UA123679C2 - Рідка композиція нейротоксину, стабілізована триптофаном або тирозином - Google Patents

Рідка композиція нейротоксину, стабілізована триптофаном або тирозином Download PDF

Info

Publication number
UA123679C2
UA123679C2 UAA201811606A UAA201811606A UA123679C2 UA 123679 C2 UA123679 C2 UA 123679C2 UA A201811606 A UAA201811606 A UA A201811606A UA A201811606 A UAA201811606 A UA A201811606A UA 123679 C2 UA123679 C2 UA 123679C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
tug
liquid composition
biu
botulinum neurotoxin
tryptophan
Prior art date
Application number
UAA201811606A
Other languages
English (en)
Inventor
Андерс Ярстад
Анна Фрііс
Анна Фриис
Ульф ШТАЛЬ
Анн Гурелл
Барбро Агрен
Емілія Едштром
Емилия Эдштром
Ендрю Пікетт
Эндрю Пикетт
Original Assignee
Іпсен Біофарм Лімітед
Ипсен Биофарм Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Іпсен Біофарм Лімітед, Ипсен Биофарм Лимитед filed Critical Іпсен Біофарм Лімітед
Publication of UA123679C2 publication Critical patent/UA123679C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/164—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
    • A61K38/4893—Botulinum neurotoxin (3.4.24.69)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/20—Halogens; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/24—Phosphorous; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/39—Derivatives containing from 2 to 10 oxyalkylene groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/40—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing nitrogen
    • A61K8/44—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/4906—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with one nitrogen as the only hetero atom
    • A61K8/4913—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with one nitrogen as the only hetero atom having five membered rings, e.g. pyrrolidone carboxylic acid
    • A61K8/492—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with one nitrogen as the only hetero atom having five membered rings, e.g. pyrrolidone carboxylic acid having condensed rings, e.g. indol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A61K8/66—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/06—Preparations for care of the skin for countering cellulitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/20—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of the composition as a whole
    • A61K2800/30—Characterized by the absence of a particular group of ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Винахід стосується стабільної рідкої композиції, яка містить протеїновий нейротоксин, поверхнево-активну речовину, амінокислоту, вибрану з триптофану та тирозину, буфер, який містить іони натрію, хлориду та фосфат, та яка має рН від 5,5 до 8 і є стабільною протягом 2 місяців, та її застосування для лікування або профілактики нервово-м'язових та ендокринних розладів, а також для лікування або запобігання зморшкам шкіри.

Description

(57) Реферат:
Винахід стосується стабільної рідкої композиції, яка містить протеїновий нейротоксин, поверхнево-активну речовину, амінокислоту, вибрану з триптофану та тирозину, буфер, який містить іони натрію, хлориду та фосфат, та яка має рН від 5,5 до 8 і є стабільною протягом 2 місяців, та її застосування для лікування або профілактики нервово-м'язових та ендокринних розладів, а також для лікування або запобігання зморшкам шкіри.
Представлений винахід стосується препаратів рідкого нейротоксину, який не містить тваринного протеїну. Зокрема, представлений винахід стосується препаратів рідкого ботулінічного нейротоксину, який не містить тваринного протеїну, стабілізованих з непротеїновими ексципієнтами.
Препарати нейротоксинів, описані в даному документі, прийнятні для застосування в терапії та, зокрема, для введення пацієнту для досягнення бажаного терапевтичного або естетичного ефекту.
ПЕРЕДУМОВИ СТВОРЕННЯ ВИНАХОДУ
Клостридієві нейротоксини, які природно продукуються клостриді(альними штамами, представляють собою найбільш токсичні біологічні агенти, відомими на сьогоднішній день, та одночасно є потужними інструментами для лікування низки нервово-м'язових та ендокринних розладів, включаючи цервікальну дистонію, еластичність, блефароспазм, гіпергідроз або сіалорею. Вони також використовують в естетичній галузі для згладжування зморшок.
Для того, щоб бути прийнятною для використання як фармацевтичний продукт, композиція нейротоксинів повинна бути такою, щоб її можна було зберігати без значної втрати активності нейротоксинів.
В усіх схвалених, на теперішній час, препаратах ботулінічних нейротоксинів, як стабілізатор використовується тваринний (включаючи людський) протеїн, як правило, людський сироватковий альбумін (НА).
Однак, присутність тваринних протеїнів, таких як НБА в фармацевтичних композиціях, є небажаною через ризик, навіть якщо він низький, небажану передачу інфекційних агентів, які передаються тваринами, таких як пріони, пацієнтові.
В даній галузі техніки описаними є препарати токсинів ботуліну, які не містять тваринного протеїна. Наприклад, М/00158472 описує ліофілізовані композиції, в яких полісахарид, такий як 2-гідроксіетиловий крохмаль, використовується для стабілізації ботулінічного токсину.
МО2005007185 описує композиції, в яких поверхнево-активна речовина та суміш щонайменше двох амінокислот, вибраних з Сі та Сіп або Ар та Азп, використовуються для стабілізації ботулінічного токсину.
Однак більшість препаратів попереднього рівня техніки не є стабільними у рідкій формі та
Зо тому зберігаються в ліофілізованій або висушеній при заморозці формі. Такі препарати мають бути відновлені лікарем в стерильному сольовому розчині перед введенням пацієнту. Дана стадія відновлення є пов'язаною з втратою часу лікаря, ризиком помилки розведення, а також ризиком забруднення під час процесу відновлення. Постачальник ботулінічного токсину повинен також проводити тренінги для лікарів, щоб гарантувати, що стадія відновлення виконується адекватно.
Таким чином, рідкі препарати є вигідними, оскільки вони усувають втрату часу лікаря, ризик помилки розведення, ризик забруднення та необхідність проведення тренінгів для постачальника.
Рідкі препарати, які не містять Н5ЗА, є описаними, наприклад, в УМО2006005910, який розкриває препарати рідкого ботулінічного токсину, які включають поверхнево-активну речовину, хлорид натрію та дисахарид. М/02009008595 розкриває препарати рідкого ботулінічного токсину, які включають полісорбат 20 та метіонін.
Метою представленого винаходу є створення вигідних, рідких, вільних від тваринних протеїнів, препаратів ботулінічних нейротоксинів, які є прийнятними для зберігання та для використання в терапії. Зокрема, стабілізуючий препарат повинен зберігати стабільність продукту, бути вільним від тваринних протеїнів, та також бути прийнятним для стабілізації нейротоксину, який не містить комплексоутворюючих протеїнів.
СУТЬ ВИНАХОДУ
Першим аспектом представленого винаходу є рідка композиція, яка містить або складається, по суті, з протеїнового нейротоксину, поверхнево-активної речовини, амінокислоти, вибраної з триптофану та тирозину, буферу, який містить іони натрію, хлориду та фосфату, який має рН від 5,5 до 8, який є стабільним з плином часу та, який не містить протеїнів тваринного походження.
Інший аспект представляє собою застосування рідких композицій відповідно до винаходу в терапії та/або в косметиці.
Ще одним аспектом представленого винаходу є використання амінокислоти, вибраної з триптофану та тирозину, для захисту протеїнового нейротоксину від розкладання у рідкій композиції, яка не містить протеїнів тваринного походження.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
Першим аспектом представленого винаходу є рідка композиція, яка містить або складається, по суті, з протеїнового нейротоксину, поверхнево-активного речовини, амінокислоти, вибраної з триптофану та тирозину, буферу, який містить іони натрію, хлориду та фосфату, який має рН від 5,5 до 8, який є стабільним з плином часу та який не містить протеїнів тваринного походження. "Вільний від тваринних протеїнів" слід розуміти, як такий, який не містить протеїнів тваринного походження, включаючи людське походження.
Нейротоксин представляє собою речовину, яка орієнтована на нервову клітину та впливає на неврологічну функцію. Протеїнові нейротоксини включають ботулінічні токсини (ВОоМТ) та правцевий токсин (ТеМмт). Переважно протеїновий нейротоксин являє собою ботулінічний нейротоксин.
Ботулінічні нейротоксини представляють собою 150 кДа металопротеази, які складаються з активної форми легкого ланцюга 50 кДа (Ї) та важкого ланцюга 100 кДа (Н), зв'язаних дисульфідним мостом. Ланцюг і! являє собою цинк-протеазу, яка внутрішньоклітинно розщеплює один з протеїнів ЗМАКЕ (розчинний М5Е-зв'язанний протеїновий рецептор), залучених до везикуло опосередкованого вивільнення нейротрансмітерів, тим самим порушуючи механізми, опосередковані нейротрансміттерами. Важкий ланцюг охоплює два домени: М-термінальний 50-кДа-транслокаційний домен (Нм) та С-термінальний 50 кДа рецептор-зв'язуючий домен (Нс). Домен Не ботулінічного нейротоксину містить дві різні структурні ознаки, які називаються як Нос та Нсм домени. Вважається, що амінокислотні залишки, які беруть участь у зв'язуванні з рецепторами, передусім розташовані в домені Нсс.
Ботулінічні нейротоксини були класифіковані у 7 антигенно-відмінних серотипів (від А до 5).
Ілюстративні амінокислотні послідовності для кожного серотипу надаються в даному документі як ЗЕО ІЮ МО 1-7.
Для кожної з послідовностей різні домени можуть бути, наприклад, наступними.
Кваліфікований фахівець оцінить, що в кожному з доменів ботулінічного нейротоксину може існувати певна відмінність.
ВоМтТ діють, наприклад, на нервово-м'язові нервові з'єднання, запобігаючи вивільненню ацетилхоліну та, тим самим, запобігають скороченню м'язів. Нервова термінальна інтоксикація є оборотною, її тривалість варіює для різних серотипів ВОМТ.
Природні ВоМТ продукуються Сіовігідічт роїціпит та іншими видами клостридію, такими як
С. ршугісит, С. Багай та С. агдепіїпепбсе як частина багатопротеїнових комплексів, які захищають нейротоксин від протеолітичної розщеплення. Під "ботулінічним нейротоксином в комплексній формі" мається на увазі ботулінічний нейротоксин та один або декілька протеїнів, які є частиною в природі, таких багатопротеїнових комплексів (асоційованих з нейротоксином протеїнів або "МАР"). МАР включають нетоксичні протеїнів негемаглютиніну (МТМН) та протеїнів гемаглютиніну (НА-17, НА-33 та НА-70). Під "ботулінічним нейротоксином високої чистоти" мається на увазі ботулінічний нейротоксин, що суттєво не містить МАР.
Відповідно до варіанта здійснення винаходу, ботулінічний нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин в комплексній формі. Відповідно до іншого варіанта здійснення, ботулінічний нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин високої чистоти.
Спосіб одержання ВоМТ через культуру природних клостридіальних штамів та очищення їх кожного в комплексній формі або у формі високої чистоти є добре відомими в даній галузі та описаними, наприклад, у Пікетта, Енді (Ріскей, Апау). "Воїшіпит їохіп аз а сіїпіса! ргодисї: тапиїтасійге апа рпаптасоїіоду." Сіїпіса! Арріїсайоп5 ої Воїшіпит Мешгоїохіп. Зргіпдег Мем/ мок, 2014. 7-49.
Високочистий чи практично чистий ботулінічний нейротоксин може бути отриманий з протеїнового комплексу, який включає ботулінічний токсин, наприклад, відповідно до способу, описаного в Ситепі (орісз5 іп МістобіоІоду апа Іттипоіоду (1995), 195, р. 151-154.
Як альтернатива, високочистий ботулінічний нейротоксин може бути отриманий шляхом рекомбінантної експресії гена ВоМТ в гетерологічному господарі, такому як Е. соїї, та очищення від неї.
Переважно протеїновий нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин.
Відповідно до варіанта здійснення винаходу, ботулінічний нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин в комплексній формі. Відповідно до іншого варіанта здійснення, ботулінічний нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин високої чистоти.
Відповідно до варіанта здійснення винаходу, ботулінічний нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин, очищений від його природного клостридіального штаму. Відповідно до іншого варіанта здійснення, ботулінічний нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин, який одержують рекомбінантно в гетерологічному господарі, такому як Е. соїї.
Відповідно до представленого винаходу, ботулінічний нейротоксин може бути ВоМтТ серотипу А, В, С, 0, Е, Е або б.
Відповідно до представленого винаходу ботулінічний нейротоксин може представляти собою модифікований ботулінічний нейротоксин. Відповідно до представленого винаходу, "модифікований ВоМТ" являє собою ВоОоМТ, який має амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 50 95 ідентичність послідовності з ЗЕО ІЮ МО 1, 2, 3, 4, 5, 6 або 7. Переважно, модифікований ВоМТт має амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 60, 70, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 95 ідентичність послідовності з «ЕО ІЮ МО 1, 2, 3, 4, 5, 6 або 7. Переважно, модифікований ВоМТ являє собою ВоОМТ, чия амінокислотна послідовність відрізняється від 5ЕО ІЮО МО 1, 2, 3, 4, 5, 6 або 7 на менше ніж 600, 400, 200, 150, 100, 50 або 20 амінокислотних заміщень, делецій або доповнень, наприклад, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 або 1 заміщення амінокислот, делеції або доповнення.
Відповідно до представленого винаходу рекомбінантний ботулінічний нейротоксин може представляти собою химерний ботулінічний нейротоксин. Відповідно до представленого винаходу, "химерний ВоМТт" складається з домену Г, Нм, Нсм та Нес, які не всі належать до того самого серотипу. Наприклад, химерний ВОМТ може складатися з І -ланцюга з одного серотипу та повного Н-ланцюга (Ну, Нсм та Нсс доменів) з іншого серотипу. Химерний ВоОМТ також може складатися з Ї ланцюга та Нм домену ("Нм") з одного серотипу та Не домену (Нсм та Нсс) з
Зо іншого серотипу. Химерний ВоОМТ також може складатися з ланцюга І. та Нм та Нсм доменів ("розширене І Ним") з одного серотипу та домену Нсс з іншого серотипу.
Відповідно до винаходу домен легкого ланцюга (І) може мати амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 50 95, переважно щонайменше 60, 70, 80, 90, або 95 95 ідентичність послідовності до однієї з наступних амінокислотних послідовностей, та яка зберігає здатність розщеплювати один з протеїнів 5МАКЕ, які беруть участь в опосередкованому везикулою вивільненні нейротрансміттера: - Амінокислота 1-448 з БЕО ІЮО МО: 1 - Амінокислота 1-440 з БЕО ІО МО: 2 - Амінокислота 1-441 з БЕО ІО МО: З - Амінокислота 1-445 з БЕО ІЮ МО: 4 - Амінокислота 1-422 з БЕО ІО МО: 5 - Амінокислота 1-439 з БЕО ІО МО: 6 - Амінокислота 1-441 з БЕО ІО МО: 7
Відповідно до винаходу, Нм домен може мати амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 50 95, переважно щонайменше 60, 70, 80, 90, або 95 95 ідентичність послідовності до однієї з наступних амінокислотних послідовностей, та яка зберігає здатність до транслокації: - Амінокислота 449-871 з 5БЕО ІЮО МО: 1 - Амінокислота 441-858 з БЕО ІО МО: 2 - Амінокислота 442-866 з 5ЕО ІЮО МО: З
БО - Амінокислота 446-862 з 5ЕО ІЮО МО: 4 - Амінокислота 423-845 з 5БЕО ІЮО МО: 5 - Амінокислота 440-864 з 5ЕО ІЮО МО: 6 - Амінокислота 442-863 з 5ЕО ІЮО МО: 7
Відповідно до винаходу, домен Несе може мати амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 50 95, переважно щонайменше 60, 70, 80, 90, або 95 95 ідентичність послідовності до однієї з наступних амінокислотних послідовностей, та яка зберігає здатність зв'язуватися з нервово-м'язовою кліткою: - Амінокислота 872-1296 з 5БЕО ІЮО МО: 1 - Амінокислота 859-1291 з БЕО ІО МО: 2 60 - Амінокислота 867-1291 з 5ЕО ІО МО: З
- Амінокислота 846-1252 з БЕО ІЮ МО: 5 - Амінокислота 865-1274 з БЕО ІЮ МО: 6 - Амінокислота 864-1297 з БЕО ІЮ МО: 7
Відповідно до винаходу домен Нсс може мати амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 50 95, переважно щонайменше 60, 70, 80, 90, або 95 95 ідентичність послідовності до однієї з наступних амінокислотних послідовностей, та яка зберігає здатність зв'язуватися з нервово-м'язовою клітиною: - Амінокислота 1111-1296 з ЗЕО ІЮ МО: 1 - Амінокислота 1098-1291 з БЕО ІЮ МО: 2 - Амінокислота 1112-1291 з БЕО ІЮ МО: З - Амінокислота 1099-1276 з ЗЕО ІЮ МО: 4 - Амінокислота 1086-1252 з БЕО ІЮ МО: 5 - Амінокислота 1106-1274 з БЕО ІЮ МО: 6 - Амінокислота 1106-1297 з ЗЕО ІЮ МО: 7
Визначені вище еталонні послідовності слід розглядати як керівництво, оскільки можуть бути незначні зміни відповідно до субсеротипів. "Відсоткова ідентичність послідовностей" між двома чи більше послідовностями нуклеїнової кислоти або амінокислотними послідовностями є функцією кількості ідентичних нуклеотидів / амінокислот в однакових положеннях, розділених вирівняними послідовностями. Таким чином,
Фо ідентичність може бути розрахований як кількість ідентичних нуклеотидів / амінокислот в кожному положенні у вирівнюванні, поділена на загальну кількість нуклеотидів / амінокислот у вирівняній послідовності, помножена на 100. У розрахунках 95 ідентичності послідовності може також брати до уваги кількість розривів та довжину кожного розриву, який потрібно ввести, щоб оптимізувати вирівнювання двох чи більше послідовностей. Порівняння послідовностей та визначення відсоткової ідентичності між двома або більше послідовностями можуть бути виконані з використанням спеціальних математичних алгоритмів, таких як ВІ А5Т, які будуть добре знайомі кваліфікованому фахівцю.
Поверхнево-активні речовини (або поверхнево-активні агенти) представляють собою сполуки, які є здатними знижувати поверхневий натяг між рідиною та твердою речовиною або
Зо між двома рідинами. Поверхнево-активні речовини можуть бути неіонними, аніонними, катіонними або амфотерними. В композиціях відповідно до винаходу поверхнево-активна речовина переважно представляє собою неіїонну поверхнево-активну речовину. Неїонні поверхнево-активні речовини включають поліоксіетиленгліколеві алкилові прості ефіри, такі як монододеціловий простий ефір октаєтиленгліколю або монододеціловий простий ефір пентаетиленгліколю; поліоксипропіленгліколеві алкилові прості ефіри; глюкозидалкілові прості ефіри, такі як дециллглюкозид, лаурилглюкозид або октилглюкозид; поліоксіетиленгліколеві прості ефіри октилфенолу, такі як ТІйоп Х-100; поліоксіетиленгліколеві прості ефіри алкілфенолу, такі як ноноксинол-9; гліцериналкілові прості ефіри, такі як гліцериллаурат; поліоксиетиленгліколеві прості ефіри сорбітану, такі як полісорбати; сірбітаналкілові прості ефіри, такі як Зрап5; кокамід МЕА, кокамід ОЕА; додецилдиметиламіну оксид; блок- співполімери поліетиленгліколю (та поліпропіленгліколю, такі як полоксамери; поліетоксильований таловий амін (РОЕА).
Відповідно до переважного варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винахода включає неіонну поверхнево-активну речовину, яка представляє собою полісорбат, переважно полісорбат 20 (РЗ20), полісорбат 60 (Р5бО) або полісорбат 80 (РБЗВ80О).
