WO2007029666A1

WO2007029666A1 - 電気泳動装置および装置構成器具

Info

Publication number: WO2007029666A1
Application number: PCT/JP2006/317491
Authority: WO
Inventors: Koji Sakairi; Chie Hayashida; Yutaka Unuma; Yuji Maruo; Katsuyoshi Takahashi; Michinobu Mieda
Original assignee: Toppan Printing Co., Ltd.; Sharp Kabushiki Kaisha
Priority date: 2005-09-05
Filing date: 2006-09-05
Publication date: 2007-03-15
Also published as: US20070278102A1; US7951279B2; JP4728072B2; JP2007071609A

Abstract

　第１分離媒体（４）を内部に収納するための第１分離媒体収納部（４’）；第１分離媒体（４）での分離方向を規定する第１開口部（７）および第２開口部（８）；ならびに、穿孔可能な絶縁薄膜（３）にて被覆された第３開口部（９）、が備えられた絶縁物を有する電気泳動器具であって、第１分離媒体収納部（４’）は、第１開口部（７）および第２開口部（８）を介して外部と連絡していることを特徴とする電気泳動器具（１００）、および当該電気泳動器具（１００）を備えた電気泳動装置を提供する。したがって、作業者が電気泳動ゲルに接触することなく、分離したタンパク質をサンプリングし、種々の分析と容易に組み合わせることができる電気泳動装置および当該装置を構成する器具を提供して、電気泳動の利便性を高めることができる。

Description

明細書

電気泳動装置および装置構成器具

技術分野

[0001] 本発明は、電気泳動装置および当該装置を構成する器具に関するものであり、より詳細には、分離媒体を外部に取り出さずに感度よくモニタリングし得、かつ分離媒体の所望の部分を切り出して他の分析への移行を簡便に行ヽ得る電気泳動装置および当該装置を構成する器具に関するものである。

背景技術

[0002] 電気泳動を用いた分析 (例えば、質量分析)では、分離媒体である電気泳動ゲルが充填されたカセットを泳動槽に配置し、タンパク質 (または DNAZRNA)を含むサンプルをアプライし、電気泳動を行った後にゲルをカセットから取り出し、ゲルを染色した結果を観察し、所望の部分をゲル力も切り出し、切り出したゲル片を用いている。

[0003] サンプルの分離，展開に用いる電気泳動用のゲルは薄ぐ壊れやすい。電気泳動後のこのようなゲル中に含まれるタンパク質分離スポット (バンド）を検出および Zまたは定量するためには、（1)カセットを泳動槽から取り外し、（2)カセットを分解してゲルを取り出し、（3)ゲルを検出装置へ搬送し (または搬送するために平坦な固定板に載せ）、そして (4)ゲルの変形を防止するために液体に浸す (またはサポートフィルムに固定化する）。このような操作は煩雑であり、ゲルは有毒であるので、取り出し操作は危険を伴う。さらに、電気泳動を行った後に取り出したゲルを染色するので無駄な時間を要する。蛍光染色を施したサンプルを用いてゲル染色までの工程を省略する方法 (例えば、特許文献 1および 2を参照のこと）が知られている。

[0004] ゲルに触れることなく所望の部分を切り出すための技術もまた知られてヽる（例えば、特許文献 3〜6を参照のこと)。これらの技術を用いれば、ゲルまたはゲル片に触れることなく引き続く分析工程を行うことができる。

特許文献 1 :日本国公開特許公報「特開平 5— 215713号公報 (公開日：1993年 8月 24日）」」

特許文献 2 :日本国公開特許公報「特開平 5— 215714号公報 (公開日：1993年 8月 24日）」」

特許文献 3 :日本国公開特許公報「特開平 7— 132079号公報 (公開日：1995年 5月 23日）」」

特許文献 4:日本国公開特許公報「特開 2005— 69905号公報 (公開日： 2005年 3 月 17日）」」

特許文献 5 :日本国公開特許公報「特開 2005— 77242号公報 (公開日： 2005年 3 月 24日）」」

特許文献 6 :日本国公開特許公報「特開 2005— 172621号公報 (公開日： 2005年 6 月 30日）」」

発明の開示

[0005] し力しながら、特許文献 1および 2に記載されている技術を用いても種々の分析を行うためにはゲル力も所望の部分を切り出す必要がある。また、特許文献 3〜6に記載されている技術を用いるためには、上述した（1)〜(4)のような煩雑な操作、場合により取り出したゲルを染色する操作、および検出装置カゝらゲルを切り出す装置へ移動することが必要である。

[0006] これらの 2種類の技術は、ゲルをカセットから取り出すことが不可欠であるため、これらの技術を組み合わせて行う際においても、作業者がゲルに触れることなく連続的に行い得るものではなぐ当業者は、ゲルとの接触を回避することはできな力つた。特に、電気泳動工程の機械化'自動化を試みたとしても、ゲルをカセットから取り出すことなく検出し、所望の部分をゲル力も切り出すことができな力つた。ゲルを取り出すことにより、タンパク質分離スポットが拡散したり、ゲルが汚染、乾燥または変形したりするので、電気泳動終了後に他の分析工程へ首尾よく移行することができない。

[0007] 本発明は、上記の問題点に鑑みてなされたものであり、その目的は、電気泳動を開始した後、作業者が電気泳動ゲルに接触することなぐ分離したタンパク質を容易に確認し、所望の部分を所望の時点で容易に切り出し得るサンプリング可能な電気泳動装置を実現することにある。

[0008] 本発明に係る電気泳動器具は、絶縁物を有し、

該絶縁物は、第 1分離媒体を内部に収納するための第 1分離媒体収納部；

第 1分離媒体収納部と外部とを連絡しかつ第 1分離媒体での分離方向を規定するための第 1開口部および第 2開口部；ならびに

穿孔可能な絶縁薄膜にて被覆された第 3開口部

を備えて、ることを特徴として、る。

[0009] 本発明は、電気泳動用の分離媒体を保持する電気泳動器具に関する。本発明に係る電気泳動器具は、上記構成を有することにより、第 1開口部から第 2開口部に向けてサンプル分離するように電流が流れる際に所望の時点で分離中のサンプルを回収し得る第 1分離媒体を収納することができる。

[0010] 本発明に係る電気泳動器具において、絶縁物は第 1板状絶縁体および絶縁薄膜を備え、第 1分離媒体収納部が該第 1板状絶縁体上に設けられた凹部であり、該絶縁薄膜が前記第 1分離媒体を被覆してヽることが好ま Uヽ。

[0011] 本発明に係る電気泳動器具は、上記構成を有することにより、公知のスラブゲル電気泳動用装置に適用し得るとともに、第 1分離媒体を収納する凹部の開口を絶縁薄膜によって外部と遮断した状態で保存することができる。

