TWI819234B - 鼠李糖乳桿菌tci366及/或其代謝產物用於改善肌膚狀況的用途 - Google Patents
鼠李糖乳桿菌tci366及/或其代謝產物用於改善肌膚狀況的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- TWI819234B TWI819234B TW109127829A TW109127829A TWI819234B TW I819234 B TWI819234 B TW I819234B TW 109127829 A TW109127829 A TW 109127829A TW 109127829 A TW109127829 A TW 109127829A TW I819234 B TWI819234 B TW I819234B
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- tci366
- lactobacillus rhamnosus
- skin
- metabolites
- melanin
- Prior art date
Links
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 title claims abstract description 55
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 title claims description 142
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 14
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 30
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 23
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 claims description 19
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 claims description 19
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 12
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 claims description 7
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 claims description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 6
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 claims description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 208000009795 Microphthalmos Diseases 0.000 claims description 3
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 claims description 3
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 claims description 3
- 201000010478 microphthalmia Diseases 0.000 claims description 3
- 238000012827 research and development Methods 0.000 abstract 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 85
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 56
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 36
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 23
- 230000036564 melanin content Effects 0.000 description 22
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 16
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 14
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 13
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 10
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 9
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 9
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 8
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 8
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 8
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 8
- 230000008099 melanin synthesis Effects 0.000 description 8
- 101150087532 mitF gene Proteins 0.000 description 8
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 8
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 6
- BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N kojic acid Chemical compound OCC1=CC(=O)C(O)=CO1 BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960004705 kojic acid Drugs 0.000 description 6
- WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N kojic acid Natural products OC(=O)C(N)CN1C=CC(=O)C(O)=C1 WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 5
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 5
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 4
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 4
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 4
