TWI764356B

TWI764356B - 含乳酸菌菌株或其發酵物的抗老化組合物及其用途

Info

Publication number: TWI764356B
Application number: TW109138362A
Authority: TW
Inventors: 何協勳; 郭易緯; 林家弘; 林杞輝; 劉承叡; 林文揚
Original assignee: 豐華生物科技股份有限公司
Priority date: 2020-11-04
Filing date: 2020-11-04
Publication date: 2022-05-11
Also published as: TW202218674A

Abstract

本發明提出一種抗老化組合物，其包含：（a）經分離的乳酸菌菌株或其發酵物、以及（b）賦形劑、稀釋劑或載體；乳酸菌菌株包含長雙歧桿菌長亞種（ Bifidobacterium longumsubsp . longum）OLP-01菌株、動物雙歧桿菌（ Bifidobacterium animalissubsp. lactis）CP-9菌株、長雙歧桿菌（ Bifidobacterium longum）BLI-02菌株、短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）Bv-889菌株、兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidum）Bf-688菌株、與植物乳酸桿菌（ Lactobacillus plantarum）PL-02菌株。

Description

含乳酸菌菌株或其發酵物的抗老化組合物及其用途

本發明有關一種組合物以及其用途，且特別關於一種含乳酸菌菌株或其發酵物的抗老化組合物及其用途。

益生菌乃人體重要的共生菌，依照菌株及菌種差異，具有多種不同的生理功能，如：調節消化道菌相、消化道機能、調整血糖、增強免疫、抗氧化及抗疲勞等。此外，有些菌株甚至有多種不同的功能。舉例而言， Lactobacillus rhamnosusGG（LGG）是目前研究最多的菌株，其具有多種不同的功能，例如：平衡與改善胃腸道功能、增強人體自身免疫能力、預防和幫助治療腹瀉、減少呼吸道感染的機率、排出毒素及預防齲齒等。這些功能性菌株的發現對於提升人類健康有著極大助益。

近年來，許多研究也指出氧化物質和心血管疾病、癌症及老化等習習相關。老化現象是一種普遍性、進行性、累積性與傷害性的生理衰退，但基於個體差異無法透過單一或簡單模式加以描述。然而，隨著研究進展發現，人類老化與體內氧化自由基（reactive oxygen species，ROS）息息相關，氧化自由基會造成體內細胞的DNA、蛋白質、脂質等分子破壞，使得生理功能逐漸喪失，產生疾病與器官老化。許多文獻指出氧化自由基是造成體內器官老化的主要因素之一。於是，研究新的抗氧化物質以延緩老化，為目前國內、外抗衰老研究領域的主要議題之一。

許多文獻研究證實白藜蘆醇（resveratrol）具有抗氧化功能，亦有研究發現於動物實驗的延緩老化功能。但白藜蘆醇存在潛在的副作用，於臨床實驗中發現服用高劑量白藜蘆醇（2.5g至5.0g/每天），會產生胃噁心、腸胃脹氣、腹部不適與腹瀉等症狀。此外，白藜蘆醇可能具有抗凝血效果，可能干擾肝臟中與代謝藥物有關的酵素（如：cytochrome P450、CYP1A2），進而干擾多種常見的藥物作用，可能引發服藥者未知風險，使用前需先諮詢醫生或藥師。另外在動物實驗中亦發現輕微的雌激素效果，患有對雌激素敏感的患者，如：乳癌病患、卵巢癌病患、子宮癌病患，應避免服用。

近年也陸續發現某些益生菌菌株具備抗氧化功能，如： Bifidobacterium longum（GB-1496）、 Bifidobacterium animalis、 Lactobacillus plantarum與 Lactobacillus rhamnosus。於臨床實驗上證實乳酸菌的食用安全性，且菌株發酵產物也證實具備抗氧化功效。因此，服用菌株與其發酵產物的混合物既可加強體內中和氧化物質的效果，亦可增強延緩老化的目的。

此外，老年健康與老年照護的課題，也是近年來世界各國有關當局所重視的問題。有鑑於此，發展出一種安全且可長期使用的抗老化補充品有其重要性。一般而言，乳酸菌相當安全，故找出具有多種複合功效的乳酸菌菌株，便是目前極需努力的目標。

