WO2007074769A1 - 生物組織固定・包埋・薄切用カセット及びその操作方法 - Google Patents

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WO2007074769A1
WO2007074769A1 PCT/JP2006/325771 JP2006325771W WO2007074769A1 WO 2007074769 A1 WO2007074769 A1 WO 2007074769A1 JP 2006325771 W JP2006325771 W JP 2006325771W WO 2007074769 A1 WO2007074769 A1 WO 2007074769A1
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embedding
cassette
biological tissue
slicing
tissue
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PCT/JP2006/325771
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Shigeru Amano
Yoshinobu Toda
Original Assignee
Kyoto University
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    • G01N2001/368—Mounting multiple samples in one block, e.g. TMA [Tissue Microarrays]

Definitions

  • the present invention is an operation for preparing a tissue specimen by performing a series of operations up to fixation, dehydration, penetration into an embedding agent, embedding, and further slicing in a single container (cassette).
  • the present invention relates to a fixed 'embedded' slicing cassette and a method for operating the same that can simplify and save labor and eliminate the contamination of other specimens.
  • the tissue When investigating the state of a tissue such as tissue force collected from a living organism, the tissue is examined in a histological laboratory to perform pathological diagnosis of the tissue, and the biological tissue is stored in a cassette for morphological research.
  • a series of operations such as fixing, embedding and slicing are generally performed.
  • the tissue collected from a living organism is first put directly into a bottle containing a fixative solution, or placed in a nylon mesh bag and then a bottle containing a fixative solution. 17 or in a cassette 1 as shown in FIG. 17 formed of a multi-hole plate, and as shown in the figure, the lid is closed and this cassette container is filled with a fixative such as formalin, pure ethanol, acetone or the like. Fix the tissue in a jar.
  • FIG. 17 2 is a partition provided in the container, 3 is a large number of small holes provided in the bottom of the container, and 4 is a fitting portion of the lid of the cassette.
  • the fixed container containing the cassette containing the biological tissue is carried to the tissue examination room.
  • the already fixed biological tissue may be put in a cassette container and used for the following operations.
  • the laboratory for tissue already stored and fixed in a cassette container, open the lid of the cassette container to check the biological tissue in the container and confirm the contents of the patient information described in the tissue and the cassette container. Close the lid and set it in the automatic embedding device.
  • the initial force is less likely to be in the cassette.
  • the fixed bottle force is also replaced with a cassette dedicated to knitting and weaving.
  • a biological tissue is immersed in a fixative solution in a fixed bottle in a biological tissue. After replacing the tissue in the fixed bottle with a cassette container, the tissue is set in an automatic embedding device. Do .
  • the tissue fixed in the nylon mesh can be directly set in the automatic embedding device.
  • tissue in a cassette container or nylon mesh is automatically subjected to dehydration and paraffin infiltration operations. When paraffin infiltration is completed, take out the cassette container or nylon mesh containing the automatic embedding force tissue and transfer it to the paraffin bath in the adjacent embedding center.
  • An automatic embedding device is a device that automatically performs a series of operations from dehydration of biological tissue to paraffin infiltration.
  • An embedding center is a device that embeds and cools tissue that has been infiltrated with an embedding agent.
  • Automatic laboratories and embedment centers are currently used in most laboratories Fixing and embedding of thin slicing cassettes manually without using automatic embedding devices It can be impregnated with paraffin, and can be embedded and cooled manually without using the embedding center.
  • an embedding dish prepared separately on the embedding center table is set at a predetermined position, and a small amount of melted paraffin is poured into the embedding dish.
  • Patent Document 1 Japanese Patent Laid-Open No. 8-211047
  • Patent Document 1 collects as much tissue as possible by simply placing a plurality of biopsy samples on the bottom surface when placing the collected biopsy sample on the bottom surface in the dish of the embedding cassette.
  • a tissue in a strip shape such as the human liver, kidney or prostate, or a small and irregular tissue such as gastric mucosa or large intestine mucosa is collected as a biopsy sample
  • these tissues are placed in an embedding cassette. Simply placing it may ultimately prevent the entire tissue from being neatly adhered to the bottom surface of the embedding dish. For this reason, there is a possibility that sufficient inspection information over the entire length of the biopsy sample cannot be obtained when it is sliced later with a microtome.
  • the biopsy sample is solidified with a fixing support containing dalcomannan and formalin, and an embedding cassette is placed in a capsule container, and the surroundings are gelled containing methanol and formalin.
  • the capsule container is transported to a pathology laboratory, where the embedding cassette taken out from the capsule container is placed in another container, dehydrated with a dehydrating agent, further degreased and transparent.
  • FIG. 9 (b) which is compared with the process chart of the present invention (FIG. 9 (a), details will be described later), a series of steps from the collection of the biopsy tissue by the conventional method to the dyeing work are performed.
  • the “process table” is shown. Note that (b) bold arrows in the figure f (f, f, f, f) indicate the organization of the doctor, nurse or laboratory technician.
  • a container is made of a material that can be sliced, the collected biological tissue is stored in the container, and then the container is fixed until embedding and slicing. Advance the operation process without changing, simplifying the work, saving labor, eliminating the possibility of tissue deformation and destruction, and the possibility of mistakes in the organization, and embedding the tissue in close contact with the bottom As a result, it is a first object to provide a cassette for fixing and embedding a biological tissue capable of obtaining a good and accurate histopathological diagnosis result.
  • Another problem is that the biological tissue fixing and embedding obtained in the first problem is used to store and fix the biological tissue and embed it, and the tissue fixing force is sliced. Can be operated without changing the container in the middle of the operation until the specimen tissue is put in the cassette, and furthermore, it is possible to maintain the tissue form, prevent the destruction, and create a consistent biopsy tissue that prevents mistakes Tissue fixation 'embedding' is to provide a thin slice operation method.
  • a substrate on which a biological tissue collected on a slicable material plate having a hardness and strength greater than or equal to a predetermined value is placed; It is equipped with a cover plate that can bend the material plate or open and close a separate plate so that it can be attached and detached.
  • the substrate is provided with a storage section for storing biological tissue, and the cover plate is closed to keep the biological tissue in close contact with it.
  • a holding member is provided in the housing part of the substrate via a cover plate or detachable, and both plates are fixed with biological tissue ⁇ Embedding * slice cassette It is a thing.
  • Fixing and embedding biological tissue which is another means of solving the above problem using the cassette for embedding and slicing the biological tissue.
  • Slicing force Place biological tissue in the storage section under the substrate of the set, close the cover plate to store the biological tissue in the storage section, fix biological tissue and embed * Dip the sliced cassette in the fixative, Fix the biological tissue in a state where the biological tissue is fixed with the tightly attached 'holding material, then fix'embedding' thin cutting force set in the automatic embedding device and dehydrated, then put it in the embedding agent penetration tank Place and fix the embedding agent into the biological tissue in the thin slice cassette, then remove the fixed 'embedding' thin slice force set from the automatic embedding device and place it in the embedding dish.
  • More embedding agent Fixing and embedding After embedding the thin-cutting cassette, separate it from the embedding dish to form a thin-cut embedding block, and place this thin-cut embedding block on a microtome for tissue section preparation.
  • Securing 'embedding' Slicing embedding block including slicing cassette Immobilizing biological tissue 'embedding-Securing slicing cassette' embedding ⁇ Slicing operation method can be adopted .
  • the embedding agent for frozen section preparation is injected and embedded in the fixed' embedded 'sliced cassette immediately, and the cover plate
  • the fixed 'embedding' slicing cassette may be frozen, and then the biological tissue fixed 'embedded' slicing method may be employed, by slicing with a cryostat.
  • a cryostat is a device that slices biological tissue under freezing by installing a microtome for slicing in a freezing room with a minus 15 ° C force and minus 30 ° C.
  • the biological tissue fixing / embedding / slicing cassette having the above-described configuration is such that the biological tissue is not moved in the bottom surface of the storage unit by opening the cover plate from the substrate and putting the biological tissue in the storage unit under the substrate.
  • the biological tissue is brought into close contact with the bottom surface with a holding member, the lid plate is closed, and it is placed in a container containing formalin for transport.
  • the cassette containing this biological tissue is also taken out of the container, set in the automatic embedding device, dehydrated, infiltrated with norafine embedding agent, and then taken out from the automatic embedding device, the inside of the cassette Place the biological tissue in the embedding dish without removing the biological tissue from the cassette, and embed it by injecting the embedding agent from the upper force set. In some cases, an embedded frame is required.
  • the terms “substrate” and “cover plate” are a concept including the material of the base sheet and the cover sheet, and the base sheet or the cover sheet having a relatively thin thickness is formed in a planar form depending on the form and thickness of the plate material. It is called a lid sheet, and it is a three-dimensional form that is relatively thick and is called a substrate or lid plate.
  • a thin embedding block including the cassette storing the biological tissue is formed.
  • a good biological tissue specimen can be obtained by slicing this block with a microtome.
  • slicing refers to slicing biological tissue with a special blade called a microtome.
  • fixation can be performed by coagulating or denaturing biological proteins with chemicals such as formalin, picric acid / formalin 'acetic acid mixture, pure ethanol, and acetone according to the purpose of staining.
  • Liquid component It is to change from a state to a solid state (usually a formalin aqueous solution is used).
  • the above cassette is made of a material that can be sliced with a microtome, and once the collected biological tissue is stored in this cassette container, a series of operations are performed without changing the container from fixing to slicing process. This makes it possible to simplify work, save labor, reduce yarn and weaving, and eliminate the possibility of mistakes occurring between tissues.
  • tissue since the tissue is in close contact with the bottom of the cassette, it is possible to reduce the deformation of the tissue that occurs during the process of tissue collection, fixation, and embedding, and to produce a good sliced section.
  • Embedding means that biological tissue is infiltrated into paraffin, paraplast, celloidin, epoxy resin, etc. according to the purpose of specimen preparation, and paraffin is usually used.
  • the biological yarn and weave fixing / embedding thin-cut cassette includes a substrate on which the biological yarn and weave is placed, and a lid plate that opens and closes the substrate.
  • a storage unit for storing biological tissue is provided, and a biological tissue is closely attached and held to prevent movement of the biological tissue. Since a large number of small holes were provided, the biological tissue was stored in the cassette container, and after the biological tissue was prevented from moving, it was fixed with the cassette together with the fixing agent, dehydrated, and the embedding agent penetrated.
  • the embedding with an embedding agent is formed into a block for slicing, and this block is installed in a microtome, and the biological tissue can be sliced by slicing the block including the force set. can get.
  • the biological tissue fixing / embedding 'thin cutting cassette substrate storage portion Place the biological tissue on top, close the lid plate to accommodate the biological tissue, immerse this cassette in the fixative, and fix the biological tissue in a state where the biological tissue is fixed with the adhesion 'holding member, Embed this cassette After that, it is separated from the embedding dish to form an embedding block for slicing, and this block is placed on a microtome to slice the block including the cassette.