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 3
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 3
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- -1 troche Substances 0.000 description 3
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102000013760 Microphthalmia-Associated Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010050345 Microphthalmia-Associated Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 238000010802 RNA extraction kit Methods 0.000 description 1
- 108020001027 Ribosomal DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010040880 Skin irritation Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000015173 baked goods and baking mixes Nutrition 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000008269 hand cream Substances 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- DFCXLPXOMCCXKM-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonic acid;hydrofluoride Chemical compound F.OS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 DFCXLPXOMCCXKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 1
- 230000036556 skin irritation Effects 0.000 description 1
- 231100000475 skin irritation Toxicity 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000000475 sunscreen effect Effects 0.000 description 1
- 239000000516 sunscreening agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
- C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast
- C12N1/185—Saccharomyces isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
- C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
- A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
- A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
- C12R2001/85—Saccharomyces
- C12R2001/865—Saccharomyces cerevisiae
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Virology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Birds (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
Abstract
一種鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物在製備改善肌膚狀況的組合物之用途,其中鼠李糖乳桿菌TCI366(Lactobacillus rhamnosus TCI366)寄存於財團法人食品工業發展研究所,且寄存編號為BCRC 910942。
Description
本發明關於一種鼠李糖乳桿菌及/或其代謝產物的用途,特別是關於一種鼠李糖乳桿菌TCI366(Lactobacillus rhamnosus TCI366)及/或其代謝產物,其用於製備改善肌膚狀況的組合物。
肌膚由外向內依序包含表皮層、真皮層及皮下組織,並作為人類個體提供對抗陽光中紫外線(ultraviolet,UV)輻射、病原體、摩擦力等環境因子的第一層保護,進而降低肌膚產生受損狀態發生的機率。
常見的肌膚受損狀態,例如肌膚彈力下降、保肌膚含水量不足(肌膚較為乾燥、無光澤)、毛孔粗大、皺紋、肌膚產生斑點及/或整體較為暗沈、蠟黃等。
並且,除了因正常歲年齡增長造成的肌膚受損外,在某些環境因素下,則會加速肌膚受損的進程。舉例而言,一般常見的自然因素例如陽光中的紫外線。當暴露於紫外線中,紫外線刺激皮膚病形成黑色素,更會加速產生前述受損的肌膚狀態。
此外,由於在現代生活中,人們使用帶有螢幕的電子產品的時間大幅增加,螢幕所發出的具有較短波長、較高能量的可見光(後稱藍光)在長時間照射肌膚的情況下,也加速產生前述受損的肌膚狀態。
在一些實施例中,一種鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物在製備改善肌膚狀況的組合物之用途,其中鼠李糖乳桿菌TCI366(Lactobacillus rhamnosus TCI366)寄存於財團法人食品工業發展研究所,且寄存編號為BCRC 910942。
綜上所述,任一實施例的鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物可用於製備組合物。並且,鼠李糖乳桿菌TCI366寄存於財團法人食品工業發展研究所,且寄存編號為BCRC 910942。在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366具有耐胃酸膽鹽之功能。在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物所製備組合物可用於改善肌膚狀況。在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物具有以下至少一項功能:降低小眼畸形相關轉錄因子(MITF)基因表現量、抑制酪胺酸酶活性、抑制黑色素形成、減少肌膚斑點、減少肌膚紫外線色斑形成、提高肌膚含水量或其組合。
鼠李糖乳桿菌TCI366(Lactobacillus rhamnosus TCI366)是分離自人體腸道的乳桿菌屬的菌株。鼠李糖乳桿菌TCI366以寄存編號BCRC 910942寄存於財團法人食品工業發展研究所。並且,此鼠李糖乳桿菌TCI366具有良好的改善宿主或受體肌膚狀況的作用。其中,改善肌膚狀況的情形為抑制宿主或受體的酪胺酸酶活性、降低宿主或受體的黑色素形成、提升宿主或受體的肌膚光澤度、提升宿主或受體的肌膚含水量或其組合。其中,宿主或受體為人。
鼠李糖乳桿菌TCI366為格蘭氏陽性菌,可於厭氧環境下生長,為厭氧細菌。鼠李糖乳桿菌TCI366的菌落邊緣平整且表面光滑,其菌落成白色。鼠李糖乳桿菌TCI366生長的溫度為35℃至37℃。並且,可於酸鹼值(pH值)為3至7的環境下生存。