[0012] 本発明に係る電気泳動器具は絶縁物を有し、

該絶縁物は、

第 1分離媒体が内部に収納されている第 1分離媒体収納部；

穿孔可能な絶縁薄膜にて被覆された第 3開口部

を備えて、ることを特徴として、る。

[0013] 本発明に係る電気泳動器具は、上記構成を有することにより、第 1分離媒体中にて第 1開口部から第 2開口部に向けてサンプル分離するように電流が流れる際に所望の時点で分離中のサンプルを回収することができる。

[0014] 本発明に係る電気泳動器具にお!ヽて、絶縁物は第 1板状絶縁体および絶縁薄膜を備え、第 1分離媒体収納部は第 1板状絶縁体上に設けられた凹部であり、絶縁薄膜は第 1分離媒体を被覆して!/、ることが好ま U、。 [0015] 本発明に係る電気泳動器具は、上記構成を有することにより、公知のスラブゲル電気泳動用装置に適用し得るとともに、第 1分離媒体を絶縁薄膜によって外部と遮断した状態で保存することができる。

[0016] 本発明に係る電気泳動器具において、絶縁物は第 2板状絶縁体をさらに備え、第

1分離媒体収納部は第 1板状絶縁体上に設けられた凹部であることが好ましい。

[0017] 本発明に係る電気泳動器具は、上記構成を有することにより、器具全体により強度を持たせることができ、かつ公知のスラブゲル同様に取り扱うことができる利便性を有している。

[0018] 本発明に係る電気泳動器具において、第 3開口部は第 2板状絶縁体に設けられて、ることが好まし!/、。

[0019] 本発明に係る電気泳動器具は、第 1分離媒体を収納する基板とは別の基板に第 3 開口部を設けることにより、器具内での第 1分離媒体の作製が容易になり、第 1分離媒体の封着が容易になる。

[0020] 本発明に係る電気泳動器具にお!、て、第 1板状絶縁体または絶縁薄膜が光透過性材料力もなることが好まし、。

[0021] 本発明に係る電気泳動器具は、第 1板状絶縁体または絶縁薄膜が光透過性材料力なることにより、第 1板状絶縁体または絶縁薄膜を介して光照射および蛍光検出を行うことが可能であり、第 1分離媒体を第 1分離媒体収納部において検出し、その場において所望の部分を第 1分離媒体力切り出すサンプリング操作が可能になる。

[0022] 本発明に係る電気泳動器具において、第 1開口部にて第 1分離媒体と接触させる第 1緩衝液を充填するための第 1緩衝液槽および第 2開口部にて第 1分離媒体と接触させる第 2緩衝液を充填するための第 2緩衝液槽がさらに備えられていることが好ましい。

[0023] 本発明に係る電気泳動器具は、電気泳動に必要な緩衝液を充填するための緩衝液槽を有してヽるので、新たな糸且立ての必要性がな!、。

[0024] 本発明に係る電気泳動器具にお!、て、上記絶縁物、第 1緩衝液槽および第 2緩衝液槽がー体形成されてヽることが好ま、。

[0025] 本発明に係る電気泳動器具は、電気泳動に必要な緩衝液を充填するための緩衝液槽を一体ィ匕して有してヽるので、操作 Z運搬が容易である。

[0026] 本発明に係る電気泳動器具において、第 1開口部または第 2開口部力サンプルを保持した第 2分離媒体を密着させる形状を有してヽることが好まヽ。

[0027] 本発明に係る電気泳動器具は、第 1開口部または第 2開口部が、サンプルを保持した第 2分離媒体を密着させる形状を有していることにより、サンプルを確実に第 1分離媒体に移動させることができ、かつ第 1分離媒体においてより高度な分離を遂行することがでさる。

[0028] 本発明に係る電気泳動器具が上記構成を有することにより、別の分離媒体にて分離したサンプルを第 1分離媒体に供給することができ、 2次元電気泳動を実行し得る

[0029] 本発明に係る電気泳動器具において、第 1分離媒体の分離パラメータは第 2分離媒体の分離パラメータと異なることが好まし、。

[0030] 本発明に係る電気泳動器具は、上記構成を有することにより、より高度な分解能を有し得る。

[0031] 本発明に係る電気泳動器具において、上記絶縁薄膜は、膜厚が 1000 /z m以下であることが好ましい。上記絶縁薄膜の膜厚は、フィルムの材質に応じて 800 /z m以下であることがより好ましぐ 500 m以下であることがさらに好ましぐ 125 m以下であることが最も好ましい。

[0032] 本発明に係る電気泳動器具において、上記絶縁薄膜は、突き刺し強度が l〜50m Nの範囲内であることが好まし!/、。

[0033] 本発明に係る電気泳動器具にお!、て、上記絶縁薄膜はポリスチレンフィルム、ポリエチレンテレフタレートフィルム、ポリ塩化ビュルフィルム、ポリ塩化ビ-リデンフィルム、ポリオレフイン系榭脂フィルム、またはポリプロピレンフィルムであることが好ましい。

[0034] 本発明に係る電気泳動装置は、上記電気泳動器具、および第 1分離媒体中のサンプルを切り出すための切り出し手段が備えられてヽることを特徴として、る。

[0035] 本発明に係る電気泳動装置は、上記構成を有することにより、所望の時点で分離中のサンプルを回収し得る第 1分離媒体を収納することができる。

[0036] 本発明に係る電気泳動装置は、第 1分離媒体中のサンプルを照射するための照射手段、および該サンプルからの蛍光を検出するための検出手段がさらに備えられて、ることが好まし!/、。

[0037] 本発明に係る電気泳動装置は、上記構成を有することにより、分離中のサンプルを観察することができる。

[0038] 本発明に係る電気泳動装置は、第 1分離媒体に電圧を印加するための第 1電圧印加手段がさらに備えられて、ることが好ま、。

[0039] 本発明に係る電気泳動装置にお!ヽて、第 1緩衝液槽および第 2緩衝液槽に挿入するための第 1電極および第 2電極は、第 1電圧印加手段と連結された第 1配線手段に設けられて、ることが好ま U、。

[0040] 本発明に係る電気泳動装置は、緩衝液槽とは独立した形態で電極を有すること〖こより、電極の取替えや洗浄を容易に行い得る。

[0041] 本発明に係る電気泳動装置は、サンプルを保持した第 2分離媒体を第 1開口部または第 2開口部へ移動するための移動手段がさらに備えられて、ることが好ま U、。

[0042] ゲルの変形または汚染を防止するためには、ヒトの手を介することなく電気泳動が行われることが必要である。本発明に係る電気泳動装置は、上記移動手段という自動搬送系を有することにより、自動化された 2次元電気泳動を可能にする。

[0043] 本発明に係る電気泳動装置において、第 1配線手段は上記移動手段によって移動されることが好ましい。

[0044] 本発明に係る電気泳動装置は、上記構成を有することにより、ヒトの手を介することなく自動搬送系による自動化された 2次元電気泳動を可能にする。

[0045] 本発明に係る電気泳動装置は、サンプルを第 2分離媒体中で分離するための分離器具がさらに備えられており、上記移動手段が、第 2分離媒体中を分離器具から第 1 開口部または第 2開口部へ移動することが好ま U、。