  • the tissue is collected and placed in a cassette, then sliced to a thickness of a few microns with a microtome, and the biological tissue is not handled with tweezers at all until it is stained.
  • the tissue can be manipulated, and the preparation of sliced sections for staining biological tissue can be made easily and satisfactorily, preventing mistakes in the tissue during the work, and simplifying the work and saving labor.
  • Various effects are obtained such that it can be used as an effective test container in the histomorphological examination area including clinical examination.
  • FIG. 1 (a) perspective view of the cassette for biological tissue fixation 'embedding ”of the first embodiment (a) perspective view, (b) (a) sectional view from arrow B-B
  • FIG. 4 (a) Container force in the paraffin infiltration tank of the automatic embedding device. Explanatory diagram of the work to take out the same cassette, (b) Explanatory diagram of the work to put the cassette on the embedding dish.
  • FIG.5 Cross-sectional view of the above cassette placed on an embedding dish, an embedding frame placed above it, and molten paraffin poured from the top
  • FIG. 6 (a) Perspective view of the embedding block for thin slices with the block force formed on the embedding pan removed, and (b) The embedding block for thin slices as a microtome for thin slices Explanation of set state
  • FIG. 8A is an external perspective view of the cassette for embedding and slicing a biological yarn and weaving for storing the biological yarn and weaving according to the first, second, and third modified examples.
  • FIG. 8B Biological tissue fixation / embedding of the first variant * Partially cut-out cassette for slicing The external perspective view of the variant
  • FIG. 9 Process chart of biopsy tissue manipulation ((a) Invention of the present application, (b) Conventional example)
  • FIG. 10 is an exploded perspective view of the cassette for embedment and slicing according to the second embodiment.
  • FIG. 11 (a) Top view of the cassette in FIG. 10, (b) (a) Cross section from B-B in (a), (c (a) Cross-sectional view of arrow C in the figure
  • FIG. 13 (a) Cross-sectional view of operation for pouring paraffin into cassette, same as above (b) Cross-sectional view showing the state of setting to microtome and slicing
  • FIG. 14 is an exploded perspective view of a biological tissue fixing 'embedded' thin slice cassette for storing biological tissue of first, second, and third modified examples of the second embodiment.
  • FIG. 17 is an external perspective view of an example of a conventional container for storing collected biological tissue.
  • FIG. 1 shows a cassette 10A for fixing and embedding a biological tissue according to the first embodiment.
  • (A) is an external perspective view
  • (b) is a cross-sectional view taken along the line BB in FIG.
  • This cassette 10A is a biological tissue fixing / embedding sliced cassette that has multiple grooves on the bottom and fixes and “embeds” slices of biopsy tissues such as liver, prostate, and kidney. .
  • the other shape of the cassette is shown in FIG. 8A, which will be described later.
  • the fixed / embedded 'thin-cutting cassette 10A is made by folding one long thin plastic sheet into two at the bent portion 14 and facing one side to the base sheet 11'.
  • the sheet piece is a lid sheet 12 ', and the base sheet 11' is formed with a plurality of rows of grooves 13.
  • the biological tissue adheres and holds and the movement of the biological tissue is prevented.
  • the biological tissue is brought into close contact with the bottom surface, and the biological tissue is not destroyed! /
  • a sponge material 13a having a certain degree of elasticity and capable of being sliced is attached.
  • the sponge material 13a is not necessarily required to be attached to the lid sheet.
  • the sponge material 13a is stored in the groove 13, and is taken out during use and the tissue is stored in the groove 13.
  • the seat 12 ' may be closed.
  • the force is a sponge material.
  • an adhesive may be used to hold the biological tissue tightly and hold it.
  • the material of the base sheet 11 and the lid sheet 12 is water-resistant, fixing agent resistance to fixing agents such as formalin, alcohol, and acetone, and organic solvents such as xylene and black mouth form. Resistant to organic solvents, unaffected by paraffin, not affected by significant deformation and material changes due to temperature changes of 30 ° C to 65 ° C, and has a microtome (slicing device) to be described later.
  • the portion of the groove 13B of the storage unit 13 is made of a material capable of slicing a fixed-embedded slicing cassette containing biological tissue to a thickness of several microns.
  • 15 is a patient information display part such as a patient name and a code symbol written on the back of the corner position of the base sheet 11 ′, and 15a is for distinguishing a collected tissue written next to the groove of the base sheet 11 ′. It is a groove number.
  • the base sheet and the groove material are made of polypropylene selected from the medium strength of synthetic polymer compounds (plastic).
  • the base sheet 11 ′ and the groove 13 are made of two types of polypropylene with different thicknesses. Both are rigid.
  • the base sheet 11 ′ is harder and the groove 13 is harder.
  • the cassette 10A in the illustrated test example has a length of 20 mm, a width of 34 mm, a groove width of 3 mm, a groove depth of 2 mm, a material thickness of the base sheet 11 ′, a lid sheet 12, force O. 4 mm to: Lmm,
  • the groove 13 (the entire U-shaped cross section) is 0.1 mm to 0.2 mm.
  • the sponge material 13a has a width of 2.5 mm, a height of 1.5 mm, and a length of 20 mm corresponding to the groove of the base sheet.
  • the size and thickness of the sheet and sponge material are of course not limited thereto.
  • polypropylene is shown as the sheet and groove material, but other materials such as Teflon may be used instead, as long as the material satisfies the above-mentioned conditions such as resistance, temperature resistance and sliceability. (Registered trademark), polystyrene, nylon, ABS resin, paper with special processing, or other biological materials can be used.
  • a fitting portion 15b formed by a small concave portion and a convex portion that are closely fitted to each other at appropriate positions around the front end side of both sheets is provided on one of the sheets and the other sheet.
  • the respective concave and convex portions are fitted to each other so that both sheets are fitted. Put it into a combined state. If necessary, the concave and convex fitting portion 15b releases one of the two sheets by separating the other force.
  • the lid sheet 12 ' can be attached to and detached from the base sheet 11' Various types other than the above can be adopted.
  • the fixed / embedded 'slicing cassette 10A having a groove having the above-described configuration is a cassette container mainly used for clinical examination of collected biological yarn and tissue, and before being collected by human biopsy.
  • a long and narrow strip of tissue such as a prostate is accommodated, and then a series of operations required for preparation of tissue-stained specimens from fixation, dehydration, embedding and embedding of the embedding agent, and slicing are performed in the same container. It is used to simplify work and save labor, and to produce reliable and good tissue stained specimens.
  • FIG. 1 to FIG. 9 the following series of operations will be described in which the biological tissue is accommodated in the fixed / embedded / slicing cassette 10A.
  • the patient name and the collection date of the target patient are displayed on the patient information display section 15 of the unused fixed “embedded” sliced cassette 10A. Enter patient information such as the site.
  • the lid sheet 12 ′ is opened from the base sheet 11 ′, and the collected biological tissue T 1, T,...
  • a plurality of grooves 13 in the cart 11 ' are sequentially accommodated in a predetermined arrangement. Then, cover the base sheet 11 'with the cover sheet 12' with the sponge for tissue adhesion / holding function, and close the cassette so that the biological tissue is in close contact with the bottom surface of the base sheet 11 '.
  • the sponge material may be stored in a groove that does not need to be attached to the lid sheet. Immediately place the cassette containing the biological tissue into a fixed bottle containing fixative.
  • the fixing bottle 20 for transporting the fixing / embedding * thin cutting cassette 10A is filled with the fixing solution Ls so that the fixing / embedding * thinning cassette 10A is sufficiently immersed. Put the force set in the fixer Ls. Close the lid 21 of the fixed bottle 20 that is the cassette storage container and fix it. Enter the hospital name etc. in the display section 22 of the fixed bottle 20.
  • the above work is carried out at the hospital or clinic where the patient belongs, and then transported from the hospital to the laboratory. In hospitals with clinics such as clinics, they are transported from the tissue collection room to the tissue examination room.
  • the lid 21 of the fixed bottle 20 is opened, the fixed "embedding" thin-cutting cassette 10A is taken out, and set in the automatic embedding apparatus.
  • the cassette moves to the paraffin infiltration tank after dehydration.
  • a plurality of containers in the paraffin infiltration tank 30 (made of wire mesh) 31 are placed.
  • the fixed “embedded” thin-cut cassette 10A (10a-10d) is taken out by the forceps in the tank and transferred to the paraffin tank installed in the embedding center.
  • the cassette removed from the paraffin bath is placed in the embedding dish 40 containing a small amount of paraffin with the bottom of the cassette facing down.
  • the embedding frame 41 is set on the embedding dish 40 from above the cassette in the embedding dish 40 on the embedding center as shown in FIG.
  • melted embedding Lp such as paraffin is poured into embedding dish 40.
  • the embedding agent Lp is poured into embedding dish 40.
  • the upper force of embedding frame 41 is also pressed with tweezers toward the embedding pan.
  • the embedding dish 40 is moved onto a cooling stand (not shown) adjacent to the embedding center, and is cooled for a predetermined time to solidify the embedding agent Lp in the embedding dish 40 and the embedding frame 41. .
  • the blocking force by the solidified embedding agent Lp is removed.
  • the slicing block Bp including the fixing / embedding * slicing cassette 10A shown in FIG. 6 (a) is obtained.
  • embedded frame 41 is shown below). It is embedded with the bottom of the cassette attached to the paraffin surface of the paraffin block.
  • Bp is an upper layer block including a fixed / embedded thin slice cassette 10A
  • Bp is a lower layer block including an embedding frame 41.
  • the patient information entered in the patient information display section 15 can be seen through the fins.
  • the thin-cut block Bp thus obtained is set in the block holding part 51 of the microtome 50 as shown in FIG.
  • the top surface force of the block Bp is cut several times, and the ultrathin cut piece Bp depends on the cutting depth.
  • Slicing with the microtome of the resulting block Bp containing the biological tissue was a good slicing result similar to the conventional method.
  • the next dyeing operation process is started.
  • This cut piece Bp includes a thin piece of biological tissue T to T and a thin piece of cassette material of a cassette for fixation and embedding 'thin cutting 13
  • the thin section 13 'of the cassette material was not stained in the general staining, but only the biological tissue was stained, and the same good staining results as in the conventional method were obtained.
  • the base sheet 11 'and the lid sheet 12' are formed by integrally folding a single long sheet into two folded sheets. These sheets may be formed so as to be detachable from each other by providing fitting / detaching portions on both sheets.
  • the groove 13 is provided as a housing structure on the bottom surface of the base sheet, and the groove 13 is provided with a plurality of narrow strips of grooves 13 in a direction orthogonal to the sheet length direction is provided in parallel with each other.
  • the groove shape is not limited to this, and may be, for example, an L shape or a U shape.
  • the bottom storage structure may have various structures such as a flat surface, a dent, or a shape divided by a partition plate, which will be described later.
