UA119050C2 - ПІРОЛО[1.2-f][1.2.4]ТРИАЗИНИ, ЯКІ ВИКОРИСТОВУЮТЬСЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ РЕСПІРАТОРНО-СИНЦИТІАЛЬНИХ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ - Google Patents

ПІРОЛО[1.2-f][1.2.4]ТРИАЗИНИ, ЯКІ ВИКОРИСТОВУЮТЬСЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ РЕСПІРАТОРНО-СИНЦИТІАЛЬНИХ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ Download PDF

Info

Publication number
UA119050C2
UA119050C2 UAA201606308A UAA201606308A UA119050C2 UA 119050 C2 UA119050 C2 UA 119050C2 UA A201606308 A UAA201606308 A UA A201606308A UA A201606308 A UAA201606308 A UA A201606308A UA 119050 C2 UA119050 C2 UA 119050C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
afm
mmol
pharmaceutically acceptable
compound
acceptable salt
Prior art date
Application number
UAA201606308A
Other languages
English (en)
Inventor
Майкл О'ніл Генреген Кларк
Едвард Доурфлер
Ричард Л. Макман
Дастин Сиґел
Original Assignee
Ґілеад Саєнсиз, Інк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=52003049&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=UA119050(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Ґілеад Саєнсиз, Інк. filed Critical Ґілеад Саєнсиз, Інк.
Publication of UA119050C2 publication Critical patent/UA119050C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H7/00—Compounds containing non-saccharide radicals linked to saccharide radicals by a carbon-to-carbon bond
    • C07H7/06—Heterocyclic radicals

Abstract

У даному документі запропоновані композиції, способи застосування і сполуки заміщених тетрагідрофуранілпіроло[1.2-f][1.2.4]триазин-4-амінів формули (І) для лікування інфекції вірусом Pneumovirinaes, включаючи респіраторно-синцитіальні вірусні інфекції, а також способи і проміжні сполуки для синтезу сполук тетрагідрофуранілпіроло[1.2-f][1.2.4]триазин-4-аміну. EMBED ISISServer (I)