Найбільш переважно, неїонна поверхнево-активна речовина представляє собою РБВ80.
Якщо поверхнево-активна речовина представляє собою полісорбат, її концентрація переважно становить від 0,001 95 до 15 95 об./0б., більш переважно від 0,005 до 2 95 об./06б., ще більш переважно від 0,01 до 1 95, наприклад, 0,01, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 або 1 95 об./0б. Відповідно до одного варіанта здійснення, поверхнево-активна речовина являє собою РБЗ80 в концентрації від 0,05 до 0,2 95 об./06., наприклад, приблизно 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09,0,10, 0,11, 0,12,0,13, 0,14, 0,15,0,16,0,17, 0,18, 0,19 або 0,20 95 об./о6.
РБ20 має густину приблизно 1,1 г/мл. РОбО має густину приблизно 1,044 г/мл. РБЗ8О має густину приблизно від 1,06 до 1,09 г/мл.
Вважається, що полісорбати утворюють міцели та запобігають адсорбції протеїнів на поверхнях та агрегації протеїну. Не бажаючи бути пов'язаними теорією, вважається, що при розкладі / окисленні полісорбати можуть утворювати пероксиди та кислоти, які можуть впливати на стабільність протеїну. Тому вважається бажаним, щоб концентрація полісорбату була настільки низькою, наскільки це можливо, в препараті продукту. Тому вважається бажаним, щоб концентрація полісорбату не перевищувала 200-кратної критичної міцелярної концентрації (СМС), більш переважно, вона не повинна перевищувати в 100, 50, 20, 10 або 5 разів СМО.
Для РБ20 (Мм/ 1227,5 г/моль) СМС становить приблизно 8х109 М при 21 С, тобто приблизно 0,01 95 мас./об.
Для РБбО (Муму 1309 г/моль) СМС становить приблизно 21х10:5 М при 21 "С, тобто приблизно 0,003 95 мас/об.
Для РБ80 (Му 1310 г/моль) СМС становить приблизно 12х105 М при 21 "С, тобто приблизно 0,002 95 мас/об.
Відповідно до переважного варіанта здійснення, концентрація полісорбату становить від 1 до 200 разів більше її СМС при заданій температурі, наприклад приблизно 21 "С, переважно від 2 до 100 разів її СМС, наприклад приблизно в 20 або 50 разів її СМС.
Рідка композиція відповідно до винаходу включає амінокислоту, яка являє собою триптофан або тирозин. Не бажаючи бути пов'язаними з теорією, вважається, що триптофан або тирозин можуть запобігти окисненню активного протеїну, який переведе його в нефункціональний стан.
Дійсно, вважається, що амінокислота, додана в молярний надлишок над нейротоксином, буде окислена в першу чергу, зберігаючи нейротоксин. Також вважається, що триптофан або тирозин можуть нейтралізувати реакційноздатні продукти розщеплення поверхнево-активних речовин, таких як полісорбати.
Переважно, що амінокислота є триптофаном. Більш Переважно, що амінокислота є |1- триптофаном.
Концентрація амінокислоти переважно становить від приблизно 0,1 до 5 мг/мл, більш переважно від 0,1 до 5 мг/мл, від 0,25 до З мг/мл, наприклад, приблизно 0,25, 0,5, 1, 1,5, 2 або
З мг/мл.
Композиція відповідно до винаходу містить буфер, який містить іони натрію, хлориду та фосфату. Автори винаходу дійсно неочікувано встановили, що буфери без іонів натрію, хлориду та фосфату знижували стабільність токсину. Переважно буфер також містить іони калію.
Буфер, наприклад, може бути отриманий шляхом поєднання хлориду натрію, хлориду калію та фосфатних солей натрію. Концентрація хлориду натрію становить переважно від 10 до
Ко) 500 мМ, переважно від приблизно 25 до 300 мМ, наприклад приблизно 25, 50, 75, 100, 140, 150, 200, 250 або 300 мМ.
Концентрація фосфату натрію становить переважно від 1 до 100 мМ, переважно від 2 до 50 мМ, наприклад приблизно 2, 5, 10, 20, 30, 40 або 50 мМ.
Концентрація калію хлориду переважно становить від ї до 50 мМ, переважно від 1 до 10 мМ, наприклад приблизно 1, 2, 3, 4, 5 або 10 мм.
Композиція відповідно до винаходу має рн від 5,5 до 8. Відповідно до переважного варіанта здійснення, рН становить від 6,0 до 7,5, наприклад, приблизно 6,3, 6,35, 6,4, 6,45, 6,5, 6,55, 6,6, 6,65, 6,7, 6,75, 6,8, 6,85,6,9, 6,95, 7,0, 7,05, 7,1, 7,15, 7,2, 7,25, 7,3, 7,35, 7,4, 7,45 або 7,5.
Переважно, рН знаходиться в межах однієї одиниці від фізіологічного рН (який становить приблизно 7,4).
Композиція, відповідно до винаходу, є рідкою. Композиція переважно включає водний розчинник, переважно воду, наприклад, стерильну воду, воду для ін'єкцій, очищену воду, стерильну воду для ін'єкцій.
Переважно, препарат є ізотонічним та підходить для ін'єкції пацієнту, зокрема, пацієнту- людині.
Кількість ботулінічного нейротоксину зазвичай виражається в одиницях мишей 1050 (летальна доза 50), які визначаються як середня летальна внутрішньочеревна доза у мишей.
ОБО для мишей (МІО50) для ботулінічних токсинів не є стандартизованою одиницею.
Дійсно, аналізи, які використовуються різними виробниками доступних на ринку токсинів відрізняються, зокрема, вибором буфера для розведення. Наприклад, дослідження, який використовується для Юузрогія, використовує желатиновий фосфатний буфер, тоді як аналіз, який використовується для ВОТОХФ, використовує фізіологічний розчин як розріджувач.
Вважається, що желатинові буфери захищають токсин при високих розведеннях, що використовуються в аналізах 050. На відміну від цього, вважається, що використання фізіологічного розчину, як розчинника, призводить до певної втрати ефективності. Це може пояснити, чому при дослідженні аналізом ЮузрогФ одна одиниця ВОТОХФ є еквівалентною приблизно трьом одиницям Бузрогі (Зігацдпап, Ю. МУ., 2006, АТІ А 34(3), 305-313; Натбрієюп апа
РісКей, Натбрієюп, Р., апа А. М. РісКей, 1994, доитаї ої Ше Воуаї босієїу ої Медісіпе 87,11: 719).
Переважно буфер розведення, який використовується для визначення 1050 миші, 60 представляє собою желатиновий фосфатний буфер. Наприклад, 050 миші може бути визначена, як описано в Натрбіетюп, Р. еї аІ. Ргодисійоп, ригіїсайоп апа їохоїдіпуд ої Сіовігідіит рошіїпит їуре А їохіп. Еав5. сх. Е. г І ем/ів, апа Р. 5. Апдеєї. Асадетіс Ргевз5, Іпс., Мем Мої, ОА, 1981, р. 248. Коротко кажучи, зразки ботулінічного токсину серійно розбавляють 0,2 95 (мас./об.) желатиновим 0.07М Ма2НРОЯ4 буфером з рН 6,5. Групі мишей (наприклад, від 4 до 8 мишей на групу) вагою близько 20 г внутрішньочеревно вводять зразок розбавленого токсину (наприклад, 0,5 мл на тварину). Групи розбавлення, наприклад, 5 груп розбавлення, відбираються таким чином, щоб вони досягали 50 95 летальної дози. За мишами спостерігають протягом аж до 96 годин та оцінюють летальну дозу 50 для мишей (МІ 050).
Композиція відповідно до винаходу переважно містить від 4 до 10 000 1050 одиниць ботулінічного нейротоксину на мл, більш переважно, від 10 до 2000 І 050 одиниць ботулінічного нейротоксину на мл, наприклад, 20, 30, 40, 50, 75, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 або 1500 І 050 одиниць ботулінічного нейротоксину на мл.
Кількість ботулінічного нейротоксину також може бути виражена в нг. Композиція відповідно до винаходу переважно містить від приблизно 0,01 до 75 нг ботулінічного нейротоксину на мл, більш переважно, від приблизно 0,03 до 20 нг ботулінічного нейротоксину на мл, більш переважно, від приблизно 0,1 до 15 нг ботулінічного нейротоксину на мл, наприклад, приблизно 0,15,0,3, 0,5, 0,75,1,2, 3, 4,5, 6, 7, 8, 9 або 10 нг ботулінічного нейротоксину на мл.
Препарат відповідно до винаходу не містить тваринного протеїну. Зокрема, композиції відповідно до винаходу не містять альбуміну та, зокрема, ніякого сироваткового альбуміну людини. Переважно, композиція відповідно до винаходу є вільною від тваринного продукту, а це означає, що вони не містять ніякої складової тваринного (включаючи людського) походження.
Переважно композиція відповідно до винаходу не містить протеїн, крім протеїнового нейротоксину. Відповідно до іншого варіанта здійснення, композиція відповідно до винаходу не містить інших протеїнів, крім протеїнового нейротоксину та одного або декількох МАР (пов'язаних з нейротоксином протеїнів). З метою уникнення сумнівів, слід зазначити, що амінокислоти не є протеїнами.
Відповідно до варіанта здійснення винаходу, композиція не містить сахаридів, в тому числі ніяких моносахаридів, ніяких дисахаридів, ніяких полісахаридів.
Рідка композиція відповідно до винаходу є стабільною з плином часу. Наприклад, вона
Зо стабільна протягом 2 місяців при температурі від 2 до 8 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом З місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад, при 5 "С. Відповідно до переважного варіанта здійснення вона є стабільною протягом 6 місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад, при 5 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 12 місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад, при 5 "С. Відповідно 35 до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 18 місяців при температурі від 2 до 8 С, наприклад, при 5 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 24 місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад, при 5 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 36 місяців при температурі від 2 до 87сС, наприклад, при 5 "С. Відповідно до одного варіанта вона є стабільною протягом З місяців при 40 кімнатній температурі, наприклад, при 25 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 6 місяців при кімнатній температурі, наприклад, при 25 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 2 місяців при 37 "С.
Рідка композиція відповідно до винаходу переважно зберігається при температурі від 0" до "С. В переважному варіанті здійснення вона зберігається при 2-8 "С, наприклад, при 5 "С. В іншому варіанті здійснення вона зберігається при кімнатній температурі. Переважно вона не заморожується.
Стабільність може оцінюватися шляхом порівняння активності ботулінічного нейротоксину з плином часу. Активність ботулінічного нейротоксину може відноситися до здатності активності ботулінічного нейротоксину зв'язуватися з його рецептором-мішенню на клітині, переміщати легкий ланцюг у клітину та/або розщеплювати його протеїн-мішень 5ЗМАКЕ.
Способи вимірювання активності ботулінічного нейротоксину є добре відомими в даній галузі. Активність ботулінічного нейротоксину може бути оцінена, наприклад, за допомогою аналізу летальності мишей (ГО050), як описано вище, аналізу на основі м'язової тканини, такий як аналіз діафрагмового нерва половини діафрагми миші (наприклад, як описано в ВідаїКе, Н. апа Киттеї А., Тохіп5 7,12 (2015): 4895-4905), клітинного аналізу (наприклад, як описано в
МО 0201349508 або УМО 02/016969) або екстрацелюлярного аналізу протеолітичної активності, такого як ВоТебзіж (набір для виявлення ботулінічного нейротоксину (Воїціпит Меигоїохіп
Оеїесійоп Кі), доступний від Віозепіїпеї! Іпс.).
Переважно, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо існує не більше, ніж певний відсоток втрати активності протягом певного періоду часу та при заданій температурі.
Відповідно до одного варіанта здійснення, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо існує не більше, ніж 30 95 втрата позаклітинної протеолітичної активності протягом 3, 6, 12, 18, 24 або 36 місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад, не більше, ніж 30 9о втрата позаклітинної протеолітичної активності протягом 6 місяців при 5 "С. Переважно, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо існує не більше, ніж 20 95 втрата позаклітинної протеолітичної активності протягом З місяців при 5 "С, більш переважно протягом 6, 12, 18, 24 або 36 місяців при 5 "С. Відповідно до іншого варіанта здійснення, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо існує не більше, ніж 40 95 втрата позаклітинної протеолітичної активності протягом З місяців при кімнатній температурі, наприклад, при 25 "С.
Переважно, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо існує не більше, ніж 30 95 втрата позаклітинної протеолітичної активності протягом З місяців при 25 С, більш переважно протягом б місяців при 25 "С. Відповідно до іншого варіанта здійснення винаходу, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо існує не більше, ніж 50 95 втрата позаклітинної протеолітичної активності протягом 2 місяців при 37 "С. Позаклітинна протеолітична активність може вимірюватися за допомогою аналізу ВоТевіф).
Відповідно до одного варіанта здійснення винаходу, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо втрати в одиницях МІО5О становлять не більше, ніж 30 95 протягом 2, 3, 6, 12, 18, 24 або 36 місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад не більше, ніж 3095 втрат у одиницях МІ О50 протягом б місяців при 5 "С. Переважно, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо втрати в одиницях МІ 050 становлять не більше, ніж 20 95 протягом 2 місяців при 5 "С, більш переважно протягом 3, 6, 12, 18, 24 або 36 місяців при 5 "С. Відповідно до іншого варіанта здійснення, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо втрати в одиницях МІО5О становлять не більше, ніж 40 95 протягом 2 або З місяців при кімнатній температурі, наприклад, при 25 "С. Переважно, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо втрати в одиницях МІ 050
Зо становлять не більше, ніж 30 95 протягом З місяців при 25 "С, більш переважно протягом 6 місяців при 25 "С. Відповідно до іншого варіанта здійснення, композиція відповідно до винаходу вважається стабільною, якщо втрати в одиницях МІО5О становлять не більше, ніж 50 95 протягом 2 місяців при 37 "С. Одиниці МІО50 можуть вимірюватися, як зазначено вище.
Рідкі композиції відповідно до винаходу можуть зберігатись в герметизованих флаконах або шприцях, наприклад скляних флаконах або шприцях, переважно скляних флаконах або шприцях типу 1 (або "нейтральні до організму". Переважно в флаконі або шприці кисень відсутній або його дуже мало. Флакони або шприці можна, наприклад, заповнювати в атмосфері з вмістом кисню нижче 100 м.ч., переважно нижче 50 м.ч., та газоподібний азот може використовуватись як захисна атмосфера у флаконах. Коли використовуються скляні флакони, вони, наприклад, можуть бути закриті пробками із хлорбутилу або бромбутилового каучуку, які можуть бути закупореними ЕРіигоТес? пробками. Переважно, рідкі композиції відповідно до винаходу зберігаються у скляних флаконах, закритих захисними пробками РіІигоТесф).
Відповідно до одного з варіантів здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - від4 до 10 000 одиниць І 050 ботулінічного нейротоксину на мл, - від 0,001 до 15 95 об./об. полісорбату, - від 0,1 до 5 мг/мл триптофану, - від 10 до 500 мМ масі, - від 1 до 50 мМ КСІ, - від 1 до 100 мМ фосфату натрію, має рН від 5,5 до 8, та є стабільною протягом 6 місяців при 5 "С.
Відповідно до одного з варіантів здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - від 10 до 2000 1050 одиниць ботулінічного нейротоксину на мл, - від 0,005 до 2 95 об./об. полісорбату, - від 0,1 до 5 мг/мл триптофану, - від 25 до 300 мМ масі, - від 'ї до 10 мМ КСІ, - від 2 до 50 мМ фосфату натрію, 60 має рН від 6,0 до 7,5, та є стабільною протягом 12 місяців при 5 "С.
Відповідно до одного з варіантів здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - від 10 до 2000 1050 одиниць ботулінічного нейротоксину на мл, -від 0,05 до 0,2 95 об./об. полісорбату 80, - від 0,1 до 5 мг/мл триптофану, - від 25 до 300 мМ масі, - від до 10 мМ КСІ, - від 2 до 50 мМ фосфату натрію, має рН від 6,0 до 7,5, та є стабільною протягом 12 місяців при 5 "С.
Відповідно до одного з варіантів здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 0,2 95 об./06. полісорбату 80, - 1 мг/мл триптофану - 140 мМ масі, - З ММ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 6,6.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 0,04 95 об./0б6. полісорбату 80, - 1 мг/мл триптофану - 140 мМ масі, - З ММ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 6,9.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з:
Зо - ботулінічного нейротоксину В, - 0,25 95 об./06. полісорбату 20, - 4 мг/мл триптофану - 140 мМ масі, - З ММ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 7,4.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 0,01 95 об./0б6. полісорбату 80, - 0,25 мг/мл триптофану - 255 мМ масі, - 2 ММ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 7,2.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 0,01 95 об./об. полісорбату 80, - 0,25 мг/мл триптофану - 255 мМ масі, - 10 мМ КСІ, - БО мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 6,3.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 1 95 об./06. полісорбату 80, - 0,25 мг/мл триптофану - 255 мМ масі, бо - 50 мМ фосфату натрію,
причому рН зазначеної композиції становить приблизно 6,3.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 1 95 об./об. полісорбату 80, - З мг/мл триптофану - 255 ММ Масі, - 10 мМ КС, - БО мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 7,2.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 0,1 95 об./0б. полісорбату 80, - 1,625 мг/мл триптофану - 140 мм масі, - З мМ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 6,75.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 0,01 95 об./0б6. полісорбату 80, - 1 мг/мл триптофану - 140 мм масі, - З мМ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 6,75.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить
Ко) або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 0,1 95 об./0б. полісорбату 80, - 1 мг/мл триптофану - 140 мм масі, - З мМ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 6,75.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину А, - 1 95 об./06. полісорбату 80, - 1 мг/мл триптофану - 140 мм масі, - З мМ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 6,75.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину В, - 15 95 об./об. полісорбату 20, - 1 мг/мл триптофану - 140 мм масі, - З мМ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 7,4.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину В, - 15 95 об./об. полісорбату 20, бо - 4 мг/мл триптофану
- 140 мм масі, - З мМ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 7,4.
Відповідно до іншого варіанта здійснення, рідка композиція відповідно до винаходу містить або складається, фактично, з: - ботулінічного нейротоксину В, - 0,25 95 об./06. полісорбату 20, - 4 мг/мл триптофану - 140 мм масі, - З мМ КСІ, - 10 мМ фосфату натрію, причому рН зазначеної композиції становить приблизно 7,4.
Інший аспект представляє собою застосування рідких композицій відповідно до винаходу в терапії.
Рідкі композиції відповідно до винаходу можуть використовуватися в терапії для лікування або профілактики м'язових розладів, нервово-м'язових розладів, неврологічних розладів, офтальмологічних розладів, больових розладів, психологічних розладів, суглобових розладів, запальних розладів, ендокринних розладів або урологічних розладів.