  • FIG. 9 shows a comparison table of the above “operation steps”.
  • (a) is a process when the cassette of the above embodiment is used
  • (b) is a process when a conventional cassette is used.
  • the tissue sample collected at the hospital is put in a cassette and moved to a tissue examination room, and then the tissue examination room is moved to the embedding cassette. If the cassette of the above embodiment was used, the tissue was transferred to the cassette at the hospital (F) and transferred until the last (F) staining work.
  • FIG. 8A shows fixed / embedded 'thin-cutting cassettes 1 OA', 10A ", 10A '" according to modified examples (first to third modified examples) of the first embodiment.
  • the fixed 'embedded' slicing cassette 10A 'in the first modified example of Fig. 8A (a) has a predetermined depth protruding below the base sheet 11' (opposite to the lid sheet 12 ').
  • Multiple small, irregular biopsy tissues such as gastric mucosa biopsy tissue, large intestinal mucosa biopsy tissue, cervical mucosa biopsy tissue, etc. This is a cassette for slicing and embedding biological tissue.
  • the edge material 13c of the recess 13b and As in the case of the groove 13, the lower bottom material is made of a material that can be sliced thinner than the base sheet 11 ′.
  • the fixed, embedded, and sliced cassette 10A "of the second modified example of FIG. 8 (b) is surrounded by an edge member 13c having a predetermined depth protruding downward from the base sheet 11 '.
  • This is a cassette with a storage section consisting of a plurality of dents 13b separated by a partition plate 13b ', and is used to fix biological tissues for multiple medium-sized tissues obtained by excision of large intestine polyp or transurethral bladder cancer.
  • the rim 13b edge 13c, partition 13b 'and bottom bottom material are thinner than the base sheet 11' and can be sliced.
  • the shape in which the partition plate 13b 'is provided can be various shapes other than the cross shape. Also, when the space of the recess 13b is expanded as much as possible from the state shown in the figure. The force that the top thickness of the rim 13c matches the width of the base sheet 11 ' And Mukoto.
  • FIG. 8A (c) shows a third modified example of the fixed, embedded, and thin-cut cassette 10A ′ ”of the base sheet 11
  • a cassette with a storage section consisting of a recess 13b surrounded by an edge material 13c projecting at a predetermined depth and having a flat bottom surface. It is large and flat, such as liver surgery material and gastric surgery material. Biological tissue immobilization for tissue. Also in this modified example, the edge member 13c and the lower bottom member of the recess 13b are made of a material that can be sliced from the base sheet 11 'in the same manner as the groove 13.
  • a sealing / holding sponge material 13a as shown in the first embodiment is attached to the lid sheet 12 'of each of the above embodiments.
  • Each sponge material 13a is formed in a shape corresponding to a recess of the base sheet 11 ', a space partitioned by a partition plate, and a planar storage space.
  • the top thickness of the edge member 13c matches the width of the base sheet 11 ', but the base sheet 11' includes this case.
  • the sponge material 13a is not necessarily required to be attached to the lid sheet 12 ', but is stored in the recess 13b as a storage portion, and is taken out during use and the tissue is stored in the recess 13b. After that, the upper force may be set on the tissue of the groove 13 to close the lid sheet 12 '. Also, the base sheet 11 'is stored in the bottom, side and end plates, as well as the lid sheet 12'. Although not shown in the area other than the surface of the sponge material 13a attached corresponding to the part, the diameter is 0 so that the liquid can enter the cassette during fixing, dehydration, embedding agent penetration, and embedding operation. . 5mm ⁇ l.
  • the Omm about multiple holes provided in the standard of 10 holes and 40 holes ZlOOmm 2.
  • the base sheet 11 ′ and the lid sheet 12 ′ are mutually connected in the same manner as in the first embodiment! Take the type to join to the heel.
  • the fixed “embedded” thin-cutting cassette is a force bending type in which the base sheet 11 ′ and the lid sheet 12 ′ are bent at the bent portion 14.
  • the base sheet 11 ′ and the lid sheet 12 ′ can be made detachable.
  • the biological yarn and weave fixed / embedded thin slice cassette 10AR which is an example applied to the fixed 'embedded' thin slice cassette of the first modification, is shown, and the other The modification is not shown in the figure.
  • a fitting portion 15b having a small concave portion and a convex portion which are fitted in close contact with each other at appropriate positions around both sheets is provided. A plurality of positions are formed on one sheet and the other sheet.
  • the concave and convex portions are fitted to each other so that the two sheets are joined. If necessary, the concave and convex fitting portion 15b can be opened by pulling one of the sheets away from the other.
  • the base sheet 11 ' may be attached to the base sheet 11' in such a manner that it is detachable in addition to the type with the concave and convex fitting portion 15b, for example, a type in which the outer peripheries of both sheets are appropriately joined together by clamping means such as clips and staples.
  • clamping means such as clips and staples.
  • Various types other than the above can be adopted as long as the lid sheet 12 'can be attached and detached.
  • the base sheet 11 'and the lid sheet 12' In general, they are formed with the same material and the same thickness (may be different materials and different thicknesses), but in the fixed 'embedded' slicing cassette of each embodiment described above, slicing is performed by a microtome in the final process. Since the lid sheet 12 'does not need to be sliced, the lid sheet 12' is made of a material different from the base sheet 11 'and of a different thickness (thick, hard and high strength). Do it.
  • FIG. 10 is an exploded perspective view of the fixed “embedded” thin-cut cassette 10B of the second embodiment.
  • the cassette 10B includes a peripheral plate (side plate) 17 having a support portion 17a using the same material as the substrate 11 along the outer periphery of the substrate 11 of the cassette 10A of the first embodiment.
  • 1 2 is formed as a separate body (detachable), and the shape of the lid plate 12 and the details of the edges are slightly different, and the close contact holding member 13A is not adhered to the back surface of the lid plate 12 and is prepared separately one by one This is different from the example of the first embodiment.
  • Reference numeral 17a denotes a supporting part for the peripheral plate, and 18 denotes a gripping part for the cover plate 12. The position of the gripping portion is not limited to this portion, and can be formed at an appropriate position on the cover plate 12.
  • the detailed configuration of the first embodiment will be applied as necessary even if the illustration and description of the second embodiment are omitted, and will be applied to members having the same material and the same function.
  • the substrate 11 and the cover plate 12 have a force equivalent to that of the base sheet 11 ′ and the cover sheet 12 ′ of the cassette 10A of the first embodiment.
  • the thickness of the plate material is larger than the thickness of each sheet of the cassette of the first embodiment. Since the three-dimensional shape differs, it will be described as a plate material as described above. Accordingly, in the present invention, the terms “substrate” and “cover plate” are concepts including the material of the base sheet and the cover sheet.
  • the cassette 10B has a peripheral plate 17 formed so as to surround the outer periphery of the substrate 11, and a box in which the cover plate 12 is detachably fitted inside the cassette without a gap. It is formed into a mold shape.
  • the engaging convex piece 12a is not limited to this portion, and can be formed at an appropriate position of the lid plate 12.
  • the sponge material 13a as the close contact holding member 13A is prepared separately from the cover plate 12 (non-adhesive), and after inserting biological tissues one by one into the groove 13 with tweezers, the upper force is also increased.
  • the cover method is adopted. However, on the back surface of the cover plate 12, as in the first embodiment, a plurality of sponge materials 13 a are placed at predetermined positions corresponding to the lower groove portions. It may be installed at intervals.
  • the groove 13 is provided on the plane of the substrate 11 in a range slightly shorter than the width of the lid plate 12, and the detailed structure thereof will not be described.
  • a fitting hole 16 b is provided at a position corresponding to the convex piece 12 a of the cover plate 12.
  • the fitting hole 16b is not limited to this part, and can be appropriately formed in a part corresponding to the engaging convex piece 12a of the cover plate 12.
  • a support portion 17 a is provided on one side of the peripheral plate 17 of the substrate 11. This support portion 17a is provided in order to maintain the strength of the cassette and make it easier to hold the cassette 10B when the hospital force is also moved to the tissue examination room. It is also possible to change the size of the support portion 17a and change the size of the base plate 11. Information such as the patient number is displayed on the inclined surface.
  • polypropylene is used as the substrate, groove material, peripheral plate, and cover plate.
  • the material of the substrate 11, the groove 13, the peripheral plate 17, and the support portion 17a is made of polypropylene having different thicknesses, and both are hard, but the substrate 11, the peripheral plate 17, and the support portion 17a are harder.
  • the groove 13 is softer.
  • the cassette 10B shown is 27 mm long, 40 mm wide, groove width 2 mm, groove depth 4 mm Material thickness is substrate 11 and cover plate 12 is 1. Omm to l .5 mm, groove 13 (the entire U-shaped cross section) ) 0. lmn! ⁇ 0.2mm.
  • the sponge material 13a has a width of 2 mm, a height of 2 mm, and a length of 24 mm corresponding to the groove of the substrate.
  • the bottom surface, the side surface and the end plate of the groove 13 of the substrate 11 and the end plate 12, and the lid plate 12 are appropriately positioned during fixing, dehydration, embedding agent penetration, and embedding operation.
  • a large number of holes 16a having a diameter of about 0.5 mm to l.Omm or a similar small hole are provided on the bottom surface of the groove 13 so that the liquid can enter the cassette.
  • the small hole 16 is provided with a long hole along the side wall of the groove 13, and the fitting hole 16 b is provided with a plurality of cutout holes corresponding to the convex pieces 12 a of the cover plate 12.
  • the substrate instead of the substrate, the cover plate, the peripheral plate, and the groove material polypropylene, other materials such as polyurethane and Teflon can be used as long as the materials satisfy the above conditions such as resistance, temperature resistance and sliceability.
  • polyurethane and Teflon can be used as long as the materials satisfy the above conditions such as resistance, temperature resistance and sliceability.
  • Teflon (Registered trademark), polystyrene, vinylon, nylon, ABS resin, specially processed paper, or other biological materials can be used.
  • the living thing in the groove 13 of the lever Fig. 12 shows a schematic diagram of the state where tissue T is inserted using tweezers.
  • the lid plate
  • the biological tissue is kept tightly held to prevent the movement of the biological tissue, the biological tissue is brought into close contact with the bottom surface, and the biological tissue is not destroyed. Since the material 13a is prepared separately in advance as a close contact holding member 13A, the biological tissue inserted into the storage portion of the plurality of grooves 13 of the substrate 11 is not moved! Be
  • FIG. 13 shows an operation cross-sectional view in a state corresponding to FIG. 5 in the case of the first embodiment.
  • the embedding frame 41 is not used when the paraffin is poured. Therefore, in the slicing block Bp, the embedding frame 41 including the frame plate of the lower layer lock Bp of the first embodiment is not used.