在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366具有耐胃酸膽鹽之功能。舉例來說,鼠李糖乳桿菌TCI366於胃模擬環境(pH值3-4)的存活率為88%,且於腸道模擬環境(pH值7)的存活率為97%。因此,鼠李糖乳桿菌TCI366可在人體腸胃道環境定殖。
在一些實施例中,透過培養鼠李糖乳桿菌TCI366,並透過離心分離鼠李糖乳桿菌TCI366菌體及上清液後,將上清液經過濾後可取得鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物。換言之鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物包括鼠李糖乳桿菌TCI366進行代謝後分泌至培養液中的物質。在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物更包括用以培養鼠李糖乳桿菌TCI366的培養液,且此培養液已培養過鼠李糖乳桿菌TCI366,但此培養液不包含鼠李糖乳桿菌TCI366菌體。在一示範例中,將鼠李糖乳桿菌TCI366以乳桿菌MRS培養基(BD Difco™ Lactobacilli MRS Broth) 於37℃下16小時得到含有鼠李糖乳桿菌TCI366菌體及其代謝產物的菌液。接著,將菌液以轉速5000rpm離心15分鐘以分離鼠李糖乳桿菌TCI366菌體及含有鼠李糖乳桿菌TCI366代謝產物的上清液。取上清液以0.22微米(μm)的濾網過濾上清液以得到鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物。
於此,用語「代謝產物」意為培養鼠李糖乳桿菌時,經此鼠李糖乳桿菌代謝後所分泌至培養液中之物質,或者為經此鼠李糖乳桿菌代謝後所分泌至培養液中之物質與培養此鼠李糖乳桿菌的乳桿菌培養液,但不包含此鼠李糖乳桿菌本體。
在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物能用以降低宿主或受體的黑色素形成基因的表現量。其中,黑色素形成基因可以為但不限於小眼畸形相關轉錄因子(MITF)基因。基此,當宿主服用鼠李糖乳桿菌TCI366及/或鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物時,可抑制宿主體內的MITF基因的表現量,進而降低黑色素形成。
在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物具有抑制宿主或受體的酪胺酸酶活性之功能。舉例來說,當宿主服用鼠李糖乳桿菌TCI366及/或鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物時,可抑制宿主體內的酪胺酸酶活性,進而降低黑色素形成,以減少宿主肌膚斑點數量及/或減少宿主肌膚紫外線色斑形成。
於此,在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物具有抑制黑色素形成之功能。其中,黑色素形成的原因包括自然形成(例如自然老化、自然光照射等)及藍光照射形成。基此,當宿主服用鼠李糖乳桿菌TCI366及/或鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物時,可用以抑制黑色素形成,進而降低宿主肌膚的斑點數量及/或減少宿主肌膚紫外線色斑形成。其中,此黑色素形成包括自然老化導致的黑色素形成、自然光照射導致的黑色素形成、藍光照射導致的黑色素形成或其組合。
在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366具有提高宿主肌膚光澤之功能。舉例來說,當宿主服用鼠李糖乳桿菌TCI366時,可提高宿主的肌膚的光澤度。
在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366具有提高宿主肌膚含水量之功能。舉例來說,當宿主服用鼠李糖乳桿菌TCI366時,可提高宿主的肌膚的含水量。
因此,在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物可用於製備改善肌膚狀況的組合物。其中,改善肌膚狀況可為提升肌膚的光澤度、提升肌膚的含水量、降低肌膚黑色素形成、減少肌膚斑點形成、減少肌膚斑點數量、減少肌膚紫外光色斑形成或其組合。
在一些實施例中,前述之任一組合物可為醫藥品。換言之,此醫藥品包含有效含量的鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物。
在一些實施例中,前述之醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成適合於經腸道地、非經腸道地(parenterally)、口服的、或局部地(topically)投藥劑型。
在一些實施例中,經腸道或口服的投藥劑型可為,但不限於,錠劑(tablet)、片劑(troche)、口含錠(lozenge)、丸劑(pill)、膠囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)或細顆粒(granule)、溶液、懸浮液(suspension)、乳劑(emulsion)、糖漿(syrup)、酏劑(elixir)、濃漿(slurry)或類似之物。舉例來說,當組合物的劑型為膠囊狀時,組合物的劑量為5x109
菌落形成單位/膠囊(CFU/cap)的鼠李糖乳桿菌TCI366。
在一些實施例中,非經腸道地或局部地投藥劑型可為,但不限於,注射品(injection)、無菌的粉末(sterile powder)、外部製劑(external preparation)或類似之物。在一些實施例中,注射品的投藥方式可為皮下注射(subcutaneous injection)、表皮內注射(intraepidermal injection)、皮內注射(intradermal injection)或病灶內注射(intralesional injection)。
在一些實施例中,前述之醫藥品可包含被廣泛地使用於藥物製造技術之醫藥上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。在一些實施例中,醫藥上可接受的載劑可為下列載劑中一種或多種:溶劑(solvent)、緩衝液(buffer)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、崩解劑(disintegrating agent)、分散劑(dispersing agent)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤濕劑(wetting agent)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以及類似之物。關於選用之載劑的種類與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。在一些實施例中,作為醫藥上可接受的載劑的溶劑可為水、生理鹽水(normal saline)、磷酸鹽緩衝液(phosphate buffered saline,PBS)、或含有醇的水性溶液(aqueous solution containing alcohol)。
在一些實施例中,前述之任一組合物可為食品。換言之,食品包含特定含量的鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物。在一些實施例中,前述之食品可為食用產品或食品添加物(food additive)。在一些實施例中,食用產品可為但不限於:飲料(beverages)、乳製品(dairy products)、發酵食品(fermented foods)、烘培產品(bakery products)、健康食品(health foods)以及飲食補充品(dietary supplements)。
