EA029904B1 - Уменьшение содержания насыщенных жирных кислот в семенах растений - Google Patents

Abstract

Композиции и способы, обеспечивающие генетическое кодирование и экспрессию новой дельта-9-десатуразы в растительных клетках. В некоторых воплощениях преимущество способов экспрессии нуклеиновых кислот в растительной клетке заключается в применении активности фермента дельта-9-десатуразы, приводящей к уменьшению процентного содержания насыщенных жирных кислот в семенах растения и к сопутствующему увеличению содержания ω-7 жирных кислот. В других воплощениях аминокислотные последовательности обладают активностью дельта-9-десатуразы. Способы могут включать в себя экспрессию дельта-9-десатуразы в растительных клетках, растительных материалах и целых растениях с целью увеличения количества необычных жирных кислот в целых растениях, семенах растений и растительных материалах, таких как семена.

Description

Настоящая заявка представляет собой частичное продолжение одновременно рассматриваемой заявки υδδΝ 11/576750, которая представляет собой перевод в национальную фазу международной патентной заявки РСТ № РСТ/υδ 05/36052, поданной 7 октября 2005, предназначенной для Соединенных Штатов Америки и опубликованной на английском языке в виде международной публикации РСТ № \7О 2006/042049 А2 20 апреля 2006. Международная патентная заявка РСТ № РСТ/υδ 05/36052 представляет собой продолжение предварительной патентной заявки США № 60/617532, поданной 8 октября 2004. Настоящая заявка также является продолжением предварительной патентной заявки США № 61/358314, поданной 24 июня 2010.

Область техники

Некоторые воплощения в основном относятся к конкретным ферментам дельта-9-десатуразам, нуклеиновым кислотам, кодирующим указанные ферменты, а также к способам их экспрессии в растительной клетке. Некоторые воплощения относятся к применению активности конкретных ферментов дельта9-десатураз с целью уменьшения процентного состава насыщенных жирных кислот в растительных материалах (например, в семенах) и увеличения процентного состава ω-7 жирных кислот. В настоящем документе также раскрываются растения и растительные материалы, полученные с помощью способов, раскрытых в конкретных воплощениях.

Уровень техники

Растительные масла постепенно заменяют животные масла и жиры как основной источник поглощаемого жира в рационе. Однако в большинстве развитых стран потребление насыщенных жиров составляет примерно от 15% до 20% от общего потребления калорий. Министерство сельского хозяйства США в последнее время рекомендует для достижения здорового образа жизни снизить уровень насыщенных жиров менее чем до 10% от ежедневного потребления калорий. Чтобы обеспечить информированность потребителя, руководства по маркированию, выпускаемые в настоящее время υδΌΑ, присваивают продуктам, в которых общее содержание насыщенных жирных кислот составляет менее 1,0 г на 14 г, маркировку "низкое содержание насыщенных жирных кислот" ("1о^-ка!"), а продуктам, в которых общее содержание насыщенных жирных кислот составляет менее 0,5 г на 14 г, маркировку "отсутствие насыщенных жирных кислот" ("по-ка!"). Это означает, что растительные масла должны содержать менее 7 и 3,5% насыщенных жирных кислот для получения маркировки "1о^-ка!" или "по-ка!" соответственно. Со времени опубликования указанных руководств произошел скачок в потребительском спросе на "1о\\ка!" и "по-ка!" масла. В настоящее время указанный спрос удовлетворяется, в основном, маслом канолы и, в гораздо меньшей степени, подсолнечным и сафлоровым маслами.

В отличие от насыщенных и транс-жиров ненасыщенные жиры (мононенасыщенные и полиненасыщенные) являются полезными (особенно при умеренном потреблении). Насыщенные жиры и трансжиры вызывают повышение уровня нежелательного ЬПЬ-холестерина в крови. Присутствующий в пище холестерин также приводит к повышению уровня ЬПЬ-холестерина и может вносить вклад в развитие болезни сердца, даже если уровень БОБ не повышается. Таким образом, для соблюдения здоровой диеты рекомендуют выбирать пищу с низким уровнем насыщенного жира, транс-жира и холестерина.

Характеристики масел растительного или животного происхождения преимущественно определяются числом атомов углерода и водорода в молекуле масла, а также числом и положением двойных связей в цепи жирной кислоты. Большая часть растительных масел содержит разные количества пальмитиновой (16:0), стеариновой (18:0), олеиновой (18:1), линолевой (18:2) и линоленовой (18:3) жирных кислот. Традиционно пальмитиновую и стеариновую кислоты называют "насыщенные", поскольку их углеродные цепи насыщены атомами водорода и, следовательно, не содержат двойные связи; они содержат максимально возможное число атомов водорода. Жирнокислотные цепи олеиновой, линолевой и линоленовой кислот содержат 18 атомов углерода и одну, две или три двойные связи соответственно. Олеиновую кислоту обычно рассматривают как мононенасыщенную жирную кислоту, тогда как линолевая и линоленовая кислоты представляют собой полиненасыщенные жирные кислоты. В соответствии с υ.δ.Ό.Α. маркировка масляных продуктов "по ка!" относится к продуктам, в которых общее содержание насыщенных жирных кислот составляет менее 3,5 мас.% (по отношению к общей массе жирных кислот).

Масло канолы имеет самый низкий уровень насыщенных жирных кислот среди всех растительных масел. "Канолу" относят к рапсовому семени (Втакыеа), в котором содержание эруковой кислоты (С22:1) составляет максимум 2% по отношению к общей массе жирных кислот в семени (предпочтительно максимум 0,5 мас.%, наиболее предпочтительно практически 0 мас.%) и которое дает после измельчения и воздушной сушки муку, содержащую менее 30 мкмоль/г обезжиренной (не содержащей масла) муки. Указанные типы рапсового семени отличаются по пригодности к употреблению в пищу от более традиционных разновидностей.

Предполагают, что в масличном семени синтез жирных кислот происходит преимущественно в пластидах. Основным продуктом жирнокислотного синтеза является пальмитат (16:0), который эффективно удлиняется с получением стеарата (18:0). Все еще оставаясь в пластиде, насыщенные жирные кислоты могут затем подвергаться десатурации под действием фермента, известного как ацил-АСР дельта9-десатураза, с введением одной или нескольких углерод-углеродных двойных связей. А именно стеарат

- 1 029904

может подвергаться быстрой десатурации под действием пластидного фермента дельта-9-десатуразы с получением олеата (18:1). Фактически пальмитат также может подвергаться десатурации с получением пальмитоолеата (16:1) под действием пластидной дельта-9-десатуразы, однако в большинстве растительных масел данная жирная кислота присутствует только в следовых количествах (0-0,2%). Таким образом, основными продуктами жирнокислотного синтеза в пластиде являются пальмитат, стеарат и олеат. В большинстве масел основной синтезированной жирной кислотой является олеат, поскольку насыщенные жирные кислоты присутствуют в гораздо более низких пропорциях.

Синтезированные жирные кислоты экспортируются из пластиды в цитоплазму. Последующая десатурация растительных жирных кислот в цитоплазме, по-видимому, ограничивается олеатом, который может подвергаться десатурации с получением линолеата (18:2) и линолената (18:3) под действием микросомальных десатураз, действующих на олеоильные или линолеоильные субстраты, образующие сложные эфиры с фосфатидилхолином (РС). Кроме того, в зависимости от растения, олеат может подвергаться дополнительной модификации путем элонгации (до 20:1, 22:1 и/или 24:1), или путем добавления функциональных групп. Указанные жирные кислоты наряду с насыщенными жирными кислотами, пальмитатом и стеаратом, затем используются для синтеза триглицеридов, входящих в состав эндоретикулярных мембран.

Растительный фермент ацил-АСР дельта-9-десатураза является растворимым. Он присутствует в строме пластиды и использует в качестве субстратов синтезированные жирные кислоты, образующие эфиры с АСР, преимущественно стеарил-АСР. Данный фермент отличается от других дельта-9десатураз, которые находятся в мембране эндоплазматического ретикулума (ЕР, или микросом), используют в качестве субстрата жирные кислоты, образующие эфиры с Со-А, и обеспечивают десатурацию обоих насыщенных жирных кислот, пальмитата и стеарата. Патенты США 5723595 и 6706950 описывают растительную десатуразу.

Дрожжевой ген дельта-9-десатуразы выделяют из Зассйатотусск есгсуыас. клонируют и секвенируют. З!иксу с! а1. (1989) 1. ΒίοΙ. Сйст. 264: 16537- 44; З!иксу с! а1. (1990) 1. ΒίοΙ. Сйст. 265:20144-9. Указанный дрожжевой ген вводят в ткань листа табака (Ро1а8Йсок с! а1. (1991) РАЗЕВ 1. 5:А1157; Ро1а§йок с! а1. (1992) Р1ап! РЬу8ю1. 100:894-901) и экспрессируют в данной ткани. Кроме того, этот дрожжевой ген экспрессируют в томате. См. \Уапд с! а1. (1996) 1. Адпс. Рооб Сйст. 44:3399-402; апб \Уапд с! а1. (2001) РЬу!осЬст181ту 58:227-32. Хотя при использовании указанного дрожжевого гена дельта-9-десатуразы и для табака и для томата описано некоторое увеличение уровня определенных ненасыщенных жирных кислот и некоторое уменьшение уровня определенных насыщенных жирных кислот, табак и томат не являются явно масличными культурами. Данный дрожжевой ген также вводят в Втаккюа парик. Патент США 5777201.

Другую грибковую ацил-СоА дельта-9-десатуразу из АкрстдШик шби1ап8 вводят в канолу, чтобы достичь пониженных уровней насыщенных жирных кислот в масле, получаемом из семян. Публикация патентной заявки США ИЗ 2008/0260933 А1. Ацил-СоА дельта-9-десатураза А. шби1ап8 обеспечивает в большей степени уменьшение уровня стеарата (61-90%), чем имеющихся в избытке пальмитатсодержащих жирных кислот (36-49%), в масле, получаемом из семян.

Описание изобретения

В настоящем описании раскрываются новые грибковые ферменты дельта-9-десатуразы; нуклеиновые кислоты, содержащие по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, кодирующую такую десатуразу; а также растения, растительные материалы (например, семена), части растений и растительные товарные продукты, содержащие перечисленные выше элементы. Аспекты некоторых воплощений иллюстрируются с использованием грибковых ферментов дельта-9-десатураз, выделенных из МадпароИйс дпкса, ЕсрФкрЬаспа побогит и НсПсоусгра /са. Некоторые примеры включают в себя применение нативных и синтетических дельта-9-десатураз, для которых предпочтительным субстратом является пальмитиновая или стеариновая кислота.

Некоторые воплощения включают в себя выделенную молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует фермент дельта-9-десатуразу, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из ЗЕО ГО N0: 12, ЗЕО ГО N0: 13, ЗЕО ГО N0: 14, ЗЕО ГО N0: 50, ЗЕО ГО N0: 51, ЗЕО ГО N0: 52, ЗЕО ГО N0: 72 и ЗЕО ГО N0: 73. В конкретных примерах молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательность, по меньшей мере на 60% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из ЗЕО ГО N0: 3, ЗЕО ГО N0: 4, ЗЕО ГО N0: 5, ЗЕО ГО N0: 8, ЗЕО ГО N0: 9, ЗЕО ГО N0: 10, ЗЕО ГО N0: 11, ЗЕО ГО N0: 15, ЗЕО ГО N0: 16, ЗЕО ГО N0: 17, ЗЕО ГО N0: 44, ЗЕО ГО N0: 45, ЗЕО ГО N0: 48 и ЗЕО ГО N0: 49. Указанные и другие воплощения могут включать в себя выделенный полипептид дельта-9-десатуразы, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из ЗЕО ГО N0: 12, ЗЕО ГО N0: 13, ЗЕО ГО N0: 14, ЗЕО ГО N0: 50, ЗЕО ГО N0: 51, ЗЕО ГО N0: 52, ЗЕО ГО N0: 72 и ЗЕО ГО N0: 73.

В настоящем описании также раскрываются способы экспрессии по меньшей мере одной из вышеупомянутых последовательностей нуклеиновых кислот и/или полипептидов в растительной клетке. Преимущество конкретных воплощений заключается в применении активности фермента дельта-9- 2 029904

десатуразы, приводящей к уменьшению процентного содержания насыщенных жирных кислот в растении, растительном материале (например, в семени) и/или части растения, включающей в себя растительную клетку, и/или в растительном товарном продукте, полученном из одного из перечисленных выше элементов. При этом в некоторых воплощениях в растении, растительном материале, части растения и/или растительном товарном продукте может увеличиваться содержание ω-7 жирных кислот.

Некоторые воплощения включают в себя способ уменьшения количества насыщенных жирных кислот в растении, растительном материале, части растения и/или растительном товарном продукте, где указанный способ включает в себя трансформацию растительной клетки молекулой нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид дельта-9-десатуразы настоящего изобретения, с целью уменьшения количества насыщенных жирных кислот в клетке. Некоторые воплощения включают в себя способ получения рекомбинантного растения, которое содержит более низкие количества насыщенных жирных кислот, чем растение дикого типа того же вида. Такой способ может включать в себя трансформацию растительного материала (или растительной клетки) молекулой нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид дельта9-десатуразы настоящего изобретения, и культивирование трансформированного растительного материала (или растительной клетки) с получением растения. В конкретных примерах растительную клетку и/или растительный материал АгаЫбор818 8р. трансформируют молекулой нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид дельта-9-десатуразы настоящего изобретения.

Вышеописанные и другие признаки станут более очевидными из нижеследующего подробного описания некоторых воплощений, которое приводится со ссылкой на сопровождающие чертежи.

Краткое описание чертежей

На фиг. 1 показан схематический филогенетический анализ разных белковых последовательностей грибковой десатуразы. Полноразмерные белковые последовательности изображенных десатураз выравнивают с помощью С1н81а1Х и демонстрируют с помощью МЕСА.

На фиг. 2(а-б) показано выравнивание генных последовательностей грибковой дельта-9-десатуразы. Заглавные буквы обозначают консервативные нуклеотиды в данном выравнивании. Заштрихованные буквы обозначают идентичные нуклеотиды в данном выравнивании.

На фиг. 3(а-Ь) приведено выравнивание полипептидов грибковой дельта-9-десатуразы.

На фиг. 4-18 показаны плазмидные карты типичных плазмид, содержащих нуклеотидные последовательности, кодирующие полипептид грибковой дельта-9-десатуразы, которые можно использовать в некоторых воплощениях. На фиг. 4, в частности, показаны плазмидные карты типичных плазмид, содержащих нуклеотидные последовательности, кодирующие ΕηΌ9Όδ-2 (фиг. 4а; ρΌ АВ 110110) и ΗζΌ9Όδ (фиг. 4Ь; ρΌΑΒ110112), которые дополнительно содержат 5'-иТК РуРйа8 и З'-ИТК РуРйа8.

На фиг. 19 приведены результаты, демонстрирующие общее содержание насыщенных жирных кислот (%РАМЕ) в типовых семенах Т₂ АгаЫбор818, полученных от растений, трансформированных некоторыми типичными генными последовательностями грибковой дельта-9-десатуразы.

На фиг. 20 приведены результаты, демонстрирующие содержание пальмитиновой кислоты (С16:0) (%РАМЕ) в типовых семенах Т₂ АгаЫбор818, полученных от растений, трансформированных некоторыми типичными генными последовательностями грибковой дельта-9-десатуразы.

На фиг. 21 приведены результаты, демонстрирующие содержание стеариновой кислоты (С 18:0) (%РАМЕ) в типовых семенах Т₂ АгаЫбор818, полученных от растений, трансформированных некоторыми типичными генными последовательностями грибковой дельта-9-десатуразы.

На фиг. 22 приведены результаты, демонстрирующие содержание пальмитолеиновой кислоты (С16:1) (%РАМЕ) в типовых семенах Т₂ АгаЫбор818, полученных от растений, трансформированных некоторыми типичными генными последовательностями грибковой дельта-9-десатуразы.

На фиг. 23 приведено графическое изображение накопления транскриптов мРНК ΗζΏ9Όδ и ΕηΌ9Όδ-2 (по сравнению с транскриптами АпО9П§) в развивающихся семенах растений канолы, трансформированных рОАВ7319 (АпЭ9П§ ν3 и ΕηΌ9Όδ-2 ν2) или рОАВ7324 (АпЭ9П§ ν3 и ΗζΌ9Όδ ν2). Методом количественной ОТ-ПЦР определяют ААС1 каждого гена по сравнению с уровнем транскрипции актина, после чего количество транскрипта ΗζΌ9Όδ и ΕηΌ9Όδ-2 нормализуют по уровню транскрипта АпО9П§ в каждом образце.

Список последовательностей

Нуклеотидные последовательности, перечисленные в прилагающемся списке последовательностей, показаны с использованием стандартных буквенных сокращенных обозначений нуклеотидных оснований, определенных в 37 С.Р.К. § 1.822. Показана только одна цепь каждой нуклеотидной последовательности, однако подразумевается, что комплементарная цепь включена в настоящее описание со ссылкой на показанную цепь. В прилагающемся списке последовательностей

ЗЕС ГО N0:1 описывает прямой праймер, используемый для ПЦР-амплификации фрагмента гена ацил-СоА дельта-9-десатуразы Ма^ароВЬе дп8еа (иногда называемой Μ§Ό9Όδ).

ЗЕО ГО N0:2 описывает обратный праймер, используемый для ПЦР-амплификации фрагмента гена ацил-СоА дельта-9-десатуразы М. дг18еа (иногда называемой М§0903).

ЗЕО ГО N0: 3 описывает типичный фрагмент гена ацил-СоА дельта-9-десатуразы М. §п8еа (иногда

- 3 029904

называемой Μ§Ό9Όδ). амплифицированный методом ПЦР.

8ЕО ГО N0: 4 описывает типичный клон Μ§Ό9Όδ. не содержащий интронов.

8Е0 ГО N0: 5 описывает типичную нуклеотидную последовательность, кодирующую первую ацилСоА дельта-9-десатуразу Ь-срЮ^рНаспа пойогит. иногда называемую ΕηΌ9Όδ-1.

8Е0 ГО N0: 6 и 7 описывают последовательности праймеров. подходящие для применения в некоторых воплощениях.

8Е0 ГО N0: 8 описывает типичную нуклеотидную последовательность. кодирующую вторую ацилСоА дельта-9-десатуразу Ь. пойогит. иногда называемую ΕηΌ9Όδ-2.

8Е0 ГО N0: 9 описывает кодирующий участок типового нативного гена дельта-9-десатуразы М. дпхса (обозначенный Μ§Ό9Όδ νΐ).

8Е0 ГО N0: 10 описывает кодирующий участок типового нативного гена дельта-9-десатуразы Нейсоуегра /еа (обозначенный ΗζΌ9Όδ νΐ).

8Е0 ГО N0: 11 описывает кодирующий участок типового нативного гена дельта-9-десатуразы (ΕηΌ9Όδ-2 ν1) Ь. пойогит.

8Е0 ГО N0: 12 описывает аминокислотную последовательность типовой нативной дельта-9десатуразы М. дпкеа (Μ§Ό9Όδ).

8Е0 ГО N0: 13 описывает аминокислотную последовательность типовой нативной дельта-9десатуразы Н. ζеа (ΗζΌ9Όδ).

