KR20200057873A - 비피도박테리움 롱검 및 홉 추출물을 포함하는 항당뇨 또는 항아토피용 유제품 - Google Patents

비피도박테리움 롱검 및 홉 추출물을 포함하는 항당뇨 또는 항아토피용 유제품 Download PDF

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Abstract

본 발명은 비피도박테리움 롱검 및 홉 추출물을 포함하는 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 구체적으로, 본 발명에 따른 방법으로 제조된 비피도박테리움 롱검 및 홉 추출물, 대추 추출물 및 아로니아 추출물 중 어느 하나 이상을 포함하는 식품 조성물은 아토피와 당뇨를 개선시키는 효과가 있어, 이를 당뇨 또는 아토피 예방 또는 개선용 식품 또는 화장료 조성물, 특히 유제품으로 이용할 수 있다.

Description

비피도박테리움 롱검 및 홉 추출물을 포함하는 항당뇨 또는 항아토피용 유제품{Antidiabetic or antiatopic dairy products comprising Bifidobacterium longum and hop extract}
비피도박테리움 롱검 및 홉 추출물을 포함하는 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
피부는 인체 외부를 덮고 있는 기관으로, 사람의 피부는 보호막으로써 기능을 할 뿐 아니라, 인체의 내부로 물이 침투하는 것을 막고, 체온을 조절하며, 해로운 박테리아가 인체에 침입할 수 없도록 1차 면역 장벽을 형성한다.그러나 이러한 피부의 장벽기능은 피부 내·외의 다양한 자극으로 인해, 피부가 손상되어, 건조해지거나, 피부의 염증반응을 발생시키기도 하며, 이때 발생하는 초기 염증 반응을 효과적으로 제어하지 못할 경우, 심각한 피부염 등으로 악화될 수 있다.
상기 피부염에는 크게는 아토피성 피부염, 접촉성 피부염, 및 지루성 피부염등으로 나뉘며, 피부염을 겪는 사람들의 고통은 가려움증, 홍반, 부종 및 진물 등에 의한 고통에 한정되지 않고, 외부의 시선 등으로 인한 사회적 적응을 곤란하게 하는 정신적 고통까지 겪게 한다.
아토피성 피부염(Atopic Dermatitis, "AD")은 만성적이고 재발성의 염증성 피부질환으로 소양증과 피부건조증, 특징적인 습진을 동반한다. 아토피성 피부염은 세계적으로 급증하는 추세이며 유병률이 인구의 20%라는 보고도 있다. 종래에는 피부염 치료를 위한 다양한 의약품 및 연고제 등이 제공되고 있으나, 여러 의약품을 복용하고 있거나, 의약품에 대한 부담을 가진 사람들에게는 이러한 접근이 어려울 수 있다.
한편, 당뇨병(Diabetes)은 대표적인 만성 성인병의 하나이다. 우리나라의 당뇨병 환자는 전체 인구의 약 5%정도로 최소한 250만명으로 추정되고 있다. 당뇨병은 혈중에 있는 당분이 인슐린 분비의 부족이나 인슐린의 작용 및 기능 부족으로 인해 에너지로 사용되지 못하고 혈액에 남아 있게 되는 질병이다. 당뇨병의 원인으로는 식생활의 서구화, 비만증, 운동부족, 스트레스 등을 들을 수 있다. 현재 미국, 유럽 및 일본과 같은 선진국에서는 비만 및 당뇨병의 증가로 인한 사회 경제적인 파장이 엄청나며, 한국의 경우도 경제적 발전으로 인해 당뇨병 환자가 급속도로 증가하여 2025년경에는 3억명 이상의 환자가 발생할 것으로 예측된다.
당뇨병은 크게 인슐린 의존성인 제1형 당뇨병과 비의존성 제2형 당뇨병으로 나눌 수 있다. 인슐린 저항성은 제2형 당뇨병 병인의 주요 요소로서, 제2형 당뇨병 환자의 90% 이상에서 나타나며, 고혈당이 나타나기 수년 전부터 선행되는 것으로 생각된다. 많은 경우 비만을 동반하는 제2형 당뇨병은 혈중 내 지방산의 증가로 인하여 인슐린저항성이 유도되어 포도당 대사에 이상이 발생하여 결국 혈중 내 혈당이 높아지는 질환이며, 아울러, 췌장 소도의 기능 부전 및 이로 인한 인슐린 분비의 이상과 신호 전달 이상이 제2형 당뇨병의 원인으로 또한 생각된다.
