KR102116046B1 - 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 오메가3 지방산, 홍삼추출물 및 천연 복합 추출물을 포함하며, 상기 천연 복합 추출물은 원지 추출물 및 석창포 추출물을 포함하며, 상기 오메가3 지방산은 EPA(Eicosapentaenoic acid) 73 중량% 이상 포함하는 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 오메가3 지방산과 같은 천연물을 이용한 조성물로, 복용 시 부작용이 없고, 인지 장애 질환 예방 또는 치료 효과가 우수하며, 또한, 활성산소종의 제거, DNA 손상에 대한 항산화, ACE(Angiotensin Converting Enzyme) 효소 저해활성, AChE(acetylcholine esterase) 저해 활성, NO(Nitric oxide) 생성 억제활성, 산화질소 생성 효소 NOS-2 발현 증가활성 및 PC12세포에서 NF-κκB 전사활성 증가 효과가 우수하다.
본 발명은 오메가3 지방산과 같은 천연물을 이용한 조성물로, 복용 시 부작용이 없고, 인지 장애 질환 예방 또는 치료 효과가 우수하며, 또한, 활성산소종의 제거, DNA 손상에 대한 항산화, ACE(Angiotensin Converting Enzyme) 효소 저해활성, AChE(acetylcholine esterase) 저해 활성, NO(Nitric oxide) 생성 억제활성, 산화질소 생성 효소 NOS-2 발현 증가활성 및 PC12세포에서 NF-κκB 전사활성 증가 효과가 우수하다.
Description
본 발명은 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, EPA를 73 중량% 이상 포함하는 오메가3 지방산, 홍삼 추출물 및 천연 복합 추출물을 포함하여, 인지 장애 질환 예방 또는 치료 효과가 우수한 조성물에 관한 것이다.
사람의 뇌는 학습, 기억, 운동 등을 총괄하는 중요한 부위로서 신경세포들이 서로 연결되어 거대한 신경망이 형성되는데, 이 신경망이 학습과 기억을 포함하는 신경계적 기반이 된다.
하지만 다양한 원인에 의해 유해 활성산소종(Reactive Oxygen Species)이 과다하게 생성되어 체내에 축적되면, 세포에 산화적 손상을 주어 세포퇴화와 세포괴사 등을 유도한다. 정상적인 경우 체내 제거기전인 superoxide dismutase(SOD), catalase, carotenoid 및 glutathione 등에 의해 제거되지만, 체내에 남아있는 ROS는 뇌 신경 세포의 퇴화와 사멸을 유도하여 올바른 신경망 형성에 부정적으로 영향을 학습능력과 기억력을 저하시키며, 심할 경우 파키슨씨병, 알츠하이머와 같은 퇴행성 뇌질환을 유발시킨다.
또한 뇌의 학습, 기억과 같은 인지능력은 acetylcholine(ACh)과 같은 신경전달물질에 의해 나타난다. 신경세포 말단에서 분비되는 ACh는 학습과 같은 외부자극을 시냅스의 수용체를 통해 정상적으로 신호를 전달한 뒤 acetycholinesterase (AChE)에 의해 acetate와 choline으로 분해되어 다시 부분 재흡수된다. 이러한 과정을 cholinergic system이라 하며 알츠하이머 환자들의 대부분은 이 과정에서 심각한 문제가 일어난다고 알려져 있 다. ACh의 감소는 뇌의 인지능력을 손상시켜 정상적으로 작동하지 못하게 한다.
만병의 근원이라고 할 수 있는 ROS 역시 스트레스에 의해 생성이 촉진된다. 뿐만 아니라 angiotensin II는 고혈 압의 주된 원인인 스트레스에도 영향을 미친다는 연구결과가 있다. Nrf2의 항산화 target 유전자의 발현을 억제 시킴으로써 ROS의 수준을 증가시키고 NF-κκB signaling을 통해 superoxide dismutase (SOD)를 감소시켜 산화스 트레스를 유도한다.
주의력결핍과잉행동장애(Attention Deficit and Hyperactivity Disorder, 이하 ADHD)는 학령기 전후의 아동에 게서 흔히 나타나는 정신과적 질환으로, 부주의(Inattention), 과잉행동(Hyperactivity), 충동성(Impulsivity)이 주된 증상이다. 이와 같은 주의집중부족과 과잉활동은 아동의 학습장애를 비롯한 다양한 심리 사회적 장애들을 동반하며, 청소년기의 비행이나 일탈행동, 성인기에는 약물 남용 및 범죄 등을 야기시키는 원인이 될 수 있다고 보고되었다(Y. B. Lee, J. S. Shin, Korean journal of family social work, pp129-157, 2000, G. D. Kewley, British Medical Journal, 23, pp1594-1596. 1998, L. B. Silver, Attention-deficit hyperactivity disorder, Washington, DC.: American Psychiatry Press, Inc. 1992).
