JP2020055855A - 呼吸器合胞体ウイルス感染を処置するのに有用なピロロ［１，２，ｆ］［１，２，４］トリアジン - Google Patents

呼吸器合胞体ウイルス感染を処置するのに有用なピロロ［１，２，ｆ］［１，２，４］トリアジン Download PDF

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Abstract

【課題】ＨＲＳＶ感染などのＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染を含めた、有効でありかつ許容可能な毒性プロファイルを有する、Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅウイルス感染を処置するのに有用な、新しい抗ウイルス剤の提供。【解決手段】下式１等の置換テトラヒドロフラニル−ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−アミン化合物。【選択図】なし

Description

分野
特に呼吸器合胞体ウイルス感染を含む、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染を処置するための置換テトラヒドロフラニル−ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−アミン化合物、方法および医薬製剤、ならびに化合物を調製するのに有用な方法および中間体が、本明細書において提供される。
背景
Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルスは、流行している多くのヒトおよび動物疾患の原因となる、一本鎖マイナスセンスＲＮＡウイルスである。このウイルスのＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅサブファミリーは、Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅファミリーの一部であり、ヒト呼吸器合胞体ウイルス（ＨＲＳＶ）を含む。ほとんどすべての児童が、２回目の誕生日までに、ＨＲＳＶ感染を有することになる。ＨＲＳＶは、幼児および児童期における下気道感染症の主な原因であり、感染者の０．５％〜２％が入院を必要とする。慢性の心臓、肺疾患のある老人および成人、または免疫抑制されている老人および成人もやはり、重度のＨＲＳＶ疾患を発症するリスクが高い（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｄｃ．ｇｏｖ／ｒｓｖ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ）。ＨＲＳＶ感染を予防するワクチンは、現在、利用可能ではない。モノクローナル抗体であるパリビズマブは、免疫学的予防に利用可能であるが、その使用は、高いリスクのある幼児、例えば、未熟児、または心臓もしくは肺の先天性疾患のどちらかを有する幼児に限定されており、一般使用の場合の費用は高く設定されていることが多い。さらに、ヌクレオシドアナログであるリバビリンは、ＨＲＳＶ感染を処置する唯一の抗ウイルス剤として承認されたが、有効性は限られている。したがって、抗Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅ治療薬が必要とされている。
ウイルス感染を処置するのに有用なピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン化合物の例が、Ｕ．Ｓ．２０１２／０００９１４７Ａ１（Ｃｈｏら）、Ｕ．Ｓ．２０１２／００２０９２１Ａ１（Ｃｈｏら）、ＷＯ２００８／０８９１０５Ａ２（Ｂａｂｕら）、ＷＯ２００８／１４１０７９Ａ１（Ｂａｂｕら）、ＷＯ２００９／１３２１３５Ａ１（Ｂｕｔｌｅｒら）、ＷＯ２０１０／００２８７７Ａ２（Ｆｒａｎｃｏｍ）、ＷＯ２０１１／０３５２３１Ａ１（Ｃｈｏら）、ＷＯ２０１１／０３５２５０Ａ１（Ｂｕｔｌｅｒら）、ＷＯ２０１１／１５０２８８Ａ１（Ｃｈｏら）、ＷＯ２０１２／０１２４６５（Ｃｈｏら）、ＷＯ２０１２／０１２７７６Ａ１（Ｍａｃｋｍａｎら）、ＷＯ２０１２／０３７０３８（Ｃｌａｒｋｅら）、ＷＯ２０１２／０８７５９６Ａ１（Ｄｅｌａｎｅｙら）およびＷＯ２０１２／１４２０７５Ａ１（Ｇｉｒｉｊａｖａｌｌａｂｈａｎら）において記載されている。
ＨＲＳＶ感染などのＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染を含めた、有効でありかつ許容可能な毒性プロファイルを有する、Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅウイルス感染を処置するのに有用な、新しい抗ウイルス剤が依然として必要とされている。
米国特許出願公開第２０１２／０００９１４７号明細書 米国特許出願公開第２０１２／００２０９２１号明細書 国際公開第２００８／０８９１０５号 国際公開第２００８／１４１０７９号 国際公開第２００９／１３２１３５号 国際公開第２０１０／００２８７７号 国際公開第２０１１／０３５２３１号 国際公開第２０１１／０３５２５０号 国際公開第２０１１／１５０２８８号 国際公開第２０１２／０１２４６５号 国際公開第２０１２／０１２７７６号 国際公開第２０１２／０３７０３８号 国際公開第２０１２／０８７５９６号 国際公開第２０１２／１４２０７５号
概要
ヒト呼吸器合胞体ウイルスによって引き起こされる感染の処置を含めた、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルスファミリーにより引き起こされる感染を処置するための、化合物、方法および医薬製剤が提供される。
式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩
Figure 2020055855
 が提供され、式中、
Ｒ１は、ＨまたはＦであり、
Ｒ２は、ＨまたはＦであり、
Ｒ３は、ＯＨまたはＦであり、
Ｒ４は、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキル、アジド、ハロゲンまたはＣ１〜Ｃ２ハロアルキルであり、
Ｒ６は、ＯＨであり、
Ｒ５は、Ｈおよび
Figure 2020055855
 の群から選択され、ここで、
ｎ’は、１、２、３および４から選択され、
Ｒ８は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、−Ｏ−ベンジル、−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよびＣＦ３から選択され、
Ｒ９は、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、
Figure 2020055855
 から選択され、
Ｒ１０は、ＨおよびＣＨ３から選択され、
Ｒ１１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ１２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよび−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルから選択される。
詳細な説明
本明細書における一実施形態は、Ｒ１がＨであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびｎ’を含めた、他の変数（ｖａｒｉａｂｌｅ）がすべて、式（Ｉ）について上で定義されているとおりである、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む。
本明細書における別の実施形態は、Ｒ２がＨであり、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびｎ’を含めた、他の変数がすべて、式（Ｉ）について上で定義されているとおりである、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む。
本明細書におけるさらなる実施形態は、Ｒ１とＲ２の両方がＨであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびｎ’を含めた、他の変数がすべて、式（Ｉ）について上で定義されているとおりである、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む。
本明細書におけるさらに別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５のいずれもＨであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびｎ’を含めた、他の変数がすべて、式（Ｉ）について上で定義されているとおりである、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む。
本明細書における別の別々の実施形態は、Ｒ１とＲ２の両方がＨであり、Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびｎ’を含めた、他の変数がすべて、式（Ｉ）について上で定義されているとおりである、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む。
本明細書における別の別々の実施形態は、Ｒ１とＲ２の両方がＨであり、Ｒ３がＦであり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびｎ’を含めた、他の変数はすべて、式（Ｉ）について上で定義されているとおりである、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む。
本明細書において提供される別の実施形態は、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩
Figure 2020055855
 を含み、式中、
Ｒ３は、ＯＨまたはＦであり、
Ｒ４は、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキル、アジド、ハロゲンまたはＣ１〜Ｃ２ハロアルキルであり、
Ｒ５は、Ｈおよび
Figure 2020055855
 の群から選択され、ここで、
ｎ’は、１、２、３および４から選択され、
Ｒ８は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、−Ｏ−ベンジル、−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよびＣＦ３から選択され、
Ｒ９は、フェニルであり、
Ｒ１０は、ＨおよびＣＨ３から選択され、
Ｒ１１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ１２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよび−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルから選択される。
さらなる実施形態は、
Ｒ３が、ＯＨまたはＦであり、
Ｒ４が、ＣＮ、メチル、エチル、エテニル、エチニル、アジド、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２または−ＣＦ３であり、
Ｒ５、および他の基のすべてが、式（ＩＩ）について定義されているとおりである、
式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む。
同様に、Ｒ３がＦである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ３がＯＨである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ３がＦであり、Ｒ４がＣＮである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がＣＮである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ１とＲ２の両方がＨであり、Ｒ３がＦであり、Ｒ４がメチル、エチル、ビニルまたはエチニルである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がメチル、エチル、ビニルまたはエチニルである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ３がＦであり、Ｒ４がハロメチルである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がハロメチルである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ５がＨである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、各Ｒ５がＨであり、Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がメチル、エチル、ビニルまたはエチニルである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ５がＨであり、Ｒ３がＦであり、Ｒ４がハロメチルである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｒ５がＨであり、Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がハロメチルである、上記の、式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む実施形態が提供される。
Ｒ５がＨ以外であってもよい式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む上記実施形態の各々の範囲内に、他の変数のすべてが、その実施形態について記載されているとおりであり、Ｒ５が、
Figure 2020055855
Figure 2020055855
 の群から選択され、式中、
Ｒ８は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジルおよび−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルから選択され、
Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよび−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルから選択される、さらなる実施形態が存在する。
直前に記載されている実施形態の各々の範囲内に、Ｒ８およびＲ９がそれぞれＣ１〜Ｃ
８アルキルから選択されることを除き、他の変数のすべてが直前に記載されているとおりである式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含むさらなる実施形態が存在する。直前の文に記載されている実施形態の各々の範囲内に、Ｒ８およびＲ９がそれぞれＣ１〜Ｃ６アルキルから選択されることを除き、他の変数のすべてが直前に記載されているとおりである式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含むさらなる実施形態が存在する。直前の文に記載されている実施形態の各々の範囲内に、Ｒ８およびＲ９がそれぞれＣ１〜Ｃ５アルキルから選択されることを除き、他の変数のすべてが直前に記載されているとおりである式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含むさらなる実施形態が存在する。直前の文に記載されている実施形態の各々の範囲内に、Ｒ８およびＲ９がそれぞれＣ１〜Ｃ４アルキルから選択されることを除き、他の変数のすべてが直前に記載されているとおりである式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含むさらなる実施形態が存在する。
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物を含む、本明細書に記載されている実施形態の各々の範囲内に、すべての変数が特定の実施形態について定義されているとおりであり、Ｒ３がＦである場合、Ｒ４はメチルではないという条件をさらに含む、さらなる実施形態が存在する。
定義
用語ハロおよびハロゲンは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択されるハロゲン原子を指す。
「アジド」はアジド基、すなわち−Ｎ３基を指す。用語「ｎ」は、本明細書で使用する場合、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９および２０、すなわち２から２０または２〜２０から選択される整数などの整数を指す。一部の例では、「ｎ」は、１〜３、１〜４、１〜６、１〜８、２〜４、２〜６、２〜８などの整数の群を指す。
用語「ハロアルキル」は、本明細書で使用する場合、１個または複数の水素原子がハロ置換基によってそれぞれ置きかえられている、本明細書において定義されているとおりのアルキルを指す。例えば、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロアルキルは、１個または複数の水素原子がハロ置換基によって置きかえられた、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである。こうした範囲には、アルキル基ｔ上のハロ置換基１個からアルキル基の完全なハロゲン化までが含まれる。
ｎが、単独または別のラジカルとの組合せのどちらかで整数である、用語「（Ｃ１〜ｎ）ハロアルキル」は、本明細書で使用する場合、上で定義されている１〜ｎ個の炭素原子を有するアルキルラジカルであって、１個または複数の水素原子がハロ置換基によってそれぞれ置きかえられている、アルキルラジカルを意味することが意図されている。ｎが２である（Ｃ１〜ｎ）ハロアルキルの例には、以下に限定されないが、クロロメチル、クロロエチル、ジクロロエチル、ブロモメチル、ブロモエチル、ジブロモエチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、フルオロエチルおよびジフルオロエチルが含まれる。
ｎが、単独または別のラジカルとの組合せのどちらかで整数である、用語「（Ｃ１〜ｎ）アルキル」は、本明細書で使用する場合、１〜ｎ個の炭素原子を含有する非環式、直鎖または分枝鎖アルキルラジカルを意味することが意図されている。「（Ｃ１〜４）アルキル」には、以下に限定されないが、メチル、エチル、プロピル（ｎ−プロピル）、ブチル（ｎ−ブチル）、１−メチルエチル（ｉｓｏ−プロピル）、１−メチルプロピル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチルプロピル（ｉｓｏ−ブチル）、および１，１−ジメチルエチル（ｔｅｒｔ−ブチルまたはｔ−ブチル）が含まれる。略語Ｍｅはメチル基を意味する。Ｅｔ
はエチル基を意味し、Ｐｒはプロピル基を意味し、ｉＰｒは１−メチルエチル基を意味し、Ｂｕはブチル基を意味し、ｔＢｕは１，１−ジメチルエチル基を意味する。
用語「アルキル」は、ノルマル、第二級または第三級原子を含有する炭化水素を指す。例えば、アルキル基は、１〜４個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル）、１〜３個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル）または１個もしくは２個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ２）アルキル）を有することができる。適切なアルキル基の例には、以下に限定されないが、メチル（Ｍｅ、−ＣＨ３）、エチル（Ｅｔ、−ＣＨ２ＣＨ３）、１−プロピル（ｎ−Ｐｒ、ｎ−プロピル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−プロピル（ｉ−Ｐｒ、ｉ−プロピル、−ＣＨ（ＣＨ３）２）、１−ブチル（ｎ−Ｂｕ、ｎ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−１−プロピル（ｉ−Ｂｕ、ｉ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−ブチル（ｓ−Ｂｕ、ｓ−ブチル、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）および２−メチル−２−プロピル（ｔ−Ｂｕ、ｔ−ブチル、−Ｃ（ＣＨ３）３）が含まれる。「アルキル」はまた、親アルカンの同一または２個の異なる炭素原子から２個の水素原子を除去することにより誘導される、一価のラジカル中心を２個有する飽和の分枝鎖または直鎖炭化水素ラジカルを指す。典型的なアルキルラジカルには、以下に限定されないが、メチレン（−ＣＨ２−）、１，１−エチル（−ＣＨ（ＣＨ３）−）、１，２−エチル（−ＣＨ２ＣＨ２−）、１，１−プロピル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）−）、１，２−プロピル（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−）、１，３−プロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、１，４−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）などが含まれる。
「アルケニル」は、少なくとも一つの不飽和部位、すなわち炭素−炭素ｓｐ２二重結合を有するノルマル、第二級または第三級炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖の炭化水素である。例として、アルケニル基は、２〜４個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル）または２〜３個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ３アルケニル）を有することができる。適切なアルケニル基の例には、以下に限定されないが、エチレンまたはビニル（−ＣＨ＝ＣＨ２）およびアリル（−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）が含まれる。
ｎが、単独または別のラジカルとの組合せのどちらかで整数である、用語「（Ｃ２〜ｎ）アルケニル」は、本明細書で使用する場合、２〜ｎ個の炭素原子を含有する不飽和の非環式直鎖または分枝鎖ラジカルであって、これらの炭素原子の少なくとも２個が、二重結合により互いに結合している、ラジカルを意味することが意図されている。こうしたラジカルの例には、以下に限定されないが、エテニル（ビニル）、１−プロペニル、２−プロペニルおよび１−ブテニルが含まれる。特に明記しない限り、用語「（Ｃ２〜ｎ）アルケニル」は、以下に限定されないが（Ｅ）および（Ｚ）異性体、ならびにそれらの混合物を含めた、可能な個々の立体異性体を包含することが理解される。（Ｃ２〜ｎ）アルケニル基が置換されている場合、特に明記しない限り、置換により化学的に安定な化合物、例えば当業者によって認識されている化合物が生じるよう、該（Ｃ２〜ｎ）アルケニル基は、水素原子をそうでない場合には有するその任意の炭素原子上で置換されていると理解される。
「アルキニル」は、少なくとも一つの不飽和部位、すなわち炭素−炭素ｓｐ三重結合を有するノルマル、第二級または第三級炭素原子を含有する、直鎖または分枝鎖の炭化水素である。例えば、アルキニル基は、２〜４個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル）または２〜３個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ３アルキン）を有することができる。適切なアルキニル基の例には、以下に限定されないが、アセチレン（−Ｃ≡ＣＨ）、プロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）などが含まれる。
ｎが、単独または別のラジカルとの組合せのどちらかで整数である、用語「（Ｃ２〜ｎ）アルキニル」は、本明細書で使用する場合、２〜ｎ個の炭素原子を含有する不飽和の、
非環式、直鎖または分枝鎖ラジカルであって、これらの炭素原子の少なくとも２個が、三重結合により互いに結合している、ラジカルを意味することが意図されている。ｎが４である、こうしたラジカルの例には、以下に限定されないが、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニルおよび１−ブチニルが含まれる。（Ｃ２〜ｎ）アルキニル基が置換されている場合、特に明記しない限り、置換により化学的に安定な化合物、例えば当業者によって認識されている化合物が生じるよう、該（Ｃ２〜ｎ）アルキニル基は、水素原子をそうでない場合には有するその任意の炭素原子上で置換されていると理解される。
用語シクロアルキルは、環式脂肪族基を指す。シクロアルキル基は、本明細書では、３個もしくは４個の炭素環原子を有するシクロアルキル環を指す「Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキル」、または３個、４個、５個もしくは６個の炭素環原子を有するシクロアルキル環を示す「Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル」、すなわちシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル環など、それらの環中の炭素原子数によって参照されてもよい。
用語「炭素環」または「カルボシクリル」は、単環式環系として３〜４個の炭素原子または３〜６個の炭素原子などの指定された炭素原子数を有する、飽和（すなわち、シクロアルキル）、または部分不飽和（例えば、シクロアルケニル、シクロアルカジエニルなど）環を指す。一実施形態では、炭素環は、３〜６個の環炭素（すなわち、（Ｃ３〜Ｃ６）炭素環）を含む単環である。単環式炭素環の非限定例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、１−シクロペンタ−１−エニル、１−シクロペンタ−２−エニル、１−シクロペンタ−３−エニル、シクロヘキシル、１−シクロヘキサ−１−エニル、１−シクロヘキサ−２−エニル、１−シクロヘキサ−３−エニルおよびシクロヘキサ−１，３−ジエニル環が含まれる。
カルボシクリル基はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）２、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、および−ＣＦ３から独立して選択される、０、１、２または３個の置換基により置換されていてもよい。
医薬製剤
同様に、薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステル、ならびに薬学的に許容される担体または添加剤を含む医薬製剤が本明細書において提供される。同様に、別々の医薬製剤であって、その各々が、薬学的に有効な量の式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステル、ならびに薬学的に許容される担体または添加剤を含む、医薬製剤が提供される。
本明細書における化合物は、通常の作業に従って選択される、従来の担体および添加剤と共に製剤化される。錠剤は、添加剤、流動促進剤、充填剤、バインダーなどを含有する。水性製剤は、無菌形態で調製され、そして、経口投与以外の投与による送達が意図されている場合、一般に等張である。製剤はすべて、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ」（１９８６年）において説明されている添加剤などの添加剤を任意選択で含有する。添加剤には、アスコルビン酸および他の抗酸化剤、ＥＤＴＡなどのキレート剤、デキストラン、ヒドロキシアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルメチルセルロース、ステアリン酸などの炭水化物などが含まれる。製剤のｐＨは、約３〜約１１の範囲であるが、通常、約７〜１０である。
活性成分は、単独で投与することが可能であるが、それらを医薬製剤として提供することが望ましいことがある。獣医学的およびヒト使用のための製剤はどちらも、上で定義さ
れている少なくとも１種の活性成分を、１種または複数種の許容可能な担体、および任意選択で他の治療成分、特に、本明細書において議論されている追加の治療成分と一緒に含む。担体は、製剤の他の成分と適合し、かつそのレシピエントにとって生理的に無害であるという意味において、「許容される」ものでなければならない。
製剤には、上記の投与経路に適したものが含まれる。製剤は、単位剤形で提供されるのが好都合であることがあり、薬学分野において周知の方法のいずれかによって調製されてもよい。技法および製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ）において一般に見いだされる。こうした方法は、活性成分と、１種または複数種の補助成分を構成する担体との会合に至らせるステップを含む。一般に、製剤は、活性成分と、液体担体もしくは微粉化固体担体、またはそれらの両方とを均一かつ十分な会合に至らせ、次に必要に応じて製品に成形することにより調製される。
経口投与に適した製剤は、カプセル剤、カシェ剤または錠剤などの別個の単位として提供されてもよく、これらはそれぞれ、粉末もしくは顆粒として、水性液体もしくは非水性液体の溶液もしくは懸濁物として、または水中油型液状エマルションもしくは油中水型液状エマルションとして、所定量の活性成分を含有している。活性成分はまた、ボーラス剤、舐剤またはペースト剤として投与されてもよい。
錠剤は、任意選択で１種または複数種の補助成分と共に、圧縮または成形することにより作製される。圧縮錠剤は、任意選択で、バインダー、滑沢剤、不活性賦形剤、保存剤、表面活性剤または分散剤と混合した、粉末または顆粒などの流動形態の活性成分を、適切な機械で圧縮することにより調製することができる。成形錠剤は、適切な機械で、不活性液状賦形剤により湿潤させた粉末化活性成分の混合物を成形することにより作製することができる。錠剤は、任意選択でコーティングされていても刻印がされていてもよく、任意選択で、活性成分のそこからの放出が遅延または制御されるよう、製剤化される。
眼または他の外部組織、例えば、口腔および皮膚の感染の場合、製剤は、活性成分を、例えば、０．０７５〜２０％ｗ／ｗ（０．６％ｗ／ｗ、０．７％ｗ／ｗなどの０．１％ｗ／ｗきざみで、０．１％〜２０％の間の範囲の活性成分を含む）、好ましくは０．２〜１５％ｗ／ｗ、最も好ましくは０．５〜１０％ｗ／ｗの量で含有している局所用軟膏剤またはクリーム剤として、好ましくは施用される。活性成分は、軟膏剤に製剤化される場合、パラフィン性または水混和性軟膏基剤のいずれかと共に用いられ得る。あるいは、活性成分は、水中油型のクリーム基剤を含むクリーム剤に製剤化され得る。
所望の場合、クリーム基剤の水相は、例えば、少なくとも３０％ｗ／ｗの多価アルコール、すなわち２個または２個超のヒドロキシル基を有するアルコール、例えばプロピレングリコール、ブタン１，３−ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００を含む）、ならびにそれらの混合物などを含むことができる。局所用製剤は、皮膚または他の患部から活性成分の吸収または浸透を促進する化合物を含むことが望ましいことがある。こうした皮膚浸透促進剤の例には、ジメチルスルホキシドおよび関連類似物が含まれる。
エマルション剤の油相は、公知の方法で公知の成分から構成され得る。相は、単なる乳化剤（他には、エマルジェント（ｅｍｕｌｇｅｎｔ）としても公知である）を含み得るが、望ましくは、少なくとも１種の乳化剤と脂肪もしくは油、または脂肪および油の両方との混合物を含む。好ましくは、親水性乳化剤は、安定剤として作用する親油性乳化剤と一緒に含まれる。油と脂肪の両方を含むことも好ましい。一緒になって、安定剤を含むまたは含まない乳化剤は、いわゆる乳化性ワックスを構成し、油および脂肪と一緒になったワ
ックスは、クリーム状製剤の油性分散相を形成する、いわゆる乳化性軟膏基剤を構成する。
製剤における使用に適したエマルジェントおよびエマルション安定剤には、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、セトステアリルアルコール、ベンジルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリルおよびラウリル硫酸ナトリウムが含まれる。
製剤に適した油または脂肪の選択は、所望の審美的特性を達成することに基づく。クリーム剤は、チューブまたは他の容器からの漏れを防止するのに適した粘ちょう性を有する、好ましくはべたつきがなく、染みが付かず、かつ洗い流しが可能な製品とすべきである。ジイソアジピン酸エステル、ステアリン酸イソセチル、ヤシ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、パルミチン酸２−エチルヘキシルなどの直鎖もしくは分枝鎖の一塩基性または二塩基性アルキルエステル、あるいはＣｒｏｄａｍｏｌ ＣＡＰとして公知の分枝鎖エステルのブレンドが使用されてもよく、最後の三つが好ましいエステルである。これらは、必要とされる特性に応じて、単独で、または組み合わせて使用されてもよい。あるいは、白色軟質パラフィンおよび／または流動パラフィンなどの融点の高い脂質、または他の鉱物油が使用される。
本明細書における医薬製剤は、１種または複数種の薬学的に許容される担体または添加剤、および任意選択で他の治療剤と一緒の組合せを含む。活性成分を含有している医薬製剤は、所期の投与方法に適した任意の形態であってもよい。経口使用に使用される場合、例えば、錠剤、トローチ剤、ロセンジ剤、水性または油性懸濁剤、分散性散剤または粒剤、エマルション剤、硬質もしくは軟質カプセル剤、液剤、シロップ剤またはエリキシル剤が調製され得る。経口使用向け組成物は、医薬組成物の製造に関する技術分野において公知の任意の方法に従って調製することができ、こうした組成物は、口当たりのよい調製物をもたらすために、甘味剤、着香剤、着色剤および保存剤を含めた、１種または複数種の剤を含有していてもよい。錠剤の製造に適した非毒性の薬学的に許容される添加剤との混和物中に活性成分を含有している錠剤が許容可能である。これらの添加剤は、例えば、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなどの不活性賦形剤、トウモロコシデンプンまたはアルギン酸などの顆粒剤および崩壊剤、デンプン、ゼラチンまたはアカシアなどの結合剤、ならびにステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクなどの滑沢剤であってもよい。錠剤は、コーティングされていなくてもよく、または胃腸管における崩壊および吸着を遅延させ、それによってより長期間にわたる持続作用を提供するよう、マイクロカプセル化を含む公知の技法によってコーティングされていてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延物質が、単独またはワックスと共に用いられてもよい。
経口使用用製剤はまた、活性成分が不活性固体賦形剤、例えば、リン酸カルシウムもしくはカオリンと混合されている硬質ゼラチンカプセルとして、あるいは活性成分が、水、またはピーナッツ油、流動パラフィンもしくはオリーブ油などの油性媒体と混合されている軟質ゼラチンカプセルとして与えられてもよい。
水性懸濁剤は、水性懸濁剤の製造に適した添加剤との混和物中に活性物質を含有する。こうした添加剤には、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアカシアゴムなどの懸濁化剤、天然のリン脂質（例えば、レシチン）などの分散剤または湿潤剤、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成
物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導される部分エステルとの縮合生成物（例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）が含まれる。水性懸濁剤はまた、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｐ−ヒドロキシ安息香酸ｎ−プロピルなどの１種または複数種の防腐剤、１種または複数種の着色剤、１種または複数種の着香剤、および１種または複数種の甘味剤（スクロースまたはサッカリンなど）を含有してもよい。
油性懸濁剤は、落花生油、オリーブ油、ゴマ油またはココナッツ油などの植物油中、または流動パラフィンなどの鉱物油中に、活性成分を懸濁させることにより製剤化され得る。経口懸濁剤は、蜜ろう、硬質パラフィンまたはセチルアルコールなどの増粘剤を含有してもよい。上で説明したものなどの甘味剤および着香剤を添加して、口当たりのよい経口調製物をもたらすことができる。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤の添加によって保存することができる。
水を添加することによる、水性懸濁剤の調製に適した分散性散剤および粒剤は、分散剤または湿潤剤、懸濁化剤、および１種または複数種の防腐剤との混和物中に活性成分を提供する。適切な分散剤または湿潤剤、および懸濁化剤は、上に開示されているものによって例示される。さらなる添加剤、例えば甘味剤、着香剤および着色剤も存在してもよい。
医薬組成物また、水中油型エマルション剤の形態であってもよい。油相は、オリーブ油または落花生油などの植物油、流動パラフィンなどの鉱物油、またはこれらの混合物であってもよい。適切な乳化剤には、アカシアゴムおよびトラガカントゴムなどの天然のゴム、大豆レシチンなどの天然のリン脂質、脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導されるエステルまたは部分エステル、例えばモノオレイン酸ソルビタンなど、およびこれらの部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンなどが含まれる。エマルション剤はまた、甘味剤および着香剤を含有してもよい。シロップ剤およびエリキシル剤は、グリセロール、ソルビトールまたはスクロースなどの甘味剤と製剤化され得る。こうした製剤はまた、粘滑剤、防腐剤、着香剤または着色剤を含有することができる。
医薬組成物は、無菌の注射可能な水性または油性懸濁剤などの、無菌の注射可能なまたは静脈用の調製物の形態であり得る。この懸濁剤は、上で明記した、分散剤または湿潤剤、および懸濁化剤に適切なものを使用して、公知技術に従って製剤化することができる。無菌の注射可能なまたは静脈用の調製物はまた、１，３−ブタン−ジオール溶液などの非毒性の非経口として許容される賦形剤または溶媒中の、無菌の注射可能な液剤であっても懸濁剤であってもよく、凍結乾燥粉末として調製されてもよい。用いることができる許容可能なビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、無菌の不揮発性油が溶媒または懸濁媒体として慣例的に用いられ得る。この目的上、合成モノグリセリドまたは合成ジグリセリドを含む任意の無刺激性の不揮発性油を用いてもよい。さらに、オレイン酸などの脂肪酸も同様に、注射可能物質の調製において同様に使用することができる。
単一剤形を生産するための担体用物質と組み合わせることができる活性成分の量は、処置される宿主および特定の投与形式に応じて、様々である。例えば、ヒトへの経口投与が意図されている徐放性製剤は、総組成物の約５〜約９５％（重量：重量）で変わり得る適切かつ好都合な量の担体用物質と配合した活性物質を約１〜１０００ｍｇ含有し得る。医薬組成物は、投与のために容易に測定可能な量を提供するよう調製することができる。例えば、静脈内注入が意図されている水性液剤は、約３０ｍＬ／時の速度で適切な容量の注入が起き得ることを目的に、液剤１ミリリットルあたり約３〜５００μｇの活性成分を含有し得る。
眼への局所投与に適した製剤には、活性成分にとって適切な担体中、とりわけ水性溶媒中に活性成分が溶解しているかまたは懸濁している、点眼剤も含まれる。活性成分は、０．５〜２０％、有利には０．５〜１０％、特に約１．５％ｗ／ｗの濃度で、こうした製剤中に好ましくは存在している。
口腔における局所投与に適した製剤は、風味付けされた基剤、通常、スクロースおよびアカシア、またはトラガカント中に活性成分を含むロゼンジ剤；ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアなどの不活性基剤中に活性成分を含むパステル剤；ならびに適切な液体担体中に活性成分を含む洗口剤を含む。
直腸投与用の製剤は、例えば、カカオ脂またはサリチレートを含む適切な基剤を含む坐剤として提供され得る。
肺内または鼻腔の投与に適した製剤は、例えば、０．５、１、３０、３５などの０．１〜５００ミクロンの範囲の粒径を有しており、この製剤は、肺胞嚢に到達するよう、鼻道を通しての迅速吸入によってまたは口腔を通しての吸入によって投与される。適切な製剤には、活性成分の水性または油性液剤が含まれる。エアゾール剤または乾燥粉末剤の投与に適した製剤は、従来の方法に従って調製することができ、以下に記載されている、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅ感染の処置または予防において、これまで使用されている化合物などの他の治療剤と共に送達され得る。
別の実施形態は、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅ感染、および潜在的に関連性のある細気管支炎を処置するのに適した、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む、新規の、有効であり、安全であり、非刺激性であり、生理的に適合可能である吸入可能な組成物を提供する。好ましい薬学的に許容される塩は、肺への刺激をそれほど引き起こす恐れのない、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩またはリン酸塩を含めた無機酸塩である。好ましくは、吸入可能な製剤は、約１〜約５μｍの間の空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）を有する粒子を含むエアゾール剤中で、気管支内空間に送達される。好ましくは、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、ネブライザー、加圧式定量式噴霧器（ｐＭＤＩ）、または乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）を使用した、エアゾール剤送達用に製剤化される。
ネブライザーの非限定例には、噴霧式、ジェット式、超音波式、加圧式、振動式多孔質プレート、または適応できるエアゾール送達技術を利用するものを含めた同等のネブライザーが含まれる（Ｄｅｎｙｅｒ， Ｊ． Ａｅｒｏｓｏｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ２０１０年、２３巻、補遺１、Ｓ１〜Ｓ１０頁）。ジェット式ネブライザーは、空気圧を利用し、液状溶液を破壊してエアゾール液滴にする。超音波式ネブライザーは、液体を小さなエアゾール液滴にせん断する圧電性結晶により作動する。加圧式噴霧化システムは、加圧下にある溶液を、小さな細孔に強制的に通して、エアゾール液滴を発生させる。振動式多孔質プレートの装置は、迅速な振動を利用して、液流を適切な液滴サイズにせん断する。
好ましい実施形態では、噴霧化用製剤は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物の製剤をエアゾール化して必要なＭＭＡＤの粒子にすることが可能なネブライザーを使用して、主に約１μｍ〜約５μｍの間のＭＭＡＤを有する粒子を含むエアゾール中で、気管支内空間に送達される。最適な治療有効性とし、かつ気道上部および全身の副作用を回避するために、エアゾール化粒子の大部分は、約５μｍより大きなＭＭＡＤを有するべきではない。エアゾールが、５μｍより大きなＭＭＡＤを有する粒子を多数含有する場合、粒子は気道上部に堆積し、これにより、下気道における炎症および気管支収縮の部位に送達される薬
物量が低下する。エアゾールのＭＭＡＤが、約１μｍより小さい場合、粒子は、吸入空気中に懸濁した状態のままになる傾向があり、続いて、呼気中に吐き出される。
本明細書における方法に従って製剤化および送達される場合、噴霧化用のエアゾール製剤は、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅ感染を処置するのに十分な治療有効用量の式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物をＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅ感染の部位に送達させる。治療有効用量の式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物を送達する効率を反映するように、投与される薬物の量は調節されなければならない。好ましい実施形態では、水性エアゾール製剤と、噴霧式、ジェット式、加圧式、振動式多孔質プレートまたは超音波式ネブライザーとを組み合わせると、ネブライザーに応じて、投与された式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物の用量の少なくとも約２０〜約９０％、通常、約７０％を気道に送達することが可能になる。好ましい実施形態では、活性化合物の少なくとも約３０〜約５０％が送達される。より好ましくは、活性化合物の約７０〜約９０％が送達される。
別の実施形態では、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、乾燥した吸入可能な粉末として送達される。化合物は、乾燥粉末または定量式噴霧器を使用して、気管支内空間に化合物の微細粒子を効果的に送達する乾燥粉末製剤として、気管支内に投与される。ＤＰＩによる送達の場合、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、ミル粉砕噴霧乾燥、臨界流体処理、または溶液からの沈殿により、約１μｍ〜約５μｍの間のＭＭＡＤを主に有する粒子に加工される。約１μｍ〜約５μｍの間のＭＭＡＤを有する粒径を生成することが可能な、媒体ミル粉砕、ジェットミル粉砕および噴霧乾燥の装置ならびに手順が当技術分野において周知である。一実施形態では、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物に添加剤が加えられた後、必要なサイズの粒子に加工される。別の実施形態では、添加剤は、例えば、添加剤としてラクトースを使用することにより、薬物粒子の分散を補助するのに必要なサイズの粒子とブレンドされる。
粒径の決定は、当技術分野において周知の装置を使用して行われる。例えば、多段階式アンダーソンカスケードインパクタ（ｍｕｌｔｉ−ｓｔａｇｅ Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｃａｓｃａｄｅ ｉｍｐａｃｔｏｒ）、または定量式噴霧器および乾燥粉末吸入器内部のエアゾールのための装置を特徴付けるものとして、米国薬局方第６０１章中に具体的に引用されているものなどの他の適切な方法。
別の好ましい実施形態では、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、乾燥粉末吸入器または他の乾燥粉末分散装置などの装置を使用して、乾燥粉末として送達される。乾燥粉末吸入器および装置の非限定例には、ＵＳ５，４５８，１３５、ＵＳ５，７４０，７９４、ＵＳ５７７５３２０、ＵＳ５，７８５，０４９、ＵＳ３，９０６，９５０、ＵＳ４，０１３，０７５、ＵＳ４，０６９，８１９、ＵＳ４，９９５，３８５、ＵＳ５，５２２，３８５、ＵＳ４，６６８，２１８、ＵＳ４，６６７，６６８、ＵＳ４，８０５，８１１およびＵＳ５，３８８，５７２において開示されているものが含まれる。乾燥粉末吸入器の設計は、主に二つある。設計の一つは、薬物用レザーバーが装置内部に置かれている定量装置であり、患者は、吸入チャンバに一用量の薬物を加える。第２の設計は、個々の用量がそれぞれ、別々の容器中で製造された、工場内で定量された装置である。両システムは、薬物を１μｍ〜約５μｍのＭＭＡＤの小さな粒子にする製剤に依存しており、以下に限定されないが、ラクトースなどのより大きな添加剤の粒子を有する共製剤を含むことが多い。薬物粉末は、吸入チャンバに入れられ（装置での定量によってまたは工場で定量された投薬量の破壊により）、患者の吸気流によって粉末が装置から出て、口腔に入るよう促進される。粉末経路の非層流の特徴によって、添加剤−薬物の凝集物の分解が引き起こされ、大きな添加剤粒子の塊は、喉の奥への固着を引き起こす一方、より小さな薬物の粒子は、肺の深部に堆積する。好ましい実施形態では、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、本明細書に記載されている乾燥粉末吸入器のいずれかの
タイプを使用して、乾燥粉末として送達され、この場合、いかなる添加剤も除く乾燥粉末のＭＭＡＤは、主に、１μｍ〜約５μｍの範囲にある。
別の実施形態では、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、定量式噴霧器を使用して、乾燥粉末として送達される。定量式噴霧器および装置の非限定例には、ＵＳ５，２６１，５３８、ＵＳ５，５４４，６４７、ＵＳ５，６２２，１６３、ＵＳ４，９５５，３７１、ＵＳ３，５６５，０７０、ＵＳ３，３６１３０６およびＵＳ６，１１６，２３４において開示されているものが含まれる。好ましい実施形態では、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩は、定量式噴霧器を使用して、乾燥粉末として送達され、この場合、いかなる添加剤も除く乾燥粉末のＭＭＡＤは、主に、約１〜５μｍの範囲にある。
膣投与に適した製剤は、活性成分に加えて、当技術分野において適切であることが公知である担体を含有するペッサリー剤、タンポン剤、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤またはスプレー製剤として提供されてもよい。
非経口投与に適した製剤には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌薬、および製剤を所期のレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る、水性および非水性の無菌注射液剤、ならびに懸濁化剤および増粘剤を含み得る水性および非水性の無菌懸濁剤が含まれる。
製剤は、単位用量または多回用量の容器、例えば密封したアンプルおよびバイアル中で提供され、そして、使用の直前に、無菌液体担体、例えば注射用水の添加しか必要としない冷凍乾燥（凍結乾燥）状態で保管され得る。即時の注射液剤および懸濁剤が、既に記載されている種類の無菌の散剤、粒剤および錠剤から調製される。好ましい単位投薬量製剤は、本明細書の上で列挙されている、活性成分の一日量もしくは一日量未満の単位用量、またはその適切な分割量を含有するものである。
特に上記の成分に加え、製剤は、問題となる製剤のタイプを考慮して、当技術分野で慣用的な他の剤を含むことができ、例えば、経口投与に適したものは着香剤を含んでもよいことを理解すべきである。
獣医学的組成物がさらに提供され、該獣医学的組成物は、上で定義されている少なくとも１種の活性成分を、そのための獣医学的担体と一緒に含む。
獣医学的担体は、組成物を投与する目的に対して有用な物質であり、そして、そうでない場合には不活性であるかまたは獣医学の技術分野において許容可能であり、かつ活性成分と適合可能な、固体、液体または気体の物質であり得る。これらの獣医学的組成物は、経口、非経口、または任意の他の所望の経路によって投与され得る。
本明細書における化合物は、より低い頻度での投薬を可能にするかまたは所与の活性成分の薬物動態もしくは毒性プロファイルを改善するように活性成分の放出が制御および調整される化合物の一つまたは複数を活性成分として含有する制御放出医薬製剤（「制御放出製剤」）を提供するために使用される。
活性成分の有効用量は、処置されている状態の性質、毒性、化合物が予防的に（低用量）または進行中のウイルス感染に対して使用されているのか、送達方法、および医薬製剤に少なくとも依存し、従来の用量漸増研究を使用して、臨床医により決定される。それは、１日あたり約０．０００１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重、典型的には、１日あたり約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、より典型的には、１日あたり約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇ体重、最も典型的には、１日あたり約０．０５〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重となることが予
想され得る。例えば、約７０ｋｇの体重の成人用の１日あたりの候補用量は、１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは５ｍｇ〜５００ｍｇの間の範囲となり、単回または多回用量の形態をとることができる。
投与経路
化合物（本明細書では、活性成分と呼ばれる）の一つまたは複数は、処置される状態に適した任意の経路により投与される。適切な経路には、経口、直腸、鼻腔、肺、局所（口腔および舌下を含む）、膣および非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、髄膜内および硬膜外を含む）などが含まれる。好ましい経路は、例えば、レシピエントの状態に応じて様々であり得ることが理解される。本明細書における化合物の優位性は、それらが経口で生体利用可能である点、および経口投薬され得る点である。
併用療法
組成物はまた、他の活性成分と組み合わせて使用される。Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染の処置の場合、好ましくは、他の活性治療剤は、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染、特に呼吸器合胞体ウイルス感染に対して活性である。こうした他の活性治療剤の非限定例は、リバビリン、パリビズマブ、モタビズマブ、ＲＳＶ−ＩＧＩＶ（ＲｅｓｐｉＧａｍ（登録商標））、ＭＥＤＩ−５５７、Ａ−６０４４４（ＲＳＶ６０４としても公知）、ＭＤＴ−６３７、ＢＭＳ−４３３７７１、ＡＬＮ−ＲＳＶ０、ＡＬＸ−０１７１、およびそれらの混合物である。
Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルスの感染の多くは、呼吸器感染である。したがって、呼吸器の症状および感染の後遺症を処置するために使用される追加の活性な治療薬が、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物と組み合わせて使用されてもよい。追加の剤は、好ましくは、経口または直接吸入により投与される。例えば、ウイルス性呼吸器感染を処置するための、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物と組み合わされる、他の好ましい追加の治療剤には、以下に限定されないが、気管支拡張剤およびコルチコステロイドが含まれる。
１９５０年（Ｃａｒｒｙｅｒ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｌｌｅｒｇｙ、２１巻、２８２〜２８７頁、１９５０年）に喘息治療として最初に導入された、グルココルチコイドは、依然として最も強力であり、一貫してこの疾患の有効な治療法であり続けているが、その作用機序は、依然として十分に理解されていない（Ｍｏｒｒｉｓ、Ｊ． Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．、７５巻（１号）１〜１３頁、１９８５年）。不運なことに、経口グルココルチコイド療法は、体幹肥満、高血圧、緑内障、グルコース不耐性、白内障形成の促進、骨ミネラルの減少、および心理的影響などの深刻な望ましくない副作用を伴い、それらはすべて、長期治療剤としてのその使用を制限している（ＧｏｏｄｍａｎおよびＧｉｌｍａｎ、第１０版、２００１年）。全身性副作用への解決策は、炎症部位にステロイド薬を直接、送達することである。吸入コルチコステロイド（ＩＣＳ）は、経口ステロイドの重度の有害効果を緩和するために開発された。式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物と組み合わせて使用することができるコルチコステロイドの非限定例は、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、フルオロメトロン、酢酸フルオロメトロン、ロテプレドノール、ロテプレドノールエタボネート、ヒドロコルチゾン、プレドニゾロン、フルドロコルチゾン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、ベタメタゾン、ベクロメタゾンジプロピオネート（ｂｅｃｌｏｍｅｔｈａｓｏｎｅ ｄｉｐｒｏｐｒｉｏｎａｔｅ）、メチルプレドニゾロン、フルオシノロン、フルオシノロンアセトニド、フルニソリド、フルオコルチン−２１−ブチレート、フルメタゾン、ピバル酸フルメタゾン、ブデソニド、プロピオン酸ハロベタソール、フロ酸モメタゾン、プロピオン酸フルチカゾン、シクレソニド、または薬学的に許容されるそれらの塩である。
抗炎症性カスケードメカニズムを通して作用する他の抗炎症剤もまた、ウイルス性呼吸