[0046] 本発明に係る電気泳動装置は、上記構成を有することにより、ヒトの手を介することなく自動搬送系による自動化された 2次元電気泳動を可能にする。

[0047] 本発明に係る電気泳動装置は、第 2分離媒体中体に電圧を印加するための第 2電圧印加手段がさらに備えられて、ることが好ま、。

[0048] 本発明に係る電気泳動装置は、上記構成を有することにより、自動化された 2次元電気泳動を可能にする。

[0049] 本発明に係る電気泳動装置において、分離器具に挿入するための第 3電極が、第 2電圧印加手段と連結された第 2配線手段に設けられていることが好ましい。

[0050] 本発明に係る電気泳動装置は、上記構成を有することにより、自動化された 2次元電気泳動を可能にする。

[0051] 本発明に係る電気泳動装置において、第 2配線手段が上記移動手段によって移動されることが好ましい。

[0052] 本発明に係る電気泳動装置は、上記構成を有することにより、自動化された 2次元電気泳動を可能にする。

[0053] 本発明に係る電気泳動装置において、上記切り出し手段、上記照射手段および上記検出手段を制御するための制御手段がさらに備えられていることが好ましい。

[0054] 本発明に係る電気泳動装置は、上記構成を有することにより、高度に自動化された

2次元電気泳動を可能にする。

[0055] 本発明を用いれば、電気泳動の終了直後にサンプリングすることができる。さらに、本発明を用いれば、ゲルの乾燥、変形および Zまたはタンパク質分離スポットの拡散などの不利益を抑制または防止し得る。

[0056] 例えば、サンプル中には、高含有量であり分子量が既知のタンパク質と、微量で未知のタンパク質とが含まれているが、本発明を用いれば、高含有量タンパク質スポットを容易に除去し得る。よって、高含有量タンパク質のスポットの拡散、および高強度の蛍光の拡散 ·散乱を防止し得、微量タンパク質の微弱な蛍光を検出することができる。

[0057] さらに、本発明を用いれば、検出した蛍光を分析する際に、分析処理の範囲が適性となるため、精度を向上させることができる。また、例えば、サンプル中には種々の分子量のタンパク質が含まれているが、電気泳動の初期段階で分離される高分子量タンパク質を電気泳動の初期段階で切り出すことにより、分離状態の高いタンパク質スポットを回収し得、よって、首尾よく分析することができる。

図面の簡単な説明

[0058] [図 1]本発明の一実施形態に係る電気泳動器具の要部構成を示す斜視図である。圆 2]本発明の一実施形態に係る電気泳動器具の要部構成を示す断面図である。圆 3]本発明の一実施形態に係る電気泳動器具の要部構成を説明するための模式図である。

圆 4]本発明の一実施形態に係る電気泳動器具の要部構成を説明するための断面図である。

[図 5]本発明の一実施形態に係る自動化 2次元電気泳動装置の要部構成を示す断面図である。

[図 6]本発明の一実施形態に係る自動化 2次元電気泳動装置の要部構成を示す断面図である。

[図 7]本発明の一実施形態に係る自動化 2次元電気泳動装置の要部構成を示す断面図である。

[図 8]本発明の一実施形態に係る自動化 2次元電気泳動装置の要部構成を示す断面図である。

[図 9]本発明の一実施形態に係る自動化 2次元電気泳動装置の要部構成を示す断面図である。

圆 10]本発明の一実施形態に係る電気泳動器具の要部構成を示す斜視図である。圆 11]本発明の一実施形態に係る電気泳動器具の要部構成を示す断面図である。符号の説明

1 下部基板 (第 1板状絶縁体)

2 上部基板 (第 2板状絶縁体)

3 榭脂フィルム (絶縁薄膜）

4 2Dゲル (第 1分離媒体）

4，溝部 (第 1分離媒体収納部)

5 第 1緩衝液槽

6 第 2緩衝液槽

7 第 1開口部

8 第 2開口部

9 第 3開口部 20 切り出し手段

30 照射手段

40 検出手段

50 第 1電圧印加手段

51 第 1配線手段

52 第 1電極

53 第 2電極

60 ステージ（固定基板）

70 1Dセル (分離器具）

71 1D分離槽

72 1Dゲル (第 2分離媒体)

73 支持板

74 ゲル付支持板

80 第 2電圧印加手段

81 第 2配線手段

82 第 3電極

90 アーム

100 2Dセル (電気泳動器具:

200 電気泳動装

201 2次元電気泳動装置

発明を実施するための最良の形態

[0060] 本発明に係る電気泳動器具の一実施形態を、 2次元電気泳動用の 2Dチップ（2次元目電気泳動用チップ）として利用可能な電気泳動器具 100を例として、図 1〜4に基づいて説明する。

[0061] 本発明の一実施形態に係る電気泳動器具の要部構成を示す斜視図を図 1に示す。本実施形態に係る電気泳動器具 100において、下部基板 (第 1板状絶縁体） 1、上部基板 (第 2板状絶縁体) 2、およびこれら 2枚の基板の間に設けられた榭脂フィルム (絶縁薄膜) 3からなる絶縁物 10に、 2次元目電気泳動を行う第 1分離媒体 4を収納する溝部 (第 1分離媒体収納部) 4'、第 1緩衝液槽 5、第 2緩衝液槽 6、および第 3開口部 9が設けられて、る。図 1に示す電気泳動器具 100の断面図を図 2に示す。

[0062] 図 1および 2に示すような電気泳動器具の作製手順を図 3および 4を用いて説明する。

[0063] 上面に溝部 4'を設けた下部基板 1を、榭脂フィルム 3と貼り合せた上部基板 2と重ね合わせることにより、溝部 4'は絶縁物 10により覆われる。そして上部基板 2を貫く 2 つの溝 (第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6)が下部基板 1に設けられている。第 1 分離媒体収納部 4'に収納された第 1分離媒体 4は、第 1開口部 7および第 2開口部 8 において絶縁物 10の外部と連絡している。第 1分離媒体 4はまた、上部基板 2に設けられた第 3開口部 9において、榭脂フィルム 3によって絶縁物 10の外部と隔てられている。

[0064] 第 1開口部 7および第 2開口部 8は、電気泳動器具 100に設けられた第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6にそれぞれ面している。サンプルの分離を実行するために、第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6には、溝部 4'に収納された第 1分離媒体 4と第 1開口部 7および第 2開口部 8にて接する第 1緩衝液および第 2緩衝液がそれぞれ充填される（図示せず)。

