JP7315356B2 - 蛍光観察装置 - Google Patents

Description

本開示は、蛍光観察装置に関する。

従来の蛍光観察装置として、例えば特許文献１に記載の識別装置がある。この従来の識別装置は、被験体の腫瘍部位に存在するプロトポルフィリン類の蛍光を分光検出する装置である。プロトポルフィリン類は、プロトポルフィリンＩＸ（ＰｐＩＸ）及びフォト－プロトポルフィリン（ＰＰｐ）である。識別装置は、ＰｐＩＸの一部をＰＰｐに変換する光照射部と、ＰｐＩＸの蛍光とＰＰｐの蛍光とを分光する分光部と、ＰｐＩＸの蛍光とＰＰｐの蛍光との相対蛍光強度を検出する分光検出部と、ＰｐＩＸとＰＰｐとの相対蛍光強度に基づいて腫瘍部位と正常部位の判別を行う腫瘍判別部とを有している。

特許第５９９１９７５号公報

腫瘍を切除する手術を行う場合、腫瘍組織が術部に残存していないか否かを調べるための断端検査が術後に行われる。断端検査の検体は、手術で切除した組織であり、腫瘍組織とその周辺の正常組織とを含むものである。断端検査では、検体の表面部分を切り出して複数の検体片とし、当該検体片を蛍光プローブで染色する。腫瘍組織と正常組織とでは、蛍光強度の経時的な挙動が異なる。このため、蛍光プローブによる染色から所定時間が経過した後の検体片の蛍光強度を計測することにより、検体片における腫瘍組織の残存の有無を判断できる。検体片に腫瘍組織が残存していない場合、腫瘍組織が術部に残存していないと判断される。

断端検査による腫瘍組織の残存の有無の判断は、例えば病理医によって行われる。しかしながら、現状では、検体片を病理標本化した後、病理医が顕微鏡で観察しているため、観察速度及び観察精度の向上が課題となっている。また、検体片に腫瘍組織が残存している場合、患者に追加の治療を適切に施すためには、検体における腫瘍組織の残存部位と患者の術部との位置関係を容易に識別するための工夫も必要となる。

本開示は、上記課題の解決のためになされたものであり、観察速度及び観察精度の向上が図られ、かつ検体片と切り出し元である検体との位置関係を容易に識別できる蛍光観察装置を提供することを目的とする。

本開示の一側面に係る蛍光観察装置は、検体から切り出した検体片の蛍光観察を行う蛍光観察装置であって、検体片が載置されるトレイと、検体片に照射する励起光を発生する光源部と、検体片からの蛍光を検出する検出部と、検出部からの検出信号に基づいて検体片の蛍光画像を生成する画像生成部と、を備え、トレイは、当該トレイの中央領域の周囲に設けられた複数の載置領域を備えると共に、検体に対する検体片の切り出し方位を示す標識部を備える。

この蛍光観察装置では、検体片からの蛍光に基づいて蛍光画像を生成する。蛍光画像の観察により、検体片の蛍光を顕微鏡で観察する場合に比べて観察速度及び観察精度の向上が図られる。また、この蛍光観察装置では、トレイの中央領域の周囲に検体片が載置される複数の載置領域が設けられていると共に、検体に対する検体片の切り出し方位を示す標識部が設けられている。このような載置領域の配置及び標識部により、検体から切り出された検体片と切り出し元である検体との位置関係を容易に識別することが可能となる。

トレイは、励起光の照射によって基準となる強度の蛍光を発生させる参照部を備えていてもよい。蛍光の強度の基準を参照することにより、検体片における蛍光の強度の時間変化が微弱な場合であっても、観察精度を十分に確保できる。

参照部は、中央領域に設けられていてもよい。この場合、トレイのスペースを効率的に利用することができる。

複数の載置領域は、仕切部材によって互いに仕切られていてもよい。この場合、検体片に適用する蛍光プローブが他の載置領域に流れてしまうことを防止できる。また、検体片から生じる蛍光が他の載置領域の検体片を照射してしまうことを防止できる。

