JPH04321681A - 化合物ｅｓ−２４２−７およびｅｓ−２４２−８ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ヴァーティシリウム（
Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ）属に属する微生物により生
産され、神経細胞保護作用、神経変性障害および痴呆症
の治療におけるＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸レセプ
ター拮抗作用を有する化合物ＥＳ−２４２−７およびＥ
Ｓ−２４２−８に関する。かかる拮抗剤は、卒中、低血
糖症、一過性虚血性脳発作、心肺手術または心停止時の
脳虚血、周産期窒息、てんかん、ハンチントン舞踏病、
アルツハイマー症、脳性まひ、オリーブ橋小脳萎縮症、
ならびに溺水、脊髄損傷などの無酸素症のような病的状
態における神経変性障害の予防及び治療のために使用さ
れる。

【０００２】

【従来の技術】微生物が生産するＮ−メチル−Ｄ−アス
パラギン酸レセプター拮抗作用を有する化合物として、
化合物ＥＳ−２４２−１〜５が本出願人により出願され
ている（特願平２−１３３３２２号）。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、優れ
たＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸レセプター拮抗作用
を有する新規生理活性物質を提供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明によれば、式（Ｉ
）

【０００５】

【化２】

【０００６】（式中、Ｒ１　およびＲ２　は異なって、
水酸基または水素を表わす）で表わされる化合物ＥＳ−
２４２−７およびＥＳ−２４２−８を提供することがで
きる。該化合物はヴァーティシリウム属に属する微生物
を培養することにより得ることができる。以下に本発明
を詳細に説明する。

【０００７】上記式（Ｉ）で表わされる化合物において
、Ｒ１　が水酸基およびＲ２　が水素である化合物をＥ
Ｓ−２４２−７、Ｒ１　が水素およびＲ２　が水酸基で
ある化合物をＥＳ−２４２−８とそれぞれ命名する。化
合物ＥＳ−２４２−７およびＥＳ−２４２−８の理化学
的性質を以下に示す。 （ｉ）ＥＳ−２４２−７ 性　　状　　：　　白色粉末 分子式　　：　　Ｃ３２Ｈ３４Ｏ９ 分子量　　：　　５６２ マススペクトル（ＥＩ）：　　ｍ／ｚ：５６２（Ｍ＋　
）高分解能マススペクトル（ＥＩ）： 実測値　　　　５６２．２１７１ 計算値　　　　５６２．２２００（Ｃ３２Ｈ３４Ｏ９）
融　　点　　：　　１５８〜１５９℃ 比旋光度　　：〔α〕Ｄ　２５＝＋１０８°（ｃ＝０．
１６，　クロロホルム） 赤外部吸収スペクトル：（ＫＢｒ錠剤）（ｃｍ−１）３
４１０，　１６２５，　１５８０，　１４６０，　１３
８０，　１３６０，　１３４５，　１２６０，　１２１
５，　１２０５，　１１５５，　１０９５ 紫外部吸収スペクトル：（メタノール）λｍａｘ　（ｎ
ｍ）　２３９　（ε　９３４００），　３０８（ε　９
７００），　３５２（ε８７００）１Ｈ−ＮＭＲスペク
トル：　（４００ＭＨｚ，　ＣＤＣｌ３）　　１．２６
（３Ｈ，　ｄ），　１．２８（３Ｈ，　ｄ），　２．５
１（１Ｈ，　ｂｓ），　２．５２（１Ｈ，　ｂｓ），　
３．００（１Ｈ，　ｄｄ），　３．４４（３Ｈ，　ｓ）
，　３．６２（１Ｈ，　ｑ），　３．７４（３Ｈ，ｓ＋
　１Ｈ），　３．７８（１Ｈ，　ｍ），　４．０５（３
Ｈ，　ｓ），　４．１６（３Ｈ，　ｓ），　４．７５（
１Ｈ，　ｄ），　４．８４（１Ｈ，　ｄ），　５．１２
（１Ｈ，　ｄ），　５．２７（１Ｈ，　ｄ），　５．９
７（１Ｈ，　ｄ），　６．１４（１Ｈ，　ｓ），　６．
４６（１Ｈ，　ｄ），　６．７１（１Ｈ，　ｓ），　９
．３９（１Ｈ，　ｓ），　９．４８（１Ｈ，ｓ） １３Ｃ−ＮＭＲ　スペクトル　（１００ＭＨｚ，　ＣＤ
Ｃｌ３）　１７．０（ｑ），　２１．６（ｑ），　３６
．３（ｔ），　５５．２（ｑ），　５６．３（ｑ）ｘ２
，　５７．１（ｑ），　６４．９（ｔ），　６５．１（
ｔ），　６６．４（ｄ），　７０．５（ｄ），　７３．
６（ｄ），　９３．５（ｄ），９８．０（ｄ），　９８
．５（ｄ），　１０９．６（ｓ），　１１０．５（ｓ）
，　１１４．３（ｓ），　１１４．４（ｓ），　１１４
．８（ｄ），　１１５．６（ｓ），　１２２．８（ｓ）
，　１３５．３（ｓ），　１３５．６（ｓ），　１３５
．７（ｓ），　１３６．３（ｓ），　１４９．３（ｓ）
，　１４９．５（ｓ），　１５４．５（ｓ），　１５７
．３（ｓ）　×２，　１５７．６（ｓ）呈色反応：Ｉ２
　に陽性

