WO2005018653A1 - スキンケア用の内服組成物 - Google Patents

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WO2005018653A1
WO2005018653A1 PCT/JP2004/012183 JP2004012183W WO2005018653A1 WO 2005018653 A1 WO2005018653 A1 WO 2005018653A1 JP 2004012183 W JP2004012183 W JP 2004012183W WO 2005018653 A1 WO2005018653 A1 WO 2005018653A1
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WO
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kefir
composition according
lactobacillus
fermented milk
internal use
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PCT/JP2004/012183
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English (en)
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Sennosuke Tokumaru
Koichiro Tokumaru
Tetsutaro Sakiyama
Original Assignee
Nihon Kefir Co., Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
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    • A61K8/922Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of vegetable origin
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    • A61Q19/02Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
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    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08Anti-ageing preparations
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    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Definitions

  • the present invention relates to an internal use composition for skin care, and uses of the composition as foods and pharmaceuticals.
  • Kefir grains are a traditional fermented milk starter (such as the Caucasus) called Kefir.
  • Patent Document 1 describes a cosmetic material having a skin whitening effect and an active oxygen scavenging effect, characterized in that it contains a cell extract of Lactobacillus genus Lactobacillus separated from kefir grains.
  • Patent Document 2 discloses a fermentation broth prepared by inoculating Kefir grain strength, isolated Saccharomyces yeasts, culturing, and removing the yeast from the obtained culture broth.
  • a safe cosmetic that has a skin whitening effect and is characterized by being formulated is described.
  • Patent Document 3 describes a cosmetic for removing stains, buckwheat, moles and the like, characterized by blending a culture supernatant of kefir grains.
  • Patent Document 1 JP-A-5-163134
  • Patent Document 2 Japanese Patent Laid-Open No. 7-10734
  • Patent Document 3 International Publication No. 01/019324 Pamphlet
  • An object of the present invention is to provide a skin care means that can exert a systemic effect with no side effects even if it is regularly used by internal use, and that the effect is not reduced by perspiration or friction.
  • the present invention relates to a composition for internal use for skin care containing Kefia fermented milk, and the use of this composition as a food and a medicine.
  • the present invention also relates to a method of using the above-mentioned internal use composition for skin care. Furthermore, the present invention also relates to a method of using kefir fermented milk for producing an internal composition for skin care.
  • an internal composition for skin care can be obtained.
  • the fermented milk of kefir bacterium used in the present invention is a naturally derived product and is essentially edible, so it can be safely used as an internal medicine.
  • the composition of the present invention can be used internally, a systemic effect can be expected, and the effect is not reduced by perspiration or friction.
  • Kefia fermented milk used in the present invention refers to kefir and kefir-like fermented milk, and mixtures thereof.
  • the kefir fermented milk used in the present invention is preferably kefir.
  • the kefir used in the present invention refers to fermented milk obtained using kefir grains as seed bacteria.
  • the kefir grains refer to a bacterial mass in which lactic acid bacteria and yeast coexist, that is, a natural immobilized microorganism symbiosis.
  • Symbiosis is a phenomenon in which different organisms live in a positional and geographically steady relationship.
  • the kefir grains used in the present invention are not particularly limited as long as they are used as inoculum of kefir.
  • the inoculum of kefir that is widely eaten and consumed in the Caucasus region May be used.
  • the kefir grains used in the present invention are symbiotic with lactic acid bacteria and yeast, and are different from those in which lactic acid bacteria and yeast are simply mixed.
  • the kefir grains of the present invention include, for example, viscous polysaccharides (such as kefiran) in addition to bacteria, 50-55 of the total amount of kefir grains. /. May be included.
  • viscous polysaccharides such as kefiran
  • symbiotic bacteria in kefir grains are more vigorous and effective than the same type of bacteria that exist alone or in a mixture, such as by the action of substances such as bacteriocin secreted by each other. Excellent in component secretion.
  • Bacteria symbiotic in the kefir grains of the present invention and those in which lactic acid bacteria and yeast are mixed can be distinguished by the following method.
  • the bacteria that are symbiotic in the kefir grains of the present invention are simply mixed with lactic acid bacteria and yeast. Excellent antibacterial activity against coliforms.
  • the above disc method is described, for example, in McGroarty, J.A. and Reid, G. 1988. Detection of a lactobacillus substance that inhibits Escherichia coli. Can. J. Microbiol, 34: 974-978.
  • the kefir grains used in the present invention can be obtained from, for example, License Intruda ( Russian). In the present invention, for example, it is preferable to use kefir grains activated according to the method described in JP-A-62-283842.
  • a product obtained by separation from kefir by a conventional method for example, culture powder can be used as kefir grains.
  • culture powders are commercially available from Wisby (Germany), Ryosan (Canada) and Roselle (Strength Nada).
  • kefir of the present invention those marketed by Nippon Kefir Company can be used.
  • kefir can also be produced according to conventional methods, for example, methods described in JP-A Nos. 62-83842 and 2000-166467.
  • methods described in JP-A Nos. 62-83842 and 2000-166467 for example, fermenting animal milk, soy milk or rice milk, or a mixture thereof, or skim milk, processed milk, prepared milk or dairy products, etc. at 25 ° C for 24 hours using kefir grains as inoculum You can get more power S.
  • animal milk for example, milk such as cow, buffalo, horse, sheep or goat, as soy milk, for example fermented products or emulsions such as soybean
  • rice milk for example, white rice Milk or brown rice milk
  • white rice Milk or brown rice milk can be used.
  • kefir fermented with soy milk by fermentation with a fermentation aid for example, an enzymatic degradation product of casein, and a mineral derived from milk
  • a fermentation aid for example, an enzymatic degradation product of casein, and a mineral derived from milk
  • fermented products obtained by the method shown below are also preferred as kefir of the present invention.
  • Step 1) Inoculate 0.15 15 g (preferably 0.3 10 g, more preferably 0.5-4. 5 g) of kefir grains against lOOg of sterilized soymilk composition;
  • Step 2) 8-72 hours at 5-30 ° C (preferably 15-25 ° C, more preferably 18 ° C-23 ° C), and / or f acidity SO. 55-1.50 (preferably Fermentation until f 0.60-1.20, more preferably f 0.665-0.90).
  • Step b) Inoculum is prepared by culturing at 5-30 ° C (preferably 15-25 ° C, more preferably 18 ° C-23 ° C).
  • lactic acidity refers to lactic acid acidity unless otherwise specified. This lactic acid acidity is obtained by performing neutralization titration with 1 / 10N NaOH using 1% phenolphthalein solution as an indicator, and converting the acid contained in food from the required 1 / 10N NaOH into the amount of lactic acid. be able to.
  • the soymilk composition used in the above step 1 contains a fermentation aid in addition to soymilk or water soymilk. With this aid, the composition of the soy milk composition should be close to that of milk.
  • auxiliary used in the present invention commercially available fermentation auxiliary, for example, those used in the production of yognoreto or cheese can be used alone or in combination.
  • P as inorganic phosphorus
  • Fe is 0.001 or more, more Preferably it is 1 or less
  • Na is 0.006 or more, more preferably 0.6 or less
  • K is 0.001 or more, more preferably 1 or less
  • Mg is 0.007 or more. More preferably, it is 0.07 or less
  • C1 is 0.008 or more, more preferably 0.8 or less
  • lactose is 0.01 or more, more preferably 50 or less.
  • Auxiliaries that can be used in the present invention may include whey (eg, whey produced during cheese manufacture) concentrates.
  • Table 1 shows examples of fermentation aids.
  • the soy milk formulation may optionally comprise an animal protein, preferably peptone; a protein hydrolyzed small molecule mixture.
  • animal protein and peptone commercially available products can be used.
  • the kefir-like fermented milk used in the present invention uses a mixture of lactic acid bacteria and yeast as seed bacteria instead of kefir grains, and can be produced by the same method as the above kefir. S can.
  • the lactic acid bacteria and yeast can be obtained by isolation and culture from kefir grains, or those not derived from kefir grains can be used.
  • the kefir fermented milk of the present invention may be a mixture of the above kefir grains and lactic acid bacteria, yeasts or acetic acid bacteria not derived from the kefir grains.
  • the kefir fermented milk may be in a liquid form with no particular limitation on the form, but may be in the form of a solid, particularly a powder.
