter such as a bandpass filter to be monochromatic, and the light has only a wavelength that can excite the fluorescence.
  • the magnetic field application unit is a unit disposed on the bottom surface side of the light transmissive member.
  • the magnetic field application unit is not particularly limited, but from the viewpoint of exerting a strong magnetic field on the liquid sample, the magnetic field application unit is arranged directly below the bottom surface of the light transmissive member at a position facing the detection surface of the detection chip in the thickness direction. It is preferable.
  • the constituent member of the magnetic field application unit is not particularly limited as long as it can apply a magnetic field to the region into which the liquid sample is introduced, and examples thereof include known permanent magnets and electromagnets.
  • Known liquid particles such as magnetic beads are added to the liquid sample, and when the target substance is present, a conjugate of the target substance and the magnetic particles is formed.
  • a fluorescent labeling substance that specifically adsorbs or binds to the target substance to label the target substance may be used.
  • known fluorescent substances such as fluorescent dyes, quantum dots, and fluorescent dyes can be used.
  • the target substance detection method include a method of detecting scattered light emitted from the conjugate upon receiving evanescent light in the evanescent field in addition to fluorescence detection.
  • a light scattering substance that specifically adsorbs or binds to the target substance and scatters light may be used.
  • the light scattering material include nanoparticles, such as polystyrene beads and gold nanoparticles.
  • the binding method of the target substance, the magnetic particles, the fluorescent labeling substance and the light scattering substance is not particularly limited, and depending on the substance, physical adsorption, antigen-antibody reaction, DNA hybridization, biotin-avidin A known binding method such as a bond, a chelate bond, or an amino bond can be applied.
  • the magnetic field application unit draws the conjugate floating in the liquid sample to the surface of the detection surface by applying the magnetic field, and enables detection in a short time.
  • the detection in order to perform detection without noise caused by scratches or the like on the detection surface, by comparing and observing the state before and after movement of the combined body with application of the magnetic field by the magnetic field application unit, The detection may be performed by removing the noise signal included in the optical signal before moving the combined body. According to such detection, the target substance combined with the magnetic particles is moved by the magnetic field application unit, whereas noise generated in the detection surface is not moved by the magnetic field application unit. By performing detection focusing on the moving optical signal, the noise signal can be eliminated.
  • the magnetic field application unit is configured to apply the magnetic field on the bottom surface side of the light transmissive member in order to compare and observe the state of the combined body before and after movement.
  • the member is movable in a direction having a vector component in a direction parallel to the in-plane direction.
  • the permanent magnet or the like and a slide member that can slide while supporting the permanent magnet or the like can be configured. .
  • the light detection unit is arranged on the detection surface, and a region in the vicinity of the surface of the detection surface is used as a detection region, and can detect an optical signal emitted from the combined body containing the target substance upon irradiation with the light. Is done.
  • a target substance detection method of the first invention is a method for detecting a target substance using the target substance detection device of the first invention, and includes at least a light irradiation step and a magnetic field application step, and further, if necessary. And a light detection step.
  • the light irradiation step is a step of irradiating light on the detection surface from the upper surface side of the light transmissive member via the light incident structure of the light transmissive member under a total reflection condition.
  • the magnetic field applying step is a step of applying a magnetic field from the bottom surface side of the light transmissive member by the magnetic field applying unit, and preferably, the magnetic field applying unit is placed in the plane of the detection surface in a state where the magnetic field is applied. This is a step of moving in a direction having a vector component parallel to the direction.
  • the light detection step is a step of detecting an optical signal emitted from the combined body with the light irradiation.
  • the positional relationship is explained based on the positional relationships of the “upper surface”, “bottom surface”, and “side surface” of the light transmissive member.
  • these positional relationships indicate relative positional relationships, and even when the target substance detection device is used upside down or tilted, there is no change in the relative positional relationships.
  • the magnetic field application unit is disposed even when the target substance detection device is tilted by 90 ° and the “upper surface” and the “bottom surface” are located laterally and the “side surface” is located above or below.
  • FIG. 1 is explanatory drawing explaining the outline
  • the detection chip 1 in the first embodiment includes a light transmissive member 2.
  • the light transmissive member 2 is a plate-like member, a part of the upper surface is a detection surface 2a, the side surface is an upward inclined surface 2b, and the body part can receive light from the upper surface and can guide the light to the inside.
  • the main body 2c is used.
  • the detection surface 2a is a surface set as a part of the upper surface of the light transmissive member 2, and when the back surface (the bottom surface side of the light transmissive member 2) is irradiated with light under total reflection conditions.
  • An evanescent field is formed in the vicinity of the surface (the upper surface side of the light transmissive member 2).
  • a side wall 4 is erected around the detection surface 2 a so as to form a box having the detection surface 2 a at the bottom, and the liquid sample A is placed in the box. be introduced.
  • the upward inclined surface 2b configured as a side surface of the light transmissive member 2 is a surface that is inclined in a direction away from the detection surface 2a toward the bottom surface side from the upper surface with respect to the thickness direction Y of the light transmissive member 2.
  • the light irradiated from the light irradiation portion B arranged facing the upward inclined surface 2b is inclined with respect to the length direction X orthogonal to the thickness direction Y of the light transmissive member 2.
  • the light incident on the main body 2c is propagated along the length direction X in the main body 2c while being reflected a plurality of times on the top and bottom surfaces of the main body 2c.
  • the light propagating through the main body 2c is totally reflected at the position of the detection surface 2a to form an evanescent field near the surface of the detection surface 2a (first light incident structure).
  • the light irradiation part B faces the upward inclined surface 2 b on the side surface of the light transmissive member 2 on the upper surface side of the light transmissive member 2, as shown in FIG.
  • the magnetic field application unit C is disposed immediately below the bottom surface of the light transmissive member 2 at a position facing the detection surface 2a in the thickness direction Y, and the light detection unit D is disposed on the upper surface side of the light transmissive member 2. Is done.
  • the conjugate including the target substance floating in the liquid sample A and the magnetic particles is drawn near the surface of the detection surface 2a where the conjugate can emit an optical signal, Enables measurement in a short time.
  • the magnetic field application unit C is slid in the length direction X, for example, and the optical signals before and after the slide movement are detected, so that only the combined body that follows the slide movement of the magnetic field application unit C can be detected and detected. It is possible to perform detection without a noise signal caused by a scratch or the like on the surface 2a.
  • the light detection unit D can detect light from the combined body in the vicinity of the surface of the detection surface 2a.
  • the magnetic field application unit C is not disposed on the bottom surface of the light transmissive member 2 without competing the arrangement positions of the light irradiation unit B and the magnetic field application unit C. Since it can be arranged at a position close to the detection surface 2a, and the light irradiated from the light irradiation part B can be irradiated to the detection surface 2a under the total reflection condition, it is separated from the detection surface 2a. Therefore, it is not necessary to use a strong magnetic field applying member that can apply a magnetic field from a certain position, and it is possible to avoid an increase in the size of the apparatus, and it is possible to manufacture the apparatus at a small size and at low cost.
  • FIG. 2 is explanatory drawing explaining the outline
  • the detection chip 10 in the second embodiment includes a light transmissive member 12.
  • a liquid sample storage groove 14 for introducing the liquid sample A is formed on the upper surface.
  • the liquid sample storage groove 14 is formed in a concave cross-sectional shape, and its bottom surface serves as a detection surface 12a.
  • an upper surface side cutout portion 15 formed on the upper surface and having an upward inclined surface 12b is formed.
  • the upper surface side notch 15 is formed in a substantially V-shaped cross section.
  • the upward inclined surface 12b is a surface that is inclined in a direction away from the detection surface 12a from the upper surface toward the bottom surface side with respect to the thickness direction Y of the light transmissive member 12, and is disposed to face the upward inclined surface 12b.
  • the light emitted from the light irradiating part B is incident on the main body part 12 c in a state of being inclined with respect to the length direction X orthogonal to the thickness direction Y of the light transmissive member 12.
  • the distance W between the light incident position on the upward inclined surface 12b and the light irradiation position on the detection surface 12a is preferably 1.0 mm to 50.0 mm as the shortest distance.
  • light incident on the main body 12c is guided to the detection surface 12a after being reflected from the bottom surface of the main body 12c as few times as possible, preferably only once, and is reflected on the back surface of the detection surface 12a.
  • An evanescent field is formed near the surface of the detection surface 12a while being totally reflected (first light incident structure).
  • the light irradiation part B is arranged at a position facing the upward inclined surface 12 b on the upper surface side of the light transmissive member 12, as shown in FIG. 2.
  • the distance W between the light incident position on the upward inclined surface 12b and the light irradiation position on the detection surface 12a is the upward inclined surface 2b (light) in the detection chip 1 in the first embodiment. Since the distance between the light incident position on the side surface of the transmissive member 2 and the light irradiation position on the detection surface 2a is shorter, attenuation of light traveling in the main body 12c can be suppressed.
  • Other configurations and effects are the same as those of the target substance detection apparatus according to the first embodiment, and thus description thereof is omitted.
  • FIGS. 3 to 5 are explanatory diagram showing an example of the incident angle of light.
  • the detection chip 1 ′ has a structure in which a part of the upper surface of the light transmissive member 2 ′ is a detection surface 2a.
  • light is transmitted through the normal direction, that is, the direction perpendicular to the upward inclined surface 2 b ′, with respect to the upward inclined surface 2 b ′ configured as the side surface of the light transmissive member 2 ′.
  • the light irradiation direction of the light irradiation part B is set so that the light irradiation part 2 ′ is incident, and the upward inclined surface 2b ′ when viewed as a V-shaped groove angle with the upper surface side of the light transmissive member 2 ′ open.
  • ⁇ 1 which is an angle formed by the light irradiation direction of the light irradiation unit B, is 90 °.
  • the angle ⁇ 2 formed by the thickness direction Y of the light transmissive member 2 ′ and the light incident direction with respect to the bottom surface of the light transmissive member 2 ′, the bottom surface and the side surface (upwardly inclined surface 2b ′) of the light transmissive member 2 ′. ) To be equal to ( ⁇ 2 ⁇ ). Since these events occur regardless of the material of the light transmissive member 2 ′, the light reflection position in the main body of the light transmissive member 2 ′ is uniquely specified based on the setting of the angle ⁇ .
  • the position setting of the detection surface 2a ′ in the detection chip and the setting of the optical system in the target substance detection apparatus can be simplified. In the example shown in FIG.
  • the angle ⁇ is preferably 50 ° to 80 °.
  • a certain ⁇ 1 is assumed to be less than 90 °.
  • the light refracted by the upward inclined surface 2b ′ is reflected by the bottom surface of the light transmissive member 2 ′ and guided to the upper surface. It is burned.
  • the light incident angle ⁇ 1 is less than 90 °, the light refracted by the upward inclined surface 2b ′ is not totally reflected on the bottom surface of the light transmissive member 2 ′, and is directly outside the light transmissive member 2 ′. Produces a penetrating component. In this state, it is necessary to note that the incident light is not irradiated on the detection surface 2a ′ under the total reflection condition. If ⁇ 1 is too smaller than 90 °, the position of the upper surface where the reflected light is guided becomes too close to the side surface (upwardly inclined surface 2b ′), and it is difficult to set the position of this upper surface as the detection surface 2a ′. It is necessary to pay attention to.
  • ⁇ 1 is less than 90 °
  • the lower limit thereof depends on the angle ⁇ , but the light irradiation direction of the light irradiation part B and the length direction of the light transmissive member 2 ′ on the detection surface 2a ′ side. It is preferable that the angle formed with X is 90 ° or more.
  • a certain ⁇ 1 is an angle exceeding 90 °.
  • the light refracted by the upward inclined surface 2b ′ is preferable because it is easily totally reflected by the bottom surface of the light transmissive member 2 ′.
  • ⁇ 1 is larger than 90 °
  • the detection chip 1 ′ is enlarged as a result of the position of the upper surface from which the reflected light is guided away from the upward inclined surface 2b ′.
  • ⁇ 1 is an angle exceeding 90 °
  • the upper limit thereof depends on the angle ⁇ , but the angle at which the light irradiation direction of the light irradiation part B does not reach parallel to the length direction X of the detection chip 1 ′. is there.
  • the detection chip 20 in the third embodiment includes a light transmissive member 22.
  • the light transmissive member 22 is a plate-like member, and a part of the upper surface is a detection surface 22a, and the body portion is a main body portion 22c that can receive light from the upper surface and guide it into the inside.
  • a side wall 24 is erected around the detection surface 22 a so as to form a box with the detection surface 22 a as a bottom, and the liquid sample A is introduced into the box. Is done.
  • the side surface is a downward inclined surface 22b that is inclined in a direction away from the detection surface 22a as it goes from the bottom surface to the upper surface side with respect to the thickness direction Y. The light is incident on the upper surface of the light transmissive member 22 at a position facing the side surface in the thickness direction Y.
  • the light emitted from the light irradiator B on the upper surface is reflected, for example, in the order of the downward inclined surface 22b and the bottom as shown in the figure, and is totally reflected at the position of the detection surface 22a. While being reflected, an evanescent field is formed in the vicinity of the detection surface 22a (second light incident structure).
  • the detection in the third embodiment in which the side surface of the light transmissive member 2 faces the bottom surface side.
  • an evanescent field can be obtained in the same manner as the detection chip 1 in the first embodiment.
  • FIG. 7 is explanatory drawing explaining the outline
  • the detection chip 30 in the fourth embodiment has a light transmissive member 32.
  • a liquid sample storage groove 34 for introducing the liquid sample A is formed on the upper surface.
  • the liquid sample storage groove 34 is formed to have a substantially V-shaped cross section, and a surface forming one side of the groove having the substantially V-shaped cross section serves as a detection surface 32a.
  • the downward inclined surface 32 b in which the side surface is inclined in a direction away from the detection surface 32 a toward the upper surface side from the bottom surface with respect to the thickness direction Y.
  • the light is incident on the upper surface of the light transmissive member 32 at a position facing the side surface in the thickness direction Y.
  • the light irradiation part B light is irradiated from the direction of the thickness direction Y, that is, the direction perpendicular to the upper surface, to the upper surface of the light transmissive member 32, and the light incident into the main body part 32c is inclined downward 32b.
  • the detection chip 30 configured as described above, light incident on the main body 32c is guided to the detection surface 32a without being reflected by the upper and lower surfaces of the main body 32c. It is possible to suppress the deterioration of the light accompanying the reflection of light.
  • Other configurations and effects are the same as those of the target substance detection apparatus according to the first embodiment, and thus description thereof is omitted.
  • FIG. 8 is explanatory drawing explaining the outline
  • the detection chip 40 according to the fifth embodiment is a modification of the detection chip 10 according to the second embodiment. Like the detection chip 10 according to the second embodiment, the detection surface 42a, the upward inclined surface 42b, the main body 42c, and the liquid sample are used. A light transmissive member 42 having a storage groove 44 is provided. In the detection chip 40 according to the fifth embodiment, the upper surface side notch 45 is different from the detection chip 10 according to the second embodiment, and the upper surface side notch 45 has a lower refractive index than the material for forming the main body 42c. A refractive material 45a is embedded.
  • the low refractive material 45a is embedded in the upper surface side cutout 45, and the entire upper surface of the light transmitting member 42 is in a flat state.
  • the upper surface side cutout 45 is not contaminated by the liquid sample A that sometimes enters from the liquid sample storage groove 44.
  • the upper surface side notch portion 45 is configured in this way, by utilizing the refraction of light at the upward inclined surface 42b that forms the interface between the low refractive material 45a and the main body portion 42c formed of the high refractive material, Similarly to the detection chip 10 in the second embodiment, the light irradiated from the light irradiation unit B can be guided to the detection surface 42a in a state where the light is reflected only once in the main body 42c.
  • Other configurations and effects are the same as those of the target substance detection device according to the second embodiment, and thus description thereof is omitted.
  • FIG. 9, 10 is explanatory drawing which shows a modification.
  • the detection chip 40 ′ has a structure in which a part of the upper surface of the light transmissive member 42 ′ is the detection surface 42 ′ and the upper surface side cutout 45 ′ is arranged.
  • the light irradiation part B is on the upper surface side of the light transmissive member 42 ′ with respect to the upward inclined surface 42 b ′ of the upper surface side notch 45 ′.
  • the angle ⁇ ) in FIG. 9 is set at a relatively small angle.
  • is small, the light introduced from the upward inclined surface 42b ′ is not totally reflected on the bottom surface of the light transmissive member 42 ′, and a component is transmitted as it is outside the main body 42c ′ in the light transmissive member 42 ′. (See the dotted arrow in FIG. 9), it is necessary to be aware that in this state, the incident light is not irradiated on the back surface under the total reflection condition.
  • must be equal to or greater than the minimum angle at which the incident light can satisfy the total reflection condition with respect to the detection surface 42 ′. Even when the low refractive material 45a ′ is not embedded in the upper surface side cutout 45 ′, the light refracted by the upward inclined surface 42b ′ is not transmitted unless the refractive index of the light transmissive member 42 ′ is high. It should be noted that a component that is not totally reflected on the bottom surface of 42 'and is transmitted as it is to the outside of the light transmissive member 42' is generated.
  • the light incident angle ⁇ is formed to be inclined with respect to the in-plane direction of the bottom surface of the light transmitting member 42 ′, and the downward inclined surface.
  • the bottom side cutout portion 46 having 46a is formed on the bottom surface of the light transmissive member 42 'so that the reflected light is guided so as to satisfy the total reflection condition with respect to the detection surface 42a' set on the top surface. May be.
  • the bottom side cutout 46 can be formed by the same method as the top cutout 45 '.
  • the low-refractive material 46a may be embedded in the bottom-side cutout portion 46 similarly to the top-side cutout portion 45 '.
  • FIG. 11 is explanatory drawing explaining the outline
  • the detection chip 50 in the sixth embodiment is a modification of the detection chip 20 in the third embodiment.
  • the detection chip 50 in the sixth embodiment includes a light transmissive member 52.
  • a liquid sample storage groove 54 for introducing the liquid sample A is formed on the upper surface.
  • the liquid sample storage groove 54 is formed in a concave shape in cross section, and its bottom surface serves as a detection surface 52a.
  • a bottom surface side notch portion 56 formed on the bottom surface and having a downward inclined surface 52b is formed, and the bottom surface side notch portion 56 is formed.
  • a low refractive material 56a having a refractive index lower than that of the material for forming the main body 52c is embedded as needed.
  • the bottom-side cutout portion 56 is formed on the bottom surface of the light transmissive member 52, the liquid sample that enters from the liquid sample storage groove 54 when the liquid sample A is introduced and discharged. With A, the inside of the bottom-side notch 56 is not soiled. Further, when the bottom-side cutout portion 56 is configured by embedding the low refractive material 56a, it is possible to prevent the downward inclined surface 52b from being exposed to the outside and being contaminated by adhesion of dust in the atmosphere.
  • the light irradiated from the light irradiation portion B is reflected by the downward inclined surface 52b and the bottom surface once by using the reflection of light on the downward inclined surface 52b, and the detection surface 52a.
  • Other configurations and effects are the same as those of the target substance detection apparatus according to the third embodiment, and thus description thereof is omitted.
  • FIG. 12 is explanatory drawing explaining the outline
  • the target substance detection device according to the seventh embodiment relates to a modification in which the target substance detection device according to the first embodiment is used with an inclination of 90 °. Therefore, in the target substance detection device according to the seventh embodiment, the “upper surface” and the “bottom surface” of the target substance detection device according to the first embodiment are located on the side and the “side surface” is located on the upper side. Maintaining the positional relationship of the “upper surface”, “bottom surface” and “side surface” in the target substance detection apparatus according to the first embodiment, assuming that the surface of the light transmissive member 62 on the side where the light is disposed is viewed as the “bottom surface” I will explain.
  • the detection chip 60 in the seventh embodiment is a modification of the detection chip 1 in the first embodiment. As shown in FIG.
  • the detection chip 60 in the seventh embodiment includes a light transmissive member 62.
  • a liquid sample storage groove 64 for introducing the liquid sample A is formed on the side surface.
  • the liquid sample storage groove 64 is formed as a perforated groove having a concave cross section, and a surface facing the bottom surface among the surfaces constituting the perforated groove is a detection surface 62a.
  • the target substance detection device and the target substance detection method according to the first aspect of the present invention are configured so that the target substance is arranged in an arbitrary direction as long as the relative positional relationship between the “upper surface”, the “bottom surface”, and the “side surface” is maintained.
  • the posture of the detection device can be changed.
  • Other configurations and effects are the same as those of the target substance detection apparatus according to the first embodiment, and thus description thereof is omitted.
  • the target substance detection chip of the second invention includes an electric field enhancement layer and a light transmissive member.
  • the electric field enhancement layer is a layer in which an enhanced electric field is formed on the front surface side when light is applied to the back surface under total reflection conditions.
  • the electric field enhancement layer There is no restriction
  • the surface plasmon excitation layer examples include a metal layer containing at least one of gold, silver, platinum, and aluminum.
  • the metal layer surface plasmon resonance is excited on the surface by the light irradiated from the back side, and the enhanced electric field is obtained in the vicinity of the surface.
  • the thickness of the metal layer an optimum value is determined depending on the constituent material and the wavelength of light to be irradiated. Generally, when the surface plasmon resonance is excited in the near ultraviolet to near infrared region, the thickness of the metal layer is several nm to several tens of nm.
  • the method for forming the metal layer is not particularly limited and may be a known method such as a vapor deposition method, a sputtering method, a CVD method, a PVD method, or a spin coating method.
  • a material or a glass material if the metal layer is formed directly on the light-transmitting member, the adhesiveness may be lowered and easily peeled off. Therefore, from the viewpoint of improving adhesion, it is preferable to form an adhesive layer using nickel or chromium as a forming material on the surface of the light transmissive member, and to form the metal layer on the adhesive layer.
  • the target substance and the fluorescent substance are obtained from excitation light when the target substance and the fluorescent substance are close to the metal layer.
  • a phenomenon called quenching occurs in which the energy transferred to the metal layer decreases the luminous efficiency.
  • the coating layer is not particularly limited, and can be formed of a transparent layer having a thickness of several nm to several tens of nm formed of a glass material such as silica glass, an organic polymer material, or the like.
  • the waveguide mode excitation layer There is no restriction
  • the laminated body of the thin film layer formed with a metal material or a semiconductor material, and the dielectric material layer formed with a translucent dielectric material is mentioned.
  • the waveguide mode excitation layer the waveguide mode is excited in the dielectric layer by the light irradiated from the back side, and the enhanced electric field is obtained in the vicinity of the surface.
  • the thin film layer constitutes the back side layer
  • the dielectric layer constitutes the front side layer.
  • the thickness of the thin film layer is the same as that of the surface plasmon excitation layer, and an optimum value is determined depending on the constituent material and the wavelength of light to be irradiated, and this value can be calculated from calculation using the Fresnel equation. It is known. In general, when using light in a wavelength band from the near ultraviolet to the near infrared region, the thickness of the thin film layer is several nm to several hundred nm.
  • the light transmissive dielectric material is not particularly limited, and examples thereof include resin materials such as silicon oxide, silicon nitride, and acrylic resin, metal oxides such as titanium oxide, and metal nitrides such as aluminum nitride. Is preferable, and silicon oxide is preferable because of its high chemical stability.
  • resin materials such as silicon oxide, silicon nitride, and acrylic resin
  • metal oxides such as titanium oxide, and metal nitrides such as aluminum nitride. Is preferable, and silicon oxide is preferable because of its high chemical stability.
  • silicon oxide is preferable because of its high chemical stability.
  • it can select suitably from a well-known formation method according to material.
  • the light transmissive member includes a support surface that can support the electric field enhancement layer from the back surface side, and a support surface that extends from the top surface to the bottom surface with the surface on which the support surface is formed in the thickness direction as the top surface.
  • This is a substantially plate-like member having a main body part that can guide light inside.
  • the light transmissive member has a first light incident structure that causes the light that has been irradiated from the upper surface side and passed through the upward inclined surface to be incident on the back surface through the main body portion under a total reflection condition, and It is configured to have one of the light incident structures of the second light incident structure in which the light irradiated from the upper surface side and reflected by the downward inclined surface is incident on the back surface through the main body portion under the total reflection condition. Is done.
  • the optically acting surface that is, the surface on which light is incident and the surface on which light is reflected are preferably optically smooth.
  • the light transmissive member has a role of an optical prism in a conventional detection chip, and a magnetic field application unit can be disposed below the position where the electric field enhancement layer is formed in the target substance detection chip. It has a role of guiding the light emitted from the upper surface side of the light transmissive member to the back surface of the electric field enhancement layer. That is, the light transmissive member has the light incident structure in which the light irradiated from the upper surface side is incident on the back surface of the enhanced electric field layer under a total reflection condition.
  • Plastic materials which can be mass-produced by injection molding such as polystyrene, a polycarbonate, a cycloolefin, an acryl, High transparency
  • a glass material such as silica glass capable of ensuring the above is preferable.
  • the polystyrene and the cycloolefin have less autofluorescence and can reduce noise, and the polycarbonate can realize a high refractive index, and thus can be miniaturized.
  • the acrylic since the acrylic has high transparency, it is possible to suppress light attenuation during light guiding.
  • the thickness of the light transmissive member is not particularly limited, but is preferably 0.1 mm to 10.0 mm from the viewpoint of rigidity, light guide performance, and degree of magnetic attenuation. If the thickness is less than 0.1 mm, cracking, distortion, etc. are likely to occur and handling may be difficult. Further, if the thickness is smaller than the beam diameter of the incident light, light loss occurs at the time of incidence and noise light is generated. Therefore, the thickness is preferably larger than the beam diameter. In addition, since a magnetic field is applied from the back surface, when the thickness exceeds 10.0 mm, it may be difficult to apply a suitable magnetic field on the surface due to attenuation. Moreover, if the said thickness is 5.0 mm or less, attenuation
  • a liquid sample is introduced into a region where the electric field enhancement layer (and the support surface) is formed to verify whether the target substance exists.
  • maintaining the said liquid sample introduced It is preferable to apply the following structure. That is, as one configuration, a side wall portion stands around the support surface so that a part of the upper surface of the light transmissive member is the support surface and a box-like body having the support surface as a bottom is formed. The structure to be provided is mentioned. In this configuration, the liquid sample is held in the box.
  • said side wall part it can form with the same material and formation method as the said light transmissive member, for example.
  • a liquid sample storage groove having at least a part of a support surface is formed on the upper surface of the light transmissive member.
  • the liquid sample is held in the liquid sample storage groove.
  • the liquid sample storage groove may be formed by a molding process when the plate-like member constituting the light-transmitting member is formed, or may be formed by a cutting process after the plate-like member is formed.
  • the liquid sample storage groove As the shape of the groove, an arbitrary shape such as a concave shape, a V shape, and a trapezoidal shape can be applied in a cross-sectional view. Such a shape is excluded because the support surface cannot be formed if the shape is not present.
  • the liquid sample storage groove is not particularly limited, but an inclined support surface that inclines in a direction away from the inclined surface as it goes from the top surface to the bottom surface side with respect to the thickness direction of the light transmissive member as the support surface. It is good also as a structure to have.
  • the inclined surface is set to irradiate the electric field enhancement layer on the support surface with the total reflection condition with the light propagating in the main body.
  • the incident angle of the light with respect to can be set in a wide range, and the degree of freedom of setting can be expanded.
  • the target substance detection chip is configured so that the light is emitted from a light irradiation unit disposed on the upper surface side of the light transmissive member based on a viewpoint of avoiding competition with the magnetic field application unit disposed on the bottom surface side of the light transmissive member. Is assumed to be irradiated. That is, in the light incident structure, the traveling direction of the light irradiated from the upper surface side of the light transmissive member is changed by the inclined surface, whereby the light is totally reflected on the back surface of the electric field enhancement layer. Can be incident.
  • the inclined surface may be formed as a side surface of the light transmissive member, and a notch formed in at least one of an upper surface and a bottom surface of the light transmissive member. It may be formed as a component surface.
  • the cutout portion is formed on the upper surface of the light transmissive member and has a top side cutout portion having the upward inclined surface and the bottom surface formed on the bottom surface of the light transmissive member and having the downward inclined surface. It is formed as at least one of the side notches.
  • the cutout portion may be a gap, but it is difficult to clean when the liquid sample enters this portion, so that the lower refractive index is lower than that of the main body portion.
  • a refractive material may be embedded. That is, when the upper surface side notch is embedded with the low refractive material, the liquid sample can be prevented from entering the upper surface side notch.
  • the low-refractive material since the low-refractive material is used, the light can be guided to the electric field enhancement layer using refraction at the interface between the upwardly inclined surface of the upper surface side notch and the main body.
  • the light transmissive member When embedding the low refractive material in the upper surface side notch, for example, a known plastic material having a refractive index of about 1.4 is embedded in the upper surface notch, and the body portion has a refractive index. By forming it with a known plastic material of about 1.6, the light transmissive member can be configured.
  • the bottom surface side notch portion is formed on the bottom surface of the light transmitting member, the liquid sample introduced into the top surface side does not enter the notched portion.
  • the shortest distance is 1.0 mm to 50.0 mm. It is preferable.
  • the number of times can be set to one.
  • the inclined surface is formed as the downward inclined surface, it is preferable to reduce the number of times the light is reflected by the main body, and the number of times the light is reflected by the main body is set to be zero. It is optimal that the light is incident on the electric field enhancement layer with only one reflection on the inclined surface.
  • “light transmittance” indicates that the visible light transmittance is 0.5% or more.
  • the light incident structure includes an inclination angle of the inclined surface, an irradiation angle of the light with respect to the inclined surface, a material (refractive index) of the light transmissive member, a light incident position on the inclined surface, and the electric field enhancement layer.
  • the path to the back surface of the electric field enhancement layer of the light irradiated from the upper surface side of the light transmissive member is given by giving conditions such as the distance between the light irradiation position and the thickness of the light transmissive member It can be set by calculating with an optical calculation method.
  • a target substance detection apparatus includes the target substance detection chip according to the second invention, a light irradiation unit, and a magnetic field application unit, and further includes a light detection unit as necessary.
  • the target substance detection chip since the matter demonstrated about the said target substance detection chip of 2nd invention can be applied, suppose that the duplicate description is abbreviate
  • the light irradiating part is disposed on the upper surface side of the light transmissive member, and is a part capable of irradiating light on the back surface of the electric field enhancing layer through the light incident structure of the light transmissive member under total reflection conditions. is there.
  • the light source of the light irradiation unit is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include known lamps, LEDs, and lasers.
  • the back surface of the electric field enhancement layer is irradiated with the light under the total reflection condition to form the enhanced electric field in the vicinity of the surface, and light is emitted from a combined body including the target substance and magnetic particles.
  • the detection principle is to generate a signal. Therefore, the role required of the light irradiation part is only to irradiate the light on the back surface of the electric field enhancement layer under the total reflection condition. If it plays such a role, it is limited to the selection of the light source. There is no.
  • the irradiation light may be incident on the light incident portion using a guide portion such as a collimator lens that restricts the irradiation direction of the irradiation light to a specific direction. it can.
  • the light incident on the light incident portion may be monochromatic light having a wavelength that can excite fluorescence or light from a light source having a wide wavelength band such as a lamp or LED. It is preferable that the light is transmitted through an optical filter such as a bandpass filter to be monochromatic, and the light has only a wavelength that can excite the fluorescence.
  • the magnetic field application unit is a unit disposed on the bottom surface side of the light transmissive member.
  • the magnetic field application unit is not particularly limited, but from the viewpoint of exerting a strong magnetic field on the liquid sample, immediately below the bottom surface of the light transmissive member at a position facing the electric field enhancement layer in the target substance detection chip in the thickness direction. It is preferable to be arranged in
  • the constituent member of the magnetic field application unit is not particularly limited as long as it can apply a magnetic field to the region into which the liquid sample is introduced, and examples thereof include known permanent magnets and electromagnets.
  • Known liquid particles such as magnetic beads are added to the liquid sample, and when the target substance is present, a conjugate of the target substance and the magnetic particles is formed.
  • a fluorescent labeling substance that specifically adsorbs or binds to the target substance to label the target substance may be used.
  • known fluorescent substances such as fluorescent dyes, quantum dots, and fluorescent dyes can be used.
