KR20200124107A - 차조기 발효 추출물을 포함하는 망막 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents
차조기 발효 추출물을 포함하는 망막 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 대한 것이다.
또한, 본 발명은 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막기능 개선용 조성물에 대한 것이다.
본 발명의 차조기 발효 추출물은 발효하지 않은 차조기 추출물에 비하여 산화스트레스에 의한 시신경 세포의 사멸을 유의적으로 억제시키므로 시신경 세포 감소와 관련된 망막 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 또는 망막 기능 개선용 조성물로서 효과적으로 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막기능 개선용 조성물에 대한 것이다.
본 발명의 차조기 발효 추출물은 발효하지 않은 차조기 추출물에 비하여 산화스트레스에 의한 시신경 세포의 사멸을 유의적으로 억제시키므로 시신경 세포 감소와 관련된 망막 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 또는 망막 기능 개선용 조성물로서 효과적으로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 대한 것이다.
또한, 본 발명은 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막기능 개선용 조성물에 대한 것이다.
망막(Retina)은 안구의 가장 안쪽을 덮고 있는 투명한 신경조직으로 구조적으로는 광수용체층, 신경절세포층(Retinal ganglion cell layer), 신경섬유층 등을 포함한 10개의 층으로 구성되어 있다. 안구로 들어온 빛이 광수용체세포(photoreceptor cell)에서 감지되어 전기적 신호로 전환되면, 신경절세포층에 존재하는 망막신경절세포(Retinal ganglion cell)가 이 전기적 신호를 뇌의 시신경 중추로 전달함으로써, 우리가 사물을 볼 수 있게 된다. 따라서 안압 상승, 고혈압, 당뇨, 혈전, 동맥경화 등에 의해 망막신경절세포가 사멸하게 되면 시력 왜곡이나 시력 상실이 야기될 수 있다.
녹내장은 가장 흔한 신경변성 질환 중 하나이며 비가역성 실명의 주요 원인인데, 전 세계적으로 7천만 명이 넘는 사람들, 특히 노인에게서 발생한다. 녹내장은 진행성 기능장애와, 시력 상실에 이르는 망막 신경절 세포(retinal ganglion cells, RGCs)의 손실을 특징으로 하는 복합적 다요인성 질환이다. 높은 안압(intraocular pressure, IOP)과 연령 증가는 녹내장의 신경변성에 대한 감수성 요인이다.
황반(macula lutea)은 눈의 망막에서 시세포가 밀집되어 있어 빛을 가장 선명하고 정확하게 받아들이는 부분이며, 여러 가지 원인에 의해 이 황반부에 변성이 일어나 시력 장애를 일으키는 질환을 황반변성(macular degeneration)이라고 한다. 상기 황반변성은 녹내장, 당뇨망막증과 함께 실명의 3대 원인 중의 하나이다. 황반변성을 야기하는 가장 큰 원인은 연령증가이며, 그 외 가족력, 인종, 흡연 등도 원인으로 알려져 있다. 이는 서구화된 식습관과 더불어 오존층 파괴로 인한 자외선 노출 증가로 인한 결과로 예측된다. 특히, 황반 변성은 본래 노인층에서 주로 발생하는 질환이었으나, 최근 들어 국내에서도 발병 연령대가 60대 노년층에서 4, 50대 중장년층으로 낮아지고 있는 추세로서, 중장년층 발병률 또한 최근 수년 동안 급속히 증가하고 있다. 황반이 손상되면 눈에 작은 활자체, 얼굴 생김새 또는 작은 물체와 같은 세부적인 것을 알아보는 능력을 상실하게 된다. 황반 변성은 크게 건성과 습성 두 유형으로 분류할 수 있으며, 황반 변성 환자 중 약 90% 정도는 건성 황반 변성 환자이다. 건성 황반변성은 황반부 조직이 얇아지거나 위축되어 노폐물이 쌓여 망막세포를 사멸시키고, 습성 황반변성은 망막 내 또는 그 아래에 노폐물이 쌓여 신생혈관이 성장해 약한 신생혈관의 파열로 황반부에 손상을 주어 시력손실이 발생한다. 건성 형태일 경우, 초기에는 징후가 없어 자가진단이 어려운 것이 특징이고 서서히 진행되어 실명 위험성이 상대적으로 적지만, 건성 황반 변성은 아직까지 확립된 치료법이 없는 실정이므로, 예방의 필요성이 더욱 강조되고 있다.