이에, 본 발명자들은 아토피성 피부염 및 당뇨병에 유용한 기능성 식품을 개발하기 위하여 연구하던 중, 비피도박테리움 롱검 균주 및 홉, 아로니아 또는 대추 추출물을 혼합한 조성물이 아토피 및 당뇨병 증상을 억제하는 효과가 있음을 확인함으로써, 상기 조성물을 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 식품 또는 화장품으로서 유용하게 이용될 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
대한민국등록특허 제10-1250463호
본 발명의 목적은 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 식품 또는 화장료 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주; 및 홉(Humulus lupulus) 추출물을 포함하는 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 살균된 원유에 우유 발효용 유산균, 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주 및 홉(Humulus lupulus) 추출물을 첨가하고 30 내지 50℃의 온도에서 3 내지 10시간 배양하여 발효유를 제조하는 단계;를 포함하는 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 유제품의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주; 및 홉(Humulus lupulus) 추출물을 포함하는 아토피의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 비피도박테리움 롱검 및 홉 추출물, 대추 추출물 및 아로니아 추출물 중 어느 하나 이상을 포함하는 식품 조성물은 아토피와 당뇨를 개선시키는 효과가 있어, 이를 당뇨 또는 아토피 예방 또는 개선용 식품 또는 화장료 조성물, 특히 유제품으로 이용할 수 있다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 식품 조성물
본 발명은 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주; 및 홉(Humulus lupulus) 추출물을 포함하는 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 식품 조성물은 대추(Zizyphus jujuba) 및 아로니아(Aronia melanocarpa) 중 1종 이상의 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다. 바람직하게는, 대추 추출물 또는 아로니아 추출물 중 1종을 더 포함하거나, 대추 추출물 및 아로니아 추출물 모두를 더 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주는 신생아로부터 분리된 균주인 것일 수 있다. 한국등록특허 제10-1250463호에는 신생아 분변에서 분리한 내산소성 비피도박테리움 롱검 비피더스 유산균 및 이를 이용한 프로바이오틱 조성물이 게재되어 있다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 홉(hop, Humulus lupulus)은 뽕나무과에 속하는 숙근성의 덩굴식물로서, 맥주의 원료로 사용되어 왔다. 홉은 루풀린(lupulin) 성분을 포함하며, 이는 휴물렌(Humulen), 미르센(Myrcene), 휴물론(Humulon), 루풀론(Lupulon), 호프레신 등 의 복잡한 혼합물이다. 홉의 루풀린 성분으로 인한 독특한 향기와 쓴맛은 관능적으로 맥주의 독특한 향기와 상쾌한 맛을 나게 하며, 쌉쌀한 맛과 방부의 효과는 물론 거품을 잘 일어나게 하며, 항균작용, 진정작용, 방부효과 등의 기능성을 갖게 한다. 또한 홉의 탄닌 성분이 보리의 구수한 맛과 조화를 이루어 기름진 음식과 함께 섭취할 경우 느끼함을 감소시키는 역할을 한다. 홉은 진정 작용과 항균 작용이 우수하고, 생식기, 비뇨기 및 내분비 계통에도 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다. 또한, 화장품 원료로서의 홉은 수렴 효과 및 자극 완화 효과를 위하여 사용되고 있다. 본 발명에서 이용되는 '홉'은 홉의 다양한 기관(예: 잎, 꽃, 줄기 및 과실 등)을 이용하는 것일 수 있고, 바람직하게는 미성숙의 암꽃 이삭 또는 열매를 의미하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 대추(jujube, Zizyphus jujuba)는 갈매나무과(Rhamnace)의 지지푸스(Zizyphus)속 낙엽활엽교목의 열매로 북아프리카와 서유럽의 원산지이다. 대추의 약용성분으로는 각종 스테롤, 알칼로이드, 사포닌, 비타민, 세로토닌(serotonin), 유기산, 지방산류, 폴리페놀, 히드록시메틸푸프푸랄, 플라보노이드 및 아미노산류 등이 보고되어 있다. 대추는 예로부터 건강식품으로서 영양성분이 풍부하며 한약재로 사용하고 있으며, 대추는 강장작용, 항암, 항염증, 결핵, 기관지염 및 신경쇠약 치료효과 등의 효능이 있다는 것으로 알려져있다. 대추는 과용으로 섭취하여도 부작용이 없고 건강 기능성 물질이 다량 함유되어 있어 약선식품으로 이용되고 있다. 본 발명에서 이용되는 '대추'는 대추 열매를 의미하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 아로니아(Aronia melanocarpa)는 장미과에 속하는 베리류로서, 동북 아메리카 및 동유럽에서 자생하고 있다. 검붉은색을 띠는 아로니아는 근래에는 전 세계에 널리 재배되고 있으며, 또한 원예종에서 2품종간에 교배육종으로 재배되고 있다. 아로니아는 특히, 안토시아닌이 자연계 식물들 중에서 가장 높은 군에 속한다고 알려져있다. 안토시아닌 중에서도 Cyanidin-3-galactoside, Cyanidin-3-glucoside, Cyanidin-3-arabinoside, Delphinidin-3-glucoside 등 많은 종류의 안토시아닌이 함유 되어있으며, 그 밖에도 다량의 페놀이 함량되어 있다고 알려져있다. 이러한 아로니아는 연구를 통해 뛰어난 항산화 효과와 항염증과 면역의 증강에 효능을 보일 뿐만 아니라, 당뇨 및 각종 심혈관계 질환과 향장 관련 효능에 대해서도 많은 연구가 이루어졌다. 본 발명에서 이용되는 '아로니아'는 아로니아 열매를 의미하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 상기 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리하는 방법을 사용하여 추출물을 분리 및 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된 추출물은 적절한 용매를 이용하여 상기의 방법으로 준비된 유효성분 원료를 그대로 또는 분쇄하여 추출할 수 있다. 이때 추출물을 수득하기 위해 사용할 수 있는 적절한 용매로는 당업계에서 허용되는 용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있다. 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
바람직하게는 상기 홉 추출물, 대추 추출물 및 아로니아 추출물은 각각 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 다가 알코올, 탄화수소계 용매 또는 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출용매를 사용하여 추출한 것일 수 있고, 더 바람직하게는 물 또는 에탄올로부터 선택되는 1종 이상의 추출용매를 사용하여 추출한 것일 수 있다.
