WO2012147463A1 - 細胞培養容器および細胞培養装置 - Google Patents

細胞培養容器および細胞培養装置 Download PDF

Info

Publication number
WO2012147463A1
WO2012147463A1 PCT/JP2012/058975 JP2012058975W WO2012147463A1 WO 2012147463 A1 WO2012147463 A1 WO 2012147463A1 JP 2012058975 W JP2012058975 W JP 2012058975W WO 2012147463 A1 WO2012147463 A1 WO 2012147463A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
cell culture
electrode
cell
frame
lid
Prior art date
Application number
PCT/JP2012/058975
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
亮太 中嶌
豊茂 小林
志津 松岡
貴之 野崎
Original Assignee
株式会社日立製作所
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 株式会社日立製作所 filed Critical 株式会社日立製作所
Priority to JP2013511981A priority Critical patent/JP5758989B2/ja
Priority to US14/113,857 priority patent/US20140045252A1/en
Publication of WO2012147463A1 publication Critical patent/WO2012147463A1/ja

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
    • C12M41/36—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of biomass, e.g. colony counters or by turbidity measurements
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
    • C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/46—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of cellular or enzymatic activity or functionality, e.g. cell viability

Definitions

  • the present invention relates to a cell culture container that realizes non-invasive cell quality evaluation and a cell culture apparatus using the cell culture container.
  • Patent Document 1 As a means for solving these problems, for example, an apparatus for automating a cell culture process in a closed system as shown in Patent Document 1 has been developed. This is achieved by automating the cell culture process and reducing the risk of biological contamination by using a closed culture container that does not require the operation of opening and closing the lid of the culture container.
  • the function of the cell sheet can be non-invasively measured by measuring transepithelial electrical resistance by utilizing the formation of a closed connection between cells.
  • An evaluation method has been proposed (see Patent Document 2 and Non-Patent Document 1).
  • transepithelial electrical resistance measuring devices necessary for this are already commercially available from WPI (World Precision Instrument), nanoAnalytics, and the like.
  • An object of the present invention is to solve all of these problems and to provide a cell culture vessel and a cell culture apparatus using the cell culture vessel in which cell observation and transepithelial electrical resistance measurement can be performed in real time.
  • a cell culture container for holding and culturing cells, a frame holding a culture medium for culturing cells, and a lid part detachably attached to the frame
  • a cell culture container provided with a first electrode having a shape capable of observing cells on the bottom or side surface of the frame and a second electrode having a shape capable of observing cells on the lid.
  • a cell culture apparatus for measuring the electrical resistance of cells in a cell culture container, comprising a closed culture container for cell culture and a closed culture container.
  • a cell culture thermostat for controlling the culture environment of the closed culture vessel, and an AC voltage generator, the closed culture vessel having a frame for holding a culture medium for culturing cells, A lid portion detachably attached to the frame body, a first electrode having a shape allowing cell observation on the bottom or side surface of the frame body, and a second electrode having a shape allowing cell observation on the lid portion;
  • the voltage generator provides a cell culture device capable of measuring electrical resistance by applying an alternating voltage between a first electrode and the second electrode during cell culture in a closed culture vessel.
  • the cell culture container of the present invention it becomes possible to measure transepithelial electric resistance and observe cells in real time in a state where cells are cultured while maintaining a closed space during automatic culture, and to transplant cells / tissues Safe and secure patient treatment can be realized after quality evaluation of the product itself.
  • FIG. 1 is a diagram showing a cross-sectional structure of an example of a cell culture container in the first embodiment.
  • the cell culture container 1 is a square container and is made of a plastic having rigidity together with plasticity such as polycarbonate, polystyrene, and polypropylene.
  • the frame body 2 and the lid 3 constituting the cell container 1 are formed by injection molding or the like, and have a structure in which the insert container 4 can be inserted.
  • the insert container 4 may be a commercially available product, such as a product manufactured by BD, a product manufactured by Corning, or a product manufactured by Greiner, and usable products are not limited.
  • the lid 3 or the frame body 2 is provided with an elastic member 5 such as an O-ring so that particles containing gas or bacteria from the outside are not mixed.
  • the connection of the lid 3 to the frame 2 can be fixed by mating the screw threads provided on the lid 3 and the frame 2, but is not limited to this method.
  • the frame body 2 is provided with a pair of flow paths 6 having a connection projection structure at one end for injecting and discharging air and water vapor.
  • the position of the flow path 6 in the frame 2 should be changed depending on the amount of the culture medium introduced into the container, but may be any position above the level of the introduced culture medium.
  • the frame 2 is provided with a flow path 7 having a projection structure at one end for injecting and discharging the culture solution.
  • the flow path 7 is desirably installed so that the bottom surface of the frame body 2 and the lowermost portion of the inner diameter of the flow path 7 have the same height. By doing so, it is possible to efficiently inject and discharge the culture solution.
  • the frame 2 may be tilted as appropriate.
  • the lid 3 is provided with a flow path 8 having a connecting projection structure at one end for injecting and discharging the culture solution into and from the insert container 4.
  • the flow path 8 is arranged so as not to hinder cell observation.
  • the length of the flow path 8 is preferably long enough not to touch the bottom surface of the insert container 4.
  • the flow paths 6, 7, and 8 can be connected to a tube 9 made of an elastic material such as silicon having an inner diameter that matches the protrusion structure size of the flow path, and is necessary for connection to an automatic culture apparatus.
