WO2003045409A1

WO2003045409A1 - Composition pharmaceutique produite a partir de medecine traditionnelle chinoise et son procede de production

Info

Publication number: WO2003045409A1
Application number: PCT/CN2001/001593
Authority: WO
Inventors: Wei Xiao
Original assignee: Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd
Priority date: 2001-11-29
Filing date: 2001-11-29
Publication date: 2003-06-05
Also published as: CN1239183C; US20080160075A1; AU2002221512A1; CN1558768A; US20050106276A1

Description

—种中药组合物及其制备方法技术领域

本发明涉及一种中药组合物，特别是涉及一种中药组合物及其制备方法。

背景技术

肾为先天之本，内寄元阴、元阳，乃脏腑阴阳之根本，宜固藏而不宜耗泄。若禀赋不足，摄生不当，久病肾虛，或老年精气亏损，则常易表现腎虛诸候。肾阴为人身阴液之本，具有滋养、濡润脏腑組织，充养脑髓，骨骼之功，若肾亏损，失于濡养，虛热内生，则可表现肾阴虛证的一系列症状。熟地黄为玄参科植物地黄的炮制加工品。主产河南、浙江。性甘，微温，归肝、肾经，具有滋阴补血，益精填髓之功。主要成分有环烯醚萜甙类成分梓醇、甘露醇、地黄素等。药理试验表明有显著强心、升压、利尿、降低血糖作用。山茱萸为山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉。主产陕西、河南等省。性酸、涩，微温，经归肝、肾，具有补益肝肾，涩精固脱之功。主要成分有山茱萸甙、皂甙、熊果酸、没食子酸等。药理试验表明有抗炎、降血糖、抗休克及强心等作用。山药为薯蓣科植物薯蓣的于燥根茎。主产河南、河北等省。性酸、甘，微温，归脾、胃、肝经，具有补脾养胃，生津益肺，补肾涩精之功。主要成分有皂甙、胆碱、精氛酸、淀粉等。药理试验表明有滋补强壮、助消化及免疫等作用。泽泻为泽泻科植物泽泻的干燥块茎。主产福建、江西、四川等省。性甘、寒，经归腎、膀胱，具有利小便，清湿热之功，主要成分有泽泻醇 A、 B、 C及泽泻醇 A乙酸酯、泽泻醇 B乙酸酯、泽泻醇 C 乙酸酯、胆碱、卵磷脂等。药理试验表明有利尿、降血脂、抗脂肪肝等作用。牡丹皮为毛莨科植物牡丹的干燥根皮，主产安徵、河南等省。性苦、辛，微寒，归心、肝、腎经，具有清热凉血，活血化瘀之功。主要成分有牡丹酚、芍药甙、挥发油等。药理作用表明有降压、镇静、催眠、镇痛、抗惊厥、解热、抗炎、抗过敏、抑菌等作用。茯苓为多孑孔菌科真菌茯苓的干燥菌核。主产陝西、安徽等省。性甘、淡，平，归心、肺、脾、肾经，具有利水渗湿，健脾宁心之功。主要成分有茯苓酸、茯苓聚糖、块茎酸等。药理试验表明有利尿、抑菌等作用。

技术内容

本发明的目的在于提供一种用于治疗肾阴亏损，头晕耳鸣，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精，消渴等病症；吸收快、疗效好、无副作用、月良用方便的中药组合物及其制备方法；本发明另一目的在于提供上述组合物的新的制药用途。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

熟地黄 300- 1000重量份山茱萸（制） 150- 600重量份牡丹皮 100-450 重量份山药 150- 600重量份茯苓 100- 450重量份泽泻 100- 450重量份精制食用植物油适量

以上六味，将牡丹皮加 6- 12倍量的水，润透 1-3小时，水蒸汽蒸餾提取 6- 12小时，收集蒸馏液为药材的 8倍量，母液另存；馏液 0- 4°C冷藏 10- 14小时，滤取丹皮酚，冷风吹干，密闭保存，备用；残渣与熟地黄、山药、茯苓加 6 - 10倍量水煎煮 1 - 4次，每次 0.5-2 小时，合并煎液，与丹皮酚母液浓缩成 801:下 d= l.10 的浸膏，采用离心分离机离心，转速为 20000转 /分，离心 20分钟，离心后残渣弃去，药液浓缩至相对密度为 1.13度的浸膏 I；山茱萸，泽泻粉碎成粗粉，加 4- 8倍量 50- 80%乙醇回流提取 1-3次，每次 2 -4小时，合并滤液，回收乙醇，浓缩至 80 下相对密度为 1.14 的浸膏 Π; 合并浸膏 I、 Π, 浓缩至 80 C下相对密度为 1.30— 1.35 的稠膏，真空干燥，粉碎、过筛。丹皮朌粉碎，与浸膏粉混合，加辅料适量，经胶体磨磨勾，过筛，压制成软胶嚢，每粒软胶嚢内容物重 l. Og, 相当于生药 3. 0g; 或者每粒软胶嚢内容物重 0. 5g, 相当于生药 1. 5g。

本发明制成的胶嚢口服量为 1次 2粒，每日 3次。本发明胶嚢服用后崩解时间为 4 - 6分钟，成品中总多糖含量高，丹皮酚及熊果酸平均得率高，欧前胡素含量为 0. 517 - 0. 569 %。与现有技术相比，本发明胶嚢起效快、疗效好、口服剂量小、服用方便且产品质量稳定。

实验例：

1.受试药物

本发明胶嚢由连云港康缘制药有限公司提供。批号： 970712。用蒸馏水将本发明胶嚢制成浓度为每 100ml 药液含生药量 9g、 18g、 56g、 112g的混悬液。