器感染の処置のために、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物と組み合わせる追加の治療剤として有用である。ホスホジエステラーゼ阻害剤（例えば、ＰＤＥ−４、ＰＤＥ−５またはＰＤＥ−７特異的）、転写因子阻害剤（例えば、ＩＫＫ阻害によりＮＦκＢを遮断する）またはキナーゼ阻害剤（例えば、Ｐ３８ＭＡＰ、ＪＮＫ、ＰＩ３Ｋ、ＥＧＦＲまたはＳｙｋを遮断する）のような、「抗炎症シグナル伝達モジュレーター」（本文では、ＡＩＳＴＭと呼ばれる）の施用は、これらの小分子が、限られた数の共通する細胞内経路、すなわち抗炎症の治療的干渉にとっての臨界点であるシグナル伝達経路しか標的としないので、炎症のスイッチを切る論理的な手法である（Ｐ．Ｊ． Ｂａｒｎｅｓ、２００６年による総説を参照されたい）。これらの非限定的な追加の治療剤には、５−（２，４−ジフルオロ−フェノキシ）−１−イソブチル−１Ｈ−インダゾール−６−カルボン酸（２−ジメチルアミノ−エチル）−アミド（Ｐ３８Ｍａｐキナーゼ阻害剤ＡＲＲＹ−７９７）；３−シクロプロピルメトキシ−Ｎ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−４−ジフルオロメトキシ（ｄｉｆｌｕｏｒｏｒｍｅｔｈｏｘｙ）−ベンズアミド（ＰＤＥ−４阻害剤であるロフルミラスト）；４−［２−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）−２−フェニル−エチル］−ピリジン（ＰＤＥ−４阻害剤であるＣＤＰ−８４０）；Ｎ−（３，５−ジクロロ−４−ピリジニル）−４−（ジフルオロメトキシ）−８−［（メチルスルホニル）アミノ］−１−ジベンゾフランカルボキサミド（ＰＤＥ−４阻害剤であるオグレミラスト）；Ｎ−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（ＰＤＥ−４阻害剤であるＡＷＤ１２−２８１）；８−メトキシ−２−トリフルオロメチル−キノリン−５−カルボン酸（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−アミド（ＰＤＥ−４阻害剤であるＳｃｈ３５１５９１）；４−［５−（４−フルオロフェニル）−２−（４−メタンスルフィニル−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン（Ｐ３８阻害剤であるＳＢ−２０３８５０）；４−［４−（４−フルオロ−フェニル）−１−（３−フェニル−プロピル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ブタ−３−イン−１−オール（Ｐ３８阻害剤であるＲＷＪ−６７６５７）；４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシ−フェニル）−シクロヘキサンカルボン酸２−ジエチルアミノ−エチルエステル（シロミラストの２−ジエチル−エチルエステルプロドラッグ、ＰＤＥ−４阻害剤）；（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−［７−メトキシ−６−（３−モルホリン−４−イル−プロポキシ）−キナゾリン−４−イル］−アミン（ゲフィチニブ、ＥＧＦＲ阻害剤）；および４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（イマチニブ、ＥＧＦＲ阻害剤）が含まれる。
ホルモテロール、アルブテロールまたはサルメテロールなどの吸入β２−アドレノ受容体アゴニスト気管支拡張剤と式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物とを含む組合せもまた、非限定的ではあるが、呼吸器のウイルス感染の処置に有用な、好適な組合せである。
ホルモテロールまたはサルメテロールなどの吸入β２−アドレノ受容体アゴニスト気管支拡張剤とＩＣＳとの組合せもまた、気管支収縮および炎症の両方を処置するために使用される（それぞれ、Ｓｙｍｂｉｃｏｒｔ（登録商標）およびＡｄｖａｉｒ（登録商標））。式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物と共に、これらのＩＣＳとβ２−アドレノ受容体アゴニストとの組合せを含む組合せもまた、非限定的ではあるが、呼吸器のウイルス感染の処置に有用な、好適な組合せである。
肺の気管支収縮を処置または予防する場合、抗コリン作用薬が使用可能であり、したがって、ウイルス性呼吸器感染を処置するために、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物と組み合わせる、追加の治療剤として有用である。これらの抗コリン作用薬には、以下に限定されないが、ＣＯＰＤにおけるコリン作動性トーンを制御するために、男性において治療
有効性を示した（特に、Ｍ３サブタイプの）ムスカリン受容体のアンタゴニスト（Ｗｉｔｅｋ、１９９９年）である、１−｛４−ヒドロキシ−１−［３，３，３−トリス−（４−フルオロ−フェニル）−プロピオニル］−ピロリジン−２−カルボニル｝−ピロリジン−２−カルボン酸（１−メチル−ピペリジン−４−イルメチル）−アミド、３−［３−（２−ジエチルアミノ−アセトキシ）−２−フェニル−プロピオニルオキシ］−８−イソプロピル−８−メチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタン（イプラトロピウム−Ｎ，Ｎ−ジエチルグリシネート）、１−シクロヘキシル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸１−アザ−ビシクロ［２．２．２］オクタ−３−イルエステル（ソリフェナシン）、２−ヒドロキシメチル−４−メタンスルフィニル−２−フェニル−酪酸１−アザ−ビシクロ［２．２．２］オクタ−３−イルエステル（レバトロペート）、２−｛１−［２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾフラン−５−イル）−エチル］−ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニル−アセトアミド（ダリフェナシン）、４−アゼパン−１−イル−２，２−ジフェニル−ブチルアミド（ブゼピド（Ｂｕｚｅｐｉｄｅ））、７−［３−（２−ジエチルアミノ−アセトキシ）−２−フェニル−プロピオニルオキシ］−９−エチル−９−メチル−３−オキサ−９−アゾニア−トリシクロ［３．３．１．０２，４］ノナン（オキシトロピウム−Ｎ，Ｎ−ジエチルグリシネート）、７−［２−（２−ジエチルアミノ−アセトキシ）−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−アセトキシ］−９，９−ジメチル−３−オキサ−９−アゾニア−トリシクロ［３．３．１．０２，４］ノナン（チオトロピウム−Ｎ，Ｎ−ジエチルグリシネート）、ジメチルアミノ−酢酸２−（３−ジイソプロピルアミノ−１−フェニル−プロピル）−４−メチル−フェニルエステル（トルテロジン−Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシネート）、３−［４，４−ビス−（４−フルオロ−フェニル）−２−オキソ−イミダゾリジン−１−イル］−１−メチル−１−（２−オキソ−２−ピリジン−２−イル−エチル）−ピロリジニウム、１−［１−（３−フルオロ−ベンジル）−ピペリジン−４−イル］−４，４−ビス−（４−フルオロ−フェニル）−イミダゾリジン−２−オン、１−シクロオクチル−３−（３−メトキシ−１−アザ−ビシクロ［２．２．２］オクタ−３−イル）−１−フェニル−プロパ−２−イン−１−オール、３−［２−（２−ジエチルアミノ−アセトキシ）−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−アセトキシ］−１−（３−フェノキシ−プロピル）−１−アゾニア−ビシクロ［２．２．２］オクタン（アクリジニウム−Ｎ，Ｎ−ジエチルグリシネート）、または（２−ジエチルアミノ−アセトキシ）−ジ−チオフェン−２−イル−酢酸１−メチル−１−（２−フェノキシ−エチル）−ピペリジン−４−イルエステルが含まれる。
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物はまた、感染と、呼吸器感染の症状の両方を処置するための粘液溶解剤と組み合わされてもよい。粘液溶解剤の非限定例は、アンブロキソールである。同様に、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物は、感染と、呼吸器感染の症状の両方を処置するための去痰薬と組み合わされてもよい。去痰薬の非限定例は、グアイフェネシンである。
肺疾患を有する患者において小気道の即時および長期クリアランスを改善するために、噴霧状の高張食塩水が使用されている（Ｋｕｚｉｋ、Ｊ． Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ ２００７年、２６６頁）。式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物はまた、特に、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染が細気管支炎を併発する場合、噴霧状の高張食塩水と組み合わせることができる。式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物と高張食塩水との組合せはまた、上で議論した追加の剤のいずれかを含み得る。一実施形態では、約３％の噴霧状の高張食塩水が使用される。
患者へ同時または逐次投与するために、単一剤形中に、任意の化合物を１種または複数種の追加の活性治療剤と組み合わせることも可能である。併用療法は、同時または逐次レジメンとして投与されてもよい。逐次投与される場合、組合せは、２回または２回超の投与で投与され得る。
本明細書における化合物と１種または複数種の他の活性治療剤との共投与は、一般に、治療有効量の化合物と１種または複数種の他の活性治療剤とが患者の体内にどちらも存在するよう、化合物と１種または複数種の他の活性治療剤とを同時または逐次投与することを指す。
共投与には、１種または複数種の他の活性治療剤の単位投薬量を投与する前または後に、単位投薬量の化合物を投与すること、例えば、１種または複数種の他の活性治療剤を投与した数秒、数分または数時間以内に化合物を投与することが含まれる。例えば、化合物の単位用量を最初に投与し、続いて、数秒または数分以内に、１種または複数種の他の活性治療剤の単位用量を投与することができる。あるいは、１種または複数種の他の治療剤の単位用量が最初に投与され、次いで、数秒または数分以内に、化合物の単位用量を投与することができる。一部の場合、最初に化合物の単位用量を投与し、ある時間（例えば、１〜１２時間）の後に、続いて、１種または複数種の他の活性治療剤の単位用量を投与することが望ましいことがある。他の場合、最初に１種または複数種の他の活性治療剤の単位用量を投与し、ある時間（例えば、１〜１２時間）の後に、続いて、本明細書における化合物の単位用量を投与することが望ましいことがある。
併用療法は、「相乗性」および「相乗的な」を提供することがある。すなわち、活性成分を一緒に使用した場合に実現される効果が、化合物を別々に使用して生じる効果の総和よりも大きい。相乗効果は、活性成分が、（１）共製剤化され投与される、もしくは組合せ製剤として同時に送達される場合、（２）別々の製剤として交互に、もしくは並行して送達される場合、または（３）一部の他のレジメンによるものである場合に達成することができる。交互療法で送達される場合、相乗効果は、化合物が逐次に、例えば、別々の錠剤、丸剤もしくはカプセル剤中で、または別々のシリンジ中での異なる注射により投与または送達される場合に達成され得る。一般に、交互療法中、各活性成分の有効投薬量が逐次、すなわち連続的に投与される一方、併用療法では、有効投薬量の２種または２種超の活性成分が一緒に投与される。相乗的な抗ウイルス効果は、組合せの個々の化合物の、予想される純粋に相加的な効果よりも大きな抗ウイルス効果を意味する。
さらに別の実施形態では、本出願は、ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染を処置する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルをヒトに投与するステップを含む方法を提供する。同様に、ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染を処置する別々の方法であって、その各々が、治療に有効で薬学的に有効な量の式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステル、ならびに薬学的に許容される担体または添加剤をヒトに投与するステップを含む、方法が提供される。
別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくはエステルのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオマー、互変異性体、多形、疑多形、アモルファス形態、水和物または溶媒和物の治療有効量をヒトに投与することによる、ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅ感染を処置する方法が提供される。
Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅ感染の処置を必要とするヒトにおいてＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅ感染を処置する別々の方法であって、各々の方法が、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオマー、互変異性体、多形、疑多形、アモルファス形態、水和物または溶媒和物の治療有効量をヒトに投与するステップを含む、方法がさらに提供される。
さらに別の実施形態では、本出願は、ヒトにおけるヒト呼吸器合胞体ウイルス感染を処置する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルをヒトに投与するステップを含む方法を提供する。
さらに別の実施形態では、本出願は、ヒトにおけるヒト呼吸器合胞体ウイルス感染を処置する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステル、ならびに少なくとも１種の追加の活性治療剤をヒトに投与するステップを含む方法を提供する。
ヒト呼吸器合胞体ウイルス感染の処置を必要とするヒトにおいてヒト呼吸器合胞体ウイルス感染を処置する別々の方法であって、各々の方法が、治療有効量の、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルをヒトに投与するステップを含む、方法がさらに提供される。
同様に、ヒト呼吸器合胞体ウイルス感染の処置を必要とするヒトにおいてヒト呼吸器合胞体ウイルス感染を処置する別々の方法であって、各々の方法が、治療有効量の、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステル、ならびに少なくとも１種の追加の活性治療剤をヒトに投与するステップを含む、方法が提供される。
同様に、ヒト呼吸器合胞体ウイルス感染の処置を必要とするヒトにおいてヒト呼吸器合胞体ウイルス感染を処置する別々の方法であって、ヒトが、細気管支炎にも罹っており、各々の方法が、治療有効量の式（Ｉ）、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルをヒトに投与するステップを含む、方法が提供される。
同様に、ヒト呼吸器合胞体ウイルス感染の処置を必要とするヒトにおいてヒト呼吸器合胞体ウイルス感染を処置する別々の方法であって、ヒトが、肺炎にも罹っており、各々の方法が、治療有効量の式（Ｉ）、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルをヒトに投与するステップを含む、方法が提供される。
同様に、ヒト呼吸器合胞体ウイルス感染に罹っているヒトにおける呼吸器の症状を改善する別々の方法であって、各々の方法が、治療有効量の式（Ｉ）、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルをヒトに投与するステップを含む、方法が提供される。
呼吸器合胞体ウイルス感染に罹っているヒトにおける呼吸器の症状には、鼻詰まりまたは鼻水、咳、ぜいぜい音を立てること、くしゃみ、呼吸促迫または呼吸困難、無呼吸、細気管支炎および肺炎が含まれ得る。
同様に、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染または呼吸器合胞体ウイルス感染を処置するための医薬を製造するための、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルの使用を含む実施形態が提供される。
同様に、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染または呼吸器合胞体ウイルス感染を処置するための医薬を製造するための、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実
施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルの使用を含む実施形態が提供される。
同様に、薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステル、ならびに薬学的に許容される担体または添加剤を含む医薬製剤が提供される。薬学的に有効な量の式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステル、ならびに薬学的に許容される担体または添加剤を含む医薬製剤がさらに提供される。
同様に、薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステル、ならびに薬学的に許容される担体または添加剤、ならびに薬学的に有効な量の少なくとも１種の追加の活性治療剤を含む医薬製剤が提供される。薬学的に有効な量の式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステル、ならびに薬学的に許容される担体または添加剤、ならびに薬学的に有効な量の少なくとも１種の追加の活性治療剤を含む医薬製剤がさらに提供される。
同様に、ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染または呼吸器合胞体ウイルス感染の処置に使用するための、式（Ｉ）、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルを含む別々の実施形態が提供される。
同様に、医薬として使用するための、式（Ｉ）、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルを含む別々の実施形態が提供される。
同様に、式（Ｉ）、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルを使用することを特徴とする、ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染または呼吸器合胞体ウイルス感染の処置が意図されている医薬を製造する方法を含む別々の実施形態が提供される。
同様に、ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染または呼吸器合胞体ウイルス感染を処置するための、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルが提供される。
同様に、ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染または呼吸器合胞体ウイルス感染を処置するための、式（ＩＩ）の化合物もしくは本明細書における実施例の具体的な化合物の一つ、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物および／もしくはエステルを含む別々の実施形態が提供される。
本明細書において記載されている化合物がさらに提供される。同様に、本明細書において記載されている医薬組成物が提供される。同様に、本明細書において記載されている式（Ｉ）の化合物の使用方法が提供される。本明細書において記載されている式（Ｉ）の化合物を作製する方法がさらに提供される。
化合物の代謝物
同様に、本明細書において記載されている化合物のｉｎ ｖｉｖｏでの代謝産物は、当該産物が新規であり、かつ従来技術を超えた自明なものではない限り、本明細書の範囲内
に収まる。当該産物は、例えば、主に酵素過程による、投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、エステル化などに由来し得る。したがって、化合物をその代謝産物が生じるのに十分な時間、哺乳動物に接触させるステップを含むプロセスにより産生される、新規かつ非自明な化合物が含まれる。当該産物は、通常、放射標識されている（例えば、１４Ｃまたは３Ｈ）化合物の調製、化合物の、ラット、マウス、モルモット、サルなどの動物またはヒトへの検出可能な用量（例えば、約０．５ｍｇ／ｋｇを超える）での非経口投与、代謝が起こるのを可能にする十分な時間（通常、約３０秒から３０時間）、および尿、血液または他の生物試料からの化合物の変換産物の単離によって同定される。これらの産物は、標識されているので（他のものは、代謝物中で生き残ったエピトープに結合することが可能な抗体を使用することによって単離される）、容易に単離される。代謝物の構造は、従来の手法、例えば、ＭＳまたはＮＭＲ分析によって決定される。一般に、代謝物の分析は、当業者に周知の従来の薬物代謝研究と同じ方法で行われる。変換産物は、別の方法でｉｎ ｖｉｖｏで見出されない限り、それら自体がＨＳＶ抗ウイルス活性を有していない場合でさえも、化合物を治療的に投薬した場合の診断的アッセイにおいて有用である。
代用胃腸分泌液において化合物の安定性を決定するための策および方法が公知である。化合物は、本明細書では、代用腸液または胃液中、３７℃で１時間インキュベートした際に保護基の約５０モルパーセント未満が脱保護される場合に、胃腸管において安定と定義される。単に化合物が胃腸管に対して安定だからということが、それらがｉｎ ｖｉｖｏで加水分解され得ないことを意味するわけではない。プロドラッグは、通常、消化器系において安定であるが、消化管腔、肝臓、肺もしくは他の代謝性臓器、または一般に細胞内において、親薬物に実質的に加水分解され得る。本明細書で使用する場合、プロドラッグは、経口送達への生物的バリアを乗り越えた後に、親薬物を効率よく遊離させるよう化学的に設計されている化合物であると理解される。
略語
実験の詳細を記載する際に、ある特定の略語および頭字語が使用されている。これらの大部分は、当業者によって理解されるが、表１は、これらの略語および頭字語の多くを一覧表示したものを含んでいる。
Figure 2020055855
Figure 2020055855
一般スキーム
Figure 2020055855
 スキーム１は、核酸塩基Ｓ１ｂを生成するためのヨウ素化反応（例えば、ＮＩＳ）から始まる中間体の一般合成を示している。
Figure 2020055855
 スキーム２は、ＷＯ２０１２０３７０３８Ａ１において記載されている手法と同様の手
法で、中間体Ｓ２ｂを得るためのフッ素化反応（例えば、ＨＢＦ４、ＮａＮＯ２）から始まる、中間体の一般合成を示している。次に、中間体Ｓ２ｂをヨウ素化（例えば、ＮＩＳ）すると、核酸塩基Ｓ２ｃを生成することができる。
Figure 2020055855
 スキーム３は、適切な核酸塩基Ｓ３ｂとのリチウム−ハロゲン交換（例えば、ｎ−ＢｕＬｉ、［−ＣＨ２ＳｉＭｅ２Ｃｌ］２）反応、およびそれに続くラクトンＳ３ａへの付加から始まる、化合物の一般合成を示している。ルイス酸性条件（例えば、ＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ、Ｅｔ３ＳｉＨ）下、ペンダント１’ヒドロキシル基の還元により、中間体Ｓ３ｃが生成する。中間体Ｓ３ｃは、まず窒素官能基において保護されてよく（例えば、ＢｚＣｌ、Ｐｙｒ；ＮＨ４ＯＨ）、次に、ベンジル基が還元条件（例えば、ＨＣＯ２Ｈ、Ｐｄ／Ｃ、ＢＣｌ３、ＢＢｒ３）下で除去されて、中間体Ｓ３ｄを得ることができる。最初に選択的な５’ヒドロキシル保護（例えば、ＤＭＴｒＣｌ）、次に、２’および３’ヒドロキシル保護（例えば、ＴＢＳＣｌ）、続いて、酸性条件（例えば、ＴｓＯＨ）下での５’ヒドロキシル保護基の選択的除去を含む順序により、中間体Ｓ３ｅが得られる。次に、５’ヒドロキシル基は、対応するヨウ化物に変換されてよく（例えば、（ＰｈＯ）３ＰＭｅＩ）、それは次に、塩基性条件（すなわち、ＫＯｔＢｕ）に曝露されて脱離反応が引き起こされ、中間体Ｓ３ｆが生成する。オレフィンＳ３ｆの酸化（例えば、ＤＭＤＯ）、続くルイス酸性条件（例えば、ＩｎＢｒ３）下での適切な求核剤（例えば、ＴＭＳＣＮ）による処理、およびヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＣｓＦ）により、中間体Ｓ３ｇが得られる。窒素保護基を除去（例えば、ＮＨ２Ｍｅ）すると、タイプＳ３ｈの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム４は、Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００７年、５０巻、５４６３〜５４７０頁において記載されている手法と同様の手法で、オレフィンＳ３ｆの酸化（例えばＤＭＤＯ）およびとそれに続く、ルイス酸性条件（例えば、ＩｎＢｒ３）下での適切な求核剤（例えば、ＴＭＳＮ３）による処理から始まる、化合物の一般合成を示している。次に、ヒドロキシル保護基を除去（例えば、ＣｓＦ）すると、中間体Ｓ４ａが得られる。窒素保護基を除去（例えば、ＮＨ２Ｍｅ）すると、タイプＳ４ｂの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム５は、中間体Ｓ５ａを得るために、適切なアルコールＨＯＲａの存在下、オレフィンＳ３ｆの酸化（例えば、ＤＭＤＯ）およびそれに続くヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＣｓＦ）から始まる、化合物の一般合成を示している。窒素保護基（例えば、ＮＨ２Ｍｅ）を除去すると、タイプＳ５ｂの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム６は、Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ， Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ， ａｎｄ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ ２００５年、２４巻、３４３〜３４７頁において記載されている手法と同様の手法で、オレフィンＳ３ｆの酸化（例えば、ＤＭＤＯ）、およびそれに続く適切な求核剤（例えば、（ＨＣ≡Ｃ）３Ａｌ）による処理から始まる、化合物の一般合成を示している。次に、ヒドロキシル保護基を除去（例えば、ＣｓＦ）すると、中間体Ｓ
６ａが得られる。窒素保護基を除去（例えば、ＮＨ２Ｍｅ）すると、タイプＳ６ｂの最終化合物が生じる。水素化条件（例えば、Ｈ２、Ｐｄ／Ｃまたはリンドラー条件）によるこの最終化合物の処理により、タイプＳ６ｃおよびＳ６ｄの最終化合物をそれぞれ選択的に得ることができる。シクロプロパン化条件（例えば、ＣＨ２Ｎ２）による最終化合物Ｓ６ｄの処理により、タイプＳ６ｅの最終化合物が生じ得る。
Figure 2020055855
 スキーム７は、ＷＯ２０１２０３７０３８Ａ１において記載されている手法と同様の手法で合成した中間体Ｓ７ａの窒素を保護（例えば、ＴＭＳＣｌ、Ｐｙｒ；ＢｚＣｌ、Ｐｙｒ；ＮＨ４ＯＨ）する合成順序で始まる、化合物の一般合成を示している。次に、５’ヒドロキシル基（例えば、ＤＭＴｒＣｌ）の選択的保護により、中間体Ｓ７ｂが生成する。２’ヒドロキシル基の保護（例えば、ＴＢＳＣｌ）、およびそれに続く、酸性条件（例えば、ＴｓＯＨ）下での５’ヒドロキシル基の除去により、中間体Ｓ７ｅが得られる。酸化的条件（例えば、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ、Ｐｙｒ、ＴＦＡ、ＤＭＳＯ）下での５’ヒドロキシル基のアルデヒドへの変換、およびそれに続く、対応するエノレートとホルムアルデヒドとの縮合、および還元（例えば、ＮａＢＨ４）により、中間体Ｓ７ｆが生じる。次に、オルトゴナル保護基（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）によるヒドロキシル部分の連続的な選択的保護（例えば、ＤＭＴｒＣｌおよびＴＢＳＣｌ）、およびそれに続く、酸性条件（例えば、ＴｓＯＨ）下での、より不安定な保護基の除去により、中間体Ｓ７ｇが得られる。酸化的条件（例えば、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ、Ｐｙｒ、ＴＦＡ、ＤＭＳＯ）下でのヒドロキシル基のアルデヒドへの変換により、中間体Ｓ７ｈが生成する。アルデヒドＳ７ｈのハロ−オレフィン中間体Ｓ７ｉへの処理は、Ｗｉｔｔｉｇオレフィン化条件（例えば、［Ｐｈ３ＰＣＨ２Ｂｒ］＋Ｂｒ−、ＫＯｔＢｕ）下で行うことができる。塩基性条件（例えば、ＫＯｔＢｕ）下での脱離反応によりアルキンが生成し、ヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＴＢＡＦ）および窒素保護基の除去（例えば、ＮＨ４ＯＨ）により、タイプＳ７ｊの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム８は、オキシム形成（例えば、ＮＨ２ＯＨ・ＨＣｌ）、およびそれに続く、オキシムのニトリル基（例えば、ＣＤＩ）への変換から始まる、化合物の一般合成を示している。次に、窒素保護基の除去（例えば、ＮＨ４ＯＨ）およびヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＨＦ・Ｐｙｒ）により、タイプＳ８ａの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム９は、Ｗｉｔｔｉｇオレフィン化条件（例えば、［Ｐｈ３ＰＣＨ３］＋Ｂｒ−、ＫＯｔＢｕ）でのアルデヒドＳ７ｈのオレフィンへの処理から始まる、化合物の一般合成を示している。ヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＴＢＡＦ）および窒素保護基の除去（例えば、ＮＨ４ＯＨ）により、タイプＳ９ａの最終化合物が生じる。次に、還元条件（例えば、Ｈ２、Ｐｄ／Ｃ）により、タイプＳ９ｂの最終化合物を生成することができ、シクロプロパン化条件（例えば、ＣＨ２Ｎ２）により、タイプＳ９ｃの最終化合物を生成することができる。
Figure 2020055855
 スキーム１０は、ヒドロキシル基を塩化物に変換するためのＡｐｐｅｌ反応（例えば、Ｐｈ３Ｐ、ＣＣｌ４）から始まる、化合物の一般合成を示している。ヒドロキシル保護基（例えば、ＴＢＡＦ）の除去および窒素保護基の除去（例えば、ＮＨ４ＯＨ）により、タイプＳ１０ａの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム１１は、中間体Ｓ７ｇの遊離ヒドロキシル基を、不安定な保護基により保護（例えば、ＰＭＢＣｌ、Ｋ２ＣＯ３）することから始まる、化合物の一般合成を示している。２’および５’シリルオキシ保護基の選択的除去（例えば、ＴＢＡＦ）、ならびにそれに続く、丈夫な保護基による再保護（例えば、ＢｎＢｒ、ＮａＨ）、および酸性条件（例えば、ＡｃＯＨ）下での、不安定なヒドロキシル保護基の除去により、中間体Ｓ１１ａが得られる。ヒドロキシル基のフッ素（例えば、ＤＡＳＴ）への変換、ならびにそれに続くヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＢＢｒ３）および窒素保護基の除去（例えば、ＮＨ４ＯＨ）により、タイプＳ１１ｂの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム１２は、５’ヒドロキシル基を対応するヨウ化物に変換（例えば、（ＰｈＯ）３ＰＭｅＩ）し、次にこのヨウ化物を、中間体Ｓ１２ａを生成する脱離反応を行うために塩基性条件（すなわち、ＫＯｔＢｕ）により処理することから始まる、化合物の一般合成を示している。Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００７年、５０巻、５４６３〜５４７０頁において記載されている手法と同様の手法で、オレフィンＳ１２ａの酸化（例えば、ＤＭＤＯ）、ならびにそれに続く、ルイス酸性条件（例えば、ＳｎＣｌ４）下での適切な求核剤（例えば、ＴＭＳＮ３）による処理、ならびにヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＣｓＦ）および窒素保護基の除去（例えば、ＮＨ４ＯＨ）により、タイプＳ１２ｂの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム１３は、適切なアルコールＨＯＲａの存在下、オレフィンＳ１２ａの酸化（例えば、ＤＭＤＯ）、およびヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＣｓＦ）から始まる、化合物の一般合成を示している。窒素保護基を除去（例えば、ＮＨ２Ｍｅ）により、タイプＳ１３ａの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム１４は、中間体Ｓ１４ａを生成するための、キサンテート形成（例えば、ＰｈＯＣ（Ｓ）Ｃｌ、ＤＭＡＰ）、およびそれに続く、Ｂａｒｔｏｎ−ＭｃＣｏｍｂｉｅ脱酸素化反応（例えば、（ＴＭＳ）３ＳｉＨ、ＡＩＢＮ）から始まる、化合物の一般合成を示している。ヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＴＢＡＦ）および窒素保護基の除去（例えば、ＮＨ４ＯＨ）により、タイプＳ１４ｂの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム１５は、Ｂｉｏｓｃｉ． Ｂｉｏｔｅｃｈ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９９３年、５７巻、１４３３〜１４３８頁において記載されている手法と同様の手法で調製される中間体Ｓ１５ａから始まる化合物の一般合成を示している。加水分解条件（例えば、Ｋ２ＣＯ３、ＭｅＯＨ）を使用する、酢酸エステルの保護基の除去、ならびにそれに続く化学選択的酸化条件（例えば、ＮＩＳ、Ｂｕ４ＮＩ）、および２’ヒドロキシル基の保護（例えば、ＢｎＢｒ、Ａｇ２Ｏ）により、中間体Ｓ１５ｂが生成する。適切な核酸塩基Ｓ３ｂによるリチウム−ハロゲン交換（例えば、ｎ−ＢｕＬｉ、［−ＣＨ２ＳｉＭｅ２Ｃｌ］２）、およびラクトンＳ１５ｂへの付加、続く、ルイス酸性条件（例えば、ＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ、Ｅｔ３ＳｉＨ）下での１’ヒドロキシル基の還元、および脱保護（例えば、Ｈ２、Ｐｄブラック）により、タイプＳ１５ｃの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム１６は、中間体Ｓ１６ａを生じさせるための、酸化的条件（例えば、ＥＤＣＩ
・ＨＣｌ、Ｐｙｒ、ＴＦＡ、ＤＭＳＯ）下での５’ヒドロキシル基のアルデヒドへの変換、ならびにそれに続く、対応するエノレートとホルムアルデヒドとの縮合、および還元（例えば、ＮａＢＨ４）から始まる、化合物の一般合成を示している。次に、オルトゴナル保護基（例えば、ＤＭＴｒＣｌおよびＴＢＳＣｌ）によるヒドロキシル部分の連続的な選択的保護、およびそれに続く、酸性条件（例えば、ＴｓＯＨ）下での、より不安定な保護基の除去により、中間体Ｓ１６ｂが得られる。次に、Ａｐｐｅｌ反応（例えば、Ｐｈ３Ｐ、ＣＣｌ４）によりヒドロキシル基を塩化物に変換してもよく、ヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＴＢＡＦ）および窒素保護基の除去（例えば、ＮＨ４ＯＨ）により、タイプＳ１６ｃの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム１７は、中間体Ｓ１６ｂの遊離ヒドロキシル基を、不安定な保護基（例えば、ＰＭＢＣｌ、Ｋ２ＣＯ３）により保護することから始まる、化合物の一般合成を示している。２’、３’および５’シリルオキシ保護基の選択的除去（例えば、ＴＢＡＦ）、ならびにそれに続く、丈夫な保護基による再保護（例えば、ＢｎＢｒ、ＮａＨ）、および酸性条件（例えば、ＡｃＯＨ）下での、不安定なヒドロキシル保護基の除去により、中間体Ｓ１７ａが得られる。ヒドロキシル基のフッ素への変換（例えば、ＤＡＳＴ）、ならびにそれに続くヒドロキシル保護基の除去（例えば、ＢＢｒ３）および窒素保護基の除去（例えば、ＮＨ４ＯＨ）により、タイプＳ１７ｂの最終化合物が生じる。
Figure 2020055855
 スキーム１８は、中間体Ｓ１８ａの適切な求電子ハロゲン化反応により、タイプＳ１８ｂ（例えば、ＮＣＳ）、Ｓ１８ｃ（例えば、ＮＩＳ）、およびＳ１８ｄ（例えば、セレクトフルオル）の最終化合物が得られる、化合物の一般合成を示している。
Figure 2020055855
 スキーム１９は、タイプＳ１９ａの最終化合物を生じさせるためのクロスカップリング反応（例えば、Ｚｎ（ＣＮ）２、Ｐｄ（ＰｔＢｕ）３）から始まる、化合物の一般合成を示している。次に、化合物Ｓ１９ａは、ニトリルの加水分解反応（例えば、Ｈ２Ｏ２、ＮＨ４ＯＨ、Ｈ２Ｏ）により処理されて、タイプＳ１９ｂの化合物が得られる。
Figure 2020055855
 スキーム２０は、タイプＳ２０ａの最終化合物を生じさせるためのＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａ反応（例えば、ＣｕＩ、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２）から始まる、化合物の一般合成を示している。
Figure 2020055855
 スキーム２１は、タイプＳ２１ａの最終化合物を生じさせるためのクロスカップリング反応（例えば、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２、Ｃｓ２ＣＯ３）から始まる、化合物の一般合成を示している。
Figure 2020055855
 スキーム２２は、タイプＳ２２ｂのリン酸化類似体の合成を含む、化合物の一般合成を示している。
Figure 2020055855
 スキーム２３は、タイプＳ２３ｂのリン酸化類似体の合成を含む、化合物の一般合成を示している。
Figure 2020055855
 スキーム２４は、タイプＳ２４ｂのリン酸化類似体の合成を含む、化合物の一般合成を示している。
実験
Figure 2020055855
 中間体１ｂ
中間体１ａ（５０ｍｇ、３７３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に、室温で、固体のＮ−ヨードスクシンイミド（８４ｍｇ、３７３ｍｍｏｌ）を投入した。１．５時間後、反応混合物を１Ｍ ＮａＯＨ溶液（１０ｍＬ）により希釈し、得られたスラリーを室温で撹拌した。１時間後、固体を真空濾過により収集し、減圧下で乾燥すると中間体１ｂが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８９ （ｓ， １Ｈ）， ７．７８ （ｂｒ−ｓ， １Ｈ）， ６．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３０ （ｂｒ−ｓ，
１Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．２１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２６１．０２［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝１．５３６分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１ｄ − （２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロフラン−２−オール
ＴＨＦ（２００ｍＬ）中の７−ヨードピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−アミン１ｂ（６．８４ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）および１，２−ビス（クロロジメチルシリル）エタン（５．６６ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）の懸濁物に、アルゴン雰囲気下、−７８℃でｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ、３４．４ｍＬ、８６．０ｍｍｏｌ）を迅速に加えた。添加している間に、反応混合物の内部温度が−４０．５℃まで上昇し、反応混合物は濁りのない褐色溶液になった。１５分後、−７８℃に予め冷却した（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン（１ｃ、Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈから購入、１０ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（４０ｍＬ）溶液をカニューレにより迅速に加えた。１時間後、反応混合物を酢酸（１５ｍＬ）によりクエンチし、得られた混合物を室温まで加温した。得られた混合物を酢酸エチル（８００ｍＬ）により希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５００ｍＬ）およびブライン（５００ｍＬ）により洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（２２０ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体１ｄが得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．５０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５５３．３４［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．２分にＡＣＮを１００％、２．２分〜２．４分にＡＣＮを１００％〜２％、２．４分〜２．５分にＡＣＮを２％。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝３．４４２分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。ＴＬＣ：溶離液：酢酸エチル、Ｒｆ＝０．５（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体１ｅ − ７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−アミン
中間体１ｄ（４．７４ｇ、８．５８ｍｍｏｌ）およびトリエチルシラン（３．５６ｍＬ、２２．３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４３ｍＬ）溶液に、アルゴン雰囲気下、シリンジにより、０℃で三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（１．５９ｍｌ、１２．９ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。２時間後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）によりゆっくり希釈し、得られた混合物を酢酸エチル（２×１５０ｍＬ）により抽出して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（２４ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体１ｅが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ７．８８ （ｓ， １Ｈ）， ７．３７ − ７．２２ （ｍ， １５Ｈ）， ６．７３ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ，
１Ｈ）， ６．７１ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６６ （ｄ，
Ｊ ＝ ４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．６０ （ｄ，
Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５４ （ｓ， ２Ｈ）， ４．４５ （ｄ， Ｊ ＝ １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３９ （ｄｔ， Ｊ ＝ ７．１， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２５ （ｔ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１４ − ４．１０ （ｍ， １Ｈ）， ３．７８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．７， ３．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．７， ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．０１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５３７．４１［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．２分にＡＣＮを１００％、２．２分〜２．４分にＡＣＮを１００％〜２％、２．４分〜２．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．５９６分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。ＴＬＣ：溶離液：酢酸エチル、Ｒｆ＝０．３（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体１ｆ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体１ｅ（３．９４ｇ、７．３４ｍｍｏｌ）のピリジン（３６．７ｍＬ）溶液に、アルゴン雰囲気下、室温でベンゾイルクロリド（１．６９ｍｌ、１４．６８ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。１時間後、追加のベンゾイルクロリド（１．６９ｍｌ、１４．６８ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。１９時間後、水（２０ｍＬ）をゆっくり加え、反応混合物がわずかに濁った。次に、反応混合物がｐＨ＝１０の塩基性になるまで、水酸化アンモニウム（約１０ｍＬ）をゆっくり加えた。１時間後、水（１５０ｍＬ）を添加漏斗により滴下添加すると、添加している間に、反応混合物から白色固体がゆっくりと沈殿し始めた。得られた混合物を２４時間撹拌し、白色固体を真空濾過により収集し、トルエンから共沸して乾燥すると、中間体１ｆが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．２３ （ｂｒ ｓ， １Ｈ），
７．６２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３８ − ７．２１ （ｍ， １８Ｈ）， ７．１７ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．６３ − ４．４４ （ｍ， ４Ｈ）， ４．４３ − ４．３９ （ｍ， １Ｈ）， ４．２２ （ｔ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１５ − ４．１０ （ｍ， １Ｈ）， ３．７９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．８， ３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．７， ３．７ Ｈｚ， １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．９１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６４１．１８［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．２分にＡＣＮを１００％、２．２分〜２．４分にＡＣＮを１００％〜２％、２．４分〜２．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中５０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．６（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体１ｇ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体１ｆ（４．３９ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）とパラジウム担持炭素（１０重量％、２．２ｇ）との混合物に、アルゴン雰囲気下、室温でエタノール（６８．５ｍＬ）およびギ酸（５１．７ｍＬ、１．３７ｍｏｌ）を逐次加えた。３日後、反応混合物をセライトのパッドを通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗製残留物をトルエン（３×２０ｍＬ）と共沸させると、中間体１ｇが得られ、これをさらに精製することなく次のステップで直接使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ８．１５ （ｓ， １Ｈ）， ７．６７ − ７．４０ （ｍ， ５Ｈ）， ７．２３ （ｄ， Ｊ ＝ ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．００ （ｄ， Ｊ ＝ ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４４ （ｔ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１７ （ｔ， Ｊ ＝ ５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０３ （ｑ， Ｊ ＝ ４．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．１， ３．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．０４分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３７１．１５［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．２分にＡＣＮを１００％、２．２分〜２．４分にＡＣＮを１００％〜２％、２．４分〜２．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。；
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝２．０５５分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１ｈ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体１ｇ（２．４４ｇ、６．５９ｍｍｏｌ）のピリジン（３２．５ｍＬ）溶液に、室温で、固体の４、４’−ジメトキシトリチルクロリド（２．２３ｇ、６．５９ｍｍｏｌ）を一度に加えた。５．５時間後、反応混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）により希釈し、得られた混合物をブライン（３×２００ｍＬ）により洗浄した。有機層を減圧下で濃縮し、粗製残留物をＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（８０ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体１ｈが得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．６８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６７３．２２［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．２分にＡＣＮを１００％、２．２分〜２．４分にＡＣＮを１００％〜２％、２．４分〜２．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝４．２７０分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中５０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．１５（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体１ｉ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−３，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体１ｈ（１．８４ｇ、２．７４ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（２．２３ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２８．２ｍＬ）溶液に、室温で、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（２．４７ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）を加えた。１７時間後、反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５００ｍＬ）をゆっくり加えた。得られた混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）により抽出し、有機層をブライン（２×４００ｍＬ）により洗浄して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（８０ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体１ｉが得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝３．４３分、ＭＳ ｍ／ｚ＝９０１．３７［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．５５分にＡＣＮを１００％、３．５５分〜４．２分にＡＣＮを１００％〜２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝５．７２４分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中５０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．７５（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体１ｊ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体１ｉ（２．４１ｇ、２．６７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２２．３ｍＬ）溶液に、０℃でｐ−トルエンスルホン酸一水和物（５０９ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ）のメタノール（３．７ｍＬ）溶液をゆっくり加えた。１．５時間後、この反応混合物を飽和炭酸水素塩水溶液（１００ｍＬ）により希釈し、得られた混合物をジクロロメタン（２×１００ｍＬ）により抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。この粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（１２０ｇのＳｉＯ２
Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体１ｊが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．７２ （ｂｒ−ｓ， １Ｈ），
８．１６ （ｂｒ−ｔ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．０７ （ｂｒ−ｔ， Ｊ ＝ ７．７ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．４９ − ７．４３ （ｍ， １Ｈ）， ５．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．１， ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７０ − ４．６３ （ｍ， １Ｈ）， ４．４４ （ｄ， Ｊ ＝ １２．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２４ （ｄ， Ｊ ＝ １２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， １．４８ （ｓ， ９Ｈ）， １．３０ （ｓ， ９Ｈ）， ０．６５ （ｓ， ３Ｈ），
０．６４ （ｓ， ３Ｈ）， ０．４１ （ｓ， ３Ｈ）， ０．００ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．６６分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５９９．１９［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝５．６２２分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒ
ｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中５０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．５５（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体１ｋ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−３，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（ヨードメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
メチルトリフェノキシホスホニウムヨージド（０．９９ｇ、２．１９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９．９ｍＬ）溶液に、室温で中間体１ｊ（１．１９ｇ、１．９９ｍｍｏｌ）を加えた。３時間後、追加分量のメチルトリフェノキシホスホニウムヨージド（０．９９ｇ、２．１９ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）により希釈し、ブライン（３×１００ｍＬ）により洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（８０ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体１ｋが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．２１ （ｂｒ ｓ， １Ｈ），
７．６１ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．０５ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ５．４４
（ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５２ （ｔ， Ｊ ＝ ４．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０８ − ３．９９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５５ （ｄｄ， Ｊ
＝ １０．７， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．７， ５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ０．９３ （ｓ， ９Ｈ）， ０．８５ （ｓ， ９Ｈ）， ０．１６ （ｓ， ３Ｈ）， ０．１１ （ｓ， ３Ｈ）， −０．０１ （ｓ，
３Ｈ）， −０．１１ （ｓ， １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝３．０６分、ＭＳ ｍ／ｚ＝７０９．１６［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝５．８３７分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中２０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．４５（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体１ｌ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−メチレンテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体１ｋ（１．７７ｇ、２．５ｍｍｏｌ）のピリジン（２５ｍＬ）溶液に、室温でカリウムｔ−ブトキシド（７００ｍｇ、６．２４ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）により希釈した。得られた混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）により抽出した。次に、有機層をブライン（２００ｍＬ）により洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、減圧下で濃縮した。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（４０ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体１ｌが得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．８７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５８１．３７［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水
グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝５．７５０分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中５０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．２０（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体１ｍ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体１ｌ（５６０ｍｇ、０．９６４ｍｍｏｌ）のアセトン（４．８２ｍＬ）溶液に、０℃でＤＭＤＯ（アセトン中の０．０７Ｍ溶液、１３．８ｍＬ、０．９６４ｍｍｏｌ）を
加えた。１０分後、反応混合物を減圧下で濃縮し、トルエン（２×１ｍＬ）と共沸して乾燥すると１ｍが得られ、これをさらに精製することなく次のステップで直ちに使用した。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．５７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６１５．１４［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水
グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
Figure 2020055855
 中間体１ｎ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−シアノ−５−（（トリメチルシリルオキシ）メチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
粗製中間体１ｍ（約５９２ｍｇ、約０．９６４ｍｍｏｌ）およびトリメチルシリルシアニド（６４０μｌ、４．８０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１９．２ｍＬ）溶液に、アルゴン雰囲気下、０℃で、臭化インジウム（ＩＩＩ）（６８１ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を加えた。４．５時間後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６ｍＬ）によりクエンチし、室温まで加温した。得られた混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ）と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）との間で分配した。相を分離し、水層をジクロロメタン（２０ｍＬ）により抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮すると、中間体１ｎ（１：１ジアステレオマー混合物）（７１０ｍｇ）が得られ、これをさらに精製することなく次のステップで直接使用した。
ＬＣ／ＭＳ：最初に溶出した異性体ｔｒ＝２．９１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６９６．２８［Ｍ＋１］、２番目に溶出した異性体ｔＲ＝３．０２分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６９６．１９［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
Figure 2020055855
 中間体１ｏ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−５−シアノ−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
粗製中間体１ｎ（６６８．２３ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９．６ｍＬ）溶液に、室温でフッ化セシウム（７２９ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）を加えた。５時間後、反応混合物をブライン（１００ｍＬ）により希釈し、得られた混合物をジクロロメタン（３×１００ｍＬ）により抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮すると、中間体１ｏ（１：１ジアステレオマー混合物）が得られ、これをさらに精製することなく次のステップで直接使用した。
ＬＣ／ＭＳ：最初に溶出した異性体ｔＲ＝１．３１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３９６．１９［Ｍ＋１］、２番目に溶出した異性体ｔＲ＝１．３２分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３９６．１９［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
Figure 2020055855
 （実施例１） − （２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３，４−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−カルボニトリル
粗製中間体１ｏのメタノール（１ｍＬ）溶液に、室温でメチルアミン（水中４０％、０．３ｍＬ）を加えた。２．５時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８ １００Å １００×３０ｍｍカラム、５〜１５％のアセトニトリル／水のグラジエント、２５分間）により直接、精製した。所望の生成物および４’アノマーを含有しているフラクションを合わせて、減圧下で濃縮した。次に、４’アノマーを分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８ １００Å １００×３０ｍｍカラム、５〜１５％のアセトニトリル／水のグラジエント、２５分間）により分離した。所望の生成物を含有しているフラクションを合わせて、凍結乾燥すると、実施例１が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．７９ （ｓ， １Ｈ）， ６．８５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５
Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４５ （ｄ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５９
（ｔ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４０ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８８ （ｄ， Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８０ （ｄ， Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．２９分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２９２．１６［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．２分にＡＣＮを１００％、２．２分〜２．４分にＡＣＮを１００％〜２％、２．４分〜２．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝０．３７７分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。ＨＰＬＣ：ｔＲ＝６．６４３分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８（２） １１０Ａ、２５０×４．６ｍｍ；溶媒：アセトニトリル、水；グラジエント：１０分かけてＡＣＮを５〜１５％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体２ｂ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
Ｎ２をパージしたフラスコに、中間体２ａ、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−オール（ＷＯ２０１２０３７０３８Ａ１に従い調製、１．２０ｇ、４．０１ｍｍｏｌ）（ピリジンと３回、共蒸発させることにより乾燥させた）を加え、次に、これをピリジン（１８ｍＬ）に溶解させた。クロロトリメチルシラン（１．５４ｍＬ、１３．１３ｍｍｏｌ）を０℃で一度に加え、得られた混合物をＮ２雰囲気下で１時間撹拌した。ベンゾイルクロリド（６７５μＬ、５．８２ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応混合物を１時間撹拌した。追加分量のベンゾイルクロリド（１００μＬ）を加え、残存出発原料を消費させた。モノ−およびビス−Ｂｚ保護生成物の混合物が観察された。反応物をＨ２０（５ｍＬ）によりクエンチし、得られた混合物を５分間撹拌した。次に、濃ＮＨ４ＯＨ（ａｑ）（８ｍＬ）を一度に加え、１５分間撹拌し、撹拌終了時点でビス−Ｂｚ生成物は所望の生成物に変換された。溶媒を減圧下で除去し、次に、残留物をＣＨ３ＯＨと共蒸発させた。ヘキサン中５０％〜１００％のＥｔＯＡｃの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによる精製後に、中間体２ｂを単離した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２６ − ７．９１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８８ − ７．７９ （ｍ， １Ｈ）， ７．６１ （ｔ， Ｊ ＝
７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５６ − ７．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３７ − ７．２４ （ｍ， １Ｈ）， ７．１０ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０１ （ｓ， １Ｈ）， ５．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ２３．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１６ − ４．９１
（ｍ， １Ｈ）， ４．８６ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２１
− ４．０４ （ｍ， １Ｈ）， ３．８２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．０， ３．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １２．３， ５．６， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １２．２， ５．７， ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−１９６．３３ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５５．１， ２２．５ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．７７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３７３．１４［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体２ｃ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−３−フルオロ−４−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体２ｂ（１．３ｇ、３．４９ｍｍｏｌ）をピリジンと共蒸発させることにより乾燥させた。次に、乾燥した物質をＮ２雰囲気下、ピリジン（１５ｍＬ）に溶解させた。４，４’−ジメトキシトリチルクロリド（１．７１ｇ、５．０ｍｍｏｌ）を室温で一度に加え、２時間撹拌した。エタノール（２ｍＬ）を加え、得られた溶液を５分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残留物をヘキサン中０％〜１００％のＥｔＯＡｃの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると中間体２ｃが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２８ − ８．０２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．６１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３６ （ｄｄｔ， Ｊ ＝ ６．０， ４．７， ２．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３１ − ７．０４ （ｍ， ７Ｈ）， ６．９０ − ６．７３ （ｍ， ４Ｈ）， ５．６２ （ｄ， Ｊ ＝ ２４．４ Ｈｚ，
１Ｈ）， ５．４９ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２７ − ５．０１ （ｍ， １Ｈ）， ４．３２ − ４．１３ （ｍ， １Ｈ）， ４．０６ −
３．９５ （ｍ， １Ｈ）， ３．６９ （ｓ， ４Ｈ）， ３．２８ （ｓ， ３Ｈ）， ３．１２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．４， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−１９５．５８ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５２．１， ２４．７ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．３７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６７５．２９［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体２ｄ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−３−フルオロ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
Ｎ２雰囲気下で調製した中間体２ｃ（１．４７ｇ、２．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８ｍＬ）溶液に、イミダゾール（２５１ｍｇ、３．７０ｍｍｏｌ）を加え、次いでｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（４９２ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で１６時間撹拌した。溶液をＨ２Ｏ（５ｍＬ）により希釈し、次に、溶媒を減圧下で除去した。残留物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとの間で分配した。層を分離し、次に、有機相をブラインにより洗浄した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、これを濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。この粗製物質をこのまま次のステップで使用した。
粗製物質をＣＨＣｌ３（１５ｍＬ）に溶解させ、０℃に冷却した。混合物に、ＣＨ３ＯＨ（６ｍＬ）に溶解させたｐ−トルエンスルホン酸水和物（４１４ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）を滴下添加し、１５分間撹拌した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）によりクエンチした。有機物をブラインにより洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をヘキサン中０％〜５０％のＥｔＯＡｃの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると中間体２ｄが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２１ − ７．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５１ （ｄｔ， Ｊ ＝ ３９．９， ７．５ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．１２ − ６．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ５．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ２１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０７ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５４．６， ３．８ Ｈｚ， １Ｈ），
４．８６ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２８ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １７．８， ７．１， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３ − ３．７２ （ｍ， １Ｈ）， ３．６３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １２．１， ５．２， ３．０ Ｈｚ，
１Ｈ）， ３．４３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １２．１， ６．０， ４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ０．８０ （ｓ， ９Ｈ）， ０．０１ （ｓ， ３Ｈ）， ０．００ （ｓ， ３Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−１９８．０５ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５４．２， １９．８ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．３５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４８７．２４［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体２ｅ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−３−フルオロ−５，５−ビス（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
Ｎ２雰囲気下で調製した、トルエン（４ｍＬ）およびＤＭＳＯ（６ｍＬ）中の中間体２ｄ（８５６ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）の溶液に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）（５０４ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物にピリジン（１５０μＬ）およびＴＦＡ（７０μＬ）を加え、混合物を室温で１５分間撹拌した。追加のＥＤＣＩ（１００ｍｇ）およびピリジン（１００μＬ）を加え、混合物をさらに４５分間撹拌した。反応物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）によりクエンチした。有機物をブラインにより洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去すると粗製アルデヒドが得られ、これをこのまま次のステップで使用した。
粗製アルデヒドをジオキサン（５ｍＬ）に溶解させ、３７％ホルムアルデヒド（ａｑ）（９２５μＬ）を加え、次いで２Ｎ ＮａＯＨ（ａｑ）（９２５μＬ）を加えた。室温で３時間撹拌した後、反応物をＡｃＯＨによりクエンチし、ＥｔＯＡｃにより希釈して、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去すると粗製アルドール生成物が得られ、これをこのまま次のステップに供した。
Ｎ２雰囲気下で粗製アルドール生成物をＥｔＯＨ（９ｍＬ）に溶解させ、０℃に冷却した。ＮａＢＨ４（８０ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）を一度に加え、反応物を１０分間撹拌した。反応物をＡｃＯＨによりクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２により希釈して、水と飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）との１：１溶液により洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をヘキサン中０％〜１００％のＥｔＯＡｃの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると中間体２ｅが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２０ − ７．９９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５１ （ｄｔ， Ｊ ＝ ３９．５， ７．５ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．１５ − ６．９３ （ｍ， ２Ｈ）， ５．５０ （ｄ， Ｊ ＝ １４．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２４ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５４．２， ５．４ Ｈｚ， １Ｈ），
４．７８ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝
１０．７， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．７， ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．９， ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５５ − ３．３５ （ｍ， ３Ｈ）， ０．８２ （ｓ， ９Ｈ）， ０．０７ （ｓ， ３Ｈ）， −０．０９ （ｓ， ３Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−２００．３７ （ｄ， Ｊ
＝ ５１．１ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．２５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５１７．２１［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体２ｆ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−フルオロテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
Ｎ２雰囲気下、中間体２ｅ（３７０ｍｇ、０．７１７ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）およびＴＥＡ（２００μＬ）に溶解させ、次に、０℃に冷却した。４，４’−ジメトキシトリチルクロリド（０．３６４ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を一度に加え、反応混合物を３０分間撹拌した。ＣＨ３ＯＨ（２ｍＬ）を加え、溶液をＣＨ２Ｃｌ２および飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）により希釈した。有機層をブラインにより洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をヘキサン中５％〜１００％のＥｔＯＡｃの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、粗生成物がビス−ＤＭＴｒと４’β生成物の混合物として得られた。この混合物を、さらに精製することなく以降で用いた。
Ｎ２雰囲気下、ＤＭＦ（３ｍＬ）中の粗生成物（５７４ｍｇ、混合物）に、イミダゾール（１４３ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を加え、次いでｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（１５８ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で２時間撹拌した。溶液をＣＨ３ＯＨ（１ｍＬ）およびＥｔＯＡｃにより希釈した。有機物をＨ２Ｏ、次にブラインにより洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物を、ヘキサン中０％〜５０％のＥｔＯＡｃの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、中間体２ｆが得られ、これはビス−ＤＭＴｒ物質をいくらか含有していた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．２５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝９３３．５２［Ｍ＋１］；ＬＣシステム
：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体２ｇ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−フルオロ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体２ｆをＣＨＣｌ３（５ｍＬ）に溶解させ、０℃に冷却した。混合物に、ＣＨ３ＯＨ（４ｍＬ）に溶解させたｐ−トルエンスルホン酸水和物（９０ｍｇ、０．４７４ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応混合物を５分間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）によりクエンチした。有機物をブラインにより洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をヘキサン中０％〜４０％のＥｔＯＡｃの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると中間体２ｇが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．０９ − ７．８８ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４８ （ｄｔ， Ｊ ＝ ３５．４， ７．４ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．３０ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８８ （ｓ， １Ｈ）， ５．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １８．８， ４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０５ （ｄｔ，
Ｊ ＝ ５４．６， ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．９， ５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９１ − ３．６４ （ｍ， ３Ｈ）， ０．９２ − ０．７０ （ｍ， １８Ｈ）， ０．１３ − ０．０４ （ｍ， ６Ｈ），
０．０１ （ｍ， ６Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−１９６ （ｍ）
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．６１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６３１．４３［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体２ｈ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（（Ｅ）−２−ブロモビニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−フルオロテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
トルエン（０．７５ｍＬ）およびＤＭＳＯ（０．１５ｍＬ）中の中間体２ｇ（２２８ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２雰囲気下、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）（２０８ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物にピリジン（３０μＬ）およびＴＦＡ（１５μＬ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃにより希釈し、Ｈ２Ｏ、次いでブラインにより洗浄した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去すると粗製アルデヒドが得られた。この物質をこのまま次のステップで使用した。
ＴＨＦ（４ｍＬ）中の臭化ブロモメチルトリフェニルホスホニウム（３１４ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）の懸濁物に、−４０℃でＫＯｔＢｕ（ＴＨＦ中１．０Ｍ、１．０８ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＮ２雰囲気下で２時間撹拌した。粗製アルデヒドをＴＨＦ（４ｍＬ）に溶解させ、滴下添加した。反応混合物を冷浴から取り出し、１時間かけて１０℃まで加温した。反応混合物を−４０℃まで再冷却し、この反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ）によりクエンチした。層を分離し、有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をヘキサン中０％〜５０％のＥｔＯＡｃの溶離液を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると中間体２ｈが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．０８ − ７．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．６２ − ７．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３４ − ７．０１ （ｍ， ３Ｈ）， ６．９２ （ｓ， １Ｈ）， ６．６０ − ６．４５ （ｍ， １Ｈ）， ６．３５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６１ （ｄ， Ｊ ＝
２５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５６．３， ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６９ − ４．４６ （ｍ， １Ｈ）， ３．９７ （ｄ， Ｊ ＝ １１．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５３ （ｄ， Ｊ ＝ １１．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ０．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ３．９ Ｈｚ， １８Ｈ）， ０．１３ − −０．１０ （ｍ， １２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−１９０．６０ （ｍ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．１０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝７０５．５４／７０７．２９［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体２ｉ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−５−エチニル−３−フルオロテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
Ｎ２雰囲気下で中間体２ｈ（２０４ｍｇ、０．２８９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（８ｍＬ）に溶解させ、−４０℃に冷却した。ＫＯｔＢｕ（ＴＨＦ中１．０Ｍ、１．０８ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。飽和ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ）によりクエンチしながら、反応物を２０分間撹拌した。溶液をＥｔＯＡｃにより希釈し、ブラインにより洗浄した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をヘキサン中０％〜５０％のＥｔＯＡｃの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、中間体２ｉが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．１２ − ７．８８ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５１ （ｄｔ， Ｊ ＝ ３６．５， ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３２ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８８ （ｓ， １Ｈ）， ５．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ２２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．３， ５．１， ３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １８．１， ５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９１ （ｄ， Ｊ ＝ １１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３ − ３．６２ （ｍ， １Ｈ）， ２．５５ （ｍ， １Ｈ）， ０．９０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２５．３， １．６ Ｈｚ， １８Ｈ）， ０．２０ − −０．０８ （ｍ， １２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−１９３．１０ （広幅−ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．８８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６２５．２４［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体２ｊ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−エチニル−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ
［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
Ｎ２雰囲気下、中間体２ｉ（１５２ｍｇ、０．２４３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３．５ｍＬ）溶液に、室温でＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１．０Ｍ、７００μＬ、０．７００ｍｍｏｌ）を加え、混合物を３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残留物をヘキサン中４０％〜１００％のＥｔＯＡｃの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると中間体２ｊが得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．８８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３９７．１６［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 （実施例２） − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−エチニル−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−オール
中間体２ｊ（７１ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＯＨ（２ｍＬ）溶液に、濃ＮＨ４ＯＨ（ａｑ）（０．７ｍＬ）を加え、得られた溶液を室温で１６時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。この残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２中０％〜２０％のＣＨ３ＯＨの溶離液勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより、次いでＨ２Ｏ中０％〜２０％のＡＣＮの溶離液勾配を使用する逆相ＨＰＬＣにより精製すると、実施例２が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．７７ （ｓ， １Ｈ）， ６．９０ − ６．７０ （ｍ， ２Ｈ）， ５．６２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２５．５， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１８ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５６．０， ５．４， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２０．５， ５．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９３ − ３．５９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ０．７ Ｈｚ， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ−１９３．７６ （ｄｄｄ， Ｊ
＝ ５６．０， ２５．５， ２０．４ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．４５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２９３．１３［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣ
Ｎを２％。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．１１２分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ。
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ１８ ２．６μｍ １００Ａ、４．６×１００ｍｍ
溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水
グラジエント：０分〜８．０分にＡＣＮを２〜９８％、１．５ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体３ａ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−フルオロ−５−ホルミルテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
Ｎ２雰囲気下で調製した、ＤＭＳＯ（１ｍＬ）およびトルエン（１０ｍＬ）中の中間体２ｇ（１．１３ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（１．０２ｇ、５．３６ｍｍｏｌ）およびピリジン（１４９μＬ、１．９２ｍｍｏｌ）を加えた。ＴＦＡ（７４μＬ、０．９７ｍｍｏｌ）を滴下添加した。１時間後、反応をＬＣ／ＭＳにより確認した。単一ピークを観察し、保持時間は出発原料と類似していたが、Ｍ＋１ピークは、生成物について予期されるものに等しかった。さらにピリジン５０μＬを加え、反応物をさらに１５分間撹拌した。ＬＣ／ＭＳによる変化はなかった。反応物をＥｔＯＡｃにより希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ．）とＨ２Ｏとの１：１混合物によりクエンチした。混合物は、ＥｔＯＡｃと、追加のＨ２Ｏとの間で分配した。有機層を分離し、Ｈ２Ｏ、ブラインにより洗浄し、次に、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。乾燥剤を真空濾過により除去し、濾液を濃縮した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解させて濃縮し、得られた物質を高真空下に１時間置いた。生成物である中間体３ａを、このまま次の反応に使用した。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．９０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６２９．４６［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体３ｂ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３
−フルオロ−５−（（Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
Ｎ２雰囲気下で調製した中間体３ａ（前のステップからの粗製物質、１．７９ｍｍｏｌと見なす）のピリジン（１１ｍＬ）溶液に、室温でＨＯＮＨ２・ＨＣｌを一度に加えた。５分後に反応をＬＣ／ＭＳにより確認した。出発原料は消費された。反応を２５分後に、再度、確認した。最初の時点からの変化はなかった。反応物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとの間で分配した。有機層を分離してブラインにより洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過した。濾液を濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２に溶解させて再度、濃縮し、残留物を高真空下に置いた。生成物である中間体３ｂを、このまま次の反応に使用した。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．８３分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６４４．５５［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体３ｃ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−５−シアノ−３−フルオロテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体３ｂ（前のステップからの粗製物質、１．７９ｍｍｏｌと見なす）のＡＣＮ（１６ｍＬ）溶液に、ＣＤＩ（４３６ｍｇ、２．６９ｍｍｏｌ）を一度に加えた。反応をＮ２雰囲気下で行った。２０分後に反応をＬＣ／ＭＳにより確認した。出発原料および生成物の質量を有するピークは、かろうじて時間分解される。反応を１．５時間後に、確認した。出発原料に相当するＵＶピークは、ほぼなくなり、質量のピーク強度は低下した。反応物をＣＨ２Ｃｌ２により希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ．）とＨ２Ｏとの１：１混合物によりクエンチした。層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２により抽出し戻し、合わせた有機層をブラインとＨ２Ｏとの１：１混合物により抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過した。濾液を濃縮し、以下の溶媒勾配を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより中間体３ｃを単離した：ヘキサン中０％ＥｔＯＡｃからヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃまで上昇、ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃで勾配を停止、次に、ヘキサン中４０％ＥｔＯＡｃまで上昇。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３１ （ｓ， １Ｈ）， ８．０７ （ｓ， １Ｈ）， ７．６５ （ｔ， Ｊ ＝ ８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５４ （ｔ， Ｊ ＝ ８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１５ （ｄ， ４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０２ （ｓ， １Ｈ）， ５．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ２４ Ｈｚ， １Ｈ），
５．５１ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５２， ４．８， ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １８．４， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９４ （ｄｄ，
Ｊ ＝ ５３．２， １１．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ０．９３ （ｓ， ９Ｈ， ），
０．８４ （ｓ， ９Ｈ）， ０．１７ （ｓ， ３Ｈ）， ０．１６ （ｓ， ３Ｈ）， ０．０５ （ｓ， ３Ｈ）， ０．０１ （ｓ， ３Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−１９４．６５８ （ｄｔ，
Ｊ ＝ ５３， ２１．４ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．８４分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６２６．６０［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体３ｄ − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−４−フルオロテトラヒドロフラン−２−カルボニトリル
氷水浴中で冷却した中間体３ｃ（７７０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１１．２ｍＬ）溶液に、濃ＮＨ４ＯＨ（ａｑ）（３．７４ｍＬ）を加えた。冷浴を取り除き、得られた不均一溶液を一晩、撹拌した。翌日、反応は、ＬＣ／ＭＳにより決定したところ、未完了であった。追加の濃ＮＨ４ＯＨ（ａｑ）（４ｍＬ）および２−ＭｅＴＨＦ（１２ｍＬ）を加えた。反応は均一になったが、２０分後、さらなる反応の進行はなかった。反応物を濃縮し、残留物をＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解させた。この混合物に、濃ＮＨ４ＯＨ（ａｑ）（５ｍＬ）および十分なＭｅＯＨ（１．９ｍＬ）を加えると、溶液が均一な単一相になった。反応物を室温で２２時間撹拌した。反応は、ほとんど完了した（約５％の出発原料が残存した）。反応物をＣＨ２Ｃｌ２およびＨ２Ｏにより希釈した。層を分離し、水層を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）により希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２により抽出した。水層を２Ｎ
ＨＣｌにより中和し、次に、ＣＨ２Ｃｌ２により抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、これを濾過により除去した。濾液を濃縮し、以下の溶媒勾配を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、残留物から中間体３ｄを単離した：ヘキサン中０％ＥｔＯＡｃからヘキサン中５０％ＥｔＯＡｃまで上昇、ヘキサン中５０％ＥｔＯＡｃで勾配を停止、次に、ヘキサン中１００％ＥｔＯＡｃまで上昇。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．５９分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５２２．４７［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 （実施例３） − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−カルボニトリル
ポリプロピレン製チューブ中で、中間体３ｄ（１００ｍｇ、０．１９１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃でピリジン中７０％のＨＦ・ピリジン（６０μＬ、０．４７８ｍｍｏｌ）を加えた。２０分後、反応を確認した。反応は起こっておらず、そこで、追加のピリジン中７０％のＨＦ・ピリジン（１５０μＬ）を加え、冷浴を取り除いた。１時間５０分後、追加のピリジン中７０％のＨＦ・ピリジン（１５０μＬ）を加えた。さらに２時間後、追加のピリジン中７０％のＨＦ・ピリジン（３００μＬ）を加えた。さらに２時間１５分後、追加のピリジン中７０％のＨＦ・ピリジン（１ｍＬ）を加えた。反応物の濁りがなくなって均一となり、この時点で、最後の追加のピリジン中７０％のＨＦ・ピリジンを加えた。反応物を一晩、撹拌した。翌日、反応は完了した。反応物を氷浴中で冷却し、Ｈ２Ｏおよび少量の飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）によりクエンチした。混合物を濃縮し、残留物をＤＭＳＯに溶解させた。残存している不溶性物質を濾過により除去し、濾液をＨＰＬＣにより半精製した。単離した物質をＤＭＦに溶解させ、ＨＰＬＣにより精製した。実施例３は、ＴＦＡ塩として０．５％で単離された。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＦ−ｄ７）δ７．９２ （ｓ， １Ｈ）， ６．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６４ （ｄ， Ｊ ＝ ６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．９２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．８３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２５．２，