  • the subsequent process of dyeing operation is the same as in the first embodiment. Further, as in the case of the first embodiment, the above operation process is finally performed after collecting a living tissue with tweezers in a hospital and placing it in a cassette (arrow F) as shown in FIG. 9 (a). Transfer the sliced thin section to the staining work (arrow F) until the cassette with tweezers
  • FIG. 14 shows external perspective views of cassettes 10B, 10B ′′, 10B ′′ ′ of three modified examples of the cassette 10B of the second embodiment.
  • the cover plate 12 is detachable unless otherwise specified. Therefore, the same components as those of the second embodiment are denoted by the same reference numerals and description thereof is omitted.
  • the peripheral plate 17 is formed so as to surround the outer periphery of the substrate 11, and has a predetermined depth protruding below the base plate 11 (on the side opposite to the cover plate 12).
  • a housing portion for the recess 13b surrounded by the edge member 13c is provided.
  • the details of the holes 16, 16a, the fitting holes 16b, etc. are omitted, but are provided in the same manner as in the second embodiment. This also applies to the following example.
  • the cassette 10B "of the second modified example in Fig. 14 is a biological tissue fixing 'embedded' slice cassette for a plurality of medium-sized tissues.
  • the edge of the recess 13b is used.
  • the material 13c, the partition plate 13b ′, and the lower bottom material are made of a material that can be sliced thinner than the substrate 11 as in the case of the groove 13.
  • the cassette 10B ′ ′′ of the third modified example in FIG. Is a cassette having a housing portion composed of a recess 13b surrounded by an edge member 13c of a predetermined depth protruding in a flat shape and having a flat bottom surface.
  • the edge member 13c and the lower bottom material are the same as in the case of the groove 13.
  • Thinner material that can be sliced is used, and it is a biological tissue fixing and embedding 'slicing force set for large, flat tissue.
  • Fig. 15 shows the compatibility (by chemical resistance) of the plate material (sheet material in the figure) and sponge material that are compatible with the cassette for biological tissue fixation 'embedding' of the first and second embodiments described above.
  • Heat resistance, thin slice compatibility are shown in tabular form.
  • polypropylene, vinyl, nylon, and Teflon are all suitable for the plate material.
  • Teflon registered trademark
  • polyurethane is most suitable for various resistances.
  • FIG. 16 shows the results of the biological tissue fixation 'embedded' thin slice cassette slice test of the second embodiment.
  • biopsy yarn and weaving paraffin-embedded, sliced, and stained (conventional microphotograph HE) using the conventional method and the method using the cassette of the second embodiment (hereinafter referred to as the method of this example).
  • This is a reproduction of a photograph of dyeing x200).
  • the state of embedding, slicing and dyeing by the method of this example was the same as the conventional method, and normal processing and operation were possible.

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Abstract

　薄切可能な素材で容器を作成して、採取された生物組織を容器に収納後、固定から薄切まで容器を変えることなく標本作製過程を行い、生物組織の正確な組織検査情報を得ることができ、作業の簡略化と、組織の挫滅の可能性を低く抑え、標本の取り違えなどのミスを無くすことができる生物組織固定・包埋・薄切用カセット及びこのカセットを用いた生物組織を固定・包埋してブロックにし、さらには固定・包埋・薄切操作する方法を得ることである。 　生物組織固定・包埋・薄切用カセット１０Ａは、薄切可能、かつ所定以上の強度の素材シートを用いた基部シート１１’と蓋シート１２’から成り、基部シート１１’は生物組織を収容する収納部として溝１３を持ち、蓋シート１２’は基部シート１１’と一体の素材の長尺状の薄いプラスチックのシートを折曲部１４で２つに折曲させ、基部シート１１’と一体として蓋シート１２’を開閉するようにしたものであり、蓋シート１２’には基部シート１１’の底面構造に対応した部位に組織密着・保持部材のスポンジ素材１３ａで生物組織を底面に密着させて固定剤で固定した後、脱水、浸透し包埋剤のパラフィンで包埋し、かつ包埋枠を含めて薄切用ブロックを形成し、ブロックをミクロトームで薄切して良好な生物組織標本を作成することができる。

Description

生物組織固定 ·包埋'薄切用カセット及びその操作方法
技術分野
[0001] この発明は、生物組織の固定、脱水、包埋剤への浸透並びに包埋、さらには薄切 までの一連の作業を同一の容器 (カセット）内で行うことにより組織標本作成の操作過 程を簡素化、省力化し他の検体の混入を排除し得る生物組織固定'包埋 ·薄切の操 作を可能とする固定'包埋'薄切用カセット及びその操作方法に関する。
背景技術
[0002] 生物体より採取された組織力ゝらその組織の状態を調べる場合、組織検査室で検査 し、組織の病理学的診断を行い、又、形態研究のために生物組織をカセットに収納 し、固定、包埋、さらに薄切という一連の作業が一般に行われる。このような従来の一 般的な操作作業は、まず生物体より採取された組織を、直接固定液の入った瓶に入 れたり、ナイロンメッシュの袋に入れた後、固定液の入った瓶に入れたり、あるいは多 孔板で形成された図 17に示すようなカセット 1に収納し、図示して 、な 、蓋を閉じて このカセット容器をホルマリン、純エタノール、アセトン等の固定液の入った瓶に入れ 、組織を固定する。
[0003] 図 17において、 2は容器内に設けられた仕切り、 3は容器底面に設けられた多数の 小孔、 4はカセットの蓋のはめ込み部分である。そして、この生物組織を収納したカセ ットを入れた固定容器を組織検査室に運ぶ。場合によっては既に固定された生物組 織を新たにカセット容器に入れて以下の操作に供することもある。検査室では、既に カセット容器に収納され固定された組織については、カセット容器の蓋を開けて中の 生物組織を確かめると共にその組織とカセット容器に記載されている患者情報の内 容を確認した後、蓋を閉じて自動包埋装置にセットする。小さな生検組織では、初め 力もカセットに入っていることは少なぐこの時点で固定瓶力も小糸且織専用のカセット に入れ替えられる。
[0004] カセットに入って ヽな 、生物組織で固定瓶の中で固定液に浸漬されて 、る組織は 、固定瓶中の組織を新たにカセット容器に入れ替えた後、自動包埋装置にセットする 。ナイロンメッシュに入って固定された組織はそのまま自動包埋装置にセットすること が出来る。自動包埋装置ではカセット容器や、ナイロンメッシュに入った組織が自動 的に脱水、パラフィン浸透操作を受ける。パラフィン浸透が終了すると、自動包埋装 置力 組織の入ったカセット容器、あるいはナイロンメッシュを取り出して、隣接する包 埋センターのパラフィン槽に移す。なお、自動包埋装置とは生物組織の脱水からパラ フィン浸透までの一連の操作を自動的に行う装置である。