  • the method for detecting the target substance include a method for detecting scattered light emitted from the conjugate upon receiving light enhanced by the enhanced electric field in addition to fluorescence detection.
  • a light scattering substance that specifically adsorbs or binds to the target substance and scatters light may be used.
  • the light scattering material include nanoparticles, such as polystyrene beads and gold nanoparticles.
  • the binding method of the target substance, the magnetic particles, the fluorescent labeling substance and the light scattering substance is not particularly limited, and depending on the substance, physical adsorption, antigen-antibody reaction, DNA hybridization, biotin-avidin A known binding method such as a bond, a chelate bond, or an amino bond can be applied.
  • the magnetic field application unit draws the conjugate floating in the liquid sample to the surface of the electric field enhancement layer by applying the magnetic field, thereby enabling detection in a short time.
  • the detection in order to perform detection without noise caused by scratches or the like on the surface of the electric field enhancement layer, comparative observation before and after the movement of the combined body with application of the magnetic field by the magnetic field application unit is performed. By doing so, it is also possible to perform detection without the noise signal contained in the optical signal before the combined body movement. According to such detection, the target substance combined with the magnetic particles is moved by the magnetic field application unit, whereas noise generated due to scratches on the detection chip surface is not moved by the magnetic field application unit. The noise signal can be eliminated by performing the detection focusing on the moving optical signal.
  • the electric field enhancement layer is applied in a state where the magnetic field is applied on the bottom surface side of the light transmissive member in order to compare and observe the state before and after the movement of the combined body.
  • the member is movable in a direction having a vector component in a direction parallel to the in-plane direction of the surface, and is composed of, for example, the permanent magnet or the like and a slide member that can slide while supporting the permanent magnet or the like. Can do.
  • the light detection unit is disposed on a surface of the target substance detection chip on which the electric field enhancement layer is formed (a surface of the electric field enhancement layer), and a region near the surface of the electric field enhancement layer is used as a detection region. It is possible to detect an optical signal emitted from the conjugate containing the target substance with the irradiation of.
  • a region near the surface of the electric field enhancement layer is used as a detection region.
  • the target substance detection method of the second invention includes at least a light irradiation step and a magnetic field application step, and further includes a light detection step as necessary.
  • ⁇ Light irradiation process> a total reflection condition is applied from the upper surface side of the light transmissive member to the back surface of the electric field enhancement layer through the light incident structure of the light transmissive member with respect to the target substance detection chip of the second invention. This is a step of irradiating light.
  • the matter demonstrated about the said light irradiation part in the said target substance detection apparatus of 2nd invention can be applied as an implementation method of the said light irradiation process, suppose that the duplicate description is abbreviate
  • the magnetic field application step is a step of applying a magnetic field from the bottom surface side of the light transmissive member by the magnetic field application unit, and preferably the magnetic field application unit is placed on the surface of the electric field enhancement layer in a state where the magnetic field is applied. This is a step of moving in a direction having a vector component parallel to the inward direction.
  • the duplicate description is abbreviate
  • the light detection step is a step of detecting an optical signal emitted from the combined body with the light irradiation.
  • FIG. 15 is an explanatory diagram for explaining the outline of the target substance detection chip according to the first embodiment.
  • the target substance detection chip 101 includes an electric field enhancement layer 102 and a light transmissive member 103.
  • the electric field enhancement layer 102 is formed as a layer in which an enhanced electric field is formed on the front surface side when light is applied to the back surface under total reflection conditions.
  • the light transmissive member 103 is a plate-like member, and a part of the upper surface is a support surface 103a that can support the electric field enhancement layer 102 from the back surface side, and the side surface is an upward inclined surface 103b.
  • the body portion is a main body portion 103c capable of receiving light from the upper surface and guiding it to the inside.
  • a side wall portion 105 is erected around the support surface 103a so as to form a box having the support surface 103a as a bottom, and the liquid sample A is placed in the box. be introduced.
  • the upward inclined surface 103b configured as a side surface of the light transmissive member 103 is a surface that is inclined in a direction away from the support surface 103a toward the bottom surface side from the upper surface with respect to the thickness direction Y of the light transmissive member 103.
  • the light emitted from the light irradiating part B arranged to face the upward inclined surface 103b is inclined with respect to the length direction X orthogonal to the thickness direction Y of the light transmitting member 103.
  • the light incident on the main body 103c is propagated along the length direction X in the main body 103c while being reflected a plurality of times on the top and bottom surfaces of the main body 103c.
  • the light propagating in the main body 103c is totally reflected at the position of the back surface of the electric field enhancement layer 102 on the support surface 103a, and forms an enhanced electric field near the surface of the electric field enhancement layer 102 (first light incident structure).
  • the light irradiation part B has an upward inclined surface 103b on the side of the light transmitting member 103 on the upper surface side of the light transmitting member 103.
  • the magnetic field application unit C is disposed immediately below the bottom surface of the light transmissive member 103 at a position facing the electric field enhancement layer 102 in the thickness direction Y, and the light detection unit D is the top surface of the light transmissive member 103. Arranged on the side.
  • the magnetic field application unit C by applying a magnetic field, a combined body including a target substance floating in the liquid sample A and magnetic particles is drawn to the vicinity of the surface of the electric field enhancement layer 102 where the combined body can emit an optical signal.
  • Measurement in a short time is possible. Further, for example, by sliding the magnetic field application unit C in the length direction X and detecting the optical signal before and after the slide movement, it is possible to detect only the combined body that follows the slide movement of the magnetic field application unit C. Detection can be performed without a noise signal caused by scratches on the surface of the enhancement layer 102. Further, the light detection unit D can detect light from the combined body in the vicinity of the surface of the electric field enhancement layer 102.
  • the target substance detection device is configured using the target substance detection chip 101 in this way, the arrangement of the light irradiation part B and the magnetic field application part C does not compete with each other, and the magnetic field application part C is replaced with the light transmissive member 103. Since the bottom surface can be disposed at a position close to the electric field enhancement layer 102 and the light irradiated from the light irradiation part B can be irradiated to the back surface of the electric field enhancement layer 102 under the total reflection condition.
  • FIG. 16 is explanatory drawing explaining the outline
  • the target substance detection chip 110 includes an electric field enhancement layer 112 and a light transmissive member 113.
  • a liquid sample storage groove 115 for introducing the liquid sample A is formed on the upper surface.
  • the liquid sample storage groove 115 is formed in a concave shape in cross section, and its bottom surface serves as a support surface 113 a of the electric field enhancement layer 112.
  • the light transmissive member 113 is formed with an upper surface side notch 116 formed on the upper surface and having an upward inclined surface 113b.
  • the upper surface side notch 116 is formed in a substantially V-shaped cross section.
  • the upward inclined surface 113b is a surface that is inclined in a direction away from the support surface 113a as it goes from the upper surface to the bottom surface side with respect to the thickness direction Y of the light transmissive member 113, and is disposed to face the upward inclined surface 113b.
  • the light emitted from the light irradiating part B is incident on the main body 113c in a state of being inclined with respect to the length direction X orthogonal to the thickness direction Y of the light transmissive member 113.
  • the distance W between the light incident position on the upward inclined surface 113b and the light irradiation position on the electric field enhancement layer 112 is preferably 1.0 mm to 50.0 mm as the shortest distance.
  • the light incident on the main body 113c is guided to the back surface of the electric field enhancement layer 112 on the support surface 113a while being reflected as few times as possible on the bottom surface of the main body 113c, preferably only once. Then, the electric field is totally reflected at the position of the back surface and an enhanced electric field is formed in the vicinity of the surface of the electric field enhancing layer 112 (first light incident structure).
  • the light irradiation part B is arranged on the upper surface side of the light transmitting member 113 at a position facing the upward inclined surface 113b.
  • the distance W between the light incident position on the upward inclined surface 113b and the light irradiation position on the electric field enhancement layer 112 is equal to that in the target substance detection chip 101 according to the first embodiment. Since the distance between the light incident position on the upward inclined surface 103b (the side surface of the light transmissive member 103) and the light irradiation position on the electric field enhancement layer 102 is shorter, the attenuation of light traveling in the main body 113c is suppressed. Can do. Other configurations and effects are the same as those of the target substance detection chip 101 and the target substance detection apparatus in the first embodiment, and thus description thereof is omitted.
  • FIGS. 17 to 19 is an explanatory diagram showing an example of the incident angle of light.
  • the target substance detection chip 101 ′ has a structure in which an electric field enhancement layer 102 ′ is disposed on the upper surface of the light transmissive member 103 ′.
  • an electric field enhancement layer 102 ′ is disposed on the upper surface of the light transmissive member 103 ′.
  • light is transmissive from the normal direction, that is, the direction perpendicular to the upward inclined surface 103b ′, with respect to the upward inclined surface 103b ′ configured as the side surface of the light transmissive member 103 ′.
  • the light irradiation direction of the light irradiation part B is set so as to enter the member 103 ′, and the upward inclined surface 103b ′ when viewed as a V-shaped groove angle with the upper surface side of the light-transmitting member 103 ′ open.
  • the angle ⁇ 1 formed with the light irradiation direction of the light irradiation part B is 90 °.
  • the light reflection position on the main body of the light transmissive member 103 ′ is uniquely specified based on the setting of the angle ⁇ .
  • the setting of the electric field enhancement layer in the target substance detection chip and the setting of the optical system in the target substance detection apparatus can be simplified.
  • the angle ⁇ is preferably 50 ° to 80 °.
  • a certain ⁇ 1 is assumed to be less than 90 °.
  • the light refracted by the upward inclined surface 103b ′ is reflected by the bottom surface of the light transmissive member 103 ′ and guided to the upper surface. It is burned.
  • the lower limit depends on the angle ⁇ , but the light irradiation direction of the light irradiation portion B and the length of the light transmissive member 103 ′ on the electric field enhancement layer 102 ′ side. It is preferable that the angle formed with the direction X is 90 ° or more.
  • a certain ⁇ 1 is an angle exceeding 90 °.
  • the light refracted by the upward inclined surface 103b ′ is easily totally reflected by the bottom surface of the light transmissive member 103 ′.
  • ⁇ 1 is larger than 90 °
  • the target substance detection chip 101 ′ is increased in size as a result of the position of the upper surface from which reflected light is guided away from the upward inclined surface 103b ′.
  • ⁇ 1 is an angle exceeding 90 °, although the upper limit depends on the angle ⁇ , the light irradiation direction of the light irradiation part B does not reach the length direction X of the target substance detection chip 101 ′. Is an angle.
  • theta 1 Can also be applied to the upward inclined surface 113b of the light transmissive member 113 in the target substance detection chip 110 according to the second embodiment.
  • theta 1 and angle of greater than 90 ° the theta 1 is too large than 90 °, optical transparency forming the opposite surface an upward inclined surface 113b of the V-shaped upper surface notch 116
  • the constituent part of the member 113 becomes an obstacle to light irradiation, and the angle setting of ⁇ 1 is restricted. Conversely, when ⁇ 1 is 90 ° and less than 90 °, such a restriction is unlikely to occur.
  • the target substance detection chip 120 according to the third embodiment includes an electric field enhancement layer 122 and a light transmissive member 123.
  • the light transmissive member 123 is a plate-like member, and a part of the upper surface is a support surface 123a that can support the electric field enhancement layer 122 from the back surface side, and the body portion receives light from the upper surface to enter the inside.
  • the main body 123c can be guided.
  • a side wall portion 125 is erected around the support surface 123a so as to form a box having the support surface 123a as a bottom, and the liquid sample A is introduced into the box. Is done.
  • the side surface is a downward inclined surface 123b that is inclined in a direction away from the support surface 123a as it goes from the bottom surface to the upper surface side with respect to the thickness direction Y. The light is incident on the upper surface of the light transmissive member 123 at a position facing the side surface in the thickness direction Y.
  • the light irradiated from the light irradiation part B to the upper surface is introduced into the main body part 123c, for example, as shown in the drawing, the light is reflected in the order of the downward inclined surface 123b and the bottom surface, and the electric field enhancement on the support surface 123a is performed. It is totally reflected at the position of the back surface of the layer 122 and an enhanced electric field is formed in the vicinity of the surface of the electric field enhancing layer 122 (second light incident structure).
  • the third embodiment is formed so that the side surface of the light transmissive member 103 faces the bottom surface side. Also in the target substance detection chip 120 according to the above, an enhanced electric field can be obtained in the same manner as the target substance detection chip 101 in the first embodiment.
  • FIG. 21 is explanatory drawing explaining the outline
  • the target substance detection chip 130 includes an electric field enhancement layer 132 and a light transmissive member 133.
  • a liquid sample storage groove 135 for introducing the liquid sample A is formed on the upper surface.
  • the liquid sample storage groove 135 is formed in a substantially V-shaped cross section, and a surface forming one side of the substantially V-shaped cross section serves as a support surface 133a of the electric field enhancement layer 132.
  • the downward inclined surface 133b is inclined so that the side surface is inclined away from the support surface 133a as it goes from the bottom surface to the upper surface side with respect to the thickness direction Y.
  • the light is incident on the upper surface of the light transmissive member 133 at a position facing the side surface in the thickness direction Y.
  • the light irradiation part B light is applied to the upper surface of the light transmissive member 133 from the thickness direction Y, that is, from the direction perpendicular to the upper surface, and the light incident on the main body part 133c is directed downwardly on the inclined surface 133b.
  • the target substance detection chip 130 configured as described above, light incident on the main body portion 133c is not reflected on the upper surface and the bottom surface of the main body portion 133c, but is guided to the back surface of the electric field enhancement layer 132 on the support surface 133a. Since the light is emitted, deterioration of the light due to reflection on the top surface and the bottom surface can be suppressed.
  • Other configurations and effects are the same as those of the target substance detection chip 101 and the target substance detection apparatus in the first embodiment, and thus description thereof is omitted.
  • FIG. 22 is explanatory drawing explaining the outline
  • the target substance detection chip 140 according to the fifth embodiment is a modification of the target substance detection chip 110 according to the second embodiment.
  • the electric field enhancement layer 142, And a light transmitting member 143 having a support surface 143a, an upward inclined surface 143b, a main body 143c, and a liquid sample storage groove 145.
  • the upper surface side notch part 146 is different from the target substance detection chip 110 according to the second embodiment, and the upper surface side notch part 146 is made of the material forming the main body part 143c.
  • a low refractive material 146a having a low refractive index is embedded.
  • the low refraction material 146a is embedded in the upper surface side cutout portion 146, and the entire upper surface of the light transmitting member 143 is in a flat state.
  • the upper surface side notch portion 146 is not contaminated by the liquid sample A entering from the liquid sample storage groove 145 during discharge.
  • the upper surface side notch portion 146 is configured in this way, by utilizing the refraction of light in the upward inclined surface 143b forming the interface between the low refractive material 146a and the main body portion 143c formed of the high refractive material, Similarly to the target substance detection chip 110 according to the second embodiment, the light emitted from the light irradiation unit B can be guided to the back surface of the electric field enhancement layer 142 in a state where the light is reflected only once in the main body 143c. .
  • Other configurations and effects are the same as those of the target substance detection chip 110 and the target substance detection device in the second embodiment, and thus description thereof is omitted.
  • each figure of FIG. 23, 24 is explanatory drawing which shows a modification.
  • the target substance detection chip 140 ′ has a structure in which an electric field enhancement layer 142 ′ is disposed on the upper surface of the light transmissive member 143 ′ and an upper surface side notch 146 ′ is disposed. It is said.
  • the light irradiation part B is on the upper surface side of the light transmitting member 143 ′ with respect to the upward inclined surface 143 b ′ of the upper surface side notch 146 ′.
  • the angle formed between the upward inclined surface 143b ′ and the light irradiation direction of the light irradiation part B (when viewed as a V-shaped groove angle with the upper surface side of the light transmissive member 143 ′ open)
  • the angle ⁇ ) in FIG. 23 is set at a relatively small angle.
  • is small, the light introduced from the upward inclined surface 143b ′ is not totally reflected by the bottom surface of the light transmissive member 143 ′, and a component is transmitted as it is outside the main body 143c ′ of the light transmissive member 143 ′. (See the dotted arrow in FIG.
  • should be equal to or greater than the minimum angle at which the incident light can satisfy the total reflection condition with respect to the back surface.
  • the light incident angle ⁇ is formed to be inclined with respect to the in-plane direction of the bottom surface of the light transmitting member, and the downward inclined surface 147a is formed.
  • the bottom side cutout portion 147 having the bottom surface of the light transmitting member 143 ′, the reflected light is guided to the electric field enhancement layer 142 ′ disposed on the top surface so as to satisfy the total reflection condition. May be.
  • the bottom side cutout 147 can be formed by the same method as the top cutout 146 '.
  • a low-refractive material may be embedded in the bottom-side cutout portion 147 in the same manner as the top-side cutout portion 146 '.
  • FIG. 25 is an explanatory diagram for explaining the outline of the target substance detection chip according to the sixth embodiment.
  • a target substance detection chip 150 according to the sixth embodiment is a modification of the target substance detection chip 120 according to the third embodiment.
  • the target substance detection chip 150 according to the sixth embodiment includes an electric field enhancement layer 152 and a light transmissive member 153.
  • a liquid sample storage groove 155 for introducing the liquid sample A is formed on the upper surface.
  • the liquid sample storage groove 155 is formed in a concave shape in cross section, and its bottom surface serves as a support surface 153 a of the electric field enhancement layer 152.
  • a bottom surface side notch portion 157 formed on the bottom surface and having a downward inclined surface 153b is formed, and the bottom surface side notch portion 157 is formed.
  • a low refractive material 157a having a refractive index lower than that of the material for forming the main body 153c is embedded as needed.
  • the bottom-side cutout portion 157 is formed on the bottom surface of the light transmissive member 153, the liquid sample A enters and exits from the liquid sample storage groove 155 when the liquid sample A is introduced and discharged.
  • the liquid sample A does not contaminate the bottom side cutout 157.
  • the bottom-side cutout portion 157 is configured by embedding the low-refractive material 157a, it is possible to prevent the downward inclined surface 153b from being exposed to the outside and being contaminated by adhesion of dust in the atmosphere.
  • the bottom-side cutout portion 157 also reflects the light emitted from the light irradiation portion B by the downward inclined surface 153b and the bottom surface one by one using the reflection of light on the downward inclined surface 153b, thereby increasing the electric field enhancement layer.
  • the light can be guided to the back surface of 152 (second light incident structure).
  • Other configurations and effects are the same as those of the target substance detection chip 120 and the target substance detection device in the third embodiment, and thus description thereof is omitted.
  • the target substance detection chip of the third invention has a light-transmitting substrate and, if necessary, an electric field enhancement layer and a concavo-convex structure imparting layer.
  • the light transmissive substrate is a member that transmits light.
  • the method for forming the uneven surface is not particularly limited, and examples thereof include known methods such as an injection molding method, a nanoimprint method, and an etching method.
  • “light transmittance” indicates that the visible light transmittance is 0.5% or more.
  • the electric field enhancement layer is a layer in which when one surface is irradiated with light under total reflection conditions, an enhanced electric field is formed on the other surface.
  • the electric field enhancement layer There is no restriction
  • the surface plasmon excitation layer examples include a metal layer containing at least one of gold, silver, platinum, and aluminum.
  • the metal layer surface plasmon resonance is excited on the other surface by the light irradiated on the one surface, and the enhanced electric field is obtained on the other surface.
  • the thickness of the metal layer an optimum value is determined depending on the constituent material and the wavelength of light to be irradiated. Generally, when the surface plasmon resonance is excited in the near ultraviolet to near infrared region, the thickness of the metal layer is several nm to several tens of nm.
  • the method for forming the metal layer is not particularly limited and may be a known method such as a vapor deposition method, a sputtering method, a CVD method, a PVD method, or a spin coating method.
  • a material or a glass material if the metal layer is formed directly on the light-transmitting member, the adhesiveness may be lowered and easily peeled off. Therefore, from the viewpoint of improving adhesion, it is preferable to form an adhesive layer using nickel or chromium as a forming material on the surface of the light-transmitting substrate and to form the metal layer on the adhesive layer.
  • the target substance and the fluorescent substance are obtained from excitation light when the target substance and the labeling substance are close to the metal layer.
  • a phenomenon called quenching occurs in which energy is transferred to the metal layer and luminous efficiency is lowered.
  • the coating layer is formed on the surface of the metal layer for the purpose of separating the target substance and the labeling substance from the surface of the metal layer, the quenching is suppressed and the decrease in luminous efficiency is suppressed.
  • the coating layer is not particularly limited, and can be formed of a transparent layer having a thickness of several nm to several tens of nm formed of a glass material such as silica glass, an organic polymer material, or the like.
  • the waveguide mode excitation layer There is no restriction
  • the laminated body of the thin film layer formed with a metal material or a semiconductor material, and the dielectric material layer formed with a translucent dielectric material is mentioned.
  • the guided mode excitation layer the guided mode is excited in the dielectric layer by the light applied to the one surface, and the enhanced electric field is obtained on the other surface.
  • the thin film layer constitutes the one surface side layer, and the dielectric layer constitutes the other surface side.
  • the thickness of the thin film layer is the same as that of the surface plasmon excitation layer, and an optimum value is determined depending on the constituent material and the wavelength of light to be irradiated, and this value can be calculated from calculation using the Fresnel equation. It is known. In general, when using light in a wavelength band from the near ultraviolet to the near infrared region, the thickness of the thin film layer is several nm to several hundred nm.
  • the light transmissive dielectric material is not particularly limited, and examples thereof include resin materials such as silicon oxide, silicon nitride, and acrylic resin, metal oxides such as titanium oxide, and metal nitrides such as aluminum nitride. Is preferable, and silicon oxide is preferable because of its high chemical stability.
  • resin materials such as silicon oxide, silicon nitride, and acrylic resin
  • metal oxides such as titanium oxide, and metal nitrides such as aluminum nitride. Is preferable, and silicon oxide is preferable because of its high chemical stability.
  • silicon oxide is preferable because of its high chemical stability.
  • it can select suitably from a well-known formation method according to material.
  • the concavo-convex structure imparting layer is a layer having the light transmittance and having one surface as a concavo-convex surface.
  • the material for forming the concavo-convex structure imparting layer is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose.
  • acrylic resin, polyester resin, polyolefin resin, general-purpose plastic, engineering plastic, super engineering plastic, synthetic high Known light-transmitting materials such as molecular resins, natural resins, ultraviolet curable resins, thermosetting resins, and thermoplastic resins can be used.
  • the method for forming the uneven surface is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose.
  • the etching method electron beam drawing method, laser drawing method, laser interference method, cutting method, self-organization
  • Known forming methods such as chemical conversion methods can be mentioned.
  • the target substance detection chip is composed of the light transmissive substrate itself, the concavo-convex structure imparting layer is laminated on the light transmissive substrate, or the electric field enhancement layer is formed on the light transmissive substrate.
  • the electric field enhancing layer and the concavo-convex structure imparting layer are laminated on the light transmissive substrate.
  • an evanescent field is generated when light is irradiated from the back surface side under the total reflection condition with the surface opposite to the surface on which the uneven structure is formed as the back surface. Can exist on the surface.
  • the enhanced electric field can be present on the surface when the light is irradiated from the back surface side under total reflection conditions.
  • the example of a specific layer structure is later mentioned with drawing.
  • the target substance detection chip has a concavo-convex structure configured by periodically arranging a plurality of convex portions for the purpose of suppressing adsorption of a conjugate formed by binding at least magnetic particles to the target substance. It is formed so as to have on the surface.
  • the concavo-convex structure is formed on the concavo-convex surface formed on either the light-transmitting substrate or the concavo-convex structure imparting layer.
  • the concavo-convex structure is not particularly limited.
  • the whole or part of the concavo-convex structure has a height of 1 ⁇ m to 1.55 ⁇ m.
  • the pitch interval between adjacent convex portions is either a small interval of 0.45 ⁇ m to 0.55 ⁇ m or a large interval of 1.45 ⁇ m to 1.55 ⁇ m.
  • the specific example of the said uneven structure is later mentioned with drawing.
  • the target substance detection chip 401 includes a light transmissive substrate 402 and a concavo-convex structure imparting layer 403.
  • FIG. 26 is an explanatory diagram showing a schematic configuration of the first embodiment.
  • the light transmissive substrate 402 has a smooth surface, and an uneven structure imparting layer 403 is laminated on the smooth surface.
  • the light-transmitting substrate 402 is formed with a side wall portion so as to form a box body having the smooth surface as a bottom, and stores a liquid sample for verifying the presence of a target substance using the box body as a liquid storage section. You may be comprised so that it may make.
  • smooth means optically smooth, and means that the surface accuracy of the smoothed surface is ⁇ / 2 or less.
  • the concavo-convex structure imparting layer 403 is laminated on the light-transmitting substrate 402, and the surface opposite to the surface on the light-transmitting substrate 402 side is an uneven surface.
  • corrugated structure provision layer 403 It fixes on the light transmissive board
  • the target substance detection chip 401 In the target substance detection chip 401, an uneven structure is formed on the surface by the uneven surface of the uneven structure imparting layer 403. Further, the target substance detection chip 401 has a structure in which a concavo-convex structure imparting layer 403 is laminated on a light-transmitting substrate 402, and a concavo-convex structure from the back side with the surface opposite to the surface on which the concavo-convex structure is formed as the back surface.
  • the evanescent field can be present near the surface when the application layer 403 is irradiated with the light under total reflection conditions.
  • the concavo-convex structure has a role of suppressing the binding in the liquid sample introduced onto the surface from adsorbing to the surface, and is configured by a plurality of convex portions being periodically arranged.
  • a state in which the adsorption of the combined body is suppressed by the uneven structure will be described with reference to FIGS.
  • FIGS. 27A and 27B are explanatory views for explaining a state in which adsorption of the combined body is suppressed by the uneven structure.
  • the height H of the convex portion is set to a length of 1R to 2 ⁇ m with respect to the particle diameter R of the bonded body M, and the width W of the convex portion is set with respect to the particle diameter R of the bonded body M. , 9 / 20R to 3 / 2R.
  • the bonded body M is adsorbed on the surface of the target substance detection chip 401 (the concavo-convex surface of the concavo-convex structure imparting layer 403) by reducing the contact area and reducing the work of adhesion. Can be suppressed.
  • the conjugate M can be preferably used when it can be regarded as a sphere having a diameter of about 1 ⁇ m, for example.
  • a protein having a size of several nm is used as the target substance
  • a fluorescent dye having a size of several nm is used as the labeling substance
  • magnetic particles having a particle diameter of 1 ⁇ m are used as the magnetic fine particles.
  • the target substance and the target substance are one-hundredth or smaller in size of the magnetic fine particles, so that the conjugate M can be regarded as a sphere having a particle diameter of 1 ⁇ m, and the uneven structure is formed.
  • the pitch interval P 1 is preferably 0.45 ⁇ m to 0.55 ⁇ m
  • the height H is preferably 1 ⁇ m to 1.55 ⁇ m
  • the width W is 0.45 ⁇ m to 1.5 ⁇ m is preferred.
  • the pitch P 1 was smaller interval than the particle size R of the coupling body M the pitch P 1, as shown in FIG. 27 (b), the particles of the conjugate M a pitch P 2
  • the length R may be set to a length of 29 / 20R to 31 / 20R, that is, larger than the particle diameter R of the bonded body M.
  • the pitch P 2 on the assumption that the detection conjugate having a diameter of about 1 [mu] m, 1.45 .mu.m ⁇ 1.55 .mu.m are preferred. With such a concavo-convex structure, there is a possibility that one bonded body adheres and becomes stable.
  • the target substance detection chip 401 can be reduced. Adsorption of the bonded body M to the surface (the uneven surface of the uneven structure imparting layer 403 ′).
  • the height H and the width W are the same as those described with reference to FIG.
  • the shape of the convex portion has been described as a quadrangular prism shape in cross section, but the shape of the convex portion may be any shape such as a trapezoidal shape, a semicircular shape, a semielliptical shape, and the like. can be in the form, the pitch spacing P 1 at these shapes, P 2, for the height H and width W, or length, respectively become maximum, it is possible to apply the settings.
  • the target substance detection chip 401 according to the first embodiment adsorption of the combined body can be suppressed by the uneven structure.
  • the target using the magnetic particles is used. It can be used for substance detection, and the applied target substance detection apparatus can be manufactured in a small size and at low cost.
  • the target substance detection chip 401 has a structure in which the concavo-convex structure imparting layer 403 is laminated on the light transmissive substrate 402. By forming an uneven surface similar to the uneven surface, the target substance detection chip can be constituted by the light-transmitting substrate itself.
  • the target substance detection chip 410 includes a light-transmitting substrate 412, a concavo-convex structure imparting layer 413, and an electric field enhancement layer 414.
  • FIG. 28 is an explanatory diagram showing a schematic configuration of the second embodiment.
  • the light-transmitting substrate 412 has a smooth surface, and an electric field enhancement layer 414 is laminated on the smooth surface.
  • the light-transmitting substrate 412 is formed with a side wall so as to form a box having the smooth surface as a bottom, and a liquid sample for verifying the presence of a target substance using the box as a liquid reservoir 415. Configured to be stored.
  • the electric field enhancement layer 414 is a layer in which an enhanced electric field is formed on the other surface when light is irradiated from one surface under total reflection conditions, and is laminated on the smooth surface of the light-transmitting substrate 412. It is a smooth layer.
  • the electric field enhancement layer 414 is configured according to a known surface plasmon excitation layer and waveguide mode excitation layer.
  • the concavo-convex structure imparting layer 413 is laminated on the electric field enhancement layer 414 and has a surface opposite to the surface on the electric field enhancement layer 414 side as a concavo-convex surface.
  • the concavo-convex structure imparting layer 413 is not particularly limited, but is fixed on the electric field enhancing layer 414 by adhesion, adhesion, fusion, bonding, or the like.
  • the concavo-convex structure imparting layer 413 is configured such that the enhancement electric field is the surface in order to allow the enhancement electric field to be present in the vicinity of the surface of the target substance detection chip 410. It needs to be thin enough to reach Therefore, in this case, the thickness of the thinnest part of the uneven structure imparting layer 413, that is, the part where the convex part is not formed, is preferably 200 nm or less.
  • a method of applying a resist on the electric field enhancing layer 414 and developing the resist after exposure to impart a concavo-convex structure is preferable.
  • the concavo-convex structure imparting layer 413 is integrated with the dielectric layer in the electric field enhancement layer 414 to form a waveguide layer.
  • the thickness of 413 is not particularly limited, and the enhanced electric field can be present near the surface of the target substance detection chip 410.
  • the target substance detection chip 410 In the target substance detection chip 410, an uneven structure is formed on the surface by the uneven surface of the uneven layer providing layer 413 constituting the outermost layer. Further, the target substance detection chip 410 has a structure in which an electric field enhancement layer 414 and a concavo-convex structure imparting layer 413 are laminated in this order on a light-transmitting substrate 412, and a surface opposite to the surface on which the concavo-convex structure is formed. When the light is irradiated from the back side to the one surface of the electric field enhancing layer under the total reflection condition from the back side, the enhanced electric field can be present in the vicinity of the surface.
  • the uneven structure imparting layer 413 is integrated with the dielectric layer in the electric field enhancement layer 414 to form a waveguide layer.
  • the surface on which the light is totally reflected is the surface of the concavo-convex structure imparting layer 413.
  • the target substance detection chip 410 according to the second embodiment adsorption of the combined body can be suppressed by the uneven structure.
  • the target using the magnetic particles is used. It can be used for fluorescence observation of a substance, and an applicable target substance detection apparatus can be manufactured in a small size and at a low cost. Since the other items are the same as those of the target substance detection chip 401, redundant description is omitted.
  • the target substance detection chip 420 includes a light-transmitting substrate 422, a concavo-convex structure imparting layer 423, and an electric field enhancement layer 424.
  • the light-transmitting substrate 422 includes a liquid as an arbitrary configuration.
  • a reservoir 425 is formed.
  • FIG. 29 is an explanatory diagram showing a schematic configuration of the third embodiment.
  • the uneven structure imparting layer 423 is formed on the light-transmitting substrate 422, and the electric field enhancement layer 424 is formed on the uneven structure imparting layer 423. That is, in the target substance detection chip 420, a light-transmitting substrate 422 having a smooth surface and a surface opposite to the surface on the light-transmitting substrate 422 side are stacked on the smooth surface of the light-transmitting substrate 422.