대한민국 등록특허 제10-1391308호는 벌개미취 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 망막질환 예방 및 치료용 조성물에 대한 것으로서, 벌개미취 추출물 또는 이의 분획물에 망막세포의 세포 자살을 억제하여 망막 관련 질환을 예방 또는 치료할 수 있는 조성물을 제공하고 있다.
한편, 차조기(Perilla frutescens)는 꿀풀과의 한해살이풀로서 기침, 가래, 인후염, 소화불량, 부스럼, 마비증상 당뇨병, 요통 등 다양한 질병 치료에 사용되며, 항균효과 또는 항암 효과가 있음이 알려져 있다. 그러나, 차조기 추출물 내지 발효 추출물을 포함하는 시신경 세포와 관련된 망막 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 조성물에 대한 연구는 현재까지 개시된 바 없다.
이에, 본 발명자들은 시신경 세포 보호 효과가 우수하면서 부작용이 없는 효과적인 천연물 소재를 제공하기 위하여 예의 노력한 결과, 차조기 발효 추출물은 산화스트레스로 인한 시신경 세포의 사멸을 억제하는 효과가 우수하므로 시신경 내지 망막 관련 질환에 대하여 기존에 사용되던 화학적 약물들을 대체할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막기능 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 발효 추출물은 차조기의 잎, 줄기, 꽃, 열매 및 전초로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 부위에서 추출되는 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 발효 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출한 다음 발효균주로 발효시킨 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 발효균주는 고초균, 유산균 및 효모로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 고초균은 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis), 바실러스 투링기엔시스(Bacillus thuringiensis), 바실러스 리체니포미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens), 바실러스 스테아로서모필리스(Bacillus stearothermophilus), 바실러스 코아귤란스(Bacillus coagulans), 바실러스 롱검(Bacillus longum), 바실러스 푸밀루스(Bacillus pumilus), 바실러스 브레비스(Bacillus brevis), 바실러스 서큘란스(Bacillus circulans) 및 바실러스 폴리믹사(Bacillus polymyxa)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 바실러스(Bacillus)속 균이고;
상기 유산균은 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 류테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius) 로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 락토바실러스(Lactobacillus)속 균이며;
상기 효모는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 유바룸(Saccharomyces uqvarum), 사카로마이세스 엘립소이데우스(Saccharomyces ellipsoideus), 사카로마이세스 카를스베르겐시스(Saccharomyces carlsbergensis), 사카로마이세스 사케(Saccharomyces sake), 사카로마이세스 코레아누스(Saccharomyces coreanus), 사카로마이세스 리폴리티카(Saccharomyces lipolytica) 사카로마이세스 보울라디(Saccharomyces boulardii) 및 사카로마이세스 파스토리아누스(Saccharomyces pastorianus)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 사카로마이세스(Saccharomyces)속 균; 일 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 발효는 5℃ 내지 80℃ 에서 30분 내지 10일 동안 수행하는 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 망막질환은 녹내장, 황반변성, 망막 혈관폐쇄, 황반원공, 당뇨망막증, 망막박리, 중심성망막증, 야맹증, 망막색소변성증, 망막전막, 색소성 망막염, 시신경병증 및 망막병증 으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것일 수 있다.
본 발명은 또한, 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막기능 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 망막기능은 시신경 세포와 관련된 기능인 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 조성물은 식품 조성물, 화장품 조성물, 의약품 조성물 및 의약외품 조성물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것일 수 있다.
따라서, 본 발명의 차조기 발효 추출물은 발효하지 않은 차조기 추출물에 비하여 산화스트레스에 의한 시신경 세포의 사멸을 유의적으로 억제시키므로 시신경 세포 감소과 관련된 망막 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 또는 망막 기능 개선용 조성물로서 효과적으로 사용될 수 있다.