在一些實施例中,前述之任一組合物可為化妝品或保養品。換言之,化妝品或保養品包含特定含量的鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物。
在一些實施例中,前述之化妝品或保養品可為下列任一種型態:化妝水、凝膠、凍膜、泥膜、乳液、乳霜、唇膏、粉底、粉餅、蜜粉、卸妝油、卸妝乳、洗面乳、沐浴乳、洗髮精、護髮乳、防曬乳、護手霜、指甲油、香水、精華液及面膜。在一些實施例中,前述之化妝品或保養品可視需要更包含外用品可接受成分。在一些實施例中,外用品可接受成分可例如為乳化劑、滲透促進劑、軟化劑、溶劑、賦型劑、抗氧化劑、或其組合。
例一:菌種鑑定
首先,將分離自人類腸道的分離菌株以乳酸菌之16S核醣體基因(16SrDNA)序列進行菌種鑑定。透過聚合酶連鎖反應(PCR)得到此分離菌株的16SrDNA序列(即SEQID NO:1)。接著,利用美國國家生物技術資訊中心(NCBI)網站,將SEQID NO:1所示的基因序列分別與其他鼠李糖乳桿菌亞種之16SrDNA序列進行序列比對後,可知分離菌株的16SrDNA序列與其他鼠李糖乳桿菌亞種的16SrDNA序列的相似性如表1所示。因此,將此分離菌株命名為鼠李糖乳桿菌TCI366。並且,將此鼠李糖乳桿菌TCI366以寄存編號BCRC 910942寄存於財團法人食品工業發展研究所。
表1
鼠李糖乳桿菌亞種 | 相似度 |
Lactobacillus rhamnosus strain LRB | 97% |
Lactobacillus rhamnosus strain LV108 | 97% |
Lactobacillus rhamnosus strain 6577 | 96% |
Lactobacillus rhamnosus strain 6366 | 97% |
Lactobacillus rhamnosus strain SKB1311 | 97% |
Lactobacillus rhamnosus strain BIO5366 | 97% |
Lactobacillus rhamnosus strain L20 | 97% |
例二:耐胃酸膽鹽試驗
於此,將鼠李糖乳桿菌TCI366以緩衝液、人工胃液(pH 3)及人工腸液(pH 7)進行測試,以確認鼠李糖乳桿菌TCI366於生物體腸胃消化道中的酸鹼耐受性。其中,緩衝液為0.2莫爾濃度(M)氯化鉀(KCL, 品牌Sigma-Aldrich)且pH值為7。人工胃液為0.2 M氯化鉀且pH值為3。人工腸液為0.2 M氯化鉀及0.3重量%的牛膽鹽(品牌Difco™ Oxgall)且pH值為7。
進行一活化程序將鼠李糖乳桿菌TCI366活化。首先,將鼠李糖乳桿菌TCI366凍菌以10體積%的菌量培養於液態乳桿菌MRS培養基(BD Difco™ Lactobacilli MRS Broth)中,並於37下培養16小時,以活化鼠李糖乳桿菌TCI366。
接著,將活化後的鼠李糖乳桿菌TCI366菌液取1體積%的濃度接種至20毫升的待測溶液中,然後以轉速50rpm於37℃下震盪培養3小時。其中,三個組別的待測溶液分別為人工胃液(實驗組)、人工腸液(實驗組)及氯化鉀緩衝液(控制組)。從培養後的菌液取100微升(μL)的菌液塗盤,並於28℃下靜置培養3天,並於3天後以肉眼計數各組別的活菌數(計算固態乳桿菌MRS培養基上的菌落數)。
請參閱圖1。圖式中鼠李糖乳桿菌TCI366的存活率為計數後的活菌數,並以log CFU/mL表示。其中,log CFU/mL代表每毫升菌液含有的菌落形成單位(CFU,colony-forming unit)並以對數(log10
)表示。由圖1可知,控制組的鼠李糖乳桿菌TCI366的存活率為7.79 log CFU/mL、人工胃液實驗組的鼠李糖乳桿菌TCI366的存活率為6.85 log CFU/mL,及人工腸液實驗組的鼠李糖乳桿菌TCI366的存活率為7.59 log CFU/mL。由此可知,人工胃液實驗組的活菌數為控制組的88%,且人工腸液實驗組的活菌數為控制組的97%。
基此,鼠李糖乳桿菌TCI366具有耐胃酸膽鹽之功能,代表鼠李糖乳桿菌TCI366可通過宿主腸胃道的酸鹼值壓力,定殖於宿主腸道中。
例三:鼠李糖乳桿菌TCI366代謝產物的製備
以前述活化程序將鼠李糖乳桿菌TCI366活化後,將10體積%的活化後的鼠李糖乳桿菌TCI366接種於液態乳桿菌MRS培養基中,並於37下培養16小時。接著,以轉速5000rpm離心15分鐘以分離鼠李糖乳桿菌TCI366菌體及含有鼠李糖乳桿菌TCI366代謝產物的上清液。取上清液並以0.22微米(μm)的濾網過濾以得到鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物。
於此,可知鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物為鼠李糖乳桿菌TCI366進行代謝後分泌至培養液中的物質以及用以培養此鼠李糖乳桿菌TCI366的液態乳桿菌MRS培養基(但不含菌體)。
例四:黑色素形成基因的表現量分析
於此,所使用培養基為含有90體積% Eagle’s最低限度基本培養基-非必需胺基酸(MEM-Non-Essential Amino Acids;品牌Gibco)、10體積%胎牛血清蛋白(fetal bovine serum,FBS;品牌:Gibco)及1 mM丙酮酸鈉(sodium pyruvate,品牌:Gibco)的細胞培養基(以下稱MEM培養基)。所使用的細胞株為人類黑色素瘤細胞(品牌:ATCC®
,CRL-1872),以下稱A375.S2細胞。所分析的黑色素形成基因為小眼畸形相關轉錄因子(MITF)基因。
將A375.S2細胞以每孔1×105
個的數量接種於每孔含2毫升MEM培養基之6孔培養盤中,並於37℃下培養24小時,並分為實驗組及控制組。接著,更換MEM培養基為實驗培養基,並培養24小時。其中,實驗組的實驗培養基為含有0.25體積%例3所製備的鼠李糖乳桿菌TCI366代謝產物的MEM培養基。控制組的實驗培養基為單純的MEM培養基(即不含鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物)。
接著,以RNA萃取套組(RNA extraction kit;品牌GeneAid)萃取以各組經實驗培養基培養過的A375.S2細胞之RNA。將各組RNA轉譯成cDNA後,以MITF-F(SEQID NO:2)引子及MITF-R(SEQID NO:3)引子(如表2所示),結合nCounter分析系統(nCounter Analysis Systems)進行分析,分析結果如圖2所示。需要特別說明的是,圖2中的基因表現是以相對倍率呈現,其中使用Excel軟體之STDEV公式計算標準差,且各組之間的統計學顯著差異是藉由學生t-試驗來統計分析。
表2
序列編號 | 序列名稱 | 序列 |
SEQID NO:2 | MITF-F | GCCTCCAAGCCTCCGATAAG |
SEQID NO:3 | MITF-R | GCACTCTCTGTTGCATGAACT |
請參閱圖2。將控制組的MITF基因的表現量視為1,代表將未經鼠李糖乳桿菌TCI366代謝產物處理的A375.S2細胞內的MITF基因的表現量視為100%。基此,實驗組的MITF基因的表現量為0.31。換言之,經鼠李糖乳桿菌TCI366代謝產物處理的A375.S2細胞內的MITF基因被抑制69%的表現量。
基此,鼠李糖乳桿菌TCI366分泌的鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物具有降低MITF基因的表現量之作用。換言之,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物可用以降低MITF基因的表現量,進而減少黑色素合成。