  • the culture medium injecting / discharging flow path is provided in each of the frame body 2 and the lid portion 3, but when the injection port and the discharge port are separated, one more each in the frame body and the lid portion.
  • a channel may be provided, and a pair of channels may be formed respectively.
  • FIGS. 2 to 8 are views showing the structures of the examples in which electrodes having various shapes are arranged in the above-described cell culture container. 2 to 4 show electrodes arranged on the bottom of the frame, and FIGS. 6 to 8 show electrodes arranged on the side of the frame.
  • a circular electrode 10 is disposed on the bottom of the frame 2, which is the bottom of the culture holding surface of the frame, as shown in the top view in the lower part of FIG. 2, and the lid 3 penetrates the lid 3.
  • a rod-shaped electrode 11 is disposed along the flow path 8, and the electric wire 12 from the electrode 11 is disposed outside the frame body and connected to an AC voltage generator 13 capable of measuring electric resistance.
  • These electrodes have a shape that enables cell observation so that there is no hindrance in cell observation, and are arranged at a position where there is no hindrance in cell observation.
  • the electrodes 10 and 11 constitute the electrode part of the cell culture vessel 1.
  • the method for connecting the AC voltage generator 13 and the cell culture container is such that the electric wire 12 previously connected to the AC voltage generator 13 is connected to the electrode part of the cell culture container or is connected to the electrode part of the cell culture container 1 in advance.
  • a method of connecting the electric wire 12 to the AC voltage generator 13 may be used.
  • the electrode 10 and the electrode 11 may be referred to as a first electrode and a second electrode, respectively.
  • the AC voltage is used for measuring the transepithelial electrical resistance of the cell because it does not damage the cells and tissues.
  • the AC voltage is also used in the above-mentioned products of WPI and nanoAnalytics.
  • FIG. 3 to FIG. 5 are diagrams showing a configuration of a modification of the embodiment of the cell culture container in which the electrode described in FIG. 2 is arranged.
  • FIG. 3 instead of directly connecting an electric wire to the electrode 10 at the bottom of the frame 2, by providing a cell culture container mounting table 14 that can be energized at the bottom of the frame 2, The electric resistance can be measured simply by placing the cell culture container 1 on the cell culture container mounting base 14. Specifically, when the cell culture container 1 is installed, the cell culture container installation table 14 is provided with an electrode at a position in contact with the electrode 10 of the cell culture container 1 and connected to the installation table 14.
  • the electric wire 12 is connected to an AC voltage generator 13 having an electric resistance measurement function.
  • the AC voltage generator 13 calculates the electrical resistance value of various cells such as transepithelial cells from the relationship between the current and voltage applied to the electrode section, and details the current value and voltage value later. It can also be set as the structure which acquires an electrical resistance value by outputting to a control apparatus.
  • the flow path 8 provided in the lid 3 is made of a material that can be energized, thereby connecting to the AC voltage generator 13 capable of measuring electrical resistance, and to the flow path.
  • the electrical resistance can be measured without providing a separate electrode by connecting the electric wire.
  • the cell culture container mounting base 14 may be provided at the bottom of the frame 2 as shown in FIG.
  • the flow path 9 of the frame body 2 is made of a material that can be energized from FIG. 4 and connected to the AC voltage generator 13 that functions as an electrical resistance measuring device, and the electrical resistance can be measured in the same manner. It is.
  • a circular electrode 15 serving as a second electrode is disposed on the side surface of the culture holding surface of the frame body 2, that is, on the side surface of the frame body, as shown in a perspective view on the lower side of the figure,
  • a rod-shaped electrode 11 is disposed on the lid 3 along the flow path 8, and the electric wire 12 from the electrode 11 is disposed outside the frame and connected to an AC voltage generator 13 capable of measuring electrical resistance.
  • the method for connecting the AC voltage generator 13 and the cell culture vessel 1 may be the method described in FIG.
  • a cell culture vessel installation table 16 capable of energizing the electrode 15 is provided by providing a configuration in which the electric wire 12 is not directly connected to the electrode 15 on the side surface of the frame 2 but connected to the electric wire 12 itself.
  • the electric resistance can be measured only by placing the cell culture container 1 on the cell culture container mounting table 16.
  • the flow path 8 provided in the lid part 3 a material that can be energized, the electric resistance can be measured by connecting the electric wire 12 to the flow path 8 without providing a separate electrode. is there.
  • the cell culture container mounting table 16 may be provided at the bottom of the frame body 2.
  • FIG. 9 is a block diagram for explaining a functional configuration of the cell culture device 17 to which the various cell culture containers 1 described above can be connected.
  • FIG. 3 is a diagram showing an overall configuration in which each component controlled by the control device 18 is connected to the cell culture container 1 arranged inside the thermostatic chamber 19. Needless to say, what is arranged in the thermostatic chamber 19 is the closed-system culture container described with reference to FIGS. 2 to 8 or the closed-system culture container installed on the cell culture container installation table.
  • the control device 18 includes a temperature adjusting unit 20 for controlling the temperature of the thermostatic chamber 19, a humidity adjusting unit 21 for controlling the humidity in the culture vessel, and a gas concentration in the culture vessel.
  • a gas concentration adjusting unit 23 having a gas supply unit 22 and a liquid feeding tube connected to a tank 24 for holding the culture solution and waste solution for automatically exchanging the culture solution in the culture vessel.
  • CCD (Charge Coupled Device) camera 26 for temperature observation, temperature / humidity / CO 2 / O 2 sensor 27, and transepithelial electrical resistance for the purpose of controlling the operation of the medium supply pump 25 and the respective components
  • An AC voltage generator 28 for measurement and a device for displaying a display screen 29 are connected.
