WO2008018143A1 - Agent hydratant - Google Patents

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WO2008018143A1
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lactobacillus plantarum
heat
cells
skin
moisturizing agent
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Koutarou Muroyama
Tatsuya Ohara
Yoshitaka Hirose
Norio Yamamoto
Shinji Murosaki
Yoshihiro Yamamoto
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House Wellness Foods Corporation
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    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/92—Oral administration

Definitions

  • the present invention relates to a humectant, and more particularly to a humectant characterized by containing a heat-killed cell of Lactobacill us plantarum.
  • stratum corneum that is a thin biological protective film, and it is this stratum corneum that is in contact with the outside world that can live without losing moisture even in a dry atmosphere. Because! The stratum corneum is thin and supple, and it is adjusted so as to maintain a healthy skin condition while keeping the water in the body intact. In general, the skin water content is kept at 10-20%. It is said that the skin is healthy!
  • Patent Document 1 Japanese Patent Application Laid-Open No. 2001-89381
  • Patent Document 2 JP 2002-145753
  • Patent Document 3 Japanese Patent Laid-Open No. 2005-314402
  • Patent Document 4 Japanese Patent Application Laid-Open No. 2004-269408
  • Patent Document 5 Japanese Patent Application Laid-Open No. 2004-254632
  • an object of the present invention is to provide a moisturizing agent that exhibits a moisturizing effect by oral administration (internal use).
  • the present invention provides:
  • Lactobacillus plantarum (Lactobacillus plantarum) heat moisturizing agent characterized by containing as an active ingredient
  • Lactobacillus plantarum is Lactobacillus plantarum L-137 strain (Lactobacillus plantarum L-137, accession number FERM B P-08607),
  • a method of moisturizing the skin comprising administering an effective amount of heat-killed Lactobacillus plantarum to a human in need of skin moisturization, and
  • the moisturizing agent of the present invention exhibits an excellent moisturizing effect by orally administering it or directly applied to the skin, and various skins such as wrinkles, tarmi, skin firmness, spots, and kusumi. Exhibits excellent effects in preventing and improving symptoms.
  • Fig. 1 shows the amount of keratinous water (%) in Lactobacillus plantarum L137 heat-killed cell administration group (indicated as L137 administration group in the figure) and control group in Test Example 1.
  • the active ingredient of the moisturizing agent according to the present invention is a heat-killed cell of Lactobacillus plantarum, and a killed cell obtained by heat-treating Lactobacillus plantarum (Lactobacillus plantarum) Is the body.
  • Representative bacteria belonging to Lactobacillus plantarum include ratatobatinoles 'plantarum L 137, ratatobatinoles' plantarum JCM 1149 reference strain, Lactobacillus plantarum L—051 (No. 1 1912 ), But Lactobacillus plantarum L-137 is most preferred.
  • Lactobacillus plantarum L 137 was transferred to the Patent Organism Depositary, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, under the accession number FERM BP-08607 (FERM P-15317 deposited on November 30, 1995) ).
  • the bacterium used in the present invention can be obtained by culturing in a medium such as a natural medium, a synthetic medium, or a semi-synthetic medium.
  • a medium containing a nitrogen source and a carbon source is used.
  • the nitrogen source include meat extract, peptone, dartene, casein, fermenter extract, amino acid, and the like.
  • Examples of the carbon source include glucose, xylose, fructose, inositol, maltose, salted water, starch Nocus, bran, molasses, glycerin, etc. are used.
  • ammonium sulfate, potassium phosphate, magnesium chloride, salt, iron, manganese, molybdenum, and the like can be added as inorganic substances, and various vitamins and the like can be added.
  • the culture temperature is about 25 to 40 ° C, preferably about 27 to 35 ° C
  • the culture time is about 12 to 48 hours
  • aeration shaking may be performed.
  • the pH of the medium is about 3-6, preferably about 4-6.
  • the cells may be collected and then heat-killed cells may be prepared, or the cells in the culture solution may be prepared by heating and killing the cells without separating the cells from the culture solution.
  • the body may be collected and the heat-killed cells may be collected.