Description

Галузь винаходу
У даному винаході запропоновані заміщені сполуки тетрагідрофураніл-піроло|1.2-
ЧІИ1.2.4)гриазин-4-аміну, способи і фармацевтичні композиції для лікування інфекції вірусом
Рпешитомігіпаех, зокрема, включаючи респіраторно-синцитіальні вірусні інфекції, а також способи і проміжні сполуки, які використовуються для отримання сполуки.
Передумови винаходу
Рпештомігїіпаеє віруси являють собою віруси, які містять одноланцюжкову молекулу РНК негативної полярності, які є відповідальними за багато поширених захворювань у людини і тварин. Підродина вірусів Рпештомігіпае є частиною сімейства Рагатухомігідає і включає респіраторно-синцитіальний вірус людини (НК5М). Майже у всіх дітей перших двох років життя є інфекція НЕБУ. НАМ є основною причиною інфекції нижніх дихальних шляхів у ранньому віці й дитинстві, і у випадках від 0,595 до 2595 від загального числа інфікованих потрібна госпіталізація. Люди похилого віку й дорослі з хронічними захворюваннями серця, хворобою легень або ті, у кого ослаблений імунітет, також мають високий ризик розвитку тяжких захворювань НАКБМ (пЕр:/Лимли. сас.дом/г5м/паех.піті). У даний час не доступна жодна вакцина, яка запобігає інфекції НЕ5БМ. Для імунопрофілактики доступне моноклональне антитіло
Раїїмігитаб, але його використання в немовлят обмежене через високий ризик, наприклад, у недоношених дітей або у дітей зі вродженим пороком серця або з хворобою легень, і його вартість для широкого використання часто непомірно висока. Крім того, як єдиний противірусний засіб для лікування інфекції НЕЗМ був затверджений аналог нуклеозиду рибавірин, але він має обмежену ефективність. Таким чином, існує потреба в анти-
Рпешитомігіпає лікарських засобах.
Приклади піроло(2,3-4|Іпіримідинових сполук, використаних для лікування вірусних інфекцій, описані в Ш.5. 2012/0009147 А1 (Спо еї а1І.), 0.5. 2012/0020921 А! (Спо еї а), УМО 2008/089105
Аг (Вари єї аЇ.), УМО 2008/141079 АТ (Вари єї а), УМО 2009/132135 АТ (ВіШег еї а!.), МО 2010/002877 Аг (Егапсот), УМО 2011/035231 АТ (Спо еї аїІ.), МО 2011/035250 АТ (Вшег еї аї.),
МО 2011/150288 АТ (Спо еї а), МО 2012/012465 (Сно вї а), УМО 2012/012776 АТ (МасКтап єї а), УМО 2012/037038 (Сіатке еї а!) МО 2012/087596 А1 (ОеІапеу еї аІ.) Її УМО 2012/142075 А1 (СініамаНарнап єї аї!.).
Зо Зберігається потреба в нових ефективних і таких, які мають прийнятні профілі токсичності, противірусних засобах, які можуть використовуватися при лікуванні вірусних інфекцій
Рагатухомігідає, включаючи вірусні інфекції Рпештомігіпає, такі як інфекції НАМ.
Суть винаходу
Запропоновано сполуки, способи і фармацевтичні склади для лікування інфекцій, викликаних сімейством вірусу Рпештомігіпає, включаючи лікування інфекцій, викликаних респіраторно- синцитіальним вірусом у людини.
Запропонована сполука формули (І) або її фармацевтично прийнятна сіль: в2 Мне
Ше Ше М х " ри (в) ви в" 3-о в ! 0) яв ре де:
В1 являє собою Н або Е;
В2 являє собою Н або Е;
ЕЗ являє собою ОН або Е;
К4 являє собою СМ, С1-С4 алкіл, С2-С4 алкеніл, С2-С4 алкініл, С3-С4 циклоалкіл, азидо, галоген або С1-С2 галогеналкіл;
Е6 являє собою ОН;
Е5 вибраний із групи, яка включає Н і: в) є) о о о-ї ши но--р в-е-... 07 / Тор отв / Ге ра о но о. НО но , но но з но . в? о ші Ї М в--8-«СНо) : о і | їх 10 8 . (в) : в
Кк ЗАСН) 1 о З / о в'? де: п'вибраний із 1, 2, З і 4;
Е8 вибраний із С1-С8 алкілу, -0-С1-С8 алкілу, бензилу, -О-бензилу, -«СН2-С3-С6 циклоалкілу, -
О-СнН2г-С3-С6 циклоалкілу і СЕЗ;
КУ вибраний із фенілу, 1-нафтилу, 2-нафтилу,
Ш-х М - - | Ж Ж . ?
К10 вибраний із Н і СНЗ;
К11 вибраний із Н або С1-С6 алкілу;
КІ12 вибраний із Н, С1-С8 алкілу, бензилу, С3-С6 циклоалкілу і -«СН2-С3-С6 циклоалкілу.
Детальний опис винаходу
Один варіант здійснення даного винаходу включає сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, де К1 являє собою Н, і всі інші змінні, включаючи К2, КЗ, К4, К5, Кб, К7, К8, КУ,
К10, К11, К12 і п", мають значення, визначені вище для формули (1).
Інший варіант здійснення даного винаходу включає сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, де К2 являє собою Н, і всі інші змінні, включаючи КІ, КЗ, К4, К5, Кб, К7, К8, КУ,
К10, К11, К12 і п", мають значення, визначені вище для формули (1).
Наступний варіант здійснення даного винаходу включає сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, де обидва, К1 і К2, являють собою Н, і всі інші змінні, включаючи КЗ, К4, К5, Кб, К7, К8, КО, К10, КІ11, К12 і п", мають значення, визначені вище для формули (1).
Ще один варіант здійснення даного винаходу включає сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, де обидва, КІ, К2, і К5 являють собою Н, і всі інші змінні, включаючи КЗ, К4, Кб, К7, К8, КУ, К10, К11, К12 їі п", мають значення, визначені вище для формули (1).
Зо Інший самостійний варіант здійснення даного винаходу включає сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, де обидва, КІ і К2, являють собою Н, КЗ являє собою ОН, і всі інші змінні, включаючи К4, К5, Кб, К7, К8, КУ, К10, К11, К12 ії п, мають значення, визначені вище для формули (1).
Інший самостійний варіант здійснення даного винаходу включає сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, де обидва, КІ і К2, являють собою Н, КЗ являє собою БЕ, і всі інші змінні, включаючи К4, К5, Кб, К7, К8, КУ, К10, К11, К12 і п", мають значення, визначені вище для формули (1).
Інший варіант здійснення даного винаходу включає сполуку формули (ІЇ) або її фармацевтично прийнятну сіль:
МН»
Ша хх М
Чи (в) в» 3-о в а 4 но де:
ЕЗ являє собою ОН або Е;
К4 являє собою СМ, С1-С4 алкіл, С2-С4 алкеніл, С2-С4 алкініл, С3-С4 циклоалкіл, азидо, галоген або С1-С2 галогеналкіл;
Е5 вибраний із групи, яка включає Н і: їй о
Ї 0 о 7 пеня соня со р е шен но но-Р / - Но | Зорю
І Го щі) о І
Е но » во о . в ? . 9, Тр--рння ве 8--(СНу | ше
КН в--я в
У і : х ! о ше У- о ве вс, / КТ о-Тх / о в'є де: п'вибраний із 1, 2, З і 4;
Е8 вибраний із С1-С8 алкілу, -0-С1-С8 алкілу, бензилу, -О-бензилу, -«СН2-С3-С6 циклоалкілу, -
О-СнН2г-С3-С6 циклоалкілу і СЕЗ;
КУ являє собою феніл;
К10 вибраний із Н і СНЗ;
К11 вибраний із Н або С1-С6 алкілу;
КІ12 вибраний із Н, С1-С8 алкілу, бензилу, С3-С6 циклоалкілу і -«СН2-С3-С6 циклоалкілу.
Наступний варіант здійснення винаходу включає сполуку формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, де:
ВЗ являє собою ОН або Е;
РА являє собою СМ, метил, етил, етеніл, етиніл, азидо, РЕ, СІ, -СН2СІ, -СН2Е, -СНЕ2 або -СЕЗ; і 5 і всі інші групи є такими, як визначено для формули (І).
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (Ії) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де КЗ являє собою ЕК.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де КЗ являє собою ОН.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІЇ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де КЗ являє собою ЕК, і К4 являє собою СМ.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІЇ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де КЗ являє собою ОН, і К4 являє собою СМ.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де обидва, К1 і К2, являють собою Н, КЗ являє собою ЕК, і К4 являє собою метил, етил, вініл або етиніл.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де КЗ являє собою ОН, і К4 являє собою метил, етил, вініл або етиніл.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІЇ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де КЗ являє собою РЕ, і К4 являє собою галогенметил.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де КЗ являє собою ОН, і К4 являє собою галогенметил.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІЇ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де К5 являє собою Н.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де кожний з К5 являє собою Н, КЗ являє собою ОН, і К4 являє собою метил, етил, вініл або етиніл.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де К5 являє собою Н, КЗ являє собою ЕК, і НА являє собою галогенметил.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає сполуку формули (ІІ) або її
Зо фармацевтично прийнятну сіль, як описано вище, де К5 являють собою Н, КЗ являє собою ОН, і К4 являє собою галогенметил.
У кожному з описаних вище варіантів здійснення винаходу, який включає сполуку Формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, де К5 може бути іншим, ніж Н, є ще варіант, де всі інші змінні мають значення, визначені вище для даного варіанта здійснення, а К5 вибраний із групи, яка включає: о . о о
Ї Її 7 НИ нао-Р но--в Бе но ото но ,; о | ; но но 7,
НО во
Гек / й кт оо, 5 до 7 Н є нзо і з шк хр --МН і 5 і / де ря ц 87 -й о- шо- т . / 0 ее де:
Е8 вибраний із С1-С8 алкілу, -0-С1-С8 алкілу, бензилу і -«СН2-С3-С6 циклоалкілу; і
КІ12 вибраний із С1-С8 алкілу, бензилу, С3-С6 циклоалкілу і -«СН2-С3-С6 циклоалкілу.
У кожний з варіантів здійснення винаходу, безпосередньо описаних вище, включений ще варіант, який містить сполуку формули (ІІ) або її фармацевтично прийнятну сіль, де всі інші змінні мають такі значення, які безпосередньо описані вище, за винятком того, що К8 і КО, кожний, вибрані з С1-С8 алкілу. У кожний з варіантів здійснення винаходу, описаних в останній пропозиції, включений ще варіант, який містить сполуку формули (Ії) або її фармацевтично прийнятну сіль, де всі інші змінні мають такі значення, які безпосередньо описані вище, за винятком того, що К8 і КУ, кожний, вибрані з С1-Сб алкілу. У кожний з варіантів здійснення винаходу, описаних в останній пропозиції, включений ще варіант, який містить сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, де всі інші змінні мають такі значення, які безпосередньо описані вище, за винятком того, що К8 і КУ, кожний, вибрані з С1-С5 алкілу. У кожний з варіантів здійснення винаходу, описаних в останній пропозиції, включений ще варіант, який містить сполуку формули (ІЇ) або її фармацевтично прийнятну сіль, де всі інші змінні мають такі значення, які безпосередньо описані вище, за винятком того, що К8 і КУ, кожний, вибрані з
С1-С4 алкілу.
У кожний з варіантів здійснення винаходу, описаних у даному документі, який включає сполуку формули (І) або формули (Ії), є ще один варіант, де всі змінні Є такими, як визначено для конкретного варіанта здійснення, і який відповідає додатковій умові, що, коли КЗ являє собою ЕК,
К4 не являє собою метил.
Визначення
Терміни гало і галоген стосуються атомів галогену, вибраних із Е, СІ, ВгіїЇ. «Азидо» стосується азидної групи, тобто, групи -М3. Термін «п», як він використовується у даному документі, стосується цілого числа, такого як ціле число, вибране 31,2,3,4,5,6,7,8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ї 20, тобто, від 2 до 20, або 2-20. У деяких випадках «п» стосується груп цілих чисел, таких як від 1 до 3, від 1 до 4, від 1 до 6, від 1 до 8, від 2 до 4, від2 доб, від2 до в і т.д.
Термін «галогеналкіл», як він використовується у даному документі, стосується алкілу, як визначено у даному документі, де один або кілька атомів водню, кожний, замінені на галогеновий замісник. Наприклад, (С1-Сб)галогеналкіл являє собою (С1-Сб)алкіл, де один або кілька атомів водню замінені на галогеновий замісник. Такий діапазон містить у собі від одного
Зо галогенового замісника в алкільній групі до повного галогенування алкільної групи.
Термін (С1-п)галогеналкіл», як він використовується у даному документі, де п позначає ціле число, або окремо, або в комбінації з іншим радикалом, призначений для позначення алкільного радикала, який має від 1 до п атомів вуглецю, як зазначено вище, де один або кілька атомів водню, кожний, замінені на галогеновий замісник. Приклади (С1-п)галогеналкілу, де п позначає 2, включають, але цим не обмежуються, хлорметил, хлоретил, дихлоретил, бромметил, брометил, диброметил, фторметил, дифторметил, трифторметил, фторетил і дифторетил.
Термін «(С1-п)алкіл», як він використовується у даному документі, де п позначає ціле число, або окремо, або в комбінації з іншим радикалом, призначений для позначення ациклічних алкільних радикалів з прямим або розгалуженим ланцюгом, які містять від 1 до п атомів вуглецю. «(С1-4)алкіл» включає, але цим не обмежується, метил, етил, пропіл (н-пропіл), бутил (н-бутил), 1-метилетил (ізо-пропіл), 1-метилпропіл (втор-бутил), 2-метилпропіл (ізо-бутил) і 1,1- диметилетил (трет-бутил або т-бутил). Скорочення Ме означає метильну групу; Еї означає етильну групу, Рг означає пропільну групу, ІРг означає 1-метилетильну групу, Ви означає бутильну групу, і ІВи означає 1,1-диметилетильну групу.
Термін «алкіл» стосується вуглеводню, який містить нормальний, вторинний або третинні атоми. Наприклад, алкільна група може містити від 1 до 4 атомів вуглецю (тобто, (С1-С4)алкіл), від 1 до З атомів вуглецю (тобто, (С1-СЗ)алкіл), або 1 або 2 атоми вуглецю (тобто, (С1-
С2)алкіл). Приклади прийнятних алкільних груп включають, але цим не обмежуються, метил (Ме, -СН3З), етил (Еї, -СН2СНЗ), 1-пропіл (н-Рг, н-пропіл, -«СН2СН2СНЗ), 2-пропіл (ізо-Рг, ізо-
БО пропіл, -СН(СНЗ)2), 1-бутил (н-Ви, н-бутил, -«СН2СН2СН2гСНВЗ), 2-метил-1-пропіл (ізо-Ви, ізо- бутил, -«СН2СН(СНЗ)2), 2-бутил (втор-Ви, втор-бутил, -«СН(СНЗІСН2СНУЗ) і 2-метил-2-пропіл (трет-Ви, трет-бутил, -С(СНЗ)3) тощо. Термін «алкіл» стосується також насиченого вуглеводневого радикалу з розгалуженим або прямим ланцюгом, який містить у радикалі два моновалентних центри, утворених шляхом видалення двох атомів водню від того самого або від двох різних атомів вуглецю вихідного алкану. Типові алкільні радикали включають, але цим не обмежуються, метилен (-СН2-), 1,1-етил (-СН(СНЗ)-), 1,2-етил. (-СН2СН2-), 1,1-пропіл и (-
СнН(СН2СНЗ)-), 1,2-пропіл (-СН2СН(СНЗ)-), 1,3-пропіл (-СН2СН2СН2-), 1,4-бутил и (-
СнгсСнагснегснНеІ-) тощо. «Алкеніл» являє собою прямий або розгалужений вуглеводень, який містить нормальні, 60 вторинні або третинні атоми вуглецю, принаймні, з однією ділянкою ненасиченості, тобто,
вуглець-вуглець, 5р2 подвійним зв'язком. Як приклади, алкенільна група може містити від 2 до 4 атомів вуглецю (тобто, С2-С4 алкеніл) або від 2 до З атомів вуглецю (тобто, С2-С3 алкеніл).
Приклади прийнятних алкенільних груп включають, але цим не обмежуються, етилен або вініл (-
СН-АСНЗ) і аліл -СН2гСН-СН).
Термін «(С2-п)алкеніл», як він використовується у даному документі, де п позначає ціле число, або окремо, або в комбінації з іншим радикалом, призначений для позначення ненасиченого ациклічного радикала з прямим або розгалуженим ланцюгом, який містить від двох до п атомів вуглецю щонайменше два з який зв'язані один з одним подвійним зв'язком. Приклади таких радикалів включають, але цим не обмежуються, етеніл (вініл), 1-пропеніл, 2-пропеніл і 1- бутеніл. Якщо не зазначено інше, термін «(С2-п)алкеніл» розуміється як такий, охоплює окремі стереоізомери, коли можливо, включаючи, але цим не обмежуючи, (Е) і (7) ізомери і їх суміші.
Коли (С2-п)алкенільна група є заміщеною, зрозуміло, що вона заміщена в будь-якого свого атома вуглецю, що в іншому випадку зв'язаний з атомом водню, якщо не зазначено інше, і заміщена таким чином, щоб заміщення призводило до хімічно стабільної сполуки, як це розуміється фахівцями у даній галузі техніки. «Алкініл» являє собою прямий або розгалужений вуглеводень, який містить нормальні, вторинні або третинні атоми вуглецю, принаймні, з однією ділянкою ненасиченості, тобто, вуглець- вуглець 5р потрійним зв'язком. Наприклад, алкінільна група може містити від 2 до 4 атомів вуглецю (тобто, С2-С4 алкініл) або від 2 до З атомів вуглецю (тобто, С2-С3 алкін). Приклади прийнятних алкінільних груп включає, але цим не обмежуються, ацетиленіл (-СІ СН), пропаргіл (-СН2СПСН) тощо.
Термін «С2-п)алкініл», як він використовується у даному документі, де п позначає ціле число, або окремо, або в комбінації з іншим радикалом, призначений для позначення ненасиченого ациклічного радикала з прямим або розгалуженим ланцюгом, який містить від двох до п атомів вуглецю щонайменше два з який з'єднані один з одним потрійним зв'язком. Приклади таких радикалів, у яких п позначає 4, включають, але цим не обмежуються, етиніл, 1-пропініл, 2- пропініл і 1-бутинил. Коли (С2-п)алкінільна група є заміщеною, зрозуміло, що вона заміщена в будь-якого свого атома вуглецю, що в іншому випадку зв'язаний з атомом водню, якщо не зазначено інше, і заміщена таким чином, щоб заміщення призводило до хімічно стабільної
Зо сполуки, наприклад, як це розуміється фахівцями у даній галузі техніки.
Термін циклоалкіл стосується циклічної аліфатичної групи. Циклоалкільні групи у даному документі можуть бути забезпечені вказівками числа атомів вуглецю у своєму кільці, наприклад, «С3-С4 циклоалкіл», який відноситься до циклоалкільного кільця з З або 4 кільцевими атомами вуглецю, або «С3-С6 циклоалкіл», який позначає циклоалкільне кільце з 3, 4, 5 або 6 кільцевими атомами вуглецю, тобто, циклопропільне, циклобутильне, циклопентильне або циклогексильне кільце.
Термін «карбоцикл» або «карбоцикліл» стосується насиченого (тобто, циклоалкіл) або частинково ненасиченого (наприклад, циклоалкеніл, циклоалкадієніл і т.д.) кільця, яке містить зазначене число атомів вуглецю, наприклад, від З до 4 атомів або вуглецю від З до 6 атомів вуглецю, як моноциклічної кільцевої системи. В одному варіанті здійснення винаходу карбоцикл являє собою моноцикл, який містить 3-6 кільцевих вуглеців (тобто, (С3-Сб)карбоцикл).
Необмежувальні приклади моноциклічних карбоциклів включають циклопропільне, циклобутильне, циклопентильне, 1-циклопент-1-енільне, 1-циклопент-2-енільне, 1-циклопент-3- енільне, циклогексильне, 1-циклогекс-1-енільне, 1-циклогексо-2-енільне, 1-циклогекс-3-енільне і циклогекса-1,3-дієнільне кільця.
Кожна карбоциклільна група може бути заміщена 0, 1, 2 або 3 замісниками, незалежно вибраними з галогену, -ОН, -СМ, -МО2, -МН2, -МН(С1-С6 алкіл), -М(С1-С6 алкіл)2, С1-С6 алкіл,
С1-С6 алкокси і -СЕ3.
Фармацевтичні композиції
У даному документі запропонована також фармацевтична композиція, яка містить фармацевтично ефективну кількість сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, сольват і/або складний ефір і фармацевтично прийнятний носій і допоміжну речовину. Також запропоновані окремі фармацевтичні композиції, кожна, яка містить фармацевтично ефективну кількість сполуки формули (І) або одну з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або її фармацевтично прийнятну сіль, сольват і/або складний ефір і фармацевтично прийнятний носій і допоміжну речовину.
Сполуки за даним винаходом в процесі отримання лікарської форми поєднують зі звичайними носіями і допоміжними речовинами, які вибирають відповідно до звичайної практики. Таблетки будуть містити допоміжні речовини, мастильні речовини, наповнювачі, зв'язувальні речовини тощо. Водні композиції готують у стерильному вигляді, і, коли вони призначені для доставки іншим способом, ніж пероральне введення, зазвичай є ізотонічними.
Усі композиції необов'язково містять допоміжні речовини, такі як представлені в огляді «НапарооК ої Рпаптасешіса! Ехсіріепіє» (1986). Допоміжні речовини включають аскорбінову кислоту й інші антиоксиданти, хелатуючі агенти, такі як ЕОТА, вуглеводи, такі як декстран, гідроксіалкілцелюлоза, гідроксіалкілметилцелюлоза, стеаринову кислоту тощо. рН сполук знаходиться в діапазоні від приблизно З до приблизно 11, однак зазвичай становить від приблизно 7 до 10.
Хоча можливо, щоб активні інгредієнти вводилися окремо, може бути переважним надати їх у вигляді фармацевтичних композицій. Композиції, як для ветеринарії, так і для використання людиною, містять щонайменше один активний інгредієнт, визначений вище, разом з одним або декількома прийнятними носіями і, необов'язково, з іншими терапевтичними інгредієнтами, зокрема, з такими додатковими терапевтичними інгредієнтам, які розглядаються у даному документі. Носій(носії) повинен бути «прийнятним» у значенні сумісності з іншими інгредієнтами складу і фізіологічно нешкідливим для реципієнта.
Композиції включають композиції, прийнятні для вищевказаних шляхів введення. Композиції можуть бути представлені у вигляді стандартної лікарської форми і можуть бути отримані будь- яким зі способів, добре відомих в галузі фармації. Опис способів і сполук, головним чином, можна знайти в Кетіпдіоп'є Рпаппасешіса! Зсіепсе5 (Маск Рибіїзпіпуд Со., Еазіоп, РА). Такі способи включають стадію приведення в асоціацію активного інгредієнта з носієм, який складається з одного або декількох допоміжних інгредієнтів. Зазвичай композиції одержують шляхом однорідного і ретельного змішування активного інгредієнта з рідкими носіями або тонко здрібненими твердими носіями або ними обома, а потім, при необхідності, доданням форми продукту.
Композиції, які підходять для перорального введення, можуть бути представлені у вигляді дискретних одиниць, таких як капсули, каші або таблетки, кожна з яких містить попередньо визначену кількість активного інгредієнта; у вигляді порошку або гранули; у вигляді розчину або суспензії у водній або неводній рідині; або у вигляді рідкої емульсії масло-у-воді або рідкій емульсії вода-в-олії. Активний інгредієнт також може вводитися у вигляді болюса, лікарської
Зо кашки або пасти.
Таблетки виготовляють шляхом пресування або формування, необов'язково, з одним або декількома допоміжними інгредієнтами. Пресовані таблетки можуть бути отримані шляхом пресування у відповідному апараті активного інгредієнта у вільній рідкій формі, такій як порошок або гранули, необов'язково, змішаного зі зв'язувальним, лубрикантом, інертним розріджувачем, консервантом, поверхнево активним або диспергувальним агентом. Формовані таблетки можуть бути виготовлені шляхом формування у відповідному апараті суміші порошкоподібного активного інгредієнта, змоченого інертним рідким розріджувачем. Таблетки, необов'язково, можуть бути покриті або на них можуть бути нанесені карби і, необов'язково, розроблені таким чином, щоб забезпечити повільне або контрольоване вивільнення з них активного інгредієнта.
У випадку інфекцій ока або інших зовнішніх тканин, наприклад, рота і шкіри, композиції, переважно, наносять у вигляді зовнішніх мазі або крему, які містять активний) інгредієнт(и) у кількості, наприклад, від 0,075 до 20 95 мас/мас (включаючи активнийі|ії) інгредієнт(и) в інтервалі між 0,1 95 і 20 95 зі збільшенням на 0,1 95 мас/мас, наприклад, 0,6 95 мас/мас, 0,7 95 мас/мас і т.д.), переважно, від 0,2 до 15 95 мас/мас, і, найбільш переважно, від 0,5 до 10 95 мас/мас. При виготовленні у вигляді мазі активні інгредієнти можуть бути використані або з парафіновою, або з мазевою основою, яка змішується з водою. Альтернативно, активні інгредієнти можуть бути в складі крему з кремовою основою типу масло-у-воді.
Якщо бажано, водна фаза кремової основи може включати, наприклад щонайменше 30 95 мас/мас багатоатомного спирту, тобто, спирту, який містить дві або більше гідроксильних груп, такого як пропіленгліколь, бутан-1,3-діол, маніт, сорбіт, гліцерин і поліетиленгліколь (включаючи
РЕС 400) і їх суміші. Місцеві склади можуть, якщо бажано, включати сполуку, яка підсилює абсорбцію або проникнення активного інгредієнта через шкіру або інші вражені ділянки.
Приклади таких підсилювачів дермального проникнення включають диметилсульфоксид і споріднені аналоги.
Масляна фаза емульсій може бути складена з відомих інгредієнтів відомим способом. Хоча фаза може містити тільки емульгатор (інакше відомий як емульгент), бажано, щоб вона містила суміш щонайменше одного емульгатора з жиром або маслом, або їх обох, і з жиром, і з маслом.
Переважно, щоб гідрофільний емульгатор був включений разом з ліпофільним емульгатором, який діє як стабілізатор. Також переважно включати як масло, так і жир. Разом емульгатори) зі 60 стабілізатором(ами) або без нього(них) утворюють так званий емульгуючий віск, а віск разом з маслом і жиром утворює так звану емульгуючу мазеву основу, яка утворить масляну дисперсну фазу кремових складів.
Емульгатори і стабілізатори емульсії, прийнятні для використання в складі, включають Тмуеепф 60, БрапФ 80, цетостеариловий спирт, бензиловий спирт, міристиловий спирт, гліцерилмоностеарат і лаурилсульфат натрію.
Вибір прийнятних масел або жирів для складу базується на меті досягнення бажаних косметичних властивостей. Крем, переважно, повинен бути нежирним, таким, який не залишає плям, і продуктом, який змивається, із прийнятною консистенцією, щоб уникнути витікання з тюбиків або інших контейнерів. Можуть бути використані моно- або двоосновні алкілові складні ефіри з прямим або розгалуженим ланцюгом, такі як ді-ізоадипат, ізоцетил стеарат, діефір жирних кислот кокосової олії ії пропіленгліколю, ізопропілміристат, децилолеат, ізопропілпальмітат, бутилстеарат, 2-етилгексил пальмітат або суміш складних ефірів з розгалуженим ланцюгом, відомі як Сгодатої САР, три останні є переважними складними ефірами. Вони можуть використовуватися окремо або в комбінації, залежно від необхідних властивостей. Як альтернатива використовуються ліпіди з високою температурою плавлення, такі як білий м'який парафін і/або рідкий парафін або інші мінеральні масла.
Фармацевтичні композиції за даним винаходом містять комбінацію з одним або декільком фармацевтично прийнятними носіями або допоміжними речовинами і, необов'язково, іншими терапевтичними агентами. Фармацевтичні композиції, які містять активний інгредієнт, можуть бути у вигляді якої-небудь форми, яка підходить для призначеного способу введення. При використанні для перорального застосування можуть бути виготовлені, наприклад, таблетки, пастилки, коржики, водні або масляні суспензії, дисперсні порошки або гранули, емульсії, тверді або м'які капсули, розчини, сиропи або еліксири. Композиції, призначені для перорального застосування, можуть бути отримані відповідно до будь-якого способу, відомого у даній галузі для виробництва фармацевтичних композицій, і такі композиції можуть містити один або декілька агентів, у тому числі підсолоджувачі, ароматизатори, барвники і консерванти, для того, щоб розробити препарат із привабливим запахом і смаком. Прийнятними є таблетки, які містять активний інгредієнт у суміші з нетоксичним фармацевтично прийнятним наповнювачем, які підходять для виготовлення таблеток. Цими наповнювачами можуть бути, наприклад, інертні
Зо розріджувачі, такі як карбонат кальцію або натрію, лактоза, фосфат кальцію або натрію; гранулюючі та розпушуючі агенти, такі як кукурудзяний крохмаль або альгінова кислота; зв'язувальні агенти, такі як крохмаль, желатин або аравійська камедь; і агенти, які змазують, такі як стеарат магнію, стеаринова кислота або тальк. Таблетки можуть бути непокритими, або вони можуть бути покриті відомими способами, включаючи мікроінкапсуляцію для затримки дезінтеграці й адсорбції в шлунково-кишковому тракті, і тим самим забезпечуючи пролонговану дію протягом більш тривалого періоду. Наприклад, може бути використаний такий матеріал для утримання, як гліцерилмоностеарат або гліцерилдистеарат, сам по собі або разом з воском.
Композиції для перорального застосування можуть бути також представлені у вигляді твердих желатинових капсул, де активний інгредієнт змішаний з інертним твердим розріджувачем, наприклад, фосфатом кальцію або каоліном, або у вигляді м'яких желатинових капсул, у яких активний інгредієнт змішаний з водою або масляним середовищем, такий як арахісова олія, рідкий парафін або оливкова олія.
Водні суспензії містять активні речовини в суміші з наповнювачами, прийнятними для виготовлення водних суспензій. Такі наповнювачі включають суспендуючий агент, такий як натрій карбоксиметилцелюлоза, метилцелюлоза, гідроксипропілметилцелюлоза, альгінат натрію, полівінілпіролідон, трагакантова камедь і смола аравійської камеді, і диспергувальні або змочувальні агенти, такі як природні фосфатиди (наприклад, лецитин), продукт конденсації алкіленоксиду з жирною кислотою (наприклад, поліоксіетиленстеарат), продукт конденсації етиленоксиду З аліфатичним спиртом З довгим ланцюгом (наприклад, гептадекаєтиленоксицетанол), продукт конденсації етиленоксиду з частковим складним ефіром, похідним жирної кислоти й ангідриду гекситу (наприклад, поліоксіетиленсорбітанмоноолеат).
Водна суспензія може також містити один або кілька консервантів, такі як етил- або н-пропіл-п- гідрокси-бензоат, один або декілька барвників, один або декілька ароматизаторів і один або кілька підсолоджувальних агентів, таких як сахароза або сахарин.
Масляні суспензії можуть бути виготовлені за допомогою суспендування активного інгредієнта в рослинній олії, такій як арахісова олія, оливкова олія, кунжутна олія або кокосова олія, або в мінеральній олії, такій як рідкий парафін. Масляні суспензії можуть містити загущувач, такий як бджолиний віск, твердий парафін або цетиловий спирт. Для надання смаку в пероральний препарат можуть бути додані підсолоджувальні агенти, такі як згадані вище, і ароматичні речовини. Ці композиції можуть бути стабілізовані шляхом додавання антиоксиданту, такого як аскорбінова кислота.
Дисперговані порошки і гранули, прийнятні для отримання водної суспензії шляхом додавання води, дають активний інгредієнт у суміші з диспергувальним або зволожуючим агентом, суспендуючим агентом і одним або декількома консервантами. Прийнятні диспергувальні або змочувальні агенти і суспендуючі агенти представлені тими, які описані вище. Також можуть бути присутніми додаткові наповнювачі, наприклад, підсолоджувачі, ароматичні речовини і барвники.
Фармацевтичні композиції можуть бути також у формі емульсій масло-у-воді. Масляна фаза може являти собою рослинну олію, таку як оливкова олія або арахісова олія, мінеральна олія, така як рідкий парафін, або їх суміші. Прийнятні емульгатори включають природні камеді, такі як аравійська камедь і трагакантова камедь, природні фосфатиди, такі як соєвий лецитин, складні ефіри або неповні складні ефіри, отримані з жирних кислот і ангідридів гекситу, такі як моноолеат сорбіту, і продукти конденсації цих часткових складних ефірів з етиленоксидом, такі як моноолеат поліоксіетиленсорбітану. Емульсія може також містити підсолоджувачі і смакові добавки. Сиропи й еліксири можуть бути приготовані з використанням підсолоджувачів, таких як гліцерин, сорбіт або сахароза. Такі препарати можуть також містити заспокійливий засіб, консервант, ароматизатор або барвник.
Фармацевтичні композиції можуть бути у вигляді стерильних ін'єкційних або внутрішньовенних препаратів, таких як стерильна ін'єкційна водна або масляна суспензія. Ця суспензія може бути приготована відповідно до відомого рівня техніки з використанням прийнятних диспергувальних або змочувальних агентів і суспендуючих агентів, які згадувалися вище. Стерильний ін'єкційний або внутрішньовенний препарат може також бути стерильним ін'єкційним розчином або суспензією в нетоксичному парентерально прийнятному розріджувачі або такому розчиннику, як розчин у 1,3-бутан-диолі, або виготовлений у вигляді ліофілізованого порошку. Серед прийнятних носіїв і розчинників, які можуть бути використані, можна вказати воду, розчин
Рінгера й ізотонічний розчин хлориду натрію. Крім того, як розчинник або суспендуюче середовище зазвичай можуть бути використані стерильні нелеткі масла. З цією метою може бути використане будь-яке нелетке масло, у тому числі синтетичні моно- або дигліцериди. Крім
Зо того, при приготуванні ін'єктованих препаратів також можуть бути використані жирні кислоти, такі як олеїнова кислота.
Кількість активного інгредієнта, яка може бути об'єднана з матеріалом носія для виготовлення стандартної лікарської форми, буде змінюватися залежно від проведеного лікування і конкретного шляху введення. Наприклад, склад з уповільненим вивільненням, призначений для перорального введення людям, може містити приблизно від 1 до 1000 мг активної речовини, змішаної з відповідною і зручною кількістю матеріалу-носіяї, яка може змінюватися від приблизно 5 до приблизно 95 95 від загальної кількості композиції (маса:маса). Фармацевтична композиція може бути отримана таким чином, щоб забезпечити легко вимірювані кількості для введення. Наприклад, водний розчин, призначений для внутрішньовенної інфузії, може містити приблизно від З до 500 мкг активного інгредієнта на мілілітр розчину для того, щоб можна було здійснювати вливання прийнятного об'єму зі швидкістю близько 30 мл/год.
Композиції, які підходять для місцевого застосування для очей, включають також очні краплі, де активний інгредієнт розчинений або суспендований у прийнятному носії, особливо у водному розчиннику для активного інгредієнта. Активний інгредієнт, переважно, присутній у таких складах у концентрації від 0,5 до 20 95, переважно, від 0,5 до 10 95, і, зокрема, приблизно 1,5 95 мас/мас.
Композиції, які підходять для місцевого застосування в порожнину рота, включають коржа, які містять активний інгредієнт на ароматизованій основі, зазвичай сахарозі й аравійській камеді або трагаканту; пастилки, які містять активний інгредієнт на інертній основі, такий як желатин і гліцерин, або сахароза і гуміарабік; і рідини для полоскання рота, які містять активний інгредієнт у відповідному рідкому носії.
Композиції для ректального введення можуть бути представлені у вигляді супозиторіїв на прийнятній основі, яка містить, наприклад, масло какао або саліцилат.
Композиції, які підходять для внутрішньолегеневого або назального введення, мають розмір частинок, наприклад, у діапазоні від 0,1 до 500 мкм, наприклад, 0,5, 1, ЗО, З5 і т.д., які вводяться шляхом швидкого вдиху через носовий прохід або шляхом інгаляції через рот таким чином, щоб досягати альвеолярних мішечків. Прийнятні композиції включають водні або масляні розчини активного інгредієнта. Лікарські форми, прийнятні для введення аерозолем або сухим порошком, можуть бути отримані відповідно до звичайних способів і можуть бути доставлені разом з іншими терапевтичними агентами, такими як сполуки, використані раніше для лікування або профілактики інфекцій Рпештомігіпає, як описано нижче.
Інші варіанти здійснення винаходу стосуються нової, ефективної, безпечної, неподразнювальної і фізіологічно сумісної інгаляційної композиції, яка містить сполуку формули (І) або формули (ІЇ) або їх фармацевтично прийнятну сіль, прийнятні для лікування інфекцій Рпешитомігіпає, і можливо пов'язаного з ними бронхіоліту. Переважними фармацевтично прийнятними солями є солі неорганічних кислот, включаючи гідрохлоридну, гідробромідну, сульфатну або фосфатну солі, оскільки вони можуть викликати менше легеневе подразнення. Переважно, інгаляційний препарат надходить у ендобронхіальний простір у вигляді аерозолю, який містить частинки з мас-медіанним аеродинамічним діаметром (ММАД) в інтервалі від приблизно 1 до приблизно 5 мкм. Переважно, сполуку формули (І) або формули (ІЇ) вводять до складу для доставки за допомогою аерозолю з використанням небулайзера, компресорного дозуючого інгалятора (рМОЇ) або інгалятора сухого порошку (ІСП).
Необмежувальні приклади небулайзерів включають розпилювальні, струминні, ультразвукові, компресорні, з вібруючою пористою пластиною або еквівалентні небулайзери, включаючи такі небулайзери, у яких використовується адаптивний пристрій доставки аерозолю (Оепуег, 5.
Аего5зо! теєдісіпе Риїтопагу Огид Оевїїмегу 2010, 23 Биуирр 1, 51-510). У струминному небулайзері використовується тиск повітря, щоб розбити рідкий розчин на крапельки аерозолю.
Ультразвуковий небулайзер працює за допомогою п'єзоелектричного кристала, який дробить рідину на дрібні крапельки аерозолю. У компресорній системі небулайзера розчин під тиском проходить через дрібні пори для утворення крапель аерозолю. У пристрої з вібруючою пористою пластиною використовується швидка вібрація для дроблення потоку рідини до відповідних розмірів крапель.
У переважному варіанті здійснення винаходу композиція для інгаляції доставляється в ендобронхіальний простір у вигляді аерозолю, який містить частинки з ММАД, переважно, розміром в інтервалі між приблизно 1 мкм і приблизно 5 мкм із використанням небулайзера, здатного перетворювати склад зі сполукою формули (І) або формули (Ії) в аерозоль з частинками необхідного ММАД. Для того, щоб бути оптимально терапевтично ефективними й уникати верхніх дихальних шляхів і системних побічних ефектів, більшість з аерозольних
Зо частинок не повинна мати ММАД більше, ніж приблизно 5 мкм. Якщо аерозоль містить велику кількість частинок із ММАД розміром більш 5 мкм, частинки осідають у верхніх дихальних шляхах, що зменшує кількість лікарського засобу, який доставляється до місця запалення і бронхоспазму в нижніх відділах дихальних шляхів. Якщо ММАД аерозолю менше, ніж приблизно 1 мкм, то частинки мають тенденцію залишатися в завислому стані у вдихуваному повітрі і згодом видихаються в процесі видиху.
При виготовленні і доставці лікарської форми відповідно до способу, описаного у даному винаході, аерозольну композицію для інгаляції забезпечує терапевтично ефективну дозу сполуки формули (І) або формули (ІЇЖ до ділянки інфекції Рпештомігіпае, достатню для лікування інфекції Рпештомігіпаеє. Кількість лікарського засобу, яка вводиться, повинна бути скоректована з урахуванням ефективності доставки терапевтично ефективної дози сполуки формули (І) або формули (Ії). У переважному варіанті здійснення винаходу комбінація водної аерозольної композиції з розпилювальним, струминним, компресорні, з вібруючою пористою пластиною або ультразвуковим небулайзером дозволяє забезпечити доставку в дихальні шляхи, залежно від небулайзера, приблизно щонайменше 20, до приблизно 90 95, як правило, близько 7095 дози сполуки, яка вводиться, формули (І) або формули (Ії). У переважному варіанті здійснення щонайменше доставляється приблизно від 30 до приблизно 50 95 активної сполуки. Більш переважно, доставляється від близько 70 до близько 90 95 активної сполуки.
В іншому варіанті здійснення винаходу сполука формули (І) або формули (Ії) або їх фармацевтично прийнятна сіль доставляються у вигляді сухого порошку для інгаляції. Сполуки вводять ендобронхіально у вигляді препарату сухого порошку для успішної доставки дрібних частинок сполуки в ендобронхіальний простір з використанням сухого порошку або дозуючого інгалятора. Для доставки за допомогою ІСП сполуку формули (І) або формули (Ії) переробляють у частинки, переважно, із ММАД в інтервалі між приблизно 1 мкм і приблизно 5 мкм шляхом розмелу розпилювальною сушкою, обробкою в критичній рідині або осадженням з розчину.
Пристрої і способи розмелу в середовищі, за допомогою струминного млина і сушки розпиленням, які можуть дозволити досягти розмірів частинок із ММАД від приблизно 1 мкм до приблизно 5 мкм, добре відомі у даній галузі техніки. В одному варіанті здійснення винаходу перед обробкою до частинок необхідних розмірів до сполуки формули (І) або формули (ІІ) додають допоміжні речовини. В іншому варіанті здійснення винаходу допоміжні речовини змішують з частинками необхідного розміру для сприяння диспергування частинок лікарського засобу, наприклад, використовуючи як допоміжну речовину лактозу.
Визначення розміру частинок здійснюють з використанням пристроїв, добре відомих у даній галузі техніки. Наприклад, багатоступінчастий каскадний сепаратор Андерсона або інший прийнятний спосіб, які конкретно зазначені у Фармакопеї США, глава 601, як характерні пристрої для аерозолів у дозованих інгаляторах й інгаляторах сухого порошку.
В іншому переважному варіанті здійснення винаходу сполука формули (І) або формули (ІІ) доставляється у вигляді сухого порошку з використанням такого пристрою, як інгалятор сухого порошку або інші пристрої для розсіювання сухого порошку. Необмежувальні приклади інгаляторів сухого порошку і пристроїв включає такі, котрі описані в О5 5458135; 005 5740794; 55775520; 005 5785049; 05 3906950; 005 4013075; 5 4069819; 005 4995385; 05 5522385; 05 4668218; 005 4667668; 5 4805811 ї 5 5388572. Існують дві основні конструкції інгаляторів сухого порошку. Одна конструкція являє собою дозуючий пристрій, у якому резервуар для лікарського засобу поміщений всередину пристрою, і пацієнт додає дозу лікарського засобу в інгаляційну камеру. Друга конструкція являє собою заводський дозований пристрій, у якому кожна індивідуальна доза поміщена в окремий контейнер. Обидві системи залежать від складу препарату з дрібних частинок із ММАД від 1 мкм ії 5 мкм і часто включають приготування ліків разом з більш великими частинками допоміжних речовин, таких як, але не обмежуючи ними, лактоза. Порошок лікарського засобу поміщають в інгаляційну камеру (або дозуючим пристроєм, або відділенням відміряної заводської дози), і вдих пацієнта прискорює вихід порошку з пристрою в ротову порожнину. Характеристики неламінарного потоку шляху порошку викликають руйнування агрегатів допоміжної речовин-лікарського засобу, і маса великих частинок допоміжних речовин призводить до їх утримування на задній частині глотки, у той час як більш дрібні частинки лікарського засобу осідають глибоко в легенях. У переважних варіантах здійснення винаходу сполука формули (І) або формули (І), або їх фармацевтично прийнятна сіль доставляються у вигляді сухого порошку з використанням інгалятора сухого порошку будь-якого типу, як описано у даному документі, коли ММАД сухого порошку, крім яких- небудь допоміжних речовин, становить, переважно, у межах від 1 мкм до близько 5 мкм.
В іншому варіанті здійснення винаходу сполука формули (І) або формули (ІЇ) доставляється у
Зо вигляді сухого порошку з використанням дозуючого інгалятора. Необмежувальні приклади дозуючих інгаляторів і пристроїв включають такі, котрі описані в 05 5261538; 005 5544647; 05 5622163; 5 4955371; 05 3565070; 5 3361306 і О 56116234. У переважних варіантах здійснення винаходу сполука формули (І) або формули (ІІ) або їх фармацевтично прийнятна сіль доставляються у вигляді сухого порошку з використанням дозуючого інгалятора, коли
ММАД сухого порошку, крім яких-небудь допоміжних речовин, становить, переважно, у межах приблизно 1-5 мкм.
Композиції, які підходять для вагінального введення, можуть бути представлені у вигляді вагінальних супозиторіїв, тампонів, кремів, гелів, паст, пін або спреїв, які містять в додаток до активного інгредієнта такі носії, які відомі в даній галузі як прийнятні для цих цілей.
Композиції, які підходять для парентерального введення, включають водні і неводні стерильні ін'єкційні розчини, які можуть містити антиоксиданти, буфери, бактеріостатичні агенти і розчинені речовини, які роблять препарат ізотонічним відносно крові передбачуваного реципієнта; і водні, ії неводні стерильні суспензії, які можуть включати суспендуючі агенти і згущувачі.
Композиції представлені в разових або в багатодозових контейнерах, наприклад, у запаяних ампулах і флаконах, і можуть зберігатися у висушеному заморожуванням (ліофілізованому) стані, який вимагає тільки додавання стерильного рідкого носія, наприклад, води для ін'єкцій, безпосередньо перед використанням. Імпровізовані розчини і суспензії для ін'єкцій одержують зі стерильних порошків, гранул і таблеток раніше описаного типу. Переважними є такі стандартні дозовані склади, які містять денну дозу або одиничну частину денної дози, як описано вище, або відповідну її частину, активного інгредієнта.
Варто враховувати, що крім інгредієнтів, зокрема, згаданих вище, композиції можуть включати інші агенти, зазвичай використані у даній галузі з урахуванням виду розглянутого складу, наприклад, склади, прийнятні для перорального введення, можуть включати смакові агенти.
Крім того, запропоновані ветеринарні композиції, які містять щонайменше один активний інгредієнт, як визначено вище, разом з ветеринарно прийнятним носієм.
Ветеринарно прийнятними носіями є речовини, використані для введення композиції, і вони можуть бути твердими, рідкими або газоподібними матеріалами, які, з іншого боку, є інертним або прийнятної у ветеринарії і сумісні з активним інгредієнтом. Ці ветеринарні композиції 60 можуть бути введені перорально, парентерально або будь-яким іншим бажаним шляхом.
Сполуки, згадані у даному документі, використовуються для забезпечення контрольованого вивільнення лікарського засобу, який містить як активний інгредієнт одну або кілька сполук («склади з контрольованим вивільненням»), у яких вивільнення активного інгредієнта є контрольованим і регульованим, що дозволяє зменшити частоту прийому або поліпшити фармакокінетику або профіль токсичності даного активного інгредієнта.
Ефективна доза активного інгредієнта залежить, принаймні, від природи захворювання, яке підлягає лікуванню, токсичності, від того, чи використовується дана сполука для профілактики (більш низькі дози), чи проти активної вірусної інфекції, способу доставки, а також фармацевтичного складу, і буде визначатися лікарем, який лікує, з використанням звичайних досліджень з ескалацією дози. Можна очікувати, що вона буде складати від приблизно 0,0001 до приблизно 100 мг/кг маси тіла на добу; як правило, від приблизно 0,01 до приблизно 10 мг/кг маси тіла на добу; більш типово, від близько 0,01 до близько 5 мг/кг маси тіла на добу; найбільше типово, від приблизно 0,05 до приблизно 0,5 мг/кг маси тіла на добу. Наприклад, передбачувана добова доза для дорослої людини з масою тіла близько 70 кг знаходиться в межах від 1ї до 1000 мг, переважно від 5 до 500 мг, і може бути у вигляді одиничної або декількох доз.
Шляхи введення
Одна або кілька сполук (названих тут як активні інгредієнти) вводяться будь-яким шляхом, який відповідає стану, який підлягає лікуванню. Прийнятні способи включають пероральний, ректальний, назальний, легеневий, місцевий (у тому числі трансбукальний і під'язичний), вагінальний і парентеральний (включаючи підшкірний, внутрішньом'язовий, внутрішньовенний, внутрішньошкірний, інтратекальний та епідуральний) тощо. Варто взяти до уваги, що переважний шлях може змінюватися залежно, наприклад, від стану реципієнта. Перевагою розглянутих у даному документі сполук є те, що вони є перорально біологічно доступними і можуть бути введені перорально.
Комбінаційна терапія
Композиції використовуються також у комбінації з іншими активними інгредієнтами. Для лікування інфекцій вірусом Рпештомігіпае5, переважно, інший активний терапевтичний агент активний проти інфекції вірусу Рпешйтомігіпае5, зокрема, респіраторно-синцитіальної вірусної
Зо інфекції. Необмежувальними прикладами таких інших активних терапевтичних агентів є рибавірин, палівізумаб, мотавізумаб, КЗМУ-ІСІМ (КезрНібатФ), МЕОБІ-557, А-60444 (відомий також як Е5М604), МОТ-637, ВМ5-433771, АЇ М-НБМО, А Х-0171 і їх суміші.
Багато інфекцій вірусами Рпештомігіпаеє є респіраторними інфекціями. Таким чином, додаткові активні терапевтичні засоби, використані для лікування респіраторних симптомів і ускладнень від інфекції, можуть бути використані в комбінації зі сполуками формули (І) або формули (І).
Додаткові агенти переважно вводять перорально або шляхом прямої інгаляції. Наприклад, інші переважні додаткові терапевтичні агенти в комбінації зі сполуками формули (І) або формули (І) для лікування вірусних інфекцій дихальних шляхів включають, але не обмежуються тільки ними, бронхолітики і кортикостероїди.
Глюкокортикоїди, які вперше були використані як терапевтичні засоби при астмі в 1950 (Саггуег,
Уоитаї! ої АйПШегау, 21, 282-287, 1950), як і раніше залишаються найсильнішою і стабільно ефективною терапією цього захворювання, хоча механізм їх дії ще до кінця не вивчений (Моїтів,
У. АїМегду Сіїп. ІттипоїЇ., 75 (1 РЮ 1-13, 1985). На жаль, пероральні глюкокортикоїдні терапевтичні засоби асоціюються зі значними небажаними побічними ефектами, такими як ожиріння тіла, гіпертонія, глаукома, порушення толерантності до глюкози, прискорення утворення катаракти, втрата кісткової тканини, а також психологічні ефекти, усі вони обмежують їх використання як довгострокових терапевтичних агентів (зооатап і Сітап, 102 еййіоп, 2001).
Рішенням для системних побічних ефектів є доставка стероїдних препаратів безпосередньо до місця запалення. Інгаляційні кортикостероїди (ІКС) були розроблені, щоб пом'якшити важкі побічні ефекти пероральних стероїдів. Необмежувальними прикладами кортикостероїдів, які можуть бути використані в комбінації зі сполуками формули (І) або формули (І), є дексаметазон, дексаметазону натрію фосфат, фторметолон, фторметолон ацетат, лотепреднол, лотепреднол етабонат, гідрокортізон, преднізолон, флудрокортізони, триамцинолон, триамцинолону ацетонід, бетаметазон, беклометазону дипропіонат, метилпреднізолон, флуоцинолон, флуоцинолону ацетонід, флунізолід, флюокортин-21-бутилат, флуметазон, флуметазон півалат, будесонід, галобетазолу пропіонат, мометазону фуроат, флутиказону пропіонат, циклесонід; або їх фармацевтично прийнятні солі.
Інші протизапальні агенти, які працюють за допомогою протизапальних каскадних механізмів, також можуть бути використані як додаткові терапевтичні агенти у комбінації зі сполуками бо формули (І) або формули (ІІ) для лікування вірусних інфекцій дихальних шляхів. Застосування
«протизапальних модуляторів передачі сигналу» (далі вказані в тексті як АІЗТМ), таких як інгібітори фосфодіестерази (наприклад, РОЕ-4, РОБЕ-5 або РОЕ-7 специфічні), інгібітори фактора транскрипції (наприклад, які блокують МЕкВ за допомогою інгібування ІКК) або інгібітори кіназ (наприклад, які блокують РЗ3В МАР, МК, РІЗК, ЕСЕК або 5УК), є логічним підходом до зняття запалення, оскільки ці малі молекули націлені на обмежене число загальних внутрішньоклітинних шляхів - тих шляхів сигнальної трансдукції, які є критичними точками для протизапального терапевтичного втручання (див. огляд Р..). Вагпе5, 2006). Ці необмежувальні додаткові терапевтичні агенти включають: 5-(2,4-дифторфенокси)-1-ізобутил-1Н-індазол-б- карбонову кислоту (2-диметиламіноетил)-амід (РЗ8 інгібітор кінази Аіту-797); З- циклопропілметокси-М-(3,5-дихлор-піридин-4-іл)/-А4-дифторметокси-бензамід (РОЕ-4 інгібітор
ВоПитіїаз);. 4-(2-(3-цдциклопентилокси-4-метоксифеніл)-2-феніл-етил|-амід (РОЕ-4 інгібітор СОР- 840); М-(3,5-дихлор-4-піридиніл)-4-(дифторметокси)-8-(метилсульфоніл)аміно|-1- дибензофуранкарбоксамід (РОЕ-4 інгібітор Одіетйав5); М-(3,5-дихлор-піридин-4-іл)-2-(1-(4- фторбензил)-5-гідроксі-1 Н-індол-З-іл|--е-оксо-ацетамід (РОЕ-4 інгібітор АМУО 12-281); (3,5- дихлор-1-окси-піридин-4-ілламід 8-метокси-2-трифторметил-хінолін-о-карбонової кислоти (РОЕ- 4 інгібітор Зсп 351591); 4-(5-(4-фторфеніл)-2-(4-метансульфініл-феніл)-1Н-імідазол-4-іл|-піридин (РЗ8 інгібітор 5В-203850);. 4-І(І4-(4-фтор-феніл)-1-(3-феніл-пропіл)-5-піридин-4-іл-1Н-імідазол-2- іл|бут-З-ін-ії-ол (РЗ8В інгібітор ЕМУО-67657); 2-діеєтиламіно-етиловий ефір 4-ціано-4-(3- циклопентилокси-4-метокси-феніл)циклогексанкарбонової кислоти (2-діетил-етиловий ефірні проліки циломіласт, РОЕ-4 інгібітор); (З-хлор-4-фторфеніл)-Г7-метокси-6-(З-морфолин-4-іл- пропокси)хіназолін-4-іл|амін (Сеййіпіб, інгібітор ЕСЕК); а також 4-(4-метил-піперазин-1-ілметил)-
М-(4-метил-3-(4-піридин-3-іл-піримідин -2-іламіно)-феніл|-бензамід (іматиніб, інгібітор ЕСЕК).
Комбінації, які містять інгальовані бронходилататори агоністи (2-адренорецепторів, такі як формотерол, сальметерол або сальбутамол, зі сполуками формули (І) або формули (ІЇ) також є прийнятними, але не обмежуючими, комбінаціями, які можуть використовуватися для лікування респіраторних вірусних інфекцій.
Комбінації інгальованих бронходилататорів агоністів (2-адренорецепторів, таких як формотерол або сальметерол, з ІКС також використовуються для лікування як бронхоспазма, так і запалення (Зутрісогію і Адмаїге), відповідно). Комбінації, які містять ці ІКС і комбінації агоністів
Зо (2-адренорецепторів разом зі сполуками формули (І) або формули (Ії), також є прийнятними, але не обмежуючими обсяг даного винаходу, комбінаціями, які можуть використовуватися для лікування респіраторних вірусних інфекцій.
Для або лікування або профілактики легеневого бронхостенозу можливе застосування мають антихолінергічні засоби і, отже, вони можуть бути використані як додаткові терапевтичні агенти у комбінації зі сполуками формули (І) або формули (І) для лікування вірусних інфекцій дихальних шляхів. Ці антихолінергічні засоби включають, але цим не обмежуються, антагоністи мускаринових рецепторів (зокрема, підтипу М3), які показали терапевтичну ефективність на людині для придушення холінергічного тонусу при ХОЗЛ (Мпек, 1999); 1-(4-гідрокси-1-|3,3,3- трис-(4-фтор-феніл)-пропіоніл|-піролідин-2-карбоніл)-піролідин-2-карбонова кислота (1-метил- піперидин-4-ілметил)-амід; 3-І3-(2-діетиламіно-ацетокси)-2-феніл-пропіонилокси|-8-ізопропіл-8- метил-8-азоніа-біцикло|3,2,|октан (іпратропіум-М, М-діетилгліцинат); 1-аза-біцикло(|2,2,2|окт-3- іловий ефір 1-циклогексил-3,4-дигідро-1 Н-ізохінолін-2-карбонової кислоти (5оїїепасіп); 1-аза- біцикло|2,2,2|окт-З-іловий ефір 2-гідроксиметил-4-метансульфініл-2-феніл-бутанової кислоти (реватропат); 2-11-(2-(2,3-дигідро-бензофуран-5-іл)-етилі|-д-3-іл)-2,2-дифеніл-ацетамід (дарифенацин); 4-азепан-1-іл-2,2-дифеніл-бутирамід (бузепід); 7-І3-(2-діетиламіно-ацетокси)-2- феніл-пропіонілокси|-9-етил-9-метил-3-окса-9-азоніа-трициклої|3,3,1,02,4|нонан (окситропий-М,
М-діетилгліцинат); 1-(2-(2-діетиламіно-ацетокси)-2,2-ди-тіофен-2-іл-ацетокси|-9,9-диметил-3- окса-9-азоніа-трицикло|3,3,1,02,4|нонан (тіотропій-М, М-діетилгліцинат); 2-(З-диїзопропіламіно-1- феніл-пропіл)-4--метил-феніловий ефір диметиламіно-оцтової кислоти (толтеродин-М, М- диметилгліцинат); 3-(4,4-біс-(4-фтор-феніл)-2-оксо-імідазолідин-1-іл|-1-метил-1-(2-оксо-2- піридин-2-іл-етил)-піролідиний; 1-1-(3-фтор-бензил)-піперидин-4-іл|-4,4-біс-(4-фтор-феніл)- імідазолідин-2-он; / 1-циклооктил-3-(3-метокси-1-аза-біцикло|2,2,2|окт-3-іл)-1-феніл-проп-2-ін-1- ол; 3-(2-(2-діетиламіно-ацетокси)-2,2-ди-тіофен-2-іл-ацетокси|-1-(З-фенокси-пропіл)-1-азоніа- біцикло/2,2,2|октан (аклідиній-М, М-діетилгліцинат); або 1-метил-1-(2-фенокси-етил)-піперидин- 4-іловий ефір (2-діетиламіно-ацетокси)-ди-тіофен-2-іл-оцтової кислоти.
Сполуки формули (І) або формули (І) також можуть бути об'єднані з муколітиками для лікування як інфекції, так і симптомів респіраторної інфекції. Необмежувальним прикладом муколітичного агента є амброксол. Подібним чином, сполуки формули (І) або формули (ІІ) можуть бути об'єднані з відхаркувальними засобами для лікування як інфекції, так і симптомів бо респіраторної інфекції. Необмежувальним прикладом відхаркувального засобу є гвайфенезин.
Гіпертонічний сольовий розчин для небулайзерної терапії використовується з метою найпереважного використання відразу і надовго просвіту дрібних дихальних шляхів у пацієнтів із захворюваннями легень (Ки?іК, 9. Реаіаїгіс5 2007, 266). Сполуки формули (І) або формули (ІІ) також можуть бути об'єднані з розпиленим гіпертонічним розчином, особливо, коли інфекція вірусом Рпештомігіпае ускладнена бронхіолітом. Сполучення сполук формули (І) або формули (І) з гіпертонічним розчином також може включати кожен з додаткових засобів, які обговорювалися вище. В одному варіанті здійснення використовується розпилення близько З 95 гіпертонічного розчину.
Крім того, можна комбінувати будь-яку сполуку з одним або декількома додатковими активними терапевтичними агентами в стандартній лікарській формі для одночасного або послідовного введення пацієнту. Комбінований терапевтичний препарат може бути введений у режимі одночасного або послідовного введення. При послідовному введенні комбінацію можна вводити у вигляді двох або більше введень.
Спільне введення сполуки за даним документом з одним або декількома іншими активними терапевтичними агентами, як правило, стосується одночасного або послідовного введення сполуки й одного або декількох інших активних терапевтичних агентів таким чином, щоб в організмі пацієнта знаходилися терапевтично ефективні кількості як сполуки, так і одного або декількох інших активних терапевтичних агентів.
Спільне введення включає введення стандартних доз сполук перед або після введення стандартних доз одного або декількох інших активних терапевтичних агентів, наприклад, введення сполук протягом декількох секунд, хвилин або годин після введення одного або декількох інших активних терапевтичних агентів. Наприклад, спочатку може бути введена стандартна доза сполуки, потім, через кілька секунд або хвилин введена стандартна доза одного або декількох інших активних терапевтичних агентів. Альтернативно, спочатку може бути введена стандартна доза одного або декількох інших терапевтичних агентів, потім протягом декількох секунд або хвилин введена стандартна доза сполуки. У деяких випадках може бути бажаним введення спочатку стандартної дози сполуки, потім введення, через кілька годин (наприклад, 1-12 годин), стандартної дози одного або декількох інших активних терапевтичних агентів. В інших випадках може бути бажаним введення спочатку стандартної дози одного або декількох інших активних терапевтичних агентів, потім введення, через кілька годин (наприклад, 1-12 годин), стандартної дози сполуки за даним документом.
Комбінована терапія може забезпечити «синергізм» і «синергетичний ефект», тобто ефект, який досягається при використанні активних інгредієнтів разом і є більшим, ніж сума ефектів, які виявляються при використанні сполук окремо. Синергетичний ефект може бути досягнутий, коли активні інгредієнти: (1) входять в один склад і вводяться або доставляються одночасно в комбінованому препараті; (2) доставляються чергуванням або паралельно у вигляді окремих композицій; або (3) вводяться яким-небудь іншим режимом. При доставці шляхом терапії, яка чергується, синергічний ефект може бути досягнутий, коли сполуки вводять або доставляють послідовно, наприклад, у вигляді окремих таблеток, драже або капсул, або за допомогою різних ін'єкцій в окремих шприцах. Зазвичай під час терапії, яка чергується, ефективну дозу кожного активного інгредієнта вводять послідовно, тобто по черзі, у той час як у комбінованій терапії ефективні дози двох або більше активних інгредієнтів вводяться разом. Синергетичний антивірусний ефект означає противірусну дію, яка більша, ніж передбачене чисто додаткових ефектів окремих сполук у комбінації.