載置領域には、検体片を固定する固定部が設けられていてもよい。この場合、固定部により蛍光観察中の検体片の位置ずれや反転などを防止できる。

蛍光観察装置は、載置領域に配置されるディッシュを更に備え、ディッシュには、検体片を固定する固定部が設けられていてもよい。ディッシュを用いることにより、検体片の取り扱いが容易なものとなる。また、固定部により蛍光観察中の検体片の位置ずれや反転などを防止できる。

画像生成部は、検出部での蛍光の検出の明度分布を保有し、明度分布に基づいて蛍光画像のシェーディング補正を行ってもよい。この場合、より鮮明な蛍光画像に基づいて検体片の観察を実施できる。

画像生成部は、検体片の蛍光の観察結果と載置領域とを対応付けた結果画像を生成してもよい。これにより、観察結果の視覚的な把握が可能となり、観察速度の一層の向上が図られる。

本開示によれば、観察速度及び観察精度の向上が図られ、かつ検体片と切り出し元である検体との位置関係を容易に識別できる。

蛍光観察装置の一実施形態を示すブロック図である。 蛍光観察装置に適用されるトレイの一例を示す斜視図である。 検体及び検体片の準備を示す概略的な図である。 トレイへの検体片の載置例を示す平面図である。 腫瘍組織及び正常組織における蛍光強度の経時的な挙動の検出例を示すグラフである。 結果画像の表示例を示す図である。 検体片を固定する固定部の例を示す概略的な斜視図である。 固定部と併用するスタンプ治具の一例を示す斜視図である。 トレイの変形例を示す平面図である。 トレイの別の変形例を示す平面図である。

以下、図面を参照しながら、本開示の一側面に係る蛍光観察装置の好適な実施形態について詳細に説明する。

図１は、蛍光観察装置の一実施形態を示すブロック図である。蛍光観察装置１は、検体Ｓ（図３参照）から切り出した検体片Ｓａの蛍光観察を行う装置として構成されている。本実施形態では、蛍光観察装置１の適用例として、手術により患者から切除した腫瘍組織の断端検査を例示する。断端検査では、検体Ｓの表面部分を切り出して複数の検体片Ｓａとし、当該検体片Ｓａを蛍光プローブで染色する。腫瘍組織と正常組織とでは、蛍光強度の経時的な挙動が異なる。このため、蛍光プローブによる染色から所定時間が経過した後の検体片Ｓａの蛍光強度を計測することにより、検体片Ｓａにおける腫瘍組織の残存の有無を判断できる。

蛍光プローブは、特定の物質との反応によって分子構造が変化し、強い蛍光を発生する物質である。断端検査に用いる蛍光プローブとしては、例えばｇＧｌｕ－ＨＭＲＧが挙げられる。ｇＧｌｕ－ＨＭＲＧは、液体の蛍光物質である。反応前のｇＧｌｕ－ＨＭＲＧは、無色透明であり、水溶性を呈する。腫瘍組織に由来する酵素と反応したｇＧｌｕ－ＨＭＲＧは、有色となり、可視化される。また、水溶性から疎水性に変化し、細胞膜を透過して細胞内に留まる性質を呈する。したがって、ｇＧｌｕ－ＨＭＲＧを用いることで、例えば数ｍｍ程度の微小な腫瘍組織に対しても精度の良い検出が可能となる。

蛍光観察装置１は、図１に示すように、トレイ１１と、光源部１２と、検出部１３と、画像生成部１４とを備えている。これらの構成は、外部からの光を遮光する筐体１６（図２参照）の内部に配置されている。また、蛍光観察装置１は、有線又は無線により、モニタ１７と情報通信可能に接続されている。モニタ１７は、パーソナルコンピュータ、スマートデバイス（スマートフォン、タブレット端末）によって構成され得る。