  • the concavo-convex structure imparting layer 423 that is the concavo-convex surface, and the concavo-convex pattern of the first concavo-convex surface is laminated on the first concavo-convex surface of the concavo-convex structure imparting layer 423 and the surface opposite the surface on the concavo-convex structure imparting layer 423 side
  • the electric field enhancement layer 424 which is the second uneven surface having a shape with the transferred surface, and an uneven structure is formed on the second uneven surface.
  • corrugated structure provision layer 423 It fixes on the light-transmitting board
  • the first uneven surface in the uneven structure providing layer 423 is formed in the same manner as the uneven surface in the uneven structure providing layer 403 (and 403 ′).
  • the electric field enhancement layer 424 is formed with a uniform thickness on the first uneven surface of the uneven structure imparting layer 423, the second uneven surface having a shape in which the uneven pattern of the first uneven surface is transferred to the electric field enhancement layer 424.
  • An uneven structure can be formed on the surface by the second uneven surface of the electric field enhancement layer 424 constituting the outermost layer.
  • the target substance detection chip 410 since the electric field enhancement layer 424 is the outermost layer, the target substance detection chip 410 is formed on the surface from the electric field enhancement layer 414 via the concavo-convex structure imparting layer 413.
  • the enhanced electric field can be present in a wider range on the surface than the enhanced electric field, and the optical signal of the target substance or the like can be easily observed in the enhanced electric field. That is, the range covered by the electric field is up to a range of about 400 nm to 1,200 nm in both of the electric field enhancement layer 414 and the electric field enhancement layer 424.
  • the detection range of the target substance by the enhanced electric field is set wider than the target substance detection chip 410. Can do. Since the other items are the same as those of the target substance detection chip 410, a duplicate description is omitted.
  • the target substance detection chip 430 includes a light transmissive substrate 432 and an electric field enhancement layer 434, and a liquid reservoir 435 is formed in the light transmissive substrate 432.
  • FIG. 30 is an explanatory diagram showing a schematic configuration of the fourth embodiment.
  • the electric field enhancement layer 434 is the outermost layer similarly to the target substance detection chip 420, but unlike the target substance detection chip 420, the electric field enhancement layer 434 is laminated on the light transmissive substrate 432. Composed. That is, in the target substance detection chip 430, a first uneven surface similar to the uneven surface in the uneven structure imparting layer 403 (and 403 ′) is formed on the light-transmitting substrate 432 itself, and the first uneven surface is uniformly formed on the first uneven surface.
  • the electric field enhancement layer 434 By forming the electric field enhancement layer 434 with a sufficient thickness, the electric field enhancement layer 434 that forms the outermost layer is formed on the electric field enhancement layer 434 by forming the second irregular surface having a shape in which the irregular pattern of the first irregular surface is transferred. An uneven structure is formed on the surface by the second uneven surface.
  • the light transmissive substrate 432 having the first uneven surface can be formed by the same method as the formation method of the uneven structure imparting layer 403 (and 403 ′).
  • the enhanced electric field can exist in a wide range on the surface, and it is easy to observe an optical signal of the target substance or the like in the enhanced electric field. Since the application layer is not disposed, the number of components can be reduced and the manufacturing can be performed at a lower cost.
  • FIGS. 31A and 31B In the uneven structure forming example 450, a plurality of convex portions 451 are formed on the smooth portion 452.
  • FIG. 31A is a perspective view showing an example of forming the uneven structure
  • FIG. 31B is a top view showing an example of forming the uneven structure.
  • the plurality of convex portions 451 are formed in two or more types of shapes. That is, in the concavo-convex structure formation example, the convex portion 451 is formed in a plurality of shapes having different lengths in the longitudinal direction (“Y” direction in the drawing). Each of the plurality of convex portions 451 has either a two-fold rotationally symmetric shape or a line-symmetrical shape as shown in an enlarged example in FIGS. 32 (a) and 32 (b).
  • FIG. 32A is an enlarged top view showing one convex portion
  • FIG. 32B is a view in which each side surface in the longitudinal direction and the lateral direction is added in addition to the top surface.
  • the plurality of convex portions 451 are arranged in the center with the longest length in the longitudinal direction, and when viewed as a symmetry axis, the lengths of adjacent ones in the short direction (the “X” direction in the figure) It has a rhombic unit periodic structure in a top view, which is arranged three by three in such a manner that the length in the direction is shortened in the order of distance from the center. Further, the plurality of convex portions 451 are arranged so that the one with the shortest length in the longitudinal direction at the end portion in the longitudinal direction of the unit periodic structure is shared with the other unit periodic structures adjacent in the lateral direction.
  • one unit periodic structure having the longest length in the longitudinal direction is opposed to the one having the shortest length in the longitudinal direction in other unit periodic structures adjacent in the longitudinal direction.
  • the whole has a periodic structure in which a plurality of the unit periodic structures are periodically arranged.
  • each of the unit periodic structures has a structure that is very similar to a scale piece of a natural fish, and the whole has a scaly shape. Adsorption of foreign substances including the conjugate can be suppressed on the surface on which 451 is formed.
  • the unit periodic structure has a rhombus shape, but may have an isosceles triangle shape or a parallelogram shape.
  • the uneven structure of the uneven structure formation example 450 is formed on the uneven surface and the first uneven surface serving as a base of the second uneven surface.
  • a shape may be applied.
  • the length in the short direction in the concavo-convex structure formation example 450 corresponds to the “width W” described with reference to FIGS.
  • the matters described in JP-A-2015-160342 can be applied as a method for forming the uneven structure formation example 450.
  • a target substance detection apparatus includes the target substance detection chip according to the third aspect of the present invention, a light irradiation unit, and a magnetic field application unit, and has a light detection unit as necessary.
  • the target substance detection device the target substance is detected using the magnetic particles that bind to the target substance.
  • a labeling substance for labeling the target substance is used.
  • the labeling substance is not particularly limited, and examples thereof include fluorescent labeling substances and light scattering substances that specifically adsorb or bind to the target substance to label the target substance.
  • fluorescent labeling substance for example, known fluorescent substances such as fluorescent dyes, quantum dots, and fluorescent dyes can be used.
  • light-scattering substance well-known light-scattering substances, such as a nanoparticle, for example, a polystyrene bead and a gold nanoparticle, can be used, for example.
  • the binding method between the target substance and the labeling substance is not particularly limited, and known binding methods such as physical adsorption, antigen-antibody reaction, DNA hybridization, biotin-avidin bond, chelate bond, amino bond, etc. may be used. Can be applied.
  • the light irradiating unit can irradiate light from the back surface side under the total reflection condition with the surface opposite to the surface on which the uneven structure of the target substance detection chip is formed as the back surface.
  • a light source of the said light irradiation part According to the objective, it can select suitably, A well-known lamp
  • an evanescent field or an enhanced electric field is formed on the surface by irradiating light from the back surface side of the target substance detection chip under a total reflection condition, and the evanescent field or the enhanced electric field is used as excitation light.
  • the role required for the light irradiation unit is only to irradiate light from the back side of the target substance detection chip under the total reflection condition. If it plays such a role, it is limited to the selection of the light source. There is no.
  • a radiation light source such as a lamp or LED
  • the back surface side of the target substance detection chip is irradiated out of the emitted light. It is necessary for light in all directions to satisfy the total reflection condition. For this reason, when a radiation light source is used, a guide unit such as a collimator lens that restricts the irradiation direction of irradiation light to a specific direction may be used.
  • fluorescence When using fluorescence as an optical signal, use a monochromatic light source with a wavelength that can excite fluorescence, or transmit light from a light source with a wide wavelength band such as a lamp or LED through an optical filter such as a bandpass filter. It is preferable to irradiate from the back surface side of the target substance detection chip after taking out only a wavelength that can be monochromatic and excite fluorescence.
  • the target substance detection chip when the front surface and the back surface of the target substance detection chip are parallel plates, the light irradiated from the back surface side is not totally reflected when a liquid is present on the front surface. Therefore, in such a case, when a diffraction grating is formed on the back surface portion of the target substance detection chip, light is diffracted by the diffraction grating when the diffraction grating is irradiated with light at a specific angle. So that the light introduced into the target substance detection chip is irradiated on the surface under total reflection conditions to form the evanescent field or the enhanced electric field on the surface.
  • the target substance detection chip may be configured. Or you may form so that the said surface and the said back surface may not become parallel.
  • the prism can be used by being optically bonded to the back surface of the target substance detection chip with a refractive index adjusting oil or an optical adhesive.
  • a material in which the light-transmitting substrate and the prism are integrally formed can be used.
  • the magnetic field application unit is formed of at least one of a first magnetic field application unit and a second magnetic field application unit.
  • the first magnetic field application unit applies a first magnetic field for moving the magnetic particles contained in the liquid sample introduced onto the surface of the target substance detection chip in a direction parallel to the surface or away from the surface.
  • a portion that can be applied and acts to keep the magnetic particles away from the surface of the target substance detection chip, or to exert a magnetic force in a direction to move parallel to the surface on the surface of the target substance detection chip It is possible to apply a magnetic field for translation.
  • the target substance and the labeling substance constituting the conjugate together with the magnetic particles generate an optical signal only in the evanescent field or the enhanced electric field. Further, the electric field strengths of the evanescent field and the enhanced electric field attenuate as the distance from the surface of the target substance detection chip increases.
  • the optical signal is attenuated, and further, the conjugate is more than a distance to the extent that the electric field strength of the evanescent field or the enhanced electric field can be regarded as zero. If it is moved away from the surface, the optical signal of the combined body will disappear.
  • the optical signal emitted from the combined body that has been changed on the surface by the application of the first magnetic field is the fluctuation of the optical signal. It becomes possible to measure over time.
  • the target substance detection apparatus detects the target substance by detecting such attenuation (including extinction) or fluctuation (which may be accompanied by attenuation and extinction) of the optical signal.
  • the first magnetic field application unit is not particularly limited as long as the combined body can be moved by application of a magnetic field, and can be appropriately selected according to the purpose. Any one or more can be used.
  • the second magnetic field application unit is arranged on the back side of the target substance detection chip and can apply a second magnetic field that attracts the magnetic particles in the liquid sample introduced onto the surface onto the surface. It is a part to be said. There is no restriction
  • the second magnetic field application unit is a unit that can move the magnetic particles in a direction having a vector component in a direction parallel to the in-plane direction of the surface in a state where the second magnetic field is applied.
  • the electromagnet or the permanent magnet is held on a slide member, and the light from the light irradiation unit on the back surface side of the target substance detection chip is irradiated.
  • An initial state in which the electromagnet or the permanent magnet is positioned in the vicinity of a region to be detected (detection region) and a direction having a vector component in a direction parallel to an in-plane direction of the surface of the target substance detection chip It can comprise by carrying out movement control between the states which moved the said permanent magnet.
  • the electromagnet is continuously or intermittently excited during the movement control. Further, the intensity of excitation may be changed during the movement control.
  • the movement control is performed by holding the electromagnets or the permanent magnets on the slide member. The same effect can be obtained.
  • the second magnetic field application unit is not particularly limited, but has a through-hole formed therein, an incomplete ring shape such as a U shape, or a plurality of members arranged in a ring shape or an incomplete ring shape. It may be a configured. If the second magnetic field application unit is a unit that can move the magnetic particles in a direction having a vector component in a direction parallel to the in-plane direction of the surface in a state where the second magnetic field is applied, noise The signal can be eliminated. That is, the target substance combined with the magnetic particles moves following the movement of the second magnetic field application unit, whereas noise generated by scratches on the target substance detection chip surface causes the second magnetic field application. Since it does not move following the movement of the part, the noise signal can be eliminated by performing detection based on the moving optical signal.
  • the light detection unit is arranged on the surface side of the target substance detection chip, and can detect an optical signal emitted from the combined body.
  • the information of the optical signal can be acquired as the two-dimensional image information, the position information of the optical signal in the two-dimensional image information appearing as the light spot, the size information observed on the two dimensions, the optical signal intensity at the light spot
  • an imaging device may be selected as the light detection unit.
  • Image sensors such as a well-known CCD image sensor and a CMOS image sensor, can be used.
  • the target substance detection method of the third invention includes at least a light irradiation step and a conjugate transfer step.
  • the light irradiation step is a step of irradiating light from the back surface side under total reflection conditions with the surface opposite to the surface on which the uneven structure of the target substance detection chip of the third invention is formed as the back surface.
  • the said light irradiation process can be implemented by the said light irradiation part in the said target substance detection apparatus of 3rd invention.
  • a combined body of a target substance and magnetic particles contained in a liquid sample introduced on the surface of the target substance detection chip is moved in a direction parallel to the surface or from the surface by applying a first magnetic field.
  • the magnetic field application unit is further moved in a direction having a vector component parallel to the in-plane direction of the surface in a state where the second magnetic field is applied, It is preferable that this is a step of moving the combined body in accordance with the movement of.
  • the combined body moving step can be performed by the magnetic field application unit in the target substance detection device of the third invention.
  • the target substance detection apparatus 500 has an optical system configured according to the configuration of a known total reflection illumination fluorescence microscope, and is configured to emit light including a target substance detection chip 401, a light source 510, and an optical prism 520. Unit, a first magnetic field application unit 530, and a light detection unit 540 (imaging device). Note that the imaging device is composed of a known CCD image sensor or the like, for example, and can acquire a two-dimensional image.
  • FIG. 33 is an explanatory diagram showing a schematic configuration of the fifth embodiment.
  • the target substance detection chip 401 is irradiated with the light L from the back surface side, and the evanescent field can be present on the surface (the surface on the side where the uneven structure imparting layer 403 is formed).
  • the target substance detection chip 401 holds the liquid sample A introduced on the surface with a cover glass G.
  • the light L emitted from the light source 510 enters the light transmissive substrate 402 through the optical prism 520, passes through the light transmissive substrate 402, and is totally reflected on the surface of the concavo-convex structure imparting layer 403. Irradiation is possible under the conditions.
  • the first magnetic field application unit 530 applies a detection region on the surface of the target substance detection chip 401 (a region where the evanescent field is formed on the surface upon receiving the light L from the light irradiation unit). In the direction away from the surface of the target substance detection chip 401, the conjugate in the liquid sample A introduced on the surface is drawn toward the first magnetic field application unit 530 by applying a magnetic field. Configured to move.
  • the 1st magnetic field application part 530 in this example is comprised with the electromagnet.
  • the liquid sample A is introduced onto the surface of the target substance detection chip 401.
  • the conjugate floating in the liquid of the liquid sample A is gravity settled on the surface of the target substance detection chip 401, it is totally reflected on the surface of the concavo-convex structure imparting layer 403 via the optical prism 520.
  • the light L is emitted from the light source 510, and the light detection unit 540 acquires the optical signal S based on the evanescent field formed on the surface of the target substance detection chip 401.
  • the electromagnet as the first magnetic field application unit 530 is excited to draw the combined body in the liquid sample A toward the first magnetic field application unit 530 by applying a magnetic field, and from the surface of the target substance detection chip 401. Move it away.
  • the uneven structure formed on the surface of the target substance detection chip 401 suppresses adsorption between the combined body and the surface of the target substance detection chip 401, and applies the magnetic field.
  • the combined body can be easily moved back and forth.
  • an optical signal on the surface of the target substance detection chip 401 after the combined body is moved while maintaining the observation field is acquired by the light detection unit 540.
  • FIGS. 34 (a) is a diagram showing a state on the surface before application of the magnetic field
  • FIG. 34 (b) is a diagram showing a state on the surface after application of the magnetic field.
  • the combined body can be easily moved by the uneven structure of the target substance detection chip 401, and the target substance constituting the combined body is detected with high accuracy. be able to.
  • the contaminants are adsorbed on the surface of the target substance detection chip 401, it is possible to perform the detection while ignoring the presence thereof, and thus it is not always necessary to clean the surface for each detection. Efficient detection can be performed.
  • the target substance detection apparatus 600 includes an optical system according to a known surface plasmon resonance sensor and waveguide mode sensor, and includes a target substance detection chip 410, a light source 610, and an optical prism 620.
  • a light irradiation unit, a first magnetic field application unit 630, and a light detection unit 640 (the imaging device) are configured.
  • FIG. 35 is an explanatory diagram showing a schematic configuration of the sixth embodiment.
  • the target substance detection chip 410 is irradiated with the light L from the back surface side, and the enhanced electric field can be present on the surface (the surface on the side where the uneven structure imparting layer 413 is formed).
  • the liquid sample A is introduced into the liquid storage unit 415.
  • the light irradiating unit can irradiate the electric field enhancement layer 414 with the light L emitted from the light source 610 to the electric field enhancement layer 414 through the optical prism 620 and the light transmissive substrate 412.
  • the first magnetic field application unit 630 applies to the detection region on the surface of the target substance detection chip 410 (the region where the enhanced electric field is formed on the surface upon receiving the light L from the light irradiation unit).
  • the 1st magnetic field application part 630 in this example is comprised with the electromagnet.
  • the liquid sample A is introduced into the liquid storage unit 415.
  • the conjugate floating in the liquid of the liquid sample A is gravity settled on the surface of the target substance detection chip 410
  • the light L emitted from the light source 610 is applied to the optical prism 620 and the light transmissive substrate 412.
  • one surface of the electric field enhancement layer 414 is irradiated under total reflection conditions, and the optical signal S based on the enhanced electric field formed on the surface of the target substance detection chip 410 is acquired by the light detection unit 640.
  • the electromagnet as the first magnetic field application unit 630 is excited to draw the combined body in the liquid sample A in the liquid storage unit 415 toward the first magnetic field application unit by applying a magnetic field, and the target substance detection chip 410.
  • adsorption of the combined body and the surface of the target substance detection chip 410 is suppressed by the uneven structure formed on the surface of the target substance detection chip 410, and the application of the magnetic field is suppressed.
  • the combined body can be easily moved back and forth.
  • the light detection unit 640 acquires an optical signal on the surface of the target substance detection chip 410 after the combined body is moved while maintaining the observation visual field.
  • optical signals before and after application of the magnetic field are obtained as shown in FIGS.
  • the optical signals d and f based on the detection are clearly distinguished from noise signals e such as scratches on the surface of the target substance detection chip 410, adsorbed on the surface or impurities existing on the surface, and fluctuations in the light source output.
  • the FIG. 36A is a diagram showing a state on the surface before application of the magnetic field
  • FIG. 36B is a diagram showing a state on the surface after application of the magnetic field. As shown in FIGS.
  • the background of the optical signal is a dark field due to the attenuation of the enhanced electric field
  • the target substance detection apparatus 600 determines the target substance based on the optical signal at the light spot.
  • the appearance of an optical signal based on movement from outside the observation field of view can also be a detection target.
  • the target substance detection device 600 the combined body can be easily moved by the uneven structure of the target substance detection chip 410, and the target substance constituting the combined body can be detected with high accuracy.
  • even when the contaminants are adsorbed on the surface of the target substance detection chip 410 it is possible to perform detection while ignoring the presence of the contaminant, so it is necessary to clean the liquid reservoir 415 for each detection. Therefore, efficient detection can be performed.
  • the target substance detection apparatus 700 has an optical system according to a known surface plasmon resonance sensor and waveguide mode sensor, and includes a target substance detection chip 410, a light source 710, A light irradiating unit including the optical prism 720, a second magnetic field applying unit 730, and a light detecting unit 740 (the imaging device) are included.
  • FIG. 37 is an explanatory diagram showing a schematic configuration of the seventh embodiment.
  • the light irradiation unit and the light detection unit 740 can be configured in the same manner as the light irradiation unit and the light detection unit 640 in the target material detection device 600 according to the sixth embodiment, and the target material detection according to the seventh embodiment.
  • the apparatus 700 is different from the target substance detection apparatus 600 according to the seventh embodiment in that a second magnetic field application unit 730 is provided instead of the first magnetic field application unit 630.
  • a second magnetic field application unit 730 is provided instead of the first magnetic field application unit 630.
  • the second magnetic field application unit 730 is disposed on the back side of the target substance detection chip 410 and applies the magnetic field to the combination in the liquid sample A introduced into the liquid storage unit 415. It can be drawn on the surface and can move in a direction having a vector component in a direction parallel to the in-plane direction of the surface of the target substance detection chip 410 with the magnetic field applied.
  • the second magnetic field applying unit 730 is formed out with sliding member for sliding said permanent magnet and the permanent magnet in the direction of the X 1 or X 2 (not shown). In the movement of the combined body, the combined body in the liquid sample A of the target substance detection chip 410 is once drawn on the surface of the target substance detection chip 410 by applying the magnetic field from the second magnetic field application unit 730.
  • the second magnetic field application unit 730 is moved in a direction (X 1 or X 2 direction) having a vector component parallel to the in-plane direction of the surface of the target substance detection chip 410 with the magnetic field applied. This is performed by following the movement of the second magnetic field application unit 730.
  • the conjugate in the liquid sample A floats in the liquid of the liquid sample A in order to draw the conjugate in the liquid sample A onto the surface of the target substance detection chip 410 by applying the magnetic field. There is no need to wait for gravity to settle on the surface of the target substance detection chip 410.
  • FIGS. 38A and 38B optical signals before and after the movement of the second magnetic field application unit are obtained as shown in FIGS. 38A and 38B, and the optical signal based on the target substance is obtained. h can be detected by clearly distinguishing it from noise signals i such as scratches on the surface of the target substance detection chip 410, adsorption on the surface or impurities existing on the surface, and fluctuations in the light source output.
  • FIG. 38A is a diagram showing a state on the surface before the movement of the second magnetic field application unit
  • FIG. 38B is a diagram showing a state on the surface after the movement of the second magnetic field application unit.
  • the fourth invention relates to a modification of the first to third inventions.
  • a target substance detection chip is a support surface disposed on a surface on an upper surface side with respect to a bottom surface, and an upward direction that is inclined in a direction away from the support surface from the upper surface toward the bottom surface side with respect to a thickness direction. Any one of the inclined surface and the downward inclined surface inclined in a direction away from the support surface as it goes from the bottom surface to the upper surface side with respect to the inclined surface and the thickness direction, and light can be received and guided to the inside.
  • a generally plate-like light transmissive member having a main body portion, and a concavo-convex structure configured by periodically arranging a plurality of convex portions on the support surface, wherein the light transmissive member is on the upper surface side.
  • the first light incident structure that causes the light, which has been irradiated from the upper surface and passed through the upward inclined surface, to enter the support surface through the main body portion under the total reflection condition, and is reflected from the upper surface side that is irradiated from the upper surface side.
  • the light to the book Having a light incident structure of any one of the second light incident structures that are incident on the support surface through a section under total reflection conditions, and having a detection surface in a part of the light transmissive member,
  • the concavo-convex structure is provided on part or all of the detection surface.
  • the target substance detection chip is not particularly limited.
  • a target substance detection device is arranged on the upper surface side of the target substance detection chip of the fourth invention and the light transmissive member, and is subjected to total reflection conditions on the support surface via the light incident structure.
  • the light transmissive member and the light incident structure in the fourth invention can be configured in the same manner as the matters described for the light transmissive member and the light incident structure in the first invention and the second invention.
  • the said uneven structure in 4th invention can be comprised similarly to the matter demonstrated about the said uneven structure in 3rd invention.
  • the electric field enhancement layer in the fourth invention can be configured in the same manner as the matters described for the electric field enhancement layer in the second invention and the third invention.
  • the said light irradiation part and the said magnetic field application part in 4th invention can be comprised similarly to the matter demonstrated about the said light irradiation part and the said magnetic field application part in 1st invention and 2nd invention.
  • the fourth invention can be configured by appropriately adopting the matters described for the first to third inventions, such as the light detection section.
  • the detection surface of the detection chip 60 shown in FIG. 12 is formed according to the matters described in the seventh embodiment (see FIG. 12) in the first invention and the matters described in the concavo-convex structure in the third invention.
  • 62a is used as the support surface, and the uneven structure according to the third aspect of the present invention is applied to the support surface.
  • the concavo-convex structure may or may not have the electric field enhancement layer as in the examples shown in FIGS. 26 and 28 to 30, and in this case, the entire support surface is provided on the support surface.
  • the electric field enhancement layer is disposed in such a manner that an enhanced electric field is formed on a surface opposite to the surface on the support surface side when light is irradiated under reflection conditions. Specifically, as shown in FIG.
  • FIG. 39 is an explanatory view showing an embodiment of the fourth invention.
  • the reference numeral 403 (uneven structure) uses the reference numeral used in the third invention as it is, and the other reference numerals use the same reference numerals used in the first invention.
  • the light-transmitting member 62 is drilled in a direction parallel to the in-plane direction of the bottom surface (the right side surface of the detection chip 60 in the drawing) from the side surface toward the inclined surface 62b.
  • liquid sample storage groove 64 formed by a rectangular perforated groove, and of the two opposing surfaces of the liquid sample storage groove 64, the surface closer to the bottom surface (the detection surface 62a in the figure) is the above-mentioned surface. It is a support surface.
