WO1992013094A1 - Procede pour produire de la cyclosporine a et/ou c - Google Patents

Procede pour produire de la cyclosporine a et/ou c Download PDF

Info

Publication number
WO1992013094A1
WO1992013094A1 PCT/JP1992/000047 JP9200047W WO9213094A1 WO 1992013094 A1 WO1992013094 A1 WO 1992013094A1 JP 9200047 W JP9200047 W JP 9200047W WO 9213094 A1 WO9213094 A1 WO 9213094A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
cyclosporin
culture
medium
producing
genus
Prior art date
Application number
PCT/JP1992/000047
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Toshio Goto
Tohru Kino
Masakuni Okuhara
Hirokazu Tanaka
Yasuhisa Tsurumi
Shigehiro Takase
Original Assignee
Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. filed Critical Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority to EP92903746A priority Critical patent/EP0568698B1/en
Priority to JP04503295A priority patent/JP3099365B2/ja
Priority to AU11812/92A priority patent/AU660651B2/en
Priority to DE69222150T priority patent/DE69222150T2/de
Priority to US08/090,138 priority patent/US5447854A/en
Publication of WO1992013094A1 publication Critical patent/WO1992013094A1/ja

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/645—Cyclosporins; Related peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145—Fungal isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi

Definitions

  • F - 4908 strain can be grown in the range of 4 ⁇ 35 e C, optimum production rearing temperature Ru. 18 to 28 e C der.
  • the growth pH range of this strain is pH 3 to 10, and the optimum growth pH is pH 6 to 7.
  • strain F-498 was on Cornmeal agar

