JP4769417B2 - アデノ随伴ウイルス(aav)血清型9の配列、それを含むベクターおよびその使用 - Google Patents
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Description
1つの観点では、本発明は新規AAV配列、これらの配列を含む組成物およびそれらの使用を提供する。有利にはこれらの組成物は治療または予防目的にrAAVの再投与を要する組成物での使用に特に良く適している。
発明の詳細な説明
本発明は、新規AAV血清型であるAAV9の核酸配列およびアミノ酸を提供する。またこれらAAV配列のフラグメントも提供する。これら各フラグメントは種々のベクター系および宿主細胞で直ちに利用することができる。中でも望ましいAAV9フラグメントはvp1、vp2、vp3および超可変領域を含むcapタンパク質、rep78、rep68、rep52およびrep40を含むrepタンパク質、ならびにこれらタンパク質をコードする配列である。これらのフラグメントは種々のベクター系および宿主細胞で直ちに利用することができる。そのようなフラグメントは単独で、他のAAV9配列もしくはフラグメントと組み合わせて、または他のAVVもしくは非AAVウイルス配列に由来する要素と組み合わせて使用することができる。1つの特に望ましい態様では、ベクターは本発明のAAV9capおよび/またはrep配列を含む。
I.AAV血清型9の配列
A.核酸配列
本発明のAAV9の核酸配列は、4382ヌクレオチドからなる図1[配列番号1]のDNA配列を含む。本発明のAAV9の核酸配列はさらに図1[配列番号1]に相補的である鎖、ならびに図1[配列番号1]およびその相補鎖に対応するRNAおよびcDNA配列を包含する。また本発明の核酸配列に含まれるのは、図1[配列番号1]およびその相補鎖の天然の変異体および工作した修飾である。そのような修飾には例えば当該技術分野で知られている標識、メチル化および1以上の自然に存在するヌクレオチドと縮重ヌクレオチドとの置換を含む。
B.AAV9アミノ酸配列、タンパク質およびペプチド
本発明はさらに本発明のAAV9核酸によりコードされるタンパク質およびそのフラグメント、および他の方法により生成されるAAV9アミノ酸を提供する。本発明はさらに合成、組換えまたは当業者に既知の他の技術を使用して生成される本発明の新規AAV血清型の配列を使用して生成されるAAV血清型を包含する。本発明は本発明の新規なAAV核酸配列から発現される新規AAVアミノ酸配列、ペプチドおよびタンパク質に限定されず、そして例えば化学合成により、他の合成技法により、または他の方法によることを含む当該技術分野で既知な他の方法により生成されるアミノ酸配列、ペプチドおよびタンパク質を包含する。例えば任意の配列が種々の技術を使用して容易に生成される。
IV.AAV9キャプシドを持つrAAVの生産
本発明は新規な野生型AAV9を包含し、その配列はこれらウイルスが天然に付随するDNAおよび/または細胞物質を含まない。別の観点では、本発明は標的細胞にヘテロロガスな遺伝子または他の核酸配列を送達するのに有用な分子の生産に、本発明の新規AAV配列(そのフラグメントを含む)を利用する分子を提供する。
A.ミニ遺伝子
ミニ遺伝子は最低限、導入遺伝子およびその調節配列、および5’および3’AAV逆方向末端反復(ITRs)を含んでなる。1つの望ましい態様では、AAV血清型2のITRsを使用する。しかし他の適当な血清型に由来するITRsも選択することができる。このミニ遺伝子はキャプシドタンパク質にパッケージングされ、そして選択した宿主細胞に送達される。
1.導入遺伝子
導入遺伝子は、問題のポリペプチド、タンパク質または他の産物をコードする導入遺伝子を挟むベクター配列にヘテロロガスな核酸配列である。核酸コード配列は、宿主細胞中で導入遺伝子の転写、翻訳および/または発現を可能とする様式で調節成分に操作可能に連結される。
2.調節要素
ミニ遺伝子に関して上記で確認した主要な要素に加えて、ベクターは本発明により生産されたプラスミドベクターでトランスフェクトした、またはウイルスに感染した細胞での転写、翻訳および/または発現を可能とする様式で導入遺伝子に操作可能に連結された、通常の必要な制御要素も含む。本明細書で使用するように「操作可能に連結した」配列には、問題の遺伝子に連続する発現制御配列、およびトランスで、つまり一定の距離を離れて作用して問題の遺伝子を制御する発現制御配列の両方を含む。
3.ミニ遺伝子のパーケッジンング宿主細胞への送達
ミニ遺伝子は宿主細胞へ送達される任意の適当なベクター、例えばプラスミド上で運ぶことができる。本発明に有用なプラスミドは、それらが複製、そして場合により原核細胞、哺乳動物細胞または両方への組み込みに適当となるように工作することができる。これらのプラスミド(または5’AAV ITR−ヘテロロガス分子−3’ITRを持つ他のベクター)は、真核および/または原核細胞中でのミニ遺伝子の複製およびこれらの系に関する選択マーカーを可能とする配列を含む。選択可能なマーカーまたはレポーター遺伝子は、中でもジェネティシン、ハイグロマイシンまたはプリマイシン(purimycin)耐性をコードする配列を含むことができる。プラスミドはアンピシリン耐性のような細菌細胞中でのベクターの存在の信号を出すために使用できる特定の選択可能なレポーターまたはマーカー遺伝子を含むこともできる。プラスミドの他の成分には複製起点およびエプスタイン・バーウイルス核抗原を使用するアンプリコン系のようなアンプリコンを含むことができる。このアンプリコン系または他の類似のアンプリコン成分は細胞中での高コピーのエピソーム複製を可能とする。好ましくはミニ遺伝子を持つ分子は細胞にトランスフェクトされ、ここで一時的に存在することができる。あるいはミニ遺伝子(5’AAV ITR−ヘテロロガス分子−3’ITRを持つ)は、染色体にまたはエピソームのいずれかとして宿主細胞のゲノムに安定に組込まれることができる。特定の態様では、ミニ遺伝子は場合により頭−対−頭、頭−対−尾または尾−対−尾のコンカテマーの多コピーで存在することができる。適当なトランスフェクション技術が知られており、そしてミニ遺伝子を宿主細胞に送達するために容易に利用することができる。
B.RepおよびCap配列
ミニ遺伝子に加えて、宿主細胞は宿主細胞中でAAV9キャプシドタンパク質(またはAAV9キャプシドのフラグメントを含んでなるキャプシドタンパク質)の発現を駆動する配列、およびミニ遺伝子中に見いだされるAAV ITRsの血清型と同じ血清型または交差−相補血清型のrep配列を含む。AAV capおよびrep配列は上記のようにAAVの供給源から独立して得ることができ、そして上記のように当該技術分野で知られている任意の既知の様式で宿主細胞に導入することができる。さらにAAV9キャプシド中のAAVベクターをシュードタイプ化する時、必須の各repタンパク質をコードする配列はAAV9により供給されてもよく、またはrepタンパク質をコードする配列は異なるAAV血清型(例えばAAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7)により供給されてもよい。例えばrep78/68配列はAAV2に由来することができ、一方rep52/40配列はAAV1に由来することができる。
C.ヘルパー機能
パッケージング宿主細胞も、本発明のrAAVをパッケージングするためにヘルパー機能を必要とする。場合によりこれらの機能は、ヘルペスウイルスにより供給される。最も望ましくは必要なヘルパー機能はそれぞれ、本明細書に記載するように、またはそしてATCCを含む様々な供給源から入手可能であるようなヒトまたは非ヒト霊長類のアデノウイルス源から提供される。現在好適な1つの態様では、宿主細胞はE1a遺伝子産物、E1b遺伝子産物、E2a遺伝子産物および/またはE4 ORF6遺伝子産物で供給されるか、かつ/またはそれらを含む。宿主細胞はVAI RNAのような他のアデノウイルス遺伝子も含むことができるが、これらの遺伝子は必要ではない。好適な態様では、宿主細胞に他のアデノウイルス遺伝子または遺伝子機能は存在しない。
D.宿主細胞およびパッケージング細胞系
宿主細胞自体は原核(例えば細菌)細胞、および昆虫細胞、酵母細胞および哺乳動物細胞を含む真核細胞を含む任意の生物から選択することができる。特に望ましい宿主細胞は限定するわけではないがA549、WEHI、3T3、10T1/2、BHK、MDCK、COS1、COS7、BSC1、BSC40、BMT10、VERO、WI38、HeLa、293細胞(機能的アデノウイルスE1を発現する)、Saos、C2C12、L細胞、HT1080、HepG2、およびヒト、サル、マウス、ラット、ウサギおよびハムスターを含む哺乳動物に由来する初代繊維芽細胞、肝細胞および筋芽細胞のような細胞を含む任意の哺乳動物種から選択される。細胞を提供する哺乳動物種の選択は本発明を限定せず;哺乳動物細胞の種類、すなわち繊維芽細胞、肝細胞、腫瘍細胞等も本発明を限定しない。使用する細胞の要件は、細胞がE1、E2aおよび/またはE4ORF6以外のアデノウイルス遺伝子を持たず;細胞はrAAVの生産中に混入ウイルスの相同的組換えを生じる可能性がある他の任意の他のウイルス遺伝子を含まず;そして細胞はDNAの感染またはトランスフェクション、およびトランスフェクトしたDNAの発現を行うことができる。好適な態様では、宿主細胞は細胞に安定にトランスフェクトされたrepおよびcapを有するものである。
V.組換えウイルスおよびその使用
本明細書に記載する技術を使用して、当業者は本発明の血清型8のキャプシドを有するか、またはAAV9の1以上のフラグメントを含むキャプシドを有するrAAVを生成することができる。1つの態様では、単一の血清型、例えばAAV9[配列番号2]に由来する完全長のキャプシドを利用することができる。別の態様では、別の選択したAAV血清型に由来するか、またはAAV9のヘテロロガスな部分に由来する配列に枠内で融合したAAV9の1以上のフラグメントを含む完全長のキャプシドを生成することができる。例えばrAAVはAAV9の1以上の新規な超可変領域配列を含むことができる。あるいは本発明の独自なAAV9配列を、他のウイルスまたは非ウイルス配列を含む構築物に使用することができる。場合により組換えウイルスは1以上のAAV9repタンパク質をコードするAAV9rep配列を持つことができる。
A.ウイルスの送達
別の観点では、本発明は導入遺伝子を宿主に送達するための方法を提供し、この方法には選択した宿主細胞を本発明のAAV9配列(またはその機能的フラグメント)を用いて生成した組換えウイルスベクターでトランスフェクトまたは感染させることが含まれる。送達法は当業者には周知であり、そして本発明を限定しない。
B.治療用の導入遺伝子