本發明乃基於所提之包含乳酸菌混合菌株或其發酵物的組合物透過小鼠實驗模式證實其具抗衰老之生理活性效果所完成的。故，本發明之包含乳酸菌混合菌株或其發酵物的組合物可用於實現上述生理活性的用途，且以食品、醫藥、或化妝品形式存在。

準此，本發明一實施方式提出一種抗老化組合物，其包含：（a）經分離的乳酸菌菌株或其發酵物、以及（b）賦形劑、稀釋劑或載體；其中乳酸菌菌株包含以寄存編號BCRC 910875寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌長亞種（ Bifidobacterium longumsubsp . longum）OLP-01菌株、以寄存編號BCRC 910645寄存於財團法人食品工業發展研究所的動物雙歧桿菌（ Bifidobacterium animalissubsp. lactis）CP-9菌株、以寄存編號BCRC 910812寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌（ Bifidobacterium longum）BLI-02菌株、以寄存編號BCRC 910844寄存於財團法人食品工業發展研究所的短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）Bv-889菌株、以寄存編號BCRC 910902寄存於財團法人食品工業發展研究所的兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidum）Bf-688菌株、與以寄存編號BCRC 911012寄存於財團法人食品工業發展研究所的植物乳酸桿菌（ Lactobacillus plantarum）PL-02菌株。

本發明另一實施方式提出一種抗老化組合物用於製備抗老化之食品組合物、醫藥組合物、或美容化妝品組合物的用途，其中抗老化組合物包含：（a）經分離的乳酸菌菌株或其發酵物、以及（b）賦形劑、稀釋劑或載體；其中乳酸菌菌株包含以寄存編號BCRC 910875寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌長亞種（ Bifidobacterium longumsubsp . longum）OLP-01菌株、以寄存編號BCRC 910645寄存於財團法人食品工業發展研究所的動物雙歧桿菌（ Bifidobacterium animalissubsp. lactis）CP-9菌株、以寄存編號BCRC 910812寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌（ Bifidobacterium longum）BLI-02菌株、以寄存編號BCRC 910844寄存於財團法人食品工業發展研究所的短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）Bv-889菌株、以寄存編號BCRC 910902寄存於財團法人食品工業發展研究所的兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidum）Bf-688菌株、與以寄存編號BCRC 911012寄存於財團法人食品工業發展研究所的植物乳酸桿菌（ Lactobacillus plantarum）PL-02菌株。

為讓本發明上述及/或其他目的、功效、特徵更明顯易懂，下文特舉較佳實施方式，作詳細說明於下：

本發明所述的乳酸菌菌株以冷凍乾燥培養物形式寄存於財團法人食品工業發展研究所，地址為台灣新竹市食品路331號。寄存詳細資料如表1所示：表1、乳酸菌菌株的寄存資料

菌株名	分類	寄存編號	寄存日期
OLP-01	長雙歧桿菌長亞種 Bifidobacterium longumsubsp . longum	BCRC 910875	2019年2月22日
CP-9	動物雙歧桿菌 Bifidobacterium animalissubsp. lactis	BCRC 910645	2014年8月21日
BLI-02	長雙歧桿菌 Bifidobacterium longum	BCRC 910812	2018年1月18日
Bv-889	短雙歧桿菌 Bifidobacterium breve	BCRC 910844	2018年7月20日
Bf-688	兩歧雙歧桿菌 Bifidobacterium bifidum	BCRC 910902	2019年6月12日
PL-02	植物乳酸桿菌 Lactobacillus plantarum	BCRC 911012	2020年7月28日

於本文發現如表1所列之寄存的長雙歧桿菌長亞種（ Bifidobacterium longumsubsp . longum）OLP-01菌株、動物雙歧桿菌（ Bifidobacterium animalissubsp. lactis）CP-9菌株、長雙歧桿菌（ Bifidobacterium longum）BLI-02菌株、短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）Bv-889菌株、兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidum）Bf-688菌株、及植物乳酸桿菌（ Lactobacillus plantarum）PL-02菌株具有抗老化的生理活性功能。故，表1所列之所有菌株或其發酵物可用於抗老化的用途。

