UA115302C2 - Спосіб зменшення вмісту насичених жирних кислот - Google Patents

Спосіб зменшення вмісту насичених жирних кислот Download PDF

Info

Publication number
UA115302C2
UA115302C2 UAA201300808A UAA201300808A UA115302C2 UA 115302 C2 UA115302 C2 UA 115302C2 UA A201300808 A UAA201300808 A UA A201300808A UA A201300808 A UAA201300808 A UA A201300808A UA 115302 C2 UA115302 C2 UA 115302C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
promoter
desaturase
plant
delta
gene
Prior art date
Application number
UAA201300808A
Other languages
English (en)
Inventor
Енн Оуенс Мерло
Даніель Ж Гашотт
Марк А. Томпсон
Теренс А. Уолш
Скотт Бівен
Original Assignee
ДАУ АГРОСАЙЄНСІЗ ЕлЕлСі
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ДАУ АГРОСАЙЄНСІЗ ЕлЕлСі filed Critical ДАУ АГРОСАЙЄНСІЗ ЕлЕлСі
Publication of UA115302C2 publication Critical patent/UA115302C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0071—Oxidoreductases (1.) acting on paired donors with incorporation of molecular oxygen (1.14)
    • C12N9/0083—Miscellaneous (1.14.99)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
    • C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
    • C12N15/8247—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine involving modified lipid metabolism, e.g. seed oil composition
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y114/00—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14)
    • C12Y114/19—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14) with oxidation of a pair of donors resulting in the reduction of molecular oxygen to two molecules of water (1.14.19)
    • C12Y114/19001—Stearoyl-CoA 9-desaturase (1.14.19.1), i.e. DELTA9-desaturase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/34—Vector systems having a special element relevant for transcription being a transcription initiation element
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/36—Vector systems having a special element relevant for transcription being a transcription termination element

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Винахід належить до виділеної молекули нуклеїнової кислоти, що містить генний регуляторний елемент, функціонально зв’язаний з полінуклеотидом, який кодує фермент дельта-9-десатуразу. Також винахід належить до способу зменшення процентного вмісту насичених жирних кислот в рослинних або дріжджових клітинах, який включає трансформацію клітин молекулою нуклеїнової кислоти, що містить генний регуляторний елемент, функціонально зв’язаний з полінуклеотидом, який кодує фермент дельта-9-десатуразу.