[0005] また、包埋センターとは包埋剤で浸透された組織を包埋、冷却する装置である。現 在ほとんどの検査室では自動包埋装置及び包埋センターが使用されている力 自動 包埋装置を使用することなぐ生物糸且織の入った固定 ·包埋'薄切用カセットを手動で 脱水、パラフィン浸透させ、また包埋センターを使用せず手動で、包埋 '冷却操作を 行うことも出来る。次に、包埋センターのテーブル上に別途用意された包埋皿を所定 位置にセットし、融解したパラフィンを包埋皿内に少量流し込む。
[0006] この包埋皿のパラフィン内に、包埋センター内のパラフィン槽から出したカセット容 器内、あるいはナイロンメッシュ内の生物組織をピンセットで取り出して、包埋皿の中 に生物組織をセットする。次いで包埋皿の上に包埋枠を乗せて、上から融解パラフィ ンを流し込み、生物組織と一体となった包埋枠を含む包埋皿を包埋センターに隣接 する冷却部上に置いて冷却する。これによりパラフィンが固まると、生物組織と包埋枠 を一体に形成したブロック、すなわち薄切用包埋ブロックを包埋皿力 外す。そして、 このブロックをミクロトーム（薄切装置）にセットして薄切する。上記の一般的な固定 · 包埋 '薄切方法にっ 、ては特許文献 1にも記載されて 、る。
特許文献 1：特開平 8— 211047号公報
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0007] 上述した従来の一般的な生物組織の固定 ·包埋 ·薄切方法では、生検組織を採取 後直ちに固定瓶やカセットに入れると、組織はその周囲に自由空間があるため固定 に伴い組織の形に歪をきたすことが多ぐ標本作成上の大きな問題点となる。また、 検査室でカセット容器やナイロンメッシュから生物糸且織をピンセットで取出して別の包 埋皿の上に移動させて包埋操作をするため、生物組織を部分的に挫滅して傷付け、 良好な組織標本の作製が出来なくなることがある。また、カセット容器内の複数の生 物組織を誤って元の配置と異なる配置で包埋皿に配置し、生物組織間にコンタミ状 態を生ずることがあり、検査結果に大きな影響を与え、重大な誤診の原因となることが ある。このような問題は、特許文献 1でも指摘されている。
[0008] しかし、特許文献 1の方法は、採取された生検試料を包埋カセットの皿内底面に置 く際に、底面に単に複数の生検試料を置くだけで、組織を出来るだけ採取されたそ のままの状態、例えば直線状に固定させるために底面に溝、あるいは不整形な状態 の場合は凹みのような収容部は設けられていない。従って、例えば人体の肝臓、腎 臓あるいは前立腺など短冊状となった組織、あるいは胃粘膜、大腸粘膜などの小型 で不整な組織を生検試料として採取した場合、それらの組織を包埋カセット内に置く だけでは、最終的に包埋皿の底面に組織全体をきれいに密着させることができなくな ることがある。このため、後にミクロトームで薄切した際に生検試料の全長に亘る十分 な検査情報が得られな 、という問題を生じる可能性がある。
[0009] 又、上記特許文献 1の方法では生検試料をダルコマンナン、ホルマリンを含む定着 支持剤で固化し、カプセル容器内に包埋カセットを入れてその周りをメタノール、ホ ルマリンを含むゲル化剤でゲルィ匕して固定し、このカプセル容器を病理検査室に搬 送し、そこでカプセル容器から取出した包埋カセットを別の容器内に入れて脱水操作 剤で脱水操作し、さらに脱脂、透徹等の操作後包埋カセットを容器力ゝら取出し、この 包埋カセットから生検試料をゲル状ブロックの状態で取出して包埋皿内に入れ、その 上に空の包埋カセットを載せてその上力もパラフィン等の包埋剤を注入し、これを冷 却固化して包埋ブロックが得られる。
[0010] しかし、この方法はゲル化剤やその他各種の操作剤を必要とし、かつシャーレ、力 プセル、別の容器、包埋皿へと移動させ、種々の機材、操作過程を必要とし、操作が 煩雑なため、実際の医療現場では殆ど利用されていない。従来の方法による生検組 織の採取時より染色作業までの一連の工程について、本願発明の工程表（図 9の（a )図、詳細は後述）と比較する図 9の (b)図において、その「工程表」を示す。なお、（b )図中の太線の矢印 f (f 、 f 、 f 、 f )は組織を医師、看護師或いは検査技師がピンセ
1 2 3 4
ットを用いて手で扱うところを示しており、この際に組織の変形や、座滅が起こり、又 組織の取り違えミスなどが起きる可能性が生じる。
[0011] この発明は、上記の問題に留意して、薄切可能な素材で容器を作成して、採取さ れた生物組織を容器に収納後、固定力 包埋'薄切過程まで容器を変えることなく操 作過程を進め、作業の簡略化'省力化を図り、組織の変形や挫滅、さらには組織同 士の取り違えミスの可能性を無くし、また組織を底面に密着した状態で包埋し、その 結果として良好で正確な病理組織診断結果を得ることができる生物組織固定 ·包埋' 薄切用カセットを提供することを第 1の課題とする。
[0012] 又、もう 1つの課題は、第 1の課題で得られる生物組織固定 ·包埋'薄切用カセットを 用いて生物組織を収納、固定'包埋し、組織の固定力 薄切操作まで操作の途中で 容器を変えることなく検体組織をカセットに入れたまま操作が可能であり、さらに組織 の形態を保ち、挫滅を防ぎ、取り違えミスを防ぐ一貫した生検組織作成を可能とする 生物組織固定'包埋 ·薄切の操作方法を提供することである。
課題を解決するための手段
[0013] この発明は、上記の第 1の課題を解決する手段として、所定以上の硬さ及び強度の 薄切可能な素材板に採取された生物組織を載置する基板と、基板と一体の素材板 を折曲させ、又は別体の板材を着脱自在として開閉する蓋板とを備え、基板に生物 組織を収納する収納部を設け、蓋板を閉じてその間に生物組織を密着'保持し生物 組織の移動を阻止する密着 ·保持部材を基板の収納部内に蓋板を介して又は着脱 自在に設け、両板材には多数の小孔を設けた生物組織固定 ·包埋*薄切用カセットと したものである。
[0014] 上記生物組織固定 ·包埋'薄切用カセットを用いた、もう 1つの課題を解決する手段 である生物組織の固定，包埋 ·薄切操作方法として、生物組織固定，包埋 ·薄切用力 セットの基板下の収納部内に生物組織を載せ、蓋板を閉じて収納部内に生物組織を 収容し、生物組織固定 ·包埋*薄切用カセットを固定液中に浸漬して、密着'保持部 材で生物組織を定着させた状態で生物組織を固定し、その後固定'包埋 '薄切用力 セットを自動包埋装置に設置して脱水した後、包埋剤浸透槽内に入れて固定 ·包埋' 薄切用カセット内の生物組織に包埋剤を浸透させ、次いでこの固定'包埋 '薄切用力 セットを自動包埋装置より取り出し包埋皿内に入れ、その上部より包埋剤を注入し、 固定 ·包埋'薄切用カセットを包埋した後、包埋皿より分離して薄切用包埋ブロックを 形成し、この薄切用包埋ブロックを、組織切片作成用ミクロトームに設置して、固定' 包埋'薄切用カセットを含む薄切用包埋ブロックを薄切する生物組織の固定'包埋- 薄切用カセットの固定'包埋 ·薄切操作方法を採用することができる。
[0015] 或いは、上記固定 ·包埋'薄切用カセットに生物組織を入れた後、直ちに固定 '包 埋'薄切用カセット内に凍結切片作成用包埋剤を注入包埋し、蓋板で蓋をした後、 固定'包埋'薄切用カセットを冷凍し、その後クリオスタツトで薄切する生物組織の固 定 '包埋 '薄切方法を採用してもよい。なお、クリオスタットとは薄切用ミクロトームをマ ィナス 15°C力もマイナス 30°C程度の冷凍室に設置し、冷凍下で生物組織を薄切す る装置である。
[0016] 上記の構成とした生物組織固定 ·包埋'薄切用カセットは、蓋板を基板から開いて 基板下の収納部に生物組織を入れ、生物組織が収納部底面内で移動せず且つ収 納時の形態を保っために密着 ·保持部材で生物組織を底面に密着させ、蓋板を閉じ てホルマリンの入った容器内に入れて搬送する。組織検査室ではこの生物組織の入 つたカセットを容器力も取り出し、自動包埋装置にセットして脱水した後、ノラフィン包 埋剤を浸透させ、その後このカセットを自動包埋装置より取り出して、カセット内部か ら生物組織を取り出すことなくカセットに入れたまま生物組織を包埋皿内に入れ、力 セットの上方力ゝら包埋剤を注入して包埋する。なお、包埋枠を必要とする場合もある
1S この場合は包埋材を注入する前にカセット上に置く。また、この発明では、基板、 蓋板の用語は基部シート、蓋シートの材料を含む概念であり、板材の形態や厚さによ つて平面的形態で比較的厚さが薄いものを基部シート或いは蓋シートと呼び、立体 的形態で比較的厚 、ものを基板或いは蓋板と呼ぶこととする。
[0017] 上記カセットを冷却した後、包埋皿を取除くと生物組織を収納したカセットを含む薄 切用包埋ブロックが形成される。このブロックをミクロトームで薄切すると良好な生物 組織標本が得られる。ここで、薄切とは生物組織をミクロトームと呼ばれる特殊な刃を 持った装置で薄く切ることである。また、固定とは組織の腐敗を防ぎ組織構築を保つ 為に、染色目的に応じてホルマリン、ピクリン酸 ·ホルマリン '酢酸混合液、純エタノー ル、アセトンなどの薬品で生体蛋白質を凝固あるいは変性させて、生体成分を液ィ匕 状態から固化状態に変化させること (通常ホルマリン水溶液が使用される）である。
[0018] 脱水とは生物組織内の水分をエタノール、エタノール 'メタノール混合液あるいはァ セトンなどで置換し生物内水分を除くことで、通常はエタノールが使用される。さらに 、包埋剤の浸透とは脱水された生物組織を、中間剤を介して融解したパラフィン、セ ロイジンなどの包埋剤の中に浸し、生物組織内に包埋剤を浸みこませることで、通常 はパラフィンが用いられる。
[0019] 上記カセットはミクロトームで薄切可能な素材で容器を作成することにより、採取さ れた生物組織を一旦このカセット容器に収容すると、固定から薄切過程まで容器を 変えることなく一連の作業を進めることが可能となり、作業の簡略化'省力化と糸且織の 挫滅を軽減し、組織間の取り違えのミス発生の可能性を無くすことができる。又カセッ ト底面に組織が密着しているので、組織の採取から固定、包埋過程で生ずる組織の 変形を少なくし、良好な薄切切片の作成が出来る。包埋とは生物組織を標本作製の 目的に応じてパラフィン、パラプラスト、セロイジン、エポキシ榭脂などに浸透させて固 めることであり、通常パラフィンが使用される。
発明の効果
[0020] 以上説明したように、この発明の生物糸且織固定 ·包埋'薄切用カセットは生物糸且織 を載置する基板と、基板に対して開閉する蓋板とを備え、基板に生物組織を収納す る収納部を設け、生物組織を密着'保持し生物組織の移動を阻止する密着'保持部 材を基板の収納部内に蓋板を介して又は着脱自在に設け、両板材には多数の小孔 を設けたものとしたから、生物組織をカセット容器内に収容した後は、生物組織の移 動を阻止した状態でカセットと共に固定剤による固定、脱水、包埋剤の浸透、包埋剤 による包埋'薄切用ブロックを形成し、このブロックをミクロトームに設置して、上記力 セットを含む上記ブロックを薄切することにより生物組織を薄切することができるという 利点が得られる。