  • Example of concavo-convex structure 451 Convex 452 Smooth surface 500, 600, 700

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Abstract

【課題】磁性粒子を用いた目的物質の検出に用いることができ、小型でかつ低コストに製造可能な目的物質検出装置等を提供すること。 【解決手段】本発明の目的物質検出装置は、底面に対して上面側の面に配される検出面2aと、厚み方向に対し上面から底面側に向かうにつれて検出面2aから離れる方向に傾斜する上向き傾斜面2bと、光を受光して内部に導光可能とされる本体部2cとを有する全体略板状の光透過性部材2を備え、光透過性部材2が前記上面側から照射され上向き傾斜面2bを通過させた前記光を本体部2cを介して検出面2aに対し全反射条件で入射させる光入射構造を有する検出チップ1と、光透過性部材2の前記上面側に配され、前記光入射構造を介して検出面2aに全反射条件で光を照射可能とされる光照射部Bと、光透過性部材2の底面側に配される磁場印加部Cと、を備えること等を特徴とする。

Description

目的物質検出チップ、目的物質検出装置及び目的物質検出方法
 本発明は、光の全反射に伴って生成されるエバネッセント場又は増強電場を利用して、液体中に存在する目的物質を光学的に検出可能な目的物質検出チップ、目的物質検出装置及び目的物質検出方法に関する。
 近年、溶液中に存在する微小物質、特にDNA、RNA、タンパク質、ウイルス、細菌等の生体関連物質を検出・定量する方法が開発されている。このような方法としては、例えば、全反射によるエバネッセント場を利用する方法が知られている。
 前記全反射によるエバネッセント場を利用する方法としては、例えば、全反射照明蛍光顕微鏡が挙げられる。前記全反射照明蛍光顕微鏡は、液体試料とカバーガラス或いはスライドガラスとの界面で入射光を全反射させ、これによって生じるエバネッセント場を励起光として利用し、ノイズとなるバックグラウンド光が少ない蛍光観察を行う技術である(特許文献1参照)。また、該技術は、超解像を実現可能な技術であり、単分子観察を可能とする。
 全反射を利用する方法について、目的物質と結合する磁性粒子を用い、検出チップ下側に配された磁石に基づく、磁場の印加により前記目的物質と前記磁性粒子との結合体を前記検出チップ表面の局所領域に引き寄せ、この局所領域に前記励起光を照射して、前記目的物質の検出を行う方法が提案されている(特許文献2参照)。この提案によれば、磁場の印加によって前記検出チップ表面に対する前記目的物質の吸着又は近接が促され、短時間での測定が可能となる。
 しかしながら、この提案では、前記検出チップの下側に光学プリズムが存在するため、前記局所領域と前記磁石との間の距離を十分に近づけることができず、前記磁石により印加される磁場の強さが前記検出チップ表面上に至るまでに減衰してしまい、十分に前記目的物質を前記局所領域に引き寄せることができない問題を有する。
 また、この問題を解決するために強い磁場を印加させようとすると、装置が大掛かりになるとともに製造コストが嵩む問題を発生させる。
 前記磁性粒子を用いた蛍光検出方法として、磁場印加部(例えば、磁石)による磁場の印加前後の様子を比較観察することで、前記磁場印加前における光信号のうち、ノイズ信号を排除した検出を行う方法が提案されている(非特許文献1,2参照)。この提案によれば、前記磁性粒子と結合した前記目的物質が前記磁場の印加により移動するのに対し、前記検出チップ表面のキズ等に生ずるノイズは、前記磁場の印加により移動しないことから、移動する光信号に着目した検出を行うことで、前記ノイズ信号を排除することができる。
 しかしながら、この磁場の印加前後の様子を比較観察する方法においても、前記光学プリズムが用いられるため、前記磁場の強さの減衰によって前記目的物質を移動させにくく、また、前記磁場の強さを高めようとすると、装置が大掛かりになるとともに製造コストが嵩むこととなる。
 また、溶液中に存在する微小物質、特にDNA、RNA、タンパク質、ウイルス、細菌等の生体関連物質を検出・定量する方法として、例えば、表面プラズモン共鳴を利用する方法、導波モード(光導波モード、導波路モード、光導波路モードなどとも呼ばれる)の励起を利用する方法が知られている。
 前記表面プラズモン共鳴を利用する方法としては、例えば、表面プラズモン共鳴励起増強蛍光分光法が知られている。
 この方法は、クレッチマン配置と呼ばれる光学配置を用いて、プリズムに接したガラス表面の金薄膜層と液体試料との界面での入射光の全反射によって、前記金薄膜上に表面プラズモン共鳴を励起し、前記金薄膜表面に増強電場を形成することを特徴とする。前記表面プラズモン共鳴によって前記金薄膜表面近傍において増強された光を励起光として、前記増強電場内に存在する蛍光分子を励起し、強い蛍光を生じさせ、バックグラウンド光が少ない蛍光観察を行う技術である(特許文献3参照)。
 また、前記導波モードの励起を利用する方法は、シリカガラス基板上にシリコン層(半導体層)とSiO層とをこの順で積層した検出チップを、シリカガラス製の台形プリズム上に設置して、前記検出チップで全反射される条件で前記台形プリズム側から光を照射し、増強電場を得ることを特徴とする(非特許文献3参照)。この方法では、前記検出チップに対して裏面側(前記シリカガラス基板側)から前記全反射条件を満たしつつ特定の入射角で前記光を照射すると、特定波長の光が前記検出チップ内を伝搬する前記導波モードと結合し、前記導波モードが励起される。前記導波モードが励起されると、前記検出チップ表面近傍に前記増強電場が発生する。これにより、前記増強電場内に存在する蛍光分子が励起され、バックグラウンド光が少ない蛍光観察を行うことができる(非特許文献4参照)。なお、前記半導体層としては、金属層で形成することもでき、前記半導体層を前記金属層で構成する検出チップにおいて励起される前記導波モードは、リーキーモード、漏洩モードなど呼ばれることがある(非特許文献5参照)。
 ところで、前記表面プラズモン共鳴を利用する方法について、目的物質と結合する磁性粒子を用い、磁場の印加により前記目的物質と前記磁性粒子との結合体を前記検出チップ表面の局所領域に引き寄せ、この局所領域に前記励起光を照射して、前記目的物質の検出を行う方法が提案されている。この方法では、前記磁場の印加によって前記検出チップ表面に対する前記目的物質の吸着又は近接が促され、短時間での測定が可能となる(特許文献4参照)。
 この前記磁性粒子を用いる場合の光学装置を図面を参照しつつ、説明する。図13は、光学装置の概要を説明するための断面図である。
 図13に示すように、光学装置200は、光学プリズム201上に、ガラス基体202及び金属膜203で構成される検出チップ204が配されて構成される。ガラス基体202は、函状とされ、金属膜203が配される内部側に液体試料が導入される。また、光照射部205と、磁場印加部としての磁石206とを備える。
 光学装置200では、検出チップ204の裏面側(光学プリズム201と接する面側)に対し、全反射条件で光照射部205から光を照射し、金属膜203における光照射領域を前記局所領域として、前記局所領域上に増強電場を発生させ、前記液体試料中に含まれる前記目的物質からの蛍光を検出する。
 この際、前記目的物質は、前記磁性粒子との結合体とされるため、磁石206からの磁場の印加によって前記局所領域に引き寄せられ、短時間で検出可能とされる。
 しかしながら、光学装置200では、光学プリズム201が存在するため、前記局所領域となる金属膜203と磁石206との間の距離を十分に近づけることができず、磁石206により印加される磁場の強さが減衰してしまい、十分に前記目的物質を前記局所領域に引き寄せることができない問題を有する。
 また、この問題を解決するために強い磁場を印加させようとすると、装置が大掛かりになるとともに製造コストが嵩む問題を発生させる。
 また、前記磁性粒子を用いた前記蛍光検出方法として、磁場印加部(例えば、磁石)による磁場の印加前後の様子を比較観察することで、前記磁場印加前における光信号のうち、ノイズ信号を排除した検出を行う方法が提案されている。この方法によれば、前記磁性粒子と結合した前記目的物質が前記磁場の印加により移動するのに対し、前記検出チップ表面のキズ等に生ずるノイズは、前記磁場の印加により移動しないことから、移動する光信号に着目した検出を行うことで、前記ノイズ信号を排除することができる(非特許文献1,2参照)。なお、前記目的物質が蛍光等の光を発しない物質である場合には、前記目的物質を標識化する蛍光物質等を結合させて、その発光を検出する。
 この磁場の印加前後の様子を比較観察する方法においても、光学装置200と同様、光学プリズムが用いられるため、前記磁場の強さの減衰によって前記目的物質を移動させにくく、また、前記磁場の強さを高めようとすると、装置が大掛かりになるとともに製造コストが嵩むこととなる。
 前記光学プリズムによる大型化を避けるため、前記光学プリズムを用いず、前記検出チップの前記液体試料を導入するV字状等の溝に電場増強層を形成することで前記検出チップ自身に前記光学プリズムの役割を付与する方法も提案されている(特許文献4参照)。
 しかしながら、この方法においても、前記磁性粒子を用いた前記蛍光検出方法を行う場合には、検出面をなす前記検出チップの前記溝が形成される面(表面)と対向する面(裏面)側から前記溝に対して光を照射するように前記光照射部が配されるため、前記検出チップの裏面側に配される前記磁石等と配置上競合することとなる。
 この点、前記検出チップの裏面側において、前記光照射部から照射される光の光路から外れた位置に前記磁石等を配すると、その分、前記液体試料が導入される前記検出チップの表面側と前記磁石等との間の距離が長くなる。例えば、図14に示すように、検出チップ304裏面側において、光照射部305から照射される光の光路から外れた位置に磁石306a,bを配することとすると、検出チップ304の金属膜303が形成される表面側と磁石306a,bとの間の距離が長くなる。なお、図14は、前記検出チップの表面側と前記磁石等との間の距離が長くなる様子を示す説明図である。
 したがって、前記磁場の強さが減衰して前記目的物質の引き寄せや移動をさせにくくなる。また、この問題を前記磁場の強さを高めて解決しようとすると、結局のところ、装置が大掛かりになるとともに製造コストが嵩むこととなる。
 また、前記蛍光観察方法では、検出精度に課題を有し、前記検出精度の一層の向上が望まれている。
 即ち、前記蛍光観察方法で検出される光信号には、前記蛍光分子からの蛍光のほか、前記検出チップ表面の汚れや傷による散乱光、前記検出チップの構成部材から生じる自家蛍光、試料中に含まれる夾雑物からの発光等に基づくノイズ信号が含まれることから、前記蛍光観察方法では、前記検出精度の低下要因となる前記ノイズ信号を排除することが求められる。
 こうしたことから、本発明者らは、前記ノイズ信号を排除した目的物質検出方法として、目的物質に蛍光標識物質や光散乱物質のような標識物質及び磁性粒子を結合させ、その結合体の様子を磁場印加部(例えば、磁石)による磁場の印加前後で比較観察することで、前記磁場印加前における光信号に含まれるノイズ信号を排除した検出を行う方法を提案している。
 この方法によれば、前記標識物質及び前記磁性粒子と結合した前記目的物質が前記磁場の印加により移動するのに対し、前記検出チップ表面のキズ等を原因とする前記ノイズ信号は、前記磁場の印加により移動しないことを利用して、前記ノイズ信号を排除した検出を行うことができる(非特許文献1,2参照)。
 しかしながら、この提案においても、前記結合体が前記検出チップの表面と非特異的に吸着して前記磁場の印加前後で移動しないことがあり、移動しない前記結合体からの光信号は、前記ノイズ信号と同様に扱われるため、前記結合体と前記検出チップとの吸着状況によっては、前記検出精度の向上が見込めないことがある。一方、この問題を解決するため、強い磁場を印加して前記結合体を確実に移動させようとすると、装置が大掛かりになるとともに製造コストが嵩むこととなる。
特開2002-236258号公報 特許第5301894号公報 国際公開2015/194663号公報 特許第5920692号公報
安浦 雅人、藤巻 真「微量検出のための導波モードイメージセンサの開発」電気学会研究会資料 センサ・マイクロマシン部門総合研究会(2016年6月29日,30日)、pp.45~52、一般社団法人電気学会(2016年) M. Yasuura and M. Fujimaki, Sci. Rep. Vol. 6, pp. 39241-1-39241-7 (2016) M. Fujimaki et al. Optics Express, Vol. 23 (2015) pp.10925-10937 K. Nomura et al. J. Appl. Phys. Vol. 113, (2013) pp.143103-1-143103-6 R. P. Podgorsek, H. Franke, J. Woods, and S .Morrill, Sensor. Actuat. B51 pp.146-151 (1998年)
 第1発明は、従来技術における前記諸問題に関連し、磁性粒子を用いた目的物質の検出に用いることができ、小型でかつ低コストに製造可能な目的物質検出装置及び該目的物質検出装置を用いた目的物質検出方法を提供することを課題とする。
 第2発明は、従来技術における前記諸問題に関連し、磁性粒子を用いた目的物質の検出に用いることができ、目的物質検出装置を小型でかつ低コストに製造可能な目的物質検出チップ、目的物質検出装置及び目的物質検出方法を提供することを課題とする。
 第3発明は、従来技術における前記諸問題に関連し、磁性粒子を用いた目的物質の検出に用いることができ、前記目的物質の検出精度を向上させるとともに目的物質検出装置を小型でかつ低コストに製造可能な目的物質検出チップ、目的物質検出装置及び目的物質検出方法を提供することを課題とする。
 第1発明についての前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
 <1> 底面に対して上面側の面に配される検出面と、厚み方向に対し前記上面から前記底面側に向かうにつれて前記検出面から離れる方向に傾斜する上向き傾斜面及び前記厚み方向に対し前記底面から前記上面側に向かうにつれて前記検出面から離れる方向に傾斜する下向き傾斜面のいずれかの傾斜面と、光を受光して内部に導光可能とされる本体部とを有する全体略板状の光透過性部材を備え、前記光透過性部材が前記上面側から照射され前記上向き傾斜面を通過させた前記光を前記本体部を介して前記検出面に対し全反射条件で入射させる第1の光入射構造及び前記上面側から照射され前記下向き傾斜面で反射された前記光を前記本体部を介して前記検出面に対し全反射条件で入射させる第2の光入射構造のいずれかの光入射構造を有する検出チップと、前記光透過性部材の前記上面側に配され、前記光入射構造を介して前記検出面に全反射条件で前記光を照射可能とされる光照射部と、前記光透過性部材の前記底面側に配される磁場印加部と、を備えることを特徴とする目的物質検出装置。
 <2> 光透過性部材が上面に形成されるとともに上向き傾斜面を有する上面側切欠き部及び底面に形成されるとともに下向き傾斜面を有する底面側切欠き部の少なくともいずれかの切欠き部を有する前記<1>に記載の目的物質検出装置。
 <3> 切欠き部に本体部よりも屈折率の低い低屈折材料が埋設される前記<2>に記載の目的物質検出装置。
 <4> 光透過性部材の側面が傾斜面とされる前記<1>に記載の目的物質検出装置。
 <5> 光入射構造が、第1の光入射構造における上向き傾斜面を通過させた光及び第2の光入射構造における下向き傾斜面で反射された光の少なくともいずれかを底面で反射させた後に検出面に対し全反射条件で入射可能とされる前記<1>から<4>のいずれかに記載の目的物質検出装置。
 <6> 傾斜面における光入射位置と検出面における光照射位置との間の最短距離が、1.0mm~50.0mmとされる前記<1>から<5>のいずれかに記載の目的物質検出装置。
 <7> 光透過性部材の厚みが0.1mm~10.0mmとされる前記<1>から<6>のいずれかに記載の目的物質検出装置。
 <8> 光透過性部材の上面に少なくとも一部を検出面とする液体試料貯留溝が形成される前記<1>から<7>のいずれかに記載の検出チップ。
 <9> 液体試料貯留溝が検出面として光透過性部材の厚み方向に対し上面から底面側に向かうにつれて傾斜面から離れる方向に傾斜する傾斜検出面を有する前記<8>に記載の目的物質検出装置。
 <10> 光透過性部材の上面の一部が検出面とされるとともに前記検出面を底とする函状体を形成するように前記検出面の周囲に側壁部が立設される前記<1>から<7>のいずれかに記載の目的物質検出装置。
 <11> 前記<1>から<10>のいずれかに記載の目的物質検出装置を用いた目的物質検出方法であって、光透過性部材の上面側から光入射構造を介して検出面に全反射条件で光を照射する光照射工程と、前記光透過性部材の底面側から磁場を印加する磁場印加工程と、を含むことを特徴とする目的物質検出方法。
 第2発明についての前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
 <12> 裏面に対し全反射条件で光を照射したときに表面側に増強電場が形成される電場増強層と、前記電場増強層を前記裏面側から支持可能とされる支持面と、厚み方向に対し前記支持面が形成される面を上面として前記上面から底面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する上向き傾斜面及び前記厚み方向に対し前記底面から前記上面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する下向き傾斜面のいずれかの傾斜面と、前記光を受光して内部に導光可能とされる本体部とを有する全体略板状の光透過性部材とを備え、前記光透過性部材が前記上面側から照射され前記上向き傾斜面を通過させた前記光を前記本体部を介して前記裏面に対し全反射条件で入射させる第1の光入射構造及び前記上面側から照射され前記下向き傾斜面で反射された前記光を前記本体部を介して前記裏面に対し全反射条件で入射させる第2の光入射構造のいずれかの光入射構造を有することを特徴とする目的物質検出チップ。
 <13> 光透過性部材が上面に形成されるとともに上向き傾斜面を有する上面側切欠き部及び底面に形成されるとともに下向き傾斜面を有する底面側切欠き部の少なくともいずれかの切欠き部を有する前記<12>に記載の目的物質検出チップ。
 <14> 切欠き部に本体部よりも屈折率の低い低屈折材料が埋設される前記<13>に記載の目的物質検出チップ。
 <15> 光透過性部材の側面が傾斜面とされる前記<12>に記載の目的物質検出チップ。
 <16> 光入射構造が、第1の光入射構造における上向き傾斜面を通過させた光及び第2の光入射構造における下向き傾斜面で反射された光の少なくともいずれかを底面で反射させた後に裏面に対し全反射条件で入射可能とされる前記<12>から<15>のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
 <17> 傾斜面における光入射位置と電場増強層における光照射位置との間の最短距離が、1.0mm~50.0mmとされる前記<12>から<16>のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
 <18> 光透過性部材の厚みが0.1mm~10.0mmとされる前記<12>から<17>のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
 <19> 光透過性部材の上面に少なくとも一部を支持面とする液体試料貯留溝が形成される前記<12>から<18>のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
 <20> 液体試料貯留溝が支持面として光透過性部材の厚み方向に対し上面から底面側に向かうにつれて傾斜面から離れる方向に傾斜する傾斜支持面を有する前記<19>に記載の目的物質検出チップ。
 <21> 光透過性部材の上面の一部が支持面とされるとともに前記支持面を底とする函状体を形成するように前記支持面の周囲に側壁部が立設される前記<12>から<18>のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
 <22> 前記<12>から<21>のいずれかに記載の目的物質検出チップと、光透過性部材の上面側に配され、光入射構造を介して電場増強層の裏面に全反射条件で光を照射可能とされる光照射部と、前記光透過性部材の底面側に配される磁場印加部と、を備えることを特徴とする目的物質検出装置。
 <23> 前記<12>から<21>のいずれかに記載の目的物質検出チップに対し、光透過性部材の上面側から光入射構造を介して電場増強層の裏面に全反射条件で光を照射する光照射工程と、前記光透過性部材の底面側から磁場を印加する磁場印加工程と、を含むことを特徴とする目的物質検出方法。
 第3発明についての前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
 <24> 光透過性基板上に、複数の凸部を周期的に配して構成される凹凸構造を有することを特徴とする目的物質検出チップ。
 <25> 平滑面を有する光透過性基板と、前記光透過性基板の前記平滑面上に積層されるとともに前記光透過性基板側の面と反対の面が凹凸面とされる凹凸構造付与層とで構成され、前記凹凸面で凹凸構造が形成される前記<24>に記載の目的物質検出チップ。
 <26> 光透過性基板上に、少なくとも一の面に全反射条件で光が照射されたとき他の面上に増強電場が形成される電場増強層が配され、前記光透過性基板側の面を裏面として前記裏面側から前記電場増強層の前記一の面に対し前記光が全反射条件で照射されたときに前記増強電場が表面近傍に存在可能とされる前記<24>から<25>のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
 <27> 平滑面を有する光透過性基板と、前記光透過性基板の前記平滑面上に積層される平滑な電場増強層と、前記電場増強層上に積層される凹凸構造付与層とで構成され、前記凹凸構造付与層の凹凸面で凹凸構造が形成される前記<26>に記載の目的物質検出チップ。
 <28> 平滑面を有する光透過性基板と、前記光透過性基板の前記平滑面上に積層されるとともに前記光透過性基板側の面と反対の面が第1凹凸面とされる凹凸構造付与層と、前記凹凸構造付与層の前記第1凹凸面上に積層されるとともに前記凹凸構造付与層側の面と反対の面が前記第1凹凸面の凹凸パターンが転写された形状の第2凹凸面とされる電場増強層とで構成され、前記第2凹凸面で凹凸構造が形成される前記<26>に記載の目的物質検出チップ。
 <29> 第1凹凸面を有する光透過性基板と、前記光透過性基板の前記第1凹凸面上に積層されるとともに前記光透過性基板側の面と反対の面が前記第1凹凸面の凹凸パターンが転写された形状の第2凹凸面とされる電場増強層とで構成され、前記第2凹凸面で凹凸構造が形成される前記<26>に記載の目的物質検出チップ。
 <30> 凸部が2種類以上の形状で形成されるとともに、前記形状の少なくとも1種が2回回転対称形状及び線対称形状のいずれかとされる前記<24>から<29>のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
 <31> 前記<24>から<30>のいずれかに記載の目的物質検出チップと、前記目的物質検出チップの凹凸構造が形成される面と反対の面を裏面として前記裏面側から全反射条件で光を照射可能とされる光照射部と、前記目的物質検出チップの表面上に導入される液体試料に含まれる磁性粒子を前記表面に平行な方向又は前記表面から遠ざける方向に移動させる第1磁場を印加可能とされる第1磁場印加部及び前記目的物質検出チップの前記裏面側に配されるとともに前記表面上に導入された前記液体試料中の前記磁性粒子を前記表面上に引き寄せる第2磁場を印加可能とされる第2磁場印加部の少なくともいずれかで形成される磁場印加部と、を備えることを特徴とする目的物質検出装置。
 <32> 第2の磁場印加部を有し、かつ、前記第2磁場印加部が第2磁場を印加した状態で目的物質検出チップ表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動可能とされる前記<31>に記載の目的物質検出装置。
 <33> 前記<24>から<30>のいずれかに記載の目的物質検出チップの凹凸構造が形成される面と反対の面を裏面として前記裏面側から全反射条件で光を照射する光照射工程と、前記目的物質検出チップの表面上に導入される液体試料に含まれる目的物質と磁性粒子との結合体を第1磁場の印加により前記表面に平行な方向又は前記表面から遠ざける方向に移動させる第1結合体移動工程、及び、前記裏面側に配される磁場印加部からの第2磁場の印加により前記液体試料中の前記結合体を前記表面上に引き寄せる第2結合体移動工程の少なくともいずれかで実施される結合体移動工程と、を含むことを特徴とする目的物質検出方法。
 <34> 第2結合体移動工程を含み、かつ、前記第2結合体移動工程が第2磁場を印加した状態で磁場印加部を目的物質検出チップ表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動させ、前記磁場印加部の移動に追従させて結合体を移動させる工程である前記<33>に記載の目的物質検出方法。
 第4発明
 <35> 底面に対して上面側の面に配される支持面と、厚み方向に対し前記上面から前記底面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する上向き傾斜面及び前記厚み方向に対し前記底面から前記上面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する下向き傾斜面のいずれかの傾斜面と、光を受光して内部に導光可能とされる本体部とを有する全体略板状の光透過性部材と、前記支持面上に複数の凸部を周期的に配して構成される凹凸構造とを備え、前記光透過性部材が前記上面側から照射され前記上向き傾斜面を通過させた前記光を前記本体部を介して前記支持面に対し全反射条件で入射させる第1の光入射構造及び前記上面側から照射され前記下向き傾斜面で反射された前記光を前記本体部を介して前記支持面に対し全反射条件で入射させる第2の光入射構造のいずれかの光入射構造を有し、かつ、前記光透過性部材の一部に検出面を有し、前記検出面の一部又は全部に前記凹凸構造を有することを特徴とする目的物質検出チップ。
 <36> 支持面上に、前記支持面に全反射条件で光が照射されたとき前記支持面側の面と反対側の面上に増強電場が形成される電場増強層が配される前記<35>に記載の目的物質検出チップ。
 <37> 支持面上に、前記支持面に全反射条件で光が照射されたとき前記支持面側の面と反対側の面上にエバネッセント場発生領域が形成される前記<35>に記載の目的物質検出チップ。
 <38> 前記<35>から<37>のいずれかに記載の目的物質検出チップと、光透過性部材の上面側に配され、光入射構造を介して支持面に全反射条件で前記光を照射可能とされる光照射部と、前記光透過性部材の底面側に配される磁場印加部と、を備えることを特徴とする目的物質検出装置。
 なお、第1発明と、第2発明とは、それぞれ、前記磁場印加部により印加される磁場の強さの減衰を抑制するため、前記磁場印加部を近づけて配することを許容する前記検出チップの共通した構造を持つ。
 また、第1発明及び第2発明と、第3発明とは、それぞれ、前記磁場印加部を用いた前記目的物質の検出に好適な検出チップが用いられる点で対応する関係を持つ。
 また、第4発明は、第1~第3発明の変形例に関し、第1~第3発明のいずれかと共通した課題、構造及び発明の効果を持つ。
 第1発明によれば、従来技術における前記諸問題に関連して、磁性粒子を用いた目的物質の検出に用いることができ、小型でかつ低コストに製造可能な目的物質検出装置及び該目的物質検出装置を用いた目的物質検出方法を提供することができる。
 第2発明によれば、従来技術における前記諸問題に関連して、磁性粒子を用いた目的物質の検出に用いることができ、目的物質検出装置を小型でかつ低コストに製造可能な目的物質検出チップ、目的物質検出装置及び目的物質検出方法を提供することができる。
 第3発明によれば、従来技術における前記諸問題に関連して、磁性粒子を用いた目的物質の検出に用いることができ、前記目的物質の検出精度を向上させるとともに目的物質検出装置を小型でかつ低コストに製造可能な目的物質検出チップ、目的物質検出装置及び目的物質検出方法を提供することができる。
第1実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。 第2実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。 光の入射角度の一例を示す説明図(1)である。 光の入射角度の一例を示す説明図(2)である。 光の入射角度の一例を示す説明図(3)である。 第3実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。 第4実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。 第5実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。 変形例を示す説明図(1)である。 変形例を示す説明図(2)である。 第6実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。 第7実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。 光学装置の概要を説明するための断面図である。 検出チップの表面側と磁石等との間の距離が長くなる様子を示す説明図である。 第1実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。 第2実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。 光の入射角度の一例を示す説明図(1)である。 光の入射角度の一例を示す説明図(2)である。 光の入射角度の一例を示す説明図(3)である。 第3実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。 第4実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。 第5実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。 変形例を示す説明図(1)である。 変形例を示す説明図(2)である。 第6実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。 第1実施形態の概略構成を示す説明図である。 凹凸構造により結合体の吸着が抑制される様子を説明する説明図(1)である。 凹凸構造により結合体の吸着が抑制される様子を説明する説明図(2)である。 第2実施形態の概略構成を示す説明図である。 第3実施形態の概略構成を示す説明図である。 第4実施形態の概略構成を示す説明図である。 凹凸構造の形成例を示す斜視図である。 凹凸構造の形成例を示す上面図である。 1つの凸部を拡大して示す上面図である。 上面に加え、長手方向及び短手方向の各側面を付加した図である。 第5実施形態の概略構成を示す説明図である。 磁場の印加前における表面上の様子を示す図である。 磁場の印加後における表面上の様子を示す図である。 第6実施形態の概略構成を示す説明図である。 磁場の印加前における表面上の様子を示す図である。 磁場の印加後における表面上の様子を示す図である。 第7実施形態の概略構成を示す説明図である。 第2磁場印加部の移動前における表面上の様子を示す図である。 第2磁場印加部の移動後における表面上の様子を示す図である。 第4発明の一実施形態を示す説明図である。
 以下、第1発明について、詳細に説明する。
(目的物質検出装置)
 第1発明の目的物質検出装置は、検出チップと、光照射部と、磁場印加部とを有し、更に、必要に応じて、光検出部を備える。
<検出チップ>
 前記検出チップは、以下に説明する光透過性部材を備える。
-光透過性部材-
 前記光透過性部材は、底面に対して上面側の面に配される検出面と、厚み方向に対し前記上面から前記底面側に向かうにつれて前記検出面から離れる方向に傾斜する上向き傾斜面及び前記厚み方向に対し前記底面から前記上面側に向かうにつれて前記検出面から離れる方向に傾斜する下向き傾斜面のいずれかの傾斜面と、光を受光して内部に導光可能とされる本体部とを有する全体略板状の部材である。
 また、前記光透過性部材は、前記上面側から照射され前記上向き傾斜面を通過させた前記光を前記本体部を介して前記検出面に対し全反射条件で入射させる第1の光入射構造及び前記上面側から照射され前記下向き傾斜面で反射された前記光を前記本体部を介して前記検出面に対し全反射条件で入射させる第2の光入射構造のいずれかの光入射構造を有するように構成される。
 なお、前記光透過性部材において、光学的に作用する面、つまり、光が入射する面や光が反射する面は、光学的に平滑であることが好ましい。
 前記光透過性部材は、従来の検出チップにおける光学プリズムの役割と、前記検出面での光の全反射に基づきエバネッセント場を形成する役割とを兼ねるとともに、前記検出チップにおける前記検出面の設定位置の下側に磁場印加部を配設可能とするため、前記光透過性部材の上面側から照射される前記光を前記検出面に導光させる役割を有する。
 即ち、前記光透過性部材は、上面側から照射される前記光を前記検出面に対し全反射条件で入射させる前記光入射構造を有することを特徴とする。
 前記光透過性部材の形成材料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、射出成型により量産可能なポリスチレン、ポリカーボネート、シクロオレフィン、アクリル等のプラスチック材料、高い透明性を確保できるシリカガラス等のガラス材料が好ましい。前記ポリスチレン、前記シクロオレフィンは、自家蛍光が少なくノイズの低減が可能であり、前記ポリカーボネートは高い屈折率を実現できるため小型化が可能になる。また、前記アクリルは、高い透明性を持つため導光時の光の減衰を抑制することが可能である。
 前記光透過性部材の厚みとしては、特に制限はないが、剛性、導光性能、及び、磁気の減衰度合いの観点から、0.1mm~10.0mmであることが好ましい。前記厚みが0.1mm未満であると、割れ、歪みなどが生じやすく取り扱いが難しくなることがある。また、前記厚みが入射光のビーム径より小さいと入射時に光のロスが生じると共に、ノイズ光が生じるため、前記厚みとしては、前記ビーム径よりも大きいことが好ましい。また、底面側から磁場を印加することから、前記厚みが10.0mmを超えると減衰により好適な磁場を前記検出面上に付与することが難しくなることがある。また、前記厚みが5.0mm以下であれば、磁場の減衰を大きく抑制することができる。
 前記光透過性部材としては、前記検出面が形成される領域に前記目的物質の存否等が検証される液体試料が導入される。導入される前記液体試料を保持するための構成としては、特に制限はないが、次の構成を適用することが好ましい。
 即ち、一つの構成として、前記光透過性部材の上面の一部が前記検出面とされるとともに前記検出面を底とする函状体を形成するように前記検出面の周囲に側壁部が立設される構成が挙げられる。この構成では、前記函状体内に前記液体試料が保持される。なお、前記側壁部としては、例えば、前記光透過性部材と同じ材料及び形成方法で形成することができる。
 また、他の一つの構成として、前記光透過性部材の前記上面に少なくとも一部を前記検出面とする液体試料貯留溝が形成される構成が挙げられる。この構成では、前記液体試料貯留溝内に前記液体試料が保持される。なお、前記液体試料貯留溝としては、前記光透過性部材を構成する板状部材の形成時に成形加工により形成してもよいし、前記板状部材形成後、切削加工により形成してもよい。
 また、更に他の一つの構成として、前記液体試料貯留溝が前記光透過性部材の前記傾斜面が形成される側の側面と反対側の側面から前記傾斜面側に向けて穿設される穿設溝として形成される構成が挙げられる。この構成では、前記液体試料貯留溝(穿設溝)を構成する面のうち、前記底面と最も近い位置で対向する面が前記検出面を構成する。
 なお、前記液体試料貯留溝から前記液体試料がこぼれ落ちることを防止するため、前記液体試料貯留溝の開口には、必要に応じて、カバーガラス等の蓋を設けて密閉することができる。