於一實施方式，本發明所提之用於上述生理功能的組合物，其包含：（a）經分離的乳酸菌菌株或其發酵物，而乳酸菌菌株包含以寄存編號BCRC 910875寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌長亞種（ Bifidobacterium longumsubsp . longum）OLP-01菌株、以寄存編號BCRC 910645寄存於財團法人食品工業發展研究所的動物雙歧桿菌（ Bifidobacterium animalissubsp. lactis）CP-9菌株、以寄存編號BCRC 910812寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌（ Bifidobacterium longum）BLI-02菌株、以寄存編號BCRC 910844寄存於財團法人食品工業發展研究所的短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）Bv-889菌株、以寄存編號BCRC 910902寄存於財團法人食品工業發展研究所的兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidum）Bf-688菌株、與以寄存編號BCRC 911012寄存於財團法人食品工業發展研究所的植物乳酸桿菌（ Lactobacillus plantarum）PL-02菌株、以及（b）賦形劑、稀釋劑或載體。

較佳地，賦形劑、稀釋劑或載體可為生理上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體，藉此所提之組合物可作為一食品組合物或美容化妝品組合物使用。較佳地，賦形劑、稀釋劑或載體可為醫藥上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體，藉此所提之組合物可作為一醫藥組合物使用。

於作為食品組合物的條件下，生理上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體可為一食品，例如：乳製飲品、茶、咖啡、糖果（如：口含片、咀嚼錠、軟糖等）、機能性飲品或以上任意組合，其中乳製飲品可為發酵乳、優格、乳酪或乳粉等。

於美容化妝品組合物的條件下，生理上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體可為（a）液狀化妝品，如：沐浴液、洗髮液、護髮乳、化妝水、香水、精華液、乳液、化妝水或保濕噴霧等；（b）乳液狀化妝品；（c）膏霜狀化妝品，如：潤面霜、粉底霜、洗髮膏、眼霜、手霜、液態面膜或髮蠟等；（d）粉狀化妝品，如：香粉或爽身粉；（e）塊狀化妝品，如：粉餅；或（f）棒狀化妝品，如：口紅。

於作為醫藥組合物的條件下，醫藥組合物可呈口服劑型或皮膚外用劑型。口服劑型例如為錠劑、膠囊、溶液劑或粉劑等。

較佳地，所述之乳酸菌菌株為活性菌株或去活性菌株。較佳地，於作為食品組合物、美容化妝品組合物或醫藥組合物的條件下，菌株數量為10 ⁶CFU以上；更佳地，菌株數量為10 ¹⁰CFU以上。此外，發酵物可包含去活性菌株的發酵液、去除菌體的發酵液或此等任一的乾燥粉末。舉例而言，發酵液可為發酵上清液或乳清發酵液等。較佳地，依組合物總重量計，乳酸菌發酵物的發酵乾燥粉末含量為0.5wt％以上；或者，乳酸菌發酵物的去活性菌株發酵液或去除菌體發酵液含量為2.5wt％以上。

實施例1：乳酸菌菌株之形態學及一般性質

根據16S rDNA序列分析以及API細菌鑑定系統分析結果來確認乳酸菌菌株於分類學上的特徵。乳酸菌菌株於形態學及一般性質上的特徵詳如表2所示：表2、乳酸菌菌株的形態學及一般性質特徵