추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다. 본 발명의 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다.
예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 추출물은 상기한 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 원심분리, 여과, 농축후 동결 건조하여 냉장실에 보관하면서 그대로 사용할 수도 있고, 상기 1차 추출물을 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수 있다. 또한, 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography)등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다.
따라서 본 발명에 있어서 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 식품은 유제품 또는 기능성 음료인 것일 수 있고, 바람직하게는 유제품인 것일 수 있다. 상기 유제품은 예를 들어, 우유(milk), 발효유, 액상 요구르트, 호상 요구르트, 요거트, 응유, 아이스크림, 발효 시리얼성 제품, 유(乳)성 분말, 치즈 및 스프레드로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있으나 이에 제한되지는 않으며, 바람직하게는 요거트(yogurt)인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 식품이 유제품인 경우, 본 발명의 비피도박테리움 롱검 균주 및 홉 추출물, 대추 추출물 및 아로니아 추출물 중 1종 이상의 추출물을 혼합(mix)하여 유제품에 단순 첨가하는 것일 수 있고, 우유에 균주를 접종하는 단계에서 첨가하여 함께 배양(발효)하는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서는, 요거트 제조시 원유 발효를 위한 유산균 첨가 단계에서 비피도박테리움 롱검 균주 및 홉 추출물을 첨가하여 제조된 요거트와 이에 대추 추출물 및 아로니아 추출물 중 1종 이상의 추출물을 더 첨가하여 제조된 요거트가 비피도박테리움 롱검 균주, 홉 추출물, 대추 추출물 및 아로니아 추출물을 각각 첨가하여 제조된 요거트보다 아토피 및 당뇨 증상을 억제 또는 개선시키는 효과가 우수함을 확인하였다(실험예 1 내지 4 참조).
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 비피도박테리움 롱검 균주는 동견건조분말 형태로 식품 조성물에 포함되는 것일 수 있고, 상기 균주를 배양하여 얻은 배양물 또는 배양액 형태로 식품 조성물에 포함되는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 식품 조성물에 포함된 비피도박테리움 롱검 균수는 4.0×108 내지 10.0×108 CFU/g가 적합할 수 있고, 상기 균수가 포함된 경우, 조직감 및 맛이 더욱 우수할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 이용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 통상의 음료 또는 유제품과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로오스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 이용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 식품 조성물 100㎖당 일반적으로 약 001~004g, 바람직하게는 약 002~003g이다.
상기 외에 본 발명에 따른 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 이용되는 탄산화제 등에 첨가할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육에도 첨가할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 이용할 수 있다.