２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４０ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５４．８， ４．８， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７５ （ｄｔ， Ｊ ＝ ２２， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２， ６．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２， ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＦ−ｄ７）δ−７４．９２ （ｓ）， −１９３．７２６ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５４．５， ２３．３ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．５６分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２９４．１０［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．２２０分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ１８ ２．６μｍ １００Ａ、４．６×１００ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水
グラジエント：０分〜８．０分にＡＣＮを２〜９８％、１．５ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体４ｂ − （３ａＲ，５Ｒ，６ａＳ）−５−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２，２−ジメチルジヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−６（３ａＨ）−オン
１０Ｌの四つ口丸底フラスコに、室温で、中間体４ａである（３ａＲ，５Ｓ，６Ｓ，６ａＲ）−５−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−６−オール（５００ｇ、１．９０ｍｏｌ）のジクロロメタン／水（２．７Ｌ／２．３Ｌ）溶液を入れた。これに、炭酸ナトリウム（２９０ｇ、３．４２ｍｏｌ）を加えた。次に、炭酸カリウム（４５１ｇ、３．２４ｍｏｌ）を加えた。この後に、２，２，６，６−テトラメチルピペリジノオキシ（ＴＥＭＰＯ、１５．２ｇ、９６．３１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物に、臭化テトラブチルアンモニウム（３１ｇ、９５．２０ｍｍｏｌ）を加えた。上記のものに、Ｎ−ブロモスクシンイミド（５１４ｇ、２．８６ｍｏｌ）を３５℃で小分けにして加えた。得られた溶液を撹拌しながら室温で２時間反応させた。得られた溶液を、２×１Ｌのジクロロメタンにより抽出し、有機層を合わせた。得られた混合物を水１×１．５Ｌにより洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。これにより、（粗製）中間体４ｂが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｃ − （３ａＲ，５Ｓ，６Ｒ，６ａＲ）−５−（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−６−オール
２Ｌの四つ口丸底フラスコに、中間体４ｂ（３７０ｇ、１．２９ｍｏｌ）のメタノール（１３００ｍＬ）溶液を入れた。上記のものに、水素化ホウ素ナトリウム（２６．４ｇ、７０６．３８ｍｍｏｌ）を室温で小分けにして加えた。得られた溶液を撹拌しながら室温で２時間反応させた。得られた混合物を真空下で濃縮した。次に、反応物を５％塩化アンモニウム水溶液１０００ｍＬを添加することによりクエンチした。得られた溶液を、３×５００ｍＬのジクロロメタンにより抽出し、有機層を合わせた。得られた溶液を水２×３００ｍＬにより洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。粗生成物を石油エーテルから再結晶することにより精製した。これにより、中間体４ｃが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｄ
５０００ｍＬの四つ口丸底フラスコに、中間体４ｃ（３５０ｇ、１．３４ｍｏｌ）のジクロロメタン（７００ｍＬ）溶液を入れた。これに、臭化テトラブチルアンモニウム（４
７６．８ｇ、１．４８ｍｏｌ）を加えた。混合物に、５０％水酸化ナトリウム／水（７００ｇ）を加えた。上記のものに、２−（ブロモメチル）ナフタレン（３４０ｇ、１．５４ｍｏｌ）を数回かけて加えた。得られた溶液を撹拌しながら室温で４時間反応させた。次に、ジクロロメタン／水（１：１）１８００ｍＬを添加することにより、反応物をクエンチした。得られた溶液を、２×１Ｌのジクロロメタンにより抽出し、有機層を合わせた。得られた混合物を水１×１０００ｍＬにより洗浄した。残留物を石油エーテル／水１０００／１０００ｍＬに溶解させた。粗生成物を石油エーテルから再結晶することにより精製した。これにより、中間体４ｄが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｅ − （Ｒ）−１−（（３ａＲ，５Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチル−６−（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）エタン−１，２−ジオール
５Ｌの四つ口丸底フラスコに、中間体４ｄ（５００ｇ、１．２５ｍｏｌ）を入れた。これに、酢酸（１．８Ｌ）を加えた。混合物に、水（６００ｍＬ）を加えた。得られた溶液を撹拌しながら室温で一晩反応させた。固体を濾去した。得られた溶液を、３×１Ｌの石油エーテルにより抽出し、水層を合わせた。得られた溶液を２Ｌの酢酸エチルにより希釈した。得られた混合物を塩化ナトリウム（ａｑ）２×２Ｌにより洗浄した。溶液のｐＨ値を炭酸ナトリウム（５０％）により８に調節した。得られた溶液を、２×１Ｌの酢酸エチルにより抽出し、有機層を合わせて真空下で濃縮した。これにより、中間体４ｅが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｆ − （３ａＲ，５Ｓ，６Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチル−６−（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−５−カルボアルデヒド
１０Ｌの四つ口丸底フラスコに、室温で中間体４ｅ（３００ｇ、８３３．３３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２１００ｍＬ）溶液を入れた。この後に、室温で、０．５時間で過ヨウ素酸ナトリウム（２５０ｇ）の水（４０００ｍＬ）溶液を添加した。得られた溶液を撹拌しながら室温で０．５時間反応させた。固体を濾去した。得られた溶液を３×１０００ｍＬの酢酸エチルにより抽出し、有機層を合わせた。得られた混合物を塩化ナトリウム（ａｑ）２×１０００ｍＬにより洗浄した。得られた混合物を真空下で濃縮した。これにより、中間体４ｆが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｇ − （（３ａＲ，６Ｓ，６ａＲ）−２，２−ジメチル−６−（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−５，５−ジイル）ジメタノール
１０Ｌの四つ口丸底フラスコに、室温で中間体４ｆ（２５０ｇ、７６１．３６ｍｍｏｌ）の水／テトラヒドロフラン（１２５０／１２５０ｍＬ）溶液を入れた。上記のものに、撹拌しながら、０〜１５℃で、２Ｎ水酸化ナトリウム（ｓｏｄｉｕｎ ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ）（ａｑ）（１５００ｍＬ）を滴下添加した。混合物に、ホルムアルデヒド（６２０ｍＬ）を加えた。得られた溶液を撹拌しながら室温で一晩反応させた。得られた溶液を酢酸エチル２×２０００ｍＬにより抽出した。得られた混合物を塩化ナトリウム（ａｑ）２×２０００ｍＬにより洗浄した。有機層を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。残留物を石油エーテル：酢酸エチル（２／１）を用いるシリカゲルカラムに適用した。粗生成物を酢酸エチル：エタノールから、１ｇ／（１ｍＬ：１ｍＬ）の比で再結晶した。これにより、中間体４ｇが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｈ − （（３ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）メチル）−２，２−ジメチル−６−（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）メタノール
窒素をパージし、その不活性雰囲気を維持した５Ｌの四つ口丸底フラスコに、室温で中間体４ｇ（１２５ｇ、３４６．８４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５００ｍＬ）溶液を入れた。混合物に、室温でトリエチルアミン（１５７．５ｍＬ）を加えた。上記のものに、撹拌しながら、０〜１０℃でｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロリド（１５７．５ｍＬ）を滴下添加した。得られた溶液を撹拌しながら室温で一晩反応させた。次に、反応物を、メタノール３７．５ｍＬを添加することによりクエンチした。得られた混合物を５％塩化水素（ａｑ）２×５００ｍＬおよび炭酸水素ナトリウム（ａｑ）２×５００ｍＬにより洗浄した。得られた混合物を１Ｎ水酸化ナトリウム（ａｑ）２×５００ｍＬにより洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。粗生成物をジクロロメタン／ヘキサンから再結晶することにより精製した。これにより、中間体４ｈが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｉ − ｔｅｒｔ−ブチル（（（３ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−５−（ヨードメチル）−２，２−ジメチル−６−（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）メトキシ）ジフェニルシラン
窒素をパージし、その不活性雰囲気を維持した１０００ｍＬの三つ口丸底フラスコに、中間体４ｈ（２０ｇ、３１．７３ｍｍｏｌ）のトルエン（３２０ｍＬ）溶液、トリフェニルホスフィン（３５ｇ、１３２．１１ｍｍｏｌ）、イミダゾール（８．９６ｇ、１３２．２６ｍｍｏｌ）を入れた。これに続いて、６０℃でヨウ素（１６．９５ｇ、６６．８ｍｍｏｌ）を数回かけて加えた。得られた溶液を油浴中、８０℃で一晩、撹拌した。反応混合物を水／氷浴により室温まで冷却した。得られた溶液を１０００ｍＬの酢酸エチルにより希釈した。得られた混合物をチオ硫酸ナトリウム（ａｑ）２×３００ｍＬにより洗浄した。得られた混合物を塩化ナトリウム（ａｑ）１×３００ｍＬにより洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチル／石油エーテル（１：１０）を用いるシリカゲルカラムに適用した。これにより、中間体４ｉが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｊ − ｔｅｒｔ−ブチルジフェニル（（（３ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−２，２，５−トリメチル−６−（ナフタレン−２−イルメトキシ）テトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）メトキシ）シラン
窒素をパージし、その不活性雰囲気を維持した２０００ｍＬの丸底フラスコに、中間体４ｉ（６６ｇ、８８．４７ｍｍｏｌ）のエタノール／酢酸エチル（６００／６００ｍＬ）溶液、トリエチルアミン（２０．７ｇ、２０２．５２ｍｍｏｌ）、パラジウム担持炭素（１０重量％、２４．８ｇ、２３．３０ｍｍｏｌ）を入れた。得られた溶液を４０℃で３時間撹拌した。固体を濾去した。得られた混合物を真空下で濃縮した。得られた溶液を１５００ｍＬの酢酸エチルにより希釈した。得られた混合物を塩化ナトリウム（ａｑ）１×５００ｍＬにより洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。これにより、中間体４ｊが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｋ − （３ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニ
ルシリルオキシ）メチル）−２，２，５−トリメチルテトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−６−オール
５００ｍＬの丸底フラスコに、中間体４ｊ（１．０ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）溶液、水（１．２５ｍＬ）、および２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン（ＤＤＱ、７８０ｍｇ、３．４０ｍｍｏｌ）を入れた。得られた溶液を室温で１時間撹拌した。得られた溶液を５０ｍＬのジクロロメタンにより希釈した。得られた混合物を水１×３０ｍＬおよび炭酸水素ナトリウム（ａｑ）２×３０ｍＬにより洗浄した。得られた混合物を塩化ナトリウム（ａｑ）１×３０ｍＬにより洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチル／石油エーテル（１：２０〜１：１０）を用いるシリカゲルカラムに適用した。これにより、中間体４ｋが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｌ − （３ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−５−（ヒドロキシメチル）−２，２，５−トリメチルテトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール−６−オール
５０ｍＬの丸底フラスコに、中間体４ｋ（５２０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（９ｍＬ）溶液、フッ化テトラブチルアンモニウム（３６９ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）を入れた。得られた溶液を室温で２時間撹拌した。得られた混合物を真空下で濃縮した。残留物をジクロロメタン／メタノール（１００：１）を用いるシリカゲルカラムに適用した。これにより、中間体４ｌが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ５．６４ （ｄ， Ｊ ＝ ３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６７ （ｍ， １Ｈ）， ４．５５ （ｍ， １Ｈ）， ４．０５ （ｍ， １Ｈ）， ３．２４ − ３．３０ （ｍ， １Ｈ）， ３．１１ − ３．１８ （ｍ， １Ｈ），
１．５０ （ｓ， ３Ｈ）， １．２７ （ｓ， ３Ｈ）， １．１６ （ｓ， １Ｈ）．
Figure 2020055855
 中間体４ｍ −（３ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）−２，２，５−トリメチルテトラヒドロフロ［３，２−ｄ］［１，３］ジオキソール
窒素をパージし、その不活性雰囲気を維持した５０ｍＬの三つ口丸底フラスコに、中間体４ｌ（１８０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（４ｍＬ）溶液を入れた。これに続いて、水素化ナトリウム（６０重量％、１４０ｍｇ、３．５０ｍｍｏｌ）を０℃で小分けにして加えた。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌した。得られた溶液を撹拌しながら室温でさらに３０分間反応させた。これに０℃で撹拌しながら臭化ベンジル（４５２ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）を滴下添加した。得られた溶液を撹拌しながら室温でさら
に３時間反応させた。次に、反応物を塩化アンモニウム（ａｑ）３０ｍＬを添加することによりクエンチした。得られた溶液をジクロロメタン５０ｍＬにより抽出し、有機層を合わせて無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチル／石油エーテル（１：３０〜１：２０）を用いるシリカゲルカラムに適用した。これにより、中間体４ｍが得られた。
Figure 2020055855
 中間体４ｎ − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）−５−メチルテトラヒドロフラン−２，３−ジイルジアセテート
１０００ｍＬの丸底フラスコに、中間体４ｍ（やはり、Ｂｉｏｓｃｉ． Ｂｉｏｔｅｃｈ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９９３年、５７巻、１４３３〜１４３８頁に従って調製、４５ｇ、１１１．１９ｍｍｏｌ）、酢酸（２７０ｍＬ）、無水酢酸（９０ｍＬ）、硫酸（４５ｄ）を入れた。得られた溶液を室温で３０分間撹拌した。次に、１０００ｍＬの水／氷を添加することにより、反応物をクエンチした。得られた溶液を３０００ｍＬの酢酸エチルにより希釈した。得られた混合物を水２×１０００ｍＬおよび炭酸水素ナトリウム（ａｑ）４×１０００ｍＬにより洗浄した。得られた混合物を塩化ナトリウム（ａｑ）２×１０００ｍＬにより洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチル／石油エーテル（１：３０〜１：２０）を用いるシリカゲルカラムに適用した。これにより、中間体４ｎが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）：δ７．２８ − ７．３８ （ｍ，
１０Ｈ）， ６．１３ （ｓ， １Ｈ）， ５．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８Ｈｚ，
１Ｈ）， ４．４４ − ４．６８ （ｍ， ４Ｈ）， ４．３３ （ｄ， Ｊ ＝ ５．１Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３３ − ３．４５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１５ （ｓ， ３Ｈ）， １．８８ （ｓ， ３Ｈ）， １．３５ （ｓ， ３Ｈ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝４５１［Ｍ＋Ｎａ］
Figure 2020055855
 中間体４ｏ − （３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）−３−ヒドロキシ−５−メチルジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン
中間体４ｎ（１．３ｇ、３ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）に溶解させた。炭酸カリウム粉末（４５６ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１時間撹拌した。次に、反応混合物を減圧下で濃縮した。アセトニトリルを加え、５分間撹拌した。不溶物を濾別し、アセトニトリルで洗浄した。減圧下で濾液を濃縮した。無水ＤＣＭ（２０ｍＬ）に得られた物質を溶解させた。ヨウ化テトラブチルアンモニウム（１．６６ｇ、４．５ｍｍｏｌ）およびＮ−ヨード−スクシンイミド（ＮＩＳ、１．６９ｇ、２．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を暗所で１６時間撹拌した。追加のＮＩＳ（０．８５ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を加え、４時間撹拌した。追加のＮＩＳ（０．８５ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を加え、暗所で２日間撹拌した。ＥｔＯＡｃにより反応物を希釈し、チオ硫酸ナトリウム水溶
液により２回、次に、飽和塩化ナトリウム水溶液により洗浄した。有機部分を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。シリカゲルカラム（ヘキサン中０〜３０％ＥｔＯＡｃ）により精製すると、中間体４ｏが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）：δ７．３５ − ７．２２ （ｍ，
１０Ｈ）， ４．８２ （ｂｓ， １Ｈ）， ４．７５ − ４．６６ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５５ − ４．４４ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１３ （ｄ， Ｊ ＝ ８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７０−３．４５ （ｍ， ２Ｈ）， １．３８ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．５８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３４２．９［Ｍ＋１］、３６０．０［Ｍ＋Ｈ２Ｏ］；ＬＣ／ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、３０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．１％酢酸；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％酢酸
２．５分で緩衝液Ｂを５〜１００％、次に、０．９分間、１００％、２ｍＬ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．７８分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．０５％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．０５％ＴＦＡ；５分で緩衝液Ｂを２〜９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体４ｐ − （３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）−５−メチルジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン
中間体４ｏ（９５５ｍｇ、２．７９ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させた。臭化ベンジル（４００μＬ、３．３５ｍｍｏｌ）および酸化銀（Ｉ）（７１２ｍｇ、３．０７ｍｍｏｌ）を加えた。Ｎ２（ｇ）下、暗所で６０℃で３時間撹拌した。追加の臭化ベンジル（４００μＬ、３．３５ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ２（ｇ）下、暗所で６０℃で１６時間撹拌した。追加の酸化銀（Ｉ）（３５０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ２（ｇ）下、暗所で６０℃で８時間撹拌した。室温まで冷却した。固体を濾別し、ＥｔＯＡｃにより洗浄した。濾液を減圧下で濃縮すると油状物が得られた。ヘキサンを加えて２時間撹拌すると、固体が得られた。固体を収集し、ヘキサンにより洗浄した。固体を高真空下で乾燥させると、中間体４ｐが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）：δ７．３５ − ７．１６ （ｍ，
１５Ｈ）， ５．０３ （ｄ， Ｊ ＝ １２Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７９ − ４．７１ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５２ − ４．４０ （ｍ， ４Ｈ）， ４．０６ （ｄ， Ｊ ＝ ６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４９ − ３．３９ （ｍ， ２Ｈ）， １．３８ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．９１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４３３．１［Ｍ＋１］、４５０．１［Ｍ＋Ｈ２Ｏ］；ＬＣ／ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、３０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．１％酢酸；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％酢酸；２．５分で緩衝液Ｂを５〜１００％、次に、０．９分間、１００％、２ｍＬ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝４．５４分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００；Ｐｈｅｎ
ｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．０５％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．０５％ＴＦＡ
５分で緩衝液Ｂを２〜９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体４ｑ − （３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）−５−メチルテトラヒドロフラン−２−オール
中間体１ｂ（１４８ｍｇ、０．５７０ｍｍｏｌ）および１，２−ビス（クロロジメチルシリル）エタン（１２３ｍｇ、０．５７０ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解させ、Ａｒ（ｇ）下、−７０℃で撹拌した。反応混合物に、内部温度を−６５℃より低く維持しながら、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍの溶液、６８４μＬ、１．７１ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応物を−４０℃まで加温し、１５分間、維持した。次に、Ａｒ（ｇ）下、反応混合物に、−７０℃に予め冷却した中間体４ｐ（２２４ｍｇ、０．５１８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を加えた。得られた溶液を−４０℃で２時間撹拌した。次に、反応混合物を、ＥｔＯＡｃとクエン酸（ａｑ）との撹拌混合物に注ぎ入れた。５分間撹拌した。有機層をとり、飽和ＮａＣｌ（ａｑ）により洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣにより精製すると、中間体４ｑが得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．６０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５６７．３［Ｍ＋１］、５６５．１［Ｍ−１］；ＬＣ／ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、３０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．１％酢酸；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％酢酸；２．５分で緩衝液Ｂを５〜１００％、次に、０．９分間、１００％、２ｍＬ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．２２分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．０５％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．０５％ＴＦＡ；５分で緩衝液Ｂを２〜９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体４ｒ − ７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（ベンジルオキシメチル）−５−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−アミン
中間体４ｑ（８１ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解させ、氷浴中、Ｎ２（ｇ）下で撹拌した。トリエチルシラン（１１４μＬ、０．７１５ｍｍｏｌ
）を一度に加えた。三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（２７μＬ、０．２１５ｍｍｏｌ）を滴下添加した。１５分間撹拌し、次に氷浴を取り除いた。６０分間撹拌した。トリエチルアミン（１００μＬ、０．７１５ｍｍｏｌ）を加え、減圧下で濃縮した。ＥｔＯＡｃに溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）（２ｘ）により洗浄し、次に、ＮａＣｌ（ａｑ）で飽和させた。有機物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。シリカゲルカラム（ヘキサン中０〜８０％ＥｔＯＡｃ）により精製すると、中間体４ｒが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）：δ７．７１ （ｓ， １Ｈ）， ７．３５ − ７．１０ （ｍ， １６Ｈ）， ６．８２−６．７８ （ｍ， １Ｈ）， ５．５７ （ｄ， Ｊ＝４．４Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７０ − ４．４５ （ｍ， ６Ｈ）， ４．２５ − ４．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５５ − ３．４０ （ｍ，
２Ｈ）， １．４２ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．７５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５５１．４［Ｍ＋１］；ＬＣ／ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ
Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、３０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．１％酢酸；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％酢酸；２．５分で緩衝液Ｂを５〜１００％、次に、０．９分間、１００％、２ｍＬ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．５７分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．０５％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．０５％ＴＦＡ；５分で緩衝液Ｂを２〜９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例４） − （２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルテトラヒドロフラン−３，４−ジオール
中間体４ｒ（２３ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）をギ酸／ＭｅＯＨ溶液（１：９、１０ｍＬ）に溶解させた。パラジウムブラックを加え、６０℃で９０分間撹拌した。室温まで冷却し、セライトによって濾過した。減圧下で濾液を濃縮した。分取ＨＰＬＣにより精製した。減圧下で濃縮した。ＮａＨＣＯ３（ａｑ）に溶解させ、中性条件下でＨＰＬＣにより精製すると、実施例４が得られた。
分取ＨＰＬＣシステム：Ｇｉｌｓｏｎ ２１５ Ｌｉｑｕｉｄ Ｈａｎｄｌｅｒ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８ ４ｕ、１００×３０．０ｍｍ
緩衝液Ａ：水中０．１％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ；１３分で緩衝液Ｂを５〜１００％、２０ｍＬ／分。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）：δ８．０１ （ｓ， １Ｈ）， ７．４１ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３３ （ｄ， Ｊ ＝ ８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５３−４．４９ （ｍ， １Ｈ）， ４．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５０ （ｍ， ２Ｈ）， １．２７ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．３０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２８１．３［Ｍ＋１］、２７９．０［Ｍ−１］；ＬＣ／ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、３０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．１％酢酸；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％酢酸；２．５分で緩衝液Ｂを５〜１００％、次に、０．９分間、１００％、２ｍＬ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝０．４２分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．０５％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．０５％ＴＦＡ；５分で緩衝液Ｂを２〜９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体５ａ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−５−アジド−３，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（トリメチルシリルオキシ）メチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
アルゴン雰囲気下、粗製中間体１ｍ、Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド（約１１０ｍｇ、約０．１８ｍｍｏｌ）およびアジドトリメチルシラン（ａｚｉｄｏｔｒｉｍｅｔｈｙｓｉｌａｎｅ）（２４２μｌ、１．８４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１．５ｍＬ）溶液に、室温で臭化インジウム（ＩＩＩ）（１３０ｍｇ、０．３６９ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１ｍＬ）によりクエンチした。得られた混合物を、ジクロロメタン（２０ｍＬ）と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）との間で分配した。相を分離し、水層をジクロロメタン（２０ｍＬ）により抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮すると、中間体５ａが得られ、これをさらに精製することなく次のステップで直接使用した。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝３．５２分、ＭＳ ｍ／ｚ＝７１２．１６［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．５５分にＡＣＮを１００％、３．５５分〜４．２分にＡＣＮを１００％〜２％、２μｌ／分。
Figure 2020055855
 中間体５ｂ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−アジド−３，４−ジヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
粗製中間体５ａ（約１２０ｍｇ、約０．１６８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、室温でフッ化セシウム（２５６ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）を加えた。２５時間後、反応混合物をブライン（１００ｍＬ）により希釈し、得られた混合物を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）により抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮すると、中間体５ｂが得られ、これをさらに精製することなく次のステップで直接使用した。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．４０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４１２．１７［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝２．４６分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例５） − （２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオール
粗製中間体５ｂのメタノール（１ｍＬ）溶液に、室温で濃水酸化アンモニウム（１ｍＬ）を加えた。２日後、反応混合物を減圧下で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ４ｕ Ｈｙｄｒｏ−ＲＲ ８０Å １５０×３０ｍｍカラム、５〜１００％アセトニトリル／水のグラジエント）により直接、精製した。所望のものを含有しているフラクションを合わせて、減圧下で濃縮した。ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（４ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜２０％メタノール／ジクロロメタン）により残留物を再精製すると、実施例５が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．７９ （ｓ， １Ｈ）， ６．８６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７７ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５
Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６３
（ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６９ （ｄ， Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５９ （ｄ， Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．７６分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３０８．０８［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．２分にＡＣＮを１００％、２．２分〜２．４分にＡＣＮを１００％〜２％、２．４分〜２．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝１．２８７分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ジクロロメタン中２０％メタノール、Ｒｆ＝０．４（ＵＶ）
Figure 2020055855
 （実施例６）（ＴＰ−１とも称する） − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−シアノ−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例３（１５．０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を真空下、一晩、フラスコ中で乾燥させた。そのフラスコにトリメチルホスフェート（０．５ｍＬ）および１，８−ビス（ジメチルアミノ）ナフタレン（２５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を氷／水浴により冷却して、Ｎ２下で撹拌した。蒸留したオキシ塩化リン（１０μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を加え、反応物を冷却しながら、４時間撹拌した。トリブチルアミン（０．１ｍｌ、０．４２ｍｍｏｌ）およびピロリン酸トリブチルアンモニウム（ＤＭＦ中０．５Ｍ溶液０．８ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を冷却しながら、さらに４５分間撹拌した。反応物を炭酸水素トリエチルアンモニウム（０．５Ｍ、５ｍＬ）によりクエンチした。溶媒を回転蒸発により除去し、残留粗製混合物を水２ｍＬに溶解させた。炭酸水素トリエチルアンモニウム０〜１Ｍの線形グラジエントを用いる、Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＤＥＡＥ Ａ−２５カラムを使用して、生成物を精製した。生成物含有フラクションをプールし、濃縮すると、実施例６（ＴＰ１）が得られ、次にこれを水１ｍＬに溶解させると１０ｍＭ溶液が得られた。
ＭＳ ｍ／ｚ＝５３２．０［Ｍ−１］
イオン交換ＨＰＬＣの保持時間：１２．０１５分；カラム：ＤＮＡＰａｃ ＰＡ−１００
４×２５０ｍｍ ＳＮ
溶媒Ａ：ｍｉｌｌｉＱ水；溶媒Ｂ：０．５Ｍ臭化テトラエチルアンモニウム；溶媒グラジエントプログラム：Ａ１００％を使用して１０分間平衡化し、次に、１４分間にわたりＢ０〜８０％の勾配；流速：１ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例７）（ＴＰ２でもある） − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−エチニル−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例２（１６．０ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）を真空下、一晩、フラスコ中で乾燥させた。そのフラスコにトリメチルホスフェート（０．５ｍＬ）および１，８−ビス（ジメチルアミノ）ナフタレン（２８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ２下、溶液を氷／水浴により冷却して、撹拌した。蒸留したオキシ塩化リン（１１μＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を冷却しながら、４時間撹拌した。トリブチルアミン（０．１１ｍＬ、０．４２ｍｍｏｌ）およびピロリン酸トリブチルアンモニウム（ＤＭＦ中０．５Ｍ溶液の０．９ｍＬ、０．４５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を冷却しながら、さらに４５分間撹拌した。反応物を炭酸水素トリエチルアンモニウム（０．５Ｍ、５ｍＬ）によりクエンチした。溶媒を回転蒸発により除去し、残留粗製混合物を水２ｍＬに溶解させた。炭酸水素トリエチルアンモニウム０〜１Ｍの線形グラジエントを用いる、Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＤＥＡＥ Ａ−２５カラムを使用して生成物を精製した。生成物含有フラクションを貯め、濃縮すると、実施例７（ＴＰ２）が得られ、次にこれを水１．４ｍＬに溶解させると１０ｍＭ溶液が得られた。
ＭＳ ｍ／ｚ＝５３１．０［Ｍ−１］
イオン交換ＨＰＬＣの保持時間：１９．８２９分；カラム：ＤＮＡＰａｃ ＰＡ−１００
４×２５０ｍｍ ＳＮ
溶媒Ａ：ｍｉｌｌｉＱ水；溶媒Ｂ：０．５Ｍ臭化テトラエチルアンモニウム；溶媒グラジエントプログラム：Ａ１００％を使用して１０分間平衡化し、次に、１４分間にわたりＢ０〜８０％の勾配；流速：１ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例８）（ＴＰ３） − （（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−シアノ−３，４−ジヒドロ
キシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例１（５．０ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）のＰＯ（ＯＭｅ）３（０．６ｍＬ）溶液に、０℃でＰＯＣｌ３（４５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を０℃で１０時間撹拌し、１０時間撹拌した時点で、イオン交換ＨＰＬＣにより、約５０％の変換率であることが示された。ピロホスフェートトリブチルアミン塩（２５０ｍｇ）のＡＣＮ（０．６ｍＬ）溶液を加え、次いでトリブチルアミン（１１０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で０．５時間撹拌し、イオン交換ＨＰＬＣにより、反応の完了が示された。反応物を炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液（１Ｍ、５ｍＬ）によりクエンチした。反応混合物を室温で０．５時間撹拌し、次に、濃縮して、水により２回、共蒸発させた。残留物をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解させ、イオン交換カラムにロードして、Ｈ２Ｏ、次に、５〜３５％の炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液（１Ｍ）−Ｈ２Ｏにより溶出した。生成物フラクションを合わせて濃縮し、Ｈ２Ｏと共蒸発させた。残留物をイオン交換カラムにより再度、精製すると、粗製物質が得られた。３１Ｐ ＮＭＲにより、この物質は不純物を含有していることが示されたので、この物質をＣ−１８カラムにより再精製し、０．０５％ＴＥＡを含有する０〜１５％ＡＣＮ−Ｈ２Ｏを用いて溶出し、生成物を含有しているフラクションを合わせて濃縮して、３．６ｍｇの物質を得た。これは、１Ｈ ＮＭＲ分析により示されたとおり、ＴＥＡを１．５当量しか含有していなかった。この物質をＨ２Ｏ（１ｍＬ）に溶解させ、炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液（１Ｍ、０．１ｍＬ）を加えた。得られた混合物を減圧下で濃縮し、減圧下でＨ２Ｏにより２回、共蒸発させると、実施例８（ＴＰ３）が、四ＴＥＡ塩として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）：δ７．７８ （ｓ， １Ｈ）， ６．８５ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ３．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６５ − ４．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２０ − ４．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１５ − ３．００ （ｍ， ２４Ｈ）， １．１８ − １．０８ （ｍ， ３６Ｈ）．３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）：δ−６．２５ （ｄ， Ｊ ＝ ５２
Ｈｚ）， −１２．２１ （ｄ， Ｊ ＝ ５２ Ｈｚ）， −２２．３２ （ｔ， Ｊ ＝ ５２ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝５３０．２［Ｍ−１］、５３２．１［Ｍ＋１］
Figure 2020055855
 （実施例９）（ＴＰ４） − （（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例５（６．０ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）のＰＯ（ＯＭｅ）３（０．６ｍＬ）溶液に、０℃でＰＯＣｌ３（４５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で１０時間撹拌し、１０時間撹拌した時点で、イオン交換ＨＰＬＣにより、約５０％の変換率であることが示された。ピロホスフェートトリブチルアミン塩（２５０ｍｇ）のＡＣＮ（０．６ｍＬ）溶液を加え、次いでトリブチルアミン（１１０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で６時間撹拌した。反応物を炭酸水素トリエチルアンモニウム
緩衝液（１Ｍ、５ｍＬ）によりクエンチした。反応混合物を室温で０．５時間撹拌し、次に、濃縮して、水により２回、共蒸発させた。残留物をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解させ、イオン交換カラムにロードして、Ｈ２Ｏ、次に、５〜３５％の炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液（１Ｍ）−Ｈ２Ｏにより溶出した。生成物フラクションを合わせて濃縮し、Ｈ２Ｏと共蒸発させた。残留物をイオン交換カラムにより再度、精製すると、粗製物質が得られた。３１Ｐ ＮＭＲにより、この物質は不純物を含有していることが示されたので、物質をイオン交換カラムにより再度、再精製して、粗製物質を得た。物質をＮａＨＣＯ３（１０ｍｇ）により処理し、混合物を減圧下で濃縮した。固体残留物をＨ２Ｏ０．５ｍＬに溶解させ、ＮａＯＨ（１Ｎ）４０μＬを加えた。得られた混合物を、Ｃ−１８カラムを用い、Ｈ２Ｏにより溶出して精製し、生成物を含有しているフラクションを合わせて減圧下で濃縮すると、実施例９（ＴＰ４）が四ナトリウム塩として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）：δ７．７６ （ｓ， １Ｈ）， ６．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ４．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５９ （ｄ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６０ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５５ （ｄ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９９ （ｑｄ， Ｊ ＝ １１．２， ５．５ Ｈｚ， ３Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）：δ−８．１３ （ｄ， Ｊ ＝ １９．８ Ｈｚ）， −１４．０４ （ｄ， Ｊ ＝ １８．９ Ｈｚ）， −２４．００ （ｔ， Ｊ ＝ １９．３ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝５４６．１［Ｍ−１］、５４７．９［Ｍ＋１］
Figure 2020055855
 中間体ＰＤ１ａ − Ｓ−２−ヒドロキシエチル２，２−ジメチルプロパンチオエート
−７８℃に冷却した、２−チオエタノール（３．５０ｍＬ、５０．０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（７．０２ｍＬ、５０．０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に、３０分かけて、ピバロイルクロリド（６．１５ｍＬ、５０．０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応物を室温までゆっくりと加温し、進行をＴＬＣによりモニタリングした。３０分後、反応が完了していると決定し、水によりクエンチした。層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２により洗浄した。有機物を合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥させた。固体を濾過して、溶媒を減圧下で除去した。粗製物を０〜５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、中間体ＰＤ１ａが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ４．８９ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４９ − ３．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８６ （ｔ， Ｊ ＝ ６．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．１４ （ｓ， ９Ｈ）．
Figure 2020055855
 オキシ塩化リン（２８１μＬ、３．０８ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解さ
せ、溶液を−７８℃まで冷却する。チオエステルＰＤ１ａ（１．００ｇ、６．１７ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解させ、ＰＯＣｌ３溶液にゆっくりと加える。次に、ＴＥＡ（８９１μＬ、６．１６ｍｍｏｌ）を滴下添加し、３０分間、冷却して撹拌する。次に、室温まで加温し、２時間撹拌する。ｐ−ニトロフェノール（４２８ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）を一度に加え、次いで、ＴＥＡ（４４９μＬ、３．０８ｍｍｏｌ）をゆっくりと加える。室温で３０分間撹拌する。ＴＬＣ（７０：３０ヘキサン／ＥｔＯＡＣ）では、スポットは一つしか示されなかったが、ＬＣ／ＭＳは、二つのピーク（生成物およびビス−ｐ−ニトロフェノレート）を有していた。溶液をエーテルにより希釈し、固体を濾過により除去し、廃棄した。母液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製すると、生成物およびビス−ｐ−ニトロフェノレートの混合物が得られた。次に、混合物をＨＰＬＣにより再精製すると、中間体ＰＤ１ｂである、Ｓ，Ｓ’−２，２’−（（４−ニトロフェノキシ）ホスホリル）ビス（オキシ）ビス（エタン−２，１−ジイル）ビス（２，２−ジメチルプロパンチオエート）が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．２９ − ８．２１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４６ − ７．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２３ （ｂｒ ｑ， Ｊ ＝ ７．７ Ｈｚ， ４Ｈ）， ３．１６ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ６．７ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．２３ （ｓ， １８Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−７．７２ （ｓ）
Figure 2020055855
 （実施例１０）（ＰＤ１とも称される） − Ｓ，Ｓ’−２，２’−（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−シアノ−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）ホスホリル）ビス（オキシ）ビス（エタン−２，１−ジイル）ビス（２，２−ジメチルプロパンチオエート）
実施例１（６．０ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（０．１ｍＬ）に溶解させ、ＴＨＦ（０．２ｍＬ）を加えた。次に、アルゴン雰囲気下、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液、０．０３１ｍＬ、０．０３１ｍｍｏｌ）を室温で加えた。１０分後、中間体ＰＤ１ｂ（１５．７ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（０．１ｍＬ）溶液を加え、得られた混合物を５０℃まで加温した。５時間後、得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ４ｕ Ｈｙｄｒｏ−ＲＲ ８０Å