導入遺伝子によりコードされる有用な治療用産物には、限定するわけではないがインスリン、グルカゴン、成長ホルモン(GH)、副甲状腺ホルモン(PTH)、成長ホルモン放出因子(GRF)、濾胞刺激ホルモン(FSH)、黄体形成ホルモン(LH)、ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン(hCG)、血管内皮増殖因子(VEGF)、アンジオポエチン、アンジオスタチン、顆粒球コロニー刺激因子(GCSF)、エリスロポエチン(EPO)、結合組織増殖因子(CTGF)、塩基性繊維芽細胞増殖因子(bFGF)、酸性繊維芽細胞増殖因子(aFGF)、上皮増殖因子(EGF)、血小板由来増殖因子(PDGF)、インスリン増殖因子IおよびII(IGF−IおよびIGF−II)、TGFα、アクチビン、インヒビンを含むトランスフォーミング増殖因子αスーパーファミリーの任意のもの、あるいは任意の骨形成タンパク質(BMP)のBMPs1〜15、増殖因子のヒレグリン/ニューレグリン/ARIA/neu 分化因子(NDF)ファミリーの任意のもの、神経増殖因子(NGF)、脳由来神経栄養因子(BDNF)、ニューロトロフィンNT−3およびNT−4/5、毛様体神経栄養因子(CNTF)、グリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)、ノルチュリン(neurturin)、アグリン、セマフォリン/コラポスリンファミリーの任意のもの、ネトリン−1およびネトリン−2、肝細胞増殖因子(HGF)、エフリン類(ephrins)、ノギン、ソニックヘッジホッグおよびチロシンヒドロキシラーゼを含むホルモンおよび増殖および分化因子を含む。
C.免疫原性導入遺伝子
あるいはまたは加えて、本発明のベクターは本発明のAAV9配列および選択した免疫原に対して免疫応答を誘導するペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質をコードする導入遺伝子を含むことができる。例えば免疫原は種々のウイルス科から選択することができる。免疫応答が望まれる望ましいウイルス科の例は、一般的な風邪の原因の約50%を占めるライノウイルス属;ポリオウイルス、コクサッキーウイルス、エコーウイルスおよびA型肝炎ウイルスのようなヒト腸内ウイルスを含む腸内ウイルス属;および主に非−ヒト動物において足および口の疾患の原因であるアフトウイルス属を含むピコルナウイルス科を含む。ピコルナウイルス科内のウイルスで、標的抗原はVP1、VP2、VP3、VP4およびVPGを含む。別のウイルス科には、流行性胃腸炎の重要な病原体であるウイルスのノーウォーク群を包含するカルシウイルス科を含む。ヒトおよび非−ヒト動物に免疫応答を誘導するための標的抗原として使用するために望ましいさらに別のウイルス科は、シンドビスウイルス、ロス川ウイルスおよびベネゼエラ、東部および西部ウマ脳髄膜炎を含むアルファウイルス属、および風疹ウイルスを含むルビウイルスを含むトガウイルス科である。フラビウイルス科にはデング、黄熱、日本脳炎、セントルイス脳炎およびダニ媒介性脳炎ウイルスを含む。他の標的抗原は、感染性気管支炎ウイルス(家禽)、ブタ伝染性胃腸炎ウイルス(ブタ)、ブタ赤血球凝集脳脊髄炎ウイルス(ブタ)、ネコ伝染性腹膜炎ウイルス(ネコ)、ネコ腸内コロナウイルス(ネコ)、イヌコロナウイルス(イヌ)のような多数の非−ヒトウイルス、および普通の風邪および/または非−A、BまたはC型肝炎の原因となり得るヒト呼吸コロナウイルスを含むC型肝炎またはコロナウイルス科から生成することができる。コロナウイルス科内で、標的抗原にはE1(Mまたはマトリックスタンパク質とも呼ばれる)、E2(Sまたはスパイクタンパク質とも呼ばれる)、E3(HEまたは赤血球凝集素−エルテロース(elterose)とも呼ばれる)、糖タンパク質(すべてのコロナウイルスに存在するわけではない)、またはN(ヌクレオキャプシド)を含む。さらに別の抗原は、ベシキュロウイルス(例えば水疱性口内炎ウイルス)および一般的な狂犬病ウイルス(例えば狂犬病)を含むラブドウイルス科を標的とすることができる。ラブドウイルス科内で適当な抗原は、Gタンパク質またはNタンパク質に由来することができる。マールブルグおよびエボラウイルスのような出血性の発熱ウイルスを含むフィロウイルス科も抗原の適当な供給源となり得る。パラミクソウイルス科には、1型パラインフルエンザウイルス、3型パラインフルエンザウイルス、ウシ3型パラインフルエンザウイルス、ルブラウイルス(ムンプスウイルス)、2型パラインフルエンザウイルス、4型パラインフルエンザウイルス、ニューカッスル病ウイルス(ニワトリ)、牛疫、麻疹およびイヌジステンバーを含むモルビリウイルス、および呼吸合胞体ウイルスを含むニューモウイルスを含む。インフルエンザウイルスはオルトミクソウイルスの科に分類され、そして抗原の適切な供給源である(例えばHAタンパク質、N1タンパク質)。ブニヤウイルス科には、ブニヤウイルス属(カリフォルニア脳炎、ラ クロス(La Crosse))、フレボウイルス属(リフト渓谷熱)、ハンタウイルス属(プレマーラ(puremala)はヘマハギン(hemahagin)熱ウイルスである)、ナイロウイルス属(ナイロビヒツジ病)および種々の割り当てられていないブニガウイルス属(bungavirus)を含む。アレナウイルス科は、LCMおよびラッサ熱ウイルスに対する抗原の供給源を提供する。レオウイルス科には、レオウイルス属、ロタウイルス属(これは小児の急性胃腸炎の原因である)、オルビウイルス属およびカルチウイルス属(cultivirus)(コロラドダニ熱、レボンボ(Lebombo)(ヒト)、ウマ脳症、ブルータング)を含む。レトロウイルス科には、ネコ白血病ウイルス、HTLV1およびHTLVII、レンチウイルス(lentivirinal)(これはHIV、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、ウマ感染性貧血ウイルスおよびスプーマウイルスを含む)のようなヒトおよび獣医学上の疾患を包含するオンコリウイルス(oncorivirinal)の亜科を含む。パポバウイルス科にはポリオーマウイルス(BKUおよびJCUウイルス)の亜科およびパピローマウイルス(癌または乳頭腫の悪性の進行に関連する)の亜科を含む。アデノウイルス科には呼吸疾患および/または腸炎を引き起こすウイルス(EX、AD7、ARD、O.B.)を含む。パルボウイルス科のネコパルボウイルス(ネコ腸炎)、ネコパンロイコペニアウイルス(panleucopeniavirus)、イヌパルボウイルスおよびブタパルボウイルス。ヘルペスウイルス科には、シンプレックスウイルス属(simplexvirus)(HSVI、HSVII)、バリセーロウイルス属(varicellovirus)(仮性狂犬病、水痘帯状疱疹)を含むアルファヘルペスウイルス亜科、およびサイトメガロウイルス属(HCMV、ムロメガロウイルス属(muromegalovirus))を含むベータヘルペスウイルス亜科、およびリンホクリプトウイルス属(lymphocryptovirus)、EBV(バーキットリンパ腫)、伝染性鼻気管支炎、マルク病ウイルスおよびラジノウイルス属(rhadinovirus)を含むガンマヘルペスウイルス亜科を含む。ポックスウイルス科にはオルソポックスウイルス(バリオーラ(Variola)(痘瘡)およびワクシニア(Vaccinia)(牛痘))、パラポックスウイルス、アビポックスウイルス、カプリポックスウイルス、レポリポックスウイルス、スイポックスウイルスを包含する脊椎動物ポックスウイルス亜科、およびエントモポックスウイルスの亜科を含む。ヘパドナウイルス科には、B型肝炎ウイルスを含む。適当な抗原源となり得る1つの分類されていないウイルスは、デルタ肝炎ウイルスである。さらに抗原の供給源である別のウイルスはニパ(Nipan)ウイルスである。さらに別のウイルス源には、鳥類感染性嚢疾患ウイルスおよびブタ呼吸および生殖症候群ウイルスを含む。アルファウルイス科にはウマ関節炎ウイルスおよび種々の脳炎ウイルスを含む。
AAV2repを新規AAV血清型のcap配列と融合することによりキメラパッケージング構築物を作成する。これらキメラパッケージング構築物は、最初にAd5ヘルパープラスミドを使用して293細胞での3回のトランスフェクションにより、AAV2 ITRsを持つ組換えAAVゲノムのシュードタイプ化に使用する。これらのシュードタイプ化ベクターはこれら新規血清型の完全かつ感染性ウイルスが単離される前に、形質導入に基づく血清型の実験における性能を評価し、そしてNHPおよび齧歯類を含む種々の動物モデルを対象として新規AAV血清型の遺伝子転移効率を評価するために使用する。
A.pAAV2GFP
AAV2プラスミドは、構成的プロモーターの制御下で発現するAAV2 ITRsおよび緑色蛍光タンパク質を含む。このプラスミドは以下の要素を含む:AAV2ITRs、CMVプロモーターおよびGFPコード配列。
B.トランスプラスミドのクローニング
組換えシュードタイプ化AAV9ベクター生産用のキメラトランス−プラスミドを構築するために、p5E18プラスミド(Xiao et al.,1999,J.Virol.73:3994−4003)をXhoIで部分消化して、プラスミドを3169bpのみの位置のXhoI部位で線状とした。次いでXhoI切断末端をフィルインし、そして戻し連結した。この修飾されたp5E18プラスミドをXbaIおよびXhoIで完全に消化するまで制限処理してAAV2cap遺伝子配列を除去し、そしてpCRAAV96−5+15−4プラスミドから単離したAAV9cap遺伝子を含む2267bpのSpeI/XhoIフラグメントに置き換えた。
C.シュードタイプ化rAAVの生産
rAAV粒子(AAV9キャプシド中のAAV2ベクター)は、アデノウイルスを含まない方法を使用して生成する。簡単に説明すると、シスプラスミド(AAV2 ITRsを含むpAAV2.1 lacZプラスミド)、およびトランスプラスミドpCRAAV96−5+15−4(AAV2repおよびAAV8capを含む)およびヘルパープラスミドをそれぞれ同時に293細胞に1:1:2の比率でリン酸カルシウム沈殿によりコトランスフェクトした。
以下の実施例では、本明細書に記載したように構築したAAV2/9rAAVが家族性高コレステロール血症のマウスモデルにおいてLDLレセプターを送達し、そして血漿コレステロールおよびトリグリセリドのレベルを減少させるために十分な量でLDLレセプターを発現することを示す。
新規AAV9血清型に基づくベクターの性能を、筋肉および肝臓に向けられたマウスモデルで評価し、そして既知の血清型AAV1、AAV2およびAAV5に基づくベクターと比較する。分泌型タンパク質を発現するベクターを使用して血清のELISA分析を介して種々の血清型間の相対的形質導入効率を定量する。標的組織内の形質導入の細胞分布は、lacZ発現ベクターおよびX−gal組織化学を使用して評価する。
Claims (9)
- 配列番号2のアミノ酸203〜736のアミノ酸配列を含んでなるAAV9キャプシドタンパク質、及び、AAV逆方向末端反復並びに宿主細胞で発現を支配する調節配列に操作可能に連結されたヘテロロガスな遺伝子、を含んでなるミニ遺伝子、を含んでなるアデノ随伴ウイルス(AAV)。
- AAVキャプシドが、
(a)a) vp1キャプシドタンパク質、アミノ酸(aa)1〜736;および、
b) vp2キャプシドタンパク質、aa138〜736、
からなる群から選択されるAAVキャプシドタンパク質の配列を含んでなる、請求項1に記載するAAVであって、
ここでアミノ酸番号は配列番号2の番号である上記AAV。 - 請求項1または2に記載のAAVキャプシドをコードする核酸配列を含んでなる分子。
- 上記核酸配列が:
vp1、nt2121〜4323;
vp2、nt2532〜4323;および
vp3、nt2730〜4323、ここでヌクレオチド番号は配列番号1の番号である、
からなる群から選択される請求項3に記載の分子。 - 上記分子がAAVキャプシドタンパク質および機能的AAVrepタンパク質をコードするAAV配列を含んでなる、請求項3または4に記載の分子。