Description

молекулою нуклеїнової кислоти, що містить генний регуляторний елемент, функціонально зв'язаний з полінуклеотидом, який кодує фермент дельта-9-десатуразу.
Претендування на пріоритет
Дана заявка являє собою часткове продовження заявки 0.5.5.М. 11/576750, яка одночасно розглядається, яка являє собою переведення в національну фазу міжнародної патентної заявки
РСТ Мо РСТ/О5О5/36052, поданої 7 жовтня 2005 року, призначеної для Сполучених Штатів
Америки і опублікованої англійською мовою у вигляді міжнародної публікації РСТ Мо МО 2006/042049 А2 20 квітня 2006 року. Міжнародна патентна заявка РСТ Мо РСТ/О5О5/36052 є продовження попередньої патентної заявки США Мо 60/617532, поданої 8 жовтня 2004 року.
Дана заявка також є продовженням попередньої патентної заявки США Мо 61/358314, поданої 24 червня 2010 року.
Галузь техніки
Деякі втілення в основному стосуються конкретних ферментів дельта-9-десатураз, нуклеїнових кислот, які кодують вказані ферменти, а також способів їх експресії в рослинній клітині. Деякі втілення стосуються застосування активності конкретних ферментів дельта-9- десатураз з метою зменшення процентного складу насичених жирних кислот в рослинних матеріалах (наприклад, в насінні) і збільшення процентного складу Ф-7 жирних кислот. У цьому документі також розкриваються рослини і рослинні матеріали, отримані за допомогою способів, розкритих в конкретних втіленнях.
Рівень техніки
Рослинні олії поступово замінюють тваринні масла і жири як основне джерело жиру, яке поглинається в раціоні. Однак в більшості розвинених країн споживання насичених жирів складає приблизно від 1595 до 2095 від загального споживання калорій. Міністерство сільського господарства США останнім часом рекомендує для досягнення здорового способу життя знизити рівень насичених жирів менше ніж до 1095 від щоденного споживання калорій. Щоб забезпечити інформованість споживача, посібники по маркуванню, які випускаються в наш час
И5ОА, присвоюють продуктам, в яких загальний вміст насичених жирних кислот складає менше 1,0 г на 14 г, маркування "низький вміст насичених жирних кислот" ("Ом/-за!"), а продуктам, в яких загальний вміст насичених жирних кислот складає менше 0,5 г на 14 г, маркування "відсутність насичених жирних кислот" ("по-заї"). Це означає, що рослинні олії повинні містити менше 795 і 3,596 насичених жирних кислот для отримання маркування "Іом/-заї" або "по-заї",
Зо відповідно. З часу опублікування вказаного посібника стався стрибок в споживчому попиті на "ІЮму-заї" і "по-заї" олії. У цей час вказаний попит задовольняється, в основному, олією каноли і, в набагато меншій мірі, соняшниковою і сафлоровою оліями.
На відміну від насичених і транс-жирів ненасичені жири (мононенасичені і поліненасичені) є корисними (особливо при помірному споживанні). Насичені жири і транс-жири спричиняють підвищення рівня небажаного ІІ -холестерину в крові. Присутній в їжі холестерин також призводить до підвищення рівня Іі -холестерину і може робити внесок в розвиток хвороби серця, навіть якщо рівень ГО. не підвищується. Таким чином, для дотримання здорової дієти рекомендують вибирати їжу з низьким рівнем насиченого жиру, транс-жиру і холестерину.
Характеристики олій рослинного або тваринного походження переважно визначаються числом атомів вуглецю і водню в молекулі олії, а також числом і положенням подвійних зв'язків в ланцюгу жирної кислоти. Більша частина рослинних олій містить різні кількості пальмітинової (16:0), стеаринової (18:0), олеїнової (18:1), лінолевої (18:2) і ліноленової (18:3) жирних кислот.
Традиційно пальмітинову і стеаринову кислоти називають "насичені", оскільки їх вуглецеві ланцюги насичені атомами водню і, отже, не містять подвійні зв'язки; вони містять максимально можливе число атомів водню. Жирнокислотні ланцюги олеїнової, лінолевої і ліноленової кислот містять 18 атомів вуглецю і один, два або три подвійних зв'язки, відповідно. Олеїнову кислоту звичайно розглядають як мононенасичену жирну кислоту, тоді як лінолева і ліноленова кислоти являють собою поліненасичені жирні кислоти. Відповідно до Ш.5.0.А. маркування масляних продуктів "по 5аї" стосується продуктів, в яких загальний вміст насичених жирних кислот складає менше 3,595 за масою (відносно загальної маси жирних кислот).
Олія каноли має найнижчий рівень насичених жирних кислот серед всіх рослинних олій. "Канолу" відносять до ріпакового насіння (Вгаззіса), в якому вміст ерукової кислоти (С22:1) складає максимум 295 відносно загальної маси жирних кислот в насінні (переважно максимум 0,595 за масою, найбільш переважно, практично 095 за масою), і яке дає, після подрібнення і повітряного сушіння борошно, яке містить менше 30 мкмоль/г знежиреного (яке не містить олії) борошна. Вказані типи ріпакового насіння відрізняються за придатністю до вживання в їжу від більш традиційних різновидів.
Передбачають, що в олійному насінні синтез жирних кислот відбувається переважно в пластидах. Основним продуктом жирнокислотного синтезу є пальмітат (16:0), який ефективно бо подовжується з отриманням стеарату (18:0). Все ще залишаючись в пластиді, насичені жирні кислоти можуть потім піддаватися десатурації під дією ферменту, відомого як ацил-АСР дельта- 9-десатуразу, з введенням одного або декількох вуглець-вуглецевих подвійних зв'язків. А саме, стеарат може піддаватися швидкій десатурації під дією пластидного ферменту дельта-9- десатурази з отриманням олеату (18:11). Фактично пальмітат також може піддаватися десатурації з отриманням пальмітоолеату (16:11) під дією пластидної дельта-9-десатурази, однак в більшості рослинних олій дана жирна кислота присутня тільки в слідових кількостях (0- 0,295). Таким чином, основними продуктами жирнокислотного синтезу в пластиді є пальмітат, стеарат і олеат. У більшості олій основною синтезованою жирною кислотою є олеат, оскільки насичені жирні кислоти присутні в набагато більш низьких пропорціях.
Синтезовані жирні кислоти експортуються з пластиди в цитоплазму. Подальша десатурація рослинних жирних кислот в цитоплазмі, ймовірно, обмежується олеатом, який може піддаватися десатурації з отриманням лінолеату (18:2) і ліноленату (18:3) під дією мікросомальних десатураз, які діють на олеоїльні або лінолеоїльні субстрати, які утворюють складні ефіри з фосфатидилхоліном (РОС). Крім того, залежно від рослини, олеат може піддаватися додатковій модифікації шляхом елонгації (до 2071, 22:11 і/або 24:1), або шляхом додавання функціональних груп. Вказані жирні кислоти нарівні з насиченими жирними кислотами, пальмітатом і стеаратом, потім використовуються для синтезу тригліцеридів, які входять до складу ендоретикулярних мембран.
Рослинний фермент ацил-АСР дельта-9-десатураза є розчинним. Він присутній в стромі пластиди і використовує як субстрати синтезовані жирні кислоти, які утворюють ефіри з АСР, переважно стеарил-АСР. Даний фермент відрізняється від інших дельта-9-десатураз, які знаходяться в мембрані ендоплазматичного ретикулуму (ЕК, або мікросом), використовують як субстрат жирні кислоти, які утворюють ефіри з Со-А, і забезпечують десатурацію обох насичених жирних кислот, пальмітату і стеарату. Патенти США 5723595 і 6706950 описують рослинну десатуразу.
Дріжджовий ген дельта-9-десатурази виділяють з Засспаготусев5 сегемізіає, клонують і секвенують. ЗішКеу еї аї. (1989) У. ВіоІ. Спет. 264: 16537- 44; 5шШКеу єї аї. (1990) У. ВіоІ. Спет. 265:20144-9. Вказаний дріжджовий ген вводять в тканину листа тютюну (Роїазпсок еї аї. (1991)
ЕАБЕВ 9. 5:А1157; РоїазпокК еї аї. (1992) Ріапі РНузіої. 100:894-901) і експресують в даній
Зо тканині. Крім того, цей дріжджовий ген експресують в томаті. Див. Умапд еї аї. (1996) 9. Адгіс.
Роса Спет. 44:3399-402; апа Мапа еї а. (2001) Рпуюспетівігу 58:227-32. Хоча при використанні вказаного дріжджового гена дельта-9-десатурази і для тютюну і для томата описано деяке збільшення рівня певних ненасичених жирних кислот і деяке зменшення рівня певних насичених жирних кислот, тютюн і томат не є явно олійними культурами. Даний дріжджовий ген також вводять в Вгаззіса пари5. Патент США 5777201.
Іншу грибкову ацил-СоА дельта-9-десатуразу з АзрегудйШи5 підціап5 вводять в канолу, щоб досягнути знижених рівнів насичених жирних кислот в олії, яку отримують з насіння. Публікація патентної заявки США И5 2008/0260933 А1. Ацил-СоА дельта-9-десатураза А. підшап5 забезпечує в більшій мірі зменшення рівня стеарату (61-9095), ніж пальмітатвмісних жирних кислот (36-4990), які є в надлишку, в олії, яку отримують з насіння.
ОПИС ВИНАХОДУ
У даному описі розкриваються нові грибкові ферменти дельта-9-десатурази; нуклеїнові кислоти, які містять щонайменше одну нуклеотидну послідовність, яка кодує таку десатуразу; а також рослини, рослинні матеріали (наприклад, насіння), частини рослин і рослинні товарні продукти, які містять перераховані вище елементи. Аспекти деяких втілень ілюструються з використанням грибкових ферментів дельта-9-десатураз, виділених з Мадпарогійе дгізеа,
Іеріозрпаєтіа подогит і Неїїсомегра 7еа. Деякі приклади включають в себе застосування нативних і синтетичних дельта-9-десатураз, для яких переважним субстратом є пальмітинова або стеаринова кислота.
Деякі втілення включають в себе виділену молекулу нуклеїнової кислоти, яка кодує фермент дельта-9-десатуразу, який містить амінокислотну послідовність щонайменше на 8095 ідентичну послідовності, вибраної з групи, яка складається з 5ЕО ІЮО МО: 12, 5ЕО ІЮ МО: 13, 5ЕО ІЮ МО: 14, ЗЕО ІЮ МО: 50, ЗЕО ІО МО: 51, 5ЕО ІЮО МО: 52, ЗЕО ІО МО: 72 і ЗЕО ІЮ МО: 73. У конкретних прикладах молекула нуклеїнової кислоти містить послідовність щонайменше на 6095 ідентичну послідовності, вибраної з групи, яка складається з 5ЕО ІЮ МО: 3, 5ЕО ІЮО МО: 4, 5ЕО ІЮО МО: 5,
ЗЕОІЮО МО: 8, 5ЕО ІЮ МО: 9, 5ЕО ІЮО МО: 10, 5ЕО ІО МО: 11, 5ЕО ІО МО: 15, 5ЕО І МО: 16,
ЗЕО ІЮО МО: 17, ЗЕО ІЮ МО: 44, 5ЕО ІЮ МО: 45, 5ЕО ІЮ МО: 48 ії ЗЕО ІЮ МО: 49. Вказані і інші втілення можуть включати в себе виділений поліпептид дельта-9-десатурази, який містить амінокислотну послідовність щонайменше на 8095 ідентичну послідовності, вибраної з групи,
яка складається з ЗЕО ІЮ МО: 12, 5ЕО ІЮО МО: 13, 5ЕО ІЮО МО: 14, 5ЕО ІЮО МО: 50, 5ЕО ІЮ МО: 51, ЗЕО ІО МО: 52, 5ЕО ІО МО: 72 і БЕО ІЮ МО: 73.
У даному описі також розкриваються способи експресії щонайменше однієї з вищезазначених послідовностей нуклеїнових кислот і/або поліпептидів в рослинній клітині.
Перевага конкретних втілень полягає в застосуванні активності ферменту дельта-9-десатурази, який призводить до зменшення процентного вмісту насичених жирних кислот в рослині, рослинному матеріалі (наприклад, в насінні) і/або частині рослини, яка включає в себе рослинну клітину, і/або в рослинному товарному продукті, отриманому з одного з перерахованих вище елементів. При цьому в деяких втіленнях в рослині, рослинному матеріалі, частині рослини ілабо рослинному товарному продукті може збільшуватися вміст Ф-7 жирних кислот.
Деякі втілення включають в себе спосіб зменшення кількості насичених жирних кислот в рослині, рослинному матеріалі, частині рослини і/або рослинному товарному продукті, де вказаний спосіб включає в себе трансформацію рослинної клітини молекулою нуклеїнової кислоти, яка кодує поліпептид дельта-9-десатурази даного винаходу, з метою зменшення кількості насичених жирних кислот в клітині. Деякі втілення включають в себе спосіб отримання рекомбінантної рослини, яка містить більш низькі кількості насичених жирних кислот, ніж рослина дикого типу того ж виду. Такий спосіб може включати в себе трансформацію рослинного матеріалу (або рослинної клітини) молекулою нуклеїнової кислоти, яка кодує поліпептид дельта-9У-десатурази даного винаходу, і культивування трансформованого рослинного матеріалу (або рослинної клітини) з отриманням рослини. У конкретних прикладах рослинну клітину і/або рослинний матеріал Агарідорзіє 5р. трансформують молекулою нуклеїнової кислоти, яка кодує поліпептид дельта-9-десатурази даного винаходу.
Вищеописані і інші ознаки стануть більш очевидними з нижченаведеного докладного опису деяких втілень, який приводиться з посиланням на супроводжуючі креслення.
КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ
На фіг. 1 показаний схематичний філогенетичний аналіз різних білкових послідовностей грибкової десатурази. Повнорозмірні білкові послідовності зображених десатураз вирівнюють за допомогою СіизіаїЇхХ і демонструють з допомогою МЕСА.
На фіг. 2(а-д) показано вирівнювання генних послідовностей грибкової дельта-9-десатурази.
Зо Великі букви означають консервативні нуклеотиди в даному вирівнюванні. Заштриховані букви означають ідентичні нуклеотиди в даному вирівнюванні.
На фіг. З(а-5) приведено вирівнювання поліпептидів грибкової дельта-9-десатурази.
На фіг. 4-18 показані плазмідні карти типових плазмід, які містять нуклеотидні послідовності, які кодують поліпептид грибкової дельта-9-десатурази, які можна використовувати в деяких втіленнях. На фіг. 4, зокрема, показані плазмідні карти типових плазмід, які містять нуклеотидні послідовності, які кодують ГпреоО5-2 (фіг. 4а; РОАВ110110) ії Н;?0905 (фіг. 46; ррАВ110112), які додатково містять 5'-0ТЕ РуРпаз і 3-ОТА РуРнНав.
На фіг. 19 приведені результати, які демонструють загальний вміст насичених жирних кислот (90еАМЕ) в типовому насінні Те» Агарідорзі5, отриманому від рослин, трансформованих деякими типовими генними послідовностями грибкової дельта-9-десатурази.
На фіг. 20 приведені результати, які демонструють вміст пальмітинової кислоти (С16:0) (ФРАМЕ) в типовому насінні Тег Агарідорзіз, отриманому від рослин, трансформованих деякими типовими генними послідовностями грибкової дельта-9-десатурази.
На фіг. 21 приведені результати, які демонструють вміст стеаринової кислоти (С18:0) (ФРАМЕ) в типовому насінні Тег Агарідорзіз, отриманому від рослин, трансформованих деякими типовими генними послідовностями грибкової дельта-9-десатурази.
На фіг. 22 приведені результати, які демонструють вміст пальмітолеїнової кислоти (С16:1) (99РАМЕ) в типовому насінні Т2 Агарідорзіз, отриманому від рослин, трансформованих деякими типовими генними послідовностями грибкової дельта-9-десатурази.
На фіг. 23 приведене графічне зображення накопичення транскриптів мРНК Н20905 і
Ї пр0905-2 (в порівнянні з транскриптами АпО9О5) в насінні рослин каноли, яке розвивається, трансформованому ррАВ7319 (АпО905 уз і І пО905-2 м2) або ррдв7324 (АпреО5 му3 і Н2Ю90О5 м2). Методом кількісної ОТ-ПЛР визначають ЛДлАСІ кожного гена в порівнянні з рівнем транскрипції актину, після чого кількість транскрипту Н?09О5 і прео05-2 нормалізують за рівнем транскрипту АпО9О5 в кожному зразку.
СПИСОК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
Нуклеотидні послідовності, перераховані в списку послідовностей, який додається, показані з використанням стандартних буквених скорочених позначень нуклеотидних основ, визначених в 37 С.Р.К. 5 1.822. Показаний тільки один ланцюг кожної нуклеотидної послідовності, однак мається на увазі, що комплементарний ланцюг включений в даний опис з посиланням на показаний ланцюг. У списку послідовностей, який додається:
ЗБО ІЮ МО:1 описує прямий праймер, який використовується для ПЛР -ампліфікації фрагменту гена ацил-СоА дельта-9-десатурази Мадпарогійе дгізеа (яка інколи називається
Мао).
ЗБО ІЮ МО:2 описує зворотний праймер, який використовується для ПЛР-ампліфікації фрагменту гена ацил-СоА дельта-9-десатурази М. дгізеа (яка інколи називається М9090О5).
ЗЕО ІЮО МО: З описує типовий фрагмент гена ацил-СоА дельта-9-десатурази М. дгізеа (яка інколи називається М900905), ампліфікований методом ПЛР.
ЗЕО ІЮ МО: 4 описує типовий клон М90905, який не містить інтронів.
ЗЕО ІЮ МО: 5 описує типову нуклеотидну послідовність, яка кодує першу ацил-СоА дельта- 9-десатуразу І еріозрпаєгіа подогит, яка інколи називається І преоО5-1.
ЗБЕО ІЮО МО: 6 ії 7 описують послідовності праймерів, відповідні для застосування в деяких втіленнях.
ЗЕО ІЮ МО: 8 описує типову нуклеотидну послідовність, яка кодує другу ацил-СоА дельта-9- десатуразу Г.. подогит, яка інколи називається І пО905-2.
ЗЕО ІЮ МО: 9 описує ділянку яка кодує типовий нативний ген дельта-9-десатурази М. дгізеа (позначений Мо090О5 м1).
ЗБО ІЮ МО: 10 описує ділянку яка кодує типовий нативний ген дельта-9-десатурази
Неїїсомегра 7єва (позначений Н20905 м1).
ЗБО ІЮ МО: 11 описує ділянку яка кодує типовий нативний ген дельта-9-десатурази (л0905-2 мі) І. подогит.
ЗЕО ІО МО: 12 описує амінокислотну послідовність типової нативної дельта-9-десатурази М. діізеа (М90905).
ЗЕО ІЮО МО: 13 описує амінокислотну послідовність типової нативної дельта-9-десатурази Н. 7е6а (Н20905).
ЗЕО ІЮ МО: 14 описує амінокислотну послідовність типової нативної дельта-9-десатурази Ї. подогит (І п0р905-2).
ЗБО ІЮО МО: 15 описує послідовність типового канола-оптимізованого гена дельта-9-
Зо десатурази М. дгізеа (Ма0905 мг).
ЗБО ІЮО МО: 16 описує послідовність типового канола-оптимізованого гена дельта-9- десатурази Н. 7є6а (Н2О905 м2).
ЗБО ІЮО МО: 17 описує послідовність типового канола-оптимізованого гена дельта-9- десатурази Г. подогит (І п0905-2 мг).
ЗЕО ІО МО: 18-39 описують послідовності праймерів і зондів, відповідні для застосування в деяких втіленнях.
ЗЕБЕО І МО: 40-43 описують типові альтернативні послідовності Коак, які можна використовувати для підвищення експресії в деяких втіленнях.
ЗЕО ІЮО МО: 44 описує послідовність іншого типового канола-оптимізованого гена дельта-9- десатурази Г. подогит (І п0905-2 м3).
ЗЕО ІЮ МО: 45 описує послідовність іншого типового канола-оптимізованого гена дельта-9- десатурази Н. 7єеа (Н2О90О5 м3).
ЗЕО ІЮ МО: 46 описує амінокислотну послідовність маркера Мус.
ЗЕО ІЮ МО: 47 описує амінокислотну послідовність маркера НА.
ЗБОЮ МО: 48 описує типову нуклеотидну послідовність, яка кодує дельта-9-десатуразу
АзрегоїПи5 підшапв, яка інколи називається АпО9ОО5 м2.
ЗБО ІЮ МО: 49 описує другу типову нуклеотидну послідовність, яка кодує дельта-9- десатуразу А. піаціап5, яка інколи називається АпО9О5 м3.
ЗЕО ІЮО МО: 50 описує амінокислотну послідовність, яка кодується нуклеїновими кислотами, описаними в ЗЕО І МО: 48-49 (Апр905).
ЗЕО ІЮ МО: 51 описує амінокислотну послідовність іншої типової десатурази Апр9О5.
ЗБЕО ІЮО МО: 52 описує амінокислотну послідовність типової нативної дельта-9-десатурази (СОЇ ЕЇ) Засспаготусез сегемівзіає.
ЗЕО ІО МО:53-66 описують плазміди, відповідні для застосування в деяких втіленнях.
ЗЕО ІЮ МО: 67-71 описують деякі регуляторні елементи нуклеїнових кислот, відповідні для застосування в деяких втіленнях.
ЗЕО ІЮ МО: 72 описує 68 М-кінцевих залишків (1-68) типової десатурази АпО905.
ЗЕО ІЮ МО: 73 описує 175 С-кінцевих залишків (281-455) типової десатурази АпО9О5.
ЗЕО ІЮ МО: 74 описує карту плазміди РОАВІ110110. бо ЗЕО ІЮ МО: 75 описує карту плазміди РОАВІ110112.
ЗЕО ІО МО: 76 описує типову нуклеотидну послідовність, яка кодує типову ацил-СоОА дельта- 9-десатуразу М. дгізеа, яка інколи називається Мо09О5.
ЗЕО ІЮ МО: 77 описує амінокислотну послідовність, яка входить в склад типової нативної дельта-9-десатурази Ї.. подогит з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 14.
ЗЕО ІЮ МО: 78 описує амінокислотну послідовність, яка входить в склад типової нативної дельта-9-десатурази Н. 7єа з послідовністю 5ЕО ІЮО МО: 13.
СПОСІБ (СПОСОБИ) ЗДІЙСНЕННЯ ВИНАХОДУ
Ї. Огляд деяких втілень
Автори винаходу попередньо вводять грибкову ацил-СоА дельта-9-десатуразу Азрегуйи5 підціап5 в канолу, щоб досягнути зменшення рівня насичених жирних кислот в олії, отриманій з насіння. Публікація патентної заявки США 5 2008/0260933 А1. Дельта-9-десатураза А. підшапь забезпечує більш високий ступінь виснаження олії, яка отримується з насіння по стеарату (61- 9095), ніж по наявних в надлишку пальмітатвмісних жирних кислотах (36-49965). Таким чином, спільне введення дельта-9-десатурази, яка переважно діє на пальмітатвмісні насичені вуглеводні, дозволяє досягнути зменшення загального вмісту насичених вуглеводнів шляхом доповнення вибірковою по стеарату активності дельта-9-десатурази А. підшап5. У деяких втіленнях даного винаходу розкриваються поліпептиди грибкової дельта-9-десатурази з різною субстратною специфічністю. Конкретні втілення включають в себе пальмітат-специфічну дельта-9-десатуразу (наприклад, нативний грибковий фермент, розкритий в даному документі, або його функціональний еквівалент; а також синтетичний поліпептид, який переважно використовує як субстрат пальмітинову кислоту).
Даний опис розкриває молекули нуклеїнової кислоти, які кодують поліпептид дельта-9- десатурази, які містять нуклеотидну послідовність щонайменше на 6095 ідентичну послідовності, вибраної з групи, яка складається з 5ЕО ІЮ МО: 3, 5ЕО ІЮО МО: 4, 5ЕО ІЮО МО: 5,
ЗЕОІЮО МО: 8, 5ЕО ІЮ МО: 9, 5ЕО ІЮО МО: 10, 5ЕО ІО МО: 11, 5ЕО ІО МО: 15, 5ЕО І МО: 16,
ЗЕО ІЮ МО: 17, 5ЕО ІО МО: 44, 5ЕО ІЮ МО: 45, 5ЕО ІО МО: 48 ії 5ЕО ІЮО МО: 49. У деяких втіленнях молекула нуклеїнової кислоти може додатково містити генний регуляторний елемент, функціонально зв'язаний з послідовністю, яка кодує поліпептид дельта-9-десатурази. У конкретних втіленнях генний регуляторний елемент може являти собою промотор фазеоліну, 5'-
Зо нетрансльована ділянка фазеоліну, 3'-нетрансльована ділянка фазеоліну, 3'-чсетрансльована ділянка ОКЕ1 Адгорасіегішт їшптегасіеп5, промотор вірусу мозаїки жилок маніоки Саззама меїп
Мозаїс Міги5, ділянка приєднання матриксу КВ7 Місойапа їабасит, Т-ланцюжкова бордюрна послідовність, промотор КС і промотор ЕАЕ 1.
Також розкриваються поліпептиди дельта-9-десатурази, які містять амінокислотну послідовність щонайменше на 8055 ідентичну послідовності, вибраної з групи, яка складається з
ЗЕО ІЮ МО: 12, ЗЕО ІО МО: 13, БЕО ІЮ МО: 14, 5ЕО ІЮ МО: 50, ЗЕО ІО МО: 52, 5БЕО ІЮ МО: 72 і
ЗЕО ІЮО МО: 73, а також молекули нуклеїнової кислоти, які кодують такі поліпептиди дельта-9- десатурази.
У деяких втіленнях молекули нуклеїнової кислоти і поліпептиди дельта-9-десатурази можуть...
Втілення даного винаходу включають в себе способи зменшення кількості насичених жирних кислот в рослинному матеріалі, рослинній клітині, рослинній тканині, або в цілій рослині. Такі способи можуть включати в себе трансформацію рослинного матеріалу, рослинної клітини, рослинної тканини, або цілої рослини щонайменше однієї з вищезазначених молекул нуклеїнової кислоти, з метою зменшення кількості насичених жирних кислот в рослинному матеріалі, рослинній клітині, рослинній тканині, або в цілій рослині. Конкретні втілення включають в себе способи виборчого зменшення кількості пальмітинової і/або стеаринової жирної кислоти в рослинному матеріалі, рослинній клітині, рослинній тканині, або в цілій рослині.
Розкриті тут способи можна здійснювати, наприклад, на рослинах або на рослинних матеріалах, отриманих з рослин (наприклад, на рослинах роду Агабрідорвзіб5, або канола).
Конкретне втілення стосується способів отримання або регенерації рекомбінантної рослини, яка містить знижені кількості насичених жирних кислот в порівнянні з рослиною дикого типу того ж виду, де способи включають в себе трансформацію рослинної клітини або рослинного матеріалу щонайменше однієї з вищезазначених молекул нуклеїнової кислоти; і культивування трансформованого рослинного матеріалу з отриманням рослини. Також розкриваються рослини, рослинні матеріали, рослинні клітини і насіння, отримані за допомогою одного з вищезазначених способів.
ІЇ. Скорочення жу: - жирна кислота, яка містить х атомів вуглецю і у подвійних зв'язків в положенні 7, рахуючи від карбоксильного кінця
АСР - ацил-переносний білок
СоА - кофермент А
ЕА - жирні кислоти
ЕАМ - флуоресцеїн
ЕАЗ - синтаза жирних кислот
ЕАМЕ - метиловий ефір жирної кислоти
КАБІЇ - синтаза ВД-кетоацил-АСР ІЇ
МИРА - мононенасичена жирна кислота
М/Т - дикий тип
І. Терміни
Жирна кислота: У даному описі термін "жирна кислота" стосується довголанцюжкових аліфатичних кислот (алканових кислот) з різною довжиною ланцюга, наприклад, приблизно від
С12 до С22, хоча існують кислоти як з більш довгим, так і з більш коротким ланцюгом.
Структура жирної кислоти описується формулою худі, де х означає загальне число атомів вуглецю (С), а у означає число подвійних зв'язків у вуглецевому ланцюгу в положенні «7», рахуючи від карбоксильного кінця кислоти.
Метаболічний шлях: Термін "метаболічний шлях" стосується ряду хімічних реакцій, які протікають в клітині і каталізовані ферментами, які призводять до утворення метаболічного продукту або до ініціації іншого метаболічного шляху. Метаболічний шлях може включати в себе декілька або багато стадій і може конкурувати з іншим метаболічним шляхом за специфічні субстрати для реакцій. Подібним чином, продукт одного метаболічного шляху може бути субстратом для іншого метаболічного шляху.
Метаболічна інженерія: З метою даного винаходу термін "метаболічна інженерія" стосується створення раціональних стратегій зміни одного або декількох метаболічних шляхів в клітині, так, щоб в результаті постадійної модифікації вихідної речовини в загальній схемі всіх метаболічних шляхів, які функціонують в клітині, можна було б отримати продукт, який має точно задану хімічну структуру.
Зо Десатураза: У даному описі термін "десатураза" стосується поліпептиду, здатному здійснювати десатурацію (тобто вводити подвійний зв'язок) однієї або декількох жирних кислот з отриманням жирної кислоти, яка представляє інтерес, або її попередника. Рослинний розчинний фермент десатуразу жирних кислот може регіоспецифічно вводити подвійний зв'язок в субстрат насичений ацил-АСР. Ацил-СоА десатурази регіоспецифічно вводять подвійний зв'язок в субстрат насичений жирний ацил-СоА. Дана реакція включає в себе активацію молекулярного кисню двоелектронним відновленим дизалізним центром, координованим чотириспіралевим пучком, які утворюють центр конфігурації десатурази. У деяких втіленнях особливий інтерес представляють ацил-СоОА дельта-9-десатурази.
Дельта-9-18:0-АСР десатураза потрібна до всіх рослин для підтримки рідинності мембрани.
Хоча цей фермент насамперед здійснює десатурацію стеароїл-АСР, в меншій мірі він також активний відносно пальмітоїл-АСР.
Варіантна десатураза: У даному описі термін "варіантна десатураза" охоплює десатурази, які мають специфічні профілі активності, які відповідають їх участі в утворенні незвичайних жирних кислот. Варіантну десатуразу можна виділити з організму, отриманого внаслідок програми направленої еволюції, або її можна отримати рекомбінатними методами у вигляді синтетичної десатурази, відмінної консервативними амінокислотами від однієї або декількох охарактеризованих десатураз.
Рослина-нащадок: З метою даного винаходу термін "рослина-нащадок" стосується будь-якої рослини, яку можна отримати за допомогою методів селекції рослин, або отриманої з неї рослинного матеріалу. Методи селекції рослин добре відомі в даній галузі і включають в себе природну селекцію, штучну селекцію, селекційне розведення з використанням аналізу молекулярних маркерів ДНК, трансгенну і комерційну селекцію.
Рослинний матеріал: У даному описі термін "рослинний матеріал" стосується будь-якої клітини або тканини, отриманої з рослини.
Молекула нуклеїнової кислоти: Полімерна форма нуклеотидів, яка може включати в себе смислові і антисмислові ланцюги РНК, кКДНК, геномної ДНК, а також синтетичні форми і змішані полімери вищезгаданих сполук. Нуклеотид включає в себе рибонуклеотид, дезоксинуклеотид або модифіковану форму нуклеотиду будь-якого типу. У даному описі термін "молекула нуклеїнової кислоти" використовується як синонім термінам "нуклеїнова кислота" і бо "полінуклеотид". Цей термін включає в себе одноланцюжкові і дволанцюжкові форми ДНК.
Молекула нуклеїнової кислоти може містити або природні, або модифіковані, або ті і інші нуклеотиди, з'єднані зв'язками, які зустрічаються в природі, або, міжнуклеотидними зв'язками, які не зустрічаються в природі.
Молекули нуклеїнової кислоти можуть бути модифіковані за допомогою хімічних або біохімічних способів, або вони можуть містити неприродні або дериватизовані нуклеотидні основи, що може легко визначити рядовий фахівець в даній галузі. Такі модифікації включають в себе, наприклад, введення міток, метилування, заміну одного або декількох природних нуклеотидів на аналог, міжнуклеотидні модифікації, такі як незаряджені містки (наприклад, метилфосфонати, фосфотриефіри, фосфорамідати, карбамати і інш.), заряджені містки (наприклад, фосфоротіоати, фосфородитіоати і інш.), виступаючі фрагменти (наприклад, пептиди), інтеркалятори (наприклад, акридин, псорален і інш.), хелатуючі засоби, алкілуючі засоби і модифіковані містки (наприклад, альфа-аномерні нуклеїнові кислоти і інш.). Термін "молекула нуклеїнової кислоти" також включає в себе будь-яку топологічну конформацію, таку як одноланцюжкова, дволанцюжкова, частково двоспіральна, триспіральна, шпилькова, циклічна і закрита конформації.
Функціонально зв'язаний: Перша нуклеотидна послідовність функціонально зв'язана з другою нуклеотидною послідовністю, якщо перша нуклеотидна послідовність знаходиться в функціональній залежності від другої нуклеотидної послідовності. Наприклад, промотор функціонально зв'язаний з кодуючою послідовністю, якщо промотор може впливати на транскрипцію або експресію кодуючої послідовності. У випадку отримання нуклеїнових кислот рекомбінантними методами функціонально зв'язані нуклеотидні послідовності звичайно є суміжними і, при необхідності, в одній рамці зчитування можна з'єднати дві білок-кодуючі послідовності. Однак функціонально зв'язані нуклеїнові кислоти не обов'язково повинні бути суміжними.
Регуляторний елемент: У даному описі термін "регуляторний елемент" стосується молекули нуклеїнової кислоти, здатної регулювати функціонування гена; тобто молекули, здатної впливати на транскрипцію або трансляцію функціонально зв'язаної транскрибованої молекули нуклеїнової кислоти. Регуляторні елементи, такі як промотори, лідерні послідовності, інтрони і ділянки термінації транскрипції є молекулами некодуючих нуклеїнових кислот, здатні
Зо регулювати функціонування гена, які є невід'ємною частиною загальної експресії генів в живих клітинах. Отже, виділені регуляторні елементи, здатні функціонувати в рослинах, можна використовувати для зміни фенотипів рослин рекомбінантними методами. Під "регуляторним елементом" йдеться про ряд нуклеотидів, який визначає, чи відбувається експресія конкретного гена, коли вона відбувається і на якому рівні. Регуляторні послідовності ДНК специфічно взаємодіють з регуляторними або іншими білками.
У даному описі термін "здатність регулювати функціонування гена" стосується молекули нуклеїнової кислоти, здатної впливати на транскрипцію або трансляцію функціонально зв'язаної молекули нуклеїнової кислоти. Виділена молекула нуклеїнової кислоти, здатна регулювати функціонування гена, може визначати час або місце експресії, або модулювати рівень і швидкість експресії функціонально зв'язаної молекули нуклеїнової кислоти. Виділена молекула нуклеїнової кислоти, здатна регулювати функціонування гена, може включати в себе промотор, інтрон, лідерну послідовність або 3'-ділянку термінації транскрипції.
Промотори: У даному описі термін "промотор" стосується молекули нуклеїнової кислоти, яка бере участь в розпізнаванні і зв'язуванні РНК-полімерази ІІ або інших білків, таких як фактори транскрипції (транс-діючі білкові фактори, які регулюють транскрипцію), з подальшою ініціацією транскрипції функціонально зв'язаного гена. Самі промотори можуть містити піделементи, такі як цис-елементи або енхансерні домени, які впливають на транскрипцію функціонально зв'язаних генів. "сослинний промотор" являє собою природний або не природний промотор здатний функціонувати в рослинних клітинах. Рослинний промотор можна використовувати як
Б'-регуляторний елемент для модуляції експресії функціонально зв'язаного гена або генів.
Рослинні промотори можна класифікувати за часовим, просторовим або пов'язаним з розвитком характером експресії. Описані тут молекули нуклеїнових кислот можуть містити нуклеотидні послідовності, які включають в себе промотори.
Ідентичність послідовностей: У даному описі термін "ідентичність послідовностей" або "ідентичність" в застосуванні до двох нуклеотидних або поліпептидних послідовностей може стосуватися залишків двох послідовностей, які є однаковими при вирівнюванні з максимальною відповідністю в певному вікні порівняння.
Якщо термін "процент ідентичності послідовностей" використовують в застосуванні до білків, потрібно розуміти, що положення, в яких знаходяться не ідентичні залишки, можуть відрізнятися бо в результаті консервативних амінокислотних замін, в процесі яких амінокислотні залишки замінюють на інші амінокислотні залишки з подібними хімічними властивостями (такими як заряд, гідрофобність або стеричні ефекти), і, отже, такі заміни не змінюють функціональних властивостей молекули.
Таким чином, якщо послідовності відрізняються в результаті консервативних замін, процент ідентичності послідовностей можна відкоригувати до більш високого значення, щоб врахувати консервативну природу заміни в положенні, в якому присутні не ідентичні залишки.
Послідовності, які відрізняються внаслідок таких консервативних замін, характеризуються "подібністю послідовностей" або "подібністю". Методи такої корекції добре відомі рядовим фахівцям в даній галузі. Як правило, такі методи включають в себе оцінку консервативної заміни як швидше часткового, а не повного незбігу, яка підвищує процент ідентичності послідовностей. Наприклад, якщо ідентичній амінокислоті присвоюють оцінку від О до 1, а неконсервативній заміні присвоюють оцінку 0, то консервативній заміні присвоюють оцінку від 0 до 1. Оцінку консервативних замін можна розрахувати, наприклад, при виконанні програми
РС/СЕМЕ (ІпівїІїдепеїїс5, Мошпіаїп Мієм/, СА).
У даному описі термін "процент ідентичності послідовностей" може стосуватися значення, визначеного шляхом порівняння двох оптимально вирівняних послідовностей у вікні порівняння, де частина послідовності у вікні порівняння може містити добавки або делеції (тобто пропуски) стосовно послідовності (яка не містить добавок або делецій), яка порівнюється для оптимального вирівнювання двох послідовностей. Процент розраховують шляхом визначення числа положень обох послідовностей, в яких зустрічаються ідентичні нуклеотидні або амінокислотні залишки, з отриманням числа співпадаючих положень, розподілу числа співпадаючих положень на загальне число положень у вікні порівняння і множення результату на 100, з отриманням значення процента ідентичності послідовностей.
Аналогічне положення в амінокислотній послідовності: Нуклеотидні і амінокислотні послідовності можна вирівнювати за допомогою способів, описаних в нижченаведених параграфах. При вирівнюванні положення в одній послідовності є "аналогічним" положення в послідовності, яка вирівнюється, якщо положення є ідентичними в консенсусній послідовності.
Способи вирівнювання послідовностей з метою порівняльного аналізу добре відомі в даній галузі. Різні програми і алгоритми вирівнювання описані в: Зтйй апа Умагегтап, Адм. Аррі. тай.
Зо 2:482, 1981; Мевеаієтап апа УУипвспи, у). Мої. Віої. 48:443, 1970; Реагзоп апа Гіртап, Ргос. Маї).
Асад. сі. ОБА 85:2444, 1988; Ніддіпв апа ЗНагр, Сепе 73:237-44, 1988; Ніддіп5 апа 5Нагр,
САВІОБЗ 5:151-3, 1989; Согреї єї аї, Мисівєїс Асідх Везєагсп 16:10881-10890, 1988; Ниапо, єї аї,
Сотриїег Арріїсайоп5 іп Ше Віозсієпсе5 8:155-65, 1992; Реагзоп єї аЇ, Меїйодв5 іп Моїіесшаг
Віоіоду 24:307-31, 1994; Тайапа еї ані, ЕЕМ5 Містобіої. І ей., 174:247-50, 1990. Айвепиї! еї аї, У. Мої.
Віої. 215:403-10, 1990 (докладний опис методів вирівнювання послідовностей і розрахунку гомології).
Вавіс І оса! АІїдптепі Зеагсі Тоої (ВІ А5Т) Національного центру біотехнологічної інформації (МСВІ) можна знайти в інтернеті (на сайті Біавзі.пеобі.піт.піп.дом/Віавзі.сді) для застосування в поєднанні з програмами для аналізу послідовностей, такими як Біабір і Біазіп. Опис визначення ідентичності послідовностей за допомогою даної програми можна знайти в інтернеті через МОВІ на сайті Біазі.побі.піт.пій.дом Віахі.сдаі"СМО-УумераРАСЕ ТМРЕ-Віазіросзв.
Для порівняння амінокислотних послідовностей використовують функцію програми ВІ АЗТ "Віазі 2 зедиепсев" (рі25ед) з параметрами за умовчанням. Конкретні параметри можуть бути відкориговані на розсуд фахівця в даній галузі, наприклад, з отриманням штрафу за незбіг або винагороди за збіг.
Трансформований: У даному описі термін ""трансформований" стосується клітини, тканини, органу або організму, в які введена чужорідна молекула нуклеїнової кислоти, така як конструкція. Введена молекула нуклеїнової кислоти може інтегруватися в геномну ДНК реципієнтних клітин, тканини, органу або організму, в результаті чого введена полінуклеотидна молекула успадковується подальшим потомством. Термін "трансгенний" або "грансформований" в застосуванні до клітини або організму також включає в себе потомство клітини або організму, а також потомство, отримане внаслідок програми селекції, яка проводиться, наприклад, шляхом схрещування з використанням такої трансгенної рослини як батьківська рослина, і яка має змінений фенотип, зумовлений присутністю чужорідної молекули нуклеїнової кислоти.
ЇМ. Концепції метаболічної інженерії з метою зменшення вмісту насичених жирних кислот в клітині-, тканині- або організмі-хазяїні
А. Огляд
Втілення даного винаходу включає в себе введення дельта-9-десатураз, які мають бо специфічну вибірковість відносно ацил-СоА (наприклад, відносно пальмітинової або стеаринової кислоти), в насіння рослин. Специфічна вибірковість дельта-9-десатурази відносно ацил-СоА забезпечує спрямованість на деякі конкретні пули насичених жирних кислот (такі як пальмітат, для перетворення в мононенасичені продукти). Щоб зменшити вміст насичених жирних кислот, вибирають ацил-СоА дельта-9-десатурази, оскільки вони звичайно не продукуються в рослинних системах в якій-небудь помітній мірі.
В. Поліпептиди
Стосовно деяких втілень даного винаходу поліпептиди містять амінокислотну послідовність, яка за результатами вирівнювання має високий процент ідентичності з послідовністю, вибраною з групи, яка складається з БЕО ІЮ МО: 12, 5ЕО ІЮ МО: 13, 5ЕО ІЮ МО: 14, 5ЕО ІЮО МО: 50, 5ЕО
ІЮ МО: 52, 5БО ІО МО: 72 і 5ЕБО ІЮО МО: 73. Конкретні амінокислотні послідовності, які використовуються у вказаних і інших втіленнях, можуть містити послідовності, які, наприклад щонайменше приблизно на 7095, приблизно на 7595, приблизно на 8095, 81905, 8295, 8395, 8495, 8595, 8695, 8795, 8895, 8995, 9095, 9195, 9295, 9395, 9495, 9595 9695, 9795, 9895, 9995 або 100905 ідентичні вищезгаданим послідовностям. У багатьох втіленнях амінокислотна послідовність, за результатами вирівнювання, яка має вищезгадану ідентичність відносно згаданих вище послідовностей, кодує пептид з ферментативною активністю дельта-9-18:0-АСР десатурази, або частину такого пептиду.
С. Нуклеїнові кислоти
Деякі втілення включають в себе молекули нуклеїнової кислоти, які кодують описаний вище поліпептид. Наприклад, нуклеотидні послідовності, які використовуються в деяких втіленнях, за результатами вирівнювання мають високий процент ідентичності відносно послідовності, вибраної з групи, яка складається з БЕО ІЮ МО: 3, 5ЕО І МО: 4, 5ЕО ІО МО: 5, 5ЕО ІО МО: 8,
ЗЕО ІЮО МО: 9, 5ЕО ІЮО МО: 10, 5ЕО ІЮ МО: 11, 5ЕО І МО: 15, 5ЕО ІО МО: 16, 5ЕО ІЮ МО: 17,
ЗБО ІЮ МО: 44, 5ЕБЕО ІЮО МО: 45, 5БО ІЮ МО: 48 ії 5ЕБЕО ІЮ МО: 49. Конкретні нуклеотидні послідовності, які використовуються у вказаних і інших втіленнях, можуть містити послідовності, які наприклад щонайменше приблизно на 6095, приблизно на 6595, приблизно на 7095, приблизно на 7595, приблизно на 8095, 8195, 8295, 8395, 8495, 8595, 8695, 8795, 8895, 8995, 9095, 9196, 9290, 9390, 9495, 9590 969, 9790, 9895, 9995 або 10095 ідентичні послідовності, вибраній з групи, яка складається з БЕО ІЮ МО:З3, 5ЕО ІЮ МО:4, 5ЕО ІЮО МО:5, 5ЕО ІЮ МО:8, 5ЕО ІО МО:9,
Коо) ЗЕО Ю МО 10, 5ЕО 1О МО-11, 5ЕО 1О МО:15, 5ЕО ІЮ МО:16, БЕО ІО МО: 17, БЕО ІО МО 44, 5ЕО
ІО МО:45, БЕО ІЮО МО:48 і БЕО ІО МО:49. Рядовому фахівцеві в даній галузі відомо, що молекули нуклеїнових кислот можна модифікувати, практично не змінюючи амінокислотну послідовність кодованого поліпептиду, наприклад, шляхом введення допустимих нуклеотидних замін відповідно до виродженості кодонів.
У деяких втіленнях молекули нуклеїнової кислоти даного винаходу включають в себе генний регуляторний елемент (наприклад, промотор). Промотори можна вибирати залежно від типу клітини, в яку вставляють векторну конструкцію. Промотори, здатні функціонувати в бактеріях, дріжджах і рослинах, добре відомі в даній галузі. Промотори також можна вибирати за їх регуляторними властивостями. Приклади таких властивостей включають в себе здатність підвищувати транскрипційну активність, здатність до індукування, тканинну специфічність і специфічність до стадії розвитку. Описані рослинні промотори, здатні до індукування, вірусного або синтетичного походження, які мають конститутивну активність і здатні здійснювати часову або просторову регуляцію. Див., наприклад, Ро52Кому5Кі еї а. (1989) ЕМВО .). 3:2719; Оаеї! еї аї. (1985) Майшге 313:810; і Спам єї а. (1989) Зсіепсе 244:174-81.
Прийнятні індуковані промотори включають в себе, наприклад, промотори, які індукуються саліциловою кислотою або поліакриловими кислотами, які утворюються внаслідок застосування антидотів (гербіциди на основі заміщених бензолсульфонамідів), промотори теплового шоку, промотор нітрат-індукований, отриманий з послідовності молекули нуклеїнової кислоти транскрибованої в нітратредуктазу шпинату, гормон-індуковані промотори і світлоіїндуковані промотори, зв'язані з малою субодиницею карбоксилази КиВР і сімействами І НОР.
Приклади прийнятних тканиноспецифічних, залежних від стадії розвитку промоторів, включають в себе промотор ВДВ-конгліциніну 754 і насіннє-специфічні промотори. Рослинні функціональні промотори, які використовуються для переважної експресії в пластидах насіння, включають в себе промотори білків, які беруть участь в біосинтезі жирних кислот в насінні олійних рослин, і промотори запасних рослинних білків. Приклади таких промоторів включають в себе 5'-регуляторні ділянки послідовностей молекул нуклеїнових кислот, траскрибованих в фазеолін, напін, зеїн, соєвий інгібітор трипсину, АСР, стеароїл-АСР десатуразу і олеосин. ІНШИМ прикладом тканиноспецифічного промотору є промотор лектину, специфічний до тканин насіння.
Інші прийнятні промотори включають в себе промотори нопалін-синтази, манопін-синтази і октопін-синтази, які присутні на, пухлино-індукованих плазмідах Адгорасіегішт Ішптегасієп5в; промотори 195 і 355 вірусу мозаїки цвітної капусти (Самум); посилений промотор 355 Саму; промотор 355 вірусу мозаїки Ріджмогї; світлоїндукований промотор малої субодиниці рибулозо- 1,5-біфосфат карбоксилази (55К08ІЗСО); промотор ЕІЕ-4А тютюну (Мапавбеї еї а. (1995) Ріапі
Мої. Віо!. 29:995-1004); кукурудзяної синтетази сахарози; кукурудзяної алкогольдегідрогенази І; кукурудзяного світлозбирального комплексу; кукурудзяного білка теплового шоку; промотор хітинази Агарідорхіє; промотори ІТР (ліпід-переносного білка); халькон-ізомерази петунії; соєвого збагаченого гліцином білка 1; пататину картоплі; промотор убіхітину; і промотор актину.
Переважно використовують насіннє-селективні, тканиноселективні або індуковані промотори.
Насіннє-специфічна регуляція описана, наприклад, в ЕР 0255378.
Щоб досягнути підвищеної експресії гетерологічного гена (генів), можна здійснити реконструкцію гена (генів) з метою більш ефективної експресії в клітині-хазяїні (наприклад, в клітині рослини, такої як канола, рис, тютюн, маїс, бавовник і соєвий біб). Отже, необов'язковою додатковою стадією при конструюванні гена, який кодує дельта-9-десатуразу, з метою експресії в рослині (тобто крім додавання одного або декількох генних регуляторних елементів), є реконструкція ділянки гетерологічного гена, який кодує білок, який забезпечує оптимальну експресію. Конкретні втілення включають в себе реконструйовані гени, оптимізовані з метою підвищення рівня експресії (тобто продукуючі більше білка) в клітині трансгенної рослини каноли, або в клітині рослини Агабрідорбвхі5, відмінній від клітини рослини каноли, або в клітині рослини Агарідорзіз, трансформованої природною послідовністю гетерологічного гена.
Внаслідок пластичності, яка забезпечується надмірністю/виродженістю генетичного коду (це означає, що деякі амінокислоти кодуються декількома кодонами), еволюція геномів в різних організмах або класах організмів призводить до різного застосування синонімічних кодонів. Таке "зміщення кодонів" знаходить відображення в середньому складі основ в ділянках, які кодують білки. Наприклад, організми, геноми яких мають відносно низький вміст (з-С, використовують більше кодонів, які містять А або Т в третьому положенні синонімічних кодонів, тоді як організми, геноми яких мають відносно високий вміст (з, використовують більше кодонів, які містять С або С в третьому положенні. Крім того, вважають, що присутність "мінорних" кодонів в
Зо МРНК може знижувати абсолютну швидкість трансляції мРНК, особливо, якщо заряджена тРНК, відповідна мінорному кодону, присутня у відносно невеликому надлишку. Продовження даного міркування полягає в тому, що зменшення швидкості трансляції під дією окремих мінорних кодонів щонайменше підсумовується у випадку присутності декількох мінорних кодонів. Таким чином, МРНК з високим відносним вмістом мінорних кодонів будуть мати відповідно низькі швидкості трансляції в конкретному експресійному хазяїні. Такі швидкості можуть призводити до відповідних низьких рівнів кодованого білка.
При конструюванні оптимізованих генів, які кодують дельта-9-десатуразу, для експресії в канолі або Агабрідорзі5 (або в інших рослинах, таких як рис, тютюн, маїс, бавовник або соєві боби), важливо визначати зміщення кодонів в передбачуваній рослині (рослинах) - хазяїні. Існує множина широко доступних баз даних за послідовностями ДНК, в яких можна знайти інформацію про розподіл кодонів в геномах рослин, або про білок-кодуючі ділянки різних рослинних генів.
Зміщення кодонів являє собою статистичний розподіл кодонів, які використовують хазяїн експресії (наприклад, рослину, таку як канола або Агабрідорвзі5) для кодування амінокислот, які входять до складу його білків. Зміщення кодонів можна розрахувати як частоту, з якою використовується один кодон в порівнянні з кодонами всіх амінокислот. Альтернативно зміщення кодонів можна розрахувати як частоту, з якою використовується один кодон для кодування конкретної амінокислоти, в порівнянні з іншими кодонами, які використовуються для кодування цієї ж амінокислоти (синонімічні кодони).
При конструюванні оптимізованих кодуючих ділянок для експресії в рослині генів дельта-9- десатурази, треба визначити кодони, переважні рослиною насамперед ("перший вибір"), а також переважні кодони другого, третього, четвертого і інш. виборів, якщо існує декілька виборів.
Потім можна сконструювати нову послідовність ДНК, яка кодує амінокислотну послідовність дельта-9-десатурази, де нова послідовність ДНК відрізняється від нативної послідовності ДНК (яка кодує десатуразу) в результаті заміни кодонів на переважні хазяїном експресії (кодони першої переваги, другої переваги, третьої переваги або четвертої переваги і інш.) для кодування амінокислоти в кожному положенні амінокислотної послідовності. Потім нову послідовність аналізують на наявність ділянок ферментативної рестрикції, які можуть створюватися в процесі модифікацій. Ідентифіковані передбачувані ділянки рестрикції 60 модифікують шляхом заміни вказаних кодонів кодонами наступної переваги, щоб видалити ділянки рестрикції. Інші ділянки послідовності, які можуть впливати на транскрипцію або трансляцію гетерологічної послідовності, включають в себе точки з'єднання екзон:інтрон (5' або 3), сигнали додавання полі-А і/або сигнали термінації РНК-полімерази. Послідовність можна додатково аналізувати і модифікувати з метою зменшення частоти дублетів ТА або Со. Крім вказаних дублетів, блоки послідовності, які містять приблизно більше шести однакових нуклеотидів С або С, також можуть впливати несприятливим чином на транскрипцію або трансляцію послідовності. Отже, такі блоки бажано модифікувати шляхом заміни кодонів першого, другого або інш. вибору на переважний кодон наступного вибору.
За допомогою описаного вище способу фахівець в даній галузі може модифікувати чужорідний для конкретної рослини ген (гени) таким чином, щоб забезпечити його оптимальну експресію в рослині. Цей спосіб також описаний в заявці РСТ МО 97/13402. Таким чином, для трансформації хазяїнів, які включають в себе рослини, можна використовувати оптимізовані синтетичні гени, функціонально еквівалентні генам десатурази деяких втілень. Додатковий посібник по отриманню синтетичних генів можна знайти, наприклад, в патенті США Мо 5380831.
Після конструювання оптимізованої для рослини послідовності ДНК на папері або іп 5іййсо, можна синтезувати в лабораторії реальну молекулу ДНК, послідовність якої точно відповідає конструйованій послідовності. Такі синтетичні молекули ДНК можна клонувати або піддавати їх іншим маніпуляціям, так якби вони були отримані з природних або нативних джерел. р. Способи генетичної трансформації рослинного матеріалу
Деякі втілення направлені на спосіб отримання трансформованої клітини, яка містить одну або декілька молекул нуклеїнової кислоти (нуклеїнових кислот), яка містить нуклеотидну послідовність щонайменше на 60595 ідентичну послідовності, вибраної з групи, яка складається з
ЗЕО ІО МО: 3, 5ЕО ІО МО: 4, БЕО ІЮ МО: 5, БЕО І МО: 8, 5ЕО ІО МО: 9, 5ЕО ІО МО: 10, 5ЕО І
МО: 11, БЕО ІО МО: 15, 5ЕО ІЮ МО: 16, 5ЕО І МО: 17, 5ЕО ІЮО МО: 44, 5ЕО ІЮ МО: 45, 5ЕО І
МО: 48 ії 5ЕБЕО ІО МО: 49. Вказані молекули нуклеїнової кислоти також можуть містити, наприклад, некодуючі регуляторні елементи, такі як промотори. Нарівні з некодуючими регуляторними елементами і транскрибованими послідовностями нуклеотидних молекул в клітину можна вводити інші послідовності. Вказані інші послідовності можуть включати в себе 3'- термінатори транскрипції, сигнали 3'-поліаденілування, інші послідовності, які не транслюються,
Зо транзитні або напрямні послідовності, селектовані маркери, енхансери і оператори.
Спосіб трансформації звичайно включає в себе стадії вибору прийнятної клітини-хазяїна, трансформації клітини-хазяїна рекомбінантним вектором і отримання трансформованої клітини- хазяїна. Методи введення ДНК в клітини добре відомі фахівцям в даній галузі. Як правило, ці методи можна поділити на п'ять груп: (1) хімічні методи (Сгапат апа Мап дег ЕБ (1973) Мігоїосду 54(2):536-9; 7айоикаї єї а!. (1992) Апп. М.М. Асайд. осі. 660:136-53); (2) фізичні методи, такі як мікроін'єкція (Сареспі (1980) СеїЇ 22(2):479-88), електропорація (М/опд апа Меитапп (1982)
Віоспіт. Віорпуз. Не5. Соттип. 107(2):584-7; Рготт єї аї. (1985) Ргос. Май. Асад. осі. ОБА 82(17):5824-8; патент США 5384253), і прискорення частинок (опп5іоп апа Тапд (1994) Меїпоа»5
Сеїї Віої. 43(А):353-65; Рупап еї аі. (1993) Ргос. Май. Асад. осі. ОСОБА 90(24): 11478-82; (3) застосування вірусних векторів (Сіарр (1993) Сііп. Регіпай!. 20():155-68; І и єї аї. (1993) 9. Ехр.
Меса. 178(6):2089-96; Едійіє апа Апаегзоп (1988) Віоїесппіднев5 6(7):608-14); (4) застосування рецептор-опосередкованих механізмів (Сигієї еї а. (1992) Нит. Сеп. Тег. 3(2): 147-54; Мадпег еї аЇ. (1992) Рос. Май. Асад. Зсі. ОБА 89(13):6099-103); і (5) застосування механізмів опосередкованих бактеріями, такими як Адгобасіегішт. Альтернативно нуклеїнові кислоти можна безпосередньо вводити до репродуктивних органів рослини, таких як пилок. 2пои еї аї. (1983) Меїнодз іп Еплутоїіоду 101:433; Незз (1987) Іпієт. Неу. Сую!. 107:367; І о єї а!. (1988)
Ріапі Мої. ВіоІ. Керогпіег 6:165; Репа еї аїІ. (1987) Маїшге 325:274. Інші методи трансформації включають в себе, наприклад, трансформацію протопластів, описану в патенті США 5508184.
Молекули нуклеїнової кислоти також можна вводити в незрілі ембріони. Меийацз еї аї. (1987)
ТНеог. Аррі. Сепеї. 75:30.
Для трансформації рослинних клітин частіше за все використовують наступні методи: опосередковане Адгобасіегічшт перенесення ДНК (Егаїеу еї аї. (1983) Ргос. Май. Асад. Зсі. ОБА 80:4803) (описане в патенті США 5824877; патент США 5591616; патент США 5981840; і патент
США 6384301) і біолістика або бомбардування мікрочастинками (тобто метод генної гармати) (як описано в патенті США 5550318; патент США 5538880; патент США 6160208; патент США 6399861; і патент США 6403865). Як правило, проводять ядерну трансформацію, однак, якщо бажано специфічно трансформувати пластиди, такі як хлоропласти або амілопласти, трансформацію проводять шляхом опосередкованої мікрочастинками доставки цільових молекул нуклеїнової кислоти в пластиди рослин конкретних видів, таких як, наприклад, 60 Агабрідорзі5, тютюн, картопля і різновиди Вгаззіса.
Адгорасіегіийт-опосередковану трансформацію проводять шляхом застосування рекомбінантної грунтової бактерії яка належить до роду Адгобрасіегішт. Деякі види
Адгорасіегішт опосередковують перенесення специфічної ДНК, відомої як "Т-ДНК", яка після генетичної трансформації може переносити будь-який бажаний фрагмент ДНК в рослини багатьох видів. Основні події, які характеризують процес Т-ДНК-опосередкованого патогенезу, включають в себе: індукцію генів вірулентності, а також процесинг і перенесення Т-ДНК. Даний процес є предметом численних оглядів. Див., наприклад, Кеат (1989) Апп. Кеу. Рпубораїйної. 27:583- 618; Ноулага апа СйоувкКу (1990) Віоаззаувз 12:103-8; Кадо (1991) Стї. Веу. Ріапі 5сі. 10:1-
З2; 7атргувзКкі (1992) Аппиа! Нем. Ріапі РНузіої. Ріапі Мої. Віої. 43:465- 90; Семіп (1993) іп
Тгап5депіс Ріапів, Кипд апа Ми едв5., Асадетіс Ргев5, Зап Оієдо, СА, рр. 49-87; Віпп5 апа Ном/ї? (1994) Іп Васівїіса!| Раїйодепевів ої Ріапів апа Апітаї!5, Оапо, єд., Вепіп: 5ргіпдег Мепад., рр. 119- 38; Носукаах апа Веї|егзрегдеп (1994) Апп. Нем. Рпуїораїйої. 32:157-79; І ев55іІ апа ІапКка (1994)
Сеїї 77:321-4; апа 7ирап апа 7атьгузкі (1995) Аппиаї! Неу. Рнуюораїйної. 27:583-618.
Щоб полегшити вибір, або відмітити трансформовані рослинні клітини, незалежно від методу трансформації, ДНК, яка вводиться в клітину, може містити ген, здатний функціонувати в регенерованій рослинній тканині, продукуючи сполуку, яке додає рослинній тканині стійкості до сполуки, яка в інших випадках є токсичною. Гени, які представляють інтерес, для застосування як маркера селекції, маркера скринінгу або маркера відмітки, включають в себе, без обмеження, р-глюкуронідазу (505), зелений флуоресцентний білок (СЕР), люциферазу і гени стійкості до антибіотиків або гербіцидів. Приклади генів стійкості до антибіотиків включають в себе гени, які додають стійкості до пеніциліну, канаміцину (а також неоміцину, 418, блеоміцину); метотрексату (і триметоприму); хлорамфеніколу; і тетрацикліну. Наприклад, стійкість до гліросату може додавати ген стійкості до гербіциду. ЮОеїПа-Сіорра єї аї. (1987)
Віо/Тесппоіоду 5:579-84. Крім того, можна використовувати і інші засоби селекції, наприклад, які включають в себе, без обмеження, стійкість до фосфінотрицину і біалафосу, а також механізми позитивної селекції (доеге5бго еї аї. (1998) Мої. Вгеед. 4:111-7), які входять в об'єм втілень даного винаходу.
Трансформовані клітини ідентифікують шляхом селекції або скринінгу і культивують у відповідному середовищі, яке забезпечує регенерацію, після чого їм дають розвиватися до
Зо цілих рослин.
Способи, які розкриваються в даному винаході, можна використовувати в поєднанні з будь- якою трансформованою рослинною клітиною або тканиною. Трансформовані клітини і тканини стосовно даного опису включають в себе, без обмеження, клітини або тканини, здатні до подальшого розвитку з утворенням рослини. Фахівцям в даній галузі відомо, що ряд рослинних клітин або тканин після трансформації шляхом вставки екзогенної ДНК і подальшого культивування у відповідних умовах можуть розвиватися до диференційованої рослини.
Відповідні для таких цілей тканини можуть включати в себе, без обмеження, незрілі зародки, тканину щитка зародка, суспензійні клітинні культури, незрілі суцвіття, меристему паростків, експлантати вузликів, тканину калюса, тканину гіпокотилю, сім'ядолі, коріння і листя.
Методи регенерації, розвитку і культивування рослин з трансформованих протопластів або експлантатів рослин відомі в даній галузі. Ууеіззрасп апа М/еіз5расі (1988) Меїпоаз ог Ріапі
Моїесшіаг Віоіоду, (Ед5».) Асадетіс Ргевв, Іпс., зап Оіедо, СА; Ноїв5сп еї аїЇ. (1985) 5сієпсе 227:1229-31. Як правило, вказаний процес регенерації і росту включає в себе стадії відбору трансформованих клітин і культивування вказаних клітин протягом звичайних стадій ембріонального розвитку до утворення проростка з коренем. Подібним чином регенерують трансгенні зародки і насіння. У даному способі трансформанти звичайно культивують в присутності селекційного середовища, яке дозволяє відбирати трансформовані клітини і забезпечує регенерацію паростків рослини. Егаієу еї а. (1993) Ргос. Майї). Асай. Зсі. О5А 80:4803. Вказані паростки звичайно отримують протягом двох-чотири місяців. Потім отримані трансгенні паростки з корінням вирощують в середовищі, відповідному для вирощування рослин, такому як грунт. Клітини, які вижили після впливу селективного засобу, або клітини, охарактеризовані як позитивні за результатами скринінгу, можна культивувати в середовищі, яке забезпечує регенерацію рослин. Потім паростки можна перенести в середовище, прийнятне для стимуляції росту кореневої системи, яке містить селективний засіб і антибіотик для запобігання росту бактерій. У багатьох паростків розвивається коріння. Такі паростки пересаджують в грунт або інше середовище, яке забезпечує подальший розвиток кореневої системи. Як вказано вище, даний спосіб може варіювати залежно від конкретного використовуваного штаму рослини і, отже, його деталі можуть змінюватися на розсуд фахівця в даній галузі.
Регенеровані трансгенні рослини можна піддати самозапиленню з отриманням гомозиготних трансгенних рослин. Альтернативно пилок, отриманий з регенерованих трансгенних рослин, можна використовувати для перехресного схрещування з нетрансгенними рослинами, переважно інбредних ліній агрономічно важливих видів. | навпаки, пилок нетрансгенних рослин можна використовувати для запилення регенерованих трансгенних рослин.
Трансгенна рослина може передавати трансформовану послідовність нуклеїнової кислоти своєму потомству. Трансгенна рослина переважно є гомозиготню по трансформованій послідовності нуклеїнової кислоти і передає цю послідовність всім своїм нащадкам при статевому розмноженні, або в результаті статевого розмноження. Потомство можна вирощувати з насіння, продукованого трансгенною рослиною. Потім отримані рослини можна піддати самозапиленню з отриманням даної селекційної лінії рослин.
Потомство вказаних рослин можна аналізувати, в числі інших ознак, на експресію гена.
Експресію гена можна детектувати за допомогою ряду традиційних методів, таких як вестерн- блотинг, нозерн-блотинг, імунопреципітація і ЕГІЗА (твердофазний імуноферментний аналіз).
Трансформовані рослини також можна аналізувати на присутність введеної ДНК і рівень експресії і/або профіль жирних кислот, який забезпечується молекулами нуклеїнових кислот і пептидними молекулами даного винаходу. Фахівцям в даній галузі відомі численні методи, відповідні для аналізу трансформованих рослин. Наприклад, методи аналізу рослин включають в себе, без обмеження, саузерн-блотинг або нозерн-блотинг, методи на основі ПЛР, біохімічні аналізи, методи фенотипового скринінгу, польові аналізи і імунодіагностичні аналізи.
Способи специфічної трансформації дводольних добре відомі в даній галузі. Трансформація і регенерація рослин з використанням вказаних способів описані для ряду зернових, які включають в себе, без обмеження, члени роду Агарідорзі5, бавовник (со55урішт Піг5шит), соєві боби (Сіусіпе тах), арахіс (Агаспіх пуродаєа) і члени роду Вгаззіса. Способи трансформації дводольних, насамперед, із застосуванням Адгобасіегішт Ішпегасіеп5, і отримання трансгенних рослин описані для бавовнику (патент США 5004863; патент США 5159135; патент США 5518908); соєвих бобів (патент США 5569834; патент США 5416011; МсСабе еї аї. (1988)
Віотесппоїоду 6:923; СпПгівіои єї а. (1988) Ріапі РНузіої. 87:671-4); Вгазвзіса (патент США 5463174); арахісу (Спепо еї аї. (1996) Ріапі СеїІ Кер. 15:653-7; МеКепйу еї а!. (1995) Ріапі Сеї
Зо Вер. 14:699-703); папайя; і гороху (Огапі еї а. (1995) Ріапі Сеї! Нер. 15:254-8).
Способи трансформації однодольних добре відомі в даній галузі. Трансформація і регенерація рослин з використанням вказаних способів описані для ряду зернових, які включають в себе, без обмеження, ячмінь (Ногдешт уцідагає); маїс (7еа таувз); овес (Амепа заїїма); грястицю звичайну (басіуїї5 діотегага); рис (Огула заїїма, включаючи різновиди іпаїса і
З5 )|аропіса); сорго (Богопит бБісоїог); цукрову тростину (Засспагит 5р); високу кострицю (Резішса агипаіїпасеа); газонні трави (наприклад, Аодгобії5 віоІопітєга, Роа ргаїепвзі5, 5іепоїарпгит зесипдайшт); пшеницю (Тгййсит аевіїмит); ії люцерну (Меадісадо заїїма). Для фахівців в даній галузі очевидно, що існує ряд способів трансформації, які можна використовувати і модифікувати з отриманням стабільних трансгенних рослин ряду цільових культур, які представляють інтерес.
У способах даного винаходу можна використовувати будь-які рослини. Переважні для модифікації стосовно даного винаходу рослини включають в себе, як приклад і без обмеження, олійні рослини, Агабідорзіб5 (Паїїапа, огірочник (Вогадо 5рр.), канолу (Вгазвзіса 5рр.), рицину (Кісіпи5 соттипів), боби какао (ТПпеобгота сасаос), кукурудзу (7еа таух), бавовник (сСо55урійт 5рр.), Статре 5рр., Сирпєа 5рр., льон (Гіпит 5рр.), Гездпиегейа і Гітпапіпез 5зрр., Гіпоїа, красолю (Тгораеоїшт 5рр.), Оеєпоїпега 5рр., оливкове дерево (Оїєа 5рр.), пальмове дерево (Еїаеї5 5рр.), арахіс (Агаспі5 5рр.), ріпак, сафлор (Саппатиз 5рр.), соєві боби (Сіусіпе і ода 5рр.), соняшник (Неїапіпих 5рр.), тютюн (Місомапа 5рр.), Метопіа 5рр., пшеницю (Тгйісит 5рр.), ячмінь (Ногаеит 5рр.), рис (Огула 5рр.), овес (Амепа 5рр.), сорго (Зогдапит 5рр.) і жито (зесаїе 5рр.), а також інші члени Сгатіпеає.
Для фахівців в даній галузі очевидно, що існує ряд способів трансформації, які можна використовувати і модифікувати з отриманням стабільних трансгенних рослин ряду цільових культур, які представляють інтерес.
Е. Трансгенне насіння
У деяких втіленнях трансгенне насіння може містити поліпептид дельта-9-десатурази, який включає в себе амінокислотну послідовність щонайменше на 8095 ідентичну послідовності, вибраної з групи, яка складається з БЕО ІЮ МО: 12, 5ЕО ІЮО МО: 13, 5ЕО ІЮО МО: 14, 5ЕО ІЮО МО: 50, 5ЕО ІЮ МО: 51, 5ЕО ІЮ МО: 52, 5ЕО ІЮО МО: 72 і 5ЕО ІО МО: 73. У вказаних і інших втіленнях трансгенне насіння може містити нуклеотидну послідовність щонайменше на 6095 ідентичну 60 послідовності, вибраної з групи, яка складається з 5ЕО ІЮ МО: 3, 5ЕО ІЮО МО: 4, 5ЕО ІЮО МО: 5,
ЗЕО ІЮ МО: 8, 5ЕО ІО МО: 9, 5ЕО ІО МО: 10, 5ЕБЕО ІО МО: 11, 5ЕБЕО ІО МО: 15, 5ЕОІЮ МО: 16,
ЗЕО ІЮ МО: 17, ЗЕО ІЮ МО: 44, 5ЕО ІЮО МО: 45, 5ЕО ІЮ МО: 48 їі 5ЕО ІО МО: 49. У деяких втіленнях трансгенне насіння може містити знижені рівні насичених жирних кислот (таких як пальмітинова жирна кислота і/або стеаринова жирна кислота). Насіння можна зібрати з фертильної трансгенної рослини і використати його для вирощування потомственних поколінь трансформованих рослин, які включають в себе лінії гібридних рослин, які містять щонайменше одну нуклеотидну послідовність з описаних вище і, необов'язково, один додатковий ген або нуклеотидну конструкцію, яка представляє інтерес.
Нижченаведені приклади приведені для ілюстрації деяких конкретних ознак і/або втілень.
Вказані приклади не треба тлумачити як обмеження винаходу конкретними описаними ознаками або втіленнями.
ПРИКЛАДИ
Приклад І: Клонування ацил-СоА дельта-9-десатураз і функціональна характеризація о!е!1- дефіцитних дріжджів
Клонування ацил-СоОА дельта-9-десатураз Мадпарогіпе дгізеа
Ген ацил-СоА дельта-9-десатурази Мадпарогіпе дгізеа (М90905) виділяють з геномної ДНК з використанням праймерів на основі послідовності, опублікованої МСВІ/Вгоай Іпзійше, початково відміченої як "гіпотетичний білок" і на 55,495 ідентичної на нуклеотидному рівні ацил-
СоА дельта-9-десатуразі 5. сегемізіає (тобто ОЇ ЕТ). Конструюють прямий і зворотний праймери, кожен з яких містить 41 пару основ в довжину. Прямий праймер, Модем (ЗЕО ІО МО: 1), містить ділянку ЕСОКІ на 5'-кінці. Зворотний праймер, МО9АК (ЗЕБЕО ІЮ МО:2), містить стоп-кодони в кожній з три рамок зчитування і кінцеву ділянку ХПпоЇ.
Ген М90905 ампліфікують методом ПЛР, використовуючи набір для ПЛР ТаКага Е/ Тад'м (Такага Віо Іпс., Ої5и, ЗПпіда, дарап) стосовно інструкції виробника. Умови ампліфікації включають в себе 942С протягом 1 хвилини, потім 30 циклів по 947"С протягом 30 сек, 607 протягом 60 секунд і подовження при 72"С протягом 90 секунд. Стадію кінцевого подовження проводять при 72"С протягом 10 хвилин. Передбачуваний продукт ПЛР розміром 1425 пар основ вирізають з агарозного гелю і очищають, використовуючи обертові колонки Мопіаде стосовно рекомендацій виробника (Мійіроге, ВіПегіса, МА). Очищений фрагмент клонують у
Зо векторі клонування рСКФ2.1 ТОРОФ (Іпмігодеп, Сагізрай, СА). Продукт реакції ТОРО вводять в хімічно компетентні клітини Е. соїї Тор 10 в умовах, які рекомендуються постачальником.
Виділяють бактеріальні колонії, які містять передбачуваний клон. За допомогою набору для виділення ДНК Маспегеу-Маде! МисіІеовзріп (Маспегу-Мадеї, Мештапп-Меапаег-5ігавзве, Оіїгеп,
Септапу) отримують міні-плазміди, після чого ДНК розщеплюють рестрикційними ферментами
ЕсоКіІІ ї Хпої. Ідентифікують позитивні клони, які містять очікуваний фрагмент гена М909О5 розміром 1425 п.о. Нуклеотидну послідовність отримують шляхом реакцій секвенування.
Послідовність ПЛР-ампліфікованого фрагмента приведена в ЗЕО ІО МО: 3.
Аналіз послідовності показує наявність невеликого (90 п.о.) інтрону, розташованого на 5'- кінці гена М90905. Інтрон видаляють методом сплайсинг-ПЛР з подовженням і перекриттям.
Отриманий методом ПЛР амплікон очищають в гелі, клонують у векторі клонування рекФа2.1
ТОРОФ і використовують для трансформації клітин Е. соїї Тор 10. Деякі клони ідентифікують шляхом аналізу з розщепленням очищеної ДНК з окремих трансформантних колоній ферментами рестрикції. Вказані клони секвенують, щоб підтвердити присутність клону МОЮ9О5, який не містить інтрон. Отримана послідовність приведена в 5ЕО ІЮО МО: 4.
Кожен з генів М9090О5, який містить, так і не містить інтрон, субклонують у вигляді фрагмента ЕсоКІїХлпоОї в дріжджовому векторі експресії. Вказаний дріжджовий вектор експресії містить ген дельта-9-десатурази Азрегоїйййи5 підшапе (АпО9О5), фланкований промотором дельта-9-десатурази 5. сегемізіає і З'ТЕ/термінатором дельта-9-десатурази. З гена дельта-9- десатурази Азрегойи5 підшап5 вирізають фрагмент ЕсоКіІ/ХпоїЇ, який замінюють фрагментом, який містить ген Ма09О5, або ген М90905, який не містить інтрон. Два клони, які містять ген
М90905 (один з інтроном, інший без інтрону), використовують для трансформації 5. сегемізіає.
Дефіцитний по дельта-9-десатуразі штам 5. сегемізіае (ОЕУ093), який підтримують на дріжджовому екстракт-пептон-декстрозному (ХРО) середовищі, яке містить ТмеепФ 80, трансформують, використовуючи набір для трансформації дріжджів АЇїКаїї-Сайоп (ОбБріодепе,
МопігеаїЇ, Сапада). Доповнені штами ідентифікують по зростанню в середовищі, яке не містить
ТмеепФ 80 (мононенасичена жирна кислота як доповнення) або урацил (випадання основи в присутності агару, який містить зС-ОКА). Доповнені штами очищають до окремих колоній на селективному середовищі три рази. Потім доповнені штами перевіряють шляхом ПЛР- ампліфікації гена дельта-9-десатурази і секвенування продукту ПЛР. Крім того, штами, які бо містять клон М90905, повертаються до жирнокислотної і урацильної залежності щонайменше після три пасажів на середовищі ХРО я ТмеепФф 80, з подальшим приведенням штамів в контакт з середовищем СОВА ЗС-ШКА мінус Тмеепф 80.
Експресія інтронвмісної Моабе9О5-кодуючої послідовності відсутня, це свідчить про те, що інтрон не піддається сплайсингу по дріжджовому механізму. Потім шляхом аналізу ЕАМЕ характеризують субстратну специфічність дріжджового штаму, який містить МареО5з-кодуючу послідовність, в якій відсутній інтрон.
Клонування ацил-СоА дельта-9-десатураз І еріозрпаєгіа подогит
За допомогою програми пошуку ВіабзіМ з колекції Е5БТ |. подогит вибирають дві послідовності Е5Т І еріозрпаєгіа подогит (1246 і 429 пар основ, відповідно), які мають високий рівень ідентичності (54,095 і 54,295, відповідно) відносно ацил-СоА дельта-9-десатурази 5. сегемізіае (ОЇ Е1). Результати вирівнювання показують, що ці послідовності є на 64,695 ідентичними одна одній, дозволяючи передбачити присутність двох різних ацил-СоОА дельта-9- десатураз І еріозрпаєтіа подогит. Ген ГпреО05-1 (5ЕО ІЮ МО:5) виділяють шляхом скринінгу бібліотеки кКДНК Г. подогит з використанням генного зонда розміром 1246 п.о. Визначають послідовність даного гена і виділяють кодуючу послідовність. Пвнорозмірну послідовність гена
Їп0905-2 спочатку вибирають з геномних послідовностей Іеріоз5рпаєта подогит, опублікованих Вгоай Іпбзійше, шляхом пошуку ВГАБТ з використанням послідовності Е5Т розміром 429 п.о. Продукт пошуку, ідентифікований Зирегсопійд І п 1.4 як такий, що містить ген, який має 10095 гомологію відносно фрагмента розміром 429 п.о., де вказаний ген позначають як кодуючий "гіпотетичний білок". Потім ген Її п0905-2 клонують з бібліотеки кКДНК Геріозрпаєгіа подогит, використовуючи ПЛР-праймери на основі послідовності по 1.4 5ирегсопід.
Використовують праймери з послідовностями І пазБАб2Е (ЗЕО ІО МО: 6) і Ії па"гАбр2К (ЗЕО І
МО: 7). Прямий праймер конструюють з використанням ділянки 5'--Ватні, а зворотний праймер містить стоп-кодони в три рамках зчитування і кінцеву ділянку МеоЇ.
Аліквоту бібліотеки КДНК Геріозрпаєтгіа подогит розбавляють 1/10 з отриманням 400 нг матриці ДНК для реакції ПЛР. ПЛР-ампліфікацію проводять, використовуючи набір для ПЛР
Такага Е7 Тад "м ії рекомендовані умови ампліфікації, які включають в себе 94"С протягом 1 хвилини, потім 30 циклів по 947С протягом 30 сек, 60"С протягом 60 секунд і подовження при 727"Сб протягом 90 секунд. Стадію кінцевого подовження проводять при 72"С протягом 10
Зо хвилин. Передбачуваний продукт ПЛР розміром 1370 пар основ вирізають з агарозного гелю і очищають, використовуючи обертові колонки Мопіаде стосовно рекомендацій виробника.
Очищений фрагмент клонують у векторі клонування рСКФ2.1 ТОРОФ. Продукт лігування вводять в хімічно компетентні клітини Е. соїї Тор 10 стосовно інструкцій виробника. Виділяють колонії, які містять передбачуваний клон. За допомогою колонок Маспегеу-Маде! Мисієозріп отримують міні-плазміди, після чого ДНК розщеплюють рестрикційними ферментами Ватні і
Мсої. Передбачувані клони І пО905-2 ідентифікують і секвенують.
Секвенуванням підтверджують послідовність клону /п0е05-2 (5БО ІЮО МО:8) шляхом порівняння з послідовністю "гіпотетичного білка". Ідентифікують консервативну зміну в послідовності Їп0О905-2. Кодон ТС (цистеїн) змінюють на АС (серин) шляхом заміни тимідину аденіном в положенні 271, вказаний кодон транслюється в амінокислоту 89 опублікованої послідовності. Ця консервативна зміна, а цистеїн не є висококонсервативною амінокислотою серед множини нитчастих грибів, тому спроби внести таку зміну не роблять.
Гени Гп0еО5-1 і Її пре05-2, 5ЕО ІЮ МО:5 і 8 відповідно, клонують в дріжджовом векторі експресії. Вміст однієї з кодуючих послідовностей І пр9О5-1 і Ї пр905-2 в клонах підтверджують рестрикційним аналізом і секвенуванням ДНК.
Дефіцитний по дельта-9-десатуразі штам 5. сегемізіае (ОЕМУ093), який підтримують на середовищі МРО, яке містить Тмеєп?Ф? 80, трансформують, використовуючи набір для трансформації дріжджів АїКаїї-Сайоп, Обіодепе. Доповнені штами ідентифікують по зростанню в середовищі, яке не містить ТжеепФ 80 (мононенасичена жирна кислота як доповнення) або урацил (БОВА 5б0-ига). Доповнені штами очищають до окремих колоній на селективному середовищі три рази. Потім доповнені штами перевіряють шляхом ПЛР -ампліфікації гена дельта-9-десатурази і секвенування продукту ПЛР. Крім того, штами, які містять клон І п0905-2, повертаються до жирнокислотної і урацильної залежності щонайменше після три пасажів на середовищі ХРО ж ТжмеепФ 80, з подальшим приведенням штамів в контакт зі середовищем рОВА 550-ОКА мінус ТугеепФф 80. Потім за допомогою аналізу ГЕАМЕ характеризують субстратну специфічність дріжджових штамів, які містять кодуючу послідовність І п0905-1 або І прерз5і-2.
Клонування дефіцитного по дельта-9-десатуразі штаму 5. сегемізіає і трансформація його геном Н2О9О5
Оптимізований для рослини синтетичний ген, який кодує ацил-СоА дельта-9-десатуразу бо Неїїсомегра 7еа (Н20905) (ідентифікований як Н2РОЮ52 в КозепіїєЇй еї аї. (2001) Інзесі
Віоспет. Мої. ВіоІ. 31(10):949-64), вирізають з ЮБАБРІСО89 (описаний нижче) у вигляді фрагмента ВатнНі/Хпо!Ї і очищають в гелі, використовуючи обертові колонки Мопіаде.
Отриманий фрагмент лігують у відповідні ділянки рестрикції описаного раніше дріжджового вектора експресії і використовують для трансформації штаму Е. сої ОНба за допомогою стандартних методів молекулярної біології і стосовно інструкцій постачальників (Іпмйгодеп,
Сагіврай, СА).
Використовуючи рестрикціний аналіз і ДНК-секвенування, вибирають клон, який містить ген
Н20905, і здійснюють його трансформацію в дефіцитний по дельта-9-десатуразі штам 5. сегемізіае, ОЕМО093. Штам ОЕУ093, який підтримують на середовищі УРО, яке містить Тиуеепфт 80, трансформують за допомогою набору для трансформації дріжджів АїКаїї-Сайоп, ОБіодепе.
Доповнені штами ідентифікують по зростанню в середовищі, яке не містить ТмеепФ 80 (жирна кислота як доповнення) і урацил (БОВА 5С-ШКА). Передбачувані доповнені штами очищають до окремих колоній на селективному середовищі три рази. Потім доповнені штами перевіряють шляхом: Її) екстракції плазмідної ДНК за допомогою набору для виділення плазмід ОБріодепе
Уевеавзі і подальшої ПЛР-ампліфікації з використанням праймерів, специфічних до гена Н2О90О5; і) секвенування генів Н?2БОО5-специфічного продукту ПЛР; і ії) повернення штаму до жирнокислотної і ШКА-3-залежності шляхом пасажів штаму щонайменше три рази на середовищі ХРО ж ТмеепФ 80, з подальшим приведенням штамів в контакт зі середовищем рОВА 50-ОКА мінус ТугеепФф 80. Потім за допомогою аналізу ЕАМЕ характеризують субстратну специфічність перевіреного доповненого дріжджового штаму Н20О905.
Аналіз Її преоре-1, їп0905-2, М90905 і Н2Б2905, експресованих в ОГЕ 1-дефіцитному дріжджовому штамі
Як описано вище, три типових гени ацил-СоА дельта-9-десатурази (0905) клонують з фітопатогенних грибів, Мадпарогійе дгізеа (Мо090О5) і І еріозрпаєтгіа подогит (ГпОеО5-1 і
Ї п0905-2). Вказані гени і білки, які кодуються ними раніше не були охарактеризовані. Ацил-СоА дельта-9-десатурази каталізують утворення цис-подвійного зв'язку між 9 і 10 атомами вуглецю тіоефірів насичених жирних кислот, які містять 14, 16 і 18 атомів вуглецю, і коферменту А, з отриманням тетрадеценової (14:1), гексадеценової (16:11) або олеїнової кислоти (18:1), відповідно. Ефекти, пов'язані з організм-специфічною біологією, усуваються шляхом експресії
Зо генів різних грибкових ацил-СоА дельта-9-десатураз в одному біологічному середовищі. Так, експресія генів грибкових ацил-СоА дельта-9-десатураз здійснюється з використанням промотору ендогенного гена оЇеІ в пальмітоїл-стеароїл-СоА-десатуразу (ОГЕ1)-дефіцитному дріжджовому штамі ОЕУ0О93. Таким чином, відмінності, які спостерігаються в даній системі в специфічності до субстрат-жирних кислот пов'язані з конкретними грибковими дельта-9- десатуразами, експресованими в доповненому штамі 5. сегемізіавє.
Визначають субстратні специфічності СоА-десатураз М90905, І прерві-1 і І прерз-г, експресованих в доповнених штамах ОМЕ093, в порівнянні з штамом ОЕМО93, доповненим
АпОреОз (з5деА), описаним в УУМО/1999/050430. Дріжджову експресійну конструкцію, яка містить ген АпООЮО5, експресія якого керована промотором гена оЇеІ, використовують для трансформації штаму 5. сегемізіае ОЕМО93 і експресують за описаним вище способом.
Доповнені штами 5. сегемізіае вирощують в мінімальному середовищі, яке не містить жирні кислоти, при З0"С протягом 24 годин. Промиті і ліофілізовані клітинні осади піддають кількісному аналізу ГАМЕ. Результати даного аналізу показані в таблиці 1 І п0905-2 гарантують утворення С14:1 і С16:1, тоді як Її пр905-1 і Мо9090О5 віддають перевагу С18:0, на що вказує співвідношення жирних кислот С16:1/1871, отримане внаслідок аналізу жирнокислотного складу дріжджів.
Таблиця 1
Порівняння жирнокислотного складу оІеІ-дефіцитних дріжджів, експресуючих чотири різні грибкові десатурази
С161/ |С18:1/ |С1671/ їпрер5і | 15 | 00 | 365 | 8,7 | 1,8 | 515 02 | 282 | 047
Апрер5 | 05 | 00 | 263 | 78 | 20 | 634 | 03 | 317 | оле морер5 05 | 00 | 227 | 91 | 18 659 04 | 370 | ол4 тати песен він 00001 тип оїеЇІ-пиїї -- зе» 126 ||| тю 11
Пустий вектор їх
Тееелюво | 22 оз |з | ви | ви
Потім нові десатурази порівнюють з нативною стеароїл-СоОА дельта-9-десатуразою 5. сегемізіає (0ЇІеї), перенесеної в середовище, яке використовується для рекомбінантної експресії.
Конструюють дріжджовий вектор експресії, який містить нуклеотидну послідовність 5.
Сегемізіае, описану в УМО/2000/011012. Дріжджову експресійну конструкцію, яка містить нативну стеароїл-СоА дельта-9-десатуразу 5. Сегемізіае, використовують для трансформації штаму 5. сегемізіде ОЕМО093 і експресують за описаним вище способом. У даних експериментах також аналізують іншу, не грибкову ацил-СоА дельта-9-десатуразу, отриману з комах, які належать до різновидів Неїїсомегра 7є6а (Н2О905).
Доповнені штами 5. сегемізіає, які містять один з генів М9009О5, Іпрере-2 і Н?0905, вирощують у виснаженому бульйоні ЗС-ОКА. Контрольний штам рраАВ467ЕМ-1 (ОГЕМО093, трансформований рраАВ467В/М за описаним раніше способом трансформації дріжджів) вирощують в БРОВ 5С-ОКА ж Тмеєпое 80, а висхідний, дефіцитний по дельта-9-десатуразі штам
З. сегемізіае, ОЕМ093, вирощують в середовищі ООВ 5сАА ж ТумеепФ 80. У культури вносять смужки клітин, свіжоотримані з планшета, який містить таке ж середовище і 1,595 агар. Штами вирощують при 30"С протягом 24 годин. Культури центрифугують при 6000 об/хв протягом 10 хвилин. Осади промивають водою, знов центрифугують при 6000 об/хв протягом 10 хвилин і потім заморожують при -20"С до проведення аналізу ЕАМЕ. Аналізують три ряди експресійних культур.
Висушені із замороженого стану дріжджові осадки омилюють в метанолі, який містить 1090 (мас/об) Маон. Неомилені ліпідні домішки (стероли) видаляють гексаном. Метанольну фракцію підкислюють додаванням Н2а504 і протоновані жирні кислоти екстрагують гексаном. Виділену гексанову фракцію висушують, жирні кислоти метилують 0,5 М Меонсі при 80"С протягом 30 хвилин. Отримані БАМЕ екстрагують гексаном, який містить метиловий ефір ундеканової кислоти як внутрішній стандарт. Екстракти ЕБАМЕ аналізують за допомогою газового хроматографа з полум'яно-іонізаційним детектором РІРБЄ890 (Запіа Сіага, СА), обладнаним капілярною колонкою ВРХ 70 (15 м х 0,25 мм х 0,25 мкм), ЗОЕ (А!йвійп, ТХ). ЕАМЕ розділяють в температурному градієнті, використовуючи гелій як газ-носій. Кожен зразок ЕАМЕ ідентифікують
Зо за часом втримання і кількісно визначають шляхом введення стандартної суміші БАМЕ ріпакової олії Маїгеуа, І І-С (Рівеазапі Сар, РА) як калібрувального стандарту.
Таблиця 2 описує жирнокислотний склад (у вигляді "У6БАМЕ) оіІєІ-дефіцитних дріжджових клітин ОЕМО093, експресуючих різні типові ацил Со-А дельта-9-десатурази. Всі штами добре ростуть, є доповненими введеними десатуразами і не вимагають ендогенних МИОБЕА (мононенасичені жирні кислоти).
Таблиця 2
Жирнокислотний склад (у вигляді 95 від загального вмісту ЕАМЕ) оЇІеІ-дефіцитного дріжджового штаму ОЕХ093, експресуючого ацил-Со-А дельта-9-десатурази (в дужках приведене стандартне відхилення нгоер5 | 6 | 26(1,3) | 0,9(0,5) | 34,7(6,8) | 37,5(42) | 60011) | 18,4 (41) ої | 6 | пл) | 06(04) | 144(26) 492(16)| 561) | гоп)
Апрер5 | 8 | 0,5(0,3) / 02(02) | 23,5(22) | 9,3(3,0) | 2,1(0,5) | 64,6 (3.2)
Приведені дані показують, що жирнокислотний склад доповнених дріжджових штамів варіює залежно від введеного гена. Її преОО05-2 продукує відносно високі кількості С16:1, як і Н2О9О5 і оїеї, тоді як АпОЗО5 і М90090О5 продукують відносно високі кількості С18:1.
Різний рівень перетворення залежно від довжини ланцюга можна додатково продемонструвати шляхом розрахунку частки МОБА для кожної жирної кислоти з довжиною ланцюга С14, С16 або С18, відносно загального вмісту жирних кислот. Отримані дані демонструють відносно високий рівень перетворення в С16:1 під дією ЇпреО5-2 і Н2О905, і в
С1871 під дією Апр9О5 і М90905. Таблиця 3. У чотири нижніх рядах приведені результати для контрольних зразків, доповнених тергітолом, ненасиченими жирними кислотами або Ту"еєпФф).
Зразки з різними буквами відрізняються значною мірою за результатами тесту Тикеу-Ктатег, який проводиться в комплекті статистичного програмного забезпечення УМР (5А5 Іпзійше Іпс.,
Сагу, МС).
Таблиця З
Частина МИРА в загальному вмісті жирних кислот кожної довжини ланцюга (Схх:1/(Схх:0Схх:1) іі 77711111 |1111034 | 079) | 0810)
Пустийзразокжтергітол.//////7777777711111111111 11006 | щЩ 0 | щф0 (Пустий зразок я тергітол я рицинолеїновакислотаї | 007 | 0 | 001 (Пустий зразок я тергітол'ялінолевакислота | 0 2 | 0 | 004 и С16 МОБГА включають в себе цис-вакценову кислоту (С18:1А11), отриману в результаті подовження пальмітолеїнової кислоти (С16:1Д9)
Філогенез грибкових ацил-СоА десатураз
Філогенетичний аналіз декількох амінокислотних послідовностей грибкових ацил-СоА дельта-9-десатураз дозволяє передбачити, що І пре905-2 відрізняється від дельта-9-десатураз, які віддають перевагу 18:0. Таким чином, автори висунули гіпотезу, що характеристика інших грибкових дельта-9-десатураз, тісно пов'язаних або з дельта-9-десатуразами, які віддають перевагу 18:0, або з їп0905-2, може призвести до ідентифікації десатураз з діапазоном активності відносно 18:0 або 16:0. Дана гіпотеза дозволяє передбачити, що грибкова дельта-9- десатураза, більш тісно пов'язана з Ї пр905-2, буде мати підвищену активність відносно 16:0.
Пошук в загальнодоступних базах даних за послідовностями ДНК (Вгоай Іпзійше, МОВІ, еїс.) не виявив ніяких генних послідовностей, які спеціально позначаються як дельта-9-десатурази
Мадпарогійе дгізеа або І еріозрпаєгіа подогит. Ріат аналіз послідовностей Вгоай Іпвійше, ідентифікованих в даному описі, свідчить про те, що вказані білки містять цитохром В5 і мотиви десатурази, які також виявлені в інших грибкових ацил-СоА дельта-9-десатуразах. Однак
Зо вказані білки не були раніше ідентифіковані як ацил-СоА дельта-9-десатурази. Автори продемонстрували наявність даної функції у вказаних білків шляхом доповнення в дріжджах, зворотних досліджень і аналізу послідовностей ДНК.
Взаємовідносини деяких генних послідовностей грибкових десатураз аналізують філогенетично, використовуючи метод з'єднання сусідніх послідовностей за допомогою програмного забезпечення МЕСА. Татига еї аї. (2007) Мої. Вісі. апа Емоїшіоп 24:1596-9. На фіг. 1 показані результати філогенетичного аналізу послідовностей грибкових десатураз. Вказані послідовності ідентифікують шляхом ВіазіМм-пошуку в базі даних МСВІ з використанням амінокислотної послідовності АпОеО5 (заед). І преОр5-1 і Мо0905 мають більш високий рівень ідентичності послідовностей, ніж Ії пП0е05-2. Крім того, вирівнювання І п0еО5-1, І п0905-2 і
Ма90905 з використанням СіиеїамМму показує відмінність І п0905-2 від Ї п0905-1 ії Мое90О5. Фіг. 2.
Нуклеотидні послідовності І п0905-1 і М90905 містять більш високе число однакових пар основ.
Таблиця 4 і фіг. З додатково ілюструють філогенетичний взаємозв'язок ідентифікованих білків, Її п0905-1, їп0905-2 і М90905, а також АпреЮр5 і дріжджової десатурази 5СОГЕ1.
Амінокислотні послідовності І п0905-1, Ма9р90О5 і Апре9ОЮ5 (здеА) мають більш високий процент ідентичності відносно один до одного, ніж Гп0905-2. Консервація амінокислотної ідентичності дозволяє передбачити, що субстратна специфічність відносно 18:0 ацил-СоА залежить від консервативної послідовності, загальної для І преОО5-1, М90905 і АпОеО5 (5деА). І навпаки, ацил-СоА-субстратна специфічність Їп0еО05-2 переважно направлена на 16:0 внаслідок дивергенції її амінокислотної послідовності.
Таблиця 4
Амінокислотна ідентичність різних послідовностей грибкових десатураз, вирівняних з використанням СіивіаМ/ 71111111 тро | прерб52 | Моб9О5 | ДріжджоваоіЕ1 прерії /17777771111-1111711111бія61111117бо61 17111114 перерва 1777111бія 77771711 -11111Ї711111бабв1111111111149б61 мерер5 77777756 | 777 баь 77771717
Приклад 2: Конструювання і синтез оптимізованих генів дельта-9-десатурази Мадпарогійпе дгізеа, Неїїсомегра 7єа і Геріозрпаєгіа подогит
Щоб досягнути підвищеної експресії генів грибкової дельта-9-десатурази в канолі, автори конструюють вказані гени так, щоб вони більш ефективно експресувались в клітинах трансгенної каноли, які містять гетерологічний ген. Екстенсивний аналіз послідовностей ділянок
ДНК, які кодують нативну дельта-9-десатуразу Мадпарогійе дгізеа, Неїїсомегра 7еа і
І еріозрпаєгіа подогит, розкритих в даному документі як ЗЕО ІЮ МО:9, ЗЕО ІЮ МО: 10 ії 5ЕО І
МО: 11, відповідно, свідчить про присутність декількох мотивів послідовності, які ймовірно перешкоджають оптимальній експресії в рослині, а також неоптимального складу кодонів для
Зо такої експресії в рослині. Щоб сконструювати оптимізовані гени, які кодують білок дельта-9- десатуразу, автори отримують послідовності ДНК іп 5іїїсо, які є більш "подібні рослинним" (а саме, більш "канолу-подібними") за природою, де модифікації послідовності не перешкоджають трансляції, або не призводять до утворення нестабільних мРНК.
Щоб сконструювати оптимізовані для рослини гени, які кодують дельта-9-десатуразу, отримують послідовності ДНК, які кодують амінокислотні послідовності білків десатураз, з використанням надмірного генетичного коду, визначеного за допомогою таблиці зміщень кодонів, складеної на основі послідовностей, які кодують білки конкретних рослин-хазяїнів (тобто каноли). Кодони, які переважно використовуються в канолі, показані в таблиці 5. В колонках С і с таблиці 5 показано розподіл (у 90 від застосування всіх кодонів для конкретної амінокислоти) синонімічних кодонів для кожної амінокислоти, виявлений в кодуючих ділянках
Вгаззіса париб5. Відомо, що деякі синонімічні кодони, які кодують деякі амінокислоти, рідко зустрічаються в генах рослин (наприклад, СО в канолі). Вважається, що кодон рідко використовується, якщо його трапляння в генах рослини будь-якого типу становить приблизно 1095 або менше від діапазону кодування відповідної амінокислоти (означають "СОМИ" в колонках
О ї Н таблиці 5). Щоб оцінити розподіл кодонів інших виборів, які кодують амінокислоту, для кожного кодону розраховують середньозважене значення за формулою:
Середньозважене значення 9521 - 1096С1956С296СЗжінш.)хоосС1х100,
де С1 означає кодон, який аналізується, а 9502, 9523, і інш. означає середні значення 905 інших синонімічних кодонів в Вгахзіса парих (середні значення 95 відповідних кодонів беруть з колонок С і С таблиці 5).
Середньозважене значення 95 для кожного кодону беруть в колонках О і Н таблиці 5.
Таблиця 5
Трапляння синонімічних кодонів в кодуючих ділянках генів каноли (В. париз) (колонки С і 5).
Значння трапляння збалансованих-зміщених кодонів, визначення для конструкції оптимізованого для рослини синтетичного гена, приведені у колонках 0 і Н
А | в Її с о | є | є а! нн
Амінокислота! Кодон Канола Середньозважена) |, Нокислота Кодон Канола| Середньозважене о значення Зо значення п) (Бо) бал 99 | 7777779 гУв(ю
Аве(в) |СсосС | 89 |оМО
РНЕ (Б)
АБМ (М)
АВР (0) НО (в) су (6)
ЕМО ЗЕВ (5) 100,0 9 0) с (в) тив) сг (б) ТАР (М 100,0 100,0 плши шшш ши сти ши сш ШИ несн) о
МА! (М)
І.Є) "МА - Не застосовується рми - Не застосовується
Нові послідовності ДНК, які головним чином кодують амінокислотні послідовності дельта-9- десатураз Мадпарогійе дгізеа, Неїїсомегра 7еєа і І еріозрпаєтгіа подогит, ЗЕО ІЮ МО: 12, 5ЕО ІО
МО: 13 ї 5ЕБО ІЮ МО: 14 відповідно, конструюють для оптимальної експресії в канолі, використовуючи розподіл кодонів першого і другого виборів як кодони, які часто використовуються в генах каноли. Нові послідовності ДНК відрізняються від нативних послідовностей ДНК, які кодують білки дельта-9-десатурази, присутністю кодонів, переважних рослиною (тобто, кодонів першої переваги, другої переваги, третьої переваги або четвертої переваги) для кодування відповідної амінокислоти в кожному положенні амінокислотної послідовності білка.
Конструювання оптимізованих для рослини послідовностей ДНК ініціюють шляхом зворотної трансляції білююових послідовностей ЗЕБЕО І МО: 12, 5БО ІЮО МО: 13 і 5ЕБЕО ІО МО: 14, використовуючи таблицю зміщення кодонів в канолі, складену з колонок О і Н таблиці 5. Потім початкові послідовності модифікують шляхом компенсуючих змін кодонів (при збереженні загального середньозваженого трапляння кодону), щоб видалити ділянки розпізнавання ферментами рестрикції, високостабільні внутрішньоланцюжкові повторні структури і інші послідовності, які можуть впливати шкідливий чином на маніпуляції по клонуванню або експресію рекомбінантнго гена в рослинах. Потім послідовності ДНК повторно аналізують на ділянки розпізнавання ферментами рестрикції, які можуть виникати в процесі введення модифікацій. Потім ідентифіковані ділянки додатково модифікують шляхом заміни відповідних кодонів переважними кодонами першого, другого, третього або четвертого вибору.
Модифіковані послідовності додатково аналізують і додатково модифікують, щоб зменшити трапляння дублетів ТА їі СО і збільшити трапляння дублетів ТО і СТ. Крім вказаних дублетів, ділянки послідовності, які містять більш ніж приблизно шість послідовних залишків (5-1 або
ІАКТІ, модифікують шляхом заміни кодонів першого або другого і інш. вибору на переважні кодони іншого вибору. При конструюванні гена рідко використовувані кодони не включають в його склад в істотній мірі, їх використовують тільки при необхідності застосування критерію конструювання, відмінного від складу кодонів як такого (такого як додавання або делеція ділянок розпізнавання ферментами рестрикції). Приклади сконструйованих за допомогою описаного способу синтетичних оптимізованих для каноли послідовностей ДНК, які кодують десатурази, описані в БЕО ІЮ МО: 15, 5ЕО ІЮ МО: 16 і 5ЕО ІЮ МО: 17.
Отримані послідовності ДНК, описані в 5ЕБЕО ІЮ МО: 15-17, мають підвищену міру різноманітності кодонів і бажаний склад основ. Крім того, вказані послідовності містять стратегічно розміщені ділянки розпізнавання ферментами рестрикції і не містять послідовності, які можуть перешкоджати транскрипції гена або трансляціям продукту мРНК. У таблицях 6-8 порівнюють вміст кодонів в ділянках, які кодують білки дельта-9-десатурази, які присутні в нативному гені і в його оптимізованих для рослин версіях, і потім ті ії інші порівнюють з рекомендаціями за вмістом кодонів для рослинно-оптимізованої послідовності, розрахованими з використанням даних, приведених в колонках 0 і Н таблиці 5.
Таблиця 6
Вміст кодонів в ділянках, які кодують білок МОЮ9О5
Нативну ділянку, яка кодує десатуразу М дгіза порівнюють з оптимізованою для рослини версією
Реко-
Число у обу ваний Число у обу Рекомендов
Амі Число! 95 у оптимі: оптимізо-| склад - о, оптимі- | оптимі- аний склад мі- зова- - |Аміно- Число у У у оптимізо- ноКи- Кодон | Натитнатив- ному ваному оптимі кис- |Кодон | натино- | натив- зованомувованом ваної для слота вному) ному для для зованої лота му гені |Іному гені для для рослини гені | гені росли- рослини | для роспини | рослини послідо- ни гені гені рослини гені гені вності пОСЛлІДО- вності
СТА | 0 | 00 | 0 1 001 00 ші 3335 (А) що цв)
ІПТА Її 0 | 00 | 0 | 00 | 00
Аса| 1 | 48| 6 | 286 | 305
НС АК А
«т- (сбесу| л2 571. о | 00 | 00 |(Ю сААСу| 28 | 966 | 16 | 555 | 554 сею|о1о00| 21 оо | соте) т | хо 7 | хо хо рід т шт (в тт | 2 | 7105 | 8 | 421. | «4 (м ТААТ | 0,001 9 | з91 | 374 | (ССА| 0 | 00 | 6 / 2868 | 296
НІ ин тня (0) |сАТ| 8 |320| 14 | 560 | 575 | (Р)
ІсСст 1 7 | 333 | 8 | зви | 373 (С) ЕВ одн шин ншшитвшшсн (в) 197 0 | 00 | 4 / лаЗ 158 (ТАС | о |00| 0 | 00 | 00
Таблиця 6
Вміст кодонів в ділянках, які кодують білок МОЮ9О5
Нативну ділянку, яка кодує десатуразу М дгіза порівнюють з оптимізованою для рослини версією
Реко- мендо-
Число у обу ваний Число у обу Рекомендов оптимі- - - - | аний склад - Число! 95 у оптимізо-| склад - оптимі- | оптимі- -
Амі- зова- - |Аміно- Числоу| Фу оптимізо- у нати-Інатив- ваному | оптимі- зованомузованом н ноки- |Кодон ному -| кис- |Кодон| натино- | натив- ваної для вному| ному для зованої - | для для слота - Н для лота му гені |ному гені рослини гені | гені рослини | для рослини | рослини - росли- - - - послідо- - гені рослини гені гені - ни гені - вності послідо- вності
І |ТА 1 (1000 100,0. | 100,0 ІТосС 1 9 | з21 | 4 | 1453 | 187 тс | 9 | з21 | 0 1 00 | 00 (0) Іст | 2 | 71 | 8 1 286 | 272
ІАСА | 4 | 16,7 | 6 | 250 | 263 (Е)т6|бАсу| 14 /1933| 8 | 533 | 564 |тНнА сбзА| 8 |1955| 15 | 366 | 364 |П) гу ТАР туВ с (н) (СТА | 1 / 25 | 0 | 00 | 00
МА.
І Е () м
АТ | 8 /з333| 9 | 37,5 | Збе фі е го го
Таблиця 7
Вміст кодонів у ділянках, які кодують білок Н;29О5 Нативну ділянку, яка кодує десатуразу Н 7еа, порівнюють з оптимізованою для рослини версією
Рекомен- Рекомен-
Число у ув у дований Число у дований
Число! 5 оптимі- й Число Е Фо у - У у оптимі- склад У у | оптимі- - склад
Аміно- у зова- : - у оптимізоваї : натив- зованому | оптимізо- | Аміноки- нати- Ізованом оптимізо- кис- ІКодонінатив- ному н Кодон | натив- ному для н ному для ваноїдля| слота вному| у для ваної для лота ному Н для ному - рослини з гені рослини | рослини | гені |рослини - рослини гені рослини - - гені - гені - гені гені послідо- гені послідов- вності ності
ОСА) 4 |114| 9 | 257 | 233 | (СТА | 2 /59| 0 | 00 | 00
АГА сто | 8 (23,51 710 | 294 | 285 (ж) (есо| 8 |229| 4 | тя | лаг |в Ору сто | ля |4ї2| 6 | 176 | лаб
Іст | 6 |17,6| ло | 294 | 316