당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 유제품의 제조방법
본 발명은 살균된 원유에 우유 발효용 유산균, 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주 및 홉(Humulus lupulus) 추출물을 첨가하고 30 내지 50℃의 온도에서 3 내지 10시간 배양하여 발효유를 제조하는 단계;를 포함하는 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 유제품의 제조방법을 제공한다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 대추(Zizyphus jujuba) 및 아로니아(Aronia melanocarpa) 중 1종 이상의 추출물을 더 첨가하고 배양하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 유제품은 우유(milk), 발효유, 액상 요구르트, 호상 요구르트, 요거트, 응유, 아이스크림, 발효 시리얼성 제품, 유(乳)성 분말, 치즈 및 스프레드로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있으나 이에 제한되지는 않으며, 바람직하게는 요거트(yogurt)인 것일 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 '우유 발효용 유산균'은 원유를 발효시켜 발효유를 제조하기 위한 목적으로 첨가되는 유산균을 의미한다. 상기 유산균은 바람직하게 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacilus bulgaricus), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실루스 델브루에키이(Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus), 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides), 비피도박테리움 비피둠(Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis), 비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve), 스타필로코쿠스 아우레스(Staphylococcus aureus), 스타필로코쿠스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis), 스트렙토코쿠스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 및 스트렙토코쿠스 뮤탄스(Streptococcus mutans)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직하게는 상기 유제품이 요거트인 경우 스트렙토코쿠스 써모필러스(Streptococcus thermophilus), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus) 및 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상을 사용하는 것일 수 있고, 상기 유제품이 치즈인 경우 락토바실루스 델브루에키이(Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus) 및 스트렙토코쿠스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 중 어느 하나 이상을 사용하는 것일 수 있다. 본 발명의 일실시예에서는 스트렙토코쿠스 써모필러스(Streptococcus thermophilus), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus) 및 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis)가 혼합된 동결건조유산균(TYPE: Lyofast SAB 440 B, SACCO S.R.L., 이탈리아)을 구입하여 요거트 제조에 사용하였다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 비피도박테리움 롱검 균주는 우유를 발효시키는 목적으로도 이용할 수 있으나, 본 발명에서는 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선 기능을 부여하기 위한 목적으로 첨가되는 것이다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 비피도박테리움 롱검 균주 및 홉 추출물, 대추 추출물 및 아로니아 추출물 중 1종 이상의 추출물을 혼합(mix)하여 유제품 완제품에 단순 첨가하는 것일 수 있고, 우유에 균주를 접종하는 단계에서 첨가하여 함께 배양(발효)하는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 비피도박테리움 롱검 균주는 동견건조된 분말 형태로 첨가되는 것일 수 있고, 상기 균주를 배양하여 얻은 배양물 또는 배양액 형태로 첨가하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 원유 전체 100 중량부 기준으로, 비피도박테리움 롱검 균주 1 내지 5 중량부, 홉 추출물, 대추 추출물 및 아로니아 추출물 각각 0.1 내지 3 중량부 첨가하는 것일 수 있고, 바람직하게는 피비도박테리움 롱검 균주 2 내지 4 중량부, 홉 추출물, 대추 추출물 및 아로니아 추출물 각각 0.5 내지 2.5 중량부 첨가하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 배양은 30 내지 50℃의 온도에서 3 내지 10시간 배양하는 것일 수 있고, 바람직하게는 35 내지 45℃의 온도에서 3 내지 7시간 배양하는 것일 수 있다. 30℃ 이하에서 발효시키는 경우 유산균에 의한 발효의 속도가 느린 문제점이 있으며, 50℃ 이상에서는 유산균의 생육이 억제되어 발효가 제대로 일어나지 않는다. 또한, 3시간보다 적게 발효시키면 발효가 충분히 일어나지 않고, 10시간이 넘게 발효시키는 경우 유산균의 발효산물, 특히 유기산이 많이 만들어져 식감이 떨어지는 단점이 있다.
아토피의 예방 또는 개선용 화장료 조성물
본 발명은 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주; 및 홉(Humulus lupulus) 추출물을 포함하는 아토피의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 화장료 조성물은 대추(Zizyphus jujuba) 및 아로니아(Aronia melanocarpa) 중 1종 이상의 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다. 바람직하게는, 대추 추출물 또는 아로니아 추출물 중 1종을 더 포함하거나, 대추 추출물 및 아로니아 추출물 모두를 더 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 화장수, 영양로션, 영양크림, 수분크림, 마사지크림, 에센스, 페이스트, 마스크팩, 패치, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 클렌저, 오일, 파운데이션, 메이크업 베이스, 왁스 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 제형인 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 상기한 필수 성분 이외의 다른 성분들은 기타 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 바람직하게는 화장품학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액 마이크로 에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및/또는 바이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소적용 또는 전신적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있으며, 이들 조성물은 당해 분야의 통상적 방법에 따라 제조될 수 있다.
또한, 상기 화장료 조성물은 본 발명의 추출물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 이들 보조제는 화장품학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.
이하, 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
< 제조예 1> 비피도박테리움 롱검 동결건조분말의 제조
건강한 한국인 영아의 분변으로부터 분리된 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) KACC 91563은 농촌진흥청(Rural Development Administration, RDA) 국립축산과학원(National Institute of Animal Science, NIAS)으로부터 제공되었다.
상기 비피도박테리움 롱검 KACC 91563 2×107 cfu/㎖의 균수를 BL 액체배지에 접종하고, 배양기에서 혐기조건 하에서 37℃에서 24시간 동안 정치배양(batch culture)하였다. 이것을 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하고, 인산완충식염수(phosphate buffered saline; PBS)로 균체를 세척한 후 다시 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 수거한 균체는 보존제인 탈지분유(skim milk) 분말과 1:1의 중량비로 섞은 후 동결건조하여, 균수 1.5×108 cfu/g의 비피도박테리움 롱검 KACC 균주가 포함된 비피도박테리움 롱검 동결건조분말을 제조하였다.
본 발명의 비피도박테리움 롱검 균주는 상기와 같이 동결 건조된 분말 형태 또는 배양물 형태로 제공될 수 있다.