- 上記分子がAAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5およびAAV6からなる群から選択される血清型に由来するcapタンパク質または機能的AAVrep遺伝子を含んでなる請求項5に記載の分子。
- 上記分子がプラスミドである請求項3ないし6のいずれかに記載の分子。
- AAV血清型キャプシドを含んでなる組換えアデノ随伴ウイルス(AAV)を生成する方法であって:(a)AAVキャプシドタンパク質をコードする分子;(b)機能的rep遺伝子;(c)AAV逆方向末端反復(ITRs)および導入遺伝子を含んでなるミニ遺伝子;および(d)ミニ遺伝子のAAVキャプシドタンパク質へのパッケージングを可能にする十分なヘルパー機能、を含む宿主細胞を培養する工程を含んでなり、該宿主細胞が請求項3ないし7のいずれかに記載の分子を含んでなる上記方法。
- 請求項1または2に記載のアデノ随伴ウイルスまたは請求項3ないし7のいずれかに記載の分子でトランスフェクトした宿主細胞。
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Families Citing this family (176)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2013202568B2 (en) * | 2001-11-13 | 2015-09-17 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adeno-associated virus rh.8 (AAVrh.8) sequences and recombinant AAVs comprising same |
ATE520707T1 (de) | 2001-11-13 | 2011-09-15 | Univ Pennsylvania | Verfahren für den nachweis und/oder die identifikation von sequenzen des adeno- assoziierten virus (aav) sowie isolation von dadurch identifizierten, neuen sequenzen |
EP2359869B1 (en) | 2001-12-17 | 2018-12-26 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adeno-associated virus (AAV) serotype 8 sequences, vectors containing same and uses therefor |
AU2003274397A1 (en) * | 2002-06-05 | 2003-12-22 | University Of Florida | Production of pseudotyped recombinant aav virions |
EP2298926A1 (en) * | 2003-09-30 | 2011-03-23 | The Trustees of The University of Pennsylvania | Adeno-associated virus (AAV) clades, sequences, vectors containing same, and uses thereof |
US7655467B2 (en) | 2003-11-14 | 2010-02-02 | The University Of Washington | Compositions and methods for systemic nucleic acid sequence delivery |
WO2007120542A2 (en) | 2006-03-30 | 2007-10-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Aav capsid library and aav capsid proteins |
US9198984B2 (en) | 2006-04-28 | 2015-12-01 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Scalable production method for AAV |
US20120322861A1 (en) | 2007-02-23 | 2012-12-20 | Barry John Byrne | Compositions and Methods for Treating Diseases |
US9725485B2 (en) | 2012-05-15 | 2017-08-08 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | AAV vectors with high transduction efficiency and uses thereof for gene therapy |
HUE030719T2 (en) | 2007-04-09 | 2017-05-29 | Univ Florida | RAAV vector formulations and methods comprising tyrosine-modified capsid proteins for their use |
EP2019143A1 (en) * | 2007-07-23 | 2009-01-28 | Genethon | CNS gene delivery using peripheral administration of AAV vectors |
EP2058401A1 (en) * | 2007-10-05 | 2009-05-13 | Genethon | Widespread gene delivery to motor neurons using peripheral injection of AAV vectors |
WO2009088786A1 (en) * | 2007-12-31 | 2009-07-16 | Nanocor Therapeutics, Inc. | Rna interference for the treatment of heart failure |
MX2010012592A (es) | 2008-05-20 | 2011-05-05 | Eos Neuroscience Inc | Vectores para la administracion de proteinas sensibles a la luz y metodos de uso de las mismas. |
US9217155B2 (en) | 2008-05-28 | 2015-12-22 | University Of Massachusetts | Isolation of novel AAV'S and uses thereof |
US9415121B2 (en) | 2008-12-19 | 2016-08-16 | Nationwide Children's Hospital | Delivery of MECP2 polynucleotide using recombinant AAV9 |
US11219696B2 (en) | 2008-12-19 | 2022-01-11 | Nationwide Children's Hospital | Delivery of polynucleotides using recombinant AAV9 |
JP5879256B2 (ja) | 2009-05-02 | 2016-03-08 | ジェンザイム・コーポレーション | 神経変性障害のための遺伝子治療 |
US8734809B2 (en) | 2009-05-28 | 2014-05-27 | University Of Massachusetts | AAV's and uses thereof |
SG10201908848RA (en) | 2010-03-29 | 2019-10-30 | Univ Pennsylvania | Pharmacologically induced transgene ablation system |
US9315825B2 (en) | 2010-03-29 | 2016-04-19 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Pharmacologically induced transgene ablation system |
CA3066596A1 (en) | 2010-04-23 | 2011-10-27 | University Of Massachusetts | Cns targeting aav vectors and methods of use thereof |
CA2833905C (en) | 2010-04-23 | 2019-09-10 | University Of Massachusetts | Multicistronic expression constructs |
CA2833912C (en) | 2010-04-23 | 2021-09-21 | University Of Massachusetts | Aav-based treatment of cholesterol-related disorders |
CA3128549A1 (en) | 2010-07-12 | 2012-01-19 | Universitat Autonoma De Barcelona | Gene therapy composition for use in diabetes treatment |
WO2012109570A1 (en) | 2011-02-10 | 2012-08-16 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Viral vectors with modified transduction profiles and methods of making and using the same |
WO2012145624A2 (en) | 2011-04-21 | 2012-10-26 | University Of Massachusetts | Raav-based compositions and methods for treating alpha-1 anti-trypsin deficiencies |
US20130039888A1 (en) | 2011-06-08 | 2013-02-14 | Nationwide Children's Hospital Inc. | Products and methods for delivery of polynucleotides by adeno-associated virus for lysosomal storage disorders |
US8559100B2 (en) | 2011-10-12 | 2013-10-15 | Guardian Industries Corp. | Coated article with low-E coating having absorbing layer over functional layer designed to increase outside reflectance |