例五:酪胺酸酶活性檢測
於此,所使用培養基為添加有10體積%胎牛血清蛋白(fetal bovine serum,FBS;品牌:Gibco)及1體積%盤尼西林-鏈黴素(penicillin/streptomycin,品牌:Gibco)的DMEM培養基(Dulbecco's Modified Eagle Medium;品牌:Gibco),以下稱基礎培養基。所使用的細胞株為小鼠黑色素瘤細胞株B16F10(購自美國典型培養物保存中心(ATCC),編號CRL-6475),以下稱B16F10細胞。所使用的溶液包括裂解緩衝液(Lysis buffer),其中裂解緩衝液是以0.1M磷酸緩衝液、0.1mM苯甲基磺醯氟(PMSF;品牌:Sigma)及1%曲拉通X-100(Triton X-100,pH6.8:品牌:J.T.Baker)配製而成。
將B16F10細胞以每孔1.5×105
個細胞的細胞數接種於含有2mL基礎培養基的6孔培養盤的各孔中,並置於37°C下培養24小時。
在培養24小時後,將B16F10細胞分成3個組別:一個實驗組、一個對照組以及一個控制組。移除各組別的基礎培養基,並更換成每孔2mL實驗培養基,然後置於37°C下接續培養48小時。其中,實驗組的實驗培養基為含有0.25體積%例3所製備的鼠李糖乳桿菌TCI366代謝產物的基礎培養基。對照組的實驗培養基為含有0.25體積%麴酸(kojic acid)的基礎培養基。控制組的實驗培養基為單純的基礎培養基(即不含鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物,也不含麴酸)。
於培養48小時後,移除各孔中的實驗培養基並以1倍(1x)的磷酸鹽緩衝液(phosphate buffered saline,PBS,品牌:Gibco)潤洗二次。於沖洗後,將胰蛋白酶(trypsin)加入至各孔中以處理細胞3分鐘。於3分鐘處理後,將各孔的懸浮的細胞個別收集於15mL離心管中,接而以400xg離心5分鐘以分離第一細胞沉澱物(cell pellet)與上清液。透過1xPBS再懸浮細胞沉澱物及離心反覆進行二次後,以50μL的裂解緩衝液再懸浮細胞沉澱物,以得到細胞懸浮溶液。震盪含有細胞懸浮溶液的離心管並以12,000xg離心20分鐘以收分離第二細胞沉澱物及細胞溶液。將各組細胞溶液進行蛋白質定量後,取400μg/well細胞溶液至96孔盤中,並以裂解緩衝液定量至每孔體積為90μL。接著,添加10μL的10mM L-多巴(L-Dopa)至各孔中以形成反應溶液,並於37℃及避光狀態下,每10分觀察至每孔反應溶液的顏色由透明變深色。接著於405nm的波長下以ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay,酵素結合免疫吸附法)讀取儀(廠牌:BioTek)來讀取96孔培養盤中各孔的吸光值(OD405
)。
於量測後,將所測得的吸光值代入下列公式(1)計算酪胺酸酶活性百分比(%)。換言之,於此,是將控制組的酪胺酸酶活性視為100%來計算各組別的相對酪胺酸酶活性百分比(%)。並且,各組之間的統計學顯著差異是藉由學生t-試驗(student t-test)來統計分析,如圖3所示。在圖3中,「***」代表在與控制組比較下其p值小於0.001、「▲▲▲」代表在與對照組比較下其p值小於0.001。
公式(1)
相對酪胺酸酶活性百分比(%)=(OD405 sample
/OD405 control
)×100% (1)
其中,OD405 sample
代表欲換算之組別的吸光值,而OD405 control
代表控制組的吸光值。
請參考圖3。相較於控制組,實驗組的酪胺酸酶活性百分比為33.21%,代表其酪胺酸酶活性被抑制66.79%,而對照組的酪胺酸酶活性百分比為78.04%,代表其酪胺酸酶活性被抑制21.96%。並且,相較於對照組,實驗組的酪胺酸酶活性百分比有顯著地降低。換言之,相較於麴酸,鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物能有效抑制酪胺酸酶活性,進而有效地抑制黑色素生成。
基此,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物能用以抑制酪胺酸酶活性,進而具有改善肌膚狀況的作用。
例六:黑色素含量檢測
於此,所使用培養基為添加有10體積%胎牛血清蛋白(fetal bovine serum,FBS;品牌:Gibco)及1體積%盤尼西林-鏈黴素(penicillin/streptomycin,品牌:Gibco)的DMEM培養基(Dulbecco's Modified Eagle Medium;品牌:Gibco),以下稱基礎培養基。所使用的細胞株為小鼠黑色素瘤細胞株B16F10(購自美國典型培養物保存中心(ATCC),編號CRL-6475),以下稱B16F10細胞。
將B16F10細胞以每孔1.5×105
個細胞的細胞數接種於含有3mL基礎培養基的6孔培養盤的各孔中,並置於37°C下培養24小時。
在培養24小時後,將B16F10細胞分成3個組別:一個實驗組、一個對照組以及一個控制組。移除各組別的基礎培養基,並更換成每孔3mL實驗培養基,然後置於37°C下接續培養48小時。其中,實驗組的實驗培養基為含有0.25體積%例3所製備的鼠李糖乳桿菌TCI366代謝產物的基礎培養基。對照組的實驗培養基為含有0.25體積%麴酸(kojic acid)的基礎培養基。控制組的實驗培養基為單純的基礎培養基(即不含鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物,也不含麴酸)。
於培養48小時後,移除各孔中的實驗培養基並以1倍(1x)的磷酸鹽緩衝液(phosphate buffered saline,PBS,品牌:Gibco)潤洗二次。於沖洗後,將胰蛋白酶(trypsin)加入至各孔中以處理細胞3分鐘。於3分鐘處理後,將各孔的懸浮的細胞個別收集於15mL離心管中,接而以400xg離心5分鐘以分離細胞沉澱物(cell pellet)與上清液。透過1xPBS再懸浮細胞沉澱物及離心反覆進行二次後,以200μL的1xPBS再懸浮細胞沉澱物,以得到細胞溶液。接著,將細胞溶液於液態氮中放置10分鐘,接而於室溫下靜置30分鐘進行解凍。在解凍完全之後,各離心管以12,000xg離心30分鐘。於30分鐘離心後,移除各離心管中上清液並添加入120μL 1N NaOH(配於ddH2
O)以與各離心管中的沉澱物進行混合。在混合均勻之後,將含有混合溶液的各離心管於60℃乾浴槽中靜置1小時。之後,從各離心管中取100μL混合溶液至96孔培養盤中並於405nm的波長下以ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay,酵素結合免疫吸附法)讀取儀(廠牌:BioTek)來讀取96孔培養盤中各孔的吸光值(OD405
)。
於量測後,將所測得的吸光值代入下列公式(2)計算出黑色素含量相對百分比(%)。換言之,於此,是將控制組的黑色素含量視為1(即控制組的黑色素含量相對百分比為100%)來計算各組別的相對黑色素含相對百分比(%)。並且,各組之間的統計學顯著差異是藉由學生t-試驗(student t-test)來統計分析,如圖4所示。在圖4中,「*」代表在與控制組比較下其p值小於0.05,「**」代表在與控制組比較下其p值小於0.01。
公式(2)
黑色素含量相對百分比(%)=(OD405 sample
/OD405 control
)×100% (2)
請參照圖4。相較於控制組,實驗組的黑色素含量相對百分比為79.51%,而對照組的黑色素含量相對百分比為98.62%。換言之,實驗組降低21.49%的黑色素生成,而對照組降低1.38%的黑色素生成。於此,相較於控制組及對照組,實驗組的黑色素含量相對百分比均有顯著地降低。由此可知,相較於麴酸,鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物能有效抑制黑色素生成。