ADHD의 원인으로 유전적 요인(R. A. Barkley. Attention deficit hyperactivity disorder: A handbook of diagnosis and treatment. New York: Guilford Press. 1990), 납 수치와 인스턴트식품의 식품첨가물에 대한 반작용으로 보는 생화학적 요인(G. David, J. Neal, Abnormal Psychology. John Wilry & Sons. 1976), 뇌에 전달 하는 자극을 적절히 선택하는데 문제가 있다고 보는 견해 (이효신, 정서학습장애연구. 16), 환경적 요인 즉 부모와 자녀와의 관계나 부모의 사회적 지위, 임신 중 산모의 흡연과 알콜 남용 등을 언급하기도 하였으나 아직 원인에 대한 논의는 분분하다(H. Mang, H. Chung, The Journal of Elementary Education. 18, pp243-277, 2005). 그러나 사회심리적인 요인보다 신경생물학적 요인이 중요하다고 여겨지고 있으며 이에 따라 이 질환의 약물치료와 생물학적 요인에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다.
종래 유통되고 있는 ADHD 치료제의 경우, 불면, 식욕감퇴, 두통, 위통, 오심 등의 부작용과 틱장애를 악화시키는 문제가 있다. 또한, 어린이 돌연사에 대한 위험성이 제기되고 있는 실정이다.
이에, ADHD 및 인지 학습 능력 장애 질환의 예방 또는 치료를 위하여, 섭취시 부작용이 없고, ADHD 및 인지 학습 능력 장애 질환의 예방 또는 치료에 우수한 효과를 나타낼 수 있는 조성물의 제조가 필요하다.
본 발명의 목적은 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 오메가3 지방산과 같은 천연물을 이용한 조성물로, 복용 시 부작용이 없고, 인지 장애 질환 예방 또는 치료 효과가 우수한 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 활성산소종의 제거, DNA 손상에 대한 항산화, ACE(Angiotensin Converting Enzyme) 효소 저해활성, AChE(acetylcholine esterase) 저해 활성, NO(Nitric oxide) 생성 억제활성, 산화질소 생성 효소 NOS-2 발현 증가활성 및 PC12세포에서 NF-κB 전사활성 증가 효과가 우수한 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물은 오메가3 지방산, 홍삼추출물 및 천연 복합 추출물을 포함하며, 상기 천연 복합 추출물은 원지 추출물 및 석창포 추출물을 포함하며, 상기 오메가3 지방산은 EPA(Eicosapentaenoic acid) 73 중량% 이상 포함할 수 있다.
상기 인지 장애 질환은 알츠하이머병, 뇌혈관성 치매증, 피크병, 크루츠펠트-야곱병, 두부손상에 의한 치매 및 파킨슨 병, 주의력 결핍장애(ADHD), 시각적 감지능(visual perception) 결함, 우울증, 헌팅톤 무도병(Huntington's chorea) 및 노인성 치매(senile dementia)로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
상기 홍삼추출물은 인삼에 발효균을 접종하여 제조한 발효 홍삼일 수 있다.
상기 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물은 천연 추출물을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 식품 조성물은 상기 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 뇌기능 개선용 식품 조성물은 상기 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은 상기 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 포함할 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물은 오메가3 지방산, 홍삼추출물 및 천연 복합 추출물을 포함하며, 상기 천연 복합 추출물은 원지 추출물 및 석창포 추출물을 포함하며, 상기 오메가3 지방산은 EPA(Eicosapentaenoic acid) 73 중량% 이상 포함한다.
보다 구체적으로, 본 발명의 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물은 오메가3 지방산, 홍삼추출물 및 천연 복합 추출물을 포함한다.
상기 오메가3 지방산은 EPA(Eicosapentaenoic acid) 73 중량%을 포함하는 것을 특징으로 한다. 현재 유통되고 있는 오메가3 지방산은 EPA 및 DHA가 2:1로 구성되어, 오메가3 지방산 내에 DHA가 다량 포함되어 있다. 이러한 DHA는 ADHD와 연관성이 높지 않은 것으로, 실제 오메가3 지방산이 ADHD에 효과가 있는 것은 오메가3 지방산 내에 포함되어 있는 EPA 때문으로, 유통되는 오메가3 지방산은 EPA가 소량 포함되어 있어, ADHD에 직접적인 효과가 있지 않은 문제가 있다.
이에 본 발명에서는 오메가3 지방산을 포함하며, 상기 오메가3 지방산은 EPA를 73 중량% 포함하는 것을 특징으로 한다. 실제 ADHD와 같은 인지 장애 질환에 효과가 있는 EPA를 다량 포함하는 오메가3 지방산을 이용함에 따라, 인지 장애 질환의 예방 또는 치료에 우수한 효과를 나타낼 수 있다.
또한, 본 발명은 홍삼 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하며, 상기 홍삼 추출물은 홍삼 추출물로부터 분리된 진세노사이드이며, 상기 진세노사이드는 진세노사이드-Ra1, -Ra2, -Ra3, 말로닐진세노사이드-Rb1, -Rb2, -Rc, -Rd, Rf, Rf2, Rg1, Rg3, Rg5, Rg6, 20(R)-G-Rg2, 20(R)-G-Rh1, Rh2, Rh4, K-R1, K-R2, 20(E)-G-F4, Rs1, Rs2, Rs3, 폴리아세틸렌진세노사이드-Ro 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되며, 바람직하게는 말로닐진세노사이드-Rg1, -Rb1 및 -Rg3이며, 상기 예시에 국한되지 않는다. 바람직하게 상기 진세노사이드는 말로닐진세노사이드-Rg1, -Rb1 및 -Rg3을 0.5:0.5:1 내지 1:1:1의 중량 비율로 혼합하여 포함된다.