WO2013103896A1 (en) | 2012-01-06 | 2013-07-11 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Treating cardiovascular or renal diseases |
US10294281B2 (en) | 2012-05-15 | 2019-05-21 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | High-transduction-efficiency rAAV vectors, compositions, and methods of use |
RU2015101276A (ru) | 2012-06-19 | 2016-08-10 | Юниверсити Оф Флорида Рисерч Фаундейшн, Инк. | Способы лечения болезней и композиции для их осуществления |
PT2879719T (pt) | 2012-08-01 | 2018-10-08 | Ohio State Innovation Foundation | Administração intratecal do vírus adeno-associado 9 recombinante |
EP2692868A1 (en) | 2012-08-02 | 2014-02-05 | Universitat Autònoma De Barcelona | Adeno-associated viral (AAV) vectors useful for transducing adipose tissue |
EP2749569A1 (en) | 2012-12-28 | 2014-07-02 | Annibale Alessandro Puca | Variant of BPIFB4 protein |
GB201403684D0 (en) | 2014-03-03 | 2014-04-16 | King S College London | Vector |
WO2015127128A2 (en) | 2014-02-19 | 2015-08-27 | University Of Massachusetts | Recombinant aavs having useful transcytosis properties |
CA2939950C (en) | 2014-03-09 | 2023-08-22 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions useful in treatment of ornithine transcarbamylase (otc) deficiency |
EA201691809A1 (ru) | 2014-03-10 | 2017-01-30 | ЮНИКЬЮРЕ АйПи Б.В. | Дополнительно усовершенствованные векторы aav, продуцируемые клетками насекомого |
WO2015143078A1 (en) | 2014-03-18 | 2015-09-24 | University Of Massachusetts | Raav-based compositions and methods for treating amyotrophic lateral sclerosis |
WO2015191508A1 (en) | 2014-06-09 | 2015-12-17 | Voyager Therapeutics, Inc. | Chimeric capsids |
US10973931B2 (en) | 2014-09-16 | 2021-04-13 | Universitat Autònoma De Barcelona | Adeno-associated viral vectors for the gene therapy of metabolic diseases |
US10370432B2 (en) | 2014-10-03 | 2019-08-06 | University Of Massachusetts | Heterologous targeting peptide grafted AAVS |
EP3200830B1 (en) | 2014-10-03 | 2020-09-09 | University of Massachusetts | High efficiency library-identified aav vectors |
RU2738421C2 (ru) | 2014-10-21 | 2020-12-14 | Юниверсити Оф Массачусетс | Варианты рекомбинантных aav и их применения |
RU2020109343A (ru) | 2014-11-05 | 2020-03-17 | Вояджер Терапьютикс, Инк. | Полинуклеотиды aadc для лечения болезни паркинсона |
MX2017006216A (es) | 2014-11-14 | 2018-08-29 | Voyager Therapeutics Inc | Composiciones y métodos para tratar la esclerosis lateral amiotrófica (ela). |
DK3218386T3 (da) | 2014-11-14 | 2021-06-07 | Voyager Therapeutics Inc | Modulatorisk polynukleotid |
RU2727015C2 (ru) * | 2014-11-21 | 2020-07-17 | Дзе Юниверсити Оф Норт Каролина Эт Чепел Хилл | Векторы aav, нацеленные на центральную нервную систему |
EP3230441A4 (en) | 2014-12-12 | 2018-10-03 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for the production of scaav |
EP3233131A1 (en) | 2014-12-16 | 2017-10-25 | Board of Regents of the University of Nebraska | Gene therapy for juvenile batten disease |
ES2900973T3 (es) | 2015-01-07 | 2022-03-21 | UNIV AUTòNOMA DE BARCELONA | Constructo genético de vector individual que comprende genes de insulina y glucoquinasa |
EP3632923A1 (en) | 2015-01-16 | 2020-04-08 | Voyager Therapeutics, Inc. | Central nervous system targeting polynucleotides |
US20180030096A1 (en) | 2015-02-03 | 2018-02-01 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Recombinant aav1, aav5, and aav6 capsid mutants and uses thereof |
MA41451A (fr) | 2015-02-04 | 2017-12-12 | Univ Washington | Constructions anti-tau |
US10584321B2 (en) | 2015-02-13 | 2020-03-10 | University Of Massachusetts | Compositions and methods for transient delivery of nucleases |
CA3021949C (en) | 2015-04-24 | 2023-10-17 | University Of Massachusetts | Modified aav constructs and uses thereof |
US10017832B2 (en) | 2015-08-25 | 2018-07-10 | Washington University | Compositions and methods for site specific recombination at asymmetric sites |
CA2996420A1 (en) | 2015-09-28 | 2017-04-06 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Methods and compositions for antibody-evading virus vectors |
WO2017070516A1 (en) | 2015-10-22 | 2017-04-27 | University Of Massachusetts | Prostate-targeting adeno-associated virus serotype vectors |
WO2017070525A1 (en) | 2015-10-22 | 2017-04-27 | University Of Massachusetts | Methods and compositions for treating metabolic imbalance in neurodegenerative disease |
EP3368054A4 (en) | 2015-10-28 | 2019-07-03 | Voyager Therapeutics, Inc. | REGULATORY EXPRESSION USING THE ADENO-ASSOCIATED VIRUS (AAV) |
WO2017075119A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | The Trustees Of The Univeresity Of Pennsylvania | Intrathecal administration of adeno-associated-viral vectors for gene therapy |
CA3006569A1 (en) | 2015-12-02 | 2017-06-08 | Voyager Therapeutics, Inc. | Assays for the detection of aav neutralizing antibodies |
US11015173B2 (en) | 2015-12-11 | 2021-05-25 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Scalable purification method for AAV1 |