8Е0 ГО N0: 14 описывает аминокислотную последовательность типовой нативной дельта-9десатуразы Ь. пойогит (ΕηΌ9Όδ-2).

8Е0 ГО N0: 15 описывает последовательность типового канола-оптимизированного гена дельта-9десатуразы М. дпкеа (Μ§Ό9Όδ ν2).

8Е0 ГО N0: 16 описывает последовательность типового канола-оптимизированного гена дельта-9десатуразы Н. ζеа (ΗζΌ9Όδ ν2).

8Е0 ГО N0: 17 описывает последовательность типового канола-оптимизированного гена дельта-9десатуразы Ь. пойогит (ЬпО9П§-2 ν2).

8Е0 ГО N0: 18-39 описывают последовательности праймеров и зондов. подходящие для применения в некоторых воплощениях.

8Е0 ГО N0: 40-43 описывают типовые альтернативные последовательности Козак. которые можно использовать для повышения экспрессии в некоторых воплощениях.

8Е0 ГО N0: 44 описывает последовательность другого типичного канола-оптимизированного гена дельта-9-десатуразы Ь. пойогит (ЬпО9П§-2 ν3).

8Е0 ГО N0: 45 описывает последовательность другого типичного канола-оптимизированного гена дельта-9-десатуразы Н. теа (ΗζΌ9Όδ ν3).

8Е0 ГО N0: 46 описывает аминокислотную последовательность маркера Μус.

8Е0 ГО N0: 47 описывает аминокислотную последовательность маркера НА.

8Е0 ГО N0: 48 описывает типичную нуклеотидную последовательность. кодирующую дельта-9десатуразу АкретдШик шйи1ап8. иногда называемую АпО9Э8 ν2.

8Е0 ГО N0: 49 описывает вторую типичную нуклеотидную последовательность. кодирующую дельта-9-десатуразу А. шйи1аи8. иногда называемую АпО9Э8 ν3.

8Е0 ГО N0: 50 описывает аминокислотную последовательность. кодируемую нуклеиновыми кислотами. описанными в 8Е0 ГО N0: 48-49 (АиЭ9П8).

8Е0 ГО N0: 51 описывает аминокислотную последовательность другой типичной десатуразы АиЭ9П8.

8Е0 ГО N0: 52 описывает аминокислотную последовательность типичной нативной дельта-9десатуразы (8с0ЬЕ1) Зассйатотусек сегеуыае.

8Е0 ГО N0:53-66 описывают плазмиды. подходящие для применения в некоторых воплощениях. 8Е0 ГО N0: 67-71 описывают некоторые регуляторные элементы нуклеиновых кислот. подходящие

для применения в некоторых воплощениях.

8Е0 ГО N0: 72 описывает 68 ^концевых остатков (1-68) типичной десатуразы АпО9Э8.

8Е0 ГО N0: 73 описывает 175 С-концевых остатков (281-455) типичной десатуразы АпО9Э8.

ЗЕЦ ГО N0: 74 описывает карту плазмиды рЭАВ110110.

ЗЕЦ ГО N0: 75 описывает карту плазмиды рЭАВ110112.

8Е0 ГО N0: 76 описывает типичную нуклеотидную последовательность. кодирующую типичную ацил-СоА дельта-9-десатуразу М. дйкеа. иногда называемую Μ§Ό9Όδ.

8Е0 ГО N0: 77 описывает аминокислотную последовательность. входящую в состав типичной нативной дельта-9-десатуразы Ь. пойогит с последовательностью ЗЕЦ ГО N0: 14.

8Е0 ГО N0: 78 описывает аминокислотную последовательность. входящую в состав типичной нативной дельта-9-десатуразы Н. ζеа с последовательностью 8ЕЦ ГО N0: 13.

Способ (способы) осуществления изобретения

I. Обзор некоторых воплощений

Авторы изобретения предварительно вводят грибковую ацил-СоА дельта-9-десатуразу АкретдШик

- 4 029904

шби1ап8 в канолу, чтобы достичь уменьшения уровня насыщенных жирных кислот в масле, полученном из семян. Публикация патентной заявки США И8 2008/0260933 А1. Дельта-9-десатураза А. шби1ап8 обеспечивает более высокую степень истощения получаемого из семян масла по стеарату (61-90%), чем по имеющимся в избытке пальмитат-содержащим жирным кислотам (36-49%). Таким образом, совместное введение дельта-9-десатуразы, которая преимущественно действует на пальмитат-содержащие насыщенные углеводороды, позволяет достичь уменьшения общего содержания насыщенных углеводородов путем дополнения избирательной по стеарату активности дельта-9-десатуразы А. шби1ап8. В некоторых воплощениях настоящего изобретения раскрываются полипептиды грибковой дельта-9-десатуразы с разной субстратной специфичностью. Конкретные воплощения включают в себя пальмитатспецифичную дельта-9-десатуразу (например, нативный грибковый фермент, раскрытый в данном документе, или его функциональный эквивалент; а также синтетический полипептид, предпочтительно использующий в качестве субстрата пальмитиновую кислоту).

Настоящее описание раскрывает молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептид дельта9-десатуразы, содержащие нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 60% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕЦ ГО N0: 3, 8ЕЦ ГО N0: 4, 8ЕЦ ГО N0: 5, 81Τ) ГО N0: 8, 81Т) ГО N0: 9, 81Τ) ГО N0: 10, 81Τ) ГО N0: 11, 81Τ) ГО N0: 15, 81Т) ГО N0: 16, 81Т) ГО N0: 17, 8ЕЦ ГО N0: 44, 8ЕЦ ГО N0: 45, 8ЕЦ ГО N0: 48 и 8ЕЦ ГО N0: 49. В некоторых воплощениях молекула нуклеиновой кислоты может дополнительно содержать генный регуляторный элемент, функционально связанный с последовательностью, кодирующей полипептид дельта-9-десатуразы. В конкретных воплощениях генный регуляторный элемент может представлять собой промотор фазеолина, 5'нетранслируемый участок фазеолина, 3'-нетранслируемый участок фазеолина, 3'-нетранслируемый участок 0КР1 АдтоЪас1етшт ШтсГасющ. промотор вируса мозаики жилок маниоки Саккауа усш Мо8а1е VIги8, участок присоединения матрикса РВ7 №соОапа 1аЪасит, Т-цепочечная бордюрная последовательность, промотор ЬГКС83 и промотор РАЕ 1.

Также раскрываются полипептиды дельта-9-десатуразы, содержащие аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 81Т) ГО N0: 12, 81Τ) ГО N0: 13, 81Τ) ГО N0: 14, 81Т) ГО N0: 50, 81Т) ГО N0: 52, 81Т) ГО N0: 72 и 81Т) ГО N0: 73, а также молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие такие полипептиды дельта-9десатуразы.

В некоторых воплощениях молекулы нуклеиновой кислоты и полипептиды дельта-9-десатуразы могут экспрессироваться в растительном материале, растительной клетке, растительной ткани или целом растении, с целью понижения количества насыщенных жирных кислот в растительном материале, растительных клетках, растительных тканях или целых растениях по отношению к количеству, наблюдаемому в растении дикого типа того же вида. Альтернативные варианты осуществления изобретения включают способы понижения количества насыщенных жирных кислот в растительном материале, растительной клетке, растительной ткани или целом растении. Такие способы могут включать трансформирование растительного материала, растительной клетки, растительной ткани или целого растения по меньшей мере одной из вышеупомянутых молекул нуклеиновой кислоты, так что количество насыщенных жирных кислот в указанных растительном материале, растительной клетке, растительной ткани или целом растении понижается. Частные варианты осуществления включают способы предпочтительного понижения количества пальмитиновой и/или стеариновой жирных кислот в растительном материале, растительной клетке, растительной ткани или целом растении.

Воплощения настоящего изобретения включают в себя способы уменьшения количества насыщенных жирных кислот в растительном материале, растительной клетке, растительной ткани, или в целом растении. Такие способы могут включать в себя трансформацию растительного материала, растительной клетки, растительной ткани, или целого растения по меньшей мере одной из вышеупомянутых молекул нуклеиновой кислоты, с целью уменьшения количества насыщенных жирных кислот в растительном материале, растительной клетке, растительной ткани, или в целом растении. Конкретные воплощения включают в себя способы избирательного уменьшения количества пальмитиновой и/или стеариновой жирной кислоты в растительном материале, растительной клетке, растительной ткани, или в целом растении.

Раскрытые здесь способы можно осуществлять, например, на растениях или на растительных материалах, полученных из растений (например, на растениях рода АгаЫбор818, или канола). Конкретное воплощение относится к способам получения или регенерации рекомбинантного растения, содержащего пониженные количества насыщенных жирных кислот по сравнению с растением дикого типа того же вида, где способы включают в себя трансформацию растительной клетки или растительного материала по меньшей мере одной из вышеупомянутых молекул нуклеиновой кислоты; и культивирование трансформированного растительного материала с получением растения. Также раскрываются растения, растительные материалы, растительные клетки и семена, полученные с помощью одного из вышеупомянутых способов.

II. Сокращения

х:уА² - жирная кислота, содержащая х атомов углерода и у двойных связей в положении ζ, считая от

- 5 029904

карбоксильного конца

АСР - ацилпереносящий белок

СоА - кофермент А

РА - жирные кислоты

РАМ - флуоресцеин

РА§ - синтаза жирных кислот

РАМЕ - метиловый эфир жирной кислоты

КАЗН - синтаза β-кетоацил-АСР II

МИРА - мононенасыщенная жирная кислота

\УТ - дикий тип

III. Термины

Жирная кислота: В настоящем описании термин "жирная кислота" относится к длинноцепочечным алифатическим кислотам (алкановым кислотам) с разной длиной цепи, например, приблизительно от С12 до С22, хотя существуют кислоты как с более длинной, так и с более короткой цепью. Структура жирной кислоты описывается формулой х:уА², где х обозначает общее число атомов углерода (С), а у обозначает число двойных связей в углеродной цепи в положении "ζ", считая от карбоксильного конца кислоты.

Метаболический путь: Термин "метаболический путь" относится к ряду химических реакций, протекающих в клетке и катализируемых ферментами, которые приводят к образованию метаболического продукта или к инициации другого метаболического пути. Метаболический путь может включать в себя несколько или много стадий и может конкурировать с другим метаболическим путем за специфические субстраты для реакций. Подобным образом, продукт одного метаболического пути может являться субстратом для другого метаболического пути.

Метаболическая инженерия: В целях настоящего изобретения термин "метаболическая инженерия" относится к созданию рациональных стратегий изменения одного или нескольких метаболических путей в клетке, так, чтобы в результате постадийной модификации исходного вещества в общей схеме всех метаболических путей, функционирующих в клетке, можно было бы получить продукт, обладающий точной заданной химической структурой.

Десатураза: В настоящем описании термин "десатураза" относится к полипептиду, способному осуществлять десатурацию (т. е. вводить двойную связь) одной или нескольких жирных кислот с получением представляющей интерес жирной кислоты или ее предшественника. Растительный растворимый фермент десатураза жирных кислот может региоспецифично вводить двойную связь в субстрат насыщенный ацил-АСР. Ацил-СоА десатуразы региоспецифично вводят двойную связь в субстрат насыщенный жирный ацил-СоА. Данная реакция включает в себя активацию молекулярного кислорода двухэлектронным восстановленным дижелезным центром, координированным четырехспиральным пучком, который образует центр конфигурации десатуразы. В некоторых воплощениях особый интерес представляют ацил-СоА дельта-9-десатуразы.

Дельта-9-18:0¹-АСР десатураза нужна всем растениям для поддержания жидкостности мембраны. Хотя этот фермент в первую очередь осуществляет десатурацию стеароил-АСР, в меньшей степени он также активен в отношении пальмитоил-АСР.

Вариантная десатураза: В настоящем описании термин "вариантная десатураза" охватывает десатуразы, которые обладают специфическими профилями активности, соответствующими их участию в образовании необычных жирных кислот. Вариантную десатураза можно выделить из организма, полученного в результате программы направленной эволюции, или ее можно получить рекомбинатными методами в виде синтетической десатуразы, отличающейся консервативными аминокислотами от одной или нескольких охарактеризованных десатураз.

Растение-потомок: В целях настоящего изобретения термин "растение-потомок" относится к любому растению, которое можно получить с помощью методов селекции растений, или к полученному из него растительному материалу. Методы селекции растений хорошо известны в данной области и включают в себя естественную селекцию, искусственную селекцию, селекционное разведение с использованием анализа молекулярных маркеров ДНК, трансгенную и коммерческую селекцию.

Растительный материал: В настоящем описании термин "растительный материал" относится к любой клетке или ткани, полученной из растения.

Молекула нуклеиновой кислоты: Полимерная форма нуклеотидов, которая может включать в себя смысловые и антисмысловые цепи РНК, кДНК, геномной ДНК, а также синтетические формы и смешанные полимеры вышеуказанных соединений. Нуклеотид включает в себя рибонуклеотид, дезоксинуклеотид или модифицированную форму нуклеотида любого типа. В данном описании термин "молекула нуклеиновой кислоты" используется как синоним терминам "нуклеиновая кислота" и "полинуклеотид". Этот термин включает в себя одноцепочечные и двухцепочечные формы ДНК. Молекула нуклеиновой кислоты может содержать либо природные, либо модифицированные, либо те и другие нуклеотиды, соединенные встречающимися в природе, или не встречающимися в природе межнуклеотидными связями.

Молекулы нуклеиновой кислоты могут быть модифицированы с помощью химических или биохи- 6 029904

мических способов, или они могут содержать неприродные или дериватизированные нуклеотидные основания, что может легко определить рядовой специалист в данной области. Такие модификации включают в себя, например, введение меток, метилирование, замену одного или нескольких природных нуклеотидов на аналог, межнуклеотидные модификации, такие как незаряженные мостики (например, метилфосфонаты, фосфотриэфиры, фосфорамидаты, карбаматы и др.), заряженные мостики (например, фосфоротиоаты, фосфородитиоаты и др.), выступающие фрагменты (например, пептиды), интеркаляторы (например, акридин, псорален и др.), хелатирующие средства, алкилирующие средства и модифицированные мостики (например, альфа-аномерные нуклеиновые кислоты и др.). Термин "молекула нуклеиновой кислоты" также включает в себя любую топологическую конформацию, такую как одноцепочечная, двухцепочечная, частично двухспиральная, трехспиральная, шпилечная, циклическая и закрытая конформации.

Функционально связанный: Первая нуклеотидная последовательность функционально связана со второй нуклеотидной последовательностью, если первая нуклеотидная последовательность находится в функциональной зависимости от второй нуклеотидной последовательности. Например, промотор функционально связан с кодирующей последовательностью, если промотор может оказывать влияние на транскрипцию или экспрессию кодирующей последовательности. В случае получения нуклеиновых кислот рекомбинантными методами функционально связанные нуклеотидные последовательности обычно являются смежными и, при необходимости, в одной рамке считывания можно соединить две белоккодирующие последовательности. Однако функционально связанные нуклеиновые кислоты не обязательно должны быть смежными.

Регуляторный элемент: В настоящем описании термин "регуляторный элемент" относится к молекуле нуклеиновой кислоты, способной регулировать функционирование гена; т.е. к молекуле, способной влиять на транскрипцию или трансляцию функционально связанной транскрибируемой молекулы нуклеиновой кислоты. Регуляторные элементы, такие как промоторы, лидерные последовательности, интроны и участки терминации транскрипции, представляют собой молекулы некодирующих нуклеиновых кислот, способные регулировать функционирование гена, которые являются неотъемлемой частью общей экспрессии генов в живых клетках. Следовательно, выделенные регуляторные элементы, способные функционировать в растениях, можно использовать для изменения фенотипов растений рекомбинантными методами. Под "регуляторным элементом" подразумевается ряд нуклеотидов, который определяет, происходит ли экспрессия конкретного гена, когда она происходит и на каком уровне. Регуляторные последовательности ДНК специфически взаимодействуют с регуляторными или другими белками.

В настоящем описании термин "способность регулировать функционирование гена" относится к молекуле нуклеиновой кислоты, способной влиять на транскрипцию или трансляцию функционально связанной молекулы нуклеиновой кислоты. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, способная регулировать функционирование гена, может определять время или место экспрессии, или модулировать уровень и скорость экспрессии функционально связанной молекулы нуклеиновой кислоты. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, способная регулировать функционирование гена, может включать в себя промотор, интрон, лидерную последовательность или З'-участок терминации транскрипции.

Промоторы: В настоящем описании термин "промотор" относится к молекуле нуклеиновой кислоты, которая участвует в распознавании и связывании РНК-полимеразы II или других белков, таких как факторы транскрипции (транс-действующие белковые факторы, которые регулируют транскрипцию), с последующей инициацией транскрипции функционально связанного гена. Сами промоторы могут содержать подэлементы, такие как цис-элементы или энхансерные домены, влияющие на транскрипцию функционально связанных генов. "Растительный промотор" представляет собой природный или не природный промотор способный функционировать в растительных клетках. Растительный промотор можно использовать в качестве 5'-регуляторного элемента для модуляции экспрессии функционально связанного гена или генов. Растительные промоторы можно классифицировать по временному, пространственному или связанному с развитием характеру экспрессии. Описанные здесь молекулы нуклеиновых кислот могут содержать нуклеотидные последовательности, включающие в себя промоторы.

Идентичность последовательностей: В настоящем описании термин "идентичность последовательностей" или "идентичность" в применении к двум нуклеотидным или полипептидным последовательностям может относиться к остаткам двух последовательностей, которые являются одинаковыми при выравнивании с максимальным соответствием в определенном окне сравнения.

Если термин "процент идентичности последовательностей" используют в применении к белкам, следует понимать, что положения, в которых находятся не идентичные остатки, могут различаться в результате консервативных аминокислотных замен, в процессе которых аминокислотные остатки заменяют на другие аминокислотные остатки с подобными химическими свойствами (такими как заряд, гидрофобность или стерические эффекты), и, следовательно, такие замены не изменяют функциональных свойств молекулы.

Таким образом, если последовательности различаются в результате консервативных замен, процент идентичности последовательностей можно скорректировать до более высокого значения, чтобы учесть консервативную природу замены в положении, в котором присутствуют не идентичные остатки. После- 7 029904

довательности, которые различаются в результате таких консервативных замен, характеризуются "подобием последовательностей" или "подобием". Методы такой коррекции хорошо известны рядовым специалистам в данной области. Как правило, такие методы включают в себя оценку консервативной замены как скорее частичного, а не полного несовпадения, что повышает процент идентичности последовательностей. Например, если идентичной аминокислоте присваивают оценку от 0 до 1, а неконсервативной замене присваивают оценку 0, то консервативной замене присваивают оценку от 0 до 1. Оценку консервативных замен можно рассчитать, например, при выполнении программы РС/ΟΕΝΕ (1п!еШдепейск, МоиШаш У1е\у. СА).