トレイ１１は、検体片Ｓａを載置する部分である。トレイ１１は、図２に示すように、例えば樹脂によって平面視で略正方形状の板状に形成されている。トレイ１１は、検体片Ｓａの蛍光観察の感度を担保するため、例えば黒色などの暗い色を呈していることが好ましい。トレイ１１は、例えば筐体１６の一の側面の下部に設けられた引出部１８の天面に載置可能となっている。引出部１８の出し入れにより、トレイ１１上に載置した検体片Ｓａの筐体１６内の検査位置に対して進出／退避させることができる。

トレイ１１の一面側には、図２に示すように、中央領域２１と、中央領域２１の周囲に設けられた複数の載置領域２２とを有している。本実施形態では、中央領域２１及び載置領域２２は、マトリクス状に配置されている。本実施形態では、中央領域２１の周囲８箇所に載置領域２２が配置されており、最大で８体の検体片Ｓａを同時に観察することができる。中央領域２１及び載置領域２２は、いずれも正方形状をなし、互いに等面積となっている。

また、中央領域２１及び載置領域２２は、仕切部材２３によって互いに仕切られている。仕切部材２３は、トレイ１１の本体と一体に樹脂によって形成されている。仕切部材２３は、検体片Ｓａに適用する蛍光プローブが他の載置領域２２に流れることを防止するため、また、検体片Ｓａから生じる蛍光が他の載置領域２２の検体片Ｓａを照射することを防止するため、防止所定の高さをもって中央領域２１及び載置領域２２を囲うように設けられている。

本実施形態では、中央領域２１は、更にマトリクス状に４つの分割領域２４に分割されている。分割領域２４は、後述の図４に示す参照板（参照部）Ｒが配置される領域である。参照板Ｒは、励起光の照射によって基準となる強度の蛍光を発生させる板状部材である。参照板Ｒの蛍光強度は、腫瘍組織の蛍光強度と異なり、経時的な変動が生じない。このため、参照板Ｒの蛍光強度を参照することで、検体片Ｓａの蛍光強度の経時的な変動が微弱である場合でも精度の高い蛍光観察の実施が可能となる。本実施形態では、参照部として参照板Ｒを例示するが、参照部の形状に特に限定は無く、柱状、ブロック状などの他の形状であってもよい。

トレイ１１は、検体Ｓに対する検体片Ｓａの切り出し方位を示す標識部２５を備えている。標識部２５は、例えば中央領域２１を検体Ｓの中心部分と見立てた場合に、各載置領域２２に載置された検体片Ｓａが切り出し元である検体Ｓにおいていずれの方位に位置していたかを示すものである。本実施形態では、標識部２５は、トレイ１１の一縁から側方に突出する突出部２６によって構成されている。突出部２６と切り出し方位との関連付けは任意である。例えば突出部２６の位置が示す方位が「下」であるならば、突出部２６が設けられた縁の切り出し方位が「下」、中央領域２１を挟んで突出部２６と反対側の縁の切り出し方位が「上」となる。また、例えば図２における紙面右側の切り出し方位が「右」、図２における紙面左側の縁の切り出し方位が「左」となる。

図２の例では、突出部２６の平面形状は、半円状となっているが、突出部２６の平面形状は任意であり、矩形状、多角形状などであってもよい。標識部２５は、突出部２６に限られず、他の態様を採り得る。例えば標識部２５は、突出部２６のほか、文字、記号、色、図形、及びこれらの組み合わせなどによって構成されていてもよい。

光源部１２は、図１に示すように、白色光源３１と、励起光源３２とを備えている。白色光源３１及び励起光源３２は、筐体１６内において、例えばトレイ１１の配置位置の上方に配置されている。白色光源３１は、例えばランプなどで構成され、トレイ１１上の検体片Ｓａに対して上方から白色光を照射する。また、励起光源３２は、例えばＬＥＤなどで構成され、トレイ１１上の検体片Ｓａに対して上方から励起光を照射する。