 前記液体試料貯留溝を形成する場合、前記溝の形状としては、断面視で凹状、V字状、台形状等の任意の形状を適用することができるが、半円形のような平坦な面がない形状であると前記検出面を形成できないため、こうした形状は除かれる。
 また、前記液体試料貯留溝としては、特に制限はないが、前記検出面として前記光透過性部材の厚み方向に対し上面から底面側に向かうにつれて前記傾斜面から離れる方向に傾斜する傾斜検出面を有する構成としてもよい。即ち、このような傾斜検出面を前記検出面として有すると、前記本体部内を伝播する前記光を前記検出面に全反射条件で照射させるために設定される前記傾斜面に対する前記光の入射角度を広範囲で設定することができ、設定の自由度を広げることができる。
 前記検出チップは、前記光透過性部材の底面側に配される前記磁場印加部との競合を避ける観点に基づき、前記光透過性部材の上面側に配された光照射部から前記光が照射されることを前提とした構成とされる。
 即ち、前記光入射構造では、前記光透過性部材の上面側から照射される前記光の進行方向を前記傾斜面により変更させることで、前記検出面に対して前記光を全反射条件で入射可能とする。
 前記傾斜面としては、このような役割を果たす限り、前記光透過性部材の側面として形成されていてもよく、また、前記光透過性部材の上面及び底面の少なくともいずれかに形成される切欠き部の構成面として形成されていてもよい。
 前記切欠き部としては、前記光透過性部材の上面に形成されるとともに前記上向き傾斜面を有する上面側切欠き部及び前記光透過性部材の底面に形成されるとともに前記下向き傾斜面を有する底面側切欠き部の少なくともいずれかとして形成される。なお、前記切欠き部としては、前記光透過性部材を構成する板状部材の形成時に成形加工により形成してもよいし、前記板状部材形成後、切削加工により形成してもよい。
 また、前記上面側切欠き部としては、切欠かれた部分が空隙とされてもよいが、この部分に前記液体試料が侵入した場合に洗浄しにくいため、前記本体部よりも屈折率の低い低屈折材料が埋設されてもよい。即ち、前記上面側切欠き部が前記低屈折材料で埋設されると、前記上面側切欠き部内に前記液体試料が侵入することを防止することができる。
 また、前記低屈折材料を用いるため、前記上面側切欠き部の前記上向き傾斜面と前記本体部との界面における屈折を利用して前記検出面に前記光を導光させることができる。
 なお、前記上面側切欠き部に前記低屈折材料を埋設させる場合、例えば、屈折率が1.4程度の公知のプラスチック材料を前記上面側切欠き部に埋設させ、前記本体部を屈折率が1.6程度の公知のプラスチック材料で形成することで、前記光透過性部材を構成することができる。
 また、前記底面側切欠き部では、前記光透過性部材の底面に形成されることから、上面側に導入される前記液体試料が切欠かれた部分に侵入することがない。
 ただし、前記底面側切欠き部の前記下向き傾斜面が外部に露出して大気中の塵などの付着により汚れることを防止する観点から、前記上面側切欠き部と同様、切欠かれた部分に前記低屈折材料を埋設させることが好ましい。
 ところで、前記傾斜面における光入射位置と前記検出面における光照射位置(前記上面側における前記検出面の設定位置)との間の距離が長い場合、前記本体部内を進行する前記光が弱められ、また、前記本体部での前記光の反射が生じるごとに前記光が弱められる。一方で、光入射位置と前記検出面における光照射位置の距離が近すぎると、入射時に生じる散乱などによるノイズが光信号中に混じり、検出精度を落とす原因になる。
 したがって、前記傾斜面における光入射位置と前記検出面における光照射位置との間の距離としては、好適な範囲が存在し、具体的には、最短距離で1.0mm~50.0mmとされることが好ましい。
 このような距離とすると、前記本体部内を進行する前記光が弱まることを抑制することができ、かつ、ノイズを抑制し、また、前記本体部で前記光が反射する回数を減らし、最適には、前記回数が1回となるように設定できる。また、前記傾斜面が前記下向き傾斜面として形成される場合も、前記本体部で前記光が反射する回数を減らすことが好ましく、前記本体部での前記光が反射する回数をゼロとし、前記下向き傾斜面における1回の反射だけで前記検出面に前記光を入射させるように設定されることが最適である。
 なお、本明細書において「光透過性」とは、可視光透過率が0.5%以上であることを示す。
<コーティング層>
 前記光透過性部材としては、前記検出面上にコーティング層が形成されていてもよい。
 前記コーティング層の形成材料としては、前記光透過性部材と同様、光透過性を有していれば特に制限はなく、公知の樹脂材料、ガラス材料等が挙げられる。
 前記コーティング層の形成方法としては、特に制限はなく、スパッタリング法、蒸着法、スピンコート法、塗布、貼り付け、ラミネート等の公知の方法が挙げられる。
 前記コーティング層としては、前記光透過性部材の前記検出面を被覆するように形成され、前記コーティング層の上面が前記検出面の役割を有する。
 このコーティング層によれば、前記光透過性部材が比較的柔らかい樹脂で形成されている場合、キズの付きにくい硬い樹脂やガラス材料でコートすることによって前記光透過性部材の前記検出面にキズが付くのを防止することができる。
 また、前記コーティング層をフッ素樹脂等で形成する場合、前記検出面の汚れを防止する防汚効果も得られる。加えて、この防汚効果により、前記コーティング層の上面に目的物質や磁性粒子が吸着することを防止することができ、延いては、後述の磁場印加部によって前記磁性粒子と結合した前記目的物質を移動させて検出する場合、前記磁性粒子と前記目的物質の結合体が前記コーティング層の表面に吸着して移動しなくなることを防ぐことができる。
 また、前記光透過性部材の加工精度が悪く、その検出面に荒れが発生している場合には、前記コーティング層によって前記検出面の荒れを緩和し、全反射時の光散乱を抑制して、ノイズを低減することができる。この場合、特に制限はないが、平滑性に優れた前記検出面を得る観点から前記コーティング層として薄いガラスフィルムを選択し、前記光透過性部材の前記検出面上にラミネートすることが特に好ましい。
 また、樹脂製の前記光透過性部材の前記検出面上にガラスによる前記コーティング層を形成する場合、耐薬品性が高く、有機溶媒や強酸、強アルカリに強い検出チップを得ることができる。
 なお、前記光入射構造としては、前記傾斜面の傾斜角度、前記傾斜面に対する前記光の照射角度、前記光透過性部材の材質(屈折率)、前記傾斜面における光入射位置と前記検出面における光照射位置との間の距離及び前記光透過性部材の厚み等の条件を与えて、前記光透過性部材の上面側から照射される前記光の前記検出面に対する経路を公知の光学的算出方法で算出することで設定することができる。
<光照射部>
 光照射部は、前記光透過性部材の前記上面側に配され、前記光透過性部材の前記光入射構造を介して前記検出面に全反射条件で前記光を照射可能とされる部である。
 前記光照射部の光源としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知のランプ、LED、レーザー等が挙げられる。前記目的物質検出装置では、前記検出面に対し前記全反射条件で前記光を照射することで前記検出面の表面近傍に前記エバネッセント場を形成し、前記目的物質と磁性粒子とを含む結合体から光信号を発生させることを検出原理とする。そのため前記光照射部に求められる役割としては、前記検出面に対し前記全反射条件で前記光を照射することのみであり、このような役割を担うものであれば光源の選択に制限がない。
 なお、ランプ、LED等の放射光源を用いる場合には、照射光の照射方向を特定の方位に規制するコリメートレンズ等の案内部を用いて、前記光入射部に前記照射光を入射させることができる。
 また、前記光入射部に入射させる前記光としては、前記結合体に対して、蛍光を励起可能な波長を持つ単色光か、または、ランプ、LED等の広い波長帯域を持つ光源からの光をバンドパスフィルタ等の光学フィルタに透過させて単色化し、前記蛍光を励起可能な波長のみとした光とすることが好ましい。
<磁場印加部>
 前記磁場印加部は、前記光透過性部材の前記底面側に配される部である。
 前記磁場印加部として、特に制限はないが、前記液体試料に強い磁場を及ぼす観点から、前記検出チップにおける前記検出面と前記厚み方向で対向する位置における前記光透過性部材底面の直下に配されることが好ましい。
 前記磁場印加部の構成部材としては、前記液体試料が導入される領域に磁場を印加可能であれば、特に制限はなく、公知の永久磁石、電磁石等を挙げることができる。
 前記液体試料には、磁気ビーズ等の公知の磁性粒子が添加され、前記目的物質が存在する場合、前記目的物質と前記磁性粒子との結合体が形成される。なお、前記目的物質が蛍光を生じにくい物質である場合には、前記目的物質と特異的に吸着ないし結合して前記目的物質を標識化する蛍光標識物質を用いてもよい。前記蛍光標識物質としては、例えば、蛍光色素、量子ドット、蛍光染色剤等の公知の蛍光物質を用いることができる。
 また、前記目的物質の検出方法としては、蛍光検出に加え、前記エバネッセント場におけるエバネッセント光を受けて前記結合体から発せられる散乱光を検出する方法も挙げられる。
 前記散乱光を検出する場合、前記目的物質が散乱光を生じにくい物質である場合には、前記目的物質と特異的に吸着ないし結合して光を散乱する光散乱物質を用いてもよい。前記光散乱物質としては、例えば、ナノ粒子、例えばポリスチレンビーズや金ナノ粒子などが挙げられる。
 なお、前記目的物質、前記磁性粒子、前記蛍光標識物質及び前記光散乱物質の結合方法としては、特に制限はなく、物質に応じて、物理吸着、抗原-抗体反応、DNAハイブリダイゼーション、ビオチン-アビジン結合、キレート結合、アミノ結合などの公知の結合方法を適用することができる。
 前記目的物質等からの光は、前記検出面の表面近傍に形成される前記エバネッセント場内で生じるため、短時間で前記光信号の検出を行うためには、前記液体試料中を浮遊する前記結合体を前記検出面の表面近傍まで引き寄せることが必要となる。
 前記磁場印加部では、前記磁場の印加により、前記液体試料中を浮遊する前記結合体を前記検出面の表面に引き寄せ、短時間での検出を可能とする。
 ところで、前記検出では、前記検出面におけるキズ等を原因とするノイズを排除した検出を行うため、前記磁場印加部による前記磁場の印加を伴う前記結合体の移動前後の様子を比較観察することで、前記結合体移動前における光信号に含まれるノイズ信号を排除した検出を行うこととしてもよい。このような検出によれば、前記磁性粒子と結合した前記目的物質が前記磁場印加部により移動するのに対し、前記検出面のキズ等に生ずるノイズは、前記磁場印加部により移動しないことから、移動する光信号に着目した検出を行うことで、前記ノイズ信号を排除することができる。
 このような検出を行う場合、前記磁場印加部としては、前記結合体の移動前後の様子を比較観察するため、前記光透過性部材の底面側において、前記磁場を印加した状態で前記検出面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動可能な部材とされ、例えば、前記永久磁石等と前記永久磁石等を支持した状態でスライド移動可能なスライド部材とで構成することができる。
<光検出部>
 前記光検出部は、前記検出面上に配され、前記検出面の表面近傍の領域を検出領域とし、前記光の照射に伴い前記目的物質を含む前記結合体から発せられる光信号を検出可能とされる。
 前記光検出部としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知のフォトダイオード、光電子増倍管等の公知の光検出器やCCDイメージセンサ、CMOSイメージセンサ等の公知の撮像デバイスを用いることができる。
(目的物質検出方法)
 第1発明の目的物質検出方法は、第1発明の前記目的物質検出装置を用いて目的物質を検出する方法であり、少なくとも、光照射工程と、磁場印加工程とを含み、更に、必要に応じて、光検出工程を含む。
<光照射工程>
 前記光照射工程は、前記光透過性部材の前記上面側から前記光透過性部材の前記光入射構造を介して前記検出面に全反射条件で光を照射する工程である。
 なお、前記光照射工程の実施方法としては、第1発明の前記目的物質検出装置における前記光照射部について説明した事項を適用することができるため、重複した説明を省略することとする。
<磁場印加工程>
 前記磁場印加工程は、前記磁場印加部により前記光透過性部材の底面側から磁場を印加する工程であり、好適には、前記磁場を印加した状態で前記磁場印加部を前記検出面の面内方向と平行なベクトル成分を持つ方向に移動させる工程である。
 なお、前記磁場印加工程の実施方法としては、第1発明の前記目的物質検出装置における前記磁場印加部について説明した事項を適用することができるため、重複した説明を省略することとする。
<光検出工程>
 前記光検出工程は、前記光の照射に伴い前記結合体から発せられる光信号を検出する工程である。
 なお、前記光検出工程の実施方法としては、第1発明の前記目的物質検出装置における前記光検出部について説明した事項を適用することができるため、重複した説明を省略することとする。
 なお、第1発明に係る前記目的物質検出装置及び前記目的物質検出方法について、前記光透過性部材における「上面」、「底面」及び「側面」の各位置関係に基づき、位置関係の説明を行ったが、これらの位置関係は、相対的な位置関係を示すものであり、前記目的物質検出装置が逆さ又は傾けて使用される場合であっても、前記相対的な位置関係に変更がない場合には、第1発明の技術的範囲に含まれる。例えば、前記目的物質検出装置を90°傾けて使用し、「上面」及び「底面」が側方、「側面」が上方又は下方に位置する場合であっても、前記磁場印加部が配される側の前記光透過性部材の面を「底面」として視たときの「上面」及び「側面」の前記相対的な位置関係に変更がない場合には、第1発明の技術的範囲に含まれる(例えば、後述の第7実施形態、図12参照)。
[第1実施形態]
 以下では、第1発明の前記目的物質検出装置の構成例を図面を参照しつつ、具体的に説明する。
 先ず、第1実施形態に係る目的物質検出装置を図1を参照しつつ、説明する。なお、図1は、第1実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。
 図1に示すように、第1実施形態における検出チップ1は、光透過性部材2を有する。光透過性部材2は、板状の部材であり、上面の一部が検出面2aとされ、側面が上向き傾斜面2bとされ、胴部が上面から光を受光して内部に導光可能な本体部2cとされる。ここで、検出面2aは、光透過性部材2の上面の一部に設定される面であり、裏面(光透過性部材2の底面側)に対し、全反射条件で光を照射したときに、表面(光透過性部材2の上面側)近傍にエバネッセント場を形成する。
 また、光透過性部材2の上面には、検出面2aを底とする函状体を形成するように検出面2aの周囲に側壁部4が立設され、前記函状体内に液体試料Aが導入される。
 ここで、光透過性部材2の側面として構成される上向き傾斜面2bは、光透過性部材2の厚み方向Yに対し上面から底面側に向かうにつれて検出面2aから離れる方向に傾斜する面とされ、上向き傾斜面2bと対向して配される光照射部Bから照射される光が光透過性部材2の厚み方向Yと直交する長さ方向Xに対して傾斜する状態で本体部2c内に入射される。
 本体部2c内に入射される光は、本体部2cの上面及び底面で複数回反射されつつ、本体部2c内を長さ方向Xに沿って伝播される。
 本体部2c内を伝播する光は、検出面2aの位置で全反射され、検出面2aの表面近傍にエバネッセント場を形成させる(第1の光入射構造)。
 検出チップ1を用いて目的物質検出装置を構成する場合、図1に示すように、光照射部Bが光透過性部材2の上面側における、光透過性部材2側面の上向き傾斜面2bと対向した位置に配され、磁場印加部Cが検出面2aと厚み方向Yで対向する位置における光透過性部材2底面の直下に配され、光検出部Dが光透過性部材2の上面側に配される。
 磁場印加部Cでは、磁場の印加により、液体試料A中を浮遊する目的物質と磁性粒子とを含む結合体を前記結合体が光信号を発することが可能な検出面2aの表面近傍に引き寄せ、短時間での測定を可能とする。また、磁場印加部Cを例えば長さ方向Xにスライド移動させ、スライド移動前後の光信号の検出を行うことで、磁場印加部Cのスライド移動に追従する前記結合体のみを検出可能とし、検出面2aにおけるキズ等を原因とするノイズ信号を排除した検出を行うことができる。
 また、光検出部Dでは、検出面2aの表面近傍における前記結合体からの光を検出可能とされる。
 このように構成される第1の実施形態に係る目的物質検出装置では、光照射部Bと磁場印加部Cとの配設位置を競合させず、磁場印加部Cを光透過性部材2底面における検出面2aとの距離が近い位置に配設させることができ、かつ、光照射部Bから照射される光を検出面2aに対し全反射条件で照射させることができるため、検出面2aと離れた位置から磁場を印加可能な強力な磁場印加部材を用いる必要がなく、装置が大掛かりになることを避けることができ、小型で低コストに製造することができる。
[第2実施形態]
 次に、第2実施形態に係る目的物質検出装置を図2を参照しつつ、説明する。なお、図2は、第2実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。
 図2に示すように、第2実施形態における検出チップ10は、光透過性部材12を有する。光透過性部材12では、第1実施形態における光透過性部材2と異なり、上面に液体試料Aを導入する液体試料貯留溝14が形成される。液体試料貯留溝14は断面凹状の形状で形成され、その底面が検出面12aとされる。
 また、光透過性部材12では、第1実施形態における光透過性部材2と異なり、上面に形成されるとともに上向き傾斜面12bを有する上面側切欠き部15が形成される。上面側切欠き部15は、断面略V字状の形状で形成される。
 ここで、上向き傾斜面12bは、光透過性部材12の厚み方向Yに対し上面から底面側に向かうにつれて検出面12aから離れる方向に傾斜する面とされ、上向き傾斜面12bと対向して配される光照射部Bから照射される光が光透過性部材12の厚み方向Yと直交する長さ方向Xに対して傾斜する状態で本体部12c内に入射される。
 また、上向き傾斜面12bにおける光入射位置と検出面12aにおける光照射位置との間の距離Wは、最短距離として1.0mm~50.0mmが好適である。
 また、本体部12c内に入射される光は、本体部12cの底面で可能な限り少ない回数、好ましくは1度だけ反射された状態で、検出面12aに導光され、検出面12aの裏面で全反射されるとともに検出面12aの表面近傍にエバネッセント場を形成させる(第1の光入射構造)。
 検出チップ10を用いて目的物質検出装置を構成する場合、図2に示すように、光照射部Bが光透過性部材12の上面側における、上向き傾斜面12bと対向した位置に配される。
 このように構成される検出チップ10では、上向き傾斜面12bにおける光入射位置と検出面12aにおける光照射位置との間の距離Wが、第1実施形態における検出チップ1における上向き傾斜面2b(光透過性部材2の側面)における光入射位置と検出面2aにおける光照射位置との間の距離よりも短いことから、本体部12c内を進行する光の減衰を抑えることができる。
 なお、これ以外の構成及び効果については、第1実施形態に係る目的物質検出装置と同様であるため、説明を省略する。
 続いて、第1実施形態における検出チップ1の光透過性部材2の上向き傾斜面2bに対する光の入射角度に関し、図3~5を参照しつつ、補足説明を行う。なお、図3~5の各図は、光の入射角度の一例を示す説明図である。
 図3に示すように、検出チップ1’は、光透過性部材2’の上面の一部が検出面2aとされた構造とされる。
 ここで、図3に示す例では、光透過性部材2’の側面として構成される上向き傾斜面2b’に対し、法線方向、即ち、上向き傾斜面2b’と垂直な方向から光が光透過性部材2’内に入射されるよう、光照射部Bの光照射方向が設定され、光透過性部材2’の上面側を開放させたV字の溝角としてみたときの上向き傾斜面2b’と光照射部Bの光照射方向との成す角度であるθが90°とされる。
 このように、θを90°として、上向き傾斜面2b’と垂直な方向から光を入射させると、上向き傾斜面2b’での光の屈折が生じない。また、光透過性部材2’の厚み方向Yと光透過性部材2’の底面に対する光の入射方向との成す角度θと、光透過性部材2’の底面と側面(上向き傾斜面2b’)との成す角度αとが等しくなる(θ=α)。そして、これらの事象は、光透過性部材2’の材質に依らずに生じることから、角度αの設定に基づき、一意に光透過性部材2’の本体部における光の反射位置を特定して検出チップにおける検出面2a’の位置設定及び目的物質検出装置における光学系の設定を簡単化させることができる。図3に示す例では、角度αが小さすぎるとθも小さくなりすぎ、入射された光が光透過性部材2’の底面で全反射されず、そのまま光透過性部材2’外に透過する成分を生じさせる。この状態になると、入射された前記光が検出面2a’に対し全反射条件で照射されなくなってしまうことから、留意する必要がある。一方、角度αが大きすぎると上面側からの光の入射が困難になることから、角度αとしては、50°~80°が好ましい。
 一方、図4に示す例では、光透過性部材2’の上面側を開放させたV字の溝角としてみたときの上向き傾斜面2b’と光照射部Bの光照射方向との成す角度であるθが90°未満とされる。
 このように、θを90°未満として、上向き傾斜面2b’に光を入射させると、上向き傾斜面2b’で屈折された光が光透過性部材2’の底面で反射され、上面に導かれる。
 ただし、光入射角度θが90°よりも小さすぎると、上向き傾斜面2b’で屈折された光が光透過性部材2’の底面で全反射されず、そのまま光透過性部材2’外に透過する成分を生じさせる。この状態になると、入射された前記光が検出面2a’に対し全反射条件で照射されなくなってしまうことから、留意する必要がある。
 また、θが90°よりも小さすぎると、反射光が導かれる上面の位置が側面(上向き傾斜面2b’)に近づきすぎとなり、この上面の位置を検出面2a’として設定し難くなることに留意する必要がある。
 したがって、θを90°未満とする場合、その下限としては、角度αに依存するものの、検出面2a’側における、光照射部Bの光照射方向と光透過性部材2’の長さ方向Xとの成す角が90°以上となる角度であることが好ましい。
 一方、図5に示す例では、光透過性部材2’の上面側を開放させたV字の溝角としてみたときの上向き傾斜面2b’と光照射部Bの光照射方向との成す角度であるθが90°を超える角度とされる。
 このように、θを90°を超える角度として、上向き傾斜面2b’に光を入射させると、上向き傾斜面2b’で屈折された光が光透過性部材2’の底面で反射され、上面に導かれる。反射の際、上向き傾斜面2b’で屈折された光が光透過性部材2’の底面で全反射され易く好ましい。
 ただし、θが90°よりも大きすぎると、反射光が導かれる上面の位置が上向き傾斜面2b’と遠ざかる結果、検出チップ1’が大型化することに留意する必要がある。
 θを90°を超える角度とする場合、その上限としては、角度αに依存するものの、光照射部Bの光照射方向が検出チップ1’の長さ方向Xに対し平行に至らない角度である。
 なお、ここでは、図3~5を挙げ、第1実施形態における検出チップ1の光透過性部材2の上向き傾斜面2bに対する光の入射角度の補足説明を行ったが、θとしては、第2実施形態における検出チップ10の光透過性部材12の上向き傾斜面12bに対しても、適用することができる。
 ただし、θを90°を超える角度とする場合、θが90°よりも大きすぎると、V字状の上面側切欠き部15の上向き傾斜面12bと反対側の面をなす光透過性部材12の構成部分が光照射の障害となり、θの角度設定に制約が生じることに留意する必要がある。逆に、θを90°及び90°未満とする場合には、このような制約が生じにくい。
<第3実施形態>
 次に、第3実施形態に係る目的物質検出装置を図6を参照しつつ、説明する。なお、図6は、第3実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。
 図6に示すように、第3実施形態における検出チップ20は、光透過性部材22を有する。光透過性部材22は、板状の部材であり、上面の一部が検出面22aとされ、胴部が上面から光を受光して内部に導光可能とされる本体部22cとされる。また、光透過性部材22の上面には、検出面22aを底とする函状体を形成するように検出面22aの周囲に側壁部24が立設され、函状体内に液体試料Aが導入される。
 光透過性部材22では、第1実施形態における光透過性部材2と異なり、側面が厚み方向Yに対し底面から上面側に向かうにつれて検出面22aから離れる方向に傾斜する下向き傾斜面22bとされ、側面と厚み方向Yで対向する位置における光透過性部材22の上面に前記光が入射される。
 ここで、上面に対して光照射部Bから照射される光は、本体部22cに導入後、例えば、図示のように下向き傾斜面22b、底面の順で反射され、検出面22aの位置で全反射されるとともに検出面22aの表面近傍にエバネッセント場を形成させる(第2の光入射構造)。
 このように、光透過性部材2の側面が上面側を向く第1実施形態における検出チップ1と異なり、光透過性部材2の側面が底面側を向くように形成される第3実施形態における検出チップ20においても、第1実施形態における検出チップ1と同様にエバネッセント場を得ることができる。
<第4実施形態>
 次に、第4実施形態に係る目的物質検出装置を図7を参照しつつ、説明する。なお、図7は、第4実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。
 図7に示すように、第4実施形態における検出チップ30は、光透過性部材32を有する。光透過性部材32では、第1実施形態における光透過性部材2と異なり、上面に液体試料Aを導入する液体試料貯留溝34が形成される。液体試料貯留溝34は、断面略V字状の形状で形成され、前記断面略V字状の溝の一辺を形成する面が検出面32aとされる。
 ここで、光透過性部材32では、第1実施形態における光透過性部材2と異なり、側面が厚み方向Yに対し底面から上面側に向かうにつれて検出面32aから離れる方向に傾斜する下向き傾斜面32bとされ、側面と厚み方向Yで対向する位置における光透過性部材32の上面に前記光が入射される。
 光照射部Bでは、光透過性部材32の上面に対し、厚み方向Yの方向、つまり、上面と垂直な方向から光を照射し、本体部32c内に入射される光は、下向き傾斜面32bで1度だけ反射され、即ち、本体部32cの上面及び底面で反射されることなく、本体部32c内を長さ方向Xに沿って伝播され、検出面32aの位置で全反射されるとともに検出面32aの表面近傍にエバネッセント場を形成させる(第2の光入射構造)。
 このように構成される検出チップ30では、本体部32c内に入射される光が本体部32cの上面及び底面で反射されることなく、検出面32aに導光されることから、上面及び底面での反射に伴う前記光の劣化を抑制することができる。
 また、これ以外の構成及び効果については、第1実施形態に係る目的物質検出装置と同様であるため、説明を省略する。
[第5実施形態]
 次に、第5実施形態に係る目的物質検出装置を図8を参照しつつ、説明する。なお、図8は、第5実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。
 第5実施形態における検出チップ40は、第2実施形態における検出チップ10の変形例であり、第2実施形態における検出チップ10と同様、検出面42a、上向き傾斜面42b、本体部42c及び液体試料貯留溝44を有する光透過性部材42を備える。
 第5実施形態における検出チップ40では、上面側切欠き部45が第2実施形態に係る検出チップ10と相違し、上面側切欠き部45に本体部42cの形成材料よりも屈折率の低い低屈折材料45aが埋設される。
 このように構成される検出チップ40では、上面側切欠き部45に低屈折材料45aが埋設され、光透過性部材42の上面全体がフラットな状態とされるため、液体試料Aの導入及び排出時に液体試料貯留溝44から侵入等する液体試料Aにより、上面側切欠き部45内が汚れることがない。
 また、このように上面側切欠き部45を構成する場合でも、低屈折材料45aと高屈折材料で形成される本体部42cとの界面をなす上向き傾斜面42bにおける光の屈折を利用して、第2実施形態における検出チップ10と同様に、光照射部Bから照射される光を本体部42c内で1度だけ反射させる状態で検出面42aに導光させることができる。
 なお、これ以外の構成及び効果については、第2実施形態に係る目的物質検出装置と同様であるため、説明を省略する。
 続いて、第5実施形態における検出チップ40について、図9,10に示す変形例を交えつつ、補足説明を行う。なお、図9,10の各図は、変形例を示す説明図である。
 図9に示すように、検出チップ40’は、光透過性部材42’の上面の一部が検出面42’とされ、かつ、上面側切欠き部45’が配された構造とされる。
 ここで、図9に示す例では、図8に示す例と比較して、光照射部Bが上面側切欠き部45’の上向き傾斜面42b’に対し、光透過性部材42’の上面側から光を照射することとされ、光透過性部材42’の上面側を開放させたV字の溝角としてみたときの上向き傾斜面42b’と光照射部Bの光照射方向との成す角度(図9中の角度β)が比較的小さな角度で設定される。
 βが小さい場合、上向き傾斜面42b’から導入される光が光透過性部材42’の底面で全反射されず、そのまま光透過性部材42’における本体部42c’の外に透過する成分を生じさせることから(図9中の点線矢印参照)、この状態になると、入射された前記光が前記裏面に対し前記全反射条件で照射されなくなってしまうことに留意する必要がある。
 したがって、βとしては、入射された前記光が検出面42’に対し全反射条件を満たしうる最小角度以上でなければならない。
 なお、上面側切欠き部45’に低屈折材料45a’が埋設されない場合も、光透過性部材42’の屈折率が高くないと、上向き傾斜面42b’で屈折された光が光透過性部材42’の底面で全反射されず、そのまま光透過性部材42’外に透過する成分を生じさせることに留意する必要がある。
 また、光入射角度βを比較的小さな角度とする場合であっても、図10に示すように、光透過性部材42’の底面の面内方向に対して傾斜して形成され、下向き傾斜面46aを有する底面側切欠き部46を光透過性部材42’の底面に形成することで、上面に設定される検出面42a’に対して全反射条件となるように反射光を導くように構成してもよい。なお、底面側切欠き部46は、上面側切欠き部45’と同様の方法で形成することができる。また、底面側切欠き部46には、上面側切欠き部45’と同様に低屈折材料46aが埋設されていてもよい。
 [第6実施形態]
 次に、第6実施形態に係る目的物質検出装置を図11を参照しつつ、説明する。なお、図11は、第6実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。
 第6実施形態における検出チップ50は、第3実施形態における検出チップ20の変形例である。
 図11に示すように、第6実施形態における検出チップ50は、光透過性部材52を有する。光透過性部材52では、第3実施形態における光透過性部材22と異なり、上面に液体試料Aを導入する液体試料貯留溝54が形成される。液体試料貯留溝54は断面凹状の形状で形成され、その底面が検出面52aとされる。
 また、光透過性部材52では、第3実施形態における光透過性部材22と異なり、底面に形成されるとともに下向き傾斜面52bを有する底面側切欠き部56が形成され、底面側切欠き部56には、必要に応じて本体部52cの形成材料よりも屈折率の低い低屈折材料56aが埋設される。
 このように構成される検出チップ50では、光透過性部材52の底面に底面側切欠き部56が形成されるため、液体試料Aの導入及び排出時に液体試料貯留溝54から侵入等する液体試料Aにより、底面側切欠き部56内が汚れることがない。
 また、底面側切欠き部56が低屈折材料56aを埋設させて構成されると、下向き傾斜面52bが外部に露出して大気中の塵などの付着により汚れることを防止することができる。
 また、底面側切欠き部56においても、下向き傾斜面52bにおける光の反射を利用して、光照射部Bから照射される光を下向き傾斜面52b及び底面で1度ずつ反射させて検出面52aに導光させることができる(第2の光入射構造)。
 なお、これ以外の構成及び効果については、第3実施形態に係る目的物質検出装置と同様であるため、説明を省略する。
 [第7実施形態]
 次に、第7実施形態に係る目的物質検出装置を図12を参照しつつ、説明する。なお、図12は、第7実施形態に係る目的物質検出装置の概要を説明する説明図である。
 第7実施形態に係る目的物質検出装置は、第1実施形態に係る目的物質検出装置を90°傾けて使用する変形例に係る。そのため、第7実施形態に係る目的物質検出装置では、第1実施形態に係る目的物質検出装置における「上面」及び「底面」が側方、「側面」が上方に位置するが、磁場印加部Cが配される側の光透過性部材62の面を「底面」として視たものとして、第1実施形態に係る目的物質検出装置における「上面」、「底面」及び「側面」の位置関係を維持した説明を行う。
 第7実施形態における検出チップ60は、第1実施形態における検出チップ1の変形例である。
 図12に示すように、第7実施形態における検出チップ60は、光透過性部材62を有する。光透過性部材62では、第1実施形態における光透過性部材2と異なり、側面に液体試料Aを導入する液体試料貯留溝64が形成される。
 液体試料貯留溝64は、断面凹状の穿設溝として形成され、前記穿設溝を構成する面のうち、前記底面と最も近い位置で対向する面が検出面62aとされる。
 このように第1発明に係る前記目的物質検出装置及び前記目的物質検出方法は、「上面」、「底面」及び「側面」の相対的な位置関係を維持すれば、任意の方向に前記目的物質検出装置の姿勢を変化させて用いることができる。
 なお、これ以外の構成及び効果については、第1実施形態に係る目的物質検出装置と同様であるため、説明を省略する。
 以下、第2発明について、詳細に説明する。
(目的物質検出チップ)
 第2発明の目的物質検出チップは、電場増強層と、光透過性部材とを備える。
<電場増強層>
 前記電場増強層は、裏面に対し全反射条件で光を照射したときに表面側に増強電場が形成される層である。
 前記電場増強層としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知の表面プラズモン励起層及び導波モード励起層を適用することができる。
 前記表面プラズモン励起層としては、例えば、金、銀、プラチナ及びアルミニウムの少なくともいずれかを含む金属層が挙げられる。
 前記金属層では、前記裏面側から照射される前記光によって前記表面に表面プラズモン共鳴が励起され、前記表面近傍に前記増強電場が得られる。
 前記金属層の厚みとしては、構成材料及び照射する光の波長によって最適値が決定されるが、この値は、フレネルの式を用いた計算から算出可能であることが知られている。一般に、近紫外から近赤外域で前記表面プラズモン共鳴を励起させる場合、前記金属層の厚みは、数nm~数十nmとなる。
 前記金属層の形成方法としては、特に制限はなく、蒸着法、スパッタリング法、CVD法、PVD法、スピンコート法等の公知の形成方法が挙げられるが、前記光透過性部材の形成材料がプラスチック材料やガラス材料である場合、前記金属層を直接、前記光透過性部材上に形成すると、密着性が低くなり、簡単にはがれてしまうことがある。
 そのため、密着性を向上させる観点から、前記光透過性部材の面上にニッケルやクロムを形成材料とする接着層を形成し、この接着層上に前記金属層を形成することが好ましい。
 目的物質又は前記目的物質を標識化する蛍光物質等からの光を検出する場合、前記目的物質及び前記蛍光物質等が前記金属層に近接すると、前記目的物質及び前記蛍光物質等が励起光から得たエネルギーが前記金属層に移行し、発光効率が低下するクエンチングと呼ばれる現象が生ずる場合がある。
 この場合、前記目的物質及び前記蛍光物質等を前記金属層の表面から離間させる目的で、前記金属層の表面上に被覆層を形成すると、前記クエンチングが抑制され、発光効率の低下を抑制することができる。
 前記被覆層としては、特に制限はなく、シリカガラス等のガラス材料、有機高分子材料等で形成される厚みが数nm~数十nmの透明な層により形成することができる。
 前記導波モード励起層としては、特に制限はなく、金属材料又は半導体材料で形成される薄膜層と、光透過性誘電材料で形成される誘電体層との積層体が挙げられる。