  • the control device 18 can receive the electrical resistance value itself or the current / voltage value from the AC voltage generator 28 and obtain the electrical resistance value of the cultured cell.
  • the control device 18 and the display screen 29 are a processing unit and a storage unit of a normal computer including a processing unit and a storage unit including a central processing unit (CPU), an input / output unit including a display device and a keyboard, and the like.
  • the control device 18 operates various programs stored in the storage unit on the CPU as the processing unit, thereby operating the temperature control unit 20 to the AC voltage generator 28. By controlling the above, it is possible to control the culture environment in the thermostatic chamber 19 and perform a predetermined culture in the culture vessel 1.
  • the humidity control unit 21 and the gas concentration control unit 23 do not need to be directly connected to the culture vessel 1, but the temperature control unit 20, the humidity control unit 21, the gas concentration control unit 23, and the temperature / humidity / CO 2.
  • the O2 sensor 27 may be configured to be connected to the constant temperature bath 19.
  • gas permeability such as polycarbonate, polystyrene, polymethylpentene and the like.
  • Cell culture can be performed by depositing a transparent thin film to enable gas exchange inside the cell culture vessel 1.
  • FIG. 10 is a diagram showing an electrical resistance value when a rabbit corneal epithelial cell is cultured in the insert container 4 of the cell culture container 1 of this example in which the above-described electrodes are arranged using an existing electrical resistance measuring apparatus. is there.
  • the cells were cultured in a pattern of three seeded cells, and the arrows indicate the time when the cells spread over the entire culture surface and reached confluence. From this figure, it can be seen that the electrical resistance value is higher than the background at the time of reaching confluence, that is, at the time of starting the closed bond formation. It is possible to determine whether or not to continue culturing by using cell observation and the above-described phenomenon of resistance change during automatic culturing.
  • FIG. 11 shows an example of a culture continuation determination program for the cell culture device 17 in this embodiment.
  • This program is a program executed by the control device 18 including the CPU and the storage unit described above.
  • cells are imaged by the CCD camera 26 (step S1) and a cell image is acquired (step S2).
  • a predetermined image processing program in the control device 18 described above a process of detecting cells from the acquired image data is performed (step S3), and the cell occupation area in the image is calculated after binarization (step S3).
  • step S4 After acquiring the data of several points on the culture surface, the control device 18 continues the culture without measuring the electric resistance value when the cell occupation area does not reach the predetermined area, and steps S1 to S5 at a predetermined timing. Is repeated (step S6).
  • the control device 18 controls the AC voltage generator 28 to measure the electrical resistance value when the cell occupation area is determined to be 100% based on the determination result in S5 (step S7). As a result of the measurement, when an increase in the electrical resistance value obtained from the AC voltage generator 18 is recognized as compared with the background (Yes in Step S8), the stratified culture is continued (Step S9), and at a predetermined timing. End the culture.
  • step S8 If no increase in the measured electrical resistance value is observed (No in step S8), the culture is continued for a predetermined period, the camera is manually photographed (step S10), the image is acquired (step S11), and the cell occupation area is 100. It is judged whether it is% (step S12). If the cell occupation area is less than 100%, the culture is continued (step S14), and steps S7 to S12 are repeated.
  • Step S12 When the cell occupation area is 100% (Yes in Step S12), the electric resistance value is measured (Step S13), and it is determined whether or not an increase in the electric resistance value is recognized (Step S15). If an increase in the electrical resistance value is observed, the stratified culture is continued (step S16), and the culture is terminated at a predetermined timing. If no increase in electrical resistance is observed, the culture is stopped (step S17).
  • FIG. 12 shows an example of the display screen 29 on the display device when the culture process of the cell culture device according to the present embodiment is executed.
  • a cell observation image 31 and an electrical resistance measurement result 32 are displayed in the image display area.
  • a temperature / humidity / concentration display area 33 indicating the environmental temperature, humidity, CO2 concentration, and O2 concentration in the thermostatic chamber 19 is displayed.
  • a button 34 for selecting an automatic sequence or a manual sequence of the culture process buttons 35 and 36 for selecting a cell observation mode and an electrical resistance measurement mode, and a button 37 for selecting a culture solution exchange mode are displayed.
  • transepithelial cells have been mainly described as the cells to be cultured, the cells to be cultured are not limited to transepithelial cells and can be applied to all cell types.
  • the above-described embodiments have been described in detail for easy understanding of the present invention, and are not necessarily limited to those having all the configurations described.
  • a part of the configuration of one embodiment can be replaced with the configuration of another embodiment, and the configuration of another embodiment can be added to the configuration of one embodiment. Further, it is possible to add, delete, and replace other configurations for a part of the configuration of each embodiment.
  • each of the above-described configurations, functions, processing units, processing means, and the like may be realized by dedicated hardware by designing a part or all of them, for example, with an integrated circuit.
  • Information such as a control program for realizing each function can be stored not only in a memory as a storage unit but also in a storage device such as a hard disk, SSD (Solid State Drive), or a recording medium such as an IC (Integrated Circuit) card. .
  • the present invention is useful as a cell culture container that realizes non-invasive cell quality evaluation and a cell culture apparatus using the cell culture container.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Electromagnetism (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