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

明 細 省 '
シ ク π ス ポ リ ン A お よ びノま たは C の製造法 技 術 分 野
本発 明 は 、 免疫抑制作用、 抗炎症作用等 を有す る シ ク 口 ス ポ リ ン A お よ び Zま たは C の製造法に 関す る も の で あ り 、 医薬品等の製造分野で利用さ れ る 。 背 景 技 術
従 来 、 シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び C の 構造 に 関 し て は 、 そ れぞれヘ ル べチ カ ' キ ミ 力 ' ァ ク タ （ Helvetica Chimica Acta ) 第 59卷、 第 1075〜 1092頁 C 1976 ) 、 同第 60卷 、 第 1247〜： 1255頁 （ 1977 ) お よび同第 70卷、 第 13〜 36頁 （ 1987 )に記載さ れて お り 、 ま た シ ク ロ ス ポ リ ン A 、 C 等 の シ ク ロ ス ポ リ ン 系化合物の製造法 と し て は 、 特 開昭 50 - 89598号公報、 特開昭 52 - 59180号公報、 特開昭 55 - 55150号公報お よ び特開昭 57 - 63093号公報記載の 法が知 られて レゝ る 。 癸 明 の 開 示
本発 明の発明者 ら は 、 シ ク ロ ス ポ リ ン系化合物の製造 法 に つ いて鋭意研究 し た結果、 上記の公知の方法で用い ら れ る 菌 と は異な る ネ ク ト リ ァ属に属す る新菌種が シ ク コ ス ポ リ ン A お よ び/ま た は C を生産す る こ と を新た に 見 出 し た。 本発 明は 、 ネ ク ト リ ァ属に属する シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び ま たは C生産菌を培地に培養 し 、 その培養物か ら シ ク ロ ス ポ リ ン A お よびノまたは C を採取す る方法に関 す る も のであ る 。
本癸 明で使用す る ネ ク ト リ ァ属に属す る シ ク ロ スポ リ ン A お よ び Zまたは C生産菌の う ち 、 本癸明者等が 日 本 国鹿児島県奄美大島名瀬市で採取 し た土壌試料か ら新た に 分離 し た菌株 （ F - 4908株 と 番号を付す ） は、 以下に 示す よ う な菌学的性質を有す る 。
種 々 の培地上での特徴
表 1 に 、 F — 4 9 0 8株を バ レ イ シ ョ * ブ ド ウ 糖寒天培 地 、 麦芽 エ キ ス 寒天培地 お よ び コ ー ン ミ ー ル寒天培地 上 、 2 5 eCで 2 週間培養 し た と き の発育状態の特徵を示 す 。 色名 は 、 日 本色彩研究所の 「 色の標準 」 を使用 し た
F - 4908株の各種培地に おけ る培養上の特徵
Figure imgf000004_0001
パレイショ · 7ドウ 麦芽：！キス コーンミール 糖寒天培地 寒天培地 寒天培地
ス し、 チ 1)
ー ブ〜 オ リ 薄い オ リ ー
表面の色 ー ブま たは ブ〜 明 る い 白色
灰味オ リ ー ォ リ ー ブ 中心部のみ ブ 中心部 黄色
に橙 々色の
Ο. ioa ίκ. J* 3 f
ず る 暗い黃茶〜 黄茶 白色
暗い茶 培 培地中 に黄 中心部のみ 裏面 の色 地中に茶色 色の可溶性 黄色
の可溶性色 色素が拡散
素が拡散
'Ή
Figure imgf000005_0001
1土 1土 、 rift 1 ゥ
土 βρで ¾i間 そ の他の と も に胞子 と も に胞子 培養 し た と き 特徴 形成は観 ら 形成は観 ら 分生子が形成 れない れない さ れ る
25'Cで 4 週間 以上培養 し た と き 子の う 殻 が形成さ れ る 生理学的特徴