【０００８】（ｉｉ）ＥＳ−２４２−８性　　状　　：
　　白色粉末 分子式　　：　　Ｃ３２Ｈ３４Ｏ９ 分子量　　：　　５６２ マススペクトル（ＥＩ）：　　ｍ／ｚ：５６２（Ｍ＋　
）高分解能マススペクトル（ＥＩ）： 実測値　　　　５６２．２１８８ 計算値　　　　５６２．２２００（Ｃ３２Ｈ３４Ｏ９）
融　　点　　：　　１６２〜１６３℃ 比旋光度　　：　　〔α〕Ｄ　２５＝＋５°（ｃ＝　０
．１６，　　クロロホルム） 赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤）（ｃｍ−１）　３
４２０，　１６２５，　１６０５，　１５７５，　１４
５０，１３７５，　１３５５，　１３００，　１１９５
，　１１４５，　１１０５，　１０８０ 紫外部吸収スペクトル：（メタノール）λｍａｘ　（ｎ
ｍ）　２３９（ε１０３０００），　３１４（ε　１０
８００），　３４６（ε９３００）１Ｈ−ＮＭＲスペク
トル：　（４００ＭＨｚ，　ＣＤＣｌ３　）　１．１６
（３Ｈ，　ｄ），　１．３２（３Ｈ，　ｄ），　１．８
８（１Ｈ，　ｂｓ），　２．１３（１Ｈ，　ｄｄ），　
２．２８（１Ｈ，　ｄｄ），　３．４７（３Ｈ，　ｓ）
，３．６８（１Ｈ，　ｄｑ），　３．７２（３Ｈ，ｓ）
，３．７６（１Ｈ，　ｍ），　４．０４（３Ｈ，　ｓ＋
１Ｈ），　４．１７（３Ｈ，　ｓ），　４．７３（１Ｈ
，　ｄ），　４．８４（１Ｈ，　ｄ），５．１２（１Ｈ
，　ｄ），　５．２０（１Ｈ，　ｄ），　５．９９（１
Ｈ，　ｄ），　６．４０（１Ｈ，　ｄ），　６．５８（
１Ｈ，　ｓ），　６．７５（１Ｈ，　ｓ），　９．４１
（１Ｈ，　ｓ），　９．４５（１Ｈ，　ｓ） １３Ｃ−ＮＭＲ　スペクトル：　（１００ＭＨｚ，　Ｃ
ＤＣｌ３）　　１６．８（ｑ），　２１．５（ｑ），　
３４．５（ｔ），　５５．１（ｑ），　５６．３（ｑ）
ｘ２，　５７．０（ｑ），　６４．７（ｔ），　６５．
２（ｔ），　６８．１（ｄ），　７０．４（ｄ），　７
３．７（ｄ），９４．５（ｄ），　９６．８（ｄ），　
９８．０（ｄ），　１０９．３（ｓ），　１１０．６（
ｓ），　１１４．０（ｓ），　１１４．３（ｓ），　１
１５．３（ｓ）　，１１６．７（ｄ），　１２１．４（
ｓ），　１３４．９（ｓ），　１３５．１（ｓ），　１
３５．３（ｓ），　１３７．５（ｓ），　１４９．１（
ｓ），　１４９．４（ｓ），　１５４．０（ｓ），　１
５７．０（ｓ），　１５７．１（ｓ），　１５７．５（
ｓ）．呈色反応　　：Ｉ２　に陽性なお以上のデータは
、下記の機器により測定した。 融点：柳本製作所　　ミクロ融点測定装置赤外部吸収ス
ペクトル：島津製作所 ＩＲ−２７Ｇ　　赤外分光光度計 紫外部吸収スペクトル：日立製作所 ２００−２０型ダブルビーム分光光度計ＮＭＲスペクト
ル：ブルッカー社 ＡＭ−４００核磁気共鳴装置 旋光度：日本分光　　ＤＩＰ−３７０ デジタル旋光計 マススペクトル：日立製作所 Ｍ−８０Ｂ質量分析計 以上のデータよりＥＳ−２４２−７およびＥＳ−２４２
−８はそれぞれ新規化合物であることが判明した。