ІАСА| 1 | 77 | 6 | 462 | 438 | ІТА | 2 1591 0 | 00 | 00 та | 2 591 8 | 23,5 | 253 два |сСаАЇ 2 |л5а| 0 | 00 | 00 | увук (я |сасЇ 5 |з851 0 | 00 | 00 | АС | 14 |560| 15 | 600 | 554 сосі! 0 | 00 | 0 | 00 | 00 |МЕТ(МІАТа | 8 /л1001 8 | ло0 | тоб сот о | 00 з | 231 | 257 рев (м)
РКО (Р) (0) (САТ 9 |з36,0| 13 | 520 | 575 000, 0 | 00 | 492 | сст | 8 5001 6 | 375 | 373 (с) |таті! о | 00 | 1 | тоб 0001 0 1 00 1 00
ЕМО |та о | 00 | о | 00 щ00 |вевду(в)
ТА 0 | 00 | 1 | л000 | то0о Ітос | 6 137,51 3 | 188 | 18,7 тса | з |т188| 0 | 00 | 00 (0) (Етвісло| я |зб4| 6 | 55 564 |гудв(у ссА| 8 |400| 9 | 450 | 364 сім |сос! 6 |з00| 4 | 200 | 162 (6) ТАР (М 100,0 тУв(юО|ТАС | 12 |800| 9 | 600 | 594
Таблиця 7
Вміст кодонів у ділянках, які кодують білок Н;29О5 Нативну ділянку, яка кодує десатуразу Н 7еа, порівнюють з оптимізованою для рослини версією
Рекомен- Рекомен-
Число у ув у дований Число у дований
Число оптимі- - Число - У у
Амі ув у оптимі- склад У у | оптимі- - склад міно- у зова- Я - у оптимізоваї Я натив- зованому | оптимізо- | Аміноки- нати- Ізованом оптимізо- кис- ІКодонінатив- ному н Кодон | натив- ному для н ному для ваноїдля| слота вному| у для ваної для лота ному з для ному - рослини
З гені рослини | рослини : | гені |рослини - рослини гені рослини - - гені - гені - гені гені послідо- гені послідов- вності ності нівєнусАЄІ лі | 73.3 8 | 533 | 496 / |ТАТ | з |200| 6 | 400 | 6 (СТА | 0 1001 0 | 00 | 00
УА (М)
ПЕ(ФІАТСІЇ 10 | 5001 9 | 450 | 427 | ста | 13 (6841) 6 | 316 | 317 ст | 1 531 8 | 421 | з
Всьо- Всьо- ою в| || добре | 1711
Таблиця 8
Вміст кодонів у ділянках, які кодують білок Ії п0905-2 Нативну ділянку, яка кодує десатуразу І. подогит порівнюють з оптимізованою для рослини версією.
Числоу) у, Рекомен- Число у| 95у - б у дований - -
Число! 5 оптимі- й Число 5 оптимі-| оптимі-| Рекомендо- - У у оптимізм- склад - У у в
Амі- К у зова- - Аміно- у зова- | зова- | ваний склад о- нати- ваному | оптимізм- нати- - - ноКи- нативн ному я кис- | Кодон | натив- ному | ному |оптимізованої дон вному для ваної для вному слота ому - для лота ному -| для для | для рослини й гені рослини рослини : | гені : - гені рослини - - гені росли- | росли- | послідовності - гені послідо- - - гені - ни гені | ни гені вності (СТА | 7 1561! 0 | 00| 00
АІА І0сСЇ 9 |281| 7 | 219 | 212 (А) ІєО ост 8 /250| 13 | 406 | 413 (00
ТА | з |67| 0 | 00 | 00 ( дссуі З / 103 9 | 30 | 305 | (та | 9 2001 11 /244| 253
НС почни ше вини пиши пн сот шви вип ши шив шт В (в) сас| 8 276) 0 1 00 | 00 Цю с| |і 0 | оо оо М ме| е|кю| | хо зоб сет 2 169 | 7 | 241 | 2557 |РНЕ |ТІС | 16 |800| 12 | 600 | 586 ( ід ашши тнше нн яви тя (я) (тт | а 200! 8 | 400| 44 (м ГААТІ 6 |500| 4 | з33 | 374
РВО |ССоС | 8 Щ|444| з |167| 146 ( (б) ГС2АТІЇ 8 | 33,31 14 | 583 | 575 |Ф)
СУ8 (с) |тет| 1 |2001 з | 600 | 5068 | дес | 8 |276| 5 |172| 179 (
ІТАА! 0 100 | 0 | 00 | 00 | ІСТ | 6 /|207| 5 |172| 158
ЕМО 1000, 0 | 00 | 00 |взЕН |ТСА | 1 |з34| 6 |207| 204
ІТаАЇ 0 | 001 1 | тоб 100,0. |(5) |тос | 6 |207| 5 | л172| 187 сім ІтСа | 7 2411 0 | 001 00 (0) |СсАшіІ 8 |444| 8 | 444 | 500 | ст | 1 34) 8 |276| 272 ( а (Есбіслс| 10 | 66,7 8 | 5353 | 564 |тнв (7 сім 8Бс| 16 |421| 6 | 158 | 162 | І(АСТ | 2 1801 7 |280| з00 свв в вв) в | ве зе ко п нити ниття т (0 (ТАТ | 6 |353,| 7 | 42 | 406 (нн. |САТ| 6 |з333| 9 | 500 | 504 | (СТА | 6 /176|! 0 | 00| 00 мА |сто | ло |294| 9 |265| 270
ІЕ(ФІАТСЇ 9 | 4091 10 | 455 | 427 |)
АТт| 9 |4091 7 | 318 | Збе | ст | 6 |176| 14 | 412| 43 р(
Всьо- Всьо- 7! 12 | | 171 бен) ер
Синтез фрагментів ДНК, які містять ЗЕО ІО МО: 15, 5ЕБЕО ІЮО МО: 16 ї 5ЕО ІЮО МО: 17, проводять комерційні постачальники (Рісозогірі, Ноивіоп, ТХ і Віне Негоп ВіоїесппоЇоду, ВоїпеїЇ,
ММА). Вказані канолу-оптимізовані послідовності означають як версія 2 (м2). Потім синтетичні фрагменти ДНК клонують у векторах експресії і використовують для трансформації
Адгобрасіегішт і каноли, як описано в приведених нижче прикладах.
Приклад 3: Конструювання плазміди
Вказані нижче плазміди конструюють за допомогою стандартних методів молекулярної біології. Конструюють полінуклеотидні фрагменти, які містять елементи, регулюючі транскрипцію в рослинах (які включають в себе промотор, зв'язаний з геном, який представляє інтерес, який закінчується З'ЮТК), або "РТИО", і об'єднують їх з іншими елементами, регулюючими транскрипцію в рослинах, в Т-ланцюжковій ділянці бінарного вектору.
Опис ррАвВ7з318: рраАвВ7з318 (фіг. 6; 5ЕО І МО: 58) конструюють за допомогою стандартних методів молекулярної біології. Вказана плазміда містить дві послідовності РТО десатурази.
Перша послідовність РТ десатурази містить промотор фазеоліну Рпазеоїи5 миЇдагі5 (промотор
РуРНаз м2 (ЗЕО ІО МО: 67); Сепрапк: 901263), 5'-чсетрансльована ділянка Ріазеоїи5 миїЇдагів (5'-
ТК РуРпа5 (5ЕО ІС МО: 68); Сепрапк: 901263), ген АпреО5 УЗ (ЗЕБО І МО: 49), 3- нетрансльована ділянка РІазеоїй5 миїЇдагіє (3-ОТА РуРназ мі (ЗЕБЕО ІО МО: 69); Сепрапк: 301263) і ділянка приєднання матриксу РпазеоЇи5 миЇдагі5 (3-МАВ РуРНав м2 (ЗЕО ІО МО: 70);
Сепрапк: 901263). Друга послідовність РТО десатурази містить промотор РмиРпаз м2, 5-ОТА
РуРпаз, Іпреор5-2 м2 (ЗЕО ІЮ МО: 17) і Зі-нетрансльована ділянка ОКЕ23 Адгобасіегійт їмтеїасієпв (3-ОТА АШОАЕ23 (ЗЕО ІО МО: 71); Ниапоа еї а!. (1990) 9. Васіегіої. 172:1814-22).
Елементи РТ десатурази з'єднуються за допомогою додаткових коротких вбудованих послідовностей. Дві послідовності РТО десатурази фланкуються ділянками рекомбінації
СаїемжауфФ, Іпмігодеп, які забезпечують перенесення вказаних експресійних касет РТ в плазміду, яка використовується для трансформації Адгобасіегійт. Крім того, плазміда містить точку початку реплікації і маркер селекції по канаміцину.
Опис рорАВ7З319: ррАВ7319 (фіг. 7; 5БО ІЮ МО: 60) конструюють шляхом СаїемжауФф- рекомбінації між ррАВ7318 і рРОАВ7309 (фіг. 5; ЗЕО ІЮ МО: 53). Вказана плазміда містить дві послідовності РТО десатурази, описані в попередньому розділі "Опис ррАВ7318". Вказані РТ
Зо розташовуються в орієнтації голова-хвіст в Т-ланцюжкових бордюрних ділянках ДНК бінарного вектору ррАВ7309, який використовується для трансформації рослин. Цей бінарний вектор містить РТО фосфінотрицин-ацетилтрансферази, який включає в себе промотор вірусу мозаїки жилок маніоки (промотор С5УМММ м2; Мегдадиег еї аї. (1996) Ріапі Мої. Віої. 31:1129-39); фосфінотрицин-ацетилтрансферазу (РАТ м5; УмМопІереп еї аІ. (1988) Сепе 70:25-37); і 3- нетрансльована ділянка ОКЕ1 Адгобасієегіит шптегасіеп5 (З'ЮТК АШОРКНІ м4; Ниапо еї а!. (1990), вище), в додавання до інших регуляторних елементів, таких як ділянка приєднання матриксу
КВ7 Місойапа їабасит (КВ7 МАКм2; Сепрапк: 067919), овердрайв Омегагіме (Того еї аї. (1988)
Ргос. Май. Асай. сі. О.5.А. 85(22):8558-62) і Т-ланцюжкові бордюрні послідовності (Т-ДНК- бордюр А і Т-ДНК-бордюр В; Сагапег еї аї. (1986) Зсіепсе 231:725-7, і міжнародна патентна публікація РСТ Мо. УМО2001/025459А1). Плазміди, які містять описані вище РТИ, виділяють і перевіряють шляхом розщеплення рестрикційними ферментами і секвенування ДНК.
Опис ррдівВ7320: ррАВ7з320 (фіг. 8; 5ЕО ІЮ МО:55) конструюють за допомогою стандартних методів молекулярної біології. Вказана плазміда містить одну послідовність РТО десатурази.
РТШ десатурази містить промотор РуРваз м2, 5'-ОТА РуРнНав, І пр905-2 м2 (5ЕО ІО МО: 17) і 3--
ТК АшОКкЕ23. Елементи РТ десатурази з'єднуються за допомогою додаткових коротких вбудованих послідовностей. Послідовність РТО десатурази також фланкується ділянками рекомбінації СаїеулауфФ, Іпмійгодеп, які забезпечують її перенесення в плазміду, які використовується для трансформації Адгобасіегішт. Крім того, плазміда містить точку початку реплікації і маркер селекції по канаміцину.
Опис рорАВ7З321: ррАВ7321 (фіг. 9; 5ЕБО ІО МО: 61) конструюють шляхом бСаїежауф- рекомбінації між ррАВ7320 і рраАВ7309. Вказана плазміда містить послідовність РТО десатурази, описану в попередньому розділі "Опис ррадавВ7319". Вказаний РТ розташовується в орієнтації голова-хвіст в Т-ланцюжкових бордюрних ділянках ДНК бінарного вектору ррАВ7309, який використовується для трансформації рослин. Цей бінарний вектор містить РТ фосфінотрицин-ацетилтрансферази: промотор С5МММ м2; РАТ м5; і 39-0ТК АШОКЕ1 м4, в додавання до інших регуляторних елементів, таких як овердрайв і Т-ланцюжкові бордюрні послідовності (Т-ДНК-бордюр А і Т-ДНК-бордюр В). Плазміди, які містять описаний вище РТИ, виділяють і перевіряють шляхом розщеплення рестрикційними ферментами і секвенування
ДНК.
Опис ррдавВ7323: ррАВ7323 (фіг. 10; 5ЕО І МО: 56) конструюють за допомогою стандартних методів молекулярної біології. Вказана плазміда містить дві послідовності РТЮО десатурази.
Перший РТИи десатурази містить промотор РуРіах м2, 5-0ОТА РуРназ, Апр9О5 хуЗ (ЗЕО ІЮ МО: 47), 3-ЮТК РуРпаз ї 3-МАК РуРпаз м2. Другий РТ десатурази містить промотор РмиРПаз м2, 5'-
ТА РуРпазх, Н20О9О5 м2 (5БО ІО МО: 16) ії 3-00ТК АшОКкЕ23. Елементи РТ десатурази з'єднуються за допомогою додаткових коротких вбудованих послідовностей. Дві послідовності
РТИ десатурази фланкуються ділянками рекомбінації СагемауФф), Іпмігодеп, які забезпечують перенесення вказаних експресійних касет РТИО в плазміду, яка використовується для трансформації Адгобасіегішт. Крім того, плазміда містить точку початку реплікації і маркер селекції по канаміцину.
Опис ррАВ7324: ррАвВ7324 (фіг. 11; 5БО ІЮ МО: 62) конструюють шляхом Саїеуауюф- рекомбінації між ррАВ7323 і ррАВ7309. Вказана плазміда містить дві послідовності РТ десатурази, описані в попередньому розділі "Опис ррдаВ7323". Вказані РТО розташовуються в орієнтації голова-хвіст в Т-ланцюжкових бордюрних ділянках ДНК бінарного вектору ррАВ7309, який використовується для трансформації рослин. Цей бінарний вектор містить РТ фосфінотрицин-ацетилтрансферази: промотор С5МММ м2; РАТ м5; і ЗОТК АШшОКЕ1 м4, в додавання до інших регуляторних елементів, таких як овердрайв і Т-ланцюжкові бордюрні послідовності (Т-ДНК-бордюр А і Т-ДНК-бордюр В). Плазміди, які містять описані вище РТИ, виділяють і перевіряють шляхом розщеплення рестрикційними ферментами і секвенування
ДНК.
Опис ррдівВ7325: ррдаВ7325 (фіг. 12; 5ЕО ІЮО МО:57) конструюють за допомогою стандартних методів молекулярної біології. Вказана плазміда містить одну послідовність РТО десатурази.
Даний РТИи десатурази містить промотор РуРіах м2, 5'-ОТА РуРіаз, Н20905 м2 (ЗЕО І МО: 16) і 3-ЮТК АшШОКЕ23. Елементи РТИ десатурази з'єднуються за допомогою додаткових коротких вбудованих послідовностей, а послідовність РТ десатурази фланкується ділянками рекомбінації (зайем/ауфФ, Іпмійгодеп, які забезпечують її перенесення в плазміду, яка використовується для трансформації Адгобасіегішт. Крім того, плазміда містить точку початку реплікації і маркер селекції по канаміцину.
Опис ррАВ7326: ррАвВ7326 (фіг. 13; 5БО ІЮ МО: 63) конструюють шляхом Саїежауф-
Зо рекомбінації між ррАВ7325 і ррАВ7309. Вказана плазміда містить послідовність десатурази
РТ, описану в попередньому розділі "Опис ррАВ7325.7 Вказані РТО розташовуються в орієнтації голова-хвіст в Т-ланцюжкових бордюрних ділянках ДНК бінарного вектору ррАВ7309, який використовується для трансформації рослин. Цей бінарний вектор містить РТ фосфінотрицин-ацетилтрансферази: промотор С5МММ м2; РАТ м5; і 3- ТК АШшШОКЕЇ1 ма4, в додавання до інших регуляторних елементів, таких як овердрайв і Т-ланцюжкові бордюрні послідовності (Т-ДНК-бордюр А і Т-ДНК-бордюр В). Плазміди, які містять описані вище РТИ, виділяють і перевіряють шляхом розщеплення рестрикційними ферментами і секвенування
ДНК.
Опис ррдавВ7327: ррАВ7327 (фіг. 14; 5ЕО ІО МО: 58) конструюють за допомогою стандартних методів молекулярної біології. Вказана плазміда містить одну послідовність РТО десатурази.
РТИШ десатурази містить промотор РмиРіаз м2, 5'-ЮТК РуРпавх, ген АпОеОО5 м3 (ЗЕО ІЮ МО: 49) і 3-ШТК АшШОКЕ23. Елементи РТ десатурази з'єднуються за допомогою додаткових коротких вбудованих послідовностей. Послідовність РТО десатурази також фланкується ділянками рекомбінації (зайем/ауФ, Іпмігодеп, які забезпечують її перенесення в плазміду, яка використовується для трансформації Адгорасіегішт. Крім того, плазміда містить точку початку реплікації і маркер селекції по канаміцину.
Опис ррАВ7328: рравВ7328 (фіг. 155 5БО ІЮ МО: 64) конструюють шляхом СаїємауФф- рекомбінації між ррАВ7327 і рраАВ7309. Вказана плазміда містить послідовність РТ десатурази, описану в попередньому розділі "Опис ррдавВ7327". Вказаний РТ розташовується в орієнтації голова-хвіст в Т-ланцюжкових бордюрних ділянках ДНК бінарного вектору ррАВ7309, який використовується для трансформації рослин. Цей бінарний вектор містить РТ фосфінотрицин-ацетилтрансферази: промотор С5МММ м2; РАТ м5; і ЗОТК АШшОКЕ1 м4, в додавання до інших регуляторних елементів, таких як овердрайв і Т-ланцюжкові бордюрні послідовності (Т-ДНК-бордюр А і Т-ДНК-бордюр В). Плазміди, які містять описаний вище РТИ, виділяють і перевіряють шляхом розщеплення рестрикційними ферментами і секвенування
ДНК.
Опис ррдавВ7329: рРрАВ7329 (фіг. 16; 5ЕО ІО МО: 59) конструюють за допомогою стандартних методів молекулярної біології. Вказана плазміда містить одну послідовність РТО десатурази, яка включає в себе промотор РуРіах м2, 5-ОТК РуРпах, Мо090О5 м2 (5ЕО ІЮО МО: 15) і 3-ОТА 60 АШшОКЕ23. Елементи РТ десатурази з'єднуються за допомогою додаткових коротких вбудованих послідовностей. Послідовність РТО десатурази фланкується ділянками рекомбінації
СаїемжауФф), Іпмігодеп, які забезпечують її перенесення в плазміду, яка використовується для трансформації Адгобасіегішт. Крім того, плазміда містить точку початку реплікації і маркер селекції по канаміцину.
Опис ррАВ7330: ррАвВ7З3О0 (фіг 17; 5БО ІЮ МО: 65) конструюють шляхом Саїежауф- рекомбінації між ррАВ7329 і рраАВ7309. Вказана плазміда містить послідовність РТ десатурази, описану в попередньому розділі "Опис ррАВ7325." Вказаний РТ розташовується в орієнтації голова-хвіст в Т-ланцюжкових бордюрних ділянках ДНК бінарного вектору ррАВ7309, який використовується для трансформації рослин. Цей бінарний вектор містить РТ фосфінотрицин-ацетилтрансферази: промотор С5МММ м2; РАТ м5; і З'СТК АШшОКЕї1 ма4, в додавання до інших регуляторним елементів, таких як овердрайв і Т-ланцюжкові бордюрні послідовності (Т-ДНК-бордюр А і Т-ДНК-бордюр В). Плазміди, які містять описаний вище РТИ, виділяють і перевіряють шляхом розщеплення рестрикційними ферментами і секвенування
ДНК.
Опис ррАВ7331: Крім описаних вище, конструюють контрольну плазміду, яка не містить РТО десатурази (5ЕО ІЮ МО: 66). Фіг. 18. Крім регуляторних елементів, описаних в рОАВ7309, дана конструкція містить тільки РТО фосфінотрицин-ацетилтрансферази.
Приклад 4: Трансформація Адгобасіегійт
Електро-компетентні клітини Адгобасієегішт іштеїасієп5 (таблиця 9) отримують за способом
Меїдеї апа Сіагергоок (2002) "Ном/ то Тгапвіопт Агарідорвів" Сп. 5, іп Агарідорзів, Со Бргіпд
Нагбог Гарогаїогу Рге55, Соїй Зргіпд Нагрог, МУ. 50 мкл компетентних клітин Адгобасіегійт відтають на льоду і трансформують, використовуючи від 300 до 400 нг плазмідної ДНК бінарного вектору. Клітинну суміш піддають електропорації в присутності ДНК, використовуючи заздалегідь охолоджені кювети для електропорації (0,2 см) і електропоратор Віо-Вай Сепе
Риїземке (Негсше5, СА), в наступних умовах: напруга: 2,5 кВ, тривалість імпульсу: 5 мсек, конденсаторна місткість на виході 25 мкФ, опір 200 0. Після електропорації в кожну кювету додають 1 мл бульйону УЕР (дріжджовий екстракт (10 г/л), пептон (10 г/л) і Масі (5 г/л)), після чого суспензію клітин в середовищі МЕР переносять в пробірку для культивування об'ємом 15 мл. Клітини інкубують, обережно струшуючи, при 282С протягом 4 годин, і потім культуру
Зо вміщують на чашки, які містять МЕРжагар і відповідний чинник селекції стосовно таблиці 9.
Чашки інкубують протягом 2-4 днів при 282С, після чого колонії відбирають, смугами наносять на свіжі чашки, які містять ХЕР-нагар, для селекції по антибіотику і інкубують при 282С протягом 1-3 днів. Колонії перевіряють як Адгобасіегічшт, використовуючи кетолактозний тест, і потім виділяють позитивні по кетолактозі колонії шляхом двох пасажів окремих колоній. Кінцеву накладку колоній роблять після завершення виділення окремих колоній.
Таблиця 9
Штами Адгобасієгічт і вибір антибіотику вектору
Перевірка колоній Адгобасіегішт: Аналіз на присутність інтактної плазміди проводять методом рестрикційного розщеплення, використовуючи вектор-специфічні рестрикційні ферменти. Для виділення плазмідної ДНК з вибраних трансформованих колоній Адгобасіегійт використовують набори для виділення плазмідної ДНК Маспегеу-Маде! МисіеоВопафФ стосовно рекомендацій виробника. Як контроль служить плазмідна ДНК бінарного вектора, яка використовується для трансформації АдгоБрасіегішт. Проводять чотири окремі реакції розщеплення, використовуючи 0,75-1 мкг ДНК. Реакцію залишають протікати протягом 1-2 гі потім аналізують методом електрофорезу в агарозному гелі з фарбуванням бромідом етидію.
Відбирають колонії, для яких продукти розщеплення під дією всіх ферментів є ідентичними плазмідному контролю і мають очікувані розміри згідно з розташуванням смуг.
Штам А. їштеїасіеєпе ГВА404 (Іпмігодеп Сагізрадй, Саїйогпіа) використовують для трансформації Агарідорзі5, а штам А. їштегасієп5 27075 (Нербит еї аї. (1985) 9. Сеп. Місгобіо|. 131:2961-9) для трансформації каноли.
Приклад 5: Адгобасіегічт-опосередкована трансформація Агарідорбвів Іпайапа
Трансформація Агабрідорзів: Агарідорзіз трансформують, використовуючи метод занурення квіткових рослин, заснований на способі Сіоцдп апа Вепі (1998) Ріапі У. 16:735-743. Вибрану колонію Адгобрасіегішт використовують для інокуляції однієї або декількох пре-культур в 30 мл бульйону УЕР, який містить відповідні антибіотики для селекції. Культуру (культури) інкубують протягом ночі при 289С, постійно перемішуючи при 220 об/хв. Кожну пре-культуру використовують для інокуляції двох культур в 500 мл бульйону УЕР, який містить антибіотики для селекції, після чого культури інкубують протягом ночі при 282С, постійно перемішуючи.
Потім клітини центрифугують приблизно при 8700 д протягом 10 хвилин при кімнатній температурі і отриманий супернатант відкидають. Клітинний осад обережно ресуспендують в 500 мл інфільтраційного середовища, яке містить: солі 1/2х Мигахпіде апа ЗКоод/вітаміни В5
Сатбого, 1095 (мас/об) сахарози, 0,044 мкМ бензиламінопурину (10 мкл/літр початкового розчину в ДМСО з концентрацією 1 мг/мл) і 300 мкл/літр б5ім'екф | -77. Рослини віком приблизно 1 місяць занурюють в середовище на 15 секунд, стежачи за тим, щоб нові суцвіття були навантажені. Потім рослини викладають на бік, накривають (прозорим або непрозорим покриттям) і залишають на 24 години, після чого промивають водою і ставлять вертикально.
Рослини вирощують при 222С з періодом чергування світло/лемрява 16/8 годин. Приблизно через 4 тижні після занурення від рослин збирають насіння.
Умови вирощування Агабідорбзів ІПаійапа: Свіжозібране насіння сушать протягом 7 днів при кімнатній температурі в присутності зневоднювального засобу. Після сушіння насіння суспендують в 0,195 розчині агарози (Зідта Спетісаї! Со., 5. І оці5, МО). Суспендоване насіння зберігають при 49С протягом 2 днів, щоб досягнути стану спокою і гарантувати одночасне проростання насіння (розшарування). Суміш З!ип5піпе ГР5 (Зип Ого Ногіісиниге Іпс., ВеїПемие,
МА) покривають тонким шаром вермікуліту і піддають підповерхневому зрошуванню розчином
Ноадіап до зволоження. Грунтову суміш дренують протягом 24 годин. Розшароване насіння висівають на вермікуліт, накривають вологозберігальними ковпаками (КОКО Ргодисів,
Вгата!єа, Опіагіо, Сапада) і тримають протягом 7 днів. Після проростання насіння рослини вирощують в автоматичному регуляторі Сопмігоп (моделі СМР4О3О і СМРЗ244, СопігоЇПей
Епмігоптепів Гітйей, УмМіппіред, Мапіоба, Сапада) в умовах довгого дня (16 годин світло/8 годин
Зо темрява) при інтенсивності світла 120-150 мкмоль/м:сек, постійній температурі (222С) і вологості (40-50965). Рослини спочатку поливають розчином Ноадіап, а потім деіїонізованою водою, тримаючи грунт вологим, але не мокрим. Незадовго до збору насіння (за 1-2 тижні до збору) рослини висушують.
Селекція трансформованих рослин Ті: Насіння Ті висівають в лотки для пророщування розміром 10,5'х21" (Т.О. Ріазіісз Іпс., Сієагмаїег, ММ), як описано вище, і вирощують у вказаних умовах. Ковпаки видаляють через 5-6 днів після висівання. Через 5 днів і потім через 10 днів після висівання паростки кроплять 0,2095 розчином гербіциду глуфосинату (І ірепу) в об'ємі 10 мл/лоток (703 л/га), використовуючи пневматичний розпилювач Юеміріє5 для доставки ефективної кількості, 280 г/га, глуфосинату. 10 мл розчину гербіциду глуфосинату вносять піпеткою в сцинтиляційний флакон об'ємом 20 мл для кожного лотка, який окроплюється.
Зрошуючу рідину доставляють шляхом горизонтального і вертикального нанесення. Після кожного зрошування всі селекційні лотки забезпечують бірками, на яких вказані назва гербіциду, частота нанесення і дата нанесення. Через 4-7 днів після другого зрошування ідентифікують стійкі до гербіциду рослини і пересаджують їх в горщики, які містять суміш Зи!ип5йпіпе І Р5.
Пересаджені рослини поміщають в теплицю і вирощують у вказаних вище умовах. Через шість- вісім тижнів після пересадження від кожної рослини збирають насіння і зберігають їх окремо під індивідуальним ідентифікаційним номером.
Приклад 7:
Адгорасіегійт-опосередкована трансформація каноли
Отримання Адгорасіегішт: Штами Адгобасіегішт, які містять одну з плазмід ррАВ7319, ррАВ7З21, ррАВ7З24, ррАВ7З26, рравВ7328, рраАВ7з30 ії ррАВ7331, висівають штрихом в чашки з середовищем УЕР (бактопептон (20,0 г/л) і дріжджовий екстракт (10,0 г/л)), який містить стрептоміцин (100 мг/мл) і спектиноміцин (50 мг/мл), після чого інкубують протягом 2 днів при 282Сб. Петлю дводенної культури із засіяної штрихом чашки інокулюють в 150 мл модифікованого середовища УЕР, яке містить стрептоміцин (100 мг/мл) і спектиноміцин (50 мг/мл), яке знаходиться в стерильній перекиненій колбі (колбах) об'ємом 500 мл, і струшують при 200 об/хв і 2820. Перед трансформацією гіпокотилів каноли культури ресуспендуюють в М- середовищі (солі І 5; 395 глюкози; модифіковані вітаміни В5; 1 мкМ кінетин; 1 мкМ 2,4-0; рН 5,8) розбавляють до відповідної щільності (50 єд. Клетта). бо Трансформація каноли:
Пророщування насіння: Здійснюють поверхневу стерилізацію насіння каноли (різновид
Мехега 710) 1095 водним розчином гіпохлориту протягом 10 хвилин, після чого насіння промивають три рази на стальних ситах стерильною дистильованою водою. Насіння пророщують в середовищі для каноли 72 М5 (1/2 М5, 295 сахарози, 0,895 агару), яке міститься в фітолотках (25 насінин на фітолоток). Лотки вміщують в кліматичну камеру для пророщування насіння (Регсіма! Зсіепійіс, Іпс., Реггу, ІА) з режимом росту, встановленим на 252С і фотоперіод 16 годин світла/8 годин темряви, і пророщують протягом 5 днів.
Попередня обробка: На 5 день в асептичних умовах вирізають сегменти гіпокотилю розміром «З мм, відкидаючи шматочки кореню і паростка (висушування гіпокотилів запобігають, вміщуючи їх в процесі вирізування в 10 мл стерильної води по). Сегменти гіпокотилю вміщують горизонтально на стерильному фільтрувальному папері в калюс-індукуючому середовищі, М5К10О1 (М5; 1 мг/л кінетину; 1 мг/л 2,4-Ю; 390 сахарози; 0,790 фітагару), і тримають протягом З днів стадії попередньої обробки в кліматичній камері для пророщування з режимом зростання, встановленим на 22-232С і фотоперіод 16 годин світла/8 годин темряви.
Спільне культивування з Адгобасієгішт: За день до обробки Адгобасіегішт інокулюють колби зі середовищем УЕР, яке містить відповідні антибіотики. Сегменти гіпокотилів переносять з фільтрувального паперу в пусті чашки Петрі розміром 100х25 мм, які містять 10 мл рідкого середовища М для запобігання висушуванню сегментів гіпокотилів. На даній стадії для збору і перенесення сегментів використовують шпатель. Рідке середовище М видаляють піпеткою, після чого в чашки Петрі додають 40 мл суспензії Адгорасієегішт (на 500 сегментів 40 мл розчину
Адгобасіегішт). Сегменти обробляють протягом 30 хвилин, періодично обертаючи чашки Петрі так, щоб гіпокотилі залишалися завантаженими в розчин Адгобасіегішт. У кінці періоду обробки розчин Адгобасієгішт переносять піпеткою в лабораторну склянку для відходів, автоклавують і відкидають (розчин Адгорасіегішт повністю видаляють, щоб запобігти розростанню
Адгорасіегішт). Оброблені гіпокотилі переносять пінцетом назад у вихідні чашки, які містять
М5К1О1 і фільтрувальний папір, стежачи за тим, щоб сегменти не висихали. Сегменти гіпокотилів разом з контрольними сегментами повертають в кліматичну камеру для пророщування із зниженою інтенсивністю світла (яку досягають, накриваючи чашки алюміневою фольгою), і оброблені гіпокотилі культивують спільно з Адгобасієегішт протягом З днів.
Зо Індукція калюса на селекційному середовищі: Після З днів спільного культивування сегменти гіпокотилів переносять окремо пінцетами на калюс-індукуюче середовище, М5К1ТО1НІ1 (М5; 1 мг/л кінетину; 1 мг/л 2,4-Ю0; 0,5 г/л МЕ5З; 5 мг/л АоМО»з; 300 мг/л тіментину; 200 мг/л карбеніциліну; 1 мг/л Негбіасе; 395 сахарози; 0,795 фітагару). Сегменти гіпокотилів фіксують на середовищі, але не занурюють в нього.
Селекція і регенерація паростків: Після культивування протягом 7 днів на калюс- індукуючому середовищі, які мають калюс сегменти гіпокотилів переносять в середовище для регенерації паростків 1, яке містить маркер селекції, М2В3З2А1НІ1 (М5; З мг/л ВАР; 1 мг/л зеатину; 0,5 г/л МЕ5; 5 мг/л А9МОз; 300 мг/л тіментину; 200 мг/л карбеніциліну; 1 мг/л Негбіасе; 3905 сахарози; 0,795 фітагару). Через 14 днів гіпокотилі з паростками переносять в середовище для регенерації 2 з підвищеним вмістом маркера селекції, М5В321НЗ (М5; З мг/л ВАР; 1 мг/л зеатину; 0,5 г/л МЕ5; 5 мг/л АоМОз; 300 мг/л тіментину; 200 мг/л карбеніциліну; З мг/л Негріасеєф);
З9о сахарози; 0,795 фітагару).
Подовження паростків: Через 14 днів сегменти з паростками переносять в середовище для подовження паростків, МЗМЕЗН5 (М5; 300 мг/л тіментину; 5 мг/л Негбріасеф; 295 сахарози; 0,790 агару ТС). Паростки, які видовжилися, виділяють і переносять в МОМЕЗНУ». Через 14 днів інші паростки, які не видовжилися, в першому циклі, вміщають на М5МЕЗНЗ5 і переносять в свіже селекційне середовище такого ж складу. На даній стадії всі сегменти гіпокотилів, які залишилися, відкидають.
Паростки, які видовжилися, на середовищі М5В321НЗ, через два тижні виділяють і переносять в середовище М5МЕЗНУ». Інші паростки, які не видовжилися, в першому циклі на
М5МЕЗНУЬ, виділяють і переносять в свіже селекційне середовище такого ж складу. На даній стадії всі сегменти гіпокотилів, які залишилися, відкидають.
Індукція кореневої системи: Через 14 днів паростки переносять в середовище М5МЕ5Т (М5; 0,5 г/л МЕ5; 300 мг/л тіментину; 295 сахарози; 0,795 агару ТС) для індукції кореневої системи.
Паростки, у яких не з'явилося коріння після першого перенесення на середовище МЗ5МЕЗ5Т, піддають перенесенню другого або третього циклу на середовище М5МЕ5Т до отримання рослин з корінням. Паростки, які не подовжилися/не пустили коріння після першого перенесення на середовище М5О5МЕЗТ, піддають перенесенню другого або третього циклу на середовище
М5МЕБЗТ до отримання рослин з корінням. Рослини, які пустили коріння на середовищі 60 М5МЕЗН5 або М5МЕ5Т, і є ПЛР-позитивними, відправляють для пересадки в грунт. Після загартування рослини каноли То додатково аналізують, щоб ідентифікувати особні, які містять трансгенні касети РТО. Потім рослини переносять в теплицю, вирощують до стадії зрілості і збирають насіння для додаткового аналізу.
Приклад 8: Аналіз ДНК з тканини листя Агабрідорбів Т. і тканини листя каноли То
Рослини каноли То і рослини Агарідорзі5 Ті аналізують, щоб ідентифікувати особні, які містять експресійні касети РТО. Аналізи Іпмадек» проводять з метою початкового скринінгу зразків приблизно трансформованих рослин і ідентифікації особнів, які містять одну копію раї
РТИ. Особні, ідентифіковані як такі, які містять одну копію, зберігають і додатково аналізують на присутність одного або декількох РТ десатурази методом ПЛР. Зразки, які є ПЛР-позитивними по експресійній касеті РТ десатурази, додатково аналізують методом саузерн-блотингу. Аналіз методом саузерн-блотингу проводять, щоб підтвердити присутність в рослинах генної експресійної касети РТИШ з бінарного вектора, який використовується для трансформації рослин.
Однокопійні особні, які містять всі РТ, вибирають для подальшої розробки.
Виділення ДНК: Загальну геномну ДНК (ГДНК) екстрагують з ліофілізованої тканини листя за допомогою рослинного набору ОМеазую 96 (Оіадеп, МаІепсіа, СА). Потім отриману гДНК розбавляють до 10 нг/мкл (канолу) або 0,7 нг/мкл (Агабідорзії) для аналізу числа копій методами ПЛР і Іпиладегоф).
Аналіз Іпладегое): Аналіз числа копій селектованого маркеру раї проводять методом Іпмадего (Тпіга Ууаме Тесппоіодіе5, Мадізоп, М/Л). Геномну ДНК денатурують при 9592 протягом 10 хвилин, охолоджують на льоду і змішують з основною сумішшю реагентів, яка містить олігонуклеотидні зонди, молекули барвників, здатні до резонансного перенесення енергії флуоресценції (ЕРЕТ) і розщеплювальний фермент, відносно інструкції виробника. Реакційні суміші містять зонди як внутрішні стандарти генів. Ген 1-дезоксиксилулоза-5--фосфат редуктоїзомерази (ОХК1І) використовують як внутрішній стандарт для генів Агарідорві5 в реакціях аналізу ІпуадегФ), а ген білка з групи високорухомих білків (НМОа) використовують як внутрішній стандарт для генів каноли в реакціях аналізу Іпмадеге). Крім того, планшети містять 1-копійні, 2-копійні і 4-копійні стандарти, а також контрольні зразки дикого типу і пусті ямки, які не містять зразок. Всі реакційні суміші покривають мінеральним маслом і потім інкубують в термоциклері при 6б39С протягом 1,5 г. Після інкубації реакційну суміш зчитують на
Зо флюорометричному планшет-рідері (Зупегду("7М) 2, ВіоТек Іпзігитепів, УмМіпоо5Кі, МТ).
Результати зчитування збирають для обох каналів ЕАМ (А 485-528 нм) і КЕО (АХ 560-620 нм). На основі отриманих результатів для кожного зразка визначають перевищення нульового рівня (тобто, фоновий рівень) у всіх каналах шляхом розподілу вихідного сигналу зразка на вихідний сигнал в лунці, яка не містить матриці. За допомогою отриманих даних конструюють стандартну криву і визначають найкраще наближення методом лінійно-регресійного аналізу.
Використовуючи параметри, ідентифіковані на основі даного наближення, визначають уявне число копій для кожного зразка.
Аналіз ПЦ: Аналіз ПЛР проводять з використанням праймерів, які застосовуються для ампліфікації кожного елемента транскрипції в рослинах. Вказані праймери розташовані в промоторі (фазеоліну) і в 3-0ОТЕ (Фазеоліну або ОКЕ23). Вказані однакові набори праймерів використовують для аналізу ПЛР як каноли, так і Агарідорбзіз. Для ПЛР-аналізу плазмід ррАВ7З319 і ррАВ7324 використовують праймери МА5414 (ЗЕО ІЮО МО: 18) і МА5З415 (5ЕО ІЮ
МО: 19), щоб ампліфікувати перший РТО. Вказаний РТ містить промотор фазеоліну, функціональний еквівалент гена ацил-СОоА дельта-9-десатурази АзрегойЙйи5 підшапз (АпО9О5 м3; 5БО ОО МО: 49) і термінатор З'ЮТК фазеоліну. Для ПЛР-ампліфікації другого РТ з конструкції РОАВ7319, використовують праймери МА5415 і МА5Б413 (ЗЕО ІЮО МО: 20). Вказаний
РТО містить промотор фазеоліну, функціональний еквівалент гена ацил-СоА дельта-9- десатурази Іеріозрпаєгіа подогит (їп0905-2 м2; 5БО ІЮО МО: 17) ії ЗК ОКЕ23. Пари праймерів МА5З415 і МА5Б413 також використовують для ампліфікації другого РТ плазмід, утворених в результаті трансформації плазмідою ррАВ7324 (промотор фазеоліну, генів ацил-
СоА дельта-9-десатурази Неїїсомегра 7єеа м2 (Н20905 м2; 5ЕО ІЮ МО: 16) і З'ОТК ОКЕ23). Крім того, пари праймерів МА5415 і МА5ЗА13 також використовують для ампліфікації РТИ, які входять до складу конструкцій РОАВ7321 і рОАВ7326.
Реакції ПЛР проводять в об'ємі 25 мкл, використовуючи 20 нг геномної ДНК, 5 одиниць Ех
Тад (Такага), 1х буфер для реакції, 0,2 мкМ кожного амМТР і 0,8 мкМ кожного праймеру. Реакції ампліфікації проводять в термоблоці ОМА Епдіпе ТеїгадФ 2 (Віокай, Негсцшіе5, СА). Для праймерів МА5413 ії МА5415 використовують наступні умови реакцій: З хвилини при 949С; потім 35 циклів по 30 сек при 942С, 30 сек при 632С, і З хв при 722"С; кінцеве подовження проводять протягом 10 хвилин при 72"С. Для праймерів МА5414 і МА5415 використовують такі ж умови бо реакції з єдиною відмінністю, якак полягає в тому, що температуру зменшують з 632С до 602С.
Продукти реакції аналізують в 195 агарозному гелі, забарвлюють бромідом етидію і візуалізують на сеІ-бостм,
Аналіз методом саузерн-блотингу: Аналіз методом саузерн-блотингу використовують для визначення характеру інтеграції подій в канолі. За допомогою вказаних експериментів отримують дані, які демонструють інтеграцію трансгену десатурази в геном каноли і його цілісність. Вибрану подію характеризують як повнорозмірну, проста подія інтеграції, яка включає в себе одну копію трансгену десатурази з бінарного вектора, який використовується для трансформації рослини.
Детальний аналіз методом саузерн-блотингу проводять з використанням зондів, специфічних до генів десатурази і дескриптивним ферментам рестрикції, які здатні розщеплювати плазміду в певних ділянках. Внаслідок вказаного розщеплення утворюються здатні до гібридизації фрагменти внутрішньої частини плазміди, або фрагменти, які охоплюють сполуки плазміди з геномною ДНК каноли (бордюрні фрагменти). Розміри молекул, визначені методом саузерн-гідридизації для сполучення ферментів рестрикції і зондів, є унікальними для кожної події. Вказані аналізи також демонструють, що фрагмент плазміди вбудовується в геномну ДНК каноли без реаранжирування Т-ланцюжкової ДНК.
Щоб провести аналіз методом саузерн-блотингу, 100 мг ліофілізованої тканини листя каноли екстрагують, використовуючи набір Ріапі Міпі Ки (Оіадеп). Щоб визначити число копій, п'ять мікрограм (5 мкг) гДНК на зразок розщеплюють одночасно рестрикційними ендонуклеазами 5реї і Расі (Мем/ Епдіапа Віоїабз, Ірзм/ісп, МА) з отриманням фрагментів, які містять ті, які представляють інтерес РТ і/або селектований маркер (РАТ). Розщеплену ДНК аналізують на 0,895 агарозному гелі.
Коротко кажучи, після електрофоретичного розділення і візуалізації фрагментів ДНК гелі піддають депуринізації шляхом обробки 0,25 М НСІ протягом приблизно 20 хвилин, після чого їх обробляють денатуруючим розчином протягом приблизно 30 хвилин і потім нейтралізуючим розчином протягом щонайменше 30 хвилин. Протягом ночі проводять саузерн-перенесення на нейлонові мембрани (МійПіроге, ВіПегіса, МА), використовуючи капілярну систему, яка містить 10х 55С. Після перенесення мембрани промивають розчином 2х 5550 і потім приєднують до них
ДНК шляхом зшиття під дією УФ. Даний спосіб дозволяє отримати саузерн-мембрани, готові до
Зо гібридизації.
Отримують зонди, ПЛР-фрагменти ампліфікують з плазмідною ДНК і очищають методом гель-екстракції, використовуючи набір для гель-екстракції ОІАдніскФ (Оіадеп). Для отримання зонда І пре9О05 використовують праймери апубов8 (5ЕО ІО МО: 21) і аг009 (ЗЕО ІЮ МО: 22). Для отримання зонда Н?209 використовують праймери агу010 (ЗЕО ІЮ МО: 23) і агпм011 (ЗЕО ІЮ МО: 24). Умови ПЛР для всіх три реакцій включають в себе 35 циклів з температурою відпалу 632 і часом подовження 1 хвилина. Фрагменти ПЛР мітять З2Р, використовуючи набір для довільного мічення праймерів Ргіте-ЩКе КттТ (5ігагадепе, І а доПа, СА).
Стадію гібридизації проводять протягом ночі приблизно при 65"С в гібридизаційному термостаті. Блоти нейлонових мембран промивають, піддають впливу «рпо5рпог ітаде 5сгееп» протягом ночі і сканують на сканері 5іогт м 860 (МоІесшаг ОСупатісв, Зиппумаїе, СА).
Приклад 9: Жирнокислотний склад трансгенного насіння Агабрідорзі5, яке містить ацил-СоА дельта-9-десатуразу
Рослини Агарідорзіз трансформують векторами Адгобасіегішт, які містять гени І преОз-2 м2 (рОАВ7З321; 5ЕО І МО: 61), Н2О905 м2 (рОАВ7326; 5ЕО ІЮ МО: 63) або М90905 м2 (рРОАВ7330;
ЗЕО ІЮ МО: 65). Рослини також трансформують вектором, які містить ген АпО9О5 (рраВ7328;
ЗЕО ІЮ МО: 64). Пустий вектор, який містить тільки селектований маркерний ген раї (рОАВ7331;
ЗБЕО ІЮ МО: 66), використовують як негативний контроль. Трансформації також проводять з використанням поєднання двох десатураз, стеароїл-специфічної десатурази (АпО9О5) і пальмітоїл-специфічної десатурази, або ії прер5-2 (ррОАВ7319; 5ЕО ІО МО: 60), або Н2;реОр5 (ррАВ7З324; 5ЕО ІО МО: 62). У всіх випадках гени десатураз знаходяться під контролем насіннє- специфічного промотору РуиРпах (патент США 5504200). Сукупність насіння Т2 збирають з гербіцидо-стійких рослин Ті, перевірених на вміст гена раї шляхом аналізу Іплмадегб і РТО десатурази шляхом аналізу методом ПЛР.
Зразки насіння гомогенізують в гептані, який містить тригептадеканоїн (Ми-СнНек ргер,
ЕІузіап, ММ) як замінник, використовуючи стальну кульку і кульковий млин. Перед гомогенізацією до зразка додають 0,25 М розчин свіжоотриманого МеОМа (Зідта) в меон.
Реакцію проводять при помірному нагріванні (4072) і постійному струшуванні. Реакцію контролюють шляхом витягання метилованого замінника. Екстракцію ЕАМЕ повторюють три рази, після чого всі гептанові шари об'єднують перед аналізом. Повноту екстракції бо підтверджують шляхом аналізу присутності РЕАМЕ в четвертому циклі екстракції/дериватизації.
Зо
Отримані ЕАМЕ аналізують методом ЗС-РІЮ, використовуючи капілярну колонку ВРХ 70, 5ОЕ (15 м х 0,25 мм х 0,25 мкм). Кожен БАМЕ ідентифікують за часом утримання і кількісно визначають шляхом введення стандартної суміші ріпакової олії, Маїгеуа, І С (Рівазапі Сар,
РА), як калібрувального стандарту.
Аналіз ЕАМЕ насіння То трансгенних особнів демонструє, що експресія кожної десатурази вносить значний внесок в зменшення загального вмісту насичених жирних кислот в насінні, яке визначається за середнім вмістом насичених жирних кислот в кожній групі особнів. Таблиця 10 і фіг. 19. У даній таблиці і в нижченаведених таблицях значення, позначені різними буквами, відрізняються значною мірою за результатами тесту Тикеу-Кгатег НБ5О, який проводиться в пакеті статистичного програмного забезпечення МР (ЗАЗ Іпзійше Іпс., Сагу, МС). Поєднання
Апреорз з ЇпреоОр5-2 або Н2БОЮО5 дають саме низьке середнє значення загального вмісту насичених жирних кислот.
Таблиця 10
Загальний вміст насичених жирних кислот насіння Т2 Агабідорвів
Число зразків Середнє значення загального
Ген : т2 вмісту насичених ЖК
Контроль. | 204 ІА | | | 13,49
Дикийтиї//////// | 60 ФА | 9 (!/! | 13,16
Ма0905 ме 742 1 (Ів Ї | 10,26 іпр9о5-2 ма 7749 | БжЖБмМ 'Юб ІВ Ї | 10,00
Н2г09о5 мг пи теля п Є: НЯ КОНЯ ПО: Ж:
АпО9О5 УЗ 8211 Ї11111111с1117111111111118в3С1С
Апреюрз хз
Апреюрз хз
Хоча всі десатурази знижують загальний вміст насичених жирних кислот в насінні
Агабрідорзі5, вони впливають різним чином на вміст пальмітинової і стеаринової жирних кислот, стосовно прогнозів, зроблених на основі експериментів з дріжджами. Таблиця 11 їі фіг. 20 показують середній вміст пальмітинової кислоти в кожній групі особнів. Таблиця 12 і фіг. 21 показують середній вміст стеаринової кислоти в насінні Т2 кожної групи особнів.
Таблиця 11
Вміст пальмітинової кислоти в насінні То Агабідорвів
Ген Середній вміст пальмітинової кислоти
Контроль. ТА Ї/ Ї771117ї11111171Ї1111111111111772ссСсС
Дикийтиїї//////// ОО ЇА ЇЇ 11111171 Ї1111111111111754СсС1С
Ма0905 мг пи І: з Я ОХ ПО 1: ПО
АпО905 УЗ ни спи п ПО с по іпр9о5-2 ма є1111111558.4.....ЙЩБ
Н2г09о5 мг 1 до11111111111557...ЙЙЙЙЙЙССС
Ап0реюз уЗ - І п0905-2 у? 5,54
Апрерзуз я нНарерзуг! ЇЇ 0в 111151
Таблиця 12
Вміст стеаринової кислоти в насінні Т2 Агабідорзів
Ген Середній вміст стеаринової кислоти
Контроль ЇТА ЇЇ 77777711 2961сСсСС
Дикийтип С ФА ЇЇ 77771711 294ссСс2 іпр9о5-2 ма нини: пиши
Н2г09О5 мг нинннсснинншпшнншшишишш о тури
Ма90905 х2 іє
Адпрерзузанареряма | ОС 17777771
Апрерв уз нн снншнишшшек пиши
АпрерзуЗіпрорв-ама | ОО | 777771717171Є777717171111111111112е81
Апроре і М9090О5 впливають більш значним чином на вміст стеаринової кислоти, ніж
Її л0905-2 і Н20905. І навпаки, Їпре05-2 і Н2О9О5 впливають більш значним чином на вміст пальмітинової кислоти, ніж АпОеО5 і М90905. Поєднання десатураз впливають більш значним чином на обидві жирні кислоти. Такі ж результати отримують при аналізі впливу десатураз на підвищення в насінні вмісту пальмітолеїнової кислоти, яка є первинним продуктом дельта-9- десатурації пальмітинової кислоти. Таблиця 13 і фіг. 22.
Таблиця 13
Вміст пальмітолеїнової кислоти в насінні Т2 Агарідорвів
Ген Середній вміст пальмітолеїнової кислоти
Апреюрз хз
Апреюрз хз
Н2г09о5 мг пи КЕ: ПНЯ ПОН ПОН НО:
АпО905 УЗ |В |ЇЄ ЇЇ 7Гї7777777771717112ло71 іпОр905-2 ма пи ПНЯ Кс ПНЯ ООН ПО ТК: х НО
Ма0905 мг пи п ПНЯ Кс ЛЯ ООН ПО ТАТ» ПО
Контроль./-/-/:/ ЇЇ ЇЇ 1Е ОЇ 777777777710817777СсС2С
ІДикийтиї/////// 1777 ЇЇ ЇЇ Щ4Е ОЇ 77777777771080777777с72
Існують очікувані варіації впливу десатураз на вміст насичених жирних кислот серед особнів, які аналізуються, положення, яке є наслідком і числа копій. Порівняння повного профілю жирних кислот у особнів з самим низьким загальним вмістом насичених жирних кислот (середнє значення від п'яти особнів з самим низьким вмістом насичених жирних кислот) приведене в таблиці 14 нарівні з жирнокислотним профілем насіння рослин дикого типу і рослин, трансформованих контролем.
Таблиця 14
Жирнокислотний профіль трансгенних Агарідорзів Т», які мають найнижчий загальний вміст насичених жирних кислот. Стандартні відхилення приведені в лапках 1 С140 С16:0 С16 С18:0 С18и
Дикий тип 0,08 7,54 0,31 2,94 14,91 1,47 0,02 0,41 0,05 0,19 1,44 0,10 й 0,02 0,05 0,04 0,34 2,04 0,1 0,07 5,10 2,92 0,72 20,52 1,72 0,06 413 411 1,26 19,34 1,94 0,05 4,68 3,49 1,53 19,35 2,05 0,08 6,64 1,60 1,05 18,01 1,60
Апреюрз хз 0,06 4,41 3,71 0,97 19,60 2,03
І лр905-2 м2 0,00 0,17 0,35 0,33 0,88 0,21
Апреарвуз з 0,08 4,86 4,09 1,01 18,10 2,03 н:2розгрвзм2 0,02 0,35 0,65 0,22 2,40 0,31 " Масс. х цис-ваксенова кислота (18:1 п-7) 001 с182 С18:3 С20:0 С20: С20:2 С22:0 С221 С240 . 28,72 17,85 20,11 0,21
Дяийтют обл | ву ово) ро) (в омвюве оловом ото
Контроль 29,28 18,07 2,08 19,62 1,85 0,39 1,70 0,27 й 1,29 1,35 0,16 123 0,17 013 0,04 0,14 29,64 17,59 0,44 18,26 1,42 0,24 1,26 0,10 29,31 17,26 0,81 18,39 1,47 0,18 1,50 0,23 27,12 17,46 1,00 19,33 1,45 0,32 1,48 010 29,76 17,98 0,63 19,19 1,60 0,26 1,44 0,16 прав | гей | лвя4 | Бе | 1765 | 140 | 089 113 03 у? (0,91) (0,41) (0,27) (0,23) (0,04) (0,03) (0,06) (0,02)
АпрорвБуЗ а 29,28 18,83 0,65 17,88 1,55 0,20 1,33 0,11 н:2розгрвзм2 1,78 1,69 0,21 1,90 0,20 012 0,24 0,08
Крім зменшення вмісту насичених пальмітинової і стеаринової жирних кислот і збільшення вмісту мононенасичених жирних кислот (пальмітолеїнової і олеїнової), присутність десатураз також приводить до зменшення кількості арахідинової кислоти (С20:0) в насінні. Приблизно це зумовлено тим, що дана жирна кислота утвориться внаслідок подовження стеаринової і пальмітинової кислот. Безпосередня десатурація С20:0 під дією введених десатураз, мабуть, відсутня, оскільки не виявлено супутнє підвищення вмісту ейкозенової кислоти (С20:1) у вигляді
С20:1,А9.
Приклад 10: Отримання антитіла проти дельта-9-десатурази
Діагностичні засоби, такі як антитіла, потрібні для характеристики експресії трансгенного білка дельта-9-десатурази в рослинах. Оскільки ацил-СоА дельта-9-десатурази є мембранозв'язувальними білками, важко досягнути рутинну надекспресію в ЕвбсПегіспіа соїї.
Однак для отримання антитіл можна здійснити надекспресію С-кінцевого фрагменту кожного білка дельта-9-десатурази, який не містить ніяких трансмембранних доменів білка.
Полімеразні ланцюгові реакції: ПЛР;-праймери конструюють для ампліфікації еквівалентного
С-кінцевого фрагменту кожної десатурази. 3- Праймер конструюють так, щоб він кодував фрагмент білка з С-кінцевим маркером бх Ніх. Щоб полегшити клонування, в склад 5'- і 3- праймерів вводять ділянки рестрикції Маеї ії Ватні, відповідно. Послідовності праймерів приведені в таблиці 15. Очікувані продукти ампліфікації мають розміри 659 п.о. для І преоО5-2, 683 п.о. для МареЮ5 і 335 п.о. для Н2090О5. Реакції ПЛР проводять з використанням набору для ПЛР ТаКага Ех Тад'м (Сіопіесп, Моипіайп Міем, СА) в умовах, які рекомендуються постачальником. Загальний об'єм реакційної суміші ПЛР становить 50 мкл. Кожна реакційна суміш містить 200 нг плазмідної ДНК їі 50 пмоль кожного праймеру. ДНК денатурують при 949С протягом 1 хв, потім проводять 30 циклів, які включають в себе 942 протягом 30 сек, 60 протягом 1 хвилини і 722С протягом 30 сек. Кінцеве подовження проводять при 722С протягом 10 хвилин. Кожен продукт ПЛР пропускають через дві ямки на стерильному 0,759 агарозному гелі, потім ДНК очищають в гелі, використовуючи обертові колонки Мопіаде, і елююють 15 мкл буферу ТЕ.
Таблиця 15
Послідовності олігонуклеотидних праймерів, використовуваних для ПЛР-ампліфікації С-кінцевих фрагментів пб905-2, Мар9О5 і Н;ЮО905 , Прямий праймер ! ЗЕО ІЮ МОС25 : .
Апії прорвБаЕ для С-кінцевої мли СМТ боонононовсновсстовненє ОТ Со
Зворотний ! ЗЕО ІЮ МО 26 праймер для С-
АПШЛОЗО52НИ | СбАТОСОСАСССАСАССССССТСААССААССТСТС кінцевої ділянки
І лрорза2 , Прямий праймер ! ЗЕО ІЮ МО 27 : . ділянки МОЮО9О5
Зворотний ! ЗЕО ІЮ МО 28 праймер для С-
АПЕМООЗО5НИ | осАтососсосстТоАОСАСССОСААСАСОСТО кінцевої ділянки
Мароро , Прямий праймер ! ЗЕО ІЮ МО 29 : . ділянки Н2/Ю9О5
Зворотний ! ЗЕО ІЮ МО:30 праймер для С-
АПШН2ОЗО5НИ | СоАТОСТОСТСТТТАСССТТОАТОСТААТООСТОС СО кінцевої ділянки н:20р905
ТОРО-клонування: Очищені С-кінцеві фрагменти піддають ТА-клонуванню у векторах
ТОРОФ рекКеО2.1 (Іпмігодеп, Сагпізрай, СА) і використовують для трансформації клітин Е. соїї
Тор 10 стосовно інструкції виробника (Іпмігодеп). Відбирають трансформовані клітини і виділяють плазмідну ДНК, використовуючи колонки Мисіеобріп? (Маспегеу-Маде!І СтрнН 8 Со,
Оигеп, Септапу). Три мікролітри (3 мкл)у ДНК розщеплюють ферментами Мае!ї і Ватні в загальному об'ємі 20 мкл протягом 90 хвилин при 37"С, після чого продукти розділяють в 0,895 агарозному гелі. У кожному випадку спостерігають ген-специфічний фрагмент (і смугу вектору
ТОРОФ розміром 3,9 т.ч-.). Для кожного клонованого гена вибирають три позитивних клони і проводять секвенування, щоб підтвердити, що ампліфікований фрагмент ПЛР не містить помилки. Всі клони М90905 містять крапкову мутацію, яка мовчить в положенні 45, яка вказує або на однонуклеотидний поліморфізм між опублікованою послідовністю і ПЛР-матрицею, або на помилку, яка мовчить ПЛР. Оскільки мутація є такою, яка мовчить, немає необхідності проводити корекцію і клон вибирають для субклонування.
Отримання плазмід експресії С-кінцевого фрагменту дельта-9-десатураза: ПЛР- ампліфіковані фрагменти гена, який кодує дельта-9-десатуразу, розщеплюють ферментами
Зо рестрикції Має! ї Ватні і лігують у відповідні ділянки рестрикції експресійного вектору рРЕТЗОБ(ї). Стадія клонування завершується додаванням 15 С-кінцевих амінокислот, які утворюють С-кінцевий маркер бх Ніх, який полегшує очищення повнорозмірного білка.
Передбачається, що вказані додані амінокислоти не впливають на експресію білка. Вибрані позитивні клони перевіряють шляхом розщеплення ферментом рестрикції і секвенування.
Експресія С-кінцевих пептидних фрагментів дельта-9-десатурази в БЕ. соїї: Плазміди експресії дельта-9-десатуразу/рЕТЗОБ(к) використовують для трансформації клітин Е. соїї ВІ 21 (ОЕЗ) відповідно до рекомендацій виробника (Момадеп, Мадізоп, УМ). Клітини вміщують в планшети І А, які містять канаміцин (50 мкг/мл) і глюкозу (1,25 М). Планшети інкубують протягом ночі при 37"С. З планшета зішкрібають повну петлю клітин і інокулюють їх в колби об'ємом 500 мл, які містять 250 мл ІВ, канаміцин (50 мкг/мл) і ізопропіл-Р-ЮО-тіогалактозидний (0,75 мМ) індуктор. Тестують три індукційних стани. Індукування культур проводять при різних температурах і протягом різних проміжків часу, а саме: протягом ночі (18 г) при 28"С; протягом ночі при 16"С; або протягом 4 годин при 37"С. Клітини збирають шляхом центрифугування в пляшках об'ємом 250 мл при 6000 об/хв протягом 15 хвилин і потім заморожують при -207С.
Очищення С-кінцевих пептидних фрагментів дельта-9-десатурази: Клітинні осади, отримані з культур об'ємом 250 мл, відтають і ресуспендують в 50 мл холодного забуференого фосфатом фізіологічного розчину (РВ5), який містить 1095 гліцерину і 0,5 мл протеазо- інгібіторної суміші (Зідта, 5. Гоціх5, МО), за допомогою ручного гомогенізатора. Клітини руйнують на льоду протягом приблизно 10 хвилин за допомогою ультразвукового дезінтегратора Вгапзоп, модель 450 (Оапригу, СТ). Внутрішньоклітинні тільця осаджують центрифугуванням при 10000 д протягом 15 хвилин і потім екстрагують 2-3 рази РВ5, який містить 0,595 тритони Х-100, доки концентрація білка в супернатанті, який вимірюється за допомогою аналізу Бредфорда, не досягне фонового рівня. Виділені внутрішньоклітинні тільця солюбілізують в розчині РВ5, який містить 6 М сечовину і 5 мМ ОТТ, при кімнатній температурі і перемішують протягом приблизно 1 години. Солюбілізовані білки відділяють від нерозчинених речовин шляхом центрифугування при 30000 д протягом 15 хвилин, після чого супернатант, який залишився наносять на Мі-афінну колонку об'ємом 5 мл (СЕ Неайсаге, НіТгар Спе|аїйіпо,
Різсагаулхау, МУ). Гістидинові маркери С-кінцевих пептидів дельта-9У-десатурази зв'язуються з металовмісною смолою і потім фрагменти елююють в градієнті 50-200 мМ імідазолу, використовуючи АКіа? Ехріогег 100 (СЕ Неайвсаге, Різсаїаулау, МУ). Фракції збирають (кожна об'ємом З мл) і елюювання піків аналізують методом 505-РАСЕ. Фракції, які містять С-кінцевий
Зо пептид дельта-9-десатурази, об'єднують і концентрують, використовуючи пристрій для фільтрування Атісоп?б ОКга 10000 МУУСО (Мійроге, ВіМПегіса, МА), до отримання об'єму менше 5 мл. Потім зразок білка наносять на колонку для гель-фільтрації Ні І оаа м ХК16/60 Зирегдех "м 200 (СЕ Неайсаге, Різсагажау, МУ) і врівноважують 6 М сечовиною в розчині, який містить 20
ММ Тті5-НСЇ, 150 мМ Масі і 1 мм ОТ. Пікові фракції (кожна об'ємом 4 мл), які містять чистий С- кінцевий пептид дельта-9-десатурази, зберігають (після перевірки методом 5О5-РАСЕ і інших біохімічних характеристик) і використовують для отримання антитіл. Отримують пептиди з очікуваними розмірами 27 кДа для пептиду І п0905-2, 15 кДа для пептиду Н20О905 і 28 кДа для пептиду МареО5. Умови індукції дозволяють отримати кількість білка, достатню для візуалізації шляхом фарбування гелів 5О5-РАСЕ Кумасі синім.
Отримання поліклональних антитіл: Кролячі антитіла проти кожного з три С-кінцевих пептидів дельта-9-десатурази виготовляє відповідно до договору спеціальна установа (5ігаїецдіс
ВіозоЇшіоп5, Межагк, ОЕ). Слідуючи їх стандартним процедурам, отримують антисироватку з високим титром (визначеним методом ЕГІ5А) проти кожного з три білкових фрагментів. Кожен очищений С-кінцевий пептид дельта-9-десатурази розбавляють буфером, який містить 20 мМ
Ттів-НСЇ, 150 мМ Масі, 1 мм ОТ ії сечовину з кінцевою концентрацією 2-3 М, щоб підтримувати білок в розчині. Приблизно 10 мг білка відправляють в 5ігагедіс Віозоїшіоп5 для отримання поліклонального антитіла. Для кожного імуногену беруть двох кроликів і використовують стандартні методи імунізації (70 днів). Для отримання емульсії використовують новий ад'ювант, який називається ТйепМах?е (зої4. Отримання антитіл підтверджують шляхом титрування методом ЕГІ5А в процесі імунізації і в кінці процедури. Антисироватку отримують в два різні моменти часу; перший раз через 2 місяці після початку стандартної процедури, а другий при знекровленні.
Щоб виділити загальну фракцію Ідс з кролячої сироватки, приблизно 20-30 мл антисироватки з високим титром наносять на стійку до лугу колонку з білком А об'ємом 5 мл (СЕ
Неайнсаге, НітТтар'ї Марбеїєсі биВе", Мо по каталогу 11-0034-94). Після стандартного промивання РВ5 зв'язані (Дб елююють зі смоли шляхом короткої обробки буфером, який містить 0,1 М цитрату натрію і 0,3 М масі, рН 3,3, і відразу нейтралізують шляхом додавання до кожної фракції 1/10 об'єму буфера, який містить 2 М Тті5-НСЇІ, рН 9. Афінну колонку санують шляхом обробки 0,5 М Маон, слідуючи стандартній процедурі безрозбірного миття обладнання бо (СІР), щоб уникнути перехресного забруднення дО. Остаточно виділені з кожного зразка ДО діалізують проти 50 об'ємів РВЗ при 4"С протягом ночі, після чого методом Бредфорда визначають концентрацію білка, використовуючи ВСА як стандарт (Ріегсе, Мо продукту 23208).
Аліквоти об'ємом один мл переносять в окремі пробірки і зберігають при -8026.
Отримані антитіла являють собою діагностичні засоби, які використовуються для вимірювання експресії білка десатурази в трансгенному рослинному матеріалі. Антитіла використовують для розробки кореляцій між фенотипом, який відповідає олії з низьким вмістом насичених жирних кислот, і рівнем експресії білків дельта-9-десатурази.
Приклад 11: Рівні білків ацил-СоА дельта-9-десатуразу в насінні Агабідорвзів Т»
Поліпептиди дельта-9-десатурази детектують в зразках зрілого трансгенного насіння методом вестерн-блотингу. Зразки для аналізу отримують шляхом розмелювання сухого насіння в молотильному барабані, який містить кульки з нержавіючої сталі Кіесо"м ((сагсіа
Маспіпе, Мізаійа, СА). Додають буфер для екстракції (50 мМ трис, 10 мМ ЕОТА, 295 505), після чого пробірки із зразками обережно струшують протягом 30 хвилин. Зразки центрифугують протягом 15 хвилин при 3000 гсї. Потім супернатант збирають і використовують для аналізу.
Кількість загального розчинного білка в екстракті насіння визначають методом Лоурі (ВіоКай,
Негсціевз, СА). Зразки, отримані в буфері для зразків І О5 (Іпийгодеп, Сагіврай, СА), який містить 40 мМ ОТТ, нормалізують до отримання концентрації загального розчинного білка 1,55 мг/мл, щоб досягнути нормалізованого навантаження, яке становить 20 мкг загальних розчинних білки на лінію. Зразки піддають електрофорезу в гелях, які містять 4-1295 біс-тріс (Іпмігодеп), з подальшим перенесенням на нітроцелюлозні мембрани. Блоти блокують блокуючим буфером і досліджують із застосуванням антитіл проти чотири різних поліпептидів дельта-9-десатурази (Апрор5, І пр905-2, Н20905 і Мо0905) (див. приклад 10).
У всіх випадках отримують кролячі поліклональні антитіла проти очищеного С-кінцевого пептидного фрагменту, який містить маркер Ні, окремих десатураз, як описано вище. Очищені
С-кінцеві фрагменти використовують як стандартні антигени для кількісного визначення методом вестерн-блотингу. Для детекції використовують повторні антитіла проти кролячих імуноглобулінів, які містять флуоресцентну мітку (козячі антитіла проти кролячих імуноглобулінів АБ 633; Іпмігодеп). Блоти візуалізують на флуоресцентному пристрої для візуалізації Турпооп'"м Тгіо Рін5 (ЗЕ Неапйпсаге). Отримують стандартні криві, використовуючи
Зо метод квадратичної апроксимації, і кількісно визначають рівень експресії, використовуючи метод лінійної регресії.
Аналіз екстрактів зрілого насіння Т2 особнів Агарідорбхі5 методом 505-РАСЕ і вестерном- блотингу показує наявність смуг, відповідних потрібному розміру молекул, візуалізованих за допомогою специфічної антисироватки. Кількісну оцінку вказаних смуг проводять з використанням специфічних стандартних антигенів. Кількісний аналіз екстрактів насіння Тег
Агарідорзі5 методом вестерн-блотингу з використанням відповідної антисироватки показує, що в зрілому насінні присутній в середньому 63 нг І пр905-2/мг загального білка (об) (макс. 228 нг/мг об) ії 34 нг НОЮ 5/мг об (макс. 100 нг/мг об). Що стосується М90905, в насінні Т2 детектують в середньому 58 нг/мг об (макс. 1179 нг/мг об). Що стосується АпО9О5, в зрілому насінні Т2 детектують в середньому 625 нг/мг об (макс. 1,5 мкг/мг об). Таким чином, в трансгенному насінні рівень експресії пальмітоїл-специфічних десатураз, І преОз-2 і Н2О9О5, в 10-18 раз менше, ніж рівень експресії АпО9О5. Отже, більш високі рівні експресії вказаних десатураз можуть призвести до додаткового зниження вмісту насичених вуглеводнів, особливо пальмітинової кислоти.
Приклад 12: Експресія генів дельта-9-десатурази в канолі
Ряд трансгенних особнів каноли отримують в результаті трансформації, проведеної з використанням РрРОАВ7321 (5ЕО ІО МО: 61) і рРОАВ7326 (5ЕО ІЮО МО: 63) (які містять відповідно гени ГпОеОО5-2 і Н?20905, які контролюються насіннє-специфічним промотором РуРпНавб).
Тридцять дев'ять особнів ррАВ7321, які містять ген ЇпреО05-2, ідентифікують шляхом ПЛР- аналізу геномної ДНК і вирощують в теплиці до отримання насіння Ті. Подібним чином, ідентифікують 80 особнів ррАВ7326, які містять ген Н209О5, і отримують насіння Ті. Канолу також трансформують плазмідою ррАВ7319 (ЗЕО ІЮ МО:60) або ррАВ7324 (ЗЕО ІЮ МО:62), яка містить ген АпОеОЮО5, сполучений з геном /п0905-2 або НО209О5, які контролюються промотором РуРвах. Вибирають відповідно 44 і 76 особнів, які за даними аналізу ПЛР містять обидва гени десатурази, і вирощують їх в теплиці до отримання насіння ТТ.
Аналіз ЕАМЕ в зразках насіння Т: особнів, трансформованих ррАВ7321 (І п0905-2 м2) або ррАВ-7326 (Н20905 м2), показує відсутність значного зменшення рівня насичених жирних кислот в порівнянні з нетрансформованими рослинами каноли, або рослинами, трансформованими пустим контрольним вектором. Вестерн-блотинг насіння Ті: показує 60 відсутність детектованих рівнів білків дельта-9-десатурази. Крім того, в насінні Ті рослин,
трансформованому ррАВ7319 (АпО905 уз і І пО905-2 м2) або ррдв7324 (АпреО5 му3 і Н2Ю90О5 мг), відсутні детектовані рівні білка Ії п0905-2 або Н?20905, тоді як білок АпО9О5 можна легко детектувати. У даних особнів спостерігається зменшення вмісту насичених жирних кислот в порівнянні з контрольними рослинами, однак воно пов'язане з експресією АпреО5.
Щоб визначити відносні рівні мРНК генів дельта-9-десатурази, загальну РНК екстрагують з насіння особнів каноли, яке розвивається, трансформованих конструкціями, які містять гени двох десатураз (рОАВ7319 і рОАВ7324), і аналізують методом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Насіння збирають на сухому льоду на 20, 25, 29, 32, 39 або 41 дні після запилення від декількох рослин каноли і зберігають при -80 "С. Загальну РНК отримують з 50 мг об'єднаного замороженого насіння, використовуючи набір для екстракції рослинної РНК
ЕМеазуФ (Оіадеп) стосовно рекомендацій виробника. Екстраговану РНК використовують в якості матриці для синтезу КДНК з використанням Зирегвзсгірк ПІ Рігеї 5ігапа Зупіпезі5 Зуирегтіх тог аВТ-РСЕК (Іпмігодеп) стосовно інструкцій виробника.
Аналізи ОТ-ПЛР планують проти мішеней десатурази за допомогою центра по плануванню аналізів Коспе (Коспе Оіадповіісв5, Іпаіапароїї5, ІМ). Праймери, які використовуються в даному аналізі, описані в таблиці 16. У планових аналізах використовують БАМ-мічені зонди ОРІ. (Коспе Оіадповііїс5). Реакції вказаних аналізів проводять з подвійними повторами, в контрольному аналізі використовують актин каноли, мічену техасовим червоним, синтезовану в
Іп'єдгатеа ОМА Тесппоіодієв.
Таблиця 16
Деталі кількісного аналізу ОТ-ПЛР
ЗЕО ІЮО МО:31 ЗЕО ІЮ МО:32
Апреарз ,саАСТТСТСТАСТОТСАСС| ТССаАТОСТСОТтТасаттс| ОРІ 59 тпаА т
ЗЕО ІЮ МО:34
ЗЕО ІЮО МО:33
ЗЕО ІЮО МО:35 ЗЕО ІЮ МО:З36б
Ї алр905 сттсетадстасс;ттаато | сСасАААСТСАТастааціАА | ОРІ 27
АС ат
ЗЕО ІЮО МО:37 ЗЕО Ір МО:38 ЗЕО ІЮО МО:39
Асіїп СстТАСТОСТАТТаТОаСтТоСаСА СТотТотоаатТаАСААТСТТ| САСО)аСтТАТСОСТОСИ,ТСТ
Ст САТ СаАТС
Реакції ОТ-ПЛР проводять в термоблоці для проведення реакцій ПЛР в режимі реального часу ГідпСусіего 4801! (Коспе). Дані для аналізів мішені ОРІ. збирають, використовуючи фільтр емісії при 533 нм і сигнал збудження при 483 нм. Дані для контрольного аналізу актину збирають, використовуючи фільтр 610 нм і сигнал збудження при 558 нм. Значення часу циклу і відношення мішень до контролю розраховують автоматично, використовуючи потік операцій аналізу "Адмапсей КеїЇайме Опапійісайоп" програмного забезпечення І1С4801І. Відносне накопичення транскриптів десатурази в кожному зразку розраховують, використовуючи стандартний метод ЛАСІ (Носпе).
У всіх зразках насіння каноли, трансформованих ррАвВ7319 (АпО905 уз і Іїп0р905-2 мг) і рорАВ7324 (АпОО5 м3 і Н20905 м2), накопичення транскриптів трансгенів Н20ОО5 або
Їа0р905-2 значно нижче, ніж накопичення транскриптів трансгенів АпО9О5. Відмінності, які спостерігаються в накопиченні транскриптів варіюють від З до 20 разів. Фіг. 23. Таким чином, недостатня експресія Н20О905 і І п0905-2 може пояснити неможливість детектувати поліпептид і відсутність фенотипу, пов'язаного з даними генами.
Приклад 13: Експресія РТО дельта-9У-десатурази під управлінням альтернативних промоторів
Шляхом застосування інших ділянок регуляції транскрипції для експресії генів, які кодують білки прерві-2, Н?р0905 і М90905, можна додатково збільшити вміст вказаних дельта-9- десатураз в канолі. Ідентифікація і застосування ділянок регуляції транскрипції, які забезпечують експресію на більш ранніх стадіях розвитку і протягом більш тривалих періодів часу, може призвести до збільшення рівнів гетерологічних дельта-9-десатураз в насінні каноли внаслідок стимуляції стійкої насіннє-специфічної транскрипції гетерологічного гена на ранніх стадіях розвитку насіння. Приклади таких ділянок регуляції транскрипції включають в себе, без обмеження, промотор /КС53 (патент США 7253337) і промотор ЕГАЕ 1 (патент США 6784342).
Вказані промотори використовують окремо, або в поєднанні, щоб управляти експресією експресійних касет їп0р905-2, Н0905 і М90905, наприклад, шляхом їх функціонального з'єднання з такими генами, які описані раніше в складі плазмід ррАВ7З319; ррАВ7З321; рорАВ7З324; ррдавВ7326; рравВ7328; і рРОАВ7330. Способи заміни ділянок регуляції транскрипції в плазміді добре відомі в даній галузі. По суті, полінуклеотидний фрагмент, той, який містить промотор РиРпах видаляють з рравВ7319, рравВ7321, рравВ7324, ррАвВ7326, ррдівВ7328 або рОАВ7З30 (або з попередніх плазмід, які використовуються для отримання ррАВ7З319, рорАВ7З321, ррАВ7324, ррАВ7З326, рОАВ7328 або рраАВ7330) і замінюють промоторною ділянкою І1КС5З3 або ЕБАЕ 1. Нові плазміди використовують для стабільної трансформації рослин каноли відповідно до способів, описаних в попередніх прикладах. Трансгенні рослини каноли виділяють і характеризують на молекулярному рівні. Визначають накопичення отриманої дельта-9У-десатурази і ідентифікують рослини каноли, стабільно експресуючі дельта-9- десатуразу.
Інші модифікації ділянок регуляції транскрипції з метою підвищеної експресії дельта-9- десатурази включають в себе заміну існуючої послідовності Ко7ак будь-якої з послідовностей, описаних в таблиці 17. Конструювання альтернативних послідовностей Козака і введення їх вище за ділянку початку зчитування дельта-9-десатурази здійснюють за допомогою стандартних методів молекулярної біології. Синтетичні полінуклеотидні фрагменти синтезують і клонують вище послідовності, яка кодує дельта-9-десатуразу, за допомогою методів, відомих в даній галузі. Оточення старт-кодону впливає сильним чином на рівень експресії трансгену.
Модифікація послідовності Козака з отриманням послідовностей, перерахованих в таблиці 17,
Зо підвищує рівень експресії гетерологічної дельта-9-десатурази.
Таблиця 17
Послідовності Козака, які вводять вище гетерологічного гена дельта-9-десатурази, з метою збільшення експресії
Приклад 14: Конструювання і синтез генів дельта-9-десатурази Неїїсомегра 7єа йі
І ерюозрпаєтіа подогит
Щоб досягнути підвищених рівнів експресії гетерологічних генів в рослинах, модифікують стратегію оптимізації кодонів, описану в прикладі 2, і, використовуючи нову схему конструювання, отримують ділянки гетерологічних генів, які кодують Н:09О5 і ГпреО5-2.
Вибір кодонів здійснюють за допомогою таблиці, яка містить розраховані зміщення кодонів в передбачуваній рослині-хазяїні, якою в цьому випадку є канола. При конструюванні кодуючих ділянок з метою експресії в рослині генів дельта-9-десатурази, визначають кодони, переважні рослиною насамперед ("першого вибору"), і використовують їх приблизно у 9595 випадків.
Кодони "другого вибору" використовують економно, з частотою приблизно 595. Відповідно, конструюють нову послідовність ДНК, яка кодує амінокислотну послідовність дельта-9- десатурази, де нова послідовність ДНК відрізняється від нативного гена дельта-9-десатурази внаслідок заміни кодонів на переважні рослиною насамперед і другу для кодування амінокислоти в кожному положенні амінокислотної послідовності. Потім нову послідовність аналізують на наявність ділянок ферментативної рестрикції, які можуть створюватися в процесі модифікацій. Ідентифіковані ділянки ферментативної рестрикції потім видаляють шляхом заміни існуючих кодонів на переважні кодони першого або другого вибору. Також видаляють інші ділянки послідовності, які можуть впливати на транскрипцію або трансляцію гена, який представляє інтерес, особливо високостабільні стрижневі петлеутворювальні структури.
Кодони переважних виборів (першого і другого виборів) визначають виходячи з генетичного коду каноли з використанням таблиці зміщень кодонів, складеної з послідовностей каноли, які кодують білки. У колонках таблиць 18 і 19, озаглавлених "95 в нативному гені", приведені розподіли (у 95 від використання всіх кодонів для конкретної амінокислоти) синонімічних кодонів для кожної амінокислоти, виявлених в кодуючих ділянках Вгаззіса париб5 (каноли). Нові послідовності ДНК, які кодують, в основному, амінокислотні послідовності дельта-9-десатураз
М. агізеа, Н. 7леа і Її. Модогит, конструюють з метою оптимальної експресії в канолі, використовуючи розподіл переважних кодонів першого і другого виборів, виявлених в генах каноли. Конструювання оптимізованих для рослини послідовностей ДНК починають зі зворотної трансляції білкових послідовностей 5ЕО ІЮО МО: 12 (М. дгізеа), «ЕО ІЮ МО: 13 (Н. 7еа) і ЗЕО ІЮ
МО:14 (С. подогит), використовуючи отриману таблицю зміщень кодонів. У колонках, озаглавлених "95 в оптимізованому для рослини гені", приведені переважні кодони і частота, з якою їх включають в конструкцію гена дельта-9-десатурази. ЗЕО ІЮ МО: 44 і 5ЕО ІЮ МО: 45 описують нові канола-оптимізовані нуклеотидні послідовності десатураз Їпре05-2 і Н?29О5, відповідно. Вказані нові канола-оптимізовані послідовності означають І п0905-2 у3 і Н:ХБ905 м3.
Таблиця 18
Кодоновий склад ділянок, які кодують білок Н;ХЮ9О5 Порівняння нативної ділянки, яка кодує десатуразу Н 7еа, з оптимізованою для рослини версією
Число ч у у Склад, о, Число ув у Склад, - спо ву оптимі- оптимі: екомендо- - Число| у У. оптимі| рекомендова
Амі- у » У зова- | Р енд Амі- у нати-| оптимі р Ленд ноки-| КО" | нати-| натив-| зова- ному ваний для | ноки-| Кодоні нати-| вно-| зовано, сРано| НИЙ для слота дон вному ному ному для оптиМміІЗОВаНОЇ слота вному| му му для му для оптимізовано гені гені для рослини для рослини гені гені рослин рослин Ії для рослини росли- гені ПОСЛІДОВНОСТІ и гені и гені | ПОСЛІДОВНОСТІ ни гені (ЗсСА| 4 /114| 1 | 29 | 00 (| (СТА | 2 /|591| 0 | 00 00
АІА |0ССЇ 7 200 0 | 00 | 00 (| сто | 8 2351 0 | 00 | 00 ( (А) ЇасоЇ 8 |229| 0 | 00 1 00 | ІБО |СТа | 14 |412| 0 | 00 | 00 Яі (о ст" | 6 |7176| з4 |ло0о| тл000
ІдсА| 1 | 77 | 0 | 00 | щ.00 (| ІТА | 2 /|591| 0 | 00 00
Ітта | 2 /|591| 0 | 00 00
АНС ее Аа а Твео ВУ оо (в) бас) 5 / 3851 0 1 00 | 00 Цю сов! о |о0) 0/0 | осо |М Ат в |мюо)| в | мо бо нов в но в Нв в вв я Я ди ними кт Тл Мт (я) (тт | 4 |167| 0 | 00 | 00 (м |ААТІ 5 |278| 0 | 00 | 00
Діда нше шшшетшшши п шше РВО |ССС | 5 Щ|313| 0 | 00 | 00 ц( (0) |САТІ 9 |з360| 23 | 920 | 1000 |) |сса| 2 |125| 0 | 00 | 00 (
Ісст | 8 |500ї 0 | 00 00 (с) тат! 0 | 001 о | 00 | 00 | дос у| 2 |125| 0 | 00 | 00 (
ІТАА/ 1 /1000,| 0 | 00 | 00 (| ІАсСТ | 1 |631| 0 | 00 00
ЕМО |ТАа| 0 | 0001 0 1 00 | 00 |ЗЕН |ТСА | 1 |63| 1 | 63 | 00
ІТ5А| 0 | 00 | 1 | ло00| л000 (5) |тос | 6 |375| 0 | 00 | 00
Гід ншитинви нш г лтш ши ю ши се | з Щ|188| 0 | 00 | 00 ( (0) |САс)| 4 |667| 0 | 00 | 00
ДЯ тв тв нг Мн НИ я ІАСА | З /|167| 0 | 00| 00 (Е) 16 тНнА ссаА| 8 /400| 20 | л0о00| л000 (7 |АСеу| 4 |222| 0 | 00 | 00 сім І8асЇ 6 1300; 0 | 00 | 00 | АСТ | 4 |2г22| 0 | 00 | 00 ( с) |вов| г | тою) о) ою | со му те мм м) юю оо плини пиши шини пиши пишу ешЕ ши ВШ ЯНВ ХИТ ШИ (0 (ТАТ | з |2го00|Ї 0 | 00 | 00
САТ| 4 |26,71 0 | 00 | 00 | СТА | 0 00; 0 | 00 | 00 (
АТ З / 150 1 | 50 | 00 |маІ |стс| 5 |263| 0 | 00 | 00
ІЕ (І) М (ста | їз (684, 0 | 00 | 00
АТт| 7 |з3501 0 | 00 | 00
Всьо- Всьо- сере те, 17 гер ре Го
Таблиця 19
Кодоновий склад ділянок, які кодують білок Ії п905-2
Порівняння нативної ділянки, яка кодує десатуразу І Модогит, з оптимізованою для рослини версією
Числоу| 9у с Числоу| 95у Скпад,
Число ги оптимі- | оптимі- клад, Число ги оптимі- | оптимі-| Рекомен-
Аміно- у з У зова- зова- рекомендо- Аміно- у » У зова- | зова- дований для кис- |Кодон | нати- натив- ному ному ванийдля | кис- Кодон | натив- нати- ному ному оптимізо" лота вному ному для для оптиміІЗОВаНОЇ лота ному вному для для ваної для гені гені рослини| рослини для рослини. гені гені рослини|)рослини рослини - : ПОСЛІДОВНОСТІ : : пОСЛлІДО- гені гені гені гені вності
ОСА | 3 | 94| 0 | 00 | 00 | СТА | 7 1156! 0 | 00 | 00 лІА засос | 9 |28л| 0 | 00 1 00 | сто | ля (зл; 0 | 00 | 00 (4) (оса | 121375| 0 1 00 | 00 |в |Ста| 7 |156| 0 | 00 | 00 Р/ ст | 8 12550| 32 | 1000 | 000 100
АсА | 4 |ї38| 1 | 34 | 00 | ТА | з 167| 0 | 00 | 00 се | З |103| 28 | 96,6 | 1000 - | та | 9 200, 0 | 00 | 00
НС А КАН я «т- сесі| 8 276 о | 00 | 00 Дю со) 5 |та о | оо оо м Аа) в |мо| в | мо) юю ни ин р и я т пли и пт рен (є (тт | 4 2001 0 | 00 | 00 |/ (М ГААТ | 6 /500| 0 / 00 | 00 (
ДС ясних яв вх я нг я РВО |сосС | 8 |444| 0 | 00 | 00 ( (0) (САТ | 8 333) 22 | 917 | 7000 | |сса| 2 |пи| 0 | 00 | 00 ( сст| 5 278, 0 | 00 | 00 (с) |тат | 1 |г2го0| о | 00 | 00 | досі 8 |276| 0 | 00 | 00 (
ТАА | 0,00 0 | 00 | 00 | ст | 6 /207| 0 | 00 | 00
ЕМО (ТАС | 1 71000, 0 | 00 | 00 |зЕН |ТСА | 1 |34| 1 | 34 | 00 (ТаА | 0 | 00 | 1 | 1000 | 000 (5) /тос| 6 |207| 0 | 00 | 00 са | 7 |гмл| 0 | 00 | 00 (0) |сСАСу| 8 |444| 0 | 00 | 00 | ст | 1 34 28 | 966 | 1000 тин ши кишки шгя ли ши АСА | 11 1440| 0 | 00 | 00 (Е) 16 тнаА (у |Асау| 7 280 0 | 00 | 00 сім ї8ас | 16 |421| 0 | 00 | 00 (| АсСТ | 2 80, 0 | 00 | 00 б (в| |». ооо сю (ЛК ев| ю|юо| 5 юю оо ери
СО (ТАТ | 6 |353| 0 | 00 | 00 ) (САТ | 6 333 0 | 00 1 00 | СТА | 6 |176Ї 0 | 00 | 00
АТА | 4 |ї182| 1 | 45 | 00 |мАІ |сто| 10 /294| 0 | 00 | 00 іЕ(ФІАТо | 9 | 40,9) 21 | 955 | 1000 |М) |сте| 12 |3531 0 | 00 | 00
Атт | 9 14091 0 | 001 00 | ст | 6 Щ|176| 34 | 1000 000
Всьо- Всьо- бебі! || | 771017 рів |і;
Синтез фрагментів ДНК, які містять 5ЕО ІЮ МО:44 і 5ЕО ІЮО МО:45, здійснюють Рісозогірі і
ВіІсе Негоп ВіоїесппоЇоду. Потім синтетичну ДНК клонують у векторах експресії і використовують для трансформації каноли, в основному, за способами, описаними в попередніх прикладах.
Приклад 15: Модифікація М- і С-кінців з метою збільшення накопичення поліпептидів ацил-
СоА десатурази в рослинах
На накопичення і стабільність мембранозв'язувальних білків в ендоплазматичному ретикулумі (ЕК) можуть впливати мотиви і модифікації на М- ї С-кінцях амінокислотних послідовностей. Камій апа Носрзігаззег (2008) Маї. Кем. Мої. Сей. ВіоІ. 9:679-90. Зокрема, показано, що М- і С-кінцеві мотиви і модифікації модулюють накопичення і стабільність ліпідних десатураз в грибках і рослинах, а також в тваринах. МсСагіпеу еї аї. (2004) Ріапі У. 37: 156-73;
Мгіаці еї а. (2000) Ргос. Маї!. Асай. 5сі. 0.5.А. 97: 8883-8.
Додавання епітопного маркеру Мус або гемаглютиніну (НА) до М-кінця ЕАЮ2 або БАЗ значно збільшує рівноважний рівень даних ферментів в дріжджах. О'Оиціп еї аї. (2009) Аррі
Місгобіо! Віоїеснпої 83: 117-25. Відповідно, додавання вказаних або подібних епітопів до М-кінця дельта-9-десатурази даного винаходу застосовується для збільшення експресії поліпептиду в рослині. Полінуклеотидний лінкер, який кодує маркер Мус (ЗЕО ІЮ МО: 46) або маркер НА (5ЕО
ІЮ МО: 47), клонують на 5'-кінці послідовності, яка кодує дельта-9-десатуразу (наприклад, нН?2р9ор5, Мар9Ор5, Апрорвбі, І пр905-1 ії Ії п0905-2), у вигляді безперервної відкритої рамки зчитування. Отриману кодуючу послідовність клонують в рослинній експресійній плазміді з використанням стратегії клонування, описаної в прикладі 3. Нову плазміду використовують для стабільної трансформації клітини, матеріалу або тканини рослини Агабрідорвіб5 і/або каноли.
Трансгенні рослини регенерують з трансформованих рослинних клітин, матеріалів або тканин.
Трансгенні рослини виділяють і характеризують на молекулярному рівні. Визначають накопичення отриманої дельта-9-десатурази в насінні трансгенних рослин і ідентифікують рослини, стабільно експресуючі поліпептид дельта-9-десатурази.
Дані по експресії АпО9О5 в Агабідорвів і канолі (приклади 11 і 12) свідчать про значно більш високому рівні експресії цього конкретного ферменту десатурази в порівнянні з Н?209ОЗ5 і
Ї а0905-2. Таким чином, М- і С-кінці, які знаходяться поза основним доменом десатурази (який містить трансмембранні сегменти і консервативні каталітичні залишки гістидину) АпОеО5, повністю або частково можна використовувати для заміни еквівалентних залишків в десатуразах з більш низьким рівнем експресії з метою його підвищення. Відповідно, М-кінцеві залишки 1-68 і С-кінцеві залишки 281-455 АпреОр5 (ЗЕО ІО МО: 72 і 5ЕО ІО МО: 73, відповідно) повністю або частково використовують для повної або часткової заміни 68 М-кінцевих залишків (1-68) і 168 С-кінцевих залишків (281-449) їп10905-2 (5ЕБО ІЮО МО: 14) і/або 76 М-кінцевих залишків (1-76) і 60 С-кінцевих залишків (293-353) Н?0905 (5ЕО ІЮ МО: 13). Отриману кодуючу послідовність клонують в рослинній експресійній плазміді з використанням стратегії клонування, описаної в прикладі 3. Нову плазміду використовують для стабільної трансформації клітини, матеріалу або тканини рослини Агабрідорвзі5 і/або каноли. Трансгенні рослини регенерують з трансформованих рослинних клітин, матеріалів або тканин. Трансгенні рослини виділяють і характеризують на молекулярному рівні. Визначають накопичення отриманої дельта-9- десатурази в насінні трансгенних рослин і ідентифікують рослини, стабільно експресуючі модифікований поліпептид Н2БОО5 або модифікований поліпептид Її пр905-2.
Приклад 16: Модифікації з метою підвищення експресії мРНК ацил-СоА десатурази в рослинах
У даній галузі відомо, що експресію МРНК можна підвищити шляхом введення генетичних елементів, які стабілізують і які підвищують накопичення мРНК. Введення 5- і 3- нетрансльованих ділянок (наприклад, послідовності 5'- і 3-0ТК тютюну О5тоїп (І іш еї аї. (2003)
Зо Маї. Віотесппої. 21:1222-8) і послідовності вірусу мозаїчної хвороби тютюну 0 (Саїе еї а. (1987)
Мисієїс Асід5 Рез. 15:8693-711)), або інтронів (Коієї еї аї. (1996) Ріапі Мої. Віої. 32:393-405) в безпосередній близькості від послідовності, яка кодує Н;?0905 або І прероьі-2, використовують для підвищення рівня експресії трансгену в порівнянні з експресією такої ж кодуючої послідовності, яка не містить вищезгаданих генетичних елементів. Додавання одного або декількох з вказаних генетичних елементів в РТО десатураз проводять за допомогою відомих в даній галузі способів. Полінуклеотидні фрагменти, які містять 5'-нсетрансльовану ділянку, 3'- нетрансльовану ділянку і/або інтрон, додають в рослинну експресійну плазміду (таку як ррАВ7319, ррдвВ7321, ррАВ7324, рРрАВ7З326, ррдв7328, рРрАВ7330 або попередні плазміди, які використовуються для отримання рравВ7319, ррдАвВ7321, ррАВ7324, ррАвВ7326, ррдіВ7328 або роАВ7З30) за допомогою стандартних методів клонування. Нову плазміду використовують для стабільної трансформації клітини, матеріалу або тканини рослини Агабрідорвіб5 і/або каноли.
Трансгенні рослини регенерують з трансформованих рослинних клітин, матеріалів або тканин.
Трансгенні рослини виділяють і характеризують на молекулярному рівні. Визначають накопичення отриманої дельта-9-десатурази в насінні трансгенних рослин і ідентифікують рослини, стабільно експресуючі поліпептид Н:;ЯЮОО5З або І пр905-2.
Крім того, в даній галузі відомо, що гени дріжджових десатураз, такі як ОГЕТ1, є у високій мірі регульованими. Делеція послідовностей, які кодують трансмембранні ділянки, які є частиною домену цитохрому 65, зменшують стабільність транскрипту ОЇ Е1. Метшіа еї аї. (2003) 9. Віої.
Спет. 278(46):45269-79. Присутність вказаних послідовностей в ОЇ Е1 стабілізує мРНК.
Відповідно, введення послідовностей ОЇ Е1, які кодують трансмембранну ділянку і домен цитохрому Б5 в послідовність, яка кодує п0е905-2 або Н?0БОЮр5, використовують для підвищення стабільності транскрипту мРНК кодуючої послідовності, за допомогою цього підвищення рівня експресії і подальшого збільшення вмісту поліпептиду І преО05-2 або Н?0О905.
Химерну послідовність, яка кодує Їп0еОО05-2 або НО209О5, яка містить послідовності трансмембранної ділянки ОГЕ1 і домену цитохрому 65, конструюють за допомогою відомих в даній галузі методів. Отриману кодуючу послідовність включають в рослинну експресійну плазміду (наприклад, за способами, описаними в попередніх прикладах) і використовують для отримання трансгенних рослин шляхом Адгорасіегійт-опосередкованої трансформації рослин.
Трансгенні рослини виділяють і характеризують. Визначають накопичення отриманої дельта-9-
десатурази в насінні трансгенних рослин і ідентифікують рослини, стабільно експресуючі дельта-9-десатуразу.
Приклад 17
Застосування альтернативної 3'-нетрансльованої термінаторної ділянки для стабільної експресії дельта-9-десатурази в рослині
Внаслідок обмеженого числа доступних 3-01 В-термінаторів, для термінації транскрипції звичайно використовують 3-0 В-термінатор ОРЕ 23 Адгорасієтішт (АШОВЕ23 3-ШТК). Недавно було показано, що інші 3-ШТА-термінатори більш ефективно здійснюють термінацію транскрипційного зчитування в Агабрідорзіх5 Іпаіапа. Відповідно, З'ЮТК-термінатор фазеоліну
РПпазеоїй5 миЇдагіз (ЗЕБО І МО: 69) використовують в поєднанні з промотором фазеоліну
РІПазеоїйи5 миЇдагіз для зменшення транскрипційного зчитування вищих генів, і за допомогою цього зменшення транскрипційної інтерференції.
З'ОТА-термінатор фазеоліну РІіазеоїш5 миЇдагіз (РмРпаз З'ЮТК м) вводять до складу експресійної касети І пО905-2 м2 і до складу експресійної касети Н20О905 м2, раніше описаних в плазмідах ррАВ7321 і ррАВ7326. Відповідно дої способами, добре відомими фахівцям в даній галузі, полінуклеотидний фрагмент, який містить З'ЮТК РуРпаз мі, вміщують нижче гена
Їп0905-2 м2 з отриманням бінарної плазміди, ррАВ110110 (фіг. 4а; 5БО І МО: 74).
Полінуклеотидний фрагмент, той, який містить З'ЮТК РуРпавт мі також вміщують нижче гена
Н2О905 ма2 з отриманням бінарної плазміди рОАВ110112 (фіг. 45; ЗЕО ІЮ МО: 75).
Отримані бінарні плазміди перевіряють шляхом розщеплення рестрикційними ферментами і секвенування. Всі нові плазміди використовують для стабільної трансформації клітини, матеріалу або тканини рослини Агабідорві5 і/або каноли. Трансгенні рослини регенерують з трансформованих рослинних клітин, матеріалів або тканин. Трансгенні рослини виділяють і характеризують на молекулярному рівні. Визначають накопичення отриманої дельта-9- десатурази в насінні трансгенних рослин і ідентифікують рослини, стабільно експресуючі поліпептид Н»20905 або І пр9О5-2.
СПИСОК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
-1105 Бош Адтовсієпсев І1Є
Мек1іо, Апп 0 саспоєсе, рапієї 7
Тротраоп, Макк А
Мна15В, Текепсе А «120» ЗМЕНШЕННЯ ВМІСТУ НАСИЧЕНИХ ЖИРНИХ КИСЛОТ В НАСІННІ РОСЛИН -130»5 2971-р10092.105 -150з 05 61/358,314 «1512: 2010-06-24 -1605 78 «17025 РасепсІп уеквіоп 3.4 «-2105 1 «211» 44 «212» ДНК «213» Штучна «220» «223» Прямий праймер Маоде1гсазЕ «400з 1 чаачааєсса ЄдадсЕссуєс абссьсссссс адсассадаче єдас 44 «210з3 2 «2115» 41 «212з ДНК «213» Штучна «2202 «223 Зворотний праймер МоЗзавгїсак «4005 2 сесчадссад ссадссасяс дасссдачса сссдяддаасач чЧ 41 «-810з З «2112 1523 «212» ДНК «213з Штучна «22й» «223» ПЛР-ампліфікований фрагмент МарЗО5 «а0б0з З чаасссасачч ссЕсуссаєс сссессссаяся ссучадссая сеадсесЯссвв сссечаєсудче І-3в) асрассдасі ссаадсссає даддаасасс ааччзадссасч асядссадчдсаа дссдаяасасаєс 120 сссчадасас ссасчасасо саачаассодч сасазачсася ссаассудчес саасассасс 189 єссаєссссаЯає ссЯасЯассссе чдассЧддссес асасссасьс аседччадесссс ссессасадеча 240 аачасдассЯд басдаддсечЕ сЧЕссассас сссаасассу чессодччаає сСассаесуч 300 аачечадсісс сСдаасааасу ачесаасеч ссдссестяса сСесаассаєс сЯсасесаєс зво ссгачасЯясЕ аасеЕадчаааа сеЕсдсЧчдЧЕСЄ ассассчасе ссадЧдсссас ачсссясаса 420 ачасесодЧос ссодессава асссассесссЧ ссчесчєсча счесачеасс десчададес 480 ссаєсачцаєд дсоддсссаас чЧуссассЯясу сасассассд асасассчає ассесуачаачу 540 асссстассс адсссяасаад дадЕссссеусЄ асссасасає чодчасадчасд сесссдааче бо ачаассссаа чаадсададс сяасассдаса ссассуассі чаасчаччас сссЯясесЧчіса бо сбедЧдсадса ссчсаасьсс сьсаачсчсая ссасесссає дасссвсдвео ссесссасас 720 есЯасудссду сессеЧдсечЧ ч9сдЧассасе чдаддчадасьс саєссасуча часассессдае тво чЧЕЧЕСТсосе сЯсссадсад дссасесессо чсуєссаассс чессдсссас садсссаЧчса 840 ассачссссСс счасчасєсяс аасссаяассус десдассасує сассасачес ссаддссассе 900 ссачачачуд асассасаас сСЕссассася ачсссссЕєс ддастассяс аасчстаєсч 960 адсаяддсасса чсбаєсдчасссс ассаадсдді сааєссддчає ссучаацчсач сеЕсЯадссьсУ 1020 сссасаассї даадсауссс сассаааася ачасєсдачаа чуачасядсЯясс сачсаєчесучс 1080 ачаачаадссї сдассадазд сдсоассаачс ссчаєсадуд басссесссаЯ дадсадсьсс 11249 ссЯсЕЧссач ссачачаєсдас ЕссоЧєсЧадчс адіссаадаа соддаааччсс гЧдчаєсдсва 1200 ссассяддсЯдє саєссасзає чячссодУуєдасс ссаєсавоача ссасссечас дасададссс 1269
Есаєссаасеіс чдассассцус задчасусаа ссасаайсіс саасчдасдає чіЕссасаасс 1320 асіссаасус судсссасаас ссрядссссоча ссасясЯявЯає чадсчЕЕссд сяєдасудеєе 1380 чечачасеЧа часседдаад сосусссадЕ ссуаааасаа ччасЯясссса ассчесЯяссу 1440 авсссссоаЧча Саассдсаєс дЕсСсЯсадсЯда дсаддсаадс дассааччес діссачссса 1500 тЕссчдаддсЯдс ссаддссуся са 1523 «2105 4 «211» 1428 «212» ДНК «2132 Штучна «2202 «223» клон Мудпере, який не містить інтронів «40025 4 асяадссссдяс саєсеЕєссьс субдссучач ссддссдссЯ ссеЕсссседа сЯадсасеасс Іе) чассссаачс ссаєсдаддаа сассаадддс Сасчасасса дсаауссяса сасссссчад 120 асассстасда сасісаадаа седадсаєсаад сасуєсаасе дасеЕсаасас сассеєсаєс 180
Есасесдбдс сссрчдастду всссасасос ассврассяда ЕЄссссссдса чеЕддаачаса 240 чссасасддч ссЯдссЯясссра ссассссаас ассуддсссоду чаассассдс сядссСассас 390 счассесдддад сссасачсьс дсасаачяссо кссЯсссСссЯдс ссаазаєсса сстсдссЯасе збо чЕсддсЯяссд ЧдсчосЯассЧа дадссссаєс адаєдуєдає ссаасяддсса ссяасдсасас 420 сассдасаса ссчатгассча чааччасссес сасесадесс дсааддудєсь сседсасеса 480 сасасчуддас дчасусссосс даадсадаас сосаадаадсе аддадссядсас счасаєсасс 54АО чассрдаася аччасссессЧє ЧСС садсассяса асЕсссєсаа чсЯдвдеЕваєс (де) гЕСавдусес ссЯарсосссс сасассісЯясу чсрЯЧчссссЯа десадададдсда ссасіачдадча 56о ччссЕСаєсс асччадаврає єссдсЯябасс сЕсЕссассо ачдсачуссас сесссЧасуьс 720 засеєсдсссЯ ссесассучсе сачедЧассад сесЕссася асєсдядсаассс ЧдссЯясдасдає 780 сасачесаєса сачсссрудс сасссібсдда чдадддасасс асаассесса ссасчачсес 840 сегссауасо ассуусаасдс сассччачсда Сассадсаєсу ассссассаа чеаддссаасс зо0 хачасссоЧча адсачдчсссчу Сессрдсссас зассьдаачс адссссусса ааасчачасс зео чЧачаачучас дсуєссачса дссдсадаач ааччсссчасс адаадедедс саачеседає 1020 сЧчачасасьс сессддадса усЕссссЯсс чдесесачесоуа асдасессяс гдчадсачісс 1080 аачаасучаа ачасЕсчдЧас сЯасадссадсс дасассаєсс асчаєсддєсаяад Єдассссаєс 1140 ааччассасс ссдаєдасад адсссссаєс аасісаусса сСедЧдсааччда сасаассчса 1200 аєссЕсаасч ЧчсаЯчЧЕЧЕрсСа саассасссс аасуссусьс асаасседсе сеЕсчасваєд 1260 счсадсЧдчасЯ ссссодсЯсСЯЧч счадссдсдаЧч деЕсдачаєссо даавадсадсус ссадесссдаа 1320 аасаадччасч ссЕсаассяс сассчасссо ссаядусаассе чсаєссЯасссу счечЧачЧчеЕЧач 1380 саадсчасса ачаєсассоса десечссссд дасасссада ссдсоаєсда 1428 «21022 5 -21125 1997 «2122 ДНК «2132 БПерхговзрнаєтіа подогат «4003 5 сссчасссає саасчсацчес дадсасдасад дЕСссседас сЯдуааачсяч чсадсуадсд бо саасусаасс аасдєсдадес адсесассса єсаддсассс сададсссвас ассссасасс 120 кссучдсссодє аєчЕсЧсдчсу дааєсудєдач судасаасаа Есесасасад дааасадеста 180 гсассасдає сСасоссааує ссЧчаааєсаа сссссассаа адддаасаза адссддадес 240 ссассдсадчЕе чдадсддссЯасс ссачаассач садаєссссес даддсьдсауд аасссадсас 300 чачсаєчдссє ссссассадуд седеєсЯссад сасдсададсс ассдчассссд адссссатсаа 360 чсачдссЯеісі сетаєддсда дсасессдда чоссаассяс аассссаацє асчаєсссаа 420 чЧаачссусас аєсасадаса Єдсссассас чсддссазас судсассадс асєчесаасьд аво чеесаасаяєс абсбесаєса ЕєсЯдсдєЧчес єсссЯассуддс сасЯчссЯяссу сесЕсСЕдчЧас 5і4О ссссссдсад сдЧдаздасся сеЕЧечсаЯдудс сассавсвас сасссссдда сЕЧчасстсад 00 баєсассясс ддасассаєс чЧіссссуддудс асасаадсса сасаасдсся чссессесс 6Б6бО чаччаєссьдд сесссЯяссоя єЕсЯдсдсвЯд ЄСФдседссЧач даєсссаєсе чдессодасоддад 720 ссуєсчассас сасясссасо ассастасас счасассаас ааччассссє асачсассоч 780 саадчдссЕс сессасачес ассєсяддаєо часддссаєч азасадаассе ссаачдсЯясає 840 счдссдсассе дасассассу асесдаасча ддассссЯс ЧчЕсЯссьддс адсасаачаа зо ссасаєсавая дссаєссасса ссабдадссє дасессрссо ЄссассяассЯя седабсесає 96о чеЕччдЧчасчає счддасчяддчЕЧч дсбссаєсса сясгдаЯасСаєс сессдбассє сосссдЯєсса 1020 чсачассасс ссесасЯсса асссаЯссбсас ссассочесе дадсдассадс сесссчасдча 1080 ссясаасьсе ссссуєбдасс асчссаєсас сЯясесЕсдес асссьсддад ачадекасса 1140 саасссссас сасчадеЕссс ссессдасса ссдсаасаячсс ассуадсачуєс ассадсасдча 1200 сессассазч гадіссарсо чоасеЕдеЕЧчад саачсссЯддс сесдсстсса ассссаадса 1260 чдЕсссЯасссс аасдааассд адааччадсся сдсссадсад ссссачаача адассдасса 1390 чазчасадсасс азасесЯчасеЕ дадчЕдЕссс бсеЕсадазссад ссясссЯєса сачааєаачЧча 1380 счастасчіс чЧдачсаччсса адаасаддсеся садЕСЕСсСасс десдссЯсса чесдессаЯассса 1440 сдасяЯдссасс чассесаєсса асчачсассос сяддсЯддсаач асясЕсаєса ададсадсяс 1500 сЧдсааучас чссассусса сЯсссвасдд сяддЕЧЕсвас ЕСссасссса асоддадссса 1550 саасевссьс Єсрассаєдча чоадчессЧЧсЧЕ сасссусоче дассасдаач седачаєсса 1620 чаадсдсдсі сачсЯдсдада асаадчасує сччачссьдоЯдсс ссудчасчася саччдсаассс 1680 аассассачу чсЕддсаасс ачассассаа дассдсчсаа сссасссача асдссачсчес 1740 адчсасачаєє чдчасссссає ссссасдчадс часчсасачадс ЯзЕсСсдассаЯс сесессссесє 1800 сччасучасач ачзсазсаєсс аассссьсадч счассЯяссач ааачсаєсає дуєссасчаєу 1860 сеЕсадссасч ссачаєддся гацчсссЯса чдссекссісд адсдаєбєдчуз баєсдаааачі 1920 адссьсасуд ссрачассаа чаасчаааас асссасчаєї сСсачааазаа аазааааава 1980 ааасссаяачя чададес 1997 «2105 Є «2115 39 «2125 ДНК «213» Штучна «220» «2232» Прямий праймер ГпазЕАроЕ «4002 6 ччаєссаєсда саддсссрсадда садсасєссса чаччаєаач 39 «21023 7 «211з5 38 «212» ДНК «213» Штучна «220»
«2232 Зворотний праймер ГпазЕАОК «40023 7 ссасччісаЧч ссадссасус адссасадсос сссссзас зв «2102 8 «2112» 1370 «212» ДЕК «2132 БПересоврідекіа подогит «4002 8 ччасссасуд сддссЕсСЯЧа садсаєсссса чадчасаачч ссассрсЯясс дазаєссдасе 6о сасаєссаає ассаачаацчі аассссСеЕсачЧ аассддсаса ачаачасааа ссддсссаас 120 асчасячссуч садЧеЕдсссає асессясессс ччассссасс сСаасасясас сасчассасес 180 асасчассса сЯясссаєсся дбссуссссЯ басстассссоб дсасадесес содадасаєсаса 240 часоачатаєс аєсдассасу чЧачесаєсуєс адсвасссся ссосдестасс дстасясева зай
СбЕсссрадссі бсасачдсдас сддадчесаєс саачдсадьд сЕсчаєдчсєу дадсдсааає 360 сассадсдсесс ассассчатч дассдасаса абєдаадчасєс ссврасєссЯяєЄ басасасдде 420 стасвраєссс саяасасаєсач асчддасддсра ссдаасадсуд асссесазаді сааачассдча 480 асачасчєса чедчдакєсссуа сачсчтасссс ЧчеЕсЯсадссі ддсадсасаа чсаскасадс 540 аачдсачассеадс сдЕссуссде чесддасасєсьс сссаєчаєся садссаддссе сддчасаддада бо чаєсчадсЧочу чачассьсЯя ссасчссдас ассасссчач сЯсассссЯас ссадсадасд 5бо асассссЯсЯ сдаасьсьссо сядсядсаєсод ассудсчадс адссуєссЯа суасачасас 720 асачссссчач ассасуєссс дасадсЯясьЯ дсаасчзаєсуу чачааччаса ссасаасесс 780 сассасдаає Єсссаадсда ссассусаас чЧедЧассассе дасассааса сдассстасес 840 азасчучсіса сесассесосе сьсссбсддс сесесссссос ссасасассс дсссаааасс Зоо
БЕссуддесса аєчачаєеЧа заазачччсуд сгдсаасаас аасаааааус ссесдчасаач зе азаадсясісад чассєчЧаєьсдя чоддсссассос сЕСьЬвссаас сесссуєссає ассасадчас 1029 часєсссазвд сдсуєсдсаа адчадсссудс чачаєдссуЯя ссЧсеЯассЯяас ачасасчЧчась 1080 сасчасяєса чссадсссає бдаадаєсас сссуддадаса чзчачсссчЧчає ссодачьяст 1140 чЕчддчсааач асдудасачуч чаєчессаас ддачадечсає асуадсасад Єааєсдсудсу 1200 саєсааєсссЯдс ЄдЕсчасаає дачдчдасддча чсдссСсадач чЕсачасадча часдчЧчаЧчЧчЕд 1260 тЧддаачаадс адачачеядча бЯчСсСссСгзаддо аададсуаса ССсседадаса дассасясау 1320 чеЕдчачачаї саЧссЗЧачачч чассЯасадсо дсЯсадсьаа сечассабоау 1370 «2105 9 «2112» 1428 «2179 ДНК «2132 МадчпароксНе дківеа
«40025 8 асаддстссяс сассессссс сЯасЯдссЯячач сЄсаЧчссодссу ссеЕсСсссвда сддсассасе бо чассссаадчс ссаєдаддаа сассаадччас басдасуєса дсаадссдса сасесссачач 120 асасссаєсда сасссаадаа седдсаєсаад сасдссаасе дасеісаасас сасесесаєс 180 сесдесеЕдЧЕде сесечаесЯЯ ссесаваєсс асссассчоач ссосесвсчса деддзадасу 240 чесечсасячя сЕдссуссвба свсасстсаас ассддессду чааєссассдс суддасвассас зоо счасєссдуу сссасадссс дсасааддсс ЕсдсЕсссдЯдс Єсааааєсьа сеЕсдессдасе 360 чесчадсЯассЯ чдЕдссассча чддасеЕссаєс ачаєчасЯді ссаасччеіса ссчсчсасас 420 сассчасаса ссечаєассуча чдааччасссс сасьссадссс дсаадчуєсо сесбдбсассса 480 сасаєдучає ддаєдсьссі дазадсачдаас сссаачааус адддссдсас сдасаєсасо 540 чассЕЧчаася ачдасессЯяс єЯдЕссассвсоад садсассяса асесссссаа чЕЧЕЧСсСстасс І-ике) сссаєсдасес гсЯасесвсссс сасасссЯаву адссаддсесссЯ десочочачсЧа ссассачача бво часЕссаєсеЕ асдчададрає єссдсЯясЯасс сЕссгсєсо адсаддссас сЕвєссдЯдсЧвс 720 аасесаЯасЕса сссастчасЕ садедЧассадч ссссЕсчасу аєсодсаасес дссЯасчєдає 780 сасассаєса садсссодуЧї: сасссесСоада чадддасасс асаассссса ссасчаядчЕсес 840 сесессяддасеь ассаяасаасаяс саєєсчачсяЯд сассадсаєд ассссассаа чеддЕсааес 900 бачаєссядда адсадсссуду ссеЕбдсесас аасстдаадце адсесссусса ааасччачаєє 960 чачдаачдадас чесдЕссадса чсгЧсадаадч аадсссчасс ачаачсчече саачессчає 1020 гЧчачастаєсс ссгсоададса дсесссесЧєсс ЧЕсачссод аєдасеЕссдЯдє сдадсачесс 1080 аадаасядаа аучсссЯдчасє сасачсьясс чдасоссаєсс асчаєдессоу Едасессаєс 1140 ааччассасс седдсадЧдсад адсссьсаєс аасссудсса ссддсазаудча саяасаассдса 1200 асссєсаасу чечасЯссса саассастос аасассадсес асаасстдеє сссчассаєд 1260 счеЕчсЧачсЯ сЕссЯасоєбЧд сояодссдсдад чЕсСдачаєсі дааадсясудс ссадеЕссяаа 1320 аасааччася Ссссаассяє сЯябеЧасссті ссдддеаасс дсаєсуєсся саяасЯадасачЧа 1380 саадсчасса ачдессЯчесса десеЧЕсссу ддбдсеЕсадд ссосясда 1428 «210з 10 «-211з: 1062 «212» ДНК «213» Не1ісоуетра хга -4005 10 асачдсЕссаа асасаєсуда чсдаєсдчеЕдаас ададсдсссс Єсчтачдачеча сдсадсдасд во ссяддассьду содседессас десдссьдсу садаачдчсьд асаасаддсс саадсаасеад 120 чедсЧЧчадча асасассасе дЕсСстсаясСсає сессасссач сядсЕсьЕса суддачаєсає 180 седсЕСсССсЕ ссссадссаа асудсадаса часасаєсся сстасаєссє Ячдсаєдессасєс 240 сссаячасесу чсаєссасядс Єддачсасає сядсссдсдда сссасаачіс ссасааачсе збо аааєсчесскс сссдчадеЕсає сседдЕсаєс ЕсЕаасасач єдасаєєсса ядасассЯсе 360 асадассЯдчу сядсосчасса ссдаясагусаї сасаачсасс соодааассча счесдассеє 420 саєаасясда сссдаччавс ссесессест сасаєссчЧчсє чдассЯдсісЯасЄ саддааасає 480 сссачассіса адчачаадчч саачучассс часаєчачсео асссасссуєс єдасессаєі 54аО сЕСаЯЧЯдсЕсСс ачаазаааєа стасссдаєс ссчасчуссст сдасьсдссс сасдаєсдесс во ассчєчавсс ссдЕдсасс седоЧчаєдаа асссодасса астсаєесьї єдеаЧдеЧчасе ве асадссссЯясо асчсчеЕссасє ссгазасчсдч асчсучсссЯя ссаассссдс сасесасаад 720 гЧдаЧдчдадЧдаса ачссссасча сааазадсаєє аадсссссяЯя аазасссЯяєс дассассавад 7во сссасесссу чдадааддаєс ссасаассас сассасассе єсссЕсдддча ссасаааасс 840 чесдадссдд чдсаасаасаа асссаасссс ассассассь ссСассаассс ссесдсгаза зо аєсчадесода сеЕсСасчассс чаачасадсу сссдаєсчдаса ссчдссаадчаа сааддсдчаза 960 сусасвродчед асядесссса ссассьасоу чассдЧчудчау асуаааасса аєссааадаа 1020 чаааєсчасу ссяссассач аассаасссос аадччасчасс за 1062 «-212з3 11 «2115 1350 «2122 ДНК «213» ПербоБрнаекіа подокит «4002 11 асчасадсес сдчасачсасє сссачаччає ааддссассї судссдаааєс чдасссасась І23) саасаєсаадч аадсаасесе соаочаасьдч басаачаача сааасечуєс саасасчасч 120 сеЕЧччЕЧЧдсЯас всасасссяс ссеЕсСудассс сассіаасас дсассасяасс асссасасча 180 ссрасастса сеча Ессує ссгдрасктас єсссдсасад сЕбссодсає сасадучсоача 240 баєссасєсддас саєддачеса ссадсауссас гЕссясесясо сассяссася сссаєсссса зо чссЕвссасач дсуссачадс саєссазачЯчє ачсдсесчає сдсччачсЯс ааассассяс 36о чдессассасс часядассуа сасааєуаач часссстасе ссабвсаєдся садоссаєка а20 сссссясаса ссудасяддасє ддсассудаас адсчасссоса аачссааачдуд ссдчаасачас 48о чесачсдаєс ссчасадсда ссссЯїсодсба чсссдусаус асааусасса счасаачсас 540 ссасечсссЯя ссчечечддає ассссесасу ассдсадссодя дссссадЧдася чачачассау 200 сччЧЧдчадчсс седЕсрасус сЯядсавєсасс счачеочсЯсс ссусссадса часдчасаєьс ево счсЯдсдаась сесеісасяса сЕсачаєссячс чадсачесяє ссчасчасач асдадсасчссе 720 счадассася СЕЕсдЧдасаус чЕсадусаасу аєдчудЧчадаачу дабаєсасаа сссссассас 780
Чааєсссссаа дсчаєсавсу саасусчаєс асссдудсасс аабасчассс гбассаааєдд 840 сесавсрассе ссЕссссоесе сядсссссбс ссссссадсає асссЯядсесаа аасссссесад 900 їссаасчдача ссчааааачч чсУчссЯсаа саасаасада аачссссууа саачаачсяс 960 ссаччасссо аєсддддесь асссектесес саассссссу ссасассуєд дчасчасьсе 1020 саадсчсЯсс дсааачачес сЯчсчачасаЯ ссЯддссЯдссЯ ссЯасадачасаєЄ чдасеєсасчас 1080 чЧЕсадссадє сбасєдаада сассссуча часаччачісє Счасссодчач сЧсодесдЧЧес 1140 ааадасдуда садчдчаєсчсс саасодчадчус деасаєдадс асадсаасдсе дасачдсаєсаас 1200 срадссассда саасчадччє чачачсдссс адчадчєддас аччаччсоча ч«абдЧсодаад 12650 аадсачачач сачасчессс аччадзададс часаєсеєсда дасачачсєсас дсадасоаозчад 1320 ачучссдассЯч ачачадчесас: чассдсасад 1350 «210з5 12 «211 475 «212» Білок «213» Мачпарог:спе чківеа «414005 12 мес А1іа Бек Бет Бек Беї бек Ма1ї Рко бій Ппей А1ї1а діа А1їа Рре Ркго 1 5 10 15
Авр сіу Тк ТНК Авр Рре цув Рко Меє Ак Авп о Тік Ппув а1у Тук Авр
Уаїі Бек ПпЦувБ Рго Нів І1е Бех бій Тптг Рко Меї тТйх печ цув Авп Ттр
Нів цув Нів Уа1ї Авп Ткр Пец Авп Тк Тпг Ре І1е Ппей ЕБе Уаї Рхго бо
Гец Аїа сіу цец І1е Бек ТЕ Тук Тгр уа1ї Рко Пезп с1п Тер цув ТЬк 65 70 75 во
А1ї1а уа1ї Ттр Аза Ма1ї1 уа1їі Тух Тук Рпе Авп Тк с1у цец біу т1е тТвг в5 90 з6
А1ї1а біу тук Нів Аг4Я4 їей Ткр діа Нів бек бек Тук ПЦув А1а бек Іеч 100 105 110
Рго пеп пув тТ1е Тук Пейп А1а А1а уаї б1іу А1їа сі1іу А1а Уаї с1ц ау 115 120 125 бек І1є Ага Тер Ттгр бек Авц бСіу Нів Ахд А13а Ніз Нів Акад Тук Тік 130 135 140
Авр Так бій ув Авр Рко Тук бек Уаі Акуд цуз с01у Без Пеп Тук Вег 145 150 155 160
Нів Меє с1у Ткр Меї печ пец ЦцувБ біп Авп Рко Пув ЦувБ біп с1у АкФ 165 170 175
Тих Авр І1е ТЬБхІ Авр Мей Авпо обі) Авр Рко Уа! Уа! Уа1! Ткр віп Нів 180 185 190