F - 4908株は 、 4 〜 35eCの範囲で生育可能で、 最適生 育温度 は 18〜 28eCであ る 。 ま た、 本菌株の生育 pH範囲は pH 3 〜 10、 最適生育 pHは pH 6 〜 7 であ る 。
F - 4 9 0 8株の有性生殖形態は コ ー ン ミ ー ル寒天上、
25eC で 4 週間以上培養 し た と き に観 られ、 子の う 殻中 に 褐色 の子の う 胞子が形成さ れる 。 ま た無性生殖形態は 多
、 の種類の培地上で形成さ れ、 分生子形成様式は 内分芽 型 の フ ィ ァ 口型であ る 。 表面殺菌 し た植物葉上 に 接種 し た場合 に 、 子の う 殻 は 表在性で あ り 、 形状 は 球形 も し く 'は亜球形か ら ア ン プ ル形 を し て お り 、 乳頭状の 開孔部 を一つ持つ。 側毛 は な く 、 色は 明 る い茶色か ら橙 々 色で あ り 、 直径 150〜 2 5 0 m、 子の う 杲壁は薄 く 、 3 〜 4 層 細胞層か ら な つ て い る 。 開孔部は直径 70~ 80 m、 高さ 50〜 60 Z mの隆 起で あ り 、 孔 口がひ と つ開き 、 内側にペ リ ブ イ ソ ィ ズ型 の周 糸 を 備 え る 。 子の う は一重壁子の う で非ア ミ ロ イ ト'性 、 先端構造は発達せず、 円筒形か ら桿棒形で、 長さ 60- 85 il m, 幅 7. 5〜 11 /Κ ηι、 8 個の子の う 胞子が単列 に 形成さ れる 。 子の う 胞子は茶色か ら褐色で表面は剌状か ら こ ぶ状を し てい る 。 子の う 胞子は 2 細胞か ら な り 、 そ れ ら の細胞はそれぞれ液胞を一つずつ有 し て お り 、 長さ 11 - 12 £ m, 幅 6 〜 7 £ mで形状は楕円形か ら広楕円形で 両端は 丸 く 隔壁部で く びれてい る 。
分生子柄 は無色 、 滑面で隔壁が あ り 、 単生 ま た は ゆ ゆ る く コ レ ミ ア を形成 して い る 。 分生子柄の長さ は 50〜 100 m、 幅は 3 〜 4. 5 i mであ り 、 頂端細胞が フ ィ ァ ラ ィ ド に な る 。 フ ィ ア ラ ィ ドは無色、 滑面で、 形状は桿形ま た は 糸状で あ る 。 フ ィ ア ラ ィ ドの長さ は 30 ~ 45 m、 幅 は 2 ~ 3. 5 mで あ り 、 先端部の幅は 1 〜 2 mで明瞭な 力 ラ ー を有す る 。
分生子 は 、 1 細胞か ら な り 、 無色、 滑面で形状は楕 円形か ら長楕円形で あ る 。 分生子は長さ 5 ~ 24 i m、 幅 2. 5~ 4 〃 mの範囲で様 々 な大き さ に な り 、 連鎖せずフ ィ ァ ラ イ ド先端で小塊をつ く る 。 栄養菌 糸 は 、 隔壁 を 有 し 、 無色 、 滑面で分枝 し て い る 。 そ の 菌 糸 細胞 は 幅 2 〜 4 . 5 〃 mの 円筒形 を し て い る 。 ま た、 厚膜胞子は形成さ れない。
以上の こ と よ り F — 4908株は 、 ネ ク ト. リ ア属 に 所属 し 、 子 の う 殻が単生 し て 子座 を 成せず 、 子の う 殻壁 は 薄 く 、 褐色で 剌状の子の う 胞子 を形成す る と い ぅ 特 徴 を も つ 。 ま た 、 そ の無性生殖形態 は ア ク レ モ ニ ゥ ム 属 （ L r emon ium Link ) または ァ ク ロ シ リ ン ド リ ゥ ム C Acrocvlindrium Bonorden ) に帰属さ れる。 これ ら の特徴か ら 、 本菌株 は マ イ コ ロ ジ カ ル · ペー パ ー ズ
(My co logical Papers)第 73巻、 第 1 〜 115頁 （1959〉 ； マ ィ コ ロ ジ ァ （ Mycologist 65巻、 第 401〜 420頁 （1973) ; お よ び ニ ュ ー ジー ラ ン ド · ジ ャ ー ナ ル ' ォ ブ · ボ タ ニー