  • the conventional free The product obtained by the freeze drying method is advantageous because the composition of the fermented milk is maintained and concentrated.
  • Examples of the lactic acid bacteria include Lactobacillus and lactic acid cocci.
  • Lactobacillus casei Lactobacillus kefiranofaciens; Lactobacillus casei;
  • Lactobacillus kefiri; 7 can be used for Lactobacillus brevis.
  • Lactococcus lactis As lactic acid cocci, for example, Lactococcus lactis; Enterococcus faecalis; streptococcus lactis; Streptococcus cremons; Streptococcus diacetylactis;
  • yeast examples include lactose fermentable yeast and lactose non-fermentable yeast.
  • lactose-fermenting deciduous yeasts examples include Kluyveromyces marxianus, particularly Kluyveromyces marxianus var. Marxianus or i ⁇ Kiuyveromyces marxianus var. Lactis; Candita keiyr; or Brettanomyces anomalus.
  • lactose non-fermentable yeast for example, Saccharomyces unisporous
  • the inoculum used for producing the kefir grains or kefir-like fermented milk used in the present invention may contain any combination of the above-mentioned bacteria, but preferably 10-15 species of lactic acid bacteria and yeast 6 — 10 species, more preferably 7 lactobacilli and 10 yeasts.
  • the inoculum when producing the kefir grains or kefir-like fermented milk of the present invention may further contain 7 types of lactic acid cocci.
  • the inoculum used in producing the kefir grains or kefir-like fermented milk of the present invention is preferably a four-fold weight of Lactobacillus kefiranofaciens, Lactobacillus kefin, Lactobacillus brevis and Leuconostoc mesenteroides as the Lactobacillus Candita kefyr as the yeast. Contains 1 or more, especially 3 of ⁇ Candita holmii or Saccharomyces unisporaqs.
  • the inoculum used in the production of the kefir grains or kefir-like fermented milk of the present invention is optionally.
  • acetic acid bacteria may be included.
  • the above-mentioned bacteria contained in the kefir fermented milk used in the present invention may be live or dead. Further, the fermented milk of kefir fungus of the present invention may contain both live and dead bacteria.
  • the composition of the present invention comprises ingredients that can be used for skin care, such as vegetable oils, carotenoids, antioxidants, vitamins, amino acids, mineralolates, collagen, chondroitin, chondroitin sulfate, elastin, hyanorenoic acid, gnorecosamine, oligosaccharide, May contain phospholipids such as icosapentaenoic acid, docosahexaenoic acid, linolenoreic acid, linolenic acid, arbutin, kojic acid, placenta, lucinole, ellagic acid, vegetable ceramide and squalene, and anti-inflammatory agents. Les. Preferable are collagen, chondroitin, hyanorelonic acid, placenta, and phospholipids such as plant ceramide and squalene.
  • These components may be synthetic products, natural products, or natural products, and may be crude extracts or purified products.
  • the above-described components can be used alone or in combination of two or more.
  • the vegetable oil used in the present invention can be obtained from plant seeds by pressing or the like.
  • Preferred are safflower oil, wheat germ oil and soybean oil.
  • the extraction method and the purification method of the vegetable oil are not particularly limited.
  • the vegetable oil of the present invention may be a crude extract or a purified product.
  • the above vegetable oils may be used alone or in combination of two or more.
  • carotenoids examples include carotenoid hydrocarbons and carotenol (xanthophyll).
  • the carotenoid hydrocarbon is, for example, j3-force rotin and lycopene (lycopene), and preferably / 3-carotene.
  • the above carotenol includes, for example, rutin, zeaxanthin, cryptoxanthin, canthaxanthin, capsanthin hydradex.
  • rutin and zeaxanthin particularly preferably rutin.
  • These carotenoids are preferably naturally derived products.
  • a marigold extract containing rutin, particularly an extract from a petal of maricold is preferred.
  • these carotenoids can be used singly or in combination of two or more.
  • / 3-force rotin and rutin can be used in combination.
  • antioxidants examples include vitamin C, vitamin E, anthocyanin and polyphenol. Vitamin C and vitamin E are preferred.
  • antioxidants are preferably natural products.
  • soybean extract containing vitamin E particularly soybean oil containing vitamin E is preferred.
  • antioxidants can be used alone or in combination of two or more.
  • vitamin A oil examples include vitamin A oil, vitamin Bl, vitamin B2, vitamin B6, vitamin B12, nicotinic acid amide, calcium pantothenate, vitamin C, vitamin D2, vitamin E, and vitamin K.
  • Vitamin B2 and the like are preferable.
  • the composition of the present invention may contain these vitamins alone or in combination of two or more.
  • Examples of the mineral include copper, zinc, selenium, calcium, manganese, potassium, and iron.
  • the composition of the present invention may contain these minerals alone or in combination of two or more.
  • amino acids examples include tryptophan, threonine, and methionine.
  • the composition of the present invention may contain these amino acids alone or in combination of two or more.
  • composition of the present invention contains excipients, sweeteners, acidulants, thickeners, flavors, pigments, emulsifiers, and other materials commonly used in foods. It may be included.
  • composition of the present invention can be used for skin care for skin care.
  • it can be used for whitening and skin beautification.
  • the composition of the present invention can be used, for example, for the prevention / treatment of sunburn prevention 'improvement or stain' buckwheat.
  • “Beautiful skin” refers to, for example, use for giving the skin firmness, luster, softness, smoothness, and transparency, making the texture more vigorous, and adjusting. Therefore, the composition of the present invention can prevent wrinkles and sagging caused by, for example, aging, exposure to ultraviolet rays, changes in hormone balance, and active oxygen injury, etc. for improving, improving skin elasticity, moisturizing skin, acne or pimples ⁇ Can be used for improvement or for rough skin prevention
  • the fact that it is used for the above-mentioned skin care uses is indicated on the body, packaging, instructions or promotional material of the internal use composition of the present invention, so that the conventional kefir bacteria It may be distinguished from fermented milk.
  • the main body means a container directly containing the internal composition of the present invention
  • the packaging means a paper or a box surrounding the container
  • the instruction is a document explaining the internal composition of the present invention.
  • the promotional material is a document used to promote the sales of the internal use composition of the present invention.
  • the composition according to the present invention is used as a food, particularly as a health food, a functional food, a health supplement, a food for specified health use, a beauty food, and a nutritional supplement (sublimation) for the purpose of skin care or the like.
  • a food particularly as a health food, a functional food, a health supplement, a food for specified health use, a beauty food, and a nutritional supplement (sublimation) for the purpose of skin care or the like.
  • These foods may be in the form of, for example, drinking water such as tea and juice; ice cream, jelly, candy, chocolate and chewing gum. It may also be in the form of a liquid, powder, granule, capsule or tablet.
  • composition according to the present invention can be used as a medicine, for example, for the prevention or treatment of freckles.
  • These pharmaceuticals are administered orally, for example, in the form of tablets, coated tablets, dragees, hard or soft gelatin capsules, solutions, emulsions or suspensions.
  • the intake of the composition according to the present invention is not particularly limited, but can be appropriately selected according to the dosage form and the age, weight and symptoms of the user or patient.
  • an oral intake of kefir 0.3 g 9 g, preferably 26 g, more preferably 4 g to 6 g as an active ingredient amount per day for an adult is desirable.
  • the intake period depends on the age and symptoms of the user or patient. It can be arbitrarily determined depending on the situation.
  • Kefir grains obtained from Nippon Kefia containing Lactobacillus kenranomciens, Lactobacillus kefiri, Lactooacillus brevis, Kluyveromyces marxianus, Candita kefyr, Candita holmii and Saccharomyces unisporaqs were used.
  • This disc was placed approximately in the center on the BYE plate medium. Next, this BYE plate medium was incubated at 4 ° C. for 3 hours, so that the bacterial culture solution soaked in the disk was diffused into the medium. Subsequently, after incubation at 37 ° C for 18 hours, the inhibition zone around the disk was examined.
  • the prepared milk prepared by adding skim milk powder to milk was sterilized, then cooled, inoculated with the above kefir grains as inoculum, and fermented at 25 ° C for 24 hours to obtain fermented milk.
  • This fermented milk was freeze-dried to obtain Kefir MSL as a powder.
  • Kefir MSD was obtained as a powder in the same manner as the above kefir MSL, except that it was sterilized after lyophilization.