상기 진세노사이드는 홍삼 또는 인삼 사포닌 성분 중 아글리콘에 당(글루코오스)이 하나 결합된 구조로 이루어지며, 암세포 증식 억제 작용, 종양 증식 억제 작용 등의 다양한 약리 작용이 있는 것으로 알려져있다.
상기 진세노사이드는 홍삼 또는 인삼에서 추출하며, 이때, 진세노사이드의 추출 효율을 높이기 위해 발효 홍삼을 이용할 수 있고, 상기 발효 홍삼은 인삼에 발효균을 접종하여 제조할 수 있다.
보다 구체적으로 발효 홍삼의 홍삼 추출물은 파낙시돌(panaxydol), 파낙시놀(panaxynol), 파낙시트리올(panaxytriol), 폴리아세틸렌(polyacetylene)계 화합물, 말톨(maltol)과 같은 페놀계 화합물, 피넨(pinene), 오시넨(ocinene) 및 진세노사이드 등과 같은 다양한 유효성분을 포함하고 있다. 또한 상기 유효성분 중 진세노사이드는 복합 탄수화물(알코올 또는 페놀과 당의 복합체)로, 중추신경계 흥분작용과 진정 작용을 하며, 신진대사 조절, 혈당 감소, 근육활동 향상, 내분비계 흥분작용, 그리고 호르몬 수치를 적당하게 유지시켜주는 효과를 나타낸다.
상기 발효균은 일반적으로 알려진 균주를 이용할 수 있으며, 예를 들어, 락토바실러스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius), 락토바실러스 아시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 락토바실러스 퍼멘툼(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 델브루에키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 레우테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 부츠네리(Lactobacillus buchneri), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 존스니(Lactobacillus johonsonii), 락토바실러스 케피르(Lactobacillus kefir) 등과 같은 유산 바실리, 락토코코스 락티스(Lactococcus lactis), 락토코코스 플랜타룸(Lactococcus plantarum), 락토코코스 라피노락티스(Lactococcus raffinolactis), 엔테로코코스파에칼리스(Enterococcus faecalis), 엔테로코코스 파에시늄(Enterococcus faecium), 스트렙토코코스 터모필리우스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡락티스(Leuconostoc lactis), 류코노스톡 메센테로이드(Leuconostoc mesenteroides) 등과 같은 유산 콕사이 및 비피도박테리움 애닐멀스(Bifidobacterium animals), 비피도 박테리움 비피듐(Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 인판티스(Bifidobacterium infantis), 비피도바테리움 롱굼(Bifidobacterium longum), 비피도박테리움 수도롱굼(Bifidobacterium pseudolongum), 비피도박테리움 터모필룸(Bifidobacterium themophilum), 비피도박테리움 아돌센티스(Bifidobacterium adolescentis) 등과 같은 비피도박테리아를 포함할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것일 수 있다.
상기 홍삼 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 용매로 추출한 것일 수 있다. 상기 '홍삼 추출물'이란 홍삼을 추출하여 수득한 추출물을 의미한다. 상기 홍삼 추출물은 홍삼 분쇄물을 물, 에탄올, 메탄올 등과 같은 탄소수 1 내지 6의 알코올과 같은 극성 용매, 또는 알코올과 물의 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합 용매로 용출할 수 있으며, 바람직하게는 1:3 내지 1:5의 에탄올과 물의 혼합비를 가지는 혼합 용매로 용출할 수 있다. 이 때, 추출 온도는 10℃ 내지 100℃, 바람직하게는 실온에서, 추출 기간은 12시간 내지 4일, 바람직하게는 24시간 동안 추출한 추출물 일 수 있다. 여과된 추출물을 진공 회전 농축기로 감압 농축하여 수득한 결과물일 수 있으나, 본 발명의 항당뇨 효과를 나타낼 수 있는 홍삼 추출물인 한, 이에 제한되지 않고, 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이의 조정제물 또는 정제물을 모두 포함한다.
상기 천연 복합 추출물은 원지 추출물 및 석창포 추출물을 포함할 수 있다.
상기 원지(Polygala tenuifolia Willd.)는 한국(중부 이북), 중국북부에 분포하는 원지과 여러해살이풀이다. 잎은 어긋나고 바늘 모양이며 꽃은 자주빛으로 7 내지 8월에 줄기와 가지 끝에서 총상꽃차례(raceme)로 드문드문 달 린다. 꽃잎은 나비 모양이고, 윗부분이 벌어지며 밑이 붙고, 밑의 것은 끝이 갈라진다. 수술은 8개로 밑부분이 합해진다. 열매는 삭과로 편평하고 2개로 갈라지며 종자에 털이 많다. 주요성분으로는 사포닌(Saponin), 원지사 포닌 A-G(Onjisaponin A-G), Tenuifolin, 잔톤(Xanthones), 2,6,7,8-테트라메톡시잔톤(2,6,7,8- Tetramethoxyxanthone), 3-하이드록시-2,6,7,8-테트라메톡시 폴리자일리톨(3-Hydroxy-2,6,7,8-Tetramethoxy polygalitol) 등이 함유되어 있다. 한방에서는 뿌리를 원지라고 하며 거담제, 강장제, 강정제로 쓴다.