2.实验材料：

2. 1受试药物：同上

2. 2阳性药物：

2. 2. 1夜来香脉康 (γ—月见草一 E)：白球恩医科大学制药厂产品。批号： 960814。

2. 2. 2盐酸苯乙双胍片（降糖灵）：江苏金坛制药厂产品。批号： 961004 2. 2. 3龟龄集：山西中药厂产。批号： 970302。

2. ². 4黄芪精口服液：南京中医学院制药厂产。批号： 971102。 2. 3药物配制方法：

2. 3. 1 用蒸孀水将本发明软胶嚢制成浓度为每 100ml 药液含尘药量 9g、 18g、 56g、 112g的混悬液。

2. 3. 2用蒸榴水将夜来香脉康制成浓度为 4 %、 54 %的混悬液。

2. 3， 3用蒸錨水将降糖灵制成浓度为 0. 5 %的混悬液。

2. 3. 4用蒸孀水将龟龄集制成浓度为 1. 2 %的混悬液。 .3.5用蒸馏水将黄芪精口服液制成浓度为 27%的溶液。 .4组别与剂量：

.4.1小鼠给药剂量：给药容积为 20ml /kg。

(1)模型组、正常对照組：蒸餾水。

(2)阳性药物组：阳性药物溶液。

(3)高剂量组： 18 %本发明软胶嚢混悬液（3.6g / kg)。

(4)低剂量組： 9%本发明软胶嚢混悬液（1.8g/kg)。

(本发明软胶嚢临床成人用药量约为生药量 0.18g/kg)。 .4.2大鼠给药剂量：

给药容积为 10ffll/kg。

(1)模型组、正常对照组：蒸馏水。

(2)阳性药物组：阳性药物溶液。

(3)高剂量组： 18 %本发明软胶嚢混悬液（1.8g / kg)。

(4)低剂量組： 9%本发明软胶嚢混悬液（0.9g/kg)。

.4.3家兔给药剂量：

给药容积为 1ml /kg。

(1)模型组：蒸馏水。

(2)阳性药物组：阳性药物溶液。

(3)高剂量组： 112%本发明软胶嚢混悬液（1.12g/kg)。

(4)低剂量組： 56%本发明软胶嚢混悬液（0.56g/kg)。 .5受试动物：

.5.1健康 SD大鼠，由南京中医药大学实验动物中心提供。 .5.2健康 ICR小鼠，由南京中医药大学实验动物中心提供。 .5, 3青紫蓝家兔，由南京铁道医学院实验动物中心提供。 .5.4实验动物环境设施合格证书：苏动环字第 95102号。

苏动环字第 97003号。

实验动物合格证书：苏动质字第 97003号。 2. 6试剂：

2. 6. 1总胆固醇（TCH)测定试剂盒：上海科欣生物技术研究所产品。

批号： 970801、 9804010。

2. 6. 2高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C)测定试剂盒：上海科欣生物技术研究所产品。批号： 970801、 980201。

2. 6. 3低密度脂蛋白胆固醇（LDL- C)测定试剂盒：上海科欣生物技术研究所产品。批号： 970801、 980201。

2. 6. 4甘油三酯（TG)测定试剂盒：上海科欣生物技术研究所产品。

批号： 971202、 980501。

2. 6. 5葡萄糖测定试剂盒：上海科欣生物技术研究所产品。

批号： 971001。

2. 6. 6超氧化物歧化酶（SOD)测定试剂盒：南京建成生物工程研究所提供。批号： 980223。

2. 6. 7丙二窿（MDA)测定试剂盒：南京建成生物工程研究所提供。

批号：議 223。

3. 实验方法与结果：

3. 1对实验性高脂血症家兔血脂的影响

3. 1. 1实验操作：

取青紫蓝家兔 28只，雄性，体重 1. 9 ~ 2. 2kg。随机分为 4組，即模型組、夜来香脉康阳性药物组、本发明软胶嚢高、低 2个剂量組。各組动物采用食饵性高脂血症形成方式，喂飼高脂饲料（1 %胆固醇， 10 %猪油， 15 %鸡蛋黄, 74 %家兔常规饲料），连续 4周以形成高脂血症。喂飼高脂饲料同时，每天口服给药 1次，连续 4周，另取雄性家兔 7只为正常对照组。末次给药后，禁食 24小时，各组动物耳缘静脉取血，分离血清，采用测定试剂盒测定血清甘油三酯 (TG)、总胆固醇 (TCH)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL- 0、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C) , 计算出 TC / HDL- C及动脉粥样硬化指数 (A1) , 并采用组间 t值法与模型组进行显著性测定比较。

动脉粥样硬化指数 AI: (TC-HDL-C) /HDL-C 3.1.2实验结果:

本发明软胶嚢可明显降低实验性高脂血症家兔的 TG、 TCH、 LDL-C, TCH/HDL- C比值及 AI, 与模型组相比，有显著性意义。结果见表 1。

3.2对实验性高脂血症大鼠血脂的影响

3.2.1实验操作：

取 SD大鼠 60只，雄性，体重 200~250g。喂饲高脂饲料 (2%胆固醇， 10%猪油， 0.2%甲基破氧嘧啶， 87.8%大鼠常规饲料），连续喂养 4周后，各鼠眼眶取血，采用测定试剂盒测定血清总胆固醇 (TCH) , 选取 TCH值在 7~11 mmol/L的高脂血症大鼠 40只，随机分为 4組，即模型组、夜米香脉康阳性药物组、本发明软胶嚢高、低 2个剂量組。每天灌胃给药 1次，连续 4周，另取雄性大鼠 10只为正常对照组。末次给药后，禁食 16小时，各组动物眼眶取血，分离血清，采用测定试剂盒测定血清 TG、 TCH、 LDL-C、 HDL-C, 计算出 TC/HDL-C及 AI, 并采用组间 t值法与模型组进行显著性测定比较。 3.2.2实验结果：