 前記導波モード励起層では、前記裏面側から照射される前記光によって前記誘電体層内に前記導波モードが励起され、前記表面近傍に前記増強電場が得られる。
 なお、前記導波モード励起層では、前記薄膜層が前記裏面側の層を構成し、前記誘電体層が前記表面側の層を構成する。
 前記金属材料としては、特に制限はなく、例えば、金、銀、銅、プラチナ、アルミニウム等が挙げられる。
 また、前記半導体材料としては、特に制限はなく、例えば、シリコン、ゲルマニウム等の半導体材料又は既知の化合物半導体材料が挙げられるが、中でも、安価で加工が容易なシリコンが好ましい。
 前記薄膜層の厚みとしては、前記表面プラズモン励起層と同様で、構成材料及び照射する光の波長によって最適値が決定されるとともに、この値は、フレネルの式を用いた計算から算出可能であることが知られている。一般に、近紫外から近赤外域の波長帯の光を使用する場合、前記薄膜層の厚みは、数nm~数百nmとなる。
 前記光透過性誘電材料としては、特に制限はなく、例えば、酸化シリコン、窒化シリコン、アクリル樹脂等の樹脂材料、酸化チタン等の金属酸化物、窒化アルミニウム等の金属窒化物が挙げられるが、作製が容易で、化学的安定性が高い酸化シリコンが好ましい。
 なお、前記薄膜層及び前記誘電体層の形成方法としては、材料に応じて公知の形成方法から適宜選択することができる。
<光透過性部材>
 前記光透過性部材は、前記電場増強層を前記裏面側から支持可能とされる支持面と、厚み方向に対し前記支持面が形成される面を上面として前記上面から底面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する上向き傾斜面及び前記厚み方向に対し前記底面から前記上面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する下向き傾斜面のいずれかの傾斜面と、前記光を受光して内部に導光可能とされる本体部とを有する全体略板状の部材である。
 また、前記光透過性部材は、前記上面側から照射され前記上向き傾斜面を通過させた前記光を前記本体部を介して前記裏面に対し全反射条件で入射させる第1の光入射構造及び前記上面側から照射され前記下向き傾斜面で反射された前記光を前記本体部を介して前記裏面に対し全反射条件で入射させる第2の光入射構造のいずれかの光入射構造を有するように構成される。
 なお、前記光透過性部材において、光学的に作用する面、つまり、光が入射する面や光が反射する面は、光学的に平滑であることが好ましい。
 前記光透過性部材は、従来の検出チップにおける光学プリズムの役割を有するとともに、前記目的物質検出チップにおける前記電場増強層が形成される位置の下側に磁場印加部を配設可能とするため、前記光透過性部材の上面側から照射される前記光を前記電場増強層の前記裏面に導光させる役割を有する。
 即ち、前記光透過性部材は、上面側から照射される前記光を前記増強電場層の前記裏面に対し全反射条件で入射させる前記光入射構造を有することを特徴とする。
 前記光透過性部材の形成材料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、射出成型により量産可能なポリスチレン、ポリカーボネート、シクロオレフィン、アクリル等のプラスチック材料、高い透明性を確保できるシリカガラス等のガラス材料が好ましい。前記ポリスチレン、前記シクロオレフィンは、自家蛍光が少なくノイズの低減が可能であり、前記ポリカーボネートは高い屈折率を実現できるため小型化が可能になる。また、前記アクリルは、高い透明性を持つため導光時の光の減衰を抑制することが可能である。
 前記光透過性部材の厚みとしては、特に制限はないが、剛性、導光性能、及び、磁気の減衰度合いの観点から、0.1mm~10.0mmであることが好ましい。前記厚みが0.1mm未満であると、割れ、歪みなどが生じやすく取り扱いが難しくなることがある。また、前記厚みが入射光のビーム径より小さいと入射時に光のロスが生じると共に、ノイズ光が生じるため、前記厚みとしては、前記ビーム径よりも大きいことが好ましい。また、裏面より磁場を印加することから、前記厚みが10.0mmを超えると減衰により好適な磁場を表面上に付与することが難しくなることがある。また、前記厚みが5.0mm以下であれば、磁場の減衰を大きく抑制することができる。
 前記光透過性部材としては、前記電場増強層(及び前記支持面)が形成される領域に前記目的物質の存否等が検証される液体試料が導入される。導入される前記液体試料を保持するための構成としては、特に制限はないが、次の構成を適用することが好ましい。
 即ち、一つの構成として、前記光透過性部材の上面の一部が前記支持面とされるとともに前記支持面を底とする函状体を形成するように前記支持面の周囲に側壁部が立設される構成が挙げられる。この構成では、前記函状体内に前記液体試料が保持される。なお、前記側壁部としては、例えば、前記光透過性部材と同じ材料及び形成方法で形成することができる。
 また、他の一つの構成として、前記光透過性部材の前記上面に少なくとも一部を支持面とする液体試料貯留溝が形成される構成が挙げられる。この構成では、前記液体試料貯留溝内に前記液体試料が保持される。なお、前記液体試料貯留溝としては、前記光透過性部材を構成する板状部材の形成時に成形加工により形成してもよいし、前記板状部材形成後、切削加工により形成してもよい。
 前記液体試料貯留溝を形成する場合、前記溝の形状としては、断面視で凹状、V字状、台形状等の任意の形状を適用することができるが、半円形のような平坦な面がない形状であると前記支持面を形成できないため、こうした形状は除かれる。
 また、前記液体試料貯留溝としては、特に制限はないが、前記支持面として前記光透過性部材の厚み方向に対し上面から底面側に向かうにつれて前記傾斜面から離れる方向に傾斜する傾斜支持面を有する構成としてもよい。即ち、このような傾斜支持面を前記支持面として有すると、前記本体部内を伝播する前記光を前記支持面上の前記電場増強層に前記全反射条件で照射させるために設定される前記傾斜面に対する前記光の入射角度を広範囲で設定することができ、設定の自由度を広げることができる。
 前記目的物質検出チップは、前記光透過性部材の底面側に配される前記磁場印加部との競合を避ける観点に基づき、前記光透過性部材の上面側に配された光照射部から前記光が照射されることを前提とした構成とされる。
 即ち、前記光入射構造では、前記光透過性部材の上面側から照射される前記光の進行方向を前記傾斜面により変更させることで、前記電場増強層の裏面に対して前記光を全反射条件で入射可能とする。
 前記傾斜面としては、このような役割を果たす限り、前記光透過性部材の側面として形成されていてもよく、また、前記光透過性部材の上面及び底面の少なくともいずれかに形成される切欠き部の構成面として形成されていてもよい。
 前記切欠き部としては、前記光透過性部材の上面に形成されるとともに前記上向き傾斜面を有する上面側切欠き部及び前記光透過性部材の底面に形成されるとともに前記下向き傾斜面を有する底面側切欠き部の少なくともいずれかとして形成される。なお、前記切欠き部としては、前記光透過性部材を構成する板状部材の形成時に成形加工により形成してもよいし、前記板状部材形成後、切削加工により形成してもよい。
 また、前記上面側切欠き部としては、切欠かれた部分が空隙とされてもよいが、この部分に前記液体試料が侵入した場合に洗浄しにくいため、前記本体部よりも屈折率の低い低屈折材料が埋設されてもよい。即ち、前記上面側切欠き部が前記低屈折材料で埋設されると、前記上面側切欠き部内に前記液体試料が侵入することを防止することができる。
 また、前記低屈折材料を用いるため、前記上面側切欠き部の前記上向き傾斜面と前記本体部との界面における屈折を利用して前記電場増強層に前記光を導光させることができる。
 なお、前記上面側切欠き部に前記低屈折材料を埋設させる場合、例えば、屈折率が1.4程度の公知のプラスチック材料を前記上面側切欠き部に埋設させ、前記本体部を屈折率が1.6程度の公知のプラスチック材料で形成することで、前記光透過性部材を構成することができる。
 また、前記底面側切欠き部では、前記光透過性部材の底面に形成されることから、上面側に導入される前記液体試料が切欠かれた部分に侵入することがない。
 ただし、前記底面側切欠き部の前記下向き傾斜面が外部に露出して大気中の塵などの付着により汚れることを防止する観点から、前記上面側切欠き部と同様、切欠かれた部分に前記低屈折材料を埋設させることが好ましい。
 ところで、前記傾斜面における光入射位置と前記電場増強層における光照射位置との間の距離が長い場合、前記本体部内を進行する前記光が弱められ、また、前記本体部での前記光の反射が生じるごとに前記光が弱められる。一方で、光入射位置と前記電場増強層における光照射位置の距離が近すぎると、入射時に生じる散乱などによるノイズが光信号中に混じり、検出精度を落とす原因になる。
 したがって、前記傾斜面における光入射位置と前記電場増強層における光照射位置との間の距離としては、好適な範囲が存在し、具体的には、最短距離で1.0mm~50.0mmとされることが好ましい。
 このような距離とすると、前記本体部内を進行する前記光が弱まることを抑制することができ、かつ、ノイズを抑制し、また、前記本体部で前記光が反射する回数を減らし、最適には、前記回数が1回となるように設定できる。また、前記傾斜面が前記下向き傾斜面として形成される場合も、前記本体部で前記光が反射する回数を減らすことが好ましく、前記本体部での前記光が反射する回数をゼロとし、前記下向き傾斜面における1回の反射だけで前記電場増強層に前記光を入射させるように設定されることが最適である。
 なお、本明細書において「光透過性」とは、可視光透過率が0.5%以上であることを示す。
 なお、前記光入射構造としては、前記傾斜面の傾斜角度、前記傾斜面に対する前記光の照射角度、前記光透過性部材の材質(屈折率)、前記傾斜面における光入射位置と前記電場増強層における光照射位置との間の距離及び前記光透過性部材の厚み等の条件を与えて、前記光透過性部材の上面側から照射される前記光の前記電場増強層の裏面に対する経路を公知の光学的算出方法で算出することで設定することができる。
(目的物質検出装置)
 第2発明の目的物質検出装置は、第2発明の前記目的物質検出チップと、光照射部と、磁場印加部とを有し、更に、必要に応じて、光検出部を備える。なお、前記目的物質検出チップについては、第2発明の前記目的物質検出チップについて説明した事項を適用することができるため、重複した説明を省略することとする。
<光照射部>
 光照射部は、前記光透過性部材の上面側に配され、前記光透過性部材の前記光入射構造を介して前記電場増強層の裏面に全反射条件で光を照射可能とされる部である。
 前記光照射部の光源としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知のランプ、LED、レーザー等が挙げられる。前記目的物質検出装置では、前記電場増強層の裏面に対し前記全反射条件で前記光を照射することで表面近傍に前記増強電場を形成し、前記目的物質と磁性粒子とを含む結合体から光信号を発生させることを検出原理とする。そのため前記光照射部に求められる役割としては、前記電場増強層の裏面に対し前記全反射条件で前記光を照射することのみであり、このような役割を担うものであれば光源の選択に制限がない。
 なお、ランプ、LED等の放射光源を用いる場合には、照射光の照射方向を特定の方位に規制するコリメートレンズ等の案内部を用いて、前記光入射部に前記照射光を入射させることができる。
 また、前記光入射部に入射させる前記光としては、前記結合体に対して、蛍光を励起可能な波長を持つ単色光か、または、ランプ、LED等の広い波長帯域を持つ光源からの光をバンドパスフィルタ等の光学フィルタに透過させて単色化し、前記蛍光を励起可能な波長のみとした光とすることが好ましい。
<磁場印加部>
 前記磁場印加部は、前記光透過性部材の底面側に配される部である。
 前記磁場印加部として、特に制限はないが、前記液体試料に強い磁場を及ぼす観点から、前記目的物質検出チップにおける前記電場増強層と前記厚み方向で対向する位置における前記光透過性部材底面の直下に配されることが好ましい。
 前記磁場印加部の構成部材としては、前記液体試料が導入される領域に磁場を印加可能であれば、特に制限はなく、公知の永久磁石、電磁石等を挙げることができる。
 前記液体試料には、磁気ビーズ等の公知の磁性粒子が添加され、前記目的物質が存在する場合、前記目的物質と前記磁性粒子との結合体が形成される。なお、前記目的物質が蛍光を生じにくい物質である場合には、前記目的物質と特異的に吸着ないし結合して前記目的物質を標識化する蛍光標識物質を用いてもよい。前記蛍光標識物質としては、例えば、蛍光色素、量子ドット、蛍光染色剤等の公知の蛍光物質を用いることができる。
 また、前記目的物質の検出方法としては、蛍光検出に加え、前記増強電場で強められた光を受けて前記結合体から発せられる散乱光を検出する方法も挙げられる。
 前記散乱光を検出する場合、前記目的物質が散乱光を生じにくい物質である場合には、前記目的物質と特異的に吸着ないし結合して光を散乱する光散乱物質を用いてもよい。前記光散乱物質としては、例えば、ナノ粒子、例えばポリスチレンビーズや金ナノ粒子などが挙げられる。
 なお、前記目的物質、前記磁性粒子、前記蛍光標識物質及び前記光散乱物質の結合方法としては、特に制限はなく、物質に応じて、物理吸着、抗原-抗体反応、DNAハイブリダイゼーション、ビオチン-アビジン結合、キレート結合、アミノ結合などの公知の結合方法を適用することができる。
 前記目的物質等からの光は、前記電場増強層の表面近傍に形成される前記増強電場内で生じるため、短時間で前記光信号の検出を行うためには、前記液体試料中を浮遊する前記結合体を前記電場増強層の表面近傍まで引き寄せることが必要となる。
 前記磁場印加部では、前記磁場の印加により、前記液体試料中を浮遊する前記結合体を前記電場増強層の表面に引き寄せ、短時間での検出を可能とする。
 ところで、前記検出では、前記電場増強層の表面におけるキズ等を原因とするノイズを排除した検出を行うため、前記磁場印加部による前記磁場の印加を伴う前記結合体の移動前後の様子を比較観察することで、前記結合体移動前における光信号に含まれるノイズ信号を排除した検出を行うこととしてもよい。このような検出によれば、前記磁性粒子と結合した前記目的物質が前記磁場印加部により移動するのに対し、前記検出チップ表面のキズ等に生ずるノイズは、前記磁場印加部により移動しないことから、移動する光信号に着目した検出を行うことで、前記ノイズ信号を排除することができる。
 このような検出を行う場合、前記磁場印加部としては、前記結合体の移動前後の様子を比較観察するため、前記光透過性部材の底面側において、前記磁場を印加した状態で前記電場増強層表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動可能な部材とされ、例えば、前記永久磁石等と前記永久磁石等を支持した状態でスライド移動可能なスライド部材とで構成することができる。
<光検出部>
 前記光検出部は、前記目的物質検出チップの前記電場増強層が形成される面(前記電場増強層の表面)上に配され、前記電場増強層の表面近傍の領域を検出領域とし、前記光の照射に伴い前記目的物質を含む前記結合体から発せられる光信号を検出可能とされる。
 前記光検出部としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知のフォトダイオード、光電子増倍管等の公知の光検出器やCCDイメージセンサ、CMOSイメージセンサ等の公知の撮像デバイスを用いることができる。
(目的物質検出方法)
 第2発明の目的物質検出方法は、少なくとも、光照射工程と、磁場印加工程とを含み、更に、必要に応じて、光検出工程を含む。
<光照射工程>
 前記光照射工程は、第2発明の前記目的物質検出チップに対し、前記光透過性部材の上面側から前記光透過性部材の前記光入射構造を介して前記電場増強層の裏面に全反射条件で光を照射する工程である。
 なお、前記光照射工程の実施方法としては、第2発明の前記目的物質検出装置における前記光照射部について説明した事項を適用することができるため、重複した説明を省略することとする。
<磁場印加工程>
 前記磁場印加工程は、前記磁場印加部により前記光透過性部材の底面側から磁場を印加する工程であり、好適には、前記磁場を印加した状態で前記磁場印加部を前記電場増強層の面内方向と平行なベクトル成分を持つ方向に移動させる工程である。
 なお、前記磁場印加工程の実施方法としては、第2発明の前記目的物質検出装置における前記磁場印加部について説明した事項を適用することができるため、重複した説明を省略することとする。
<光検出工程>
 前記光検出工程は、前記光の照射に伴い前記結合体から発せられる光信号を検出する工程である。
 なお、前記光検出工程の実施方法としては、第2発明の前記目的物質検出装置における前記光検出部について説明した事項を適用することができるため、重複した説明を省略することとする。
[第1実施形態]
  以下では、第2発明の前記目的物質検出チップの構成例を図面を参照しつつ、具体的に説明する。
 先ず、第1実施形態に係る目的物質検出チップを図15を参照しつつ、説明する。なお、図15は、第1実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。
 図15に示すように、第1実施形態に係る目的物質検出チップ101は、電場増強層102と、光透過性部材103とを有する。
 電場増強層102は、裏面に対し全反射条件で光を照射したときに表面側に増強電場が形成される層として形成される。
 また、光透過性部材103は、板状の部材であり、上面の一部が電場増強層102を前記裏面側から支持可能とされる支持面103aとされ、側面が上向き傾斜面103bとされ、胴部が上面から光を受光して内部に導光可能な本体部103cとされる。
 また、光透過性部材103の上面には、支持面103aを底とする函状体を形成するように支持面103aの周囲に側壁部105が立設され、前記函状体内に液体試料Aが導入される。
 ここで、光透過性部材103の側面として構成される上向き傾斜面103bは、光透過性部材103の厚み方向Yに対し上面から底面側に向かうにつれて支持面103aから離れる方向に傾斜する面とされ、上向き傾斜面103bと対向して配される光照射部Bから照射される光が光透過性部材103の厚み方向Yと直交する長さ方向Xに対して傾斜する状態で本体部103c内に入射される。
 本体部103c内に入射される光は、本体部103cの上面及び底面で複数回反射されつつ、本体部103c内を長さ方向Xに沿って伝播される。
 本体部103c内を伝播する光は、支持面103a上の電場増強層102の裏面の位置で全反射され、電場増強層102の表面近傍に増強電場を形成させる(第1の光入射構造)。
 目的物質検出チップ101を用いて目的物質検出装置を構成する場合、図15に示すように、光照射部Bが光透過性部材103の上面側における、光透過性部材103側面の上向き傾斜面103bと対向した位置に配され、磁場印加部Cが電場増強層102と厚み方向Yで対向する位置における光透過性部材103底面の直下に配され、光検出部Dが光透過性部材103の上面側に配される。
 磁場印加部Cでは、磁場の印加により、液体試料A中を浮遊する目的物質と磁性粒子とを含む結合体を前記結合体が光信号を発することが可能な電場増強層102の表面近傍に引き寄せ、短時間での測定を可能とする。また、磁場印加部Cを例えば長さ方向Xにスライド移動させ、スライド移動前後の光信号の検出を行うことで、磁場印加部Cのスライド移動に追従する前記結合体のみを検出可能とし、電場増強層102表面におけるキズ等を原因とするノイズ信号を排除した検出を行うことができる。
 また、光検出部Dでは、電場増強層102表面近傍における前記結合体からの光を検出可能とされる。
 このように目的物質検出チップ101を用いて前記目的物質検出装置を構成する場合、光照射部Bと磁場印加部Cとの配設位置を競合させず、磁場印加部Cを光透過性部材103底面における電場増強層102との距離が近い位置に配設させることができ、かつ、光照射部Bから照射される光を電場増強層102の裏面に対し全反射条件で照射させることができるため、電場増強層102と離れた位置から磁場を印加可能な強力な磁場印加部材を用いる必要がなく、装置が大掛かりになることを避けることができ、前記目的物質検出装置を小型で低コストに製造可能とする。
[第2実施形態]
 次に、第2実施形態に係る目的物質検出チップを図16を参照しつつ、説明する。なお、図16は、第2実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。
 図16に示すように、第2実施形態に係る目的物質検出チップ110は、電場増強層112と、光透過性部材113とを有する。
 光透過性部材113では、第1実施形態における光透過性部材103と異なり、上面に液体試料Aを導入する液体試料貯留溝115が形成される。液体試料貯留溝115は断面凹状の形状で形成され、その底面が電場増強層112の支持面113aとされる。
 また、光透過性部材113では、第1実施形態における光透過性部材103と異なり、上面に形成されるとともに上向き傾斜面113bを有する上面側切欠き部116が形成される。上面側切欠き部116は、断面略V字状の形状で形成される。
 ここで、上向き傾斜面113bは、光透過性部材113の厚み方向Yに対し上面から底面側に向かうにつれて支持面113aから離れる方向に傾斜する面とされ、上向き傾斜面113bと対向して配される光照射部Bから照射される光が光透過性部材113の厚み方向Yと直交する長さ方向Xに対して傾斜する状態で本体部113c内に入射される。
 また、上向き傾斜面113bにおける光入射位置と電場増強層112における光照射位置との間の距離Wは、最短距離として1.0mm~50.0mmが好適である。
 また、本体部113c内に入射される光は、本体部113cの底面で可能な限り少ない回数、好ましくは1度だけ反射された状態で、支持面113a上の電場増強層112の裏面に導光され、前記裏面の位置で全反射されるとともに電場増強層112の表面近傍に増強電場を形成させる(第1の光入射構造)。
 目的物質検出チップ110を用いて目的物質検出装置を構成する場合、図16に示すように、光照射部Bが光透過性部材113の上面側における、上向き傾斜面113bと対向した位置に配される。
 このように構成される目的物質検出チップ110では、上向き傾斜面113bにおける光入射位置と電場増強層112における光照射位置との間の距離Wが、第1実施形態に係る目的物質検出チップ101における上向き傾斜面103b(光透過性部材103の側面)における光入射位置と電場増強層102における光照射位置との間の距離よりも短いことから、本体部113c内を進行する光の減衰を抑えることができる。
 なお、これ以外の構成及び効果については、第1実施形態における目的物質検出チップ101及び目的物質検出装置と同様であるため、説明を省略する。
 続いて、第1実施形態に係る目的物質検出チップ101における光透過性部材103の上向き傾斜面103bに対する光の入射角度に関し、図17~19を参照しつつ、補足説明を行う。なお、図17~19の各図は、光の入射角度の一例を示す説明図である。
 図17に示すように、目的物質検出チップ101’は、光透過性部材103’の上面に電場増強層102’が配された構造とされる。
 ここで、図17に示す例では、光透過性部材103’の側面として構成される上向き傾斜面103b’に対し、法線方向、即ち、上向き傾斜面103b’と垂直な方向から光が透過性部材103’内に入射されるよう、光照射部Bの光照射方向が設定され、光透過性部材103’の上面側を開放させたV字の溝角としてみたときの上向き傾斜面103b’と光照射部Bの光照射方向との成す角度であるθが90°とされる。
 このように、θを90°として、上向き傾斜面103b’と垂直な方向から光を入射させると、上向き傾斜面103b’での光の屈折が生じない。また、光透過性部材103’の厚み方向Yと光透過性部材103’の底面に対する光の入射方向との成す角度θと、光透過性部材103’の底面と側面(上向き傾斜面103b’)との成す角度αとが等しくなる(θ=α)。そして、これらの事象は、光透過性部材103’の材質に依らずに生じることから、角度αの設定に基づき、一意に光透過性部材103’の本体部における光の反射位置を特定して目的物質検出チップにおける電場増強層の設定及び目的物質検出装置における光学系の設定を簡単化させることができる。図17に示す例では、角度αが小さすぎるとθも小さくなりすぎ、入射された光が光透過性部材103’の底面で全反射されず、そのまま光透過性部材103’外に透過する成分を生じさせる。この状態になると、入射された前記光が前記裏面に対し前記全反射条件で照射されなくなってしまうことから、留意する必要がある。一方、角度αが大きすぎると上面側からの光の入射が困難になることから、角度αとしては、50°~80°が好ましい。
 一方、図18に示す例では、光透過性部材103’の上面側を開放させたV字の溝角としてみたときの上向き傾斜面103b’と光照射部Bの光照射方向との成す角度であるθが90°未満とされる。
 このように、θを90°未満として、上向き傾斜面103b’に光を入射させると、上向き傾斜面103b’で屈折された光が光透過性部材103’の底面で反射され、上面に導かれる。
 ただし、光入射角度θが90°よりも小さすぎると、上向き傾斜面103b’で屈折された光が光透過性部材103’の底面で全反射されず、そのまま光透過性部材103’外に透過する成分を生じさせる。この状態になると、入射された前記光が前記裏面に対し前記全反射条件で照射されなくなってしまうことから、留意する必要がある。
 また、θが90°よりも小さすぎると、反射光が導かれる上面の位置が側面(上向き傾斜面103b’)に近づきすぎとなり、この上面の位置に電場増強層102’を形成し難くなることに留意する必要がある。
 したがって、θを90°未満とする場合、その下限としては、角度αに依存するものの、電場増強層102’側における、光照射部Bの光照射方向と光透過性部材103’の長さ方向Xとの成す角が90°以上となる角度であることが好ましい。
 一方、図19に示す例では、光透過性部材103’の上面側を開放させたV字の溝角としてみたときの上向き傾斜面103b’と光照射部Bの光照射方向との成す角度であるθが90°を超える角度とされる。
 このように、θを90°を超える角度として、上向き傾斜面103b’に光を入射させると、上向き傾斜面103b’で屈折された光が光透過性部材103’の底面で反射され、上面に導かれる。反射の際、上向き傾斜面103b’で屈折された光が光透過性部材103’の底面で全反射され易く好ましい。
 ただし、θが90°よりも大きすぎると、反射光が導かれる上面の位置が上向き傾斜面103b’と遠ざかる結果、目的物質検出チップ101’が大型化することに留意する必要がある。
 θを90°を超える角度とする場合、その上限としては、角度αに依存するものの、光照射部Bの光照射方向が目的物質検出チップ101’の長さ方向Xに対し平行に至らない角度である。
 なお、ここでは、図17~19を挙げ、第1実施形態に係る目的物質検出チップ101における光透過性部材103の上向き傾斜面103bに対する光の入射角度の補足説明を行ったが、θとしては、第2実施形態に係る目的物質検出チップ110における光透過性部材113の上向き傾斜面113bに対しても、適用することができる。
 ただし、θを90°を超える角度とする場合、θが90°よりも大きすぎると、V字状の上面側切欠き部116の上向き傾斜面113bと反対側の面をなす光透過性部材113の構成部分が光照射の障害となり、θの角度設定に制約が生じることに留意する必要がある。逆に、θを90°及び90°未満とする場合には、このような制約が生じにくい。
<第3実施形態>
 次に、第3実施形態に係る目的物質検出チップを図20を参照しつつ、説明する。なお、図20は、第3実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。
 図20に示すように、第3実施形態に係る目的物質検出チップ120は、電場増強層122と、光透過性部材123とを有する。
光透過性部材123は、板状の部材であり、上面の一部が電場増強層122を裏面側から支持可能とされる支持面123aとされ、胴部が上面から光を受光して内部に導光可能とされる本体部123cとされる。また、光透過性部材123の上面には、支持面123aを底とする函状体を形成するように支持面123aの周囲に側壁部125が立設され、函状体内に液体試料Aが導入される。
 光透過性部材123では、第1実施形態における光透過性部材103と異なり、側面が厚み方向Yに対し底面から上面側に向かうにつれて支持面123aから離れる方向に傾斜する下向き傾斜面123bとされ、側面と厚み方向Yで対向する位置における光透過性部材123の上面に前記光が入射される。
 ここで、上面に対して光照射部Bから照射される光は、本体部123cに導入後、例えば、図示のように下向き傾斜面123b、底面の順で反射され、支持面123a上の電場増強層122の裏面の位置で全反射されるとともに電場増強層122の表面近傍に増強電場を形成させる(第2の光入射構造)。
 このように、光透過性部材103の側面が上面側を向く第1実施形態に係る目的物質検出チップ101と異なり、光透過性部材103側面が底面側を向くように形成される第3実施形態に係る目的物質検出チップ120においても、第1実施形態における目的物質検出チップ101と同様に増強電場を得ることができる。
<第4実施形態>
 次に、第4実施形態に係る目的物質検出チップを図21を参照しつつ、説明する。なお、図21は、第4実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。
 図21に示すように、第4実施形態に係る目的物質検出チップ130は、電場増強層132と、光透過性部材133とを有する。
 光透過性部材133では、第1実施形態における光透過性部材103と異なり、上面に液体試料Aを導入する液体試料貯留溝135が形成される。液体試料貯留溝135は、断面略V字状の形状で形成され、前記断面略V字状の溝の一辺を形成する面が電場増強層132の支持面133aとされる。
 ここで、光透過性部材133では、第1実施形態における光透過性部材103と異なり、側面が厚み方向Yに対し底面から上面側に向かうにつれて支持面133aから離れる方向に傾斜する下向き傾斜面133bとされ、側面と厚み方向Yで対向する位置における光透過性部材133の上面に前記光が入射される。
 光照射部Bでは、光透過性部材133の上面に対し、厚み方向Y方向、つまり、上面と垂直な方向から光を照射し、本体部133c内に入射される光は、下向き傾斜面133bで1度だけ反射され、即ち、本体部133cの上面及び底面で反射されることなく、本体部133c内を長さ方向Xに沿って伝播され、支持面133a上の電場増強層132の裏面の位置で全反射されるとともに電場増強層132の表面近傍に増強電場を形成させる(第2の光入射構造)。
 このように構成される目的物質検出チップ130では、本体部133c内に入射される光が本体部133cの上面及び底面で反射されることなく、支持面133a上の電場増強層132の裏面に導光されることから、上面及び底面での反射に伴う前記光の劣化を抑制することができる。
 また、これ以外の構成及び効果については、第1実施形態における目的物質検出チップ101及び目的物質検出装置と同様であるため、説明を省略する。
[第5実施形態]
 次に、第5実施形態に係る目的物質検出チップを図22を参照しつつ、説明する。なお、図22は、第5実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。
 第5実施形態に係る目的物質検出チップ140は、第2実施形態に係る目的物質検出チップ110の変形例であり、第2実施形態に係る目的物質検出チップ110と同様、電場増強層142と、支持面143a、上向き傾斜面143b、本体部143c及び液体試料貯留溝145を有する光透過性部材143とを備える。
 第5実施形態に係る目的物質検出チップ140では、上面側切欠き部146が第2実施形態に係る目的物質検出チップ110と相違し、上面側切欠き部146に本体部143cの形成材料よりも屈折率の低い低屈折材料146aが埋設される。
 このように構成される目的物質検出チップ140では、上面側切欠き部146に低屈折材料146aが埋設され、光透過性部材143の上面全体がフラットな状態とされるため、液体試料Aの導入及び排出時に液体試料貯留溝145から侵入等する液体試料Aにより、上面側切欠き部146内が汚れることがない。
 また、このように上面側切欠き部146を構成する場合でも、低屈折材料146aと高屈折材料で形成される本体部143cとの界面をなす上向き傾斜面143bにおける光の屈折を利用して、第2実施形態に係る目的物質検出チップ110と同様に、光照射部Bから照射される光を本体部143c内で1度だけ反射させる状態で電場増強層142の裏面に導光させることができる。
 なお、これ以外の構成及び効果については、第2実施形態における目的物質検出チップ110及び目的物質検出装置と同様であるため、説明を省略する。
 続いて、第5実施形態に係る目的物質検出チップ140について、図23,24に示す変形例を交えつつ、補足説明を行う。なお、図23,24の各図は、変形例を示す説明図である。
 図23に示すように、目的物質検出チップ140’は、光透過性部材143’の上面に対して、電場増強層142’が配され、かつ、上面側切欠き部146’が配された構造とされる。
 ここで、図23に示す例では、図22に示す例と比較して、光照射部Bが上面側切欠き部146’の上向き傾斜面143b’に対し、光透過性部材143’の上面側から光を照射することとされ、光透過性部材143’の上面側を開放させたV字の溝角としてみたときの上向き傾斜面143b’と光照射部Bの光照射方向との成す角度(図23中の角度β)が比較的小さな角度で設定される。
 βが小さい場合、上向き傾斜面143b’から導入される光が光透過性部材143’の底面で全反射されず、そのまま光透過性部材143’における本体部143c’の外に透過する成分を生じさせることから(図23中の点線矢印参照)、この状態になると、入射された前記光が前記裏面に対し前記全反射条件で照射されなくなってしまうことに留意する必要がある。
 したがって、βとしては、入射された前記光が前記裏面に対し前記全反射条件を満たしうる最小角度以上でなければならない。
 なお、上面側切欠き部146’に低屈折材料146a’が埋設されない場合も、光透過性部材143’の屈折率が高くないと、上向き傾斜面143b’で屈折された光が光透過性部材143’の底面で全反射されず、そのまま光透過性部材143’外に透過する成分を生じさせることに留意する必要がある。
 また、光入射角度βを比較的小さな角度とする場合であっても、図24に示すように、光透過性部材の底面の面内方向に対して傾斜して形成され、下向き傾斜面147aを有する底面側切欠き部147を光透過性部材143’の底面に形成することで、上面に配される電場増強層142’に対して全反射条件となるように反射光を導くように構成してもよい。なお、底面側切欠き部147は、上面側切欠き部146’と同様の方法で形成することができる。また、底面側切欠き部147には、上面側切欠き部146’と同様に低屈折材料が埋設されていてもよい。
 [第6実施形態]
 次に、第6実施形態に係る目的物質検出チップを図25を参照しつつ、説明する。なお、図25は、第6実施形態に係る目的物質検出チップの概要を説明する説明図である。
 第6実施形態に係る目的物質検出チップ150は、第3実施形態に係る目的物質検出チップ120の変形例である。図25に示すように、第6実施形態に係る目的物質検出チップ150は、電場増強層152と、光透過性部材153とを有する。
 光透過性部材153では、第3実施形態における光透過性部材123と異なり、上面に液体試料Aを導入する液体試料貯留溝155が形成される。液体試料貯留溝155は断面凹状の形状で形成され、その底面が電場増強層152の支持面153aとされる。
 また、光透過性部材153では、第3実施形態における光透過性部材123と異なり、底面に形成されるとともに下向き傾斜面153bを有する底面側切欠き部157が形成され、底面側切欠き部157には、必要に応じて本体部153cの形成材料よりも屈折率の低い低屈折材料157aが埋設される。
 このように構成される目的物質検出チップ150では、光透過性部材153の底面に底面側切欠き部157が形成されるため、液体試料Aの導入及び排出時に液体試料貯留溝155から侵入等する液体試料Aにより、底面側切欠き部157内が汚れることがない。