  • Kefir MSL and Kefir MSD have a total solid content of 96-98%, protein Quality 22—25%, Moon quality 9. 0—11%, Sugar 54—55%, Ash content 5.2—5.8%, Energy 3
  • Kefir MSL 90—417 kcal.
  • the number of viable bacteria contained in Kefir MSL was 10 8 / g or more for lactic acid bacteria and 10 5 / g or more for yeast.
  • soy milk 1013 g of soy milk (manufactured by Marusan) was sterilized at 80 ° C. This was inoculated with 50 g of kefir grains (obtained from Nippon Kefia) and cultured at 20 ° C. A soft card was formed 19 hours after inoculation, but the acidity was 0.40. Twenty-four hours after inoculation, the acidity was 0.50.
  • the milk sterilized at 90 ° C was inoculated with 1.5% (by weight) of Caucasian kefir grains (obtained from Nippon Kefia) and cultured at 20 ° C for 20 hours to obtain an inoculum.
  • Soy milk (manufactured by Nippon Beans) 900g was sterilized at 70 ° C and cooled (10 ° C).
  • the inoculum prepared above was inoculated with 1.5% (weight ratio) and cultured at 20 ° C.
  • Each of 160 g of milk sterilized at 90 ° C was inoculated with 2.5 g of kefir grains (obtained from Nippon Kefia) and cultured at 20 ° C for 20 hours. The card was well formed. Cooled 24 hours after inoculation.
  • curds were formed in each case, but they were softer than the soymilk fermented product preparation example 3.
  • the electrode was cooled after 24 hours.
  • Each acidity is shown in Table 5.
  • Formulations containing the soymilk in Table 6 (manufactured by Marusan; unprepared, BX10.6) were sterilized by conventional methods.
  • Soy milk manufactured by Nippon Beans Co., Ltd .; BX12. 8 20 kg of water was added to 150 kg (BX11.1). Sterilized at 80 ° C for 5 minutes.
  • auxiliaries in Table 1 (1.9 kg (final concentration 1.1%)) and peptone 0.36 kg (final concentration 0.2%) dissolved in 10 kg of water were sterilized at 80 ° C for 5 minutes.
  • the acidity was 0.60 19 hours after the inoculation, and the acidity was 0.72 20 hours after the inoculation.
  • the obtained fermentation product was sterilized at 85 ° C for 5 minutes.
  • the fermented product was lyophilized by a conventional method to obtain a light yellow powder.
  • the powder did not feel the unique smell of soy milk.
  • Test meals 1 and 2 were prepared to have the composition shown in Table 7. [0066] Table 7
  • the subjects were 10 healthy women aged 31-40 years old who had dry and rough skin or acne skin as subjective symptoms. During the study period, subjects were not allowed to use any drug, topical medicine, or health food that had an effect on the skin other than test meals 1 and 2.
  • test meal 1 or test meal 2 Subjects ingested either test meal 1 or test meal 2 at a dose of 2 g, 3 times a day, with water for 28 days.
  • ultraviolet light with the minimum amount of erythema was irradiated on the inner side of one of the upper arms of the test subject, and melanin, erythma and L values were measured 14 days and 28 days later using a meggeter meter and color difference meter. Subsequently, ingestion of the test meal was started and continued for 28 days. At the beginning of the test meal intake, the inside of the upper arm, which was different from the previous irradiation of ultraviolet rays, was irradiated with the same amount of ultraviolet rays as the previous minimum erythema amount. Value, erythema value and L value were measured.
  • the eyelids were taken in replicas, and then the test meals were started and taken continuously for 28 days. On the 28th day, the eyes were taken again in replicas.
  • This Parallel light was irradiated to the Prica from a certain direction (30 °), and the resulting shadow was image-processed. From this, the shadow area and its length were calculated.
  • the standard scale force also calculated the shadow area and its length, and corrected the numerical value of the eye corner replica. From these values, the sea area ratio, the maximum sea average depth and the maximum sea maximum depth were calculated.
  • the viscoelasticity of the skin was measured by the change in the skin sucked into the probe by applying a constant negative pressure to the skin surface inside the forearm with the probe of the cutometer. Subsequently, the ingestion of the test meal was started and continued for 28 days. On the 28th day, the viscoelasticity of the skin was measured again as described above.
  • the probe of the Corneometer Before the test meal is ingested, the probe of the Corneometer is brought into close contact with the skin surface on the inner side of the forearm, so that the microprocessor in the device reads the switch information in the probe and the measurement time during which electricity flows and registers them.
  • the keratin moisture content was measured by evaluating with calibration data. Subsequently, the intake of the test meal was started, and the intake was continued for 28 days. On the 28th day, the keratin water content was measured again as described above.
  • the number of bifidobacteria in the stool was measured according to a conventional method before and after the intake of the test food (on the 28th day after ingestion).
  • a questionnaire survey on lifestyle was conducted at the start of the study, followed by a questionnaire survey on the skin just before the start of taking the test meal, on the 14th day and 28th day after the intake.
  • Subjects were asked to fill out a diary of their daily diet, physical condition and test meal intake during the test meal intake period.
  • melanin INDEX value mean value ⁇ standard deviation of 10 subjects
  • the 14th day was before the test meal intake. In this period, it was 101.74 ⁇ 1.33%, and during the period of ingestion of the test meal, it was 99.74 ⁇ 1.40%, which was reduced by 2.0% by taking the test meal.
  • 101.24 ⁇ 1.02% was shown in the period before taking the test meal, 99.21 ⁇ 1.02% in the period before taking the test meal, and 2.03% by taking the test meal. A significant difference was observed (p 0.01, t test).
  • the INDEX value (average soil standard deviation of 10 subjects) was 102.39 ⁇ 1.52% for the period before taking the test meal, and for the period while taking the test meal. ⁇ indicates 101. 50 ⁇ 1. 52 0/0 , 0. 89 0/0 decreased by the intake of the test meal. On the 28th day, it shows 102. 64 ⁇ 3.02% in the period before taking the test meal, and 101.5 1 ⁇ 1.89% in the period before taking the test meal. % Reduction was observed.
  • the measured value represents the average soil standard deviation of 10 subjects.
  • the wrinkle area rate was reduced by 3.83% in 3 subjects out of 10 subjects by the intake of the test meal, and decreased by 7.83% on average.
  • Isobe In 7 of the 10 subjects, improvement was observed before and after taking the test meal.
  • the stratum corneum water content (mean soil standard deviation) of 10 cases was 51.83 ⁇ 63.87 S before ingestion, while the post-ingestion force was 63.87 ⁇ 10.68 / is, an improvement of 12.04 / is Increased significantly (p ⁇ 0.05, t test).
  • the skin condition was evaluated for moisture, agitation, elasticity, texture, transparency, and wrinkles.
  • the case where each state could not be recognized was evaluated with a score between 1 and 5 points, and the case where each state was recognized with a score between 1 and 5 points, respectively.
  • Table 9 shows the average values of 10 subjects. In terms of the average of the 10 cases, the scores on the 14th and 28th days after ingestion increased in all conditions compared to before the intake of the test meal.
  • test meal 1 In the intestinal bacteria, an increase in bifidobacteria called good bacteria was observed. In test meal 1, an excellent whitening effect and wrinkle improvement effect were observed. On the other hand, the test food 2 had an excellent moisturizing effect.
  • the fermented soymilk product prepared above showed a whitening effect, an improvement effect on the viscoelasticity of the skin, an improvement effect on the moisturizing function (horny layer moisture content), and an increase effect of bifidobacteria.