【０００９】つぎに、各種展開剤によるＥＳ−２４２−
７およびＥＳ−２４２−８の薄層クロマトグラフィーの
Ｒｆ値を第１表に示す。検出はヨウ素反応もしくは２５
３．７ｎｍの紫外線照射法により行った。

【００１０】

【表１】

【００１１】実験１ 薄層：キーゼルゲル６０Ｆ２５４　（メルク社製、Ａｒ
ｔ．５６２８） 展開溶媒：ヘキサン：アセトン＝３：２展開方法：室温
、上昇法、１５〜６０分実験２ 薄層：ＲＰ−１８（メルク社製、Ａｒｔ．１３７２４）
展開溶媒：１００％メタノール 展開方法：室温、上昇法、１５〜６０分つぎに、ＥＳ−
２４２−７およびＥＳ−２４２−８の生理活性について
、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸レセプター拮抗作用
を試験例で説明する。

【００１２】試験例１　　　　結合試験ラット脳に対す
るＮ−〔１−（２−チエニル）シクロヘキシル〕−３，
４−［３Ｈ］ピペリジンの試験管内結合性を、Ｖｉｇｎ
ｏｎら［ブレイン　　リサーチ（Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓｅ
ａｒｃｈ）２８０，　１９４−１９７　（１９８３）〕
の修正法に従い、ラット大脳破砕物を用いて測定し、結
合を５０％阻害するのに必要な濃度（ＩＣ５０）を算出
した。

【００１３】結果を第２表に示す。

【００１４】

【表２】

【００１５】つぎに、ＥＳ−２４２−７およびＥＳ−２
４２−８の製造法について説明する。ＥＳ−２４２−７
およびＥＳ−２４２−８は、ヴァーティシリウム属に属
し、ＥＳ−２４２−７、およびＥＳ−２４２−８生産能
を有する微生物を培地に培養し、培養液中にＥＳ−２４
２−７およびＥＳ−２４２−８を生成蓄積させ、該培養
物からＥＳ−２４２−７およびＥＳ−２４２−８を採取
することによって得ることができる。

【００１６】ＥＳ−２４２−７およびＥＳ−２４２−８
生産性微生物としてはヴァーティシリウム属に属し、Ｅ
Ｓ−２４２−７およびＥＳ−２４２−８生産能を有する
ものであればいずれの微生物でも用いることができる。 また、これらの菌株を人工的変異方法、たとえば紫外線
照射、Ｘ線照射、変異誘導剤処理などによって変異させ
た変異株あるいは自然的に変異した変異株などでもＥＳ
−２４２−７およびＥＳ−２４２−８生産能を有してい
れば本発明に用いることができる。具体的に好適な例と
しては、ヴァーティシリウム・スピーシーズ（Ｖｅｒｔ
ｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｓｐ．）　　ＳＰＣ−１５８９８株
があげられる。

【００１７】ヴァーティシリウム・スピーシーズ　　Ｓ
ＰＣ−１５８９８株の菌学的性質は次の通りである。 （１）肉眼的観察 麦芽エキス寒天培地を用いて、２０℃で培養したとき、
集落の直径は培養１０日目で１３〜１６ｍｍに達する。 集落表面は白色綿毛状で、裏面は、淡橙色を呈する。