基此,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物能用以抑制黑色素生成,進而具有改善肌膚狀況的作用。
例七:藍光造成的黑色素含量檢測
於此,所使用培養基為添加有10體積%胎牛血清蛋白(fetal bovine serum,FBS;品牌:Gibco)及1體積%盤尼西林-鏈黴素(penicillin/streptomycin,品牌:Gibco)的DMEM培養基(Dulbecco's Modified Eagle Medium;品牌:Gibco),以下稱基礎培養基。所使用的細胞株為小鼠黑色素瘤細胞株B16F10(購自美國典型培養物保存中心(ATCC),編號CRL-6475),以下稱B16F10細胞。
將B16F10細胞以每孔1.5×105
個細胞的細胞數接種於含有3mL基礎培養基的6孔培養盤的各孔中,並置於37°C下培養24小時。
在培養24小時後,將B16F10細胞分成3個組別:一個實驗組、一個對照組以及一個控制組。移除各組別的基礎培養基,並更換成每孔3mL實驗培養基,然後將對照組及實驗組置於藍光LED上照射3小時(控制組並未以藍光LED照射),接著將各組於37°C下接續培養24小時。其中,實驗組的實驗培養基為含有0.25體積%例3所製備的鼠李糖乳桿菌TCI366代謝產物的基礎培養基。對照組及控制組的實驗培養基為單純的基礎培養基(即不含鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物)。
於培養24小時後,移除各孔中的實驗培養基並以1倍(1x)的磷酸鹽緩衝液(phosphate buffered saline,PBS,品牌:Gibco)潤洗二次。於沖洗後,將胰蛋白酶(trypsin)加入至各孔中以處理細胞3分鐘。於3分鐘處理後,將各孔的懸浮的細胞個別收集於15mL離心管中,接而以400xg離心5分鐘以分離細胞沉澱物(cell pellet)與上清液。透過1xPBS再懸浮細胞沉澱物及離心反覆進行二次後,以200μL的1xPBS再懸浮細胞沉澱物,以得到細胞溶液。接著,將細胞溶液於液態氮中急凍30秒後,接而於室溫下靜置30分鐘進行解凍。在解凍完全之後,各離心管以14,000xg離心30分鐘。於30分鐘離心後,移除各離心管中上清液並添加入120μL 1N NaOH(配於ddH2
O)以與各離心管中的沉澱物進行混合。在混合均勻之後,將含有混合溶液的各離心管於60℃乾浴槽中靜置1小時。之後,從各離心管中取100μL混合溶液至96孔培養盤中並於405nm的波長下以ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay,酵素結合免疫吸附法)讀取儀(廠牌:BioTek)來讀取96孔培養盤中各孔的吸光值(OD405
)。
於量測後,將所測得的吸光值代入下列公式(3)計算出藍光造成的黑色素含量相對百分比(%),如圖5所示(圖5及公式(3)標示為「黑色素含量相對百分比」)。換言之,於此,是將控制組的黑色素含量視為1(即控制組的黑色素含量相對百分比為100%)來計算各組別的相對黑色素含相對百分比(%)。並且,各組之間的統計學顯著差異是藉由學生t-試驗(student t-test)來統計分析。在圖5中,「▲▲」代表在與對照組比較下其p值小於0.01、「***」代表在與控制組比較下其p值小於0.001。
公式(3)
黑色素含量相對百分比(%)=(OD405 sample
/OD405 control
)×100% (3)
請參照圖5。相較於控制組,實驗組的黑色素含量相對百分比為108.08%,而對照組的黑色素含量相對百分比為130.28%。換言之,當以藍光處理後,對照組的黑色素含量相對百分比相較於控制組提高了30.28%,而實驗組以藍光及鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物共同處理後,實驗組的黑色素含量相對百分比相較於控制組僅提高了8.08%。由此可知,相較於對照組,實驗組的藍光造成的黑色素生成有顯著地被抑制22.2%,代表鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物能有效抑制藍光造成的黑色素生成。
基此,鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物能用以抑制藍光造成的黑色素生成,進而具有改善肌膚狀況的作用。
例八:人體試驗
為進一步確認鼠李糖乳桿菌TCI366對於人體的影響。以每顆膠囊含有5X109
CFU(即5x109
CFU/cap)的鼠李糖乳桿菌TCI366的活菌膠囊提供給受試者每日服用一顆(50毫克菌粉/日,指每日服用一顆含有50毫克鼠李糖乳桿菌TCI366菌粉的膠囊),並服用6週。並於服用前(視為第0週)及服用6週後(視為第6週)以肌膚分析儀器(DermaLab® Combo Skin Analyzer)進行分析。其中分析項目包括肌膚斑點、肌膚紫外線色斑、肌膚光澤度及肌膚含水量。
受試者有8位,且為年齡為20-55歲的女性及男性。並且,此些受試者的膚色黯沉、面部肌膚上有斑點。
測試結果以第0週及第6週的數值一起比較。第0週為試驗前量測的數值,代表受試者未服用含有鼠李糖乳桿菌TCI366的活菌膠囊的肌膚狀態。第6週係為連續服用六周後量測的數值,代表受試者服用含有鼠李糖乳桿菌TCI366的活菌膠囊後的肌膚狀態。需要特別說明的是,各組之間的統計學顯著差異是藉由學生t-試驗(student t-test)來統計分析。在圖式中,「*」代表在與第0週比較下其p值小於0.05、「**」代表在與第0週比較下其p值小於0.01。
請參閱圖6。將8位受試者於第0週測量到的肌膚斑點數量之平均數值視為100%,且8位受試者於第6週測量到的肌膚斑點數量之平均數值相較於第0週的數值為92.7%。換言之,在連續服用6週的含有鼠李糖乳桿菌TCI366的活菌膠囊後,8位受試者肌膚斑點數量下降7.3%。再請參閱圖7,比較第0週及第6週的測量照片,可知第6週計數到的斑點S6的數量較第0週計數到的斑點S0的數量少。由此可知,鼠李糖乳桿菌TCI366能減少受試者肌膚的斑點數量,具有改善肌膚狀況的功效。
請參閱圖8。將8位受試者於第0週測量到的肌膚紫外線色斑之平均數值視為100%,且8位受試者於第6週測量到的紫外線色斑之平均數值相較於第0週的數值為94.4%。換言之,在連續服用6週的含有鼠李糖乳桿菌TCI366的活菌膠囊後,8位受試者肌膚紫外線色斑減少5.6%。再請參閱圖9,比較第0週及第6週的測量照片,可知第6週測量到的紫外線色斑UVS6的分布情形較第0週測量到的紫外線色斑UVS0的分布情形稀疏。並且,於圖9中,第6週箭頭處的紫外線色斑較第0週箭頭處的紫外線色斑淺。由此可知,鼠李糖乳桿菌TCI366能減少受試者肌膚的紫外線色斑分布情形,具有改善肌膚狀況的功效。
請參閱圖10。將8位受試者於第0週測量到的肌膚光澤度之平均數值視為100%,且8位受試者於第6週測量到的肌膚光澤度之平均數值相較於第0週的數值為109.8%。換言之,在連續服用6週的含有鼠李糖乳桿菌TCI366的活菌膠囊後,8位受試者肌膚光澤度提高9.8%。再請參閱圖11,比較第0週及第6週的測量照片,可知第6週圓圈所示的光澤B6較較第0週圓圈所示的光澤B0明亮。由此可知,鼠李糖乳桿菌TCI366能提高受試者肌膚的光澤度,具有改善肌膚狀況的功效。
請參閱圖12。將8位受試者於第0週測量到的肌膚含水量之平均數值視為100%,且8位受試者於第6週測量到的肌膚含水量之平均數值相較於第0週的數值為105.8%。換言之,在連續服用6週的含有鼠李糖乳桿菌TCI366的活菌膠囊後,8位受試者肌膚含水量提高5.8%。由此可知,鼠李糖乳桿菌TCI366能提高受試者肌膚的含水量,具有改善肌膚狀況的功效。