Наприклад, рідкі композиції відповідно до винаходу можуть використовуватися для лікування або профілактики захворювання, стану або синдрому, вибраного з наступного: - офтальмологічні розлади, вибрані з групи, яка включає блефароспазм, страбізм (включаючи рестриктивний або міогенний страбізм), амбліопію, осциллопсію, захисний птоз, терапевтичний птоз для захисту рогівки, ністагм, езотропію, диплопію, ентропіон, ретракцію повік, орбітальна міопатію, гетерофорію, супутні неправильні розташування, несумісне відхилення, первинну або вторинну езотропію або екзотропію, внутрішньоядерну офтальмоплегію, косу девіацію, синдром Дуейна та ретракцію верхньої повіки; - розлади руху, включаючи геміфаціальний спазм, кривошию, спастичність у дитини або дорослої людини (наприклад, при церебральному паралічах, після інсульту, при розсіяному
Зо склерозі, травматичному ураженні головного мозку або у пацієнтів з травмою спинного мозку), ідіопатичні фокальні дистонії, м'язову ригідність, писальну судому, дистонію руки, параліч ІМ нерва, оромандібулярну дистонію, тремор голови, пізню дискінезію, пізню дистонію, професійні судоми (у тому числі судоми музикантів), параліч лицевого нерва, спазм закриття щелепи, спазм обличчя, синекінезія, тремор, первинний писальний тремор, міоклонус, синдром м'язевої скутості, дистонія стопи, лицевий параліч, синдром болючості рук та рухів пальцями, тікові порушення, дистонічні тіки, синдром Туретта, невроміотонію, тремтіння підборіддя, параліч бічного прямого м'яза, інверсію дистонічної стопи, щелепну дистонію, синдром кролика, мозочковий тремор, параліч Ії нервова, міоклонус піднебіння, акатизію, м'язеві судоми, параліч
ЇМ нерва, "застигання" при ході, дистонія розгиначів тулуба, постпаралітичну синкінезію лицевого нерва, вторинну дистонію, хворобу Паркінсона, хорею Гантінгтона, епілепсію, офф- період дистонію, головний правець, міокімію та доброякісний синдром крампі-фасцикуляції; - оториноларингологічні розлади, включаючи спастичну дисфонію, вушні розлади, порушення слуху, вушне клацання, тінітус, запаморочення, хворобу Меньєра, дисфункцію завиткового нерва, заїкання, крікофарингеальну дисфагію, бруксизм, замикання гортані при хронічній аспірації, гранульому голосової щілини, вентрикулярну дистонію, вентрикулярну дисфонію, мутаційну дисфонію, тризм, хропіння, тремтіння голосу, аспірацію, дистонію з протрузією язика, піднебінний тремор, глибокий прикус губи та гортанну дистонію; синдром першого прикусу; - розлади шлунково-кишкового тракту, включаючи ахалазію, анальну тріщину, закреп, дисфункцію скронево-нижньощелепного суглоба, дисфункцію сфінктера Одді, стійку гіпертонію сфінктера Одді, розлади кишкових м'язів, пуборектальний синдром, анізмус, пілороспазм, дисфункцію жовчного міхура, шлуково-кишкову або стравохідну моторну дисфункцію, дифузний стравохідний спазм та гастропарез; - сечостатеві розлади, включаючи детрузорно-сфінктерне дизсинергію, гіперрефлексію детрузора, неврогенну дисфункцію сечового міхура (наприклад, при хворобі Паркінсона, травми спинного мозку, інсульті або розсіяному склерозі), гіперактивний сечовий міхур, нейрогенну детрузорнугіперактивність, спазми сечового міхура, нетримання сечі, затримку «сечі, гіпертрофовану шийку сечового міхура, дисфункцію випорожнення, інтерстиціальний цистит, вагінізм, ендометріоз, тазовий біль, збільшення передміхурової залози (доброякісна гіперплазія бо передміхурової залози), простатодинію, рак передміхурової залози та пріапізм;
- дерматологічні розлади, включаючи розлади проліферації клітин шкіри, шкірні рани, псоріаз, розацеа, акне; рідкісні спадкові захворювання шкіри, такі як синдром Фокса-Фордайса або хворобу Хейлі-Хейлі; зменшення келоїдного та гіпертрофічного рубця; зменшення розміру пор; запальні захворювання шкіри; болісні запальні стани шкіри; - больові розлади, включаючи біль у спині (біль у верхній частині спини, біль у нижній частині спини) міофасціальний біль, головний біль напруження, фіброміалгію, болісні синдроми, міалгію, мігрень, хлистову травму, біль у суглобах, післяопераційний біль, білль не пов'язаний з м'язовим спазмом та біль пов'язаний з розладами гладкої мускулатури; - запальні захворювання, включаючи панкреатит, нейрогенні запальні порушення (включаючи подагру, тендиніт, бурсит, дерматоміозит та анкілозуючий спондиліт); - секреторні розлади, такі як надлишкові секреції залоз, гіпергідроз (у тому числі пахвовий гіпергідроз, пальмарний гіпергідроз та синдром Фрея), гіперсалівацію, сіалорею, бромгідрози, гіперсекрецію слизу, гіперлакрімацію, дисфункцію голокринових залоз; надлишок секрету шкірного сала; - дихальні порушення, включаючи риніт (включаючи алергічний риніт), ХОЗЛ, астму та туберкульоз; - гіпертрофічні розлади, включаючи збільшення м'язів, гіпертрофію жувальних м'язів, акромегалію та нейрогенну передню великогомілкову гіпертрофію з міалгією; - суглобові порушення, включаючи тенісний лікоть (або епікондиліт ліктьового суглоба), запалення суглобів, коксартроз, остеоартрит, патологію м'язів-обертачів плеча, ревматоїдний артрит та синдром зап'ястного каналу; - ендокринні порушення, такі як цукровий діабет 2 типу, гіперглюкагонізм, гіперінсулінізм, гіпоінсулінізм, гіперкальціємію, гіпокальціємію, порушення щитоподібної залози (у тому числі захворювання Грейвса, тиреоїдит, тиреоїдит Хашімото, гіпертиреоз та гіпотиреоз), паратиреоїдні розлади (у тому числі гіперпаратиреоз та гіпопаратиреоз), синдром Кушінга та ожиріння; - аутоїмунні захворювання, такі як системний червоний вовчак; - проліферативні захворювання, включаючи пухлини парагангліоми, рак передміхурової залози та пухлини кісток;
Зо - травматичні ураження, включаючи спортивні травми, травми м'язів, рани сухожиль та переломи кісток; та - використання як ветеринарних препаратів (наприклад, іммобілізація ссавців, коліка у коней, ахалазія у тварин або спазми м'язів у тварин).
Рідкі композиції відповідно до винаходу також можуть використовуватися в естетичній медицині (тобто для поліпшення зовнішнього вигляду), зокрема для лікування або запобігання зморшок шкіри, зокрема зморшок обличчя, таких як лицьові міжбровні зморшки, зморшки контуру ока, глабеллярні, опущені кути рота, зморшки шиї (платизмальні тяжі), зморшки підборіддя (підборідний м'яз, лимонна кірка, підборіддя з ямочкою), лобові лінії, зморшки "розтягнутої шкіри", ліфтинг носу, лікування лінії сну. Відповідно до цього аспекту винаходу, особа, яка підлягає лікуванню чи запобіганню для поліпшення зовнішнього вигляду, переважно не страждає на будь-які розлади, стани або синдроми, описані вище. Більш переважно, вказаний суб'єкт є здоровим суб'єктом (тобто не страждає будь-яким захворюванням, станом або синдромом).
Рідкі композиції відповідно до винаходу можуть використовуватися в комбінації з іншою терапевтичною сполукою. В одному варіанті здійснення рідкі композиції відповідно до винаходу вводять в комбінації з анальгетичною сполукою для лікування болю, зокрема в комбінації з опіоїдною похідною, такою як морфін, як описано в МО 2007/144493, зміст якої є включеним в даний документ у вигляді посилання. В іншому варіанті здійснення, рідкі композиції відповідно до винаходу вводяться в комбінації з гіаалуроновою кислотою, наприклад, для лікування раку передміхурової залози, як описано в публікації МО 2015/0444416, зміст якої є включеним в даний документ у вигляді посилання.
Ще одним аспектом представленого винаходу є застосування амінокислоти, вибраної з триптофану та тирозину, для захисту протеїнового нейротоксину від розкладання у рідкій композиції, яка не містить протеїнів тваринного походження.
Відповідно до переважного варіанта здійснення, амінокислота представляє собою триптофан, більш переважно, І -триптофан.
Переважно протеїновий нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин.
Відповідно до варіанта здійснення винаходу, ботулінічний нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин в комплексній формі. Згідно з іншим варіантом здійснення, бо ботулінічний нейротоксин є ботулінічним нейротоксином високої чистоти. Відповідно до варіанта здійснення винаходу, ботулінічний нейротоксин є ботулінічним нейротоксином, очищеним від його природного клостридіального штаму. Відповідно до іншого варіанта здійснення, ботулінічний нейротоксин представляє собою ботулінічний нейротоксин, який одержують рекомбінантно в гетерологічному господарі, такому як Е. соїї. Відповідно до представленого винаходу, ботулінічний нейротоксин може представляти собою ВоМТтТ серотипу
А, В, С, 0, Е, Е або б. Відповідно до представленого винаходу ботулінічний нейротоксин може представляти собою модифікований ботулінічний нейротоксин, як описано вище. Відповідно до представленого винаходу рекомбінантний ботулінічний нейротоксин може представляти собою химерний ботулінічний нейротоксин, як описано вище.
Амінокислота використовується в комбінації з поверхнево-активною речовиною та буфером, який містить іони натрію, хлориду та фосфату, та рідка композиція має рН від 5,5 до 8.
Переважно, поверхнево-активна речовина представляє собою неіонну поверхнево-активну речовину, більш переважно полісорбат, наприклад РБ20, РБЗбО або РБбБ80. Більш переважно, неїонна поверхнево-активна речовина представляє собою РБ80. Переважно, буфер також містить іони калію. Буфер, наприклад, може бути отриманий шляхом поєднання хлориду натрію, хлориду калію та солей фосфату натрію. Відповідно до переважного варіанта здійснення, рн становить від 6,0 до 7,5, наприклад 6,3, 6,35, 6,4, 6,45, 6,5, 6,55, 6,6, 6,65, 6,7, 6,75, 6,8, 6,85, 6,9, 6,95, 7,0, 7,05, 7,1, 7,15, 7,2, 7,25, 7,3, 7,35, 7,4, 7,45 або 7,5. Переважно, рН знаходиться в межах однієї одиниці від фізіологічного рН (що становить приблизно 7,4).
Відповідно до переважного варіанта здійснення застосування відповідно до винаходу рідка композиція є стабільною протягом 2 місяців. Наприклад, вона є стабільною протягом 2 місяців при температурі від 2 до 8 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом З місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад, при 5 "С.
Відповідно до переважного варіанта здійснення вона є стабільною протягом 6 місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад, при 5 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 12 місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад, при 5 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 18 місяців при температурі від 2 до 8 С, наприклад, при 5 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 24 місяців при температурі від 2 до 8 "С, наприклад, при 5 "С. Відповідно до одного з
Зо варіантів здійснення вона є стабільною протягом 36 місяців при температурі від 2 до 8 "с, наприклад, при 5 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом З місяців при кімнатній температурі, наприклад, при 25 "С. Відповідно до одного з варіантів здійснення вона є стабільною протягом 6 місяців при кімнатній температурі, наприклад, при 2576.
ПРИКЛАДИ
1. Отримання стабільних рідких препаратів ботулінічного токсину А
Рідкі препарати ботулінічного токсину, які містять 15 нг/мл високоочищеного ВОоМТ/А, 15 95 об./06. полісорбату 20, амінокислоту, вибрану з тирозину (Туг), триптофану (Тгр) та цистеїну (Су), або суміш з метіоніну (Ме), тирозину (Туг), триптофану (Тгр) та цистеїну (Суз) (Бідта
Аїдгісп), та фосфатний сольовий буфер (РВЗ від СаіІріоспет) (140 мМ Масі, 10 мМ фосфату натрію та З мМ КСІ при рН 7,4 при 25 "С) отримували, фільтрували, використовуючи 0,22 мкм
РМОЕ (полівініліденфторид) фільтри та зберігали у силіконізованих 2-мл скляних шприцях протягом б днів при 40 "С, після чого для кожного препарату проводили дослідження щодо ефективності.
Для дослідження щодо ефективності шприці, які містять препарати, виливали в 2 мл скляні флакони (Спготасої, бої4) з кришками, які містять РТЕЕ-оброблену каучукову перегородку (Спготасої), або 1,7 мл пластикові мікроцентрифужні пробірки (Ахудеп, Махітит Ресомегу), які обидві мають низьку здатність щодо адсорбції протеїна. Потім препарати розбавляли 0,9 95 розчином Масі з З 95 сироваткового альбуміну людини (НБ5А). Для кожного препарату 50 мкл зразка вводили в литковий м'яз мишей у той самий день, коли проводили розведення. Мишей контролювали протягом З днів, та зафіксованою була ступінь паралічу.
Результати показані в таблиці 1.
Таблиця 1
Прискорене дослідження щодо зберігання (6 днів при 40 "С) амінокислотних добавок щодо стабільності ВОМТ/А. В результаті у мишей спостерігається параліч: - - не аналізується,
ММ - без зауважень, РА - параліч та ї - смерть. ефективності
Розведення '
Буфер Вот Амінокислота | 0,9 Масі з нс День! День2) День З ц. З 95 НЗА (раз)
Ттр 025 мг/мл ж
Сув 0,25 2х 0,25 ММ мг/мл ж
Мею,25 мг/мл ж
РВ5 рН Туг0,25 20х 0,025 ММ 14 мг/мл о 15 нг/мл 2х | 025 | - | - мм ді Су 1 мм 0025 | 11 ММ 1 полісорбат Виражений РА во тиоле ах | ов | омооюота 0,025 | - | - | мм 2х | 025 | - | її ї.Й.ЙЄєЄєЄ(.
Пр мм 0025 | 1-1 ММ 1 2х | 025 | - | - мм 0,025 | - | - | мм
Виявлено, що тирозин та триптофан мають захисний ефект проти розкладання ВОоМТ/А.
Триптофан, як виявилося, має найсильніший захисний ефект. Цистеїн, а також суміш, яка містить всі 4 амінокислоти, не мала захисного ефекту. 2. Отримання стабільних рідких препаратів ботулінічного токсину В
Рідкі препарати ботулінічного токсину, які містять 350 нг/мл високоочищеного ВоМТ/В, 15 95 об./06. полісорбату 20, амінокислоту вибрану з тирозину (Туг), триптофану (Тгр) та цистеїну (Суз) або суміш з метіоніну (Ме), тирозину (Туг), триптофану (Тгр) та цистеїну (Сув), та фосфатний сольовий буфер (РВ5) при рН 7,4 отримували, фільтрували, використовуючи 0,22 мкм фільтри, та зберігали у силіконізованих 2-мл скляних шприцях протягом двох тижнів при 40 "С, після чого проводили дослідження щодо ефективності для кожного препарату, як описано вище.
Результати показані в таблиці 2.
Таблиця 2
Прискорений тест на зберігання (два тижні при 40 "С) амінокислотних добавок щодо стабільності
ВоМтТ/В. В результаті у мишей спостерігається параліч: - - не аналізується,
ММ - без зауважень, РА - параліч та ї - смерть. ефективності
Розведення в Ін'єк
Буфер Вом т/В Амінокислота 0,9 масі з З 6 Доза |День 1|День 2 День З конц. НЗА (ну) (раз)
Тгр 0,25 мг/мл ї
Суз 0,25 мг/мл
РєРВ5 рн но 1ох 1,75 РА 74 Меї 0,25 мг/мл 350 нг/мл но 15 95 Туг 0,25 мг/мл полісорбат 20 Сувімомл.о | ох 175) - | - | РА /
Туг0,575м/мл | ох |175| - | її! оолеімомло -5285- 65------вк-- прімт? ми Св 1051 1-1 РА. 1
Виявлено, що тирозин та триптофан мають захисний ефект щодо розкладання ВоОоМТ/В.
Цистеїн, так само, як і суміш, яка містить всі 4 амінокислоти, також мав захисний ефект, але в слабшій мірі. 3. Оцінка різних концентрацій триптофану та полісорбату 20
Рідкі препарати ботулінічного токсину, які містять високоочищений ВоМТ/А або ВоМТт/В та різні концентрації полісорбату 20 (РБ5 20) та триптофану та фосфатний сольовий буфер (РВ5) при рН 7,4 отримували, фільтрували, використовуючи 0,22 мкм фільтри та зберігали у силіконізованих 2-мл скляних шприцях. Дослідження щодо ефективності паралічу задніх кінцівок були проведені для кожного препарату, як описано вище.
Результати показані в таблиці 3.
Таблиця З
Оцінка концентрації Тгр та полісорбату 20 (Р520) щодо стабільності ВОМТ/А або ВоМТ/В.
В результаті у мишей спостерігається параліч: - - не аналізується, МУМ - без зауважень,
РА - параліч та ї - смерть.
Розвед Оцінка ефективності (1-34) для зразків, які , зберігалися за різних температур та протягом різної
ВОМ | Тер РегО ення в | Ін'єк. тривалості часу
МИ КА А НУК Мо Мч (нг/мл) | мл) 33 9 (нг) - ( - - - -
НА (з) в вв 8-1 2 6 5 « Л Є А - Л о 5х (015-11-11 - | - | - | - | мк
Вомт/ 5 | во огві 1х 0184-55 5 2 5 «Р
А | 5х 0415-11-11 - 1 1-1 - м 515 08-25 Я вд 5х |015|-1-1 1 - | - | - | її РА 100 в їх 51-1-1-1- 1 | - | |РА лох | 05 | - | -|РА - | - | РА | - | - | РА
ВоМТ/ 00 доб! їх Ї51-,Ї- 1 -,|-|1 1111 в | лох |051|-|-|РА"Ї - | - ММ - | - | РА ю0! 3 зв 1 їх Ї51-1-11,- 1 11 11 лох | 05 | - |-|РА!Ї | - |РА | - | - | РА
Ступінь паралічу (РА): 1. Вражені пальці; 2. Незначне оніміння в задній лапі; 3. Обидві задні лапи паралізовані; 4. Задні лапи паралізовані; Елююючий буфер після очищення (5): 50 мМ ацетату натрію рН 4,5 з 0,2 95 (об./06.), полісорбат 20 та 400 мм хлориду натрію. 7", можливо, відбулося змішування двох розчинів ВОМТ/А 25 "С 8 мг/мл Тгр 0,25 95 полісорбату 20. 4. Оцінка різних сольових концентрацій в ВоОМТ/В препаратах
Рідкі препарати ботулінічного токсину, які містять 100 нг/мл високоочищеного ВоМТ/В, полісорбат 20, триптофан від різних постачальників амінокислот та буфер, вибраний з РВЗ рн 7 4 (СаіІріоспет), 12 нМ фосфатного буфера рН 7 (АроїеКейб та 20 мМ натрію ацетату (МаАс) рН 5,5 (МаАс від Ріка та оцтова кислота від Мегск) отримували, фільтрували, використовуючи 0,22 мкм фільтри та зберігали у силіконізованих 2-мл скляних шприцях. Дослідження щодо ефективності паралічу задніх кінцівок були проведені для кожного препарату, як описано вище.
Результати показані в таблиці 4.
Таблиця 4 оцінка різних концентрацій солі щодо стабільності ВОМТ/В. В результаті у мишей спостерігається параліч: - - не аналізується, МУМ - без зауважень. РА - параліч та ї - смерть.