[0065] 用語「サンプル」は当該分野において標本、調製物と同義で用いられ、本明細書中で使用される場合、「生物学的サンプル」またはその等価物が意図される。「生物学的サンプル」は、供給源としての生物材料 (例えば、個体、体液、細胞株、組織培養物もしくは組織切片)から得られる、任意の調製物が意図される。生物学的サンプルとしては、体液 (例えば、血液、唾液、歯垢、血清、血漿、尿、滑液、および随液)および組織供給源が挙げられる。好ましい生物学的サンプルは、被験体サンプルである。好ましい被験体サンプルは、被験体から得た皮膚病変部、喀痰、咽頭粘液、鼻腔粘液、膿、または分泌物である。本明細書中で使用される場合、用語「組織サンプル」は、組織供給源より得られた生物学的サンプルが意図される。哺乳動物から組織生検および体液を得るための方法は当該分野で周知である。本明細書中で使用される場合、用語「サンプル」としては、上記生物学的サンプルおよび上記組織サンプル以外に、上記生物学的サンプルおよび上記組織サンプルより抽出したタンパク質サンプル、ゲノム DNAサンプルおよび Zまたは総 RNAサンプルも挙げられる。

[0066] 上部基板 2と榭脂フィルム 3とが貼り合わされた構成を用いて電気泳動器具 100を説明したが、榭脂フィルム 3は溝部 4'が設けられた下部基板 1上に貼り合わされていても、上部基板 2と榭脂フィルム 3とが別々であってもよい。また、図 10および 11に示すように、上部基板 2を用いることなぐ絶縁物 10が下部基板 1と榭脂フィルム 3とからなってもよい。

[0067] 絶縁物 10が下部基板 1と榭脂フィルム 3とからなる場合、溝部 4'には第 1分離媒体 4がすでに収納されて、ることが好ま、。また図 2では第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6の部位の榭脂フィルム 3は除去されて、るが、この部位の榭脂フィルム 3は電気泳動器具 100を使用する直前に除去されてもよい。このような構成を用いれば、第 1分離媒体 4および緩衝液を収納した電気泳動器具 100を榭脂フィルム 3が完全に覆うことができるので、予め試薬を収納した形態で電気泳動器具 100を保存しておくことができる。

[0068] 電気泳動器具 100以外の場所で作製した第 1分離媒体 4を溝部 4'に収納して用いる場合は、操作性の観点力も上部基板 2と榭脂フィルム 3とが貼り合わされて、る方が好ましい。もちろん、この場合も、上部基板 2なしで榭脂フィルム 3のみであってもよい

[0069] いずれの場合であっても、電気泳動器具において第 2開口部 8から第 1開口部 7に向力つてのみ電流が流れる必要があるので、絶縁物 10は第 1開口部 7および第 2開口部 8を除いた部位にて第 1分離媒体 4に密着しかつ第 1分離媒体 4を絶縁しなければならない。また、第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6において液体 (緩衝液）が保持されなければならないので、絶縁物 10は防水性が高いことが好ましい。このような特性を有する絶縁物の例としては、ポリエチレンテレフタレート、ポリ塩化ビュル、ポリ塩ィ匕ビユリデンなどが挙げられる力これらに限定されない。

[0070] また、図 5に示すように、第 1分離媒体 4中の所望のタンパク質 (または DNAなど）バンドを切り出し手段 20によって切り出す場合、榭脂フィルム 3は切り出し手段 20によって首尾よく貫かれなければならない。よって、榭脂フィルム 3は、中空針状体にて突き刺し貫通可能な榭脂薄膜であることが好ましぐ膜厚が 125 μ m以下であることが好ましぐ 30〜125 /ζ πιの範囲内であることがより好ましい。また、榭脂フィルム 3は、先端径 5mm以下の中空針状体にて突き刺し貫通可能な榭脂薄膜であることが好ましぐ突き刺し強度が l〜50mNの範囲内であることがなお好ましい。

[0071] 上記所望のタンパク質 (または DNAなど）が蛍光標識 (または蛍光染色）されて！/、る場合、タンパク質 (または DNAなど)バンドの蛍光を検出する必要がある。この場合、蛍光を発生させるためには励起光がタンパク質 (または DNAなど）に届かなければならず、発生した蛍光が第 1分離媒体外部に放出されなければならない。よって、絶縁物 10は、励起光および蛍光を透過させる透過部を有していなければならない。透過部は光透過性材料からなり、透過部の透過率は 80%以上が好ましぐ 85%以上力り好ましぐ 90%以上が最も好ましい。また絶縁物 10は、基板 1もしくは絶縁薄膜 3の、ずれかの一部分に透過部を設ける構成でも、全体が光透過性材料からなってちょい。

[0072] タンパク質 (または DNAなど)を標識する蛍光物質に励起光を照射するための照射手段 30およびタンパク質 (または DNAなど)を標識する蛍光物質が発する蛍光を検出するための検出手段 40を設ける部位は適宜設定され得るが、図 6に示すように、照射手段 30および検出手段 40を第 1分離媒体 4の上方に設置されることが好ましい。したがって、榭脂フィルム 3は光透過性であることが非常に好ましい。図 6では照射手段 30から出射された光が榭脂フィルム 3を透過して第 1分離媒体 4を照射し、第 1分離媒体 4中のサンプルが照射光によって蛍光を発し、この蛍光を検出手段 40が検出する。もちろん、下部基板 1が光透過性であれば、下部基板 1の下方に照射手段 30および検出手段 40を設置してタンパク質 (または DNAなど）を標識する蛍光物質が発する蛍光を検出することも可能である。

[0073] また、第 1開口部 7および第 2開口部 8においてのみ第 1分離媒体 4が緩衝液と接していることが好ましいので、第 1分離媒体 4を覆う絶縁物 10は防水性が高い物質からなることが好ましい。

[0074] 以上の観点から、絶縁物 10を構成する好ま U、材料としては、ガラス、榭脂が挙げられ、榭脂材料としてはアクリル榭脂、 PDMS、ポリオレフイン系榭脂、ポリカーボネート、ポリスチレン、 PET、塩ビなどが挙げられ、重量や操作性、生産性の観点からァクリル樹脂（例えば、ポリメチルメタタリレート（PMMA)など）が好ましい。また、本発明に用いられる榭脂フィルム 3の好まし!/、例としては、ポリエチレンテレフタレートフィルム、ポリ塩化ビュルフィルム、およびポリ塩化ビ-リデンフィルムが挙げられる力これらに限定されない。特に、榭脂フィルム 3自体が透過部である場合は、榭脂フィルム 3は光学材料として設計された榭脂を用いたフィルム、例えば、アクリル榭脂フィルムまたはポリオレフイン系榭脂フィルムであることが好ましい。

[0075] なお、電気泳動器具 100におヽて、絶縁物 10、第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6がー体形成されている態様を用いて本発明を説明してきたが、これらは別々に構成されていてもよい。また、第 1分離媒体 4を第 1分離媒体収納部 4'にて作製しても、別途作製した第 1分離媒体 4を移動して第 1分離媒体収納部 4'に固定してもよい。第 1分離媒体収納部 4'は溝である必要はなぐその場合、下部基板 1上の第 1分離媒体 4を固定する部位を囲むように、第 1分離媒体 4の厚みと等しいスぺーサ（図示せず)を配置し、スぺーサを介して下部基板 1と上部基板 2とを接着すればよい。