検出部１３は、例えばＣＣＤイメージセンサやＣＭＯＳイメージセンサといった撮像素子を備えて構成されている。検出部１３は、筐体１６内において、例えばトレイ１１の配置位置の上方に配置されている。検出部１３の検出面（不図示）は、トレイ１１と対向するように下向きに配置されている。検出部１３は、必要に応じて検体片Ｓａで生じる波長の蛍光を透過する光学フィルタ３３を備えていてもよい。検出部１３は、白色光による検体片Ｓａの撮像結果を示す検出信号と、励起光の照射によって検体片Ｓａで生じた蛍光の撮像結果を示す検出信号とを画像生成部１４に出力する。

画像生成部１４は、例えばプロセッサ及びメモリを備えるマイクロコンピュータ或いはＦＰＧＡ（field-programmable gate array）などによって構成されている。画像生成部１４は、検出部１３からの検出信号に基づいて検体片Ｓａの蛍光画像を生成する。本実施形態では、画像生成部１４は、白色光による検体片Ｓａの撮像結果を示す検出信号に基づいて可視画像を生成し、検体片Ｓａで生じた蛍光の撮像結果を示す検出信号に基づいて蛍光画像を生成する。そして、画像生成部１４は、可視画像と蛍光画像とを重畳した重畳画像を生成し、当該重畳画像をモニタ１７に出力する。また、画像生成部１４は、検体片Ｓａの蛍光の観察結果と載置領域２２とを対応付けた結果画像（図６参照）Ｇを生成し、当該結果画像をモニタ１７に出力する。

画像生成部１４は、蛍光画像（重畳画像）のシェーディング補正を行う機能を有していてもよい。この場合、画像生成部１４は、例えばトレイ１１と同等の面積を有する参照板の撮像結果に基づいて、検出部１３での蛍光の検出の明度分布を予め保有し、当該明度分布に基づいて蛍光画像（重畳画像）のシェーディング補正を実行する。シェーディング補正を実行することにより、検出部１３の構成に起因する蛍光の明度分布の影響を打ち消すことが可能となり、蛍光観察の精度の向上が図られる。

次に、上述した蛍光観察装置１を用いた蛍光観察方法について説明する。ここでは、上述した断端検査を例示する。断端検査では、まず、図３（ａ）に示すように、手術により患者から腫瘍組織を切除し、これを検体Ｓとする。次に、図３（ｂ）に示すように、検体Ｓの表面部分をメス等で切り出し、図３（ｃ）に示すように、複数の検体片ＳａＡ～ＳａＤを作製する。検体片ＳａＡ～ＳａＤは、検体Ｓの切除元である人体との関係で、上下左右の切り出し方位が定まる。図３（ｃ）の例では、検体片ＳａＡの方位が「下」、検体片ＳａＢの方位が「上」、検体片ＳａＣの方位が「右」、検体片ＳａＤの方位が「左」である。

検体片Ｓａの作製の後、図４に示すように、検体片Ｓａをトレイ１１にセットする。図４の例では、有底筒状のディッシュ４１内に検体片Ｓａをそれぞれ配置し、ディッシュ４１を介して検体片Ｓａを載置領域２２上に配置している。載置領域２２への検体片Ｓａの配置にあたっては、トレイ１１の標識部２５が示す切り出し方位に対応するように検体片ＳａＡ～ＳａＤを配置する。すなわち、突出部２６が設けられた縁側の中央の載置領域２２に検体片ＳａＡを載置し、中央領域２１を挟んで突出部２６と反対の縁側の中央の載置領域２２に検体片ＳａＢを載置する。また、図４における紙面右縁側の中央の載置領域２２に検体片ＳａＣを載置し、図４における紙面左縁側の中央の載置領域２２に検体片ＳａＤを載置する。

また、載置領域２２への検体片Ｓａの配置にあたっては、切出面Ｐ（図３（ｃ）参照）を上方（検出部１３側）に向ける。検体Ｓの最表面部分（図３（ｂ）及び図３（ｃ）参照）は、手術で用いる電気メスの影響で組織が変性している場合があり、蛍光プローブに対する反応が殆ど生じない。このため、検体片Ｓａの切出面Ｐが観察対象の断端（stump）となる。中央領域２１には、参照板Ｒを配置する。分割領域２４における参照板Ｒの配置位置は、任意である。すなわち、４つの分割領域２４のいずれに参照板Ｒを配置してもよい。