Тестування Оцінка ефективності (1-39) для . зразків, які зберігалися протягом
ВОМ ефективності пд й
Тер різної тривалості час
Т/в рБз2О ' о юонц буфер | виробник | 52) |РозведенняГІн'єк (нг/мл) та конц. в 09 Масі (раз) (ну) 100 РВЗ |Аїйпотою)| 5 їх /5/|: || її рнт.А | 4 мг/мл лох |05| - | - РАЇ | Г /
Зідта їх 51-11: 1 тю | РВ5 | дідфісп | 5 внтя | вими | | ох фо)
Зідта їх 51-11: 1 тю || дсп | 15 ох о А риє, 1 мг/мл "
Зідта їх 51-11 1-11 тю || Аюїісп | 025 ох о А А? риє, 4 мг/мл " зо еофаи| Ас! 50 ох 05171 я 100 Фосфат Аїагісн 15 й у яммі) | ох о) | мм 20мМ | Зідта їх |51-1|- РАЇ | ГГ / 100 МаАс Аїагісн 15 10х 05 РА рн, 4 мг/мл й 1. Деяка втрата функції; 2. Слабкий параліч
Результати показують, що препарати, які містять буфер РВ5 (який містить іони натрію, хлориду, фосфату та калію), відіграють певну роль в стабільності ботулінічного токсину. 5. Оцінка різних стабілізаторів
Рідкі препарати ботулінічного токсину, які містять 15 нг/мл високоочищеного ВоМТ/А, полісорбат 20 (РБ20) або полісорбат 80 (РБ8О) або НЗА, триптофан та РВ5 отримували, фільтрували, використовуючи 0,22 мкм фільтри, та зберігали у силіконізованих 2-мл скляних шприцях. Дослідження щодо ефективності паралічу задніх кінцівок були проведені для кожного препарату, як описано вище.
Результати показані в таблиці 5.
Таблиця 5
Оцінка різних поверхнево-активних речовин щодо стабільності ВОМТ/А. В результаті у мишей спостерігається параліч: - - не аналізується, МУМ - без зауважень, РА - параліч ії - смерть.
Дослідження Оцінка ефективності (1-34) для зразків, що
ВОМ ефективності зберігалася різну тривалість часу
Т/А Стабіліза-| Розведення | Ін'єк конц. | РУФЕРІ ТР. тор в09 (нг/ мл) масі з З до | Доза
НА (раз). | (нг) чага за |та) га за | та | 2а | за 15 | РВЗ |їмг| РБВО | їх 045); | | | | - | |РАЧ рН7.4 |/мл) 02595 | 15х 00511 | | | 1-1 - мА 15 | РВЗ |їмг| РБгО | їх 045); | | | | - | |РАЗ рН7.4 |/мл) 02595 | 15х 00511 | |-|- РА; - | - ММ 15. | РВЗ НВА | 1,7х |045Ї1| | її | /- 1 11 рнт,А тІму/мл| 15х |00511Ї! | Її 1 1-1 РАЧ 1. Сильний параліч обох задніх лап; 2. Кути лапи; 3. Сильний параліч 6. Оцінка різних препаратів
Рідкі препарати ботулінічного токсину, які містять 10 нг/мл високоочищеного ВоМТ/А, 0,25 95
РБЗВО, 1 мг/мл триптофану та РВ5 отримували як описується вище. рН регулювали до 6,6 та 7,0 шляхом додавання НСІ. Кожен препарат зберігався протягом 5 тижнів при 40 "С.
Кожний препарат потім розбавляли в 10 разів, та дослідження щодо ефективності паралічу задньої кінцівки проводились, як описано вище (0,05 нг на ін'єкцію). В обох випадках параліч задньої кінцівки спостерігався на 3-й день. Параліч був сильнішим при використанні препарата з рн 6,6. 7. Оцінка різних препаратів
Рідкі препарати ботулінічного токсину, які містять 0,3 нг/мл високоочищеного ВоМТ/А, полісорбат, вибраний з РБ20 та РБЗ80, 1 мг/мл триптофану та 12 мМ РВ5З при рН 7,4 отримували, як описується вище. рН кожного препарату регулювали до рнН 6,6 або 6,9 шляхом додавання 1,2 М НОСІ.
Полісорбат 20 випробовувався з однією концентрацією, 0,2 95 мас/об., яка відповідає приблизно 20 разовій його СМС (критична міцелярна концентрація, приблизно 0,01 95 мабс./об. при 21 "С). Полісорбат 80 досліджували в двох концентраціях 0,04 95 та 0,2 95 мас/об., що відповідає, відповідно, приблизно 20 та 100 разовій його СМС (приблизно 0,002 95 мас/об, при 202179).
Таблиця 6
Вибір полісорбату та рн : РБ2О до РБ2О до
РБ2О-1 0 11111111 -111111111711111111171661 рБ20-2 0 17111111 -1111111171111111117169
РБВО-1 1-11 004 | ...ЮюЮДрИ7Д66
РБВО-2 1-17 004 | ..ЙюЮюЮИ7Дл698 2 щЮю.
РЗВО-3 1-01 11111166
Для кожного препарату об'єм 0,5 мл заповнювали в 1 мл довгий скляний шприць (ВО) та герметично закривали плунжером з фторвуглецевим покриттям.
Ефективність вимірювали за допомогою дослідження паралічу задньої кінцівки у мишей, як описано вище.
Ніякого зниження ефективності не спостерігалося в будь-якому препараті після 6 місяців зберігання при 5 "С та після 25 76. 8. Оцінка різних препаратів
Отримували дев'ятнадцять різних препаратів, які містять високоочищений ботулінічний нейротоксин типу А, з різною концентрацією полісорбату 80, триптофану, фосфату натрію, хлориду натрію, хлориду калію та різного рН. Кожен препарат мала цільову номінальну ефективність 500 Од./мл. Кожен препарат був дегазований, фільтрований через 0,2 мкм фільтр та заповнений в флакони. Газоподібний азот був використаний як захисна атмосфера в флаконах. Наповнення виконували в анаеробній камері. Кожен препарат був заповнений в 1 мл аліквотах в атмосфері азоту в 2 мл скляні флакони, закриті пробками РішйгоТес Ф), герметизовані алюмінієвими запобіжними ковпачками та зберігалися у вертикальному положенні.
Стабільність 19 композицій було оцінено при 5 С, 25 7С та 37 "С, використовуючи ВотТеві
ОФдля вимірювання ефективності.
Таблиця 7
Ексципієнтні композиції
Експ. : Триптофан Полісорбат 80 | Масі
Назва РН Фосфат натрію (мМ) (мг/мл) (об. 95 (мМ) КСІ (мМ)
М 11763 1 77772 | 025 | 001 | 25 | 0
Ма 1772 1.777772 | 025 | Кр Бх001 | 255| 0
М7 1763 | 750 2 2 ЮщЩщ | з | 001 | 25| 0
М 17/72 17777750... |. .ЮюЮюЮюД3 юю ющ| 001 | 251| 0
М 1 63 | 50 2 ЮюЮДщ | 025 | 1 | 25141 0 мае 1772 |1.777771750 | 025 щЩ | 1 251 0
МІЗ 1163 1 7771711712 | 11111171 125 .Й.ЙКО
МА 1772 17777172 |111713 11111111 251 0 1,625
Таблиця 8
Компоненти упаковки
Номер виробу, Постачальник
Прозорий скляний флакон з боро-силікатного скла 1097221, 5спой
Тип І плюс, 2 мл
Сіра, покрита РіІюсгоїес, бромбутилова пробка
Умезіаг Б5, 13 ММ 1356 4023/50, М/еві
Алюмінієві запобіжні ковпачки, 13 мм 5920-6623, М/еві
Для всіх препаратів розчин залишався прозорим та, головним чином, безбарвним.
Концентрації ексципієнтів, досліджувані в цьому дослідженні, здається, не впливають на рн препаратів протягом досліджуваного часового інтервалу. Результати щодо ефективності представлені в таблиці 9.
Таблиця 9
Результати ефективності ВоТеві
Н ефективності ВоТеві
Р) (Од//мл) (Воїезі) 0 місяців м | 63 | щщхь5в56 6 щющ (| 0 | 0 | 0 | 0 | з9 | «5
Мм3з | 63 | -(,лРа9 | 288 | 64 | 406 | 90 | 512 | 114 мб | 72 | -.,93 щ-| 0 | 0 | 0 | 0 | 52 | 56
М7 | 63 | (гав | 0 | 0 | 0 | 0 | 239 | 100 ме | 63 | (лоб | 0 | 0 | 700 | 51 | 294 | 150 мі2 | 72 | -.(а1 7 | 96 | 23 | 295 | 72 | 47 | 101 мі4 | 72 | 206. | 0 | 0 | 0 | 0 | 183 | 89
Для декількох композицій втрата ефективності була не більше, ніж 30 95 протягом більше 6 місяців при 5 "С та/або не більше, ніж приблизно 40 95 зниження ефективності протягом З місяців при 257 С та/або не більше, ніж приблизно 50 95 зниження ефективності протягом 2 місяців при 37 "С. 9. Оцінка РЗ5 60
Препарат, який містить високоочищений ботулінічний нейротоксин типу А, був отриманий З 0,1 95 (06./06.) РЗБбО, 1 мг/мл І -триптофану, 10 мМ фосфату натрію, 140 мМ хлориду натрію, З
ММ хлориду калію та води для ін'єкцій. рН регулювали до 6,75, використовуючи НСІ. Препарат мав цільову номінальну ефективність 100 Од./мл. Композицію дегазували, фільтрували через 0,2 мкм фільтри та асептично заповнювали в 2 мл флакони в анаеробній камері в атмосфері азоту з об'ємом наповнення 1 мл. Газоподібний азот був використаний як захисна атмосфера в флаконах. Флакони були закриті пробками РіІйгоТесФф), герметизовані алюмінієвими запобіжними ковпачками
Таблиця 10
Компоненти упаковки ип І плюс, 2 мл 13 мм ін'єк. пробка, покрита бромбутилом .
Ефективність з плином часу при 37 "С та 25 "С вимірювалась з використанням дослідження
МІ 050, як описано в даному документі.
При 37 "С залишкова ефективність після 9 тижнів становила приблизно 50-55 95 від вихідної ефективності.
При 25 "С залишкова ефективність після З місяців становила приблизно 80 95 від вихідної ефективності.
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«ЗО» Хв5ЕМ БІОРНАКМ т
ВЕБВТК КІМ НЕАСТН ЗА
«120» ВІДКА КОМПОЗИЦІЯ НЕЙРОТОКСИНУ, СТАБІЛІЗОВАНА ТРИПТОФАНОМ АБО ТИРОЗИНОМ «130» їЇВБА 001-М0(23 «50 РСТУКРІОЇ6/О657055 «151» 2036-05-57 «1680» 7 «170» Расеттй увгхіоп 3.5 «МО» Її «гіїх лав «812» РЕТ «213» Кклостридієвни батулін «МОМ 3
Мат го вне уа1ї Ап о вух бій РМ Ай ЦП КУ5 Ар Рго маї Ахп б1у 1 5 ї 15
Уаі Аб5р Хв Аїа Туг їі уз Хі БкО Аблодія біу біп Меї бій Рго
БІВ)
Узі муз Аїд Рв мух їі нНіз Аби бух Хі ТероуУуді Тіє Рез бів Ага
Ар ТАК РМе тТйг о АБвВ Рго біб біб бі Аврогец Ап го го го бів 5 во
Аіз уз біп мазі го узі Заг Туг Тук АВр Заг о тТВг тує рев Зак твг 65 70 75 80
АБр АБИ ОТ мух АБр о АФ Туг бен бух бі Ууді тТВгобух вен рве іш 85 о 35
Ага ї16 Туг баг твк др ів СіУ АКа Ме рен бен) твг бак жїє Уа 100 15 Мо
Агу Оіу хі вро вве ткробіу біу жає тТВг Хі АБр отв Ов Бе уз
З 115 159 155 чаї хте Азр тТВйг о аяй Сух їі Ай ма! Хі бій го абробіу 5ег туг 130 135 130 осв 5ег біб біб би Ап о бей маі Хі 116 ЗЕ Бго бег Аїа АзЮ Т1є 14 155 15 160 їТ6 біб Ре біб Суб рук бек ре сіу ні бій Уаї рей Ап Сей те 155 179 175
Ага Ап осіУ туго бі бак отвг осів Тув Ї16 Аг Ре Зак рга Ар вне їщо 185 190
Те ве біу вве бів біб Зег речи бій уд Ар о тиг аб РКО бе Сем 195 200 205 біу АТа біу ух ре Аїд Трг о Азр вко Аза Уа! ТВковву АТа яз Б 210 215 270 їео їі нів Аа біу нів Аг Бец тує біу Ті Аїз Ха АБИ Рго Ав 223 230 235 240 дга узі Ре вух уаї деп ТР АБ Аа тук тут б Мах бак біу ей й 245 Мо 355 біз маії его Ре бій 019 Бву Аг Те вне біу біу нії Ар Аїа вух бо 265 275
Ре їв 556 5ег мем біп бін Аба бін РМе Аго кеш ці Ту тує Ах 77 2850 285
Цує РБе цу5 Ар І12 Аїа баг Тйг ве) дяп цу діа уз Бег Хів уУді 2940 295 300
НІ Твг отТвг Аїд Зегоїви біб тує Меї ух Ап о маї пе уз В муз
ЗО 315 320 тТук ви ви бег 610 Азр ТНг баг біу ув Те Зег узі Ар огух рей 325 330 335 іЦух ва дер уз ев Туг дув Межї зей ТР сії: іє тує ТВк бів Ар у 340 345 у за
Ахп РНе УДІ ух РНЄ РВе уз Узі цен АБ АгЯ цу ТВг Тук ев Ап 355 360 355 вйе Ар уз діа ма! Ра у; І1е адяп тів Уаї Рго цу Уа) А5й тут 378 375 зо
Те оЖіє Тук Адзросіу Ре д5п іец АгО АБпотТаг Ахв геу Ав дів Аза 385 350 395 300 вне Ап біу бій А5а ТК бі ЖХ16 Ачй Аби Меб дбп Ре ТВг о фух сви 405 410 415 уз Ап Ре тпг осіу ей Ре ОТО РМ Тук Суб ви мем Су уд! де 420 425 430 З сіу жів Ї116 ТАБ баб уз ТВ вух аг ай АБ уз О1у туго Ав гу 435 у Ко у 445 у у аїа ви Ахп Ахрогез Суб 116 Муз Уйі АБИ АЖИ Тер АБр це Ре вве 450 455 350
Заг ро бег бій Ар АБИ РНЄ ТНг АБИ АЗрогец АхВ ух с1у бій 10 485 475 475 з80 ї16 те баг Ахр о тТИгР АБАаА Ті бі АТа АТа сі 61) Ахп тів 5ег гей 85 90 335
АБр цен гіе бів сії Туг Туг беу тТВг вве Ап Ре А5р дп бін го 500 505 510 сів Ажи тів Бег їі Бій А5й фен бек бег Ар о ї16 Та сіу бій зву 515 5иО 525 сій грец Меї Рко Ап їі 010 Аг вве вго Ал 535 Мух рух Тук оч 530 535 5 ем Ах вух Туг ТИР Мет вве ні Тук Цен ос Аїа біп бів вве 01» 545 550 55 550 ніх сіу Куб бек асо Те АТа ів ТВг о Аки 5ег о маї Аба біц Аза ву 56 579 575 ау Ап РгО Заг АР уд Туг тТвР оРйЄ РБе 5ег бек Ар Тут маї цЦух 580 585 590
Му Уві Ап обу Аіа те бів Аїв Аза мех Ре бен сі Тер узі 619 595 00 6505 іп без чуаї туг Ар РВЄ ТВР Ар бін твг Заг обів маї бБег Твг отв 510 5І5 БІО лов Туз Хі Аїа Азов х1е тик їв їі їі вгбо Тук Хе бу ро Аа 525 530 535 ща їеи Ап Хі О1У Ай Мет бе Туг Бу А5р АБр Ре уаі! бБіу Аїв Мей 645 550 6555
Ї1е Рне 5ег сх дія Уаї Їїе цеи іви Біб Ве Те Рко сії ї11е АТа 56 5685 Ба
Те рго маї йву б1у ТвговБе Аїд сцен Уа! Заг о тук З16 А1а Ав вує 875 ВО 585
УДі рец твВгоУуді сів ТК Ї16 Ар о АЖИ АТа Бе 5ег УбБ АКО А5п Оу 6590 595 700 муз ТР Ахр бі ма! Тук вуз Тук те Уа! Твг Ази Терен Аїа Був 7 Я 715 й 7 чаї дяи тВг о біп Хі Ар овен 116 Аго іу5 уз Мет уз 10 Аїа цев 755 73о 735 сій А5в бів Аза біШ Аа тТвиг обу Аза хів хів а5а тує бій Туг Аби 740 745 750 біп Тут тВг бів бів бій уз дей Ап ї16 А5п РН АЗп Те АБр Ар 755 750 7655 іжи бек зе іує ви АБ бін бег ІТе Азп цуз АТв МебЄ Ха А5п Ії16 7270 775 780 д:п ух ВЕ фей дб бій Суб бег уді Зек Туг це) Меї Ап аг мех 785 790 795 ОО
ЇІ1е го Тук Ф1у уаі цу5 АГ ав бін Абр ве Ар Аа Баг ре ух 805 510 815
Азр АїВ ев іец уз тук Ха тТуг Ар Ап Аго бі ТВг ген те о1у 820 825 30
Єв Уаї Ар Аго іє сух Авр о цув Уа! А Ап тТВгоіво бег о Тве Ахр 835 840 щ45
Ті вго бе бій це 5ег З Тут Уаі аА5р Ап сій Аго бен ей заг 555 БІ
Те РМе ті біз тує Х16 ув деп То Хі Ап тег баг ІВ Бей дви 8655 875 875 о
Бенц Аг туго бів Зег дян нів фей їв дав Мем бег Ага Тук Аїа аг 555 ща 595 руб ї1іе А5а 116 сіу бег цу ді АБ ке Ар о РгОо Х16 АЮ ух Ав 00 905 910 бій їі бій їву Ре АБ бе) бі Бег Бег цу їф8 бій ма! 116 Кеу 515 920 325 іїуз Ап Аїва їі ма! Тук дб5ап бек Меї Тук сій А5я Бйє баг тТАг Заг 930 35 Зо
Ре Тео ї1е Аго ї11е рРго уз Туг Впе Аяп 5ег Ті 5ег ви АБп АБИ 345 350 955 960 ів Тут Тйг Її їів дей бух Меї бій А5п А5п Зег Фу тер уз Уа! 965 970 525
Зег зви Ап ще сіу 610 ї16 її Тер Тнг бен бій Бр о тВг бів б1у
Зо 98 990
Іїе уз бій алго ма! мзі вне му Туг Заг біп Ммеб Ті АЖи хів 5ег 995 їщ00о 1005
Азр туг ї1е Ап Аго ТгроХів бе Удії ТВг ОЇ ТВго АбА АБ АКо