EP4215605A1 (en) | 2015-12-11 | 2023-07-26 | The Trustees of The University of Pennsylvania | Scalable purification method for aav8 |
WO2017100704A1 (en) | 2015-12-11 | 2017-06-15 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Scalable purification method for aavrh10 |
WO2017160360A2 (en) | 2015-12-11 | 2017-09-21 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Scalable purification method for aav9 |
WO2017120589A1 (en) | 2016-01-08 | 2017-07-13 | Washington University | Compositions comprising chemerin and methods of use thereof |
US11826433B2 (en) | 2016-02-02 | 2023-11-28 | University Of Massachusetts | Method to enhance the efficiency of systemic AAV gene delivery to the central nervous system |
EP4094780A3 (en) | 2016-02-12 | 2023-02-08 | University of Massachusetts | Anti-angiogenic mirna therapeutics for inhibiting corneal neovascularization |
WO2017147509A1 (en) | 2016-02-25 | 2017-08-31 | Marco Colonna | Compositions comprising trem2 and methods of use thereof |
EP3440210A4 (en) | 2016-04-05 | 2019-11-27 | University of Massachusetts | COMPOSITIONS AND METHODS FOR SELECTIVE INHIBITION OF EXPRESSION OF GRAINHEAD PROTEIN |
US11446398B2 (en) | 2016-04-11 | 2022-09-20 | Obsidian Therapeutics, Inc. | Regulated biocircuit systems |
US11433116B2 (en) | 2016-04-14 | 2022-09-06 | Cedars-Sinai Medical Center | GJA1 isoforms protect against metabolic stress |
WO2017181105A1 (en) | 2016-04-15 | 2017-10-19 | University Of Massachusetts | Methods and compositions for treating metabolic imbalance |
US11299751B2 (en) | 2016-04-29 | 2022-04-12 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions for the treatment of disease |
WO2017189959A1 (en) | 2016-04-29 | 2017-11-02 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions for the treatment of disease |
WO2017197355A2 (en) | 2016-05-13 | 2017-11-16 | 4D Molecular Therapeutics Inc. | Adeno-associated virus variant capsids and methods of use thereof |
CN109831916B (zh) | 2016-05-18 | 2023-07-21 | 沃雅戈治疗公司 | 治疗亨廷顿氏舞蹈病的组合物和方法 |
IL302748A (en) | 2016-05-18 | 2023-07-01 | Voyager Therapeutics Inc | modulatory polynucleotides |
WO2017218852A1 (en) | 2016-06-15 | 2017-12-21 | University Of Massachusetts | Recombinant adeno-associated viruses for delivering gene editing molecules to embryonic cells |
EP3491008A2 (en) | 2016-07-26 | 2019-06-05 | BioMarin Pharmaceutical Inc. | Novel adeno-associated virus capsid proteins |
EP3831281A1 (en) | 2016-08-30 | 2021-06-09 | The Regents of The University of California | Methods for biomedical targeting and delivery and devices and systems for practicing the same |
US10457940B2 (en) | 2016-09-22 | 2019-10-29 | University Of Massachusetts | AAV treatment of Huntington's disease |
CA3038292A1 (en) | 2016-09-28 | 2018-04-05 | Cohbar, Inc. | Therapeutic mots-c related peptides |
KR20190075964A (ko) | 2016-10-13 | 2019-07-01 | 유니버시티 오브 매사추세츠 | Aav 캡시드 설계 |
AU2017362491B2 (en) | 2016-11-17 | 2023-02-02 | Nationwide Children's Hospital Inc. | Intrathecal delivery of recombinant Adeno-associated virus encoding Methyl-CpG binding protein 2 |
EP3548616A4 (en) | 2016-12-01 | 2020-05-13 | Sangamo Therapeutics, Inc. | TAU MODULATORS AND METHODS AND COMPOSITIONS FOR THEIR ADMINISTRATION |
US11117930B2 (en) | 2017-02-23 | 2021-09-14 | Adrx, Inc. | Peptide inhibitors of transcription factor aggregation |
US11752181B2 (en) | 2017-05-05 | 2023-09-12 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of treating Huntington's disease |
CN110913866A (zh) | 2017-05-05 | 2020-03-24 | 沃雅戈治疗公司 | 治疗肌萎缩性侧索硬化(als)的组合物和方法 |
WO2018208972A1 (en) | 2017-05-09 | 2018-11-15 | University Of Massachusetts | Methods of treating amyotrophic lateral sclerosis (als) |
WO2018226992A1 (en) | 2017-06-07 | 2018-12-13 | Adrx, Inc. | Tau aggregation inhibitors |
JOP20190269A1 (ar) | 2017-06-15 | 2019-11-20 | Voyager Therapeutics Inc | بولي نوكليوتيدات aadc لعلاج مرض باركنسون |
WO2019018342A1 (en) | 2017-07-17 | 2019-01-24 | Voyager Therapeutics, Inc. | NETWORK EQUIPMENT TRACK GUIDE SYSTEM |
EP3662060A2 (en) | 2017-08-03 | 2020-06-10 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for delivery of aav |
ES2970198T3 (es) * | 2017-08-16 | 2024-05-27 | Lgv1 S R L | Isoforma VTFT de una proteína BPIFB4 para uso en enfermedades y lesiones neuronales |
RU2770922C2 (ru) | 2017-09-20 | 2022-04-25 | 4Д Молекьюлар Терапьютикс Инк. | Капсиды вариантов аденоассоциированных вирусов и методы их применения |
JP7397488B2 (ja) | 2017-09-22 | 2023-12-13 | ユニバーシティ オブ マサチューセッツ | Sod1二重発現ベクターおよびその使用 |
US20200237799A1 (en) | 2017-10-16 | 2020-07-30 | Voyager Therapeutics, Inc. | Treatment of amyotrophic lateral sclerosis (als) |
JP7502991B2 (ja) | 2017-10-16 | 2024-06-19 | ボイジャー セラピューティクス インコーポレイテッド | 筋萎縮性側索硬化症(als)の治療 |
CA3079568A1 (en) * | 2017-10-18 | 2019-04-25 | Regenxbio Inc. | Fully-human post-translationally modified antibody therapeutics |
CA3082136A1 (en) | 2017-11-08 | 2019-05-16 | Avexis, Inc. | Means and method for preparing viral vectors and uses of same |
CA3083472A1 (en) | 2017-11-27 | 2019-05-31 | 4D Molecular Therapeutics Inc. | Adeno-associated virus variant capsids and use for inhibiting angiogenesis |