 また、底面側切欠き部157が低屈折材料157aを埋設させて構成されると、下向き傾斜面153bが外部に露出して大気中の塵などの付着により汚れることを防止することができる。
 また、底面側切欠き部157においても、下向き傾斜面153bにおける光の反射を利用して、光照射部Bから照射される光を下向き傾斜面153b及び底面で1度ずつ反射させて電場増強層152の裏面に導光させることができる(第2の光入射構造)。
 なお、これ以外の構成及び効果については、第3実施形態における目的物質検出チップ120及び目的物質検出装置と同様であるため、説明を省略する。
 以下、第3発明について、詳細に説明する。
(目的物質検出チップ)
 第3発明の目的物質検出チップは、光透過性基板を有し、必要に応じて、電場増強層、凹凸構造付与層を有する。
<光透過性基板>
 前記光透過性基板は、光を透過させる部材である。
 前記光透過性基板としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ガラス基板やプラスチック基板等の公知の光透過性基板を用いることができる。
 また、前記光透過性基板に凹凸面を形成する場合、前記凹凸面の形成方法としては、特に制限はなく、射出成型法、ナノインプリント法、エッチング法等の公知の方法を挙げることができる。
 なお、本明細書において、「光透過性」とは、可視光透過率が0.5%以上であることを示す。
<電場増強層>
 前記電場増強層は、一の面に全反射条件で光が照射されたとき他の面上に増強電場が形成される層である。
 前記電場増強層としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知の表面プラズモン励起層及び導波モード励起層を適用することができる。
 前記表面プラズモン励起層としては、例えば、金、銀、プラチナ及びアルミニウムの少なくともいずれかを含む金属層が挙げられる。
 前記金属層では、前記一の面に照射される前記光によって前記他の面上に表面プラズモン共鳴が励起され、前記他の面上に前記増強電場が得られる。
 前記金属層の厚みとしては、構成材料及び照射する光の波長によって最適値が決定されるが、この値は、フレネルの式を用いた計算から算出可能であることが知られている。一般に、近紫外から近赤外域で前記表面プラズモン共鳴を励起させる場合、前記金属層の厚みは、数nm~数十nmとなる。
 前記金属層の形成方法としては、特に制限はなく、蒸着法、スパッタリング法、CVD法、PVD法、スピンコート法等の公知の形成方法が挙げられるが、前記光透過性基板の形成材料がプラスチック材料やガラス材料である場合、前記金属層を直接、前記光透過性部材上に形成すると、密着性が低くなり、簡単にはがれてしまうことがある。
 そのため、密着性を向上させる観点から、前記光透過性基板の面上にニッケルやクロムを形成材料とする接着層を形成し、この接着層上に前記金属層を形成することが好ましい。
 目的物質又は前記目的物質を標識化する標識物質からの発光を観察する場合、前記目的物質及び前記標識物質が、前記金属層に近接すると、前記目的物質及び前記蛍光物質等が励起光から得たエネルギーが前記金属層に移行し、発光効率が低下するクエンチングと呼ばれる現象が生ずる場合がある。
 この場合、前記目的物質及び前記標識物質を前記金属層の表面から離間させる目的で、前記金属層の表面上に被覆層を形成すると、前記クエンチングが抑制され、発光効率の低下を抑制することができる。
 前記被覆層としては、特に制限はなく、シリカガラス等のガラス材料、有機高分子材料等で形成される厚みが数nm~数十nmの透明な層により形成することができる。
 前記導波モード励起層としては、特に制限はなく、金属材料又は半導体材料で形成される薄膜層と、光透過性誘電材料で形成される誘電体層との積層体が挙げられる。
 前記導波モード励起層では、前記一の面に照射される前記光によって前記誘電体層内に前記導波モードが励起され、前記他の面上に前記増強電場が得られる。
 なお、前記導波モード励起層では、前記薄膜層が前記一の面側の層を構成し、前記誘電体層が前記他の面側を構成する。
 前記金属材料としては、特に制限はなく、例えば、金、銀、銅、プラチナ、アルミニウム等が挙げられる。
 また、前記半導体材料としては、特に制限はなく、例えば、シリコン、ゲルマニウム等の半導体材料又は既知の化合物半導体材料が挙げられるが、中でも、安価で加工が容易なシリコンが好ましい。
 前記薄膜層の厚みとしては、前記表面プラズモン励起層と同様で、構成材料及び照射する光の波長によって最適値が決定されるとともに、この値は、フレネルの式を用いた計算から算出可能であることが知られている。一般に、近紫外から近赤外域の波長帯の光を使用する場合、前記薄膜層の厚みは、数nm~数百nmとなる。
 前記光透過性誘電材料としては、特に制限はなく、例えば、酸化シリコン、窒化シリコン、アクリル樹脂等の樹脂材料、酸化チタン等の金属酸化物、窒化アルミニウム等の金属窒化物が挙げられるが、作製が容易で、化学的安定性が高い酸化シリコンが好ましい。
 なお、前記薄膜層及び前記誘電体層の形成方法としては、材料に応じて公知の形成方法から適宜選択することができる。
<凹凸構造付与層>
 前記凹凸構造付与層は、前記光透過性を有するとともに一の面が凹凸面とされる層である。
 前記凹凸構造付与層の形成材料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、アクリル樹脂、ポリエステル樹脂、ポリオレフィン樹脂、汎用プラスチック、エンジニアリングプラスチック、スーパーエンジニアリングプラスチック、合成高分子樹脂、天然樹脂、紫外線硬化性樹脂、熱硬化性樹脂、熱可塑性樹脂等の公知の光透過性材料を用いることができる。
 また、前記凹凸面の形成方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、エッチング法、電子線描画法、レーザー描画法、レーザー干渉法、切削法、自己組織化法等の公知の形成方法が挙げられる。加えて、前記形成方法で賦形したものを型、版として使用し、型、版に溶融した各種材料を流し込み、硬化した後に剥離することで型、版の凹凸を転写する方法等を挙げることができる。
<層構成>
 前記目的物質検出チップとしては、前記光透過性基板自身で構成されるか、前記光透過性基板上に前記凹凸構造付与層が積層されるか、前記光透過性基板上に前記電場増強層が積層されるか、前記光透過性基板上に前記電場増強層及び前記凹凸構造付与層が積層されて構成される。
 前記目的物質検出チップにおいて前記電場増強層が形成されない場合には、前記凹凸構造が形成される面と反対の面を裏面として前記裏面側から光が全反射条件で照射されたときにエバネッセント場が表面上に存在可能とされる。
 また、前記目的物質検出チップにおいて前記電場増強層が形成される場合には、前記裏面側から前記光が全反射条件で照射されたときに前記増強電場が表面上に存在可能とされる。
 なお、具体的な層構成の例については、図面とともに後述する。
<凹凸構造>
 前記目的物質検出チップは、前記目的物質に少なくとも磁性粒子が結合して形成された結合体の吸着を抑制することを目的として、複数の凸部を周期的に配して構成される凹凸構造を前記表面に有するように形成される。
 前記凹凸構造は、前記光透過性基板及び前記凹凸構造付与層のいずれかに形成される凹凸面に基づいて形成される。
 前記凸部の形状としては、特に制限はなく、短軸方向の断面視で角柱状、台形状、半円状、半楕円状等の任意の形状とすることができる。
 前記凹凸構造としては、特に制限はないが、例えば、前記結合体が直径1μm程度であると見積もられる場合には、全体又は一部が、凸部の高さが1μm~1.55μmとされるとともに隣接する前記凸部間のピッチ間隔が0.45μm~0.55μmの小間隔及び1.45μm~1.55μmの大間隔のいずれかとされる周期構造とされることが好ましい。
 なお、前記凹凸構造の具体的な例については、図面とともに後述する。
[第1実施形態]
 第3発明の第1実施形態について図面を参照しつつ説明する。なお、第1実施形態は、第3発明の目的物質検出チップに係る実施形態である。
 図26に示すように、目的物質検出チップ401は、光透過性基板402と、凹凸構造付与層403とを有する。なお、図26は、第1実施形態の概略構成を示す説明図である。
 光透過性基板402は、平滑面を有し、前記平滑面上に凹凸構造付与層403が積層される。
 なお、光透過性基板402は、前記平滑面を底とする函状体を形成するように側壁部が形成され、前記函状体内を液体貯留部として目的物質の存在を検証する液体試料を貯留させるように構成されてもよい。
 また、本明細書において、平滑とは、光学的に平滑であることを意味し、平滑とされる面の面精度がλ/2以下であることを意味する。
 凹凸構造付与層403は、光透過性基板402上に積層されるとともに光透過性基板402側の面と反対の面が凹凸面とされる。なお、凹凸構造付与層403としては、特に制限はないが、粘着、接着、融着又は貼合等により光透過性基板402上に固定される。
 目的物質検出チップ401では、凹凸構造付与層403の前記凹凸面により凹凸構造が表面に形成される。
 また、目的物質検出チップ401では、光透過性基板402上に凹凸構造付与層403が積層された構造とされ、前記凹凸構造が形成される面と反対の面を裏面として前記裏面側から凹凸構造付与層403に対し前記光が全反射条件で照射されたときに前記エバネッセント場が表面近傍に存在可能とされる。
 前記凹凸構造は、前記表面上に導入される前記液体試料中の前記結合体が前記表面に吸着することを抑制する役割を有し、複数の凸部が周期的に配されて構成される。この凹凸構造により前記結合体の吸着が抑制される様子を図27(a),(b)を参照しつつ説明する。なお、図27(a),(b)は、前記凹凸構造により前記結合体の吸着が抑制される様子を説明する説明図である。
 図27(a)に示すように、前記凹凸構造は、隣接する前記凸部間のピッチ間隔Pが、結合体Mの粒子径Rに対して、9/20R~11/20Rの長さ、即ち、結合体Mの粒子径Rよりも小間隔で設定される。また、前記凸部の高さHが、結合体Mの粒子径Rに対して、1R~2μmの長さに設定され、前記凸部の幅Wが、結合体Mの粒子径Rに対して、9/20R~3/2Rの長さに設定される。
 このような凹凸構造を有すると、接触面積を減らし,付着仕事量を小さくすることにより、目的物質検出チップ401の前記表面(凹凸構造付与層403の前記凹凸面)に結合体Mが吸着することを抑制することができる。
 ここで、前記磁場の印加に伴う前記目的物質の移動観察を行う観点から、結合体Mとして、例えば直径1μm程度の球状と見なせる場合において好適に用いることができる。このような例としては、大きさが数nmのタンパク質を前記目的物質とし、前記標識物質として大きさ数nmの蛍光色素を用い、前記磁気微粒子として粒子径1μmの磁性粒子を用いた場合が挙げられる。この例では、前記目的物質や前記標的物質は、前記磁気微粒子の100分の1以下の大きさであり、よって、結合体Mは粒子径1μmの球と見なすことができ、前記凹凸構造が形成されることで、目的物質検出チップ401の利便性を向上させることができる。
 このような例の場合、ピッチ間隔Pとしては、0.45μm~0.55μmが好ましく、高さHとしては、1μm~1.55μmが好ましく、幅Wとしては、としては、0.45μm~1.5μmが好ましい。
 図27(a)に示す例では、ピッチ間隔Pを結合体Mの粒子径Rよりも小間隔としたが、図27(b)に示すように、ピッチ間隔Pを結合体Mの粒子径Rに対して、29/20R~31/20Rの長さ、即ち、結合体Mの粒子径Rよりも大間隔で設定してもよい。また、ピッチ間隔Pとしては、直径1μm程度の結合体を検出することを想定して、1.45μm~1.55μmが好ましい。
 このような凹凸構造を有すると、結合体1つが付着し安定する可能性があるが、複数個が付着して安定、凝集するための付着仕事量を小さくすることにより、前記目的物質検出チップ401の前記表面(凹凸構造付与層403’の前記凹凸面)に結合体Mが吸着することを抑制することができる。
 なお、高さH及び幅Wについては、図27(a)を用いた説明と同様である。
 また、図27(a),(b)では、前記凸部の形状を断面四角柱状として説明したが、前記凸部の形状としては、断面台形状、半円状、半楕円状等の任意の形状とすることができ、これらの形状におけるピッチ間隔P、P、高さH及び幅Wについては、それぞれ最大となる長さで、前記設定を適用することができる。
 以上のように第1実施形態に係る目的物質検出チップ401では、前記凹凸構造により、前記結合体の吸着を抑制することができる。
 また、第1実施形態に係る目的物質検出チップ401では、前記表面上への前記磁場の印加を規制することがなく、前記結合体の移動が可能であることから、前記磁性粒子を用いた目的物質の検出に用いることができ、適用される目的物質検出装置を小型でかつ低コストに製造することが可能とされる。
 なお、第1実施形態に係る目的物質検出チップ401では、光透過性基板402上に凹凸構造付与層403が積層された構造とされるが、光透過性基板402自身に凹凸構造付与層403における前記凹凸面と同様の凹凸面を形成することで、光透過性基板自身により目的物質検出チップを構成することができる。
[第2実施形態]
 第3発明の第2実施形態について図面を参照しつつ説明する。なお、第2実施形態は、第3発明の目的物質検出チップに係る実施形態である。
 図28に示すように、目的物質検出チップ410は、光透過性基板412と、凹凸構造付与層413と、電場増強層414とを有する。なお、図28は、第2実施形態の概略構成を示す説明図である。
 光透過性基板412は、平滑面を有し、前記平滑面上に電場増強層414が積層される。また、光透過性基板412は、前記平滑面を底とする函状体を形成するように側壁部が形成され、前記函状体内を液体貯留部415として目的物質の存在を検証する液体試料を貯留させるように構成される。
 電場増強層414は、一の面から全反射条件で光が照射されたときに他の面上に増強電場が形成される層であり、光透過性基板412の前記平滑面上に積層される平滑な層とされる。なお、電場増強層414は、公知の表面プラズモン励起層及び導波モード励起層に準じて構成される。
 凹凸構造付与層413は、電場増強層414上に積層されるとともに電場増強層414側の面と反対の面が凹凸面とされる。なお、凹凸構造付与層413としては、特に制限はないが、粘着、接着、融着又は貼合等により電場増強層414上に固定される。なお、電場増強層414として公知の表面プラズモン励起層を用いる場合、前記増強電場が目的物質検出チップ410の表面近傍に存在可能とされるには、凹凸構造付与層413は前記増強電場が前記表面に到達する程度に薄い必要がある。従って、この場合には、凹凸構造付与層413の最も薄い部分、つまり凸部が形成されていない部分の厚さは、200nm以下であることが好ましい。このような薄い凹凸構造付与層413を形成するには、電場増強層414上にレジストを塗布し、レジストを露光後現像して凹凸構造を付与する手法が好ましい。一方、電場増強層414として公知の導波モード励起層を用いる場合、凹凸構造付与層413が電場増強層414における前記誘電体層と一体となって導波路層を形成するため、凹凸構造付与層413の厚さには特に制限はなく、前記増強電場を目的物質検出チップ410の表面近傍に存在可能とされる。
 目的物質検出チップ410では、最表層を構成する凹凸層付与層413の前記凹凸面により凹凸構造が前記表面に形成される。
 また、目的物質検出チップ410では、光透過性基板412上に電場増強層414と凹凸構造付与層413とがこの順で積層された構造とされ、前記凹凸構造が形成される面と反対の面を裏面として前記裏面側から電場増強層の前記一の面に対し前記光が全反射条件で照射されたときに前記増強電場が表面近傍に存在可能とされる。なお、上述のように、電場増強層414として公知の導波モード励起層を用いる場合、凹凸構造付与層413が電場増強層414における前記誘電体層と一体となって導波路層を形成するため、前記光が全反射される面は、凹凸構造付与層413の表面となる。
 以上のように第2実施形態に係る目的物質検出チップ410では、前記凹凸構造により、前記結合体の吸着を抑制することができる。
 また、第2実施形態に係る目的物質検出チップ410では、前記表面上への前記磁場の印加を規制することがなく、前記結合体の移動が可能であることから、前記磁性粒子を用いた目的物質の蛍光観察に用いることができ、適用される目的物質検出装置を小型でかつ低コストに製造することが可能とされる。
 なお、これ以外の事項は、目的物質検出チップ401と同様であるため、重複した説明を省略する。
[第3実施形態]
 第3発明の第3実施形態について図面を参照しつつ説明する。なお、第3実施形態は、第3発明の目的物質検出チップに係る実施形態である。
 図29に示すように、目的物質検出チップ420は、光透過性基板422と、凹凸構造付与層423と、電場増強層424とを有し、光透過性基板422には、任意の構成として液体貯留部425が形成される。なお、図29は、第3実施形態の概略構成を示す説明図である。
 目的物質検出チップ420では、目的物質検出チップ410と異なり、光透過性基板422上に凹凸構造付与層423が形成されるとともに凹凸構造付与層423上に電場増強層424が形成される。
 即ち、目的物質検出チップ420では、平滑面を有する光透過性基板422と、光透過性基板422の前記平滑面上に積層されるとともに光透過性基板422側の面と反対の面が第1凹凸面とされる凹凸構造付与層423と、凹凸構造付与層423の前記第1凹凸面上に積層されるとともに凹凸構造付与層423側の面と反対の面が前記第1凹凸面の凹凸パターンが転写された形状の第2凹凸面とされる電場増強層424とで構成され、前記第2凹凸面で凹凸構造が形成される。
 なお、凹凸構造付与層423としては、特に制限はないが、粘着、接着、融着又は貼合等より光透過性基板422上に固定される。
 凹凸構造付与層423における前記第1凹凸面は、凹凸構造付与層403(及び403’)における前記凹凸面と同様に形成される。
 凹凸構造付与層423の前記第1凹凸面上に均一な厚みで電場増強層424を形成すると、前記第1凹凸面の凹凸パターンが転写された形状の前記第2凹凸面を電場増強層424に形成することができ、最表層を構成する電場増強層424の前記第2凹凸面により凹凸構造が表面に形成される。
 このように構成される目的物質検出チップ420では、電場増強層424が最表層とされるため、目的物質検出チップ410における、電場増強層414から凹凸構造付与層413を介して前記表面上に形成される前記増強電場よりも、前記増強電場を前記表面上に広範囲で存在させることができ、前記増強電場における前記目的物質等の光信号観察を行い易い。
 即ち、前記増強電場が及ぶ範囲は、電場増強層414及び電場増強層424のいずれにおいても400nm~1,200nm程度離れた範囲までであり、これ以上離れると電場が急激に減衰することから、電場増強層424を最表層として前記増強電場を前記表面上に広範囲で存在させる目的物質検出チップ420では、前記増強電場による前記目的物質等の検出範囲を目的物質検出チップ410と比べて広く設定することができる。
 なお、これ以外の事項は、目的物質検出チップ410と同様であるため、重複した説明を省略する。
[第4実施形態]
 第3発明の第4実施形態について図面を参照しつつ説明する。なお、第4実施形態は、第3発明の目的物質検出チップに係る実施形態である。
 図30に示すように、目的物質検出チップ430は、光透過性基板432と、電場増強層434とを有し、光透過性基板432には、液体貯留部435が形成される。なお、図30は、第4実施形態の概略構成を示す説明図である。
 目的物質検出チップ430では、目的物質検出チップ420と同様に電場増強層434が最表層とされるが、目的物質検出チップ420と異なり、光透過性基板432上に電場増強層434を積層させて構成される。
 即ち、目的物質検出チップ430では、光透過性基板432自体に凹凸構造付与層403(及び403’)における前記凹凸面と同様の第1凹凸面を形成し、この前記第1凹凸面上に均一な厚みで電場増強層434を形成することで、前記第1凹凸面の凹凸パターンが転写された形状の前記第2凹凸面を電場増強層434に形成し、最表層を構成する電場増強層434の前記第2凹凸面により凹凸構造が表面に形成される。
 なお、前記第1凹凸面を有する光透過性基板432は、凹凸構造付与層403(及び403’)の形成方法と同様の方法により形成することができる。
 このように構成される目的物質検出チップ430では、前記増強電場を前記表面上に広範囲で存在させることができ、前記増強電場における前記目的物質等の光信号観察を行い易いことに加え、凹凸構造付与層を配さない分、部品点数を減らしてより低コストに製造することができる。
[凹凸構造の形成例]
 第1実施形態~第4実施形態における前記凹凸構造について、更に好適な形成例を図面を参照しつつ説明する。
 図31(a),(b)に示すように、凹凸構造形成例450は、複数の凸部451が平滑部452上に形成される。なお、図31(a)は、前記凹凸構造の形成例を示す斜視図であり、図31(b)は、前記凹凸構造の形成例を示す上面図である。
 凹凸構造形成例450では、複数の凸部451が2種類以上の形状で形成される。即ち、凹凸構造形成例では、凸部451が長手方向(図中の「Y」方向)の長さが異なる複数の形状で形成される。
 また、複数の凸部451は、図32(a),(b)に一例を拡大して示すように、それぞれが2回回転対称形状及び線対称形状のいずれかとされる。なお、図32(a)は、1つの凸部を拡大して示す上面図であり、図32(b)は、上面に加え、長手方向及び短手方向の各側面を付加した図である。
 複数の凸部451は、長手方向の長さが最も長いものが中央に配され、これを対称軸とみたてたときに、短手方向(図中の「X」方向)で隣接するものの長手方向の長さを前記中央に配されたものから離れる順に短くして3つずつ配された、上面視で菱形状の単位周期構造を有する。
 また、複数の凸部451は、前記単位周期構造の長手方向の端部における長手方向の長さが最も短いものを、短手方向で隣接する他の前記単位周期構造と共有するように配されるとともに、一の前記単位周期構造における前記長手方向の長さが最も長いものが、長手方向で隣接する他の前記単位周期構造における前記長手方向の長さが最も短いものと対向するように配され、全体が複数の前記単位周期構造を周期的に配置させた周期構造を有する。
 このように構成される凹凸構造形成例450では、個々の前記単位周期構造が自然界の魚類が有する鱗片とよく似た構造とされ、全体が鱗肌状とされることから、前記複数の凸部451が形成された表面上に前記結合体を含む異物の吸着を抑制することができる。
 なお、本例では、前記単位周期構造を菱形状としたが、二等辺三角形状としてもよいし、平行四辺形状としてもよい。
 また、凹凸構造形成例450により前記目的物質検出チップの前記凹凸構造を形成する場合には、前記凹凸面、前記第2凹凸面の下地となる前記第1凹凸面に凹凸構造形成例450の凹凸形状を適用すればよい。
 また、凹凸構造形成例450における短手方向の長さは、図27(a),(b)を用いて説明した「幅W」に相当する。
 また、凹凸構造形成例450の形成方法としては、特開2015-160342号公報に記載の事項を適用することができる。
(目的物質検出装置)
 第3発明の目的物質検出装置は、第3発明の前記目的物質検出チップと光照射部と磁場印加部とを備え、必要に応じて光検出部を有する。
 前記目的物質検出装置では、前記目的物質と結合する前記磁性粒子を用いて前記目的物質を検出する。前記目的物質が前記エバネッセント場又は前記増強電場によって、蛍光や散乱光を生じにくい物質である場合に前記目的物質を標識化させるための標識物質が用いられる。
 前記標識物質としては、特に制限はなく、前記目的物質と特異的に吸着ないし結合して前記目的物質を標識化する蛍光標識物質や光散乱物質が挙げられる。
 前記蛍光標識物質としては、例えば、蛍光色素、量子ドット、蛍光染色剤等の公知の蛍光物質を用いることができる。
 また、前記光散乱物質としては、例えば、ナノ粒子、例えばポリスチレンビーズや金ナノ粒子などの公知の光散乱物質を用いることができる。
 なお、前記目的物質と前記標識物質との結合方法としては、特に制限はなく、物理吸着、抗原-抗体反応、DNAハイブリダイゼーション、ビオチン-アビジン結合、キレート結合、アミノ結合などの公知の結合方法を適用することができる。
<光照射部>
 前記光照射部は、前記目的物質検出チップの前記凹凸構造が形成される面と反対の面を裏面として前記裏面側から全反射条件で光を照射可能とされる。
 前記光照射部の光源としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知のランプ、LED、レーザー等が挙げられる。第3発明では、前記目的物質検出チップの前記裏面側から全反射条件で光を照射することで前記表面にエバネッセント場又は増強電場を形成し、前記エバネッセント場又は前記増強電場を励起光とした前記目的物質及び前記磁性粒子を含む結合体から光信号を発生させる。そのため前記光照射部に求められる役割としては、前記目的物質検出チップの前記裏面側から全反射条件で光を照射することのみであり、このような役割を担うものであれば光源の選択に制限がない。
 ランプ、LED等の放射光源を用いる場合には、前記目的物質検出チップの前記表面側からの照射光の漏れ出しを避けるため、放射される光のうち前記目的物質検出チップの前記裏面側に照射される全ての方位における光が全反射条件を満たす必要がある。こうしたことから、放射光源を用いる場合には、照射光の照射方向を特定の方位に規制するコリメートレンズ等の案内部を用いてもよい。
 また、光信号として蛍光を用いる場合、蛍光を励起可能な波長を持つ単色光源を用いるか、または、ランプ、LED等の広い波長帯域を持つ光源からの光をバンドパスフィルタ等の光学フィルタを透過させて単色化し、蛍光を励起可能な波長のみを取り出した後に前記目的物質検出チップの前記裏面側から照射することが好ましい。
 ここで、前記目的物質検出チップの前記表面と前記裏面とが平行な板である場合、前記裏面側から照射された光は、前記表面上に液体が存在すると全反射されない。よって、このような場合には、前記目的物質検出チップの前記裏面部分に回折格子を形成することにより、前記回折格子に特定の角度で光を照射したときに、光が前記回折格子で回折されて前記目的物質検出チップ内に導入されるとともに、前記目的物質検出チップ内に導入された光が全反射条件で表面に照射されて前記表面上に前記エバネッセント場又は前記増強電場が形成されるように、前記目的物質検出チップを構成してもよい。または、前記表面と前記裏面とが平行にならないように形成してもよい。或いは、前記光源から照射される光を公知のプリズムを介して前記目的物質検出チップの前記裏面に照射することとしてもよい。前記プリズムとしては、前記目的物質検出チップの前記裏面に屈折率調整オイル又は光学用接着剤等により光学的に貼り合せて用いることができる。また、前記プリズムの形成材料として、前記光透過性基板の形成材料と同じ形成材料が選択される場合には、前記光透過性基板と前記プリズムとが一体成型されたものを用いることもできる。
<磁場印加部>
 前記磁場印加部は、第1の磁場印加部及び第2の磁場印加部の少なくともいずれかで形成される。
<第1の磁場印加部>
 第1の磁場印加部は、前記目的物質検出チップの前記表面上に導入される前記液体試料に含まれる前記磁性粒子を前記表面に平行な方向又は前記表面から遠ざける方向に移動させる第1磁場を印加可能とされる部であり、前記目的物質検出チップの前記表面から前記磁性粒子を遠ざける遠ざけ磁場、又は、前記目的物質検出チップの前記表面上で前記表面に平行に移動させる方向に磁力を作用させる平行移動用磁場を印加可能とされる。
 前記磁性粒子とともに前記結合体を構成する前記目的物質及び標識物質は、前記エバネッセント場又は前記増強電場内においてのみ、光信号を発生する。また、前記エバネッセント場及び前記増強電場の電場強度は、前記目的物質検出チップの前記表面から遠ざかるにつれて減衰する。その為、遠ざけ磁場の印加によって前記結合体が前記表面から遠ざけられると光信号が減衰し、更に、前記結合体が、前記エバネッセント場又は前記増強電場の電場強度がゼロとみなせる程度までの距離以上に前記表面から遠ざけられると、前記結合体の光信号が消滅することとなる。また、前記光検出部に撮像デバイスを用い、2次元画像情報を取得できる場合には、前記第1の磁場の印加によって表面上で変動した前記結合体の発する光信号は、前記光信号の変動として経時的に計測することが可能となる。前記目的物質検出装置では、このような光信号の減衰(消滅を含む)又は変動(減衰、消滅を伴い得る)を検知して、前記目的物質を検知する。
 前記第1の磁場印加部としては、磁場の印加により前記結合体を移動させることが可能であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知の電磁石及び永久磁石のいずれか1つ以上を用いることができる。
<第2の磁場印加部>
 前記第2の磁場印加部は、前記目的物質検出チップの前記裏面側に配されるとともに前記表面上に導入された前記液体試料中の前記磁性粒子を前記表面上に引き寄せる第2磁場を印加可能とされる部である。
 前記第2の磁場印加部としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、公知の電磁石及び永久磁石を用いて構成することができる。
 このような前記第2の磁場印加部を有すると、前記液体試料中を浮遊する前記結合体を前記目的物質検出チップの前記表面に引き寄せることができ、短時間で前記目的物質の検出を行うことができる。
 また、前記第2の磁場印加部としては、前記第2磁場を印加させた状態で前記磁性粒子を前記表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動可能とされる部であることが好ましい。
 このような前記第2の磁場印加部としては、例えば、スライド部材上に前記電磁石又は前記永久磁石を保持し、前記目的物質検出チップの前記裏面側における前記光照射部からの前記光が照射される領域(検出領域)の近傍に前記電磁石又は前記永久磁石を位置させる初期状態と、前記目的物質検出チップの前記表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に向けて前記電磁石又は前記永久磁石を移動させた状態との間で移動制御させることで構成することができる。なお、前記電磁石を用いる場合、前記移動制御中、連続的或いは断続的に励磁させた状態とする。また、前記移動制御中に励磁の強度を変化させてもよい。
 また、複数の前記電磁石又は永久磁石を配置し、各部材における前記磁場の印加状態を制御することによっても、前記スライド部材上に前記電磁石又は前記永久磁石を保持して前記移動制御を行う構成と同等の効果を得ることができる。
 また、前記第2の磁場印加部としては、特に制限はないが、貫通孔が形成されている、或いはU字型などの不完全な環状、或いは複数の部材が環状乃至不完全な環状に配置された構成であってもよい。
 前記第2の磁場印加部が前記第2磁場を印加させた状態で前記磁性粒子を前記表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動可能とされる部であると、ノイズ信号を排除することができる。
 即ち、記磁性粒子と結合した前記目的物質が前記第2の磁場印加部の移動に追従して移動するのに対し、前記目的物質検出チップ表面のキズ等により生ずるノイズが前記第2の磁場印加部の移動に追従して移動しないことから、移動する光信号に着目した検出を行うことで、前記ノイズ信号を排除することができる。
<光検出部>
 前記光検出部は、前記目的物質検出チップの前記表面側に配され、前記結合体から発せられる光信号を検出可能とされる。
 前記光検出部としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知のフォトダイオード、光電子増倍管等の光検出器を用いることができる。
 光信号の情報を2次元画像情報として取得することができると、光点として現れる2次元画像情報における光信号の位置情報や、2次元上で観察されるサイズ情報、光点における光信号強度の増減情報を時系列で観察することにより、その光点が、目的物質によるものであるか、目的物質に関与する情報を示すものであるか、又は、夾雑物、光源出力の揺らぎ、検出板表面のキズ等の目的物質に関与しない情報を示すものであるかを区別することが可能となる。このような2次元画像情報の取得を可能とするには、前記光検出部として撮像デバイスを選択すればよい。前記撮像デバイスとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、公知のCCDイメージセンサ、CMOSイメージセンサ等のイメージセンサを用いることができる。
(目的物質検出方法)
 第3発明の目的物質検出方法は、少なくとも光照射工程と結合体移動工程とを含む。
<光照射工程>
 前記光照射工程は、第3発明の前記目的物質検出チップの前記凹凸構造が形成される面と反対の面を裏面として前記裏面側から全反射条件で光を照射する工程である。
 前記光照射工程は、第3発明の前記目的物質検出装置における前記光照射部により実施することができる。
<結合体移動工程>
 前記結合体移動工程は、前記目的物質検出チップの表面上に導入される液体試料に含まれる目的物質と磁性粒子との結合体を第1磁場の印加により前記表面に平行な方向又は前記表面から遠ざける方向に移動させる第1結合体移動工程、及び、前記裏面側に配される磁場印加部からの第2磁場の印加により前記液体試料中の前記結合体を前記表面上に引き寄せる第2結合体移動工程のいずれかで実施される工程である。
 前記第2結合体移動工程としては、更に、前記第2磁場を印加した状態で前記磁場印加部を前記表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動させ、前記磁場印加部の移動に追従させて前記結合体を移動させる工程であることが好ましい。
 前記結合体移動工程は、第3発明の前記目的物質検出装置における前記磁場印加部により実施することができる。
[第5実施形態]
 次に、第3発明の第5実施形態を図面を参照しつつ説明する。なお、第5実施形態は、第3発明の目的物質検出装置に係る実施形態である。
 図33に示すように目的物質検出装置500は、公知の全反射照明蛍光顕微鏡の構成に準じて光学系が構成され、目的物質検出チップ401と、光源510及び光学プリズム520で構成される光照射部と、第1磁場印加部530と、光検出部540(撮像デバイス)とで構成される。なお、前記撮像デバイスは、例えば、公知のCCDイメージセンサ等で構成され、2次元画像の取得が可能とされる。なお、図33は、第5実施形態の概略構成を示す説明図である。
 目的物質検出チップ401は、裏面側からの光Lの照射を受け、表面(凹凸構造付与層403が形成される側の面)上に前記エバネッセント場を存在可能とされる。また、目的物質検出チップ401は、前記表面上に導入された液体試料AをカバーガラスGで保持することとしている。
 前記光照射部は、光源510から照射される光Lが光学プリズム520を介して光透過性基板402に入射し、光透過性基板402を透過して、凹凸構造付与層403の表面で全反射される条件で照射可能とされる。
 また、第1磁場印加部530は、目的物質検出チップ401の前記表面上の検出領域(前記光照射部による光Lの照射を受け、前記表面上に前記エバネッセント場が形成される領域)に対して斜め上方に配され、前記表面上に導入された液体試料A中の結合体を磁場の印加により第1磁場印加部530の方向に引き寄せつつ、目的物質検出チップ401の前記表面から遠ざける方向に移動させるように構成される。本例における第1磁場印加部530は、電磁石により構成される。
 このように構成される目的物質検出装置500では、先ず、目的物質検出チップ401の前記表面上に液体試料Aを導入させる。
 次に、液体試料Aの液中を浮遊する前記結合体が目的物質検出チップ401の前記表面上に重力沈降した後、光学プリズム520を介して凹凸構造付与層403の表面で全反射される条件で光源510から光Lを照射し、光検出部540で目的物質検出チップ401の前記表面上に形成される前記エバネッセント場に基づく光信号Sを取得する。
 次に、第1磁場印加部530としての前記電磁石を励磁して液体試料A中の前記結合体を磁場の印加により第1磁場印加部530に向けて引き寄せ、目的物質検出チップ401の前記表面から遠ざける方向に移動させる。