Abstract

 内服で常用しても副作用がなく、全身的効果を発揮し得る、そして発汗や摩擦によって効果が低下しない、スキンケア手段を提供することを目的とする。  ケフィア菌発酵乳を含むスキンケア用の内服組成物、ならびにこの組成物の食品および医薬品。

Description

明 細 書
スキンケア用の内服組成物
技術分野
[0001] 本発明は、スキンケア用の内服組成物、ならびにこの組成物の食品および医薬品 としての用途に関する。
背景技術
[0002] 今日、美白や美肌に対する社会の関心は高まりをみせ、それに伴い様々な美白 · 美肌などを目的としたスキンケア用の製品が開発されている。これらスキンケア用製 品は皮膚に直接適用するものが大半である。
[0003] しかし、皮膚に外用する場合、スキンケアの効果は塗布した局所的な部分のみしか 期待できず、全身的にスキンケアを行いたい人には不向きであった。さらに、美容上 特に関心の高い顔などの部分にスキンケアを施す場合、発汗や物理的な摩擦などに よりスキンケアの効果が低下または消失するおそれがあるため、短時間ごとに塗布を 繰り返す必要があり不便であった。そのため、美容食品、健康食品または機能性食 品として、内服によりスキンケアを行う製品も開発されてきている。
[0004] ケフィァ粒(ケフィァグレーンとも称される)は、ケフィァ(Kefir)と呼ばれるコーカサス 地方などの伝統的な発酵乳の種菌 (スターター)である。近年、このケフィァを利用し た化粧料が開発されてきている。例えば、特許文献 1には、ケフィァ粒力 分離したラ タトバチルス属乳酸菌の菌体抽出物を配合したことを特徴とする、皮膚美白効果およ び活性酸素消去効果を有する化粧料が記載されている。また、特許文献 2には、ケ フィァ(Kefir)粒力、ら分離したサッカロマイセス(Saccharomyces)属酵母を接種し培養 を行い、得られた培養液から酵母を除去することによって調製された発酵液を配合し て成ることを特徴とする、皮膚美白効果を有し、かつ安全な化粧料が記載されている 。さらに、特許文献 3には、ケフィァ粒の培養上清を配合したことを特徴とする、シミ、 ソバカス、ほくろなどを除去する化粧料が記載されている。
しかし、これらの化粧料は皮膚に直接適用されるもので、ケフィァが内服により良好 なスキンケア効果を及ぼし得るか否かは不明であった。 特許文献 1 :特開平 5 - 163134号公報
特許文献 2:特開平 7 - 10734号公報
特許文献 3 :国際公開第 01/019324号パンフレット
発明の開示
[0005] 本発明は、内服で常用しても副作用がなぐ全身的効果を発揮し得る、そして発汗 や摩擦によって効果が低下しない、スキンケア手段を提供することを目的とする。
[0006] 本発明者は、鋭意研究を重ねた結果、ケフィァ菌発酵乳が内服により美白 '美肌効 果を発揮することを見出し、本発明を完成させた。
[0007] すなわち、本発明は、ケフィァ菌発酵乳を含むスキンケア用の内服組成物、ならび にこの組成物の食品および医薬品としての用途に関する。
また、本発明は、スキンケアのために上記内服組成物を使用する方法にも関する。 さらに、本発明は、スキンケア用内服組成物を製造するための、ケフィァ発酵乳を 使用する方法にも関する。
[0008] 本発明によれば、スキンケア用の内服組成物を得ることができる。本発明で使用さ れるケフィァ菌発酵乳は、天然由来品であり、本質的には食用であるので、安全に内 服で常用することができる。また、本発明の組成物は、内服で使用できるので、全身 的効果を期待でき、発汗や摩擦によってその効果は低下しない。
発明を実施するための最良の形態
[0009] 本発明において使用されるケフィァ菌発酵乳は、ケフィァおよびケフィァ様発酵乳、 ならびにこれらの混合物をいう。本発明において使用されるケフィァ菌発酵乳は、好 ましくはケフィァである。
[0010] 本発明で使用されるケフィァとは、ケフィァ粒を種菌として用いて得られた発酵乳の ことをいう。
ケフィァ粒は、乳酸菌と酵母とが共生している菌塊、すなわち天然の固定化微生物 共生体のことをいう。共生とは、異種の生物が位置的'地理的に定常的な緊密関係を 保って、生活している現象のことをいう。
本発明で使用されるケフィァ粒は、ケフィァの種菌として使用されるものであれば、 特に制限されない。例えば、コーカサス地方で広く飲食されているケフィァの種菌を 使用してよい。
本発明で使用されるケフィァ粒は乳酸菌と酵母との共生体である点で、乳酸菌と酵 母とが単に混在しているものとは相違する。
本発明のケフィァ粒は、菌以外にも、例えば粘性多糖類 (ケフイランなど)をケフィァ 粒の総量の 50— 55。/。含んでもよい。
また、ケフィァ粒内で共生している菌は、互いに相手の分泌するバクテリオシンなど の物質の作用を受けたりすることなどにより、単独または混在して存在している同種 の菌より、生命力および有効成分分泌力で優れている。
本発明のケフィァ粒内で共生している菌と、乳酸菌と酵母とが混在しているものとは 、以下の方法により区別することができる。
乳中の抗生物資の検出に一般的に使用されるディスク法またはカップ法などを準 用した試験において、本発明のケフィァ粒内で共生している菌は、単に混在している 乳酸菌と酵母より優れた大腸菌群などに対する抗菌活性を示す。上記のディスク法 は、 列えば、 McGroarty, J.A.および Reid,G. 1988. Detection of a lactobacillus substance that inhibits Escherichia coli. Can. J. Microbiol, 34: 974—978に記載されて いる。
[0011] 本発明で使用されるケフィァ粒は、例えば、ライセンスイントルダ社(ロシア)などから 得ること力 Sできる。本発明においては、例えば、特開昭 62— 83842に記載された方 法に準じて活性化したケフィァ粒を使用することが好ましい。
また、本発明においては、ケフィァから慣用の方法で分離して得られたもの、例え ば、カルチャーパウダーをケフィァ粒として使用することもできる。このようなカルチヤ 一パウダーなどは、ウイズバイ社(ドイツ)、リヨ一サン社 (カナダ)およびローゼル社 (力 ナダ)などから市販されてレ、る。
[0012] 本発明のケフィァは、 日本ケフィァ社が市販しているものを使用することができる。
あるいは、ケフィァは、慣用の方法、例えば特開昭 62—83842号公報および特開 20 00—166467号公報に記載された方法に準じて製造することもできる。例えば、ケフ ィァ粒を種菌として使用し、獣乳、豆乳もしくは米乳またはこれらの混合物、あるいは これらの脱脂乳、加工乳、調整乳または乳製品などを、 25°C、 24時間発酵させること により得ること力 Sできる。
[0013] 上記のケフィァの製造においては、獣乳として、例えば牛、水牛、馬、羊または山羊 などの乳を、豆乳として、例えば大豆などの発酵産物または乳化物を、米乳として、 例えば白米乳または玄米乳などを使用することができる。
[0014] また、豆乳に、発酵助剤、例えばカゼインの酵素分解物と、乳由来のミネラルとを添 カロして発酵させたケフィァも本発明に使用できる。あるいは、以下に示す方法により 得られる発酵産物も本発明のケフィァとして好ましレ、。
工程 1)殺菌した豆乳配合物 lOOgに対し、ケフィァ粒 0. 15 15g (好ましくは 0. 3 10g、より好ましくは 0. 5-4. 5g)を接種し;
工程 2) 5— 30°C (好ましくは 15— 25°C、より好ましくは 18°C— 23°C)で 8— 72時間、 及び/又 fま酸度力 SO. 55—1. 50 (好ましく fま 0. 60- 1. 20、より好ましく fま 0. 65— 0. 90)になるまで発酵させる。
なお、この発酵において、ケフィァ粒を以下のようにして処理して得た種菌を使用す ることちでさる。
工程 a)殺菌した牛乳 100gに対し、 0. 15— 15g (好ましくは 0. 3— 10g、より好ましく は 0、 5-4. 5g)のケフィァ粒を接種し;
工程 b) 5— 30°C (好ましくは 15— 25°C、より好ましくは 18°C— 23°C)で培養して種 菌を調製する。
本明細書で「酸度」というときは、特別な場合を除き、乳酸酸度をいう。この乳酸酸 度は、 1%フエノールフタレイン溶液を指示薬として、 1/10N NaOHで中和滴定を 行レ、、要した 1/10N NaOHから食品中に含まれる酸を乳酸量に換算して求めるこ とができる。
[0015] 必要な時間が経過し、又は必要な酸度に達したならば、 5 2°Cまで冷却して、発 酵の進行をとめる。
上記工程 1において用いられる豆乳配合物は、豆乳、又は加水した豆乳以外に、 発酵助剤も含む。この助剤により、豆乳配合物の組成を牛乳に近レ、ものとするとよい 。本発明に用いる助剤としては、市販されている発酵助剤、例えばョーグノレト、チー ズなどの製造の際に用いられるものを単独で又は組み合わせて用いることができるが 、好ましくは Ca、 P、 Fe、 Na、 K、 Mg、 Cl、リン酸塩及び乳糖からなる群より選択され る成分の 1又は 2以上を含むものであり、より好ましくは、少なくとも P、 Fe、 K、 CI及び 乳糖を含むか、またはこれらの 7成分のすべてを含むものである。各成分の添加量は
、豆乳配合物の成分、発酵に用いる菌の種類などに基づいて種々の範囲に設定す ること力 Sできる力 豆乳配合物 100g中の好ましいおよその含量 (g)は、それぞれ: Ca は 0. 005以上であり、より好ましくは 0. 5以下であり; P (無機リンとして)は 0. 009以 上であり、より好ましくは 0. 9以下であり; Feは 0. 001以上であり、より好ましくは 1以 下であり; Naは 0. 006以上であり、より好ましくは 0. 6以下であり; Kは 0. 001以上で あり、より好ましくは 1以下であり; Mgは 0. 0007以上であり、より好ましくは 0. 07以 下であり; C1は 0. 008以上であり、より好ましくは 0. 8以下であり;乳糖は 0. 01以上 であり、より好ましくは 50以下である。
[0016] 本発明に用いることができる助剤は、ホエー(例えば、チーズ製造時に生じる乳清) 濃縮物を含んでもよい。発酵助剤の例を表 1に示す。
[0017] 表 1 .