< 제조예 2> 홉 추출물의 제조
50mesh 이하로 분쇄된 홉 건조 분말 20g에 추출용매로 50% 에탄올 400ml을 넣고 shaking water bath(KMC-1205SW1, Vision, Daejeon, Korea)에서 70℃, 6~12시간 추출하여 추출액을 얻었다. 상기 추출액을 mesh filter(stainless steel filter mesh, R&K, China, 4~400mesh)로 여과하였다. 상기 여과한 여과액을 rotary evaporator(DL10-3000, Greatwall, 20L)를 이용하여 용매를 모두 제거하여 홉 추출물을 제조하였다. 추출물을 멸균 처리(KRS A-1,Health up, Korea)된 용기에 옮겨 담아 5℃에서 냉장보관하였다.
< 제조예 3> 아로니아 추출물의 제조
50mesh 이하로 분쇄된 아로니아 열매 건조 분말 20g에 추출용매로 50% 에탄올 400ml을 넣고 shaking water bath(KMC-1205SW1, Vision, Daejeon, Korea)에서 70℃, 6~12시간 추출하여 추출액을 얻었다. 상기 추출액을 mesh filter(stainless steel filter mesh, R&K, China, 4~400mesh)로 여과하였다. 상기 여과한 여과액을 rotary evaporator(DL10-3000, Greatwall, 20L)를 이용하여 용매를 모두 제거하여 아로니아 추출물을 제조하였다. 추출물을 멸균 처리(KRS A-1,Health up, Korea)된 용기에 옮겨 담아 5℃에서 냉장보관하였다.
< 제조예 4> 대추 추출물의 제조
50mesh 이하로 분쇄된 대추 열매 건조 분말 20g에 추출용매로 50% 에탄올 400ml을 넣고 shaking water bath(KMC-1205SW1, Vision, Daejeon, Korea)에서 70℃, 6~12시간 추출하여 추출액을 얻었다. 상기 추출액을 mesh filter(stainless steel filter mesh, R&K, China, 4~400mesh)로 여과하였다. 상기 여과한 여과액을 rotary evaporator(DL10-3000, Greatwall, 20L)를 이용하여 용매를 모두 제거하여 대추 추출물을 제조하였다. 추출물을 멸균 처리(KRS A-1,Health up, Korea)된 용기에 옮겨 담아 5℃에서 냉장보관하였다.
< 실시예 비교예 > 비피도박테리움 롱검 및 홉, 아로니아 , 대추를 포함하는 요거트의 제조
원유를 6℃ 이하의 온도를 유지하여 원유탱크에 투입한 다음, 여과망을 이용하여 이물질을 제거하고 균질기에서 지방구의 균질화를 실시하였다. 그 다음 원유를 90℃에서 10분간 살균한 다음 43℃의 온도가 되도록 살균된 원유를 냉각하였다. 냉각된 원유 100kg에 계량된 우유 발효용 유산균 3.2g 및 상기 제조예 1의 비피도박테리움 롱검 동결건조분말 및 제조예 2 내지 4의 홉, 아로니아 또는 대추 추출물을 하기 표 1과 같이 첨가한 다음 41℃에서 5시간 동안 배양함으로써, 원유를 발효시켜 발효유를 수득하였다. 이때, 상기 우유 발효용 유산균으로는 동결건조유산균(TYPE: Lyofast SAB 440 B, SACCO S.R.L., 이탈리아)을 구입하여 사용하였다. 배양이 완료된 발효유에 자이로즈설탕 3kg 및 올리고당 650ml를 첨가하여 교반기로 교반시킨 다음, 0~5℃ 로 냉각하여 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4의 요거트를 제조하였다.
(g/100kg) 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 비교예 1 비교예 2 비교예 3 비교예 4
비피도박테리움 롱검 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 - - -
홉 추출물 1.5 1.5 1.5 1.5 - 1.5 - -
아로니아 추출물 - 1.5 - 1.5 - - 1.5 -
대추 추출물 - - 1.5 1.5 - - - 1.5
< 실험예 1> 요거트의 아토피 개선 효과 평가(동물 모델 실험)
아토피성 피부염이 유발된 6주령의 수컷 NC/Nga 마우스(Shizuoka Laboratory Animal Center (Tokyo, Japan)) 모델에 대하여 상기 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4의 요거트의 아토피 개선 효능을 양성 대조군 및 음성 대조군과 비교 평가하였다.
모든 동물 절차 및 실험은 동물실험윤리위원회(IACUC)에 의해 승인된 실험동물 사용 및 사육 관리 규정을 준수하여 진행하였다. 실험동물들을 사육상자에 각각 넣고 1주일간 환경에 적응시켰고, 이 기간 동안 특별한 증상을 보이지 않는 동물들만 실험에 사용하였다. 적응기간 동안, 동물들은 온도는 섭씨 22±2℃, 상대습도 40~60%, 명/암 사이클은 12시간/12시간에서 사육하였고, 시판되는 설치류 사료 및 물은 자유롭게 섭취할 수 있게 하였다.