JP2021511020A (ja) | 2018-01-17 | 2021-05-06 | アドリーナス セラピューティクス, インコーポレイテッド | 21−ヒドロキシラーゼ欠損症のためのアデノ随伴ウイルス遺伝子療法 |
US10610606B2 (en) | 2018-02-01 | 2020-04-07 | Homology Medicines, Inc. | Adeno-associated virus compositions for PAH gene transfer and methods of use thereof |
JP7244547B2 (ja) | 2018-02-19 | 2023-03-22 | ホモロジー・メディシンズ・インコーポレイテッド | F8遺伝子機能を回復させるためのアデノ随伴ウイルス組成物及びその使用の方法 |
JP7406677B2 (ja) | 2018-04-03 | 2023-12-28 | ギンコ バイオワークス インコーポレイテッド | 抗体を回避するウイルスベクター |
US20220025396A1 (en) * | 2018-05-07 | 2022-01-27 | Spark Therapeutics, Inc. | Plasmid free aav vector producing cell lines |
EP3790627A2 (en) | 2018-05-09 | 2021-03-17 | BioMarin Pharmaceutical Inc. | Methods of treating phenylketonuria |
TW202005978A (zh) | 2018-05-14 | 2020-02-01 | 美商拜奧馬林製藥公司 | 新穎肝靶向腺相關病毒載體 |
CA3099306A1 (en) | 2018-05-15 | 2019-11-21 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for the treatment of parkinson's disease |
EP3793616A1 (en) | 2018-05-15 | 2021-03-24 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for delivery of aav |
EP3806888B1 (en) | 2018-06-12 | 2024-01-31 | Obsidian Therapeutics, Inc. | Pde5 derived regulatory constructs and methods of use in immunotherapy |
EP3807404A1 (en) | 2018-06-13 | 2021-04-21 | Voyager Therapeutics, Inc. | Engineered 5' untranslated regions (5' utr) for aav production |
US20210355454A1 (en) | 2018-07-24 | 2021-11-18 | Voyager Therapeutics, Inc. | Systems and methods for producing gene therapy formulations |
CA3111076A1 (en) | 2018-08-30 | 2020-03-05 | Tenaya Therapeutics, Inc. | Cardiac cell reprogramming with myocardin and ascl1 |
WO2020069461A1 (en) | 2018-09-28 | 2020-04-02 | Voyager Therapeutics, Inc. | Frataxin expression constructs having engineered promoters and methods of use thereof |
TW202035689A (zh) | 2018-10-04 | 2020-10-01 | 美商航海家醫療公司 | 測量病毒載體粒子的效價及強度之方法 |
CA3115248A1 (en) | 2018-10-05 | 2020-04-09 | Voyager Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acid constructs encoding aav production proteins |
WO2020077165A1 (en) | 2018-10-12 | 2020-04-16 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for delivery of aav |
CN113166781A (zh) | 2018-10-15 | 2021-07-23 | 沃雅戈治疗公司 | 在杆状病毒/Sf9系统中大规模生产rAAV的表达载体 |
UY38407A (es) | 2018-10-15 | 2020-05-29 | Novartis Ag | Anticuerpos estabilizadores de trem2 |
US20210386788A1 (en) | 2018-10-24 | 2021-12-16 | Obsidian Therapeutics, Inc. | Er tunable protein regulation |
BR112021009739A2 (pt) | 2018-11-30 | 2021-10-19 | Novartis Ag | Vetores virais aav e usos dos mesmos |
AU2020208467A1 (en) | 2019-01-18 | 2021-08-05 | Voyager Therapeutics, Inc. | Methods and systems for producing AAV particles |
CN113518784A (zh) | 2019-01-28 | 2021-10-19 | 科巴公司 | 治疗性肽 |
CN113924115A (zh) | 2019-01-31 | 2022-01-11 | 俄勒冈健康与科学大学 | 用于aav衣壳的使用转录依赖性定向进化的方法 |
WO2020174369A2 (en) | 2019-02-25 | 2020-09-03 | Novartis Ag | Compositions and methods to treat bietti crystalline dystrophy |
CR20210444A (es) | 2019-02-25 | 2021-11-02 | Novartis Ag | Composiciones y métodos para tratar distrofia cristalina de bietti |
TW202102525A (zh) | 2019-03-21 | 2021-01-16 | 美商史崔德生物公司 | 重組腺相關病毒載體 |
WO2020227515A1 (en) | 2019-05-07 | 2020-11-12 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for the vectored augmentation of protein destruction, expression and/or regulation |
US20230137971A1 (en) | 2019-07-11 | 2023-05-04 | Tenaya Therapeutics Inc. | Cardiac cell reprogramming with micrornas and other factors |
WO2021011436A1 (en) | 2019-07-12 | 2021-01-21 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Separation and quantification of empty and full viral capsid particles |
WO2021040736A1 (en) | 2019-08-30 | 2021-03-04 | Obsidian Therapeutics, Inc. | Tandem cd19 car-based compositions and methods for immunotherapy |
WO2021046155A1 (en) | 2019-09-03 | 2021-03-11 | Voyager Therapeutics, Inc. | Vectorized editing of nucleic acids to correct overt mutations |
US20220348937A1 (en) | 2019-09-06 | 2022-11-03 | Obsidian Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for dhfr tunable protein regulation |
AU2020361533A1 (en) | 2019-10-08 | 2022-04-28 | Trustees Of Boston College | Proteins containing multiple, different unnatural amino acids and methods of making and using such proteins |
TW202128736A (zh) | 2019-10-17 | 2021-08-01 | 美商史崔德生物公司 | 用於治療c型尼曼—匹克病之腺相關病毒載體 |
EP4073257A1 (en) | 2019-12-09 | 2022-10-19 | UCL Business Ltd | Gene therapy composition and treatment for myh7-linked cardiomyopathy |
TW202140791A (zh) | 2020-01-13 | 2021-11-01 | 美商霍蒙拉奇醫藥公司 | 治療苯酮尿症之方法 |
KR20220149590A (ko) | 2020-03-02 | 2022-11-08 | 테나야 테라퓨틱스, 인코포레이티드 | 심근세포-발현 마이크로rna에 의한 유전자 벡터 제어 |
CA3170369A1 (en) | 2020-03-05 | 2022-04-14 | Michal Shahar | Methods and compositions for treating cancer with immune cells |
EP4135841A1 (en) | 2020-04-15 | 2023-02-22 | Voyager Therapeutics, Inc. | Tau binding compounds |
EP4146672A1 (en) * | 2020-05-04 | 2023-03-15 | The University of North Carolina at Chapel Hill | Modified adeno-associated virus vectors that evade neutralizing antibodies and uses thereof |