　自動培養と、自動培養中の細胞観察と電気抵抗値測定を可能とする、電極を具備する細胞培養容器を提供する。細胞培養容器の枠体２の底部もしくは側面に円形状の電極１０を細胞観察可能となるよう設置する。また、細胞培養容器蓋部３に棒状の電極１１を細胞観察可能となるよう設置、もしくは、細胞培養容器の流路８を通電可能な素材とすることにより細胞培養容器を構成する。電極１０と電極１１との間に交流電源発生装置１３を接続し、培養を行いながら、細胞の経上皮電気抵抗測定を行う。これにより、自動培養と、自動培養中の細胞観察と電気抵抗値測定を可能とする。

Description

細胞培養容器および細胞培養装置
　本発明は、非侵襲的な細胞の品質評価を実現する細胞培養容器とその細胞培養容器を用いる細胞培養装置に関するものである。
　自分の細胞もしくは他人の細胞を用いて疾病の治療を行う再生医療では、生体から採取した細胞は、しばしば、培養して細胞の数を増やす、あるいはしかるべき形に組織を形成させた後に治療に用いられる。治療に用いる細胞の培養は、細胞プロセシングセンタ（Cell Processing Center：CPC）という細胞培養用クリーンルームの中で、GMP (Good Manufacturing Practice) に準拠して行わなければならない。ここでの課題は、細胞培養は技術者の手によって行われるために、患者１名分の細胞の調製に対して労力とコストが非常にかかるという点と、手動で操作することによる生物学的汚染リスクがあるという点である。
　これらの課題を解決する手段として、例えば、特許文献１に示すような閉鎖系で細胞培養工程を自動化する装置が開発されてきた。これは、培養容器の蓋を開閉する操作が不要な閉鎖系培養容器を用いることで、細胞培養工程の自動化と生物学的汚染リスクの低減が達成されるものである。
　他方、培養後の細胞もしくは組織の品質評価には、組織学的解析等の侵襲的なものが一般的であり、治療に使う細胞そのものを評価することは困難であった。
　この課題を解決する方法としては、角膜上皮細胞シートなどの上皮系細胞シートにおいては、細胞間閉鎖結合が形成されることを利用して、経上皮電気抵抗測定により細胞シートの機能を非侵襲で評価する方法が提案されている（特許文献２、非特許文献１参照）。また、これに必要な経上皮電気抵抗測定装置はすでにWPI(World Precision Instrument)社やnanoAnalytics社等から市販されている。
特開２００６－１４９２３７号公報 特開２００９－２７９２８号公報
　しかしながら、上述した既存の経上皮電気抵抗測定装置には、特許文献1のような閉鎖
系培養装置に適合するものはなく、自動培養中に閉鎖空間を保ったままリアルタイムで経上皮抵抗値を測定することはできないという課題があった。また、市販されている製品や特許文献２のような電極形状および配置では、自動培養中に実行する必要がある細胞観察が困難であるという課題があった。さらに、市販されている製品や特許文献２のような電極形状および配置では、培養層下層底部の特に上層側の培養面直下には、栄養細胞などの細胞を培養できないという課題があった。
　本発明の目的は、これらの課題を全て解決し、細胞観察と経上皮電気抵抗値測定がリアルタイムで実施可能となる細胞培養容器とそれを利用した細胞培養装置を提供することにある。
　上記目的を達成するため、本発明においては、細胞を保持、培養するための細胞培養容器であって、細胞を培養する培養液を保持する枠体と、枠体に取り外し可能に取り付けられる蓋部と、枠体の底部もしくは側面に、細胞観察可能となる形状の第１電極と、蓋部に細胞観察可能となる形状の第２電極とを備える細胞培養容器を提供する。
　また、上記目的を達成するため、本発明においては、細胞培養容器内の細胞の電気抵抗を測定する細胞培養装置であって、細胞培養用の閉鎖系培養容器と、閉鎖系培養容器が設置される細胞培養用恒温槽と、閉鎖系培養容器の培養環境を制御する制御装置と、交流電圧発生装置とを備え、記閉鎖系培養容器は、細胞を培養する培養液を保持する枠体と、枠体に取り外し可能に取り付けられる蓋部と、枠体の底部もしくは側面に、細胞観察可能となる形状の第１電極と、蓋部に細胞観察可能となる形状の第２電極とを備え、交流電圧発生装置は、閉鎖系培養容器で細胞培養中に、第１電極および前記第２電極間に交流電圧を印加することにより電気抵抗を測定することが可能な細胞培養装置を提供する。
　本発明に係る細胞培養容器によれば、自動培養時に閉鎖空間を保持したまま細胞などを培養した状態で、リアルタイムで細胞の経上皮電気抵抗値測定と細胞観察が可能となり、移植する細胞・組織そのものの品質評価を行った上で、安全安心な患者治療を実現できる。
第１の実施例の細胞培養容器の電極が配置されていない状態の断面を示す図である。 第１の実施例に係る、細胞培養容器に電極を配置した一構成例を示す図である。 第１の実施例に係る、細胞培養容器に電極を配置した他の構成例を示す図である。 第１の実施例に係る、細胞培養容器に電極を配置した他の構成例を示す図である。 第１の実施例に係る、細胞培養容器に電極を配置した他の構成例を示す図である。 第１の実施例に係る、細胞培養容器に電極を配置した他の構成例を示す図である。 第１の実施例に係る、細胞培養容器に電極を配置した他の構成例を示す図である。 第１の実施例に係る、細胞培養容器に電極を配置した他の構成例を示す図である。 第１の実施例に係る、細胞培養容器を有する細胞培養装置の構成を示す図である。 第１の実施例に係る、ウサギ角膜上皮細胞を培養した際の電気抵抗値を示す図である。 第１の実施例に係る、培養継続判定プログラムを示す図である。 第１の実施例に係る、培養継続判定プログラム表示画面を示す図である。
　以下添付図面を参照して本発明の種々の実施例について説明する。ただし、これらの実施例は本発明を実現するための一例に過ぎず、本発明の技術的範囲を限定するものではない。また、各図において共通の構成については同一の参照番号が付されている。
  第１の実施例を、図面に従い順次説明する。
　＜細胞培養容器の構造＞
  図１は、第１の実施例における細胞培養容器の一例の断面構造を示す図である。細胞培養容器１は、正方形の容器であって、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリプロピレンなどの可塑性と共に剛性有するプラスチックから成る。細胞容器１を構成する枠体２と蓋部３は射出成形などにより形成され、内部にインサート容器４を挿入可能な構造となっている。インサート容器４は市販のものでよく、ＢＤ社製、コーニング社製、グライナー社製などで、使用可能な製品は限定されない。蓋部３もしくは枠体２には、Ｏリングなどの弾性部材５が設けられ、それにより外部からの気体や菌を含む粒子が混入しない。蓋部３の枠体２への接続は、蓋部３および枠体２に設けられたネジ山同士をかん合させることにより固定できるが、この方法に限定されるものではない。