상기 석창포(Acorus gramineus)는 천남성과(Araceae)에 속하는 다년생 초본으로 한국, 중국, 일본 등지에서 자생하고 있으며, 한국에서 는 중부와 남부지방에서 자생한다. 석창포는 산골짜기에서 자라며 뿌리줄기는 옆으로 길게 자라고 지상에 있는 줄기와 더불어 독특한 향기가 나는 식물이다. 석창포는 연못가나 도랑가에서 자라는 일반 창포보다 잎이 보다 좁고 길이가 짧으며 뿌리가 가는 특징이 있다. 또한 석창포의 다른 이름으로 수검초, 요구, 창본, 창양, 창초, 창포, 구절창포 등이 있다.
상기 천연 복합 추출물은 단독 사용 시, 인지 장애 질환 예방 또는 치료 효과가 발생하나, 오메가3 지방산 및 홍삼 추출물에 포함시켜 사용할 경우, 각 구성 성분의 상호 작용으로 인해, 오메가3 지방산 내의 EPA 및 홍삼 추출물인 진세노사이드의 인지 장애 질환 예방 또는 치료 효과를 더욱 상승시킬 수 있다.
이에, 상기 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물은 오메가3 지방산을 포함하며, 상기 오메가3 지방산 100 중량부에 대하여, 홍삼 추출물 0.1 내지 1 중량부; 및 천연 복합 추출물 1 내지 10 중량부를 포함할 수 있다. 상기 범위 내에 의하는 경우, 각 성분의 혼합 사용에 따른 상승 작용으로 인지 장애 질환의 예방 또는 치료 활성의 상승 효과가 가장 높아질 수 있다.
바람직하게 본 발명의 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물은 오메가3 지방산; 진세노사이드; 및 천연 복합 추출물을 포함하며, 상기 천연 복합 추출물은 원지 추출물 및 석창포 추출물을 포함한다. 상기 천연 복합 추출물 이외에 천연 추출물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 한다. 상기 천연 추출물은 고비 추출물, 콩짜개덩굴 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으나, 상기 예시에 국한되지 않는다.
상기 고비(Osmunda japonica Thunb.)는 산허리 이하의 숲 가장자리에 자라는 다년초로 높이 60 내지 100cm이고 주먹 같은 근경에서 여러 대가 나온다. 잎은 2회우상복엽이고 우편의 길이는 20 내지 30cm이다. 생식엽은 영양엽보다 일찍 나와서 일찍 쓰러지고 소우편은 매우 좁아져서 선형으로 되며 포자낭이 밀착한다. 각기, 감기, 관절통, 구충, 난관난소염, 대하, 수종, 실뇨, 요술산통, 토혈, 해혈, 혈변 등에 우수한 효과가 있는 것으로 알려져있다.
상기 콩짜개덩굴(Lemmaphyllum microphyllum C.Presl)은 습한 바위 겉이나 노목에 붙어 자라는 상록다년초로 근경이 옆으로 뻗으며 잎이 드문드문 달린다. 영양엽은 원형 또는 타원형이며 가장자리가 밋밋하다. 포자낭이 달린 포자엽은 주걱형이며 둥글고 밑부분이 좁아진다. 개선, 경혈, 악창, 양혈해독, 지혈, 청폐지해, 치통, 코피, 타박상, 폐옹, 풍진, 해수, 혈뇨 등에 우수한 효과가 있는 것으로 알려져있다.
이에, 상기 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물은 오메가3 지방산을 포함하며, 상기 오메가3 지방산 100 중량부에 대하여, 홍삼 추출물 0.1 내지 1 중량부; 천연 복합 추출물 1 내지 10 중량부; 고비 추출물 0.1 내지 0.5 중량부 및 콩짜개덩굴 추출물 0.1 내지 0.5 중량부를 포함할 수 있다. 보다 구체적으로 상기 오메가3 지방산 100 중량부에 대하여, 홍삼 추출물 0.1 내지 1 중량부; 원지 추출물 0.5 내지 5 중량부; 석창포 추출물 0.5 내지 5 중량부; 고비 추출물 0.1 내지 0.5 중량부 및 콩짜개덩굴 추출물 0.1 내지 0.5 중량부를 포함할 수 있다. 상기 범위 내에 의하는 경우, 각 성분의 혼합 사용에 따른 상승 작용으로 인지 장애 질환의 예방 또는 치료 활성의 상승 효과가 가장 높아질 수 있다. 즉, 고비 추출물 및 콩짜개덩굴 추출물을 추가로 포함함에 따라, 오메가3 지방산, 진세노사이드, 원지 추출물 및 석창포 추출물의 인지 장애 질환의 예방 또는 치료 활성의 상승 효과를 가장 높일 수 있다.
상기 원지 추출물 및 석창포 추출물은 인지 장애 질환 예방 및 치료에 효과가 있으며, 오메가3 지방산 및 홍삼 추출물과 혼합 사용에 의해 인지 장애 예방 및 치료 효과가 상승 작용한다. 즉, 원지 추출물 및 석창포 추출물을 혼합 사용시에 단독 사용에 의해서도 인지 장애의 예방 및 치료에 효과가 있다. 다만, 본 발명의 경우에는 고비 추출물 및 콩짜개덩굴 추출물은 더 포함시킴에 따라, 각 구성 성분의 혼합 사용에 따른 상승 작용으로 인해, 인지 장애 질환의 예방 또는 치료 활성 효과가 더욱 상승한다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함될 수 있으며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들어 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
본 발명의 원지 추출물 및 석창포 추출물은 예로부터 식용 및 약용으로 사용되어 온 것으로 그 투여용량에 특별한 제약은 없고, 체내 흡수도, 체중, 환자의 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다. 일반적으로 원지 추출물 및 석창포 추출물은 상세하게는 체중 1 kg당 10 내지 1000 mg 정도를 투여할 수 있으며, 보다 상세하게는 체중 1 kg당 50 내지 500 mg 정도 투여할 수 있다. 본 발명의 원지 추출물 및 석창포 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물은 유효량 범위를 고려하여 제조하도록 하며, 이렇게 제형화된 단위 투여형 제제는 필요에 따라 약제의 투여를 감시하거나 관찰하는 전문가의 판단과 개인의 요구에 따라 전문화된 투약법을 사용하거나 일정 시간 간격으로 수회 투여할 수 있다.