検体片Ｓａをトレイ１１にセットした後、検体片Ｓａをそれぞれ蛍光プローブで染色し、トレイ１１を引出部１８の天面に載置する。次に、引出部１８を筐体１６内に収容し、トレイ１１上に載置した検体片Ｓａの筐体１６内の検査位置に対して進出させる。続いて、光源部１２から白色光及び励起光を検体片Ｓａに照射し、励起光の照射によって検体片Ｓａで生じる蛍光を検出する。そして、白色光による検体片Ｓａの撮像結果を示す検出信号に基づいて生成した可視画像と、検体片Ｓａで生じた蛍光の撮像結果を示す検出信号に基づいて生成した蛍光画像とを重畳して重畳画像を生成し、当該重畳画像をモニタ１７に出力する。また、検体片Ｓａの蛍光の観察結果と載置領域２２とを対応付けた結果画像をモニタ１７に出力する。なお、蛍光プローブでの染色前に検体片Ｓａの自家蛍光を検出し、自家蛍光の強度を補正して蛍光強度の検出を行うようにしてもよい。

図５は、腫瘍組織及び正常組織における蛍光強度の経時的な挙動の検出例を示すグラフである。図５では、横軸に時間（蛍光プローブで染色してからの経過時間）を示し、縦軸に蛍光強度を示している。図５に示すように、正常組織では、時間の経過に対する蛍光強度の変動が殆ど生じないのに対し、腫瘍組織では、時間の経過とともに蛍光強度が徐々に増加していく傾向がある。したがって、所定時間経過後の蛍光強度を所定の閾値と比較することにより、検体片Ｓａに腫瘍組織が含まれているか否かを判定することができる。

図６は、結果画像の表示例を示す図である。同図の例では、結果画像Ｇには、例えば断端検査のＩＤ等が表示される領域Ｇａと、トレイ１１の載置領域２２に対応した図形が表示される領域Ｇｂと、結果画像Ｇに対するコマンドが表示される領域Ｇｃとが含まれている。領域Ｇａには、例えば検査の日時、被検査者の名前、ＩＤなどが表示されている。領域Ｇｂには、検体片Ｓａの蛍光の観察結果と載置領域２２とが対応付けられて表示されている。ここでは、蛍光強度を示す数値のほか、観察結果が陽性か陰性かに基づく色分け、陽性の度合いを示す印などが表示されている。領域Ｇｃには、結果画像Ｇを閉じるコマンドや印刷コマンドなどが表示されている。

検体片Ｓａに判定結果が陽性のものが含まれる場合、陽性と判定された検体片Ｓａを選別し、切り出し方位と関連付けて病理医に提出する。これにより、複数の検体片Ｓａから陽性と判定された検体片Ｓａのみをスクリーニングできると同時に、陽性と判定された検体片Ｓａと切り出し元である検体Ｓ（すなわち患者の術部）との位置関係を容易に識別することが可能となる。

以上説明したように、蛍光観察装置１では、検体片Ｓａからの蛍光に基づいて蛍光画像を生成する。蛍光画像の観察により、検体片Ｓａの蛍光を顕微鏡で観察する場合に比べて観察速度及び観察精度の向上が図られる。また、蛍光観察装置１では、トレイ１１の中央領域２１の周囲に検体片Ｓａが載置される複数の載置領域２２が設けられていると共に、検体Ｓに対する検体片Ｓａの切り出し方位を示す標識部２５が設けられている。このような載置領域２２の配置及び標識部２５により、検体Ｓから切り出された検体片Ｓａと切り出し元である検体Ｓとの位置関係を容易に識別することができる。

本実施形態では、トレイ１１が励起光の照射によって基準となる強度の蛍光を発生させる参照板Ｒを備えている。蛍光の強度の基準を参照することにより、検体片Ｓａにおける蛍光の強度の時間変化が微弱な場合であっても、観察精度を十分に確保できる。また、本実施形態では、参照板Ｒが中央領域２１に設けられている。これにより、トレイ１１のスペースを効率的に利用することができる。