В настоящем описании термин "процент идентичности последовательностей" может относиться к значению, определенному путем сравнения двух оптимально выровненных последовательностей в окне сравнения, где часть последовательности в окне сравнения может содержать добавления или делеции (т.е. пробелы) по отношению к сравниваемой последовательности (которая не содержит добавления или делеции) для оптимального выравнивания двух последовательностей. Процент рассчитывают путем определения числа положений обеих последовательностей, в которых встречаются идентичные нуклеотидные или аминокислотные остатки, с получением числа совпадающих положений, деления числа совпадающих положений на общее число положений в окне сравнения и умножения результата на 100, с получением значения процента идентичности последовательностей.

Аналогичное положение в аминокислотной последовательности: Нуклеотидные и аминокислотные последовательности можно выравнивать с помощью способов, описанных в нижеследующих параграфах. При выравнивании положение в одной последовательности является "аналогичным" положению в выравниваемой последовательности, если положения являются идентичными в консенсусной последовательности.

Способы выравнивания последовательностей с целью сравнительного анализа хорошо известны в данной области. Разные программы и алгоритмы выравнивания описаны в: διηίΐΐι апб ХУаЮгтагг Αάν. Αρρί. та!й. 2:482, 1981; №еб1етап апб ХУипкск 1. Мо1. ΒίοΙ. 48:443, 1970; Реагкоп апб Ыртап, Ргос. Ναίί. Асаб. 8с1. И8А 85:2444, 1988; Шддшк апб §Ьагр, Сепе 73:237-44, 1988; Шддшк апб §йатр, САВЮ8 5:1513, 1989; Согре! е! а1., ШсШс Аабк Кекеатсй 16:10881-10890, 1988; Ниапд, е! а1., Сотри!ег Аррйсайопк ш (Не Вюкшепсек 8:155-65, 1992; Реагкоп е! а1, Мебюбк ш Мо1еси1аг Вю1оду 24:307-31, 1994; Тайапа е! а1., РЕМ§ М1сгоЪю1. Ье!!., 174:247-50, 1990. А1!ксНи1 е! а1., 1. Мо1. Вю1. 215:403-10, 1990 (подробное описание методов выравнивания последовательностей и расчета гомологии).

Вак1с Ьоса1 Айдитеп! ЗеатсН Тоо1 (ВЬА§Т) Национального цента биотехнологической информации (ΝΡΒΙ) можно найти в интернете (на сайте Ъ1ак!.псЪ^.иίт.и^Ь.дον/Β1ак!.сд^) для применения в сочетании с программами для анализа последовательностей, такими как Ъ1ак!р и Ъ1ак!п. Описание определения идентичности последовательностей с помощью данной программы можно найти в интернете через NСΒI на сайте Ыак1.псЫ.п1т.1п11.до\' В1ак1.сдЕ^?СМ0=\УеЪ&РАСЕ_ТУРЕ=В1акГОоск.

Для сравнения аминокислотных последовательностей используют функцию программы ВЬА§Т "В1ак! 2 кесцкпсек" (Ъ12кец) с параметрами по умолчанию. Конкретные параметры могут быть скорректированы по усмотрению специалиста в данной области, например, с получением штрафа за несовпадение или вознаграждения за совпадение.

Трансформированный: В настоящем описании термин "трансформированный" относится к клетке, ткани, органу или организму, в которые введена чужеродная молекула нуклеиновой кислоты, такая как конструкция. Введенная молекула нуклеиновой кислоты может интегрироваться в геномную ДНК реципиентных клетки, ткани, органа или организма, в результате чего введенная полинуклеотидная молекула наследуется последующим потомством. Термин "трансгенный" или "трансформированный" в применении к клетке или организму также включает в себя потомство клетки или организма, а также потомство, полученное в результате программы селекции, проводимой, например, путем скрещивания с использованием такого трансгенного растения в качестве родительского растения, и обладающее измененным фенотипом, обусловленным присутствием чужеродной молекулы нуклеиновой кислоты.

IV. Концепции метаболической инженерии с целью уменьшения содержания насыщенных жирных кислот в клетке-, ткани- или организме-хозяине

A. Обзор

Воплощение настоящего изобретения включает в себя введение дельта-9-десатураз, обладающих специфической избирательностью в отношении ацил-СоА (например, в отношении пальмитиновой или стеариновой кислоты), в семена растений. Специфическая избирательность дельта-9-десатуразы в отношении ацил-СоА обеспечивает направленность на некоторые конкретные пулы насыщенных жирных кислот (такие как пальмитат, для превращения в мононенасыщенные продукты). Чтобы уменьшить содержание насыщенных жирных кислот, выбирают ацил-СоА дельта-9-десатуразы, поскольку они обычно не продуцируются в растительных системах в сколько-нибудь заметной степени.

B. Полипептиды

В соответствии с некоторыми воплощениями настоящего изобретения полипептиды содержат аминокислотную последовательность, которая по результатам выравнивания обладает высоким процентом идентичности с последовательностью, выбранной из группы, состоящей из §ЕЦ ΙΌ ΝΟ: 12, §ЕЦ ГО ΝΟ:

- 8 029904

13, 8ЕО ΙΌ N0: 14, 8ЕО ΙΌ N0: 50, 8ЕО ΙΌ N0: 52, 8ЕО ΙΌ N0: 72 и 8ЕО ΙΌ N0: 73. Конкретные аминокислотные последовательности, используемые в указанных и других воплощениях, могут содержать последовательности, которые, например, по меньшей мере, примерно на 70%, примерно на 75%, примерно на 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичны вышеуказанным последовательностям. Во многих воплощениях аминокислотная последовательность, по результатам выравнивания обладающая вышеуказанной идентичностью по отношению к упомянутым выше последовательностям, кодирует пептид с ферментативной активностью дельта-9-18:0-АСР десатуразы, или часть такого пептида.

С. Нуклеиновые кислоты

Некоторые воплощения включают в себя молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие описанный выше полипептид. Например, нуклеотидные последовательности, используемые в некоторых воплощениях, по результатам выравнивания обладают высоким процентом идентичности по отношению к последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8Е0 ГО N0: 3, 8Е0 ГО N0: 4, 8Е0 ГО N0: 5, 8Е0 ГО N0: 8, 8ЕО ГО N0: 9, 8ЕО ГО N0: 10, 8ЕО ГО N0: 11, 8ЕО ГО N0: 15, 8ЕО ГО N0: 16, 8ЕО ГО N0: 17, 8Е0 ГО N0: 44, 8Е0 ГО N0: 45, 8Е0 ГО N0: 48 и 8Е0 ГО N0: 49. Конкретные нуклеотидные последовательности, используемые в указанных и других воплощениях, могут содержать последовательности, которые, например, по меньшей мере, примерно на 60%, примерно на 65%, примерно на 70%, примерно на 75%, примерно на 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95% 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичны последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8Е0 ГО N0:3, 8ЕО ГО N0:4, 8ЕО ГО N0:5, 8ЕО ГО N0:8, 8ЕО ГО N0:9, 8ЕО ГО N0:10, 8ЕО ГО N0:11, 8ЕО ГО N0:15, 8ЕО ГО N0:16, 8ЕО ГО N0: 17, 8ЕО ГО N0:44, 8ЕО ГО N0:45, 8ЕО ГО N0:48 и 8ЕО ГО N0:49. Рядовому специалисту в данной области известно, что молекулы нуклеиновых кислот можно модифицировать, практически не меняя аминокислотную последовательность кодируемого полипептида, например, путем введения допустимых нуклеотидных замен в соответствии с вырожденностью кодонов.

В некоторых воплощениях молекулы нуклеиновой кислоты настоящего изобретения включают в себя генный регуляторный элемент (например, промотор). Промоторы можно выбирать в зависимости от типа клетки, в которую вставляют векторную конструкцию. Промоторы, способные функционировать в бактериях, дрожжах и растениях, хорошо известны в данной области. Промоторы также можно выбирать по их регуляторным свойствам. Примеры таких свойств включают в себя способность повышать транскрипционную активность, способность к индуцированию, тканевую специфичность и специфичность к стадии развития. Описаны растительные промоторы, способные к индуцированию, вирусного или синтетического происхождения, обладающие конститутивной активностью и способные осуществлять временную или пространственную регуляцию. См., например, Ρθ5/1<ο\Υ5ΐ<ί е! а1. (1989) ЕМВ0 1. 3:2719; 06е11 е!а1. (1985) ХаПие 313:810; и Сйаи е!а1. (1989) 8с1епсе 244:174-81.

Подходящие индуцируемые промоторы включают в себя, например, промоторы, индуцируемые салициловой кислотой или полиакриловыми кислотами, образующимися в результате применения антидотов (гербициды на основе замещенных бензолсульфонамидов), промоторы теплового шока, нитратиндуцируемый промотор, полученный из последовательности молекулы нуклеиновой кислоты транскрибируемой в нитратредуктазу шпината, гормон-индуцируемые промоторы и светоиндуцируемые промоторы, связанные с маленькой субъединицей карбоксилазы КиВР и семействами ЬНСР.

Примеры подходящих тканеспецифичных, зависимых от стадии развития промоторов, включают в себя промотор β-конглицинина 78а и семя-специфичные промоторы. Растительные функциональные промоторы, используемые для предпочтительной экспрессии в пластидах семени, включают в себя промоторы белков, участвующих в биосинтезе жирных кислот в семенах масличных растений, и промоторы запасных растительных белков. Примеры таких промоторов включают в себя 5'-регуляторные участки последовательностей молекул нуклеиновых кислот, траскрибируемых в фазеолин, напин, зеин, соевый ингибитор трипсина, АСР, стеароил-АСР десатуразу и олеосин. Другим примером тканеспецифичного промотора является промотор лектина, специфичный к тканям семян.

Другие подходящие промоторы включают в себя промоторы нопалин-синтазы, маннопин-синтазы и октопин-синтазы, которые присутствуют на опухоль-индуцируемых плазмидах АдгоЬасЮгшт ШтеГаС1еп8; промоторы 198 и 358 вируса мозаики цветной капусты (СаМУ); усиленный промотор 358 СаМУ; промотор 358 вируса мозаики Ρί§γοτί; светоиндуцируемый промотор маленькой субъединицы рибулозо1,5-бифосфат карбоксилазы (55ΡυΒΙ8ί.Ό); промотор ЕШ-4А табака (Мап6е1 е! а1. (1995) Р1ап! Мо1. Βίο1. 29:995-1004); кукурузной синтетазы сахарозы; кукурузной алкогольдегидрогеназы Ι; кукурузного светособирающего комплекса; кукурузного белка теплового шока; промотор хитиназы АтаЫ6ор818; промоторы ЬТР (липид-переносящего белка); халькон-изомеразы петунии; соевого обогащенного глицином белка 1; пататина картофеля; промотор убихитина; и промотор актина. Предпочтительно используют семяселективные, тканеселективные или индуцируемые промоторы. Семя-специфичная регуляция описана, например, в ЕР 0255378.

Чтобы достичь повышенную экспрессию гетерологичного гена (генов), можно осуществить реконструкцию гена (генов) с целью более эффективной экспрессии в клетке-хозяине (например, в клетке растения, такого как канола, рис, табак, маис, хлопчатник и соевый боб). Следовательно, необязательной

- 9 029904

дополнительной стадией при конструировании гена, кодирующего дельта-9-десатуразу, с целью экспрессии в растении (т.е. помимо добавления одного или нескольких генных регуляторных элементов), является реконструкция участка гетерологичного гена, кодирующего белок, обеспечивающая оптимальную экспрессию. Конкретные воплощения включают в себя реконструированные гены, оптимизированные с целью повышения уровня экспрессии (т.е. продуцирующие больше белка) в клетке трансгенного растения канолы, или в клетке растения АгаЫбор818, отличной от клетки растения канолы, или в клетке растения ЛгаЫбор818, трансформированного природной последовательностью гетерологичного гена.

Вследствие пластичности, обеспечиваемой избыточностью/вырожденностью генетического кода (это означает, что некоторые аминокислоты кодируются несколькими кодонами), эволюция геномов в разных организмах или классах организмов приводит к разному применению синонимичных кодонов. Такое "смещение кодонов" находит отражение в среднем составе оснований в участках, кодирующих белки. Например, организмы, геномы которых имеют относительно низкое содержание О+С, используют больше кодонов, содержащих А или Т в третьем положении синонимичных кодонов, тогда как организмы, геномы которых имеют относительно высокое содержание О+С, используют больше кодонов, содержащих О или С в третьем положении. Кроме того, полагают, что присутствие "минорных" кодонов в мРНК может снижать абсолютную скорость трансляции мРНК, особенно, если заряженная тРНК, соответствующая минорному кодону, присутствует в относительно небольшом избытке. Продолжение данного рассуждения заключается в том, что уменьшение скорости трансляции под действием отдельных минорных кодонов, по меньшей мере, суммируется в случае присутствия нескольких минорных кодонов. Таким образом, мРНК с высоким относительным содержанием минорных кодонов будут иметь соответственно низкие скорости трансляции в конкретном экспрессионном хозяине. Такие скорости могут приводить к соответствующим низким уровням кодируемого белка.

При конструировании оптимизированных генов, кодирующих дельта-9-десатуразу, для экспрессии в каноле или АтаЫбор818 (или в других растениях, таких как рис, табак, маис, хлопчатник или соевые бобы), важно определять смещение кодонов в предполагаемом растении (растениях)-хозяине. Существует множество широко доступных баз данных по последовательностям ДНК, в которых можно найти информацию о распределении кодонов в геномах растений, или о белок-кодирующих участках разных растительных генов.

Смещение кодонов представляет собой статистическое распределение кодонов, которые использует хозяин экспрессии (например, растение, такое как канола или АтаЫбор818) для кодирования аминокислот, входящих в состав его белков. Смещение кодонов можно рассчитать как частоту, с которой используется один кодон по сравнению с кодонами всех аминокислот. Альтернативно смещение кодонов можно рассчитать как частоту, с которой используется один кодон для кодирования конкретной аминокислоты, по сравнению с другими кодонами, используемыми для кодирования этой же аминокислоты (синонимичные кодоны).

При конструировании оптимизированных кодирующих участков для экспрессии в растении генов дельта-9-десатуразы, нужно определить кодоны, предпочитаемые растением в первую очередь ("первый выбор"), а также предпочтительные кодоны второго, третьего, четвертого и др. выборов, если существует несколько выборов. Затем можно сконструировать новую последовательность ДНК, которая кодирует аминокислотную последовательность дельта-9-десатуразы, где новая последовательность ДНК отличается от нативной последовательности ДНК (кодирующей десатуразу) в результате замены кодонов на предпочитаемые хозяином экспрессии (кодоны первого предпочтения, второго предпочтения, третьего предпочтения или четвертого предпочтения и др.) для кодирования аминокислоты в каждом положении аминокислотной последовательности. Затем новую последовательность анализируют на наличие участков ферментативной рестрикции, которые могут создаваться в процессе модификаций. Идентифицированные предполагаемые участки рестрикции модифицируют путем замены указанных кодонов кодонами следующего предпочтения, чтобы удалить участки рестрикции. Другие участки последовательности, которые могут влиять на транскрипцию или трансляцию гетерологичной последовательности, включают в себя точки соединения экзон:интрон (5' или 3'), сигналы добавления поли-А и/или сигналы терминации РНК-полимеразы. Последовательность можно дополнительно анализировать и модифицировать с целью уменьшения частоты дублетов ТА или СО. Помимо указанных дублетов, блоки последовательности, содержащие примерно более шести одинаковых нуклеотидов О или С, также могут оказывать неблагоприятное влияние на транскрипцию или трансляцию последовательности. Следовательно, такие блоки желательно модифицировать путем замены кодонов первого, второго или др. выбора на предпочтительный кодон следующего выбора.

С помощью описанного выше способа специалист в данной области может модифицировать чужеродный для конкретного растения ген (гены) таким образом, чтобы обеспечить его оптимальную экспрессию в растении. Этот способ также описан в заявке РСТ XVО 97/13402. Таким образом, для трансформации хозяев, включающих в себя растения, можно использовать оптимизированные синтетические гены, функционально эквивалентные генам десатуразы некоторых воплощений. Дополнительное руководство по получению синтетических генов можно найти, например, в патенте США № 5380831.

После конструирования оптимизированной для растения последовательности ДНК на бумаге или ίη

- 10 029904

кШсо, можно синтезировать в лаборатории реальную молекулу ДНК, последовательность которой точно соответствует конструированной последовательности. Такие синтетические молекулы ДНК можно клонировать или подвергать их иным манипуляциям, как если бы они были получены из природных или нативных источников.

Ό. Способы генетической трансформации растительного материала

Некоторые воплощения направлены на способ получения трансформированной клетки, которая содержит одну или несколько молекул нуклеиновой кислоты (нуклеиновых кислот), содержащих нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 60% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из δΕΟ ΙΌ N0: 3, δΕΟ ΙΌ N0: 4, δΕΟ ΙΌ N0: 5, δΕΟ ΙΌ N0: 8, δΕΟ ΙΌ N0: 9, δΕΟ ΙΌ N0: 10, δΕΟ ΙΌ N0: 11, δΕΟ ΙΌ N0: 15, δΕΟ ΙΌ N0: 16, δΕΟ ΙΌ N0: 17, δΕΟ ΙΌ N0: 44, δΕΟ ΙΌ N0: 45, δΕΟ ΙΌ N0: 48 и δΕΟ ΙΌ N0: 49. Указанные молекулы нуклеиновой кислоты также могут содержать, например, некодирующие регуляторные элементы, такие как промоторы. Наряду с некодирующими регуляторными элементами и транскрибируемыми последовательностями нуклеотидных молекул в клетку можно вводить другие последовательности. Указанные другие последовательности могут включать в себя З'-терминаторы транскрипции, сигналы З'-полиаденилирования, другие нетранслируемые последовательности, транзитные или направляющие последовательности, селектируемые маркеры, энхансеры и операторы.

Способ трансформации обычно включает в себя стадии выбора подходящей клетки-хозяина, трансформации клетки-хозяина рекомбинантным вектором и получение трансформированной клетки-хозяина. Методы введения ДНК в клетки хорошо известны специалистам в данной области. Как правило, эти методы можно подразделить на пять групп: (1) химические методы (Сгайат апб Уаи бет БЬ (1973) Уйо1оду 54 (2):536-9; 2а11оика1 е! а1. (1992) Αηη. ΝΥ. Асаб. δοί. 660:136-53); (2) физические методы, такие как микроинъекция (СаресЫ (1980) Се11 22 (2):479-88), электропорация (Аопд апб №итапп (1982) ВюсЫт. Вюрйук. Кек. Соттип. 107(2):584-7; Рготт е! а1. (1985) Ргос. №11. Асаб. δα. υδΑ 82 (17):5824-8; патент США 5384253), и ускорение частиц Нойпйоп апб Тапд (1994) Ме!йобк Се11 Вю1. 43(А):353-65; Рупап е! а1. (1993) Ргос. N11. Асаб. δα. υδΑ 90(24): 11478-82; (3) применение вирусных векторов (С1арр (1993) Сйп. Рейпа!о1. 20 (1) :155-68; Ьи е! а1. (1993) 1. Вхр. Меб. 178 (6) :2089-96; Ε§1ί1ίδ апб Апбегкоп (1988) Вю!есйЫдиек 6 (7):608-14); (4) применение рецептор-опосредованных механизмов (Сште1 е! а1. (1992) Нит. Сеп. Тйег. 3(2):147-54; Аадпег е! а1. (1992) Ргос. №!1. Асаб. δα. υδΛ 89 (13):6099-103); и (5) применение механизмов опосредованных бактериями, такими как АдгоЪас!ейит. Альтернативно нуклеиновые кислоты можно непосредственно вводить в репродуктивные органы растения, такие как пыльца. 2йои е! а1. (1983) Ме!йобк ш Вп/утоЫду 101:433; Некк (1987) ЕЛет. Кеу. Су!о1. 107:367; Ьио е! а1. (1988) Р1ап! Мо1. Вю1. Керойег 6:165; Репа е! а1. (1987) №Лиге 325:274. Другие методы трансформации включают в себя, например, трансформацию протопластов, описанную в патенте США 5508184. Молекулы нуклеиновой кислоты также можно вводить в незрелые эмбрионы. №ийаик е! а1. (1987) Тйеог. Арр1. Сепе!. 75:30.