本发明软胶嚢可明显降低实验性高脂血症大鼠的 TG、 TCH, LDL- C、 TCH /HDL-C比值及 AI, 与模型组相比，有显箸性意义。结果见表 2。

3.3对实验性高血糖小鼠血糖值的影响

3.3.1实验搡作：

取小鼠 100只，雄性，体重 25~30g。腹腔注射链脲霉素 180mg /kg。 72小时后将存活鼠眼眶取血，采用葡萄糖测定试剂盒测定血清血糖值，选取血糖值在 18~33mmol/L的高血糖小鼠 40只，随机分为 4组，即模型組、降糖灵阳性药物组、本发明软胶嚢高、低 2 个剂量組。每天灌胃给药 1次，连续 10天，另取雄性小鼠 10只为正常刘 '照組。末次给药后，禁食 12小时，各组动物自眼眶取血，离心分离血清，应用葡萄糖测定试剂盒，采用葡萄糖酶法测定血糖值，并采用组间 t值法与模型組进行显箸性测定比较。

3. 3. 2实验结果：

本发明软胶嚢可明显降低链脲霉素致小鼠高血糖动物模型的血糖值，与模型組相比，有显箸性意义。结果见表 3。

3. 4对实验性高血糖大鼠血糖值的影响

3. 4. 1实验操作：

取雄性大鼠 160只，体重 200 - 250g。腹腔注射四氧嘧啶 200mg / kg, 72小时后将存泠鼠眼眶取血，采用葡萄糖测定试剂盒测定血清血糖值，选取血糖值在 20 ~ 25mmol / L的高血糖大鼠 40只，随机分为 4組，即模型组、降糖灵阳性药物组、本发明软胶嚢高、低 2 个剂量組。每天灌胃给药 1次，连续 10天，另取雄性大鼠 10只为正常对照组。取血前禁食 12小时，末次给药 1小时后，各组动物自眼眶取血，离心分离血清，应用葡萄糖测定试剂盒，采用葡萄糖酶法测定血糖值，并采用組间 t值法与模型組进行显著性测定比较。

3. 4. 2实验结果：

本发明软胶嚢可明显降低四氧嘧，症致大鼠高血糖动物模型的血糖值，与模型組相比，有显著性意义。结果见表 4。

3. 5对大鼠血清 S0D、 LP0含量的影响

3. 5. 1实验操作：

取 SD大鼠 40只，雌雄各半，体重 350 ~ 450g。随机分为 4组，即正常对照組、电龄集阳性药物组、本发明软胶嚢高、低 2个剂量组。每天灌胃给药 1次，连续 10天。末次给药 24小时后，自大鼠眼眶取血，离心分离血清，应用超氧化物歧化酶（SOD)测定试剂盒，采用黄嘌吟氧化酶法，于 550nm波长比色，测定光密度 (0D)值，按公式计算各鼠血清 SOD活力（亚硝酸盐单位， NU / ml) ; 应用丙二醛 (MDA)测定试剂盒，采用丙二醛一硫代巴比妥酸法于 532nm波长比色 , 测定光密度值，按公式计算各鼠血清中 MDA含量，并采用组间 t值法与正常对照组进行显著性测定比较。

计算公式：

对照管 0D值-测定管 0D值

SOD活力（NU/mlJ^ ■¾() % 品稀铎倍数对照管 0D值测定管 0D值-测定空白管 0D值

MDA (nM/ml) = xlOnM/iol ^x稀释倍数标准管 0D值-标准空白管 0D值

3. 5. 2实验结果:

本发明软胶嚢可明显提高大鼠血清 SOD活力，降低大鼠血清 MDA 3. 6对小鼠免疫器官脏器指数的影响

3. 6. 1实验操作：

取健康幼年 ICR小鼠 40只，雌雄各半，体重 12 ~ 14g。随机分为 4组，即正常对照组、黄芪精口服液阳性药物组、本发明软胶嚢高、低 2个剂量组。每天灌胃给药 1次，连续 10天。末次给药 24 小时后，用颈推脱臼法处死动物，取各小鼠胸腺及脾脏，称重，计算出小鼠胸腺指数及脾脏指数 (脏器指数二脏器重量 mg /体重 g) , 并采用组间 t值法与正常对照组进行显著性测定比较。

3. 6. 2实验结果:

本发明软胶嚢可明显提高幼年小鼠胸腺指数及脾脏指数，与正常对照组相比，有显著性意义。结果见表 6。

3. 7对 DNCB致小鼠皮肤迟发型超敏反应之炎症水肿的影响

3. 7. 1实验操作：取 ICR小鼠 50只，雌雄各半，体重 20 ~ 22g。用 7 %的 2， 4一二硝基氯苯 (DNCB)丙酮溶液 0. 02ml于各鼠背部皮下注射致敏。随机分为 5组，即正常对照组、模型组、龟龄集阳性药物组、本发明软胶嚢高、低 2个剂量组，致敏当曰开始给药，每天灌胃给药 1次，连续 10天。在致敏后的第 4天、第 6天，除正常对照组外，其余各组动物分别腹腔注射环嶙酰胺 30mg / kg。末次给药 1小时后，各鼠右耳涂以 1 % DNCB麻油溶液 0. 03 ml激发。 16小时后处死动物，用直径 8mm圆冲于各鼠的左、右耳分别冲下 1圆耳片，称重，以左耳片与右耳片重量之差作为 DNCB致小鼠皮肤迟发型超敏反应之炎症水肿强度的指标，并采用组间 t值法与模型组进行显著性测定比较。 3. 7. 2实验结果：