АкЯд Авп о Ре Без Ппув Сув Уаї І1ї1е Рре Меє Аза теп уа1і ЕРБе Рко Тік 195 200 205 печ Уаі1 Аза сз1у Гей 01у Ткр біу Авр Тут Ткр сб1у сіу Ріе І1е Тук 210 215 220 -1у б1у І1їе Гей Акд Уаії Рібе Рре Уаї біп біп А1їа ТБк РБе Сув Уаї 225 230 235 240
Авп бек ем АТа Нів Ткр Пем біу АБр біп Рхто Рре АвБр АБр АкЧ АБО 245 250 255
Бек Рко АкЯд АвБр Нів Уаї І1е Трх А1їа Пец Уа1ї ТЕ Пец с01у са1ц 01Уу 260 255 270
Тук Нів Авп о Рпе Нів Нів сі) Рре Рко бБехт Авр Тук Акд Авп А1а І1е 275 280 285 січ Тер Тук біп Тук Авр Ркго Трг Був Тктр бек І1е Ткр І1е Ттгр цув 290 295 300
Сбіп реп со1у Пец Аза Нів Авп цеп ув й1п Рре Акд бЗіп Авп сб1и І1е 305 310 315 320 січ був з1у Акд Уа! біп біп еп Сбіп ув цув Пейп Авр б1іп Був Ака 325 330 335
А1їа пув без Авр Тер 01у І1е Рхо Бей бі біп Гей Рко Уа1! МУаї бек 340 345 350
Тер Авр Авр Рпе Уа1ї біц біп бек Був Авп сбіу Був Аза Тер І1е АдІ1а 355 360 365 чаї А1ї1а біу уУаї І1е НіБ Авр Уаї СсС1у Авр Рре І1е Був Авр Ніз Рго 370 375 заоб біу б1у Акч А1а Ппеч І1їе АБп бек А1а І1е с1у цПув АвБр Аа1іа тТпх А1а 385 3290 395 400
І1їе Рре Адп сіу сіу Уа! Тук Авп Нів Бек Авп А1а А1їа Нів Авп Ге 405 410 415
Те Бех Тит Меє Акд УМаї сі1у Уа! Пеп Акч біу с1у Сув біч Уаї с1іц 420 425 430
І1е Ткр пПув Акдч Аза Сіп Бек бій Авп був Авр Уа1і Зек Тік Уа1ї Уа1 435 440 445
Авр бек бек с1у Авп Ахч І1е уУаї Ак Аза сіу с1у с1іп А1їа Трк пу 450 455 460 уа1ї Ууаї сбіп Рко Уа! Рго б1у А1ї1а біп Аза А1а й 465 479 а75 -210з» 13 «2115» 353 «212» Білок «213» Не1ісоуекра хеа «4ай0з 13
Мес діа Рко Авп о І1е бек 214 Азр Уаї Авп біу Уаї Бец Ррбе сій Бек 1 5 10 15
Авр Аіїа А1їа Тік Рко Авр Беч АТа Пецп бБет ТБт Рко Рко Уа1 біп Був зо
А1Тїа Авр Авп Ак Рко пув бів Пец уа1ї Тгтр Акуд АБп І1е Пец Пемп РБе
Аїа Тут цес Нів цец діа А1а тец Тут біу біу Тук Пец Рбе Пец РБе бо
Бех А1а Пув Ткр б5б1п тТБкЕ Авр І1е Рье Аіа Тук І1їе цей Тук Уа1ї І1е 65 7о 78 8а
Зек сіу бец сі1у І1е Тих Аїа біу А1їа Нів Агуд Пец Тер А1а Нів цув 85 во 95
Бек Тухкх цув Аїа цпув Ткр Рко цей Акд Уа! Т1е теп Уаї І1е РНе Авп 100 105 110
Тик Ууаї А1ї1а Ре біп АБр Аїа Аїа Мес АБр Тер А13 Аку Авр Нів Ак 115 120 125 мес Ні Ніа пув тТук Бек бій ТБ Авр Аїа Авр Ркго нів Авп А1а тТіг 130 135 140
Акч сіу Рпе Рре Рре бек Нів І1е б01і1у ТкЕр Гей Пел уа1і1 АкчЧ Гув Нів 145 150 155 160
РКО Авр тез пув січ Пув б1у Пув біу пей Авр Мес Бек Авр Гез Геч 165 170 175
А1а Авр Рго І1ї1е Гей Акуд Рне біп був Був Тук Тук Пец І1ї1е Пец Мес 180 185 150
Его пе А1а Сув Рое уаї Меє Рко ТПк Уа1і І1е Рго Уа1 Тут РіНе Тгр 1935 200 205 сіу Бій Так Тер ТБх Авзп Аза Рпе Рпе УуУаї А1а А1їа Мес Ре Ак4д4 Тук 210 215 220
А1а Рре І1е Пец Авп уа1ї ТНК Ткр о тей Уаї Авп бех А1а А1ї1а Нів Буз 225 230 235 240
ТЕр З1у Авр цув Рко Тук Авр їув бек І1е Пув Рко Бек бі Авп Гей 245 250 255
Зек Уа1 А1їа Мес РБе А1а пе сіу січ с1у Рре Нів Авп Тук Нів Нів 260 265 279
Тік Ре Рко Тур Авр Тухг Пцубв Тік А1а сій печ с1іу Авп Авп Ппув Гей 275 280 285
Авп Ре Тк Тк о ТВк Ре І1е Авп Рпе Ріе А1а Пув І1е сіу Ткр Аїа 230 295 300
Тук Авр цей Ппув Тит УМа1 Бек Авр Авр І1е Уаї цЦув Авп Ак Уаі1ї Пуз 305 310 315 320
Ак ТЕ б1у АвБр с1у Бек Нів Нів Геї Ткр с1у Тер бі1у Авр бій Азп за5 330 335 сіп бек Ппув аТиа біч І1е Авр Аза А1їа І1їе Акад І1е Ап РрРго Пув Авр за 345 350
Азр «210з3 14 «211» 449 «2125 Білок «2133 Персовріаетіа подохит «100» 14
Меє Аїа Аза Пец Авр бек І18е Рко п01ц АБр Гув Аза Тіг бек бек Гув 1 5 10 15
Зек ТБЕ Нів І1е сіп Тук біп біш уаї Тк РБе Аку Авп Ткр тТук був 29 25 30 пув І1е Авп Ткр Гез Авп о Тк Тк Гей Уа1! Маї Ппей Т1е Рко діа Гей а1у Геч Тук Пец ТІ Аку Тк ТБк Рго Гпец Тіт АкЧ Рео Тк Ге Т1е бо
Тер бек Уа1 Пе Тук Тук Рпе Сув Трк А1а Ре с1у І1е Тк біу Ф1Уу 65 70 75 Ед)
Тук Ніз Акд їецп Тер бБег Нів Акуд бек Тук Бек Аза АкЯ Пец Рко Іїей 85 20 5
АкЯ Пец Ріе Гец А1Тїа Рре Тпх сіу А1їа С1у Аза Іїе сбіп біу бек А1їа
Т00 105 110
Аг Ткр Ткр Бек Аза Авп Нів Аку А1їа Нів Нів АкЧЯд4 Ткр Тік Авр так 115 120 125
Мес Пув АвБр Рко Тук бек уаї Мес Акд с1у цем Гей Рпе Бек Нів І1е 130 135 140 с1у Ткр Мес уаї Геч деп Бек АБр Рго Гув Уа1і Пув с1у Акд ТЕБЕ Авр 145 150 155 160
Ууаї Бек Авр Пеп Авр бек Авр Рхто Уаї Уаї Уа1ї Ттр сіп Нів Шув Нів 165 170 175
Тут біу цув Сув Пец Пец Рпе А1їа А1їа Тер І12е Ріре Рго Меє І1е Ууаї 180 185 190
А1ї1а зі1іу гец сіу ТЕр с1у Авр Тер Ткр сбіу б1іу цеч Уаі1і Тух Аїіа 01у 195 290 205
І1їе Ії1е Ак Аї1а Сув Рпе Уаї б5іп б1іп А1їа Тк РБе Суз Маі1і Ап о Бек 210 215 220 цец діа Ніб Тер ч11е с1у с) біп Рко Рпе двр Авр АкКд АкдЯд Тік Рго 225 23а 235 240
АхЧ о АБр Нів Уаї пем Тіт Ата Геп Уаї Тпг Меб с1у бі с1у Тухг Нів 245 250 255
Авп Ре Нів Ніаяа 210 Рре Рко Бек Авр Тух АкЧч Авп Аїа І1е І1е Тегр 260 265 270
Тук біп Тук Авр Рко Тік Ппуз Ткр Гец І1е Тук Пем Рпе Бех Печ а1у 275 280 285
Рко Ре Рко Пей А1ї1а Тук Бек пец цув Тіт Рре Ак бек Азп січ І1е 290 295 300 іп цув с1у АкЧ Пейп біп б1іп біп біп Ппув Аза пе АвроПув Був АхЯд 05 310 315 320
Бек с1іу реч Авр Ткр сіу Пец Рко Гей Ріе сіп їец Рко Уа1 І1е бетг 325 330 335
Ткр Авр Авр Ре бз1іп А1а Аку Сув Ппув бій бек о біу біз Меє Пец Уаї 340 345 350
А1а уаї Аїа сі1у Уаї І112е Нівз Авр Уаї бек сіп Рпе І1е січ Авр нів 355 36 365
Рко сіу сіу Акч Бек Пец І16є Аку Бек А1а Уаї! 41у цПув Авр с1у Тк 370 375 зво й з1у Меє Ріе Авп о бсіу п1у Уаї Тук бі Нів Бек Авп АТа АТа Нів дви 385 390 385 400
Тем Пец бек Тк Меє Ак4Я4 Уаї б1у уаі1 цей Акад б1у с1у біп 531 Уаї 405 410 415 сій Уа1 Ткр Був цув біп Аку Уа1 Авр Уа! реп біу Пув бег АБр І1е 420 425 430 їец АтЯд сіп Уа! Тк Акуд Уа1ї біз Агуд Печ уаї січ с1у А1а уаї діа а35 440 445
А1а «7102 15 «211» 1428 «212 ДНК «2132» Штучна «2202 «223» Оптимізована для кансли послідовность десатурази «400» 15 асддссадса чЕсссссаач сЯсЯдссачаа сссуссесчсач сссссссгда саддасзас І-33) часіссааас ссаєсчадчдаа сассааачядс бабсдасчссї ссааассьса саєссеєсьдаа 120 асасоцдаєда сеЕссудаадаа ссдадсасааа сасаядєдаасе дусеЕсаасас сасаєеєсаєє 180 сЕсСевеЕвБаСЕсС сасеєдачсеЧча чЧЕсСЧассьса ассесаєсуЧач ЕСсСсЕсСьЕссСа асадаааасєс 240 чсадедсаЧа сачсЕдесуєра стассеєсаас асеєдчасьсу ччассассас сддссассає 300 адаєсячсада сасаєссесс ссасаадасс адсесдсссс ссаааавсса сесссдссаяаса 360 чесдЧЕдсЕЯд чадссодаєсда адассссаса ачасяддсдча чсаасучаса сачачсасає 420 сасадаєаса садасасада чааадарссї басєсадеєда дчдаачучає: дессвасачде 480 сасасчадчеє чдчадавдсвссс чЧаачсачаас ссааачаадс аадучачучас чдчдасаєвсасе 5АО чаєссдаасаяч аддасссаді сачасоадЧЕсСсЯдЯд саасаєадда асеЕсссссаа чЧЕчЧЕчЧЕЧасс во
Ессаєдусес садесссссс сассссвЯрс дссдадсссЯда дасчдачача ссассдоадда бо
ЧчагЕссаєсі асучачудає сесчачачса Есе Ярсс ачсаадссас сЕЕСсЯєЯЧЕс 720 аасессассся сасаєсчддсі: єдЧаеЕЧаєссаа ссЯясссЧаєсу асадааасссо сссасаясдЧас 7во сасаядссасаа седсьсесЯЕ сасуссддЧЕ чаачдассаєс асаасесеса ссаєдчачеся 840 ссуєсачасі асадчаааєдо часєдадсуя сассадсасу ассссасдаа ч«сЧадЧадсаєс з00 сачаєеєсодда адсаасесчЧч ассрдсссас аассеісаачс аасссачаса чаасчачаса 960 чачазаучаа чадсссааса чссдсадаадч ааассудаєс ачаачачачс чааасссчає 1020 сададаасас сяссудаааса асссссеусе ЯдечеЕсесууЧЧ асдассссЯс сдаасачеса 1080 аадаасчадса аддсасачає сасьЯдссЯсі часаассаєсс асчаєчесчу счасессаєс 1140 аадчаєссаєс ссчасчаасч Сасссесасс аасіссясча ссдасааача суссасачсЯ 1200 асссссаася чзадчсядссса саассасеса ааєдссоясас асаассеессь ссссассаєд 1260 ачадсбаЧеЯЧ ссссссусяд ачачдсдсдаа ЧчсдЧадасаєс чддааасуєчс ссазачедчач 1320 аасааачаєдЯд сссссСассос Яддессдасаде Єссддсаасс чсаєсЯясдадч ачдссадчсада 1380 саачссасса аадсдаяссса дссадесесо дЧчгдсссаач садсссда 1428 «2105» 16 «211» 1062 «212» ДНК «213» Штучна 222 «223» Оптимізована для каноли послідовність десатурази «40022 16 аєсдасеЕссса асаєсссеЕЧча чдаєЧчессаає дасассссЕ ЕсЧадчесача счесасаасс ео0 ссічаєссуд сесессесас ассассвдсЯ сааавачссу асаасадасс сазадсаасеь 120 чЕдЕдЧачча асавессясь єсссусьсас сєхадсассься садсьсЕСсСса соддачасьає 180 сяде Есесс ссачесдсааа аєдасадчасс часасєссстся сесасаєсссє ставдссаєс 240
ЕссоЧчассяд дчагсаасьдс сддудаусасає ачасеседуд сссасаачес асасааавдесс 300 аачсччссас Ссачауссає асесдадссаєс сссзасасд ссдсссссса адасаскасс 360 асччаєсддд сссуєдасса садаасудсає сасаадсаса чсуадассда счсадассса 420 сасааєдсаа счачадявЕЄ сеЕсЕссссСЕ сасасвддее ядевбЕсссЯдЄ садчдааасає 480 ссеЕчасссда аачааааадч даададдасьс дасаєдачечя ассессссвадс счасссваєа 540 сеЕссЧСЕЕЕсС адазачаачса ссаєссдчатс сесаєдсессс сдЧчесвасвсЕ сосчаєчеса 5О0 ассядєсассс садеесасес сеоадчадаа асссддасаа абуссессьс содсаЯачсаЧчсс 1) асдссссЯясе авясосссає сседаасчсс асссдадссдд сааасьссде счдсасасаачд 720 саЧчочачаса аассстаєча саачсссабс аачссеЕссся аавасссссс ачссасчає4 78о кЕсСсассссду здзадааддаєс ссасаассас сассасассе ссссдсдудда ссасаадаса в4о чдсачадсссу дааасаасаа дчесдаасссс асаасаасяє ссаєсааєссє сеЕссдсдава 900 аєсячЕсЧоаЧч сстаєдчаєсе даачассЧдвд ачсЧчасєдчаса ссЯссаачаа саддчеЕсазач 960 ачаассчоасу асддчаадсса ссасссссодд частчзчачся асуачааєса дадсаваачаа 1020 чачасадаєу садссассач чассаасссі ааачасчаєс да 1062 «2102 17 -2115 1350 «2122 ДНК «213» Штучна «220» «2232 Оптимізована для каноли послідовність десатурази «4002 17 асдадссдсас ссдчасадсає ссссдадчас ааадсааста дссссаадчіс аасссасаса во сачсассзад адчссасЯясс Садчаассуу Сасаадаааа ссаассудес саасасдчасе 120 себдасвдрсс єсаєссесвас ссссдддЧебд сассбдасда даассасасс ссесассада 180 сссасосеса ЕссодеЕсьує сосссастає ссссасасадч сасеЕсддсає саседчаєдас 240
Сассасачас ЕСсдЯддсссса бадчеЕсссас ачсасчачує Єдсессассчач асссесссса 300 чессссассу чачссччсас часссаадає сссдсаачає часЯддссачс саассасача 360 чсасассасс дссддасоада сассаєчаад чдассссстасе ссдеєдаєсдад аччасьдсЕд 420
Ессссессаса саддссддає дасссссаас єссдчаєссаа адусєсааачу сачаасачає 480 чЕвЕссЧчаєс єсдасесьда ЕсссЯдссЯабЕ дЕдсддсазс асазасасса Садсаадчсус 540 реЕдсЕсЕссЯ ссдессяадає ссеЕсссесчаєч асачсчуссЯ чдассдудЧчссЯ чоддачдаєсау 65о0 схЧдЧдаЧчсддас ксЧасссасдс єЯддсаєсаєа сЯягЯасстясс ЕсЯЕссачса адссасессс вва сЧчЕЧЕсаась сассддсаса СЕЧучасадує даасаассяс єсСЧаєчасач асчтасьсса 720 аччддассаєд сссеЧчассус ЧчссоЯддссаса аєдуддадаад дасассасаа сесссассає 7во чадсеЕсссда дедассасад ааасдесаєс асесдусаєсс адсаєдассс сасааачесача 840 сеЕсасссасес ЕСсСЕСадЯдевЕ Чдддрсссссе ссаєссдасос асесєсссаа чдассЕєвссЯае з00 їсСсаасчача ссЧдадазачу ааддсіссад саасачсааа ачасеісссда саадаааацча Зео ачссаЧчЕСьЬсЯЧ ассдчаччасті ЕссксЕсьсс садсеЕсссауд счаєсссаєу чзчасчасссе 1020 саадсесЯсс дсадачааач сччачачаєдч сесдеєсЯсвя сЕдссачачі дасссаєчає 1080 чеЕссоссачс єсассдаача ссасссьЯчує дадаччадес ссассадчаач сасечсс9да 1140 аазчасчача сесчасасусєс саасодсдда чсоасасдаас асссааасяс сусасасаас 1200 гбдседадса сааєчачачі садчадесьсу ачзачдусудчас аачаачсчячча чзасссЧЧаад 1260 азасачачозч бЄЯдчасчуєссЕ СчоачЧчаадчеєса часаєссьсєс дссаадеєдчас аачаччсдаза 1320 сЯдєсЕдЧсЧЧа ааддадсрдЕ єдсадсаєсдаа 1350 «2105 18 «211» 24 «2122 ДНК «213» Штучна «220» «223» Праймер МА5414 «4005 18 гдазчасасес сасаачсесяє саса 24 «210з 19 «2115 24 «2127 ДНК «2132 Штучна «220» «223» Праймер МА5415 «40025 19
Чдааассаєса счсессссдса сасча 24 «210» 20 «2112 24 «2122 ДНК «2132» Штучна «2202 «223» Праймер МАБЯ13 «да» 20
Счдассдаає бдаадасавд сссс за «210з3 21 «21155 25 «212» ДНК «2132 Штучна «22йз «223» Праймер акчО008 «4002 21 асассьсеса ссадасстас сссса 25 «-2102 122 «711» 22 «212з ДНК «213» Штучна «220» «2232 Праймер агєчО009 «1005 22 сасасаасча счачаєсача де 22 «210з» 23
«2112 24 «2125 ДНК «2132 Штучна «220» «223» Праймер акчо1ї0 «100 23 саадссасас ааадссаад: дасс 24 «2105 24 «211з: 22 «212» ДНК «2135 Штучна «2205 «2232 Праймер акшО011 «49002 24
Саасяддааса сдасЕдссас ча 22 «2105 25 «2112 33 «2125 ДНК «2132 Штучна «220» «223» Праймер АпсібпреарваЕ «400 25 сасаєдясссу асчасачасу сасчссісчта час 33 «21053 26 «211» 35 «212» ДНК «213» Штучна «2205 «223» Праймер АпсіїГпрЗре52ВБ «4005 26 ччасссдсад ссасадсссс сссаассаас сЕсес 35 «21025 27 «211з3 36 «2122 ДНК «213» Штучна «220» «2232 Праймер АпсіМЧчрЗорБЕ «4005 27 сатасдсссд асчаєсясаа сЕсяЯяссясуєЄ чаєсас 36 «2105 28 «2112 32 «212» ДНК «213з Штучна
«223» Праймер АпсімадрозОоБВН «400» 28 ччаєссусча сесчачсасс сучаасачачс Ка 32 «2105 29 «21155 30 «212з ДНК «213» Штучна «2202 «223» Праймер АпгрінН2рЗоВЕ «400» 79 сасаєсдсаєч асаадсссає саадсестссес зо «2105 30 «2115 35 «2122 ДНК «2135 Штучна «220» «223» Праймер Апсін»рЗОоБЕй «4005 30 ччакссесссЧт сессачуЧчеє чаєсссьзаєд чсбас 35 «210з:3 31 «9741» 74 «212з ДНК «213» Штучна «220» «223» Прямий праймер для мішені АпОЗО: «-14005 31 ччасссссст асестсассе гача 24 «-210з5 32 «2112 20 «2122 ДНК «Рр13з Штучна «220з «223» Зворотний праймер для мішені АпрЗ05 «400з: 32 сосчаєсесвс сессадасссе 20 «2102 33 «211» 18 «212» днк «2132 Штучна «220» «223» Прямий праймер для мішені Н2рООБ «4100» 33 часссасаса асасаасч 18 «2102 34 -211» 21 «212 ДНК «213» Штучна «720» «223» Зворотний праймер для мішені НПЗ «4005 34 сссаасзача адссадссаа С 2і «210» 35 «2112 20 «212з ДНК «213» Штучна «220» «223» Прямий праймер для мішені Лпозрв «40055 35 чеЕссечассу сЯдсесдассас 20 «2105 36 «211» 20 «2122 ДНК «213» Штучна «2202 «2232 Зворотний праймер для мішені Гпроре «4002 36 сдчааассса сдасачаачс 20 «21035 37 «21123 21 «2122 ДНК «213» Штучна «220з «2232 Прямий праймер для мішені Астіп «40053 37 стассдусає садасдсесдаас 21 «210» 38 «2115 22 «212» ДНК «213» Штучна «220» «223» Зворотний праймер для мішені Ассгіп «-4005 38 сеЕсЕсСЕсСЯЯЧЕ чачааєсьвс ас 22 «2105 39
«2112 22 «2125 ДНК «2132» Штучна «2202 «223» Актиновий зонд «айо» 39 сасядстаєсс сссчесссЧча сс 22 «210 40 «2115» 13 «2122 ДНК «2132 Штучна «2202 «223» Послідовність Козака «400» 40 чдасссааса ад 13 «21025 41 «211» 13 «2122 ДНК «2132 Штучна «2202 «723» Послідовність Козака «4002 41 асаассаааа асд 13 «2102» 42 «211» 18 «2122 ДНК «213» Штучна «220» «223» Послідовність Козака «400» 42 асаассаасс кассабад 18 «210» 43 «211» 14 «212» ДНК «2135 Штучна «220 «2232» Послідовність Козака «4002 аз асаассаааа заса 14 «210» 44 «211» 1350 «212» ДНК «213» Штучна
«223» Оптимізована для каноли десатураза «414002 44 асдчастяасес ссчаєсссає сссададдає аадчесрассє ссєсгаадьс сбасссасаєс бо саасассаач аачесассіє саччаассуч сасаадаача ссаасьрддсс гаасассасс 120 себассЯдсСсс Ссаєсссадс сессддасьї: сасссрасса дчдассассосс асссассадч 180 ссаассстса ЕседдессЯЕ Есесвбасьас єсссдсассдя сЕсссудаахє аассоададча 240 сассасаччс КЕсдЯЧсссса саддессвбас сстодссачаєс Ссссасссад дсвевесесвЕ 00 чсесссасся чдадссадачс саїссаачча сседстачає ясдсддсссдс саассасачу 360 десЕсассаса часчдЧдассчуа Сассасуаад часссасасс ссчссаєсчад дачасессьє 420
Ебсесьсаса ссаядаєудчає дасвсссаас сседасосаа аддесаачча ааччассчає 480
ЧчЕсСтсеЧаєс ЕсЧасессда сссачесяст чсссдусаас асаачсасста сочааачсдс 540 сЕсСсСЕсСсссЯя ссдесрудає ссбсссааєд ассяссдсбЯ часеЕсдчдаєсд чадачаєсач ОО счЧадчачдчас ссдсЕсСасус садааєссаєс адддсЕсЯдсЕ ссусЕсааса адссасесьс бо сЯдсудссаасі сссссдссса срдчдаєсудда дадсаассає ссдасдасад даддасссса 720 ачччаєсаст єссеЕсассЯяс ЕСЕсЯєссасс асаучачаду дасассасаа сесссассас 780 чадессссає ссдассасад чаасяссаєс асссудсасс аасасчасос аассаачсдд 840 сесаєстасс всессссос судассаєсс ссасьсЯясьс асссссьсаа часссєсачча оо ссраасдача Есочадаачучу азудссьссаа саасаасааа аддессссда саадаачачу збо гседаасссЯя ассчудчасе Єссасессессс саасссссач ЕєСаєсеЕська ччаєчаєссс 1020 саадссадчс дсааччачіс соддадачаєд сЕсЧссдсвя ЕсЯастачЧаде сасссасдає 1080 чигсссгсаає ссассдадда Ссасссадча ччазаддсссс єсаєсадаєс сЧчсеЕЧЕсдда 1140 аачсчаєддаа ссучаасдясєс сзасудадча чЕссасчаче асессаасядс сдЯдсессасаас 1200 сссесЕссса ссаєдачачі сдчачесссЕ ачддчадчас аачачачссдча ч«деЕссоадаад 1260 аачсаааддуд ссдаєсдессо сЯдЧуааваачесса часассссса чусаачссас сададассдЧадч 1320 аччеєсЧдЕсд ачддачевсає садссчсеседа 1350 «210з3 45 «2112 1062 «2125 ДНК «213» Штучна «2202 «223» Оптимізована для каноли десатураза «400з; 45 аєдчссссаа асаєсьсьча чуаєчесаас ччачесстьвс ссдадсссда сассастасе бо ссачаєссвд сесесрссас сссассачії сааааддосд асаасачдчуєс ааачсаасс 120 чеЕесодЧчадчда асаєсесесе бБЕссусеЕсас сексассеся седсесссса соадаччаєсас 180 ссСЕєЕсСсСЕВЕ ссеЕсСЕдссаз чЧЕЧУЧсааасс дасасссься сссасасссс ссасЯяссасс 240
ЕскчдЧдасссд чаасаассус сЯчЧадсасас аддссссуЧчЯ сссасаачіс ссасаздасс Зоо аачсачссас ссачзаядчЕсає ссЕСуєсасс бссазсасся єсдсЕсСссса адасдссаЯсес зво асяччаєсуЧчч ссаччучаєса сачуаєдсас сасаадсассо срдадассда сдадсесдаєссса 420 сасаасясса ссаччадавсе сесстссссс сасассдчає часесесвдс саддаачсас 4аво ссачаєссса адчадаадуд азадчачасес дчасасчєсся асесессечсе сдаєссааєс 50 есссадчесссе аааадаадса стасссраєс сьсасассас єсЯясссоссс сястсасосса бо ассчсстаєсс сачессасес ссочудадад асссддасса асчссссссс суссоасеЧес 1-3) асадсссачасє асаяссвссає ссосаасуєсє ассерчдсеся ссаласьссдядс сдсессасазад 720 сЧчЧЧдчачаса ачссасасча саачсссасс аадссаєсся ачаасссєесс сЧЕвЧсваєд 780 сЕСсСдссссс9д Чачадчудаєс ссасаассас сассасассї ссссабдача гСасаачасс ва4о чесдадессвЯ дааасаасаа чссСсбаасссс ассассассь Єсассаасес ссссастсаач Зоо ассадчасчдуд сесасдаєсе саадассЯясе ссеЧаєдаса єсЯссаадаа сачочЧчЕсаач зво аччдассзчач асучаєсаса ссассьєсоЯдЧ дчасачачач асдачаасса асссазадчад 1020 чадассчасу ссдссассач чаєсаассса заччасчаєс ча 1062 «2102 46 «2115 10 «2122 Білок «213» Штучна «220» «223» маркер Мус «4005 46 сі б1іп пув Грем І12г Бек с011 010 Авзр Гей 1 5 10 «21025 47 «2112 9 «2122 Білок «2132 Штучна «220» «2232 Гемаглютининовий маркер «00» 47
Тут Рко Тук Авр Уа1і Рко Авр Тук Аза 1 5 «210» 48 «211» 1368 «212» ДНК
«2132 Аврегуі1їїцв підчи1апав «400» 48 акдсседссс саассЯясьсча сассадудсс аддассссад аддссаадаа чачсссасаєс 50 чесдасасся ссассаасад дсасааєссЯду сасаачсасч суаассууасе саасЯвевьс 120 сесаєсаєсяЯ дааєсссасі ссасячаєусє асссаадсееЕс ЄссаддЧчеЕссс асессаваесс 180 аачассясса гссучассЯє чаєстассас сессеЕссасся дасесоуодаає сассЯяседча 240
Сассасачачс ЄсеЕдадсеса седсесесас сессастассс єсссасьсау чакссЧчасеис Зоо чесоассдссЯ даддадчадс сЯссдачача сссассадає дадсдаддссад ччассасачч 360
Ччсссаєсаса дасасассда сассчасаач дасссатасс седчессачадаа чочассссосе 420
Сасссссасс єсудчаєаддас дасдасдаач сацаасссаа адаччаєсуд ааччассчас 480 аксссстдаєс ссаасчадча сесадссуєс дЕссддсаас асадчааста ссссазадсї 540 чеЕчдсссасса сСаччасссадс Сассссаавд сЕсчссЯассЯя часссддааєсЯа чачадаєсач Бо сесачаччає єсЯясчдсасяс єддааєсссЕ адчассеЕссс ссдсссааса адссассссе ебо сасаЯасчаасе сссссдссса ссяачЧчсесаЧа чассаассає сСсдаєдаєсад даасьссссєЕ 720 аччачассасч счассассуєс ЕсСЕсЯдссСасс сеЕсаЧчачачяч чЧчасассасаа сссссассас 780 чачсесссає сєдассасау даасчсраєсс чадсддсасс адсасчаєсс сассаачсча 840 сессаєссдуад сесддаадса асссддаєсд дсссасчаєс ссаздаадес садчассаас 00 чачаєсдада адуддаадддс ссаасаассс садаачаадс єсдасадчаа здадддсесасс зво сЕсЧчасесЧчад даассосаст сдассаассс ссачсчаєду аасддчаєча ссасдссдад 1020 саадссаача асодаачачч астсассЯсс ассоссдчач ссодгссасча суссассчас 1080 сссассаачу ассасссадчуч аччааачусе асчаєсьскс ссочаассуч аааччасаст 1140 ассяссасЯдс Ссаасочача ачсясассас сасісьтаасо садсссасаа ссіссссадес 1200 ассасчзачуад сЧчдчачсчас садчадчадда сЯдсчачдесєсЯЧ адасссадаа чзадчасссад 1260 азгучачаася Есдадсасудє саддчдасдда сссЯддасааа дадсдЧдаєссадч дассоадачачд 1320 саассаасса адассссада десаасссса ассаястчаєсдч сбдассвдаа І 1368 «-2102 49 «211з5 1368 «212» ДНК «21325 Штучна «220» «223» АпОрЗр5 У3 мутант, який мовчить «4002 49 асасссЯчссс саассЯссча сассачаччесс ачччсіссад ачуссаачаа часссасаєс бо асідасасся ссассаасад дсасааєсдд сасаадсасу гдаассячдсс саасяєсссес 120 сесассаєссЯя чаассссасо ссасддасчс асссаачсьс сссдодессс асессаасьс 180 аачассяста сссадЧдссЯяЕ чаєстассас ЕссссСсассу часссудаає сассЯястодда 240 сассасачдс СсЕЕдЧчдсьса сеусссасас Єссдссассс сеЕссасьсазу часссоадсссе 300 чесчдсЕЧчЕва чачочаччаус суссЧдадаача Єссассадчає часдЧчуссад дчассасачЧчуч зе чсессаєсаса часасассода сассуасаау часссасасс седесаддаа сачаськсєс 429 басесьсасс ссоЧасодає чоасчаєсдаач садаасссаа ачаччаєсач аачдудассдчас 480 ассестдасс ссаасдадча сссачуссЯясс дсссоддсаас асаздзаєста сессаачцчєє 540 чеЕдеЕссасса садачасьсяс єдЕсссааву сеЕвЧЕсЯдсстяЯя часесочасу чачачаєсач ОО сЕсдчадчає єсаяасдсасяс Еддчааєссьс аздасстєссь сСсоасссааса адссасессьс 110) гЧсардаасе сЕссвдасеЕса сбдЯчссбуда чаєсаассає Есчаєчаєач чаасссессе 720 ачччаєсасу єЄдчаєссассяс ссссЧЕсасс сссадачачч часассасаа сЕсСссассас 78 чачеєсссає сЕдассасад чаасчссаєс чадчсядсасс аусассчассссассазачі ча 840 сссасссчоуч сссадаадса ассбудаєся дессасчаєс ссаадаачьс садддссаас збо чачаєсєсзача ачаочаадчдас Єсаасаасьс садаачаачсе ссдаєадчаа чадчадссасі з60 сксчассооду даассесасс сдассаасьс ссачсдаєуд аасдчадаєча сстасчесдад 1020 саадссаада асччаачоачу асседЕсЧес ассадстодад ссЯдЕсСсасча сЧассассдас 1080
Бесассаадуд ассасссауд аддааачясо асчаєсьсіс ссдаааєсоада зааячаєдсе 1140 ассчссардс ссаасачаду ачсєдсассас сассссаасу садсссасаа сесссссаде 1200 ассаєдадча сдочачесчуає саччддачдаа саасчачуаєсд адаєссячазх чадачсссад 1260 аадчачазся ссдчадсасЯяєЄ сачучасуда сссоддасааа чадоасчаєссад чассддЧдазчад 1320 саассаасса ачаєсссада уссавеьссса ассяседабд седсевсва 1368 -21035 50 «211з3 455 «2122» Білок «2132» АБрекцчіі1їце підшіапь «400 50
Меє бек Аза РрРко Тк А1їа АБр Іі АгдЯд Аза Ак Аза Рко сі А1Та Гуз 1 5 10 15 пцув Чаї Нів І1е А1а Авр ТПх Аза І1е Авп Аку Ні Авп Ттр Тух Цув
Нів Ма1ії Авп ТЕр Тец Авп Уа1ї РБе Пец І1їе І12е сіу ІТ1еє Рко Геип Тук сіу Суз І1е біп А1їа Рпе Тер Уаї Рко Гец біп Геп Ппув Трк Ата І1е 5О 55 бо
Ткр А1а Маї І1е тТук тТук РБе Рце ТНК біу Пец біу т1еє Трк А1а с1Уу е5 70 75 во
Тук Нів Аг Пец Тер А1а Нів Сув бек Тук Бек А1їа ТПІ Пей Рко Гей 85 зо 95
АкчЧч І1е ТкЕр Пеп Аїа А1а Ууаї сбі1у 5і1у б1у Аза Уаї сій біу Бек І1е 100 105 110
Ак Тгр Ттр А1а Ак Авр Нів Атд Аїа Нів Нів Ах4 Тук Тік Авр Тік 115 120 125
Авр цув Авр Рко Тук бек Уа1 Ат4 Пув біу Бем Пем Тук бЗех Нів Гей 130 135 140 . сі1у Тктр Меє Уа1ї Мек Гув біп Авп оРко МПув Акд Ізїе С1у Акуд Тіг Авр 145 150 155 160
Іїе бек дер Гез Авп сій Авр Рко Уаї уаї Уаї ТкЕр б1п Нів Акд Авп 165 170 175
Тук Печ Пув Маї Уаї Рпе Тих Мес біу цей А1ї1а уаі1і1 Рко Меєс Гец Уаї 180 185 190
Аїа с1у цез біу Тер Сіу Аяр Тур Пец с1у с01у Рре уа1! Тук А1а 01У 195 200 225
І1е Пец АкчЯ4 І1е Ре Ре уа1ї йіп сіп А1їа Тк Робе Сув Уаї Авп Зекг 210 215 220
Бтеч Аїа Нів Ткр Пе с1у Авр с1п Рко Рре Авгр Авр Ак Авп о беї Ркто 225 230 235 240
Ак Авр Нів Уаї Т1е ТрПт А1їа Пец Уа1і ТЕ Пец б1у біз с1у Тук Нів 245 250 255
Авп Ре Ніава Нів Сі Рре Рко бБех Авр Тух Акуд Авп АЗїа І1е Січ Ттр 260 265 270 І
Нів біп Тук АБр Рго Тік БСув Тур Бек Іїе Тктр А1а Ттр Пцув біп Гей 275 28о 285 сі1у ем А1їа Тук АБр цеп Був Гув Ре АкЧ А1а Авп 511 І1е сій Був 290 235 Зоо сіу Акз Уа1 біп біп Гей біп Пув ув Без Авр Акд Пцув Аку Атїа ТбЕ 305 310 315 320
Пец Авр Ткр бсіу ТВх Рго Пец Авр біп Пей Рко Уа1і Месє бій Тер Авр 325 330 335
АБвр Тук Уа1 сі сіп Аза був Авп о сбіу АкЯд сіу пем уаї АтТа ІГІ1е А1а 340 345 350 сіу Маї1ї Уаї Нів Авр Маї Тк Авр Рре І1е Був АБр Нів Рко с1у с01у 355 3во 365
Був А1а Мес т1іеє Бек бек біу т11е сбіу цу АБр Аїа Тік Аїа Меє Ріе 370 375 80
Авп осіу с1у Уаїі Тук Тук Нів Бек Авп А1а А1їа Ніє Авп Пец Гей бек зв5 390 395 400
Твх Меб Адку уаї сіу Уаї І1їе Акдч с1у сіу Сув сі Уаї бі І1е Ткр 405 410 415 цуз Аку А1а біп Пув бій Авп ма1 сій Тук Уа1 Аку Авр с1у бек с1У 420 425 430 сіп Ахд Уаї1ї І1їе Аг4 Аза с1у бі сіп Рко ТБк БубБ І1їе Рко с1ї Ркго 435 440 445
ІТ1е Рко тБхї А1а дер Аза А1а 450 455 «2102 51 «211» 455 «2125 Білок «2132 Аврекчіі1їчцае пійчіапз «4002 51 '
Мес бек А1а Рко ТіК А1ї1а Авр т1є Акд Аза АхкчЯ Аїа Рко бі А1а Був 1 5 10 15 цув уаії Ніз І1ї1е Аїа Авр ТЕ Аза І1е Авп Аху Нів Авп о Ткр Тук Був 20 25 30
Ніз Уаї Авп Ткр реч Авп Уаї Рпе Ппецп Т1е І1е сб1у І1е Рко Геп Тук біу Сув І1е біп А1а Рре Тктр Уа1ї Рко Геї Сбіп Пецп пув ТБг А1та т1е
БО 55 6О
ТкЕр А1а Маї І1е Тук Тук Рюре Рре ТПк с1у Пец сіу Іч11е Тйк А1а с1у
І-І 70 75 8о
Тук Нів Агд теп Тгр А1а Нів Сув Бек Тук Бек АіЗіа Тк Це Рко Гец 85 90 з5
АкЧч І11е Ткр Пем А1а Аза Уа1 бі1іу біу С1у Аїа уа)! бій бі1у бек Іїе 100 105 110
Аг Тер Тер А1а Акуд Авр Нів Аку Аїа Нів Нів Акад Тук ТНК Авр Тк 115 120 125 І
Авр Пув Авр Рко Тук бЗет Уа1 Ак4д пув Сіу цей Пец Тук бек Нів Гей 130 135 140
Сіу Ткр Меє уаї Меє Пув б1іп Авп Рко цув Акад т1е с1у Акуд Тік Авр 145 150 155 160
І1е бек Авр Ппей Авзп сій Авр Рко Уа! Уаї Уа1! Тер с1п Нів Атд Авп 165 170 175 тТук Пе пув Уа! уа1 Рре ТП Меє б1іу Пей Аїа Уа1ї Рко Меє Пец Уаї 180 185 1950
Авіа сі1у Пезп сіу Ткр б1у АБр Ткр Пцеп біу зіу Рре уа1 Тук А13 01у 195 200 205
І1е еп АкЧ І1еє РПе Рпе УуУаї сіп біп Аза Тпх Рре Сув уа1ї Авп бек 210 215 229 їец Аїа Пец ТЕр бПец с01у АБр біп Рко Ррбе Авр Авр Ак Авп о бег рРко 225 230 235 240
Ат ввр Нів Уа1і! І1їе Тк А1ї1а Гей Уа1і Тик Ге сбіу п1з СсСіу Тук Нів 245 250 255
Авп Рпе Нів Нів Сіц Рібе Рго бег Авр Тук Агуд Авп А1а І1е бій Ткр 260 265 270
Нів сіп Тук Авр Рго ТБк Гув Ттр бек чІ1е Ттр Аза Тер цЦув сіп Гей 275 280 285 біу Пеп А1а Тук Азр Пес їув Пув Ре Акч Аза Авзп біц т11е сій Був 290 295 300 сіу Ак Ма1 сбіп сіп цеч біп Пув пувБ Те Авр Ак ув Акд Аз1а Тпг 305 310 315 320
Пец Авр ТтІр сіу Тік Рко ей Авр озіп Пец Рго Уа1 Мес с1б Ткр Авр 325 330 з35
Авр Тук уаї Ссіц біп Ад1а Ппув Авп біу АкЯ4я сіу цей уаї А1їа І1е Ад1а за 345 350 біу Уа1 уУаї Нів Авр Уаї Тк Авр Рре І1Те Губ Авр Ні Рго п1у с01у 355 360 365
Пцув Аїа Месє Іїе бех бек 51у І1е бі1іу цувк АвБр А1а Тк Аїа Меє Рне 370 375 380
Авпосіу с1у Уаї Тук Тук Нів Зек дяп Аї1а діа Нів Авп Пец Гей бег за5 390 395 400
Тік Мес Акд Уаї сіу Уа1 І1е Акд с1у сіу Сув бі уа1 біс І1е Ткгр 405 410 415
Гуз Акч о А1а сбіп пув б1із Авп оуаї с01п Тук уаії Акд Авр б1у Бек 01у 420 425 430 зіп Акд Ууаї І12 АкЧч Аза біу піч біп Рко Тк був 116 Ро біз Рко 435 440 445
І1е Рко ТЬх А1а Ар Аїа діа 450 455 «-910з 52 -2112 510 «212з Білок й «213» бЗасспакоштусев сехеуівіае «400з3 5727
Ме Бко Тих бек сіу Тік ТнкК І1е бі. цей т1е Авр Авр біп Рре Рко 1 5 10 15 цув Авр Авр бек А1а Бек Бех б1у І1е Уа) Авр 01 УуУа)ї Авр Пец ТіК січ А1а Авп І1е Геч діа Тік біу Гец АвБп цуз Гуз А1а Рго Ахд І1е
УуУаї Авп сіу РБе спіу бек Пей Меє біу бек Пув сі Меб Уа1ї бек Уаї1 5О 55 60 сій Ре Авр цув Був С1у Азп обі Ппув Пцув Бек Авп Пец Авр Ак Гец 65 70 75 во їец січ Був Авр Авпосіп біц Пув 010 бі А1зїа Буз Тпх Пув т1е Нів 85 зо 35
Ізїе Бех 011 біп Рко Тур Тк Пеп Ап Авп о Тер о Нів біп Нібв Гем Авп 10а 105 110
Тер Пец Авп Меєс Уаї Пец Уа1 Сув сіу Мес Рко Меб Ії бі1у Ткр Тук 115 120 125
Ре А1їа Печ бБеїх біу цув Уа1 Рко Беч Нів рецшц АБп о УМаї Рбе Ппей РБе 130 135 140
Бек Ууа1 Рне Тук Тут Азїа уаї Сі1іу з1у Уа! Бех І1е Тік Аїа с1у Тук 145 150 155 160 нів Ак Пец Тктр Бек нів Ак Бек Тук Бек А1їа Нів Тгр Рко Гцец АкФ 165 170 175
Пцез Рпе Тух А1їа І12 Рре с1у Сув А1а Бек Ма1ї біз с1у БбБег АтТа Гув 180 185 190
Ткр Тер с1у Нів Бех Нів Ак І1е Нів Ніє Акд Тук ТЕ Авр Тк Геч 195 200 205
АкаЯ4 Авр Рто Тут Авр А1а АкЧд Агд с1у Пемч Тітр Тук бек Нів Меє с1у 210 215 220
Тхр Меє Пец пем Пцув Рго Авп Рко цЦув Тут Пцув А1їа Аку Азїа Авр І1е 225 230 235 240
ТНЕ Авпр Месє Тік Авр АБр Тер ТІ І1е Аку Рпе бі1п Нів Акч Нів Тук 245 7250 255
І1їе Пец Пец Мес Бецп Пеп Тк АТа Ре Уа1 І1е Рко ТпПх Пес І11е Суг 260 265 279 біу Тух Ре Рре Авп Авр Тут Мес б1у біу Ппецп І1їе Тук Аїа с1у Рре 275 2580 285
І1ї1е Агу Уа1! Рре Уаї І1е біп сіп діа Тпкх Рпе Сув ЇТ12е Авп бек Меє 230 295 300
А1а Нів Тук І1їе біу ТЕ біп Рго РБе Авр дар Ак АкЯ Тк Рко Акд 305 310 315 320
Авр Авп Тер І1е ТПкЕ Аза І1е уаї тік вБе біу Сі б1у Тук Нів Авп 325 330 335
Рпе Нів Нів сій РНе Рко ТНК АБр Тук Акд Авп Аза І1е Був Ткр Тукг 340 3а5 350 сіп Тук Авр Рко Тк Ппув Уа1! І16є І1ї1е Тук цецп Тих Бек Пес Уаї 51уУ 355 360 3е5 печ А1т1а Тук АБр Пец Був Пув РбБе бех б1іп Авп А1ї1а І1е 51ч 01 А1а 370 375 зво пПесч І12е біп б1іп біз біп був Був ч11е Авп о цув Пув був Аїа Був І1е 385 380 395 аа
АвпоТтр б1у Рко Уаі Пец ТБк Авр Гей Рго Мес Тгр Авр Пцув біп тик 405 410 415
Рпе їеч Аїа ПцЦув бек Гув Сіц АбпопПув с1іу Пец уаї1ї І1е І1е бек С01Уу 420 а25 430
І1їе Уа1і Нів Авр уа1ї бек біу Тук І1їе Бек Сі Нів Рко Ссіу сіу сі 435 440 445
ТрЕ Пеп І1е Пув ТБЕ Аза Геп с1іу цуз Авр А1а Тік Пув Аза Рре бек а5о 455 460 сіу п1т1у уаї Тук Аку Нів бек Авп А1ї1а А1їа Сіп Авп Уаї Сей діа Авр 465 470 475 480 мес Агу уМаї Аа1а уаї І11е Був 51 бек Пув Авп бек А1а І1є Ак9у Мес 4вБ 490 425
Аіа Бек Пув Акч Зі1у 912 І1е Тух бід Тк сб1у ув РНе Ріє воо й зо5 510 «210» 53 «211» 13227 «2122 ДНК 213» Штучна «2205 «223» Плазміда рОАВ7309 «4005: 53 ччассадссе адааччсаатє стасссаачає дсадсаєсаа дааєссааєд сесасадааа бо ааассаєсдча ачдсассасядсє аадсісадса адаадсачає саасаєдсоту сасаєаєоса 120 асссасдссс ааазаєсєчаач аасчсасача Сасаачаєсс сасассдсса даасасчааєдЧч 180 аачаасасує ачааассуаа ааачаачаас сачдечаача азаачаасссс даачасчтаа 240 чсассдасда саасаасдаа задаачаача саачассучс чЧчассусєдааа чачасасада 300 ччасасасасє аачдсддааа асдсзаддадус ддазадсаас сЕсСсассасаа адчадааєстьса 360
Есессссаста ссрасрсссвьс сасаєсссєссуусяаєсєсассс ЕсддсссесдЧча чссессссає 420 асазддаасе задеЕссяуса сІсдсдазаа саздаааааа сЄссуЯдсЯасвза дсрасессся аво ссдааЧеЕасі ачааддаєасаа сесссадчачаа асесасааче ЄЕЧЕздЯдсас сачаєссуда 540
Сбесссааасса суссіссоча чачуачасса чесдадасса дассадссас адсадсесчає бо асчассЯдсчч сесчсуасає сассаассаєс сасассдада свдеЕстасачі даассссазд ебо асазачссас ааасассаса ачдачсачаєс чаєдаєссад ачзачдсєсЯдса адасадаєсас 720 ссссяЯддЕБЯд ЕбЯдссЧадЯяє ЕдачадчбЯсЕ дЯдсЯддссдЯдва сЕдсеЕсСасяс гБддассседа 780 ааччссадча асдядсеЕсасча Ссдчасадчеє чЧчачдачсасьу сСссасуєчЕсС асасадусає 840 сааачачссдд дсессадчдасс Сасассдсас асасаєссядс ссаадсссає дчаачудсдсаа Зоо чассссааче ссдсчдассас сассасаудус сесссадася асссаєсссЯяс сачдоассасає зво чачяссссдд часасасадс ссячадсаса Ссдсдсдсач ссдчасасаа чсасдасоача 1020 сЧдасаєчаєч єсЯчЕсессу чсааачаччає сєседадЧчесоєс садесессьсс ааддадесачьс 1080 ачдссачсса сссааассьд ачсадесадс Есаассассє ачачсссдаїє садсачсаає 1140 адсЕссссад сядссаєсссяЯя дассчаєсссь аєсечесдесу ааасадессус дасуадасаау 1200 чЧссесссЕсЕсС адааачасач дсудссазад чдаасссаадчу сЧачадсадуує сасачдессссс 1260 ачЕсссьсЯс ддаачсяссіс дагссааччс чсачадччсує садсодддвасч аадсазаачі 1320 чдессдЧдасьсдє аасаадасає деЕсЧдаєссста сЯаєвадччаєа ссааачстаєч басессаєссас 1380 баасаєаасс адсдрасссо аасасусась асчаєсьсса асдсссссасє садссдссуса 1440
ЕЧсаассЯядс Чесасааваає ааєссссяді дассеЕсСсьсс Єзасссадда саазаєсаваєса 1500
СЯссаєсаса асессссусча сссдасссЯс сСасадчааєсс чаздсаасУсс счадаесовх 1560 счссассасе сесаєсесає аассесасає дчсассєдада аасаааааєс кагсасаєсьс 16520 аасесаласа счрасасссд бєазадааєда сассессдааа чазасасачс Есааасасье 1680 ассдасаааа саасаачеіса додасаєсасау сссаадсада аасаєсавааєт саєссдаєаса 1740 ачЕсєсааасе садазаавасєс ссаасзассу ассасасєсадч ссуддсасаєсь дссчсадчава 1890 азачасеЕчЧад Єдсчатаєса содочедсааса сасаддаае сЯдсСЕЄсааася асседсаєсь 1869 аасстЕссЯддс ссаасессдса садчааачас дЕсчассдсЯ дбадсеЕсьсЯ сссадсадає 1920 сЧчадесссса чсссссесус ссчаєсЯадуає ссааєсчеєує ссесадессЯє чаассдаавачд 1980 сдЧчдасчасса асачсучаад аассуааачя засчачесує сбсасасессу аєчаєсуддес 2040
ЕсєдЧєдаад часассаєсу садссаадса адсссаєдаа аддсбєдаєуу дачачасчса 2100 таассасчач чсессасчачся ддасеЕсасссї ссачачачча сссассесає сасссаачсч 2160 сасчасусаа ачсачссасс дчачсасуЧа сСссссЯассдуд сасассаєсс дссасчадес 2220 ачсадасдаа чачассссса сдаасядсуддс саачдссача чдссаадсада каскасассс 2280 кодссдсаччс сеєсссасса єссаасачеє чодссЧассьс єдчазачадс сісачдсєдад 2340 чессасассяЯ ааачачаєсяч асддаєсаєсу асасассаєч сеЕдЕссдсва дссадаавсса 2400 чаєсасаєсс часасячссає сдсаусстчЧа сдсачасасд дадччасазає Єчаєссаваа 24560 чаєсусссач чачсачсессса сссасадсасу ссдасаачзаза сачаааєссс дссчачЕсаа 2520 счсадссосс сасдасзчає ссувададасєса сссасссоуча асясассадс сСсдсассаде 2580 гссасуєсас асседссьсс аєссдааєсаа часясбадса асЕдЕЕсева дясеЕссЧесЕс 2640 чЕсдсЯЧсад дасадсаадс дсессадаса ссаєссвасс сссааасесс асдсьдача 2709 асадссЕсье аасессєссЯ дазаасааса ассдсякерс аазаєссача ЄЧчЕссодаса 2760 тадасаєчає Сдсаааасаа сссасссаау єЕдссасессаєд аасаєаачеє єбасадзваєає 2820 тсссссавсс ссдссаєссча асдаасаача асааасасас сеЕссссСсаас ассасааахта 2880 адсесесаса сяссЯсссас асассдудаа Есаєтстссає сассессуся сааавачєсас 2940 ччасасеьсЯє чЧааадсдаса сааассдЯдсЯча аасссасаядуа зачедЯссссуч адесесдссьс Зоо чаччссадсу сабаядсасаса часасасаса Єсаєсесаєє часчсеЕсЯФчс ааєзаєссЯасс 3060 ассачаєстє ЄСеЕсасдсає адаєдсасьс дЧааассачсс аасегсСссадас аачсассааа зі20 сччзаєчсдас Єссадсасає Сааааасясс сясаардЕдЕ Єаєсаадчесу сСсеаадсЯяєс 3180 аассєдасьс асаасєдаає асаєссессучусс ссачссадес аасачессесча сССгасааєсса 3240 аасасаєсссс чдссддссддс ссасаяасасдс сдаччааєсс гдасссдчсс сссасесода 3300 сачсєдааєсчса часасятссчЧа аасааачаєс сссуаасєсад ааєзаєєває єсавєасссс 3360 счестаєааа сасчасядає сасааєеєсує субессраєсса ааасабасес єсаєвєевсава 3420 асаасаясвдс ддасаєсстас ассесесєчаає сдаааазааа ссоцчсааєста стссссесссе 3480 веЕссссасає сдассаєсає асссаєсдсь даєссаєдса чаєсссссуд асасдаачес 3540 асссасаасс чаасасаєсо садссяссусЕ дссЯдссесас асссяддесядда деседсаєаче 360 хсачсссссас дсадаассда чдссдЧчссауудч сачасаасеЕс ссассдадаа сечачссаєд зво асассессс ссссаасасяч чдЕдадсчдасд чддсаасдча чЕЧчасссаса Едчдассьсеє 3720 ааасаєсаєс сусєсоочасачЧ сЯчссЯдсчада даадсадсся асссЯчеЕЧача Есадссдчаста 3780 сассаччсач чсасясааса счассусааа чсасссчаас чсадчіасаа гсчачесуає 3вао чЕссасадсЯду аасчассаау саачсЕсдас ЕЧдссасесес дачадсдадас, сясессасадес 39300 счадчачсЯс адсссстідау чачасчадчач дсессусоєса дсдауссяаяа ачдччессдчад 3960 ааччачадас асссссссгс ддсодсасЯсЯ Ччісасаяасяса сачачдсусач сесеідчекаа 4020 ааасаачаєс сасазасаєс чдсссаазач сададссаааа часадчссад сачЧчЕЧдессцча 4080 аааасдяддуєсд дааасссся сааасдссду авсессєссасс єдеЕддасадс сесеісаааєу 4140 їсааєаддядєд саяссесеЕсає сетдЕсСадсає Ессдссссво аадсдссава дассаЯасдаессс 4200 сЕсаєссдсс адсадссяся ссссссаадс чдссаасасся сачддчсасесє асссссаЧчЧас або ссасссасає саєссчусудучу ааасссЯясЯяс аааассадас «сесссаясся асссдасачада 4320 сеЕдчассадсі ссасдєсЯсс ддссдчаааєс чадссвадссс сесаєссЯяєс аасдссусас азаой счачЕЧчадьс ддссссеЕсаа чЕЧЕсаасяЯяє ссяссосеса сЄсЕЧЕсСачсЯ ачачдесаадіь 4440
ЕсСсссоясзаз чдсасссасаа сассддсддс сЯсяддсЯсе сасасасяддс сЕсччасаасут 4500 сссссачсдс дЕссосаччч ссасачасау ссаяссадесс адсадсчачду дсаассадесс 4560 сЯддЕЧачседі сддааадчає счасдядчавсь сссссяссчс асаассссас Ессчаачеса 4620 ссасадсчає сеЕессссудса сасссасссо вЕссссуусасу асасасадуча ссссдссааа 4680 чачЕсЯсдЄ ачасьссссе сачесчвассс аасчддадсддєса дссоддсадач асадасдагу 4740 гачадсссасс сосчадсода ЄЧдЕЕсСсСЕссе ссассядсссс ссавесадсас ссддсодсос 4800 тсаасччддаа СсссчЯчссссЯ счадачссдудс садссассдс судчасчсааса чаєсчачаваса 48560 ачсодасдудс счасуааассо аадссаасса дчаадддсад ссосасстасс ааддсясасе 4320 чесессссада сдаасчдаача чсзассуачу ааааччсдуас дасадссудс асчадесьчс 4380 стадсссасес ЧдесЯддссуєс учссадяддес асаааассас дадсассасч дассаєчаче 5040 асчЕссядсча дсЕдасссудс аєсааєчоасу асссчачсся ссЕдаЧчсчЧчсе сеЕЧдссЧчааас 5100 всебдадасссас сзасдасссдя сддсасодчсЯяс ЧаЯсЕсЧдаєЧча сдссасчаєс сссдссебсас 5160 сЧчЧсуаачає суаачадазач садчасчадсе гсодчсаачає сасчасчччсе чЧЕчЧЧсссосе І) счаддадсада дссаєсдасес ссссадссЯдс саааасддсс дададасасЯя счбдаєсасс 528О аачсасястссе ссасусаяссое сассаачаад ачдсчасессЯя сяддачседаЕ асесаечсад 5349 чЧчасаачассс ччаасассаа чсасуадаач чЧчасчдсєсача сЯдеЕсстасачч чассчасьсе 5100 ассчссчата аччсадЧдаєса сссддасасс ааддсассад чсоддаїсааа ссаддаакаа 5авО чачсасаєсд ссссадсЯясЯ адссуддаса аєсссясаач чачдасдаає даассодасач 5Б520 гЕсдассуда ададсасасач чдсаадаасся ассчасдсодач ЯддЕсЕсСссяс счадчасасс 5580 чааассаєсу саадссячсас сдссацаясЯаї чсдссссядсЯя ааассессса чЕссЯссадес 5в4й ссчасдудсєсс адсаадссас чдадассаадаєс дадсчсчаса дсядсдсаасі дасссесессе 5700 чсессрдсссд сассаєсядс саяссусаддад сетсесосЯясс дссссдааса чдадададсадса 57вО чЧчЕссЧЧдсда адссчаєсчас сасєсдасасч счаддаасста сЧчасчассаа даачсдазаа 5820 ассяассддсзд аддасссддс аазасачдчсс адсчадасса ачзсаддссяс дЕсЯаседааа 5880 сасасчаадс ачсачаєсаа дчазасдсад СЕЄссСстЕсСЯаСЄ ссдасаседс дес аЧчсса 5540 часасчаєсєдс дадсчаєсдес азасчасася дсссЯасссся сссрдрссас сасасдсаас обо аачааааєсс сусасдаддс дссасаааас ааччссасе сссасуєсєсаа саадччасябд обо аадаєсассї асассддсаЯяї счадссЯдсдда чссдасчаєсд асчаасьчаЯає деддсачсач 6120 чсассчдчаче асусчааусч сассссвасс ддасчачссда ссассестссас чдсссосасчад 6180 сессЧдесача асссчдассяЯя десчасєсаає чадссчасасс асасчаачаяс счадччдаасас 6240 седссасасс сасаддсчас часуаєдддс сссасЯясссдЯя ассЯясдядсбЯуд чдсасссддаа зоб ссаядсдЯдссдс кассасасся сесссясЯсс ссдадассЯяся дсаадаааас десесЯае вас зо саччєссеча ссчасчадча аассассуєу сечЧчЕссЧесЯ чЧчсдчассасста сасчаааєсс 6420 асасддчдада адсассядсаа десЯдссЯссу асддадсссдас чдчдасдеьссуа ссаєсссаде 64во гсчсассячач ачсосчсассс чдсссаачесу чдазассьвос дсессавсаясу сузаєсадає 6540
ЕссасссЯдсоя бдаачаадьЯч чдсасчачсач чссдасчаау сессЯдсчаача чсесосадчас 600 ачсячадсссду сччаасасчс ссчачссаає часдчдасссдд сасассдсаа асчессадчдадас бо сеЕсасодЧдЯЧчс сачссссаядс счзаччассса чдсадссачся собсассяддс ассссадчаа 6725 саачсячдчса ссясссуасу сасссаЯдссрс десссадсаєсс дессядддаася сасадсасас 6780 сссасчаасо десчасааас ачачдаєсла ааседасаає єдЕЧаєсаач деЕсадаєсс 6840 часчасЕсЧЧаЧ адсчдсстас чЕЧсаччаїєс сссасуачає ссчаєсассу дссссааада 6900 аачсЕссача часдессяЯдда ЄссЯасбЕсасд адсасчадча дазааачесс асодадЧсЧе 696 їсяседаася чдегЕдсзачає дссдедасає ссаддсдссва саєсчасяддс дачаєсаєса 7020 часечссЯЧі сссааасач чаддасяусс ссаачуасяс ссасаачеасу савсьдьсся 7о8о
ЧчечЕссссЧє ачачсссдаа сачсчачасс чачадчассас сачЕасассяд ссдсаддасяЯ 7140 счссЯЧасачЧчу ссСстаєссассс чеЕЧасудаєся сссчасачає ссесаасодуа асссчеасоадЧа 7290 содсчсафсьс сассессадс дсасссааса сЕсСсЯссаєсь ссддчачссва єсЯсевасьс 7260 счадсстасся сссдссадчо чадассосяа счасчусачу счссЯдсасач сочсечаєсча 7320
ЕсчсЯдсссас сессуссЯсс сечссачаса чесечасася ассчасаддасЯч чсесечоадаЧ 7380 сктасссядсоад аассдсдадс ЧчеЧчЧчсЯассяє сЧЧсЧссдас ассавзасдса чдсаЯассадасєс 7440 сеЕчєсЯдсЯЄ сасачсяддас ссдЧчсадача саяадесессає чдсУуєсссяда ассясассда 7500 сссадсазачеч дсаасстссс дрдссесвЕдс Есасссесас сядссбддсаа сеЕдасоадчесся 7560 чаччассссі ЯсЕСЧЯЄСсСссСа чтачсессадч СдДЕсєсЧдассс чссааєссся аєдсесстасад 7620 чаассаавЯяї ссссядсссд ЧчсчсЧдсеся ачсесчаєсяд ачсачЧєсса асссасьссс 7680 сеЕсдассссЯ дададаєсесЯя сзасесчаас ссасачсеЕдЕ ЕСЄССсСсСсассд дасьссссса 77а0 чесесссчачес дсесссачсучу ааєсссдсрасс сестассууаа ссчадчадсас зачасчасас 7800 сеЕаасааєсс асссаадесЯя асассЯдссЕс дсддсусуде ЕСааєссада адссааасає 7860 сасчачоачаа чсчадсдаєся ссчаачсаєс часссаасста ссачаччсач єсдасдяссає 7920 счачсассає сісчаассза счссдссддс сусасаєссуд сасаядсевссу сачсаядчасЧча 7980 сддссеЧчаад ссасасачеу асассчаєсс чЧссддссасу чсдассусаа дасссдаєча 8040 аасзасусуя счачсссеєда сСсаасчассє сссЯдЧааасст ссудсевессо ссдададачад 8100 счачаєссос сяЯясЯядссбЯдсад азадссассає сЧссдсдадсас аасчасаєса єсссасЧчасУ 8160 ссасссадсс аадсудсудаас судсаасьсуд адаасддсад сусааєдаса Єссесасачу 8220 бассрссчад ссадссасда Есчасаєєда ЕєсЕдастаєс ссдсЕЧасаа аачсаачада 8280 асасачсчЕс ЧссеЕсЧЧеЕач дсссачсчас ЧддЧдаддаасес сЕсСЯдаєссяЧч ЕЕСсСссдвнаса за ччаєсвавеЕє чачусдссаа асдааасссі аасчесасєдуч аасісууссяс сечассддЧе вабйбо
Садчдсчаєдач сдазаєчсадч сасссасЯяєс деЕсссячсасе єдчсасадчся сачсаасс9у 8460 саазаєссаса ссдчазччасч ссЧссЯассча седддсааєч дадсядссвдс сддсссадса 8520 ссачесссяєс асасссдаад ссададсачаядс сраєсссууа саачаачаєс деседЧасссс 8580 чсчсасачає садчссуддаад аассеЕдесса ссасусдааа дасчачаєсса ссазачсаче 8640 саяддсаааєва бЯдЕссаасаа БссУусссаад ссчдасяссЯяс СбсасядсЯяс дусссаассс 700 аадсячссача чадссдаЧчцЧча ачасстаєдся счаєсьдеЕсд аадасудЕєс єаадсессдае 8760 сесссчечаєдуд сассссдааєс саєсссосаєсс ссЯдсусессаа чдасчасквсос сексасаче 8820 ссассачччс Саааєсаасс садссочасьс чіссудсчаа аскудуссудса сЕссаасада авво аасаассазла сазасасаса саусуассса Сссасасчадч сссааассас аасддасасає вза аксесдссад Есадсаєсає сасассаааа дчссаддсессу засачессда аассачаазу зоб сеЕсдсаасся ачассстасаєч дссаааєсся сесЕсачеся сасаасаєса сссассоадає зобо сссаассядс дсдаєсаєда чдссясяасса задассссава ссасасссоч сстаасссач з120 ссвдЧдсассу адсаааасаа асссоуаасса аассааааса сааасасаса чсесесасає 9180 асасчссьсс аадасссьсо асачааєссе ссссааазаа сасстадааа сасссдсдас з240
ЕсеЕсссядаса сЯдеЕзавасьсс сячссавасає даадсдсссс ассесстаєсса ассссазаєса 9300 аєсачеЕсЯдса счаєсасссу сссассаачі чссассаааа сасдєсааєс СсСсСЕСУЄСсСЕ з36о
Ессабсаєсса саєсдссаааа сссаєссаава Ссссрасаса Сссессссча асесдазаса 9429 ааасессЯає аасссаааас сааасадаас асаєсаєсає сеаддсаєса саєсеєчаєссс з4во сасасстаас сассааатс: чддсСгЕаастсЕ дааадсдсас абсаасдааа аассадессаа 3540 асчасеазаза Сазасаааса ссаєчеЕдеЕва сеЕвзадааває ЄсЕСсССаєаа даавсавесва збо асачаєсаса сдЕссЯдсаяза ааааассяаає серЕасезас асасасаєсс асесассагва 9660 заєсєдасаз адсаачдаєста авасаасаєс сассєвасаа аааааваасс адааааєсясь 9720
Чазаасссуд саааассдаа ссаасссааа ссуасасачеЕ ЕЧасЄєвсоадЕс счасссечає 2780 асааассчаа ссаасссядс ссаєссбдсас сссвбааєсає аасадсесса аваєсесаад зв40 асассаєсаа десаасясєсЯд сСсаасаєссє ддааавсьсЯя сааааєдааєс саадчсссавса 2800 сЧасрЯдсаас аєчаасєссаа аадсадсєсу асчсодЧчЕЧЧє аабаєчеЕаває сеассеєчЧчакєс 39360 ссаазаазає ассссаауса сСтаасааєсє срдсбадчаа чааддєврадс басчаєссасєс 10020 адсааадеса чаасасаасу аассасааач ЄЧчаєечаачс Есдааасаса счдааддааса 10080 аасассссса адаазаєасу сааєсдчасься даасаааача аачсчасаса СЕсСсСссЧЄьсС 10150 їсааасаадс ассссссста аадааєбддса Яясосссессс дсасчсаась ассасаясссс 10200 сеесуєсаса ааааєсєссаЯч астастаєвд дчаасьсссс ссдаааасач сачесассяс 10260
БЕааєсаадд сдсудссабадс ссчудсаадс дадссдсасаа чЕссдсасаа аааачссчаа 10320 счадаазасує ааааєчаваєс азасаєсаає астассааасеі адассссаса Сазаазасач 10380 астасасаає асєдіаааас асаасасаєс сачссастаї чаассаасса сесадаєдає 10440 ассадсдассе сасачссдас счасачесс ссаааєдеьсс єседуадедає дссдссааст 10500 сачссдассу асадссессс ааасдесссс стсазасяда ассчесЯябає ссадссьрасс 10560 счссаєсусс сссааєсасся сассаааєсєса сСазаазадаза Саачааааач аддсдсдадс 10620 свсЕсЕсссу сдсдасаааа сСааааасаєс сасстаєсса сасасяссач бассавадес 10680 седааавааєса сссусаєсаа чаасзасссс асаассосса бсасессессс Есасаачеся 10740
Евсадсевса єссудцчдаєсесє садесестає асессасеааа садсдаєавач Ссссеєдсвяає 10800 сЕСтассЯчса ссасссчдса часедадссас дсасазучудчча чессчасасс сасаєссесе 10850 ачдаасаєсач чесаасчасуч СсЕссЧаасас сасссссусая чечоседЧача ссадссассь 10820 сеЕсссссдас аасччадасс дасасасечч ссасаєсодуі Чдоассаєссасуд сяссадсевє 10980 сасссссудасє асдсассасс дадсаазадсс сасдддадасє сссассрдас адсачасявая 11040 саседчесач чздадачаєссасс асссаяссдсс садЧсЯьуєс аасаасаєса сетседсасає 11100 ссасааасад асчасаасчд сссесссссЄ бабсаддсдса аассссааас судсассссаєс 11160 сачсесссрЯс сессЯдссадс аааададсся сссассссаа сааассядас дассссадсс 11220 агсессессе давсевссяс єЕсссадсЯяє ссддсасуса дасчасададс вссасьсвдс 11280 асадесусас ссассачасс дчачасаєсу асассасаса сдсссбдадо аастдакадс 11340 хассчссдсс аасечдссась деаасасдсі десссасадс асасссстсі седасасасс 11400 єсдадіасас асассачсає асасссесаї ассдсааааа Єсадсдсдса аасасдсаса 11460 ссасраєссЯ чсссссачса адссЯячасес асчочусясс сасдсссссе ссчссассса 11520 тсасачсасе чЕсаЯаєсаассс аєсаачсаєс ссдссдасає ддазчссаєс асааасддса 11580
Часдаассе чаассуссад сддсаєсаус асссбдесдс сЕсдсдядгаєа абсасессдссс 11640 аєсддсдаааа счаддудедаа чаацеЕсассс асассучсса сусЕсадаєс аааасстчуусч 11700 ааасісассс ачочуаєсдоас сдадасчааа аасасаєьсі саасааассс ЕсСсадддава 11760 тїачддссачзЯс ссссассусба асасаядссаса сссрдсдаає агасчесудстад ааастядссуд 11820 ааассЯяссЯяє чдавасесаст ссачадсчає чаааасясЕс садсссссьсо асччаааася 11880 чеЕчсаасаау чдесдаасась ассссабтаєс ассаусссас субсобссає бсдссасасядч 11940 аасєЕссяЯЧчає чадсаєссає саддсудадса ачдаасаяедаа сааачучесяд акаааасская 12000 сусссаєсессс сстссасує сіссааазад чесосаасає ссадссдаас чесссодеса 12060 садчсасасс дадсаасьча сбдаааєчесс ссааааєуєє сЕєБбасуаєбу ссаєєсдуадає 12120 асаєсаасачя счагсасассс адсдасесссь ссесссасьс садссеЕссеє адсессвдаа 12180 ааксесчата асісаааааа сасадсссядс ачсдаєсссста Есссассасуч деЧчааачься 12240 чЧаассссеса сусассуаєсс аасуєсссає ссЕСсСЧдссааа ачссцчассса ччдасЕКсссяЯя 12300 чеаєсаасач ддасассачу асссасесас сссасуааче чассесссоє сасаччсаєь 12360 сбасссЯядеадс ааачдсдсуасс дадсЧчасдсс дссаасссач ссчастасад чссастааса 17420 ссаєссаачі ачссдчассса садедчассяуч асасчдссасЯ ссссасачса ссасчтачьс 12480 сасЕсЕЕсас ячсааааєсса асссаасаса седаєаєста сассаєссса сусеєЕєсСЕсЯє 12540 ссачсЕсссЕ бдсасаааче дЧассдсЯддсс дсесааєтаз асссааассс аассаасдса 12600 ассссдчассс ссаасаасуа аддсаасдас дсаааадааа заасдсасас сассусаєсч 126560 аксссссасуч асдссуааче д«сдссасбаас аєдасчасуає асаассаааа сассаассдяє 12720 счсассссрає єдаааєдаса ссдрсасєсс аассасассес ссдЧаврсссду сасаєчасаєс 12780 часєЧчсаача адсазасаає адасдссдЯсЕ ЧчЕсааачаас сдссаєсаса єдсдссстаас 12840
Сачачучаас ссдадсусса дасссаасса аасассасаз аасассесас сссдссясса 12900 чсааєсддсЯЧсЄ аассадсдса дасазаєсддс чдсааачаєсу сддааааасс ссесссдадчся 12960 чсасчарачс сдсссссдта ссоссдассс адссадсось асссдчассса аччаодсдссст 13020 сЯчссадсдЧчас аааєсдессс сазддачаса чссаєдсссс асассссуєс дааазасааа 13080
ЕсадссеЕссад аддадасдчса аадссадеся ссссссааса аддзаєчесЯя аддадчсаає 13140
ЧеаассЯяссЕ сесдсадсас асЕссСЕсСстаа сссаааааєс аассєсадрасс саачасаєсся 13200 саааааастс асчдЯясссааа сссвєдчса 13227 «2105 54 . «211» 10247 «212з ДНК «-213» Штучна «2205» «223» Плазміда роОАВ7318 «4005 54 сасадссчасс садсьссссе дсбасааачіс ддсассасаа Чазачсаєся сесассааєс бо гдссчсаасу аасачачєсас сасєсачісаа аасааваєса їсасссдеса сссадсечає 120 аєсссстаєа чсчачесЯчкта ссасасодЧчіс асачесеуЕсс ссктчдсадсєї ссдасссуєа 180
Есссааааєсс ссеЕдчасуєса саєссаЯасасаа дчасаааааста Сассаєсасу аасаасаааайа 239 сЕДЕссЯсЕс асасааасач саасасаачу чдсдссасуа дссасаєссса асуддчаааса 300 ссададчесЯас чассаааєес саасаєсчачає чсечасссає асчучсасда асчадессае зво чаєааєсдсся часзаєсачая Сбусуасавсс бассЯясеЕсЧс асдддазачсес сзчасдсячсса 4220 чадссдссес Єдааасаєдчуд саааддрадс чісдссааєач асдссасадча сдчачасоЧчес 48о ачасьазаасс дассдасуча аїсстасассє сеЕсссчдасса Есаачсаєсс какссдвасе з4Ааб сссчасєчася саєдчеєсасс сассастічсу асссссячаа азасачсасє ссаччеаєса боб чаачаасаєс ссдаєссачу сдаааасасс дсвдасасяс садсадчеЕясс сссдсЧчесау бо
ЕсЯдсасесцда ЕкссесЯвсвЯ КаасвдЕссЕ Сссаасадсу асссдябасе гсЯссссасе 720 сачдсдсаає сасдааєсчаа СаасчаЯссгд дссдЧаєсдсда чсдассссча єчасучачеда 780 ааєддссЯччс ссдссдааса адссіддчааа давасдсаса засЕсєєсдес асссеєсассу 840 чаєссадссу Ссасссасчда счасьсссса сеЕсдасаасс ссасссссда судаччачаза з00
СЕаасачасс дЧдсассчаєче сддасчачесс дчЧчаассятсад ассчаєсасса ччасстсасс І асссвраєдуда аседссесдд єчадеЕсессс сствєсаєсас адазасдаддеє ессесавава 1020 гагчдсаєсу асаассссєда гаєдаасааа ЕсасацдеЕссс асеЕєдаєеє счдаєдадесс 1080 сбсраассад авассдадссаа ссЯЧЧЕсдеаа сассячасача дчсаєсасдясі дчасесЧчасад 1140 часчдсЯдсаа дсссаєдасс ааааєсссосі засдєдадсс асчодссЯсЕ ссассчачеч 1200
Есачасссся сачаазачає сазачдчаєсс ЕссЕдадчасєс сЕсЕЕсеЕссеЕ дсдсасСааєс 1260 сЯдсЕдсЕсЯс ааасазаааа ассассдядсса ссачсячсачЯ сССЕЧЕсбЯасс чдаассаацчад 1320 ссассаастс ЕбсСЕСсссдаа дубаассдудс бссадсадад сусачасасс ааасассуєс 1389 сеЕсссадсЯдє аздссусачс ачуссассас Ессаачаасі ссдгсадсасс чдесссасасас 1440 сЕСсСЯЧсЕСсСсЯс саассссЯсс ассадсядес дссдссачесу чечаєсаачьс усаєсстсасс 15900 чачссачасеЕ саадасчаєса чЕсСассЯядає аачддсдсачсе чассЯЧчассЯя аасачдчаччЧчачЧе 1560 ссдсдсасас адсессадсьЕ дададсечзася асссасассу аассдадаса сссасадсде 1620 чачсаєсуач азачсядссає десссосчаа чудачдаазаачч сддасадчса гссадсаадес 1680 часадчадсся даасаддчдача чсусасчадч чадсьсссадч дчччаааасуєс седарасссє 1740 хасачессед ссдЯадеЕсссЯя ссасесседа стсдадсдьс дасьсеЕсЯава абсадсьсяєса 1800 чччччЧчсуча чдессасдчаа азасдссадс аасосаядесі ЕБЕсасядесс сседдессЕС 1860 гЯдссдЯдссесеЕс седЧсесасає чЕСсССЕСссс дсяссаєссс ссчассссдс дчасаассяс 1920 ассасодесЕ ЕЕдЧаєЧчсдадс Єдавбассосі садссдсадсс дазасчассуа дсдсадсчад 1980 гсачсдачся аччаачсодча ададсдссса асасдсааас сасесссссо сасЯасассад 2040 ссдчаєссаєс аасдсачсьд дсасдасадч ссЕссссуасе дчааачсууЯя садсчадесче 2100 аасусааєса асасчсаядсас сЯдссадссад чаачадсссд садавасдса азааддесає 2160 ссяассаддає чдасссессус ссачесссдає дсссчдсачес ссасадсодуд суссссасес 2220 чссасссісс даадссассдс Сссасаасаяасє ссаааєссдс ссссадчсяча есЯдсСсссас 2280 ссаччачаче чЕСсассдас ааасаасача гаааасчааа часссадссї сссдассдчач 2349 сеевссавес сасссчасус ссдддсачесс сстасьссся сЯЄсаасуєсс адсаєадаєса 2400 сЕсссссадсо сасчасяссЯ саааасдасд дссадсссвса адсеЕсддасс ссааасааєсу 2460 акесстаєсес дассдасадс дассьчЕссу сЕдсаасааа ссдасаачса асчесвесьс 2520 асаасчсессаа сЕСсЯдсасаа аааачсачус Сссосодесся сасеаддЯдЕсє ааасесссада 2580 ачссадччаає Ссааасааач аадедчаєсдядс дсччссясса сЕчасассссс ачсаєсаєса 2640 сачсдаааде єссЯадсссес ссассадсЯд ссеЕсЕрассь ссасссааад ЧчадеЕсесссса 2790 ссраааааєєе січчсаєсає рессасьста сесечвЕсасьс баавБссссса саассесбЧд 2760
Ссдазассає сасусьссся сасасуасає сессасааає сєсаєсасьсту ссазасаєсе 2820 їсааассядса Саааваєссса счаадесссся Себаєсствва асусадесста асастсексає 2880 аєсдааасає асааєссасс сааєсссадс чЕсЧадсадаз ачсасааєча ЕсСсавсесса 2349 сЕСЕЕСЕсса сасааасЯсї Саагасасаа Сбасавасааа КЕСЕЕтассі саачааччає 3000 сЕссссасьссь асассссааа аасасаєтсса ссааасассс сеЕсаассася сСсаааєсьсає збо аасаасаадес бБЯСсссаааа дсаасаааасє Ссаассссає аасьсьсьса сссдаассдаає 3120 ссрааадсаа сасссачсіЧа сасаастадс саксЕвсесс ссдЧаасааа азааєссаає 3180 хаксассяаса сЕссссссСас асаасчаааа сСссСсассааа саасчаєсся садсавесссс 3240 чЧчаадсаадсс акдссаєсдса ааасєсєссаса аєссссаєсс дасассасуд аадсаассда з300 ачассктчсЕіс ссасаєсдсдча часасайєстс ссаааусаас сссаасааса чссассаває 3360
Ксаачасссс асасассаза сасісаасає сасссссааа ааассялаєса уасаєсааєса 3420 ааасасєссасєст сессссааєсс саачесссаає сяседааєсс чечассаєся аєссаєсаєс 3480 сктастаєсусс сааасвЯявес сСабачдасачі Ссааачсааа саєаачсаас чсСадсададеь 3540 чесачадсдс сассссааас сасааассає аачасесаса дсддассаає Ссссасасас 3600 сссесассус сссрасссвсс сесссдодсасд саадсссдяса ассддаасса ссдсчаддЧчЕса зве ссаєдасасс ссядсддссес ссздсссасд сасддаєдес сдсЯдсаадаа азачасааачд 3729 аасааадааа ааачасаааа сачачадаса заасусаасс асасаассза сссаазЕсад 3780 їсассдаяасся ассзачдаєся ссдсодєссає чсасдсссаа асадссасчса аадсвасаєсч 3840 басссаасає дсассссааа сддсеісассс ассссаассос асасасазаас асассдсссь 3900
БЕєсЕссаєс ассассасаа ссасоєудсає асасссассс єссрссдядсса себсаавьке збо
Ессасессаа сасасуссаа сссдсасасу суєдссассс сасдсссааз сессссасаса 4020 гЯассссаасс ассьсосвсес бсасарааса ссрасаааса ссестаасає сасссасьсс 4080 сЕссасєсасс сасссаєрсса чдадсастасі асістассас Сасаасассо саасссаасе 4140 сасарссаає ассасесврад чаєссаасаа ЄдсСссбдсьсс аассдяседас ассадчастса 4200 чаЧчесссача ччссаачаза чсссасаєся ссчасассяс сассаасаччач сасзаєссаче 4260 асаадсасяє чаассдчссс аасятсессес бсаєсаєсяч аассессасес сасочасоаса 4320
Ессаачсеєс ссодадЕссса ссЕсааскса адассяссає січддаскЯабрЯ аєстсассась зво
ЕсЕссассуч асссддаасс ассдсєддає ассасаддсс Ебдддсесас єасеЕсагасе 4440 седссасьст ЕссасеЕваче асссддсссу ссасеЕЧссод азчдаччачес чесчЧчадачає 4500 стассачзасч чсдачссадча даєссасачаяч сссаєсєсасадч дсасассдає ассдасазаЧчєа 450 асссасбасьс сЯдссадчаад даасесссос асссссассє бадасддаєач чечЧасачааче 4620 ачаасссааа Ччадчассоадда аччассчаса бесссдассі саасчадчас ссадесеЕчесч 4680 сссдасааса саччаассас сссаачяесЯя сасссассає чоачасьсясс чесссаасдс 4740 гЕсчЕсчуссчу асссоочаєчу ччачаєсядес ЕсЗЧчаччаєс счсЧсастсі дчаассосса 4800 ччаєсьесстї сдсссаасаа чсеасстссь ачдсдсдаасьс ссЕсдсЕсСас Єадсссадад 4860 ассаассаєс счаєсдаєбадч аассссссса чзддчаєсасяї дассассЯясе сЕсСЯдсрассс 4920 ссаЧчачачдадд асассасаас ссссассасу адсьсссаєс сдассасадч аасаяссатсч 4980 ачсддсасса чзсасдасссс ассаадсчдЯас ссрасссдддЧчс ссЧддаадсаа сссадчаєтсад 540 сЕсбасдаєсі саадаадесс адддсеаасуд адаєсчачаа чачаададдеє саасаасьсс 5100 ачаадзачсс Єчасачдаач аччассассс сСсбдассдоачЧча аасессассс чаєссаасске 5160 сачсдасяда асчдоачаєчас сасяссчадс азадссаадаа судаачачча сссчеЕєЧчеса 5220
Естссоачаче сдсЕсасчає чдесасесдасі ссассаачуча Єсасссачдчча здазадуска 5280 счасссстєс суудаассуда азаучаєсдсса ссдссаєчсс саасчдчадча чсусассасс 5340 ассссаасдс адсесасаас ссссссадса ссаєчадчаЧче чачадедаєс ачдадчаччає 500 чсчзачуєсда часссддаач аддадсссача адчдачаасяч: єдадсасуєє адудчасудає БаЄб0 ссддасаавдч чдусчассачу дссудададс аассаассаа чзаєссссачад ссааєсссаа 5520 ссесдчесуаєдо сдсссдадчва десадсссаа ссасссадас сассадсаєач аассааааєд 55ВО саєчсачддьчЧ Саачадссса Єдччачачсас ччаасаєсояс асссдассає дсзасачває 540 аасааседад ссссавсьса сСЕссЕсСссас даасазасаа ачччдаєядеває часасаєсаа 5700 сасссрассо асасасссса СЕЧУСссСссасЯа асаааєсьсс ссссассасс асаааєссаєс 5760 сдаассЯсЧа саядсескасду аасудссссаа асадсасааа аасазаєсдядеч састаєаада 5В2О сЕсрсрааас засссвсаасі ссадсассує даасдадаса саачсассаа чдаачасаєаа 5880 сааєсаєаає ддаачаадчсЕ судассвссасе сабасаєсає абассассса сесаєдсаєие 540 асасезудас чЕсаазддЧдада сасазасааєсс асааачачад аадсссасає ссаєсссасає 6Оо0о ассасасасу асссастсає асассасасс баєсссассса сеЕєаавчесс Есаєаачаве бовБо кчасссаєча сассестаас ассесачесу агаєдврасає даазадасбас савсєдаасе 6120 сссесасвсв адсасаазадає сдчаєссаєсс Ссаавасачуч сссавстаає ЄсСсаседссе 6180 сісасаччаса ааааааааає саєсчадссда сссдасаааа сассдааддча сссаазасаа 6240 їаасаазтаа сааатаасає асаасаєася басавазаєт саєсасааса Саасаєесає зо стабаааааа дсааасаєсу ссасааассє акасааєсує ссадссеєсдЯдс ЕЧччаасчаас езео сесаассаєс сбазасчадач сааасасаєє счасЕсеєссва чдеЕсассваас азастаєссає 6420
Есаасассає аєчааасьсе сеЕЕсссЕсасє сазусааадаа бааааєсааа ссаадаадча 6480 саасяддЕчЕсс ссааксссса сасаассаас сЕСсСсасаазча аадссаадчіс адчадасааса 6540 аааааасаау сааадчазає сССЕССааєссє дадесечвьсевє деЕсбЄдссдса єзаєссаєсадс боб ачсааваасас сасасасаас ссссссадса чсачачсаає чассвассят чсдсссвас бо всввевраввев васеесьсса ссадсааача асааасаааа каазаєдача сассссачуд 6720 асдссссвас ссссасасаа аассессаааа асаадссьсс Садсассста ссаасчааєє 6780 сачасдассЯясе сссссадсасд асассясссо дсачадссаа чочсасдчетс аассааасса 6840 чдеЕсссссадс аєсаєсасач Єдчааадссвс дасссбссся ссяадсЯддесЕ севассьсга 600
КЕсаааччачя СЕЕСессассс аааааєссву драссаєєсе сасессвсассе чдеЕсасеЕссаа 6960
ЕЕссесаєсаа СсСсссудЕьсСЯ азассассас дсеЕсссдсас асчаваєссо сасааасеса 7020 ксаєсеЕдеЕса засасьсєсса аассядсаєаа зассєЕсасда адссссЯчрес аксессааєд 708о сСачссіааса сСесссасаст Ччааасасаєа асссасесаа Ссссачсясс адсачазадс 7140 агаасцчасєссс ассесссаєсс ссссссасає ааасчсссаа сСасасаасає ааасааассс 7200 сстассссаа чазадчаєсьсс ссассьсаса ссссааааає асаєєсаєсса засасьесссс 7260 аассасдєаа ассссасаає аасаачссд ЕсСсаааачса асазаааєсса ассссаєзває 7329 гЕСЕесваєсс дасьдчассьє ааадсаасас ссадсдасас аастадссає сессЕсессе 7380 чаасаааааа асссааєсає саєсуваєсс всЕсрасаса аєдааааєьс сассазасза 7440 бвдаєссоєсоЧч сасссссдаа Чдсаачесаєд ссасусаааа ЄеЄсвасраавс сесаєесдас 7500 ассасдчазадч саассдаача сстассЕеЕсвра сасдсчачаєс асаєсьссва аадсааєсьеє 75БвО ааєаасадьс асрасассса ачаєсеєсава сабсааасас ссаасаєсас ссссаазааааа 7620 ссаассачаєт аєсаасеєваада СассасеЕсьє сеЕзЗавьстсяа Яясссаасєсяє Єсавасссаса 7680 ассассчаєс бассаєесьа ссаєусєсаа ассдвсвсає адакадсеса аадсааакає 7740 аадсаасдса чсачдадсусс ачачсдссас сссбааассає ааасстаєазач аєссасоЧчед 7800 чассаакесс састасасевсо ссассудєсєеес сасссссссе сдчсаєсчсаа Ччессдасаасі 7вво чддааєссасся сдачссЯасса счасасссся СучЕссессу дессаєдасає чдадаєссевасу 798920 саадчазазадч асазачааса аачаааавадч асаааасача чдачасаааас дсаассасас 79380 аассаассса аассачссас сдаЯдсечаєса адаєссдядссдс чдсссакчтає деЕссаааєдс вого сасчсааадс засасдєдст саасаєдсас ссСсазасядудс сСсасссаєсо саасссасас 8100 асааасасає сЧдсссвБЕсвро сссассаєса ссасаассас стчсасасає ссасссьсяс 160 ссдссассес аасЕссссса ссссаасаса счссаассвя сасасаяасЯясу ссассссає 8220 сеосааассіс саєдсасЯясе ссаассассє Есссссесає асаасєасста сааасассєс 8280
Сбаасассасс сассвесссс ассасрссаєсс сабссачачеЕ ассастасеєс бассасеаса 82:40 авассссаас ссаасссаса СЕсласаста ссссадччсас сседсадуда Ессаасааєа 8400 чссчасасссд асадсаєссс єЧаддасааа чсаассадсі ссаачдчссаас ссасасасад вабо сассаададч ссасячсссач чаассддрас аадалааєсса ассдадасссаа сасчасссс: 8520 чеЕсЧчессеса сссседсссе сЯдаЧЕбдрас ссоасчачаа ссасассеєсь сассачасссо 8580 асссесаїттс: дасссЯасссс ссассасесес сдсасадсеує ссдасаєсаєс єдЧчсадессас 8640 сасачасстс дассссасад чЕсСсСсасаді чЧсдчачессчо саєсдадаєсє сессевсдасе 8700 сссассяддад ссаддсасдає ссаачдессе чЧсазчаєсддє чассадссаа ссасадачса 876о сассассочЕс ддасддасас сасчааччас ссестасоссо сЧаєсчадача астчсевсве 8820 ссссасасад ассадаєачЕ сессаасссо часссааачу ссагачасач аасачасаєс ваво
Ессдассься ассссдчасос сєсЧссдсу бдудсаасаса аасассасду саадеЧчсссЯ 8940 сесЕсвасед сссЯдассес єсочаєдаса чсаддссЧчачдс саЧдассаЧчч ачаєсячвау во ччесчдастсч сстасдссуд саєссасасяає дессеЕдчсвЕсЯ сесадсааує сасєсестає з06о чссаасссас счдсасаєсаЯч чаєсачусчаа саассЯясссу асдасачася Сасессаз9а 3120 чассасчеєсс счассдсчсс дассасааєу дчдадааддчає ассасаасеє ссассасзчад 180
Ессссдчадчдсу ассасачдааа садссатсасс; счусассаче асдасессас ааачсддесс 9240 асссаєсссо ссачсесдчу Єссессссса ссЯддссрасе сьсссаадас сеЕєссдЯдссес з300 азаєчачасьд адаазачаач дсьссадсаа сачсазаадд сссІсСдасаа чазаачаадь 2360 ччЕсЕсЧакс чадчдассьссс Ессе ссса сЕсссачеда Есссасадуда Едассесссаа заго чессЧчеЕсудса аадааачсяч ачачаєчсес дссдсвдсЯ ссддачедає ссаєчаєаєс 9480
Есесадссса седаацаєса ссссдабуддуа ачддадсссса ссадаачсяс се сачааа з5аЙ чаєдачасєд Чдсаєдсссаа сддасадЧачедч сасдаасаєЕ сааасдссус асасаасісд 8600 сечадсасаа єчачачесадЧ адссебдада часддЧдасаач аадеччачає Ессдчаадааа 9з66о сачачччсда аєдЕссссуу Чаачесачас асбсеЕссЯсс аачсдчасаач часддадчесчЧи 9720 ссчагачаач чачссчесЯс адсчєдасєча чсачестадеє бааєсассса чачсЕсядес 9780 ассессчачса єсааааєсса ссбадаааса сасаасаєсЕє сассЧсадас сЕЧседдчада 9840 аєсдаєссдс сассасадааа ассасааааа аассесаєсь дссесааєса ЕсЕсаодчаєс 2900 часаєссєзадч асяссвавгає баєссуєсод дЕсассасс ассассдсда ссдадчаадає 3960 садчсчдасасу ааасасссоає ачсассассЯ абааєрсрасс сдааааєсса єаадаааадчс 10020 ааасадссаса сдааєссдаєсд авасаасаса аадасадаса аадссасяса састсаддає 10080 аєссчудссчад ассаседаас аєссдачсаау аєсасоячаає єссеЕдЧчасаду адсасдеьссе 10140 саасссадсес саааєдчасач сСесчаааєсасс садвассяссо сасасучсаччач ачсучаєсає 10200 ссаєседчЕсвЯя сСсЕЧаЄсЯдсс сссуєссааса сЧддЧадсоса аддЕсЧа 10247 «2105 55 «211» 6058 «212» ДНК «213з3 Штучна «2202 «223» Плазміда ррАвВ7320 «400» 55 ааєсєссдсячс сЯясевссссЯа сабдасаєсся сссрдсачад ссаадсчсає Ядсссааєссяза бо асвачссьсс садсаєсаєс асадсчааад сСЕссЯЧчевсс сесЯссудчеяЯ дес ссвасс 120 сссасссбааа чада сссс ассрааааає ссвдасаєса Ессесасьсь асеЕсачесасе 180 всаассссос асааєссссо дссдазасєса ссасуссссс дсасасчаса сСссссасзаа 240 сессаєваєсс чссазаасаєс сссааассяс асааааєссє асдаадссосс дсссасесесс 300 аасчсауссо аасаєсссса саєсдазаєса сасааєссас ссааєсссад сЯясвЧЧчєада 36о аачсасаасуч асссасссьс асссіссссс асасазаєде еєЕсаасасаса асасаваасаа 420 асссобсасс ссаадаачуа СЕсСсссасес сасаєссстаа ааасасассс ассааасаєс 480
БеЕссаассас дсазаєссеіса сбаасаасаач ссодссссааа адсаасаааа сЕсаасесса 540 саассьсссо асссчдасьча сссСсааадса асасссачсЯя асасаассач ссасесессс бо сЕєсдаасаа азаааєссаа ссассассує асессессса сасааєсдааа ассссассаа во асаасчаєсс чсадсасссс сдаадсаачє сасдссасудс аааассссає аасссссаксь 720 счасассасу даачдсаасся аадасосаЯась ЕсСсасаєчеу адасасаєсє сссааачсаа 780 ссесаасаає ачессассаса сесаачаєсеі сакасассаа асасссааса ссасеєсваа 840 аааасеаваасеі адасасаасе аааасассаєс сссЕссаасс ссаауесеєсза Єсчєссааєс 00 сЯсчассаєс чассвасрає сссассасас ссаааєсдєс ссасадчасач єссааадсаа 960 асаєсалаадсаа сЯдсадсачач сдссадачсу ссассстааз ссабааасса саачасссає 1020 часачассаваа Єсессасава сеЕвсеЕсаєвд соссесассеє сессеЕбоусає деаадссестє 1080 ааскчдааєєс ассдсдадес адссаєдасас ЕСсстЯсаЯадсеє сЕсЯдсссає чсасачаєся 1140 садасасаадаа ааачасааадч аасааачаза ааачдасаааа сачададаса ааасдсваєс 1200 асасаассаа сссазаєсад ссассдадсьУу ассаадаєссу ссдсясссає дсавсдессаа 1260 асадссаєсаса аадсаасася сЯсссаасає чсассссаза счдсьсассо ассосаассос 1320 асасасазасєс асаєсЯсевєе СесссеЕссабс ассассасаа ссассєдсає асаєссаєсес 1380 сссЕссясса ссрсааєссс бссасеьссаа сасасуєсаа сессядсабсаєдЯд сдябдссасес 1440 сасдсссаза бсбссаєдса сЯссссаасс ассеЕссьстіс Есасасааса ссгасаааса 1500 сесЕСсСЕЗзаває сасьсасеєс ссеЕсаєсаєс саєссаєсса чачеастасеє асесеаскас 1560 сбасаасассс саасссаасо сасасссаає астассссач чдсасссбдса чдоадаєсссаас 1620 аасчдссдса ссєзаєсачса сссосдадда сааачсаась ачссссааді саасссасає 1680 асадчсассаа чачадссасує ссаддчаасьд дсасаачааа ассаасьуусє ссаасасчас 1740 ссеЕсЯдссуєс сесасессьдя сьсевдаусе дсасседася адаассасас сссьсассачд 1800 асссасссеіс агссадчесссяЯя сесессасса сЕсссдсСаса дсдЯдсссддса ссастдЧечЧча 1860 сстассасада ссссдасссо асаддесьса сачсасдчада ссдссаєсда часьсьсссе 1920 часесссасс ддадссдЯсу счасссаачу ссссдсаада садеЧасСсадч ссзаєсасад 1380 часасаєсас сЯяссЯаЧчасаач асассаєчаа дчассссрас сссдсдаєсда даддастдась 2040
ЧдеЕссссессас аєаддссдда сЯддЕссссаа сссесдаєсса ааччісааач усадаасача 2100 сасеседає сесєдасьсся ассссаєсЯяє сасодсдусаа сасааасасе асачсаачьч 2160 реЕсЯсссссс дссЯсессдда ксеЕсЕссдає часачсдЯддсе чдаЧдсесЧЧчЧЕс дододчачаєсд 272920 чсадЧчачсЧуча сссассстасу ссадсаєсає асчасчессце ЕСсасесаде аадссасссе 2280 сеЕчЧЕЧЕСсаас ссассчдудсас ассудасада сдаасаасся СеЕсЄдаєчаса часасасьсс 2340 ааддчаєсає чссседчдасся сЯяссадесас аасадаачаа счасассаса асссссасса 2400
Сбдадьссссд адсдассаса дааасчесесас сасесадсає сачстаєдасс ссасазвачі чу 2460 часеЕсаєстає сеЕссесадсс садассссье сесассддсесс сасссессса адасесссссуд 2520 тсссаасдач ассдадааач дааччессса чдсаасадсаа ааддсЕсссд асаздазаад 2580 авасЯддЕссс даєссддоачас сЕсСссссесв ссадссеЕсса чеЧчассссає чадаєчассес 2840 ссаачсьсуєЄ саясазадчааа чсадчачачає чессЯассЯасо чдесдссадач Сдасссаєца 2790 сЯдЕсСЕСсСссад сеЕсаєсдзад ассаєсссЯдч гдоададдаче сесаєсачаа дедссатсаЧд 2760
Чазачасчадч ассдасасЯядс сСсаасччєча ачсусасуаа сасссааася седсасасаа 2820 сссдсеЕЧчадчс асзасчачач ссЯдаЧчссес чачачусодда саачаачсудЧч адчддсссодчаа 2880 чЧчааасачачаяч Ччеччаєдссс ЕсЯчддаачьс ачасаєєсстс соссаадчсда сазадччасодча 2340 чсЯяссроЧчсЯ дааччачссЯд Есасачечсд асчачсаєьс адсссаасса ссбачадесе З000 чаєсассісЧ адсаєссаааа сссасссада аасасасаає ассссдссас азддадссєсастд зо6о чачааєсчає ссдстассає аааааєсаса аааазаєссь асссдсссса ассаєсссач 3120 чаєсоачсасс ааччасачссє азассаєсссд ссачддуєсасі асясаєсаєс ячссаассдаза З180 ачассачсчда сасдааасає ссдсадрасе ассзаєаасєс сасссдаааа сссасаадчаа 3240 аадсазасчє сасасчаасс дасчааасад сасазачаса чдасааадсса сясасаєсса 3300 ччаєасєдудс сдачаєвасе даасасєсдад саачаєсасу чаассессда сачзчачсаєуд 3360 ссессаассс адсссаааєд дсачссчааа сасессазасс дссссатасдя садчачсдча 3аг20
Есасесаєся СЕЕдЕеЕбадЧЕ бассЕсСЕдсс васаєдддчад сссааддісчЯ4 чсадсассчас 3480 ссадЯдсЕсссеЕ єдсасаааді сгддсаєсаєа адааачсаєс дексассаає СЕС сасаас 3540 чЧазасадчеєса ссассачеса азасаазаєс ассасссусс асссадсвда сасссесетає 3600 ачсдадеЕсЯс астасасадс саєадсьдЯдЕс сесеЧчусадс ссечдЧчсссЯяє ЧЕСсСЕсзаааєс 3660 сеседаєсудсєє асассаядсаса ачасааааає акгассассає чаасаасааа ассдбесдасе 3720
Сасасазаса чеаасасаадч чаЧчедссаєд адссаваєсс аасчадааас десчачассд 3780 счассааасс ссаасаєсдда Сассчасьсса сСасдуччдсаса аасочччесся счасаасаЯяєсс 3840 чдадсааєсач чсасчасаає ссассЯясссдЯд сасдддаадс сочасадсясс ачачссаєсе ззово седааасаєсч чсаааччсач сЯдссадссааї часдссасадч асдачаєдує сачассааас 3960 сеачсечасачя аасьсабасс сессЕссдасс ассаачсаєс сстасссЯясас гсседчаєдає 4020 чсасяЧчЕсас ссассассяс часссоссуда аазасачсасє сссаддраєс ачазчаакає 4080 ссечасссад чсдаааасає сЯссдаєдед ссдадсадсяс ЄсссясяссЯя дебочсассся 1149 авессвЯдссс дсааєсЧссс бсЕсаасадс чассясчває єЕсЯяссеЕсЯс есадудсасаа 4200 ссасдааєдча асаасоЯядесс ФачсЕдасдся ачедаєссьч асчасдяадсу саасчастаЧ 4260 сссдЕсдаас азадсссддаа ачааасусас авлвассссрдс сасєсессасс ддаєсссадсс 4320
Ччесасеєсаєо чеЕЧчаєссессс асссдасаас сесасссссу асчаддадазх ассаасаддас 4380 кЧасассдасдя ссЯацдасчачі сочааєсяса чдассчасасс аддчаєсссяс саєсстасЧчу 4440 ааседссісч чеЧчадссссс бесресасєса садчазасуддсе ссссссаааа асасаядеаве 4500 часааєсссод асаєдаасаа аседсадесе сабєсдЧасас седчасуадеьє ссеЕстааксса або чаассчусса ассддеЕсдса асаседдсадч адсаєсасяс СчассечЧася одасадсаса 4629 ачессаєдас сааааєссоє бЄаасадєдчацче сасудсуєЄсЯЕ Єссасєуачсе дЕсадасссс 4680 чсачазаача ссаааччасєс сссесвчачає сссеЕсЕсСссс сдсдсясаає седссдсекд 4749 сааасадааа аассассяЯсеі ассадсЯячдсЯ чсесЯасссдс судаєсаада чеосСассаасі авоай сБЕСЕсссда аддсаассяуд сессадсада чсядсадасбас саааєсассяє сесссстсачсд 4860 бачссчсачусє гадуссасса сессаздаас ссеЧчеЕадсас сЯясссасасва сстсасьессд 4520 стаассссЯс сСассачсЯччс сЧседссачс дасчаєсааче сЯєдчЕсСевас сЯочассочЧчас 980
Есаачасзчає адесассдядда Сзадасчсач садЕсЯяддадсс даасоячаччуд сссасдсаса 5040 сачессадсЕ содачсчаас дассктасасс чаасстчадає асссасадсд счадсаєсда 5100 чааадчсдсса счссссссдЧча ачачадазач дсддасадує асссоадстазад счдасачууч Ес 5160 ччаасаучаєч ачсдсасчач ддадссссса чдддддааасу сссаЯадсассс єсаєадсссс 5220 чеЕсдачЕссс чесассссся асесбдчасяє счассесечЕ чавдсссяЯясс адддачасач 5280 адсссасядда аааасуссач саасчсдяддес сеЕсссасЯяді ссссадесеє ссассачдссу 5340 тЕсдсЕсаса ЕЯДСЕсСЕсрос басяссаєсс сссдаєсссу сбачасаасся Сагсассусес 5400 сссчачсчазч ссдасассдс єсудссусадес сдаасчассу адсусачсча чесадсдаде 5460 чаччаачсояЧч аачачседссс аасасасааа ссассссссс ссаясдсяссЯа чдесдадаєссає 5520 саасдсадсо дудасасчасад чеЕсЕсссдас соддазадсоуд дчсачсчачед саасясааєс 55ВО ааксасасдса сседссадсса дддаацадеїї дсадааасус зазаачасса бесаєсачда 5Б40 сЧчЧчссЕсссу сссачсессда сдсседасад Ессаєсддсуд десядссобдсо сассасеосьс 5700 счачссчіса ссссасаася сссааасесу сссссдяддсадч асбсясссса сЕсаддадад 5760 сЧЕссассда сааасаасад абаааасдаз азддсоссадсс сіссдассдча дссесссЯси 520 ссасссчаєд ссрдасадесє ссссасьсьс дсЧдчЕсзасяс садсаєдчає ясесссессад 5880 бсасдасЯясЕ дЕаааасчас чадссадсссс аадсссядас сссаааєаає чаврссвсаєсес 5З40 їчдассчасач сєдассЕдьсс ЯдЕсЯдсаасаа ассчасєдадс аасяссьссо сСасаасдчсса ооо ассгсдсаса аааавасачч ссссдясаЯадесс дсасстаддес сєааасьсьад аачссада ео58 «2105» 56 «2115» 9956 «212» ДНК «2131» Штучна «220» «223» Плазміда рОАБ7323 - «400» 56 ссачсссссо адсассасса садсдаааді сссЧддсвсс сесдассаяЧчідЯ ЕсСЕСсСсасеє бо стасссавач чадчеЕсссоса сскаааааєс стдасаєсає ссесасстса сеЕсчесасьс 120
Саасессссса сааєссссЯдд ссдаааєсає сасаЯясьсссяЯя сасасчаєває ссссасазває 180 ссассасьсу сбсСазасассс ссааассоядса баааасьсса сдаадсссся Єссаєссввса 240 абдєадесса асасскесає аседааасає асаасеєсасе сСаасеЕсачс ч«ссаддЧсадаа за0 адсасаасоа Єссассєсска ссссгсеЕсса сСабаааєяєс саасасасаа басааасава 36о сеЕсЕсСсассу саачааччає ссссосаєсессс асассєсадаа аасасаєста Ссааасаєсе 420 сссаассася баааєсьсає засааєзачі єдЕсСссаааа чсааєсаааає ссаастссає 480 ааєсьсвсса сссдасесдає сесавадсаа сасссацічЧа сасаассачсе сассесекьс 540
СбЕЕдааєсаза ааааєссаак Бассаєєсдса ССЕСссссСас асааєсєдазаа ссссассаза бо сааєчасєсся сдоддсассссе даадсаачдесс асадгссасачса ааасесьаса асесссаєте бе часассасудд аадсаасецда ачаєседесс ссасаєадста часасассв: сгазачесааєс 720
КЕсаасааса чссассасає ссаачасєссс асасассааа сСасссзасає сасеЕсссааа 7ао ааассазаєса дасасааєсса авзасастаєсе сесесаавсс саачестсаає саяссазасьс 840
ЧдеЧассаєсая асссаєсаєс ссастасуюс сазаєсусєсс сасачасаче СсСебааачтсааа 00 тасзадсаає чсачсачадеі чссачадсуЯє бассссааас саєзазаскає зачаєсссасч зво чЧчеЕдчастаає ЕсСЕсасаває веЕсстасвчс єсСЕсСассесесє сессддсаєа Езадессуєа 1020 ассдчаасса сеЕчсаддусєсд ссасчасаєсє седсдассс вЕчасссавя сасачаєськ 1080 дсосаадааа аачасадада асааачааза аадасаааас ададчачасаа аасудсааєса 1140 сасаассаас ссаааєсачі сассччстіда ссаачасєсяс сясясссаєяд Сасдсссааа 1200 сЯдссасусаа адчсаасасуєЄ чсЕСаасаєд сасссбазає дасбсассоса бсссаассса 1260 сасасадаса сассяасестььс ссосссаєса Ссассасаас сасссдсава сасесаєссь 1320 сррссудссас сссааєсеєст ссассссаас асасассаас ссосабасдс дсдссаєсесс 1380 асдсссааає ссссаєдсає дерссаасса сесбсвбсссе сасасаасає сваєааасає 1440 сЕсСсаакаєс асесасьссь сесаєсаєсс асссаєссач адсассаста стстассась 1500 асаасасссс аасссаассс агасссааса ссассссачя бассссдсад дчаєссааса 1560 асячдсеЕссса асавєссссда ччаєдссаає час ссЕвЕ ссдадссача сдсдаддсаасо 1620 сссдчаєсессаяч сесссСсссас ассассьусуд сааазачосу асаасадасс саачсаасьсє 1680
ЧеЕдчсЧдчачча асасстсасе ссссасссас ссасассссуя сачсссссса сяддадассає 1740
БЕЯЧЕСЕСсСьсСЄ сЄсадсусааа аєсддсадаєс чдасаєьсься сеЕсасаєеся ссаєсдссаєс 1800 сссдчассодч дчаєсаасечс сдоадусасає адассссдадд сссасаадьс асасааадсо 1860 аачсадссас ссадачесає аседассаєс сссаасасая ЕсЯссьсЕсСа ачасдсьЯсЕ 1920 асччаєсбєддуд сЕсусєдасса бачаасчсає сасаачсаса усчачассча счсудассса 1980 сасзаєчсаа счададччсЄс сЕЕссЕсссе сасаєвсядачесє чдасЕсссвчс сСаддааасає 2040 сссЧчаєсьда аадааааачяч чазчачасссо часаєчачсч асссссьсдсе бааєссааса 2100 сЕссЯСЕсСЕсС адаачаачеьа срассечаєс сьсаєдсстєс соддссьЯвЕЄ єдсдасасса 2160 ассєсстассс сЯядсссассс ссдадчдадаа асєЕсддчдасаа асядсьсвссЕ сябдасачес 2220 аєдеьєссдЯєс асдчоссесає ссечдаасуєь ассечассад сСудассссдо садсасасаачд 2280 хчЧаЧадаса аассссаєда саадессасєсс аадссссссд азаассьско адсєдсдавч 2340 їЕсЯдссссуд дачааддчаєс ссасаатссас сабсасастс ЕбссЧчеЕдудча ссасаачаса 2400 чЧчсададсЕсЧд дааасаасаа ч«ссцаассьс асаасаасяє сКсассаавсс сесЕсдсоааа 2460 аєсаччЕсуач сссасчассї чаачассусЯ ачзечдасчаса ЄсЯдссаадаза сачаччссаад 2520 ачаассядся асддаадчсса ссасссссдЯ чдоадссдадЧаса асдадаасса дадсаазадаа 2580 чадасацаєсд садссаєсадч чассаасссс ааадасчассї сачсачссач сссааєсасєсс 2640
СачадсссдЯяад сЄсассссчзад баєсааааєс сасссадааа басасаасає сседссосад 2700 асЕсдссЯдда чаассдассо чссСаєссасаз аааєсасаза ааваєссьсає седсесссаає 2760 сасессадча єсуусаєсза адасаясьтаа асксаєсьдєс дадесастас чсаєсаєєче 2820 чаєссдачааєцч ассадсдаєа сдчазакасєсс дсаусасктає сдасааєсса Кседаазакс 2880 сасаадаааа дсазасуєса саєдаассдЧа сбдаавасааса сааадасада Сааачесасч 2940 сасаєссадаЯ асассддассу ачассассуда асассдадса адассасуцча асссссааса 3000 ччачсасаясс сЕсааєсссач сссаааєддс адесчаааса сссааассяс сссаєаєаса 3060 ччачсччаєсс асссаєсєчес кчсссучссЧ сесссеЧчссаа сасдчоадачесс сааччессачЧче 3120 чЧсассасес адссесссссу сСасазачссу дсаєсасаадч ааздсаєсоськсассааєсс 3180
ЧдЕсЧчеаасча асаддадссасс ассачссада агааааєксат Сасссуссає ссадссчаса 3240 ссссебасач Счадссусбає сасаєдуєса сбадссдсссс ссддсачеєс ЄддсссЯса ззао сеісааааєсі седаєдісас ассусасаач асааааасає ассассасда асаасаазас 3360 сдессрЯяссса сасааасачі азсасаачачч дЕдссасчад ссасаєсєссаа сддаадасає заго счадчссусу ассааасссс азсасачася ссдасссаса садасасааа саадесссЧед заво асааєдссяд дсааєсадчує чсчасааєсЕ ассчсссдса сочаддаадсесс часасЯассачд 3540 аяссачссссс ЧааасасдЧче заадчдсачесч ссдссаасча сЯдссасачає чачасуччесса 35600 часстазассд дчссдасудаа ЕЕсасдсссс ссссдассаю саачсавссє асссясассс 366о сгдасчаєсас асадссасьс ассассясча сссссоуааа засадсаєсссадасаєсад 3720 аачаасаєсс сдасссадччс даазасассч ссдасасяЯясе чдасадсУусссс ссдсяЯяссае 3780 сасасссдає сесгасеЕсЯс аасеуссесЕ сСстаасадсдча гсдсусаєсі сЯясессасЕс зв40 ачзчсдсааєс асчааєдаає аасадеіссуад ссуаєсдсдадч счаєсесдає часчадечса 3900 асдасеЕЧчусс сдссдаасаа дЕСЕЧддЯдааач азасасасаа ассессясса СсЕСсСсСсассад 3960 асссадЕсЯЧЕ сасссасдаує дчавсесьсас ссдасаасся сасссссдас дачдчоддааає ад20
СаасададсєсЯ саєсдаєЧчєс ддаасдачеся дааєсядсача ссдасассач чаєсесоасса 4080 сссвасучаа ссдссссує дачеЕсетстс сьєсаєсаса дазасудссс Єсссааааає 4140 асаддсаєсуа саасссрдає асєдаасааає саядасадсесса сессдасЧчесс часчадессь 4200
Ебссааєсача аєсчзЧЯЧссСаає сЧассасаас ассдоасадач сассасаЯчесу ассєЕдасодаа 4269 асчоасудусаач сЕсаєдасса ааассссісба асдсоучачеЕса соосоєссуєсс саседчачсає 4320 сачассссуєЄ адаааадаєс азааччассьс сссдадчавсс ссрсвссссд сасясаасесс 4380 чесдссрса аасааааааа ссассчссас садсяЧчсуЯас ссЧсесЧчесоа чассаачаче 4440
Сассаасссе ссссссдаач дсаассддсії ссадсачаче дсачасасса засассуєесс 4500 сЕсСтачедса дчесасачсса чссассасе сСсаачаасьс сЯдсадсасся сссасасасо авБео
ЕсассссЯдсс аассссуєса ссадсачссч ссдссачеяу стасаачеся сасссгассд 4620 чассаддассс зачасчатадч ссассучаса ачасасачся чЧчЕСсСЧчадсеча асадчачаЧчоччс 4680 сабадсасаса чессадсссЯ дадсуаасуа ссбасассуда асєдачдасас ссасачсчс4д 4740 ачсаєєдада аачдсуссасу сЕссссдазу дчадазадчас ддасадчдває ссядсаадея 4800 чсадчдчссаЯд аасадчачадч садсасчадад адсссссадад чудааасдядсс садтассссс 4вво агачдсссесас сЯячасЕсСсус сасссссдас СедЧчачсчссд ассссоєча сЧчдсссяссад 4929 чадЧдасаддач ссстасддаза аасчесадса асчсдЧдссЕк кЕсасЯуЕєс сгуддсесее 4980 чЧеЕЧЧссСЕсЕ сЯсЕсасася сссстсесссуд сяассаєсссс кчавссьячс чаєсаассята 5040
ЕсассЯясссї ЕдачечЧчачсеї дчасассдстс дссдсадссу аасчассчач счсачсчачес 5100 садсдачсча дадаачсоддаа чдадчсядсссаа сасдсааасс дссесьсссс дсасдаЕваЧс 5160 счасєсасса аєдсачссдуд сасчасадає сСссссдассд дааадсччас адчсдачсаса 5220 асчсааєсаа сасдясдсасс дсрачссадда аадачсЕсдЕ ачазаасдсаа азаддссаєс 5280 сЯдЕсаччаєд дссссссЯасо сачеЕссдаєса сесддсадсї сасчдудсаЧчас ЧдЕсседссся 5340 ссасссссся здзассаєсусо ссасаасяєсс сазаасссяЯясь сссудсачає Єсдєсссасе 5400 саддачачеЯд сссассдаса аасаасачає азаасдааад дессадесьс ссаасєдаде 54АБвО сескеЧеЕссв асстчасдес гЧдасачссес стасссссус чссСаасчсса чсасачавде 5520 ссссесачсс асчасдссЯдс аааасзасдд ссачсссгбаа дсісачуссс сазаєааєда 5580
ЕСЕсаєтеву ассдчавачеч ассбуєсссЯясЄ садсаасааає сдасчачсаа СЯссекесса 5640 баасдссаас бБЕсСЯасСасааа ааачсадчсеї ссасядссяс ассачасеЕса аасессачаа 5700 чссадчдаасі сазасааачда здсчаєсдсу сядчдссЯяссас сЯабассссса дчсаєсаєсає 5760 ачечааачеЕс ссадсЕССсСЕ сассядеЕсЯв Севсвассьс сасссааача чассЕсссас 5О2О сбаазааєсс сЯачсассавс сссассьсас ссЯяссасься аассссеєсає аассеєссаде 5ВВО сдааасстаєс асаядсссссдЯс асасдчдаєваєс согасааасс саєссасссуяє сазасасєссс 5З4О0 сааассдсає аазасьссає даадессссяє сеаєссссаа сддсадесссаа сассесссата ОО ссдазасаса сааєссасеє аассссачдед ссЯЧчсачааа чсасааєчає стасссесає ОБО сстсссесаєс асазасуссс аасасасаає асгааасааає сесссасесс аадазаччаси 6120 ссесассєса сассестазаз асасасвсас сааасасьсе ссаассасує аваєсссаєа 6180 асаагаадЕє чЧЕсссаааач Саабазааєє саассссаєа асЕссесвтає ссчаседаєс 6240
Есаазачсаас асссадсдас асаасьадсесс асЕврсссьссеЕ седаасааваа аваєссавес езбо аєсасвдрає сєссссстаса сааєсдаааає сссассааас аасчаєссує часаєссеосд візво аачсаачсса счугсасусаа аассссасаа сссссассся асассасууа ачсаасьсдаа 6420 чаєсрЯдсссє сасасусдад асасасевсс сааачдсзасє сгсаасаанач ссассатаскс 6а4во саачаєсьса сасассааає асссаасаєє асесссааава аассазаєсау асасааєсєсва 6540 аасассасьс сессаавььс аадсссазась усьдааєссЯ бсдасьтаєсда вБЕсавкавсс 6б6ов басстасуУуєсс ааассоясєсс асачасачес сазачсааає асавзадсаасд сачдсадааса бо сгсачачсчсс ассстадасс асбааассаса адчаєссаєудч гаддассааєс сссасаваєс 6720 сссваєсясе ЕрсассеЕвсЕ сЕсСачсаєді аачсссчеЕаа ссадчааєтсас сасаЧадЧдЕ вас 6780 саєчасасес сагддЕсЕвЕ сдасссасусєс аєддаєЧчссЕ чдедсаачаза аачасазада 6840 асааачаааа аачасаазас адададасаа азсусааєса сасаассаас Есаааєсачес 6300 сасбдассда ссаачассдс сясдєссабд СаєцЕссаза Едссасбдсаа адсаасасдє 6960
ЧдсЕСсаасасуд сассеЕсааажє дасрсасеса Есссаассса сасасаааса сассасеєссс 7020
БЕсСЕсСсабса Есассасаас сассечсаєса басєсавєссс сесссяассас сесазеЕсссс 7ово ссасіссаас асасяєсаас ссдсасаєадс чеЕдссассосо асдсссааає ссссасчесає 7140 чЕЕсСсаасса ссеЕссссрос сасараасас ссасазасас сіссзасаєс асссасьсос 7200 сесассабсс асссасссазд адсассасса ссссассасс асазасасссс аасссаасес 7260 асасссааса ссасесссачу асссаасаає чзеЕссдсссса ассдсессдаса ссадаЧчесад 7320 чЧчасіссадад чссаадазачд сесасаєсус сцчасассЯясо ассаасачус асааєсчаса 7380 саачсасуєсЯя аассдасеса асчкесєессь сассаєсяча ассесасесе асоачаєсчсає 7440 ссазачсЕссс сад ссссас сісаасьсаа дассяссаєс сддассЯдсаа ссбассасеєс 7500 сессассодда сеЕсдуаасса ссуссддаса ссасаччссє саудсеєсасе дессасассс 7560 вассасссеЕ ссасєвбадча сссдасоссас сачссЯдссада чазачачесч єедадддаєс 7620 бассачаєчуч счадссачау ассасачдуддс Ссассаєауу сасассдаса ссцчасаазчзча 7ево сссасасссЕ дсЕадзазачч чассесссса сісвсасстє дччасаччасчч єЧчасдаачса 7740 чаасссазач аччдаєсоадаа чдассчасає сеЕсЕдаєсес аасуачдасс сачсеасесде 7800
Есеусаасас аддчаассасс сСсаачдсєдс дЕсСсассаєЯч ччасеЕсассЯ єсссаасдсє таб сЧчЕсассодЧча сссодчаєсдчу чачаєсядсе бададчасес асдсасчссая даасссьвач 75820 чаєсЕсссес чЕСсаасаад сктассевсеєЯ счедаасься сеЕсЯдсісасе часеесадЧчацда 7380
Есаассаєсс часєчаслача асссьссрад ччаєссасуєуд ассассдяссс Єсассасссс 8040 сддачачаядча сассасаасс їссассасда дсссссассс дассасадда асадсваєсцча 8100 чЧчсчадсассач басчасссгта ссаачєсдасс гасссчуЧчес Соодаадсаас ЕСсаЧчаєссодс 8160
СсасчацсьсС аачаачесса дадсраасча чассуачаад чааачяуюеЕс аасаастєса 8220 чЧаачаачсЕЕ часачааача чоаЧдсрасссс Єдсаєсддоада ассссасься аєсаасьссс 8280 ачсчаєсддаа соддаєчасе асчссСдадса ачдчссаадаас дааадчдучас ссоадєссастає 58340 сяссадЧацчсЕ чіссасчасу ббасечассс: сассааччає сасссаддчач чЧчазадачесає вапо чаєсьсьссє дадзассддаа аддаєдссєас саясксаєдєсс аасодаччад сусастасса в46о сессаасдса дсссасаасс СЕСЕсадсас саєсчададеєЧч ччачсдаєса чадаасчаєу 8520 счаччесчач асссоуаача чоадсісачаа здучачаасуєс дадсасясса чачасоадаєс вБ5ВО садасаааччяч чЕдаєсадддч ссддададса ассаассаад арсссададс саассссаас 8б4о сасрдавудсеЕ десссдачсад сЕадсеєсаає сассессадуєс ассадсаєча ассааааєае 8709 асчсачдсдЕс аачачсеЕсає чаачачсаєсч чааєсаєсуба сссдчассаскч сСаасачтіаса 8760 асааседаде Сесавсосаєс ЕСсСЕсстасуд аасадасааа ддасоассаєд асасаєсаас 8820 ассссаєсса сасассесає кдсестаєда сааавсссся сессаєсаєса Єаааєсаєсь ввво чаассусуас часссасдда асудсіссааа Садсасаваа асавааєчеЧчс ассасаачдас 8940
Ссссраааса ассссаассс садсассдсЯ азсчачасає аадсдеЕсаад аазасасаас зо000 ааєсаєсаася чаачаачссс чеЕсеЕссассс асасассаса сассасссас єсасдасасса зов6о сраєсадчасуд ссаздчдадчас агаасаасса сааададача адессдчраєс саєссасаєса з120 ссасаєазсса сосасстсавба сассасассвї асссасексає єгаасуєссс сасаадЧчєьс 9180 часссаєдає аєстсстаава ЕсСттачісєда сасуусасасяа аааваччсасе ассетуаасьс 3240 сессасіссуд Сасааачасєс ддчдассасссс сазачсдадс ссасьсзасєс ссассусссе а300 сбасачасаа ааазаазасс аєсдадссдчасє ссдасаааає ассдааддає Єсааватаає ззво ааєсааасазаі ааасаасаба саасасаєсудє акагаваєсе ассагаасає засаєьсаєс 9420 сасаааааач сааасассаЯє сасаааєсса СасзассЯєс сауссьсаЯасо ччаасдааєс 92480
ЄсааєсасьсС аазасчадачі ааасасаєсєс чдасссесссоуч стаєссааса зассаєсаєсяе 9540
Єаасассава сдааавссьс єсЕсЕссаєс адсааадаас ааааєсааає саздазадачас 9600 аасдуєдссс саассостбає асаассвзасі гссасаадаа адссаадесса дачасаасаа зве0 ааааасаадс ааадчааасєс сеЕсгаасєсся адссяасссвЯ ссбдссасає ааєссаєсдса 9720 чЧЕаазасасї асасаєаасс сссссадсад сачачсааєч чЕсдасочктя бассвачесе 9780 сЕсСЕсасьсь арсЕссесає садчсааачаа сааасаааасє аааасчачасє ассссадача 9840 сдесссаасс сосбасасада ассссааааа саадсссссс адчсассстас саасчаасьс з900 чсчдассЧчсьс сСосссасаєда саєсусрсссу сададчссаач сдядсасдсееса ассааа заве «21025 57 «21153 5767 «2122 ДНК «213з3 Штучна «220» -223з Плазміда ррАВ7325 «-1005 57 аасссясядо сЯчсеЕсссссу саєдасаєся ссссдсада ссаадсоасає чсеЕсаассаа (51) ассаЧеЕсьсс сачсаєсаєс асачсечааач СссСЕЧчсокес сссассадаса дЕБЕЕккасе 120
Гссасстсааа чадасссссес асстіаазаає Сссдасасєса ЄЕсеЕсассьє асссуаєсасєсе 180 сесаавсссес асаасссстя дссдаааєса ссасдссссс асасасчаса сссстасааа 240 сесаєссасьс чесааасасєе сЕСсСааассяс асаааасесс асчаддядсссс дсссассьсь 300 аасдсадссс аасаєеєссса Сассдаааса сасСаасссас Ссаастссса сЯссадесача 36о аачсаєсаасч асрссассссе асрссеЕсссвс асасазасдЯдс сСсаасасаса асасааасаа 420 агсссссасс сСсаачаачча сСеесссасеє сагракессяаа ааавасаєссс ассааасаєс 480
ЕЕЕсаассас дсаааєсьса саасаасааєЧ Ксуссссаза адсаасаааяа СсСсаасесса 540
ХаасЕсссуї асЕсдасьцда ссіІсСсааацчса асасссадья асасаассяадя ссасєсвсссс ди) ссссЯдаасаа ааазасссаа Ссаєсаєсає асссессесва сасааєдааа ассесассаява бо асаасєчаєсс чеудсасссс Єуаачсаачі сасдєсаєбус ааааєссссає аасссссавес 720 дасассася чаадсаасса аачаєсєЯясЕї Ессасасодсу адасасаєсЕ ссгазадсаа 780
ЕСсЕєаасаас адссассаса сісаачассс сасасассяа асасссааса Ссассьссайв 840 аазассзаєс ачасасаасс аазасаєсас ЕСЕСЕсСааєс ссаадессєва сЕдЕссдааєс 200 сЧсЧдастаєе чарсвсассає бссассасдс сразасвуєт ссасацаєад ссеааацчеаа 960 абасаачнаа сасадсачач єЧссачадся сбассстада ссасааасса Еаачаєсеєсає 1020 часчасстаа СЕсЕсСасавра сссесєрасвсу ссреєрассьс сесесаачсає чдсаадсседе 1080 аасєддааєсє ассчдсдЧдЧасс десаєсдасас сстастадесе сеЕсуЧчсссає дсасучаєсь 1140 счсдсаздаа ааадасаваєч аасазадаза азвадасаааа сачачачаса ааасасааєс 1200 асасаассаа сеісааассрач ссаседдсьЯ ассаачаєся ссясуєссає зсасуєссяа 1260 асдссасдса аачсаасася Сусссаасає чдсассссСсааа сдасьсассс ассссаассс 1320 асасасааас асаєсдсессь сесссессасс ассассасаа ссасстяасає асасесаєсс 1380
ЕсЕЕсСсдсса ссесаасьсс сесассесаа сасасяссаа сссдчсасасч сЯєсдеЕсаєсе 1440 сасдсссааа сссссаєоаса сЯассссаассе ассесссссс ссасасааса сссасСаааєса 1500 ссЕссаасає сасесасьсс сЕссаєсаєс саєссаєсса чадсассасі асесвасвас 1569 сасаасассс саасосаасо сасасссаає астассссач дсассссуса дачасссаас 1620 аасСадссссс аасасесссу адчасчісаа Чудес сЕсаадссач аєдсадсаас 1680 ссссаасеву дсвьсбессоса сассасссує дсаазаачдсі дасаасачасєс ссаачсаась 1740 счсЧсзЧад аасарьсвдсо ЕсЕЕСЯСЕсСа сссусасссс чсадеєсьсі асачачочста 1800 сЕбдЕЕссЕсС сссачсідсаа аасдасадаєс счасасьсьс дсевасаєсс сЕсаваессає 1860 сссрдччастя чоачасаассд ссдддасаса сачасссьдд адсссасаадче сасасааадес 19320 саачесчсса сеЕсадачеєса сасьдчсєсає ссесаасася чЕсдссЕссс аачасдседсе 1980 сасдчаєсяЯяд дебосуєЧасс асауааєдса ссасааусасє аусуачассу асчсучассс 2040 асасааєсдса асдачадачЕє сестсрескс ссасаєсядс сЯадсЕссссЯ ЕсСадччазаса 2100
ЕссєдаєсіЧ азачааааяач дудаачадасс счасаєдаде чассьссвсЯя седаєсссаає 2160 асессЯсссс сауаадаадс ассаєсьдає ссесасдсст стазусстдЯсс ссасдаєсдаес 2220 аассчєсаєс ссЯядссвасі ЕсСгЕЧддчача аасссддаса аасдесссоев єсЧчгддсаче 2280 саєдееєссЯяє гтасадсЕссса ксссдаатчт сасстчЧчудєсЯа чЕдЧчаасесья ссасасасаа 2340 чеЕЧчадЧдачас ааассстасу асаачессає саавасстссс даааасссьє сачесаЧчсчає 2200 чсссасессу даадааччає єссасааєсса ссаєсасасс сссссуєцоад астасаачасє 2460 ачсаччадсес ддааасааса адссдаасьс сасаасаасу Ессаєсааве єСсСЕссЧсодаа 2520 ааєсячасєсадд дссраєчаєі сдЧазчассЯє чадечаєсчас ассдссаача асачоадЕсаа 2580 чачаассядус часядаадссо ассаєсссссоЯ чадссдудЧчасЄ часдачаасс ададсааада 2640 адачаєсачає дсадчссаєсса дчассаасес сааачасчасєс счачсадсса чессааєссас 2700 ссачачессч чЧчссассссчда чеассаааає сраєссєсадаа асасасааса ЕСЕсЧЧЕсдса 2760 ччессЯдссоу ачаассчаєс сдссассасба аааассасаа ааааасьсса сеЕсЧдссссаа 2220 ссассесадуд аєсдяддсаєса аддасодсеса ааєсасесас садчесасста сасаєсаєса 2880 гЧчаєсазудаа чаєсачсчає асуааасаєс сдсачдсасса ссууаєааєсь асссдаааає 2340 їсасаачдааа адсааасусс асасдазссу асдааасаає асааадасад асааадчесас 3000 чсасасссад часассдуєс дчачаєсаєсу аасассчЧчачЕ аачаєсасчу аасєссьдчас зо6о аччачсасяє ссссаассса дсссазаєду садеЕсЧчааає асссаадсся ссссасаєсдс з120 аччачсудчає сасссаєсЯяє ссЯссЕдЯСсЕ дсссессасса асасчдадачі ссазадєсєдч зіво счсдссдасс садсесссьс дсасааадсс дадсассасагх дазаачсаєсу стсаєсааєсс 3240 сЧссасаасЯя аасаччссас саїсачісаа аасаазаєса сскассечсса сссачсечає 3300 асссссотата чічачссса ссасаєсчуадіс асачссЯассе сссучсачес ссддсссЯсд 3360 ссссаазаєс сссдчасядсса сассдсасаа дасазазаса баєсассасу аасаасаааа 3420 сЕдЕСЕдсЕЄ асаєазасадч Єаасасзачая чЧчаЧасЧЕсСасча десасаєсса асачддчаавасу зав8о гсчачачссяс чассаааєсс саасасачає чссдасссас асачччасасаз асодаЧасесяЯс 3540 часаасчдссд дасаассачд сдсуасааєс саєсдсссЯдс асдоадаадсс счаєсасясса 3600 чачссЧчЕссс сдааасаєда саааччсадс чісассаасуд асуєссасада сдадасадес 36560 ачассааасс дасєдасоддча асссасдсоб сьсссуасса ссаачсаєсе сасссаясасс 3720 ссідчаєчасд сасаяддессасо сассассасо асссссоддаа ааасадсаєє ссаддраєса 3780 чЧаадаасаєс сбдасьсадч сдаааасаєс дссдасоасос гчЧчЧдсачсЯЕє сседсассЧу 3840 сгЧсасссда сссссдеЕссу саасьдсссє єссдзасадсу ассясявраєє сесЯсессоасЕ 3900 саччсчсаає сасдаасчаа саасуддчесвд чесдасаяасаяа чЕЧчасеЕссда ЕчасчачечЧі 3960 аасчусічус сеЕдссдааса ачссруддааа чЧааасдсаса засьсесдсс ассоссасся 3020 чаєссадься Єсасесаєда счаєвссьса сссчасаассе єсСасеєссвда сдаддадчааа 4080 їсаасачасс чЧчсассчасудс судасазадсс чдадзассасад ассдасасса чддассеєсдес 4140 аєсскасуча асеЕчсстісчЧч сдачсьсьсі сссссассас адазасоадсо Ссссссаааза 4200 гасддсаєссд абЄаасєсссяда касуаасааа ссадсадесьс аєресведавдсе счаєчачьсе 4260
ЕЕссаассад ааєсяддкссаа ссЧадссдсаа сассддсача дсаєсасуєє часесдас9д 4320 часаччсдсаа здсісасдасєс аааассссос аасаябдадьс асчсчссЯчЕс ссастсдачед 4з8о0
ЕсачассссЯд Гадазаачає саааучаєсь ссссдчдадаєс сеЕсЕесссссЄ дсчсасаасс 4440 сдсЕдссСдс ааасаааааа ассассуста ссадсЯядбЯдд ЄЕсЯСсЕсдсс ддааєссаачач 4500 ссассаасес СсСЕсссуаа чЧдсСзассучс сСссачсачач сусачасасс ааасасечес або сеЕсссачедЕ ачссдЯдсадссЄ адассассас сссаачаасоі ссчсадсасс дсссасасас 4620 сеЕсЯясссвЯас саасссьсс ассадсдчдсеЕ ассуссадчьяЯ Чдсчасазчсс деЕдессЕсасс 4680 чаЧчссдчасс саачасчаса чссассоочає аачасаясадс чачссЯадЧдссЯ аасоадчачЧчачдЕ 4740 ссдєдсасас адсссадссс дчадсдаасу асстасассдя зассчачаса сссасадсчє 4800 чачсассдад ааадсядссаєс чсесЕсссуаз чзодчачазаду сччасадчдса сссядсаадс 49860 часачадіся чЧаасадчача чдчсдсасчадч чадсессесад чддчааасяс седчасассьс 4920 сасадессьЯд ссоадуссес ссасессеєда сесчадсяєсс чассессас асастсчєса 4980 чаччаЧчсадда ассеЕасдчаа ааасчссадс аасчсяЯядссє ЕБЕЕсасЯЧчеє сссадссесе 5040 єЕЧчсеЯдЧссЕс ссЯдсЕсСасає чЕсССЕсСЕсСсє десдЕсасссс сечаєссвдес ддадаєаасесяс 5100 ассассядссі седачсдадс сдасассясс суссдсадсо даасчассча дечсачсдач 51І6О ссадідадсч аддаачсуча ачЧчачечессса абасусааас сассЕсЕссое саЯасяЯясЧчЕсад 5220 ссчаєссасс аасчсачсіу чсасдасадаяч ЕСсЕсссдасі ддааадсдадч сачесдачсЧс 5280 аасясаасса асасдсяЯсас сЯяссачссад даачачьсьЯ Садчааасяаса ааааачдссає 5Зао ссчссаддає ддсссссрс Ссадсссдає дессдасаче ссСасудсояодя саяссссдссс 5400 чссасссісс дадссЯдссдс сесасаасяє ссаааєссус гсссачсодча сеЕсЯассобсас 5БАвО ссаддчдадаче дсгсассуасєс ааасаасача Саааасчааа чусссадссє сседассудау 5520 сескссасеЕс баєссдаєудсе сруддасадеес сесасесссяЯя сЯссаасасс адсасучаєсу 5580
ЕсЕссссадо сасчасЯяєсд Саааасчася чссачЕсьса адсссччдадсс ссааасааєч 5640 асєєтаєесс чассчасачс часссасссЯя срдсаасаза сСчасдачса аєасьвЕвеЕ 5700 асаасдссаа сЕсвБЯдсасаа аааадсадчс сссасядчесая састачасьс ааассссада 5760 адссаду 5767 -210з3 58 «211з 6109 «2125 ДНК «213» Штучна «220» «223» Плазміда ррдав7327 «400з: 58 счаєсассєс чдачеаєссаза аєссасссад заасасасза бассссассяЯя саадсеєссаес бо ччачаассча ссрдссарса Едааааєссас аааагадасьс сасссясссес дассасьсса 120 ччассчасас бааддасядсс Едааєсасес деЕсддадєсас сасчсаєсає сччєсчассуач 180 аачаєсачсу абасуаааса єссубаусас саєсуаєаає Есасседааа агссасаача 240 ааадсааася Ебасасяаає ЕєЧчасуаааса асасааадас ачасааадсс асчсасатєцьє 300 аччаєаєсду ссуачаєсас Єчаасассда чдсаадаєсас учааєссссЯ асаддадсає 360 чдссеессаакс садсосааає чзасадседаа асасссазас сассссасає чсавчаасоч 420 ассаєссаєс чЕссечЕсСсЯЗ ссЯссЕсСсСЯсС саасаєчуда чсссазачуєс дасдасассда 480 сссачсЕссс гсудсасавач Есуучдсассає аадазадцдсає сусссавєсаа СЕБУуссЯсаа Бай счаасачасс ассассаусс аааасаааає сатсасссяас сасссадеву агассессоса во
Сбачсдачссдя сассасаєчя Єсасадссяс СеЕсскддадсач сссгчасосЯя басСсссаадааа С)
ЕсеісеЧасує сасаєсдсас аадаєазаза сасаєсаєса Єдаасааєза аассЯчссекас 729
Есасасааас адсаасасаа чоддасчЧЕсСас чадссасасе саасоддчаза саЯдссачадчасс 780 чЧесчакссааає сссаасасчу асдсєдасьє асасчучеаєс азасуддуссс дечаєсзавці 840 судасааєса чусадсчасаа СссассЯссс чсасСодддаач сссчаєчсяс сачачсеЕЧчес 900
Сесдааасає ддсааачдса дсдсСсдссаа счдасдссаса чаєсєдачаєдд ссадассааа збо сеічасічЧася чааєсвасдас ссесссссуаєс сассаадсає сЕсасссува сесевчаєча 1020 счусасдуєса сеЕсассасьу сзчасссссууд ааазасадса ссссадуєсає садаадчааса 1080 гсссдассса чачсСдаазаса ссЯассдчасдс дссдасачся ссссрдсЯясс чассасаєсс 1140
Ччасссссдсе сдсааседсо сесесСаасад садассуєсчва ссісЯссссу сесадусаса 1200 ассасчаасу аасаасЯачЕсє сЯчЧесЧаєсас чачечаєссс Часчасуачес чсаасчасса 1260 асесЕЧЕсдаа саадсссячЧа аадааасдса багасьєссЯя ссаєбстісас сядаєєссачі 1320 суєсасссає дасачасьесе сасесчаєава секттавсесе уасчачучча аассазсачч 1380
Есадваєссчає чссддасдач ссддааєсдЯяс адассчасас садччаєссвя ссаєсскаєч 1440 чааседсоссо ддасзадссс ссссєссассі асадазасудч секЕСссааа засаєсадеає 1500 бЧчасаасссс часасчааса аассдядсадьс Єсасєєсчаєяа сесчаєсуадс Сессессбаасес 1560 ачаассдусс аассдадесдІ дасассудса дачдсаєсасч седасссчас чадчасаасде 1620 аачесссаєда ссааааєссс Сгаасаядсдач ЕсСасоосЯяєсоя Есссассдчад суєсацасесс 1680 счсачазаач аєсаааччає сссстсддача ссссгсесс ссдсусясаа сседссЯссе 1740 чЧсааасаааа ааассассус сассадсуде чассбусьсЯ ссдчааєсаач адссассаас 1800 ссЕсеСЕссЯя ааддсаасся дсЕссадсад адсдсачаса ссазаєастя бесссстачі 1860 чсачссЯдсач Ссадуссасс ассссаадаа ссссдсадса ссЯясссасає ассссЯассес 1920
Ччссааєсесуд срассачсяд ссдсьдссад єчддадсдасаад ссЧсдсссва ссадчЧчеЕсацда 1950 сісаадасча сачдссассяду асазддсчса дсоччесаяадчус ЄдаасочадчЧчя чЕсСсЯсдасас 2040 асадсссадс сЄсдчдадсддаа счасссасас счаасьчача басстрасадс чсчдачсасьч 2100 ачазадсусс асядсссссся аадддачааа чосодасачя сасссодсаа чсадчсаддує 2160 счдаасачча чадсядсасуа чаддачсЕссс аддадддааас чдсседдЧдчсаєс сеЕсасаЧчсесс 2220 кЧЕсСЯдЯвЕЄ сяссассессє часеЕврдадся бсчасеЕсесд єдавусЕсуєЄ саддачдачсч 2280 чачессасуу ааааасудсса дсаасацсоадс сЕсЕсЕвсасяд сссссддссЄ сссадссадес 2340 вЕЕсдсЕсас асчЕссесссс ссдсярсаєсо ссосдаєсссе дсдЧчасаасо дбассассдс 2400 сЕседачсЧча чсєчасассу ссосуссдсад ссчаасзасс дадсусачсоя ачссадчсдчаа 2460 счадчаачдся чаачачдсчсс саатасудсаа ассЯяссЕтссс ссессдЯдсЯяасЯясь часечасеса 2529
Ссаасасачс счдсасчаса чдсЕссссода ссудааачся часачедадес чсаасчсаає 2550 баасасусдЯї ассетссачсс аддазчачьї счсадазасу сааааадчес асссЯяєссача 2640 асдчсссссо чдсссадсссу асасссддса чсссасучеч чдасЯяссссдадс седссасесся 2700 ссадаЧчесЯсс дссссасаас чсссазассс чессссядсч дассьдсссо асссадчада 2760 чечессассЯя асааасааса чдасааагасуа азаддсссаді ссеЕСсСсдасьд адссЕсссае 2820 тЕсаєссдає дсесвддсадь сесссбасься сЯдсдеЕсСаася ссачсаєяада саЯарессссеса 2880 чіЕсасчасЯчї сдЕаазасда сддссадьсе єсаадсссддадд ссссаааєвза сааєстсаєє 2940 седасьдаса чсдассесчЕс сЯссусааса аассуаєдчач сааєдсЕсьс ссаєаасаес з00о аасьсрдбас аааававачсад чдсіссясядс счсастадче ссСааасєсса дазачссадча 3060 аєБссясяадсс дебсссесбос асуасаєсдЯясЄ ссбдсадачс саачсчсасд сссСаассаза 3120 сстадіссссс ачсассасса бадсуазаче сесбачсвсвсС ссассучбЯяя ЄБессссасссо 3180 стаєсрааач ччдчЕсЕЕсса ссгазаааєс седчасаєсаєс ссссасесса сесассассе 3240 стаасссссоса саасссссЯау ссчавассає сасясссссу сасасчаває ссссасадає 300 стассасссу сСсааасаєес ссааассядса сааааєсьса сдаачьссся ссвгаєсьста 3360 асасадчссса асассскесас ассдазасає асаасєссасс саассссадс чссадсачЧчаа 3420 ачсаєсзаєча сссассссса ЕсСсЕссссса сабдаасчсс сСаасакасаа Сасааасааа 3480 ссесрассс саачзааччає сСетсссасеьсе асассссааа затасаєсса ссааатаєсс 3540
БеЕсаассасЯя Єзааєсьісає аасбаабааді бдЕбссазааа чсаагаааає сезаасессає 3600 аавсеєсвсва сссдассдасє ссбааадсаа сасссадсда сасаассадс савсєсесесе з66о
ЕсЕЧдаасааа ааааєссаає Сбассаєсява ЕСЕСЕСЕсає асааєдаааа Есессассааа 3720 сааєчаєсся Сачкасссс даадсаачесс асачссаєдса азасесссава асссесаєсс 3780 дасасрасачдч аачіаассча ачассьусьє ЕсСасаєдсуа часасаєсьс ссазадсаає 3840 сссаасааса чссассабає ссазуаєссс асасаєссава Сасссаасає сасьсссаазх 3900 ааассаасса часасаасєста ааасассасс сссссаассс саачессессаає сЯясСссваассь 3960 чеЕдастаєсяа асссаєссаєс ссастасЯаєс сСаааєсуєсс саєачасаче сеааачсааа 4020 сбасаачсазас дсачсададі чссачачсудє сассссааас сасааассає аачасссасч 4080 чЧчеддассаає ЕсСЕеЕсасасає ЕссссСассде єсЕсасссвс єсссдЧарасЯ баадессяса 4140 ассчдааєса ссдсадассд ссаєдасась ссусЯддЕсссеє єсоддеЕссасу сасучассьс 4200 чсусаачааа задасааача асааачаалаа аачдасаааас ачадачдасаа аасдсаасса 4260 сасаассаас ссазассадс састчусеча ссаачаєсяс сусЯясєссавя баєдесссава 4329 бадссасодсаа адсаасасудє Яясссаасаєдч сасеєсааає дддсесасоса бессаассса 4380 сасасаааса саєседссесе бссессаєса ссассасаас сассвясаса саєсссаєвесс 4440 сттссчссас стсааєессь ссассссаас асасастсаас ссчсасаєдас чедесаєсос 4500 асдсссааас ссссагусає ЧчЕсСсСсаасса сосссссссє Сасасаасає стасаавсас а560 сеЕсЕзасаєс асесасссесс єссассаєссо асссасссадч адсассасса ссссассасе 4620 асаасасссс аасссаасьс асасссааса ссрасессадя сасссвбдсад дчдасссааса 4680 асчЕСтдЯдсеєс саассястіЧа сассадчуасе ачуддссссз4я4 аддссаадчаа часссасаєс 4740 чеєчасасся стассаасад чсасаасєсдч сасаздсасч гдаассячасс саасчессс 4800 сесаєсаєсдя дааєсссасс ссасудасдс асссаадсьс сссддчессс асессаасьс 4960 аачассоускса сссдчоассяс чаєссксасктас ссссссасся часссодчаас сассассудда 4220 сбассасачас сСЕсЯЧЯассса ссдессасас єссдсвассс бсссасссач дасссодчЧчеес 4980 чсесасьЯсбу даддаддачо счседачдуча сссрассадає удчсддасвад дчассасачу 5040 чессассаста чусасассча бассчасаач Ччасссабассо ссдссадчаа чудасесссс 5100 тасссссасс ссодаєддаає доасдасдазя садаасссаа ададчаєсядЧч азддассзчас 5160 ассєссдаєс ссаасчдадда сссадсесдсс дссЕЧасаас асаччаасса ссєсаачуєє 5АйО чсдсссасса єдачасьсяс ЕдЧесессааєд ссваєсвассд часссудчаєя чачачаєсау 5280 сЕсачаччає ссачсЧасасчс сачаассссс ачччаєсссссс ссЯсссааса адстассЕсс 5340 гбЯдсдєдаасе сссЕвбЯдсЕса сЕдадсесЯЧа часксаассає Єсчаєчаєсач чаасссьсся 5400 адчдчадаєсася єдаєссасеяде гсссЯсСсасс сеЕсСоддадачу часассасаа сссесесассас 560 чачеЕссссас ссечассасач чаасчсстасс чаусддсасс адсасчаєсс сСассавачсач 5Б20
ЕссаєсвдаЧч сесбдчааачеа асссдчаєсу чессасчаєс Єсаачаачсї саччдссаас 5580 чачассчада ачччаачучс ссаасаасесс сауазадаачс ссдасадчаа чададсбасс 5ЕЗО сссчассяча даасесссасо суаєсаассї ссадедаєсчд ааєдучаєда ссасястдад 5700 саадссаадча асдяддазоачад асеЕбЯЧсстасЕ ассдссуздач ЕсЯдсСеЕсасча сеастассдас 5760 сЕсаєсаачя ассасссачя адчаааччеє асуаєсьсьс седдааєсод азаадчасусе 520 ассчячстасчє Єсазсучаду адсдесассас сасссваасу садсесасаа сесесесадс 5аВО ассаєцаччачдч ЄЧчдчадеЕдає садчдчауча бдсдчачасс4 ачассЕЧчЧчааха дЧчаччаччсссад 5840 ааччачаася Есдадсасуї садчдасуча сссадчЧчасааа чадсдассау чассаЧчадач 6опо саассаасса ачаєсссача чссаасссса ассяссдасу седчсссдачі адссСсадсевса обо ассасссаєчд єсассадсає даассазаає дсасусачуає чсаачаЧчес 6105 «21053 59 -211» 6136 «2127 ДНК «213» Штучна «220» «223» Плазміда ррАВ?329 «4005» 59 сечдесасесс чачтассавла ассессасссау ааасасасаа сассссдядсся саддессасяе бо ччадаассда бсеЕдсваєсса бааааассас аааааааєсь бавреєвадссяс заєваєвска 120 ччаєсєсяддсає бЄааччасасеі саааєвтавсь чдссддуєсас сасусаєсає счсчаєесчЧчад 180 аадаєсачсу асасуаааса ЕссЯчсСадсрас баєсчаєаає ссасссдааа асссасаада 240 азадсазаса ссасаєдашас сЯдасдчаааса асасааадас ачасааачес асдсасаєсє 300 аччаєсаєсддч ссдадаєсас єдаасаєсса деаадаєсас дуааєьсссу асаддачсає 360
