UA127831C2 - Капсид аденоасоційованого вірусу та його застосування для інгібування ангіогенезу - Google Patents

Капсид аденоасоційованого вірусу та його застосування для інгібування ангіогенезу Download PDF

Info

Publication number
UA127831C2
UA127831C2 UAA202003841A UAA202003841A UA127831C2 UA 127831 C2 UA127831 C2 UA 127831C2 UA A202003841 A UAA202003841 A UA A202003841A UA A202003841 A UAA202003841 A UA A202003841A UA 127831 C2 UA127831 C2 UA 127831C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
amino acid
sho
aam
acid sequence
shi
Prior art date
Application number
UAA202003841A
Other languages
English (en)
Inventor
Девід Керн
Девид Керн
Мелісса Коттерман
Мелисса КОТТЕРМАН
Девід Шаффер
Девид Шаффер
Пол Шиманьский
Пітер Френсіс
Питер Френсис
Original Assignee
4Д Молекьюлар Терапьютикс Інк.
4Д Молекьюлар Терапьютикс Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 4Д Молекьюлар Терапьютикс Інк., 4Д Молекьюлар Терапьютикс Инк. filed Critical 4Д Молекьюлар Терапьютикс Інк.
Publication of UA127831C2 publication Critical patent/UA127831C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0008—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0075—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the delivery route, e.g. oral, subcutaneous
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14145—Special targeting system for viral vectors

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Винахід стосується варіантів капсидних білків аденоасоційованого вірусу (AAV), що мають одну або більше модифікацій в амінокислотній послідовності, відносно вихідного капсидного білка AAV, які, коли присутні у віріоні AAV, додають збільшеної інфекційності для одного або більше типів клітин сітківки, порівняно з інфекційністю для клітин сітківки віріона AAV, що містить немодифікований вихідний капсидний білок AAV. Даний винахід також стосується рекомбінантних віріонів AAV і їх фармацевтичних композицій, що містять варіант капсидного білка AAV, як описано в даному описі, способів отримання цих варіантів капсидних білків і віріонів rAAV, і способів застосування цих капсидних білків і віріонів rAAV в дослідницькій і в клінічній практиці, наприклад, в доставці послідовності нуклеїнової кислоти в одну або більше клітин сітківки для лікування порушень і захворювань сітківки.