本发明软胶嚢可明显增加小鼠左耳片与右耳片重量之差，与模型组相比，有显著性意义。结果见表 7。

3. 8对小鼠血清溶血素量的影响

3. 8. 1实验搡作：

取 ICR小鼠 50只，雌雄各半，体重 20 ~ 22g。各鼠分别腹腔注射 5 %鸡红细胞生理盐水悬液 0. 21ml进行免疫。随机分为 5組，即正常对照組、模型組、龟龄集阳性药物组、本发明软胶嚢高、低 2 个剂量组，免疫当日开始给药，每天灌胃给药 1次，连续 7天。在免疫后的第 4天、第 6天，除正常对照組外，其余各組动物分别腹腔注射环磷酰胺 30mg / kg。木次给药 1小时后，各鼠摘眼球取血，离心分离血清，用生理盐水将血清稀释 100倍，取稀释血清 lml, 与 5 %鸡红细胞生理盐水悬液 0. 5ml、 10%补体 0. 5ml混合， 37°C恒温 30分钟， 0"C水箱中中止反应。离心，取上清液于 540nm波长比色，测定光密度 (0D)值，以 0D值作为血清溶血素量的指标，并采用組间 t值法与模型组进行置著性测定比较。

3. 8. 2实验结果：本发明软胶嚢可明显增加小鼠血清溶血素量，与模型组相比，有显著性意义。结果见表 8。

3. 9对小鼠常压耐缺氧能力的影响

3. 9. 1实验操作：

取 ICR小鼠 40只，雌雄各半，体重 19 ~ 22g。随机分为 4组，即常对照组、黄芪精口服液阳性药物組、本发明软胶嚢高、低 2个剂量组。每天灌胃给药 1次，连续 10天。末次给药 1小时后，将各鼠分别放入盛有 159钠石灰的 125 ml白色广口瓶内，瓶盖周围涂以凡士林保证密封，立既计时，以呼吸停止为指标，观察各鼠存活时间，并采用組间 t值法与正常对照组进行显著性测定比较。

3. 9. 2实验结果：

本发明软胶嚢可明显延长小鼠常压耐缺氧时间，与正常对照组相比，有显著性意义。结果见表 9。

3. 10对小鼠低温游泳时间的影响

3. 10. 1实验操作：

取 ICR小鼠 50只，雌性，体重 18 ~ 20g。随机分为 4组，即正常对照组、黄芪精口服液阳性药物组、本发明软胶嚢高、低 2个剂量组。每天灌胃给药 1次，连续 7天，末次给药前禁食 12小时。末次给药 1小时后，将小鼠置于直径与高度均为 30cm的玻璃水槽内进行低温游泳实验，水深 20cm, 水温 10 ±1 , 每鼠尾部负重为体重的 5 %。观察各小鼠低温游泳持续时间，并采用组间 t值法与正常对照组进行显著性测定比较。

3. 10. 2实验结果：

本发明软胶嚢可明显延长小鼠低温游泳时间 , 与正常对照組相比，有显著性意义。结果见表 10。

4.结论：

实验结果表明：本发明软胶嚢可明显降低实验性高脂血症家兔的血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、 TCH/HDL- C比值及动脉粥样硬化指数，明显降低实验性高脂血症大鼠的血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、 TCH/HDL-C比值及动脉粥样硬化指数；明显降低链脲霉素致高血糖小鼠及四氧嘧啶致高血糖大鼠的血糖值；可明显提高大鼠血清 SOD活力，降低大鼠血清 MDA 含量；明显提高幼年小鼠胸腺指数及脾脏指数，明显提高 DNCB致小鼠皮肤迟发型超敏反应之炎症水肿强度及小鼠血清溶血素量；明显延长小鼠常压耐缺氧时间及低温游泳时间，证明该药具有降低血脂作用、降低血糖作用、升高机体超氧化物歧化酶水平作用及降低机体脂质过氧化物的作用、增强免疫功能作用及具有抗疲劳及抗应激作用。表 1: 本发明软胶嚢对高脂血症家兔血脂的影响（X ¾D) 組别正常模型組夜来香脉康本发明软胶嚢本发明 4¾JR嚢

― ― 0.45 1.12 0.56 动物数

7 7 7 7 7

(只）

TG

(mmol/L) 16.2 JO.68 10.55 .66 1.44^0.66*** 1.70 94*** 2.76^ .27***

TCH

(mmol/L) 0.99¾).18 44.00 01 5.00 ±1.10*** 1.62 iO.45*** 5.05 ¾.04***

HDL- C

(mmol/L) 0.81¾.18 2.09 JO.30 0.93 JO.42*** 0.79^0.19*** 0.63^0.18***

LDL-C

(mmol/L) 0.54^0.18 7.38 i0.25 3.05 ±1.63*** 1.64^0.49*** 3.41^0.76***

TCH/

HDL-C 1.30¾.41 21.48 36 5.16 ±1.95*** 2.15 JO.80*** 7.87 43***

AI 0.30¾).41 20.48 36 4.16 ±1.95*** 1.15^0.80*** 6.87 43*** 与模型組比较： ***： P<0.001； Δ: P<0.05。 B 表 2: 本发明软胶嚢对高脂血症大鼠血脂的影响（X ¾D) 組别正常对照模型組夜来香脉康本发明软股嚢本发明软脱嚢剤量（g/kg) ― ― 0.4 1.8 0.9 动物（只） 10 10 10 10 10