[0021] また、上記生物組織固定'包埋'薄切用カセットを用いた生物組織の固定'包埋'薄 切操作方法では、生物組織固定 ·包埋'薄切用カセットの基板の収納部上に生物組 織を載せ、蓋板を閉じて生物組織を収容し、このカセットを固定液中に浸漬して、密 着'保持部材で生物組織を定着させた状態で生物組織を固定し、このカセットを包埋 した後、包埋皿より分離して薄切用包埋ブロックを形成し、このブロックを、ミクロトー ムに設置して、上記カセットを含む上記ブロックを薄切する固定'包埋 ·薄切操作方 法を順次用いることにより、組織を採取しカセットに入れた後、ミクロトームで数ミクロン 単位の薄さで薄切し、染色作業をするまで一貫して生物組織を一切ピンセット等で扱 うことなく生物組織を操作でき、生物組織の染色用薄切切片標本の作成を簡便かつ 良好に作成でき、作業中に起こる組織の取り違えミスを防止すると共に作業の簡素 ィ匕、省力化を図ることができ、臨床検査を含む組織形態学的検査領域で有効な検査 容器として利用することができるという種々の効果が得られる。
図面の簡単な説明
[図 1]第 1実施形態の生物組織固定'包埋'薄切用カセットの (a)外観斜視図、（b) (a )図の矢視 B— Bからの断面図
[図 2]同上のカセットへ生物組織を収容する作業の説明図
[図 3]同上のカセットを固定用収納容器へ入れた斜視図
[図 4] (a)自動包埋装置のパラフィン浸透槽内の容器力 同上のカセットを取出す作 業の説明図、（b)上記カセットを包埋皿に載せる作業の説明図
[図 5]同上のカセットを包埋皿上に置き、その上方に包埋枠を置いて、上部より融解し たパラフィンを流し込む状態の断面図
[図 6] (a)包埋皿上に形成されたブロック力も包埋皿を取除いた薄切用包埋ブロック の外観斜視図、 (b)薄切用包埋ブロックを薄切用ミクロトームにセットした状態の説明 図
[図 7]生物組織の薄切片をスライドガラス上に貼付けた状態の説明図
[図 8A]第 1、第 2、第 3変形例の生物糸且織を収納するための生物糸且織固定 ·包埋-薄 切用カセットの外観斜視図
[図 8B]第 1変形例の生物組織固定 ·包埋*薄切用カセットを着脱自在形式とした部分 変形例の外観斜視図
[図 9]生検組織操作の工程表（ (a)本願発明、 (b)従来例）
[図 10]第 2実施形態の固定'包埋 ·薄切用カセットの分解斜視図
[図 11]図 10の（a)同上のカセットの平面図、（b) (a)図の矢視 B— Bからの断面図、（c ) (a)図の矢印 C力もの断面図
[図 12]同上カセットを用いた生検組織の挿入状態を説明する説明図
[図 13] (a)同上カセットにパラフィンを流し込む操作の断面図、（b)ミクロトームにセッ トして薄切する状態を示す断面図
[図 14]第 2実施形態の第 1、第 2、第 3変形例の生物組織を収納するための生物組織 固定'包埋 '薄切用カセットの分解斜視図
[図 15]シート素材、スポンジ素材の対薬品性、耐熱性、薄切試験結果の図表
[図 16]生物組織固定'包埋'薄切用カセットの薄切 '染色試験結果の比較図
[図 17]採取された生物組織を入れる従来の容器の一例の外観斜視図
符号の説明
10A、 10A，、 10A"、 10A"'、 10AR 生物組織固定'包埋'薄切用カセット 10Β、 10Β'、 10Β"、 ΙΟΒ'" 生物組織固定 ·包埋'薄切用カセット
11 基板
11 ' 基部シート
12 蓋板
12， 蓋シート
12a 凸片
13A 密着，保持部材
13a スポンジ素材
13B 収納部
13 溝
13b 凹み
13b' 仕切り板
13c 縁材
14 折曲部
15 患者情報表示部
15b 嵌合部
16、 16a 孔 16b 嵌合孔
17 周縁板
17a 支持部
18 掴持部
20 固定瓶
21 蓋
30 パラフィン浸透槽（自動包埋装置内）
31 容¾：
40 包埋皿
41 包埋枠
50 ミクロトーム
発明を実施するための最良の形態
[0024] 以下、この発明の実施の形態について図面を参照して説明する。図 1は、第 1実施 形態の生物組織の固定'包埋 '薄切用カセット 10Aを示す。（a)図は外観斜視図、（b )図は（a)図の矢視 B— Bからの断面図である。このカセット 10Aは、底面に複数の溝 を持ち、肝臓、前立腺、腎臓などの短冊状となった生検組織を固定'包埋'薄切する 生物組織固定 ·包埋'薄切用カセットである。なお、カセットの他の形状については図 8Aに示し、これについては後述する。図示のように、固定 ·包埋'薄切用カセット 10A は、一枚の長尺状の薄いプラスチックのシートを折曲部 14で 2つに折曲げて、一方を 基部シート 11 '、対向するシート片を蓋シート 12'とし、基部シート 11 'には複数列の 溝 13を設けて形成されている。
[0025] 一方蓋シート 12'の下面には、図示のように、基部シート 11 'の溝 13に対応して、 生物組織を密着 ·保持し生物組織の移動を阻止する密着 ·保持部材 13Aとして、生 物組織を底面に密着させ、生物組織を挫滅させな!/ヽ程の弾力性を有し且つ薄切可 能なスポンジ素材 13aが貼り付けてある。ただし、スポンジ素材 13aは必ずしも蓋シー トに貼り付ける必要はなぐ溝 13内に収納しておき、使用時に取り出して組織を溝 13 に収納した後、その上力も溝 13の組織上にセットし蓋シート 12'を閉じるようにしても よい。但し、密着 ·保持部材 13Aとして図示の例ではスポンジ素材とした力 これに替 わる機能を有する、例えば接着剤を用いて生物組織を密着'保持させるようにしても よい。
[0026] 基部シート 11，、蓋シート 12，の素材は、耐水性で、ホルマリン、アルコール、ァセト ンのような固定剤に対する耐固定剤性、キシレン、クロ口ホルムのような有機溶媒に対 する耐有機溶媒性で、パラフィンで変質せず、— 30°C〜65°Cの温度変化で著しい 変形、材質変化等の大きな影響を受けず、かつ後述するミクロトーム (薄切装置）によ り組織収納部 13の溝 13Bの部分は数ミクロン単位の厚さに生物組織を含む固定-包 埋'薄切用カセットを薄切可能な素材を用いる。なお、 15は基部シート 11 'の隅位置 の裏面に書き込まれる患者名、コード記号等の患者情報表示部、 15aは基部シート 1 1 'の溝の横に記入された採取組織を区別するための溝番号である。
[0027] 図示の例では、上記基部シート、溝素材として合成高分子化合物 (プラスチック）の 中力 選んだポリプロピレンを用いている。但し、基部シート 11 'と溝 13の素材は厚さ •硬さの異なる 2種類のポリプロピレンを用いており、両方共硬質ではある力 基部シ ート 11 'の方が硬ぐ溝 13の方が柔らカい。図示の試験例のカセット 10Aは、縦 20m m、横 34mm、溝の幅 3mm、溝の深さ 2mm、素材の厚さは基部シート 11 '、蓋シー ト 12，力 O. 4mm〜： Lmm、溝 13 (コ字断面全体）が 0. lmm〜0. 2mmである。スポ ンジ素材 13aは、基部シートの溝に対応して幅 2. 5mm、高さ 1. 5mm,長さ 20mm である。但し、シート並びにスポンジ素材の大きさ、厚さはこれに限定されないことは 勿論である。
[0028] 又、基部シート 11 'の溝 13の底面、側面並びに端板、さらには蓋シート 12'で溝 13 に対応する部位に、図示省略しているが、固定、脱水、包埋剤浸透、包埋操作中に 液がカセット内に浸入出来るように直径 0. 5mn！〜 1. Omm程度の孔を 10孔〜 40孔 ZlOOmm2の基準で設ける。溝 13の両端は端板 13tで閉じられている。この端板 13 tも溝 13と硬さ、厚さは同じである。なお、図示の例では、シート、溝素材としてポリプ ロピレンを示したが、これに代えて上記耐性、耐温度性、薄切り可能性等の条件を満 たす材料であれば他の素材、例えばテフロン (登録商標）、ポリスチレン、ナイロン、 A BS榭脂、特殊加工を施した紙類あるいはその他の生物素材等を用いることができる [0029] さらに、図 1に示すように、両シートの先端側周辺の適宜位置に互いに密着して嵌 合する小さな凹部と凸部による嵌合部 15bをいずれか一方のシートと他方のシートに 複数箇所（図示の例では 2箇所)それぞれ形成し、基部シート 11 'に蓋シート 12'を 被せて生物組織をその間に収容するときは、それぞれの凹部と凸部を嵌合させて両 シートを結合状態にする。必要に応じて上記凹凸の嵌合部 15bは、両シートの一方 を他方力も引き離して解放する。凹凸の嵌合部による形式以外にも、例えば両シート の適宜外周辺をクリップやホッチキスなどの挟持手段や接着剤等で互いに接合する 形式のように基部シート 11 'に蓋シート 12'を着脱できれば上記以外の他の種々の 形式のものを採用することができる。
[0030] 上記構成の溝を有する固定 ·包埋'薄切用カセット 10Aは、主として採取された生 物糸且織の臨床検査に用いられるカセット容器であり、人体の生検で採取された前立 腺のように細長ぐ短冊状の組織を収容し、その後固定、脱水、包埋剤の浸透並びに 包埋、さらに薄切までの組織染色標本作成に必要な一連の作業を同一容器内で行 い、作業の簡素化と省力化を図り、かつ確実で良好な組織染色標本を作成するのに 用いられる。図 1〜図 9を参照して、上記固定 ·包埋'薄切用カセット 10A内に生物組 織を収容する作業以下の一連の作業にっ 、て説明する。
[0031] まず、図 1に示すように、作業の前準備として、未使用の固定'包埋'薄切用カセット 10Aの患者情報表示部 15に対象となる患者の患者名、採取年月日、部位等の患者 情報を記入する。次に、図 2に示すように、蓋シート 12'を基部シート 11 'から開き、 採取された生物組織 T , T…を医師或いは看護師がピンセット Pで摘んで基部シ
1 2
ート 11 'の複数の溝 13に順次所定の配置で収容する。っ 、で組織密着 ·保持機能 のためのスポンジを貼り付けた蓋シート 12'を基部シート 11 'に被せ、生物組織が基 部シート 11 'の収納部底面に密着するようにしてカセットを閉じる。スポンジ素材は蓋 シートに貼り付けておく必要はなぐ溝部に収納しておいても良い。その後、直ちに生 物組織を含むカセットを固定液の入った固定瓶に入れる。
[0032] この固定 ·包埋*薄切用カセット 10Aを搬送するための固定瓶 20には、図 3に示す ように固定 ·包埋*薄切用カセット 10Aが十分浸る程度に固定液 Lsを入れておき、力 セットをこの固定液 Lsに浸す。カセット収納容器である固定瓶 20の蓋 21を閉じ、固 定瓶 20の表示部 22に病院名等を記入する。なお、以上の作業は患者の属する病院 •医院等で行なわれ、その後、病院から検査室へ搬送される。検査室を持つ病院'医 院等では組織採取室より組織検査室に運ばれる。
[0033] 組織検査室に固定瓶 20が送られると、固定瓶 20の蓋 21を開けて固定'包埋 '薄切 用カセット 10Aを取出し、自動包埋装置にセットする。自動包埋装置内でカセットは、 脱水後にパラフィン浸透槽に移動し、浸透が終わると図 4の（a)図に示すように、パラ フィン浸透槽 30の容器 (金網製） 31内の複数の固定'包埋 '薄切用カセット 10A(10 a〜10d)が槽内力 ピンセットで取り出され、包埋センターに設置されたパラフィン槽 に移される。パラフィン槽より取り出されたカセットは包埋センター上で、図 4の（b)図 に示すように、カセット底面を下にして少量のパラフィンを入れてある包埋皿 40内に 入れる。