Description

білка ААМ, як описано в даному описі, способів отримання цих варіантів капсидних білків і віріонів ГААМ, і способів застосування цих капсидних білків і віріонів ГААМ в дослідницькій і в клінічній практиці, наприклад, в доставці послідовності нуклеїнової кислоти в одну або більше клітин сітківки для лікування порушень і захворювань сітківки.
ПЕРЕХРЕСНЕ ПОСИЛАННЯ НА СПОРІДНЕНІ ЗАЯВКИ
ІЇО0О1| По даній заявці заявляється пріоритет тимчасових заявок на патент США Мо. 62/590976, поданої 27 листопада 2017 р. і 62/664726, поданої 30 квітня 2018 р., повний зміст кожної з яких наведений в даному описі як посилання.
ВКЛЮЧЕННЯ ЯК ПОСИЛАННЯ СПИСКУ ПОСЛІДОВНОСТЕЙ, ПРЕДСТАВЛЕНОГО В
ФОРМІ ТЕКСТОВОГО ФАЙЛУ
І002| Список послідовностей представлений з даним описом в формі текстового файлу "090400-501 0-М/О-зеад-Ії5їіпдіх, створеного 26 листопада 2018 р. і що має розмір 238 Кб.
Повний зміст текстового файлу наведений в даному описі як посилання.
ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ, ДО ЯКОЇ НАЛЕЖИТЬ ВИНАХІД
ІЇ0ОО3| Винахід, описаний в даному описі, стосується, головним чином, області віріонів аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містять варіанти капсидних білків, і отримання таких варіантів капсидів з використанням способів спрямованої еволюції.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
Ї004| Спадкові захворювання сітківки включають велику групу гетерогенних генетичних захворювань, що вражають приблизно 1 на 3000 людей (більше 2 мільйонів людей у всьому світі), і є основним джерелом тяжкої втрати зору або сліпоти. Комплексні, багатофакторні захворювання сітківки, такі як волога вікова дегенерація жовтої плями (мАМО) і діабетична ретинопатія (ОР), зачіпають навіть більше індивідуумів, де 1,7 мільйонів американців в цей час живуть з тяжкою втратою центрального зору, асоційованою з жАМО, і майже одна третина дорослих у віці старше 40 років з діабетом мають значні порушення зору. Ці захворювання, як правило, асоційовані з дисфункцією або загибеллю одного або декількох типів клітин сітківки, в деяких випадках, через відсутність експресії або функцію ключового білка, наприклад, ЕРЕб65 при ГСА2, в інших випадках, через мутації генів, які створюють токсичні продукти генів, наприклад, домінантних мутацій, що впливають на згортання білка родопсину, або в інших випадках, через зміни фізіології сітківки, індуковані ектопічної експресією білка, наприклад,
МЕСЕ при МАМО.
ЇОО5| Одним способом задоволення цієї великої незадоволеної медичної необхідності є опосередкована аденоасоційованим вірусом (ААМ) генотерапія, при якій рекомбінантний
Зо аденоасоційований вірус (ГААМ) використовують для доставки гена в один або більше типів клітин в сітківці, наприклад, для заміни відсутнього гена, для корекції домінантно дефектного гена або для забезпечення матриці для безперервної білкової терапії. Хоча успіхи клінічної генотерапії на основі ААМ ростуть, вона все ще має недоліки, застосовно до властивостей вірусного вектора, включаючи, наприклад, націлювання на бажані клітини сітківки 3 високою ефективністю. Наприклад, ідентифіковано і охарактеризовано множину гомологічних серотипів
ААМ приматів і множину серотипів нелюдиноподібних приматів, де ААМ2 є найбільш добре охарактеризованим серед серотипів ААМ і першим призначеним для адаптації як носій для доставки генів в око. Однак, не опубліковано, що ці ААМ (включаючи ААМ2) є ефективними для трансдукції більш глибоких типів клітин сітківки при доставці за допомогою введення в скловидне тіло. Відповідно, в даній галузі існує необхідність в нових варіантах ААМ з чудовою здатністю до трансдукції, які можуть забезпечувати більш ефективну доставку гена в клітини сітківки для лікування захворювання очей. У даній галузі існує необхідність в таких варіантах
ААМ, які мають поліпшений профіль трансдукції для сітківки - в деяких випадках, широкий, в інших випадках, переважний для конкретних типів клітин сітківки, - порівняно з ААМ дикого типу і варіантами ААМ, як відомо в даній галузі.
І006Ї Природний ААМ являє собою одноланцюжковий ДНК-вірус, що містить три відкриті рамки зчитування, гер, сар і аар. Перший ген, гер, кодує чотири білки, необхідні для реплікації геному (Вер78, Керб8, Кер52 і Кер40), другий, сар, експресує три структурні білки (МР1-3), які збираються з формуванням вірусного капсиду, і третій, аар, експресує активуючий зборку білок (ААР), необхідний для зборки капсиду. ААМ залежить від присутності вірусу-помічника, такого як аденовірус або вірус герпесу, для активної реплікації. При відсутності вірусу-помічника, ААМ переходить в латентний стан, в якому його геном підтримується епісомно або інтегрує в хромосому хазяїна в локусі ААМ51.
Ї0О0О7| Способи спрямованої еволюції іп мійго і іп мімо можна використовувати для відбору варіантів ААМ, що забезпечують поліпшення, порівняно з сучасними векторами для доставки генів на основі ААМ. Такі способи спрямованої еволюції відомі в даній галузі і описані, наприклад, в Публікації РСТ МО 2014/194132 і в Коцептап 5 Зспапйег (Маїиге Кеміеєм/ Сепеїісв,
АОР, рибіївней опіїпе 20 Мау 2014; дої: 10.1038/пг93742), повний зміст обох з яких наведений в даному описі як посилання. Спрямована еволюція являє собою спосіб конструювання капсиду, бо що імітує природну еволюцію за допомогою чергованих циклів процесів внесення генетичної різноманітності і відбору, таким чином, дозволяючи накопичення переважних мутацій, яке все більше поліпшує функцію біомолекули, такої як віріон на основі ААМ. У цьому способі, в гени сар ААМ дикого типу вносять різноманітність для отримання великих геномних бібліотек, які упаковують для отримання бібліотек вірусних частинок, і селективний тиск прикладають для виділення унікальних варіантів з чудовими фенотипами, які можуть долати бар'єри для доставки генів.
І0О08| Варіанти ААМ описані, наприклад, в Патентах США номера 9193956; 9186419; 8632764; 8663624; 8927514; 8628966; 8263396; 8734809; 8889641; 8632764; 8691948; 8299295; 8802440; 8445267; 8906307; 8574583; 8067015; 7588772; 7867484; 8163543; 8283151; 8999678; 7892809; 7906111; 7259151; 7629322; 7220577; 8802080; 7198951; 8318480; 8962332; 7790449; 7282199; 8906675; 8524446; 7712893; 6491907; 8637255; 7186522; 7105345; 6759237; 6984517; 6962815; 7749492; 7259151; і 6156303; Публікаціях заявок на патент США номера 2013/0295614; 2015/0065562; 2014/0364338; 2013/0323226; 2014/0359799; 2013/0059732; 2014/0037585; 2014/0056854; 2013/0296409; 2014/0335054 2013/0195801; 2012/0070899; 2011/0275529; 2011/0171262; 2009/0215879; 2010/0297177; 2010/0203083; 2009/0317417; 2009/0202490; 2012/0220492; 2006/0292117; ії 2004/0002159; Публікаціях європейських заявок на патент номера 2692731 А1; 2383346 В1; 2359865 В1; 2359866 В1; 2359867 В1; і 2357010 В1; 1791858
В1; 1668143 81; 1660678 В1; 1664314 В1; 1496944 В1; 1456383 В1; 2341068 В1; 2338900 В1; 1456419 В1; 1310571 В1; 1456383 В1; 1633772 В1; і 1135468 ВІ; і Міжнародних публікаціях (РСТ) номера УМО 2014/124282; УМО 2013/170078; МО 2014/160092; УМО 2014/103957;. УМО 2014/052789; МО 2013/174760; УМО 2013/123503; МО 2011/038187; ії МО 2008/124015;. МО 2003/054197; однак в жодному з цих посилань не описані варіанти здійснення і/або ознаки, і/або склади структур варіантів ААМ, описаних в даному описі.
ІОО0О9Ї|Ї Зміст всіх документів і посилань, процитованих в даному описі і в процитованих
Патентних документах, наведений в даному описі як посилання.
СУТЬ ВИНАХОДУ
ЇО0О10| Даний винахід стосується варіантів капсидних білків аденоасоційованого вірусу (ААМ), що мають одну або більше модифікацій в амінокислотній послідовності, відносно вихідного капсидного білка ААМ, які, коли вони присутні у віріоні ААМ, додають збільшеної
Зо інфекційності для одного або більше типів клітин сітківки, порівняно з інфекційністю для клітин сітківки віріосна ААМ, що містить немодифікований вихідний капсидний білок ААМ. Даний винахід також стосується рекомбінантних віріонів ААМ і їх фармацевтичних композицій, що містять варіант капсидного білка ААМ, як описано в даному описі, способів отримання варіантів капсидних білків і віріонів гААМ, і способів використання цих капсидних білків і віріонів ГААМ в дослідницькій і в клінічній практиці, наприклад, в доставці послідовності нуклеїнової кислоти в одну або більше клітин сітківки для лікування порушень і захворювань сітківки.
ЇОО11| У деяких аспектах опису, даний винахід стосується варіантів капсидних білків аденоасоційованого вірусу (ААМ), ці варіанти капсидних білків ААМ, мають одну або більше модифікацій в амінокислотній послідовності, порівняно з вихідним капсидом ААМ, які, коли присутні у віріоні ААМ, додають збільшеної інфекційності для одного або більше типів клітин сітківки (наприклад, фоторецепторної клітини (наприклад, паличок; колбочок), гангліонарної клітини сітківки (КОС), гліальної клітини (наприклад, гліальної клітини Мюллера, мікрогліальної клітини), біполярної клітини, амакринової клітини, горизонтальної клітини і/або клітини пігментного епітелію сітківки (КРЕ)), порівняно з інфекційністю для клітин сітківки віріона ААМ, що містить вихідний капсидний білок ААМ, що не містить модифікацію амінокислотної послідовності. 0012) У деяких аспектах, даний винахід стосується віріонів рекомбінантного ААМ (ГААМ), ці віріони гААМ містять варіант капсидного білка, як описано в даному описі, де віріони ТААМ мають збільшену інфекційність для одного або більше типів клітин сітківки (наприклад, фоторецепторної клітини (наприклад, паличок; колбочок), гангліонарної клітини сітківки (КОС), гліальної клітини (наприклад, гліальної клітини Мюллера, мікрогліальної клітини), біполярної клітини, амакринової клітини, горизонтальної клітини і/або клітини пігментного епітелію сітківки (ЕРЕ)), порівняно з інфекційністю для клітин сітківки віріона ААМ, що містить відповідний немодифікований вихідний капсидний білок ААМ. У деяких варіантах здійснення, віріон Т АДАМ має збільшену інфекційність для всіх клітин сітківки, порівняно з віріоном ААМ, що містить вихідний капсидний білок ААМ. У інших варіантах здійснення, віріон гААМ має збільшену інфекційність для конкретних типів клітин сітківки, але не для інших, порівняно з віріоном ААМ, що містить вихідний капсидний білок ААМ. Іншими словами, віріон гГААМ має збільшену інфекційність, яка є переважною для конкретних типів клітин сітківки, але не для інших, 60 наприклад, гААМ має, переважно, збільшену інфекційність для одного або більше типів клітин,
які вибрані з фоторецепторних клітин, гангліонарних клітин сітківки, гліальних клітин, біполярних клітин, амакринових клітин, горизонтальних клітин і/або клітин пігментного епітелію сітківки (ЕРЕ), але не має збільшену інфекційність для всіх типів клітин. 0013) У деяких варіантах здійснення, віріон гААМ містить гетерологічну нуклеїнову кислоту.
У деяких таких варіантах здійснення, гетерологічна нуклеїнова кислота кодує РНК, яка кодує поліпептид. У інших таких варіантах здійснення, гетерологічна послідовність нуклеїнової кислоти кодує РНК яка не кодує поліпептид, наприклад, гетерологічна послідовність нуклеїнової кислоти кодує засіб для РНК-інтерференції, напрямну РНК для нуклеази і т. д. 0014) Даний винахід також стосується фармацевтичних композицій, що містять інфекційні віріони ГААМ, що розглядаються, і фармацевтично прийнятний носій.
ЇО015| Даний винахід також стосується застосування віріона гААМ, що містить варіант капсидного білка, як описано в даному описі, в способі доставки гетерологічної нуклеїнової кислоти в клітину-мішень (таку як клітина сітківки) за допомогою наведення клітини-мішені в контакт з віріоном гААМ. У деяких варіантах здійснення, клітина-мішень знаходиться іп мімо, наприклад, в око індивідуума, який потребує лікування захворювання очей. У інших варіантах здійснення, клітина-мішень знаходиться іп міїго. 0016) Даний винахід також стосується способів лікування захворювання очей за допомогою введення суб'єкту, який потребує такого лікування, ефективної кількості віріонів ГААМ, що містять варіант капсидного білка, як описано в даному описі, або фармацевтичній композиції, що містить ефективну кількість віріонів гГААМ.
ЇОО17| Даний винахід також стосується виділеної нуклеїнової кислоти, що містить послідовність, що кодує варіант капсидного білка ААМ, як описано в даному описі, і клітини- хазяїна, що містить виділену нуклеїнову кислоту. У інших варіантах здійснення, виділена нуклеїнова кислота і/або виділена клітина-хазяїн містить гААМ. 0018) У деяких аспектах, варіант капсидного білка ААМ містить вставку від приблизно 5 амінокислот до приблизно 20 амінокислот ("гетерологічний пептид" або "пептидну вставку") в
СН-петлі капсидного білка, порівняно з відповідним вихідним капсидним білком ААМ, де варіант капсидного білка, коли присутній у віріоні АДАМ, додає збільшеної інфекційності для клітини сітківки порівняно з інфекційністю для клітини сітківки віріона ААМ, що містить відповідний вихідний капсидний білок ААМ. У деяких варіантах здійснення, пептид містить послідовність, вибрану з групи, яка складається з ОАОТТКМ (5ЕО ІЮ МО:13), ІБООТКН (5ЕО І МО 14),
АБОБТКА (ЗЕО ІЮ МО:15), МОСУТКТ (ЗЕО ІЮ МО:16), НОІТКМІ (ЗЕО І МО:17), НРОТТКМ (ЗЕО
ІО МО:18), НООТТКМ (5ЕО ІЮ МО:19), МКТТМКО (5ЕО ІЮ МО:20), ІЗМЕМЕН (5ЕО ІЮО МО:21),
ОАМАМЕМ (5ЕО 10 МО:22), ООКЗКМІО (5ЕО ІЮ МО:23), ТМАТ5РО (5ЕО І МО:24), РМЗТНОаЗ (ЗЕО І МО:25), КОВАРБТ (5ЕО ІЮ МО:С26), ГАОАОТТКМА (5ЕО ІЮО МО:27), І АІЗВОТКНА (5ЕО
ІО МО:28), І СІБООТКНА (5ЕО ІО МО:С29), І ААБО5ТКАА (ЗЕО ІЮ МО:30), ГГ АМООМТКТА (5ЕО І
МО:З31), ГАНОІТКМІА (5ЕО ІЮ МО:32), ГАНРОТТКМА (5ЕО ІЮ МО:33), ГГ АНООТТКМА (5ЕО І
МО:34), ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:35), І РІЗМЕМЕНА (5ЕО ІО МО:З36), І РОАМАМЕМА (5ЕО 10
МО:37), ГАСКОКМІБА (5ЕО ІЮ МО:38), І АТМАТ5ОРОА (5ЕО ІЮ МО:39), ГАРМЗТНаБЗА (5ЕО І
МО:40) ії ГАКОКАРБТА (5ЕО ІЮО МО:41). У деяких варіантах здійснення, пептид в основному складається з послідовності, вибраної з групи, яка складається з ОАДОТТКМ (ЗЕО ІЮО МО:13),
ІЗООТКН (5ЕО І МО:14), АБОЗТКА (ЗЕО 10 МО:15), МОЮМТКТ (5ЕО 10 МО:16), НОІЇТКМІ (ЗЕО
ІО МО 17), НРОТТКМ (5ЕО ІЮ МО:18), НООТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:19), МКТТМКО (5ЕО І МО:20),
ІЗМЕМЕН (ЗЕО І МО:21), ОАМАМЕМ (5ЕО І МО:22), ОК5ОКМІО (5ЕО І МОс23), ТМАТ5РО (ЗЕО ІЮ МО:24), РІМЗТНИаБ5З (5ЕО І МО:25), КОВАРБТ (5ЕО ІЮО МО:26), Г АОАОТТКМА (5ЕО І
МО:27), ГАІБВОТКНА (5ЕО І МО:28), ГаІ5РОТКНА (5ЕО І МО:29), ГААБОЗТКАА (5ЕО 10
МО:30), ГАМОЮУТКТА (5ЕО ІЮ МО:З31), ГГ АНОІТКМІА (5ЕО ІО МО:32), ГГ АНРОТТКМА (5ЕО 1
МО:33), ГАНОЮТТКМА (5ЕО І МО:34), | АМКТТМКОА (5ЕО І МО:З35), І РІЗМЕМЕНА (5ЕО 10
МО:36), ГРОАМАМЕМА (5ЕО ІЮ МО:37), ГАЯКЗКМІБА (5ЕО ІЮО МО:38), ГГ АТМАТ5РОА (5ЕО І
МО:39), ГАРМЗТНОЗА (ЗЕО ІЮ МО:40) і ГАКОКАРЗТА (ЗЕО ІЮО МО:41). У деяких аспектах, варіант капсидного білка ААМ містить одну або більше амінокислотних замін, порівняно з відповідним вихідним капсидним білком ААМ, де варіант капсидного білка, коли присутній у віріоні ААМ, додає збільшеної інфекційності для клітини сітківки порівняно з інфекційністю для клітини сітківки віріона ААМ, що містить відповідний вихідний капсидний білок ААМ.
І0019| У споріднених аспектах, варіант капсидного білка ААМ містить пептидну вставку і одну або більше амінокислотних замін, порівняно з відповідним вихідним капсидним білком
ААМ, де варіант капсидного білка, коли присутній у віріоні ААУ, додає збільшеної інфекційності для клітини сітківки порівняно з інфекційністю для клітини сітківки віріона ААМ, що містить відповідний вихідний капсидний білок ААМ.
ІОО2О| Даний винахід стосується також варіанту капсидного білка ААМ, що містить гетерологічний пептид ГАІБООТКНА (5ЕО ІО МО:28) і заміну РЗ4А, відносно ААМ2. У споріднених варіантах здійснення, даний винахід стосується інфекційного рекомбінантного
ААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, щонайменше на 9095 ідентичний послідовності, яка вказана як 5ЕО ІО МО:42, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність, що кодує інгібітор МЕСЕ, переважно, інгібітор МЕСРа, і фармацевтичної композиції, яка містить їх.
У деяких варіантах здійснення, гетерологічна послідовність нуклеїнової кислоти, яка кодує інгібітор МЕСЕ, вибрана з послідовності, що кодує афліберцепт, ранібізумаб, одноланцюжковий варіант ранібізумабу (зс-ранібізумаб ІН або НІ), бролуцизумаб, 5с- ранібізумаб, злитий з доменом Ес да (з5с-ранібізумаб-Рс), або бролуцизумаб, злитий з доменом Ес Ідс (бролуцизумаб-Ес). У споріднених варіантах здійснення, рекомбінантний АДАМ містить гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить дві або більше послідовностей, кожна з яких кодує інгібітор МЕСсСРа (наприклад, першу послідовність, що кодує афліберцепт, і другу послідовність, що кодує бролуцизумаб). У переважних варіантах здійснення, гетерологічна послідовність нуклеїнової кислоти має послідовність з будь-якої з ФЕО ІЮ МО:65, 67, 69, 70, 72, 74, 76 або послідовність, щонайменше на 9095 ідентичну їй. У інших споріднених варіантах здійснення, даний винахід стосується способу для лікування пацієнта із захворюванням очей, асоційованим із збільшеними внутрішньоочними рівнями МЕСЕа, що включає введення пацієнту, переважно, за допомогою ін'єкції в скловидне тіло, ефективної кількості інфекційного рекомбінантного ААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, щонайменше на 9095 ідентичний послідовності, яка вказана як 5ЕО ІЮ МО:42, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність, що кодує інгібітор МЕСЕ.
ІЇ0021| Даний винахід стосується також варіанту капсидного білка ААМ, що містить гетерологічний пептид ГАІЗВОТКНА (ЗЕО ІЮ МО:28) і амінокислотні заміни М312К, М4490,
М5515, ІбО9ВМУ, і 17350), відносно ААМ2. (0022 Даний винахід стосується також способів отримання і/або доставки гААМ, що містить варіант капсиду ААМ, як описано в даному описі. Крім того, даний винахід стосується наборів, що містять гААМ, що містить варіант капсиду ААМ, як описано в даному описі, і для використання в способах, описаних в даному описі.
Зо І0023| У інших варіантах здійснення, віріон ААМ, що містить варіант капсидного білка, в попередніх абзацах, може включати будь-який з попередніх або описаних згодом варіантів здійснення. Дійсно, зрозуміло, що конкретні ознаки винаходу, які, для ясності, описані в контексті окремих варіантів здійснення, можуть бути також представлені в комбінації в одному варіанті здійснення. І навпаки, різні ознаки винаходу, які, скорочено, описані в контексті одного варіанту здійснення, можуть бути також представлені окремо або в будь-якій відповідній субкомбінації. Всі комбінації варіантів здійснення, що стосуються винаходу, конкретно включені у винахід і описані в даному описі, точно також, як якби всі без виключення комбінації були індивідуально і явно описані. Крім того, всі субкомбінації різних варіантів здійснення і їх елементів також конкретно включені у винахід і описані в даному описі, точно також, як якби всі без виключення субкомбінації були індивідуально і явно описані в даному описі.
І0024| Суть винаходу не призначена ні для визначення формули винаходу, ні для обмеження об'єму винаходу яким-небудь чином.
І0025) Інші ознаки і переваги винаходу, описаного в даному описі, стануть очевидними з наступних фігур, детального опису і формули винаходу.
І0026| До ознайомлення з описом даних способів і композицій, потрібно розуміти, що цей винахід не обмежений конкретними описаними способом або композицією, і таким чином, може мати варіанти. Потрібно розуміти також, що термінологія, що використовується в даному описі, призначена тільки для мети опису конкретних варіантів здійснення, і не призначена для обмеження, оскільки об'єм даного винаходу обмежений тільки прикладеною формулою винаходу.
І0027| Описаний в даному описі винахід проілюстрований на фігурах і в описі. Однак, в той час як конкретні варіанти здійснення проілюстровані на фігурах, не існує наміру обмеження винаходу проілюстрованими і/або описаними конкретними варіантом або варіантами здійснення. Замість цього, описаний в даному описі винахід призначений для включення всіх модифікацій, альтернативних конструкцій і еквівалентів, що входить в зміст і об'єм винаходу.
Таким чином, фігури призначені для ілюстрації, а не для обмеження. 0028) Коли представлений діапазон значень, зрозуміло, що кожне проміжне значення, до десятої одиниці нижньої межі, якщо контекст явно не вимагає іншого, між верхньою і нижньою межами цього діапазону, також конкретно описане. Кожний менший діапазон між будь-яким бо значенням або проміжним значенням у вказаному діапазоні і будь-яким іншим вказаним або проміжним значенням в цьому вказаному діапазоні включений у винахід. Верхня і нижня межі цих менших діапазонів можуть бути, незалежно, включені або виключені в діапазоні, і кожний діапазон, в якому будь-яка, ніяка або обидві межі включені в менші діапазони, також включений у винахід, з урахуванням будь-якої конкретно виключеної межі у вказаному діапазоні. Коли вказаний діапазон включає одну або обидві межі, діапазони, що виключають будь-яку або обидві з цих включених меж, також включені у винахід. 0029) Якщо не вказане інше, всі технічні і наукові терміни, що використовуються в даному описі, мають таке ж значення, яке є загальноприйнятим для фахівця в галузі, до якої належить цей винахід. Хоча будь-які способи і матеріали, схожі або еквівалентні з описаними в даному описі, можна використовувати в практиці або тестуванні даного винаходу, в цей час описані деякі потенційні і переважні способи і матеріали. Зміст всіх публікацій, згаданих в даному описі, наведений в даному описі як посилання для розкриття і опису способів і/або матеріалів, в зв'язку з якими процитовані публікації. Зрозуміло, що даний опис має перевагу перед описом в будь-якій включеній публікації в тій мірі, в якій присутня невідповідність.
І0030| Як стане очевидним для фахівця в даній галузі при читанні цього опису, кожний з індивідуальних варіантів здійснення, описаних і проілюстрованих в даному описі, має дискретні компоненти і ознаки, які можна легко відділяти від ознак будь-якого з декількох інших варіантів здійснення або комбінувати з ними, без відхилення від об'єму або змісту даного винаходу.
Будь-який згаданий спосіб можна здійснювати в порядку згадки подій або в будь-якому іншому порядку, який є логічно можливим.
ЇОО31| Потрібно зазначити, що в даному описі і в доданій формулі винаходу неконкретизовані і конкретизовані форми однини включають об'єкти посилання множини, якщо контекст явно не вимагає іншого. Таким чином, наприклад, посилання на "рекомбінантний віріон АДУ" включає множину таких віріонів, і посилання на "фоторецепторну клітину" включає посилання на одну або більше фоторецепторних клітин і її еквівалентів, відомих фахівцям в даній галузі, і т.д. Крім того, потрібно зазначити, що пункти формули винаходу можуть бути складені для виключення будь-якого необов'язкового елемента. Таким чином, це твердження призначене, щоб служити попередньою основою для використання такої виключаючої термінології, як "єдино", "тільки" і т.п., в зв'язку з переліком елементів пункту формули винаходу, або для використання "негативного" обмеження. 00321 Публікації, що обговорюються в даному описі, представлені тільки по їх описах до дати подачі даної заявки. Нічого в цьому описі не треба розглядати як допущення, що даний винахід неправомірно датувати заднім числом таку публікацію на основі попереднього винаходу. Крім того, представлені дати публікації можуть відрізнятися від фактичних дат публікації, які можуть потребувати незалежного підтвердження.
КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ
0033) Винахід більш зрозумілий з детального опису, який йде далі, при читанні в поєднанні з супровідними кресленнями. Файл патенту або заявки містить щонайменше одне креслення, виконане в кольорі. Копії публікації цього патенту або патентної заявки з кольоровим кресленням(кресленнями) будуть представлені патентним відомством після запиту і оплати необхідної виплати. Потрібно зазначити, що, відповідно до загальноприйнятої практики, різні ознаки фігур наведені не в масштабі. Навпаки, вимірювання різних ознак довільно збільшені або зменшені для ясності. У креслення включені наступні фігури.
І0034| На фігурі 1 показані варіанти здійснення способу спрямованої еволюції. На стадії (а) показане отримання бібліотеки вірусних капсидів, що включає комбінації способів мутагенезу
ДНК і генів сар. На стадії (Б) показана упаковка вірусів таким чином, що кожна вірусна частинка складена з мутантного капсиду, який оточує ген сар, що кодує цей капсид, і очищена. Бібліотеку капсидів потім піддають селективному тиску іп мйго або іп мімо. У цьому аспекті способу спрямованої еволюції, тканини або клітинний матеріал, які представляють інтерес, збирають для виділення варіантів ААМ, які успішно інфікували цю мішень, і успішні віруси виділяють. На стадії (с) показане збагачення успішних клонів зі стадії 1 за допомогою повторюваного відбору.
На стадії (а) показане збагачення відібраних на стадії 2 генів сар, підданих стадіям повторного внесення різноманітності і додаткового відбору для повторюваного збільшення пристосованості вірусу. На стадії (е) показані варіанти, ідентифіковані як кращі в ході стадій відбору вектора 1 і 2, які можна промислово отримувати як рекомбінантні вектори ААМ і характеризувати по рівню трансдукції різних типів клітин і тканин - мішеней. Завдяки характеру процесу спрямованої еволюції ААМ, для варіантів, описаних в даному описі, вже показана здатність до трансдукції клітин сітківки і доставки геному (геному, що кодує варіант гена сар) в ході процесу відбору.
І0ОЗ35| На фігурі 2 представлена схема фіксації зразків сітківки, яка показує, де зразки, з яких бо ампліфіковані вірусні геноми, зібрані в межах широкої області сітківки.
І0О036| На фігурі З показана ампліфікація ПЛР вірусних геномів з тканини шару гангліонарних клітин (ОСІ), внутрішнього ядерного шару (ІМ), фоторецепторного/зовнішнього ядерного шару (ОМ) ії шару пігментного епітелію сітківки (КРЕ) з репрезентативного циклу відбору. Як в праве око (верхнє зображення), так і в ліве око (нижнє зображення) ін'єктували бібліотеку. Відбирали зразки внутрішньої сітківки (внутр.), середньої сітківки (середн.), і зовнішньої/периферичної сітківки (зовн.). Смуги всередині червоних рамок представляють успішну ампліфікацію вірусних геномів.
І0037| На фігурі 4А-4О0 показана частота мотивів в аналізі секвенування. На фігурі 4А представлений аналіз секвенування циклу 3. На фігурі 4В представлений аналіз секвенування циклу 4. На фігурі 4С представлений аналіз секвенування циклу 5. На фігурі 40 представлений аналіз секвенування циклу 6.
І0ОЗ8| На фігурі 5 представлена репрезентативна тривимірна модель ААМ2, що містить випадковий гептамер після амінокислоти 587.
І0039| На фігурі бА-6М/ представлено вирівнювання 5ЕО ІЮ МО:1-11 з ААМ дикого типу, що показує локалізацію амінокислот між і серед тих, що належать до дикого типу (що зустрічаються в природі) серотипів ААМ1, ААМ2, ААМЗА, ААМЗВ і ААМ4-10.
І0040| На фігурі 7 представлені флуоресцентні зображення очного дна, отримані з використанням Неїаеїбегу Зресігаїї5 "м, для сітківки африканської зеленої мавпи після введення в скловидне тіло 2х10"! геномів вектора (гв) ААМ2, що доставляє трансген СЕР під контролем промотору СММ (ААМ2.СММУ.СЕР). Зображення отримували у вихідній точці (А) і через 14 діб (В), 28 діб (С) і 42 діб (0) після ін'єкції.
І0041| На фігурі 8 представлені флуоресцентні зображення очного дна, отримані з використанням Неїаеїбегу Зресігаїї5 "мМ, для сітківки африканської зеленої мавпи після введення в скловидне тіло 2х10!! геномів вектора (гв) нового варіанту ААМ ГАІЗВОТКНАУРЗ4А, що доставляє трансген СЕР під контролем промотору СММ (ГАІБВОТКНАЗ-РЗАА.СМУ.СЕР).
Зображення отримували у вихідній точці (А) і через 14 діб (В), 28 діб (С) і 42 діб (02) після ін'єкції.
І0042| На фігурі 9 представлені флуоресцентні зображення очного дна, отримані з використанням сітківки яванських макак після введення в скловидне тіло нового варіанту ААМ
ГАІЗООТКНАЖРЗЯ4А, що доставляє трансген СЕР під контролем опромотору САС
Зо (ГАІБСОТКНАхЖРЗ4А.САС.ЕСЕР). (А) Зображення сітківки мавпи після ін'єкції в скловидне тіло 2х10" гв вектора, отримане через 14 діб (АТ), 21 добу (А2) і 28 діб (АЗ) після ін'єкції. (В)
Зображення сітківки мавпи після ін'єкції в скловидне тіло 1х1012 гв вектора, отримане через 14 діб (В1) і 21 доби (В2) після ін'єкції.
І0043| На фігурах 10А-10Е представлені результати імуногістохімічного аналізу сітківки мавпи після ін'єкції в скловидне тіло 1х1072 гв нового варіанту ААМ ГАІЗВОТКНАХРЗ4А, що доставляє трансген СЕР під контролем промотору САС, проаналізованої через три тижні після ін'єкції. Все дані імуногістохімії представлені поруч з відповідним флуоресцентним зображенням очного дна, де червоною рамкою визначено, де приблизно в сітківці проведений аналіз. Фігура 10А: Надійну трансдукцію пігментного епітелію сітківки (КРЕ) і фоторецепторів спостерігали з використанням специфічного для СЕР антитіла (червоний). Імунофарбування фоторецепторних колбочок з використанням антитіла проти М/ -опсину показане білим. Фігури 108 і 10С: Надійну трансдукцію фоторецепторних паличок і колбочок (фігура 108) і КРЕ (фігура 10С) спостерігали за допомогою прямої флуоресценції ЕСЕР (зелений) і за допомогою імуногістохімії з використанням специфічного для СЕР антитіла (червоний). Меланосоми в КРЕ виглядають чорними на зображенні. Фігура 100: Трансдукцію фоторецепторних колбочок (ідентифіковану за допомогою М/| -опсину, білий) і гангліонарних клітин сітківки (КОС) в фовеї і поблизу, спостерігали за допомогою прямої флуоресценції ЕСЕР (зелений) і за допомогою імуногістохімії з використанням специфічного для СЕР антитіла (червоний). Зображення на середніх панелях являють собою більш високе збільшення (63Х) області, позначеної білою рамкою на лівій панелі. Фігура 10Е: Трансдукцію гангліонарних клітин сітківки (КОС) і шару гангліонарних клітин сітківки спостерігали за допомогою прямої флуоресценції ЕСЕР (праві панелі, зелений; нижня права панель являє собою 63Х збільшення верхньої правої панелі); на верхній лівій панелі показана область підсвічення з високою освітленістю.
І0044| На фігурах 11А-11Е представлені дані по трансдукції клітин пігментного епітелію сітківки (КРЕ) людини іп міго рекомбінантним ААМ вірусом, що містить новий варіант капсиду
ААМ ГАІЗБОТКНАЖРЗ4АА і трансген СЕР під контролем промотору САС. Клітини, піддані диференціюванню в клітини ЕРЕ з лінії ембріональних стовбурових клітин людини (фігури 11А і 11С) або з індукованих плюрипотентних стовбурових клітин (ЕВ-іІРЗС), які походять з фібробластів людини (фігури 118 ї 110), інфікували з використанням нового варіанту ААМ бо ГАІЗРОТКНАХРЗЯ4А.САС.СЕР або контролю дикого типу ААМ2.САС.ОЕР. Фігури 11А ії 118:
Отримання імунофлуоресцентних зображень культур клітин через 7 діб після інфекції при МОЇ 500 показує, що новий варіант капсиду ААМ (ліві панелі) трансдукує клітини КРЕ краще, ніж капсид ААМ2 дикого типу (праві панелі). Фігури 11 і 110: Кількісна оцінка процента позитивних по СЕР клітин КРЕ в кожній культурі за допомогою проточної цитометрії виявила, що новий варіант ААМ капсиду забезпечує значуще, залежне від дози поліпшення кількості трансдукованих клітин, порівняно з капсидом ААМ2 дикого типу, незалежно від джерела клітин.
Фігури 11Е ї 11Е: Кількісна оцінка кількості СЕР в кожній культурі за допомогою Вестерн- блотингу виявляє, що новий варіант ААМ забезпечує значуще поліпшення експресії трансгена, порівняно з капсидом дикого типу, незалежно від джерела клітин. 00451) На фігурах 12А-12Е показані варіанти здійснення білків проти МЕСЕ. На фіг. 12А показаний дизайн афліберцепту, який складається з сигнального пептиду ЕЙ людини, домену 2 МЕСНЕНКІ і домену З МЕОСЕКІ, злитого з областю Ес Ідс1 людини. На фіг. 128-С показані види дизайну ранібізумабу, які включають гнучкий білковий лінкер для переведення дволанцюжкового антигензв'язувального фрагмента (Раб) в одноланцюжковий Раб (з5сЕар). На фіг. 128 показана легка-важка (ІН) форма, яка складається з сигнального пептиду легкого ланцюга каппа Ід людини, варіабельного легкого, константного легкого, варіабельного важкого і константного важкого 1 доменів ранібізумабу, зв'язаних за допомогою гнучкого пептиду. На фіг. 12С показана важка-легка (НІ) форма, яка є схожою, за винятком того, що сигнальний пептид походить з важкого ланцюга Ідс людини, і важкий і легкий домени розташовані на протилежних сторонах від лінкера, порівняно з формою ІН. На фіг. 120 показаний дизайн бролуцизумабу, який включає варіабельний легкий і варіабельний важкий домени, зв'язані за допомогою гнучкого пептиду. На фіг. 12Е показаний дизайн 5с-ранібізумабу І Н-Ес, що складається з форми зсРаь ІН злитої з областю Ес ІдД01 людини. На фіг. 12Е показаний дизайн бролуцизумабу-Ес, який складається з бролуцизумабу, злитого з областю Ес ІдсС1ї людини. Червоні смуги представляють ділянки, які визначають комплементарність (СОК). Гени піддавали оптимізації по кодонному складу для поліпшеної експресії в клітинах людини і синтезували в СепелАгі або
Сепбогірі, і вставляли у вектор рдАМ-бАС-5М40 рА між промотором САС і поліА-сигналом
ЗУ40. (0046) На фігурах 13А-В показаний результат ЕГІ5А для детекції білків, що зв'язуються з
Зо МЕСРЕ. На фіг. 13А показано, що активність зв'язування МЕСЕ детектована в середовищах від клітин НЕК293Т, трансфікованих з використанням експресуючих афліберцепт (ЗЕО ІЮ МО:65) або одноланцюжковий (с) ранібізумаб (5ЕО 10 МО:67, 69 і 70) плазмід, але не від клітин після несправжньої трансфекції або трансфекції експресуючого СЕР вектора. На фіг. 13В показано, що активність зв'язування МЕСЕ детектована в середовищах від клітин НЕК293Т, трансфікованих з використанням експресуючих афліберцепт (ЗЕО І МО:65), зс-ранібізумаб
НІ (ЗЕО 10 МО:69) або бролуцизумаб (5ЕО ІО МО:74) плазмід, але не від клітин, трансфікованих експресуючим СЕР вектором. Сигнал для бролуцизумабу є дуже низьким, найбільш ймовірно, через погане впізнавання антитілом для детекції. Планки погрішностей представляють стандартне відхилення для ямок після трансфекції в чотирьох повторах.
І0047| На фігурах 14А-В представлені репрезентативні Вестерн-блоти серед від клітин
НЕК29ЗТ, трансфікованих конструкціями проти МЕСЕ. На фіг. 14А показані експресуючі афліберцепт (ЗЕО ІЮ МО:65) або 5с-ранібізумаб (5ЕО ІЮО МО:67, 69 їі 70) плазміди. Клінічні зразки як ейлеа, так і афліберцепту, відновлюються до окремих половин димера, з уявною молекулярною масою 58 кДа (включаючи глікозилування). Клінічний люцентис відновлюється до окремих легкого і важкого ланцюгів по 24 кДа, в той час як білки 5с-ранібізумабу не розділяються і мігрують при приблизно 48 кДа. Присутня більш висока кількість форм ІН білка, порівняно з формою НІ білка, відповідно до кількісної оцінки білка, отриманої за допомогою
ЕПІЗА. На фіг. 148 показані експресуючі афліберцепт (ЗЕО ІЮ МО:65), зс-ранібізумаб І НІ (5ЗЕО
ІО МО:69) або бролуцизумаб (5ЕО І МО:74) плазміди. Сигнал для бролуцизумабу є низьким, найбільш ймовірно, через погане впізнавання антитілом для детекції. Білок мігрує з коректною молекулярною масою 26 кДа. Був відсутній сигнал в будь-якому зі зразків негативного контролю для несправжньої трансфекції або СЕР. (0048) На фігурах 15А-В показаний результат конкурентного ЕГІ5А для детекції вільного
МЕС після інкубації із середовищем від клітин НЕК293Т, трансфікованих конструкціями проти
МЕС. На фіг. 15А показані експресуючі афліберцепт (ЗЕО ІЮ МО:65) або 5с-ранібізумаб (ЗЕО
ІО МО:67, 69 і 70) плазміди. Криві інгібування для чотирьох білків проти МЕСЕ зі зразків після трансфекції були дуже схожими з клінічними порівняльними білками ейлеа і люцентисом.
Афліберцепт і ейлеа конкурували за МЕСЕ сильніше, ніж варіанти 5с-ранібізумабу і люцентис.
Всі три форми 5с-ранібізумабу були майже ідентичними. На фіг. 158 показані експресуючі 60 афліберцепт (ЗЕО ІО МО:65), зс-ранібізумаб І НІ (ЗЕО ІЮ МО:69) або бролуцизумаб (5ЕО ІО
МО:74) плазміди. Не було присутньо активності конкуренції для зразка негативного контролю
СЕР. Планки погрішностей представляють стандартне відхилення для ямок після трансфекції в двох повторах.
І00491| На фігурі 16 показаний результат аналізу нейтралізації клітинного МЕСЕ. У аналізі використовують клітини НЕК293, експресуючі злиті білки рецептор МЕСРЕ/бета-галактозидаза, які утворюють активну бета-галактозидазу при зв'язуванні МЕСБЕ. Клітини інкубують із сумішами
МЕС ії різного розведення середовищ від клітин НЕК293Т, трансфікованих експресуючими афліберцепт (5ЕО ІЮ МО:65) або 5с-ранібізумаб (ЗЕО ІЮ МО:69) плазмідами. Криві інгібування білків проти МЕСЕ зі зразків після трансфекції показують, що білки проти МЕСЕ нейтралізували активність МЕСЕ на рівнях, еквівалентних клінічним порівняльним білкам. Планки погрішностей представляють стандартне відхилення для ямок після аналізу в двох повторах. 0050 На фігурі 17А-В показаний результат аналізу нейтралізації клітинного МЕСБЕ, проведеного з використанням рівних об'ємів середовища від клітин НЕК293Т, трансфікованих з використанням плазмід проти МЕСЕ. На фіг. 17А показані експресуючі СЕР, афліберцепт (ЗЕО
ІО МО:65), зс-ранібізумаб НІ. (ЗЕО ІО МО:67) або 5с-ранібізумаб І НІ (ЗЕО ІЮО МО:69) плазміди.
Всі оцінені конструкції проти МЕСЕ нейтралізували МЕСЕ. На фіг. 17В показані експресуючі
СЕР, афліберцепт (ЗЕО ІО МО:65), зс-ранібізумаб І НІ (ЗЕО ІЮ МО:69) і бролуцизумаб (ЗЕО І
МО:74) плазміди. Всі оцінені конструкції проти МЕСЕ нейтралізували МЕСЕ. Був присутнім слабкий ефект матриці для контрольного зразка СЕР при всіх аналізованих розведеннях.
Планки погрішностей представляють стандартне відхилення для ямок після трансфекції в двох повторах.
І0ОО51| На фігурі 18 показаний результат ЕГІЗА для детекції МЕСЕ в середовищі від клітин
ВРЕ, трансфікованих експресуючими афліберцепт (5ЕО ІЮ МО:65) або 5с-ранібізумаб (ЗЕО ІЮ
МО:67, 69, і 70) плазмідами. Спостерігали зменшення рівнів МЕСЕ за допомогою як експресії афліберцепту, так і експресії 5с-ранібізумабу. Ефект на рівні МЕСЕ всіх трьох форм 5б- ранібізумабу був схожим. Планки погрішностей представляють стандартне відхилення для ямок після трансфекції в чотирьох повторах. 00521 На фігурі 19 показаний результат ЕГІЗА для детекції МЕСЕ в середовищах, зібраних від клітин КРЕ через шість або десять діб після трансдукції з використанням капсиду К100 (що
Зо має амінокислотну послідовність, вказану як 5ЕБЕО ІЮ МО:42), експресуючого трансгени афліберцепту (5ЕО ІЮО МО:65), зс-ранібізумабу (5ЕО ІЮ МО:67 і 69) або бролуцизумабу (ЗЕО ІЮ
МО:74). Ендогенний рівень МЕСЕ, як показано в клітинах, трансдукованих контрольним вектором СЕР, становив 4500-8300 пг/мл. Трансдукція всіма векторами проти МЕСЕ приводила до рівнів МЕСЕ, що не піддаються детекції в середовищах. Планки погрішностей представляють стандартне відхилення для ямок після трансфекції в чотирьох повторах.
І0О531| На фігурі 20 показаний результат ЕГІЗА для детекції білків, які зв'язуються з МЕСЕ в середовищах, зібраних від клітин КРЕ через шість або десять діб після трансдукції з використанням капсиду К100 (що має амінокислотну послідовність, вказану як х»ЕО ІЮ МО:42), експресуючого трансгени проти МЕС. Активність зв'язування МЕСЕ детектували в середовищах від клітин, трансдукованих експресуючими афліберцепт (ЗЕО ІЮ МО:65), в5б- ранібізумаб (ЗЕО ІЮ МО:67 і 69) або бролуцизумаб (ЗЕО ІО МО:74) векторами, але не від клітин, трансдукованих експресуючим СЕР вектором. Сигнал для бролуцизумабу є дуже низьким, найбільш ймовірно, через погане впізнавання антитілом для детекції. Планки погрішностей представляють стандартне відхилення для ямок після трансфекції в чотирьох повторах.
І0054| На фігурах 21 представлені репрезентативні Вестерн-блоти середовищ, зібраних від клітин КРЕ через шість або десять діб після трансдукції з використанням капсиду К100 (що має амінокислотну послідовність, вказану як БЕО ІЮ МО:42), експресуючого трансгени проти МЕОБЕ.
Клінічні зразки як ейлеа, так і афліберцепту (ЗЕО ІЮ МО:65), відновлюються до окремих половин димера, з уявною молекулярною масою 60 кДа (включаючи глікозилування), як показано чорною стрілкою. Не було присутнім смуг з коректною рухливістю в зразку негативного контролю СЕР. Клінічний люцентис відновлюється до окремих легкого і важкого ланцюгів по 24 кДа, в той час як 5с-ранібізумаб НІ і ІН (ЗЕО ІО МО:67 і 69) не розділяються і мігрують з уявною молекулярною масою 58 кДа, як показано сірою стрілкою. Сигнал для бролуцизумабу (5ЕО ІЮ
МО:74) є низьким, найбільш ймовірно, через погане впізнавання антитілом для детекції. Білок мігрує з коректною молекулярною масою 26 кДа, як показано заштрихованою стрілкою.
І0О55)| На фігурі 22 показаний результат конкурентного ЕГІЗА для детекції вільного МЕСЕ після інкубації із середовищами, зібраними від клітин КРЕ через шість або десять діб після трансдукції з використанням капсиду К100 (що має амінокислотну послідовність, вказану як
ЗЕО Ір МО:42), експресуючого трансгени проти МЕСБЕ. Всі конструкції проти МЕСЕ конкурували бо за МЕСБЕ. Не було присутнім активності конкуренції для зразка негативного контролю СЕР. Рівні ендогенного МЕСЕ були більш високими для найбільш низького розведення, через ендогенний
МЕСЕ, продукований клітинами КРЕ. Планки погрішностей представляють стандартне відхилення для ямок після аналізу в двох повторах.
І0О56| На фігурі 23 показаний результат аналізу нейтралізації клітинного МЕСЕ, проведеного із середовищами, зібраними від клітин КРЕ через шість діб після трансдукції капсидом Н100 (що має амінокислотну послідовність, вказану як 5ЕО ІО МО:42) експресуючим трансгени проти
МЕСР. Всі оцінені конструкції проти МЕСЕ нейтралізували МЕСЕ. Не спостерігали нейтралізації
МЕСЕ для середовищ після контрольної трансдукції СЕР. Планки погрішностей представляють стандартне відхилення для ямок після аналізу в двох повторах.
ВИЗНАЧЕННЯ
Ї0057| Якщо не визначене інше, всі технічні і наукові терміни, що використовуються в даному описі, мають таке ж значення, яке є загальноприйнятим для фахівця в галузі, до якої належить ця технологія. 0058) Аденоасоційований вірус являє собою непатогенний парвовірус, що складається з одноланцюжкового ДНК-геному 4,7 т.п.о. всередині безоболонкового, ікосаедричного капсиду.
Геном містить три відкриті рамки зчитування (ОНЕ), фланковані інвертованими кінцевими повторами (ІТК), що функціонують як вірусна точка початку реплікації і сигнал упаковки. ОВЕ гер кодує чотири неструктурні білки, що відіграють ролі у вірусній реплікації, регуляції транскрипції, сайт-специфічній інтеграції і зборці віріона. ОКЕ сар кодує три структурні білки (МР 1-3), які звираються з формуванням 60-членного вірусного капсиду. Нарешті, ОКЕ, присутня як альтернативна рамка зчитування всередині гена сар, утворює активуючий зборку білок (ААР), вірусний білок, що локалізує білки капсиду ААМ в ядерці і функціонує в процесі зборки капсиду. 0059) Існує декілька природних (що стосуються "дикого типу") серотипів і більше 100 відомих варіантів ААМ, кожний з яких відрізняється по амінокислотній послідовності, зокрема, всередині гіперваріабельних областей капсидних білків, і таким чином, по властивостях доставки їх генів. Жоден ААМ не був асоційований з яким-небудь захворюванням людини, що робить рекомбінантний ААМ привабливим для клінічних застосувань.
ЇОО60О| Для цілей опису в даному описі, термін "ААМ" являє собою скорочення для аденоасоційованого вірусу, включаючи, без обмеження, сам вірус і його похідні. За винятком випадків, коли вказане інше, термін стосується всіх підтипів або серотипів і як компетентних по реплікації, так і рекомбінантних форм. Термін "ААУ" включає, без обмеження, ААМ типу 1 (ААМ- 1 або ААМ'ІІ), ААМ типу 2 (ААМ-2 або ААМ2), ААМ типу ЗА (ААМ-ЗА або ААМЗА), ААМ типу ЗВ (ААУ-3В або ААМЗВ), ААМ типу 4 (ААМУ-4 або ААМ4), ААМ типу 5 (ААМ-5 або ААМ5), ААМ типу 6 (ААУ-6 або ААМб), ААМ типу 7 (ААМ-7 або ААМ7), ААМ типу 8 (ААМ-8 або ААМ8), ААМ типу 9 (ААУ-9 або ААМ9), ААМ типу 10 (ААМ-10 або ААМ10, або ААМгп10), пташиний ААМ, бичачий
ААМ, собачий ААМ, козячий ААМ, кінський ААМ, ААМ приматів, ААМ, що не належить до приматів, і овечий ААМ. "ААМ приматів" стосується ААМ, який інфікує приматів, "ААМ, який не належить до приматів" стосується ААМ, який інфікує ссавців, що не належать до приматів, "бичачий ААУ" стосується ААМ, який інфікує бичачих ссавців і т.д.
ІЇ00О61| Геномні послідовності різних серотипів ААМ, так само як послідовності природних кінцевих повторів (ТЕ), білків Кер і субодиниць капсиду, відомі в даній галузі. Такі послідовності можна виявити в літературі або в публічних базах даних, таких як сепВапкК. Див., наприклад, номери доступу в СепВапк МС 002077.1 (ААМ1!), АРО63497.1 (ААМ1!), МС 001401.2 (ААМ2),
АРО43303.1 (ААМ2), 901901.1 (ААМ2), 0О48704.1 (ААМЗА), МС 0017291 (ААМЗА), АРО28705.1 (ААУЗВ), МО 001829.1 (ААМ4), О89790.1 (ААМ4), МО 0061521 (ААБ5), АРО85716.1 (ААМ-5),
АРО28704.1 (ААМб), МС 006260.1 (ААМ7), АЕ513851.1 (ААМ7), АЕ513852.1 (ААМ8) МО 0062611 (ААУ-8), АУ530579.1 (ААМУ9), ААТ46337 (ААМ10) і ААХО88208 (ААМгп10); зміст яких наведений в даному описі як посилання для опису послідовностей нуклеїнової кислоти і амінокислотних послідовностей ААМ. Див. також, наприклад, 9гімізіама еї аї. (1983) 9. Мігоїоду 45:555; СпПіогіпі еї а!. (1998) 9. Мігоїоду 71:6823; СпНіогіпі єї а. (1999) 3). Мігоїоду 73: 1309; Вапіє!-5снаа| еї а!. (1999) ..
Мігоіоду 73:939; Хіао еї аї. (1999) 9. Мігоїоду 73:3994; Митатаївзи еї аї. (1996) Мікоіоду 221:208; зпайде еї. а!. (1986) 9. Міго!. 58:921; Сіао єї аї. (2002) Ргос. Маї. Асад. сі. ОБА 99: 11854; Могів єї а!. (2004) Мігоіоду 33:375-383; Міжнародні патентні публікації УМО 00/28061, У/О 99/61601, УМО 98/11244; і Патент США Мо. 6156303.
І0062| Послідовності природних білків сар (капсидних), асоційованих з серотипами ААУ, відомі в даній галузі і включають описані в даному описі як ААМ1 (5ЕО ІЮО МО:1), ААМ2 (ЗЕО ІЮ
МО:2), ААМЗА (5ЕО ІЮ МОЗ), ААМЗВ (ЗЕО І МО:4), ААМА (5ЕО ІЮ МО: 5), ААМ5 (ЗЕО ІЮ МО: б),
ААУб (5ЕО ІЮ МО:7), ААМ7 (ЗЕО ІЮ МО:8), ААМ8 (5ЕО ІЮО МО:9), ААМ9 (5ЕО І МО:10), ААМ1О0 (ЗЕО ІЮ МО:11) ї ААМТИ10 (ЗЕО ІЮ МО:12). Терміни "варіант капсидного білка ААУ" або "варіант 60 ААУ" стосуються капсидного білка ААМ, що містить амінокислотну послідовність, що включає щонайменше одну модифікацію або заміну (включаючи делецію, вставку, точкову мутацію і т.д.), порівняно з послідовністю капсидного білка ААМ, яка зустрічається в природі або що стосується "дикого типу", наприклад, як указано в 5ЕО ІЮО МО:1-12 в даному описі. Варіант капсидного більа ААМ може мати приблизно 8095 ідентичності або більше з амінокислотною послідовністю капсидного білка дикого типу, наприклад, 8595 ідентичності або більше, 9095 ідентичності або більше, або 9595 ідентичності або більш з амінокислотною послідовністю капсидного білка дикого типу, наприклад, 9895 або 9995 ідентичності з капсидним білком дикого типу. Варіант капсидного білка ААМ може не бути капсидним білком дикого типу.
ІЇ0063| Для цілей по даному опису, "віріон АДАМ" або "вірусна частинка ААУ" стосується вірусної частинки, що складається зі щонайменше одного капсидного білка ААМ і інкапсидованого полінуклеотиду ААУ. 0064) Для цілей за даним описом, термін ""-ААМ" являє собою скорочення, яке стосується рекомбінантного аденоасоційованого вірусу. "Рекомбінантний", застосовно до полінуклеотиду, означає, що полінуклеотид є продуктом різних комбінацій стадій клонування, рестрикції або лігування, і інших способів, що приводять до отримання конструкції, відмінних від полінуклеотиду, виявленого в природі. Рекомбінантний вірус являє собою вірусну частку, що містить рекомбінантний полінуклеотид. Терміни, відповідно, включають репліки початкової полінуклеотидної конструкції і потомство вихідної вірусної конструкції. 0065) Термін "тААМ вектор" включає віріони ГААМ (тобто, вірусні частинки гААМ) (наприклад, інфекційний віріон гААМ), які по визначенню включають полінуклеотид гААМ; і також включає полінуклеотиди, що кодують ГААМ (наприклад, одноланцюжковий полінуклеотид, що кодує гААМ (55--ААМ); дволанцюжковий полінуклеотид, що кодує гААМ (аз-гААМ), наприклад, плазміди, що кодують гААмМ; і т.п.).
ЇОО6б| Якщо віріон ААМ містить гетерологічний полінуклеотид (тобто полінуклеотид, відмінний від геному ААМ дикого типу, наприклад, трансген для доставки в клітину-мішень, засіб для РНКІі або засіб на основі СКІЗРК для доставки в клітину-мішень і т.д.), його, як правило, позначають як "рекомбінантний віріон ААМ (гГААМ)" або "вірусна частинка гААМ". Як правило, гетерологічний полінуклеотид фланкований щонайменше однією, і як правило, двома, послідовностями інвертованого кінцевого повтору (ІТК) ААМ.
Зо І0067| Термін "упаковка" стосується серії внутрішньоклітинних подій, що приводять до зборки і капсидування частинки ААМ. Гени "гер" і "сар" ААМ стосуються полінуклеотидних послідовностей, що кодують білки реплікації і капсидування аденоасоційованого вірусу. гер і сар ААМ позначені в даному описі як "гени упаковки" ААУ. (0068) Термін "вірус-помічник" для ААМ стосується вірусу, що дозволяє ААМ (наприклад,
ААМ дикого типу) піддаватись реплікації і упаковці за допомогою клітини ссавця. Множина таких вірусів-помічників для ААМ відомі в даній галузі, включаючи аденовіруси, віруси герпесу і поксвіруси, такі як вірус вісповакцини. Аденовіруси включають ряд різних підгруп, хоча аденовірус типу 5 з підгрупи С є найбільш загальноприйнятим. Численні аденовіруси, отримані від людини, ссавців, що не належать до людини і птахів, відомі і доступні з депозитаріїв, таких як АТСС. Віруси сімейства герпесу включають, наприклад, віруси простого герпесу (НБУ) і віруси Епштейна-Барр (ЕВМ), так само як цитомегаловіруси (СММУ) і віруси псевдосказу (РАМ); які також доступні з депозитаріїв, таких як АТОС. 0069) Термін "функція(функції) вірусу-помічника" стосується функції(функцій), кодованої(их) в геномі вірус-помічника, які дозволяють реплікацію і упаковку ААМ (в поєднанні з іншими вимогами до реплікації і упаковки, описаними в даному описі). Як описано в даному описі, "функцію вірусу-помічника" можна забезпечувати рядом способів, включаючи надання вірусу- помічника або надання, наприклад, полінуклеотидних послідовностей, що кодують необхідну функцію(функції), в транс-положенні для клітини-продуцента. Наприклад, плазмідним або іншим експресуючим вектором, що містить нуклеотидні послідовності, що кодують один або більше аденовірусних білків, які трансфікують клітину-продуцента, разом з ГААМ вектором. 00701 Термін "інфекційні" вірус або вірусна частинка являє собою ті, які містять компетентно зібраний вірусний капсид і є здатними до доставки полінуклеотидного компонента в клітину, для якої вид вірусу є тропним. Термін не обов'язково включає яку-небудь здатність до реплікації вірусу. Аналізи інфекційних вірусних частинок описані в іншому місці в даному описі і в літературі в даній галузі. Вірусну інфекційність можна виражати як співвідношення інфекційних вірусних частинок до загальної кількості вірусних частинок. Способи визначення співвідношення інфекційних вірусних частинок до загальної кількості вірусних частинок відомі в даній галузі. Див., наприклад, Сгаіїпдег еї аі. (2005) Мої. Тег. 11: 5337 (описуючий аналіз інфекційного титру ТСІО50); і 2о10їиКпіп еї а. (1999) Сепе Тег. 6:973. Див. також приклади.
І0071)| Термін "тропізм", в рамках винаходу, стосується переважного націлювання вірусу (наприклад, ААМ) на клітини конкретного виду хазяїна або на конкретні типи клітин всередині виду хазяїна. Наприклад, вірус, який може інфікувати клітини серця, легені, печінки і м'язів, має більш широкий (тобто, збільшений) тропізм, порівняно з вірусом, який може інфікувати тільки клітини легені і м'язів. Тропізм може також включати залежність вірусу від конкретних типів молекул поверхні клітин хазяїна. Наприклад, деякі віруси можуть інфікувати тільки клітини з поверхневими глікозаміногліканами, в той час як інші віруси можуть інфікувати тільки клітини з сіаловою кислотою (таку залежність можна тестувати з використанням різних ліній клітин з недостатністю конкретних класів молекул як потенційних клітин-хазяїв для вірусної інфекції). У деяких випадках, тропізм вірусу описує відносні переваги вірусу. Наприклад, перший вірус може бути здатним інфікувати всі типи клітин, але є набагато більш успішним в інфекції клітин з поверхневими глікозаміногліканами. Другий вірус можна розглядати як такий, що має схожий (або ідентичний) тропізм з першим вірусом, якщо другий вірус також віддає перевагу таким же характеристикам (наприклад, другий вірус також є більш успішним в інфекції клітин з поверхневими глікозаміногліканами), навіть якщо абсолютні значення ефективності трансдукції не є схожими. Наприклад, другий вірус може бути більш ефективним, ніж перший вірус, в інфекції кожного даного тестованого типу клітин, але якщо відносні переваги є схожими (або ідентичними), другий вірус все ще можна вважати таким, що має схожий (або ідентичний) тропізм з першим вірусом. У деяких варіантах здійснення, тропізм віріона, що містить варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, не є зміненим відносно природного віріона. У деяких варіантах здійснення, тропізм віріона, що містить варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, збільшений (тобто, розширений) відносно природного віріона. У деяких варіантах здійснення, тропізм віріона, що містить варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, зменшений відносно природного віріона.
І0072| Термін "компетентний по реплікації" вірус (наприклад, компетентний по реплікації
ААМ) стосується фенотипічно дикого типу вірусу, який є інфекційним і є також здатним до реплікації в інфікованій клітині (тобто, в присутності вірусу-помічника або функцій вірусу- помічника). У випадку ААМ, компетентність по реплікації, як правило, вимагає присутності функціональних генів упаковки ААМ. Як правило, вектори гААМ, як описано в даному описі, є
Зо некомпетентними по реплікації в клітинах ссавців (особливо в клітинах людини) через відсутність одного або більше генів упаковки ААМ. Як правило, такі вектори гГААМ позбавлені послідовностей будь-яких генів упаковки ААМ, щоб мінімізувати можливість того, що компетентні по реплікації ААМ утворяться за допомогою рекомбінації між генами упаковки ААМ і вхідним ГААМ вектором. У багатьох варіантах здійснення, препарати гААМ вектора, як описано в даному описі, являють собою препарати, які, якщо взагалі містять, містять мало компетентного по реплікації ААМ (гСААМ, також позначеного як ЕСА) (наприклад, менше ніж приблизно 1 гсдАМ на 102 частинок гААМ, менше ніж приблизно 1 гсААМ на 104 частинок гААМ, менше ніж приблизно 1 гсААМ на 10 частинок гГААМ, менше ніж приблизно 1 гсААМ на 1012 частинок гГААМ або відсутність гСААМ).
І0073| Термін "полінуклеотид" стосується полімерної форми нуклеотидів будь-якої довжини, включаючи дезоксирибонуклеотиди або рибонуклеотиди, або їх аналоги. Полінуклеотид може містити модифіковані нуклеотиди, такі як метиловані нуклеотиди і аналоги нуклеотидів, і може уриватися ненуклеотидними компонентами. Якщо вони присутні, модифікації структури нуклеотиду можна вводити до або після зборки полімеру. Термін полінуклеотид, в рамках винаходу, означає взаємозамінно дво- і одноланцюжкові молекули. Якщо інше не вказане або не є необхідним, будь-який варіант здійснення в даному описі, який містить полінуклеотид, включає як дволанцюжкову форму, так і кожну з двох комплементарних одноланцюжкових форм, як відомо, або як прогнозують, які складають дволанцюжкову форму.
Ї0074| Полінуклеотид або поліпептид має певний процент "ідентичності послідовності" з іншим полінуклеотидом або поліпептидом, що означає, що, при вирівнюванні, цей процент основ або амінокислот є однаковими при порівнянні двох послідовностей. Схожість послідовностей можна визначать рядом різних способів. Для визначення ідентичності послідовностей, послідовності можна вирівнювати з використанням способів і комп'ютерних програми, включаючи ВІ А5БТ, доступних у всесвітній мережі жшер на пебі.піт.пій.дом/ВІАЗТ/.
Іншим алгоритмом вирівнювання є ЕАЗТА, доступний в пакеті програмного забезпечення
Сепеїйсв Сотршиїйпуд Сстоир (СС) з Мааізоп, Умізсопвіп, ОА, що знаходиться в повній власності дочірньої компанії Охіога Моїесціаг сгоишр, Іпс. Інші способи вирівнювання описані в Мейоз іп
Епгутоїоду, мої. 266: Сотршиїег Меїйодв їог МасготоїІесціаг Зедиепсе Апаїузів (1996), ед.
Вооїїше, Асадетіс Ргевз5, Іпс., підрозділ Нагсошгі Вгасе 5 Со., зап Оіедо, Саійотіа, О5А. бо Особливий інтерес представляють програми вирівнювання, що допускають пропуски в послідовності. Алгоритм Сміта-Уотермана є одним з типів алгоритму, що допускає пропуски у вирівнюванні послідовностей. Див. Меїйп. Мої. ВіоїЇ. 70: 173-187 (1997). Також, програму БАР з використанням способу вирівнювання Нідлмана і Вунша можна використовувати для вирівнювання послідовностей. ДИВ. У. Мої. Віо!. 48: 443- 453 (1970). 0075) Термін "ген" стосується полінуклеотиду, що здійснює функцію деякого роду в клітині.
Наприклад, ген може містити відкриту рамку зчитування, здатну кодувати продукт гена. Одним з прикладів продукту гена є білок, транскрибований і трансльований з гена. Іншим прикладом продукту гена є РНК, наприклад, функціональний продукт РНК, наприклад, аптамер, інтерферуюча РНК, рибосомальна РНК (рРНК), транспортна РНК (тРНК), некодуюча РНК (нкРНК), напрямна РНК для нуклеаз і т.д., яка транскрибується, але не транслюється.
І0076| Термін "продукт експресії гена" або "продукт гена" являє собою молекулу, що утворюється в результаті експресії конкретного гена, як визначено вище. Продукти експресії генів включають, наприклад, поліпептид, аптамер, інтерферуючу РНК, матричну РНК (мРНК),
РРНК, тРНК, некодуючу РНК (нкРНК) і т.п.
І0077| Термін "засіб на основі міРНК" ("мала інтерферуюча" або "коротка інтерферуюча
РНК" (або міРНК)) являє собою РНК-дуплекс нуклеотидів, націлений на ген, який представляє інтерес ("тен-мішень"). "РНК-дуплекс" стосується структури, утвореної за допомогою комплементарного утворення пар між двома областями молекули РНК, що формує область дволанцюжкової РНК (а5РНК). міРНК є "націленою" на ген, в тому значенні, що нуклеотидна послідовність дуплексної частини міРНК є комплементарною нуклеотидній послідовності гена- мішені. У деяких варіантах здійснення, довжина дуплекса міРНК складає менше 30 нуклеотидів. У деяких варіантах здійснення, дуплекс може мати довжину 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23,22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11 або 10 нуклеотидів. У деяких варіантах здійснення, довжина дуплекса становить 19-25 нуклеотидів. У деяких варіантах здійснення, опосередковане міРНК націлювання на ген здійснюють з використанням направлюваної ДНК
РНК-інтерференції (ааРНКІ), що являє собою спосіб вимкнення гена, в якому використовують конструкції ДНК для активації ендогенних шляхів РНК-інтерференції (РНКІ) в клітині тварини.
Такі конструкції ДНК розробляють для експресії самокомплементарних дволанцюжкових РНК, як правило, короткошпилькових РНК (кшШРНК), які після процесингу приводять до вимкнення гена або генів-мішеней. Можна здійснювати вимкнення будь-який РНК, включаючи ендогенні
МРНК або вірусні РНК, за допомогою розробки конструкцій для експресії дволанцюжкової РНК, комплементарної бажаної мРНК-мішені. Таким чином, частина РНК-дуплекса із засобу на основі міРНК може становити частину короткошпилькової структури, позначеної як кшРНК. У доповнення до дуплексної частини, шпилькова структура може містити частину петлі, розташовану між двома послідовностями, що формують дуплексо. Довжина петлі може змінюватися. У деяких варіантах здійснення, петля має довжину 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 або 13 нуклеотидів. Шпилькова структура може також містити 3'- або 5'-виступаючі частини. У деяких варіантах здійснення, виступаюча частина являє собою 3- або 5'-виступаючу частину довжиною 0, 1, 2, 3, 4 або 5 нуклеотидів. Як правило, рівень продукту експресії (наприклад,
МРНК, поліпептиду і т.д.) гена-мішені зменшують за допомогою засобу на основі міРнНК (наприклад, міРНК, кшРНК і т.д.), що містить специфічні дволанцюжкові нуклеотидні послідовності, які Є комплементарними фрагменту довжиною щонайменше 19-25 нуклеотидів (наприклад, послідовності з 20-21 нуклеотидів) транскрипта гена-мішені, включаючи 5'- нетрансльовану (ШТ) область, ОКЕ або 3-ИТ область. У деяких варіантах здійснення, малі інтерферуючі РНК мають довжину приблизно 19-25 н. Див., наприклад, в заявках РСТ УМО 00/44895, МО 99/32619, МО 01/75164, УМО 01/92513, ММО 01/29058, УМО 01/89304, УМО 02/16620 і
УМО 02/29858; і Публікації патенту США Мо. 2004/0023390 описи технології міРНК. міРНК і/або
КШРНК можуть бути кодовані послідовністю нуклеїнової кислоти, і послідовність нуклеїнової кислоти може також включати промотор. Послідовність нуклеїнової кислоти може також включати сигнал поліаденілювання. У деяких варіантах здійснення, сигнал поліаденілювання являє собою синтетичний мінімальний сигнал поліаденілювання. (0078) Термін "антисмислова РНК" включає РНК, яка є комплементарною продукту експресії гена. Наприклад, антисмислова РНК, націлена на специфічну мРНК, являє собою засіб на основі РНК (або може являти собою модифіковану РНК), яка є комплементарною мРНК, де гіоридизація антисмислової РНК з мРНК змінює експресію мРНК (наприклад, за допомогою зміни стабільності РНК, зміни трансляції РНК і т.д.). У "антисмислову РНК" включені також нуклеїнові кислоти, що кодують антисмислову РНК.
Ї0079| Застосовно до "засобів на основі СКІЗРК/Са59", термін "СКІ5РК" включає асоційовані з короткими паліндромними повторами, розташованими кластерами, рівномірно 60 віддаленими один від одного/СКІЗРЕ. системи (Са5х), залучені до забезпечення для бактерій і архей адаптивного імунітету проти вірусів і плазмід з використанням СКІЗРЕК РНК (сгРНК) для спрямованого вимкнення проникаючих нуклеїнових кислот. Білок Са59 (або його функціональний еквівалент і/або варіант, тобто, подібний Са5з9 білок) природним чином має активність ДНК-ендонуклеази, яка залежить від асоціації білю»а з двома природними або синтетичними молекулами РНК, які називаються сгРНК їі їгасгтРНК (які також називаються напрямними РНК). У деяких випадках, дві молекули є ковалентно зв'язаними з утворенням одиночної молекули (яка також називається одиночною напрямною РНК ("онНРНК")). Таким чином, Са59 або подібний Са59 білок вступає в асоціацію з РНК, націленою на ДНК (де термін включає як конфігурацію напрямної РНК з двох молекул, так і конфігурацію напрямної РНК з одиночної молекули), яка активує Са59 або подібний Са59 білок і спрямовує білок на послідовність нуклеїнової кислоти - мішень.
Ї0ОО80| Якщо Саз59 або подібний Са59 білок зберігає природну ферментну функцію, він може розрізати ДНК-мішень з утворенням дволанцюжкового розриву, що може приводити до зміни геному (тобто, редагування: делеції, вставки (коли присутній донорний полінуклеотид), заміни і т.д.), таким чином, до зміни експресії гена. Деякі варіанти Са59 (де варіанти включені в термін подібний Са59) змінені таким чином, що вони мають зменшену активність розрізання ДНК (в деяких випадках, вони розрізають один ланцюг замість обох ланцюгів ДНК-мішені, в той час як, в інших випадках, вони мають від сильно зменшеної до відсутньої активності розрізання ДНК).
Подібні Са59 білки зі зменшеною активністю розрізання ДНК (навіть без активності розрізання
ДНК) все ще можна націлювати на ДНК-мішень для блокування активності РНК-полімерази.
Альтернативно, Саб59 або подібний Саб59 білок можна модифікувати за допомогою злиття домену активації транскрипції МРб4 з білком Сав59 і спільно доставляти злитий білок з білком- помічником М52-РбБ5О-НОЗЕ1 і одиночною напрямною РНК, що містить РНК-аптамери М52 в тетрапетлі і стеблі-петлі, для формування в клітині комплексу медіатора синергічної активації (Саз9-5АМ), який активує транскрипцію. Таким чином, ферментно неактивні подібні Са59 білки можна націлювати на специфічну локалізацію в ДНК-мішені за допомогою РНК, націленої на
ДНК, щоб блокувати або активувати транскрипцію ДНК-мішені. Термін "засоби на основі
СКІБРЕ/Са59", в рамках винаходу, включає всі форми СКІЗБРЕ/Са59, як описано вище або як відомо в даній галузі.
Зо І0081| Детальну інформацію по засобах на основі СКІЗРК можна виявити, наприклад, в (а)
Уіпек еї. аїІ., Зсієпсе. 2012 Аца 17;337(6096):816-21: "А ргодгаттабіє ачаІ-АМА-дцідей ОМА епдописівєазе іп адаріїме Басієвгла! іттипйу"; (Б) Ої єї аї., Се. 2013 Рер 28; 152(5): 1173-83: "Веригтрозіпд СВІБРЕ аз ап АМА-дціаєа ріаногт ог зедпепсе-5ресіїїс сопігої ої депе ехргеззіоп" і (с) Патентній заявці США номер 13/842859 і заявці РСТ номер РСТ/О513/32589; повний зміст всіх з яких наведений в даному описі як посилання. Таким чином, термін "засіб на основі
СКІБРЕ", в рамках винаходу, включає будь-який засіб (або нуклеїнову кислоту, що кодує такий засіб), що містить природні і/або синтетичні послідовності, які можна використовувати в системі на основі Са59 (наприклад, Са59 або подібний Са59 білок; будь-який компонент РНК, націленої на ДНК, наприклад, РНК, подібну сгРНК, РНК, подібну ігасгтРНК, одиночну напрямну РНК і т.д.; донорний полінуклеотид; і т.п.).
І0082| Під "нуклеазами з цинковими пальцями" (2ЕМ) розуміють штучні ДНК-ендонуклеази, отримані за допомогою злиття зв'язуючого ДНК домену з цинковим пальцем з доменом, який розщеплює ДНК. 2ЕМ можна конструювати для націлювання на бажані послідовності ДНК, і це дозволяє нуклеазам з цинковими пальцями розщеплювати унікальні послідовності-мішені. При введенні в клітину, 2ЕМ можна використовувати для редагування ДНК-мішені в клітині (наприклад, в геномі клітини) за допомогою індукції утворення дволанцюжкових розривів. Більш широку інформацію по використанню 2ЕМ, див., наприклад, в: Авигі еї аЇ., Мої Тег. 2012 Реб; 29(2):329-38; Вірікома єї аЇ. Зсієпсе. 2003 Мау 2:300(5620):764; М/осй єї аЇ. Зсієпсе. 2011 ди 15;333(6040):307; Оспіаї еї аі. Сепе5 СеїІв. 2010 Ацо; 15(8):875-85; ТаКази евї. а)!., Іпзесі Віоспет
Мої Віої. 2010 Осі; 40(10):759-65; ЕКкКег евї аї, 7ергаййвий 2008 Биттег; 5(2): 121-3; Мошпао еї аї,
Ргос Маї! Асай 5сі ОБА. 2011 Арг 26:108(17):7052-7; Сюідьего еї аї, Сеї. 2010 Маг 5:140(5):678- 91; Сецгів єї а), Зсієпсе. 2009 ди! 24;325(5939):433; Ріівікому5Ка вї аї, РІ о5 Опе. 2011;6(6):621045. дої: 10.1371/ЛошгпаІ.ропе.0021045. Ериб 2011 дип 13; Наизснійй еї аї, Ргос Маї! Асад 5сі О5А. 2011 ди! 19108(29): 12013-7; і Ми еї аї, Сеїї Ке5. 2011 Мом; 21(І 1): 1638-40; опис всіх з яких, застосовно до 2ЕМ, наведений в даному описі як посилання. Термін "засіб на основі 2ЕМ" включає нуклеазу з цинковими пальцями і/або полінуклеотид, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує нуклеазу з цинковими пальцями. (0083) Термін засобу на основі "ефекторних нуклеаз, подібних до активаторів транскрипції", або "ТАГЕМ", стосується ефекторним нуклеаз, подібних до активаторів транскрипції (ТАГ ЕМ), бо які являють собою штучні ДНК-ендонуклеази, отримані за допомогою злиття ефекторного домену ТАЇ,, що зв'язує ДНК (подібного до активатора транскрипції), з доменом, що розщеплює
ДНК. ТАГЕМ можна швидко конструювати для зв'язування практично з будь-якою бажаною послідовністю ДНК, і після введення в клітину, ТАГЕМ можна використовувати для редагування
ДНК-мішені в клітині (наприклад, в геномі клітини) за допомогою індукції утворення дволанцюжкових розривів. Більш широку інформацію по використанню ТАГЕМ див., наприклад, в: НосКетеуєг еї а). Маї ВіоїєснпоЇ. 2011 ши! 729(8):731-4; МУоой єї а). Зсівєпсе. 2011 ди 15;333(6040):307; Теб55оп еї а). Маї ВіоїесппоІї. 2011 Ацу 5:29(8):695-6; і Ниапо еї. аї., Маї
Віотесппої. 2011 А!ца 5:29(8):699-700; опис всіх з яких, застосовно до ТАГЕМ, наведений в даному описі як посилання. Термін "засіб на основі ТАГЕМ" включає ТАЇЕМ (і/або полінуклеотид, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує ТАГЕМ.
І0084| Термін "контрольний елемент" або "контрольна послідовність" стосується нуклеотидної послідовності, залученої у взаємодію молекул, що вносить внесок в функціональну регуляцію полінуклеотиду, включаючи реплікацію, дуплікацію, транскрипцію, сплайсинг, трансляцію або деградацію полінуклеотиду. Регуляція може впливати на частоту, швидкість або специфічність процесу, і може бути посилювальною або інгібуючою по характеру. Контрольні елементи, відомі в даній галузі, включають, наприклад, послідовності для регуляції транскрипції, такі як промотори і енхансери. Промотор являє собою область ДНК, здатну, в певних умовах, зв'язуватися з РНК-полімеразою і ініціювати транскрипцію кодуючої області, звичайно локалізованої нижче (в напрямку 3) від промотору. Промотори можуть бути діючими повсюдно, тобто, активними в множині типів клітин, наприклад, промотори САС або
СМУ; або специфічними для тканини або клітини, наприклад, промотор по, який є активним в паличках, або промотор опсину, який є активним в колбочках.
І0085| Термін "оперативно зв'язаний" або "функціонально зв'язаний" стосується безпосереднього сусідства генетичних елементів, де елементи знаходяться у взаємозв'язку, що дозволяє їм функціонувати очікуваним чином. Наприклад, промотор є функціонально зв'язаним з кодуючою областю, якщо промотор допомагає ініціації транскрипції кодуючої послідовності.
Можуть бути присутніми проміжні залишки між промотором і кодуючою областю, за умови, що цей функціональний взаємозв'язок зберігається. (0086) Термін "експресуючий вектор" включає вектор, що містить полінуклеотидну область, яка кодує поліпептид, який представляє інтерес, і яку використовують для здійснення експресії білка в призначеній клітині-мішені. Експресуючий вектор може також містити контрольні елементи, функціонально зв'язані з кодуючою областю, для полегшення експресії білка в мішені. Комбінацію контрольних елементів і гена або генів, з якими вони функціонально зв'язані для експресії, іноді позначають як "експресуюча касета", велика кількість яких є відомими і доступними в даній галузі або можуть бути легко сконструйовані з компонентів, доступних в даній галузі.
І0087| Термін "гетерологічний" означає той, що походить з молекули, генотипічно відмінної від іншої молекули, з якою його порівнюють. Наприклад, полінуклеотид, введений за допомогою способів генної інженерії в плазміду або вектор, отримані з відмінного виду, являє собою гетерологічний полінуклеотид. Промотор, видалений зі своєї природної кодуючої послідовності і функціонально зв'язаний з кодуючою послідовністю, зв'язаним з якою його не виявляють в природі, являє собою гетерологічний промотор. Таким чином, наприклад, ГААМ, що включає гетерологічну послідовність нуклеїнової кислоти, що кодує продукт гетерологічного гена, являє собою гААМ, що включає полінуклеотид, в нормі не включений в природний ААМ дикого типу, і кодований продукт гетерологічного гена являє собою продукт гена, в нормі не кодований природним ААМ дикого типу.
І0088| Терміни "генетична зміна" і "генетична модифікація" (і їх граматичні варіанти), використовують взаємозамінно в даному описі для позначення процесу, в якому генетичний елемент (наприклад, полінуклеотид) вводять в клітину, відмінного від мітозу або мейозу.
БО Елемент може бути гетерологічним для клітини, або може являти собою додаткову копію або поліпшений варіант елемента, вже присутнього в клітині. Генетичну зміну можна здійснювати, наприклад, за допомогою трансфекції з використанням рекомбінантної плазміди або іншого полінуклеотиду за допомогою будь-якого способу, відомого в даній галузі, такого як електропорація, преципітація фосфатом кальцію або приведення в контакт з комплексом полінуклеотид-ліпосома. Генетичну зміну можна також здійснювати, наприклад, за допомогою трансдукції або інфекції з використанням ДНК- або РНК-вірусу або вірусного вектора. Як правило, генетичний елемент вводять в хромосому або в мініхромосому в клітині; але будь-яка зміна, яка змінює фенотип і/або генотип клітини і її потомства, включена в цей термін.
Ї0089| Застосовно до модифікації клітини, термін "генетично модифікований" або бо "трансформований", або "трансфікований", або ""трансдукований" за допомогою екзогенної ДНК
(наприклад, за допомогою рекомбінантного вірусу) стосується ситуації, коли така ДНК введена всередину клітини. Присутність екзогенної ДНК приводить до постійної або тимчасової генетичної зміни. Трансформуюча ДНК може бути або може не бути інтегрованою (ковалентно зв'язаною) в геномі клітини. "Клон" являє собою популяцію клітин, отриману з окремої клітини або спільного предка за допомогою мітозу. "Лінія клітин" являє собою клон первинної клітини, який є здатним до стабільного росту іп міго протягом багатьох поколінь.
І0090| У рамках винаходу, кажуть, що клітина є "стабільно" зміненою, трансдукованою, генетично модифікованою або трансформованою з використанням генетичної послідовності, якщо послідовність є доступною для здійснення своєї функції під час тривалого культивування клітини іп мійго і/або протягом тривалого періоду часу іп мімо. Як правило, така клітина є "спадково" зміненою (генетично модифікованою) в тому відношенні, що введена генетична зміна, яка також піддається успадкуванню потомством зміненої клітини.
І0091| Терміни "поліпептид", "пептид" і "білок" використовують взаємозамінно в даному описі для позначення полімерів амінокислот будь-якої довжини. Терміни також включають амінокислотний полімер, який був модифікований; наприклад, за допомогою утворення дисульфідного зв'язку, глікозилування, ліпідування, фосфорилування або кон'югації з компонентом, який мітить. Поліпептиди, такі як антиангіогенні поліпептиди, нейропротективні поліпептиди, і т.п., при обговоренні в контексті доставки продукту гена суб'єкту-ссавцеві, і композицій для цього, стосуються відповідного інтактного поліпептиду, або будь-якого його фрагмента або генетично модифікованого похідного, які зберігають бажану біохімічну функцію інтактного білка. Подібним чином, посилання на нуклеїнові кислоти, що кодують антиангіогенні поліпептиди, нуклеїнові кислоти, кодуючі нейропротективні поліпептиди, і інші такі нуклеїнові кислоти для використання в доставці продукту гена суб'єкту-ссавцеві (які можна позначати як "тгрансгени" для доставки в клітини-реципієнта), включають полінуклеотиди, що кодують інтактний поліпептид або будь-який фрагмент або генетично модифіковане похідне, що мають бажану біохімічну функцію.
І0092)| У рамках винаходу, "виділена" плазміда, нуклеїнова кислота, вектор, вірус, віріон, клітина-хазяїн, білок або інша речовина стосується препарату речовини, позбавленої щонайменше деяких з інших компонентів, які також можуть бути присутніми там, де речовина
Зо або схожа речовина зустрічається в природі або звідки вона спочатку отримана. Таким чином, наприклад, виділену речовину можна отримувати з використанням способу очищення для Її збагачення з суміші джерел. Збагачення можна вимірювати на абсолютній основі, такій як маса на об'єм розчину, або можна вимірювати відносно другої, потенційно створюючої перешкоди речовини присутньої в суміші джерел. Варіанти здійснення зі збільшуваним збагаченням по цьому опису мають збільшений ступінь виділення. Виділені плазміда, нуклеїнова кислота, вектор, вірус, клітина-хазяїн або інша речовина є, в деяких варіантах здійснення, очищеними, наприклад, з чистотою від приблизно 8095 до приблизно 9095, з чистотою щонайменше приблизно 9095, з чистотою щонайменше приблизно 9595, з чистотою щонайменше приблизно 9895 або з чистотою щонайменше приблизно 9995, або більше.
ІЇ0093| У рамках винаходу, терміни "лікування", "обробка" і т.п., стосуються отримання бажаного фармакологічного і/або фізіологічного ефекту. Ефект може бути профілактичним відносно повного або часткового запобігання захворюванню або його симптому, і/або може бути терапевтичним відносно часткового або повного лікування захворювання і/або несприятливого ефекту, що приписується захворюванню. "Лікування", в рамках винаходу, стосується будь-якого лікування захворювання у ссавця, зокрема, у людини, і включає: (а) запобігання виникненню захворювання (і/або симптомів, викликаних захворюванням) у суб'єкта, який може мати схильність до захворювання або ризик отримання захворювання, але ще не діагностований як такий, що має його; (Б) інгібування захворювання (і/або симптомів, викликаних захворюванням), тобто, зупинку його розвитку; і (с) полегшення захворювання (і/або симптомів, викликаних захворюванням), тобто, виклик регресії захворювання (/або симптомів, викликаних захворюванням), тобто, пом'якшення захворювання і/або одного або більше симптомів захворювання. Наприклад, композиції і способи, що розглядаються, можуть бути направлені на лікування захворювання сітківки. Необмежувальні способи оцінки захворювань сітківки і їх лікування включають вимірювання функції сітківки і її змін, наприклад, змін гостроти зору (наприклад, найкращої коригованої гостроти зору ІВСМАЇ, здатності до пересування, навігації, виявлення і розрізнення об'єктів), змін поля зору (наприклад, статичної і кінетичної периметрії поля зору), клінічне обстеження (наприклад, огляд за допомогою щілинної лампи переднього і заднього сегмента ока), вимірювання здатності відповідати на електрофізіологічні сигнали всіх довжин хвиль на світлу і в темряві (наприклад, всі форми електроретинографії (ЕНС) бо І(повноформатну, мультифокальну і патерни), всі форми індукованого зорового потенціалу
(МЕР), електроокулографію (ЕОС), оцінку кольорового зору, адаптації до темряви і/або контрастної чутливості; вимірювання змін анатомії або стану здоров'я з використанням анатомічних і/або фотографічних показників, наприклад, оптичної когерентної томографії (ОСТ), фотографування очного дна, лазерної скануючої офтальмоскопії з системою адаптивної оптики, флуоресценції і/або аутофлуоресценції; вимірювання рухливості очного яблука і руху очей (наприклад, ністагма, переваги і стабільності фіксації), вимірювання зареєстрованих результатів (повідомлених пацієнтом змін в зорово-опосередкованих і незорово- опосередкованих поведінці і діяльності, повідомлених пацієнтом результатів |РКОЇ, основаних на опитувальниках оцінок якості життя, повсякденної діяльності і показників неврологічної функції (наприклад, функціональної магнітно-резонансної томографії (МК)).
І0094| Терміни "індивідуум", "хазяїн", "суб'єкт" ії "пацієнт" використані взаємозамінно в даному описі, і означають ссавця, включаючи, але без обмеження, людей; нелюдиноподібних приматів, включаючи мавп; ссавців спортивних тварин (наприклад, коней); ссавців сільськогосподарських тварин (наприклад, овець, кіз і т.д.); ссавців домашніх тваринних (собак, кішок і т.д.); і гризунів (наприклад, мишей, пацюків і т.д.).
ІЇ0095| У деяких варіантах здійснення, індивідуум являє собою людину, яка раніше природним чином піддалась впливу ААМ і в результаті, що є носієм антитіл проти ААМ (тобто, нейтралізуючих ААМ антитіл). У деяких варіантах здійснення, індивідуум являє собою людину, якій раніше вводили ААМ вектор (і яка в результаті може бути носієм антитіл проти ААМ,), і яка потребує повторного введення вектора для лікування іншого стану або для додаткового лікування того ж самого стану. На основі позитивних результатів в клінічних дослідженнях, що включають доставку генів за допомогою ААМ, наприклад, в печінку, м'яз і сітківку - всі тканини, схильні до впливу нейтралізуючих антитіл проти цього носія - існує множина таких терапевтичних застосувань/захворювань-мішеней. (0096) Термін "ефективна кількість", в рамках винаходу, являє собою кількість, достатню для отримання переважних або бажаних клінічних результатів. Ефективну кількість можна вводити за одне або декілька введень. Для цілей за даним описом, ефективна кількість сполуки (наприклад, інфекційного віріону гААМ) являє собою кількість, достатню для полегшення, пом'якшення, стабілізації, звертання, запобігання, сповільненню або затримкам прогресування
Зо (/або асоційованих симптомів) конкретного стану захворювання (наприклад, захворювання сітківки). Відповідно, ефективна кількість інфекційного віріона гААМ являє собою кількість інфекційного віріона гААМ, яка є здатною до ефективної доставки гетерологічної нуклеїнової кислоти в клітину-мішень (або клітини-мішені) індивідуума. Ефективні кількості можна визначати передклінічно, за допомогою, наприклад, детекції в клітині або тканині продукту гена (РНК, білка), кодованого гетерологічною послідовністю нуклеїнової кислоти, з використанням способів, добре відомих в даній галузі, наприклад, КТ-ПЛР, Вестерн-блотингу, ЕГІ5А, флуоресценції або інших зчитувань репортера, і т.п. Ефективні кількості можна визначати клінічно, за допомогою, наприклад, детекції зміни початку або прогресування захворювання з використанням способів, відомих в даній галузі, наприклад, аутофлуоресценції очного дна, ангіографії з рлуоресцеїном, ОСТ, мікропериметрії, адаптивної оптики і т.д. і т.п., як описано в даному описі і як відомо в даній галузі.
І0097| Термін "клітина сітківки" стосується в даному описі будь-якого з типів клітин, що складають сітківку, такого як, без обмеження, гангліонарні клітини сітківки (КО), амакринові клітини, горизонтальні клітини, біполярні клітини, фоторецепторні клітини, гліальні клітини
Мюллера, мікрогліальні клітини і пігментний епітелій сітківки (КРЕ). Термін "фоторецепторні клітини" стосується в даному описі, без обмеження, клітин паличок або "паличок", і клітин колбочок або "колбочок". Термін "клітини Мюллера" або "глія Мюллера" стосується гліальних клітин, які підтримують нейрони в сітківці хребетних. (0098) Термін "спрямована еволюція" стосується способу конструювання капсиду, іп мйго і/або іп мімо, що імітує природну еволюцію за допомогою чергованих циклів процесів внесення генетичної різноманітності і відбору, таким чином, накопичення переважних мутацій, все більше поліпшуючого функцію біомолекули. Спрямована еволюція часто включає спосіб іп мімо, позначений як "біопенінг", для відбору варіантів ААМ з бібліотеки, де варіанти мають більш ефективний рівень інфекційності для типу клітини або тканини, який представляє інтерес.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС
Ї0099| Аденоасоційовані віруси (ААМ) являють собою сімейство парвовірусів з одноланцюжковим ДНК-геномом 4,7 т.п.о., що міститься всередині безоболонкового капсиду.
Вірусний геном природного ААМ має 2 інвертовані кінцеві повтори (ІТК) - що функціонують як вірусна точка початку реплікації і сигнал упаковки - що фланкують 2 первинні відкриті рамки бо зчитування (ОКЕ): гер (що кодує білки, які функціонують у вірусній реплікації, регуляції транскрипції, сайт-специфічній інтеграції і зборці віріона) і сар. ОКЕ сар кодує З структурні білки, які збираються з формуванням бО-членного вірусного капсиду. Виділена множина природних варіантів і серотипів ААМ, і жоден не був асоційований із захворюванням людини. 00100) Рекомбінантні варіанти ААМ можна використовувати як вектори для доставки гена, де маркер, який представляє інтерес, або терапевтичний ген вставляють між ІТК замість гер і сар. Показано, що ці вектори трансдукують клітини, як такі, що діляться, так і такі, що не діляться, іп міго і іп мімо, і можуть забезпечувати стабільну експресію трансгена протягом декількох років в пост-мітотичній тканині. Див., наприклад, Кпіре ОМ, НоулЛеу РМ. Рівїдв'
Мігоїоду. Іірріпсой М/Піатве в УМїКіпв, Рпйаде!рніа, РА, ОА, 2007; Сао с-Р, АМміга МА, У/апо Г,
Саїседо В, Чдоппв5іоп У, Міїзоп УМ. Момеї! адепо-аззосіаїей мігибзев5 їот тТтезив топКеуз аз месіог5 ог питап депе ІШегару. Ргос Майї! Асай 5сі ОБА 2002; 99: 11854-9; Аїспівоп ВМУ, Савіо ВС,
Наттоп УМ. Адепомігив-Авзосіаїей Оеєгїесіїме Мігив Рапісіев5. Зсієпсе 1965; 149: 754-6; Ноддап
МО, ВіасКіом МА, Коуе М/Р. Зішаїез ої зтаї! ОМА мігизев ТоШпа іп магіои5 адепомігив ргерагаїопв: рпузісаї, Біоіодіса!, апа іттипоіодіса! сНагасіегівіїс5. Ргос Маї! Асай 5сі ОБА 1966; 55: 1467-74;
ВіасКіож МА, Ноддап МО, Ноуме МУР. Ізоїайоп ої адепоміги5 -аззосіаїва мігизе5 їот тап. Ргос Маї!
Асад сі ОБА 1967; 58: 1410-5; Вапівє!-5спаа! О, 2йиг Найзеп Н. Спагасіегігайоп ої Ше ОМА ої а деїтесіїме пПитап рагмомігив ізоЇїаїтей їот а депіаї! 5іе. Мігоїоду 1984; 134: 52-63; Мауог НО, Меїпіск
У. Зтаї! адеохугірописієїс асід-сопіаіпіпа мігизез (рісодпамігив агоир). Маїште 1966; 210: 331-2;
Могі 5, УМмапуд І, ТаКеиспі Т, Капада Т. Ту/о поме! адепо-аззосіаїей мігибе5 їйїот супото!див топкКеу: рзейдоїуріпд сНагасіеєгігайоп ої сарзій ргоївїп. Мігоїоду 2004; 330: 375-83; Ріоце ТВ. Сепе
Іегару ргодгев5 апа ргозресів: гесотбріпапі адепо-аз5зосіаїед міги5 (ТААМ) месіогх. Сепе Тег 2004; 11: 805-10. 00101) Для рекомбінантного ААМ (позначеного в даному описі просто як "ААМ") отримані багатообіцяючі результати у збільшуваних кількостях клінічних досліджень. Однак, існують недоліки доставки генів, які можуть обмежувати корисність ААМ, такі як імунні відповіді проти капсиду, низька трансдукція конкретних тканин, неможливість направленої доставки в конкретні типи клітин і відносно низька ємність перенесення. У багатьох ситуаціях, існує недостатнє знання механізмів для ефективного розширення раціонального дизайну з можливістю поліпшення ААМ. Як альтернатива, з'явилася спрямована еволюція як спосіб отримання нових