У ще одному варіанті здійснення винаходу за даною заявкою запропонований спосіб лікування інфекції вірусом Рпештомігіпає у людини, де спосіб включає введення людині терапевтично ефективної кількості сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру. Також запропоновані деякі способи лікування інфекції вірусом Рпештомігіпає у людини, кожний з який включає введення людині терапевтично ефективної фармацевтично ефективної кількості сполуки формули (Ії) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їхній фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру і фармацевтично прийнятного носія і допоміжної речовини.
В іншому варіанті здійснення винаходу запропонований спосіб лікування інфекції Рпештомігіпає у людини шляхом ведення людині терапевтично ефективної кількості рацемату, енантіомеру, діастереомеру, таутомеру, поліморфу, псевдополіморфу, аморфної форми, гідрату або сольвату сполуки формули (І) або їхньої фармацевтично прийнятної солі або складного ефіру.
Крім того, запропоновані деякі способи лікування інфекції Рпештомігіпає у людини, при необхідності цього, де кожен спосіб включає введення людині терапевтично ефективної кількості рацемату, енантіомеру, діастереомеру, таутомеру, поліморфу, псевдополіморфу, бо аморфної форми, гідрату або сольвату сполуки формули (ІЇ) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеними у даному документі, або їхній фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру.
У ще одному варіанті здійснення винаходу в даній заявці запропонований спосіб лікування інфекції респіраторно-синцитіального вірусу людини в людини, де спосіб включає введення людині терапевтично ефективної кількості сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру.
У ще одному варіанті здійснення винаходу в даній заявці запропонований спосіб лікування інфекції респіраторно-синцитіального вірусу людини в людини, де спосіб включає введення людині терапевтично ефективної кількості сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру і щонайменше одного додаткового активного терапевтичного агента.
Крім того, запропоновані деякі способи лікування інфекції респіраторно-синцитіального вірусу людини в людини, при необхідності цього, де кожен спосіб включає введення людині терапевтично ефективної кількості сполуки формули (Ії) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їхньої фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру.
Також запропоновані деякі способи лікування інфекції респіраторно-синцитіального вірусу людини в людини, при необхідності цього, де кожен спосіб включає введення людині терапевтично ефективної кількості сполуки формули (Ії) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їхньої фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру і щонайменше одного додаткового активного терапевтичного агента.
Також запропоновані деякі способи лікування інфекції респіраторно-синцитіального вірусу людини в людини, при необхідності цього, коли людина, крім того, страждає бронхіолітом, де кожен спосіб включає введення людині терапевтично ефективної кількості сполуки формули (1), формули (ІІ) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їхньої фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру.
Також запропоновані деякі способи лікування інфекції респіраторно-синцитіального вірусу людини в людини при необхідності цього, коли людина, крім того, страждає на пневмонію, де
Зо кожен спосіб включає введення людині терапевтично ефективної кількості сполуки формули (1), формули (ІЇ) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеними у даному документі, або їхньої фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру.
Також запропоновані деякі способи поліпшення симптомів респіраторних захворювань у людини, яка страждає на інфекцію респіраторно-синцитіального вірусу людини, де кожен спосіб включає введення людині терапевтично ефективної кількості сполуки формули (І), формули (ІІ) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, їхніх фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру.
Респіраторні симптоми в людини, яка страждає респіраторно-синцитіальною вірусною інфекцією, можуть включати закладений ніс або нежить, кашель, ускладнене дихання, чхання, швидке дихання або ускладнене дихання, задишку, бронхіоліт і пневмонію.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає застосування сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру при виготовленні лікарського засобу для лікування інфекції вірусом Рпеитомігіпає або респіраторно- синцитіальної вірусної інфекції.
Також запропонований варіант здійснення винаходу, який включає застосування сполуки формули (ІІ) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їхньої фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру при виготовленні лікарського засобу для лікування інфекції вірусом Рпейтомуіїіпає або респіраторно- синцитіальної вірусної інфекції.
Також запропонований фармацевтичний склад, який містить фармацевтично ефективну кількість сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру і фармацевтично прийнятний носій і допоміжна речовина. Крім того, запропонований фармацевтичний склад, який містить фармацевтично ефективну кількість сполуки формули (ІІ) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їхньої фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру і фармацевтично прийнятний носій і допоміжну речовину.
Також запропонований фармацевтичний склад, який містить фармацевтично ефективну кількість сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру і фармацевтично прийнятний носій і допоміжну речовину і фармацевтично ефективну 60 кількість щонайменше одного додаткового активного терапевтичного агента. Крім того,
запропонований фармацевтичний склад, який містить фармацевтично ефективну кількість сполуки формули (Ії) або однієї з конкретних сполук за прикладами, наведеними у даному документі, або їхньої фармацевтично прийнятної солі, сольвату і/або складного ефіру і фармацевтично прийнятний носій і допоміжну речовину і фармацевтично ефективну кількість щонайменше одного додаткового активного терапевтичного агента.
Також запропоновані деякі варіанти здійснення винаходу, які включають сполуку формули (І), формули (ІЇ) або одне з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їх фармацевтично прийнятну сіль, сольват і/або складний ефір для застосування при лікуванні інфекції вірусом Рпештомігіпає або респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції в людини.
Також запропоновані деякі варіанти здійснення винаходу, які включають сполуку формули (І), формули (ІЇ) або одну з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їх фармацевтично прийнятну сіль, сольват і/або складний ефір для використання як лікарський засіб.
Також запропоновані деякі варіанти здійснення винаходу, які включають спосіб виготовлення лікарського засобу, призначеного для лікування інфекції вірусом Рпешитомігіпае або респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції в людини, який характеризується тим, що використовується сполука формули (І), формули (Ії) або одна з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їх фармацевтично прийнятна сіль, сольват іл або складний ефір.
Також запропонована сполука формули (І) або її фармацевтично прийнятна сіль, сольват і/або складний ефір для лікування інфекції вірусом Рпештомігіпає або респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції в людини.
Також запропоновані деякі варіанти здійснення винаходу, які включають сполуку формули (Ії) або одну з конкретних сполук за прикладами, наведеним у даному документі, або їх фармацевтично прийнятну сіль, сольват і/або складний ефір для лікування інфекції вірусом
Рпеитомігпає або респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції в людини.
Крім того, запропонована сполука, описана у даному описі. Також запропонована фармацевтична композиція, описана у даному описі. Також запропонований спосіб застосування сполуки формули (І), описаний у даному описі. Крім того, запропонований спосіб
Зо отримання сполуки формули (І), описаний у даному описі.
Метаболіти сполук
Крім того, у рамки даного документа підпадають іп мімо метаболічні продукти сполук, описаних у даному документі, у тій мірі, у який такі продукти є новими і неочевидними відносно відомого рівня техніки. Такі продукти можуть бути результатом, наприклад, окислювання, відновлення, гідролізу, амідування, етерифікації і т.п. сполуки, яка вводиться, головним чином, внаслідок ферментативних процесів. Відповідно, охоплюються нові і неочевидні сполуки, утворені способом, який включає контактування сполуки з організмом ссавця протягом періоду часу, достатнього для утворення метаболічного продукту цієї сполуки. Такі продукти, як правило, ідентифікуються отриманням міченого радіоактивним ізотопом (наприклад, 14С або ЗН) сполуки, введення її парентерально в дозі, яка виявляється, (наприклад, вище ніж приблизно 0,5 мг/кг) тварині, такій як пацюк, миша, морський свинка, мавпа або людина, надаючи досить часу для протікання метаболізму (зазвичай приблизно від 30 секунд до 30 годин) і виділяючи продукти їх перетворення із сечі, крові або інших біологічних зразків. Ці продукти можна легко виділити, оскільки вони мічені (інші виділяють шляхом використання антитіл, здатних зв'язувати епітопи, які зберігаються в метаболіті). Структури метаболітів визначаються звичайним чином, наприклад, за допомогою М5 або ЯМР-аналізу. Зазвичай аналіз метаболітів здійснюють у такий же спосіб, як і звичайні дослідження метаболізму лікарських засобів, добре відомі фахівцям у цій галузі техніки. Продукти конверсії, за умови, що вони в іншому випадку не виявляються іп мімо, можуть бути використані в діагностичних аналізах для терапевтичного дозування сполук, навіть якщо вони самі по собі не володіють НЗМ противірусною активністю.
Засоби і способи визначення стабільності сполук у замісних шлунково-кишкових секреціях відомі. Сполуки визначаються у даному документі як стабільні в шлунково-кишковому тракті, коли у випадку для менше ніж приблизно 50 мольних відсотків захищених груп віддаляється захист у замісному шлункового соку або соку кишечника при інкубуванні протягом 1 години при 372С. Просто стабільність сполук у шлунково-кишковому тракті, не означає, що вони не можуть бути гідролізовані іп мімо. Проліки зазвичай стабільні в травній системі, але можуть бути в значній мірі гідролізовані до вихідного препарату в травному каналі, печінці, легенях або інших органах метаболізму, чи, головним чином, у клітинах. Як використовується у даному описі, під проліками розуміється сполука, яка хімічно призначена для ефективного вивільнення вихідного 60 лікарського засобу після того, як він переборе біологічні бар'єри при пероральній доставці.
Скорочення
При описі експериментальних подробиць використовуються деякі скорочення й абревіатури.
Хоча більшість з них зрозуміла фахівцю в цій галузі техніки, у таблиці 1 наведений список багатьох з цих скорочень і абревіатур.
Таблиця 1
Перелік скорочень і абревіатур
ДМФ 00000 |диметилформамд.///7777777777771111111111111ссСсСсС
Руб Ф(піридин/////777777711111111111111111111111111ссСсС
МИ іній НН недейтерованого розчинника
Загальні схеми
МН МН» со МІБ зе ЗМ х мя мя М
Ї
51іа З1Ь
Схема 1
На схемі 1 показаний загальний шлях синтезу проміжних сполук, починаючи з реакції йодування (наприклад, МІ5) з метою отримання нуклеїнового основи 516.
Мне МН» МН» се НВЕ, ща МІ5 Ф з
ХМ - х М. -
Мем» Мамо» Ми | М'СЕ 52а 52Ь 52с
Схема 2
На схемі 2 показаний загальний шлях синтезу проміжних сполук, починаючи з реакції фторування (наприклад, НВЕ4, Мамо2) способом, який подібний до того, який описаний у
УМО2012037038А1, з отриманням проміжної сполуки 5265. Проміжна сполука 526 потім може бути йодована (наприклад, МІ5) з метою отримання нуклеїнової основи 526.
МН МНех т Мне 1; л-Виці сег 15 Б2бі, вуг: о р
Впо МА - ГСНоВімМе сть 4 ї М чно я ут с м у / ул аа -- -М. ся й їх. ад о ще
М Мой : по фе ЩО опенннннннннннк НО еч Моди а Ми зді 2) БЬБІН (що; 2унСозН, чо;
Ва ОВпо/ ВеЕзеБЬО Ні раю в-
ВвОо ОВп но он
За 53Ь іс за
МН див МНВх ре реч облтит я : тс рт
ТУ ОМС, Буг д ФІ Й 1) (РО) Ме! с ях, і з омро (4 у, ії пеннннннннняю НО ар И ді сни ді снтнтеняю НОЯ од ри 21 ТВО, тю х / 2 КОВи цех ще 2У Ва чех т 3) ТОН н- й тМБсМ пон-я тво отв5 тво отТв5 З ОеЕ но он 5Зе зи 839
МН; мне с пеня ДО ра ну х/ М'в
М; но он
Зап Схема 3
На схемі 3 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з обміну літій-галоген (наприклад, взаємодія н-Ви і, |-СН2БІМе2С12) з відповідною нуклеїновою основою 53б, потім додавання до лактону 5З3а. Відновлення бічної 1" гідроксильної групи в середовищі кислоти
Льюїса (наприклад, ВЕЗ-ЕЇ2О, ЕїЇз5і) дає проміжну сполуку 53с. Проміжна сполука 5З3с спочатку може бути захищена (наприклад, В:2СіІ, Руг; МНАОН) за азотною функціональною групою, і бензильні групи потім можуть бути вилучені в умовах відновлення (наприклад, НСО2Н, РИа/С,
ВСІЗ, ВВг3) з отриманням проміжної сполуки 53. Послідовність, яка включає спочатку селективний захист 5' гідроксилу (наприклад, ОМТТСІ), потім захист 2 і 3' гідроксилу (наприклад,
ТВОЇ), потім селективне видалення 5' гідроксильної захисної групи в кислотних умовах (наприклад, Т5ОН) призводить до отримання проміжної сполуки 53е. 5' гідроксильна група потім може бути перетворена у відповідний йодид (наприклад, (РПО)ЗРМЕеЇ), який потім піддається впливу основних умов (тобто, КОЇВи) для здійснення реакції елімінування, даючи проміжну сполуку 53Ї. Окислювання олефіну 531 (наприклад, ОМОО) з наступною обробкою відповідним нуклеофілом (наприклад, ТМ5СМ) у середовищі кислоти Льюїса (наприклад, ІпВг3) і видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, С5) дають проміжну сполуку 539. Видалення захисної групи азоту (наприклад, МН2Ме) призводить до отримання кінцевої сполуки типу ЗЗП.
МНВ: МАВ: МНо гом 1урмМоо ШИ; МноМе го м ра шт Ам АК пимісини Ам -. мМ тв! но о мМ тв! но З тв - 2упВг х шо а ТММ» Й нт й Е тв5о Отв5 3) СвЕ но он но он 53 54а 5465
Схема 4
На схемі 4 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з окислювання олефіну 53 (наприклад, ОМОО) з наступною обробкою відповідним нуклеофілом (наприклад, ТМ5М3) у середовищі кислоти Льюїса (наприклад, ІпВг3) способом, який подібний до того, який описаний у У. Мед. Спет. 2007, 50, 5463-5470. Видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, С5Е) дає далі проміжну сполуку 54а. Видалення захисної групи азоту (наприклад, МН2Ме) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 546.
МНВ: МАВ МН» 1; Ммро ! нове ! МНоМе -ю у, МеВ --- Н- о У Моди зіптннннню НО фе у, Мови 2) СвЕ вед" ВО, тво отв5 но он но он
З зба в)
Схема 5
На схемі 5 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з окислювання олефіну 5ЗЇ (наприклад, ЮОМОО) у присутності відповідного спирту НОКа з наступним видаленням гідроксильних захисних груп (наприклад, С5Е) і отриманням проміжної сполуки 55а. Видалення захисної групи азоту (наприклад, МН2Ме) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 550.
МВ Мне МН»
А, А щих те ев ск м М тм рве в я помро дві МоМе : щи
Щ щ їх че росте НнОо-- ред ж че тд! пня но Ме й жк зв т ще й 2) (Се оА й / М У твБО отТв5 нн он но он а Зва ВАВ нт 56 ; дя а Відновпнення зв
ЯН у Ліндпарокм м Мне мно но- БИ -. . М А ол ; опвутя СТО оснж, ще шенню С носу о. м і сіння ее пд тд! на он -УОУ І ші
Збо не оно ба но оно бе
Схема 6
На схемі 6 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з окислювання олефіну 53 (наприклад, ОМОО) з наступною обробкою відповідним нуклеофілом (наприклад, (НСЕС)ЗАЇ) способом, який подібний до того, який описаний у Мисієобіде5, Мисіеоїіде5, апа Мисієїс Асійв5 2005, 24, 343-347. Видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, С5Е) дає далі проміжну сполуку Зба. Видалення захисної групи азоту (наприклад, МН2Ме) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 560. Обробка кінцевої сполуки в умовах гідрування (наприклад, Н2, Ра/С або каталізатор Ліндлара) може призвести до селективного отримання кінцевої сполуки типу
Збс і 5ба, відповідно. Перетворення кінцевої сполуки 5ба за допомогою утворення циклопропанового кільця (наприклад, СН2М2) може призвести до отримання кінцевих сполук типу Збе.
МН» 1утМвсі, Руг МН МНВх зи М ВСІ, Руг; зи М зе М
МнНАОН 1) ТВ5С1, Ітіа но-я о мив 2 оМто-я о Зизни ТВВстЯ о о Зі 2) ОМС Руг 2) ТОН
НО НО тво Е 57а 576 57е
МВ: МН: 1) ЕОСІЄНСІ з ЗМ жи ЗМ
Руг, ТРА, ОМ5О 1) ОМТтСІ, ЕМ ЕОСТеНСІ
УПА но дев п оМмтсЕвМ тв5о-х о у; Моди сяяння 2) СН»ОЮ, Маон не 2) ТВОЇ, тій. нон Руг, ТРА 3) мавну р ша 3) ТОН шо Мо тво тВ5О є ви 579
МНВА МН» МН»о за ЗМ зи М зи М ви. твво-у о ЗМ ди ПРСНоВИ ВИ твоя о, У ОКО но-у о У в!
Осн КОЇВи рай 2УТВАЕ -7
Еш Вг ЕН 3) МНАОН - тв50. ЕЕ тВ5О ЕЕ но 57п 87і 87
Схема 7
На схемі 7 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи із синтетичної послідовності по захисту азоту (наприклад, ТМ5СЇІЇ, Руг; В2СІ, Руг; МН4АОН) у проміжної сполуки 57а, синтезованої в такий же спосіб, як описано в М/02012037038А1. Селективний захист 5' гідроксильної групи (наприклад, ЮОМТгСІ) дає потім проміжну сполуку 576. Захист 2' гідроксильної групи (наприклад, ТВЗСІ), потім видалення 5' гідроксильної групи в кислотних умовах (наприклад, Т5ОН) дає проміжну сполуку 57е. Перетворення 5' гідроксильної групи в альдегід в умовах окислювання (наприклад, ЕОСІ-НСІ, Руг, ТФУ, ДМСО), потім конденсація відповідного еноляту з формальдегідом і відновлення (наприклад, Мавнаі) дають проміжну сполуку 57Ї. Наступний селективний захист гідроксильних груп ортогональними захисними групами (наприклад, ОМТГСІ ії ТВЗСІ), потім видалення більшої частини рухливих захисних груп у кислотних умовах (наприклад, Т5ОН) дає далі проміжну сполуку 579. Перетворення гідроксильної групи в альдегід в умовах окислювання (наприклад, ЕОСІ-НСІ, Руг, ТФУ, ДМСО) дає проміжну сполуку 57. Перетворення альдегіду 57П у галоген олефінову проміжну сполуку 57і може бути здійснене в умовах олефінізації Віттінга (наприклад, |РАИЗРСНО2ВГ|еВг-, КОЇВИ).
Реакція елімінування в лужних умовах (наприклад, КОЇВи) дає алкін, і видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, ТВАБЕ) і захисної групи азоту (наприклад, МНАОН) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 57).
Мн МН» твво-х о х. Мод! 1) МНоОНеНСІ но-х о У Мови о- 2) СО! че ль 3) МН,ОоН ЕН тв5О0 4) НЕеРуг НО в
З/п Зва
Схема 8
На схемі 8 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з утворення оксиму (наприклад, МН2ОН:-:НСІЇ) з наступним перетворенням оксиму в нітрильну групу (наприклад,
СОЇ). Видалення захисної групи азоту (наприклад, МНАОН) і гідроксильних захисних груп (наприклад, НЕ:Руг) призводить потім до отримання кінцевої сполуки типу Зв8ва.
МН» зе УМ но-х о в!
МВ МН Не, РУС - у - ПТ ІРАзРСНЬІГ ВС им - НО твво-я о) зні ДОВ -0но-х о м вер б-ки 2) ТВАЕ - МН
ЕД 3) мно їз Ши 2 тв50 є но г СНОМ» зи В
У - рн
НО є 59с
Схема 9
На схемі 9 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з перетворення альдегіду 57п в олефін в умовах олефінізації Віттінга (наприклад, ІРОЗРСОНЗІ|ВІі-, КОЇВи). Видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, ТВАРЕ) і захисної групи азоту (наприклад, МНАОН) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 59а. Реакція відновлення (наприклад, Н2, Ра/с) може потім давати кінцеві сполуки типу 590, і реакція утворення циклопропанового циклу (наприклад, СН2М2) може давати кінцеві сполуки типу 596.
МАВ: МН» же ЗМ за М 1) Різ, СС твво-я о ЗИ зві РРО ноу о Зі нОо-у 2) ТВА сА-Є їз 3) МНАОН НИ тво г НО 57та 5іба
Схема 10
На схемі 10 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з реакції Аппеля (наприклад,
РАЗР, ССІ4) для перетворення гідроксильної групи в хлорид. Видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, ТВАБЕ) і захисної групи азоту (наприклад, МНАОН) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 510а.
МНВ: МНВг Мне б: М І за М зе УМ 1) РМВСІ, КЬСО 1) ОАЗТ т850- о у; Мн! ЗІМЕШ ЛЮТ во о у; мив! оту ); Мов! ше 7) ТВАЕ ше 2) ВВгз поет ноту у Зуваве, ман 97 У замін 7 тв50 4) Асон ВпО КЕ НО г 579 5іта 8116
Схема 11
На схемі 11 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з захисту вільної гідроксильної групи проміжної сполуки 579 рухливою захисною групою (наприклад, РМВСІ,
К2СО3). Селективне видалення 2 і 5 силілокси захисних груп (наприклад, ТВАБЕ), потім повторний захист стійкими захисними групами (наприклад, ВпВг, Ма) і видалення рухливих гідроксильних захисних груп у кислотних умовах (наприклад, АСОН) дає проміжну сполуку 511а.
Перетворення гідроксильної групи у фтор (наприклад, СА5Т), потім видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, ВВг3) і захисної групи азоту (наприклад, МНАОН) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 5116.
МНВ МНВ: МН» ун М 1) оМоо м ву 1) (РО) РМ о У Моди 2) ЗПС, ТММ, юувуте в г2укови і-ї з МОН МУ у тв80 тво й не те 512а 8126
Схема 12
На схемі 12 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з перетворення 5' гідроксильної групи у відповідний йодид (наприклад, (РПО)ЗРМеї), який потім обробляють у лужних умовах (тобто, КОЇВи) для здійснення реакції елімінування, одержуючи проміжну сполуку 512а. Окислювання олефіну 512а (наприклад, ЮМОО) з наступною обробкою відповідним нуклеофілом (наприклад, ТМ5М3) у середовищі кислоти Льюїса (наприклад, ЗпсСі4) способом, подібним до того, який описаний у .). Мей. Спет. 2007, 50, 5463-5470, і видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, С5) і захисної групи азоту (наприклад, МНАОН) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 5126.
МНВ2 Мне с. Що З ормоо, нове Гм о Мови нн но о У ди у 2) СЕ ве тВ50 3) МНАОН не 512а 51За
Схема 13
На схемі 13 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з окислювання олефіну 512а (наприклад, ОМОО) у присутності відповідного спирту НОкКа і видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, С5). Видалення захисної групи азоту (наприклад, МН2Ме) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 513а.
МНВ: МНВ: МН» за М 1) РРОС(ВОСІ з М г тво о учив МАР тво о уд ТВА но-х о У ді но- 2) (ТМ8)58ІН, 7 2) МНОН ще
ТВ5О в ТВ5О є НО г 579 514а 51аь
Схема 14
На схемі 14 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з утворення ксантату (наприклад, РІОС(5)СІ, ОМАР) з наступною реакцією деоксигенування по Бартон-МакКомбі (наприклад, (ТМ5)З35ІН, АІВМ) з метою отримання проміжної сполуки 514а. Видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, ТВАРЕ) і захисної групи азоту (наприклад, МНАОН) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 5146.
Мне
О. еОдс б. о МН 1) п-Виц ум вою 1) КьЬСО», меон вого сеї І-СНовІіМе»СЦо но-х о С Моди
ВпО Одес 0/2) МІ5, ВшМІ впо ОВ МОМ тв! 2) ЕБВІН с 3) ВиВг, Адо2О | ВЕЗзЗеЕЬО 5 в1Ба 81БЬ 83ь 3) Но, Ра чернь но он 51Бс
Схема 15
На схемі 15 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з проміжної сполуки 515а, отриманої способом, подібним до того, який описаний у Віозсі. Віоїтесі. Віоспет. 1993, 57, 1433- 1438. Видалення ацетатних захисних груп в умовах гідролізу (наприклад, К2СОЗ, Меон), потім хемоселективне окислювання (наприклад, МіІ5, Ви4МіІ) і захист 2" гідроксильної групи (наприклад, ВпВг, Ад20) дають проміжну сполуку 5156. Обмін літій-галоген (наприклад, н-Ви і,
ІСН2БЗІМе2СІ2) з відповідною нуклеїновою основою 536 і додавання до лактону 515Б, потім відновлення 1! гідроксильної групи в середовищі кислоти Льюїса (наприклад, ВЕЗ-Е2О, ЕЇЗ5ІіО) і видалення захисних груп (наприклад, Н2, Ра чернь) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 515б.
МН МВ
Я р 1) ЕОСЬНСІ за М но о Моя в! Руг, ТЕА, ОМБО но о х. Мод! 1) ОМС, ЕМ 23сСн»О, маон о оно- 2) ТВЗСІ, Ітід.
ЕВ 3) Мавн, Те 3) ТОН тво отв5 тв5о отв5
ЗЗе зба
МНВ2 МН»
УМ. им. )РР, СС х твво-х о мств" З РезР. сс ноу о Мед но 2) ТВАЕ сн
ЕН 3) МНАОН а твзо отв5 но он 5ІбЬ 516с
Схема 16
На схемі 16 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з перетворення 5' гідроксильної групи в альдегід в умовах окислювання (наприклад, ЕОСІ-НСІ, Руг, ТФУ, ДМСО), потім конденсація відповідного еноляту з формальдегідом і відновлення (наприклад, Мавна) призводять до отримання проміжної сполуки 516а. Наступний селективний захист гідроксильних груп ортогональними захисними групами (наприклад, ОМТ"ГСІ ії ТВЗСІ), потім видалення більш рухливої захисної групи в кислотних умовах (наприклад, Т5ОН) дають далі проміжну сполуку 516р. Реакцією Аппеля (наприклад, РАЗР, ССІ4) можна потім перетворити гідроксильну групу в хлорид, і видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, ТВАРЕ) і захисної групи азоту (наприклад, МНАОН) призводить до отримання кінцевої сполуки типу 516бс.
МНВІ МНВ: МН»
Ж уРМВОюСО ща 1) рАБТ ШК; і ; і і тв50-4 о у Ми ш- ОВО о У Моди --- н-аАо5 у мив не 2) ТВАЄ но 2) ВВга ША - 3) Вивг, ман - 3) МНАОН - тво отв5 4) АсОнН ВПО ОВп но он 51ІбЬ з17а 5170
Схема 17
На схемі 17 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з захисту вільної гідроксильної групи проміжної сполуки 5160 рухливою захисною групою (наприклад, РМВСІ,
К2СО3). Селективне видалення 2", 3, і 5' силілокси захисних груп (наприклад, ТВАБЕ), потім повторний захист стійкими захисними групами (наприклад, ВпВг, Ма) і видалення рухливих гідроксильних захисних груп у кислотних умовах (наприклад, АСОН) дають проміжну сполуку
З17а. Перетворення гідроксильної групи у фтор (наприклад, ОА5БТ), потім видалення гідроксильних захисних груп (наприклад, ВВг3) і захисної групи азоту (наприклад, МНАОН) призводять до отримання кінцевої сполуки типу 5176.
сі МН Мне Е МН
Же Є зи ЗМ де: М : ! Е но о У Моди г ФК) но о У Мед зеіесншог ногу У Мч ве хай в х й нов нов ні 5іВЬ 51ва з18а
Бе: ЕІ но о) у М ри в но в
Схема 18 51в8с
На схемі 18 показаний загальний шлях синтезу сполук за допомогою відповідних реакцій електрофільного галогенування проміжної сполуки 51ва з отриманням цільових сполук типу 5186 (наприклад, МС5), 518с (наприклад, МІ), і 518а (наприклад, Зезестиог). в)
І МН» МС 0 МН НМ МН» з М зи М Но за М 292 но- о УМ ви 2п, (СМ НО о у-муичди МОНО НО о уві в РО(РІВиз)» в і по ки но но в но в 518с 519а зізь в Схема 19
На схемі 19 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з реакції поперечного зв'язування (наприклад, 2п(СМ)2, Ра(РІВи)З) з отриманням цільових сполук типу 519а. Сполука 519а потім може бути синтезована за допомогою реакції гідролізу нітрилу (наприклад, Н2гО2,
МНАОН, Н2О) з отриманням сполуки типу 5196.
Кк
Ї МН» со у же
У ! зи М но о Моди реакція х Ж
У синте ЇМ. дО 1 -- Соногашири ве" но в З
НО в 51всС 52О0а о К-Н,ТМ5, Ме циклопропіл, РН
Схема 20
На схемі 20 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з реакції Соногашири (наприклад, Си, РасІг(РРІАЗ)2) з отриманням цільових сполук типу 520а.
МА» е щ МН
Ше М х . за ЗМ
Но- о Мом реакція х ; пен -- НО М в в о М -й Сузукі ве
НО в 5-5
НО в
З18с 521а
КН, Ме, РН
Схема 21
На схемі 21 показаний загальний шлях синтезу сполук, починаючи з реакції поперечного зв'язування (наприклад, Ра(арросСІ2, С52С0О3) з отриманням цільових сполук типу 521а. в2 МН» но-в
НО ор Во 0 МН» за ЗМ Ж о
Р(О)СІ»; НО 5.я зи М ноу КУ Моди -ЯяЯ ЛУ ноя х Я. ' де" ІпВоЗ МН РОН» оо Мов
Ен в но їв но Кк 522а 5225
Схема 22
На схемі 22 показаний загальний шлях синтезу сполук, який включає синтез фосфорильованих аналогів типу 5226. в2 МН во МА» зи СМ о зи М
Т о, но-х о у, Моди вбо-р-їв ІвВиМаСІ вОо-р--о- о У мор ши і підт лотіх нання І х в, в дмФ, тгФ ви, нав нав 522а 52За 5235
Схема 23.
На схемі 23 показаний загальний шлях синтезу сполук, який включає синтез фосфорильованих аналогів типу 5236. - й
СА йо ЗІ Х но о Мур Рв 1) Основа хо МВ! ще ІС 2) Окиснення / р но в вто т 522а 524а 5240
Схема 24
На схемі 24 показаний загальний шлях синтезу сполук, який включає синтез фосфорильованих аналогів типу 5246.
Експериментальна частина
МА» МН» се МІ си ЗК х М дмФ М Ми 1а 16
Проміжна сполука 16.
У розчин проміжної сполуки Та (50 мг, 373 ммоль) у ДМФ (1 мл) при кімнатній температурі поміщали М-йодсукцинімід (84 мг, 373 ммоль) у вигляді твердої речовини. Через 1,5 год. реакційну суміш розбавляли 1М розчином Маон (10 мл), і отриману суспензію перемішували при кімнатній температурі Через 1 год. тверді продукти збирали шляхом вакуумного фільтрування і сушили при зниженому тиску з отриманням проміжної сполуки 165. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-46) б 7,89 (с, 1Н), 7,78 (шир-с, 1Н), 6,98 (д, У-4,4 Гц, 1Н), 6,82 (д, У-4,4
Гц, 1Н), 3,30 (шир-с, 1Н).
ГХ/МС: 1К-1,21 хв, М5 т/2-261,02 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпепто І СО РІееї; колонка: Кіпеїех 2,6 мк ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95
АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: 1г-1,536 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
МН»
МН | сі
Впо о 2 вав зи ЗМ -О че сі! зе М | У М. я ---/ х М р ни Впо о "М зп "М ВибітФ з,
ВпО ОВп -- ОН
ВпО ОВп 1с 15 1а
Проміжна сполука а - (25, ЗА, 48, 5Н)-2-(4-амінопіроло(1.2-4(1.2.4)триазин-7-іл)-3,4- біс(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)тетрагідрофуран-2-ол.
До суспензії 7-йодпіроло|1.2-ЦИ1.2.4|Ігриазин-4-аміну 16 (6,84 г, 26,5 ммоль) і 1,2- біс(хлордиметилсиліл)етану (5,66 г, 26,3 ммоль) у ТГФ (200 мл) при температурі -782С в атмосфері аргону швидко додавали н-бутиллітій (2,5М у гексані, 34,4 мл, 86,0 ммоль). У процесі додавання внутрішню температуру реакційної суміші підвищували до -40,52С, і реакційна суміш ставала прозорим розчином коричневого кольору. Через 15 хв через канюлю швидко додавали розчин (ЗК, 4К, 5К)-3,4-біс(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)дигідрофуран-2(ЗН)-ону (1с,
Зо придбано у фірми Сагрозупій, 10 г, 23,9 ммоль) у тетрагідрофурані (40 мл), попередньо охолодженому до температури -782С. Через 1 год. реакційну суміш гасили оцтовою кислотою (15 мл), і отриманій суміші давали нагрітися до кімнатної температури. Отриману суміш розбавляли етилацетатом (800 мл) і промивали насиченим водним розчином бікарбонату натрію (500 мл) і насиченим сольовим розчином (500 мл). Органічний шар сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5102 (колонка 220 г 5іІО2 СотрШав5п НР Соїа Соїштп, 0- 100 95 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 14.
ГХ/МС:1К-1,50 хв, М5 т/2-553,34 (Ма1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО РЕІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 1,5 хв 2-100 956 АСМ, 1,5 хв-2,2 хв 100 95 АСМ, 2,2 хв-2,4 хв 100 5-2 95 АСМ, 2,4 хв-2,5 хв 2 Фо
АСМ.
ВЕРХ: г -3,442 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: етилацетат, К-О,5 (УФ)
МН» МН» за ЗМ за ЗМ
ВЕЗОє: х
Впо-я о у М -3, впохо ми
ЕН СНоСЬ ЕН
ВпОо ОВп ВпО ОВп 1а 1е
Проміжна сполука Те-7-(25, 35, АВ, 58)-3,4-біс(бензилокси)-5- (бензилоксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-Я(1.2.4Ігриазин-4-амін.
У розчин проміжної сполуки 14 (4,74 г, 8,58 ммоль) і триетилсилану (3,56 мл, 22,3 ммоль) у ОСМ (43 мл) повільно за допомогою шприца при температурі 0С в атмосфері аргону додавали комплекс трифториду бору з діетиловим ефіром (ефірат трифториду бору) (1,59 мл, 12,9 ммоль). Через 2 год. реакційну суміш повільно розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію (100 мл), і отриману суміш екстрагували етилацетатом (2х150 мл), сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5102 (24 г 502 СотрШав5п НР сої СоїІштп, 0-100 95 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 1е. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 7,88 (с, 1Н), 7,37-7,22 (м, 15Н), 6,73 (д, У-4,6 Гц, 1Н), 6,71 (д, 9У-4,6
Гц, ТН), 5,66 (д, У-4,2 Гц, 1Н), 4,71 (с, 2Н), 4,60 (д, 9У-12,0 Гц, 1Н), 4,54 (с, 2Н), 4,45 (д, 9-11,9 Гу, 1Н), 4,39 (дт, 9У-7,1, 3,6 Гц, 1Н), 4,25 (т, 9-46 Гу, 1Н), 4,14-4,10 (м, 1Н), 3,78 (дд, 9У-10,7, 3,4 Гц, 1Н), 3,65 (дд, У-10,7, 4,0 Гц, 1Н).
ГХ/МС:1А-2,01 хв, М5 т/2-537 41 (Ма1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО Рівееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95
АСМ, 1,5 хв-2,2 хв 100 95 АСМ, 2,2 хв-2,4 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,4 хв-2,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: ІК-3,596 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: етилацетат, К-О0,3 (УФ)
МН» МН зи ЗМ зи ЗМ хм Я Вс хм Я
Впо--ї о м00ОЗН- - Во о М лейїх Руг; В т МНАоН Б
ВпОо ОВп ВпО ОВп 12 17
Проміжна сполука 1еМ-(7-(25, 35, АВ, 58)-3,4-біс(бензилокси)-5-
Зо (бензилоксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4(1.2.4|Ігриазин-4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки Те (3,94 г, 7,34 ммоль) у піридині (36,7 мл) повільно при кімнатній температурі в атмосфері аргону додавали бензоїл хлорид (1,69 мл, 14,68 ммоль). Через 1 год. повільно додавали додаткову кількість бензоїл хлориду (1,69 мл, 14,68 ммоль). Через 19 год. повільно додавали воду (20 мл), і реакційна суміш ставала злегка мутною. Потім повільно додавали гідроксид амонію («10 мл) доти, поки реакційна суміш не ставала лужною з рнН-10.
Через 1 год. за допомогою краплинної лійки додавали по краплях воду (150 мл), і в міру додавання з реакційної суміші починала повільно випадати в осад тверда речовина білого кольору. Отриману суміш перемішували протягом 24 год., і тверду речовину білого кольору збирали шляхом вакуумного фільтрування і сушили азеотропним відгоном з толуолу з отриманням проміжної сполуки 117. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,23 (шир. с, 1Н), 7,62 (т, У-7,68 Гц, 1Н), 7,53 (т, У-7,6 Гц, 2Н), 7,38- 7,21 (м, 18Н), 7,17 (д, У-7,6 Гц, 1Н), 5,69 (д, 9-41 Гц, 1Н), 4,71 (с, 2Н), 4,63-4,44 (м, 4Н), 4,43- 4,39 (м, 1Н), 4,22 (т, 9У-4,5 Гц, 1Н), 4,15-4,10 (м, 1Н), 3,79 (дд, 9У-10,8, 3,2 Гц, 1Н), 3,65 (дд,
У-10,7, 3,7 Гц, 1Н).
ГХ/МС: 1К-1,91 хв, М5 т/2-641,18 (Ма-1|); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО Рівееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95
АСМ, 1,5 хв-2,2 хв 100 95 АСМ, 2,2 хв-2,4 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,4 хв-2,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкл/хв.
ТОХ: елюент: 50 95 етилацетат у гексані, ЕЧ-0,6 (УФ)
МнВХ МНВ: жи ЗМ за ЗМ 1095 РОС впО о у, хе - но о у, тн
Ка Мурашкова ве кислота у
ВпО /ОВп ЕН но он 1 19
Проміжна сполука 19-ІМ-(7-((25, ЗВ, 45, 5Н8)-3,4-дигідрокси-5-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-2- іл)піроло|1.2-Ц(1.2.4)триазин-4-іл)бензамід.
До суміші проміжної сполуки 11 (4,39 г, 6,85 ммоль) і паладію на вуглеці (10 95 по масі, 2,2 г) при кімнатній температурі в атмосфері аргону послідовно додавали етанол (68,5 мл) і мурашину кислоту (51,7 мл, 1,37 моль). Через З д реакційну суміш фільтрували через шар з целіту, і фільтрат концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок азеотропно відганяли з толуолом (Зх20 мл) з отриманням проміжної сполуки 19, яку прямо використовували на наступній стадії без додаткового очищення. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) б 8,15 (с, 1Н), 7,67-7,40 (м, 5Н), 7,23 (д, 9У-4,7 Гц, 1Н), 7,00 (д, 9-4,7
Гц, 1Н), 5,40 (д, 9У-6,0 Гц, 1Н), 4,44 (т, 9У-5,7 Гц, 1Н), 4,17 (т, 9-51 Гц, 1Н), 4,03 (д, 9У-4,3 Гц, 1Н), 3,81 (дд, 9У-12,1, 3,5 Гц, 1Н), 3,71 (дд, 9У-12,0, 4,5 Гц, 1Н).
ГХ/МС:1К-1,04 хв, М5 т/2-371,15 |(Ма1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО РЕІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв-2,2 хв 100 95 АСМ, 2,2 хв-2,4 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,4 хв-2,5 хв 2 95
Зо АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: ІК-2,055 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
МНВІ МАВ: я ЗМ Ше М но-х оо ЗИ ВМС омто-х ої км
Руг у но Он но он
Проміжна сполука 1п-М-(7-(25, ЗВ, 45, 58)-5-(біс(4-метоксифеніл)у(феніл)метокси)метил)-3,4- дигідрокситетрагідрофуран-2-іл)піроло|(1 .2-411.2.4Ігриазин-4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки 19 (2,44 г, 6,59 ммоль) у піридині (32,5 мл) при кімнатній температурі однією порцією у вигляді твердої речовини додавали 4,4-диметокситритил хлорид (2,23 г, 6,59 ммоль). Через 5,5 год. реакційну суміш розбавляли етилацетатом (300 мл), і отриману суміш промивали насиченим сольовим розчином (3х200 мл). Органічний шар концентрували при зниженому тиску, і сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5102 (80 г 5І02 СотрШавзп НР Соїа Соїштп, 0-100 до етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 1П.
ГХ/МС:1К-1,68 хв, М5 т/2-673,22 |М'-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпепгто І СО Р|ееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 м;
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 1,5 хв 2-100 956 АСМ, 1,5 хв-2,2 хв 100 95 АСМ, 2,2 хв-2,4 хв 100 5-2 95 АСМ, 2,4 хв-2,5 хв 2 Фо
АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: ІК-4,270 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: 50 95 етилацетат у гексані, ЕЧ-0,15 (УФ)
МНВХ МВ: омтго-х о З Твої омтто-х о ЯК імід, ОМЕ но он тво Отв5 1п 1ї
Проміжна сполука 1і-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-5-(біс(4-метоксифеніл)у(феніл)метокси)метил)-3,4- біс(трет-бутилдиметилсилілокси)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4И1.2.4Ігриазин-4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки 1п (1,84 г, 2,74 ммоль) й імідазолу (2,23 г, 32,8 ммоль) у М, М- диметилформаміді (28,2 мл) при кімнатній температурі додавали трет-бутилдиметилсиліл хлорид (2,47 г, 16,4 ммоль). Через 17 год. у реакційну суміш повільно додавали насичений водний розчин бікарбонату натрію (500 мл). Отриману суміш екстрагували етилацетатом (500 мл), і органічний шар промивали насиченим сольовим розчином (2х400 мл), сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5іІО2 (80 г 5і02 СотріШазп НР СоїЇй Соїштп, 0-100 Фо етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 11.
ГХ/МС:1К-3,43 хв, М5 т/2-901,37 (Ма-1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО РЕІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,55 хв 100 95 АСМ, 3,55 хв-4,2 хв 100 95-2 95 АСМ при 2 мкл/хв
ВЕРХ: ІК-5,724 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: 50 до етилацетат у гексані, К-0,75 (УФ)
МНВХ | МН з ЗМ за М рмтю-х о ми ТОНН оно о З мМмеон
А ром ЕН твзо отв5 тв5БоОо отв5 1 1)
Зо
Проміжна сполука 1)Ї-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-3,4-біс(трет-бутилдиметилсилілокси)-5- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-Ц(1.2.4|)гриазин-4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки 11 (2,41 г, 2,67 ммоль) у дихлорметані (22,3 мл) при температурі 020 повільно додавали розчин моногідрату п-толуолсульфонової кислоти (509 мг, 2,67 ммоль) у метанолі (3,7 мл). Через 1,5 год. реакційну суміш розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату (100 мл), і отриману суміш екстрагували дихлорметаном (2х100 мл). Об'єднані органічні екстракти сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5102 (120 г 5102
Сотбрійави НР Соїй Соїштп, 0-100 95 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 11. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,72 (шир-с, 1Н), 8,16 (шир-т, 9У-7,1 Гц, 2Н), 8,07 (шир-т, У-7,7 Гц,
ЗН), 7,49-7,43 (м, 1Н), 5,75 (д, 9У-8,2 Гц, 1Н), 5,28 (дд, 9-81, 4,7 Гц, 1Н), 4,81 (д, 9У-5,0 Гц, 1Н), 4,70-4,63 (м, 1Н), 4,44 (д, 9У-12,3 Гц, 1Н), 4,24 (д, 9-12,4 Гц, 1Н), 1,48 (с, 9Н), 1,30 (с, 9Н), 0,65 (с,
ЗН), 0,64 (с, ЗН), 0,41 (с, ЗН), 0,00 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1 -2,66 хв, М5 т/2-599,19 |Ма1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО РЕІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 96 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95
АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: ІК-5,622 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: 50 95 етилацетат у гексані, К-0,55 (УФ)
МН: МНВ: зи ЗМ за ЗМ но-х о у, м (РПО)зРМеї ко У, М дМиФ твзоОо отв5 тво отв5 1Ї . 1К
Проміжна сполука 1К-М-(7-(25, 35, 48, 55)-3,4-біс(трет-бутилдиметилсилілокси)-5- (йодметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4(1.2.4)гриазин-4-іл)бензамід.
До розчину метилтрифеноксифосфонію йодиду (0,99 г, 2,19 ммоль) у ДМФ (9,9 мл) при кімнатній температурі додавали проміжну сполуку 1) (1,19 г, 1,99 ммоль). Через З год. додавали додаткову кількість йодиду метилтрифеноксифосфонію (0,99 г, 2,19 ммоль). Через 1 год. реакційну суміш розбавляли етилацетатом (200 мл) і промивали насиченим сольовим розчином
Зо (З3х100 мл). Органічний шар сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5102 (колонка 80 г 52 СотршШазп НР бої Соїштп, 0-100 956 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 1К. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,21 (шир. с, 1Н), 7,61 (шир. т, У-7,2 Гц, 1Н), 7,53 (шир. т, У-7,5 Гц,
ЗН), 7,05 (шир. с, 1Н), 5,44 (д, 9-4,5 Гц, 1Н), 4,52 (т, У-4,3 Гц, 1Н), 4,08-3,99 (м, 2Н), 3,55 (дд, 910,7, 5,2 Гц, 1Н), 3,38 (дд, У-10,7, 5,0 Гц, 1Н), 0,93 (с, 9Н), 0,85 (с, 9Н), 0,16 (с, ЗН), 0,11 (с,
ЗН),-0,01 (с, ЗН),-0,11 (с, 1Н).
ГХ/МС:1К-3,06 хв, М5 т/2-709,16 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпепгто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 96 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95
АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: ІК-5,837 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: 20 95 етилацетат у гексані, ЕЧ-0,45 (УФ)
МНВА МН за М Же
Ше М ж М р КОЇвВи
Руг твзо отв5 тв5о отв 1К 1
Проміжна сполука 1І1-Мм-(7-(25, 35, 45)-3,4-біс(трет-бутилдиметилсилілокси)-5- метилентетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4(1.2.4)триазин-4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки 1К (1,77 г, 2,5 ммоль) у піридині (25 мл) при кімнатній температурі додавали трет-бутоксид калію (700 мг, 6,24 ммоль). Через 2 год. реакційну суміш розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію (25 мл) і насиченим сольовим розчином (200 мл). Отриману суміш екстрагували етилацетатом (300 мл). Органічний шар потім промивали насиченим сольовим розчином (200 мл), сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5102 (40 г 5І0О2 СотрШйавзп НР Соїа Соїштп, 0-100 до етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 11.
ГХ/МС: 1 -2,87 хв, М5 т/2-581,37 (Ма-1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпепто І СО Ріееєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти
Градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: ІК-5,750 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: 50 до етилацетат у гексані, КГ-0,20 (УФ)
МНВІ МНВ2 шив пиши
М рморо Гм
УМ нн Ам
Ф) М ацетон но в) М х . но с ч тв5о отв5 тв5о отв5 1! 1т
Проміжна сполука 1т-М-(7-(25, 35, 45)-3,4-біс(трет-бутилдиметилсилілокси)-5-гідрокси-5- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-Ц(1.2.4|)гриазин-4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки 11 (560 мг, 0,964 ммоль) в ацетоні (4,82 мл) при температурі 0 додавали ОМОО (0,07М розчин в ацетоні, 13,8 мл, 0,964 ммоль). Через 10 хв реакційну суміш концентрували при зниженому тиску і сушили азеотропним відгоном з толуолом (2х1 мл) з отриманням 1т, який відразу ж використовували на наступній стадії без додаткового очищення.
ГХ/МС: 1А-2,57 хв, М5 т/2-615,14 (Ма1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпепто І СО Ріееєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти
Градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкл/хв.
МНВІ МНВа2 ех В ТтМ5СМ Шо р, х нн У М. - шле Му ве 0 ТМ8О- о М
НО... СноСЬь МС у тв5О Отв5 тв5О отв5 1т 1п
Проміжна сполука 1п-М-(7-(25, 35, 45)-3,4-біс(трет-бутилдиметилсилілокси)-5-ціано-5- ((триметилсилілокси)метил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4Я(1.2.4)гриазин-4-іл)бензамід.
До розчину сирої проміжної сполуки тт (592 мг, 0,964 ммоль) і триметилсиліл ціаніду (640 мкл, 4,80 ммоль) у дихлорметані (19,2 мл) при температурі 02С в атмосфері аргону додавали бромід індію (ІІІ) (681 мг, 1,92 ммоль). Через 4,5 год. реакційну суміш гасили насиченим водним розчином бікарбонату натрію (б мл) і давали нагрітися до кімнатної температури. Отриману суміш розподіляли між дихлорметаном (20 мл) і насиченим водним розчином бікарбонату натрію (20 мл). Фази розділяли, і водний шар екстрагували дихлорметаном (20 мл). Об'єднані органічні шари сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску з отриманням проміжної сполуки 1п (суміш діастереомерів 1:1) (710 мг), яку прямо використовували на наступній стадії без додаткового очищення.
ГХ/МС: перший ізомер, який елююється, іг-2,91 хв, М5 т/2-696,28 |М-1|, другий ізомер, який елююється, ІК-3,02 хв, М5 т/2-696,19 |М--1); система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО РЕІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 96 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95
АСМ при 2 мкл/хв.
МН: МНВІ
ШеЕ- сх ч р. СвЕ ко, І
Ж нн я М. -- тМ5о о М МФ но о М д
МО, МО У у тв50 отв5 но он іп 10.
Проміжна сполука 10-М-(7-(25, ЗВ, 45)-5-ціано-3,4-дигідрокси-5- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-Ц(1.2.4|)гриазин-4-іл)бензамід.
До розчину сирої проміжної сполуки 1п (668,23 мг, 0,96 ммоль) у ДМФ (9,6 мл) при кімнатній температурі додавали фторид цезію (729 мг, 4,8 ммоль). Через 5 год. реакційну суміш розбавляли насиченим сольовим розчином (100 мл), і отриману суміш екстрагували дихлорметаном (3х100 мл). Об'єднані органічні шари сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску з отриманням проміжної сполуки 10 (суміш діастереомерів 11), яку прямо використовували на наступній стадії без додаткового очищення.
ГХ/МС: перший ізомер, який елююється, ІК-1,31 хв, М5 т/2-396,19 (МА, другий ізомер, який елююється, ІК-1,32 хв, М5 т/2-396,19 |М--1); система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпепто І СО Ріееєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 96 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95
АСМ при 2 мкл/хв.
МНВа МН» з хх
С й мемн» с Ї меон -
Мі, МС , но он но он 10 1
Приклад 1-28, 35, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-4(1.2.4)гриазин-7-іл)-3,4-дигідрокси-2- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-карбонітрил.
До розчину сирої проміжної сполуки 10 у метанолі (1 мл) при кімнатній температурі додавали метиламін (40 Фо у воді, 0,3 мл). Через 2,5 год. реакційну суміш концентрували при зниженому тиску, і відразу очищали за допомогою препаративної ВЕРХ (Рпепотіпех І ипа, 5 мкм, С18 100А, колонка 100х30 мм, градієнт 5-15 95 ацетонітрил/вода, 25 хв). Фракції, які містять бажаний продукт, і 4 аномер поєднували і концентрували при зниженому тиску. Потім 4 аномери розділяли за допомогою препаративної за допомогою препаративної ВЕРХ (Рпепотіпех ГГ ипа, 5 мкм, С18 100А, колонка 100х30 мм, градієнт 5-15 95 ацетонітрил/вода, 25 хв). Фракції, які містять бажаний продукт, поєднували і ліофілізували з отриманням сполуки за прикладом 1. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) 5 7,79 (с, 1Н), 6,85 (д, 9У-4,5 Гц, 1Н), 6,76 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 5,45 (д, 9-5,9 Гц, 1Н), 4,59 (т, У-5,7 Гц, 1Н), 4,40 (д, 9У-5,6 Гц, 1Н), 3,88 (д, 9У-12,0 Гц, 1Н), 3,80 (д, 9У-12,0
Гц, 1ТН).
ГХ/МСО: 1К-0,29 хв, М5 т/2-292,16 |М--1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО РЕІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 1,5 хв 2-100 956 АСМ, 1,5 хв-2,2 хв 100 95 АСМ, 2,2 хв-2,4 хв 100 5-2 95 АСМ, 2,4 хв-2,5 хв 2 Фо
АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: ІК-0,377 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 9895 АСМ при 2 мл/хв.; ВЕРХ: ІК-6,643 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: І ипа 5 мкм С18(2) 110А, 250х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил, вода; градієнт: 5-15 9о
АСМ протягом 10 хв при 2 мл/хв
МН. МН:
З В2СІ, ТМ, Ен ум --6---- ук но-к о М Руг но-к о м
НО в НО 2а 2
Проміжна сполука 26-М-(7-(25, ЗВ, АВ, 5А)-3-фтор-4-гідрокси-5- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4(1.2.4)гриазин-4-іл)бензамід.
У продуту М2 колбу додавали проміжну сполуку 2а, (2К, ЗК, 4, 55)-5-(4-амінопіроло(|1.2-
ЦІ1.2.4)гриазин-7-іл)-4-фтор-2-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-3-ол (отриманий відповідно до
Зо МО20120370384А1, 1,20 г, 4,01 ммоль) (сушили шляхом спільного розпарювання з піридином З рази), потім розчиняли в піридині (18 мл). При температурі 02С однією порцією додавали хлортриметилсилан (1,54 мл, 13,13 ммоль), і отриману суміш перемішували в атмосфері М2 протягом 1 год. Додавали по краплях бензоїл хлорид (675 мкл, 5,82 ммоль), і реакційну суміш перемішували протягом 1 год. Для витрати вихідної речовини, яка залишилася, додавали додаткову кількість бензоїл хлориду (100 мкл). Спостерігалася суміш моно- і біс-В7 захищених продуктів. Реакційну суміш гасили Н2гО (5 мл), і отриману суміш перемішували протягом 5 хв.
Потім однією порцією додавали концентрований МНАОН(водн.) (8 мл) і залишали перемішуватися протягом 15 хв, у цей час біс-В7 продукт перетворювався в бажаний продукт.
Розчинники видаляли при зниженому тиску, і потім залишок упарювали разом з СНЗОН.
Проміжну сполуку 260 виділяли після очищення виділяли після очищення за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюентів 50 905-100 96 ЕЮАсС у гексані. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 8,26-7,91 (м, 2Н), 7,88-7,79 (м, 1Н), 7,61 (т, 9-7,5 Гц, 1Н), 7,56- 7,36 (м, 2Н), 7,37-7,24 (м, 1Н), 7,10 (д, 9У-4,6 Гц, 1Н), 7,01 (с, 1Н), 5,53 (д, 9У-23,4 Гц, 1Н), 5,45 (д, 10. 9У-6,5 Гц, 1Н), 5,16-4,91 (м, 1Н), 4,86 (т, У-5,6 Гц, 1Н), 4,21-4,04 (м, 1Н), 3,82 (дд, 9У-8,0, 3,9 Гу, 1Н), 3,71 (ддд, 9У-12,3, 5,6, 2,6 Гц, 1Н), 3,52 (ддд, У-12,2, 5,7, 4,5 Гц, 1Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 6-196,33 (дт, У-55,1, 22,5 Гу).
ГХ/МС:1А-0,77 хв, М5 т/2-373,14 (Ма1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 5013,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 96 мурашиної кислоти, вода з 0,1 96 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МН МН:
СУ Б МТС, Руг " й: ко но о ото. М но НО СЕ 25 2с
Проміжна сполука 2с-М-(7-(25, ЗА, 48, 58)-5-(біс(4-метоксифенілу(феніл)метокси)метил)-3- фтор-4-гідрокситетрагідрофуран-2-іл)упіроло(1.2-ЧП1.2.4)гриазин-4-іл)бензамід.
Проміжну сполуку 25 (1,3 г, 3,49 ммоль) сушили шляхом спільного розпарювання з піридином.
Висушену речовину потім розчиняли в піридині (15 мл) в атмосфері М2. При кімнатній температурі однією порцією додавали 4,4-диметокситритил хлорид (1,71 г, 5,0 ммоль) і залишали перемішуватися протягом 2 год. Додавали етанол (2 мл), і отриманий розчин перемішували протягом 5 хв. Розчинники видаляли при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюентів 0 950-100 96 ЕАсС у гексані, з отриманням проміжної сполуки 26. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 8,28-8,02 (м, 2Н), 7,61 (т, 9У-7,5 Гц, 1Н), 7,51 (т, 9У-7,6 Гц, 2Н), 7,36 (ддт, У-6,0, 4,7, 2,0 Гц, 2Н), 7,31-7,04 (м, 7Н), 6,90-6,73 (м, 4Н), 5,62 (д, 9У-24,4 Гц, 1Н), 5,49
Зо (д, 9-7,0 Гц, 1Н), 5,27-5,01 (м, 1Н), 4,32-4,13 (м, 1Н), 4,06-3,95 (м, 1Н), 3,69 (с, 4Н), 3,28 (с, ЗН), 3,12 (дд, У-10,4, 5,2 Гц, 1Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 5-195,58 (дт, У-52,1, 24,7 Гу).
ГХ/МС:1К-1,37 хв, М5 т/2-675,29 |Ма1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 96 мурашиної кислоти, вода з 0,1 96 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МВ: МНВ: су 01. ТВ8СІ, Ітій, ДМФ Мих рМтто-х о зм нОо-х о р-н
М 2. ТОН, Меон, СНО» М
НО Е ТВО
2с 29
Проміжна сполука 2а-М-(7-((25, 35, 4В8, 5Н)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)-3-фтор-5- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-Щ(1.2.4|)триазин-4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки 2с (1,47 г, 2,18 ммоль) у ДМФ (8 мл), приготованого в атмосфері М2, додавали імідазол (251 мг, 3,70 ммоль), потім трет-бутилхлордиметилсилан (492 мг, 3,27 ммоль). Розчин залишали перемішуватися при кімнатній температурі протягом 16 год. Розчин розбавляли Н2О (5 мл), і потім розчинники видаляли при зниженому тиску. Залишок розподіляли між ЕЮАс ії Н2гО. Шари розділяли, і потім органічну фазу промивали насиченим сольовим розчином. Органічні продукти сушили над Ма2504, який видаляли шляхом фільтрування, і фільтрат концентрували при зниженому тиску. Сиру речовину використовували на наступній стадії як таку.
Сиру речовину розчиняли в СНСІЗ (15 мл) і охолоджували до температури 02С. До суміші додавали по краплях гідрат п-толуолсульфонову кислоту (414 мг, 2,18 ммоль), розчинену в
СНЗОН (6 мл), і залишали перемішуватися протягом 15 хв. Реакційну суміш гасили насич.
МмансозЗ(водн.). Органічні продукти промивали насиченим сольовим розчином і сушили над
Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюентів 0 90-50 96 ЕОАсС у гексані, з отриманням проміжної сполуки 2а. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 8,21-7,98 (м, 2Н), 7,51 (дт, У-39,9, 7,5 Гц, ЗН), 7,12-6,86 (м, 2Н), 5,48 (д, 9У-21,9 Гц, 1Н), 5,07 (дт, У-54,6, 3,8 Гц, 1Н), 4,86 (т, У-5,5 Гц, 1Н), 4,28 (ддд, 9У-17,8, 71, 4,4 Гу, 1Н), 3,83-3,72 (м, 1Н), 3,63 (ддд, 9У-12,1, 5,2, 3,0 Гц, 1Н), 3,43 (ддд, У-12,1, 6,0, 4,2 Гц, 1Н), 0,80 (с, 9Н), 0,01 (с, ЗН), 0,00 (с, ЗН). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 6-198,05 (дт, У-54,2, 19,8 Гц).
ГХ/МС:1К-1,35 хв, М5 т/2-487,24 |Ма1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МАВ:
МН 4, дмсо, тої, ОСІ, ча ше Руг, тФУ у зм у м дян ло НО М. я но-к о м о М 2. Формальдегід, МАДВОН Кк -- діоксан, НО но- - тво г 3. мавн,, ЕЮН тв5Оо г 24 2е
Проміжна сполука 2е-М-(7-((25, 35, 4Н)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)-З-фтор-5,5- біс(гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4П1.2.4|)триазин-4-іл)бензамід.
До розчину проміжної сполуки 24 (856 мг, 1,75 ммоль) у толуолі (4 мл) і ДМСО (6 мл),
Зо приготованому в атмосфері М2, додавали гідрохлорид 1-етил-3-(З-диметиламінопропіл)- карбодііміду (ЕОСІ) (504 мг, 2,63 ммоль). До цієї суміші додавали піридин (150 мкл) і ТФУ (70 мкл), і суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 15 хв. Додавали додаткову кількість ЕОСІ (100 мг) і піридин (100 мкл), і суміш перемішували ще 45 хв. Реакційну суміш гасили Н2О (10 мл) і СН2СІ2 (10 мл). Органічні продукти промивали насиченим сольовим розчином і сушили над Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску з отриманням сирого альдегіду, який використовували як такий на наступній стадії.
Сирий альдегід розчиняли в діоксані (5 мл) і додавали 37 96 формальдегід(водн.) (925 мкл), потім 2н Маон(водн.) (925 мкл). Після перемішування при кімнатній температурі протягом З год. реакційну суміш гасили АСОН, розбавляли ЕОАс і промивали Н2О. Органічні продукти сушили над Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску з отриманням сирого альдольного продукту, який використовували як такий на наступній стадії.
В атмосфері М2 сирий альдольний продукт розчиняли в ЕН (9 мл) і охолоджували до температури 02С. Однією порцією додавали Мавнаі (80 мг, 2,1 ммоль), і реакційну суміш перемішували протягом 10 хв. Реакційну суміш гасили АСОН, розбавляли СН2СІ2 і промивали розчином 1:1 води і насич. МанСоЗ(водн.). Органічну фазу сушили над Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюювання від 0 95 до 100 95 ЕОАс у гексані, з отриманням проміжної сполуки 2е. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 8,20-7,99 (м, 2Н), 7,51 (дт, У-39,5, 7,5 Гц, ЗН), 7,15-6,93 (м, 2Н), 5,50 (д, У-14,1 Гц, 1Н), 5,24 (дт, У-54,2, 5,4 Гц, 1Н), 4,78 (т, У-5,6 Гц, 1Н), 4,48 (дд, У-10,7, 4,8 Гц,
1Н), 4,34 (дд, У-6,7, 4,9 Гц, 1Н), 3,62 (дд, У-11,9, 4,9 Гц, 1Н), 3,55-3,35 (м, ЗН), 0,82 (с, 9Н), 0,07 (с, ЗН),-0,09 (с, ЗН). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 6-200,37 (д, 9У-51,1 Гу).
ГХ/МС:1К-1,25 хв, М5 т/2-517,21 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50113,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МН: І МАВ: бхиту банту
М 1. ОМТСІ, ТЕА, ОСМ у М но-х о. / Маре ооо БОЮ Ме не- 2. ТВ8СЇ, Ітід, ДМФ омто- у тв. ТВО Р 2е 21
Проміжна сполука 21-М-(7-(25, 35, 48, 58)-5-(біс(4-метоксифенілу(феніл)метокси)метил)-4- (трет-бутилдиметилсилілокси)-5-(трет-бутилдиметилсилілокси)метил)-3-фтортетрагідрофуран- 2-іл)піролоїЇ1.2-Я(1.2.4Ігриазин-4-іл)бензамід.
Проміжну сполуку 2е (370 мг, 0,717 ммоль) в атмосфері М2 розчиняли в СН2СІ2 (10 мл) і ТЕА (200 мкл) і потім охолоджували до температури 02б. Однією порцією додавали 4,4- диметокситритил хлорид (0,364 г, 1,07 ммоль), і реакційну суміш залишали перемішуватися протягом 30 хв. Додавали СНЗОН (2 мл), і розчин розбавляли СН2СІ2 і насич. МанСоЗ(водн.).
Органічний шар промивали насиченим сольовим розчином, сушили над Ма25054, фільтрували, і розчинники видаляли при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюентів 5 955-100 95 Ес у гексані, з отриманням сирого продукту у вигляді суміші біс-ЮМТг і 48 продуктів. Цю суміш використовували далі без додаткового очищення.
В атмосфері М2 до сирого продукту (574 мг, суміш) у ДМФ (З мл) додавали імідазол (143 мг, 2,10 ммоль), потім трет-бутилхлордиметилсилан (158 мг, 1,05 ммоль). Розчин залишали перемішуватися при кімнатній температурі протягом 2 год. Розчин розбавляли СНЗОН (1 мл) і
ЕОАс. Органічні продукти промивали Н2О і потім насиченим сольовим розчином. Органічний шар сушили над Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюентів 0 95- 5095 ЕОАс у гексані, з отриманням проміжної сполуки 2ї, який містить небагато біс-ЮОМТ"г продукту.