WO2021230987A1 (en) | 2020-05-13 | 2021-11-18 | Voyager Therapeutics, Inc. | Redirection of tropism of aav capsids |
WO2021247995A2 (en) | 2020-06-04 | 2021-12-09 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of treating neuropathic pain |
BR112023001456A2 (pt) | 2020-07-27 | 2023-04-11 | Voyager Therapeutics Inc | Composições e métodos para o tratamento de distúrbios neurológicos relacionados à deficiência de beta glicosilceramidase |
US20230285596A1 (en) | 2020-07-27 | 2023-09-14 | Voyager Therapeutics, Inc | Compositions and methods for the treatment of niemann-pick type c1 disease |
US20240043494A1 (en) | 2020-08-07 | 2024-02-08 | Amicus Therapeutics, Inc. | Vesicle Targeting Proteins And Uses Of Same |
CN113754727B (zh) * | 2020-09-30 | 2022-07-12 | 广州派真生物技术有限公司 | 腺相关病毒突变体及其应用 |
US11781156B2 (en) | 2020-10-09 | 2023-10-10 | Tenaya Therapeutics, Inc. | Plakophillin-2 gene therapy methods and compositions |
CA3198675A1 (en) | 2020-10-15 | 2022-04-21 | Prevail Therapeutics, Inc. | Recombinant adeno-associated virus compositions and methods for producing same |
BR112023015303A2 (pt) | 2021-02-01 | 2023-11-14 | Regenxbio Inc | Método para tratar doença cln2 devido a deficiência de tpp1 em um sujeito |
KR20230159837A (ko) | 2021-03-19 | 2023-11-22 | 아드레나스 테라퓨틱스, 인코포레이티드 | 21-하이드록실라제 결핍에 대한 유전자 요법 |
EP4323010A1 (en) | 2021-04-13 | 2024-02-21 | Research Institute at Nationwide Children's Hospital | Recombinant adeno-associated virus encoding methyl-cpg binding protein 2 for treating pitt hopkins syndrome via intrathecal delivery |
CA3225985A1 (en) | 2021-07-01 | 2023-01-05 | Indapta Therapeutics, Inc. | Engineered natural killer (nk) cells and related methods |
EP4363437A1 (en) | 2021-07-01 | 2024-05-08 | Amicus Therapeutics, Inc. | Neurotensin variants and tagged proteins comprising neurotensin or sortilin propeptide |
IL309742A (en) | 2021-07-08 | 2024-02-01 | Tenaya Therapeutics Inc | Optimal expression cassettes for gene therapy |
WO2023010120A2 (en) * | 2021-07-30 | 2023-02-02 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Engineering aav vectors with improved cns targeting |
AU2022326565A1 (en) | 2021-08-11 | 2024-02-08 | Sana Biotechnology, Inc. | Genetically modified cells for allogeneic cell therapy |
WO2023019227A1 (en) | 2021-08-11 | 2023-02-16 | Sana Biotechnology, Inc. | Genetically modified cells for allogeneic cell therapy to reduce complement-mediated inflammatory reactions |
AU2022325955A1 (en) | 2021-08-11 | 2024-02-08 | Sana Biotechnology, Inc. | Genetically modified cells for allogeneic cell therapy to reduce instant blood mediated inflammatory reactions |
CA3227108A1 (en) | 2021-08-11 | 2023-02-16 | Xiaomeng HU | Genetically modified primary cells for allogeneic cell therapy |
TW202333776A (zh) | 2021-10-12 | 2023-09-01 | 美商阿斯帕醫療公司 | 用於治療腦白質失養症的方法及組合物 |
WO2023133595A2 (en) | 2022-01-10 | 2023-07-13 | Sana Biotechnology, Inc. | Methods of ex vivo dosing and administration of lipid particles or viral vectors and related systems and uses |
WO2023135316A1 (en) | 2022-01-17 | 2023-07-20 | Dinaqor Ag | Gene therapy composition and treatment for dystrophin-related cardiomyopathy |
WO2023150647A1 (en) | 2022-02-02 | 2023-08-10 | Sana Biotechnology, Inc. | Methods of repeat dosing and administration of lipid particles or viral vectors and related systems and uses |
WO2023158836A1 (en) | 2022-02-17 | 2023-08-24 | Sana Biotechnology, Inc. | Engineered cd47 proteins and uses thereof |
WO2023173123A1 (en) | 2022-03-11 | 2023-09-14 | Sana Biotechnology, Inc. | Genetically modified cells and compositions and uses thereof |
WO2023201207A1 (en) | 2022-04-11 | 2023-10-19 | Tenaya Therapeutics, Inc. | Adeno-associated virus with engineered capsid |
WO2023214346A1 (en) | 2022-05-06 | 2023-11-09 | Novartis Ag | Novel recombinant aav vp2 fusion polypeptides |
WO2024007020A1 (en) | 2022-06-30 | 2024-01-04 | Indapta Therapeutics, Inc. | Combination of engineered natural killer (nk) cells and antibody therapy and related methods |
WO2024026377A1 (en) | 2022-07-27 | 2024-02-01 | Sana Biotechnology, Inc. | Methods of transduction using a viral vector and inhibitors of antiviral restriction factors |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000028061A2 (en) * | 1998-11-05 | 2000-05-18 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adeno-associated virus serotype 1 nucleic acid sequences, vectors and host cells containing same |
JP2003235562A (ja) * | 2001-11-13 | 2003-08-26 | Univ Pennsylvania | アデノ随伴ウィルス(aav)配列の検出及び/又は同定の方法ならびにそれにより同定される新規な配列の単離 |
Family Cites Families (31)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5478745A (en) | 1992-12-04 | 1995-12-26 | University Of Pittsburgh | Recombinant viral vector system |
US5658785A (en) | 1994-06-06 | 1997-08-19 | Children's Hospital, Inc. | Adeno-associated virus materials and methods |
US6204059B1 (en) | 1994-06-30 | 2001-03-20 | University Of Pittsburgh | AAV capsid vehicles for molecular transfer |