TG 药前 1.53 i0.16 8.92 ±1.12 8.93 ±1.04 8.91 ±1.12 8.89 ±1.13

(mmol/L) 药后 1.58 JO.13 11.50 ¾.06 3.18^0.65*** 3.03 JO.65*** 3.48 iO.70***

TCH 药前 0.71 JO.17 2.21¾).34 2.11^.33 2.15^0.32 2.11¾).37

药后 0.69 i0.18 2.86¾.72 1.03 39*** 1.15 ¾.39*** 1.17 JO.35***

HDL-C 药前 0.91¾.22 3.38 .85 3.58 84 3.54 ±1.15 3.57 ±1.03

(mmol/L) 药后 0.95 JO.26 4.13 81 1.84 JO.68*** 2.02 JO.59*** 1.97 JO.77***

LDL-C 药前 0.80^0.20 6.49±1.17 6.60 ±1.13 6.31 ±1.10 6.09 ±1.05

(mmol/L) 药后 0.76^0.14 7.75 ±1.68 1.75 ¾.47*** 1.56 JO.66*** Δ 2.02 i0.44***

TCH/ 药前 1.77 JO.45 2.74^0.58 2.55 iO.29 2.77 JO.91 2.63 JO.59

HDL-C 药后 1.79 dO.55 2.80*.24 1.82 iO.33*** 1.56¾).32*** 2.01 JO.75**

药前 0.77 JO.45 1.74 JO.58 1.55 JO.29 1.77 JO.91 1.63i0.59

AI

药后 0.79 JO.55 1.80 iO.24 0.82 JO.33*** 0.56^0.32*** 1.01^0.75** 与模型组比较： **： P<0.01， ***： P〈0.001; Δ : P<0.05。

表 3: 本发明软胶嚢对高血糖小鼠血糖值的影响（X D)

动物 GLU (mmol/L) 組别

(只) m 药后正常对照 10 5.59 71 5. 27 93 模型組 ― 10 25.94^4.74 39 • 72 J8.59 降糖灵 0.1 10 25.43 93 12.51 ¾.93**Φ 本发明软胶嚢 3.6 10 25.27 07 11 .72 .62*** 本发明软胶嚢 1.8 10 25.26 .07 23 .65 49**Φ 与模型組比较： ***: Ρ<0·001。表 4: 本发明软胶嚢对高血糖大鼠血糖值的影响（X ¾D)

剂量动物 GLU (mmol/L) 組别

(g/kg) (只）药前药后正常对照一一 10 5. 95 ¾. 62 6. 36 ¾). 81 模型組一 10 24. 77 31 降糖灵 0. 1 10 22. 72 ±1. 53 14. 52 ¾. 99*** 本发明软胶囊 1. 8 10 22. 65 ±1. 52 12. 58 97*** 本发明软胶嚢 0. 9 10 22. 68 ±1. 55 17. 87 ¾. 54** o

与模型组比较： **： Ρ<0. 01, ***: Ρ<0. 001。

表 5: 本发明软胶嚢对大鼠血清 S0D、 LP0含量的影响（X :!SD) 剂量动物 CO S COOD活力 MM 組别

(g/kg) (只）（NU/ml) (nM/ml) 正常对照組 ― 167. 1 ¾9. 3 龟龄集 0. 12 10 771. 3 ±182. 8* 135. 6 ¾7. 8* 本发明软股嚢 1. 80 10 873. 7 ¾11. 1** 121. 0 ¾8. 7*Φ 本发明软肢囊 0. 90 10 750. 3 ¾06. 0 137. 8 ¾8. 0* 与模型組比较： *： P<0. 05, **: P〈0. 01。

表 6: 本发明软胶嚢对小鼠胸腺及脾脏指数的影响（X ¾D)

动物体重胸腺指数脾脏指数組别

(只） (g) (mg/ ) (mg/g) 正常对照 ― 10 21. 25 ¾. 40 3. 04 ¾. 66 4. 61 47 黄芪精口服液 5. 4 10 24. 30 32 5. 00 ±1. 00** 5. 68 ±1. 38* 本发明软胶嚢 3. 6 10 19. 34 ±1. 72 4. 05 ^0. 93* A 5. 66 ±1. 30* A Δ 本发明软胶嚢 1. 8 10 19. 92 ¾. 81 3. 84 ^0. 68* 5. 08 ±1. 15 与模型组比较： *： P<0. 05, **: P<0. 01； Λ : P<0. 05; Δ Δ Ρ〈0. 01。表 7: 本发明软胶嚢对小鼠皮肤迟发型超敏反应的影响（X ¾D) 組别剂量动物左耳片重右耳片重左右耳片重量之差

(g/kg) (只） (mg) (mg) (mg) 正常对照 -- 10 13.40*.52 15.00 ±1.25 16.0¾).97 模型組 -- 10 14.00 ±1. 41 14.60 ±1.50 0.60 ±1.58 龟龄集 0.24 10 12.70 ±1. 16 17.90 ¾.73 5.20 ¾.82*** 本发明软胶嚢 3.6 10 13.60 ±1. 70 20.70 ¾.06 7.10 ¾.01*** Α Δ 本发明软胶嚢 1.8 10 13.30 ±1.83 16.00 ±1.41 2.70±1.64** 与模型組比较： **： P<0.01, ***: P<0.001； A AP〈0.01。

表 8: 本发明软胶嚢对小鼠血清溶血清溶血素量的影响（X ¾D) 剂量动物光密度值

組别

(g/kg) (只) (0D)

正常对照 —― 10 0.192¾.099 模型組 ― 10 0.137 006 龟龄集 0.24 10 0.170 ¾.008**Φ 本发明软胶嚢 3.6 10 0.251 ^Ο.099*ΦΦΔ Δ 本发明软胶嚢 1.8 10 0.171 028** 与模型组比较： **： P<0.01, ***： P<0.001; Α ΔΡ<0.01。表 9: 本发明软胶嚢对小鼠常压耐缺氧时间的影响（X:tSD) 剂量动物存活时间組别