마우스는 DNCB 처리 2일전 에테르로 마취하여 가위와 면도기로 털을 면도하였다. DNCB(1-클로로-2,4-디니트로벤젠)(Sigma-Aldrich, USA)에 대한 민감화 및 반복된 접종으로 아토피성 피부염과 유사한 피부병변을 유발하였다. 구체적으로 아토피성 피부염을 유발하기 위하여, 쥐를 4주 동안 1%의 DNCB 용액으로 4회 처리하였다. DNCB 용액은 DNCB에 아세톤: 올리브 오일을 3:1의 비율로 첨가하여 제조하였다.
긁음 행동 시험을 위하여, 4주간 DNCB로 아토피성 피부염을 유발시킨 NC/Nga 마우스에 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4의 요거트를 각각 음수(증류수)에 섞어 300㎎/㎏(body weight) 농도로 주당 3회씩 경구투여하였다. 음성 대조군은 아토피성을 유발시키지 않은 거짓 대조군(sham group)에 해당되는 정상군이고, 양성 대조군은 1-클로로-2,4-디니트로벤젠(DNCB)(Sigma-Aldrich, USA)에 의해 아토피성 피부염이 유발된 NC/Nga 마우스 그룹이다. 상기 음성 대조군 및 양성 대조군은 증류수를 경구투여하였다. 시험결과의 통계학적 유의성을 평가할 수 있도록 각 시험군당 개체 수는 6마리로 하였다.
긁는 횟수(스크래치 스코어)는 1주일 간격으로 측정하였으며, 하나의 그룹에서 3마리의 쥐를 무작위로 선택하여 새로운 케이지로 이동시킨 후, 머리, 목, 복부 피부, 위 및 코에 대해서 10분 동안 쥐가 긁은 횟수를 세어 평균값으로 측정하였다. 코, 귀, 및 복부를 뒷발로 긁는 동작을 기록하고, 배와 등 피부를 핥는 동작은 기록하지 않았다. 처리 부위에 대한 아토피 개선 효과를 스크래칭 스코어로 평가하였다. 측정된 스크래치 스코어 평균값(회/min) 및 상기 측정값으로부터 6주 후 대비 7주 후 및 10주 후의 긁기 억제율(%)을 계산하여, 하기 표 2에 나타내었다.
스크래칭 스코어
(회/10min)
실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 비교예 1 비교예 2 비교예 3 비교예 4 양성대조군 음성대조군
5주 후 3.0 3.3 3.7 3.7 3.0 3.3 3.3 3.7 3.0 3.3
6주 후 64.3 63.7 63.7 63.3 65.0 65.3 65.3 65.3 65.7 5.3
7주 후 54.6 51.7 52.3 48.0 60.7 62.0 62.3 62.7 64.3 5.0
8주 후 44.7 40.7 43.0 21.7 52.3 56.7 58.3 58.7 63.0 4.7
9주 후 39.0 34.0 34.7 12.3 50.7 55.0 56.7 56.3 60.3 5.0
10주 후 35.3 24.7 25.0 5.7 48.3 53.3 55.7 55.3 59.7 3.7
억제율 (6주후 대비 10주후) 15.1% 18.8% 17.9% 24.2% 6.6% 5.1% 4.6% 4.0% 2.1% -
억제율 (6주후 대비 10주후) 45.1% 61.2% 60.8% 91.0% 25.7% 18.4% 14.7% 15.3% 9.1% -
10주간의 각 그룹의 피부 병변의 심각도를 육안으로 관찰해본 결과, 아토피 유발을 위해 DNCB 처리를 시작한지 5주 후부터 쥐의 피부에 병변이 발생하기 시작하였고, 6주 후가 되었을 때 아토피 증상이 가장 심각하게 나타났다. 이에 따라, 상기 표 2에 나타난 바와 같이, 음성 대조군에서는 아토피성 피부염의 지표인 스크래치 스코어가 4주에서 10주 사이에 거의 일정하게 유지된 반면, 음성대조군을 제외한 모든 아토피 유발 그룹에서 긁는 횟수가 5주 후 대비 6주 후에 현저하게 증가하였다. 5주 후부터 아토피 유발 물질 처리를 중단함에 따라, 시간이 지날수록 자연적으로 아토피 발생이 감소하면서 6주 후에 급증된 긁는 횟수가 10주 후에는 약간 감소되었다. 그러나 이 경우에 양성대조군과 비교예 1 내지 4의 요거트를 투여한 그룹에 비하여, 실시예 1 내지 4의 요거트를 투여한 그룹에서 스크래칭 스코어가 현저히 낮게 감소하였고, 특히 실시예 4의 요거트를 투여한 그룹에서 쥐의 긁기는 10주 후 거의 완전하게 억제되었다.