[0034] その後、包埋センター上で図 5に示すように包埋皿 40内にカセットの上方から包埋 皿 40の上に包埋枠 41をセットする。次いで、溶融タンク力 パラフィン等の融解した 包埋剤 Lpを包埋皿 40に流し込む。このとき、包埋皿の深さ一杯に包埋剤 Lpを入れ ることにより固定 ·包埋 ·薄切用カセット 10Aだけでなく、包埋枠 41と包埋皿 40の凹部 との隙間スペースにも包埋剤 Lpが満たされる。包埋枠 41の上方力もピンセットでカセ ットを包埋皿に向けて下方に押し付ける。この状態で包埋皿 40は包埋センターに隣 接する冷却台（図示省略)上に移され、所定時間冷却されて包埋皿 40内並びに包 埋枠 41内の包埋剤 Lpが固化される。
[0035] そして、固化された包埋剤 Lpによるブロック力 包埋皿 40を取り除くと、図 6の（a) 図に示す固定 ·包埋*薄切用カセット 10Aを含む薄切用ブロック Bpが得られる（包埋 枠 41を下にして示している）。カセット底面がパラフィンブロックのパラフィン表面に密 着している状態で包埋されている。 Bpは固定 ·包埋'薄切用カセット 10Aを含む上 層ブロック、 Bpは包埋枠 41より成る下層ブロックである。薄切用ブロック Bpではパラ
2
フィンを透力して患者情報表示部 15に記入された患者情報等を見ることが出来る。
[0036] このようにして得られた薄切用ブロック Bpは、図 6の（b)図に示すように、ミクロトーム 50のブロック保持部 51にセットされ、切断刃 52によりミクロン単位の極薄状にブロッ ク Bpの上端面力 複数回切断が行なわれ、極薄の切断片 Bp が切断の深さに応じ て複数枚得られる。得られた生物組織を含む薄切用ブロック Bpのミクロトームによる 薄切は、従来の方法と同様の良好な薄切結果であった。上記切断片 ΒΡι，を図 7に示 すスライドガラス 60上に置いた後、次の染色操作過程に移る。この切断片 Bp には 生物組織の薄片 T 〜T 、及び固定 ·包埋'薄切用カセットのカセット素材の薄片 13
1， 4，
'が含まれている。なお、上記切断片 Bp を染色すると、一般染色ではカセット素材 の薄片 13'は染色されず、生物組織のみが染色されて従来の方法と同様の良好な 染色結果が得られた。
[0037] なお、上記第 1実施形態では、基部シート 11 'と蓋シート 12'は 1枚の長尺シートを 2つ折りに折曲して一体に形成したものを示した力 両シートは別体のシートとし、両 シートに嵌合着脱部を設けて互いに着脱自在に形成してもよい。又、基部シートの底 面の収容構造として溝 13を設けるタイプとし、この溝 13はシート長さ方向に直交する 方向の細い帯状の複数列の溝 13を互いに平行に設けた例を示したが、溝形状はこ れに限らず、例えば L字形、コ字形等としてもよい。また底面収納構造は溝形以外に 後述する平面、凹み或いは仕切り板で分割された形などの種々の構造としてもよい。
[0038] 図 9に以上の「操作工程」の比較表を示す。 (a)図は上記実施形態のカセットを用 いた場合の工程であり、（b)図は従来のカセットを用いた場合の工程である。この表 を参照すれば、従来の操作工程では病院で採取された組織検体をカセットに入れて 組織検査室に移動させ、この組織検査室にぉ 、て包埋カセットに組織を移し替える 作業を 2回も行っていたのに対して、上記実施形態のカセットを使用すれば、病院で 組織をカセットにいれ (F )た後は、最後に (F )染色作業をするまで組織を移し替え
1 2
る作業が全く必要ないことが理解される。移し替え作業が不要となることについては 以下の変形例や第 2実施形態でも同様である。
[0039] 図 8Aに第 1実施形態の変形例 (第 1〜第 3変形例）の固定 ·包埋'薄切用カセット 1 OA'、 10A"、 10A' "を示す。図 8Aの（a)図の第 1変形例の固定'包埋 '薄切用カセ ット 10A'は、基部シート 11 'の下方（蓋シート 12'と反対側）に突出する所定深さの 縁材 13cで囲まれた凹み 13bの収納部を持ったカセットであり、胃粘膜生検組織、大 腸粘膜生検組織、子宮頸部粘膜生検組織などの複数の小型、不整な生検組織の為 の生物組織固定'包埋'薄切用カセットである。ただし、凹み 13bの縁材 13c並びに 下底材は溝 13の場合と同じく基部シート 11 'より薄い薄切可能な材料が用いられて いる。
[0040] 図 8Aの（b)図の第 2変形例の固定.包埋.薄切用カセット 10A"は、基部シート 11 ' の下方に突出する所定深さの縁材 13cで囲まれ、内部を仕切り板 13b 'で仕切られ た複数の凹み 13bから成る収納部を有するカセットであり、大腸ポリープ切除組織、 あるいは経尿道的膀胱癌摘除術等によって得られる複数の中型組織のための生物 組織固定'包埋'薄切用カセットである。この例でも、凹み 13bの縁材 13c、仕切板 13 b '並びに下底材は溝 13の場合と同じく基部シート 11 'より薄 、薄切可能な材料が用 いられている。但し、仕切板 13b 'を設ける形状は、十字状以外にも種々の形状とす ることができる。又、凹み 13bのスペースを図示の状態より可能な限り広げた場合、縁 材 13cの頂部厚みが基部シート 11 'の幅に一致する力 基部シート 11 'はこの場合 を含むこととする。
[0041] 図 8Aの（c)図の第 3変形例の固定.包埋.薄切用カセット 10A' "は、基部シート 11
'の下方に突出する所定深さの縁材 13cにより囲まれ、下面が平面状に広がった凹 み 13bから成る収納部を有するカセットであり、肝臓手術材料、胃手術材料など大型 で平面的な組織のための生物組織固定 ·包埋'薄切用カセットである。この変形例の 場合も、凹み 13bの縁材 13c並びに下底材は溝 13の場合と同じく基部シート 11 'より 薄 ヽ薄切可能な材料が用いられて 、る。
[0042] なお、上記各実施形態の蓋シート 12'には第 1実施形態で図示されているような密 着 ·保持用のスポンジ素材 13aがそれぞれ貼り付けてある。各スポンジ素材 13aは、 基部シート 11 'の凹み、仕切り板で仕切られたスペース、平面状の収納スペースにそ れぞれ対応した形状として形成されている。又、この例でも凹み 13bのスペースを図 示の状態より可能な限り広げた場合、縁材 13cの頂部厚みが基部シート 11 'の幅に 一致するが、基部シート 11 'はこの場合を含むこととする。
[0043] ただし、前述したように、スポンジ素材 13aは必ずしも蓋シート 12'に貼り付ける必 要はなぐ収納部としての凹み 13b内に収納しておき、使用時に取り出して組織を凹 み 13bに収納した後、その上力も溝 13の組織上にセットし蓋シート 12 'を閉じるように してもよい。又基部シート 11 'の底面、側面並びに端板、さらには蓋シート 12'で収納 部に対応して付着されたスポンジ素材 13aの面以外の部位に、図示省略しているが 、固定、脱水、包埋剤浸透、包埋操作中に液がカセット内に浸入出来るように直径 0 . 5mm〜l. Omm程度の多数の孔を 10孔〜 40孔 ZlOOmm2の基準で設ける。第 1 、第 2、第 3変形例のいずれに於いても、基部シート 11 'と蓋シート 12'を第 1実施形 態と同様の方法で互！ヽに接合する型式を取る。
[0044] 胃粘膜生検組織、大腸粘膜生検組織、子宮頸部粘膜生検組織などの複数の小型 、不整な生検組織の為の基部シート 11 'に凹みを持ったカセット、大腸ポリープ切除 組織、あるいは経尿道的膀胱癌摘除術等によって得られた複数の中型組織のため の底面に仕切り板を有するカセット、肝臓手術材料、胃手術材料など大型で平面的 な組織の為の基部シート 11，底面が平面となったカセットを用いた、固定から脱水、 包埋、薄切に至る一連の作業は、溝を有する第 1実施形態の固定'包埋 '薄切用力 セットを用 、る場合と基本的に同様である。
[0045] なお、上記各実施形態では全て固定'包埋'薄切用カセットは、基部シート 11 'と蓋 シート 12'を折曲部 14で折曲させる形式のものを示している力 折曲形式以外の形 式として、図 8Bに示すように、基部シート 11 'と蓋シート 12'を着脱自在な形式とする ことも出来る。この着脱自在形式のものについては、第 1変形例の固定'包埋 '薄切 用カセットに適用した例である生物糸且織固定 ·包埋'薄切用カセット 10ARについて のみ図示し、他の変形例については図示省略する。
[0046] しかし、この場合折曲部 14による折曲形式ではないため、これに替えて両シートの 周辺の適宜位置に互いに密着して嵌合する小さな凹部と凸部による嵌合部 15bをい ずれか一方のシートと他方のシートに複数箇所それぞれ形成する。そして、基部シー ト 11 'に蓋シート 12'を被せて生物組織をその間に収容するときは、それぞれの凹部 と凸部を嵌合させて両シートを結合状態にする。必要に応じて上記凹凸の嵌合部 15 bは、両シートの一方を他方から引き離すことにより開放できるものとする。
[0047] 但し、凹凸の嵌合部 15bによる形式以外にも着脱自在とする形式、例えば両シート の適宜外周辺をクリップやホッチキスなどの挟持手段で互いに接合する形式のように 基部シート 11 'に蓋シート 12'を着脱できれば上記以外の他の種々の形式のものを 採用することが出来る。又、折曲形式の場合は、基部シート 11 'と蓋シート 12'は、一 般に同一材料、同一厚さで形成される (異なる材料、異なる厚さとしてもよい）が、上 記各実施形態の固定'包埋'薄切用カセットでは、最終工程でミクロトームにより薄切 する際に、蓋シート 12'を薄切する必要がないから、着脱自在形式の場合、蓋シート 12'は基部シート 11 'と異なる材料、異なる厚さ (厚くて硬ぐ高強度)のシートにより 形成してちょい。
[0048] 図 10に第 2実施形態の固定'包埋 '薄切用カセット 10Bの分解斜視図を示す。この カセット 10Bは、第 1実施形態のカセット 10Aの基板 11の外周に沿って基板 11と同 じ素材を用いた、支持部 17aを有する周縁板 (側板） 17を備え、かつ基板 11と蓋板 1 2が別体 (着脱自在）として形成され、かつ蓋板 12の形状、端部の細部が少し異なり 、密着'保持部材 13Aが蓋板 12の裏面に接着されず、 1つずつ別個に用意される点 が第 1実施形態の例と異なる。 17aは周縁板の支持部、 18は蓋板 12の掴持部である 。掴持部の位置はこの部位に限らず、蓋板 12の適当な位置に形成できる。
[0049] なお、以下では、第 1実施形態の詳細な構成についてこの第 2実施形態では図示、 説明を省略したものでも必要に応じて適用されるものとし、かつ同一素材、同一機能 の部材には同一の符号を付して (但し、下記の基板 11、蓋板 12は基部シート 11 '、 蓋シート 12'のダッシュを省略)詳細な説明を省略し、主として第 1実施形態と異なる 構成、機能について説明する。又、基板 11、蓋板 12は、第 1実施形態のカセット 10 Aの基部シート 11 '、蓋シート 12'に相当する力 第 1実施形態のカセットの各シート の厚さより板材の厚さが厚ぐ立体的形状が異なるので、上記のように板材として説 明する。従って、この発明では、基板、蓋板の用語は基部シート、蓋シートの材料を 含む概念である。