(g/kg) (只） (min) 正常对照一— 10 16.39 ±1.71 黄芪精口服液 5.4 10 16.30 ±1.68 本发明软胶嚢 3.6 10 20.51 .42** Δ Δ 本发明软胶嚢 1.8 10 18.23 ¾· 20 与模型组比较： **： P〈0. 01, Δ Δ Ρ〈0. 01。

表 10: 本发明软胶嚢对小鼠低温游泳持续时间的影响（X ¾D)

剂量动物低温游泳持续时间组别

(g/kg) (只） (min)

正常对照 —— 10 3. 14 89 黄芪精口服液 5. 4 10 5. 62 ±1. 59** 本发明软胶嚢 3. 6 10 6. 29 ¾. 33** 本发明软胶嚢 1. 8 10 4. 23 ±1. 04 与模型组比较： **： P〈0. 01。

实验例二：临床试验观察

一、病例选择标准

(一）诊断标准

1、肾阴虛证诊断标准：（参照全国第三届中医中西医结，合虚证会议标准）具有腰膝酸痛、五心烦热、口干咽燥、头晕、耳鸣、耳章、盗汗、大便秘结、舌质红、脉细数。

2、高脂血症诊断标准：

正常饮食情况下， 2周内 2次测血清总胆固醇均 > 6. Ommol / L, 或甘油三酯 > 1. 54醒 ol / L, 或高密度酯蛋白男性 < 1. 04醒 ol / L, 女性 < 1. 17mmol / L可确诊。

3、糖尿病（Π型）诊断标准：（采用 1980年 WHO暂行标准）

(1)有糖尿病症状，任何时间血糖 > 11. lmmol / L, 或空腹血糖 > 7. 8mmol / L。

(2)有糖尿病症状而血糖未达上迷标准，进行 75g口服葡萄糖耐量试验（0GTT) , 2小时血糖> 11. lmmol / L。

(3)如无糖尿病症状，除上述标准外须另加一项标准，即 0GTT1 小时血糖> 11. lmmol / L,或另一次 0GTT2小时血糖> 11. lmmol / L, 或另一次空服血糖 > 7. 8mmol / L„ π型糖尿病即患者符合上述标准，

(二）试验病例标准

1、纳入病例病种选择依据：

根据本发明软胶嚢药理研究有降脂、降糖作用，及可治疗消渴的功效，选择了高脂血症及糖尿病两个病种进行肾阴虛证临床验证，并另设开放治疗组（不限病种）。

2、纳入病例标准：

(1)辨证为肾阴虚（包括阴虛火旺）证，并且积分值〉 10分者。

(2)高脂血症、 Π型糖尿病或曾经确诊后已使用药物及饮食控制稳定者，以及其它疾病（开放组）辨证为腎阴虛者。

(3)年龄在 18岁以上， 70岁以下

(4)自愿受试者。

3、排除标准：

(1)有心血管、脑血管、肝、肾、造血系统等严重原发性疾病精神病患者。

(2)年龄在 18岁以下或 70岁以上者。

(3)妊娠期或哺乳期妇女，以及对本药过敏者。

(4)肾阴虛积分值〈10分者，或辨证属阴虛湿热见舌苔厚膩者。

(5)不符合纳入标准，未按规定用药，无法判断疗效，或资料不全等影响疗效或安全性判断者。

二、分组及用药方法

1、对照方式：

采用治疗前后自身对照。设治疗组 100例，开放治疗组 30例。

2、用药方法：

单盲法治疗組给予本发明软胶嚢（批号： 970607) , 每次口服 2 粒 (每粒含生药量 1. 5g)， 1 日 3次。

3、疗程： 6周 4、病例来源：门诊、住院病例均可，其中门诊患者 152人，住院病人 78人，住院患者占 33. 91 %。对于门诊病人嘱严格用药，每周指派专人随访并追

三、观察指标

1、疗效性观察：

(1)腎阴虛证症状、体症积分值变化情况

(2)高脂血症的血脂变化及 Π型糖尿病血糖变化情况。

2、安全性观察：

(1)一般情况

(2)血、尿、粪常规检查

(3)肝功能（SGPT、八/ 0)及肾功能（81^、 Scr)检查

(4)心电图检查

3、观察方法：

艮药后每周都应询问病人试验用药情况，并做记录。

(2)在试验前及试验后 2、 4、 6周进行肾阴虛证积分评定，试验前后进行血糖、血脂有关项目评价及安全性评价，并认真记录。

四、疗效判定标准

(一）肾阴虚证疗效判定标准：

分为四级，即临床痊愈、显效、有效、无效。

1、临床痊愈：肾阴虛证的症状、体征消失或积分值下降〉 90 %。

2、效：肾阴虛的症状、体征明显改善，积分值下降在 60 %—90

%。

3、有效：腎阴虛的症状、体征均有好转，积分值下降在 30 % --60

%。

4、无效：肾阴虛的症状、体征无改善或积分值下降〈30 %。

(二）糖尿病疗效判定标准（参照《中药新药临床研究指导原则》第一辑 P216) 1、显效：治疗后症状基本消失，空腹血糖 <7.2mmol/L(130mg /dl)餐后 2 小时血糖〈8.3mmol/L(150nig/dl), 24小时尿糖定量 <10.0g; 或血糖、 24小时尿糖定量较治疗前下降 30%以上。

2、有效：治疗后症状明显改善，空腹血糖 <8.3mmol/L(150mg / dl)餐后 2小时血糖〈10. Ommol / L (180mg / dl) , 24小时尿糖定量 <25.0g; 或血糖、 24小时尿糖定量较治疗前下降 10%以上。

3、无效：治疗后症状无明显改善，血糖、尿糖下降未达上迷标准。

(三）高脂血症疗效判定标准（参照《中药新药临床研究指导原则》第二辑 P 172)