본 발명은 또한, 오메가3 지방산을 포함하는 항산화 활성용 의약외품 조성물을 제공한다. 보다 구체적으로, 본 발명의 원지 추출물 및 석창포 추출물은 항산화 활성을 목적으로 의약외품 조성물에 첨가할 수 있다.
본 발명에 있어서 '의약외품'은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 섬유, 고무제품 또는 이와 유사한 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 아니하며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염형 예방을 위하여 살균, 살충 및 이와 유사한 용도로 사용되는 제제 중 하나에 해당하는 물품으로서, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미한다.
본 발명의 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 의약외품 조성물은 이에 제한되지는 않으나, 상세하게는 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제 비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터 충진제일 수 있다.
본 발명은 또한, 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 추출 혼합물을 첨가할 수 있는 건강기능식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함할 수 있다. 상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
상기와 같이, 본 발명의 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 식품용 조성물 또는 약학용 조성물로 이용할 경우, 오메가3 지방산의 고유의 비린 맛 및 텁텁함으로 인해 기호성이 떨어지는 문제가 발생할 수 있다. 또한, 천연 복합 추출물의 쓴맛도 문제될 수 있다.
이에, 본 발명에서는 기호성이 떨어지는 문제를 방지하고, 인지 장애 질환 예방 또는 치료 효과를 보다 상승시키기 위해, 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물 및 전동싸리(Yellow melilot) 추출물을 추가로 소량 포함할 수 있다.
상기 감초(Glycyrrhiza uralensis)는 콩과 유럽감초, 만주감초, 기타 동속식물의 뿌리 및 근경으로, 봄과 가을에 채취해 수염 뿌리를 제거하고 볕에 말려 사용한다. 성질은 평이하고 맛이 달다. 생용하면 해동하는 성질이 있어 창양, 종독, 인후종통, 식중독을 치료할 수 있다. 또한 약을 조화시키는 성질이 있어 약의 준렬한 성질을 감쇄시킨다. 복통, 설사, 노권, 심계, 경간, 폐위 등을 치료할 수 있다.
상기 전동싸리(Yellow melilot)는 초목서(草木犀)··멜리토우스초라고도 한다. 중국 북부 원산이다. 저지대의 풀밭에 자란다. 높이 60 내지 90cm이고 가지가 갈라지며 마르면 향기가 난다. 어릴 때는 털이 있으나 후에 없어진다. 잎은 어긋나고 3개의 작은잎으로 된 겹잎이다. 작은잎은 긴 타원형 또는 거꾸로 선 바소꼴이며 가장자리에 잔 톱니가 있다. 그리고 꽃은 7 또는 8월에 피고 노란색이며 가지 끝이나 잎겨드랑이에서 총상으로 빽빽하게 달린다. 꽃받침에는 잔 털이 있다. 열매는 달걀 모양이며 털이 없고 검게 익는다. 풀 전체를 해열··안질··신장염 등에 약용한다. 꽃이 보다 작고 흰색인 것을 흰전동싸리(M. alba)라고 한다. 모두 목초자원으로 재배하던 것이 번져서 야생으로 자란다.
상기 감초 추출물 및 전동싸리 추출물은 소량 포함되어, 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물의 기호도를 상승시키고, 구성 성분과의 혼합 사용에 의해, 인지 장애 질환의 예방 또는 치료 효과를 상승시킬 수 있다.
바람직하게는, 본 발명의 상기 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물은 오메가3 지방산을 포함하며, 상기 오메가3 지방산 100 중량부에 대하여, 홍삼 추출물 0.1 내지 1 중량부; 천연 복합 추출물 1 내지 10 중량부; 고비 추출물 0.1 내지 0.5 중량부, 콩짜개덩굴 추출물 0.1 내지 0.5 중량부, 감초 추출물 1 내지 3 중량부 및 전동싸리 추출물 0.1 내지 0.3 중량부로 포함할 수 있다. 상기 범위에 의하는 경우 각 추출물의 상호 작용에 의한 상승효과로 임계적 의의가 있는 정도의 상승효과가 발현되며, 상기 범위를 벗어나는 경우 상승효과가 급격히 저하되거나 거의 없게 된다.
본 발명의 오메가3 지방산을 포함하는 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물은 오메가3 지방산과 같은 천연물을 이용한 조성물로, 기호성이 높고 복용 시 부작용이 없고, 인지 장애 질환 예방 또는 치료 효과가 우수하다.