Зо варіантів ААМ, що задовольняють конкретні біомедичні потреби. У способах спрямованої еволюції використовують способи внесення генетичної різноманітності і відбору, щоб дозволяти накопичення переважних мутацій, яке все більше поліпшує функцію біомолекули. У цьому способі, в гени сар ААМ дикого типу вносять різноманітність декількома способами для отримання великих геномних бібліотек, які упаковують для отримання бібліотек вірусних частинок, і потім селективний тиск прикладають для виділення нових варіантів, які можуть долати бар'єри для доставки генів. Важливо, що необов'язково знати механістичну базу, яка лежить в основі проблеми доставки гена, для спрямованої еволюції функції, що може, таким чином, прискорювати розробку поліпшених векторів. 00102) Як правило, варіанти, описані в даному описі, отримані з використанням бібліотеки іабо бібліотек ААМ. Такі бібліотека або бібліотеки ААМ отримана/отримана за допомогою мутагенезу гена сар, гена, що кодує структурні білки капсиду ААМ, за допомогою ряду способів спрямованої еволюції, відомих і легко доступних фахівцеві в галузі генної інженерії вірусів.
Див., наприклад, Вагієї! еї аіІ. Ат. 5ос. Сепе СеїІЇ Тег. 151п Аппи. Мевї. 20, 5140 (2012); Вом/ез, 0. еї аї. у. Мігої. 77, 423-432 (2003); Стау єї а). Мої. Тнег. 18, 570-578 (2010); Спітт, 0. еї а...
Мігої. 82, 5887-5911; Коегбет", у. Т. еї аІ. Мої. ТНег. 16, 1703-1709 (2008); Гі МУ. еї аІ. Мої. Тнег. 16, 1252-1260 (2008); Коегбег", у. Т. еї аі. Меїйпоадз Мої. Віої. 434, 161-170 (2008); Коегбетг", 4). Т. еї а.
Нит. Сепе Тег. 18, 367-378 (2007); і Коегрег, 9. Т. еї аіІ. Мої. Тег. 17, 2088-2095 (2009). Такі способи, без обмеження, є наступними: і) ПЛР зі зниженою точністю для введення випадкових точкових мутацій у відкриту рамку зчитування (ОКЕ) сар ААМ з визначеною наперед, модифікованою частотою; ії) рекомбінація або "перетасовування ДНК" вірусів іп міго або іп мімо для отримання випадкових химер генів сар ААМ для отримання бібліотеки генів з множиною серотипів ААМ; ії) вставки випадкових пептидів в певні ділянки капсиду за допомогою лігування вироджених олігонуклеотидів в ОКЕ сар; ім) певні вставки кодуючих пептид послідовностей у випадкові локалізації в ОКЕ сар ААМ за допомогою мутагенезу з використанням транспозонів; м) заміна поверхневих петель капсидів ААМ бібліотеками пептидних послідовностей, розроблених біоїнформативно, на основі рівня консервативності кожного положення амінокислоти серед природних серотипів і варіантів ААМ, для отримання бібліотек "заміни петель"; мі) випадкова заміна амінокислот в положеннях виродженості між серотипами ААМ для отримання бібліотек предкових варіантів (Запіадо-Огії еї аї., 2015); і комбінація таких способів.
00103) З використанням перетасовування ДНК отримує химери з комбінуванням їх вихідних властивостей унікальними і часто переважними способами; однак, деякі можуть бути нездатними до упаковки, що, фактично, зменшує різноманітність бібліотеки. Концентрування різноманітності бібліотеки досягають способами вставки пептидів, такими як, без обмеження, їїї- їм) вище. Різноманітність бібліотеки концентрують також такими способами, як у) вище, і таке концентрування направлене на множину гіперваріабельних областей, які лежать на поверхні експонованих петель капсиду ААМ. У той час як багатьма способами отримують варіанти капсидів з мутаціями тільки в невеликій області капсиду, ці способи можна об'єднувати з додатковими способами мутагенезу для модифікації повного капсиду. 00104) Після того, як бібліотека або бібліотеки ААМ отримана/отримана, віруси потім упаковують таким чином, що кожна частинка ААМ складається з мутантного капсиду, що оточує ген сар, що кодує цей капсид, і очищають. Варіанти бібліотеки потім піддають селективному тиску способами іп міїго і/або іп мімо, відомими і легко доступним фахівцеві в галузі ААМ. Див., наприклад, Мапезпгі, М. еї а. Маїиге Віоїесі. 24, 198-204 (2006); ВаїКага, 0. єї аї. осі. Тгапві.
Меа. 5, 189га76 (2013); І івому5Кі, Ї.. еї аі. Майте. 506, 382-286 (2013); Мапа, І. еї аї. РМАБ. 106, 3946-3951 (2009); СХао, Сх. єї аІ. Мої. Тнег. 13, 77-87 (2006); і Веї,, Р. еї аІ. Нит. Сепе. Тег. 22, 985-997 (2011). Наприклад, без обмеження, варіанти ААМ можна відбирати з використанням ії) афінних колонок, за допомогою елюції з яких різних фракцій отримують варіанти із зміненими властивостями зв'язування; ії) первинних клітин - виділених зі зразків тканини або іморталізованих ліній клітин, що імітують поведінку клітин в організмі людини - за допомогою чого отримують варіанти ААМ зі збільшеною ефективністю і/або тканиноспецифічністю; іїї) моделей на тваринах - які імітують середовище клінічної генотерапії - за допомогою чого отримують варіанти ААМ, що успішно інфікували тканину-мішень; ім) моделі людських ксенотрансплантатів, за допомогою яких отримують варіанти ААМ, що інфікували трансплантовані клітини людини; і/або комбінації способів їх відбору.
ЇО0О10О5)| Після відбору вірусів, їх можна виділяти відомими способами, такими як, без обмеження, опосередкована аденовірусом реплікація, ампліфікації ПЛР, секвенування нового покоління і клонування, і т.п. Потім клони вірусів збагачують за допомогою повторюваних циклів способів відбору і ДНК ААМ виділяють для виділення відібраних варіантів генів сар, що представляють інтерес. Такі відібрані варіанти можна піддавати додатковим модифікації або мутагенезу, і таким чином, вони служать новою вихідною точкою для додаткових стадій відбору для ступінчастого збільшення пристосованості ААМ вірусу. Однак, в конкретних випадках, успішні капсиди отримані без додаткових мутацій.
І00106| Варіанти ААМ, описані в даному описі, отримані, щонайменше частково, з використанням способу спрямованої еволюції іп мімо, такого як способи, описані вище, що включають використання скринінгу в сітківці приматів після введення в скловидне тіло. Таким чином, варіанти капсидів ААМ, описані в даному описі, містять одну або більше модифікацій в амінокислотній послідовності, які забезпечують більш ефективну трансдукцію клітини сітківки приматів, ніж відповідний вихідний капсидний білок ААМ. У рамках винаходу, "відповідний вихідний капсидний білок АДМ" стосується капсидного білка ААМ з того ж серотипу ААМ дикого типу або варіанту серотипу ААМ, що і варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, але що не містить одну або більше модифікацій амінокислотної послідовності варіанту капсидного білка ААМ, що розглядається. 00107) У деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, містить гетерологічний пептид від приблизно 5 амінокислот до приблизно 20 амінокислот, вставлений за допомогою ковалентного зв'язку в петлю СН або петлю ІМ капсидного білка ААМ, порівняно з відповідним вихідним капсидним білююм ААМ. Під "петлею ОН" або петлею ІМ капсидного білка ААМ розуміють доступну для розчинника частину, що позначається в даній галузі як петля СН або петля ІМ, капсидного білка ААМ. Інформацію про петлю СН/петля ІМ капсиду ААМ, див., наприклад, в мап Мієї еї аїЇ. (2006) Мої. Тег. 14:809; Райгоп еї аї. (2005) 9.
Мігої. 79:5047; і 5Ппеп еї аї. (2007) Мої. Тег. 15:1955. Таким чином, наприклад, ділянка вставки може знаходитися в межах приблизно амінокислот 411-650 капсидного білка МР1 ААМ.
Наприклад, ділянка вставки може знаходитися в межах амінокислот 571-612 МРІ ААМІ, амінокислот 570-611 МР1 ААМ2, в межах амінокислот 571-612 МР1Т ААМЗА, в межах амінокислот 571-612 МР1 ААМЗВ, в межах амінокислот 569-610 МР1 ААМАЯ4, в межах амінокислот 560-601 УР1
ААМУ5, в межах амінокислот 571-612 МР1 ААМб, в межах амінокислот 572-613 МР1 ААМ7, в межах амінокислот 573-614 УР1Т ААМ8, в межах амінокислот 571-612 МР1 ААМОУ або в межах амінокислот 573-614 МРТ ААМ10 УРІ1, або відповідних амінокислот будь-якого його варіанту.
Фахівцеві в даній галузі відомо, на основі порівняння амінокислотних послідовностей капсидних 60 білків з різних серотипів ААМ, де ділянка вставки, "відповідна амінокислотам ААМ2", може знаходитися в капсидному білку з будь-якого даного серотипу ААМ. Див. також на фігурі 6 вирівнювання 5ЕО ІЮО МО:1-11 з ААМ дикого типу, що показує локалізацію амінокислот між і серед тих, що належать до дикого типу (що зустрічаються в природі) серотипів ААМ1, ААМ2,
ААМЗА, ААМЗВ і ААМ4-10. 00108) У конкретних варіантах здійснення, ділянка вставки являє собою одиночну ділянку вставки між двома сусідніми амінокислотами, локалізовану між амінокислотами 570-614 МРІ1 з будь-якого серотипу ААМ дикого типу або варіанту ААМ, наприклад, ділянка вставки знаходиться між двома сусідніми амінокислотами, локалізованими в межах амінокислот 570- 610, амінокислот 580-600, амінокислот 570-575, амінокислот 575-580, амінокислот 580-585, амінокислот 585-590, амінокислот 590-600, або амінокислот 600-614 УР з будь-якого серотипу або варіанту ААМ. Наприклад, ділянка вставки може знаходитися між амінокислотами 580 і 581, амінокислотами 581 і 582, амінокислотами 583 і 584, амінокислотами 584 і 585, амінокислотами 585 і 586, амінокислотами 586 і 587, амінокислотами 587 і 588, амінокислотами 588 і 589 або амінокислотами 589 і 590. Ділянка вставки може знаходитися між амінокислотами 575 і 576, амінокислотами 576 і 577, амінокислотами 577 і 578, амінокислотами 578 і 579 або амінокислотами 579 і 580. Ділянка вставки може знаходитися між амінокислотами 590 і 591, амінокислотами 591 і 592, амінокислотами 592 і 593, амінокислотами 593 і 594, амінокислотами 594 і 595, амінокислотами 595 і 596, амінокислотами 596 і 597, амінокислотами 597 і 598, амінокислотами 598 і 599 або амінокислотами 599 і 600. Наприклад, ділянка вставки може знаходитися між амінокислотами 587 і 588 ААМ2, між амінокислотами 590 і 591 ААМІ1, між амінокислотами 588 і 589 ААМЗА, між амінокислотами 588 і 589 ААМУЗВ, між амінокислотами 584 і 585 ААМ4, між амінокислотами 575 і 576 ААМ5, між амінокислотами 590 і 591 ААМб, між амінокислотами 589 і 590 ААМ7, між амінокислотами 590 і 591 ААМ8, між амінокислотами 588 і 589 ААМО, або між амінокислотами 588 і 589 ААМ10. 00109) У деяких варіантах здійснення, пептидна вставка, описана в даному описі, має довжину 5 амінокислот, б амінокислот, 7 амінокислот, 8 амінокислот, 9 амінокислот, 10 амінокислот, 11 амінокислот, 12 амінокислот, 13 амінокислот, 14 амінокислот, 15 амінокислот, 16 амінокислот, 17 амінокислот, 18 амінокислот, 19 амінокислот або 20 амінокислот. У іншому варіанті здійснення, пептидна вставка, описана в даному описі, містить від 1 до 4 спейсерних
Зо амінокислот на аміно-кінці (М-кінці) і/або на карбокси-кінці (С-кінці) будь-якої з пептидних вставок, описаних в даному описі. ілюстративні спейсерні амінокислоти включають, без обмеження, лейцин (І), аланін (А), гліцин (С), серин (5), треонін (Т) і пролін (Р). У конкретних варіантах здійснення, пептидна вставка містить 2 спейсерні амінокислоти на М-кінці їі 2 спейсерні амінокислоти на С-кінці. У інших варіантах здійснення, пептидна вставка містить 2 спейсерні амінокислоти на М-кінці і 1 спейсерну амінокислоту на С-кінці.
ЇО0О110)| Пептидні вставки, описані в даному описі, раніше не були описані і/або вставлені в капсид ААМ. Без наміру бути пов'язаними з теорією, присутність будь-якої з описаних пептидних вставок може діяти для зменшення афінності варіанту капсиду для гепаринсульфату, що, ймовірно, зменшує зв'язування з позаклітинним матриксом перед сітківкою приматів. Крім того, мотиви пептидної вставки, описані в даному описі, можуть забезпечувати поліпшену трансдукцію клітин сітківки приматів за допомогою додавання домену для зв'язування рецептора на поверхні клітин. 00111) У деяких переважних варіантах здійснення, пептидна вставка містить амінокислотну послідовність по будь-якій з формул нижче. 00112) У деяких аспектах, пептидна вставка може являти собою пептид довжиною 7-10 амінокислот, формули Та:
М Мох Х2ХзХаХХ Ху з, де кожний з МУ1-Уз, якщо присутній, незалежно вибраний з Аа, І єи, Спу, 5ег, ТНг, Рго
Хі вибраний з Сп, Авп, Нів, Пе і АІа
БО Хг вибраний з Аа, Сіп, А5р, 5ег, І ув і Рго
Хз вибраний з Ар, Іе, ТНг і А5п
Ха вибраний з ТНг, Зег, Туг, СіІп, Сім і АІа
Х5 вибраний з ТнНг, І уз і А5п
Хв вибраний з І ух, Авп і СІМ
Х? вибраний з Азп, ТПг, Пе, Ні, Ар і Аа.
Ї00113| У конкретних варіантах здійснення, пептидна вставка формули та містить амінокислотну послідовність, вибрану з ОДОТТКМ (ЗЕО 10 МО:13), ІБЮОТКН (5ЕО ІЮ МО:14),
АБОБТКА (ЗЕО І МО:15), МООУТКТ (ЗЕО МО:16), НОІТКМІ (ЗЕО 1О МО:17), НРОТТКМ (5ЕО 10
МО:18), НОЮТТКМ (5ЕБЕО ІЮ МО:19), МКТТМКО (ЗЕО ІЮО МО:20), ІЗМЕМЕН (ЗЕО ІЮ МО:21) і 60 ОСАМАМЕМ (ЗЕО ІО МО:22).
00114) У інших аспектах, пептидна вставка може являти собою пептид довжиною 7-10 амінокислот, формули 16:
М Мох Х2ХзХаХХ Ху з, де кожний з МУ1-Уз, якщо присутній, незалежно вибраний з Аа, І єи, Спу, 5ег, ТНг, Рго
Хі вибраний з Сіп, Авп, Нів і Пе
Хг вибраний з Аа, Сіп, Ар і Зег
Хз вибраний з Ар і Пе
Ха вибраний з ТНг, Туг і СіІп
Х5 вибраний з ТНг і І у
Хв вибраний з І уз і А5п
Х? вибраний з Авп, ТПг, Пе і Ніб
ІЇ00115| У конкретних варіантах здійснення, пептидна вставка формули 16 містить амінокислотну послідовність, вибрану з ОДОТТКМ (ЗЕО 10 МО:13), ІБЮОТКН (5ЕО ІЮ МО:14),
МООУТКТ (5ЕО МО:16), НОЇТКМІ (5ЕО 1 МО:17) ії НООТТКМ (ЗЕО ІО МО:19). 00116) У інших аспектах, пептидна вставка може являти собою пептид довжиною 7-10 амінокислот, формули 1с
М1МаХіХ2гА5рХз ГТ узХ аз, де кожний з МУ1-Уз, якщо присутній, незалежно вибраний з Аа, І єи, Спу, 5ег, ТНг, Рго
Хі вибраний з Сіп, Авп, Нів і Пе
Хг вибраний з Аа, Сп ії Зег
Хз вибраний з ТНг, Туг і СіІп
Ха вибраний з Авзп, ТАг і Ні
ІЇ00117| У конкретних варіантах здійснення, пептидна вставка формули 1с містить амінокислотну послідовність, вибрану з ОДОТТКМ (ЗЕО 10 МО 13), ІБЮОТКН (5ЕО ІЮ МО 14),
МОБУТКТ (ЗЕО МО:16) і НОЮОТТКМ (5ЕО І МО:19). 00118) У інших аспектах, пептидна вставка може являти собою пептид довжиною 7-10 амінокислот, формули 14:
М1МаХіХ2гАврХз ГАТТ гХа уз, де кожний з МУ1-Уз, якщо присутній, незалежно вибраний з Аа, І єи, Спу, 5ег, ТНг, Рго
Зо Хі: вибраний з сСіп і Пе
Хг2 вибраний з Аїа і бег
Хз вибраний з ТНг і СіІп
Ха вибраний з Авп і Ніб5
ІЇ00119| У конкретних варіантах здійснення, пептидна вставка формули 14 містить амінокислотну послідовність, вибрану з ОАОТТКМ (5ЕО ІЮ МО:13) і ІБСОТКН (ЗЕО ІЮ МО 14). 00120) У інших аспектах, пептидна вставка може являти собою пептид довжиною 7-11 амінокислот, формули Іе
МіМаХІХ2гАвпХзАвпаиХа м з, де кожний з МУ1-Уз, якщо присутній, незалежно вибраний з Аа, І єи, Спу, 5ег, ТНг, Рго
Хі: вибраний з сСіп і Пе
Хг2 вибраний з Аїа і бег
Хз вибраний з Сіи і АІа
Ха вибраний з Авп і Ніб5 (00121) У інших варіантах здійснення, пептидна вставка формули 1е містить амінокислотну послідовність, вибрану з ІЗМЕМЕН (ЗЕО ІЮ МО:21) і ФОФАМАМЕМ (ЗЕО ІО МО:22).
І00122| У іншому варіанті здійснення, пептидна вставка може являти собою пептид довжиною 7-11 амінокислот, формули Па:
М М2Хі1Х2ОХзТКХ ах з, де кожний з МУ1-Уз, якщо присутній, незалежно вибраний з Аа, І єи, Спу, Зег, ТНг, Рго
БО Хі вибраний з О, М, А, Н і І;
Хг вибранийз О, А, Р і 5;
Хз вибранийз Т, М, Бі;
Ха вибраний з Т, М, А і Н. 00123) У наступному варіанті здійснення пептидної вставки з амінокислотної послідовності формули ХІХ2ОХЗТКХА, пептидна вставка вибрана з групи, яка складається з ОАДОТТКМ (5ЕО
ІО МО:13), ІБСОТКН (5ЕО ІЮ МО 714), АБОЗТКА, МОЮМТКТ (5ЕО МО:16), НООСОТТКМ (5ЕО 1ІЮ
МО:19) і НРОТТКМ (5ЕО І МО:18). 00124) У деяких таких варіантах здійснення, пептидна вставка може являти собою пептид довжиною 7-11 амінокислот, формули ППБ: 60 М М2Хі1Х2ОХзТКХ ах з,
001251 де кожний з м1-Уз, якщо присутній, незалежно вибраний з Аа, І ей, Спу, ет, ТНг, Рго
Хі вибраний з М, А і Н;
Хг вибраний з, Р і 5;
Хз вибранийз Т, М і 5; і
Ха вибраний з Т, Мі А. (00126) У наступному варіанті здійснення пептидної вставки з амінокислотної послідовності формули ХІХ2ОХЗТКХ4, пептидна вставка вибрана з групи, яка складається з АБОБ5ТКА,
МООУТКТ (ЗЕО МО:16), НОЮТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:19), і НРОТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:18).
І00127| У інших варіантах здійснення, пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з КОВАРБТ (5ЕО 10 МО:26), ТМАТ5РО (ЗЕО ІЮ МО:24), РМЗТНОа5 (5ЕО
ІО МО:25) і ЗКЗКМІО (5ЕО ІЮ МО:23).
І00128| У деяких варіантах здійснення, пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з АБОБТКА (ЗЕО ІЮ МО:15), ОАМАМЕМ (ЗЕО ІЮ МО:22), ОАОТТКМ (ЗЕО
ІО МО 13), ІБООТКН (5ЕО ІЮ МО:14), МООМТКТ (5ЕО 10 МО:16), НОІТКМІ (5ЕО 10 МО:17),
НРОТТКМ (5ЕО ІЮ МО:18), НОЮТТКМ (5ЕО ІЮ МО 19), МКТТМКО (5ЕО ІО МО:20), ІЗМЕМЕН (ЗЕО І МО:21), ЕКЗКМІО (5ЕО ІЮ МО:23), ТМАТОРО (5ЕО 10 МО 24), РМЗТНОаБ5 (5ЕО І
МО:25) і КОКАРБТ (5ЕО ІЮ МО:26).
І00129| У інших переважних варіантах здійснення, пептидна вставка має від 1 до З спейсерних амінокислот (У1-Мз) на аміно- і/або карбокси-кінці амінокислотної послідовності, вибраної з ОДОТТКМ (5ЕО ІЮ МО 13), ІБСОТКН (5ЕО ІО МО: 14), АБОЗТКА (5ЕО І МО: 15),
МОЮМТКТ (5ЕО ІО МО:16), НОІЇТКМІ (5ЕО 10 МО:17), НРОТТКМ (ЗЕО І МО 18), НООТТКМ (ЗЕО 10 МО:19), МКТТМКО (5ЕО 10 МО:20), ІЗМЕМЕН (5ЕО ІЮ МО:21), ОАМАМЕМ (5ЕО 1
МО:22), ОК5КМІЮО (5ЕБЕО ІС МО:23), ТМКТЗРО (ЗЕО ІО МО:24), РМЗТНОБВ (З5ЕБО ІЮО МО:25) і
КОКАРЗТ (5ЕО ІО МО:26). У конкретних таких варіантах здійснення, пептидна вставка вибрана з групи, яка складається з: ГАОАОТТКМА (5ЕБЕО ІЮ МО:27), ГАІЗСОТКНА (5ЕО ІЮ МО:28),
ГаізротТКкНнА (5ЕО ІО МО:29), І ААБОБЗТКАА (5ЕО І МО:30), І АМОЮМУТКТА (5ЕО ІЮ МО:31),
ГАНОІТКМІА (5ЕО 10 МО:32), ГАНРОТТКМА (5ЕО ІЮ МО:33), ГАНОЮОТТКМА (5ЕО І МО:34),
ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮО МО:З35), І РІЗМЕМЕНА (5ЕО ІЮ МО:З36), ГРОАМАМЕМА (ЗЕО І МО:37),
ГАСКЗКМІБА (5ЕО ІЮО МО:38), ГАТМКТЗРОА (5ЕО ІЮ МО:39), ГГ АРМЗТНОЗА (5ЕО ІЮО МО:40) і
Зо ГАКОВАРБЗТА (5ЕО І МО:41). 00130) У деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, не включає ніяких інших модифікацій амінокислотної послідовності, відмінних від пептидної вставки від приблизно 5 амінокислот до приблизно 20 амінокислот в петлі СН або петлі ІМ.
Наприклад, в деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з ОДОТТКМ (5ЕО ІЮ МО:13), ІБСОТКН (5ЕО ІЮ МО:14), АБОБЗТКА (5ЕО ІО МО:15),
МОЮМТКТ (5ЕО ІО МО:16), НОІЇТКМІ (5ЕО 10 МО:17), НРОТТКМ (ЗЕО І МО 18), НООТТКМ (ЗЕО 10 МО:19), МКТТМКО (5ЕО 10 МО: 20), ІЗМЕМЕН (5ЕО І МО:21), ОАМАМЕМ (5ЕО І
МО:22), ЕКЗКМІО (5ЕО ІЮ МО:23), ТМАТОРО (5ЕБО ІЮ МО24), РМЗТНОаЗ (5ЕО ІЮ МО:25),
КОВАРБЗТ (5ЕО ІЮ МО:26), ГАОАОТТКМА (5ЕО І МО:27), ГАІБВОТКНА (5ЕО ІЮ МО:28),
ГаіїзротТКкНнА (5ЕО ІО МО:29), І ААБОЗТКАА (5ЕО 10 МО:30), ГАМОЮУТКТА (5ЕО 10 МО:З1),
ГАНОІТКМІА (5ЕО 10 МО:32), ГАНРОТТКМА (5ЕО ІЮ МО:33), ГАНОЮОТТКМА (5ЕО І МО:34),
ГАМКТТМКОА (5ЕО ІО МО:З35), І РІЗМЕМЕНА (5ЕО ІЮ МО:36), ГРОАМАМЕМА (5ЕО ІО МО:37),
ГАСК5КМІВА (5ЕО ІЮ МО:38), І АТМАТ5ОРОА (5ЕО ІЮ МО:39), | АРМЗТНОЗА (5ЕО ІЮ МО:40) і
ГАКОКАРЗТА (5ЕО ІО МО:41), і варіант капсиду ААМ не включає ніяких інших амінокислотних замін, вставок або делецій (тобто, варіант капсидного білка ААМ містить вказану вставку і є в іншому відношенні ідентичним відповідному капсидному білку ААМ). Іншими словами, варіант капсидного білка ААМ, що містить вказану вставку, є в іншому відношенні ідентичним вихідному капсидному білку ААМ, в який вставлений пептид. Як інший приклад, варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, містить пептидну вставку, що має амінокислотну послідовність, вибрану з ОДОТТКМ (ЗЕО 10 МО 13), ІБЮОТКН (5ЕО ІЮ МО:14), АБО5ТКА (5ЕО
ІО МО:15), МООСМТКТ (5ЕО І МО:16), НОІЇТКМІ (5ЕО 10 МО:17), НРОТТКМ (5ЕО ІО МО:18),
НООТТКМ (5ЕО 10 МО:19), МКТТМКО (5ЕО 10 МО:20), ІЗМЕМЕН (5ЕО ІЮ МО:21), ОАМАМЕМ (ЗЕО І МО:22), ЕКЗКМІО (5ЕО ІЮ МО:23), ТМАТОРО (5ЕО 10 МО 24), РМЗТНОаБ5 (5ЕО І
МО:25), КОВАРБЗТ (5ЕО ІЮО МО:26), ГАОАОТТКМА (5ЕО І МО:27), ГАІБВОТКНА (5ЕО І
МО:28), І! сІБВОТКНА (5ЕО ІО МО:С29), І ААБОБЗТКАА (5ЕО ІЮ МО:30), ГГ АМОЮСУТКТА (5ЕО Ір
МО:З31), ГАНОІТКМІА (5ЕО І МО:32), ГАНРОТТКМА (5ЕО ІЮ МО:33), ГАНООТТКМА (5ЕО 10
МО:34), ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:35), І РІЗМЕМЕНА (5ЕО ІЮ МО:36), РОАМАМЕМА (5ЕО 10
МО:37), ГАСКОКМІБА (5ЕО ІЮ МО:38), І АТМАТ5ОРОА (5ЕО ІЮ МО:39), ГАРМЗТНаБЗА (5ЕО І 60 МО:40) і ГАКОКАРБТА (5ЕО ІО МО:41), де пептидна вставка локалізована між амінокислотами
587 і 588 МР1 з капсиду ААМ2 або відповідними амінокислотами МРІ1 з іншого вихідного ААМ, наприклад, між амінокислотами 588 і 589 МР1 з ААМ1І, ААМЗА, ААМЗВ, ААМб або ААМО, між амінокислотами 586 і 587 МР1І з ААМ4, між амінокислотами 577 і 578 МР1 з ААМ»5, між амінокислотами 589 і 590 МРІ1 з ААМ7, між амінокислотами 590-591 МРІ з ААМ8 або ААМТ0 і т.д. де білкова послідовність варіанту капсиду ААМ є іншому відношенні ідентичною послідовності відповідного вихідного капсидного білка ААМ, наприклад, будь-якій з ФЕО 1О МО:1-12. 00131) У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, в доповнення до вмісту пептидної вставки, наприклад, як описано в даному описі або як відомо в даній галузі, в петлі СН, містить від приблизно 1 до приблизно 100 амінокислотних замін або делецій, наприклад, від 1 до приблизно 5, від приблизно 2 до приблизно 4, від приблизно 2 до приблизно 5, від приблизно 5 до приблизно 10, від приблизно 10 до приблизно 15, від приблизно 15 до приблизно 20, від приблизно 20 до приблизно 25, приблизно 25-50, приблизно 50-100 амінокислотних замін або делецій, порівняно з вихідним капсидним білком ААМ. Таким чином, в деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка, що розглядається, містить амінокислотну послідовність, що має ідентичність послідовності 8595 або більше, 9095 або більше, 9595 або більше, або 9895 або більше, наприклад, або 9995 ідентичності з відповідним вихідним капсидом ААМ, наприклад, капсидним білком дикого типу, як указано в 5ЕО ІЮ МО:1- 12.
ІЇ00132| У наступному варіанті здійснення, одна або декілька амінокислотних замін знаходяться в положенні залишку(залишків) амінокислот 1, 15, 34, 57, 66, 81, 101, 109, 144, 164, 176, 188, 196, 226, 236, 240, 250, 312, 363, 368, 449, 456, 463, 472, 484, 524, 535, 551, 593, 698, 708, 719, 721, і/або 735 капсидного білки МР1 ААМ2, як пронумеровано до вставки пептиду, або відповідних залишку(залишків) амінокислот іншого капсидного білка ААМ. У деяких таких варіантах здійснення, одна або декілька амінокислотних замін вибрані з групи, яка складається з МІ, І15Р, РЗ4АА, М570, М6бК, 810, С1018, 5109Т, В8144К, А144М, О164К, Т176Р, 11881, 5196, п226Е, с236М, І240Т, Р2Б505, МЗ312К, РЗбЗІ, ОЗ68Н, М4490, ТА56К, 5463У, 0472М,
Р484С, А524Т, Р5У355, М5515, АБОЗЕ, ІЄ98М, М708І, М719М, 57211. і 17350) капсидного білка МР1
ААМ2, як пронумеровано до вставки пептиду, або відповідних залишку(залишків) амінокислот іншого капсидного білка ДАМ.
Зо 00133) У переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка ААМ, що містить а) пептидну вставку в сН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ІЗЮОТКН (ЗЕО ІЮ МО:14), І СІБООТКНА (5ЕО
ІО МО:29) ії ГАІЗООТКНА (ЗЕО ІЮ МО:28), і В) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2) або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ1Ї, І 15Р,
РЗ4А, М570, М6бК, А810, О1018, 5109Т, В144К, А144М, О164К, Т176Р, 11881, 5196У, с226Е, сеЗбМ, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗбБЗІ, ОЗ68Н, М4490, Т456К, 5463, 0472М, Н4і84С, АБ24Т,
РБ5З55, М5515, АБОЗЕ, ІбЄО8М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. У деяких варіантах здійснення, одна або декілька амінокислотних замін вибрані з групи, яка складається з:
МІ 15РАРБ5ЗБ55, РЗЯ4А, РЗ4Аз5721І, М570, МббК, 8810, О1018, 5109Т, В14АК, В144М,
О164К, О0164К-М708І, Т176Р, 1188І, 5196М, С22бЕ, с236М, І240Т, М312К,
М312К4-м4490-4-0472М--М5515-І698МУ-І 7350, РЗб63І, К484С--М7081І, Т456К і М7081. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу АДАМ. 00134) У особливо переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ІЗООТКН (5ЕО ІО МО 14), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАІЗООТКНА (ЗЕО ІЮ МО:28) або І СІБРОТКНА (5ЕО ІЮО МО:29), між амінокислотами 587 і 588 МР1 з ААМ2 або відповідними амінокислотами з іншого капсиду ААМ, і додатково містить амінокислотну заміну РЗ4А в положенні залишку 34, відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО:2) або відповідного залишку з іншого капсиду ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995, або більшу, ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотної послідовності, вказаної в зХЕО
ІЮ МО:2, або з відповідним вихідним капсидом ААМ. У особливо переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентична наступній амінокислотній 60 послідовності:
МААРИМІ РОММІ ЕОТІ БЕСІВОУММУКІ КРОРРРРКААДЕННКОСО5НАСЇ МІ РЕУКМІ СРЕМИаЇ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНБРУЕРОЗЗВИа ТаКАСООРАВКАІ МЕСОТИрАОЗУМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ГЕТРИ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАВУМОВІ ІМУММУ СЕ АРКА МЕКГЕМОМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМ5У ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОВСЕЕКЕЕРОБаМИ І РаКОСаЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІАТТМРМАТЕОМОа ЗБУТ МІ ОВОМІ АІЗО
ТКНАКОДАТАЮУМТОСМІ РОМУМООСАОМУМІ ОВРІМАКІРНТОСНЕНРОЗРІ МОСС КНРРРОЇІКМ
ТРМУИРАМРОТТЕЗААКЕА5ЗРІТОУЗТИаОМ5МЕЕМ ЕГОКЕМЗКАММРЕЮМ ТММ МКЗУММОгТМОоТМа
МУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО 10 МО:42) 00135) У іншому особливо переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ІЄЮОТКН (ЗЕО ІЮ МО:14), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності
ГАІББОТКНА (5ЕО ІЮ МО:28) або І сІ5ББООТКНА (5ЕО ІО МО:29), між амінокислотами 587 і 588 капсидного білка ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ, і містить амінокислотну заміну МЗ312К, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду АДАМ2 (ЗЕБЕО І МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ і необов'язково, додатково містить амінокислотні заміни М4490, 0472М, М5515, І698М і/або І 7350), порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, або відповідні заміни в іншому вихідному серотипі ААМ. У іншому особливо переважному варіанті здійснення, варіант капсиду АДМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ІЄЮОТКН (ЗЕО ІЮО МО:14), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАЇБООТКНА (ЗЕБЕО ОО МО:28) або ІСІ5БРОТКНА (5ЕБО І МО:29), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ, і містить амінокислотні заміни М312К, М4490, 0472М, М5515, Іб98М і
Ї7350, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або заміни відповідних залишків в іншому вихідному серотипі ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати
Зо щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу, ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО:2. У особливо переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРИМІ РОУММІ ЕОТІ БЕСІВОММУКІ КРЕОРРРРКРАЕННКОО5НАСЇІ МІ РОУКМІ РЕМ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КиИМНАВАЕРОЕВІ КЕОТЗЕССМІ ЯаВАВАМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНБРУЕРОЗЗВИа ТаКАСООРАВКАІ МЕСОТИрАОЗУМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБСАЗМОМНУ ГУ ЗТРУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУ ОВ ІМММУ СЕ АРКА КЕКІ ЕМОМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТТ МОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ яММаБОАЗМИаНн5О5
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІ ТОМІ МІ БАТОТРрСТТТО5А
ГОРБОдДИаАБОЇВМОЗАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМОУ ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОВЕЕКЕЕРОБОаМИ І РЯКОСЗЕКТЗМОТЕКУМІТОЕЕЕІАТТУМРМАТЕОМОа5У5ТМІ ОВОМІ АІЗО
ТКНАКОАДАТАОЮУМТОСМІ РОМУМООСАОМУМІ ОВРІМАКІРНТОСНЕНРОЗРІ МОСС КНРРРОЇІКМ
ТРМУИРАМРОТТЕЗААКЕА5ЗРІТОУЗТИаОмМ5МЕЕМ ЕГОКЕМЗКАУМРЕМОМ Т5МУ МКОУММВЕТМОТМ
СМУ5ЕРАЕРІСТАМІ ТАМО (5ЕО ІЮ МО 43) 00136) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААУ, що містить а) пептидну вставку, локалізовану між амінокислотами 588 і 589 МР11 з ААМ'1,
ААМЗА, ААМЗВ, ААМб або ДАМО, амінокислотами 586 і 587 з ДАМА, амінокислотами 577 і 578 з
ААМ5, амінокислотами 589 і 590 з ААМ7 або амінокислотами 590-591 з АДАМ8 або ААМ'10, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ІЗООТКН (ЗЕО ІЮ МО:14),
ГОІЗРОТКНА (5ЕО ІО МО:29) і ГАІ5БОТКНА (5ЕО ІЮ МО:28), і 5) заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 709 з ААМЗА або ААУЗВ, заміну аланіну на ізолейцин в положенні 709 з ААМІ1 або ААМб, заміну аспарагіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 707 з ДАМА або амінокислоти 709 з ААМО, або заміну треоніну на ізолейцин в положенні амінокислоти 710 з
ААМ7 або амінокислоти 711 з ААМ8 або ААМ'10, або заміну глутаміну на ізолейцин в положенні амінокислоти 697 з ААМ5, і, необов'язково, в іншому відношенні ідентичному будь-якій з ФЕО 10 60 МО: 1 ї 3-12. У переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ІБЮОТКН (ЗЕО ІЮО МО:14), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГГ АІЗООТКНА (ЗЕО ІО МО:28) або І БІЗСОТКНА (ЗЕО ІО МО:29), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і 5) амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, де варіант капсидного білка містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін.
І00137| У іншому варіанті здійснення, варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ІЗООТКН (ЗЕО ІЮ МО:14), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАЇІЗООТКНА (ЗЕО ІО МО:28) або І БІЗСОТКНА (ЗЕО ІО МО:29), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і 5) амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з 5ЕО ІЮ МО:2. 00138) У іншому варіанті здійснення, варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ІЗООТКН (ЗЕО ІЮ МО:14), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАЇІЗООТКНА (ЗЕО ІО МО:28) або І ВІЗСОТКНА (ЗЕО ІО МО:29), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і Є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з БЕ ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИаЕ
РУМЕАРААДАЇ ЕНОКАМОНОЇ О5СОМРУЇ КИМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕССОМІ !АМЕОАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505САЗМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВСУОВІ ІМММУУСЕАРКАМЕКСЕМІОМКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕО МО ЗУЗТМІ ОВОИМІ СІЗО
ОТКНАВОААТАВЮУМТОСМІ РОМУМОВАрУМІ ОЗРІМАКІРНТОСИНЕНРЗБРІ МОСС КНРРРОГ І
КМТРУРАМРОЗТТЕЗААКЕАЗЕТОУЗТИОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕІЮМТЗМУМКОУММВЕТМОТ
МОамуУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО І МО:44) 00139) У переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка ААМ, що містить а) пептидну вставку в сН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ФАЮТТКМ (5ЕО ІО МО:13) і ГАОАОТТКМА (ЗЕО
ІО МО:27), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі АДАМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ, І 15Р, РЗАА, М570, МббК, 8810, 01018, 51097, В144К,
В144М, О164К, Т176Р, 1188І, 5196М, сп226Е, с2г36бМ, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗБЗІ, ОЗ68Н,
Мм4490, Т456К, 5463, 0472М, 84840, Аб24Т, РБ5ЗБ5, М5515, АБОЗЕ, Іб98М, М719М, 57211,
Ї7350 і їх комбінації, переважно, вибраної з 5109Т, Р2505, А524Т, А5БО9ЗЕ, Іб698У, М7О081І і/або
М719М. Ділянка пептидної вставки, переважно, локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. У особливо переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОАЮТТКМ (ЗЕБО ІЮ МО:13), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності Г(АОАОТТКМА (ЗЕО ІО МО:27) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ, і містить амінокислотну заміну І698М, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААУ, де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідному положенні.
Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу, ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в
ЗЕО ІО МО:2. У деяких варіантах здійснення, відповідна амінокислотна заміна являє собою амінокислотну заміну ІЄ99У, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМЗА, ААУЗВ або ААМО, заміну Іб87У, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ5, заміну І700М 60 заміна, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ7, заміну 1701М, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ8 або ААМ10. У особливо переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 909565, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ БЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАИІ МІ РЕ УКМІ РЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТ5ЕеСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ55:0502АЗМОМНУГИахУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУМ ОВ ІМММУУСЕАРКАЇ МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСОВОБІ ММРЕАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОМИ РаКОСаЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВОМІ АСАЮ
ТТКМАВОААТАВЮУМТОСМІ РОМУМОВАрУМІ ОБРІМАКІРНТОСИНЕНРЗРІ МОСС КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТООМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕМОУТЗМУМКЗУМУМВСЕТМОТ
МамуУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО ІЮ МО:45) (00140) У інших переважних варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОАДОТТКМ (5ЕО ІО МО:13), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАОСАОТТКМА (ЗЕО ІО МО:27), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ, і містить амінокислотну заміну М719М і необов'язково, заміну М7О8І, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ, де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідному положенні. 00141) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААУ, що містить а) пептидну вставку, локалізовану між амінокислотами 588 і 589 УР11 з ААМ'1,
ААМЗА, ААМЗВ, ААМб або ДАМО, амінокислотами 586 і 587 з ДАМА, амінокислотами 577 і 578 з
ААМ5, амінокислотами 589 і 590 з ААМ7, або амінокислотами 590-591 з ААМ8 або ААМ'10, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ОАДОТТКМ (ЗЕО ІЮО МО:13) і
Зо ГАОАОТТКМА (5ЕО ІЮО МО:27), і 5) заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 709 з
ААМЗА або ААМУЗВ, заміну аланіну на ізолейцин в положенні 709 з ААМІ або ААМб, заміну аспарагіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 707 з АДАМА або амінокислоти 709 з ДАМО, або заміну треоніну на ізолейцин в положенні амінокислоти 710 з ААМ7 або амінокислоти 711 з
ААМУВ8 або ААМ'10, або заміну глутаміну на ізолейцин в положенні амінокислоти 697 з ААМ5. У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка ААМ, що містить а) пептидну вставку, локалізовану між амінокислотами 588 і 589 МР1 з ДААМІ, ААМЗА,
ААМЗВ, ААМб або ААМО, амінокислотами 586 і 587 з ААМ4, амінокислотами 577 і 578 з ААМ5, амінокислотами 589 і 590 з ААМ7, або амінокислотами 590-591 з ААМ8 або ААМ'10, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність вибрану з ОАЮТТКМ (5ЕБО ІЮ МО:13) і
ГАФОАОТТКМА (ЗЕО ІЮО МО:27), і В) амінокислотну заміну серину на треонін в положенні 109, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ', ААМЗА, ААМЗВ, ААМ4, ААМ7, ААМ8, ААМУ або
ААМ10, або в положенні 108, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ5 або ААМб. У переважних варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОАЮОТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:13), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАОАОТТКМА (5ЕО ІЮ
МО:27), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМа2, і містить заміну серину на треонін в положенні амінокислоти 109 (5109Т) або амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 708 (М708І), порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, де варіант капсидного білка містить від 1 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін і має, переважно, щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО:2. У інших переважних варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОАЮТТКМ (ЗЕБО ІЮ МО:13), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАОСАЮОТТКМА (ЗЕО ІО МО:27), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ, і містить заміну серину на треонін в положенні амінокислоти 109 ії амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2.
(00142) У іншому варіанті здійснення, варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОАЮТТКМ (ЗЕО ІО МО:13), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАОАОТТКМА (ЗБЕО ІЮО МО:27), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і Б) щонайменше одну амінокислотну заміну, де амінокислотна послідовність варіанту капсиду не містить амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, і не містить заміну серину на треонін в положенні амінокислоти 109, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2. 00143) У іншому варіанті здійснення, варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОАЮТТКМ (ЗЕО ІО МО:13), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності Г(АОАОТТКМА (ЗЕБЕО ІЮ МО:27), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з БЕО ІЮ МО 2.
І00144)| У іншому переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з НОЇТКМІ (ЗЕО 10 МО:17),
ІАНОІТКМІА (ЗЕО ІЮО МО:60) і І АНОІТКМІА (ЗЕО ІЮО МО:32), і В) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ1Ї, І 15Р,
РЗАА, М570р, МббК, 810, О1О18, 51097, В14А4К, В144М, О164К, Т176Р, 11881, 5196У, с226Е, сезбМ, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗБЗІ, ЮЗ68Н, НЗ895, М4490, ТА56К, 5463, 0472М, Н484С,
А5Б24Т, Р5355, М5515, А5БО9ЗЕ, ІбЄО8М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. У деяких варіантах здійснення, капсидний білок ААМ містить одну або більше амінокислотних замін, вибраних з 51097, МК3895, А5БОЗЕ і/або М708І. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. У одному переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність НОЇТКМІ (ЗЕ
ІО МО:17), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної
Зо послідовності ІАНОСІТКМІА (ЗЕО ОО МО:60), або ГАНОСІТКМІА (5ЕБЕО ІЮ МО:32), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і містить амінокислотну заміну 5109Т, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО:2. 00145) У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність НОЇТКМІ (ЗЕО ІЮО МО':17), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ІАНОЇТКМІА (ЗЕО ІЮ МО:60) або ГАНОІТКМІА (ЗЕО ІЮ МО:32), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМЗ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРААДАЇ ЕНОКАМОНОЇ О5СОМРУЇ КИМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕССОМІ !АМЕОАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505САЗМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВСУОВІ ІМММУУСЕАРКАМЕКСЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОМИ РаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВОМІ АНОІТ
КМАНОААТАВВУМТОСМІ РЕОМУМОВАРУМІ ОСРІМАКІРНТРИаНЕНРЗРІ МОСЕИІ КНРРРОЇШКМ
ТРУРАМРОЗТТЕЗААКЕАЗЕЇТОМЗТИаОУМЕТЕМ ЕГОКЕМЗКАМ МРЕІЮМУТЗМУМКЗУММОЕТМОТМИа
МУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО 10 МО:46) (00146) У інших варіантах здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку, що містить, в основному що складається з або що складається з амінокислотної послідовності бо ГАНОІТКМІА, між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і В) щонайменше одну амінокислотну заміну, де амінокислотна послідовність варіанту капсиду не містить амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю
ААМ2. У інших варіантах здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ЮСІТКМІА (5ЕО ІЮ МО:61), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ІАНОІЇТКМІА (ЗЕО ІЮО МО:60), або І АНОІТКМІА (ЗЕО ІЮО МО:32), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ?2 і 5) заміну М7О81І, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2. У інших варіантах здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку що містить, в основному що складається з або що складається з амінокислотної послідовності ГАНОІТКМІА (ЗЕБО ІЮ МО:32) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ, і р) дві або більш амінокислотні заміни, де амінокислотна послідовність варіанту капсиду містить амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2.
І00147| У іншому переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з МОЮМУТКТ (ЗЕО ІО МО:16) і
ГАМОЮБУТКТА (ЗЕО ІО МО:31), ії Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІЇ, І15Р, РЗАА, М570, М6бК, Н810,
ОТО18, 51097, В144К, В144М, О164К, Т176Р, 11881, 5196М, сй226Е, с236М, І240Т, Р2505,
РЗбЗІ, ОЮЗ68Н, мМ4490, ТА56К, 5463М, 0472М, 84840, АБб24Т, Р5З55, М5515, АБОЗЕ, 1698,
М7ТО8І, М719М, 57211, І 7350 і їх комбінації. У деяких варіантах здійснення, капсидний білок ААМ містить одну або більше амінокислотних замін, вибраних з 51097, 51097-5463У, ОЗ68Н і
М708І. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ?2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. У одному переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МОЮМТКТ (ЗЕО ІЮ МО:16), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності | АМОЮМТКТА (5ЕО ІЮ
МО:31), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і містить амінокислотну заміну М7О81,
Зо порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності 3 усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО:2. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МОЮМТКТ (5ЕО ІЮ
МО:16), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГГ АМОЮМУТКТА (5ЕО ІЮ МО:31) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮ МО2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМУІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОратТАММІТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаН5О5
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВ ТТМРМАТЕОМОЗУЗТМІ ОВИаМІ АМОЮ
УТКТАНОААТАВВУМТОСМІ РЕОМУМОВАрУМІ ОБРІМАКІРНТОСНЕНРУОЗРІ МСОСЕСІ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕЮМТЗМММКЗУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (ЗЕО І МО:47) (00148) У інших варіантах здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МОЮУТКТ (ЗЕБО ІЮ МО:16), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГГ АМОЮМУТКТА (ЗЕО І МО:31), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ?2 і БЮ) амінокислотну заміну 51097, порівняно з послідовністю з ЗЕ ІЮ МО:2, і необов'язково, амінокислотну заміну 5463, де бо варіант капсиду має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність з усією довжиною амінокислотної послідовності, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:2. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МОЮМТКТ (5ЕО ІЮ
МО:16), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАМОЮУТКТА (ЗЕО ІЮ МО:31) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМАа, і Б) амінокислотну заміну 5109Т, порівняно з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІЮО МО:2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з 5ЕО 10 МО 2. 00149) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААУ, що містить а) пептидну вставку, локалізовану між амінокислотами 588 і 589 МР11 з ААМ'1,
ААМЗА, ААМЗВ, ААМб або ААМО, амінокислотами 586 і 587 з ААМ4, амінокислотами 577 і 578 з
ААМ5, амінокислотами 589 і 590 з ААМ7, або амінокислотами 590-591 з ААМ8 або ААМ'10, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з МОЮМУТКТ (ЗЕО ІО МО:16) і
ГАМОЮОУТКТА (ЗЕО ІЮ МО:З1), і В) амінокислотну заміну аспарагіну на лізин в положенні 313, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМІ1 або ААМб, або в положенні 314, порівняно з амінокислотною послідовністю ДАМО, або заміну серину на лізин в положенні 312 з ААМЗА або
ААМЗВ, або в положенні 315 з ААМ8 або ААМ'10, або заміну аргініну на лізин в положенні 303 з
ААМ4 або ААМ»5, або в положенні 314 з ААМ7. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МОЮМТКТ (5ЕО ІЮ
МО:16), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАМОЮУТКТА (ЗЕО ІЮ МО:31) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМАа, і Б) амінокислотну заміну МЗ312К, де варіант капсидного білка містить від 1 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін. 00150) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з РМЗТНОв (5ЕО ІЮО МО:25) і ГАРМЗТНОЗА (5ЕО І
МО:40), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі АДАМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ, І 15Р, РЗАА, М570, МббК, 8810, 01018, 5109Т, В144К,
Зо В144М, О164К, Т176Р, 1188І, 5196М, сп226Е, с2г36бМ, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗБЗІ, ОЗ68Н,
М4490, Т456К, 5463, 0472М, В8484С, АБ524Т, РБ5З55, М5515, АБОЗЕ, Іб98М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. У одному переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність РМ5ТНОЗ (ЗЕО ІО МО:25), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності
ГАРМЗТНОБА (5ЕБО ІЮ МО:40), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і містить амінокислотну заміну М708І, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕБЕО ІЮ МО:2. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність РМЗ3ТНОБ (5ЕО ІЮ МО:25), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАРМЗТНОБА (5БО ІЮО МО:40), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМа, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду АДАМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРААДАЇ ЕНОКАМОНОЇ О5СОМРУЇ КИМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕССОМІ !АМЕОАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОБЗЗОТОКАСООРАВКАВІ МЕБОТИарАОЗУМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗМТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ ММРИТВОМІ УМ ЗА ТМТРЗИТТТОА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИ РаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВОМІ АРМ 60 тТнНазАНОАДАТАВУМТОСМІ РОМУМОВАОРУМІ ОСРІМАКІРНТРИаНЕНРЗРІ МС ОЇ КНРРРОЇІ І
КМТРУРАМРОЗТТЕЗААКЕАЗЕТОУЗТИОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕІЮМТЗМУМКОУММВЕТМОТ
МОамуУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО ІЮМО:48) 00151) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКТТМКОА (ЗЕО ІО МО:62) і ГАМКТТМКОА (ЗЕО ІЮ
МО:35), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2) або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ, І 15Р, РЗАА, М570, МббК, 8810, 01018, 5109Т, В144К,
В144М, О164К, Т176Р, 1188І, 5196М, сп226Е, с2г3бМ, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗбЗІ, ОЗ68Н,
М4490, Т456К, 5463, 0472М, В8484С, АБб24Т, РБ5ЗБ5, М5515, АБОЗЕ, ІбО8М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. У одному переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКТТМКОА (ЗЕО ІЮО МО:62), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності
ГАМКТТМКОА (5ЕБО ІЮО МО:35), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і містить амінокислотну заміну М4490, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5БО ІЮ МО:2. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:62), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАМКТТМКОА (5ЕБО ІО МО:35), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМа, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду АДАМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕеСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОраТттПпАММІТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаН5О5
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВСОМІ АМКТ
ТЯКОАВКОДАТАВЮВУМТОСМІ РЕМУМООВОМУМІ ОСРІМАКІРНТОСНЕНРЗРІ МСЕ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕЮМТЗМММКЗУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (ЗЕО ІО МО:49) 00152) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ТМЕТЗРО (ЗЕО ІЮ МО:24) і | АТМКТ5РОА (ЗЕО І
МО:39), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2) або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ, І 15Р, РЗАА, М570, МббК, 810, О101Н, 5109Т, В144К,
В144М, О164К, Т176Р, 1188І, 5196М, сп226Е, с2г36бМ, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗБЗІ, ОЗ68Н,
Мм4490, Т456К, 5463, 0472М, 84840, Аб24Т, РБ5ЗБ5, М5515, АБОЗЕ, Іб98М, М719М, 57211,
Ї7350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ?2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААУ.
У спорідненому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка ААМ, що містить а) пептидну вставку, локалізовану між амінокислотами 588 і 589 УР1І з ААМІ1, ААМЗА,
ААМЗВ, ААМб або ААМО, амінокислотами 586 і 587 з ААМ4, амінокислотами 577 і 578 з ААМ5, амінокислотами 589 і 590 з ААМ7, або амінокислотами 590-591 з ААМ8 або ААМ'10, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ТМКТЗРО (5БО ІЮ МО:24) і
ГАТМКТЗРОА (5ЕО ІЮ МО:39), і В) заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 709 з 60 ААМЗА або ААМЗВ, заміну аланіну на ізолейцин в положенні 709 з ААМ1 або ААМб, заміну аспарагіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 707 з АДАМА або амінокислоти 709 з ДАМО, або заміну треоніну на ізолейцин в положенні амінокислоти 710 з ААМ7 або амінокислоти 711 з
ААМУВ8 або ААМ'10, або заміну глутаміну на ізолейцин в положенні амінокислоти 697 з ААМ5. У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку що містить, в основному що складається з або що складається з амінокислотної послідовності ГГ АТМКТЗРОА (ЗЕО ІЮ МО:39) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і 5) амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, де варіант капсидного білка містить від 1 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін. У іншому варіанті здійснення, варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ТМКТ5РО (ЗЕО ІЮО МО:24) між амінокислотами 587 і 588 капсиду
ААМ2, і В) амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО:2. 00153) У іншому варіанті здійснення, варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ТМКТ5РО (ЗЕО ІЮ МО:24), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності (І АТМАТ5РОА (ЗЕО ІО МО:39), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ/2 і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з ЗЕО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду
ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О50:ОМРМУЇ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕССОМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаН5О5
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИ РаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВОМІ АТМА
Т5РОАВОААТАВУМТОСМІ РОМУМОВАрУМІ ОЯВБРІМАКІРНТОИаНЕНРЗРІ МСБО КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕЮМТЗМММКЗУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (ЗЕО ІО МО:50) 00154) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з СКЗКМІО (ЗЕО ІЮО МО:23) і ГАСКЗКМІСА (5ЕО І
МО:38), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі АДАМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ, І 15Р, РЗАА, М570, МббК, 8810, О101Н8, 5109Т, В144К,
В144М, О164К, Т176Р, 1188І, 5196М, сп226Е, с2г36бМ, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗБЗІ, ОЗ68Н,
М4490, Т456К, 5463, 0472М, В8484С, АБб24Т, РБ5ЗБ5, М5515, АБОЗЕ, ІбО8М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності 3 усією довжиною амінокислотній
БО послідовності, яка вказана в 5ЕО ІО МО:2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду АДАМ містить пептидну вставку, локалізовану між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, що містить амінокислотну послідовність ЗК5КМІЮО (5ЕО ІЮ МО:23), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ( АСКЗКМІСА (5ЕО І
МО:38), і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з ЗЕО ІЮ МО:2. У інших варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ містить а) пептидну вставку що містить, в основному що складається з або що складається з амінокислотної послідовності ГГ АОК5КМІВА (ЗЕБЕО ІО МО:38) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і містить щонайменше одну амінокислотну заміну.
Ї00155| У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну бо послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095,
щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 98595 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРААДАЇ ЕНОКАМОНОЇ О5СОМРУЇ КИМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕССОМІ !АМЕОАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТИарАОБУМРОРОРІ ЧФОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСІГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ ММРИТВОМІ МІ ЗА ТМ РЗатттОА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИ ТРаКОСаЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОЗУЗТМІ ОВОаМІ АСК
КМІСАВОДАТАВЮВУМТОСМІ РЕОМУМООВОУМІ ОСРІМЖМАКІРНТОаТНЕНРЗРІ МСЕ КНРРРОШІК
МТРУРАМРОТТЕ5ЗААКЕАЗЕІТОУЗТИаОМ5МЕЕМ БЕ ОКЕМЗКАММР ЕОМ ТММ МКОУММВЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (ЗЕО ІО МО:51) 00156) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з АБОЗТКА (ЗЕО ІЮО МО':15) і ГГ ААБОБЗТКАА (5ЕО ІЮ
МО:30), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі АДАМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ, І 15Р, РЗАА, М570, МббК, 8810, 01018, 5109Т, В144К,
В144М, О164К, Т176Р, 1188І, 5196М, сп226Е, с2г36бМ, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗбБЗІ, ОЗ68Н,
М4490, Т456К, 5463, 0472М, В8484С, АБб24Т, РБ5ЗБ5, М5515, АБОЗЕ, ІбО8М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або більшу ідентичність амінокислотної послідовності 3 усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮО МО:2. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду
Зо містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність АБОЗТКА (ЗЕО ІЮ МО:15), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності | ААБОЗТКАА (5ЕО ІЮО МО:30), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮ МО2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИЇІ МІ РЕУКМІ ЯРЕМИ ОКИЕ
РУМЕАРААДАЇ ЕНОКАМОНОЇ О5СОМРУЇ КИМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕССОМІ !АМЕОАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505САЗМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВСУОВІ ІМММУУСЕАРКВІ МЕКГЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИ РаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВОМІ ААБО
ЗТКААВОААТАВУМТОСМІ РЕМУМООВОМУМІ ОСРІМАКІРНТООНЕНРЗРІ МСЕ КНРРРОШІК
МТРУРАМРОТТЕ5ЗААКЕАЗЕІТОУЗТООМ5МЕІЕМ ЕІ ОКЕМЗКАММРЕЮМТЗМУМКОМММВЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (ЗЕО І МО:52)
І00157| У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з КОКАРЗТ (ЗЕО ІЮ МО:26) і І АКОКАРТЗА (5ЕО ІЮ
МО:41), і В) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі АДАМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ, І 15Р, РЗАА, М570, МббК, 8810, 01018, 5109Т, В144К,
В144М, О164К, Т176Р, 1188І, 5196М, сп226Е, с2г36бМ, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗБЗІ, ОЗ68Н,
М4490, Т456К, 5463, 0472М, В8484С, АБб24Т, РБ5ЗБ5, М5515, АБОЗЕ, ІбО8М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між бо амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або більшу ідентичність амінокислотної послідовності 3 усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮО МО:2. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність КОКАРБЗТ (ЗЕО ІЮ МО:26), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАКОКАРТЗА (5ЕО ІЮ МО:41) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРСОМІ РОМ ЕОТІ 5ЕСІВОММКІ КРаРРРРКРАЕВНКООБАСЇ МІ РЕМКМІ СРЕМИаЇ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРУЕРОЗБЗБОЗО ТаКАСООРАВКВАВІ МЕБОТИарАОБМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ЄМ ЗТРУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУОВ ІМММУ СЕ АРКАЇ МЕКГЕМІОУМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БА ТМТ РОСИ ТТТО5А
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМ5У ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОБЕЕКЕЕРОБОМ ІТРЕЕКОСЗЕКТММОТЕКУММІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОИаВУ5Т МІ ОВОМІ АКОВ
АРБТАВОААТАВЮВУМТОСМІ РЕОМУМОЮВОММІ ОСРІМАКІРНТОСНЕНРОРІ МСС ЕІ КНРРРОШІК
МТРУИРАМРОТТЕЗААКЕАЗЕІ ТОМЗТасмМеМЕЕМ ЕЕГ ОКЕМЗКАУММРЕЮМТ5МММКОУММоЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (ЗЕО ІО МО:53) 00158) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з НОЮТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:19) і ГАНОЮТТКМА (5ЕО ІЮ
МО:34), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2) або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі ААМ
Зо (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі в одному або декількох з відповідних положень: МІ1Ї, І 15Р, РЗАА, М570, М6бК, 810,
ОТО18, 5109Т, А144К, В1І44М, О164К, Т176Р, 1188І, 5196М, сй226Е, с236М, І240Т, Р2БО5,
МЗ12К, РЗбЗІ, ОЮЗ68Н, М4490, ТА56К, 5463У, 0472М, ВН484С, АБб24Т, РБ5З55, М5515, АБОЗЕ,
ІЄ98М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІО МО:2. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність НООТТКМ (ЗЕО І
МО:19), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАНОЮТТКМА (ЗЕО ІО МО:34) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮ МО2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРСОМІ РОМ ЕОТІ 5ЕСІВОММКІ КРаРРРРКРАЕВНКООБАСЇ МІ РЕМКМІ ЯРЕМИ ОКИаЕ
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
БО СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРУЕРОЗБЗБОЗО ТаКАСООРАВКВАВІ МЕБОТИарАОБМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ГУ ЗТРИУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУОВ ІМММУ СЕ АРКА МЕКІ ЕМІОМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМ5У ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОБСЕЕКЕЕРОБОМ ТРЕЕКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЄЕІВТТМРМАТЕОМОа ЗБУТ МІ ОВОИМГАНОЮ
ТТКМАВОАДАТАВЮВУМТОСМІ РЕМУМОЮВОММІ ОСРІМАКІРНТОСНЕНРОУРІ МОСС ЕІ КНРРРОШІК
МТРУИРАМРОТТЕЗААКЕАЗЕІ ТОМЗТасОМеМЕЇЕМ ЕЕГ ОКЕМО5КАУМРЕЮМТОМИМКОУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (ЗЕО ІО МО:54)
00159) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ІЗМЕМЕН (5ЕО ІЮО МО:21) і Ї РІЗМЕМЕНА (5ЕО ІЮ
МО:36), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі АДАМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі в одному або декількох з відповідних положень: МІ1Ї, І 15Р, РЗАА, М570, М6бК, 810,
ОТО18, 5109Т, А144К, В1І44М, О164К, Т176Р, 1188І, 5196М, сй226Е, с236М, І240Т, Р2БО5,
МЗ12К, РЗбЗІ, ОЗ68Н, М4490, ТА56К, 5463У, 0472М, ВН484С, АБб24Т, РБЗБ55, М5515, АБОЗЕ,
ІЄ98М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО:2. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ІЗМЕМЕН (ЗЕО ІЮ
МО:21), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГРІЗМЕМЕНА (5ЕО ІЮ МО:36), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРСОМІ РОМ ЕОТІ 5ЕСІВОММКІ КРаРРРРКРАЕВНКООБАСЇ МІ РЕМКМІ СРЕМИаЇ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНБРУЕРОЗЗВИа ТаКАСООРАВКАІ МЕСОТОарАОЗБУРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ЄМ ЗТРУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУОВ ІМММУ СЕ АРКАЇ МЕКГЕМІОУМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
Зо ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІТООМІ МІ БА ТМТРЗИаТТТОА
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМ5У ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОБЕЕКЕЕРОБОМ ТЕЕКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМИа5БУЗ ТМ ОВОМІ РІБМЕ
МЕНАНОАДАТАОУМТОСМІ РОМУМООВОМУМІ ОСРІМАКІРНТОСНЕНР5РІ МСБО КНРРРОШІК
МТРУИРАМРОТТЕЗААКЕАЗЕІ ТОУЗТООМЗМЕІЕМЕГОКЕМО5КАУМРЕЮМТ5МММКОУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (ЗЕО ІО МО:55) 00160) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ОАМАМЕМ (ЗЕО ІЮ МО:22) і ГРОАМАМЕМА (ЗЕО ІЮ
МО:37), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі АДАМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ, І 15Р, РЗАА, М570, МббК, 8810, 01018, 5109Т, В144К,
В144М, О0164К, Т176Р, 1188І, 5196У, (226Е, с236М, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗбЗІ, ОЗ68Н,
М4490, Т456К, 5463У, 0472М, 84840, АБ24Т, РБЗ55, М5515, АБОЗЕ, Іб98М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або більшу ідентичність амінокислотної послідовності 3 усією довжиною амінокислотній
БО послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮО МО:2. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ФАМАМЕМ (ЗЕО ІЮ МО:22), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГРОАМАМЕМА (ЗЕО ІЮО МО:37), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮ МО2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРСОМІ РОМ ЕОТІ 5ЕСІВОММКІ КРаРРРРКРАЕВНКООБАСЇ МІ РЕ МКМ ЯРЕМИ ОКИаЕ бо РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНБРУЕРОЗЗВИа ТаКАСООРАВКАІ МЕСОТИрАОЗУМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ГУ ЗТРИУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУ ОВ ІМММУ С ЕВ! РКВІ МЕКІ ЕМІОМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМ5У ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОВЕЕКЕЕРОБаМИРЯКОСЗЕКТММОІЕКУМІТОЕЕЕІАТТЯМРМАТЕОМОа БУТ МІ ОВОМІ РОАМ
АМЕМАНОААТАВЮУМТОСМІ РЕМУМУООАОММІ ОСРІМЖМАКІРНТОСНЕНРУОРІ МОСС КНРРРОЇ І
КМТРМРАМРОТТЕЗААКЕА5ЗЕЇТОУЗТаОМ5МЕЕМ ЕЕГ ОКЕМЗКАМ МРЕІЮМТЗМУМКОМММОєТМОТ
МамуУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО ІО МО:56) 00161) У іншому варіанті здійснення, даний винахід стосується варіанту капсидного білка
ААМ, що містить а) пептидну вставку в СН-петлі капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з НРОТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:18) і ГАНРОТТКМА (5ЕО ІЮ
МО:33), і Б) одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2), або відповідну заміну в іншому вихідному серотипі АДАМ (тобто, відмінному від ААМ2), де замінена амінокислота(амінокислоти) не зустрічаються в природі у відповідних положеннях: МІ, І 15Р, РЗАА, М570, МббК, 8810, 01018, 5109Т, В144К,
В144М, О0164К, Т176Р, 1188І, 5196У, 226Е, с236М, І240Т, Р2505, МЗ312К, РЗбЗІ, ОЗ68Н,
М4490, Т456К, 5463У, 0472М, 84840, АБ24Т, РБЗ55, М5515, АБОЗЕ, Іб98М, М708І, М719М, 57211, 17350 і їх комбінації. Переважно, ділянка пептидної вставки локалізована між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або більшу ідентичність амінокислотної послідовності 3 усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮО МО:2. У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність НРОТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:18), або яка містить, яка в основному складається з або яка складається з амінокислотної послідовності ГАНРОТТКМА (5ЕО ІЮ МО:33) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичність послідовності, або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності: 001621
МААРИМІ РОМ ЕОТІ 5ЕСІВОМ/МУКІ КРОРРРРКРАЕННКОО5НОЇ МІ РИУКМІ СРЕМОаЇ ОКИаєЕРМ
МЕАВСАААЇГ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМУІ КУМНАВАЄЕРОЕВІ КЕОТЗЕССОИМІ СААМЕОАККВМІ ЕРІ СІ.
МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРУМЕРОЗЗЗИа ТаКАСООРАВКВІ МЕСОТарАрЗУРОРОРІ ЧОРРААРЗ ві атмМїїІмаЇТаза4дРМАЮММЕСА ОСИ МЗБаММ НОТУ МОаОвМІТТ5ТАТМАЇ РТУММНІ КО 5БОБаАЗМОМНУгахУ5ТРМУСМЕОЕМАЕНСНЕЗРАВУТОВІ ІМУММУУСЕАРКВІ МЕКІ ЕМІОУКЕМТОМ раттПпАММІТ5ТМОМЕТО5ЕМОЇ РУМІ авбАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМСМІ ТІ ММаБОдДУаВОВЕМУ
СГЕМЕРБОМІ АВТОММЕТЕЗУТЕРЕОМРЕНЗЗМАН5БОЗБІ ОВІ ММРИТВОМІ УМ АТМ РЗОаТТТО5ВІ.
ОББОАДСАБОІВВОЗАМУМІ РЕРСУВООВУЗКТЗАОМММЗЕМБУУ ТОАТКУНІ МЕВОБІ ММРОаРАМА5
НКОСЕЕКЕЕРОБОамМ ІТРЕЕКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІА ТТМРМАТЕОМИавУТМ ОВОМІ АНРОТ
ТКМАНКНОАДАТАОЮУМТОСМІ РОМУМООСАОМУМІ ОВРІМАКІРНТОСНЕНРОЗРІ МОСС КНРРРОЇІКМ
ТРМУИРАМРОТТЕЗААКЕА5ЗРІТОУЗТИаОМ5МЕЕМ ЕЕ ОКЕМ5КАММРЕІЮУТ5МУМКОУММОгТМОоТМа
МУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО 10 МО:57). 00163) У декількох аспектах, даний винахід стосується варіанту капсидного білка ААМ, що містить одну або більше амінокислотних замін, порівняно з відповідним вихідним капсидним білком ААМ, де варіант капсидного білка, коли присутній у віріоні ААМ, додає збільшеної інфекційності для клітини сітківки порівняно з інфекційністю для клітин сітківки віріона ААМ, що містить відповідний вихідний капсидний білок ААМ. 00164) У деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну заміну РЗ4А, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2) або амінокислотну заміну РЗЗА, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ5 (ЗЕО І
МО:6). У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО:2 або 5ЕО ІЮ МО:6, і містить амінокислотну заміну 60 РЗ4А або РЗЗА, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 або ААУ відповідно.
У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що містить амінокислотну заміну РЗ4А порівняно з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО 2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5БО ІО МО:2. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну РЗ4А, порівняно з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІЮ МО:2, де варіант капсидного білка містить від 1 до 5, від 5 до 10 або від до 15 амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю капсидного білка
ААМ2, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:2. 00165) У інших варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну 10 заміну в положенні амінокислоти 164, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2) або у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ (тобто, відмінного від ААМ2), де замінена амінокислота не зустрічається в природі у відповідному положенні. У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІО МО 2, ії містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 164, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2). У деяких варіантах здійснення, віріон гТААМ містить амінокислотну заміну глутаміну на лізин в положенні амінокислоти 164, порівняно з амінокислотною послідовністю з ААМ1, ААМ2 або
ААМб, або в положенні амінокислоти 165, порівняно з амінокислотною послідовністю з ААМ7,
ААУВ або ААМ'10; або містить заміну серину на лізин в положенні амінокислоти 160 з ААМ5, або містить заміну аланіну на лізин в положенні амінокислоти 164 з ДАМО. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 164 (наприклад, О164К), порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО І
МО:2), де варіант капсидного білка містить від 71 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю капсидного білка ААМ2, вказаною в ЗЕО ІО МО:2. У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що містить а амінокислотну заміну 2164К порівняно з
Зо амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2. У інших варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни 0164К і М708І, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2), або відповідні заміни в іншому вихідному серотипі
ААМ (тобто відмінного від ААМ2), і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО:2. 00166) У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 698, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО:2) або у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ (тобто відмінного від ААМ2), де замінена амінокислота не зустрічається в природі у відповідному положенні. У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕБЕО ІЮО МО 2, і містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 698, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2). У деяких варіантах здійснення, віріон ТААМ містить амінокислотну заміну ізолейцина на валін в положенні амінокислоти 698, порівняно з амінокислотною послідовністю з ААМ2, або в положенні амінокислоти 699, порівняно з амінокислотною послідовністю з ААМЗА, ААМЗВ, або
ААМО, або в положенні амінокислоти 687 з ДАМ5, або в положенні амінокислоти 700 з ДААМ7, або в положенні амінокислоти 701 з ААМ8 або ААМ10. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 699 (наприклад, Іб98М), порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІО МО:2), де варіант капсидного білка містить від 1 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю капсидного білка ААМ2, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2. У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що містить амінокислотну заміну ІбО8М, порівняно з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮО МО:2 і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною 60 послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:2.
І00167| У інших варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 109, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2), або у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ (тобто відмінного від ААМ2). У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІО МО 2, ії містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 109, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2). У деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну серину на треонін в положенні 109, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ1!, ААМЗА, ААМЗВ,
ААМ4, ААМ7, ААМ8, ААМО або ААМ10, або в положенні 108, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ5 або ААМб. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну 51097, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, де варіант капсидного білка містить від 1 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін. У інших споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну 5109Т і амінокислотну заміну АБОЗЕ, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2. У деяких варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни 51091 і А493М, і необов'язковий, АБОЗЕ і/або М708І, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААДМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2), або відповідні заміни в іншому вихідному серотипі ААМ (тобто відмінного від
ААМ2) і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО 2. У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни 51097, А493М, АБОЗЕ і М708І, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2), або відповідні заміни в іншому вихідному серотипі
ААМ (тобто відмінного від ААМ2) і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній
Зо послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО 2. У інших переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни 51097 ії М708І, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМа2, і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО І МО 2, або є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з ЗЕО ІЮ МО 2. 00168) У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 593, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2), або у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ (тобто відмінного від ААМ2). У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІО МО 2, ії містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 593, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮО МО:2). У деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну гліцину на глутамат в положенні амінокислоти 594, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ'1,
ААМЗА, ААМб або ААМУ, або в положенні амінокислоти 583 з ААМ5, або в положенні амінокислоти 596 з ААМ8 або ААМ10, або амінокислотну заміну аргініну на глутамат в положенні амінокислоти 594 з ААМЗВ, або амінокислотну заміну аспартату на глутамат в положенні амінокислоти 592 з ААМ4 або амінокислотну заміну глутаміну на глутамат в положенні 595 з ААМ7. У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну А5У9ЗЕ, порівняно з амінокислотною послідовністю АДАМА, і не містить одну або більше з наступних амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2:
І19М, МЗ369А, К2бк, М2150, 53555, М46А і 5196Р. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни АБОЗЕ і М5960, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 99965 ідентичності з усією довжиною амінокислотної послідовності, вказаною в ЗЕО ІЮ МО 2. У інших 60 варіантах здійснення, варіант капсиду містить амінокислотні заміни А5У9ЗЕ і М5960, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю ААМ2. У інших варіантах здійснення, варіант капсиду містить амінокислотні заміни АБУОЗЕ ії М708І, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995 ідентичності з усією довжиною амінокислотної послідовності, вказаною в ЗЕО ІЮО МО 2. У інших варіантах здійснення, варіант капсиду містить амінокислотні заміни АБОЗЕ їі М70О81І, порівняно з амінокислотною послідовністю
ААУ і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю ААМ2. 00169) У інших варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО:2) або у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ (тобто відмінного від ААМ2) де замінена амінокислота не зустрічається в природі у відповідному положенні.
Переважно, віріон ГААМ не містить заміну проліну на серин в положенні амінокислоти 250, порівняно з ААМ2, або відповідною амінокислотою в іншому вихідному серотипі ААМ. У деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в
ЗБО ІЮО МО 2, і містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕБО ІЮ МО:2). У переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить заміну валіну на ізолейцин (М708І) в положенні амінокислоти 708, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в ЗЕО ІЮ МО 2, або є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з ЗЕО ІЮ МО:2, де варіант капсидного білка не містить амінокислотну заміну Р2505. У деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить заміну валіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 709 з
ААМЗА або ААМУЗВ, заміну аланіну на ізолейцин в положенні 709 з ААМІ або ААМб, заміну
Зо аспарагіну на ізолейцин в положенні амінокислоти 707 з АДАМА або амінокислоти 709 з ДАМО, або заміну треоніну на ізолейцин в положенні амінокислоти 710 з ААМ7 або амінокислоти 711 з
ААМУВ8 або ААМ'10, або заміну глутаміну на ізолейцин в положенні амінокислоти 697 з ААМ5. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну
МТ7О81І, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, де варіант капсидного білка містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, і де варіант капсидного білка не містить амінокислотну заміну Р2505. У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну М7О081І і також містить амінокислотну заміну АБОЗЕ і/або 5109Т, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2. У інших споріднених варіантах здійснення, варіант капсиду містить амінокислотні заміни М708І ії АБОЗЕ, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, де варіант капсидного білка є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю ААМ2. У інших споріднених варіантах здійснення, варіант капсиду містить М7О81І ї 5109Т амінокислотні заміни, порівняно з амінокислотною послідовністю
ААМ2, де варіант капсидного білка є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю ААМ2. У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни М708І ї М719М, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМО2 і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в
ЗЕО ІЮ МО 2, або є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з 5ЕО ІЮ
МО:2. У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни
МТО8І ї К733С, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО 2 або є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з 5ЕО ІЮ МО:2. У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни М708І і (57270, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮ МО 2, або є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю з БЕО ІЮ МО 2. 00170) У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 196, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО:2) або у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ (тобто відмінного від ААМ2), де замінена амінокислота не зустрічається в природі у відповідному положенні і є, необов'язково, відмінною від проліну. У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮО МО 2, і містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 196, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2), і що є, необов'язково, відмінної від заміни 5196Р. У переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну серину на тирозин в положенні амінокислоти 196 з ААМ2 або ААМО, або в положенні амінокислоти 197 з ААМ7, ААУВ8 або ААМ10, або в положенні амінокислоти 186 з ААМ5; або заміну аланіну на тирозин в положенні амінокислоти 196 з ААМ1 або ААМб; або заміну метіоніну на тирозин в положенні амінокислоти 191 з ДАМ4; або заміну треоніну на тирозин в положенні амінокислоти 196 з
ААМЗА або ААМЗВ. У спорідненому варіанті здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що містить амінокислотну заміну 5196, порівняно з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2, і є в іншому відношенні ідентичним з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 196, відмінну від заміни 5196Р (наприклад, містить заміну 5196), порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІО МО:2), де варіант капсидного білка містить від 1 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю капсидного білка
ААДУ2, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2. 00171) У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 175, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2
Зо (ЗЕО ІЮ МО:2), або у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ (тобто відмінного від ААМ2), де замінена амінокислота не зустрічається в природі у відповідному положенні. У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІО МО 2, ії містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 175, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2). У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду містить амінокислотну заміну О175Н, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, як указано в ЗЕО ІЮ МО:2, або заміну глутаміну на гістидин у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 175 (наприклад, О175Н), порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО І
МО:2), де варіант капсидного білка містить від 71 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю капсидного білка ААМ2, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:2. 00172) У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 64, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО:2) або у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ (тобто відмінного від ААМ2), де замінена амінокислота не зустрічається в природі у відповідному положенні. У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІО МО 2, ії містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 64, порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2). У деяких варіантах здійснення, віріон гТААМ містить амінокислотну заміну Рб45, порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, як указано в ЗЕО ІЮ МО:2, або заміну проліну на серин у відповідному положенні іншого вихідного серотипу ААМ. У споріднених варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну в положенні амінокислоти 64 60 (наприклад, Рб45), порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2), де варіант капсидного білка містить від 1 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, порівняно з амінокислотною послідовністю капсидного білка ААМ2, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:2. 00173) У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну послідовність що має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595 або щонайменше 98595 ідентичність з послідовністю капсиду ААМ дикого типу, вибраною з групи, яка складається з ЗЕО ІЮ МО: 1,2, 3,4, 5,6, 7, 8, 10, 11 ї 12, і також містить Її) одну або більше амінокислотних замін, вибраних з групи, яка складається з РЗАА, 51097-М708І, АБОЗЕ--М5960,
Мт081-М719М, М7081-н57270, 510971 А493УЖАБОЗЕНМ7О8І, М7081-5733С, О164К і 1698М, і/або (ї) пептидну вставку, вибрану з групи, яка складається з ОАОТТКМ (5ЕО ІЮ МО:13), ІБЮОТКН (ЗЕО ІЮ МО 14), АБОЗТКА (ЗЕО ІЮ МО:15), МОЮМТКТ (5ЕО ІЮ МО:16), НОІТКМІ (ЗЕО ІЮ МО:17),
РОАМАМЕМ (5ЕО ІЮ МО:63), ТМАТ5РО (5ЕО 10 МО: 24), РМ3ТНОаБ5 (5ЕО ІЮ МО:25), КОВАР5Т (ЗЕО ІЮ МО:26), НОЮТТКМ (5ЕО І МО:19), НРОТТКМ (5ЕО 10 МО:18), МКТТМКО (5ЕО 1
МО:20), аКЗКМІО (ЗЕО 10 МО:23), РІЗМЕМЕН (5ЕО ІО МО:64), І АОАОТТКМА (5ЕО ІЮ МО:27),
ГАІБВОТКНА (5ЕО І МО:28), І! СІЗБРОТКНА (5ЕО ІЮ МО:29), ГГ ААБОБЗТКАА (5ЕО ІО МО:30),
ГАНОІТКМІА (5ЕО 10 МО:32), ГГ РОАМАМЕМА (5ЕО ІЮ МО:37), ГАМОЮМУТКТА (5ЕО ІЮ МО:З1),
ГАТМАТ5РОА (5ЕО ІО МО:39), І АРМЗТНаБЗА (5ЕО ІЮ МО:40), І АКОВАРБ5ТА (5ЕО ІО МО41),
ГАНООЮТТКМА (5ЕО ІЮО МО:34), ГГ АНРОТТКМА (5ЕО ІЮ МО:33), І АМКТТМКОА (5ЕО ІЮО МО:35),
ГАСКЗКМІБА (5ЕО ІЮ МО:38) і ГРІЗМЕМЕНА (5ЕО ІО МО:36). У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ містить вказані одну або більше амінокислотних замін і/або пептидних вставок і є в іншому відношенні ідентичним послідовності, вибраний з групи, яка складається з
ЗЕО ІЮ МО: 1-12.
ІЇ00174| У деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ являє собою предковий капсидний білок. Під предковим капсидним білком розуміють еволюційного предка капсидного білка, що виявляється в природі в цей час, наприклад, ААМ1, ААМ2, ААМ3З, ААМА4,
ААМУ5, АДУб, ААМ7, ААМ8, ААМО9, ААМГП10, ААМ11, ААМ12, ААМ'13, який отримують іп 5іїсо за допомогою випадкової заміни амінокислот в положеннях виродженості між капсидними білками
ААМ, що виявляються в природі в цей час. Один необмежувальний приклад предкового капсиду представлений нижче, де положення виродженості (залишки 264, 266, 268, 448, 459, 460, 467, 470, 471, 474, 495, 516, 533, 547, 551, 555, 557, 561, 563, 577, 583, 593, 596, 661, 662,
Зо 664, 665, 710, 717, 718, 719, 723) відмічені як "Х": 001751
МААРИМІ РОМ ЕОМІ 5ЕСІВЕММ ОЇ КРЕОАРКРКАМООКООВСИ ВИ МІ РОМКМУІ СРЕМОЇ ОКИЕРМ
МААРрАААЇ ЕНОКАМООСОЇ КАСОМРМУЇ ВУМНАВСАЕРОЕВІ ОБОТ5ЕССОМІ аВАМЕОАККИМІ ЕРІ СІ.
МЕЕВАКТАРЕАККАРУЕРЗБРОВЗРОБЗТИа акКкКаооРАККВІ МЕБОТИОЗЕЗУРОРОРІ СЕРРАСРБО ав а5аТМАДасайОаАРМАЮММЕСАВИаМамМмАБаМуУНСОЗ ТМ СОВМІТТ5ТАТМА РТУММНІ КО вХхБХахТМОМнУгаХУ5ТРИУСУБОЄМАЕНСНЕЗРАВУТОВИ ІМУММУСЕАРКАЇ МЕКІ ЕМІОУКЕМТТМ раТмппАММІТЗТМОМЕЗОБЕМОЇ РУМ аивзАНОССІ РРЕРАОМЕМІРОМОаМмІ ТІ МмМОаЗОАМавоЕу
СГЕМЕРБОМІ АВТОММЕТЕЗУТЕРЕОМРЕНЗЗМАН5БОЗБІ ОВІ ММРІИТВОМІ ММ ХАТОЗТОаСТАСОХХЕЇ.
ГРЄОХаРХХМОХОАКМУМ РЕРСУВООВМУ5КТІ ХОМММОМЕАМУТаАТКУНІ МЕ ВХ5І ММРОМАМАТ
НКОСЕХЕАЕЕРБЗББОМ ІРЕКХадаТхмММТхХІ ХММУМХТХЕЕЕІКТТМРМАТЕХМОИУМАХМІ ОБОБМТАРХТО
ХУМБОСАЇ РОМУМОМАОУМІ ОСРІМАКІРНТОСМЕНРЗРІ МОСС КНРРРОШІКМТРУРАМРРХХ
ЕХХАКЕАБЕІТОУЗТаОМЗМЕІЕМЕГОКЕМУЗКАММРЕІЮМТ5ММАКЗХММОБАМХХХОамМУХ ЕР АРІСТ
ВМ ТАМ. (5ЕО ІО МО:58) 00176) У деяких варіантах здійснення, предковий капсидний білок містить амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності, яка вказана в 5ЕО ІЮО МО:58. У деяких варіантах здійснення, предковий капсидний білок містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності ААМ2, наприклад, як указано в 5ЕО ІЮО МО 2. У деяких варіантах здійснення, предковий капсидний білок містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною амінокислотній послідовності з предкової послідовності, описаної в ЗЕБЕО ІЮ МО:58 або в 5ЕО ІЮО МО:2, і містить один або більше амінокислотних залишків, вибраних з групи, яка складається з: аланіну (А) в 264, аланіну (А) в 266, серину (5) в 268, аланіну (А) в 448, треоніну (Т) в 459, аргініну (К) в 460, аланіну (А) в 467, бо серину (5) в 470, аспарагіну (М) в 471, аланіну (А) в 474, серину (5) в 495, аспарагіну (0) в 516,
аспарагіну (0) в 533, глутаміну (0) в 547, аланіну (А) в 551, аланіну (А) в 555, глутамінової кислоти (Е) в 557, метіоніну (М) в 561, серину (5) в 563, глутаміну (0) в 577, серину (5) у 583, валіну (М) в 593, треоніну (Т) в 596, аланіну (А) у 661, валіну (М) в 662, треоніну (Т) в 664, проліну (Р) в 665, треоніну (Т) в 710, аспарагінової кислоти (0) в 717, аспарагіну (М) в 718, глутамінової кислоти (Е) в 719 і серину (5) в 723. У деяких переважних варіантах здійснення, варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995, в деяких випадках 10095 ідентичність амінокислотної послідовності з усією довжиною наступній амінокислотній послідовності і містить один або більше амінокислотних залишків, вибраних з групи, яка складається з: аланіну (А) в 264, аланіну (А) в 266, серину (5) в 268, аланіну (А) в 448, треоніну (Т) в 459, аргініну (К) в 460, аланіну (А) в 467, серину (5) в 470, аспарагіну (М) в 471, аланіну (А) в 474, серину (5) в 495, аспарагіну (0) в 516, аспарагіну (0) в 533, глутаміну (0) в 547, аланіну (А) в 551, аланіну (А) в 555, глутамінової кислоти (Е) в 557, метіоніну (М) в 561, серину (5) в 563, глутаміну (0) в 577, серину (5) у 583, валіну (М) в 593, треоніну (Т) в 596, аланіну (А) у 661, валіну (М) в 662, треоніну (Т) в 664, проліну (Р) в 665, треоніну (Т) в 710, аспарагінової кислоти (0) в 717, аспарагіну (М) в 718, глутамінової кислоти (Е) в 719 і серину (5) в 723: 00177
МААРрИмІ РОУМІ ЕОМІ БЕСІВЕМ М ОЇ КРЕАРКРКАМООКОВОрИ ВИ МІ РО УКМІ РЕМ! ОКОаЕРУ
МААВААДАЇ ЕНОКАМОООЇ КАСОМРМУ АУМНАВАЕРОЕВ ОБОТЗЕССОИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ СІ.
МЕЕВАКТАРЕККАРМЕРБРОВЗРОБЗТИСККаосОРАККАІ МЕБОТИарзЕБЗМРОРОРІ ЧСЕРРАСРБ а г ад5атмААаааАРМАЮММЕСАВСаМамаАБаминсовпгмі аремМІТТЗТАТУАГРТУММНІ КО
ЗАБАСОТМОМНУгахУЗТРМУСМУЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВИ ІМММУУСЕАРКВІ МЕКІ ЕМІОУКЕМТТМ рамПпАММТ5ТМОМЕЗОБЕМОЇ РУМ азАНОССІ РРЕРАОМЕМІРОМОаМмІ ТІ ММаБОАМаВнЗЗЕм
СГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5МТЕРЕОМРЕНЗЗМАНЗОБВІ ОВІ МУРОМ ММ ААТОЗТОаатАаИтввї.
ГЕБОДаРЗОММЗАОАКМУМ РЕРСУВООВНУЗКТІ 5ОМММЗМЕАМТаАТКУНІ МСВОБІ ММРЕОМАМА
ТНКОСЕОВЕЕРБЗИМ ІРЕКОСАСАММТАГЕМУММТЗЕЕЕІКТТУМРМАТЕОУСУМАБЗМІ ОБЗМТАРМ татуУМ5осда РаЕаМУМОМАВУМІ ОБРІМАКІРНТРОамМЕНРЗРІ МОСС КНРРРОПІКМТРУРАМРР
АМЕТРАКЕАЗЕІТОУЗТИОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕІЮМТЗМУАКЗТММОБАМОМЕСУУ5ЕР АРІ
СТАМІ ТАМ. (5ЕО ІЮ МО:59). 00178) У інших варіантах здійснення, варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну послідовність що має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595 або щонайменше 98595 ідентичність з послідовністю капсиду ААМ дикого типу, вибраною з групи, яка складається з предкового варіанту, описаного в даному описі як зЕО ІЮ МО:58, містить один або більше амінокислотних залишків, вибраних з групи, яка складається з: аланіну (А) в 264, аланіну (А) в 266, серину (5) в 268, аланіну (А) в 448, треоніну (Т) в 459, аргініну (К) в 460, аланіну (А) в 467, серину (5) в 470, аспарагіну (М) в 471, аланіну (А) в 474, серину (5) в 495, аспарагіну (0) в 516, аспарагіну (0) в 533, глутаміну (0) в 547, аланіну (А) в 551, аланіну (А) в 555, глутамінової кислоти (Е) в 557, метіоніну (М) в 561, серину (5) в 563, глутаміну (0) в 577, серину (5) у 583, валіну (М) в 593, треоніну (Т) в 596, аланіну (А) у 661, валіну (М) в 662, треоніну (Т) в 664, проліну (Р) в 665, треоніну (Т) в 710, аспарагінової кислоти (0) в 717, аспарагіну (М) в 718, глутамінової кислоти (Е) в 719 і серину (5) в 723; і також містить Її) одну або більше амінокислотних замін, вибраних з групи, яка складається з РЗАА, 51097Т--М7081І,