Для трансформации растительных клеток чаще всего используют следующие методы: опосредованный АдтоЪас!ейит перенос ДНК (Рга1еу е! а1. (1983) Ргос. №И. Асаб. δα. ^А 80:4803) (описанный в патенте США 5824877; патент США 5591616; патент США 5981840; и патент США 6384301) и биолистика или бомбардировка микрочастицами (т.е. метод генной пушки) (как описано в патенте США 5550318; патент США 5538880; патент США 6160208; патент США 6399861 и патент США 6403865). Как правило, проводят ядерную трансформацию, однако, если желательно специфически трансформировать пластиды, такие как хлоропласты или амилопласты, трансформацию проводят путем опосредованной микрочастицами доставки целевых молекул нуклеиновой кислоты в пластиды растений конкретных видов, таких как, например, АтаЫборЫк, табак, картофель и разновидности Втакыса.

АдгоЪас!ейит-опосредованную трансформацию проводят путем применения рекомбинантной почвенной бактерии, принадлежащей к роду А§тоЪас!ейит. Некоторые виды А§тоЪас!ейит опосредуют перенос специфической ДНК, известной как "Т-ДНК", которая после генетической трансформации может переносить любой желательный фрагмент ДНК в растения многих видов. Основные события, характеризующие процесс Т-ДНК-опосредованного патогенеза, включают в себя: индукцию генов вирулентности, а также процессинг и перенос Т-ДНК. Данный процесс является предметом многочисленных обзоров. См., например, Кеат (1989) Апп. Кеу. Рйу!ора!йо1. 27:583-618; Но\\лгб апб Сйоукку (1990) Вюаккаук 12:103-8; Кабо (1991) Сп!. Кеу. Р1ап! δα. 10:1-32; 2атЪтукк1 (1992) Аппиа1 Кеу. Р1ап! Рйукю1. Р1ап! Мо1. Вю1. 43:465-90; СеМп (1993) ш Тгапкдетс Р1ап!к, Кипд апб Аи ебк., Асабетю Ргекк, δаη О1едо, СА, рр. 49-87; Втпк апб Но\\й/ (1994) Ы Вас!епса1 Ра!йодепек1к оГ Р1ап!к апб Атта1к, Эапд. еб., Вегйп: δр^^ηде^ Уег1ад., рр. 119-38; Нооукаак апб ВеуеткЪетдеп (1994) Апп. Кеу. Рйу!ора!йо1. 32:157-79; Ьекк1 апб Ьапка (1994) Се11 77:321-4; апб 2ирап апб 2атЪтукк1 (1995) Аппиа1 Кеу. Рйу!ора!йо1. 27:583-618.

Чтобы облегчить выбор, или отметить трансформированные растительные клетки, независимо от метода трансформации, вводимая в клетку ДНК может содержать ген, способный функционировать в регенерируемой растительной ткани, продуцируя соединение, которое придает растительной ткани устойчивость к соединению, которое в иных случаях является токсическим. Гены, представляющие интерес для применения в качестве маркера селекции, маркера скрининга или маркера отметки, включают в себя, без ограничения, β-глюкуронидазу (С^), зеленый флуоресцентный белок (СРР), люциферазу и

- 11 029904

гены устойчивости к антибиотикам или гербицидам. Примеры генов устойчивости к антибиотикам включают в себя гены, придающие устойчивость к пенициллинам, канамицину (а также неомицину, 0418, блеомицину); метотрексату (и триметоприму); хлорамфениколу; и тетрациклину. Например, устойчивость к глифосату может придавать ген устойчивости к гербициду. ОеПа-Саорра с1 а1. (1987) Вю/ТесЬпо1о§у 5:579-84. Кроме того, можно использовать и другие средства селекции, например, включающие в себя, без ограничения, устойчивость к фосфинотрицину и биалафосу, а также механизмы положительной селекции (1оет8Ьто е! а1. (1998) Мо1. Вгееб. 4:111-7), которые входят в объем воплощений настоящего изобретения.

Трансформированные клетки идентифицируют путем селекции или скрининга и культивируют в подходящей среде, которая обеспечивает регенерацию, после чего им дают развиваться до целых растений.

Раскрываемые в настоящем изобретении способы можно использовать в сочетании с любой трансформируемой растительной клеткой или тканью. Трансформируемые клетки и ткани в соответствии с данным описанием включают в себя, без ограничения, клетки или ткани, способные к дальнейшему развитию с образованием растения. Специалистам в данной области известно, что ряд растительных клеток или тканей после трансформации путем вставки экзогенной ДНК и последующего культивирования в подходящих условиях могут развиваться до дифференцированного растения. Подходящие для таких целей ткани могут включать в себя, без ограничения, незрелые зародыши, ткань щитка зародыша, суспензионные клеточные культуры, незрелые соцветия, меристему побегов, эксплантаты узелков, ткань каллюса, ткань гипокотиля, семядоли, корни и листья.

Методы регенерации, развития и культивирования растений из трансформированных протопластов или эксплантатов растений известны в данной области. ХУеЩЬасН апб ХУеЩЬасН (1988) Ме!йоб§ £от Р1ап! Мо1еси1аг Вю1о§у, (Еб§.) Лсабешю Рте88, 1пс., 8ап О1едо, СА; Нотксй е! а1. (1985) 8с1епсе 227:1229-31. Как правило, указанный процесс регенерации и роста включает в себя стадии отбора трансформированных клеток и культивирования указанных клеток на протяжении обычных стадий эмбрионального развития до образования проростка с корнем. Подобным образом регенерируют трансгенные зародыши и семена. В данном способе трансформанты обычно культивируют в присутствии селекционной среды, которая позволяет отбирать трансформированные клетки и обеспечивает регенерацию побегов растения. Рта1еу е! а1. (1993) Ргос. №б. Асаб. 8ст И8А 80:4803. Указанные побеги обычно получают в течение двух-четырех месяцев. Затем полученные трансгенные побеги с корнями выращивают в среде, подходящей для выращивания растений, такой как почва. Клетки, выжившие после воздействия селективного средства, или клетки, охарактеризованные как положительные по результатам скрининга, можно культивировать в среде, обеспечивающей регенерацию растений. Затем побеги можно перенести в среду, подходящую для стимуляции роста корневой системы, которая содержит селективное средство и антибиотик для предотвращения роста бактерий. У многих побегов развиваются корни. Такие побеги пересаживают в почву или другую среду, обеспечивающую дальнейшее развитие корневой системы. Как указано выше, данный способ может варьировать в зависимости от конкретного используемого штамма растения и, следовательно, его детали могут изменяться по усмотрению специалиста в данной области.

Регенерированные трансгенные растения можно подвергнуть самоопылению с получением гомозиготных трансгенных растений. Альтернативно пыльцу, полученную из регенерированных трансгенных растений, можно использовать для перекрестного скрещивания с нетрансгенными растениями, предпочтительно инбредных линий агрономически важных видов. И наоборот, пыльцу нетрансгенных растений можно использовать для опыления регенерированных трансгенных растений.

Трансгенное растение может передавать трансформированную последовательность нуклеиновой кислоты своему потомству. Трансгенное растение предпочтительно является гомозиготным по трансформированной последовательности нуклеиновой кислоты и передает эту последовательность всем своим потомкам при половом размножении, или в результате полового размножения. Потомство можно выращивать из семян, продуцируемых трансгенным растением. Затем полученные растения можно подвергнуть самоопылению с получением настоящей селекционной линии растений.

Потомство указанных растений можно анализировать, в числе прочих признаков, на экспрессию гена. Экспрессию гена можно детектировать с помощью ряда традиционных методов, таких как вестернблоттинг, нозерн-блоттинг, иммунопреципитация и ЕЬ18А (твердофазный иммуноферментный анализ). Трансформированные растения также можно анализировать на присутствие введенной ДНК и уровень экспрессии и/или профиль жирных кислот, обеспечиваемые молекулами нуклеиновых кислот и пептидными молекулами настоящего изобретения. Специалистам в данной области известны многочисленные методы, подходящие для анализа трансформированных растений. Например, методы анализа растений включают в себя, без ограничения, саузерн-блоттинг или нозерн-блоттинг, методы на основе ПЦР, биохимические анализы, методы фенотипического скрининга, полевые анализы и иммунодиагностические анализы.

Способы специфической трансформации двудольных хорошо известны в данной области. Трансформация и регенерация растений с использованием указанных способов описаны для ряда зерновых, включающих в себя, без ограничения, члены рода АгаЫборЩ. хлопчатник (Ооккуршш Ыт8и!ит), соевые

- 12 029904

бобы (О1усше тах), арахис (ЛгасЫк йуродаеа) и члены рода Вга551са. Способы трансформации двудольных, в первую очередь, с применением АдгоЪас!егшт 1итеГас1еп5. и получения трансгенных растений описаны для хлопчатника (патент США 5004863; патент США 5159135; патент США 5518908); соевых бобов (патент США 5569834; патент США 5416011; МсСаЪе е! а1. (1988) Вю!есйио1оду 6:923; СЬг151ои е! а1. (1988) Р1ап! Рйу5ю1. 87:671-4); Вга55юа (патент США 5463174); арахиса (Сйеид е! а1. (1996) Р1ап! Се11 Рер. 15:653-7; МсКеп!1у е! а1. (1995) Р1ап! Се11 Рер. 14:699-703); папайи; и гороха (Сгап! е! а1. (1995) Р1ап! Се11 Рер. 15:254-8).

Способы трансформации однодольных хорошо известны в данной области. Трансформация и регенерация растений с использованием указанных способов описаны для ряда зерновых, включающих в себя, без ограничения, ячмень (Ногбеит уи1дагае); маис (2еа тау5); овес (Ауеиа 5айуа); ежу сборную (Эас1у1|5 д1отега!а); рис (Огу/а 5айуа, включая разновидности шбюа и _|арошса); сорго (8огдйит Ысо1ог); сахарный тростник (8ассйагит 5р); высокую овсяницу (Ре5!иса агиибшасеа); газонные травы (например, Адго5Й5 5!о1ошГега, Роа рга!еи515, 8!еио1арЬгит 5есииба!ит); пшеницу (ТгШсит ае5йуит) и люцерну (Мебюадо 5айуа). Для специалистов в данной области очевидно, что существует ряд способов трансформации, которые можно использовать и модифицировать с получением стабильных трансгенных растений ряда представляющих интерес целевых культур.

В способах настоящего изобретения можно использовать любые растения. Предпочтительные для модификации в соответствии с настоящим изобретением растения включают в себя, в качестве примера и без ограничения, масличные растения, ЛгаЫбор515 Шайаиа, бурачник (Вогадо 5рр.), канолу (Вга55юа 5рр.), клещевину (Р1сши5 соттиш5), бобы какао (ТйеоЪгота сасао), кукурузу (2еа тау5), хлопчатник (Оо55уршт 5рр.), СгатЪе 5рр., Сирйеа 5рр., лен (Шиит 5рр.), Ье5циеге11а и Р1тпаи1йе5 5рр., Ьшо1а, настурцию (Тгораео1ит 5рр.), ОепоШега 5рр., оливковое дерево (О1еа 5рр.), пальмовое дерево (Е1ае15 5рр.), арахис (ЛгасЫ5 5рр.), рапс, сафлор (Саг1йати5 5рр.), соевые бобы (О1усше и 8о.)а 5рр.), подсолнечник (Не11аи!йи5 5рр.), табак (Ыюойаиа 5рр.), Уетоша 5рр., пшеницу (ТгШсит 5рр.), ячмень (Ногбеит 5рр.), рис (Огу/а 5рр.), овес (Луепа 5рр.), сорго (8огдйит 5рр.) и рожь (8еса1е 5рр.), а также другие члены Огатшеае.

Для специалистов в данной области очевидно, что существует ряд способов трансформации, которые можно использовать и модифицировать с получением стабильных трансгенных растений ряда представляющих интерес целевых культур.

Е. Трансгенные семена

В некоторых воплощениях трансгенное семя может содержать полипептид дельта-9-десатуразы, включающий в себя аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕО ГО ЫО: 12, 8ЕО ГО ЫО: 13, 8ЕО ГО ЫО: 14, 8ЕО ГО ЫО: 50, 8ЕО ГО ЫО: 51, 8ЕО ГО ЫО: 52, 8ЕО ГО ЫО: 72 и 8ЕО ГО ЫО: 73. В указанных и других воплощениях трансгеное семя может содержать нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 60% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕО ГО ЫО: 3, 8ЕО ГО ЫО: 4, 8ЕО ГО ЫО: 5, 8ЕО ГО ЫО: 8, 8ЕО ГО ЫО: 9, 8ЕО ГО ЫО: 10, 8ЕО ГО ЫО: 11, 8ЕО ГО ЫО: 15, 8ЕО ГО ЫО: 16, 8ЕО ГО ЫО: 17, 8ЕО ГО ЫО: 44, 8ЕО ГО ЫО: 45, 8ЕО ГО ЫО: 48 и 8ЕО ГО ЫО: 49. В некоторых воплощениях трансгенное семя может содержать пониженные уровни насыщенных жирных кислот (таких как пальмитиновая жирная кислота и/или стеариновая жирная кислота). Семена можно собрать с фертильного трансгенного растения и использовать их для выращивания потомственных поколений трансформированных растений, включающих в себя линии гибридных растений, которые содержат по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность из описанных выше и, необязательно, один дополнительный ген или представляющую интерес нуклеотидную конструкцию.

Нижеследующие примеры приведены для иллюстрации некоторых конкретных признаков и/или воплощений. Указанные примеры не следует истолковывать как ограничение изобретения конкретными описанными признаками или воплощениями.

Примеры

Пример I: Клонирование ацил-СоА дельта-9-десатураз и функциональная характеризация о1е1дефицитных дрожжей

Клонирование ацил-СоА дельта-9-десатураз Мадиароййе дп5еа

Ген ацил-СоА дельта-9-десатуразы Мадиароййе дп5еа (МдО9Э8) выделяют из геномной ДНК с использованием праймеров на основе последовательности, опубликованной ЫСВ1/Вгоаб 1и5!йи!е, исходно помеченной как "гипотетический белок" и на 55,4% идентичной на нуклеотидном уровне ацил-СоА дельта-9-десатуразе 8. сегеу151ае (т.е. ОЬЕ1). Конструируют прямой и обратный праймеры, каждый из которых содержит 41 пару оснований в длину. Прямой праймер, МдЛ9Р (8ЕО ГО ЫО: 1), содержит участок ЕсоР1 на 5'-конце. Обратный праймер, Мд9АР (8ЕО ГО ЫО:2), содержит стоп-кодоны в каждой из трех рамок считывания и концевой участок Хйо1.

Ген МдО9Э8 амплифицируют методом ПЦР, используя набор для ПЦР Такага Е2 Тац™ (Такага Вю 1пс., О!5и, 8Ыда, 1арап) в соответствии с инструкцией производителя. Условия амплификации включают в себя 94°С в течение 1 мин, затем 30 циклов по 94°С в течение 30 с, 60°С в течение 60 с и удлинение при 72°С в течение 90 с. Стадию конечного удлинения проводят при 72°С в течение 10 мин. Предполагаемый продукт ПЦР размером 1425 пар оснований вырезают из агарозного геля и очищают, используя

- 13 029904

вращающиеся колонки МоШаде в соответствии с рекомендациями производителя (Мййроге. ВШепса. МА). Очищенный фрагмент клонируют в векторе клонирования рСК®2.1 ТОРО® (1иуйтодеи. Саткйаб. СА). Продукт реакции ТОРО вводят в химически компетентные клетки Е. сой Тор 10 в условиях. рекомендуемых поставщиком. Выделяют бактериальные колонии. содержащие предполагаемый клон. С помощью набора для выделения ДНК Масйегеу-Хаде1 Ыискокрш (Масйегу-Наде1. №итапп-№апйет-81та88е. Ийтеи. Оеттапу) получают мини-плазмиды. после чего ДНК расщепляют рестрикционными ферментами ЕсоЫ и Хйо1. Идентифицируют положительные клоны. содержащие ожидаемый фрагмент гена МдИ9И8 размером 1425 п.о. Нуклеотидную последовательность получают путем реакций секвенирования. Последовательность ПЦР-амплифицированного фрагмента приведена в 8ЕО ГО N0: 3.

Анализ последовательности показывает наличие небольшого (90 п.о.) интрона. расположенного на 5'-конце гена МдИ9И8. Интрон удаляют методом сплайсинг-ПЦР с удлинением и перекрыванием. Полученный методом ПЦР ампликон очищают в геле. клонируют в векторе клонирования рСК®>2.1 ТОРО® и используют для трансформации клеток Е. сой Тор 10. Некоторые клоны идентифицируют путем анализа с расщеплением очищенной ДНК из отдельных трансформантных колоний ферментами рестрикции. Указанные клоны секвенируют. чтобы подтвердить присутствие клона МдИ9И8. не содержащего интрон. Полученная последовательность приведена в 8Е0 ГО N0: 4.

Каждый из генов МдИ9И8. как содержащий. так и не содержащий интрон. субклонируют в виде фрагмента ЕсоКИХйо1 в дрожжевом векторе экспрессии. Указанный дрожжевой вектор экспрессии содержит ген дельта-9-десатуразы АкретдШик шби1аи8 (АпИ9И8). фланкированный промотором дельта-9десатуразы 8. сетеу181ае и 3'ИТР/терминатором дельта-9-десатуразы. Из гена дельта-9-десатуразы А8регдШи8 и1би1аи8 вырезают фрагмент ЕсоЫ/Хйо1. который заменяют фрагментом. содержащим ген МдИ9И8. или ген МдИ9И8. не содержащий интрон. Два клона. содержащих ген МдИ9И8 (один с интроном. другой без интрона). используют для трансформации 8. сетеу181ае.

Дефицитный по дельта-9-десатуразе штамм 8. Сетеу181ае (0ΡΥ093). который поддерживают на дрожжевой экстракт-пептон-декстрозной (ΥΡΌ) среде. содержащей Тетееи® 80. трансформируют. используя набор для трансформации дрожжей А1кай-Сайои (ОЫодепе. Моп1геа1. Саиаба). Дополненные штаммы идентифицируют по росту в среде. которая не содержит Тетееи® 80 (мононенасыщенная жирная кислота как дополнение) или урацил (выпадение основания в присутствии агара. содержащего 8С-ИКА). Дополненные штаммы очищают до отдельных колоний на селективной среде три раза. Затем дополненные штаммы проверяют путем ПЦР-амплификации гена дельта-9-десатуразы и секвенирования продукта ПЦР. Кроме того. штаммы. содержащие клон МдИ9И8. возвращаются к жирнокислотной и урацильной зависимости по меньшей мере после трех пассажей на среде ΥΡΌ + Тетееи® 80. с последующим приведением штаммов в контакт со средой ИОВА 8С-ИКА минус Т\уееп® 80.