【００１８】バレイショ・ブドウ糖寒天培地を用いて、
２０℃で培養したとき、集落の直径は培養１０日目で１
６〜１９ｍｍに達する。集落表面は白色綿毛状で、裏面
はくすんだ暗褐色を呈する。本菌株の至適生育温度は１
０〜３３℃であり、２０〜２８℃で最も良好に生育する
。 生育しうるｐＨは２〜１１で至適生育ｐＨは６〜８であ
る。 （２）麦芽エキス寒天培地上で培養したときの本菌株の
光学顕微鏡的観察菌糸は隔壁を有し、無色、平滑でよく
分岐する。菌糸が束状になることはほとんどない。フィ
アライドは単生あるいは気中菌糸に輪生する。しばしば
、気中菌糸から分生子柄が立ち上がり、１〜３回程度分
岐することもあり、その先端にフィアライドを３〜５本
形成する。フィアライドは、無色、平滑で、きり状ある
いは倒棍棒形を呈し、先端になるにしたがい細くなる。 フィアライドの長さは８〜２３μｍで、幅は最も広いと
ころで１．５〜２μｍであり先端は細く、幅０．３〜０
．５μｍである。分生子の個体発生様式は内生出芽型で
あり、分生子はフィアライド先端に集塊となって固まる
。分生子の長軸はフィアライドの縦軸に斜めあるいは直
角に位置する。フィアロ型分生子は、単細胞、無色、平
滑で、楕円形、長楕円形、倒卵形あるいは側面がくぼん
だ楕円形を呈し、その両端はわずかに丸みを帯びる。分
生子の長さは、３．５〜５μｍで、幅は１〜２μｍであ
る。厚膜胞子は形成されない。本菌株は、上述したアナ
モルフ（ａｎａｍｏｒｐｈ）のみ観測され、テレオモル
フ（ｔｅｌｅｏｍｏｒｐｈ）は観測されない。

【００１９】以上の菌学的性質から、本菌の分類学上の
位置をウォルター・ガムス（ＷａｌｔｅｒＧａｍｓ）著
の「セファロスポリウム−アールティゲ・シメルピルツ
ェ（ヒフォミセテス）（Ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｕｍ
−ａｒｔｉｇｅ　Ｓｃｈｉｍｍｅｌｐｉｌｚｅ（Ｈｙｐ
ｈｏｍｙｃｅｔｅｓ）　）」（Ｇｕｓｔａｖ　Ｆｉｓｃ
ｈｅｒ　Ｖｅｒｌａｇ，　Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，　１９
７１年）に従って検索した結果、本菌株は、ヴァーティ
シリウム属に属することが認められた。本菌株を”ヴァ
ーティシリウム・スピーシーズ（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉ
ｕｍ　ｓｐ．）ＳＰＣ−１５８９８”と命名し、ブダペ
スト条約にもとづき平成１年９月２０日付で微工研条寄
第２６０４号（ＦＥＲＭＢＰ−２６０４）として、工業
技術院微生物工業技術研究所に寄託した。

【００２０】微生物の培養に際しては糸状菌の培養に用
いられる通常の培養方法が適用される。用いられる培地
は菌の資化しうる炭素源、窒素源、無機物などを程よく
含有する培地であれば天然培地、合成培地いずれでも用
いられる。炭素源としては、グルコース、フラクトース
、シュークロース、スタビロース、澱粉、デキストリン
、マンノース、マルトース、糖蜜などの炭水化物、クエ
ン酸、リンゴ酸、酢酸、フマール酸などの有機酸、メタ
ノール、エタノールなどのアルコール、メタン、エタン
、プロパン、ｎ−パラフィンなどの炭化水素、グルタミ
ン酸などのアミノ酸あるいはグリセロールなどが用いら
れる。

【００２１】窒素源としては塩化アンモニウム、硫酸ア
ンモニウム、硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウムな
どのアンモニウム塩、アスパラギン酸、グルタミン、シ
スチン、アラニンなどのアミノ酸、尿素、ペプトン、肉
エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コーン・スチープ・リ
カー、大豆粉、綿実粕、大豆カゼイン、カザミノ酸、フ
ァーマメディアなどが用いられる。

【００２２】無機物としてはリン酸一水素カリウム、リ
ン酸二水素カリウム、リン酸二水素ナトリウム、硫酸マ
グネシウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、硫酸銅、硫酸
コバルト、硫酸亜鉛、パントテン酸カルシウム、モリブ
デン酸アンモニウム、硫酸アルミニウムカリウム、炭酸
バリウム、炭酸カルシウム、塩化コバルト、食塩などが
用いられる。

【００２３】その他必要に応じて培地にビタミン、サイ
アミンなど菌体の増殖あるいはＥＳ−２４２−７および
ＥＳ−２４２−８の生産性を促進する物質を加えること
もできる。用いられる微生物が特定の物質を要求する場
合は、生育に必要な物を加えることが必要である。

【００２４】培養は振盪培養法、通気攪拌培養法などに
より、温度２０−４０℃、ｐＨ中性付近で行われる。３
〜１５日の培養によって、ＥＳ−２４２−７およびＥＳ
−２４２−８の蓄積は最大に達する。培養物中に、蓄積
したＥＳ−２４２−７およびＥＳ−２４２−８を培養液
から単離採取するに際しては、通常の生理活性物質の培
養液から採取する方法が適用される。