１５０×３０ｍｍカラム、４０〜１００％アセトニトリル／水のグラジエント）により精製した。所望の生成物を含有しているフラクションを合わせて、凍結乾燥すると、実施例１０（ＰＤ１）が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ７．８２ （ｓ， １Ｈ）， ６．６９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５
Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５６ （ｄ， Ｊ ＝ ３．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６１
（ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ４．４５ − ４．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２２ −
４．０６ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１３ （ｄｔ， Ｊ ＝ １１．７， ６．７ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．２３ （ｓ， ９Ｈ）， １．２１ （ｓ， ９Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−２．３４ （ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．７０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６６０．０２［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ
溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．２０４分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水
グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例１１）（ＰＤ２） − Ｓ，Ｓ’−２，２’−（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−シアノ−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）ホスホリル）ビス（オキシ）ビス（エタン−２，１−ジイル）ビス（２，２−ジメチルプロパンチオエート）
実施例３（１０．５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（０．１ｍＬ）に溶解させ、ＴＨＦ（０．１ｍＬ）を加えた。次に、アルゴン雰囲気下、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液、０．０５４ｍＬ、０．０５４ｍｍｏｌ）を室温で加えた。１０分後、中間体ＰＤ１ｂ（２７．３ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（０．１ｍＬ）溶液を加え、得られた混合物を５０℃まで加温した。２４時間後、得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ４ｕ Ｈｙｄｒｏ−ＲＲ ８０Å １５０×３０ｍｍカラム、４０〜１００％アセトニトリル／水のグラジエント）により精製した。所望の生成物を含有しているフラクションを合わせて、凍結乾燥すると、実施例１１（ＰＤ２）が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ７．９４ （ｓ， １Ｈ）， ６．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６７ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５
Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２７．８， １．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．２， ４．９， １．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２１．２， ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．３， ７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．３， ７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１０ （ｄｄｔ， Ｊ ＝ １５．９， ８．０， ６．７ Ｈｚ， ４Ｈ）， ３．１６ − ３．０４ （ｍ， ４Ｈ），
１．２３ （ｓ， ９Ｈ）， １．２１ （ｓ， ９Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−２．１０ （ｓ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−１９１．６４ （ｄｄｄ， Ｊ
＝ ５５．０， ２７．８， ２１．３ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．８５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６６２．０３［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．３８５分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体ＰＤ３ｃ − （２Ｓ）−２−エチルブチル２−（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリルアミノ）プロパノエート
フェニルジクロロホスフェートＰＤ３ａ（１．５ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ３０ｍＬに溶解させ、Ｎ２（ｇ）下、氷浴中で撹拌した。アミノエステルＨＣｌ塩ＰＤ３ｂである、（Ｓ）−２−エチルブチル２−アミノプロパノエート塩酸塩（Ｅｕｒ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．２００９年、４４巻、３７６５〜３７７０頁に従い調製、２．１ｇ、１０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。ＴＥＡ（３ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）を滴下添加した。０℃で１時間撹拌した。ｐ−ニトロフェノール（１．４ｇ、１０ｍｍｏｌ）を一度に加え、ＴＥＡ（１．５ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）も加えた。次に、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。ＤＣＭにより希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）により洗浄した。有機物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。シリカゲルカラム（ヘキサン中０〜１５％ＥｔＯＡｃ）により精製すると、中間体ＰＤ３ｃが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．２３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８
Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４１ − ７．３０ （ｍ， ４Ｈ）， ７．２５ − ７．１９ （ｍ， ３Ｈ）， ４．１０ − ４．００ （ｍ， ３Ｈ）， ３．９０−３．８３ （ｍ， １Ｈ）， １．５５ − １．４５ （ｍ， １Ｈ）， １．４２ − １．３１ （ｍ， ７Ｈ）， ０．８７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２Ｈｚ， ６Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−３．０４ （ｓ）， −３．１０ （ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．８７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４５１．１［Ｍ＋１］、４４９．０［Ｍ−１］；ＬＣ／ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、３０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．１％酢酸；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％酢酸；２．５分で緩衝液Ｂを５〜１００％、次に、０．９分間、１００％、２ｍＬ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝４．４０分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．０５％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．０５％ＴＦＡ；５分で緩衝液Ｂを２〜９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例１２）（ＰＤ３） − （２Ｓ）−２−エチルブチル２−（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−シアノ−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリルアミノ）プロパノエート
実施例３（１５ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解させ、Ｎ２（ｇ）下で撹拌した。ｐ−ニトロフェニルホスホルアミデート（ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｏａｍｉｄａｔｅ）ＰＤ３ｃ（３５ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解させ、反応混合物に一度に加えた。ＴＨＦ中のｔＢｕＭｇＣｌ（ＴＨＦ中１Ｍ、７７μＬ、０．０７７ｍｍｏｌ）を滴下添加した。２時間撹拌した。追加のｐ−ニトロフェニルホスホルアミデート（無水ＤＭＦ０．５ｍＬ中、３５ｍｇ）および追加のｔＢｕＭｇＣｌ（ＴＨＦ中１Ｍ、５０μＬ、０．０５０ｍｍｏｌ）を加えた。２時間撹拌した。追加のｐ−ニトロフェニルホスホルアミデート（無水ＤＭＦ０．５ｍＬ中、３５ｍｇ）および追加のｔＢｕＭｇＣｌ溶液（ＴＨＦ中１Ｍ、５０μＬ、０．０５０ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間撹拌した。ＥｔＯＡｃにより希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）（３×）により洗浄した。飽和ＮａＣｌ（ａｑ）により洗浄し、有機物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下で濃縮した。シリカゲルカラム（ＤＣＭ中０〜５％ＭｅＯＨ）により精製した。フラクションを合わせ、減圧下で濃縮した。改質剤としてＴＦＡを用いる分取ＨＰＬＣにより精製すると、実施例１２（ＰＤ３）が得られた。
分取ＨＰＬＣシステム：Ｇｉｌｓｏｎ ２１５ Ｌｉｑｕｉｄ Ｈａｎｄｌｅｒ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８ ４ｕ、１００×３０．０ｍｍ
緩衝液Ａ：水中０．１％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ；１３分で緩衝液Ｂを５〜１００％、２０ｍＬ／分。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ７．８９ （ｓ， １Ｈ）， ７．３１ − ７．１３ （ｍ， ６Ｈ）， ６．８０−６．７５ （ｍ， １Ｈ）， ５．８０ − ５．７０ （ｍ， １Ｈ）， ５．３５ − ５．２０ （ｍ， １Ｈ）， ４．８０ − ４．６２ （ｍ， １Ｈ）， ４．６０ − ４．４５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．３５ − ４．１０ （ｍ， １Ｈ）， ４．０６ − ３．９６ （ｍ， ３Ｈ）， １．４９ − １．２８ （ｍ， ８Ｈ）， ０．９０ − ０．８２ （ｍ，
６Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ２．３６ （ｓ）， ２．２２ （ｓ）．
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．００分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．０５％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．０５％ＴＦＡ；５分で緩衝液Ｂを２〜９８％、２ｍＬ／分。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．３９分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６０５．１［Ｍ＋１］、６０３．０［Ｍ−１］；ＬＣ／ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ、Ｃ１８、５ｕ、１１０Ａ、３０×４．６ｍｍ；緩衝液Ａ：水
中０．１％酢酸；緩衝液Ｂ：アセトニトリル中０．１％酢酸；２．５分で緩衝液Ｂを５〜１００％、次に、０．９分間、１００％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体６ａ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−フルオロ−５−ビニルテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
中間体２ｇであるＮ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−フルオロ−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド（２２０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を、無水ＤＭＳＯ５ｍＬに溶解させて、Ｎ２（ｇ）下で撹拌した。ＥＤＣＩ（１００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を加え、次にＴＦＡ−ピリジン（３４ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を加えた。１時間撹拌した。追加のＥＤＣＩ（１００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳによるモニタリングによって、出発原料アルコールが残存していることが示された。追加のＥＤＣＩ（１００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳによるモニタリングによって、反応が完全な変換に到達したことが示された。酢酸エチルにより希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）（２×）、次に、飽和ＮａＣｌ（ａｑ）により洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。シリカゲルカラム（ヘキサン中０〜２０％ＥｔＯＡｃ）により精製した。フラクションを合わせて、減圧下で濃縮するとアルデヒドが固体として得られた。臭化メチルトリフェニルホスホニウム（５００ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ１０ｍＬ中に懸濁させて、Ａｒ（ｇ）下、−７８℃で撹拌した。ヘキサン中２．５Ｍのｎ−ブチルリチウム溶液（５６０μＬ、１．４０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を氷浴中、１時間撹拌すると、黄色混合物が得られた。上で調製したアルデヒドを無水ＴＨＦ５ｍＬに溶解させ、反応物に滴下添加した。氷浴を取り除き、反応物を室温まで加温した。室温で３時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、酢酸エチルにより抽出した。有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）、次に、飽和ＮａＣｌ（ａｑ）により洗浄した。有機物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。シリカゲルカラム（ヘキサン中０〜２０％ＥｔＯＡｃ）により精製すると、中間体６ａが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２２ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．０３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ７．５８ （ｄｔ， Ｊ ＝ ４０．４， ７．４ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．１２ （ｄ， Ｊ ＝ ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９７ （ｓ， １Ｈ）， ６．０１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．５， １０．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５８ （ｄ， Ｊ ＝ ２２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．５， ２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２５ （ｄｄ， Ｊ ＝
１１．０， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．４，
４．９， ２．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２０．８， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６３ − ３．４０ （ｍ， ２Ｈ）， ０．８９ （ｓ， ９Ｈ）， ０．８４ （ｓ， ９Ｈ）， ０．０９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ６Ｈ）， ０．００ （ｄ， Ｊ ＝ １４．１ Ｈｚ， ６Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−１９１．８６ （ｄ， Ｊ
＝ ５６．８ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝６２７．３［Ｍ＋１］。
Figure 2020055855
 （実施例１３） − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）−２−ビニルテトラヒドロフラン−３−オール
中間体６ａ（１４６ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、得られた溶液を氷浴中で撹拌した。ＴＨＦ中１ＭのＴＢＡＦ溶液（７００μＬ、０．７０ｍｍｏｌ）を加えて２時間撹拌した。ＥｔＯＡｃにより希釈し、飽和ＮａＣｌ（ａｑ）（５×）により洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。ＭｅＯＨ中７Ｍのアンモニア（７ｍＬ）中に溶解させ、１８時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮した。改質剤としてＴＦＡを含むＣ１８分取ＨＰＬＣにより精製した。フラクションを合わせ、減圧下で濃縮した。ＮａＨＣＯ３（ａｑ）に溶解させ、中性条件下で分取ＨＰＬＣにより再精製した。フラクションを合わせて冷凍乾燥すると、実施例１３が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ７．５４ （ｓ， １Ｈ）， ６．６２
− ６．４９ （ｍ， ２Ｈ）， ５．９８ − ５．７９ （ｍ， １Ｈ）， ５．５５ − ５．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ５．３１ （ｄ， Ｊ ＝ １１．１ Ｈｚ，
１Ｈ）， ５．１１ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５４．８， ５．２， ２．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２０．６， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６２ − ３．４３ （ｍ， ２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−１９３．２３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５４．７， ４４．２ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝２９５．２［Ｍ＋１］
Figure 2020055855
 （実施例１４） − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−エチル−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−オール
実施例１３（５ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍＬ）に溶解させた。次に、１０％Ｐｄ／Ｃ Ｄｅｇｕｓｓａ触媒（２ｍｇ）を加え、得られた混合物を水素ガスの雰囲気下で撹拌した。４０分後、得られた混合物を濾過してＰｄ／Ｃを除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を水に溶解させて冷凍乾燥すると、実施例１４が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ７．６７ （ｓ， １Ｈ）， ６．７９
− ６．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ５．５４ − ５．１２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．４６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．１， ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６５ − ３．４４ （ｍ， ２Ｈ）， １．８９ − １．４４ （ｍ， ２Ｈ）， ０．８４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ３Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−１９７．６２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝
５４．５， ２０．６， １５．０ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝２９７．３［Ｍ＋１］。
Figure 2020055855
 （実施例１５）（ＰＤ４） − Ｓ，Ｓ’−２，２’−（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−ビニルテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）ホスホリル）ビス（オキシ）ビス（エタン−２，１−ジイル）ビス（２，２−ジメチルプロパンチオエート）
実施例１３（５ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解させた。ｐ−ニトロ−フェノネート（ｐ−ｎｉｔｒｏ−ｐｈｅｎｏｎａｔｅ）（１３ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）を一度に加えた。ＴＨＦ中１Ｍのｔ−ブチルマグネシウムクロリド（２５μＬ、０．０２６ｍｍｏｌ）を滴下添加した。１時間撹拌した。５０℃まで加温し、２時間撹拌した。追加のｐ−ニトロ−フェノネート（１３ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。追加のＴＨＦ中１Ｍのｔ−ブチルマグネシウムクロリド（２５μＬ、０．０２６ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で１６時間撹拌した。室温まで冷却した。得られた混合物を分取ＨＰＬＣカラムにより直接、精製し、水中０〜１００％のＡＣＮにより線形グラジエントで溶出すると、実施例１５（ＰＤ４）が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．８４ （ｓ， １Ｈ）， ６．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５
Ｈｚ， １Ｈ）， ６．１０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．４， １０．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．８， １．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６１
（ｓ， １Ｈ）， ５．４５ − ５．３５ （ｍ， １Ｈ）， ５．１５ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．６， ５．０， ２．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２２．５， ５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．１， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０８ − ３．９５ （ｍ， ５Ｈ）， ３．０６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．０， ６．１ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．２１ （ｓ， ９Ｈ）， １．１８ （ｓ， ９Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ１９２．９９ （ｔｄ， Ｊ ＝
５５．７， ２３．６ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝６６３．０［Ｍ＋１］。
Figure 2020055855
 （実施例１６）（ＰＤ５） − （２Ｓ）−２−エチルブチル２−（（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート
実施例５（５ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を無水Ｎ−メチル−２−ピロリドン（０．２ｍＬ）に溶解させ、アルゴン雰囲気下、ＴＨＦ（０．１ｍＬ）を加えた。次に、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１Ｍ、２４μＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）を室温で加え、白色固体が沈殿した。５分後、反応混合物にｐ−ニトロフェニルホスホルアミデートＰＤ３ｃ（１５ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（０．１ｍＬ）溶液を一度に加え、得られた混合物を５０℃まで加熱した。３．５時間後、反応混合物を室温まで冷却し、１８時間撹拌した。次に、ｐ−ニトロフェニルホスホルアミデートＰＤ３ｃ（５０ｍｇ、０．１１１ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１Ｍ、２４μＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに５日間撹拌した。次に、得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ４ｕ Ｈｙｄｒｏ−ＲＲ ８０Å １５０×３０ｍｍカラム、４０〜１００％アセトニトリル／水のグラジエント）により直接、精製した。所望の生成物を含有しているフラクションを合わせて、凍結乾燥すると、実施例１６（ＰＤ５）が得られた（２：１ジアステレオマー混合物）。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ７．８８ （ｂｒ ｓ， １Ｈ），
７．３３ − ７．２２ （ｂｒ ｍ， ２Ｈ）， ７．２２ − ７．１０ （ｂｒ
ｍ， ３Ｈ）， ６．６９ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６１ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６４ − ５．５６ （ｍ， １Ｈ）， ４．５４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５０ −
４．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ４．１１ − ３．９４ （ｍ， ３Ｈ）， ３．９０
− ３．７６ （ｍ， １Ｈ）， １．４９ （ｓ， Ｊ ＝ ６．２ Ｈｚ， １Ｈ）， １．４０ − １．２４ （ｍ， ７Ｈ）， ０．８６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４
Ｈｚ， ６Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ２．６８ （ｓ）， ２．５６ （ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．７０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６１９．０９［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ。
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．０１０分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例１７）（ＴＰ５） − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−ビニルテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例１３（６．０ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）のＰＯ（ＯＭｅ）３（０．６ｍＬ）溶液に、０℃でＰＯＣｌ３（５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で６時間撹拌し、６時間撹拌した時点で、イオン交換ＨＰＬＣにより、約９０％の変換率であることが示された。ピロホスフェートトリブチルアミン塩（２５０ｍｇ）のＡＣＮ（０．６ｍＬ）溶液、次いでトリブチルアミン（１１０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で１時間撹拌した。反応物を炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液（１Ｍ、５ｍＬ）によりクエンチした。反応混合物を室温で０．５時間撹拌し、次に、濃縮して、水により２回、共蒸発させた。残留物をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解させ、イオン交換カラムにロードして、Ｈ２Ｏ、次に、５〜３５％の炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液（１Ｍ）−Ｈ２Ｏにより溶出した。生成物フラクションを合わせて濃縮し、Ｈ２Ｏと共蒸発させた。固体残留物をＨ２Ｏ３ｍＬに溶解させ、ＮａＯＨ（１Ｎ）１００μＬを加えた。得られた混合物を、Ｃ−１８カラムを用い、Ｈ２Ｏにより溶出して精製し、生成物を含有しているフラクションを合わせて減圧下で濃縮すると、実施例１７（ＴＰ５）が四ナトリウム塩として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）：δ７．７４ （ｓ， １Ｈ）， ６．８９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．００ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．４， １１．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ２３．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４９ （ｄ， Ｊ
＝ １６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３２ （ｄ， Ｊ ＝ １１．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５４．０， ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２３．７， ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．３， ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．６， ３．８ Ｈｚ， １Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）：δ−８．３８ （ｄ， Ｊ ＝ ２０．５ Ｈｚ）， −１３．６７ （ｄ， Ｊ ＝ １９．３ Ｈｚ）， −２４．２０ （ｔ， Ｊ ＝ １９．９ Ｈｚ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−１９４．５８ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５５．０， ２３．８ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝５３３．０［Ｍ−１］、５３５．０［Ｍ＋１］
Figure 2020055855
 （実施例１８）（ＴＰ６） − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−エチル−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例１４（５．０ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）のＰＯ（ＯＭｅ）３（０．６ｍＬ）溶液に、０℃でＰＯＣｌ３（４５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で６時間撹拌し、６時間撹拌した時点で、イオン交換ＨＰＬＣにより、約９０％の変換率であることが示された。ピロホスフェートトリブチルアミン塩（２５０ｍｇ）のＡＣＮ（０．６ｍＬ）溶液を加え、次いでトリブチルアミン（１１０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で１時間撹拌した。反応物を炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液（１Ｍ、５ｍＬ）によりクエンチした。反応混合物を室温で０．５時間撹拌し、次に、濃縮して、水により２回、共蒸発させた。残留物をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解させ、イオン交換カラムにロードして、Ｈ２Ｏ、次に、５〜３５％の炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液（１Ｍ）−Ｈ２Ｏにより溶出した。生成物フラクションを合わせて濃縮し、Ｈ２Ｏと共蒸発させた。固体残留物をＨ２Ｏ３ｍＬに溶解させ、ＮａＯＨ（１Ｎ）１００μＬを加えた。得られた混合物を、Ｃ−１８カラムを用い、Ｈ２Ｏにより溶出して精製し、生成物を含有しているフラクションを合わせて減圧下で濃縮すると、１８（ＴＰ６）が四ナトリウム塩として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）：δ７．７３ （ｓ， １Ｈ）， ６．８６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２１．９， ３．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２３ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５５．２， ４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２０．６， ５．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０８ − ３．８４ （ｍ， ３Ｈ）， １．８３ （ｄｑ， Ｊ ＝ １４．４， ７．４， ６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， １．６２ （ｄｑ， Ｊ ＝ １５．０， ７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ０．８７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ３Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： −５．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ２０．２ Ｈｚ）， −１０．８１ （ｄ， Ｊ ＝ １９．３ Ｈｚ）， −２１．６０ （ｔ， Ｊ ＝ １９．８ Ｈｚ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−１９４．７７ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５５．２， ２１．２ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝５３５．１［Ｍ−１］、５３６．９．０［Ｍ＋１］。
Figure 2020055855
 中間体８ａ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−５−（ヨードメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
アルゴンをパージしたフラスコに、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の２ｂ（６８ｍｇ、０．１８３ｍｍｏｌ）を加え、次いでメチルトリフェノキシホスホニウムヨージド（１２４ｍｇ、０．２７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で５分間撹拌し、５分間撹拌した時点で、生成物への完全な変換がＬＣＭＳにより観察された。反応物をメタノールによりクエンチし、溶媒を減圧下で除去した。粗製物質をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとの間で分配した。有機物を分離して、ブラインにより洗浄した。得られた物質をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗製物質をシリカゲルクロマトグラフィー（２０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製すると中間体８ａが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１７ （ｍ， ３Ｈ）， ７．６３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．１７ − ６．９６ （ｍ， ２Ｈ）， ５．７４ （ｓ， １Ｈ）， ５．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ２４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１９ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５４．６， ４．５， ２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０９ − ３．９２ （ｍ， １Ｈ）， ３．７２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．０， ３．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．０， ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−１９４．２３ （ｍ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．１３分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４８３．２３［Ｍ＋１］
ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体８ｂ − （３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−２−メチレンテトラヒドロフラン−３−オール
中間体８ａ（８０ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）をＴＨＦに溶解させた。ＤＢＵ（０．０７４ｍＬ、０．４９８ｍｍｏｌ）を一度に加えた。次に、反応物を油浴中、１６時間、６０℃まで加熱した。反応物を室温まで冷却し、溶媒を減圧下で除去した。粗製物質をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜７０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体８ｂが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３４−８．０５ （ｍ，
３Ｈ）， ７．６３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．１３ （ｄ， Ｊ ＝ ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．９７ − ５．８２
（ｍ， ２Ｈ）， ５．３９ − ５．１３ （ｍ， １Ｈ）， ４．８９ − ４．６９ （ｍ， １Ｈ）， ４．３８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１６ （ｔ， Ｊ ＝ １．８ Ｈｚ， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−１９８．１４ （ｄｄｄ，
Ｊ ＝ ５３．９， ２４．７， ２０．９ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．０５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３５５．１５［Ｍ＋１］
ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体８ｃ − （２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−２−（ヨードメチル）テトラヒドロフラン−３−オール
塩化ベンジルトリメチルアンモニウム（５５ｍｇ、０．２９６ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（１９．３ｍｇ、０．２９６ｍｍｏｌ）をＡＣＮ（１ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を室温で一晩、撹拌し、次に、濾過して、シリンジにより中間体８ｂ（５０ｍｇ、０．１４１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に加えた。次に、Ｎ−メチルモルホリン（０．０７８ｍＬ、０．７０６ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ヨウ素（６５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を滴下添加した。１５分後、ガスの発生がもはや観察できなくなるまで、Ｎ−アセチルシステインを加えた。次に、溶液が薄黄色になるまで、水性飽和チオ硫酸ナトリウムを加えた。粗製混合物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとの間で分配した。相を分離し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製物質をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜６０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると、中間体８ｃが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．３１−８．０５ （ｍ， ３Ｈ）， ７．６３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０４ （ｓ， １Ｈ）， ６．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ２３．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５５ − ５．３１ （ｍ， １Ｈ）， ４．６２ （ｄｔ， Ｊ ＝ ２１．９， ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８ − ３．５６ （ｍ， ２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−１９４．４４ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５４．７， ２２．８ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．１９分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５２４．０９［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体８ｄ − （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−２−（ヨードメチル）テトラヒドロフラン−３−イルアセテート
中間体８ｃ（４０ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に、室温で無水酢酸（０．００９ｍＬ、０．０９２ｍｍｏｌ）を加え、次いでＤＭＡＰ（１０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、反応混合物をメタノールでクエンチし、得られた混合物を減圧下で濃縮した。粗製物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜５０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体８ｄが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．１５−８．０２ （ｍ， ３Ｈ）， ７．６２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ），
７．００ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．９５ − ５．８０ （ｍ， １Ｈ）， ５．７０ − ５．４３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７１ （ｄ， Ｊ ＝ １１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６０ （ｄ， Ｊ ＝ １１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２５ （ｓ， ３Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−１９２．７８ （ｄｄｄ， Ｊ
＝ ５５．７， ２４．６， １８．５ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．３５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５６６．１４［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体８ｅ − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−アセトキシ−２−アジド−５−（４−ベンズアミドピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロテトラヒドロフラン−２−イル）メチルベンゾエート
中間体８ｄ（３０ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、室温で１５−クラウン−５（０．１０５ｍＬ、０．５３１ｍｍｏｌ）および安息香酸ナトリウム（７７ｍｇ、０．５３１ｍｍｏｌ）を加えた。次に、反応物を１０５℃まで加熱した。３０時間後、反応混合物を室温にし、５％ＬｉＣｌ（ａｑ）とＥｔＯＡｃとの間で分配した。相を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（２×）により洗浄した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜６０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体８ｅが得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ８．２５ − ７．９７ （ｍ， ４Ｈ）， ７．６９ − ７．４０ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９５ − ６．８０ （ｍ， １Ｈ）， ５．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ２５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６５ （ｄ， Ｊ ＝ １．９ Ｈｚ，
１Ｈ）， ５．６２ − ５．４８ （ｍ， １Ｈ）， ４．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝
７９．３， １２．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２０ （ｓ， ３Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ−１９２．５７ （ｄｄｄ， Ｊ
＝ ５３．９， ２５．１， ２２．０ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．４５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５６０．１４［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 （実施例１９） − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−オール
中間体８ｅ（２４ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）に、室温でＣＨ３ＯＨ中７ＮのＮＨ３（２ｍＬ）を加えた。１６時間後、得られた混合物を減圧下で濃縮した。粗製残留物を酸改
質剤を使用しない逆相ＨＰＬＣにより精製すると、実施例１９が得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ４）δ７．８１ （ｓ， １Ｈ），
６．８５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．８０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２４．７， １．９ Ｈｚ，
１Ｈ）， ５．２２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．６， ５．１， １．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２２．９， ５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８１ （ｄ， Ｊ ＝ １２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７０ （ｄ， Ｊ ＝ １２．２ Ｈｚ， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， メタノール−ｄ４）δ−１９５．３０ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．５， ２４．６， ２２．９ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．６１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３１０．０２［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ
溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体９ｂ − （（３ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ベンジルオキシ）−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）メタノール
アルゴン雰囲気下、水素化ナトリウム（６０重量％、１．５５ｇ、３８．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、０℃で（（３ａＲ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ベンジルオキシ）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソール−５，５−ジイル）ジメタノール（９ａ、Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈから購入、１０．０ｇ、３２．２ｍｍｏｌ）を加えた。１０分後、臭化ベンジル（４．５４ｍＬ、３８．６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温まで加温した。２時間後、反応物を飽和塩化アンモニウム水溶液（５００ｍＬ）によりクエンチした。得られた混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）により抽出した。次に、有機相をブライン（４００ｍＬ）により洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて、減圧下で濃縮すると無色油状物が得られた。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（２２０ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体９ａ（９．４９ｇ、７３％）が無色油状物として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．３８ − ７．１９ （ｍ， １０Ｈ）， ５．６８ （ａｐｐ ｔ， Ｊ ＝ ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７３ （ｑ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６３ （ｄ， Ｊ ＝ １２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４９ − ４．３６ （ｍ， ３Ｈ）， ４．２４ （ｂｒ
ｓ， １Ｈ）， ４．２０ − ４．１３ （ｍ， １Ｈ）， ３．８１ （ｄ， Ｊ