　枠体２には、空気および水蒸気を注入および排出するための、接続突起構造をその一端に有する一対の流路６が設けられている。この流路６の枠体２における位置は、容器内に導入する培養液の量によって変えるべきであるが、導入された培養液面よりも上部であればよい。また枠体２には、培養液を注入および排出するための突起構造をその一端に有する流路７が設けられている。この流路７は、枠体２の底面と流路７内径の最下部が同じ高さとなるように設置することが望ましい。そうすることで、培養液の効率的な注入排出を可能とする。培養液を全て交換する場合は、枠体２を適宜傾ければよい。
　蓋部３には、インサート容器４内に培養液を注入および排出するための、接続突起構造をその一端に有する流路８が設けられている。この流路８は、細胞観察に支障がないように配置する。細胞観察に支障がないとは、例えば細胞培養容器内を顕微鏡観察する際に、顕微鏡光軸を阻害しない形状を備え、また顕微鏡光軸を阻害しない位置に配置することを意味する。また流路８の長さは、インサート容器４の底面に触れないような長さがよい。流路６、７、８は、流路の突起構造サイズに適合する内径をもつシリコンなど弾性体からなるチューブ９が接続可能であり、自動培養装置との接続に必要である。
　なお、培養液注入排出用流路は、枠体２、蓋部３にそれぞれ１か所ずつ設けているが、注入口と排出口を分ける場合は、枠体、蓋部にさらに１か所ずつ流路を設け、それぞれ一対の流路を形成すればよい。
　＜電極の形状と配置＞
  図２～８に上述した細胞培養容器に種々形状の電極を配置した実施例の構造を示す図を示す。図２～図４は枠体の底面に電極を配置したもので、図６～図８は枠体の側面に電極を配置したものである。
　図２において、枠体の培養保持面の底面である枠体２の底部に、同図下段の上面図に示すように円形の電極１０を配置し、蓋部３に、蓋部３を貫通する流路８に沿うように棒状の電極１１を配置し、電極１１からの電線１２は枠体外に配置され、電気抵抗が測定可能な交流電圧発生装置１３に接続される。これらの電極は、細胞観察に支障がないように、細胞観察可能となる形状を備え、また、細胞観察に支障が無い位置に配置する。以下、これらを細胞観察可能となる形状と称し、例えば細胞培養容器内を顕微鏡観察する際に、顕微鏡光軸を阻害しない形状、位置を意味することとする。電極１０、１１で、細胞培養容器１の電極部を構成している。交流電圧発生装置１３と細胞培養容器の接続方法は、予め交流電圧発生装置１３に接続された電線１２を細胞培養容器の電極部へ接続するか、予め細胞培養容器１の電極部に接続された電線１２を交流電圧発生装置１３へ接続する方法でよい。なお、本明細書において、電極１０、電極１１を、それぞれ第１電極、第２電極と呼ぶ場合がある。
　以上のような電極形状と配置により、枠体２の底部への細胞接着と、枠体２の底部とインサート容器４の底部の細胞観察が可能となる。なお細胞の経上皮電気抵抗測定に交流電圧を用いるのは、細胞、組織への損傷を与えないためであり、上述した市販のWPI社やnanoAnalytics社の製品でも交流電圧が用いられている。
　図３～図５は、図２で説明した電極を配置した細胞培養容器の実施例の変形例の構成を示す図である。図３では、枠体２の底部の電極１０に直接電線を接続するのではなく、枠体２の底部に通電可能な細胞培養容器設置台１４を設けることで、底部２の電極１０に関しては、その細胞培養容器設置台１４に細胞培養容器１を載置するだけで電気抵抗が測定可能となる。具体的には、細胞培養容器設置台１４には、細胞培養容器１を設置した際に、細胞培養容器１の電極１０と接触する位置に電極が設けられており、設置台１４に接続された電線１２が電気抵抗測定機能を備えた交流電圧発生装置１３に接続される。なお、交流電圧発生装置１３は、電極部に印加する電流と電圧との関係から、経上皮細胞等の種々の細胞の電気抵抗値を算出したり、電流値と電圧値を後で詳述する制御装置に出力することにより、電気抵抗値を得る構成にすることもできる。
　一方、図４の変形例では、蓋部３に設けられた流路８そのものを通電可能な材質にすることで、電気抵抗測定が可能な交流電圧発生装置１３に接続を行い、その流路へ電線を接続することで別途電極を設けることなく、電気抵抗が測定可能である。この場合にも、図３のように枠体２の底部に細胞培養容器設置台１４を設けてもよい。図５の変形例では、図４からさらに枠体２の流路９を通電可能な材質にして、電気抵抗測定器として機能する交流電圧発生装置１３に接続を行い、同様に電気抵抗を測定可能である。
　図６の変形実施例において、枠体２の培養保持面の側面、すなわち枠体側面に、同図の下側に斜視図を示すように、第２電極となる円形の電極１５を配置し、蓋部３に、流路８に沿うように棒状の電極１１を配置し、電極１１からの電線１２は枠体外に配置され、電気抵抗測定が可能な交流電圧発生装置１３に接続される。交流電圧発生装置１３と細胞培養容器１の接続方法は、図２において説明した方法でよい。
　図７、図８は図６の変形実施例の更なる変形例である。図７では、枠体２の側面の電極１５に直接電線を接続するのではなく、それ自身が電線１２に接続する構成を備えることにより、電極１５に通電可能な細胞培養容器設置台１６を設けることで、底部の円形電極１５に関しては、その細胞培養容器設置台１６に細胞培養容器１を載置するだけで電気抵抗が測定可能とする。図８では、蓋部３に設けられた流路８そのものを通電可能な材質にすることで、その流路８へ電線１２を接続することで別途電極を設けることなく、電気抵抗が測定可能である。この場合、図７のように枠体２の底部に細胞培養容器設置台１６を設けてもよい。
　＜細胞培養装置の構成＞
  図９は、上述した種々の細胞培養容器１が接続可能な細胞培養装置１７の機能構成を説明するためのブロック図である。制御装置１８によって制御される各構成要素が、恒温槽１９の内部に配置される細胞培養容器１に接続される全体の構成を示す図である。なお、恒温槽１９中に配置されるものは、図２～図８を用いて説明した閉鎖系培養容器、或いは細胞培養容器設置台に設置された当該閉鎖系培養容器であることは言うまでもない。