이러한 결과로부터 상기 실시예 1 내지 4의 요거트는 아토피 유발된 쥐의 긁는 횟수를 현저히 감소시키는 것으로 나타남에 따라, 아토피 개선 효과를 가짐을 확인하였다.
< 실험예 2> 요거트의 아토피 개선 효과 평가(패널테스트)
상기 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4의 요거트를 아토피성 피부염 환자에 적용하여 아토피 개선 효과를 살펴보았다.
대상자는 실험에 들어가기 한달 전에 비스테로이드성 항염증제 및 기타 스테로이드 제제를 적용하지 않은 사람들로 선정하였고, 5세부터 40세 정도의 아토피 환자로서, 2년 이상 아토피성 피부염을 앓고 있는 환자 60명을 대상으로하여, 무작위로 10명씩 나누어 각각 상기 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4의 요거트를 1일 1회씩 90일간 음용케한 후, 홍반, 염증 및 가려움증에 대한 개선 정도를 평가하였다.
홍반, 염증 및 가려움증에 대한 개선 효능 평가에 대한 점수 기준은 5점 평가법을 이용하였는데, 다음과 같다. 점수기준 : 1점 - 아주 악화되었다(처음보다 50% 이상 악화), 2점 - 조금 악화되었다(조금이나마 악화), 3점 - 차이가 없었다, 4점 - 약간 개선되었다(조금이나마 개선), 5점 - 아주 많이 개선되었다(처음보다 50% 이상 개선). 점수 평가는 객관성을 유지하기 위해 피실험자와 실험의뢰자가 공동으로 평가하도록 하였으며, 악화 또는 개선의 정도는 환부를 보고 3자의 종합판단에 의거 결정하였다. 각 평가 결과 점수에 대한 평균 값을 하기 표 3에 나타내었다.
실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 비교예 1 비교예 2 비교예 3 비교예 4
홍반 4.30 4.45 4.40 4.80 3.45 3.30 3.25 3.25
염증 4.25 4.40 4.45 4.80 3.40 3.25 3.20 3.20
가려움증 4.35 4.40 4.40 4.85 3.60 3.30 3.25 3.20
상기 표 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 실시예 1 내지 4의 요거트가 비교예 1 내지 4의 요거트보다 홍반, 염증 및 가려움증에 대한 개선 효과가 더 높은 것으로 나타났다. 특히, 비피도박테리움 롱검 균주, 홉 추출물, 대추 추출물 및 아로니아 추출물을 첨가하여 제조된 실시예 4의 요거트가 아토피 개선 효과가 가장 우수함을 확인하였다.
< 실험예 3> 요거트의 항당뇨 효과(동물 모델 실험)
5주령의 C57BLKS/J-db/db(db/db) 마우스(2형 당뇨 및 비만)를 ㈜중앙실험동물(서울, 대한민국)로부터 구매하여 항당뇨 효과 확인 실험을 진행하였다. 실험동물 사육실의 적절한 온도(24±2℃)와 습도(55±5℃)를 유지하며 12시간 주기로 명암을 조절하였다. 모든 동물 절차 및 실험은 동물실험윤리위원회 (IACUC)에 의해 승인된 실험동물 사용 및 사육 관리 규정을 준수하여 진행하였다.
상기 마우스를 대상으로 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4의 요거트 처리군 및 요거트 무처리군으로 실험군(각 군당 6마리)을 나누었고, 각 요거트는 300mg/kg(body weight)으로 100μL씩 매일 오전 9-10시 사이에 경구투여용 존데를 사용하여 8주간 투여하였으며, 무처리군은 동일한 양의 증류수를 경구 투여하였다. 이때, 모든 실험군의 사료는 동일하게 급여하였다.
8주간 경구투여 후, 혈당 측정기를 이용하여 혈액 내 공복시의 혈당량(mg/dl)을 측정하여 평균값을 계산하였고, 무처리군 당뇨 흰쥐 대비 요거트 처리군의 혈당 감소율을 계산하였다. 또한, 마우스 단일클론(monoclonal) 항-렛트(anti-rat) 인슐린 항체가 코팅된 렛트/마우스 인슐린 ELISA 키트(Merck Millipore, 미국)를 이용하여 혈중 인슐린 함량(ng/ml)을 측정하여 평균값을 계산하였고, 무처리군 당뇨 흰쥐 대비 요거트 처리군의 인슐린 분비 증가율을 계산하였다. 혈당, 혈당 감소율, 혈중 인슐린 함량 및 인슐린 증가율 측정 결과는 하기 표 4에 나타내었다.