또한, 활성산소종의 제거, DNA 손상에 대한 항산화, ACE(Angiotensin Converting Enzyme) 효소 저해활성, AChE(acetylcholine esterase) 저해 활성, NO(Nitric oxide) 생성 억제활성, 산화질소 생성 효소 NOS-2 발현 증가활성 및 PC12세포에서 NF-κκB 전사활성 증가 효과가 우수하다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
[제조예: 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조]
1. 원지 추출물의 제조
원지 에탄올 추출물(PE)을 얻기 위하여 상엽 100 g당 에탄올 1 L를 첨가하여 60℃℃, 150 rpm으로 3일간 교반한 후 이를 3,000 rpm에서 20분간 원심분리하여 상층액만 분리하였다. 분리된 상층액을 Whatman 필터(No.2)로 여과하고 감압농축과정을 통하여 고형성분을 얻어내고 막자사발로 잘게 마쇄하고 밀봉시켜 -70℃℃ 초저온 냉동고에 보관하였다.
2. 천연 추출물의 제조
상기 원지 추출물의 제조 방법과 동일한 방식을 이용하여, 석창포 추출물(AE), 고비 추출물(OE), 콩짜개덩굴 추출물(LE), 감초 추출물(GE) 및 전동싸리 추출물(YE)을 제조하였다.
3. 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조
오메가3 지방산(EPA(Eicosapentaenoic acid) 73 중량% 이상 포함), 진세노사이드, 원지 추출물(PE), 석창포 추출물(AE), 고비 추출물(OE), 콩짜개덩굴 추출물(LE), 감초 추출물(GE) 및 전동싸리 추출물(YE)을 혼합하여 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 제조하였다.
보다 구체적인 함량 범위는 하기 표 1과 같다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| 오메가3 지방산 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 진세노사이드* | 0.05 | 0.1 | 0.5 | 1 | 2 | - | - | - | - | - |
| 진세노사이드** | - | - | - | - | - | 0.05 | 0.1 | 0.5 | 1 | 2 |
| PE | 0.1 | 0.5 | 3 | 5 | 10 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 |
| AE | 0.1 | 0.5 | 3 | 5 | 10 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 |
| OE | 0.05 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 1 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
| LE | 0.05 | 0.1 | 0.3 | 0.5 | 1 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
| GE | 0.5 | 1 | 2 | 3 | 5 | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 |
| YE | 0.05 | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.5 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
(단위 중량부, 진세노사이드*는 말로닐진세노사이드-Rg1, -Rb1 및 -Rg3을 0.5:0.5:1 혼합한 것이며, 진세노사이드**는 말로닐진세노사이드-Rg1, -Rb1 및 -Rg3을 1:1:1의 중량 비율로 혼합한 것을 이용함)
[실험예: 활성 실험 분석]
1. DPPH radical 분석
1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical을 이용하여 실시예 및 비교예에 따른 radical 소거능력을 측정하였다.(Imai J, Ide N, Nagae S, Moriguchi T, Matsuura H, Itakura Y. Antioxidant and radical scavanging effects of aged garlic extract and its constituents. Planta Medica-J Med Plant Res 60, 417-420, 1994.) 상기 실험번호 MX1 내지 MX10을 DPPH 용액을 가하여 10초 동안 잘 혼합한 다음, 실온에서 20분 동안 반응 시킨 후 525 nm에서 흡광도를 측정하였다. DPPH radical 함량은 시료 첨가군과 대조군의 흡광도 비를 %값으로 환산하여 나타내었다.
생체에서 산화적 스트레스와 관련되어 있는 DPPH, superoxide anion과 같은 활성산소종에 대하여 상시 실시예 및 비교예 따른 소거능력 및 환원력에 대하여 조사하였다. DPPH radical 소거법은 DPPH radical이 항산화 물질로 인해 환원되면, 자색이 탈색되는 정도를 지표로 하여 지질과산화의 초기 억제 정도를 예측할 수 있다. 상기 실험번호 MX1 내지 MX10의 항산화 효과를 알아보기 위해 DPPH를 이용하여 항산화 작용을 측정하여 하기의 표 2에 나타내었다(실험번호 MX1 내지 MX10을 처리하지 않은 군(blank)을 기준(100%)으로 DPPH radical(%)로 나타내었다). 하기의 표 2를 참조하면, DPPH에 대하여 소거효과가 나타났다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| DPPH radical(%) | 80 | 62 | 45 | 52 | 71 | 56 | 43 | 35 | 48 | 77 |
2. 환원력 분석