菌株名	形態特徵
長雙歧桿菌長亞種 OLP-01	1、為厭氧菌，革蘭氏染色下為陽性菌。不生成孢子，不具觸酶、氧化酶及運動性，在絕對厭氧環境下生長，最適宜的生長溫度為37±1℃，屬於兼性異質發酵性菌株，葡萄糖代謝時不產生氣體。 2、於MRS培養基生長出的菌落為白色實心圓形，菌體型態為中長桿狀，兩端偶伴有雙歧分支（Y字型或V字型）。
動物雙歧桿菌 CP-9菌株	1、為厭氧菌，革蘭氏染色下為陽性菌。不生成孢子，不具觸酶、氧化酶及運動性，在絕對厭氧環境下生長，最適宜的生長溫度為37±1℃，屬於兼性異質發酵性菌株，葡萄糖代謝時不產生氣體； 2、於MRS培養基生長出的菌落為白色實心圓形，菌體型態為中長桿狀，兩端偶伴有雙歧分支（Y字型或V字型）。
長雙歧桿菌 BLI-02	1、為厭氧菌，革蘭氏染色下為陽性菌。不生成孢子，不具觸酶、氧化酶及運動性，在絕對厭氧環境下生長，最適宜的生長溫度為37±1℃，屬於兼性異質發酵性菌株，葡萄糖代謝時不產生氣體。 2、於MRS培養基生長出的菌落為白色實心圓形，菌體型態為中長桿狀，兩端偶伴有雙歧分支（Y字型或V字型）。
短雙歧桿菌 Bv-889	1、為厭氧菌，革蘭氏染色下為陽性菌。不生成孢子，不具觸酶、氧化酶及運動性，在絕對厭氧環境下生長，最適宜的生長溫度為37±1℃，屬於兼性異質發酵性菌株，葡萄糖代謝時不產生氣體。 2、於MRS培養基生長出的菌落為白色實心圓形，菌體型態為中短桿狀，兩端偶伴有雙歧分支（Y字型或V字型）。
兩歧雙歧桿菌 Bf-688	1、為厭氧菌，革蘭氏染色下為陽性菌。不生成孢子，不具觸酶、氧化酶及運動性，在絕對厭氧環境下生長，最適宜的生長溫度為37±1℃，屬於兼性異質發酵性菌株，葡萄糖代謝時不產生氣體。 2、於MRS培養基生長出的菌落為白色實心圓形，菌體型態為中長桿狀，兩端偶伴有雙歧分支（Y字型或V字型）。
植物乳酸桿菌 PL-02	1、為兼性厭氧菌，可於低或正常的氧氣濃度下生活。適合的生長溫度為10至45℃，而30至35℃則是最佳範圍，但在接近冰點亦能生存。對其生長而言，最佳的酸鹼度範圍為pH3.5至4.2之間，耐鹽性約為13至15％。 2、外觀乃是桿狀直線型的菌種，兩端以圓弧形收尾。通常寬為0.9至1.2mm；長為3.0至8.0mm。以單個、兩兩成對或者多個呈短鏈形式排列存在。

實施例2：乳酸菌菌株的收集

所使用的乳酸菌菌株使用前以20%甘油保存於-80℃。需要使用時，於37℃下以含有0.05% cysteine的MRS broth（DIFCO）活化24小時二次。所使用的乳酸菌菌株混合物有長雙歧桿菌長亞種（ Bifidobacterium longumsubsp . longum）OLP-01菌株、動物雙歧桿菌（ Bifidobacterium animalissubsp. lactis）CP-9菌株、長雙歧桿菌（ Bifidobacterium longum）BLI-02菌株、短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）Bv-889菌株、兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidum）Bf-688菌株、以及植物乳酸桿菌（ Lactobacillus plantarum）PL-02菌株，來源皆為人類腸道。於一實施樣態中，培養所使用的液態培養基包含5至30wt%牛奶與1至10wt%大豆粉至少其中之一；於一實施樣態中，培養所使用的液態培養基包含碳源以及氮源至少其中之一，碳源包含葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、半乳糖、甘露糖、海藻糖、澱粉、糖蜜、馬鈴薯澱粉、玉米澱粉、麥芽萃取物、麥芽糊精或以上任意組合，而氮源包含(NH ₄) ₂SO ₄、(NH ₄) ₃PO ₄、NH ₄NO ₃、NH ₄Cl、酪蛋白胺基酸、尿素、蛋白腖、聚蛋白腖、胰化腖、肉類萃取物、酵母萃取物、酵母粉、牛奶、大豆粉、乳清、或以上任意組合；於一實施樣態中，依培養所使用之液態培養基的重量計，葡萄糖與麥芽糊精共佔2至5wt％。

乳酸菌菌株發酵產生之發酵物為利用上述乳酸菌菌株至少其中之一於培態培養基發酵所產生的，再經離心、過濾、加熱殺菌等步驟，最後純化取得。依實際需求，發酵物可進一步乾燥成乳酸菌發酵物粉末，而粉末劑型或所形成的水溶液劑型可保存於常溫。

實施例3：於體外的自由基清除活性分析

DPPH（di(phenyl)-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium）為穩定的自由基分子，DDPH自由基甲醇溶液於波長517nm下有最高吸收值。當DPPH自由基與抗氧化物質作用後，抗氧化物質提供氫離子來清除自由基，而DPPH自由基便會失去原先具有的藍紫色而造成吸光值降低。

乳酸菌菌株之自由基清除能力的檢測過程如下：常見乳酸菌菌株及其發酵菌液（約為2x10 ⁹CFU，OD約為2.0）、不具抗氧化活性效果的嗜熱鏈球菌（ Streptococcus thermophiles）Ｌ-243菌株（約為2x10 ⁹CFU，OD約為2.0，作為負控制組）、及二次水（作為空白組）分別與0.2mM的DPPH甲醇溶液以比例1：1混合。混合均勻後，於室溫暗室下反應30分鐘。接著，於4℃下經12000rpm轉速離心2分鐘後，取200μl至96孔盤中並測定其OD ₅₁₇值。自由基清除能力的計算公式如下：