＝ １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５６ （ｄ， Ｊ ＝ １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４６ （ｑ， Ｊ ＝ １０．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４７ （ｓ， ３Ｈ）， １．２５ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．８８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４２３．３１［Ｍ＋Ｎａ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ
ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．７９分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中４０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．４（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体９ｃ − （３ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ベンジルオキシ）−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソール−５−カルボアルデヒド
中間体９ｂ（１．９５ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２４．５ｍＬ）溶液に、室温でデス−マーチンペルヨージナン（３．１ｇ、７．３ｍｍｏｌ）を加えた。１．５時間後、反応混合物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（８０ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体９ｃ（１．９４ｇ、１００％）が無色油状物として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ９．９１ （ｓ， １Ｈ）， ７．３６ − ７．１１ （ｍ， １０Ｈ）， ５．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ３．４ Ｈｚ，
１Ｈ）， ４．７１ （ｄ， Ｊ ＝ １２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５９ （ｄ， Ｊ ＝ １２．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５９ − ４．５８ （ｍ， １Ｈ），
４．５２ （ｄ， Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４６ （ｄ， Ｊ ＝
１２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ），
３．６８ （ｄ， Ｊ ＝ １１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６１ （ｄ， Ｊ ＝
１１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， １．６０ （ｓ， ３Ｈ）， １．３５ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．９９分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４２１．２５［Ｍ＋Ｎａ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ
ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡ
ＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝４．０９分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中４０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．６（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体９ｄ − （３ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，６ａＲ）−６−（ベンジルオキシ）−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−２，２−ジメチル−５−ビニルテトラヒドロフロ［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソール
臭化メチルトリフェニルホスホニウム（５．３８ｇ、１５．１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）溶液に、−７８℃で２．５Ｍ ｎ−ブチルリチウム（６．０２ｍＬ）を加えた。反応物を０℃まで加温し、中間体９ｃ（２．００ｇ、５．０２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液をシリンジによりゆっくり加えた。反応混合物を室温まで加温し、４時間撹拌した。次に、反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）によりクエンチし、水（２００ｍＬ）と酢酸エチル（２００ｍＬ）との間で分配した。層を分離し、有機層をブライン（２００ｍＬ）により洗浄して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（１２０ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜５０％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体９ｄ（１．０１ｇ、５１％）が無色油状物として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ７．４２ − ７．１７ （ｍ， １０Ｈ）， ６．１９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．６， １１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ３．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．５， １．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．１， １．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７６ （ｄ， Ｊ ＝ １２．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６２ − ４．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５２ （ｄ， Ｊ ＝ １２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４１ （ｄ， Ｊ ＝ １２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３２ （ｄ， Ｊ ＝ １．５ Ｈｚ，
２Ｈ）， １．５２ （ｓ， ３Ｈ）， １．２９ （ｓ， ３Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．１３分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４１９．２４［Ｍ＋Ｎａ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ
ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝４．３７分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５
．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中５０％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．５５（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体９ｅ − （３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ベンジルオキシ）−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−２−メトキシ−５−ビニルテトラヒドロフラン−３−オール
中間体９ｄ（１．０１ｇ、２．５５ｍｍｏｌ）のメタノール（１２．５ｍＬ）溶液に、室温でジオキサン中４ＭのＨＣｌ（３２０μＬ）を加えた。１．２５時間後、反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）との間で分配した。相を分離し、有機相をブライン（１００ｍＬ）により洗浄して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮すると、粗製中間体９ｅ（１．０５ｇ、１’アノマーの約２．５：１混合物）が無色油状物として得られた。
ＬＣ／ＭＳ：主要アノマーｔＲ＝２．００分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３９３．２２［Ｍ＋Ｎａ］、副アノマーｔＲ＝１．９８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３９３．２２［Ｍ＋Ｎａ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ
ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：主要アノマーｔＲ＝４．０１分、副アノマーｔＲ＝３．９５５分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中２５％酢酸エチル、主要アノマーＲｆ＝０．３０（ＵＶ）、副アノマーＲｆ＝０．２５（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体９ｆ − （２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−２−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−メトキシ−２−ビニルテトラヒドロフラン
アルゴン雰囲気下、室温で中間体９ｅ（１．０ｇ、２．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１３．５ｍＬ）溶液に、固体のＮａＨ（６０重量％、１３０ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、臭化ベンジル（０．３８ｍＬ、３．２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を４時間撹拌した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（５ｍＬ）によりクエンチし、酢酸
エチル（１００ｍＬ）とブライン（１００ｍＬ）との間で分配した。相を分離し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮すると、粗製中間体９ｆ（１．５７ｇ、１’アノマーの約２：１混合物）が無色油状物として得られた。
ＬＣ／ＭＳ：主要アノマーｔＲ＝１．８８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４８３．３６［Ｍ＋Ｎａ］、副アノマーｔＲ＝１．８３分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４８３．３６［Ｍ＋Ｎａ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ
ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．２分にＡＣＮを１００％、２．２分〜２．４分にＡＣＮを１００％〜２％、２．４分〜２．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：主要アノマーｔＲ＝４．８３分、副アノマーｔＲ＝４．６２分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体９ｇ − （３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−ビニルテトラヒドロフラン−２−オール
中間体９ｆ（１．５ｇ、３．２ｍｍｏｌ）に、０℃でＴＦＡ（１６ｍＬ）および水（１．６ｍＬ）の溶液を加え、反応混合物を室温まで加温した。９時間後、水（１ｍＬ）を加え、反応混合物をさらに１０時間撹拌した。次に、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗製残留物を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２×１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）により洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（２４ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製した。所望の生成物を含有しているフラクションを合わせると中間体９ｇ（５８０ｍｇ）が無色油状物として得られ、これは、他の不純物との混合物であった。混合物を次のステップで直接使用した。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝３．１３分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４６３．８８［Ｍ＋ＯＨ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ
ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝４．３４分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体９ｈ − （３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−ビニルジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン
中間体９ｇ（５８０ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）および４Å ＭＳ（１００ｍｇ）のＤＣＭ（６．４５ｍＬ）溶液に、室温で過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（４５．７ｍｇ、１３０μｍｏｌ）および４−メチルモルホリンＮ−オキシド（４５７ｍｇ、３．８９ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、反応混合物にシリカゲル（約５００ｍｇ）を加え、得られたスラリーをシリカゲルプラグ（約１ｇ）により濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（１２ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体９ｈ（２５４ｍｇ、２ステップで１８％）が無色油状物として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ７．３８ − ７．２３ （ｍ， １３Ｈ）， ７．２０ − ７．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ５．９１ （ｄｄ， Ｊ ＝
１７．５， １１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．５，
０．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．２， ０．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９６ （ｄ， Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）． ４．７４ −
４．６８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５５ − ４．４７ （ｍ， ３Ｈ）， ４．３９
（ｄ， Ｊ ＝ １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５５ （ｄ， Ｊ ＝ １０．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４６
（ｄ， Ｊ ＝ １０．８ Ｈｚ， １Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．１９分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４４４．７８［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝４．５３分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：ヘキサン中２５％の酢酸エチル、Ｒｆ＝０．４５（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体９ｉ − （３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−ビニルテトラヒドロフラン−２−オール
ＴＨＦ（４ｍＬ）中の中間体１ｂ（０．２１ｇ、０．８１ｍｍｏｌ）および１，２−ビス（クロロジメチルシリル）エタン（０．１７ｇ、０．８１ｍｍｏｌ）の懸濁物に、アルゴン雰囲気下、−７８℃でｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ、１．０ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を迅速に加えた。次に、アルゴン雰囲気下、９ｈ（０．１８ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に、−７８℃で得られた混合物をカニューレにより移した。２０分後、反応混合物を０℃まで加温し、１５分間撹拌した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（１ｍＬ）によりクエンチした。得られた混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）により希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（１２ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体９ｉ（１１．１ｍｇ、５％、異性体混合物）が無色油状物として得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．９７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５７９．２７［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．３７分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：酢酸エチル、Ｒｆ＝０．３（ＵＶ）
Figure 2020055855
 中間体９ｊ − ７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ビス（ベンジルオキシ）
−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−５−ビニルテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−アミン
中間体９ｉ（１１．０ｍｇ、１９．０μｍｏｌ）およびトリエチルシラン（０．５ｍＬ）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、アルゴン雰囲気下、０℃で三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（０．１ｍＬ）をゆっくり加えた。１時間後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）によりゆっくり希釈し、得られた混合物を酢酸エチル（２×１０ｍＬ）により抽出して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製残留物を、ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（４ｇのＳｉＯ２ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ ＨＰ Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｕｍｎ、０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、中間体９ｊ（７．７ｍｇ、７２％）が無色薄膜状物として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ７．８７ （ｓ， １Ｈ）， ７．３７ − ７．１７ （ｍ， １５Ｈ）， ６．７３ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ，
１Ｈ）， ６．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．５， １０．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７０ （ｄ， Ｊ ＝ ３．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．５， １．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７２ − ４．５６ （ｍ， ４Ｈ）， ４．４９ （ｄ， Ｊ ＝ １１．９ Ｈｚ，
２Ｈ）， ４．４３ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．６， ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５６ （ｓ， ２Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．３２分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５６３．３３［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝３．５１分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
ＴＬＣ：溶離液：酢酸エチル、Ｒｆ＝０．４０（ＵＶ）
Figure 2020055855
 （実施例２０） − （２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−（ヒドロキシメチル）−２−ビニルテトラヒドロフラン−３，４−ジオール
アルゴン雰囲気下、中間体９ｊ（７．７ｍｇ、１３．７μｍｏｌ）のジクロロメタン（１ｍＬ）溶液に、−７８℃で三臭化ホウ素（１Ｍ、０．０６ｍＬ、６０μｍｏｌ）を滴下
添加した。１時間後、反応混合物を０℃まで加温し、さらに１．５時間撹拌した。反応物を−７８℃に冷却し、２：１メタノール／ピリジン溶液（１．５ｍＬ）によりクエンチした。得られた混合物を室温まで加温し、減圧下で濃縮した。粗製残留物を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ４ｕ Ｈｙｄｒｏ−ＲＲ ８０Å １５０×３０ｍｍカラム、０〜１００％アセトニトリル／水のグラジエント）により精製すると、実施例２０（０．５ｍｇ、１３％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．７８ （ｓ， １Ｈ）， ６．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５
Ｈｚ， １Ｈ）， ６．０２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．４， １１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．４， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， ２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１５ （ｄ， Ｊ
＝ ８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．２， ５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６０ （ｄ， Ｊ ＝ １１．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４９ （ｄ， Ｊ ＝ １１．８ Ｈｚ， １Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．８４分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２９３．１９［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜１．５分にＡＣＮを２〜１００％、１．５分〜２．２分にＡＣＮを１００％、２．２分〜２．４分にＡＣＮを１００％〜２％、２．４分〜２．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝２．１８１分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例２１） − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−５−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−オール
実施例１９（２３７ｍｇ、０．７６６ｍｍｏｌ）およびセレクトフルオル（４０７ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（５ｍＬ）中に懸濁させ、ＡｃＯＨ（０．２ｍＬ）を加えた。得られた混合物を室温で３０分間撹拌し、次に、炭酸水素ナトリウム溶液により中和して濾過し、固体を除去した。真空中で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣ（水中０〜３０％アセトニトリル）によって精製すると、実施例２１（２７ｍｇ、１１％）がオフホワイトの固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．７３ （ｓ， １Ｈ）， ６．
６３ （ｓ， １Ｈ）， ５．８０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２３．９， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１６ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．３， ５．０， １．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２３．５， ５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９４ − ３．６０ （ｍ， ２Ｈ）
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ−１６１．７６ （ｓ）， −１９５．４２ （ｄ， Ｊ ＝ ５５．４ Ｈｚ）
ＭＳ ｍ／ｚ＝３２８［Ｍ＋Ｈ］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ
Figure 2020055855
 中間体１１ｂ − ２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−アミン
ポリチューブの容器に中間体１１ａ（２．０ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）を投入した。次に、反応容器を氷浴に入れ、７０％ＨＦ／Ｐｙｒ（１８ｍＬ）およびピリジン（９ｍＬ）の両方を逐次、加えた。次に、ピリジンの添加直後に、ｔＢｕＮＯ２（２．０７ｍＬ、１７．４３ｍｍｏｌ）を２０分かけて、ゆっくり加えた。溶液は発熱およびガスの発生を伴いながら、黄褐色から黒色になる。次に、反応物をさらに２０分間撹拌し、次に、反応混合物を水により希釈して減圧下で濃縮した。粗製残留物を酢酸エチルと水との間で分配した。有機物を分離し、水性層を酢酸エチルにより３回、洗浄した。有機物を合わせて、ブラインにより洗浄した。粗製物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（５０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると、中間体１１ｂ（１．６８ｇ、８２％）が黄褐色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４９ − ８．０９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５８ （ｔ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５， １Ｈ）， ６．５９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−７３．４２ （ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．０３分、ＭＳ ｍ／ｚ＝１５３．０８［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１１ｃ − ７−ブロモ−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリ
アジン−４−アミン
１１ｂ（３．３６ｇ、２２．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を氷浴中で０℃に冷却した。１，３−ジブロモ−５，５−ジメチルヒダントイン（３．１６ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を４０分かけて、添加漏斗により滴下添加した。１時間後、反応物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（ａｑ）によりクエンチし、粗製物をＥｔＯＡｃと５％ＬｉＣｌ（ａｑ）との間で分配した。有機物を５％ＬｉＣｌ（ａｑ）（４×）、次いでブラインにより抽出した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、固体を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。粗製残留物をＣＨ２Ｃｌ２と共に超音波処理し、固体を濾過により収集して、高真空下で乾燥させると、中間体１１ｃ（３．９３ｇ、７７％）が黄色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４９−８．４４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−７１．４５ （ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．２２分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２３２．９８［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１１ｅ −（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−２−（４−アミノ−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−（ベンジルオキシ）−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−３−フルオロテトラヒドロフラン−２−オール
１１ｃ（２．０９ｇ、９．０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、１，２−ビス（クロロジメチルシリル）エタン（ＳＴＡＢＡＳＥ、１．９６ｇ、９．０８ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた混合物を周囲温度で１時間撹拌した。次に、メタノールを伴うドライアイス浴を使用して、反応物を−７８℃まで冷却した。内部温度を−６５℃に維持するようにｎＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、１０．９ｍＬ、２７．２ｍｍｏｌ）を加えた。次に、反応混合物に、中間体１１ｄ（ＷＯ２０１２０１２７７６に従い調製、２．５ｇ、７．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液を１分かけて加えた。５分後、反応混合物を酢酸によりクエンチし、周囲温度にした。溶媒を減圧下で除去し、残留物を酢酸エチルに溶解させた。有機物を水、次いでブラインにより洗浄した。層を分離し、有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮すると、粗製１１ｅが異性体の混合物として得られ、これをこのまま次のステップで使用した。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．３２分および１．４０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４８３．１５［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム
：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１１ｆ − ７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（ベンジルオキシ）−５−（（ベンジルオキシ）メチル）−３−フルオロテトラヒドロフラン−２−イル）−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−アミン
中間体１１ｅ（１．９９ｇ、３．７２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）に溶解させ、混合物にＴＥＳ（４．７５ｍＬ、２９．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃まで冷却し、ＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ（１．０７ｍＬ、４．０９ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。１５分後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）によりクエンチし、層を分離した。水層をＣＨ２Ｃｌ２により洗浄した。有機層を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）により洗浄した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜６０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体１１ｆ（１．１２ｇ、６４％、１’アノマーの２：１混合物）が得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．５５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４６７．４７［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１１ｇ − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−オール
中間体１１ｆ（０．８２ｇ、１．７６ｍｍｏｌ）を酢酸（２５ｍＬ）に溶解させた。反応容器にアルゴンをパージし、１０％Ｐｄ／Ｃ（４６８ｍｇ、０．４３９ｍｍｏｌ）を加えた。容器中の気体を抜き、Ｈ２（ｇ）を逆充填（ｂａｃｋｆｉｌｌ）（３×）した。１時間後、反応容器に窒素をパージした。得られた混合物をセライトのパッドにより濾過し
、濾過ケーキをＣＨ３ＯＨにより洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、次に、酢酸エチル、次いでヘキサンと共蒸発させると、中間体１１ｇ（５０３ｍｇ、９８％、１’アノマーの２：１混合物）が得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．８１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２８６．９７［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１１ｈ − （２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−２−（ヨードメチル）テトラヒドロフラン−３−オール
アルゴンをパージしたフラスコに、１１ｇ（２８３ｍｇ、０．９８９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を加え、次いでメチルトリフェノキシホスホニウムヨージド（０．５３６ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物を０℃で１０分間撹拌し、次に、周囲温度まで加温した。３０分後、反応物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（ａｑ）によりクエンチした。粗製物質をＥｔＯＡｃと５％ＬｉＣｌ（ａｑ）との間で分配した。有機物を分離して、ブラインにより洗浄した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をＡＣＮに溶解させ、酸改質剤を用いずにＨＰＬＣにより精製すると、中間体１１ｈ（２０１ｍｇ、５２％、１’アノマーの２：１混合物）が白色固体として得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．０８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３９７．１２［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１１ｉ − （３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−フルオロピロロ［２
，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−２−メチレンテトラヒドロフラン−３−オール
１１ｈ（３５６ｍｇ、０．８９９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８ｍＬ）溶液に、ＤＢＵ（０．４０３ｍＬ、２．７０ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を６０℃に加熱した。３時間後、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（４０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると、中間体１１ｉ（２０１ｍｇ、８３％、１’アノマーの２：１混合物）が白色固体として得られた。
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．０４分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２６９．１４［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１１ｊ − （２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−２−（ヨードメチル）テトラヒドロフラン−３−オール
塩化ベンジルトリメチルアンモニウム（２９２ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（１０２ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）をＡＣＮ（４ｍＬ）に溶解させ、得られた混合物を周囲温度で４時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を１１ｉ（０．２０１ｇ、０．７４９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に加えた。ＮＭＭ（０．４１２ｍＬ、３．７５ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ヨウ素（０．３４２ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液を滴下添加した。１５分後に、ガスの発生が観察されなくなるまで、Ｎ−アセチルシステインを少量ずつ加えた。溶液が薄黄色になるまで、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（ａｑ）を加えた。得られた混合物を水と酢酸エチルとの間で分配した。層を分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（２０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体１１ｊ（１８３ｍｇ、５６％）が単一異性体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ２８．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２３．８， ２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３６ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５４．９， ５．０， ２．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６０ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ２１．５， ６．９， ５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６３ （ＡＢｑ， Δδ＝ ０．０９ｐｐｍ， Ｊ ＝ ８Ｈｚ， ２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−７１．７４ （ｓ）， −１９４．５７ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５４．９， ２４．０， ２１．７ Ｈｚ）
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．７１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４３７．９３［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１１ｋ − （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−２−（ヨードメチル）テトラヒドロフラン−３−イルイソブチレート
１１ｊ（０．１８３ｇ、０．４１９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、イソ酪酸無水物（０．０８３ｍＬ、０．５０２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．１１８ｍＬ、０．８３７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１０ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を周囲温度で１５分間撹拌し、反応物をＣＨ３ＯＨによりクエンチした。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜５０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体１１ｋ（０．１９８ｇ、９３％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ３０．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７７ − ５．４７ （ｍ，
３Ｈ）， ３．６９ （ＡＢｑ， Δδ＝ ０．０５ｐｐｍ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ，
２Ｈ）， ２．７０ （ｐ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， １．２４ − １．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ６Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−７１．５８ （ｓ）， −１９４．８９ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．０， ２４．３， １６．８ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．５６分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５０８．１３［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１１ｌ − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−３−（イソブチリルオキシ）テトラヒドロフラン−２−イル）メチル３−クロロベンゾエート
中間体１１ｋ（０．１５３ｇ、０．３０２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６ｍＬ）に溶解させた。二塩基性リン酸カリウム（０．１３８ｇ、０．６０３ｍｍｏｌ）、硫酸水素テトラブチルアンモニウム（０．２１０ｇ、０．６１８ｍｍｏｌ）および３ークロロ安息香酸（０．０９７ｇ、０．６１８ｍｍｏｌ）を逐次、加えた。得られた混合物を０℃まで冷却し、ＭＣＰＢＡ（０．２０３ｇ、０．９０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度まで加温し、１６時間撹拌した。次に、反応混合物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（ａｑ）によりクエンチし、減圧下で濃縮した。粗製水性残留物をＡＣＮにより希釈し、酸改質剤を用いずに分取ＨＰＬＣによって精製すると、中間体１１ｌ（２０ｍｇ、１３％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４６ （ｄ， Ｊ ＝ ２６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．９６ − ７．８１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８１ −
７．６６ （ｍ， １Ｈ）， ７．６２ − ７．４６ （ｍ， １Ｈ）， ６．９４
（ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７３ （ｓ， ３Ｈ）， ４．６０ （ＡＢｑ， Δδ＝ ０．０８ｐｐｍ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６６ （ｐ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， １．２０ − １．０１ （ｍ， ６Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ＝ −７１．４５ （ｓ），
−１９３．４１ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５４．４， ２５．４， ２１．２ Ｈｚ，）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．２２分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５３６．１７［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例２２） − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−オール
中間体１１ｌ（２２ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＯＨ（１ｍＬ）溶液に、室温で濃ＮＨ４ＯＨ（１ｍＬ）を加えた。３０分後、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗製残留物を最少量のＨ２Ｏにより希釈し、酸改質剤を用いずに分取ＨＰＬＣにより精製すると、実施例２２（１０ｍｇ、７７％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４０ （ｄ， Ｊ ＝ ３０．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．９５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．８９ （ｄ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２３．８， ２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４４ （ｔ， Ｊ ＝ ６．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１８ （ｄｄｄ，
Ｊ ＝ ５５．３， ５．１， ２．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ２３．７， ７．５， ５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５９ （ｄｄｄ， Ｊ
＝ ４８．５， １２．０， ６．１ Ｈｚ， ２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ−７１．１８ （ｓ）， −１９３．４８ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５５．３， ２３．８ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．１３分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３２７．８６［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１２ａ − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−５−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−フルオロテトラヒドロフラン−２−カルボニトリル
中間体３ｄ（５７ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（３ｍＬ）溶液に、セレクトフルオルＩＩ（５２ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）を一度に加えた。１．５時間後、反応物を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）を添加することによりクエンチした。酢酸エチル（４ｍＬ）を加え、二相の混合物を５分間、激しく撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃおよび飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）によりさらに希釈した。層を分離し、有機相を水、次に、ブラインにより抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。乾燥剤を真空濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。以下の溶媒勾配を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、濃縮した粗製物質から中間体１２ａ（１１ｍｇ、１８．７％）を単離した：ヘキサン中０％ＥｔＯＡｃからヘキサン中７０％ＥｔＯＡｃに上昇、出発原料がカラムから溶出したら、素早く１００％ＥｔＯＡｃに上昇。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．７２ （ｓ， １Ｈ）， ７．５５ （ｓ， １Ｈ）， ５．６５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２４．８， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３８ （ｄｑ， Ｊ ＝ ５４．４， ２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８８
（ｄｄ， Ｊ ＝ １９．２， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９６ （ＡＢｑ， ΔδＡＢ ＝ ０．１４１ｐｐｍ， Ｊ ＝ １１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ０．９９ （ｓ， ９Ｈ）， ０．８６ （ｓ， ９Ｈ）， ０．２１ （ｓ， ６Ｈ）， ０．０７ （ｓ， ３Ｈ）， −０．０２ （ｓ， ３Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ−１６１．７９５ （ｓ）， −１９４．８０６ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５４．５， １９．２， １８．８ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．０６分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５４０．６４［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳ：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 （実施例２３） − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−５−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−カルボニトリル
ポリプロピレン製チューブ中で、中間体１２ａ（２９ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、０℃でピリジン中７０％のＨＦ・ピリジン（５１μＬ、１．９７ｍｍｏｌ）を加えた。１．５時間後、反応物を氷浴から取り出した。ピリジン中７０％のＨＦ・ピリジンを３時間後（１５０μＬ）、５時間４５分後（２００μＬ）および２１時間１５分後（０．７ｍＬ）にさらに加えた。次に、反応混合物をさらに２４時間撹拌し、２４時間撹拌した時点で、反応混合物を氷浴中で冷却し、次に、水におよび飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）によりクエンチした。混合物を減圧下で濃縮し、残留物をＤＭＦに溶解させた。得られた溶液／懸濁物をシリンジフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ ０．４５μｍ ＰＴＦＥとＧＭＦ）により濾過した。濾液をＨＰＬＣに注入し、半精製した生成物を以下の溶媒勾配を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによりさらに精製した：ＤＣＭ中０％ＭｅＯＨからＤＣＭ中２０％ＭｅＯＨに上昇。生成物含有フラクションを濃縮し、残留物を凍結乾燥すると、実施例２３（５ｍｇ、３０％）が白色粉末として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＦ−ｄ７）δ７．７４ （ｓ， １Ｈ）， ６．６１ （ｓ， １Ｈ）， ５．７５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２５．２， １．６ Ｈｚ，
１Ｈ）， ５．２３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５４．８， ４．８， １．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２２， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９０