於此,透過例二可知,鼠李糖乳桿菌TCI366可適應於人體腸胃環境。透過例四可知,鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物具有降低黑色素形成基因(如,MITF基因)的表現量的作用。透過例五可知,鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物具有降低酪胺酸活性之作用。透過例六及例七可知,鼠李糖乳桿菌TCI366的代謝產物具有抑制黑色素形成(自然形成、自然光造成及藍光造成的黑色素)之作用。透過例八可知,鼠李糖乳桿菌TCI366具有改善肌膚狀態的作用,其中改善肌膚狀態包括減少斑點數量、減少紫外線色斑、提高肌膚光澤度、提高肌膚含水量或其組合。
綜上所述,根據本發明任一實施例的鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物,其可製備改善肌膚狀況的組合物。並且,鼠李糖乳桿菌TCI366具有耐胃酸膽鹽之功能,可生存於腸胃道環境。由於鼠李糖乳桿菌TCI366可用以降低受體的MITF基因表現及/或抑制酪胺酸酶活性,其能有效地抑制黑色素形成,進而改善受體肌膚狀態(如,漸少肌膚斑點、減少肌膚紫外線色斑等)。在一些實施例中,鼠李糖乳桿菌TCI366可用以提高受體肌膚光澤度及/或受體肌膚含水量,進而改善受體肌膚狀態。
雖然本發明的技術內容已經以較佳實施例揭露如上,然其並非用以限定本發明,任何熟習此技藝者,在不脫離本發明之精神所作些許之更動與潤飾,皆應涵蓋於本發明的範疇內,因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
S0:斑點
S6:斑點
UVS0:紫外線色斑
UVS6:紫外線色斑
B0:光澤
B6:光澤
圖1是鼠李糖乳桿菌TCI366於胃腸模擬環境中的存活率實驗的結果圖;
圖2是MITF基因相對表現倍率的結果圖;
圖3是酪胺酸酶活性實驗的結果圖;
圖4是黑色素含量相對百分比的結果圖;
圖5是藍光造成的黑色素含量相對百分比的結果圖;
圖6是第0週及第6週的斑點數據結果圖;
圖7是第0週及第6週的斑點分析結果圖;
圖8是第0週及第6週的紫外線色斑數據結果圖;
圖9是第0週及第6週的紫外線色斑分析結果圖;
圖10是第0週及第6週的肌膚光澤度數據結果圖;
圖11是第0週及第6週的肌膚光澤度分析結果圖;以及
圖12是第0週及第6週的肌膚含水量數據結果圖。
TW中華民國 財團法人食品工業發展研究所 2019/09/17 BCRC 910942。
Claims (8)
- 一種鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物在製備改善肌膚狀況的組合物之用途,其中鼠李糖乳桿菌TCI366(Lactobacillus rhamnosus TCI366)寄存於財團法人食品工業發展研究所,且寄存編號為BCRC 910942,且該改善肌膚狀況為提高肌膚光澤及/或提高肌膚含水量。
- 如請求項1所述之用途,其中該鼠李糖乳桿菌TCI366具有耐胃酸膽鹽之功能。
- 如請求項1所述之用途,其中該鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物具有降低小眼畸形相關轉錄因子(MITF)基因表現量之功能。
- 如請求項1所述之用途,其中該鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物具有抑制酪胺酸酶活性之功能。
- 如請求項1所述之用途,其中該鼠李糖乳桿菌TCI366及/或其代謝產物具有抑制黑色素形成之功能。
- 如請求項1所述之用途,其中該鼠李糖乳桿菌TCI366具有減少肌膚斑點之功能。
- 如請求項1所述之用途,其中該鼠李糖乳桿菌TCI366具有減少肌膚紫外線色斑形成之功能。
- 如請求項1所述之用途,其中組合物為食品、保養品或醫藥品。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201962886397P | 2019-08-14 | 2019-08-14 | |
US62/886,397 | 2019-08-14 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW202106318A TW202106318A (zh) | 2021-02-16 |
TWI819234B true TWI819234B (zh) | 2023-10-21 |
Family
ID=74567121
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW108145366A TWI754189B (zh) | 2019-08-14 | 2019-12-11 | 普蒂亞花萃取物用於提升皮膚細胞的粒線體活性的用途 |
TW109127829A TWI819234B (zh) | 2019-08-14 | 2020-08-14 | 鼠李糖乳桿菌tci366及/或其代謝產物用於改善肌膚狀況的用途 |
TW109127828A TWI754350B (zh) | 2019-08-14 | 2020-08-14 | 釀酒酵母tci907、組合物以及釀酒酵母tci907及/或其代謝產物的用途 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW108145366A TWI754189B (zh) | 2019-08-14 | 2019-12-11 | 普蒂亞花萃取物用於提升皮膚細胞的粒線體活性的用途 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW109127828A TWI754350B (zh) | 2019-08-14 | 2020-08-14 | 釀酒酵母tci907、組合物以及釀酒酵母tci907及/或其代謝產物的用途 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20210047701A1 (zh) |
CN (3) | CN112386618A (zh) |
TW (3) | TWI754189B (zh) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114717131B (zh) * | 2021-09-07 | 2023-05-26 | 青岛蔚蓝生物股份有限公司 | 一株对皮肤损伤具有保护作用的鼠李糖乳杆菌及其应用 |
US20230218504A1 (en) * | 2022-01-11 | 2023-07-13 | Tci Co., Ltd. | Lactobacillus sakei and method for spermidine production with lactobacillus sakei or metabolite thereof |
WO2024073721A1 (en) * | 2022-09-30 | 2024-04-04 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Methods and absorbent articles for inhibiting fecal protease activity |
CN118490726A (zh) * | 2024-07-19 | 2024-08-16 | 杭州菌吾细研生物科技有限公司 | 酿酒酵母s-16的应用及其组合物和复合微生物制剂 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108125905A (zh) * | 2018-02-18 | 2018-06-08 | 王甲林 | 一种具有鼠李糖乳杆菌发酵活性成分的美白乳液 |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100962052B1 (ko) * | 2007-05-11 | 2010-06-08 | 주식회사 코리아나화장품 | 락토바실러스 람노서스 유산균주 또는 이의 배양액을함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물 |