도 1은 시신경 세포에서 산화적스트레스(H2O2)로 유도된 세포손상에 대한 차조기 수용성 추출물 또는 차조기 발효 추출물의 보호효과를 나타낸다. 차조기 수용성 추출물을 바실러스 서브틸리스로 발효한 발효 추출물(B. subtilis)의 시신경 보호효과는 차조기 수용성 추출물 및 다른 발효 추출물에 비하여 가장 우수한 것으로 나타냈다. 붉은 점선은 산화적 스트레스에 의해 손상된 용매 대조군(Veh)의 세포 생존률을 나타낸다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명의 '망막질환(retinal diseases)'은 망막에 이상이 생겨 발생할 수 있는 모든 질환을 포함하는 개념이며, 특히 시신경 세포의 감소 내지 사멸과 관련된 망막질환을 의미할 수 있다.
본 발명의 '차조기 발효 추출물'은 차조기 추출물을 먼저 제조한 다음 발효균주를 이용하여 추출물을 발효시킨 것을 의미한다.
본 발명의 '개선'은 망막의 기능 내지 망막질환과 관련된 증상 등이 질적 또는 양적으로 완화되는 모든 효과를 의미한다.
차조기 추출물을 바실러스 서브틸리스, 락토바실러스 람노서스 또는 사카로마이세스 세레비지에로 발효시켜 제조(실시예 1)한 차조기 발효 추출물을 과산화수소로 산화스트레스를 유발한 시신경 세포에 처리한 결과(실시예 3), 시신경 세포의 사멸이 유의적으로 억제되었다. 이는 본 발명의 차조기 발효 추출물이 시신경 세포 보호 효과 더 나아가 망막의 기능을 개선시키는 효과가 있음을 의미한다.
특히, 차조기 추출물을 바실러스 서브틸리스로 발효시키는 경우, 발효하지 않은 차조기 수용성 추출물이나 락토바실러스 람노서스 또는 사카로마이세스 세레비지에로 발효시킨 다른 차조기 발효 추출물들과 비교하여 가장 우수한 시신경 세포 보호 효과를 나타냈다. 구체적으로, 상기 차조기 바실러스 서브틸리스 발효물은 10 ~ 300 ㎍/mL 의 농도에서 가장 유의적인 시신경 세포 사멸 억제 효과가 나타났다(도 1).
따라서, 본 발명은 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
차조기(Perilla frutescens)는 차즈기로도 불리며 항균 내지 항암효과가 있다고 알려져 있다. 캘리포니아롤 또는 스시 등 밥으로 하는 요리에 사용되기도 하며 음식의 색을 내거나 직물 등을 염색하는데에 염료로서 사용되기도 한다.
차조기 발효 추출물을 제조하기 위하여 먼저, 차조기 추출물을 제조한다. 이는 차조기의 잎, 줄기, 꽃 또는 열매 등의 지상부 내지 전초로부터 추출할 수 있으나, 바람직하게는 차조기의 잎, 줄기, 꽃 또는 열매 등의 지상부에서 추출하는 것이 바람직하고, 가장 바람직하게는 차조기의 잎에서 추출하는 것이 바람직하다. 추출 용매는 물, C1 내지 C6의 알코올 또는 이들의 혼합물일 수 있으나, 바람직하게는 물 또는 C1 내지 C4의 저급알코올인 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게는 물, 메탄올, 에탄올 또는 프로판올 인 것이 바람직하며 가장 바람직하게는 물을 용매로 하는 것이 가장 바람직하다(실시예 1).
상기 차조기 추출물을 발효시키는데 사용할 수 있는 발효균주는 고초균, 유산균 또는 효모를 이용할 수 있으며, 바람직하게는 상기 고초균은 바실러스(Bacillus)속, 유산균은 락토바실러스(Lactobacillus)속, 효모는 사카로마이세스(Saccharomyces)속 인 것이 차조기 추출물의 시신경 세포 사멸 억제효과를 증진시키는 데에 바람직하다.
상기 고초균은 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis), 바실러스 투링기엔시스(Bacillus thuringiensis), 바실러스 리체니포미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens), 바실러스 스테아로서모필리스(Bacillus stearothermophilus), 바실러스 코아귤란스(Bacillus coagulans), 바실러스 롱검(Bacillus longum), 바실러스 푸밀루스(Bacillus pumilus), 바실러스 브레비스(Bacillus brevis), 바실러스 서큘란스(Bacillus circulans) 및 바실러스 폴리믹사(Bacillus polymyxa)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 바실러스(Bacillus)속 균일 수 있고;
상기 유산균은 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 류테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius) 로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 락토바실러스(Lactobacillus)속 균일 수 있으며;
상기 효모는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 유바룸(Saccharomyces uqvarum), 사카로마이세스 엘립소이데우스(Saccharomyces ellipsoideus), 사카로마이세스 카를스베르겐시스(Saccharomyces carlsbergensis), 사카로마이세스 사케(Saccharomyces sake), 사카로마이세스 코레아누스(Saccharomyces coreanus), 사카로마이세스 리폴리티카(Saccharomyces lipolytica) 사카로마이세스 보울라디(Saccharomyces boulardii) 및 사카로마이세스 파스토리아누스(Saccharomyces pastorianus)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 사카로마이세스(Saccharomyces)속 균일 수 있다.