  • Examples of a method for collecting bacterial cells include a method in which distilled water is added to a culture solution, the supernatant is removed by means such as centrifugation, and the operation is repeated as necessary, and the bacterial cells are collected by centrifugation or filtration. .
  • the heat-killed cells of Lactobacillus plantarum according to the present invention are inactivated by heat treatment of the collected live cells or the culture solution containing the live cells, spray-dried, frozen. It can be obtained by drying by an appropriate means such as drying.
  • Caro The heat temperature is usually about 60-100 ° C, preferably about 70-90 ° C.
  • the heating means may be a known means using a heater.
  • the heating time is usually about 5 to 40 minutes, preferably about 10 to 30 minutes after reaching the desired temperature.
  • the dose of the heat-killed bacterial cell which is an active ingredient, varies depending on the sex, age, weight, and condition (symptom) of the subject, Weight is about 60 kg), and about 0.4 mg to 2 g per liter, preferably about 1 mg to about ⁇ : Lg, more preferably about 5 mg to 0.5 g.
  • the dose of the heated dead cells as the active ingredient is usually about 10 cm 2 for the area of the application site. 1 day, about 0.01-2.5 mg, preferably about 0.02-lmg. Do not administer the above dose once or in several divided doses per day.
  • the humectant of the present invention when orally administered, it may be a solid preparation such as powder, granule, pill, tablet, capsule or liquid such as syrup.
  • carriers or additives corresponding to the form of the preparation can be used.
  • Carriers or additives include, for example, excipients (sodium polyacrylate, calcium polyacrylate, carboxymethylcellulose, lactose, dextrin, corn starch, crystalline cellulose, sucrose, sodium chloride salt, glucose, urea, starch, calcium carbonate.
  • lubricant magnesium stearate, sucrose fatty acid ester, glycerin fatty acid ester, purified talc, polyethylene glycol, etc.
  • disintegrant carboxymethylcellulose calcium, anhydrous hydrogen phosphate) Calcium, sodium carboxymethylcellulose, low substituted hydroxypropylcellulose, dry starch, sodium alginate, agar powder, sodium bicarbonate, calcium carbonate, etc.
  • binder hydroxy Propylcellulose, gum arabic solution, water, ethanol, propanol, simple syrup, dextrose solution, starch solution, gelatin solution, carboxymethyl cellulose, methylcellulose, polyvinylpyrrolidone, etc.
  • solubilizer gum arabic, polysorbate 80, etc.
  • Absorption enhancers such as sodium lauryl sulfate
  • buffers phosphate buffer, acetate buffer, borate buffer, carbonate buffer, citrate buffer, Tris
  • the moisturizing agent of the present invention can also be used in cosmetics.
  • Cosmetics include, for example, body cleansers, hand cleansers, cleansers such as facial cleansers, basic cosmetics such as skin lotions, emulsions, and creams, makeups such as foundations, under makeup, and white powder.
  • Cosmetic dosage forms such as The amount of the moisturizing agent of the present invention added to cosmetics is not particularly limited, but is usually 0.01% in the total amount of cosmetics as the amount of heat-killed Lactobacillus plantarum, an active ingredient. ⁇ 2.5 wt% is preferred, more preferably 0.02 to 1 wt%.
  • Glucose 1. / 0 yeast extract 1. / 0 , 0.5% polypeptone, 0.2% meat extract, 0.2% sodium acetate, manganese sulfate tetrahydrate 0.001%, iron sulfate heptahydrate 0.001%, salt Lactobacillus' plantarum L-137 (Accession No. FERM BP-08607) strain was inoculated into 6 L of a medium containing 0.001% and sucrose fatty acid ester 0.05% and cultured at 32 ° C for 24 hours. After cultivation, the culture was centrifuged at 5000 rpm for 35 minutes to collect the cells.
  • the obtained cells were well dispersed in physiological saline and centrifuged at 5000 rpm for 35 minutes, and the supernatant was removed to collect the cells. After repeating this operation three times, the cells were dispersed in ion-exchanged water, heated at 70 ° C. for 10 minutes, and then freeze-dried to obtain about 7 g of heated dead cells.