Зо ГХ/МС:1А-2,25 хв, М5 т/2-933,52 |Ма-1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв-2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ.
МНЕ: Мн ит Сет
М М во тон, сно», МОН пев омто- у но
ТВО тв50 в 2 29
Проміжна сполука 29-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)-5-(трет- бутилдиметилсилілокси)метил)-3-фтор-5-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піролої|1.2-
ЧІИ1.2.4)гриазин-4-іл)бензамід.
Проміжну сполуку 27 розчиняли в СНСЇІЗ (5 мл) і охолоджували до температури 02С. До суміші додавали по краплях гідрат п-толуолсульфонової кислоти (90 мг, 0,474 ммоль), розчинений у
СНЗОН (4 мл), і реакційну суміш залишали перемішуватися протягом 5 хв. Реакційну суміш гасили насич. МансСоЗ(водн.). Органічні продукти промивали насиченим сольовим розчином,
сушили над Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюентів 0 9о5- 40 96 Ес у гексані, з отриманням проміжної сполуки 29. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,09-7,88 (м, 2Н), 7,48 (дт, 9У-35,4, 7,4 Гц, ЗН), 7,30 (д, У-4,6 Гц, 1Н), 6,88 (с, 1Н), 5,69 (дд, У-18,8, 4,2 Гц, 1Н), 5,05 (дт, 9У-54,6, 4,7 Гц, 1Н), 4,62 (дд, 9У-14,9, 51 Гц, 1Н), 3,91-3,64 (м, ЗН), 0,92-0,70 (м, 18Н), 0,13-0,04 (м, 6Н), 0,01 (м, 6Н). 19Е ЯМР (376 МГц, СОСІЗ) б -196 (м).
ГХ/МС:1А-2,61 хв, М5 т/2-631,43 |Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 96 мурашиної кислоти, вода з 0,1 96 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв-2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ. 2. брометил трифеніл фосфорний бромід, КОЇВи, ТГФ
МАВ дмсо, Тої, БОСІ, МНВ
С Б Руг, ТФУ ит тв5о (г) М 2. брометип трифеніл тво о ) М. щої - фосфорний Оромід, В М нОо- КОоїВи, ТФ В чн у тВ50. тв8о є 29 2п
Проміжна сполука 2п-М-(7-(25, 35, 48, 58)-5-(Е)-2-бромвініл)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)- 5-(трет-бутилдиметилсилілокси)метил)-3-фтортетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4(1.2.4)триазин- 4-іл)бензамід.
До розчину проміжної сполуки 29 (228 мг, 0,361 ммоль) у толуолі (0,75 мл) і ДМСО (0,15 мл) в атмосфері М2 додавали гідрохлорид 1-етил-3-(З-диметиламінопропіл)карбодіїміду (ЕОСІ) (208 мг, 1,08 ммоль). До цієї суміші додавали піридин (30 мкл) і ТФУ (15 мкл), і суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 30 хв. Реакційну суміш розбавляли ЕЇОАсС і промивали Н2О, потім насиченим сольовим розчином. Органічні продукти сушили над Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску з отриманням сирого альдегіду. Цей продукт використовували як такий без додаткового очищення.
До суспензії броміду бромметилтрифенілфосфонію (314 мг, 0,72 ммоль) у ТГФ (4 мл) при температурі -407С додавали КОЇВи (1,0М у ТГФ, 1,08 мл, 1,08 ммоль), і реакційну суміш перемішували протягом 2 год. в атмосфері М2. Сирий альдегід розчиняли в ТГФ (4 мл) і додавали по краплях. Реакційну суміш забирали з холодної бані і давали нагрітися до температури 102С протягом 1 год. Реакційну суміш знову охолоджували до температури -402С, і
Зо реакційну суміш гасили насич. МНАСіІ(водн.). Шари розділяли, і органічні продукти сушили над
Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі з використанням елюенту з 0 95-50 90 ЕОАС у гексані з отриманням проміжної сполуки 2. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,08-7,85 (м, 2Н), 7,62-7,36 (м, 2Н), 7,34-7,01 (м, ЗН), 6,92 (с, 1Н), 6,60-6,45 (м, 1Н), 6,35 (д, 9У-8,2 Гц, 1Н), 5,61 (д, 9У-25,1 Гц, 1Н), 4,82 (дд, 9У-56,3, 4,9 Гц, 1Н), 4,69- 4,46 (м, 1Н), 3,97 (д, 9У-11,4 Гц, 1Н), 3,53 (д, 9У-11,4 Гц, 1Н), 0,84 (д, 9У-3,9 Гц, 18Н), 0,13-0,10 (м, 12нН). 19Е ЯМР (376 МГц, СОСІЗ) б -190,60 (м).
ГХ/МС: їК-2,10 хв, М5 т/2-705,54/707,29 |Ма1|Ї; система РХ: Тпегто Ассеіа 1250 СВЕРХ;
Система МС: Тпепто І СО РІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 96 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв-2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ.
МНВ: МН: он -их тв5О х м Ве КОЇВи,тТгФ тво У М й,
ІФ) хвоя нн пото поп п п нн о Ма пня
Ку р. тво тв5О0 2п 2і
Проміжна сполука 2і-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)-5-(трет- бутилдиметилсилілокси)метил)-5-етиніл-3-фтортетрагідрофуран-2-іл)упіроло|1.2-4П1.2.4)гриазин- 4-іл)бензамід.
Проміжну сполуку 2п (204 мг, 0,289 ммоль) в атмосфері М2 розчиняли в ТГФ (8 мл) і охолоджували до температури -40"С. Повільно додавали КОЇВи (1,0М у ТГФ, 1,08 мл, 1,08 ммоль). Реакційну суміш залишали перемішуватися протягом 20 хв і гасили насич.
МНАСІ(водн.). Розчин розбавляли ЕІОАс і промивали насиченим сольовим розчином. Органічні продукти сушили над Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску.
Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюентів 0 95-50 96 ЕОАсС у гексані, з отриманням проміжної сполуки 21. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,12-7,88 (м, 2Н), 7,51 (дт, 9У-36,5, 7,5 Гц, 2Н), 7,32 (д, У-4,6 Гц, 1Н), 6,88 (с, 1Н), 5,79 (д, 9У-22,1 Гц, 1Н), 5,02 (ддд, У-55,3, 5,1, 3,2 Гц, 1Н), 4,56 (дд, 9У-18,1, 51 Гц, 1Н), 3,91 (д, 9У-11,3 Гц, 1Н), 3,83-3,62 (м, 1Н), 2,55 (м, 1Н), 0,90 (дд, 9У-25,3, 1,6 Гц, 18Н), 0,20- 0,08 (м, 12Н). 19Е ЯМР (376 МГц, СОСІЗ) 6-193,10 (шир. с).
ГХ/МС:1К-1,88 хв, М5 т/2-625,24 (Мт); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв-2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ.
МН: МНВ
Жан З хх
У у, ТВАЕ х М тво о М. пня но о М ші
А М тгФ В: М
ТВО є НО ЕЕ гі 2і
Проміжна сполука 2І-М4-(7-(25, ЗА, АВ, 5А)-5-етиніл-З-фтор-4-гідрокси-5- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-Ц(1.2.4|)гриазин-4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки 2і (152 мг, 0,243 ммоль) у ТГФ (3,5 мл) при кімнатній температурі в атмосфері М2 додавали ТВА (1,0М у ТГФ, 700 мкл, 0,700 ммоль) і суміш залишали перемішуватися протягом 30 хв. Розчинники видаляли при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюентів 40 595-100 95
КОДАс у гексані, з отриманням проміжної сполуки 21.
Зо ГХ/МС:1АК-0,88 хв, М5 т/2-397,16 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв-2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ.
МНВХ МН»
Сун у -тх
М М ву Мнюн вв й Йон
НО в НО ЕЕ 2 2
Приклад 2-28, ЗА, 48, 55)-5-(4-амінопіроло(1.2-ЧП1.2.4)гриазин-7-іл)-2-етиніл-4-фтор-2- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-3-ол.
У розчин проміжної сполуки 2) (71 мг, 0,179 ммоль) у СНЗОН (2 мл) додавали конц.
МНаОонНводн.) (0,7 мл), і отриманий розчин перемішували при кімнатній температурі протягом 16 год. Розчинники видаляли при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі, використовуючи градієнт елюентів 0 95-20 956 СНЗОН у СН2СІ2, потім за допомогою обернено-фазової ВЕРХ, використовуючи градієнт елюентів 0 95-20 956 АСМ у Н2О, з отриманням сполуки за прикладом 2. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОЗО0) 6 7,77 (с, 1Н), 6,90-6,70 (м, 2Н), 5,62 (дд, 9У-25,5, 2,6 Гц, 1Н), 5,18 (ддд, 9У-56,0, 5,4, 2,7 Гц, 1Н), 4,57 (дд, 9У-20,5, 5,4 Гц, 1Н), 3,93-3,59 (м, 2Н), 3,02 (д, У-0,7 Гц, 1Н). 19Е ЯМР (376 МГц, СОЗОБ) 6-193,76 (ддд, У-56,0, 25,5, 20,4 Гц).
ГХ/МС:1А8-0,45 хв, М5 т/2-293,13 |(Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 96 мурашиної кислоти, вода з 0,1 96 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
ВЕРХ: ІК-З3,112 хв; система ВЕРХ: серії АдіПепі 1100.
СоЇштп: Рпепотепех Кіпеїех С18, 2,6 мкм, 100А, 4,6х100 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ
Градієнт: 0 хв-8,0 хв 2-98 95 АСМ при 1,5 мл/хв. х МНВх х МНВ: тво у ) ММ ЕОСЬНСІ РУгТФУ ТВ5О- ) мом - ре | - ще ке нОо- М дмсо, То! Охстух щ- тво ТВО СЕ 29 За
Проміжна сполука За-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)-5-(трет- бутилдиметилсилілокси)метил)-3-фтор-5-Ттогптуїітетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4(1.2.4)гриазин- 4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки 29 (1,13 г, 1,79 ммоль) у ДМСО (1 мл) і толуолі (10 мл), приготованому в атмосфері М2, додавали ЕОСІ.НСІ (1,02 г, 5,36 ммоль) і піридин (149 мкл, 1,92 ммоль). Додавали по краплях ТФУ (74 мкл, 0,97 ммоль). Через 1 год. реакційну суміш
Зо перевіряли за допомогою ГХ/МС. Спостерігався один пік з часом утримання аналогічним вихідним речовинам, але з М--1 піком, який дорівнює очікуваному для продукту. Додавали ще 50 мкл піридину, і реакційну суміш перемішували додатково 15 хв. Ніяких змін за даними ГХ/МС.
Реакційну суміш розбавляли ЕОАсС і гасили сумішшю 1:1 насич. МанСоЗ(водн.) і Н2О. Суміш розподіляли між ЕОАс і ще Н2О. Органічний шар відокремлювали і промивали Н2О, насиченим сольовим розчином і потім сушили над Ма2504. Осушувач видаляли шляхом вакуумного фільтрування, і фільтрат концентрували. Залишок обробляли СН2СІі2, концентрували, і отриману речовину поміщали у високий вакуум на 1 год. Продукт, проміжну сполуку За, використовували як таку на наступній стадії.
ГХ/МС:1К-1,90 хв, М5 т/2-629,46 |Ма-1)|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв-2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ.
МНВХ МНВХ
З йез твбо х З НОМН»енСІ, тв5о-. у іх (о) М М нина ІФ) -М М
Ох М- піридин Ме Мм- є - но СЯ т тВ50 0 Т850 ЕЕ
За Кі в)
Проміжна сполука 3р-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)-5-(трет- бутилдиметилсилілокси)метил)-3-фтор-5-((Е)-(гідроксиимино)метил)тетрагідрофуран-2- іл)піроло|1.2-Ц(1.2.4)триазин-4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки За (сирий продукт із попередньої стадії, приблизно 1,79 ммоль) у піридині (11 мл), приготованого в атмосфері М2, однією порцією при кімнатній температурі додавали НОМН2.НСЇ. Реакційну суміш через 5 хвилин контролювали за допомогою ГХ/МС; вихідна речовина була витрачена. Реакційну суміш знову перевіряли через 25 хвилин. Ніяких змін порівняно з початковим моментом не було. Реакційну суміш концентрували, і залишок розподіляли між ЕТОАс ії Н2гО. Органічний шар відокремлювали, промивали насиченим сольовим розчином, сушили над Ма25054 і фільтрували. Фільтрат концентрували, поміщали в
СН2гСЇІ2, знову концентрували, і залишок поміщали у високий вакуум. Продукт, проміжну сполуку
ЗБ, використовували як таку на наступній стадії.
ГХ/МС:1К-1,83 хв, М5 т/2-644,55 |Ма1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 96 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв-2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ. х МАВ: МН: тво і Є св тв5о дк о) М шва о мо М
Пе М АСМ -- Мм- но С или ан ди тВ50 0 ТВ50 є
ЗЬ Зс
Проміжна сполука Зс-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)-5-(трет- бутилдиметилсилілокси)метил)-5-ціано-3-фтортетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4И1.2.4Ігриазин- 4-іл)бензамід.
У розчин проміжної сполуки ЗБ (сирий продукт із попередньої стадії, приблизно 1,79 ммоль) у
АСМ (16 мл) однією порцією додавали СО! (436 мг, 2,69 ммоль). Реакцію проводили в атмосфері М2. Через 20 хвилин реакційну суміш контролювали за допомогою ГХ/МС. Піки з масою вихідного матеріалу і продукт були ледь розділені за часом. Реакційну суміш перевіряли через 1,5 год. УФ-пік, який відповідає вихідному матеріалу, майже зникав, а інтенсивність масового піка була зменшена. Реакційну суміш розбавляли СН2СІ?2 і гасили сумішшю 1:1 насич. мМансозЗ(водн.) і Н2О. Шари розділяли, водний шар знову екстрагували СН2СІ2, і об'єднані
Зо органічний шари екстрагували сумішшю 1:1 насиченого сольового розчину і Н2О, сушили над
Ма25054 і фільтрували. Фільтрат концентрували, і проміжну сполуку Зс виділяли за допомогою хроматографії на колонку із силікагелем з використанням наступного градієнта елюентів: 0 Фо
КОАс у гексані, підвищуючи до 20 96 ЕОАсС у гексані, пауза при 20 95 ЕОАс у гексані, і потім підвищуючи до 40 95 ЕОАс у гексані. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-46) б 8,31 (с, 1Н), 8,07 (с, 1Н), 7,65 (т, У-8 Гу, 1Н), 7,54 (т, 9-8 Гц, 1Н), 1,15 (д, 4 Гц, 1), 7,02 (с, 1Н), 5,82 (д, 9-24 Гу, 1Н), 5,51 (ддд, У-52, 4,8, 2,68 Гц, 1Н), 4,70 (дд, 918,4, 4,4 Гц, 1Н), 3,94 (дд, 9У-53,2, 11,2 Гц, 2Н), 0,93 (с, 9Н), 0,84 (с, 9Н), 0,17 (с, ЗН), 0,16 (с,
ЗН), 0,05 (с, ЗН), 0,01 (с, ЗН). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 6-194,658 (дт, 9-53, 21,4 Гц).
ГХ/МС:1К-1,84 хв, М5 т/2-626,60 |Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв-2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ.
МАВ: . Мне тво у у- тво у - о. иИ-мМ МОМ, о М М дж М- рий Мщ-
МА- меон М тВ50 СЕ ТВ50 СЕ
Зс. за
Проміжна сполука За - (28, ЗА, 45, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-4(1.2.4)утриазин-7-іл)-3-(трет- бутилдиметилсилілокси)-2-(трет-бутилдиметилсилілокси)метил)-4-фтортетрагідрофуран-2- карбонітрил.
У розчин проміжної сполуки Зс (770 мг, 1,23 ммоль) у МеОнН (11,2 мл), охолодженого на бані з крижаною водою, додавали концентрований МН4АОНІ(водн.) (3,74 мл). Охолоджуючу баню видаляли, і гетерогенний розчин, який утворився, перемішували протягом ночі. Наступного дня реакція завершувалася не цілком, як визначалося даними ГХ/МС. Додавали додаткову кількість концентрованого МНАОНводн.) (4 мл) і 2-МеТГ Ф (12 мл). Реакційна суміш ставала гомогенною, але через 20 хвилин не спостерігалося подальшого прогресу реакції. Реакційну суміш концентрували, і залишок розчиняли в ТГФ (15 мл). До цієї суміші додавали концентрований
МНаАОНводн.) (5 мл) і достатню кількість МеонН (1,9 мл), щоб зробити розчин гомогенним і монофазним. Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 22 год.
Реакція майже завершувалася (залишалося приблизно 5 95 вихідної речовини). Реакційну суміш розбавляли СН2СІ2 і Н2О. Шари розділяли, і водний шар розбавляли насиченим розчином
Мансоз(водн.) і екстрагували СН2СІ2. Водний шар нейтралізували за допомогою 2н НОСІ і потім екстрагували СН2СІ2. Об'єднані органічні шари сушили над Ма2504, який видаляли шляхом фільтрування. Фільтрат концентрували, і проміжну сполуку За виділяли з залишку за допомогою хроматографії на колонку із силікагелем з використанням наступного градієнта елюентів: 0 Фо
КОДАс у гексані, підвищуючи до 50 95 ЕАс у гексані, пауза при 50 95 ЕОАсС у гексані, і потім підвищуючи до 100 95 ЕОАс у гексані.
ГХ/МС:1К-1,59 хв, М5 т/2-522,47 |Ма1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,8 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МН» МН» з, й: тво еще НЕРуг НО ше о М. 117 о; М. - м ше М-
ЩА тФ М- твво Е но Е за З
Приклад З - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|!1.2-Щ/1.2.4)триазин-7-іл)-4-фтор-3-гідрокси-2- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-карбонітрил.
У розчин проміжної сполуки За (100 мг, 0,191 ммоль) у ТГФ (2 мл) у поліпропіленовій пробірці в атмосфері М2 при температурі 02О додавали 70 95 НЕ піридину у піридині (60 мкл, 0,478 ммоль).
Через 20 хвилин перевіряли реакційну суміш; реакція не відбувалася, тому додавали додаткову кількість 70 95 НЕ піридину у піридині (150 мкл), і охолоджуючу баню видаляли. Через 1 годину і 50 хвилин додавали додаткову кількість 70 9о НЕ'піридин у піридині (150 мкл). Через ще 2 години додавали додаткову кількість 70 90 НЕ" піридину у піридині (300 мкл). Через ще 2 години і 15 хвилин додавали додаткову кількість 70 95 НЕ"піридину в піридині (1 мл). Реакційна суміш ставала прозорою і гомогенною при останньому додаванні 7095 НЕ'піридину в піридині.
Реакційну суміш перемішували протягом ночі. Реакція завершувалася наступного дня.
Реакційну суміш охолоджували на крижаній бані і гасили Н2О і невеликою кількістю насиченого розчину МансСоОЗ(водн.). Суміш концентрували, і залишок поміщали в ДМСО. Нерозчинну речовину, яка залишилася, видаляли шляхом фільтрування, і фільтрат частково очищали за допомогою ВЕРХ. Виділену речовину розчиняли в ДМФ і очищали за допомогою ВЕРХ. Сполуку за прикладом З виділяли з 0,5 95 у вигляді солі з ТФУ. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМФ-а?7) б 7,92 (с, 1Н), 6,99 (д, У-4,4 Гц, 1Н), 6,89 (д, 9У-4,9 Гц, 1Н), 6,64 (д, 9-6 Гу, 1Н), 5,92 (т, 9У-6,4 Гу, 1Н), 5,83 (дд, У-25,2, 2 Гу, 1Н), 5,40 (ддд, 9У-54,8, 4,8, 2,4 Гу, 1Н), 4,75 (дт, 9-22, 5,2 Гц, 1Н), 4,02 (дд, 9-12, 6,4Гц, 1Н), 3,87 (дд, 9-12, 6,4 Гц, 1Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМФф-а?7) 6-74,92 (с), -193,726 (дт, 9У-54,5, 23,3 Гц).
ГХ/МС:1А-0,56 хв, М5 т/2-29410 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тегто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,8 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
ВЕРХ: ІК-З3,220 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Рпепотепех Кіпеїтех С18, 2,6 мкм, 100А, 4,6х100 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ
Градієнт: 0 хв-8,0 хв 2-98 95 АСМ при 1,5 мл/хв. о Ф) Ф) о. ча Мв5 ї і на 09 909 ла 4р
Проміжна сполука 4р-(За, БВ, ба)-5-(А)-2,2-диметил-1,З-діоксолан-4-іл)-2,2- диметилдигідрофурої|З3,2-4111,3)діоксол-б(За)-він.
У 10 л-ову 4-хгорлу круглодонну колбу поміщали розчин проміжної сполуки 4а, (За, 55, 65, ба)- 5-(В8)-2,2-диметил-1,3-діоксолан-4-іл)-2,2-диметилтетрагідрофурої3,2-4|11,3|діоксол-б-олу, (500 г, 1,90 моль) у суміші дихлорметан/вода (2,7 л/2,3 л) при кімнатній температурі. До нього додавали карбонат натрію (290 г, 3,42 моль). Потім додавали карбонат калію (451 г, 3,24 моль).
Потім додавали 2,2,6,6-тетраметилпіперидиноокси (ТЕМРО, 15,2 г, 96,31 ммоль). До суміші додавали бромід тетрабутиламонію (31 г, 95,20 ммоль). До неї порціями при температурі 35260 додавали М-бромсукцинімід (514 г, 2,86 моль). Отриманий розчин залишали взаємодіяти при перемішуванні протягом 2 год. при кімнатній температурі. Отриманий розчин екстрагували 2х1 л дихлорметану, і органічні шари поєднували. Отриману суміш промивали 1х1,5 л води. Суміш сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували у вакуумі. Це давало (сиру) проміжну
Зо сполуку 465. в) о т меон СД о 6009 на 09 4р 4с
Проміжна сполука до-(За, 55, ба, ба)-5-(Н)-2,2-диметил-1,3-діоксолан-4-іл)-2,2- диметилтетрагідрофурої3,2-4|11П1,3|діоксол-б-ол.
У 2 л-ову 4-хгорлу круглодонну колбу поміщали розчин проміжної сполуки 46 (370 г, 1,29 моль) у метанолі (1300 мл). До нього порціями при кімнатній температурі додавали боргідрид натрію (26,4 г, 706,38 ммоль). Отриманий розчин залишали взаємодіяти при перемішуванні протягом 2 год. при кімнатній температурі. Отриману суміш концентрували у вакуумі. Реакцію потім гасили шляхом додавання 1000 мл 5 95-ного водного розчину хлориду амонію. Отриманий розчин екстрагували З3х500 мл дихлорметану, і органічні шари поєднували. Отриманий розчин промивали 2х300 мл води. Суміш сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували у вакуумі. Сирий продукт очищали перекристалізацією з петролейного ефіру. Це дає проміжну сполуку 46.
о; о о о); я ча ром щі на но 5Оз; Маон МАРО 4с 4а
Проміжна сполука 4а.
У 5000 мл-ову 4-хгорлу круглодонну колбу поміщали розчин проміжної сполуки 4с (350 г, 1,34 моль) у дихлорметані (700 мл). До нього додавали бромід тетрабутиламонію (476,8 г, 1,48 моль). До суміші додавали 50 95 гідроксид натрію/вода (700 г). До неї декількома партіями додавали 2-(бромметил) нафталін (340 г, 1,54 моль). Отриманий розчин залишали взаємодіяти при перемішуванні протягом 4 год. при кімнатній температурі. Реакцію потім гасили шляхом додавання 1800 мл суміші дихлорметан/вода (1:11). Отриманий розчин екстрагували 2х1 л дихлорметану, і органічні шари поєднували. Отриману суміш промивали 1х1000 мл води.
Залишок розчиняли в суміші 1000/1000 мл петролейний ефір/вода. Сирий продукт очищали перекристалізацією з петролейного ефіру. Це давало проміжну сполуку 44. о, о, но о) зані ча бучо р дсон/ ньо но у; ве
МАРО (9 МАРО (У 4а де
Проміжна сполука 4е - (А!Я)-1-(За, БА, 68, ба)-2,2-диметил-6-(нафталін-2- ілметокси)тетрагідрофурої|3,2-4|11,З|діоксол-5-іл)етан-1,2-диол.
У 5 л-ову 4-хгорлу круглодонну колбу поміщали проміжну сполуку 44 (500 г, 1,25 моль). До неї додавали оцтову кислоту (1,8 л). До суміші додавали воду (600 мл). Отриманий розчин залишали взаємодіяти при перемішуванні протягом ночі при кімнатній температурі. Тверді продукти відфільтровували. Отриманий розчин екстрагували Зх1 л петролейногоого ефіру, і водні шари поєднували. Отриманий розчин розбавляли 2 л етилацетату. Отриману суміш промивали 2х2 л хлориди натрію(водн.). Значення рН розчину встановлювали рівним 8 за допомогою карбонату натрію (50 95). Отриманий розчин екстрагували 2х1 л етилацетату, і органічні шари поєднували і концентрували у вакуумі. Це давало проміжну сполуку 4е. 7 о но о ! но ве Н -о я що Мма!0, КЗ Що ХО о (6; шоп т о о о ле / о у
Проміжна сполука 41 - (За, 55, 68, ба)-2,2-диметил-6-(нафталін-2-ілметокси)тетрагідрофурої3,2- 41И1,З)діоксол-5-карбальдегід.
У 10 л-ову 4-хгорлу круглодонну колбу при кімнатній температурі поміщали розчин проміжної сполуки 4е (300 г, 833,33 ммоль) у 1,4-діоксані (2100 мл). Його обробляли шляхом додавання розчину перйодату натрію (250 г) у воді (4000 мл) при кімнатній температурі протягом 0,5 год.
Отриманий розчин залишали взаємодіяти при перемішуванні протягом 0,5 год. при кімнатній температурі. Тверді продукти відфільтровували. Отриманий розчин екстрагували Зх1000 мл етилацетату, і органічні шари поєднували. Отриману суміш промивали 2х1000 мл розчини хлориду натрію(водн.). Отриману суміш концентрували у вакуумі. Це давало проміжну сполуку 4. о но ЗА пи сно но- Ї що 009 шт в) о, ши о, ди; Су ва
Проміжна сполука 449 - ((За, 65, ба)-2,2-диметил-6-(нафталін-2-ілметокси)тетрагідрофурої3,2-
ФІИ1,З)діоксол-5,5-діїл)удиметанол.
У 10 л-ову 4-хгорлу круглодонну колбу поміщали розчин проміжної сполуки 4 (250 г, 761,36 ммоль) у суміші вода/тетрагідрофуран (1250/1250 мл) при кімнатній температурі. До нього по краплях при перемішуванні при температурі 0-152С додавали 2н гідроксид натрію(водн.) (1500 мл). До суміші додавали формальдегід (620 мл). Отриманий розчин залишали взаємодіяти при перемішуванні протягом ночі при кімнатній температурі. Отриманий розчин екстрагували 2х2000 мл етилацетату. Отриману суміш промивали 2х2000 мл розчини хлориду натрію(водн.).
Органічні шари поєднували і сушили над безводним сульфатом натрію. Залишок наносили на колонку із силікагелем з петролейним ефіром'етилацетатом (2/1). Сирий продукт перекристалізовували із суміші етилацетат:етанол при співвідношенні 1г/1 мл:1 мл). Це давало проміжну сполуку 49. но 8) й: р твоево оно но Я чук ТВОРБСЇ нот У чу о) пили ноаниннй о; (С ОСМ, ТЕА
Ся б
Проміжна сполука 4пП - ((За, 58, 65, ба)-5-(трет-бутилдифенілсилілокси)метил)-2,2-диметил-6б- (нафталін-2-ілметокси)тетрагідрофуроїЇ3,2-4111,3|діоксол-5-іл)метанол.
У 5 л-ову 4-хгорлу круглодонну колбу, продуту і витриману в інертній атмосфері азоту, поміщали розчин проміжної сполуки 44 (125 г, 346,84 ммоль) у дихлорметані (2500 мл) при кімнатній температурі. До суміші при кімнатній температурі додавали триєетиламін (157,5 мл). До нього по краплях при перемішуванні при температурі 0-102С додавали трет-бутилдифенілсиліл хлорид (157,5 мл). Отриманий розчин залишали взаємодіяти при перемішуванні протягом ночі при кімнатній температурі. Реакцію потім гасили шляхом додавання 37,5 мл метанолу.
Отриману суміш промивали 2х500 мл 5 95 хлориду водню(водн.) і 2х500 мл розчини бікарбонату
Зо натрію(водн.). Отриману суміш промивали 2х500 мл 1н гідроксиду натрію(водн.). Суміш сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували у вакуумі Сирий продукт очищали перекристалізацією із суміші дихлорметан/гексан. Це давало проміжну сполуку 40.
тво оно твокво оно но- Й є РизеР, Ї» |-Н і є
Кі Ко) нн У "о о Ітід і)
Проміжна сполука 4і - трет-бутил(((За, 5К, 65, ба)-5-«(йодметил)-2,2-диметил-6-(нафталін-2- ілметокси)тетрагідрофурої3,2-4|11,3|діоксол-5-іл)уметокси)дифенілсилан.
У 1000 мл-ову З-хгорлу круглодонну колбу, продуту і, що витримується в інертній атмосфері азоту, поміщали розчин проміжної сполуки 4п (20 г, 31,73 ммоль) у толуолі (320 мл), трифенілфосфін (35 г, 132,11 ммоль), імідазол (8,96 г, 132,26 ммоль). Потім декількома партіями при температурі 602С додавали йод (16,95 г, 66,8 ммоль). Отриманий розчин перемішували протягом ночі при температурі 809С на масляній бані. Реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури на бані вода/лід. Отриманий розчин розбавляли 1000 мл етилацетату. Отриману суміш промивали 2х300 мл тіосульфати натрію(водн.). Отриману суміш промивали їх300 мл розчину хлориду натрію(водн.). Суміш сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували у вакуумі. Залишок наносили на колонку із силікагелем за допомогою суміші етилацетат/петролейний ефір (1:10). Це давало проміжну сполуку 4.
ТВОРБО о. но ТВоРБО о. ДО у є РО/С,ТЕА А у р: до09 ЕЮН, Ес 009 5 й 29 І
Проміжна сполука 4| - трет-бутилдифеніл(((За, 5, 65, ба)-2,2,5-триметил-б-(нафталін-2- ілметокси)тетрагідрофурої|3,2-4|11,3|діоксол-5-іл)уметокси)силан.
У 2000 мл-ову круглодонну колбу, продуту і витриману в інертній атмосфері азоту, поміщали розчин проміжної сполуки 4і (66 г, 88,47 ммоль) у суміші етанол/етилацетат (600/600 мл), триетиламін (20,7 г, 202,52 ммоль), паладій на вуглеці (10 95 мас, 24,8 г, 23,30 ммоль).
Отриманий розчин перемішували протягом З год. при температурі 402С. Тверді продукти відфільтровували. Отриману суміш концентрували у вакуумі. Отриманий розчин розбавляли 1500 мл етилацетату. Отриману суміш промивали 1х500 мл розчину хлориду натрію(водн.).
Суміш сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували у вакуумі. Це давало проміжну сполуку 41. твово тро о м твор о рем, нго В ча ло, й
ОО "
Проміжна сполука 4К - (За, 5В8, 65, ба)-5-(трет-бутилдифенілсилілокси)метил)-2,2,5- триметилтетрагідрофурої3,2-4111,3|діоксол-б-ол.
У 500 мл-ову круглодонну колбу поміщали розчин проміжної сполуки 4) (1,0 г, 1,63 ммоль) у дихлорметані (15 мл), воду (1,25 мл) і 2,3-дихлор-5,6-диціано-1,4-бензохінон (ДДО, 780 мг, 3,40 ммоль). Отриманий розчин перемішували протягом 1 год. при кімнатній температурі.
Отриманий розчин розбавляли 50 мл дихлорметану. Отриману суміш промивали 1х30 мл води і 2х30 мл розчини бікарбонату натрію(водн.). Отриману суміш промивали 1х30 мл розчину хлориду натрію(водн.о. Суміш сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували у вакуумі. Залишок наносили на колонку із силікагелем за допомогою суміші етилацетат/петролейний ефір (1:20--1:10). Це давало проміжну сполуку 4К.
Т В) ІФ) но в) ча
В ше ТВА го о я т ХО рем Я ча но (9) но а4к 4
Проміжна сполука 4! - (За, 58, 65, ба)-5-(гідроксиметил)-2,2,5-триметилтетрагідрофурої3,2- 4ІИ1,З)діоксол-б-ол.
У 50 мл-ову круглодонну колбу поміщали розчин проміжної сполуки 4К (520 мг, 1,12 ммоль) у тетрагідрофурані (9 мл), фторид тетрабутиламонію (369 мг, 1,40 ммоль). Отриманий розчин перемішували протягом 2 год. при кімнатній температурі. Отриману суміш концентрували у вакуумі Залишок наносили на колонку із силікагелем за допомогою суміші дихлорметан/метанол (100:1). Це давало проміжну сполуку 41. 1ТН ЯМР (300 МГц, ДМСО-аб): б 5,64 (д, 9У-3,9Гц, 1Н), 4,96 (д, У-6,6Гц, 1Н), 4,67 (м, 1Н), 4,55 (м, 1Н), 4,05 (м, 1Н), 3,24-3,30 (м, 1Н), 3,11-3,18 (м, 1Н), 1,50 (с, ЗН), 1,27 (с, ЗН), 1,16 (с, 1Н). но о Впо о ний Що ВпВг,Ман дме С но ТІФ Впо (в) ді ат
Проміжна сполука 4т - (За, 5А, 65, ба)-6-(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-2,2,5- триметилтетрагідрофуроїЗ3,2-4111,3|діоксол.
У 50 мл-ову З-хгорлу круглодонну колбу, продуту і витриману в інертній атмосфері азоту, поміщали розчин проміжної сполуки 41 (180 мг, 0,84 ммоль) у тетрагідрофурані (4 мл). Потім при температурі 02С додавали порціями гідрид натрію (60 9о мас, 140 мг, 3,50 ммоль). Отриманий розчин перемішували протягом 30 хв при температурі 020. Отриманий розчин залишали взаємодіяти при перемішуванні протягом додаткових 30 хв при кімнатній температурі. До цього розчину по краплях при перемішуванні при температурі 02С додавали бензил бромід (452 мг, 2,62 ммоль). Отриманий розчин залишали взаємодіяти при перемішуванні протягом додаткових
З год. при кімнатній температурі. Реакцію потім гасили шляхом додавання 30 мл хлориду
Зо амонію(водн.о. Отриманий розчин екстрагували 50 мл дихлорметану, і органічні шари поєднували і сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували у вакуумі. Залишок наносили на колонку із силікагелем за допомогою суміші етилацетат/петролейний ефір (1:30- 1:20). Це давало проміжну сполуку 4т.
ВпОо о) Впо Оу ог ноБО, їі Коли
Впо (в); АсОнН, АсоОо Впо Ос 4т ап
Проміжна сполука 4п - (28, ЗА, 45, 5Н8)-4-(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-5- метилтетрагідрофуран-2,З-діїл діацетат.
У 1000 мл-ову круглодонну колбу поміщали проміжну сполуку 4т (також отриману відповідно до
Віозсі. Віоїеєсп. Віоспет. 1993, 57, 1433-1438, 45 г, 111,19 ммоль), оцтову кислоту (270 мл),
оцтовий ангідрид (90 мл), сірчану кислоту (45 4). Отриманий розчин перемішували протягом 30 хв при кімнатній температурі. Реакцію потім гасили шляхом додавання 1000 мл суміші вода/лід.
Отриманий розчин розбавляли 3000 мл етилацетату. Отриману суміш промивали 2х1000 мл води і 4х1000 мл розчину бікарбонату натрію(водн.). Отриману суміш промивали 2х1000 мл розчину хлориду натрію(водн.). Суміш сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували у вакуумі. Залишок наносили на колонку із силікагелем за допомогою суміші етилацетат/петролейний ефір (1:30-1:20). Це давало проміжну сполуку 4п. 1ТН ЯМР (300 МГц, СОСІЗ): б 7,28-7,38 (м, 1ОН), 6,13 (с, 1Н), 5,37 (д, У-4,8Гц, 1Н), 4,44-4,68 (м,
АН), 4,33 (д, 9У-5,1Гц, 1Н), 3,33-3,45 (м, 2Н), 2,15 (с, ЗН), 1,88 (с, ЗН), 1,35 (с, ЗН).
М5 т/2-451|М--Ма|)
О. оОдс яки -о
Во В, 1) КосОоз, Меон Впо а
ВПО Одес 2) МІ5, ВидМІ, ОСМ ВПО ОН ап 4о
Проміжна сполука 40 - (ЗА, 45, 5Н)-4-(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-3-гідрокси-5- метилдигідрофуран-2(ЗН)-он.
Проміжну сполуку 4п (1,3 г, З ммоль) розчиняли в безводному Меон (15 мл). Додавали порошок карбонату калію (456 мг, 3,3 ммоль), і реакційну суміш перемішували протягом 1 год. Реакційну суміш потім концентрували при зниженому тиску. Додавали ацетонітрил і перемішували протягом 5 хвилин. Нерозчинні речовини відфільтровували і промивали ацетонітрилом.
Фільтрат концентрували при зниженому тиску. Отриману речовину розчиняли в безводному
РСМ (20 мл). Додавали тетрабутиламоній йодид (1,66 г, 4,5 ммоль) і М-йод-сукцинімід (МІ5, 1,69 г, 2,5 ммоль). Протягом 16 год. реакційну суміш перемішували в темряві. Додавали ще МІЗ (0,85 г, 125 ммоль) і перемішували протягом 4 годин. Додавали ще МІ5 (0,85 г, 1,25 ммоль) і перемішували протягом 2 днів у темряві. Розбавляли реакційну суміш ЕОАс і два рази промивали водним розчином тіосульфату натрію і потім насиченим водним розчином хлориду натрію. Органічну частину сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Очищали на колонці із силікагелем (0-30 96 ЕОАс у гексані) з отриманням проміжної сполуки 40. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ): б 7,35-7,22 (м, 10ОН), 4,82 (шир., 1Н), 4,75-4,66 (м, 2Н), 4,55-4,44 (м, 2Н), 4,13 (д, У-8Гц, 1Н), 3,70-3,45 (м, 2Н), 1,38 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-2,58 хв, М5 т/2-342,9 (МАТ), 360,0 (МАН2ОЇ; ГУ/МС система: Тпегто І СО Адмапіаде;
Ко) Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 30х4,6 мм; буфер А: 0,1 95 оцтова кислота у воді; буфер
В: 0,1 95 оцтова кислота в ацетонітрилі 5-100 95 буфер В за 2,5 хв, потім 100 95 протягом 0,9 хв при 2 мл/хв.
ВЕРХ: І8-3,78 хв; система ВЕРХ: Адіїепі 1100; Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 50х4,6 мм; буфер А: 0,05 95 ТФУ у воді; буфер В: 0,05 95 ТФУ в ацетонітрилі; 2-98 95 буфер В за 5 хвилин при 2 мл/хв. во дого, ВпВг во у
ВпО ОН Ос ВПО ОВп 4о ар
Проміжна сполука 4р - (ЗВ, 45, 5Н)-3,4-біс(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-5- метилдигідрофуран-2(ЗН)-він.
Проміжну сполуку 40 (955 мг, 2,79 ммоль) розчиняли в ЕІОАс (10 мл). Додавали бензил бромід (400 мкл, 3,35 ммоль) і оксид срібла(І) (712 мг, 3,07 ммоль). Перемішували при температурі 602С в атмосфері М2 (газ) у темряві протягом З год. Додавали ще бензил бромід (400 мкл, 3,35 ммоль) і перемішували при температурі 602С в атмосфері М2 (газ) у темряві протягом 16 год.
Додавали ще оксид срібла(І) (350 мг, 1,5 ммоль) і перемішували при температурі 602С в атмосфері М2 (газ) у темряві протягом 8 год. Охолоджували до кімнатної температури. Тверді продукти відфільтровували і промивали ЕІОАс. Концентрували фільтрат при зниженому тиску з отриманням олії. Додавали гексан і перемішували протягом 2 год. з отриманням твердої речовини. Збирали тверду речовину і промивали гексаном. Сушили тверду речовину у високому вакуумі з отриманням проміжної сполуки 4р. 1Н ЯМР (400 МГц, СОСІЗ): 6 7,35-7,16 (м, 15Н), 5,03 (д, 9-12Гц, 1Н), 4,79-4,71 (м, 2Н), 4,52-4,40 (м, 4Н), 4,06 (д, 9У-6Гц, 1Н), 3,49-3,39 (м, 2Н), 1,38 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-2,91 хв, М5 т/2-433,1 (МТ), 450,1 (МАН2ОЇ; ГУ/МС система: Тпепгто І СО Адмапіаде;
Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 30х4,6 мм; буфер А: 0,1 95 оцтова кислота у воді; буфер
В: 0,1 95 оцтова кислота в ацетонітрилі; 5-100 95 буфер В за 2,5 хв, потім 100 95 протягом 0,9 хв при 2 мл/хв.
ВЕРХ: І8-4,54 хв; система ВЕРХ: Адіїепі 1100; Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 50х4,6 мм; буфер А: 0,05 95 ТФУ у воді; буфер В: 0,05 95 ТФУ в ацетонітрилі 2-98 95 буфер В за 5 хвилин при 2 мл/хв.
Мне
МН ! і-сІ с о о 2 Сію | тод М в у ум не я ' !
ЕД я пвиці,тгФ ВО У он
ВпОо ОВп ар 16 44
Проміжна сполука 44 - (ЗА, 45, 5Н8)-2-(4-амінопіроло|(1.2-4(1.2.4)триазин-7-іл)-3,4- біс(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-о-метилтетрагідрофуран-2-ол.
Проміжну сполуку 15 (148 мг, 0,570 ммоль) ії 1,2-біс(хлордиметилсиліл)етан (123 мг, 0,570 ммоль) розчиняли в безводному ТГФ (20 мл) і перемішували в атмосфері Аг (газ) при температурі -702С. У реакційну суміш по краплях додавали н-бутиллітій (2,5М розчин у гексані, 684 мкл, 1,71 ммоль), підтримуючи при цьому температуру нижче -652С. Реакційну суміш залишали нагріватися до температури -402С і витримували протягом 15 хв. Потім у реакційну суміш в атмосфері Аг (газ) додавали розчин проміжної сполуки 4р (224 мг, 0,518 ммоль) у ТГФ (10 мл), попередньо охолоджений до температури -702С. Отриманий розчин перемішували протягом 2 год. при температурі -402С. Реакційну суміш потім виливали в суміш, яка перемішується, ЕТАс і лимонної кислоти(водн.). Перемішували протягом 5 хв. Поєднували органічний шар і промивали насиченим розчином Масі(водн.). Сушили органічний шар над безводним Ма2504 і концентрували при зниженому тиску. Очищали за допомогою
Зо препаративної ВЕРХ з отриманням проміжної сполуки 44.
ГХ/МС: їК-2,60 хв, М5 пт/2-567,3 |М-Н1|, 565,1 І(М-1|; ГХ/МС система: Тпегто (СО) Аймапіаде;
Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 30х4,6 мм; буфер А: 0,1 95 оцтова кислота у воді; буфер
В: 0,1 95 оцтова кислота в ацетонітрилі; 5-100 95 буфер В за 2,5 хв, потім 100 95 протягом 0,9 хв при 2 мл/хв.
ВЕРХ: І8-3,22 хв; система ВЕРХ: Адіїепі 1100; Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 50х4,6 мм; буфер А: 0,05 95 ТФУ у воді; буфер В: 0,05 95 ТФУ в ацетонітрилі; 2-98 95 буфер В за 5 хвилин при 2 мл/хв.
МНь МН»
УМ, 0 ТЕВ, ОСМ СИ
ВпиО о о й ВПО г 9 М «у ун ВЕзеЕБО «3,
ВпОо ОВп ВПО ОВп 49 Аг
Проміжна сполука 4г-7-(25, 35, 45, 5Н)-3,4-біс(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-5- метилтетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4Ц1.2.4|)гриазин-4-амін.
Проміжну сполуку 44 (81 мг, 0,143 ммоль) розчиняли в безводному ОСМ (15 мл) і перемішували в атмосфері М2 (газ) на крижаній бані. Однією порцією додавали триєтилсилан (114 мкл, 0,715 ммоль). Додавали по краплях трифторид бору-діетил ефірат (27 мкл, 0,215 ммоль).
Перемішували протягом 15 хв і потім крижану баню відставляли. Перемішували протягом 60 хв.
Додавали триетиламін (100 мкл, 0,715 ммоль) і концентрували при зниженому тиску. Розчиняли в ЕЮАс і промивали насиченим розчином МансСозЗ(водн.) (2х) і потім насиченим розчином
Масі(водн.). Органічні фракції сушили над безводним Ма2504 і концентрували при зниженому тиску. Очищали на колонці із силікагелем (0-80 96 Е(ОАс у гексані) з отриманням проміжної сполуки 4Гг. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ): б 7,71 (с, 1Н), 7,35-7,10 (м, 16Н), 6,82-6,78 (м, 1Н), 5,57 (д, У-4,4Гц, 1Н), 4,70-4,45 (м, 6Н), 4,25-4,15 (м, 2Н), 3,55-3,40 (м, 2Н), 1,42 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-2,75 хв, М5 іт/2-551,4 |МА1|; ГХ/МС система: Тпепто СО Адмапіаде
Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 30х4,6 мм; буфер А: 0,1 95 оцтова кислота у воді; буфер
В: 0,1 95 оцтова кислота в ацетонітрилі; 5-100 95 буфер В за 2,5 хв, потім 100 95 протягом 0,9 хв при 2 мл/хв.
ВЕРХ: І8-3,57 хв; система ВЕРХ: Адіїепі 1100; Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 50х4,6 мм; буфер А: 0,05 95 ТФУ у воді; буфер В: 0,05 95 ТФУ в ацетонітрилі; 2-98 95 буфер В за 5 хвилин при 2 мл/хв. о ХУ мя Ра чернь о У Моя
ВПО дит НО
НС у СОН НС у
Е я меон Ех
ВпОо ОВп но он 4г 4
Приклад 4 - (28, 35, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-ЩЦП1.2.4|Ігриазин-7-іл)-2-(гідроксиметил)-2- метилтетрагідрофуран-3,4-диол
Проміжну сполуку 4г (23 мг, 0,042 ммоль) розчиняли в розчині мурашина кислота/меон (1:9, 10 мл). Додавали паладієву чернь і перемішували при температурі 609С протягом 90 хв.
Охолоджували до кімнатної температури і фільтрували через целіт. Фільтрат концентрували при зниженому тиску. Очищали за допомогою препаративної ВЕРХ. Концентрували при зниженому тиску. Розчиняли в МанНСОЗ(водн.) і очищали за допомогою ВЕРХ у нейтральних умовах з отриманням сполуки за прикладом 4.
Система препаративної ВЕРХ: Сіїзоп 215 І ідцій Напаїег; Рпепотепех Сетіпі, С18, 4мкм, 100х30,0 мм
Буфер А: 0,1 95 ТФУ у воді; буфер В: 0,1 95 ТФУ в ацетонітрилі; 5-100 95 буфер В за 13 хвилин при 20 мл/хв. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ): 6 8,01 (с, 1Н), 7,41 (д, 9-48 Гц, 1Н), 7,02 (д, У-4,8 Гц, 1Н), 5,33 (д, 9-8
Гц, 1ТН), 4,53-4,49 (м, 1Н), 4,15 (д, 9У-5,6 Гу, 1Н), 3,50 (м, 2Н), 1,27 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-0,30 хв, М5 т/2-281,3 (МА11, 279,0 |М-1); ГХ/МС система: Тпегто СО Аймапіаде;
Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 30х4,6 мм; буфер А: 0,1 95 оцтова кислота у воді; буфер
В: 0,1 95 оцтова кислота в ацетонітрилі; 5-100 95 буфер В за 2,5 хв, потім 100 95 протягом 0,9 хв при 2 мл/хв.
ВЕРХ: їі8-0,42 хв; система ВЕРХ: Адіїепі 1100; Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 50х4,6 мм; буфер А: 0,05 95 ТФУ у воді; буфер В: 0,05 95 ТФУ в ацетонітрилі; 2-98 95 буфер В за 5 хвилин при 2 мл/хв. 5О0
МНВх МНВ: с р, ТММ С см но- о Й мщ7 ВГ; мого Ми
НО, Ссносіь М , тво отв5 тво отв5 1т за
Проміжна сполука 5Ба-М-(7-(25, 35, 45, 5Н)-5-азидо-3,4-біс(трет-бутилдиметилсилілокси)-5- ((триметилсилілокси)метил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4Я(1.2.4)гриазин-4-іл)бензамід.
До розчину сирої проміжної сполуки т, М-(7-(25, 35, 45)-3,4-біс(трет-бутилдиметилсилілокси)-
Б-гідрокси-5-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4Я(1.2.4)гриазин-4-іл)бензаміду, (9110 мг, «0,18 ммоль) і азидотриметилсилану (242 мкл, 1,84 ммоль) у дихлорметані (1,5 мл) при кімнатній температурі в атмосфері аргону додавали бромід індію (ІІІ) (130 мг, 0,369 ммоль).
Через 1 год. реакційну суміш гасили насиченим водним розчином бікарбонату натрію (1 мл).
Отриману суміш розподіляли між дихлорметаном (20 мл) і насиченим водним розчином бікарбонату натрію (20 мл). Фази розділяли, і водний шар екстрагували дихлорметаном (20 мл).
Об'єднані органічні шари сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску з отриманням проміжної сполуки 5а, яку прямо використовували на наступній стадії без додаткового очищення.
ГХ/МС:1К-3,52 хв, М5 т/2-712,16 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО РЕІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,55 хв 100 95 АСМ, 3,55 хв-4,2 хв 100 95-2 95 АСМ при 2 мкл/хв.
МнНВА МнВх тМ5о 7 но й
МУ у М у у тво отв5 по он
Ба Бо
Проміжна сполука 5р-М-(7-(25, ЗА, 45, 5Н)-5-азидо-3,4-дигідрокси-5- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4(1.2.4)гриазин-4-іл)бензамід.
До розчину сирої проміжної сполуки 5а (4120 мг, «0,168 ммоль) у ДМФ (5 мл) при кімнатній температурі додавали фторид цезію (256 мг, 1,68 ммоль). Через 25 год. реакційну суміш розбавляли насиченим сольовим розчином (100 мл), і отриману суміш екстрагували етилацетатом (3х100 мл). Об'єднані органічні шари сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску з отриманням проміжної сполуки 50, яку прямо використовували на наступній стадії без додаткового очищення.
ГХ/МС:1К-1,40 хв, М5 т/2-412,17 (МаА1), РХ система: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 595-295 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкКл/хХвВ.
ВЕРХ: І8-2,46 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
МН МН. й: сх де ЛО, ч й но М но М о меон в М
М у Мо и но он НО он 19) 5
Приклад 5 (- (28, 35, 4В, 55)-5-(4-амінопіроло|(1.2-4(1.2.4-гриазин-7-іл)-2-азидо-2- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-3,4-діол.
До розчину сирої проміжної сполуки 56 у метанолі (1 мл) при кімнатній температурі додавали концентрований гідроксид амонію (1 мл). Через 2 дні реакційну суміш концентрували при зниженому тиску і відразу очищали за допомогою препаративної ВЕРХ (Рпепотіпех Зупегаі 4 мк Нуайго-БЕЕ. 80А, колонка 150х30 мм, градієнт 5-100 95 ацетонітрил/вода). Фракції, які містять бажані продукти, поєднували і концентрували при зниженому тиску. Залишок знову очищали за допомогою хроматографії на колонку з 52 (4 г 502 СотрШазп НР сої Соїштп, 0-20 Фо метанол/дихлорметан) з отриманням сполуки за прикладом 5. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) 5 7,79 (с, 1Н), 6,86 (д, 9У-4,5 Гц, 1Н), 6,77 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 5,51 (д, 3-6,0 Гц, 1Н), 4,63 (т, У-5,8 Гц, 1Н), 4,37 (д, 9У-5,7 Гц, 1Н), 3,69 (д, У-12,0 Гц, 1Н), 3,59 (д, 9У-12,0
Гц, 1ТН).
ГХ/МС:1А-0,76 хв, М5 т/2-308,08 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95
АСМ, 1,5 хв-2,2 хв 100 95 АСМ, 2,2 хв-2,4 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,4 хв-2,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: І8-1,287 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.;
ТОХ: елюент: 20 95 метанол у дихлорметані, КІ-0,4 (УФ) но-вя
МН» но в Приклад 6 й: Ж х но о но о Хм м Р(О)СІв; о-р М мя М- но ІФ) у М - (пВиз МН» РО Но іо Му но Е че М
НО СЕ
3 ТРІ
Приклад 6 (вказаний також як ТР-1) - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-Я(1.2.4Ітриазин-7-іл)- 2-ціано-4-фтор-3-гідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
Сполуку за прикладом З (15,0 мг, 0,05 ммоль) сушили в колбі у вакуумі протягом ночі. У колбу додавали триметилфосфат (0,5 мл) і 1,8-біс(диметиламіно)нафталін (25 мг, 0,12 ммоль), і розчин залишали перемішуватися в атмосфері М2, охолоджуючи на бані лід/вода. Додавали дистильований оксихлорид фосфору (10 мкл, 0,11 ммоль), і реакційну суміш залишали перемішуватися протягом 4 год. при охолодженні. Додавали трибутиламін (0,1 мл, 0,42 ммоль) і
Зо пірофосфат трибутиламонію (0,8 мл 0,5М розчину в ДМФ, 0,4 ммоль), і реакційну суміш залишали перемішуватися протягом ще 45 хв при охолодженні. Реакційну суміш гасили бікарбонатом триетиламонію (0,5М, 5 мл). Розчинники видаляли шляхом розпарювання на роторі, і сиру суміш, яка залишилася, розчиняли в 2 мл води. Продукт очищали з використанням колонки Зерпадех ОЕАЕ А-25 з лінійним градієнтом 0-1М бікарбонату триетиламонію. Продукт,
який містить Фракції, поєднували і концентрували з отриманням сполуки за прикладом 6 (ТР), потім розчиняли в 1 мл води з отриманням 10мМ розчину.
М5 т/2-532,0 (М-11
Іонообмінна ВЕРХ, час утримання: 12,015 хв; колонка: ОМАРас РА-100 4х250 мм 5М
Розчинник А: вода тії; розчинник В: 0,5М тетраетиламонію бромід; програма градієнта розчинника: урівноваження з використанням 100 9о А протягом 10 хв, потім градієнт 0-80 95 В протягом 14 хв; потік: 1 мл/хв. но-в х. МН не Ов Приклад 7
У Чо) но о й М Р(О)СІ»; Но ов чи: я Мм- но о І і; я- - М я, (пВизічнНЬ Рон. о М ш-/
НО СЕ -Н М но Е 2 твР2
Приклад 7 (також ТР2) - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-Я(1.2.4)Ігриазин-7-іл)-2-етиніл-4- фтор-3-гідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
Сполуку за прикладом 2 (16,0 мг, 0,055 ммоль) сушили в колбі у вакуумі протягом ночі. У колбу додавали триметилфосфат (0,5 мл) і 1,8-біс(диметиламіно)нафталін (28 мг, 0,13 ммоль), і розчин залишали перемішуватися в атмосфері М2, охолоджуючи на бані лід/вода. Додавали дистильований оксихлорид фосфору (11 мкл, 0,12 ммоль), і реакційну суміш залишали перемішуватися протягом 4 год. при охолодженні. Додавали трибутиламін (0,11 мл, 0,42 ммоль) і трибутиламонію пірофосфат (0,9 мл 0,5М розчину в ДМФ, 0,45 ммоль), і реакційну суміш залишали перемішуватися протягом ще 45 хв при охолодженні. Реакційну суміш гасили бікарбонатом триетиламонію (0,5М, 5 мл). Розчинники видаляли шляхом розпарювання на роторі і сиру суміш, яка залишилася, розчиняли в 2 мл води. Продукт очищали з використанням колонки Зерпадех ОЕАЕ А-25 з лінійним градієнтом 0-1М бікарбонату триетиламонію. Продукт, який містить фракції, поєднували і концентрували з отриманням сполуки за прикладом 7 (ТР), потім розчиняли в 1,4 мл води з отриманням 10 Мм розчину.
М5 т/2-531,0 (М-1)
Іонообмінна ВЕРХ, час утримання: 19,829 хв; колонка: ОМАРас РА-100 4х250 мм 5М
Розчинник А: тій вода; розчинник В: 0,5М бромід тетраетиламонію; програма градієнта розчинника: урівноважування з використанням 100 95 А протягом 10 хв, потім градієнт 0-80 Фо В протягом 14 хв; потік: 1 мл/хв. нов
МН» но бро Приклад 8
З Х і: ро); ме" и НОо де ря (пВизМ Ні РОН» ом но он че М
НО он 1 ТРЗ
Приклад 8 (ТРЗ) - (28, 35, 48, 55)-5-(4-амінопіроло(1.2-Я01.2.4)гриазин-7-іл)-2-ціано-3,4-
Зо дигідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
До розчину сполуки за прикладом 1 (5,0 мг, 0,017 ммоль) у РО(ОМЕе)зЗ (0,6 мл) при температурі 02С додавали РОСІЗ (45 мг, 0,29 ммоль). Реакційну суміш перемішували при температурі 020 протягом 10 год., у цей момент іонообмінна ВЕРХ показувала приблизно 50 95 конверсії.
Додавали розчин солей пірофосфату трибутиламіну (250 мг) у АСМ (0,6 мл), потім трибутиламін (110 мг, 0,59 ммоль). Реакційну суміш перемішували при температурі 02С протягом 0,5 год., і іонообмінна ВЕРХ показувала, що реакція завершувалася. Реакційну суміш гасили буфером з бікарбонатом триетиламонію (1М, 5 мл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 0,5 год., потім концентрували і двічі упарювали разом з водою. Залишок розчиняли в Н2О (5 мл) і поміщали на іонообмінну колонку, елюювали Н2О, потім 5-35 95 буфером з бікарбонатом триетиламонію (1М)-Н2О. Фракції, які містять продукт, поєднували, концентрували й упарювали разом з Н2гО. Залишок знову очищали за допомогою іонообмінної колонки з отриманням сирого продукту. ЗІРН ЯМР показував, що даний продукт містив домішки, тому продукт знову очищали за допомогою колонки С-18, елюювали 0-15 95 АСМ-Н2О, які містять 0,05 95 ТЕА, і фракції, які містять продукт, поєднували і концентрували з отриманням 3,6 мг продукту, який містив тільки 1,5 еквив. ТЕА, як було показано за допомогою 1Н ЯМР аналізу. Продукт розчиняли в Н2О (1 мл) і додавали буфер з бікарбонатом триетиламонію (1М, 0,1 мл). Отриману суміш концентрували при зниженому тиску і два рази упарювали разом з Н2О при зниженому тиску з отриманням сполуки за прикладом 8 (ТРЗ), у вигляді солі з тетра-ТЕА. 1ТН ЯМР (400 МГц, 020): 6 7,78 (с, 1Н), 6,85 (д, 9У-2,4 Гу, 1Н), 6,82 (д, 9У-2,4 Гц, 1Н), 5,51 (д, У-3,0
Гц, 1Н), 4,65-4,55 (м, 2Н), 4,20-4,08 (м, 2Н), 3,15-3,00 (м, 24Н), 1,18-1,08 (м, З6Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, 020): 6-6,25 (д, 9-52 Гц),-12,21 (д, 9252 Гц),-22,32 (т, 9252 Гу).
М5 т/2-530,2 (М-11, 532,1 (М-А1) о)
НО Приклад 9 чо но вв я Х Ф) но С- ! НО 5. и ой м Р(О)СІ; О-в' Че
Ма Мм- ---ЯЙ. НО о х У я (пВизМНІоРьОНо ; о М, й
НО он МУ" М
НО он 5 ТРА
Приклад 9 (ТРА) - (28, 35, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-Ч4И1,2,4|)гриазин-7-іл)-2-азидо-3,4- дигідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
До розчину сполуки за прикладом 5 (6,0 мг, 0,019 ммоль) у РО(ОМЕе)зЗ (0,6 мл) при температурі 02С додавали РОСІЗ (45 мг, 0,29 ммоль). Реакційну суміш перемішували при температурі 020 протягом 10 год., у цей момент іонообмінна ВЕРХ показувала приблизно 50 95 конверсії.
Додавали розчин солей пірофосфату трибутиламіну (250 мг) у АСМ (0,6 мл), потім трибутиламін (110 мг, 0,59 ммоль). Реакційну суміш перемішували при температурі 02С протягом 6 год.
Реакційну суміш гасили буфером з бікарбонатом триетиламонію (1М, 5 мл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 0,5 год., потім концентрували і два рази упарювали разом з водою. Залишок розчиняли в Н2О (5 мл) і поміщали на іонообмінну колонку, елюювали Н2О, потім 5-35 95 буфером з бікарбонатом триетиламонію (1М)-Н2гО. Фракції, які містять продукт, поєднували, концентрували й упарювали разом з Н2О. Залишок знову очищали за допомогою іонообмінної колонки з отриманням сирого продукту. З1Р ЯМР
Зо показував, що даний продукт містив домішки, тому продукт повторно очищали за допомогою іонообмінної колонки знову з отриманням сирого продукту. Продукт обробляли Мансоз (10 мг), і суміш концентрували при зниженому тиску. Твердий залишок розчиняли в 0,5 мл Н2гО і додавали 40 мкл Маон (Ін). Отриману суміш очищали на колонці С-18, елюювали Н2О, і фракції, які містять продукт, поєднували і концентрували при зниженому тиску з отриманням сполуки за прикладом 9 (ТРА) у вигляді тетранатрієвої солі. 1ТН ЯМР (400 МГц, 020): 6 7,76 (с, 1Н), 6,88 (д, У-4,3 Гц, 1Н), 6,81 (д, 9У-4,6 Гц, 1Н), 5,59 (д, 9У-5,5
Гц, 1ТН), 4,60 (т, 9У-5,6 Гц, 1Н), 4,55 (д, 9У-5,8 Гц, 1Н), 3,99 (квд, 9У-11,2, 5,5 Гц, ЗН).
З1Р ЯМР (162 МГц, 020): 6 -8,13 (д, 9У-19,8 Гц), -14,04 (д, У-18,9 Гц), -24,00 (т, У-19,3 Гц).
М5 т/2-546,1 (М-11, 547,9 (М-А1) о дв ТЕА, СНоСІ» о зу ЗОН ----- утво
РОла
Проміжна сполука РОТа-5-2-гідроксіетил 2,2-диметилпропантіоат.
До розчину 2-тіоетанолу (3,50 мл, 50,0 ммоль) і триетиламіну (7,02 мл, 50,0 ммоль) у СН2СІ2, який охолоджували до температури -782С, додавали по краплях пиваліл хлорид (6,15 мл, 50,0 ммоль) протягом 30 хв. Реакційній суміші дозволяли повільно нагрітися до кімнатної температури і протікання реакції відслідковували за допомогою ТСХ. Через 30 хв визначали, що реакція завершувалася, і гасили водою. Шари розділяли, і водний шар промивали СН2СІ2.
Органічні продукти поєднували і сушили над сульфатом натрію. Тверді продукти фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску. Сирий продукт очищали за допомогою хроматографії на силікагелі 0-50 96 ЕАс/гексан з отриманням проміжної сполуки РОТа. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) 5 4,89 (т, 9У-5,5 Гц, 1Н), 3,49-3,36 (м, 2Н), 2,86 (т, 9У-6,7 Гц, 2Н), 1,14 (с, 9Н). о ОН Ом Ва вон РОСІ», ТЕА, СНЬСІ» О о Я о 78 с б-р о
І
МО» отв
РОла РОТЬ
Оксихлорид фосфору (281 мкл, 3,08 ммоль) поміщали в СН2СІ2 (5 мл) і охолоджували розчин до -782С. Тіоефір РОТа (1,00 г, 6,17 ммоль) поміщали в СН2СІ2 (5 мл) і повільно додавали в розчин з РОСІЗ. Потім додавали по краплях ТЕА (891 мкл, 6,16 ммоль) і залишали перемішуватися холодним протягом 30 хв, потім нагрівали до кімнатної температури і залишали перемішуватися протягом 2 год. Однією порцією додавали п-нітрофенол (428 мг, 3,08 ммоль), потім повільно додавали ТЕА (449 мкл, 3,08 ммоль). Перемішували при кімнатній температурі протягом 30 хв. ТСХ (70:30 гексан/г(ОАСсС) показувала тільки одну пляму, але за даними ГХ/МС було два піки (продукт і біс-п-нітрофенолат). Розчин розбавляли ефіром, і тверді продукти видаляли шляхом фільтрування і відкидали. Матковий розчин концентрували й очищали за допомогою хроматографії на силікагелі з отриманням суміші продукту і біс-п-нітрофенолату.
Суміш потім знову очищали за допомогою ВЕРХ з отриманням проміжної сполуки РОБ, 5,5- 2,2-(4-нітрофенокси)фосфорил)біс(окси)біс(етан-2,1-діїл) біс(2,2-диметилпропантіоат). 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,29-8,21 (м, 2Н), 7,46-7,36 (м, 2Н), 4,23 (шир. кв, уУ-7,7 Гц, 4Н), 3,16 (шир. т, У-6,7 Гц, 4Н), 1,23 (с, 18Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, СОСІЗ) 6 -7,72 (с). стро ше укл вимосі о о8ото С
КАМ в А.Є 9 Ані ВВ ного поши ше ши иа
А. "ши: жо І Ох,
МН ЩЕ о ММе Мн на он й но он
Е! РОТЬ Приклад 10 Ро
Приклад 10 (вказаний також як РОЇ) - 5,5-2,2-((28, 35, 4В, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2- 1(1.2.4)гриазин-7-іл)-2-ціано-3,4-дигідрокситетрагідрофуран-2-іл)уметокси)уфосфорил)біс
Зо (окси)біс(етан-2,1-діїл) біс(2,2-диметилпропантіоат).
Сполуку за прикладом 1 (6,0 мг, 0,02 ммоль) розчиняли в ММР (0,1 мл) і додавали ТГФ (0,2 мл).
Потім при кімнатній температурі в атмосфері аргону додавали трет-бутил магній хлорид (1,0М розчин у ТГФ, 0,031 мл, 0,031 ммоль). Через 10 хв додавали розчин проміжної сполуки РОТр (15,7 мг, 0,031 ммоль) у ТГФ (0,1 мл), і отриману суміш нагрівали до температури 5020. Через 5 год. залишок, який утворився, очищали за допомогою препаративної ВЕРХ (Рпепотіпех Зупегаді 4 мк Нуйго-АН 80А, колонка 150х30 мм, 40-100 95 градієнт ацетонітрил/вода). Фракції, які містять бажаний продукт, поєднували і ліофілізували з отриманням сполуки за прикладом 10 (РОТ). 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 7,82 (с, 1Н), 6,69 (д, 9У-4,5 Гц, 1Н), 6,64 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 5,56 (д, 9-34 Гц, 1Н), 4,61 (шир. с, 2Н), 4,45-4,32 (м, 2Н), 4,22-4,06 (м, 4Н), 3,13 (дт, 9У-11,7, 6,7 Гц, 4Н), 1,23 (с, 9Н), 1,21 (с, 9Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, СОСІЗ) 5 -2,34 (с).
ГХ/МС:1К-1,70 хв, М5 т/2-660,02 (Ма-1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО РЕІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв- 2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 96 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95
АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: І8-3,204 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 96 ТФУ
Градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
МН» Мо» бю Приклад 1! МН» р й ІВиМосІ 9 вото ше но-- о у щи 08 -Щн-- зу тв оо о у - зу вив. їФ СД м | 5 ММ? М
НО є НО ЕЕ
З РОТЬ РО2
Приклад 11 (РО) - 5,5-2,2-(((28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-Я(1.2.4Зтриазин-7-іл)-2-ціано- 4-фтор-3-гідрокситетрагідрофуран-2-іл)уметокси)фосфорил)біс(окси)біс(етан-2,1-діїл) біс(2,2- диметилпропантіоат).
Сполуку за прикладом З (10,5 мг, 0,036 ммоль) розчиняли в ММР (0,1 мл) і додавали ТГФ (0,1 мл). Потім при кімнатній температурі в атмосфері аргону додавали трет-бутил магній хлорид (1,0 М розчин у ТГФ, 0,054 мл, 0,054 ммоль). Через 10 хв додавали розчин проміжної сполуки
РОТЬ (27,3 мг, 0,054 ммоль) у ТГФ (0,1 мл), і отриману суміш нагрівали до температури 5020.
Через 24 год. залишок, який утворився, очищали за допомогою препаративної ВЕРХ (Рпепотіпех Зупегдаі 4 мкм Нуйго-КК 80А, колонка 150х30 мм, 40-10095 градієнт ацетонітрил/вода). Фракції, які містять бажаний продукт, поєднували і ліофілізували з отриманням сполуки за прикладом 11 (РОЗ). 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 7,94 (с, 1Н), 6,75 (д, 9У-4,5 Гц, 1Н), 6,67 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 5,77 (дд, у-27,8, 1,4 Гц, 1Н), 5,43 (ддд, 9У-55,2, 4,9, 1,3 Гц, 1Н), 4,93 (дд, 9У-21,2, 4,9 Гц, 1Н), 4,49 (дд, 911,3, 7,68 Гц, 1Н), 4,40 (дд, У-11,3, 7,8 Гц, 1Н), 4,10 (ддт, У-15,9, 8,0, 6,7 Гц, 4Н), 3,16-3,04 (м,
АН), 1,23 (с, 9Н), 1,21 (с, 9Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, СОСІЗ) 56 -2,10 (с). 19Е ЯМР (376 МГц, СОСІЗ) 6 -191,64 (ддд, 9У-55,0, 27,8, 21,3 Гц).
ГХ/МС:1К-1,85 хв, М5 т/2-662,03 |Ма-1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95
АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкКл/хХвВ.
ВЕРХ: І8-3,385 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
О НС) осМ, тА с, о
Фу туто ум пити о0-р-о отв! р 2) р-МОРРОН, ТЕА пуер І;
РОЗа РОЗЬ розе 0МО2
Проміжна сполука РОЗС - (25)-2-етилбутил 2-ЦА- нітрофенокси)(фенокси)фосфориламіно)пропаноат.
Феніл дихлорфосфат РЮОЗа (1,5 мл, 10 ммоль) розчиняли в 30 мл безводного ОСМ і перемішували в атмосфері М2 (газ) на крижаній бані. Додавали однією порцією НС сіль аміно складного ефіру РОЗ, гідрохлорид (5)-2-етилбутил 2-амінопропаноату, (отриманого відповідно до Еиг. У. Мей. Спет. 2009,44, 3765-3770, 2,1 г, 10 ммоль). Додавали по краплях ТЕА (З мл, 22 ммоль). Перемішували протягом 1 год. при температурі ОС. Додавали однією порцією п- нітрофенол (1,4 г, 10 ммоль) і ТЕА (1,5 мл, 11 ммоль). Реакційну суміш потім перемішували при кімнатній температурі протягом 16 год. Розбавляли ОСМ і промивали насиченим розчином
МмМансозЗ(водн.). Органічні фракції сушили над безводним Ма2504 і концентрували при зниженому тиску. Очищали на колонці із силікагелем (0-15 95 ЕОАс у гексані) з отриманням проміжної сполуки РОЗС.
1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,23 (д, 9У-8,8 Гц, 2Н), 7,41-7,30 (м, 4Н), 7,25-7,19 (м, ЗН), 4,10-4,00 (м, ЗН), 3,90-3,83 (м, 1Н), 1,55-1,45 (м, 1Н), 1,42-1,31 (м, 7Н), 0,87 (т, У-7,2Гц, 6Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, СОСІЗ) б -3,04 (с), -3,10 (с).
ГХ/МС: 1К-2,87 хв, М т/2-451,1 (МА-11, 449,0 |М-1)|; система ГХ/МС: Тпегто І СО Аймапіаде;
Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 30х4,6 мм; буфер А: 0,1 95 оцтова кислота у воді; буфер
В: 0,1 95 оцтова кислота в ацетонітрилі; 5-100 95 буфер В за 2,5 хв, потім 100 95 протягом 0,9 хв при 2 мл/хв.
ВЕРХ: І8-4,40 хв; система ВЕРХ: Адіїепі 1100; Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 50х4,6 мм; буфер А: 0,05 95 ТФУ у воді; буфер В: 0,05 95 ТФУ в ацетонітрилі; 2-98 95 буфер В за 5 хвилин при 2 мл/хв.