1930 115 1020 іти АЖ Аж Зає уз Хі 15 те Аза біу Аг іви Хе Азр вій 1055 1830 1035 уз го 312 5ег Ап оїец сіу А5п хів нія АЇа б5евг Ап Ап їв 1040 3045 1050
Мет Рйе бух цей дер Біу Суб Ага АБротВг нія дго Тук те тТтр 1055 ТОбо Й 1005 їі вух тує РЕ АЖИ реу Ре оАхр обу біб кер Ап бів рух бі 1070 1075 1080 ї1е гу АБроБеи тук абр Азп бів бег Абп баг біу їЇ1е ей ух 1055 10950 1995
Ар Рйе Тгробіу Ар оТуг іїгц бій Туг Ар Був йго Туг Туг Ммаж 1100 у 1305 Щі ло цен Ап о фец Туг адяр Рго Ахп о фу Туг ма! Ар оуді Ахп Ази Уа що 11320 1125 біу хе Ага б1у тує Має Тук овен овфуз біу го дго біу ог ха й 1130 я У 1135 у у 1140
Ме ТВг Тег оАЖи ТІЄ тТуг огву Ах» о бег бБег ве туго Аго Біу ТВг 1145 150 155
Муз вп Х3іе ХТе у руб тук АЇа ек СТУ А5пП вує АбБр Ах ІЇ6 1160 1365 1170
Уа! РО, АЖ АЖ АБ АГО Уді туг Тв АБИ Уа УЗ Уа! Куб дл 1175 1580 1185 уз 01 туго аг Мей дід тТВг о Ап АЇз Зегобіп Аїа біу худі бій що 1395 1200
Муз Ха фен баг Аїда бан бів Хіе Рго Ар омаії біу дБА дей бег 1205 1210 1215 сів уді Узі Уа! Мех фу его 1ув Ахп Ар бій чу Те твг Ав 1228 1235 1250
Куб СУБ, ух Меї Аб5п о іец сбіп АБр ода Ап біу Абп о АБроїі1о О1У 1235 1240 1245
Ре їі сіу Ре ні сіп пе дп Аби Те іа бує цец маї АТа 1255 1250 дег дп о тТгр оТуг Ап Ага біп ї16 5іч Аго бегобег о Аго тве Гву 1265 1270 1275
Я1у Суз хек Тгробім бе їі орго уаї А5р АБо б3)у тер б1у бів 138о 1285 1290 КУ
Ага РРО во 1295 «810» 2 «21ї» 1591 «ий» РТ «213» Кклоєтридієвий ботулін «МО» 2 ні Рго ма? ТВе ге Аа Ап РН АБИ ЦД А5п Азр РгоО тів ве» Ап
Ап АБИ тів те мах меж бід его бро Рпе АТа Ага бі1у те оту Ага
Туг Туг бух діз Ре уз Ї18 Тйг Ар о Аго ї116 тТКрої1е те бго бі
УТ ІБ 40 я 45
Аго туго тТвг Ре бу Тут су Рго бі Абр Ре АБ Гуз бег Зег сіу 50 55 бо
Хі Ра АБИ Аго Або маї Суз бів туго тТуг Ар орго Азротуг Кей Ап 55 70 25 80
ТНг Ав Ар гу Су Азп ї16 бе цем бій Тиг Має тів суб ів РНа 8 30 55
Авп Ага ї18 фух Бег (ух Рго Ме сіу біц ух ей їв сії Меї ї16 3100 183 о
Те Аа Ф1у 1Те рРго Туг сеу щу АВ Аго Аг Уві го бе бій 1 115 12 125 вве дбп ТВг ода їі дія 5егоуаї ТВгоУаї а5пофує сви х16 ЗБК Ап 130 135 140
Бго Ту її уві 16 ме вуз уз Єїу ї18 бе Ав Ап бен Ї1е ї16 145 ї 35 ї650
Рпе біу Рго біу бго маі Сей АБ Бій А5ап бін те Хі А5р 11 у 165 373 175
Жівє бій Ап ніз ее Аїа бег Аго бі сіу пе біу біу тів межх бій 150 185 130
Мет щує РБе Сує Рго сі тук уві Заг о уаі Ре АБ АЗИ Уаї бів си 200 205
Ап вуз біу Аїа бег ЇЇ Ре Аяп Аго Агу біу Тут РМЄ Бег АБр РгО 5Ю 215 9 20
АЇй цеч 316 їец мех ніх сії цен Хіє н3і5 Уа! цев із 51у ви тує 225 230 235 240
Оу Щг1е цуб маї АБр Ар гео РгОо хе узі Рго А5п бі ух рух Ре 245 250 255
Ре мет бій бег ТР Абр Аа ї1є біп АЇа бін бів сен М тТве вве 260 265 27 сіу біу бій АБр его аг Ї1а Х1е тВг овго Заг о таг оЕв мух 5ег їв
Ух 280 га тТуг дев Гуз Уаії сви біп АБ РНе Аго С1у 116 МУаї Ар Аго ев АВА 29 295 300
Хе Уаї щаз Уа! Су5 тів баг А5р вго дп ї18 деп їТе АБап їв 155 305 30 315 320
Му5 Ап ух Ре іу5 Ар оБух Тут рух Ре ма! бі: Ар бек бін біу 135 330 333
Гуз тТуг бег їі Абр о ма! бі Зег Ре АБр ух сен Туг ух бег фви 340 345 350 мех рРНе ву Ре тб обі ТК Або 116 Аїа бу АБИ Туг бух Хі ух 360 355 тат 78 Аіа Заг Туг бле баг дер бег Ге Рго Рго ма! Му5 хів вуз зл 375 380
АБ Мей меи Ар А5п бій ї1е Туг Тнг х1є біб біз сту ейе деп те 385 390 395 400
Баг Ар ух Ар Мет бів уз бій туР аку біу віп аб5и Му Аа ї1о 405 з 415
Ап ув сіп діа туго сій біц ї1іе бек фу бів ні5 се Аа Уаї тук 420 425 30 їу5 Ї1е бій Меї Суб їух баг уаї йу5 Аїа Бго бі її Суб Ї10 Авр 435 | 340 445
Уа1 Ахр Ах бій Ахр Мей Ріо Ре 312 АЇа А5р бух Ап бек Ре 5ек 450 455 4650 аво АБр ен бег ку АбАа сі Адго ї1е Зід Тук або тТВе бій баб Ади 470 475 389
Туг тів бій А5п о А5р ве Бкго Ї16 Ап бів бен її беб АБр тр Авр
485 459 495 ги Ме заг не Хі бів кец рго ев бій Або ТВб бін бек бе тв 500 505 50
Ар Р Азп Уа! Ар ома! го уа! тує бін цу Біп Рго АЇїз хів уз 515 520 525
ЩУу5 Х1е вва тВг оАБробій А5а Те жів РНе бій Тук о йву тує як 91В 530 525 540
ТР РИе Ро бен Азр 31е Аго Ар їі Заг оізу Тег Баг бег Ра Ар 545 550 558 БЕ дер А1а рей їец РМ БР АХА Був уд! т 5ег рРйе Ре бек МЕТ Ар 555 570 575
Туг їв ух ТВг Аїш Абп о цу маї уа! бів Аза бу ви РАБ АТ бу 580 585 590
Тттр ма! Я іп хів маг Ах" Ахр вне уві 118 сіб А Ап Був бак 595 500 55
Абап ТР Мет АБр о кух Т1е Аз Ар їі Зак ви 116 мі го Туг Та 50 6із 620 о1іу сез Аїа бец Ап Уві Б1у Аж бій ТВгР о АТ ух бі Аби РВе сі 525 630 635 Бай дяп Аїа Ве бі тів Аа біу Аа Зег ї1е меш бен біз Ре тів его 545 550 535 бій бен фен їі Рго Уа! Уа! Сіу Аїа ве сец ге бів Звг тує Хі16 560 555 670
Авр АБИ уз Ав уз Її Х1е ув те Хі А5р А5п АТа сцен тТвВг ух єВО 585
АгО Аза бі Дуб Тер бег Ар Ме Туг біу цец хів чаї Аїа сій тр 590 695 700
Кен Бег ТВг Узі дп тйгобіп Ре Туг Тег ї16 ух біз біу мех тує 705 730 75 729
КУЖ АТа ви Ап М сіп АТа біп АТа ев сіб біб Хе Хе фу Туг 725 730 735
Аг "о а5ап їіе Тук бег 10 ух бі ух баг Аби Ті дхп їв А5 9 У 740 ту й 745 у 750 пе
РНе Абп вер Те дл о бег у рез Ап сів біу Х16 дб бій Аа Хе 75 755 755
Авр Аза ї118 Ал дя вве у1в Акп біу Сук бег уді баг Туг Бад меє 770 775 780 ву вух Мех ЇЇ РГО фен АТа маї бі у5 цеб аб Ар РВе Ахор АВ 785 790 79х 800
ТВ фей цуб5 цу АБп ец це АБа Туг Х10 Ар обій А5посух ев Тут 805 816 815 їву ІТ Ту баг Аї8 бін Туг Си ве Заг уз Уа! да ув Туг зви 820 25 8530
Туз ТВг їі Мет РГО РО дер бец бек Х16 Туг Те АБИ АвроТВг тіє 535 840 845
Ма. її бій Меї РЕ Ажп ух Туг Аби бек піц ї1е ву Ап АХА Хе 850 855 850 ї16 ем Азп осей Ага Туг БУ Ар АБ! АБЛЛ о Бву 18 Ар сем бег сіу 865 У 875 880 тТуг О1У АТа вує ма! 51 Уа! Тут Ар сіу маї 10 ей А5Р АВ Куб 885 890 595
Азп сій Ра фу цей ТВе Зег 5ег АЇа АБИ Бак бух Тв дев Уві тв
З00 905 5 сп А5п біз Ап їЇ1е Ї116 РЕ Аби бег узі Ре ей АБр Ре бек Уві 915 з20 925 бБег Ре Тгр їі лаг її Рго ух Туг ух АБ Ар обіу Ті бій дп з30 З35 940 тук хе нів Азп о На ТНге їтТе їв дж су МОЖ ух д5п АБИ баг 945 950 555 960 біу тер уз Те баб Хе Аг сіу А5п Агу ї1і6 116 Тгротвб ев Те
У ТРУ я 5 У и РО в5у5
Ар хів Ап с1у бух ТНг бух бек уді ве вве бій тує дп Уа Агб 980 985 0 бі Азр тт его обі туг іа дей Аг тер о РвБа Рне Уа! тВг ожхіе так 595 1000 1005
АБ ОА ей А Ап Аа су 116 Тут ІТ Аж біу ух мей 1) 1010 1015 1020
Баг о Ажи Те АБротів Гу зав Т1е аАго бів Уа! 116 АіЗ А5а сту 1025 1050 1035 іш хів Жіє ее уз сей Ар о біу Ар ї1а АБр Аге Тег бій Ре 1040 1045 1059 те 15 МОЖ ув Тук рн Бек Хі рРНЄ Ап отТйг бів без ек вій 1055 1060 1065 баг АБп о ї1іє біз бів Аго Туг о бух їі бій бег Тук бЗег бід Туг 1070 1075 1680 ви ім Ав Ре Тер оаіу дяп о Рго рей Меї Тук Ай о Бу5 бі тут 3985 090 1095
Тут Ме РМ Ап АТа ФІіУу А Ку Ап баг о тТуг Її ух фей Куб
Її щмо5 31 фуУз Ар Баг Рго маії біу бій Хі фей тТВг оАгЯ бваго фу Туг Ав 1335 120 1325 сі АВ бек оруб Тук Ії Ап Туг Аг Азробев туго їв сту сш лю 1155 1140 мух Ре Її їі АгР5 АгУ Суб 5ег дБ зег біп Заг о Ї16 АБа Ахр 3145 1150 1155
Ар її узі Аго Суб Бі Ах о тТук Ї16 Туг їец або Випа вве деп 1150 9 1155 33то
Кен Азп о біп бій Тгроагу Уа! Туг ТВгоТуг губ Тук о РНе Був Гуз 75 11850 1185 біз біб бів уз сео Ре іви Аа РКО їі бе? АБИ 5ег АБО ой 190 3395 1900 вве 15 Аа Те оХів сїв 316 вух біб Тук а5робіц бій во тА 1205 ї210 152515
Туг заг Сух Яіп о бею це: ве Суб Бу Ахр бін бім 5ег ТВг д5р 1220 1225 1230 сів її Ту сен хів біу 16 ніх ага Ре Ту біз 5Зеаб бїу 118 1235 1240 1245 чаї ре ої соц тТук цу Ах» о отук РНе Суб 16 баг о фух тгр отут 1250 1555 1750
ЕТО су, бів Уаії су Аг су5 го Туг доп іез іу5 фе о1у Су» 255 19270 1275 деп Це ій рве хів рго іув Ар обін Ф1у Теротнк о бів 250 1255 1290
«210» З «211» 329 «азо» РТ «21іїх кКлостридієвий ботулін «0»
Меї Рго їі Тнг оїі1і6 Ай Аа вне Авп ня Бек Ар Рго ма! А5Юр Ап 1 5 ї 15
Ух АБ Їїа їео тує бен Абр о тВг нів ей дей ТК гей АТа Аби си
РІ) 75 Зо его бій бух Аа рве Аго ї1є Твг о біу Азпоїіе Тгв узі Те Рго АБ» 35 40 45
Ага РМе ЗБ АгО АБИ его АЙ РО Ах ви Ах" Був ВгО вгОо Ага Ма 50 55 60
ТВйг бек го ух бек Бі Туг Туг АбБр РРО АБ Ту ви бек Тйг Ахр 53 7 75 80 5ег Ар гу5 А5р ро Ре іви суб бі їі 16 уз Цви вве уз АгО 85 30 55
Ї18 АБп баг лев ії їТа біу бів бід яз їі Туг Абу Бей бек ТВг 19 105 110
АвроІіє Рго вве его біу АБ Ап деп ОТйг РКО ЇТе АБа Те РН АБр 120 125
Ре Ахр Уаі Ар РМе Аха Зак о маі АЗроУаі вух ТАг АгО бій біу Аби 1390 335 140 деп Тгроуві цу тТпгобіу Зег Ї1е АБ Рго бек уаї 116 їЇ16 ТВ сх 145 150 155 16 рРго Ага бій АБпої1е ї16 АвроРгО б Те охагс ТР ОРНе бує баб Таг 165 ії 175
АЛ АБИ ТВг вве Аа Аїа бій 1 щу рРне біу Аїа цей бек їі ї1е 180 18 390 баг Її бег вго Ага ве мет рец тТпг отТуг Бег Ап діа Тг Ап Абр 155 00 205
Уа! сіх сів бу Агш Ре бек суз баг сі епе су мас Ар вго 16 у 215 ка
Мец їі бєи Меї Ні бій фей Ап МНіз Аа Меб Ні Ази Цен Туг бі 225 230 235 24
Ї12е АТа Ще Рго А5п Ако біп Тйг ОЇ баб обеб уві ТВг о 5ег два Т1е 245 250 255
Зо
Те Тут Бег сп Туг Ап Уаї цу5 ів їв тТуг АТа б1в їв Туг АЇВ 250 2655 270 рве б1іу біу рго те ХТе А5р оре) хів Рго муз бек Ай Аго бує тТуг 3 280 785 бе бів бій іуз Дід цеб Або Туг туг Аг Зеагє Хх12 А1а ух АгО Кей 290 у 7295 й 0 аАвп бек їі їй їВг Аа АЗИ Рго бег бег Рнє Аза ух Ту Те Ту 305 310 315 зи сій тТук уз Фів у це ее Ага ух ни Аг Ре ма! щі бію 5ег 325 330 335
Баг б1у бів ма! те Уйі Ай АгО АБА ух РЕ УдДі бін цец тугк дп 340 345 350
Зі йец тк бій їТе ве тйг обі РМе АБпотук А1а вуз 16 Туг Авп 355 360 355
УЗ бів Ачап АгО бух Хв 1 цец бБег дп уді Туг ТВгоРго уз! тиг 370 375 зкО
А1їа Аа їі гейш др Або Аа Уа! Тук Ар ІТ бів Ай СТу Ве Ап 385 390 395 400
ІТе го вух дег Аяй ви АЗп Уві це бе меє біу біп Ад5п ву 5ег 405 0 415
Ага Ап о Рго дія бен Ага Куб уаії А5п РгГОо бій Ай Меж цем Ту ев 420 425 30
Те ТИг вух пе Су5 НіЗз цу5 діа тів ар біу Аг Зег Мец туг АБИ 435 440 445 мух ТВг іє АБр Суб АРО біц зби без уаі су Азп отТйг АБр цен Рго у 450 у Я 455 у 360 й не ї1е сіу Авр Хе бек Ар Уві Куб ТВг Ар Х18 РО ву Аг ух 565 470 475 480
Ар Ті Аа бів ов т обів маї Ті Туб туг вгРо Азр оди маї бет 485 450 495
Маї акр бій маї Її1а без 5ег іу5 Ахп те бек Ф1и нів 55 стіп вед 50о 505 5 дер іец рен тТуг ко бек ї1е дев бег бі хаб бів хів іви вго бу 515 520 525 бі Аби бій Уа)! вне тТуг АБр АБИ Агу Те сіб АЗпоУаі дер отуг ви 530 535 540 дхп Заг туго туго туго грец бї0 Заг біп цуб се Заг Ахр Ап оУуді сіц 545 550 555 560
АВ тнє Тигоейе Тс Ага баг їТе бі біб Аа мей Ар Аа 5ег Аза 565 570 575
Бйуз ма! Туг Те тТук Ре рго Тигоїву Аїа Абп бух уаї д5п АТа Су 585 590
Уаї бів су сіу кеш вне ай мет тгр ад Аби Авроуаї Уві бій Або 59 500 6о5
Ра тТвг ТВг ода Ті ву аг Мух Ар ТИг гей Абр оку Х1в бег Ахр 510 ві 50
Узі бек Аа Х1іе їі бго Туг Ії1а бі Рго Аїа сем А5а о 3Зів Бек АЙ 625 30 635 0 5ег мді Ага Ага піу ахп о РМНе ТК осіб Аа ве АТ маї Те іх Уа 645 650 ву
Тв іє веи іви бі АТа Байе о рго біб Ре тік хів го Азїа вв віх 6бо 63 57 віз ве узі їі Тук Заг о Бу5 уаї біп бі АгУ Аяп бі хів ї1е кує 575 бо 585
Тв 16 Ар Ап Сух цеи бів біп аку ї1е бух ака Тер осу5 Ар Бег 590 595 700
ТУуг вів тго Меб мМеї зі Тег о тТтро ви Бе вто ХТів Жіа твгобів рве 705 710 7 720
АВ о Аха ї1в6 бек отТує Зій Меї Туг Або заг фен Ап о Туг сій Аїа біу 725 730 735
Аіа тів уз дів уз Хе А5роівен Фіз Туг вуз ух туг бек біу баг 70 745 759
АБр Суб сім А5п ї16 мух бБег біп Уа? бій А5п бен цуб Ай бек гей 755 760 755
Ав Уві ух Хі баг 5Зій із Меї ах Ап їі АБп цу РВе їі Агу 778 275 "во
ЗШ Сух бег уді ТР Тут ей РВе Куб Ах Маї меци Рго бух уд! Те 785 790 795 800
АБО бій фей Аяп бі: Не Ар Аг Ап ТВгобуз АТа бух сей 512 дей 805 510 815 цен ї18 Аже бер ні АБИ ті Ті ібн Узі СТу бі Уві Ар цу ви 825 830
Куб АТа ув маї Ап АВ бег сне біп де ТВ ОЇТе рго Ре Ап Те 835 840 845 вне баг Тут ТАг АБ Аби Зег іви іви фу Ар оїї6є Хів Ап бів тує 8530 855 360
Ре Абп Ап хе АБА дер аг бух Ії цем бег ей бій А5ВО АгО 1 у5 565 87 75 8850
Ази тТАговец ув! вв ТВг Баг о біу Тук дбп Аза бій уві хеб бів 51 58 890 593 зЗіу бр ма! бій Ме) Ахп рго ї116 Ре вго пе лер рве цув мви «у 00 905 910 5ег баг 5 січ Ар Аго сту щу чаі Ті маї те бій АБи бів деп 315 920 325 ха маї туг дБ 5ек мех М о10 бак Ре 5ег Т1а Бег Ре Тер ї16 930 9135 940
Ага ї16 А5п о мух Тгр о уді Бег дзп ей Рго о1у Туг тк Ії 18 Ар 945 50 955 550
Заг ма! ух Ап Аби Бет о1у Тер обек ї1е біу її ї1а 5еб А5п РНе 9655 970 925 ме уді РНЄ Твг цен вух СІЙ АБ Бін Ар Бек сіц бів бах Хе Ав 980 З85 990
Те 5ег Тук Авр їїе Зег Аби Ап о Аїа Рго б1у Туг Ахпо бух ТРробпе 595 100 1005
Ре Уа! Те ма! ТВг Аа Ахп о Меї Меї б1у Аа Мет губ ХТа Ту 1010 1015 1020
Тіе Ав" бі мух це КТ зво Тнг жїїа ув маї су 10 фей тик 1025 1030 3035
СТУ Її6 АБИ Ра Зег був ТВг о її тТВг Ре сі ї16 Аби губ Її 1040 10455 1059 го вро Тиг обіу ен ї1е ТВг о 5ег др хег Ар Ах" 18 А5п мех 1055 1060 1065 їгр 16 АК А5р оРНе Туг 316 ре АТа фу бін ем азр обі цу
1070 1075 1080
Ар її Аа Хе ев вне Аби о баг обев бій Тує ТВг о дви маї маї 1085 3096 1095 ух АБИ туго тер 01у А5п Аїр о зіву гу туго Аза губ бій Туг Тут 1100 1105 її1о меє уаї Азп х1є Аз т оен АзЗп о Аго Туг Меє Тук Аа Ап Заг 1.35 РОТУ 1120 я У 1125