本実施形態では、トレイにおける複数の載置領域２２が仕切部材２３によって互いに仕切られている。これにより、検体片Ｓａに適用する蛍光プローブが他の載置領域２２に流れてしまうことを防止できる。また、検体片Ｓａから生じる蛍光が他の載置領域２２の検体片Ｓａを照射してしまうことを防止できる。

本実施形態では、画像生成部１４が検出部１３での蛍光の検出の明度分布を保有し、明度分布に基づいて蛍光画像のシェーディング補正を実行する。これにより、鮮明な蛍光画像に基づいて検体片Ｓａの観察を実施できる。また、本実施形態では、画像生成部１４が検体片Ｓａの蛍光の観察結果と載置領域２２とを対応付けた結果画像Ｇを生成する。これにより、観察結果の視覚的な把握が可能となり、観察速度の一層の向上が図られる。

本開示は、種々の変形を適用可能である。例えば上記実施形態では、ディッシュ４１に検体片Ｓａを載置しているが、ディッシュ４１に検体片Ｓａを固定する固定部Ｆが設けられていてもよい。固定部Ｆは、図７（ａ）の例では、メッシュ状の底面５１ａを有するディッシュ５１によって構成されている。このディッシュ５１は、検体片Ｓａを載置するディッシュ４１の内径と比べて一回り小さい外径を有している。この場合、メッシュ状の底面５１ａをディッシュ４１内の検体片Ｓａに押し付けることによって検体片Ｓａをディッシュ４１に固定できる。

図７（ｂ）の例では、固定部Ｆは、ディッシュ４１の底面に設けられた複数の微細なニードル５２によって構成されている。この場合、検体片Ｓａをニードル５２に刺すことにより、検体片Ｓａをディッシュ４１に固定できる。ディッシュ４１に固定部Ｆを設けることにより、検体片Ｓａの取り扱いが容易なものとなる。蛍光観察中は、蛍光プローブから受ける浮力により検体片Ｓａの姿勢が変動することが考えられるが、固定部Ｆを用いることで、蛍光観察中の検体片Ｓａの位置ずれや反転などを防止できる。

また、図８（ａ）及び図８（ｂ）に示すようなスタンプ治具６１を固定部Ｆと併用してもよい。スタンプ治具６１は、例えばメッシュ状の底面６２ａを有する筒状部６２と、底面６２ａの縁に設けられた脚部６３と、筒状部６２の天面６２ｂの中心に設けられた棒状の把持部６４とを備えている。このスタンプ治具６１を用いてメッシュ状の底面６２ａを検体片Ｓａに押し付ける場合、脚部６３の長さに基づいて検体片Ｓａへの押し付け力を規定することができる。したがって、過剰な押し付け力の付加による検体片Ｓａの破損を防止できる。

上述した実施形態では、ディッシュ４１を介して検体片Ｓａをトレイ１１の載置領域２２に載置しているが、ディッシュ４１を用いずに検体片Ｓａをトレイ１１に直接載置してもよい。この構成において固定部Ｆを用いる場合、上述したニードル５２をトレイ１１の表面に直接設けるようにすればよい。

図９及び図１０は、トレイの変形例を示す平面図である。図９（ａ）に示すトレイ１１Ａでは、図１と同様にマトリクス状に載置領域２２が設けられており、中央領域２１も検体片Ｓａの載置領域２２となっている。トレイ１１Ａでは、標識部２５である突出部２６と反対側の縁に参照板Ｒを載置する張出部２７が設けられている。この張出部２７は、標識部２５としても機能する。図９（ｂ）に示すトレイ１１Ｂでは、中央領域２１の周囲に４つの長方形状の載置領域２２が設けられている。トレイ１１Ｂでは、標識部２５としての突出部２６が紙面左右の縁にもそれぞれ設けられており、検体片Ｓａの切り出し方位がより視覚的に把握し易くなっている。