 ここで、目的物質検出装置500では、目的物質検出チップ401の前記表面に形成される前記凹凸構造により、前記結合体と目的物質検出チップ401の前記表面との吸着が抑制され、前記磁場の印加前後で前記結合体を容易に移動させることができる。
 次に、観察視野を維持したまま前記結合体を移動させた後の目的物質検出チップ401の前記表面上の光信号を光検出部540で取得する。
 このように構成される目的物質検出装置500では、前記磁場の印加前後(前記結合体の移動前後)における光信号が、図34(a),(b)のように得られ、前記目的物質に基づく光信号a,cを、目的物質検出チップ401の前記表面上のキズ、前記表面に吸着ないし前記表面上に存在する夾雑物、光源出力の揺らぎなどのノイズ信号bと明確に区別して検出される。なお、図34(a)が前記磁場の印加前における前記表面上の様子を示す図であり、図34(b)が前記磁場の印加後における前記表面上の様子を示す図である。また、図示しないが、観察視野外からの移動に基づく、光信号の出現も検出対象とすることができる。
 以上のように目的物質検出装置500によれば、目的物質検出チップ401の前記凹凸構造により前記結合体を容易に移動させることができ、前記結合体を構成する前記目的物質を高精度に検出することができる。また、目的物質検出チップ401の前記表面上に前記夾雑物が吸着している場合でも、その存在を無視した検出を行うことができるため、必ずしも検出ごとに前記表面を洗浄処理する必要がなく、効率的な検出を行うことができる。
[第6実施形態]
 次に、第3発明の第6実施形態を図面を参照しつつ説明する。なお、第6実施形態は、第3発明の目的物質検出装置に係る実施形態である。
 図35に示すように目的物質検出装置600は、公知の表面プラズモン共鳴センサ及び導波モードセンサに準じて光学系が構成され、目的物質検出チップ410と、光源610及び光学プリズム620で構成される光照射部と、第1磁場印加部630と、光検出部640(前記撮像デバイス)とで構成される。なお、図35は、第6実施形態の概略構成を示す説明図である。
 目的物質検出チップ410は、裏面側からの光Lの照射を受け、表面(凹凸構造付与層413が形成される側の面)上に前記増強電場を存在可能とされる。また、目的物質検出チップ410では、液体貯留部415に液体試料Aが導入される。
 前記光照射部は、光源610から照射される光Lを光学プリズム620及び光透過性基板412を介して電場増強層414に全反射条件で照射可能とされる。
 また、第1磁場印加部630は、目的物質検出チップ410の前記表面上の検出領域(前記光照射部による光Lの照射を受け、前記表面上に前記増強電場が形成される領域)に対して斜め上方に配され、液体貯留部415に導入された液体試料A中の結合体を磁場の印加により第1磁場印加部630の方向に引き寄せつつ、目的物質検出チップ410の前記表面から遠ざける方向に移動させるように構成される。本例における第1磁場印加部630は、電磁石により構成される。
 このように構成される目的物質検出装置600では、先ず、液体貯留部415に液体試料Aを導入させる。
 次に、液体試料Aの液中を浮遊する前記結合体が目的物質検出チップ410の前記表面上に重力沈降した後、光源610から照射される光Lを光学プリズム620及び光透過性基板412を介して電場増強層414の一の面に対して全反射条件で照射し、光検出部640で目的物質検出チップ410の前記表面上に形成される前記増強電場に基づく光信号Sを取得する。
 次に、第1磁場印加部630としての前記電磁石を励磁して液体貯留部415における液体試料A中の前記結合体を磁場の印加により第1磁場印加部に向けて引き寄せ、目的物質検出チップ410の前記表面から遠ざける方向に移動させる。
 ここで、目的物質検出装置600は、目的物質検出チップ410の前記表面に形成される前記凹凸構造により、前記結合体と目的物質検出チップ410の前記表面との吸着が抑制され、前記磁場の印加前後で前記結合体を容易に移動させることができる。
 次に、観察視野を維持したまま前記結合体を移動させた後の目的物質検出チップ410の前記表面上の光信号を光検出部640で取得する。
 このように構成される目的物質検出装置600では、前記磁場の印加前後(前記結合体の移動前後)における光信号が、図36(a),(b)のように得られ、前記目的物質に基づく光信号d,fを、目的物質検出チップ410の前記表面上のキズ、前記表面に吸着ないし前記表面上に存在する夾雑物、光源出力の揺らぎなどのノイズ信号eと明確に区別して検出される。なお、図36(a)が前記磁場の印加前における前記表面上の様子を示す図であり、図36(b)が前記磁場の印加後における前記表面上の様子を示す図である。
 図36(a),(b)に示すように光信号は、前記増強電場の減衰によりバックグランドが暗視野とされ、目的物質検出装置600では、光点の光信号に基づき、前記目的物質を検出する。また、図示しないが、観察視野外からの移動に基づく、光信号の出現も検出対象とすることができる。
 目的物質検出装置600によれば、目的物質検出チップ410の前記凹凸構造により前記結合体を容易に移動させることができ、前記結合体を構成する前記目的物質を高精度に検出することができる。また、目的物質検出チップ410の前記表面上に前記夾雑物が吸着している場合でも、その存在を無視した検出を行うことができるため、必ずしも検出ごとに液体貯留部415を洗浄処理する必要がなく、効率的な検出を行うことができる。
[第7実施形態]
 次に、第3発明の第7実施形態を図面を参照しつつ説明する。なお、第7実施形態は、第3発明の目的物質検出装置に係る実施形態である。
 図37に示すように、第7実施形態に係る目的物質検出装置700は、公知の表面プラズモン共鳴センサ及び導波モードセンサに準じて光学系が構成され、目的物質検出チップ410と、光源710及び光学プリズム720で構成される光照射部と、第2磁場印加部730と、光検出部740(前記撮像デバイス)とで構成される。なお、図37は、第7実施形態の概略構成を示す説明図である。
 前記光照射部及び光検出部740は、第6実施形態に係る目的物質検出装置600における前記光照射部及び光検出部640と同様に構成することができ、第7実施形態に係る目的物質検出装置700は、第1磁場印加部630に代えて第2磁場印加部730を配する点で第7実施形態に係る目的物質検出装置600と相違する。以下、相違点について説明する。
 第2磁場印加部730は、目的物質検出チップ410の前記裏面側に配されるとともに液体貯留部415に導入された液体試料A中の前記結合体を磁場の印加により目的物質検出チップ410の前記表面上に引き寄せ可能とされるとともに前記磁場を印加した状態で目的物質検出チップ410の前記表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動可能とされる。ここで、第2磁場印加部730は、永久磁石と前記永久磁石をX又はXの方向にスライド移動させるスライド移動部材(不図示)とで形成される。
 前記結合体の移動は、第2磁場印加部730からの前記磁場の印加により、一旦、目的物質検出チップ410の液体試料A中の前記結合体を目的物質検出チップ410の前記表面上に引き寄せた後、前記磁場を印加した状態で第2磁場印加部730を目的物質検出チップ410の前記表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向(X又はXの方向)に移動させ、この第2磁場印加部730の移動に追従させて行う。
 この第2磁場印加部730を用いる場合、前記磁場の印加により液体試料A中の前記結合体を目的物質検出チップ410の前記表面上に引き寄せるため、液体試料Aの液中を浮遊する前記結合体が目的物質検出チップ410の前記表面上に重力沈降することを待つ必要がない。
 また、このように構成される目的物質検出装置700では、第2磁場印加部の移動前後における光信号が、図38(a),(b)のように得られ、前記目的物質に基づく光信号hを、目的物質検出チップ410の前記表面上のキズ、前記表面に吸着ないし前記表面上に存在する夾雑物、光源出力の揺らぎなどのノイズ信号iと明確に区別して検出することができる。なお、図38(a)が第2磁場印加部の移動前における前記表面上の様子を示す図であり、図38(b)が第2磁場印加部の移動後における前記表面上の様子を示す図である。
 以下、第4発明について説明する。第4発明は、第1~第3発明の変形例に関する。
 第4発明に係る目的物質検出チップは、底面に対して上面側の面に配される支持面と、厚み方向に対し前記上面から前記底面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する上向き傾斜面及び前記厚み方向に対し前記底面から前記上面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する下向き傾斜面のいずれかの傾斜面と、光を受光して内部に導光可能とされる本体部とを有する全体略板状の光透過性部材と、前記支持面上に複数の凸部を周期的に配して構成される凹凸構造とを備え、前記光透過性部材が前記上面側から照射され前記上向き傾斜面を通過させた前記光を前記本体部を介して前記支持面に対し全反射条件で入射させる第1の光入射構造及び前記上面側から照射され前記下向き傾斜面で反射された前記光を前記本体部を介して前記支持面に対し全反射条件で入射させる第2の光入射構造のいずれかの光入射構造を有し、かつ、前記光透過性部材の一部に検出面を有し、前記検出面の一部又は全部に前記凹凸構造を有する。
 また、前記目的物質検出チップとしては、特に制限はなく、前記支持面上に、前記支持面に全反射条件で光が照射されたとき前記支持面側の面と反対側の面上に増強電場が形成される電場増強層が配されるか、又は、前記支持面上に、前記支持面に全反射条件で光が照射されたとき前記支持面側の面と反対側の面上にエバネッセント場発生領域を持つものであってもよい。
 第4発明に係る目的物質検出装置は、第4発明の前記目的物質検出チップと、前記光透過性部材の前記上面側に配され、前記光入射構造を介して前記支持面に全反射条件で前記光を照射可能とされる光照射部と、前記光透過性部材の前記底面側に配される磁場印加部と、を備える。
 ここで、第4発明における前記光透過性部材及び前記光入射構造は、第1発明及び第2発明における前記光透過性部材及び前記光入射構造について説明した事項と同様に構成することができる。
 また、第4発明における前記凹凸構造は、第3発明における前記凹凸構造について説明した事項と同様に構成することができる。
 また、第4発明における前記電場増強層は、第2発明、第3発明における前記電場増強層について説明した事項と同様に構成することができる。
 また、第4発明における前記光照射部及び前記磁場印加部は、第1発明及び第2発明における前記光照射部及び前記磁場印加部について説明した事項と同様に構成することができる。
 また、第4発明は、前記光検出部など第1~第3発明について説明した事項を適宜採用して構成することができる。
 第4発明では、第1発明における第7実施形態(図12参照)で説明した事項及び第3発明における前記凹凸構造について説明した事項に準じて形成され、図12に示す検出チップ60の検出面62aを前記支持面とし、この支持面上に、第3発明における前記凹凸構造を適用して構成される。この凹凸構造としては、図26、28~30に示す例のように前記電場増強層を有しても、有さなくともよく、有する場合には、前記支持面上に、前記支持面に全反射条件で光が照射されたとき前記支持面側の面と反対側の面上に増強電場が形成される形で前記電場増強層が配される。
 具体的には、図39に示すように、検出面62a(図12参照)上に、凹凸構造403(図26等参照)が形成される。図39は、第4発明の一実施形態を示す説明図である。図39において、符号403(凹凸構造)は、第3発明に用いられる符号をそのまま使用し、それ以外の符号は、第1発明に用いられる符号をそのまま使用している。
 なお、この実施形態では、光透過性部材62が側面から傾斜面62b側に向けて前記底面(図中、検出チップ60の右側面)の面内方向と平行な方向で穿設される断面略矩形状の穿設溝で形成される液体試料貯留溝64を有し、液体試料貯留溝64が持つ2つの対向面のうち、前記底面に近い側の面(図中、検出面62a)が前記支持面とされる。
   1,1’,10,20,30,40,40’,50,60 検出チップ
   2,2’,12,22,32,42,42’,52,62 光透過性部材
   2a,2a’,12a,22a,32a,42a,42a’,52a,62a 検出面
   2b,2b’,12b,42b,42b’,62b 上向き傾斜面
   2c,12c,22c,32c,42c,42c’,52c,62c 本体部
   4,24  側壁部
   14,34,44,54,64  液体試料貯留溝
   15,45,45’ 上面側切欠き部
   45a,45a’,56a 低屈折材料
   46,56  底面側切欠き部
   22b,32b,46a,52b 下向き傾斜面
   A  液体試料
   B  光照射部
   C  磁場印加部
   D  光検出部
   W  距離
   X  長さ方向
   Y  厚み方向
  θ,θ,α,β 角度
第2発明の説明に使用する符号
   101,101’,110 目的物質検出チップ
   120,130,140,140’,150 目的物質検出装置
   102,102’,112,122,132,142,142’,152 電場増強層
   103,’,113,123,133,143,143’,153 光透過性部材
   103a,113a,123a,133a,143a,153a 支持面
   103b,103b’,113b,143b,143b’ 上向き傾斜面
   103c,113c,123c,133c,143c,143c’,153c 本体部
   105,125  側壁部
   115,135,145,155  液体試料貯留溝
   116,146,146’ 上面側切欠き部
   146a,146a’,157a 低屈折材料
   147,157  底面側切欠き部
   123b,133b,147a,153b 下向き傾斜面
   200  光学装置
   201  光学プリズム
   202  ガラス基体
   203,303 金属膜
   204,304 検出チップ
   206,306a,306b 磁石
   A  液体試料
   B,205,305 光照射部
   C  磁場印加部
   D  光検出部
   W  距離
   X  長さ方向
   Y  厚み方向
  θ,θ,α,β 角度
 第3発明の説明に使用する符号
  401,410,420,430  目的物質検出チップ
  402,412,422,432  光透過性基板
  403,403’413,423  凹凸構造付与層
  414,424,434  電場増強層
  415,425,435  液体貯留部
   450   凹凸構造形成例
   451   凸部
   452   平滑面
  500,600,700  目的物質検出装置
  510,610,710  光源
  520,620,720  光学プリズム
  530,630  第1磁場印加部
  540,640,740  光検出部
   730  第2磁場印加部

Claims (38)

  1.  底面に対して上面側の面に配される検出面と、厚み方向に対し前記上面から前記底面側に向かうにつれて前記検出面から離れる方向に傾斜する上向き傾斜面及び前記厚み方向に対し前記底面から前記上面側に向かうにつれて前記検出面から離れる方向に傾斜する下向き傾斜面のいずれかの傾斜面と、光を受光して内部に導光可能とされる本体部とを有する全体略板状の光透過性部材を備え、前記光透過性部材が前記上面側から照射され前記上向き傾斜面を通過させた前記光を前記本体部を介して前記検出面に対し全反射条件で入射させる第1の光入射構造及び前記上面側から照射され前記下向き傾斜面で反射された前記光を前記本体部を介して前記検出面に対し全反射条件で入射させる第2の光入射構造のいずれかの光入射構造を有する検出チップと、
     前記光透過性部材の前記上面側に配され、前記光入射構造を介して前記検出面に全反射条件で前記光を照射可能とされる光照射部と、
     前記光透過性部材の前記底面側に配される磁場印加部と、
     を備えることを特徴とする目的物質検出装置。
  2.  光透過性部材が上面に形成されるとともに上向き傾斜面を有する上面側切欠き部及び底面に形成されるとともに下向き傾斜面を有する底面側切欠き部の少なくともいずれかの切欠き部を有する請求項1に記載の目的物質検出装置。
  3.  切欠き部に本体部よりも屈折率の低い低屈折材料が埋設される請求項2に記載の目的物質検出装置。
  4.  光透過性部材の側面が傾斜面とされる請求項1に記載の目的物質検出装置。
  5.  光入射構造が、第1の光入射構造における上向き傾斜面を通過させた光及び第2の光入射構造における下向き傾斜面で反射された光の少なくともいずれかを底面で反射させた後に検出面に対し全反射条件で入射可能とされる請求項1から4のいずれかに記載の目的物質検出装置。
  6.  傾斜面における光入射位置と検出面における光照射位置との間の最短距離が、1.0mm~50.0mmとされる請求項1から5のいずれかに記載の目的物質検出装置。
  7.  光透過性部材の厚みが0.1mm~10.0mmとされる請求項1から6のいずれかに記載の目的物質検出装置。
  8.  光透過性部材の上面に少なくとも一部を検出面とする液体試料貯留溝が形成される請求項1から7のいずれかに記載の検出チップ。
  9.  液体試料貯留溝が検出面として光透過性部材の厚み方向に対し上面から底面側に向かうにつれて傾斜面から離れる方向に傾斜する傾斜検出面を有する請求項8に記載の目的物質検出装置。
  10.  光透過性部材の上面の一部が検出面とされるとともに前記検出面を底とする函状体を形成するように前記検出面の周囲に側壁部が立設される請求項1から7のいずれかに記載の目的物質検出装置。
  11.  請求項1から10のいずれかに記載の目的物質検出装置を用いた目的物質検出方法であって、
     光透過性部材の上面側から光入射構造を介して検出面に全反射条件で光を照射する光照射工程と、
     前記光透過性部材の底面側から磁場を印加する磁場印加工程と、
     を含むことを特徴とする目的物質検出方法。
  12.  裏面に対し全反射条件で光を照射したときに表面側に増強電場が形成される電場増強層と、
     前記電場増強層を前記裏面側から支持可能とされる支持面と、厚み方向に対し前記支持面が形成される面を上面として前記上面から底面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する上向き傾斜面及び前記厚み方向に対し前記底面から前記上面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する下向き傾斜面のいずれかの傾斜面と、前記光を受光して内部に導光可能とされる本体部とを有する全体略板状の光透過性部材とを備え、
     前記光透過性部材が前記上面側から照射され前記上向き傾斜面を通過させた前記光を前記本体部を介して前記裏面に対し全反射条件で入射させる第1の光入射構造及び前記上面側から照射され前記下向き傾斜面で反射された前記光を前記本体部を介して前記裏面に対し全反射条件で入射させる第2の光入射構造のいずれかの光入射構造を有することを特徴とする目的物質検出チップ。
  13.  光透過性部材が上面に形成されるとともに上向き傾斜面を有する上面側切欠き部及び底面に形成されるとともに下向き傾斜面を有する底面側切欠き部の少なくともいずれかの切欠き部を有する請求項12に記載の目的物質検出チップ。
  14.  切欠き部に本体部よりも屈折率の低い低屈折材料が埋設される請求項13に記載の目的物質検出チップ。
  15.  光透過性部材の側面が傾斜面とされる請求項12に記載の目的物質検出チップ。
  16.  光入射構造が、第1の光入射構造における上向き傾斜面を通過させた光及び第2の光入射構造における下向き傾斜面で反射された光の少なくともいずれかを底面で反射させた後に裏面に対し全反射条件で入射可能とされる請求項12から15のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
  17.  傾斜面における光入射位置と電場増強層における光照射位置との間の最短距離が、1.0mm~50.0mmとされる請求項12から16のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
  18.  光透過性部材の厚みが0.1mm~10.0mmとされる請求項12から17のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
  19.  光透過性部材の上面に少なくとも一部を支持面とする液体試料貯留溝が形成される請求項12から18のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
  20.  液体試料貯留溝が支持面として光透過性部材の厚み方向に対し上面から底面側に向かうにつれて傾斜面から離れる方向に傾斜する傾斜支持面を有する請求項19に記載の目的物質検出チップ。
  21.  光透過性部材の上面の一部が支持面とされるとともに前記支持面を底とする函状体を形成するように前記支持面の周囲に側壁部が立設される請求項12から18のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
  22.  請求項12から21のいずれかに記載の目的物質検出チップと、
     光透過性部材の上面側に配され、光入射構造を介して電場増強層の裏面に全反射条件で光を照射可能とされる光照射部と、
     前記光透過性部材の底面側に配される磁場印加部と、
     を備えることを特徴とする目的物質検出装置。
  23.  請求項12から21のいずれかに記載の目的物質検出チップに対し、光透過性部材の上面側から光入射構造を介して電場増強層の裏面に全反射条件で光を照射する光照射工程と、
     前記光透過性部材の底面側から磁場を印加する磁場印加工程と、
     を含むことを特徴とする目的物質検出方法。
  24.  光透過性基板上に、複数の凸部を周期的に配して構成される凹凸構造を有することを特徴とする目的物質検出チップ。
  25.  平滑面を有する光透過性基板と、前記光透過性基板の前記平滑面上に積層されるとともに前記光透過性基板側の面と反対の面が凹凸面とされる凹凸構造付与層とで構成され、前記凹凸面で凹凸構造が形成される請求項24に記載の目的物質検出チップ。
  26.  光透過性基板上に、少なくとも一の面に全反射条件で光が照射されたとき他の面上に増強電場が形成される電場増強層が配され、前記光透過性基板側の面を裏面として前記裏面側から前記電場増強層の前記一の面に対し前記光が全反射条件で照射されたときに前記増強電場が表面近傍に存在可能とされる請求項24から25のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
  27.  平滑面を有する光透過性基板と、前記光透過性基板の前記平滑面上に積層される平滑な電場増強層と、前記電場増強層上に積層される凹凸構造付与層とで構成され、前記凹凸構造付与層の凹凸面で凹凸構造が形成される請求項26に記載の目的物質検出チップ。
  28.  平滑面を有する光透過性基板と、前記光透過性基板の前記平滑面上に積層されるとともに前記光透過性基板側の面と反対の面が第1凹凸面とされる凹凸構造付与層と、前記凹凸構造付与層の前記第1凹凸面上に積層されるとともに前記凹凸構造付与層側の面と反対の面が前記第1凹凸面の凹凸パターンが転写された形状の第2凹凸面とされる電場増強層とで構成され、前記第2凹凸面で凹凸構造が形成される請求項26に記載の目的物質検出チップ。
  29.  第1凹凸面を有する光透過性基板と、前記光透過性基板の前記第1凹凸面上に積層されるとともに前記光透過性基板側の面と反対の面が前記第1凹凸面の凹凸パターンが転写された形状の第2凹凸面とされる電場増強層とで構成され、前記第2凹凸面で凹凸構造が形成される請求項26に記載の目的物質検出チップ。
  30.  凸部が2種類以上の形状で形成されるとともに、前記形状の少なくとも1種が2回回転対称形状及び線対称形状のいずれかとされる請求項24から29のいずれかに記載の目的物質検出チップ。
  31.  請求項24から30のいずれかに記載の目的物質検出チップと、
     前記目的物質検出チップの凹凸構造が形成される面と反対の面を裏面として前記裏面側から全反射条件で光を照射可能とされる光照射部と、
     前記目的物質検出チップの表面上に導入される液体試料に含まれる磁性粒子を前記表面に平行な方向又は前記表面から遠ざける方向に移動させる第1磁場を印加可能とされる第1磁場印加部及び前記目的物質検出チップの前記裏面側に配されるとともに前記表面上に導入された前記液体試料中の前記磁性粒子を前記表面上に引き寄せる第2磁場を印加可能とされる第2磁場印加部の少なくともいずれかで形成される磁場印加部と、
     を備えることを特徴とする目的物質検出装置。
  32.  第2の磁場印加部を有し、かつ、前記第2磁場印加部が第2磁場を印加した状態で目的物質検出チップ表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動可能とされる請求項31に記載の目的物質検出装置。
  33.  請求項24から30のいずれかに記載の目的物質検出チップの凹凸構造が形成される面と反対の面を裏面として前記裏面側から全反射条件で光を照射する光照射工程と、
     前記目的物質検出チップの表面上に導入される液体試料に含まれる目的物質と磁性粒子との結合体を第1磁場の印加により前記表面に平行な方向又は前記表面から遠ざける方向に移動させる第1結合体移動工程、及び、前記裏面側に配される磁場印加部からの第2磁場の印加により前記液体試料中の前記結合体を前記表面上に引き寄せる第2結合体移動工程の少なくともいずれかで実施される結合体移動工程と、
     を含むことを特徴とする目的物質検出方法。
  34.  第2結合体移動工程を含み、かつ、前記第2結合体移動工程が第2磁場を印加した状態で磁場印加部を目的物質検出チップ表面の面内方向と平行な方向のベクトル成分を持つ方向に移動させ、前記磁場印加部の移動に追従させて結合体を移動させる工程である請求項33に記載の目的物質検出方法。
  35.  底面に対して上面側の面に配される支持面と、厚み方向に対し前記上面から前記底面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する上向き傾斜面及び前記厚み方向に対し前記底面から前記上面側に向かうにつれて前記支持面から離れる方向に傾斜する下向き傾斜面のいずれかの傾斜面と、光を受光して内部に導光可能とされる本体部とを有する全体略板状の光透過性部材と、前記支持面上に複数の凸部を周期的に配して構成される凹凸構造とを備え、前記光透過性部材が前記上面側から照射され前記上向き傾斜面を通過させた前記光を前記本体部を介して前記支持面に対し全反射条件で入射させる第1の光入射構造及び前記上面側から照射され前記下向き傾斜面で反射された前記光を前記本体部を介して前記支持面に対し全反射条件で入射させる第2の光入射構造のいずれかの光入射構造を有し、かつ、前記光透過性部材の一部に検出面を有し、前記検出面の一部又は全部に前記凹凸構造を有することを特徴とする目的物質検出チップ。
  36.  支持面上に、前記支持面に全反射条件で光が照射されたとき前記支持面側の面と反対側の面上に増強電場が形成される電場増強層が配される請求項35に記載の目的物質検出チップ。
  37.  支持面上に、前記支持面に全反射条件で光が照射されたとき前記支持面側の面と反対側の面上にエバネッセント場発生領域が形成される請求項35に記載の目的物質検出チップ。
  38.  請求項35から37のいずれかに記載の目的物質検出チップと、
     光透過性部材の上面側に配され、光入射構造を介して支持面に全反射条件で前記光を照射可能とされる光照射部と、
     前記光透過性部材の底面側に配される磁場印加部と、
     を備えることを特徴とする目的物質検出装置。

     
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10976255B2 (en) * 2016-04-28 2021-04-13 National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology Optical detection method and optical detection device
WO2023100203A1 (en) * 2021-12-03 2023-06-08 Universita' Degli Studi Della Campania "Luigi Vanvitelli" Optical sensor, support for said optical sensor and detection system to detect the presence and/or concentration of an analyte in a solution

Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS531894B2 (ja) 1973-08-08 1978-01-23
JPS5920692B2 (ja) 1981-11-16 1984-05-15 ロ−ヌ−プ−ラン・スペシアリテ・シミ−ク 水溶性ガム質を基材とした組成物、その製造法及び使用
JPH0484738A (ja) * 1990-07-27 1992-03-18 Hitachi Ltd 減衰全反射プリズム用セル
JPH04178539A (ja) * 1990-11-14 1992-06-25 Hitachi Ltd 減衰全反射プリズムセル
JP2002236258A (ja) 2001-01-25 2002-08-23 Olympus Optical Co Ltd 白色光源を有する全反射蛍光顕微鏡
JP2005195477A (ja) * 2004-01-07 2005-07-21 Rohm Co Ltd 表面プラズモン共鳴センサ
JP2007248253A (ja) * 2006-03-15 2007-09-27 Omron Corp 光学部品、光学センサ、表面プラズモンセンサ及び指紋認証装置
JP2010512534A (ja) * 2006-12-12 2010-04-22 コーニンクレッカ フィリップス エレクトロニクス エヌ ヴィ ラベル粒子を検出するマイクロエレクトロニクスセンサデバイス
JP5301894B2 (ja) * 2008-06-27 2013-09-25 富士フイルム株式会社 検出方法
WO2015030833A1 (en) * 2013-08-31 2015-03-05 Pandata Research Llc Spectrometer with multiple waveguides
WO2015194663A1 (ja) 2014-06-20 2015-12-23 コニカミノルタ株式会社 表面プラズモン共鳴励起増強蛍光分光(spfs)用センサーチップ、spfs測定法、およびspfs用キット

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69733650T2 (de) * 1996-03-01 2006-04-20 Beckman Coulter, Inc., Fullerton System zum simultanen Durchführen einer Vielzahl von Ligandenbindungs-Untersuchungen
JP4381752B2 (ja) 2003-09-02 2009-12-09 シスメックス株式会社 光学的定量方法及び光学的定量装置
JP4595072B2 (ja) 2006-03-09 2010-12-08 独立行政法人産業技術総合研究所 光導波モードセンサー
JP2008249361A (ja) 2007-03-29 2008-10-16 Fujifilm Corp 表面プラズモンセンサーおよび免疫学的測定方法
JP2010071682A (ja) 2008-09-16 2010-04-02 Fujifilm Corp センシング装置、物質検出方法、検査チップ、及び検査キット
KR20100072528A (ko) 2008-12-22 2010-07-01 한국전자통신연구원 바이오 칩 및 바이오 물질 검출 장치
JP5544836B2 (ja) 2009-11-19 2014-07-09 オムロン株式会社 表面プラズモン共鳴チップ
EP2726852B1 (en) 2011-06-30 2020-11-25 Koninklijke Philips N.V. Multiple examinations of a sample
JP5920692B2 (ja) 2011-07-15 2016-05-18 国立研究開発法人産業技術総合研究所 目的物質検出チップ、目的物質検出装置及び目的物質検出方法

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS531894B2 (ja) 1973-08-08 1978-01-23
JPS5920692B2 (ja) 1981-11-16 1984-05-15 ロ−ヌ−プ−ラン・スペシアリテ・シミ−ク 水溶性ガム質を基材とした組成物、その製造法及び使用
JPH0484738A (ja) * 1990-07-27 1992-03-18 Hitachi Ltd 減衰全反射プリズム用セル
JPH04178539A (ja) * 1990-11-14 1992-06-25 Hitachi Ltd 減衰全反射プリズムセル
JP2002236258A (ja) 2001-01-25 2002-08-23 Olympus Optical Co Ltd 白色光源を有する全反射蛍光顕微鏡
JP2005195477A (ja) * 2004-01-07 2005-07-21 Rohm Co Ltd 表面プラズモン共鳴センサ
JP2007248253A (ja) * 2006-03-15 2007-09-27 Omron Corp 光学部品、光学センサ、表面プラズモンセンサ及び指紋認証装置
JP2010512534A (ja) * 2006-12-12 2010-04-22 コーニンクレッカ フィリップス エレクトロニクス エヌ ヴィ ラベル粒子を検出するマイクロエレクトロニクスセンサデバイス
JP5301894B2 (ja) * 2008-06-27 2013-09-25 富士フイルム株式会社 検出方法
WO2015030833A1 (en) * 2013-08-31 2015-03-05 Pandata Research Llc Spectrometer with multiple waveguides
WO2015194663A1 (ja) 2014-06-20 2015-12-23 コニカミノルタ株式会社 表面プラズモン共鳴励起増強蛍光分光(spfs)用センサーチップ、spfs測定法、およびspfs用キット

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
K. NOMURA ET AL., J. APPL. PHYS., vol. 113, 2013, pages 143103 - 1,143103-6
M. FUJIMAKI ET AL., OPTICS EXPRESS, vol. 23, 2015, pages 10925 - 10937
M. YASUURAM. FUJIMAKI, SCI. REP., vol. 6, 2016, pages 39241 - 1,39241-7
MASATO YASUURAMAKOTO FUJIMAKI: "Institute of Electrical Engineers Society materials, the Sensors and Micromachines Society", 29 June 2016, INSTITUTE OF ELECTRICAL ENGINEERS OF JAPAN, article "Development of Waveguide-mode Image Sensor for Trace Detection", pages: 45 - 52
R. P. PODGORSEKH. FRANKEJ. WOODSS. MORRILL, SENSOR. ACTUAT., vol. B51, 1998, pages 146 - 151
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