Аг бів Хі уаї Ра Аха ТВг о АгО АгУО Аяп Аяп АЗп о АЗр о РНа Ав 1130 1135 1140 іш сіу тут ух її Жіє Ті ух аго Хе Аге біу АбБА ТВК Ап 1145 У 1150 у Н У 1155
АБротТВг АКо ма! аг о1у біу АБр охо Беу туг РАВ АБромет ТАг 1160 9 9 1155 у 175
Т1е Аби Ап мух АТЯ Туг Ази бен ее Мет ух аБп о бій Твге Ме 1175 80 1385
Туг АїЗ Або АБИ Ні Звг о тйг бів Ар їі Туб Ааіз Її щу еу 1190 1195 1200
Ага бів бів тТвйг мух Абзр 318 АБ Ар оАбАа їі ті Ве бів Пе 1205 1210 1515 бій РРО Мефб АБО АБАа тА ща тук Тут Аїа баг бБіп їі РЕ уз 1220 1225 1230 ег дп не аяп біу бій Абло їТа хег біж їв суг Зек Хе «1у 1235 1240 3245
Те отут Ага Ре Ага ке о біу ТУ Ар о тгротує Ага Ні Аа тус 155 1255 1200 їец ма! ойго Тиг омаї у5 Бій біу ап тТуг дія бек Це їви ої 1265 1270 1275 аг Тк бег ТВг ніх тер му Рне уаі го Маї «аг Оу 1286 1285 1290 «240» 4 «кії» 1575 «ій» РТ «йі3» клостридієвий ботулін «300» 4
Меб ТК оте вго Уаї фу Ар Ре АВ п 5зек ар го УЗ АБ Ар 1 5 ї 15
Ап Аяр Хіє зей туго без Аг Те Рго бій АБ мух Мей ї10 ТАгРОТве 20 25 30 рго ма! у Аїд вйе мат ї1е тк бій Ай Те тТгромаї тів Рго бів 3 40 35
Ага РНе бег бег Ар о ТВтг деп РРО 5ег Кец бег цу РгО РгО АгГО РГО 50 55 бо тнг бак обуб Туг бЄїп бак тує Туг АВ Рго яег о тук ау Яве о ТВг Ахр 65 Ук ТУ 70 ТУГУ й 75 80 сін бій уз Авротйг вве вес бух бі Х18 16 бух меу Ре у АгО 23 90 53
Ї16 А5п 1 зла Азр їТє СТУ уз цу ви 118 дбп туго іви уві ув! 105 1 5іу Заг его Ре мет с1у Або баг бак ТАг вго бу а5р Твиг вве дер 115 хо 12 вве ТВР оАгу нів ТВгОТВг оАБАа Хе Аїя Уа! бій фуб5 РНе 1 Азп бу 130 135 140 зак тр вух ма! тТиг Ах її Ії Тиг овго бек узі ігн Та Рій іх 145 150 155 16
Вго без бго да їїв Бе дер тує тік від Звб офви Твгозви сів б1у 165 170 175 сів бів бег абп Рго бек вне Сім ву Рвпе діу тийг цвои бак 118 ви 180 18 150 іїуб5 ма! Аіа Ро бів Ре ви фрезу Те РНа баг Ар оуді ТВгобет дей п 200 205 сій бег бег Аїа ма! Бей Оу ух 5ег 116 РБе Су Меї Ар ого Уві 210 213 220
Іі Аа іви мех ні бій бе Твк Міб5 бек цеу Ні5 біт цен туг ої 225 230 535 249 їі ах ті вго аг одер бух Ак Та 58 Рго біп ма! 5ек бі пу 245 25 255
Вп вне баг біп Аяр БІу го Ап уді бій Ре біш б Сец тук тве 2650 255 хо
Ре ЧУ 51у іви А5р ма! б1іц 116 116 го біп 316 бін Аг Бег ди 27 280 285 цен лге Ой уз АТа вуз біу ніб5 Туг цу АБр о їі1а АТа цу Аго се 290 295 о
АБ дБ Ї16 Ах бує тТйг їХ16 го хаб Заг Тктр 16 Заг Ах хів з5р 305 310 315 32 їух Туг фу ух тів Ре ек біб фу5 Тук Ап Ре Ар Суб Аяр Ап у 325 3 335
Жвг обіу А5п Ре Уа! Уа! Ап ї16 вар чу вве Аа Заг рей Тук 5ег 340 34 350
Ази Бац таг о Аяп маї мех 5ег бін маї Уа1ї Тук баг баб бій Туг АБ 355 160 365
Уа! Бує АБ АгО Те Міб Туг Рйе бег Аго нія Туг сен го маї РНе 370 375 ЗО
Аа Ап їі їеу Ар абр абп ї1іе туг ТР о їЇ16 Аго АБО біУ Ре Ап 385 390 335 300 іви ТвгоА5а Дуб СТУ Ре АБ ІТ Біб АхИ 5ег біу віп д5аи тів Фу че 410 СНІ
Аго АВА РГО АЇз Сен бій ух цен бог Зег б) баг Уа! Уа! Ар о уец 420 425 430
РБе тс бу уа! Суб ес АгО Фу ТК ух Авп 5ег А Ар Азр 5ег 435 340 Фа:
Те Суб Хе руб уаї їж Аяп АЙ Аго цей о бго Тує маї Аїа Ар у 450 455 450
Ав БЗег ї1е бек сів бі 12 Ре 016 Аж мув Тв їв Тег Азр обі «55 БУД 475 ва тб Ап оуаі б1й Ай Туг бек Ажр рух Ре Хег ев Ав бін Зег її 485 3490 4955 ! це АБр о біу бій Ууаі вго ї1е АбАа его бів їте маї Ахрорго беи геу 500 505 510
Рго АБ Узі А5а Меїс бід Рго ви Аяп їжи Бго б1іу бі) бій їів ма! 515 520 525 бе тує Ар Ар її ТВг бух Тук уаї А5р о Тук цей Ап Заг тТуг туг 530 535 | 540 ТУ
Тук ви бів Бег сій Су іец бег Ап Ап Уа! він ди Та тк ен 550 555 560
ТВг ТВг бег узі сін біш Аїа цей біу Ту бЗег А5п уз 116 Туг ТАИг
583 570 575 евпе еп ро Зег ви АТа СТИ Су Узі Ап огуз бу уд Фіп Аїа су 580 585 390 імжи Рів цеу Авп оТгро Ав Аби бі ма! Уаї біб Ар о бйе ТВ ОТГ АБИ 395 50 505 їїе мебє цу уб дяр тйг ів Ар ому Ї1е Бег АБр змаії бег уві її 510 615 6520 їі рго Тугк їі біу его аа цей деп Те віу Ази бег Аїд сви АВ 525 50 635 54 біУ Ап РНе Ахи бій Аа рне Аїа Тнг Аа сіу уаї Аза РИ їви ви 545 530 555 сі су Ре Рго 16 РНе те осів бго дія сен оту уві ре тТАг вне 560 565 070
Туг бек бБег Хі сій сіб агРо сів Суб 116 Те бух ТС ТТ си АВ 575 бо 585 суб Бен біц сіп Ага Уві щу Аг Тгр обу а5р зек тТуг біп тер Меє 590 6595 700
Ууаї баг Ажа Ттробаец бег ага х1е6 так отв" бів ее Аха нія ї1е деп 705 710 715 720 тТук бів мех Туг Або чек іву Зве Тут бій Аїа АБр о АТа ті уз АТа 725 730 735 іУ5 Х18 Ав озви біб туго їу5 уз тук хаг біу Зеб Ахрорує Є Ап о УГТ 715 й яко
І16 Буя бег єї узі сію дл ів фу Ап 5ег ге ар ма)? уз теє
Ух 7650 78
Заг ЗіБ Аа Ме АХЙй Аяп хів Аа Су вве те ща біц Суб баг уд! 770 775 78
Же тут бви РНе ух Аяп Мет цез Рго ух уаї Ї1е Ахр бів їв деп 785 798 795 800
ЦУб Ре Авр ец лагу Тйгофує Тобі вер 118 Аєй Мем ї1е дБ бак 5оЗ 816 515 нів Ахп Їів Зіс фе уУуаі сіу бін мі АБр АгОо во їу5 АТа вуз МВ 820 825 830
Авп сії бек Ре біц А5п Ті Ме рго Ре Ап хів ва заг тує Те 8535 840 545
Ави АБИ бег зву ем офух абр ї1е Те АБ біб Туг пе Ал хог Х1е 850 855 360 деп Абр баг фуб Ті Бен его сви б Ахп су8 муз Ахи АТа цем уві 85 870 ВИЗ БО
Ар о тТАаг Бак о біу Тук лжи Аїв бі) Уа! дга маії 1у А5р азп ма бій 85 890 595 їер АБА Тйк Ї1е тук тТвк Аа Ар вве вуз сен 5ег Зег бек б1у А5р 900 205 Зо їу5 Ї16 16 Уа! Ап рем деп деп дбп ї1е і6ц Туг баг АТа Ті туг 915 ча 325 біз деп Зег бег уаї чек РМе Тгр їі мух Ка 5ег Цуб5 Ар грец Тпг зо 9335 30
АвВ Зег НіБ Аха бій Туг ТВг оїТе Те дп бег Хі 910 бТй Ази 5ег 950 955 ЗО с1у груз це сСух Хе Аго А5п бу Ап Ії Біб ткро бів ву 1 955 970 975 аА5роУуаї А5В Агу вух Тут мух бег се Ті6 Ре АБО Тук баг бю 5ег
ЗО 85 З50 йен Бег нія тійг о біу Тук ТвВР Аа фує Тир РНе РВЕ Уді ТНг їв Тве 595 1900 1005
Ап Ахп о хів Меї сіу Туг Мет іуб5 ву Тут Ті ап біу 616 цей 1910 1015 1020 ух бій баг бій бух їі бі) АБр бен Азо бів Уа! був ву Ар 1025 1030 1035
Муз тТвг Хе уаї РВе бі» її Або бій АЖа їв Ар бій Ап бій 1040 1045 1050
Маї ер тер 018 Аго Ар оре Ажп хів ре ев у сі Бен бек 1055 1050 3065 д5п бій Ажр ті Ап їі6 Уа! туго сіш б1у 615 316 Бе АГО АВ 1070 щи5 1080
УДІ жів Щує Ар Тут Тгробіу АЗповго ев уз РВе дер тТВг ой 3085 1090 3095
Тук тТук ї1е Хі6 А5п Ар АБИ Туг Ї1а Ар Ага туго ї16 АТа его
Мою їм її бів Бех АБ Уаї ей маї бец ма бій туго Рг зер Ага Бек цу 1120 25
НЕЗЯ 1 ТВР обі АБа Рго І116 ТНК ї16 суб Бак УЗІ Баг Ар Дух 1330 115 3150
Ап ОРгО Тур Баг Аг їі ів аАбА біу д5р Ап Хі6 Ів бен нів щя5 ї150 1155
Мес без Туг Абп Зег Ага Бу5 Ту мех 116 її Аг АБр о тТВг Ар 13650 у 1165 3170
Тк жів Тув Аїа тТвРОбБіп сіу 1Уу бін Суб бек бів А5п Су Уві 75 1150 мяз туг Аа бен вух ев біп бег А5п ген О1уУ АВ 15 біу 31 бу ца 1195 1200
Ііе Ре Бек Хі2 ух Абп іє ма) баг уз деп уз. ТУ сух 5аг 1205 1215 1215 біп тів пе чеаг баг Ра А ів Ап тВгомМеї бе еу Аза Або 1220 1555 1230
Ііе ту ув Рго тТгр Ага вне век орРНе ух Аж дія туго таг вго 1235 1240 1245 ма1 Аїа оУщі ТИг оАБАИ Туг 010 тТВгРофув ей ви бек о Ве его авт 1250 1255 1250
Ре Тгр гук РВе Те 5ег ас АБрорго б1у Тер уві и 1265 1270 1275 вк ж У «їі» 4957 «ій» РТ «13» Клостридієвий ботулін «002 5
Мет Рго кує Ме да заг ВАВ Ап Тут вп дер го маї Ап щЕБ Аг
Тиг їі вен Туг Ті бух вго біу б1у Суб ба бів Рйш Туг бу бег
РВе два Хіе Ммеї муз Ав Х12 ТР їі тів РКО біб Ага АБа уаі Ті с1у те тТВг о Рго сіп Ашр вва ні рго рго Твкобеє сви був дп бі бо
Авр яак баг тТук Туг Ар о Рго Ази о тТуг це бій Баг др бів сій ух
655 70 75 во
Ар Ага вва цен іух тів ма) Тег о цуб хі РБе Ах Аг Тв Ав АБ ва я Зо 35
Ап гБеу аг щу с1у Ії6 Сем цен біб бін меш 5ег Гуз Аїа Аяй Рго 105 135
Тут ви біуУ Ап Ашо Ай ТИР о Бго Ар Ав біп вве нів Хі біу АВ 116 120 1213
Аіа бек дія маї бі є СУ Рне Бек Абп б1у бек бій АЗр о ї1е ей 130 135 140 цею го Ап Уві її Х1е Меб біу АТа бій Рго А5р о бви РВЕ би ТАг 145 ї50 155 160
Ап бвг Баг дп Хі Баг бу АРЯ Аж Ай тує Мех вго баг Аби НІВ 155 170 175
Фіу Ре діу баг 3112 Аїа ї1е уаї ТВг РВе Зег Рго сін це бек ре 180 ї55 1950
Аго ве Ах" Ар Аши аг Мас Ахп бій бле їТе бій ар о бго Аа ів 795 200 295 тТаг ве мес нів Біб їв) хі Ніз бер зви ніх сх Мен Тук біу Аїх 210 215 22 ух біх х16 тТвг о тТВк фу Туг о ТвВг о Ї1е тб обій губ б1а0 д5п го рем 225 530 235 240 16 Твг Аа Ще ве с1іу Тиг Ап оїієе бі біб пе ви тйг вва біу 24 250 255 с1у тйг Ахр рез азп ха Хі тТВе Зак Аді бій Зег Аяв АБр ОХ туф 250 255 270
ТВг АбА ен сен АТ АВр Тут Сх цу« Хе Аїд 5ег Су іви баб сує 575 280 285
Уві біп Уаї бек Ап Рго ву веу Аха Рго Туг ух Ахр уві пе бій 290 295 300 діз уз Тук біу цен Ажр Гуз дер Аїв ег біу їі Туг бег уді Ай 305 у ЗО 315 у 320 їі Ап фу Рв Ап Ар тів Ра ув вух Ген Тук Бек ре тк сій 325 30 155
Ре Ар озеи АЇЗ тт о їух Ре біп у! ух Суз Ага бій тТвг тує їв 340 345 350 бу бій тТуг іу5 Туг Ра уз ву бег АБп це ве) Ах АБ Зоб Х16 335 360 3655
Тук деп Те хек ої 1у т Ах Тв Аби АБИ івец фу5 Уаі А5п РНе 370 375 ЗО ве сіу бій ап АВ Азпогец Аби вго Ага ї1е тів Твгобго ї1е тег
ЗЕ 390 395 400 су Аге біу сад ма? Куб ух її ів Ага Ре Суб уз Ап хів ха
МУ 405 У 410 415 зе уві ук ох І16 Аго уз Заг ї1іе Суб 18 бі Х18 АБИ Азпоб1уУ 42 425 430 біш ке бпе вне Уві Аїа Заг біб Ап бек Туг А5п азр Ав Аж хі 335 0 345
Аква Те Рго Сує біц Хе або Ахр Те УВІ Тйг бег Ап Ап одяп Туг 450 45 4650 сі А5пй АБр ген Ар бій ма! Х1е (ви А5п РМ Аби бег бін бек вій 465 470 475 «480 го сіу меш бек Ар бій у5 шу АяпП зау ТВг Ті сій А5а АБр Аза «5 430 495
Тут 116 РгОо фу ТУР Ар обег деп піу Те ЗеК Ахр їв бі бів ніх 500 505 510
Ар Ууді деп бін Бей Аби узі РБе рНЕ Тук се Ар Аа бій був хв 515 520 325 пго 16 О1У бій Ах" Аяи уді Ап це) тб Бек зве Іа АБо твпг Аа 530 535 540 ії ке бів сів Ро фу5 Хі6є Тук тік РБа ре бег баг бій ее хів 545 550 555 550
АБ дяи Уа! деп За Рго маії біп Аа АЇа бен вна узі Зег тгр Ї1е 555 579 572 біп бів Уа! рец Уаї Акр вне ТВ оТАг сі) АТя да вів мує Заг тА 550 з85 У та Ар іуз тів Аа дво хі бек хі уві уві бго туг їТе біу Бей 595 60 505
АТа кецй Аз Ї18 біу Абап іш Аза сій був У Аква Ре уз Ар Аїд о 6515 620 ви біш ви мец бу АТа сіу 116 без вео біб Рве бій рго бів фе
БУ. 530 635 50 рей ха Рго їВг Хі фею муаї Ре їТйг Іі2 Цу5 бег Ре бец о1у баг 645 650 555 «ег А5р АБ Муз Авпобух ма! 18 1у5 АТа 118 Ай АБИ АїВ ев Дух 650 505 6579 сії Ага йо бід цу тгробує би маї тує яек ре тів уЩі 5ек Ахп 575 ба 555
Тгромеє Твг вух ів Ази тТАг о бій Ре Аби ух во їуз Бів біп мех
Б 595 то
Тут 51й Аїа ей бій Ах бій уаі Ап Аза хе рух ТР оті 116 сін 705 710 715 720
Зег губ Туг Ал обер Тут тс без сів бін бу Аа бів во так Ах 725 730 735 ух Туг Ар хів мух сів 10 бій АБО бі) Бей Ази бій вух уді бег 740 745 750
Ї1а дів ме; Ап АБА Х16 дер св ве бец тйг бів Зег о зЗає Ї1е бак 755 76 755 туг вецу Мех ух ем Хі Аби БіШ Уа! ух їв Аби уз бе Ага 16 770 775 780
Тук Ахр бін А5а Уаї руб їВг о Тук о івц бец дев Тук їі Хе бій Нів 785 70 795 Зоо
Ф1у Бег те цей біу біц бег віп бій бі Бей АБИ Баг межє маї твк 5ох 810 5
Ахр о Тнг осей Ап Абп бЗек їі РО РВе ух ви бег Зег туг тТнг Авр 820 825 850
Аяр ух х1е цаи Їїє хег тує РВЄ дбп суб Ре Ре (уз Ага тів ув 835 540 845 ег бег бег Узі і6у Ап Мет Аг Туг ух Ап А5р бух Туг ма! Ар 850 855 во
Тнг о Зевг біу туг АбробЗег Ахп ЇІ1е Аха їі деп сіу д5р о маї Тук іму 865 873 875 850
Тує вго Твг два Су? д5п аій Ре біу 116 Туг дбп Азр цу іви Заг 585 890 БЯ5 сі: уві Азп їі8 бег сій Авп Ав М Її її туг АБр д5в ух Туг 0 905 910 ух дБ Ре баг її 5ег о РНе Тер Уа! Аго Ї16 вго АБИ Туг АБ Ав 915 З20 925 цу ше маї Ази Уді ази Ап бів тує тк ої1е Хо Аба Су Мет Аг 930 935 949 дер Аяп Ахп баг біу Тгрогуз ма! баг огез аб ні деп бів се 12 945 з50 955 960
Тгр Твг ев ба вер Ап А1а бі ї1е да бій вух ве А1а РА АЙ
БІ 970 975
Тут б1у А5п Аїа Ап бі Хі баг о Азр тує Хе Або Бує тТгр (ее вве зво З85 990
Уаї те Же тиг АЖ Ар Аг ви бу А5р о бег бух сен Туг 116 Ап 395 3000 1005 біу дбп о бец їв Ар бій гу баг Хі цеи АБп їав бу дб хів 1010 1015 1020 нія ма! Бек Абр Ап їі Кв Ра цу Х1е маі Ап Суб бог о туг 1025 1030 1035 тТвгодга тує хів су Ще дич "вне Азп їі Ре Азр уз біц 1040 у 1015 ТУ 1050 й іГеи а5в сії таг обін їїв бів отТБговеу Туг баб Ап би Во Ах 1055 1060 1065
Тит оаА5аА їі бе у Абр оре тТге біу деп о туг без фен тТуг Ар 1970 3075 3080
Куб іш отуг Туг бен сем ази Уві бе) губ го дп АБ РАЄ т1Єє 3085 1090 1095
Дбр АгРО АгО Суб Ар Зег тйг о без Зог 10 АХй Аяа Іа Аг 5еб 110о 9 1105 ло 5
Ти" Ї16 фей ен АЇя АБпП Ага бен туго Зек біу Хі ух уві Куз ці 4120 1125 ї1іе сій Ага уа1ї Ап АБИ баг о Бег ТВг Ап Ар оАбп о їви ма1 АгО 1530 1135 1140
ЦУБ Аяи Ар бів Ма! Тут Її дело вва ма! Аїа Яви мб твк нів 1145 1ї150 1155
Сей Рне Бго ес» Туг Аза АБр о тВг о АЇТа ТвВгОтТВг АБИ бух бід ух
1160 1165 170
ТВг її Суз ї116 бек Бех бег б1у АБпП о АРО Ре Ає" бій ма! ха 1175 1180 1185
Ууаї меж АБИ Заг ма! Б1У Ай Аа Суб Тйг Мах АБИ Бе су АБ 1150 1195 1290
Азпоабп б1у Ап Ази те ех ец бен Ф1у вве мув діа дБр те 1205 1219 1213 чаї чаї Аа бат Те тро тує туг Тнг Мі мех Ако Азронів тТАг 1220 125 1210 деп Яек АБ біу Суд Ра Тгр о Ап Ре їв Зег бій біб ні у 1235 1950 1543