  • the above-mentioned heat-killed cells were placed in a powder feed (CE-2, manufactured by Nippon Claire Co., Ltd.) to a final weight of 10 mg% and mixed.
  • the skin moisture meter moisture checker MY—808S, manufactured by SCARA Co., Ltd.
  • moisture checker MY—808S manufactured by SCARA Co., Ltd.
  • Measurement was performed 5 times (total 10 times).
  • the average value of the 6 data was defined as the horny water content (%) of each individual.
  • the average standard deviation of each group was determined from the horny water content of each individual, and the time course is shown in Fig. 1.
  • the Lactobacillus plantarum L-137 heat-killed cell administration group had no significant difference from the control group until the 4th week.
  • the stratum L 137 heat-killed cells group significantly improved the water retention capacity of the stratum corneum compared to the control group.
  • a cream was prepared by the conventional method with the blending amounts shown in Table 2 below.
  • the present invention it is possible to provide a moisturizing agent that improves the moisture retention ability of the stratum corneum and is effective in preventing or restoring rough skin.

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Description

明 細 書
保湿剤
技術分野
[0001] 本発明は、保湿剤に関し、さらに詳しくはラクトバチルス ·プランタラム (Lactobacill us plantarum)の加熱死菌体を含有することを特徴とする保湿剤に関する。
背景技術
[0002] ヒトの皮膚は、薄い生物学的防御膜である角質層によって覆われており、乾燥した 大気中でも水分を失うことなく生活することができるのは、外界と接するこの角質層が 存在して!/、るからである。角質層は薄くしなやかで且つ体内の水分を失わな 、ように 保ち、健常な皮膚状態を維持するように調節している。一般に皮膚の水分量が 10〜 20%に保たれた状態力 健康な皮膚であると!/ヽわれて ヽる。
[0003] しかしながら、老化や季節変動などにより正常な角質水分調節機構が損なわれると 肌荒れなどを生じ、深刻なスキントラブルを招く恐れもある。従来から、角質層の水分 保持能力を改善し、肌荒れを防止するためにグリセリンなどの多価アルコール、ヒア ルロン酸、コンドロイチン、コラーゲン、ムコ多糖類などを配合した外用保湿剤が知ら れている（特許文献 1〜3参照)。また、 /3—グルカンとェンテロコッカス'フエカリス (E nterococcus faecalis)の加熱処理菌体とを併用して配合した外用保湿剤が知ら れている (特許文献 4参照)。さらに、セラミドと乳酸菌の生菌体とを併用した美容食品 が知られて ヽる (特許文献 5参照)。
[0004] 特許文献 1 :特開 2001— 89381号公報
特許文献 2 :特開 2002— 145753号公報
特許文献 3：特開 2005 - 314402号公報
特許文献 4：特開 2004 - 269408号公報
特許文献 5：特開 2004— 254632号公報