( ew Zealand Journal of Botany)第 14卷、 第 231〜 260 頁 （ 1976〕 記載の ネ ク ト リ ァ属の分類基準に従え ば、 ネ ク ト リ ア . ぺ ツ イ ッ ァ . ト ー ド ウ . ェ ク ス . フ リ ー ス . フ リ ー ス 、'、 Nectria peziza ^ lode ex Fr. ) Fr. ) また は ネ ク ト リ ァ · デ ン テ ィ フ ェ ラ · サ ミ ュ エ ル （ Nectria dentif era Samuels：) と 比較的類似 レて レ、 る 。 し か し 、 ネ ク 卜 リ ア · ぺ ッ ィ ッ ァ は子の う 胞子の表面構造が線状 隆起で 本菌株のそれ と 異な り 、 子の う 殻の大 き さ 、 子の う 胞子の大 き さ 、 形状、 着色の有無等で も 明 らか に相異 が み ら れ る 。 ま た、 ネ ク ト リ ア ' デ ン テ ィ フ ヱ ラ に つレ、 て も 、 本菌株 と は 子 の う 胞子の表面構造、 大 き さ 、 形 状 、 着色の有無、 子の う の大 き さ 、 子の う 殻の形状等で 相異点 を も つ 。 し たが っ て無性生殖形態が ア ク レ モ ニ ゥ ム属 ま たは ア ク ロ ン リ ン ド リ ゥ ム属であ る既知の ネ ク ト リ ア 属菌の中 に は、 F - 4908株に相当す る も のは なレ、 と 思われ る 。 .
以上の こ と か ら 、 F - 4908株を ネ ク 卜 リ ア属の新菌 種 と 認め、 ネ ク ト リ ア ' エ ス ピー ' F — 4908 C Nectria sp. F - 4908 ) と 命名 し た。
こ の ネ ク ト リ ア ' エ ス ピー . * F — 4908株は、 通商産業 省工業技術院微生物工業技術研究所 （ 日 本国茨城県つ く ば市東 1 丁 目 1 一 3 ) に微ェ研条寄第 3235号 と して平成 3 年 1 月 22日 に寄託さ れてい る 。
こ の発明で使用す る シ ク ロ ス ポ リ ン Aお よびノまたは C 生産菌 は 、 例 え ば X 線、 紫外線等の照射処理、 例 え ぱナ イ 卜 ロ ジェ ン · マ ス タ ー ド、 ァザセ リ ン、 亜硝酸、 2 — ァ ミ ノ プ リ ン 、 N— メ チル ー N ' — 二 ト π — N — 二 ト コ ソ グ ァ 二 ジ ン （ NTG ) 等の変異誘起剤に よ る処理、 フ ァ ー ジ接触、 形質転換、 形質導入、 接合等の通常用い られ る 菌種変異処理方法に よ り 、 シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び Zま たは C の生産能を高め る こ と がで き る 。
ネ ク 卜 リ ア属に属す る シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び Zま た は C 生産菌を培地に培養す る こ と に よ り 行われる シ ク 口 ス ポ リ ン A お よ びノまたは C の生産は原則的に は一般微 生物の培養方法に準ずるが、 通常は液体培地に よ る深部 培養法が有利であ る 。 培養に用い られる培地 と し ては、 ネ ク ト リ ァ属に属す る シ ク ロ ス ポ リ ン A お よびノまたは C 生産菌が利用 す る 栄養源 を 含有す'る 培地で あれ ば よ い 。 す なわ ち 、 合成培地、 半合成培地あ る い は天然培地 が 用 い ら れ 、 培地組成 は 炭素源 と し て は 、 例 え ば グ ル コ ー ス 、 シ ュ 一 ク ロ ー ス 、 マ ル ト ー ス 、 グ リ セ リ ン 、 で ん粉 、 液化でん粉等が用い られ、 窒素源 と し て 、 例え ば 肉 エ キ ス 、 カ ゼ イ ン 加水分解物、 ペ プ ト ン 、 ダ ル テ ン ミ ー ル 、 コ ー ン ミ ー ル 、 綿実粉、 大豆粉、 コ ー ン ♦ ス チ ー プ ♦ リ カ ー、 ピーナ ツ パ.ゥ ダ一、 小麦胚芽、 乾燥酵 母 、 酵母エ キ ス 、 尿素、 り ん酸ア ン モニ ゥ ム等が用い ら れ る 。 こ のほか、 例え ば り ん酸水素ニナ ト リ ウ ム 、 り ん 酸二水素 カ リ ウ ム 、 塩化マ グ ネ シ ウ ム 、 硫酸マ グ ネ シ ゥ ム 、 炭酸 カ ル シ ウ ム 、 ヨ ウ ィ匕ナ ト リ ウ ム 、 塩ィヒコ バ ル ト 6 水塩等の無機塩 も 必要に応 じ て培地に添加さ れる 。