（ＡＢｑ， ΔδＡＢ ＝ ０．１５１ｐｐｍ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， ２Ｈ） ．１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＤＭＦ−ｄ７）δ−１６１．７２７ （ｓ），
−１９３．７２６ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５４．５， ２２．９， ２１．８ Ｈｚ）．
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．８１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３１２．１３［Ｍ＋１］；ＬＣ：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳ：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３分にＡＣＮを２％。
Figure 2020055855
 中間体１３ａ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−３−フルオロ−５−（ヨードメチル）テトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
トリフェニルホスフィン（９７３ｍｇ、３．７１ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（２５２ｍｇ、３．７１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、室温でヨウ素（２５３ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）を加えた。ヨウ素が完全に溶解すると、化合物２ｇ（６５０ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液をゆっくりと滴下添加した。得られた混合物を８０℃で３日間撹拌し、次に、真空中で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜５０％のＥｔＯＡｃ）によって精製すると、中間体１３ａ（２３０ｍｇ、３３％）が油状物として得られた。
ＭＳ ｍ／ｚ＝７４２［Ｍ＋Ｈ］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ。
Figure 2020055855
 中間体１３ｂ − Ｎ−（７−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−３−フルオロ−５−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）ベンズアミド
窒素雰囲気下で中間体１３ａ（２００ｍｇ、０．２４３ｍｍｏｌ）をメタノール（１０ｍＬ）に溶解させ、１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ、０．０９４ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．０３５ｍＬ、０．２４３ｍｍｏｌ）を加えた。次に、得られた混合物をＨ２雰囲気下
（バルーン）、室温で４０分間撹拌した。得られた混合物を濾過して真空中で濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜４０％ＥｔＯＡｃ）により精製すると、中間体１３ｂ（１４５ｍｇ、７２％）が白色固体として７５％純度で得られた。
ＭＳ ｍ／ｚ＝６１６［Ｍ＋Ｈ］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ
Figure 2020055855
 （実施例２４） − （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルテトラヒドロフラン−３−オール
中間体１３ｂ（１４５ｍｇ、７５％純度、０．１７７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ、０．５３ｍＬ、０．５３１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌し、次にメタノール性アンモニア（７Ｎ、１０ｍＬ）を加えた。得られた混合物を２４時間撹拌し、減圧下で濃縮した。粗製残留物を分取ＨＰＬＣ（２０分で、水中０〜３５％アセトニトリル）により精製すると、実施例２４（３０ｍｇ、６０％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．７８ （ｓ， １Ｈ）， ６．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５
Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２１．５， ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２５ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．５， ５．３， ４．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １７．２， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６５ − ３．４３ （ｍ， ２Ｈ）， １．２７ （ｓ， ３Ｈ）
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ−１９７．０８ （ｄｄｄ， Ｊ
＝ ５５．４， ２１．５， １７．１ Ｈｚ）
ＭＳ ｍ／ｚ＝２８２［Ｍ＋Ｈ］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ。
Figure 2020055855
 中間体１４ａ − （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオール
中間体１ｅ（２．６４ｇ、４．９１ｍｍｏｌ）を酢酸（５０ｍＬ）に溶解させた。フラスコにアルゴンをパージし、１０％Ｐｄ／Ｃ（１．０５ｇ、０．９８２ｍｍｏｌ）を加えた。フラスコ中の気体を抜き、Ｈ２（ｇ）を３回逆充填（ｂａｃｋｆｉｌｌ）した。反応混合物をＨ２（ｇ）の雰囲気下で撹拌した。１時間後、フラスコに窒素をパージし、ＣＨ３ＯＨ洗液を使用して、反応混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、次に、ＥｔＯＡｃ、続いてヘキサンと共蒸発させた。残留物を高真空下に置くと、中間体１４ａ（１．３１ｇ、９９％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８０ （ｓ， １Ｈ）， ７．６６ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０９ （ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０６−４．５６ （ｍ， ３Ｈ）， ４．２１ （ｔ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９３ （ｔ， Ｊ ＝ ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７７ （ｑ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４８ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ３８．９， １１．８， ４．４ Ｈｚ， ２Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．４７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝２６７．１３［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｂ − （（３ａＲ，４Ｒ，６Ｓ，６ａＳ）−６−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メタノール
中間体１４ａ（３．１３ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）をアセトン（８０ｍＬ）に溶解させ、ＴｓＯＨ（６．００ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）を加えた。オルトギ酸トリエチル（６．０ｍＬ、３６．１ｍｍｏｌ）を１０分かけて、ゆっくり加えた。得られた混合物を周囲温度で一晩、撹拌した。反応混合物がｐＨ＝８になるまで、飽和炭酸ナトリウム水溶液を加えた。固体を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。粗製残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。相を分離し、有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製物をシリカゲルクロマトグラフィー（６０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ〜２０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）により精製すると、中間体１４ｂ（２．５５ｇ、７１％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８３ （ｓ， １Ｈ）， ７．７１ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７３ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２１ （ｄ， Ｊ ＝ ４
．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８４ （ｔ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．７， ３．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９９ − ３．８５ （ｍ， １Ｈ）， ３．４６ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４８ （ｓ， ３Ｈ）， １．２９ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．８７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３０７．２１［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｃ − ７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−アミン
中間体１４ｂ（２．５５ｇ、８．３２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解させ、混合物を０℃に冷却した。イミダゾール（１．７０ｇ、２４．９ｍｍｏｌ）を加え、続いてＴＢＳＣｌ（１．８８ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、反応物をメタノールによりクエンチした。得られた混合物を減圧下で濃縮し、粗製残留物を水とＥｔＯＡｃとの間で分配した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（５０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体１４ｃ（２．６０ｇ、７４％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８３ （ｓ， １Ｈ）， ７．７４ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６８ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．００ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．５， ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．５， ３．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９７
（ｔｄ， Ｊ ＝ ５．１， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６４ （ｄ， Ｊ ＝
５．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４８ （ｓ， ３Ｈ）， １．２８ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８３ （ｓ， ９Ｈ）， −０．０２ （ｓ， ６Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．９１分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４２１．６０［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、
２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｄ − ｔｅｒｔ−ブチル（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）カルバメート
中間体１４ｃ（２．５９ｇ、６．１６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６０ｍＬ）に溶解させ、得られた溶液を０℃に冷却した。次に、Ｂｏｃ２Ｏ（２．６９ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．３ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）を加えた。ＴＥＡ（２．５６ｍＬ、１８．３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、反応混合物を室温まで加温した。３時間後、反応混合物を０℃まで冷却し、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）を加え、次いで、濃ＮＨ４ＯＨ（ａｑ）（５０ｍＬ）を加えた。得られた混合物を室温まで加温し、一晩、撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗製残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。層を分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると、中間体１４ｄ（２．８２ｇ、８８％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．４６ （ｓ， １Ｈ），
８．２０ （ｓ， １Ｈ）， ７．１９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ），
６．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３３ （ｄ， Ｊ ＝ ４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．５， ４．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．５， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０１ （ｑ， Ｊ ＝ ５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６４ （ｄ， Ｊ ＝ ５．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４９ （ｓ， ９Ｈ）， １．３２ （ｄ， Ｊ ＝ ２２．７
Ｈｚ， ６Ｈ）， ０．８２ （ｓ， ９Ｈ）， −０．０３ （ｓ， ６Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．８９分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５２１．２７［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｅ − ｔｅｒｔ−ブチル（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）カルバメート
中間体１４ｄ（２．８ｇ、５．４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解させ、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１．０Ｍ、５．９２ｍＬ、５．９２ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、追加のＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１．０Ｍ、５．９２ｍＬ、５．９２ｍｍｏｌ）を加えた。さらに３０分後、反応混合物を水によりクエンチし、得られた混合物をＥｔＯＡｃ（２×）により抽出した。合わせた有機層をブラインにより洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（１０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体１４ｅ（２．１９ｇ、８６％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．４６ （ｓ， １Ｈ），
８．２２ （ｓ， １Ｈ）， ７．２０ （ｓ， １Ｈ）， ６．９５ （ｓ， １Ｈ）， ５．２９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０３ （ｄｄ， Ｊ
＝ ６．６， ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８５ （ｔ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０５ − ３．９０ （ｍ， １Ｈ）， ３．４６ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ，
２Ｈ）， １．５０ （ｓ， １２Ｈ）， １．２９ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．５２分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４０７．０５［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｆ − ｔｅｒｔ−ブチル（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＳ）−６，６−ビス（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）カルバメート
中間体１４ｅ（１．７８ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２０ｍＬ）およびトルエン（１５ｍＬ）に溶解させた。ピリジン（０．３５ｍＬ、４．３８ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（１．２６ｇ、６．５６ｍｍｏｌ）を加え、続いてＴＦＡ（０．１７８ｍＬ、２．３９ｍｍｏｌ）を加えた。９０分後、追加のピリジン（０．３５ｍＬ、４．３８ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（１．２６ｇ、６．５６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに３０分間撹拌した。反応物を水によりクエンチし、得られた混合物をＣＨ２Ｃｌ２により抽出した。水性層をＣＨ２Ｃｌ２により抽出し戻した。有機層を合わせてブラインにより洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製物を高真空下に１５分間置き、次に、このまま次のステップで使用した。
粗製残留物をジオキサン（１５ｍＬ）に溶解させ、ホルムアルデヒド（水中３７％、５．０ｍＬ、３７．２ｍｍｏｌ）および２Ｎ ＮａＯＨ（５．３４ｍＬ、１０．７ｍｍｏｌ）を逐次、加えた。１０分後、反応物をＡｃＯＨによりクエンチし、得られた混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）とＣＨ２Ｃｌ２との間で分配した。水層をＣＨ２Ｃｌ２により抽出し戻した。有機層を合わせてブラインにより洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製物を高真空下に１５分間置き、次いで、次の反応に直接用いた。
粗製残留物をＥｔＯＨ（５０ｍＬ）に溶解させ、ＮａＢＨ４（０．３２４ｇ、８．７６ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。２０分後、反応混合物をＡｃＯＨによりクエンチし、減圧下で濃縮した。粗製残留物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）との間で分配した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（５０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体１４ｆ（１．９１ｇ、６８％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．４５ （ｓ， １Ｈ），
８．２０ （ｓ， １Ｈ）， ７．１９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．３ Ｈｚ， １Ｈ），
６．９５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３５ （ｄ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０６ （ｔ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７９−４．７４ （ｍ， ２Ｈ）， ４．４５ （ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３ − ３．４６ （ｍ， ３Ｈ）， ３．４０ − ３．３０ （ｍ，
１Ｈ）， １．５０ （ｓ， １２Ｈ）， １．２７ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．４５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４３７．０９［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｇ − ｔｅｒｔ−ブチル（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｓ，６ａＳ）−６−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）カルバメート
中間体１４ｆ（１．１５ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（０．７３ｍＬ、５．２７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を０℃まで冷却し、ＤＭＴｒＣｌ（１．３５ｇ、３．９５ｍｍｏｌ）を加えた。１０分後に、反応混合物をＣＨ３ＯＨによりクエンチし、次に、ＣＨ２Ｃｌ２により希釈した。得られた混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）およびブラインにより洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると１４ｇ（１．９５ｇ、７９％）がオフホワイトの固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．４６ （ｓ， １Ｈ），
８．２３ （ｓ， １Ｈ）， ７．５６ − ７．０７ （ｍ， １０Ｈ）， ７．０７ − ６．７０ （ｍ， ５Ｈ）， ５．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０４ （ｔ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９３ − ４．７１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８０ − ３．５９ （ｍ， ７Ｈ）， ３．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．９， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．２５ （ｄ， Ｊ ＝ ９．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．０９ （ｄ， Ｊ ＝ ９．９ Ｈｚ， １Ｈ）， １．５０ （ｓ， ９Ｈ）， １．２５ （ｓ， ３Ｈ）， １．２１ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．５４分、ＭＳ ｍ／ｚ＝７３９．２８［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｈ − ｔｅｒｔ−ブチル（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＳ）−６−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）カルバメート
中間体１４ｇ（１．５３ｇ、２．０８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、イミダゾール（０．４２ｇ、６．２３ｍｍｏｌ）を加え、続いてＴＢＳＣｌ（０．４７ｇ、３．１１ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、反応物をメタノールによりクエンチし、ＥｔＯＡｃと５％ＬｉＣｌ（ａｑ）との間で分配した。相を分離し、有機層をブラインにより洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜５０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると１４ｈ（１．７７ｇ、７８％）がオフホワイトの固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．４７ （ｓ， １Ｈ），
８．２３ （ｓ， １Ｈ）， ７．５６ − ６．６６ （ｍ， １５Ｈ）， ５．３１ （ｄ， Ｊ ＝ ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．５， ４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７３ （ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ），
３．８７ （ｄ， Ｊ ＝ ９．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７２ （ｓ， ６Ｈ），
３．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ９．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３１ （ｍ， １Ｈ），
３．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ９．８ Ｈｚ， １Ｈ）， １．５０ （ｓ， ９Ｈ），
１．２５ （ｓ， ３Ｈ）， １．２２ （ｓ， ３Ｈ）， ０．７５ （ｓ， ９Ｈ）， −０．０４ （ｓ， ３Ｈ）， −０．０８ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．３４分、ＭＳ ｍ／ｚ＝８５３．５０［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．０分にＡＣＮを２〜１００％、１．０分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｉ − ｔｅｒｔ−ブチル（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＳ）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）カルバメート
中間体１４ｈ（１．３８ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）をクロロホルム（２０ｍＬ）に溶解させ、得られた溶液を０℃に冷却した。次に、ＴｓＯＨ（０．３４ｇ、１．７８ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＯＨ（１６ｍＬ）溶液をゆっくり加えた。３０分後、反応物を飽和ＮａＨＣＯ３
（ａｑ）によりクエンチし、得られた混合物をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。層を分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体１４ｉ（０．８４ｇ、９４％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．４２ （ｓ， １Ｈ），
８．２０ （ｓ， １Ｈ）， ７．１９ （ｓ， １Ｈ）， ６．８９ （ｓ， １Ｈ）， ５．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０５ （ｄｄ， Ｊ
＝ ６．２， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７１ （ｄ， Ｊ ＝ ６．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５１ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７０ （ｄ， Ｊ ＝ １０．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５９ （ｄ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ，
２Ｈ）， ３．４９ （ｄ， Ｊ ＝ １０．２ Ｈｚ， １Ｈ）， １．４９ （ｓ， １２Ｈ）， １．２８ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８２ （ｓ， ９Ｈ）， −０．０１ （ｓ， ３Ｈ）， −０．０２ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．８８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５５１．２５［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ
ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ
ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．０分にＡＣＮを２〜１００％、１．０分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｊ − ｔｅｒｔ−ブチル（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＳ）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−６−シアノ−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）カルバメート
中間体１４ｉ（０．８３８ｇ、１．５２ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（５ｍＬ）およびトルエン（３ｍＬ）に溶解させた。ピリジン（０．１４ｍＬ、１．６７ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（０．４３８ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）を加え、続いてＴＦＡ（０．０５７ｍＬ、０．７６１ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、追加のピリジン（０．１４ｍＬ、１．６７ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（０．４３８ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、追加のピリジン（０．１４ｍＬ、１．６７ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（０．４３８ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、反応混合物を１／２飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）によりクエンチし、ＥｔＯＡｃと１／２飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）との間で分配した。層を分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解させ、高真空下で１時間濃縮すると残留物が得られ、これを次のステップで直接使用した。
残留物をピリジン（８ｍＬ）に溶解させ、ヒドロキシルアミン塩酸塩（０．１５９ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）を一度に加えた。１５分後、反応混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃと水との間で分配した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物を高真空下に３０分間置き、このまま第３ステップに使用した。
粗製残留物をＡＣＮ（８ｍＬ）に溶解させた。ＣＤＩ（０．３７ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）を一度に加えた。４５分後、追加のＣＤＩ（０．３７ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、反応物を１／２飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）によりクエンチした。粗製物をＥｔＯＡｃと１／２飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）との間で分配した。層を分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜５０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると、中間体１４ｊ（０．７２ｇ、８７％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．５３ （ｓ， １Ｈ），
８．２５ （ｓ， １Ｈ）， ７．２１ （ｓ， １Ｈ）， ７．００ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６２ （ｄ， Ｊ ＝ ３．６ Ｈｚ， １Ｈ），
５．２８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， ３．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３ （ｓ， ２Ｈ）， １．６２ （ｓ， ３Ｈ）， １．５０ （ｓ， ９Ｈ）， １．３３ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８３ （ｓ， ９Ｈ）， ０．００ （ｓ， ６Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．５０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５４６．１５［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｋ − （３ａＳ，４Ｒ，６Ｓ，６ａＳ）−６−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−カルボニトリル
中間体１４ｊ（０．６８８ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）に溶解させた。臭化亜鉛（０．５６７ｇ、２．５２ｍｍｏｌ）を一度に加え、反応混合物を周囲温度で撹拌した。３時間後、反応混合物をシリカ充填カートリッジに加え、シリカゲルクロマトグラフィー（４０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体１４ｋ（０．５６ｇ、９９％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８６ （ｓ， １Ｈ）， ７．８０ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５５ （ｄ， Ｊ ＝ ３．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， ３．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８２ （ｓ， ２Ｈ）， １．６１ （ｓ， ３Ｈ）， １．３３ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８３ （ｓ，
９Ｈ）， −０．１３ （ｓ， ６Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝２．２７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４４６．６８［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｌ − Ｎ−（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＳ）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−６−シアノ−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）アセトアミド
中間体１４ｋ（０．２０ｇ、０．４４９ｍｍｏｌ）をピリジン（２ｍＬ）に溶解させ、次に、無水酢酸（０．２１ｍＬ、２．２４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を周囲温度で撹拌した。３０分後、反応混合物をメタノールでクエンチし、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により直接、精製すると中間体１４ｌ（０．１８５ｇ、８５％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．８７ （ｓ， １Ｈ），
８．３１ （ｓ， １Ｈ）， ７．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．７ Ｈｚ， １Ｈ），
７．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８４ （ｓ， ２Ｈ）， ２．３６ （ｓ， ３Ｈ）， １．６２ （ｓ， ３Ｈ）， １．３３ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８３ （ｓ， ９Ｈ）， ０．００ （ｓ， ３Ｈ）， −０．０１
（ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．１４分、ＭＳ ｍ／ｚ＝４８８．３８［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；
グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｍ − Ｎ−（５−ブロモ−７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＳ）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−６−シアノ−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）アセトアミド
中間体１４ｌ（８０ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解させ、ＮＢＳ（２９ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）を一度に加えた。４５分後、反応物をメタノールにより希釈した。溶媒を減圧下で除去した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜５０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）により精製すると中間体１４ｍ（５０ｍｇ、５４％）がオフホワイトの固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．１３ （ｓ， １Ｈ），
８．４２ （ｓ， １Ｈ）， ７．２９ （ｓ， １Ｈ）， ５．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．６， ３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９１ （ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８４ （ｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２７ （ｓ， ３Ｈ）， １．６２ （ｓ， ３Ｈ）， １．３３ （ｓ， ３Ｈ）， ０．８３ （ｓ， ９Ｈ）， ０．０２ （ｓ， ３Ｈ）， ０．００ （ｓ， ３Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．７９分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５６６．４０［Ｍ＋１］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１４ｎ − Ｎ−（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＳ）−６−（（（ｔｅｒｔ
−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−６−シアノ−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−５−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）アセトアミド
中間体１４ｍ（５０ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解させ、溶液を−７８℃に冷却した。ｎＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、０．０７１ｍＬ、０．１８ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド（ＮＳＦＩ、３３．４ｍｇ、０．１０６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５分間撹拌した。次に、反応物をＡｃＯＨによりクエンチした。溶媒を減圧下で除去した。粗製残留物を逆相ＨＰＬＣにより精製すると中間体１４ｎ（１０ｍｇ、２２％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ４）δ８．１３ （ｓ， １Ｈ），
６．８０ （ｓ， １Ｈ）， ５．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ３．５ Ｈｚ， １Ｈ），
５．２３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．７， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２ （ｄ， Ｊ ＝ １．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３７ （ｓ， ３Ｈ）， １．７０ （ｓ， ３Ｈ）， １．３８ （ｓ， ３Ｈ）， ０．９０ （ｓ， ９Ｈ）， ０．０８ （ｓ， ６Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， メタノール−ｄ４）δ−１５６．４３ （ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．６５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５０６．１８［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜２．４分にＡＣＮを２〜１００％、２．４分〜２．８０分にＡＣＮを１００％、２．８分〜２．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、２．８５分〜３．０分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例２５） − （２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−５−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３，４−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−２−カルボニトリル
中間体１４ｎ（１１ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を、周囲温度で５０％ＴＦＡ水溶液に溶解させた。２時間後、反応混合物を固体Ｎａ２ＣＯ３によりクエンチし、ｐＨ＝８に到達させた。溶媒を減圧下で除去し、粗製残留物を逆相ＨＰＬＣにより精製した。実施例２５を含有しているフラクションを合わせて取り置いておき、Ｎ６−アシルを含有しているフラクションを合わせて、減圧下で濃縮した。Ｎ６−アシル中間体の残留物を濃ＮＨ４ＯＨ（ａｑ）（１ｍＬ）に溶解させ、混合物を周囲温度で撹拌した。３０分後、得られた混合物を減圧下で濃縮し、粗製残留物をＨＰＬＣにより精製した。実施例２５を含有しているフラクションを、先に取り置いておいた実施例２５を含有しているフラクションと合わせると、実施例２５（４ｍｇ、５８％）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ６）δ７．７１ （ｓ， １Ｈ），
６．５６ （ｓ， １Ｈ）， ５．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ），
４．４８ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３ （（ＡＢｑ， Δδ＝ ０．０５ｐｐｍ， Ｊ ＝ １２ Ｈｚ， ２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， メタノール−ｄ４）δ−１６１．８１ （ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝０．４７分、ＭＳ ｍ／ｚ＝３１０．１３［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×３．００ｍｍ；溶媒：０．１％ギ酸を含むアセトニトリル、０．１％ギ酸を含む水；グラジエント：０分〜１．４分にＡＣＮを２〜１００％、１．４分〜１．８０分にＡＣＮを１００％、１．８分〜１．８５分にＡＣＮを１００％〜２％、１．８５分〜２分にＡＣＮを２％、１．８ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 中間体１５ａ − ｔｅｒｔ−ブチル（７−（（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＳ）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−６−（クロロメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−イル）カルバメート
中間体１４ｉ（１００ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を無水ピリジン（５ｍＬ）に溶解させた。トリフルオロメタンスルホニルクロリド（２３μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を一度に加え、反応混合物を室温で４５分間撹拌した。次に、追加のトリフルオロメタンスルホニルクロリド（１００μＬ）を加えた。３０分後、追加のトリフルオロメタンスルホニルクロリド（１００μＬ）を加えた。さらに３０分経過後、追加のトリフルオロメタンスルホニルクロリド（１００μＬ）を加え、反応物を３０分間撹拌し、３０分間撹拌した時点で、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗製残留物を無水ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させ、次に、塩化リチウム（１５３ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）を一度に加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）により希釈し、飽和塩化ナトリウム水溶液（３×２０ｍＬ）により洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜２０％酢酸エチル）により精製すると中間体１５ａが得られた。
ＭＳ ｍ／ｚ＝５６９．０［Ｍ＋Ｈ］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ
Figure 2020055855
 （実施例２６） − （２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−（クロロメチル）−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオール
中間体１５ａをＴＦＡと水の溶液（１：１、５ｍＬ）に溶解させ、得られた混合物を１６時間撹拌した。次に、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗製残留物を炭酸水素ナトリウム水溶液およびアセトニトリルに溶解させ、分取ＨＰＬＣにより精製すると、実施例２６（１９ｍｇ、３４％）が白色粉末として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ７．６１ （ｓ， １Ｈ）， ６．７２
− ６．６４ （ｍ， ２Ｈ）， ５．１９ （ｄ， Ｊ ＝ ９．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７３ − ４．６６ （ｍ， １Ｈ）， ４．２８ （ｄ， Ｊ ＝ ５．２
Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８ （ｓ， ２Ｈ）， ３．７２ − ３．５７ （ｍ， ２Ｈ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝３１５．３［Ｍ＋Ｈ］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ
Figure 2020055855
 （実施例２７）（ＴＰ７でもある） − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例２７は、実施例ＴＰ４について記載されている手法と同様の手法で、実施例１９から出発して、四ナトリウム塩として調製した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ７．７６ （ｓ， １Ｈ）， ６．８３
（ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ２５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５５．２， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７８ （ｄｄ， Ｊ
＝ ２６．８， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０８ − ４．１８ （ｍ， ２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−１９３．７４ − −１９４．０２
（ｍ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−４．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ５３．２ Ｈｚ， １Ｐ）， −１０．２５ （ｄ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ， １Ｐ）， −２０．２８ （ｔ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ， １Ｐ）．
Figure 2020055855
 （実施例２８） − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−５−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例２８は、実施例ＴＰ４について記載されている手法と同様の手法で、実施例２１から出発して、四ナトリウム塩として調製した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ７．６４ （ｓ， １Ｈ）， ６．６０
（ｓ， １Ｈ）， ５．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ２４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５４．８， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２７．２， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０５ − ４．１８ （ｍ， ２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−１６１．００ （ｓ）， −１９６．３９ − −１９６．６９ （ｍ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−８．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ５０．４ Ｈｚ）， −１４．２０ （ｄ， Ｊ ＝ ４６．０ Ｈｚ）， −２４．０８ （ｔ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝５６７．８７［Ｍ＋１］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ
Figure 2020055855
 （実施例２９） − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−アジド−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例２９は、実施例ＴＰ４について記載されている手法と同様の手法で、実施例２２から出発して、四ナトリウム塩として調製した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ６．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ２４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５４．４，
４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２６．８， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０２−４．１２ （ｍ， ２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−７５．９５ （ｓ）， −１９６．５１ − −１９６．８０ （ｍ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−８．２９ （ｄ， Ｊ ＝ ５３．２ Ｈｚ）， −１４．２２ （ｄ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ）， −２４．０９ （ｔ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝５６７．５９［Ｍ＋１］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ
Figure 2020055855
 （実施例３０） − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−５−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−シアノ−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例３０は、実施例ＴＰ４について記載されている手法と同様の手法で、実施例２３から出発して、四ナトリウム塩として調製した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ７．６４ （ｓ， １Ｈ）， ６．５７
（ｓ， １Ｈ）， ５．８７ （ｄ， Ｊ ＝ ２４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５３．６， ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２５．２， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２６−４．３５ （ｍ， ２Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−１６１．０５ （ｓ）， −１９４．９２ − −１９５．１９ （ｍ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−８．２２ （ｄ， Ｊ ＝ ５０．８ Ｈｚ）， −１４．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ）， −２４．０１ （ｔ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝５５１．９１［Ｍ＋１］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ
Figure 2020055855
 （実施例３１）（ＴＰ１１でもある） − （（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−３−ヒドロキシ−２−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例３１は、実施例ＴＰ４について記載されている手法と同様の手法で、実施例２４から出発して、四ナトリウム塩として調製した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ７．６６ （ｓ， １Ｈ）， ６．７８
（ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２３．６， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ），
５．１６ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ５５．２， ５．２， ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２３．２， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．６， ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．８， ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， １．２ （ｓ， ３Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−１９５．７４ − −１９６．０１
（ｍ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−８．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ５０．４ Ｈｚ）， −１３．５４ （ｄ， Ｊ ＝ ４５．６ Ｈｚ）， −２４．１１ （ｔ， Ｊ ＝ ４８．０ Ｈｚ）．
Figure 2020055855
 （実施例３２）（ＴＰ１２でもある） − （（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−５−フルオロピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−シアノ−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例３２は、実施例ＴＰ４について記載されている手法と同様の手法で、実施例２５
から出発して、四ナトリウム塩として調製した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ７．５９ （ｓ， １Ｈ）， ６．５７
（ｓ， １Ｈ）， ５．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５６
（ｄ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．６， ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．２， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）．
１９Ｆ ＮＭＲ （３７６ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−１６１．２５ （ｓ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−８．２９ （ｄ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ）， −１４．４９ （ｄ， Ｊ ＝ ５３．２ Ｈｚ）， −２４．１５ （ｔ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝５４９．９０［Ｍ＋１］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ
Figure 2020055855
 （実施例３３）（ＴＰ１３でもある） − （（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−（クロロメチル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート
実施例３３は、実施例ＴＰ３について記載されている手法と同様の手法で、実施例２６から出発して、四トリエチルアミン塩として調製した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ７．７６ （ｓ， １Ｈ）， ６．９２
（ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ６．８５ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ５．３２ （ｄ， Ｊ
＝ ９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７８ （ｄｄ， Ｊ ＝８， ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０８ （ｄｄ，
Ｊ ＝ １０．０， ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３ − ３．９５ （ｍ， ３Ｈ）， ３．０７ （ｑ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２４ Ｈ）， １．１６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ３６ Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）δ−９．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ４５．６ Ｈｚ）， −１１．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ４８．８ Ｈｚ）， −２２．９５ （ｔ， Ｊ ＝ ４８．４ Ｈｚ）．
ＭＳ ｍ／ｚ＝５５５．０６［Ｍ＋１］。ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ
Figure 2020055855
 （実施例３４）（ＰＤ６でもある） − （２Ｓ）−２−エチルブチル２−（（（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−シアノ−４−フルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート
実施例１（３．８ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）を無水Ｎ−メチル−２−ピロリドン（０．２ｍＬ）に溶解させ、アルゴン雰囲気下、ＴＨＦ（０．１ｍＬ）を加えた。次に、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１Ｍ、２０μＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）を室温で加え、白色固体が沈殿した。５分後、反応混合物にｐ−ニトロフェニルホスホルアミデートＰＤ３ｃ（１２ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（０．１ｍＬ）溶液を一度に加え、得られた混合物を５０℃まで加熱した。２０時間後、反応混合物を室温まで冷却し、次に、分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ４ｕ Ｈｙｄｒｏ−ＲＲ ８０Å １５０×３０ｍｍカラム、４０〜１００％アセトニトリル／水のグラジエント）により直接、精製した。所望の生成物を含有しているフラクションを合わせて、凍結乾燥すると、実施例３４（２．９ｍｇ、３７％、３：２のジアステレオマー混合物）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．８０ （ｓ， ０．３Ｈ）， ７．７８ （ｓ， ０．６Ｈ）， ７．３８ − ７．１０ （ｍ， ５Ｈ）， ６．８５ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ ＝ ４．７， ２．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７５ − ６．７１ （ｍ， １Ｈ）， ５．５４ − ５．４６ （ｍ， １Ｈ）， ４．６５ −
４．５８ （ｍ， １Ｈ）， ４．５３ − ４．３１ （ｍ， ３Ｈ）， ４．０７
− ３．８４ （ｍ， ３Ｈ）， １．５４ − １．３９ （ｍ， １Ｈ）， １．３８ − １．１９ （ｍ， ７Ｈ）， ０．９２ − ０．８１ （ｍ， ６Ｈ） ２９Ｈ
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ３．２５ （ｂｒ ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｔＲ＝１．５５分、ＭＳ ｍ／ｚ＝６０３．１９［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８ １００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝２．９８分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
Figure 2020055855
 （実施例３５）（ＰＤ７でもある） − （２Ｓ）−エチル２−（（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−２−シアノ−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート
実施例１（１９ｍｇ、６５．３μｍｏｌ）をＮＭＰ（０．２ｍＬ）に溶解させた。アルゴン雰囲気下、室温で、ＴＨＦ（０．１ｍＬ）を加え、次いで、ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウムクロリド（テトラヒドロフラン中１．０Ｍ溶液、０．０９８ｍＬ）を加えた。５分後、中間体ＰＤ７ａ（ＵＳ２０１２０００９１４７Ａ１に従って調製、５１．４ｍｇ、１３０μｍｏｌ）のＴＨＦ（０．１ｍＬ）溶液を加え、得られた混合物を５０℃まで加温した。１時間後、反応混合物を室温まで冷却し、分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ４ｕ Ｈｙｄｒｏ−ＲＲ ８０Å １５０×３０ｍｍカラム、５〜１００％アセトニトリル／水のグラジエント）により直接、精製した。生成物を含有しているフラクションを合わせて濃縮し、得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８ １００×３０ｍｍカラム、５〜１００％アセトニトリル／水のグラジエント）により再精製すると、実施例３５（１２ｍｇ、３４％、３：２のジアステレオマーの混合物）が白色固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ７．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３
Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．３ Ｈｚ， ０．６Ｈ）， ７．３６ − ７．１２ （ｍ， ５Ｈ）， ６．８８ − ６．８１ （ｍ， １Ｈ）， ６．７６ − ６．７０ （ｍ， １Ｈ）， ５．５３ − ５．４６ （ｍ， １Ｈ）， ４．６６ − ４．６０ （ｍ， １Ｈ）， ４．５５ − ４．３０ （ｍ，
３Ｈ）， ４．１５ − ３．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．９３ − ３．７９ （ｍ， １Ｈ）， １．３０ − １．１２ （ｍ， ６Ｈ）．
３１Ｐ ＮＭＲ （１６２ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ３．２７ （ｂｒ ｓ）．
ＬＣ／ＭＳ：主要ジアステレオマーｔＲ＝１．２８分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５４７．１４［Ｍ＋Ｈ］、副ジアステレオマーｔＲ＝１．３０分、ＭＳ ｍ／ｚ＝５４７．０４［Ｍ＋Ｈ］；ＬＣシステム：Ｔｈｅｒｍｏ Ａｃｃｅｌａ １２５０ ＵＨＰＬＣ；ＭＳシステム：Ｔｈｅｒｍｏ ＬＣＱ Ｆｌｅｅｔ；カラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ ２．６μ ＸＢ−Ｃ１８
１００Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％酢酸を含むアセトニトリル、０．１％酢酸を含む水；グラジエント：０分〜２．０分にＡＣＮを２〜１００％、２．０分〜３．０５分にＡＣＮを１００％、３．０５分〜３．２分にＡＣＮを１００％〜２％、３．２分〜３．５分にＡＣＮを２％、２μｌ／分。
ＨＰＬＣ：主要ジアステレオマーｔＲ＝２．４４分、副ジアステレオマーｔＲ＝２．４６分；ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ｓｅｒｉｅｓ．；カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８ １１０Ａ、５０×４．６ｍｍ；溶媒：０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル、０．１％ＴＦＡを含む水；グラジエント：０分〜５．０分にＡＣＮを２〜９８％、５．０分〜６．０分にＡＣＮを９８％、２ｍＬ／分。
同様に、それぞれ、式（Ａ）、式（Ｂ）、式（Ｃ）、式（Ｄ）および式（Ｅ）の化合物
Figure 2020055855
 を含む別々の実施形態が提供され、式中、各場合において、Ｘ１は酸素保護基を表し、Ｘ２はアミン保護基を表す。
有用な酸素保護基には、シリルエーテル保護基、またはメトキシベンジル基を含むベンジル型保護基が含まれる。
有用なシリルエーテル保護基には、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、ジメチルイソプロピルシリル（ＩＰＤＭＳ）、ジエチルイソプロピルシリル（ＤＥＩＰＳ）、ジメチルヘキシルシリル（Ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｅｘｙｌｓｉｌｙｌ）（ＴＤＳ）、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳまたはＴＢＤＭＳ）、ｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）、トリベンジルシリル、トリ−ｐ−キシリルシリル（ｘｙｌｙｌｘｉｌｙｌ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）、ジフェニルメチルシリル（ＤＰＭＳ）、ジ−ｔ−ブチルメチルシリル（ＤＴＢＭＳ）、トリフェニルシリル（ＴＰＳ）、メチルジフェニルシリル（ＭＤＰＳ）、ｔ−ブチルメトキシフェニルシリル、トリス（トリメチルシリル）シリル（シシル）、（２−ヒドロキシスチリル）ジメチルシリル（ＨＳＤＭＳ）、（２−ヒドロキシスチリル）ジイソプロピルシリル（ＨＳＤＩＳ）、ｔ−ブチルメトキシフェニルシリル（ＴＢＭＰＳ）およびｔ−ブトキシジフェニルシリル（ＤＰＴＢＯＳ）保護基が含まれる。
有用なベンジル型保護基には、ベンジル、ハロゲン化ベンジル、ｐ−メトキシベンジル、ベンジルオキシメチル、２，４−ジメトキシベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、２，６−ジメトキシベンジル、ｐ−ＣＦ３−ベンジル、ｐ−メチルベンジル、ｐ−メトキシベンジル（ｍｅｔｈｏｘｙｌｂｅｎｚｙｌ）、３，５−ジメチルベンジル、ｐ−ｔｅｒｔ−ブチルベンジル、ｏ−ニトロベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−ハロベンジル（ｐ−Ｂｒ−ベンジルを含む）、２，６−ジクロロベンジル、ｐ−シアノベンジル、ｐ−フェニルベンジル、２，６−ジフルオロベンジル、ｐ−アシルアミノベンジル（ＰＡＢ）、ｐ−アジドベンジル（Ａｚｂ）、４−アジド−３−クロロベンジル、２−トリフルオロメチルベンジル、ｐ−（メチルスルフィニル）ベンジル、２−ピコリル、４−ピコリル、３−メチル−２−ピコリルＮ−オキシド、２−キノリニルメチル、ジフェニルメチル（ＤＰＭ）、ｐ，ｐ’−ジニトロベンズヒドリル、トリフェニルメチル、アルファ−ナフチルジフェニルメチル、ｐ−メトキシフェニルジフェニルメチル、ジ（ｐ−メトキシフェニル）フェニルメチル、トリ（ｐ−メトキシフェニル）メチル、４，４’，４”−トリス（ベンゾイルオキシフェニル）メチル、および２−ナフチルメチル保護基が含まれる。
有用なアミン保護基には、ｐ−メトキシベンジルカルボニル（ＭｏｚまたはＭｅＯＺ）
、アセチル（Ａｃ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、３，４−ジメトキシベンジル（ＤＭＰＭ）、ｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）、トシル（ＴｓまたはＴｏｓ）、トリフルオロアセトアミド、およびトリチル保護基が含まれる。有用なアミン保護基にはまた、カルバメートおよびアミド保護基が含まれる。カルバメート保護基の例には、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ）、９−（２−スルホ）フルオレニルメチル、９−（２，７−ジブロモ）フルオレニルメチル、１７−テトラベンゾ［ａ，ｃ，ｇ，ｉ］フルオレニルメチル（Ｔｂｆｍｏｃ）、２−クロロ−３−インデニルメチル（Ｃｌｉｍｏｃ）、ベンズ［ｆ］インデン−３−イルメチル（ｂｅｎｚ［ｆ］ｉｎｄｅｎ−３−ｙｌｍｅｔｈｙｌ）（Ｂｉｍｏｃ）、２，７−ジ−ｔ−ブチル［９−（１０，１０−ジオキソ−１０，１０，１０，１０−テトラヒドロチオキサニル）］メチル（ＤＢＤ−Ｔｍｏｃ）、［２−（１，３−ジチアニル）メチル（Ｄｍｏｃ）、および１，１−ジオキソベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イルメチル（Ｂｓｍｏｃ）カルバメートなどのメチルおよびエチルカルバメートが含まれる。
有用な置換エチルカルバメートの例には、１，１−ジメチル−２−シアノエチル、２−ホスホニオエチル（Ｐｅｏｃ）、２−メチルチオエチル、２−（ｐ−トルエンスルホニル）エチル、２，２，２，−トリクロロエチル（Ｔｒｏｃ）、２−（トリメチルシリル）エチル（Ｔｅｏｃ）、２−フェニルエチル（ｈＺ）、１−（１−アダマンチル）−１−メチルエチル（Ａｄｐｏｃ）、１，１−ジメチル−２−ブロモエチル、１，１−ジメチル−２−クロロエチル、１，１−ジメチル−２，２−ジブロモエチル（ＤＢ−ｔ−ＢＯＣ）、１，１−ジメチル−２，２，２−トリクロロエチル（ＴＣＢＯＣ）、１−メチル−１−（４−ビフェニリル）エチル（Ｂｐｏｃ）、１−（３，５−ジ−ｔ−ブチルフェニル）−１−メチルエチル（ｔ−Ｂｕｍｅｏｃ）、２−（２’ピリジル）エチル、２−（４’ピリジル）エチル、２，２−ビス（４’−ニトロフェニル）エチル（Ｂｎｐｅｏｃ）、Ｎ−（２−ピバロイルアミノ）−１，１，ジメチルエチル、２−［（２−ニトロフェニル）ジチオ］−１−フェニルエチル（ＮｐＳＳＰｅｏｃ）、２−（Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボキサミド）エチル、ｔ−ブチル（ＢｏｃまたはＢＯＣ）、１−アダマンチル（１−Ａｄｏｃ）、２−アダマンチル（２−Ａｄｏｃ）、ビニル（Ｖｏｃ）、アリル（Ａｌｏｃまたはａｌｌｏｃ）、１−イソプロピルアリル（Ｉｐａｏｃ）、シンナミル（Ｃｏｃ）、４−ニトロシンナミル（Ｎｏｃ）、３−（３’−ピリジル）プロパ−２−エニル（Ｐａｌｏｃ）、８−キノリルおよびＮ−ヒドロキシピペリジニル、カルバメート、ならびにメチルジチオ、エチルジチオ、イソプロピルジチオ、ｔ−ブチルジチオおよびフェニルジチオカルバメートを含むアルキルジチオカルバメートが含まれる。
同様に、ベンジル、ｐ−メトキシベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−ブロモベンジル、ｐ−クロロベンジル、２，４−ジクロロベンジル、４−メチルスルフィニルベンジル（Ｍｓｚ）、９−アントリルメチル、４−メチルチオフェニル（Ｍｔｐｃ）、１−メチル−１−（トリフェニルホスホニオ）エチル（２−トリフェニルホスホニオイソプロピル）（Ｐｐｏｃ）、２−ダンシルエチル（Ｄｎｓｅｏｃ）、２−（４−ニトロフェニル）エチル（Ｎｐｅｏｃ）、４−フェニルアセトキシベンジル（ＰｈＡｃＯＺ）、４−アジドベンジル（ＡＣＢＺ）、４−アジドメトキシベンジル、ｍ−クロロ−ｐ−アシルオキシベンジル、ｐ−（ジヒドロキシボリル）ベンジル、カルボベンジルオキシ（Ｃｂｚ）、４−ベンゾイソオキサゾリルメチル（Ｂｉｃ）、２−（トリフルオロメチル）−６−クロモニルメチル（Ｔｃｒｏｃ）、フェニルおよびジフェニルメチルカルバメートなどの、アリール含有カルバメートおよび置換アリール含有カルバメートも有用である。さらなるカルバメートには、ブチニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロプロピルメチル、１−メチルシクロブチル、１−メチルシクロヘキシル、１，１−ジメチルプロピニルおよび１−メチル−１−シクロプロピルメチルカルバメートが含まれる。
アミンに対する有用なアミド保護基には、Ｎ−ホルミル、Ｎ−アセチル、Ｎ−クロロア
セチル、Ｎ−トリクロロアセチル、Ｎ−トリフルオロアセチル（ＴＦＡ）、Ｎ−フェニルアセチル、Ｎ−３−フェニルプロピオニル、Ｎ−４−ペンテノイル、Ｎ−ピコリノイル、Ｎ−３−ピリジルカルボキサミド、Ｎ−ベンゾイルフェニルアラニル、Ｎ−ベンゾイルおよびＮ−ｐ−フェニルベンゾイルアミドが含まれる。
抗ウイルス活性
別の実施形態は、ウイルス感染を阻害する方法であって、こうした阻害が必要と疑われる試料または被験体を本明細書の組成物により処置するステップを含む方法に関する。
ウイルスの含有が疑われる試料には、生きている生物などの天然または人工の物質；組織または細胞培養物；生物物質の試料などの生物試料（血液、血清、尿、脳脊髄液、涙、痰、唾液、組織試料など）；実験室試料；食物、水または空気の試料；細胞の抽出物などのバイオ製品試料、特に、所望の糖タンパク質を合成する組換え細胞などが含まれると、本明細書中では考えられる。通常、試料は、ウイルス感染を誘発する生物、多くの場合、腫瘍ウイルスなどの病原性生物を含有していることが疑われる。試料は、水および有機溶媒＼水混合物を含む、いかなる媒体中にも含有され得る。試料には、ヒトなどの生きている生物、および細胞培養物などの人工物質が含まれる。
所望される場合、組成物を適用した後の化合物の抗ウイルス活性は、当該活性を検出する直接的および間接的な方法を含めた任意の方法によって観察されてよい。当該活性を決定する、定量的、定性的および半定量的方法のすべてが企図される。通常、上記スクリーニング方法の一つが適用されるが、生きている生物の生理的特性の観察など、他の任意の方法が適用可能である。
化合物の抗ウイルス活性は、公知の標準的なスクリーニングプロトコールを使用して測定することができる。例えば、化合物の抗ウイルス活性は、以下の一般的なプロトコールを使用して測定することができる。
呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）抗ウイルス活性および細胞毒性アッセイ
抗ＲＳＶ活性
ＲＳＶに対する抗ウイルス活性は、ＨＥｐ−２細胞において、感染性の細胞変性細胞保護アッセイを使用して決定される。このアッセイでは、ウイルス感染および／または複製を阻害する化合物は、細胞生存試薬を使用して定量することができるウイルス誘発性の細胞死滅に対する、細胞保護効果をもたらす。ここで使用される技法は、公開されている文献（Ｃｈａｐｍａｎら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． ２００７年、５１巻（９号）：３３４６〜５３頁）において記載されている方法を新規に適応したものである。
ＨＥｐ−２細胞は、ＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＩ）から入手し、１０％ウシ胎児血清およびペニシリン／ストレプトマイシンを補充したＭＥＭ培地中で維持する。細胞は、１週間に２回、継代し、準集密段階で維持する。化合物の試験前に、ＲＳＶ株Ａ２の市販保存液（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＤ）の力価測定を行い、ＨＥｐ−２細胞における望ましい細胞変性効果を生じさせる、ウイルス保存液の適切な希釈度を決定する。
抗ウイルス試験の場合、ＨＥｐ−２細胞は、大きな細胞培養用フラスコ内で、ほぼ集密ではあるが、完全にはそうなっていないところまで成長させる。試験される化合物は、用量応答フォーマットに標準化されているプレート一つあたり、８種または４０種の試料のどちらかで、３８４ウェルの化合物希釈プレート中でＤＭＳＯで予め希釈される。プレート中で、３倍きざみで連続希釈した各試験化合物を調製し、試験試料を音波移送装置（ａ
ｃｏｕｓｔｉｃ ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｐｐａｒａｔｕｓ）（Ｅｃｈｏ、Ｌａｂｃｙｔｅ）により、１ウェルあたり１００ｎｌで、細胞培養アッセイ３８４ウェルプレートに移す。各化合物の希釈物は、一連または四連の試料で、乾燥アッセイプレートに移され、このプレートは、アッセイを行う準備が整うまで、保管される。陽性および陰性対照は、垂直方向のブロックにおいて、プレートの両端に対向して置かれる（１カラム分）。
続いて、５０，０００個／ｍｌの密度の細胞を用いる滴定により先に決定したウイルス保存液の適切な希釈液を使用して感染性混合物を調製し、２０ｕＬ／ウェルを自動装置（ｕＦｌｏｗ、Ｂｉｏｔｅｋ）により化合物を伴う試験プレートに加える。各プレートには、それぞれ、０％および１００％のウイルス阻害標準試料を生成するための陰性および陽性対照（それぞれ、１６連）が含まれる。ＲＳＶによる感染後に、３７℃の細胞培養インキュベータ内で、試験プレートを４日間、インキュベートする。インキュベート後、細胞生存試薬である、Ｃｅｌｌ ＴｉｔｅｒＧｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）をアッセイプレートに加え、このプレートを短時間、インキュベートし、アッセイプレートすべてにおける発光の読取り測定を行う（Ｅｎｖｉｓｉｏｎ、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）。ＲＳＶ誘発性の細胞変性効果、阻害率は、残存している細胞生存レベルから決定される。これらの数値は、各試験濃度について、０％および１００％の阻害対照に対して算出され、各化合物のＥＣ５０値は、ＲＳＶ誘発性の細胞変性効果を５０％阻害する濃度として非線形回帰により決定される。様々な有効な抗ＲＳＶツール用化合物が、抗ウイルス活性の陽性対照として使用される。
ＨＥｐ−２細胞における細胞毒性アッセイ
試験化合物の細胞毒性は、以前に他の細胞タイプに関して記載されている手法と同様の手法で細胞生存試薬を使用して、抗ウイルス活性と並行して、感染していないＨＥｐ−２細胞において決定する（Ｃｉｈｌａｒら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． ２００８年、５２巻（２号）：６５５〜６５頁）。細胞がＲＳＶに感染していない点を除いて、抗ウイルス活性の決定の場合と同じプロトコールを、化合物の細胞毒性の測定に使用する。代わりに、同じ密度の感染していない細胞混合物を、やはり１００ｎｌ／試料に予め希釈した化合物を含有しているプレートに、２０ｕｌ／ウェルで加える。次に、アッセイプレートを４日間、インキュベートし、続いて、同じＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬の添加を使用する細胞生存試験、および発光の読取り測定を行う。未処理細胞、および２ｕＭのピューロマイシン（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）で処理された細胞は、それぞれ１００％および０％細胞生存率の対照として働く。細胞生存率の百分率を０％および１００％対照に対する、各試験化合物濃度について算出し、ＣＣ５０値を細胞生存率が５０％低下する化合物濃度として、非線形回帰により決定する。
ＭＴ−４細胞における細胞毒性アッセイ
ＭＴ−４細胞系は、ＮＩＨ ＡＩＤＳ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｐｒｏｇｒａｍ（Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ、ＭＤ）から入手し、１０％ＦＢＳ、ペニシリン１００単位／ｍＬ、ストレプトマイシン１００単位／ｍＬおよび２ｍＭ Ｌ−グルタミンを補充した、ＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｉｒｖｉｎｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｓａｎｔａ Ａｎａ、ＣＡ、カタログ番号９１６０）において培養した。ＭＴ−４細胞を１週あたり２回、継代し、０．６×１０６細胞／ｍＬ未満の細胞密度を維持した。２６ｎＭ〜５３０μＭの範囲の３倍連続希釈化合物の１００×濃度を含有する完全ＲＰＭＩ−１６４０培地を、黒色３８４ウェルプレートに四連でスタンプした（ｓｔａｍｐｅｄ ｉｎ）。化合物を添加した後、２×１０３個のＭＴ−４細胞を、ＭｉｃｒｏＦｌｏ液体分注器（ＢｉｏＴｅｋ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を使用して各ウェルに加え、細胞を５％ＣＯ２のインキュベータ中、３７℃で５日間、培養した。インキュベート後、細胞を２５℃で平衡化し、細胞生存率をＣｅｌｌ−Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ生存試薬２５μＬを加えることにより決定した。混合物を２５℃で１０分間、インキュベートし、発光シグナ
ルをＶｉｃｔｏｒ Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅプレートリーダーで定量した。ＣＣ５０値は、Ｃｅｌｌ−Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏのシグナルにより決定される場合、細胞生存率を５０％低下させる化合物の濃度として定義する。データは、Ｐｉｐｅｌｉｎｅ Ｐｉｌｏｔ Ｐｌａｔｅ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｔｉｃｓ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎソフトウェア（Ｖｅｒｓｉｏｎ ７．０、Ａｃｃｅｌｒｙｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を使用して解析した。ＣＣ５０値は、４−パラメータＳ字用量−応答式：Ｙ＝Ｂｏｔｔｏｍ＋（Ｔｏｐ−Ｂｏｔｔｏｍ）／（１＋１０＾［（ＬｏｇＣＣ５０−Ｘ）＊ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ］）（式中、ＴｏｐおよびＢｏｔｔｏｍは、それぞれ１００％および０％の細胞生存率に固定した）を使用して、非線形回帰分析から算出した。ＣＣ５０値は、三つの独立した実験の平均±標準偏差として算出した。
Figure 2020055855
別の利点は、Ｒ４置換を欠く化合物（すなわち、Ｒ４＝Ｈである化合物）と比べた場合の、Ｒ４置換を有する化合物がＭＴ−４細胞毒性に関してもたらす優位性に関する。例えば、構造
Figure 2020055855
 を有する化合物である（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−５−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオール（Ｐａｔｉｌ， Ｓ．Ａ．、Ｏｔｔｅｒ， Ｒ． Ａ．、Ｋｌｅｉｎ， Ｒ． Ｓ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９９４年、３５巻、５３３９〜５３４２頁）は、ＭＴ−４においてＣＣ５０＝０．００７μＭを示す一方、実施例１、４、５、２０および２６はすべて、ＭＴ−４においてＣＣ５０＞５３μＭを示す。さらに、構造
Figure 2020055855
 を有する化合物である（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−オール（ＷＯ２０１２０３７０３８Ａ１）は、ＭＴ−４においてＣＣ５０＝３０μＭを示す一方、実施例２、３、１３および１４はすべて、ＭＴ−４においてＣＣ５０＞１０６μＭを示す。
別の利点は、Ｒ４置換を欠く化合物（すなわち、Ｒ４＝Ｈである化合物）と比べた場合の、Ｒ４置換を有するＲ３＝Ｆの化合物がＨＥｐ−２抗ＲＳＶ活性に関してもたらす優位性に関する。例えば、上記構造を有する化合物である、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−２−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−オール（ＷＯ２０１２０３７０３８Ａ１）は、ＨＥｐ−２においてＥＣ５０≧１００μＭを有する一方、実施例２、３、１３、１４、１９、２１、２２、２３および２４はすべて、ＥＣ５０≦１００ｕＭを示す。
ＲＳＶ ＲＮＰ調製
ＲＳＶリボ核タンパク質（ＲＮＰ）複合体は、Ｍａｓｏｎら（１）のものを改変した方法から調製した。ＨＥｐ−２細胞は、ＭＥＭ＋１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）中、７．１×１０４個の細胞／ｃｍ２の密度でプレート培養し、３７℃（５％ＣＯ２）で一晩、付着させた。付着後、細胞を３５ｍＬ ＭＥＭ＋２％ＦＢＳにおいて、ＲＳＶ Ａ２（ＭＯＩ
＝５）に感染させた。感染から２０時間後に、培地をアクチノマイシンＤ２μｇ／ｍＬを補充したＭＥＭ＋２％ＦＢＳに置きかえ、１時間、３７℃に戻した。次に、細胞をＰＢＳにより１回洗浄し、３５ｍＬのＰＢＳ＋リソ−レシチン２５０μｇ／ｍＬにより１分間処理し、この後、すべての液体を吸引した。細胞を１．２ｍＬの緩衝液Ａ［５０ｍＭ ＴＲＩＳ酢酸塩（ｐＨ８．０）、１００ｍＭ酢酸カリウム、１ｍＭ ＤＴＴおよびアクチノマイシンＤ２μｇ／ｍＬ］にスクラップすることにより収集し、１８ゲージのニードルにより継代を繰り返すことにより溶解させた（１０回）。細胞溶解物を１０分間、氷中に置き、次に、２４００ｇで、４℃で１０分間遠心分離機にかけた。上澄み液（Ｓ１）を除去し、ペレット（Ｐ１）を１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を補充した緩衝液Ｂ［１０ｍＭ ＴＲＩＳ酢酸塩（ｐＨ８．０）、１０ｍＭ酢酸カリウムおよび１．５ｍＭ ＭｇＣｌ２］６００ｕＬ中で、１８ゲージのニードルにより継代を繰り返す（１０回）ことによって粉砕した。再懸濁させたペレットを１０分間、氷中に置き、次に、２４００ｇで、４℃で１０分間、遠心分離機にかけた。上澄み液（Ｓ２）を除去し、ペレット（Ｐ２）を、０．５％デオキシコレートおよび０．１％Ｔｗｅｅｎ４０を補充した緩衝液Ｂ６００μＬ中で粉砕した。再懸濁させたペレットを１０分間、氷中に置き、次に、２４００ｇで、４℃で１０分間、遠心分離機にかけた。ＲＳＶ ＲＮＰ複合体を豊富に含有している上澄み液（Ｓ３）フラクションを収集し、タンパク質濃度を２８０ｎｍにおけるＵＶ吸光度によって決定した。一定分量のＲＳＶ ＲＮＰ Ｓ３フラクションを−８０℃で保管した。
ＲＳＶ ＲＮＰアッセイ
転写反応は、３０μＬの反応緩衝液［５０ｍＭ ＴＲＩＳ酢酸塩（ｐＨ８．０）、１２０ｍＭ酢酸カリウム、５％グリセロール、４．５ｍＭ ＭｇＣｌ２、３ｍＭ ＤＴＴ、２ｍＭ エチレングリコール−ビス（２−アミノエチルエーテル）−四酢酸（ＥＧＴＡ）、５０μｇ／ｍＬ ＢＳＡ、２．５Ｕ ＲＮａｓｉｎ（Ｐｒｏｍｅｇａ）、ＡＴＰ、ＧＴＰ、ＵＴＰ、ＣＴＰおよび１．５ｕＣｉ［α−３２Ｐ］ＮＴＰ（３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）］中で、粗製ＲＳＶ ＲＮＰ複合体２５μｇを含有していた。転写アッセイにおいて使用される放射標識ヌクレオチドは、ＲＳＶ ＲＮＰ転写の阻害を評価されるヌクレオチドアナログに適合するよう選択した。冷却した競合ＮＴＰを、そのＫｍの半分の最終濃度で加えた（ＡＴＰ＝２０μＭ、ＧＴＰ＝１２．５μＭ、ＵＴＰ＝６μＭおよびＣＴＰ＝２μＭ）。残りの３種のヌクレオチドは、最終濃度１００μＭで加えた。
ヌクレオチドアナログがＲＳＶ ＲＮＰ転写を阻害したかどうか決定するために、５倍きざみで６段階の連続希釈を使用して化合物を加えた。３０℃で９０分間インキュベートした後、ＲＮＰ反応をＱｉａｇｅｎ ＲＬＴ溶解緩衝液３５０μＬにより停止し、ＲＮＡをＱｉａｇｅｎ ＲＮｅａｓｙ ９６キットを使用して精製した。精製されたＲＮＡを６５℃で１０分間、ＲＮＡサンプルローディングバッファー（Ｓｉｇｍａ）中で変性させて、２Ｍホルムアルデヒドを含有する１．２％アガロース／ＭＯＰＳゲル上で実施した。アガロースゲルを乾燥させて、Ｓｔｏｒｍホスホルイメージャースクリーンに感光させて、Ｓｔｏｒｍホスホルイメージャー（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して現像した。放射標識転写物の合計を５０％低下させる化合物の濃度（ＩＣ５０）を、二連の非線形回帰分析により算出した。
参照文献 Ｍａｓｏｎ， Ｓ．、Ｌａｗｅｔｚ， Ｃ．、Ｇａｕｄｅｔｔｅ， Ｙ．、Ｄｏ， Ｆ．、Ｓｃｏｕｔｅｎ， Ｅ．、Ｌａｇａｃｅ， Ｌ．、Ｓｉｍｏｎｅａｕ， Ｂ．およびＬｉｕｚｚｉ， Ｍ．（２００４年）Ｐｏｌｙａｄｅｎｙｌａｔｉｏｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｃｙｔｉａｌ ｖｉｒｕｓ ＲＮＡ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ． Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、３２巻、４７５８〜４７６７頁。
Figure 2020055855
さらなる考察は、例示化合物が、２’ＣＭｅ置換を有する化合物と比べてＲＳＶ ＲＮＰの転写の強力な阻害を示すという優位性に関する。例えば、構造
Figure 2020055855
 を有する（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３，４−ジヒドロキシ−４−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート（ＷＯ２００８０８９１０５Ａ２およびＷＯ２０１０００２８７７Ａ２）は、ＩＣ５０＝８．５μＭを示す一方、実施例ＴＰ３はＩＣ５０＝０．０２５μＭを示す。さらに、構造
Figure 2020055855
 を有する化合物である（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノピロロ［２，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル）−４−フルオロ−３−ヒドロキシ−４−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）メチルテトラハイドロジェントリホスフェート（ＷＯ２０１１０３５２３１Ａ１）は、ＩＣ５０≧１００μＭを示す一方、実施例ＴＰ１はＩＣ５０＝０．０８６μＭを示し、ＴＰ２はＩＣ５０＝１μＭを示す。
一実施形態において、例えば、以下の項目が提供される。
（項目１）
式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩
Figure 2020055855
であって、式中、
Ｒ１は、ＨまたはＦであり、
Ｒ２は、ＨまたはＦであり、
Ｒ３は、ＯＨまたはＦであり、
Ｒ４は、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキル、アジド、ハロゲンまたはＣ１〜Ｃ２ハロアルキルであり、
Ｒ６は、ＯＨであり、
Ｒ５は、Ｈおよび
Figure 2020055855
Figure 2020055855
の群から選択され、ここで、
ｎ’は、１、２、３および４から選択され、
Ｒ８は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、−Ｏ−ベンジル、−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよびＣＦ３から選択され、
Ｒ９は、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、
Figure 2020055855
から選択され、
Ｒ１０は、ＨおよびＣＨ３から選択され、
Ｒ１１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ１２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよび−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルから選択される、
化合物または薬学的に許容されるその塩。
（項目２）
Ｒ１がＨである、項目１に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目３）
Ｒ２がＨである、項目１に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目４）
Ｒ１とＲ２の両方がＨである、項目１、２または３のいずれかに記載の化合物。
（項目５）
Ｒ１、Ｒ２およびＲ５がそれぞれＨである、項目１、２、３もしくは４のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目６）
Ｒ１とＲ２の両方がＨであり、Ｒ３がＯＨである、項目１、２、３、４もしくは５のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目７）
Ｒ１とＲ２の両方がＨであり、Ｒ３がＦである、項目１、２、３、４もしくは５のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目８）
式（ＩＩ）
Figure 2020055855
の、項目１、２、３もしくは４のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩であって、式中、
Ｒ３は、ＯＨまたはＦであり、
Ｒ４は、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキル、アジド、ハロゲンまたはＣ１〜Ｃ２ハロアルキルであり、
Ｒ５は、Ｈおよび
Figure 2020055855
Figure 2020055855
の群から選択され、ここで、
ｎ’は、１、２、３および４から選択され、
Ｒ８は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、−Ｏ−ベンジル、−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよびＣＦ３から選択され、
Ｒ９は、フェニルであり、
Ｒ１０は、ＨおよびＣＨ３から選択され、
Ｒ１１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ１２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよび−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルから選択される、化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目９）
Ｒ４が、ＣＮ、メチル、エチル、エテニル、エチニル、アジド、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２または−ＣＦ３である、項目１、２、３、４、５もしくは８のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目１０）
Ｒ３がＦである、項目１、２、３、４、５、７、８もしくは９のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目１１）
Ｒ３がＯＨである、項目１、２、３、４、５、６、８もしくは９のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目１２）
Ｒ３がＦであり、Ｒ４がＣＮである、項目１、２、３、４、５、７、８、９もしくは１０のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目１３）
Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がＣＮである、項目１、２、３、４、５、７、８、９もしくは１１のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目１４）
Ｒ１とＲ２の両方がＨであり、Ｒ３がＦであり、Ｒ４がメチル、エチル、ビニルまたはエチニルである、項目１、２、３、４、５、７、８、９もしくは１０のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目１５）
Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がメチル、エチル、ビニルまたはエチニルである、項目１、２、３、４、５、７、８、９もしくは１１のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許
容されるその塩。
（項目１６）
Ｒ３がＦであり、Ｒ４がハロメチルである、項目１、２、３、４、５、７、８、９もしくは１０のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目１７）
Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がハロメチルである、項目１、２、３、４、５、７、８、９もしくは１１のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目１８）
Ｒ５がＨである、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６もしくは１７のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目１９）
Ｒ５が、
Figure 2020055855
の群から選択され、式中、
Ｒ８は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジルおよび−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルから選択され、
Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、ベンジル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルおよび−ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルから選択される、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６もしくは１７のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２０）
Ｒ８およびＲ９がそれぞれＣ１〜Ｃ８アルキルである、項目１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７もしくは１９のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２１）
Ｒ８およびＲ９がそれぞれＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される、項目１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７もしくは１９のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２２）
Ｒ８およびＲ９がそれぞれＣ１〜Ｃ５アルキルから選択される、項目１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１９、２０もしくは２１のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２３）
Ｒ８およびＲ９がそれぞれＣ１〜Ｃ４アルキルから選択される、項目１、２、３、４
、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１９、２０、２１もしくは２２のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２４）
Ｒ３がＦである場合、Ｒ４はメチルではないという条件をさらに含む、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２もしくは２３のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２５）
Ｒ５が、Ｈおよび
Figure 2020055855
の群から選択される、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３もしくは２４のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２６）
Ｒ５が
Figure 2020055855
である、項目１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１９、２０、２１、２２、２３、２４もしくは２５のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２７）
Ｒ５が
Figure 2020055855
である、項目１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１９、２０、２１、２２、２３、２４もしくは２５のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２８）
Ｒ５が
Figure 2020055855
である、項目１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１９、２０、２１、２２、２３、２４もしくは２５のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目２９）
Figure 2020055855
の群から選択される、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７もしくは２８のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目３０）
Figure 2020055855
の群から選択される、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７もしくは２８のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目３１）
Figure 2020055855
の群から選択される、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７もしくは２８のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目３２）
Figure 2020055855
の群から選択される、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７もしくは２８のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目３３）
Figure 2020055855
の群から選択される、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７もしくは２８のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目３４）
Figure 2020055855
の群から選択される、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１
３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７もしくは２８のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目３５）
ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染を処置する方法であって、治療有効量の、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３もしくは３４のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を前記ヒトに投与するステップを含む方法。
（項目３６）
ヒトにおけるヒト呼吸器合胞体ウイルス感染を処置する方法であって、治療有効量の、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３もしくは３４のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を前記ヒトに投与するステップを含む方法。
（項目３７）
薬学的に有効な量の、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３もしくは３４のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容される担体または添加剤を含む医薬製剤。
（項目３８）
項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３もしくは３４のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩が使用されることを特徴とする、ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染または呼吸器合胞体ウイルス感染の処置が意図されている医薬を製造する方法。
（項目３９）
ヒトにおけるＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染または呼吸器合胞体ウイルス感染の処置に使用するための、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３もしくは３４のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
（項目４０）
式（Ａ）、式（Ｂ）、式（Ｃ）、式（Ｄ）および式（Ｅ）
Figure 2020055855
 から選択される化合物であって、式中、Ｘ１は酸素保護基であり、Ｘ２はアミン保護基である、化合物。
（項目４１）
Figure 2020055855
 から選択される、項目４０に記載の化合物。
（項目４２）
本明細書において記載されている化合物。
（項目４３）
ヒトにおいてＰｎｅｕｍｏｖｉｒｉｎａｅウイルス感染または呼吸器合胞体ウイルス感染を処置するための医薬を製造するための、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３もしくは３４のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩の使用。

Claims (1)

  1. ピロロトリアジン。
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