；其中，OD _sample表示受測樣品的OD ₅₁₇值，OD _blank表示空白組的OD ₅₁₇值。

如圖1的試驗結果所示，相較其他乳酸菌菌株，動物雙歧桿菌（ Bifidobacterium animalissubsp. lactis）CP-9菌株、長雙歧桿菌長亞種（ Bifidobacterium longumsubsp. longum）OLP-01菌株、長雙歧桿菌（ Bifidobacterium longum）BLI-02菌株、短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）Bv-889菌株、兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidum）Bf-688菌株、以及植物乳酸桿菌（ Lactobacillus plantarum）PL-02菌株具有較高的清除自由基能力。

實施例4：於體外的FRAP鐵離子還原/抗氧化能力法分析

FRAP為ferric ion reducing antioxidant power（或ferric reducing ability of plasma）的縮寫，中文稱為「鐵離子還原/抗氧化能力法」，其為於低pH條件下，利用亞鐵離子與TPTZ（tripyridyltriazine，三吡啶基三嗪）生成藍紫色複合物來測量樣品抗氧化能力，此方法廣泛運用於食品與保健品的抗氧化能力分析。

具體而言，FRAP測定總抗氧化能力的原理在於酸性條件下抗氧化物能還原Fe ³⁺-TPTZ成藍紫色的Fe ²⁺-TPTZ，隨後於波長593nm下測定吸光度，即可作為樣品的總抗氧化能力指標。由於反應於酸性條件下進行可抑制一些內源性的干擾。由於樣品中的鐵離子或亞鐵離子總濃度通常低於10μM，故樣品中的鐵離子或亞鐵離子不會顯著地干擾FRAP的檢測反應。此外，由於反應體系中的鐵離子或亞鐵離子與TPTZ螯合，樣品本身所含的少量金屬離子螯合劑通常亦不會顯著地影響檢測反應。

如圖2的試驗結果所示，相較其他乳酸菌菌株，長雙歧桿菌長亞種（ Bifidobacterium longumsubsp. longum）OLP-01菌株、短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）Bv-889菌株長雙歧桿菌、植物乳酸桿菌（ Lactobacillus plantarum）PL-02菌株、（ Bifidobacterium longum）BLI-02菌株、動物雙歧桿菌（ Bifidobacterium animalissubsp. lactis）CP-9菌株、兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidum）Bf-688菌株，具有較高的鐵還原能力，亦即這些菌株含有較高的抗氧化能力。

實施例5：乳酸菌菌株於小鼠體內的抗老化分析試驗

氧化物蛋白質羰基（protein carbonyl）含量檢驗與粒線體DNA之8-氧代-2'-脫氧鳥苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine）含量檢驗為組織老化的重要指標，而過氧化氫酶（catalase，CAT）活性為組織抗老化的重要指標。以下乳酸菌於小鼠中的抗衰老模式採用此三項指標分析。

將10個月大的小鼠分為9組，每組4隻，每日進行管餵。攝取乳酸菌劑量乃根據2005年美國食品藥物局公告的實驗初期估算方法進行；其中，「控制組」餵食一般飼料；「正控制組」餵食一般飼料與每日每公斤小鼠體重20.5mg白藜蘆醇；「低劑量乳酸菌組」餵食每日每公斤小鼠體重1.03x10 ⁹CFU乳酸菌菌株；「低劑量乳酸菌搭配代謝產物組」餵食每日每公斤小鼠體重1.03x10 ⁹CFU乳酸菌菌株與20.5mg乳酸菌菌株的自身發酵產物；「高劑量乳酸菌組」餵食每日每公斤小鼠體重4.1x10 ⁹CFU乳酸菌菌株；「高劑量乳酸菌搭配代謝產物組」餵食4.1x10 ⁹CFU乳酸菌菌株與20.5mg乳酸菌菌株的自身發酵產物；其中，於「低劑量乳酸菌組」、「低劑量乳酸菌搭配代謝產物組」、「高劑量乳酸菌組」與「高劑量乳酸菌搭配代謝產物組」中，長雙歧桿菌長亞種（ Bifidobacterium longumsubsp. longum）OLP-01菌株、短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）Bv-889菌株長雙歧桿菌、植物乳酸桿菌（ Lactobacillus plantarum）PL-02菌株、（ Bifidobacterium longum）BLI-02菌株、動物雙歧桿菌（ Bifidobacterium animalissubsp. lactis）CP-9菌株、及兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidum）Bf-688菌株之間的菌株數量比為1：1：1：1：1：1。連續餵食六個月後，摘取小鼠內臟器官腦部、心臟與肝臟，並評估各組別小鼠的衰老情況。