발효 조건은 5℃ 내지 80℃ 에서 30분 내지 10일 동안 수행하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 20℃ 내지 40℃에서 3일 내지 8일 동안 수행하는 것이 바람직하고, 가장 바람직하게는 22℃ 내지 30℃에서 4일 내지 6일 동안 수행하는 것이 가장 바람직하다(실시예 1).
상기 차조기 발효 추출물의 투여경로는 경구 또는 비경구로 가능하며, 비경구의 경우 피부외용, 주사, 경피 또는 비강 등의 경로로 투여할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 차조기 발효 추출물의 투여로 인하여 시신경 세포 사멸과 관련된 증상들을 완화시킬 수 있으며 그외 망막 기능이 개선되는 효과를 얻을 수 있어 궁극적으로는 망막질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
본 발명의 상기 망막질환은 시신경 세포의 사멸 등의 원인으로 망막 기능에 이상이 생겨 나타나는 모든 질환을 의미하나, 바람직하게는 녹내장, 황반변성(노인성, 습성 또는 건성 황반변성), 망막 혈관폐쇄, 황반원공, 당뇨망막증, 망막박리, 중심성망막증, 야맹증, 망막색소변성증, 망막전막, 색소성 망막염, 시신경병증(선천성 레베르시신경병증 또는 허혈성 시신경병증) 및 망막병증(퇴행성 망막병증, 당뇨병성 망막병증, 고혈압성 망박병증, 미숙아 망막병증 또는 허혈성 망막병증) 으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게는 녹내장 또는 황반변성인 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 상기 조성물을 제형화할 경우에는 하나 이상의 완충제(예를 들어, 식염수 또는 PBS), 항당뇨제, 정균제, 킬레이트화제(예를 들어, EDTA 또는 글루타치온), 충진제, 증량제, 결합제, 아쥬반트(예를 들어, 알루미늄 하이드록사이드), 현탁제, 농후제 습윤제, 붕해제 또는 계면활성제, 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분(옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분 등 포함), 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 덱스트로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 말티톨, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 예컨대, 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다.
경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 또는 보존제 등이 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있으며, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제 또는 좌제 등이 포함된다. 비수성용제 및 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있으며, 비경구 투여시 피부외용; 복강내, 직장, 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사하는 주사제; 경피 투여제; 또는 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법에 따라 제형화할 수 있다.
상기 주사제의 경우에는 반드시 멸균되어야 하며 박테리아 및 진균과 같은 미생물의 오염으로부터 보호되어야 한다. 주사제의 경우 적합한 담체의 예로는 이에 한정되지는 않으나, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 이들의 혼합물 및/또는 식물유를 포함하는 용매 또는 분산매질일 수 있다. 보다 바람직하게는, 적합한 담체로는 행크스 용액, 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline) 또는 주사용 멸균수, 10% 에탄올, 40% 프로필렌 글리콜 및 5% 덱스트로즈와 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 상기 주사제를 미생물 오염으로부터 보호하기 위해서는 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르빈산, 티메로살 등과 같은 다양한 항균제 및 항진균제를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 주사제는 대부분의 경우 당 또는 나트륨 클로라이드와 같은 등장화제를 추가로 포함할 수 있다.
경피 투여제의 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태가 포함된다. 상기에서 경피 투여는 약학 조성물을 국소적으로 피부에 투여하여 약학 조성물에 함유된 유효한 양의 활성성분이 피부 내로 전달되는 것을 의미한다.