ЧЕСЕЄссСааєс садсессааас дЧчсадссдаа асасссазлас суссосасасє десаддачеЧуа 420 ассаєссаєс дчеЕссусссду єбусесссаЯс саасасдудда дессаадчес чдасудсассда аво сесадчсеьссс ЕсЯдсасааач Єсдасаскає аадааадсає єдсстассаа СЕсЯЧЕсасаа 540 сдазсачдєс ассаєсачсс аазасаазає саєссаєссаяас саєссачевч асаєсссста воб тачечачеса саєсасаєда Есабадссдс ссСсседасаєч сЕСбддсссЯя ЄдссЕсаааа бо
Есссрдаєує басаседсас задасааааа сабсассасса Єдаасаасаа аасеЕдссьяс 720 срасасааас адсаасасаа чччЧсассає дачссавабс саасчдчааа суссдаччсс 780 чесчаєсааає сссаасаєуч асдссдасьс асасддчває ааасаччссс дечаєсаасче ва счачсаасса часочсЧчасаа сссассусьс деасучдаау сссчасасяс сачаяссЯєс зоб себдааасає дадсазачудсба дсЯссЯдссаа сдасяссаса часчачаєда Єсадассааа збо седассдЧася чзаасьсасуєс сесЕсссчдас саєссаадсає кЕсаєсссяса сссссчаєча 1020
Ечасасудеьса сесассасья счаєсоссяд азааасадса ссссачдубає садзачааса 1080 сссрчаєсєсса ддсдазааса ссЯассЧасяс дсвсадсадья Єессссдсосс ЯадесвЧсавїсс 1140 чаєсссьЯясс ЄдЕбаасєсуєс сесераасад сдаєсясяба єсссЧассЕсЯ сесадчечса 1209 аксасчзааєсч аакєзасачеє сдУесЕєЧасоасп чадчечасьсЕ чдаєдасчдаде чеЕзасчдчсд 1260 чсссдеЕсСЯдаа саачсссдда аачазасдса савасьссса ссаєссссас сЯячасссачі 1320 счесастсає чзаєдаььссс сасссдасаа ссесаєсссск чЧасчаччачуда аагтсаасада 1380
Есасастсдас ЧчеЕсадасча ссадаассясп ачассчасас саччаєсьтсу ссассставд 1440 чЧчааседссес часчадчеЕссе сЕСсСтссаєс асадааасяд сЕсссссааа аасаєдасає 1500 сдасааєсссє часаєдааса ааєсєсдсадесс ссабєссчаєсд сссчасдчачі СсЕссесссааєс 1560 азаасьудчеЕс аассядссує аасассддса чадчсаєсася ссдасесдас чадасдасас 1620 аачсссаєда ссазааасссс ссСаасдедад срасусяєся сЕссасеєдач сдссадассс 16580 сукачаааад ассааадчає сеЕбскеєдада СестЕССсЕС ссдчсядсуєЄаа ЕСЕДСсСЕЯесе 1740 дсазасаааа ааассассЯяс бассачечаї чЧдЕсьдЯссвЯ ссддчаєсаач ачссассаас 1800 сссєвссссЯ аадчдчсаассу дссЕсадчсад адсусачаса ссааасасту ссссессаче 1860 чесачесдбад сбаддссасс ассссаздаа сеісбдЕадса ссясстасає ассесЯястсь 19820 чесааєсссЧ ссассадбсодч ссдссЯдссач сдасдаєаач ссЯяєсуєсека сесдачЕсдазча 13860 сссаачасуа сачссассудд аєааддсяса чсаддссдчЧчс счЧчаасчачад деЕсседедсас 2040 асачсссадс ссддачсдядаа счасссасас сдаасєдача сассосасаче чеЧачсаєсд 2100 ачааачсусс асдяссісссу аадудачаза часдЧдасачу сасссЯячсаа десачасачаЧи 2160 сучаасадча чачсдсасча дададссссс ацддчаачазас десечуваєс єссасадесс 2220
ЕдЕСЧЯЯЧЕСЕ сдссассесс часссдадсуя ссзаєссьссд єдчаєсчсьсяає садчддачсд 2280 чачссраєду ааааасдсса дсаасдсоадс ссссссасяд СЕСССЯЧесь сесЯассЯЧес 2340 гБсвасссас асасЕСьсксС ссасЯстасс ссеосчасссс деЕЧчаєаасс чраєсассдс 2400 сЕЕБєЧдадеда чесчасассу сссуссосач ссчаасчасе чадсусачсу ачесачеЕчач 2460 счачдчаачся даадачдсядсо саасасачсаз ассдссессс сссасЯсЯтЕ дассчаєтсса 2520
ЄБбаасдсадс будсасчаса ядЕссСсссда сгддааачсдя чдадсадсчдадес дсаасдсаає 2580
Саасасаясує ассасвачсес адчаачачьс сугадааасу садаааччес асссуєсадч 2640 асччссвсєсє чессазсссЯ асдсесєдаса чессасдасу ччсЯбсссдс ссуассасссі 2700 ссядассусЕ дссссасаас чдЕссааассс чсссссудсу чассеуссосе асссаддача 2760 чзсезсссассч асааасааса здасазаасуза ааддсессадс сссссчассо адссссссУє 2829 кссасесуає чеседчсаче бссобасесь сЯсдесаася срадсаєсуча бБасссессса 2889 чЧчесасчасЯє сдбаавзасуа суддссадессї саачсссду4 сессаааєаа ссаєстесаєс 2340 сЕЧчасечаса чзедасеваЯас сЯдссасааса ааєсдаєдчач саавдядстсьс єсасаасосс 3000 аасетссдрас аазааачсадч десссЯчсчас сасастадує ЕсСааасєсса чЧчазассадаа 306о асссасоаусс дсЕсеЕсссудс асдасаєсдс сстдсададс сазасудсаєя сссааєссава 3120 сврадссссос аядсаєсаєса бадесдааадчс ЄЕсвБдЯдасссЕсС вєсаясодасоЯЯ БЕСЕСвсассє з180 ссавЕєааач чад ссса ссвбазаааєи: ссадсассає єсесасьста сЕбадсвасьс 3240 тааксесьса сааєсьсьвоу седаааєсає сасясссссу сасасдасає сссесасазає 3300 ткЕассасссд гсаваасасес ссааассуса баваасєссса сааадсесся сесасесьса ззео аскчсачесса асасстссає ассдааасає асаасссасс сааєсссадс чсбсадсачаа 3420 адсаєсааєча бсстасьстса сесЕСсовеса сасааасчєс саасасасаа сСасазасааа 3480 сесееєсассеі саачааччає сесссасься асаєсссаза аасасаєсеса Єсааасаєьс 3540
Сссаассасч сааасссьсає аасаасаачс сс сссаааа чсаасаааає Ссазесесає з6оо заєсесесвра сЕсдассдає сссааадсаа сасссадесда сасазссаєе сасеьесесьс зве
ЕсЕдаасааа азаасссаає сассасєсчсва сссеЕсЕсстає асааєдаааа кеЕссассааа 3720 саасчаєсссд сачадсассесс даачдсаадьс асдссасуса азасьссасСса асссссацьс 3780 часассасуд аадсаасеча ачасссЯяссс Ссасабдсдаа дасасафсес ссразачсааєс 3840 «ссаасааса чуссассасає ссаачаєссс асасассаза сасссаватає Сассестсагва 3909 аааєсааєса часасааєса ааавсаєсась вєЕСЕСЕяасстє сааддсеєвєаає єдседЧаавесс заво чечассасстя асесаєсаєєс сстастасручуєс сазассЯяссс сасачасаді ссСазадсааа 4020
Сасаадсаас чсачсадачЕ ч«ссачадсЯс сасссбааас сабсазассає зачаєєссаєад 4080 чЧЕддастізає сСЕссасасрає сеЕСЕсаксяс вЕсСсСасствЕ ЕСЕЄддваєся саацчессчра 4140 ассодааєста седчЕдчаЧЕсЯ ссаєдасась седсадеЕсьє ЄсочеЕєсава саєчачаєссьс 4200 чдсдсаачааа аадасааада асааачаааа аадасаааас адачачасаа аасдсааєсса 4260 сасаассаас сСсаазассзасє сассдуссда сСсаадаєссяси сЯясдясссасбя сагасСссаваа аї329
Єудссасдсаа адсаасасує чсЕсаасасу сасессааає дасссассса ссесаассса 4380 сасасаааса сасєдчесесЕ ЕЄСЕЕєСсСаєса Есассасяас сассєсчтаса Саєссаєсесс 4440 сЕСссдссас сесаавсссо ЕсасеЕссаас асасяЯєсаас ссдсаєвасас дечссаєсес 4500 аєдсссааає сессаєаядсає яссссаасса ссеЕрссесвеє сасасазавас ссасаааєас а5650 сссгаасаєсс астсасессс сссаєсаєсс асссасссачу адсастасса сессастасе 4620 асаасасесссо аасссаасьс акаєссазса ссассссрадуу сассссасад ддаєсссааса 468о асдчдесачдса ясссстсавдя сЯдсЯдссачаа сссдсечсач соссссссда содчасааса 4740 часессаавас ссасдаддаа сассааадас сасчасдссс ссавасссса сассессдаа 4800 асассдаєдча сЕсСссаадчаа сЕдчсасааа сасдесчаасс дасссаасасєс сасаєстсаєс 4860 сеЕСКСсавсс сассчассчу чесчассьса асссаєсочадд Сссссессса асддаавасе 4320 чсачсдсодча садссдсдса срассссаас ассддасссу ччассассяс гадссассає 4980 ачассдсдудд сасасьсссс ссасаадусс адсссдЯссьс єсааааєсста ссесдссдеса 5040 чсвадсЯась чачссЯссда аччссссаса здабаддсдудда чсаасаядаса сачадсасає 5100 сасачасаса садасасача чазачасссе БасссачечЧа чадаачдчасс десссасаче 5160 сасаєсячачасЕ ччасдссссс чазусадаас ссавачаадс аачччаччас ддасаєсасе 5220 часєссдаасєч аччасссачі бач дЧссбдЯЧ саасасбсадча асссссьсза чедсаєсчЧчасс 5280 сссаєчдсьЕс саддсссЕвес сассоєбЯвс десддесьЯдУ засдуадчача ссассучадча 5340 чаесеЕссаєссе ассдсчачадачає сссдачадся СссЕссЯдссс адсаадессас сесгессЯсаве 5АО0 аасєсасссу сасаєсддсє Соусчассаа ссчзіссЧдасу асадааастс сссасчрдчас 5160 саєдесаєаа сердсссссЯдс сасчссдуде дааддсстасс асаасьсяса ссаєчадесх 5520 ссЯдссачасо асачазаєдс зассчачсядд сассадсаєсд ассссасчаа ч«сдддачсась 5БВО тачасссодда адсаасссуд асесЯдсссас аассісаадчс адсссадаса чааєдчазчаса 5бад
Чачаздачаа чаддЕссааса чЕсусадаач азассяачаєс ауаачадаче чааасссЧчає 5700 бадчачдаасас сяссдЧдааса асеЕссестоатс ЯдЕЧЕСЕСсоЯдУа асдчасессЯЕ Сдаасадесса 5760 аачааєдаса азчздсасчдає гдстЯдЕсасі дасєсаксс асчаєчесдч єдЧасеєсаєс 5820 аачдччдассасс ссдасуддася гЧессьсасс аассссдсда ссудусааача сЯдссасачед 5ВВО аєсеЕссаасу чачасдссса сааєсаєсса аасдссусас асаассЕсесє ссссассаєд 59540 ачзччЕсЯадЕЯ ЕСссЕСсССсЯсСЯдуЧ адчддсдсдаа ЧчеЕддадаєсає Чдазаасчедчс ЕсааачеЕчач 6000 аасааачаєч єссссасесає ЧчууссЄЧчасаче сссоадсаасс удсассдсчач адессоддасудда вово саазчзссасса задсдадссса десадсссос чадсдЯдсссаад садсссуаєд адсадесадес 6120 сСсаассасеї адачдес 6136 «2102» 60 «211» 18713 «2122 ДНК «213» Штучна «2202 «223» Плазміда рОрАВ7319 -400з 60
ЕбдсСасагад сачдеЕсасЯаде суссвбааєса аасссааасс саассааєсдяс аассссдаєс во
Сссаасаася ааччсаасячд сЯдсаааадчаа ааааєсчсаєч ссасечсаєь дчассевесає 120 часдесвЧчаад счсассасаяа сасчаєчасу гагбазєссааа агассласьу сссасьсса 18во
Єєдаааєсдас ассяесассс саассасаєс сеЕсдасєсья сбасаєсуаса счасєдсаач 240 аадтааасаа садасудссЯдє ЕдЕСааачаа ссдссарсає акдедссіаа ссадчачадаа 300
Ессчадсуєс адасссаассе ааасассаса азастассеса сессдссусс адсаасачЕч 360
Саассадсяс ачдасаааєчу сясазачасс чсучааааас сессссуачі часаєсчасач 420 свтасссссче ассячссдавс садссачссс сассеєдасьс задуддаєдссс ссЯссадвда 4во сааассдссс ссааддадас адссаєдссс сасасессЯЕ ЕЧчааааасаа ассдесстссу 5іАО чачачасудЕ ааадссадеє дсЕссссаає аадчааєдес чадчачасаа сЧчгаассосс бо ссЕдчсачса сассссссра асссааааає саасссдрає ссаачасасс дсазаааасе 6бо тасддчсссаа ассссоясачду ассадсссач ааддсаасса сссаачаєсує адсассаада 720 аєссаасясь сбасуддаааа ассасуддазу сассавєуєзха чесссачсаач аачсачаєса 780 асасчсудса сасаєсдсаас стасадсссаа аааєдаачаа сЯсасадаса саачаєссвса 840 бассдссаца асасчаауаа чаасасусад ааассчЧаааа ачЧаадаасса часууаадааа 290 ачааєссссда ачасдсраадс ассчЧасчаса асааєдааза даадаачаса адчесччасча зво ббусдааача часаєбачачу асасаєсдсаа д«адсСадаааає дсааччдсду азадсаасся 1020 тассасааадч чааєсссаєс ссссассасе сасссесесса вассєьсссся бєадссавсьсе 1080
Ччсссесбдаде сесссрасає ааччаассаа чессоусаєс бдсдааааса адааааааєс 1140 садсЯдсаачс сасЕсссссє дзадсасєда дчасасаасе Есачачааає єсочгааЧчессе 1200 чЧчеЕачдадсасса чаєссддаєсс ссааассаєу СссссодЧчада одадассаді Сдчдадаєсзач 1260 ссачстасач садссдасає дассдядсудЕс єЧеЕдасасся сеаассаєта саєсдачаса 1320 сссасадсда ассесградчас адачссасаа асассасаач ачсччаєсча сдасссадад 1380 аччесусаач асадасассс єсЯдЕсЯадЕЄ дсєдачасвса аддавЧасвЧс ЧЧчссачсасс 1440 чдсеЕсасяссдЯд дадсссгдадаа Ччассаччаас чесссасчасє чадасачесда дчачеасьЯчс 1500 басчдсдссас асаддсаєса ааддеєсдддс ссаддаєста саєссдсасас асасьтаєсе 15260 аачеЕссаєча аччстсаачуеа ЕССЕзачссЕ дсоаЧчЕсЯсьу сСсасачусся сссааасччає 1620 ссаєсраядсса чассадсасда часЕссддча сСасасадссс чдаддадСасаєс дсдсдасадеє 1680 чЧчасасаачс асздсочасу чсаєдаєсчЕс дуссессоде аааччачаєсєї сдчадссдсса 1740 чдсЕсссссаа чассадссач дчссачссасс саааєссдчач Садчесадчесс аассасссач 1800 адсссзаєсдя чсяддсаасад сьссссадсу ссассссЯядя ссдчдаєссссає ссЯдсассдаїч 1860 асачссдсЯа счЧчасааддяо сссоссссСад азачасачас додссададча асссааччсєу 1920 аччаєдадсса сдасссесач ЕсссЕсЯабоЯЯЧ аадсдЯдсЕсдЯа Сссаадчсос ачаччсдеЕса 1980 чсячдчаєдчаа дсаааадсояє ссдаєсдтаа саачасаєдс сСчассссася Саадчаєаєс 2040 агзгачсаєсчдса сссаєссасса асасааєссад СудсСассссаа сасусассас часссссазає 2100 чессссассяд ссосочсася сааксяддсує сасааааєаа сссссаядеда сесссевеса 2160 акссадчдаєч аааєаасаєд Свассаєсаає СЕСссдсдаєсе гсаЯдчссессуаєтста садчааєеча 222й ачечЕЧдсссоЯ аччссудЕсЯ ссассасссс саєсссаєаа СЄБЕсСасаєдь арессдааава 2280 саазааавсса сдчсаєсссаа сссааасася сасасссуса аачаасчаєа сссЕЧазацча 2340 аасасадчссЕ ааасасссасє єдасзазаєа асаачссаду бассасачеіс сазасаааза 2402 сасбазаєста ссдаєдсаачч ЕсСсаааєсса чааатаєсесс аасаасєдає сабЄаєсадесе 2460 чЧасасаєсдс сдсачаєдаа ачассчачся счзасаєсаєд дчедсаасаса сачаваєсся 2520 гссааасчає сідсаассраа сссссЯадсос аасссСудсаса ччазачасяс сачассЯясяде 2580 ачессЕсЯдсс сачсацассу ддасЕсссаде ссесссассс даєссоаучессе ааєчеЕсдссс 2640 гсадссдсда ассудаачся часчдассаас адсддаачаа седаваадчаа счадссдссє 2700 асассссчає чассаччсссс сачеЕЧаачуу баєсассдса дссаадсаач сесасдааач 2760 чесчаєазуча чачясосаса ассаєдчауас ссасдусуцчя сеЕсСаєвссьс адачааддаєс 2820
ТассссЧчєсу сісаадсяса соддсусааад садссасєтод адсдсаадась сесуєссдса 2880 сассасессяс сасчачесау сачасдаада дассеєєсавбу аасясаяддсса аддесачачи 2949 саздсачаєдач Єсасусссву сбдсадассс сссессарраєс саабачеЕсЯд сЧаєсьсья 3000 чазачачссї содЧдссдадус ссасассдаза ададассчає чдасаєсяає асдссакдеє 30650 чдессадссадс сачаассачЧа ссасасссуа сасадссаєсу садсеєЧася сачасасача 3120 ччасаачсєсд аєссасддча ссусссачуа дсадсеєсаєс саєдсасясс дЧчасаадааса з180 чазаєсссчр счзадссаасу садссчсьса стасадчасєссс даачассаєс сасеєсодчаає 3240 чсаєссачсвс чдсассадсьс сЯдсассасас седсссбсасє сеєдазсаача бБассачсаає 300
ЄЕЧЕЕЕСсСаче ЕсСЕдссссЯЄ сЧчеддсадачя садсаачьЯдс Ессадасаєс ассссаЯаєесе 3360 саваєтсєсає десадчачаас адсесссстаа сссссссуа аасазсадас садсоєсккза 3420 аасесачаєд сссядЧчасаса дасаєдаєсд саааасаасс сасессаачесдя есаєсесазчаа 3480 сасааєчсссеЕ асдаасаєсс єбссаєссес дссассддаас чаасаачаче ааасасассє 3549 сЕсссаасає сасааасаву СеЕссрасася ссЯясссасас асеудддаасєс асссссаєса 3600 ссссдсуса авачссасуч асасссусєда аадсчасаса аассдсчааа сСссЧсоЧчада зво чеЕчссесдадч сесЯдесссда частадсдса сдсасасача сасасасаєс ассеєсаєсда 3720 сасесдЯсаа сааєссуєсає сачаєсдссс ссасусасад асосассста аассадссаа 3780
Ессбачасаа чсассааасдя чаєбчсдЧчассс сачсасаєста аааасячсссяЯя сааєдечсва 3840
Ссаачссдсс саадсуєсаа сеЕесдаєссас аассдаасає абсседсссс адссацессаава забо садсесдаєс сСасаассуаа сСасассседс седчссадуссс асяасЯясЯєсЯя аддааєссеєд 3960 асседасссос сасссддасяч сдааєсусада сасядссдааа саазчаєтвес счааєссачаа 4020 сааєссуссі ассдссЕсся сссасаааса суасячаєсЯя саасссЯаєся Ссвсассааа 4080 асасассссс асстсасаає аасастдсдуа асасссасає ссседаассЯя ааааааааєє 4140 часааєстасеь ссесесеЕвеЕсс ссссаваєсд ассаєсасас Єсассяссдча сссаєчсача 4200
Есксссядас асдчаачссає ЕЄсасааєсса асасаксессд сосдссдясбаЯас сЯяссесдсас 4260 ссядссдадс ссдсасяєся чсссссасос адаассдадс содчеЕсачуса часвассьссс 4320 ассчадаасс дадссаєсдсд сасссЕсссс ссаасасуді чачсдасдад чсаасудчачі 4зво часссасаєч дчасісссаа асаєсаєссу ЕсдчаєчасяЯя ссчсдчачача адсачессчає 4440 ссядсдачасс адссдасадса ссоуудсадаче чдсасаасасу ассаясаазає асссчаасЯас 4б5оо адасасааєс дадссчасЯяс ссасдядсдядаа сдассавудса адсЕсчдес ссасеЕсесадчЧ 4550 ччечЧадчадсся сеЕсЯдсддесч ачдчачасчсад сесссддаддаа чаєчучадччс ссасаЯаєссадс 4620 чаЧчоесчадчдач чдабссдачдаа чзачададсас сссссессда сЯагасЯсдЯддЕ сасчсасаса 4680 чадсдсадсс сгддссааза асаадуєсса сааасаєсод сссавааачса дассазаада 4740 саччєссадсу Чдеадссдавза аасддасада аасссеЕсуса ааєдесацдає вссссасстд 4800
Сддасадссс сісааасучєс аасаччсдся ссессссассь чссадсасіс сСассссесаа 4860 чЕчЧссаачча сСсасаЯасссос саєссрдядссач садссясясе сосбсаачдсдЯдс саагсассчса 4920 чачсасссає ссссачасст дсссасаєса ссєдЕсЧудаа асссусядсаа аассаддадочЧче 4зао вЕссуссчає сєсадсддадась дадссадсьсс асаЯдссяЯяассуд ссдаааєсча дессасессе 5040 саєссЧеісаа сдссасяссяЯя часдчачісуд ссссєсаачі Яассаасяссс ч«сесссесаєс 5100 сбассачсчдач чдассаачЕьсс: сссаЯасчаддчс абссасаася ссоддсдасся садбабесєса 5160 сасасядссс сзасаяадсЯсс сссадсЯсує ссдсадддчсс асадасяадсс дсессадсессад 5220 садсдадчдс аассачсссяЯя ЧчЕЧчадсчесу чааачачдеЕся асачассесесє сссассасає 5280 аасестусьє соуЧччссасс асадсчассс сесссЯяадчсаса сссассссс есссдасасчає 5340 асасадчаєсо ссдссааачя дЗіссЯдсосСач астусссесу чсустакссаа счадсЯссачс БІО счдчдсаччає заЧчсчаадса дчсссассся счачсччЧчЧчсЯ ЕСесеЕссеес аседесссьє 54АбО асєсачсассі ЧччсчЯчдсЯассс аасудчачааєс сьяассссдсу ачачсесдасся чстассдссу 58520 чесдЕаасада счЧчаддудсаач садчаєддсесЯ абдааассаа дссаассадач аадуддсачес 5580 сасссассаа засчсассдс сссссадасч аасдаачачс чассдчадчаа азаччеЧчасуа вБЕ40 садосачдсає зачосеЕЧесЯ дссрасессус садссусєсуд ссададссас ааааєссасад 5700 чечесуасада серасдадсас дсссдсчаде сдасссдсає саасддсчас сечачдссусс 5750 гаЧддсодссЕ Чдстдааассс Єдадсссасся асдасссдся сасаячдсЯясуд сссочЧчесвчава 5820 ссасчасссої сасесечесЯ дсзаачаєсу аачадаадса чдачасчацдессс дасаачаєса 5880 тчзасдддсЯчє чздсесссся аччададсачадс саєдасеЕсЕс сЄсадссяасса ааасадесдча За чаЧчачсЧдсося єчассЯчссаа чсасЯяєссссс асадсусессса ссаадаачач счассєссаЯаса стекол) чачессчасас ссасдсадачд саачасссяд аасассаачі асчачаауча сядсесачасаЯ 6Оово чеЕссасяддча ссчасессає бєдосчаєаадч ч«Еддаєсаєс будасассаз чуусассачас 6120 чеачссазаєсс адааасаачу чсасассдсс ссядесчодад ссоддуддсває сссосаздоа 61980 чЧччсдЧдааєдча ассоачасуєс Сддассячаач часасасачас аадааседає сдчдасаясдачаЧу 6240
ЕСЕсссдссЯ адчаєдссда аассаєсяса адссдсасся Есаєдсуєде десессдсзаа 6300 асесбсссаді ссдЯдЕсядсьс часддессад саачдессасуд ссаздаєсда дсудсчасаде бе чечсаасьяч сессссостЯас сеседессуса ссаєсаяддсся ссЯчсддчвачся ЕссЯасдЯссаЄ 6420 сЕсдаасачяч адчсддсачу сЄсСсЧддсдаач Ссдаєдасса ссдасасасу ачдааската Б5БАВО асзассаача адсчааааас сдссчасдад часссдчсаа засаддссадч счачасесазда 6540 саччссЯясує сассдаваса сасдаачсад сачаєсаача аааєдсадсє ЕсСсстєЧчЕсс Єва часаєсдядсяс сдсддссода сасчаєдсда дсдасядссаа асчасасячс ссясессьдсс бево седеЕссасса сдсусаасаа чаазаєссся сячсчаддсас счсаааасаа чеассасссьс 6720 сасчссааса аччасядсдаа чассасссас ассуусчесу ачсЕдсоддоас счасчаєдас 6780 чаасечасЯас чдасадсачячє ч«сеЕдчачсас дсудаадсяса сссебаєсяд сазадесзчаєс 840 асссссасас ксетасдчачеєЕ ссдссаддас ссдаддесаЧі счассааєсча ссеудусаєсас 6900 асдазаддсся аддаасяассе дссасдЯдссса садусчасядч сзасдддаесЕ сасяєрсесдас БО сасЯчссдоадс ассерчддааєс ЯддсдссЯдссу ссдсассЯясе ЄссасЯсссе ачасесчдєадЧс 7020 аачаааасяє ссесчссчсеса чассссдаєс дасчдаддааа ЄсЯассЯсЯясЕ ЯясЕсдсвдус 7280 чассассаса счааасссає асачучадаад сассядсаадсе садссЯссдас дасссчасаа 7140 асдгссчасі ассссадссс дсассдядддадад ссчбсасссесус Есаачсесяда аасстсссас 7209 сеЕсаєсдсдсу даєсоддаєсьс сасссдсчсч аачаадсядче чсчачсачує сачедчаачес 7260
СЧсчаачачс сЧсдачасач сччесссаддьЯд даасасдядссЕ ддаддссааєдча сдасссаддЧЕч 7320 сассдсазас чдсесададссі сасддадсса чЕсссаЧчесУу дач ссадес ачессачсяЯсс 7380
Есаседдсає єссадчааса адсядасасо чсссчасуса сскассссас ссачсассос 7440 ссуччасаяаса судсЧчсачссс сСасчаассядс сдасааасад адчаєссааза Єсачасааєсд 7500
Ччаєсаадусє Есадаєесда сддсЕсЯЧчач сочадссдасоє чсаччаєсес садсдадаєсс 7т7авбо часрдссяддс ссбдаачааа дссссадада бЯасссЯдЧчасс саясссасчач сасчаччача 7620 аааадсссає ададччсЧссс чсечЧаасячядє басчачаєче сдсгдасаєссс дасасссаса 7ево ссчасчдсуда чаєсаєсєсудуду ссдссадессс ссаазасадча ччасччссос ааччасссе 7740 асааадчдсчса сссчЧчеЕссде ЧЕбсссусЯдЧЯ ачсссядааса чсзчзаддадссча ддадесясст 7800 чсасдсрасс ЯдсачдасуссЯ ссчасддасс СассдсссЧє часєчаєсдЯдєс сдасадасьс 7860 саасчадаас ссдчсдчасд сдсаєстсса сосесддсдс асссаатаст ссдссавесе 7920 чдадсьсЯдсеЕ дессасссся ЧЕСсассусс єдссЯЧасЯЧ дЧЕсСЯсЯЯдсЯ асчасаччсч 79380 сЕдЕдсадес дссдасчадес чЕдсссавее сьдссусьсі чесбачдсадс ссчаєбасчає 8040 гчасчддсаЧі сесдадддаЧсє аєсссдсддаа седсядасає чоасяссасса ЧчЕдсЕдасас 8100 сааасдсадс дстачасссї чссадасдєсу сачдсачуссє чдасаддаддусу дЕсссСсаєча 8160 сасссядаас сяасдссдасс сусааусдус аассесссЯє ЯдссеЕссасес ассссвасся 8220 сстчаадсаасі чадсадссдда ччуассссьЯдс ссаЯасЕссаче ачсЕСсадсу сессдасссдс 8280 сааєсссчає дсссасадда ассаавдеєсс ссуддесЕЧчас аЧЕдадсесдЯас сеЧчаєсочач вз4о счЧдЧдєсваас ссасьссесс соЧссссоадуа дааєсссуся асссдаасесс асачссасес 8400 ссссассудуду сесссесаде ссссдачсЯяс ссадсдуддаа ЕСесЧсасесс сесассдааасе 8460 ччачадсасзч дасдасядссьі аасааєссає ссаачссчас ассЯяссвссяс чдасЯясЯадсес 8520 засссадчдад сСразасаєса суадддаадс чдусдаєсясо чзаадсаєсча сесаастаєс 8580 ачачасачсс дасассаксу адсчссаєсо сдаассздасу сСедсесдддссЯя сасаєессяса вва сячссссдса чЧідчасодсу дессдаадсс асасадечає ассдаєсссас судссасаде 8700 чассдсаадчя сссчаєсчайа саасясяася адссссдаєс аасдчассссс кудааасьсе 876 часессссоєЄ дчадчададся адасьсіссд саЯсЕдЕадаа сесассаєєЯ сеасасасча вя20 счасаєсасеЕ ссдсодЧчсЯсЕ асссачсеаа чсаЯясуаасся саасссадач аасдудсадсд 88 сааєчасаєсс сесдсааса сссссдадсс адссасчдаєс дЧасаєєдаєс садставссе 8340 чессдЧасаааа чсаачадаас асачсдєссдс сЕсддсаддє: ссадсячасЯяч ачдаасьсьс зро сдаєссЯдсЕ ссоядаасаду ассрассвєда дадасссазає дазаассьсаа счсбасдуаа зоб сеЕсЧдссуссс дассдудудсся дсчаєсчачесд аааєчсачья сЕсасЯявсЯяв сссясаєссд 9120 чЧЕасадсяса чЕаассядса азассдсдсс дааддаєдсс дсеЕдссчасеі дччсааєддаа 180 чечсессдссЯя дсссадсаєс адсссяєссає ассгчаачсь адчадсачасес ассесоадаса 9240 ачаадассядс ссадесЕсЯс дсядсацчаєса чсЕддазчаа Ссбасссась асдсдааачу 9300 счадаєсасс ааччсачссу дсаааєалаєд Ессаасааєє сдсЕсаадсое дасдссдесе 9360 счесчасосяч сесаасссаа чсуссадада чссддадЧчаад ассасдсясдЯя аєсЕЧсЕЧаа 8420 чзасЯдЧчЕссса адссеЕсЯясесЕ сусддаєдуаса сЕссавеса Есесссаєссс дсчсссаада 480 сччсЕЕсСссс Сечасачссе аєсаддусвта заєсааєсса чссдасьсує ссодг дааає 954й чадссадсасї ссаасадааа саассаваса аасасасаса чсчассваєс сасасчасе з6о0 сааассасаа сучсрасасає сссуссачсс адсассасса сассаааачс сачуусссчаа зво сачессдааа ссадааачеє сосааєсдач ЧчЕсСсасаддчо савасьсЯясеі сЕсадссаЯаса 3720 саасаєсаси сассаядаєсс сСаассдядчсдс дассасдаче саясуассааа аассссааєс 3780 асаєссуддес саасьсадсе сдадбсассдад сааавсааає ссудаассааа ссзавасаса 2840 аасасасадс ЕсКссасасає асасссссаа вассесесас адаасессес Ссааваавса 99300 сстадаааса сесЯасчасьс Есссддсаєч Євасасссся сСавдасассча ачдсдссссає 9960 вЕссаєсаас сСссазасаасє соЧчеЕсдсася аєсасьсксь сассаадсдє сассаааасч 10020 сябсаавсьс сере сС сасаєссаса сассаааасс сассазаасс сссасасаєс 10080
ЕсЕсссЧчаає ссдаадЕдаа асрсеєсЧчаєаа СссСаааасса аасачаасає ассассаєсьс 10140 аччсаєсаса ссдчассссва СасеЕсзаєса сеаааєсьЯду ЕсаассЕеЕєсєуа аадсустасає 10200 саасдааааа ссадссааас чассааааса аасаааєаєс асчедесаєє аздаавасьс 10260
Бсссасаача асассссаас адассасаєсд ЕЕсЧеаадаа азассааєсс ссассазасас 10320 асасаєссрас Есаєсаааза ссСЕЧчасааад баадаєсааа асааєсаєєса єссаасаааа 10380 аааааассад ааааєсдсєда ааасссддса ааасодазасс аасссааасо чабакадєчеЕсу 10440 чЧЕссЯдЧсссЯ ассссдасас ааассуаасс аасксачассс асссадсассс стааєсаєраа 10500 садчсессссаас ассссаачасєс ассассаадс ЄаасдссЯясс аасаєссьясу ааассесуса 105650 аааєдчаасса ачдсстасасо дссасаасає чаасесаааа дсачсссчає чсоЧчесдадсая 10620
Басасаассь ассебдарссь ааааааасає сссаачсаєс аасааєьссть дссаддазача 10680 аччЕсадсва счассбасад сааадссачда асасааєчаа ссасазачсчя ассдаадссс 10740 чаааєаєасяч азачаасааа сассессаза аааасасуса аєдасьсядда асаааачдаза 10800 чечаврававеє сеЕєдеесЕЄ азасаацеає ссесссссааа чаасуєчсаде сесссесвсує 10860 асчеаассає сасасссесссс ссЯдссСасааа аассссддає бассаєсдуд аасссесєвсос 10920
Чазаасадсд дссассяЯясьсС азгсааччсу счтсесасфчссе чадаусаачеяу ссаясасаачс 10980
Еєдеасаааа азадсаддесс сЯясдчдссояса сраддЕсСьаа ассссачаач сваддаавьс 116040 ааасааачаа чдсууаєсяасус дчассяссасс дсасесссач бассаєссаєЄа чечдазадчьс 11100 саЧчссесссс Яадссддсадсе сЕесрассесь асесалзачач чеЕсесссасс саазаассся 11160
Ччасассавсс всасестась сдссассьвса ассссвссава ассеЕссдадЕс дазаєсаєса 11220 счсЕсссуса сасчасаєсс ссасазасьєе ассакссусс ааасаєсссс ааассяЯсаса 11280 азасестасу аачесссяаїтс стассссваас чрадесссаас асссссастає счЧааасасає 11340 аасссасеса арссгадсус СадсСачааач сасааєдась сасссессасе сссесссаса 11400 бааасядссса асасасааса СааасазасеЕ ссесассеєса адазчуассс сссасеєссає 11460 ассссааааа сасассєтаєс ааасавсьсь саассасуєа аассесасаа баасзадесу 11520 сЕссаааадяді аасааааєссь аасессаєаа БсБЕссвавс сзчассчаєст сСазадсааса 11580 ссесачецдаса саастадеса ссЕСеЕЕЕсСЕС сдаасааава аасссааєса ссаєсусаєс 11640
Ессе сасас аасуааааєєс ссассазаса асчаєссурч чсаїтссседЧда ачдсаачесає 11700 чесасасааа ассссасаає Єсссаєссда сассасддаа дезасьдчаау ассстадсессет 11760 асаєдсдача сасаєсстсої ааачеаасьє Саасаасачс гассасаєсс аачассьсає 11820 ахкассааава сесаасаєса сссссааааа аєсааєсєсача сасаассаза асассассьє 11889 сесааєсьсьа адессааєся седааєвечЕ частаєєдчає єсаєсасьсь асстасаяссса 11540 аавсядсссса садасачесс ааачеаааса сазаусаасчі адсачачедс СачадсяЯєса 12000 сессрааасса базассаєсаа часссасдде ддассааєсс ссасасасеє ссрассусьс 12060 тгасеввсвс єсудчдсавяса ачсссясаас бсддаассасс чЧчечЧчасьасс асчасасьсо 12120 чсачеЕссЕсс Чдоасссаєдса саддаєдсссЧч саяасаадазаа адасааачаз сааачааааа 12180 адасазааса чдачачасааа асдядсадесас асаассазасо сааассадесс асеєдасЕЧає 12240 саадаєссясс чсчессаєдчь агдЕссазає чоссаєдсааа дсаасасясуд ссбаасасас 12300 асессааасч чсесасссає сісаасссас асасааасас ассясстЕвевє ссеЕсСсассає 12360 сассасаасо ассеЕЧетасає асбссасеєссс вЕСсСсудссасс ксаасьвест сассссааса 12420 сасуєсаасс Едсаєаєсдсу ЕЧдЕсасссоса гусссаааєо сссаєдсаєя вЕссаассає 12480 стссеЕсссес асаєтдасасс бабавааєбасс Сссааваєса сесасеєсьс Есахсаєсса 12540
Ессаєссача чсассастас Ессаскваста гаасасссса асссаассса басссаасає 12600 тасестадда сссаасаасч бссдсессаа ссЯсідасає садчадстадчча дссссачача 12660 стаадчааччї ЕсасассяЯсе часассяЯста ссаасадччса саасеччсас аачдсасуєда 12720 ассдчсссаа сдсссссссс ассассоддаа сессасссса содчасчсаєс саадсьсесс 12780 чадЕЄссасї Есаасєсаваа ассядстаєсс адассЯсдає срассасьес сссассядає 12840
Єсддааєсас сЯяссудудасас сасаддеєсс Ядддсесассд сесасастсе десассссьс 12900 сасесаддчає ссадсЕСсаЯасЕ дсЕдЕсЯдЧач чдаччадсьде єчададдаєсє ассадаєсядде 12960 ччЧдссаддчда ссасаччЯдс: сассасачоЯсє асассдасас сдасааччас ссаєассстя 13020
Есадсчазадча ассссессас всссасссся дасачзасчає часчаачсад аасссазача 13080 ччаєссучаач чЧассдасаєсс єсесдчасссса асчаччассесс ачдчссядссудсс сдасаасаса 13140
Чччаассассє саадчЕсуєЯ СЕссассаєдчу дасебасьЯє Ессаавдссє деЕкадсвсЯддас 13200
Есадасядаад ачаєсчассє чдчазчзчаєсся саЯдсасочссчу аассесссачача ассссссьсу 13260 сЕсаасааус сассеЕсссдс дсдаасьссос ссасесасьд дссгсаддачас саассаєссдЯд 13320 аєчасадчдаа сссссссадчдд чаєсасуєда ссассусЕст Бдссассссс одЧдададочає 13380 ассасаасЕс ссассасчад сссесасссу ассасаччаа счессаєсччач сдадсассачс 13440 асчаєсссас саадсдуєсо асссудассс ддаачдсаасі єдчассудес сасчдаєсьса 13500 ачзазчєссач чдаассаасчач ассчадаача даазчдадссса асазссссау аздаачсося 13560 асадчаачадч дчассаскоесо чассудудаа ссссасссда ссаасесоса чсдабдааає 13620 чачаєдасса сЯдссдадсаа дсгдлдадаасд чдаачудчасе єЧЕсдсЕаєс дссдчачесуя 13680
Ессасчаєує сассчасссс асєсаачуаєс асссаудадчу аазддссабу ассеєсЕссьд 13740 чзааєсучааа ччасдсвасс дссасяссса асдчаучдадс дсасстассас сссаасчсач 13800 сесасаассї ссеЕбадсасс аєчаччдсда дчачедаєссач чудадчасус чачассчача 138690
Ессдадаадач чуссісачаад чдадаасчєсу адсасяссач дчасдчассо ддсасааачуу 13929
Ечаєсадддс гддадачсаа ссаассаача Есссадачес аассссаасс дссдасдсся 13980 стсчачеадс сгадсссаасс асссаддсса ссадсасдаа ссааааєчса сосадчецдса 14040 ачадсссаєд чадачсасач аасассдсрасє седассабаЯє аасачдсасаа баассчадсє 14100 ссабєсесасе ссссссасбда асааасааау чаєдесаєда сабаєссадса ссстаєссраєс 14160 чдсассеравь чсЕбєстасуає ааасєвссстс єрасьассає ааассасєссу аассаясдася 14220 чессасчдаа садссссааау адсасаадааа сазаєчсдса ссасаачасоь ссссааасаа 14280
СеЕссаасьсс адсаєсусда асдадасаса адсуссаада адасасааса аєсасааєуд 14340 зачаадсссу сссссассса скасасвасає ассасесасе сасусаєсає ассадчаєує 14400 саадчачаса Саасаассає ааадачадаа чессЯараєссс ассбасасає барасассас 14460 ссасеЕсасає ассасасеса бссасесаєс саасдесьсе асаачуєсьд аєсссаєдава 14520 сссссаасає сскадссчає асдсасаєсда ааадчсаста сесдЧаасься стсасестьяє 14580 асаааачеЕсЯ чаєсаєссссє ааачдсуддауаєс сСасссаасес всасбдесвссс сасачасада 14640 ааааааасса ЄдачеєЧдЧс Едчасааааса сЕдазаяддаєє гаааасааса асазасааса 14700 аасаасасає аасастаєчса басбсаааєсса ссасаасаба асаєсеЕсаєсеЕ агаааааачі 14760 ааасаєсяєс асаааєсстає асаассуєсс адссссЯссЯ Чаасуаався сааєсаєсса 14820 аасчачадса аасасаєссу асссєесеЕчуаєЄ сарссаасаа ассассассеку аасастасає 14880 чааассстстс сеЕсЕСсСасса дсазачааса ааассааасс аачааччаса асддсядсссо 14940 ааєссьсава саассаасьс ссасаачада чссаадссад адасазасада задасаачса 15000 ааччааасес СсСтааєссча осссяссесує ссоссасаса ассраєсосач саааасаста 15060 сасаєаассс ЕЄсгадсаде ададсаасач сечЧчассясує дессадессс вБеЕссассься 15120 ссср сасс адсааачаає ааасааааса зазідадаса ссесадчачає ЧчеЕсЕсаассс 15180
Ебасасаааа ссссааааас аадсссссса дсасосстасс аасдаассся сядессасьсс 15240 сседсасдас ассЯяїсссус ададссаадс чсаєчсссаа Ссааассадчіь сссесачсає 15300 саєсасадчед ааадссссудЧ сетстсссЯасо чзадсЯдеЕвеЕсс Сассесссаєсс сгааачддчддес 15360
Есссассваа азасеєссаді аєсаєсссєса сеЕСсТасеваєс басессааєє єсеЕсасааєс 15420
Ессадссдаа ассассасядс сЕссЯядсасас чзасассссса сазасссаєсс асссдєсааа 15480 саєссессааа ссядсасаааа ЕсСЕсасдаауч ЕсссЯєсссас ссссаасчса чеЕссаасаєс 15540 ссасассда аасасасаає єсасссаасе сєсадсЧеЕсучЧ сбадааачдсає ааєчасссає 15600 ссорасьсіс ссссасасза асдсссааса сасаасасаа асазасссьє Сассссаада 15660 зчдчастссссос ассссасасеє ссааааасає асесассаваа гасссессссаа ссасчсбсааає 15720 сесабаасаа саачссЯссс саааачсаає аааастссаас Ессаєааєсс СЄсЕсасссуа 15780 стчаєсссаа адсадсассс адсдасасаа сстадссассє ЕСссссссда асаааазаає 15840 ссааєссаєса сеЯдсасьссс сссасасаає дчазаавссса ссааасаасу асссдсддеа 15900 вЕсссдааде аадесасдсс асдсааааст сксасааєсссос саєбсдасас басучаачьа 15960 ассчаадаєс єдссЕЕсаса сдсудаччасас ассссстава чсаасссесвла саасадссас 16020 сасасссаад ассссасаса ссааасассс аабаєсасьс сстааааааєє аассадасає 16080 аасєазазава ссасесеьс аассссааді гсааєтдсуву аасссдідас сассдассса 16140 єбасесвасе аєчЕссааає сдссЕсасад асадсесава дсазасасаа чеЕаасдсадчі 16200 ачачсусса адсядссассс сааассасаа ассакаачає ссасаддьсча ссааєтьсса 16260
Сасаєсескс ассдсЕСства сесбсесесвя деасдсаачі ссдеаассддча аассассуєд 16320
ЧчЕсЯдссасд асасессуєд дЕсЕсЕсЯдЧЕ ссаєсасасєдач ассссодсаса адааааадас 16380 ааадаасааа чаааавачас адаасацчача часаааасус ааєсасасаа ссаасессава 16440 ссадесассд десдаєссаад аєсдяссдсЯє ссаєдсаєЯь ссаааєдсса сСдсааачсаа 16500 сасясдссвба асаєдсассї гааасддссс асссассоєса асссасасас ааасасаєсд 16560 ссЕСЕЕсСсЕс саєсаєсасс асаассасст дсасасаєьс асрссссссс дссассьсяа 16620 всссЕссасе ссаасасасу ссаассьдса сгасусясеуссо асоссавдсс саааєсьсса 16680 счасасдсссс ваассасесес ссествраває аавасстаса аасассссра акассассьса 16740 сЕссссесає сасссаєссса сссададчіас бассасеЕста стасвасаас ассссаассо 16800 аасеєсасасс саасаскасс стадурассс сдсадддаєс саасааєдас касастсдає і6860 адсаєссстд аддасааачс аассрачсбсс аачссаасесс асасасачіа ссаазаччєс 16920 асчсєссадда аседчЧчсасаа чЧааааєсаас саддессааса счасссссяс сЯясссрсассе 16980 сесчсесссЯа дассусассс дасчачаассе асассесьса ссачдасссас ссеЕсасесуч 17040 гЕсЕЧасссеЕсс ассассссся сасадсЯссс чдудсассассд чедассасса сачасссвЯяд 17100
Есссабадує сессасачедс дадчесчсса сеЧадчасься єссбудсвЕс сасерддачес 17160
ЧчасЯсчаєсс ааччссссдс аачаєсчасчу ссадссааєсс асададеаса ссассЯяєвсЯяч 17220 асаядасасса сСчааччассс сЕасессасЯя асчадаччас СЯдссассссс ссасасадає 17280 сччаєдчясЕс сСсаассссда Егссзаачасєс ааачасачаа сачасЯдсссс счаєсссдасєс 17340 сссчассесу сосдсвЧсЯсу дсаасасааа сассасддса адсадаєєсасе сеЕссдссусь 17400 сдчасссссс счаєдасачс чассадудссЯ дассддочад ассоччесччау сачасскяєс 17460 тасассддса ссасасусас ссчсссечсс садсаадсса собсссЯясЯс саасссасся 17520 чсасаєсдчда СадчдЕЧааса ассЯясЕїдає часачасусва ссссаачоача єсасдєссья 17580 асєдечЕсЯдд єсасаасауча ачаадчасас сасаассссе ассасдадес сссчадеЕчас 17640 басачаааєч ссаєсаєссд дсассачвсає часессвасаа адсддсесає ссассьссьтс 17700 адсесваддчасс ссбесссась дудсссасесь сссаадассь сссЯдсеєссаа Счачаєсдчад 17760 ааачдчаадусє сЕсадсааса дсаааачасе ссЕЧасаача ааачаадсчу Єсессдаєссоячя 17920 ччассвсссс Бсгбессадсьі Єссадедаєс єсаєддчаєч астсссаадс ЕсЯссдсаваа 17880 чааачсччач адаєчсьсяє сЯсечссасо дчадсчассо асзабяссес ссадсесасс 17940 чаачаєсаєс ссдасЧчоадчач дачссісасє ачаадсдсвд єсддчазача СсчЧчассояче 185000 асдсссаасу дсддадсдса суаасаєтсса засусстсас асаастсЯсе дЧдадсасзаєя 18060 ачачссадад ссісдадачач сддасаадаа чсачадЯссс счЧаадазаса чадчачсадає 18120 чеЕсессддда адссадасає бесссодссаа чіЧасаачучд ЕдчадсЯяїсе ддЕЧЧчааячца 18180 чесессдсадч сдсдаєчачі ачеЕсачссса ассасссада чсессудьсас сесчдадраєс 18240 зазаєссас сачаааєаса саасасссв сесдсачассе чссаЧадаає сдаєсвдскта 18300 їсасааааає сасааааааа ЄЕсСсасеєсдс сесааєтаєс єсаччаєсдд бассазддасєс 18360 дессааасса сесдЕсуддуаєЄ сассасясає саєсдсдаєє дадаадаєса чечасасода 18420 асарссдядсадч сассаєсчає ааєссаєсвд аааасссаста адаазадсагв асдєсасаєу 18480 ааєссуаєдаа асаасасааа дасадакааа чссасчсаса ЕсСграчдасає сададссзачає 18540 стаседаасає Сдчачеаачає сасудааєєє ссдасадчач саєасстсса асссачссса 18500 аасаяачсачеї чазасассса аассусссса баєдсадчач сачаєсаєсс ассуєеєвуасе 18560 сЧдссЯдссСЄ садссаасасд ддадксесаад чдесодЧдесЧчссе суасссадеє бос 18713 «-210з5 61 «2115 14524 «212» ДНК «213» Штучна «220» «-223з Плазміда рОАВ7321 «4002 61
ЕсЧдсасааач сЯдЕсдЧсЧас сЯстсааєса аасссаааєс саассааєдс аассссЧасс бо їссаасаася заддсзаєдая сдсаааачсаа аазасдсаєч ссассясаєсес дассссссає 120 чаєдчЕєЧчаач сЯясчссасаа табєдчаєчаву сасалаєсааа асаєсаасься ссасасьсса 180 ссЧааасучс ассчссастс саассасаєс сссдаєссес ссасаєдаса счассасадач 240 аадсааасаа сбадасаЯссдЯс Єдессааадаа СЕдссасбсає абдасдсссаа ссадчачучаа по гсЕЧадсуєс ачасессаасс ааасаєсаса ааасаєсьса сЕссдЕєсдсс адсаасочаєсу 360 саассачсЯс адзасааасдуд саяасааадчаєс дсоддааааас сессссесчаді часаєчаєач 420 сечсессссче асасечасє садесадчося кассечасьсє аадччсядссс єсчесачеЕча 4во сазаєсассу ссаадчадас адссавадссо сасассебує Єдааваасаа ассєчсссЕсч 510 чачачасддс ааачссадес чсЕСЕссаас ааддааєдес дадчачясаа сдсаассясс 6О0 сссдасадса сасессеста асссааааає саасссчіас ссаадасасс дсаааазасс бо сасчоаєссаз асссрдсаду ассадсссад ааддсаасса СссаачаєчЕі адсассаада 720 аєссаавдЯьє басчуддаааа асстасудаадч сассаєдраа дессачсаач аачсачаєса 780 асасцдсчддса сасаєадсаас стасдсссаа азасдаачаа сусасачаса саачаєссса ва сбассдссачда асасчдаадаа чЧаасасусбач азасєсдаааа адаачаасса дачсдаацчааа 200 ачаассссда адасусаадс ассдчасдаса асаасуаааа чаачаачаєа аччЕСЯЧЕЧа зей
ЕсЧеЧааача часасадачя асасаєдсаа чдасддаааає деааччасоч ааачесаассе 1020 сСассасааач чааєсьсаєс ссссастасе басссеєста сассевссод єчесасьсяя 1080 чсссееЕдадс ссссссасає ааддаассаа дсЕсддсасс сдсуааааса адааавааєс 1140 сЧасасаадс сасссссстЕ даадсаседа чдасасаасі ссададааає сечбаздадеєве 1200 чсачзасасса чдассесудаєс ссазассаєд ЕСсСсссодача ддадассаді кчачаєссаЧча 1250 ссадссасадч сачсссвасає дассосоЯсс Єдсдасаєся ссвзассаєса сасссаздзасу 1320
ЕссасачсдЧа ассссадчас ачачесасаа асассасазач ачсячассча счаєссвазчад 1380 ачассдсаад асачасассс ссдассЯддЕс дседадчсвд адддеєЧчеЕсас адесадсавс 1440
ЧчессСасусту дадссссддаа чассадуаас дсебасчаєс ччасачссча чачсассчес 1500 сасдсдссас асаддсаєса зачассдадує стадчаєсса саєсдсасас асасссасес 1560 аачеЕстаєуу адоасачсазаду сессаачесє чсдЧесдасва єсаєзадаеся Ессавасдає 1620 ссаєсєдеса дассусасда часЕссЧада Сасасадссо дачдасасасє дсачсддсадсе 1680
Чччасасаачсе асудеЕдчаєсуд дсаєчаєсасс «ЕСЕ ссЧас ааачачаьссє счадссЧчсса 1740
ЧдесСесЕссаа чассачесач чдссадесасс савзваєссдач СадчеЕСачесс ааєсассєсава 1800 ачсессчасся дсудусаасач сбессьсадсу ссасссосаяда ссдассскає сечЕЧсеЧчаа 1860 асадсєдчсяд садасаадчс сессссссад ааачасачудє чдассааадча асссаачачсЧ 1920 ачачсачусста счдчсЕсСссач СЕсСссСрЯсЯад аачдсчдсссад ссгазачдсЯс ачачдедесса 1980 чсадодчасдаа дсааавачсяє ссчаєсвсдсаа саадасаєсдс сдаєссьася сааччасаєс 2040 ааачсаєдса сссассасса асасаассау сасассссаа сасдсассас даєсьссаає 2100 аЕсЕссасвд ссоасссбаєд сСазассдадасяс сасаазаєда Сссссадсча сесвссєсссса 2160 асссадчаєч ааасаасаєд ссассасаас ЕКссЯдсЧчасс садеЕссЯясса садчааєсча 2220 ачсЯдсЧсЕса адчссЯядЕсЯя ссассасссос сасрсссасєаа ССсСсСасасде асссдааада 2280 сааааассса сддсасссаа сссСазасасу сасассвуса аздзаєчаєса кскедазача 2340 аасасадесс аазсасссасє сдасзадаса асаачосазчд сасстаєсадчос саадсазаава 2400 саєааассса ссчасусаач Ессазаєсса чааасаєссс васаасесає сасаєсзасес 2460 часасаєсдс судсадасєчаа ачассдадчся счасаєсасд дедсзасаса сзадчавсссЯ 2520 гссааасчає сеЕдсЯєстаа СЕЕссЯдссс аасссудсаса ч«дазадасяє саассасядядес 2580 адсЕсЕвдсс садсачассу дасЕсСссаде севсессуссс Чдаєсяддаєсс авасассдесс 2640 есадседсда ассуддаадсу часуассаас аздсдчаадаа ссчЧчаааччаа счадссЯявесс 2700 асасесбудає дассядсессос сЧддеЕЧаачаЧч сассаєсуса дссаадсазу сесаєсдзаад 2760 чссчасадоач чачусасаса ассасчачусє ссасддсаядЯя сеЕсаєссььє адачдчадчаєс 2329 саєсьсЯясЕєЯЧ сесаадечса сЯдсусааач сацЕісаєседу адсадасадаєє єссуєсаса 2880 таєвсавссяс сасуадесауд садасуаада часссесасу аасачеддеса ачассачаде 2940
Саачсачаєдч ссасассста седсаддеосс срстассаєс сааєсзуєсояч ссдаєсьссд з00о чааачачссє суддсеЕдаччудс ссастассдаа ачачаєсчає ддасаєсчає аєадссавачьє зо6о деЕЕсдссадсе садаассача ссасаєссда басчссассд сачессдася сачаєаєдача 3120 ччасаачссч асссаєсучда ссдсссадда чсадсесавс сасусасчссо дасаадааса 3180 чазаєсссЯяс сдачссаасу сачесучссва счасдчаєсс дазаддеєсаєс саєссадаає 3240 чеассадесеЕ дсассадсесс сачсассасас седесессає сєЧаасаача сдЕсадсаає 3300 сЯдсЕсссадс ЕсЕЧЕСсСЕсЯЄ сЧсдасадоад садсаадсде сесадасаєс асессечевес 3360 савааєєЕссає чсгсддадаас адсеЕсссваа сбБсегвсада аасазасачдас сасЯяаєссесаа заго аасєсачаєд єСсСбдчасаєа часаєдаєся сазааєаасс сатеЕсаацід ссасссачаа заво сасаачсЕсс аєдаавяєвс єсссаєессс чдесаєсуаас чаасаачаді аазасасасесс зва сЕсеЕсСсаасає сасазаєлач сСсСсссасася ссЯсссасас ассяддааєс асесссаєсса 3600 сЕсссдсЯса азадссасчу асасссяасда аачсечасаса аассусчааа ЕєссЧчсачудзча зЗ66о чЧчесдссссдач сеЕсЯассісча чуссачсяса сдсасасада сасасасасс ассеєсаєсдаа 3720 гЧчсеІсочЧсіаа сСаассчссає сачассяссе ссасдсасадч асдсасссча заєсадчссаа 3780 сЕсСсадасаа дсассавасч чзасдсдЧдассс сачсасастїа завасаяасссчя сааєчсаЯєсса 3840 бсаадссдсс саадсяссаа сСсдасьссас аассдаасає ассссдссос адссачддссаа 3900 садсесчаєс басаассзаа сасассссас судосаЧчосо асчсасасся аддааєсссд 3960 асссдассес сасссддася Єчаасдсада сасчєсдаза бааачасьсс счтчаассадаа 4020 таассечесс аседсрсссу сесасаааса счасудаєся баасссяасся сЄсСссассааа 4080 асчгасеЕсьсС аєстсасаає аасуссясчуд асаєсстасає єсссдаассЯ ааааааааєс 4140
Чдасбаасвасс сеЕБссьссьсС сессасаєьуд ассаєсасбас ссассаЯсЕда сссасчсача 4200
ЕкссссяЧчас ассаачссає ссасааєєда асабаєсссд ссдссясьдс сусьЕссСсасас 4260 сечзасададчс ссЯчсаєачєсЯя дЕсЕссасаяс ачааседчаче счадссадчаса часбаассссс 4320 ассдадаасс чдадссаєуєд сассссссссо ссаасасаччі чадсчасчдд дсаасаодачс 4380 чаєсссасасу дчасссссда асаєсаєссся ссяадасадсу ссЧчечачача ачдсачесчає 4440 сесЧчечачасс ачдссдасяса ссаддчдасачадс дсдсаасася аєсусааачеі агссдаасас 4500 аддрасааєс чадссдчасує сасусяуаа счассаадчса ачессдачеваЯа ссаєєссвда абвей ччечачассЯ сЕсЯдсадссЯя аздадасдядсад ссеседдада часуччачас ссчЯчсчесаче ав20 чадссЯддчЧчач ЧчдсссЧачаа даЧчаЧччдсас сесесессяч сдгсадсаясяує сасясдсаса 4680 чЧадсяасадсс ссддссСаааа асааччесста сСазасассчуч сссСаааадса чассазаача 4740 сачдссадсдя деЕдадссдаза аасоуддасяда аасссссСЯчса аасчсессучає сессессасесд 4800 сбадЧчасадссс сеєсаваєаяєсс заасадасася ссесеісассє дссачсастсо єдесесссаа 4850 чЧЕЧЕсаадча єсдсуссссе сассстуєсач садесусадсс ссесаачьчс саасассадса 4920 чадсасссає ссссадчястеєсє дсссасаєса ЕсеЕдеЕдудаа асссусядєбаа азахсадасчЧи 4980 сЕссяссаяат ссоЯсучадуєє дадссадсвсс асуссаяссдд ссдаааєсча чесеЕЧчссссь 5040 сакссЯчссаа сяссчсуассу чачбЄЧачссЯу ссссісаадс десаасчисс дссесьсаєс 5100 хУуксачсдач дадссаацчс сс сссдсуаддє асссасаасу ссодсуасся сяддедсегсд 5160 сасасаяддчсст сдасяддсЯдсс ссЕЯддсуусЯєЄ ссдсадддсс асачасддес дессадсссафд 5220 счдсчаддас аассачссся чсуадсЯссЯ дазачачесу асчдаєсьсе сссуседсає 5280 аассстасьї: сададессаєс асачсчасес гсссадврава сссаєссвьб сесдасасчає 5340 асасаччаєс ссдссаазяч ЧчеЕссЯсСасад ассесссссу чдедсаєссаа саядоечЕсадс 500 счачсаччає аддчучдаадса дасссассся счадсадаєч Есссевсевс аседчесесстс 5БАБО асессчсассє яддсядсчесо аасуччаасс ссдсеєссдсу аддссддсессЯя дестассууєся 5ББ52О дсяасаасача счаччасазч сдчасдассЯ асдааассаа дссаассачЯя аачцасадес 580 сасссрассаа часчсасьдс сесссацасу аасдаадачео чассчаддаа ааачачесчасаЧ 5640 счуссчдсає дадсссуєсд дссбассвдс єддЯдсодссЯяд ссадудесас азаааєсасау 5700 чсчссасаддЧа сктаєдчадсас чіссадечаче баддсссосає сааєсдасчас ссддассассо 5760 садасоадссо дссчазассс сЯддсссасся асдчдасссяся сасадсясач ссссдсааєд заго ссасчаєсстї сяссссЯстч дсодаачаєсу аачачаачса чсчасчачссс Ччасаачуєса 5ОВО счЧасддасЯас дасссдсося адддсачадс саєдассЕсе Есадссусса ааасддссад 5За40 ачачачсдсчед єЧасеуссаа чсасуєссссе абдсясссса ссаачдаачад сдассссасд 6000 задссдчасас ссдсдсадууд саачаєссоу аасассаачс асчачдаачуа сазуссачасу вав чЕссасчячуда ссчасессає сдссчасаач чсддассаєс сСоддасассаа ддадасассаддас 6120
Чдачісааасс аддааєсаачу дсасаєсусс ссоддсдєчЧчач Есчудддадсаає сссосаадча 6180 ччаЕЧаасда ассаддчасЯясє счассудаач дсасасадачс аадаассчає счасчсчачЧа 6240 веесссссу адчаєчссдяда аассассуса ачсессусасся ссасусчеодес зссссасчаа 6390 ассеєєссаде ссдссяадссс дасдЧєссад саадсвасоядч ссаачаєсцча чсусдасадес 636о чечдсаасьда сісессосас ссбдсосясу ссаєсудсся ссЯсдчадся єесасчєсаЧе 6420 сесдаасадцдя ачадсдяддсадуд сЕсдасдаач ссаєсєдасса ссдасасадсу ачачааассаса 6480 асчассаада ачсдааааас сЯссоддсчад чассЕддсаа аасаччссач счадчссаад бБ5аб саддссясЯясє сЯдссдаааса сасчдаадсач сачцаєсаачу ааасдсачеос весоєвЧсес 6бОо часасьдсдс сасачссадча сасчасясча чсЧаєсдссаа асчасасяддяде ссдсесьдес 6бббо сеЕдЕссасса сЯядсусаасаа чааааєссся содсчачасяс сдсазаасаа Ччаєсавьссьс 6720 сасчісааса аччасадсєдаа дассасобас ассяддсудєся ауссдсуучус счасчаєчас 6780 чаассдудсас дасачсачує Ччісдчадсас дсчаадесядса сссстаєсуд счадесечаєс 6840 ассЕєсасЯяє єссасчадсес єсоссадчас ссаадссдає счассаасяд ссоачсассас 800 асчазадасся аддааєсєчесс десчсассса сачасуасуд счасудаччесс сасясссуас ваво сясЯяссодас асссччаасс часа сЯссЯя ссусассяЯяссо Сссусуєссос адассдедас 7020 аачаааасчє сссЯссСЯсса дассссрдаєс часчадчава содЕсЯасосс ЧдЕссассдче 7аво чассассаса суаааєєсаїє асочудачаадч сассусаачсе сЯчссдадассдас ддасссдасд4д 7140 акдсЕссасс ассссадсес дсассдддад ссдсасссяс ссаачссіЯуа аассеессяас 7200 сссасасдсд чаєссудаєсе сасссЯясусЯ аачаачсчдас дЧчедадсадЧчачєе саусчавасс 7260 сЯсдаадачі сасчачдсач сЯдсссуЧеЯ даасасяссе дадЕсааєда садасссЧччса 7320 састчсааас чдссачадссо сасодадсса чесссязсся чадасеЕсадс адссадсаєсь т7з8о ссассдаясає сссаччааса азсудчсаст зсссчасуса ссбасессЯяс бсадсаєсяЯс 7440 ссуччасса соусусяссс басдаасрдс суаєсааасад аддаєсаага ссЧасааєсу 7500 бдассааддс ссадаєссяча судчсссЯдЧад судссдасаяє дсачдаєссс сдсдачаєсс 7560 чаєсдссддс ссбдаадааа дсеіссадача сЧЯсссддасс сусссасдад сасдадчада 7620 аазачсссає дчаадасаЯЧссс десдаасуде сасчачаєодс сусддсаєсо ддсдсесаса 7ево саасддсача чаєсаєсчадч ссдессЯддссі ссааасадча ччзасддсссо задчасасьс 7740 асаачдадсдса сссдсссуде Чпсесссусгуд адсесуааса чсечачассча чЧадессчеса 7800 чкасосЕЧсє ЧдсаЧчусЧчсвЯ ссаядсуачеьс саєбадсссує Ччаєчаєсуєс счасачаєсс 7860 саасуудаає ссоддсЯчЧчася сасавсьсса єссеЕсудсяс асеЕєававаєс Есассаєссе 72329 ччадсЕсУуєє ЧчЕСсСвавеЕсся Ядсссассясе сдссодас9чу ЧдЧчссасЯаЧдсуя асядсадчасд 7з80 срдгдсадсс дседаєчдьс дбдсессаєсє седссЯясьсь дЯдсєададасадс ссдавбасчає водо счаєачдсдає сессдаддадеє асссасудаа ссдсадЧдсЯї дасясьЯассЯа дсЯдсеЕдЧасас 8100 сааасдядсадс чссачаєссі ЯдЕсЯдсЯссу садсддадссі доасддаддасу деЕссссасад 8160 сясеЕсячЧчаас сЯєчесдасс сясаадечуєс аассесссЯє дссеседсве ассесвасечЧ 8220 сссзчсаасс чдасадссчча ччассссрдс ссассссачь ачесссадсяа сссчдаєсссяс 8280 саасссодає дсссасаддча ассаасясьс ссадсседас дсаддсесадс ссдаєсовач 8340 сЯядаСЕсСаас ссасеьссосо сСсадессссяда ччассссоасу асссдаассс асадчссоассс 8400 ссЕсаседчачд сЕсссссадсо соссуадсяс ссадчсдочаа ЕССУусСасссо Ссаєсчаасс 8460 чачачсасач часядасассо аасаасссає Ссаадссчас ассустссууси часесачсве 8520 аасссадчач сСсааасаєса сдачадаадс чддєЧасєсусс даадсаєсча сссаасткаєс 85550 адачясачЕс часЯЕссаєсуд адсуссаєсі сдаассчасу гсЯссяадссЯя басаєсссаса 8640 сдадсЕссядса дедчаєдчоася дссеєдаадес асасачсдає ассдаєсьдс ЄдаєссасдЯдде 8700 чзассчядсазадуд сесчасдаза саасясаЯася адсьсьчаєс аасчассьсе сддааассьс 8760 дасЕсссоссЕ Чддачачачеч ачасьсьсся сосєчсадаа десассаєсу ссадсасасаа 8820 счасаєсаєе ссчєсдудсЯсс аєссачссаа чсдсдаассЯд саасєссдчач аасудсадсЯ ваво саасчасаєс ссгсдсадудса ссесстчадес адссасдаєс часаєєдаєс єяадссассьс 8840 чЧесдасааза чдсаздадаас асадсуєсдс себсадсачає ссадсддсаа аддаасьсся 000 сєчаєссядьїЄ сседаасаду асссассвда дчасаяссаваає чааассссаа сдссаєсодаа 260 сссдссдЯдссс чЧчассддассу дсЧасчачся аааєдсадсЯя сеЕсасЯяєсдЕ сссасаєсесу 93120 чЧчеасачсдса дівзвассядса аааєсясЯясс дааучаєдессячсечессчасе дадсаасоча 3180 дсдсссадссд дсссадсаєс ачессуссає ассгєдаадсЕ ачадасаддссЕ аєсесддаса 9240 ачаачаєсчс ЕсдЧчссссЯс дсясадаєса дссядчаачаа БЕеЕсЧЕссасе асаядєдааачч аз00 саачаєсасс аададсачесЯ асааасааєу ссраасааєс сусссаадсе дасаяссяЯяст 9360 счсучсЯясЧч сстсаасссаа ЧчсЯдсгадача чссдадддаач ассаєчсдсч аєсьдчессдаа 3420 часаддсссса ачсессаЯссЕ сусуаєсудса бБЕссдаєсса вссесасссс дсасесазда заво
Сбачдсесссосе ссоасачеьсс ассадачдсса зассзаєста чссчасесає ссаядічааає 9540 чаЧчдседсасе ссаасадааа саассаааса аасасасаса чсчассвавєе сасасчачес 9600 сазассасаа судчсасасасє сссуссадес адсаєсаєсса сассаааачі садасссуаа зво сачсесЕсСаааа сСсачазачсес сасаасєсдад дЕссасадчдс сааасссясс сесадссдса 720 сватаєсасе сассуддаєбсс єаассоддЕді чассасчадас сачсдчдаєсааа аасбсесааєє з780 асасєвсдаес гаасссачсї сдусассуад сбаааасааає СЄсуаассааа ссаааасаса 2840 аасаєасаді ЕСсСсасасає асясссєсаа часесеєває ачаасесссс ЕєсСааваааваєса 9300 сессадаааса Ессдсачассс ссссадсасд Саасасссся сбааасаєда адчсасессах 98960
СсеЕсасраас сЕсСаааєаає сЯяЧЕСсСЯсасу ассасестся саєсаадеьяс Сассааааєд 10020 сядссааєсьс сЄссЯдбссьсєсС саєасссаєба суссаааасе бабсаазасс сеЕсСсасасаєс 10080
Ессе ссдаас ссдаачьдаа ассєссдаасаа сЕсаааасса аасачаасає ассаєсаєсс 10140 аччсассавра СЄбдавсьсса сСасьсааєса сбаааєсвоауч ссаассссда задчедсасає 10200 саасчааааа Есадссааас зчзассааааса аасааасаєс асдеєчЕсаєс аачааааскс 10260
Ессрасаача асассссаас адассатаєу сЕсСЯусааааа ааассаассс ссассаасас 10320 асабасссас ссассавааа сСЕсдасааач слачаєсааа асдзасассса сссаасаааа 1038580 аааалваассад ааааєбдссда азасссудса ааассядаасс аасссааасс чдасасазасся 10440 чеЕссЯдЧдсссЯя ассссєдасає авассдаасс аасесддеЕсс абссудсаєссс сбаассаєаа 10500 тачессєсєаає ассссаачає ассассавачЕ Саасчссуєс азсассссчч аааєсьесуса 10560 азаєчаасса адсссасасдя чссрдсаасає чаасссазаа чдсачсссчає зсччсЯдчсаа 10620 гаєдеЕаассс ассбдаєссс ааагазаасає сосаачваєь дасааєсссь чссаччаача 10680 ачдссадчсса счдаєссасад сададссада абасаасдаа ссасазачьд аєсдаадессс 10740 чааасасасу ааддчаасааа КаїрЕссааа аааасасуса абдасесудда асазаадчаза 10800 чсчасасасе сссЕдсЕсссс ааасаадсає сособссааа чаасучсаде сессствсдс 10860 асаясаассає сасдсрсссс ссусбвасаза аасессуддас сассаєсодд аасевссскев 10920 чЧаазаєсадся чесассЯсЕс аазассааддся сдссавчссс зоддсаадсяд ссдсасаачі 10980 ссдсасазаа аадсаддсьс садсаддсодса ссаддЕєсаа ассссадаач сгаддааєсс 11040 чечассдсЕЄ Есссдсаєдча саєссясссьуд сададссаад счдсаєдсеса ассавзассач 11100
ЕсЕсссадса Ссассасачі чааачеесьд дсеЕсесЕсос сЯддбадевЕс брассьссає 11160 бсааачдЧччс сссссассста аааассстоддч баєсавссьс асеетасьсу стастєстаає 11220 сесссасаає сессдЯдесєда аассасєсасу сЕбссаасаса счаваєсссє асазаєстає 11280 стассрядссаа асасеєсссаа ассаясасааа ассссасдаа дссссувсса кссссваєує 11340 ачцЕсьЕаасає сесссасаєсу заасасаєсаа Єссасссаасє Есгадсуєса чсачааадса 115400 сааєчаєсса сссеЕсаврьсє ссессасаса аасдсссаасє асасаасаса аасазасьсь 11460 срассссаач ааччассссс сарсессасас сссСаазааса сасссассаа асассессса 11520 ассасуєааа ссссаєааса асаачЕсуЮЄс Єсаааачтаа сааааєссстаа ссссасааєс 11580 сссесасссу ассчасссса аадсаасасс садсудасаса ассадсессасс сесссссссЯ 11640 аасазазааа сссаассавс ассдсрасьсеє ссессасасаа счазааєсссс ассааасааєс 11700 часесчусЯддаЕ аєссссдаад саздссавсЯяс сасасаааає сстасзасєскс ссассьдаса 11760 ссасчуаачЕ аассдаадає сеЕдсЕсссас асдсудадаса сассесссаа адсаасссса 11820 асгаасаусса сстасаєссаа даєсссасаєс ассааасась саасаєсасс Есеаааааає 11880 гааєсадава єзассаазає ассассессс саасєсссаач СЕсаатсуєс даасссдесда 11940 стаєєсдаєсс ассаєссстас васдсесяаа сЕдсЕссаса дасадсьссаа адсазасата 12000 ачсааєсуєад садачечсса дадеуссасо ссааассаєа аассасаача ссгсасдадєдя 12060 ассааєсссс асасаєсссст сассясьвсс ассессестс доасасдсаач Ессустаасся 12120 чаассасьяс ЯддассЯассаїє часасьсьЯяс ЯддЕСьЬКссад сЄссаєодсаєу чассссдсдс 12180 аадазазача сазадаасаа адаазааада саазасадач адасаааасу сааєсасаса 12240 ассаасссаа асрадссасе дасєЧчаєссаа чассуссядся сСссаєдсаєдя Есгаааєдчєс 12300 аксадсааадса асасаяасЯссс засабдсасе србаааєудеє сасссабсьс аасссасаса 12360 сааасасаєс дсссессссс ссаєссассас сасаассасс сЯастасасаєх сассссссвс 12429 суссассєса аєсьсессас ЕсСсаасасас дЕсаассьдс абасасдсує сабсссаєує 12480 ссаааєссьсс асдсасяїсс саассассте сесрссрвбаєа баасассьрає ааасассссс 12540 аасаєсасьс асессеЕсрса ссасссассс асссадачса стасвасссті ассасвтаєаа 12600 бассссаасс саасессасбає ссаасассас сссачусасс срадасадддає ссоаасавьуд 12660 ссЧсасссда Садсаєссст даччачасааач саасьадссс саауссаасс сасасасадеі 12720 ассаачачдЯє сасЯєссадач аассдасаса ачаааассаа ссуЧдсЕСаас асдассссвьу 12780 ссдбссссас ссеседасЕсССЕ дадчЕсЧусасе сЧасчачаас сасасссссс ассачассста 12840 сссесасесч чсесясесес брасстасьссе чдсасадсчєс ссасассасе осочсдассасс 12900 асачассссдЯд дЧчЕсссасадчу ксссасадчся счаччєсдсс ассдачасес ЕсссеЯчасес 12950 ссасьддадче сЯддеЕдсдаєс сааччєссстя саачасдуєд дссадссаає сасададсас 13020 ассассЯяссу часячасасс асдааддасс ссврасеєсьдЯс даєдачачча ссадесЯсьсе 13080 сесасасачуч СеччасдчЕє сесаасьссу аєссазаадад: сазачдачсача асачасяьссе 13140 седассссда сьседаєссс дессяЯаскасУЧсЄ чусаасасаа асасгтаєсччачс аачеЕдЕсвдс. 13200 гсЕссЯасеусс ссЯдааєсьсо сечаєдаєач сдассдаЧчес чадЧссддадда чаєсаччсаЧдЧу 13260 чсчдчасесас ссасяссадас ассасасуєч сесаЯсЕСсСЯЄ ссачсаачес ассессьдсу 13320 ссаасссаєсс дасасасєсуд асачасудаас аасеЯчсссда гсдасачасяс асессаачаа 13380 ассасдсссо дассдсЯдссЯ4 зссасаасуд дадааддчаса ссасаасесс сассасдаде 13440
Есссчадеда ссасадчааає дссаєсаєсє Чсддсаєсадеа Едасссраса аадеддсеіса 13500
ЕссассесеЕс садсЕсЯддадс сссебсссавє БдЯдсстасес ЕсеЕсаачасс Єсссуувьсса 13560 аєсдачаєсда чазаччаачу стссачсаас адсаааачучсєс СсссЕЧасаау аааачаабд 13620
ЧЕсЕсєЧаєьд чддасьскссь сестсссадче ббссачсдає сісасдадчЧає чдассеєсаау 13680 сесдЕсЯдсаа ачазаачесдЧа чачаєсдсссд сеЕдссдеєсЯас єЧччадечЧчаєс саєчаєуаєсь 13740 сссачсесає счаачаєссає сссддсдудда ддадссьсає садазаєЧсе ЯдсЕЧдачааач 13800 асдаддассуд сасчєссаає часоддасдс асдаасаєсс ааасаесуса сасаасесує 13860 сдадсасаає чачдачесдЧча чЕсЕсдачач дЕддасаача ачесочадччсс ссдаадчааас 13920 ачадччачсЯдЧча саЕссеЕсаЧу аадссачаса сЕсссссдЯдсса адсдасааччяч чеччадсЯдєс 13980 сЧчЧчсдчаачя ачссдЕсдса дсусдаєдач садссадссс аассасссад ачсссудесса 14040 ссеосдачксає саааасєссає ссадазабас асаасасєьсє Ядесчсадасе єдседчачаа 14100
Есчаєсьдсе ассасааааа ссасаааааа ассссаєсссЯя ссссаассає сссадчаєсд 14160 чсассааача сядсеЕсаааєс асссуссаду ссасктасяса ссаєсЯдедаї ЄдЧачаадаєс 14220 ачдсзасасда дзасасссусра дстастаєсда саасссассс даааасссасє аачаааачса 14280 засдссасає дзассдасда аасааскасаа адасадасаа адссасчсас асссадчаса 14340 ссЧдуссдада ссассдааса ссдачсаада ссасодааєс Сседасачча чсаєдесьсс 14400 ааєссадссс ааасчдсачі Сдааасасьс ааассдсссс асаєдсауча дсучассаєс 14460 саєсяєссус ссЯдЕсдссі ссуссаасає доддачсссаа чадссдадсаЯод сесдасссаде 14520 ссс 14524 «2105 62 «211» 18422 «212» ДНК «213» Штучна . «220» «223» Плазміда ррАБ7324 «400» 62
ЕсЯсСасаазч садссЧсоддс сдсеЕсааєта аасесалаєс сааєьааєдс аассексдаатс во їссаасаасу ааддсаасдуд сдЕаазадаа ааааєсдсаєач Есаєсвдасаєс даєсськсає 120 часчсєсдаад сЯсдссаєаа сасчаєчаєу сагааєсааа асассаасся ссадсаєесса 180 седааасдде асеєдЕсасеє саассасаєс сссдаєссся ссасаєчаса сдассасаач 240 аадеааасаа гачасуссЯяї сдЕсазадза ссЯдссассає асчечсссаа сеЕададддаа 300
ЕсссадсЯсс ачдасссаасс азасасстаса ааасаєссса сесбдссЯясс ачсааєсдасч 360
Сазассачесусєс адасааасоч сдгбааачаєс дсддавааас сеЕссссдЯаче чдсаєчасач 420 сеЕчссЕссЯдЄ ассяссчасе садессадссе басседассс аадчаєдссс ссдєсадесача 480 сазасвсачссу ссазучачас адссасуссс сасассссЯс Сдчааазасаа ассачдссьсса 5АО чачдачасдді азаадссадсс дсссессаає ааддаасчсс чаддачадсаа садсааседес БО сссчасадса сассссскста асссааааає сааєссдрає ссаачасасс дсаазааасе бо сасяддЕссаза асссрдсадад ассадсссад заддадсааєсса Ессаачасдядє адсассаадча 720 аєссааєсуст сасудчаааа ассасяддаач сассаєсєусаа чессадчсесаач аачсачаєса 780 асаєЄєдсудса сабасдсаас ссабусЄссаа азаєсдаачаа сСдбасадаєба саадаєссса 840 бассдссача аєасдаадчаа чдаасасдсачЧ ааассдаздаа адаадаасса дасчаадааа 900 ачдааєссєда зчдасячсаадс ассдасчаса асаасдааза чаачаачаса ачоссяЯаЧчезда 960 гсачсдазада часасачачу асасасчіазаа часддаааас ЧдЕаадчасач ааачеаассє 1020
Сассасааадч чааєсссаєс ссосассасе сСаєссесесса састссссся гдссасссс 1080 чсессссдаде Есссссасас ааччаассаа ч«еЕссЯддсаєс сасдазааса ачааааааєс 11540 сЧдасчсазчс сассессссс даачсассда дадасасаасі ссададааає ссасаадесесе 1200 чсачасасса часссддаєс ссааассасч сссссодчачуа чаачассаді єчачаєсади 1260 ссадссасач садседчасає чдассечсЯядЧЕЕ бБаЧбЯдасасся Єсаассаєса саєєчадасу 1320 тссасадсда ассстадчас ачауссасаа асассасаач ачсдчааєссдча сдаєссачад 1380 азуссодсаач асачасассс ссСочессаЧЧс ЧдсесчаччссаЯа аачасассяс часедвасасс 1440 чессасаяссуд чассссддаа дасЕаччаас чессасчаєс дчасачссча чачсассасс 1509 сасдєдЕсас агадаоасаєса ааччессдадс сраддаєста саєсдсасас асавсєдсьс 1560 аадсссасдач ачасясаачя сЕссаадссі дсддЕедсвЯ ссасаддесь бссавассає 1620 ссаєссчєса чассдсаєда ччасесссдуча сасасадесс чудусасаєсс дсясасадсе 1680 ччасасаачс асудсодаєуд чсасчаєяєс дасЕсссЧддсе аааччучасьс счадссосса 1740 чессссссаа ддссадесад дссадссасс саваєссчач гадссачесе аассасссад 1800 ачдсесчасса дсчдсаасад ссЕсЕСачся ссаєсссдяддча бедчаєссстає седсаседаз 1860 асадссдсод сЯддсааддсе єсЕСьЬСЕсад ааачасачас ддссаваадча асссааччачед 1920 аччеЧдЧаЧсса сСедсесЕсад сЕссеЕсЯсда задсясесду сссаачцаєдс ачадчедеса 1980 чечачаєсдаа дсаааадсяє ссдчасєсудєсЄяза саадаєаєді Ечаєсстася савадчаєаєс 2040 авачсасуса сссаєсасса асабазаєсач єдсассссаа сасдсасьас дав сссаає 2100 ябЄссесассу ссдядседваєд сааєсЯядеує сасазааєяаа Ессссддеда сЕвссЕксса 7160 асссадчаєу ааасаасаєд бсрассасаає ЄСЕсосдаєс содеЕссяска саддааєьда 2220 адсядсдсссд аддесядесдЯд ссассасьсо савсссаєсаз СЕссСасаєдЕє аєсесдааааа 2280
Сааааассса сдусаєсссаа СЄсСсааасася бабассєбєдса аачааєсєдаєба ссЕсдааача 2340 аасасадчьсс ааасасссає Єдасазааса асаачдссадч сассасачсс саадсаадаад 2400 сасааасьса ссдаєсусаад ЕссСадаєсса чааасасссс ааслассдає сасаєссачЧчее 2460 часасассяс сЯясадасуза ачассдадсЯя счасаєсасу чсдсаасаса сачдааєсся 2529 сссааасчає ссодсясстаа ссбсссудссс аасссдсаса чччаазадасяє счассадсауЧі 2550 ачесссссдсс сасачасья дассессаче сссессассс чассядчьсс аасчседчессс 26540 ссадсЕдсЧа ассддаадся дасдассаас адсадаачаа ссдааадчаа сдчадссясес 2720 асассссдає даєсдяддсссс сдЧчсдавуда сассассуса Ччессаадсаад сесасчааад 2760 чссчасачуд чачддсясаса ассасчадус ссасядсододу сссастсскс ачачаччаєс 2829 сассесуєсо сссаадсодса суасчсааау сачесассду здасдсоачасе сесаєссодса 2880 сассасссас сасчадссач садасчаача часстссаса аасчсддсса ачддссавдаче 2340 саачсачаєдч ссасаяасссся ссдсадачссоу сессассаєс сааєачеЕссЯа ЕсчЧасссеса зо0бо чааадчадчесе сдассдадас ссагассдаа ададаєсчає ччасаєсчає асдесаваєс заєой чЧЕсСесдссадс сачазссача ссасасссда сасдссаєсд садсєсЧасу сачасаєудда 3129 чЧчаєаачесч асеЕсаєдадЧа ЕсдсЕсадча чсадсесаєс сасдсасядсс дасаадааса з180 чазаєссесає счачесаасу садссдссса сдасучаєссс даачдуєсаєс сасесетдаає 3240 чеаєсачсес Чдсассадстс сЯясуєсасас седесьссає ссдаасаадча сЧЕсадесааєс 3300 тасЕсссадче сЕвЧЕсссУє сасуддсадуад содсаадсдядс єссадасаєс асссеуєссь 3360 сааассеЕсає чсегччадаас адсссстсаа сссесссдада аасаасадас сасЯссесаа 3420 аасссачаєся сСссуддасаса здасаєдаєсу Саааасаасс сасссаадся ссасссадаа 3480 сасзачесес асачзаасяєсс Сессасессс деЕсассдаас дчаасзададі заасасасеї 35Бай сЕссСсаасає Сасааасазуя ЕссЕсСасася ссассвасас ассччддааєсс акресссаєтса зво сссЕсусуса азадесасуд асасеєсдєда ааусудасаєа заседсчааа сгЕссасаддада 3660
ЧчЕЧчЕсЕсдад ЕсСсоссЕсда ддссадсуса судусасабада сасасасаєс ассьсаєсда 3720 сЯсЕсдЯчЕаа баассудссає бачаєсарсо ссасдсаєач асдсасссда аассадесаа 3780 сссадасаа чсаєссааасч чаєдсдассс сачсасаєса аазасдсссдя сааєдечьса 3840 ссаадесЯсс саадсячєсаа СссЧчаєссас зассдаасає аєсстадсссс адссадессаа ззо00 сачсесчассє сасаассаа Сасаєсссяс сЯядссодссс асчсаячєдесся аддалесеосУ з960 асссоддсссс саєсссодчася гдаасдчсача сасясстааа Сазадаєсьс сячаассадаа 24020 саассьдчссс аєсдссссЯя сссасаааса сдасоадаєся баасесдєся сЕсрассава 4080 асчсассєсс асстсасаас заасдссдсдч асасссасає сЕсСсдаасьЯ аазаааааєс 4140 часаассасс сеЕсссЕсвЕе сессасаєсу ассаєсаєсас ссасєдсеЧча Ессаєдчеачда 4200
Есесссядчас асуаачссає ссСасааєєдча агасассссрд ссдссдЯдсрдс сЯясісСедсас 4260 ссддгаддаче ЕстусаєдеЕва дссеЕсгасдс адаассчадс сачЧчЕсачаса часазсьссс 4320 асссоадаасеі чадссаєчсч сасессссес ссаасасудє чачечасчдча дсаасададвче 4380 чаєссасаєч дчдасссссаа асаєсаєсся ссЧддчдасддсч ЄбдсЧчачача адсачссчає 4440 ссчсчачаєс адссзасаса ссудасаддадс дсдсаасаса ассачсазачі асссуаасдс 4500 ачдсбасааєсс дадссчасує сСсасясддаа сдчассаздса ачсЕсСЯчдесч ссасьєсвсао 4550 чЧасчаччссяЯя сссЧасучесу аччдчасусад сссесоададчу часдадачде сечзсЯасСсазде во чачЧчссадчаач ччсссадаЧаа ччадачЧдсас сесоесткесчуд сячсасачсЯдЕ сасчдсдсаса дво чеачсясачсс ссдуассаааа асаачаєсса сааасаєсояч Ссссааавуса дасСсаааада. 4749 саддесадся ч«чеддссдааа аасдччсуда аассосьсаса аасуссддчає сеЕсссдсесва «800 сЧдчасачсос сісаааєдес аасачадасдсд ссссєсассь дссадсасвс сдсоссесаа авво чсчссаадча СсЧсассеосе сассьдссад садессусудсс ссесаадесчє саасасечса 4920 чадсасьсас ссесаддесс Ядсссасаєса сссЧсдадаа асссясдсаа ааєсачася 4980 веЕссуссчає ссдсчачасе чассачевсс асуссяссдЯдд сеуаааєссда чосрдссссе 50 сассеєдссаа счссаячсусся часдадссосда сесесбсаачі чЕсаасяєсес дссссссвЕс 5100 їдссачсЧчад дадссаадсвс сссдсчаддє асссасаасу ссадчсддсеся судедесесУ 5160 сасасадсЕсї счасддсЯябс ЕссддсЯсуаї сСсдсачадесс агачасуддес дссадсессад 5290 счЧдсчадддс аассадсссу дчечадсяссЯ чааачачсся асччасессс сссадссучсає 52ВО аасссстчссс сачачссасс асадсчасссє сессчадсаса сСссасесесс єссасасчає 5340 асасаддаєс: Єсдссааадая ЧчЕссЯсдбад асееєбсссівд чсасасссза соасдяссачдчс 5АОО счдЧчодсаччає аддеЕчаадчса дчсссассся счачсчудня бссссвсеве зседесссте 5і60 асссдсассе ддсддеЕдесс аастадаасс ссдсссьсся аддосоддсоЯ десассдясся 5520
Чдсдсаасацча счадчасаач сачаєсдусья асчааассаа дссаассадд аадддасадесс 85во сассваєсаа чдсдЕасьдс сЕєссацчася аасдаададс чаєсдаддаа ааччдсдучсчЧч 5Ббай сядссудсає чадессєдссу ядссбассвдс бадссЯассЯяд ссадчддсєссас аааассасдад 5700 чезісусчада ссасуадсас Фдсссосдаче Садсссдсає саасддедас ссдудесусєс 57Бо гачасЯядесЕ дсеЕдЧааасес сддсссассдя асдчасссдясЯя сасаядсЯсяд єссчасчасч 5820 ссасдаєссі сдесссЯстЯ Чдсуаачаєся аадауаачса чдасчадесс дасаачаєса 5880 счасадасЯє чудсссдадсссу адоддсачадсе саєчасесис сбадчссудсса азасядесда 5940 чдачдсдсдся сдаєсдесаа чсастсессс агдсдсесса Есаадчаачач счассесдчсч 6О0О чачссодстас ссдсЧсадуа саачаєссодд аасассаачі асчачаачча соддадассадасу 6ОбО чеЕссасчодда ссдассесає гдссчаєаач чсоЧчассаєс бдчдасассаа Часассаддс 6120 чадссазаєс адчаасаацчя зчдсасаєсусс ссояддсясЧчач ссудддсаає сссоасаадчча 618о чУучЕЧааєча ассдчасясс сдассуддаад дсасасадчс аадаассдає счасасадчЧча 6240
БЕСЕссясся ачддчасдссуа аассаєссяса адссдсасся єсаєдсяасаЯас чсссссдаа 5300 асстсссадс ссЯяссоддсес удасдяддсссад саадссасуд ссаачаєсда чсадсдасачес 65ЗвО чедсаассчая стссссскудс сссдесссасу ссаєссадсся ссусаядЧадся гесасассае 65420 сссчаасзчч ачасачсачч СсСтчосуаад Ссуаєчасса Ссчасасчсу адчаассаєч 6480 асуассаада адсчааааас сдссучсдач чдасссддсаа аасаччссад судадуссаад 6540 садчссусує бЯсідаааса сасчзааусач сачаєсаачя ааасчсадсеє сЕСссЕСсЧЕСс 6600 чаєсаєсдсдс сЯяєддссодда сасаєдсча дсчаєусєсаа асдасасядче сеусесеусо 2) седсЕсасса сЯдсадсаасаа чаааассссу сдсчаддсчс Ечсазаасаа чдассасьссс 6720 сасчісааса аччасячсдаа чассасссас ассоачсЯчессд адссдсаЯаддс саасчаєдас тво чаассчдчсЧЕ дасачсачасє чЕеЕсуддадсас дсдаачсаяса сссссаєсод сдачсечаєс 6840 асесссасчс сстасччачес ссадссаудас сеачасстЧччє счаєсааєддч ссяддсаєсас 6900 асчаадчсся ачадаасяссо чдссасяссса сачачсчасуд счасадчассї сасдессяаас 6960 счсЯчссЯддас асссдчааєс часуссЯясся ссдсассЯясс СссаясяЯсСесс чавассЯясаде тОо20 аадаааасує сссЯдбсдсса дчесссудаєс уасчаддааа Есчссасасо чеЕсвассаЧес 7280 дассасраса сзаааєссає асдадачаау Сассядсааче счЧЕсЯссдас часссдчасаа 7140 акасЕсяасті авсссадсес дсассддчад ссусбасссяс ссаачсессЯдЧа аасессссос 7200 сесаєдсчсд даєсядчаєсс сасссоасЯсч аачаачЕчЧучсє чесчадсадде садсчаадес тео гЧсдаачаді сдсчададсач сддссЕдЯдсЯ даасасдссє дадссаасяча Єдассьяаба 7320 саєсдсазас чЧчстадуддссі ЕдсЯадЧадЕса деессядсесЯ дачасссадс адссадсась 7380 ссассддсасє сссаддааса адчсдудсасе деесчасдса сосдсьссдс ссадсаєсяс 7440
Есадддасчса сддсясудсісС басчаасьдс счасааасач аддаєсаааа єсдасааєса 7590 єчассааддс ссадаєссуа счусссЯЧад сяддссчасує дсадчаєссс сасдчадаєес 7560 чаєссЯссоде сссдаачааа дсесссадада сачсссдддЕс сЯясСЕсасчад сасдачаача 7620 аазачсссає чдачдадсЯсес Чсеідаасяяе Соасзадаєдс сясадсаєсс дасасссаса 7880 гсчасачсча чассаєсдуд седесЯдЕсо єсааасадда ччасоудсосе аадччасяЯастс 7740 асаачасяса Сссдсссддс ЧчЕсессЯсоу адсссуааса дсчаддссдяа чадчачссЧесч 7800 чсасассчдес дсададсудсєсєу ссодечаЧчеЕс бассдсісдє чаєсчаєсЯявс счасачаєссс 7860 саасячаячаає сеЕчЧЧчсЯдЧчасу сяЯсаєсьсса сссесдадсує астсаасаєє ссассаєссє 7920 ччачеЕсЯсЕ ЧдЕссасьсся дссесбассдЯдсс сассудасаа ЧдассосудчсЯя асяддсадачса тзво седсасачес чссдасочес дсовесассс седссдсссо дчесаддсачс ссдаєсасаає 8040 єчасчддсдядді ссессдудаддасс асссдсоадчаа сЕдсЯдусучє дасЯсеЧчеЕса деЧдссдасас 8100 сааасядсадче чссачассосу чЧссоаЧчедЧчссч сачсочдчассі ччсдаЧчачсд ЯдсеЕсссасод 8160 сЧчЕссадчаас сдсассдасс сдсаачсдядс аассссссЯяс дсссссассс асесссассд 8220 ссгдасаасі дасдачссада чдуасессскас гссдадесесаує ачесссачея єседасссдас 8280 саассссдячає асссасадда ассааєуєсс ссяадссвЯадс деЕдасеЕсСЯЯдс ссдаєсачад 8340 счачЕссаас ссасетссьЄ єЧусьссдач чдаассссоосу асбсдаассеє асачесвасес ва4п0 себсассудда сЕсссссадс сеседадсяс ссадсдддаа СЕсЯсасссс ссассаасе 8460 чачачсасач часчасуссеї аасаасссає ссаадссчас ассяссЕсяас дасЯасачдсьс 8520 аасссаддчдач Ссааасаєса Єчачдчаачо часЧаєсстусс даадваєсяда сесазстаєс 85ВО ачадчсаядсе дЧчсоссассу адсуссаєссі суаассядася СсЕдссдасся Еасаєссака 8640 счасіссчса чсчдчЧасдаса чдсссдаадссо асасадсдає акечасссус сдассасЯаде 8700 чассдсаадд сеЕсЧчаєчааа саасусчася адсеЕсеЧаєс васчассьсе садааасессс 8760 чассЕсссосЕ Ччдададачадсесч адаєессссу сядсЕдсадаз чісассаєсч ЕссЯасасдаа 8820 счасаєсасс ссЯдсяддсУсс асссадссаа дсдсдаассу сааєссуадаач ааєдасадса 8880 саасєчасаєс сосдсадчдчіа ссеЕссЧдадесс адссасчаєс часаєсдаєс садссасесс 89540 чссдчасаазаа чсзадачаас асадеуєсяас соссддчсаддс ссадсчасач адчаасьсс З000 тчасссдЧсс сссдаасачч асстасссда дадсЯдссааає дааассьсяа сдадссасачаа 906о сЕСЧдссЯдссс дасстчоачЧчссч Ччеуаєдчачся ааасдчіадся сесасяєсоє сссЯясаєсе са 93120 чеЕасадсдса чсаассууса ааассаяасадсес дазаддаєуєс дссадссдасе дадсаасада 9180 чсачссстассЯ Ядсссаядсаєсс адсесЯєсає асесдаадсе ачдсадастс ассесдуаса 9240 ачаачаєссядс ссддесесас дсчдсачаєса д«ссСддаадаа сссУусссасс асдсдазачу 9300 счачаєсасо аадчсачься дсааасзаєч сстаасааєє сачсссаадсс часяассЯясьс 3360 счзсчасяЯсЯчЧ сссаасессаа дсЯдЕсСадада дссадчдччааач ассасчсусу аєсьдсєдаа 9420 ччсаЧсссса адссісяссо сЯасуаєдуса сбссчаєбсса сесссастос дсасссаача зав8о гЧчасессссс сєсячсаусес ассачууста аассаассва чссуасесує ссяддеЕдЧадає 95ай чадссдсасо ссаасадааа саассаааса аасасасаса чдсдчасссасе сасасчадеє 9600 сааассасаа сячсасасає ссЕдссадсс адсаєсаєса сассааааує сачасессдаа зебо тачеЕсСсдааа ЕсСсачазачес сдсааєєдач чЕссасауче сааасссясе сЕсСадссуєа 3720 саасаєсасе сассоддаєсс саассядесдЕ даєсасуддс сяЯасчаєсаваа аассесаатс з780 асасеєсудсс саасссадсо сачдсассдау саааасазає гсудаассааа ссаазасаєта ав4о аасасасаче сесесасасає асаясесссаа часьссссає здаасьсеся ссазааааса 900 сссадаааєса сссдсдчдасіс Ессгсаяддсабдя саасраєскся Есааасаєдча ачсассосає ваво
СЕЕвассаас ЕЕсСаваєсаас єдассдсася ассасесеєсе сассаадсЯяє басбааааєу 120020 счі:сааскссс сЕСасесСЕсс сасасссаса сачЕсадаасс тассаааасс сстсасасСсаєс 10080
Єсссссудаає єСдаачсдаа асессчаєза сЄсСаазаєса аабсадаасає ассарсаєсь 10140 аччсаєссава ссцчаєеєсеса сасеєсаасьа ссааассєуд ссаасьссуда аачеусасає 10209 саасдаазаа ссадссааас дассааааса аасазабсаєс асдедссасс аачаазаєьс 10260
Есссасаада абасессаас адаєсавасдя гєЕсдсааааа аааєстааєсє ссассадасас 10320 асасаєссас Есассаздааа СЕсдасааач саачаєсааа асаасаєсса сстбаасаава 10380 ааазаассач ааааєсдссда ааасссддса ааассдчаасс аасссааасс часасадску 10440 чессудЕсвЯ ассесєдасає ааассчаасс аасеєсудесс акседсассс ссааєсаєаа 10500 хтадсессаає асстсаачає асстаєсаадсі Ссаасчєсдсс аасассссуд ааасесссдса 10560 ааасчааєса адссктасасд дсєдсаасає дааєссазаа чсачсессчає чсдасадсаа 10620 стаєдрааєьс асссдаєссі адааазасає сссаадсаєс аасаассссс дстадчаача 10680 ачассадсса счасссасад сзаадссача асасаасоза ссагазадсдяд абсбдзадссс 10740 чааакасася ааддаасааа басссссааа зааасасчса асчастсуча асаааачаза 10800 чсчасасаєс сесссаЯсьссс ааасаадсає сссссссадаа чаасдздсачь сСссесьстдс 19860 асусаасває саєдссосеб ссасбрасааа засессодас сассассддуу аассессься 109720
Чааааєсачдсу десассясес аассаадудсу сассаєсусос дачсаачеЯу ссаясасаае 10989 ссусасаааа аачдчсачадссс саясдяддссяса ссаддсесда ассссадаач ссаччааєсс 11040 ааасаазачаа дсчассясяЯяс чассчссаст дсасссосад сассаєсаса дедазадссс 11100
ЕЧассссссс ЯссЯдсЯдес сеЕссасевсті абесааачяд дЕвЕсссасс сСаааааєссь 11160 ччбассаєсс бсастесасеЕ бдеЕсасьсска ассесссяра ассеЕсвадЕс дазаєсаєса 11220 сЯдсеЕсссуса сасччасаєсс стасаааєсть аєсагссдЕс ааасаєсьєс яааассасаса 11280 ааассссаєд аадссссяєс саєссссаає усадсссаас асесссасає сдааасатає 11340 ааксссассса ассссадсЯяє судчсачазач сасааєдаєь бассстсасєс сссссєсавра 11500 ставаєзссста асасасааса сСааасаааєс сЕссасссса ачуааччаєсьс сссаєсссає 11460 асессааааа сбасаєесаєс азасассес саассасуса аассісаєаа їтаасаадчеся 11520 гсссааааді ааєзааассс аассссабаа сСЕСсессраєс счаседаєся базаадсааса 11580 сссачсдаса саассадсса СЕЄБЕЕСсССС Бдааєазааза аасссааєса ссаєсдяставс 11640 сЕссессасСас аасдааааєс Єсассаааса асуаєссяся дсаєсссьда адсаачдссає 11700 чЕсасдсааа асеєссасаає Єсссассвда сассасауаа чсаассчаач аєсстусьсьє 117650 асаєсчсчада сасаєсессс азачеааєсье Сааєсаасаді сассасасьс аачдаєьссає 11820 асассазаса сЕсаасаєса сссссавааа аєсааєссача сасаассааа асгастассст 11889
Ссеааєсьсска адсесаассу ссуааєтсує дЧассаєсчає ссассасссь ассасчрсса 11940 аасєчеЕссса сачасачсьсС ааачусаааса сСаадсаасдї аччсачачсьує садачсясса 12000 сессеЕааасса Єааассаєраа чаєесаєдус дчастаарсє єсасабаєсев сеЕваєсусьс 12060
Ссасстссес гсадчсаєсдчса ачеЕссчіаас ссадаастасс ЧсЧчодЧЕсасс асчасассстї 12129 чЕччеЕсЕЄ чодсссасдса бучдавбоссвд сядсаадазааа ачасааачаа сааачазлзааа 12180 ачасааааса чададасааа асусаассас асадссаасс саааєсадсс ассдачссуає 12240 саачаксясс чоевасссасяс асдкстсааає дессасясааа дсаасасясу сссаасаєяс 12300 асеЕсстаааєсд дсеєсасссає сісаасссас асасааасас аксудсстсевє сСесссаєсає 12360 сассасаасс ассєдсарає ассавсесс ЕсСссЯассассо Єсаавврсвсвс сасессааса 12420 сасчссаасс сдсасасася бдесасссса бдсссаааєс сссаєсдсасд Єсссаассас 12580 сЕвсСЕсСЕСЬС агасаарасс бабазабасо Есраасаєса сесасессеЄ ссаєсаєсса 12540
Ессасссада дсассассас гсссассасса саасасссса асссаассса сасссадатас 12600 тасксссадча сссаасаавдяд ЕсЕдсЕссаа ссусідасає саддуссада дссссачада 12660 ссазоаачає ссасассясс часассяста ссаасачдчса саассауцас аадсасясда 12720 аседдсЕсаа суєсьссссс аєсассучЧаа сСсессасссса сддаєдчсаєс саачсстссь 12780 чччевссасе ссаасессаач ассассаєсе чадсеЧеЕдає стастасьве сЕсассядаєс 12840
Есддаассас сядсрддасас сасадчеєсі чачессаску сссасассссо дссасьсссс 12900 сасЕсаддає седЧдсЕсдсЕ чесоссоддчад чазчачссої сдачаддаєсі ассачасядчЕ 12960 чудссадода ссасаддудсе сассасачує асассчасас сдасааддчас ссасасссья 13020
Есадчаадуд асЕбссссас бсссассьсу чаєсдчаєдує часдаачсач аасссваача 13080
Ччассядаазч чдассчасаєс ссеЧаєсьса асчаччассс адссдссдЕс сдусаасаса 13140
Ччдаасьассе саачачєбЯсу сссассаєда часесасваЯс Бссаагасеьс деЕсЯдссддає 113200 ссадасдада ачаєсядсесЕ дааддчаєсся сусасаяассяу аасссссадч ассесссеся 13760 сЕсаасаадс сассесседс Фдсдаасесьс ссчексасся чсссадачає саассаєссу 13320 асзчасаддаа сесссссауа дассасядбда Єсассясьсь Едссасссьб дчадачоуодає 13380 ассасаассс ссассасчад сісссаєссу ассасаддаа счдссаєсчач сддсассаді 13440 асуассссас саадсазссе асссдддсьс дааадсвасс судассддсс Сасдассосса 13500 адаачсссад чассаасчач ассуадаачуд чаадачдЕсса асаасессач аачазачеєтья 13550 асаччазчач чуссасьссє дассдачддаа ссссасесда Єсаасесса децчаєддаає 13620 чччдаєдасса сЧчЕсдадсаа ссаачаасу чаадчачасе бдЕсассаєс дссачадчіся 13680 тесасчасясє Сассуасссс ассааччдаєс асссадчачч ааачддссабєуд ассссессвя 13740 чааєсудааа зчасядссасс дссасдсєса асддадчаде деассассас Естзасчсад 13800 сЕсасаассеЕ Сссессачсасс асчачоадеЧа дачсдаєсадч даедадчдасудс дачассЧчача 13860 гсгдЧдаачад часссачазч чадаасуєсд адсасуєсач чдчасдчаєсь дчасааачуч 13920 тхчзассачоадчдс сучачадсаа ссаассазача ссссачадсс аассссаасс чдседасосся 13980 сеЕсЧчачсачі ЕадсеЕсаасс ассеаууєса ссачсаєдаа сгаазаєдса сддсадчасува 14040 ачачсссасу чадачсаєчя аасаєсдсає ссуассаєудє аасадсаєза Саассчадсс 14100 ссаєсесасс сессссаєсча асааасазач чаєдчесасдуда сСасассааса ссссасссає 14169 чЧчсассттасс чдеЕсссасчає ааасеЕсссьс ссастаєсає азассаєсссу зассясуася 14220 чсЕсасддая сЯсессадає адсасааааа садасуєдкта ссасаадасе сСссстадасаа 14280 сссстаасьсЕ адсаєсдсда асуадасаса ачедсраача ачасаєсааса ассаєаасуу 14340 аачаачьссЯ ссессаєсьса сасаєсасає ассасссаст гасдсаєсає ассаччасаяє 14490
Сбааддачаса Саасаассасє ааачачачаа чсессаарасес асссасасає Сасасастас 14450 ссасссатасє аскасассса сссасссасс саасуссстіс асаачуєссуя асссаєдаса 14520 весссазває єссадсрдає асудстасасда азаддсаста ссбсдаассстї сесасссьЯЕ 14580 аєсаааччесЯ даєсаєссіс ааачсчадес расссаавсс сассдсьссс сасачасаваа 14640 аааазааєса сччачседусс сдасазаааса ссдаадчаєс саааасааса асааасааса 14700 заєдзласасає азасасаєсдбра сбасаааєсста сгтасаасаса асасеЕсаєсє абаааааадс 14760 ааасаєсуєс асаааєссає асаассуєсє адссЕсусьЯ чаасчаавст саастассра 14820 аасчацдадеа аасаваєсьто ассссссдчє саєссаасаа ассаєсарсе азсастасає 14850 чаааєсєьевЕє бЕссЕсаєбса дсааачдааса ааассазаєсс аздаадчаса асддсєдессс 14940 ааєссессаса саассаасес ссасаадаза Ччесаачісад адасаасааа аааасазадса 15009 ааячааасеєє сесааєєссса дес ссадседсаса ассрасдсад бадядаасасса 15060 сасасаассс сЕЕєсадсаде ачачсаасчч сСсчассябЯяс дсессадессс евсавбсса 15120 єсЕсеЕсаєс адсазацаас ааасааааса азаєдачаса соссачччає деЕсссаассс 15180 ссасасаааа ссссааааас аачесссста дсассстассо аасчааєсссд сЯддссЯсЕвс 15240 сесдсаєдас ассдяссосЯс адачесаачс чсасясесаа Сбавассаде сесссачсає 15300 саєсасачсу ааачссссод сссссесЯдсс дабадесесе сасесссавс сааадчдддЯеєє 15360
Есссасссаа аааєсєссаді аєсасьсеса стстасевЯєс расссбааєь Єсесасаассо 15420
ЕссЯЧссдаа ассаєсасяс сЕссЧдсасас часаєсссса сазаєссвсаєь асссдесада 15480 сасвеЕссаза ссусасаааа ЄсссаєЧчаауд ссссуєссає ссрсаасчва чіссаасаюс 15540
СЕсаєасєда аасаєаєзає єсасесааєє ссадсдЯдссда сачааадчсає засуаєссає 15600 всесбасвсье сеЕссасасаа асдсссааса сасаасаєаа асааасссьс бассеЕсаада 15669 аччаєсссессс аєсставасє Ссааааасає ассраєссааа сассссєсаа ссасЯбааає 15720 сЕсасаасаа саачеЕсЧссс саааачсаає аааасссаас Сссабсааєсе сессасссуа 15780 сечасссраа адсаасассс адсдасасаа ссачдссасьс єсессссесаа асазазаває 15840 ссааєссаєса ссасаєсесс сЕсасасаас даазаєссса ссаваасааєч асессчЯасдаса 15900 сЕсссдазЯяс аачссасЯясс асдсазаасс ссасзаєссс сасседасас сасоочаачса 15960 ассчаачасс соасссссаса сусуадасас асстєссавза чсаавсссаа бЄааєадеЕсас 16020
Сасасссаау асЕсараса ссаааєтасєсс аакаєссасьсє срааааааєє ааєсєсачабає 16080 аассааааса ссасессссс аасссваадь Есааєсояєьу аасссаедас сассдчаєьса 16140 ссасесвасс асдсссааає сЯассрсасач агадсессаяаа чдсааасасаа чЕаасясадеЕ 16200 ачдадєсдссад адсдссасес Сааассасаа ассасаачає ссаєачдсдда сєааєссеєса 16260 татасесссЕ акесдесесва сесессссву чдсасуєсєзачі ссасаассдд аастаседея 16320 часечесаєд асасстссЯра дссЕсЕсЯаде ссасдсаєвоауд аєсесдсаса ачааааачас 16380 азадаасааа Чаааааадас аазасачада дасаааасує ааєссасасаа ссаасесава 16440 сгаччесасту дссдаєсаацч ассдссдядсяЯяї ссасясбаєяс сіааасусса гдсааадсаа 16500 сасуєдссса асасдсасьс стаааєсддсесс асссасссса асссасасас ааасасаєсу 16560 ссСЕсЕсЕьсьС сабсаєсасс асаассассс дсасасаєссс абссссебссос досассьсяа 16629 вЕссвссасі єсаасасасу сгсаассрядса басдсячсассе асссесасачос сааассьсса 16680 сасаєуєссс аассассьсс ссссссасає аасасссаса аасасссста асассассса 16740 сЕсєсЕЕесає саєссаєсса сссададсас сассасссса ссассаєдлас ассссаассс 16800 аасесасаєс саасассасо срадусассос сдсадуддаєс саасаасяадс Есссаасаєс 16860 сеЧадчаєту «ссаасяддсас єссстседад Єсачаєдсуд саасссседа ссСсдЯссссес 16920 сссасассас сечсдсаааа ачссчасаас ачасссаачсо аасесусдсч чадчаасаєс 16980
Ебсасьсьссу себасссуса ссссдсадсеє сЕСсасдчач чссаввьясс ссесевссаде 17040 чсаааасучуце адассчасає сЕсСсЯасссас асссеЕссасч ссасессссау ассдчочаса 17100 ассдссЧчадча сасасачасе ссдчадсссас аадеЕсасаса аадссаадЕфд дссасссада 17160 чеЕсасасьрдуд ссаєсессаа сасодеЕсЧчес кЕЕсаачася седссасячча ссдаадсссЯс 17220 чассасачаа судсассасаа чсасадсчач ассдасячсуд асссасасаа сусаасчача 17280
ЧасЕЕсСЕСсСс бсссссасає сдуседчусьс сесссадуа засассссда ссегчазаадаа 17340 ааачддаадд дасссуасає чачедаєсьс србЧчевучаєс саасасессу СЕсссауаау 17400 аачсассасс счЧчаєссьсає чсесЕстддассе сБассЕсЯдсЧа гассаассяє бассссЯддЕс 17460 тасссссдЧча чдачааассся часадаєчсє ссссссасоач сачссаєчеє ссястасадсе 17520
ЕСсаєсссдча асачссасссЧч деЕсЧасааас сссЯассасас асаачсчадч ачасадассс 17589 сасдасаачс ссассааусс ссссчаааас сссссадссу счасчессуас сссСсадччачаї 17640 ччасьссаса ассассаєсса сасесссссЯя сСадчассаса адасадсача чсосоадааас 17700 аасаадссча ассссасаас аасасессаєс аассссессд сядзазаєсяч сеаддосктає 17760 часссдазуа сЕдсчачеда єЄдасаєсясс аадаасадд ссаачадаас сСдадсчдасодча 17829 адссаєсаєс сєссдадасьЯЧ Ччдадсдаєдад ааєссачадса аадаачадає ачаєасадес 17880 ассаччаєсса ассссазача счассдчачса чссаустсаа ссасссачад сесяассасс 17940 ссчачсасса азасссассс ачазасасас азасассссуас сдсачасесЯя ссочачааєс 18000 чдаєсссассасє сасааааасс асазадааає сссасссдсс ссаассаврсо Саддчаєсдудс 18060 ассзачзачдася сЕСаааєсає єсдЕсадуєс ассасдсаєс ассасдассу адаачаєсач 18120 счаєсасзчдаза баєссЯясаде ассрассдака асссасссдча авасссасаа даааачсааа 18180 счЕсасаєча аєссчасдчааа сазасасааач асачдасавач ссасдсасає Есадчасаєє 182490 чассдчачаєс асеЕчЧчаасасс чадсазадасс асдаддааськс ЕЧасадчаче асуєсстссаа 18300 їссадсссаа аєдасачьско ааасасссаа аседсесссат взсдсаччаче чдчассаєсса 18360 сечЕсЕЯссс ЧдЯдссдЯдссссс дссаасасядд чачсссаадач ссчдсаядсЯсс уасссадсьс 18420 се 18427 «2105 63 «-211» 14233 «212з ДНК 213» Штучна «220» «223» Плазміда рОАВ7326 «4100» єз
ЕсЯдсбасааад ЄддссЧусддс сусесєааєва аасесаааєсс садЕсаасдс ааєсьсчавьь І) сЕсаасаасу аадасзасаядч счтагзазачаа газгасдсаєд стаєсакаєє даєсьсесає 120 чаєчдссЧаач сясаЯассаєаа сасчаєчася сСасаассааа асасстаасся сСсездсаєссса 180 їсЧазасдус ассачссасьс саассасаєс сесеєЧассссд ссасаєдчаса счассчсаач 740 аадсзаасаа садасаЯяссЯї сдДдссааачаа ссдоесаєссає аєдсдссктаа сгадчададаа Зоо сссчадссс ачасстаасс азасассаса ааакасссса сестаяссЯсс адсаасдаасч 360 саассадсус адасазаєдд сдсазачаєс дсоддааааас сіссссдчаді дчасасчасад 420 сеЕчсссссдс асгадсаакс садссадсст сасссдассЕ авауаддвдессо єсчеЕсадсча 48о сазаєсдсекЕ ссазадчацає адссаєдсессе сасассесуї сдааааасвза аєсдсосссч 540 чачачасдді ааадссадес десссссааєс аачдчаасуєс дчадчачадсаа сесСаассудес 6о0 гссддсадса сасессесса акссаазаає саасссусає ссаадаєаєс дсаааавасе 1-0) таєдасЕсаз асссідсадчая ассадессач аададсааєса Ессаачаєчє ачсаєсаача 720 аєссаасяасс сасддчаааа ассасодчаач сассасусаа дсссадсазяч аадсадаєса 780 асаєчсудса сабєасчсаас ссраєдчЕсєсая аааєдаачаа Едсасачаєа саадаєссьа ва стасідссада асасдаадаа чаасасодсач азассдаааа ачдазчаасса дчасдачаадааа лен) ачааєссссда ачасусаачс ассічЧасчаса асаасчаздаа чаачаачаса ачуссччачсда 960 ссасСдазача часасачачу асасасчсаа часадаааає чеаачучедЧ ааачсзассь 1020 сассасааач чаассесссассе сессассасе сасссестесса таєсссссся сассасесьс 1080 чессеєчачі вЕсСостасає азаддаассаа чеЕссдчсавс сасдааааса адазааазаєє 1140 сачеЕчсаачс Ссасссссссс чаздсассда осчасасаасс сєсадчдачдааає ссчсаадчеься 1200 чрачадсбасса чаєсроадасс ссааассаєч сесосачЧацча ччачдассаці сдачассада 1260 ссачсстасач сачеєчЧчасас чоссчсадесс сСачасдасассЯя ссаассаєса сассдачаса 1320 ссврасадечуа ассссадудас ачадссасаза асассасаач ачсддаєєча счассвачад 1380 аздссдсаад асадасассс ссацЧчЕсдЧчЕс десчачассу аччасачєссоає часечасасе 1440 чсЕсасчссд чоссссбддаа чассадчдаас чсссасчаєс дчасачесЧча чачсасьдаес 1500 тасчЕдссас асачасаєса ааччссЯаудс сеадчаєсса сассдсасаєс асасеєсассьс 1560 аачссстаєдчоа ададсусаадча СЕсЕаачесь чЕдаЧсЕбЯасьЯд ЕсСасадассе сссавасчає 1620 ссаєскуєсса ддссЯдсаєда чсчссссдЧЯдда сасасачесс чддЧчЧчсасаїсє дадсчсдсачдсе 16589 чЧччаасасаачс асяддсачаєсу чсасчасаЯсс ячсссссЯдс ааачччасес сдачессдсса 1740 чсссесссаа чадссачеЕсад чессадеЕсасс сазасссдач сачссадчдссс аассасессад 1800 адсєсчаєсся чсдасаасад себсссадся ссассесесоддд Єсчасестак севЕЧЕєЧва 1860 асадесчсдядд Єдддсаачус ЄссссЕссад ааадчасадуєс дассааадцда асссааччва 1920 ачасадчєса єддсвсісад БЕССЕєЧеЯЧЯ заадсЯясьбЄдда Есказдчсус адзадЕДЧЕва 1980 чсддчдасдаа дсаааачсдЯдс ссуаєсдсаа сзауасаєчЕ єчЧчаєсссасу сСааччасаєє 2040 ааачсасуєта сссарсасса асасаассад сдсасессаз баєчсастас часссосвзає 2100 дессесассд ссассядсабд базссддсяс сасзазасаа сссссачсда сЕссесссва 2160 аєссадчасд аааєаатаєд сраєсасаає ЕсСЕсаЯасчаєє гдасссЯясса Саддааєсва 2290 ачесчедсьсо адуєсудчеся ссассасьсс саєстссастаа сСесасаєдячє асссдааааа 2280 сааазаєєса садчвасьсза ЕсСсааасасу сасасссдса аачааєчаєса ссссдаазча 2340 аасаєачссс ааасаєссас сЧасааадта асаауссаду саєсбабадеЕс саздсааааа 2400 сасаааєссса ссдасудсаач ЕсЄсаааєсса чазасасрсвсаасаассдає сасаєссадее 2469
ЯЧЧчсасассдс сясачаєдчаа адаседачсч сдчасаєсаєЯд дедсаасаса Єачдаваессєт 2529 сЕсСааасдає ссясЯсскаа СЕсСЕСЯЯдссс аасссддсаса чазазчасяє счассасоде 2580 адсессссдсс садсачассу дасЕсссадс ссеЕсссЯяссс даєсчдааєсс заєчеЕсцесесс 240 ссачссдсда ассудаадсЯя часчассаас адсддаачаз ссдазададаа сччадссЯссе 2700 асассссдає чдассадчессс сазусуаадуд бассассчса дссаадсаад сссаєдааад 2760 асссаєчаду чачасЧдсаса ассасочачочс ссасодсучч сесассссс асчучачааєс 2820 саєсісЯдссд сісаадсдса сдасдсааач сачссаєсядд ачдсасочаєс ЕссЯдЕсдоаса 2880 басктасесудс сасдачеЕсад сацаєчаада чассеєссаку васачсдасса аддесададе 2940 каачсачаєд сЕасусссвя ссдсачачось сЕссастаєс саасачевдач сечасессь 3000 чааачачссесє соччссдачує ссасгассддаа ачачаєсєсчає чдасаєсчає асассасаєс з060 чЕсвЯссадс садаассача Єсасаєссда Касчсесасся сачессдасу сачаєсаєсача 3120 ччасаачсьч асссаєсучуа ссусєсадча чсадсссасс сасаячсасдсс дасаадааса 3180 чааассссяЯяс счадссаася садссЯяссса сдчзасдчаєсс чазаддессаєс саєсссдуаає 3240 дсассачьсо дсассадсьс счсяссасас ссдсссесас сечЧчаасаача сдсеацсаає 3300 весесссаде сесЯссЕсЯаЄ счсадсачад сададсаадсяс сссачасаєс аксссосссе 3360 саааєсьсасє чдссдЧчадаас адссссьсаа ссссЕЕсЯдда аасаазсадас сдсдЯассссаа 3420 заєссачаєд Ессаддасаса часасдаєсу сазаасаасс баєссаачья ссаєтссадаа 3480 сасаачсьсс асдаасчюис Есссавсесс ядссассчаас чаасаачачеі азасасассє 3540 гсЕсСеазсас сасадласєаач Ссесссасасу сСЕЧдсссСасас ассодуаааєс аєссссаєса 3600 сссссусуса аададссасдя асасссусуа аадсчасаса аассдочазда сссасадача зво чечдссесдад сЕсЯдссесда дуссадсядса сСудсасасада сасасасаєс ассоссаєсза 3720 сдсссддсаа сааєссдессає сачаєсдсьс ссасусаєсач асасасссодча аассадсесаа 3780 сессадасаа дсаєссвааася чдасусчассс сачсасаєста аааасдядссся саасчсуєса 3840 ссазуєсасс саадсячьсаа ЕсСсчаєсссас ааєсдаасає асось«чсоссс адссадесва 3900 садсссчась сбасаассуаа сасасссвдс сачдссодсссо астсасаєся адчааєсссЯ 3960 акссчасессс састседчасая єдааєдсада сасЯдссдчаваа Сааачаєсес саваєсадаа 4020 сааєссурес аседсесессЯ сстасаааса сзасдчаєся СаасссЯяссу ссссассаза 4080 аєчасасеЕссс асеєссасаасє аасдсєдсЯд асаєсстасає ссседааєссу аааааааасс 4140 ччсаасстаєс сорго сресаєаєсьсд ассаєсасас ссассдссча сесасдсача 4200 сесесссудас асуаадчдссає Ебасаассеча асасаєссбуя ссассдсьЯдс сЯясеєсасасє 4260 ссчядсадаче ссчдсасассЧ ЧЕсСсссасЯс адаассчадес садссачуаса часааєсссь 4320 ассдачаасі чачссасчід сасссссссс ссаасасуді дадсдчасдда дсесзасададс 4380 часссасасу дчасссссяаа асассассся ссадасяддся сСсдсчачача ачсачессчає 4440 сесчідазаєс адссцдасуса ссуудсаддс дсусаасасу ассдясаааче асесчаасяс 4500 аччсасаасс чЧчачессзасес ссасасочаа счассаачса ачсссоадесбЯ ссасєсссяа 4550 чЧчсдачассу сссасчассу ачддчдасоасад ссессдадодада часдодчаЧас ссчедекаде 4620 чаЧчссододчад дасеЕсЧчадаа чодадддсаєс сссссіЕссуд сдгодсЯсоде сасддсаасаса л4ево ччаасасачсс стдЧчЕсСаааа асаачдессса сааасаєсду сСсазаачса уддеЕсаааада 4740 саддЕсадсч ч«сддссдааа азсдЯддасдда аасссссдса аабдссддчає сссссчЧчсесс4 «4800 бадасачессо сісааасцуєс аасаччєдся сесоссаєссь чссадсаєссес Сдсесесесаа 4860 чесчссаачча ссасдадсссов сасссяссач садссоасЯдсс ссссаздсєчс саасасесдса 4920 чачсасесає сессачудсЕє чдеЕссасаєса ссессдусЧдадаа асєсЯсясСаа аассадчече 4980 сЕссоассдає ссасчадасс дассачсесс асЯяссуссуд ссдаааєсча чсссассссе 5040 сайссЕдссаа сдссдсаЯассЯя дасчачесяад ссссссааче дкссаасаєсе дсессесасс 5100
ЕЧдссадчсдад чдссаачсЕс сСссоаосччачтує асссасаася ссяддесдасеся счасЧчвсссд 5160 сасасчадссг счасячдсдЯсЕ ЕсгдЯддсЯсЯє ЕсЯасачддсс асадасаяадсо досадоссад 5220 сдадсдадчдс аассадесся чсдадсЯєся Чааададссу асчдаєссве сссдадссасає 5Б2НО аассседсЕсє сяддадесаєс асачсчасьс сстсудсаса сесаєкссеєє гссасасває 5340 ахтасаччаєе ссассавача деЕЕсясасад ассесссься чзедсасссаа сЯдсдєсачде 5БАОО сдчдсадчдає аадсчаачса дасссассся счачсоЧчаєа СсссЕсстсс аседессссьс заєо асссчсассесс часачсасес аасяччдаасєс ссдссссуса аддегддессяЯя десассчесд 5Б2О0
Чдсдсаасада сдаддасаачд садчаєчуадсру асудавассяла дссаассада аачадсадес БО сасстраєссаа чдсЯдсасьдс сссссадасу азсудаацадс дасєдаддаа ааддсадсча 5640 счассЯдчсає чадсссЧЕсЯ дссбасссдс садссЯяєссдая ссаддассас аааассасач 5700 чсесЧчЕсясдча стаєдачсас дЕссЯдесчадо ЕчЧусссЯсає саасчасчас ссадассдсс 5750 саЯачдасадссі дссдазасьс садсссассу асдасссуся сасочасясяча ЕссоочедЧчатч 5аго ссасчаєссь сусссЕдссЧ усчаачаєссу аадачаачса ччасчачесЕ дасаадчеса заво садасдддсЯс часссоасссЯ адчадсачаче сасчасессс ссачесчетва авасччесяд вач4о ччадчеЕдсЯясЯ єдаєьяассаа дсасяссссс абдсдсЕсса Есаачаачач сдчасеЕєссячсЯд 6о0по чачссаачнає ссакасадудд сзачаєссдЯд аасассаачі асдчачаадча счдссачасу бобо чеЕсвасдууа ссдасевєсає сЧчесуасаач чедаастаєс бадасассаа дасассадас 6120 чачссааваєс адчдаасаачд чсасассдсс ссддсаєсчач Ссоадачдсаає ссесасаауча 6180 чачсчЧаасча аєсятчасясс єЧчассядаач чсасасададсе аадаассчає счасусоадач 6240 сЕсссясся аздчдасдссда аассассяса адссцчсасся ЄсасядсЯябрус дссссусумва 6300 асссЕссачдс ссЯдссаддесе часудсссад саадчдесасуч ссаадаєсца дсдсдчасачес Зв чсдсаасвядяд сессссссас о ссеадсессясЯя ссаєсучдссяЯя сечдсдчадсяЯя ЕссасЯссає 6420 сЕСЧаасадч адчсдусадя ЕсСсЯддсЯдаад сСсдчаєдасса Ссдасасосдя ачдаастаєд 6б4в8о асчассаача адсчааааас суссудсчач часссдасаа засаччєсач счаддадесзач 6540 саччссЯдсЯє ЄЯдссдЧчазаса сасчазачсач сачаєсаадч азаєдсадсе сСЕСсСЕвЧЕВсС бо часассдсчс счсдууссода сасчасєсчсда дсчасядссаа асчасасотус ссдсьсевдсс бо сЕдсссасса счсдсаасаа чаааасссся сасдадусяс сасаазасаа даассасьсьс 6720 сасчісааса аучдасуєдчаа даєсасссас ассддсчеся адссдсЯдус суасчаєдаєс 6780 чаассчасЯс: дЧдасадсачдЯс ЧеЕсЧчЧазстас чсдЧаачсуса сссстассодуч счадссодаєес ваг ассессасує сссасчаде: ссдссаччас ссдчасесЧає счаєсааєуда сесядбсассас 8500 асчааччссу ачадаасясесс чссчусчссса сачдсчасод счзаєчадесс сасчсссчас 6зео счсЧчЕсЯдЧус ассєачЧчаасєс ЯдчсассчссЯ ссчсасесдсс СссасаЯасосс чдассдсаЧе 7020 аачаавгасаясє сссЯяббсдсса дадЄсссдаєс дасчадчааа ЄсядЕсЯчсаЯасЕ чЕбсЧдссдас т7аво чассассаса счагаєссає асчадЧадаадч кассосааче СЧгсчссдЧас часссчасч 7140 асдЕЕсчасс аєЕссадстіс чсассуууач ссчбасссЯяс ссазусьддуа аассссссяос 7200 сесаєдсаяася чаєсадчаєсс сасссоусасоа зазавдсдас дсаадсачдє соадсчаадсс 7260 гдсзаачачеЕ счЧсдачоасау сядчесвсЯЧчсЯ чдаасасЯяасоє чачссааєча сєчасстдаса 7320 саєсдсааас чссачадесЕ сЧсЧаддуєса дЕсссядсьч чаддсЕсачс адссадсасе 7380 ссаседасає Ессадчааса ачдсдчучсасс чЧсссдасуса сссачсЕсСсЯслссачсаєсас 7440 єсаччасаса счдсчсасЕСсС Сасчаассяс счасазасач аччассазаа ссачасаасьт 75Оо0 счассазадс сСсачаєсста садсссдачач счассчасЯяс дсадчаєссе сасачаєесс 7560 чаєсдссЯядс сссдаавчаяла дссссадача сЯаЕссадусс сЯасЕСсасчач сасчадчача 7620 азаачсссає ччадачсЯассс десдаасучу Ссоасчачаєсчс сусчдсаєссс ддадсосссаса 7ево ссаасаддсда дассассача срдссЯдссо ссазасадча чаасчусссс азадчасдасес 7740 асаачасятса ЕСЕЧдсссЯядс ЯСБсссЯс4д адсссдядааса чдсдаддссда даадЕсассЯ 7800 чеаєсдсєЧдсЕ чсчдЧсЧЕвЯ ссочсучче баєсасесаяс чаєчаєссясс счасачаєсе т77вей саасдадчаас: ссччсоддчасч сяасассесссса ссессодсус асссаасасє сечдстасссє 7920 дчачессЯес ЧдсЕсаєсссЯя деЕссбассусєссе сассддасаа дассдсодсЯ асадсадчасу 7теаво сечсадсачсс ЧчседасаЧчіс ЧеЧсесасос сеЕдссясссс досаддсачс ссдасасчає 8040 єЧчаєсоачсЯадЕ ссрдочаЧчеє асксегдсоадчЧаа сгасяоачЧчсЯас ЧдЧсасЕчЧЕвЯ ЧЕдсгдЧасає 81600 саавасасадс дссадавєссоі дссядсдссЯя садсддассо чддсдддадсу дчЕєсСссаєду 8160 счеЕєсЯдЧдаас счбсьдасс сясаачсчадс аассеЕсссЯяє дессссасес ассессасся 8220 сссдчасаасе чусочассдядча чдасеЕсссасьссясссессачс ачясессаусу сссдастссЧс 82850 саассссдас дсессасадуа ассаасядссс ссаддссвяддс Ядсадасссудс сечассЯадад 8340 сЯддасссаас ссасьсссвс сддссссядЯя дааєссссудсд асссддасеє асачссдесє вабо сессрассадчЯ ссЕЕСЕсСадс ссссчадсяс гсадсадддаа СЕСЧдЕасссс сБассааасе 8460 чччадсасач часчасуссс аасаакссаї ссаачссуас ассчссеісде дасдсЧчасе 8520 аасссачадач СсСааасасса сдачадаадс часдассудсес дааасаєсдяда сесаастасєс 8589 адачаядсадсс чддадсдссаєссо адсассаєсс сзчзаассчася сечсеЕчасоЯ сасатссота 8640 сяЯдссссудса чедчЧчасачася десеЕдаадсс асасачсчає ассчассвас садесасоае а700 чассчсзадуч сЕєЧаєдааа сазсдсачасоу адсеЕсЕдаєс аасчассьсс сддавасьсе 8750 чЧассЕссссо дчдадачадсяЯя ачдасссьсссЯя сдседсадаа чеісассаєсч ссЯасосасда 8820 сесчасаєсаст ссясадсУсс асссачесаа дсЯясчаасся сааєссЯЧчадч аасодсачсд 880 саасдасасс сеЕсдсаддчса Сссссдадсес адссасчасс дасассдасєс садесассь 8340 чсесдасаааа дсаадачазс асадсяссЯс сесдасачає ссадсодсда ачааасьсьс 9000 сЧчаєссЯядЕЄ сседаасаччя асссаєссуа чЧчсудуссааає чааассстсаа соссаєсдауаа зово сесудссассе часеддасся Чдсчаєдачся аааєчкадсд сесасчєсдЕ сссасаєєсьФч 9120 чЧчеасачсдчса чсаассаччса ааассясасс чаадчдаєдсс Ччсрдссдасі чдадсавааєсадада з180 чдсЯдсссудсся дсссадсаєс адссосдссає асуісааачсс аддсачасте ассссудчаса 240 ачдаачассас ссадЧчесссус чесасачасса Ччесучаачаа СЕсСУассСсасі асчсчавачч 9300 счачаєсасс азадчсачеся дчсазасааєсяч сссаасааєс сдЯдсссаздес засассяЯсссе азео сдсчдадсчсдуа сЕЕаасессва ч«сдеіЕсадача ЧчесчЧчадаач асктасдсоаса зксечЕвааа 3420 ччасчЧасєссса ачесссяЯясос счсдЧасдядчса сссечасеса сссесасссо чедессаача 9480 баЧасесСсссс ссадсачсвс ассадччсса аассаасєсса чесчасссає ссяадесдЧааає 540 чччассусассе ссаасадааа саассаааса засасасаса чсчдасесаєс сасасчадчеє зво сааассасаза сучсасакає сседссадсс адсаєсаєса сассааваче сададсссуаа З6ей сачеЕссдаза ссачазачсе сдсаассучадчд Ччосссасададс савзаєссяЯяст сесвассоса 9720 сааєаєсась сассудаєсс баассччсЧ: чассасчдус сясадаєсаза аассетсаасєсе з7во асаєссядЕсС баасеЕсачьс садсассдачЧ сСаазасааає Есуаассааа ссаааасаєа 9840 аасасасадеу ЕСЕсасасає асдсссесСсаа часевсьсає адаасессос ссазааааса зз00 їбссачазаса сСсеБЧчсчЯчаско сссстдучдсаса баасаєссссЯя ссаааєзЕЧа ачесдссссає 9960 сБссаєсаас ссбааасаає счдсвЧчвасу абсасесесе сассазадсус сасраазаєч 10020 счссаасьсьс вЕвБЕаБЕсрЕсС саваєксаєа БудЕсаааасєсс бассазавате сесакаєаєс 10080 рессссааає сечЧчаачсчаа ассссчасаа СсСЕсСаазаєса аасачаасає ассаєтакссє 10140 ачусаєсаєа сесдаєесьса сасссаасса стазаєссду ссаасьесда аадбдсрасає 10200 саасдааааа ссадссааас дассазааса аасазасаєс асаосчестасс аачазааєсс 10260 ссссасаада асаєсетазі адассаєаєся ссбЯдсаваааа азассаавсс Ссасбсаасас 10320 акасаєсссас ссассаазаа сссдЧасааау Ссаачастізаа асаасассса ссосаасаааа 10380 аааазассач аааасассда ааасссудса азассдаасс ваєссааасс дасасачься 10440 чЧеЕссчдсесЧч ассседасає ааассяаасс аасьсаяаусс асссасассс стаассаєза 10500 бачсьесаас ассссаачає асбассазячє саасдеЕбдЕс аабабсссду азасеЕсєсяса 105650 азаєдаасса ачсстасаєсдЯд чесдсаасає чаасссаааа чсачсесуає чсдабадчЧезаа 10620 сасдсаасес асесдасьсь ааааааасає сссаачураєсє засаавсссі дсєаддаада 10680 адчЕсбадсса сдаєеЕсасау сааачдссадча асасааєсдаа ссаєсаазЯячсч асєчаадевсе 10740 чазатасася ааудаасааа сасссссааа аааасасуса асчасссудЧа асаааачЧааа 10800 чеЧчасасакс сеЕсеЕдЧСЕСЕСЄ ааасаадсає ссссіссблах даасдадсачде ссссесеврас 10960 асдсаассає сасчсЕсссс гсассасааа аасЕсСсЯддас састаєсячдад аасеЕссьсес 10920
Чаазасадсд дссаседесс аагсаауччсу сдядссабудесо садсаачсуч ссясасааче 10980 ссдусасаааа зачсачассс счсцдессяса ссадчвссаа асссстачаач ссачдааєсс 11040 чсчассЯссЕ сссгрдсасча сассдЯдїсссу сазадссаач сусаєдсвса ассааассад 11100
Ссвсссаса ссаєссасаче чааачессссу десесессас сядсдчсеЕсс ссасссесає 11160
ЄсааачачаєЄ сЕсссассса ааааєсссоу сассасесьс асессасссту ссасесєсєсяаає 11220 вЕсСЕСсСасаає ссєсЧчуєссЧа аассассася ссссесдсаса счасасессос асазлаєссає 11280 касссассаа асасссссаа ассусасааа ассссасдаа чесссдсста ксеЕсСсаасяє 11340 ачсссаасає єсЕсСаваєсд аваєгасасаа СЕсасесаає єссадсЯяссу дчрадазачдса 11400 сазаєчаєсста сессртасссс сесесасаса аасяасссаас асасаасата засаваєсс 11460
ЕсассесСсаадч заччассссс сасеєссасас СЕСаазлзааса сасссассаа асасссссса 11520 ассасуєаза ссесасаака акаадесусс ссаааачсаа Саааасссаа ссссасаасс 11580
ЕсЕссасься ассдаєсьса аадсаасасс сачсдасаса ассачсесассе ссеЕссссьу 11640 аасаазаааа єссааєвтаєс ассяварссс Ссссасасаа СЄдаазасєесс ассааасаає 11700 чавесдсддє асесссдаач саадссавдє сасадсазвзаає сстаєсаассс ссассєдаса 11760 ссасддаачі аассдаадає сеЕдсебссас асудсдачаса саєсеЕсссаа адсааєсьса 11820 асаасадсса ссасасссаа чассссасрає ассааасасс саавассась Бссааазаає 11880
Гаассачаса бааєсаааає ассасьсьсь саасссраач СЕСсСааєсяєс чаасссуєда 11940 стассдаєссс астассстас сасдсссаза сСсЯСсссаса часадсссаа адсааасаса 12000 адсааєсчсач сачачсдс:са чачечсвасс стазассаса аассасаача Єссасядчсояч 12960 астааськьсС асасавессс сакрсоасьесс ассЕкекссс дЧдсаєчьаад Ессуасаасьч 12120 чдаассасьчє дадесдссає часасссєує ячдсссвЕсвудда Ессаєсдсаєд чавсьсасяас 12180 аадчааааача сададаасаа адазаазача саазасадач ачасаааасуд саассасаса 12240 ассаасссаа ассадссасі чусідчассаа чабсассдядсяЯя Сосасосрасу Ессазаєассо 12309 асчсаваачса асасчсдссс аасасчсасо ссСазасадссЄ сасссавссс аасессасаса 12369 сааасасаєс дссссссрсс Ссассаєсас сасаассасс сачсасасаєсс сасрьссьссосс 12420 сдсесассоса аєссссссас сСЕсаасасає деЕсаассьЯс асасдсдеЯЧЕ сассссасяс 12480 ссаааєсстсес асасасЯясєсс саассасессе сесссссаба саасассессає азасассессся 12540 аасасєсассс асессссесса ссаєссаєссо асссачадса ссассасссе ассассасаїз 12600 тассссаасс саасесавєає сСсаасассас єссадудсасс ссудсауддчає ссаасаасуч 12660 сеЕсссаасає сЄссєдаддає десзаводея СесессесЧа зссадасасч чсаассссвя 12720 авесддсвсь ссссасасса сссдсдсада задссдасаа садасссаад саасссясдє 12780 ччаччаасає ЕссдсЕЕсСсс десссасссде ассосусаус сссссасяча чустасссЯє 12840
ТЕсСЕСсСЕссад бдсааааєдуч сачассчаса БЕЖЕЕссЯсЕса савссьсвак дчесаєсссся 129600 часєдадчає аассяссаЧу дсасаєсачас сссяддассса саздоесаврас ааадссаадес 12960 чЧчассасссач адеєсабассу десаєссрсса асасдцссудс сЕсссзачас деседсваєда 130260 ассчадсесд сдассасацча асадсассаса адсасацдсда чассдасчсд дасссасаса 13080 асччсаасчач адчсссесес єсесессаса сесЯдоассЧЧсЕ СессууєсадчаЯ азвасаєсссу 13140 ассЕцЧааада аазаачддаачд чдасссесдаса счадчсчассі ссссуссдаєс ссзасасссс 13200 чЕсСсЕСсСачаа Чдаадсассавє ссдассестєса дссесвдаЯс ссассксасуд асдссаасся 13260
Ссассссдядче сеасссссдЯ дчдачааассс ядасазаєяче свсстссЧчтд дсадссатяЯяє 13320
ЄссЯясСсасдядс сессасссвЯ аасдЯссассес чеассдасчаа ссстдесуса сасаачсуча 13380 чЧачасааасс стасчасаач сссаєсааде сесседаааа ссеЕсссадес дсчасЯясссу 13449 сессдддада аддассссас аассассаєс асасЕсьссс десддаддасстас вадасадсач 13500 ачсісдуааа саасаадсву аассссасаа саасуєссає саасьсссьс дсдааааєся 13560
Чдесодассса сЧчасссдаач асєдсдадчсд абдасаєсає саадаасаду дссаадачаа 13620 седусчаєду аадссаєсає ссссдудчсь дадуєдасуа чаассачадс ааачдчаачача 13680 садаєсдсадс сасбаддаєс аасссоказач асчаєедадеі адсбадсеса аксасстада 13740 чсвсддссас сеЕсчачсаєс зааасстасс Качазасаса сгзаєаєєссьд гЕгсасадачесе 13800 чесаддадаає счаєссЯяста Есаєсадазає сасадааада бсстасссяс сьсаарсавс 13860 сачддчассда сассааччас десраааєса ЄсСЕдЕСЯдЯЧЕ састасяасає сассасцаєс 13920 чачаачаєса дсдасасдза асасссдсад бассассдає аасссасссу аазаєссаса 13980 адзааадсаа асассасаєдч аассдасуада асаасасааа дасадасааа дссасдсаса 14040 сссачуасає судссдачаєс сассдаасає сдадсаадає сасудаассс ссдзасадчач 14100 сасдесссса асссадесса аасдчсадес дааасасьса аассуусссса сасадсаччач 14160 сччаєсаєтс ассаЯвссадсеЕ соддЕсЯссЕс садссзасаєд адчадіссаач дссдасаЯдсддс 14220 счасссачес сс 14233 «2105 64 «211» 14575 «212» ДНК «21325 Штучна «2202 «2232» Плазміда ррАВ7328 «4005 64 їсЯасасааач сЯачссСасаудес сЯдсЕбаасса аасссзаасс сааєсзаєде зассвседась во їссзасаасу аачасааєсду сдсаааадаа аааасачсаса ссаседчсаєс чассьсесає 120 часчдєсЧчаач сасадассасаа сасчаєчаєся сасааєсааа асаєсаасьу ссасассьса 180 сЕдаааєдас ассясвассс сазссасасєс сссдассссд ссасасадаса счзассдсаадаа 249 задсааасаа сачасчссує суссааачаа ссдссассає асдсасссаа стадачачаа зо сЕЕєЧачсуєс ачассрааєс азабассаса ааабаєсьса сссЕЧЕсЯсс адсааєчЧчед 360 саассадсЯдс адасааавцчч сдЯсзаздаєс дсдчаааааас сессссуаче дчсаєчасач 420 сеЕЧесЕстЧЕ ассяседасеі садссадссє сасссудасес аадчасСассс сбсдссадесадаа 480 сазаєсдссС Єсаадчдачас адссаєдссс сасассеєсас сСдазаааасаа ассдсссссд 5А0 чачачасчучс ааачссачіс десесссаає аадчаасуєс дЧадччадасаа сусСаассдсс бо
Есечучсачса сасссессса всссааавзає сааєсеєдсає ссаачдчаєасс дсааазаасс бо сасаЧЕсЕаяа асссіадсачу ассадсссад азгдусєзаєса Ессаадаєді адсаєсаацча 720 аєссадсЧЕє сасдацдазаа ассасучаач сассасдбазхз дсісадсаад аадсадаєса 780 аксасасодуса сасасдсаас ссраєсасссаа ааасдалаачаа сЧсасадчаса саачаєсесса 540 тасеєдссада асасчаачаа чаасасусад ааассдазлаа адаздаасса часдаадаза 900 ачааєсєсда адасусбаадс ассудасчаса асаасчаааа чаачаачаса азассацеда 960 ссЧсдааача часасадачуд асасаєсдсаа дасддаааає ЧчеаачачдчсЯдд азачсаассє 1020 баєсасазач чаассьсасс ссеосассасс басссеЕсеса сасссєсссу Счссаєссьсе 1050 чесоссесЧчаче сеЕссссасає заддаассза дсссудсаєє сдсЧчааааса адазаавасєсєс 1140 гЧЧчсдсаадс сасьрссьсе даачсасьча ддасасаасе ссачачааає сСедсзачьсь 1200 чсачусасса часссадасєс ссааассаєЯ сссссодчача чддачассадс сдадаєсача 1260 ссачстасач сачссчасас дассясаЧчеЕс сасЧасассу ссаассаєса сассуадчаса 1320 ссбасадсда асссбадчудас ададссасаа асассасаау адсдчаєсда сєдаєссадад 1380 ачдссдсаад асадасаєссо ссдассдУсЕ асесдадЧчєсЯ ачаддсдЕсЕсЯаЕ чдассчаасСасе 14540 чсЕсасястч Ччассссодаа частадчаас дсссасчаєє сддасачеєча чадчсассуєве 1500 сасчсдєссас асачадсасса ааачссадас стачдчассса саєсдсасас асаєсссассс 1560 аадсссаєдд аддсчсаачаяа сЕсСсаздассс деаЧдесассу єсасачудсся сссааасчає 1620 ссаєссдадсса ясдссСосасаа часессСадча Сасасадссс дчадасасаєсс чсасасачее 1680 чаасасазаче аєдчасдчасу чсаєдасасс чЯдсссссдас аааччачасьс счадесдсса 1740 чесСссіссаа чассачеЕсад чесадесасс сааасседач сачЕСсСадесс азссасссад 1800 ачсесдчаєсу дсяддсаасач сісссградсу ссаєсссЯядуа седаєссьає седсчесоаа 1860 асадссЧдсад садасаачадс сссстсєсау азачасаччс ддссааадча асссаачуєу 1920 ачачечЧчЧчачсста сдЧдсссссая ССессссусучя аадсясссдач ссгаздчсдс азчзадаечсса 1980 чсадЧдаєдаа чдсаааваясдс ссдассдядсаа саачаєасу: Сдабссстасч базадчасаєе 2040 ааачсаєчса сссассасса асасааєсау сдсагсссаа Сасчсассас часерссаає 2100 чЕссЕсСасєсу ссассусаєч саассудсуєЄ сасаааваєаа ЄсессуддечЧа сесесьвсса 2160 аєссаддасу ааасаасасо сСсассасаає ссссосдасє содсссясса сачадааєсда 2220 азсасасьсу ачдсесЯддеьс ссассасьсс саєсссасаа ЕбЕсСасасде асссдаазаа 2280 саааааєсса саддсасьсаа сгІсааасасу сагасссяЯса аачаасчаса сессдааада 2350 аасасачсесс азасасссасє сдасаазаса асаадссачдчуд сассасадесс саачсавааа 2400 сасаааєсса ссаасдсааєд сссаааєсса дазасасссс засаасеЕдає сасассачесс 2460 часасаєсяс сусачаєдаа ачасісадса счасаєсасд чЕдЧсаасаса Сзаачаасссу 2520 гсСсааасчас ссЯясУусссаа КСсСссудосс аасссдсаса ччдааачасяє: счассусачЧче 2580 адссесвсдсс садсадасся адсссссаде сесесссусьс даєссядаєсо засдссдсесс 2640 ссачссусда ассудазчсд чЧчасчассаас ачсудаачаа ссучазадчаа счачессЯяссс 2700 асассссдас даєссядсссс сода даадуу бассаєсяса чссаздсазу сссасдаазач 2760 чЧсєчасдадЧа чачдсЯдсаса аєсєсаєсдаудс ссасуучсяуч себсасєсьсс ачачаччаєс 2820 баєсьсяєсєвЯ сеЕсаачсдса суЧдсчсааач сачссассоч ачсасячасс сссассЧччса 2880 саєссасссяс сасчдадссад сачасчаача чассрссасуч аасуєсчдудсса аччесачачи 2940 таачсачасч ссасадсссбЯа ссасаддссе ссссаєтаєс сааєсавасвЧа ведаєсесвд з00о чааачадссЕ сдадссдадчдас ссасассуаа ачачаєсчає ччасаєсчає асчдссаєчєс 3060 чеЕссЯдссадс садаассача ссасасссда сасдадсраєссуд садсссдася садасаєсдда з120 ччасаачссд асссаєсдудча ссЯсссадча дсадсссаєс саєдсасудсс часаачааса 3180 чааассссЯї счачеЕсаасЯя садссдсеса сдасаддаєсс даадчсєсаєс саєсєссдадаає 3240 псассадесо дсассадсееєс сосяассасас ссдесссссає сСсчаасаача СчсСсСачсаає 3300 сасесссадс сссассесує сасаддсададда счдсаздядбадс сссадасаєс ассссдсссь 336о саааксеєає дсЕддадаас адссьсьсаа сСЕссссбдЧча аасаасадас бБдсоаєссесаа 3420 аасссачаєу єсеучасава часаєсчассу саааасаасс саєссаадсу ссаєссачаа 3480 сасаадчссвс асдааєдесс єЄсссавсссс дссассдаас чЧаасаачадчі заасасасеє 3540