АБОЗЕ--М5ЬО6О, М708І-М719М, М708І-Я7270, 51091 А493МАБОЗЕ-М7О8І, М7081-87336,
О164К, і ІЄ98М, і/або (ії) пептидну вставку, вибрану з групи, яка складається з ОАДОТТКМ (5ЕО І
МО:13), ІБСОТКН (5ЕО І МО:14), АБОЗТКА (5ЕО ІЮ МО: 15), МООМТКТ (5ЕО ІЮ МО:16),
НОЇТКМІ (5ЕО 10 МО:17), РОАМАМЕМ (ЗЕО ІЮ МО:63), ТМАТ5РО (5ЕО ІЮ МО:24), РМЗТНОа5 (ЗЕО Ір МО:25), КОВАРБТ (ЗЕО І МО:26), НОЮТТКМ (5ЕО ІЮ МО:19), НРОТТКМ (5ЕО І
МО:18), МКТТМКО (5ЕО ІЮ МО 20), ЯКЗКМІО (5ЕО І МО:23), РІЗМЕМЕН (5ЕО ІЮ МО:64),
ГАОАОТТКМА (5ЕО ІЮ МО:27), ГАІЗВОТКНА (5ЕО ІЮ МО:28), І! СІБВСОТКНА (5ЕО ІО МО:29),
ГААБОБТКАА (5ЕО ІЮ МО:30), ГАНОІТКМІА (5ЕО 10 МО:32), ГРОАМАМЕМА (5ЕО І МО:37),
ГАМООУТКТА (5ЕО ІЮО МО:31), ГАТМАТ5РОА (5ЕО ІО МО:39), | АРМЗ3ТНаБА (5ЕО ІЮ МО:40),
ГАКОВАРБЗТА (5ЕО ІЮ МО:41), ГГ АНОЮТТКМА (5ЕО ІЮ МО:34), І АНРОТТКМА (5ЕО ІО МО:33),
ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:35), ГАСКЗКМІВБА (5ЕО ІЮ МО:38) і ГРІЗМЕМЕНА (ЗЕО ІЮ МО:36). У деяких варіантах здійснення, варіант капсиду ААМ містить вказані одну або більше амінокислотних замін і/або пептидних вставок і є в іншому відношенні ідентичним 5ЕО ІЮ
МО:59.
І00179)| Варіанти ААУ, описані в даному описі, отримували з використанням спрямованої еволюції іп мімо, що включає використання скринінгу сітківки приматів після введення в 60 скловидне тіло. У деяких варіантах здійснення, варіанти білків капсиду, описані в даному описі,
коли присутні у віріоні ААМ, забезпечують більш ефективну трансдукцію клітин сітківки, порівняно з трансдукцією клітин сітківки віріосном ААМ, що містить відповідний вихідний капсидний білок ААМ або ААМ дикого типу. Наприклад, в деяких варіантах здійснення, варіанти білків капсиду, описані в даному описі, коли присутні у віріоні ААМ, забезпечують більш ефективну трансдукцію клітин сітківки приматів, ніж віріони ААМ, що містять відповідний вихідний капсидний білок ААМ або капсидний білок ААМ дикого типу, наприклад, клітини сітківки поглинають більше віріонів ААМ, що містять варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, ніж віріонів ДАМ, що містять вихідний капсидний білок ААМ або ААМ дикого типу. У деяких таких варіантах здійснення, для варіанту віріона ААМ або варіанту ГгГААМ показана щонайменше в 2 рази, щонайменше в 5 разів, щонайменше в 10 разів, щонайменше в 15 разів, щонайменше в 20 разів, щонайменше в 25 разів, щонайменше в 50 разів, або більше ніж в 50 разів, збільшена трансдукція клітини сітківки, порівняно з трансдукцією клітини сітківки віріоном ААМ дикого типу або гААМ, що містить відповідний вихідний капсидний білок ААМ. У конкретних таких варіантах здійснення, варіанти білків капсиду, описані в даному описі, коли присутній у віріоні ААМ, забезпечують більш широку трансдукцію клітин сітківки приматів, ніж віріони ААМ, що містять відповідний вихідний капсидний білок ААМ або капсидний білок ААМ дикого типу. Іншими словами, варіант віріона ААМ трансдукує типи клітин, не трансдуковані віріонами, що містять відповідний вихідний капсидний білок ААМ, і таким чином більше типів клітин сітківки, ніж відповідний початковий вихідний віріон ААМ. У деяких варіантах здійснення, варіант віріона
ААМ переважно трансдукує клітину сітківки, наприклад, віріон ГААМ, що розглядається, інфікує клітину сітківки з в 2 рази, в 5 разів, в 10 разів, в 15 разів, в 20 разів, в 25 разів, в 50 разів, або більше ніж в 50 разів, вищою специфічністю, ніж інша клітина сітківки або клітина, що не належить до сітківки, наприклад, клітина поза оком. У деяких варіантах здійснення, трансдукована клітина сітківки являє собою фоторецепторну клітину (наприклад, палички; колбочки). У деяких варіантах здійснення, клітина сітківки являє собою гангліонарну клітину сітківки (КОС). У деяких варіантах здійснення, клітина сітківки являє собою епітеліальну клітину сітківки (клітину КРЕ). У деяких варіантах здійснення, клітина сітківки являє собою гліальну клітину Мюллера. У деяких варіантах здійснення, клітина сітківки являє собою мікрогліальну клітину. У деяких варіантах здійснення, клітина сітківки являє собою амакринову клітину. У
Зо деяких варіантах здійснення, клітина сітківки являє собою біполярну клітину. У деяких варіантах здійснення, клітина сітківки являє собою горизонтальну клітину. Збільшення трансдукції клітин сітківки, наприклад, збільшеної ефективності трансдукції, більш широкої трансдукції, більш переважної трансдукції і т.д. можна легко досягати іп міго або іп мімо за допомогою будь-якої кількості відомих в даній галузі способів для вимірювання експресії гена. Наприклад, можна здійснювати упаковку ААМ з геномом, що містить експресуючу касету, що містить репортерний генів, наприклад, флуоресцентний білок, під контролем повсюдно експресуючого або тканиноспецифічного промотору, і оцінювати ступінь трансдукції за допомогою детекції флуоресцентного білка, наприклад, за допомогою флуоресцентної мікроскопії. Як інший приклад, можна здійснювати упаковку ААМ з геномом, що містить забезпечену штрих-кодом послідовність нуклеїнової кислоти, і оцінювати ступінь трансдукції за допомогою детекції послідовності нуклеїнової кислоти, наприклад, за допомогою ПЛР. Як інший приклад, можна здійснювати упаковку ААМ з геномом, що містить експресуючу касету, що містить терапевтичний ген, для лікування захворювання сітківки, і оцінювати ступінь трансдукції за допомогою детекції лікування захворювання сітківки у ураженого пацієнта, якому вводили ААМ.
І00180| Офтальмологічні захворювання, які можна лікувати з використанням варіанту вектора або віріона гААМ, і/або способу, описаного в даному описі, включають, але без обмеження, моногенні захворювання, комплексні генетичні захворювання, набуті захворювання і травматичні пошкодження. Приклади моногенних захворювання включають, але без обмеження, синдром Бідля; хвороба Баттена; кристалінову дистрофію Бьетті; хороїдеремію; хоріоретинальну атрофію; хоріоретинальну дегенерацію; дистрофію колбочок або колбочок- паличок (аутосомно-домінантні, аутосомно-рецесивні, і Х-зчеплені); спадкову стаціонарну нічну сліпоту (аутосомно-домінантну, аутосомно-рецесивну і Х-зчеплену); порушення кольорового зору, включаючи ахроматопсію (включаючи АСНМ2, АСНМ3З, АСНМА ї АСНМУ5), протанопію, дейтеранопію і тританопію; атаксію Фрідрейха; вроджений амавроз Лебера (аутосомно- домінантний і аутосомно-рецесивний), включаючи, але без обмеження, І САТ, І СА2, І САЗ,
ІЇСА4, ІСАб, ІСА7, ІСА8бВ, ІСА12 і І|СА1Т5; спадкову оптичну нейропатію Лебера; макулодистрофію (аутосомно-домінантну і аутосомно-рецесивну), включаючи, але без обмеження, гостру дегенерацію жовтої плями, вітеліформну макулодистрофію Беста, візерункову дистрофію, макулодистрофію Північної Кароліни, спадкові друзи, дистрофію очного 60 дна Сорсбі, таїаціа Іємапіапезе і генетично визначену ретинопатію недоношених;
захворювання окулярно-ретинального розвитку; очний альбінізм; атрофію зорового нерва (аутосомно-домінантні, аутосомно-рецесивні і Х-зчеплені); пігментний ретиніт (аутосомно- домінантні, аутосомно-рецесивні, Х-зчеплені і мітохондріально успадковані ознаки), приклади яких включають КРІ, КР2, КРЗ, КРІ10О, КР20О, КРЗ8, КР40 і КР43; Х-зчеплений ретиношизис; хворобу Штаргардта; і синдром Ашера, включаючи, але без обмеження, О5НІВ, О5НІ1С,
О5БНІО, ОБНІР, О5НІО, ОБН2А, О5Н2С, О5Н2гО ії О5НІЗ. Приклади комплексних генетичних захворювань включають, але без обмеження, глаукому (відкритокутову, закритокутову, гіпотензивну, нормотензивну, вроджену, неоваскулярну, пігментну, псевдоексфоліативну); пов'язану з віком і інші форми дегенерації жовтої плями, як ексудативні, так і неексудативні форми (аутосомно-домінантні і аутосомно-рецесивні), такі як гостра дегенерація жовтої плями, вітеліформна дегенерація жовтої плями; ретинопатію недоношених; і синдром Фогта-Коянагі-
Харада (МКН). Приклади набутих захворювань включають, але без обмеження, гостру нейроретинопатію жовтої плями; передню ішемічну оптичну невропатію і задню ішемічну оптичну невропатію; хворобу Бехчета; оклюзію гілки вени сітківки; хоріоїдальну неоваскуляризацію; діабетичну ретинопатію, включаючи проліферативну діабетичну ретинопатію і асоційовані ускладнення; діабетичний увеїт; набряк, такий як набряк жовтої плями, кістоїдний набряк жовтої плями і діабетичний набряк жовтої плями; порушення епіретинальної мембрани; телеангієктозію жовтої плями; мультифокальний хороїдит; неретинопатичну діабетичну дисфункцію сітківки; пухлини очей; атрофію зорового нерва; відшаровування сітківки; порушення сітківки, такі як оклюзія центральної вени сітківки, проліферативна вітреоретинопатія (РМУН), оклюзійне ураження артерій і вен сітківки, оклюзію судин, увеальне захворювання сітківки; увеальну ефузію; інфекційне і інфільтруюче захворювання сітківки; захворювання зорового нерва, такі як набута атрофія зорового нерва.
Приклади травматичних пошкоджень включають, але без обмеження, гістоплазмоз; травму зорового нерва; травму ока, що торкається заднього сегмента або ділянки ока; травму сітківки; вірусну інфекцію ока; вірусну інфекцію зорового нерва; стан, який торкається заднього сегмента ока, який викликає або на який впливає лазерна терапія ока; стани, що торкаються заднього сегмента ока, які викликають або на які впливає фотодинамічна терапія; фотокоагуляцію, радіаційну ретинопатію; і симпатичну офтальмію.
Зо 00181) У іншому варіанті здійснення, варіант капсиду, описаний в даному описі, містить гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує продукт гена, такий як, без обмеження, інтерферуюча РНК, довга некодуюча РНК, коротка некодуюча
РНК, антисмислова РНК, аптамер, поліпептид, секретоване антитіло, одноланцюжкове антитіло, домен Мнн, розчинний рецептор, афітіло, ноттин, дарпин, центурин, шаперон, сайт- специфічна нуклеаза, яка забезпечує сайт-специфічний нокдаун функції гена, або модифікована сайт-специфічна нуклеаза, що забезпечує геноспецифічну активацію транскрипції.
І001821| Варіант віріона гААМ, описаний в даному описі, містить гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує продукт гена. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою інтерферуючу РНК. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою довгу некодуючу РНК. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою коротку некодуючу РНК. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою антисмислову РНК. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою аптамер. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою поліпептид. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою секретоване антитіло. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою одноланцюжкове антитіло. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою домен МНН. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою розчинну рецептор. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою афітіло. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою нотин. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою дарпін. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою центурин. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою шаперон. У деяких варіантах здійснення, продукт гена являє собою сайт-специфічну нуклеазу, яка забезпечує сайт-специфічний нокдаун функції гена.
І00183| Застосування продукту гена включають, але без обмеження, збільшення рівня фактора в клітині, збільшення рівня фактора в сусідній клітині за допомогою секреції фактора, зменшення рівня фактора в клітині, або зменшення рівня фактора в сусідній клітині за допомогою секреції фактора. Продукт гена можна конструювати для доповнення рівня продукту дефектного або відсутнього гена, зменшення рівня продукту дефектного або відсутнього гена, введення нового продукту підтримуючого гена, доповнення рівня продукту підтримуючого гена,
зменшення рівня продукту гальмуючого гена, або як зменшення рівня продукту гальмуючого гена, так і введення або доповнення рівня продукту підтримуючого гена.
І00184| Продукти генів, що доставляються за допомогою варіантів ААМ, що розглядаються, можна використовувати для зміни рівня продуктів генів або активності продуктів генів, напряму або опосередковано зв'язаних із захворюваннями і травмою сітківки. Гени, продукти яких напряму або опосередковано зв'язані з генетичними захворюваннями, включають, наприклад, гени подібного фактора АДФ-рибозилування білка 6 (АКІ 6); що взаємодіє з БбБсомою білка 1 (ВВІР'ІІ); білка 1 ББсоми (ВВ51); білка 2 ББбсоми (8852); білка 4 ББбсоми (8854); білка 5 Ббсоми (8855); білка 7 ББсоми (В8В57); білка 9 ББсоми (ВВ59); білка 10 ББсоми (ВВ510); білка 12
ББсоми (ВВ512); центросомного білка 290 кДа (СЕР290); білка 172 інтрафлагелярного транспорту (ІЕТ172); білка 27 інтрафлагелярного транспорту (ІЕТ27); інозитол-поліросфат-5- фосфатази Е (ІМРРОЕ); члена 13 підсімейства у калієвого каналу внутрішнього випрямлення (КСМ.О13); подібного фактора транскрипції з лейциновою блискавкою білка-1 (І7ТР11); білка синдрому МакКьюсіка-Кауфмана (МКК); білка синдрому Меккеля типу 1 (МК51); білка З нефронофтизу (МРНР'І); серологічно визначеного антигена 8 раку товстого кишечнику (ЗОССАСВ8); що містить трикомпонентний мотив білка 32 (ТКІМ32); домену 8 тетратрикопептидного повтору (ТТС8); білка хвороби Баттена (СІ М3); супроводжуваного Кар білка 1 (СНМ); (РКЕОМ13); (СЕ; (ТЕАОІ); подібного до взаємодіючого з арилвуглеводнем рецептору білка 1 (АІРІ1); оїх-подібного фактора транскрипції фоторецепторів колбочко- паличкового гомеобоксу (СЕХ); активуючого гуанілатциклазу білка ТА (СОСАТА); специфічної для сітківки гуанілатциклази (50ОСУ20); члена З сімейства асоційованих з мембраною білків транспорту фосфатидилінозитолу (РІТРММ3З); промініну 1 (РКОМІ1); периферину (РАРН); периферину 2 (РЕРН2); регулюючого екзоцитоз синаптичної мембрани білка 1 (КІМ51); семафорину 4А (5ЗЕМА4А); людського гомолога білка ипс119 С. еіеєдап5 (ШМС119); зв'язуючого
АТФ касетного транспортера - сітківки (АВСА4); домену 9 металопептидази АСАМ (АБАМО); активуючого транскрипцію фактора 6 (АТЕб); відкритої рамки зчитування 2 хромосоми 21 (С21опі2); відкритої рамки зчитування 37 хромосоми 8 (С8оїІї37); кальцієвого каналу; потенціалзалежного; субодиниці 4 альфа 2/дельта (САСМА204); спорідненого кадгерину члена сімейства 1 (протокадгерину 21) (СОНЕТ); подібного до церамід-кінази білка (СЕККІ); альфа-
Зо субодиниці керованого цГМФ катіонного каналу фоторецепторних колбочок (СМОАЗ); субодиниці бета З керованого циклічними нуклеотидами катіонного каналу колбочок (СМОВЗ); цикліну МА (СМММа); зв'язуючого нуклеотид гуанін білка (С-білка); поліпептиду 2 з активністю альфа-трансдукції (ЗМАТ2); члена 2 підсімейства У калієвих каналів (КСММ2); фосфодіестерази 6С (РОЕбС); фосфодіестерази б6Н (РОЕбН); центриольного білка В протеома центриолі 1 (РОС1В); члена КАВ28 сімейства онкогенів КА5 (КАВ28); фактора транскрипції гомеобокса 2 сітківки і передньої нервової складки (КАХ); 11-цис-ретинол-дегідрогенази 5 (КОНУ5Б); білка 1, який взаємодіє з регулятором ГІФази при КР (ЕРОКІРІ); члена 5 сімейства подібних до тубулін-тирозин-лігази білків (ТТ 5); субодиниці альфа-ї потенціалзалежного кальцієвого каналу Г-типу (САСМАТЕ); регулятора ГІФази при пігментному ретиніті (КРОК); (ОМАТІ1); (РОЕБЄВ); (АНО); САВР4А4); СаРА179); (пй8К1Т); СсАМб); І АІТ3); 5ІС24А1); ТАРМІ); МУХ);
ОРМІ1І МУ); ОРМІММУМ); голубого конопсину (ОРМ15МУ); фратаксину (ЕХМ); (ІМРОНІ); (ОТХ2);
САВІ); ОТНОТООЕб); ІЄТ140); ІОСВ1); ІСАБ5) І ВАТ); МММАТІ); ВОЗ); ВОНІ2); АРЕбБ);
ЗРАТА?); ТИ РІ); мітохондріальних генів (К55, НОМ, МТ-АТРб, МТ-ТН, МТ-ТІ 1, МТ-ТР, МТ- тТ52, генів кодованих мітохондріями МАОН дегідрогеназ (МТ-МОЇ); (ВЕ5Т1); СТОТМЕБЗЕРЕМРІ);
ЕГОМІ 4); ЕЗСМ2); ООСАТВ); НМОМІ); ІМРОТ1); КР111); ТІМРЗ); ОКАМ2); МЕМ2); МК); білка 1 атрофії зорового нерва (ОРАТ); ТМЕМ126А); ТІММ8А); СА4); НКТ); КІ НІ 7); МА2ЕЗ); МВА);
ОМ2МІ3); РКЕРЕЗ); РКРЕ4); РЕРЕб); РЕРЕ8); РКРЕЗ1); КОМІ); білка 1 пігментного ретиніту (АРІ); АРО); 5МАМР2О0); 5РР2); ТОРОН5Б); АВІ2ВР); Сгоп1); СІ 8М1); СМадт); СМаВ);
СуУРАМ2); НОЮ); ОНХЗ8); ЕМСТ1); ЕМ5); ГАМ161А); аРА1Т25); НаЗМАТ); ІОНЗВ); ІМРОаг);
КІАА1Т549); КІ7); МАК); МЕВТК); МУК); МЕК2); МЕОНВООІ); РОЕбА); РОЕбС); РАСО); АВРЗ);
ЕІ ВРІ); ЗІ С7А14); ОБН2А); 2МЕ408); 2МЕ513); ОБО); КЕРІ); ретиношизину (К51); АВНО12);
СОН2г3); СЕР250); СІВ2г); ОЄРМВЗ1); ЧР АЗОВ); НАН5); ММО7А); РОЮНІ5); ОБНІТС); ОБНІТС); МОР);
РОКІ); САРМ5); Е204); ІТМ2В); ГАРБ); МІН2О4); ВВІ1); Т5РАМІ12); С12опб65); СОНЗ); МЕРВР);
ОАТ); РІ А205); КВР4); КО59); КО59ВР); АЕМ52; ЕКСС); ЕВІ М5); НТЕАТ); ТІ КЗ); і ТІ КУ). 00185) Гени, продукти яких індукують або стимулюють апоптоз, позначені в даному описі як "проапоптотичні гени", і продукти цих генів (мРНК; білок) позначені як "продукти проапоптотичних генів". Проапоптотичні мішені включають, наприклад, продукти генів Вах; продукти генів Віа; продукти генів Вак; продукти генів Вас; Всі-г; Всі-ХІ1. Антиапоптотичні продукти генів включають Х-зчеплений інгібітор апоптозу.
00186) Гени, продукти яких індукують або стимулюють ангіогенез, позначені в даному описі як "проангіогенні гени", і продукти цих генів (МРНК; білок) позначені як "продукти проангіогенних генів". Проангіогенні мішені включають, наприклад, фактор росту ендотелію судин (МЕСіРа,
МЕСЕБ, МЕСЕс, Меса); рецептор 1 фактора росту ендотелію судин (МЕСЕНІ); рецептор 2 фактора росту ендотелію судин (МЕСЕН2г); споріднену Етв5 тирозинкіназу 1 (ЕЩН); фактор росту плаценти (РОЕ); тромбоцитарний фактор росту (РОСЕ); ангиопоетини; зопіс Недденоа.
Гени, продукти яких інгібують ангіогенез, позначені в даному описі як "антиангіогенні гени", і продукти цих генів (мРНК; білок) позначені як "продукти антиангіогенних генів". Продукти антиангіогенних генів включають ендостатин; тумстатин; ангіостатин; фактор пігментного епітелію (РЕОБР) і злиті білки або антитіла, які є специфічними для проангіогенних мішеней і/або їх рецепторів, наприклад, злиті білюим проти МЕСЕ 5БРЇТ1 або ейлеа, специфічні для МЕСЕ антитіла люцентис мМ і авастин "М і т.д. 00187) У деяких варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіантів ААМ, що розглядаються, діють для інгібування ангіогенезу. У конкретних переважних варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіантів ААМ, що розглядаються, діють для інгібування активності одного або більше білків МЕСЕ ссавців, вибрані з групи, яка складається з МЕСЕа, МЕСББ, МЕСЕс, МЕСБЯ і РОБ. У особливо переважних варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіантів
ААМ, що розглядаються, інгібують активність МЕсСРа. МЕсГа має 9 ізоформ, що утворюються за допомогою альтернативного сплайсингу, найбільш фізіологічно значущою з яких є МЕСЕ165.
Виявлено, що рівні МЕСРЕа збільшені в скловидному тілі пацієнтів з вологою пов'язаною з віком дегенерацією жовтої плями, діабетичним набряком жовтої плями і оклюзією вен сітківки.
Продукт(и) гена, які інгібують активність МЕСЕРа в оці, і які, таким чином, є ефективними для лікування пацієнтів зі збільшеним рівнем МЕСЕРа в скловидному тілі, включають, але без обмеження, афліберцепт, ранібізумаб, бролуцизумаб, бевацизумаб і розчинну подібну до їт5 тирозинкіназу 1 (5ЕЇ-Т1) (Мо. доступу в СепВапк 001134). У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується інфекційного рекомбінантного віріона ААМ (ГААМ), що містить (ї) варіант капсидного білка ААМ, як описано в даному описі, і (її) гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить множину послідовностей, кожна з яких кодує окремий інгібітор МЕСРа.
Зо 00188) У одному переважному варіанті здійснення, продукт гена являє собою афліберцепт.
Афліберцепт (ЕЙЛЕАФ) являє собою рекомбінантний злитий білок, що містить позаклітинний домени рецепторів 1 і 2 МЕСЕ людини, злиті з фрагментом Ес Їдс1 людини. Афліберцепт діє як розчинний рецептор-пастка, який зв'язує МЕСЕа і РОБ з більшою афінністю, ніж природні рецептори. Схвалена доза для ін'єкції афліберцепту в скловидне тіло становить 2,0 мг, його дозування змінюється відповідно до показання. Афліберцепт показаний для лікування неоваскулярної (вологої) пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями, набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки, діабетичного набряку жовтої плями і діабетичної ретинопатії. У особливо переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується нової оптимізованої по кодонному складу послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує афліберцепт (що відповідає фігурі 12А), що містить або складається з: 00189)
АТОСТТТСТТАСТОасСОаАСАсСсссСсатастастататассстає тт татстастастаАс ссастотТАаасАаассастТаАтТАсСасасСАвАССсСстСатТацпАААТатАСАаСаАаАТОССССА вАТСАТССАСАТаАССОСАсСОСаСАсСАсСА,аСсТааТСАТОоССттасСсАаАаТаАСААдасССССААСАТО
АССсСатТаАСТСТаААаААаТаттооСстСстТацсАСАСАСТаАТоСССаАСааСААвАСвААТСАТСТОаИС
АСсАдаСсСбапААдааасСТТСАТСАТСАаСААСасССАССТАСАААаАаАтосасста7астаАсстатаА дассАсСатаААТааССАССТатАСААаАССААСТАССТИаАСАСАСАвАСАпАССААСАССАТСО
АТсСсСАСсОатаастасталаСсССтТАасССАСаасСАТТаААСТО ТОТатТасассАсААХ,аСсТаватТаста
ААстТатАССасСАаААсСсвАастаААсатаваСАТОСАСТТСААСТас,АатТАсооСАасАасСА
АаСАССАаСАСААПАААСТастоААсС,вавАССтТаААААСССАсСАа,аСааСАаСпАпАТаААаА
ААТТОСТаАдасСАСССТаАССАТСОСАСОСаСсТаАСсСАпААдатаАССА,СаассСТатАСАСАТОТИаС сассад,астотааосСтаАтТаАССААпАААААСАасСАаєєтсаТтассаспватаСАСсАспААасАСААд вАСССАСАССТИТОСТоСАТОТоСТаСТоСАпААСсТаСсТОСЯСсааАсСсТтоСсатаТаттостТаТаттт
ССТоСААдаССТААаасСАСАСССТаАТаАТСАаСАпаААССССТтадаа тадсстасатаатастас
АТаТатоССАССАСааАТоССаААаТаААатТСААТтОсатТАсСОастТасАас,саостааААдаТасСАСАА
СаССААпАССААлаССтТАаАаАапААСАсСТАСААТАаСАССТАСАСЬСТОССТО ТоСОа тасСстТаАСо стастасСсАССАсаАтта,аастаААСааСАААпАатТАСААа,атТасСАдааТатоСААСААааСоссСтТа сСстТастосСтТАТСВАСААДААССАТСТОСААСасСсААл,аа,асСАаССтТАаапААССССАааТтТТАСА
САСТаССТоСААлдасСсАа,аапАСаАдасСстаАСАААаААССАсСИа ТатоостаАдсстасстааТСААСса 60 есСТстТАСССТТоСОАТАТСОСССОСТОаСААТтТасСсаАпАасСААТааССАаССтТаАпААСААСТАСАА вАСААССССТОСТОТаОСТасСАСсАаа,аСса,аАСа,аасСТСАТТОТтОоСТатАСАаСААласСстТаАСАатТацАс
ААдпСАааСАаАтТааСАаСА,аааСААсататсАа,астастоСбатаАТасСАСаАаасссСтТасСАСААС
САСТАСАСССАЧААСсСТоССстТаласстатсссСтТаасСАААТИА (5ЕО ІЮО МО:65). 00190) У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує афліберцепт, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 909565, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність нуклеїнової кислоти з усією довжиною послідовності нуклеїнової кислоти, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:65, або з нуклеотидами 79-1377 з ЗЕБО ІЮ МО:65 (без підкреслених нуклеотидів, що кодують сигнальну послідовність РІЙ). У споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіанту(варіантів) ААМ, що розглядаються, кодовані послідовністю нуклеїнової кислоти, що складається з або містить послідовність нуклеїнової кислоти з ЗЕ ІЮО МО:65, або нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 909565, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995 ідентичність з нею. У інших споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіантів ААМ, що розглядаються, містять амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з наступною амінокислотною послідовністю: 001911
МУЗУМОТОаМИ СА 5СИ І Та5о5ЗавотавРЕМЕМУ5ЕЇІРЕПНМТЕСАВЕЇ МІРСВУМТ5РМІТМТІ.
ККЕРГОТТРєРОСКАПМУОЗАКаИанпіЗМАТУКЕЇСТ І ТСЕАТтУМСОНІ МКТММІ ТНАЕОТМТПІОУМІ ЗРЗНИтТЕ
І 5МОЕКІ МІ МСТАВТЕЇ ММаюореЕмМУЕМРБЗЗКНОНККІ УМАОІ КТОЗаЗЕМККРЇІ ТІ ТІрСсУТАЗОО
СІ УТСААБЗаЇ МІТІККМЗТЕУАУНЕКОКТНТСРРОРАРЕЇГЇ СОС РЗУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУМ
МОМЗ5НЕОРЕУКЕМУ УМВИМЕМНМАКТКРАЕЕОУМЗТУАММЗМІ ТМ НОБУУЛІ МСОКЕМКОСКМУЗМКАЇ Р
АРІЕКТІЗКАКООРАЕЕРОММУТІ РРОВОЕЇ ТКМОМУБІ ТОЇ УК ЕУРБОІАМЕМ ЕЗМСОРЕММУКТТРРМУ
ГгоБразеЕн ЗК ТМоКЗАМОССаММЕЗСЗУМНЕАІ НМНУТОКОІ 51 РОК (5ЕО ІЮ МО:66)
Зо 00192) У інших споріднених варіантах здійснення, варіант(и) ААМ містять гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 96956, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з амінокислотами 27-458 з
ЗЕО ІЮ МО:66 (які відповідають амінокислотній послідовності афліберцепту без підкресленої послідовності сигнального пептиду).
Ї00193| У іншому переважному варіанті здійснення, продукт гена являє собою одноланцюжковий варіант ранібізумабу (5с-ранібізумаб). Ранібізумаб (ЛЮЦЕНТІСФ) являє собою фрагмент (Раб) моноклонального антитіла Ідс1, який зв'язує і блокує всі ізоформи
МЕСГга. ЛЮЦЕНТІСО експресуєся в формі двох окремих ланцюгів (легкого і важкого), з'єднаних за допомогою дисульфідного зв'язку між константним легким доменом (СІ) і константним важким доменом 1 (СНІ). Схвалена доза ранібізумабу для введення в скловидне тіло складає або 0,3, або 0,5 мг в 0,05 мл, залежно від показання. Ранібізумаб схвалений для лікування вологої пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями, набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки, діабетичного набряку жовтої плями і діабетичної ретинопатії. У особливо переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується нової оптимізованої по кодонному складу послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує одноланцюжкову важку-легку (НІ) форму ранібізумабу (зс-ранібізумаб НІ), яка відповідає фігурі 12С, де послідовність нуклеїнової кислоти містить або складається з: 00194
АТасАСТаСАССТОСТоСАТОСТОТПОоТОСТеасСотТасСаССАСА,аСАСАТАСТОТОаААаИтТ сслеастаа,атавпААТоТОССЯСаС,асаАСтТтаТаттСААсСсТавИТссасасттстаАдаАсталаста,атас сеасстотаасСстТАСаАСТТТАСССАСТАСОЯОаСАТаААСТОСОСТоС,АСАсСассостаасСАдАдаС
СсСстТаААТаСсСОатТосСаАТасАТСААСАССТАСАССЯИаСсСАаССААСАТАСИаССасСсаАСТТСААС
СапАСАТТСАССТтТсАаассСстасАСАССАаСААаАаСАССасстТАССТОСАСАТОААСАаССтТад слаббсАдапАСАсСасСсататАСТАСТаСассСААаТтАТСОССТАСТАСТАССаСАССАаССАСТа атТАСсТтоаАсСататавсаАСАсааСАСАСТааТСАСАататсотАасрасстСстТАСАААдасваСосс сАдасатттоССАСТОаСтТОоСтТАасСАасСААаТтСстТАССТоСватапйААСсАа,ассастстацвастат стааТтСААаСАСТАСТТТОССОСМХсСоСсТатаАссататоСтасААТА,аСОСАаСАСТаАСААасСа 60 ссатасСсАСАССТІТоСсАаа,асСса,атасСстаСАААда,асСАа,асСса,асассостатАСстотстала,аСсАааСсатоатаАс датасСАдасАаа,астттаваСАСССАпАССТАСАТСТаСААТИаТаААССАСААдаССтТАаСААС
АССААССЯ ТИСАСААдаАдАасатапААСССААаАаСтассАСААаАСАСАССстТовИаСа,ааАда7стот саАалда,ассастстацвАТСТАССааСАСААдаСстотАаСасААСА,ааСАСААда,аСсастайсСАСААСС саААСААдаСсастТСстТАСАТСТОССТОТОСТТотТасСс,авАасаСба,асАасаАтсАасатаатаатасвА тстастааСбаспААсАастТАсАаастассассстттстаавсСАасСсАСАТТСАаСТаАСАСАаАаСо сттотТаассталасессєттатаваСцпАСАсаАаТаАССАТСАСАТатТА,аСасСсАасССАацАСАТ
СТоОСААСТАССТаААСТОИТАТСсАааСАпАдАлассСс,сасСАА,вассссСстТААла,аатастаАТСТАСТТТ
АССсАаСсАасстТа7асСсАстоссвсаСатассСАаСАвАттотТапАтотаастосааСАСССАСТТСА
СССтТОаАСААТАТСТАаССТОоСАССоСстТадавАСТТСаССАССТАСТАСТОССАаСАаТАСАаСАС са,атассттавАСАТТТааСсСАцСааСАСАААдсСатасАААТСААда,аСа,асьисАаатааоастостАа са7ататТСАТСТТТоСАССТАаСа,аАСсАа,САаа,сСТаААда,атстаасСАСАа,ассттатсататасста
СТаААСААСТТСТАССССАпАпАдаССАдса,атасАатапААА,а ТасАСААсассстСАа то вСААСАаССААдсСАатотатаАсСпсАаСАааАСАаСААаапАСТоСАССТАСАдасстТатоСАаТсА
САСТаАСАСТААДаСААаассаАСТАС,АпААаСАСААдАатТаТатасасстасвААа ТІЛАСССАССА саасбсттстТАассСсТатаАССААаАасСТТСААсСсавасасаАатТаттаА (ЗЕО І МО:67) 00195) У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує 5с-ранібізумаб НІ, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність нуклеїнової кислоти з усією довжиною послідовності нуклеїнової кислоти, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:67, або з нуклеотидами 58-1575 з 5ЕБО ІЮ МО:67 (без підкреслених нуклеотидів, що кодують сигнальну послідовність ІЗНМ7-8 людини). У споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіанту(варіантів) ААМ, які розглядаються, кодовані послідовністю нуклеїнової кислоти, що складається з або містить послідовність нуклеїнової кислоти з ЗЕО ІЮО МО:67, або нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 979565, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 99595 ідентичність з нею. У інших споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіанту(варіантів) ААМ, що розглядаються, містять
Зо амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з наступною амінокислотною послідовністю: 00196)
МОМ/ПМУБІ ГІ МАААТаТУЗЕМОЇ МЕЗССІОСЇ МОРОСБІ ВІ БСААЗОМОЄТНУаММУМУУВОАРСОК
СГЕМУМСУІМТУТаЕРТУМААРЕКАРЕТЕБІ ОТЗКОТАМІ ОММ5І ВАЕОТАУУУСАКУРУУМИаТНУУ У
ЕОУМС,ОСТІ МТУ55АЗТКОаРЗМЕРІ АРОЗКОТЗСОаСТААГаСІ МКОМЕРЕРУТУБУУМЗОИАІ Т5СаМУНТ
ЕРАМІ ОББОИЇ У5І 55МУТУРББІ С ТОТМІСМУМНКРОМТКМОККУЕРКЗСОКТНІ с5ЗОВОБИЗТ стзвзататзАааттатвзАтЗзазазаавиацсазасвсаавАаатТАТАаАВЗИаЗОІОЮЇТОРББІЗАВМИ
ОАМТІТС5ЗАБОВІЗММІ МУМООКРОКАРКМИМЕТ55І НЗОМРОАЕЗаЗавзатовтІ ІЗ ОРЕОЕАТ
У СООУ5ТУРМИТРВОСТКУЄІКАТМААРБЗМУРІЕРРБЗОЕОЇ КЗатАБМУМСІ І ММЕМРВЕАКМОУМУКМУОМ
АГ ОБаМЗОЕЗУТЕООЗКОБТУБІ ЗІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТНОСІ 55РУТКОЕМАСОЕС (5ЕО
ІО МО:68). 00197) У інших споріднених варіантах здійснення, варіант(и) ААМ містять гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 96956, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з амінокислотами 200-524 з
ЗЕО ІЮ МО:68 (що відповідає амінокислотній послідовності 5с-ранібізумабу НІ. без підкресленої послідовності сигнального пептиду). 00198) У іншому особливо переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується нової оптимізованої по кодонному складу послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує одноланцюжкову легку-важку (ІН) форму ранібізумабу (зс-ранібізумаб І Н), що відповідає фігурі 128, де послідовність нуклеїнової кислоти містить або складається з: 00199)
АТаИаИТОоСТоСАСАСАСАСОИтатТСАТтСсАаСсСсТастастатавАтоттаа,аСбасстАСаваСс
АТАТССАИСТаАСАСАСАС,СССтТАаСсАасСстатта7ассттатаваСцАСАаАаТаАССАТСАС
АТатТАаСсасСсАдасСАааАСАТСАаСААСТАССТаААСТОаСТАТСсАа,аСАпААлаСССпасСААцас
СоСстТААССЯТаСтТаАТСТАСТТТАССАССАСОСТаСсАСсАа,аСсваса,атассСАасСАаАтоТасо 60 тотаасдаСсаайСАСССАСТСАСССТаАСААТАТСТАаСсСстоСсАаасстадааАСТТСассСАССТ
АСТАСТаССАаСАСаТАСАаСАСсСсстТасстасвАСАТ ТааССА,аааСАССААдсСатасАААТСАА ссасАсАадатаассастостАааСаТатСАТСТТТоСАССТАаСаАСссАа,САаасСстТаААла7атсТао
АсАаасстотатса7ататасстастаААСААСТТСТАССССАСАпАдасСсСААлса тасдатацААсца тапАСсАдсассстСАаАааСсасСААТАаССААсСАсСАа,аСа ТадсСпсАа,аСАапАСАаСААасАСТ
СТАССТАСТСОТОТаАдаСАаСАСАСТаАСССТаАдаСААааССаАСТАСпАпААаСАСАдАататА сеасстасаАддатаАСССАССАСССасСст тотАассстатаАССАдаАдастІсСААСАа,Аа,асСсА статавссаеабАа,асттасААдаСапАтотапААдаСАСАааСАСАдастотАаСапААСсСацпААС
АдаСсастайСАСААСАпасСАСАТСТаССАаСАСААХа,аССвсаетотааптстааСса,асАасасаваАас
АТсТОЯТОстТОсаССааАТоТаСсТОаСасААСсСАаСтТАСАССТЯС,СТасСстоттасАтТоСаАсаТт асад,астаатаААТотТассосатасАста,аттсАаасСАасасСсасвАтотстаАдвАста|атстатасс асСбАд,аСссастТАСаАТТТСАСССАСТАСОЯОаСАТаААСТОСИТоСпАСАвчасссстайсСАААСасо
СстТаААТОСОИатТосСаАТасАТСААСАССТАСАССЯС,СССАаССААСАТтТАСВСсСассвАСТТ САДИ ааАпАТТСАССТТсАаСсСстТасАасСАССТОСААаАаСАССасстТАССТОСАЧАТаААСАасстаАа дассадапАСАсСсасСсататАСТАСТасасССАА,ТАТСССТАСТАСТАССЯаСАССАасССАСТОав тТАСТТІоСАСОСТатасавАСАаа,СайаСАСАСТасТСАСсАаа,атТатстАасСассСТСстТАСААдАа,ааасССоСА аКсатпттосСАСТааСстоСстАаСАаСААдпАасСАСАТСАССЯССЯСОСААСсТаСстТассставастатст саТСААдапАСТАСТІ ТОСТаОАла,асстТатаассстатостасААдсАда,аСа,асвАаСАСТОаАСАТСТОИС атТасСАСАССТІТоСсАаа,аСсСсатастоСААдАлдасаассасстатАтсттатосАаасСсатсатаАСАа тасстдасдастотстапаСАСССАСпАССТАСАТСТаСААТатаААССАСАДасСсСтТАаСААСАС
САДИ ТСИАСААпААда,атапААСССААд,САастасцпАСААаАСССАССТСТОИА (ЗЕО ІЮ МО:69) 00200) У іншому особливо переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується нової оптимізованої по кодонному складу послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує одноланцюжкову легку-важку (ІН) форму ранібізумабу (зс-ранібізумаб І Н), що відповідає фігурі 128, де послідовність нуклеїнової кислоти містить або складається з:
І002о11
АатаатасСстоСАаАСССАса7ататТтТАТттсАСТаСТаСТаТтТааАТтТАаССсСваавасттТАСасАсА
САТТСсАаСстТаАСССАаАаТОоСТТСАТСТСОТаАа,аСсасстосатасаспАСАаа,ТаАССАТСАСА тастттасСсАасССАсааАТАТСТОСААСТАТСТаААТттасатТАССАаСАсААа,асоСпсасСААдвасос
СстТААССЯТаСтТаАТСТАТТТСАССАССТоССтТасСсАСАСаССЯСЯвАатТассАтосСсасттосаасто
Зо тасСсдаСсаасСАСССАСТТТАСССТаАСААтТототАассСтоСАаССАспАааАТТТСасСссСАСАТАС тТАТТаССАССАСТАСАССАССЯТаСОСТаСАСАТТТаССсСАасСасаСАССААд,СатацпАпАТСААаС сзАасбАда,атасоСбасссСАд,аСсататТСАТСсТттоСсссСстАаСса,аАСссАа,САасСтаААатстаасСА сса,ассал,асстаататасстастаААСААТТТСОТАТОССАсСАпСАас,СасССААдсатасАаатасААсаатТ ааАТААСаСоСстоСАатоСааСААТТСТСАсСаАдс,САааСатаАоСаАаСАааАСТоСААсааАТТОТ
АСАТАСАСССТатосСТСтТАСССТаАСАСТатоСААСаССсаАСТАТаАпААдаСАСААаСаТтатАСса
САТаОСОСАасСатаАСССАССАсСаасстадастосССАаТаАСАААаАасСТТтТААСАас,сас!ссАсАаИтТ ставаасАтТотТА,аСасАтоСбацвчАтотавАдаСАССпаСАСАТтОоСТотТАаСапААсСа,ааСАСАА ссасбаасСАССАСАааСАССтТСасстСстТАСААДа,аСсвасАа,асасаАатотааСс,асвсАа,сАсаАааА тосасАдсаАас,ссасАасааАтотасс,вабааСАсСасСАСАасовасасстсєттасстоСаАсаат ссластаставадаттасАассАасасстастасба,аоставаа,астсстаалсастатсттасас асСсААласпастТАТаАТТТСАСССАСТАСЯСААТаААСсСТОСИЯтабасСАаЧвасСАсСтаасСААасе сставлатасатавастТавАТСААТАССТАТАСАССЯСпАдаССААССтТАСсасСассовАСТТТАда
СапАСАТТСАСАТТТТОоССТасАтТАССАаСААаТтТтСсСАСАаССтТАССТОСАЧСАТаААСАасСсСтТаА сааСбАаАдапйАСАсСасСаТатАСТАТТасСсасССААатАТОСТТАСТАТТАССССАСАдДаССАСТОа атТАСсТттоаАСсататаасаАСАсаасСсАсостастаАсАаа,аталаСстоСсасСАаСАССААла,сааСос
АТССОаТаИ тт тОоСстТотТааССССАТСТАаСААИаТСТАССАа,аСа,асАа,сААсАаа,асСассстаааАТат стаайтТаААааАСТАСТТОССАсСА,ассСсатаАасс,ататставААтотааассстаАсстоСа ссатТасСАСАСАТТТОССОССОЯТаСстТоСсАСТОСТоТОаСсСтТаТатАТАаССТОАааСТоСатастаАс са,атассттотаастооСтТапасСАСССАпАСАТАСАТСТатААСИаТаААТСАСААаССТТСАААТА
ССАААаТСаАТААААААаТапААССААААТССТатаАТААААСССАТСТатаА (5ЕО ІЮ МО:70). (00202) У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує 5с-ранібізумаб ІН, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність нуклеїнової кислоти з усією довжиною послідовності нуклеїнової кислоти, вказаною в ЗЕО ІЮ МО:69 або 5ЕО ІЮ МО:70, або з нуклеотидами 61-1578 з 5ЕО І
МО:69 або ЗЕО ІЮ МО:70 (без підкреслених нуклеотидів, що кодують сигнальну послідовність Ід каппа). У споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіанту(варіантів)у ААМ, що розглядаються, кодовані послідовністю нуклеїнової кислоти, що 60 складається з або містить послідовність нуклеїнової кислоти з 5ЕО ІЮ МО:69 або 5ЕО ІО МО:70,
або нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995 ідентичність з нею. У інших споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіанту(варіантів) ААМ, що розглядаються, містять амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з наступною амінокислотною послідовністю: (0О2о3)
ММІОТОМРІБІ УМІЗИадмМаріІО ТОРБОІБІ БАЗМОаОВМТІТСЗАБОВІЗММІ МУМООКРИЕаКАРКУ
ПУЕТ55І НО МРЗАЕЗИаБЗавзатовтІ ІЗ оРЕОБЕАТУМСООМЗТУРМ ТРОС, ТКМУЕІКАТУМААРБЗ
МЕІЕРРРЗОЕОЇ КЗатАБУМСТЇ ММЕМРАЕАКМОМ КМОМАЇ О5аМЗОЕЗУМТЕООЗКОБЗТМУБІ З5ТІ ТІ.
ЗКАЮМЕКНКУМАСЕМТНОІ 55РУТК5ЕМАаЕСООсьЗОЗОВОЗТОтЗоЗОТтатвАИаТТатТА5ТО азазасасазассасвАсасаТАТАСАББавзЕМОЇ МЕЗОаСИаЇї МОРОСБІ ВІ ЗСААЗСУОЕТНУСММ
МмУвВОАРИаКагіи ємМмМам ІМТ аЕРТМААОЕКАРВЕТЕБІ ОТ5КЗТАМІ ОММ5І ВАЕОТАУУУСАКУРУ
УухатЗнУумгрУМУсаОСатТІ УТУ55АЗТКОаРЗМУЕРІ АРІЗКЗТЗИаатТААЇ СС МУКОМЕРЕРУТУЗУМЗИа
АГТ5амуНтТЕРАМГОББИЇ М5І 55 ГМРЗББІ ЕТО ГМІСМУМНКРЗОМТКМОККМЕРКЗСОКТНІ. (5ЕБЕО
ІО МО:71) (00204) У інших споріднених варіантах здійснення, варіант(и) ААМ містять гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 96956, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з амінокислотами 21-525 з
ЗЕО ІЮ МО:71 (що відповідає амінокислотній послідовності 5с-ранібізумабу І Н без підкресленої послідовності сигнального пептиду).
І00205| У іншому переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується нової послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує одноланцюжкову легку-важку (ІН) форму ранібізумабу, злитого з областю Ес ІдО1 людини (з5с-ранібізумаб-Ес), що відповідає фігурі 12Е, де послідовність нуклеїнової кислоти містить або складається з: (оО2о6)
АТаИаИТОоСТоСАСАСАСАСОИтатТСАТтСсАаСсСсТастастатавАтоттаа,аСбасстАСаваСс
АТАТССАИСТаАСАСАСАС,СССтТАаСсАасСстатта7ассттатаваСцАСАаАаТаАССАТСАС
АТатТАаСсасСАдасСАааАСАТСАаСААСТАССТаААСТастТАТСсА,аСАпААлаССсСцпСасСАдвас
СоСстТААССЯТаСтТаАТСТАСТТТАССАССАСОСТаСсАСсАа,аСсваса,атассСАасСАаАтоТасо з; тотаасдасайСАСССАСТСАСССТаАСААТАТСТАаСсСстосАаасстадавАСТТСассСАССТ
АСТАСТаССАаСАСаТАСАаСАСсСсстТасстасвАСАТ ТааССА,аааСАССААдсСатасАААТСАА ссасАслдата,ассбастостАаасаТаттСАТСТТТоСАССТАаСсСАСОсСАсССА,сСстТаААа, тота
АсАаасстотатса7ататасстастаААСААСТТСТАССССАСАпАдасСсСААлса тасдатацААсца тапАСсАдсассстСАаАааСсасСААТАаССААсСАсСАа,аСа ТадсСпсАа,аСАапАСАаСААасАСТ
СТАССТАСТСОТОТаАдаСАаСАСАСТаАСССТаАдаСААааССаАСТАСпАпААаСАСАдАататА сеасстаСссАддатаАСССАСсСсАа,сасассттсотАасоСстатаАССААаАастТсСААСАаАаасСсаА статавссаеабАа,асттасААдаСапАтотапААдаСАСАааСАСАдастотАаСапААСсСацпААС
АдаСсастайСАСААСАпасСАСАТСТаССАаСАСААХа,аССвсаетотааптстааСса,асАасасаваАас
АТсТОЯТОстТОсаССааАТоТаСсТОаСасААСсСАаСтТАСАССТЯС,СТасСстоттасАтТоСаАсаТт ссад,астааттаААТотТасСссатасАстаатсАасСАа,васасАтотстаАасАстатсттатасс асСбАд,аСссастТАСаАТТТСАСССАСТАСОЯОаСАТаААСТОСИТоСпАСАвчасссстайсСАААСасо
СстТаААТОСОИатТосСаАТасАТСААСАССТАСАССЯС,СССАаССААСАТтТАСВСсСассвАСТТ САДИ ааАпАТТСАССТТсАаСсСстТасАасСАССТОСААаАаСАССасстТАССТОСАЧАТаААСАасстаАа дассадапАСсАсСсасСсататАСТАСТасрасСААаТтТАТСССТАСТАСТАССЯСИСАССАасССАСТОасв
Бо тТАСТТІОоОСАСсататававАСАа,сайаСАСАСстТасТСАСсАаа,ататстАасассТСстТАСААдА,аааССоСА аКсатпттосСАСТааСстоСстАаСАаСААдпАасСАСАТСАССЯССЯСОСААСсТаСстТассставастатст саТСААдапАСТАСТІ ТОСТаОАла,асстТатаассстатостасААдсАда,аСа,асвАаСАСТОаАСАТСТОИС атТасСАСАССТІТоСсАа,аСсСсатасСстоСАААлаСАа,асвасстатАтсотТотаТатосАаа,асСсатсатаАСАа тасстдасдастотстапаСАСССАСпАССТАСАТСТаСААТатаААССАСАДасСсСтТАаСААСАС
САДИ ТСИАСААпААда,атапААСССААд,САастаспАСААаАСССАСАССТаТатосСтТоСАТИТОСТ аСТоСАСпААСстТастосаСааАссттоСсатат ТОСТаТаттТОСТоСААдДасСссСстААДааАСАСССТаА тТаАТСАаСАСААССССтТадаатаХсстаєастаеастсестааАтататоССАСаАавАТОСССААИТ вСААДСТТСААТТОССТАСОСТООАСссСасстасвАдаТасСАСААСаССААаАССААаССтТАаАсАсаА
АСАСТАСААТАаСАССТАСАСЬСТОСТО ТОоСОСТаИСстТаАсСсатастаСАССАаСаАтаасСтТаААС 60 ваСАААдпАаТАСАдатТасСсААлааТаТоСААСААвСасостасстас т ССТАТСПСАСААААССАТСТ
СсСААвасСсААлд,асаса,аоСАасстА,аапААССССАаИа г ТТАСАСАСТаССТоСААдаСАсацАСа,дас тТаАСАДАЧПААССАСсИа ТатосстаадсстасстааТСААд,ааасТТСстТАСССТТССОАТАТСОЯССИТ ааААтТасаАс,САаСААтТааССАаССТаАпААСААСТАСААЧАСААссССстоСтатастасАСАс баАсааСсТСАТТСоТтОоСтТатАСАаСААластТаАСАатаспАСААсСАаа,аСАаАтасСАаСАсаасСААС ататпсСсАдастастоСбатаАдтТасСсАсаАдааСССсТасСАСААССАСТАСАСССАсСААХ,атооСстадасс таттоСтааСАААтТаАдаССАСасСаТААСАСсатасСАтасвАсАсСАТСТИаА (5ЕО ІЮ МО:72). 00207) У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує 5с-ранібізумаб-Рс, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 909565, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність нуклеїнової кислоти з усією довжиною послідовності нуклеїнової кислоти, вказаною в 5ЕО ІЮ МО:72, або з нуклеотидами 61-2277 з ЗБО ІЮ МО:72 (без підкреслених нуклеотидів, що кодують сигнальну послідовність Ід каппа). У споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіантів, що розглядаються ААМ, кодовані послідовністю нуклеїнової кислоти, що складається з або містить послідовність нуклеїнової кислоти з ЗЕ ІЮО МО:72, або нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 909565, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 99965 ідентичність з нею. У інших споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіанту(варіантів) ААМ, що розглядаються, містять амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з наступною амінокислотною послідовністю: (оО2о8)
ММІГОТОМРІЗ УМ ІЗИадмМаріО ТОоРБОБІ БАЗМОаОВМТІТ СЗАБОВІЗММІ МУМООКРИЕаКАРКУ
ПУЕТ55І НО МРЗАЕЗИаБЗавзатовтІ ІЗ оРЕОБЕАТУМСООМЗТУРМ ТРОС, ТКМУЕІКАТУМААРБЗ
МЕІЕРРРЗОЕОЇ КЗатАБУМСТЇ ММЕМРАЕАКМОМ КМОМАЇ О5аМЗОЕЗУМТЕООЗКОБЗТМУБІ З5ТІ ТІ.
ЗКАЮМЕКНКУМАСЕМТНОІ 5БРУИТКЗЕМАаЕСасьвзазазазтатеЗататвАатТТатА5Т5 азазасасазассасвАсасаТАТАСАББавзЕМОЇ МЕЗОаСИаЇї МОРОСБІ ВІ ЗСААЗСУОЕТНУСММ
МУВОАРИаКагЕМУМаИмІММТаєЕРТМААОЕКАРВЕТЕБІ ОТ5КЗТАМІ ОММ5ЗІ ВАЕОТАУУУСАКУРУ
УухатЗнУумгрУМУсаОСатТІ УТУ55АЗТКОаРЗМУЕРІ АРІЗКЗТЗИаатТААЇ СС МУКОМЕРЕРУТУЗУМЗИа
АГ Т5аУНтТЕРАМГ ОББИЇ М5І 55ММ ГРЗ ЕТОТГМІСМУМНКРУЬМТКМОККМЕРКЗСОКТНІ ОКТН
ТОРРСОРАРЕГЇ СаРБЗМУН ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕУТСУУМОУЗНЕОРЕУКЕММ УМО МЕМНМАКТКР
ВЕЕОУМЗТУВУМУМІ ТМ НОМ МСКЕУКСКУЗМКАЇ РАРІЕКТІЗКАКЕОРАЕЕРОММТІ РРЗВОБЕЇ Т
КМОМБ5І ТС УКИЕМРЗОІАМЕМ ЕЗМСОРЕММУКТТРРМІ ОБраЗЕРІ ЗК ТМОКЗАМОВ,ММУЕЗСо
ЗУМНЕАЇ НМНУТОКБІ 5І ЗРК (ЗЕО ІО МО: 73) 00209) У інших споріднених варіантах здійснення, варіант(и) ААМ містять гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 96956, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з амінокислотами 21-752 з
ЗЕО ІЮ МО:73 (що відповідає амінокислотній послідовності 5с-ранібізумабу-Ес без підкресленої послідовності сигнального пептиду).
ІЇ00210| У іншому переважному варіанті здійснення, продукт гена являє собою бролуцизумаб. Бролуцизумаб (КТН258) являє собою оодноланцюжковий варіабельний фрагмент (5сЕм), який зв'язує і блокує всі ізоформи МЕСРа. Бролуцизумаб в цей час проходить клінічні дослідження фази І, оцінювальні дози З мг і 6 мг для лікування вологої пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями. У особливо переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується нової оптимізованої по кодонному складу послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує бролуцизумаб (відповідний фігурі 1203), де послідовність нуклеїнової кислоти містить або складається з: (002111)
АТаИаИТОоСтТоСАСАСАСАСОИтТатТСАТСсАаСсСсТастТастатавАтоттаа,абассСтТАтТаасСаА вАТССТаАТаАСАСАСАИССССАаСАСАСТОТСоТаССАас,сСсатапсаАспАСАаАаТаАТСАТСАСА таСсядсасСАаСаАпАТСАТоСАСсАаСсТОСТваСттаатТАТСАаСАсСААасСстааСААвасс
СсСстТААССТаСТаАТСТАССТЯааССТоТАСАСТОИССАсССс,асаАаатасстАасСАаАттотасаст стааАТотТа,ССассаАсаТТсАСССТаАСААТСТСТАаССстоСАассСстаАСсАСТТСассСАССТА
СстТАСТасССАвААаСсатаТатАсстааССАаСАССААСссаСасСсСААТт т тааСсСА,СааСАССАдаТст 60 сАсАадатастта,а,сСса,асАасаСавАасааеастаатааСбасАасаААа,ата,восабааАааАтТоСАсасСа стаставАтТотаАдАдатаса,аСстаатавААтТсАсСаСацАа,ааАстаст т СААсстаасавастото таАСАСТЯаАааСсТатАССЯассттаасттстоССтТаАСсСОаАСТАСТАСТАСАТОАССТОСИатоСа
АСсАсСассоСстааСААдАдс,аАстта,алатаватСацпАТТСАТСВАССССаАСаАСаАТССТТАСТАС
ВССАСАТаСсСОИССААдсаСааСАпАТТСАССАТСАСОСС,ВапАСААСАаСААпААСАСССтТатАССТо
САаАТаАДАСАааСсСстТаладаСсвАсааАСАсСса,асССататАСТАТТОТОСССОаС,аАСаАТСАСААТА соса7астасацдАСТоаАТАТСТОСОСОаСОСАс,СОасААСАСТасСТСАсСататстТАаТТаА (5ЕО Ір
МО:74). 00212) У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує бролуцизумаб, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995 або більшу ідентичність нуклеїнової кислоти з усією довжиною послідовності нуклеїнової кислоти, вказаної в 5ЕО ІЮ МО:74, або з нуклеотидами 661-816 з 5ЕБЕО ІЮ МО:74 (без підкреслених нуклеотидів, що кодують сигнальну послідовність Ід каппа). У споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіантів, що розглядаються ААМ, кодовані послідовністю нуклеїнової кислоти, що складається з або містить послідовність нуклеїнової кислоти з ЗЕ ІЮО МО:74, або нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 909565, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995 ідентичність з нею. У інших споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіантів, що розглядаються АДАМ, містять амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 969565, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з наступною амінокислотною послідовністю: (00213)
ММІГОТОМРІЗБ М ІЗИаАМОаєММТО5РБЗТІ БАБМОЮВМИТСОАБЕПНЗУУМ АМУООКРОКАРКІ І.
ІМ АБТІ АБСЕСУРЗВНЕЗаЗаЗСОАЕНТІ ТІ ОРОЮБАТУУСОМУМІ АВТМИАМЕРСОСТКІ ТМ а азасаазасасесаававЕМОЇ МЕЗССОИЇ МОРОСБІ ВІ БСТАБОаБЕ5І ТОУУУМПУУВОАРОИКаї Е
МмУаРІОРОВОРУМАТМАКСОВЕТІЗАОМЗКМТІ М ОММ5І ВАЕОТАУУУСАСОИрнмзамаі йдІмсаоО
СТІ МТУ55 (ЗЕО ІЮ МО:75) (00214) У інших споріднених варіантах здійснення, варіант(и) ААМ містять гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з амінокислотами 21-271 з
ЗЕО ІЮО МО:75 (що відповідає амінокислотній послідовності бролуцизумабу без підкресленої послідовності сигнального пептиду).
І00215| У іншому переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується нової послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує бролуцизумаб, злитий з областю Ес ІД01 людини (бролуцизумаб-Ес), що відповідає фігурі 12Е, де послідовність нуклеїнової кислоти містить або складається з: (00216)
АТаИаИТОоСТоСАСАСАСАСОИтатТСАТСсАаССТаСстТастатаавАтотота,аОбассСтТАтТаасСаА вАТССТаАТЧАСАСАСАИССССАаСАСАСТОТСоТаСсСАас,сСатапсаАспАСАаАаТаАТСАТСАСА таСсядсасСАаСаАпАТСАТоСАСсАаСсТОСТваСттаатТАТСАаСАсСААасСстааСААвасс
СсСстТААССТаСТаАТСТАССТЯааССТоТАСАСТОИССАсССс,асаАаатасстАасСАаАттотасаст стааАТСТОаССсаССОсАСТТсАСССТаАСААТСТотТАаССстТоСАассСстаАСсАСТТСасСсСАССТА
СстТАСТаСсСАпААсСатаТатАасстааССАаСАССААСссаСсасСсСААтттаасСАа,вааСАССАдаст сасдатасттаасасвАааассвсалса сотаатасСсацвАаасааатассааСавАааАтсАаасо стаставАтТотаАдАдатаса,аСстаатавААтТсАсСаСацАа,ааАстаст т СААсстаасавастото таАСАСТЯаАааСсТатАСсСсСассттааст стоССтТаАССОаАСТАСТАСТАСАТОАССТОСатоСОа
АСсАсСассоСтайСАААлсааАстталатаватацАТТСАТСВАССССаАСаАСаАТСОСТТАСТАС
ВССАСАТаСсСОИССААдсаСааСАпАТТСАССАТСАСОСС,ВапАСААСАаСААпААСАСССтТатАССТо
САВАТаААСсАХаСсСстТаАдаАаССаАапАСАСсСасСа7татАСТАТТа ТОССЯСаСасАСАТСАСААТА сосеса7астасацдАСТоаАТАТСТОССОаоСАсСасААСАСТасСТоАсСсататстТАаТаАСААаАСОс
АСАССТатТОСТоСАТаТоСТОаСТоСАпААСсТаСсТОСИСасАССтТсСаТатат ТОСтТат ТОСтТоСА
ААдаССТААапСАСАСССТадТаАтТСАаСАСААсСССтаААд,а тадсстассатеастаатасАта,7тат
СсосСАССАДапАТОСССОСААаТаААаТТСААТтТастТАСсатацвАаСса,саса,атапААаТасСАСААСассСА 60 АпАССААласССстТАаАаАдацпААСАаТАСААТАаСАССТАСАСАСТОИататосатастадссатаст вСАССАСОаАТттааСТаААСааСАААСпАаТАСААХатТасСААд,аа тат ССААСААлсСасоСстасстаст
ССТАТСЧАСААААССАТСТССААСасСсААл,асасСАасоСтА,аацвААССССАпаТ т ТАСАСАСТаС
СТоСААаСАсаСапАСаАдасСТаАСАААпААССАвсататоостаасстасстаатСАдааасттстТА ост сСпАТАТСОСССОЯТОапААТтТас,СсАсСАаСААтТааССАасСсСтаАаААСААСТАСААСАСААСО сстостатастапйАСАааСаАСаастоАТТСТоСТатАСАааСАдасСстаАСАаТапАСААаАасСА свАТОССАаСАасСааСААСсататтсАа,аста7астоСатаатТа,асАаса,адааСсстасСАСААССАСТАСА
СсССАСААХатосСстала,асстТаТатстостааСАААтТадаСсСАСасСаТААСАСсатасСАатТасаАаАСАТ
СТОА (5ЕО ІЮ МО:76). 00217) У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується послідовності нуклеїнової кислоти, яка кодує бролуцизумаб-Ес, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 909565, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995, або більшу ідентичність нуклеїнової кислоти з усією довжиною послідовності нуклеїнової кислоти, вказаної в 5ЕБО ІЮ МО:76, або з нуклеотидами 61-1530 з 5ЕБО ІЮ МО:76 (без підкреслених нуклеотидів, що кодують сигнальну послідовність Ід каппа). У споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіантів ААМ, що розглядаються, кодовані послідовністю нуклеїнової кислоти, що складається з або містить послідовність нуклеїнової кислоти з ЗЕ ІЮО МО:76, або нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 909565, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995 ідентичність з нею. У інших споріднених варіантах здійснення, продукт(и) гена, що доставляються за допомогою варіанту(варіантів) ААМ, що розглядаються, містять амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з наступною амінокислотною послідовністю.
ІО02181
ММІГОТОМРІЗБ М ІЗИаАМаєММТО5РБЗТІ БАБМОЮВМИТСОАЗЕПНЗУУМ АМУООКРОКАРКІ
ІМ АБТІ АБССУРЗВЕЗаЗаЗОАЕНТІ ТІ ОРОЮБАТУУСОМУМІ АЗТМСАМЕеСОСТКІ ТМ ЧСС азасаазасасесаававЕМОЇ МЕЗССОИЇ МОРОСБІ ВІ БСТАБОаБЕ5І ТОУУУМПУУВОАРОИКаї Е
МУСРІОРОВОРУМАТМ АКСВЕТІЗАОМЗКМТІ М ОММ5І ВАЕОТАУУУСАСОИонМЗаУаТі рім/сао
СТІ МУТУ55ОКТНТСРРОРАРЕЇ І СОаРЗМУНБ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕУТСУУМОУЗНЕОРЕМКЕМУУ ММ рРОМЕУНМАКТКРАЕЄОММЗТУВУММІ ТМ НОМ МСКЕУКСКУЗМКАЇ РАРІЕКТІЗКАКИООРАВЕР
ОМУТІРРУОВОЕЇ ТКМОМУБІ ТОЇ МКОЕМРЗБОІАМЕМ ЕБМСОРЕММУКТТРРМІ О5БОСОЗЕРІ ЗКОТМО
К5АМООСММЕЗСЗУМНЕАЇ НМНУТОКБІ 51 РОК (ЗЕО ІЮО МО: 77). (00219) У інших споріднених варіантах здійснення, варіант(и) ААМ містять гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 96956, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, щонайменше приблизно 9995 ідентичність або 10095 ідентичність з амінокислотами 21-498 з
ЗЕО ІЮ МО:77 (що відповідає амінокислотній послідовності бролуцизумабу-Ес без підкресленої послідовності сигнального пептиду).
І00220| У особливо переважних варіантах здійснення, даний винахід стосується інфекційного рекомбінантного віріона ААМ (ГААМ), що містить варіант капсидного білка ААМ, що містить пептидну вставку в Н-петлі капсидного білка, порівняно з відповідним вихідним капсидним білююом АДАМ, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність ІЗЮОТКН (ЗЕО ІО МО:14) або ГАІББОТКНА (5ЕО ІО МО:28), і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що кодує поліпептид, який інгібує активність МЕСЕ, переважно УЕСгЕа, де варіант капсидного білка додає збільшеної інфекційності для клітини сітківки, порівняно з інфекційністю відповідного вихідного капсидного білка ААМ для клітини сітківки. У деяких варіантах здійснення, ділянка вставки знаходиться між амінокислотами, що відповідають амінокислотам 587 і 588 МР1 з ААМ2 (ЗЕО ІЮ
МО:2), або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу АДАМ. Переважно, варіант капсидного білка ААМ також містить амінокислотну заміну РЗ4А, відносно МР1 капсиду
ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2), або відповідну заміну в іншому серотипі ААМ. (00221) У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується віріона гААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, що містить (і) пептидну вставку між амінокислотами, які відповідають амінокислотам 587 і 588 МРІ1 з ААМ2 (5ЕО ІО МО:2), або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу капсидного білка ААМ, порівняно з відповідним вихідним капсидним білком ААМ, і (і) амінокислотну заміну РЗ4АА, відносно МР1 капсиду ААМ2 (5ЕО І бо МО:2), або відповідну заміну в іншому серотипі ААМ, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність, що кодує афліберцепт. У переважних варіантах здійснення, послідовність нуклеїнової кислоти, яка кодує афліберцепт, складається з або містить послідовність нуклеїнової кислоти з 5ЕО ІО МО:6б5 або нуклеїнової кислоти, що має щонайменше приблизно 909565, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 9995 ідентичність з нею. У особливо переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується віріона гААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, що має амінокислотну послідовність, щонайменше на 9095 ідентичну, щонайменше на 9595 ідентичну або щонайменше на 9995 ідентичну послідовності, яка вказана як ЗЕО ІЮ МО:42, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність нуклеїнової кислоти з ЗЕО ІЮ МО:65, де варіант капсидного білка додає збільшеної інфекційності для клітини сітківки, порівняно з інфекційністю відповідного вихідного капсидного білка ААМ для клітини сітківки. У інших споріднених варіантах здійснення, гетерологічна нуклеїнова кислота додатково містить одну або більше послідовностей, кожна з яких кодує додатковий інгібітор МЕСЕа, переважно, вибраний з ранібізумабу, зс-ранібізумабу
НІ, зс-ранібізумабу ІН, 5с-ранібізумабу-Ес, бролуцизумабу і бролуцизумабу-Ес. У споріднених варіантах здійснення, даний винахід стосується фармацевтичної композиції, що містить такий
ГААМ. У інших споріднених варіантах здійснення, даний винахід стосується способу лікування асоційованого з МЕсСЕРа захворювання очей, що включає введення потребуючому цього суб'єкту ефективної кількості віріосна гААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, що має амінокислотну послідовність, щонайменше на 90595 ідентичну послідовності, яка вказана як ЗЕО
ІО МО:42, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність нуклеїнової кислоти з
ЗБЕО ІЮ МО:65 і необов'язково, одну або більше додаткових послідовностей нуклеїнової кислоти, де кожна кодує окремий інгібітор МЕСта. гААМ можна вводити за допомогою субретинальної, супрахоріоїдальної, місцевої, інтракамеральної ін'єкції або ін'єкції в скловидне тіло, але переважно, його вводять за допомогою ін'єкції в скловидне тіло. У деяких варіантах здійснення, асоційоване з МЕСЕа захворювання очей вибране з вологої (неоваскулярної, ексудативної) пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; неоваскуляризації сітківки внаслідок оклюзії вен сітківки; діабетичного набряку жовтої плями, діабетичної ретинопатії (включаючи всі стадії непроліферативної діабетичної
Зо ретинопатії і проліферативної діабетичної ретинопатії), міопічної дегенерації жовтої плями, оклюзії гілки вени сітківки, оклюзії геміретинальної вени і оклюзії центральної вени сітківки; ретинопатії недоношених; ідіопатичної хоріоїдальної неоваскуляризації; міопічної дегенерації жовтої плями і вторинної ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації; телеангієктозії сітківки; неоваскулярної глаукоми; геморагії скловидного тіла; ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації, вторинної відносно захворювань сітківки, включаючи, але без обмеження, увеїт, травму, дегенеративні порушення сітківки, генетичне захворювання сітківки і/або хороїду, пухлини ока, неоваскуляризацію рогівки і райдужної оболонки ока. У деяких переважних варіантах здійснення, асоційоване з МЕСЕа захворювання очей вибране з вологої (неоваскулярної, ексудативної) пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями; діабетичного набряку жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; діабетичної ретинопатії; і міопічної хоріоїдальної неоваскуляризації. (00222) У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується віріона гААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, що містить (і) пептидну вставку між амінокислотами, що відповідають амінокислотам 587 і 588 МР1 з ААМ2 (5ЕО ІО МО:2), або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу капсидного білка ААМ, порівняно з відповідним вихідним капсидним білком ААМ, і (і) амінокислотну заміну РЗ4АА, відносно МР1 капсиду ААМ2 (5ЕО І
МО:2), або відповідну заміну в іншому серотипі ААМ, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує ранібізумаб, зс-ранібізумаб НІ, 5с-ранібізумаб І Н або 5с-ранібізумаб-Ес. У переважних варіантах здійснення, послідовність нуклеїнової кислоти, яка кодує 5с-ранібізумаб, складається з або містить послідовність нуклеїнової кислоти, вказану в будь-якій з ЗЕО ІЮО МО:67, 69, 70 і 72, або має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995 ідентичність з нею. У особливо переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується віріона гААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, що має амінокислотну послідовність, щонайменше на 9095 ідентичну, щонайменше на 9595 ідентичну або щонайменше на 9995 ідентичну послідовності, яка вказана як ЗЕО ІЮ
МО:42, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність нуклеїнової кислоти з будь- якої з ЕО ІЮ МО: 67, 69, 70 і 72, де варіант капсидного білка додає збільшеної інфекційності для клітини сітківки порівняно з інфекційністю відповідного вихідного капсидного білка ААМ для бо клітини сітківки. У інших споріднених варіантах здійснення, гетерологічна нуклеїнова кислота додатково містить одну або більше додаткових послідовностей нуклеїнової кислоти, кожна з яких кодує окремий інгібітор МЕСЕа, переважно, вибраний з афліберцепту, бролуцизумабу і бролуцизумабу-Ес. У споріднених варіантах здійснення, даний винахід стосується фармацевтичної композиції, що містить такий гААМ. У інших споріднених варіантах здійснення, даний винахід стосується способу лікування захворювання очей, асоційованого із збільшеним рівнем внутрішньоочного МЕСта, що включає введення потребуючому цього суб'єкту ефективної кількості віріосна гААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, що має амінокислотну послідовність, щонайменше на 90595 ідентичну послідовності, яка вказана як ЗЕО
ІЮ МО:42, і гетерологічну послідовність нуклеїнової кислоти, яка містить послідовність нуклеїнової кислоти з будь-якої з 5ЕО ІЮ МО: 67, 69, 70 і 72. Переважно, гААМ вводять за допомогою ін'єкції в скловидне тіло. У деяких варіантах здійснення, асоційоване з МЕСЕа захворювання очей вибране з вологої (неоваскулярної, ексудативної) пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; неоваскуляризації сітківки внаслідок оклюзії вен сітківки; діабетичного набряку жовтої плями, діабетичної ретинопатії (включаючи всі стадії непроліферативної діабетичної ретинопатії і проліферативної діабетичної ретинопатії), міопічної дегенерації жовтої плями, оклюзії гілки вени сітківки, оклюзії геміретинальної вени і оклюзії центральної вени сітківки; ретинопатії недоношених; ідіопатичної хоріоїдальної неоваскуляризації; міопічної дегенерації жовтої плями і вторинної ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації; телеангієктозії сітківки; неоваскулярної глаукоми; геморагії скловидного тіла; ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації, вторинної відносно захворювань сітківки, включаючи, але без обмеження, увеїт, травму, дегенеративні порушення сітківки, генетичне захворювання сітківки і/або хороїду, пухлини ока, неоваскуляризацію рогівки і райдужної оболонки ока. У деяких переважних варіантах здійснення, асоційоване з МЕОСЕа захворювання очей вибране з вологої (неоваскулярної, ексудативної) пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями; діабетичного набряку жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; діабетичної ретинопатії; і міопічної хоріоїдальної неоваскуляризації. (00223) У деяких варіантах здійснення, даний винахід стосується віріона гААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, що містить (і) пептидну вставку між амінокислотами, що
Зо відповідають амінокислотам 587 і 588 МР1 з ААМ2 (5ЕО ІО МО 2), або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу капсидного білка ААМ, порівняно з відповідним вихідним капсидним білком ААМ, і (і) амінокислотну заміну РЗ4АА, відносно МР1 капсиду ААМ2 (5ЕО І
МО:2), або відповідну заміну в іншому серотипі ААМ, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує бролуцизумаб або бролуцизумаб-Ес. У переважних варіантах здійснення, нуклеотидна послідовність, що кодує бролуцизумаб або бролуцизумаб-Ес, складається з або містить послідовність нуклеїнової кислоти, вказану в ЖЕО
ІО МО:74 або 5ЕО ІЮ МО:76, або має щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9695, щонайменше приблизно 9795, щонайменше приблизно 9895, або щонайменше приблизно 9995 ідентичність з нею. У особливо переважному варіанті здійснення, даний винахід стосується віріона гААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, що має амінокислотну послідовність, щонайменше на 9095 ідентичну, щонайменше на 9590 ідентичну або щонайменше на 9995 ідентичну послідовності, яка вказана як ЗЕО ІЮ МО:42, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність нуклеїнової кислоти з 5ЕО 10 МО:74 або 5ЕО ІЮ МО:76, де варіант капсидного білка додає збільшеної інфекційності для клітини сітківки, порівняно з інфекційністю відповідного вихідного капсидного білка ААМ для клітини сітківки. У інших споріднених варіантах здійснення, гетерологічна нуклеїнова кислота додатково містить одну або більше нуклеотидних послідовностей, кожна з яких кодує окремий інгібітор
МЕСЕРа, переважно, вибраний з афліберцепту, ранібізумабу, 5с-ранібізумабу НІ, в5бс- ранібізумабу ІН ії 5с-ранібізумабу-Рс. У споріднених варіантах здійснення, даний винахід стосується фармацевтичної композиції, що містить такий гААМ. У інших споріднених варіантах здійснення, даний винахід стосується способу лікування захворювання очей, асоційованого із збільшеним рівнем внутрішньоочного МЕсСЕа, що включає введення потребуючому цього суб'єкту ефективної кількості віріона ГААМ, що містить варіант капсидного білка ААМ, що має амінокислотну послідовність, щонайменше на 90595 ідентичну послідовності, яка вказана як ЗЕО
ІЮ МО:42, і гетерологічну послідовність нуклеїнової кислоти, яка містить послідовність нуклеїнової кислоти з 5ЕО ІЮ МО:74 або 5ЕО ІЮ МО:76. Переважно, гААМ вводять за допомогою ін'єкції в скловидне тіло. У деяких варіантах здійснення, асоційоване з МЕсСРа захворювання очей вибране з вологої (неоваскулярної, ексудативної) пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; неоваскуляризації сітківки внаслідок 60 оклюзії вен сітківки; діабетичного набряку жовтої плями, діабетичної ретинопатії (включаючи всі стадії непроліферативної діабетичної ретинопатії і проліферативної діабетичної ретинопатії), міопічної дегенерації жовтої плями, оклюзії гілки вени сітківки, оклюзії гемиретинальної вени і оклюзії центральної вени сітківки; ретинопатії недоношених; ідіопатичної хоріоїдальної неоваскуляризації; міопічної дегенерації жовтої плями і вторинної ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації; телеангієктозії сітківки; неоваскулярної глаукоми; геморагії скловидного тіла; ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації, вторинної відносно захворювань сітківки, включаючи, але без обмеження, увеїт, травму, дегенеративні порушення сітківки, генетичне захворювання сітківки і/або хороїду, пухлини ока, неоваскуляризацію рогівки і райдужної оболонки ока. У деяких переважних варіантах здійснення, асоційоване з МЕсСЕРа захворювання очей вибране з вологої (неоваскулярної, ексудативної) пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями; діабетичного набряку жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; діабетичної ретинопатії; і міопічної хоріоїдальної неоваскуляризації.
І00224| Гени, продукти яких функціонують як імуномодулятори, наприклад, фактори комплемента, 0ЇІ-подібні рецептори, називають "імуномодулюючими генами". Ілюстративні імуномодулюючі гени включають гени цитокінів, хемокінів і злитих білків або антитіл, специфічних для них, і/або їх рецепторів, наприклад, злитого білка проти 1-6 рилонацепту "М, специфічного для фактора комплемента Н антитіла лампамізумабу і т.д. Гени, продукти яких функціонують як нейропротективні фактори, наприклад, рецептор тромбоцитарного фактора росту (РОСЕВ); гліальний нейротрофічний фактор (дОМЕ); фактор життєздатності колбочок (КасмЕ), який походить з паличок; фактор росту фібробластів (БСЕ); нейртурин (МТМ); циліарний нейротрофічний фактор (СМТЕ); фактор росту нервів (МОРЕ); нейтрофін-4 (МТА); нейротрофічний фактор головного мозку (ВОМЕ); епідермальний фактор росту. Гени, продукти яких функціонують як здатні відповідати на світло опсини, наприклад, опсин; родопсин; канальний родопсин; галородопсин. (00225) У деяких випадках, продуктом гена, який представляє інтерес, є сайт-специфічна ендонуклеаза, що забезпечує сайт-специфічний нокдаун функції гена, наприклад, де ендонуклеаза здійснює нокаут алелю, асоційованого із захворюванням сітківки. Наприклад, коли домінантний алель кодує дефектну копію гена, який, коли належить до дикого типу, кодує структурний білок сітківки і/або забезпечує нормальну функцію сітківки, сайт-специфічна
Зо ендонуклеаза може бути націлена на дефектний алель і здійснювати нокаут дефектного алелю. (00226) У доповнення до нокауту дефектного алелю, сайт-специфічну нуклеазу можна також використовувати для стимуляції гомологічної рекомбінації з донорної ДНК, яка кодує функціональну копію білка, кодованого дефектним алелем. Таким чином, наприклад, віріон
ГААМ, що розглядається, можна використовувати для доставки сайт-специфічної ендонуклеази, яка здійснює нокаут дефектного алелю, і можна використовувати для доставки функціональної копії дефектного алелю, що приводить до репарації дефектного алелю, таким чином, забезпечуючи продукцію функціонального білка сітківки (наприклад, функціонального ретиношизину, функціонального КРЕ65, функціонального периферину і т.д.). Див., наприклад,
Гі еї аї. (2011) Маїшге 475:217. У деяких варіантах здійснення, віріон ГААМ, описаний в даному описі, містить гетерологічну нуклеотидну послідовність, що кодує сайт-специфічну ендонуклеазу; і гетерологічну нуклеотидну послідовність, що кодує функціональну копію дефектного оалелю, де функціональна копія кодує функціональний білок сітківки.
Функціональний білки сітківки включають, наприклад, ретиношизин, КРЕб5, білок-1, який взаємодіючийє з регулятором ГІФази при пігментному ретиніті (ВСОРЕА), периферин, периферинч-2 і т.п.
І00227| Сайт-специфічні ендонуклеази, придатні для використання, включають, наприклад, мегануклеази; нуклеази з цинковими пальцями (2ЕМ); ефекторні нуклеази, подібні до активаторів транскрипції (ТАГЕМ); ії асоційовані з короткими палиіндромними повторами, розташованими кластерами, рівномірно віддалені один від одного/СКІ5РЕ (Сав), де такі сайт- специфічні ендонуклеази не зустрічаються в природі і є модифікованими для націлювання на специфічний ген. Такі сайт-специфічні нуклеази можна конструювати для розрізання в специфічних локалізаціях в геномі, і потім за допомогою з'єднання негомологічних кінців можна здійснювати репарацію розриву, в той же час, з вставкою або делецією декількох нуклеотидів.
Такі сайт-специфічні ендонуклеази (також позначені як "індели", які вносяться) потім здійснюють зсув білка з рамки зчитування і ефективний нокаут гена. Див., наприклад,
Публікацію патенту США Мо. 2011/0301073. 00228) У деяких варіантах здійснення варіанту ГгААМ вектора, описаного в даному описі, нуклеотидна послідовність, що кодує продукт гена, який представляє інтерес, є функціонально бо зв'язаною з конститутивним промотором. Придатні конститутивні промотори включають наприклад, промотор цитомегаловірусу (СМУ) (1іп5Кі єї а. (1985) Чоштпаї ої Мігоїоду 55(2): 431- 441), ранній енхансер СММ/промотор В-актину курки (СВА)У/інтрон ДВ-глобіну кролика (САС) (Міуалгакі еї а!. (1989) Сепе 79(2): 269-277, СВ5В (Часорзоп еї а!ї. (2006) МоїІєсшаг ТНегару 13(6): 1074-1084), промотор фактора елонгації 1« людини (ЕЕТо) (Кіт еї аї. (1990) Сепе 91(2): 217- 223), промотор фосфогліцераткінази (РОК) людини (Зіпдег-Зат єї аї. (1984) Сепе 32(3): 409- 417, промотор важкого ланцюга мітохондріального геному (І одегіо єї аї. (2012) РМАБ 109(17): 6513-6518), промотор убіквітину (М/ШЙ еї а). (1990) РЕВ5 ІенНегз 261: 101-105). В інших варіантах здійснення, нуклеотидна послідовність, що кодує продукт гена, який представляє інтерес, є функціонально зв'язаною з індукованим промотором. У деяких випадках, нуклеотидна послідовність, що кодує продукт гена, який представляє інтерес, є функціонально зв'язаною з тканиноспецифічним або специфічним для типу клітин регуляторним елементом.
Наприклад, в деяких випадках, нуклеотидна послідовність, що кодує продукт гена, який представляє інтерес, є функціонально зв'язаною зі специфічним для фоторецептора регуляторним елементом (наприклад, специфічним для фоторецептора промотором), наприклад, регуляторним елементом, що забезпечує вибіркову експресію функціонально зв'язаного гена в фоторецепторної клітині. Придатні специфічні для фоторецептора регуляторні елементи включають, наприклад, промотор родопсину; промотор кінази родопсину (Уошипа еї а. (2003) Орпіпаїтої. Мі. 5сі. 44:4076); промотор гена бета-фосфодіестерази (Місоца еї а!. (2007) У. Сепе Меа.9:1015); промотор гена пігментного ретиніту (Місоца еї аї. (2007) вище); енхансер гена міжфоторецепторного ретинол-зв'язувального білка (ІКВР) (Місоца еї аї. (2007) вище); промотор гена ІКВР (уоКоуата есеї аї. (1992) Ехр Еуєе Нев. 55:225), промотор гена опсину (ТискКег еї аї. (1994) РМАБ 91:2611-2615), промотор гена ретиношизину (Раїк еї аї. (2009) Сепе
Тпегару 16(7): 916-926), промотор гена білка з гомеодоменом САХ (РигиКауча вї аї. (2002) Те доштаї ої Мецгозсіепсе 22(5): 1640-1647), промотор гена поліпептиду 1 зв'язуючого нуклеотид гуанін білка з активністю альфа-трансдукції (МАТ) (І єе єї аі. (2010) Сепе ТПнегару 17:1390- 1399), промотор гена нейтрального специфічного для сітківки білка з лейциновою блискавкою (МАГ) (АКітоїо еї аї. (2006) РМАБ5 103(10): 3890-3895), промотор арестину колбочок людини (НСАВ) (Ії єї аї. (2002) Віоспетівігу апа Моїіесшіаг Віоіоду 43: 1375-1383), і промотори РА2.1,
РК1.7, РКІ1.5 ії РК1.1 (Уе еї аї. (2016) Нитап Сепе Тпегару 27(1): 72-82)). В деяких випадках,
Зо нуклеотидна послідовність, що кодує продукт гена, який представляє інтерес, є функціонально зв'язаною зі специфічним для клітин пігментного епітелію сітківки (КРЕ) регуляторним елементом (наприклад, специфічним для КРЕ промотором), наприклад, регуляторним елементом, що забезпечує вибіркову експресію функціонально зв'язаного гена в клітині КРЕ.
Придатні специфічні для КРЕ регуляторні елементи включають, наприклад, промотор гена
АРЕб5 (Мештг єї аї. (2007) Сепе ТПегару 14: 292-303), промотор гена клітинного зв'язуючого ретинальдегід білка (СКАЇГ ВР) (Кеппеаду еї аї. (1998) дошигпаї! ої Віоіодіса! Спетівігу 273: 5591- 5598), промотор гена фактора пігментного епітелію (РЕОЕ, який також називається серпін Е1) (Коїїта еї аї. (2006) МоїІесшаг апа Сеїйшаг Віоспетівігу 293(1-2): 63-69) і промотор гена вітеліформної макулодистрофії (ММО2) промотор (Езиті еї аї. (2004) Тпе уоштпаї ої Віоіодісаї!
Спетівігу 279(18): 19064-19073). В деяких випадках, нуклеотидна послідовність, що кодує продукт гена, який представляє інтерес, є функціонально зв'язаною зі специфічним для клітин глії Мюллера регуляторним елементом (наприклад, специфічним для клітин глії промотором), наприклад, регуляторним елементом, що забезпечує вибіркову експресію функціонально зв'язаного гена в гліальній клітині сітківки. Придатні специфічні для глії регуляторні елементи включають, наприклад, промотор гліального фібрилярного кислого білка (СЕАР) (Везпагоа еї аї. (1991) Удошттаї ої Віоіодіса! Спетівігу 266(28): 18877-18883). В деяких випадках, нуклеотидна послідовність, що кодує продукт гена, який представляє інтерес, є функціонально зв'язаною зі специфічним для біполярної клітини регуляторним елементом (наприклад, специфічним для біполярної клітини промотором), наприклад, регуляторним елементом, що забезпечує вибіркову експресію функціонально зв'язаного гена в біполярний клітині. Придатні специфічні для біполярної клітини регуляторні елементи включають, наприклад, промотор СЕМ (Стопіп єї а!ї. (2014) ЕМВО Моіесшіаг Меадісіпе 6(9): 1175-1190). (00229) Для цілей за винаходом, даний винахід стосується виділеної нуклеїнової кислоти, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує варіант капсидного білка ААМ, як описано вище. Виділена нуклеїнова кислота може являти собою ААМ вектор, наприклад, рекомбінантний ААМ вектор.
І00230| Даний винахід стосується також способу лікування захворювання сітківки, який включає введення потребуючому цього індивідууму ефективної кількості варіанту віріона гААМм, що містить трансген, який представляє інтерес, як описано вище і описано в даному описі. бо Фахівець в даній галузі може легко визначати ефективну кількість віріона гААМ, що розглядається, і те, що захворювання піддавали лікуванню, за допомогою тестування зміни одного або більше функціональних або анатомічних параметрів, наприклад, гостроти зору, поля зору, здатності відповідати на електрофізіологічні сигнали на світлі і в темряві, кольорового зору, контрастної чутливості, анатомії, стану і судинної мережі сітківки, рухливості очного яблука, переваги і стабільностей фіксації.
І0О0231| Необмежувальні способи оцінки функції сітківки і її змін включають оцінку гостроти зору (наприклад, найкращої коригованої гостроти зору І(ВСМАЇ, здатності до пересування, навігації, виявлення і розрізнення об'єктів), оцінку поля зору (наприклад, статичної і кінетичної периметрії поля зору), проведення клінічного обстеження (наприклад, огляду за допомогою щілинної лампи переднього і заднього сегмента ока), оцінку здатності відповідати на електрофізіологічні сигнали всіх довжин хвиль на світлі і в темряві (наприклад, всі форми електроретинографії (ЕВРО) (повноформатну, мультифокальну і патерни), всі форми індукованого зорового потенціалу (МЕР), електроокулографію (ЕОсС), оцінку кольорового зору, адаптації до темряви і/або контрастної чутливості). Необмежувальні способи оцінки анатомії і стану здоров'я сітківки, і їх змін включають оптичну когерентну томографію (ОСТ), фотографування очного дна, лазерну скануючу офтальмоскопію з системою адаптивної оптики (АО-51 0), флуоресценцію і/або аутофлуоресценцію; вимірювання рухливості очного яблука і руху очей (наприклад, ністагма, переваги і стабільності фіксації), вимірювання зареєстрованих результатів (повідомлених пацієнтом змін в зорово-опосередкованих і незорово- опосередкованих поведінці і діяльності, повідомлених пацієнтом результатів |(РКОЇ, основаних на опитувальниках оцінок якості життя, повсякденної діяльності і показників неврологічної функції (наприклад, функціональної магнітно-резонансної томографії (МЕКІ)). (00232) У деяких варіантах здійснення, ефективна кількість віріона гААМ, що розглядається, приводить до зменшення швидкості втрати функції сітківки, анатомічної цілісності або стану здоров'я сітківки, наприклад, до зменшення, в 2 рази, в З рази, в 4 рази або в 5 разів, або більше, швидкості втрати, і таким чином, прогресування захворювання, наприклад, до зменшення, в 10 разів або більше, швидкості втрати, і таким чином, прогресування захворювання. У деяких варіантах здійснення, ефективна кількість віріона гААМ, що розглядається, приводить до підвищення зорової Функції, функції сітківки, до поліпшення
Зо анатомії або стану здоров'я сітківки, і/або до поліпшення рухливості очного яблука і/або до поліпшення неврологічної функції, наприклад, до поліпшення, в 2 рази, в З рази, в 4 рази або в 5 разів, або більше функцій сітківки, анатомії або стану здоров'я сітківки, і/або до поліпшення рухливості очного яблука, наприклад, до поліпшення, в 10 разів або більше, функції сітківки, анатомії або стану здоров'я сітківки, і/або до поліпшення рухливості очного яблука. Як зрозуміло фахівцеві в даній галузі, доза, необхідна для досягнення бажаного ефекту лікування, як правило, може лежати в діапазоні від 1х108 до приблизно 1х10"» рекомбінантних віріонів, як правило, як правило, що позначаються для фахівця в даній галузі, як від 1х108 до приблизно 1х1075 "геномів вектора".
І00233| Віріон гААМ, що розглядається, можна вводити за допомогою внутрішньоочної ін'єкції, наприклад, за допомогою ін'єкції в скловидне тіло, ін'єкції субретинальної ін'єкції, за допомогою супрахоріоїдальної ін'єкції або за допомогою будь-якого зручного способу або шляху введення, який може забезпечувати доставку віріона гААМ в око. Інші зручні способи або шляхи введення включають, без обмеження, внутрішньовенні, внутрішньоартеріальні, периокулярні, інтракамеральні, субкон'юктивальні ін'єкції і ін'єкції в субтеноновий простір, і місцеве і інтраназальне введення. При введенні за допомогою ін'єкції в скловидне тіло, віріон
ГААМ, що розглядається, є здатним просуватися через скловидне тіло і перетинати внутрішню примежову мембрану (також позначену в даному описі як внутрішня обмежувальна мембрана, або "ІМ"; тонку, прозору безклітинну мембрану на поверхні сітківки, яка формує межу між сітківкою і скловидним тілом, утворену астроцитами і закінченнями відростків клітин Мюллера), іабо просуватися через шари сітківки більш ефективно, порівняно зі здатністю віріона ААМ, що містить відповідний вихідний капсидний білок ААМ.
І00234| Варіант капсидного білка, описаний в даному описі, є виділеним, наприклад, очищеним. У деяких варіантах здійснення, варіант капсидного білка, описаний в даному описі, включений в ААМ вектор або в рекомбінантний віріон ААМ (ТААМ). У інших варіантах здійснення, такі варіанти ААМ векторів і/або варіанти віріонів ААМ використовують в способі іп мімо або ех мімо лікування захворювання очей в сітківці приматів.
ІО0235| Даний винахід, крім того, стосується клітин-хазяїнів, таких як, без обмеження, виділені (генетично модифіковані) клітина-хазяїні, що містять нуклеїнову кислоту, яка розглядається. Клітина-хазяїн за винаходом, описаним в даному описі, може являти собою бо виділену клітину, таку як клітина з культури клітин іп мійго. Таку клітини-хазяїна можна використовувати для продукції варіанту віріона гААМ, що розглядається, як описано в даному описі. У одному варіанті здійснення, така клітина-хазяїн є стабільно генетично модифікованою з використанням нуклеїнової кислоти. У інших варіантах здійснення, клітина-хазяїн є тимчасово генетично модифікованою з використанням нуклеїнової кислоти. Таку нуклеїнову кислоту вводять стабільно або тимчасово в клітину-хазяїна, з використанням розроблених способів, включаючи, але без обмеження, електропорацію, преципітацію фосфатом кальцію, опосередковану ліпосомами трансфекцію, і т.п. Для стабільної трансформації, нуклеїнова кислота, як правило, додатково включає селективний маркер, наприклад, будь-який з декількох добре відомих селективних маркерів, таких як стійкість до неоміцину, і т.п. Таку клітину-хазяїна отримують за допомогою введення нуклеїнової кислоти в будь-яку з множини клітин, наприклад, клітин ссавців, включаючи, наприклад, клітини миші і клітини приматуа (наприклад, клітини людини). Ілюстративні клітини ссавців включають, але без обмеження, первинні клітини і лінії клітин, де ілюстративні лінії клітин включають, але без обмеження, клітини 293, клітини
СО5, клітини НегГа, клітини Мего, фібробласти миші 373, фібробласти СЗНІ1О0Т1/2, клітини СНО і т.п. Ілюстративні клітина-хазяїні включають, без обмеження, клітини Неїа (наприклад,
Американська колекція типових культур (АТСС) Мо. ССІ -2), клітини СНО (наприклад, АТСС Мо.
СІ 9618, ССІ 61, СКІ 9096), клітини 293 (наприклад, АТСС Мо. СКІ -1573), клітини Мего, клітини
МІН З3ТЗ (наприклад, АТСС Мо. СКІ -1658), клітини Ний-7 клітини, клітини ВНК (наприклад, АТОС
Мо. ССІ 10), клітини РС12 (АТСС Мо. СІ 1721), клітини СО5, клітини СО5-7 (АТС Мо.
СІ 1651), клітини КАТІ, клітини Її миші (АТС Мо. ССІ1І.3), клітини ембріональної нирки людини (НЕК) (АТСС Мо. СКІ 1573), клітини Ні Нерос2 і т.п. Клітини-хазяїна можна також отримувати з використанням бакуловірусу для інфекції клітин комах, таких як клітини 519, що продукують ААМ (див., наприклад, Патент США Мо. 7271002; Патентну заявку США сірок. Мо. 12/297958). У деяких варіантах здійснення, генетично модифікована клітина-хазяїн включає, в доповнення до нуклеїнової кислоти, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує варіант капсидного білка ААМ, як описано вище, нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує один або більше білків гер ААМ. У інших варіантах здійснення, клітина- хазяїн додатково містить варіант ГААМ вектора. Варіант віріосна ГААМ можна отримувати з використанням таких клітин-хазяїнів. Способи отримання віріона гААМ описані, наприклад, в
Зо Публікації патенту США Мо. 2005/0053922 і Публікації патенту США Мо. 2009/0202490.
І00236| Даний винахід, крім того, стосується фармацевтичної композиції, що містить: а) варіант віріона гААМ, як описано вище і описано в даному описі; і 5) фармацевтично прийнятний носій, розріджувач, наповнювач або буфер. У деяких варіантах здійснення, фармацевтично прийнятний носій, розріджувач, наповнювач або буфер є придатним для пацієнта-людини або пацієнта, що не належить до людини. Такі наповнювачі, носії, розріджувачі і буфери включають будь-який лікарський засіб, який можна вводити без надмірної токсичності. Фармацевтично прийнятні наповнювачі включають, але без обмеження, рідини, такі як вода, сольовий розчин, гліцерин і етанол. Фармацевтично прийнятні солі можуть включати, наприклад, солі неорганічних кислот, такі як гідрохлориди, гідроброміди, фосфати, сульфати і т.п.; і солі органічних кислот, такі як ацетати, пропіонати, малонати, бензоати і т.п.
Крім того, допоміжні речовини, такі як зволожувач або емульгатори, поверхнево-активні речовини, забуферювальні рН речовини, і т.п., можуть бути присутніми в таких носіях. Широка множина фармацевтично прийнятних наповнювачів відома в даній галузі, і немає необхідності детально обговорювати їх в даному описі. Фармацевтично прийнятні наповнювачі детально описані в множині публікацій, включаючи, наприклад, А. Сеппаго (2000) "Кептіпдіоп: Те
Зсіепсе апа Ргасіїсе ої Ріпаптасу", 201 еайоп, Іірріпсоїї, УУШіатв, 4 УМіКіпе; Рпаптасеціїсаї
Бозаде Ропт5 апа Огид Оеєїїмегу Зузієтв (1999) Н. б. Апвеї еї аї., едв., 7 ей., Іірріпсоїй,
М Шіатв, 5 УМіІКіп5; і Напароок ої Рпаптасецшіїйса! Ехсіріепі5 (2000) А. Н. Кірре еї аї., ед5»., 37 єд.
Атег. Рпагтасешііса!| А550с. У деяких аспектах за даним винаходом, даний винахід стосується фармацевтичної композиції що містить від приблизно 1х1085 до приблизно 1х1075 рекомбінантних вірусів або від 1х109 до приблизно 1х10!» геномів вектора, де кожний вказаний рекомбінантний вірус містить геном, що кодує один або більше продуктів генів.
І00237| Деякі варіанти здійснення винаходу проілюстровані в наступних пунктах 1-36: 1. Варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить пептидну вставку в ОН-петлі капсидного білка, порівняно з відповідним вихідним капсидним білком ААМ, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність ІЗЄЮОТКН (З5ЕО ІЮ МО:14), і де варіант капсидного білка додає збільшеної інфекційності для клітини сітківки, порівняно з інфекційністю відповідного вихідного капсидного білка ААМ для клітини сітківки.
2. Варіант капсидного білка ААМ за п. 1, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність У У2І50ОТКНУ», де кожний з М:-Уз незалежно вибраний з Ла, І еи, Сіу, Зег, Тгі
Рго. 3. Варіант капсидного білка ААМ за п. 2, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність ГАІЗВОТКНА (ЗЕО ІО МО:28). 4. Варіант капсидного білка ААМ за будь-яким з пп. 1-3, де ділянка вставки знаходиться між амінокислотами, що відповідають амінокислотам 587 і 588 МР1 з ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО:2), або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААУ. 5. Варіант капсидного білка ААМ за будь-яким з пп. 1-4, де капсидний білок містить одну або більше амінокислотних замін, відносно МР1 капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО:2), або одну або більше відповідних замін в іншому серотипі ААМ. 6. Варіант капсидного білка ААМ за будь-яким з пп. 1-5, де капсидний білок містить амінокислотну заміну РЗ4АА, відносно УР1 капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2), або відповідну заміну в іншому серотипі ААУ. 7. Варіант капсидного білка ААМ за будь-яким з пп. 1-6, де капсидний білок містить (Її) амінокислотну послідовність ІЗООТКН (5ЕБО ІЮ МО:14) ї (ії) амінокислотну заміну РЗА4А, і є щонайменше на 9095 ідентичним, щонайменше на 9595 ідентичним або щонайменше 9995 ідентичним послідовності, яка вказана як ЗЕО ІЮ МО:42. 8. Варіант капсидного білка ААМ за п. 7, де капсидний білок в основному складається з амінокислотної послідовності, яка вказана як ЗЕО ІЮО МО:42. 9. Рекомбінантний віріон ААМ (ГААМ), що містить варіант капсидного білка ААМ за будь-яким з пп. 1-8 і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує продукт гена. 10. тААМ за п. 9, де продукт гена являє собою поліпептид. 11. тААМ за п. 10, де гетерологічна нуклеїнова кислота містить нуклеотидну послідовність, що кодує поліпептид, який інгібує активність фактора росту ендотелію судин (МЕСЕ). 12. тААМ за п. 11, де нуклеотидна послідовність кодує злитий білок. 13. гГААМ за п. 12, де нуклеотидна послідовність кодує афліберцепт (ейлеа). 14. гААМ за п. 13, де нуклеотидна послідовність є щонайменше на 9095 ідентичною, щонайменше на 9595 ідентичною або щонайменше на 9995 ідентичною з послідовністю нуклеїнових кислоти, вказаною як 5ЕО ІО МО: 65, або з нуклеотидами 79-1377 з ЗЕО ІЮ МО:65, і переважно, кодує амінокислотну послідовність, яка вказана як 5ЕО ІЮ МО:66, або амінокислоти 27-458 з ФЕО І МО:66. 15. гААМ за п. 11, де нуклеотидна послідовність кодує моноклональне антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент. 16. гГААМ за п. 15, де нуклеотидна послідовність кодує ранібізумаб (люцентис). 17. ТтААМ за п. 15, де нуклеотидна послідовність (ї) містить послідовність, щонайменше на 9095 ідентичну, щонайменше на 9595 ідентичну або щонайменше на 9995 ідентичну з послідовністю з БЕО ІЮ МО:67 (5с-ранібізумаб НІ), або з нуклеотидами 58-1575 з БЕО ІЮ МО:67, і кодує амінокислотну послідовність, яка вказана як ЗЕО ІЮ МО:68, або (ії) кодує амінокислотну послідовність з амінокислот 20-524 з 5ЕО ІЮ МО:68. 18. гААМ за п. 15, де нуклеотидна послідовність (ії) має послідовність, щонайменше на 9090 ідентичну, щонайменше на 9595 ідентичну або щонайменше на 9995 ідентичну послідовності з
ЗЕО І МО:69 (вс-ранібізумабу НІ) або 5ЕО ІО МО:70 (5с-ранібізумабу ІН2), або з нуклеотидами 61-1578 з ЗЕО ІЮО МО:69 або 5ЕО ІЮО МО:70, і кодує амінокислотну послідовність, яка вказана як ЗЕО ІО МО:71, або (ії) кодує амінокислотну послідовність з амінокислот 21-525 з
ЗЕО І МО:71. 19. гААМ за п. 15, де нуклеотидна послідовність (ії) має послідовність, щонайменше на 9090 ідентичну, щонайменше на 9595 ідентичну або щонайменше на 9995 ідентичну з послідовністю з 5ЕО ІЮ МО:72 (вс-ранібізумабу-Ес) або з нуклеотидами 61-2277 з ЗЕО ІЮ МО:72, і кодує амінокислотну послідовність, яка вказана як ЗЕО ІЮ МО:73, або (ії) кодує амінокислотну послідовність з амінокислот 21-752 з 5ЕО ІЮ МО:73. 20. ТААМ за п. 15, де нуклеотидна послідовність кодує бролуцизумаб. 21. тААМ за п. 20, де нуклеотидна послідовність має послідовність, щонайменше на 9090 ідентичну, щонайменше на 9595 ідентичну або щонайменше на 9995 ідентичну з послідовністю нуклеїнової кислоти, вказаною як ЗЕО ІЮ МО:74, або з нуклеотидами 61-816 з БЕО ІЮ МО:74, і переважно, кодує амінокислотну послідовність, яка вказана як 5ЕБО ІЮО МО:75, або амінокислотну послідовність з амінокислот 21-271 з БЕО І МО:75. 22. ТААМ за п. 15, де нуклеотидна послідовність (ії) має послідовність, щонайменше на 9090 60 ідентичну, щонайменше на 9595 ідентичну або щонайменше на 9995 ідентичну з послідовністю з