ま た培姜中発泡の著 し い時に は 、 例えば大豆油、 亜麻 仁油 等 の植物油 、 ォ ク タ デ カ ノ ー ル 、 テ ト ラ デ カ ノ ー ル 、 へ ブ タ ノ ー ル等の高級ア ル コ ー ル類、 シ リ コ ンィ匕合 物等の消泡剤を適宜添加すれば よ い。
培養温度は 25〜 3 0 eC前後が適当であ り 、 培養容量の増 大 に 従 っ て適宜種培養を行な う と 好結果が得 られる こ と が 多 い 。 术培養の培桊時間は 5 0〜 3 0 0時間位が適当で あ り 、 培地が濃厚に な る の に従 っ て 、 培養時間を さ ら に延 長 し て も よ い。
以上述べた培養条件は使用生産菌株の特性に応 じ て そ れ ぞれ に最適の条件を選枳 し て適用さ れ る ，
次 に 、 培養に よ り 生成 し た シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び ま た は C は通常、 培姜物中の菌体内お よび 液内に蓄積 さ れ る ので 、 一般に は遠心分離、 濂過等の手段に よ り 、 菌体お よ び濾液 （ 上澄液 ） に分離 し た後、 一般抗生物質 の製造 に用い られる手段に よ り 分離、 精製お よび採取さ れ る 。 すな わ ち、 菌体を溶媒に溶解さ せ 目 的物質を溶媒 抽出 し 濂液 と 合わせた後、 液性変換、 例えば陰 イ オ ン交 換樹脂、 陽 イ オ ン交換樹脂、 非 イ オ ン性吸着樹脂等の樹 脂 に よ る姐理、 例えば活性炭、 けい酸、 シ リ カ ゲル、 ァ ル ミ ナ 、 セ ル ロ ー ス等の吸着剤に よ る処理、 結晶化、 再 結晶等の手段を任意の順序に組み合わせ または反復 し て 適用す る こ と に よ り 、 目 的物質であ る シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び Zまたは C を分離、 精製す る こ と がで き る 。
以下、 実施例に よ り 本発明 を説明す る 。
500m l容三角 フ ラ ス コ 3 本 に可溶性デ ン プ ン %ヽ ト ウ モ ロ コ シ デ ン プ ン 1 %、 グ ル コ ー ス 1 %、 綿実粉 1 %、 酵母エ キ ス 0. 5%、 ペ プ ト ン 0. 5%、 コ ー ン · ス チ ー プ · リ カ ー 0. 5%お よ び炭酸カ ル シ ウ ム 0. 2% ( pH 6.0 ) か ら成る種培養培地を 160mlずつ入れ、 滅菌する 。 こ れ ら に ネ ク ト リ ァ ' エ ス ピー ' F - 4908株 （ 微ェ研条 寄第 3235号 ） を接種 し 、 25eCで 96時間培養を行い、 種培 養液 と す る 。
別に 、 30 £ 容 ジ ャ ー フ ァ ー メ ン タ ー に可溶性デ ン プ ン 6 % , コ ー ン ' ス チ ー プ · リ カ ー 3 %、 ビーナ ツ ノ、 * ゥ ダー 1 %、 酵母エ キ ス 1 %、 ア デ 力 ノ ー ル 0.1%お よ び 炭酸 カ ル シ ウ ム 0.2% ( pH6.5 ) か ら成る生産培地を 20 £ 入れ滅菌す る 。 こ れ に 上記の種培養液 を 加 え 、 25 で 168時間培養す る （通気量 20 £ Z分、 内圧 1.0kgZcm 、 攪 拌 350rpm)。 培養終了後、 培養液 に ラ ジ オ ラ イ ト （ 商品 名 ： 昭和化学工業社製 ） （ 500 g ) を加 え 、 フ ィ ル タ 一 プ レ ス で濂過 し 、 濂液 13 £ お よ び菌体を得 る 。