БЕсСЕсаасає сасаааєазу СЕСЕсасасу ссусСЕсСасас ассудддааєс ассессаєса з6оо0
КсЕссасяса ааадссасаяч асасссдясда аадсчасаса зассасчааа сСссасачддда з6Ббо чедссесдад єсеЕдесссда чадссадесдса судсасасада сасасасасєс ассстсаєсча 3720 басссдЯдсСаа Єзассдядєсєсас бачаєсясьс срасадсасад асядсасссда аассадессаа 3780
ЕсЕсадчасаа чдіаєссааасяч чаєдедассї садсасасса аааасчссся сааєдеЧчеса 3840 ссаадссЯсс сзадсуєссаа СЕсСЧаєсссас ааєссддаасає ассссасесо адссачессаа 3909 садсссдаєс сасааєсдаа сасавсссдс сяЯядссаяадесс асаяасдсдссЯя аддзассссд 3969 асседуссос саєссдчася счаасдсача сасуссчааа сазачаєьсс сааассачаа 4020 саасссЯчсес аєсудссссся сссасаааса счасаячаєся саасссяЯассу сСсссассялаа 4080 аєсчдрассесс аєсесаваає аасассдсад асаєссасає сЕЕссдаасвЯ ааааааааєс 4140 ччсаассась сЕсссссесЕ сессасаєся ассассасас ссаєсясеча сссасчєсача 4200 сЕссссЯядчас асдаадссає ссасааєссда асасассесьдя ссдяссЯяссдс ссеЕссасас ага ссчасадачдс ссоасасчесу чеЕссссасас адаасічаде садссадчса часааєссесс 4320 аєсдачаасє дауссасояєа сассессссс ссаасасячі чадсзасячая чсаасодчаче 4380 часссасася чддасссссаза асаєсасссу ссачасачЧеЯд ссасчадчада адсачссчає 4440 ссадесчачасс адссдасадса ссддасачудс дсосаасасч ассаясаааче аєсгедаасЯс або ачасасаасс зчзачдссчасяс сСсасусячуаа счассаачса ачсісчдесЯ ссасссєесчЧча 4560 чдчсЧачасся сєсСсдсадЧчсс ачаддасясач сесссачоаача часоччачас ссаясЯчссаче 4620 чадссяачадч дадсссчачаа чдаддддадсас сессссбссяд сяСасоасоде сасдсусаса 468о чЧачсасадсс ссапдссСазааа асаачдадссса сСааасаєсуд СЕсаааавачса дуссазаача 4740 садчесачся чеЕдЧдссдааа аасодчасодчЧа аасссссаса аасчссадає СесссасссЯ «800 сачасацесс стсазавсасс азасадуєдся сесстсавсв чдеЕсадсасес басесссссаа 4860
ЧчЕдссаадча ЕсдсЧссссб саєсеуєсад гзоЕсусчсс сеесаачЕЧі саасассоса 4920 чадсасесас ссссачассс дЕссасаєса сссЯсЯддаа асссдяссбаа азссаздчсде 4з8о ссссассдає ссадсчадасо чдссадсссс асчссяссдд ссуаааєсча дсосдесссє 5О4О0 саєссдссаа саядссаясасся чдаЧдсчадссяд ссссісааде десаасяссс дссссесаєс 100 сдссачсдач чассаачесе бссодсуачує асссасаасу ссддсдадесЯя садедссьсд 5160 сасасчдчсес: счасячсдЯсс сссдусдсЯс ссадсадасс асадасояддсс дссадсссад 5220 счасчачаЯс аассачесся чЧечачсЯссчЧ ЧаааччЯдссЯя асячЧаєсьсь сесасьчсає 5280 аассессасьс саддассаєсс асачедасьс ссссадсаса сессавсевсє ссесдсасчає 5340 асасадчаєе СеЕдссааадчч ЧчЕсЄсЧчЕЧсач асеЕвЕсСсьса дедсасссаа сдасдЯдссадс 5400 саЧасаччає ачдчічЧаачса чудсссассса счачесдудуєч сссссссесс ассдєссссє 5АБО асссасассі чдчсаддсдссс аасуддааєс срдсссрЯсЯя адчссодчеся Яадссассдассу 5520
Чсусаасада єдадуусаач садасчдусеЧд аїцдааассаа дессаассацчу аадчаасачес 55ВО сасстаєсаа зчбасаседс сесссадася аасуаачадс чаєсдачддаа аачасудесЧчу 540 садссоддсає дадссідссЯ дсессасссдс содссяссЯа ссаддадссас ааааєсасоа 5700 чдсчссасадча ссасдадсас деЕссасчачс Садссодсає саасаяччечас седдчесчес 5вО сачдасЯдссь дссдааассс сддсссассу асдасссуся сасяддсоясяд сссодєдаєу 5В20 ссасчаєссь сдссссдссу дсчаадаєсу зачадаачса чдадасчадесє дудсаачдеса БаВО счзасчачдечЕ часссодссся азддчсачадс саєчасьсьс ссадссчсса азасачдчесяЯад 52349 ччччЕдсЯсЯя счассаядссаа чсасусссес асдсусссса ссаачаачач счастссчсч боб чачсвєдабає ссачєдсадуд саачаєєсуд заасассаадчі асзчзачазача саддссачасу 6Ово чЧчессасяддча ссдчассссає Ссассчасаач чсдчаєсєсаєсс соддасассва чдасассадас 6120 чччссаааєс адччаакаауч чдсасассдсс ссддадсдсчач ссдЯдЧдаддсаає сесусаачдча 6180
Чччачедаасда ассудасчьс судассучаау чсасасауусє аадаассзчає сдадасоасчачу 6240 гБЕЕссассу аччаєассдча аассассоаса ачссоясасся бсабасачвас дссссасчаа 6300 ассссессачс ссуссаяадссс часдасссадч саадссасаяад ссаачаєсдча дсусдасаде ез6о дсдсаассяд сесссссьЯс ссбдсссудсЯя ссаєссдядсся ссяагададсЯя бЄссасдаєсдае 6420 сесчаасачу азчсуЧчсачч СсеЕдЧечЧаач Ссчаєсєчасса Ссчасасаясут аччаассаєсд 6480 асчассаада адсчдазааас счссачечач часссудсаа аасачуєсач счадчесаад 6540 саддссясЯєЄ сдссЯдаааса сасудазачсад сачаєсаачу аазаєдсадес СЕеЕсСсссЧєсес бБбО0 часассдсус сусаддссууда сасчаєсдсчЧа чсудасяссаа асчдасасачдс ссуссседесс веб сеЕЧдЕссасса сасдсаасаа ЯаазааєссссЯя сасдаддсдс сСЯасаазасаа часСсассьсес 6720 сасчеєсааса ачдасдєдаа дассасссас ассдадсдЯдісу адссдсаддудс сдасдадаєдас 6780 чаассЯдсЧЕ часачсачує чссочдЧачсас дедчаачечуса сесссабсояч счадссчаєс 640 асссссасЯдє Єссасчадес ссЯдссаудас сгдддссЯдЕ счаєсаасад сесчадсаєсас 6800 асчаададсеся адчааєдссі дЕсЯчсуссоса саддсчасод сзаєдаддсес сасдєсссдчас 6960 счсЯдссддас ассгяддааєс ЧчдбассасвЯд сбасассяссо бсесадсдссеб чаасечсачЧе 7020 аадаааасЯяє сессЯясСЕдсеса дадєсседаєс дасччадчааа ЄсчєсасасЕ З4СсСЕсЧдссЧдУс 7080 чассассаса счазасєсає асучдачазая бассчсаздс счЧЕсассчас часссдчасчу 7140 асчсгсдасс ассссачссс чдсассачаад ссясбасссуясь ссаадссядда засессссас 7200 сссаєдічсуд дассядаєсс сасссдсує аачаачечЧас чЧечадсадчач: содсчаадес 7260 гсасааачадс садсачачасад сяддссіЯЧсЯ даасасдссє додадуссааєсєдча сдасссчаагд 7320 саєссасааас чесададассї счсЧддЧасса чЕсссаастя дадасісачес адссавасасе 7380 срассдчсає сссаччааса ачсчоачсасс чесссдасочса сесяассесяс Єсачсаєссяс 7440 ссдодчасаяса суддсдсусЕс сасадаасьдс сдасааасач аддаєсаааа ссдасааєсу 7500
Едаєсазцдас ссадаєссдЧа сЯдссБЯЧач саЧчссчасує дсаччаєесс сасчадавсс 7560 чассассЯадас сссчЧаадада чссссачача сЯасссууЧЯс стсесасчзадч сасчачдчадда 76520 аааачсссає здчададсуєЕс Чдссдаасяді сдсдадардс сдсддсавссе ддсечеевсаса 7ево ссдасдчсда даєсавеЧадЧ ссядссучЕсі бсааасауча ччдасудессо аачдасаЯчссс 7749 асааччсуса сссчЕссодде чссЕссоЯвЯд адсссдааса дсдадассздза чада сяЯяссд 7809 чсасЯасьясо дсадасдсса ссадсдЯддЧчес саседссоує даєдаєсяссе сдасачассс 7860 саасдддаає седасуддчаєа сусаєсьсса гссссдчсяс асебаасавс єсдаставксє 7920 ччачсеЕсЯсс чЕеЕссаєсесся чЕСсСвассдсс сЯдссдададсЯяд ЧЧдЕсудсодчсоа асучесадасд таво сЕдбдсадсс ЯдсЕЧчаєдчаєс де есаєсі ссрдссЯясесЕ дссачдсбачс ссчасасчає 8040 гЧдаєсочсчдЕ ссеєсачдчасі асссодсодаа ссасчдасЯєЄ Ячдсодссчсвса чаеЕдсесдасас 8100 сазасчсачдс десачаєсосє чЕсадЧдсуссЯ сачдсаядддадесЕ дасаддадаса чдсеЕсссаєсад 8160 сясссачЧчаас суєдссцЧасс счсаачсачс аассесссує чсскссдасес ассеєсассч 8220 сесачсаасі сасачдссдча асдасссЕсьяс ссЯяарсссадчі адссеєсадся єЕссдаєссяс 8280 саассссдасє чсессасадча ассаасяаєсс ссЯаддсесдоаспчсадсессаас седаєсочач 8340 сччаЧеЕссаас ссрасеЕссссс счЧсрсссодда чуаєсссуся асссддаасос асачссаєьс в40о сессрасрдач сСЕЕссісадс сесссоачсяс ссадсодядддаа СЕсСЧдсСасссс єЕсаєссдаасе 8460 чададсасач даєчасчссї аасааєєсає ссазадссочас ассастссдо аасасачесе 8520 аасссаддач ссааасаєса саЯдадудааде удечассясс Чдазсаєссда сесаастаєс 8580 ачачачсачес дасяссассу адсусєсассс сдаассячася Седссадссу Сасаєссяса 8640 седсессочса чезчаєсдасЯ дсссдаадсс асасачічає аєсєчаєсвдс садЕсСасуає 8700 дассдсааад сссдаєдааа саасясяддсу адсессдаєс аасчасессс садааасскс 8760 ччасЕЕссссЕ чЧЧадачачся ачаєсессся счссЯдсСадаа дссассаєсдя ссдсдасасча 8ег20 сдасаєсаєс; ссядсЯддсасс асссадссаа дсдсдаассд сааєсєссддач аасччсачесд ваво саакчасасс сесдсаддба сссссчачсс адссасдаєс дасаєсєдаєс сядссаєсьс 8940 чссЧчасаааа чсаачадаас асадсяссЯдо сесачсадчє ссадсчддсоа адчаасьсьс 3000 счасссЯясс сссдаасадч аєссасссуа чадсоссааає дааассЕсаа сЯяссаєддаа обо сссдссЯссс дассдаддссЯя десдаєдадсуд заасчарадчсЯя ссрасЯяссЯя сссодсасссьу 53120 чсасадсаса чсаассууса ааассоясясс дааучасочєс уссдссудасе чачсааксдудда зівао чсЧссгдсся дсссачдвраєсс адссесдісає асеЕсєдаачсс аддсаддчсесс абсссдчааса 3240 азаачаєсядс ссадссссЯс дсдсадаєса ЧесЯЧдаачаа сссЯЕссасі асячсуааачу з300 счачаєсассо ааччсачсся чсааасазаєд Єсбаасаасс счсссаачес дасчссассї 360 счсчдсасдд сссаасссаа чсусСсачача чсесдЧчдчаад ассасачсяЯясу асссуссаа заг20 адсдчасЕсса адссссЯяссЄ СЯасчасяддса Єсссдассса сссссаєссе дсодсесаазча 9480 сддссЕсссе ссяддсадесс ассадудеста аассааєсста десдасесдє ссддедааає 9540 чаЧчссдсасі ссаасадаза сааеЕсаааса аасасасаса дчсчасссасс сасасчадсе 9600 сааассасаа суддсасасає ссбуссадсс адсаєсаєса сассаааачі сгададсссуаа зво сачсссдаза сСсСачааачес счсааєсдад Чдчосссасаддс саазасссяЯясс сесСсачессувба 3720 саасаєсасс сассаячаєссс саассучсас чаєсасччде счсдчаєсааа аассессаавиь 780 асасесддьс саасесадчеЕс содуєсаєсдад саааасааає ссдаассааа ссаааасаєса 9840 аасаєараде Єеесаєаває асуссвьссаа дасьееєссає адаасссься Єсааааваєа 900 їстачаааса ЕссЯсаассс сссгудсаєя Саатасессу сгазасаєда адсдссссає зов ссссассазас сЕСааасаає сСочЕсСЯдсасяа асСсасеєессе сассазчсус Сассааааєся 10020 счссаасоссо ЕсЕЯсСсСосЕс сасаєсьсавба судссаааасс сассазаааєсє сесабабраєс 10080 сЕсЕссдаає ЕсдаадеЕдаа ассссдаєаа сб Еааааєса засауаасає ассассавсє 10140 ачдадсассавта сеЧаєсссессса сасстааєса сеааатсечу ссаасьссда аадсоасасає 10200 саасдадааа Ссадссазас чассааааса аасазасаєс асдсудссасс аадаааасьс 10260 вссеаєаада асассссаас адассасаєч сеЕбасааалза азаєссазасьс ссассаасас 10320 асасасссас ссассаазаа Сссдасааач сааддассааа асаасаєссса Сссаасааяаа 103950 аагааассад аааасуссда ааасссудса азассуаасс аасссааасо часасадсся 10440 чЧчЕссЯаЧеЕсвд асссеЕЧчаєає ааассдаасс васесадссс акесдсасос стіаассасаваа 10500
Садсесссааєс ассссаачає астассаачс саасЯєсдєс аасасссьду азассесдса 10560 аваєдааєса адссрасаєд яЯссдсаасає чдааєссаааа чдсадсссдчає дсддсддсаа 10620 стасдстаассс астсчасьсі аааадаасає сссаачсаєсь аахгаасесст Чесадчаача 10680 адчссадсса счдаєссасач сааадссацда асасааєчаа ссасааачсу ассдаадсеєс 10740 чазасасасд ааччаасааа сасссссааа аазасасуса асуасссуда асаазачааа 10800 чЧесечасасаєсс сссрЯссссс ааасаадсає ссессіссааа чаасчдсаус Ссссссссдс 10860 ахєчеЕаастає сгасчсесось гсЯдЕсасааа ааєссєсоачас касктассдчау аастессьсе 10920 чаазасачсчу дссассчссс аасєсаададся сяссасяссс дддсаадсяч ссусасаачес 10980 ссусасазаа аадсаччссс сасддссяса ссаддсссаа асеєссачаач ссаддааєсс 11040 чдсаЧчссЯасЕЄ єсссдсаєчда сассЯясссрЯд сададссаад счсасядссса ассааассадч 11100 ссЕсСссачіа ссассасаче дааадссєья дсссеєсЕсЯс сячеЯЧЕвЕЄ ссассьстає 11160 ссааачучує ссЕссасеса аааасссьд баєссаєсссс асеЕссасься ссассесєзає 11220 сссесасбаає сеЕбЄсЯдсвда засбсассасчяч сесссясаса счасасссос асааасєсстає 11280 касссЯдєсаа асассеєссаа ассясасааа ассссасддаа десссавсса всесвааєЧЕ 11340 ачясссазасає сесСсасассу ааасасаєда сеЕсасесаає СссадсЯссд дсадавадса 11400
Еаасцчаєста сесесасесе єСЕСсСасаса аасдсссаає асбасаасаса аасавасссть 11460
СгассесазЯ аачдаєсьсс сарссвтаває сСбсаааааса саєсвсассаа абарсеєссса 11520 ассасчтааа ссссасааса асаачесЯясс сСсазаадьаа саааасссаа сессасаакс 11580
ЕсЕссасьсу ассчасссса ааасаасасєс садсдасаса астадссась сеЕссссссву 11640 аасазааааа сссаассаєсс ассаячврасьсе сЕсрасасаа сдааааєссс ассазасаає 11700 чаєсЕдесдас асеЕссьдаад саадссасоє сасчсаааас сссасаассс ссаєссдаса 11760 ссасучаачс аасецдчаачає сесдсссЕсас асдсдачаса сасссссстаа адсварьскта 11820 асаасадсса ссасасссаа чассссасає ассазасасі саасаєсасс Сссаааааає 11880 сзассадаса саассазаає арсСасесесе саасессазу сссаасьясе дзассьдсда 11940 сгаєсчаєес ассассссас гаврдесссаза ссЯсСЕсСсава часадчеЕєссаа адсаааєсаса 12000 ачсаасчсачЧч сачачедеса чачсуєсасс ссааассавра аассасаача кеваєдчкча 12060 асеаасьсес асасаєсься саєсусссев ассекесссс часасусаадч Ессдтаасьуд 12120 чааєтассаяс чадссассає дасассссЯє дасссссСсау гссасасаєу чдассссасядс 12180 аачааааача сааачаасаа ачаазаадача сааагасачач адасаааася сааєсасаса 122450 ассаасссаа ассачессасо удссдаєссаа дчассдссдясу сссасаяабсаєач сссазааєчес 12300 асдсааадчдса асасдЯдедссс аасасачсасс ссааасядчес сасссаєссс аасссасаса 12360 сааасасаєе десЕссЕссс ссассаєсас сасадссасс сусасасасс саєсссестсс 12420 сачссасстіса асстссссас ЕсСсаасасас дЕсаасседс асавдсубдадє сассссавує 12480 ссааассєсс агасасдЯдсєс саассасесє сеісеЕсСсвсаса саасасссає ааарассссє 12540 аасаєсасес асеЕссеєссса сСсасссаєсс асссададчса ссассасссі ассастасаа 12600 гассссаасс саасссасає ссаабасвтас сстачусасс ссусачучає ссаасаасує 12660 стдсіссаас сдсгдасаєс аддадссаддд ссссададус саачаачаєє сасассяссту 12720 асассдскрас саасачасас аассдддадсаса ачсасусєдаа ссадсссаздс дЕсвессеса 12780 ссаєсчдаає ссессассссас дчасасассс аачдчсьсЕсво чдббссассс саасссаада 12840 ссасстассіяЯя дассдсдаєс сасрасьссо ссассуддасі єддааєсасс дсрдчасасс 12900 асачадссссу дудсеЕсастчс ссакасссву сбасесессс асссаучаєсс сгЯдЧдссвсдссу 12960 сеЕдссЯчЧачЯя ачдчачсьЯчсс чЧчаддчаєсса ссачасдасаЯ чдасградаддає сасачдчддадсєс 13020 ассасачдса сассдавасс дасааддчасс сасасессЧчі саччуаачоача сесстстасі 13080 сісасссрдядд асдчасчддсу асчаадсада асссааачач часстучаачу ассчасаєсо 13140 ссдчассссаа счаччассса чссЯссЯсЕ Чеасаасасад чаассассьс аачачЕсЯасуає 13200 ссассасчча асссЯчсьЯсо ссаатчсісЯ ссодсрддассо садчасачада чассадсссуд 13269 чаччаєссЯяє чдсасдссдда асссесбадча сссесЕсСсує ссаасаачес ассьссьуся 13320 сдаасесесЕ сасссассду сесддачЧчаєс зассаєсссда сдаєсадчаас ссісстадуч 13380 ассасудєдає сассдЯдссоссЕ дссасссссд дадаудудаса ссасаасссс сассасчаде 13449
Есссасссда ссасаддаас чесассчачі чдасассачьа счавсссасе зачечаєссва 13500 сссччдЧсссЯ даадсаасьс дчассчдсьсС асчдассссаа чаадсссачу ч«сіаасчдачда 13560 ссчачдаачуч аадчдЧдєЄЕсаа саассссадча адаадсесдЧа садчаачачу чесасессстя 13620 ассддачаас сссасссдас саасссссач сдасдчаасо чдчдасдассас чеЕсдЧдачсаач 13680 сеЕаадаасчя ааддддассє дссосксаєся ссоддадесує ссасчаєдеє ассдассьса 13740
Єсаадчаєса сссачдадча аачадессаєда бсссосседу зассядазад чдасядссассу 13800 ссаєдсссаа сддаудчачсу сасктассасі ссзасусаче ссасаасосс сссадсасса 13860 сЧчачачасдуЧда ачсчаєссадчд чадаєчасдсуд аддссуачає ссдчаачачоа дсссацчавлач 13920 адаасячссЧда чсасчссачуч часдчасссу часааачачс чассачачдсе чуачачсаас 13980 саассазадасє сссададсеса аксссаасся срдасадссічс єсчачсачес адсесаасса 14040 сссавдуссас сачдсасчаас сааааєсцсає чсаздсусаа чадсьсочьс ассстсчачра 14100 ссаазаєсса сЕсадаааса сасааврасеє єЧчесЧусачас ссдссдЧадча ассчаєсьдс 14160 бассасаааа аєсасаазаа аасьсвавсєЕ дссссаасса СЕЕсадчасе чдусасслаадч 14220 асчсісааасє саєсьуєссЧу уссассасус ассассасдча ссдачаачає сачесчасася 14280 ааакаєсссяЯясє ачсассассу асаасссасї сдааааєсса сСаадазаачдс ааасуєсаса 14340 сЧдаассєчЧасу ааасаасаса аачЧчасачаса аачссасчса саїссаччас ассдчдесча 14400 ассассдаає ассдадсзач ассасддаас СсСсссдасада адсаєдчессс сзаєссадсес 14460 савааєудудсач Сбдааасассі сааассдссс сасасдсачу адсччаєссає ссассясссу 14520 сЕсоЧЕсЯсс сссуссааса сЯудачесса аччссадеде дессуасссад сссве 14575 «210» 65 «211з» 14602 «212з ДНК -213» Штучна «224» ! «-823з Плазміда ррАВ7330 «40025 165 їсЧсасааач сдассдсаде счсссааєса аасссааваєє сааєсааєсдс аассеєсдчаєь во
СссаасаасЯя ааччеааєсчу сяСаазачаа зазасчсаєд єсассясбаєс чаєссьссає 120 часассдаад сдадсассасаа сасчаєчасу сасаассааа асассзастаяа сСсясасссса 180
ЕєдЧаааєссадс ассдрсассеЕ саассасаєс єсеЧдаєссьд Ссасаєдаса сдасечсаад 240 аадсазаасаа гачасядссЯЄ сдссааадаа єсаЯассаєсає абдсдсессаа ссачададаа Зоо гсеЕдадсаєс адасссаасс азабаєсаса ааасаєсьса сессЯссаЯсс ачсааєЧчасч 36о баассачсЯдс ачасааасуд сусааачаєс чечЧааааас ссссссчаде яддсасчасад 420 сЕЧссссЕЧЕ ассдсєЧдавеЕ садьсадссе ЄаєЄсдасьє азчудсдссс ЕєсЧЯчЕБадедЧа а4во саваєсдссс ссааудадас адссасудсос сасассссує суааааасаа ассЯясесесч 5І1о
ЧдасачасядЧЕ ааачесадсЕ чЧдЧсссСссааєс ааччаасаячсс дадуададасаа бдсаассдсс во сссдчсачса сасбссссса асссадзааає саасстясає ссаачасасо чсааваавасе бо сасддсссаа ассссдсачч асеачіссадч ааччсааєса Сссаачаєде адсассаадча 720 акссаасЯчсс: бсасчучаааа ассаєсддаад сассасдсаа дсссачсаау аадсачаєса 780 асаєсдсадудса сасаєусаас сбаєдсссаа азасдаадаа сдсасачата саадаєсоста 540 сСассдссача асасчааччаа даасасчсад ааассчаада адаачаасса додсодзвачааа зо ачааєсссчЧа ачасдсаадс ассчасдаса асаасдаааа даачаачаєа аддассччвда зво ссЧдсдааача часасачадя асасасдєаа чадсуддаааає чеаачаччсдда азачсаассе 1020
Баєсасааач чааєсссаєс сесссасстаєсс сасссЕсСсста сасьєєссся сдссасЕвеє 1080 чесссеедчаде бесесстасає ааддаассаа дессуддсаєс: сусЧааааса ачааааааєс 1140 сччсчсазс скасссссссс даачсассЧа дчасасаасс Ссачачааає ссасаачсес 1200 чсаччсасса часссудаєс ссааассаєд ссеЕссоадача чуачассачі СчачассачЧчо 1260 ссачссасад садсеєЧабас дассаЯасудчЕЕ єдЕдасаєсуя Єсаассаєса сассодачаса 1320
Ессасачеда асЕссадчучас ачадссасаа асассасзаєч ачсддассєда сдаєсстадач 1380 адассЧдсаад агадабассс ЄсЯЧЧЕсЯадЕЄ дсЕЧаччсса адччсЧчссЧЕ часьдчвась 1440 чессасдссд чассстдуаа чЧассаддаас доссасчасє дчасадеєсЧда чадсаседее 1500 сасчсчссас агаддачсаєса аадчдссдаус ссадчаєсса сассдсасас асасесучсес 1560 аачеЕссаєча адчсусаача СЕСсСсаачеся чеЯдчЧЕсЯдссЯ сСсасаддесе Сссааасчає 1620 ссаєссЯчсса ччссЧдсасдча ячЧссссЧдЧча сасасадссс чаддєасаєс дсадсдсачЧчсЕ 1680 чдаасасаачс асчдусдчасу чсасчдаєасєс: дудсссссЯддс азачаяачаєсь ЕЧчачссдеса 1740 чессссссаа чассадссад чссадссассо саааєссддач сачссадесс аассасосад 1800 ачесесчаєся дсодсаасач ссссьсадсу ссаєсссяду єсчавссває сеодсассдаа 1860 асачссадсЯд сдддсааддс ссссссссач аазчасададс дассааачча асссавчЧччсЯ 1920 ачдчсчдоддЧдсса суддсссьсад ссссссдсдд аадсасссау сессавоацчсчс ачададсуєса 1980 чесчаддаєсчаа дсаааачеяс ссуаєсЯдраа саачасасує суаєсссасу сааздчасаєє 2040 аазчсаєсчса сссассасса асасаассаєч счсассссаа сасдсастас чаксессаає 2100 чессссассаяд єсуссясаєд єааєсаяачедЕ сасааааєсаа єссесудеда сеЕвеесесва 2160 асссаччася ааасаасаса сСтассасаає ссссасчасс садессуєса сачооааєсча 2220 адсдсЧдсьсЯя аддссддссЯя ссассасесс сассісабаа БЕссасаєді асебдааааа 2280 їтааазаєсса счдсаєссаа БЕсСазасасу стасасссдта аадааєдаста ЕЄссЕЧааача 2340 аасаксадсес азасаєссасє сдасааааєса асадуєсадчу сасвсасадес саадсааааа 2400 сагаааєсса ссдасячсаач Сссаааєсса чазасасссс аасаассчає сСасассачеєс 2460 часасассдс сдсадасчаа ачассчачсд сдаваєсаєу дсдсаасаса Єздчаааєссу 2520 гЕсСааасчає ссдсЯясссаа сеЕсЕсддеьсс аасссасаса ддазачасяє сдассачсаде 2580 ачсЕсссусс садсадасья чусесссаде ссеЕсссудсесс чаєсачдасес засассдасессі 2640 ссадссЧчеда ассддазчся Часудассазас адсддаачаз ссдаааддаз сдадессассе 2700 ахтассссдає чассядчссіс сддЧдЕЧаачач саєсаєсяса дссаачсаач сссатстчавач 2760 чссдасдада чачасдсаса ассасдаддс ссасадчсуду сссасеєсьсо ачдчаччачаєсс 2820 сасстсуєсЯ стсаадсуса соддсасааау сачесассууд адсдсядаєс сссдЯдсесдаса 2880 бассаєсесяс сасдачссачЧ сачасчаача чассьссасу аасуєчачсса ачассачачЕ 2940
Сбаачсачася скЕасяссссд срдсадядссс сесваєсаєс саасачесяоч ссчасссьса зЗ000 чааачадссо счдсЕдадчдадс ссабассдаз ачачаєсчає ддадасаєссчає асассавасе зоб6о чессЯдссадс сачаассача ссасасосяча сасадссаєсу садсісдася садасасдча 3120 ччасаачесдя асссасдадда ссаЯасссачдча чсадессаєс сасдсасЯсс дасаадааса 3180 чааасессЯя счачесаасд садссЯясЕса сдасддаєсєсс дааадссаєс сасссаачаає 3240 чеаєсадссс Чсассачесс счсядссасас седссессає ссдаасаачда ЕЧчЧесадсаає 3300 сассесссачсес ЄседЕсЕсЯЄ сасуадсадчаа содсзачеядс сссачасаєс асесечесьє 3360 саааєєеєсає дседдадаас адссЕськсаа сЕСсСссесЯдда засаасадас сасуусссвсаа заго аасссачася сесдчасаса часасчассу Сазаасаасс басссаачся сСсаєсссадаа заво саєзадсссє абдаасЯаєсс єсссассссс чдссассачаас даасаададі ааасасассс 3540
Ессе сСаасає сасазаєаач ЕссеєсСасасЯя ЕБудссвсасас ассяддаааєс аєссесаєса 3600 вЕвссЯсЯса ааассасяддч асасссЯясча аадсодасаста аассдсдааа сесгдсчачдча З6во чЧечЕсЕсчад сСссоассссда дассадсдса бдсасаєсача сасасасаєс аєсесасєча 3720 сдсЕсЯдЯдсза сааєсдєсає садаєвчачтсї ссасусасау асусасссда аассадсесаа 3780
ЕбЕсадчасаа деЕассааасаЯя чаєдЕЧасЕс садсасаста зазасчсєсся саасаячсаЯасса 3840
Ссаадчсесчсс сСаачсуєЄсаа Сссдасссас аассдаасає асссрдсссс адссадссаа 3900 сачсссчасі сбасааєсдаа сасаєсссьус суддссддссс асдсуєдеєся адчааєссьд 3960 аєссесдассоес саєссяддаса гчЧаасчсада сасадссачЧаза сазачасссс сааассадаав 4020 саасесЯясесс ассдсесссЯя сссасазаса садасаяачассоЯя кааєссясся ссссассааа 4080 аєдсаствсс асеесасаає аасяссдсад асаєссасає СЕссЧчааєьсд аааааазаєь 41450 чЧчсаасстасс сеЕссСЕсСьсс ссссасаєсу ассаєсаєас ссассдсьда Єссасчєсача 4200 кЕсссссудас асдаадесає ссасаассда асасаєсссд ссачссчссЯясюксЯасссвасас 4260 ссячсЧччЧчадс ЕєсдсаєсчссЯ чсссссасдс адаассчачс садссаадса часзаєссесс аз20 аєссчадаасс чачссасдся сассьсСсссос ссаасасочі чадсчдасоадЯч дсаасаячаче 43850 чаєсссасасд дчасеЕсссаа асассассся ссзчасчусу Есусчачада адсачесчасє 4440 ссчсчачаєс адсочасчса ссяуасачас осЯдсаасасч ассасааачеї асссудаасочео 4500 аддсасаасс дЧадссдасдс ссасдсуддаа сдассазачса адсеЕсЯддсья ссаєсессвда 4560 ччєЧачуссЯ ЕЕСсСЯсЯдЧесЯ ачадчасясад ссесссдачаучу часдаддчаддадс ссдасЯгсадес 4620 чачдссачдчач часссчачаа чаччЧчадусас ссессосссод стсочсасЯячЕ сасасчсаса 4680 чадсасадсс ссЯядссазаа асаачддесса сааасассуу Ессазазаса дассаазачда 4740 саччесачсд дсдассдаваа аасддасача аасссссуса аасадссдЧчає ССЕссассрд 4800 саЧчасадссс сісавасдсс аасачасдся сессесаєссо Ядссачсасес счсесссссаа 49860 чсчдссаачча ссчсяссессос сасссчссач сачссядасясс ссссаадсяє саасассяса 4920 чачсасессасє ссссачЯссс деЕссасаєса сссчсЧддЧаа асеЕсЯдсЯчсаа аассадасдае 4980 ссссассчає сСсусчачоасо чоассадчсссе асдссяассда ссдаааєссча чдескдессос 5ОгО сассрдссаа сяссечедес чзчЕчЧацеЕсяя ссссісаадче десаасдядссос десессесаєс в1іб0о гЧчссачсзач чассаачесо сссасаадає асссасаася ссяадсаддссдЯя сядсасессс« 5ІівО сасасядчсЕє счасячдсЯсєЄ сСссачечсує сСідсачддсе асадасяддчес чдессачессад 5220 счасчаччас аассачесся чсчЧачсесся дааачацссу асочаєссеє сссуссасає 5280 аасссЕЧдесс счЧчучеЕсасе асадсчавсе ссесоодчсаєа сссаєсессьє сеЕсЯасасчає 5340 асасаччаєс ссЯссазача чсссЯчсЧсазч асессесссу чсдсаєссяаа сччсоссаде 500 сччусадчає ачдчсчаачта часссасссу счадсчдаваЯ сесесвссвс аседессосьья або асссясассі дасодсЧсЕС аасдчдчааєс ссчсвссадсаЯя аддсесддадесЯя дссассоЯсса 5520 чсчсгаасача сдаччдсаач сочасддадссч асбдааассаа дссаассачч азчччсадсес Б5ББВО сассстассаа дчсчЧсассче сссссачасу засуаачаче чассдадчдаа азуддсаччсда 5Бе40о саддссчасає чачссбасся десвассвдс бадссяссуд ссадааесас заааєсасач 5700 чсЯЕсуєЄдда ссабдачсас дЕссядсчадс бддасссдядсає сааєчучсчас ссоддассяЯасес 5760 сЧдЧчаЧдсддсос дседааасьс судсссассу асуасссдсд сасдячачсусояд Ессоусдаасч 520 ссасчаєсес сЯясссстчесЯ деуаачасєся азчадаачса ччасчадссе аддсааччєса 5В8О счасдчасЯс чдасссЯясссуч аддоасачачс сасчасесеє ссадссясса ааасачдесчЧч 5З40 чдчачадсаЧасояасЯя єчасьдссаа чсасЯяссссос аєдсЯясьсса Есаачдаачадч счассєсядасд БООО чачесЧчасаї ссЯясЧсадад сзачасссяд аатассесаадс асчадазуча сучесачасч бОово чЧчЕссасчаяча ссчассссає сЯдссчасаач дчЕсЧчаєсаєс содасассаа досассадчче 6120 чЧчадссаааєс аддааєзадд чдсасаєсрдсс ссдудсЧедад Есдададусаає сссадасаавацда 61860 ччЧдсчаасча ассучасацс сдчассочаач дсасасаччс аачаассчає счасасчачЧчу 5240 сеЕсгссдесЯ аддаєдссда аассассяЯса адссдсасся СсаєдсдЯдсбас дссссдасчаа 6300 ассссссачі ссадссаддссс засудсссач саадосасодд ссаачаєсча чсасчасачес ез36о чЧсасаасєдчу сесссссрас ссбасссЯсу ссаєссдддссу ссасачачсяЯя сссчсЯяссдЕ 6420 сссдаасач адосаядчсача сссдЧдсдазд ссаєдасса Ссдасасчсу адчаассаєч баво асчдассаача адсдааааас сдссаддсзад чассьчдасаяз аасачачссач счачуссаад 6540 саччссусує басеЕЧчаааса сасдаадсач садаєсааду аааєчсадсеє сссссеассс бо часассчасяс сЯасадссяда сасчасчсча чесчасдссаа асздасасядс седчегссосс бево седсссасса саЯасчсаасаа дазааєсссЯя сдсдаддсдс сЯдсаааасаа дчассаєєсссе 6720 сасассааса ачдчасасчаа дЧатсассессас ассадесчесу адседсЯадос соасчаєдає 6780 чаассдчсЯдс дасадсаччі десдЧчачсас десчаачсяса сесссагссач счачесчаєс 6840 ассксссасуаст сесасчачес ссассаддас ссдаддссдас счассааєсдод ссядсассас збо асдаачачссяЯя ачдчаасчссі дЕсдсудссва саддачсдчасдд сдасяадуссс сасуєссдас 6 сочсдссдачс ассессчуаасс ачсассдсва срдсассесЯсь сседесуссес даассасдас 7020 аачаааасчє сесуссадеса часесеЕдаєсс дчасчаччааа ссЯясеЧчсЯсе чсссассаЧес 7080 чЧассассаса сдаааєссає асоддадаачЧ сассосаадс сЯссуссдчас дадасссчасяч 7149 асдсссчасс ассссадссс дсассадддад ссусасссядс ссаадссяауа аассьсссас 7200 стсаєсчсчесд чассуччассс сасссчсЯдсЯ аадаачсддсе доедадсачЯєЄ сЯдсдаадчсо 726о счдсчаасадс сЯдсчасчочсад суасссоаусу чдаасасяссоі дяавдссааєсча счасссдучєч 732а саєсчсааас чсбачадссі сЧеаЧадеса чЕсссадЧчсвЯЧ Ччаддсссадс адссадсасе 7380 їсасьдчсає сЕсаддааса ачсудасасо дсЕсСЧдасчса ссЕЧессссЯяс ссачсаєсас 7440 ссдддасяса сядсдсЯдсос сасдаассдс сдадасааасад аччаєсаазва кЕЧасааєсч т75аб сдавсазачдас Ссачаєсссда сядсесуддчач садесдасЯяє дсадчаєсьс сасачадаєсс 7560 чаєсдісдде сссдаачаза чссссадача сасссЯадуєс ссссСасчач сасчадчача 7620 аавдачсессас уЧачадсЯссс пссдаасядс сосчадасдс сясяддсассс чддсдасссаса 768ва їсуасяччсча чассассчуя сЕчуссЯядесс ссааасадчча ччасчдчсссо ааддчдасасЕс 7740 асаачаяасяаса сссЯасссуус чдЕсССссЯясЧЯ ачдсссузаса чсчачуссча чадЧчессся 7800 чсасдссасо ч«счдасЯяЄсЯ ссядсЯдЯдЯсс сассастечс засчассяєс счасадаєсс 78во саасчччаає ссчддечачуаєд сдсаєсеієЄса Ессссядсус асеєЕзаєаєсс ссяЯяссаресь 7920 ачачесЕчЧсс дЕссассесу дчЕсСсСассчес сассЧЧадсаа аЧЕсСЯсЧоасЯ асачсачасч 7980 седсдсачсес чдссдасяцчеЕс дсдссбсассо ссдссЯяасесЕ адссасдсадс ссчасасчає вО040 сЧасчасЯаді ссгддчудесї асссдсддаа ссадсчаддсЯа: чдаасчссчес чеЧдеседасає в100 сааасасаче дссачассес чссЯчеЧчЕсУ сачсочдссо чоасаачадеЯ чЕсЕссасад 8160 счсссдазас сдсдссдасс сдадсазадедас аассссссдЯяс чдесссвсассс ассессассяЯ в220 ссеЧчасаасс дасаддссода дчдасьссьдсе ЄсЧчЕєсссаді адссеЕсадед єссЧчаєссас 8280 саасссосчає ядссбасадчуа ассааєдсес єсЯадсссядс чдсСадсессдддс седаєсоддад 8340 счддЕссаас ссасевсстє саЯдессссада дуаєссссдЯдся асссдаассє асадссЯяєсе мете) сссвассядуда ссбссесадес сессдаядсдс ссадсдадаа гесудсасьссс ссассавасс ваво
Чдачачсасач чаєчасЯсссЄ аасааєссає ссаадссчас ассяссєссас чусчодассе 8520 ааєсссаддчач Ссазасаєса счадудчдаадс чодсдассусс дазясассда сссаассаєс 8550 ачаччсачес часчдссаєсся адсчссаєбсос счаассдчдася ссаседдсся басасссдаса 8640 саяддссссаса чсддасаддсу дессдаадсс асасачечає ассчаєссяас сдассасдаає 8700 чассусбаача сеЕсдасдааа сзасчсддесЧч адссссдаєс аасчасесЕс сддааасесе 87во чЧчессссссс ддададачдсоя ачдассссоссд сассдсачаа дссассаєсЯч єсЯасасасча ва20 сдасаєсаєє ссдсудсЯсЕ асссадссаа чесдсдаасьд саасскучад аасддсачед вав сааєчасавс сесудсачадса ссссоЧачес ачссасчаєс дасаєсчаєс сачсрасесьс ва4о чссдасаааа чсаачачаас асадсодєсяас себддсадудє ссадсЯдсуда аддаасьсяє 000
ЕЧчаєссудеЕ сссдаасачуа асскаєссда ддсдссааає дааассссаа сачссасддаа Зо06о стсчссдЯссс дасьдадесвЯ дсдасчадся аааєдчсачеч стсасяєсує сесасаєссд 120 чЧсасачсаса діаассуддса авааєсаясусс дааччаєчсс Ччессдссдчась дадсаасуда 9180 дсясседссЯ дсссачьаєс ачессуєсає асеЕсдаадеє ачадсадчстс ассеЕсучаса з240 ачаачаєсас ссадссссоус дсусадаєса ч«ссСддаадаа СЄЕсЯДсСЕСсСасє асясдазадча 9300 счачаєсасс азаччсачеся чсазасаасч сссаасаасє сусєЄсаадсс дасадссдасЕє 9380 счечасчсдЯдд сЕсаасеєсаа ячсЯчЕеЕсадчача дссддддазя асрабачсусу абссдєсдаа 9420 чаЧасаЧдсесса ачссссассі сЧсчаєдуса бсссассса сСксссавссс дсЯсесаадЧа 9480 кєЯдссЕссос єсудудсачеьсс аїсадоадсса аассааєссьа дссдасьває ссддедчааає Біо
ЧчадссЯдсаст ссаасадааа саассадаса аасасасаса дсдасстстайс сасасчачсе зво саааєсасаа сяччсасасас сссчссачсс ачдсаєсаєса сассаааачс гадасссуаа зво
Сбачсссдааа ссадазадес сдсааєсдадч дсссасадчс сазаєссусе сесадссдяса 720 саасаєтасе сассоучасос саассодчсде чЧчассаєсддус сдсуаєсааа аассесааєс з7во асаєеєсдадеЕс баасссадесс сдасассдад сСадаасааає ссдаассадаа ссаазасаєа 9849 аасасаєачі СЕсСактасає асусстєссаа часьсеєсєсає адааєсесься єсаааазаєа 93900 хссадаааєа сеЕгсдсчасьс ссссдасаєч сааваєсься сбаяааасаєдча адсдсьссає ово
Есссасраас срсааасаає сяде дсасу асасесЕстї сассаачечє Састіаазааєд 10020 счссааєсьс сеЕсЧасстсссс сасаєссава бдесаааасс сСассааааєсє сеЕсасСаграєс 10080
ЕсЕсЕсуаає сеЕдаадсдаз ассссуаєаа сЕсааааєса аагсадаасає ассасстасес 10140 аччеаєсава сеЕчаєссссва сасесслаєса ссСаааєсьод ссаассеЕсда аадсдсасасєс 10290 саасчаааза бвбадссааас часіааааса аабаааєаєс асчедеЕсаве зачааааєсс 10260
Есссасаача асаєссєааї ачаєсасася сСссдсааааа алассааєстє сстассаасас 10320 асасаєсьас срассааааа сссдасааач баадассааа асаасаєсса сссаасаааа 10380 аавгазассач аадааєсчсЕЧа азасссууса ааассуаассе засссазаасс часасадчсся 10440 чаеЕсеЧчассва ассседасає ааассдавдсс аасісядссо асесдсассс ссаассасєва 10500 сачссссаас агсссаачає абсассаачс сазсЯдїЕдсс аасассссЯчч аааєсьсчса 10560 ааасдааєса адсссасаєч чссдсаасає дааєсссаааа чсадсєссчає чедчечаЯдсаа 10620 гаєсдбаакєес асессдавссЕ ааааааасає сссаачсасе аасаасессс Чсгаддаача 10680 ачдччссадсса счаєссасад сазадссада абасааєчЧаа ссасааачсч ассдаадсьс 10740 чЧчааасасася ааддаасааа саврссссааа зазасасуса асдасссдуда асазаадчдааа 10800 чечасактаєс сЕсесдсссЕс ааасаадсає ссссіссааа чаасодсачі Ссссессвдс 10860 аєдсаассає саєдсеєсссє СсЯастіасааа засьсєсддчас сСастаєсяадчу аасЕссьсксі 10920 чазаасачсу чдссассусис аассаачусЯя сассасдссс Чадсаачсоч ссесусасааче 10980 вЕЧсасаааа аадсачассс сачесддссяса стачуєесаа асссрадчаач стадчааєсс 11040 чсудссясьь всседсасча саєсЯчіссьЯ сададссаад сасасдссста ассааасьтад 11109 тсеЕсссазчіа ссассасаде дааачесесву чессссссас сЯдсЯддесее сеассьстає 11160 ссазаччаЧчЕ СЕеЕсСссассса ааааєссьтду бассаєсстс асестасесу ссасесссаає 11220 вЕсСссасаає сестадеьсЧа аассассася сскссасаса счасаєсссес асаватсває 11280 тасеЕсяссвза асаєсеесаа ассясасааа асессаєсдаа десссЯясста ссссрааєсдядє 11340 адессаасає Есссасассуд азасасаєаа ЕЄссассваає СЕсадсЯссЯ дсадааачса 11400
Саасєчаєста єссєваєсся ссрссасава засдсєссаає асасааєаса аасаааєссяї 11460 стсассссаадч ааччасесссс саєсесасає сссаааааса сасссассава асассессса 11520 ассасядсааа ссосасзаса асаадесдсс сСсааазчсаа Саавасссаз сессасєваєс 11580
ЕсвЕеЕсаєсссу ассчаєсьса аадусаасасс садчсчасаса ассадссаєть сЕсЕсссвсЯя 11640 аасааалаааа сСссааєсєсасс ассясасьсс сессасасаа Счазаастсс ассазасаає 11700 часьсдсчас асссстдаад саадесаєді сасасаааайє Ессасаассс ссаєсссдаса 11760 сеасодчааче азассчаачає седсЕсСссСас асдсуачаса сасссестаа адсаасеста 11820 ахсаасадеса сеасаєсссаа часесссасає ассазасасе саасаєсасе сесбаазааає 11880 їааєсаччаса сСазссаааає ассасьсесс саассссаауч сссаассЯяес: дчаасєссчсда 119409 ссассдчаєвст ассасссктас сасясесааа сСсаЯасСсссаса часадсссаа адсааасаса 12000 ачсазсасач сачадсясса дачсячссасс ссазассаса аассасаача сСссасячесдя 12060 ассаассссс асасаєеєссь сасеЕдсеЕссс ассЕСССссє дасасчеаад сссоєаасьч 12120 злаассассає чЧчадессяассає часассссяЯс чадсссессуд сесасдсакч чаєссссусЯяс 12180 аадааааача сааачаасаа адазаааача саааасачач адасаазасу саассасаса 12240 ассаасессаа аєсадчесасеі часеідчаєсаа чаєсяссяся сссасасавд їссавааєдсс 12300 азсчсааачса асасусасьс аасасосассо ссааасудссо сасссасссс аасссасаса 12360 сазасасаве десестьессе ссаєсаєсас сасаассасс еєдсаєасасе сасесьсяєс 12420 счссасссса асссстеєсас сссаасасас чеЕсаассідс асасачсовас саєсссасядс 12480 ссаааксьсс абусасяасес саассасесь сесессстаса сбаасассстає ааасассьсе 12540 аасаєсассс асерсьссса Есасссаєсо асссачадса ссасвтасссо астассаєаа 12600 бассссаасо саасесасає ссазасассас сстаччсасс ссдсададає ссаасаасдя 12669 ссачсачеЕсс ЕссаачічсЯ ссачаасссЯ ссчсацчевсЕ сссеєдаєадуд асаасучасс 12720
Есааасссає чаччдаасасо ааачуссаєд асдессссаа асссрсасаєс гссдааасас 12780 счасчасссс даачаассдЯду сасааасаєу сдазссчЯсСс саасассаса сСсасрссссс 128540
ЕсЯссссасе чдассдоаЧчесу ассссаасст ассддуєссс сссссаасод аазассядсач 12900 счЧЕчЧчусачс счрасасктас сссаасассу дасссудддчає сасєдссудс бассасадчає 12960 счсдоддсаса сссесоссас аачассадет сусесссссаа аассбассес дссдадсадеєся 13020 чЧчеЕЧдссдчдадс сссЧдаадаь сссасаачає часддадсаа содчасасачдча чсасассаса 13080 часасасаца сасадачааа чдасссеісасс сачечадчаа чоаочаєсасьс сСасадссаса 13140 єчддЕсочЧчає дсЕсесдаач садчаасссаа аддаадсаачач даччасуздас ассасеєчаєсєс 13209 счаасдачача сссадЕєЧЕеЕЧ чссЕЧасаас асаччаасьс ссссаачеує чсдавссеса 13260
ЕЧчастесЯадеЕ сеЕКсСсссасс сеЕсЯдсеЕЯЧсбд деседаЧчаєсд чададасьас сдададаЧчуєє 13320
Есасссаєчч зачучассесчЯ ачачедесссЕ Єсасссадса адссасстсс сдЕЧссаасі 13380 сасссасаса ссдасессЯддс чассаассЯяс ссЧасчасад азасссссса сЯясдассаєч 13440 ссасаассдс єсеЕсЯдссася ссддасдаад дссассасаа сЕсссассат дчадсссссоє 13500 сачастасач ааасдсдчасє чачесчсасс аубасчассс сасчаачусау ачсаєссяча 13560 сссочаачса асссачассс десссасвнатс ссаздсзасс сачасачаає чачасачача 13620 ачачаачуЧе сЄсаасачесд садаадчазас сСоддассачаа чададсдааа сСєдассдуд 13680 чаасассЯєє Чдуаасаассс ссеЕЧЕсЯсЯЧЕ сесддчаєда сессЕдЧЕсдаа сачссааача 13740 асдасаздчддс асдчаєсЯасе чеЕсассядЧдсу ссаєссасча сассЯддсдас сссаєссазчу 13800 ассассссач садасуєуасс сссаєсаассі ссусчаєсуу сазачаєсдсс асадсдчасєст 13860
Ссаасдядчада бєдЕссасаас сасссазаєсу ссчсасасаа ссстсрессо ассаєдачач 13920 ссяддсасссс ссдсддачду сдсчаачедд ачасасудчаа асаясдсссаа адсдчадааса 13980 аачаєчсскс сассдсуусє дасачесссд дсаассдтає сусдададесь дадсдчасаадц 14040 ссассааачі ддсєссаусса деЕссссауєд сесаачсадс ссдаєдачса ЧдеЕсСауесьаа 14100 ссасстачад сссддбсасс єсдадсаєса аааєссрасьс ачдчазасасас ваасассссуає 14160 басачачсЕсд седдачаваєс даєстястає сасазааасє асаваааває сссасседсс 14220 ссаассаєсс садчаєсодЧес ассазчдася сссааасєсає сеЯассудуєс астасясаєс 14280 аєсаєдаєсся адаздаєсадч счасасадааа сасссдбачеЕ ассаєсчдаса асссастєда 14340 ааасссаєаа чЧазааадсала сЯбсасасда ассдасдааа саабасааач асачасазад 144300 ссасадсасає сСсадчасасс дассзачасс аскчаатасєї дачсаачаєс асоддчаасьско 14460 сЧасаучадс асуссессаа Сесадсосаа асдчсадєдссЯ ааасасссаа ассдссссає 14520 асчсаччадс ччаєсаєсса СсатссЧЕсЕ ЧадесуссвсЄ дссаасаєач чадессааду 14580
Ксосдсяасасс чдасссачесс с 14602 «210» 66
«211» 10915 -212» ДНК «213» Штучна че2й0з «223» Плазміда ррАВ7Іі3ЗІ1 «4005 66 баааєссааа сссааєссаає дсааєсьсда сесссаасаа сдааддсаає уадасаясаагзад во аааЧваасучса СясЄсассуса ЄсчасссвесС аєчаєдєєда адсясдссає аасаєчаєча 120 сЯдсасааєса ааасассаас ссссдасаєюьє сассчадаєсу дчсасьдесає сссаассаєа 180
Ессссдассс бдеЕсасаєда сасчассуса адаздсаває аасадчасасс чдссдессааач 240 аацсєчссаєс аєаєдедссЕ аассадачад аасссдачся ссачасссаа ссававаєтса Зо00 саааасаєст сасссьчісу ссадсаасуд сдсаассачс дсадасазає дасдгсазача 36о ссчсячЧаааа асссссссда дедасаєчає адседсесЕсЕ Ядсассдоєча сесачессадс 420 ессавеєсудас ссааччдсдЧе сессаяссадс дасаааєсдс сессаадчад асадссаєдс аво сссасасссє Яссдааааас аааєбдсстї соЧчдчаадася чдезаадссад єсдсссвсса 54ай асааччаасд ссдадчадас аасадсаасся сссссЯаЧчсад басасьсстс саасссаааа 6по0 ассаасссЧЕ асссаачаса ссусаваааа сесасддеЕсе ааассссдса чдчассачесс 6 ачаадчбаає сассосаачає чдсадсассаа чдаасссаасч сссасдддаа ааассасдда 720 ачсаєсаєсдс аачсісачса адчаадсачдає сааєсаєдсдч сасаєсаєдса асстаєчЕсес 780 азазаєчаач аасядсасача басаачаєсс сасаседсса чаасасуаач аачаасасає 840 зчааассдаа азачаачаас саддсчаача ааачаасссс даачасуєаа дсассчасча запо саасааєдаа аадзачаача СааддссядЕ чаєсдсдаваа дчачасаєбада ддасасаєЯє 960 ааччсодазаа асчсааудас ччЧчааачсаас сссастсасаа азуаасссста сесесссасеса 1020 ссесасссссс хасасьссес сявядсассс ссцсссвєсда деСссСсссає асааччаасс 1980 аачеЕссядса сссдсдаааа саачдазаааа сс ЧддсУсаа десаксвссє гЕсдаадсасе 1140 чаччаєсасаа сЕЕсадачаа асссасааче ссЧсадчсас садасссдда ссссааасса 1200 сЯасссссяда чадчачасса д«сесдадасса дассачсеас адсадсечає асаддссачсядєч 1260 сссдечасає сетесаассає сасассдача сЧдєссасаді чаассссача асачадессас 1320 азасассаса ачачсадчаєс даєдаєсссач ачаддесЯса ачасадаєас ссеєсадессЧУ 1380
ЕсасеЧчадас: счачачЕдЧсЕ чЕдассаддса ссдосссасоас счЧчЧчесессЯу ааччдссадча 1440 асчсєсасча ссддасачіс чачачьассу сеБсасЯчсасс асасадчусає саааччесач 1590 чссврадчдаєс сасаєсчсас асасаєссяс ссаадеЕссає ддаддадсясаа чассссааче 1560 срчдчваЧчссас сассасачас сЕсссааася асссаєссЯє сачдадссаяасає дачасессЧу 1620 часасасачс ссдаддчсаса бЕдсдсадсад срддасасаа чсасччсоча саччсаєчаєа 1680
ЕсачЕсЕссо Чсааачоддчає сеЕсчадиісудс садстсессос азддссачес аддссадеса 1740 сссаааєсьд адсачссадс ссааєсассі азачсеЕсдає сачдсдЯддсзає адсЕссьстач 1800 счесаєссся чабеєЧасссі асседЕЧеЕсЯ ааасадессадс дЧЕЧЧчЧчсаауч чсссЕССсСЕсС 1860 адазачасач чсчдссавач даасссаачч счаччсчадчЧчс саєдасЕссс адссссьсЯє 1920
Ччааачсчссс ЧчасСсіаадччє дсачачусдЯд садсяддасЯ аадсаазадс чсссчаседе 1980 аасзачасає десдаєсссса сЯсаачдаса ссааачеаєу Сакссассас саасаєазаєс 2040 азчзссаєстсс аасасдсасєс асчаєсссса асдссессає сдссоасесдеса касавесоде 2100
ЧдЕсасаааає аасссссаді часеЕсЕсьсЕ гааєссаддча сдаааєааса єдеЕсаєссаєса 2160 астЕеЕссдсчча СсСсЯЧЯЧЕссЯЧЕ Сасаддааєс чаздЕЧсдсЕ сдачодссЯді саяссассасе 2220 сссаєсьєсає аасееєсасає дчсаєсєссдааа аасазаааєь саєсдчдраєсо аасссаааса 2280 сабасасеєсЯ бааачаасцча сасрсссдааа дааасасаче ссааасаєсо ассдасаааа 2340 стаасаадсса ччсассасач сссаадсааа аасаєаааєє сассуаєчса ачсеЕсаааєсе 2300 сачазасаєс Єсааєсаассуд ассасаєссад сЕдудсасакс чесдсадаєч ааачассчач 2460 сасчасаєса содсосааса сасадчааєс сЯдсссааася аєседсаєся аасесесяЯді 2529 ссаасеєсдса саддааачас чеЕсдассЯясяЯя чЧчеЕачсЕсссЯ сессачсачас ЕЧдЧчдсессса 2580 чЧЕСсСсСЕСсСсСсЯс сксччаєсЯчаЧе ссааєдссЯсЄ себсадссує даассудазая счдасчасса 2640 асачсдЧчаад аассчазача аасчадссЯє свравассесд асдаєсддсо єЄссачедазад 2700 чабаєсаєся садссаацса адсссаєчаа адчдессчаєсяч чачачасчва Саассасдвад 2760 чессасячся чесеЕкгасеєсі ссачадчадча Єсрассесує сдессаачеу саєсадсдсаїва 2820 ачсачесасе асддачсдсдяддча Ессе сасассасьс ядссасчадчеї адсадасуаа 2880 чачассссса судаасасудс саачдссача чссСвзачсача сЯдссасуссс содсгсасаздас 2340 сессстаєсса сссаасадес дУссдассіс: сддазададс сЕсЯддссдад дсссасастуд з00о ааачачаєсу асччасаєсу асасячссасч ссЯдсссдсса дссадаасса дассасаєсс за06о часасачдстає єдсадсссда саядсачасаєсч чачдасаачеі сЧасссасач чассасссад 3120 чачсадесса сссасдсасд ссчасаадаа сачаааєссс дісуадссаа счсадссасе з18о
Сасчасздає Єсчааччеса єссаєссЯядда абачсассаче бЄсусассадчс Сссасуєсас 3240 асстчсстсс аєсссдаасаа часусєссачса ассурсссса чдессеЕассеє чсеЕЧсадсад з30о часадсаачс дссссачаса ссаєсссбаЯсс сссавасссе асассддача асадссссьс 3360 аасессссед дчаааєзасад ассдсдєссї ааааєєсача сЧчЕссЯдаєа сачасаєдчає 3420 гЧдсаазаєсаа сссаєесаад кассаєссад аасасаачеіс Еставдааєує ссеЕєССВаєсе заво ссЧесаєссча асчаасзача дчсазасасас сЕССвЕсСаас ассасаааєа ачсесЕєаса 3540 сЯгеЕЧЕссає асассчддаа сСсаєссссає саєссессодсу сазаадссас дчасаєссяЯс зво чазадсдаса сааассдсача засссдсяач чачецчесссу адесбдсссс дадассачсяд 3660 саєдсасаса дасасасаса ссарсессаєс часдсесаЧчЕ забаассуєс ассачаєсде 3720 ссеєсасссає ачасусассс дааассачесс аасстссадас аадсаєссааа сччдасдєдас зт7во сЕсадсасає саазаасудєс сосааєчеєЧче Саєсаачеєся сссаадсяєс авЕссдаєсс 3840 асааєсдаає асассесбасс ссадссадес аасадсссча сссасааєсч аасасаєссся зво0 чесчдесядс ссасчсчсує сдаддааєсьс сдасссдудсс сссаєєеєсяча суєдаасса зво часасазссда аасааачасс сссчааксач аасаасссує ссассдсстс саЯасстгасааа 4020 тасчасучає счсааєесЯає сдЯдЕкебасса авгасясасьє ссассссСсавра асаасаЯасесдс 4080 ччасаєсстас асстсссЧаає суаааааада сеЕдасзаєсста ссесевевекс вЕсессакає 4140 сЧассаєсає астсаєсЯасс дасєссаєсчса чассссссяч асасчаачес асесасааєс 4200 чаасасассс сдссаЯассЯясе дчдссЯяссесЯс асссядсача чсесасасає счасессстас 4260 чсачаасьча чссодассада сачаєсаавсЕ ссасечачаа седадссаєд Єдсассессс 4320 ссссаасася чсдачсчася дадсаасдда чеЕЧаєссаса гаддасессс азасаєсаєс 4380 счесаячасчад сЯдссдсчацча чЧчаадсачссу асссусдадча ссадссчасу сассадасач 4440 чечдедсааса счаєсадсаза чЧчсассєдаас дсаддсасаа Ссдадчссдчас чЕСсасяЯасяа 4500 аасудассаауч саачесєсаЯачЧес ЕЄдссаєсссс чдаЧчасЧдачдас сЯЕЕсасодс сададддасяс 4550 адссссса49 дасасдучач чдсссасясса дедуддссудо ачодсссчад аадаачааас 4620 ассосссісс чдасасасасу чдссасчсуса садддсчсад ссссдЯдссаа азасзачаєс 4680 сасааасась ддсссаааад садчеЕсаааа часачуєсад счЧчсдассда зааасачасд 4740
Чааассссбд саааєсдсвду асссссьдсс сЯсадасадс сесеісазаєд Есаасачоаєа 4800 счдсоссесає сбассадцсас ссвассессес аадсдссаад чдассдсЯдсос сссаєсесдсс 4вбо ачсачссясу сессссаачі чссаасасся саччасастсї асссессадче ссдеєссасає 4920 саєссЯдбЯд ааасьсЯясуєЄ аааассадчс ядЕсСьссЯясся асссосчача ссчуссачсї 49960 ссасуссасе дассааваєс дадссвадссоссо сЕсатсеуєс аасаяссасяс саддєдадес 500 чассссссаа дЕдссаасяс ссассесоса сссдссадеч ачудссаачі СсеЕєссдасчач 5100 чдеасссасаа сдссяЯядсаЯядс сядсадсасСес сясасасяядс сЕсЯядасодася ЕСсСссаЯадсас 510 деЕссосаддая ссасачасду ссадссадссс адсдасдчача дсаассачсес сачабсдачесчЕ 5220 судчазадчучу: счасучатєсе сеЕсссЯядссдс абаассстдс сссадвдасса ссасадсесчає 5280 вЕсессддса сасссаєссь бЕЄссясася асасасадча СсссЯассаваа чачесссЧчває 5340 ачасссссс садсдсассс аасадсдєсса дссаяддчасачЯя асаддсдаад саууадсссассе 5:00 счсчачсчад гдсссосссЄ сбсассдсссс гсасссусас ссдасддсаас ссаасЯядааа БАБО
СесседсЕсс счаддссядус содадссассяс садсЯдсааса чаєчадуддса ачсуддчаєддс 5520 даєдааасс аадссаасса ччаачоадсад сеосасссасс ааччсчсасі дссесессача 5ЬЗО счаасчаача чсчассчаду азааччсчас Чусудесудс аєсдадессдЧе сддестассє 540 чЧчсгЧассЯсс ддссаддусєє асааааєссас чдучсчссусЯа частасчачес асасссусча 5700 чсваЧсессуєс аєсаасддсд ассградаЧесаЯа ссідадасуде ссдседааас ЄсеЕддсссас 5760 сдасчассся сдадсасудсЯяс ччасЕсадеЧда суссасчаєс сссасссвдс и сдадсааачає вОа20 сдазчачаад садчасчаче сєсЧдсаачує саєсчаєчудс чЕЧчЧЕссясс счачадсача заво чесаєдассс бБсЕсадссяс баааасачддсс чддададсдс счбсЧчаєсусс аадсасуєсс 5РАО0 ссаєчсусЕіс сассаадаач адсчасессу сяччачссЯддЕ асссодєсвчсадч чадсаачаєсс бо чдаасассаа чсасчачаач часдадссада сучсссасочч чассчасесс аєсєчесчаєва обо зададсддаєса сссддасасс азачддсассад дсддудссааа ссаддаасаа дадсасаєсд 5120 ссссядасоасу адссдяддддса абсссоосаза дачадЧчідаає чааєсдяддасу СЕєЧассоцда 5180 адчсасасач чсаачдааста ассаасядсЯяд часссЕссЯас счаччаєдес чаяассаєся 6240 саадссаячсас счссасдсує дсассссудсуя азасссссса чессЯяссЧчас ссачасдадеосс 6300 аччсаачссас дассаадаєс дадсусчаса чедсдсаасс ддсвсссссе дессссасессд 636о сдссаєсдяддс садссудсоаЧчач сдсссдсусс дссссдааса ччаччсчаса ччсссаЧсеЧа 6420 ачесчаєчас сассчасасу счаддаасса сдасдассяа чаздсЧдаааа ассдсесдадсЯ б5і80 аачасссддс аааасачуєс ачечЧачадсса ачсаччосяс чЕєдссдаза сасасчааче 2540 адсадаєссаа чддчдазасчсач сессесссЯдс ссчасассдс чесасадЧдеся часасчасєае БебО чачечаєдсес ааасдасасу чсесесдчсссбЯ сссбдсссас сасаясясаас аачааааєсо бевБО сясчсуачас чдсеЕЧсаааас ааддессаїсє сссасчссаа саачддасчсУ аадаєсассє 6729 асассддсас сдчадчссдсоау чссуасзаєд асчаассяує чсчасачсад чечссЧчЧвачс 6780 асчсчаачсу сасссссаїєс ддсдадсесча ссассессас дЕсСссасчач сЕссассачдча 6849 асссдуддссд дЕсСЧчаєсаас ЧчЧчссЯасСасє асасчаачдс счадчааєдс ссдссасасс вдо сасаддсчас дадсчаєдудчс ЄсасяєЄєсся ассусчЕсЯЧ чЧсассрддаа ссЧддЕдЧссЧас 6зво
Бассдсасся сеЕсСссЯясЯясс седдассуєа дсаадаааас дЕсессуїсЯс сачессьдча 7020 ссчасдаача ааєсуссясЯ ссЯссбБдссЯ дсдассасса сасдаваєссс абаєдадчача 7ово ачсассдсаа чзссассссЯя асддссечас чддасасссда сЕаєеєєсадс ЕсядсассочЧчд 7140 адссядсассос дессаадскд дааасесєксес чдсессасябу сучаєсячає ссосасссоясд 7200 счаачзаачся Чдсядсддачдсадч Ччесчасудаад ссіясчазуа чЕСдсЧчадас адсддссс9Ча 79650 садаасасдс сбаддудєсаавє чаєчасссда сосассядсза асяссадададс сЕгбЯагадЧодє 7320 сачзссссядс єадададсЄса дсачссадся сЕстаседччс ассссаддаа сазадсадодса 7380 седсесчася сасесЯясесс дЯдсесадсаєс дсссодчдас сасаддсядсЯяс сссасчаасс 7440
Ччесчаєсааас ададдаєсаа аассдасаає єдсЧчассаач ядсеєсачаєьс дасадссьач 7500 адсчдссчас чсудсадчдавєе сссясуадає ссуаєбадссЯя дссседаача аадстссача 7560 чаєсчсссЯяча ссечсЕсасу адсасдадча чЧаазаачессо асозчачачсує ЕсЯясЄдаасу 7620 чесчсчачас десЯдсадчсає ссддсдсота саєсчасячс чачаєссаєся даседЕсадЧЕ 760 сессаваасацч чадчасоадес ссаадчасос Ссасааччсяа саєссассся чес са 7740 ччачдсссчаа сачсзчадасс дчаччдасече сзасасассу ссдсаддасдЯдс сассаасаад 7аопо
ЕЕсаведсес чеЕЧчаєчаєся єссудасачає сссаасаяддча аєссдаєсЯядча саасЯсаєсьєс 7860 саєссесчас дсасеєсбааса ЄсЕсЯяссасе седдадесеч ссЯЧсвсассє садссєасса 7329 сесассячас чзаЧдассчсчЧа счасчусаду сассдеЕдсад ссдесєдаєяч ЕсЯябЧчевсає 7980 стебдссЧсЕ седссачаса чссссабасу ассдаєчася чсссьячаоаду свассвдсЧу во4о аасеЕЧчсддЧас дсдасЯяссас садсдссдас ассааасаячса дсястачаєс стчссачЧчсде 8100 садсадсддас ссаддсаЯачЧччаЯ сЯяадбЕсссає додсяасвсада ассдсусеча сссЯясазадчьЧ віво чсаасссссс дсоссеседс СсасссСссас сдсоссоддсаа ссччсЧЧчссд даччастеся 8220 чсесЯєссса дсадссєсад бсдсесдаєсс дссааєсосу асудссвасад даассааєде 8280 ссесддесся Ядсусаусєссся чдсссдассодд адсуадЧчеЕсса ассрасьссос сссудессссЯ 8350 чадчаєсссЯя садасссдаас сбасадесує сссссксаскя дасьсьссса чесессдчаде 8400 чессачсдУчЧч аасссбасасс ссрсаєсдядаа ссаддаадсас аддаєчасас ссаасаассс або асссаачесяЯя асассесчсесЕс чдечуусасчде Ссзласссачч ачЕСааасає сасдачузаа 8520 чсчаєдасся ссчааусаєс часссаасса ссачаддсадч ссдЧддсдєссає сзчзадсдссає 8580 сісчаассчда счссЯдссдас сусбасаєсса сасядссссд сачсячасдя соддсссдавзч вва ссасасачсч асассчассе дскзччссасу чсдассясаа ччсссдаєсда аасаасусєчу 8700 счадсссЕдЧа ссаасчассє сСебодЧааась ссуддсьсссс ссядачачач счачаєсессе 876о0 счсЯдсЕЧсач аадссассає сдссЯсдсас чдасдасаєса єсссасадсу єбасссадсс ваго заадсясечаас сдсаассвадд адаасдасау сасааєдаса сссеєвасачя савсЕєстач ваво ссадссасча ссчасаєсча єседастасєс ЕсаЯасЕЧасаа аадсаачача асасадсяЯясес 8340 чЧчсесЕсСЯадсіач чесссадсудас чудадааассс сссчдассстя ссесегдааса ччаєскавеє 000 чаччстсьаа асуааассиіє аасуссаєудач аасссдссус ссдчассЯячас сачЧасчаєчад зо6о сзаааєдсач сЯдсссСсасясс дЕСсСсСсЯсасс садсасадсЯя садсаассяд сазааєсЯса 9120 ссдааччаєч ссЯсЕЧссца сЕдччсааєсу дадсуссвус сддсссачса Есадссечес 9180 абасссЧчаач ссаччсадче ссайсссдда саачаачаєс чдессдассіс асасчсачає зР40 сачзссддчдаач заєссурсса ссасчсдаза часчачасса ссааддсадчі сяЧасааасаа 9300 бдсссаасаа бЕсЯєссаау ссчасачссодс сссчсадсас ддсесаасьс азасассада 9360 чачссчдоча ачассаєсочся счасссЯчссу ааччсЧчуссс саачссеЕсЯс ссвасчасач 9420 сассссдасс састсссаєе ссдсдсссаа даєдадсьсєсс ссесЯдсадь ссаєссачеаде 9480
Сазассаасс садссчассс чсссудуєчаа асуддсьдса сіссаасада аасааєсааа 9540 сааасаєсаса садсуассва сссасасчач сссазаєсас аасудсасає аєссессдссад 960
Ссадсаєсає сасассаааа чеЕсСаддсссЯя аасачдсссуа аассадааад сссдасааєсу зебво аччсссасач дссаааєсся сссеЕбадсся сасаасаєса сссассддає сессаассдде 2729 чЕдаєсаєча чесЯдсчаєса аааассьсаа Сратаєссьяу ЕсЕзаєссач сЕсддсассд 2780 ачсазлаасаа асссЯдаасса азассааааса Сазасасава я«ссессасас асаєчесься 9840 аадчасссссє акадаасьсс сссеЕаааааа сасссадааа ЕаєссЯдсчас ЕСсСсСЕссаЯадса 200 сЯсаасассе суссааасаєс даачсдсссс асеЕсстаєса асессаадаса аседччесаса 2360 счаєсасевЕ сесаєсааде дссассзаза сдсдЕсаасс всеЕссуввсс сосасавсса 10020 стасдссаваз сссаєсаааа сесесасаса сссЕесссда асседаачся ааассссдяає 10080 аасссаааасї сСаааєсадаас абаєссаєсає ЕсСадчатаєса басеєчасьсс сарасссаає 10140 тассаааєсс адссаасссЕ дазачдсусрас ассаасчааа аассачеісаа асчассаава 10200 бааасаласа ссасчсусса сбаачаааає ссЕСсСссабаа даараєеєсса агачаєсаца 10260 счсссусазаа аааааєсаає сСЕссастаас асатасаєсс асеЕсассааа аасссдасаа 10320 ачсаачаєса ааасаасасс сасссзасаа аааааазасс адаааасусєс чдазаасссудд 10380 саааассчдаа ссааєссааа ссдасакаде сЯЧдсстаЧеЕї сдасессуає асааассяаа 10440 ссаасьсяаєдЕ ссаєссдсас сссвіааєсає забадсесса асагесєссаау асассаєсяаа 10500 чеЕсаасчєсд єЄсаасаєссо Ччодааассвєуд сааааєсдаасє саачдсссаса соддссЯасаас 10560 ахсчааєсссаа аадсадсєЕсч асчдсадсЧЧас аабаєдкіаає сСсасессуЧасєс стааааааає 10620 аєсссаадьа сбаасаавіс седстадудаа чаадуєсадс сСасчасссас адсааачоса 10680
Чаасасааєсд аассасбазад бдассдаадс ссдааасаєста сдаадчааса аасаєсесса 10740 ааааазасася саасчасссу даасазааача зачедасата ССсСсСссусЄьс ссааасааус 10800 ассссоссса аадааєсуддса дЯеЕсЕсєссссЕ дсавдєзасе ассаєдсьсс сессясваса 10860 аааассссядд ассассаєсу чуаасеЕсссЕ седааааєад гдуссассяс стаас 10915 «2102 67 «211» 14548 Й «2127 ДНК «213» Штучна «220 «223з РУРпає у2 промотор «4005 67 сеЕсссачсає сассасачьу азачссессдуд сссссссЯасс ЧдасЯачсскес сасесссаєс во
СазаччуддЕс ссссасссаа ааассстдає аєсасссеса ссстассєаєс сасессааеєс 120
Есксасааєс сссЧчЯасЕдаа ассассасяс сЕссусасас часаєсссьа сазаєстаєс 180 асссдссаза сасссссазаа ссусасааазх СЕссасчаач ссесоасссає сессаасоса 240 чЧчЕсСсаасасс сссасаєсєєсда аасасаєаає ссасессааєс СсадсЯясєсдч садааадсає 300 ааєчасєесає сесссаєссес сессасасаа асдЕссаакса сасаасаєаг асавассесь зво
СГассеЕсаадча аччаєссссс ассеЕсасаєс Есааааасає асссассава сасессссаа 420 ссасядсааає сссасаасаа саадссЧЕсЕ саааачскаає адаасссаас сссаєсааєсс а4а8о
СЕСЕаєссЧча срдаєсесад ачсаасассс адсчасасаа ссСадссанєсє сесссссссда 5асй асаазаааає ссааєсаєса седсасьссс єсрасасаає дааааєсьса ссазасааєу во авссасдЧса сЕссЕЧавус аадссаєдяЕс асдсаааасєс срасааєссс сасесуасає ве сасчачаачса ассудаачаєс сСЯасьсссаса єдсдчадасас асссссваза чсаасесесва 720 саасадссас сасасссаач ассссасаса ссааасассс аасаєссасес ссазааааєє 780 аассадасає аастааваєса ссасеесеєс аассесааус ссааєссуєся засесочедас 840 стасечаєсса ссассскасс асясесааає сагссесасад агадсєЕсааа дсазасаєза 900 чсаасчсачеЕ ачачсчесач адсчссСассс сСааассасаа астасаачає єсасдчсдча зво ссаассссса сасасссссс асбдсссска ссессссссЯа чЧсасчсааує сеусаасьча 1020 заєсасесдсч чассдссаєд асассссуса чЕсссЕссЧує ссасасаєда ассссасдаса 1080 адааааадас ааадаасааа чазазаадас аааасачЧача дасаавасуєс аассасасаа 1140 ссаасссаала Єсадесасьд дссдаєссаач ассаяссясє ссабадсаєає ссазаєчсса 1200 сдсааачсаа сасчдассса асасчсассс сазасчачссс асссассьса асссасасас 1260 ааасасаєвєд сесрссрссс саєсассасс асаассассє чтасасаєсс ассстскссс 1320 дсосасстсаа сСссссвсасе ссаасасасдя ссаасссдса сасядсЯябаєЄс ассссасасео 1380 сааассссса сасасяасссс аассассссс ссссссрасаєс засасссаса аасасстста 1440 асассасе 1348 «210» 68 «2115 85 «212 ДНК «213» Штучна «820з «223» РуРПав 5' (ТЕ «400» 68 сасЕєсесес ассасссаєс саєссачаді ассасстасьс бассассаса асассессаас во ссаасссаса єЄссаасаскта сссва 85 «2102 69
«211» 129 «212з ДЕК «213з: Штучна «2202 «223» РУРпав 3' ОТ Уу1ї «1005 69 ачсаєдаасс ааваасчсаєч саччсчсаач адсссасядда чачсаєсдчаа сассясассес бо
ЧассасяЯчсаа саусасааєа ассдадсесссс ассрсасьсс ссссасчаасє ааасазадча 120 сФдЕсаєчає 129 «210з3 70 . «211» 1088 «212» ДНК «2132 Штучна «220» «223» РуРнав 3' МАВ у2 -4005 70 асаєсаасас гссасссасу сассєсасєсу Єсссасдаєра аассссесєсс сассаєсаса во заєсаєссча ассдесчасодч сесасддаає деєссаааєра чсасааавдзас авзасдсусас 120 сасаадасьс сестааасаає ссктаасстса чдсаєсусчаа сдачасаєаа чЕЧеЕсаачаа 180 часаєсаасаа ссасаасчча ачаачсссЯє ссссасєсєсає асассрасаса ссасссасьс 249 асдсаєсаєа сєсзадавдос аадчачасає аасаассаса аачачачаад СЄссдсаєсса Зоо сссасаваєс асасассасс сасесасата Ерасасссає ссасесатсс аагдссьєса 360 саачасесча Єссасчасає ссссаасрсаєє ЄсачесдЧдаса сЯдсасасєдаа аадчеассаєс 420 гсчдаастьсьс ссастсвуєа сСааачачєвду ассассстса аачсодчуєсь авесвастсс 480 ассчссссс асачасаааа азааааєсає чадчессЧччьсі чЧасаааасає счаадчаєссес 5А0 аааасаакаа сааасааєаа асаасаєаєа асасаєсдсає абазаєссає сасаасаєаа 600 саєрсасссра баааааачса аасассуєса Саааєстаса саассєєеса ЧчесессЧчесЧд бо аасчдаассос аассасссаа асчачачіаа асасаєссча сесесссучесє асссаасагза 720 ссаєсаєсса асастакаєд ааассЕсЕсс ЕсЕсСсаєсадч сааадааєза ааєсаааєса 78а ачазудасаа сЧасдеєссса асссесасас аассаасстЕс сасзачааад Єсаадесада 840 часаасааза азасаадчсаа зддааасссс ЕсСзассєсчач ЕБЯСсСсЕЧЕЄ сдссдсаєаав 900 сесасасачі аааасассас асасаасссо ЕсСсачсадса дадчсааєсадЧчЕ сдассясЧчеч 960 сесачекссс ссбсассеває сссЕссасса дсааадааса аасааааєча аасдчадасас 1020 сЕсачдчавд ссбсаасось Сасасаааас сссавзазваса адсесссвад сасссвасса 1080 асчаавсс 1о88 «210з: 71
«211з 457 «2125 ДНК «213» Штучна «2202 «223» АЛОЕ 3' ОТЕ У1 «400з3 71 сассааааєс сасссадааа сасасаасає сссЯссдсач дсссассоада чааєссчассс бо чссаєсасаа ааассасада ааааєсеєкає ссдсоссаас сасессадца ссадсасеаа 120
Ччадасаясссаа ассасссдсс дадчі:сасвЕас дсаєсаєсояс дасечадаад ассадсдаса 180 сдазасаєьс дсадсассас счасааєсса сссуаазаєс сасзадааала дсааасоуєта 240 сасдзаєсча счааасааса сааадасача Єзаачссася сасаєсесачу асассаддессдЧ 300 ачаєсасєда асаєссчачса ачаєсасадда аєсЕСЕЧдаса ччдадсаєдчіс сессаасссад зео сссааасудс адссдазаса сісааассудс сссасаєдса дчадсячаєс асссаєсЯс 420 сЧсссдЯсс сосгссдссаа сасдаддадес саадчьєс І 457 «210 72 «7211» 68 «2129 Білок «213» Штучна «2202 «2932» М-кінцеві залишки 1-68 Апреор5 «4002 12
Мес Бек Аїа Рго ТБих Аза АвБр І11е Агу А1Зїа Аху Аїа Рко 51іч А1а цЦув 1 5 10 15
ШПув Уаї Нібє І1їе А1ї1а Авр Тк А1їа Т12 Азп Акд Нів Авп Тер Тут ГЦув
Нів Уа1ї Авп о Ткр цей Авпоуа1 Рпе Гец І1е І1їе б1у І1еє Рго ГПеч Тухг а5 сіу Сув чІ1е б5іп Аїа Рпе Тер уУа1і Рго Пец сіп ес пув ТПг А1а ї11е
БО 55 о .
Тгр А1їа Уа1ї Іїе 65 «2105 73 «21155 175 «212з Білок «2132 Штучна «2205 «223з С-кінцеві залишки 281-455 Апреараі «4002 73 бЗек І1е Ткр А1іа Тер Пув Сбіп гей біу Пей А1їа Тух Авр Гемз пув Гув 1 5 10 15
Ре Ага А1а Авп бій І1е сі Пув б1у Акд Маї1ї сбіп б1п Геч с1іп Був цув реч Авр АкЧч Пув АкЯ4 Ата Тк Гей Авр о Тгр с1у ТНК Рко Гечй Авр - б1іп Ппей Рко уа1ї Ме сій Ткр Авр Авр тук уа1! бі сій Аза Був Авп 80 55 во
Сіу Акд б1у Пцеч Уаї А1ї1а І1еєе Азїа с1і1у уаї Уа1ї Нів Авр Уаії тіж Авр е5 70 75 во
РНе 116 Пув Авр Нів Рко біу біу Пув А1а Мес Іїе Бех бек с1у І1е 85 зо 5 б1у Ппув Авр Аїа Твкг А1ї1а Меє Рпе Авп б1у б1у Уа1 Тук Тук Нів Бек 100 105 110
Авп Авіа А1а Нів Авп Гелі пе бек ТБЕ Меб Агу уаї сіу уаі1 І1е АкЧ 115 120 125 сіу сіу Сув біц Уаі1 б1іч І1е Ткр цув Аку А1а Ссіп був п1п Адзп Ууаї 130 135 140 бі Ттук Уаі Акд Авр бзіу бек 51у сбіп Акд уаї І1е Акч Аї1а Ш1у 01 145 150 155 169 біп Рго Тк о Був І1е Рко січ Рко І1їе Рко Трк АТа Авр А1а А1а 165 170 175 «2102 74 «9211» 14103 «2123» ДНК «213» Штучна «2802 «2232 Плазміда рОАБВ110110 «400з 74 чЧсасааааза чсачадсіссЕ адасссадЧчЕ чдаадссасса сусачассає сссачсасучє бо счрадсасу сдасесдсстс ссадсаєсасє сасачсдаваа ЯчссСЕсЯЧдстес сесссоссаЧі 120 засесссас сеЕссасеєсаа зачаЧчесссс сасссааааа ссссЯдсаєс асесссасеє 180 касесдєрас сеЕсСааєсьсь саєсаассесЕ ЧчЧссдазаєе аєсасдссєс сасасасчає 240 асссссасаа асссаєсваєсє бдссааасає бсссавдассу сасааааєсь саєсдаадьсс 300 сачгссасссє сааєчсадес саасассьсс асасечааає асасааєсса сьсааєссва ЕК) чзечЕсаЧьад аавачсаєаає часссасьсь сассессьсес сасасазаєу гЕсаасаєсас 420 аасасаааса аасссвесас сесаадчаздау ассссссаєс ссавсассесса аааасасавєе 480 сассааакає ЕссЕсаасса счіаааєстс асааєаасаа чЕбЯдСсЕссаа аздсаасааа 54О абссаасісс абєаавсьвсє басссдасьч ассссааадс засасссаді дасасааста 600 чЧчессассєвеЕсс ссЕсЕЧааса азазааєсса ассаєсаєсу сассесесссс асасаасдаа бо аасессасса аасааєчаєсс сасдустассс ссдаачсаач ссасдесаєсд сааааєссса 720
Саасесссає ссдасассас ддадаачсаасЕ даачаєссяс ссЕсасасяс дачасасаєс 780 гЕСсСсааадса асрсссааєдча сачесасває асссаачаєе ссасасаєса аагасеЕсаає 8410 аєсасесєста аааааєсаає садабаєває сзазасаєса сесссссаає ЄЕсСаачесса І) асгєдчЕсЧчаає ссосдассає сдасЕсСаєса єсссассасу сеЕсаааєвсє сссасадаса зво десссаазачаса аасасзачіа асдсадсача ч«сЯссачдачі дссассосєаа ассасаазес 1020 асаачаєсса садсоадЧчасса асрсессасає асеєссессасс десессасся вексеаака 1080 счсаадссся саассддаає састдсдддс сдссасдаса сеЕссчеЧеасс ссессоадесса 1140 сасаєучдасс ссдсЯдсаача аазачасааа чЧчаасазлзачаа аааадасааа асачачачас 1200 аааасасаас сасасаасса асссааасєса чссассдудсс дассазачаєс ассясцЯяссса 1260
Едсасчссса аасдссаєудс ааадсаасас діЕдсссааса єдсасьссаа асаяддсесасс 1320 саєсеЕсаасс сасасасааа сасаєссЯяссє сЕсбссіссає саєссассаса ассасебдса 1380 такасссаєсс сссрсєссусс ассссааєрсс ссссасссса асасасясса асссдсаєсає 1440
Ччсчсяссасс ссаєсдессаа асссссаєдс асдссссааєс сасесьсьст сесасаєаає 1500 асссасааає асссссааса ссасесасьсє сьсссаєсає ссассосассс ачадчсастас 1560 басьсстасса стасаасасс ссаасосаас ссабаєссаа сасбасьсра чзчасссааса 1620 асчзчесчсас ссдасадсає ссссдаддас ааачсааска чдекссаадес аасссасата 1680 садсассаад аччссасЯсс сСаччаассчя сасаачаааа ссаассддсе саасасуасєс 1740 сЕсЯЧЕсЯксс ссасссссяс бсесаЧчассу сасссдасдчда даассасасс ссссассада 1800 сссассссса бебБЯадЕсьЯвЄ ссеЕсрассає сесьдсасач счЕсЕчЧЧасає сасьаЯадедЧс 1850
Сбассасачас сЕкЧЯасєссса садчядссссас ачсусчадає сдссаєсдач асесесессьу 1920 чсЕсссасса дадессадчсдо дасссаачч єседсаачає чачсдуссадс саассаєсачч 1980 чдсасаєсасс чЕсаЧасоуча сассасчаач чассоссасо седсдаєдач аччассоссд 2040
Ессесессаса саччссЧддає часссссаас сссдаєссаа ачддсесааацчя садаасачає 2100 чеЕсЕссеЧаєс ссдасссьда сссосдссЯсс дедгдасаас асааасаєса сдасаачсує 2160
ЕсчЧссссесо ссясеЕсдЧчає сссеЕссдасу асадесдчаскд чЧчасеЕЧаЧчЕсЧ доачачаседа 2220 счЧдасаЧчас ксЯссваєдас гсддсаєсаєа сЯясЯдсессдсе єсдеЕссадса адссасььсс 2280 сЧЕдЕСаасе сассуддсаса сСсдчасаддадє даасаассЯє ссдаєчасад асуєсасьсса 2340 аччзчзаєссася сссрдассас десдассаса асдаяадачдазад датассасаа сесссассає 2400 чадеесссда чедассасад азасдссаєс аєсбдуєсаєс адсаєдассес сасазачсда 2460 сесасссаєс сесссадссо чдуддссесссс ссассддсся асссссссаа чассссссдес 2520
Ессааєдача ссуадааадч аачддесЕєсад саасацчсааа аддсессссуа саадаааача 25850 ачсадессьсу ассдддчдасе сесресесрс садессеєссаяч гсЧаєсьісасдч дчаєчасьсе 2640 сааасссЯясЕ Яасааачааач содочачачаєя сеЕесЧЕСЯдсЕЧ сЕЧдссЯддаді даєссаєчає 2700
ЧдЕсссссаде ссасеєдаача ссаєссседчоас чадачдадсс ссассачдаач сассассаЧУ 2760 ааачасччуа сгдчсасасс саасдчдсадЧча дсдсасдаас асссааасояс сасасасаас 2820 ксассудадса саасчачачі сучачесьсЯ ададдсєадЧас аадаачсача дасеЕсдЧаза 2880 ааасачачда сучЧчасєусссо сдаддзачеса часаєсстєс чЕСвачечас зазачсачач 2340 счсседдсдЯЧ аадчадссдє єдасачсябЧча Ечадсачсва ядсссаассас срададсься 3000 чдесассачста счЧчаассаааа сясаєдсачу сдсаачадчсє сасддачаде асчдчдаавасєе обо чсасссдасс аєдсаасадс асаасаассч ауссссарсе сасеЕсссссс асчдаасавасє 3120 зазуачасяєс асдчаєсасаєс аасассссасє ссасдсасес сассуєссста сдчаєсаааєсс з180 ссЕСЕсаєста ссасазаєса сссузаєсЯє дасддестає ддааєчессс ааасачсаса 3240 аааасаааєд сасассасаа дасессссаа асааєсссаа ссссадсасс дсдаасччада 3300 сасаачсЧсс аадаачасає аасааєссаса асоддаадазаяч СсСсЯассьсса сессасасаєс 3360 ахкаєаєсасс сасЕсаєдса Есасасєссадч аєуссаауча часасаасаа Ссасааачачд 3а20 ачаачесссЯЧс асссасссає асассасаєса скасессассс асасассаса ссесСсаєсссасе 3480 асссааєсдє ссесаєсаадд ссеЕЧаєссає дасаєсссса асасссєсацчь сдаєсаєчсає 3540 аєдаазаацує аскасесчаа сссссесрасо ссдсасазаад ЧчЕсддаєсає ссесавачсд 3600 чЧЧЕСтТасксса ассссаєсус сЕссеасача Сааазазааа ассаєчачсс ЯддеЕсесЧасаїч зево аасассдчаадч чзасСсесазаає аасаасаааєс засааасаас асасаасаса єдсасаєава 3720 ссасрасраа сасаасасьс асссабазаа задсааасає сдЕсаєааає стасасааєс 3780 дессачессс Чесуддаасдчда ассссаасса сссзааасча ачсайасава єЕсдассься 3840 сччесавсса асаааєсаєс асссаасасс асраєдааасе СЕС ассачсааачЧ 3900 аасааааєса аассаачазау часаасдуєд Есссааєсеє сасасаасса ассесссасаа 3960 чааачссаауч ссададасаа саааааааса адсааачдаа ассссссаає ссчаадесавс 4020 сгасссЯссд сасааєсваєс дсадсаааас ассасасаєа ассссЕеЕссад садсададса ово асчддесдасе чсЧдеЕасссач сесоессссас сесассессс сассадсаза уаасаааєза 4140 аасааааєда часассссад чддасчЕссса асссссабас азаассссаа ааасаадчссс 4200 ссрадсассс сассаасдаа сссдсудссд сесааєсаад асдачедчаса сесачдасссе 4260 аччасссасі срЯдсрдаєсса ссадсяассад ссссдадаєс дассадсеве сеседсасааа 4320 чсадссдсяЯяч ссасесаасс ааасссааає ссаасстаасу саассеЕсЧчає сссСсаасаас 4380 чЧчааддсаася адсчсаааача азаааєдстає чссатсясає счасессєссса счасяассдаа 4440
ЧсечЧЕЧссаєа асасдаєдає дсасаассаа аасассаасі чєсасасссс ассдаваєчЧа 4500 сасеєдеЕсасє ссаассаває сЕссдчаєесь дссасаєдас асчаседсаа даачсаааєа 4560 абачасаядссу ЕсдЕсааача ассуссаєса сасчсуссса ассачадчаача асссдадечие 4620 садасссаає сааасасєсас аааасасєсес ассседссяЯс садсааєяддЕ десаассадсуя 468о садасазаєд чсдсааадає сясуддааааа ссесссссуач Єдасаєчаєа ясЕдссЕсьд 4740 саєссчсвдає ссачссадес Єсасссдасі Саадчдасасс сссуєсадсяЯя асазаєсочеє 4800
БЕсаадчдада садссабдадсс ссасасЕссЯя сгбдаавазааса аассачсссЕ чачдчдачасач 4860
Кааачссаді счсЕсЕЕсаа Еааччазеді счадчадаса асдбаассяс сЕсСсЯадсаде 4920 асасеЕсссЕ аасссаааза Есаасссдса сссаачдчасас сдудсаааазасєс Ссасацчессса 4980 аассссасад чассадссса даачддсавзасс асссаачаєая сСадсаєсаад засссааєде 5040
Есасадчдааа аассаєсддаа дсаєстаєдса адсссадсаа чазадсадчдаєс аасаєдсдаде 5100 асасаєдсаа ссосасуссса аааасдааца асдсасачдає асаадаєссі асассдссад 5160 аасасчазча ачазсасчса чЧазассдава аачаадаасс аччечаачаа азачааєсев4д 5220 аачасусаад сассдасдас аасазасчЧаза ачазчаачасє аачддссучед ассадєЧчазвад 52ІВО ачасасачач часасасуса ачосочдаааа сЧдсаадачсу чааачсаасс стассасааа 5340 ччаассстає сессссассас ссассссссс асасьсьссс дсдссасссюь счссесссоад 5400
ЕсЕсСссваєа сааддаасса адесссоддсає сЕдЕдЧаааас аададлаааає ссЯдЧдсдсазч 5160 стасстссссс счаачдсассуя аччасасаас сссачачааа ССсЯсаациє счсачадсасс 5520 ачаєссдчає сссааассає чсссссЯядад аддадассач ссдачаєсєсач чссачессаса 5580 чсадскчаса судссасЯуе ссЧусчасаєс чдссаассаве асаєсдадає чЕстасачеу 5640 аассссадча сачадесаса аасассасаа чачсечдчаєвуч аєчасссадча чачдчессасаа 5709 часачаєасєс сеЕсЧчЧЕсаЯаЧЕ сЯасечаччсє чачачеЧссу єчассучає садасссасусь 5760
ЧччасссЕддЧа аддссаддчдаа сдсісасдає сддасадесЯ ададсасьдє ссасябаєсса Ба2О сасачасасс ааачдчесдач ссстадчаєсь асасеусаса сасавесЯчсе саачессаєч БО чадасЯдсаач Ядсєсссаадсс сЯсЯдесбдсє десаксаддсес Есссааасчда сессаєссьдасе 5540 аддесдсаєд аддссссдад асасасачос содддчсасає садсасдядсадс сддаєсасаад 6бобо саєчосФЧчає дчасаєчаєчі саЧЕссссоЧ савзаччачаєє єсдчадеЕсЧчсес адсесссесса 6обо аччассадсса дассадссас ссазасссда чдеадссадчсо сааєссассса чадсссчаєс 6120 часчасааса чесссссачо доесассссяч чдесЧчасссса бесдсассда аасачссаса 6180 чсчддасазадчя сессссссСса чазачасачу судссааачя аасссаачче чаччсччасс 6гай асддесссса чеЕссесрЯасЯ чаадсЯдссвЯ дсссазчдсд садачядсЯдсс ачсадчаєча 6300 ачсаааадсдяд сссчдассядса асаздчдасава ссдассссрас дсааддасає сааачсаєае 636о асссассасс аасасааєсса чдсдсаєсссса асаєддсасса счдасьсссаа Савессвсавсс 6420 чЧчеьсдссдрає драдзвєсддсЯя ссасазааса абссссЯядбд асЕсьсьвсе аарссадчає баво чЧааасаасає чебассаєаа сСсСссвєдсддає ссадсссЯсс асаддааєсу аачсчсачссс 6540 чаччссчдсс чесассасеіс ссастсссаса ассссасаєч сасесдаааа агааааавес бБбОй асддсасеса абссааасас чраксасссді ааадааєдає аєссрдааач ааасавачеЕ є боб
Сааасасеьса ссдасаааас аасаачссач чсассасачс ссааусаааа асасазаєес 6720 асссчаєсочсаа дЕссаваєссс адазасасссї саасааседа сСсасаєсадс єЧдЧдсасаєся 6780 ссдгадаєда аадассчадс чечаєаєссає ддасдсзабас агачууаассс ЧчсЕсСааасча 6840
ЕскЯсуссста асссссЯуєс саасссусас аччазачася ссчассясдд Садсссесдс 6Єзо00 ссачсачасє чаЧчесссссач сесеЕсссдЯдсЕ счдассодаєс саасасєсуєс сссадеосасч зво аассучазус учасчассаа сачсддаача асєдазачча асчачесачЕс сасассЕсда 7020 счассяддссс сеЕддєдаачу дчеаєсаєсдяс адссазудсаа дессаєсчаза чассчасачЧчУ 7ово ччаччсдсас аассасдадч сссасаядсаЯЧч ЯчсеЕвавсссв єадддадчає ссарсесЯс 7140 чсісаачсєчс асчддсЯдсааа чсачесаєвоа дадеЕдсячає Есссочсєучас асаєсаєсст 7200 ссасчадсса чсачасчазуч ачассьссасє даасчсдчес ааддссададЧ Ссаачсазчає 7260 чдесСасасесе дссадсаддсес вСссрассає ссааєачстд чесдассєссь чазаачачес 7322 ссдассдаддя сесасассда аачачаєсча сачасассча сасдссаєує сесесссад 7380 ссачаассад ассасаєсся асасдссаєс дсадсссдас дсачасаєя адчаєзачее 7440 чаєсссаєсачуч ассасссадч ачдсачсесає ссабчсасае сасаачаас ачаааєссод 7500 ссададссЄваас дсадссяссс асдасудаєс счаададссає ссаєєсадаа Сасаєсадйчьс 7560 сдасассадсі ссусуєЄсаса сссдчЕСЕссСа ЕСсСЕДааєсаа асдчссадсаа СсЯСсЕЕсСсад 7620 сЕссассессЯд ссдсддсадя дсадсаачся сессадасає сасестасес ссазаєссса 7680 гчдсеЕддачаа садесєєеєсеса ассссссса ааасаасача ссчсуєсеіса ааасссачає 7740 чЧЕссЯдЧасає ачасаєчасєс Ччсааааєсаас ссаєсссааді дссаєсссада асаєаадчеес 7800 стасдаасаєі сесссасьсс сссаєссдаа суаасаачач савзвасасасо сСЕСЕЕсСааса тво їсасазаєза аясгЕСсСсасас ясЕЧсеЕсСаса сассяддчаає саєсьсссась асесссоасдс 7920 аазачссасу часасссЯсу аааусчдасає ааассдсчаа асссадсяддач адсассссдаа 7980 чЧчЕссдссссу ададссадсус асудсасасач асасасасає саєсссаєсьа асасесуддса вого асаассуєса стачаєсусс сссасусаса дасадсасксу ааассадчесеса ассссазчаса в100 ачсаєсаваас ччасадєдасс сСсадсасаєс адзааасдссс дсзаєчсЯсс ассааде со 8160 -есаачсесчиса асседатсса саассудзаєса сассстрдссс сачдссачсса асачсессчає 8220 ссасааєсєсда асасассссу ссчассяддссо сасаясЯясЯяєс чаддаасесся чаєседчассс 8280 ссаєсєсаядчас чеЕчЧчаасдясач асасчєсчдаа асааачаєсе ссчааєсадча асаасєтчЕє 8340 сассосЕссс дсссасааає асчасяддаєс чдезассьусс дсЕсСсассаа аасЯясасьсс 4100 саєвесаєсаа саасяссЯяся часаєсьаса БЕСЄЕссдааєє даааааааає гсЯаЧчЕаассас 84160
СессссссеЕс Єсессасасе дассаєсаєра сссаєсчссу асссаєчсад ассссссадада 8520 саєдаадоса сссасаасся аасасаєсссє дссаяссЯсса ссясессЯса сссдасадач 8580 сЕсасаєаєє чадссЕсссасо садаасечад ссудісадчоас ачасааєьсс сассдадаас вб40 гЧдадссаєас дсассвсосс ссесаасасудЧ сЧадсдчасод дасаасодадч сдаєсссасає 8700 чачассесса аасассассос чдссудаєсддс ЧЕсдсдачдач аадсадссча ссеудсчачає 8760 сачссчдасяс ассудасачу сасудсаасас чаєсусааач сасссуаасу сачдсасаає ваг2о0 счадссчасч сссасчсууа асудассаадс аадстсадеє десатсссса ччдсдачасс в9во чессдсоасс чаччдасоаса чссеседдоаЧ Чдчасчодача сссасчЕсач содчассоача 8940 чачсссчача ачдчаддаддадчса ссссессссяЯя асчгдсдсоаЧч Есасясусас ададдсдсадс зай сссяддссааа аасаадаєве асаааєсаєсдя Ясссзааачдс аддсслаазач асаадеєсаче обо часдадссдаа ааасчачсдч азасссссСдас аавабассяча ЕСЕССсЯЧссІ чЧчсдчасачес 9120 ссеЕсазлдасує саасачасдчс чдсесессаєс сассачсасс ссаяассессса адсяассаадд 8180 аєсясассос сСсасссдьса дсадссчсус сессосаачдсдЯд ссаасассяс азддсассва 3240
КссссадасЕ ЕЧсссасаєс аєсердЕЧчоада аасссядсЯса азассадася СЕСЕСЯссда 9300 сесасчачас счаассачесс сасуєсассоЯ Ччесчаааєсу ачессдсссос ссаєседсса з36о асассдядсадсс дадбЧдадссуд дссссєсаад сСдссаасясс сясесесвсає ссчссадезча 3420 чачссаачеї: сессусчада Сасссасаас чссдасадсс чечавчсссс дсасасядесе 9480 тсчасучсЯяс сссрЯддсЯдсоа єссдсададес сасачасячдадс сЯяссадесса дсадсдаадач з540 саассадссс дасЧадсЯасс даааадддес дасддавсьїЕ ЕсссЯяасьдса саасссєчЧчеє 9600 стсоЧчЧччссас сагачсзасєс сссссачсає асссаєссеу ссссасаса сасасачдчвчває 650
Ессдссазаач дасссЯясдса чдасьсессссє дадсасассса асддсдссад ссдадддсадаа 9720 саддсЧдаадс ачадсссассс чдсдчадсадає дЕЕСсСевсьЕ сасечесссяї хасссаясасс 9780 сддсЯддедес саасаяздчаас секассссас дадчсевсаддсо аассасесасс чдасусаасадє 3840 аєсчачеачсаа чсдчаєсдусєс часдааасса адчссаассад даададсадс ссассвсаєсса 2900 аччсчрассд ссссссадас чаасчаачач счассдадча азадчсчасу десддссддса 2960
ЕчадсссЯдєс дассьассева седєсЯсся дссададдеса саааассаєсч дчсчссасЯч 10020 асграєдадса счзіссЯсчад седасссЯяса Есаасоачсча сссчадссЯчс ссдддсЯядсс 10080 сассдавгасі ссдасссасс часчасссдс дсасадсачся чесссчасчаєс чесасчаєсс 10140 гсассссЯдсе дасадаачаєс чаачачаачс адчасчачес ссасаачаєс асчасадася 10200 гачессдесе чадччсачач ссасчастсс ЕсСсачсесдес аааасучссу дадададсдсядс 10260 чсчдаєссдсса адсасяЯсссс саєдадасчсссс ассаачаача чсчассссяЯяс ддадссуддса 10320 сЕссЯасдсадач дсаачаєссу чЧаасассазя сасуадаачдд асчддссадас чдасссасяду 10380 ассдасссса Есдссдчасаа дчсадассає сіддасасса аддсассачя садддєсааає 10440 садчдаасаад часасаєсяс сссаЧсдчеЧа чеЕсЯддадсаа Есссоасаачя ачадсдаася 10500 аассядасЯяї ЕсдассучЧчаа чддсасасадд саадаассча ссчасчсосдадч Ядрсстссдсс 10560 чЧчадчасассЯя ааассаєсдс аадссасасс чсСсадсЯядсу сясссесасаа зассвсссад 10620 єссЯЕсЧЯсЕ сдздаєдчссса чсаадссасЯ Чдссаачаєсдя адсчсчасад сдсдсаасья 10680 асесссссся сесбдсссас и дссаєссудсс Ядссусададес чессодсчссу бсссуаасад 10740 чаччсадсад чЕссдасдчдаа чссдчдасдассо ассдасасЯяс даддаассає часдассаач 108500 аачдчсдааааа ссдссЯдЧчсда чдассрдаса ааасздчіса чсчЧадассаа чсаччесЯяся 10860
ЕсЧссЧааас асасдаачса дсачаєсазу чаааєдсадс СЕСсСсСЕСЯЄСЄ счаєассяся 160920 ссядсЯаЧссЯдд асасдасудсу адсдасясса аасдасасдд сосясьссудс сесасссасс 10980 асчсЯдсааса ачааааєсос дсчечачася ссдсаваааса аччассавссес ссасчссаваас 110460 ааччасусуа ачассассса сассддсЯяєЄс дадссдсаду ссдчасчаєда сдаассчдчря 11100 бачЧчсачсадча СосСсЯдчЧчадчса сдсааздсус асссстаєсу дсуадссдавє сассесбсасу 11160 сЕсрасцдадс сєссассадча ссрдддссоач сесчаєсазасч дссудсаста сасчаачядсес 11220 чадчаасєдес бЯссасаосс асачасчасо чечасяддчасо ссасяссесча ссЯясдссдЯдЯ 11280 сасссаддааї сЯдЕЧссЯчсЕ дссудсасесдс ЕСссусЯдссо садассясду саадазаася 11340
ЕсссчЕсСдсс адчЕсседає счасдадузаа ассдесяЯяєсас сасЕсЧссоЧ счассассас 11400 асдаааєсєса бабоддчЧадаа чдсассусаач стадасссоча сдуаасссчася чаєдєссдасєс 11460 сассссадсс содсассддча дссусрасссд сосаадссдуд ааассссссу ссссагядсусєс 11520 чЧччааєсяадасе ссасссдЯясЯяєЄ Чдаачдаадьячу счсчадсачя ЕсоЯдчсчаадс срдсуаачад 11580 сЕдсчдачаса чсддсссЯддЕ ддаасасясс сдоадессаасуд асдассьдде дсассдсазаа 11640 счесачудсс ссЧчсададес адссссЯядсе чдаддадіссад садссадсядс сссасеядуса 11700 ссссаудаас аачсаядддсас сдсісчасус асссдсксся сссадсаєся сссдаддасяс 11760 асаяддсЯясЯясь ссасдаасія ссчасаааса чаччаєссааа ассдасаасї дедабсаадя 11820 сісачаєссу асадсеЕсбуда дсадудссчасч садсаччаєсьс ссЯядсдачаєс счаєсаядссода 11880 ссссдаадаа ачссссачач асдсссддує ссЯдсссасда чсасчадчад азазаадссса 119540 садачасЯясс суссдаасчч ссасаачаєч ссоасачсасс садчеуссстас ассчасудся 12000 ачассассФчч чебдссячсс сссазасауд ачдасуддссс саачдчасясі сасааччечо 12060 асстчсссоч сЯтЕссссЯсЯ дадсссааас адсдададссд адчдадЕсясе дадсаєдссудс 12120 гЕдсаЧччсЧЄ дссддсаЯдодуЄ єбарсдсЕс єдасдаксує ссуасачаєс ссаасуддаа 12180
ЕсЕЧЧЕЯдЧдає дсясассєвс асссссяддся сассьаасає сесассаєес сочачсьсЯає 19240 савсвасссс часссассяс ссадссоддасЯя чдадссдсаддс дасчучсачас чсеЕдсЯдсадес 12300 счсеЧасддЕ сЯчсдсссаєс ЕСсЯдссяЯясес сЯастачасач сесдчасасда ссдаєодсесуЯ 12360
ЕсссаддЧчаЧчас саєссасоча ассусччасЯя судЧсоЯсьЯчЕс дадеЕЧЕсдаса ссааасоса 12420 сясбачаєссс сЯассддсЯасс дсадсяддасе садсддаддс Ядасссссасу дсЯсЄссддаа 12480 ссЯягЯдсЕдас ссудсаачеудд саассссссЯ сЯассестдсе сасссссбасс десстяддсаас 12540 счасчассЯЧч аччассесся сесЯсесСсач Сачссссадс чеЕЕсЧасссЯя ссааєссста 12600 саЯдссрасаддад аассааєдчеЕс сесодусссдч счєддсссуд ссечаєсяуа чсоЧдасеЕсаа 12660 сесбасьсссе СсчУєсссяд аучасєсссдЯяс чдасссдаасс сасачссуєс сссєсасся 12720
ЧчеЕвЕсссад сссссдадсЯ сЕбадсддча аєссдеассес сесСассдаас счдаддадсаса 12780 ччасдасдядсес таасаассса ссСсаачссдча сассдсссся сдасасЯядеє саасссадчада 12840
ЯдсСсааасасєс асчачудаая сяадсдчассЯяс сятаадсаєся асссаассає сачадасачс 12900 вадсадєсаєс дадсдссавс гсддаассечас чЕсдосудЧчсс драсавссує асудосссус 12960 ачсччасдде чдссідааус сасасачесча саєсчаєссуд ссяЧчЕсасуч сдассудсаад 13020 чеЕсЧасчаа асаасячсоус чачсЕсьдає саасдассеЕє ссадчааассс сддссесссс 13080 сддачададс чадаєссьсс чсусстусача адессассаєє десссусася асдасаєсає 13140 сссячсдЧдсЯЕ сассессаусса адсусудаасс дсаасєсдда чдаасуусадс чсаасдасає 13200
ЕсеЕсдсаччь аєсессдчадс садссасчає сдасассчає ссаддсрасст єдсеЕдасава 13260 адсаачачаа сабадсЯясвЯа ссегаЧЕзадЯ сСесачсудся задчаасьтсь ссчЧасссЯяді 13320 ссссдаасач удаєсьтасьс аддсдссааа суазассьса асояставуда асесяссясс 13380 счассауасеЕ часчаєдачсо чазасдсадь дсссасЯасрЯ сессасаєсс ддасасадсдс 13440 адсаассядс аазаєссдсудс суааччаєсує сЯдсЕдссуас Ечдддадсаасод адсдсеседесс 13500 чдсссадсає садсссЯясса сасссдаачс сСаччсадчасе сассеЕсддЧчас аачаачаєсу 13560 сесадссЕсу сасдсачасс ачЧчссудаада асесудєссас сасудбдазау дсдадаєсас 13620 сааччсадсс адсазасаасє чсссаасааї ссЯєссаздс сдчасдссдесс єсадсаддсдсо 13680
ЧсЕсаассса адчсЯєсачад адсЕдуддчаа чассасосаяс чаєсєдссЧа аччедаєсссє 13740 аачсстсЧєс ссдсчасудс ассссчаєсс асссссассс сасусесаач асяддссьссс 13800 сесчдудсачьє саєсадчддсє азаєсаався адссчасссу сссЯддЕдааа сдчдассасас 13860 бессаасадаа асаассааас ааасасасас ачсчасесСає Єсасасчаче ссааассаса 13920 асччсасаса ксесесуссачс сачсаєсаєс асассаазач ссачасссча абадсссдаа 13980 аєссачазаче Ссеусааєсча дасссасадчуа ссазаєрссдЯдс ЕСЕсадссЯсС асзасбаєсає 14040
Єсассдяддаєс стаассядс сСааєсСаадчус дсдссаєасс садчасаздсдя дссясасаад 14100 ее 14103
«2105 75 «211» 13812 «2122 ДНК «21325 Штучна «220» " «223» Плазміда рОАВ110112 «40023 175 сеЕсдсасааа чЕЧЧасЕсЧсда ссусесаасс ааассвадає ссаассваєд саассесчас бо
Есссаасаас чааддсаасдя дсудсаазада аазаасячсає деЕсасечсає сачасссссса 120 счасдсбдаа чсЧчедссабра асасчаєчасє чдсасаассаа аасассзасі чесасасьсь 180 асєдаваєда сассярсавс ссаассасає сессчавсся дссасасдас асчассдсаа 240 чаадсаааєса агбадасяссЯя СЄЕдСсЕааача ассдсьраєса саєчеЕдесса ассачачоача 300 асєсссдадсяЯсє садасссаає сававаєсас аааасаєсєс асеєссчссус садсааєсдчуйє 360
Чдсаассачсд сачасаааєч чдсустазадає садсддааааа сссссссдад Сдусаєдаєа 420 чдссасесбссд сассяссдає ссадссадсс ссасссдасс СаачадчеЕдсс сссчачстсазчіч 48о асазааєсдсс сссаадддадча садссасдсес ссасасьссд Єсдалаааса аассдесссе 5ІО чаччачасучЧ сааачессачеЕ счдссссесаа сааччаасячс: сдаддадаса асадсаассуас 650 стссддеадс асассссссє аагрссааааа бсааєстдба сЕсаадаєас сдсааазаас С) гсасчдчесса аасссрдсач чассадссса дазудсааєсє асссаачася Садсаєссазад 720 аасссаавяс ссасачдчаза аассасудцдаа чеассасудса адсеЕсадсаа даачсачаєс 780 аасаєдсддс асаєсасядсаа сссасдссса ааааєдаача асусасачає асаачаєссе вао асассчссад аасасузача ачаасасуса дазассцчаза аадаачаасс ачасдаадаа з00 аачзааєсссд аадасусавд сассдасуасєс аасаасудада ачаачаачає заччссЯчі«ч зво агеЕЧчеЧааачЧ адасаєзчач дасасаєдса аддсддаааа Єдсаадччсч чавачсаасс 1020 сассасаза чддааєсьтає сессссастас ссасесьсссь асассеєсссе ясассацссес 1980 гЧасссесчач ССеЕсСссстаса сааддаасса адссесддсає ЕсдсСЧаааас аадаааааає 1140 бЕЧдДасЯЧсаазч сраєсьссвЕ сЧдаачсассу аддасасаас сссачадааа СЕсасаадьс 1200 счсададсасс адаєседдає сссадзассає дсессссядад аччачаєсєсач ссЧчачаєсач 1280 дссадссаса чсачссдаса сочассЧчсочЧчі ссасчасаєс дсбаассасе асасєдадас 1320 чЧЕссасачся аассссадда сачачесаса засассасаа чачсччаєса аєдчаєскача 1382 чаччссЧсаа дасачасасс сесаяддеЕсдЧчс саЯсечачуєє чадачєЧчеЕсЯ садссдасає 1440 счсстасасі чадссссодда аддесаддаа сясевасчає сддасадчесЯ ададсасеае 1500 ссасдсЧсса сасачдсаєс аааччссоуЯа ссбаччаєсо асасвядсаса сасасесдесес 1550 саачсссасд чадасучусаазу чзссЕсаачес сад ссЧсІ чссСаваддссо ссссааасаа 1620 кесасссасе аучссдсавдя адасессудду абасасадсс сддудсасає єЧдсаЯасасадс 1680 садасасаач сасадчсоаодає ччсасдатає сяде судЯч сазаадачачаєсс ссдадссдсес 1740 адесссссса аддссадсса чдссачсрас ссаазассессча чсачесадес саассасоса 1800 чадсєсдасс дасуддсааса десссссадес дссассосяад десчасоста сесЯасдссдаа 1860 аасачссчсЯ Ччедучсаадя сісрсіссса дааадасадач сддадассазаду аасссааддае 1920 чачдсдУччсс асддсесьса чЕссессвоагу чаачечсссЯ чеЕссаачяасд садачасеавс 1980 ачсЧчачаєда адсазазчєд сссзасічіа асаадчасаєч ссЧдаєсссас дсаадцчасає 2040 сбааачсасує асссаєсасс аасасзаєса чеусасеЕсса асаєдксасста счаєесссаа 2100 гЕчссеесась чссаяасесубає чдсаассядсу Есасааааса асссссачеч асесеєресьсс 2160 аасссадчає даазаєаасає ясСсаєсєсаєаа сеЕсссЯдсдає ссЯдчдсссЯяве асадчааєсса 2220 аачечсЧсіс дачдчссадЕс дссассасес ссассесава асстсасаєдяд саєседаава 2280 асааааассс асаддсаєсса асСссааасас дсасасссусє ааачаасєчасє асессдзлзаач 2340 азаасаєачЕс тааасассса ссдасадаасє аасаадссад дсаєсасадс ссаадсааава 2300 асасавзаєсо ассдасдсаа чссСсаааєссс адааасаєсс саасаассдча ссасаєсаде 2460 счч4сасаєся ссусачаєсча аачассчаче чсесчасассає часусаасас асаччаасьс 2529 чЧЕсЕааасча ссеЕсасЯяссса асссссддЕсс саасссдсас аччазачасо СсчассодсчЧа 2580 бадссссвас ссачсачась дддсеєссад бсссссбсЯсЕ счаєссддаєс сааєсдссаєс 2640 сесадссусЯ аассуддаачсес ччаасчассаа садсддадаада ассдааачуа асчадссубс 2790 сасассьсєда сзассядссє срачдсдазуд дсаєсаєсяс адссаадсаа дсЕСсСасдааа 2760 чассчасача ччзаччсдсає аассаєдачя сссасядсдя чесссасьссе Єздаддчадчає 2820 ссаєссессуУусу дсісаачсус асчдсядсааа чсачесаєсЯя чачсчсадає сетсЯчссочЧе 2880о асаєвсаєссдЯя ссасчадеса дсадасчаач адассеЕєсєсає чаасдбдадсс ааддсесачад 2940
Ссаачсачає десбасчсссє десдсаддсс СЕсссасвтає ссаасачеЕсч дЧЕсСЧассссє 3о0о чдааачачсс ссЯчдсрдачч сссабассдчда аачачассча сдчасасєсча Баєдссаєачі 3060 вдссЕдссад ссадалассад ассасаєсся асаєдадссась дсачсссЧчас чдсачасаєсауч 3120 ачдчдасазусс дасссаєдад ассЧчессада4 адсачсесас ссасдсасус счдасаадаас 3180 ачаааєсссЯя ЕсчдадеЕсаас дсадссасЕс: асзчасуддаєе сдазддеєсає ссаєсссядаз 3240 сЯчасассадес сусассачеє седсассаса ссоічсстЕса сссСуааєсазд асдссачсаа Зоо ссЯсЕсЕсад сессоссесУ сеЕдсоЯдсадчач Ччедусаадея сеЕссадасає саєссьсесяе з36о ссаааєеста Єдесудчадаа садсьсосса асбоссбЕєсад ааасааєадца срдсасевва 3420 ааасссачає чдсссдчасає ачасасчасс чсаааасаас ссастсаачє Ядссасссацча 3480 асасаачссс сасчаасчес ссессасссс сдадссассцчаа счдаасаачад бавааєсасасе 3540
ЕсЕсссааса ссасаааєаа чдсссссасас десасссаса сассЯчадаає сасессесаєь 3600 асссеЕсусЯс адзаачссасу часаєссубд ааадсдасасє ааассусдаа асссдсачЧчад з6БбО азсасссрда деЕссдссссу аддссадсядс асдсасасад асасасасає саєсьсаєса 3720 асчсссдаса асаассдєса Ссадассуєс сссасудсаса часдсассся ааассадсса 3780 ассссадаса ачсассавас дчасуєдасті ссачтасаєс ававзвасчтсс дсааєде ас 3840 ассаачесЯє ссаачсячсса асесєчасєсса саассдааса сасссідссс садссачсса 3900 асадсссзчзає ссасаассда асасасссод ссдяддссдЯддес сасдясусасс чачааасссє 3960 чаєссддсессо ссаєєсучас дсчаасясад асасдєсуаа асааадаєсє ссдааєсачда 4020 абаасесдЯасєЕ саседесссс дсссасазає асчасядаєс дсааєєссЯавс деЕсссассаа 4080 аасдсасесе сассссасаа саасдссудса чдасассесаса ЕссссЧааєсс чаааазааає 414140 сддсааєсас ссрссесссе сєсессавасє дассаєсата сссаєсассч асссасчсад 4200 ассесеосча сасчдаачеса сссасааєссуд азсасасесу дссаЯасесдядсся сесассссдаса 4260 сессадсодчач сесдсаєясе дасссссасу садаасьдчач ссяддЕсадачс ачаєзвасєсьс 4320 саєсдадаас єдачссаєує чсасесесес сссаасасяд Суадсчасач дасаасачад 4380
Сдасссасас чадасьїеса аасаєсаєсс чеЕсддасчує ЧчЕсЧсуачач аачдсачесда 4440
ЕссЧчідачдає сачссчасяс ассадчсадуд счсадасаасас зассясааад сасссдаасч 450 саччсасааї счачссчасчтч сСссасусуда асчассаачс аадсЕсЯдЧеє десаксесса 4560
ЧчаЧчЕдаддсс дсссасадсс чдачаддасуса чдсссссдаач ччасчддаччч сссасЯаєссад 4620 счачссучча чдачсссаада азадаччуччса сссссссссоя чсасаЯасЯсЯдч ЄСсасасачсас 4680 аччасдсадс ссрддссааа аасаачаєсс асааасасєся чЕссазааче аддесазазу 4740 асаччесадс чЧсдЧдассЧаа ааасчудсуа ааасссссдс азасусьядда ЄБЕссьЯссЕ во чЧчЕддасачсс ссЕсСааабдядс сзаєаддсадс дссссссаєсс сдессачсасе січесестса 4860 ачсЧдессаачу ассдсуссес ссаєсссуєса чсадссусус сссісаачья ссаасассядс 4920 ачачдасасеЕса сссссачусі єдсссасасєс асссдсяддча аасссЯясяса ааассадасЯ 4980 ссссасса сссасяаддс саддссадсес сасядєсусся Чдесдаваєся адсседессс 5040 ссаєссдсса асадссясасс дадсдадссЯя чдссссссавяд сассаасяєс сассеосесає 5100 ссадссачсда чЧдадчдссаачес ссссасчадч сасссасаас чосЯадсЯачис чечасасесвс зі6о чсасасЯяддсс Есчасячсяє сеЕсеЧадсося ЕсСЕЧсачуде сасачасядс сдссачссса 5220
Ччсчосдадад саассадссс даєЄдадсуєс дчазачудЕс часаядЧчассьвЕ єсссаЯастдса 5280 саассстаЯсЕ ссадауєсає сасачсчаєт сеЕсвсадтає асссасесьє сЕссасасда 5340 басасаччає сесЯассаазач ачсссаЯасуба часьсьссєс чддсдсассса асядсЯяссад 5400 ссауасачча садагдаачі ачдоссассс дсчадсЯядаєс ЧчеСвсстсосо сассдросеоо 54абОо тасссасасс гдасудсасс саасчдчаає сесдасессдс чачассдасес дассаседее 5520 часасаасач асчададдова чсаддаєсдасє даєдааасса адссазассач даадаасаде 55ВО ссасссаєса аддсоасассу сесссссадас чазсдаачач счассдчадча азаччедчаса 58640 чсаддссдаса счадсссасс ЯддсссСассся ссддссЯяєсу десаччядсса саазаєсаса 5700 чачсассЧдеЯд ассаєдачса счеседсчач сбуддесессяса Есааєдусда ссрЕддЧассчс 5760 сеЕчЧчдсЯддес сассчааасєт сідчЧессасс часчасссядс дсасадсдся чЕЕсадедає 5820 чссасчасссе єсЯсссЕдсЕ чдасчаачаєс чааачачдавлас ачдчасдчдадсс сдасазачес БАВО аєсдаєсччддсЯя Єдасссассс чаддасадач ссаєдаське ЕсБбадссосЕ азаасодчесу 5340 чачадсдсдЯдс дЕЧчаєсдсса адсасясссс сасдсдсЕсс ассаадаада дсчасессос бо ччадссадЧЕа ЕссЯасдсада чдсаачаєсся даасассаачч сасчачавау асддссадас бобо часссасочу ассчасібса Есодссчаєаа ЧдЧсдодаєсає ссддасасса адччсассадач 6120 счачссааас саддазасаауд дасасассус сссаяудсчеіча чссададсаа ксссчсазчд 6180 аччдєдаасд аассддасає СсЧассудаа чддсасасаду саачаассда ЕсчасоасчЧач 65240 яЕЕКЕсСсусес Ччадчаєдсся адассаїссус аадссусасс деЕсабчсуєЯа суссссусда 6300 аассессссад сСссЯяссядсс счаєдадссса дсазуссасдЯ чдссаадаєся аасачсдасачд 636о стчсдсаасся дсесЕссссевЯ ссесечдсссяс Чесассчудсс чесчсодчЧчачс чессасассо ба20 ссесчазсач чадчодсччсаяч чсЕссдсдаа чЕсчЧчасчасс ассачасасаяас дадччаастсає вада часчассаач аадсуаазаа ссдссЯддсда дадассврддадса ааасаддеєса дсдаддесаа 65540 чсачассдсЯя ссдссдадас асасчаачса дсадасєсвач чазаєдсаче СЕссесвасЕ во счаєсаєсчсу ссусчесач асасчаєдсу ачсдасусса аассасасчуд сесЯяссссас бево сссчіссасс асодсоосааса адаааасссс дсдсдчадуся ссдсааааса адчесаєссьс 6720 ссасдссаас ааддасчаєда ачассасста сассоаЧчочеіс чЧчачсессусчадч сечЧасчаєсча 67во счаасєсчасЯ Есччсачсача гЧчссоЯчадса счсдаачсясьасссссасса чсчадссдає 6840 сассебсася бестасчаче сесЧссадда сесдоЧдобЯдда седаєсаася дссоадсаєса зо сасчааддсес чачуаасдес бдссЯяасЯссе асачасдася чсзасаддчст сесасаячссача 6960 ссасЯсєсЧЯЧ сасстачддчаає сучЕЧеЕсЯсс чесоасассяс гсссясяЯатос садассячсд 7020 саачаавасу гсссЯяссЯдсс адчесссдає счасааадаа ассагсасас сасссассЧ 7080 счассассас асчаааєсса сасдддадаа чсассаяасаад ссчдссассча сЯядеседасу 7140 чаєдЕсстас сасеєссадесЕ сасассддда дссясассся сесаачсеЯЧ ааасссссса 7200 ссссасчідс дчассддадасс ссасссЯдсує чаачаачсоу счсчачсада ссоддасчаачс 7260 сечечаачач ссСасчачаса чсдассідас Чдчаасасусс счддассаася асчасссЯаЧе 7320 чсассдсааа сястачачдес ссЧдсоччадес ачЕсссудсес чдачдддсссад садесадсас 7380
Сссассяддса КсеЕсаччаас аачсчдачдусас сасесЧасяс асесвдссєсу сесачсаєсу 7440 сесчадчасус асчасЧдсусс сстасуаассЯ ссдасаааса чдаччассааа ассдасааєс 7500 чзсчдассааду сесачаєсся асдасссдда дсудссдася сасаудавеє ссдсдадчавс 7560 счассдссЯяч сессгдаачаа адссссачач асдеєссдаді ссясссасча чсасаасччач 7620 ааааагдссса Сачачасусс счсегЧаасуд ссасчадчаса ссдсудасаєє сдяддсачессас 7ево ассчасдася адчаєсаєссадд чесдссудсс сссааасачу адчасдчесс сааудасасе 7749 сасааччсачс ассесчіссу4 ссссссусЯ Ччачеседаас адсдачассу аддчассасес 7800 часаєсдсеЕдс сасЯтдасЯясс ассдчасучдає ссассчесся сСсаасчаєсує сечасачасс 7860 ссаасяддаа сссЧддЕсЯдЧчас чесдсасессе акссссддся сасссзатає ссечссассс 7920 сачачессЯає сасссасесс дусссассаяс седссчаддадсЯ дадессасоас дасадсадас 7980 чесасчсадс счссдаєуяї суєчеЕвсаєс єседссассс сдсрачуєач сессчасасча во40 геєчЧчасддасчя ссссдччЧчас сасесачсояода ассчедачечЧ єчасоЯсЕЧЕЄ часа ссдаса 8100 ссааасаясач суссачаєсс бЯссадсЯясс чусадсядасс садсядадас; дасеЕсссаєсд 8160 чсасЕсЯдаа ссусдседас ссдчсаачсояд саассЕссся ЄдсссссЯасЕ сасесессасс 8220 деседасаас садсодссдд адчасессвЯа сссдЕсссад садсеЕєтачі чЕссдаєссд 8280 ссааєсссуа Сдссврасадчд аассааєдбЕ сесддссвдУ сдабдасЕсд сседаєсядда вза чсчадЕсСваа сстасевсся ЕсадЕсссЯд чадчаєсьссяс часєсяаассо гасачсечесє 8100
Сссесассдч ЯчсЕсссесад сссссчадся сссачсчодча асссдсассс сесаєссуаасєс 8460 счаЧдадсаса ддасдасясс Саасаассса сссаачссуа сассдссссяЯя сдасЯясадес 8520 сзаєсссадда дскаазсасс асчадчччаач счдЕЧдЧассдс сдааусаєсу асссааеває 8580 сачачачсачс Ссдсдссасс чадсуєсаєс ссдаассчас ЯдссЯассодес дсасаєседе 8640 асадссссус адсддасудас дадсссдаадс сасасачсда сассдаєсся ссачессасау 8700 сдассдсаач чдсседасуаа асаасчсЯядесе чачссссдаає саасчасесе сЕдчазассс 8760 садсЕсСссос сЯчЧададачс дачаєсесссс чдсадсбЯдсада адссассаєс Ядссчсасаса 8820 асчасассає сссЯятчЧсуї сасосаусса адчечедаасі чеаасссодЧа чаасдчасаде ваво чсаасчасає ссессачсадує асссссдадс садссасчає счасаєсчає седассассе аз40 гдссдасаза адсаачачаа сасачсуссЯ ссссчдасСачу сссадсоядсд чачааассс запо ксдЧчасесуЧчЕ ссссчЧаасач чассстасссч аччсяссааа єчааасесса асчссасада зоба асссдяЯссяссо счассЯдЧчУчсЕ дусчаєчас чааасусадс дсеєсасЯяссЯя Ессеодсасес 93120 часасачсяс ачдсаассядс аааассяЯясаЯс счаачдчасяє саяассадссодчас гадчсааєча з180 адсчессЧес ЧдЧдсесадсає садсссдясса сасссдааче Саччсаччес сассссодас з240 аачаачассЯя сссЯддссосЯд садсоасацаєс адссодаача асесусссас сасячсодааад азоо
Ччсчачаєсас сааччсадес дасаааєсаає ЧчЕссаасаає ссдсессаздс сдчасассдсс зво
Есясядсояся дсссаассса адсЯяссачад задссддачаа чассасдсяс дчасссЯаєсеча 93420 аччечасссі аадсесссЯсрс скасчасчде ассссдатсс асссссассс сасаЯасссаад заво асддесЕссс сісаддсадіс саєсададчсес аааєсааєсі адссдасеєбЯ ЕссяЯадЕдааа 3540 кЧчадсідсас Сссаасацчаз асаассавас заасагбасас ачсдасесає Есасасдчаде Іва) ссаааєсаса асзддсасаса ссссдссаде садччсассаєс асассаааач ссачдсессда з66О ахгачдеЕссаа ассадааадс ссдсаассда дассессасачу ссаааєссЯяс Ссссадссдс з720 асаасаєсас Ссассядаєсстаассочес саассаачоас дсоссасчес сеадасаачед з780 чдссдсасаад сссдсасаза ааадсадасо сссадассса ддсачадсса ссасдсачас 9840 таєсгсаєчса бБаЯдсдсЯдсадс асасадссаяас ссоссадтає сасбабачеЕд аааяссссча 5900 сссесесчсс ччсачЧеЕвсс сасссссаєе сааачачЧєс ЄЕссассстаа ааасссваде ззво аєсаєеєссса свЕсассвсоЯяє сассесааєс ссесасааєс сссоУссЯаа ассаєсасуєс 10020
Ссссаяасасас дасаєссоса саааєссрасе асседссааа сасссссааа ссасасаааа 10080 всесаєдаач сессаЯсесає сесбааєдба дсосаасаєь Ессавраєєда азагасасаає 10140
Есасісаассе сізасЯяссЯч садаалачсає ааєсчасссає бссваєсеве сессасаєза 10200 акгчсЕсааса Сасаасаєсєаа асааарсссє сСсассссаада аччасссссс ассесасаєс 10260
Есааааасає ассбассавза бассесссаа ссасяЯсааає сесасаасаа саадесЯавеє 10320 саааачіаас аааасссаас сссараасієс сеЕссасссда ссдаєсссаа ачдчсаасассс 10380 ачедасасаа ссацчесассеЕ сЕсЕссссЧа асааааааає ссаассаєса Сезсассесс 10440
ЕСсасасаасє даааасссса ссааасаасу асссасадса сессЕєдаадс аачссасяаєсс 10500 асадсааааве сксасааєстсс сасссдасас сасдчаадеа асідаачаєс сЯастессаса 10560 гасаадчасасє ассеЕсссаза дсаавсссаа саасачессас сасасссзач ассесасаса 10620 ссазасасьс аасассассс сктааазаасс аассачасає зассааааса ссассссссс 10680 ааєессаачі Ссаавєсаєьу аасесуєдає сассдаєеса Есасесвасе асоасевадає 10740 гЕЧСЕсСсасач асачеЕсєсааа чсаваєсасаа чсаасчсачі ачачедесач адсдсстассс 10800 гадассасаа ассасаачає ссасдодсада стаасксесса сакасссссєе ассаястсева 10860 ссЕссЕсСІсЯ дсасдсааді ссясаассЯд аассассядсд дассдссаєд асасьрссядсЯ 10920 чЕссссЕЧуЯЄ ссасдсасаяч ассеісдсуса ачаайааачас заадазсааа дааааалачає 10980 аагагасачача часаааасдс аассасасаа ссаасссада садссассд чссчаєсаач 11040 ассяссусЯяЄ ссабдаєбасдє ссаааєсдсса бдсазачсаа сасдЕчдсьсСа асасдсасес 11100 сааасудсес асссасссса асссасасас ааасасаєвя сесесЕввребе саєсаєсаєсс 11160 асаассасст: зчзсасасассс асесеосвсо чссасстьсаа сссссесась ссазсасаєєд 11220 їсаасстдса сасядсЯяєдєс аксссаєдсс сазаєсссса бдсасдсссс аассассьсс 11280 кеєсесарає аасасссата аасассесса асассасіса ссрсстьесає сасосаєсса 11350 сссачачсас басстассста ссасеасаає ассссаассс аасссасаєсс саасассасс 11400 ссадчдаєсса асаасддеєс ссаасавсес счаччаєчьс аасаядеяЯсьс сЕСЕвЧдачес 11460 ачасчсуддса асесссрдасе садсьессЕс сасассассе чдбдсааааач ссдасаасад 11520 асссаачсаа сЕсЯгсдЕсЯдЧа чдддаасасьсь дссЕсесЯсь сасссадсасс ссасачсьсть 11580 стасччачас сатсвасссс вбсессаусадс аазаєцасад ассаядасасьє єсЯястьсасає 11640
СсЕссавдЕс аврсессудчас сададдасаас сачссддччса сасачассся чуЧчсесасва 11700 чссасасааа дссаадсдяЯс сасесачаче басасьддсс аєссссааса сядесаЯссЕс 11760 їсСаачасаяст дссасадаєє чачесссуєсда ссасацаасу сассасааді асачсчачас 11820 счасдсддас ссасасаасу саасчачачч ЕСЕСЕЄСсСЕссС ссссасаєсу чесддесесс 11880 сЧдссадччааа сассессдаєс суааадааза аддчаздача сеЕсдасасда чсдчавсьссє 11940 чссуаєсса абасессяєс сесачаачаа чсассаєсвя ассесеЕсаєадс сесеєдадссьяд 12000
ЕсвЕЧсдаво ссаассувса Сессчуюева сеЕсЕсоЧчучЧча Чаазсьссууа сааакястьу 12050 сеЕссЯсЯддса десаєсдеєссс дЕсасасьсо саєсссвдЧаає ЧЕсасссЯдЕ сачадсдаасес 12120 сассядсасас аадсдудддачЧч асааасосса бдасаадеєсс ассаачсосі ссдчаааассс 12180 сссачессчсдЯ аєдсеЕдсЕЕ соддаадаадч аєсссасаає Сассаєсаса сеЕсссссясЯя 12240 чаастасаач асачсачаєчс СсдуЧазаасаа саачссдаас сссасаасаа сачеЕссассяаа 12300 сЕсСссссоасЯ аааассЯядсс дадссграсда сссдаадасо чсдачасчася асассядссаа 12360 чаасадачдсс аачачаассч удсчасчддчаад ссассаєсЕс сачадсеЕдЧдд ЧдЕдаєчадаа 12420 їсадазчсааа здаачачаєзчач асгдсачссає садчаєсаас согааачасч астдчачсаче 12480
Садсссваєс асссрачадес сдаєсассадч басдаассаа аасдсаєсдса часчсаачадч 12540 сесаєддача дсасаодааса ссдсаєсссда ссаєбусааса дсасаасаас Ечадссссає 12600 сссасесссСс ссаєсєдааєза асазаччаєч срасдасаса ссаасасьст ассестасудсас 19660 сЕєасеЧЕсс гасдчаєаває ссесссерає гассасааає саєсьдааєсс дсдчасачдссс 12720 асчздаасчес ссааатадста сааааасавлва ссдтастає аздассессь азасаасьоє 12780 аасуссачдса СсЕЧеЕЧазсда часаєсвадеЕЯ сСсаачаачас асаасаасса сааєдуаача 12840 ачеЕсечьсСьс сасесасава ссасасаєса сессасетаєу сгассасасса ччасдсєсаяаач 12900 чачасасаас зассасазач ачачаачесс чсасссассс асасаєссаса гассасссає 12960 гсасакаєса сасесаєсса ссрастесаає дсссссасяа ЧдассеЕдаєсс асчасарсьс 13020 ктаасаєссса чссчасаєдс асасдаааач усастаєссд аасесьстса сеседсаєаа 13080 ачадссчтЧасс асссьсааач сочдарсессасс саассьсавс чес раса часадааааа 13140 ааассасчад ссдудсеєсдас аааасаєсяда ачдчаєссааа асаасаасаа асаасаваєса 13200 асабаєааса сасдсасаса аасстассає аасасаасає сСсаєссасаа ааааусааає 13260 ассдесаєсаа асссасасаа ссусссадссес єсЯдссадЧаас дЧаасєсеєсаає сасссааася 13320 ачачсадаса сасессдасевє себЯадссасс саасаааєса сСсасссядаса срасСасдааа 13380
Ессе рсСі сСсассачдсаа адаасаааає саааєссаача аддасааєсяччя сЯассссваєс 13440 сеісасасаас саасссссас аачааадсса адссададас засаааааза саздсааачуа 13500 аааєсесева аєгееЕцачесу гсЕкБуссвЯс кЯдсакааєсює асдсадсааа асассасаса 13560 аасссьсвЕ ачсадсачадч сааєчуєєЧча ссасоасусеЕс аздзсесссесс ассесасссь 13620 сЕсаєссадса аададядсаває аазасааааєс чадасасссс ачачасчесе саасссісає 13680 асаааассос ааазасаачь сЕсссаусас сосассаасч аасссяЯсаядс сЯясьсааєта 13740 ачаєсчачсча Сасссадчас сСсадчассса сестассдає састадсасе ачосссадгад 13800 ссдассадсь ЕС 13812 «2105 76 «211з 1434 «2127 ДНК «2132 МадпароксПпе чдгівеа «ч00з 76 чаасесаєчу сЕссяссасс сссссссясу ссччачсезча сбасечсесс сеоссзасадае ва ассассчассо Есаадсссає даддчдаасасс аачудссася асаядссадсаа чссасасаєс 120 гссудадасас стаєдасасі саадаассдд сабаадсася Есаассддадсс саасассасс 180 кЕсаєсьсЯє ссЧЕЧссссє ЯдаседЯссЕс асасссасьс ассдддессос єссасачсда 240 аадасдассд сасдадссЯс суссрассас сссаасасся чесгдуддчдаає басєдссуаче 300 сбассассдчас сЕсдадесса садсеєсясас ааддесссЯдс ссСесасссаз аарсрасссес 360 чЧссдссчссд чдсдскддсус сдесдадуддс скссассацчає часаддсесаа сддссассое 420 чсасассасе часасассча сассчадаач дасссстасо садсссусаа дачЕсСсссса 480 басссасаса сдадасадає девссодаач сачаасссса адазадсадчу ссдсассдас 54АО0 аксассчасс сдаасчадада ссосубеЕЧеЕс ЧЕссудсаче ассаясаасьс ссссаачьче оо чссассссса бадессссує сересссаса сесасоЧчеса десссаЧчоеса дадесдассас БО сЧчаЯдчадасс ссасссасода аудсасссся сусусссссь сесЯдсссачса чуссасессс 720 счсЧссаасі сясссасесса ссадессоас чЧчассадсссс сСсечасуаєся саасссуєся 780 счечаєсасч Ссаєссасаче ссбсадЕсасс сесачачача дасассасаа сЕбссассасєс 840 чаЧчеЕєсссвЕ соучасврассяЯ саасусвасеЕ чадеддсасс адсаєдассс сассаачсоуд 00
Есааєссоядча ссЕЧдаачса ЧдсссадчЕсЕс дессасаасс Едаадчдсачес ссаЯассаааас 960 чачасєсчдача азчачасясЯяс ссадсадссч сачаадаадс ссдассачаа чсчсдссзад 1020 сеЕєдаєсаяаа чІавтссссЕ даадсадсесє сссдєЕЯсва адсеЕчадаєча сЕСЕЧЕЕЧаЧ 10860 сачсссаача асччазачдадс сЕучассуса чдеЕЧссЯддсЯ ЕсаєЄєссасча саседдаєчЧас 1140
Ессаєссаздд ассассссяЯ сСудсачадсе сссаєсаассо счдссаєсду саадчасаса 1200 ассасаассі гсаасддсад бЯдЕсСсасаас сассссаася ссусесасаа ссесасессс9 1260 асбаєдсЧЯчсд єЧчадсассЕЕ ЧчечсуддсЯдас СасчадуєсЯя адабєссддаа дсясасссад 1329 сссдааааса здчасуєсвс аассуєсЯясь чаресессуч Чеаассясає сЯесссасусд 1380 чЧчЧчсдадсаач счассааччс суїссадссо чессссчдасЯ сісадчссяЯси асаа 1434 «210з3 77 «211» 212 «2122 Білок «2135 Пперсовріпаекіа подогит «4002 77
Тук Тук Ве Сув ТБЕ Ата Рре біу І1е Тік зіу с1у Тук Нів Ак Гей 1 5 10 15 .
Ттр бБег Нів Акуд Бек Тук бех А1їа Акд цей Рко цей Акд Пец Ріе Геч 20 25 30
А1ї1а Ріе Тпх біу А1ї1а сьЬу А1ї1а І1ї1е піп б1у бБет Аїа Агч Ткр Ткр Бек
К1а Авп Нів Ак Азї1а Нів Нів Ак ТкЕр ТПх Авр Тпх Месє ГПув Авр Рко 5Ь во
Тук бек Уа1 Месє Аку с1у Пец Геч Рре бек Нів І1еєе с01у Ткр Мес Уаї е5 70 75 во
Бе Авп бек Авр Рко Ппув Уаі ПцПув сіу Аку Тік Авр о Уа1і бек Авр теп 85 90 95
Авр Бек Авр Рко Уа1ї Уа1 уа1 Тктр біб Нів їув Нів Тух с1у ГПув Сув 100 105 110 їеч Ппейп Ре А1їа А1їа Тер І1е Рре Рко Меєс І1їе Уа1 Аїа сіу їец с1у 115 120 125
Тур с1у Авр Тктр Тер сіу сіу цем уаї тук А1а сіу І11е І1е АкЧЯд А1а 130 135 140 !
Сув Рне Уаї1ї сіп з1п А1їа Тік Ріре Сув Уаї Авп бек Печ А1їа Нів Ттр 145 150 155 160
І1е бі1у сб1іц біп Рко Ріе двр Авр Аку Агу ТК о Рго Акад Авр о Нів Ууаї 165 170 175 цец Так А1а Ге уаї Тих Меє сз1у Січ 51у Тук Нів Авп Ріе Нів Нів 180 185 190 51ч Рпе Рко бек Авр Тук Ак Авп А1а І1е 116 Тер Тук біп Туг Авр 195 220 205
Рго Тк пуз Тутр 210
«210з 78 «2115 216 «2122 Білок «213» Не1ісоуегра сгеа «-4005 78 їец Тук Уаї І1є бек сіу Бен біу І1їе тих А1їа біу А1їа Ніз Акч Геч 1 5 10 15
Тер А1а Нів цув бек Тук Ппув Аїа Пуз Тур Рго Гец Аку Уаї І1е Гей зо
Ууаї І1е Бре Авп ТНк уаї А1а РБе сСіп Авр А1ї1а А1ї1а Меє Авр Ткр А1а
Ак Авр о Нів АкчЯ Меє Нів Нів Ппув Тук бек 014 ТНЕ Авр А1а Авр РКО 5О в5 во нів Авп А1а ТБк Ака біу Рпе Рре Рпіе бек Нів І12е с1у ТЕр Тїецй Геї 65 70 75 8о
Уаї АкчЧ цЦув Нів Рко АБр Гем цПув сії Пув С01у цЦуз С1у теп Авр Меє в5 за 95 бехт Авр цем цец А1їа Авр Рко І1е Пе АкЯ4 Рпе б1іп Пув Пув Тук Тук 100 105 110
Пен Іїе рем Мес рго Гем Аїа Сув РрБе уа1ї Меє Рко ТикЕ Уа1 І1е Рко 115 120 125
Уаї тухк Рне Тер сіу біц Тк Ткр ТНтІ АБп о Атїа Ріе Рре Ууа1ї А1а Аїа 130 135 140
Мес Рре Аку Тук А1ї1а РПе І1е Геч Авп уа1ї ТП Ткр Пец Уаі АБп Бек 145 150 155 160
Азїа А1а нів пуб Тгр с01у Авр Цув Рго Тут Авр цув бет І1е Пув Рко 165 170 175 бек бій Авп оПей бек Уа1ї АТїа Меє РБе Аїа Геч сіу с0Та сС1у Ре нів 180 185 1930
Авп о тук Ні Нів ТБк Ре Рко Ткр Авр Тук Пув ТЕ Аза біц Тез 51у 195 200 205
Авп Авп цув Пем Азп Ре Тк ТТГ