[0050] 図 10に示すように、上記カセット 10Bは、基板 11の外周を囲むように周縁板 17が 形成されており、このカセットの内側に着脱自在に蓋板 12が隙間なく嵌合する箱型 形状に形成されている。係合用の凸片 12aはこの部位に限らず、蓋板 12の適当な位 置に形成できる。密着'保持部材 13Aとしてのスポンジ素材 13aは、図示の例では蓋 板 12と別個に (非接着状)用意され、生物組織を 1つずつピンセットで溝部 13内に挿 入した後、その上力も被せる方式を採用している。但し、蓋板 12の裏面に、第 1実施 形態と同様に、スポンジ素材 13aを下部の溝部に対応した部位に複数箇所、所定の 間隔で取り付けるようにしてもょ 、。
[0051] 基板 11の平面には第 1実施形態と同様に溝 13が蓋板 12の幅より少し短い範囲に 設けられており、その詳細構造については説明を省略する。基板 11の短辺側隅には 、蓋板 12の凸片 12aに対応する位置に嵌合孔 16bが設けられている。この嵌合孔 1 6bはこの部位に限らず、蓋板 12の係合用凸片 12aに対応する部位に適宜形成する ことが出来る。また、基板 11の周縁板 17の一側には、支持部 17aが設けられている。 この支持部 17aは、カセットの強度を保ち、カセット 10Bを病院力も組織検査室に移 動するときなどに持ち易くするために設けられている。支持部 17aの大きさを変え、基 板 11の大きさを変えて形成することも出来る。その傾斜面には患者番号等の情報が 表示される。
[0052] なお、図示の例では、上記基板、溝素材、周縁板、蓋板として合成高分子化合物（ プラスチック）の中力も選んだポリプロピレンを用いている。但し、基板 11と溝 13、周 縁板 17、支持部 17aの素材は厚さの異なるポリプロピレンを用いており、両方共硬質 ではあるが、基板 11 ,周縁板 17、支持部 17aの方が硬ぐ溝 13の方が柔らカい。図 示のカセット 10Bは、縦 27mm、横 40mm、溝の幅 2mm、溝の深さ 4mm 素材の厚 さは基板 11、蓋板 12が 1. Omm〜l . 5mm、溝 13 (コ字断面全体）が 0. lmn！〜 0. 2mmである。スポンジ素材 13aは、基板の溝に対応して幅 2mm、高さ 2mm、長さ 24 mmである。
[0053] 又、基板 11の溝 13の底面、側面並びに端板、さらには蓋板 12の適宜位置に、図 1 1に示すように、固定、脱水、包埋剤浸透、包埋操作中に液がカセット内に浸入出来 るように直径 0. 5mm〜l . Omm程度の多数の孔 16a、或いはこれに類似の小孔（図 示の例では孔 16aは溝 13の底面に設けられ、複数の小孔 16は溝 13の側壁に沿つ た長孔、嵌合孔 16bは蓋板 12の凸片 12aに対応する複数の切欠き孔)を設けている 。なお、図示の例では、基板、蓋板、周縁版、並びに溝素材のポリプロピレンに代え て上記耐性、耐温度性、薄切り可能性等の条件を満たす材料であれば他の素材、 例えばポリウレタン、テフロン (登録商標）、ポリスチレン、ビニロン、ナイロン、 ABS榭 脂、特殊加工を施した紙類あるいはその他の生物素材等を用いることができる。
[0054] 上記第 2実施形態の固定'包埋 ·薄切用カセット 10Bを用 V、てその溝 13内に生物 組織 Tをピンセットを用いて挿入する状態の模式図を図 12に示す。この場合、蓋板
2
12は予め基板 11から外され、スポンジ素材 13aも別途用意された状態で使用される 。図 12に示すように、生物組織 Tや T等を順次溝 13内に入れ、スポンジ素材 13aを
1 2
それぞれの生物組織の上に載せ、蓋板 12を被せて閉じた後、組織検査室へ移動さ れる。蓋板 12を閉じるときは、蓋板 12の凸片 12aを基板 11の嵌合孔 16bに嵌め込 み、蓋板 12を閉じる。
[0055] このとき、生物組織を密着 '保持して生物組織の移動を阻止し、生物組織を底面に 密着させ、生物組織を挫滅させな 、程の弾力性を有し且つ薄切可能なスポンジ素材 13aを密着'保持部材 13Aとして予め別途に用意しているから、基板 11の複数の溝 13の収納部に挿入された生物組織を移動しな!ヽように保持して蓋板 12が閉じられる
[0056] 図 13に第 1実施形態の場合の図 5に相当する状態の操作断面図を示す。病院で 組織をカセット内に挿入した後は、図 9の（b)図の従来例と異なり、カセットから生物 糸且織を取り出すことなぐ糸且織検査室へ運ばれ、そのカセットをそのまま自動包埋装 置にセットして脱水、パラフィン浸透を行いカセットより検体生物組織を取り出すことな くパラフィンによる包埋作業が始まる。図 13の（a)図に示すように、パラフィンを流し込 んだ後、包埋皿 40を取り外して出来た (b)図に示すカセットと一体の上層ブロック Bp (但し、（a)図と上下逆に示している）を、図 6の（b)図のようにミクロトームに取り付け 、薄切が始まる。
[0057] 但し、この実施形態ではパラフィンを流し込む際に包埋枠 41が使用されず、従って 薄切用ブロック Bpでは第 1実施形態の下層部ロック Bpの枠板を含む包埋枠 41がな
2
い点で第 1実施形態と異なる。また、その後染色操作過程に移ることは第 1実施形態 の場合と同じである。また、上記操作工程は、第 1実施形態の場合と同様、図 9の (a) 図に示すように、病院で生体組織をピンセットで採取してカセットに入れた (矢印 F ) 後、最後に薄切された薄切片を染色作業に移す (矢印 F )まではピンセットでカセット
2
力も取り出すことはない。
[0058] 図 14に第 2実施形態のカセット 10Bの 3つの変形例のカセット 10B，、 10B"、 10B" 'の外観斜視図を示す。これらの変形例でも、蓋板 12は着脱式であり、特記しない限 り第 2実施形態と同じ構成については同じ符号を用いて説明を省略する。（a)図の第 1変形例のカセット 10B'では、周縁板 17が基板 11の外周を囲むように形成され、基 板 11の下方 (蓋板 12と反対側）に突出する所定深さの縁材 13cで囲まれた凹み 13b の収納部を設けている。また、孔 16、 16a,嵌合孔 16b等の細部については図示を 省略しているが、第 2実施形態と同様に設けられている。この点は下記の例でも同じ である。
[0059] 図 14の（b)図の第 2変形例のカセット 10B"は、複数の中型組織のための生物組織 固定'包埋'薄切用カセットである。この例でも、凹み 13bの縁材 13c、仕切板 13b' 並びに下底材は溝 13の場合と同じく基板 11より薄い薄切可能な材料が用いられて いる。（c)図の第 3変形例のカセット 10B' "は、下方に突出する所定深さの縁材 13c により囲まれ、下面が平面状に広がった凹み 13bから成る収納部を有するカセットで あり、縁材 13c並びに、下底材は溝 13の場合と同じく基板 11より薄い薄切可能な材 料が用いられており、大型で平面的な組織のための生物組織固定 ·包埋'薄切用力 セットである。
[0060] 図 15に上記第 1、第 2実施形態の生物組織固定'包埋'薄切用カセットに適合する 板材（図中ではシート素材)、スポンジ素材の材料別の適合性 (耐薬品性、耐熱性、 薄切適合性）について試験した結果を表形式で示す。板材の素材については、表か ら分かるように、ポリプロピレン、ビニール、ナイロン、テフロン (登録商標）のいずれも 適合する。また、スポンジ素材については、各種の耐性の点でポリウレタンが最も適 合する。
[0061] 図 16に第 2実施形態の生物組織固定'包埋'薄切用カセットの薄切'染色試験結 果を示す。図中には従来の方法と第 2実施形態のカセットを用いた方法 (以下本例の 方法と言う）による生検糸且織のパラフィン包埋状態、薄切状態、染色状態 (顕微鏡写 真 HE染色 x200)の写真を複写したものである。本例の方法による包埋、薄切、染 色の状態は、従来の方法と何ら変わらず正常な処理、操作が出来た。
産業上の利用可能性
[0062] この発明の生物組織固定 ·包埋'薄切用カセットは、採取された生物組織を載置す る基板と蓋板とを備え、収納部内に生物組織を収納し、密着'保持部材により両板材 の間に生物組織を密着 ·保持部材で密着 ·保持して生物組織の移動を阻止し、多数 の小孔から固定剤を流入させて生物組織を固定 ·包埋'薄切するようにしたものであ り、この生物組織固定 ·包埋'薄切用カセットを用いて生物組織を採取しカセットに入 れた後ミクロトームで数ミクロン単位の薄さで薄切することが出来、臨床検査を含む組 織形態学的検査領域で有効な検査容器として広く利用することが出来る。

Claims

請求の範囲
[1] 所定以上の硬さ及び強度の薄切可能な素材板に採取された生物組織を載置する 基板 11と、基板 11と一体の素材板を折曲させ、又は別体の板材を着脱自在として開 閉する蓋板 12とを備え、基板 11に生物組織を密着 ·保持して収納する収納部 13B を設け、蓋板 12を閉じてその間に生物組織を密着 ·保持し生物組織の移動を阻止 する密着 ·保持部材 13Aを基板 11の収納部 13B内に蓋板 12を介して又は着脱自 在に設け、両板材には多数の小孔 16を設けた生物組織固定 ·包埋'薄切用カセット
[2] 前記収納部 13Bを、短冊状の生物組織の形状に対応する溝 13、不整な生物組織 の形状に対応する凹み 13b、又は不整形な生物糸且織を収納するのに十分な平面状 広さを有する凹み 13bのいずれ力としたことを特徴とする請求項 1に記載の生物組織 固定 ·包埋'薄切用カセット。
[3] 前記薄切可能な素材を耐水性、耐固定剤性、耐有機溶剤性、耐包埋剤性、かつ
30°C〜65°Cの耐温度性を有する合成高分子化合物、特殊加工紙類、又は上記 素材と同等の特性を有する生物素材のいずれかとしたことを特徴とする請求項 1又は
2に記載の生物組織固定 ·包埋'薄切用カセット。
[4] 前記基板 11の外周辺に沿って周縁板 17を形成し、その側辺に支持部材 17aを設 けたことを特徴とする請求項 1乃至 3のいずれかに記載の生物組織固定 ·包埋'薄切 用カセット。
[5] 前記請求項 4に記載の生物組織固定，包埋，薄切用カセットの基板 11下の収納部 13B内に生物組織を収容し、蓋板 12を閉じて生物組織固定 ·包埋'薄切用カセット を固定液中に浸漬して、密着'保持部材 13Aで生物組織を定着させた状態で生物 組織を固定し、その後固定 ·包埋'薄切用カセットを自動包埋装置に設置して脱水し た後、包埋剤浸透槽内に入れて固定 ·包埋'薄切用カセット内の生物組織に包埋剤 を浸透させ、次いでこの固定'包埋'薄切用カセットを自動包埋装置より取り出し包埋 皿 40内に入れ、その上から包埋剤を注入し、固定'包埋'薄切用カセットを包埋した 後、包埋皿 40を分離して薄切用包埋ブロックを形成し、この薄切用包埋ブロックを、 組織切片作成用ミクロトームに設置して、固定'包埋 '薄切用カセットを含む薄切用包 埋ブロックを薄切する生物組織の固定'包埋 ·薄切用カセットの固定'包埋 ·薄切操作 方法。
前記請求項 1乃至 4のいずれかに記載の固定 ·包埋'薄切用カセットに生物組織を 入れた後、直ちに固定 ·包埋'薄切用カセット内に凍結切片作成用包埋剤を注入包 埋し、蓋板 12で蓋をした後、固定'包埋'薄切用カセットを冷凍し、その後、クリオスタ ットで薄切する生物組織の固定'包埋'薄切用カセットの固定'包埋 '薄切操作方法。
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