1、临床控制：临床症状、体征消失，实验室各项检查恢复正常。

2、显效：临床症状、体征基本消失，血脂检测达到以下任 1项者： TC下降 > 20 % , TG>40 % , HDL-C上升 > 0.26励1 / L (10mg / dl), TC-HDL- C/HDL-C下降 >20%。

3、有效：血脂检测达到以下任 1项者： TC下降 >10%但 <20%, TG 下降 > 20%但〈40%, HDL-C 上升 >0.10½mol / L(4mg / dl)但 <0.26mmol / L (10mg / dl) , TC- HDL— C / HDL-C下降 > 10 %但 <20 %。

4、无效：治疗后症状、体征与血脂检测无明显改善者。

五、不良反应及副作用

观察期间，如有不良反应，均做观察记录，并加以分析讨论。六、结果：

(一）高脂血症、糖尿病治疗效果分析

表 11高脂血症治疗效果分析

疗效判断（例）总有效项目組别 _n 控显率（％)

临床控制显效有效无效率（％) 高脂血症治疗組 50 5 19 19 7 48.0 86.0 按照《中药新药治疗高脂血症的临床指导原则》的疗效判定标准，高脂血症治疗組控显率为 48. 0 % , 总有效率为 86. 0 % 。表 12 糖尿病治疗效果分析

疗效判断（例）显效率总有效项目組别 N

显效有效无效（％) 率（％) 糖尿病治疗组 50 9 25 16 18. 0 68. 0 按照《中药新药治疗消渴（糖尿病）的临床指导原则》的疗效判定标准，糖尿病治疗組显效率为 18. 0 % , 总有效率为 68. 0 % 。

(二：)、降低血脂及血糖情况比较

表 13高脂血症降脂疗效比较（单位： mmol / L)

用药前用药后组内比较组间比较项目组别例数

X¾D T p ¾D t P t P t P 胆固醇 ^疗组 50 5.84 ¾.66 0.62 >0.05 4.96 ¾.41 0.42 >0.05 5.49 <0.01 0.36 >0.05 三酸甘

治疗组 50 3.64 ¾.11 0.22 >0.05 2.78¾.61 0.28 >0.05 4.62 <0.01 1.00 >0.05 油醋

高密度

治疗组 50 1.70^0.90 0.62 >0.05 1.62^0.59 0.53 >0.05 0.86 >0.05 1.28 >0.05 脂蛋白表 14 糖尿病降糖疗效比较 (单位： mm lol / L)

用药前用药后组内比较组间比较指标组别例数

¾D t p X¾D t p t p t P 空腹治疗 6. 67 ±

50 1. 81 >0. 05 6. 23 ±1. 20 1. 88 〉0， 05 3. 00 <0. 01 0. 06 >0. 05 组 1. 39

治疗 11.05 ±

48 0. 15 >0. 05 9， 71 ¾. 38 0. 16 >0. 05 3. 93 <0. 01 0. 39 >0. 05 组 3. 13 从表 13、表 14可知，高脂血症患者治疗組有降低胆固醇、三酸甘油酯的作用，治疗前后，差异具有非常显著性；对糖尿病患者，治疗組有降低空腹血糖及餐后血糖的作用，治疗前后差异具有非常显著性。

实施例 1:

熟地黄 960g 山茱萸（制） 480g 牡丹皮 ³⁶0g 山药 480g 茯苓 360g 泽泻 360g 精制食用植物油适量

以上六味，将牡丹皮加 12倍量的水，润透 3小时，水蒸汽蒸馏提取 12小时，收集蒸馏液为药材的 8倍量，母液另存；馏液 0 - 4 " 冷藏 12小时，滤取丹皮酚，冷风吹干，密闭保存，备甩; 残渣与熟地黄、山药、茯苓加 8倍量水煎煮 3次，每次 1. 5小时，合并煎液，与丹皮酚母液浓缩成 80Ό下相对密度为 1. 10浸膏，离心，药液浓缩至 80Ό下相对密度为 1. 13的浸膏 I；山茱萸，泽泻粉碎成粗粉，加 8倍量 60 %乙醇回流提取 3次，每次 3小时，合并滤液，回收乙醇，浓缩至 80 下相对密度为 1. 14的浸膏 Π ; 合并浸膏 I 、 Π , 浓缩至 80 " 下相对密度为 1. 30—1. 35的稠膏，真空干燥，粉碎、过筛。丹皮酚粉碎，与浸膏粉混合，加辅料适量，经胶体磨磨匀，过筛，压制成软肢嚢 1000粒，即得；每粒软胶嚢内容物重 1. 0g，相当于生药 3· 0g。

实施例 2:

熟地黄 480g 山茱萸（制） 240g 牡丹皮 180g 山药 240g 茯苓 180g 泽泻 180g 精制食用植物油适量

以上六味，将牡丹皮加 10倍量的水，润透 2小时，水蒸汽蒸馏提取 10小时，收集蒸馏液为药材的 8倍量，母液另存；馏液 0 - 4 ■C冷藏 12小时，滤取丹皮酚，冷风吹干，密闭保存，备用；残渣与熟地黄、山药、茯苓加 6倍量水煎煮 2次，每次 1小时，合并煎液, 与丹皮酚母液浓缩成 80 °C下相对密度为 1.10浸膏，离心，药液浓缩至 80。C下相对密度为 1.13的浸膏 I；山茱萸，泽泻粉碎成粗粉，加 6倍量 70%乙醇回流提取 2次，每次 4小时，合并滤液，回收乙醇，浓缩至 80 °C下相对密度为 1.14的浸膏 Π; 合并浸膏 I、 Π, 浓缩至 80 °C下相对密度为 1.30— 1.35的稠膏，真空干燥，粉碎、过筛。丹皮酚粉碎，与浸膏粉混合，加辅料适量，经胶体磨磨匀，过筛，压制成软肢嚢 1000粒，即得；每粒软胶嚢内容物重 0.5g, 相当于生药 1.5g„