ЗЕО ІЮ МО:76 (бролуцизумабу-Ес) або з нуклеотидами 61-1530 з 5ЕО ІЮ МО:76, і кодує амінокислотну послідовність, яка вказана як ЗЕО ІЮ МО:77, або (ії) кодує амінокислотну послідовність з амінокислот 21-498 з 5ЕО ІЮ МО:77. 23. ТААМ за п. 11, де гетерологічна нуклеїнова кислота містить (ї) послідовність, що кодує афліберцепт, переважно, де послідовність, що кодує афліберцепт, є щонайменше на 9095 ідентичною, щонайменше на 9595 ідентичною або щонайменше на 9995 ідентичною послідовності нуклеїнової кислоти, яка вказана як ЗЕО ІЮО МО: 65, і кодує амінокислотну послідовність, яка вказана як 5ЕО ІЮ МО:66, і (її) послідовність, що кодує бролуцизумаб, переважно, де послідовність, що кодує бролуцизумаб, є щонайменше на 9095 ідентичною, щонайменше 9595 ідентичною або щонайменше 9995 ідентичною послідовності нуклеїнової кислоти, яка вказана як 5ХЕО ІЮ МО: 74 або 5ЕО ІО МО:76, і переважно, кодує амінокислотну послідовність, яка вказана як ЗЕО ІЮ МО:75 або 5ЕО ІЮ МО:77. 24. ТААМ за будь-яким з пп. 9-23, де нуклеотидна послідовність, що кодує продукт гена, є функціонально зв'язаній з послідовністю для контролю експресії. 25. Фармацевтична композиція, що містить ГААМ за будь-яким з пп. 11-24 і фармацевтично прийнятний носій. 26. Спосіб доставки інгібітора МЕСЕ в клітину сітківки, хоріоїдальну клітину, кришталикову клітину, війчасту клітину, клітину райдужної оболонки, клітину зорового нерва і/або клітину рогівки у суб'єкта, що включає введення суб'єкту віріона гААМ за будь-яким з пп. 11-24 або фармацевтичної композиції за п. 24. 27. Спосіб за п. 26, де віріон ГААМ або фармацевтичну композицію вводять в скловидне тіло суб'єкта. 28. Спосіб лікування асоційованого з МЕСЕРа захворювання очей, вибраного з вологої (неоваскулярної, ексудативної) пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; неоваскуляризації сітківки внаслідок оклюзії вен сітківки; діабетичного набряку жовтої плями, діабетичної ретинопатії (включаючи всі стадії непроліферативної діабетичної ретинопатії і проліферативної діабетичної ретинопатії); міопічної дегенерації жовтої плями; оклюзії гілки вени сітківки, оклюзії геміретинальної вени і оклюзії центральної вени сітківки; ретинопатії недоношених; ідіопатичної хоріоїдальної
Зо неоваскуляризації; міопічної дегенерації жовтої плями і вторинної ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації; телеангієктозії сітківки; неоваскулярної глаукоми; геморагії скловидного тіла; ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації, вторинної відносно захворювань сітківки, включаючи, але без обмеження, увеїт, травму, дегенеративні порушення сітківки, генетичне захворювання сітківки і/або хороїду, пухлини ока, неоваскуляризацію рогівки і райдужної оболонки ока, у суб'єкта, який потребує такого лікування, за допомогою введення суб'єкту ефективної кількості ГААМ за будь-яким з пп. 11-24 або фармацевтичної композиції за п. 25. 29. Спосіб за п. 28, де асоційоване з МЕСЕРа захворювання очей вибране з вологої (неоваскулярної, ексудативної) пов'язаної з віком дегенерації жовтої плями; діабетичного набряку жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; діабетичної ретинопатії; і міопічної хоріоїдальної неоваскуляризації. 30. Спосіб за будь-яким з пп. 26-29, де гГААМ містить капсидний білок, який в основному складається з амінокислотної послідовності, яка вказана як 5ЕО ІЮ МО:42, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність, яка кодує афліберцепт, переважно, де послідовність, що кодує афліберцепт, має послідовність, вказану в ЗЕО ІЮ МО:65. 31. Спосіб за будь-яким з пп. 26-29, де гГААМ містить капсидний білок, який в основному складається з амінокислотної послідовності, яка вказана як 5ЕО ІЮ МО:42, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність, яка кодує ранібізумаб, в5с-ранібізумаб НІ, 5б- ранібізумаб ІН, або 5с-ранібізумаб-Ес, переважно, де послідовність, що кодує 5с-ранібізумаб
НІ, зс-ранібізумаб ІН, або 5с-ранібізумаб-Ес, має послідовність, вказану в будь-якій з 5Е0 ІЮ
МО:67, 69, 70 і 72. 32. Спосіб за будь-яким з пп. 26-29, де гГААМ містить капсидний білок, який в основному складається з амінокислотної послідовності, яка вказана як 5ЕО ІЮ МО:42, і гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить послідовність, що кодує бролуцизумаб або бролуцизумаб-Ес, переважно, де послідовність, що кодує бролуцизумаб або бролуцизумаб-Ес, має послідовність, вказану в ЗЕО ІЮ МО:74 або ЗЕО ІЮ МО:76. 33. Спосіб за будь-яким з пп. 28-32, де ГААМ або фармацевтичну композицію вводять в скловидне тіло суб'єкта. 34. Спосіб за будь-яким з пп. 26-33, де суб'єкт являє собою людину. 35. Виділена нуклеїнова кислота, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує варіант 60 капсидного білка ААМ за будь-яким з пп. 1-8.
36. Виділена, генетично модифікована клітина-хазяїн, що містить нуклеїнову кислоту за п. 35.
ПРИКЛАДИ
00238) Наступні приклади наведені таким чином, щоб забезпечити фахівця в даній галузі повним розкриттям і описом того, як здійснювати і використовувати даний винахід, і не призначені ні для обмеження об'єму того, що автори даного винаходу розглядають як свій винахід, ні для представлення того, що експерименти нижче являють собою всі або єдині проведені експерименти. Зроблені зусилля для забезпечення точності, застосовно до використовуваних чисел (наприклад, кількостей, температур і т.д.), але потрібно враховувати деякі експериментальні помилки і відхилення. Якщо не вказане інше, частини являють собою частини по масі, молекулярна маса являє собою середньовагову молекулярну масу, температура наведена в градусах Цельсія, і тиск є атмосферним або близько того.
Ї00О239| Загальні способи молекулярної і клітинної біохімії можна виявити в такому стандартному посібнику, як МоіІесціаг Сіопіпд: А ІГабогаїогу Мапиаї, Зга Ед. (Затьгоок еї аї.,
Нарог Іарогаїогу Рге55 2001); поп Ргоїосоїв5 іп Моїіесшіаг Віоіоду, 4 Ед. (А!йзибеї еї аї. еав5.,
Уопп УМіеу 4 оп 1999); Ргоївїп Меїподз (ВоїІад еї аї., допп М/їєу є 5оп5 1996); Мопміга! Месіогв
Тог Сепе Тнегару (УМадпег еї а)ї. єдв., Асадетіс Ргезв 1999); Міга! Месюгз (Каріїйї є І оєему едв.,
Асадетіс Ргезз 1995); ІттипоЇоду Меїнод5 Мапциаї! (І. І еїкомії5 ед., Асадетіс Ргев5 1997); і СеїЇ апа Тіввие Сийиге: І арогаюгу Ргоседигез іп ВіоїесппоЇоду (Ооуїе б СііййНв5, доп УМіІеу б 5оп5 1998), зміст яких наведений в даному описі як посилання. Реагенти, клонуючі вектори і набори для генетичної маніпуляції, на які посилаються в даному описі, є доступними від комерційних постачальників, таких як ВіоКаай, 5іга(адепе, Іпмігодеп, Зідта-Аїагісй і СіопТесп. 00240) Приклад 1 (00241) Ін'єкція в скловидне тіло і збір тканин. Одному самцеві яванської макаки (тасаса
Тазсісшціагів) у віці 4-10 років і масою щонайменше 4 кг вводили дози за допомогою ін'єкції в скловидне тіло через склеру (приблизно на З мм позаду лімба з використанням способу і пристрою для доставки, придатного для використання для людини). Тварину піддавали анестезії і вводили місцевий анестетик. 100 мкл бібліотеки вводили в кожне око.
І00242| Евтаназію проводив кваліфікований ветеринар з використанням 100 мг/кг
Зо пентобарбіталу натрію на добу 1453. Очі вирізали і зберігали при 4 "С до нарізання. (00243) Нарізання тканин. Очі розрізали вздовж межі між зоровою і сліпою частинами сітківки з використанням скальпеля, і передній сегмент видаляли. Розрізи для виходу скальпеля виконували в сітківці навколо фовеї, щоб дозволити фіксацію сітківки, і скловидне тіло витягували. Шість зразків сітківки з кожного квадранта (переднього, заднього, назального і скроневого) збирали, як показано на фігурі 2, і виділяли клітинний матеріал, який відповідає клітинам ЕРЕ, фоторецепторам, біполярним клітинам, амакриновим клітинам, горизонтальним клітинам і/або гангліонарним клітинам.
І00244| Спрямована еволюція. Спосіб спрямованої еволюції показаний на фігурі ТА-1Е.
Стисло, отримують бібліотеку вірусних капсидів, що містить 20-- запатентованих комбінацій способів мутагенезу ДНК і генів сар (фігура 1А). Потім віруси упаковують (фігура 18) - таким чином, що кожна частинка складається з мутантного капсиду, який оточує ген сар, що кодує цей капсид, - і очищають. Бібліотеку капсидів піддають селективному тиску іп мімо. Тканину або клітинний матеріал, що представляють інтерес, збирають для виділення варіантів ААМ, які успішно інфікували цю мішень, і успішні віруси виділяють. Успішні клони збагачують за допомогою повторюваного відбору (стадія 1 - фігура 10). Відібрані гени сар потім піддають запатентованому повторному внесенню різноманітності і збагачують за допомогою додаткових стадій відбору для повторюваного збільшення пристосованості вірусу (стадія 2 - фігура 10).
Для варіантів, ідентифікованих в ході стадій відбору вектора 1 і 2, показана здатність до трансдукції клітин сітківки приматів (фігура 1Е). (00245) Успішне виділення геномів капсидів ААМ: цикли 1-6. Капсиди, виділені з кожного циклу відбору, використовували для упаковки бібліотеки, ін'єктованої для ініціації подальшого циклу відбору. Виділення генів капсидів з тканини представляє успішну інтерналізацію бібліотеки векторів в тканину, яка представляє інтерес. Після циклу 4, проводили повторне внесення різноманітності в бібліотеку перед упаковкою бібліотеки і ін'єкції для циклу 5.
Виділення вірусних геномів з КРЕ, РЕ, внутрішнього ядерного шару (ІМ) ї шару гангліонарних клітин (СС) тканини сітківки з репрезентативного циклу відбору показано на фігурі 3. Смуги всередині рамок представляють успішне виділення вірусних геномів.
І00246| Аналіз секвенування: цикли 3-6. У ході циклів 3-6, проводили секвенування індивідуальних клонів в бібліотеці для визначення частоти варіантів всередині популяції. бо Варіанти оцінювали по присутності мотивів в даних секвенування. Варіанти групували по мотивах на основі присутності уніфікуючого варіанту (наприклад, специфічної точкової мутації або специфічної послідовності пептидної вставки в постійній локалізації всередині капсиду), що зустрічається у множині послідовностей. Мотиви, що представляють щонайменше 5905 від секвенованої популяції в двох або більше циклах відбору, або щонайменше 1095 від секвенованої популяції в одному або декількох циклах відбору, представлені на фігурі 4А (цикл
З аналізу секвенування), 4В (цикл 4 аналізу секвенування), 4С (цикл 5 аналізу секвенування) і 40 (цикл 6 аналізу секвенування). (00247) Декілька репрезентативних клонів, ідентифікованих як такі, що додають збільшеної інфекційності для клітин сітківки, перераховані в таблиці 1ї7 нижче (кожний клон містить ідентифіковані заміну(заміни) і/або пептидну вставку і є в іншому відношенні ідентичним 5ЕО ІЮ
МО:2; цикл відбору, кількість послідовностей і частота (в дужках) перераховані для кожного клона):
Таблиця 1
Амінокислотна послідовність капсидного білка МР1 ААМ, що додає збільшеної інфекційності для однієї або декількох клітин сітківки. Заміни, перераховані в стовпці 2, основані на амінокислотній послідовності ААМ2 дикого типу, тобто при відсутності вставленого пептиду. - (ЗЕО ІЮ МО:28 за и а 12222003 - (ЗЕО ІЮ МО:28 РБ5ЗБ55 1 (1,6195
З ше й 1 що - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,8995 з ші 12 2 2 2 2 5 0 - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,68295 з ше - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,93395 з 1 деи 1252525 - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,68295 з и 1 и 1 шк - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,6195 з 1 дви 125 5 5 Б - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (22795 з и 1 1 ше - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,8595 зо и 100311 - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,68295 зб 10001 - (ЗЕО Ір МО:28 1 (1,68295
Б ні шт (33525253 60 - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (22795 58871 АІБВОТКНА| яО0164К--М7081І Цикли З і 4 - (ЗЕО І МО:28) 2 (3,790) 1 (1,3395
ЗІ ше (225 - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,93395 з 1 дер 1960 3225 - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (22795 з 1 0001 шо- - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,93395 з и дер 1 «о Ж О жо - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (22795 зо и 0001 - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,93395 зе 1 а 1000010 - (ЗЕО ІЮ МО:28 1 (1,8595
Таблиця 1
Амінокислотна послідовність капсидного білка МР1 ААМ, що додає збільшеної інфекційності для однієї або декількох клітин сітківки. Заміни, перераховані в стовпці 2, основані на амінокислотній послідовності ААМ2 дикого типу, тобто при відсутності вставленого пептиду. зро и 1100 з (5ЕО 1Ю МО:28 1 (1,3395 тою 1 10003 з (5БЕО 10 МО:28 1 (1,6195 ер ше 100010 з (5ЕО 1Ю МО:28 1 (1,6195
ТЕО 1 В ді оо
ЗЕОЮ МО:28 1 (1,8995
ЗЕО ІЮ МОС28 ор они отяш! я тя з (5ЕО 1Ю МО:28 1 (22795 пор ос яння песвнння з (5ЕО 1О МО:28). | 515-1698У--І 7350 орють оо з (5ЕО 1Ю МО:29 1 (1,8995 - (ЗЕО ІЮ МО:27 я 1 ше 18 1000 - (ЗЕО ІЮ МО:27 1 (22795 ес и 100010 з (5ЕО 1Ю МО:27 1 (1,6195 ес а 00010 - (ЗЕО ІЮ МО:27 1 (1,8595 ер и 100003 - (5ЕО 1Ю МО:27 1 (1,3395 588- АОАОТТКМА -1698М Цикли 5 і б кі ШИН МН НИ 1 (1,8995 о а - (ЗЕО ІЮ МО:27 588-ГАОАОТТКМА| -М7081-М719М Цикли Зі (ЗЕО ІЮ МО:27) 1 (2,089) 2 (4,559
ВО 1 ши 11000 - (ЗЕО ІЮ МО:27 1 (22795 рт | ШЕ шт пе - з (5ЕО 1Ю МО:34 2 (3,7790 588-іІАМОСУТКТА Немає Цикли 3,415 Цикли 3,4 і 5 Цикл 5 (ЗЕО ІЮ МО:31) 5 (92695) 2 (4,170) 1 (1,68295) 1 (1,3395) 2 (4,55905)
З (5,669о 2 (22795 вв и шЕа 10001 - (5ЕО ОО МО:З1 1 (1,8595 во а ши 222 - (5ЕО 1О МО:З1 1 (1,8595 вро ОВ 0 з (5ЕО 10 МО:31 1 (1,3395 1 (2,0895 588-1 АНОІТКМІА» Немає Цикли 3,4516 (ЗЕО І МО: 32) 1 (1,8595) 1 (1,3395) 1 (1,8995
Таблиця 1
Амінокислотна послідовність капсидного білка МР1 ААМ, що додає збільшеної інфекційності для однієї або декількох клітин сітківки. Заміни, перераховані в стовпці 2, основані на амінокислотній послідовності ААМ2 дикого типу, тобто при відсутності вставленого пептиду. 11 гвазу тео т 1000100
ЗЕОІЮ МО З2 1 (1,3395
Ер 1 а 10003
ЗЕО ІЮО МО:З2 1 (1,8995 пек 0010
ЗЕОІЮ МО З2 1 (1,8595 перо 1
ЗЕОІЮ МО З2 с ша 181000
ЗЕО О МО: 60 1 (2,0895 в 1 ОЇ да 222 з (5ЕО 10 МО:40 1 (1,8595 вві 1000310 з (5ЕО 1Ю МО:35 1 (22795
БЕН У НННБЬаН НИНІ НОЯ НО с з (5ЕО 1Ю МО:35 1 (2,1795 виро 23232031 1000 з (5ЕО 1Ю МО:ЗЗ3 1 (1,6195 ев 30311000 з (5ЕО 10 МО:39 1 (1,6195 сере 333031 001000
А- (5ЕО ІЮ МО:37 1 (1,8995 588-І ААБОЗБТКАА Цикли З і 4 (ЗЕО І МО:30) 1 (1,8595) 1 (1,3395
В 22203101 шо - (5ЕО ОО МО:41 1 (1,8595 тоб 22231001 з (5ЕО 1Ю МО:36 1 (2,1795
БІБ яко ше ше 06 з (5ЕО 1Ю МО:З38 1 (1,8295 1 (1,8995) З (6,829) 1 (2,1795) 1 (22795 ек рве 1 1 1 (1,8595 1 (22795
НЕМАЄ 51097 Цикл 4 Цикли 3, 4, 5 2 (2,67905) 4 (8,339) 1 (22795) 1 (22795 кр 1 (2,0895 ак тек 1 (2,0895
ОН ве 1 ОО -АБОЗЕ-М7О81І 1 (1,8595
НЕМАЄ О164К Цикли 41 5 Цикл 4 2 (2,67905) 1 (22795) 1 (1,8995 кг 1 (1,8595 1 (2,1795
Таблиця 1
Амінокислотна послідовність капсидного білка МР1 ААМ, що додає збільшеної інфекційності для однієї або декількох клітин сітківки. Заміни, перераховані в стовпці 2, основані на амінокислотній послідовності ААМ2 дикого типу, тобто при відсутності вставленого пептиду. о ше 1 (1,8595 1 (22795
НЕМАЄ АБОЗЕ Цикли 3, 4, 5 Цикли 3, 4, 5 Цикл 4
З (5,5695) 12 (2595) 1 (2,1795) 7 (9,339) 7 (15,99) 1 (1,8995 14(31,895 стає ре 1 (2,0895 теє реє 1 (22795 стеж ре ше 00 -Т491А 2 (4,1795
НЕМАЄ АБОЗЕ--М7081І Цикли 3, 4 Цикли 3, 4, 5 2 (3,790) 4 (8,339) 2 (2,67905) 1 (22795) 1 (22795 теє ге ше 1 (1,8995 1 (22795
НЕМАЄ У7О81І Цикли 3, 4, Цикли 3, 4, 5 2 (3,790) 1 (2,089) (6,679) 4 (9,099) 4 (9,099 теє гли 2 (4,559 теє рев 1 (22795 сек реко 1 (2,1795 (00248) Як капсид, що має збільшену інфекційність для однієї або декількох клітин сітківки, ідентифікований клон, що має наступну предкову послідовність МР1 капсиду: (002491 5 МААРрИмІ РОУМІ ЕОМІ БЕСІВЕМ М ОЇ КРЕАРКРКАМООКОВОрИ ВИ М РЕ МКМ СРЕМИЇ ОКО
ЕРУМААВСААДАЇГ ЕНОКАМОСОЇ КАСОМРМІ АВУМНАВАЕРОЕВІ ОБОТЗРОСМІ СВАМЕОАККАВМІ ЕР
ГС МЕЕВАКТАРаККАРМЕРЗБРОВЗРОБЗТИаСкККкКаоРАККВІ МЕСОТИОЗЕЗМРОРОРІ СЕРРА арРЗІ аа МААасааАРМАЮММЕСАВсССМИамМмАБаТмиунсорГМ аКрамМіІТТЗТАТУМАЇ РТУММНІ У
КОІ5Б5АБАСО ГМОМНУГаУЗТРИ СМ ЕОЄМАЕНСНЕЗРАВСУМОВІ ІМММУУС ЕАРКВІ МЕКІ ЕМІОУКЕ
УТТМрамтпАММ ТТ МОМЕЗОБЕМОЇ РУМ авАНОССІ РРЕРАОМЕМІРОМСОаМІ ТІ Ма ЗОАМаВ
ЗЗЕМСЇ ЕМЕРБОМІ АВТаММЕТЕЗМТЕЕОМРЕНЗЗМАНЗОБІ ОВІ ММРІТВОМІ УМ АНТОЗТОССТАС
ТАЕПЕБОАИаРЗОММЗАОСАКМУМ РИРСУВООВУЗКТІ БОМУММЗМЕАМ ТаАТКУНІ МСІВОБІ ММРО М
АМАТНКОСЕОВЕЕРБЗИаМ ІРЕКОСАСАММТАГЕМУММТЗЕЕЕІКТТМРМАТЕОМОаУМАЗМІ О5ЗМТ
АРУТатТУМБЗОСАЇ РЕМУМОМАВУМІ ОСРІМАКІРНТРОамМЕНРЗБРІ МСЕ КНРРРОШІКМТРМУРА
МРРАМЕТРАКЕАЗЕІТОУЗТаОМЗМЕТЕМЕГОКЕМЗКАУУМРЕЇЮМТЗМУАКЗТММОБАМОМЕСУМЗЕ
РАРІСТАМІ ТРМІ.. (ЗЕО ІЮ МО:59)
І00250| Цей варіант предкового капсиду еволюціонував з предкового капсиду 5ЕО І
МО:58, в якому положення виродженості (залишки 264, 266, 268, 448, 459, 460, 467, 470, А71, 474, 495, 516, 533, 547, 551, 555, 557, 561, 563, 577, 583, 593, 596, 661, 662, 664, 665, 710, 717, 718, 719, 723) еволюціонували для вмісту аланіну (А) в 264, аланіну (А) в 266, серину (5) в 268, аланіну (А) в 448, треоніну (Т) в 459, аргініну (К) в 460, аланіну (А) в 467, серину (5) в 470, аспарагіну (М) в 471, аланіну (А) в 474, серину (5) в 495, аспарагіну (0) в 516, аспарагіну (0) в 533, глутаміну (0) в 547, аланіну (А) в 551, аланіну (А) в 555, глутамінової кислоти (Е) в 557, метіоніну (М) в 561, серину (5) в 563, глутаміну (0) в 577, серину (5) у 583, валіну (М) в 593, треоніну (Т) в 596, аланіну (А) у 661, валіну (М) в 662, треоніну (Т) в 664, проліну (Р) в 665,
треоніну (Т) в 710, аспарагінової кислоти (0) в 717, аспарагіну (М) в 718, глутамінової кислоти (Є) в 719 і серину (5) в 723.
І00251| Варіанти віріона ААМ, описані в даному описі, можуть включати доцільні параметри, ознаки, модифікації, переваги і варіанти раціонального дизайну, ясно очевидні фахівцеві в галузі конструювання вірусних векторів ААМ. (00252| Приклад 2
І00253| Спрямовану еволюцію використовували для відкриття нових варіантів аденоасоційованого вірусу (ААМ) з чудовою доставкою гена в клітини сітківки після введення в скловидне тіло (ІМТ), способом введення зі значними перевагами над іншими способами доставки гена в око людини (приклад 1). Тропізм клітин після введення в скловидне тіло нового варіанту ААМ, що містить заміну РЗ4А і пептид ГАІЇІБВОТКНА (5ЕО ІЮО МО:28), вставлений в положенні амінокислоти 588 (ГАІБВОТКНАЖРЗ4АА; 5ЕО ІЮ МО:42), оцінювали іп мімо у нелюдиноподібних приматів (МНР) як репрезентативний приклад здатності варіантів ААМ, які містять ІЗООТКН (5ЕО ІО МО:14), до трансдукції клітин сітківки. (00254) Рекомбінантні віріони ААМ, що містять або капсид ААМ2, або новий варіант капсиду
ГАІЗБВОТКНАХРЗАА (5ЕО ІЮО МО:42), і геном, який містить трансген зеленого флуоресцентного білка (СЕР), функціонально зв'язаний з промотором СММУ (ААМ2СМУ.СЕР (іі
ГАІЗРОТКНАХРЗЯ4А.СММУ.СЕР, відповідно) або опромотором САС (ААМ2.САСЕСЕР і
ГАІБВОТКНАХРЗ4А.САС.ЕСЕР, відповідно), отримували з використанням стандартних способів. Африканським зеленим мавпам (фігури 7, 8) або яванським макакам (фігура 9) ін'єктували в скловидне тіло різні дози вектора в діапазоні від 4х1019 гв до 1х1012 гв на око (див. подробиці в підписах до фігур), і трансдукцію клітин сітківки оцінювали за життя за допомогою отримання флуоресцентних зображень очного дна з використанням НеїаеїЇБегу Зресігаїїв5 "М, (00255) Доставка в скловидне тіло ААМ, що містять новий варіант ГАІЗВОТКНАХРЗАА (5ЕО
ІО МО:42), приводила до більш широкої і більш надійної експресії трансгена в сітківці МНР, ніж
ААМ2 (фігури 7-9). Зображення виявили, що новий варіант ААМ капсиду забезпечує надійну експресію в центрі фовеї (в ділянці, багатій колбочками); в парафовеальному кільці (в ділянці, багатій гангліонарними клітинами сітківки) і на периферії (в ділянці, багатій багатьма типами клітин, включаючи палички, гліальні клітини Мюллера, амакринові клітини, біполярні клітини), настільки рано, як через 2 тижні після ін'єкції. На відміну від цього, і відповідно до результатів, опублікованих іншими авторами, ААМ2 диких типи забезпечує більш слабку експресію, присутню насамперед в парафовеальному кільці, і її можна детектувати тільки в більш пізні часові точки. Імуногістохімічний аналіз різних ділянок сітківки, проведений через З тижні після ін'єкції, підтвердив, що множина типів клітин сітківки, включаючи клітини пігментного епітелію сітківки, фоторецепторні палички і колбочки, і гангліонарні клітини сітківки, були успішно трансдуковані в сітківці (фігури ТОА-1ОЕ). (00256) Це дослідження ілюструє чудову доставку гена за допомогою варіанту, який містить
ІЗООТКН, після клінічно переважного способу введення, порівняно з клінічно значущим ААМ2.
Схожа ефективність є досяжною з використанням інших варіантів, що містять цей мотив пептидної вставки. Подібним чином, схожа ефективність є досяжною з використанням інших варіантів, описаних в даному описі, ідентифікованих з використанням такого ж способу спрямованої еволюції.
І00257| Приклад З (00258) Клітинний тропізм нового варіанту ААМ ГАІЗВОТКНАЖРЗ4А (5ЕО ІЮ МО:42) для клітин пігментного епітелію сітківки (КРЕ) ії фоторецепторних (РК) клітин оцінювали іп міго з використанням клітин РРЕ і клітин РЕ, отриманих з індукованих плюрипотентних стовбурових клітин (ЕВ-ІРЗС) людини, які походять з фібробластів, або ембріональних стовбурових клітин (ЕБС) людини.
І00259| Віріони ААМ, що містять або капсид ААМ2, або новий варіант капсиду
ГАІЗБВОТКНАХРЗАА (5ЕО ІЮО МО:42), і геном, який містить трансген зеленого флуоресцентного білка (ЕСЕР), функціонально зв'язаний з опромотором САС (ААМ2.САС.ЕСЕР і
ГАІБВОТКНАХРЗ4А.САС.ЕСЕР, відповідно), отримували з використанням стандартних способів. Культури клітин КРЕ людини отримували з лінії ембріональних стовбурових клітин людини Е5І-017 або індукованих плюрипотентних стовбурових клітин (ЕВ-ІР5С) людини, які походять з фібробластів з використанням 45-добового способу диференціювання. Дозрівання до клітин КРЕ підтверджували за допомогою детекції експресії маркерів зрілих КРЕ, включаючи
КРЕб5 і ВЕ5Т1; синтезу МЕСЕ і РЕОБ; і здатності до фагоцитозу зовнішніх сегментів паличок.
Культури РК отримували за допомогою багатоступінчастої парадигми формування очного келиха і підтверджували, що вони містять РЕ, за допомогою детекції експресії рековерину і 5- бо опсину через 179 діб в культурі.
(00260) Порівняно з ААМ2, ГАІЗВОТКНАХРЗАА (5ЕО І МО:42) забезпечував значуще більш високу ефективність трансдукції і експресії трансгена в культурах КРЕ людини через сім діб після інфекції, як визначено за допомогою імунофлуоресценції (фігури 11А-В), проточної цитометрії (збільшення в 2,7 раз; фігури 11С-0) і аналізу Вестерн-блотингу (фігури 11БЕ-Е).
Подібним чином, надійної трансдукції і експресії досягали з використанням
ГАІЗРОТКНАХРЗ4А. САС. ЕСЕР в культурах РК людини через 32 діб після інфекції. Це дослідження ілюструє чудову здатність варіантів, які містять ІЗЮОТКН (ЗЕО ІЮО МО:14), до доставки генів в клітини сітківки.
І00261| Приклад 4 (00262) Дизайн і конструювання векторів, які експресують білки проти МЕСЕ. Амінокислотна послідовність афліберцепту складається з сигнального пептиду ЕШ людини, домену 2 МЕСЕВ1 і домену З МЕСЕК2, злитого з областю Ес ІдСї1 людини (фігура 12А; 5ЕБЕО ІЮ МО:66).
Амінокислотні послідовності легких і важких ланцюгів ранібізумабу з'єднували за допомогою гнучкого білкового лінкера для переведення дволанцюжкового антигензв'язувального фрагмента (Ба) в одноланцюжковий Раб (зсЕбар). Легка-важка (ІН) форма складається з сигнального пептиду легкого ланцюга каппа Ід людини, варіабельного легкого, константного легкого, варіабельного важкого і константного важкого 1 доменів ранібізумабу, зв'язаних за допомогою гнучкого пептиду (фігура 128; 5ЕО ІЮО МО:71). Важка-легка (НІ) форма є схожою, за винятком того, що сигнальний пептид походить з важкого ланцюга до людини, і важкий і легкий домени знаходяться на протилежних сторонах лінкера, порівняно з формою ІН (фігура 12С;
ЗЕО ІЮ МО:68). Дизайн бролуцизумабу включає варіабельний легкий і варіабельний важкий домени, зв'язані за допомогою гнучкого пептиду, з сигнальним пептидом легкого ланцюга каппа
Ід людини для секреції з клітин ссавців (фігура 120; 5ЕО ІО МО:75). Відкриті рамки зчитування піддавали оптимізації по кодонному складу для поліпшеної експресії в клітинах людини і синтезували в СепеАгі або Сепзогірі, ії надавали в стандартному плазмідному клониуючому векторі. ДНК, що представляє інтерес, вирізали з цієї плазміди з використанням рестрикційних ферментів Ра! і Во, і вставляли в плазміду РАДАУ-САСі-5У40 рА між промотором САС і полід- сигналом 5М40. Дизайн 5с-ранібізумабу-Рс складається з форми ІН 5с-ранібізумабу, злитою з областю Ес ІдС1 людини з дизайну афліберцепту (фігура 12Е; 5ЕБО ІЮ МО:73). Дизайн
Зо бролуцизумабу-Ес складається з бролуцизумабу, злитого з областю Ес ЇдДС1 людини з дизайну афліберцепту (фігура 12Е; ЗЕО ІЮ МО:77). Області 5с-ранібізумабу ІН, бролуцизумабу і Ес ампліфікували за допомогою ПЛР з вихідних клонуючих векторів, з подовженнями, що містять ділянку для рестрикційного ферменту типу 5 В5тВі на 3'-кінці (5с-ранібізумаб ІН і бролуцизумаб) або 5'-кінці (Ес). Отримані продукти ПЛР розщеплювали з використанням рестрикційних ферментів Раї! ї В5твВІ (5с-ранібізумаб І Н і бролуцизумаб) або Во5твВІ і Ваш (Ес), і вставляли в плазміду рдАУ-бАС-5М40 рА між промотором САС і поліА-сигналом 5ЗМ40.
Реакції лігування використовували для трансформації Е. соїї, і позитивні клони ідентифікували за допомогою рестрикційного розщеплення. Потім клони вирощували в більшому масштабі, і плазмідну ДНК очищали з використанням набору Оіадеп Епдо-ЕРгее Махіргер. Ідентичність плазмід верифікували за допомогою рестрикційного розщеплення і секвенування. Плазміда рААУ-Сда-5.40 поліА містить інвертовані кінцеві повтори (ІТК) ААМ2, що дозволяють упаковку послідовностей проти МЕСЕ в капсиди ААМ і доставку в клітини, які представляють інтерес, в сітківці за допомогою введення в скловидне тіло. (00263) Клітини НЕК293Т піддавали несправжній трансфекції або трансфекції плазмідою, що містить трансген або СЕР, або білка проти МЕСЕ (5с6-8МВА НІ. (ЗЕО ІЮ МО:67), зс-АМВАЯ І НІ (ЗЕО ІЮ МО:69) і зс-АМВ2-І Н2 (ЗЕО ІОЮ МО:70), АРІ. В (ЗЕО ІЮ МО:65), ВКО (ЗЕО ІЮ МО:74)) під контролем промотору САС, з використанням реагенту для трансфекції БибСепеб, в двох окремих експериментах. Середовища збирали через 48 годину після трансфекції і аналізували з використанням набору для ЕГІЗА афліберцепту (Еадіє Віозсіепсез, Іттиподиіде ІШ-ААТ15).
Білки проти МЕСЕ детектували за допомогою НЕР-антитіла проти Ес до, наданого в наборі як реагент (несправжня, СЕР і АРІ В) або НЕР-антитіло проти Неї. Ід (50с-АМВА НІ, 5с-ЕМВ2ІНІ і 50-КМВА І НІ). Концентрації розраховували відносно клінічних ейлеа (несправжня, СЕР і АРІ В) або люцентису (5с-АВМВ2 НІ, в5с-Н8МВ2 І НІ, 5с-ЕМВ2 1Н2 і ВКО). У першому з двох експериментів, експресія афліберцепту становила приблизно 15 мкг/мл, і експресія 5бс- ранібізумабу лежала в діапазоні від 1,6 до 2,8 мкг/мл, де форми ІН експресувались в схожих концентраціях, і форма НІ експресувалась приблизно в два рази нижчої концентрації (фігура 13А). У другому експерименті, експресія афліберцепту становила приблизно 50 мкг/мл, і експресія 5с-ранібізумабу НІ становила приблизно 4,0 мкг/мл (фігура 138). Сигнал для бролуцизумабу був дуже низьким, найбільш ймовірно, через погане впізнавання антитілом для детекції. Активність зв'язування МЕСЕ не детектована в середовищах після несправжньої трансфекції або трансфекції СЕР.
І00264| Приклад 5 (00265) Для безпосередньої візуалізації білків проти МЕСЕ і підтвердження розміру білків, проводили аналіз Вестерн-блотингу серед від клітин, трансфікованих з використанням плазмід для експресії СЕР, афліберцепту (ЗЕО ІЮ МО:65), зс-ранібізумабу (ЗЕО ІО МО:67, 69 і 70) або бролуцизумабу (ЗЕО ІЮ МО:74) (фігура 14). Середовища від трансфікованих клітин НЕК29З3Т розділяли в гелі Во 4-1295 Віб-Ттів Рій (Іпийгодеп, кат. МУМО4122ВОХ), і розділені білки переносили на нітроцелюлозу з використанням пристрою іВіої2. Блот аналізували з використанням зонда кон'югованого з НЕР антитіла кози проти Ес дО людини (Тпепто, кат.» 31413, ліва панель) або антитіла кози проти Бар їЇдбС людини (Тпегто, кат. 31482, права панель), з використанням пристрою іВіпа Біех, і візуалізували з використанням хемілюмінесцентного субстрату Зирегзідпа! МУезї Юига (Тпепто кат.ж 34076). Зображення отримували з використанням пристрої для візуалізації ІВгідні РІ 1000. (00266) Зразок афліберцепту здавався схожим з клінічним порівняльним білком ейлеа. Не було присутньо сигналу в зразках негативного контролю. Клінічний порівняльний білок люцентис відновлюється до окремих легкого і важкого ланцюгів по 24 кДа, в той час як білки 5с- ранібізумабу мігрують при приблизно 48 кДа, через існування поліпептидного лінкера, який зв'язує легкі і важкі ланцюги в один білок. Присутня більша кількість форми ІН білка, порівняно з формою НІ. білка, відповідно до кількісної оцінки білка, отриманої за допомогою ЕЇГ ІЗА (фігура 13А). Сигнал для бролуцизумабу є низьким, найбільш ймовірно, через погане впізнавання антитілом для детекції. Білок мігрує з коректною молекулярною масою 24 кДа.
І00267| Приклад 6
І00268| Як додатковий спосіб для визначення активності зв'язування МЕСОЕ, проводили конкурентний ЕГІБА МЕСЕ (фігура 15). Клінічні порівняльні білюи ейлеа або люцентис і середовища від трансфікованих клітин НЕК29З3Т інкубували з 13 пМ МЕС при кімнатній температурі протягом ночі. У зразках аналізували вільний МЕСЕ з використанням набору
Опгцапіїкіпе МЕСЕ ЕГПІЗА (НО Бувієтв, кат. ЮМЕО0). У першому з двох експериментів, криві інгібування для чотирьох білків проти МЕСЕ зі зразків після трансфекції були дуже схожими з
Зо клінічними ейлеа і люцентисом. Афліберцепт і ейлеа конкурували за МЕСЕ сильніше, ніж варіанти 5с-ранібізумабу і люцентис (фігура 15А). Всі три форми 5с-ранібізумабу (ЗЕО ІЮ
МО:67, 69 і 70) були майже ідентичними. У другому експерименті, всі конструкції проти МЕСЕ конкурували за МЕСЕ (фігура 158). Не було присутньо активності конкуренції для зразка негативного контролю СЕР. (00269) Приклад 7
І00270| Для підтвердження того, що білки проти МЕСЕ, експрессовані в трансфікованих клітинах, блокують зв'язування МЕСЕ з його рецептором і таким чином, його функцію, рівні концентрації клінічних порівняльних білків і середовищ від трансфікованих клітин НЕК293Т змішували з 20 нг/мл МЕСЕ і вміщували до клітин РаїйНипіег КОК (Оізсомегх 93-099671). Ці клітини експресують злиті білки рецептор МЕСРЕ/бета-галактозидаза, які утворюють активну бета-галактозидазу при зв'язуванні з МЕСЕ. Клітини лізували через 22 години і аналізували по активності бета-галактозидази. Криві інгібування білків білки проти МЕСЕ зі зразків після трансфекції є еквівалентними кривим для клінічних порівняльних білків, показуючи, що експресовані білки блокують функцію МЕСЕ в аналізі на основі клітин (фігура 16). У двох подальших експериментах, аналіз нейтралізації клітинного МЕСЕ опроводили також з використанням рівних об'ємів середовищ від клітин НЕК293Т, трансфікованих з використанням конструкцій проти МЕСЕ. У першому з цих експериментів, оцінювали плазміди для експресії
СЕР, афліберцепту (5ЕО ІЮ МО:65), зс-ранібізумабу НІ (5ЕО ІЮ МО:67) або 5с-ранібізумабу
НІ (5ЕО ІО МО:69). Всі оцінені конструкції проти МЕСЕ нейтралізували МЕСЕ (фігура 17А).
Форма 5с-ранібізумаб ІН нейтралізувала МЕСЕ сильніше, ніж форма 5с-ранібізумаб НІ. У другому експерименті, плазміди для експресії СЕР, афліберцепту (ЗЕО ІО МО:65), вс- ранібізумабу І НІ (ЗЕО ІЮ МО:69) або бролуцизумабу (5ЕО І МО:74) змішували з 8 нг/мл МЕСЕ і вміщували в клітини Раї(йНипіег КОК (Оіз5сомегх 93-099671). Клітини лізували через 18 годину і аналізували по активності бета-галактозидази. Знов, всі оцінені конструкції проти МЕСЕ нейтралізували МЕСЕ (фігура 178). Був присутнім слабкий ефект матриці для контрольного зразка СЕР при всіх аналізованих розведеннях.
І00271| Приклад 8 (002721 Клітини пігментного епітелію сітківки (КРЕ) піддавали несправжній трансфекції або трансфекції з використанням плазміди, що містить або трансген СЕР, або трансген проти бо МЕСБЕ під контролем промотору САС, з використанням реагенту для трансфекції Гисбепено.
Середовища збирали через 48 годин після трансфекції. Ефективність трансфекції для клітин
ЕРЕ була надзвичайно низькою, як доведено по кількості експресуючих СЕР клітин (дані не представлені), і таким чином, активність зв'язування МЕСЕ не піддавалася детекції в середовищах після цих трансфекцій. Загальну концентрацію МЕСЕ в середовищах оцінювали для визначення того, чи можуть низькі концентрації засобів проти МЕСЕ зменшувати секрецію
МЕСЕ в КРЕ. Середовища збирали через 48 годин після трансфекції і аналізували з використанням набору Опцапіїкіпе МЕСЕ ЕГІЗА (850 Бувзіет5, кат.й ЮМЕО0). Спостерігали сильне зменшення рівнів МЕСЕ після експресії афліберцепту (ЗЕО ІЮ МО:65) і зменшення рівнів
МЕС після експресії 5с-ранібізумабу (ЗЕО ІЮ МО:67, 69 і 70) (фігура 18). Ефект на рівні МЕСЕ всіх трьох форм 5с-ранібізумабу був схожим. Після доставки за допомогою більш ефективної трансдукції ААМ, трансгени проти МЕСЕ приводили до отримання більш високих концентрацій білків проти МЕСЕ, що оцінювали кількісно за допомогою набору для ЕГІЗА афліберцепту.
І00273| Приклад 9 (00274) Плазміди для експресії ААМ, які несуть гени для афліберцепту (5ЕО ІЮО МО:65), 5с- ранібізумабу (ЗЕО ІЮО МО:67 і 69) або бролуцизумабу (5ЕО ІЮ МО:74), використовували для упаковки вірусної ДНК у варіант капсиду К100 (що має амінокислотну послідовність, вказану як
ЗЕО ІЮ МО:42). Зрілі клітини КРЕ трансдукували через 30 діб після розсівання в 12-ямкові планшети при МОЇ 5000 цих векторів в об'ємі 1,0 мл середовищ Х-Мімо10. Середовище змінювали через три доби після трансдукції, збирали і змінювали через шість діб після трансдукції, і знов збирали і змінювали через десять діб після трансдукції. (00275) Загальну концентрацію МЕСЕ в середовищах аналізували з використанням набору
Опгцапіїкіпе МЕСЕ ЕПІЗА (На БЗузієтвеь кат.й ЮМЕО0О) для визначення ефекту трансдукції з використанням векторів проти МЕСЕ на рівень вільного ендогенного МЕСЕ, що піддається детекції, секретованого клітинами КРЕ в середовище (фігура 19). Ендогенний рівень МЕСЕ, як показано по клітинах, трансдукованих контрольним вектором з СЕР, становив 4500 пг/мл в зразку через 6 діб і 8300 пг/мл в зразку через 10 діб. Трансдукція з використанням всіх векторів проти МЕСЕ приводила до рівнів МЕСЕ в середовищах, від низьких до таких, що не піддаються детекції. Є ймовірним, що кількість МЕС, секретованого клітинами ЕРЕ, не змінювалася, але швидше, що МЕСЕ в середовищах був зв'язаний білками проти МЕСЕ, так що не піддавався детекції за допомогою ЕГІЗА. Додаткові експерименти, включаючи Вестерн-блотинг, можна проводити для визначення загальної кількості зв'язаного і незв'язаного МЕС. (00276) Середовища після трансдукцій ЕРЕ також аналізували з використанням набору для
ЕПІЗА афліберцепту (Еадіє Віозсіепсе5, Іттиподціде ІС-АА1Т15). Білки проти МЕСЕ детектували з використанням НКР-антитіла проти Ідс НЯ (ТпептоРізпег, кат. 31410).
Концентрації розраховували відносно клінічних ейлеа (АРІ В і СЕР) або люцентису (5с2-АМВ2
НІ, 5с-КЕМВА І НІ ї ВКО). Експресія афліберцепту (5ЕО ІЮ МО:65) становила приблизно 1800 нг/мл в зразку через 6 діб і 2800 нг/мл в зразку через 10 діб. Експресія 5с-ранібізумабу лежала в діапазоні від 700 нг/мл для НІ. (ЗЕО ІЮ МО:67) в зразку через 6 діб до 1700 нг/мл для І Н (ЗЕО
ІО МО:69) в зразку через 10 діб (фігура 20). Сигнал для бролуцизумабу (ЗЕО ІЮ МО:74) був дуже низьким, найбільш ймовірно, через погане впізнавання антитілом для детекції. Активність зв'язування МЕСЕ не детектована в середовищах після трансдукції СЕР.
І00277| Приклад 10 (00278) Для безпосередньої візуалізації білків проти МЕСЕ і підтвердження розміру білків, проводили аналіз Вестерн-блотингу середовищ від трансдукованих клітин КРЕ (фігура 21).
Однакові об'єми середовищ для діб б і діб 10 розділяли в гелях Воїї 4-12905 Вів-Тгів Рів (Іпмйгодеп, кат. ММ/04122ВОХ), і розділені білки переносили на нітроцелюлозу з використанням пристрою іВіої2. Блот аналізували з використанням зонда кон'югованого з НКР антитіла кози проти Ес дО людини (Тегто, кат.2 31413, ліва панель) або антитіла кози проти
Еар до людини (Тпегто, кат.й 31482, права панель), з використанням пристрою іВіпа Ріех, і візуалізували з використанням хемілюмінесцентного субстрату Зирегзідпа! МУе5ї бига (Тпепто, кат. 34076). Зображення отримували з використанням пристрої для візуалізації Спетібос МР.
І00279| Зразки афліберцепту (ЗЕО ІЮ МО:65) здавалися схожими з клінічним порівняльним білком ейлеа (чорна стрілка). Не було присутнім смуг з коректною рухливістю в зразку негативного контролю СЕР. Клінічний люцентис відновлюється до окремих легкого і важкого ланцюгів по 24 кДа, в той час як 5с-ранібізумаб НІ (ЗЕО ІЮ МО:67) і ІН (5ЕО ІЮ МО:69) не розділяються і мігрують з уявною молекулярною масою 58 кДа, як показано сірою стрілкою.
Сигнал для бролуцизумабу (ЗЕО ІЮ МО:74) є низьким, найбільш ймовірно, через погане впізнавання антитілом для детекції. Білок мігрує з коректною молекулярною масою 26 кДа, як показано заштрихованою стрілкою. Рівні білка є майже схожими в зразках через 6 і 10 діб. бо (00280) Приклад 11
І00281| Як додатковий спосіб для визначення активності зв'язування МЕСОЕ, проводили конкурентний ЕГІЗА МЕСЕ (фігура 22). Однакові об'єми середовищ від трансдукованих клітин
ВРЕ інкубували з 13 пМ МЕС при кімнатній температурі протягом ночі. У зразках аналізували вільний МЕСЕ з використанням набору Очапікіпе МЕСЕ ЕГІЗА (КУО Бузіет5, кат. ЮМЕОО).
Середовища від клітин, трансдукованих з використанням всіх конструкцій проти МЕСБЕ, конкурували за МЕСЕ. Результати були схожими для зразків через 6 і 10 діб. Не було присутньо активності конкуренції для зразка негативного контролю СЕР. Рівні вільного МЕСЕ були вищі для найнижчого розведення, через ендогенний МЕС, продукований клітинами КРЕ. (00282) Приклад 12 00283) Для порівняння активності нейтралізації МЕСЕ білків проти МЕСЕ, експресованих в клітинах ЕРЕ з вірусних векторів, онакові об'єми середовищ від трансдукованих клітин ЕРЕ змішували з 8 нг/мл МЕСЕ і вміщували до клітин РаїйНипіег КОК (Оізсомегх 93-099671) (фігура 23). Клітини лізували через 18 годин і аналізували по активності бета-галактозидази.
Середовища від клітин, трансдукованих з використанням всіх конструкцій проти МЕСБЕ, нейтралізували МЕСЕ. Не було присутньо нейтралізації МЕСЕ, що спостерігається для середовищ після контрольної трансдукції СЕР.
І00284| Попереднє просто ілюструє принципи винаходу. Зрозуміло, що фахівець в даній галузі здатний розробляти різне аранжування, яке, хоча і не описані або не показані в даному описі в явній формі, втілюють принципи винаходу і включені в його зміст і об'єм. Крім того, всі приклади і умовні формулювання, процитовані в даному описі, принципово призначені, щоб допомогти читачеві в розумінні принципів винаходу і концепцій, представлених авторами даного винаходу для розвитку рівня техніки, і їх потрібно розглядати як не накладаючі обмеження на такі конкретно процитовані приклади і умови. (00285) Крім того, всі твердження в даному описі, які перелічують принципи, аспекти і варіанти здійснення винаходу, так само як їх конкретні приклади, призначені для включення як структурних, так і функціональних їх еквівалентів. Крім того, мають на увазі, що такі еквіваленти включають як відомі в цей час еквіваленти, так і еквіваленти, які будуть розроблені в майбутньому, тобто, будь-які елементи, розроблені для здійснення такої ж функції, незалежно від структури. Об'єм даного винаходу, таким чином, не обмежений ілюстративними варіантами здійснення, показаними і описаними в даному описі. Замість цього, об'єм і зміст даного винаходу поміщені в додану формулу винаходу.
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1105 40 Мо1есціагє Тіегарецшсісв Іпс. «1205 ВАРІАНТИ КАПСИДІВ АДЕНОАСОЦІЙОВАНОГО ВІРУСУ І ЗАСТОСУВАННЯ ДЛЯ
ІНГІБУВАННЯ АНГІОГЕНЕЗУ
«1305 090400-5010 МО «1505 75 62/590976 «1515 2017-11-27 «1505 705 62/664726 «1515 2018-04-30 «1605 77 «1705 РасепеІпПп версії 3.5 «2105 1 «2115 736 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 1 «4005 1
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег бо 1 З 10 15 бі б1у І1е Агуд бій Тер Тер Авр Гей пув Рго сіу Аза Рго Гув Рго 20 25 30 пуб Аз1а АБп осбіп біп пув біп Авр Авр б1у Акуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго 50 55 бо
Уа1ї АБп Аза Аза Авр Аїа Аз1а Аза Геш сій Нів Авр Гуз Аїа Тук Авр 65 70 75 80 біп бі1іп Гей Ппув Аїа с1у Авр АвБп Рго Тук Гей Агуд Туг Авп Нів А1а 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец біп б1іцп Авр ТПпг бБеє Рпе с1у ШУ 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Гей Уаі сбіш біш сіу Аза Ппув ТПг АТа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рго Уаі бій біп бек Рго сбіп бій Рго Авр бек бек бек с1у І1е 01Уу 145 150 155 160
Тпув ТПпгЕ б1у біп біп Рго Аїа Ппув Пув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175
Зо б1у Авр бек сій бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей сС1іу біц Рго Рго 180 185 190
Аза ТПг Рго Аїа Аза Уа1ї б1у Рго ТПг ТПг Меє Аза бек с01у с1у ШУ
З5 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у Аз1а Авр сіу Уаі о1у Ап Аї1а 210 215 220 зек б1у Авп Тгр Нів Сув Авр бек ТПг Тгр Гей с1у Авр Акуд Уа1ї! І1е 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек Аїа бек ТПг сбіу Аїа Бек АвБп Авр АвБп Нів 260 265 270
Тук Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тер сіу Тук Роре Авр Рпре АвБп Аг РІе 275 280 285
Нів Сув Нів Рібе бек Рго Агд Авр Тер біп Агд Тец І1е АБп АвБп АвБп 290 295 300
Тер б1у Рпе Акуд Рго пуб Агд Гей Авп Рпе Пув Гей Рпе АБп І1е сіп 305 310 315 320
Уаї пув бі Уаі1 Тпкг ТБЕг Авп Авр сіу Уаї ТіПг ТБПг І1е Аза АБп АвБп 325 330 335 60
Тецп ТПг бек ТПг Уаі біп Уаі1 Рпе бек Авр бек сій Тукг біп Іецй Рго
340 345 350
Тук Уаі1 гей сіу бек Аза Ні сіп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Аїа 355 3З6о 365
Авр Уа1 Ріпе Месє І1е Рго біп Тук сіу Тук Гей ТПг Гей Авп Ап б01У 370 375 380 зек біп Аїа Уаі сб1у Агкуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей бій Тук Робе Рго 385 390 395 400 зек біп Меє Іїец Агд ТПг б1у АвБп АвБп Рпе ТПг Рпе бБег Тук ТПг РБПе 405 410 415 сій бій Маї Рго Рпе Нів бек бек Туг Аїа Нів бек біп бек Гей Авр 420 425 430
Агд Гей Месє АвБп о Рго Іїец І1е Авр біп Тук Тецйп Тук Тук Гец АвБп Агд 435 440 445
ТПЕ біп Авп обіп бек біу бек Аїа сбіп Авп Гув Авр Тецй Те РПпе 5ег 450 455 460
Акуд сіу бек Рго Аїа біу Меє бек Уаії біп Рго Пув Авп Тгр Іецй Рго 465 470 475 480 б1у Ркго Сув Туг Агуд біп біп Агкуд Уаї Бек Ппув ТПкг пуб ТБг АвБр Авп 485 490 495
Зо Авп оАвп бек Авп Рпе ТПг Тер ТПг о с1іу Аїа Бек Ппув Туг Авп Гей Авп 500 505 510 б1у Акд бій бек Іїе Іїе Авп Рго сіу ТПг Аїа Месє Аїа бек Нів Гув 515 520 525
З5
Авр Авр біц Авр о Гув Рпе Рпе Рго Ме бек сіу Уаі1 Меє І1е Рбіе с1Уу 530 535 540 пув бій бек Аза с1іу Аїа Бек Авп ТПг Аїа Гей Авр Авп Уа! Меє І1е 545 550 555 560
ТПЕ Авр бій сіц біц І1е Гув Аза ТПг Авп Рго Уаі Аза ТПг сбіц Агд 565 570 575
Рпе сіу ТБг Уаії Аїа Уаї Авп Рпе сіп бек бек бек ТПг Авр Рго А1а 580 585 590
ТП б1у Авр Уаї Ні Аза Меє с1у Аза Гей Рго сіу Меє Уаї Тгр сіп 595 бо 605
Авр Агуд Авр о Уаї Тукг Іец біп сіу Рго І1е Тгр Аза Гув ІШе Рго Нів 610 615 620
ТПЕ Авр сіу Нів РіПе Нів Рго бек Рго Пец Месє сіу б1у Рпе СсС1Уу Іецй 625 630 635 640
Тув АвБп о оРго Рго Рго біп Іїе Гей Іїе Ппув Ап о ТПг Рго Уаї Рго А1а 645 650 655 бо АвБпоРго Рго Аїа бі Рре бек Аїа ТПг Пув Робе А1їа бек Рпе І1е ТПг 6бво 665 670 біп Тук бек ТПг сіу біп Уаі1 бек Уаі бій Іїе сій Тер біц Іец сіп 675 68 685 пув бій Авп о бек Ппув Агкуд Тер Авп Рго бі Уаї сіп Тук ТПг бек Авп 690 695 700
Тук Аїа Гпув Бек Аза Авп Уа! Авр Рбпе ТПг Уаї Авр АБп АБп с1Уу Іецй 705 710 715 720
Тук ТПкЕ бій Рго Агуд Рго І1е сіу ТБПг Агуд Туг Тецй ТПг Агд Рго Іецй 725 730 735 «2105 2 «2115 735 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 2 «4005 2
Меє Аза Аза Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гей бій Авр ТПг Гей 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
ТПув Рго Аї1а сій Агуд Нів Ппув Авр о Авр обег Агуд біу Іецй Уаї Гей Рго
Зо сіу Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рбе Авп с1у Гей Авр Гуз с1у бій Рго бо
Уаї АБп бі Аза Авр Аза Аза А1їа Іїецшц б1іцп Нів Авр ув Аїа Туг Авр 65 70 75 80
З5
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гей Гпув бій Авр ТпПг бек Рое с1у с1У 40 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125 45 Те бі1у Гецп Маії сій бій Рго Маї Ппув ТПг АТа Рго с1у Ппув Ппув Агкд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160 50 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Акуд Пув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 55 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205 бо А1а Рго Меє Аза АБр АБп Ап о біц с1у Аїа Авр с1у Уаї с1у Авп 5бег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
ТПг ТрПг бек ТПг Агуд Тк Тер Аїа Гей Рго ТПг Туг АБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320 пув бій Маї ТПг біп Авп Авр о сб1іу ТБПг ТЕ Тс Іїе Аза АБп АБп Гей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег
Зо 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 сіп Меє Ггец Агуд ТПг с1у Авп Авп Роре ТПг Рре бек Туг ТПг Рпе сій 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У 465 470 475 480
Рго Сув Туг Агуд біп біп Акуд Уаї бек Гув ТПг бек Аза Авр АвБп АвБп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув бо 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сбіп Агуд б1у АвБп Агд біп Аза Аїа ТЕПг 580 585 590
А1а Авр Уаі Авп ТПг біп с1іу Маії Гей Ркго сіу Мес Уаї Тер сіп Авр 595 бо 605
Акуд Авр о Уаї Тук Іец біп б1у Рго І1е Тгр Аза Гув Іїе Рго Нів ТЕГ 610 615 620
Авр с1іу Нів РібПе Нів Рго бек Рго Іїец Меє сіу сіу Рпе с1Уу Іецй Гув 625 630 635 640
Нів Рго Рго Рго сіп І1е їец Іїе пуб Авп ТПг Рго Уаі Рго Аїа Авп 645 650 655
Ркго Бек ТПг ТПг Рре бек Аза Аза їу5 Рпе А1ї1а бек Робе І1е ТПг сіп 6бво 665 670
Тук Бек ТПК с1у біп Уаії бек Уаі бій Іїе бій Тгр біц Гей сіп Туз 675 68 685 біц АвБп обек Гпув Агуд Тер Авп о Рго сій Іїе біп Тук ТПг бек Авп Туг 690 695 700
Зо
Авпопув бек Уаі Авп о Уаі Авр Робе ТПг Уаії Авр ТПг Авп с1іу Уа1 Туг 705 710 715 720 зек біц Рго Агд Рго І1е с1у ТБПг Агуд Тук Гей ТПг Агуд АвБп Іей
З5 725 730 735 «2105 З «2115 736 «212» білок 40 «213» Аденоасоційований вірус ЗА «4005 З
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег 45 1 2 10 15 бі б1у І1е Агуд бій Тер Тер Аїа Гей Ппув Рго сіу Уаї Рго біп Рго 20 25 30 50 цув Аїа АБп обіп сбіп Нів біп Авр Авп Агуд Агуд с1у Темп Уаї Гей Рго сб1у Тук Гпув Тук Ге с1у Рго с1у Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго бо 55
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80 біп біп Гей Ппув Аза с1у Авр АвБп Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів А1а 60 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец біп б1іцп Авр ТПпг бБеє Рпе с1у ШУ 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аї1а Уаі Рпе сіп Аїа Гув5 Гув Агд Іїе Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Гей Уаі сбіш біш Аза Аза Ппув ТПг Аїа Рго сіу Пув пув 01У 130 135 140
А1їа Уаї Авр біп бек Рго біп бій Рго Авр бек бек бек сіу Уа1 с1У 145 150 155 160
Тпув бек б1у Ппув біп Рго Аіїа Агд Гпув Агд Гей Авп Рпе сіу біп ТПг 165 170 175 б1у Авр бек сій бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей сС1іу біц Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго ТПг бек Іец біу бек АвБп ТПг Меє Аї1а бек с1у с1у 1У 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 зек б1у Авп Тгр Нів Сув Авр бек біп Ткгр Гей сб1у Авр Агкгуд Уаі Пе 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Зо
Тук Ппув біп І1їе бек бек біп бек біу Аїа Бек Авп Авр Авп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів
З5 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Тец І1е АБп АБп АвБп о Тгр 290 295 300 с1у Рпбе Агуд Рго Ппув Пув Гей бек РіПе пуб Гей Рпе АвБп І1е сіп Уаї 305 310 315 320
Акуд сб1іу Уаії ТБг біп Авп Авр б1у ТпПг ТБПг Тпг І1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї ге с1іу Бек Аза Нів сіп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Аїа Авр 355 360 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 сіп Аїа Уаї сб1іу Агкуд бек бек Рпе Тук Сув Гей бій Тук Роре Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе біп Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415 60
Авр Уа1 Рго Рібе Нів бек бек Туг Аїа Ні бек біп Бек Гей Авр Агд
420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей АвБп Агд ТЕПг 435 440 445 біп б1у ТПг ТпПг бек с1у ТПг ТПг Авп о біп бек Агд Гей Гец Рібе б5ег 450 455 460 біп А1ї1а сб1у Рго біп Бек Меє бек Гей біп Аза Агуд Ап Тгр Іецй Рго 465 470 475 480 б1у Ркго Сув Туг Агуд біп біп Агуд Гей бек Ппув ТПг Аза АвБп АвБр Авп 485 490 495
АвБп оАвп бек Авп о Рпе Рго Тер ТПг Аїа Аїа бек Ппув Тук Нів Іечй Авп 500 505 510 б1у Акуд Авр Бек Геш Уаі Ап Рго сіу Рго Аїа Месє Аїа бек Нів Гув 515 520 525
Авр Авр сій біц губ Рбе Рпе Рго Меє Ні б1у АвБп Гей Іїе Рпе С1У 530 535 540 пув бі б1у ТПпс ТпПг АТа бек АвБп Аза бій Гей Авр Авп Уа! Меє І1е 545 550 555 560
ТПЕ Авр бій сій біц І1е Агд ТБг ТБг Авп Рго Уаі Азї1а ТПпг сі сіп 565 570 575
Зо Тук б1іу Тпк Уаі Аза АвБп Авп Гец біп бек бек АБп ТПг Аза Рго ТЕГ 580 585 590
ТпПкЕ б1у ТБПкг Уаі1 Авп Ні біп сіу Аїа Гец Рго біу Меє Уаї Тгр сіп 595 бо 605
З5
Авр Агуд Авр о Уаї Тукг Іец біп сіу Рго І1е Тгр Аза Гув ІШе Рго Нів 610 615 620
ТПЕ Авр сіу Нів РіПе Нів Рго бек Рго Пец Месє сіу б1у Рпе СсС1Уу Іецй 625 630 635 640
Тпув Нів Рго Рго Рго біп Іїе Меє Іїе Гпув Авп о ТПг Рго Уаї Рго А1а 645 650 655
АвпоРго Ркго ТПг ТБПг Рре бек Рго Аїа Пув Робе А1їа бек Рпе І1е ТПг 6бво 665 670 біп Тук бек ТПг сіу біп Уаі1 бек Уаі бій Іїе сій Тер біц Іец сіп 675 68 685
Тпув бій Авп бек Ппув Агуд Тер АБп Рго бій Іїе сіп Туг ТПг бек Авп 690 695 700
Тук Авп о Гпув бек Уаі Авп Уа! Авр Робе ТПг Уаії Авр ТПг АвБп сіу Уаї 705 710 715 720
Тук Бек бій Рго Агуд Рго І1е сіу ТБПг Агуд Туг Тецй ТПг Агуд АвБп Гей 725 730 735 60 «2105 4 «2115 736
«212» білок «213» Аденоасоційований вірус ЗВ «4005 4
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агуд бій Тер Тер Аїа Гей Ппув Рго сіу Уаї Рго біп Рго 20 25 30 пуб Аз1а АБп осбіп біп Нів біп Авр Абвп Агуд Агуд сіу Гей Уаї Іецй Рго 35 40 45 сіу Тук Ппув Тук Гей с1у Рго сб1іу АвБп сб1у Гецп Авр Гуз с1у бій Рго 50 55 бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80 біп біп Гей Ппув Аза с1у Авр АвБп Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів А1а 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец біп б1іцп Авр ТПпг бБеє Рпе с1у ШУ 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аї1а Уаі Рпе сіп Аїа Гув5 Гув Агд Іїе Гей бій Рго 115 120 125
Зо Те бі1у Гецп Маї сій бішц Аза Аїа Гуз ТПг Аза Рго с1у Ппув Ппув Агд 130 135 140
Рко Уаі Авр біп бек Рго біп біц Рго Авр бек бек Бек біу Уаі Щ1У 145 150 155 160
З5
Тпув бек б1у Ппув біп Рго Аіїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 б1у Авр бек сій бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей сС1іу біц Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго ТПг бек Іец біу бБег АвБп ТПг Меє Аїа бек с01у с1у ШУ 195 200 205
А1а Рго Меє Аза АБр АБп Ап о біц с1у Аїа Авр с1у Уаї с1у Авп 5бег 210 215 220 зек сб1у АвБп Тгр Ні Сув Авр бек біп Тер Гей с1у Авр Агд Уа1і Те 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285 бо Сув Нів Ріре бек Рго Акуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агуд Рго Пув Ппув Гей бек Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320 пув бій Маї ТПг біп Авп Авр о сб1іу ТБПг ТЕ Тс Іїе Аза АБп АБп Гей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек Бек Рпе Тук Сув Гей бій Тук Робе Рго 5ег 385 390 395 400 сіп Меє Ггец Агуд ТПг с1у Авп Авп Робе сіп Рре бек Туг ТПг Рпе сій 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нів бек бек Туг Аза Нів бек біп бек Гец Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей АвБп Агд ТЕПг 435 440 445 біп б1у ТПг ТпПг бек с1у ТПг ТПг Авп о біп бек Агд Тецй ІТецп РПпе 5ег
Зо 450 455 460 біп А1ї1а сб1у Рго біп Бек Меє бек Гей біп Аза Агуд Ап Тгр Іецй Рго 465 470 475 480 с1у Рго Сув Тук Агуд біп біп Акуд Гей бек Пув ТПг АТїа АБп Авр Авп 485 490 495
Авп о Авп обекг АвБп о РПе Рго Тгр ТПг Аза Аза бек пув Тук Нів Гей Авп 500 505 510 б1у Агкуд Авр бек Гей Уаі Авп Рго сіу Рго Аїа Меє Аза бек Нів Гув 515 520 525
Авр Авр сій біц губ Рбе Рпе Рго Меє Ні б1у АвБп Гей Іїе Рпе С1У 530 535 540
Тпув біц б1у ТПпс ТпПг АТа бек Авп Аїа біц Тец Авр АБп Уаі Меє Ше 545 550 555 560
ТПЕ Авр бій бій бій чІ1е Агуд Тк ТБ о Ав5п Рго Уа! Аїа ТПкгЕ сій сіп 565 570 575
Тук сб1у ТБПкг Уаії Аза Авп Авп Гей біп бек Бек Ап ТПг Аїа Рго ТЕГ 580 585 590
ТПЕ Агуд ТБг Уа1і Авп Авр обіп сіу Аза Гец Рго біу Меє Уаї Тгр сіп 595 бо 605
Авр Агуд Авр о Уаї Тукг Іец біп сб1у Рго Іїе Тгр Аза Гув ІШе Рго Нів бо 610 615 620
ТПЕ Авр сіу Нів РіПе Нів Рго бек Рго Пец Месє сіу б1у Рпе СсС1Уу Іецй 625 630 635 640
Тпув Нів Рго Рго Рго біп Іїе Меє І1їе Гпув Авп о ТПг Рго Уаї Рго А1а 645 650 655
АвпоРкго Рго ТПг ТБг Рре бек Рго Аїа їув Рпе Аза Бек Рпе Іїе ТЕГ 6бво 665 670 сіп Тук бек ТПК с1іу біп Уаі бек Уаії сбіш І1е сі Ткр сій Іец сіп 675 68 685
Тпув бій Авп бек Ппув Агуд Тер АБп Рго бій Іїе сіп Туг ТПг бек Авп 690 695 700
Тук Авп о Гпув бек Уаі Авп Уа! Авр Робе ТПг Уаії Авр ТПг АвБп сіу Уаї 705 710 715 720
Тук Бек бій Рго Агуд Рго І1е сіу ТБПг Агуд Туг Тецй ТПг Агуд АвБп Гей 725 730 735 «2105 М5 «2115 734 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 4 «4005 5
Меє ТПпг Авр о с1іу Тук Гей Рго Авр Тер Гей біц АвБр АБп Тецй бек сіц
Зо 1 2 10 15 сбі1у Маії Акд сій Тер Тер Аїа Гей сбіп Рго біу Азїа Рго Ппув Рго Гув 20 25 30
Аз1а Авп о сбіп біп Нів біп Авр Авп Аза Акуд біу Гей Уаї Гей Рго с1Уу 35 40 45
Тук Ппув Тук Гей с1іу Рго біу Авп с1іу Гей Авр Ппув с1у бій Рго Уаї 50 55 бо
Ап Аза Аїа АБр Аї1а Аза Азї1а гец біцш Ні Авр ув Аза Туг Авр сіп 65 70 75 80 біп Гей гув Аза с1у Авр Ап Рго Тук Гец пуб Туг АБп Нів Аза Авр 85 90 95
Аза сій Робе біп біп Агд Гей біп б1у Авр ТПг бек Рпе с1у с1у Авп 100 105 110
Те бі1у Агуд Аїа Уаі Рбе сіп Аїа Ппуз Ппув Акуд Уа! Те бій Рго Іец 115 120 125 с1у тей Уаі сій сбіп Аїа сіу сій ТПг АТа Рго сіу Пув МПув Агд Рго 130 135 140
Тецп І1ї1е сій Бек Рго біп біп Рго Авр бек бек ТПг сіу І1е С1Уу Гув 145 150 155 160
Тпув б1у Ппув біп Рго Аїа Ппув Ппув Пув Гей Уаі1 Рпе сій Авр біц ТЕПг 60 165 170 175 сб1у А1ї1а с1у Авр с1у Рго Рго сіц сіу Бек ТПг бек сіу Аїа Меє 5ег 180 185 190
Авр Авр бБег біц Месє Агуд Аза Аїа Аїа сС1у сб1у Аїа Аїа Уаі1і сії щ1У 195 200 205 сб1у б1п с1у Аза Авр сіу Уаі с1у Авп Аза бек с1іу Авр Тгр Нів Сув 210 215 220
Авр бек ТПг Тер бек біц с1іу Нів Уаії ТіПг ТПг Торг бек ТПг Агд То 225 230 235 240
ТЕр Уа1 Гей Рго ТПг Туг Авп Авп о Нів Гец Туг їув Агд Те сС1у с1и 245 250 255 зек Гей біп бек Авп ТП Туг Авп обіу Рпе бек ТПг Рго Тер с1у Туг 260 265 270
Рпе Авр Рібе АвБп Агуд Рпе Нів Суб Нів Ріпе бек Рго Агуд Авр Тер сіп 275 280 285
Акд Гей І1е АБп АвБп АБп о Тгр біу Меє Агуд Рго пув Аїа Меє Агк9д Уаї 290 295 300 пув І1їе Рпбе АвБп І1е сбіп Уа! Ппув бій Маії ТрПг ТПг бек АБп с1у сі1ц 305 310 315 320
ТПг Тпкг Уаі1 Аза Авп Авп о Тецй ТПг бек ТПг Уаі біп І1е Рпе Аїа Авр 325 330 335
Зо зек бек Тук біц ІТец Рго Тук Уаі Меє АБр Аї1а сі1у сбіп бі с1іу б5Бег 340 345 350
Тецп Ркго Рго Рпе Рго Ап Авр Уаі Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Туг
З5 355 360 365
Сув б1у Гей Уаі ТпПг с1у Авп ТПг бек біп біп біп ТБг Авр Агд Авп 370 375 380
А1а Рпе Тук Сув Гецш біц Тук Рре Рго бек біп Мес Гей Агуд Тібг с1Уу 385 390 395 400
Авп о Авп о Рпе біц І1е ТПг Тук бек Рпе б1іцп Гпув Уаії Рго Рпе Нів 5ег 405 410 415
Меє Туг Аїа Нів бек біп бек гей Авр Агд Гец Меєс АвБп Рго ІТеп Пе 420 425 430
Авр сбіп Тук Гец Тгр б1у Гей біп бек ТПг ТПг ТпПгс с1у Тс ТПгЕ Гей 435 440 445
Ап Аза сіу ТПг Аза ТП Тс АвБп о Рбе ТПг о Гув Гей Агуд Рго ТпПг Авп 450 455 460
Рпе бек Авп Рпе Ппув Ппув Авп Тер Гей Рго біу Рго бек І1е Тув сіп 465 470 475 480 біп б1у Рпе бек Ппув ТПг Аза АвБп о сбіп Ап Туг пув І1е Рго Аїа ТЕПг 485 490 495 60 бі1у бек Авр бек Гей Іїе Ппув Тук бій ТПг Нів бек ТПг Гей АвБр 01У
500 505 510
Акуд Тер бекг Аза ІТецйп ТПг Рго біу Рго Рго Меє Аза ТПг Аза с1у Рго 515 520 525
Аза Авр бек Ппув РіПе бек АвБп бек біп Тїецп І1е Рпе Аза с1іу Рго Гув 530 535 540 біп Авп о бі1іу Авп ТпПг Аїа ТпПг Уаі Рго сіу ТпПг Гей І1е Робе ТіПг 5ег 545 550 555 560 бі бі бій гейш Аза Аїа ТПг АБп Аза ТПг Ар ТпПг Авр Меє Тер с1У 565 570 575
Авп оГечп Рго біу б1у Авр біп Бек Авп бек Авп Гей Рго ТПг Уа1! Авр 580 585 590
Акуд Гей ТБПг Аїа Іец б1у А1ї1а Уаї Ркго бі1у Меє Уаі Тер біп Авп Агд 595 бо 605
Авр І1е Тук Тук біп б1у Рго І1е Тгр Аза Гув Іїе Рго Нів ТПг Авр 610 615 620 бі1у Нів Рпе Нів Рго бек Рго Гей Іїе сіу сіу Ріпе с1іу Іецй КГув Нів 625 630 635 640
Ркго Рго Рго біп І1е Рпе І1е Губ5 АвБп о ТПг Рго Уаі Рго Аїа АБп Рго 645 650 655
Зо А1їа ТПг Тбг Рбе бек бек ТПг Рго Уаі Авп бек Рпе І1е ТПг сіп Туг 6бво 665 670 зек ТПг біу біп Уаі бек Уаі Сіп І1е АБр Тгр сій І1е сіп Гув с1ц 675 68 685
З5
Акуд Бек Гпув Агуд Тгр АБп о Рго біц Уаі біп Рпе ТПг бБег Авп Тухг Щ1У 690 695 700 біп біп Авп бек Гей Гей Тгр Аїа Рго Авр Аїа Аза б1у Гув Тук ТПг 40 705 710 715 720 бі Рго Агуд Аза Іїе сіу ТПг Агуд Тук Гей ТПг Нів Нів Іей 725 730 45 «2105 6 «2115 724 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 5 50 «4005 6
Ме бек Рпе Уа1і Авр Нів Рго Рго Авр Тер Гец біц біц Уаї с1у с1ци 1 5 10 15 55 с1у Гей Агуд біц Рпе Гей сіу Тїеш біц Аза с1у Ркго Рго Пув Рго Гув 20 25 30
Рго Авп обіп біп Нів біп Авр біп Азїа Агуд сб1у Гей Уаі Гей Рго щ1У 60
Тук Авп Тук Гей сіу Рго бі1у Авп сіу Гец Авр Агуд б1у бій Рго Уаї
50 55 бо
Авп Агуд Аїа Авр о біц Уаі Аза Акд біц Ні Авр І1е бек Туг Ап с1іц 65 70 75 80 біп тей бій Аза с1у Авр Ап Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів А1а Авр 85 90 95
Аза сій Робе біп біцш Гув Гей Аза АвБр Авр ТПг бек Рпе с1у с1у Авп 100 105 110
Тец б1у пув Аза Уаі Рпе сіп Аза Ппув пув Акд Уаі Ггец біц Ркго РБПе 115 120 125 с1у Гей Уаї бі сіц с1у Аїа Пув ТПг АзТа Рго ТПг с1і1у Гув Агд Пе 130 135 140
Авр Авр Нів РіПе Рго їув Агуд пув їув Аза Агуд ТПг бі бій Авр бег 145 150 155 160
ТПув Ркго Бек ТПг бек бБег Авр Аза сій Аїа сіу Рго бек біу бек біп 165 170 175 біп Гей біп І1їе Рго Аїа сбіп Рго Аза Бек бек Гей сС1іу Аїа АБр ТЕПг 180 185 190
Меє Бек Аза сіу сіу сіу біу Рго Гей с1іу Авр АБп АБп біп с1у Аїа 195 200 205
Зо Авр с1іу Уаі бі1у АБп Аза бек б1у Авр Ткгр Нів Суб Авр бек ТіПг Тер 210 215 220
Меє с1у Авр Акуд Уа1 Уаї Тс Ппув бек ТПг Агуд Тс Тер Уаї Гей Рго 225 230 235 240
З5 зек Тукг Авп АвБп о Нів біп Туг Агд біцш І1е Гпув Бек с1іу Бек Уа1і Авр 245 250 255 бі1у век АвБп Аза Авп Аїа Тук Рпе сіу Туг Бек ТПг Рго Тер с1і1у Туг 260 265 270
Рпе Авр Рібе АвБп Агд Рпе Нів бек Нів Тгр бек Рго Агуд Авр Тгр сіп 275 280 285
Агд Гечп І1їе АвБп АБп о Тук Тер б1у Рпе Акуд Рго Агуд бек Гецп Аг Уаї 290 295 300 пуб І1е Рпе АвБп І1їе сбіп Уаі пув сі Уаі ТпПг Уаії біп Авр бек ТПг 305 310 315 320
ТПгЕ ТпПг Іїе Аза Авп Авп о Тецй ТПг бек ТПг Уаії біп Уаії Рпе ТПг Авр 325 330 335
Авр Авр Тук біп ІТец Рго Тук Уаії Уаі с1у Авп сіу ТПг біц с1у Сув 340 345 350
Тец Ркго Азїа Рпе Рго Рго біп Уаі Рпе ТПг Гей Рго сіп Тук с1іу Туг 355 3З6о 365 бо А1а ТПг Гей Авп Агуд Авр Авп о ТбПг бій АБп о Рго ТПг бій Агуд бек 5бег 370 375 380
Рпе РібПе Сув Іїец біц Тук Рпе Рго бек Гув Меє Гей Агуд ТПг с1у Авп 385 390 395 400
Авп о Рпе сій Робе ТПг Тук Авп Рбе бій сбіц Маї Рго Рібе Нів бек 5ег 405 410 415
Рпе Аза Рго бек біп АвБп Гей Робе Губ5 ІТецй Азїа Авп Рго Гей Уа1 Авр 420 425 430 біп Тук Гей Туг Агуд Рпе Уа1і бек ТПг Авп АвБп ТП бі1у б1у Уа1і сіп 435 440 445
Рпе Авп о Гпув Авп о Тец Аза с1у Агд Туг Аза АБп о ТПг Тук Ппув Авп о Тгр 450 455 460
Рпе Рго біу Ркго Меє б1у Акуд ТПг сіп б1у Тер АБп Гей с1у Бех щу 465 470 475 480
Уа1 АвБп Агуд Аїа бек Уа! бек Аїа Рпбе Аза ТПг ТБг АБп Агд Меє с1ци 485 490 495
Тец бі сб1у Аза Бек Тук біп Уаі Рго Рго біп Рго Авп біу Меє ТЕПг 500 505 510
Авп о Авп оГец біп біу Бек Авп ТПг Туг Азї1а еп бій Авп ТПг Меє Те 515 520 525
Рпе Авп бек біп Рго Азїа АБп о Рго біу ТПг ТПпг Аза ТПг Тукг Гей сіц
Зо 530 535 540 б1у АвБп Меє Гей Іїе ТПг бек бій Бек бій ТПг біп Рго Уаї АвБп Агд 545 550 555 560
Уа1 Аїа Тук Авп Уаі сіу сб1у біп Мес Аза ТПг Авп АБп о біп бек 5ег 565 570 575
ТПгЕ ТпгЕ АТа Рго Аза ТПг біу ТПг Туг Авп Тец біп бій І1е Уаї Рго 580 585 590 б1у бек Уаі Тер Меє бій Агуд Авр Уа1і Тук Гей сіп с1іу Рго І1е Тгр 595 бо 605
Аза пув І1е Рго біцш ТПг б1у Азїа Ні Рпе Нів Рго Бек Рго Аїа Меє 610 615 620 сбі1у б1у Рпе сіу Гей Ппув Нів Рго Рго Рго Меє Меє Гей І1е Гув Авп 625 630 635 640
ТПЕ Рго Уаії Ркго біу АБп Іїе ТПг Бек Рпе бек Авр Уаі! Рго Уа1ї 5ег 645 650 655 зек Рпе І1е ТПг біп Тук бек ТПг біу біп Уаі! ТПпг Уаі бі Меє сіц 6бво 665 670
ТЕр бі Гей пув пув біц Авп о бек Гпув Агд Тгр АБп Рго бій ІШе сіп 675 68 685
Тук ТпПкЕ Авп Авп Тут Авп о Авр о Рго біп Робе Уаі Авр Рпе Азїа Рго Авр бо 690 695 700 зек ТПг бі1у біц Туг Агуд ТПг ТБг Агуд Рго І1е сі1у ТПг Агуд Тукг ГІец 705 710 715 720
ТПгЕ Агуд Рго ГІец «2105 17 «2115 736 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 6 «4005 7
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег 1 2 10 15 бі б1у І1е Агуд бій Тер Тер Авр Гей пув Рго сіу Аза Рго Гув Рго 20 пув Аїа АБп обіп біп Пув біп Авр Авр б1у Агуд с1у Темп Уаї Гей Рго сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго бо 25
Уаї АБп Аїа Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80 біп бі1іп Гей Ппув Аїа с1у Авр АвБп Рго Тук Гей Агуд Туг Авп Нів А1а
Зо 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец біп б1іцп Авр ТПпг бБеє Рпе с1у ШУ 100 105 110 35 Авп оГеп с1у Акуд Аїа Уаі Рпе сбіп Аїа Пув Гув Агд Уаії Гей бій Рго 115 120 125
Рпе сі1у Гец Уаі біцш б1п сб1у Аїа Гув5 ТПг Аза Рго с1у Ппув Гпув Агд 130 135 140 40
Ркго Уаії біц біп бек Рго біп біц Рго Авр бек бек Бек б01у Іе Щ1У 145 150 155 160
Тпув ТПпгЕ б1у біп біп Рго Аїа Ппув Пув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 45 165 170 175 б1у Авр бек сій бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей сС1іу біц Рго Рго 180 185 190 50 А1їа ТПг Рго Аїа Аїа Уаї с1іу Рго ТПг ТіПг Мес А1а бек с1іу с1у 01уУ 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у Аз1а Авр сіу Уаі о1у Ап Аї1а 210 215 220 55 зек сб1у АвБп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Гей с1у Авр Агд Уа1 Те 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 60 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек Аїа бек ТПг біу Аїа Бек АвБп Авр Ап Нів 260 265 270
Тук Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тер сіу Тук Роре Авр Рпре АвБп Аг РІе 275 280 285
Нів Сув Нів РіПе бег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Тецп Іїе АБп АБп АвБп 290 295 300
Тер б1у Рпе Акуд Рго пуб Агд Гей Авп Рпе Пув Гей Рпе АБп І1е сіп 305 310 315 320
Уаї пув бі Уаі1 ТПкг ТБг Авп Авр сіу Уа1і! ТБПг ТБг чІ1е Аїа Ап Авп 325 330 335
Тецп ТПг бек ТПг Уаі біп Уаі1 Рпе бек Авр бек сій Тукг біп Іецй Рго 340 345 350
Тук Уаі1 Гей сіу бек Аза Ні сіп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Аїа 355 360 365
Авр Уа1 Ріпе Месє І1е Рго біп Тук сіу Тук Гей ТПг Гей Ап А5Бп с1У 370 375 380 зек біп Аїа Уаї с1у Агуд бек бек Рпе Тук Сув Гей бій Тук Роре Рго 385 390 395 400 зек біп Меє Іїец Агуд ТПг о б1у АвБп АвБп о Рпе ТПг Рпе бБег Тук ТПкг Ріє 405 410 415
Зо бі Авр Уаї Рго Рпе Нів бек бек Туг Аза Нів бек біп бек Гечцп Авр 420 425 430
Акд Гей Мес АБп о Рго Іїец І1е Авр біп Тук Гей Туг Тук Гей Авп Агд
З5 435 440 445
ТПкЕ біп Авп обіп бек біу бек Аї1а сбіп Авп Гпув Авр Гей Гец Ріе б5ег 450 455 460
Агуд сб1іу бек Рго Аїа сіу Меє бек Уаі біп Рго пуб Авп Тер Іецй Рго 465 470 475 480 б1у Ркго Сув Туг Агуд біп біп Акуд Уаї бек пув ТПг Гув ТПг Авр АвБп 485 490 495
Авп о Авп обек Авп о РПе ТПг Тер ТБПг о біу Аза бек пув Туг Авп Гей Авп 500 505 510 б1у Акд бій бек Іїе Іїе Авп Рго біу ТПг Аїа Месє Аїа бек Нів Гув 515 520 525
Авр Авр Гпув Авр о ТГув РіпПе Рпе Рго Меєсє бек бі1у Уаі Меє І1е РпПе 1У 530 535 540 пув бій бек Аза с1у Аїа бек Авп ТПг Аїа Гей Авр Авп Уаї Меє Пе 545 550 555 560
ТПЕ Авр бій сій біц Ії1е Гпув Аза ТБг Авп Рго Уаі Азї1а ТПпг бій Агд 565 570 575 60
Рпе сіу ТБПг Уаі Аза Уаї АвБп Тїец біп бек бек Бек ТПг Авр Рго Аїа
580 585 590
ТП б1у Авр Уа1 Нів Уаї Месє сіу Аїа Гец Рго біу Меє Уаї Тгр сіп 595 бо 605
Авр Агуд Авр о Уаї Тукг Іец біп сіу Рго І1е Тгр Аза Гув ІШе Рго Нів 610 615 620
ТПЕ Авр сіу Нів РіПе Нів Рго бек Рго Пец Месє сіу б1у Рпе СсС1Уу Іецй 625 630 635 640
Тпув Нів Рго Рго Рго біп Іїе Гей Іїе Ппув Ап о ТПг Рго Уаї Рго А1а 645 650 655
АвБпоРго Рго Аїа бі Рре бек Аїа ТПг Пув Робе А1їа бек Рпе І1е ТПг 6бво 665 670 біп Тук бек ТПг сіу біп Уаі1 бек Уаі бій Іїе сій Тер біц Іец сіп 675 68 685
Тпув бій Авп о бек Ппув Агуд Тер АБп о Рго бі Уа1 сіп Тук ТПг бек Авп 690 695 700
Тук Аїа Гпув Бек Аза Авп Уа! Авр Рбпе ТПг Уаї Авр АБп АБп с1Уу Іецй 705 710 715 720
Тук ТПкЕ бій Рго Агуд Рго І1е сіу ТБПг Агуд Туг Тецй ТПг Агд Рго Іецй 725 730 735
Зо «2105 8 «2115 737 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 7 «4005 8
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег 1 5 10 15 сі б1і1у чІ1е Агд бій Тер Тегр Авр Гецп Ппув Рго біу Аїа Рго Пув Рго 20 25 30 пуб Аз1а АБп осбіп біп пув біп Авр Авп б1іу Агкуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Робе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго бо
Уаї АБп Аїа Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 50 65 70 75 80 біп бі1іп Гей Ппув Аїа с1у Авр АвБп Рго Тук Гей Агуд Туг Авп Нів А1а 85 90 95 55 Авр Аїа сій Рбе сбіп біц Агуд Гей сбіп бій Авр ТПг бек Рпе сС1іу с1Уу 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125 60
Тец б1у Гей Уаі сбіш біш сіу Аза Ппув ТПг Аїа Рго Аїа Пув пув Агд
130 135 140
Ркго Уаії біц Ркго бек Рго біп Агд бек Рго Авр бек бБег ТПг с1у Те 145 150 155 160 с1у гув Ппув с1іу біп біп Рго Аїа Агуд Гпув Агд Гей Авп Рое сіу сіп 165 170 175
ТпПкЕ б1у Авр Бек біц бек Уаі Рго Авр Рго біп Рго Іец С1у сій Рго 180 185 190
Рго Аїа Аза Ркго бек бек Уаі сСіу бек бі1у ТПг Уаі Аза Аїа с1у Щ1У 195 200 205 с1у Аїа Рго Меє Аїа Авр АБп А5п о біц б1у Аза Авр сіу Уаї 01Уу Авп 210 215 220
Аза бек с1у АвБп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тгр Гей б1у Авр Аг9д Уаї 225 230 235 240
І1е ТБПг ТБг бек ТПг Агуд ТпПгс Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг Авп Авп Нів 245 250 255
Тец Тук Гпув біп Іїе Бек бек бій ТПг Аза сіу Бек ТБг АвБп АвБр АвБп 260 265 270
ТПЕ Тук Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тер біу Тук Роре Авр Рпе Авп Аг4д 275 280 285
Зо Рпе Нів Сув Нів Рре бек Рго Агуд Авр Тгр б1іп Агд Гей І1е Авп Авп 290 295 300
АвпоТер с1у Робе Агд Рго Гпув пуб Тец Агуд Рпе Ппув Гей Рпе Авп І1е 305 310 315 320
З5 біп Маії гув бі Уаі ТпПг Тпг Авп Авр сбіу Уа1 ТПг ТБбг І1ї1е Аї1а Авп 325 330 335
Авп о Гей ТПг бек ТПг І1е біп Уаії Рібе бек Авр бек бій Тук сіп ГІец 340 345 350
Ркго Тук Уаї Іец бі1у бек Аїа Ні біп б1у Сув Гей Рго Рго Рое Рго 355 360 365
А1а Авр Уаі Рбе Мес І1е Рго сбіп Тук с1і1у Тук Гей ТПг Гей Авп Авп 370 375 380 бі1у бек біп бек Уаі с1іу Акуд Бек Бек Рпе Тук Сув Гец біц Тук РБПе 385 390 395 400
Ркго Бек біп Меє Іец Агуд ТПг о біу АвБп АвБп Рпе сій Рпе бБег Тук 5ег 405 410 415
Рпе біц Авр Уаі! Ркго Рпе Нів бек бек Тук Аїа Нів Бек біп бек ГІец 420 425 430
Авр Агд Гец Меєс АвБп о Рго Іїецп І1е АвБр біп Тук Гей Туг Тук Іецй Аї1а 435 440 445 бо Агуд ТПг о біп бек АБп о Рго сіу біу ТПг Аза сб1у АБп Агд сій Іеч сіп 450 455 460
Рпе Тук біп сбіу бі1у Ркго Бек ТПг Меє Аза бій сіп Аїа Ппув Авп Тгр 465 470 475 480
Тем Рго б1у Рго Сув Рбе Агуд біп біп Агкуд Уаї бек Пув ТПг Гей Авр 485 490 495 біп Авп Авп Авп обБег Ап Рпе Аза Тер ТПг сіу Аїа ТПг Гув Тукг Нів 500 505 510
Тец Авп о б1у Агуд Авп бек Ггецй Уаі Авп Рго сіу Уаі1 Аїа Меє Аза ТПг 515 520 525
Нів пув Авр Авр біц Авр Агуд Рбе Ре Рго бек бек біу Уаії Гей Ше 530 535 540
Рпе сіу Ппув ТПг б1у Азїа ТПг АвБп оТув ТБ Тпг Гей бій Ап Уаї Іей 545 550 555 560
Меє ТЕ АБп бій бій бій І1е Агуд Рго ТК Ап Рго Уаі Аза ТПк сі 565 570 575 бі Тук б1у Іїе Уа1ї Бек Бек АвБп Гей біп Аїа Аза АБп ТПпг Аза Аїа 580 585 590 біп Тпг о біп Уаі Уаі Авп Авп о сбіп с1іу Аїа Гей Рго сіу Меєсє Уа1ї! Тгр 595 бо 605 біп Авп Агуд Авр оУаї Тук Гей сіп с1у Рго І1е Тгр Аї1а Гув Ше Рго
Зо 610 615 620
Нів ТпПг Авр о сбіу Авп о Робе Нів Рго бек Рго Іїейп Меє сіу с1у РпПе С1У 625 630 635 640
Тем Ппув Нів Рго Рго Рго Сбіп І1е Гешп Іїе Пув АвБп о ТПг Рго Уаї Рго 645 650 655
Аза Авп о Рго Рго біц Маії Рпе ТПг Рго Аї1а Гув Рпе Аїа Бек Рпе І1е 6бво 665 670
ТПкЕ біп Тук бек ТПг біу біп Уаії бек Уаі бій Іїе сій Тгр сій Іей 675 68 685 біп гув бій Авп бек Ппув Агуд Тер АБп Рго бій Іїе сіп Тук ТіПг 5ег 690 695 700
Авп о Рпе сбіц пув біп Тс о біу Уаі Авр Рпе Аїа Уаі1і Авр бек біп с01Уу 705 710 715 720
Уа1ї Тук Бек бій Рго Агуд Рго І1е с1у ТПг Акуд Туг Гей ТПг Агд Авп 725 730 735
Течцч «2105 19 «2115 738 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 8 60 «4005 9
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег 1 5 10 15 сі б1у чІ1е Агд бій Тер Тгр Аїа Гей пуб Рго с1у Аїа Рго Пув Рго 20 25 30 пуб Аз1а АБп осбіп біп пув біп Авр Авр б1у Акуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Ге с1у Рго Рпе АвБп сіу Гец Авр Гув с1у сій Рго 50 55 бо
Уаї АБп Аїа Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80 біп бі1іп Гей сіп Аза с1у Авр АвБп Рго Туг Іец Агд Туг АБп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аїа сій Рбе сбіп біц Агуд Гей сбіп бій Авр ТПг бек Рпе сС1іу с1Уу 100 105 110
Ап оГец с1у Агд Аїа Уаі Рпе сбіп Аїа Гпув Ппув Акд Уаї Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Гей Уаі сбіш біш сіу Аза Ппув ТПг АТа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рко Уаії біц Ркго бек Рго біп Агуд Бек Рго Авр бек бек ТПг с1у І1е
Зо 145 150 155 160 с1у гув Ппув с1іу біп біп Рго Аїа Агуд Гпув Агд Гей Авп Рое сіу сіп 165 170 175
ТП б1у Авр бек бій бек Маії Рго Авр Рго біп Рго Гей сС1у бій Рго 180 185 190
Рго Аїа Аза Ркго бек біу Уаії сбіу Рго АБп ТПг Меє Аза Аза с1у .Щ1У 195 200 205 б1у А1ї1а Рго Меє Аза АвБр Ап Авп сі сб1у Аза Авр сіу Уаї сіу б5ег 210 215 220 зек бек біу Авп Тгр Нів Сув Авр бек ТПг Тгр Ге с1у Авр Аг9д Уаї 225 230 235 240
І1е ТБПг ТБг бек ТПг Агуд ТпПгс Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг Авп Авп Нів 245 250 255
Тем Тук Ппув біп І1їе бек АвБп сбіу ТПг бек сб1іу с1у Аїа ТПг АБп Авр 260 265 270
АвпоТПг Тук Рре біу Тук бек ТПг Рго Тгр б1у Тук Рпе Авр Ропе Авп 275 280 285
Акуд Рпе Нів Сув Нів РіПе бек Рго Агд АвБр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп 290 295 300
Авп о Авп оТгр о біу Роре Агуд Рго пуб Агд Тецй бек Рпе Пув Гей Рпе Авп бо 305 310 315 320
І1е сбіп Уаії пув біц Маї ТПпг біп АБп о біц сб1у ТПпс Гпув ТПг І1е Аї1а 325 330 335
Авп о Авп оГец ТПг бек ТПг І1ї1е біп Уаі Рпе ТПг Авр бек бій Тук сіп 340 345 350
Тецп Ркго Тук Уаі Ге сіу Бек Аза Нів сбіп сіу Сув Гей Рго Рго РіПе 355 3З6о 365
Рго Аїа Авр УМаї Рпе Меє І1їе Рго сіп Тук с1у Тук Гей ТПг Іецй Авп 370 375 380
Ап осіу бек біп Аїа Уа1ї сб1у Агкд бек бек Рпе Туг Сув Ге бій Туг 385 390 395 400
Рпе Рго бек біп Меє ІТецй Агуд ТПг б1у АБп АвБп Рпе сбіп Рпе ТПг Туг 405 410 415
ТПЕ Рпе бій Авр Уаї Рго РібПе Нів бек бек Туг Аза Нів бек біп 5ег 420 425 430
Тец Авр Агд Гей Меє Авп Рго Гей Іїе Авр біп Тук Гей Тук ТУук Іей 435 440 445 зек Акад ТПг біп ТПг ТПг сіу б1у ТПг Аза АБп ТП біп ТП Іеч с1Уу 450 455 460
Рпе бек біп біу б1у Рго АвБп ТПг Меє Аза АБп о сіп Аїа Ппув Авп о Тгр 465 470 475 480
Зо
Тец Ркго б1у Рго Сув Туг Агуд біп сбіп Агуд Уа1і бек ТПг ТПг Тс о1У 485 490 495 біп Авп Авп Авп обБег Ап Рпе Аза Тер ТПг АТа сіу ТПг Гуз Тук Нів
З5 500 505 510
Тец АвБп о б1у Агуд Авп Бек гейш Аза АБп Рго сіу Іїе Аїа Месє Аїа ТЕПг 515 520 525
Нів пуб Авр Авр бій бі Агуд Рбе Рре Рго бек АБп с1у Іїе Гей І1е 530 535 540
Рпе с1у Ппув біп АБп А1ї1а Аза Агд АвБр АБп Аза Авр Туг Бек Авр Уаї 545 550 555 560
Меє Гей ТПг Бек бій сій біц чІїе Ппув ТБг ТБг АвБп о Рго Уаі Аїа ТПг 565 570 575 бі бій Тук с1у Іїе Уаі1 Аза Авр Авп Гей біп сбіп біп АвБп ТПг А1а 580 585 590
Рго біп І1е сіу ТПг Уаї Авп бек біп сб1у Аза Гей Рго сіу Меє Уаї 595 бо 605
Тер біп Авп Агуд Авр оУаї Тук Те сбіп с1у Рго І1е Тгр Аїа Ппув І1е 610 615 620
Ркго Нів ТПг Авр о б1у АБп Рпе Ніб Рго бек Рго Гей Меє с1іу с1у Ріе 625 630 635 640 60 с1у Гешп Ппув Нів Рго Рго Рго Ссіп Іїе Гей Іїе Пув Авп ТПг Рго Уаї
645 650 655
Рго Аїа Авр Рго Рго ТПг ТПг Робе АвБп обіп бек Ппув Гей Авп бек Ре 6бво 665 670
І1е ТБПг біп Тук бек ТПпг бі1у біп Уаі бек Уаі сій І1е сіц Тгр с1ц 675 68 685
Те біп Гув бій Авп о бек Ппув Агуд Тер АБп Рго сій І1е біп Тукє Тс 690 695 700 зек Авп Туг Тук пуб бек ТПг бек Уаі Авр Рпе Аїа Уаї АвБп ТПг с1ц 705 710 715 720 сіу Маї Тук Бек бій Рго Агуд Ркго І1е сб1у ТПг Аг Туг Тей ТПг Агд 725 730 735
Авп Гей «2105 10 «2115 736 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 9 «4005 10
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег 1 5 10 15
Зо бі б1у І1е Агуд бій Тер Тер Аїа Гей пув Рго сіу Аза Рго Сбіп Рго 20 25 30 пуб Аз1а АБп осбіп біп Нів біп Авр Авп Аза Агуд сіу Гей Уаї Іецй Рго
З5 35 40 45 сб1і1у Тук Ппув Тук Ге с1у Рго с1у Авп сбіу Гей Авр пув С1у біц Рго 50 55 бо
Уа1ї АБп Аза Аза Авр Аїа Аз1а Аза Геш сій Нів Авр Гуз Аїа Тук Авр 65 70 75 80 біп бі1іп Гей Ппув Аза б1у Авр АвБп Рго Тук Гей Ппув Туг АвБп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сбіп Аїа Гув5 Гув Агд Гей Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Гей Уаі сбіш біш Аза Аза Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рго Уаі бій біп бек Рго сбіп бій Рго Авр бек бек Аїа с1у І1е Щ1У 145 150 155 160
Тпув бек б1у Аза сбіп Рго Аїа Ппув Пув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 60 б1у Авр ТПг бій бек Уа1і Рго Авр Рго біп Рго І1е С1у бій Рго Рго
180 185 190
Аза Аза Рго бек біу Уа1і бі1іу бек Іїец ТПг Меє Аїа бек с01у с1у ШУ 195 200 205
Аза Ркго Уаі Аза Авр АБп АБп о біц сіу Аза Ар сіу Уа1і сіу бек 5ег 210 215 220 зек сб1у АвБп Тгр Ні Сув Авр бек біп Тер Гей с1у Авр Агд Уа1і Те 225 230 235 240
ТПЕ ТпПкг Бек ТПг Агуд ТБ Тер Аза Гей Рго ТПг Туг Авп Авп Нів Іей 245 250 255
Тук Ппув біп І1їе бек АвБп бек ТПг бек с1іу с1у бек Бек Авп Авр Авп 260 265 270
Аза Тук Ріпе сіу Тук бек ТП Рго Тгр с1у Тук Рпе Авр Робе Авп Агд 275 280 285
Рпе Нів Сув Нів РПе бек Рго Агд АБр Тгр біп Агд Гей Іїе Авп Авп 290 295 300
АвпоТер с1у Робе Агд Рго Гув Агд Гей АБп о Рпе Ппув Гей Рпе Авп І1е 305 310 315 320 біп Маії гув бі Уаі ТПг Авр Авп Авп сбіу Уа1 Ппув ТПг І1ї1е Аї1а Авп 325 330 335
Зо Авп оГечпй ТПг о бек ТПг Уаії сіп Уа! Рпе ТБбг Авр бек Авр Тук сіп Іецй 340 345 350
Ркго Тук Уаї Іец бі1у бек Аїа Ніб5 біц б1у Сув Гей Рго Рго Рое Рго 355 3З6о 365
З5
Аза Авр Уаї Ріпе Месє І1е Рго сіп Тук бі1у Тук Гей ТПг Гей Авп Авр 370 375 380 бі1у бек біп Аза Уаі1і с1іу Акуд Бек Бек Рпе Тук Сув Гец біц Тук РБПе 385 390 395 400
Ркго Бек біп Меє Іец Агуд ТПг о біу АвБп АвБп Рпе сіп Рпе бБег Тук сіц 405 410 415
Рпе сій Авп Уаї Рго Ррпе Нів бек бек Туг Аїа Нів бек сіп бек Іецй 420 425 430
Авр Агд Гей Меєс АвБп о Рго Іїецп І1е Авр біп Тук Гей Туг Тукг Гец 5ег 435 440 445
Тпув ТПг І1їе АвБп сіу Бек сіу біп Авп біп біп ТПг Гец пув Рібе б5ег 450 455 460
Уаї Аза с1у Рго Бек Авп Месє Аїа Уаі1і сіп б1у Агд АБп Ту ІШе Рго 465 470 475 480 б1у Ркго Бек Туг Агуд біп біп Агуд Уаі Бек ТПг ТПг Уаї ТПг біп Авп 485 490 495 бо АвБп оАвп о бек бій Рпе Аза Тер Рго сіу Аїа бек бек Тгр Аїа Іецй Авп 500 505 510 с1у Агуд АБп бек Гей Меє АвБп о Рго б1і1у Рго Аїа Меєсє Аза бек Нів Гув 515 520 525 сі б1у біш Авр Агуд Рбе Рібе Рго ІТей бек сіу бек Гей І1їе Рпое 01У 530 535 540 пув біп б1у ТП б1у Агуд Авр Авп о Уаі Авр Аза Ар пуб Уа! Меє І1е 545 550 555 560
ТПЕ АвБп бій сій біц Ії1е Гпуб5 ТПг ТБг Авп Рго Уаі Азї1а ТПпг сі 5ег 565 570 575
Тук б1у біп Уаі1і Аза ТБг АвБп о Нів сбіп бег Аїа біп Аї1а сб1іп Аза сіп 580 585 590
ТП б1у Тер Уа1 сбіп Авп о біп сіу Іїе Гец Рго біу Меє Уаї Тгр сіп 595 бо 605
Авр Агуд Авр Уа1! Туг Ггецп сіп с1іу Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Ії1е Рго Нів 610 615 620
ТПЕ Авр с1у Авп РіПе Нів Рго бек Рго Пец Меє сі1у б1у Рпе сіу Меє 625 630 635 640
Тпув Нів Рго Рго Рго біп Іїе Гей Іїе Ппув Ап о ТПг Рго Уаї Рго А1а 645 650 655
Авр Рго Рго ТПг Аза Рпе АБп пуб Авр о Гув Тецп Авп бек Рпе Іїе ТЕГ
Зо бо 6бе5 670 біп Тук бек ТПг сіу біп Уаі1 бек Уаі бій Іїе сій Тер біц Іец сіп 675 68 685 пув бій Авп о бек Ппув Агкуд Тер Авп Рго бі І1їе сіп Тук ТПг бек Авп 690 695 700
Тук Тук Ппув Бек Авп Авп Уа! сіц Робе Аза Уаі АвБп ТПпг бій сіу Уаї 705 710 715 720
Тук Бек бій Рго Агуд Рго І1е сіу ТБПг Агуд Туг Тецй ТПг Агуд АвБп Гей 725 730 735 «2105 11 «2115 738 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 10 «4005 11
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агуд бій Тер Тер Авр Гей пув Рго сіу Аза Рго Гув Рго 20 25 30 пуб Аз1а АБп осбіп біп пув біп Авр Авр б1у Акуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 бо сіу Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рбе Авп с1у Гей Авр Гуз с1у бій Рго 50 55 бо
Уаї АБп Аїа Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80 сіп біп Гецшп пув Аїа с1у Авр Авп Рго Тук Гей Агуд Туг АБоп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец біп б1іцп Авр ТПпг бБеє Рпе с1у ШУ 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Гей Уаі сбіш біш Аза Аза Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Ркго Уаії біц Ркго бек Рго біп Агд бек Рго Авр бек бБег ТПг с1у Те 145 150 155 160 сі1у Ппув Ппув б1іу біп біп Рго Аїа Ппув Ппув Агд Гей Авп Рое с1у сіп 165 170 175
ТП с1у бій Бек біц бек Уаії Рго Авр Рго біп Рго І1е сС1у сій Рго 180 185 190
Рго Аїа біу Ркго бек бі1у Гей сіу бек біу ТПг Меє Аза Аза с1у ШУ 195 200 205 б1у А1ї1а Рго Меє Аза Авр Ап АБп бі сб1у Аза Авр сіу Уаї сіу б5ег
Зо 210 215 220 зек бек біу Авп Тгр Нів Сув Авр бек ТПг Тгр Ге с1у Авр Аг9д Уаї 225 230 235 240
І1е ТПг ТБг бек ТПг Агуд Тбг Тер Аїа тей Рго ТП Тук Авп Авоп Нів 245 250 255
Тецп Тук Гув біп Іїе Бек Авп сіу ТПг Бек сіу сіу бек ТПг Авп Авр 260 265 270
АвпоТПг Тук Рре сіу Тук бек ТПг Рго Тгр б1у Тук Рпе Авр Ропе Авп 275 280 285
Акуд Рпе Нів Сув Нів РіПе бек Рго Агд АвБр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп 290 295 300
Авп о Авп оТгр біу Робе Агд Рго пуб Агд Тецй бек Рпе Ппув Гец Робе Авп 305 310 315 320
Іїе сіп Уа1! Гпув сбіц Уаї ТПг сбіп Азп о біц б1у ТПг пув Тбг І1їе А1а 325 330 335
Авп о Авп оГецй ТПг бек ТПг І1е біп Уаі Рре ТПг Авр бек біц Тук сіп 340 345 350
Тецп Ркго Тук Уаі Ге сіу Бек Аза Нів сбіп сіу Сув Гей Рго Рго РіПе 355 3З6о 365
Рго Аїа Авр Уаі! Рпе Меє І1е Рго біп Тук сіу Тук Гей ТПг Гей Авп бо 370 375 380
Ап осіу бек біп Аїа Уа1ї сб1у Агкд бек бек Рпе Туг Сув Ге бій Туг 385 390 395 400
Рпе Рго бек біп Меє Іїецй Агуд ТП б1у Авп Авп Рпе сій Рібе бек Туг 405 410 415
ТПЕ Рпе бій Авр Уаї Рго РібПе Нів бек бек Туг Аза Нів бек біп 5ег 420 425 430
Тем Авр Агуд Гей Меє Авп Рго Ге Іїе Авр сіп Туг ІГец Тук Тук Іец 435 440 445 зек Агуд ТПг біп бек ТПпг сіу бі1у Тс біп б1у ТпПг біп сбіп Гей ГІец 450 455 460
Рпе бек біп Аїа б1у Рго Аза Ап Меє бБег Аза сіп Аїа пуб АБп Тгр 465 470 475 480
Тецп Ркго б1у Рго Сув Туг Агуд біп біп Агуд Уа1 бек ТПг ТБПг Іец б5ег 485 490 495 біп Авп Авп Авп обБег Ап Рпе Аза Тер ТПг сіу Аїа ТПг пув Тукг Нів 500 505 510
Тем Авп о б1у Агуд Авр бек Тецй Уаі АвБп Рго сіу Уаі Аїа Мес Аза Тіг 515 520 525
Нів пув Авр Авр біц біц Агуд Рбе Рібе Рго бек бек біу Уаї Геи Меє 530 535 540
Зо
Рпе с1у Ппув біп б1у А1ї1а с1у Агд АвБр АвБп Уаі Авр Туг Бек бек Уаї 545 550 555 560
Меє Гей ТПг Бек бій сій бій чІїе пув ТБг ТБг АвБп о Рго Уаі Аїа ТПг
З5 565 570 575 бі біп Тук сіу Уаі Уаі Аза Авр АвБп Гей біп сбіп Аїа Авп ТПг 01Уу 580 585 590
Рго Іїе Уа1! б1у АБп Уаії Авп бек сіп біу Аїа Гей Рго с1і1у Меє Уаї 595 бо 605
ТЕр біп Авп Агуд Авр оУаї! Тук Гей сіп сіу Рго І1е Тгр Аї1а Ггув Ше 610 615 620
Ркго Нів ТПг Авр о б1у АБп Рпе Ніб Рго бек Рго Гей Меє с1іу с1у Ріе 625 630 635 640 с1у Гешп Ппув Нів Рго Рго Рго Ссіп Іїе Гей Іїе Пув Авп ТПг Рго Уаї 645 650 655
Рго Аїа АвБр Рго Рго ТПг ТПг Робе бек біп Аї1а Ппув Гей Аїа бек Ріє 6бво 665 670
І1їе ТПг біп Тук бек ТПг сіу біп Уаі бек Уаі сбіц чІ1е сі Тгр с1ц 675 68 685
Те біп Гув бій Авп о бек Ппув Агуд Тер АБп Рго сій І1е біп Тукє Тс 690 695 700 60 зек Авп Тукг Тук пуб бек ТПг Авп Уаі Авр Рпе Аїа Уаі АвБп ТПг сіц
705 710 715 720 сбі1у Тпг Тук Бек бі Рго Агуд Рго Іїе с1іу ТПг Агуд Туг Гей ТіПг Агд 725 730 735
Авп Гей «2105 12 «2115 738 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус гП10 «4005 12
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агуд бій Тер Тер Аїа Гей Ппув Рго сіу Аза Рго Гув Рго 20 25 30 пуб Аз1а АБп осбіп біп пув біп Авр Авр б1у Акуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сіу Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рбе Авп с1у Гей Авр Гуз с1у бій Рго 50 55 бо
Уаї АБп Аїа Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
Зо біп бі1іп Гей Ппув Аїа с1у Авр АвБп Рго Тук Гей Агуд Туг Авп Нів А1а 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец біп б1іцп Авр ТПпг бБеє Рпе с1у ШУ
З5 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
Те бі1у Гецп УМаї сій біш сб1у Аїа Ппув ТПг Аза Рго с1у Ппув Ппув Агд 130 135 140
Ркго Уаії біц Ркго бек Рго біп Агд бек Рго Авр бек бБег ТПг с1у Те 145 150 155 160 с1у гув Ппув с1іу біп біп Рго Аїа Ппув Ппув Агд Гей Авп Рое сіу сіп 165 170 175
ТпПкЕ б1у Авр Бек біц бек Уаі Рго Авр Рго біп Рго І1е сС1у сій Рго 180 185 190
Рго Аїа біу Ркго бек бі1у Гей сіу бек біу ТПг Меє Аза Аза с1у ШУ 195 200 205 с1у Аїа Рго Меє Аїа Авр АБп А5п бій б1у Аза Авр сіу Уаї с1у 5ег 210 215 220 зек бек біу Авп Тгр Нів Сув Авр бек ТПг Тгр Гей с1у Авр с1у Уаї 225 230 235 240 60
І1е ТБПг ТБг бек ТПг Агуд ТпПгс Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг Авп Авп Нів
245 250 255
Тецп Тук Гув біп Іїе Бек Авп сіу ТПг Бек сіу сіу бек ТПг Авп Авр 260 265 270
АвпоТПг Тук Рре біу Тук бек ТПг Рго Тгр б1у Тук Рпе Авр Ропе Авп 275 280 285
Акуд Рпе Нів Сув Нів РіПе бек Рго Агд АвБр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп 290 295 300
Авп о Авп оТгр о біу Робе Агуд Рго пуб бек Тецй Авп Рпе Пув Гей Рпе Авп 305 310 315 320
Іїе сіп Уа1! Гпув сбіц Уаї ТПг сбіп Азп о біц б1у ТПг пув Тбг І1їе А1а 325 330 335
Авп о Авп оГец ТПг бек ТПг І1ї1е біп Уаі Рпе ТПг Авр бек бій Тук сіп 340 345 350
Тецп Ркго Тук Уаі Ге сіу Бек Аза Нів сбіп сіу Сув Гей Рго Рго РіПе 355 3З6о 365
Рго Аїа Авр Уаі! Рпе Меє І1е Рго біп Тук бі1у Тук Гей ТПг Гец Авп 370 375 380
Ап осіу бек біп Аїа Уа1ї сб1у Агкд бек бек Рпе Туг Сув Ге бій Туг 385 390 395 400
Зо Рпе Рго бек біп Мес Гецп Акуд ТПг о с1у Авп Авп Рпе бій Рібе бек Туг 405 410 415 біп Рпе бій Авр Уаії Рго Рпе Нів бек бБег Туг Аїа Нів бек біп б5ег 420 425 430
З5
Тец Авр Агд Гей Меє Авп Рго Гей Іїе Авр біп Тук Іецй Тук Тук Ієц 435 440 445 зек Агуд ТПг біп бек ТПпг сіу б1у ТПг Азїа с1у ТПг сбіп сбіп Гей ГІец 450 455 460
Рпе бек біп Аїа б1у Рго АвБп АвБп Меє бек Аза сбіп Аїа пуб АБп Тгр 465 470 475 480
Тем Рго б1у Рго Сув Туг Агуд біп біп Агуд Уаї бек ТПг ТПг Гецй 5ег 485 490 495 біп Авп Авр Авп обБег Ап Рпе Аза Тер ТПг б1у Азїа ТПг Гпув Тукг Нів 500 505 510
Тец Авп б1у Агуд Авр Бек Гей Уаі Авп Рго сіу Уаі Аїа Месє Аїа ТЕПг 515 520 525
Нів пув Авр Авр біц біц Агуд Робе Рпе Рго бек Бек сіу Уа1 Гей Меє 530 535 540
Рпе с1у Ппув біп б1у А1ї1а с1у їув Авр Авп Уаі Авр Тукг Бек бек Уаї 545 550 555 560 бо Меє Гей ТПг бек бій бій біц чІ1їе Ппув ТБг ТБг АБп о Рго Уаі Аїа ТПг 565 570 575 бі біп Тук сіу Уаі Уаі1 Аза Авр Авп Гей біп сбіп біп АвБп Аза А1а 580 585 590
Рго Іїе Уа1! сб1у А1ї1а Уаї Авп бек біп сіу Аїа Гей Рго с1і1у Меє Уаї 595 бо 605
ТЕр біп Авп Агуд Авр оУаї! Тук Гей сіп сіу Рго І1е Тгр Аї1а Ггув Ше 610 615 620
Ркго Нів ТПг Авр о б1у АБп о Рпе Нів Рго бек Рго Гей Меє с1іу с1у Ріе 625 630 635 640 с1у Гешп Ппув Нів Рго Рго Рго Ссіп Іїе Гей Іїе Пув Авп ТПг Рго Уаї 645 650 655
Рго Аїа АвБр Рго Рго ТПг ТПг Роре бек біп Аї1а Ппув Гей Аїа бек Ріє 6бво 665 670
І1їе ТПг біп Тук бек ТПг сіу біп Уаі бек Уаі сбіц чІ1е сі Тгр с1ц 675 68 685
Те біп Гув бій Авп о бек Ппув Агуд Тер АБп Рго сій І1е біп Тукє Тс 690 695 700 зек Авп Туг Тук пуб бек ТПг Авп Уаі Авр Рпе Аїа Уаі Авп ТПг Авр 705 710 715 720 сбі1у Тпг Тук Бек бі Рго Агуд Рго Іїе с1іу ТПг Агуд Туг Гей ТіПг Агд
Зо 725 730 735
Авп Гей «2105 13 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 13 сіп Аза Авр ТП ТП Гув Авп 1 5 «2105 14 «2115 7 «2125» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 14
І1е Бек Авр біп ТПг Гув Нів 1 5 60 «2105 15
«2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 15
А1а бек Авр бек ТПг пув Аїа 1 5 «2105 16 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 16
Авп обіп Авр о Тук ТПг Гув ТП 1 5 «2105 17 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 17
З5
Нів Авр І1ї1е ТПг пуб АБп І1е 1 5 «2105 18 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 18
Нів Рго Авр ТПг ТБг Гпув Авп 1 5 «2105 19 «2115 7 «212» білок «213» Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка бо «4005 19
Нів біп Авр ТПг ТЕ пуб Авп 1 5 «2105 20 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 20
Авпопув ТБПЕ ТБЕ Авп о Тув Авр 1 5 «2105 21 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 21
І1е Бек АБп біц АБп б1іц Нів 1 5
Зо «2105 122 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 Д 22 біп А1а АБп Аза АвБп бій Авп 1 5 «2105 23 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 23 сб1у Гпув Бек Ппув Уаі І1е Авр 1 5 «2105 24 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність 60 «2205
«223» гетерологічна пептидна вставка «4005 24
ТПЕ Авп Агуд ТБг бек Рго Авр 1 5 «2105 25 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 25
Рго Авп бек ТПг Нів с1у 5бег 1 5 «2105 26 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 26