発酵助剤の例
Figure imgf000006_0001
[0018] 豆乳配合物は、所望により、動物性タンパク質、好ましくはペプトン;タンパク質加水 分解低分子混合物を含んでもよい。動物性タンパク質およびペプトンとしては、市販 のものを用いることができる。
[0019] 本発明において使用されるケフィァ様発酵乳は、ケフィァ粒の代わりに、乳酸菌と 酵母とが混在しているものを種菌として使用し、上記のケフィァと同様の方法により製 造すること力 Sできる。この乳酸菌および酵母は、ケフィァ粒から単離 ·培養して得ること ができるし、ケフィァ粒に由来していないものも使用することができる。
[0020] 本発明のケフィァ菌発酵乳は、種菌として、上記のケフィァ粒と、ケフィァ粒に由来 していない乳酸菌、酵母または酢酸菌とを混合させたものを使用してもよい。
[0021] 本発明においては、ケフィァ菌発酵乳は、特に形態に制限はなぐ液状のものを使 用してもよいが、固形、特に粉末を使用してもよい。とりわけ粉末の場合、慣用のフリ ーズドライ製法で得たものは、発酵乳の組成がそのまま維持され濃縮されるので有利 である。
[0022] 前記の乳酸菌として、例えば、乳酸桿菌(Lactobacillus)または乳酸球菌などが挙 げられる。
学 L酸ネ早菌とし飞、 列えは、 Lactobacillus kefiranofaciens; Lactobacillus casei ;
Lactobacillus kefiri ;ま 7こは Lactobacillus brevisなど力 けられる。
ま 7こ、乳酸球菌として、例 は、 Lactococcus lactis、 ; Enterococcus faecalis; streptococcus lactis; Streptococcus cremons; Streptococcus diacetylactis;
Leuconostoc mesenteroides^特に Leuconostoc mesenteroides subsp dextranicum ;ま たは Leuconostoc cremorisなどか举げられる。
[0023] 前記の酵母として、例えば、乳糖発酵性酵母または乳糖非発酵性酵母が挙げられ る。
乳糖発酵十生酵母として、例えば、 Kluyveromyces marxianus,特に Kluyveromyces marxianus var. marxianusもしく i^Kiuyveromyces marxianus var. lactis; Candita keiyr ;または Brettanomyces anomalusなど力、挙げられる。
また、乳糖非発酵性酵母として、例えば、 Saccharomyces unisporous;
saccharomyces cerevisiae; Candita hoimii ;まに" saccharomyces umsporaqsなとか挙 げられる。
[0024] 本発明で使用されるケフィァ粒またはケフィァ様発酵乳を製造する際の種菌は、上 記の菌をいかなる組み合わせで含んでいてもよいが、好ましくは、乳酸菌 10— 15種 と酵母 6— 10種とを含み、より好ましくは、乳酸桿菌 7種と酵母 10種とを含む。本発明 のケフィァ粒またはケフィァ様発酵乳を製造する際の種菌は、さらに乳酸球菌 7種を 含んでもよい。
[0025] 本発明のケフィァ粒またはケフィァ様発酵乳を製造する際の種菌は、好ましくは、 学 L酸菌として Lactobacillus kefiranofaciens、 Lactobacillus kefin、 Lactobacillus brevis および Leuconostoc mesenteroidesの 4禾重を 、酵母として Candita kefyr Λ Candita holmiiまたは Saccharomyces unisporaqsのうち 1種以上、特に 3種 含む。
[0026] 本発明のケフィァ粒またはケフィァ様発酵乳を製造する際の種菌は、場合によりさ らに酢酸菌を含んでもよい。
[0027] 本発明に使用されるケフィァ菌発酵乳に含まれる上記の菌は、生菌であっても死菌 であってもよい。また、本発明のケフィァ菌発酵乳は生菌および死菌の両方を含んで いてもよい。
[0028] 本発明の組成物は、スキンケアに使用できる成分、例えば、植物油、カロテノイド、 抗酸化物質、ビタミン、アミノ酸、ミネラノレ、コラーゲン、コンドロイチン、コンドロイチン 硫酸、エラスチン、ヒアノレロン酸、グノレコサミン、オリゴ糖、エイコサペンタエン酸、ドコ サへキサェン酸、リノ一ノレ酸、リノレン酸、アルブチン、コゥジ酸、プラセンタ、ルシノー ノレ、エラグ酸、植物性セラミドおよびスクアレンなどのリン脂質、ならびに抗炎症剤な どを含んでもよレ、。好ましくは、コラーゲン、コンドロイチン、ヒアノレロン酸、プラセンタ、 ならびに植物性セラミドおよびスクアレンなどのリン脂質である。
これら成分は、合成品であっても、または天然由来品であってもよぐまた天然由来 品である場合、粗抽出物であっても、精製物であってもよい。
また、本発明において、上記に示した成分を、単独で使用することも、 2種以上を併 用することちできる。
[0029] 本発明に使用される植物油は、植物の種子から圧搾などにより得ることができる。例 えば、アボカド油、アマ二油、アーモンド油、エゴマ油、ォリーブ油、サフラワー油、小 麦胚芽油、ゴマ油、コメヌ力油、シソ油、セサミ油、大豆油、トウモロコシ油、パーシック 油、パーム油、ヒマヮリ油、ホホバ油、綿実油、グレープシード油および月見草油など が挙げられる。好ましくは、サフラワー油、小麦胚芽油および大豆油などである。本発 明においては、植物油の抽出方法および精製方法については特に限定されない。 また、本発明の植物油は粗抽出物であっても、精製物であってもよい。さらに、本発 明においては、上記の植物油を単独で使用しても、 2種以上を併用してもよい。
[0030] 本発明に使用できるカロテノイドとして、例えば、カロテノイド炭化水素、およびカロ チノール(キサントフィル)などが挙げられる。
[0031] 上記のカロテノイド炭化水素は、例えば、 j3—力ロチンおよびリコピン(リコペン)など であり、好ましくは /3—カロチンである。また、上記のカロチノールは、例えば、ルティ ン、ゼアキサンチン、クリプトキサンチン、カンタキサンチン、カプサンチンひ—ドラデキ はルティンおよびゼアキサンチンであり、特に好ましくはルティンである。 また、これらカロテノイドは天然由来品が好ましい。例えば、ルティンを含有するマリ 一ゴールド抽出物、特にマリーコールドの花弁からの抽出物が好ましい。
本発明において、これらカロテノイドを単独で使用することも、 2種以上を併用するこ ともでき、例えば、 /3—力ロチンとルティンとを併用することもできる。
[0032] 上記の抗酸化物質としては、ビタミン C、ビタミン E、アントシァニンおよびポリフエノ ールなどが挙げられる。好ましくは、ビタミン Cおよびビタミン Eである。
これら抗酸化物質は天然由来品が好ましい。例えば、ビタミン Eを含有する大豆抽 出物、特にビタミン E含有大豆油が好ましい。
本発明において、これら抗酸化物質を単独で使用することも、 2種以上を併用する ことちできる。
[0033] 上記のビタミンとして、例えば、ビタミン A油、ビタミン Bl、ビタミン B2、ビタミン B6、 ビタミン B12、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、ビタミン C、ビタミン D2、ビタ ミン Eおよびビタミン Kなどが挙げられ、好ましくはビタミン B2などが挙げられる。本発 明の組成物は、これらビタミンを単独でも、または 2種以上含んでもよい。
[0034] 上記のミネラルとして、銅、亜鉛、セレン、カルシウム、マンガン、カリウムおよび鉄な どが挙げられる。本発明の組成物は、これらミネラルを単独でも、 2種以上含んでもよ レ、。