氧化物蛋白質羰基含量檢驗、粒線體DNA之8-氧代-2'-脫氧鳥苷含量檢驗與過氧化氫酶活性測定等實驗詳見下文：

1、經連續餵食六個月後，先犧牲小鼠，再以手術器械將腦部、心臟、肝臟等組織摘取並分別置於微量離心管內。加入200μl的0.4M過氯酸（perchloric acid）後，以超音波均質機均質處理。

2、將各個小鼠器官均質液分別根據Protein Carbonyl Colorimetric Assay Kit（Cayman Chemical，型號：10005020）、8OHdG Check ELISA kit（JaICA，型號：KOG200S/E）與Catalase Assay Kit（Cayman Chemical，型號：707002）提供的實驗標準流程進行操作，並檢測器官內老化與抗老化指標的含量。

參照圖3至圖5，於16個月大的小鼠中，服用高劑量乳酸菌並搭配代謝產物之小鼠腦部與肝臟內的氧化物質蛋白質羰基與8-氧代-2'-脫氧鳥苷含量均為最低（圖3、4）；而服用高劑量乳酸菌並搭配代謝產物之小鼠心臟內的抗氧化酵素過氧化氫酶活性為最高（圖5），且與其他組別的小鼠比較下具有統計上的差異（p值＜0.01並以**表示）。

惟以上所述者，僅為本發明之較佳實施例，但不能以此限定本發明實施之範圍；故，凡依本發明申請專利範圍及發明說明書內容所作之簡單的等效改變與修飾，皆仍屬本發明專利涵蓋之範圍內。

無

圖1為體外的自由基清除活性分析結果圖，以說明不同乳酸菌菌株的自由基清除能力。圖2為體外的FRAP分析結果圖，以說明不同乳酸菌菌株的鐵離子還原/抗氧化能力。圖3為小鼠體內的老化分析試驗結果圖，以說明小鼠餵食不同受測樣品後腦部的氧化物蛋白質羰基含量。圖4為小鼠體內的老化分析試驗結果圖，以說明小鼠餵食不同受測樣品後肝臟之粒線體DNA的8-氧代-2'-脫氧鳥苷含量。圖5為小鼠體內的抗老化分析試驗結果圖，以說明小鼠餵食不同受測樣品後心臟的過氧化氫酶活化。

1、TW中華民國，食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，2019/02/22，BCRC 910875 2、TW中華民國，食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，2014/08/21，BCRC 910645 3、TW中華民國，食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，2018/01/18，BCRC 910812 4、TW中華民國，食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，2018/07/20，BCRC 910844 5、TW中華民國，食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，2019/06/12，BCRC 910902 6、TW中華民國，食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心， 2020/07/28，BCRC 911012