[0076] 以上のように、 1つの局面において、本発明に係る電気泳動器具は、第 1分離媒体を保持する下部基板と、該下部基板の両端に緩衝液を充填する第 1緩衝液槽および第 2緩衝液槽を備え、下部基板上に上部基板を有し、該上部基板が榭脂フィルム力なることを特徴として、る。

[0077] 他の局面において、本発明に係る電気泳動器具は、第 1分離媒体を保持している下部基板と、該下部基板の両端に緩衝液を充填する第 1緩衝液槽および第 2緩衝液槽を備え、下部基板上の第 1分離媒体を榭脂フィルムが被覆して、ることを特徴としている。

[0078] このように本発明は、タンパク質分離スポットを得るための分離帯体に接する 1つの面を薄膜にて被覆している。

[0079] 本発明に係る電気泳動器具において、上記榭脂フィルムの膜厚が 125 μ m以下で

、かつ突き刺し強度が l〜50mNの範囲内であることが好ましい。

[0080] 上記構成を有することにより、本発明に係る電気泳動器具は、中空針状体にて上記薄膜を突き刺し貫通してゲル (タンパク質スポット)を採取することができる。 [0081] 本発明に係る電気泳動器具において、上記第 1分離媒体がゲル状物質であることが好ましい。

[0082] 本発明を用いれば、ゲルを取り出す必要がな、ので、ゲルの乾燥および Zまたは変形を防止し得るとともに、ゲルを取り出した際に不可欠のゲルの洗浄を行うことなく低バックグラウンドにて分析し得る。

[0083] また、電圧印加終了（電気泳動終了）の後には、泳動終了時の目印となる色素マーカー、染料、およびサンプルに標識化されな力つた蛍光色素がゲル端面 (低分子量側）に分離している。これらの物質がサンプル分離後のゲルに接触することを防止し得るので、誤った分析を防止し得る。

[0084] さらに、本発明を用いれば、観察しながら経時的にサンプリングし得、よって精度よい、迅速かつ大量なサンプル処理が可能になる。また、泳動中にゲルの一部を切り出すことちできる。

[0085] なおさらに、電圧印加終了（電気泳動終了）の後に高含有量タンパク質 (または DN

A)のスポットを除去することができるので、微小スポットを容易に検出し得る。

[0086] 本発明に係る電気泳動装置の一実施形態を、図 5〜7に基づいて説明する。

[0087] 図 5は、本発明の一実施形態に係る電気泳動装置 200の要部構成を示す。本実施形態に係る電気泳動装置 200は、電気泳動器具 100および切り出し手段 20を備えている。電気泳動器具 100は、下部基板 1、上部基板 2、およびこれら 2枚の基板の間に設けられた榭脂フィルム 3からなる絶縁物 10の溝部 4'に、 2次元目電気泳動を行う第 1分離媒体 4が収納されている。すなわち、第 1分離媒体 4は榭脂フィルム 3〖こよって被覆されている。

[0088] 切り出し手段 20は、電気泳動装置 200の移動手段（図示せず）により 3軸方向に移動可能である。図 5に示すように、切り出し手段 20は Z軸方向（図中矢印方向）に移動することにより第 1分離媒体 4を被覆する榭脂フィルム 3を貫通し、第 1分離媒体 4を突き刺して所望のタンパク質 (または DNAなど）のバンドを回収する。上述したように、第 1分離媒体 4中の所望のタンパク質 (または DNAなど）のバンドを切り出し手段 2 0によって首尾よく貫かれなければならない。よって、榭脂フィルム 3は、中空針状体にて突き刺し貫通可能な榭脂薄膜であることが好ましぐ膜厚が 125 μ m以下であることが好ましぐ 30-125 μ mの範囲内であることがより好ましい。また、榭脂フィルム 3は、先端径 5mm以下の中空針状体にて突き刺し貫通可能な榭脂薄膜であることが好ましぐ突き刺し強度が l〜50mNの範囲内であることがなお好ましい。このような構成を有することにより、電気泳動装置 200を用いる際に、作業者はゲルに接触する必要がない。また、電気泳動の最中に電圧負荷をー且停止して、一部のタンパク質（または DNAなど）をサンプリングした後、再度電圧負荷して電気泳動を再開することができる。

[0089] なお、本発明に係る電気泳動装置 200は、切り出し手段 20、照射手段 30および検出手段 40の動作を首尾よく制御し、かつ収集したデータを処理する制御手段（図示せず)を備えている。本実施形態における制御手段は、演算部、記憶部、処理部などの複数の機能部位を併せ持つ構成を有する制御部を備えて、る。制御手段の記憶部には、制御手段の処理部にて行われる演算を実行するプログラムが格納されており、記憶部には収集されたデータもまた記録され、必要に応じて処理部に入力される。制御部において、記憶部に格納されたプログラムを演算部が実行し、図示しない入出力回路などの周辺回路を制御することによって、制御が実現される。周辺回路としては、種々の設定値 (例えば、用いる蛍光物質の励起波長 Z蛍光波長など）を格納する格納部、検出された値と格納されている値とを比較する比較部、比較結果に基づいて移動手段や切り出し手段を制御するための出力を算出する処理部などの間に形成される回路などが挙げられる力これらに限られない。これらの機能ブロックは、全て演算部の制御を受けており、これら機能ブロックは、その具体的な構成、機能等は特に限定されるものではな、。

[0090] 電気泳動器具 100にて実際に電気泳動を行うために、図 7に示すように、第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6に設けられた第 1電極 52および第 2電極 53を介して第 1 電圧印加手段 50によって第 1分離媒体 4に電圧が印加される。その結果、第 2開口部 8から第 1開口部 7に向力つて電流が流れるとともに第 1分離媒体 4にアプライされたサンプルが第 1開口部 7から第 2開口部 8に向力つて展開 Z分離される。

[0091] 本実施形態に係る電気泳動装置 200では、第 1電極 52および第 2電極 53が配線手段 51によって第 1電圧印加手段 50と連結されている。第 1電極 52および第 2電極 53は、それぞれ第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6に固定されていてもよいが、電気泳動器具 100を用いるサンプルごとに交換することを考慮すると、固定されていないことがより好ましい。配線手段 51が移動手段（図示せず）によって移動可能である場合は、第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6に設けられた電極固定部（図示せず）に着脱可能な形態であってもよい。また、図 7に示すように、第 1電極 52および第 2電極 53は、それぞれ第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6に充填される緩衝液中に挿人されるだけでもよい。