濂取 し た菌体に 7 £ のア セ ト ン を加え、 2 時間室温に 放置後濾過 し 、 菌体のア セ ト ン抽出液を得る 。 先に得 ら れた濂液 と ァ セ ト ン抽出液を合わせ 、 ダ イ ヤ イ オ ン HP— 20 ( 商品名 ： 三菱化成工業社製 ） （ 2 i ) に 吸着さ せ る 。 水 （ 4 £ ) お よ び 50%ア セ ト ン水溶液 （ 4 £ ) で順 次洗浄 し た後、 ア セ ト ン で溶出 し 、 2 £ ずつ分取す る 。 フ ラ ク シ ョ ン 4 の画分を減圧澳縮 し て ァ セ ト ン を留去す る 。 酢酸ェ チ ル （ 20ml：) で 2 回抽出 し 、 抽出液を減圧濃 縮 し て 褐色の油状物を得 る 。 油状物を シ リ カ ゲル カ ラ ム ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー に付 し 、 n —へ キ サ ン （ 100ml ) 、 n - へ キ サ ン 一酢酸ェ チ ル （ 1 ： 1 v/v、 160ml ) , η — へ キ サ ン - 酢酸ェ チ ル （ 1 ： 2 v/v、 200ml ) 、 齚酸ェ チ ル （ 300ml ) お よ びア セ ト ン （ 100ml ) で順次溶出 し 溶出 液 を 20mlずつ分取す る 。
フ ラ ク シ ョ ン 24か ら 27の画分を合わせ、 減圧濃縮 し 、 シ ク ロ ス ポ リ ン A ( 196mg ) を得 る 。
さ ら に フ ラ ク シ ョ ン 37か ら 40の画分を合わせ、 減圧濃 縮す る 。 残渣 （ 55mg ) を 85 % メ タ ノ ー ル水溶液に溶解 し 、 NSゲル （ 日 本精密化学社製 ） カ ラ ム （ 30ml：) に付 し て 精製 し 、 シ ク ロ ス ポ リ ン C ( 34mg ) を得 る 。 上記で得 られた シ ク ロ ス ポ リ ン Aの 1 H核磁気共鳴吸 収 ス ぺ ク ト ル お よび赤外線吸収 ス ぺ ク ト ル を、 それぞれ 第 1 図 お よ び第 3 図に示す。 実測の各種物性値は 、 ヘ ル ベ チ カ . キ ミ 力 . ァ ク タ （ Helvet ica Chimica Acta ) 第 59卷 、 第 1075〜 1092頁 （ 1976 ) お よ び同第 70巻、 第 1 3〜 36頁 （1 987 )記載の シ ク ロ ス ポ リ ン Aの物性値 と よ く 一致 し た 。 ま た シ ク ロ ス ポ リ ン C の 丄 核磁気共鳴吸収ス ぺ ク ト ル お よび赤外線吸収ス ぺ ク ト ル を 、 それぞれ第 2 図 お よ び第 4 図 に 示す 。 実測の各種物性値は 、 ヘ ル べ チ 力 ♦ キ ミ 力 · ァ ク タ 第 60巻、 第 1247〜 1255頁 （ 1977 ) お よ び同第 70巻、 第 13〜 36頁 （ 1 987 ) 記載の シ ク ロ ス ポ リ > C の物性値 と よ く 一致 し た。 図 面 の 簡 単 な 説 明
第 1 ~ 4 図は、 こ の発明 に よ り 得 られる シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び C の 1 H核磁気共鳴吸収 ス ぺ ク ト ル お よび赤 外線吸収 ス ぺ ク ト ル を示す も のであ り 、 第 1 図は シ ク ロ ス ポ リ ン A の 1 H核磁気共鳴吸収ス ペ ク ト ル 、 第 2 図は シ ク ロ ス ポ リ ン C の 核磁気共鳴吸収ス ペ ク ト ル 、 第 3 図 は シ ク ロ ス ポ リ ン A の赤外線吸収ス ぺ ク ト ル お よ び 第 4 図 は シ ク ロ ス ポ リ ン C の赤外線吸収ス ぺ ク ト ル を そ れ ぞれ示す。