Зо
Тув Авр Агд Аза Рго Бек ТЕПг 1 5 «2105 27 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 27
Тец А1ї1а бі1іп Аза Авр ТПг ТпПг Гув АБп Аза 1 2 10 «2105 28 «2115 10 «212» білок «213» Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 28
Тец А1а І1е бек Авр біп ТпПг Гув Нів Аїа 1 5 10 бо «2105 29 «2115 10
«212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 29
Тец б1у І1е бек Авр біп ТпПг Гув Нів Аїа 1 2 10 «2105 30 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 30
Тец А1а Азїа бек Авр Бек ТПг Гув Аза Аза 1 5 10 «2105 31 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 31
Те Азїа АБп о біп Авр Туг ТПг пув ТБбг А1а 1 5 10 «2105 32 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 32
Тец Азї1а Нів Авр чІ1їе ТПг пув АБп І1е Аїа 1 5 10 «2105 33 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 33 60
Тец Азїа Нів Рго Авр ТПг ТпПг Гув АБп Аза
1 5 10 «2105 34 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 34
Тец Азї1а Нів сіп Авр ТПг ТпПг Гув АБп Аза 1 5 10 «2105 35 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 35
Тец Аз1а АБп о Гпув ТПг ТпПг Авп Гув АвБр Аза 1 5 10 «2105 36
Зо «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 36
Тецп Ркго І1е бек АвБп бій Ап бій Нів Аїа 1 2 10 «2105 37 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 37
Тец Рго бі1іп Аза АвБп Аза Ап бій АБп Аїа 1 5 10 «2105 38 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність бо «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка
«4005 38
Тец А1ї1а с1у Ппув Бек Ппув Уаі Ії1е АБр Аїа 1 2 10 «2105 39 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 39
Тец А1а ТПг АБп Агуд ТпПг бБег Рго АБр Аза 1 5 10 «2105 40 «2115 10 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 40
Зо Тен Аза Рго Авп бек ТіПг Нів сіу бек Аїа 1 5 10 «2105 41 «2115 10
З5 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» гетерологічна пептидна вставка «4005 41
Тец А1а ув Авр Агуд Аза Рго бек ТПг Аїа 1 5 10 «2105 42 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Варіант капсиду ААУ «4005 42
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер пуб Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго бо 20 25 30 пу Аї1а Аза сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго 50 З бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
Агуд біп Гей Авр бек б1у Авр Авп о Рго Тук Гей пуб Тук Авп Нів А1а 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160 пув Аїа б1у біп сбіп Ркго Аїа Акуд Гув Агд Гей Ап Рбе сіу сіп Тіг 165 170 175 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 180 185 190
Зо
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
ТПг ТрПг бек ТПг Агуд Тк Тер Аїа Гей Рго ТПг Туг АБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320 пув бій Маї ТПг біп Авп Авр о сб1іу ТБПг ТЕ Тс Іїе Аза АБп АБп Гей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350 60
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр
355 360 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тем Меєс АБп о Рго Гей І1їе Авр сбіп Тукг Гей Тук Тук Гей бек Агд ТіПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТП ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У 465 470 475 480
Ркго Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гпув ТПг бек Аза Авр АвБп Авп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Зо Агуд Авр бек ІТей Уаії АвБп Рго сбіу Рго Аїа Мес А1їа бек Нів Пув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув 530 535 540
З5 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІ1ї1е сіц Гуз Уаї Меє ІШе ТПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сбіп Агуд біу АБп Тец А1їа І1е 5ег Авр 580 585 590 сіп Тк Ппув Ні Аїа Акуд біп Аїа Аїа ТПг Аза Ар Уа1і АБп ТПкгЕ сіп 595 бо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1і Тер сіп Авр Агд Авр Уа! Тук Іеч сіп 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго ПГец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Гей Ппув Нів Рго Рго Рго Сіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег 6бво 665 670 бо А1ї1а Аїа пув Рібе Аїа бек Рпе І1їе ТПг сіп Туг Бек ТПк с1у сіп Уаї 675 68 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
Авп оРго сій І1е біп Тук ТПг бек Авп Туг Авп пуб бек Уа1і Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд Авп Гей 740 745 «2105 43 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Варіант капсиду ААУ «4005 43
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 2 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
Зо Пув Рго Аї1а біц Агкуд Нів Гув Авр Авр бБег Агуд с1у Темп Уаї Гей Рго сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго бо
З5
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 40 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гпув біц Авр ТПг бБеє Рпе с1у с1У 100 105 110 45 Авп оГеп с1у Акуд Аїа Уаі Рпе сбіп Аїа Пув Гув Агд Уаії Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Гей Уаі бі бій Рго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго с1і1у Мпув Гув Агд 130 135 140 50
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аіїа Агд Гпув Агд Гей Авп Рпе сб1у біп ТПг 55 165 170 175 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 180 185 190 бо А1а Аза Ркго бек б1у Гецп с1у ТПг Авп ТбПг Меє Аїа ТПг сіу бек 1У 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 зек б1у Авп Тгр Нів Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агуд Уаі Пе 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп І1їе бек бек біп бек с1іу Аза Бек Авп Авр Авп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тер біп Агд Тец І1е АБп АБп АвБп о Тгр 290 295 300 с1у Рпбе Агуд Рго Ппув Акуд Гей Гув РіПе пуб Гей Рпе Авп І1е сіп Уаї 305 310 315 320 пув бі Маї ТПпг біп Авп Авр сб1іу ТБбг ТБг ТБг І1е Аза АБп АвБп Гей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр
Зо 355 360 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 сіп Аїа Уаї сб1у Агкуд бек бек РібПе Тук Сув Гецп сі Тук Робре Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445
Авр ТПг Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
А1а сб1у Аза бек Авр І1е Агуд АБп о біп бек Агуд АБп Тгр Гей Рго с1Уу 465 470 475 480
Рко Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гув ТПг бек Аза Авр Авп Авп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 60 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг бек Уаі Авр Іїе сій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575 сіу бек Уаії Бек ТПг Авп Гей біп Агуд б1у Авп Гей Аїа І1е 5Бег Авр 580 585 590 біп Тпг Ггув Нів Аза Агуд біп Аза Аза ТПг Аїа Авр Уаї Авп ТПг сбіп 595 6боо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тем Іїе Ппув Авп о ТПг Рго Ма! Ркго Аїа АБп Рго бек ТПг ТПг Рре 5ег 6бво 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68 685
Зо зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
АвпоРго біц Уаї біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 сі1у Тк Агуд Тук Гей Тібг Агуд АвБп о с1іп 740 745 «2105 44 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Варіант капсиду ААУ «4005 44
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 60 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго 50 55 бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аїа сій Рбе сбіп біц Агуд Гецп пув бій Авр ТПг бек Рпе сС1іу с1Уу 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 с1у Авр Аїа Авр бек Уа1і Рго Авр Рго сіп Рго Гецп с1іу біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205
Зо
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп І1їе бек бек біп бек б1у Аїа бек Авп АвБр АвБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр с1іу ТПг ТпПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТпПкК Уаії біп УМаії Рре ТПг Авр бек бій Тук сбіп Гец Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365 60
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег
370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сбіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТПг 435 440 445
АвпоТПг Рго бек б1і1у ТПг ТпПс Тс обіп бек Агуд Гей біп Ропе бек сіп 450 455 460
А1їа с1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тгр Гей Рго 01Уу 465 470 475 480
Рко Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гув ТПг бек Аза Авр Авп Авп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей АвБп 01Уу 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Зо Авр бій бій Гув Рпе Рре Рго сбіп бек біу Уаї Гей Іїе Рпбе с1Уу ГПув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
З5
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп о Рго Уаі Аза ТПг сбіц сбіп Туг 565 570 575 б1і1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сіп Агуд сб1у Авп Гей сіу І1е 5ег Авр 580 585 590 біп Тпг ув Нів Аза Агуд біп Аза Аза ТПг Аза Авр Уаі АБп ТПпгЕ сіп 595 бо 605 сіу Маї Ге Рго сіу Меє Уаї! Ткгр біп АвБр Агуд Авр Уаі1 Тукг Іец сіп 610 615 620 б1у Рго І1їе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг АвБр б1у Нів Рпе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Рпе 5ег бо 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68 685 бо зек Уаі бі Іїе б1іш Тер сій Темп біп Гув бій Авп бек Гув Аг9д Тгр 690 695 700
АвпоРго біц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаі1і! Авр ТПг Авп біу Уаї Тук бек бій Рго Агуд Рго І1е 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745 «2105 45 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Варіант капсиду ААУ «4005 45
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго
Зо сіу Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рбе Авп с1у Гей Авр Гуз с1у бій Рго бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
З5
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг АвБп Нів А1а 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 40 100 105 110
Ап оГец с1у Агд Аїа Уаі Рпе сбіп Аїа Гув Гув Агд Уаі Гей бій Рго 115 120 125 45 їеч біу Гецп Маї сій бій Рго Уаі! Ппув ТПг Аза Рго с1у Ппув Ппув Агд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек бек с1і1у ТПг с01У 145 150 155 160 50 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 б1у Авр Азї1а Авр бек Уа1і Рго Авр Рго біп Рго Іїец б1у біп Рго Рго 55 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205 бо А1а Рго Меє Аза АБр АБп Ап о біц с1у Азїа Авр сіу Уа1 сб1у Ап 5ег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
ТПЕ ТрПг бек ТіПг Агуд ТП Тер Аза Тей Рго ТП Тук Авп АвБп о Нів Гей 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук Бек ТПг Рго Тгр сі1у Тук Рпе Авр Робе Авп Агд РоПе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Пув Агд Гей Авп Рпе пуб Іец Рпе АБп І1е сіп Уаї 305 310 315 320 пув бій Маї ТПг біп Авп Авр о сб1іу ТБПг ТЕ Тс Іїе Аза АБп АБп Гей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег
Зо 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 сіп Меє Ггец Агуд ТПг с1у Авп Авп Роре ТПг Рре бек Туг ТПг Рпе сій 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У 465 470 475 480
Рго Сув Туг Агуд біп біп Акуд Уаї бек Гув ТПг бек Аза Авр АвБп АвБп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув бо 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575 б1і1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сіп Агуд сб1у Авп Гей Аїа біп А1їа Авр 580 585 590
ТП Трпг пув Авп Аза Агуд біп Аї1а Аза ТПг Аза Авр Уаї АвБп ТПг сіп 595 бо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег 6бво 665 670
А1ї1а Аїа пув Рібе Аїа бек Рпе І1їе ТПг біп Туг бек ТПкК с1у сіп Уаї 675 68о0 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
Зо
АвпоРго біц Уаї біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є
З5 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745 40 «2105 46 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність 45 «220» «223» Варіант капсиду ААУ «4005» 46 50 Месє Аї1а Аза Ар с1у Тук Гей Рго Авр Тгр Гей бій Авр ТПг Гей 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер пув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30 55
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго 60 50 З бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
Авп оГеп с1у Акуд Аїа Уаі Рпе сбіп Аїа Пув Гув Агд Уаії Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 180 185 190
А1а Аза Ркго бек б1у Гецп с1у ТПг Ап ТбПг Месє А1а ТПг с1у бек 01Уу 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220
Зо зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй
З5 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПЕ Рго Тер с1іу Тук Рібе Авр Рре Авп Акуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр с1іу ТПг ТпПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї теп сіу Бек Аїа Нів сіп с1і1у Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Аїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 60 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег
385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нів бек бек Туг Аза Нів бек біп бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТП ТБг о біп бек Агд Гей сбіп Рпе бек сіп 450 455 460
А1а сб1у Аза бек Авр І1їе Агуд Авр біп бек Агуд АБп Тгр Гей Рго с1Уу 465 470 475 480
Ркго Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гпув ТПг бек Аза Авр АБп Авп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Акуд Авр бек Ггец Уаі Авп Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув 530 535 540
Зо сіп бі1у бек біц Ппув ТБг Авп о Уаі! Авр чІ1їе сій Ппув Уаї Меє тІ1е ТЕГ 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575
З5 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сбіп Агуд б1іу АБп Тец Азї1а Нів АвБр Ше 580 585 590
ТпПгЕ пув Авп о ч1І1е Аза Агуд біп Аза Аза ТПг Аза Авр Уаі АБп ТПпгЕ сіп 595 6боо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1і Тер сіп Авр Агд Авр Уа! Тук Іеч сіп 610 615 620 с1у Рго І1ї1е Тгр Аїа Пув Іїе Рго Нів ТПг Авр с1у Нів Робе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго ПГец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Гей Ппув Нів Рго Рго Рго Сіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег 6бво 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1їе ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 680 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700 бо Авп оРго сій І1е біп Тук ТпПг Бек Авп Туг Авп пуб бек Уа1і Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 сі1у Тк Агуд Тук Гей Тібг Агуд Авоп о Тецй 740 745 «2105 47 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Варіант капсиду ААУ «4005 47
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго бо
Зо Уа1ї АБп біц Аза Авр Аїа А1їа Аза Геш сій Нів Авр ув Аїа Тук Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 85 90 95
З5
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гпув біцш Авр ТПг бБеє Рпе сС1у с1У 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 40 115 120 125
Тец б1у Гей Уаі бі бій Рго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго с1у Гув Гув Агд 130 135 140 45 Рго Уаі бій Нів бек Рго Уаі бій Рго Авр бек бек бек с1у Тбг 01Уу 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аіїа Агд Гпув Агд Гей АБп Рпе сб1у біп ТПг 165 170 175 50 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг сіу бек с01У 55 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 бо зек б1у Авп Тгр Нів Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агуд Уаі Пе 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп І1е бек бек біп бек біу Аїа Бек Авп Авр АБоп о Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тер біп Агд Тец І1е АБп АБп АвБп о Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр сіу ТБг ТПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТпПкК Уаії біп УМаії Рре ТПг Авр бек бій Тук сбіп Гец Рго Туг 340 345 350
Уаї ге сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег
Зо 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415
Авр УМаї Ркго Рібе Нів бек бек Тугк Аїа Нів бек сбіп бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У 465 470 475 480
Рко Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гув ТПг бек Аза Авр Авп Авп 485 490 495
Авп о бек бій Тугк бек Тер ТпПК с1у Аїа ТПг пув Тук Нів Гей Ап с1уУу 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг бо 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575 б1і1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сіп Агуд б1у Авп Гей Аза АвБп о біп Авр 580 585 590
Тук ТпПкЕ Гпув ТБПг Аза Агуд біп Аза Аза ТПг Аза Авр Уаі АБп ТПпгЕ сіп 595 6боо 605 сіу Маї Ге Рго сіу Меє Уаї! Ткгр біп АвБр Агуд Авр Уаі1 Тукг Іец сіп 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег бо 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68 685 зек Уаі біц Іїе б1іш Тер сій Гей сіп Гув бій АвБп бек Гув Агд Тгр 690 695 700
АвпоРго біц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Зо
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей
З5 740 745 «2105 48 «2115 745 «212» білок 40 «2135 Штучна послідовність «220» «223» Варіант капсиду ААУ 45 «4005 48
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 50 сі б1у чІ1е Агуд біп Тер Теср Гуз Гей пуб Рго с1у Рго Рго Рго Рго 20 25 30
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр о бБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 55 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр бо 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125 їеч біу Гецп Маї сій бій Рго Уаі! Ппув ТПг Аза Рго с1у Ппув Ппув Агд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205
А1а Рго Меє Аза АБр АБп Ап о біц с1у Аїа Авр с1у Уаї с1у Авп 5бег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
Зо
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг
З5 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Ріре бек Рго Акуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр с1іу ТПг ТпПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уа1 Рпре Меє Уаї Рго сбіп Тук бі1у Тук Гей ТПг Тей АБп АвБп с1у бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 60 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Туг ТПг Рое сі1и
405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сбіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
А1їа сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго с1Уу 465 470 475 480
Рго Сув Туг Агуд біп біп Акуд Уаї бек Гув ТПг бек Аза Авр АвБп АвБп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей АвБп 01Уу 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Авр сій біц пув Роре Рпе Рго біп бек біу Уа1! Гей Ії1е Рое сС1Уу Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
Зо Авр бій бій бій І1е Агуд Тпс Тс о Авоп Рго Уаі Аїа ТБбг сій сіп Туг 565 570 575 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сбіп Агуд б1у Авп Гей Аза Рго АБп 5ег 580 585 590
З5
ТПЕ Нів сіу бек Аза Агуд біп Аї1а Аза ТПг Аза Авр Уаі1і Ап ТПг сбіп 595 бо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп 610 615 620 б1у Рго І1їе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг АвБр б1у Нів Рпе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Пес Мес с1у с1у Рпе с1іу Гей Тув Нів Рго Рго Рго Ссіп І1еє 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе б5ег 6бво 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Гец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
АвпоРго біц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720 бо Авр Рпе ТПг Уаі1і! Авр ТПг Авп біу Уаї Тук бек бій Рго Агуд Рго І1е 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745 «2105 49 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Варіант капсиду ААУ «4005 49
Месє Аї1а Аза Ар с1у Тук Гей Рго Авр Тгр Гей бій Авр ТПг Гей 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго сб1у Тук Ппув Тук Ге с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр пуб С1у біц Рго 25 50 З бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
Зо Агуд біп Гей Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей пуб Тугк Авп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
З5
Ап оГец с1у Агд Аїа Уаі Рпе сбіп Аїа Гув Гув Агд Уаії Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 40 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек бек с1у ТПг с01У 145 150 155 160 45 пув Аїа б1у біп сбіп Ркго Аїа Акуд Гув Агд Гей Ап Рбе сіу сіп Тіг 165 170 175 б1у Авр Азї1а Авр бек Уа1і Рго Авр Рго біп Рго Іїец б1у біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205
Аза Ркго Месє Аза АвБр АБп АБп обіц сіу Аза Авр сіу Уа1і с1у Авп 5ег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240 бо ТПЕ ТрПг бек ТіПг Агуд ТП Тер Аза Тей Рго ТПг Тук Авп АвБп о Нів Гей 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПЕ Рго Тер біу Тук Рпе Авр Робпе Авп Агуд Рре Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агд Гей Авп Рібе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр с1іу ТПг ТпПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рібе ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї теп сіу Бек Аїа Нів сіп с1і1у Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Аїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сбіу 5бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц
Зо 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тем Меєс АБп о Рго Гей І1їе Авр сбіп Тукг Гей Тук Тук Гей бек Агд ТіПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У 465 470 475 480
Рко Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гув ТПг бек Аза Авр Авп Авп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Агуд Авр бек ІТецй Уаії Авп Рго сіу Рго Аїа Мес Аза бек Нів Тув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 60 565 570 575 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сбіп Агуд б1у Авп Гей Аза АвБп о Гув ТЕГ 580 585 590
ТПЕ Авп Гув Авр Аза Агуд біп Аза Аза ТПг Аза Авр Уаі АБп ТПпгЕ сіп 595 6боо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп 610 615 620 с1у Рго І1ї1е Тгр Аїа Пув Іїе Рго Нів ТПг Авр с1у Нів Робе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег 6бво 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 680 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
Авп оРго сій І1е біп Тук ТпПг Бек Авп Туг Авп пуб бек Уа1і Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735
Зо бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745 «2105 50
З5 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» 40 «223» Варіант капсиду ААУ «4005 50
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 45 1 2 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер пув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30 50 Пув Рго Аї1а біц Агкуд Нів Гув Авр Авр бБег Агуд с1у Темп Уаї Гей Рго сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго бо 55
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 60 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рго Уаі бій Нів бек Рго Уаі бій Рго Авр бек бек бек с1у Тбг 01Уу 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 зек б1у Авп Тгр Нів Сув Авр бек ТПг Тгр Мес с1у Авр Акуд Уа1ї! І1е 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Зо
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів
З5 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 с1у Рпбе Агуд Рго Ппув Акуд Гей Авп Ропе пуб Гей Рпе Авп І1е сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр с1іу ТПг ТпПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 сіп Аїа Уаї сб1іу Агуд бек бек РібПе Тук Сув Гецп сій Тук Робре Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415 60
Авр Уа1 Рго Рібе Нів бек бек Туг Аза Нів бек біп бек Гей Авр Агд
420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТП ТБг о біп бек Агд Те сбіп Робе бек сіп 450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У 465 470 475 480
Ркго Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гпув ТПг бек Аза Авр АБп АвБп 485 490 495
Авп о бек бій Тугк бек Тер ТпПК с1у Аїа ТПг пув Тук Нів Гей Ап с1уУу 500 505 510
Акуд Авр бек Ггец Уаі АвБп Рго біу Рго А1ї1а Меє Аза бек Нів Гув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр І1е сбіц Гуз Уаї Меє ІШе ТПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575
Зо сіу бек Уаї Бек ТПг Авп Гей біп Агуд с1у Авп Тей Аїа ТПг АвБп Агд 580 585 590
ТПг Бек Рго Авр Аза Агуд біп Аїа Аза ТПг Аза Авр Уаі АБп ТПгЕ сіп 595 бо 605
З5 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1і Тер сіп Авр Агд Авр Уа! Тук Іеч сіп 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Гей Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тем Іїе Ппув Авп о ТПг Рго Ма! Ркго Аїа АБп Рго бек ТПг ТПг Рре 5ег 6бво 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1їе ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
АвпоРго біц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 бо сі1у Тк Агуд Тук Гей Тібг Агуд Авоп о Тецй 740 745
«2105 51 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Варіант капсиду ААУ «4005 ч,151
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 сі б1у чІ1е Агуд біп Тер Теср Гуз Гей пуб Рго с1у Рго Рго Рго Рго
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 20 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго бо
Уаї АБп бі Аза Авр Аза Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Тукг Авр 25 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 85 90 95
Зо Авр Аїа сій Рбе біп біц Агд Гешп пув бій Авр ТПг бек Рпе с1у 1У 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
З5
Тец б1у Гей Уаі бі бій Рго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго б1у Гув Кпув Агд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 40 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аіїа Агд Гув Агд Гец АБп Рпе б1у біп ТПг 165 170 175 45 с1у Авр Аїа Авр бек Уа1і Рго Авр Рго сіп Рго Гецп с1іу біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг сіу бек с01У 195 200 205 50
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 зек с1у АвБп Тгр Ні Сув Авр бБег ТПг Тер Меє сіу Авр Агкд Уа1ї І1е 55 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255 бо Тук Ппув біп І1е бек бек біп бек біу Аїа Бек Авп Авр АБоп о Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Ріре бек Рго Акуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр сіу ТПг ТПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уа1 Рпре Меє Уаї Рго сбіп Тук бі1у Тук Гей ТПг Тей АБп АвБп с1у бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд
Зо 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445
АвпоТПг Рго бек б1і1у ТПг ТпПс Тс обіп бек Агуд Гей біп Ропе бек сіп 450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У 465 470 475 480
Рко Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гув ТПг бек Аза Авр Авп Авп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Авр бій бій пув Робе Ррпе Рго сіп бек сіу Ма! ІТейп І1е Рпе с1Уу Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сбіп Агуд б1у Авп Гей Аїа сіу Ппув бег 60 580 585 590
Тпув Маї Іїе Авр Аїа Агу сіп Аїа Аза ТПг Аїа Авр Уаї Авп ТПг сбіп 595 6боо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Пес Мес с1у с1у Рпе с1іу Гей Тув Нів Рго Рго Рго Ссіп І1еє 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег 6бво 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
АвпоРго біц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уа1і Авр ТПг Авп біу Уа1ії Тук бек бій Рго Агуд Рго І1е 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745
Зо «2105 чБ52 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність
З5 «220» «223» Варіант капсиду ААУ «4005 Д 52 40
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гей Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 45 20 25 30
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго сіу Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рбе Авп с1у Гей Авр Гуз с1у бій Рго 50 55 бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 60 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160 пув Аїа б1у біп сбіп Ркго Аїа Акуд Гув Агд Гей Ап Рбе сіу сіп Тіг 165 170 175 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
ТПг ТрПг бек ТПг Агуд Тк Тер Аїа Гей Рго ТПг Туг АБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Зо
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320 пув бій Маї ТПг біп Авп Авр о сб1іу ТБПг ТЕ Тс Іїе Аза АБп АБп Гей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 сіп Меє Ггецп Агуд ТПК с1у Авп Авп Роре ТПг Рре бек Туг ТПг Рпе сіци 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430 60
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сбіп Тук Гей Тук Тук Гей бек Агд ТПг
435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
А1їа с1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд Ап Тер Гей Рго с1Уу 465 470 475 480
Рко Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гув ТПг бек Аза Авр Авп Авп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг пув Тук Нів Гей АвБп 01Уу 500 505 510
Агуд Авр бек ІТецй Уаії Авп Рго сіу Рго Аїа Мес Аза бек Нів Тув Авр 515 520 525
Авр сій біц пув Роре Рпе Рго біп бек сіу Уа1! Гей Ії1е Рое сС1Уу Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТбПг Авп Рго Уаі Аза ТПг сбіц сбіп Туг 565 570 575 б1і1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сіп Агуд сб1у Авп Гей Аїа Аза 5ег Авр 580 585 590
Зо зек ТПг пув Аїа Азї1а Агуд сіп Аїа Аїа ТПг Аза Ар Уа1і АБп ТПкгЕ сіп 595 бо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп 610 615 620
З5 б1у Рго І1їе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег 6бво 665 670
А1ї1а Аїа пув Рібе Аїа бек Рпе І1їе ТПг біп Туг бек ТПкК с1у сіп Уаї 675 68 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер біц Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
АвпоРго біц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745 60 «2105 ю53 «2115 745
«212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Варіант капсиду ААУ «4005 53
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 2 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
Пув Рго Аї1а біц Агкуд Нів Гув Авр Авр бБег Агуд с1у Темп Уаї Гей Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Ге с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр пуб С1у бій Рго 50 55 бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів А1а 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
Зо Авп оГеп с1у Акуд Аїа Уаі Рпе сбіп Аїа Пув Гув Агуд Уа1ї! Іей сій Рго 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
З5
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр Бек бек бек с1у ТПг с01У 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 б1у Авр Азї1а Авр бек Уа1і Рго Авр Рго біп Рго Іец б1у біп Рго Рго 180 185 190
А1а Аза Ркго бек б1у Гецп с1у ТПг Ап ТбПг Месє А1а ТПг с1у бек 01Уу 195 200 205
Аза Ркго Месє Аза АвБр АБп АБп бій с1іу Аза Авр сіу Уа1і с1у Авп 5ег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
ТПЕ ТпПкг Бек ТПг Агуд ТБ Тер Аза Гей Рго ТПг Туг Авп Авп Нів Іей 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270 бо Рпе сіу Тук бек ТПкЕ Рго Тер біу Тук Рре Авр Рре Авп Акуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 с1у Рпбе Агуд Рго Ппув Акуд Гей АБп о Рпе пуб Гей Рпе Авп І1е сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр с1іу ТПг ТпПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Робе ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 сіп Аїа Уаї сб1у Агкуд бек бек РібПе Тук Сув Гецп сі Тук Робре Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг
Зо 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
А1а сб1у Аза бек Авр І1їе Агуд Авр біп бек Агуд АБп Тгр Гей Рго с1Уу 465 470 475 480
Рко Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гув ТПг бек Аза Авр Авп Авп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув 530 535 540 сіп бі1у бек біц Ппув ТБг Авп о Уаі! Авр чІ1е сій пув Уа1і! Меє І1е Тіг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сбіп Агуд б1у Авп Гей Аїа пуб АвБр Агд 580 585 590
Аза Ркго бек ТПг Аза Агуд біп Аїа Аза ТПг Аза Авр Уаі Авп ТПг сіп 60 595 6боо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тем Іїе Ппув Авп о ТПг Рго Ма! Ркго Аїа АБп Рго бек ТПг ТПг Рре 5ег 6бво 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
АвпоРго біц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 сі1у Тк Агуд Тук Гей Тібг Агуд Авоп о Тецй 740 745 «2105 ч54 «2115 745
Зо «2125» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Варіант капсиду ААУ
З5 «4005 54
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго бо 50 Уа1ї АБп біц Аза Авр Аїа Азїа Аза Геш сій Нів Авр Гуз Аїа Тук Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 85 90 95 55
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 60 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 с1у Авр Аїа Авр бек Уа1і Рго Авр Рго сіп Рго Гецп с1іу біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп І1їе бек бек біп бек б1у Аїа бек Авп АвБр АвБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Зо
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр с1іу ТПг ТпПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТпПкК Уаії біп УМаії Рре ТПг Авр бек бій Тук сбіп Гец Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек Бек Рпе Тук Сув Гей бій Тук Рое Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415
Авр Уаї Ркго Рібе Нів бек бек Тук Аїа Нів бек біп бек Тей АБр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445 60
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТП ТБг о біп бек Агд Тецй біп Робе бек сіп
450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У 465 470 475 480
Ркго Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гпув ТпПг бек Аза Авр АБп АвБп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Акуд Авр бек Ггец Уаі АвБп Рго біу Рго Аїа Меє Аза бек Нів Гув Авр 515 520 525
Авр бій бій пув Робе Ррпе Рго сіп бек сіу Ма! ІТейп І1е Рпе с1Уу Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі1 Авр І1е сбіц Гуз Уаї Меє ІШе ТПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сіп Агуд б1іу АБп Тец Азїа Нів сіп Авр 580 585 590
ТПЕ ТпкЕ пуб Авп Аза Агуд біп Аза Аза ТПг Аза Авр Уаі АБп ТПпгЕ сіп 595 бо 605
Зо сіу Маї Гецп Рго сіу Меє Уаї! Тгр біп Авр Агуд Авр Уаі1 Тукг Іец сіп 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640
З5 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу ІТецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег бо 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68 685 зек Уаі біц Іїе б1іш Тер сій Гей сіп Гув бій АвБп бек Гув Агд Тгр 690 695 700
АвпоРго біц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745 «2105 щ55 «2115 745 «212» білок 6о0 «213» Штучна послідовність
«223» Варіант капсиду ААУ «4005 Б55
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
ТПув Рго Аї1а сій Агуд Нів Ппув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гей Уаї Іец Рго 35 40 45 сіу Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рбе Авп с1у Гей Авр Гуз с1у бій Рго 50 55 бо
Уаї АБп бі Аза Авр Аза Аза Аїа Гей сіц Нів Авр їув Аїа Тукг Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гей Ппув Туг Авп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гпув біц Авр ТПг бБег Рое с1у с1У 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
Зо Тем біу Гецп Маї сій бій Рго Уаі! Ппув ТПгЕ АТа Рго с1у Ппув Ппув Агкд 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160
З5 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аіїа Агуд Гув Агд їец АБп Рпе сб1у біп ТПг 165 170 175 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу Іец б1у ТПг АвБп ТПг Меє Аза ТПг сіу бек с01У 195 200 205
А1а Рго Меє Аза АБр АБп Ап о біц с1у Аїа Авр с1у Уаї с1у Авп 5бег 210 215 220 зек с1у АвБп Тгр Ні Сув Авр бБег ТПг Тер Меє сіу Авр Агкд Уа1ї І1е 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп І1їе бек бек біп бек с1іу Аза Бек Авп Авр Авп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр бі1у Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285 бо Сув Нів Ріре бек Рго Акуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АБп АБп Тгр 290 295 300 б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320 пув бій Маї ТПг біп Авп Авр о сб1іу ТБПг ТЕ Тс Іїе Аза АБп АБп Гей 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 сіп Меє Ггец Агуд ТПг с1у Авп Авп Роре ТПг Рре бек Туг ТПг Рпе сій 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп
Зо 450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У 465 470 475 480
Рго Сув Туг Агуд біп біп Акуд Уаї бек Гув ТПг бек Аза Авр АвБп АвБп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПпг сі1у Аїа ТПг Гув Тук Нів Гей Ап 1У 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
Авр бій бій бій І1е Агуд Тпс ТБ о Ав5п Рго Уаі Аї1а ТПг сій сбіп Туг 565 570 575 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сбіп Агуд б1у Авп Гей Рго І1е 5ег Авп 580 585 590 бі АБп бій Нів Аза Агуд біп Аза Аза ТПг Аїа Авр Уаї Авп ТПг сбіп 595 6боо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп бо 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег 6бво 665 670
А1ї1а Аїа пув Рібе Аїа бек Рпе І1їе ТПг біп Туг бек ТПкК с1у сіп Уаї 675 68 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
АвпоРго біц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Ппув Бек Уа1 Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агуд Рго І1е 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745 «2105 56 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» Варіант капсиду ААУ «4005 МЯ56
Месє Аї1а Аза Ар с1у Тук Гей Рго Авр Тгр Гей бій Авр ТПг Гей 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго
З бо
Уаї АБп біш Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 80 50 Агуд біп Гей Авр бек б1у Авр Авп о Рго Тук Гей пуб Тук Авп Нів А1а 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд бо 130 135 140
Рко Уаії біц Нів бек Рго Уаі біц Рго Авр бек бек Бек с1у ТПгЕ щ1У 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175 б1у Авр Аза Авр бек Уа1 Рго Авр Рго біп Рго Гей с1іу біп Рго Рго 180 185 190
А1а Аза Ркго бек б1у Гецп с1у ТПг Ап ТбПг Месє А1а ТПг с1у бек 01Уу 195 200 205
Аза Ркго Мес Аза АвБр АБп АБп о біц б1у А1а Авр сіу Уаі о1у Авп б5ег 210 215 220 зек сб1у Авп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тер Меє с1у Авр Агд Уа1 те 225 230 235 240
ТПЕ ТПкг Бек ТПг Агуд ТБг Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг АвБп АвБп о Нів Іецй 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПЕ Рго Тер с1іу Тук Рібе Авр Рре Авп Акуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300
Зо б1у Рпе Агд Рго Ппув Агуд Гей Авп Рпе Ппув Гей Ропе Авп І1е Сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр с1іу ТПг ТпПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей
З5 325 330 335
ТПг Бек ТПг Уа1! сіп Уаії Рре ТПг Авр бек біц Тук біп Те Рго Туг 340 345 350
Уаї теп сіу Бек Аїа Нів сіп с1і1у Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Аїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1іу Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп біу б5ег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Туг ТПг Рпе сіи 405 410 415
Авр Уа1 Рго Рібе Нібв бек бек Туг Аза Ні бек біп Бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тем Меєс АБп о Рго Гей І1їе Авр біп Тукг Гей Тук Тук Гей бек Агд ТЕГ 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460 60
А1їа сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд Ап Тер Гей Рго с1Уу
465 470 475 480
Рко Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гув ТПг бек Аза Авр Авп Авп 485 490 495
Авп обБек бій Тук бек Тер ТПг бі1у Аїа ТПг пув Тук Нів Гей АвБп 01Уу 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Авр сій біц пув Роре Рпе Рго біп бек сіу Уа1! Гей Ії1е Рое сС1Уу Гув 530 535 540 сіп бі1у бек біц Ппув ТБг Авп о Уаі! Авр чІ1е сій пув Уа1і! Меє І1е Тіг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТбПг Авп Рго Уаі Аза ТПг сбіц сбіп Туг 565 570 575 бі1у бек Уаії Бек ТПг Ап Гей сбіп Агуд б1у Авп Гей Рго біп Аїа Авп 580 585 590
Аза Авп о біц АвБп Аза Агуд біп Аза Аза ТПг Аїа Авр Уаі1і Авп ТПг сіп 595 бо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп 610 615 620
Зо с1у Рго І1ї1е Тгр Аїа Пув Іїе Рго Нів ТПг Авр с1у Нів Робе Нів Рго 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
З5
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег 6бво 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68 685 зек Уаії біц І1е б1цп Тер бій Іїец біп ув бій Авп бек Ппув Агд Тер 690 695 700
Авп оРго сій І1е біп Тук ТпПг Бек Авп Туг Авп пуб бек Уа1і Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745 «2105 57 «2115 745 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» бо «223» Варіант капсиду ААУ
«4005 57
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр ТПг Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агкуд сбіп Тер Тер Ппув Гей Ппув Рго сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 30
Тпув Рго Аї1а сій Агуд Нів Гпув Авр о Авр обБег Агуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Ге с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр пуб С1у бій Рго 50 55 бо
Уа1ї АБп біц Аза Авр Аїа Азїа Аза Геш сій Нів Авр Гуз Аїа Тук Авр 65 70 75 80
Акуд біп Гец Авр бек б1у Авр АвБп о Рго Тук Гецп Ппув Туг Авп Нів А1а 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец Гув б1іц Авр ТПг бБеє Рпе с1у 0Щ1У 100 105 110
Ап оГец с1у Агд Аїа Уаі Рпе сбіп Аїа Гув Гув Акд Уаї Гей бій Рго 115 120 125
Тец б1у Геип Уаі бі бій Ркго Уаії Ппув ТПг Аїа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Зо Рго Уаі бій Нів бек Рго Уаі бій Рго Авр бек бек бек б1і1у ТЕ 1У 145 150 155 160 пуб Аї1а с1у сбіп біп Рго Аїа Агуд Гув Агд Гей Авп Рпе сіу біп Тс 165 170 175
З5 б1у Авр Азї1а Авр бек Уа1і Рго Авр Рго біп Рго Іїец б1у біп Рго Рго 180 185 190
Аза Аза Рго бек біу ІТец б1у ТБг АвБп ТПг Меє Аза ТПг с1у Бех У 195 200 205
Аза Ркго Месє Аза АвБр АБп АБп бій с1іу Аза Авр сіу Уа1і с1у Авп 5ег 210 215 220 зек б1у Авп Тгр Нів Сув Авр бек ТПг Тгр Мес с1у Авр Акуд Уа1ї! І1е 225 230 235 240
ТПЕ ТпПкг Бек ТПг Агуд ТБ Тер Аза Гей Рго ТПг Туг Авп Авп Нів Іей 245 250 255
Тук Ппув біп Іїе бек бек біп бек сіу Аїа бек АвБп Авр АБп Нів Туг 260 265 270
Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тгр с1іу Тук Рпе Авр Рпе А5п Агуд Ріе Нів 275 280 285
Сув Нів Рпе бБег Рго Агуд Авр Тгр біп Агд Гей І1їе Авп АвБп АБп Тгр 290 295 300 бо с1у Рпбе Агуд Рго Ппув Акуд Гей Авп Ропе пуб Гей Рпе Авп І1е сіп Уаї 305 310 315 320
Тпув бій Маї ТПпг біп Авп Авр с1іу ТПг ТпПг Тпг Ії1е Аза АвБп АвБп Іей 325 330 335
ТПг Бек ТпПкК Уаії біп УМаії Рре ТПг Авр бек бій Тук сбіп Гец Рго Туг 340 345 350
Уаї геи сіу Бек Аза Нів біп сіу Сув Гей Рго Рго Рпе Рго Азїа Авр 355 3З6о 365
Уаї Рпе Меє Уа1 Рго сіп Тук с1і1у Тук Гей ТБПг Гец АвБп АБп сіу 5бег 370 375 380 біп А1ї1а Уаї сіу Агуд Бек бек Рпе Тук Сув Гей сій Тук Рібе Рго 5ег 385 390 395 400 біп Меє Гей Агуд ТпПг б1у Авп Авп Рпе ТПг Рпе бек Тукг ТПг Робе с1ц 405 410 415
Авр УМаї Ркго Рібе Нів бек бек Тугк Аїа Нів бек сбіп бек Гей Авр Агд 420 425 430
Тецп Меє АвБп Рго Гей Іїе Авр сіп Тук Гей Тук Тук Гей бБег Агд ТЕПг 435 440 445
АвпоТВПЕ Рго бек біу ТПг ТПг ТБг о біп бек Агд Гей біп Рпе бек сіп 450 455 460
Аза сі1у Аїа бБег Авр І1е Агуд Авр біп б5ег Агуд АБп Тер Гей Рго 01У
Зо 465 470 475 480
Рко Сув Тут Агд біп бі1іп Акуд Уаії бек Гув ТПг бек Аза Авр Авп Авп 485 490 495
Авп о бек бій Тугк бек Тер ТпПК с1у Аїа ТПг пув Тук Нів Гей Ап с1уУу 500 505 510
Акуд Авр о бБетг Ггец Уаі АвБп о Рго біу Рго Аї1а Меє Аза бек Нів Гпув Авр 515 520 525
Авр бій біц пув Рбе Робе Рго біп бек біу Маі Іейп І1е Рпе с1УуУ Гув 530 535 540 біп б1у бек бій Ппув ТПг Авп Уаі Авр чІї1е бій пув Уаї Меє І1е ТЕПг 545 550 555 560
Авр сій біц біц І1е Агуд ТБ ТБг АвБп Рго Уаі Аза ТПг бій біп Туг 565 570 575 сіу бек Уаії Бек ТПг Авп Гей біп Агуд б1у Авп Гей Аїа Нів Рго Авр 580 585 590
ТПЕ ТпкЕ пуб Авп Аза Агуд біп Аза Аза ТПг Аза Авр Уаі АБп ТПпгЕ сіп 595 бо 605 сі1у Маї Гей Рго сіу Меє Уаі1 Тгр сбіп Авр Агуд Авр Уаї Тукг Іец сіп 610 615 620 б1у Рго Іїе Тгр Аїа Ппув Іїе Рго Нів ТПг Авр сіу Нів Ріе Нів Рго бо 625 630 635 640 зек Рго Гец Меє с1і1у б1у Рпе сіу Іецшц Гув Нів Рго Рго Рго сбіп І1е 645 650 655
Тецшц І1їе Гпув Авп ТПг Рго Уаі Рго Аза Авп Рго бек ТПг ТПг Робе 5ег 6бв6о 665 670
Аза Аза пуб Рібе Аза бек Рпе І1е ТПг біп Туг Бек ТПг с1іу сіп Уаї 675 68о 685 зек Уаі біц Іїе б1іш Тер сій Гей сіп Гув бій АвБп бек Гув Агд Тгр 690 695 700
АвпоРго сбіц І1е біп Тук ТПг бек Авп о Тук Авп о Гпув Бек Уа1і Авп Уаї 705 710 715 720
Авр Рпе ТПг Уаї Авр ТПг АвБп о біу Уа1і Тук бек бій Рго Агд Рго І1є 725 730 735 бі1у Тпг Агуд Туг Гей ТПг Агуд АвБп Гей 740 745 «2105 58 «2115 737 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Предковий капсидний білок
Зо «2205 «221» невизначена ознака «222» (264)..(264) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (266)..(266) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (268)..(268) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (448)..(448) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (459)..(460) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (467)..(467) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту бо «2205 «221» невизначена ознака
«222» (470)..(471) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (474)..(474) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (495)..(495) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (516)..(516) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (533)..(533) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (547)..(547) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (551)..(551) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (555)..(555) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (557)..(557) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (561)..(561) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (563)..(563) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (577)..(577) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 бо «221» невизначена ознака «222» (583)..(583)
«223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «221» невизначена ознака «222» (593)..(593) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (596)..(596) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (661)..(662) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (664)..(665) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (710)..(710) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (717)..(719) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «2205 «221» невизначена ознака «222» (723)..(723) «223» Хаа може являти собою будь-яку природну амінокислоту «4005 58
Месє Аї1а Аза Ар с1у Тук Гей Рго Авр Тгр Гей бій Авр АвБп Гей 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агуд бій Тер Тер Авр Гей пув Рго сіу Аза Рго Гув Рго 20 25 30 пуб Аз1а АБп осбіп біп пув біп Авр Авр б1у Акуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго зо 55 бо
Уаї АБп Аїа Аза Авр Аїа Аза Аїа Гей сіц Нів Авр Гув Аза Туг Авр 65 70 75 во сіп біп Гецшп пув Аїа с1у Авр Авп Рго Тук Гей Агуд Туг АБоп Нів Аїа 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец біп б1іцп Авр ТПпг бБеє Рпе с1у ШУ 100 105 110 бо
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго
115 120 125
Тец б1у Гей Уаі сбіш біш сіу Аза Ппув ТПг АТа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Ркго Уаії біц Ркго бек Рго біп Агд бек Рго Авр бек бБег ТПг с1у Те 145 150 155 160 с1у гув Ппув с1іу біп біп Рго Аїа Ппув Ппув Агд Гей Авп Рое сіу сіп 165 170 175
ТпПкЕ б1у Авр Бек біц бек Уаі Рго Авр Рго біп Рго Іец С1у сій Рго 180 185 190
Рго Аїа сіу Рго бек сіу Гей сіу бек біу ТПг Мес Аза Аза сС1іу с1Уу 195 200 205 б1у А1ї1а Рго Меє Аза Авр Ап АБп бі сб1у Аза Авр сіу Уаї С1Уу Авп 210 215 220
Аза бек с1у АвБп Тгр Ні Сув Авр бек ТПг Тгр Гей б1у Авр Аг9д Уаї 225 230 235 240
І1е ТБПг ТБг бек ТПг Агуд ТпПгс Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг Авп Авп Нів 245 250 255
Тец Тук Гпув біп Іїе Бек бек Хаа Бек Хаа сіу Хаа ТБПг Авп Авр Авп 260 265 270
Зо Нів Тук Рпе с1іу Тук Бек ТПг Рго Тер с1у Тук Рібе Авр Роре Авп Агд 275 280 285
Рпе Нів Сув Нів РПе бек Рго Агд АБр Тгр біп Агд Гей Іїе Авп Авп 290 295 300
З5
АвпоТер с1у Робе Агд Рго Гув Агд Тец АБп Рпе Ппув Гей Рпе Авп І1е 305 310 315 320 біп Маії гув бі Уаі ТпПг Тпг Авп Авр сбіу Уа1 ТПг ТБбг І1ї1е Аї1а Авп 325 330 335
Авп о Гей ТПг бек ТПг Уаії біп Уаії Рре бек Авр бек бій Тук сіп ГІец 340 345 350
Рго Тук Уа1! Гей с1у Бек Аїа Нів сіп сбіу Сув Гей Рго Рго Робе Рго 355 3З6о 365
Аза Авр Уаї РіПе Месє І1е Рго біп Тук бі1у Тук Гей ТПг Гей АвБп Авп 370 375 380 бі1у бек біп Аза Уаі1і с1іу Акуд Бек Бек Рпе Тук Сув Гец біц Тук РБПе 385 390 395 400
Ркго Бек біп Меє Іец Агуд ТПг о біу Авп АвБп Рпе ТПг Рпе бек Тук ТЕПг 405 410 415
Рпе біц Авр Уаі! Ркго Рпе Нів бек бек Тук Аїа Нів Бек біп бек ГІец 420 425 430 бо Авр Агуд Гей Меє АБп о Рго Гей Іїе Авр сіп Туг Гей Тук Тукг ГІеий Хаа 435 440 445
Акуд Тк біп бек ТПг біу б1у ТБг Аза сб1у Хаа Хаа сій Гей Гей Ре 450 455 460 зек біп Хаа біу Рго Хаа Хаа Меє бек Хаа сіп Аїа Пув Авп о Тгр Гей 465 470 475 480
Рко с1іу Рго Сув Туг Агуд біп біп Агкуд Уаї бек Ппув ТПг Гей Хаа сіп 485 490 495
Авп о Авп о Авп обег АвБп о Рпе Азїа Тер ТПг с1у Аїа ТПг Ппув Тук Нів Іей 500 505 510
Авп ос1іу Агуд Хаа бек Іец Маі Авп Рго біу Уаі А1ї1а Меє Аза ТПг Нів 515 520 525
Тув Авр Авр бій Хаа Агуд Рпе Рібе Рго бег бек біу Маії Іеп І1е РПе 530 535 540 с1у Ппув Хаа сбіу Аїа с1іу Хаа Авп Авп ТПг Хаа Гей Хаа Авп Уаї Меє 545 550 555 560
Хаа ТПг Хаа бій бій сій І1їе Ппув ТПг ТБг Авп Рго Уаі Азї1а ТПпг сі 565 570 575
Хаа Тук бі1у УМаії Уаії Аїа Хаа Авп їецй біп бек Бек Авп ТПг Аза Рго 580 585 590
Хаа ТПг б1у Хаа Маі Авп бек біп сіу Аїа Гей Рго сіу Меє Уа1 Тгр
Зо 595 6боо 605 біп АвБп Агуд Авр оУа1ї Тук Гей сіп с1іу Рго Іїе Тер Аїа пуб І1е Рго 610 615 620
Нів ТПг Авр о б1іу АвБп о Ррпе Нів Рго бек Рго Іїей Мес сіу с1у Рбе с1Уу 625 630 635 640 теп Ггув Нів Рго Рго Рго біп Іїе Гей Іїе Пув Авп о ТПг Рго Уаі1ї! Рго 645 650 655
Аза Авп о Рго Рго Хаа Хаа Рпе Хаа Хаа Аї1а Гув Рпе Аїа Бек Рпе І1е 6бво 665 670
ТПЕ біп Тук Бек ТПг біу біп Уа1! бек Уаі сіц І1е б1цп Тер сі Гей 675 68 685 біп гув бій Авп бек Ппув Агуд Тер АБп Рго бій Іїе сіп Тук ТіПг 5ег 690 695 700
Авп оТук Аїа Туз бек Хаа Авп Уаі Авр Рпе Аїа Уа! Хаа Хаа Хаа с1Уу 705 710 715 720
Уаї Тук Хаа бій Рго Агуд Рго Іїе сіу ТБг Агд Туг Тец ТПг Агд АвБп 725 730 735
Течцч «2105 59 60 «2115 737 «212» білок
«2135 Штучна послідовність «223» Предковий варіант капсиду «4005 59
Меє Аза Аїа Авр сіу Тук Гец Рго Авр Тер Гец біц Авр АБп Іец 5ег 1 5 10 15 бі б1у І1е Агуд бій Тер Тер Авр Гей пув Рго сіу Аза Рго Гув Рго 20 25 30 пуб Аз1а АБп осбіп біп пув біп Авр Авр б1у Акуд сіу Гец Уаї Іецй Рго 35 40 45 сб1у Тук Ппув Тук Гей с1у Рго Рпе Авп сіу Гей Авр Гув С1у бій Ркго 50 55 бо
Уа1ї АБп Аза Аза Авр Аїа Аз1а Аза Геш сій Нів Авр Гуз Аїа Тук Авр 65 70 75 80 біп бі1іп Гей Ппув Аїа с1у Авр АвБп Рго Тук Гей Агуд Туг Авп Нів А1а 85 90 95
Авр Аза сій Рре біп б1іц Агд Гец біп б1іцп Авр ТПпг бБеє Рпе с1у ШУ 100 105 110
Ап о Гей с1у Агд Аїа Уаі Рпе сіп Аїа Гув Гув Агуд Уаі Гей бій Рго
Зо 115 120 125
Тец б1у Гей Уаі сбіш біш сіу Аза Ппув ТПг АТа Рго сіу Ппув Гув Агд 130 135 140
Рго Уаі бій Рго бек Рго біп Агуд бек Рго Авр бек бек ТПг с1у І1е 145 150 155 160 с1у гув Ппув с1іу біп біп Рго Аїа Ппув Ппув Агд Гей Авп Рое сіу сіп 165 170 175
ТпПкЕ б1у Авр Бек біц бек Уаі Рго Авр Рго біп Рго Іец С1у сій Рго 180 185 190
Рго Аїа біу Ркго бек бі1у Гей сіу бек біу ТПг Меє Аза Аза с1у ШУ 195 200 205 б1у А1ї1а Рго Меє Аза Авр Ап АБп бі сб1у Аза Авр сіу Уаї С1Уу Авп 210 215 220
А1а бек с01у Авп Тгр Нів Сув Авр бек ТПг Тер Геп с1у Авр Аг Уаї 225 230 235 240
І1е ТБПг ТБг бек ТПг Агуд ТпПгс Тгр Аза Гей Рго ТПг Туг Авп Авп Нів 245 250 255
Тецп Тук Гпув біп Іїе Бек бек Аза Бек Аїа сіу Бек ТБг АвБп АвБр АвБп 260 265 270
Нів Тук Рпе сіу Тук бек ТПг Рго Тер біу Тук Роре Авр Рпе Авп Аг4д 60 275 280 285
Рпе Нів Сув Нів РПе бек Рго Агд АБр Тгр біп Агд Гей Іїе Авп Авп 290 295 300
АвпоТер сб1у Робе Агд Рго Гув Агд Тец АвБп Рпе Гпув Гей Рпе Авп І1е 305 310 315 320 біп Маії гув бі Уаі ТпПг Тпг Авп Авр сбіу Уа1 ТПг ТБбг І1ї1е Аї1а Авп 325 330 335
Авп оГечпй ТПг о бек ТПг Уаії сіп Маії Рпе бек Авр бек бій Тук сіп Гей 340 345 350
Ркго Тук Уаї Іец бі1у бек Аїа Ні біп б1у Сув Гей Рго Рго Рое Рго 355 3З6о 365
Аза Авр Уаї РіПе Месє І1е Рго біп Тук біу Тук Гей ТПг Гец АвБп Авп 370 375 380 бі1у бек біп Аза Уаі1і с1іу Акуд Бек Бек Рпе Тук Сув Гец біц Тук РБПе 385 390 395 400
Ркго Бек біп Меє Іец Агуд ТПг о біу Авп АвБп Рпе ТПг Рібе бек Тук ТЕПг 405 410 415
Рпе сій Авр УМаї Рго Рре Нів бек бек Туг Аїа Нів бек сіп бек Іецй 420 425 430
Авр Агд Гей Меєс АвБп о Рго Іїецп І1е Авр біп Тук Гей Тукг Тукг Іецй А1а 435 440 445
Зо
Акуд Тк біп бек ТПг бі1іу б1у ТБг Аза б1у ТПпг Агуд бій Гей Гей Ре 450 455 460 зек біп Аїа біу Ркго Бек Авп Месє бек Аїа сбіп Аза пуб Авп Тгр Іей 465 470 475 480
Рко с1іу Рго Сув Туг Агуд біп біп Агкуд Уаї бек Ппув ТПг Гей бек сіп 485 490 495
Авп оАвп о Авп обег АБп о Рпе Аїа Тер ТПг сб1у Аїа ТПг Ппув Тук Нів Гей 500 505 510
Авп ос1іу Агуд Авр бБег Іец УМаі Авп Рго біу Уаі А1ї1а Меє Аза ТПг Нів 515 520 525
Тув Авр Авр бій Авр Агуд Рпе Рібе Рго бег бек біу Маії Іеп І1е РПе 530 535 540 с1у гув біп с1у Аїа с1іу Аза Авп Авп ТПг Аїа Гей сбіц Авп Уа! Меє 545 550 555 560
Меє ТпПг Бек біш бій сій Іїе Ппув ТБПг ТБг Авп Рго Уаі Азї1а ТПпг сі 565 570 575 сіп Тук б1у Маії Уаії Аїа бек Авп Гей сбіп бек бек АвБп ТПг Аза Рго 580 585 590
Уаї ТпПг с1у ТпПкЕ Уаі1і Авп бек біп сіу Аїа Гец Рго біу Меє Уа1ї Тгр 595 бо 605 60 біп АвБп Агуд Авр оУа1ї Тук Гей сіп с1іу Рго Іїе Тер Аїа пуб І1е Рго
610 615 620
Нів ТпПг Авр о сбіу Авп о Робе Нів Рго бек Рго Іїейп Меє сіу с1у РпПе С1У 625 630 635 640 теп Ггув Нів Рго Рго Рго біп Іїе Гей Іїе Пув Авп о ТПг Рго Уаі1ї! Рго 645 650 655
Аза Авп о Рго Рго Аїа Уаії Рпе ТПг Рго Аї1а Гув Рпе Аїа Бек Рпе І1е бо 6бе5 670
ТПЕ біп Тук Бек ТПг біу біп Уа1! бек Уаі сіц І1е б1цп Тер сі Гей 675 68 685 сіп пув бі Авп о бек Гув Агуд Тер АБоп Рго бій І1їе сбіп Туг ТПгЕ 5ег 690 695 700
АвпоТук Аїа пуб бек ТПг АБп о Уаі Авр Рпе А1ї1а Уаі АвБр АБп бі Щ1У 705 710 715 720
Уаї Тук Бек бій Рго Агуд Рго Іїе сіу ТБг Агд Туг Тец ТПг Агд АвБп 725 730 735
Течцч «2105 60 «2115 10 «212» білок «213» Штучна послідовність «2205 «223» Гетерологічна пептидна вставка «4005 60
І1е Аїа Нібв АвБр І1е ТПг Гув АБп І1е А1а 1 5 10 «2105 61 «2115 7 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гетерологічна пептидна вставка «4005 61
Авр чІ1е ТПг Туз АБп І1е Аїа 1 5 «2105 562 «2115 8 «2125» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Гетерологічна пептидна вставка 60 «4005 62
Авпопув ТБПг ТБг Авп о Тув АвБр Аїа 1 2 «2105 63 «2115 8 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Гетерологічна пептидна вставка «4005 63
Рго біп Аїа АБп Аза АвБп обі Авп 1 2 «2105 64 «2115 8 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Гетерологічна пептидна вставка «4005 64
Рго І1їе бек АБп о біц АБп сій Нів 1 2
Зо «2105 565 «2115 1377 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» оптимізована по кодонному складу послідовність, яка кодує афліберцепт «4005 65 агдчддеЕсеЕсее аседддасас суддсуєдасед сЕдеЕдеЕдесс ЄДСЕЕЕСЕеЕвУЧ єЕСЕУДСтЯСТд бо ассддсЕеЕста дсадсддсес єдаграссуддс адасссессуа гддаааєдра садсдадаєс 120 сссдачаєса сссасаєдас сддадддсада дадссддєсєса сЄсссесдсад адсдасаадс 180 сссаасаєса ссдсдасссс даадаадссс сссссддаса сассдаєсссс сддасддсаад 240 ачааєсаєсєЕ додасадссуд даадддсесєс аєсаєсадса асдссасста сааададаєс Зоо чдассЕдсЕда ссеЕдЕдаадс сассдєдаає ддссассеєдс асаадассаа ссассесдаса 3З6о сасадасада ссаасассає сассдасодєд дсдссдадсс ссадссасддд саєєсдаассд 420
ЕСЕЧдеддосоа адаадссдУчЕ дсеЕдаассдЕ ассоууссадаа ссдадссдаа счдєдддсаєсс 480 часеЕєсаасеЕ додадрассс садсадсаад сассадсаса адааасрдде саассдддас 5340 ссдаааассс ададсддсад сдадаєсдаад ааассссода дсасссодас саєссддасддас 60 бо
ЧдЕЧассадаа деЕдассаддд ссеЕдсасаса єдеЕдссдсса дсЕСЕддссе даєдассаад 6б6о ааааасадса ссЕЄсдєдсоа ддєдсасдад ааддасаада сссасасссд Єссессаєає 720 ссгдссссад аассдсссддд соддасссссс дсдеЕссссдсЕ сссссссааа дссгааддас 78о0 ассседаєда Єсадсадаас ссседаадед асседсдеЕда єдЧдеЕддаєде деЕсссасдад 840 чаєсссдаад ЄдаадеЕєсаа ЕєдЧдрасуєд дасоддсудєдуа аадесдсасаа сдссаадасс 900 аадсссадад аддаасадсра саасадсасс Сасададедд ЕдсссасдсЕ дассдєдссд 960 сассаддаєсс ддссдаасдд сааададсас аадсдсаадд Сдсссаасаа ддсссгдссе 1020 дсЕСсСсраєсу адаааассає сеЕссааддсс аадддссадс стадддаасс ссаддеЕєтас 1080 асасеєдссеЕс саадсаддда сдадсеєдаса аадаассадд ЄдДдЕСССсСЕДдас седсстоддЕсС 1140 аадддсЕєсеЕ асссссссда баєсдссуєд даасддддада дсааєддсса дссеЕдадаас 1200 аассасаада саассссеЕсс ЕдедсеЕддас адсдасудсе саєрссевсссо дегасадсаад 1260 сЕдасадедуд асаададсад аєддсадсад ддсаасдедЕ Есадсеєдсес сдЕдаєдсас 1320 чаддсссвєдс асаассасса сасссадаад ЕсссЕдадсс єдЕСЕССЄддд саааєда 1377 «2105 6566 «2115» 458 «212» білок «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» Афліберцепт «4005 66
З5
Ме Уаї Бек Тук Тер Авр ТПг сіу Уаї Іецйц Іїеп Сув Аїа Гей Гей 5ег 1 2 10 15
Сув ТГецп Гей Гей ТПг сіу Бек Бек Бек сіу Бек Авр ТПг С1у Агд Рго 40 20 25 30
Рпе Уаї сіц Меє Тук бек бій І1е Рго б1п І1ї1е І1е Нів Меє ТПг сіц 45 с1у Акуд біц Гецп Уаії І1їе Рго Сув Акгуд Уа! ТПг бек Рго АБп І1е Тіг
З бо
Уаї ТпПЕгЕ Гей Ппув Ппув Рпе Рго Гей Авр ТПг Гей Ії1е Рго АвБр б1Уу Гув 65 70 75 80 50
Акуд І1е І1е Тгср Авр бек Агуд пув біу Рпе І1е Іїе бБег Ап Аїа ТЕПг 85 90 95
Тук Ппув бій Іїе сіу Пец ІТецйп ТПг Сув біц Аїа ТПг Уаї АБп о1у Нів 100 105 110
Тецп Тук Гув ТПг Авп Тук Гей ТПг Нів Агуд біп ТБг Ап ТПг І1е І1е 115 120 125 бо Авр Уаї Уаї Іецй бек Рго бек Нів сіу І1е бій Гей бек Уаі с1у с1іц 130 135 140 ув ТГецп Уаї Гей Авп Сув ТПг Аза Агуд ТпПг бій Гей Авп Уаї сС1у І1е 145 150 155 160
Авр Рпе Ап Тгр бі Тук Рго бек бек Пув Нів сбіп Нів Ппув ТУув ТІецй 165 170 175
Уаї Авп Агуд Авр Гей пуб ТПг о біп бек сіу бек біц Меє Гув пув РПе 180 185 190
Тецп бек ТПг Гей ТПг Іїе Авр сіу Уаі ТПг Агуд бек Авр біп с1Уу Іей 195 200 205
Тук ТпПкг Сув Аза Аза бек бек сіу Гей Месє ТПг Гуз Гув АвБп бек ТПг 210 215 220
Рпе Уаї Агкд Уаі Ні бій пув Авр Гув ТПг Нів ТП Сув Рго Рго Сув 225 230 235 240
Рго Аїа Ркго бій Гей Гей сіу с1іу Ркго бек Уаї Рре Гей Робе Рго Рго 245 250 255
Тув Ркго Гпув Авр ТПг Ггеш Меє І1їе Бек Агуд ТПг Рго біц Уаї Тс Сув 260 265 270
Уаї Уаї Уаі Авр Уа1 бек Нів бій Авр Рго біц Уаії пув Рпе АвБп Тгр 275 280 285
Тук Уаі1 Авр сіу Уаії біц Уаії Нів Авп Аїа пуб ТПг Гув Рго Агд с1ци
Зо 290 295 300 бі біп Тук Авп о бБег ТПг Туг Агуд Уаії Уа1і Бек Уа1і Гей ТПг Уаї Іеєц 305 310 315 320
Нів біп Авр Тер тей АвБп о сіу Ппув бі Тук Пув Сув Пув Уаї бек Авп 325 330 335
Тпув Аза Гей Рго Аза Рго Іїе бій Ппув ТПг Іїе бек Гпув Аїа гув Щ1У 340 345 350 біп Рго Агд бій Рго біп Уа1 Тук ТПг Гей Рго Рго бБег Агд АБр бій 355 3З6о 365
Тецп ТпКг Гув Авп обіп Уа1! Бек Гей ТПг Сув Гец Уаії Гуз б1у Рпе Туг 370 375 380
Ркго бБекг Авр І1е Аї1а Уаії бій Тгр біц бек АБп с1іу біп Рго бій Авп 385 390 395 400
АвпоТук пув ТБг ТЕ Рго Рго УМаії Гей Авр Бек Авр с1іу бек Ріре РІе 405 410 415
Тецп Тук бек Ппув Гей ТПг Уаі1 Авр Ппув бБег Агд Тер сбіп біп с1у Авп 420 425 430
Уаї Рпе бек Сув Бек Уа1 Меєсє Нів біцш Аза їецп Нів Авп Нів Тук ТЕПг 435 440 445 біп Ггув бек Гей бек Гей бек Рго с1УуУ Гув 60 450 455
«2105 67 «2115 1575 «212» ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» оптимізована по кодонному складу послідовність, яка кодує одноланцюжковий важкий-легкий ранібізумаб «4005 67 аєддасеєдда ссеЕддеЕссає ссЕдЕсессвд дедодседссоя ссасаддсас асасесссдаа бо чЧЕдсадседда єддааєсьдуа соддсоуодасеє деЕссаасстд дсуддсеЕсеЕсСЕ дадаседадс 120
ЕдеЕдссодсссЄ седдсвасда сеЕЄсСасссас басоодсаєда ассдддєссу асаддссссе 180 чдасаааддсс єєЧааєддчє содаєддаєс аасасстраса ссддсдадсс аасагасдсс 240 чдссдасеєса адсододадаєє сассессадс седдасасса дсаададсас сдсесстассес Зоо 7 садаєдааса дсссдададс сдаддасасс дссдсдсасс ассдсдссаа дсаєсссстас 3З6о
Басрасддса ссадссасед дргасеЕсєсдас деЕдЕдодддас адддсасасе ддесасадчед 420
Есгадсдссс серасааадудд ссссадсусеЕ ЄсСсссасвудуд сеЕСсСстадсад саадесстасс 480
Ессддеєддаа садссусеЕсеЕ доддсеЕдеЕСсСвд деЕсааддасе асеЕсесссда дссрдедасс 5340
ЧЕДЕССЕєдда асадсоодадс асеєдасаадс доасадєсЄдсаса ссеЕссссадс сасдссдсаа 60 7 адсадсддсес ЕЄдрасеЕсьсе дадсадсудеєс деЕдасадедс саадсадсес ЕСЕдддсасс 6б6о садасссаса сСссдсаасудс даассасаад сссадсааса ссааддсдда саадааддед 720 чаасссаада дссдсдасаа дасасасссс ддсодаадсс седдаадсдд сЕСЄДЯваєссе 78о0 ассддсасаа дсЕСсадсдуд аасаддсаса адсодсєддса саассоддаас аадсасессе 840 асаєсєдасЕ сЕддЕєседоа содадасода ддаєсадаєа дсдасодаєс соассдадсаоада 900 о асадсвбасад сеЕддсдссЕсС ЕЕСЕЧддсадс дасаєессадс єдасасадад сссеЕєстадс 960 сЕдадсдссЕ седсддудсда сададедасс аєсасаєдса дсдссадсса ддасаєсесс 1020 аастассєда ассддбраєса дсадаадссс ддсааддсесс сеЕааддеєдсеє даєсссасеЕсе 1080 ассадсадсс бдсасессду судбдсссадс адасеЕсесьу даєсьддсесС суддсассдас 1140 бЕсасссеєда саагаєстад ссеЕссадссе даддасесєсу ссасссасва сеЕдссадсад 1200 7 басадсассд Єдсссгддас аєседдссад ддсасааадд єддаааєсаа дсодасадед 1260 дссдсЕсСсва дсдЕдЕеЕссає сЕсЕсСсасс адсдасддадс адсєдаадес сддсасадсс 1320
ЕсСЕдЕСУДЄдДЕ дссеЕдссдаа саасеєстас сссададаад ссааддедса дЕддааадед 1380 часаасдссс Ессадессудуд саасадссаа дадеЕсердеда ссдадсадда садсааддас 1440
Ессассвраса дссеЕдЕссад сасасєдаса седадсаадд ссдассасда даадсасааа 1500 7 чЧдЕдбасдссє дсдаадсдас ссассадддс сЕЕсссадсс сеЕдедассаа дадсеєсаас 1560 сддададсчадЕ дЕєДа 1575 «2105 68 «2115 524 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» одноланцюжковий важкий-легкий ранібізумаб «4005 68
Ме Авр Тгр ТПг Тер бБег Іїе Гец Рое Іец Уаі Аїа Аза Аза ТПг щ1У 1 2 10 15
ТПг Тук Бек біц Уаії біп їец Уа1! сій бек сбіу біу б1у Іеп Уаї сіп 20 Рго сіу біу бек Гей Агуд Гей бек Сув Аїа Аїа бек с1у Туг Авр РіПе
ТПЕ Нів Тук сіу Месє Авп Тр Уаі1 Агд біп Аза Рго б1у Гув с1У Іецй бо 25 бі Тер Уаї с1у Тер Іїе Ап ТПг Туг ТПг с1іу сій Рго ТПг Туг А1а 65 70 75 80
Аза Авр Рпе пув Агд Агуд Рпе ТПг РіПе бек Тецп Авр ТПг бБег Ппув бег
Зо 85 90 95
ТПгЕ АТїа Тук Гей біп Мес Авп бег Ггец Агуд Аї1а б1іцп Авр ТПг Аїа Уаї 100 105 110 35 Тук Тук Сув Аїа Пув Тук Рго Туг Тук Тук с1у ТПг бек Нів Тер Туг 115 120 125
Рпе Авр Уаії Ткгр б1у бі1іп сб1у ТБг Іец Уа! ТПг Уаії Бек Бек Аїа 5ег 130 135 140 40
ТПЕ Ппув с1іу Ркго бек Уаі РПе Рго Гей Аза Рго бек бек Гув бек ТПг 145 150 155 160 зек сіу біу ТПг Азїа Аза їей сіу Сув Гей Уаії Ппув Авр Тук Ропе Рго 45 165 170 175 біц Рко Уаії ТПг Уа1ї Бек Тер Авп бек сіу Аїа Гей ТПг бек сбі1у Уаї 180 185 190 50 Нів ТП Рпе Рго Аїа Уаї Гей сбіп бек бек с1у Гей Туг Бек Гец 5ег 195 200 205 зек Уаї Уаї ТіПг Уаї Ркго бек бек бек Гей с1у ТПг сбіп ТПг Тук І1е 210 215 220 55
Сув Авп оУаії Авп о Нів Ппув Рго Бек Авп о ТПг Ппув Уаії Авр пув Туз Уаї 225 230 235 240 біц Ркго Ппув Бек Сув Авр Пув ТПг Нів Гей сіу сіу бек бек біу бег 60 245 250 255 б1у бек бі1у Бек ТПг с1іу ТПг Бек Бек бек с1іу ТПг сіу ТПг бек А1а 260 265 270 бі1у Тпг ТпПг о сіу ТПг Бек Аїа бек ТПг Бек сіу бек сіу бек б1і1у с1У 275 280 285 сі1у б1у с1у Бек сіу сіу сіу сіу Бек Аїа сіу сіу ТБг Аза ТПг А1а 290 295 300 сі1у Аїа бек бек сіу бек Авр І1е біп Гей ТПг сіп бек Рго бек 5ег 305 310 315 320
Тецп бек Азїа бек Уаі с1у Авр Агкуд Уаі ТПг Іїе ТПг Сув бек Аїа б5ег 325 330 335 біп Авр І1е бек Авп Тук Гей Авп Тер Туг біп сбіп Пув Рго б1у Гув 340 345 350
А1а Ркго Ппув Уаї Іецп І1е Тук Рбе ТПг бек бек Гей Нів бек сіу Уаї 355 3З6о 365
Ркго Бек Агуд РіПе бек біу бек біу бек бі1у ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТЕГ 370 375 380
І1е бек бек Гей сбіп Рго сій Авр Рпе Аїа ТПг Тук Тук Сув біп сіп 385 390 395 400
Тук Бек ТПг Уа1 Рго Тер ТПг Рбе сіу біп сбі1у Тс Гув Уаі бій Те 405 410 415
Зо пуб Агуд ТПпг о Уаі Аза Аїа Рго Бек Уаі Рпе Іїе Рпбе Рго Рго б5ег Авр 420 425 430 бі біп Гей Ппув бек с1іу ТПг Аза бек Уа1і Уа1 Сув Гей Гей Авп Авп 435 440 445
Рпе Тукг Рго Агд біц Азїа Гуз Уаі біп Тер Гув Уаі Авр Ап Аїа Гей 450 455 460 сіп бек б1у Авп бек біп бій бек Уаї ТПгЕ бій сбіп Авр Бек Пув Авр 465 470 475 480 зек ТПг Тук бек ТІГецй бек бек ТПг Іец ТПг Гей бек Ппув Аїа Авр Туг 485 490 495 біш ув Нів Ппув Уаії Туг Аїа Сув сі Уаі ТіПг Ні біп с1у Гец 5ег 500 505 510 зек Рго Уаії ТПг Гув бек Рпе АБп Агд с1у сій Сув 515 520 «2105 659 «211» 1578 «212» ДНК «213» Штучна послідовність «220» «223» оптимізована по кодонному складу послідовність, яка кодує одноланцюжковий легкий-важкий ранібізумаб 60 «4005 69 аєддеЕссеєсс адасасаддеЕ деЕєЄсаєсадс сеЕдсЕдстЧдЕ ддаєсеЕсьдд сдсстасдадсес бо чаєсаєссадс Єдасасадад сссградсадс сЕдЕСЕдссЕ сЕдЕдддсда сададедасс 120 ассасаєдеа дсдссадсса ддасаєсадс аастассєда ассддеєаєса дсадаадссс 180 чдасааддссс страаддеєдсеЕ даєстасесеЕ ассадсадсс гбдсасадсудд сдедсссадс 240 ачдаєєвєєстьд дсЕСЕєддсад соддсассдас Єссасссєда саасаєссад ссессадссе Зоо 7 чадчдасеєсєсд ссасстрастра седссадсад басадсассуд ЕдссЕєддас арєгддссад 3З6о чдасассаадд Єддаааєсаа дсодасадесд дссоасЕссса дсаєсдеЕссає сеЕссссасесе 420 адсчасдадс адссдаадеЕс Сдодсасадсс ЄсСЕЧЕСЯвУЧЄ одссєдссдаа саассессас 480 сссададаад ссааддсдса дсддааддсд дасаасдссс сСссададсдуаа саасадссаа 5340 чачадсдєда ссдадсадда садсааддас єстасстасе сеЕСЕдадсад сасаседасс 60 7 седадсаадд ссдассасда даадсасааа дсдсасдссІ дсдаадсдас ссассаддас 6б6о сЕссссадсс ссдсдассаа дадссссаас ададдсдадсі деседдсддсад сЕСсСсддаадс 720 чдаєссддаа дсасаддсас аадссстадс ддаассдуддаа саадсудссду сасаасаддс 78о0 асаєсєдсса дсасаадсдд ЄЄСЕдЯЯєссСЕ доадсодадасоя дадчаєссда соаддсдадсаоада 840
ЕсЕдседодсоу даасадссас адсєддеЕдсс ЄсСЕсєсеоддає ссдададєдса адседассдаа 900 7 ЕсЕдодсоодед даседдеЕсєса дссаддсудда єсСЕСЕЧдадас єдДдЕСЕрЧдЕдс содссадсодес 960 басдаєесєса сссасрасду саєдаасвдд деЕссдасадд ссссеєддсаа аддссеЕєсдаа 1020
ЕддЧдЕєсддає ддаєссаасас стасассудс дадссаасасє асдссодссда сеЕєсаадсдд 1080 ачдаєеєсассеє сСсадсссдда сассеєссаад адсассуссе ассеєссадає даасадссед 1140 ачадссдадд асассдссує драсраседс дссаадраєс сстастраста сддсассадс 1200 о сасеєддбасеЕ Есдасдєдед доддасадддс асассддеса садедЕеЕСтад сдссеЕСтаса 1260 аадддсссса дсдЕсЕсссс асеЕддсессеЕ адсадсаада дсасаєсадд соддаасеєдсь 1320 дсссеЕдддсЕ дЕСЕдДоЯєЄсаа ддасстасеЕсе сседадссвд єдассдєдЕсС сеЕддаасадсес 1380 чдадсасєда саєссддсдЕ дсасассесЕ ссадссуєбудс сссааадсад соддссеЕдтає 1440
ЕсЕСЕдЕССа дсдЕСсСуєЄдас адедсссадс адсссссвдуда дсасссадас стасаєсьдс 1500 7 ааєдеЕдаасс асаадсстрад саасассаад деЕсдасаада аддеддаасс саададседс 1560 часаадассс ассеЕсвда 1578 «2105 70 «211» 1578 «212» ДНК «2135 Штучна послідовність 60 «2205
«223» оптимізований по кодонному складу одноланцюжковий легкий-важкий ранібізумаб «4005 70 асдодєдсеЕсс адасссадчає дЕЄСаєтєєсса ссдсеєдсвЯаєЄ одчаєстадсод доасссасода бо часаєєсадс єдасссадад ЕЄссеЕєсаєсе седадсудссе ссуєдддсда садддедасс 120 аєсасаєдсеЕ седссадсса ддагаєсеєсс аастаєсьєда аєгсддрасса дсадаадссс 180 7 чдасааддсесс стааддеєдсеЕ даєставреєеєс ассадсессс гбдсасадсудд адердссаєсс 240 сЯясЕсссссда дссссддсад сддсассдас сссасссода саассссстад сссссадсса Зоо чадчассєсєсду ссасаєаста СеЕдссадсад Сасадсассуд гдссседдас агеєсддссад 3З6о чдасассаадд єддадаєсаа дсодасадесд дссдссссаа дсоасдеЕссає сЕсссссссе 420 адсдасдадс адсеєдаадес Єддсассдсс адсасдаєсєдас дсседссдаа саасєсстає 480 7 сссадададд ссааддсдса дсддааддсд дасаасдссс сСссадесссдуаа сааєєсєсссад 5340 чачадсдєда ссдадсадда сеЕссааддає єссасасаса дссеЕдеЕссЕсС сСасссеєдаса 60 сеЕдсссаадудд ссдассаєда даадсасаад деЕдсасосає дсдаддедас ссассаддоас 6б6о седадссссс садсдасааа дадссссаас аддддададі дсддаддаєс гсадсддаєссс 720 чдчдаєсеєддаа дсассддсас аєссеЕстадс ддаассуддса саадсдссда сассасаддс 78о0 7 ассЕссдссЕ сгасаадсдд садсоаодаєсє доадсоаодаддач дадчдаєссод аддаддвавдвва 840
ЕсеЕдссуддсу дсассдссас адссуддсудсес єссеЕСЕддсЕ ссдаддеєдса дседдеддвад 900
ЕСсЕодадчдад дсссдоасдса дсссддаддс Єсссеєдаддс ЕДдЕссСЕєдсоос; адсаадсдаддс 960 баєдаєесса сссастрасудуч ааєдаасьдуд дедсдссадд сассеЕддсаа доддссеЕддад 1020 бдоаддЕдддсЕ ддаєсааврас сраєасаддс дадссаасся асдссдссда сЕсСгаадсдад 1080 о ачаєєсасає сєеЕсссссудда бассадсаад Сссасадссе ассеЕссадає даасадссетд 1140 адддсададд асассудссудє деасвтаєсудс дссаадваєс сеЕсасвтаєса сддсасаадс 1200 сасєддсасеЕ ЕсдасудєдеЕд ддоддасадддс ассседдеєда садсдадсес сдссадсасс 1260 аадддсссає ссдЕдЕсЕсс ЕсСЕддсссса Сссадсааді сеассадсдд аддаасадсс 1320 дсссеЕдддає дЕСЕддесдаа ддастасесес ссададсссу ЕдассуєдеЕс седдааєєссяе 1380 7 часдсссеєда ссессудсдє дсасасавєее сссдеосдбдс Ессадессєс Еддссеєдеає 1440 адссєеєдадсеЕ ссдеЕддеєдас судєдссеЕссе адсесссвду дсасссадас асбасаєседе 1500 аасдєдааєс асаадссеєсс ааасассааа дЕСсдаєаааа аадеддаасс ааааєссвде 1560 чаєаааассс аєсеЕдеда 1578 «2105 71 60 «2115 525 «212» білок
«2135 Штучна послідовність «223» одноланцюжковий легкий-важкий ранібізумаб «4005 71
Меє Уаї гейш біп ТПг сіп Уаі Рпе Іїе бек Ггец Іец Іецй Тгр І1е 5ег 1 5 10 15 сб1у А1ї1а Тук с1у Авр Іїе біп Гей ТПг біп бек Рго бек бек Іец б5ег 20 25 30
Аза бек Уаї сбі1у Авр Акуд Уаі ТПг І1е ТПпг Сув Бек Аза Бек біп Авр 35 40 45
ІТ1е Бек Авп Туг Тец АвБп Тгр Тук біп біп Гпув Рго с1у Ппув Аїа Рго 50 55 бо пув Маї Гецп Іїе Тук Рібе ТПг бек бек Гец Нів бек сіу Уаї Рго 5ег 65 70 75 80
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 85 90 95 зек Гец біп Рго б1іц Авр Рпе Аїа ТПг Туг Тук Сув біп біп Тук б5ег 100 105 110
ТПЕ Уа1 Рго Тер ТПг Рре сіу сіп сіу ТБПг пув Уаі б1іцп І1е Гув Агд
Зо 115 120 125
ТпПг Уаі1 Аза Аза Рго бек Уаі! Рпе І1їе Рібе Рго Рго б5ег АБр бій сіп 130 135 140
Тем Ппув бек б1іу ТПг Аїа бек Уа1ї Уаї Сув Гецп Гей Авп Авп Роре Туг 145 150 155 160
Рго Агд біц Аза Гуз УМаї біп Тер Гуз Маії Авр АвБп Аїа Гей сіп б5ег 165 170 175 б1у АвБп бек біп бі Бек Уа1 ТПпг бі біп Авр бек Пув Авр бек ТЕГ 180 185 190
Тук Бек Гей бек бек ТПг Іец ТПг Ггец бег їув Аза Авр Тук сій Гув 195 200 205
Нів Ппув Уа1 Туг Аїа Сув біц Уа1! ТБг Нів біп б1у ІТецй бек бек Рго 210 215 220
Уа1ї1 ТпЕ Ппув Бек Рбе АвБп Агуд біу сбіц Сув сіу біу бек бек біу бег 225 230 235 240 б1у бек бі1у Бек ТПг с1іу ТПг Бек Бек бек с1іу ТПг сіу ТПг бек А1а 245 250 255 бі1у ТПг ТпПг о сіу ТПг Бек Аїа Бек ТПг бек сіу бек сіу Бек б01у щу 260 265 270 сі1у б1у с1у Бек сіу сіу сіу сіу Бек Аїа сіу сіу ТБг Аза ТПг А1а 60 275 280 285 б1у А1а бек бек сіу Бек біц Уаі сбіп Гей Уаі бій бек 01у с1у щу 290 295 300
Тец Маї біп Рго сіу сіу Бек Гей Агуд Гей бек Сув Аїа Аїа бег 01Уу 305 310 315 320
Тук Авр Рпе ТПг Нів Тук біу Месє Авп Тгр Уаі Агуд сіп Аза Рго с1Уу 325 330 335 пув б1у Геп біц Тер Уа1і! сіу Ткгр І1е АБп ТПг Туг ТБг с1у бій Рго 340 345 350
ТпПг Тук Аза Аза Авр Робе Губ5 Агуд Агуд Рпе ТПг Рпе б5ег Гей Авр ТЕГ 355 360 365 зек Ппув бек ТПг Аза Тук Гей біп Меє АвБп бек Гей Агуд Аїа бій Авр 370 375 380
ТПг АТїа Уа1 Тук Тук Сув Аїа Гув Тук Рго Тукг Тук Тук с1і1у ТіПг 5ег 385 390 395 400
Нів Тер Тук Ріпе Авр Уаії Тгр сіу сіп сбіу ТБПг Іец Уа! ТПг Уаї 5ег 405 410 415 зек Аїа бек ТПг Ппув с1у Ркго бек Уаї Рре Рго Гей Аза Рго бек 5ег 420 425 430
Ппув бек ТПг бек сіу с1і1у ТПг Аза Аїа Ге сіу Сув Гец Уаї Гув Авр 435 440 445
Зо
Тук Рпе Рго сій Рго Уаії ТПг Уаї бек Тгр АвБп бек б1у Аї1а Ге ТПг 450 455 460 зек сіу Уаії Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаії Іецй біп бек Бек с1у Гей Туг 465 470 475 480 зек Гей бек бек Уаі! Уаї ТПг Уаії Ркго бек бек бек Ге с1у ТПкгЕ сіп 485 490 495
ТПЕ Тук Іїе Сув Авп о Уаі Авп о Нів пуб Рго бек Авп о ТПг пуб Уаї Авр 500 505 510
Туз Кпув Маї бій Рго Ппув Бек Сув Авр Пув ТПг Нів Іец 515 520 525 «2105 72 «2115 2277 «212» ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» послідовність, яка кодує одноланцюжковий легкий-важкий ранібізумаб-
ЕС
«4005 72 аєддеЕссеєсс адасасаддеє деЕЄсаєссадс ссдссдссдс ддаєссєссдда сдсстгасддас бо чаєаєссадс Єдасасадад сссрадсадс ссдсссдссо седсдддсда сададесдасс 120 бо ассасаєдеа дсдссадсса ддасаєсадс аассасссда аседдсаєса дсадаадссс 180 чдасааддссс страаддеєдсеЕ даєстасесеЕ ассадсадсс гбдсасадсудд сдедсссадс 240 ачдаєєвєєстьд дсеЕСЕєддсад соддсассдас сссасссода саасаєссад сссссадссєо Зоо чадчасеєссдуд ссасстраста седссадсад Сасадсассу Єдссесоддас аєсєддссад 3З6о чдасассаадд Єддаааєсаа дсодасадсд дссдссссгта дсоасдеЕссає сессссасесе 420 адсдасдадс адсеєдаадес Єддсасадсес СсдссЯасЯаєсє дсссдссдаа саасесстас 480 7 сссададаад ссааддсдса дсддааддсд дасаасдсессс сссададсдда саагсадссаа 5340 чачадсдєда ссдадсадда садсааддас Сссассстасс ссссдадсад сасасесдасс 60 сЕдадсаадудд ссдассасдуда даадсасааа дЕдсасдссЕ дсддаадедас ссассадддс 6б6о сЕссссадсс ссдсдассаа дадссссаас ададдсдадеі деЕддсддсад сЕСЕддаадс 720 ччдаєсєддаа дсасаддсас аадсеєссадс ддаассддаа саадсдссдд сасаасаддс 78о0 7 асаєсєдсса дсасаадсдд ЄЄСЕдЯЯєссСЕ доадсодадасоя дадчаєссда соаддсдадсаоада 840
ЕсЕдседодсу даасадстас адсеєддсдсс ссеЕсссодає ссдаддесдса дссддссдаа 900
ЕСсЕоддсоддеЕд дассдудєсса дссаддсдда СсЕССсСдадас сдДдЕСЕЄСсдЕдсС содссадсодос 960 басдаєесєса сссасврасду саєдаассдуд дЕСсСсдасадуд ссссеєддсаа аддссеЕєсдаа 1020
ЕдоддЕсоодає ддаєсаасас срасассддс дадссаасає асдссдссда сеЕссаадсдад 1080 7 ачдаєеєсассеє Єсадсссудда сассессаад адсассдссеЕ ассеЕссадає даасадссетд 1140 ачадссдадд асассдссуає дсассассдс дссаадсаєс сссрасстасса сддсассадс 1200 сасєддсасеЕ ЕсдасудєдеЕд дддасадддс асасєддеса садсдсссад сдссеЕстваса 1260 аадддсссса дсдЕсЕсссс асеЕддсьссої адсадсаада дсасаєсадд сддааседсе 1320 дсссЕдддсЕ дЕСЕдудєЄсаа ддастасеЕвс сссдадссвд ЕдассуєдеЕс ссддаасадес 1380 о чдадсасєда саєссддсдЕ дсасассеес ссадссуєбудс Єссааадсад соддссеЕдтає 1440
ЄсеЕСсСЕдЕССсСа дсдЕСсСууЄдас адеЕдссвтадс адсеЕсьстду дсасссадас ссасаєсвдс 1500 ааєдеєдаасс асаадсссад саасассаад дЕсдасаада аддеддаасс саададсесдс 1560 часаадассс асассеЕдеЕсс Ессаєдесся дсеєссадаас СдсЕСЧддсда ассеЕєссс9авд 1620 гЄЕССЕДЕЕЕсС сЕССааадсесс гааддасасс сеЕдаєдаєса дсадаасссс Едаадесдасс 1680 7 бдсчдєдааєда Єддаєдсдесєс ссасдаддає сссудаадеда адеєсааєсд дсасуєддас 1740 часЧдєддаад Єдсасаасудс саадассаад ссгсадададд аасадсасаа СбСадсасстас 1800 ачадеддєдЕ ссдеЕдссдас судЕдсєдсас саддаєсддс Єдаасддсаа ададгсасаад 1860 бдсааддЕдЕ ссаасааддс ссеЕдссЕдсе сссаєссдада ааассаєссс сааддссаад 1920 чдассадсста додаасссса ддЕссасаса ссдсссссаа дсадддасда дсеєдасааад 1980 7 аассаддеЕдЕ сссеЕдассвд ссеЕддесаад додсЕсссасс сеЕсссдаває содссдЕддаа 2040
Едодададса аєддссадсс Єдадаасаас Сбасаадасаа ссссосссдс дседдасадс 2100 часддсеЕсає сєсеЕЕсссудса садсаадсьд асадсддаса ададсадаєд дсадсадддас 2160 аасдєдЕеЕєса дседсЕсСсдє даєдсасдад дссссдсаса ассасврасас ссадаадесс 2220 сЕдадсседЕ сеЕссЕддсаа аєдадссасу сдеЕаасасує дсаєдсдада даєсєда 2277 «2105 73 «2115 752 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» одноланцюжковий легкий-важкий ранібізумаб, злитий з Ес «4005 73
Меє Уаї Геп сбіп ТбПг біп Уаї Рбе Іїе бек Іецй Гей Гей Тер І1е 5ег 1 5 10 15 сб1у А1ї1а Тук с1у Авр Іїе біп Гей ТПг біп бек Рго бек бек Іец б5ег 20 25 30
Аза бек Уаї сбі1у Авр Акуд Уаі! ТПг Іїе ТПг Сув бБег Аїа бек біп Авр
ІТ1е Бек Авп Туг Тец АвБп Тгр Тук біп біп Гпув Рго с1у Ппув Аїа Рго
Зо 50 З бо їпув Маї Іїеп Іїе Тук Рпе ТПг бек бек Ггец Нів бек біу Уаї Рго 5ег 65 70 75 80 35 Агуд Рпе бек біу бек сіу бек б1іу ТПг Авр Робе ТПг Гей ТПг І1е 5ег 85 90 95 зек Гец біп Рго б1іц Авр Рпе Аза ТПг Туг Тук Сув біп біп Тук б5ег 100 105 110 40
ТПЕ Уа1 Рго Тер ТПг Рре сіу сіп сіу ТБПг пув Уаі б1іцп І1е Гув Агд 115 120 125
ТпПг Уаі1 Аза Аза Рго бек Уаі! Рпе І1ї1е Рібе Рго Рго б5ег АБр бій сіп 45 130 135 140
Тецп Кпув бек сіу ТПг Аїа бек Уаі Уаї Сув Гей Гей Авп Авп Рое Туг 145 150 155 160
Рго Акад біц Аїа Ппуз Уаї сіп Тер пув Уа1і! Авр АБп Аїа Гей біп 5ег 165 170 175 б1у АвБп бек біп бі Бек Уа1 ТПпг бі біп Авр бек Пув Авр бек ТЕГ 180 185 190
Тук Бек Гей бек бек ТПг Іец ТПг Ггец бек їув Аза Авр Тук сій Гув 195 200 205
Нів Ппув Уа1 Туг Аїа Сув біц Уа1! ТБг Нів біп б1у ІТецй бек бек Рго бо 210 215 220
Уаї ТПпгЕ Ппув Бек Рпе Авп Агуд сіу бій Сув біу біу бек бек біу бег 225 230 235 240 б1у бек бі1у Бек ТПг с1іу ТПг Бек Бек бек с1іу ТПг сіу ТПг бек А1а 245 250 255 бі1у Тпг ТпПг о сіу ТПг Бек Аїа бек ТПг Бек сіу бек сіу бек б1і1у с1У 260 265 270 сіу біу сб1у Бек сіу с1і1у сбіу сіу бек Аї1а сіу с1у ТБг Аза ТПг Аїа 275 280 285 б1у А1їа бек бек сіу Бек біц Уаі сіп Геш Уаі сій бек сіу с1у 01У 290 295 300
Тец Маї біп Рго сіу сіу Бек Гей Агуд Гей бек Сув Аїа Аїа бег 01Уу 305 310 315 320
Тук Авр Рпе ТПг Нів Тук бі1у Месє Авп Тгр Уаі Агд сіп Аза Рго Щ1У 325 330 335 їпув б1у Гей сій Тер Уа1 с1у ТЕр І1їе Ап ТПг Туг ТПг с1у бій Ркго 340 345 350
ТПг Тук Аза Аїа Авр Рпе Ппубз Агуд Агд Рпе ТПг Рібе бБег Гей Авр ТЕГ 355 3З6о 365 зек Ппув бек ТПг Аза Тук Гей біп Меє АвБп бек Гей Агуд Аїа бій Авр 370 375 380
Зо
ТПгЕ АТїа Уа1 Тук Тук Сув Аза Ппув Тук Рго Туг Тук Тук б1у ТПг 5ег 385 390 395 400
Нів Тер Тук Ріпе Авр Уаії Тгр сіу сіп сбіу ТБПг Іец Уа! ТПг Уаї 5ег
З5 405 410 415 зек Аїа бек ТПг пув б1у Рго бек Уа! Рпе Рго Гей Аза Рго Бек 5ег 420 425 430 пув бек ТПг бек с1іу б1у ТБг Аза Аза Геш сіу Сув Тем Уаї Ппув Авр 435 440 445
Тук Рпе Рго сій Рго Уаії ТПг Уа1 бек Тгр АвБп бек б1у Аї1а Ге ТПг 450 455 460 зек сіу Уаії Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаії Іецй біп бек Бек с1у Гей Туг 465 470 475 480 зек Гей бек бек Уаі! Уаї ТПг Уаії Ркго бек бек бек Ге с1у ТПкгЕ сіп 485 490 495
ТПЕ Тук Іїе Сув Авп Уаі Авп о Нів пуб Рго Бек Авп о ТПг Гув Уаі1ї Авр 500 505 510 пув Ппув Маї біц Ркго Пув бек Сув Авр пуб ТПг Нів Гей Авр Гпув ТіПг 515 520 525
Нів ТпПкг Сув Рго Рго Суб Рго Аїа Рго біц Іецй Гей сіу с1у Рго 5ег 530 535 540 60
Уаї Рпе Гей Рпе Рго Рго пуб Рго Пув Авр ТПг Гец Меє І1е б5ег Аг4д
545 550 555 560
ТПЕ Рго бій Уа1! ТБПг Сув Уаії Уа1 Уаї Авр Уаї бек Ні бій Авр Рго 565 570 575 бі Маї Гпув Рпе Авп Тер Туг Уаі Авр сіу Уа1 сій Уаї Нібв АБп А1а 580 585 590
Тпув ТПЕ Гув Рго Агуд бі бій біп Туг Авп бек ТПг Туг Агуд Уа1ї Уаї 595 6боо 605 зек Уаї Пец ТПг Уаї Іейп Нів біп Авр Тгр Гей АвБп с1у Ппув бій Туг 610 615 620 пув Сув Ппув Маії бек Авп Гув Аза тей Рго Аза Рго І1е сбіц Ппув ТЕГ 625 630 635 640
ІТ1е бек пув Аїа Гув б1у біп Рго Акд бій Рго сіп Уа1і Тук ТПг ГІєец 645 650 655
Ркго Рго Бест Агд Авр біцп Гей ТПг Гув Ап о біп Уаї бек Іец Тс Сув бо 6бе5 670
Тецп Маї Гпув сіу Рпе Тук Рго Бек Авр Іїе Аїа Уаі1і сій Тгр сіц 5ег 675 680 685
Авп осіу біп Рго біц Авп о Авп о Туг Ппув ТПг Тпг Рго Рго Уаї Іецй Авр 690 695 700
Зо зек Авр сіу бек Рпе Ррпе Гей Тук бек ГУув Гей ТПг Уаї Авр Гув 5ег 705 710 715 720
Акуд Тер біп біп б1у Авп Уа! Рпе бек Сув Бек Уа1 Меєс Нібв сіц А1а 725 730 735
З5
Тец Нів Авп Нів Туг ТпПг біп Ппув Бек Гей бек Гей бек Рго б1у Гув 740 745 750 «2105 174 «2115» 816 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» оптимізована по кодонному складу послідовність, яка кодує бролуцизумаб «4005 чЛ174 аєддеЕссеєсс адасасаддеЕ деЕєЄсаєсадс сеЕдсЕдствЧЕ ддаєсеЕсьда сдсстаєддас бо чачаєсдеєда єЄдасасадад ссссадсаса сеЕдЕСЕдсса дсдєдодоадада сададедаєс 120 аєсасаєдсс аддссадсда даєсаєссас адсеєдоадссда сеЕсддсаєса дсадаадссяє 180 чдасааддссс сеаадссдсеЕ даєссасссд дссеЕСсСсСасас гддссадсоод адеЕдсстадс 240 ачдаєєєєсть дсЕСЕЧДдаєс єддсодссдад Єссасссєда сааєсєсстад ссессадссе Зоо часчдасеєєсєсда ссасстрасвра седссадаас деЕдсасссдд ссадсассаа соадсдассаає 3З6о 60 бєєдодссада дсассаадсе дасадедсесє доадсодадасая дададсєсєссда соддсоадаввча 420 адеЕддсддсоа даддаєсада соаодеєдоаєодда Єсеєдаадесдс адсеєдасоада ассадасоадва 480 чдчдасеЕддеЕєс аасседдсудд сЕСЕСЕєЧдада седадседра ссуссестуда сеЕссессстд 5340 ассдастрасеЕ асграсаєдас седддЕсСсда саддсссстд дсаааддасе єдадедодеЕс 60 чддаєєсаєсу ассссдасда счдаєссевас гасдссасає дддссааддд садаєєссасс 6б6о ассадссддуд асаасадсаа даасасссод бассєссада Єдаасадссе дададссдад 720 часассдссд ЕЄдрастаєєд єдссоддсудда даєсасааса дсоддседдда асесдатасс 78о0 бддддссадд даасассддЕеЕ сассдєдеЕСсСь адеЕєсда 816 «2105 75 «2115 271 «212» білок «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Бролуцизумаб «4005 75
Меє Уаї гейш біп ТПг сіп Уаі Рпе Іїе бек Ггец Іец Іецй Тгр І1е 5ег 1 2 10 15 сб1у А1ї1а Тук сіу бій Іїе Уа1 Меє ТПг сіп бек Рго бек ТПг Іец 5ег
Зо 20 25 30
Аза бек Уаї сбі1у Авр Акуд Уаі І1е І1е ТПпг Сув біп Аїа Бек бій Те 35 І1їе Нів бек Тгр Геш Аза Тер Тук сіп біп Гув Рго с1у Пув Аза Рго
З бо
Тїув Тецп Гей Іїе Туг гейш Аїа Бек ТПг Гей Аїа бек сіу Уаї Рго 5ег 65 70 75 80 40
Акуд Рпе бек біу бек біу бек біу Аїа бій Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе 5ег 85 90 95 зек Гей біп Рго Авр Авр Рпе Аїа ТПг Тук Тук Сув біп Авп Уа1 Туг 45 100 105 110
Тец Аза бек ТПг Авп сб1іу Аза АвБп Рпе сіу біп сіу ТБкг Ппув Гей ТЕПг 115 120 125 50 Уаї теп сі1у сіу с1у сіу сб1у бек сбі1у сіу сі1у с1у бек б1у 1у щу 130 135 140 сбі1у бек б1у сіу сіу сіу Бек бій Уаі сбіп Геш Уаі1 сій бек с1у 1У 145 150 155 160 сб1у Гей УМаії сіп Рго сіу сіу Бек Гей Агуд Гей бек Сув ТПг Аїа б5ег 165 170 175 б1у Рпе бек Гей ТПг Авр Туг Туг Тук Меє ТПг Тер Уаї Агд сСіп А1а 60 180 185 190
Ркго сіу Ппув бі1у Те бій Тер Уаії сб1у Рпе І1ї1е Авр Рго Авр Авр Авр 195 200 205
Ркго Тук Туг Аїа ТПг Тгр Аї1а Гув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе 5Бег Агд Авр 210 215 220
АвпобБек Гпув Авп оТПг Тец Тук Гец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа с1іц 225 230 235 240
Авр ТПг АТїа Уа1ї Туг Тук Сув Аїа сіу с1у Авр Нів Авп бек с1у Тер 245 250 255 с1у теп Авр І1їе Тгр сб1у біп сіу ТПг Ггеш Уа1! ТПг Уаї бек 5ег 260 265 270 «2105 76 «2115 1530 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Бролуцизумаб, злитий з Ес «4005 7176 асддєссьсс адасасадчдЕ дЕєЄСаєсадс ссдсеЕдстуаєЄ одаєсєсеЕссду содсстаєддас бо чачаєсдеєда єЄдасасадад ссссадсаса сеЕдЕСЕдсса дсдєдодоадада сададедаєс 120 аєсасаєдсс аддссадсда даєсаєссас адсеєдоадссда сеЕсддсаєса дсадаадссяє 180
Зо чдасааддсесс стгаадседсеЕ даєстасствд дссеЕСтасас гддссадсдд адедсстадс 240 ачдаєєєєсть дсЕСЕЧДдаєс єддсодссдад Єссасссєда сааєсєсстад ссессадссе Зоо часчасеєссду ссасстаста седссадаас дсдсассрдуд ссадсассаа сддсдссааєс 3З6о бєєдодссада дсассаадсе дасадедсесє доадсодадасая дададсєсєссда соддсоадаввча 420 адеЕддсддсоа даддаєсада соаодеєдоаєодда Єсеєдаадесдс адсеєдасоада ассадасоадва 480 чдчдасеЕддеЕєс аасседдсудд сЕСЕСЕєЧдада седадседра ссуссестуда сеЕссессстд 5340 ассдастрасеЕ асграсаєдас седддЕсСсда саддсссстд дсаааддасе єдадедодеЕс 60 чддаєеєсаєсду ассссудасда счаєссеєсас сбасоссасає дддссаадду сачасесасс 6б6о аєсадссдддщд асаасадсаа даасасссрд бассессада Єдаасадссе дададссдад 720 часассдссд ЕЄдрастаєєд єдссоддсудда даєсасааса дсоддседдда асесдатасс 78о0
Еддддссадуд даасасєдде сассдєдеЕсе адсдасаада сссасасссд Єссессаєає 840 ссгдссссад аассдсссддд соддасссссс дсдеЕссссдсЕ сссссссааа дссгааддас 900 асссеєдаєда Есадсадаас ссссдаадсд асседсдеЕда гддеЕоддчаєсдЕ дЕССсСсасдад 960 чаєсссдаад ЄдаадеЕссаа Еєддбасуєд дасддсудєду аадсдсасаа судссаадасс 1020 аадсссрадад аддаасадса сааєадсасс гасададедд ЕдЕССЯєгдсЕ дассааєдсьд 1080 бо сассаддаєсс ддссдаасдд сааададсас аадсдсаадд Сдсссаасаа ддсссгдссе 1140 дсЕСсСсраєсу адаааассає сеЕссааддсс аадддссадс стадддаасс ссаддеЕєтас 1200 асасеєдссеЕс саадсаддда сдадсеєдаса аадаассадд ЄдДдЕСССсСЕДдас седсстоддЕсС 1260 аадддсЕєсеЕ асссссссда баєсдссуєд даасддддада дсааєддсса дссеЕдадаас 1320 аасрасаада саассссеєсс ЕдеЕдсЕддас адсдасудсе сарсєсевссо дегасадсаад 1380 сеЕдасадедд асаададсад аєддсадсад доасаасудєдЕ Есадсєдсесс сдеЕдаєдсас 1440 чаддссседс асаассастра сасссадаад ЕсссеЕдадсс єдДдЕСЕССвду саааєдадсс 1500 асдсдбааса суєдсаєдсуд ададаєседа 1530 «2105 177 «211» 498 «212» білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Бролуцизумаб, злитий з Ес «4005 77
Меє Уаї гейш біп ТПг сіп Уаі Рпе Іїе бек Ггец Іец Іецй Тгр І1е 5ег 1 2 10 15 сб1у А1ї1а Тук сіу бій Іїе Уа1 Меє ТБПг біп бек Рго бек ТПг Іец 5ег
Зо 20 25 30
Аза бек Уаї сбі1у Авр Акуд Уаі І1е І1е ТПпг Сув біп Аїа Бек бій Те 35 І1їе Нів бек Тгр Геш Аза Тер Туг біп сбіп Пув Рго с1іу Гув Аїа Рго
З бо
Тїув Тецп Гей Іїе Туг гейш Аїа Бек ТПг Гей Аїа бек сіу Уаї Рго 5ег 65 70 75 80 40
Акуд Рпе бек біу бек біу бек б1у Аїа бій Рпе ТПг Гей ТПг І1е 5ег 85 90 95 зек Гей біп Рго Авр Авр Рпе Аїа ТПг Тук Тук Сув біп Авп Уа1 Туг 45 100 105 110
Тец Аза бек ТПг Авп сб1іу Аза Авп Рпе сіу біп сіу ТБкг Ппув Гей ТЕПг 115 120 125 50 Уаї теп сі1у сіу с1у сіу сб1у бек сбі1у сіу сі1у с1у бек б1у 1у щу 130 135 140 сбі1у бек б1у сіу сіу сіу Бек бій Уаі сбіп Геш Уаі1 сій бек с1у 1У 145 150 155 160 сб1у Гей УМаії сіп Рго сіу сіу Бек Гей Агуд Гей бек Сув ТПг Аїа б5ег 165 170 175 б1у Рпе бек Гей ТПг Авр Тугк Туг Тук Меє ТПг Тер Уаї Агд сСіп А1а 60 180 185 190
Ркго сіу Ппув бі1у Те бій Тер Уаії сб1у Рпе І1ї1е Авр Рго Авр Авр Авр 195 200 205
Ркго Тук Туг Аїа ТПг Тгр Аї1а Гув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе 5Бег Агд Авр 210 215 220
АвпобБек Гпув Авп оТПг Тец Тук Гец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа с1іц 225 230 235 240
Авр ТПг АТїа Уа1ї Туг Тук Сув Аїа сіу б1у Авр Нібв Авп бек с1у Тгр 245 250 255 с1у теп Авр І1їе Тгр сбі1у біп сіу ТПг Ггеш Уа1! ТПг Уаї бек бек Авр 260 265 270
Тпув ТП Нів ТП о Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго сій Гей Гец сСіу с1Уу 275 280 285
Ркго Бек Уаії РпПе Іїецй Рпе Рго Рго Гув Рго ГПув Авр ТПг Гей Меє тТ1е 290 295 Зоо зек Агуд ТПг Рго біц УМаї ТПг Сув Уаії Уаї Уаї Авр Уа1і Бек Нів сіц 305 310 315 320
Авр Рго сій Уа1і! Ппув Рре Авп Тгр Тук Уаі Авр с1у Уаії сій Уаї Нів 325 330 335
Авп Аза пуб ТПг Тубв Рго Агд біц бі біп Туг Авп о бБегк ТПг Туг Агд 340 345 350
Зо
Уаї Уаї бек Уаі Гей ТПг Уаї гейш Нів сбіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув 355 3З6о 365 бі Тук Гпув Сув Ппув Уа1 Бек АвБп Гпув Аїа Гей Рго Аза Рго І1е с1іц 370 375 380
Тпув ТПг І1їе бек Ппув Аїа Ппув с1іу біп Рго Агуд бій Рго біп Уаї Туг 385 390 395 400
ТПЕ Гей Рго Рго бек Агуд Авр біц Гей ТпПг о пув Авп обіп Уаї бек Геч 405 410 415
ТПЕ Сув Гей Уа1ї Ппув біу Робе Туг Рго бБег Авр І1е Аї1а Уа1і сі Тгр 420 425 430 бі бек АвБп сіу біп Рго бій Авп Авп Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаї 435 440 445
Тец Авр бек Авр сіу Бек Рпе Рпе Гей Тукг бек Ппув Гей ТПг Уа1ї Авр 450 455 460
Ппув век Агд Тгр біп біп сіу Авп Уаі Рпе бек Суб бек Уаі1! Меє Нів 465 470 475 480 сі Аїа Гецп Нів Авп Нів Туг ТіПг біп пуб бек Гей бек ІГецй бек Рго 485 490 495 со1у Гув