МН» о, Приклад 12 МН» зи ЗМ о 0, о с і
Код я туту - ОМЕТФ обу МНЕ
НО Е МО» ШИ 3 РОЗС РОЗ
Приклад 12 (РОЗ) - (25)-2-етилбутил 2-((28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-4Ц(1.2.4ЇІгриазин-7- іл)-2-ціано-4-фтор-3-гідрокситетрагідрофуран-2- ілуметоксиу/фенокси)фосфориламіно)пропаноат.
Сполуку за прикладом З (15 мг, 0,051 ммоль) розчиняли в безводному ДМФ (1 мл) і перемішували в атмосфері М2 (газ). п-Нітрофенілфосфоамідат РОЗс (35 мг, 0,077 ммоль) розчиняли в безводному ДМФ (0,5 мл) і додавали в реакційну суміш однією порцією. Додавали по краплях ІВИМОСІ у ТГФ (1М у ТГФ, 77 мкл, 0,077 ммоль). Перемішували протягом 2 год.
Додавали додаткову кількість п-нітрофенілфосфоамідату (35 мг у 0,5 мл безводного ДМФ) і додаткову кількість ІВИМОСІ (1М у ТГФ, 50 мкл, 0,050 ммоль). Перемішували протягом 2 год.
Додавали додаткову кількість п-нітрофенілфосфоамідату (35 мг у 0,5 мл безводного ДМФ) і додаткову кількість розчину ІВИМОСІ (1М у ТГФ, 50 мкл, 0,050 ммоль). Перемішували протягом 16 годин. Розбавляли Е(ОАсС і промивали насиченим розчином МансозЗ(водн.) (3х). Промивали насиченим розчином МасСі(водн.), і органічні фракції сушили над безводним Ма2504.
Концентрували при зниженому тиску. Очищали на колонці із силікагелем (0-5 96 Меон у ОСМ).
Поєднували фракції і концентрували при зниженому тиску. Очищали за допомогою препаративної ВЕРХ із ТФУ як модифікатор з отриманням сполуки за прикладом 12 (РОЗ).
Система препаративної ВЕРХ: Сіївоп 215 ІГідцій Напаїег; Рпепотепех Сетіпі, С18 4мкм, 100х30,0 мм
Зо Буфер А: 0,1 95 ТФУ у воді; буфер В: 0,1 95 ТФУ в ацетонітрилі; 5-100 95 буфер В за 13 хвилин при 20 мл/хв. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 7,89 (с, 1Н), 7,31-7,13 (м, 6Н), 6,80-6,75 (м, 1Н), 5,80-5,70 (м, 1Н), 5,35-5,20 (м, 1Н), 4,80-4,62 (м, 1Н), 4,60-4,45 (м, 2Н), 4,35-4,10 (м, 1Н), 4,06-3,96 (м, ЗН), 1,49- 1,28 (м, 8Н), 0,90-0,82 (м, 6Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, СОСІЗ) 5 2,36 (с), 2,22 (с).
ВЕРХ: І8-3,00 хв; система ВЕРХ: Адіїепі 1100; Рпепотепех Сетіпі, С18, 5 мкм, 110А, 50х4,6 мм; буфер А: 0,05 95 ТФУ у воді; буфер В: 0,05 95 ТФУ в ацетонітрилі; 2-98 95 буфер В за 5 хвилин при 2 мл/хв.
ГХ/МС: 1К-2,39 хв, М т/2-605,1 (М-А-11, 603,0 |М-1|; система ГХ/МС: Тпегто І СО Аймапіаде;
Рпепотепех Септіпі, С18, 5 мкм, 110А, 30х4,6 мм; буфер А: 0,1 95 оцтова кислота у воді; буфер
В: 0,1 95 оцтова кислота в ацетонітрилі; 5-100 95 буфер В за 2,5 хв, потім 100 95 протягом 0,9 хв при 2 мл/хв.
МН: МН
С ЗМО ЕОС-НСІ, ДМСО с р,
ТФУ-Руг тв80-4 о. ЗМК у тв5о-я о. я но- , 2) РазРСН»Вг, пи -еШНоу , тв50 є тво 29 ба
Проміжна сполука ба-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)-5-(трет- бутилдиметилсилілокси)метил)-3-фтор-5-вінілтетрагідрофуран-2-іл)піроло|1.2-4(1.2.4)триазин-4- іл)бензамід
Проміжну сполуку 29, М-(7-(25, 35, 48, 5Н)-4-(трет-бутилдиметилсилілокси)-5-(трет- бутилдиметилсилілокси)метил)-3-фтор-5-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-іл)піролої|1.2-
ЧІИ1.2.4)гриазин-4-іл)/бензамід, (220 мг, 0,35 ммоль) розчиняли в 5 мл безводного ДМСО і перемішували в атмосфері М2 (газ). Додавали ЕОСІ (100 мг, 0,52 ммоль) і потім ТФУ-піридин (34 мг, 0,18 ммоль). Перемішували протягом 1 год. Додавали ще ЕОСІ (100 мг, 0,52 ммоль) і перемішували протягом 1 год. Відстеження за допомогою ГХ/МС показувало, що залишався вихідний спиртовий продукт. Додавали ще ЕОСІ (100 мг, 0,52 ммоль) і перемішували протягом 1 год. Відстеження за допомогою ГХ/МС показувало, що реакція досягає повної конверсії.
Розбавляли етилацетатом і промивали насиченим розчином МанНсСоОзЗ(водн.) (2х) і потім насиченим розчином МасСі(водн.)о. Органічний шар сушили над безводним Ма2504 і концентрували при зниженому тиску. Очищали на колонці із силікагелем (0-20 95 ЕОАс у гексані). Поєднували фракції і концентрували при зниженому тиску з отриманням альдегід у вигляді твердої речовини. Метил трифенілфосфонію бромід (500 мг, 1,40 ммоль) суспендували в 10 мл безводного ТГФ і перемішували при температурі -782С в атмосфері Аг (газ). Додавали по краплях 2,5М розчин н-бутиллітію в гексані (560 мкл, 1,40 ммоль). Перемішували реакційну суміш на крижаній бані протягом 1 год. з отриманням суміші жовтого кольору. Отриманий вище альдегід розбавляли в 5 мл безводного ТГФф і додавали по краплях у реакційну суміш. Крижану баню відставляли, і давали реакційній суміші нагрітися до кімнатної температури.
Перемішували протягом З год. при кімнатній температурі. Додавали насичений водний розчин
МНАСІ ї екстрагували етилацетатом. Органічний екстракт промивали насиченим розчином мансСозЗ(водн.) і потім насиченим розчином Масі(водн.). Органічні фракції сушили над безводним Ма25054 і концентрували при зниженому тиску. Очищали на колонці із силікагелем (0-20 95 ЕОАс у гексані) з отриманням проміжної сполуки ба. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 8,22 (шир. с, 1Н), 8,03 (шир. с, 2Н), 7,58 (дт, У-40,4, 7,4 Гц, ЗН), 7,12 (д, 9-4,7 Гц, 1Н), 6,97 (с, 1Н), 6,01 (дд, 9У-17,5, 10,9 Гц, 1Н), 5,58 (д, У-22,8 Гц, 1Н), 5,46 (дд, 9у17,5, 2,1 Гц, 1Н), 5,25 (дд, 9У-11,0, 2,0 Гу, 1Н), 5,14 (ддд, 9У-55,4, 4,9, 2,7 Гц, 1Н), 4,61 (дд, 9у-20,8, 4,8 Гу, 1Н), 3,63-3,40 (м, 2Н), 0,89 (с, 9Н), 0,84 (с, 9Н), 0,09 (д, У-8,4 Гц, 6Н), 0,00 (д, 3-141 Гц, 6Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 5 -191,86 (д, У-56,8 Гу).
М5 т/2-627,3 (М-Н1|.
МНВх МН»
ШЕ: Ше с Ї 1) ТВА, ТГФ с М твою МИ 00 - я НОЯ дя плит 2) МНз. МЕОН в тв5О0 в НО є ба 13
Приклад 13 - (28, ЗА, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-4Ц(1.2.4Ігриазин-7-іл)-4-фтор-2- (гідроксиметил)-2-вінілтетрагідрофуран-3-ол
Проміжну сполуку ба (146 мг, 0,23 ммоль) розчиняли в ТГФ (10 мл), і отриманий розчин перемішували на крижаній бані. Додавали 1М розчин ТВАЕ у ТГФ (700 мкл, 0,70 ммоль) і перемішували протягом 2 год. Розбавляли ЕІОАс і промивали насиченим розчином Масі(водн.) (бх). Органічний шар сушили над безводним Ма2504 і концентрували при зниженому тиску.
Розчиняли в 7М розчині аміаку в Мен (7 мл) і перемішували протягом 18 год. Реакційну суміш концентрували при зниженому тиску. Очищали на колонці С18 препаративної ВЕРХ із ТФУ як модифікатор. Поєднували фракції і концентрували при зниженому тиску. Розчиняли в мансозЗ(водн.) і знову очищали за допомогою препаративної ВЕРХ у нейтральних умовах.
Поєднували фракції і сушили виморожуванням з отриманням сполуки за прикладом 13. 1ТН ЯМР (400 МГц, 0209) 6 7,54 (с, 1Н), 6,62-6,49 (м, 2Н), 5,98-5,79 (м, 1Н), 5,55-5,36 (м, 2Н), 5,31 (д, 9-11,1 Гц, 1Н), 5,11 (ддд, 9У-54,8, 5,2, 2,9 Гц, 1Н), 4,42 (дд, 9У-20,6, 4,8 Гц, 1Н), 3,62-3,43 (м, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, 0209) б -193,23 (дд, 9У-54,7, 44,2 Гц).
М5 т/2-295,2 (М.Н)
МН» МН» за СМ за М
У но-х о у, хщщ РО/С, НІ НО о мя у у месн - у
НО СЕ НО СЕ
13 14
Приклад 14 - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-4Ц(1.2.4Ігриазин-7-іл)-2-етил-4-фтор-2- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-3-ол
Сполуку за прикладом 13 (5 мг, 0,017 ммоль) розчиняли в метанолі (2 мл). Потім додавали каталізатор Оедизза 1095 Ра/С (2 мг), і отриману суміш перемішували в атмосфері газоподібного водню. Через 40 хв отриману суміш фільтрували для видалення Ра/С, і фільтрат концентрували при зниженому тиску. Залишок розчиняли у воді і сушили виморожуванням з отриманням сполуки за прикладом 14. 1ТН ЯМР (400 МГц, 0209) б 7,67 (с, 1Н), 6,79-6,55 (м, 2Н), 5,54-5,12 (м, 2Н), 4,46 (дд, 9У-15,1, 5,5
Гц, 1ТН), 3,65-3,44 (м, 2Н), 1,89-1,44 (м, 2Н), 0,84 (т, У-7,6 Гц, ЗН). 19Е ЯМР (376 МГц, 0209) б -197,62 (ддд, У-54,5, 20,6, 15,0 Гу).
М5 т/2-297,3 (М-Н1|.
Ге но Мо не Прикладів 7 ра пешнт З но- о М й о й тт роя охо "М ше х вдо рі ТІФ О ш-т-ке н- о ММР -ь
НО НО
13 РІЛЬ РА
Приклад 15 (РО) - 5,5-2,2-(((28, ЗА, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-Я(1.2.4їІгриазин-7-іл)-4-фтор-
З-гідрокси-2-вінілтетрагідрофуран-2-ілуметокси)фосфорил)біс(окси)біс(етан-2,1-діїл) біс(2,2- диметилпропантіосат)
Сполуку за прикладом 13 (5 мг, 0,017 ммоль) розчиняли в безводному ДМФ (0,5 мл). Додавали однією порцією п-нітро-фенонат (13 мг, 0,026 ммоль). Додавали по краплях 1М розчин трет- бутилмагній хлориду в ТГФ (25 мкл, 0,026 ммоль). Перемішували протягом 1 год. Нагрівали до температури 502С і перемішували протягом 2 год. Додавали ще п-нітро-фенонат (13 мг, 0,026 ммоль) і перемішували протягом 2 год. Додавали ще 1М розчин трет-бутилмагній хлориду в
ТГФ (25 мкл, 0,026 ммоль) і перемішували протягом 16 год. при температурі 5026.
Охолоджували до кімнатної температури. Отриману суміш очищали прямо на колонці препаративної ВЕРХ і елюювали з лінійним градієнтом 0-100 95 АСМ у воді з отриманням сполуки за прикладом 15 (РОЗ). 1Н ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) б 7,84 (с, 1Н), 6,92 (д, 9-4,5 Гц, 1Н), 6,80 (д, 9-4,5 Гц, 1Н), 6,10 (дд, 9-17,4, 10,9 Гц, 1Н), 5,67 (дд, 9-5,8, 1,9 Гц, 1Н), 5,61 (с, 1Н), 5,45-5,35 (м, 1Н), 5,15 (ддд, У-55,6, 5,0, 2,2 Гц, 1Н), 4,65 (дд, У-22,5, 5,1 Гц, 1Н), 4,13 (дд, У-11,1, 5,2 Гу, 1Н), 4,08-3,95 (м, 5Н), 3,06 (дд, У9-7,0, 6,1 Гц, 4Н), 1,21 (с, 9Н), 1,18 (с, 9Н).
Зо 19Е ЯМР (376 МГц, СОЗОБ) б 192,99 (тд, 9У-55,7, 23,6 Гц).
М5 т/2-663,0 (М--Н11.
Щн; че р Приклад 16 Щі де ше ко Й п я О-Р-О0 - ри х й й мае ах они Її Й і Як рі ! З -
Му тя З ! о |! уд ММР тФ шт щ- чу но но ОН но он т 2 ре 5 возс РОБ
Приклад 16 (РОБ) - (25)-2-етилбутил 2-((28, 35, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-Я(1,2,А)гриазин- 7-іл)-2-азидо-3,4-дигідрокситетрагідрофуран-2- ілуметоксиух/уфенокси)фосфорил)аміно)пропаноат.
Сполуку за прикладом 5 (5 мг, 0,016 ммоль) розчиняли в безводному М-метил-2-піролідні (0,2 мл) і в атмосфері аргону додавали ТГФ (0,1 мл). Потім при кімнатній температурі додавали трет-бутил магній хлорид (1М у ТГФ, 24 мкл, 0,024 ммоль), і в осад випадала тверда речовина білого кольору. Через 5 хв у реакційну суміш однією порцією додавали розчин п- нітрофенілфосфоамідату РОЗс (15 мг, 0,032 ммоль) у ТГФ (0,1 мл), і отриману суміш нагрівали при температурі 502. Через 3,5 год. реакційну суміш залишали охолоджуватися до кімнатної температури і перемішували протягом 18 год. Потім додавали п-нітрофенілфосфоамідат РОЗС (50 мг, 0,111 ммоль) і трет-бутил магній хлорид (1М у ТГФ, 24 мкл, 0,024 ммоль), і реакційну суміш перемішували ще 5 днів. Залишок, який утворився, потім очищали прямо за допомогою препаративної ВЕРХ (Рпепотіпех Зупегаді 4 мкм Нуаго-АА 80А, колонка 1509(30 мм, градієнт 40- 100 95 ацетонітрил/вода). Фракції, які містять бажаний продукт, поєднували і ліофілізували з отриманням сполуки за прикладом 16 (РОБ) (суміш діастереомерів 2:1). 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 7,88 (шир. с, 1Н), 7,33-7,22 (шир. г, 2Н), 7,22-7,10 (шир. г, ЗН), 6,69 (шир. д, 5-44 Гц, 1Н), 6,61 (шир. д, 9-4,5 Гц, 1Н), 5,64-5,56 (м, 1Н), 4,54 (д, 9У-6,3 Гц, 1Н), 4,50- 4,20 (м, ЗН), 4,11-3,94 (м, ЗН), 3,90-3,76 (м, 1Н), 1,49 (с, 9У-6,2 Гц, 1Н), 1,40-1,24 (м, 7Н), 0,86 (т, 3-74 Гц, 6Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, СОСІЗ) 5 2,68 (с), 2,56 (с).
ГХ/МС:1К-1,70 хв, М5 т/2-619,09 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ.
Система МС: Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95
АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкКл/хХвВ.
ВЕРХ: І8-3,010 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
МН нов 2 НО во Приклад 17 ве: ,
С Р(О)СІ; но боро Мн» ноя о Й м 007 но 5 У- шиє ІпВизМНІ»Р»О- Но (Ф) -М М нич ще м-
НО НО
13 тРБ
Зо Приклад 17 (ТР) - (28, ЗА, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-ЧИ1,2,4Ігриазин-7-іл)-4-фтор-3-гідрокси- 2-вінілтетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
До розчину сполуки за прикладом 13 (6,0 мг, 0,020 ммоль) у РО(ОМЕе)зЗ (0,6 мл) при температурі 02С додавали РОСІЗ (50 мг, 0,32 ммоль). Реакційну суміш перемішували при температурі 020 протягом б год., у цей момент іонообмінна ВЕРХ показувала приблизно 90 95 конверсії.
Додавали розчин солей пірофосфату трибутиламіну (250 мг) у АСМ (0,6 мл), потім трибутиламін (110 мг, 0,59 ммоль). Реакційну суміш перемішували при температурі 02С протягом 1 год.
Реакційну суміш гасили буфером з бікарбонатом триетиламонію (1М, 5 мл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 0,5 год., потім концентрували і два рази упарювали разом з водою. Залишок розчиняли в Н2О (5 мл) і поміщали на іонообмінну колонку, елюювали Н2О, потім 5-35 95 буфером з бікарбонатом триетиламонію (1М)-Н2гО. Фракції, які містять продукт, поєднували, концентрували й упарювали разом з Н2О. Твердий залишок розчиняли в З мл Н2О і додавали 100 мкл Масн (Ін). Отриману суміш очищали на колонці С- 18, елюювали Н2О, і фракції, які містять продукт, поєднували і концентрували при зниженому тиску з отриманням сполуки за прикладом 17 (ТР) у вигляді тетранатрієвої солі. 1ТН ЯМР (400 МГц, 020): б 7,74 (с, 1Н), 6,89 (д, 9-44 Гу, 1Н), 6,81 (д, У-4,6 Гц, 1Н), 6,00 (дд, 9-17,4, 11,1 Гц, 1ТН), 5,72 (д, У-23,3 Гц, 1Н), 5,49 (д, 9У-16,9 Гц, 1Н), 5,32 (д, 9У-11,1 Гу, 1Н), 5,14 (дд, У-54,0, 4,6 Гц, 1Н), 4,72 (дд, 9У-23,7, 4,5 Гц, 1Н), 4,09 (дд, 9У-11,3, 5,8 Гц, 1Н), 3,79 (дд,
У-11,6, 3,6 Гц, 1Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, 020): б -8,38 (д, 9У-20,5 Гц), -13,67 (д, 9У-19,3 Гу), -24,20 (т, У-19,9 Гц). бо
19Е ЯМР (376 МГц, СОСІЗ) б -194,58 (дт, 9У-55,0, 23,8 Гу).
М5 т/2-533,0ГМ-11, 535,0 (М-Н1|.
МН нов 2 но 5 і Приклад 18
Ше» й: т х с РОС; но ово Мн» ною в Но р ще ІпВиз НІ Р2О7Н» о Мо М м шк м- но Е 14 ТРБб
Приклад 18 (ТРб) - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-ЧИ1,2,4|гриазин-7-іл)-2-етил-4-фтор-3- гідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
До розчину сполуки за прикладом 14 (5,0 мг, 0,017 ммоль) у РО(ОМЕе)зЗ (0,6 мл) при температурі 02С додавали РОСІЗ (45 мг, 0,30 ммоль). Реакційну суміш перемішували при температурі 020 протягом б год., у цей момент іонообмінна ВЕРХ показувала приблизно 90 95 конверсії.
Додавали розчин солей пірофосфату трибутиламіну (250 мг) у АСМ (0,6 мл), потім трибутиламін (110 мг, 0,59 ммоль). Реакційну суміш перемішували при температурі 02С протягом 1 год.
Реакційну суміш гасили буфером з бікарбонатом триетиламонію (1М, 5 мл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 0,5 год., потім концентрували і два рази упарювали разом з водою. Залишок розчиняли в Н2О (5 мл) і поміщали на іонообмінну колонку, елюювали Н2О, потім 5-35 95 буфером з бікарбонатом триетиламонію (1М)-Н2гО. Фракції, які містять продукт, поєднували, концентрували й упарювали разом з Н2О. Твердий залишок розчиняли в З мл Н2О і додавали 100 мкл Масн (Ін). Отриману суміш очищали на колонці С- 18, елюювали Н2О, і фракції, які містять продукт, поєднували і концентрували при зниженому тиску з отриманням 18 (ТРб) у вигляді тетранатрієвої солі. 1ТН ЯМР (400 МГц, 020): б 7,73 (с, 1Н), 6,86 (д, 9-46 Гу, 1Н), 6,80 (д, У-4,6 Гц, 1Н), 5,60 (дд, 20. 9-21,9, 3,5 ГЦ, 1Н), 5,23 (дт, 9У-55,2, 4,2 Гу, 1Н), 4,65 (дд, 9У-20,6, 5,3 Гц, 1Н), 4,08-3,84 (м, ЗН), 1,683 (дкв, У-14,4, 7,4, 6,9 Гц, 1Н), 1,62 (дкв, уУ-15,0, 7,5 Гц, 1Н), 0,87 (т, У-7,5 Гц, ЗН).
З1Р ЯМР (162 МГц, 020): -5,72 (д, 9У-20,2 Гц), -10,81 (д, 9У-19,3 Гц), -21,60 (т, У-19,8 Гц). 19Е ЯМР (376 МГц, СОСІЗ) б -194,77 (дт, 9У-55,2, 21,2 Гу).
М5 т/2-535,1|М-11, 536,9,0 (М--1Ї.
МНВа2 їй іш бу Ід км Й рпо-АТОРП с тм но--о 7 я ОРІ нки птн тт ор
ЕД дме -
НО НО в ва 25
Проміжна сполука ва-М-(7-(25, ЗА, 48, 55)-3-фтор-4-гідрокси-5-(йодметил)тетрагідрофуран-2- іл)піроло|2,1-4Ц(1,2,4)триазин-4-іл)бензамід.
У колбу, продуту аргоном, додавали 25 (68 мг, 0,183 ммоль) у ДМФ (2 мл), потім йодид метилтрифеноксифосфонію (124 мг, 0,274 ммоль). Реакційну суміш залишали перемішуватися
Зо при кімнатній температурі протягом 5 хв, при цьому за допомогою РХМС спостерігалася повна конверсія в продукт. Реакційну суміш гасили метанолом і розчинники видаляли при зниженому тиску. Сиру речовину розподіляли між ЕІОАс і Н2гО. Органічні продукти розділяли і промивали насиченим сольовим розчином. Отриману речовину сушили над Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску. Сиру речовину очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (20-100 96 ЕІОАс/Гексан) з отриманням проміжної сполуки ва. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-46) б 8,17 (м, ЗН), 7,63 (т, У-7,4 Гц, 1Н), 7,53 (т, У-7,6 Гц, 2Н), 7,17- 6,96 (м, 2Н), 5,74 (с, 1Н), 5,60 (д, 9У-24,9 Гц, 1Н), 5,19 (ддд, 9-54,6, 4,5, 2,1 Гц, 1Н), 4,09-3,92 (м, 1Н), 3,72 (т, 9У-6,4 Гц, 1Н), 3,63 (дд, 9У-11,0, 3,4 Гц, 1Н), 3,44 (дд, 9У-11,0, 5,9 Гц, 1Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) б -194,23 (м).
ГХ/МС:1К-1,13 хв, М5 т/2-483,23 |М--1)
ЇС система: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МНВ:
Кішіауя беиУ
Х ЇМ М: й о ИМ і рви У м В,
М пит І М тгФ 7
НО ве й НО а вЬ
Проміжна сполука 85 - (ЗА, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-Ч4И1,2,4|Ігриазин-7-іл)-4-фтор-2- метилентетрагідрофуран-3-ол.
Проміжну сполуку ва (80 мг, 0,166 ммоль) розчиняли в ТГФ. Однією порцією додавали ОВО (0,074 мл, 0,498 ммоль). Реакційну суміш потім нагрівали при температурі 602С на масляній бані протягом 16 год. Реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури, і розчинник видаляли при зниженому тиску. Сиру речовину очищали шляхом хроматографії на силікагелі (0- 70 96 ЕоАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 86. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 8,34-8,05 (м, ЗН), 7,63 (т, 9У-7,4 Гц, 1Н), 7,53 (т, 9У-7,6 Гц, 2Н), 17,13 (д, 9-4,7 Гу, 1Н), 6,85 (д, 9-44 Гц, 1Н), 5,97-5,82 (м, 2Н), 5,39-5,13 (м, 1Н), 4,89-4,69 (м, 1Н), 4,38 (д, 9-21 Гц, 1Н), 4,16 (т, У-1,8 Гц, 1Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 5 -198,14 (ддд, 9У-53,9, 24,7, 20,9 Гц).
ГХ/МС:1К-1,05 хв, М5 т/2-355,15 |Ма11
ЇС система: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МНВ2 МВ:
Фі Б ВиММезсі, ч Сх зм
Мамз, і» І "фа --в ую уві у / МмММ М і /
НО г НО г 8р 8с
Проміжна сполука 8с - (25, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло(2,1-Я0И1,2,АЗ)гриазин-7-іл)-2-азидо-4- фтор-2-(йодметил)тетрагідрофуран-3-ол.
Хлорид бензилтриметиламонію (55 мг, 0,296 ммоль) і азид натрію (19,3 мг, 0,296 ммоль) розчиняли в АСМ (1 мл). Отриману суміш перемішували при кімнатній температурі протягом
Зо ночі і потім фільтрували і за допомогою шприца додавали в розчин проміжної сполуки 86 (50 мг, 0,141 ммоль) у ТГФ (1 мл). Потім додавали М-метилморфолін (0,078 мл, 0,706 ммоль), потім по краплях додавали розчин йоду (65 мг, 0,25 ммоль) у ТГФ (1 мл). Через 15 хв додавали М-ацетил цистеїн доти, поки більше не спостерігалося виділення газу. Потім додавали насичений водний розчин тіосульфату натрію доти, поки розчин не ставав ясно-жовтим. Сиру суміш розподіляли між ЕЮАс і Н2О. Фази розділяли, і органічний шар сушили над сульфатом натрію, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сиру речовину очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-60 96 ЕІОАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 8с.
1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 8,31-8,05 (м, ЗН), 7,63 (т, 9У-7,5 Гц, 1Н), 7,53 (т, 9У-7,6 Гц, 2Н), 7,14 (д, 9-4,6 Гц, 1Н), 7,04 (с, 1Н), 6,34 (д, У-6,9 Гц, 1Н), 5,80 (д, 9У-23,7 Гц, 1Н), 5,55-5,31 (м, 1Н), 4,62 (дт, 9У-21,9, 5,9 Гц, 1Н), 3,78-3,56 (м, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 5 -194 44 (дт, 9)-54,7, 22,8 Гу).
ГХ/МС: 1К-1,19 хв, М5 т/2-524,09 |(Ма-1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МАВ МВ
Су Ас»Оо чі ум ОМАР См о; и птн р | М
В М (о чне чу тІФ й М но АсО СЕ бе ва
Проміжна сполука 8а - (25, ЗВ, 45, 55)-5-(4-амінопіроло(2,1-Я0И1,2,А)гриазин-7-іл)-2-азидо-4- фтор-2-(йодметил)тетрагідрофуран-з-іл ацетат.
У розчин проміжної сполуки 8с (40 мг, 0,076 ммоль) у ТГФ (1 мл при кімнатній температурі) додавали оцтовий ангідрид (0,009 мл, 0,092 ммоль), потім ОМАР (10 мг, 0,082 ммоль). Через 15 хв реакційну суміш гасили метанолом, і отриману суміш концентрували при зниженому тиску.
Сирий продукт очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-50 90 Е(ОАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 84. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,15-8,02 (м, ЗН), 7,62 (т, У-7,3 Гц, 1Н), 7,53 (т, 9-7,6 Гц, 2Н), 7,44 (д, 3-46 Гц, 1Н), 7,00 (д, 9У-4,6 Гц, 1Н), 5,95-5,80 (м, 1Н), 5,70-5,43 (м, 2Н), 3,71 (д, 9У-11,3 Гц, 1Н), 3,60 (д, 9-11,3 Гц, 1Н), 2,25 (с, ЗН). 19Е ЯМР (376 МГц, СОСІЗ) 6 -192,78 (ддд, уУ-255,7, 24,6, 18,5 Гц).
ГХ/МС:1К-1,35 хв, М5 т/2-566,14 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МВ: МНВ:
З В20Ма
Х М М, 15-краун-5 ВО ХУ ша
МІ -- Му --
АсО АсО ва Ве
Проміжна сполука 8е - ((28, ЗА, 45, 55)-3-ацетокси-2-азидо-5-(4-бензамідопіроло|2,1-
ЧІ1,2,4)гриазин-7-іл)-4-фтортетрагідрофуран-2-іл)метил бензоат.
Зо У розчин проміжної сполуки ва (30 мг, 0,053 ммоль) у ДМФ (2 мл) при кімнатній температурі додавали 15-краун-5 (0,105 мл, 0,531 ммоль) і бензоат натрію (77 мг, 0,531 ммоль). Реакційну суміш потім нагрівали при температурі 1052С. Через 30 год. температурі реакційної суміші давали дійти до кімнатної, і суміш розподіляли між 595 розчином ГіСі(водн.) і ЕОАс. Фази розділяли, і водну фазу промивали ЕТОАс (2х). Об'єднані органічні екстракти сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-60 96 ЕІОАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 8е. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 8,25-7,97 (м, 4Н), 7,69-7,40 (м, 6Н), 7,36 (д, У-4,7 Гу, 1Н), 6,95-6,80 (м, 1Н), 5,90 (д, 9У-25,0 Гц, 1Н), 5,65 (д, 9У-1,9 Гц, 1Н), 5,62-5,48 (м, 1Н), 4,69 (дд, У-79,3, 12,0 Гц, 2Н), 2,20 (с, ЗН). 19Е ЯМР (376 МГц, СОСІЗ) 6 -192,57 (ддд, уУ-253,9, 25,1, 22,0 Гц).
ГХ/МС:1К-1,45 хв, М5 т/2-560,14 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тепто І СО РіІеєї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ.
МНВІ МН»
Су МН, СНзЗОН се см х З. З ие но о Ме
М і В М В Й
АсО ЕЕ НО СЕ ве 19
Приклад 19 - (28, ЗА, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-4П1,2,4)гриазин-7-іл)-2-азидо-4-фтор-2- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-3-ол.
До проміжної сполуки ве (24 мг, 0,043 ммоль) додавали 7н розчин МНЗ у СНЗОН (2 мл) при кімнатній температурі. Через 16 год. отриману суміш концентрували при зниженому тиску.
Сирий залишок очищали за допомогою обернено-фазової ВЕРХ без кислотного модифікатора з отриманням сполуки за прикладом 19. 1ТН ЯМР (400 МГЦ, метанол-а4) б 7,81 (с, 1Н), 6,85 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 6,80 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 5,80 (дд, У-24,7, 1,9 Гц, 1Н), 5,22 (ддд, У-55,6, 5,1, 1,9 ГЦ, 1Н), 4,63 (дд, уУ-22,9, 5,1 Гц, 1Н), 3,81 (д,
У-12,1 Гц, 1Н), 3,70 (д, 9У-12,2 Гц, 1Н). 19Е ЯМР (376 МГц, метанол-а4) б -195,30 (ддд, 9-55,5, 24,6, 22,9 Гц).
ГХ/МС:1А-0,61 хв, М5 т/2-310,02 (Ма-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпепто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм
Розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 956 мурашиної кислоти
Градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ. но о) ман ВпОо о)
Ь Но ВпВг й о нОо-У ра -- « - - -ве нОо-" ра « з, ТІФ - Що впб 009 вю 009
За 90
Проміжна сполука 9606 - ((За, 5ВА, 65, ба)-6-(бензилокси)-5-(бензилокси)метил)-2,2- диметилтетрагідрофурої|2,3-411П1,3|діоксол-5-іл)уметанол
До розчину гідриду натрію (60 95 по масі, 1,55 г, 38,7 ммоль) у ТГФ (100 мл) при температурі 026 в атмосфері аргону додавали ((За, 65, ба)-6-(бензилокси)-2,2-диметилтетрагідрофуро!|2,3- «ПИ, З|діоксол-5,5-діїл)удиметанол (За, придбано у фірми Сагрозупій, 10,0 г, 32,2 ммоль). Через 10 хв додавали бензил бромід (4,54 мл, 38,6 ммоль), і реакційній суміші давали нагрітися до кімнатної температури. Через 2 год. реакційну суміш гасили насиченим водним розчином хлориду амонію (500 мл). Отриману суміш екстрагували етилацетатом (500 мл). Органічну фазу потім промивали насиченим сольовим розчином (400 мл), сушили над безводним сульфатом
Зо натрію і концентрували при зниженому тиску з отриманням безбарвної олії. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5іО2 (колонка 220 г 5іб2 СотрШазп НР
Сод, 0-100 95 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 9а (9,49 г, 73 95) у вигляді безбарвної олії. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-46) б 7,38-7,19 (м, 1ОН), 5,68 (майже т, 9У-3,6 Гц, 1Н), 4,73 (кв, У-4,4
Гц, 1Н), 4,63 (д, 9-12,1 Гц, 1Н), 4,49-4,36 (м, ЗН), 4,24 (шир. с, 1Н), 4,20-4,13 (м, 1Н), 3,81 (д, 3-11,9 Гц, 1Н), 3,56 (д, 9У-11,9 Гу, 1Н), 3,46 (кв, У-10,3 Гц, 2Н), 1,47 (с, ЗН), 1,25 (с, ЗН).
ГХ/МС: ІК-1,88 хв, М5 т/2-423,31 |МаеМа)|; система РХ: Тпегто Ассеіа 1250 СВЕРХ; система
МС: Тпептпо СО РїІееї; колонка: Кіпегех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95
АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкКл/хХвВ.
ВЕРХ: ІВ-3,79 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: 40 95 етилацетат у гексані, ЕЧ-0,4 (УФ)
Впо о Перйодінан ВпОо шо Деса-Мартіна в), о нОо- ра пен ьо Ду ра
І о СНьСЬ с Ще
ВпО ВПО о) 9с
Проміжна сполука 9с - (За, 5В8, 65, ба)-6-(бензилокси)-5-(бензилокси)метил)-2,2- диметилтетрагідрофурої|2,3-4111,З|діоксол-5-карбальдегід
У розчин проміжної сполуки 965 (1,95 г, 4,87 ммоль) у дихлорметані (24,5 мл) при кімнатній температурі додавали перйодинан Дессо-Мартіна (3,1 г, 7,3 ммоль). Через 1,5 год. реакційну суміш очищали за допомогою хроматографії на колонку з 502 (колонка 80 г 5іО2 СотрШазй НР
Со, 0-100 95 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 9с (1,94 г, 100 95) у вигляді безбарвної олії. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) 5 9,91 (с, 1Н), 7,36-7,11 (м, ТОН), 5,84 (д, 9У-3,4 Гц, 1Н), 4,71 (д, 9-12,1
Гц, 1Н), 4,59 (д, У-12,2 Гц, 1Н), 4,59-4,58 (м, 1Н), 4,52 (д, 9У-12,0 Гц, 1Н), 4,46 (д, 9У-12,0 Гц, 1Н), 4,37 (д, 9-44 Гц, 1Н), 3,68 (д, 9У-11,0 Гц, 1Н), 3,61 (д, 9У-11,0 Гц, 1Н), 1,60 (с, ЗН), 1,35 (с, ЗН).
ГХ/МС: ІК-1,99 хв, М5 т/2-421,25 |МаеМа)|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система
МС: Тпептпо СО РїІееї; колонка: Кіпегех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95
АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкКл/хХвВ.
ВЕРХ: І8-4,09 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: 40 95 етилацетат у гексані, ЕЧ-0,6 (УФ)
ВпОту о РізРСНаВг похо
Още" в'я Ншн шт да : Ме иВи і Ї "о
Впо тФ ВпО 9с за
Проміжна сполука 9а - (За, 5А8, 65, ба)-6-(бензилокси)-5-((бензилокси)метил)-2,2-диметил-5- вінілтетрагідрофурої2,3-4И1,3|діоксол
Зо До розчину метилтрифенілфосфонію броміду (5,38 г, 15,1 ммоль) у тетрагідрофурані (20 мл) при температурі -782С додавали 2,5М розчин н-бутиллітію (6,02 мл). Реакційній суміші давали нагрітися до температури 02С, і за допомогою шприца повільно додавали розчин проміжної сполуки 9с (2,00 г, 5,02 ммоль) у тетрагідрофурані (5 мл). Реакційній суміші давали нагрітися до кімнатної температури і перемішували протягом 4 год. Реакційну суміш потім гасили насиченим водним розчином хлориду амонію (10 мл) і розподіляли між водою (200 мл) і етилацетатом (200 мл). Шари розділяли, і органічний шар промивали насиченим сольовим розчином (200 мл), сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5іО2 (колонка 120 г 5і02 СотрШазп НР
Соїд, 0-50 95 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 9а (1,01 г, 51 95) у вигляді безбарвної олії. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 7,42-7,17 (м, 1ОН), 6,19 (дд, 9У-17,6, 11,0 Гц, 1Н), 5,76 (д, 9-3,9 Гу, 1Н), 5,52 (дд, 9У-17,5, 1,9 Гц, 1Н), 5,25 (дд, 9У-11,1, 1,8 Гц, 1Н), 4,76 (д, 9У-12,3 Гц, 1Н), 4,62-4,55
(м, 2Н), 4,52 (д, 9У-12,1 Гц, 1Н), 4,41 (д, 9У-12,1 Гц, 1Н), 4,25 (д, У-4,9 Гц, 1Н), 3,32 (д, 9-1,5 Гц, 2Н), 1,52 (с, ЗН), 1,29 (с, ЗН)
ГХ/МС: 1К-2,13 хв, М5 т/2-419,24 |МаеМа)|; система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система
МС: Тпептпо СО РїІееї; колонка: Кіпегех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95
АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 945 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкКл/хХвВ.
ВЕРХ: І8-4,37 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: 50 95 етилацетат у гексані, ЕЧ-0,55 (УФ) ши М а ння шт М М
Е Ме меон ї -
ВпОо діоксан ВПО он за де
Проміжна сполука ОУе - (ЗА, 45, 5Н)-4-(бензилокси)-5-(бензилокси)метил)-2-метокси-5- вінілтетрагідрофуран-3-ол
О розчин проміжної сполуки 94 (1,01 г, 2,55 ммоль) у метанолі (12,5 мл) при кімнатній температурі додавали 4М розчин НОСІ у діоксані (320 мкл). Через 1,25 год. реакційну суміш розподіляли між етилацетатом (100 мл) і насиченим водним розчином бікарбонату натрію (100 мл). Фази розділяли, і органічну фазу промивали насиченим сольовим розчином (100 мл), сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску з отриманням сирої проміжної сполуки 9е (1,05 г, суміш 1 аномерів «2,5:1) у вигляді безбарвної олії.
ГХ/МС: основний аномер ІК-2,00 хв, М5 т/2-393,22 |МаМа)|, побічний аномер ІК-1,98 хв, М5 т/2-393,22 |МаМаїЇ; система РХ: Тпепгто Ассеіа 1250 СВЕРХ; система МС: Тпепто СО РіІеег; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95
АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: основний аномер ІК-4,01 хв, побічний аномер ІК-3,955 хв; система ВЕРХ: серії Адіїєепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 мін-6б,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТСХ: елюент: 25 95 етилацетат у гексані, основний аномер КІі-0,30 (УФ), побічний аномер
Зо К-0,25 (УФ) ман
Впо Вп о о ВиВг о о о! -- Вчення шШщ х - тгФ -
ВпОо ОН ВпО /ОВп
Зе 9
Проміжна сполука 9 - (28, 35, 4Н)-3,4-біс(бензилокси)-2-(бензилокси)метил)-5-метокси-2- вінілтетрагідрофуран
У розчин проміжної сполуки 9е (1,0 г, 2,7 ммоль) у ТГФ (13,5 мл) при кімнатній температурі в атмосфері аргону додавали Ма (60 95 мас, 130 мг, 3,2 ммоль) у вигляді твердої речовини. Через 15 хв додавали бензил бромід (0,38 мл, 3,2 ммоль), і реакційну суміш перемішували протягом 4 год. Реакційну суміш гасили насиченим водним розчином хлориду амонію (5 мл) і розподіляли між етилацетатом (100 мл) і насиченим сольовим розчином (100 мл). Фази розділяли, і органічний шар сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску з отриманням сирої проміжної сполуки 9 (1,57 г, суміш Т аномерів «2:1) у вигляді безбарвної олії.
ГХ/МС: основний аномер ІК-1,88 хв, М5 т/2-483,36 |М'Ма)|, побічний аномер ІК-1,83 хв, М5 т/2-483,36 (Ма-Ма|; система РХ: Тпепгто Ассеіа 1250 СВЕРХ; система МС: Тпепто СО РіІеег; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: О хв-1,5 хв 2-100 956 АСМ, 1,5 хв-2,2 хв 100 95
АСМ, 2,2 хв-2,4 хв 100 95-2 965 АСМ, 2,4 хв-2,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: основний аномер ІК-4,83 хв, побічний аномер ІК-4,62 хв; система ВЕРХ: серії Адіїєепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 мін-6б,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ВпО-я Ва :
О. о ТФУ о о. он ши оон шт
ВпО 0 ОВп ВПО ОВп
Проміжна сполука 9ад-(ЗА, 45, 58)-3,4-біс(бензилокси)-5-(бензилокси)метил)-о- вінілтетрагідрофуран-2-ол
До проміжної сполуки 91 (1,5 г, 3,2 ммоль) при температурі 02С додавали розчин ТФУ (16 мл) і воду (1,6 мл), і реакційної суміші давали нагрітися до кімнатної температури. Через 9 год. додавали воду (1 мл), і реакційну суміш залишали перемішуватися ще 10 год. Реакційну суміш потім концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок розчиняли в етилацетаті (200 мл) і промивали насиченим водним розчином бікарбонату натрію (2х150 мл) і насиченим сольовим розчином (150 мл). Органічний шар сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5102 (колонка 24 г 5іО2 Сотбійа5й НР соїа, 0-100 95 етилацетат/гексан). Фракції, які містять бажаний продукт, поєднували з отриманням проміжної сполуки 99 (580 мг) у вигляді безбарвної олії, яка була сумішшю з іншими домішками. Суміш використовували на наступній стадії прямо.
ГХ/МС: їК-3,13 хв, М5 т/2-463,88 |МОНІ; система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система
МС: Тпепто СО РїІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95
АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкКл/хХвВ.
ВЕРХ: І8-4,34 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв. тутон МмМО Кто шВ-ЩВЩщ ння і ша ще СНносІ; У
ВПО ОВп ВПО 0 ОВп 99 оп
Проміжна сполука 9п 0 - (ЗВ, 45, 5Н8)-3,4-біс(бензилокси)-5-((бензилокси)метил)-5- вінілдигідрофуран-2(ЗН)-він
У розчин проміжної сполуки 99 (580 мг, 1,30 ммоль) і 4А М5 (100 мг) у ОСМ (6,45 мл) при кімнатній температурі додавали тетрапропіламонію перрутенат (45,7 мг, 130 мкмоль) і 4- метилморфолин М-оксид (457 мг, 3,89 ммоль). Через 1 год. у реакційну суміш додавали силікагель (500 мг), і отриману суспензію фільтрували через шар із силікагелю (7-1 г). Фільтрат концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5102 (колонка 12 г 5ІО2 СотріШазп НР Сода, 0-100 95 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 9П (254 мг, 18 95 за двох стадій) у вигляді безбарвної олії.
1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 7,38-7,23 (м, 13Н), 7,20-7,13 (м, 2Н), 5,91 (дд, 9У-17,5, 11,2 Гц, 1Н), 5,49 (дд, У-17,5, 0,9 Гц, 1Н), 5,33 (дд, У-11,2, 0,9 Гц, 1Н), 4,96 (д, 9У-12,0 Гц, 1Н). 4,74-4,68 (м, 2Н), 4,55-4,47 (м, ЗН), 4,39 (д, 9У-11,9 Гц, 1Н), 4,20 (д, У-6,0 Гц, 1Н), 3,55 (д, У-10,8 Гц, 1Н), 3,46 (д, У9-10,8 Гц, 1Н)
ГХ/МС: 1К-2,19 хв, М5 іт/2-444,78 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО РІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв- 3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 956 АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: І8-4,53 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: 25 95 етилацетат у гексані, ЕЧ-0,45 (УФ) сі МН 5:
МН» тд - ши ЗМ
Ву ее М де ВпОо о Моя тт Х моя Ви, тгФ штук" ОН
ВпО ОВп | т
ВПО ОВп 9п 15 ві
Проміжна сполука 9і - (ЗВ, 45, 58)-2-(4-амінопіроло(2,1-Я0И1,2,4Згриазин-7-іл)-3,4-біс(бензилокси)- 5-«(бензилокси)метил)-5-вінілтетрагідрофуран-2-ол
До суспензії проміжної сполуки 165 (0,21 г, 0,81 ммоль) і 1,2-біс(хлордиметилсиліл)етану (0,17 г, 0,81 ммоль) у ТГФ (4 мл) при температурі -787С в атмосфері аргону швидко додавали н- бутиллітій (2,5М у гексані, 1,0 мл, 2,5 ммоль). Отриману суміш потім переносили через канюлю в розчин 9П (0,18 г, 0,41 ммоль) у ТГФ (1 мл) при температурі -782С в атмосфері аргону. Через 20 хв реакційної суміші давали нагрітися до температури 02С і перемішували протягом 15 хв.
Реакційну суміш гасили насиченим водним розчином хлориду амонію (1 мл). Отриману суміш розбавляли етилацетатом (100 мл) і промивали насиченим водним розчином бікарбонату натрію (100 мл) і насиченим сольовим розчином (100 мл). Органічний шар сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5102 (колонка 12 г 5і02 СотрШазп НР СоїЯ СоїІштп, 0- 100 95 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 9і (11,1 мг, 5 9о, суміш ізомерів) у вигляді безбарвної олії.
ГХ/МС: 1К-1,97 хв, М5 іт/2-579,27 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО РІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв- 3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 956 АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: ІВ-3,37 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: етилацетат, КІ-0,3 (УФ)
МН. МН» ше М ЕБВІН ши І
ВЕз"ЕбО ши он СНноСі. шує!
ВпО /ОВп ВпО /ОВп ді 9і
Проміжна сполука 9)-7-(25, 35, 45, 5Н)-3,4-біс(бензилокси)-5-(бензилокси)метил)-5- вінілтетрагідрофуран-2-іл)піроло|2,1-4И1,2,А)гриазин-4-амін
У розчин проміжної сполуки 9і (11,0 мг, 19,0 мкмоль) і триетилсилану (0,5 мл) У ОСМ (1 мл) повільно при температурі 02С в атмосфері аргону додавали трифторид бору-дієтил ефірат (0,1 мл). Через 1 год. реакційну суміш повільно розбавляли насиченим водним розчином бікарбонату натрію (10 мл), і отриману суміш екстрагували етилацетатом (2х10 мл), сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку з 5іО2 (колонка 4 г 502 СотрШази НР соїа, 0-100 95 етилацетат/гексан) з отриманням проміжної сполуки 9) (7,7 мг, 72 965) у вигляді безбарвної плівки. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОСІЗ) б 7,87 (с, 1Н), 7,37-7,17 (м, 15Н), 6,73 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 6,51 (д, У-4,5
Гц, 1Н), 6,23 (дд, У-17,5, 10,9 Гц, 1Н), 5,70 (д, 9У-3,9 Гц, 1Н), 5,59 (дд, 9У-17,5, 1,8 Гц, 1Н), 5,32 (дд, У-10,9, 1,7 Гу, 1Н), 4,72-4,56 (м, 4Н), 4,49 (д, 9У-11,9 Гу, 2Н), 4,43 (д, 9У-5,6 Гц, 1Н), 4,25 (дд, 9-5,6, 4,0 Гц, 1Н), 3,56 (с, 2Н).
ГХ/МС: 1К-2,32 хв, М5 іт/2-563,33 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО РІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв- 3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 956 АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: ІВ-3,51 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
ТОХ: елюент: етилацетат, КІ-0,40 (УФ)
МН» Мне в: І и ЗМ
ВВ. во-я о УУЯ з но-я о З шт СНоСІ» ш--М
ВПО /ОВп но он 9і 20
Приклад 20 - (28, 35, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-Ч411,2,4|Ігриазин-7-іл)-2-(гідроксиметил)-2- вінілтетрагідрофуран-3,4-диол
У розчин проміжної сполуки 9) (7,7 мг, 13,7 мкмоль) у дихлорметані (1 мл) при температурі -7820 в атмосфері аргону додавали по краплях трибромід бору (1М, 0,06 мл, 60 мкмоль). Через 1 год. реакційній суміші давали нагрітися до температури 02С і перемішували додаткову кількість 1,5 год. Реакційну суміш охолоджували до температури -782С і гасили розчином суміші 2:1 метанол/піридин (1,5 мл). Отриманій суміші давали нагрітися до кімнатної температури і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою препаративної
Зо ВЕРХ (Рпепотіпех бЗупегді 4 мк Нуйго-ВЕ 80А, колонка 150х30 мм, 0-100 95 градієнт ацетонітрил/вода) з отриманням сполуки за прикладом 20 (0,5 мг, 13 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) б 7,78 (с, 1Н), 6,88 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 6,76 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 6,02 (дд, 917,4, 11,0 Гц, 1Н), 5,47 (дд, 9У-17,4, 2,0 Гц, 1Н), 5,23 (дд, 9У-10,9, 2,1 Гц, 1Н), 5,15 (д, 9У-8,3 Гу, 1Н), 4,72 (дд, 9-8,2, 5,7 Гц, 1Н), 4,34 (д, 9У-5,7 Гц, 1Н), 3,60 (д, 9У-11,8 Гц, 1Н), 3,49 (д, 9У-11,8 Гц, 1Нн)
ГХ/МС: 1К-0,84 хв, М5 іт/2-293,19 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО РІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-1,5 хв 2-100 95 АСМ, 1,5 хв- 2,2 хв 100 95 АСМ, 2,2 хв-2,4 хв 100 95-2 965 АСМ, 2,4 хв-2,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкл/хв
ВЕРХ: 8-2,181 хв; система ВЕРХ: серії Адіїепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
МН» Е МН» ве а и М
Х р зеМестшног Х р но-х оо м 0 0оно-У о З
МУ месмМ МУ
НО ЕЕ НО ЕЕ
49 21
Приклад 21 - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-аміно-5-фторпіроло|2,1-Я0И1,2,4Згриазин-7-іл)-2-азидо-4-фтор- 2-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-3-ол
Сполуку за прикладом 19 (237 мг, 0,766 ммоль) і зеїесшиог (407 мг, 1,15 ммоль) суспендували в ацетонітрилі (5 мл) і додавали АСОН (0,2 мл). Отриману суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 30 хв, і потім нейтралізували розчином бікарбонату натрію і фільтрували для видалення твердих речовин. Після концентрування у вакуумі залишок очищали за допомогою препаративної ВЕРХ (ацетонітрил від 0 до 30 95 у воді) з отриманням сполуки за прикладом 21 (27 мг, 11 95) у вигляді твердої речовини не зовсім білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) б 7,73 (с, 1Н), 6,63 (с, 1Н), 5,80 (дд, 9У-23,9, 1,7 Гц, 1Н), 5,16 (ддд, 955,3, 5,0, 1,7 Гц, 1Н), 4,56 (дд, У-23,5, 5,0 Гц, 1Н), 3,94-3,60 (м, 2Н) 19Е ЯМР (376 МГц, СОЗОБ) б -161,76 (с), -195,42 (д, 9-55,4 Гц)
М5 т/2-328 (МАНІ. Система МС: Тпепто І СО Ріееєї
МН» МН»
М М - -
МО Мне НЕ/Руг т-а 112 116
Проміжна сполука 11Бб-2-фторпіроло|2,1-4П1,2,4)триазин-4-амін.
Проміжну сполуку 114а (2,0 г, 13,4 ммоль) поміщали в судину роїуТибе. Реакційну посудину потім поміщали на крижану баню і послідовно додавали 70 95 НЕ/Руг (18 мл) і піридин (9 мл). Потім відразу після додавання піридину протягом 20 хв повільно додавали ІВиМО2 (2,07 мл, 17,43 ммоль). Розчин з жовтувато-коричневого кольору ставав темним з виділенням тепла й утворенням газу. Реакційну суміш потім перемішували протягом ще 20 хв, і реакційну суміш потім розбавляли водою і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок розподіляли між етилацетатом і водою. Органічні продукти розділяли, і водний шар промивали етилацетатом три рази. Органічні продукти поєднували і промивали насиченим сольовим розчином. Сирий продукт сушили над Ма2504, фільтрували, і розчинник видаляли при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (50-100 95 ЕЮАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 116 (1,68 г, 82 95) у вигляді твердої речовини жовтувато- коричневого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 8,49-8,09 (м, 2Н), 7,58 (т, 9У-2,0 Гу, 1Н), 6,95 (д, 9-4,5, 1Н), 6,59 (д, 9-4,5, 1Н).
Зо 19 ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 5 -73,42 (с).
ГХ/МС: 1К-1,03 хв, М5 іт/2-153,08 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
со дибромгідантоїн ше І х Ж МФ Ум.
М. Е й "М Е
Вг 115 11с
Проміжна сполука 11с-7-бром-2-фторпіролої|2,1-Ц(1,2,4гриазин-4-амін.
Розчин 115 (3,36 г, 22,1 ммоль) у ДМФ (50 мл) на крижаній бані охолоджували до температури 02С. За допомогою краплинної лійки протягом 40 хв додавали по краплях розчин 1,3-дибром- 5,5-диметилгидантоїну (3,16 г, 11,0 ммоль) у ДМФ (50 мл). Через 1 год. реакційну суміш гасили насич. розчином Ма252О3(водн.), і сирий продукт розподіляли між ЕТОАс і 595 розчином
ГІСіК(водн.). Органічні продукти екстрагували 5 95 розчином ГіСіІ(водн.) (4х), потім насиченим сольовим розчином. Органічні продукти сушили над Ма2504, тверді продукти видаляли шляхом фільтрування, і фільтрат концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок диспергували за допомогою ультразвуку в СН2СІ?2, і тверді продукти збирали шляхом фільтрування і сушили у високому вакуумі з отриманням проміжної сполуки 11с (3,93 г, 77 9о) у вигляді твердої речовини жовтого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 8,49-8,44 (м, 2Н), 7,08 (д, 9-46 Гц, 1Н), 6,76 (д, У-4,6 Гц, 1Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 5 -71,45 (с).
ГХ/МС: 1К-1,22 хв, М5 т/2-232,98 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
НьЬМ си М
МН» ри
Впо- ! ем зе ЗМ Хр ЗТАВАБЕ, пВвиі Впо о М М'ОСЕ хм, А. і ОН
МОСЕ ЕЕ тгФ,-78 С НА
Ве ВО г ВпО г 11с 11а 11е
Проміжна сполука 11е - (38, 4Н, 5Н8)-2-(4-аміно-2-фторпіроло|2,1-4(11,2,4)триазин-7-іл)-4- (бензилокси)-5-((бензилокси)метил)-3-фтортетрагідрофуран-2-ол.
До розчину 11с (2,09 г, 9,08 ммоль) у ТГФ (30 мл) однією порцією додавали 1,2- біс(хлордиметилсиліл)етан (ЗТАВАБЕ, 1,96 г, 9,08 ммоль), і отриманій суміші давали перемішуватися при температурі навколишнього середовища протягом 1 год. Потім реакційну суміш охолоджували до температури -782С з використанням бані із сухим льодом у метанолі.
Додавали пВиї і (2,5М у гексані, 10,9 мл, 27,2 ммоль), підтримуючи внутрішньошню температуру -652С. Потім у реакційну суміш протягом 1 хв додавали розчин проміжної сполуки 114 (отриманий відповідно до ММО2012012776, 2,5 г, 7,5 ммоль) у ТГФ (25 мл). Через 5 хв реакційну суміш гасили оцтовою кислотою і давали повернутися до температури навколишнього
Зо середовища. Розчинники видаляли при зниженому тиску, і залишок обробляли етилацетатом.
Органічні продукти промивали водою, потім насиченим сольовим розчином. Шари розділяли, і органічні продукти сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску з отриманням сирого 11е у вигляді суміші ізомерів, які використовували як такі на наступній стадії.
ГХ/МС: 1К-1,32 ії 1,40 хв, М5 т/2-483,15 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеіа 1250 СВЕРХ; система МС: Тпепто І СО РіІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 956 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2- 100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 96 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 956 АСМ при 1,8 мл/хв.
НОМ НьМ за М си М ;
Впо-.. 9 х Ми ТЕ5, ВЕзеЄ0О ВпО-.. о КУ Мо 02 ТОН СНьСЇЬ
ВО в ВПО 11е 114
Проміжна сполука 112-7-(25, 35, 48, 5Н)-4-(бензилокси)-5-(бензилокси)метил)-3- фтортетрагідрофуран-2-іл)-2-фторпіроло|2,1-10П1,2,Атриазин-4-амін.
Проміжну сполуку 11е (1,99 г, 3,72 ммоль) розчиняли в СН2СІ2 (80 мл), і до суміші додавали
ТЕЗ (4,75 мл, 29,7 ммоль). Реакційну суміш охолоджували до температури 02С ії повільно додавали ВЕЗ-Е2О (1,07 мл, 4,09 ммоль). Через 15 хв реакційну суміш гасили насич. розчином
Ммансоз(водн.), і шари розділяли. Водний шар промивали СН2СІ2. Органічні шари поєднували і промивали насич. розчином МансозЗ(водн.). Органічні продукти сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий продукт очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-60 95 ЕАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 117 (1,12 г, 64 95, суміш 1 аномерів 21).
ГХ/МС: 1К-1,55 хв, М5 іт/2-467,47 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
НоМ Нам зи М ШИК! о во хх Мои 1095 Ра/С, АСОН но х ще й пи о
Вп НО 115 119
Проміжна сполука 119 - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-аміно-2-фторпіроло|2,1-41,2,4)гриазин-7-іл)-4- фтор-2-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-3-ол
Проміжну сполуку 117 (0,82 г, 1,76 ммоль) розчиняли в оцтовій кислоті (25 мл). Реакційну посудину продували аргоном і додавали 10 95 Ра/С (468 мг, 0,439 ммоль). Посудину відкачували і заповнювали На(газ) (Зх). Через 1 год. реакційну посудину продували азотом. Отриману суміш фільтрували через шар з целіту, і шар на фільтрі промивали СНЗОН. Фільтрат концентрували при зниженому тиску і потім упарювали разом з етилацетатом, потім гексаном з отриманням проміжної сполуки 1149 (503 мг, 98 90, суміш 1 аномерів 21).
ГХ/МС: 1К-0,81 хв, М5 іт/2-286,97 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
НьМм НОМ зи М зи М ноу СНУ(ОР)зРІ, ДМФ і ге о) 8-х о
НО НО
119 нн!
Зо Проміжна сполука 11й - (25, ЗА, 48, 55)-5-(4-аміно-2-фторпіроло|2,1-41,2,4)гриазин-7-іл)-4- фтор-2-(йодметил)тетрагідрофуран-3-ол.
У колбу, продуту аргоном, додавали розчин 119 (283 мг, 0,989 ммоль) у ДМФ (10 мл), потім розчин метил трифеноксифосфонію йодиду (0,536 г, 1,19 ммоль) у 4 мл ДМФ. Реакційну суміш залишали перемішуватися при температурі 09С протягом 10 хв і потім нагрівали до температури навколишнього середовища. Через 30 хв, реакційну суміш гасили насич. розчином
Ма252О3(водн.). Сиру речовину розподіляли між Е(ОАс і 5 9о розчином ГГ іСіІ(водн.). Органічні продукти розділяли і промивали насиченим сольовим розчином. Органічні продукти сушили над
Ма25054, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок обробляли АСМ і очищали за допомогою ВЕРХ без кислотного модифікатора з отриманням проміжної сполуки 11 (201 мг, 52 95, суміш 1 аномерів 2:1) у вигляді твердої речовини білого кольору.
ГХ/МС: 1К-1,08 хв, М5 іт/2-397,12 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
НьМ НьЬМ з М зи М і в) ж Мои ОВИ, пФ, 60 с ж МИ
І; пня )
НО г НО БЕ в 11ї
Проміжна сполука 111 - (ЗВ, 48, 55)-5-(4-аміно-2-фторпіроло|2,1-4И1,2,4|)гриазин-7-іл)-4-фтор-2- метилентетрагідрофуран-3-ол.
До розчину 11Пп (356 мг, 0,899 ммоль) у ТГФ (8 мл) додавали ОВИ (0,403 мл, 2,70 ммоль), і отриману суміш нагрівали при температурі 602С. Через З год. реакційну суміш концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (40- 100 95 ЕІЮАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 11 (201 мг, 83 95, 2.1 суміш Т аномерів) у вигляді твердої речовини білого кольору.
ГХ/МС: 1К-1,04 хв, М5 т/2-269,14 |М-1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
НьЬМ НьМ за Вп(СНз)зМсї, Мама се
Що І», МММ, АСМ, ТГФ 0 ря ння рю о Сх Мо су
НО НО КЕ
Проміжна сполука 11) - (25, ЗА, 48, 55)-5-(4-аміно-2-фторпіроло|2,1-4П1,2,4|)гриазин-7-іл)-2- азидо-4-фтор-2-(йодметил)тетрагідрофуран-3-ол
Бензилтриметиламонію хлорид (292 мг, 1,57 ммоль) і азид натрію (102 мг, 1,57 ммоль)
Зо розчиняли в АСМ (4 мл), і отриману суміш перемішували при температурі навколишнього середовища протягом 4 год. Суміш фільтрували, і фільтрат додавали до розчину 111 (0,201 г, 0,749 ммоль) у ТГФ (4 мл). Додавали МММ (0,412 мл, 3,75 ммоль), потім по краплях додавали розчин йоду (0,342 г, 1,35 ммоль) у ТГФ (4 мл). Через 15 хв порціями додавали М-ацетил цистеїн доти, поки на спостерігалося виділення газу. Додавали насич. розчин Ма252О3(водн.), поки розчин не ставав світло-жовтим. Отриману суміш розподіляли між водою і етилацетатом.
Шари розділяли, і органічний шар сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (20-100 95
ЕКОАсС/Нех) з отриманням проміжної сполуки 11) (183 мг, 56 95) у вигляді єдиного ізомеру. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-46) 5 8,44 (д, 9У-28,6 Гц, 2Н), 6,98 (д, У-4,6 Гц, 1Н), 6,79 (д, 9-46 Гу, 1Н), 6,32 (д, 9У-6,9 Гц, 1Н), 5,60 (дд, 9У-23,8, 2,5 Гу, 1Н), 5,36 (ддд, уУ-54,9, 5,0, 2,6 Гц, 1Н), 4,60 (ддд, У-21,5, 6,9, 5,0 Гц, 1Н), 3,63 (АВа, Дб-0,09 м.д., У-8Гц, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 5 -71,74 (с), -194,57 (ддд, 9У-54,9, 24,0, 21,7 Гц)
ГХ/МС: 1К-1,71 хв, М5 т/2-437,93 М'-1|; система РХ: Тпепгто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв. . . ІНьЬМ
Мом агідрид ізобутанової кислоти 2 хо | МАМИ о М'ОСЕ в) М
НО Е ов 11) ве 11К
Проміжна сполука ТК - (25, ЗВ, 45, 55)-5-(4-аміно-2-фторпіроло|2,1-4П1,2,4|)гриазин-7-іл)-2- азидо-4-фтор-2-(йодметил)тетрагідрофуран-3-їіл ізобутират.
До розчину 11 (0,183 г, 0,419 ммоль) у ТГФ (10 мл) додавали ангідрид ізобутанової кислоти (0,083 мл, 0,502 ммоль), ТЕА (0,118 мл, 0,837 ммоль) і ОМАР (10 мг, 0,084 ммоль). Реакційну суміш залишали перемішуватися при температурі навколишнього середовища протягом 15 хв, і реакційну суміш гасили СНЗОН. Реакційну суміш концентрували при зниженому тиску, і сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-50 96 ЕЮАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 11К (0,198 г, 93 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) б 8,48 (д, 9У-30,7 Гц, 2Н), 6,99 (д, У-4,6 Гу, 1Н), 6,84 (д, 9-4,6 Гу, 1Н), 5,77-5,47 (м, ЗН), 3,69 (АВа, Аб-0,05 м.д., 9-12 Гц, 2Н), 2,70 (р, У9-7,0 Гц, 1Н), 1,24-1,05 (д,
У-7,0 Гц, 6Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 5 -71,58 (с), -194,89 (ддд, 9-55,0, 24,3, 16,8 Гц).
ГХ/МС: 1К-1,56 хв, М5 т/2-508,13 М'-1|; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
НОМ СІ НМ с М (МВ НО, лу ши М
Ма»НРО, ! о і; Ме З-хлорбензойна: кислота в; о У Моя во З-хлорпероксибензойна кислота Ва
МУ шт Кен 0.0 ЕЕ Снеосі», НО о. 0 ЕЕ
С Тк С МІ
Проміжна сполука 11! - (28, ЗА, 45, 55)-5-(4-аміно-2-фторпіроло|2,1-4П1,2,4|)гриазин-7-іл)-2- азидо-4-фтор-3-(ізобутирилокси)тетрагідрофуран-2-іл)уметил З-хлорбензоат.
Проміжну сполуку 11К (0,153 г, 0,302 ммоль) розчиняли в СН2СІ2 (10 мл) і Н2О (6 мл).
Послідовно додавали двоосновний фосфат калію (0,138 г, 0,603 ммоль), бісульфат тетрабутиламонію (0,210 г, 0,618 ммоль) і З-хлорбензойну кислоту (0,097 г, 0,618 ммоль).
Отриману суміш охолоджували до температури 02С і додавали МСРВА (0,203 г, 0,905 ммоль).
Реакційній суміші давали нагрітися до температури навколишнього середовища і перемішували
Зо протягом 16 год. Реакційну суміш потім гасили насич. розчином Ма252О3(водн.) і концентрували при зниженому тиску. Сирий водний залишок розбавляли АСМ і очищали за допомогою за допомогою препаративної ВЕРХ без кислотного модифікатора з отриманням проміжної сполуки 111 (20 мг, 13 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСОО-аб) 5 8,46 (д, 9У-26,4 Гц, 2Н), 7,96-7,81 (м, 2Н), 7,81-7,66 (м, 1Н), 7,62- 7,46 (м, 1Н), 6,94 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 6,80 (д, 9У-4,5 Гц, 1Н), 5,73 (с, ЗН), 4,60 (АВа, Аб-0,08 м.д.,
У-12 Гу, 2Н), 2,66 (р, 9У-7,0 Гц, 1Н), 1,20-1,01 (м, 6Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 6--71,45 (с), -193,41 (ддд, У-54,4,254,21,2 ГЦ, ).
ГХ/МС: 1К-2,22 хв, М5 т/2-536,17 М'-1|; система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв. сі НОМ НМ о
У ше В СНЗОН, МНАОН С ре
Б Мои шиття Н М.,, 2
ІФ) о М Е ве М Е
М ї 5 М ї 5 о. но ва 111 22
Приклад 22 - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-аміно-2-фторпіроло|2,1-Я0И1,2,4Згриазин-7-іл)-2-азидо-4-фтор- 2-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-3-ол
У розчин проміжної сполуки 111 (22 мг, 0,041 ммоль) у СНЗОН (1 мл) при кімнатній температурі додавали конц. МНАОН (1 мл). Через 30 хв реакційну суміш концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок розбавляли мінімальною кількістю Н2О і очищали за допомогою препаративної ВЕРХ без модифікатора з отриманням сполуки за прикладом 22 (10 мг, 77 90) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-4а6) б 8,40 (д, 9У-30,9 Гц, 2Н), 6,95 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 6,78 (д, 9-45 Гу, 1Н), 5,89 (д, 9У-7,5 Гц, 1Н), 5,61 (дд, 9У-23,8, 2,1 Гц, 1Н), 5,44 (т, 9У-6,1 Гц, 1Н), 5,18 (ддд, 9У-55,3, 5,1,2,2 Гц, 1Н), 4,44 (ддд, 9У-23,7, 7,5, 5,0 Гц, 1Н), 3,59 (ддд, У-48,5, 12,0, 6,1 Гц, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМСО-аб) 5 -71,18 (с), -193,48 (дт, 9-55,3, 23,8 Гу).
ГХ/МС: ІК-1,13 хв, М5 т/2-327,86 |М'-1|; система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
Е
МН» МН»
Ех їх тв5оО | Ме Зеїіесфічог ЇЇ тТВБ5О Й Ме
МАМИ сл не КО,
ЕМ" М- -)ЕМ" М-
М-- АСМ М- тв50Е ТВ50 СЕ за 12а
Проміжна сполука 12а - (28, ЗА, 45, 55)-5-(4-аміно-5-фторпіроло|2,1-4(1,2,4Ігриазин-7-іл)-3- ((трет-бутилдиметилсиліл)окси)-2-((трет-бутилдиметилсиліл)окси) метил) -4- фтортетрагідрофуран-2-карбонітрил
У розчин проміжної сполуки За (57 мг, 0,109 ммоль) у АСМ (3 мл) однією порцією додавали зеїІесшиог ІІ (52 мг, 0,164 ммоль). Через 1,5 год. реакційну суміш гасили шляхом додавання насиченого розчину МансСоЗ(водн.). Додавали етилацетат (4 мл), і двофазну суміш енергійно перемішували протягом 5 хв. Реакційну суміш потім розбавляли ЕОАс і насиченим розчином
МмансозЗ(водн.)о. Шари розділяли, і органічну фазу екстрагували водою і потім насиченим сольовим розчином. Органічний шар сушили над Ма2504. Осушувач видаляли шляхом вакуумного фільтрування і фільтрат концентрували при зниженому тиску. Проміжну сполуку 12а
Зо (11 мг, 18,7 95) виділяли з концентрованої сирої речовини за допомогою хроматографії на колонку із силікагелем з використанням наступного градієнта елюентів: 0 96 ЕОАсС у гексані, підвищуючи до 7095 ЕОАс у гексані, швидко, підвищуючи до 100 95 ЕОАсС після того, як вихідний продукт був елююваний зі колонки. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) б 7,72 (с, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 5,65 (дд, 9У-24,8, 2,4 Гц, 1Н), 5,38 (дкв, 954,4, 2 Гц, 1Н), 4,88 (дд, 9У-19,2, 4,4 Гу, 1Н), 3,96 (АВада, ДОАВ-О,141 м.д., 9-11 Гу, 2Н), 0,99 (с,
ОН), 0,86 (с, 9Н), 0,21 (с, 6Н), 0,07 (с, ЗН), -0,02 (с, ЗН).
19Е ЯМР (376 МГц, СОЗОБ) б -161,795 (с), -194,806 (ддд, 9У-54,5, 19,2, 18,8 Гц).
ГХ/МС: КТ-2,06 хв, М5 т/2-540,64 |М-1); система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; М5: Тпегто
ІСО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв- 2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ.
Е Е
МН» МН.
КЕ: Ех їх . Х тв5о у Мк НЕ Руг но М мм о; ЧИ, з о ЧИ че М тго м М
ТВО СЕ НО СЕ
12а 23
Приклад 23 - (28, ЗА, 48, 55)-5-(4-аміно-5-фторпіроло|2,1-411,2,4Ігриазин-7-іл)-4-фтор-3- гідрокси-2-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-карбонітрил
У розчин проміжної сполуки 12а (29 мг, 0,054 ммоль) у ТГФф (2 мл) у поліпропіленовій пробірці додавали 70 95 НЕ піридин у піридині (51 мкл, 1,97 ммоль) при температурі 02С в атмосфері Ма.
Через 1,5 год. реакційну суміш видаляли з крижаної бані. Додаткову кількість 70 95 НЕ"піридин у піридині додавали через З год. (150 мкл), 5 год. 45 хв (200 мкл) і 21 год. 15 хв (0,7 мл). Реакційну суміш потім перемішували протягом ще 24 год. при температурі, у цей момент реакційну суміш охолоджували на крижаній бані і потім гасили водою і насиченим розчином Мансоз(водн.).
Суміш концентрували при зниженому тиску, і залишок поміщали в ДМФ. Отриманий розчин/суспензію фільтрували через шприцевий фільтр (У/пайтап). Фільтрат ін'єктували на колонку ВЕРХ і наполовину очищений продукт далі очищали за допомогою хроматографії на колонку із силікагелем з використанням наступного градієнта елюентів: 0 96 МеонН у ОСМ, підвищуючи до 20 96 МеоН у ОСМ. Продукт, який містить фракції, концентрували, і залишок ліофілізували з отриманням сполуки за прикладом 23 (5 мг, 30 95) у вигляді порошку білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМФ-а?7) б 7,74 (с, 1Н), 6,61 (с, 1Н), 5,75 (дд, 9У-25,2, 1,6 Гц, 1Н), 5,23 (ддд, 9-54,8, 4,68, 1,6 Гу, 1Н), 4,64 (дд, У-22, 4,4 Гц, 1Н), 3,90 (АВа, ДбАВ-О,151 м. д., У-12 Гц, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, ДМФф-а?7) б -161,727 (с), -193,726 (ддд, 9У-54,5, 22,9, 21,8 Гц).
ГХ/МС: КТ-0,81 хв, М5 т/2-312,13 |Ма1); С: Тпегто Ассеіа 1250 СВЕРХ; М5: Тпегто СО
Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв- 2,8 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3 хв 2 95 АСМ.
МН мих су их зу Є ут твзо- КД: І» РР, змідазол твво о./-М Шу ) код щ- пптттняттнттттнттттнттттттетнттттттятнтнттттттттюттттттттнрж ХМ і М но ши тввб СЕ те тв5б0 СЕ 29 13а
Зо Проміжна сполука 1За-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-4-((трет-бутилдиметилсиліл)окси)-5-((трет- бутилдиметилсиліл)окси)метил)-3-фтор-5-(йодметил)тетрагідрофуран-2-іл)піроло|2,1-
ЧІ1,2,)гриазин-4-іл)бензамід.
До розчину трифенілфосфіну (973 мг, 3,71 ммоль) й імідазолу (252 мг, 3,71 ммоль) у ТГФ (5 мл) при кімнатній температурі додавали йод (253 мг, 1,86 ммоль). Після завершення розчинення йоду по краплях повільно додавали розчин сполуки 29 (650 мг, 0,93 ммоль) у ТГФ (5 мл).