Claims (1)

210 215 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Виділена молекула нуклеїнової кислоти, що містить генний регуляторний елемент, функціонально зв'язаний з полінуклеотидом, який кодує фермент дельта-9-десатуразу, яка складається з амінокислотної послідовності ЗЕО ІЮ МО: 12, де вказаний полінукеотид щонайменше на 90 95 ідентичний 5ЕО ІЮ МО: 9 або 5ЕО ІО МО: 15, і де генний регуляторний елемент вибраний з групи, яка складається з промотору, який здатний функціонувати в рослинній клітині, промотору дельта-9-десатурази басспаготусез сегемізіає, З'ОТА/термінатору дельта-9-десатурази, 5'-нетрансльованої ділянки фазеоліну Р/азеой5 уцідагіє, З'-нетрансльованої ділянки фазеоліну РНазеой5 миїідагіх, ділянки приєднання матриксу фазеоліну РРазео!в5 миїдагів, 3З'--нетрансльованої ділянки ОВЕ23 Адгобасіепит їшитегтасіеп5, промотору вірусу мозаїки жилок маніоки, 3'--нетрансльованої ділянки ОВЕ1 Адгобасіепит (ште!асіепв, ділянки приєднання матриксу АВ7 Лісоїіапа Їарасит, овердрайву, Т- ланцюжкових бордюрних послідовностей, ЗЕО ІЮО МО: 40, 5ЕО ІЮ МО: 41, 5ЕО ІО МО: 42 і 5ЕО ІО МО: 43.
2. Молекула нуклеїнової кислоти за п. 1, де полінуклеотид є ЗЕО ІЮ МО: 9 або 5ЕО ІЮО МО: 15.
З. Молекула нуклеїнової кислоти за п. 1, де генний регуляторний елемент є промотором, який здатний функціонувати в рослинній клітині, вибраним з групи, яка складається з промотору гена оіеї, промотору фазеоліну, промотору вірусу мозаїки жилок маніоки, промотору І КС53 і промотору ЕАЕ 1.
4. Спосіб зменшення кількості насичених жирних кислот в рослинній клітині, який включає: трансформацію рослинної клітини молекулою нуклеїнової кислоти за п. 1, де вказаний полінукеотид щонайменше на 90 95 ідентичний 5ЕО ІЮ МО: 15, і де генний регуляторний елемент вибраний з групи, яка складається з промотору, який здатний функціонувати в рослинній клітині, З'ТК/гермінатору дельта-9-десатурази, 5'-чсетрансльованої ділянки фазеоліну Рлазео/ив уцідагі5, 3'-нетрансльованої ділянки фазеоліну Ріазеои5 ушідагів, ділянки приєднання матриксу фазеоліну Ріазео/ив5 миїдагів, З3'-нетрансльованої ділянки ОНЕ23 Адгобрасіепит (те?асіепз, промотору вірусу мозаїки жилок маніоки, 3'-нетрансльованої ділянки ОВЕ1 Адтобасіелит (Шштеїасіепв, ділянки приєднання матриксу ВВ7 Лі/соїапа Іарасит, овердрайву, Т-ланцюжкових бордюрних послідовностей, ЗЕО ІЮ МО:40, 5ЕО ІЮ МО: 41, 5ЕО ІЮ МО: 42 і 5ЕО ІЮ МО: 43, так, що зменшується кількість насичених жирних кислот у вказаній рослинній клітині.
5. Спосіб зменшення кількості насичених жирних кислот у дріжджовій клітині, який включає: трансформацію дріжджової клітини молекулою нуклеїнової кислоти за п. 1, де вказаний полінукеотид щонайменше на 90 95 ідентичний ЗЕО ІЮ МО: 15, де генний регуляторний елемент є промотором дельта-9-десатурази бЗасспаготусез сегемівіає, так, що зменшується кількість насичених жирних кислот у вказаній дріжджовій клітині.
б. Спосіб за п. 4, який включає трансформацію рослинної клітини більше ніж однією молекулою нуклеїнової кислоти за п. 1.
7. Спосіб за п. 4, де вказана рослинна клітина містить додатково засіб для зменшення рівня 16:0-АСР у вказаній рослинній клітині.
8. Спосіб за п. 7, де вказаний додатковий засіб, який забезпечує зменшення рівня 16:0-АСР в рослинній клітині, являє собою позапластидну десатуразу.
9. Спосіб за п. 8, де позапластидна десатураза являє собою десатуразу, вибрану з групи, яка складається з десатурази пор, десатурази АпрОр5, десатурази Н?7О90О5 і десатурази Мар9р5.
10. Спосіб за п. 4, де рослинну клітину отримують з рослини, вибраної з роду, вибраного з Коо) групи, яка складається з Агарійорзіх, Вогадо, Сапо/а, Нісіпиз, Тнеобгота, 7еа, Соввуріит, Статбре, Сирнеа, І /пит, ІГездиегеЇЛа, І Ітпапіпевз, Гіпоіа, Ттораео!йит, Оепоїйега, Оієа, ЕПае!в, Агасніз, гарезеєей, Саппатив, Спусіпе, бодіа, Неїйапіпив, Місойапа, Метопіа, Ттійсит, Ногдейт, Огуга, Ауепа, зогупит, бесае і інших членів Статіпеає.
11. Олійна рослина, яка містить молекулу нуклеїнової кислоти за п. 1.
12. Насінина рослини, яка містить молекулу нуклеїнової кислоти за п. 1.
13. Спосіб за п. 4, який додатково включає: культивування трансформованої рослинної клітини з отриманням рослини, де насіння рослини експресує фермент дельта-9-десатуразу.
14. Рослина, отримана способом за п. 13, яка включає молекулу нуклеїнової кислоти за п. 1.
15. Рослинний матеріал, отриманий з рослини за п. 15, який включає молекулу нуклеїнової кислоти за п. 1.
16. Рослинний матеріал за п. 15, де рослинний матеріал являє собою насіння.
О5Шадо тауав Стурюсоссив пеоїогтапе Стуріососсив сичаше Іепіпша / Атуютусев гоихії ев Могпіегана аїріпа Могівегейа аїріпа дпвдед ухае Вопіго ротре мпово5 Азрегойиз огухає Марере й Азреагойше огугав Аврегойне їетем іСпрерз-2 Аврегщійих огугае п вів Уагтоміа роїунНса Сапайда аібісап5 Ріспіа апаивіа Бассії кіцуметі со Є1
0.05 Аврегойшв Гоглідчаєє
Фіг.
паб9о8-1 (5860 ІО МО:5) (1) сссдаєесассааєдсадссадсасдасаадьссьсс їпрере-2 (50 ІЮ МО:8) (1) ---ссслттттт нти МЯ0905 (8БО ІВ ОМО:76) (1) сссстттсяттттятття тях (37) сдассддааачдсаддсадсдадсдсаасдсааєсаасядсдадссадсссастсаєса (1) сяясяяяяяяяяятт тяж (1) яясятяяяятяятт тт тння (84) саддесссасассссасасссссавсссяасасяассасасддаассасдадчадсасос (1) сятяяяятяяляяятяяятяятяяитятитт яти (1) ясні (151) сддаєзасаасє ссасасааддааасадссаєчассаєчаєсасассаздасьсцзазає (1) яяятятятяятятяяяи яння (1) сяяяяяяяяяяяяяяятттт яння тянттяяня (208) саасссєсасезааоддаасаааадссададсьссассасяадЕдасадссасесеад туш и ни и и и ин и п ни и и о (1) сяттятяяятятяяттняяят няття (265) аассадсоддаєсссссоддссдсадаааєссоядсасачеаєдсськсосассвдас (1) яссттттяятттття тя ит тт (1) сятяяяяяяяятяттнятя тижня --ддасу (322) єчтеостадсаєасаддссаєссасссосАсттссссаайсьсі Пайсте- -стата (1) стяяяяитятяяяяяяяяяяяяятяня няня -- «ДАЮ Ват док осссєто (6) сатдастеєсаєсаєсьссссссаєассавАсттаас- -сосесов ост сейсвбатаде (377). осейойлсстозонйсосбассосвАВтсАя- --ВАсовессеКАЗААСВОВН (19) баско Аскосасі заграв с ТО--- 0-7 ---- "Ся датсря с ВЕ (61) ассйс дастосавдсссиссавдвАСарсААОдастАСсАсаєсвасьАВсСтосьс (64) Бі 1садєдесаловаєіан сетесаві ПОТ ТА, асогіан І ТА. (118) ВИ ССОЙЗАСАССЬА дагастезасак і ДТАДОСЬ сісао пегіА (488). оєссйестЕсАКСайсаасаво сто состосотсав се, СЕестасасся (121) АСадсастаатавї стсатаи С -Сттасасте ся пвасасбсаєга (175) АССАССТТСАфСЬТоСТЕсТоВОссто ВО тосЕСТСататосАЦЕТАСТООССЬСЯЦТ (232) ГТоПАСІСсАЙ-ОВ ост ка---- ТВ ОБТУдна ст ст наасінсцюосс
Фіг. 2а
(597) ЯСВІ СА жсЦне Ас (230) вон як ВСАА ТС От чсене (284) її спі АС Го ем диня касет в й. паї СО о ГАТТ «й ( адже с А Ід нд ща івоя че щі БЕ сво со і ви ше сайя Бо ГУ З» ще Я А ке і Гай г. ї я нені ій сера с ос о азтсайкбдАс (341) Коеела Тстадетси. ев сстія сосзасв секесті І сс сЕжайс а Гео сів шАсСАОостТо ях себо в ( пос тсАаа І кй сеанс» ї- това ший тео й й : с ве т - ше зок МААаЦс у я ціні гасі! пе Басає ви я їх сія ; М со 1) псеВИ ой СМ стотеш не пасе ке) Че к (398) | тост СсасоА ще : нове палнна сода за ) жі й ні скан пиіцін р ш (7 : ро осеват я п ндевкна лий я тосатсь есе коосмаас А с де дсоцус єв) ЕЕ тіл хо Ас скаже (401) ЗК ад АЦООе хх я ї (4 СогАс авссос 5 й 55) сс ААсОВСВВ ПАН ОВАТА пока ї М ССТАСтТ ох асче те СС т шк; сиСоевА в-алє ек мес пото скАізасі Оса с (825) АСАЙ ТЕ ССААсНО тає ай КЕ асбвестсв 7 ЧАСА МІЯ (а58) Аква сенс Е "тс с сві по (512) АС о ас оЦИВЕВ ртсацнсАї о Есай сс ки се КЕН Зола й таз. я Е сх во зесва ДЕСНИ ЕВАНІ й ана тасі а ЯМ ее дя р Аж А; бі щи не (515) ше есе КС а и. с к. зе : 515) х. о АЯОТАЄ А сом я з аос и То х века бе СД пря ЗАЕС В в ве З (939) БЕ жавнансае й Аа то «й й я й уд: ях: як (Я Ма, й й КЕ ге нн пиищи 5 їее внтос Тасіз асбАтої птвушке з. Со! м Кон пре. доня МК - Іс З ї ста) - ща о. керу і тсазг Те севсат с ся СрАсСаст а г о асо Ко : ві і че я. Ес а вес т я Се татко (996) СТИ бан ева м сазан ие аєне к щі йстеввій паст пОдноає пт Кк не (629 й пс зд я 35 с оо А се. ні - | зае вве ще се т ее УРЕКн я. нн (683 виса; не атоВтс шосе ста . у Ти ) в и Ясгбасе У севеве я Ясжас да се Ве пи я о ТАЖ п чо ее й " ті ( пас 5 Кн. Ах сяк - я ; Що ів поса полю, р ща | я А й їі с п я ее, ЖЖ х (євє) ВЕТО синий пт З ян : (740) З 1 й векисяв спишссі Тасіте дах ж спос не я Шо вистнейи каст то ; Є; я. я. СУСАА Затв ее се свой Е ) Меце я аа поса - як вдо (743 щі ще не - ЯК ій ТЯ Б сон ря В ще - ДОА чі З ( ) БА те се ще щк насе асо мем я жо шАсе де 797) 2 она ас и и Сх орви й шин 2 о не пе с м ; НЕ Ше ктанса їй КВКОйоСо я ШІвОКо уко ку сао, ЩА. ї сок як зо каст с щаще сх гай МА й ЧО, ев еВ а ак Сея ши й й 67) й снв кн іш сів ОАТАЕ за ний (854 лес лАс др Я тн на ВН Бу роя ОСА ся сл ож сода их п о ) вста А о оо кокщи с сао - Ж ас г пінні а сет . есе р. У це ж БАС т ков Сас г ат ие педннни т остов жу Кк не Ас ве ех : а Аст ян А й. й пен» раз . сс УНИВНи песпас в вс їзсс .- ВЕНУ в и
Фіг. 25 си сосна . яісеа жоза
(587 у кош явсавсй 30) сот св. УСС НАНАСЕ ВТО, (284) ану са Тс тою сіб оса Е алієд ес ПАСТА вя саббслачтсатйй с4) йтВвЦ же же я с . Аостео со : (287) таб. сЕоАсол Вооййсвій КОСТІ САССТСо сеовест кани т МЕ анкае у . А и що (341) Ф и пе постав Естеваснетее пиши Тесс тсва іш її Ст Вт Осії ТАМ Васеті ОБ я зач я Не ЇУ ее слі) ВО стаситьневосо тоне вся сода такс (344 я касустев что педа тає ( ) й АТО ОА Псовсдсі, Є днк шин сободто кс. 398) ПАТО біасааАТ Є АК ЕбстАся слів: пра ПАСМО асАс дао а чЧчансва: ж але ОА о й ЗАССДЕСЧАТЯ ОН со А КИНА, ве (401) о я СасСАДСВВСЕТЬСЯ Є нос ПааПАСЄ а Стсеб : й о зрий фе З я КИ чАсд а я в5) о Го саєдсасі ТИ КСТАБассй ше жо І ее гас тсарісс Ме отаке ль сс ою й (4 ВаААеСПСАК ТаТАСтсанйсАв сон паї а ( 58) дсой т ва сага сКАсИЙ ПАсАТа НН В ес іх 512) ДОД пооодватсьлаї осн вАВВкссВвссї нн упо АсСаадса пн ий ксасис піжа ик. З (882) СЕ Мбаадслацнсс ве ий Ем А одер (ве, . Є ї АВ. в со ка РАКИ се ст ця сокаа у з сс ВС Ах що ще Вежа лодая дин я
(1 . с. я МА а Ех ше щі сво ч 9) пен хво ТА сляото в зе ТЕ Тесс тв бач до -5ас хд ще (9393 ВЕ АВ сосАВСТЕЄ з А тосс стат, сс Са тос с 9) оБЕС зве щі ТЕКСТА ТОЄ с ІСТ та вл нщ окотевср теагсттодтео УтасАнат с,
ст . и З 15 зкойцвИВсо Є ПАТайссстесої есе СА шану ; й ОК ж нище - сет птсобай сан ас обстесАй Ной а псоєосо юс ящке: Що ТСА роздевсьй пт тес ВЗ АВС Б й (629) й віссСтсс тато шов Ясжтаст Ас ; са я со (6 Освгсат -- сфе де наш шк : 83) Ота е А абс ев АИсСтсЬОє вий (1053) Кобндсяй сЕТен пово ее, й дстчастсоо як пн Ех ЯМ я ВАСТе сб 1053) ксеве гев писекнвасее ЕСЯСЯ ос я ее (740) В я: ло я ГІСпАе кс ісп сг Етнос веБюсюх паси тисне нАс асо, ВІД. (11 ; я есте аза пайоге ОВ васедног не Шнціни : пиА ССС ' їх ОТ Зах ДА А (743 с ся ес каесЯ МАССВСААСТО работа сов А ) СА подає се список оновся п пас отаен. бе (797) бАшьсся тай заз. я бдсн секс нано дсссо сьес спа А ТАТКАСА Я : ЯБсдесс ою КА нс п вк і МОЛ ТЕ ла ЗЕ ПАСТІССАС ОС Ме й ге) тво) нсексонекке А АсАТ ук ой Позао 00) А я х АВС він щ ех нах тера ї (854) в ВиСсАсЕ до В, шеаокАСВвс; ето з ан. с сте он во АСК. косій х о 3 аєсво ах ас р що сенс ях сАст. М а о Я ант д МНН КОИте а Аг сі а іг. 2с
(1783) єсааессасстстссссстсадсадасададсаасастсаастссссадсзаєсяєта (1371) сяяти (1435) сни (1840) дазадсаєсаєсчзаесасчаєдсеісаче сад сачасачсасаєсчьссасачссьсс (1371) яяятсяянятяннянн няня няння няня нняяя (1435) сяяти і1897) сесчадедаєсаддатаєдаазадсадссьсасоддсесьадассаадаасазаасаєс (1371) ---------- я я я я (1435) -----исяяятяняя няння няння няня (1954) сасдассссадаазааааааааазаазааасьсзадуадачасс (1371) ян тнннннннтя няня (1435) ------няяян нин ня
Фіг. 24
Ппрерв-2 (ЗЕО ІР МО: 14) (1) яятяяяяяяяяяяяяяяяяя- йпрор8-1 (ЗЕО ІВ МО:49) (1) сяяти АпПроре (5БО ІР МО:50) (1) --ясятяяятяяяяяяттяяя Мароре (850 Ір МО; 12) (1) -ясссяяяяяяяяяяяяяня БСОББІ АААЗа4826 (БО ІЮ МО:52) (1) МРТЯСТТІВЦІОРОЕРКОрРЕАЄ (1) сяяти ------МААБОБІ (1) Яся няяняяяяя ня -------- -МРІЕНОАУАСМОАІЮРЕЕУКОРОРМАБЄТОЕРМ (1) сясятяятяят яти --МБАРТАРІ (1) яти А - - - -МАЗЯ5855УРЕЦБАААЕРОСТТОЕКРМ (23) 8СІУРЕУРЦТЕАМІБАТСІМККАРВІУМНСЕСЗІМСеКЕМУВУВЕРККСМВККОМЦОВІ (8) РЕРКА----ТеБКОТНІОУОВУТЕКНШУККІНННИЯТТЬУУТІВАБЬУТТКтТ --ТВЕТ (32) ВвМ8К-----ХОРККРЕЕТОМРІТАЗНЕУОНУННЕ НУТЕІІСУВЬАВСТУААРИ --ТВО (9) КАКА-----РЕАККУНІАОРТАІМЕНІ ЦУКНУ УП УР ІІІ ІОДЕИ--УНО (26) ВиТКО----УПУВКРІ ЕЗЕТРИТЬКЕ НКИ (ТТРІБЕУВЬА ПІБТУМН--УЕЦО (81) БЕКОМОЕКЕЕАКТКІНЕЗЕОРИТІКЕНОНЬВ ОО БИМЛЛИСОМЕМІОНУРАТЯСКИ (60) КРТІтМОФІЙЕСТАКО ОВЕН ИвО ОККО ЕБЛЕТИАСАТОВОАВНИСА (50) БКТАТМА ТИЕРЕТОМС ВА НАВС ЗВАТИ ВІНІЕ АХ ООАУВ СТКННА (78) УКТАУНАУ У, РИТСІС ГА ІВЕНАНЕ, КЕР КІУБНАМ АСАМЕОІВ НЄ (139) ІНУБЬЕБУКУВАУООУЯ І БАЦТНЕНИЗНАЮ ЗВНЖ КЕ ВІЕУВІРОСАВУНИАКИНОН (118) МЕВАННЕМЯВІМКАВЕоУМВС ТЕНКІВНИУЬМОСі ЕУКСВТВУЗВЦОВО РУ (141). оБЕХНЕ НУ В КК ВІЄУВКО хНЦО НН УМКОМ Кто ті гтВІ ЕОР (118) ВИБАННЕУТ ОКО: УВК БУ Б ПМК ПЕВІСЕТВІЗВЬМЕОРУХ НЕ (199) МУТКАХУТМОГІЕ, АХА ІМИСІИМЕОЕІ. АСТМІ ІЕЕУ ЗК. МЕ СА КЮ (255) НУТІМІТАЕМУІТВТІІСВУВЕМННУМО ТЕАОРІВ ЕМІННАТЕ Ін МАНУТ ТО. (257) ВАМ ННУТ 5 БІньнеК--16
Фіг. За
(292) НАУеБрКтЕвоМЕТЕКОВІЮООСКАЦОККАВОпОКОРЕЕОЇ УТ ЗМООРОАВСКЕВОЄ (313) ГАЗМЬКОРАЗМЕТЕКСКУООСОККІПОКВАКООИСУРНООЇ РУТЕНОРУУЕОАК-АНСВ (290) ГАХОБККЕВАНЕТЕКСЕУЦЮСОККООККВАТІОЙОТРІООЇ КУМЕМООУУЕОАК-КСВ (308) ГАНКОКОРВОНЕ ЕКОВУВОСОККЬООКВАКЦОИОТРЕЬКОЇ ГЛ/БНООЕУВОЄК -МСК (369) БДУОБККЕВОМАТВЕАІІОЮКОККІНКЕКАКІМИОРУСТРЕРММОКОТЕСАКОК-ЕНК (350) МІУАУАПУТННВУВОКІТЕОДЕООКОІДкЕСАХУОКООВОМЕМОВУКЕНОМАВНІИСКОТМВУ (370) СБІАМАСЛУНОМТОВ КЕНРОБКТІКЗСУСКОАТАМЕНОСТІ ЕНБНОАНН ТМКМ (347). СІМАТАСУУНІМТОРІКОНРОЗКАМІЗЄСТОКРАТАМЕМНОС УТ НОНААНІ ЦІ ТМВУ (426) СУТІ 5ВІУНВУВСУТЗЕНРОСЕТ ЦІ КТАБКНАТКАНЗаОУТЕНеМААОМУБАРМНУ (408). СУБВОСОЕУЕУНККОВ - - - - - - -УРУОКВО - - - - ІКОУТЕУЕВІМЕСАМАА (428) СМІВСОСЕУЕІТЯКЕАОКЕМНКОУСЬУСООАОМРІІКАСМОІТКУАОРІОВАВАД (405) СМІВСССЕУЕТИККАОКЕН- -УЕУУРОСВСОВКУІВАСЕОРТКІРЕРІРТАРАА (423) СМПВСОСЕУЕІНКВАОСЕНКОУЄТУУРОБОМВІУКАССОАТКУЧУОРУРСАОДА (ав4) АМІК-------------------ЕБ5КМ-8------АТЕМАЗКЕСЕІТЕТОКЕЕ
Фіг. 36 ТАДНК-бордюр х Овердрайвх, Зрес. з Нврни -- РУРНаз промотор р Ши У о 7/4у, лового
І. ---- РуРав З' ТА її рОАВІ110110 в. 1й03 В. х ДІ РУРназ 3 МАК ої . й з огі й Др івам 3' ШТ, ділянка, яка знаходиться вище ірг те 4 5 тк Т-ДНК бордюр... шлоой "А ТНК бордюр р | СМММ промотор ТДНюбордюрї ОХ РАТ іре З ТЕ, ділянка, яка знаходиться вище гена бА АшОмЕ1 З те Залишок зруйнованого ірі
Фіг. 4а
РуУРНавє 3'МАК івам 3'Цте, ділянка, яка знаходиться вище рі 5" ШТ РуРпав З'ЮТА нішею. С С8ММУ промотор Н2г0905 м2 з й ше РАТ у Аа й АшОВРЗ'ОТА РуРбаз 5. ха ху ї й Залишок зруйнованого РЕ СОЗ промотор во роАВ 11011 Г- ІрЕЗ'ЦТе, ділянка, яка знаходиться ї ! 13812 Бр І Шк вище гена бА їй уч ТДНК бордюр Т-ДНК-бордюр | з Ме Т-ДНк-бордюр Овердранех вч а " тднкКбордюр.- А Зрес к. "огім Ше наший 7 Оп пер ЧиА
Фіг. 45 АТО, який ініціює Ір сОо5 іааМ 3 ТЕ, ділянка, яка знаходиться вище іргі У ТК І сзумУ промотор М2 анно ум в'цтв сект) чіт 00 РАТУЄ ре з Уа ДАШОК З ТЕ ха ссав -« Ф-- Залишок зруйнованого ірЕСОЗ ї ірЕ3 ТЕ, част р ділянка, яка знаходиться вище гена бА роАВ7309 о РДНКбордюр. А 22 т КВ? МАК УЗ ї 13227 Бр 7. тднкбордюр А х і Ї ДНК бордюр А Т-ДНнк бордюр В. и 4. у щ 7 с. ойМ Вресв ав Я опт Чид Фіг, 5
АШОКР23 3 ИТК МІ 017 промотор ; Ае-йв в ---2 562 Гпрорвг2 У2 я ді щу й кап у З. рис РУуРваз 5 ШТК ду їь. У | у є: М РУРНає промотор УЗ |. ррАВ7З318 паші шо 10247 Бр у ; Дт РУРНав промотор У2 Руна У МАН р нд зві / вив РуРпаз 5 ТА РуУРПпаз З3'ШТЕ мі Дельта-9-десатураза УЗ
Фіг. 6 Передбачувана ділянка поліА іааМ ачв2 ізаМ 3 ОТЕ, ділянка, яка знаходиться вище іргі 5 ТЕ. АШОКРЗ ЗТ. АТО, який ініціює ірі СО Іїпр8о52ха | пхефсікеофо у Ділянка промотору вище СХУМУ рурпав тв ОО -- ВФУ 0СВУМУ промотор У2 РуРнав промотор у? г Б - б5умм 5 тА - РАТ уб РУРНає З МАК х2 Й Ко АшШОвВРЯ З ТА м й 5. Залишок зруйнованого ірі СО5 Рувнав 3 ОТ У я ррАВ7319 Н хорі з те, лілянка, яка знаходиться вище 18713 Вр І я. КЕ: Я З тДнКбордюрА Дельта-9-десатураза УЗ ЦІ її 1 ТДНК-бордюр А РуРвав 5 ТА 7, ЙО ттднкбордюр А РуРйав промотору? М, і ; хом анВі об сито Вер кв? МАА мЗ Щ ль опт ТДнЕбордюрВ А Овердрайв Брест
Фіг. 7 аш4 Термінатор транскрипції ТІ гав х Термінатор транскрипції Т2 тв с М я До ; "Ве. . РуУРвав промотор МЗ Точка початку реплікації РОС у " й 4 роАВ7320 ІА. Рурвпав 5 Те с 6058 Бр з. Ттсромоюр ооо 0 се 0 1пОФо82 2 аш2 / ет АШОВЕ23 З'ШТЕ хм1
Фіг. 8 ачцв "Перелбачувана ділянка поліА ізаМ АшШОРЕ23 3 00 ізам У ОТЕ, ділянка, яка знаходиться вище ірсі 5' Ілроор52 ци пу ди АТО, який ініціює ірі РуРназ 5' " а пра як - Ділянка промотору вище СХУМУ ря і чу . с С5УММ промотор РуРнав промотор М 5. СеУММ 5 й Я РАТ і АШшОКЕ1 з ТК ї роАВв732 | ! ас Й 14524 : Залишок зруйнованого ірг і ду і а, яка знаходиться ВИЩе М Ток отв для яазнл» КВ? МАК ; ДУ тДднюбордюр ва У 7 х. ТДНК бордюр
Т.ДНК бордюр Я, у. й Овердраає х Т-ДНК-бордюр Е ог т
Фіг. 9
РУРпаз З'МАК. осо швени. «РУРМав промотор РуРвав З'ЮТВ -
що. Я. РуРвав 5 Дельта-9-десатураза . ху і. н2І0905 . РОАВІ732 З - 9956 ІЙ РУРНаз 5" а г ї й в дИШОВЕ23 З ТК ра р РуРнав промотор Й вч аш.
ав. -е4ко са чі Кк хо Термінатор транскрипції 12 пов рис
Фіг. 10 ацв2 Передбачувана ділянка поліА ізам АшОмЕ23 З'ЛК м - іваМ 3 ТЕ, ділянка, яка знаходиться вище ірі і 5 ТЕ Н20903 м2 : г. АТО, який ініціює ірї СО5 РуРнав 5 ТК й ; в ДИ | Ділянка промотору више СЗХЗУМУ РУРНаз промотор. У2 -фь у |... СВММУ промотор У2 РН щі -бвмМУ в ут й РАТУВ РурРпав 3'МАК х2.. " АшОКЕ1 З иТК ма х Залишок зруйнованого ір; СО5 РуРнав 3 ШТК м рОАВ?З32 і; ірг 3 ТЕ, ділянка, яка знаходиться више 18422 К гена бА Дельта-9-десатураза МУ ДО пДНнісбордюр А що "Т-ДНК бордюр. А РуРпаз 5 ТА т М стоднкбордюрД РуРпає промотор У2 у й-- і й ой анві ця -- 000 :Ой Вер ЕВ? МАК УЗ --2- | огіт Т-ДНК-бордюр. В В МА Овердрайв Врест
Фіг. 11 ані Термінатор транскрипції ТІ пав і Термінатор транскрипції Т2 пав | з - диня рлЛаАЙ Ше Р Фу / Рурпаз промотор.- УЗ Точка початку реплікації РОС ЖИ е І ррАВ7325 ї 4 67 Ь ї ї ит» ! зу РмРіав 5 ТА ; а | у є сн « Т7 промотор й 7 мив НІО905 у2 ашо ни АШшОКЕ23 З' иТЕ м1
Фіг. 12 ачв2 Передбачувана ділянка поліА ізаМ АШОВЕ23 ЗАМ АТО, який ініціює ірї СО5 Нг0905 у2 . | - | Ділянка промотору вище СЗХУМУ РуРназ 5 ТА ДА ш-е 00 СУММУ промотор у? ; щі 7. С8МММ Б'ШТе Ж чи РУРНав промов У2 М Дуо РАТУЄ / /АшОКЕ1 З ТА ма акві 7 Залишок зруйнованого ірЕ СО рРОАВ?326 7 ірЕ Ки ТЕ, ділянка, яка знаходиться вище Що 14233 рр Й гена бА ВВ? МАК УЗ Х ж ТДНКбордюр Т-ДНЕ-бордюр тднкбордюр В 7 ТДНК бордюр Овердрай ж огу Врест в ж ог Кер опт чНА
Фіг. ІЗ
Залишок 3-ИТЕК РуРНах | ! АшОВЕ23 З ИТЕ хм1 і сну! ст, / ашо Депльта-9-дасатураза "За й ь 7 промотор о з й т ювуа у й У "Капв РуРпаз 5 ТВ роАВ7327 на 6109 Бр іч й і Точка початку ч ДЩЕ-- реплікації РОС РуРНав промото УЗ - й А с й Р ПРМЙЕе--ї -К Ж. термінатор транскрипції Т2 ппВ х " Термінатор транскрипції ТІ тав х аш1
Фіг. 14 ацво2 Передбачувана ділянка поліА ізаМ АЮОоОБЕ2ЗЗТВМ івам 3 ТЕ, ділянка, яка знаходиться вище ірсі У ТЕ Дельта-9-десатураза УЗ рН! і шеринни Залишок зруйнованого ізн СО а ри щі фр. 00000 Ділянка промотору вище СЗХМУМУ РуРназ 5" ут Ху ч Шл шк С8ЗМІМУ промотор х2 РУРНаз промотор 2. х З. Свумм б те Ї, / Во РАте її в.
ї. АЮОРЕ1 З ТЕ ча і ррАВ7328 . акв1 7 ї Залишок зруйнованого іре СО у 14 З 7 ? Бр Н . іре З ТЕ. ділянка, яка знаходиться вище нн чи , "гена бА вв? МАВ хз М Йо тоднюбордюр Д
Т.ДНКбордюр В де 7 у ТДНК бордюр д Овердрайв І, річ й Т-ДНК-бордюр -Д - ще . Бресї "оця як оп : "Ой Кер огіт НМА
Фіг. 15
Залишок 3-ОТЕ. РУРБав АшОвг23 З' ТЕ мі нні у пп, -аш2 ж реч Марео5 м «й - Б. 7 промотор Й й з щ. Рурнав 5 МТК роАВ?329 і! 6136 Бр яй У ДИ 000 реплікації РОС РуУРназ промотор УЗ в. тя щ ст о пр р я що д- Ж термінатор транскрипції Т2 пав Х "Термінатор транскрипції ТІ пов ух ашл1
Фіг. 16 Передбачувана ділянка поліА ізаМ ацв2г АШОЕЕ23 ЗТ м - іааМ У ТЕ, ділянка, яка знаходиться вище іргі У ОТ мМареоз ма ри Гру вння АТО, який ініціює ірі СО5 і й р Щ, з, я Ділянка промотору вище СХЗМУМУ РуРназ 5" тку чо Сл --Об8МММ леомотор М2 РуРрав промотор 2 Мом о ОзУМу 5 тв / / , Меч / АШОРЕ1 З ТА ма Ш рОодВвТ330 ачві 7 й Залишок зруйнованого ірї СО 14602 Бр ПО. рез ТВ ділянка, яка знаходиться вище М де " гена бА КВ? МАК УЗ 5 (3 лднкбордюр А ТДНКбордюв В Ди / тднюбордюр А Овердрайе щ й ТДНкбордюр.ї Д Брест ши оопм і Оггі Кер І от ІА
Фіг. 17
Передбачувана ділянка поліА ізаМ . іззму ШТЕ, ділянка, яка знаходиться вище ірсі У ТЕ ВВ7МАКУЗ 000, - АТО, який ініціює іріСО5 Т-ДНК бордюр В. рай Й ; Ше Мн Ділянка промотору вище СЗУМУ Овердрайв у, є ще. М : й СеММУ промотор У? Зресв и чу еф сБУММ 5 тв й Х У о РАте Я і АШОВРІ1З'иТА мі І рОоАВБ7331 й , 10915 рр : Ше Залишок зруйнованого ірі СО У ) г ще : ' ділянка, яка знаходиться вище з о ірі 3 Те, тена 67. Ф м ТДНЮбордюр /Д ІА че. А пив, ій Т-ДНк-бордюр. Дд оптових і ки ти Т-ДНК. бордюр А Н І Ге Огі Кер о
Фіг. 18 154 » е 1 З т.к ; . їн з ФО . Ф
: . 1 .
КЕ . КЯ ї іі е Ех БЕ 9 в. їх яри : сад Сай ст ж Н « - Ж 7 ц Ф і
Е; . я "ее т 5 г - М с о) Га г Всі пари г я й 8 ом 7 Тикеу-Кгатег «055 о іс) Конструкція
Фіг. 19
9 7 - ІЧ 8 5 с Я . з . ; й 2, о 7 и : ' І " - в І , : Ав й ; -4р» і ' «акт» . і іні г 4 я ' т- го с Ї чі М : о Мр рн НЕ а ЕВЕ Е см «о -ч « с со ТиКеу-Кгатег ті бро 0.05 - 0 є І Конструкція Фіг, 20
3.5 і 3- ера Те 4 , . М о о 25 У і І с " е м у 5 2 У ф Н о
1.5 з: - -р «ее в 1 : ! ' " 4 " е
0.5 г : ЕЕ а т ї з 2 ТІ щі ІВ оо т «і їТ / Токеу-Кгатег Конструкція
Фіг. 21 е -
4 . , з а . м ШЕ 5-й - З і . ай ч. а щі. т Оо2 Я і во . ' і
1 . У і а . е
Мк. ль БАН ИЬ ИНА (о щ- Е ; « Е з 5 5 в Всі пари Ще сою я 00 Тикеу-Кгатег 7 Я чу 005 Конструкція
Фіг. 22
0.5 ІДесатураза є н2 Е Гл х 04 5 т Е ни є кн і-й я 03 З її п Е о2 ї Е и Е ї І Її М : ї 5 0 5 г: Т я 8 о дл в ше) 2 25 Е х 077720 25 29 32 39 41 Кількість днів після запилення
Фіг. 23
UAA201300808A 2010-06-24 2011-06-24 Спосіб зменшення вмісту насичених жирних кислот UA115302C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US35831410P 2010-06-24 2010-06-24
PCT/US2011/041897 WO2011163632A2 (en) 2010-06-24 2011-06-24 Lowering saturated fatty acid content of plant seeds