JP5954828B2 (ja) * | 2010-05-21 | 2016-07-20 | 株式会社明治 | 皮膚状態の改善用組成物 |
TWI520688B (zh) * | 2010-12-03 | 2016-02-11 | Angel Yeast Co Ltd | A low-nucleic acid yeast composition, a method for producing the same, and a weight loss composition comprising the low-nucleic acid yeast |
CN104968780A (zh) * | 2012-09-20 | 2015-10-07 | 普洛特拉有限公司 | 用于治疗肥胖和肥胖相关病症的益生菌组合物和方法 |
EP3459554B1 (en) * | 2016-05-17 | 2021-10-27 | KOHJIN Life Sciences Co., Ltd. | Yeast extract having diabetes prevention effect |
KR101965482B1 (ko) * | 2016-10-28 | 2019-04-03 | 건국대학교 산학협력단 | 락토바실러스 람노서스 발효액을 유효성분으로 함유하는 피부장벽 회복 또는 피부노화 개선용 화장료 조성물 |
CN106726953A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-05-31 | 谢彩红 | 一种帝王花精华面膜液 |
-
2019
- 2019-12-11 CN CN201911265240.3A patent/CN112386618A/zh active Pending
- 2019-12-11 TW TW108145366A patent/TWI754189B/zh active
-
2020
- 2020-08-14 CN CN202010821387.2A patent/CN112386613A/zh active Pending
- 2020-08-14 US US16/993,280 patent/US20210047701A1/en not_active Abandoned
- 2020-08-14 TW TW109127829A patent/TWI819234B/zh active
- 2020-08-14 CN CN202010821394.2A patent/CN112391298B/zh active Active
- 2020-08-14 TW TW109127828A patent/TWI754350B/zh active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108125905A (zh) * | 2018-02-18 | 2018-06-08 | 王甲林 | 一种具有鼠李糖乳杆菌发酵活性成分的美白乳液 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN112391298B (zh) | 2022-07-19 |
TWI754189B (zh) | 2022-02-01 |
TW202106319A (zh) | 2021-02-16 |
US20210047701A1 (en) | 2021-02-18 |
TW202106871A (zh) | 2021-02-16 |
CN112386618A (zh) | 2021-02-23 |
CN112391298A (zh) | 2021-02-23 |
CN112386613A (zh) | 2021-02-23 |
TWI754350B (zh) | 2022-02-01 |
TW202106318A (zh) | 2021-02-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TWI819234B (zh) | 鼠李糖乳桿菌tci366及/或其代謝產物用於改善肌膚狀況的用途 | |
TWI786343B (zh) | 用於美白功效之含乳酸菌發酵物之組合物及其用途 | |
DK2360237T3 (en) | NEW Lactobacillus plantarum AND COMPOSITION CONTAINING SAME | |
WO2013021957A1 (ja) | 口腔内疾患の予防又は治療剤 | |
KR20180018354A (ko) | 바실러스 속 세균 유래 나노소포 및 이의 용도 | |
EP3647437A1 (en) | Nanovesicle derived from proteus genus bacteria, and use thereof | |
WO2013099883A1 (ja) | IgA産生促進作用を有する新規乳酸菌及びその用途 | |
TWI757850B (zh) | 唾液乳桿菌tci153及唾液乳桿菌tci153及/或其破菌液在製備改善肌膚狀況的組合物之用途 | |
TWI668009B (zh) | 用於皮膚美白之包含經醱酵之小麥胚芽的皮膚外用劑 | |
CN116064326B (zh) | 一株能够缓解抑郁情绪的动物双歧杆菌乳亚种gbw8051及其应用 | |
US20190247295A1 (en) | Use of lactobacillus plantarum gmnl-6 composition for skin care | |
CN114806977B (zh) | 一株唾液乳杆菌及其在制备抗皮炎的产品中的应用 | |
JP2019526258A (ja) | 脱毛症防止、発毛促進または性機能改善能を有するリューコノストック・ホルザプフェリイ菌株及びこれを含む組成物 | |
JP6574815B2 (ja) | 脂肪分解能を有する菌株を含む脱毛症防止または発毛促進用の組成物 | |
CN116236508A (zh) | 抗老化组合物及其推迟衰老的用途 | |
WO2020127581A1 (fr) | Composition comprenant un extrait de lactobacillus rhamnosus | |
CN114891699A (zh) | 调节菌群平衡的唾液乳杆菌 | |
TW202128983A (zh) | 短乳桿菌tci988及短乳桿菌tci988及/或其代謝產物的用途 | |
TWI827293B (zh) | 羅伊氏乳桿菌tci850及其提高免疫力及抗發炎用途 | |
TW202220681A (zh) | 皮膚細菌叢改善劑及皮膚細菌叢改善用皮膚外用劑 | |
KR101840376B1 (ko) | 탈모 예방, 발모 촉진 또는 성기능 개선능이 있는 락토바실러스 퍼멘텀 균주 및 이를 포함하는 조성물 | |
TWI835500B (zh) | 清酒乳桿菌以及其或其代謝產物用於改善膚況的用途 | |
WO2020127577A1 (fr) | Effet pro-vitaminique d'un extrait d'un microorganisme probiotique | |
CN110151672A (zh) | 一种植物乳杆菌gmnl-6组合物用于皮肤保养的用途 | |
TWI764356B (zh) | 含乳酸菌菌株或其發酵物的抗老化組合物及其用途 |