[0035] 上記のアミノ酸として、トリプトファン、スレオニンおよびメチォニンなどが挙げられる 。本発明の組成物は、これらアミノ酸を単独でも、 2種以上含んでもよい。
[0036] 本発明の組成物は、本発明の効果を損なわない限り、賦形剤、甘味料、酸味料、 増粘剤、香料、色素、乳化剤およびその他に食品で一般に利用されている素材を含 んでいてもよい。
[0037] 本発明の組成物は、スキンケア用として肌の手入れに使用することができる。例え ば、美白用および美肌用などに使用することができる。
美白用とは、例えば、肌を美しく白くするために、具体的には色ムラのなレ、、すなわ ちシミ、ソバカスがない、くすんでいない、美しい肌色にするために使用することをレ、う 。したがって、本発明の組成物は、例えば、 日焼けの防止 '改善用またはシミ'ソバカ スの予防 ·治療用などに使用することができる。
美肌用とは、例えば、皮膚にハリ、つや、柔らかさ、なめらかさ、透明感を与え、きめ を細力べし、かつ整えるために使用することをいう。したがって、本発明の組成物は、 例えば、老化、紫外線暴露、ホルモンバランスの変化および活性酸素傷害などにより 生じるシヮやたるみの防止 '改善用、皮膚弾性向上用、皮膚保湿用、二キビもしくは 吹き出物の防止 ·改善用、または肌荒れの防止 ·改善用などに使用することができる
[0038] 本発明において、上記に示したスキンケアの用途に用いられるものであることを、本 発明の内服組成物の本体、包装、説明書または宣伝物などに表示することで、従来 のケフィァ菌発酵乳と区別してもよい。ここで、本体とは本発明の内服組成物を直接 入れた容器をいい、包装とはこの容器を包む紙または箱などをレ、い、説明書とは本 発明の内服組成物を説明する文書をいい、宣伝物とは本発明の内服組成物の販売 促進に使用される文書をいう。
[0039] 本発明に係る組成物は、食品として、特にスキンケアなどの目的で健康食品、機能 性食品、健康補助食品、特定保健用食品、美容食品および栄養補助食品(サブリメ ント)として使用することができる。これら食品は、例えば、お茶およびジュースなどの 飲料水;アイスクリーム、ゼリー、あめ、チョコレートおよびチューインガムなどの形態 であってもよい。また、液剤、粉剤、粒剤、カプセル剤または錠剤の形態であってもよ レ、。
[0040] また、本発明に係る組成物は、医薬として、例えば、シミ'そばかすの予防用または 治療用に使用することができる。これら医薬品は、例えば、錠剤、コーティング錠、糖 衣錠、硬もしくは軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳濁剤または懸濁剤の形態で経口 的に投与する。
[0041] 本発明に係る組成物の摂取量は、特に制限されないが、剤型、ならびに使用者ま たは患者の年齢、体重および症状に応じて適宜選択することができる。例えば、成人 1日当たり有効成分量としてケフィァ 0. 3g 9g、好ましくは 2 6g、より好ましくは 4g 一 6gの経口摂取が望ましい。また、摂取期間は、使用者または患者の年齢、症状に 応じて任意に定めることができる。
[0042] 以下に、本発明の実施例を示すが、本発明はこれら実施例により限定されるもので はない。
実施例
[0043] 大腸菌群に対する抗菌活性
Lactobacillus kenranomciens、 Lactobacillus kefiri、 Lactooacillus brevis、 Kluyveromyces marxianus、 Candita kefyr、 Candita holmiiおよび Saccharomyces unisporaqsを含むケフィァ粒(日本ケフィァ社より入手)を使用した。
ケフィァ粒中に生存している菌と、ケフィァ由来ではない菌との、大腸菌群に対する 抗菌活十生を、 McGroarty, J.A.および Reid,G. 1988. Detection of a lactobacillus substance that inhioits Escherichia coli. CanJ.Microり iol, 34: 974—978に己载の方法 に準じて比較した。先ず、 Escherichia coliの 18時間培養液の 1白金耳量を BYEプレ ート培地上に滅菌スヮブを用いて均一に播種した。続いて、抗菌活性を調べる対象 の菌培養液 5 μ 1をろ紙ディスク(直径 6mm)にしみ込ませた。このディスクを上記 BYE プレート培地上のほぼ中央に置いた。次に、この BYEプレート培地を 4°C、 3時間ィ ンキュベートすることで、ディスクにしみ込ませた菌培養液を培地中に拡散させた。続 いて、 37°C、 18時間培養させた後、ディスク周辺の阻止帯を調べた。
その結果、ケフィァ粒で共生している菌は、ケフィァ粒由来ではない同種の菌と比 較して、大腸菌群の生育をより強く阻害し、優れた抗菌活性を示すことが認められた
[0044] ケフィァ MSLの調製
牛乳に脱脂粉乳をカ卩えて調整した調整乳を殺菌し、次いで冷却して、そこに上記 のケフィァ粒を種菌として接種し、 25°Cで 24時間発酵させて発酵乳を得た。この発 酵乳を凍結乾燥してケフィァ MSLを粉体として得た。
[0045] ケフィァ MSDの調製
凍結乾燥後に殺菌処理をした以外、上記のケフィァ MSLと同様にして、ケフィァ MSDを粉体として得た。
[0046] 上記のケフィァ MSLおよびケフィァ MSDは、ともに、全固形分 96— 98%、タンパク 質 22— 25%、月旨質 9. 0— 11%、糖質 54— 55%、灰分 5. 2— 5. 8%、エネノレギー 3
90— 417kcalであった。また、ケフィァ MSLに含まれる生菌数は、乳酸菌が 108個/ g 以上、酵母が 105個/ g以上であった。
[0047] 豆乳発酵産物調製例 1
豆乳(マルサン社製) 1013gを 80°C達温殺菌した。これにケフィァ粒(日本ケフィァ 社より入手) 50gを接種し、 20°Cで培養した。接種 19時間後には柔らかいカードが形 成されたが、酸度は 0. 40であった。接種 24時間後、酸度は 0. 50であった。
[0048] 豆乳発酵産物調製例 2
(1)ケフィァ粒を用いた種菌の調製
90°C達温殺菌した牛乳に、コーカサス地方のケフィァ粒(日本ケフィァ社より入手) を 1. 5% (重量比)接種し、 20°Cで 20時間培養し、種菌を得た。
[0049] (2)豆乳発酵物の調製
豆乳(日本ビーンズ社製) 900gを 70°C達温殺菌し、冷却した(10°C)。他方、表 1 の組成の助剤 34g、ペプトン 2gを水 64gに溶解したものを殺菌し、殺菌済み豆乳に加 えた。上記で調製した種菌を 1. 5% (重量比)接種し、 20°Cで培養した。
[0050] 接種 14時間後、非常に固いカードが形成されていた。接種 22時間後に冷却した。
酸度の変化を表 2に示した。
[0051] 表 2 .
Figure imgf000012_0001
[0052] 豆乳発酵産物調製例 3
(1)種菌の調製
90°C達温殺菌した牛乳 160gの各々に、ケフィァ粒(日本ケフィァ社より入手)を 2· 5gずつ接種し、 20°Cで 20時間培養した。カードが良好に形成されていた。接種 24 時間後に冷却した。
[0053] (2)豆乳発酵物の調製
表 3、 4の割合で加水した豆乳(日本ビーンズ社製; BX 13. 1)を 75°Cで 5分間殺 菌した。他方、表 3、 4の割合の、助剤(組成は表 1と同じ)と市販のペプトンを別に殺 菌して加水豆乳に添加し、 17°Cで上記で調製した種菌をそれぞれ 1. 5% (重量比) 接種し、 20°Cで培養した。
表 3 .配合 A :全量 2 kg分
[0055]
Figure imgf000013_0001
[0056] 接種 19時間後、各々ともにカードが形成されていたが、豆乳発酵産物調製例 3より も柔らカ 、ものであった。接極 24時間後に冷却した。各々の酸度を表 5に示した。
[0057] 表 5 .