Тгробіп боб вух 1250 «М» 6 «їі» 19274 «іх РЕТ . «213» Клостридієвий ботулін «400» 6 мес вго Уа! АЇя Ї1е деп баг Ре АБ Туг А5п о Ажр го Уві Ал АБО 1 5 30 15
Ази таг о ЇТв цеш Туг мех бій Хі рго туго біц сіб вуз бек був5 Сух тук тук Му діа Ре бій шо Мех Аго Ап о Уа! Тгроїіе тів го 618 3 40 45
Аго Ап тТвг оуЇе сіу Тйг да Бго Заг Або Ра дяр Рг Рго А1їа бег 60 іви Муб яп Б1у Зег Зег Аза Туг Туг Ар о Рго Аз ОТуг цей тик о твг 85 й) 75 Бо дер Аа бій уз др Аго Тук цез фу ТВг Тиг ї16 бух сви РНа ух 55 Зо 95
Аго їі АБИ ба" АЕЙ РгО АЇа бу пе УаЇ їецй івеци біп бів її 5ег 100 105 110
Туг А1а ув РРО Туг ме О1У Ап Ар о нії Те о Рго 112 Ар св вве 115 у 720 й 125 й 5ег Рго маії ТИг оАгУ ТВгОТВг бек омаї АБ Ї12 ух цеу бак Тве АБИ 130 135 140 чаї біз бає бог Мет ей ей аа бен ев ма! ви З1У Аза оту рго 145 150 155 150
Ар її ве бій баг Суб Сух Туг вго Уві Ага вух сей те др РгО 365 170 175
Авр ма! маї Туг Аб5р о Рго его д5п Туг біу Ре оіу бек їїе Ап Ї16
КЕ) і що уаї Тнг ейе баг го бі Тує бів Туг ТИг вне Ап вар їтїв баг б1іу 195 «00 20 б1у Ні Ап Заг Зак ТВг Обі) Зег РМе Хі діа А5р о Рго АЇз їв бе 210 215 220 івеш АТа нія сіб без їтіє ні Аїд цец нії бїу цец тує Ту Аїа аг 725 230 235 24 біУу маї ТвВг о Тук бів біз тТВгохіФ 5! узі Муз бій Аз РгО зей мех 245 250 255
Те Аїв бів бух Рго хів Аг ів біб біш ВБа їец ївг Ре оїу оіу 250 255 570 сіп А5росец Або Ї16 Жі6 ТВг бек Аїа Мех ух сім уз Хе Туєк дп 275 280 285
Аве рен цез Аа АБ тТук біб Бу5 Х1е АТа тТВг ЗОВ ів Заг 01 ма 290 755 30 доп бек Аа вго РгОо біц Туг Абр їв Аза бі Туг бух АБр тує рРВе 305 310 315 320 сіб тер офує Тук біу іви Азр Муз А5п Аіа Азр б1у бек Тут тиг Уві 325 330 335
Аха бій ази уз вне дп вів Хі Тук фу уз ев тТуг Зег Ра тТВг 340 345 350 сій бег ов зви Аа АБО БУ РП вуз Ууді ух Сух АРЯ АБИ ТИР Отут 360 385
РМе ї16 цу тук бі бе сви цуб5 уаї РРО АБ ов оц АХ Ахо АЖр 370 375 з5О їїе тук тйг Уа! 5ег сін біу вне дз її У дп беи дія маї дп 385 390 39 400
Ап Аго су їй бег ЇТ6 Куб цей АБИ Вго цух Її Хі дбБр о бег Те 405 мо 13
Рго Ар вух б1у ви ма! СТУ уз Т1е Уа! суб пе Суб ув баг ма! і 420 425 40
Ї18 РРО Ага бух біу ТИг Суз АТа Рго Рго Ага Мей Суб 116 Або У 438 у у у 50 З 445 дя Ап Зеє бій Гец РНе РНе Маї АТа бас бін бег баг тує Аби и 450 455 «60
АБ Ар тів АБп Те оРгО Гуз сти х1о Ар Ар Те тне дяп Сем дей 465 470 47 480
Ап Аяп тут Аго Аяп" Ай зви Ар обім Уа! Ті бен Абр туг дви 5ег 485 490 455 бій те їі рго бій ї18 5ег дБ оо ТВг обец А5а те мец маї с1в 500 50 510 дер Аби зег тут ма! Бгто Ага Тук Ар баг АБп біу ТАг Зає бі їв 545 5ро 525 сій сі тТуг АБроуаї ма авр РБе А5п ма! Ре РВе туг сей нія А1а 530 53 540 сіп кує маї вго біц су бІц Тиг Абп Їїїе бег без тТиг Заг Заг То 545 55 555 560
АвБр тег АТа бец без 51 бі бек у вер ЖХ1іе Ре РМе б5ег ет 1 553 БУ 575 внпе 112 Ад5р тн ї1е Аяп вух РгО Уа! А5п АТа АТа вбац ве 112 Ар 580 585 590 тТгр те бег уз маї ів АгО АБр о РВе твг тіж бій Аза те осів ув 595 600 605 б5ег те Уаї Ар мух їв Аа Ар І11е хег цем те уаї го тук ма! бій 615 620 в1у цен Аїа цен деп т1е х12 Те б1й АТа бід бує С1У Аби РІВ 01 62 530 6535 540 ім Аїа Рйе бій фей ец біу ма! бі ї18 цеб без сій РпЄ Узі Рго 645 6550 655 бій цец Тйг оЗіе Рго уза! Те цем ма! ее тик Її бує бег Туг Пе 550 565 670
Ар аг ТЕ СТИ Ап був Аби щуе Аїа тів цу Аїа Хіа Ап Ап обет 575 БО 685 їв жа біб Аг біб АТа бух ткгрогуз бі 16 Туг 5ег тив ї1а маї
599 695 700
Бак дя" Тер оБец Те Аго І16 АБ ТВгобій Ра Аа вуз АгО бух 51 705 718 715 720 бів мех тук сій дія ів сій деп бів Уді Азр АТа хів цує Те АВ 725 73й 735 їіе 516 тує цу« тує Ап Аз Туг Тйг Заг Ар Бі Куб АБИ Ага Бей
Що о ТУ у 745 й у 750 би бек бід тТуг дп хів Ахп дви іє біш бій бів ге АБ Був ку 755 760 755 уа! бег фе АТа Мех ув дп хів біз Аг Ве меж ТР сін 5ег 5ег 770 775 780 ї1а баг туг цец Мет мб ви хів Аза с1й Аїя ву маї Ту Суб ву 785 750 795 800 їцуз цуз Туг аАзр дп нів узі уз баг Ар осв ви Ави Туг Т1а Бей уз ув ту й 5О5 819 515
Ахр нів Аг ве ІТ ей Ту біб бій ТВт Аза бій ви бек Ар ву 820 825 850
Уаї їйе бег ТВг Бен Аби чего хег Х1е го вве бі веу бер бек Тук 835 854о 845
Тег Аа Ар дуб Ті сво хів їі Туг Ре деп вс іец Тук цу5 цу» 850 855 5 її сух Абр Зег Зег хіє (ви А5р Мек Аг тує бій АБИ АБ уз рве я5 870 875 ко ї1е Ар Іі сег с1і1у Тут бу баг Аж хів 5Зег ї1і2 деп сіу Ап Уді
Зах 55о 595
Тує ха Туг бек ТВГ А5й Аго АБ біз Ре б1у ї1ї6е Туг АБИ Баг Ага 900 905 510
Беи бег біц маї Аби Ї16 Аїв бій АбА де др ї1о хі тТуг АБ бег 915 920 925
Аго пи біл Аа пе Зег Хіа бек Ро тТгрочаї и ХТе его уз Ні 930 9535 94
Туг ух Рго Месї Ал Ні АБп о дгоЯ сів Тує Те Ххіе 112 Ахи Сузх Мех 545 950 955 960 сіу АБп Ахп Ап Бек Є1у Тгр гу Її баг бен Аго ТВг ха! Ага Ар 965 570 97 уз сів хів їі ТКротТйг осеу біп Або ТВК обег біу Би Суб бій АБИ су 980 й 985 у 90 мен Ї1а Ре Ага Туг бій 51 рей Ах АгО ї1о 5Зегоа5п Туб Ї16 Або 395 1000 1005 (ух Тр лів вп Уді ТР ОЇ16 ТВ оАяО Аяй Аго їеу біу Авп о 5етг 1010 1015 3020
Ага ї12 Тук Х1е абп о біу АБ сен іє Уві бів Гуз ес тів 5аг 1025 1030 1935 ази вец у Ар Іі ніх уді бвг о Ахр Ах" Хі ів вне ух тів 1050 1045 1050
Уа! біу Сух Ар Абробіц ТВго туго уаі сіу Ті6 дго Туг Ре суз 1055 у 1060 у у 1065
Маї вне Абе Те бів зебр Аяро був Тіт обі Же бін тик оївцу туг 1070 1075 3080
Зег Аби їв РО Абр ого Зего Тв бен вуз Аза тує о ТгроФТу дей 1985 1090 1095 гокей фа Туг Ахп фу ув тує туго гу Ра дп о іви ву дк ту 00 у у 1105 УСУ 1110 З уз др муз Туг ї1е Тйгобец Аби 5ег о біу Хі бе о АБп те Абп 1115 1320 1125 бій біп Ага біу маі те обі бу бек Уа! Ре ву Ап Тук ух з 11355 1140 ец Туг біз біу Уві бі ма! їі їів Ак сух аби біу Рго ї1е
Мах 50 1155
Азр Ії6 бег Ап ТК оАБр Ай Ре ха! Ага Цуб Аа Ар Мен Аа
Мо 1165 1170
Ту ж1е дай маї ув! Ар го сіу маї бїШ Туг вто їевн Туг дід
МУ 380 1155
АБр о тйг ух бе бій фує 1 уб5 Хіе 116 Ага ТК о бек Або ву цгао що 1500
АБп АБр о Бег іви сіу іп їіе іє Уа! мех ар бак їіе бу Ав 1205 1210 1215 деп суз ТтТигоМеж Ап вне бій Аа Ап Ахп біу баг о Ай ї16 біу 1220 1275 1230 це се біу вп Ні Баг Ах" Абп без уаі АЇа бек о бек Тер Туг 1235 1240 1245 ук Аяп д«п їі дго аго Абп Тпг о Зег о Звг дяп біу Суб Рпе тгр
ТУ 1250 1255 1250 аг бЗег хів бег уз бін Ап о с1у тер цу сн 1265 1270 «10» 7 «231» 1297 «ій» ВЕТ й «2313» Клестридієвий ботулін «00» 7 мат вго Ма! А5п Ї12 ву Ах РП Ах її Ап Ажр го ЇТе АБИ АБИ ї 5 ї 15
АбБроАБр їі 112 Меб Мек Фій Рго Ре абп дхр Рго сіу Рго б1у таг 50 75 30
Тут туг цу: Аїа РНєЄ Ага її ІТЄ А5р Аго ї1е тТгрохів уаї го 16
З 40 45
Ага ра твг тує 01у вве бій рго Азробіп Рв Ахй АЇз бБеб твг оту 50 55 60 уаі! Рве его фух АБр уа! Туг бі Туг туг АБО РгОо ТВг Туг ден ух 55 у й 70 Ту УгУ 75 80
Тпг Ар АТа 1 цу Ар Ку РН ву Бо тТвиге мех 118 уз бе вве 85 ві 55
Абп Ага ї12 Аби Бег о гух РРО 5ег цім біп Ав Сей і ви в Ме їТе 100 105 її
Уаї Ар А1а їі Рго Ту івц б1у А5п Аїа его Твг о бго бго Ар уз 120 125 вне Аїа АЇа Ап Уа АТа Ахломаї бег о їіа дп гу мух 10 хів бів 130 135 150 вРо са1у Аа бій Азр бій їі бух біу цей Меї ТР Ап бен тів тів 145 150 155 1650 вне сбіу го Ф1у Рго Уаї ви бЗек АБр Ап РМ ТАг Ар Баг Ммек тів 165 170 175
Мес Ап сіу нів яагобго їі Забо бід біу вва о1у Ав ОВ Мет Мех 1850 183 19
Т12 Аго Рне Су РГО бег Сух се Ап Уа! вве Абп аб Уаї сп св
195 290 205
Ав ще АИи ТВйг баг їі ве баг Аго Аг Аа 105 Ре АТа Ар РгГО 210 215 220
Аа се Тйг Ген Ммеї ні бій івєи ї1е Міб Уа! меми Ні бу цец Туг 225 230 . 235 240
Фіу Ії уз Їїя бег Ал о бвц вго Хі тТвгеовго дп Те бує Оу вве 245 250 255
Ре Межї бів Міб5 бЗег Ар Рго Уа! бів А1а 1 Я еу Ту; Твйг Ре 260 265 270
Оіу біу Ні Ар ого хег о уаі ї1е Заг Рго Заг ТВ Ао МеЖ Ай її 275 280 785 туг Ап цу дів цен бій А5а РВЕ бій Ар ої16 АїЗ АБИ АгЯ Сен ап 296 295 300
Ї1е Уаї 5ег хег Аа біп біу бек Фу Хі АБр ї1е баг це Тук цу 305 ща 315 320 сів їі6 туго Кух Аяй фух Туг Ар о РВе уді сій Або оРКО Ахп Оу Кук
ТС ву 325 330 335
Туг бек у8і Або іУу5 Ар іу« Рів Ар бух цей Тут ух Аіїй ав Меї 340 з45 350 тва біу вне Тие бім ТнР о АбА бе Аа біу бів тує б1у та уз ТВ 355 366 365
Ага ту б5ег тує РБе бек бій туго зей Рго Рго 116 ух ТНг бі ух 33 375 380 ів бац джр Ап тТиг оу1е Тує тве бій дба біз біу Ра дБ ї18 АТ 385 390 395 400
Баг Бу Аїа їец пе Те біб Рв АБИ біу бій ази бух Аа Уаї Ап 405 4ій 415
МУу5 би Аїд п бів бін Хі зекоівцз бій ні ев м3ї Ї16 Туг Аго 420 425 430
Її АТ Ме Су муб5 вБго Уа1ї Меб Туг вуз дя ТИР біу ку 5ег ой 435 440 345 сій су Хіа хів жаї Аа Ахп біб Айр іви Ра рРне тів АЇв аБп обу 550 455 4850 и 5ек рРМе бег іЦу5 Абр їеи діа ЦуУ5 Аїа бі ТВг о ї16 АТа Туг Авп 46 470 475 480
Те б10 Аа А5И Те ї16 Сі АБп оАЗй Ре баб тів АхроБіпй бе Тв 485 390 435
Ман Ар Аз зов цез Бег Бег біу хів А5р ер РГО АБ бу АБИ ТАг 50. 505 510 сій РО Ра ТВг Аяа РВЕ Ар охо І1е А5р І1е ГО узі Туг Ї1т8 цу 515 52 525 сіп бер Аа цей цуз цу Хі Ре маї АБр О1уУ АХ его беи РН Су 530 535 540
Тук меи нів Аіа бій ТВе о РНе Рго бек Ав ї16 бій Аа ев бій бед 545 550 355 550
Тве Ап 5ег о геу АБ АжО АТ це АгО АБИ АБ ОАБИ Куб маї Тує ТАг 555 570 525
РМе РВе его тТВг о дп Бей маї и З Аза Аяп о твг Уа! уаї сту Аа 580 585 590 «аг це бе уві Азпоткр о уа! цу біу ма! Хі А5р Ар Ре Те 5ег 595 БОЮ 605 бід Бек тіг бій іуб Зег тВг їі Азрозух маї бег Азр Уа! ек Т18 о 615 520 її їїє Рго Тук Ів віх Рго АТа бец Азп узі Б1у дяп бі Тйг Аа 625 53 535 5.0
МУу5 01 Аж Ре (у5 Ах Аїа Ре бі) хтів б1у бі Аа АТ Те ем 545 550 555 мех бі Ре ї116 РРО бі: цец їТе уаї бго те маї 61уУ ве ре тВе 6560 565 670 еп бін Заг отуб маї С1У АхВ цу бі ні ів їв мех тат хе 5ег 675 650 585
Ап діа вбец цуз бух Ако Абросіп уз Тр о тТваг АВ мес Ту Фу зву 590 у 595 700
І1е Уаії бег бій Тгробвци баг тТйг омаі Ап о тТигР осів Ре Туг Тк Ще 705 710 715 720 цу5 бі Аг має М АБп АЇв цей Ап Аа боїв бег біб Аза тів бі 725 230 735 іїух Ті Ті бій Ахробій Туг Ап вгя Тук баг Фін бів АБр уз Мех 740 74 750
Азп Іів АБИ їі Ахр РВЕ Аяп Ахр їі Авр о ейе ву шви Ап бій бег 755 7650 755 їЇТе а5п Бен Аїа їїе деп доп ї1е Або АБр Рйе ХТа деп ота Суб 5ег 77 775 750 її баг Туг цеч Мей АВ Аго Ме ї1і6 бго сен АТа маї ух су сер 785 790 795 500 мух АВИ Ре Ахр АБр АБИ Бей ух Аг Ахр мен ви 51 Тук 718 А5р у 805 у 9 810 у 815 тве Ах" бів дец туго бен бец др сів маї Абп те ев му ек ух 520 525 530
Уві Акп во Ні вву ку Авр бак І16 го бне Ар рем баг беу тТуг 83 840 845 пе Су Аяр ТвВг тів їец їі біп хаі Ре Аїп Аа Тук Її 5Зег Ап 85 855 860 їі бек бег А5п АТа Х16 Мем бек це бег ах ага ау сіу Аго і еи 8565 870 8275 ВО
Ї18 Ахр баг Зег біу тує Біу Аза тіг Мат Ап Узі О1У бек Ахр Уа яео 890 895
Ї1е Рве деп дев ї1є сіу дбзп біу сій Ре уз Гео яп деп бек сів 90 905 910
Ази Баг Азп ї16 ТНг Аїа Мі бій баг уз РМє ма! уа! Туг Абе хек 915 920 925
Ме Ра Афр Ап Ра Звг о хів Аа РНе тер ома! веВ Те оврго кКух Туг 930 935 94
Ап Ап Ап Ар ої1іе бій тТвгоТук бен бій деп сію туго Твг хів те 945 950 955 960 аг Суб І16 Буб АБ А5робег Фу Терогуб Уа! бек 116 бує Ту Ап 965 970 975
Аго хів хе тер о тВг фе Х1е др уаї АБп Аа цух Заг (у заг їіг 980 985 950
Ре Ре бів туго 5ег їіа Ку Ар о АшАп Кі баг Ажр тує ІЇ16 Ап кух 995 1000 1005
Ттр Ре Бег хів тйг Хі ТВгО Аа АХР о Аго ви Оу АБ АТА АБИ
Мо 1015 1020 їЇїє Туг жів АБп бі 5Зегоівн ув ух Заг обіц бух 116 ве АБ 1025 1030 1055 мец др АгО Іа АБ баг баб Аза о Аброї1е дер Рйе ух ен Т1е що 1045 1050
АБ Су отВгодяр ТВе о твговБуз Ре уаї ттр Її Те АБр впе Авп 1055 їйсо 1065
Ха РМ біу ага бів ігн дев АЇй тТвгР обі маї 5еб 5ег без туг 1070 1075 1080
Ттр їі бій баг баг Тиг о АБп Ттйг обме цух Авробйе тер с1у Аза 1085 1090 1095 го це) Ага Туг АбротвВгобій туго Туг ве) Ре Ахп бів у Мах їщю 1105 110 біподяй їі тує ї1і6 уз тТук РМе б5ег (цу діа бег мех бі бід 135 1120 1125
ТВР АЇВ РгОо АгО ТНгОАхп Райо Аяа Ап АТа Аа ї18 АБО Тугє Сп мо 35 1140
Ав їви туго івц біу сей Аго Ре хі Хе уз бух АВ Зег Ап 3145 1150 у 1155
Заг мо Азп Хіе Ап Ап Ар Або їі Уаї Або бів с1у АБе тує 1160 11655 1170
Те Туг фей Ап їв Азр Ап її Звг о Ахр обі) бег Туг Ага ха 175 150 1185
Тут уаї фен уаї дб5п бек бух бів ї1е біп тб бій Бей Ре Кей 1190 1195 3200
Аза вго 16 Азп о АЗр Ар го ліг о рРМе Тут Ар оуа! фей бій 116 1505 1210 1215 мух бух тує ту 61 Куб твВг тб тус Ай Су бій ха в) су 1220 У 1225 1230 їй нуг Ар тВг вух ТВгоРВе біу ме ее сі 11 б1у вух рве 1235 1240 1745 чаї уз Авр туг 01 гоуа! Тгтр о Ахр Тг Ту Аб5ро Аа туго РНе 1550 ву У ТУ 1255 ре ту 128о ту
Суз Хі бек бів ТРО Тук іви Ага Або ї1е бе бі 45 Хе АБ 1265 1270 1275 їУ5 ке Аг без о1у Суб Алло тро бій вве хе бго Уа! Абе бів 1280 1285 12590 е1у Тер так їв 1295

Claims (18)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Рідка композиція, яка містить протеїновий нейротоксин, поверхнево-активну речовину, амінокислоту, вибрану з триптофану та тирозину, буфер, який містить іони натрію, хлориду та фосфату, де зазначена рідка композиція має рН від 5,5 до 8, де зазначена композиція є вільною від протеїнів тваринного походження та де зазначена рідка композиція є стабільною з плином часу.