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA115302C2 true UA115302C2 (uk) 2017-10-25

Family

ID=45372139

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201300808A UA115302C2 (uk) 2010-06-24 2011-06-24 Спосіб зменшення вмісту насичених жирних кислот

Country Status (20)

Country Link
US (1) US20110302672A1 (uk)
EP (3) EP2862930B1 (uk)
JP (5) JP6096114B2 (uk)
KR (3) KR20180008885A (uk)
CN (3) CN103068986B (uk)
AR (1) AR081303A1 (uk)
AU (1) AU2011270652B2 (uk)
BR (1) BR112012033112A2 (uk)
CA (3) CA2999335C (uk)
CL (5) CL2012003665A1 (uk)
DK (3) DK2862930T3 (uk)
EA (1) EA029904B1 (uk)
ES (3) ES2623454T3 (uk)
IL (3) IL223438A (uk)
MX (3) MX338726B (uk)
NZ (3) NZ700902A (uk)
TW (4) TW201634696A (uk)
UA (1) UA115302C2 (uk)
WO (1) WO2011163632A2 (uk)
ZA (1) ZA201209083B (uk)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9617555B2 (en) 2004-10-08 2017-04-11 Dow Agrosciences Llc Generation of transgenic canola with low or no saturated fatty acids
BR102012019434B1 (pt) 2011-07-26 2021-11-09 Dow Agrosciences Llc Métodos de controle de pestes, de insetos, molécula e sequência de dna diagnóstica para o evento de soja 9582.814.19.1
BR102012019436B8 (pt) * 2011-07-26 2022-10-11 Dow Agrosciences Llc Método de detecção do evento de soja pdab9582.814.19.1
BR112017011810A2 (pt) * 2014-12-19 2018-02-27 Dow Agrosciences Llc geração de canola transgênica com baixo ou sem ácidos graxos saturados
CN106755017A (zh) * 2017-01-09 2017-05-31 程佳祎 一种纳豆激酶的转基因方法
CN109880849B (zh) * 2019-01-03 2023-04-11 四川大学 靶向肿瘤相关巨噬细胞的GHOST-shRNA表达载体复合物及其应用
CN111560394A (zh) * 2019-12-30 2020-08-21 海南大学 一种利用种子荧光快速鉴定转基因拟南芥的方法
KR102566555B1 (ko) * 2020-05-20 2023-08-14 한국화학연구원 델타-9-지방산불포화 효소를 암호화 하는 유전자 및 이의 용도
EP4222167A1 (en) 2020-09-30 2023-08-09 Nobell Foods, Inc. Recombinant milk proteins and food compositions comprising the same
US10947552B1 (en) 2020-09-30 2021-03-16 Alpine Roads, Inc. Recombinant fusion proteins for producing milk proteins in plants
US10894812B1 (en) 2020-09-30 2021-01-19 Alpine Roads, Inc. Recombinant milk proteins
KR20230046412A (ko) 2021-09-30 2023-04-06 세종대학교산학협력단 종자 내 포화지방산 함량 증가용 조성물 및 방법
CN115807014A (zh) * 2022-07-01 2023-03-17 西南大学 桑蚕脂肪酸脱氢酶Bmdesat5的应用

Family Cites Families (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5504200A (en) 1983-04-15 1996-04-02 Mycogen Plant Science, Inc. Plant gene expression
US5380831A (en) 1986-04-04 1995-01-10 Mycogen Plant Science, Inc. Synthetic insecticidal crystal protein gene
US5188958A (en) 1986-05-29 1993-02-23 Calgene, Inc. Transformation and foreign gene expression in brassica species
NZ221259A (en) 1986-07-31 1990-05-28 Calgene Inc Seed specific transcriptional regulation
US5004863B2 (en) 1986-12-03 2000-10-17 Agracetus Genetic engineering of cotton plants and lines
DE3784860D1 (de) 1986-12-05 1993-04-22 Ciba Geigy Ag Verbessertes verfahren zur transformation von pflanzlichen protoplasten.
US5416011A (en) 1988-07-22 1995-05-16 Monsanto Company Method for soybean transformation and regeneration
US7705215B1 (en) 1990-04-17 2010-04-27 Dekalb Genetics Corporation Methods and compositions for the production of stably transformed, fertile monocot plants and cells thereof
US5550318A (en) 1990-04-17 1996-08-27 Dekalb Genetics Corporation Methods and compositions for the production of stably transformed, fertile monocot plants and cells thereof
HU220773B1 (hu) 1990-01-22 2002-05-28 Dekalb Genetics Corporation Eljárás termő transzgenikus kukoricanövények előállítására
US5484956A (en) 1990-01-22 1996-01-16 Dekalb Genetics Corporation Fertile transgenic Zea mays plant comprising heterologous DNA encoding Bacillus thuringiensis endotoxin
US7037692B1 (en) 1990-03-16 2006-05-02 Calgene, Inc. Plant desaturases compositions and uses
US6403865B1 (en) 1990-08-24 2002-06-11 Syngenta Investment Corp. Method of producing transgenic maize using direct transformation of commercially important genotypes
US5384253A (en) 1990-12-28 1995-01-24 Dekalb Genetics Corporation Genetic transformation of maize cells by electroporation of cells pretreated with pectin degrading enzymes
US5518908A (en) 1991-09-23 1996-05-21 Monsanto Company Method of controlling insects
AU673994B2 (en) * 1992-03-13 1996-12-05 Agrigenetics, Inc. Modification of vegetable oil with desaturase
EP0604662B1 (en) 1992-07-07 2008-06-18 Japan Tobacco Inc. Method of transforming monocotyledon
US6166302A (en) 1995-10-13 2000-12-26 Dow Agrosciences Llc Modified Bacillus thuringiensis gene for lepidopteran control in plants
US5981840A (en) 1997-01-24 1999-11-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods for agrobacterium-mediated transformation
AR023301A1 (es) * 1998-03-30 2002-09-04 Dow Agrosciences Llc Metodo para modificar gencticamente una planta para que la misma produzca una semilla vegetal con niveles alterados de rcidos grasos saturados
WO2000011012A1 (en) 1998-08-24 2000-03-02 Rutgers, The State University Of New Jersey Synthetic fatty acid desaturase gene for expression in plants
CA2359868A1 (en) 1999-01-14 2000-07-20 Monsanto Company Soybean transformation method
US6784342B1 (en) 1999-08-04 2004-08-31 The University Of British Columbia Regulation of embryonic transcription in plants
CA2353077C (en) 1999-09-30 2012-03-20 Japan Tobacco Inc. Plant transformation vectors
US7253337B2 (en) 2000-05-24 2007-08-07 The University Of British Columbia Gene regulatory region that promotes early seed-specific transcription
WO2002008403A2 (en) 2000-07-25 2002-01-31 Calgene Llc Nucleic acid sequences encoding beta-ketoacyl-acp synthase and uses thereof
US7045683B2 (en) * 2001-05-04 2006-05-16 Abbott Laboratories Δ4-desaturase genes and uses thereof
JP2005185101A (ja) * 2002-05-30 2005-07-14 National Institute Of Agrobiological Sciences 植物の全長ｃＤＮＡおよびその利用
CA2450000A1 (en) * 2003-12-18 2005-06-18 Alberta Research Council Inc. Method of creating plants with reduced level of saturated fatty acid in seed oil
PT1766023E (pt) * 2004-06-04 2010-12-09 Fluxome Sciences As Células metabolicamente manipuladas para a produção de ácidos gordos poliinsaturados
MX2007004231A (es) * 2004-10-08 2007-06-14 Dow Agrosciences Llc Ciertas plantas con concentraciones de acidos grasos "no saturados" o saturados reducidos en semillas y aceite derivado de las semillas._.
US20080260933A1 (en) 2004-10-08 2008-10-23 Dow Agroscience Llc Certain Plants with "No Saturate" or Reduced Saturate Levels of Fatty Acids in Seeds, and Oil Derived from the Seeds
EP2562259B1 (en) * 2004-12-21 2016-07-06 Monsanto Technology LLC Transgenic plants with enhanced agronomic traits
WO2006076423A2 (en) * 2005-01-12 2006-07-20 Monsanto Technology, Llc Genes and uses for plant improvement
US20090070897A1 (en) * 2006-01-12 2009-03-12 Goldman Barry S Genes and uses for plant improvement
WO2007131720A1 (en) * 2006-05-11 2007-11-22 Cosmoferm B.V. Improved production of sphingoid bases using genetically engineered microbial strains
US8329994B2 (en) * 2008-10-14 2012-12-11 Monsanto Technology Llc Utilization of fatty acid desaturases from Hemiselmis spp

Also Published As

Publication number Publication date
JP2013534826A (ja) 2013-09-09
JP2016136957A (ja) 2016-08-04
EP2862930A1 (en) 2015-04-22
WO2011163632A3 (en) 2012-05-18
BR112012033112A2 (pt) 2015-09-08
CA2999335C (en) 2021-10-19
CL2016000902A1 (es) 2016-10-14
ES2568803T3 (es) 2016-05-04
CL2016000905A1 (es) 2016-12-09
MX338726B (es) 2016-04-28
AU2011270652B2 (en) 2015-10-01
TW201634695A (zh) 2016-10-01
CL2016000904A1 (es) 2016-12-09
DK2862930T3 (en) 2017-05-22
EP2585600B1 (en) 2016-02-03
CA2999347A1 (en) 2011-12-29
KR20180008884A (ko) 2018-01-24
EP2585600A2 (en) 2013-05-01
KR20130098282A (ko) 2013-09-04
CN105734067A (zh) 2016-07-06
IL244002A0 (en) 2016-04-21
JP6301381B2 (ja) 2018-03-28
JP2016171789A (ja) 2016-09-29
ZA201209083B (en) 2014-02-26
CN103068986A (zh) 2013-04-24
JP2016144456A (ja) 2016-08-12
IL244003A0 (en) 2016-04-21
JP2016136958A (ja) 2016-08-04
MX350491B (es) 2017-09-07
CN105755017A (zh) 2016-07-13
ES2620492T3 (es) 2017-06-28
EP2862931A1 (en) 2015-04-22
JP6186462B2 (ja) 2017-08-23
KR20180008885A (ko) 2018-01-24
JP6186463B2 (ja) 2017-08-23
EP2862931B1 (en) 2017-01-25
TW201634696A (zh) 2016-10-01
IL223438A (en) 2016-10-31
MX347113B (es) 2017-04-12
NZ700897A (en) 2015-10-30
EA029904B1 (ru) 2018-05-31
NZ603971A (en) 2015-06-26
TW201634694A (zh) 2016-10-01
CA2803098C (en) 2019-05-21
CA2999335A1 (en) 2011-12-29
NZ700902A (en) 2016-04-29
CL2012003665A1 (es) 2013-08-09
EP2862930B1 (en) 2017-02-08
CA2803098A1 (en) 2011-12-29
AU2011270652A1 (en) 2013-01-10
JP6096114B2 (ja) 2017-03-15
US20110302672A1 (en) 2011-12-08
CN103068986B (zh) 2017-03-29
ES2623454T3 (es) 2017-07-11
CL2016000903A1 (es) 2016-10-14
TW201634693A (zh) 2016-10-01
WO2011163632A2 (en) 2011-12-29
CA2999347C (en) 2020-04-14
EA201291332A1 (ru) 2013-05-30
DK2862931T3 (en) 2017-05-01
EP2585600A4 (en) 2013-12-25
DK2585600T3 (da) 2016-05-09
AR081303A1 (es) 2012-08-01
MX2012015301A (es) 2014-04-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA115302C2 (uk) Спосіб зменшення вмісту насичених жирних кислот
UA115768C2 (uk) Спосіб підвищення стійкості рослини до абіотичного стресу
Ma et al. A Gossypium hirsutum GDSL lipase/hydrolase gene (GhGLIP) appears to be involved in promoting seed growth in Arabidopsis
KR20120007038A (ko) 식물 ｓｎｆ１-관련 단백질 키나제 유전자
US20190367937A1 (en) Expression of a phosphate transporter for improving plant yield
CN110612022B (zh) 产生碳水化合物的植物材料
CN103232536B (zh) Soar1蛋白及其编码基因在调控植物对aba耐受性中的应用
CN114615881A (zh) 产生甘油三酯的非人类生物体
JPWO2008136345A1 (ja) 植物の鉄欠乏耐性を向上させるポリペプチドおよびその利用
US20170145433A1 (en) Lowering saturated fatty acid content of plant seeds
CN114524865B (zh) 一种提高玉米开花期抗旱性的dna分子及其相关生物材料与应用
AU2017202568A1 (en) Lowering saturated fatty acid content of plant seeds
US20220025391A1 (en) Improved method for the production of high levels of pufa in plants
US20210317467A1 (en) Improved method for the production of high levels of pufa in plants
KR20230154995A (ko) 벼 수확량 관련 단백질과 생체재료 및 양자의 벼 수확량 향상에서의 응용
CN103242437B (zh) Soar1蛋白及其编码基因在调控植物生长发育中的应用
CN118086332A (zh) 一种小麦种子休眠基因TaPer12-3A及其应用
Kim et al. Brassica rapa Sec14-like protein gene BrPATL4 determines the genetic architecture of seed size and shape
Cao Functional analysis of phosphate starvation-regulated protein phosphatase and a general regulation factor (14-3-3) in plants
TW201300534A (zh) 降低植物種子中飽和脂肪酸含量之技術