[0092] なお、第 1電極 52および第 2電極 53は、固定されずに移動可能である場合、容易に洗浄され得る。

[0093] 本発明に係る電気泳動装置の別の実施形態を、 2次元電気泳動装置 201を例として、図 8〜9に基づいて説明する。

[0094] 図 8は、本発明の一実施形態に係る 2次元電気泳動装置 201の要部構成を示す。

本実施形態に係る 2次元電気泳動装置 201は、 2Dセル (電気泳動器具） 100および 1Dセル (分離器具） 70を備えている。 2Dセル 100には、下部基板 1、上部基板 2、およびこれら 2枚の基板の間に設けられた榭脂フィルム 3からなる絶縁物 10の溝部 4 'に、 2次元目電気泳動を行う第 1分離媒体 4が収納されている。すなわち、第 1分離媒体 4は榭脂フィルム 3によって被覆されて、る。

[0095] 電気泳動装置 201では、 1Dセル 70は、実際に電気泳動を行うために 1D分離槽 7 1を有する。 1D分離槽 71では、図 8に示すように、第 3電極 82を介して第 2電圧印加手段 80によって 1Dゲル (第 2分離媒体）（図示せず）に電圧が印加される。その結果、 1Dゲルにアプライされたサンプルが図 8の紙面垂直方向に向力つて展開 Z分離される。

[0096] 本実施形態に係る 2次元電気泳動装置 201では、第 1電極 52および第 2電極 53が配線手段 51によって第 1電圧印加手段 50と連結されており、かつ第 3電極 82が第 2 配線手段 81によって第 2電圧印加手段 80と連結されている。

[0097] 第 1電極 52および第 2電極 53は、それぞれ第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6に固定されて、てもよ、が、 2Dセル 100を用いるサンプルごとに交換することを考慮すると、固定されていないことがより好ましい。配線手段 51が移動手段（図示せず）によつて移動可能である場合は、第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6に設けられた電極固定部（図示せず）に着脱可能な形態であってもよい。また、図 8に示すように、第 1 電極 52および第 2電極 53は、それぞれ第 1緩衝液槽 5および第 2緩衝液槽 6に充填される緩衝液中に挿入されるだけでもよヽ。

[0098] 第 3電極 82は、第 1電極 52および第 2電極 53と同様に、 1D分離槽 71に固定されていてもよいが、 1Dセル 70および 2Dセル 100を用いるサンプルごとに交換することを考慮すると、固定されていないことがより好ましい。配線手段 81が移動手段（図示せず）によって移動可能である場合は、 1D分離槽 71に設けられた電極固定部（図示せず）に着脱可能な形態であってもよい。また、図 8に示すように、第 3電極 82は、 1 D分離槽 71に充填される緩衝液中に挿入されるだけでもよヽ。

[0099] なお、第 1電極 52、第 2電極 53および第 3電極 82は、固定されずに移動可能である場合、容易に洗浄され得る。また、装置の自動化を考慮すると、 1Dセル 70および 2 Dセル 100は、ステージ（固定基板） 60上に固定されて!、ることが好まし!/、。

[0100] 図 9は、本実施形態に係る 2次元電気泳動装置 201における工程を自動化にて行うための要部構成を示す。 2次元電気泳動装置 201は、 1Dセル 70および 2Dセル 1 00をステージ 60上に備えている。 2Dセル 100には、下部基板 1、上部基板 2、およびこれら 2枚の基板の間に設けられた榭脂フィルム 3からなる絶縁物 10の溝部 4，に、 2次元目電気泳動を行う第 1分離媒体 4が収納されている。すなわち、第 1分離媒体 4は榭脂フィルム 3によって被覆されている。

[0101] 図 9に示すように、 1Dゲル 72が支持板 73と接着しゲル付支持板 74を形成している。市販されている 1Dゲル 72の裏面には約 0. 2mm厚の透明榭脂シートが付着しているので、接着剤を用いてこのシート部分と支持板 73とを接着すればよい。なお、接着材は当該分野において公知のものを使用すればよいが、 1Dゲル 72を支持板 73 と接着させた状態で使用時まで低温（― 20°C)で保存することが好ま、ので、低温保存に適した接着剤を用いることが好ましい。また、このような温度特性は、支持板 7 3についても同様である。支持板 73は本実施形態に係る 2次元電気泳動装置 201の移動手段（図示せず）によって駆動されるアーム 90によって保持される。アーム 90は移動手段（図示せず）によって、図中に示すように X方向および Zまたは Z方向に移動可能である。

[0102] 第 1緩衝液槽 5において上部基板 2を貫く開口の幅は、対応する下部基板 1の溝幅より広い。この差分によって形成されたサンプル供給口によつて、 1Dゲル 72と 2Dゲル 4とを密着させ得、よって 1D分離槽 71にて 1次元目のサンプル分離を終えた 1D ゲル 72中のサンプルの 2次元目分離を首尾よく行い得る。なお、本実施形態では、図 9に示すように、第 1開口部 7がサンプル供給口を兼ねて!/、る。

[0103] 図 9において左方力右方に向けて 2次元電気泳動が実行される。 2次元電気泳動装置 201にお、て実行される各工程にっ、て説明すると以下の通りである。

[0104] 2次元電気泳動に必要なサンプル、試薬、分離媒体を所定の位置にセットした後に、制御手段（図示せず）は、 2次元電気泳動装置 201の手段を適切に制御しかつ全工程を自動にて実行させる。制御を開始することにより制御手段により駆動される移動手段（図示せず)がアーム 90を移動 (搬送)し、よって、 1Dゲル 72は、間接的に移動 (搬送)される。

[0105] 1次元目のサンプル分離に必要な処理を施された 1Dゲル 72は、第 2分離槽 71まで搬送され、第 2分離槽 71内の第 3電極 62間に配置される。ここで、第 2電圧印加手段 80によって 1Dゲル 72に電圧が印加されて、サンプルが 1Dゲル 72中にて第 1方向に分離される。サンプル分離に必要な時間および必要な電圧に関する情報もまた、制御手段の格納部に記録されている。上述した各情報は、制御手段の格納部に記録されたプログラムによって、用いる 1Dゲル 72の種類、サンプルの種類、各試薬の種類に従って適宜選定かつ実行される。

[0106] 1Dゲル 72中にて第 1方向への分離が終了した後、 1Dゲル 72は、 1次元目のサンプル分離後（2次元目のサンプル分離前）に必要な処理を施すために所定位置まで移動手段により搬送され、必要に応じて微小振盪される。次いで、処理後の 1Dゲル 72は、 2Dゲル 4のサンプル供給口 7まで移動手段により搬送され、 2Dゲル 4に密着される。

[0107] 1Dゲル 72が 2Dゲル 4に密着された後に第 1電圧印加手段 50によって 2Dゲル 4 に電圧が印加されることにより、 2Dゲル 4において、 1Dゲル 72中で第 1方向に分離した分離サンプルが、第 1方向 (Y軸方向）と異なる第 2方向 (X軸右方向）にさらに分離される。この第 2方向へのサンプル分離を実行するために、 2Dセル 100では、第 1 方向に分離したサンプルを含む 1 Dゲル 72を 2Dゲル 4に密着させる工程； 2Dゲル 4 に電圧を印力 tlしてサンプルを第 2方向に分離する工程;第 2方向への分離中のサンプルを検出する工程が行われる。