Figure imgf000013_0002
[0058] 豆乳発酵産物調製例 4
表 6の豆乳(マルサン社製;無調製、 BX 10. 6)を含む配合物を通常の方法で殺 菌処理した。
Figure imgf000013_0003
[0060] 豆乳発酵産物調製例 3と同様に調製した種菌を 1, 5%接種し、 21°Cで培養した。 [0061] 接種 19時間後には、やわらかい良好なカードが形成されていた。このとき酸度は 0 . 75であった。
得られた発酵産物を加熱したところ、加熱中に八方による液面上昇があり、液量の 約 1. 5倍に盛り上がり、凝固が発生した。しかし、乳タンパク質の凝固とは異なり、冷 却することにより消失した。液面も元に戻った。加水豆乳と助剤液とを別殺菌しなくて も問題なレ、ものと思われた。
[0062] 豆乳発酵産物調製例 5 (豆乳発酵物 180kgの製造)
(1)種菌の調製
1) 90°C達温殺菌した牛乳に、コーカサス地方のケフィァ粒(日本ケフィァ社より入手 )を 1. 5% (重量比)接種した。
2) 20°Cで 20時間培養した(酸度 0. 78)。
[0063] (2)豆乳発酵物の調製
1)豆乳(日本ビーンズ社製; BX12. 8) 150kgに水を 20kg加えた(BX11. 1)。 80°C で 5分間殺菌した。
2)他方、表 1の助剤 1. 9kg (最終濃度 1. 1%)、ペプトン 0. 36kg (最終濃度 0. 2%) を水 10kgに溶解したものを 80°Cで 5分間殺菌した。
3)豆乳 ·水 -混合物が 25°Cに冷却されたところで、助剤 ·ペプトン'水 -混合物を加え 、さらに上記で調製した種菌 3kgを接種し、培養を開始した(24°C)。
4)接種 18時間後(23. 5°C)、カードが良好に形成されていた。これは、豆乳発酵産 物調製例 4で形成されたカードより、やや固かった。撹拌した(22°C)。
[0064] 接種 19時間後、酸度は 0. 60であり、接種 20時間後には、酸度は 0. 72であった。
得られた発酵産物を 85°Cで 5分間殺菌した。
発酵産物を通常の方法により凍結乾燥し、薄黄色の粉末を得た。粉末には豆乳独 特の臭レ、がまったく感じられな力 た。
[0065] 試験食 1の調製
表 7に示した組成になるように、試験食 1および 2を調製した。 [0066] 表 7
Figure imgf000015_0001
[0067] ヒトの皮膚に対する効果試験
1.被験者
被験者は、 31— 40歳の健康な女性 10名で、 自覚症状として、乾燥肌および荒れ 肌、または二キビ肌を有していた。試験期間中は、被験者には、試験食 1および 2以 外の、肌に対する効果がある医薬品、外用薬、健康食品は使用させなかった。
[0068] 2.試験方法
(1)試験食の摂取方法
被験者に試験食 1または試験食 2のいずれか一つを 1回 2g、 1日 3回、 28日間、水 とともに摂取させた。
[0069] (2)紫外線誘導色素沈着の測定
先ず、被験者の一方の上腕部内側に最小紅斑量の紫外線を照射し、その 14日後 と 28日後にメグザメーターおよび色差計でメラニン値、エリスマ値および L値を測定し た。続いて、試験食の摂取を開始させ、 28日間継続して摂取させた。試験食摂取開 始時に、前回紫外線を照射されたのとは別の上腕部内側に、前回と同じ最小紅斑量 の紫外線を照射して、その 14日後と 28日後にメグザメーターおよび色差計でメラ二 ン値、エリスマ値および L値を測定した。
なお、紫外線の照射量が同じであっても、個人により紅斑の出方が違うため、試験 開始前日に紫外線を照射し、翌日の試験開始時に被験者の紅斑の出る照射量を判 定し、その 1. 5倍量を上記の最小紅斑量とした。
[0070] (3)シヮの測定
試験食摂取前に目尻のシヮをレプリカにとり、続いて、試験食の摂取を開始させ、 2 8日間継続して摂取させ、その 28日目に再び目尻のシヮをレプリカにとった。このレ プリカに一定方向(30° )から並行光を照射して、生じた陰影を画像処理し、そこから 陰影面積とその長さを算出した。同様に標準スケール力らも陰影面積とその長さを算 出し、 目尻シヮレプリカの数値を補正した。これら数値からシヮ面積率、最大シヮ平均 深さおよび最大シヮ最大深さを算出した。
上記の標準スケーノレとして、 0. 2mm, 0. 4mm, 0. 6mm, 0. 8mm、 1. 0mmの各深 さの铸型から作製したレプリカを用いた。
[0071] (4)皮膚の粘弾性 (皮膚隆起力学特性)の測定
試験食摂取前に、キュトメーターのプローブを前腕部内側の皮膚表面に密着させ、 一定の陰圧をかけることによりプローブ内に吸引された皮膚の変化で皮膚の粘弾性 を測定した。続いて、試験食の摂取を開始させ、 28日間継続して摂取させ、その 28 日目に再び上記のようにして皮膚の粘弾性を測定した。
[0072] (5)角質水分量の測定
試験食摂取前に、コルネオメーターのプローブを前腕部内側の皮膚表面に密着さ せることにより、装置内のマイクロプロセッサーがプローブ内のスィッチ情報と電気の 流れる測定時間を読み取り、それらを登録されている校正データで評価することによ り、角質水分量を測定した。続いて、試験食の摂取を開始させ、 28日間継続して摂 取させ、その 28日目に再び角質水分量を上記のようにして測定した。
[0073] (6)腸内細菌検査
試験食の摂取前と摂取終了後(摂取開始 28日目)において、大便中のビフィズス 菌の菌数を常法に従い測定した。
[0074] (7)アンケート調査方法
被験者に対し、試験開始時に生活習慣に関するアンケート調査を行い、続いて、試 験食の摂取開始直前、摂取後 14日目および摂取後 28日目に肌に関するアンケート 調查も行った。
[0075] (8)日誌
被験者に、試験食の摂取期間中における、毎日の食事、体調および試験食の摂取 などにっレ、て日誌に記入させた。
[0076] (9)測定条件 上記の測定はすべて、一定の室内条件(温度 20°C *湿度 60%以下)で、洗顔の約 1時間後に行った。
3.結果
(1)美白効果 (紫外線誘導色素沈着の抑制効果)
結果を表 8に示した。
メラニン:
試験食摂取前と摂取中のそれぞれの期間における、紫外線照射前のメラニン値を 100とした場合のメラニン INDEX値 (被験者 10例の平均値 ±標準偏差)について、 14日目は、試験食摂取前の期間では 101. 74± 1. 33%を、試験食摂取中の期間 では 99. 74± 1. 40%を示し、試験食の摂取により 2. 0%低下した。 28日目は、試 験食摂取前の期間では 101. 24± 1. 02%を、試験食摂取中の期間では 99. 21 ± 1. 02%を示し、試験食の摂取により 2. 03%低下し、有意な差が認められた(pく 0. 01、t検定)。
エリスマ:
試験食摂取前と摂取中のそれぞれの期間における、紫外線照射前のエリスマ値を
100とした場合のエリスマ INDEX値 (被験者 10例の平均値土標準偏差)について、 14日目は、試験食摂取前の期間では 102. 39 ± 1. 52%を、試験食摂取中の期間 で ίま 101. 50 ± 1. 520/0を示し、試験食の摂取により 0. 890/0低下した。 28日目 ίま、 試験食摂取前の期間では 102. 64± 3. 02%を、試験食摂取中の期間では 101. 5 1 ± 1. 89%を示し、試験食の摂取により 1. 13%低下が認められた。
"直:
試験食摂取前と摂取中のそれぞれの期間における、紫外線照射前の L値を 100と した場合の L一 INDEX値 (被験者 10例の平均値土標準偏差)について、 14日目は 、試験食摂取前の期間では 97. 74± 1. 97%を、試験食摂取中の期間では 113. 6 9 ± 3. 51 %を示し、試験食の摂取により 15. 95%増加し、有意な差が認められた(p < 0. 01、 t検定)。 28日目は、試験食摂取前の期間では 97. 23 ± 2. 57。/。を、試験 食摂取中の期間では 102. 00 ± 3. 33%を示し、試験食の摂取により 4. 77%増加 し、有意な差が認められた(Pく 0. 01、 t検定)。 [0078] 表 8.