Экспрессия интрон-содержащей МдИ9И8-кодирующей последовательности отсутствует. это свидетельствует о том. что интрон не подвергается сплайсингу по дрожжевому механизму. Затем путем анализа РАМЕ характеризуют субстратную специфичность дрожжевого штамма. содержащего МдИ9И8кодирующую последовательность. в которой отсутствует интрон.

Клонирование ацил-СоА дельта-9-десатураз Йер1о8рйаепа иобогит

С помощью программы поиска Β1;·ΐ8ΐΝ из коллекции Е8Т Ь. иобогит выбирают две последовательности Е8Т йерЮ8рйаепа иобогит (1246 и 429 пар оснований соответственно). обладающие высоким уровнем идентичности (54.0% и 54.2% соответственно) по отношению к ацил-СоА дельта-9-десатуразе 8. сегеу181ае (ОЬЕ1). Результаты выравнивания показывают. что эти последовательности являются на 64.6% идентичными друг другу. позволяя предположить присутствие двух разных ацил-СоА дельта-9-десатураз йерЮ8рйаепа иобогит. Ген ЬиИ9И8-1 (8ЕО ГО N0:5) выделяют путем скрининга бибилиотеки кДНК Ь. иобогит с использованием генного зонда размером 1246 п.о. Определяют последовательность данного гена и выделяют кодирующую последовательность. Полноразмерную последовательность гена ЬиИ9И82 вначале выбирают из геномных последовательностей Ьер1о8рйаепа иобогит. опубликованных Вгоаб 1п8Й1Ше. путем поиска ВЬА8Т с использованием последовательности Е8Т размером 429 п.о. Продукт поиска. идентифицированный 8иретсоийд Ьи 1.4 как содержащий ген. обладающий 100% гомологией по отношению к фрагменту размером 429 п.о.. где указанный ген обозначают как кодирующий "гипотетический белок". Затем ген ЬиИ9И8-2 клонируют из библиотеки кДНК Йер1о8рйаег1а иобогит. используя ПЦР-праймеры на основе последовательности Ьи 1.4 8иретсоийд. Используют праймеры с последовательностями йпй9РАИ2Р (8Е0 ГО N0: 6) и Рпй9ЕАИ2Р (8Е0 ГО N0: 7). Прямой праймер конструируют с использованием участка 5'-ВатН1. а обратный праймер содержит стоп-кодоны в трех рамках считывания и концевой участок №о1.

Аликвоту библиотеки кДНК РерЮ8рйаепа иобогит разбавляют 1/10 с получением 400 нг матрицы ДНК для реакции ПЦР. ПЦР-амплификацию проводят. используя набор для ПЦР Такага Е2 Тад™ и рекомендуемые условия амплификации. включающие в себя 94°С в течение 1 мин. затем 30 циклов по 94°С в течение 30 с. 60°С в течение 60 с и удлинение при 72°С в течение 90 с. Стадию конечного удлинения проводят при 72°С в течение 10 мин. Предполагаемый продукт ПЦР размером 1370 пар оснований вырезают из агарозного геля и очищают. используя вращающиеся колонки МоШаде в соответствии с ре- 14 029904

комендациями производителя. Очищенный фрагмент клонируют в векторе клонирования рСК®2.1 ТОРО®. Продукт лигирования вводят в химически компетентные клетки Е. сой Тор 10 в соответствии с инструкциями производителя. Выделяют колонии, содержащие предполагаемый клон. С помощью колонок Масйетеу-№де1 Ыискокрт получают мини-плазмиды, после чего ДНК расщепляют рестрикционными ферментами ВатН1 и ЫсоТ Предполагаемые клоны ЬиО9О8-2 идентифицируют и секвенируют.

Секвенированием подтверждают последовательность клона ЬиО9О8-2 (8ЕО ГО N0:8) путем сравнения с последовательностью "гипотетического белка". Идентифицируют консервативное изменение в последовательности ЬиО9О8-2. Кодон ТОС (цистеин) изменяют на ЛОС (серин) путем замены тимидина аденином в положении 271, указанный кодон транслируется в аминокислоту 89 опубликованной последовательности. Это консервативное изменение, а цистеин не является высококонсервативной аминокислотой среди множества нитчатых грибов, поэтому попытки внести такое изменение не предпринимают.

Гены ЬиО9О8-1 и ЬпО9О8-2, 8Е0 ΙΌ N0:5 и 8 соответственно, клонируют в дрожжевом векторе экспрессии. Содержание одной из кодирующих последовательностей ЬиО9О8-1 и ЬиО9О8-2 в клонах подтверждают рестрикционным анализом и секвенированием ДНК.

Дефицитный по дельта-9-десатуразе штамм 8. сегеуыае (0ΡΥ093), который поддерживают на среде ΥΡΌ, содержащей Т\уеен® 80, трансформируют, используя набор для трансформации дрожжей А1кайСайощ ОЫодене. Дополненные штаммы идентифицируют по росту в среде, которая не содержит Тетееи® 80 (мононенасыщенная жирная кислота как дополнение) или урацил (ИОВА кс-ига). Дополненные штаммы очищают до отдельных колоний на селективной среде три раза. Затем дополненные штаммы проверяют путем ПЦР-амплификации гена дельта-9-десатуразы и секвенирования продукта ПЦР. Кроме того, штаммы, содержащие клон ЬиО9О8-2, возвращаются к жирнокислотной и урацильной зависимости по меньшей мере после трех пассажей на среде ΥΡΌ + Т\уеег1® 80, с последующим приведением штаммов в контакт со средой ИОВА 8С-ИКА минус Тусеи® 80. Затем с помощью анализа РАМЕ характеризуют субстратную специфичность дрожжевых штаммов, содержащих кодирующую последовательность ЬиО9О8-1 или ЬиО9О8-2.

Клонирование дефицитного по дельта-9-десатуразе штамма 8. сегеуыае и трансформация его геном ΗζΏ9Ό8

Оптимизированный для растения синтетический ген, кодирующий ацил-СоА дельта-9-десатуразу Нейсоуетра ζеа (Ηζϋ9Ό8) (идентифицированный как ΗζΡΟΌ82 в Во^енЕеИ е1 а1. (2001) Иъес! Вюсйет. Мо1. Вю1. 31 (10):949-64), вырезают из ИА8Р1С089 (описан ниже) в виде фрагмента ВатН1/Хйо1 и очищают в геле, используя вращающиеся колонки Мойаде. Полученный фрагмент лигируют в соответствующие участки рестрикции описанного ранее дрожжевого вектора экспрессии и используют для трансформации штамма Е. сой ИН5а с помощью стандартных методов молекулярной биологии и в соответствии с инструкциями поставщиков (Й1уПгоде1Т Саткйаб, СА).

Используя рестрикционный анализ и ДНК-секвенирование, выбирают клон, содержащий ген НГО9О8, и осуществляют его трансформацию в дефицитный по дельта-9-десатуразе штамм 8. сегеуыае, 0ΡΥ093. Штамм 0ΡΥ093, который поддерживают на среде ΥΡΌ, содержащей Туееи® 80, трансформируют с помощью набора для трансформации дрожжей А1каН-Саио1Т 0Ьюдег1е. Дополненные штаммы идентифицируют по росту в среде, которая не содержит Т№ееи® 80 (жирная кислота как дополнение) и урацил (ИОВА 8С-ИКА). Предполагаемые дополненные штаммы очищают до отдельных колоний на селективной среде три раза. Затем дополненные штаммы проверяют путем: ί) экстракции плазмидной ДНК с помощью набора для выделения плазмид 0Ьюдег1е Υеаδΐ и последующей ПЦР-амплификации с использованием праймеров, специфичных к гену Н/Э9Э8: ίί) секвенирования ген Н/Э9Э8специфичного продукта ПЦР; и ίίί) возвращения штамма к жирнокислотной и ИКА-3-зависимости путем пассажей штамма по меньшей мере три раза на среде ΥΡΌ + Т№ееи® 80, с последующим приведением штаммов в контакт со средой ИОВА 8С-ИКА. минус Туееи® 80. Затем с помощью анализа РАМЕ характеризуют субстратную специфичность проверенного дополненного дрожжевого штамма Н/Э9Э8.

Анализ ЬпО9О8-1, ЬпО9О8-2, МдЭ9Э8 и Н/О9О8, экспрессированных в ОЬЕ 1-дефицитном дрожжевом штамме

Как описано выше, три типичных гена ацил-СоА дельта-9-десатуразы (0908) клонируют из фитопатогенных грибов, МадмароПйе дпкеа (МдО9О8) и йерЮкрйаепа пойогшп (ЬиО9О8-1 и ЬиО9О8-2). Указанные гены и кодируемые ими белки ранее не были охарактеризованы. Ацил-СоА дельта-9десатуразы катализируют образование цис-двойной связи между 9 и 10 атомами углерода тиоэфиров насыщенных жирных кислот, содержащих 14, 16 и 18 атомов углерода, и кофермента А, с получением тетрадеценовой (14:1), гексадеценовой (16:1) или олеиновой кислоты (18:1) соответственно. Эффекты, связанные с организм-специфической биологией, устраняются путем экспрессии генов разных грибковых ацил-СоА дельта-9-десатураз в одной биологической среде. Так, экспрессия генов грибковых ацил-СоА дельта-9-десатураз осуществляется с использованием промотора эндогенного гена о1е1 в пальмитоилстеароил-СоА-десатураза (ОЬЕ1)-дефицитном дрожжевом штамме ОРΥ093. Таким образом, наблюдаемые в данной системе различия в специфичности к субстратам-жирным кислотам связаны с конкретными грибковыми дельта-9-десатуразами, экспрессированными в дополненном штамме 8. сегеуыае.

- 15 029904

Определяют субстратные специфичности СоА-десатураз ΜβΠ9ϋδ, ΕπΒ9ϋδ-1 и ΕπΠ9ϋδ-2, экспрессированных в дополненных штаммах ΘΥΡ093, по сравнению со штаммом ΘΡΥ093, дополненным ΑηΠ9Πδ (збеА), описанным в АО 1999/050430. Дрожжевую экспрессионную конструкцию, содержащую ген ΑπΠ9Ώδ, экспрессия которого управляется промотором гена о1е1, используют для трансформации штамма δ. сегеу151ае ΟΡΥ093 и экспрессируют по описанному выше способу.

Дополненные штаммы δ. сегеу151ае выращивают в минимальной среде, не содержащей жирные кислоты, при 30°С в течение 24 ч. Промытые и лиофилизированные клеточные осадки подвергают количественному анализу РАМЕ. Результаты данного анализа показаны в табл. 1. ΕπΏ9Πδ-2 обеспечивает образование С14:1 и С16:1, тогда как ΕπΏ9Πδ-1 и ΜβΠ9ϋδ отдают предпочтение С18:0, на что указывает соотношение жирных кислот С16:1/18:1, полученное в результате анализа жирнокислотного состава дрожжей.

Таблица 1. Сравнение жирнокислотного состава о1е1-дефицитных дрожжей, экспрессирующих четыре разные грибковые десатуразы

Десатураза	С14 : 0	С14:1	С16: 0	С16: 1	С18 : 0	С18 : 1	С16:1/ 16:0	С18:1/ 18 : 0	С16:1/ 18 : 1
ЬпО9О5-1	1,5	0,0	36, 5	8,7	1,8	51,5	0,2	28,2	0,17
ЬпО9О5-2	1,0	0,1	26, 6	38,1	6,3	27,9	1,4	4,4	1,37
Αηϋ9ϋ5	0,5	0,0	26, 3	7,8	2,0	63,4	0,3	31,7	0,12
МдО9О5	0,5	0,0	22,7	9,1	1,8	65,9	0,4	37,0	0,14
дрожжи дикого типа	0,6	0,0	9,6	38,6	6, 9	4 4,3
о1е1-пи11 + Тмееп® 80	2,6	0,4	38,0	10,9	7,8	40,4
Пустой вектор + Тмееп® 80	2,2	0,3	40,3	8,7	8,7	39,8

Затем новые десатуразы сравнивают с нативной стеароил-СоА дельта-9-десатуразой δ. сегеу151ае (о1е1), перенесенной в среду, используемую для рекомбинантной экспрессии. Конструируют дрожжевой вектор экспрессии, содержащий нуклеотидную последовательность δ. Сегеу151ае, описанную в АО 2000/011012.

Дрожжевую экспрессионную конструкцию, содержащую нативную стеароил-СоА дельта-9десатуразу δ. Сегеу151ае, используют для трансформации штамма δ. сегеу151ае ΟΡΥ093 и экспрессируют по описанному выше способу. В данных экспериментах также анализируют другую, не грибковую ацилСоА дельта-9-десатуразу, полученную из насекомых, относящихся к разновидностям Нейсоуегра /еа (ΗζΠ9ϋδ).

Дополненные штаммы δ. сегеу151ае, содержащие один из генов ΜβΠ9ϋδ, ΕπΏ9Πδ-2 и ΗζΠ9ϋδ, выращивают в истощенном бульоне δί'-ΕΚΑ. Контрольный штамм рОАВ467ЕУ-1 (ΟΡΥ093, трансформированный ρϋΑΒ467Β/Ν по описанному ранее способу трансформации дрожжей) выращивают в ЭОВ δί'ИКА + ТмеепА 80, а исходный, дефицитный по дельта-9-десатуразе штамм δ. сегеу151ае, ΟΡΥ093, выращивают в среде Г)ОВ зсАА + ТмеепА 80. В культуры вносят полоски клеток, свежеполученные из планшета, содержащего такую же среду и 1,5% агар. Штаммы выращивают при 30°С в течение 24 ч. Культуры центрифугируют при 6000 об/мин в течение 10 мин. Осадки промывают водой, снова центрифугируют при 6000 об/мин в течение 10 мин и затем замораживают при -20°С до проведения анализа РАМЕ. Анализируют три ряда экспрессионных культур.

Высушенные из замороженного состояния дрожжевые осадки омыляют в метаноле, содержащем 10% (мас./об.) №О11. Неомыленные липидные примеси (стеролы) удаляют гексаном. Метанольную фракцию подкисляют добавлением Η₂δΟ₄ и протонированные жирные кислоты экстрагируют гексаном. Выделенную гексановую фракцию высушивают, жирные кислоты метилируют 0,5 N МеОНС1 при 80°С в течение 30 мин. Полученные РАМЕ экстрагируют гексаном, содержащим метиловый эфир ундекановой кислоты в качестве внутреннего стандарта. Экстракты РАМЕ анализируют с помощью газового хроматографа с пламенно-ионизационным детектором Р1Р6890 ^ап1а С1ага, СА), оборудованным капиллярной колонкой ВРХ 70 (15 м х 0,25 мм х 0,25 мкм), δΟΒ (Аизйп, ТХ). РАМЕ разделяют в температурном градиенте, используя гелий в качестве газа-носителя. Каждый образец РАМЕ идентифицируют по времени удерживания и количественно определяют путем введения стандартной смеси РАМЕ рапсового масла МаЕеуа, ЕЕС (Р1еазап1 Оар, РА) в качестве калибровочного стандарта.

Табл. 2 описывает жирнокислотный состав (в виде %РАМЕ) о1е1-дефицитных дрожжевых клеток ОРΥ093, экспрессирующих разные типичные ацил Со-А дельта-9-десатуразы. Все штаммы хорошо растут, являются дополненными введенными десатуразами и не требуют эндогенных МИРА (мононенасыщенные жирные кислоты).

- 16 029904

Таблица 2. Жирнокислотный состав (в виде % от общего содержания ТАМЕ) о1е1-дефицитного дрожжевого штамма ΟΤΥ093, экспрессирующего ацил-Со-А дельта-9-десатуразы (в скобках приведено стандартное отклонение) ______

Десатураза	η	С14 : 0	С14:1	С16: 0	С16: 1	С18 : 0	С18 : 1
ЬпО9ЦЗ-2	7	1,4 (0,7)	1,4 (1,0)	26, 6 (4,5)	38,8 (2,8)	б, 0 (1,3)	25,4 (4,4)
Ηζϋ9ϋ3	6	2,6 (1,3)	0, 9 (0,5)	34,7 (6,8)	37,5 (4,2)	б, 0 (1,1)	18,4 (4,1)
о1е1	б	1,1 (0,4)	0, 6 (0,4)	14,4 (2,6)	49,2 (1,6)	5, 6 (1,1)	24,0 (1,1)
Αηϋ9ϋ3	8	0,5 (0,3)	0,2 (0,2)	23,5 (2,2)	9,3 (3,0)	2,1 (0,5)	64, б (3,2)
МдЦЭЦЗ	2	0,9 (0,0)	0, 1 (0,0)	21,2 (0,2)	12,1 (0,1)	1, б (0,1)	64,2 (0,3)

Приведенные данные показывают, что жирнокислотный состав дополненных дрожжевых штаммов варьирует в зависимости от введенного гена. Εηϋ9Ό3-2 продуцирует относительно высокие количества С 16:1, как и ΗζΌ9Ό3 и о1е1, тогда как Αηϋ9Ό3 и Μ§Ό9Όδ продуцируют относительно высокие количества С18:1.

Разный уровень превращения в зависимости от длины цепи можно дополнительно продемонстрировать путем расчета доли МИТА для каждой жирной кислоты с длиной цепи С14, С16 или С18, по отношению к общему содержанию жирных кислот. Полученные данные демонстрируют относительно высокий уровень превращения в С16:1 под действием Εηϋ9Ό3-2 и ΗζΌ9Ό3, и в С18:1 под действием Αηϋ9Όδ и Μ§Ό9Όδ. Табл. 3. В четырех нижних рядах приведены результаты для контрольных образцов, дополненных тергитолом, ненасыщенными жирными кислотами или Тхтееп®. Образцы с разными буквами различаются в значительной степени по результатам теста Тикеу-Кгатег, проводимого в комплекте статистического программного обеспечения ДМР (ЗАЗ ПтзППЛе 1пс., Сагу, N0).

Таблица 3. Доля МИТА в общем содержании жирных кислот каждой длины цепи (Схх:1/(Схх:0+Схх:1)

Десатураза	С14	С16*	С18
ΣηΟ9ϋ3-2	0,49	0,60 (Ь)	0,81 (Ь)
Ηζϋ9ϋ3	0,30	0,52 (Ь)	0,75 (с)
о1е1	0,34	0,79 (а)	0,81 (Ь)
Αηϋ9ϋ3	0,25	0,28 (с)	0,97 (а)
МдОЭОЗ	0,07	0,36 (с)	0,98 (а)
Пустой образец + тергитол	0,06	0	0
Пустой образец + тергитол + рицинолеиновая кислота	0,07	0	0,01
Пустой образец + тергитол + линолевая кислота	0	0	0,04
Пустой образец + ТВИН	0,65	0,23	0,87

* С16 МИТА включают в себя цис-вакценовую кислоту (С 18:1 Δ11), полученную в результате удлинения пальмитолеиновой кислоты (С16:1 Δ9)

Филогенез грибковых ацил-СоА десатураз

Филогенетический анализ нескольких аминокислотных последовательностей грибковых ацил-СоА дельта-9-десатураз позволяет предположить, что Εηϋ9Ό3-2 отличается от дельта-9-десатураз, предпочитающих 18:0. Таким образом, авторы выдвинули гипотезу, что характеристика других грибковых дельта9-десатураз, тесно связанных либо с дельта-9-десатуразами, предпочитающими 18:0, либо с Εηϋ9Ό3-2, может привести к идентификации десатураз с диапазоном активностей в отношении 18:0 или 16:0. Данная гипотеза позволяет предположить, что грибковая дельта-9-десатураза, более тесно связанная с Εηϋ9Ό3-2, будет иметь повышенную активность в отношении 16:0.