　図９において、制御装置１８には、恒温槽１９の温度を制御するための温度調節部２０と、培養容器内の湿度を制御するための湿度調節部２１と、培養容器内のガス濃度を制御するための、ガス供給部２２を有するガス濃度調節部２３と、培養容器内の培養液を自動で交換するための、培養液と廃液を保持するタンク２４に接続された送液用チューブを有する培養液供給ポンプ２５と、それぞれの構成要素の動作を制御することを目的とした、細胞観察用のＣＣＤ(Charge Coupled Device)カメラ２６、温度・湿度・ＣＯ２・Ｏ２センサー２７と、経上皮電気抵抗測定用の交流電圧発生装置２８と、表示画面２９を表示する装置が接続されている。なお、制御装置１８は、交流電圧発生装置２８から、電気抵抗値自身、あるいは電流・電圧値を受け取り、培養細胞の電気抵抗値を得ることができる。
　制御装置１８と表示画面２９は、中央処理部(Central Processing Unit：ＣＰＵ)からなる処理部や記憶部やディスプレイ装置やキーボードからなる入出力部等を備える通常のコンピュータの、処理部および記憶部と、ディスプレイ装置の表示部にそれぞれ対応しており、制御装置１８は、記憶部で記憶された各種のプログラムを処理部としてのＣＰＵ上で動作させることにより、温度調節部２０～交流電圧発生装置２８を制御することにより、恒温槽１９中の培養環境を制御し、培養容器１中で所定の培養を行うことを可能とする。
　湿度調節部２１とガス濃度調節部２３は、培養容器１に直接接続されている必要はなく、温度調節部２０と、湿度調節部２１と、ガス濃度調節部２３と、温度・湿度・ＣＯ２・Ｏ２センサー２７は恒温槽１９に接続されている構成でも構わない。この構成の場合、細胞培養容器１は容器外からガスを供給しなければならないため、細胞培養容器１の蓋部３の一部に、ポリカーボネートやポリスチレン、ポリメチルペンテンなどのガス透過性を有し透明な薄膜を溶着し、細胞培養容器１内部のガス交換を可能とすることで、細胞培養が可能とすることができる。
　＜培養継続判定プログラム＞
  図１０は、既存の電気抵抗測定装置を用いて、ウサギ角膜上皮細胞を、上述した電極を配置した本実施例の細胞培養容器１のインサート容器４で培養した際の電気抵抗値を示す図である。同図に示すように、播種細胞数３パターンで培養し、矢印は細胞が培養面一面に広がりコンフルエントに達した時を示すものである。この図より、コンフルエントに達した時期、即ち、閉鎖結合形成開始時期に、電気抵抗値がバックグランドよりも上昇していることが分かる。自動培養中に、細胞観察と、上述の抵抗値変化の現象を利用することで、培養継続・中止を判定することができる。
　図１１に本実施例における細胞培養装置１７の培養継続判定プログラムの一例を示す。このプログラムは、上述したＣＰＵや記憶部からなる制御装置１８が実行するプログラムである。まず、自動培養開始と共に、ＣＣＤカメラ２６で細胞を撮像し（ステップＳ１）、細胞画像を取得する（ステップＳ２）。上述した制御装置１８で所定の画像処理プログラムを動作させることにより、取得した画像データから細胞を検出する処理を実施し（ステップＳ３）、二値化後当該画像における細胞占有面積を算出する（ステップＳ４）。制御装置１８は、培養面の数点のデータを取得後、細胞占有面積が所定の面積に達していない場合は、電気抵抗値測定をせず培養を継続し、所定のタイミングでステップＳ１からＳ５を繰り返す（ステップＳ６）。
　制御装置１８は、Ｓ５での判定結果で細胞占有面積が１００％と判定された場合、交流電圧発生装置２８により電気抵抗値を測定するよう制御する（ステップＳ７）。測定の結果、バックグラウンドと比較して、交流電圧発生装置１８から取得した電気抵抗値の上昇が認められる場合（ステップＳ８でYes）は重層化培養を継続し（ステップＳ９）、所定のタイミングで培養を終了する。
　測定した電気抵抗値の上昇が認められない場合は（ステップＳ８でNo）、所定の期間培養を継続し、手動でカメラ撮影（ステップＳ１０）、画像取得し（ステップＳ１１）、細胞占有面積が１００％かどうかを判断する（ステップＳ１２）。細胞占有面積が１００％に満たない場合は、培養を継続し（ステップＳ１４）、ステップＳ７～Ｓ１２を繰り返す。
　細胞占有面積が１００％である場合（ステップＳ１２でYes）、電気抵抗値を測定し（ステップＳ１３）、電気抵抗値上昇が認められるかどうか判断する（ステップＳ１５）。電気抵抗値の上昇が認められる場合は、重層化培養を継続し（ステップＳ１６）、所定のタイミングで培養を終了する。電気抵抗値の上昇が認められない場合は、培養を中止する（ステップＳ１７）。
　図１２は本実施例による細胞培養装置の培養処理の実行の際の、ディスプレイ装置上の表示画面２９の一例を示すものである。同図において、表示画面２９中には、その画像表示エリア中に細胞観察像３１と電気抵抗測定結果３２を表示する。また、表示画面２９中には、恒温槽１９中の環境温度、湿度、ＣＯ２濃度、Ｏ２濃度を示す温度・湿度・濃度表示エリア３３を表示する。更に、培養処理の自動シーケンスか手動シーケンスかを選択するボタン３４、細胞観察モード、電気抵抗測定モードを選択するボタン３５、３６更には培養液交歓モードを選択するボタン３７を表示する。
　なお、本発明は上記した実施例に限定されるものではない。培養する細胞として、経上皮細胞を主に説明したが、培養の対象となる細胞は、経上皮細胞に限定されることなく、あらゆる細胞種に適用可能である。また、上記した実施例は本発明を分かりやすく説明するために詳細に説明したのであり、必ずしも説明の全ての構成を備えるものに限定されものではない。また、ある実施例の構成の一部を他の実施例の構成に置き換えることが可能であり、また、ある実施例の構成に他の実施例の構成を加えることが可能である。また、各実施例の構成の一部について、他の構成の追加・削除・置換をすることが可能である。
　更に、上記の各構成、機能、処理部、処理手段等は、それらの一部又は全部を、例えば集積回路で設計する等により専用ハードウェアで実現してもよい。各機能を実現する制御プログラム等の情報は、記憶部としてメモリのみならず、ハードディスク、ＳＳＤ（Solid State Drive）等の記憶装置、または、ＩＣ(Integrated Circuit)カード等の記録媒体におくことができる。
　本発明は、非侵襲的な細胞の品質評価を実現する細胞培養容器とその細胞培養容器を用いる細胞培養装置として有用である。
１…細胞培養容器
２…枠体
３…蓋部
４…インサート容器
５…弾性部材
６、７、８…流路
９…チューブ
１０、１１、１５…電極
１２…電線
１３…交流電圧発生装置
１４、１６…細胞培養容器設置台
１７…細胞培養装置
１８…制御装置
１９…恒温槽
２０…温度調整部
２１…湿度調整部
２２…ガス供給部
２３…ガス濃度調整部
２４…培養液・廃液タンク
２５…培養液供給ポンプ
２６…観察用ＣＣＤカメラ
２７…湿度・ＣＯ２・Ｏ２センサー
２８…交流電圧発生装置
２９…表示画面
３０…温度センサー
３１…細胞観察像
３２…電気抵抗測定結果
３３…温度・湿度・濃度表示エリア
３４、３５、３６、３７…ボタン。