Claims

請 求 の 範 囲
1 . ネ ク ト リ ァ属に属す る シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び /ま た は C 生産菌を培地に培養 し 、 そ の培姜物か ら シ ク π ス ポ リ ン A お よ びノま たは C を採取す ！） こ と を特徴 と δ す る シ ク ロ ス ポ リ ン Α お よ びノま た は C の製造法。
2 . ネ ク ト リ ァ属に属す る シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び ま た は C 生産菌が ネ ク ト リ ア ' エ ス ピー ' F — 4908であ る 請 求 の範 囲第 1 項 に 記載の シ ク ロ ス ポ リ ン A お よ び / ま たは C の製造法。
0 3 . ネ ク ト リ ア · エ ス ピー · Ρ - 4908。
5
PCT/JP1992/000047 1991-01-25 1992-01-22 Procede pour produire de la cyclosporine a et/ou c WO1992013094A1 (fr)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP92903746A EP0568698B1 (en) 1991-01-25 1992-01-22 Process for producing cyclosporin a and/or c
JP04503295A JP3099365B2 (ja) 1991-01-25 1992-01-22 シクロスポリンａおよび／またはｃの製造法
AU11812/92A AU660651B2 (en) 1991-01-25 1992-01-22 Process for producing cyclosporin A and/or C
DE69222150T DE69222150T2 (de) 1991-01-25 1992-01-22 Prozess zur produktion von cyclosporin-a und/oder c
US08/090,138 US5447854A (en) 1991-01-25 1992-01-22 Production of cyclosporin A and/or C with a strain of NECTRIA

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP3/87151 1991-01-25
JP8715191 1991-01-25

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO1992013094A1 true WO1992013094A1 (fr) 1992-08-06

Family

ID=13906982

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP1992/000047 WO1992013094A1 (fr) 1991-01-25 1992-01-22 Procede pour produire de la cyclosporine a et/ou c

Country Status (8)

Country Link
US (1) US5447854A (ja)
EP (1) EP0568698B1 (ja)
JP (1) JP3099365B2 (ja)
AT (1) ATE158022T1 (ja)
AU (1) AU660651B2 (ja)
CA (1) CA2101777A1 (ja)
DE (1) DE69222150T2 (ja)
WO (1) WO1992013094A1 (ja)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5409816A (en) * 1992-12-30 1995-04-25 Leiras Oy Process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein
US6306306B1 (en) 1996-03-21 2001-10-23 Arzneimittelwerk Dresden Chromatographic process for obtaining highly purified cyclosporin A and related cyclosporins

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0725076B1 (en) * 1995-02-01 2001-06-06 National Research Development Corporation of India A process for the preparation of cyclosporin A from tolypocladium species
US5709797A (en) * 1996-06-05 1998-01-20 Poli Industria Chimica S.P.A. Method of isolating cyclosporins
US5747330A (en) * 1996-06-05 1998-05-05 Poli Industria Chimica Antibiotic producing microbe
CA2358448C (en) 1998-12-30 2009-02-10 Dexcel Ltd. Dispersible concentrate for the delivery of cyclosporin
US7732404B2 (en) 1999-12-30 2010-06-08 Dexcel Ltd Pro-nanodispersion for the delivery of cyclosporin

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5763093A (en) * 1980-10-03 1982-04-16 Mitsubishi Chem Ind Ltd Production of cyclosporin

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2455859C2 (de) * 1973-12-06 1983-12-15 Sandoz-Patent-GmbH, 7850 Lörrach Das Antibiotikum Cyclosporin A (S 7481/F-1), seine Herstellung und Verwendung
CH614931A5 (ja) * 1975-11-04 1979-12-28 Sandoz Ag
DE2819094A1 (de) * 1977-05-10 1978-11-23 Sandoz Ag Cyclosporin-derivate, ihre verwendung und herstellung
FR2393535A1 (fr) * 1977-06-07 1979-01-05 Agronomique Inst Nat Rech Procede pour l'obtention de proteines alimentaires d'origine fongique ou a partir de micro-organismes pluricellulaires, dispositif de fermentation et proteines obtenues
CH637124A5 (en) * 1978-10-18 1983-07-15 Sandoz Ag Antibiotic, its preparation and use
JP2577049B2 (ja) * 1987-06-04 1997-01-29 三共株式会社 シクロスポリン製剤
HU201577B (en) * 1988-12-20 1990-11-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing cyclosporin antibiotics
US5214130A (en) * 1990-02-27 1993-05-25 Merck & Co., Inc. Synthesis of novel immunosuppressive cyclosporin analogs with modified amino acids at position-8
ATE127528T1 (de) * 1991-04-06 1995-09-15 Dresden Arzneimittel Verfahren zur fermentativen herstellung und isolierung von cyclosporin a sowie neue cyclosporin- bildende stämme.