Oyaizu의 방법(Oyaizu M. Studies on products of the browning reaction. Antioxidative activities of browning reaction products prepared from glucosamine. Japa J Nutrition [Eiyogaku Zasshi] 44, 307-315, 1986.)에 따라 측정하였다. 시료 1 ml에 pH 6.6의 200 mM 인산 완충액 및 1%의 potassium ferricyanide를 각각 1 ml씩 차례로 가하여 교반한 후 50℃의 수욕상에서 20분 동안 반응시켰다. 여기에 10% TCA (trichloroacetic acid)용액을 1 ml 가하여 13,500× g에서 15분 동안 원심분리하여 상등액 1 ml에 증류수 및 ferric chloride 각 1 ml을 혼합한 후 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. 실험번호 MX1 내지 MX10의 환원력은 대조군의 값을 기준으로 흡광도 비를 %값으로 환산하여 하기의 표 3에 나타내었다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| Reducing power(%) | 160 | 233 | 501 | 387 | 256 | 228 | 392 | 510 | 412 | 389 |
3. Superoxide anion radical 소거효과 측정
초산화물 음이온 라디칼(superoxide anion radical) 소거능은 Fridovich(Fridovich I. Superoxide anion radical (O·-2), superoxide dismutases, and related matters. J Biol Chem 272, 18515, 1997.)의 방법에 의해 정하였다. 실험번호 MX1 내지 MX10 0.1 ml와 0.1 M 인산칼륨 완충용액(potassium phosphate buffer, pH 7.5) 0.6 ml에 0.4 mM 크산틴(xanthine)과 0.24mM nitro bluetetrazolium(NBT)를 녹인 기질액 1 ml를 첨가하고 크산틴옥시다아제(xanthineoxidase, 0.049 U/ml) 1 ml를 가하여 37℃에서 20분간 반응시킨 후 1 N-HCl을 1 ml를 가하여 반응을 종료시킨 다음, 반응액 중에 생성된 초산화물 음이온 라디칼(superoxide anion radical)의 양을 560 nm에서 흡광도를 측정하여 무처리군(100%)을 기준으로 비교하여 하기의 표 4에 나타내었다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| Superoxide anion (%) | 99 | 87 | 46 | 72 | 81 | 75 | 70 | 41 | 62 | 82 |
4. In vitro 지질과산화에 대한 항산화 활성
상기 실험번호 MX1 내지 MX10을 리놀렌산 유화액(linolenic acid emulsion)과 혼합한 후에 0.8 mM H2O2 및 0.8 mM FeSO4를 혼합한 용액을 5시간 동안 반응시킨 후 0.4% TBA를 첨가하고 95℃에서 2시간 반응시킨 다음 실온에서 10분 동안반응시켰다. 그 다음 15：1 비율의 n-부탄올:피리딘 용액을 500μl을 첨가하고 1,000×g에서 10분 동안 원심분리한 후 상등액을 532nm에서 흡광도를 측정하여 지질과산화 정도는 시료 첨가 전후의 흡광도 비를 %값으로 환산하여 하기의 표 5에 나타내었다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| Lipid peroxidation(%) | 88 | 79 | 66 | 72 | 81 | 78 | 72 | 62 | 76 | 81 |
5. Hydroxyl radical에 의한 DNA 손상 분석
Genomic DNA는 약간 변형된 표준 과정에 따라 PC12 세포로부터 추출하였다(Sambrook J, Russell DW. Molecular cloning: a laboratory manual. New York, CSHL Press, 2001.). Fenton 반응에 의하여 발생된 하이드록실 라디칼(hydroxyl radical)에 노출된 DNA 산화는 기존에 실험된 방법에 따라 수행되었다(Milne L, Nicotera P, Orrenius S, Burkitt M. Effects of glutathione and chelating agents on copper-mediated DNA oxidation: pro-oxidant and antioxidant properties of glutathione. Arch Bi℃hem Biophys 304, 102-109, 1993.). 먼저 100 μl의 DNA 용액에 실험번호 MX1 내지 MX10, 200 μM FeSO4, 1 mM H2O2 및 50μg/ml genomic DNA를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 상온에서 반응시킨 후 10 mM EDTA를 첨가하여 반응을 종결시켰다. 1 μg의 DNA를 포함하는 20 μl의 반응혼합물을 1% 아가로스 겔(agarose gel)에서 100V로 30분 동안 전기영동하였다. Gel은 1 mg/ml ethidium bromide로 염색하여 물로 세척하여 UV로 LAS3000 image analyzer (Fujifilm Life Science, Tokyo, Japan)를 이용하여 관찰하였고, 무처리군을 기준으로 그 결과를 %화 하여 하기의 표 6에 나타내었고, 그 % 수치가 낮을수록 우수한 것이다. 하기의 표 6을 참조하면, 본 발명의 실험번호 MX 1 내지 10에 의하는 경우 hydroxyl radical에 의한 DNA의 손상을 감소시킬 수 있는 것을 확인하였다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| DNA oxidation(%) | 86 | 79 | 57 | 61 | 71 | 77 | 64 | 53 | 69 | 79 |
6. ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) 활성 측정