Отриману суміш перемішували при температурі 802С протягом З днів і потім концентрували у вакуумі. Залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку із силікагелем (від 0 до 50 Фо
КОДАс у гексані) з отриманням проміжної сполуки 13а (230 мг, 33 Об) у вигляді олії.
М5 т/2-742 МАНІ. Система МС: Тпепто І СО Рієві.
МН | МН хх бух х А тво Х М 1095Ра/С, Н тво М зо о бо балон о Ме ) М -ттттнтнтнтнтнтн--5 й
І к шо. о. КУ
Шк Я ТЕА, СНЗОН то тв5б ТВО СЕ
Проміжна сполука 13р-М-(7-(25, 35, 48, 5Н8)-4-((трет-бутилдиметилсиліл)окси)-5-((трет- бутилдиметилсиліл)окси)метил)-3-фтор-5-метилтетрагідрофуран-2-іл)піроло|2,1-
ЧІ1,2,)гриазин-4-іл)бензамід.
Проміжну сполуку 1За (200 мг, 0,243 ммоль) розчиняли в метанолі (10 мл) і в атмосфері азоту додавали 10 95 Ра/С (100 мг, 0,094 ммоль) і ТЕА (0,035 мл, 0,243 ммоль). Отриману суміш потім перемішували в атмосфері Н2 (балон) при кімнатній температурі протягом 40 хв. Отриману суміш фільтрували і концентрували у вакуумі і залишок очищали за допомогою хроматографії на колонку із силікагелем (від О до 40 95 ЕЮАсС у гексані) з отриманням проміжної сполуки 136 (145 мг, 72 95) у вигляді твердої речовини білого кольору з 75 У5-ною чистотою.
М5 т/2-616 МАНІ. Система МС: Тпегто І СО Рієєї
МН Мне їх бух х Х М тво Хм ТВАБ, тгФ; но м о -- т ук Мт «М у МН, Меон кл тВ5О СЕ НО 13Ь 24
Приклад 24 - (28, ЗА, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-Ч4И1,2,4Ігриазин-7-іл)-4-фтор-2- (гідроксиметил)-2-метилтетрагідрофуран-3-ол.
Проміжну сполуку 135 (145 мг, 75 У5-на чистота, 0,177 ммоль) розчиняли в ТГФ (10 мл) і додавали ТВАЕ (1М у ТГФ, 0,53 мл, 0,531 ммоль). Отриману суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 2 год. і потім додавали метанольний аміак (7н, 10 мл). Отриману суміш перемішували протягом 24 год. і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою препаративної ВЕРХ (від 0 до 35 95 ацетонітрил у воді, протягом 20 хв) з отриманням сполуки за прикладом 24 (30 мг, 60 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1Н ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) б 7,78 (с, 1Н), 6,84 (д, 9-4,5 Гц, 1Н), 6,76 (д, 9У-4,5 Гц, 1Н), 5,53 (дд, 9-21,5, 4,0 Гц, 1Н), 5,25 (ддд, У-55,5, 5,3, 4,1 Гц, 1Н), 4,44 (дд, 9У-17,2, 5,2 Гц, 1Н), 3,65-3,43 (м, 2Н), 1,27 (с, ЗН) 19Е ЯМР (376 МГц, СОЗОБ) б -197,08 (ддд, У-55,4, 21,5, 171 Гу)
М5 т/2-282 МАНІ. Система МС: Тпепто І СО Ріееі.
НМ НьМ с КІ ши ТМ іо) що х мом 1096Ра/С, АсОН но х м. в) --- о;
ВпО /ОВп | но он 1е 14а
Проміжна сполука 14а - (25, ЗВ, 45, 5Н8)-2-(4-амінопіроло|2,1-4(1,2,4|)гриазин-7-іл)-5- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-3,4-диол.
Проміжну сполуку Те (2,64 г, 4,91 ммоль) розчиняли в оцтовій кислоті (50 мл). Колбу продували аргоном і додавали 10 95 Ра/сС (1,05 г, 0,982 ммоль). Колбу відкачували і три рази заповнювали
На(газ). Реакційну суміш перемішували в атмосфері Наг(газ). Через 1 год. колбу продували азотом, і реакційну суміш фільтрували через шар з целіту, промиваючи СНЗОН. Фільтрат концентрували при зниженому тиску і потім упарювали разом з ЕОАсС, потім з гексаном.
Залишок поміщали у високий вакуум з отриманням проміжної сполуки 14а (1,31 г, 99 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 7,80 (с, 1Н), 7,66 (с, 2Н), 6,82 (д, У-4,4 Гц, 1Н), 6,66 (д, 9-44 Гц, 1Н), 5,09 (д, 9У-6,5 Гц, 1Н), 5,06-4,56 (м, ЗН), 4,21 (т, У-5,9 Гц, 1Н), 3,93 (т, У-4,9 Гц, 1Н), 3,77 (кв, 3-4,5 Гц, 1Н), 3,48 (ддд, У-38,9, 11,8, 4,4 Гц, 2Н).
ГХ/МС: 1 -0,47 хв, М5 т/2-267,13 |МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО Рееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 1004, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 956 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2- 100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв. ном НЬМ . А. о що
У 4 т Н М ! - хи Ми триетипортоформіат но ЯМИ ща М Т5ОН, ацетон зі М - пола аа ху ч/
НО он ро 1423 145
Проміжна сполука 145 - ((За, 48, 65, ба)-6-(4-амінопіроло(2,1-40И1,2,4Згриазин-7-іл)-2,2- диметилтетрагідрофурої3,4-4|1И1,3|діоксол-4-іл)уметанол.
Проміжну сполуку 14а (3,13 г, 11,7 ммоль) розчиняли в ацетоні (80 мл) і додавали Т5ОН (6,00 г, 31,5 ммоль). Протягом 10 хв повільно додавали триетилортоформіат (6,0 мл, 36,1 ммоль).
Отриманій суміші давали перемішуватися при температурі навколишнього середовища протягом ночі. Додавали насичений водний розчин карбонату натрію до рН-8 реакційної суміші.
Тверді продукти видаляли шляхом фільтрування, і фільтрат концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок розподіляли між ЕІОАс і насиченим сольовим розчином. Фази розділяли, і органічні продукти сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску.
Сирий продукт очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (60-100 95 ЕЮАс/Нех-20 95
Меон/ЕоОдАс) з отриманням проміжної сполуки 14656 (2,55 г, 71 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 7,83 (с, 1Н), 7,71 (с, 2Н), 6,83 (д, У-4,4 Гц, 1Н), 6,73 (д, 9-45 Гц,
Зо 1Н), 5,21 (д, 9У-4,9 Гц, 1Н), 5,01 (дд, У-6,6, 4,9 Гц, 1Н), 4,84 (т, 9У-5,7 Гц, 1Н), 4,71 (дд, У-6,7, 3,7
Гц, 1ТН), 3,99-3,85 (м, 1Н), 3,46 (т, У-5,5 Гц, 2Н), 1,48 (с, ЗН), 1,29 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-0,87 хв, М5 іт/2-307,21 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
НьМ НьЬМ -ву й пуб З я - . ХХ ря но Ам ТВ5С, тій тво М. ) СТ о, --/ СНоСІЬ --/ ра раї 146 14с
Проміжна сполука 14с-7-(За, 45, 68, ба)-6-«(трет-бутилдиметилсиліл)окси)метил)-2,2- диметилтетрагідрофуроїЇ3,4-4111,3|діоксол-4-іл)піроло/2,1-4(1,2,4гриазин-4-амін.
Проміжну сполуку 1465 (2,55 г, 8,32 ммоль) розчиняли в ОСМ (50 мл), і суміш охолоджували до температури 02С. Додавали імідазол (1,70 г, 24,9 ммоль), потім ТВ5СІ (1,88 г, 12,5 ммоль).
Через 16 год. реакційну суміш гасили метанолом. Отриману суміш концентрували при зниженому тиску, і сирий залишок розподіляли між водою і ЕІОАс. Органічні продукти сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (50-100 95 ЕІЮАсС/Нех) з отриманням проміжної сполуки 14с (2,60 г, 74 9о) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 7,83 (с, 1Н), 7,74 (с, 2Н), 6,82 (д, У-4,4 Гц, 1Н), 6,68 (д, 9-44 Гц, 1Н), 5,26 (д, 9У-4,4 Гц, 1Н), 5,00 (дд, У-6,5, 4,5 Гц, 1Н), 4,71 (дд, 9У-6,5, 3,7 Гц, 1Н), 3,97 (тд, 9-51, 3,6 Гц, 1Н), 3,64 (д, У-5,2 Гц, 2Н), 1,48 (с, ЗН), 1,28 (с, ЗН), 0,83 (с, 9Н), -0,02 (с, 6Н).
ГХ/МС: 1К-1,91 хв, М5 т/2-421,60 (МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 1004, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 956 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2- 100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 96 АСМ при 1,8 мл/хв. в Воснім с я ми ТМ ле М «щи Вос2О, ТЕА ЧИ вводу ОМАР, пФ тв5о. ую ша аа аа су х р: - що 14с ! 14а
Проміжна сполука 144 - трет-бутил (7-((За, 45, 6ЕВ, ба)-6-«(трет-бутилдиметилсиліл)окси)метил)- 2,2-диметилтетрагідрофурої3,4-411И1,З|діоксол-4-іл)піроло|2,1-Ч4И1,2,4)гриазин-4-ілукарбамат.
Проміжну сполуку 14с (2,59 г, 6,16 ммоль) розчиняли в ТГФ (60 мл), і отриманий розчин охолоджували до температури 02С. Потім додавали Вос20О (2,69 г, 12,3 ммоль) і ОМАР (0,3 г, 2,А6 ммоль). Повільно додавали ТЕА (2,56 мл, 18,3 ммоль), і реакційній суміші давали нагрітися до кімнатної температури. Через З год. реакційну суміш охолоджували до температури 02С і додавали Меон (10 мл), потім конц. МН4АОН(водн.) (50 мл). Отриманій суміші давали нагрітися до кімнатної температури і перемішували протягом ночі. Реакційну суміш концентрували при зниженому тиску, і сирий залишок розподіляли між ЕІОАс і воду. Шари розділяли й органічний шар сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-100 96 ЕАс/Нех) з отриманням
Зо проміжної сполуки 144 (2,82 г, 88 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-46) б 10,46 (с, 1Н), 8,20 (с, 1Н), 7,19 (д, У-4,6 Гц, 1Н), 6,90 (д, 9У-4,6 Гц, 1Н), 5,33 (д, 9У-4,2 Гц, 1Н), 5,02 (дд, У-6,5, 4,3 Гц, 1Н), 4,72 (дд, У-6,5, 3,6 Гц, 1Н), 4,01 (кв, 9У-5,0
Гц, ТН), 3,64 (д, 9У-5,1 Гц, 2Н), 1,49 (с, 9Н), 1,32 (д, 9У-22,7 Гц, 6Н), 0,82 (с, 9Н), -0,03 (с, 6Н).
ГХ/МС: 1К-1,89 хв, М5 іт/2-521,27 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
ВоснМ ВосНм 1 ре ер мае А
Н Щі с ре тво Ам оо ло ТВАЕ, ТгФ ще 0. о р ра щ 144 14е
Проміжна сполука 14е - трет-бутил (7-(За, 45, 68, ба)-6-(гідроксиметил)-2,2- диметилтетрагідрофурої3,4-4111,3|діоксол-4-іл)піролоЇ2,1-4П1,2,4гриазин-4-іл)карбамат.
Проміжну сполуку 144 (2,8 г, 5,4 ммоль) розчиняли в ТГФ (50 мл) і додавали ТВАЕ (1,0М у ТГФ, 5,92 мл, 5,92 ммоль). Через 30 хв додавали додаткову кількість ТВАЕ (1,0М у ТІФ, 5,92 мл, 5,92 ммоль). Через ще 30 хв реакційну суміш гасили водою, і отриману суміш екстрагували ЕЮАс (2х). Об'єднані органічні шари промивали насиченим сольовим розчином, сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (10-100 96 ЕІЮАсС/Нех) з отриманням проміжної сполуки 14е (2,19 г, 86 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) 5 10,46 (с, 1Н), 8,22 (с, 1Н), 7,20 (с, 1Н), 6,95 (с, 1Н), 5,29 (д, 9-46
Гц, 1ТН), 5,03 (дд, 9-6,6, 4,7 Гц, 1Н), 4,85 (т, 9У-5,7 Гц, 1Н), 4,72 (дд, У-6,6, 3,6 Гц, 1Н), 4,05-3,90 (м, 1Н), 3,46 (т, У-5,6 Гц, 2Н), 1,50 (с, 12Н), 1,29 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-1,52 хв, М5 іт/2-407,05 МАНІ; система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
ВоснМ Воснм - - М 1)ЕОСІ, Руг,ТФУ, ДМСО ке А но х м. 2) НЬСО, Маон, діоксан но х М о 3) Ммавну, ЕЮОН о - . но-- - . раї рай 14е 14
Проміжна сполука 141 - трет-бутил (7-(За, 45, ба)-6,6-біс(гідроксиметил)-2,2- диметилтетрагідрофурої3,4-4111,3|діоксол-4-іл)піролоЇ2,1-4П1,2,4гриазин-4-іл)карбамат.
Проміжну сполуку 14е (1,78 г, 4,38 ммоль) розчиняли в ДМСО (20 мл) і толуолі (15 мл).
Додавали піридин (0,35 мл, 4,38 ммоль) і ЕОСІ (1,26 г, 6,56 ммоль), потім ТФУ (0,178 мл, 2,39 ммоль). Через 90 хв додавали додаткову кількість піридину (0,35 мл, 4,38 ммоль) і ЕОСІ (1,26 г, 6,56 ммоль), і реакційну суміш перемішували протягом додаткових 30 хв. Реакційну суміш гасили водою, і отриману суміш екстрагували СН2СІ2. Водний шар знову екстрагували СН2СІ2.
Органічні шари поєднували і промивали насиченим сольовим розчином, сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий продукт поміщали у високий вакуум протягом 15 хв, потім використовували як такий на наступній стадії.
Сирий залишок розчиняли в діоксані (15 мл) і послідовно додавали формальдегід (37 905 у воді, 5,0 мл, 37,2 ммоль) і 2н Маон (5,34 мл, 10,7 ммоль). Через 10 хв реакційну суміш гасили АСОН,
Зо і отриману суміш розподіляли між насич. МансСОЗ(водн.) і СН2СІ2. Водний шар знову екстрагували СН2СІ2. Органічні шари поєднували і промивали насиченим сольовим розчином, сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий продукт поміщали у високий вакуум на 15 хв, потім прямо використовували на наступній реакції.
Сирий залишок розчиняли в ЕІЮН (50 мл), і невеликими порціями додавали Мавня (0,324 г, 8,76 ммоль). Через 20 хв реакційну суміш гасили АСОН і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок розподіляли між ЕОАс і насич. МансСозЗ(водн.). Органічний шар відокремлювали, сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (50-100 95 ЕТОАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 141 (1,91 г, 68 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-46) б 10,45 (с, 1Н), 8,20 (с, 1Н), 7,19 (д, У-4,3 Гц, 1Н), 6,95 (д, У-4,7 Гу, 1Н), 5,35 (д, 9У-5,2 Гц, 1Н), 5,06 (т, 9У-5,7 Гц, 1Н), 4,79-4,74 (м, 2Н), 4,45 (т, 9-5,8 Гц, 1Н), 3,73- 3,46 (м, ЗН), 3,40-3,30 (м, 1Н), 1,50 (с, 12Н), 1,27 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-1,45 хв, М5 іт/2-437,09 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
ВоснМ ВоснМ ря ХХ д но о х м. ОМТТСІ, ТЕА, СНоСІ» но о М
У І - Я : "т : 5 5 Щ65:55325 25:12:52 5-5 2252 2 2 « т Я що нОо- рмто-- ХМ у ок рі 141 149
Проміжна сполука 149 - трет-бутил (7-(За, 45, 65, ба)-6-(біс(4- метоксифеніл)у(феніл)метокси)метил)-6-(гідроксиметил)-2,2-диметилтетрагідрофурої3,4- 9111,З)діоксол-4-іл)піролої2,1-4(1,2,4|гриазин-4-ілукарбамат.
Проміжну сполуку 141 (1,15 г, 2,63 ммоль) розчиняли в СН2СІ2 (50 мл) і додавали ТЕА (0,73 мл, 5,27 ммоль). Отриманий розчин охолоджували до температури 02С і додавали ОМТТСІ (1,35 г, 3,95 ммоль). Через 10 хв реакційну суміш гасили СНЗОН і потім розбавляли СН2СІ2. Отриману суміш промивали насич. МанСОЗ(водн.) і насиченим сольовим розчином. Органічний шар сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-100 95 ЕАс/Нех) з отриманням 149 (1,95 г, 79 95) у вигляді твердої речовини не зовсім білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 10,46 (с, 1Н), 8,23 (с, 1Н), 7,56-7,07 (м, ТОН), 7,07-6,70 (м, 5Н), 5,24 (д, 9У-5,2 Гц, 1Н), 5,04 (т, 9У-5,9 Гц, 1Н), 4,93-4,71 (м, 2Н), 3,80-3,59 (м, 7Н), 3,52 (дд, 9У-10,9, 4,8 Гц, 1Н), 3,25 (д, 9У-9,9 Гц, 1Н), 3,09 (д, У-9,9 Гц, 1Н), 1,50 (с, 9Н), 1,25 (с, ЗН), 1,21 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1А-2,54 хв, М5 т/2-739,28 |МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 1004, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 956 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2- 100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 96 АСМ при 1,8 мл/хв. осн ВоснМ швом ре ди еВ сля сля но и , тво и
ХУ М. ТВ5СІ, іт, ДМФ вх, М
ОоМмтО-- М повин оМмтОо- чик й ря ко 148 14п
Проміжна сполука 14п - трет-бутил (7-(За, 45, ба, ба)-6-(біс(4- метоксифеніл)у(феніл)метокси)метил)-6-((трет-бутилдиметилсиліл)окси)метил)-2,2- диметилтетрагідрофурої|3,4-4111,З|діоксол-4-іл)піроло|2,1-Ч4И1,2,4Ігриазин-4-іл)укарбамат.
Проміжну сполуку 149 (1,53 г, 2,08 ммоль) розчиняли в ДМФ (10 мл) і додавали імідазол (0,42 г, 6,23 ммоль), потім ТВЗСЇІ (0,47 г, 3,11 ммоль). Через 1 год. реакційну суміш гасили метанолом і розподіляли між ЕОАс і 5 95 розчином ГіСі(водн.). Фази розділяли, і органічний шар промивали насиченим сольовим розчином, сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-50 Фо
ЕЮАс/Нех) з отриманням 14П (1,77 г, 7895) у вигляді твердої речовини не зовсім білого
Зо кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 10,47 (с, 1Н), 8,23 (с, 1Н), 7,56-6,66 (м, 15Н), 5,31 (д, У-4,9 Гу, 1Н), 5,14 (дд, У-6,5, 4,9 Гц, 1Н), 4,73 (д, 9У-6,5 Гц, 1Н), 3,87 (д, У-9,7 Гц, 1Н), 3,72 (с, 6Н), 3,53 (д, 3-9,7 Гц, 1Н), 3,31 (м, 1Н), 3,08 (д, 9У-9,8 Гц, 1Н), 1,50 (с, 9Н), 1,25 (с, ЗН), 1,22 (с, ЗН), 0,75 (с,
ОН), -0,04 (с, ЗН), -0,08 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-2,34 хв, М5 іт/2-853,50 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,0 хв 2-100 95 АСМ, 1,0 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 956 АСМ при 1,8 мл/хв.
ВоснмМ ВоснНМ н- М - М тво 5 ще тво їх мом 79 ТОН, СНО» о рмто- пт но- ще меон се р реч 14п 14
Проміжну сполуку 14 - трет-бутил (7-((За, 45, 68, ба)-6-«((трет-бутилдиметилсиліл)окси)метил)- б-(гідроксиметил)-2,2-диметилтетрагідрофурої3,4-4|11,З|діоксол-4-іл)піроло|2,1-4Ц11,2,4гриазин- 4-ілукарбамат.
Проміжну сполуку 14пП (1,38 г, 1,62 ммоль) розчиняли в хлороформі (20 мл), і отриманий розчин охолоджували до температури 02С. Потім повільно додавали розчин Т5ОН (0,34 г, 1,78 ммоль) у
СНЗОН (16 мл). Через 30 хв реакційну суміш гасили насич. розчином Мансоз(водн.), і отриману суміш розподіляли між ЕОАс і насиченим сольовим розчином. Шари розділяли, і органічний шар сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-100 96 Е(Ас/Нех) з отриманням проміжної сполуки 14ї (0,84 г, 94 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) 5 10,42 (с, 1Н), 8,20 (с, 1Н), 7,19 (с, 1Н), 6,89 (с, 1Н), 5,37 (д, 9-48
Гц, 1ТН), 5,05 (дд, 9У-6,2, 4,68 Гц, 1Н), 4,71 (д, 9-6,2 Гц, 1Н), 4,51 (т, 9У-5,5 Гц, 1Н), 3,70 (д, 9У-10,2
Гц, 1ТН), 3,59 (д, 9У-5,5 Гц, 2Н), 3,49 (д, 9У-10,2 Гц, 1Н), 1,49 (с, 12Н), 1,28 (с, ЗН), 0,82 (с, 9Н), -0,01 (с, ЗН), -0,02 (с, ЗН).
ГХ/МС:1К-1,88 хв, М5 т/2-551,25 |МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ
Система МС: Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 1004, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 956 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,0 хв 2- 100 95 АСМ, 1,0 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
ВосиАм ВосиМ
І І ле М 1) ЕОСІ, РугтФУ, ДМСО, То! р тво «мя 2) МН2ОН"НСІ, Руг тво чи
З 7 о шк И бу М З СО, АС ж: нОо-- Мк / исФеснВивтттитии чс С ре Бе 14 14)
Проміжна сполука 14) - трет-бутил (7-(За, 45, 68, ба)-6-«(трет-бутилдиметилсиліл)окси)метил)- б-ціано-2,2-диметилтетрагідрофурої3,4-4111,3|діоксол-4-іл)піроло|2,1-ЧЦ1,2,4|)триазин-4- іл)укарбамат.
Проміжну сполуку 14ї (0,838 г, 1,52 ммоль) розчиняли в ДМСО (5 мл) і толуолі (З мл). Додавали піридин (0,14 мл, 1,67 ммоль) і ЕОСІ (0,438 г, 2,28 ммоль), потім ТФУ (0,057 мл, 0,761 ммоль).
Через 30 хв додавали додаткову кількість піридину (0,14 мл, 1,67 ммоль) і ЕОСІ (0,438 г, 2,28 ммоль). Через 1 год. додавали додаткову кількість піридину (0,14 мл, 1,67 ммоль) і ЕОСІ (0,438 г, 2,28 ммоль). Через 2 год. реакційну суміш гасили Ж» насич. МанСОЗ(водн.) і розподіляли між
ЕОАс і ж насич. МансСОЗ(водн.). Шари розділяли, і органічний шар сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Залишок розчиняли в СНа2СІг, концентрували у високому вакуумі протягом 1 год. з отриманням залишку, який використовували на наступній стадії прямо.
Залишок розчиняли в піридині (8 мл), ії однією порцією додавали гідроксиламін гідрохлорид (0,159 г, 2,28 ммоль). Через 15 хв реакційну суміш концентрували при зниженому тиску і розподіляли між ЕТОАс і водою. Органічний шар сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок поміщали у високий вакуум протягом 30 хв і використовували на третій стадії як такий.
Сирий залишок розчиняли в АСМ (8 мл). Однією порцією додавали СОЇ (0,37 г, 2,28 ммоль).
Через 45 хв додавали додаткову кількість СОЇ (0,37 г, 2,28 ммоль). Через 1 год. реакційну суміш гасили 7252 насич. МансСоОзЗ(водн.-)о. Сирий продукт розподіляли між БЕОАс і 7 насич.
МмансозЗ(водн.)о. Шари розділяли, і органічний шар сушили над Ма2504, фільтрували і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-50 96 ЕТАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 14) (0,72 г, 87 9Уо) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 10,53 (с, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 7,21 (с, 1Н), 7,00 (д, 9-46 Гц, 1Н), 5,62 (д, 9-3,6 Гц, 1Н), 5,28 (дд, 9У-6,6, 3,7 Гц, 1Н), 4,93 (д, У-6,6 Гц, 1Н), 3,83 (с, 2Н), 1,62 (с, ЗН), 1,50 (с, 9Н), 1,33 (с, ЗН), 0,83 (с, 9Н), 0,00 (с, 6Н).
ГХ/МС: 1К-2,50 хв, М5 іт/2-546,15 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
ВоснМ НьїМ -и М ше ТМ тв5о х ще тв5О х ще в) 7пВго, СНоСІ» 7/9
Ме" ння МС у о й 14) 14К
Проміжна сполука 14К - (За, 48, 65, ба)-6-(4-амінопіроло(2,1-40И1,2,4)гриазин-7-іл)-4-((трет- бутилдиметилсиліл)окси)метил)-2,2-диметилтетрагідрофурої3,4-4|11,З)діоксол-4-карбонітрил.
Проміжну сполуку 14| (0,688 г, 1,26 ммоль) розчиняли в СН2СІ2 (15 мл). Однією порцією додавали бромід цинку (0,567 г, 2,52 ммоль), і реакційну суміш перемішували при температурі навколишнього середовища. Через З год. реакційну суміш поміщали на силікагелевий картридж і очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (40-100 96 ЕЮАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 14К (0,56 г, 99 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) б 7,86 (с, 1Н), 7,80 (с, 2Н), 6,85 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 6,79 (д, У-4,5 Гц, 1Н), 5,55 (д, 9У-3,7 Гц, 1Н), 5,25 (дд, У-6,6, 3,8 Гц, 1Н), 4,92 (д, 9У-6,6 Гц, 1Н), 3,82 (с, 2Н), 1,61 (с,
Зо ЗН), 1,33 (с, ЗН), 0,83 (с, 9Н), -0,13 (с, 6Н).
ГХ/МС: 1К-2,27 хв, М5 іт/2-446,68 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
НьМ Ас
Іщ ло М рай М
К Н Щі! я ї о. Ас, піридин МАВ. ме НН ме 0. 6.0 р:а р: 14Кк 141
Проміжна сполука 141І-М-(7-((За, 45, 68, ба)-6-«(трет-бутилдиметилсиліл)окси)метил)-6-ціано- 2,2-диметилтетрагідрофурої3,4-411,3|діоксол-4-іл)піроло|2,1-ЧИ1,2,4Атриазин-4-іл)ацетамід.
Проміжну сполуку 14К (0,20 г, 0,449 ммоль) розчиняли в піридині (2 мл), потім додавали оцтовий ангідрид (0,21 мл, 2,24 ммоль), і реакційну суміш перемішували при температурі навколишнього середовища. Через 30 хв реакційну суміш гасили метанолом і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок прямо очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-100 95
ЕЮАСсС/Нех) з отриманням проміжної сполуки 141 (0,185 г, 85 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-46) б 10,87 (с, 1Н), 8,31 (с, 1Н), 7,24 (д, 9У-4,7 Гц, 1Н), 7,05 (д, 9-4,7 Гц, 1Н), 5,65 (д, 9У-3,6 Гц, 1Н), 5,29 (дд, У-6,6, 3,6 Гц, 1Н), 4,93 (д, 9У-6,6 Гц, 1Н), 3,84 (с, 2Н), 2,36 (с,
ЗН), 1,62 (с, ЗН), 1,33 (с, ЗН), 0,83 (с, 9Н), 0,00 (с, ЗН), -0,01 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-1,14 хв, М5 т/2-488,38 |М'-1|; система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
АсНМ АСНМ
Вг тво і Щи тво іх ще о Мв5,ДМФ о)
МС у -Щ--- мс ок жі 141 14т
Проміжна сполука 14т-М-(5-бром-7-((За, 45, ЄВ, ба)-6-((трет-бутилдиметилсиліл)окси)метил)-6- ціано-2,2-диметилтетрагідрофуроїЇ3,4-4111,З|діоксол-4-іл)піролоЇ2,1-1411,2,4гриазин-4- іл)уацетамід.
Проміжну сполуку 141 (80 мг, 0,164 ммоль) розчиняли в ДМФ (2 мл) і однією порцією додавали
МВ5 (29 мг, 0,164 ммоль). Через 45 хв реакційну суміш розбавляли метанолом. Розчинник видаляли при зниженому тиску. Сирий залишок очищали за допомогою хроматографії на силікагелі (0-50 96 ЕТАс/Нех) з отриманням проміжної сполуки 141 (50 мг, 54 905) у вигляді твердої речовини не зовсім білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, ДМСО-аб) 6 10,13 (с, 1Н), 8,42 (с, 1Н), 7,29 (с, 1Н), 5,65 (д, 9У-3,2 Гц, 1Н), 5,29 (дд, У-6,6, 3,2 Гц, 1Н), 4,91 (д, У-6,5 Гц, 1Н), 3,84 (д, 9У-1,6 Гц, 2Н), 2,27 (с, ЗН), 1,62 (с, ЗН), 1,33 (с, ЗН), 0,83 (с, 9Н), 0,02 (с, ЗН), 0,00 (с, ЗН).
ГХ/МС: 1К-1,79 хв, М5 іт/2-566,40 |М'-1|; система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
Ве денМ Е АсНМ
ОМ, ХОМ. тво т . тв х о пВийі, МЕБІ,ТГФ ние Фе ща ннннннннжнжнжлжнлтлтллнНнНнНнННшшаа к
МС У МС у ра ро 14т 14п
Проміжна сполука 14п-М-(7-((За, 45, 68, ба)-6-«(трет-бутилдиметилсиліл)окси)метил)-6-ціано- 2,2-диметилтетрагідрофурої3,4-4|П1,З|діоксол-4-іл)-5-фторпіроло|2,1-4(1,2,гриазин-4- іл)ацетамід.
Проміжну сполуку 14т (50 мг, 0,088 ммоль) розчиняли в ТГФ (2 мл) і розчин охолоджували до температури-782С. Додавали пВиїг і (2,5М у гексані, 0,071 мл, 0,18 ммоль). Через 5 хв додавали
М-фторбензолсульфонімід (МОРІ, 33,4 мг, 0,106 ммоль), і реакційну суміш перемішували протягом 5 хв. Реакційну суміш потім гасили АСОН. Розчинники видаляли при зниженому тиску.
Сирий залишок очищали за допомогою обернено-фазової ВЕРХ з отриманням проміжної сполуки 14п (10 мг, 22 95) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, метанол-а4) 5 8,13 (с, 1Н), 6,80 (с, 1Н), 5,65 (д, 9У-3,5 Гц, 1Н), 5,23 (дд, У-6,7, 3,6 Гц, 1Н), 4,97 (д, 9У-6,7 Гц, 1Н), 3,92 (д, 9У-1,7 Гц, 2Н), 2,37 (с, ЗН), 1,70 (с, ЗН), 1,38 (с, ЗН), 0,90 (с, 9Н), 0,08 (с, 6Н). 19Е ЯМР (376 МГц, метанол-а4) б -156,43 (с).
ГХ/МС: 1К-1,65 хв, М5 ітт/2-506,18 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-2,4 хв 2-100 95 АСМ, 2,4 хв-2,80 хв 100 95 АСМ, 2,8 хв-2,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 2,85 хв-3,0 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв. є АсНМ во Нм щи М -- М тв5о х мом що) 5 м в) 1) ТФУ, НО о че накапати вна панна тт фів МС ще 2) МН.ОН, СНЗОН Ще оо ) МН, З но он 14п 25
Приклад 25 - (28, 35, АВ, 55)-5-(4-аміно-5-фторпіроло|2,1-4И1,2,4|гриазин-7-іл)-3,4-дигідрокси-2- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-2-карбонітрил.
Проміжну сполуку 14п (11 мг, 0,022 ммоль) поміщали в розчин 50 95 ТФУ у воді при температурі навколишнього середовища. Через 2 год. реакційну суміш гасили твердим Ма2СОЗ до досягнення рН-8. Розчинник видаляли при зниженому тиску, і сирий залишок очищали за допомогою обернено-фазової ВЕРХ. Фракції, які містять сполуку за прикладом 25, поєднували і відставляли, і фракції, які містять Мб-Асуї, поєднували і концентрували при зниженому тиску.
Залишок Мб-Асу! проміжної сполуки обробляли конц. МНАОН|водн.) (1 мл), і суміш залишали перемішуватися при температурі навколишнього середовища. Через 30 хв отриману суміш концентрували при зниженому тиску, і сирий залишок очищали за допомогою ВЕРХ. Фракції, які містять сполуку за прикладом 25, поєднували з раніше відставленими фракціями, які містять сполуку за прикладом 25, з отриманням сполуки за прикладом 25 (4 мг, 58 9о) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, метанол-аб) б 7,71 (с, 1Н), 6,56 (с, 1Н), 5,44 (д, 9У-5,6 Гц, 1Н), 4,48 (т, 9У-5,6
Гц, 1Н), 4,36 (д, 9У-5,5 Гц, 1Н), 3,83 (АВа, Аб-0,05 м.д., У-12 Гц, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, метанол-а4) б -161,81 (с).
ГХ/МС: 1К-0,47 хв, М5 іт/2-310,13 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО Ріееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х3,00 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 мурашиної кислоти, вода з 0,1 95 мурашиної кислоти; градієнт: 0 хв-1,4 хв 2-100 95 АСМ, 1,4 хв-1,80 хв 100 95 АСМ, 1,8 хв-1,85 хв 100 95-2 95 АСМ, 1,85 хв-2 хв 2 95 АСМ при 1,8 мл/хв.
Вос. Вос.
МН МН ж ЗМ ж М тв5о мя Тв50 ХМ м. я о М' ТС, Ру о М
З пня р КЗ но- ! СІ- я 2) ПСІДМФ ще 14і 15а
Проміжна сполука 15а - трет-бутил (7-((За, 45, 6ЕВ, ба)-6-«(трет-бутилдиметилсиліл)окси)метил)- б-(хлорметил)-2,2-диметилтетрагідрофуроїЗ,4-4|11,3|діоксол-4-іл)піролоЇ2,1-ЧП,2,4гриазин-4- іл)укарбамат.
Проміжну сполуку 14ї (100 мг, 0,18 ммоль) розчиняли в безводному піридині (5 мл). Однією порцією додавали трифторметансульфоніл хлорид (23 мкл, 0,22 ммоль), і реакційну суміш перемішували протягом 45 хв при кімнатній температурі. Потім додавали додаткову кількість трифторметансульфоніл хлориду (100 мкл). Через 30 хв додавали додаткову кількість трифторметансульфоніл хлориду (100 мкл). Через ще 30 хв додавали додаткову кількість трифторметансульфоніл хлориду (100 мкл), і реакційну суміш перемішували протягом 30 хв, у цей момент реакційну суміш концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок розчиняли в безводному ДМФ (5 мл), і однією порцією потім додавали хлорид літію (153 мг, 3,6 ммоль).
Отриману суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 16 год. Реакційну суміш розбавляли етилацетатом (50 мл) і промивали насиченим водним розчином хлориду натрію (Зх20 мл). Органічний шар сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при зниженому тиску. Сирий залишок очищали хроматографією на силікагель (0-20 95 етилацетат у гексані) з отриманням проміжної сполуки 15а.
М5 т/2-569,0 (МАНІ. Система МС: Тпегто І СО Адмапіаде
Вос.
МН МН» хм. М М. а
Шенль фе; М' отФУню НО ом 2
Ух -- 5 ьо У
С-- х у СІ-- бо но он 15а 26
Приклад 26 - (28, 35, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-411,2,4)триазин-7-іл)-2-(хлорметил)-2- (гідроксиметил)тетрагідрофуран-3,4-диол.
Проміжну сполуку 15а розчиняли в розчині ТФУ і воді (1:11, 5 мл), і отриману суміш перемішували протягом 16 год. Реакційну суміш потім концентрували при зниженому тиску.
Сирий залишок розчиняли у водному розчині бікарбонату натрію й ацетонітрилі й очищали за допомогою препаративної ВЕРХ з отриманням сполуки за прикладом 26 (19 мг, 34 9б) у вигляді порошку білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, 0209) б 7,61 (с, 1Н), 6,72-6,64 (м, 2Н), 5,19 (д, 9-91 Гц, 1Н), 4,73-4,66 (м, 1Н), 4,28 (д, 9У-5,2 Гц, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,72-3,57 (м, 2Н).
М5 т/2-315,3 МАНІ. Система МС: Тпепто І СО Адмапіаде о нов у о;
МН ІФ) О-р7 2 но б-в МН»
ЗХ « 3 зм Р(ОСІ»; но У 0- но ие. о мо М а ДИ (пвозМНІоРоО тн МУ м-
Му и 25 ІФ) Е
НО БЕ
19 27 (ТР7)
Зо Приклад 27 (також ТР7) - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-Я01,2,АЗгриазин-7-іл)-2-азидо-4- фтор-3-гідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
Сполуку за прикладом 27 одержували у вигляді тетранатрієвої солі способом, який аналогічний описаному у прикладі ТРА, виходячи зі сполуки за прикладом 19.
1ТН ЯМР (400 МГц, 020) 5 7,76 (с, 1Н), 6,83 (д, 9-44 Гц, 1Н), 6,80 (д, 9У-4,8 Гц, 1Н), 5,94 (д, 9-25,2 Гц, 1Н), 5,24 (дд, 9У-55,2, 5,2 Гц, 1Н), 4,78 (дд, У-26,8, 5,2 Гц, 1Н), 4,08-4,18 (м, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, 0209) б -193,74-194,02 (м).
З1Р ЯМР (162 МГц, 0209) б -4,60 (д, 9У-53,2 Гц, 1Р), -10,25 (д, У-48,4 Гц, 1Р), -20,28 (т, У-48,4 Гц,
ТР). нов 7
Е МН» ІФ) Ов но 5 о й и М О-р7 Ме . 23 Кх но-- о У моя Р(О)СІ»; но 5 о Від
МУ (поз МН РОН» Ма" М-
НО НО ОС Е
21 28
Приклад 28 - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-аміно-5-фторпіроло|2,1-4И1,2,4А)триазин-7-іл)-2-азидо-4-фтор-
З-гідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
Сполуку за прикладом 28 одержували у вигляді тетранатрієвої солі способом, який аналогічний описаному у прикладі ТРА, виходячи зі сполуки за прикладом 21. 1ТН ЯМР (400 МГц, 0209) б 7,64 (с, 1Н), 6,60 (с, 1Н), 5,90 (д, У-24,4 Гц, 1Н), 5,20 (дд, 9У-54,8, 4,8
Гц, 1Н), 4,72 (дд, 9У-27,2, 4,8 Гц, 1Н), 4,05-4,18 (м, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, 0209) б -161,00 (с), -196,39-196,69 (м).
З1Р ЯМР (162 МГц, 0209) 5 -8,24 (д, У-50,4 Гц), -14,20 (д, у-46,0 Гц), -24,08 (т, У-48,4 Гц).
М5 т/2-567,87 (МАТ). Система МС: Тпепто СО Адмапіаде нов , Х Ко)
МНь інф) осв но 5.05 МН» г Р(О)СІ но з ; о) і: но о у Мои - ж - Я У о М, М
МУ (пВизМНІзР2О? Но М чех но Но 22 29
Приклад 29 - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-аміно-2-фторпіроло|2,1-4И1,2,4А)триазин-7-іл)-2-азидо-4-фтор-
З-гідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
Сполуку за прикладом 29 одержували у вигляді тетранатрієвої солі способом, який аналогічний описаному у прикладі ТРА, виходячи зі сполуки за прикладом 22. 1ТН ЯМР (400 МГц, 0209) 5 6,81 (д, 9-44 Гу, 1Н), 6,75 (д, У-4,8 Гц, 1Н), 5,81 (д, 9У-24,4 Гц, 1Н), 5,16 (дд, У-54,4, 4,68 Гц, 1Н), 4,70 (дд, У-26,8, 4,4 Гц, 1Н), 4,02-4,12 (м, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, 0209) б -75,95 (с), -196,51-196,80 (м).
З1Р ЯМР (162 МГц, 0209) 5 -8,29 (д, 9У-53,2 Гц), -14,22 (д, у-48,4 Гц), -24,09 (т, У-48,4 Гц).
М5 т/2-567,59 МАТ). Система МС: Тпепто СО Адмапіаде о
НО-р7
Й Х о
Е МН НО Ов о Е ва но о-ви ц МН»
Х ! но х но-х о РОС; оно мк " Й шт -
Ме" М- - (пвиЗМНЬРОН» М-
НО но Е 23 30
Приклад 30 - (2, ЗА, 48, 55)-5-(4-аміно-5-фторпіроло|2,1-4(1,2,4|)гриазин-7-іл)-2-ціано-4-фтор-
З-гідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
Сполуку за прикладом 30 одержували у вигляді тетранатрієвої солі способом, який аналогічний описаному у прикладі ТРА, виходячи зі сполуки за прикладом 23. 1ТН ЯМР (400 МГц, 0209) б 7,64 (с, 1Н), 6,57 (с, 1Н), 5,87 (д, 9У-24,8 Гц, 1Н), 5,26 (дд, У-53,6, 4,0
Гц, 1Н), 4,82 (дд, 9-25 2, 4,4 Гц, 1Н), 4,26-4,35 (м, 2Н). 19Е ЯМР (376 МГц, 0209) б -161,05 (с), -194,92-195,19 (м).
З1Р ЯМР (162 МГц, 0209) 5 -8,22 (д, 9У-50,8 Гц), -14,48 (д, у-48,4 Гц), -24,01 (т, У-48,4 Гц).
М5 т/2-551,91 МАТ). Система МС: Тпепто СО Адмапіаде в)
НО-р7 и
МН» но б-рв Приклад 31 их І
ЩО М но о-ви МН» 5 м. А Р(О)СІ; но Ь ОУ- щ (пвизМНІ РОН» ще М-
НО СЕ но С 24 ТРІ11
Приклад 31 (також ТР11) - (28, ЗВ, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-ЧИ1,2,4Ігриазин-7-іл)-4-фтор-3- гідрокси-2-метилтетрагідрофуран-2-іл)уметил тетрагідротрифосфат.
Сполуку за прикладом 31 одержували у вигляді тетранатрієвої солі способом, який аналогічний описаному у прикладі ТРА, виходячи зі сполуки за прикладом 24 1ТН ЯМР (400 МГц, 0209) 5 7,66 (с, 1Н), 6,78 (д, У-4,8 Гц, 1Н), 6,72 (д, У-4,4 Гц, 1Н), 5,58 (дд,
У-23,6, 2,4 Гу, 1Н), 5,16 (ддд, у-55,2, 5,2, 2,8 Гц, 1Н), 4,51 (дд, 9У-23,2, 5,2 Гц, 1Н), 3,88 (дд,
У-11,6,6,0 Гц, 1Н), 3,78 (дд, уУ-10,8, 4,0 Гц, 1Н), 1,2 (с, ЗН). 19Е ЯМР (376 МГц, 0209) б -195,74-196,01 (м).
З1Р ЯМР (162 МГц, 0209) 6 -8,24 (д, 9У-50,4 Гц), -13,54 (д, 9У-45,6 Гц), -24,11 (т, У-48,0 Гц). - У нов Приклад 32
Е Мне но б-р є
Хш но 5.0 МН ро Мк ж й бю й Н й
ЧИ; (ОСІ; но сні
НО--я о уже пупку ек км Гай шк о Х нк ї-е ца з їпВиаМНЬьР»ОН» м у ре но он но он а тРІ12
Приклад 32 (також ТР12) - (28, 35, 48, 55)-5-(4-аміно-5-фторпіроло|2,1-4П1,2,4|гриазин-7-іл)-2- ціано-3,4-дигідрокситетрагідрофуран-2-іл)уметил тетрагідротрифосфат.
Сполуку за прикладом 32 одержували у вигляді тетранатрієвої солі способом, який аналогічний описаному у прикладі ТРА, виходячи зі сполуки за прикладом 25. 1ТН ЯМР (400 МГц, 0209) 6 7,59 (с, 1Н), 6,57 (с, 1Н), 5,44 (д, 9У-6,0 Гц, 1Н), 4,56 (д, 9У-5,2 Гц, 1Н), 4,48 (дд, 9У-5,6 Гц, 1Н), 4,16 (дд, У-11,6, 6,0 Гц, 1Н), 4,08 (дд, 9-11,2, 5,2 Гц, 1Н). 19Е ЯМР (376 МГц, 0209) б -161,25 (с).
З1Р ЯМР (162 МГц, 0209) 5 -8,29 (д, У-48,4 Гц), -14,49 (д, 9У-53,2 Гу), -24,15 (т, 9У-48,4 Гц).
М5 т/2-549,90 МАТ). Система МС: Тпегто І СО Адмапіаде нов
Мне но Ов Приклад 33
Ж НО 5.00 ІН. т й осв ес Га но- ши РОСІЇ»; по Хм хе : З ле. ж-М, ш а- | сен Й Ме - (пВиз МНН» я-,
НО он нб он 26 тТРІЗ
Приклад 33 (також ТР13) - (28, 35, 48, 55)-5-(4-амінопіроло(2,1-4П1,2,4)гриазин-7-іл)-2- (хлорметил)-3,4-дигідрокситетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат.
Сполуку за прикладом 33 одержували у вигляді тетра-триетиламінової солі способом, який аналогічний описаному у прикладі ТРУ, виходячи зі сполуки за прикладом 26. 1ТН ЯМР (400 МГц, 0209) 5 7,76 (с, 1Н), 6,92 (шир. с, 1Н), 6,85 (шир. с, 1Н), 5,32 (д, 9У-9,6 Гц, 1Н), 4,78 (дд, 9-8, 6,4 Гц, 1Н), 4,53 (д, У-5,6 Гу, 1Н), 4,08 (дд, У-10,0, 4,0 Гц, 1Н), 3,83-3,95 (м, ЗН), 3,07 (кв, У-7,6 Гц, 24 Н), 1,16 (т, У-7,6 Гц, 36 Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, 0209) 5 -9,44 (д, 9У-45,6 Гц), -11,51 (д, 9У-48,8 Гу), -22,95 (т, 9У-48,4 Гц).
М5 т/2-555,06 МАТ). Система МС: Тпепто СО Адмапіаде
МН. нь, ше Приклад 34 іще появ ьо У ие М ие ТМ -- її 5 ; 5 я і б уо-ро но дич ючи 0000ебту 000 ВоМос ооо им с СИН Ів; Ї сне, ДМФ, ТгФ ри ги НМ, 5
Е РОЗе І РОб
Приклад 34 (також РОб) - (25)-2-етилбутил 2-(((28, ЗА, 48, 55)-5-(4-амінопіролої|2,1-
ЦІ1,2,4)гриазин-7-іл)-2-ціано-4-фтор-3-гідрокситетрагідрофуран-2- ілуметоксиух/уфенокси)фосфорил)аміно)пропаноат.
Сполуку за прикладом 1 (3,8 мг, 0,013 ммоль) розчиняли в безводному М-метил-2-піролідоні (0,2 мл) і в атмосфері аргону додавали ТГФ (0,1 мл). Потім при кімнатній температурі додавали трет-бутил магній хлорид (1М у ТГФ, 20 мкл, 0,024 ммоль), і в осад випадала тверда речовина білого кольору. Через 5 хв у реакційну суміш однією порцією додавали розчин п- нітрофенілфосфорамідату РОЗС (12 мг, 0,026 ммоль) у ТГФ (0,1 мл), і отриману суміш нагрівали при температурі 502С. Через 20 год. реакційну суміш залишали охолоджуватися до кімнатної температури і потім прямо очищали за допомогою препаративної ВЕРХ (Рпепотіпех Зупегоді 4 мк Нудго-ЕЕ. 80А, колонка 150х30 мм, градієнт 40-100 95 ацетонітрил/вода). Фракції, які містять
Зо бажаний продукт, поєднували і ліофілізували з отриманням сполуки за прикладом 34 (2,9 мг, 37 95, 3:2 суміш діастереомерів) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) 5 7,80 (с, 0,3Н), 7,78 (с, 0,6Н), 7,38-7,10 (м, 5Н), 6,85 (шир. дд, 9-4,7, 2,2 Гц, 1Н), 6,75-6,71 (м, 1Н), 5,54-5,46 (м, 1Н), 4,65-4,58 (м, 1Н), 4,53-4,31 (м, ЗН), 4,07-3,84 (м,
ЗН), 1,54-1,39 (м, 1Н), 1,38-1,19 (м, 7Н), 0,92-0,81 (м, 6Н) 29Н
З1Р ЯМР (162 МГц, СОЗОБ) 5 3,25 (шир. с).
ГХ/МС: 1К-1,55 хв, М5 іт/2-603,19 МАНІ; система РХ: Тпепто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС:
Тпегто І СО РІееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв- 3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 956 АСМ при 2 мкл/хв.
Приклад 35
ВЕРХ: І8-2,98 хв; система ВЕРХ: серії Адіепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 хв-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
Мн, ра о Приклад35 МН; ре м Ян 5 о (4 ; о , С
ОМ, я оо ІвиМасі ни ин оку ати ноти М ра кн Оз попа оо й о й я - з -о Ї чн ДМ, Ф сто МНК до
Мне он МО; і он 1 РО7а во?
Приклад 35 (також РО?) - (25)-етил 2-(((28, 35, 48, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-ЯП1,2,4)триазин-7- іл)-2-ціано-3,4-дигідрокситетрагідрофуран-2-іл)уметокси)х/фенокси)фосфорил)аміно) пропаноат.
Сполуку за прикладом 1 (19 мг, 65,3 мкмоль) розчиняли в ММР (0,2 мл). При кімнатній температурі в атмосфері аргону додавали ТГФ (0,1 мл), потім трет-бутил магній хлорид (1,0М розчин у тетрагідрофурані, 0,098 мл). Через 5 хв додавали розчин проміжної сполуки РО7а (отриманий відповідно до 0520120009147А1, 51,4 мг, 130 мкмоль) у ТГФ (0,1 мл), і отриману суміш нагрівали до температури 5020. Через 1 год. реакційну суміш залишали охолоджуватися до кімнатної температури і прямо очищали за допомогою препаративної ВЕРХ (Рпепотіпех
Зупегаі 4 мк Нуаго-РЕ. 804, колонка 150х30 мм, 5-100 95 градієнт ацетонітрил/вода). Фракції, які містять продукт, поєднували і концентрували, і залишок, який утворився, знову очищали за допомогою препаративної ВЕРХ (Рпепотіпех І ипа, 5 мкм, колонка С18, 100х30 мм, градієнт 5- 100 95 ацетонітрил/вода) з отриманням сполуки за прикладом 35 (12 мг, 34 95, 3:22 суміш діастереомерів) у вигляді твердої речовини білого кольору. 1ТН ЯМР (400 МГц, СОЗОБ) 5 7,80 (д, 9У-2,3 Гц, 04Н), 7,78 (д, У-2,3 Гц, 0,6Н), 7,36-7,12 (м, 5Н), 6,88-6,81 (м, 1Н), 6,76-6,70 (м, 1Н), 5,53-5,46 (м, 1Н), 4,66-4,60 (м, 1Н), 4,55-4,30 (м, ЗН), 4,15- 3,98 (м, 2Н), 3,93-3,79 (м, 1Н), 1,30-1,12 (м, 6Н).
З1Р ЯМР (162 МГц, СОЗОБ) 5 3,27 (шир. с).
ГХ/МС: основний діастереомер ІК-1,28 хв, М5 т/2-547,14 |МАНІ, побічний діастереомер
ІЇК-1,30 хв, М5 т/2-547,04 МАНІ; система РХ: Тпегто Ассеїа 1250 СВЕРХ; система МС: Тпепто
І СО Еееї; колонка: Кіпеїех, 2,6 мк, ХВ-С18, 100А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95 оцтової кислоти, вода з 0,1 95 оцтової кислоти; градієнт: 0 хв-2,0 хв 2-100 95 АСМ, 2,0 хв-3,05 хв 100 95 АСМ, 3,05 хв-3,2 хв 100 95-2 95 АСМ, 3,2 хв-3,5 хв 2 95 АСМ при 2 мкл/хв.
ВЕРХ: основний діастереомер ІК-2,44 хв, побічний діастереомер ІК-2,46 хв; система ВЕРХ: серії Адйепі 1100; колонка: Сетіпі С18, 5 мк, 110А, 50х4,6 мм; розчинники: ацетонітрил з 0,1 95
ТФУ, вода з 0,1 95 ТФУ; градієнт: 0 хв-5,0 хв 2-98 95 АСМ, 5,0 мін-6,0 хв 98 95 АСМ при 2 мл/хв.
Зо Запропоновані також окремі варіанти здійснення, які включають, відповідно, сполуки формули (А), формули (В), формули (С), формули (0) ії формули (Е):
Ммн-Х? 2
МнАХ: МА-Х шу
Ше М зи М гм М я. ! хо М. уче ом.
АК но- но- Й 2 5 : ї
ЕД . ХО г . онов ;
ХО Б (АХ: (В: х- ох (С) ща
Ми Х чнА-Х2 ат ЗМ с
М хм ри Щ - 1 Х я і нон 1. Ж в 2 рі . хо (в хо вж В:
де, у кожному випадку, Х1 являє собою кисень захисну групу, і Х2 являє собою амінозахисну групу.
Використані кисневі захисні групи включають силільну ефірну захисну групу або захисну групу бензильного типу, включаючи метоксибензильні групи.
Використані силільні ефірні захисні групи включають триметилсиліл (ТМ5), триетилсиліл (ТЕ5), диметилізопропілсиліл (ІРОМ5), діетилізопропілсиліл (ОЕІРБ5), диметилгексилсиліл (ТО5), трет- бутилдиметилсиліл (ТВ5 або ТВОМ5), трет-бутилдифенілсиліл (ТВОР5), трибензилсиліл, три-п- ксилілсиліл, триізопропілсиліл (ТІР5), дифенілметилсиліл (ОРМ5), ди-трет-бутилметилсиліл (ОТВМ5), трифенілсиліл (ТР5), метилдифенілсиліл (МОРБ), трет-бутилметоксифенілсиліл, трис(триметилсиліл)силіл (5ізуї), (2-гідроксистирил)диметилсиліл (НЗ5ОМ 5), (2- гідроксистирил)диіїзопропілсиліл.й (НБЗОІ5). трет-бутилметоксифенілсиліл (ТВМР5), і трет- бутоксидифенілсиліл (ОРТВОЗ5) захисні групи.
Використані захисні групи бензильного типу включають бензил, галогенований бензил, п- метоксибензил, бензилоксиметил, 2,4-диметоксибензил, 3,4-диметоксибензил, 2,6- диметоксибензил, п-СЕЗ-бензил, п-метилбензил, п-метоксибензил, 3,5-диметилбензил, п-трет- бутилбензил, о-нітробензил, п-нітробензил, п-галогенбензил, включаючи п-ВІі-бензил, 2,6- дихлорбензил, п-ціанобензил, п-фенілбензил, 2,6-дифторбензил, п-ациламінобензил (РАВ), п- азидобензил (А7бр), 4-азидо-3-хлорбензил, 2-трифторметилбензил, п-(метилсульфініл)бензил, 2-піколіл, 4-піколіл, З-метил-2-піколіл. М-оксидо, 2-хінолінилметил, дифенілметил (ОРМ), п,п- динітробензгідрил, трифенілметил, альфа-нафтилдифенілметил, п- метоксифенілдифенілметил, ди(п-метоксифеніл)фенілметил, три(п-метоксифеніл)метил, 4,4,4"7- трис(бензоїлоксифеніл)метил і 2-нафтилметил захисні групи.
Використані амінозахисні групи включають п-метоксибензил карбоніл (Мо або МеО7), ацетил (Ас), бензоїл (В7), п-метоксибензил (РМВ), 3,4-диметоксибензил (ОМРМ), п-метоксифеніл (РМР), тозил (15 або То5), трифторацетамід і тритил захисні групи. Використані амінозахисні групи також включають карбаматні й амідні захисні групи. Приклади карбаматних захисних груп включають метил і етил карбамати, такі як 9-флуоренілметилоксикарбоніл (ЕМОС), 9-(2- сульфо)флуоренілметил, 9-(2,7-дибром)флуоренілметил, 17-тетрабензоїа, с,9,
Цфлуоренілметил (Тбітос), 2-хлор-3-інденілметил (Сіїйтос), бензІЦінден-З-ілметил (Вітос), 2,7- ди-трет-бутилІ9-(10,10-діоксо-10,10,10,10-тетрагідротіоксанил)|метил (0вО-Ттос), (2-01,3- дитіаніл)уметил (Отос) і 1,1-діоксобензо|БІгіофен-2-ілметил (В5тос) карбамати.
Приклади використаних заміщених етил карбаматов включають 1,1-диметил-2-ціаноетил, 2- фосфоніоетил (Реос), 2-метилтіоетил, 2-(п-толуолсульфоніл)етил, 2,2,2-трихлоретил (Тгос), 2- (триметилсиліл)етил (Теос), 2-фенілетил (п2), 1-(1-адамантил)-1-метилетил (Айдрос), 1,1- диметил-2-брометил, 1,1-диметил-2-хлоретил, 1,1-диметил-2,2-диброметил. (08--8ОС), 1,1- диметил-2,2,2-трихлоретил (ТСВОС), 1-метил-1-(4-бифеніліл)летил (Врос), 1-(3,5-ди-трет- бутилфеніл)-1-метилетил (-Витеос), 2-(2-піридил)етил, 2-(4-піридил)етил, /-2,2-біс(4- нітрофеніл)етил (Впреос), М-(2-пивалоїламіно)-1,1-диметилетил, 2-(2-нітрофеніл)дитіо |-1- фенілетил (МрозРеос), 2-(М, М-дициклогексилкарбоксамідо)етил, трет-бутил (Вос або ВОС), 1- адамантил (1-Адос), 2-адамантил (2-Адос), вініл (Мос), аліл (Аіос або аїос), 1-ізопропілаліл (Іраос), цинаміл (Сос), 4-нітроцинаміл (Мос), 3-(3-піридил)проп-2-еніл (Раїос), 8-хіноліл і М- гідроксипіперидинил, карбамати, а також алкілдитій карбамати, включаючи метилдитіо, етилдитіо, ізопропілдитіо, трет-бутилдитіо і фенілдитіо карбамати.
Також використаними є ариловмісні і заміщені арилвмісні карбамати, такі як бензил, п- метоксибензил, п-нітробензил, п-бромбензил, п-хлорбензил, 2,4-дихлорбензил, /-(4- метилсульфінілбензил (М57), 9-антрилметил, 4-метилтіофеніл (Мірс), 1-метил-1- (трифенілфосфоніо)етил. (2-трифенілфосфоніоізопропіл) (Ррос), 2-дансилетил (Опзеос), 2-(4- нітрофеніл)етил (Мреос), 4-фенілацетоксибензил (РНАсО/7), 4-азидобензил (АСВ), 4- азидометоксибензил, м-хлор-п-ацилоксибензил, п-(дигідроксиборил)бензил, карбобензилокси (Ср2), 4-бензізоксазолилметил (Віс), 2-(трифторметил)-б6-хромонілметил (Тсгос), феніл і дифенілметил карбамати. Додаткові карбамати включають бутиніл, циклопентил, циклогексил, циклопропілметил, 1-метилциклобутил, 1-метилциклогексил, 1,1-диметилпропініл і 1-метил-1- циклопропілметил карбамати.
Використані амідні захисні групи для амінів включають М-форміл, М-ацетил, М-хлорацетил, М- трихлорацетил, М-трифторацетил (ТФУ), М-фенілацетил, М-3-фенілпропіонил, М-4-пентоїл, М- піколіноїл, М-З-піридилкарбоксамідо, М-бензоїлфенілаланіл, М-бензоїл і М-п-фенілбензоїл аміди.
Противірусна активність
Інший варіант здійснення винаходу стосується способів інгібування вірусних інфекцій, який включає стадію обробки зразка або суб'єкта, імовірного в необхідності такого інгібування, 60 композицією за даним документом.
Розглянуті у даному документі зразки, які приблизно містять вірус, включають природні або штучні матеріали, такі як живі організми; тканини або культури клітин; біологічні зразки, такі як зразки біологічного матеріалу (кров, сироватка, сеча, спинномозкова рідина, сльози, мокротиння, слина, зразки тканин тощо); лабораторні зразки; продукти харчування, зразки води або повітря; зразки біопрепаратів, такі як екстракти клітин, особливо рекомбінантних клітин, синтезуючих бажаний глікопротеїн; тощо. Як правило, зразок приблизно містить організм, який викликає вірусну інфекцію, часто патогенний організм, такий як вірус пухлини. Зразки можуть міститися в будь-якому середовищі, включаючи воду і суміші органічних розчинників'води.
Зразки включають живі організми, такі як люди, і штучні матеріали, такі як клітинні культури.
При бажанні, антивірусну активність сполуки після застосування композиції можна досліджувати будь-яким методом, у тому числі прямими і непрямими методами виявлення такої активності.
Передбачені всі, кількісні, якісні і напівкількісні, методи визначення такої активності. Зазвичай застосовується один зі способів скрінінгу, описаних вище, однак, будь-який інший метод, такий як спостереження за фізіологічними властивостями живого організму, також застосовується.
Противірусна активність сполуки може бути визначена з використанням стандартних протоколів скрінінгу, які є відомими. Наприклад, противірусна активність сполуки може бути оцінена з використанням наступних загальних протоколів.
Аналіз противірусної активності відносно респіраторно-синцитіального вірусу (К5М) і аналіз цитотоксичності
Анти-К5ЗМ активність
Противірусну активність відносно КОМ визначали з використанням аналізу захисту проти інфекції цитопатичними клітинами на клітинах клітинної лінії НЕр-2. У цьому аналізі сполуки, які інгибують вірусну інфекцію і/або реплікацію, роблять цитопротективну дію проти індукованого вірусом знищення клітин, яке може бути визначене кількісно з використанням реагенту показника життєздатності клітин. Методи, використані у даному документі, являють собою нові адаптації способів, описаних в опублікованій літературі (Снартап єї аї., Апіїтістоб Адепів
СпетоїНег. 2007, 51(9):3346-53).
Клітини Нер-2 одержували від фірми АТСС (Мапаззав, МІ) і витримували в середовищі МЕМ з додаванням 10 95 фетальної бичачої сироватки і пеніциліну/стрептоміцину. Клітини пересівали
Зо два рази в тиждень і тримали на субконфлюентній стадії. Комерційний матеріал КЕЗМ штаму А2 (Адмапсей ВіоїесппоЇіодіез, Соїштбріа, МО) титрували перед тим, як досліджували сполуку для визначення відповідного розведення вірусного матеріалу, який генерував бажаний цитопатичний ефект у клітинах Нер-2.
У противірусних дослідженнях клітини Нер-2 вирощували у великих колбах для культивування клітин майже до злиття, але не до кінця. Досліджувані сполуки попередньо розводили в ДМСО в 384-ямкових планшетах для розведення сполуки у форматі «стандартизована доза-відповідь» або в кількості 8, або в кількості 40 зразків на планшет. Проводили 3-х кратне серійне розведення кожної досліджуваної сполуки на планшетах, і досліджувані зразки переносили за допомогою апарата акустичної передачі (Еспо, І абсуїе) при 100 нл на ямку на 384-ямкові планшети для аналізу культури клітин. Кожне розведення сполуки переносили у вигляді одного або чотирикратно повторюваних зразків на сухі планшети для аналізу, які зберігалися доти, поки аналіз не був готовий для проведення. Позитивні і негативні контролі розміщали на протилежних сторонах планшета у вертикальних ділянках (1 колонка).
Після цього готували інфекційну суміш з використанням відповідного розведення вірусного матеріалу, попередньо визначеного титруванням із клітинами при густоті 50000/мл, і додавали 20 мкл/'ямка планшети для дослідження м/сполуки за допомогою автоматики (иБіом/, Віотек).
Кожна пластина включала позитивний і негативний контролі (16 повторень кожний), щоб створити 095 і 100 95 стандарти інгібування вірусу, відповідно. Після інфікування в іспитові планшети додавали реагент для контролю життєздатності клітин, Сей Тйегоїіо (Рготеда,
Мадіхоп, УМІ) і інкубували протягом 4 днів при температурі 3720 в інкубаторі клітинних культур.
Після інкубування в аналітичні планшети додавали реагент для контролю життєздатності клітин,
Сеїї Тпегбіо (Рготеда, Мадізоп, М/І), швидко інкубували, і на всіх аналітичних планшетах визначали регістровану величину люмінесценції (Епмізоп, РегКіп ЕІтег). Індуковану КМ цитопатичну дію, відсоток інгібування, визначали за ступенем життєздатності клітин, які залишилися. Ці кількісні показники розраховували для кожної досліджуваної концентрації відносно 0 95 і 100 95 контролів інгібування, і визначали значення ЕС5О для кожної сполуки за допомогою нелінійної регресії у вигляді концентрації, яка інгібує індуковану КЗМ цитопатичну дію на 50 95. Як позитивні контролі на противірусну активність використовували різні ефективні анти-К5М експериментальні сполуки. бо Аналіз цитотоксичності на клітинах НЕр-2
Цитотоксичність досліджуваних сполук визначали на неінфікованих клітинах НЕр-2 паралельно з дослідженням противірусної активності, використовуючи реагент для контролю життєздатності клітин у такий же спосіб, як описано вище для інших видів клітин (Сійіаг еї аї., Апійпісгоб Адепіб
Спетоїнег. 2008,52(2):655-65). Для визначення цитотоксичності сполуки використовували той же протокол, що і для визначення противірусної активності, за винятком того, що клітини не були інфіковані К5М. Навпаки, неінфіковану суміш клітин при тій же густоті додавали по 20 мкл/ямка на планшети, які містять попередньо розведені сполуки, також при 100 нл/зразок.
Планшети потім інкубували протягом 4 днів з наступним на життєздатність клітин, використовуючи таке ж додавання реагенту СеПТЦег Сіо і визначення реєстрованої величини люмінесценції. Неочищені клітини і клітини, оброблені 2 мкМ пуроміціну (Зідта, 5. І оціб5, МО), служили як 100 95 ії 0956 контроль життєздатності клітин, відповідно. Відсоток життєздатності клітин розраховували для кожної концентрації досліджуваної сполуки порівняно з контролем
О 9о і 100 95, і величину СС50 визначали за допомогою нелінійної регресії у вигляді концентрації сполуки, яка відновлює життєздатність клітин на 50 95.
Аналіз цитотоксичності на клітинах МТ-4
Лінію клітин МТ-4 одержували від фірми МІН АІЮО5 Кезеагсп апа Кеїегепсе Кеадепі Ргодгат (Септапіомлп, МО) і культивували в середовищі ЕРМІ-1640 (Ігиіпе 5сіепійіс, Запіа Апа, СА, Саї я 9160), доповненому 10 95 ЕВ5, 100 одиниць/мл пеніциліну, 100 одиниць/мл стрептоміцину і 2
ММ Г-глутаміну. Клітини МТ-4 пересівали два рази на тиждень для підтримки щільності клітин нижче 0,б6х106 клітин/"мл. Повне середовище КРМІ-1640, яке містить 100х концентрацію 3- трикратно серійно розведеної сполуки, у межах від 26 нМ до 530 мкМ, штампували в чотирьох повторностях у чорні 384-ямкові планшети. Після додавання сполуки в кожну ямку за допомогою дозатора рідини Місгобіо (ВіоТек, УмМіпоо5Кі, МТ) додавали 2х103 МТ-4 клітин, і клітини культивували протягом 5 днів при температурі 372С в інкубаторі з 595 СО02. Після інкубування клітини врівноважували до 252С, і життєздатність клітин визначали шляхом додавання 25 мкл реагенту для контролю життєздатності клітин СеїІ-Тйег сСіо. Суміш інкубували протягом 10 хвилин при 252С, і сигнал люмінесценції кількісно оцінювали на планшетному рідері люмінесценції Місіог. Значення СС50 визначається як концентрація сполуки, яка зменшує життєздатність клітин на 5095, як визначено за допомогою сигналу СеїЇ-Тйег (іо. Дані
Зо аналізували з використанням програмногоо забезпечення для збору й аналізу даних Ріреїїпе
Ріпої Ріаїе Оаїа Апаїмйс5 СоПесіп (версія 7.0, Ассеїгух, Зап Оіедо, СА). Значення СО50 обчислювали проведенням нелінійного регресійного аналізу з використанням 4-х параметричного рівняння сигмовидної кривої доза-ефект: чЕВоноти(Тор-
Войот)/1-10"( осаСС50-Х)"НІіЗІореї) (пров. Уенизи(верх-низ)//1410"(одоссС50-
Х)'"коефіцієнтХілла)|)), де верх (Тор) і низ (Войот) фіксувалися на рівні 10095 їі 095 життєздатності клітин, відповідно. Значення СС50 було обчислене як середнє значенняхстандартне відхилення в З незалежних експериментах. нн ОО: ТИНИ ПЕ ГТ Я ПОЛО КТ: ПО ши ти Ето ПОЕТ ПО ПОЛО
34 (РОб 35 (РО7
Ще один позитивний ефект пов'язаний з тією перевагою, яку забезпечують сполуки, які мають заміщення К4, порівняно зі сполуками, не мають заміщення К4 (тобто такі, у яких К4-Н) відносно МТ-4 цитотоксичності. Наприклад, сполука (25, ЗК, 45, 5К)-2-(4-амінопіроло|1.2-
ЦІ1.2.4)Ігриазин-7-іл)-5-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-3,4-диол (Раїй, 5. А.; ОНег, К. А.; Ківїп,
ЕК. 5. Тетрапейгоп Гей. 1994, 35, 5339-5342), яка має структуру:
МН»
Ше то но У М Я ой но он демонструє МТ-4 СС50-0,007 мкм; тоді як сполуки за прикладами 1, 4, 5, 20 ї 26, усі демонструють МТ-4 СС50»53 мкм. Далі, сполука (2К, ЗК, 4К, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-
ЦІ1.2.4)гриазин-7-іл)-4-фтор-2-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-3-ол (М/О2012037038А1), яка має структуру:
МН»
Шен сх М но Х М р (в) М не не демонструє МТ-4 СС50-30 мкм; тоді як сполуки за прикладами 2, 3, 13 і 14, усі демонструють
МтТ-4 СС505106 мкм.
Інший позитивний ефект пов'язаний з тією перевагою, яку забезпечують сполуки з КЗ3-Е, які мають заміщення КА порівняно зі сполуками, які не мають заміщення КА (тобто ті, у яких К4-Н) відносно НЕр-2 анти-К5М активності. Наприклад, сполука (2, ЗК, 4К, 55)-5-(4-амінопіроло|1.2-
ЦІ1.2.4)гриазин-7-іл)-4-фтор-2-(гідроксиметил)тетрагідрофуран-3-ол (ММО20120370384А1) яка має структуру, зазначену вище, має НЕр-2 ЕС50-»100 мкм; тоді як сполуки за прикладами 2, 3, 13, 14, 19, 21, 22, 23 і 24, усі демонструють ЕС50-«100 мкМ.
Отримання КМ КМР
КМ ЕМР Підготовка
Е5М рибонуклеопротеїнові (КМР) комплекси одержували способом, модифікованим Мазоп еї аї (1). Клітини Нер-2 висівали при густоті клітин 7,1х104 клітин/см2 у МЕМ--10 95 фетальної бичачої сироватки (ЕВ5), і дозволяли закріплюватися протягом ночі при температурі 3720 (5 95 32). Після прикріплення клітини інфікували КЗМ А2 (МОЇІ-5) у 35 мл МЕМч-2 95 ЕВ5. Через 20 годин після інфікування середовище замінювали на МЕМчж2 95 ЕВ5, доповнену 2 мкг/мл актиноміцином О, і повертали до температури 372С протягом однієї години. Клітини потім промивали один раз за допомогою РВ5 і обробляли 35 мл РВ5еш250 мкг/мл лізолецитину протягом однієї хвилини, після чого всю рідину аспірували. Клітини збирали зішкрібанням їх у 12 мл буфера А |5О мМ ТРИС ацетат (рН 8,0), 100 мм ацетату калію, 1 мМ ОТ і 2 мкг/мл актиноміцини О| і лізували шляхом багаторазового пропущення через шприц з голкою 18 калібру (10 разів). Клітинний лізат поміщали на лід на 10 хвилин і потім центрифугували при 24009 протягом 10 хвилин при температурі 47С. Супернатант (51) видаляли, і осад (Р1) відновлювали в 600 мкл буфера В 10 мм ТРИС ацетат (рН 8,0), 10 мМ ацетату калію і 1,5 мМ
МОСІ21 з додаванням 1 95 Тритон Х-100 при повторному пропущенні через голку 18 калібру (10 разів). Ресуспендований осад поміщали на лід на 10 хвилин і потім центрифугували при 2400 д протягом 10 хвилин при температурі 42С. Супернатант (52) видаляли й осад (Рг) відновлювали в 600 мкл буфера В з додаванням 0,5 95 деоксихолату і 0,1 95 Тмеєп 40. Ресуспендований осад поміщали на лід на 10 хвилин і потім центрифугували при 24009 протягом 10 хвилин при температурі 42С. Супернатант (53), фракцію, яка містить збагачені К5М КМР комплекси, збирали і концентрацію білка визначали за УФ-поглинанням при 280 нм. Аліквоти КМ КМР фракції 53 зберігали при температурі -8020.
Аналіз КБ5М КМР
Реакційна суміш для транскрипції містила 25 мкг сирих комплексів КМ КМР у 30 мкл реакційного буфера І5О мМ ТРИС-ацетату (рН 8,0), 120 мМ ацетату калію, 5 95 гліцерину, 4,5
ММ МасСі2, 3 мМ ОТТ, 2 мМ етиленгліколь-біс(2-аміноетиловий ефір)-тетраоцтова кислота (ЕСТА), 50 мкг/мл ВЗА, 2,5 Ед. РНазина (Рготеда), АТР, СТР, ОТР, СТР і 1,5 мкКи (а-З2РІ| МТР (3000 Ки/ммоль)). Радіомічений нуклеотид, використаний в аналізі транскрипції, вибрали відповідно до нуклеотидного аналога, оціненим на інгібувані транскрипції К5М-ЕМР. Холодний конкурентний МТР додавали при кінцевій концентрації наполовину його Кт (АТР-20 мкМ,
СТР-А12,5 мкм, ОТР-б мкМ ії СТР-2 мкМ). Інші три нуклеотиди додавали при кінцевій концентрації 100 мкм.
Для визначення того, чи інгібують аналоги нуклеотидів К5М КМР транскрипцію, додавали сполуки з використанням 6 стадійного серійного розведення з 5-кратним збільшенням обсягу.
Чрез 90 хвилин інкубування при температурі 302С, реакції КМР зупиняли за допомогою 350 мкл лізисного буфера Оіадеп КІТ, ії КМА очищали з використанням набору Оіадеп КМеазу 96.
Очищену КМА денатурували в завантажувальному буфері для зразків ЕМА (Зідта) при
Зо температурі 652С протягом 10 хвилин і проганяли на гелі 1,2 95 агарозу/моРВ5, який містить 2М формальдегід. Агарозний гель сушили й експонували на люмінофорний екран 500гт і аналізували з використанням рпозрпогітадег 5іогт (СЕ Неаїсаге). Концентрацію сполуки, яка зменшує загальні радіомічені транскрипти на 5095 (12050), розраховували за допомогою нелінійного регресійного аналізу в двох повторностях.
Посилання Мазоп, 5., І амжмеї7, С., зЗацаене, У., Со, Е., зсощшеп, Е., І адасе, Г.., Зітопеаи, В. апа
Ми22і, М. (2004) Роїуадепуїіайоп-дерепаєпі зстеєпіпд аззау ог гезрігаїту зупсуйа! міги5 ВМА їапзсегіріазе асіїміу апа ідепійісайоп ої ап іппіріюг. Мисівїіс Асіаз Незеагсн, 32, 4758-4767. зо(тРЮ ЇЇ 7
ЗРІЗУ Її 77771111 і з3(тРІЗ) | 77
Ще один розгляд стосується тієї переваги, що сполуки, показані в прикладах, демонструють сильне інгібування транскрипції К5ЗМ ЕКМР порівняно зі сполуками з заміщенням 2СМе.
Наприклад, ((2К, ЗК, 4К, 55)-5-(4-амінопіроло(|2,1-Ч(1,2,4|триазин-7-іл)-3,4-дигідрокси-4- метилтетрагідрофуран-2-іл)метил тетрагідротрифосфат (М/О2008089105А2 і
УМО2010002877А2), який має структуру:
МН» у й: М о о ти п х М р рай Р. о М но Го Я рама но То о но но ї о й но демонструє ІС50-8,5 мкм; тоді як сполука за прикладом ТРЗ демонструє ІС50-0,025 мкм. Більш того, сполука (2, ЗК, 4К, 55)-5-(4-амінопіроло|2,1-Ч11,2,4)гриазин-7-іл)-4-фтор-3-гідрокси-4- метилтетрагідрофуран-2-іл)уметил тетрагідротрифосфат (М/О 2011035231 Ат), яка має структуру:
МН»о (о) о ХХ (в)
Ї Ц /Ї о ще йх но Го пе ра но ну У со но но демонструє ІС50-5100 мкм; тоді як сполука за прикладом ТРІ1І демонструє ІС50-0,086 мкм і сполука за прикладом ТР2 демонструє ІС50-1 мкм.