흡입 투여제의 경우, 본 발명에 따라 사용되는 추출물은 적합한 추진제, 예를 들면, 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 다른 적합한 기체를 사용하여, 가압 팩 또는 연무기로부터 에어로졸 스프레이 형태로 편리하게 전달 할 수 있다. 가압 에어로졸의 경우, 투약 단위는 계량된 양을 전달하는 밸브를 제공하여 결정할 수 있다. 예를 들면, 흡입기 또는 취입기에 사용되는 젤라틴 캡슐 및 카트리지는 화합물, 및 락토즈 또는 전분과 같은 적합한 분말 기제의 분말 혼합물을 함유하도록 제형화할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여하는데, 약제학적으로 유효한 양은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 즉, 본 발명의 조성물의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하다. 일일 투여량으로는, 비경구 투여 시 차조기 발효 추출물을 기준으로 하루에 체중 1 kg당 바람직하게 0.01 내지 1000 mg, 더 바람직하게는 0.01 내지 300 mg의 양으로 투여되도록, 그리고 경구 투여 시는 본 발명의 차조기 발효 추출물을 기준으로 하루에 체중 1 kg당 바람직하게 0.01 내지 1000 mg, 더 바람직하게는 0.01 내지 300 mg의 양으로 투여되도록 1 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 또한 차조기 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 외용제의 제형으로 제공할 수 있다. 본 발명의 차조기 발효 추출물을 피부외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항당뇨제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 유화제, 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 활성제, 친유성 활성제 또는 지질 소낭 등 피부 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명의 망막질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물이 피부 외용제로 제공될 경우, 이에 제한되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제 등의 제형일 수 있다.
또한 본 발명은, 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 차조기 발효 추출물은 상기 약학적 조성물에 사용된 것과 동일하므로 설명은 그 기재로 대신한다.
상기 망막질환은 상기 약학적 조성물의 적용 대상과 동일하므로 설명은 그 기재로 대신한다.
상기 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
본 발명의 차조기 발효 추출물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 화합물을 함유하는 것 외에는 다른 성분에 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
상기 외에 본 발명의 차조기 발효 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 차조기 발효 추출물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 차조기 발효 추출물 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한 본 발명은, 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막 기능 개선용 조성물을 제공한다.
상기 차조기 발효 추출물은 상기 약학적 조성물에 사용된 것과 동일하므로 설명은 그 기재로 대신한다.
상기 망막기능은 물체를 식별하게 해주는 망막의 역할 내지 기능을 의미하며, 망막기능 개선은 차조기 발효 추출물로 인하여 시신경 세포가 보호됨으로써 상기 망막의 역할 내지 기능이 양적 또는 질적으로 증강되는 것을 의미할 수 있다.
본 발명의 상기 조성물은 식품 조성물, 화장품 조성물, 의약품 조성물 및 의약외품 조성물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 조성물인 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
화장품 조성물로 제제화되는 경우, 상기 차조기 발효 추출물의 함량은 화장품 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 10 중량%이며, 바람직하게는 0.01 내지 5.0 중량%이다. 최소한의 망막기능 개선 효과를 달성할 수 있도록 차조기 발효 추출물의 함량은 상기 최소치 이상인 것이 바람직하며, 과량 첨가에 따른 사용감 저하 및 각종 제형에의 적용가능성을 고려하여 차조기 발효 추출물의 함량은 상기 최대치 이하인 것이 바람직하다. 이때, 차조기 발효 추출물의 함량은 제형 또는 화장품 조성물에 함유되는 성분들의 함량에 따라 상기 범위 내에서 적절히 조절하는 것이 바람직하다.
본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 차조기 발효 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장품 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들면 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 젤, 파우더, 보디로션, 보디크림, 보디오일, 보디에센스 등의 화장품으로 제형화 될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 제한되는 것으로 해석하지 않는 것은 해당 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명한 것이다.
차조기 추출물 및 이의 발효물 제조
차조기를 80℃에서 30분 동안 2회 열수추출한 후 121℃에서 20분간 멸균하였고, 이후 증발기로 농축하여 차조기 수용성 추출물(차조기 추출물)을 획득하였다. 상기 멸균된 차조기 수용성 추출물을 고초균, 유산균 또는 효모로 발효하여 차조기 발효 추출물을 제조하였다.