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0005] このような事情に鑑み、本発明は優れた保湿効果を有する保湿剤を提供することを 目的とする。特に本発明は、経口投与（内服）により保湿効果を発揮する保湿剤を提 供することを目的とする。
課題を解決するための手段
[0006] 本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、ラクトバチルス •プランタラム（Lactobacillus plantarum)の加熱死菌体を経口投与することにより 優れた保湿効果を有することを見出し、この知見に基づいてさらに研究を進め、本発 明を完成するに至った。
[0007] すなわち、本発明は、
[1] ラクトバチルス 'プランタラム（Lactobacillus plantarum)の加熱死菌体を有 効成分とすることを特徴とする保湿剤、
[2] ラクトバチルス ·プランタラム（Lactobacillus plantarum)がラクトバチルス ·プ ランタラム L— 137株（Lactobacillus plantarum L— 137、受託番号 FERM B P— 08607)である上記 [ 1 ]記載の保湿剤、
[3] 経口投与用である上記 [1]または [2]の 、ずれかに記載の保湿剤、
[4] ラクトバチルス ·プランタラム（Lactobacillus plantarum)の加熱死菌体の有 効量を皮膚の保湿を必要とするヒトに投与することを特徴とする皮膚の保湿方法、お よび
[5] 保湿剤を製造するためのラクトバチルス 'プランタラム（Lactobacillus plantar urn)の加熱死菌体の使用
に関する。
発明の効果
[0008] 本発明の保湿剤は、これを経口投与することにより、あるいは皮膚に直接適用する ことにより、優れた保湿効果を示し、シヮ、タルミ、肌のハリ、シミ、クスミといった種々 の皮膚症状の防止や改善に優れた効果を発揮する。
図面の簡単な説明
[0009] [図 1]図 1は、試験例 1におけるラクトバチルス ·プランタラム L 137の加熱死菌体投 与群 (図中、 L137投与群と表示)と対照群との角質水分量 (％)の経時変化を示す 図である。 発明を実施するための最良の形態
[0010] 本発明に係る保湿剤の有効成分は、ラクトバチルス ·プランタラム（Lactobacillus plantarum)の加熱死菌体であり、ラクトバチルス ·プランタラム（Lactobacillus pla ntarum)を加熱処理して得られる死菌体である。ラクトバチルス ·プランタラムに属す る菌の代表的なものとして、ラタトバチノレス'プランタラム L 137、ラタトバチノレス'プ ランタラム JCM 1149基準株、ラクトバチルス 'プランタラム L— 051 (微工研菌寄第 1 1912号)などを挙げることができるが、ラクトバチルス ·プランタラム L - 137が最も好 ま 、。上記のラクトバチルス ·プランタラム L 137は独立行政法人産業技術総合 研究所 特許生物寄託センターに、受託番号 FERM BP— 08607号（平成 7年 11 月 30日に寄託された FERM P— 15317号より移管）として寄託されている。
[0011] 上記の本発明に用いる菌は天然培地、合成培地、半合成培地などの培地に培養 することにより得ることができる。培地としては、窒素源および炭素源を含有するもの が用いられる。窒素源としては、例えば、肉エキス、ペプトン、ダルテン、カゼイン、酵 母エキス、アミノ酸などが用いられ、炭素源としては、例えば、グルコース、キシロース 、フラクトース、イノシトール、マルトース、水ァ入麹汁、澱粉、ノ カス、フスマ、糖蜜、 グリセリンなどが用いられる。このほか、無機質として、例えば硫酸アンモ-ゥム、リン 酸カリウム、塩化マグネシウム、食塩、鉄、マンガン、モリブデンなどを添加することが でき、更に各種ビタミン類その他を添加することができる。培養温度は約 25〜40°C、 好ましくは約 27〜35°Cであり、培養時間は約 12〜48時間程度であり、通気振盪し てもよい。培地の pHは約 3〜6、好ましくは約 4〜6である。
[0012] 培養終了後、菌体を採取した後、加熱死菌体を調製してもよいし、または菌体を培 養液からー且分離することなぐ培養液中の菌体を加熱死菌体にし、その加熱死菌 体を採取してもよい。菌体を採取する方法としては、例えば培養液に蒸留水を加え、 遠心分離などの手段により上清を除き、必要によりその操作を繰り返し、遠心分離や 濾過などにより菌体を採取する方法がある。