Claims (20)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Сполука формули (1): в2 Мн, -Зле М: М х ро в3-о о їх . ве : 7; в3 ій ,() або її фармацевтично прийнятна сіль, де: В' являє собою Н або Е; В2 являє собою Н або Е; ВЗ являє собою ОН або Е; В" являє собою СМ, Сі-Слалкіл, Со-Слалкеніл, Сг-Слалкініл, Сз-С«циклоалкіл, азидо, галоген або Сі-Согалогеналкіл; А? являє собою ОН; і
В? вибраний із групи, яка включає Н і: /Ї Її / і по-- Й но-Р р доми аа нь Я р. / / "То )/ / То / То но но но но но но Ї в о в" Ї Ц мою в3 В--(сн,; б-що Р. в о / Е о де в (сну 7 в" ! де: п'вибраний із 1, 2, З і 4; В? вибраний із Сі-Свалкілу, -О-Сі-Свалкілу, бензилу, -О-бензилу, -СН2-Сз-Свциклоалкілу, -0-СНе- Сз-Севциклоалкілу і СЕз; В" вибраний із фенілу, 1-нафтилу, 2-нафтилу, М нх М р р Ї ; В'Є вибраний із Н і СНз; В" вибраний із Н або С:-Свалкілу; і В": вибраний із Н, Сі-Свалкілу, бензилу, Сз-Сециклоалкілу і -СН2-Сз-Сециклоалкілу.
2. Сполука за п. 1 або її фармацевтично прийнятна сіль, де В' являє собою Н.
3. Сполука за п. 1 або її фармацевтично прийнятна сіль, де К2? являє собою Н.
4. Сполука за будь-яким з пп. 1-3 або її фармацевтично прийнятна сіль формули (І): МН, нео М хм м в3- о о ї .
м. "в3 по (1) де: ВЗ являє собою ОН або Е; В" являє собою СМ, Сі-Слалкіл, Со-Слалкеніл, Сг-Слалкініл, Сз-С«циклоалкіл, азидо, галоген або Сі-Согалогеналкіл; і В" вибраний із групи, яка включає Н і: Ї Її / і Л/ / / - / тот / То7/ То но но но но но но
Ї в о в" Ї Й у в? вВ--онН5 "-о Р в о / Е о де М в-- (сну т св" де: п'вибраний із 1, 2, З і 4; ВЗ? вибраний із С:і-Свалкілу, -0О-С1-Свалкілу, бензилу, -О-бензилу, -СН2-Сз-Свциклоалкілу, -СНе- Сз-Севциклоалкілу і СЕз; В? являє собою феніл; В'Є вибраний із Н і СНз; А" вибраний із Н або С.-Свалкілу; і В": вибраний із Н, Сі-Свалкілу, бензилу, Сз-Сециклоалкілу і -СН2-Сз-Сециклоалкілу.
5. Сполука за будь-яким з пп. 1-4 або її фармацевтично прийнятна сіль, де КЕ" являє собою СМ, метил, етил, етеніл, етиніл, азидо, Е, СІ, -СН2СІ, -СНеЕ, -СНЕ» або -СЕз.
6. Сполука за будь-яким з пп. 1-5 або її фармацевтично прийнятна сіль, де ЕКЗ являє собою РЕ.
7. Сполука за будь-яким з пп. 1-5 або її фармацевтично прийнятна сіль, де ЕКЗ являє собою ОН.
8. Сполука за п. 4 або її фармацевтично прийнятна сіль, де К" являє собою СМ.
9. Сполука за п. 4 або її фармацевтично прийнятна сіль, де обидва К!' і К? являють собою Н, КЗ являє собою КЕ, і ЕЕ" являє собою метил, етил, вініл або етиніл; або 27 являє собою метил, етил, вініл або етиніл.
10. Сполука за п. б або 7 або її фармацевтично прийнятна сіль, де К" являє собою галогенметил.
11. Сполука за будь-яким з пп. 1-10 або її фармацевтично прийнятна сіль, де В: являє собою Н.
12. Сполука за будь-яким з пп. 1-10 або її фармацевтично прийнятна сіль, де В? вибраний з групи, яка включає: ЇЇ Її і 5-й р Ж- но-77 а р / / о )/ / То / То но но но но но но Фі Ї о--Р о о не шар | МН (в) і ; де: В? вибраний із С/-Свалкілу, -0-С1-Свалкілу, бензилу і -СН2-Сз-Свциклоалкілу; і В": вибраний із Сі-Свалкілу, бензилу, Сз-Сециклоалкілу і -СН2-Сз-Сециклоалкілу.
13. Сполука за будь-яким з пп. 1-12 або її фармацевтично прийнятна сіль, де (А) ВЗ вибирають з С:і-Свалкілу; або (В) А? вибирають з С:-Свалкілу; або (С) В? вибирають з С:-Сзалкілу; або (О) А? вибирають з Сі-Слалкілу; або (Е) А"? вибирають з С:-Свалкілу; або (Р) В"? вибирають з С:-Сдлалкілу.
14. Сполука за будь-яким з пп. 1-13 або її фармацевтично прийнятна сіль, яка відповідає додатковій умові, що, коли КЗ являє собою РЕ, КЕ" не являє собою метил.
15. Сполука за будь-яким з пп. 1-14 або її фармацевтично прийнятна сіль, де КЕ? вибраний з групи, яка включає Н і: Ї і і і / на й / й на Й на й / но но ; но (а) ; (Б) і (с) .
16. Сполука за будь-яким з пп. 1-15 або її фармацевтично прийнятна сіль, вибрана з групи, яка включає: (А) МН, МН, Мн, з но у МУ я у М Ї у М г о М но о х -/ но в) х -/ Ко Ка М те ш М ме М. у ра у / У но "он но ТЕ но ТЕ Мн, Мн, ч - М ЗК ее М Х М АВ Х М я о м но о тм но і у; нас" М" но "он но "он (9) Нови но) (9) ов / но у о МН, зв с / но У М й - М -/ (в) ще ем но Е або (В)
(в) (в) Нови Но. ви / / но у о но У о -в7 -в / но З о МН, но о МН, ой ов А их їх их но о М М но о М М вт водо Ам М тує "шШ-щ-- Мм--Щш но Е но он (в) ноу й л но о. ри а.
МН, Р т МН би? ! о ори жен СМ ра й5 вк о М М А но |в) М М Лу пада о М о рн) Ї п Од / ма х 1 у й ОЮ-. неон Моно "он я Мн, -х Ге) 5 -Щ-Що5 М оо Х І р о - в св-о о М (в; щи 2 А- но Е Мн, МН; -Шжк М чу М о ї и хо о М о ота , но Ге) мно й Щ (в) 4 КД тш-Ж- но Е МИиИте но Е або (С)
Мн, я МН,
х. В т ач в; (в) М АВ Х А - (о) М. й но с! М ма тр-о о в НІ (в) - ж я но Е но Мн, -н М ГИ х М в о | о М о пиши і: мно м У у в) ку ", но (Фін! (в) пови но" (в) ше //Р но У (в) МН, в ху / но М М М НА М фйї- но ТЕ (в) пови но" (в) ше //Р но у о МН, в ху /Йї/ но М М м - М -/ (в) М он М М - 45 55 в но Е або (0)
Мн, Мн, ше М --х Х х ї чи но М - в) М -е/ но в) " М Ь МУ" ш- но Е но он МН, Н.М -ЛжС М не ет х Му А х Му Ж но о М но о М Е м: У у м У у но Е теж: Е МН, МН Х 2 Х ех хх М но | Х но М М М М м м-/ У но ТЕ но Е або (Е) БО Мн, ХУ Ко М що М М А Х А (є) Кк Н о м цо о іще см у / се-ха/ в но "он но "он
(в) (в)
Но. ви НО. ви / М / у но ви но о. р Р / М І М Е но (в) но о ше Мн, орви Мн, / / ної |З « но" У Що « о М М о М М ма Х-, ма ХУ - но ТЕ но ТЕ но. й нови Р ,/, /ї/ї но М о но" У р ев ев / / Е но у (в) но у / МН, -в МН, ер / / но о | З іх по о М ії Мт х у х Ми" і- м-Е- М- но Е і но он або (Р) (в! (о; НО ши рай / у но (в) но Ге) о 76 ше в щу Е но о но о. ри МН, о ви МН, Р / но" ма З Б но ма МК Б (в М о М В ЧІ) -3 хі М- Б но "он в) он МН, -вСК М ГТ х М в о М о- в --о (в) | До; ЖК М є 7 но он
МН, Шик М о М м В - ої о М о 1 В рах МН 2 щу з, но он 3 і "
17. Фармацевтична композиція, яка містить фармацевтично ефективну кількість сполуки за будь-яким з пп. 1-16 або її фармацевтично прийнятної солі і фармацевтично прийнятний носій і допоміжну речовину.
18. Сполука за будь-яким з пп. 1-16 або її фармацевтично прийнятна сіль для застосування при лікуванні інфекції вірусом Рпеитомуігіпає або респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції у людини.
19. Сполука, вибрана з () формули (А), формули (В), формули (С), формули (0) і формули МНн-Х2 МН-Х2 З НН ТМ хм А хо А. но о ЗМ хо о Ше в" но- і, но-х 13 у
1. с т 1 о. т тб (ЕХ 00 А) хто (в Мн-Х2 Мн-Х2 -ш-е В: М -щ-у в: М х Му ра х Му А о М в' о М в'
1. у з -Х 1. ї т , х-о 0-Х , (С) х-о (0) і МН-Х? не М но о ро но- і я, х-о Дер (в) де В! являє собою Н або Е; Х! являє собою захисну групу кисню, яка являє собою силілефірну захисну групу, вибрану з триметилсилілу (ТМ5), триєтилсилілу (ТЕЗ5), диметилізопропілсилілу (ІРОМ5), діетилізопропілсилілу (ОЕІР5), диметилгексилсилілу (ТО5), трет-бутилдиметилсилілу (ТВ5 або ТВОМ5), трет-бутилдифенілсилілу (ТВОРБ), трибензилсилілу, три-п-ксилілсилілу, триїзопропілсилілу (ТІР5), дифенілметилсилілу (ОРМ5), ди-трет-бутилметилсилілу (ОТВМ5), трифенілсилілу (ТРУ), метилдифенілсилілу (МОР), трет- бутилметоксифенілсилілу, трис(триметилсиліл)силілу (сизилу), (2-
гідроксистирил)удиметилсилілу (Н5ОМ5), (2-гідроксистирил)дізопропілсилілу (Н5ОІ5), трет-
бутилметоксифенілсилілу (ТВМРЗ) і трет-бутоксидифенілсилілу (ОРТВО5); або захисну групу бензильного типу, вибрану з бензилу, галогенованого бензилу, п-метоксибензилу,
бензилоксиметилу, 2,4-диметоксибензилу, 3,4-диметоксибензилу, 2,6-диметоксибензилу, п-СЕз- бензилу, п-метилбензилу, п-метоксибензилу, 3,5-диметилбензилу, п-трет-бутилбензилу, 0-
нітробензилу, п-нітробензилу, п-галогенбензилу, включаючи п-ВІі-бензилу, 2,6-дихлорбензилу,
п-ціанобензилу, п-фенілбензилу, 2,6-дифторбензилу, п-ациламінобензилу (РАВ), п-
азидобензилу (А2Б), 4-азидо-3-хлорбензилу, 2-трифторметилбензилу, п-
(метилсульфініл)бензилу, 2-піколілу, 4-піколілу, З3-метил-2-піколілу М-оксиду, 2-хінолінілметилу, дифенілметилу (ОРМ), р,р'-динітробензгідрилу, трифенілметилу, альфа-нафтилдифенілметилу,
п-метоксифенілдифенілметилу, ди(п-метоксифеніл)/фенілметилу, три(п-метоксифеніл)метилу,
4 4 4-трис(бензоїлоксифеніл)метилу і 2-нафтилметилу;
і Хг являє собою амінозахисну групу, вибрану з п-метоксибензилкарбонілу (Мо7 або Мео7),
ацетилу (Ас), бензоїлу (В2), п-метоксибензилу (РМВ), 3,4-диметоксибензилу (ОМРМ), п- метоксифенілу (РМР), тозилу (Т5 або То5) трифторацетаміду і тритилу; або захисну групу карбамату, вибрану з 9-флуоренілметилоксикарбонілу (ЕМОС), 9-(2-
сульфо)флуоренілметилу, 9-(2,7-дибром)флуоренілметилу, 17-
тетрабензої(а,с,4,флуоренілметилу (ТБбітос), 2-хлор-3-інденілметилу (Сіїтос), бензІЧінден-3-
ілметилу (Вітос), 2,7-ди-трет-бутилІ9-(10,10-діоксо-10,10,10,10-тетрагідротіоксанілУ|метилу (080-Ттос), (2-(1,3-дитіанілуметилу (ЮОтос), 1,1-діоксобензо|бБІгіофен-2-ілметилу (В5тос), 1,1-
диметил-2-ціаноетилу, 2-фосфоніоетилу (Ресос), 2-метилтіоетилу, 2-(п-толуолсульфоніл)етилу,
2,2,2-трихлоретилу (Тгос), 2-"триметилсиліл)етилу (Теос), 2-фенілетилу (п2), 1-(1-адамантил)-1-
метилетилу (Адрос), 1,1-диметил-2-брометилу, 1,1-диметил-2-хлоретилу, 1,1-диметил-2,2-
диброметилу (08--8ОС), 1,1-диметил-2,2,2-трихлоретилу (ТовОС), 1-метил-1-(4- біфенілілуетилу (Врос), 1-(3,5-ди-трет-бутилфеніл)-і-метилетилу (трет-Витеос), 2-(2-
піридил)етилу, 2-(4-піридил)етилу, 2,2-біс(4"-нітрофеніл)етилу (Впреос), М-(2-півалоїламіно)-1,1-
диметилетилу, 2-К2-нітрофеніл)дитіо|-1-фенілетилу (МраезРеос), 2-(М,М-
дициклогексилкарбоксамідо)етилу, трет-бутилу (Вос або ВОС), 1-адамантилу (1-Адос), 2-
адамантилу (2-Адос) вінілу (Мос), алілу (АЇое або аїПос), 1-ізопропілалілу (Ірасос), цинамілу (Сос), Зо 4-нітроцинамілу (Мос), 3-(3'-піридил)проп-2-енілу (Раїос), 8-хінолілу, М-гідроксипіперидинілу,
метилдитіо, етилдитіо, ізопропілдитіо, трет-бутилдитіо, фенілдитіо, бензилу, п-метоксибензилу,
п-нітробензилу, п-бромбензилу, п-хлорбензилу, 2,4-дихлорбензилу, 4-метилсульфінілбензилу
(М52), 9-антрилметилу, 4-метилтіофенілу (Мірс), 1-метил-1-(трифенілфосфоніо)етил(2-
трифенілфосфоніопропілу) (Ррос), 2-дансилетилу (Опзеос), 2-(4-нітрофеніл)етилу (Мреос), фенілацетоксибензилу (РПАсСО2), 4-азидобензилу (АСВ), 4-азидометоксибензилу, м-хлор-п-
ацилоксибензилу, п-(дигідроксибореніл)бензилу, карбобензилокси (СЬ2), 4-
бензизоксазолілметилу (Віс), 2-(трифторметил)-6-хромонілметилу (Тегос), фенілу,
дифенілметилу, бутинілу, циклопентилу, циклогексилу, циклопропілметилу, 1-
метилциклобутилу, 1-метилциклогексилу, 1,1-диметилпропінілу і 1-метил-1- циклопропілметилкарбаматів; або амідну захисну групу для амінів, вибрану з М-формілу, М-ацетилу, М-хлорацетилу, М-
трихлорацетилу, М-трифторацетилу (ТЕА), М-фенілацетилу, М-3З-фенілпропіонілу, /-М-4-
пентеноїлу, М-піколіноїлу, М-З-піридилкарбоксамідо, М-бензоїлфенілаланілу, М-бензоїлу і Мр-
фенілбензоїламідів; ік являє собою Н або Е або
(і) сполуки, вибраної з:
МНВІ МНВа2 За хх вх х я М М о но о ік -/ но-7 тв5о отв5 тв5о ТЕ
МНВ: МНВІ - ех ЗХ Х вх Х М М М і тво о М. -/ о чи я М но-7 тво Е но Е
20. Застосування сполуки за будь-яким з пп. 1-16 або її фармацевтично прийнятної солі для отримання лікарського засобу, призначеного для лікування інфекції вірусом Рпештомігіпає або респіраторно-синцитіальної вірусної інфекції у людини.
UAA201606308A 2013-11-11 2014-06-11 ПІРОЛО[1.2-f][1.2.4]ТРИАЗИНИ, ЯКІ ВИКОРИСТОВУЮТЬСЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ РЕСПІРАТОРНО-СИНЦИТІАЛЬНИХ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ UA119050C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361902544P 2013-11-11 2013-11-11
PCT/US2014/064412 WO2015069939A1 (en) 2013-11-11 2014-11-06 Pyrrolo [1,2,f] [1,2,4] triazines useful for treating respiratory syncitial virus infections