구체적으로, 고초균으로서 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis), 유산균으로서 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) 또는 효모로서 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerebisiae) 중 한 종을 각각 차조기 추출물에 접종한 후 온도 25 ℃, 습도 80%의 환경에서 140rpm으로 진탕배양 하면서 5일간 발효시킨 후 증발기로 농축하여 최종적으로 차조기 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis) 발효물, 차조기 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) 발효물 및 차조기 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerebisiae) 발효물의 차조기 발효 추출물을 제조하였다.
세포의 준비
시신경 세포인 R28 세포를 실험 때까지 저포도당(low glucose), 10% 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS), 1% 항생제(penicillin 및 streptomycin)가 들어있는 DEME 배지(Dulbecco Modified Eagle Medium)를 37℃ 및 5% CO2의 조건에서 배양하여 준비하였다.
차조기 발효 추출물의 시신경 보호 효과
차조기 수용성 추출물(차조기 추출물) 내지 차조기 발효 추출물이 산화스트레스로부터 시신경 세포를 보호하는 효과가 있는지 여부를 확인하고자 하였다.
구체적으로, 상기 [실시예 2]의 R28 세포에 상기 [실시예 1]에서 제조한 차조기 추출물 내지 차조기 발효 추출물들을 각각 농도별로 10, 30, 100 또는 300 ㎍/mL씩 30분간 전처리하였다. 이후, 0.5 mM의 과산화수소(H2O2)를 24시간 처리하여 시신경 세포의 세포 사멸을 유도한 후에 세포 생존율을 측정하였다. 세포 생존율은 MTT 어세이를 통하여 MTT가 살아있는 세포의 미토콘드리아 환원효소(mitochondrial reductase)에 의해 포르마잔으로 형성되는 정도를 흡광도를 통해 측정함으로써 확인하였다. 대조군(Control, CTL)은 차조기 추출물 및 H2O2 모두 처리하지 않았으며, 용매 대조군(Veh)은 H2O2 만을 처리하였다(N=3, 평균±SD, *P<0.05 vs. CTL, #P<0.05 vs. Veh).
그 결과, [도 1]에 나타난 바와 같이, 차조기 수용성 추출물 및 발효 추출물 모두 시신경 세포의 사멸을 억제하는 것을 확인하였다. 그 중에서도 차조기 추출물을 바실러스 서브틸러스로 발효한 발효물(B. subtilis)이 차조기 수용성 추출물 내지 다른 발효물들에 비하여 같은 농도 대비 가장 우수한 시신경 세포 사멸 억제효과를 나타냈다. B. subtilis는 약 300 ㎍/mL에서 대조군 대비 최대 약 70~80% 수준의 가장 높은 세포 생존율을 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 하기 [표 1]과 같이 25% 보호효과가 나타나는 농도로 비교했을 경우(EC25), 차조기 수용성 추출물은 약 100 ㎍/mL에서 25%의 세포보호효과가 나타난 반면, 차조기 추출물을 바실러스 서브틸러스로 발효한 발효물(B. subtilis)은 약 10 ㎍/mL에서 25%의 세포보호효과가 나타났다.
[
제조예
]
1. 정제의 제조
차조기 발효 추출물
50㎎
비타민 C
10 mg
결정 셀룰로오스
515 mg
카르복시메틸셀룰로오스칼슘
12 mg
이산화규소
8 mg
스테아린산 마그네슘
5 mg
상기의 성분들을 혼합하고 통상적인 정제의 제조방법에 따라 습식과립법 또는 건식과립법을 이용하여 정제를 제조하였다.
2. 캡슐제의 제조
차조기 발효 추출물
100㎎
전분
50mg
유당
50mg
탈크
1mg
스테아린산 마그네슘
5mg
상기의 성분들을 혼합하고 통상적인 캡슐제의 제조방법에 따라서 캡슐제를 제조하였다.
3. 액제의 제조
차조기 발효 추출물
500㎎
이성화당
10g
자당
10g
레몬향
적당량
정제수를 가하여 전체
50㎖
상기의 성분들을 통상적인 액제의 제조방법에 따라서 혼합하여 갈색병에 충전하고 멸균시켜서 액제를 제조하였다.
4. 주사제의 제조
차조기 발효 추출물
50㎎
소디움 메타비설파이트
2.6㎎
메틸파라벤
0.5㎎
프로필파라벤
0.1㎎
주사용 멸균증류수
적당량
상기의 성분들을 혼합하고 통상적인 주사제의 방법으로 2㎖로 조절한 후, 앰플에 충전하고 멸균하여 주사제를 제조하였다.