Claims (26)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Нуклеїнова кислота, яка кодує інгібітор МЕСБЕ-А, причому зазначена нуклеїнова кислота містить одну або більше із: (ї) нуклеотидної послідовності, вказаної як ХЕО ІЮ МО:65 (афліберцепт), (і) нуклеотидної послідовності, вказаної як ХЕО ІЮ МО:69 (зс-ранібізумаб І НІ), (ії) нуклеотидної послідовності, вказаної як ХЕО ІЮ МО:74 (бролуцизумаб), (ім) нуклеотидної послідовності, вказаної як ХЕО ІЮ МО:67 (5с-ранібізумаб-НІ), (у) нуклеотидної послідовності, вказаної як ЗЕО ІЮ МО:70 (5с-ранібізумаб-Ї Нг), (мі) нуклеотидної послідовності, вказаної як ЗЕО ІЮ МО:72 (5с-ранібізумаб-Ї Н-Ес), (мії) нуклеотидної послідовності, вказаної як ХЕО ІЮ МО:76 (бролуцизумаб-Ес), (мії) нуклеотидної послідовності, вказаної в нуклеотидах 79-1377 5ЕО І МО:65 (афліберцепт), (їх) нуклеотидної послідовності, вказаної в нуклеотидах 61-1578 5ЕО ІЮ МО:69 (зс-ранібізумаб НІ), (х) нуклеотидної послідовності, вказаної в нуклеотидах 61-816 5ЕО ІЮ МО:74 (бролуцизумаб), (хі) нуклеотидної послідовності, вказаної в нуклеотидах 58-1575 50 ІЮ МО:67 (5с-ранібізумаб- НУ, (хії) нуклеотидної послідовності, вказаної в нуклеотидах 61-1578 5ЕО ІЮ МО:70 (5с-ранібізумаб- ІН), (хії) нуклеотидної послідовності, вказаної в нуклеотидах 61-2277 5ЕО ІЮ МО:72 (5с-ранібізумаб- І Н-гс), (хім) нуклеотидної послідовності, вказаної в нуклеотидах 61-1530 ЗЕО ІО МО:76 (бролуцизумаб- Ес), (хм) нуклеотидної послідовності, яка щонайменше на 90 95 ідентична нуклеотидній послідовності, вказаній у будь-якому з (1)-(хім).
2. Нуклеїнова кислота за п. 1, де нуклеотидна послідовність є щонайменше на 95 95 ідентичною нуклеотидній послідовності, вказаній у будь-якому з (1)-(хім).
3. Нуклеїнова кислота за п. 1, де нуклеотидна послідовність є щонайменше на 99 95 ідентичною Зо нуклеотидній послідовності, вказаній у будь-якому з (1)-(хім).
4. Вектор рекомбінантного аденоасоційованого вірусу (гААМ), який містить нуклеїнову кислоту за п. 1, де нуклеотидна послідовність, вказана у будь-якому з (і)-(хм), функціонально зв'язана з послідовністю для контролю експресії.
5. Вектор гААМ за п. 4, де послідовність для контролю експресії містить повсюдно експресуючий промотор.
6. Вектор гААМ за п. 5, де повсюдно експресуючий промотор вибраний із промоторів СМУ, САС і
СВА.
7. Вектор гААМ за п. 4, де вектор гААМ містить (а) нуклеїнову кислоту, яка містить нуклеотидну послідовність, вказану в будь-якому з (і)-(ім), або нуклеотидну послідовність, яка щонайменше на 90 95 ідентична будь-якій із (ї)-(ім), причому зазначена нуклеотидна послідовність функціонально зв'язана з послідовністю для контролю експресії, і (5) варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), який містить пептидну вставку в Н-петлі капсидного білка щодо відповідного вихідного капсидного білка ААМ, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність ІБЮООТКН (ЗЕО ІЮ МО:14).
8. Вектор гААМ за п. 7, де пептидна вставка має довжину від 7 до 10 амінокислот і містить амінокислотну послідовність У1м2І5О0ОТКНУ», де кожен із У1-Уз незалежно вибраний із Аа, Г еи, Стпу, б5ег, ТАг і Рго.
9. Вектор гААМ за п. 8, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність ГАІЗООТКНА (ЗЕО ІЮ МО:28).
10. Вектор гААМ за п. 7, де ділянка вставки знаходиться між амінокислотами, які відповідають амінокислотам 587 і 588 МР1 з ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2) або відповідному положенню в капсидному білку іншого серотипу ААМ.
11. Вектор гААМ за п. 7, де капсидний білок містить одну або більше амінокислотних замін щодо МРІ1 капсиду ААМ2 (5ЕО ІО МО:2) або одну або більше відповідних замін в іншому серотипі ААМ.
12. Вектор гААМ за п. 11, де капсидний білок містить амінокислотну заміну РЗ4А щодо УРІ1 капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО:2) або відповідну заміну в іншому серотипі ААМ.
13. Вектор гААМ за п. 12, де капсидний білок містить (ї) амінокислотну послідовність ІЄЮОТКН (ЗБЕО ІО МО:14) ї (ії) амінокислотну заміну РЗ4А, і є щонайменше на 90 95 ідентичним послідовності, вказаній як ЗЕО ІЮ МО:42.
14. Вектор гААМ за п. 13, де капсидний білок містить амінокислотну послідовність, вказану як ЗЕО ІЮ МО:42.
15. Вектор гААМ за п. 4, де нуклеїнова кислота додатково містить нуклеотидну послідовність, яка кодує інтерферуючу РНК, яка інгібує ангіогенез.
16. Вектор гААМ за п. 15, де інтерферуюча РНК знижує експресію проангіогенного генного продукту, вибраного з МЕСРа, МЕСЕБ, МЕСЕс, МЕСЕа, МЕСЕВІ, МЕСЕВН2, МЕСЕНЗ, РОБ, РОС і ангіопоетину.
17. Фармацевтична композиція, яка містить нуклеїнову кислоту за будь-яким із пп. 1-3 або ГААМ за будь-яким із пп. 4-16 і фармацевтично прийнятний носій.
18. Композиція, яка містить нуклеїнову кислоту за будь-яким із пп. 1-3 або гГААМ за будь-яким із пп. 4-16 для застосування у способі доставки інгібітора МЕСЕ в клітину сітківки, хоріоїдальну клітину, кришталикову клітину, війчасту клітину, клітину райдужної оболонки, клітину зорового нерва і/або клітину рогівки.
19. Застосування фармацевтичної композиції за п. 17 для виготовлення лікарського засобу для лікування МЕСЕ-асоційованого захворювання очей, вибраного з вологої (неоваскулярної, ексудативної) вікової дегенерації жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; неоваскуляризації сітківки внаслідок оклюзії вен сітківки; діабетичного набряку жовтої плями, діабетичної ретинопатії (включаючи всі стадії непроліферативної діабетичної ретинопатії і проліферативної діабетичної ретинопатії); міопічної дегенерації жовтої плями; оклюзії гілки вени сітківки, оклюзії геміретинальної вени і оклюзії центральної вени сітківки; ретинопатії недоношених; ідіопатичної хоріоїдальної неоваскуляризації; міопічної дегенерації жовтої плями і вторинної ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації; телеангієктазії сітківки; неоваскулярної глаукоми; геморагії скловидного тіла; ретинальної і хоріоїдальної неоваскуляризації, вторинної щодо захворювань сітківки, включаючи, але не обмежуючись ними, увеїт, травму, дегенеративні порушення сітківки, генетичне захворювання сітківки і/або хоріоїду, пухлини ока, неоваскуляризацію рогівки і райдужної оболонки ока, у суб'єкта, який цього потребує.
20. Застосування за п. 19, де МЕСЕ-асоційоване захворювання очей вибране з вологої (неоваскулярної, ексудативної) вікової дегенерації жовтої плями; діабетичного набряку жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вени сітківки; діабетичної ретинопатії і міопічної хоріоїдальної неоваскуляризації.
21. Застосування за п. 18, де фармацевтична композиція є придатною для внутрішньоочного введення.
22. Застосування за п. 21, де фармацевтична композиція є придатною для ін'єкції у скловидне тіло.
23. Фармацевтична композиція, яка містить фармацевтично прийнятний носій і віріон гААМм, причому віріон ГААМ містить (ї) капсидний білок, який містить амінокислотну послідовність, вказану як 5ЕБЕО ІЮ МО:42, ї (ії) гетерологічну нуклеїнову кислоту, яка містить нуклеотидну послідовність, вказану як 5ХЕО ІЮ МО:65, або послідовність, яка щонайменше на 99 95 ідентична їй, причому зазначена нуклеотидна послідовність функціонально зв'язана з послідовністю для контролю експресії, яка містить промотори СМУ, САС або СВА.
24. Фармацевтична композиція за п. 23, де гетерологічна нуклеїнова кислота додатково містить нуклеотидну послідовність, яка кодує поліпептид або інтерферуючу РНК, яка інгібує ангіогенез.
25. Фармацевтична композиція за п. 24, де поліпептид вибраний із ендостатину; тумстатин; ангіостатин і фактора пігментного епітелію (РЕЮОЕ), або де інтерферуюча РНК зменшує експресію проангіогенного генного продукту, вибраного з МЕСЕРа, МЕСРББ, МЕСЕс, МЕСБа, МЕСЕКІ1, МЕСЕК2, МЕСЕКЗ, РОБ, РОС і ангіопоетину.
26. Фармацевтична композиція за будь-яким із пп. 23-25 для застосування у виготовленні лікарського засобу для лікування вологої (неоваскулярної, ексудативної) вікової дегенерації жовтої плями; діабетичного набряку жовтої плями; набряку жовтої плями після оклюзії вен сітківки; діабетичної ретинопатії або міопічної хоріоїдальної неоваскуляризації.
ЕЕ й: ДФ Д ДФ(Ь в со в ВОК ОВК я Запатентовані бібліютеки ЯМІ зд г и Білбі векторній ка: "Вуйнрясктора Детлхе в ев | шо стадії | Шо " стадія З НИ ки кн М нау М АК МТ, и х ж - 2 :х ЖК сю В ДОК ОО х юні. с Ки і вва ОБ рвь-я з цовий оо т ОК в зе об прова в В і І, НН и в ве х я в вне к р ва Ідентифіковані кра. ; я яке вектори У «1 Їдентервсовані кращі. Варіанти капснду ДДУ їв)
Фіг. 1 Праве око Ліве ово З шо ве Жодхооког В З зе хе В ж ка ; їх ас, С шк Ж ох ВК В о я ОБОВ Во с Я Б. І х І | й. пннннні дрів з фе М Ів І ши судинні аркадя Її ов ші і КО ї Я уко ї суднина зркадя
Фіг. 2
ОА І 525 Е й го. Е з а зи Е ЗВ я п: н сса3. ЗОВ п і у я щ.нУгО с нт се ВЕК пт вноВЕ гер Зав. сх с с 2 ОВ аву ож с Е дей п М : ЛО КЕ с я шк її : Я їх г Е зннх по з СК, п ї сх т. (о " ; ї з У г - с п ЩО КН х с г ; с ХМ ВО с ж ж зх с ТЯ Ж ря я с ОО ее о ДО ЗК о
Ж. шо ! Є 0 с о ВЕ ЇЇ нн п ян її с с с ШОВ п. АКА ЗХ с й шо о. МК У с ПИВ с ПУХ со СОУ З З пасе, п ДОК Коня ок МЕ се хх ХХ С я . п в с СО о. п ХХ г Зх п 1 с ОХ од с п МАО ХУ . п М ОО п п СХ Хо г о о. За У с хо МОЖ зх МЕ с МОБ ЗО о. В с ОХ ОН Я с З ОО п с х ОКО ХХ МОХ ХУ с г с с МЕ ОО СОЖОКХ с В ХХ с Я с З ОО ОО с с оо. с с у ОО хх хо ЗО с З о ОНКО ОХ ОО Я р з ЗХ ХХ у схе СУ с СО СХ МКК ХО с С о о. ООН МУ ОХ ХА Хе З У ж ОО ТХ Ех Ох ОХ 0 СО СЕ о с ХК ПТС З КК ЗО ж С ОКО ПЕ МІДОЮ с У с ТУЯ .- о ЗХ МО ОК есК я З ВХ ХОМ с; Ко с 5 ОДОКХ КУ о МО У С п КА КЗ с 1 СО У с же Ме ЗО до МКУ ж ОО МОРІВ ня 1 ВЕН БК Оя М да с я хх о Є Ди КИ Кия МКК МОХ с ЗХ ТЕ МА УК У 3 З СХ жк Я КЕ А сок ЗХ КЕ З У ЕК ВУ В Вк с КАХ А М І ТКС Ко С сни У пи хх ОХ с а а УКВ АК п 5 0. де ПЕ ЗО Ме З с ВА хх ОО кекс їх ЕХ а ХХ х Х хх У хе Я ПОД і и шо Же МАУ ХХ с г нг о п. З о ше дж КК с с п с ХК Зо С п КВ Зо Кт У ух с о В с о шо У о З ЕН роя й оо М с КК о о ЗУ З М ох я й и Ох хх с п ОК СБ щ ОО х де ще ЕХ о що МАУ ОХ У я с Кя СИ М ХХ ЗУ ТММ ! с с. я с их о | " н ! с В 2 М о, М оо ех 5 с ОХ о о КО ЗХ КИТ оті ох ху с СОЯ У У Ох ОК с 5 МКК т ке ТК о о МО У с У КЕ ОО о хх о с о о МУ С ПА КК с СК г с МК З хх ВЕ ее с : с УКХ З ЗЕ ОО ВХ ех с с ОК х ЗК ет с І с З ООЖЕ Зх ОК Кі с В на: Я УСКя У ХХ МИ ЗК У сх с | | І с МА со с с З Ух Те ОО х с пк ох Се с йо; ЗВМ. З ї с З с з. сею. со г о. хх Хе с 7 я МУ 3 Які Кох ХХ с с ж с я кУУ ОК с о... с Ж ВЕ Тр. з с В о с сх хх БЖ ОО с
ГГ. о ЗО ЗОБА. де с г що п ЗО досох о. КО с Ко п я ге с п о З : їх. сер с о ча Ж. с 1 о У ї Я ж КІ сови ЇЇ У п ВЕЖ : у ВЕУ п С М ЗЕ о Ох СНИ зу с с п. ке ХО Ж ум с о З Те ЕВ. ех с ш вк: ВНУ ие я т ОХ с с З с й Ку ХО с с вих сгр. з с о у Є ВЕ с с хх МЖК Хе о ие З ОО и о і
"В. се о. о З ЖЕ ОХ МО СХ с Я ХХ с АХ о ХХ г у; с 4 ЗК с ХХ ОО о с ах ПО с МОВ що п г З ср МО с З ще ХХ 0 зе ЗМ З ХХ УК ХХ с о ЗХ З З с ж З ОО о - Кк п Зх х о. МЕ с ОО СХ ХК г с СУ ЕХ СО ХХ с КОВЯ ОО ЗЕ Ко ОХ с ХХ с 5 ї й с Ух С хх ке З с ХХ ЗО З с СО с ОХ Ух З с с Я що с схо ж ХХ ОО хо с 1 с х МК с о с с Зх 0 с 1 Во с 5 МО с 1 во Я ОО с ЖОщ с с с о с ОК о МЕ с ХХ с с . с о, КУ ХХ п. ОО кош оо. с ОО с о о Ох ме В У с СУК З ОК Тих сх м Я МОХ .: щу ВН ОХ ТО Ох ВАХ я ж ЗК ЗХ Зх Ж ЛИЖ Вис ЕН МЕ ХО с с СОЯ Бех ях с доУя г. ще КОХ с В с ХК с ; о о 5 МАК СЯ У О МКК у ТОх 1 с с Х с с Ок: с ще она о ОХ кни о. ОК Ех с СО . п. ї | о с С до 0. о с В З ЛУ Ко В зе о ОКО Ух І с У С с п с ООеЬ оо Х ЗУ в ще с Код с п Бк: и М сх о ОХ ЗО уОМ а, Ех У У с о с БО КО с я: о: с ХУ Ох АК С Ов м ТК КК З с в кое В ях ОО ок є с о ж МК с . с КОХ с Ка ВО Ох с - ПНЯ с Я с с о о. с хе дя Ех у а с ЇЇ п. дО г її ЗХ с СХ ох с ЇЇ о с п. ХХ с РК Зх З п о З . ЗК ОХ о й оо с Х с с о. с що ЗКУ с І с с ОХ с Кн З с г ДЕ сх о КХ МКК - хе М ж Ох мя Кк дно ОБОХ У Є З с 4 и с . о с З о КАХ Се с ше с с ОК с КЗ п С с о о . о с о с а
По.
й 0. що ох с о о с. о не і КО ЇЇ о С Б яке п ОБ о. о З її чо с Ух З о п. Є п с ВЕ ІГ. о Ф с бр 0 Цикл (Б 0 Циклі
0 і. м ЯМ и ЕХ Ко ох с її. ЕЕ. о с ;
о. о. с с о І!
0. с її) а закнхя ЇХ й й Є Цики 5 4 Цикл Ко є 5 с ух . о ко с : ОМ М ХХ Кн КО З,
с . по В о З . с . с г с 0. с ОО ХО У НЕ о ОК о. у і 0 т ОО ОО КО це 0, с о. в їй я а с. врАставка « КО Вставка З. тТочкова 0 ШЩрточкова Щставка щ нн пептиду ні пептиду ЗІ мутація ЩІ мутація 22 пептилу КЗ
Фіг. 4 шк: Авт у я. свв кх ше ло ух В Оу ах шин с Ще ЕК ник Пе ее не же ді и ве ВЕ о КМ М с КК НК и я Ж о З її с и ПКУ Я КК и и Кк НЯ я ПОС нед Се КЛ Ои, ЕКО ОК м ник м ОКО: и пн не во ПОж ве Кя о МК док ПО Кн я п о и и о в ке К- Му и опи и ох В и я ОК КО ОК ОО ВК В пох КО КО КК ЕК ЗАнНЯ КВ я КК их ОО Пов КК Кв Канни оо КВ ше Ж ФМ Ек Я НЕ Кк ек ОВ ов ОО КЕ ВК в КК сн 5. ода о пн КК «Во Кт Со о КО о о МКК Ес ек я ки шир с о п ОО ноя З У Оу К КИ ОК Кн в з. Сон р ЕВ, ПК в в и и м в шу КЕ в Ко он о Тк НН з и и СК "ЗМ 000 ши ко Мене пюрвшо воя ОСТ ОЖеКрЕ
Фіг. 2 : жду си ще х ТЕ я КУ 5 5 Ж Х Шк шк о д ско в вня тв у вве пи: кова 5 С У КВ КО ЖЕ дачі шЕСНО мес г 7 Й ї ТЕ шах ЖЕ хо ким сек ех кв у КК СК В ЕК ВК КВК КК сх па МОБ ВО В ВО А КО ВУ ЕК І мап ши п Е МЕ: Ж : 7 7 пут Ж й ЕЕ КУ дл щокою ру до КК КК В КК ком Б І о аа БЕ ВЧ по 0. нн п 0. ї ІЙ УА С скік ке і зі хх и піз о в ее в ву ЗВ Ж ЩІ ЩЕ ВУ пуп его по попе і 7 ї хх Ж ях : пк зок у щу ОН НК п гм М ау ЗО ОО ВО а и А НА иа 5 дет свовеч пек ку окон В кА ВН ЗК п аа ОСНО МО В п Я ям ' ї 7 їй і У й кот ТКЕих НК ків зх КАБ ВЕК ТІ соусі, нн щих вок і ї їх Ж Ж дір вва ще; вірно тні Кос КВК у ек ОВК по ВЖЕ ПЕС що Ж ща ОО КІ ж Я па М ї ї 2 Б кодоощо сотих сот : сени зання КЕКВ есте КК ВачУБІЕО НІ МО І по о пп поп не ї -х МЕ ХХ ш А хкдо тик со краше. р у о ОК ко ВН п. ККУ вава ЕВ В ех НИ пл я : я Ї х ! ще ЗЕ ща керу ек ж жінк: З 3 ХОМ ВЕ ВЕ ВЗН В: ЗАВ в У ВВ ВЕ пап ока пен АОС НН БЮ 3 Мо пн
Фіг. А
«ж ке й Б Кн ее ще ЕК у ВВ пиво я (що А певне вон» а ме: кчсвх а ЯК НОВ ВК В КВ В (НД КОКО ВОК ВХ т ШО мамі жа ОК ший: з вшо Е. немов енв ее сек зе фах : ап ОВКОВ я ес ос сквер Де ЕВЕЕх вне) шо о ООН звонков, ко рен ве ОКХ я Кк с ЕХ З МБ Б ПМЖ ЕМ . А КЕ с С ГУ Ба х ПКОЮТВЯ ЕОИ сірколимні ОА ЕС ЯКОЮ ом ЗУ ду сещви о Бзе АОС ВОМ В ОН зве пе нн з КК Ве ка: з 8 в ОН вок : кое ска ше ж Бу КО веквнввки ва АВ ОКО НЕК Я в я КеХІиК око ке пп НП Щі КЕКВ ВК З во ор ви М п АК І цп А во пох нин е кАУЯ Ка КОЮ шо вно п шин В. В ОН кн ДОК ХОМ Ка 5 ОККО КОХ а Що се ооо ШИ, З пшона і ві шк кни вАое МО В ще вона нн ноя БП ШИ ВН ВИКОВ ВВ В ВН вв з КВН з вх змето 0 ВНБЕКВ На Ват зееажен хи си ЕХ ВО 3 МКК ВКМТИ щих Й сво сн кох я Ме КВ КК У У ОК УМОВИ МВК ще пиши МАМИ КО АВ СМТ ЗЕ фо вно вв с ПКУ КК КК КК вв ев ОК Ж КК КДЖ ле світу: авт ЩО ш ши - що Би МИ щі КЕ АКВА М : сен ЕК ТК и КД В КОД я ПЕ ко в и хе ау що КВОМКИ я ер во вес а КО мене а нове Ми І я ПЕК КВК КОМУ ВМ ОКЖИК ал ге КО 3 о ля 7 ВАК КЕ ТИ ОК : І Ї си м
Фіг. 8 сення. щенна я оо о о Х мер й т То подеенчннвияннюннь «ані ВЕ ЕК кА тя а Ящй екон в онов но АК ЮТЕР Є ОК оо В Ед КК Ж З КК МКК ОККО ЗМ. кис ввнкх се ов НЕ КЕ що Я шк ШИ сна ПАИЯ шко пен онов хх нн вени ОК в ОККО Є ОКА ПИ СОКИ УСЕ М их Й п ан нн о. мя НЬВИ КК пат С й сонні КК КД нн нн пнеке пон еинвне век еще жк ня пп КАК ОКО ЕКО у п ПОКИ МКК я НН Я ЕК НО МОМ КІ ет ж ко песо у ОНИ МОЮ ще КК В ОВ КВК Я Ми ХК ОКХ Б КОЖ ОМ ту Ще а Як КК КК МАКТУТУК и Ко в питан днини ие Но шо ска ща сн: зх ПК КЕ ОКУ УДК С о ши и у ке е хе ноонве вет о в о КБ ОК КВ в КВК КАК ВК ОК КОКО ла : Б м ТИМКО що ШИ Ж ши В ші вищ МЕМКХИХ М п осо КВК ООН АТ ОО ОО В Ме коор сек я Бе: щ ше ік вух ще КК СКК МКИ ЩІ ШИ ооо не КАУВ ЕОМ МО В ч- штишино кевнниннн же нн НВ . вк: зн о хвУуз ЕС НО ме: ЦО пап ТО ко спон ВІ но вує ЕС Те ТЕ я ТК сни Зощоне сво п за Х Ух іш ЗМК Гн х кі СКК РОК ОК
Фіг. 6С
КІ
Її. ОККО Б М во сив ОК о У ХО а КЕКВ я ші В отих А її вешаетстя І ВЕК ВЖЕ. ЗК СКК МКК ОК - па МУКУ ТЕ НО 5 в ЕВ з о ка В НК КЕ кщщщЦпома в КБ сени я прив нн ї п. З РКОВИЕН Що ше зі БЕ фе О її и СЕМ КМ ПК ПО ТЕ екон Кн п ня о й ШИ ЩІ ОК ВЕ КК М МКК ЩЕ доки, зам В Уа ЩЕ пес на і сш ся КК ІВ ши ДАЕ стек Ку ЛКК ОККО Ши яко не аахЕ (5 ях ев ЦО ЖОВ ве сві яКОВ
А . як і о а Ми ЗК ВЕК ВК КК ея ОК КК Я У пло ПОС кове ОК КЕ Ох КО і. й УВО МО ОБО КН же ОО : сн я жа хо ж КК КК Ж я зе В: я МІЯ І КК ВВ ВЕК ех ТЕ І М и з НО п ТАНК здо евоще з и С ж п п 5 пн ся АКОТ х те КК оо МЕН шо н нечае ма ко шо пом ях м Ох М г ни песо КОКО С ЕК УКХ КРМККИКИТХ Ні яке ск ЗАМ ОС це пз зх ни вн БАКУ а ок МКК З КІ МКК КК ШИЯ вк цесу ще Б п в в «Є СІК пови ИН ІЕХ УДУДуоух ОД КОХ УМО сх са Тех щ ВК 5 БОКУ : по МО КУБ с я і ж дк ох зУ ся ОЗ я ПУ КТ КЕ КХ ПОХИЖОМ Ми плен поет а З ААМ ЗЕ ко я ки я І ее винне МВ МКУ ння пиши в ее: ен: п вен о мч у рев соконве опа С : МК ОКУ дк еВ ке КО г Ж ОККО Ж НХ ще шо ско й т МО: се а. ж х ОН п: Ве кож ЕК МОЗ Х. ЕХ . ово зе ЕІ МКК пе я Шк: БЖ хо хх як 3 : Я ОХ шо шк ше о м Що є нев кни АН НН А ше Шо ій ї ОК КК ОМ я СК ссовссотве ха г Кк Іо кекс з зоБІц ВЕ кшжеше ше ик Хек, Хо пкпенкщц пиво КК СОМ МИШКУ Ж ЕКС КЕКВ : жде що ї меж: т КОКО зе еоекв вно МВ вк КК і КЗ и А Її . ОВ нео М: КК Щ ОК ПК ЗО ВКМ АК У з й ПРИСІВ. БІ У ще Що мли вв есе кон К ох иниКК КСО ж НЕ БВ до шен ше и г По дек ТЯ ПК КК її і. Ме ще Б ек во та сере ї дк ЕК ех хх МКК ке я ск «ЩЕ ке вияв їх ще сви «сени ши шо в ш я кое З ше : шк - ко ООН БАЗ СМ п КЗ нон Шк | си С ОБ З Б ее енвв пиши ХК ву ке с. ТЕХ Б о ОК шив нЕЕшНоК Ежен їх ще в в й ПМЖ тик т ПЕ ов ЩЕ: ЖІ Ка ще с Що ше щі КК ЖЕО ОК В х. - ЗИМИ МИ ния поши з МОЖЕ зиекУнении " - ОО он ее І ЕВІВ ве вв Ек ее ще шко й ЕТ Неи ИН зо М : щ- г КАК Ех ОО Кн ОКО ОХ З . п Не ХЕ ПМ ЖК оон: не в КК В шк З яко ХУ сосні Сов ее ЩО БЕ ха х с онувтя пп яті дні пе ще арок МНК В 5 Б ев з ЖЕ зо ви и ; | я М. ОКО ку ВЕ ОВК В зи ши 7 ші ж Пес 5. у поле КІЗ Ка В АВ СО 5 ПП ї І пекшв т ----ще: і свт пен моБо в т сих ге МК м В с. В Ен п ноз ц Ши сне о - с Й КЕКВ ВК ВК и ЖЕ Ессе ЗонВк Ми ва зкніною піп ща пе я Б КК М я КО КЕ - КЕ ТО . сет ВИе їх хе шо ов В БІХК о овен Ач КО ОХ з Я вени ки пост МЖК, ст МБ ПКЕЕ ПК ! ТТ ди зок: щ М ЗЕ пи х ККУ НГ ОК З М М м с пещення кош пе к х. тре сипици КО І І поси і Ж МОЖ з ЛУК, їх я итиетинини В ке КОХ М Є З . МАШІ пон у ке ее ко ВХ ОО КАТОК КИ я ро пен еВ ОК А п ше аа КА с Ва па В Ж пе Пи: шини шк щ МК шк КК КЕ БНО «І ЕХ УКВ Кд ув мера ЩО нев ееваз ОО зекненнне дах ТЕ МА ВІ с кеВ: "КК ЖЕ ом за З ЗТ у ЩО М ХМК х в МОМ й | Ши те попку в КМ ЖОВ Же . ще ке КА У ет вовк с Б лока пи ВОВК КЕ ВЕ ВЕ Що Фіг. БЕ
ВЕ Зх щ т ща М сен ЩЕ кох ж со ЕК ЕО у я МВ я ве ОО с ОВК ВЕ Іво яв пою ект: : шен Бо " ох Ві Ви т Кк у ие ОВ ще т отв скшх зх дахі ко! Шен навик овсвик Вів: шен ке Й щи коня док ща НЕ КО це ме З ЗЕ ЯКУ ня ОН тю менше же ваУх ши в 55 КОВО с ПАК ОТЖУХЖИМ шх моя МИХ КТ ДО шо я З ЖАХ УК ОК ВЖЕ зак В: МВ Хе ско Я А УТ св осв КО о ОК ТВ ен Бе М 7 що М вк «пи я сш ФК МАЄ ТУ а ще по В БО шен МАУ ЛКК МК пи КЕ ух ВВ УК дешйао св За Ул КК І КУ і дик З Ко ОО КИ А ши ше Чт но Нор о дю МК ЗМИВ сю, КК ККУ Кт ВК І ши пам дам БЕ мні МІ Ж лин НК КВ дл КЕ, ВК еко: ди вАТя КВ ян ск пе пев кг АЖ гу ЕК о ТК Зх с шк МВА ЕК ВІ се І шен ск ХК вен ЖЕК я КОВО ВК КК ке ДЕКО іх КК ск ж МО АУБ ня ЕЕ т ТЕ сок ее БЦ ХУ О й Що пок 5 пп й с пан о со ЕВ НИ ХХ ке доня а: ОКО КО в пю ЩЕ АК ЦІ Є ре кн аз Те сіл НЕ ВК КМУ і МЕ с Щш тео: ВК МАМТ БЕ НО Я пе зх ви пе ов ші . вк з свне ее авиние ев) чашка ІМК В но ЩІ ув ще В зАуа ВЕ Ю мо жизни нос ев ся з вен - ЖАКА ОКО ї ПК АК ОХ СОЯ у ВА Ко ок В з ОККО ле шт Коко ев с ОБО 7 вк В СК МОЖ я с В КОЖ КК зЗю меси З ШИ кокон ПО. в ке жи ТК ЕЖАЛХ ЖК хо ЗК С ОН МІ СК БЕ Аа КК Те - пит ЗАЖАЖ ріг. ї зів зов ХВ НУ Кшцкнє п. шко пого Квести Шо пес в вв ВО 1 вва но і ше веенняє хе Кв в на нене жнн ши ЕК вок дру м | офоМВе і ко опт т ск ВЕЖ щу ЩА пе ЩО я КК й ща ТИ КОХ Ко ВК КВ КК ІВ щи . вика що НН Ж а ще пл вн шо шо сови и КО ОО ВХ й міне нио Я ДУ КАК ЗК Ка. ОВК ВЕ КК КЕ АТЦ ЦЕ ви гуй . попу ІВ й : ОКО В п СОН МО РКК УКВ як ж ЕК Я З і зав ще «о й пе ин вахве сна вон: пд вевкенв внН ОО ОХ ХМ кв З З ПК МОМ ХЕ: кВ я : свое вевеншеки пен ще «хіх ще т З ше МУ ї их кино ТЕ ВекоВЕВ о ; ЗО ОХ ЛЕМ и АТ сокИ ще НА Ц ще Ме нене ве: І ки в Ей а в Б й : їх я КАК МІК Ки певкеещх МАМ ЕД в: ВІ С пп везе є АЖ ІК ХО МИ М КК ОККО НИ нн нин КВ я ВОВК КАТЕТ ВАТ БЕ ща Б ОБ вату у ЗЕМИКВМХ ев Ме І ання кон УК НО 7 МЕ сили ОБО м що ІВ зва АБУЄ СКЗ ви т ще мех ее Не А СКЗ ХЕ ки о ВЕ М ПЕКИ МД пшх ОСІ ВН В я. Я пп овоч ВЕ ЕВ ВИК хо ЖК лиВИю КУ ЦИ ОК: КН МОМ жом ов КН КК т. вам? ЕВ Є веегитваканохв ние венее неви ЦЕ З І во На о кефетее я Оз ХЕ Ся оон Ж ЕК 5 не ах що вх пк Ж МНК Ух пишної сш» яку Хо Ко х хЯ М ПАК КММИМ М у ЕС НІ МО о ННЯ п ААУ ОКО Б Б как КИ ГК: КО ї че зама ска Фіг. бо
ТЕ МЕ, - ко Мк хо КЕ еВ що КИМ од ств ше КОТ КН Кс УТ ЕОМ ОО: ше и кн но ВЕ хм Код век фо МЖ КТК ЗОН І і жу ВАМ СЛ він М в и кох сект, МО ЕЕ В ОО пев м ст | пе Бен вЕУВ КО вн певен: Ов р ОО А ЕК Ав ККУ я хау аА ОО а їж Ох ока ПМ еко КО о ЩО винна же ВВС Ко, ХО ОКОМ кутя пт Я мн кв а. ср пи у ГЕО ЖИМ ох ВК В КК ЩО КК ЯКЕ поши АУБ КО се І о 3. ВХ ВО ОЯ МК Х ОО ПА Кеди пис ях о КК ші КОКО х х КІ МЖК шу КЕ су рт шо Ки ІЕМ я КК КК Кука У МОМ КАМИ дж Я АЖ КК сот ЦЕ я ожщи г МБ не : чн п. ха пох АТХ ЕІ шен ПО В Й ТЕО ВЕК У СК о З довщ сх ши тм Ж Я ду КА КО ссконв Ко зу ЖК я ШУ со вд БК кН ВТ ов: ев ех ее . М Бе ит я есе ЕК УЖ Ек Я АУБ ЕК МКК ше ща: що пи о ве МИ ЕК що Й нову ти М щі о. У ШЕ вон ше МЕ ТОЮ п Ер Кк Ка УЖ 7 Я оккввкних тет я Що ще секс хо ТЕ М ЯК Кк ск МО Ва УОСК ЖК БУК І АК КО ЕКО ок ах КВК МКК М ЛК Кс УК о МЕККА ЖЕ з п п що пет 7 : га ККХ ПОЕТИ ОТ сиг КУА КК Се Е ПК ХОМ понти ке ее У п АК сво шт - Кк еЕОвова: ВАЖКО М везе їх Фев енон ПАТО потоп вче мене хо кк МИ донос, Ку и ж ПОХКОКК вАЧВ КВ шт п т зе жа ВО ке І У КЕ жо г ЖК ІЕЕ Ц Б й а ж ДК МІКК Фіг ен т дО - пи пд Ж я Бе х. ее З Ї пи ти и КК то ще? п о и кое енер ве ОО як плити. вам ож пн я КО Кт КО АМС КК Манна ККУ ВК век п Сак ОК КАНОН вне КВК КК оо КЕ ХКЕя ПРИМ КВК КИЙ Б шо птн щі ча ще а Яке Бе . Ом МН Я зо: несе кт ОКО В ек ее п оон хе Б ши , шен кажете шо щі що с ПЕ МУК ККИЯ ща КК я І я СИ с й прю Ек В їх як пі БО єв о. чен АК ЕС КА й--5 5 г р екон неви кеВ НЕК КК Ж с З -к шо ЖЕ З я везе Ж пе у ще ща я ше: Кене МОМ ге Б а щш се кнввод ки в ее ща КК од По одонт Да ОО В й о. пише ЖЖ Ва каш КК йо в ан я пи щи вне. Ко МКК ж - - ВОМ БО ке ще й: ВК ШЕ ппоюжни ВО Б ву ки: Во " СЕ КК ме М З СЕ нти зле Ек МЖК ЖЕ тку КК вн Кая В у ТОК як, КК ВК азам но зн 5 ав о зн о МУК Ж ех чек ОК ПОЖЕЖ ке М я КЕ З Зх МК Е шо ВК НА Б Ук шеде их УК Ко З КА СНО дешеву ООН ке Ке : зах У БЕ 3 кориці зв - В КК ЖЕ вшня еще Бус Ка
Й с. жк вп М шен вне 0. що ке у. ух А МКМ «КИ. я МУ ПЕМИКЯХ ХІМ: секс сок МК За ще Ю к ШИ і ши о З | З «всовне АКУБ ЗЕ Ю ке неза засн о сек. З ОКХ т енд ЕЕ НВ, ем ее Ве ЗХ ях СВ сх втім От куки АЖ БОЮ ВК ТІ с і тних ШИ - евоце ; МТ ОКО ФА ОХ КОЖЕН г ще т ОВ ши шУомо т вБа ТЕМ певну пихи Х я ПК УКХ КОЖ В Аг У ЕК пе зе кн й Про ке я МАУ ща І ех Сх БІЙ о о не ши ; ВЕШООЖОКНХ Ки ення т ЕХ ж КОДУ Тед сно МО ши що пл пня жкак МЕ ОО я 7 см дк Ж КИЕВ ЕМ ЕХ Ох Ко КУ ваш. мал тн ши я ЕЕ пев Б БК З І я Ж КУН дощ Б СИ ке: ТК УМОВ Б Ве ВК ОККО Ко ОККО ПУМКОМТТУХ Еге М ко КК ее ОО НИВ ПОКММИМЯ АВ ОКО О пз НО КК ВКМ | ше т іч СК ПІНКИ ОБО 7 ме Фіг. БІ
ДІМ Ї БІВ. ще м т нка шо п КО КК КК ВК КК Ме Ех зве вони вх х тн хх " ЗЕ 7 Ти ш ОВК ВК ок КК Я ОО ЕК МАЮ ко я пон ев тв оевК БЕ т он ех ОК КК ВК и КО МКМ МК тк . . с арк: жк Мер о Б ее ОККО . о ДЕ Ку Щ я я КАК СКК хЕЖУ сао В кто ОБ НО ЯКЕ фе М ТЯ ; ЖЖ. . он ел АК ве веоВ кое 5 чо дно ке ЩЕ І БОЖЕ СКК КИ КЕ МКК ря І сні еко ЕК КВК Як затв сеоючо о вве нна в: п т Ск во с. ї аа БЕ БЕ МК щі СЕ ОВК КЕН ТЕ секр с ОККО з: яко РУК КМ ХОДУ ЕЕ о нм оно фо ЕКО МКК МО а ПК ва - Мосс ндвакю ЕК КК КВ ОКО У ЕК КВК КК КЕ о Ше сх екон оо оон по ко сс вкквннек КККХ ШК ВВ ЯК ТМ АВ КК ах ЯК ВЕОЮ ши пам ЩЕ ї М лолни КК КЕ со ДАТ НО КМ ВІ р шия вн оон зе енвовен й винне нема зн у ек ее і. кан І МАК ЗКВА КЕ, КВ КК ВОК жк ще зефенкце же Ин о п ЕКО КВК вс в Пл зе ев п ов КК ЕТ ЕФ Ю Мо: 8) НОВА ВАНН вх вки яки я к ши п ЩО - Хе вв ве сн це Ах т а Це ПЕ ОХ окон ввккеа ев Во ово її У В - х с ЕХ КК КК я КК ОО УА ОК КК ВО ж
М з. ППД Її о. й ха а КВ М НИ пев опе ее БЖ дк Я я совно знеоа з ве о п і: сесшнаех ду фея Кк ММК МКК МИ ЗЕМ п о ше каш и Я Щ КН В 7 З Й НН ее ХА Ж й ІК Щ ще ї 3 ВК МУКАХ ОКОМ МЖК ТИ НИ І в
Фіг. 5. Ж ЖЕ. Ку жо в ЖЕ оС ек ке соввнв вен ск с по кни пе ЯК КК зщщ. В с. В ; ХО п тт де з КК гук КЕ ЛЮКИ М ОХ п ЯК софваня кекх ВАТА ЗК ОК ж ВУХ УКУ певен ек Ве: ПВ В кн до ОК НО ЕЕ КО КО ще ЕХ ї ОКО з кв НН КВ ОО що щв п ОО ПК с ; МКК я шо МЖК ВАМ І ші її шк КІ ТК З М ЖІ МКМ па ШИ Ек кВ ке ОО ВЕЖ МК У я епі 0 о ВА А ТЕО КЕКК ОЕМ ОК КЕКВ хе ші рн уеенше хи М ПК КК В ПОКЖКЯ - лиж СЕК сив вх КР; Же ж щ КЕ о КВ МОМ ТХ по я ау ин ЯК ЖЕ певно онов МБ І шах вх МБ ма БО хх то Ш асани ЕКС ТЕХ ак Кене КК не ок кн ПИ | З оон оз Це овен КЕ в ОККО В ВОК ще) в її ї айв вик ЩО М КВ ЯКУ СХ ско свв сс пишно щас чено ОКУ хх ОК Я КОХ ПО В Ж й Жди ва МУ НП як: у ОВК: й і їх ї Іа ТКУ АКМЕВВК УА СУК ЕВ піно СКЗЕКЕ ек Вик КОКО ов ев КЕ КЕ МОЖ аа КК ХХ З З Я В КО КК нн НЕК Вк ВЕК т КО ЕК о. ту НК Кіш НО. ПК Зк ПИВ й с ї тв Що дже тка ЩЕ зе ОЕМ МК Ба КОВО ВК у вве ВАШУ БЕ ВК ВІ с ле перу НО ВОК ник во пе ен 5 КК ККУ Ви ОК КТК сх ВК КМ Пн : ВВ ев з в оп вне х с щКх З ЗІВА МКМ дея ЩЕ: я се ваза ОО БК МО З шо шнек ше: ох с в МІ о и у КЗ ПК МИХ го С іх ї о КК ТМ МК ХЕМИИ МО КМККМИ И Ж ж Шк шк ооо ке ее кВ о УЖ КАК о вок КН І ААУ М ОК КК
Фіг. ОК ке Ж карих «КЕ У ІВ НЯНЯ ще т- я докдею тор КЕ Я ЖЕК СЕ КК Ні зе з. ЩА - 5 ее М . пий ОТВЖИщИ Я ІК ПЕ ПИ КЕ пере ТАКЖЕ М же песни я АК . КВ свввещокя У сек КЕ м соневкх попи кре о КУЄ Бош й ОВК і ШИ поз че о зно ек Що вени: Су а : Амі ЕО МЕХ шов пої поля ай ХВО Кк КА МОБ ХУ пи п. ОБ Якя орки Ер Б 7 ак За я фев - шо о як У А -- сенннни В їй ко ск С - ТК с Ум ТО КК ЗОЗ БИК : с 7 БЕ не ве КАХ ОКО В ва З шо пев пе 7 сек ще її МН шо сіжаке т Ве ко І ОК В ЗОВ вв НІ ТИТя п о ПАХ свервнех каз попе ииу пн ОЦ ще ши: КИ я шо МКК МК Кокс КВ ж КЕНЕ НК ке. ве ТК УКВ ан. тез насе ШІ пев ха ОО ще пещцеоае щ не знво хшх с хе ХА Ко / Ж ВК ПОНІ Ка шо КККЕя ОК М побио а Ж ЖК ча : 5 пщщЦ Ех ка ее ше ПЕК АНЯ А КО секс же ее Щі туя МК. ші Щі нн КК ти щ ал ДК КК хі ТОВКИ ; КН «І. ї БЖ КК аа БЕ Бе ЖК ще БІ як в Б пОЄть - я ТУ еешею З о, АН О даю М , АКА ОКА І ЕХ ЕК Хо ОКУ ЗЕ НУ АК В ок еще Ва щ щ досві а ки шо ш кове АЖ ОХ КУ екв ОО МАЯ ек М хи су ХО БИ ко І ПЕК ВК се ММК пи ЕК й Ех Б ОКА Б Ж ля КК У ши ПОВ Ще се БІ ТУ як з.п Щі ДЯ Ти : пк кеВ Ока ОО шо. КК вве ЗК Я БО КТС ЖО шо КН З С яне "ТВО де пнаенних ваш : МОУ ще ОККО УКХ Хе КЕ ЕХ Що пек. В МВ я Кс тя то сих ЗМ ПЕЖО с ке КЕ кож Я ПО Б Мем ПЕКУ ХВ УМ АЖ ще би ЖЖ я пе. 7 я ІК МКК я тих я ЕКС КЕ у тр Ж 7 : ТК же я я АУБ ЕН Ю Фіг. БІ. жо же ск есте а ща ЦО за м я: Кт Й сосків ух НЕ ВК ПЕЖО свй евноно ОВ З «я с п пит Б , екв КВК КК М М я ее же КВК ОМ М 7 ІОВ КЕ КМ КТК Я кеВ МОУ З ще | МИ т ВІ пе я ев МД поь я АК я ЕК тк ОК ТТ МІХ ЕК КВК є ЕКЗ сова орви, Ам ЕН ВА (|-: ек ІП шо шо ев МУ Жк Ж КЕ ЯК ней пен УК МУК ПЕ о ся ПАМ сек У ЕХ ех МВ «це хх ЕЕ ОВО ее Ж спхимл а МНЕ ОО ОККО ее КК МН КК Я Бр де ее ж и Я ЕЛК ВИК: я косах Яа ОО Ж Б КК як ОК она хе ен вл» ЕІ св МАТ БО з ск ще тини: ін. ваша В свіжу Як ІОН зх . ГЕ ші 5 пов З Се НІ ВЖК по ЦЕ Бе пи БО м ще ВБИВ дотри ак ЕК в КК КЕ УМКОх шк ОК иа ок ВЕ Ам Ше ща Ба ве в. в с ОБ т дк МКЖУКМ Спа їх нка В ЩІ СУКОМММИМИХ ж иможкЕ а ВК : НУ я З товщу теекВОя пев ГЕО мох ве сн є ке нн виш етвех с Де КК ОКО КСВ ОКХ я м 15 КВК ва ек ї А у ще Ба вовни п Би ЕМ В Ню хат а: Б: У КО МОХ севкове З ши Я д спиш: д дк ков ААУЖ СЕС 0. пн тен енне ЕН НК ХЗ пр ков НН НЕ КЕКВ ЕК 7 пор п Ку З Не шо ОК І МТМ ше света Ме ше дини ОО ВУ уза я м ганок: горе: я я сн Б Б зюво в ск нов вве У пе, и МУКАХ ЕКО КУМ КЕВМК у с ЕК ВК ВК я ОНКО Я да ВК Не засн ти ко й пе м ак ве ЖАХ пох, Ш ЖУКИ п примоно ПК ЛОЖОК ТУ п пил ж КООКИК 7 вики Бе те ЖЕ ЕН 7 о пове ЕСЕ ВК В : «лова шо ВО пава ве ВАВ СЕС шо з ен КС ЛИЖ ач яко ду ЩО ОА МУК ЩО К Яд о КМ ІК ща КА ОВ щу ж ЖІ хе же си А У Ок Фіг. ОМ А МІХ жесту 7 ж КУ ЩО БО кое ох ж ох ВЕ ОНИ пох аа Ши не МеВ я З КК нн кВ п еВ Ох пиогох НО В і. і БО ка м ОО ах хек пес да КЕ ХЕ й я я КВН Ко отв Ще УКХ а ЩЕ МАХ до ооо пе ЕН шо як з нижнБеевЕкиНн ше: хе в ВУЄ С НУ я ЗЕ сен ЗК ПН т Б п 5 МО дих ха жа КЕ мЕК БІО МК Ка СО Ту нене кожен: Ат ЗЕМ А М З о скине овен хі ша Ж КИ пав на У п чно М ЩЕ пп ТА ТИ осоК вк: ек ПН жк кенояЕ Ач ОКО Я ша Я еле ско «ен ве і Ех ЕК ЗАКО ж М КОКО ї Її З ! В Ве ПЛАВКИ ПОЖККВ ТА т ЗЕМ дир тики Кк ДМ МЕ Кн ща 3 Подк евео вк поки СОКУ щ МКК ща ах Б ОТ 455 я Ще т екон: вон мое нн ж У ее ким А ЕК КВ еВ є я ут оон е ух ВОК ши КЕ екон зв п Бен возі УК ПТН й Б КН М КК щу : кове ВУ БК НЕ ВК КОКОН ЕВ ря У ЧЕ ВЕ сен З ще нити вУкнеоененнни вУВо Во шен тотт- ах п вон В ОВ ОВ вве НВ: ха чаю но п г ен ї певне: ос она ОК М а. усна «Бр ме ай в ОБ ЗВ че скор и ас ех осв ще земне и: себе шпіц Оз КК хх що ЕР ж МО ОМ МАО КН УА І ПММ УЮ КК
Фіг. М ве о за п а ве окон ВО ща вки» оон: КК З КУМ я БЦ ккееооцох канон 0. ШК У БІ ПІК й. о Ши Я теку ВИ ї ВКМ КУКИ ех ве со кт р ка ще ВА ОМ ОК У окон повні ке ее НДО ня зІщ Іо В. 5 шенні. пл п т конвою - си В ШЕ ПУЖЖО ЛИМОНИ И М ОКХ Тгх Щ УОшНя КА КІ ваше СЕК ОК КІ с: екв пен не вв: в ве як КИ НК кокон КО В БЕ ЗІ ОК я ТЕЖ ОО З хо но : що ХК ВК Ве Ме КЗ М о Ж МЕН ВК ЖК ТК Ш во зквни КАТА ЕМВ М Ю В я оо певних нове не зва 7 сор КК ОО КК КО "БВ х кан уже щех в. А КЕН КУМ ОО ЕЮИХ ШЕ пи Хо вро оеввев Бора ен в КН у В КО ЗОВ ОК КОЖ якшо ее щу: Бе В з а ОО ШОЕ НК А и ААУ КІЗ яр лит окт ОКО КАТА ОКЕАНИ 5 МЕ я ПОН еп Ева нев нее ві ш - и ОК КИ УКЛ ЕМО ВИ Як Уа о пе тв ЖЕО. ск со сжеооххх хх ШЕ ОК К ДЕ . ши о крвк в КеКо ве мае вона В я же ет Со еВ кс нев ЕВ ПК ОК Я шо я . ІКОН БОБ ЯК о пн г п я осо песни В у тек ах ТЕ КМИН ММ ше ТЕ З ек ук се ПВЕК КЕ її ВАМ БО ОК Ж ї ТИ пан сн о у МКК я ОК ОХ ЗК ОКОМ Ол : зр Витоки КЗ І її І хв саке ть ще В ЖК вне т ТКУ нет в фев воввще в АВ ЕС КІ С з ВЕ кот вес зем еве ББн Ук т се кент Ко о дОв УК КК КВ ПОМ ож КВК й шо Б: ОКО п заса кети и В к ХУ МК Мя КМ ЕЕ ска вк оон ноя совок пиши . п ОК КК носове ПК В КК КК п МОМ : шию М ПММ х.
Фіг. во
У вот совок 5 шо ЕК пд Кс ке МІКн КК ЛОЖКУ ЖК ї. ет 5 КЕ конк що о есе КК В ЖЕК ОО зеБсвснях ЖЖ «в з сю «тн ДЕК сеєкоеюєх жк сх ЯК Кк зн о Са ОК ще "Щі Бе Я ке БО ТЕО ЕЕ З с нколесо ЗК дяк дю м ре я шк 5 ОККО хи Ж зо екшн се В сек С ЕК шко Аж Б ОБ ВЖКИМ ПО я Ка КУ ЖЖ В ЖЕНЕ Бк мен у ЗО ЯоЕ п о «С МОВ пек: Б: хе ЕХ Ї Кз якої сжеев 5 як У ЖАХ СД ема ож у я ОКО их 5 Б їх попу зе тик ВКОБЕЕ п щу п шо І ОБЖ ЕХ МЕ Ко ВО ОВ я ОО НО Я Шо те ннне сек Й а ЕН кн КЕ жа БУ ще БО ККв ве ши шт пев вів є екв Що М ше ІРО о сонневк КЕ ве ідею У Б ОО в МК ПН сш - З У ЕСНО КК Я ше вв їх швея чі тРян Ох Шк з щи НО БЕ Й ОО и ПЖх МЕЖ . соди ОКХ Судно ПК ХМ БУМ В ; «пе лот дак чт А АН М пенктезакикі У же З ОК Я чи рУеНе я о жоснщ м вх МЖК ХЕДКЕ піком З УМ К ий Ба З се ВЗ Кк хе ШЕ Ж сою МЕ ом що я. ВКМ МО ЕОЖЕО ве МО а кВ і певен ха Ж ХИЖИХ ЕЕ г у КБ КИ дико ке зЕЖ ОО не я вк й чн ВАМ КСО М! сдеоксн БЕН ож овен сх аж іже ЗВ. ї а; о Коник ен Я екв Кн хо 5 о Кя ух с ЦЕ В ОХ о ЕКО М дк - ЩЕ екс квея В хх вових мит : пеошханевки 7 я Шо ю виз я п я Ім ета МеВ Ж ролю. ПМ ТК. ше З З ЗИМ ТХ сад дення Ох КЕ з М ОК стркр ку КК хек, ПОВАБЕО же 3 мех ек вея Бе НЯ кою ще ке З паж хх БЕНХ У ї КО В З Мере Ву ВИМИ Ж Що доля І ЯМОК о пи ЦЕ ЕЕ МІ що Бик яко кж КО КВ аа М В ; ет аа: де: ж 5 ОКА с Му ее ЗК З . току Ох ОА ОХ ; ВХ мок Фіг. 6Р щи що у пох, Ем Е ОІВ КЕ дах я и В ту я с ПЕН в ще ке вки щу я ке ї ек ке МІД Б пажини, МКК ОКУ МЕ КЕН «ЦЗ! я ж пре ОБУ че ЕК Вот а пе вет МИ шщ- БЕ і докккеке я кое Я оживе о а КК ов Вк ПАК кв Бе п. ша п ОКО НО кед КО сни КК МАМІ НЕО В ВЕК З пев ехвА не я Кевін: - ее е ши З Оп с едвоквкох о в ТИ ооо я о З о ее я ЛВ зе що БК ВК 7 же секти Б щщк ще ку хх ВУСЛяЕС В ЯКЕ ; неви: а Ов ях АК КК ех Я ОК Же СХОЖЕ и. ке вищ КЕ ЗУ шодо ше а Б 7 ва опт с ан ОБО ОО ОЗАЖ Бо пе о я па ше я шк У соту Б Ов МККИХ 5 нище 3 53 я в шо З Ж їх ще ши вх Ж екон пк: ТЯ с кт ЖЕНИХ Бо ПАНА Кн с ККУ кх | ще я БІжОо юне хе Чо : сок п Ж Ба ккує МЕ пев в пен зве Що З ко ЕКО ВК В ш. з ін: ЕК В кв вен, М. І ие МО з ЕС ВО В жа ще . БІ жа БАК ОКО ПО Е ПА ВО щХ Кок Мен БВ кжех що я Я ще ше шо пен ее Бе де З ОВ що Я соокононоюя А З КСО ВЕ І о ЕК ОБ ЗК ЖКОВ г КІВ : ЕК ша х ОО ГЕВКО пен ЯКУ ПАК вищ шин ОВ х шо шо КД в їв шо. ТЕ т о, певен я пе пот р кове ще В : ВЕНИ ЩБОВ у БЕ ДЖ ктосеещер Си ГК ЯЗ КО : Х еко оввнн КСО а: еко
Аа. Ж А СОСИШ пов а ї ОКХ сах КОЖ в КУ Ї й 3 5 МЕН ско, БЕ ж Щі : Я ОП ЕС МО г. БО АК ОБ Фіг. ВИК
Ну ке я ода ко ї о на м нн ; Є М и в и Х ОХ У я ск с КОВО КО ек КВК 3 ОН МБ зані ем ММК КН ше Бо. прик БУК ЕК і овен сову пен ен зи в ин ккикиКикх ї З ПП К У КОЖ кро СОМ УК о і п. птчРЗ її суху дво ам ЯКЕ МЕМ УМХ -Е с шення лася п -- ем ен оо веною ВЕБНЕНЕ-- шен АВУВА ОЕМ В НО ЗІ МК ж пеню пекан ке ПОС МБ у ОО ПТК БИ ний АВІВІЕО І їх шити КК КК в но ВК шосе | 5 ; ЗУ ОО и ух а. її З дя - ОДМКК ЖИ В КК ОК ДЕК АК КЕ: т Що за ЖЕО З МО В БОМ КВК Св ОВО по повен оно кове ши с. з ке ОХ ОБ А БЕ ПЕКВ КН ОВНА ВОВК св вн ВВ: Ах тих Ве ігр А ККУ ЕМ КЕ шию их Ше сЕщЕ квот косах пив кине З пн Б - ОК КО М ХО м МКК НК ВЕ еВ ПУСКОМ Ж о МЕ нагю пол тт ЩА ек оековко І 5 щ М 5 я В еуним т ІЩЕ ВИК ТАМ ко КЕ ? ня я пз кН ге В ВН -- ОО з ОН З ТТ ЕН А КК КК и ка Кв В каре УК ДСК МО В Яку бокова ка Вес: ос мае п Ам її чо Зо ке ї щі пут ши й ЖУМЕ неп ет, СУК я ААУ ВІ МК ОБ в Ж се тик каш «нн ке НН КОКОН В п. а овен п ї А Око М ще ї о: о т т ЖК ВУХ ТК Фіг ОЕ я ЖК а ке БИК денно нен Же п нд пн шо пе ВОК АК ВАК ОК о ОККО КК КК и сх веж ків а ШИК КВК век о КК КК и ох ї А НКО И г ж Б. кофе вих Шев нне Те я З . ПОЧНИ а Ж о ; п З Мо ве я лк 7 кат Ек ОКО БО А ОТ КВ ча пи шк Ше пиши : о ДО ВВ В вк 5 5 що ЕКО ня ПЕК КК КК В п по т о сло дою МОСК ОК КК С КЕКВ 7 АЕЕУА ТВО НЕ ВКИ В МА ЗЕ сій 5 . дев» СК БЕ КК КУ ВОЖ ОК КУМ Я , Ме зо ага що сарі схе ХО ПММ ОМ хушЕ т. ЕХ ноя Б ВЕС я і. их ще п ПИ о ХКО Б ЗВ нн КВ хв ее п! і Еш у ЯКА і | . кока В М ща КИТИ ж нн ЗЕМ кни ни КК о о ВЕК КВ МЕ пиши п Сон Кв СО яи КВ ЗК Я в НН Шк твй о веттк нт т НО в неаеке . п КИ ІВу кі ух нати КК ся У шо ши ВАВ БО МОСК Я віщо зерен: вс вве щ виб се Би МОВ ї ї МК Ї ах 7 о. п Я ами доннй що ЕВ КУ еВ В с У Кв Я ОО ПМ х т вКю ММЯ 7 . Би КИ й ення сок вк Ки ВАВ ЯУ ОБ КК УК ОВ Б БЕ Щ зе ве; вони о пен кове КВ ВВ днк ок вв ХЕ І (Ва ще УКВ хе ев НІ АК "СЕКЖЕЖХОУ КМ. ОБ ВКМ АХ ес ее В МІУ ОО КК А од еще онов зе ще пев: я вам пе в ок ев КК в вк ев - КЕ НК Ге М Я БЕ г му | пе тов он ох о нн ен а ЗОВ УК С Ох а ЗО ВО КЕ ща хх са ДИМ КУ дл МК т
Фіг. 565 жк ШИХ ще я КЗ я в і. КК ОК Ко вн КК - мВ ОМ в НИ 0. Її . ам Урі ЕВ Я ООН ОК т в ва МК ВО АК ПТ пе . «З вк ВА По ОВ свв і п Ор В я Од: ОО В Ж МНН КЕ ВК Ве еВ вся КОВО В Ко ЕК ХО ше МЕЗО КОСЯ тота Я ях стен с ек твквв КЕ ВВ Ж Ба ее ЦО КО МК я | -- позов а Ж у 5 БІ БК Кя її - Ж Ед ВА ПИВ КІ ЛОЖОК я СВ с шо ААУ СВО Б БК Б МК З ще век в нн ЖУК ї МАВ СК Ко комоди ОО ЧК МК. ОК ПК оби ОККО ВК по о в М х ПК МЖК я ак яю) в Миття БИ я ня ВЕК За В ЯК сво ОХ о юн нев вок ев Кр ко нон ОВ В ОХ Б Б КЕКВ ЯК - Кая юн ЗИ сх ХИЖИХ НИХ Ех Кох Щ ; ам В Що ЩЕ Без УК щ ХАМКИК й БО Й дк дитинко есе мок ще ЖК ов з М ОН КК УК кВ ОКУ с песо: Я вало ех пок я ск З я не кара шк Пе ПЕВ КК " ЗЕ сх нн оон не по п М ЕВ У нКк й) ши чо оз п ще АВТ МЕНЕ КК В МКК Я КК о и ОВО ока СОН ї мин ви Ми но ОК КИТ ОВ КК КК я Воплі і до пд, ру каиу. щх ЖЖ ЖК В КВК ВИК КУ С с Я КЕ КУБ ща В ЖВ: ЖІ ПЖОК НК МИХ ооо он есе век ККУ и рю Б ДН то и Кк КК око ЗЖЕЕК БЕ: сів Ух кн ВЕ ВЕ ЕЕ зве: З Б ау ВИ Кор» ЕН пе вве ЖЕ ков векове ХК в ВХ поста ще ке: ис вве из ав незавнев ЗО в ВК КВ виь с Не с сту ЕН Ек т З ХК АБО ОО НО В 2
Фіг. ст яТУ дк» ще ще НК посли АЛЬ ; ЕЛОЕННЯ одне я не я ОШо кк КК Ве Ж ще ЕКЗ оо АВ ї пен коеваннонсивники хе щі х МБ ОО о МІОМИ ММ іно С Кт ни сЕ іо ХК УК КК ВОК кв и щі ВЕК ТВВК а ЗК. МКК ле У з аауУЖ ОК Би ОИВЕЕЕННО ВХ ше о з о ТИХ х я шими пили, пе ву в а КОЖ ох ОН се Ж ШК оюмоз ВЕВЕКНееВеАнеттене кеК Вик: М МЕМ де но екон ви ши м Ов ох ще В ОК в ВА В НК ша В М В В ДЖ ЯК ЖЕ п що о ОО в НК НН В Я в ж пес оон тв НН З З Мов МО сен вк тт в т ва ши ЕЕ В щи ж БМК МИМО К а ЖУК ння Я АКВА НК. ЖК ЖК В КК ПО ОК В БО г косо ще ке х о В В ВК й . Шо Вау З ОО ХК ОН сек с мне пшоох | зе в в ков кв заст КАК в А вк В кт КАК КК ОМ КК В ків ПС щих МК КО ши т он ле вм кеди ке: КЕ невже о, зно ПОБУ Ве КВ Іони ОКО В не КК КВК ЖЕ жо х БЕ МО т ВОК Вовк МО я ХО 5 мАчт ЕВ юю мог т Ек ТЯЖКЕ щей . сне сво о и я зве І аж ВЗ у ме певен евео ке тек, їх хек ку ВРХ ОО У ПОКИ Пх 7 ЖК ск в ВО кс ішевя п, ; ве ква вени повен зе тка кое: и : Со ко пиво пн. ОК в дн о ; Я п , ОК и КОКО Ж пдке ів ж ВК ПЕК УК М КК Во ша ее З КХ ЖК 5 ОК М КК В
Фіг. и ня а тв . се ї . х да свое кт ху ее о в НО в дАшІ ОБО МЕ МП и я ВВ соку КВК КК в АК ЕК Я Вата Ж БЕ Кі ше Ен ще я БЕ р пе пе о о ев ох о в ве я в в в я ВВЕ Ач ЕС ОО ВВ пе ща шт М - з що їЕ В х - кас КК вів ОКО КК В З ЗО В ВВ Є КК В КО, В В КК вв Ве о ВЕ ВО КК ЩА КА ЕТКЕ з н К м ж. м но хх нт, н н хв фер Не вер КА ож а Ам ЕД ОК В п поло Я хе сиве Ще жерх ОМ М В М В М М М В и ме Ме ща о: хара ве ВО ех кеее о ев о ех ово В НО у: БК хек кре ве ЗБЕ АКБК ВОК КМ Я З ОВ В ХК В В КП В о ВЖИ ие ШК КЕ Тк . НЕ ок Ж ее Ко вок ЕК ж ЗК хх ОК Ки КК З ХОКОСНХ я КОВКА пк МК Кв СТ дАМТ ВЕ Ю МО: В п по оч ! ЕІ й м : з с х . нд - я У с . кар ЕМ НЯ и в ОО аАУК ОКО Кот п оон п Ж ді и І веж вух ЗК КК еще ОК КК КК Ж ОК КОЖ и пап ен КОКО ВОВК ЕКО В ВК КК ек КВК А ВК ВК Ж зви КВ во КВ Кк КЕ ВЕК ААУ ОБО О МО г дк
Фіг. БУ Тай жо У КЕ У я ООБІВ жду хви ке сиди Ж Ходи КК дек ак о ек о ох кекс МКК 3 : АВМІ ЕВ НЮ МО: З мет Не вп ті во ОТ туаа кві дж НН о Ве ж КК В ях ЯКО З кам пови В ме НЕ НВ КЕ ВЕН ВН НК ВО М КВ КОК нене ВК зво КО КК В я тах ТА х кковх ск кІЕх д УЖ В Я ААУ Ох Я па ТЕ ЖДЕ КІ ще ї ще І. при г НИ ххе вве век Ж ОО ОН в В В ще шо ЮК юю пн пон як ща т кож р МК Ка: АД в В М в п 7 ПОКИ ШИ ХК; ве Ж З их ТЕ «ОК дХ шов їх Фе Ку ХЕ ге Пи КК КВ Я с екс ЕК ЕК КВ и ВК зви ОВ Ам БЕО ОО ОО а пт вот ЦО ВІК УВК тах хочу вач МР віче В ЕН ВОК БК ВК З ОВ в ок В, ВАК ВО Б Кох ях і "дк сш в клю Ве ВК В ВК В В ВЕК Я КВ КВН ук В же кВ кое ВВ ВЕ и А пн ке важ " В с жк фор вк кажи С де Кт ОК КК аа еВ ; о КЕ КВ КвИЙ я ААУВІЗЕО ЮК ЦО Ше в СЕЕХХ - з ПИ т МУК ОКХ ж ШОЕ м о ще ВАЖІС БО ЕОМ Ж па
Фіг. У
СС с но В г 5. а НВО ВК я ОО я с х 5 Доки оо п я Коен овен М ях і. 3 Я Доки ЕНН ОО ОХ х с в 5. ПЕ г с с ; г ВК: Дон 5, с я с : і. п ос с г ! с ВВ ОО и ПЕК г с о. сс с : с с 0. с с і с п і ж с ОО ОО М х І г с МО ОКО я ВК М ОО ОВО о с і. с і сс с І у КК и СС с с Дункан с . с : с я с с Я: 1 с мно нн нн ння КЕН і ДМБ МО ОО ОО КО В . М о Як ОО ЕЕ вн с с 5 вх вм о В с В шу онов вноввввяя нн НИ пон оон . с ДОН 0. Де с днина Б нен о ОН НН я поненнннкя МОХ ПОН ВК Сон вних ос : с Ва У ОКХ КО я оон о а КВ с п о с нан с : с ВО : ос с с дк с Звене ОО МВ ЗК М о Пе ОО ОО и Воно Б Даних Ви с с с ПО Б
0. ВОВК с ПИ 0 оо с с Дон с со є о. с МО Дно с я с с оон с ЕНН У М ар у В По вно ВМ п с о с ПЕН ша с г ее Щ5 с о ФБКГф(ГюМ нс с ОО ПОД ОБО ООН нини ов Ен с Дорн КНИЖКИ а ПО хх МО с 3533355 с ж сссссссннН Щ( с с с с с Сон. ЇЇ с В с Же ОО ОО ОК у 5 п ОККО ПЕНЯ ДЕ Ой ОХ ХО М і я ПО КО Он ВХ. ЕХ М ОК пня с с с с с с : с п ДЕ а КУ п ; с с с с і - їх ЕК ОКХ ОКО НК оон с с о СУ п В Ї . с х с с Кн нкни с Ох: с Ме ОХ о в с с с я ССО. 3 пе зо ух ОО ПО с ог с Ов КС. ПКЕЕ ОО о я . 1; с БУДИ Б 5 ОО п КН ПЕК Я онов ВА ОО Ох о ЩЕ о ОО Но м ям СУМНИМИ 5 ДЕМО пок они ЕНН КЕ ВМО с пасавоенвя внененнннннях ВК ОКО ОО ПОВ ДО 3 Ки ОО ВО з с ПЕ с с с ЕН 0. он о. о ої ВО ОК о Пи ЕК еВ ВЕ с о с . сс ВО вх ХО ОО о с Ох УК ОО Кене ЕВ В В ОО я с о. 1 о 5 х 5 ОО о. с с ВО КВН ОО ЕТО В ОВО ек ВВ с о с З. 5 ОЕИЕКИКИКЯ КК КК Е ОО о с с нн С В ОО 5 с с о. НН. с ВноеЯ ОО ОО уро ОМ ОКОМ с о 5 с НВ УК ОО рон ВОК ЕХ ОК и ОН МАК ОО и ї ВоКоКн ОК М Ден ВОК Кия я ЗОН с і. с с. оо ВО п ОО с с с с Ван Мн он ОО с ЗНННН т 0. о ОО я ОО Ох с НН я В М ПО ЕК Он я ОО КОС З Сх о. По ен . ПОВНО Б: ше ОХ М ОКО НО У. У ООН зно ОО оно и а фон нку Вднрорвв ОККО ОВ КВН нин зн що і. КЕ ОО ОВ КОВО
Фіг. 8 т с с. сш дере п є о. с її ї о о з З в а й п юн ; є о З ох ОВО : що СВ их ЗО шо с Ох о ЗКУ я ЕТ ЗК с с КВ о ОККО З ТО о КЗ с с о А о. ше. с. п ОКХ Я. с З З о с р ОО Ве ЕХ КЕ х ЗУ ОО . ОХ г с ко о. 55 гг ! Й о с о о шт є як я о. ХО У АХ З ЗЕ ОО нн їх її с КЕ З Зх г ще ХА ЗХ а КЕ пе Я
0. . о. о. пс З -. Ко х . о о. . в т Що СВ ї по с с . в о о а. о. З 1 Но : ЗО Х З х М о о с щи
ЗЕ КОКОН В ОК пса ; ВО ОХ Ох СХ ОО я ВО о КК ОХ В Бай Я я ЕК З М ще еО КОЗУ дин шен Б ке ЗЕ ОВК КА ОККО ОС пре теа ї 3 а п Ух я Мей Я МКК Соня З УМХ Ох ХО З КО ОО х з БИ ее ш с о с . ее Наш о. АХ ван о БЕ Кох Ко сх ТУ с о. о Есть с Се БОЖКО се А с . В Не ще ЩЕ ВО се УК т ОТАК с МО де шия со 0 с. с с Зони КОС: ПД Кт Кт МК ПЕНІ ВХ ОО ОКХ Ко о ня ен КО ВІ п Ел ЩО ОО КЕ Б о КУ МАЯ о 1 о о и а 5 еВ КН С МУ ХУ ш. й В КК КО З КК КК УУБ Ки,
і . І чо. с с о. ОХ МА У ЗХ МК С Я Я І НК МК Я ОБО ПОБОО ОО Ва Я Штучне пис 5 ние о ї п о ОО ЗУ КВ В я ПО ДО ЗК ОО КО о ОКУ з АВ щ я З ВС ПО я о С ХК УК ОО ВН Іва Я І З ОО В КН КОХ КОКО Ох с г і я о. 5 с В у ТК НОЖУ я ОК Я . й о і З о ек ОВО СУК Кн ОХ х ЗЕ я З ЖК КОС ! пе 5 ОО СУ ПО З МО о МОУ я о КОМ К АН Мних ПО АХ п ОВ І в.
а: . ші
На. В ХУ ОО КЕ ок ки ПОВ Он п и . У о я й Б п а я о М 1 ПО З в Я по ен В я її М ОО Я 5 що я КК Ме ОД 0, 50 мкм 5 БЕ а несення 00 Й У ще де х ун Е о В І . З з Вени я Ще КСВ Я З й а Мой ка св її ше: КУ ОКО оно Денне Кн в : шо з в ко ННЯ 5 ОС НВ 5 яю 0 5 НО СІ шо не ГО о ВК ож кави С я ж ПЕ ВХ МК п щ ЯК Б ва НИ . КИ ЗХ В ! ах р ОО о Вон - г КОС Ох хх й ОО КК ЕКС НННЯ Г ОМ З ММЗ ще ОК ОО ОН В й ж ОККО ПО е о її певно ВЕ о: . 30. ОН ей : шо. ОО т Б п п а ол БО шо КВ о 0 її.» 000 ж 5 я Я ЗКУ МК ех ОКХ КОКО 1: Ге поч М і : ол ОК В ОКО п ЕК Костюк ОКХ КОХ п хх З с роя о. А її і: се с Й її ом ни о ОК с Б ша . її Деко п ХВ за ЗК Б о. . . ш п Кт ОО сов ; у М | НОТ : и; ш- НИ ва дак щире се сє ОА их ооо ом п З ах Ох З Ж. зе і ПАХ ССС К КОХ Зх о 5 з ще не К РОЗМ ЗУ ХХ ОО Ос
Ух. с з шу, ев щ й ШЕ МУ я а ОБО оон І НН: ОК ЗОБУ МЕ ОО я ОСКОООВ ХК СХ ОКО ОК БО ОО Нм о: ек т КЕ В ВК оо ЗНАНІ МОЯ Кох ОО М ОХ ОК Ди СС Од МН Й шо о її о о в ке КО нн: ОХ ОККО ОО ЗНО х ОО . .
г в. а о. ТЕОЕАЕВВ о І си тб у п в Не ша. : о . і; с т» і. ОО М ОМВО Я а І: о. КН ОККО МЕ ВЕ В СХ ПК ОВК ЗК А ши Я ПЕК 5 в. з її ее с с о . щі с В ШО У пе ВК о: о ЗО і с в шо с й ХМ я и ТЕ ВО я Б х Кс і шо Й шо; ше в ш ПК ОК и о. МОЗ й ля ше і шо ОО не ше: п КК ОО КК В т Ес ЕНН СЯ СК ОХ хо ОО Я ї ща ня а З с и ЕН ; .
с. Шо І й а ОК ОНИ Вовоя ен тб Й ня
Фіг. 1ОС векв а | зе кк в фев: и вні все ороросю й В В у в Коста ев у я ху ВЕР УЖ» і ши я си бе я яні о де ОВ В у й й ОО ше НН а о. и ТК мекон Яр ща Ве ВВ ГДИМНКВКОЇ ж ВОНО ОК Я я Он они ен оо У я Я ВХ ешЕ ше КВ я Я ВХ ЗУ « в с ЕК ОО В т В ою Я і . Не 0 ша я як сс о х Б ОО В Ен с Ми Я б ОКХ Вон ОМ ОО Ко яе я ша с с ПО ун ша В с КОКО ВК ОК о ОО ОО У З УКХ ОН ОК М во Де СОМ що. МИ ОД ОК ОК ОКО ЗО З . о . . с МО с МО О о о Ка с МО КЕ НН КН З У ще є ОБ КК КК ЗО ЗУБНИХ п ОО ОО ОК о а ВО о нн НЕ КЕ п М оо а тв ВО В В о. с. . с я пові Во М М н.с г
5. ОО З З о о ОО п и: М с Ве Ох ВНох ОХ ХО КО МО ооо нан с й п с ви о ох ОО ОМ Ин и. о Бк ок Ше оон тт є її -к ша е геЗ ТК ЕК ен МО я Ти г . й М й ше. МО Я ен ші ще ВХ М и шия син й не 535300 нн Ве нн Зв Бе есе: МОВ ; и о о. о кол Еооовю я Ко ооо ов я и н Е й еф ЕІ КОСИ ОМ А вия БЕН М жеееоч фо пе пити с да І анти п ня ння я КЕ сів в пе ОО ПЕК п ОО шк о пен пе ПО я шк в ОКО Бе Пн Я у ЯНВ ПОН В МО ОХ М я 2 У ДО кв давню Ох о с я 0. 0 пн В ОО ОМ НЯ МОМО я М я о о о. о о с Її о Ше шншнн с Нв нен Б ВЕС нн МУ п То сов Б МНН ою шини кажи кОкаая ЕК ОО он ВВ Зоо ств хе я теме о рада МОУ щ КОХ З СО З ще Ох У о У с ж сх ОХ ОО ОО Х с а о у А ОХ ККУ ЗАБОО Ох с с ша ж ЗО п ЕХ МК КК І с о. - ОККО ОХ ОКХ КЕ СО КИ с о І о . , М ОК З ОК щ о. с МК о Зх З с Ся ОК ОКО КЗ ОМ ВО УМ ж М
Фіг. 100 ема ОО ша СКК с шо пово вом вве ВАКЕ КК Мо Ве о ХХ шт ші : КК КК ОККО КТ ен ОО В В о с Її ВН с МК МО ша ЕН ща З ОХ п с З с о. що с ЕХ З х с о. о. о. о. о. сс с о о З со В ПОМ З ОО с с с с дО ОКХ СОЯ КЕ СК сс.
о . . п. нн,їїЇ:..- Ж В о і. . с с ОВО о З ВВЕ, оо Ох с Ох с п | і ООН с С о У с з М с ОК М В с 7 о оо ЯК о ООН ня п ІК ПОТ . - З ення У Вени У ВО ПЕК т пе : їв З ї я МОХ. ще ПО й ПО ес я ВО о МОВ сх. с пн ниннни ня зе то В хх ОКО КК З шк І о. ОКХ ЗО з КО хх КО КК з В ТЕ х КОХ Б З ЕК х КК с КК СЕК с 0
: . хх Ах сс . . с . . с ! А . 5. С Ка МЕ КК ПО с. юн З с З ІК НД ОО КОХ ПО і : Ме ІПМ с : ЗО о с ВОК В с М Я З с
: с. І х с
ВО . З г г г о ІІ ОО А МОВ ОХ . ЩІ
А. ЕРЕ. які нохолять із! .ЕкІіНОохОолятТь БОС. АР л з ЕС людини ща КК АК В ват ' с дае вве Ж ОС «І зн ОХ де пов МО осо Добове ОКО у я ОКОМ М еВ: ОК ОО КОД КОКО С Дива а Ов а В ОХ КО ОК о и У КЕ с с ОО М я ДК у с ОО, с ОК ОО що пот в ЕКО ПО оо с ОВ ОО С фра є ОКХ ОХ Я я кН и я с.
с. п ас її. ОО ПЕ ОМ УМ и ООН ЗК У ОККО ОК М КН МУ и КМ Мо ОК ОЗ МЕМ с а ОК Б. п ша ПО М ЗЕ Вя о о о с Я с усссссСсССсю КОКО с
Б. о с о ОХ о У у Ех с о: ПОМ ОО ОО я оо: ОХ ПО е ОО о ССС: ОКХ Ох п с 0 ОО З ПА По с . и с п ОМ с о ЗХ ОКО в КВ є ВОК КОНВЯ З ВО ОКУ КЕН З я ЗХ . КО о о ВЕСНУ МУК 5 с п с
3 3. ж ОО с с с я -. ОМ С ож А . х МОЯ ОО их КЕ К я у ОК о з МИМО
; « ж ше рве, . ВРЕ. які походять із ЕВ-ІРЗС людини
В. КРЕ,. які нОоХхоляЯть 13 1. ЛюЮДННА я - В с є су ; ча дооощек ЗЯККЯВНВО ТВ око Опов о опор о ово ЗО ЗБ Же ВОК ВВ ОО І М в пн о с З вані 0 05 є Де Є ОО ОО МАО ОО Мих Ж овеосоги Бех о ОД ВО о ОВК я ун ОК ОК В В МО я и М ОКХ ее, ОН КОМА ОК ККУ ОК с : с і ЗМО ОКА Х ЗО о ОН С Ор и МОХ о о ЗК МИ ОК КА ОО З нн В Ох ПО В КЕ ОМ ОО о и ОК ОО в ОТО ЗБ я и ху КО УДО ОО ОО С ОК ОО а я ПО я ОО ВХ ЗКУ ПО и ОКА о КОВО ЗОЗ ОО в СО Ох ОО В ОО В В о МИ ОХ ях ОО МОН М Ко с о с МО и КК М В МО СОНЯ СО ще и МУ М о В ОО я МО у ОХ ТО ОО я Пе В У МОВ е ЕМ в В В ОО о о я ОК пи оо ОО В ВО В Я о и ОХ с
3. в ОХ СК ОКО ПО не В о о о ; ше Ох я В СВ ОО С Вк КН в А КО УМ СО с 5. КО с СЕ М ЗОКС ТА ОА ДН МК КОХ УКХ ЗК АОХОКА о ОК х У УМ ОК Я ВЕ ОК ОО К ОМ ОХ 0 У КК ОК в КЛ ОМ СК КОМ ЗУ в М Со о Ак у з У Я СР, УВО Ж ПЕВНО ЗОЗ КО КО Кия З в М ЗО УВУ ОВ ОКУ А ЕОМ м А КЕ о м Ов иа ВИСОКУ ВУ А В ОК Ви ОК В ОВ КВ о Он шо а МН їх Зх Ж - в веж Е т варіант т А щ / везкої - : ; пня ВК ія бою ши ААМ2 кю: БЕРЕ, які походять їз ЕЗЄС люлини т ,
Фіг. 11С
В. що В Ве фе З ка / к | ; Я шою. ке жив аж ддуї в. КОЖ , н ще ; х їв З в , 8 : У довеювютювяня ЕРЕ, які походять 3 ЕНАІРОЄ поднни
Фіг. 110 ЕМАЯН Я КРЕ фест осот МЕН "Контр варіант ДАМУ. ЕС сксп. б'є КВЯРБС АРЕ ММ ЯЮЙ РЕ Ю «Контр. варіант ДАМ? «Контр. варіант ДАУЄ ЕС єкспозб о ЕС експ. ЗП
Фіг. 11Е
Е о. Е ж варіант щі зх ДАЧУ;
; . Ся дк Я І КВ. : Її В м НЕ ШЕ ї 5 БЕ З Зх Ї Ва ЕВ | В Ї ж К-хЯ З ; 4 х : Х. ДАІ нн ем: щею Ж ЕКО ВЖК НН ВЕ НА КК А ЗБ Ебіежспо З оо ЗБ ж ОБО БУК ЕКО Зо БО винен ринки Коко Тонке нон я мно Фіг ле Афліберцепт Ісигн; пептид НН) меОНІ 92 | УБОгКІ о3 о вої о НИМИ и ння УХА АХА АНА и Кн пси Кох -к з ХУ Кен
Фіг. 12А Мун р ЕЕ КЕ ккд Гсигн; пептид ід капи МО а Ілінкер ун сно | шо ПП в в и в еф оо; Ви ПИШИ АРРНКААКАНн х Я ще БИ
Фіг. 128 Лінкер : хи Как 5с- Ранібізумай МІ. щен м ШЕ в КК Кр ви в КК жк МО /сигно пептид важкогланц Ю | М |СНІ Ліякер Мі С) т а ЩО
Фіг. 12С Лінкер Бролуцизумає . і сигн. пептид ію хапла| Мі інкер МН ш
Фіг. 120 Лінкер
Лінкер ПТК б
ЩЕ. Баібозвай «ЕЕ певен 86- Ранійізумаб "Р ке син, пептид о капияу м о Лінвео нісні що і ше АН КААТНН АК НН АН НН АКА АННА АК ЕН НИ ВАННА нн ВЕ ЕЕ ААВВН пов У ЩО
Фіг. 12Е Лінкер КК і Ми п ОП в Тева нн певен о я о вно Я ЕС і Дон А ДА АН М нн вв ВО фіг. 12Е о | шини ше ; | : я : : : | ! : ! : : ах АВ : у Ка ЕЕ : : : ї оч ши : роожмих : ' : о : ї : : : ї : : о : І : : Моя : лих В : : : -о МАО ї т: . : : : ї ЕТО шк щ : ов "о : : ООЕКЕ ї г : ї От ї : Ка : : КК ЕКО ї : - : й Що вна 3 : чо
Фіг. 1ЗА ї : 3 : ; : ЕЕ О. о ння ин пишні не Е я Бе пня ши ши в иа нини ння ня їй ї ї ї : : ОТ : ! ! : че, ! | : ! ож ї : : : : : ЕГ" се ї Я : : Моно : ! : : ої : : ; :
Фіг. 138. - щ- ре Ж ще ех я - х щ що-то - г - с ца я ях в Еш БЕ є хх їх з ще і 3 З туї ; ч о 5 п М Б че т ша п я шо . с у ЗХ се с М ОБ в и В СЕК ЛЮКИ КК ЗК х ОО ЕК Ж ПЕКИ НИ ШИК ММ ПЕ ОХ ЗЕ ХК ОК ПІСЕПИСДИДИНОТИЙ ППЖИКТИ ве ПИ п о ПКУ С СХ х. ще ЩО З п м с с зиюнююх ДО : - пн ! ПЕлшев ВН с 5 о Ах зо т с пт с ТИХ ЛИ т Пт п Я Я пн а п нення Зо п п ее З
1. и п я по ою у
Фіг. 14А янй ян я у ке я я її що оз ОО КЕ Ш С І. : ОО С с 97 л--- Антитілапротно РО 9уУ 55.. Антитіланротно Ба Об вен о 04 пнях БОБ М: пов ; п ОО Е - Кия 1 ХМК. ОКО ШІ В курок. шипа п о й не. пеккеення а 8 ванню До ЕК 1 З МИЛИХ 1 Од МОМИКММХ:
Фіг. 14 : «вої : : 1омнівсне Билев : : й скоовк В, : : п ен і оранж: : г Я од я Пол дю ї. зр нене КОХ я Я о Кк Ве у шо 22 Ж вижене ї Ов Б-я Ту чн : КЕ ша. о т у ре НВ : пт , : кв : сккитвху : се оо, : р оно ПІЮОЦЕНТИС - і : я : же ей ца : к : Є : и ї с ї ! й : р ! Ї ' : ще : кох ков КЕ ВЕ : па 18 ЕЕ МО ЗМОВА Антитіла проти МЕОР(ИМІ
Фіг. 15А
: : : ; : : й : : я: зве ; : : : й : : : а ве їх Є ще ьо а Ко нова Я ву діт : : ж : Грає гу й Жкагісе -- те ї : : кої тя, Як ї т» : : : : Ой ня Ь Я ж. : ! : Хе ; пд йти Костянтин В етики птн сте ЗЕ пи июня х деп ютер ча їх : чу -фк СЕ : Шесу : : ж Кз їж : ї : ЖЕ : : тя о: 7к : ких : ох о : А ї т | : ОВ ! : У і я ех ВМ : ож ої : ях, ; т ке МІЖ ле : : 5 ! я інт ТЕ ' ож ' : я ї я нів МІ ' : : : з є я ! : !
: . : : гу й ко : : : з : : «кВ тугу езхкозу у свя : : : : ! : и я че : І : п. в ко 1 ї : оо т нор това : : ЖК соду о Дт ртутний Пт тоди но дит тт кароюааннй оон Б осстхЯВКосооо о ВВсжокз як : : чи щ уУБВЕ йо : пня :
й. 7 ї У ки з Ж с М одрчкя г їх уч і ! Антитіла праг усе Іа тНнІсть розозилення! - ї ї й : о : ! ! щ ОН вано ній - же Билез : ев вн 7 ї - жа вх ВВ 7 й : пої Кк : т У ско М : аю «ве як ще :
: т. я Уже хе КЕ М ХХ ї : Зх те» ПЮВЕНТИ зехомуюю Я Кк і : Я ЕК ї ї їк. К і, : ; : хх : Ї т; се ж кю За : а. Я я ї : кв, . , Зам о: пенні Пд рда у квой: : БМ : ефе Ек я : ; і Ж. шої : ! х 5 ко ЗЕ Кік тк щі Антитіла проти УББЕНОМИ)
Фіг. 16
І «Ім км Ї ск у: ї : : : : ї ще ще Зк кино : ! ї пддок Коимкикявюкнеєкних хай, сірі ореооорья в овя хек ОО : ї т що - охо Же бою В : ь ле ве Бо оф Ж : й хузі кох 7 ї і Я Ка НИ пас ї : : Ї : х ' : о й я т : їх У я ва ї ї : ; я ЩЕ од ж В : сук : » 5 че т " : ї з ж і: ЧИ ї ; : зазна С ТХ т х БІ х ї Я зт ко гм : С . - Ж з у : ол : ; хх ху ї 7 ск з Її ше они я ВВ : . Ж : пої І пом Я ж. я т, : : знан с Же МЕ : 3 кУш : х ки СК : ї к з нене З са Ж. . з їх ї г арок «а КХ, ж -х : ща що їв З : парта Разовдвлання ї сх "ка : : ; ї і ї ї : ТК : ї ї Х ж : т : : ї І Б ; : : : :
: г. Таку, шу воював, : ху ! х : : вада їж яко плеа о Ж т феном : 1 сн : : 7 т ї до ГУ я х : 7 і і шк : : - З Вот хви ї 3 ї Не : ! : КК ж ; 5 ї ї г хг. о 7 ке ГУ хотів и І Конус ую З Зако ру : 7 океан ВОВНУ Ж п ї В т. "в : : ще : їх в й : ! : ї Б КЕ : 7 Е ї -3 Ж ча : : : ! пода й : . В. ше : ЗО дит ето нет ТХ - й, я Ко с. шин ення принти п не шо ї : : т Є ке ! : : ї ; тож х го :
: 7. т й у т. І : МВ Конт: ПОЕТ ИТОКИ ТК яю ПУТ Хео у Ук То Пметюях те сти я ЩЖш ПДК УТОИТУЮТИЮТ КУТИКИ КОИХ дети УТ ї І ї ав ВК воює сом ФвежанЙЙ кан : : злак : Од удав, ! : я - я - . - з : : Антнтіла проти БОС (кратність розбавлення) !
: : х : Ва : : ХЕ во : : ! і шк ши Е : : ї в ше ши. П:окя : ЖЕ МОХ : : Я І МОМ : : я: о. і 5 С о. о.
т о. ОО Б що : : Б пе г ЩО о : ш- ше ще У п. о о. : БУМ що ОХ ще да ОК ОО М що г ве о. ! І що і що що : сок дик м Кк ха й КУ КУ де БУДЕ МВ несправжня ЕВ ВКШК ОБОВ ВЕНЕ ема Очне
Фіг. 18 і : | : ! : ї . що : ! : М УК ! : : : с ЯУЖУМ : : т : МО ї ся шо : : : : ЗО : ЗО й Пи инрттх пи гу : ге ВО - в НЯ : : : : ОО ї шо : : : ШЕ тУМОМ : : КО ї : З :. : : З : КЕ : укл я а ке Що лобаб Б доба 1
Фіг. 19 ла КТ . : ж : : у ще як. : : зник нн зе ще : ши і Ше : : ше же ще : що : Б ВШ оо Е : й | 1 : па ши : | ! 4 ще се | ; ше ке а о Бе : | ! о г п : : Й Я ПК гої - : : | | 5 Б В сша - ше о ЩЕ КЕ : ж : | Ка Кон г Ж ввщ Кох З ! | пи и ще : и ше а о да дя : доба в лоба 19 :
Фіг. 20 щих. ск фен З о зві -- се штат 7 ЕВ - зе МВ ми се ж З і що ЕР АВ с-щ- НЕ їн ВКо ОН дя б зо ОО БОБІВ ьо Мов вх ОВ осо вк с В ЖК Ах доба вв Ян но пек ше ке Щі По п КК В нн о ен й) 5 п ех не и нн я п ОО ВО т ВК шо і: пд пря Я с в яд ше я : а и и М а р во ше я У щі во ПОЖОЖ ШИ п КИ я ОЙ ох ВІН я осо я 3 г По їв с КОЛИ ПИ ДТЕК ДЖ ПЕКТИ й 0. ПИШЕ МЕ ОК МК КИ МИ ЗО р я В о пев во 00000 Антнтлапротно Бо юЮо 00000000 Антнплапрати БОС ше в нн ян
Фіг. 21
Деба б : ї шкі ї : В : я З : й ха До тнннднсстя МКОКЖХ е : ин тт . - В й - : . ХЕ ї : : ша Я ! : од поз : Ж х : "я : : Яд ее ї : ктетесь бе ЕК нені п Вон " ї : ї : і смію важ В енд спро декутння пітуінийии 7 я пек ВЖК - й во й м вс : : ї- їх . : пиши кун и Я з ї ї : я Пет от . Її : хеонниях х : : же ов йо :
: . що : : те : зе ва : : ! й Я свою т нн и фай дн вия нн няння : і Ще . в т й є г. І се Ь І я щої ї : жо : а з - іа ЖУ фінецтти . Фолти впишеия ім ринки Он ше понти Мн я пебоуюлюни м ТЕ : ве ї : : нь Те са ше : » 8-х ких 7 ; вро т, т, : : ; СЕ : : ня я В у : чо т Зк Є : : : Ї : : ть Сх НСС: : ЯКО Жешхлиуталу ит тею Шо тут пре лит Ід нути шипи шинтити о ВВ, ддутоднь я ВВА дек ув кине ча: ї : Ан но ВИТ МА вадянх УМО їКХ ВО: - ще ; сть тях ї : ЖКоратність розбавлення !
Фіг. 2е Лобо Ох ї т т КЗ я : : ї : Ей Е й : : : й ПЕ нення Я і : -к як Ї : де пе . ї о поолаюи ЙО се МК : сек жо: оо зе ОКО ТИХ ов УВА подано, косе ес векфвет т : ї сей КО шо й ре яки овен шен . : : сх І кхзвйкхх ки ЕК КК МО У : : ж . шжжеюю МАСОК ККУ то. ПО ж Ох 0 . 7 . птн у що . сини жк б титан тити : «кін : : хе ї бе, М і що : З : за ! ве 7 Бхжікюю ЗУБКИ : ї м : ха ок шої . - пад ПО НН ох, ї ки : ше: ї і З ух . зе я до г ї бе: Ле : ех Клваедвнек ЕЕ «г . нити Сл Ян : ЩЕ : й . Яке ення ШЕ Бодлюдн нитки для ОД Ли де дк деяке нк пятїкти До нти ект ДОК Дні Тиятиня яні Дуо ов жеожію КВК кю Кк ож ВК ЗАМКУ МЕЖІ МКК ВАК Ко ХЕ Кратність розоавлення Фіг, 22 (продовження!
UAA202003841A 2017-11-27 2018-11-26 Капсид аденоасоційованого вірусу та його застосування для інгібування ангіогенезу UA127831C2 (uk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762590976P 2017-11-27 2017-11-27
US201862664726P 2018-04-30 2018-04-30
PCT/US2018/062478 WO2019104279A1 (en) 2017-11-27 2018-11-26 Adeno-associated virus variant capsids and use for inhibiting angiogenesis