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA119050C2 true UA119050C2 (uk) 2019-04-25

Family

ID=52003049

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201606308A UA119050C2 (uk) 2013-11-11 2014-06-11 ПІРОЛО[1.2-f][1.2.4]ТРИАЗИНИ, ЯКІ ВИКОРИСТОВУЮТЬСЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ РЕСПІРАТОРНО-СИНЦИТІАЛЬНИХ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ

Country Status (36)

Country Link
US (4) US9388208B2 (uk)
EP (3) EP4122932A1 (uk)
JP (7) JP6234571B2 (uk)
KR (4) KR101864973B1 (uk)
CN (2) CN105899216B (uk)
AP (1) AP2016009186A0 (uk)
AU (5) AU2014346665A1 (uk)
BR (1) BR112016010261B1 (uk)
CA (1) CA2928674C (uk)
CL (1) CL2016001120A1 (uk)
CR (1) CR20160220A (uk)
CU (1) CU20160065A7 (uk)
CY (1) CY1121948T1 (uk)
DK (2) DK3068405T3 (uk)
DO (1) DOP2016000107A (uk)
EA (2) EA039734B1 (uk)
ES (2) ES2743619T3 (uk)
GT (1) GT201600086A (uk)
HR (2) HRP20220920T1 (uk)
HU (2) HUE059683T2 (uk)
IL (1) IL245324B (uk)
LT (2) LT3068405T (uk)
MD (1) MD4596C1 (uk)
MX (2) MX2016006066A (uk)
MY (2) MY197933A (uk)
NZ (1) NZ719592A (uk)
PE (1) PE20160670A1 (uk)
PH (1) PH12016500867A1 (uk)
PL (2) PL3505173T3 (uk)
PT (2) PT3068405T (uk)
SG (1) SG11201603427XA (uk)
SI (2) SI3505173T1 (uk)
TR (1) TR201910961T4 (uk)
UA (1) UA119050C2 (uk)
WO (1) WO2015069939A1 (uk)
ZA (1) ZA201603123B (uk)

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011035250A1 (en) 2009-09-21 2011-03-24 Gilead Sciences, Inc. Processes and intermediates for the preparation of 1'-substituted carba-nucleoside analogs
MX2013000744A (es) 2010-07-22 2013-03-07 Gilead Sciences Inc Metodos y compuestos para tratar infecciones virales por paramyxoviridae.
UA119050C2 (uk) * 2013-11-11 2019-04-25 Ґілеад Саєнсиз, Інк. ПІРОЛО[1.2-f][1.2.4]ТРИАЗИНИ, ЯКІ ВИКОРИСТОВУЮТЬСЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ РЕСПІРАТОРНО-СИНЦИТІАЛЬНИХ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ
WO2015143712A1 (en) 2014-03-28 2015-10-01 Merck Sharp & Dohme Corp. 4'-substituted nucleoside reverse transcriptase inhibitors
TWI678369B (zh) * 2014-07-28 2019-12-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療呼吸道合胞病毒感染之噻吩並［３,２-ｄ］嘧啶、呋喃並［３,２-ｄ］嘧啶及吡咯並［３,２-ｄ］嘧啶化合物類
EA031726B1 (ru) 2014-09-26 2019-02-28 Рибосайенс Ллк 4'-винилзамещенные производные нуклеозидов в качестве ингибиторов репликации рнк респираторно-синцитиального вируса
TWI740546B (zh) 2014-10-29 2021-09-21 美商基利科學股份有限公司 製備核糖苷的方法
KR20230130175A (ko) 2014-12-26 2023-09-11 에모리 유니버시티 Ｎ4-하이드록시시티딘, 이와 관련된 유도체 및 이의 항 바이러스적 용도
US10251904B2 (en) 2015-09-16 2019-04-09 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating arenaviridae and coronaviridae virus infections
CN108289931B (zh) * 2015-09-23 2022-10-11 默沙东公司 4’-取代的核苷逆转录酶抑制剂及其制备
TWI740910B (zh) 2016-03-09 2021-10-01 美商艾洛斯生物製藥公司 非環抗病毒劑
KR102318320B1 (ko) * 2017-03-14 2021-10-27 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 고양이 코로나바이러스 감염의 치료 방법
EP4219513A1 (en) 2017-05-01 2023-08-02 Gilead Sciences, Inc. Crystalline form of (s)-2-ethylbutyl 2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-aminopyrrolo[2,1-f] [1,2,4]triazin-7-yl)-5-cyano-3,4-dihydroxytetrahydrofuran2-yl)methoxy)(phenoxy) phosphoryl)amino)propanoate
CA3077489A1 (en) 2017-07-11 2019-01-17 Gilead Sciences, Inc. Compositions comprising an rna polymerase inhibitor and cyclodextrin for treating viral infections
WO2019053696A1 (en) 2017-09-18 2019-03-21 Alios Biopharma, Inc. SUBSTITUTED NUCLEOSIDES, NUCLEOTIDES AND ANALOGS THEREOF
CN109748921B (zh) * 2017-11-03 2022-03-22 中国科学院上海药物研究所 N-叔丁氧羰基保护的杂环类化合物、其制备方法及其用于制备c-核苷类似物的方法
CN111372592A (zh) 2017-12-07 2020-07-03 埃默里大学 N4-羟基胞苷及衍生物和与其相关的抗病毒用途
US11040975B2 (en) 2017-12-08 2021-06-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Carbocyclic nucleoside reverse transcriptase inhibitors
CN108787177B (zh) * 2018-08-07 2024-03-15 中南大学 淤浆法制备黄原酸盐的方法及系统
US20220267362A1 (en) * 2019-05-14 2022-08-25 The Regents Of The University Of Michigan Methods for Glycosylation
TWI789695B (zh) 2020-01-27 2023-01-11 美商基利科學股份有限公司 治療sars cov-2感染之方法
TW202245800A (zh) 2020-02-18 2022-12-01 美商基利科學股份有限公司 抗病毒化合物
TW202322824A (zh) * 2020-02-18 2023-06-16 美商基利科學股份有限公司 抗病毒化合物
TW202315607A (zh) 2020-02-18 2023-04-16 美商基利科學股份有限公司 抗病毒化合物
AU2021224588A1 (en) * 2020-02-18 2022-08-25 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
CN111187269A (zh) * 2020-02-27 2020-05-22 江苏阿尔法药业有限公司 一种瑞德西韦中间体的合成方法
CN113336758B (zh) * 2020-03-03 2022-08-19 北京桦冠医药科技有限公司 化合物7-碘吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-胺的一种新合成方法
CN111233870A (zh) * 2020-03-11 2020-06-05 中国科学技术大学 用于快速制备瑞德西韦药物中间体的方法
CN115298181A (zh) 2020-03-12 2022-11-04 吉利德科学公司 制备1’-氰基核苷的方法
WO2021207049A1 (en) 2020-04-06 2021-10-14 Gilead Sciences, Inc. Inhalation formulations of 1'-cyano substituted carbanucleoside analogs
CN112778310A (zh) 2020-04-20 2021-05-11 中国科学院上海药物研究所 核苷类似物或含有核苷类似物的组合制剂在抗病毒中的应用
CN113527303B (zh) * 2020-04-21 2022-06-10 浙江工业大学 一种瑞德西韦母核中间体的制备工艺
CN111440176B (zh) * 2020-04-28 2022-04-26 江苏大学 金属配合物促进的瑞德西韦中间体的合成方法
KR20230018473A (ko) 2020-05-29 2023-02-07 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 렘데시비르 치료 방법
CN111620903A (zh) * 2020-06-17 2020-09-04 安徽贝克联合制药有限公司 C-核苷类似物以及用于合成瑞德西韦合成的含腈c-核苷类化合物的制备方法及其应用
IL299202A (en) 2020-06-24 2023-02-01 Gilead Sciences Inc 1'-cyano nucleoside analogs and uses thereof
CN111732618A (zh) * 2020-07-03 2020-10-02 镇江巨杰新材料技术研发中心(有限合伙) 瑞德西韦关键片段的合成方法
CN111793101B (zh) * 2020-07-17 2022-09-30 四川大学 C-核苷化合物的合成方法
CA3185450A1 (en) 2020-08-06 2022-02-10 Istvan Borza Remdesivir intermediates
EP4204421A2 (en) 2020-08-27 2023-07-05 Gilead Sciences, Inc. Compounds and methods for treatment of viral infections
CN112500417B (zh) * 2020-12-31 2022-01-21 山东诚汇双达药业有限公司 一种4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪的制备方法
AU2022256476A1 (en) 2021-04-16 2023-10-12 Gilead Sciences, Inc. Methods of preparing carbanucleosides using amides
WO2023023527A1 (en) 2021-08-18 2023-02-23 Gilead Sciences, Inc. Phospholipid compounds and methods of making and using the same
IL310854A (en) 2021-08-20 2024-04-01 Shionogi & Co Nucleoside compounds and their drug derivatives possessing viral growth inhibitory activity
TW202400185A (zh) 2022-03-02 2024-01-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療病毒感染的化合物及方法
WO2023168194A1 (en) 2022-03-03 2023-09-07 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds and methods of making and using the same
US20230382940A1 (en) 2022-03-03 2023-11-30 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds and methods of making and using the same

Family Cites Families (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3361306A (en) 1966-03-31 1968-01-02 Merck & Co Inc Aerosol unit dispensing uniform amounts of a medically active ingredient
US3565070A (en) 1969-02-28 1971-02-23 Riker Laboratories Inc Inhalation actuable aerosol dispenser
FR2224175B1 (uk) 1973-04-04 1978-04-14 Isf Spa
US4069819A (en) 1973-04-13 1978-01-24 Societa Farmaceutici S.P.A. Inhalation device
IT1017153B (it) 1974-07-15 1977-07-20 Isf Spa Apparecchio per inalazioni
SE438261B (sv) 1981-07-08 1985-04-15 Draco Ab Anvendning i dosinhalator av ett perforerat membran
US4805811A (en) 1985-03-29 1989-02-21 Aktiebolaget Draco Dosage device
SE448277B (sv) 1985-04-12 1987-02-09 Draco Ab Indikeringsanordning vid en doseringsanordning for lekemedel
IT1228459B (it) 1989-02-23 1991-06-19 Phidea S R L Inalatore con svuotamento regolare e completo della capsula.
US4955371A (en) 1989-05-08 1990-09-11 Transtech Scientific, Inc. Disposable inhalation activated, aerosol device for pulmonary medicine
DE69230613T2 (de) 1991-07-02 2000-12-28 Inhale Inc Verfahren und vorrichtung zum abgeben von medikamenten in aerosolform
US5261538A (en) 1992-04-21 1993-11-16 Glaxo Inc. Aerosol testing method
US5785049A (en) 1994-09-21 1998-07-28 Inhale Therapeutic Systems Method and apparatus for dispersion of dry powder medicaments
US5388572A (en) 1993-10-26 1995-02-14 Tenax Corporation (A Connecticut Corp.) Dry powder medicament inhalator having an inhalation-activated piston to aerosolize dose and deliver same
US5522385A (en) 1994-09-27 1996-06-04 Aradigm Corporation Dynamic particle size control for aerosolized drug delivery
US5544647A (en) 1994-11-29 1996-08-13 Iep Group, Inc. Metered dose inhalator
US5622163A (en) 1994-11-29 1997-04-22 Iep Group, Inc. Counter for fluid dispensers
US6116234A (en) 1999-02-01 2000-09-12 Iep Pharmaceutical Devices Inc. Metered dose inhaler agitator
CA2426187C (en) * 2000-10-18 2011-08-16 Pharmasset Limited Modified nucleosides for the treatment of viral infections and abnormal cellular proliferation
GB0114286D0 (en) 2001-06-12 2001-08-01 Hoffmann La Roche Nucleoside Derivatives
JP2005504087A (ja) 2001-09-28 2005-02-10 イデニクス（ケイマン）リミテツド ４’が修飾されたヌクレオシドを使用するｃ型肝炎ウイルス治療のための方法および組成物
WO2005020885A2 (en) 2003-05-21 2005-03-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of severe acute respiratory syndrome (sars)
AR046959A1 (es) * 2003-12-18 2006-01-04 Tibotec Pharm Ltd Morfolinilo que contiene bencimidazoles como inhibidores de la replicacion del virus sincitial respiratorio
CN101611046A (zh) * 2007-01-12 2009-12-23 拜奥克里斯特制药公司 抗病毒的核苷类似物
AU2008251555B2 (en) 2007-05-10 2012-08-30 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Tetrahydrofuro [3 4-D] dioxolane compounds for use in the treatment of viral infections and cancer
EP2019519B1 (en) 2007-07-25 2011-07-06 Nokia Siemens Networks Oy Method for addressing ethernet streams with a structured GPON GEM Port ID
KR101681559B1 (ko) * 2008-04-23 2016-12-01 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 항바이러스 치료를 위한 1'-치환된 카바-뉴클레오사이드 유사체
EP2313102A2 (en) 2008-07-03 2011-04-27 Biota Scientific Management Bycyclic nucleosides and nucleotides as therapeutic agents
WO2011035250A1 (en) 2009-09-21 2011-03-24 Gilead Sciences, Inc. Processes and intermediates for the preparation of 1'-substituted carba-nucleoside analogs
US8455451B2 (en) 2009-09-21 2013-06-04 Gilead Sciences, Inc. 2'-fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
ES2730805T3 (es) 2009-09-21 2019-11-12 Gilead Sciences Inc Análogos de carba-nucleósido sustituido por 2'-fluoro para el tratamiento antiviral
TW201201815A (en) * 2010-05-28 2012-01-16 Gilead Sciences Inc 1'-substituted-carba-nucleoside prodrugs for antiviral treatment
EP2596004B1 (en) 2010-07-19 2014-09-10 Gilead Sciences, Inc. Methods for the preparation of diasteromerically pure phosphoramidate prodrugs
MX2013000744A (es) * 2010-07-22 2013-03-07 Gilead Sciences Inc Metodos y compuestos para tratar infecciones virales por paramyxoviridae.
TW201305185A (zh) 2010-09-13 2013-02-01 Gilead Sciences Inc 用於抗病毒治療之２’－氟取代之碳－核苷類似物
JP2013538230A (ja) * 2010-09-20 2013-10-10 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド 抗ウイルス治療用の２’−フルオロ置換カルバヌクレオシド類似体
TW201701876A (zh) 2010-12-20 2017-01-16 吉李德科學股份有限公司 治療ｃ型肝炎病毒（ｈｃｖ）之方法
WO2012142075A1 (en) 2011-04-13 2012-10-18 Merck Sharp & Dohme Corp. 2'-azido substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
US20130143835A1 (en) * 2011-12-05 2013-06-06 Medivir Ab HCV Polymerase Inhibitors
CN107459544B (zh) * 2011-12-22 2021-03-16 詹森生物制药有限公司 取代的核苷、核苷酸及其类似物
SI2834258T1 (sl) * 2012-03-13 2017-04-26 Gilead Sciences, Inc. 2'-substituirani karba-nukleozidni analogi za protivirusno zdravljenje
SG11201502750UA (en) 2012-10-08 2015-06-29 Idenix Pharmaceuticals Inc 2'-chloro nucleoside analogs for hcv infection
TWI582077B (zh) 2013-11-07 2017-05-11 必治妥美雅史谷比公司 作爲ＩＬ－１２、ＩＬ－２３及／或ＩＦＮα反應調節劑之經烷基－醯胺取代之吡啶化合物
UA119050C2 (uk) * 2013-11-11 2019-04-25 Ґілеад Саєнсиз, Інк. ПІРОЛО[1.2-f][1.2.4]ТРИАЗИНИ, ЯКІ ВИКОРИСТОВУЮТЬСЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ РЕСПІРАТОРНО-СИНЦИТІАЛЬНИХ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ

Also Published As

Publication number Publication date
AU2021201554B2 (en) 2023-02-02
CN114085243A (zh) 2022-02-25
PL3068405T3 (pl) 2019-10-31
AP2016009186A0 (en) 2016-04-30
MD4596B1 (ro) 2018-10-31
US9388208B2 (en) 2016-07-12
AU2019204381A1 (en) 2019-07-11
HRP20220920T1 (hr) 2022-10-28
US10059716B2 (en) 2018-08-28
MY197933A (en) 2023-07-25
EP3068405A1 (en) 2016-09-21
US9701682B2 (en) 2017-07-11
AU2017232039B2 (en) 2019-03-28
AU2023202506A1 (en) 2023-05-11
DOP2016000107A (es) 2016-06-15
HUE044960T2 (hu) 2019-12-30
KR20200057103A (ko) 2020-05-25
EP3505173A1 (en) 2019-07-03
ES2926155T3 (es) 2022-10-24
PL3505173T3 (pl) 2022-10-17
CR20160220A (es) 2016-07-22
LT3068405T (lt) 2019-08-12
EA029712B1 (ru) 2018-05-31
JP2022088661A (ja) 2022-06-14
KR20180059958A (ko) 2018-06-05
US20170008897A1 (en) 2017-01-12
CN110003215B (zh) 2021-12-17
US20190055253A1 (en) 2019-02-21
EP4122932A1 (en) 2023-01-25
EP3505173B1 (en) 2022-07-06
JP2018070658A (ja) 2018-05-10
ES2743619T3 (es) 2020-02-20
PT3505173T (pt) 2022-11-18
AU2019204381B2 (en) 2021-04-01
PH12016500867A1 (en) 2016-06-20
SI3505173T1 (sl) 2022-09-30
DK3505173T3 (da) 2022-08-22
DK3068405T3 (da) 2019-07-29
PE20160670A1 (es) 2016-07-10
CY1121948T1 (el) 2020-10-14
US20150133395A1 (en) 2015-05-14
JP2018021051A (ja) 2018-02-08
HUE059683T2 (hu) 2022-12-28
CL2016001120A1 (es) 2017-05-05
SI3068405T1 (sl) 2019-08-30
WO2015069939A1 (en) 2015-05-14
CN105899216B (zh) 2019-03-05
MX2020010628A (es) 2020-10-22
EA039734B1 (ru) 2022-03-04
KR102243724B1 (ko) 2021-04-23
US10377761B2 (en) 2019-08-13
BR112016010261A2 (uk) 2017-08-08
JP7054394B2 (ja) 2022-04-13
JP6234571B2 (ja) 2017-11-22
JP7247155B2 (ja) 2023-03-28
GT201600086A (es) 2018-01-17
CN105899216A (zh) 2016-08-24
CN110003215A (zh) 2019-07-12
JP2024041986A (ja) 2024-03-27
MX2016006066A (es) 2016-08-12
MD20160063A2 (ro) 2016-11-30
AU2017232039A1 (en) 2017-10-12
AU2014346665A1 (en) 2016-05-19
CU20160065A7 (es) 2016-09-30
US20180016280A1 (en) 2018-01-18
EA201690978A1 (ru) 2016-09-30
AU2017232039C1 (en) 2019-07-25
IL245324B (en) 2018-08-30
KR20210046833A (ko) 2021-04-28
JP2021046413A (ja) 2021-03-25
LT3505173T (lt) 2022-10-10
MD4596C1 (ro) 2019-05-31
PT3068405T (pt) 2019-08-05
JP6393380B2 (ja) 2018-09-19
ZA201603123B (en) 2019-08-28
EP3068405B1 (en) 2019-05-01
EA201792639A1 (ru) 2018-09-28
BR112016010261B1 (pt) 2022-02-08
KR20160074011A (ko) 2016-06-27
KR101864973B1 (ko) 2018-06-05
JP2020055855A (ja) 2020-04-09
NZ719592A (en) 2017-12-22
JP2017502925A (ja) 2017-01-26
HRP20191303T1 (hr) 2019-10-18
TR201910961T4 (tr) 2019-08-21
KR102355881B1 (ko) 2022-01-25
KR102113705B1 (ko) 2020-05-21
AU2021201554A1 (en) 2021-04-01
IL245324A0 (en) 2016-06-30
SG11201603427XA (en) 2016-05-30
CA2928674A1 (en) 2015-05-14
MY182986A (en) 2021-02-05
CA2928674C (en) 2018-10-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA119050C2 (uk) ПІРОЛО[1.2-f][1.2.4]ТРИАЗИНИ, ЯКІ ВИКОРИСТОВУЮТЬСЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ РЕСПІРАТОРНО-СИНЦИТІАЛЬНИХ ВІРУСНИХ ІНФЕКЦІЙ
ES2808868T3 (es) 2'-Cloro aminopirimidinona y nucleósidos de diona de pirimidina
CN114085243B (zh) 可用于治疗呼吸道合胞病毒感染的吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪
EA045066B1 (ru) ПИРРОЛО[1.2-f][1.2.4]ТРИАЗИНЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