US5856152A (en) * | 1994-10-28 | 1999-01-05 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Hybrid adenovirus-AAV vector and methods of use therefor |
US6001650A (en) * | 1995-08-03 | 1999-12-14 | Avigen, Inc. | High-efficiency wild-type-free AAV helper functions |
US5866552A (en) * | 1996-09-06 | 1999-02-02 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Method for expressing a gene in the absence of an immune response |
JP2001500015A (ja) | 1996-09-06 | 2001-01-09 | トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア | T7ポリメラーゼを利用する組換えアデノ随伴ウイルスの誘導可能な製造方法 |
US20020037867A1 (en) * | 1999-02-26 | 2002-03-28 | James M. Wilson | Method for recombinant adeno-associated virus-directed gene therapy |
ATE380037T1 (de) | 1996-09-06 | 2007-12-15 | Univ Pennsylvania | Verfaheren zur durch rekombinante adeno- assoziierte virus-gerichtete gentherapie |
EP0950111A1 (en) * | 1996-09-06 | 1999-10-20 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods using cre-lox for production of recombinant adeno-associated viruses |
AU4645697A (en) | 1996-09-11 | 1998-04-02 | Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The | Aav4 vector and uses thereof |
AU5070298A (en) * | 1996-12-05 | 1998-06-29 | Introgene B.V. | Genetic modification of primate hemopoietic repopulating stem cells |
US6251677B1 (en) * | 1997-08-25 | 2001-06-26 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Hybrid adenovirus-AAV virus and methods of use thereof |
CA2303768C (en) * | 1997-09-19 | 2009-11-24 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods and vector constructs useful for production of recombinant aav |
CA2304131A1 (en) | 1997-09-19 | 1999-04-01 | James M. Wilson | Method for gene transfer using bcl2 and compositions useful therein |
EP1015619A1 (en) * | 1997-09-19 | 2000-07-05 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods and cell line useful for production of recombinant adeno-associated viruses |
CA2324225A1 (en) | 1998-03-20 | 1999-09-23 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for helper-free production of recombinant adeno-associated viruses |
CA2745131C (en) | 1998-05-28 | 2016-08-09 | John A. Chiorini | Aav5 vector and uses thereof |
US6759237B1 (en) * | 1998-11-05 | 2004-07-06 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adeno-associated virus serotype 1 nucleic acid sequences, vectors and host cells containing same |
US6387368B1 (en) * | 1999-02-08 | 2002-05-14 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Hybrid adenovirus-AAV virus and methods of use thereof |
JP4693244B2 (ja) * | 1999-03-18 | 2011-06-01 | ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア | 組換えアデノ随伴ウイルスのヘルパー無しの生産のための組成物および方法 |
CA2375098A1 (en) | 1999-06-02 | 2000-12-14 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods useful for production of recombinant viruses which require helper viruses |
AU1071701A (en) * | 1999-09-29 | 2001-04-30 | Trustees Of The University Of Pennsylvania, The | Methods for rapid peg-modification of viral vectors, compositions for enhanced gene transduction, compositions with enhanced physical stability, and uses therefor |
US6365394B1 (en) * | 1999-09-29 | 2002-04-02 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Cell lines and constructs useful in production of E1-deleted adenoviruses in absence of replication competent adenovirus |
EP1234048A2 (en) | 1999-12-03 | 2002-08-28 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for increasing packaging and yields of recombinant adenoviruses using multiple packaging signals |
US6468524B1 (en) * | 2000-03-22 | 2002-10-22 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | AAV4 vector and uses thereof |
US6855314B1 (en) | 2000-03-22 | 2005-02-15 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | AAV5 vector for transducing brain cells and lung cells |
AU2001255575B2 (en) * | 2000-04-28 | 2006-08-31 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Recombinant aav vectors with aav5 capsids and aav5 vectors pseudotyped in heterologous capsids |
AU2001289177A1 (en) | 2000-08-30 | 2002-03-13 | Haplogen, Llc | Method for determining alleles |
EP2359869B1 (en) * | 2001-12-17 | 2018-12-26 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adeno-associated virus (AAV) serotype 8 sequences, vectors containing same and uses therefor |
US9819463B2 (en) | 2016-02-18 | 2017-11-14 | Huawei Technologies Co., Ltd. | Method and apparatus for transmitting data in a wireless communication system |
-
2002
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-
2018
- 2018-03-20 CY CY20181100321T patent/CY1120209T1/el unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000028061A2 (en) * | 1998-11-05 | 2000-05-18 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adeno-associated virus serotype 1 nucleic acid sequences, vectors and host cells containing same |
JP2003235562A (ja) * | 2001-11-13 | 2003-08-26 | Univ Pennsylvania | アデノ随伴ウィルス(aav)配列の検出及び/又は同定の方法ならびにそれにより同定される新規な配列の単離 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
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