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5763093A (en) * 1980-10-03 1982-04-16 Mitsubishi Chem Ind Ltd Production of cyclosporin

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5409816A (en) * 1992-12-30 1995-04-25 Leiras Oy Process for producing immunosuppressives and a novel microbial species to be employed therein
US6306306B1 (en) 1996-03-21 2001-10-23 Arzneimittelwerk Dresden Chromatographic process for obtaining highly purified cyclosporin A and related cyclosporins

Also Published As

Publication number Publication date
CA2101777A1 (en) 1992-07-26
US5447854A (en) 1995-09-05
JP3099365B2 (ja) 2000-10-16
ATE158022T1 (de) 1997-09-15
EP0568698A4 (en) 1994-11-23
DE69222150T2 (de) 1998-01-15
DE69222150D1 (de) 1997-10-16
AU660651B2 (en) 1995-07-06
EP0568698B1 (en) 1997-09-10
EP0568698A1 (en) 1993-11-10
AU1181292A (en) 1992-08-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4933180A (en) Novel antibiotic vermisporin, process for the production thereof and pharmaceutical composition comprising it as an active antibacterial agent
JPH02231071A (ja) 新種トリポクラディウム・バリウム、及びそれを利用するサイクロスポリン系抗生物質の生産方法
WO1992013094A1 (fr) Procede pour produire de la cyclosporine a et/ou c
JP2802097B2 (ja) 新規な制癌抗生物質ｍｉ４３―３７ｆ１１及びその製造法
JPH10503368A (ja) 抗原生動物環状テトラペプチド
JP2768829B2 (ja) 抗生物質
JPH05222050A (ja) 新規スクアレンシンセターゼ阻害剤及びそれからの製法
JPS6337638B2 (ja)
JP3902283B2 (ja) 抗生物質ホルママイシンとその製造法
CH648327A5 (de) Anthracycline.
JPH08109182A (ja) 化合物ｒｐ−１５５１類
JPH1112296A (ja) 抗真菌化合物ａｆａ０４２４
US5219754A (en) Strain Ophiobolus vermisporus FERM BP-1636
ITMI950865A1 (it) Derivati della purporogallina
JPH0265775A (ja) 新規微生物及びジベレリン類の製造方法
JPH1112280A (ja) 新規抗生物質ａｂ５５２９、その製造法および殺虫剤
JPS5834113B2 (ja) 新規抗生物質シスタマイシン及びその製造法
JPS5944392A (ja) ７−アミノ−セフアロスポラン酸の製造法
KR20010011248A (ko) 신생혈관 형성을 저해하는 신규 화합물 시스-푸마질린 및 이를함유하는 신생혈관 형성 저해 조성물
JPS59166090A (ja) 新抗生物質ｒｋ−８７−ａ物質及びその製造法
JPH04321681A (ja) 化合物ｅｓ−２４２−７およびｅｓ−２４２−８
JPH07149637A (ja) ジアシルグリセロールキナーゼ阻害剤
JPS58198484A (ja) 抗生物質ｘ−１４８７３ａ，ｇおよびｈ
JPS61151149A (ja) デイフアラニソ−ルａ及びその製造法
JPS58209986A (ja) 抗生物質ホスホノクロリンおよびその製造法

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AU CA JP US

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FR GB GR IT LU MC NL SE

DFPE Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101)
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 1992903746

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2101777

Country of ref document: CA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 08090138

Country of ref document: US

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 1992903746

Country of ref document: EP

WWG Wipo information: grant in national office

Ref document number: 1992903746

Country of ref document: EP