[0013] 本発明のラクトバチルス ·プランタラム（Lactobacillus plantarum)の加熱死菌体 は、採取された生菌あるいは生菌を含んだ培養液ごと、加熱処理により不活性化さ せ、噴霧乾燥、凍結乾燥などの適当な手段によって乾燥することにより得られる。カロ 熱温度は通常約 60〜100°C、好ましくは約 70〜90°Cである。加熱手段としては、ヒ 一ターを用いる公知の手段であってよい。加熱時間は所望の温度に達した後、通常 約 5〜40分、好ましくは約 10〜30分である。
[0014] 本発明の保湿剤は、経口で投与する場合、有効成分である加熱死菌体の投与量 は、対象者の性別、年齢、体重、状態 (症状）によっても異なるが、成人一人 (体重約 60kg)【こ対し、 1曰あたり、約 0. 4mg〜2g、好ましく ίま約 lmg〜： Lg、さら【こ好ましく【ま 約 5mg〜0. 5gの範囲である。皮膚に直接適用する場合は、適用する皮膚面積に応 じて、適宜選択することができるが、有効成分である加熱死菌体の投与量は、通常、 適用部位の面積約 10cm2に対して、 1日にっき、約 0. 01-2. 5mg、好ましくは約 0 . 02〜lmgであるのがよい。前記の投与用量を、 1日あたり、 1回または数回に分け て投与な 、し適用すると良 、。
[0015] 本発明の保湿剤を経口投与する場合は、散剤、顆粒剤、丸剤、錠剤、カプセル剤 などの固型製剤であってもよぐシロップ剤などの液剤であってもよい。これらの製剤 を製造する場合には、その製剤形態に応じた担体もしくは添加剤を使用することがで きる。担体もしくは添加剤としては、例えば、賦形剤（ポリアクリル酸ナトリウム、ポリアク リル酸カルシウム、カルボキシメチルセルロース、乳糖、デキストリン、コーンスターチ 、結晶セルロース、白糖、塩ィ匕ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム 、カオリン、ケィ酸、リン酸カリウムなど）、滑沢剤 (ステアリン酸マグネシウム、ショ糖脂 肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、精製タルク、ポリエチレングリコールなど） 、崩壊剤（カルボキシメチルセルロースカルシウム、無水リン酸水素カルシウム、カル ボキシメチルセルロースナトリウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、乾燥デン プン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウムなど）、 結合剤（ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアゴム液、水、エタノール、プロパノー ル、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロー ス、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンなど）、溶解補助剤（アラビアゴム、ポリソル ペート 80など）、吸収促進剤（ラウリル硫酸ナトリウムなど）、緩衝剤（リン酸緩衝液、酢 酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、炭酸緩衝液、クェン酸緩衝液、トリス緩衝液など）、保存剤 (パラォキシ安息香酸メチル、パラォキシ安息香酸ェチル、パラォキシ安息香酸プロ ピル、パラォキシ安息香酸ブチル、クロロブタノール、ベンジルアルコール、塩化ベン ザルコ-ゥム、デヒドロ酢酸ナトリウム、ェデト酸ナトリウムなど）、増粘剤（プロピレング リコーノレ、グリセリン、ヒドロキシェチノレセノレロース、ヒドロキシプロピノレセノレロース、ポリ ビュルアルコール、ポリエチレングリコールなど）、安定化剤（亜硫酸水素ナトリウム、 チォ硫酸ナトリウム、ェデト酸ナトリウム、クェン酸ナトリウム、ァスコルビン酸、ジブチ ルヒドロキシトルエンなど)または PH調整剤 (塩酸、水酸化ナトリウム、リン酸、酢酸な ど）を挙げることができる。
[0016] また、本発明の保湿剤は化粧品に配合して使用することもできる。化粧品としては、 例えば、ボディ洗浄料、ハンド洗浄料、洗顔料などの洗浄料類や化粧水、乳液、タリ ームなどの基礎ィ匕粧料、ファンデーション、アンダーメークアップ、白粉などのメーク アップ料などの化粧料剤形などが挙げられる。本発明の保湿剤の化粧品への配合 量は、特に制限されないが、通常、有効成分であるラクトバチルス ·プランタラム (Lac tobacillus plantarum)の加熱死菌体の量として、化粧品全量中の 0. 01〜2. 5重 量％が好ましぐさらに好ましくは 0. 02〜1重量％である。
実施例
[0017] 以下に試験例および実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらに限定 されるものではない。