図１０（ａ）に示すトレイ１１Ｃの平面形状は、円形となっている。トレイ１１Ｃでは、中央領域２１の形状は円形となっており、当該中央領域２１の周囲に６つの円弧状の載置領域２２が配置されている。中央領域２１には、参照板Ｒが配置される。また、中央領域２１において、参照板Ｒが配置される領域の周囲には、「ToP」「Bottom」「Left」「Right」といった文字が標識部２５として付されている。図１０（ｂ）に示すトレイ１１Ｄの平面形状は、正三角形となっている。トレイ１１Ｄでは、中央領域２１の形状は円形となっており、当該中央領域２１の周囲に３つの二等辺三角形状の載置領域２２が配置されている。中央領域２１には、参照板Ｒが配置される。トレイ１１Ｄの各辺に対応する縁には、それぞれ突出部２６が設けられている。突出部２６には、「Bottom」「Left」「Right」といった文字が標識部２５として付されている。図１０（ｃ）に示すトレイ１１Ｅの平面形状は、正五角形状となっている。トレイ１１Ｅでは、中央領域２１の形状は円形となっており、当該中央領域２１の周囲に５つの正三角形状の載置領域２２が配置されている。中央領域２１には、参照板Ｒが配置される。トレイ１１Ｅの各辺に対応する縁には、それぞれ突出部２６が設けられている。突出部２６には、「Bottom」「Left」「Right」といった文字が標識部２５として付されている。

これらの変形例に係るトレイ１１Ａ～１１Ｅにおいても、載置領域２２の配置及び標識部２５により、検体Ｓから切り出された検体片Ｓａと切り出し元である検体Ｓとの位置関係を容易に識別することができる。また、検体片Ｓａの切り出し数に応じた数の載置領域２２を設けることで、蛍光観察を行う際の検体片Ｓａの取り扱いが容易なものとなる。

１…蛍光観察装置、１１，１１Ａ～１１Ｅ…トレイ、１２…光源部、１３…検出部、１４…画像生成部、２１…中央領域、２２…載置領域、２３…仕切部材、２５…標識部、４１…ディッシュ、Ｆ…固定部、Ｇ…結果画像、Ｒ…参照板（参照部）、Ｓ…検体、Ｓａ…検体片。

Claims (8)

1. 検体から切り出された検体片の蛍光観察を同一の蛍光プローブで行う蛍光観察装置であって、
   前記検体片が載置されるトレイと、
   前記検体片に照射する励起光を発生する光源部と、
   前記検体片からの蛍光を検出する検出部と、
   前記検出部からの検出信号に基づいて前記検体片の蛍光画像を生成する画像生成部と、を備え、
   前記トレイは、当該トレイの中央領域の周囲に設けられた複数の載置領域を備えると共に、前記検体に対する前記検体片の切り出し方位と前記中央領域に対する前記載置領域の方位とを対応付ける標識部を備える蛍光観察装置。
2. 前記トレイは、前記励起光の照射によって基準となる強度の蛍光を発生させる参照部を備える請求項１記載の蛍光観察装置。
3. 前記参照部は、前記中央領域に設けられている請求項２記載の蛍光観察装置。
4. 前記複数の載置領域は、仕切部材によって互いに仕切られている請求項１～３のいずれか一項記載の蛍光観察装置。
5. 前記載置領域には、前記検体片を固定する固定部が設けられている請求項１～４のいずれか一項記載の蛍光観察装置。
6. 前記載置領域に配置されるディッシュを更に備え、
   前記ディッシュには、前記検体片を固定する固定部が設けられている請求項１～４のいずれか一項記載の蛍光観察装置。
7. 前記画像生成部は、前記検出部での前記蛍光の検出の明度分布を保有し、前記明度分布に基づいて前記蛍光画像のシェーディング補正を行う請求項１～６のいずれか一項記載の蛍光観察装置。
8. 前記画像生成部は、前記検体片の蛍光の観察結果と前記載置領域とを対応付けた結果画像を生成する請求項１～７のいずれか一項記載の蛍光観察装置。
   

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