Figure imgf000018_0001
測定値は、 被験者 1 0例の平均値土標準偏差を表す。
* *は、 P< 0 . 0 1を表す。
[0079] (2)抗シヮ効果
シヮ面積率:
シヮ面積率は被験者 10例中 3例に、試験食の摂取により 3. 2— 1 1. 8%の低下を 認め、平均して 7. 83%低下した。
最大シヮ平均深さ:
最大シヮ平均深さは縮緬ジヮのようなシヮでの測定は困難であるため、測定できた のは被験者 10例中 6例のみであった。そのうちの 4例に、試験食の摂取による改善 力認、められ、最大 135. 平均して 47. 7 μ m改善した。
最大シヮ最大深さ:
最大シヮ平均深さの測定が可能だった 6例中 5例に、試験食の摂取による改善が 認められ、最大 70. 7 μ ιη、平均して 45. 98 z m改善した。
[0080] (3)皮膚の粘弾性向上効果
頰部:
試験食の摂取前と摂取後とを比較し改善が認められたのは被験者 10例中 4例であ つに。
腕部:
試験食の摂取前と摂取後とを比較し改善が認められたのは被験者 10例中 4例であ つに。
[0081] (4)保湿効果 (角層水分量測定の結果)
頰部: 試験食の摂取前と摂取後とを比較し改善が認められたのは被験者 10例中 7例であ つた。 10例の角層水分量 (平均値土標準偏差)は、摂取前が 51. 83±63. 87 Sで あるのに対して、摂取後力 63. 87±10.68/isと、 12.04 /is改善し、有意に上昇し た(p<0.05、t検定)。
腕部:
試験食の摂取前と摂取後とを比較し改善が認められたのは被験者 10例中 10例で あり、 10例の角層水分量 (平均値 ±標準偏差)は、摂取前が 33. 93±6. であ るのに対して、摂取後が 40. 33±7.64 xsと、 6.4 μ s改善し、有意に上昇した(p <0.01、t検定)。
[0082] (5)腸内細菌検査の結果
大便中ビフィズス菌(Bifidobacterium spp.):
試験食の摂取前と摂取後とを比較し、被験者 10例中 5例において、ビフィズス菌の 増加が認められ、最大で 6.0X108力 4. 1 109個/§大便と6. 8倍に増加し、 10 例の菌数 (平均値土標準偏差)は 3.4X109から 6.4X109個/ g大便と 2. 12倍に 増加した。
[0083] (6)アンケート調査の結果
被験者本人の自覚により、潤い、はり、弾力、キメ、透明感およびシヮについての肌 の状態を評価させた。各状態を自覚できない場合を一 5—一 1点の間のスコア一で、 各状態を自覚できる場合を 1一 5点の間のスコア一で、それぞれ評価させた。表 9に 被験者 10例の平均値を示した。 10例の平均値でみた場合、いずれの状態において も試験食摂取前と比較して摂取後 14日目と 28日目の点数は増加しており、肌の潤 レ、 (摂取前と摂取後 28日目)、はり(摂取前と摂取後 14日目)、キメ (摂取前と摂取後 14日目)、透明感 (摂取前と摂取後 14日目、摂取前と摂取後 28日目)およびシヮ (摂 取前と摂取後 14日目、摂取前と摂取後 28日目)において有意な差が認められた (p <0.05、符号検定)。 [0084] 表 9 . 本人の自覚による肌の状態の点数
Figure imgf000020_0001
*は、 p < 0 . 0 5 (符号検定) を示す。
[0085] (7)飲用後のアンケート
被験者の摂取後の感想では、「カサカサ肌に潤いが出てきた」、「便通がとてもよく なって、お腹の張った感じがなくなった」、「娘につやが出てきたといわれた」、「便の 回数が増えた」、「摂取前より肌の調子がよくなつた」などがあった。
[0086] 4.まとめ
試験食 1および 2の美白効果については、色素沈着の抑制'早期改善が認められ、 シヮの改善も認められた。皮膚の粘弾性においては頰部で改善が認められた。保湿 機能 (角層水分量)においては頰部、腕部共に改善が認められた。特に、保湿効果 に優れていた。
また、腸内細菌においては、善玉菌といわれるビフィズス菌の増加が認められた。 試験食 1において、優れた美白効果とシヮ改善効果が認められた。一方、試験食 2 におレ、て、優れた保湿効果が認められた。
また、上記において調製した豆乳発酵産物にも、美白効果、皮膚の粘弾性におけ る改善効果、保湿機能 (角層水分量)における改善効果、ビフィズス菌増加効果が認 められた。

Claims

請求の範囲
[I] ケフィァ菌発酵乳を含有する、スキンケア用の内服組成物。
[2] ケフィァ菌発酵乳がケフィァ粒を種菌として用いて得られた発酵乳である、請求項 1 記載の内服組成物。
[3] ケフィァ粒が乳酸菌と酵母とが共生している菌塊である、請求項 2記載の内服組成 物。
[4] ケフィァ粒が粘性多糖類を含む、請求項 2または 3記載の内服組成物。
[5] 粘性多糖類を総量の 50— 55%含む、請求項 4記載の内服組成物。
[6] 粘性多糖類がケフイランである、請求項 4または 5記載の内服組成物。
[7] ケフィァ菌発酵乳が乳酸菌と酵母とが混在しているものを種菌として用いて得られ た発酵乳である、請求項 1記載の内服組成物。
[8] 乳酸菌が乳酸桿菌および乳酸球菌からなる群より選択される 1種以上の菌である、 請求項 3— 7のいずれか 1項記載の内服組成物。
[9] ¥し酸ネ平菌 ^ Lactobacillus kefiranofaciens、 Lactobacillus casei、 Lactobacillus kenn、 および Lactobacillus brevisからなる群より選択される 1種以上の菌である、請求項 8記 載の内服組成物。
[10] 乳酸珠 力 Lactococcus lactis、 Enterococcus faecalis、 streptococcus lactis、
Streptococcus cremoris、 Streptococcus diacetylactis、 Leuconostoc mesenteroides、 および Leuconostoc cremorisからなる群より選択される 1種以上の菌である、請求項 8 または 9記載の内服組成物。
[I I] 酵母が乳糖発酵性酵母および乳糖非発酵性酵母からなる群より選択される 1種以 上の菌である、請求項 3 10のいずれか 1項記載の内服組成物。
[12] 乳糖発酵性酵母が Kluyveromyces marxianus, Candita kefyr、および
Brettanomyces anomalusからなる群より選択される 1種以上の菌である、請求項 11記 載の内服組成物。
[13] し糖 発酵十生酵母力 ^Saccharomyces umsporous、 saccharomyces cerevisiae、
Candita holmii、および Saccharomyces unisporaqsからなる群より選択される 1種以上 の菌である、請求項 11または 12記載の内服組成物。 [14] 乳酸菌力 ^Lactobacillus kefiranofaciens、 Lactobacillus kefiri、 Lactobacillus brevisお よび Leuconostoc mesenteroidesの 4種の |S| C、あり、酵母力 sCandita kefyr、 Candita holmiiおよび Saccharomyces unisporaqsからなる群より選択される 1種以上の菌である 、請求項 3— 7のいずれか 1項記載の内服組成物。
[15] 種菌として酢酸菌をさらに用いる、請求項 1一 14のいずれか 1項記載の内服組成 物。
[16] ケフィァ菌発酵乳が豆乳を発酵させて得られた発酵乳である、請求項 1一 15のい ずれか 1項記載の内服組成物。
[17] ケフィァ菌発酵乳が牛乳を発酵させて得られた発酵乳である、請求項 1一 15のい ずれか 1項記載の内服組成物。
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