【００２５】すなわち、アセトン、メタノールなどの有
機溶媒による菌体成分の抽出、ろ過、遠心分離などによ
る菌体除去、吸着樹脂、シリカゲル、シラナイズドシリ
カゲル、逆層シリカゲル、アルミニウム、セルロース、
ケイ藻土、ケイ酸マグネシウム、ゲルろ過剤、イオン交
換樹脂などを用いるカラムクロマトグラフィーもしくは
薄層クロマトグラフィーによる活性物質の吸脱着処理、
適当な溶媒系による分配などによってＥＳ−２４２−７
およびＥＳ−２４２−８は単離される。

【００２６】培養液からＥＳ−２４２−７およびＥＳ−
２４２−８を単離する一例は次の通りである。培養液を
ろ過もしくは遠心分離することによって培養液上清を得
る。得られた培養液上清を吸着樹脂で吸着後、適当な溶
媒を用いて溶出する。溶出液を減圧濃縮することにより
溶剤を除去し水溶液とする。ついで、この水溶液に水と
混和しない溶媒、例えば酢酸エチル、酢酸ブチル、ヘキ
サンなどを添加して抽出する。

【００２７】抽出液を減圧下濃縮し、シリカゲルカラム
クロマトグラフィーで処理して活性物質を吸着する。つ
いで、クロロホルムなどの適当な溶剤で溶出し、溶出液
を減圧下で濃縮し、逆相シリカゲルカラムクロマトグラ
フィーで活性画分を吸着し適当な溶媒で溶出することに
より、ＥＳ−２４２−７およびＥＳ−２４２−８が得ら
れる。

【００２８】上記精製工程中のＥＳ−２４２−７および
ＥＳ−２４２−８の検出は、蛍光剤入りシリカゲル（キ
ーゲルゼルＦ２５４　、メルク社製）を用いた薄層クロ
マトグラフィーに付し、ヨウ素反応または２５３．７ｎ
ｍの紫外線照射法により行う。

【００２９】

【実施例】実施例１ 種菌として、ヴァーティシリウム・スピーシーズ（Ｖｅ
ｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ　　ｓｐ．）ＳＰＣ−１５８９８
を用い、第一種培地としてＶ８野菜ジュース（キャンベ
ル社製）２０ｍｌ／ｄｌおよび炭酸カルシウム０．３ｇ
／ｄｌ（ｐＨ６．４）の組成からなる培地を用いた。種
菌１白金耳を２５０ｍｌ容三角フラスコに入れた上記第
一種培地４０ｍｌに植菌し、２５℃で４日間振盪培養し
た（第一種培養）。

【００３０】第一種培養により得られた培養液（第一培
養液）３０ｍｌを２ｌ容バッフル付三角フラスコに入っ
た３００ｍｌの第二種培地に植菌した。第二種培地の組
成は第一種培地の組成と同じである。第二種培養は２５
℃で２日間行った。得られた第二種培養液１．８ｌを２
００ｌ容培養タンクに入った１００ｌの第三種培地に植
菌した。第三種培地の組成は第一種培地の組成と同じで
ある。第三種培養は２５℃で２日間行った。得られた第
三種培養液１００ｌを２ｋｌ容培養タンクに入った１０
００ｌの主発酵培地に植菌した。主発酵培地として、グ
ルコース　２．０ｇ／ｄｌ、ペプトン２．０ｇ／ｄｌ、
ポテトスターチ２．０ｇ／ｄｌ、リン酸二水素カリウム
０．０５ｇ／ｄｌ、リン酸マグネシウム　０．０５ｇ／
ｄｌ（ｐＨ６．０）の組成からなる培地を用いた。主発
酵培養は２５℃で４日間攪拌培養により行った。