ACE 활성은 0.3 M NaCl을 포함한 0.1 M sodium borate buffer (pH 8.3)에 토끼 rabbit lung acetone powder을 1 g/10ml (w/v)의 농도로 4℃에서 2시간 동안 추출한 후, 원심분리(4℃, 4,000 rpm, 40분)하여 ACE 조효소액을 얻었다. 실험번호 MX 1 내지 10에 각각 0.1 M 붕산나트륨 완충액(pH 8.3) 100 μl와 ACE 조효소액 50 μl를 가한 다음, 37℃에서 5분 동안 예비반응을 시킨 후, 0.3 M NaCl이 포함된 0.1 M 붕산나트륨 완충액(pH 8.3) 5 ml에 HHL(hippuryl-histidyl-leucine) 25 mg을 첨가하여 만든 기질 50 μl를 가하여 37℃에서 30분간 반응을 시켰다. 이에 1 N HCl을 250 μl를 첨가하여 반응을 정지시킨 후, 아세트산 에틸(ethyl acetate) 1.5 ml를 가해 15초 동안 교반한 다음, 원심분리(3,000 rpm, 5 min, 4℃)하여 상등액 1 ml을 얻었다. 이 상등액을 완전히 건조시켜 증류수 3 ml를 넣어 교반한 후 분광광도계로 228 nm에서 흡광도를 측정하였다. 음성대조군으로는 증류수 50μl를 사용하였으며, 양성대조군으로는 captopril 0.1%를 사용하여 실시예와 그 활성을 비교하였다. ACE 효소활성은 무처리군을 기준(100%)으로 시료 첨가 전후의 흡광도 비를 %값으로 환산하여 하기의 표 7에 나타내었다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| ACE inhibition(%) | 155 | 176 | 220 | 188 | 162 | 172 | 184 | 225 | 192 | 164 |
7. AChE (Acetylcholine esterase) 활성측정
PC12 세포로부터 분리한 AchE (25 mU/ml) 50 μl를 반응효소로, 0.1 M의 인산나트륨 완충액(pH 8.0)에 녹인 1mM의 아세틸콜린 요오드화물을 기질로 하였고, 발색 시약은 39.6 mg의 5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoic acid 및 15 mg의 탄산수소나트륨을 0.1 M 인산나트륨 완충액(pH 7.0) 10 ml에 용해하여 제조하였다. 효소반응은 다음과 같이 전개하였다. 2 ml의 0.1 M 인산나트륨 완충액(pH 8.0)에 20 μl의 실험번호 MX1 내지 MX10, 200 μl의 10 mM DTNB 용액 및 100 μl의 효소 (0.03 U)를 가하고 37℃에서 10분간 전 유지시킨 다음, 기질 200 μl를 가해 3분 간 반응시킨 후, 분광광도계로 412 nm에서 흡광도 값을 측정하였다. AChE의 활성은 무처리군을 기준(100%)으로 실시예의 첨가 전후의 흡광도 비를 %값으로 환산하였다. 전후의 흡광도 비를 %값으로 환산하여 하기의 표8에 나타내었다. 하기의 표 8을 참조하면 본 발명의 실험번호에 따른 조성물을 사용한 경우 AchE 활성 억제 효과가 관찰되었다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| ACE inhibition(%) | 87 | 77 | 66 | 72 | 81 | 79 | 74 | 62 | 76 | 80 |
8. PC12세포에서 NF-κB 전사활성에 대한 시험
PC12 cells를 6-well plate에 분주하고 37℃에서 배양하였다. 세포가 약 70 내지 80%의 증식했을 때, 혈청이 함유되지 않은 DMEM 배지로 세척하고 5시간 동안 혈청 및 항생물질 없이 DMEM로 배양하였다. 이어 세포를 lipofectamine 시약(Invitrogen, USA)으로 well 당 DNA 총량을 조절한 NF-κB promoter가 삽입된 pGL3 reporter vector(NF-κκB-Luc) 1 μg 및 pcDNA 3.1를 300 ng 함유 DNA 혼합물로 transfection 시켰다. 72 시간 배양한 후, 세포를 용리시키고, luminometer (Tecan Austria GmbH, Austria)를 이용하여 luciferase 활성을 측정하였다. Well 당 transfection된 세포수의 차이를 보정하기 위하여, 기질로서 o-nitrophenylbetagalactopyranoside를 사용하여 β-galactosidase 활성을 모니터링 하였다. 데이터를 "평균±표준편차(n=3)"로 나타내었다. NF-κB promoter-luciferase construct를 PC12 cells에 transfection시킨 후에 실험번호 MX 1 내지 10의 조성물을 처리한 후 NF-κB promoter-luciferase construct를 이용하여 NF-κB의 전사 활성이 실험번호 MX 1 내지 10의 조성물에 의해 영향을 받는지 여부를 조사하여 실험번호 MX1을 기준으로 지수(%)화 하여 하기의 표 9에 나타내었다. 상기 지수가 높을수록 NF-κB의 전사 활성이 우수한 것이다.
| MX1 | MX2 | MX3 | MX4 | MX5 | MX6 | MX7 | MX8 | MX9 | MX10 | |
| Relative luciferase activity(%) | 100 | 250 | 302 | 271 | 99 | 100 | 242 | 310 | 210 | 98 |
상기 실험을 기초로 본 발명에 따른 실험번호 MX 1 내지 10의 조성물은 활성산소종의 제거, DNA 손상에 대한 항산화, ACE(Angiotensin Converting Enzyme) 효소 저해활성, AChE(acetylcholine esterase) 저해 활성, NO(Nitric oxide) 생성 억제활성, 산화질소 생성 효소 NOS-2 발현 증가활성 및 PC12세포에서 NF-κB 전사활성 증가효과를 가진다는 것을 확인할 수 있었다. 따라서, 상기 실시예를 기초로 두뇌 인지능력 개선을 위한 다양한 제품 군에 활용될 수 있다. 특히, 실험번호 MX3 및 MX8에서 이러한 효과가 더 우수함을 확인하였다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.
Claims (7)
- 오메가3 지방산, 진세노사이드, 원지 추출물, 석창포 추출물, 고비 추출물, 콩짜개덩굴 추출물, 감초 추출물 및 전동싸리 추출물을 포함하며,
상기 오메가3 지방산은 EPA(Eicosapentaenoic acid) 73 중량% 이상인 것인
인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제 1항에 따른 인지 장애 질환 예방용 조성물을 포함하는
식품 조성물. - 제 1항에 따른 인지 장애 질환 예방용 조성물을 포함하는
뇌기능 개선용 식품 조성물. - 제 1항에 따른 인지 장애 질환 예방 또는 치료용 조성물을 포함하는
약학 조성물.
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