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA127831C2 true UA127831C2 (uk) 2024-01-17

Family

ID=66631726

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA202003841A UA127831C2 (uk) 2017-11-27 2018-11-26 Капсид аденоасоційованого вірусу та його застосування для інгібування ангіогенезу

Country Status (21)

Country Link
US (1) US11766489B2 (uk)
EP (3) EP3717636B1 (uk)
JP (3) JP7184894B2 (uk)
KR (1) KR20200088853A (uk)
CN (1) CN111770999A (uk)
AU (2) AU2018372235B9 (uk)
BR (1) BR112020010674A2 (uk)
CA (1) CA3083472A1 (uk)
CL (1) CL2020001360A1 (uk)
CR (1) CR20200282A (uk)
DK (1) DK3717636T3 (uk)
ES (1) ES2946747T3 (uk)
FI (1) FI3717636T3 (uk)
IL (1) IL274712A (uk)
MX (1) MX2020005451A (uk)
PE (1) PE20210915A1 (uk)
PH (1) PH12020550706A1 (uk)
PT (1) PT3717636T (uk)
SG (1) SG11202004545XA (uk)
UA (1) UA127831C2 (uk)
WO (1) WO2019104279A1 (uk)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9840553B2 (en) 2014-06-28 2017-12-12 Kodiak Sciences Inc. Dual PDGF/VEGF antagonists
KR20180104635A (ko) 2015-12-30 2018-09-21 코디악 사이언시스 인코포레이티드 항체 및 이의 접합체
BR112020012336A2 (pt) * 2017-12-19 2021-03-30 Akouos, Inc. Administração de anticorpos terapêuticos mediada por aav para o ouvido interno
US11149256B2 (en) 2018-09-26 2021-10-19 California Institute Of Technology Adeno-associated virus compositions for targeted gene therapy
US20220411508A1 (en) * 2019-09-09 2022-12-29 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for making and using multispecific antibodies
EP4028531A2 (en) * 2019-09-09 2022-07-20 Massachusetts Eye and Ear Infirmary Methods and compositions for modulating the interaction between adeno-associated virus (aav) and the aav receptor (aavr) for altered bio-distribution of aav
CN114786731A (zh) 2019-10-10 2022-07-22 科达制药股份有限公司 治疗眼部病症的方法
AU2020373326A1 (en) * 2019-10-31 2022-06-02 Medizinische Hochschule Hannover AAV vector variants for ocular gene delivery
US20240067678A1 (en) * 2020-12-16 2024-02-29 Children's Medical Research Institute Adeno-associated virus capsids and vectors
US20240059743A1 (en) * 2020-12-16 2024-02-22 Chidren's Medical Research Institute Aav capsids and vectors
CN113041360A (zh) * 2021-04-01 2021-06-29 深圳廷美奥生物技术有限公司 一种用于治疗年龄相关性黄斑变性的药物
KR20230167100A (ko) * 2021-04-09 2023-12-07 에이버맥스 바이오파마 인크. 안구 트랜스진 발현을 위한 조성물 및 방법
EP4326339A2 (en) 2021-04-20 2024-02-28 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Compositions and methods for treating retinal degenerative disorders
KR20240014477A (ko) * 2021-05-28 2024-02-01 상하이 레제네리드 테라피즈 컴퍼니 리미티드 변이체 캡시드를 갖는 재조합 아데노-연관 바이러스 및 이의 응용
CN113481237A (zh) * 2021-06-29 2021-10-08 厦门朔望医药科技有限公司 一种预防和治疗新生血管眼部疾病的基因药物
AU2022340595A1 (en) * 2021-09-06 2024-04-18 Huidagene Therapeutics (Singapore) Pte. Ltd. Treatment of rpe65-associated eye diseases and disorders
CN114057840B (zh) * 2021-10-14 2022-09-20 和元生物技术（上海）股份有限公司 包含变异的aav9衣壳蛋白的重组腺相关病毒颗粒
WO2023089151A1 (en) * 2021-11-19 2023-05-25 The University Of Bristol Materials and methods for treatment of macular degeneration
CN116444626A (zh) * 2021-12-28 2023-07-18 成都弘基生物科技有限公司 经过修饰的aav衣壳蛋白及其用途
WO2023173086A1 (en) * 2022-03-11 2023-09-14 Avirmax Biopharma Inc. Compositions and methods for expressing therapeutics
CN117180455A (zh) * 2022-06-07 2023-12-08 成都弘基生物科技有限公司 腺相关病毒药物组合物及其用途
WO2024084075A1 (en) 2022-10-20 2024-04-25 Sparingvision Compositions and methods for treating retinal degenerative disorders
CN116621935B (zh) * 2022-12-08 2024-01-26 广州派真生物技术有限公司 腺相关病毒突变体及其应用
CN117247434B (zh) * 2023-11-10 2024-02-02 上海朗昇生物科技有限公司 衣壳修饰型病毒载体及其制备和用途

Family Cites Families (98)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US608200A (en) 1898-08-02 Toy cannon
AU4645697A (en) 1996-09-11 1998-04-02 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The Aav4 vector and uses thereof
US6156303A (en) 1997-06-11 2000-12-05 University Of Washington Adeno-associated virus (AAV) isolates and AAV vectors derived therefrom
US7323179B2 (en) 1997-12-19 2008-01-29 Naomi Balaban Methods and compositions for the treatment and prevention of Staphylococcus and other bacterial infections
US6506559B1 (en) 1997-12-23 2003-01-14 Carnegie Institute Of Washington Genetic inhibition by double-stranded RNA
JP4060531B2 (ja) 1998-05-28 2008-03-12 アメリカ合衆国 Ａａｖ５ベクターおよびその使用
US6984517B1 (en) 1998-05-28 2006-01-10 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services AAV5 vector and uses thereof
US6759237B1 (en) 1998-11-05 2004-07-06 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Adeno-associated virus serotype 1 nucleic acid sequences, vectors and host cells containing same
JP4573437B2 (ja) 1998-11-05 2010-11-04 ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア アデノ随伴ウイルス血清型１核酸配列、ベクターおよび同一物を含有する宿主細胞
CA2348382C (en) 1998-11-10 2013-09-17 The University Of North Carolina At Chapel Hill Chimeric parvovirus vectors and methods of making and administering the same
DE19956568A1 (de) 1999-01-30 2000-08-17 Roland Kreutzer Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens
UA74146C2 (uk) * 1999-06-08 2005-11-15 Редженерон Фармасьютікалс, Інк. Модифікований хімеричний поліпептид з покращеними фармакокінетичними властивостями
EP1235842A4 (en) 1999-10-15 2003-04-23 Univ Massachusetts GENESIS OF THE RNA INTERFERENCE PATH AS AID OF TARGETED GENTIAN INTERFERENCE
IL151928A0 (en) 2000-03-30 2003-04-10 Whitehead Biomedical Inst Rna sequence-specific mediators of rna interference
DE60141014D1 (de) 2000-05-23 2010-02-25 Univ Rochester Verfharen zur herstellung von herpes-simplex-virus-amplikons, die resultierenden amplikons und ihre verwendung
CA2410947A1 (en) 2000-05-30 2001-12-06 Johnson & Johnson Research Pty Limited Methods for mediating gene suppresion by using factors that enhance rnai
AU2001284160A1 (en) 2000-08-19 2002-03-04 Axordia Limited Modulation of stem cell differentiation
WO2002029858A2 (en) 2000-09-29 2002-04-11 Infineon Technologies North America Corp. Deep trench etching method to reduce/eliminate formation of black silicon
ES2312494T3 (es) * 2000-12-14 2009-03-01 Genentech, Inc. Produccion de anticuerpos completos en celulas procariotas.
WO2002053703A2 (en) 2001-01-05 2002-07-11 Children's Hospital, Inc. Aav2 vectors and methods
US7749492B2 (en) 2001-01-05 2010-07-06 Nationwide Children's Hospital, Inc. AAV vectors and methods
US7271002B2 (en) 2001-11-09 2007-09-18 United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Production of adeno-associated virus in insect cells
NZ532635A (en) 2001-11-13 2007-05-31 Univ Pennsylvania A method of identifying unknown adeno-associated virus (AAV) sequences and a kit for the method
PT1453547T (pt) 2001-12-17 2016-12-28 Univ Pennsylvania Sequências do vírus adeno-associado (aav) do serotipo 8, vetores contendo as mesmas, e utilizações destas
JP4769417B2 (ja) 2001-12-17 2011-09-07 ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア アデノ随伴ウイルス（ａａｖ）血清型９の配列、それを含むベクターおよびその使用
WO2003054197A2 (en) 2001-12-21 2003-07-03 Medigene Ag A library of modified structural genes or capsid modified particles useful for the identification of viral clones with desired cell tropism
US20040002159A1 (en) 2002-04-05 2004-01-01 Weidong Xiao Methods for the production of chimeric adeno-associated virus (AAV) vectors, compositions of chimeric AAV vectors, and methods of use thereof
WO2003089612A2 (en) 2002-04-17 2003-10-30 University Of Florida Research Foundation, Inc. IMPROVED rAAV VECTORS
ATE405295T1 (de) 2002-05-01 2008-09-15 Univ Florida Verbesserte raav-expressionssysteme für die genetische modifikation spezifischer capsidproteine
US20040023390A1 (en) 2002-08-05 2004-02-05 Davidson Beverly L. SiRNA-mediated gene silencing with viral vectors
US7220577B2 (en) 2002-08-28 2007-05-22 University Of Florida Research Foundation, Inc. Modified AAV
US7186522B2 (en) 2003-03-31 2007-03-06 Cytyc Corporation Papanicolau staining process
WO2004106360A2 (en) 2003-05-23 2004-12-09 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Viral vectors with improved properties
EP1486567A1 (en) 2003-06-11 2004-12-15 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Improved adeno-associated virus (AAV) vector for gene therapy
US8071028B2 (en) 2003-06-12 2011-12-06 Abbott Diabetes Care Inc. Method and apparatus for providing power management in data communication systems
DK3235827T3 (da) 2003-06-19 2021-04-19 Genzyme Corp Aav-virioner med reduceret immunreaktivitet og anvendelser deraf
US9441244B2 (en) 2003-06-30 2016-09-13 The Regents Of The University Of California Mutant adeno-associated virus virions and methods of use thereof
US9233131B2 (en) 2003-06-30 2016-01-12 The Regents Of The University Of California Mutant adeno-associated virus virions and methods of use thereof
ES2648241T3 (es) 2003-09-30 2017-12-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Clados de virus adenoasociados (AAV), secuencias, vectores que contienen el mismo, y usos de los mismos
EP2149583B1 (en) 2004-09-24 2015-10-28 Novartis AG Modified VP1-capsid protein of parvovirus B19
CA2591544A1 (en) 2004-12-15 2006-06-22 The University Of North Carolina At Chapel Hill Chimeric vectors
ES2525067T3 (es) 2005-04-07 2014-12-17 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Método de incremento de la función de un vector de AAV
WO2006119432A2 (en) 2005-04-29 2006-11-09 The Government Of The U.S.A., As Rep. By The Sec., Dept. Of Health & Human Services Isolation, cloning and characterization of new adeno-associated virus (aav) serotypes
AU2006304997B2 (en) 2005-10-20 2012-03-01 Uniqure Ip B.V. Improved AAV vectors produced in insect cells
US7867484B2 (en) 2006-01-27 2011-01-11 University Of North Carolina At Chapel Hill Heparin and heparan sulfate binding chimeric vectors
WO2007120542A2 (en) 2006-03-30 2007-10-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Aav capsid library and aav capsid proteins
CN101495624A (zh) 2006-04-28 2009-07-29 宾夕法尼亚州立大学托管会 衣壳免疫原性降低的经修饰aav载体及其用途
US20070274985A1 (en) * 2006-05-26 2007-11-29 Stefan Dubel Antibody
PL2191001T3 (pl) 2007-04-09 2017-01-31 University Of Florida Research Foundation, Inc. Kompozycje wektora RAAV mające białka kapsydu zmodyfikowane tyrozyną i sposoby ich zastosowania
WO2008124015A1 (en) 2007-04-09 2008-10-16 The Regents Of The University Of California Methods for purifying adeno-associated virus virions
EP2012122A1 (en) 2007-07-06 2009-01-07 Medigene AG Mutated parvovirus structural proteins as vaccines
US20100203083A1 (en) 2007-05-31 2010-08-12 Medigene Ag Mutated structural protein of a parvovirus
DK2176283T3 (en) 2007-07-14 2017-02-13 Univ Iowa Res Found METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATMENT OF BRAIN DISEASES
US20090215879A1 (en) 2008-02-26 2009-08-27 University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for adeno-associated virus (aav) with hi loop mutations
WO2009137006A2 (en) 2008-04-30 2009-11-12 The University Of North Carolina At Chapel Hill Directed evolution and in vivo panning of virus vectors
EP2297185A1 (en) 2008-06-17 2011-03-23 Amsterdam Molecular Therapeutics (AMT) B.V. Parvoviral capsid with incorporated gly-ala repeat region
JP2010002479A (ja) 2008-06-18 2010-01-07 Crossfor:Kk メガネレンズ用装飾体およびメガネ用装飾体装着具
CA3020290A1 (en) * 2008-06-25 2009-12-30 Esbatech, An Alcon Biomedical Research Unit Llc Stable and soluble antibodies inhibiting vegf
WO2010031865A1 (en) 2008-09-19 2010-03-25 Charitē Universitätsmedizin Berlin Identification and characterisation of recombinant viral gene therapy vectors
US8889641B2 (en) 2009-02-11 2014-11-18 The University Of North Carolina At Chapel Hill Modified virus vectors and methods of making and using the same
US8734809B2 (en) 2009-05-28 2014-05-27 University Of Massachusetts AAV's and uses thereof
WO2010141706A1 (en) 2009-06-03 2010-12-09 Cedars-Sinai Medical Center Effective vector platform for gene transfer and gene therapy
WO2011038187A1 (en) 2009-09-25 2011-03-31 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Controlled adeno-associated virus (aav) diversification and libraries prepared therefrom
US8299295B2 (en) 2009-10-15 2012-10-30 Johnson Matthey Public Limited Company Polymorphs of bromfenac sodium and methods for preparing bromfenac sodium polymorphs
US8263396B2 (en) 2010-04-01 2012-09-11 Weidong Xiao Methods and compositions for the production of recombinant virus vectors
DK2826860T3 (en) 2010-04-23 2018-12-03 Univ Massachusetts CNS targeting AAV vectors and methods for their use
US8927514B2 (en) 2010-04-30 2015-01-06 City Of Hope Recombinant adeno-associated vectors for targeted treatment
US8628966B2 (en) 2010-04-30 2014-01-14 City Of Hope CD34-derived recombinant adeno-associated vectors for stem cell transduction and systemic therapeutic gene transfer
EP2571512B1 (en) 2010-05-17 2017-08-23 Sangamo BioSciences, Inc. Novel dna-binding proteins and uses thereof
US8663624B2 (en) 2010-10-06 2014-03-04 The Regents Of The University Of California Adeno-associated virus virions with variant capsid and methods of use thereof
US10415056B2 (en) 2010-11-10 2019-09-17 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions and methods for generating adeno-associated viral vectors with undetectable capsid gene contamination
US9409953B2 (en) 2011-02-10 2016-08-09 The University Of North Carolina At Chapel Hill Viral vectors with modified transduction profiles and methods of making and using the same
US10392632B2 (en) 2011-02-14 2019-08-27 The Children's Hospital Of Philadelphia AAV8 vector with enhanced functional activity and methods of use thereof
BR112013020734A2 (pt) 2011-02-17 2017-06-13 Univ Pennsylvania composições e métodos para alterar a especificidade do tecido e aprimorar a transferência gênica mediada por aav9
PL3254703T3 (pl) 2011-04-22 2020-10-05 The Regents Of The University Of California Wiriony wirusa towarzyszącego adenowirusom z różnymi kapsydami i sposoby ich zastosowania
WO2012169822A2 (ko) * 2011-06-10 2012-12-13 강원대학교산학협력단 암세포 증식 억제와 혈관신생 억제를 위한 융합 단백질 및 이를 포함한 항암 조성물
KR101397088B1 (ko) * 2011-06-10 2014-05-19 강원대학교산학협력단 암세포 증식 억제와 혈관신생 억제를 위한 융합 단백질 및 이를 포함한 항암 조성물
HUE038225T2 (hu) 2011-08-23 2018-10-29 Roche Glycart Ag Bispecifikus, T-sejtaktiváló antigénkötõ, molekulák
EP3795581A3 (en) 2011-08-24 2021-06-09 The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University New avv capsid proteins for nucleic acid transfer
EP2768529A1 (en) 2011-10-21 2014-08-27 Intervet International B.V. Recombinant nonpathogenic mdv vector providing multivalent immunity
US20140359799A1 (en) 2011-12-23 2014-12-04 Case Western Reserve University Targeted gene modification using hybrid recombinant adeno-associated virus
CA2864879C (en) 2012-02-17 2021-07-20 The Children's Hospital Of Philadelphia Aav vector compositions and methods for gene transfer to cells, organs and tissues
PT2839014T (pt) 2012-04-18 2021-03-19 Childrens Hospital Philadelphia ¿composição e métodos para transferência de genes altamente eficiente com a utilização de variantes de capsídeo de aav
US20140162319A2 (en) 2012-05-02 2014-06-12 Sangeetha Hareendran Nucleotide sequences, methods, kit and a recombinant cell thereof
JP6385920B2 (ja) 2012-05-09 2018-09-05 オレゴン ヘルス アンド サイエンス ユニバーシティー アデノ随伴ウイルスプラスミド及びベクター
WO2013174760A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 Deutsches Krebsforschungszentrum Optimized aav-vectors for high transduction rates in dendritic cells
EP2692731A1 (en) 2012-07-31 2014-02-05 Paul-Ehrlich-Institut Bundesamt für Sera und Impfstoffe Recombinant Adeno-Associated virus (AAV) vector particles displaying high-affinity ligands for cell-type specific gene delivery
CN104797593B (zh) 2012-09-28 2020-05-08 北卡罗来纳-查佩尔山大学 靶向少突胶质细胞的aav载体
US9938541B2 (en) 2012-12-25 2018-04-10 Takara Bio Inc. AAV variant
WO2014124282A1 (en) 2013-02-08 2014-08-14 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Enhanced aav-mediated gene transfer for retinal therapies
AU2014244167A1 (en) 2013-03-13 2015-10-08 The Children's Hospital Of Philadelphia Adeno-associated virus vectors and methods of use thereof
CA2907799A1 (en) 2013-05-31 2014-12-04 The Regents Of The University Of California Adeno-associated virus variants and methods of use thereof
EP3452103A1 (en) * 2016-04-15 2019-03-13 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions for treatment of wet age-related macular degeneration
US11596699B2 (en) 2016-04-29 2023-03-07 CureVac SE RNA encoding an antibody
CN115925999A (zh) * 2016-05-13 2023-04-07 4D分子治疗有限公司 腺相关病毒变体衣壳和其使用方法
RS61311B1 (sr) * 2016-06-16 2021-02-26 Adverum Biotechnologies Inc Lečenje amd korišćenjem varijante aav2 sa afliberceptom
WO2019060454A2 (en) 2017-09-20 2019-03-28 4D Molecular Therapeutics Inc. CAPSID VARIANT ADENO-ASSOCIATED VIRUSES AND METHODS OF USE
MX2020003945A (es) * 2017-10-18 2020-11-09 Regenxbio Inc Tratamiento de enfermedades oculares y cancer de colon metastasico con vegf-trap humano modificado post-traduccionalmente .

Also Published As

Publication number Publication date
AU2022203494A1 (en) 2022-06-09
AU2018372235A1 (en) 2020-06-11
PE20210915A1 (es) 2021-05-19
BR112020010674A2 (pt) 2020-11-10
US11766489B2 (en) 2023-09-26
JP7184894B2 (ja) 2022-12-06
KR20200088853A (ko) 2020-07-23
PT3717636T (pt) 2023-05-30
CN111770999A (zh) 2020-10-13
EP4272728A2 (en) 2023-11-08
WO2019104279A1 (en) 2019-05-31
ES2946747T3 (es) 2023-07-25
CL2020001360A1 (es) 2020-09-11
FI3717636T3 (fi) 2023-06-01
EP4219695A2 (en) 2023-08-02
CR20200282A (es) 2021-02-18
EP3717636A1 (en) 2020-10-07
CA3083472A1 (en) 2019-05-31
EP3717636A4 (en) 2021-09-08
AU2018372235B2 (en) 2022-02-24
RU2020121215A3 (uk) 2021-12-29
SG11202004545XA (en) 2020-06-29
IL274712A (en) 2020-07-30
US20200282077A1 (en) 2020-09-10
AU2018372235B9 (en) 2022-03-10
DK3717636T3 (da) 2023-05-30
EP3717636B1 (en) 2023-03-08
JP2024015194A (ja) 2024-02-01
RU2020121215A (ru) 2021-12-29
JP2021503914A (ja) 2021-02-15
MX2020005451A (es) 2020-08-27
JP2022121534A (ja) 2022-08-19
PH12020550706A1 (en) 2021-04-26
EP4219695A3 (en) 2024-01-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA127831C2 (uk) Капсид аденоасоційованого вірусу та його застосування для інгібування ангіогенезу
CA3023592C (en) Adeno-associated virus variant capsids and methods of use thereof
CN103561774B (zh) 具有变异衣壳的腺相关病毒病毒体及其使用方法
CN105980569A (zh) 重组aav-crumbs同源物组合物及治疗lca-8和进行性rp的方法
US20210128750A1 (en) Modulation of neural pathways
JP2018508519A (ja) ポリヌクレオチドを網膜錐体に硝子体内送達するための組成物及び方法
UA125501C2 (uk) Моноклональне антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, яке здатне специфічно зв'язуватися з альфа-синуклеїном людини, його застосування та спосіб лікування синуклеопатії
CN102159713A (zh) 用于递送光敏蛋白的载体和使用方法
US11510950B2 (en) Variant AAV capsids for intravitreal delivery
CA3234028A1 (en) A modified mglur6 promoter and methods of use
AU2017256910B2 (en) Optogenetic visual restoration using Chrimson
CA2715875A1 (en) Method of treating ocular diseases by gene therapy
JP2021510301A (ja) 網膜障害を治療するための組成物及び方法
US20220175969A1 (en) Enhanced human opsin promoter for rod specific expression
CN110066769A (zh) 用于改善的病毒生产的禽类细胞
KR102609571B1 (ko) 개선된 광 민감성을 갖는 채널옵신 변이체에서의 돌연변이의 확인 및 이의 용도
WO2021182646A1 (ja) 色認識のための光応答性タンパク質及びその利用
WO2007122976A1 (ja) ポリグルタミン病の治療剤又は発病抑制剤
EP3261679B1 (en) Gene therapy to improve vision
CN112522276B (zh) 一种emc1核苷酸序列及其应用
EP4163296A1 (en) G-protein-gated-k+ channel-mediated enhancements in light sensitivity in patients with rod-cone dystrophy (rcd)
RU2773756C2 (ru) Варианты капсидов аденоассоциированного вируса и их применение для ингибирования ангиогенеза
WO2023227043A1 (zh) 编码rpgr的核酸及其应用
Matsuki Development of gene therapy for achromatopsia due to CNGA3 mutations
CN110167958A (zh) 载体介导的眼睛免疫耐受性