Claims (15)

  1. 細胞を保持、培養するための細胞培養容器であって、
    前記細胞を培養する培養液を保持する枠体と、
    前記枠体に取り外し可能に取り付けられる蓋部と、
    前記枠体の底部もしくは側面に、細胞観察可能となる形状の第１電極と、
    前記蓋部に細胞観察可能となる形状の第２電極と、
    を備えることを特徴とする細胞培養容器。
  2. 請求項１に記載の細胞培養容器であって、
    前記第１電極は、前記枠体の底部に形成された円形状の電極からなり、
    前記第２電極は、前記蓋部に形成された棒状の電極からなる、
    ことを特徴とする細胞培養容器。
  3. 請求項１に記載の細胞培養容器であって、
    前記蓋部に、前記枠体に前記培養液を導入する流路を設け、
    前記第１電極は、前記枠体の底部に形成された円形状の電極からなり、
    前記第２電極は、前記蓋部に設けられた前記流路を通電可能とすることにより構成する、ことを特徴とする細胞培養容器。
  4. 請求項１に記載の細胞培養容器であって、
    前記第１の電極は、前記枠体の側面に形成される円形状の電極により構成される、
    ことを特徴とする細胞培養容器。
  5. 請求項４に記載の細胞培養容器であって、
    前記蓋部に、前記枠体に前記培養液を導入する流路を設け、
    前記第２電極は、前記蓋部に設けられた前記流路を通電可能とすることにより構成する、ことを特徴とする細胞培養容器。
  6. 細胞培養容器内の細胞の電気抵抗を測定する細胞培養装置であって、
    細胞培養用の閉鎖系培養容器と、
    前記閉鎖系培養容器が設置される細胞培養用恒温槽と、
    前記閉鎖系培養容器の培養環境を制御する制御装置と、
    交流電圧発生装置とを備え、
    前記閉鎖系培養容器は、前記細胞を培養する培養液を保持する枠体と、前記枠体に取り外し可能に取り付けられる蓋部と、前記枠体の底部もしくは側面に、細胞観察可能となる形状の第１電極と、前記蓋部に細胞観察可能となる形状の第２電極とを備え、
    前記交流電圧発生装置は、前記閉鎖系培養容器で細胞培養中に、前記第１電極および前記第２電極間に交流電圧を印加する、
    ことを特徴とする細胞培養装置。
  7. 請求項６に記載の細胞培養装置であって、
    前記第１電極は、前記枠体の底部に形成された円形状の電極からなり、
    前記第２電極は、前記蓋部に形成された棒状の電極からなる、
    ことを特徴とする細胞培養装置。
  8. 請求項６に記載の細胞培養装置であって、
    前記蓋部に、前記枠体に前記培養液を導入する流路を設け、
    前記第１電極は、前記枠体の底部に形成された円形状の電極からなり、
    前記第２電極は、前記蓋部に設けられた前記流路を通電可能とすることにより構成する、ことを特徴とする細胞培養装置。
  9. 請求項６に記載の細胞培養装置であって、
    前記第１の電極は、前記枠体の側面に形成される円形状の電極により構成される、
    ことを特徴とする細胞培養装置。
  10. 請求項９に記載の細胞培養装置であって、
    前記蓋部に、前記枠体に前記培養液を導入する流路を設け、
    前記第２電極は、前記蓋部に設けられた前記流路を通電可能とすることにより構成する、ことを特徴とする細胞培養装置。
  11. 請求項７に記載の細胞培養装置であって、
    前記交流電圧発生装置に接続され、通電可能な細胞培養容器設置台を更に備え、
    前記閉鎖系培養容器が載置された前記細胞培養容器設置台が前記細胞培養用恒温槽に設置される、
    ことを特徴とする細胞培養装置。
  12. 請求項８に記載の細胞培養装置であって、
    前記交流電圧発生装置に接続され、通電可能な細胞培養容器設置台を更に備え、
    前記閉鎖系培養容器が載置された前記細胞培養容器設置台が前記細胞培養用恒温槽に設置される、
    ことを特徴とする細胞培養装置。
  13. 請求項９に記載の細胞培養装置であって、
    前記交流電圧発生装置に接続され、通電可能な細胞培養容器設置台を更に備え、
    前記閉鎖系培養容器が載置された前記細胞培養容器設置台が前記細胞培養用恒温槽に設置される、
    ことを特徴とする細胞培養装置。
  14. 請求項６に記載の細胞培養装置であって、
    前記制御装置は、
    前記交流電圧発生装置による電気抵抗測定結果をもとに、前記培養の継続、中止を判定する、
    ことを特徴とする細胞培養装置。
  15. 請求項６に記載の細胞培養装置であって、
    前記制御装置は、
    前記細胞培養用恒温槽内に設置された前記閉鎖系培養容器内のガス濃度を調節するため、前記前記閉鎖系培養容器へのガス供給を制御する、
    ことを特徴とする細胞培養装置。
PCT/JP2012/058975 2011-04-28 2012-04-02 細胞培養容器および細胞培養装置 WO2012147463A1 (ja)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2013511981A JP5758989B2 (ja) 2011-04-28 2012-04-02 細胞培養容器および細胞培養装置
US14/113,857 US20140045252A1 (en) 2011-04-28 2012-04-02 Cell cultivation container and cell culturing apparatus

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2011101057 2011-04-28
JP2011-101057 2011-04-28

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2012147463A1 true WO2012147463A1 (ja) 2012-11-01

Family

ID=47071988

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2012/058975 WO2012147463A1 (ja) 2011-04-28 2012-04-02 細胞培養容器および細胞培養装置

Country Status (3)

Country Link
US (1) US20140045252A1 (ja)
JP (1) JP5758989B2 (ja)
WO (1) WO2012147463A1 (ja)

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016016950A1 (ja) * 2014-07-29 2016-02-04 株式会社日立製作所 細胞培養装置、及び閉鎖系培養容器
KR101796143B1 (ko) 2016-01-27 2017-12-01 한양대학교 에리카산학협력단 통합형 세포 배양 및 노출 평가 장치
JP2019522980A (ja) * 2016-06-29 2019-08-22 ノースイースタン・ユニバーシティ 細胞培養チャンバーおよびその使用方法
JP2020134478A (ja) * 2019-02-26 2020-08-31 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 電極基板、測定装置、取外用具および測定方法
JP2020146015A (ja) * 2019-03-15 2020-09-17 国立大学法人京都大学 マイクロ流体デバイス
WO2020189219A1 (ja) * 2019-03-19 2020-09-24 富士フイルム株式会社 情報処理装置、細胞培養システム、情報処理方法、及び情報処理プログラム
JPWO2019182093A1 (ja) * 2018-03-23 2021-03-11 住友ベークライト株式会社 培養容器
WO2021054103A1 (ja) * 2019-09-20 2021-03-25 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 電気抵抗測定装置、電気抵抗測定方法および電気抵抗算出装置

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS62191764A (ja) * 1986-02-06 1987-08-22 シーエムビー　フードキャン　ピーエルシー 微生物検査装置
JP2001275659A (ja) * 2000-03-31 2001-10-09 Masahito Taya 細胞培養方法、細胞培養装置及び記録媒体
JP2002517225A (ja) * 1998-06-08 2002-06-18 アニ クロード 有機細胞を培養し、かつこの細胞の電気生理学的活性度を研究するための装置、およびこの装置で使用する膜
JP2003042994A (ja) * 2001-08-01 2003-02-13 Matsushita Electric Ind Co Ltd バイオセンサカートリッジ及びバイオセンサ分与装置
JP2005137307A (ja) * 2003-11-07 2005-06-02 Japan Science & Technology Agency 細胞及び組織の損傷を評価する方法及びその測定装置
JP2006217806A (ja) * 2005-02-08 2006-08-24 Matsushita Electric Ind Co Ltd 培養装置
JP2007215473A (ja) * 2006-02-16 2007-08-30 Foundation For The Promotion Of Industrial Science 培養細胞の電気シグナル計測デバイスおよび該デバイスを用いる電気シグナル計測方法
JP2007222120A (ja) * 2006-02-27 2007-09-06 Hitachi Medical Corp 自動培養装置
JP2008209350A (ja) * 2007-02-28 2008-09-11 Matsushita Electric Ind Co Ltd 血液凝固時間測定装置