5. 건강 기능성 음료 제조
비타민
0.5 중량%
식이섬유
4.0 중량%
액상과당
93.0 중량%
유화제
1.0 중량%
향료
0.5 중량%
차조기 발효 추출물
1.0 중량%
상기 조성물에 총 용량이 50 ㎖이 되도록 정제수를 혼합한다. 혼합액을 2 ~ 3 ㎛ 필터에 통과시켜 부유물을 제거한 최종혼합액을 90 ~ 93 ℃에서 15 ~ 20초간 살균하여 50㎖ 병에 충진하고 80 ~ 85℃에서 15 ~ 20분간 후 살균하여 건강 기능성 음료제품을 완성하였다.
Claims (12)
- 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 발효 추출물은 차조기의 잎, 줄기, 꽃, 열매 및 전초로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 부위에서 추출되는 것을 특징으로 하는 망막질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 발효 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출한 다음 발효균주로 발효시킨 것을 특징으로 하는 망막질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제3항에 있어서, 상기 발효균주는 고초균, 유산균 및 효모로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 망막질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 고초균은 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilis), 바실러스 투링기엔시스(Bacillus thuringiensis), 바실러스 리체니포미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens), 바실러스 스테아로서모필리스(Bacillus stearothermophilus), 바실러스 코아귤란스(Bacillus coagulans), 바실러스 롱검(Bacillus longum), 바실러스 푸밀루스(Bacillus pumilus), 바실러스 브레비스(Bacillus brevis), 바실러스 서큘란스(Bacillus circulans) 및 바실러스 폴리믹사(Bacillus polymyxa)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 바실러스(Bacillus)속 균이고;
상기 유산균은 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 류테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius) 로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 락토바실러스(Lactobacillus)속 균이고; 및
상기 효모는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 유바룸(Saccharomyces uqvarum), 사카로마이세스 엘립소이데우스(Saccharomyces ellipsoideus), 사카로마이세스 카를스베르겐시스(Saccharomyces carlsbergensis), 사카로마이세스 사케(Saccharomyces sake), 사카로마이세스 코레아누스(Saccharomyces coreanus), 사카로마이세스 리폴리티카(Saccharomyces lipolytica) 사카로마이세스 보울라디(Saccharomyces boulardii) 및 사카로마이세스 파스토리아누스(Saccharomyces pastorianus)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 사카로마이세스(Saccharomyces)속 균;
인 것을 특징으로 하는 망막질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제3항에 있어서, 상기 발효는 5℃ 내지 80℃ 에서 30분 내지 10일 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 망막질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 망막질환은 녹내장, 황반변성, 망막 혈관폐쇄, 황반원공, 당뇨망막증, 망막박리, 중심성망막증, 야맹증, 망막색소변성증, 망막전막, 색소성 망막염, 시신경병증 및 망막병증 으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 망막질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제8항에 있어서, 상기 망막질환은 녹내장, 황반변성, 망막 혈관폐쇄, 황반원공, 당뇨망막증, 망막박리, 중심성망막증, 야맹증, 망막색소변성증, 망막전막, 색소성 망막염, 시신경병증 및 망막병증 으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 망막질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 차조기(Perilla frutescens) 발효 추출물을 포함하는 망막기능 개선용 조성물.
- 제11항에 있어서, 상기 망막기능은 시신경 세포와 관련된 기능인 것을 특징으로 하는 망막기능 개선용 조성물.
- 제11항에 있어서, 상기 조성물은 식품 조성물, 화장품 조성물, 의약품 조성물 및 의약외품 조성물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 망막기능 개선용 조성물.
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WO2023287107A1 (ko) * | 2021-07-13 | 2023-01-19 | 임수복 | 손상된 망막상피세포에 대하여 세포사 억제 효과를 갖는 조성물 및 그 제조 방법 |
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2019
- 2019-04-23 KR KR1020190047567A patent/KR102456080B1/ko active IP Right Grant
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Cited By (1)
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WO2023287107A1 (ko) * | 2021-07-13 | 2023-01-19 | 임수복 | 손상된 망막상피세포에 대하여 세포사 억제 효과를 갖는 조성물 및 그 제조 방법 |
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Publication number | Publication date |
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KR102456080B1 (ko) | 2022-10-18 |
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