무처리군 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 비교예 1 비교예 2 비교예 3 비교예 4
혈당(mg/dl) 652.8 578.2 547.2 549.5 442.2 606.0 626.8 628.0 628.5
혈당감소율(%) - 11.4 16.2 15.8 32.3 7.2 4.0 3.8 3.7
인슐린(ng/ml) 1.18 1.62 1.83 1.79 2.65 1.36 1.30 1.29 1.28
인슐린증가율(%) - 37.3 55.1 51.7 124.6 15.3 10.2 9.3 8.5
그 결과 상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 요거트를 섭취하지 않은 무처리군(652.8mg/dl)에 비해 요거트를 복용한 당뇨 흰쥐의 혈당은 606.0 내지 628.5mg/dl로 감소하였고, 실시예 1 내지 4의 요거트를 복용한 당뇨 흰쥐 혈당은 비교예 1 내지 4의 요거트를 복용한 당뇨 흰쥐 혈당보다 1.5배 이상 감소하는 것을 확인하였다.
또한, 무처리군 당뇨 흰쥐의 혈중 인슐린 함량은 1.18ng/ml로 확인된 것에 비해, 본 발명에 따른 요거트를 복용한 당뇨 흰쥐는 1.28 내지 2.65ng/ml로 나타나 요거트 복용에 의해 인슐린 분비가 증가한 것으로 나타났으며, 실시예 1 내지 4의 요거트를 복용한 당뇨 흰쥐의 혈중 인슐린 함량은 비교예 1 내지 4의 요거트를 복용한 당뇨 흰쥐보다 2배 이상 증가하는 것을 확인하였다.
이러한 결과로부터 상기 실시예 1 내지 4의 요거트는 혈당 증가 억제 및 인슐린 분비 증가를 통해 항당뇨 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였다.
< 실험예 4> 요거트의 항당뇨 효과(패널테스트)
본 발명에 따른 요거트를 음용시 혈당 변화에 미치는 효과를 측정하기 위하여, 공복 시 혈당 지수가 100 mg/dL 이하인 정상인 군 20~40 대 남자 5명, 여자 5명을 대상으로 하기와 같이 실험을 수행하였다.
상기 요거트의 음용 방식은, 우선 피실험자들에게 동일한 식사를 제공하고 식후 상기 요거트를 섭취하게 하는 방식으로 진행하였다. 피실험자에게 제공된 식사는 식빵 75g, 햄 20g, 양상추 20g, 딸기쨈 20g, 게맛살 30g 및 체다치즈 10g으로 구성하였으며, 우리나라 식품 성분표(Can pro 30, 한국영양학회)를 이용하여 분석한 결과, 상기 식사는 총 3564 kcal로, 총 열량 중 당질 5957%, 단백질 1814%, 지질 2227%로 구성되었다. 상기 식사를 제공한 후, 바로 상기 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4의 요거트를 각각 음용하도록 하였다. 식사 전 혈당 및 요거트 음용후 2시간 동안 30분 간격으로 혈당을 측정하여, 혈당(mg/dL) 변화를 하기 표 4에 나타내었다.
혈당
(mg/dL)
실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 비교예 1 비교예 2 비교예 3 비교예 4
0분(식사전) 96.1 93.4 94.5 93.6 92.8 95.4 94.6 93.4
30분후 148.2 142.5 143.2 123.7 173.8 179.2 179.3 178.6
60분후 131.2 123.8 126.5 106.2 157.6 164.2 165.3 166.2
90분후 122.4 114.3 116.5 100.6 143.8 153.3 152.4 150.4
120분후 117.8 105.6 109.5 95.9 135.2 144.7 145.7 146.8
당뇨병의 주된 원인 중 하나는 인슐린의 조절 능력이 떨어지는 것에 있으며 이로 인해 식후에는 혈당이 급격하게 증가하여 인슐린이 과다 분비되는 것이 주된 문제이다.
실시예 1 내지 4는 비교예 1 내지 4와 비교할 때, 식사로 인해 급격히 증가하는 혈당을 낮추어주는 것으로 나타났으며, 특히 실시예 2 내지 4의 경우 식후 급격한 혈당 상승을 가장 많이 억제해주는 것으로 나타났다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (7)

  1. 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주; 및 홉(Humulus lupulus) 추출물을 포함하는 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 식품 조성물은 대추(Zizyphus jujuba) 및 아로니아(Aronia melanocarpa) 중 1종 이상의 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 식품 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 식품은 유제품인 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
  4. 살균된 원유에 우유 발효용 유산균, 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주 및 홉(Humulus lupulus) 추출물을 첨가하고 30 내지 50℃의 온도에서 3 내지 10시간 배양하여 발효유를 제조하는 단계;를 포함하는 당뇨 또는 아토피의 예방 또는 개선용 유제품의 제조방법.
  5. 제4항에 있어서,
    대추(Zizyphus jujuba) 및 아로니아(Aronia melanocarpa) 중 1종 이상의 추출물을 더 첨가하고 배양하는 것을 특징으로 하는, 제조방법.
  6. 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum KACC 91563) 균주; 및 홉(Humulus lupulus) 추출물을 포함하는 아토피의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 대추(Zizyphus jujuba) 및 아로니아(Aronia melanocarpa) 중 1종 이상의 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
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