Поиск в общедоступных базах данных по последовательностям ДНК (Вгоаб Ιηδΐϊΐυΐ^, ΝΟΒΙ, е!с.) не выявил никаких генных последовательностей, специально обозначаемых как дельта-9-десатуразы МадиарогФе дг1зеа или ЦерФзрйаепа побелит. РРат анализ последовательностей Вгоаб 1из1Ди1;е, идентифицированных в данном описании, свидетельствует о том, что указанные белки содержат цитохром В5 и мотивы десатуразы, которые также обнаружены в других грибковых ацил-СоА дельта-9-десатуразах. Однако указанные белки не были ранее идентифицированы как ацил-СоА дельта-9-десатуразы. Авторы продемонстрировали наличие данной функции у указанных белков путем дополнения в дрожжах, обратных

- 17 029904

исследований и анализа последовательностей ДНК.

Взаимоотношения некоторых генных последовательностей грибковых десатураз анализируют филогенетически, используя метод соединения соседних последовательностей с помощью программного обеспечения ΜΕΘΆ. Татига е1 а1. (2007) Μοί. Βίοί. апд Еуо1ийоп 24:1596-9. На фиг. 1 показаны результаты филогенетического анализа последовательностей грибковых десатураз. Указанные последовательности идентифицируют путем В1азШ-ноиска в базе данных ΝΟΒΙ с использованием аминокислотной последовательности ΑηΠ9Ό8 (здеА). Εηϋ9Όδ-1 и Μ§Ό9Ό8 обладают более высоким уровнем идентичности последовательностей, чем ΕηΠ9Ό8-2. Кроме того, выравнивание ΕηΠ9Ό8-1, ΕηΠ9Ό8-2 и Μ§Ό9Ό8 с использованием С1из1а!Ш показывает отличие ΕηΏ9Ό8-2 от ΕηΏ9Ό8-1 и Μ§Ό9Ό8. Фиг. 2. Нуклеотидные последовательности ΕηΌ9Ό8-1 и Μ§Ό9Ό8 содержат более высокое число одинаковых пар оснований.

Табл. 4 и фиг. 3 дополнительно иллюстрируют филогенетическую взаимосвязь идентифицированных белков, Εηϋ9Ό8-1, Εηϋ9Ό8-2 и Μ§Ό9Ό8, а также ΑηΠ9Ό8 и дрожжевой десатуразы 8сОЕЕ1. Аминокислотные последовательности Εηϋ9Ό8-1, Μ§Ό9Ό8 и ΑηΠ9Ό8 (здеА) имеют более высокий процент идентичности по отношению друг к другу, чем Εηϋ9Ό8-2. Консервация аминокислотной идентичности позволяет предсказать, что субстратная специфичность в отношении 18:0 ацил-СоА зависит от консервативной последовательности, общей для ΕηΏ9Ό8-1, Μ§Ό9Ό8 и ΑηΏ9Ό8 (здеА). И наоборот, ацил-СоАсубстратная специфичность Εηϋ9Ό8-2 предпочтительно направлена на 16:0 в результате дивергенции ее аминокислотной последовательности.

Таблица 4. Аминокислотная идентичность разных последовательностей грибковых десатураз,

выровненных с использованием С1из1а1Ш

	ЬпО9ЦЗ-1	ЬпЦ9ЦЗ-2	МдЦЭЦЗ	Дрожжевая ΟΙιΕΙ
Αηϋ9ϋ5 (з<1еА)	81%	61%	75%	49%
Σηϋ9ϋ5-1	—	61%	75%	47%
Σηϋ9ϋ5-2	61%	--	62%	49%
МдО9О5	75%	62%	—	49%

Пример 2. Конструирование и синтез оптимизированных генов дельта-9-десатуразы Μа§ηаρο^ΐйе дпзеа, НеНсоуегра /еа и Еер1озрНаепа подогит

Чтобы достичь повышенной экспрессии генов грибковой дельта-9-десатуразы в каноле, авторы конструируют указанные гены так, чтобы они более эффективно экспрессировались в клетках трансгенной канолы, содержащих гетерологичный ген. Экстенсивный анализ последовательностей участков ДНК, кодирующих нативную дельта-9-десатуразу Μадпарο^ΐΗе дпзеа, НеНсоуегра /еа и Еер1озрНаепа подогит, раскрытых в данном документе как 8КС) ΙΌ N0:9, 8КС) ΙΌ ΝΟ: 10 и 8КС) ΙΌ ΝΟ: 11 соответственно, свидетельствует о присутствии нескольких мотивов последовательности, которые предположительно препятствуют оптимальной экспрессии в растении, а также неоптимального состава кодонов для такой экспрессии в растении. Чтобы сконструировать оптимизированные гены, кодирующие белок дельта-9десатуразу, авторы получают последовательности ДНК т зШсо, которые являются более "подобными растительным" (а именно более "канола-подобными") по природе, где модификации последовательности не препятствуют трансляции, или не приводят к образованию нестабильных мРНК.

Чтобы сконструировать оптимизированные для растения гены, кодирующие дельта-9-десатуразу, получают последовательности ДНК, кодирующие аминокислотные последовательности белков десатураз, с использованием избыточного генетического кода, определенного с помощью таблицы смещений кодонов, составленной на основе последовательностей, кодирующих белки конкретных растений-хозяев (т.е. канолы). Кодоны, предпочтительно используемые в каноле, показаны в табл. 5. В колонках С и О табл. 5 показано распределение (в % от применения всех кодонов для конкретной аминокислоты) синонимических кодонов для каждой аминокислоты, обнаруженное в кодирующих участках Вгаззюа нариз. Известно, что некоторые синонимичные кодоны, кодирующие некоторые аминокислоты, редко встречаются в генах растений (например, СОО в каноле). Считается, что кодон редко используется, если его встречаемость в генах растения любого типа составляет примерно 10% или менее от диапазона кодирования соответствующей аминокислоты (обозначают "ΌΝϋ" в колонках Ό и Н табл. 5). Чтобы оценить распределение кодонов остальных выборов, кодирующих аминокислоту, для каждого кодона рассчитывают средневзвешенное значение по формуле:

Средневзвешенное значение %С1 =

1/(%С1+%С2+%СЗ+др.)х%С1х100,

где С1 обозначает анализируемый кодон, а %С2, %С3 и др. обозначает средние значения % остальных синонимичных кодонов в Вгаззюа нариз (средние значения % соответствующих кодонов берут из колонок С и О табл. 5).

Средневзвешенное значение % для каждого кодона берут в колонках Ό и Н табл. 5.

- 18 029904

Таблица 5. Встречаемость синонимичных кодонов в кодирующих участках генов канолы (В. парик) (колонки С и О). Значения встречаемости сбалансированных-смещенных кодонов, определенные для конструкции оптимизированного, для растения синтетического гена, приведены в колонках Ώ и Н

А	В	С	ϋ	Ε	Е	Θ	Н
Аминокислота	Кодон	Канола %	Средневзвешенное Значение	Аминокислота	Кодон	Канола %	Средневзвешенное Значение
АЬА (А)	ССА	23,3	23,3	ЬЕи (ь)	СТА	10,1	ьыи
ССС	21,2	21,2	СТС	22,8	28,5
ССС	14,2	14,2	СТС	11,6	14,6
ест	41,3	41,3	СТТ	25,2	31,6
АКС (К)	АСА	31,8	43,8	ТТА	10,1	ϋΝυ
АСС	22,1	30,5	ТТС	20,2	25,3
ССА	9,9	ϋΝυ	ЬУЗ(К)	ААА	44,6	44,6
ССС	8,9	ϋΝυ	ААС	55,4	55,4
ССС	8,6	ϋΝυ	МЕТ(М)	АТС	100,0	100,0
ССТ	18,6	25,7	РНЕ (Е)	ЬТС	58,6	58,6
Α3Ν (Ν)	ААС	62,6	62,6	ТТТ	41,4	41,4
ААТ	37,4	37,4	РКО (Р)	ССА	29,6	29,6
АЗР (Ь)	САС	42,5	42,5	ССС	14,6	14,6
САТ	57,5	57,5	ССС	18,4	18,4
СУЗ (С)	ТСС	49,2	49,2	ССТ	37,3	37,3
ТСТ	50,8	50,8	ЗЕК (3)	АСС	16, 0	17,9
ΕΝϋ	ТАА	38,5	ϋΝυ	АСТ	14,1	15,8
ТАС	22,1	ϋΝυ	ТСА	18,2	20,4
ТСА	39,4	100,0	ТСС	16,7	18,7
СЬЫ (0)	САА	50,0	50,0	ТСС	10,7	ϋΝυ
САС	50,0	50,0	ТСТ	24,3	27,2
сьи (Е)	САА	43,6	43,6	ТНК(Т)	АСА	26,3	26,3
САС	56, 4	56, 4	АСС	26, 9	26, 9
СЬУ(С)	ССА	36,4	36,4	АСС	16, 9	16, 9
ССС	16,2	16,2	АСТ	30,0	30,0
ССС	15,2	15,2	ТКР (№)	ТСС	100,0	100,0
ССТ	32,1	32,1	ТУК (У)	ТАС	59,4	59,4
ΗΙ3(Н)	САС	49,6	49,6	ТАТ	40,6	40,6
САТ	50,4	50,4	УАЬ (V)	СТА	10,8	ϋΝυ
ЬЬЕ (I)	АТА	21,1	21,1	СТС	24,1	27,0
АТС	42,7	42,7	СТС	28,3	31,7
АТТ	36,2	36,2	СТТ	36, 8	41,3

**ΝΑ = Не применяется ***ΌΝυ = Не используется

Новые последовательности ДНК, которые главным образом кодируют аминокислотные последовательности дельта-9-десатураз МалпароЛИе дпкеа, НеНсоуегра /еа и Ьер1окрНаег1а побогит, δΗΟ ΙΌ ΝΟ: 12, δΗΟ ΙΌ ΝΟ: 13 и δΗΟ ΙΌ ΝΟ: 14 соответственно, конструируют для оптимальной экспрессии в каноле, используя распределение кодонов первого и второго выборов как кодоны, часто используемые в генах канолы. Новые последовательности ДНК отличаются от нативных последовательностей ДНК, кодирующих белки дельта-9-десатуразы, присутствием кодонов, предпочитаемых растением (т.е. кодонов первого предпочтения, второго предпочтения, третьего предпочтения или четвертого предпочтения) для кодирования соответствующей аминокислоты в каждом положении аминокислотной последовательности белка.

Конструирование оптимизированных для растения последовательностей ДНК инициируют путем обратной трансляции белковых последовательностей δΗΟ ΙΌ ΝΟ: 12, δΗΟ ΙΌ ΝΟ: 13 и δΗΟ ΙΌ ΝΟ: 14, используя таблицу смещения кодонов в каноле, составленную из колонок Ώ и Н табл. 5. Затем исходные последовательности модифицируют путем компенсирующих изменений кодонов (при сохранении общей средневзвешенной встречаемости кодона), чтобы удалить участки распознавания ферментами рестрикции, высокостабильные внутрицепочечные вторичные структуры и другие последовательности, которые могут оказывать вредное влияние на манипуляции по клонированию или экспрессию рекомбинантного гена в растениях. Затем последовательности ДНК повторно анализируют на участки распознавания ферментами рестрикции, которые могут возникать в процессе введения модификаций. Затем идентифицированные участки дополнительно модифицируют путем замены соответствующих кодонов предпочтительными кодонами первого, второго, третьего или четвертого выбора. Модифицированные последовательности дополнительно анализируют и дополнительно модифицируют, чтобы уменьшить встречаемость

- 19 029904

дублетов ТА и СО и увеличить встречаемость дублетов ТО и СТ. Помимо указанных дублетов, участки последовательности, содержащие более чем примерно шесть последовательных остатков [О+С] или [А+Т], модифицируют путем замены кодонов первого или второго и др. выбора на предпочтительные кодоны другого выбора. При конструировании гена редко используемые кодоны не включают в его состав в существенной степени, их используют только при необходимости применения критерия конструирования, отличного от состава кодонов как такового (такого как добавление или делеция участков распознавания ферментами рестрикции). Примеры сконструированных с помощью описанного способа синтетических оптимизированных для канолы последовательностей ДНК, кодирующих десатуразы, описаны в 8Ер ГО N0: 15, 8Ер ГО N0: 16 и 8Ер ГО N0: 17.

Полученные последовательности ДНК, описанные в 8Е^ ГО N0: 15-17, имеют повышенную степень разнообразия кодонов и желательный состав оснований. Кроме того, указанные последовательности содержат стратегически размещенные участки распознавания ферментами рестрикции и не содержат последовательности, которые могут препятствовать транскрипции гена или трансляции продукта мРНК. В табл. 6-8 сравнивают содержание кодонов в участках, кодирующих белки дельта-9-десатуразы, которые присутствуют в нативном гене и в его оптимизированных для растений версиях, и затем те и другие сравнивают с рекомендациями по содержанию кодонов для растение-оптимизированной последовательности, рассчитанными с использованием данных, приведенных в колонках Ό и Н табл. 5.

Таблица 6. Содержание кодонов в участках, кодирующих белок Μ§Ό9Ό8. Нативный участок, кодирующий десатуразу М. §п§а сравнивают с оптимизированной для растения версией

Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	%в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	%в оптимизированном для растения гене	Рекомендуемый состав оптимизированной для растения последовательности	Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	% в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	%в оптимизированном для растения гене	Рекомендуемый состав оптимизированной для растения последовательности
АЬА (А)	ОСА	4	10,5	10	26,3	23,3	ЬЕи (Ь)	СТА	0	0,0	0	0,0	0,0
ССС	18	47,4	8	21,1	21,2	СТО	11	28,9	11	28,9	28,5
ссс	3	7,9	4	10,5	14,2	СТО	11	28,9	5	13,2	14,6
ост	13	34,2	16	42,1	41,3	СТТ	12	31,6	12	31,6	31,6
АКС (К)	АСА	2	9,5	10	47,6	43,8	ТТА	0	0,0	0	0,0	0,0
ΑΟΟ	1	4,8	6	28,6	30,5	ТТО	4	10,5	10	26,3	25,3
СОА	2	9,5	0	0,0	0,0	ЬУ8 (К)	ААА	1	3,4	13	44,8	44,6
сос	12	57,1	0	0,0	0,0	ААС	28	96,6	16	55,2	55,4
соо	0	0,0	0	0,0	0,0	МЕТ (М)	АТС	7	100	7	100	100,0
сот	4	19,0	5	23,8	25,7	РНЕ (Р)	ТТС	17	89,5	11	57,9	58,6
ΑδΝ (Ν)	ААС	23	100.0	14	60,9	62,6	ТТТ	2	10,5	8	42,1	41,4
ААТ	0	0,0	9	39,1	37,4	РКО (Р)	ССА	0	0,0	6	28,6	29,6
ΑδΡ (О)	ОАС	17	68,0	11	44,0	42,5	ССС	9	42,9	3	14,3	14,6
САТ	8	32,0	14	56,0	57,5	ССС	5	23,8	4	19,0	18,4
СУ8 (С)	тос	2	66,7	1	33,3	49,2		сст	7	33,3	8	38,1	37,3
тот	1	33,3	2	66,7	50,8	δΕΚ (δ)	АОС	3	10,7	5	17,9	17,9
ΕΝΌ	ТАА	0	0,0	0	0,0	0,0	АОТ	0	0,0	4	14,3	15,8
ТАО	0	0,0	0	0,0	0,0	ТСА	5	17,9	7	25,0	20,4
ТОА	1	100,0	1	100,0	100,0	ТСС	9	32,1	4	14,3	18,7
СЬИ (Ω)	САА	2	9,5	11	52,4	50,0	ТСО	9	32,1	0	0,0	0,0
ОАО	19	90,5	10	47,6	50,0	ТСТ	2	7,1	8	28,6	27,2
оьи (Е)16	ОАА	1	6,7	7	46,7	43,6	ТНК (Т)	АСА	4	16,7	6	25,0	26,3
ОАО	14	93,3	8	53,3	56,4	АСС	15	62,5	7	29,2	26,9
СЬУ (С)	ОСА	8	19,5	15	36,6	36,4	АСО	1	4,2	4	16,7	16,9
ООО	13	31,7	7	17,1	16,2	АСТ	4	16,7	7	29,2	30,0
ООО	1	2,4	6	14,6	15,2	ТКР (\¥)	ТОО	21	100	21	100	100,0
СОТ	19	46,3	13	31,7	32,1	ТУК (Υ)	ТАС	16	94,1	10	58,8	59,4
ΗΙδ (Н)	САС	19	95,0	10	50,0	49,6	ТАТ	1	5,9	7	41,2	40,6
САТ	1	5,0	10	50,0	50,4	УАЬ (V)	ОТА	1	2,5	0	0,0	0,0
1ЬЕ (I)	АТА	1	4,2	5	20,8	21,1	СТС	21	52,5	11	27,5	27,0
АТС	15	62,5	10	41,7	42,7	ОТО	4	10,0	13	32,5	31,7
АТТ	8	33,3	9	37,5	36,2	ОТТ	14	35,0	16	40,0	41,3

- 20 029904

Таблица 7. Содержание кодонов в участках, кодирующих белок ΗζΌ9Όδ. Нативный участок, кодирующий десатуразу Н. ζеа, сравнивают с оптимизированной для растения . версией

Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	% в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	% в оптимизированном для растения гене	Рекомендуемый состав оптимизированной для растения последовательности	Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	%в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	% в оптимизированном для растения гене	Рекомендуемый состав оптимизированной для растения последовательности
АЬА (А)	ОСА	4	ИД	9	25,7	23,3	ЬЕи Д)	СТА	2	5,9	0	0,0	0,0
ССС	7	20,0	7	20,0	21,2	СТС	8	23,5	10	29,4	28,5
ССС	8	22,9	4	П,4	14,2	СТС	14	41,2	6	17,6	14,6
ОСТ	16	45,7	15	42,9	41,3	СТТ	6	17,6	10	29,4	31,6
АКС (Ю	АСА	1	7,7	6	46,2	43,8	ТТА	2	5,9	0	0,0	0,0
АСС	5	38,5	4	30,8	30,5	ТТС	2	5,9	8	23,5	25,3
ССА	2	15,4	0	0,0	0,0	ЬУ8 (К)	ААА	11	44,0	10	40,0	44,6
ССС	5	38,5	0	0,0	0,0	ААС	14	56,0	15	60,0	55,4
ССС	0	0,0	0	0,0	0,0	МЕТ (М)	АТС	8	100	8	100	100,0
сст	0	0,0	3	23,1	25,7	РНЕ (Р)	ТТС	20	83,3	14	58,3	58,6
Α8Ν (Ν)	ААС	13	72,2	11	61,1	62,6	ТТТ	4	16,7	10	41,7	41,4
ААТ	5	27,8	7	38,9	37,4	РКО (Р)	ССА	1	6,3	5	31,3	2,.6
А8Р (О)	САС	16	64,0	12	48,0	42,5	ССС	5	31,3	3	18,8	14,6
САТ	9	36,0	13	52,0	57,5	ССС	2	12,5	2	12,5	18,4
СУ8 (С)	ТСС	1	100,0	0	0,0	49,2		ССТ	8	50,0	6	37,5	37,3
ТСТ	0	0,0	1	100,0	50,8	8ЕК (8)	АСС	2	12,5	3	18,8	17,9
ΕΝΌ	ТАА	1	100,0	0	0,0	0,0	АСТ	1	6,3	3	18,8	15,8
ТАО	0	0,0	0	0,0	0,0	ТСА	1	6,3	3	18,8	20,4
ТСА	0	0,0	1	100,0	100,0	ТСС	6	37,5	3	18,8	18,7
СЬИ (Ω)	САА	2	33,3	3	50,0	50,0	ТСС	3	18,8	0	0,0	0,0
САС	4	66,7	3	50,0	50,0	ТСТ	3	18,8	4	25,0	27,2
сьи (Е)16	САА	7	63,6	5	45,5	43,6	ТНК (Т)	АСА	3	16,7	5	27,8	26,3
САС	4	36,4	6	54,5	56,4	АСС	7	38,9	5	27,8	26,9
СЬУ (С)	ССА	8	40,0	9	45,0	36,4	АСС	4	22,2	3	16,7	16,9
ССС	6	30,0	4	20,0	16,2	АСТ	4	22,2	5	27,8	30,0
ССС	2	10,0	3	15,0	15,2	ТКР (XV)	ТСС	14	100	14	100	100,0
ССТ	4	20,0	4	20,0	32,1	ТУК (Υ)	ТАС	12	80,0	9	60,0	59,4
Н18(Н)	САС	11	73,3	8	53,3	49,6	ТАТ	3	20,0	6	40,0	40,6
САТ	4	26,7	7	46,7	50,4	УАЬ (V)	СТА	0	0,0	0	0,0	0,0
ГОЕ (I)	АТА	3	15,0	4	20,0	21,1	СТС	5	26,3	5	26,3	27,0
АТС	10	50,0	9	45,0	42,7	СТС	13	68,4	6	31,6	31,7
АТТ	7	35,0	7	35,0	36,2	СТТ	1	5,3	8	42,1	41,3

Всего 165 165 Всего 189 189

21

029904

Таблица 8. Содержание кодонов в участках, кодирующих белок ЬпП9П5-2. Нативный участок, кодирующий десатуразу Б. побогат сравнивают с оптимизированной для растения версией

Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	% в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	%в оптимизированном для растения гене	Рекомендуемый состав оптимизированной для растения последовательности	Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	%в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	%в оптимизированном для растения гене	Рекомендуемый состав оптимизированной для растения последовательности
АЬА (А)	ОСА	3	9,4	7	21,9	23,3	ЬЕи (Ь)	СТА	7	15,6	0	0,0	0,0
ОСС	9	28,1	7	21,9	21,2	СТО	14	31,1	13	28,9	28,5
ОСО	12	37,5	5	15,6	14,2	СТО	7	15,6	7	15,6	14,6
ост	8	25,0	13	40,6	41,3	СТТ	5	П,1	14	31,1	31,6
АКС (Ю	АСА	4	13,8	13	44,8	43,8	ТТА	3	6,7	0	0,0	0,0
АСС	3	10,3	9	31,0	30,5	ТТО	9	20,0	11	24,4	25,3
ССА	7	24,1	0	0,0	0,0	ЬУ8(К)	ААА	9	45,0	9	45,0	44,6
ССС	8	27,6	0	0,0	0,0	ААС	11	55,0	11	55,0	55,4
ссс	5	17,2	0	0,0	0,0	МЕТ (М)	АТС	9	100	9	100	100,0
сот	2	6,9	7	24,1	25,7	РНЕ (Р)	ТТС	16	80,0	12	60,0	58,6
ΑδΝ (Ν)	ААС	6	50,0	8	66,7	62,6	ТТТ	4	20,0	8	40,0	41,4
ААТ	6	50,0	4	33,3	37,4	РКО (Р)	ССА	3	16,7	5	27,8	29,6
ΑδΡ (О)	САС	16	66,7	10	41,7	42,5	ССС	8	44,4	3	16,7	14,6
САТ	8	33,3	14	58,3	57,5	ССО	2	П,1	3	16,7	18,4
ΟΥδ (С)	ТСС	4	80,0	2	40,0	49,2		сст	5	27,8	7	38,9	37,3
ТОТ	1	20,0	3	60,0	50,8	δΕΚ (δ)	АОС	8	27,6	5	17,2	17,9
ΕΝϋ	ТАА	0	0,0	0	0,0	0,0	АОТ	6	20,7	5	17,2	15,8
ТАО	1	100,0	0	0,0	0,0	ТСА	1	3,4	6	20,7	20,4
ТОА	0	0,0	1	100,0	100,0	ТСС	6	20,7	5	17,2	18,7
СЬИ (Ω)	САА	10	55,6	10	55,6	50,0	ТСО	7	24,1	0	0,0	0,0
САО	8	44,4	8	44,4	50,0	ТСТ	1	3,4	8	27,6	27,2
оьи (Е)16	САА	5	33,3	7	46,7	43,6	ТНК (Т)	АСА	11	44,0	7	28,0	26,3
ОАО	10	66,7	8	53,3	56,4	АСС	5	20,0	7	28,0	26,9
СЬУ (С)	ОСА	13	34,2	14	36,8	36,4	АСО	7	28,0	4	16,0	16,9
ООО	16	42,1	6	15,8	16,2	АСТ	2	8,0	7	28,0	30,0
ООО	6	15,8	6	15,8	15,2	ТКР (\¥)	ТСС	19	100	19	100	100,0
СОТ	3	7,9	12	31,6	32,1	ТУК (Υ)	ТАС	11	64,7	10	58,8	59,4
ΗΙδ(Η)	САС	12	66,7	9	50,0	49,6	ТАТ	6	35,3	7	41,2	40,6
САТ	6	33,3	9	50,0	50,4	УАЬ (V)	ОТА	6	17,6	0	0,0	0,0
1ЬЕ (I)	АТА	4	18,2	5	22,7	21,1	ОТС	10	29,4	9	26,5	27,0
АТС	9	40,9	10	45,5	42,7	ОТО	12	35,3	11	32,4	31,7
АТТ	9	40,9	7	31,8	36,2	ОТТ	6	17,6	14	41,2	41,3

Всего 214 214 Всего 236 236

Синтез фрагментов ДНК, содержащих δΕΟ ГО ΝΟ: 15, δΕΟ ГО ΝΟ: 16 и δΕΕ) ГО ΝΟ: 17, проводят коммерческие поставщики (Ρίοοδοτίρΐ, Ноиз1оп, ТХ и В1ие Негоп Вю1есБпо1оду, Во1Бе11, ^Л). Указанные канола-оптимизированные последовательности обозначают как версия 2 (ν2). Затем синтетические фрагменты ДНК клонируют в векторах экспрессии и используют для трансформации АдгоЪас1епит и канолы, как описано в приведенных ниже примерах.

Пример 3. Конструирование плазмиды

Указанные ниже плазмиды конструируют с помощью стандартных методов молекулярной биологии. Конструируют полинуклеотидные фрагменты, содержащие элементы, регулирующие транскрипцию в растениях (включающие в себя промотор, связанный с представляющим интерес геном, оканчивающимся З'иТК.), или "РТИ", и объединяют их с другими элементами, регулирующими транскрипцию в растениях, в Т-цепочечном участке бинарного вектора.

Описание рБАВ7318: рБАВ7318 (фиг. 6; δΕΕ) ГО ΝΟ: 58) конструируют с помощью стандартных методов молекулярной биологии. Указанная плазмида содержит две последовательности РТИ десатуразы. Первая последовательность РТи десатуразы содержит промотор фазеолина РБазеоШз ^1§ап8 (промотор РуР1к^ ν2 (δΕ9 ΙΌ ΝΟ: 67); ОепЪапк: Ю1263), 5'-нетранслируемый участок РЬазео1^ (5'ЕТЕ ΕνΕΙκίδ (δΕ9 ГО ΝΟ: 68); ОепЪапк: Ю1263), ген АпБ9Б8 ν3 (8Ε9 ГО ΝΟ: 49), 3'-нетранслируемый участок Р^ео1ш ν^^ίδ (3'-ИТК РуР1к^ ν1 (δΕ9 ΙΌ ΝΟ: 69); ОепЪапк: Ю1263) и участок присоедине- 22 029904

ния матрикса Р1а8ео1и8 уи1даг18 (3'-МАК ΡνΡ1κ·ΐ8 ν2 (8ЕЦ ΙΌ N0: 70); ОепЬапк: 101263). Вторая последовательность РТи десатуразы содержит промотор Р\РНа8 ν2, 5'-ИТК ΡνΡ1ι;·ΐ8. ΕηΌ9Όδ-2 ν2 (8ЕЦ ΙΌ N0: 17) и 3'-нетранслируемый участок ОКЕ23 АдгоЬаДегшш 1итеГас1еп8 (3'-ИТК А1иОКЕ23 (8ЕЦ ГО N0: 71); Ниапд е! а1. (1990) 1. Вас1егю1. 172:1814-22).

Элементы РТИ десатуразы соединяются посредством дополнительных коротких встроенных последовательностей. Две последовательности РТИ десатуразы фланкируются участками рекомбинации Оа!етеау®, ΙηνίίΐΌ^η, которые обеспечивают перенос указанных экспрессионных кассет РТИ в плазмиду, используемую для трансформации А§гоЬас1егшт. Кроме того, плазмида содержит точку начала репликации и маркер селекции по канамицину.

Описание рЭАВ7319: рЭАВ7319 (фиг. 7; §ЕЦ ГО N0: 60) конструируют путем Оа1е\\цу®рекомбинации между рЭАВ7318 и рЭАВ7309 (фиг. 5; §ЕЦ ГО N0: 53). Указанная плазмида содержит две последовательности РТи десатуразы, описанные в предыдущем разделе "Описание рОАВ7318". Указанные РТИ располагаются в ориентации голова-хвост в Т-цепочечных бордюрных участках ДНК бинарного вектора рОАВ7309, используемого для трансформации растений. Этот бинарный вектор содержит РТИ фосфинотрицин-ацетилтрансферазы, который включает в себя промотор вируса мозаики жилок маниоки (промотор С8УМУ ν2 ; Уегйадиег е! а1. (1996) Р1ап! Мо1. Вю1. 31:1129-39); фосфинотрицинацетилтрансферазу (РАТ ν5; VоЫ1еЬеη е! а1. (1988) Оепе 70:25-37); и 3'-нетранслируемый участок 0КЕ1 АдгоЬаДегшт 1итеГас1еп8 (3'ИТК Λΐιι0ΡΗ ν4; Ниапд е! а1. (1990), выше), в добавление к другим регуляторным элементам, таким как участок присоединения матрикса РВ7 №сойапа (аЬасиш (РВ7 МАКу2; ОепЬапк: И67919), овердрайв 0уегйпуе (Того е! а1. (1988) Ргос. №ιΐ1. Асай. 8с1. ИЗА 85 (22):8558-62) и Тцепочечные бордюрные последовательности (Т-ДНК-бордюр А и Т-ДНК-бордюр В; Оагйпег е! а1. (1986) 8аепсе 231:725-7, и международная патентная публикация РСТ №. ν0 2001/025459А1). Плазмиды, содержащие описанные выше РТИ, выделяют и проверяют путем расщепления рестрикционными ферментами и секвенирования ДНК.

Описание рОАВ7320: рОАВ7320 (фиг. 8; §ЕЦ ГО N0:55) конструируют с помощью стандартных методов молекулярной биологии. Указанная плазмида содержит одну последовательность РТи десатуразы. РТи десатуразы содержит промотор РνРЬа8 ν2, 5'-ИТК РνРЬа8, ЬпО9П§-2 ν2 (8ЕЦ ΙΌ N0: 17) и 3'иТР А1и0КР23. Элементы РТи десатуразы соединяются посредством дополнительных коротких встроенных последовательностей. Последовательность РТи десатуразы также фланкируется участками рекомбинации Оа1е^ау®, 1^йгодеп, которые обеспечивают ее перенос в плазмиду, используемую для трансформации А§гоЬас1егшт. Кроме того, плазмида содержит точку начала репликации и маркер селекции по канамицину.

Описание рОАВ7321: рОАВ7321 (фиг. 9; §ЕЦ ГО N0: 61) конструируют путем Оа1е\уау®рекомбинации между рОАВ7320 и рОАВ7309. Указанная плазмида содержит последовательность РТи десатуразы, описанную в предыдущем разделе "Описание рОАВ7319". Указанный РТИ располагается в ориентации голова-хвост в Т-цепочечных бордюрных участках ДНК бинарного вектора рОАВ7309, используемого для трансформации растений. Этот бинарный вектор содержит РТи фосфинотрицинацетилтрансферазы: промотор С8УМУ ν2; РАТ ν5; и 3'-ИТК А1и0КР1 ν4, в добавление к другим регуляторным элементам, таким как овердрайв и Т-цепочечные бордюрные последовательности (Т-ДНКбордюр А и Т-ДНК-бордюр В). Плазмиды, содержащие описанный выше РТи, выделяют и проверяют путем расщепления рестрикционными ферментами и секвенирования ДНК.

Описание рОАВ7323: рОАВ7323 (фиг. 10; §ЕЦ 1Р N0: 56) конструируют с помощью стандартных методов молекулярной биологии. Указанная плазмида содержит две последовательности РТИ десатуразы. Первый РТи десатуразы содержит промотор РνРЬа8 ν2, 5'-ИТК РνРЬа8, Λη^9^δ ν3 (8ЕЦ ΙΌ N0: 47), 3'-ИТК РνРЬа8 и 3'-МАК РνРЬа8 ν2. Второй РТи десатуразы содержит промотор РνРЬа8 ν2, 5'-ИТК РνРЬа8, ΗζΌ9Όδ ν2 (8ЕЦ ΙΌ N0: 16) и 3'-ИТК ΛΐиОΚΡ23. Элементы РТИ десатуразы соединяются посредством дополнительных коротких встроенных последовательностей. Две последовательности РТИ десатуразы фланкируются участками рекомбинации Оа1е^ау®, ^йгодеп, которые обеспечивают перенос указанных экспрессионных кассет РТи в плазмиду, используемую для трансформации Λ§^оЬасΐе^^ит. Кроме того, плазмида содержит точку начала репликации и маркер селекции по канамицину.

Описание рОАВ7324: рОАВ7324 (фиг. 11; §ЕЦ ГО N0: 62) конструируют путем Оа1е\уау®рекомбинации между рОАВ7323 и рОАВ7309. Указанная плазмида содержит две последовательности РТи десатуразы, описанные в предыдущем разделе "Описание рОАВ7323". Указанные РТи располагаются в ориентации голова-хвост в Т-цепочечных бордюрных участках ДНК бинарного вектора рОАВ7309, используемого для трансформации растений. Этот бинарный вектор содержит РТи фосфинотрицин-ацетилтрансферазы: промотор С8УМУ ν2; РАТ ν5; и 3'ИТК ΛΐиОΚΡ1 ν4, в добавление к другим регуляторным элементам, таким как овердрайв и Т-цепочечные бордюрные последовательности (ТДНК-бордюр А и Т-ДНК-бордюр В). Плазмиды, содержащие описанные выше РТИ, выделяют и проверяют путем расщепления рестрикционными ферментами и секвенирования ДНК.

Описание рОАВ7325: рОАВ7325 (фиг. 12; §ЕЦ ГО N0:57) конструируют с помощью стандартных

- 23 029904

методов молекулярной биологии. Указанная плазмида содержит одну последовательность РТи десатуразы. Данный РТи десатуразы содержит промотор РуРЬик ν2, 5'-ИТК РуРНик, ΗζΌ9Όδ ν2 (5>Еф ΙΌ N0: 16) и 3'-ИТК Л1и0КР23. Элементы РТи десатуразы соединяются посредством дополнительных коротких встроенных последовательностей, а последовательность РТи десатуразы фланкируется участками рекомбинации Са1еуау®, Ιηνίΐτο^βη, которые обеспечивают ее перенос в плазмиду, используемую для трансформации ЛдгоЪас1егшт. Кроме того, плазмида содержит точку начала репликации и маркер селекции по канамицину.

Описание ρΌΆΒ7326: рЭЛБ7326 (фиг. 13; 5>Еф ГО N0: 63) конструируют путем Са1еуау®рекомбинации между ρΌΆΒ7325 и ρΌΆΒ7309. Указанная плазмида содержит последовательность десатуразы РТИ, описанную в предыдущем разделе "Описание ρΌΆΒ7325." Указанные РТи располагаются в ориентации голова-хвост в Т-цепочечных бордюрных участках ДНК бинарного вектора ρΌΆΒ7309, используемого для трансформации растений. Этот бинарный вектор содержит РТи фосфинотрицинацетилтрансферазы: промотор СкУМУ ν2; РАТ ν5; и З-'ИТК ΛΐιιΟΡΕΙ ν4, в добавление к другим регуляторным элементам, таким как овердрайв и Т-цепочечные бордюрные последовательности (Т-ДНКбордюр А и Т-ДНК-бордюр В). Плазмиды, содержащие описанные выше РТи, выделяют и проверяют путем расщепления рестрикционными ферментами и секвенирования ДНК.

Описание ρΌΛΒ7327: ρΌΛΒ7327 (фиг. 14; 5>Еф ГО N0: 58) конструируют с помощью стандартных методов молекулярной биологии. Указанная плазмида содержит одну последовательность РТи десатуразы. РТи десатуразы содержит промотор РуРНах ν2, 5'-иТК РуРЬик, ген ΛηΌ9Όδ ν3 (5>Еф ΙΌ N0: 49) и 3'иТР Λΐιι0ΡΕ23. Элементы РТи десатуразы соединяются посредством дополнительных коротких встроенных последовательностей. Последовательность РТи десатуразы также фланкируется участками рекомбинации Са1еуау®, ΙηνίΐΓο^η, которые обеспечивают ее перенос в плазмиду, используемую для трансформации АдгоЪас1егшт. Кроме того, плазмида содержит точку начала репликации и маркер селекции по канамицину.

Описание ρΌΛΒ7328: ρΌΛΒ7328 (фиг. 15; 5>Еф ГО N0: 64) конструируют путем Са1еуау®рекомбинации между ρΌΛΒ7327 и ρΌΛΒ7309. Указанная плазмида содержит последовательность РТи десатуразы, описанную в предыдущем разделе "Описание ρΌΛΒ7327". Указанный РТИ располагается в ориентации голова-хвост в Т-цепочечных бордюрных участках ДНК бинарного вектора ρΌΛΒ7309, используемого для трансформации растений. Этот бинарный вектор содержит РТи фосфинотрицинацетилтрансферазы: промотор СкУМУ ν2; РАТ ν5; и 3'ИТК Λΐιι0ΡΕ1 ν4, в добавление к другим регуляторным элементам, таким как овердрайв и Т-цепочечные бордюрные последовательности (Т-ДНКбордюр А и Т-ДНК-бордюр В). Плазмиды, содержащие описанный выше РТи, выделяют и проверяют путем расщепления рестрикционными ферментами и секвенирования ДНК.