【００３１】得られた発酵終了液１０００ｌをケイ藻土
８０ｋｇを加え、ろ過した。分別した菌体に６００ｌの
ｎ−プロパノールを加え攪拌後再びろ過した。ろ液を１
２００ｌの水で希釈し、ダイアイオンＨＰ−２０（三菱
化成社製）カラム（６０ｌ）に通塔後、２００ｌの６０
％メタノールで洗浄し、アセトン２５０ｌで溶出した。 溶出画分を減圧濃縮し、２０ｌのヘキサンで抽出した。 水層にさらに１０ｌの酢酸エチルを加え２回抽出した。 酢酸エチル層を減圧濃縮したものの一部（３７．１ｇ）
を少量のクロロホルムに溶解し、クロロホルムを用いて
充填した２ｌのシリカゲルカラム（Ａｒｔ．７７３４、
メルク社製）の上端にのせ、クロロホルムで溶出した。 溶出液を１ｌずつ分取すると、フラクション番号４から
６にＥＳ−２４２−７が、フラクション番号７にＥＳ−
２４２−８が溶出された。フラクション番号４から６を
集め、減圧下で濃縮乾固すると７ｇの油状物質が得られ
た。この油状物質を少量のクロロホルムに溶解し、少量
のケイ藻土を加え減圧乾固したものをヘキサン：アセト
ン（９：１）を用いて充填したシリカゲルカラム（ワコ
ーゲル、和光純薬社製）５００ｍｌの上端にのせ、ヘキ
サン：アセトン（８：２）混合溶液で洗浄した後、６ｌ
の酢酸エチルで溶出した。溶出液を濃縮乾固すると１．
８ｇの褐色油状物が得られた。これを、少量の酢酸エチ
ルに溶解した後、４℃で放置すると無色結晶が生成した
。 この結晶をろ過により除去した後、結晶母液を濃縮乾固
し少量のケイ藻土に吸着し、ヘキサン：アセトン（７：
３）で充填した３００ｍｌのシリカゲルカラム（Ａｒｔ
．９３８５、メルク社製）の上端にのせヘキサン：アセ
トン（７：３）で溶出した。溶出液を１７ｍｌずつ分取
すると、フラクション番号５１から６７にＥＳ−２４２
−７が溶出された。この画分を集め、同様のシリカゲル
カラムクロマトグラフィー３００ｍｌに付し、ＥＳ−２
４２−７を含む画分を濃縮乾固し、７５％メタノールで
充填した１５０ｍｌの逆相シリカゲルカラム（ＹＭＣ−
ＯＤＳ、山村化学社製）の上端に同担体に吸着させた状
態でのせ、７５％メタノ−ルで溶出した。溶出の際に、
溶出液の２４２ｎｍの吸光度を分光光度計（ＵＶＩＤＥ
Ｃ−１００−ＩＩＩ、日本分光社製）で検出しながら吸
光度のピ−クを分取すると親ピ−クのあとに出現する小
さなピ−クにＥＳ−２４２−７が溶出された。この画分
を濃縮乾固するとＥＳ−２４２−７の白色粉末が６．３
ｍｇ得られた。

【００３２】また、最初のシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーで得られたＥＳ−２４２−８をふくむ画分（フ
ラクション番号７）を濃縮乾固すると１３．５ｇの油状
物が得られた。これを少量のケイ藻土に吸着させた後、
ヘキサン：アセトン（７：３）を用いて充填したシリカ
ゲルカラム（Ａｒｔ．９３８５、メルク社製）６００ｍ
ｌの上端にのせ、ヘキサン：アセトン（７：３）で溶出
した。 溶出液を２０ｍｌずつ分取すると、フラクション番号１
４０から２１０にＥＳ−２４２−８が溶出された。この
画分を集め、同様にシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー２００ｍｌに付し、ＥＳ−２４２−８を含む画分を濃
縮乾固すると５４．４ｍｇ得られた。これを７５％メタ
ノールを用いて充填した１５０ｍｌの逆相シリカゲルカ
ラム（ＹＭＣ−ＯＤＳ、山村化学社製）の上端に、同担
体に吸着させた状態でのせ、７５％メタノールで溶出し
た。溶出の際に、溶出液の３０５ｎｍの吸光度を分光光
度計（ＵＶＩＤＥＣ−１００−ＩＩＩ、日本分光社製）
を用いて検出すると２種の独立したピ−クが得られ、そ
れぞれを分取した。遅れて溶出されるピ−クを集めて濃
縮するとＥＳ−２４２−８の無色粉末が２７ｍｇ得られ
た。

【００３３】

【発明の効果】本発明によれば、Ｎ−メチル−Ｄ−アス
パラギン酸レセプター拮抗作用を有する化合物ＥＳ−２
４２−７およびＥＳ−２４２−８を提供することができ
る。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　式（Ｉ） 【化１】 （式中、Ｒ１　およびＲ２　は異なって、水酸基または
   水素を表わす）で表わされる化合物ＥＳ−２４２−７お
   よびＥＳ−２４２−８。