[0108] なお、 2Dゲル 4での分離において必要な時間などの情報もまた、制御手段の格納部に記録されている。上述した各情報は、制御手段の格納部に記録されたプロダラムによって、用いる 1Dゲル 72および 2Dゲル 4の種類、サンプルの種類、各試薬の種類に従って適宜選定かつ実行される。

[0109] 照射手段 30および検出手段 40を用いることにより、サンプルの第 2方向への分離途中にサンプルの分離状況を電気泳動終了時または電気泳動中に高感度で分析する。必要に応じて、第 1電圧印加手段 50による 2Dゲル 4への電圧印加を停止し、目的の位置に存在する蛍光標識ィ匕されたタンパク質 (または DNAなど）のスポットまたはバンドを切り出し手段 20によって切り出す。

[0110] なお、用いる蛍光物質の特性などの情報もまた、制御手段の格納部に記録されている。上述した各情報は、制御手段の格納部に記録されたプログラムによって、用いる 1Dゲル 72および 2Dゲル 4の種類、下部基板 1および/または榭脂フィルム 3の種類、サンプルの種類、各試薬の種類に従って適宜選定かつ実行される。

[0111] 2次元電気泳動装置 201では、 1Dゲル 72にてサンプルは第 1方向に分離され、次いで、 2Dゲル 4にて第 2方向に分離される。第 1方向への分離と第 2方向への分離を規定するパラメータは同じであってもよいが、分離性能を向上させるためにはそれぞれ異なることが好ましい。これら 2方向への分離を規定するパラメータとしては、タンパク質の等電点、分子量、単位サイズあたりの表面電荷 (ゾーン電気泳動）、ミセルへの分配係数 (ミセル動電クロマトグラフィー）、固定相移動相への分配係数 (電気クロマトグラフィ一）、相互作用物質との親和定数 (親和結合電気泳動)などが挙げられる力通常の 2次元電気泳動では、第 1方向への分離が等電点に基づいて、第 2方向への分離が分子量に基づ、て行われる。

[0112] 1Dセル 70および 2Dセル 100をサンプルごとに交換して用いるべきであることを考慮すると、これらの固定化は着脱可能であることが好ましい。 1Dセル 70および 2Dセル 100を、ステージ（固定基板) 60に固定するための機構としては、真空吸引機構、挟固定機構、磁力固定機構および静電吸着機構が挙げられるが、これらに限定されない。アーム 90によるゲル付支持板 74の保持もまた同様である。また、真空吸引機構を採用する場合は、真空吸着プレート（図示せず)を介して固定することが好ましい

[0113] 電気泳動装置 200においては、ゲル付支持板 74の 3次元での位置精度が重要であるが、電気泳動装置 200の有する制御手段（図示せず)の制御下にてアーム 90が精度よく移動され、 1Dゲル 72に対して種々の工程が精度よく実行される。また、電極 52 - 53 - 82の搬送 Z固定を自動化にて行う場合は、制御手段の制御下にてアーム 9 0力第 1緩衝液槽 5、第 2緩衝液槽 6および 1D分離槽 71への電極 52· 53 · 82の搬送 Z固定を行い得る。

[0114] 電気泳動は高電圧下にて行われるので、サンプルの分離中には 1Dセル 70および 2Dセル 100は高温になる。よって 2次元電気泳動装置 201には、 1Dセル 70および 2Dセル 100ならびにこれらを固定するステージ 60を冷却するための冷却手段（図示せず）がステージ 60直下に設けられている。特に、 2次元電気泳動装置 201は、ペルチェ冷却制御機構を採用することにより、電気泳動時の 1Dセル 70および 2Dセル 10 0の温度を一定に保つことができる。

[0115] また、本発明に係る 2次元電気泳動装置 201は、図中に明示していないが、 1Dゲル 72および 2Dゲル 4の温度制御を行うための温度制御手段（図示せず)などを備えることにより、さらに高度なサンプル分離を行い得る。

[0116] このように 2次元電気泳動装置 201において、制御手段による上述したような制御が実行されることにより、 2次元電気泳動の工程を全自動にて行い得る。また、 2次元電気泳動装置 201が、上述したような制御が実行する制御手段を有することにより、種々のプロトコルの選定および Zまたは導入を容易に行って、サンプル分離性能を追求することができる。また、 2次元電気泳動の電圧印加プログラムをコンピュータにてフィードバック制御するための 2次元用高電圧印加制御システムを導入し、自動ステージと連携して制御することができる。

[0117] 以上のように、 1つの局面において、本発明に係る電気泳動装置は、第 1分離媒体を保持する下部基板と、該下部基板の両端に、第 1電極および第 2電極を有しかつ緩衝液を充填する第 1緩衝液槽および第 2緩衝液槽を備え、下部基板に保持された第 1分離媒体上に榭脂フィルム力なる上部基板を有し、第 1緩衝液槽および第 2緩衝液槽は緩衝液で満たされてなることを特徴としている。

[0118] 本発明に係る電気泳動装置において、上記榭脂フィルムの膜厚が 125 μ m以下で

[0119] 本発明に係る電気泳動装置において、上記下部基板の上部に照射手段および検出手段を備えることが好まし、。

[0120] 本発明に係る電気泳動装置において、上記第 1分離媒体がゲル状物質であることが好ましい。

[0121] ヒトゲノムプロジェクトが終了した後、プロテオーム研究が盛んに行われている。「プロテオーム」とは、特定の細胞、器官、臓器の中で翻訳生産されているタンパク質全体が意図され、その研究としてはタンパク質のプロフアイリングなどが挙げられる。

[0122] タンパク質をプロフアイリングする手法の 1つとして最も用いられているもの力タンパク質の 2次元電気泳動である。タンパク質は、電荷および分子量の独特の性質を有して!/、るので、多数のタンパク質の混合物であるプロテオーム力電荷のみまたは分子量のみに依存して個々のタンパク質を分離するよりも、両者を組み合わせることにより、より多くのタンパク質を高分解能にて分離することができる。

[0123] 2次元電気泳動は、タンパク質を電荷に依存して分離する等電点電気泳動、および分子量に依存して分離するスラブゲル電気泳動（特に、 SDS -PAGE)の 2つの電気泳動ステップカゝらなる。また、 2次元電気泳動は、用いるサンプルを変性剤存在下または非存在下にて行うことことも可能であり、数百種類以上のタンパク質を一度に分離し得る、優れた手法である。