2. Рідка композиція за пунктом 1, в якій зазначена поверхнево-активна речовина являє собою неіонну поверхнево-активну речовину.
3. Рідка композиція за пунктом 2, в якій зазначена неіонна поверхнево-активна речовина являє собою полісорбат, переважно полісорбат 20, полісорбат 60 або полісорбат 80.
4. Рідка композиція за будь-яким одним з пунктів 1-3, в якій зазначена амінокислота являє собою триптофан, переважно І -триптофан.
5. Рідка композиція за будь-яким одним з пунктів 1-4, в якій зазначений буфер додатково містить іони калію.
6. Рідка композиція за будь-яким одним з пунктів 1-5, де зазначена композиція має рнН від 6,0 до
7,5.
7. Рідка композиція за будь-яким одним з пунктів 1-6, причому не більше ніж 30 95 втрата позаклітинної протеолітичної активності відбувається протягом 2, 3, 6, 12, 18, 24 або 36 місяців при 5 С.
8. Рідка композиція за будь-яким одним з пунктів 1-7, в якій зазначений протеїновий нейротоксин являє собою ботулінічний нейротоксин, вибраний з природного ботулінічного нейротоксину в комплексній формі, високочистого природного ботулінічного нейротоксину та рекомбінантного ботулінічного нейротоксину.
9. Рідка композиція за пунктом 8, в якій зазначений ботулінічний нейротоксин являє собою рекомбінантний ботулінічний нейротоксин, вибраний з ботулінічного нейротоксину А, В, С, 0, Е, Е або б, модифікованого ботулінічного нейротоксину та химерного ботулінічного нейротоксину.
10. Рідка композиція за будь-яким одним з пунктів 1-9, де зазначена рідка композиція містить: - від 4 до 10000 1050 одиниць ботулінічного нейротоксину на мл, - від 0,001 до 15 95 об./об. полісорбату, - від 0,1 до 5 мг/мл триптофану, - від 10 до 500 мМ масі, - від 1 до 50 мМ КСІ, - від 1 до 100 мМ фосфату натрію, має рН від 5,5 до 8 та є стабільною протягом 6 місяців при 5 "С.
11. Рідка композиція за пунктом 10, де зазначена рідка композиція містить: - від 10 до 2000 1050 одиниць ботулінічного нейротоксину на мл, -від 0,05 до 0,2 95 об./об. полісорбату 80, - від 0,1 до 5 мг/мл триптофану, - від 25 до 300 мМ масі, - від 'ї до 10 мМ КСІ, - від 2 до 50 мМ фосфату натрію, має рН від 6,0 до 7,5 та є стабільною протягом 12 місяців при 5 "С.
12. Рідка композиція за будь-яким одним з пунктів 1-11 для застосування в терапії.
13. Рідка композиція за пунктом 12 для застосування в лікуванні або профілактиці м'язових розладів, нервово-м'язових розладів, неврологічних розладів, офтальмологічних розладів, больових розладів, психологічних розладів, суглобових розладів, запальних розладів, ендокринних розладів або урологічних розладів.
14. Застосування рідкої композиції за будь-яким одним з пунктів 1-11 для лікування або запобігання зморшкам шкіри, зокрема зморшкам обличчя, таким як міжбрівні зморшки обличчя, зморшки контуру ока, опущення кутів рота, зморшки шиї (платизмальні тяжі), зморшки підборіддя (підборідний м'яз, лимонна кірка, підборіддя з ямочкою), лобових ліній, зморшки "розтягнутої шкіри", ліфтингу носу, лікування ліній сну.
15. Застосування амінокислоти, вибраної з триптофану та тирозину для захисту протеїнового нейротоксину від розкладання в рідкій композиції, яка є вільною від протеїнів тваринного походження.
16. Застосування за пунктом 15, де зазначена амінокислота являє собою триптофан.
17. Застосування за пунктом 15 або 16, де зазначений протеїновий нейротоксин являє собою 60 ботулінічний нейротоксин.
18. Застосування за пунктом 15, де зазначена амінокислота застосовується в комбінації з поверхнево-активною речовиною та буфером, який містить іони натрію, хлориду та фосфату, та зазначена рідка композиція має рН від 5,5 до 8.
UAA201811606A 2016-05-27 2017-05-26 Рідка композиція нейротоксину, стабілізована триптофаном або тирозином UA123679C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP2016062085 2016-05-27
PCT/EP2017/062785 WO2017203038A1 (en) 2016-05-27 2017-05-26 Liquid neurotoxin formulation stabilized with tryptophan or tyrosine

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA123679C2 true UA123679C2 (uk) 2021-05-12

Family

ID=56289455

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201811606A UA123679C2 (uk) 2016-05-27 2017-05-26 Рідка композиція нейротоксину, стабілізована триптофаном або тирозином

Country Status (30)

Country Link
US (4) US20190183988A1 (uk)
EP (3) EP4026532A1 (uk)
JP (1) JP7053498B2 (uk)
KR (2) KR102399451B1 (uk)
CN (2) CN111701010B (uk)
AR (1) AR108631A1 (uk)
AU (1) AU2017270359B2 (uk)
BR (1) BR112018074311A2 (uk)
CA (1) CA3025437A1 (uk)
CY (2) CY1124237T1 (uk)
DK (2) DK3679946T3 (uk)
EA (1) EA038124B1 (uk)
ES (2) ES2911124T3 (uk)
GE (1) GEP20207139B (uk)
HR (2) HRP20220024T1 (uk)
HU (2) HUE057640T2 (uk)
IL (2) IL285190B (uk)
LT (2) LT3679946T (uk)
MX (1) MX2018014631A (uk)
PL (2) PL3463432T3 (uk)
PT (2) PT3463432T (uk)
RS (2) RS61340B1 (uk)
RU (1) RU2741497C9 (uk)
SA (1) SA518400513B1 (uk)
SG (1) SG11201810561YA (uk)
SI (2) SI3463432T1 (uk)
TW (1) TWI777955B (uk)
UA (1) UA123679C2 (uk)
WO (1) WO2017203038A1 (uk)
ZA (1) ZA201807904B (uk)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8168206B1 (en) 2005-10-06 2012-05-01 Allergan, Inc. Animal protein-free pharmaceutical compositions
SG10202100698QA (en) 2008-12-31 2021-02-25 Revance Therapeutics Inc Injectable Botulinum Toxin Formulations
IL268980B (en) 2009-06-25 2022-09-01 Revance Therapeutics Inc Botulinum toxin formulations without albumin
US9480731B2 (en) 2013-12-12 2016-11-01 Medy-Tox, Inc. Long lasting effect of new botulinum toxin formulations
EP3436054B2 (en) 2016-09-13 2022-07-27 Allergan, Inc. Stabilized non-protein clostridial toxin compositions
JP2021508453A (ja) * 2017-12-20 2021-03-11 アラーガン、インコーポレイテッドＡｌｌｅｒｇａｎ，Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ ボツリヌス毒素細胞結合ドメインポリペプチドおよび皮膚の若返りのための使用方法
TW202112348A (zh) * 2019-06-07 2021-04-01 英商益普生生物製藥有限公司 中度至極重度眉間紋及眼角外紋之治療
AU2023207838A1 (en) 2022-01-14 2024-07-04 Galderma Holding SA Treatment of moderate to very severe glabellar lines and lateral canthal lines
WO2023156389A1 (en) * 2022-02-15 2023-08-24 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Liquid botulinum toxin formulation and use thereof

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI240627B (en) * 1996-04-26 2005-10-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Erythropoietin solution preparation
TW574036B (en) * 1998-09-11 2004-02-01 Elan Pharm Inc Stable liquid compositions of botulinum toxin
DE60125986T3 (de) * 2000-02-08 2011-07-28 Allergan, Inc., 92612, Calif. Pharmazeutische Zusammensetzungen mit Botulinum Toxin
US20030118598A1 (en) * 2000-02-08 2003-06-26 Allergan, Inc. Clostridial toxin pharmaceutical compositions
US20060269575A1 (en) * 2000-02-08 2006-11-30 Allergan, Inc. Botulinum toxin pharmaceutical compositions formulated with recombinant albumin
US7163671B2 (en) * 2000-02-29 2007-01-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Long-term stabilized formulations
US6627602B2 (en) * 2001-11-13 2003-09-30 Duke University Preventing desensitization of receptors
DE10333317A1 (de) 2003-07-22 2005-02-17 Biotecon Therapeutics Gmbh Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA)
GB2416122A (en) * 2004-07-12 2006-01-18 Ipsen Ltd Botulinum neurotoxin composition
EP2266600B1 (en) * 2004-07-26 2014-09-10 Merz Pharma GmbH & Co. KGaA Therapeutic composition with a botulinum neurotoxin
EP1778279B1 (en) * 2004-08-04 2014-12-03 Ipsen Biopharm Limited Pharmaceutical composition containing botulinum neurotoxin a2
US20080220021A1 (en) 2005-02-14 2008-09-11 Pankaj Modi Topical Botulinum Toxin Compositions for the Treatment of Hyperhidrosis
FR2902341B1 (fr) 2006-06-16 2011-02-25 Scras Utilisation therapeutique simultanee, separee ou etalee dans le temps d'au moins une neurotoxine botulique, et d'au moins un derive opiace
CN101687046B (zh) * 2007-07-10 2012-12-26 株式会社美地拓斯 稳定性改善的肉毒毒素药物液体组合物
US9107815B2 (en) * 2008-02-22 2015-08-18 Allergan, Inc. Sustained release poloxamer containing pharmaceutical compositions
KR101910490B1 (ko) 2011-06-01 2018-10-22 바이오메디슨, 인코퍼레이티드 비-ｆｒｅｔ 보툴리눔 검정법
KR101640694B1 (ko) 2011-09-29 2016-07-18 셀스냅, 엘엘씨 독소생산능 시험용 조성물 및 방법
KR101357999B1 (ko) * 2012-03-20 2014-02-03 함종욱 보툴리눔 에이형 독소의 액상제품
EP3052120A1 (en) 2013-09-30 2016-08-10 Galderma S.A. Prostate cancer treatment
GB201407525D0 (en) * 2014-04-29 2014-06-11 Syntaxin Ltd Manufacture of recombinant clostridium botulinum neurotoxins

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20202070T1 (hr) 2021-02-19
HUE052023T2 (hu) 2021-04-28
HRP20220024T1 (hr) 2022-04-01
JP7053498B2 (ja) 2022-04-12
US20210330765A1 (en) 2021-10-28
GEP20207139B (en) 2020-07-27
DK3679946T3 (da) 2022-02-07
US20190183988A1 (en) 2019-06-20
IL263173B (en) 2021-08-31
PT3679946T (pt) 2022-01-14
CN111701010B (zh) 2023-09-26
IL285190B (en) 2022-07-01
EP3463432A1 (en) 2019-04-10
KR20190022548A (ko) 2019-03-06
EP4026532A1 (en) 2022-07-13
IL285190A (en) 2021-08-31
SA518400513B1 (ar) 2022-11-03
BR112018074311A2 (pt) 2019-10-01
KR20220054887A (ko) 2022-05-03
PT3463432T (pt) 2021-01-12
CY1124916T1 (el) 2023-01-05
SI3463432T1 (sl) 2021-02-26
PL3679946T3 (pl) 2022-05-30
LT3679946T (lt) 2022-02-10
HUE057640T2 (hu) 2022-05-28
SG11201810561YA (en) 2018-12-28
CN109562148A (zh) 2019-04-02
KR102399451B1 (ko) 2022-05-23
AU2017270359B2 (en) 2023-09-21
CN111701010A (zh) 2020-09-25
SI3679946T1 (sl) 2022-04-29
EA038124B1 (ru) 2021-07-09
WO2017203038A1 (en) 2017-11-30
AR108631A1 (es) 2018-09-12
CY1124237T1 (el) 2022-07-22
RU2018142149A (ru) 2020-06-29
IL263173A (en) 2018-12-31
US20240050539A1 (en) 2024-02-15
TWI777955B (zh) 2022-09-21
CA3025437A1 (en) 2017-11-30
JP2019517481A (ja) 2019-06-24
EP3463432B1 (en) 2020-10-07
MX2018014631A (es) 2019-06-12
EA201892493A1 (ru) 2019-04-30
RU2741497C9 (ru) 2021-04-30
RU2741497C2 (ru) 2021-01-26
RU2018142149A3 (uk) 2020-07-23
EP3679946B1 (en) 2022-01-05
ZA201807904B (en) 2020-05-27
ES2846350T3 (es) 2021-07-28
US20230181702A1 (en) 2023-06-15
EP3679946A1 (en) 2020-07-15
LT3463432T (lt) 2021-01-25
AU2017270359A1 (en) 2018-12-13
RS61340B1 (sr) 2021-02-26
RS62832B1 (sr) 2022-02-28
US20230190892A9 (en) 2023-06-22
ES2911124T3 (es) 2022-05-17
TW201742632A (zh) 2017-12-16
KR102423739B1 (ko) 2022-07-21
PL3463432T3 (pl) 2021-04-19
DK3463432T3 (da) 2021-01-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA123679C2 (uk) Рідка композиція нейротоксину, стабілізована триптофаном або тирозином
US10201594B2 (en) Compositions and methods for safe treatment of rhinitis
DK1817051T3 (en) A pharmaceutical composition comprising botulinum neurotoxin, a nonionic surfactant, sodium chloride and SUCROSE
KR100852824B1 (ko) 보툴리눔 신경독소를 포함하는 치료 조성물
AU2011316111B2 (en) Formulation suitable for stabilizing proteins, which is free of mammalian excipients
JP2012522786A (ja) 血管の過敏反応と関連した皮膚状態を治療する方法および組成物
KR20070057862A (ko) 조직 치유에 사용하기 위한 클로스트리디움 신경독
US20220160844A1 (en) Liquid neurotoxin formulation stabilized with tryptophan or tyrosine