[0018] [試験例 1]
グルコース 1。/0、酵母エキス 1。/0、ポリペプトン 0. 5%、肉エキス 0. 2%、酢酸ナトリ ゥム 0. 2%、硫酸マンガン ·4水和物 0. 001%、硫酸鉄 · 7水和物 0. 001%、食塩 0 . 001%、ショ糖脂肪酸エステル 0. 05%含む培地 6Lにラクトバチルス 'プランタラム L— 137 (受託番号 FERM BP— 08607)株を接種し、 32°Cで 24時間培養した。培 養後、培養液を 5000rpmで 35分間遠心分離し菌体を集めた。得られた菌体を生理 食塩水によく分散し、 5000rpmで 35分間遠心分離した後、上清を除き菌体を集め た。この操作を 3回繰り返した後、菌体をイオン交換水に分散し、 70°C10分間加熱し た後、凍結乾燥することにより、加熱死菌体を約 7g得た。前記加熱死菌体を粉末飼 料 (CE— 2、 日本クレア (株)製）に最終重量 10mg%になるようにカ卩え、混合した。
[0019] 7週齢のへアレスマウス（HR— 1、雌、 日本エスエルシー（株））に試験開始前の 1 週間は予備飼育として CE— 2粉末飼料と水を自由摂取させた。体重により群分けし ( 各群 8匹）、上記で調製したラクトバチルス 'プランタラム L— 137加熱死菌体配合飼 料を与え 6週間飼育した。同時に、対照群には、ラクトバチルス ·プランタラム L— 137 加熱死菌体を含まな!/ヽ CE— 2粉末飼料を与え飼育した。
[0020] 群分け時から 2週間毎に肌水分計 (モイスチャーチヱッカー MY— 808S、スカラ（ 株)製)で背中側の中心から下半身 (腰部から臀部)付近の肌の左右を交互に各 5回 (計 10回)測定した。最小値力も 2データおよび最大値力も 2データを除外し、 6デー タの平均値を各個体の角質水分量 (％)とした。各個体の角質水分量から各群の平 均値士標準偏差を求め、その経時変化を図 1に示す。
[0021] 図 1から明らかなように、 4週目まではラクトバチルス ·プランタラム L— 137加熱死菌 体投与群は対照群と比べて差はな力つた力 6週目にラクトバチルス ·プランタラム L 137加熱死菌体投与群は対照群に比べて有意に角質層の水分保持能力が改善 された。
[0022] [実施例 1]
下記表 1に記載の配合量にて各原料をよく混合した後、本発明の保湿剤の重量が 1錠あたりの重量が lOmgとなるように打錠して、 1錠 500mgの錠剤を製造した。
[表 1]
Figure imgf000007_0001
[0023] [実施例 2]
下記表 2に記載の配合量にて、常法により、クリーム剤を製造した。
[表 2] 成分 配合量 （重量％) 試験例 1で作製した加熱死菌体 0 . 2
ポリエチレングリコール 2
自己乳化型モノステアリン酸グリセ
5
リン
セチルアルコール 4
スクヮラン 6
2―ェチルへキサン酸トリグリセリ
6
ル
1 , 3—ブチレングリコール 7
L—ヒスチジン 3
精製水 残量 産業上の利用可能性
本発明により、角質層の水分保持能力を改善し、肌荒れの防止'回復などに有効な 保湿剤を提供することができる。
紙面による し（注意 -1¾子 ¾ タが原本とょります'）
[この用紙は、国際出顺の一都を稱成せず 国際出願の用紙の牧数に筠入しない]
Figure imgf000009_0001
受理官庁記入檷
-4 この )¾紙は国際出願とともに受理した
(はい/いいえ）
権限のある職員 国際事務局記入欄
Figure imgf000009_0002
差替え用弒（IIIJ26)

Claims

請求の範囲
[1] ラクトバチルス'プランタラム（Lactobacillus plantarum)の加熱死菌体を有効成 分とすることを特徴とする保湿剤。
[2] ラクトバチルス ·プランタラム（Lactobacillus plantarum)がラクトバチルス ·プランタ ラム L一 137株（Lactobacillus plantarum L一 137、受託番号 FERM BP— 08
607)である請求の範囲第 1項記載の保湿剤。
[3] 経口投与用である請求の範囲第 1項または第 2項のいずれかに記載の保湿剤。
[4] ラクトバチルス 'プランタラム（Lactobacillus plantarum)の加熱死菌体の有効量を 皮膚の保湿を必要とするヒトに投与することを特徴とする皮膚の保湿方法。
[5] 保湿剤を製造するためのラクトバチルス 'プランタラム（Lactobacillus plantarum) の加熱死菌体の使用。
差替え用紙（mi26)
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