Claims

一種抗老化組合物，係包括：(a)經分離的乳酸菌菌株，該乳酸菌菌株包含以寄存編號BCRC910875寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌長亞種(Bifidobacterium longum subsp.longum)OLP-01菌株、以寄存編號BCRC 910645寄存於財團法人食品工業發展研究所的動物雙歧桿菌(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)CP-9菌株、以寄存編號BCRC 910812寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)BLI-02菌株、以寄存編號BCRC 910844寄存於財團法人食品工業發展研究所的短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)Bv-889菌株、以寄存編號BCRC 910902寄存於財團法人食品工業發展研究所的兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)Bf-688菌株、與以寄存編號BCRC 911012寄存於財團法人食品工業發展研究所的植物乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)PL-02菌株；以及(b)賦形劑、稀釋劑或載體；其中該抗老化組合物的使用劑量為每日每公斤個體體重4.1x10⁹CFU的該乳酸菌菌株。
如請求項1所述之抗老化組合物，其中該乳酸菌菌株為活性菌株或去活性菌株。
如請求項1所述之抗老化組合物，其中於該組合物為食品組合物或美容化妝品組合物下，該賦形劑、稀釋劑或載體為一生理上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體；於該組合物為醫藥組合物下，該賦形劑、稀釋劑或載體一為醫藥上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。
如請求項3所述之抗老化組合物，其中該生理上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體為一食品，該食品為乳製飲品、茶、咖啡、糖果或機能性飲品，而該乳製飲品為發酵乳、優格、乳酪或乳粉。
如請求項3所述之抗老化組合物，其中該醫藥組合物呈口服劑型或皮膚外用劑型，而該口服劑型為錠劑、膠囊、溶液劑或粉劑。
如請求項1所述之抗老化組合物，其中該乳酸菌菌株培養於一液態培養基，該液態培養基包含5至30wt%牛奶與1至10wt%大豆粉。
如請求項1所述之抗老化組合物，其中該乳酸菌菌株培養於一液態培養基，該液態培養基包含碳源以及氮源，該碳源包含葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、半乳糖、甘露糖、海藻糖、澱粉、糖蜜、馬鈴薯澱粉、玉米澱粉、麥芽萃取物或麥芽糊精，而該氮源包含(NH₄)₂SO₄、(NH₄)₃PO₄、NH₄NO₃、NH₄Cl、酪蛋白胺基酸、尿素、蛋白腖、聚蛋白腖、胰化腖、肉類萃取物、酵母萃取物、酵母粉、牛奶、大豆粉或乳清。
如請求項7所述之抗老化組合物，其中依據該液態培養基的重量計，該葡萄糖與該麥芽糊精共佔2至5wt%。
一種抗老化組合物用於製備抗老化之食品組合物、醫藥組合物、或美容化妝品組合物的用途，其中該抗老化組合物包含：(a)經分離的乳酸菌菌株，該乳酸菌菌株包含以寄存編號BCRC910875寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌長亞種(Bifidobacterium longum subsp.longum)OLP-01菌株、以寄存編號BCRC 910645寄存於財團法人食品工業發展研究所的動物雙歧桿菌(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)CP-9菌株、以寄存編號BCRC 910812寄存於財團法人食品工業發展研究所的長雙歧桿菌 (Bifidobacterium longum)BLI-02菌株、以寄存編號BCRC 910844寄存於財團法人食品工業發展研究所的短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)Bv-889菌株、以寄存編號BCRC 910902寄存於財團法人食品工業發展研究所的兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)Bf-688菌株、與以寄存編號BCRC 911012寄存於財團法人食品工業發展研究所的植物乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)PL-02菌株；以及(b)賦形劑、稀釋劑或載體；其中該抗老化組合物的使用劑量為每日每公斤個體體重4.1x10⁹CFU的該乳酸菌菌株。
如請求項10所述之用途，其中該乳酸菌菌株為活性菌株或去活性菌株。
如請求項10所述之用途，其中於該抗老化組合物用於製備抗老化之食品組合物或美容化妝品組合物下，該賦形劑、稀釋劑或載體為一生理上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體；於於該抗老化組合物用於製備醫藥組合物下，該賦形劑、稀釋劑或載體一為醫藥上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。
如請求項11所述之用途，其中該生理上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體為一食品，該食品為乳製飲品、茶、咖啡、糖果或機能性飲品，而該乳製飲品為發酵乳、優格、乳酪或乳粉。
如請求項11所述之用途，其中該醫藥組合物呈口服劑型或皮膚外用劑型，而該口服劑型為錠劑、膠囊、溶液劑或粉劑。
如請求項9所述之用途，其中該乳酸菌菌株培養於一液態培養基，該液態培養基包含5至30wt%牛奶與1至10wt%大豆粉。
如請求項9所述之用途，其中該乳酸菌菌株培養於一液態培養基，該液態培養基包含碳源以及氮源，該碳源包含葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、半乳糖、甘露糖、海藻糖、澱粉、糖蜜、馬鈴薯澱粉、玉米澱粉、麥芽萃取物或麥芽糊精，而該氮源包含(NH₄)₂SO₄、(NH₄)₃PO₄、NH₄NO₃、NH₄Cl、酪蛋白胺基酸、尿素、蛋白腖、聚蛋白腖、胰化腖、肉類萃取物、酵母萃取物、酵母粉、牛奶、大豆粉或乳清。
如請求項15所述之用途，其中依據該液態培養基的重量計，該葡萄糖與該麥芽糊精共佔2至5wt%。