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2502621C3 (de) * 1975-01-23 1978-09-14 Kernforschungsanlage Juelich Gmbh, 5170 Juelich Messung elastischer und dielektrischer Eigenschaften der Membran lebender Zellen
GB9908681D0 (en) * 1999-04-16 1999-06-09 Central Research Lab Ltd Apparatus for, and method of, introducing a substance into an object
US20070293893A1 (en) * 2006-06-14 2007-12-20 Craig Stolen Method and apparatus for preconditioning of cells
CN101270332B (zh) * 2008-04-30 2012-05-30 广东省人民医院 用于细胞或组织培养和处理的装置和方法

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS62191764A (ja) * 1986-02-06 1987-08-22 シーエムビー　フードキャン　ピーエルシー 微生物検査装置
JP2002517225A (ja) * 1998-06-08 2002-06-18 アニ クロード 有機細胞を培養し、かつこの細胞の電気生理学的活性度を研究するための装置、およびこの装置で使用する膜
JP2001275659A (ja) * 2000-03-31 2001-10-09 Masahito Taya 細胞培養方法、細胞培養装置及び記録媒体
JP2003042994A (ja) * 2001-08-01 2003-02-13 Matsushita Electric Ind Co Ltd バイオセンサカートリッジ及びバイオセンサ分与装置
JP2005137307A (ja) * 2003-11-07 2005-06-02 Japan Science & Technology Agency 細胞及び組織の損傷を評価する方法及びその測定装置
JP2006217806A (ja) * 2005-02-08 2006-08-24 Matsushita Electric Ind Co Ltd 培養装置
JP2007215473A (ja) * 2006-02-16 2007-08-30 Foundation For The Promotion Of Industrial Science 培養細胞の電気シグナル計測デバイスおよび該デバイスを用いる電気シグナル計測方法
JP2007222120A (ja) * 2006-02-27 2007-09-06 Hitachi Medical Corp 自動培養装置
JP2008209350A (ja) * 2007-02-28 2008-09-11 Matsushita Electric Ind Co Ltd 血液凝固時間測定装置

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPWO2016016950A1 (ja) * 2014-07-29 2017-04-27 株式会社日立製作所 細胞培養装置、及び閉鎖系培養容器
WO2016016950A1 (ja) * 2014-07-29 2016-02-04 株式会社日立製作所 細胞培養装置、及び閉鎖系培養容器
KR101796143B1 (ko) 2016-01-27 2017-12-01 한양대학교 에리카산학협력단 통합형 세포 배양 및 노출 평가 장치
JP7100592B2 (ja) 2016-06-29 2022-07-13 ノースイースタン・ユニバーシティ 細胞培養チャンバーおよびその使用方法
JP2019522980A (ja) * 2016-06-29 2019-08-22 ノースイースタン・ユニバーシティ 細胞培養チャンバーおよびその使用方法
JP7279703B2 (ja) 2018-03-23 2023-05-23 住友ベークライト株式会社 培養容器
JPWO2019182093A1 (ja) * 2018-03-23 2021-03-11 住友ベークライト株式会社 培養容器
JP2020134478A (ja) * 2019-02-26 2020-08-31 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 電極基板、測定装置、取外用具および測定方法
WO2020174897A1 (ja) * 2019-02-26 2020-09-03 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 電極基板、測定装置、取外用具および測定方法
JP7232078B2 (ja) 2019-02-26 2023-03-02 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 電極基板、測定装置および測定方法
JP7217521B2 (ja) 2019-03-15 2023-02-03 国立大学法人京都大学 マイクロ流体デバイス
JP2020146015A (ja) * 2019-03-15 2020-09-17 国立大学法人京都大学 マイクロ流体デバイス
JPWO2020189219A1 (ja) * 2019-03-19 2020-09-24
WO2020189219A1 (ja) * 2019-03-19 2020-09-24 富士フイルム株式会社 情報処理装置、細胞培養システム、情報処理方法、及び情報処理プログラム
JP7314253B2 (ja) 2019-03-19 2023-07-25 富士フイルム株式会社 情報処理装置、細胞培養システム、情報処理方法、及び情報処理プログラム
WO2021054103A1 (ja) * 2019-09-20 2021-03-25 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 電気抵抗測定装置、電気抵抗測定方法および電気抵抗算出装置

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2012147463A1 (ja) 2014-07-28
US20140045252A1 (en) 2014-02-13
JP5758989B2 (ja) 2015-08-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5758989B2 (ja) 細胞培養容器および細胞培養装置
EP2832847B1 (en) Culture vessel and automated culture apparatus
JP7511473B2 (ja) 電気測定実施装置
Schmid et al. Electrical impedance spectroscopy for microtissue spheroid analysis in hanging-drop networks
KR101808063B1 (ko) 세포 배양 플레이트를 구비하는 세포 배양장치
JP5866006B2 (ja) 培養容器及び自動培養装置
US10227556B2 (en) Cell culture devices for biomimetic and pathomimetic cell cultures
JPWO2007052718A1 (ja) 細胞培養用振盪装置及び細胞培養方法の振盪培養方法
JP2013518571A (ja) 細胞変異の無標識での検出と分類、特に、細胞球状体の生成と特性解析のための統合型培養・測定装置、その構成要素及びその使用方法
EP2725097A1 (en) Cell culture device and cell culture method
KR101706153B1 (ko) 미세유체칩 기반 세포 배양 시스템
EP3136078B1 (en) Cell smearing apparatus and cell smearing method
van Neste et al. Designing a Bioreactor to Improve Data Acquisition and Model the Throughput of Engineered Cardiac Tissues
CN108384715A (zh) 一种细胞划痕实验用培养皿及其使用方法
RU2395812C2 (ru) Устройство для исследования пространственного свертывания крови и ее компонентов
JP6239759B2 (ja) 温度調整容器
CN211602621U (zh) 一种临床医学检验用涂片装置
CN218710460U (zh) 一种多功能的细胞迁移检测装置
JP5577498B2 (ja) ウェルユニット及び検体セル
Salierno et al. Encapsulated Petri dish system for single-cell drug delivery and long-term time lapse microscopy
JP2009183193A (ja) マイクロインジェクション用のシャーレ
RU2395811C2 (ru) Кювета для исследования пространственного свертывания крови и ее компонентов
RU171227U1 (ru) Камера для экспрессного комплексного электрокинетического анализа
KR20240106836A (ko) 조직 또는 세포배양용 직립형 배양슬라이드 장치
RU61432U1 (ru) Устройство подготовки плазмы, богатой тромбоцитами, к микроскопическим исследованиям

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 12777085

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2013511981

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 14113857

Country of ref document: US

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 12777085

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1