[0124] 2次元電気泳動では、サンプルを 1次元目ゲルにて等電点電気泳動を行った後、 1 次元目ゲルを取り出して 2次元目ゲルにアプライし、分子量に基づヽて 2次元目の分離を行う。通常、等電点電気泳動を行う 1次元目ゲルは、その幅や長さに比べて非常に薄い形状を有している。よって、ゲルの表裏、 pH勾配の方向の識別が困難であるだけでなぐ反りや捩れが発生しやすぐ形状を一定に保つことが困難である。このことは電気泳動結果の再現性が悪い要因となりやすい。さらに、 1次元目ゲルの操作もまた容易ではなぐ 1次元目ゲルを 2次元目ゲルまで移動する際の位置精度を向上させることは困難である。

[0125] このように 2次元電気泳動は優れた手法である一方で、熟練した技術を要する。作業者の熟練度に依存するので、 2次元電気泳動を用いて再現性よく定量的なデータを取得することは困難である。

[0126] しかし、本発明を用いれば、 2次元電気泳動の工程を全自動にて行い得、かつ再現性よく定量的なデータを取得することができる。

[0127] なお、本明細書において、電気泳動器具および電気泳動装置について本発明を説明してきたが、本明細書を読んだ当業者は、本発明はまた、タンパク質の分離方法 (タンパク質の電気泳動方法)を提供することを容易に理解する。

[0128] すなわち、 1つの局面において、本発明は、

•分離媒体を保持する下部基板と、該下部基板の両端に、緩衝液を充填する第 1緩衝液槽および第 2緩衝液槽を備えた電気泳動器具の下部基板に、予め蛍光染色済みのタンパク質試料を含む第 1分離媒体を保持する工程、

'該保持された第 1分離媒体上に榭脂フィルムからなる上部基板を配置する工程、

'第 1緩衝液槽および第 2緩衝液槽に緩衝液を充填する工程、

'緩衝液下部基板に第 1電極および第 2電極を配置する工程、

•電気泳動によりタンパク質を分離する工程、

•分離する様子又は分離した結果を該上部基板上部に位置する照射手段および検出手段により検出する工程、

を有して!/、ることを特徴として、るタンパク質の分離方法を提供する。

[0129] 本発明に係るタンパク質の分離方法において、上記タンパク質を分離する工程でタンパク質を分離し、蛍光により検出した後、所望のタンパク質が分離されている分離媒体をフィルム上力回収針を突き刺すことにより回収することが好ましい。

[0130] 本発明に係るタンパク質の分離方法において、上記榭脂フィルムの膜厚が 125 m以下で、かつ突き刺し強度が l〜50mNの範囲内であることが好ましい。

[0131] 本発明に係るタンパク質の分離方法において、上記第 1分離媒体がゲル状物質であることが好ましい。

[0132] 尚、発明を実施するための最良の形態の項においてなした具体的な実施態様は、あくまでも、本発明の技術内容を明らかにするものであって、そのような具体例にのみ限定して狭義に解釈されるべきものではなぐ当業者は、本発明の精神および添付の特許請求の範囲内で変更して実施することができる。

[0133] また、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中にぉヽて参考として援用される。

産業上の利用の可能性

[0134] 本発明に係る電気泳動器具は、電気泳動装置 (特に 2次元電気泳動装置)の不利益を改善し得、現在盛んに行われているプロテオーム研究をより発展させることができる。また、本発明に係る電気泳動器具を電気泳動装置の一部として、または一部材として別々に作製'販売することができるので、機械分野、化学分野、生物分野を問わず、市場を活性ィ匕することができる。

Claims

請求の範囲

[1] 絶縁物を有する電気泳動器具であって、

該絶縁物は、

第 1分離媒体を内部に収納するための第 1分離媒体収納部；

穿孔可能な絶縁薄膜にて被覆された第 3開口部

を備えて!/ヽることを特徴とする電気泳動器具。

[2] 前記絶縁物が第 1板状絶縁体および前記絶縁薄膜を備え、第 1分離媒体収納部が該第 1板状絶縁体上に設けられた凹部であり、該絶縁薄膜が前記第 1分離媒体を被覆してヽることを特徴とする請求項 1に記載の電気泳動器具。

[3] 絶縁物を有する電気泳動器具であって、

該絶縁物は、

第 1分離媒体が内部に収納されている第 1分離媒体収納部；

穿孔可能な絶縁薄膜にて被覆された第 3開口部

を備えて!/ヽることを特徴とする電気泳動器具。

[4] 前記絶縁物が第 1板状絶縁体および前記絶縁薄膜を備え、第 1分離媒体収納部が該第 1板状絶縁体上に設けられた凹部であり、該絶縁薄膜が前記第 1分離媒体を被覆していることを特徴とする請求項 3に記載の電気泳動器具。

[5] 前記絶縁物が第 2板状絶縁体をさらに備え、前記第 3開口部が第 2板状絶縁体に設けられて!/、ることを特徴とする請求項 2または 4の、ずれか 1項に記載の電気泳動器。

[6] 第 1板状絶縁体または前記絶縁薄膜が光透過性材料力なることを特徴とする請求項 2, 4,または 5のいずれか 1項に記載の電気泳動器具。

[7] 第 1開口部にて第 1分離媒体と接触させる第 1緩衝液を充填するための第 1緩衝液槽および第 2開口部にて第 1分離媒体と接触させる第 2緩衝液を充填するための第 2 緩衝液槽がさらに備えられていることを特徴とする請求項 1〜6のいずれか 1項に記載の電気泳動器具。

[8] 前記絶縁物、第 1緩衝液槽および第 2緩衝液槽が一体形成されてヽることを特徴とする請求項 7に記載の電気泳動器具。

[9] 第 1開口部または第 2開口部が、サンプルを保持した第 2分離媒体を密着させる形状を有していることを特徴とする請求項 1〜8のいずれか 1項に記載の電気泳動器具

[10] 第 1分離媒体の分離パラメータが第 2分離媒体の分離パラメータと異なることを特徴とする請求項 9に記載の電気泳動器具。

[11] 前記絶縁薄膜は、膜厚が 1000 m以下であることを特徴とする請求項 1〜10のいずれ力 1項に記載の電気泳動器具。

[12] 前記絶縁薄膜は、突き刺し強度力^〜 50mNの範囲内であることを特徴とする請求項 1〜： LOのいずれか 1項に記載の電気泳動器具。

[13] 前記絶縁薄膜がポリスチレンフィルム、ポリエチレンテレフタレートフィルム、ポリ塩化ビニルフィルム、ポリ塩化ビニリデンフィルム、ポリオレフイン系榭脂フィルム、または二軸延伸性ポリプロピレンフィルムであることを特徴とする請求項 1〜10のいずれ力 1 項に記載の電気泳動器具。

[14] 請求項 1〜13のいずれか 1項に記載の電気泳動器具、および第 1分離媒体中のサンプルを切り出すための切り出し手段が備えられてヽることを特徴とする電気泳動装置。

[15] 第 1分離媒体中のサンプルを照射するための照射手段、および該サンプル力の蛍光を検出するための検出手段がさらに備えられていることを特徴とする請求項 14 に記載の電気泳動装置。