Claims

权利要求

1. 一种中药组合物，其特征在于该组合物是由下列原料药制成的：熟地黄 300 - 1000重量份山茱萸（制） 150- 600重量份牡丹皮 100-450 重量份山药 150- 600重量份茯苓 100- 450重量份泽泻 100- 450重量份

2. 一种如权利要求 1所述的中药组合物，其特征在于该组合物是由下列原料药制成：

熟地黄 960重量份山茱萸 (制） 480重量份牡丹皮 360重量份山药 480重量份茯苓 360重量份泽泻 360重量份

3. 一种如权利要求 1所述的中药組合物，其特征在于该组合物是由下列原料药制成：

熟地黄 480重量份山茱萸 (制） 240重量份牡丹皮 180重量份山药 240重量份茯苓 180重量份泽泻 180重量份

4. 一种药物软胶嚢，其特征在于该软胶嚢是由下述方法制成的：熟地黄 300 - 1000重量份山茱萸（制） 150- 600重量份牡丹皮 100-450 重量份山药 150- 600重量份茯苓 100- 450重量份泽泻 100- 450重量份精制食用植物油适量

以上六味，将牡丹皮加 6- 12倍量的水，润透 1-3小时，水蒸汽蒸馏提取 6-12小时，收集蒸熘液为药材的 8倍量，母液另存；馏液冷藏 10- 14小时，滤取丹皮酚，冷风吹干，密闭保存，备用；残渣与熟地黄、山药、茯苓加 6 - 10倍量水煎煮 1 - 4次，每次 0.5- 2 小时，合并煎液，与丹皮酚母液浓缩成 80 "C下 d=l.10 的浸膏，离心，药液浓缩至相对密度为 1.13度的浸膏 I；山茱萸，泽泻粉碎成粗粉，加 4 - 8倍量 50 - 80 %乙醇回流提取 1 - 3次，每次 2- 4小时，合并滤液，回收乙醇，浓缩至 80 下相对密度为 1.14 的浸膏 Π; 合并浸膏 I、 Π, 浓缩至 80 !下相对密度为 1.30— 1.35 的稠膏，真空干燥，粉碎、过筛。丹皮酚粉碎，与浸膏粉混合，加辅料适量，经胶体磨磨匀，过筛，压制成软胶嚢。

5. 如权利要求 4所述的药物软胶嚢，其特征在于该软胶嚢是由下迷方法制成的：

熟地黄 960g 山茱萸（制） 480g 牡丹皮 360g 山药 480g 茯苓 360g 泽泻 360g 精制食用植物油适量

以上六味，将牡丹皮加 12倍量的水，润透 3小时，水蒸汽蒸馏提取 12小时，收集蒸馏液为药材的 8倍量，母液另存；馏液 0-4 °C冷藏 12小时，滤取丹皮酚，冷风吹干，密闭保存，备用；残渣与熟地黄、山药、茯苓加 8倍量水煎煮 3次，每次 1.5小时，合并煎液，与丹皮酚母液浓缩成 80°C下相对密度为 1.10浸膏，离心，转速为 20000转 /分，离心 20分钟，离心后残渣弃去，药液浓缩至 80 下相对密度为 1.13的浸膏 I；山茱萸，泽泻粉碎成粗粉，加 8倍量 60%乙醇回流提取 3次，每次 3小时，合并滤液，回收乙醇，浓缩至 80Ό下相对密度为 1.14的浸膏 Π; 合并浸膏 I、 Π, 浓缩至 80 °C下相对密度为 1.30— 1.35的稠膏，真空干燥，粉碎、过筛。丹皮酚粉碎，与浸膏粉混合，加辅料适量，经胶体磨磨勾，过筛，压制成软肢嚢 1000粒，即得；每粒软胶嚢内容物重 l.Og, 相当于生药 3.0g。

6. 如权利要求 4所述的药物软胶嚢，其特征在于该软胶嚢是由下述方法制成的：

以上六味，将牡丹皮加 10倍量的水，润透 2小时，水蒸汽蒸餾提取 10小时，收集蒸馏液为药材的 8倍量，母液另存；馏液 0 - 4 °C冷藏 12小时，滤取丹皮酚，冷风吹干，密闭保存，备用；残渣与熟地黄、山药、茯苓加 6倍量水煎煮 2次，每次 1小时，合并煎液，与丹皮酚母液浓缩成 80 下相对密度为 1. 10浸膏，离心，转速为

20000转 /分，离心 20分钟，离心后残渣弃去，药液浓缩至 80 :下相对密度为 1. 13的浸膏 I；山茱萸，泽泻粉碎成粗粉，加 6倍量 70 %乙醇回流提取 2次，每次 4小时，合并滤液，回收乙醇，浓缩至

80°c下相对密度为 1. 14的浸膏 π ; 合并浸膏 i、 π , 浓缩至 80 :下相对密度为 1. 30— 1. 35的稠膏，真空干燥，粉碎、过筛。丹皮酚粉碎，与浸膏粉混合，加辅料适量，经胶体磨磨匀，过筛，压制成软肢嚢 1000粒，即得；每粒软胶嚢内容物重 0. 5g，相当于生药 1. 5g。

7. 如权利要求 1、 2或 3所述的药物组合物，其特征在于该組合物在制备治疗糖尿病药物中的应用。

8. 如权利要求 1、 2或 3所述的药物组合物，其特征在于该組合物在制备治疗高血脂症药物中的应用。

9. 如权利要求 1、 2或 3所述的药物组合物，其特征在于该組合物在制备抗疲劳、耐缺氧的药物中的应用。