Описание ρΌΛΒ7329: ρΌΛΒ7329 (фиг. 16; 5>Еф ГО N0: 59) конструируют с помощью стандартных методов молекулярной биологии. Указанная плазмида содержит одну последовательность РТи десатуразы, которая включает в себя промотор Р\РНа5 ν2, 5'-ИТК РуРН)^ Μ§Ό9Όδ ν2 (5>Еф ΙΌ N0: 15) и 3'-ИТК А1и0КР23. Элементы РТИ десатуразы соединяются посредством дополнительных коротких встроенных последовательностей. Последовательность РТи десатуразы фланкируется участками рекомбинации Са1еуау®, Ιηνίΐτο^η, которые обеспечивают ее перенос в плазмиду, используемую для трансформации АдгоЪас1егшт. Кроме того, плазмида содержит точку начала репликации и маркер селекции по канамицину.

Описание ρ^АБ7330: ρ^АБ7330 (фиг. 17; 5>Еф ГО N0: 65) конструируют путем Са1еуау®рекомбинации между ρ^АΒ7329 и ρ^АΒ7309. Указанная плазмида содержит последовательность РТи десатуразы, описанную в предшествующем разделе "Описание ρ^АΒ7325." Указанный РТи располагается в ориентации голова-хвост в Т-цепочечных бордюрных участках ДНК бинарного вектора ρ^АБ7309, используемого для трансформации растений. Этот бинарный вектор содержит РТИ фосфинотрицин-ацетилтрансферазы: промотор СкУМУ ν2; РАТ ν5; и 3'ИТК А1и0КЕ1 ν4, в добавление к другим регуляторным элементам, таким как овердрайв и Т-цепочечные бордюрные последовательности (ТДНК-бордюр А и Т-ДНК-бордюр В). Плазмиды, содержащие описанный выше РТи, выделяют и проверяют путем расщепления рестрикционными ферментами и секвенирования ДНК.

Описание ρ^АБ7331: Помимо описанных выше, конструируют контрольную плазмиду, которая не содержит РТИ десатуразы (5>Еф ГО N0: 66). Фиг. 18. Кроме регуляторных элементов, описанных в ρ^АБ7309, данная конструкция содержит только РТи фосфинотрицин-ацетилтрансферазы.

Пример 4. Трансформация АдгоЪас1ег1цт

Электро-компетентные клетки АдгоЪас1егшт ШтеГааеик (табл. 9) получают по способу \Уефе1 анй СкыеЬгоок (2002) "Ноу Ю ТгаикГогт А^аЪ^άορк^к" СН. 5, ίη А^аЪ^άορк^к, Со1б δρτίη^ НагЪог ЬаЪогаФгу Ргекк, Со1б δρτίη§ НагЪог, N¥2 50 мкл компетентных клеток АдгоЪас1егшт оттаивают на льду и трансформируют, используя от 300 до 400 нг плазмидной ДНК бинарного вектора. Клеточную смесь подвергают электропорации в присутствии ДНК, используя предварительно охлажденные кюветы для электропорации (0,2 см) и электропоратор Β^-Ραύ Севе Ри1кег® (Негси1ек, СА), в следующих условиях: напряжение: 2,5 кВ, длительность импульса: 5 мсек, конденсаторная емкость на выходе 25 мкФ, сопротивле- 24 029904

ние 200 Ω. После электропорации в каждую кювету добавляют 1 мл бульона УЕР (дрожжевой экстракт (10 г/л), пептон (10 г/л) и ЫаС1 (5 г/л)), после чего суспензию клеток в среде УЕР переносят в пробирку для культивирования объемом 15 мл. Клетки инкубируют, осторожно встряхивая, при 28°С в течение 4 ч, и затем культуру помещают на чашки, содержащие УЕР+агар и подходящий фактор селекции в соответствии с табл. 9. Чашки инкубируют в течение 2-4 дней при 28°С, после чего колонии отбирают, полосами наносят на свежие чашки, содержащие УЕР+агар, для селекции по антибиотику и инкубируют при 28°С в течение 1-3 дней. Колонии проверяют как АдгоЪас1спит, используя кетолактозный тест, и затем выделяют положительные по кетолактозе колонии путем двух пассажей отдельных колоний. Конечную накладку колоний делают после завершения выделения отдельных колоний.

Таблица 9. Штаммы АдгоЪас1спит и выбор . антибиотика

Штамм	Геномная селекция	Т±-хелперная селекция	Селекция по бинарному вектору
Ζ7075	З-ЬгерГотусз-П	Капатус1п	5ресЫпотус1п
ША2569	ЕгуЬЬготус1п	Капатус1п	5ресЫпотус1п
ЕНА105	ЗЕгерЕотусз-П	Нет	5ресЫпотус1п
ША2552	ЕгубНготустп	Нет	ЗресЫпотустп

Проверка колоний АдгоЪас1спит: Анализ на присутствие интактной плазмиды проводят методом рестрикционного расщепления, используя вектор-специфичные рестрикционные ферменты. Для выделения плазмидной ДНК из выбранных трансформированных колоний АдгоЪас1спит используют наборы для выделения плазмидной ДНК Масйсгсу-Ыадс1 Ыис1соВопб® в соответствии с рекомендациями производителя. В качестве контроля служит плазмидная ДНК бинарного вектора, используемого для трансформации АдгоЪас1спит. Проводят четыре отдельные реакции расщепления, используя 0,75-1 мкг ДНК. Реакцию оставляют протекать в течение 1-2 ч и затем анализируют методом электрофореза в агарозном геле с окрашиванием бромидом этидия. Отбирают колонии, для которых продукты расщепления под действием всех ферментов являются идентичными плазмидному контролю и имеют ожидаемые размеры согласно расположению полос.

Штамм А. ШтсГасюпз ЬВА404 (1п\з1годсп Саг1зЪаб, СаИГогша) используют для трансформации АгаЫборз1з, а штамм А. ШтсГасюпз 2707З (НсрЪигп с! а1. (1985) I. Осп. М1сгоЪю1. 131:2961-9) - для трансформации канолы.

Пример 5. АдгоЪас1сгшт-опосредованная трансформация АгаЫборз1з !йа11апа

Трансформация АгаЫборз1з: АгаЫборз1з трансформируют, используя метод погружения цветковых растений, основанный на способе С1оидй апб Всп! (1998) Р1ап! I. 16:735-743. Выбранную колонию АдгоЪас1сгшт используют для инокуляции одной или нескольких пре-культур в 30 мл бульона УЕР, содержащего соответствующие антибиотики для селекции. Культуру (культуры) инкубируют в течение ночи при 28°С, постояно перемешивая при 220 об/мин. Каждую пре-культуру используют для инокуляции двух культур в 500 мл бульона УЕР, содержащего антибиотики для селекции, после чего культуры инкубируют в течение ночи при 28°С, постояно перемешивая. Затем клетки центрифугируют примерно при 8700 д в течение 10 мин при комнатной температуре и полученный супернатант отбрасывают. Клеточный осадок осторожно ресуспендируют в 500 мл инфильтрационной среды, содержащей: соли 1/2х МигазЫдс апб Зкоод/витамины В5 ОатЪогд, 10% (мас./об.) сахарозы, 0,044 мкМ бензиламинопурина (10 мкл/литр исходного раствора в ДМСО с концентрацией 1 мг/мл) и 300 мкл/л ЗП\ус1® Ь-77. Растения возрастом примерно 1 месяц погружают в среду на 15 с, следя за тем, чтобы новые соцветия были погружены. Затем растения выкладывают на бок, накрывают (прозрачным или непрозрачным покрытием) и оставляют на 24 ч, после чего промывают водой и ставят вертикально. Растения выращивают при 22°С с периодом чередования свет/темнота 16/8 ч. Примерно через 4 недели после погружения от растений собирают семена.

Условия выращивания АгаЫборз1з 1ИаИапа: Свежесобранные семена сушат в течение 7 дней при комнатной температуре в присутствии обезвоживающего средства. После сушки семена суспендируют в 0,1% растворе агарозы (З1дта Сйст1са1 Со., З1. Ьошз, М0). Суспендированные семена хранят при 4°С в течение 2 дней, чтобы достичь состояния покоя и гарантировать одновременное прорастание семян (расслаивание). Смесь ЗипзЫпс ЬР5 (Зип Ого НогИсиНигс 1пс., Вс11суис, ^А) покрывают тонким слоем вермикулита и подвергают подповерхностному орошению раствором Ноад1ап до увлажнения. Почвенную смесь дренируют в течение 24 ч. Расслоенные семена высевают на вермикулит, накрывают влагосберегающими колпаками (ΚΘΗΌ Ргобис1з, Вгата1са, 0п!агю, Сапаба) и держат в течение 7 дней. После прорастания семян растения выращивают в автоматическом регуляторе Сопсзгоп (модели СМР4030 и СМР3244, Соп!го11сб Еп\згоптсп1з Ытбсб, Жпшрсд, МапбоЪа, Сапаба) в условиях длинного дня (16 ч свет/8 ч темнота) при интенсивности света 120-150 мкмоль/м²с, постоянной температуре (22°С) и влажности (40-50%). Растения вначале поливают раствором Ноад1ап, а затем деионизированной водой, держа почву влажной, но не мокрой. Незадолго до сбора семян (за 1-2 недели до сбора) растения высушивают.

Селекция трансформированных растений Т₁: Семена Т₁ высевают в лотки для проращивания разме- 25 029904

ром 10,5"х21" (Т.О. Р1а8Йс8 1пс., С1еатоа1ег, МЩ, как описано выше, и выращивают в указанных условиях. Колпаки удаляют через 5-6 дней после высевания. Через 5 дней и затем через 10 дней после высевания проростки обрызгивают 0,20% раствором гербицида глуфосината (ЫЬеДу) в объеме 10 мл/лоток (703 л/га), используя пневматический распылитель ^еV^1Ь^88 для доставки эффективного количества, 280 г/га, глуфосината. 10 мл раствора гербицида глуфосината вносят пипеткой в сцинтилляционный флакон объемом 20 мл для каждого обрызгиваемого лотка. Орошающую жидкость доставляют путем горизонтального и вертикадльного нанесения. После каждого орошения все селекционные лотки снабжают бирками, на которых указаны название гербицида, частота нанесения и дата нанесения. Через 4-7 дней после второго орошения идентифицируют устойчивые к гербициду растения и пересаживают их в горшки, содержащие смесь 8ип8Ыпе ЬР5. Пересаженные растения помещают в теплицу и выращивают в указанных выше условиях. Через шесть-восемь недель после пересаживания от каждого растения собирают семена и хранят их отдельно под индивидуальным идентификационным номером.

Пример 7. АдгоЬаЫегшт-опосредованная трансформация канолы

Получение А§гоЬас1егшт: Штаммы А§гоЬас1егшт, содержащие одну из плазмид рОАВ7319, рОАВ7321, рОАВ7324, рОАВ7326, рОАВ7328, рОАВ7330 и рОАВ7331, высевают штрихом в чашки со средой УЕР (бактопептон (20,0 г/л) и дрожжевой экстракт (10,0 г/л)), содержащей стрептомицин (100 мг/мл) и спектиномицин (50 мг/мл), после чего инкубируют в течение 2 дней при 28°С. Петлю двухдневной культуры из засеянной штрихом чашки инокулируют в 150 мл модифицированной среды УЕР, содержащей стрептомицин (100 мг/мл) и спектиномицин (50 мг/мл), которая находится в стерильной опрокинутой колбе (колбах) объемом 500 мл, и встряхивают при 200 об/мин и 28°С. Перед трансформацией гипокотилей канолы культуры ресуспендируют в М-среде (соли Ь8; 3% глюкозы; модифицированные витамины В5; 1 мкМ кинетин; 1 мкМ 2,4-Ό; рН 5,8) и разбавляют до подходящей плотности (50 ед. Клетта).

Трансформация канолы: Проращивание семян: Осуществляют поверхностную стерилизацию семян канолы (разновидность №хега 710) 10% водным раствором гипохлорита в течение 10 мин, после чего семена промывают три раза на стальных ситах стерильной дистиллированной водой. Семена проращивают в среде для канолы '/₂ М8 (1/2 М8, 2% сахарозы, 0,8% агара), содержащейся в фитолотках (25 семян на фитолоток). Лотки помещают в климатическую камеру для проращивания семян (Регщуа1 8с1епЫгс, 1пс., Репу, 1А) с режимом роста, установленным на 25°С и фотопериод 16 ч света/8 ч темноты, и проращивают в течение 5 дней.

Предварительная обработка: На 5 день в асептических условиях вырезают сегменты гипокотиля размером ~3 мм, отбрасывая кусочки корня и ростка (высушивание гипокотилей предотвращают, помещая их в процессе вырезания в 10 мл стерильной воды тИИЦ). Сегменты гипокотиля помещают горизонтально на стерильной фильтровальной бумаге в каллюс-индуцирующую среду, М8КГО1 (М8; 1 мг/л кинетина; 1 мг/л 2,4-Ό; 3% сахарозы; 0,7% фитагара), и держат в течение 3 дней стадии предварительной обработки в климатической камере для проращивания с режимом роста, установленным на 22-23°С и фотопериод 16 ч света/8 ч темноты.

Совместное культивирование с А§гоЬас!егшт: За день до обработки А§гоЬас!егшт инокулируют колбы со средой УЕР, содержащей подходящие антибиотики. Сегменты гипокотилей переносят с фильтровальной бумаги в пустые чашки Петри размером 100х25 мм, содержащие 10 мл жидкой среды М для предотвращения высушивания сегментов гипокотилей. На данной стадии для сбора и переноса сегментов используют шпатель. Жидкую среду М удаляют пипеткой, после чего в чашки Петри добавляют 40 мл суспензии А§гоЬас1егшт (на 500 сегментов 40 мл раствора А§гоЬас1егшт). Сегменты обрабатывают в течение 30 мин, периодически вращая чашки Петри так, чтобы гипокотили оставались погруженными в раствор АдгоЬаЫегшт. В конце периода обработки раствор АдгоЬас!егшт переносят пипеткой в лабораторный стакан для отходов, автоклавируют и отбрасывают (раствор А§гоЬас1егшт полностью удаляют, чтобы предотвратить разрастание А§гоЬас1егшт). Обработанные гипокотили переносят пинцетом обратно в исходные чашки, содержащие М8КГО1 и фильтровальную бумагу, следя за тем, чтобы сегменты не высыхали. Сегменты гипокотилей вместе с контрольными сегментами возвращают в климатическую камеру для проращивания с пониженной интенсивностью света (которую достигают, накрывая чашки алюминевой фольгой), и обработанные гипокотили культивируют совместно с А§гоЬас1егшт в течение 3 дней.

Индукция каллюса на селекционной среде: После 3 дней совместного культивирования сегменты гипокотилей переносят по отдельности пинцетами на каллюс-индуцирующую среду, М8КГО1Н1 (М8; 1 мг/л кинетина; 1 мг/л 2,4-Ό; 0,5 г/л МЕ8; 5 мг/л АдУ0₃; 300 мг/л тиментина; 200 мг/л карбенициллина; 1 мг/л НегЫасе; 3% сахарозы; 0,7% фитагара). Сегменты гипокотилей фиксируют на среде, но не погружают в нее.

Селекция и регенерация ростков: После культивирования в течение 7 дней на каллюсиндуцирующей среде, содержащие каллюс сегменты гипокотилей переносят в среду для регенерации ростков 1, содержащую маркер селекции, М8В321Н1 (М8; 3 мг/л ВАР; 1 мг/л зеатина; 0,5 г/л МЕ8; 5 мг/л А8У0₃,; 300 мг/л тиментина; 200 мг/л карбенициллина; 1 мг/л НегЫасе; 3% сахарозы; 0,7% фитага- 26 029904

ра). Через 14 дней гипокотили с побегами переносят в среду для регенерации 2 с повышенным содержанием маркера селекции, Μ8Β3Ζ1Η3 (М8; 3 мг/л ВАР; 1 мг/л зеатина; 0,5 г/л МЕ8; 5 мг/л АдЫОз; 300 мг/л тиментина; 200 мг/л карбенициллина; 3 мг/л НегЫасе®; 3% сахарозы; 0,7% фитагара).

Удлинение ростков: Через 14 дней сегменты с ростками перносят в среду для удлинения ростков, М8МЕ8Н5 (М8; 300 мг/л тиментина; 5 мг/л НегЫасе®; 2% сахарозы; 0,7% агара ТС). Удлинившиеся ростки выделяют и переносят в М8МЕ8Н5. Через 14 дней остальные ростки, которые не удлинились в первом цикле, помещают на М8МЕ8Н5 и переносят в свежую селекционную среду такого же состава. На данной стадии все оставшиеся сегменты гипокотилей отбрасывают.

Ростки, удлинившиеся на среде Μ8Β3Ζ1Η3, через две недели выделяют и переносят в среду М8МЕ8Н5. Остальные ростки, которые не удлинились в первом цикле на М8МЕ8Н5, выделяют и переносят в свежую селекционную среду такого же состава. На данной стадии все оставшиеся сегменты гипокотилей отбрасывают.

Индукция корневой системы: Через 14 дней ростки переносят в среду М8МЕ8Т (М8; 0,5 г/л МЕ8; 300 мг/л тиментина; 2% сахарозы; 0,7% агара ТС) для индукции корневой системы. Ростки, у которых не появились корни после первого переноса на среду М8МЕ8Т, подвергают переносу второго или третьего цикла на среду М8МЕ8Т до получения растений с корнями. Ростки, которые не удлинились/не пустили корни после первого переноса на среду М8МЕ8Т, подвергают переносу второго или третьего цикла на среду М8МЕ8Т до получения растений с корнями. Растения, которые пустили корни на среде М8МЕ8Н5 или М8МЕ8Т, и являются ПЦР-положительными, отправляют для пересадки в почву. После закаливания растения канолы То дополнительно анализируют, чтобы идентифицировать особи, содержащие трансгенные кассеты РТИ. Затем растения переносят в теплицу, выращивают до стадии зрелости и собирают семена для дополнительного анализа.

Пример 8. Анализ ДНК из ткани листьев АгаЫбор818 Т₁ и ткани листьев канолы Т₀

Растения канолы Т₀ и растения АгаЫбор818 Т₁ анализируют, чтобы идентифицировать особи, содержащие экспрессионные кассеты РТИ. Анализы 1пуабег® проводят с целью исходного скрининга образцов предположительно трансформированных растений и идентификации особей, содержащих одну копию ра! РТИ. Особи, идентифицированные как содержащие одну копию, сохраняют и дополнительно анализируют на присутствие одного или нескольких РТИ десатуразы методом ПЦР. Образцы, являющиеся ПЦР-положительными по экспрессионной кассете РТИ десатуразы, дополнительно анализируют методом саузерн-блоттинга. Анализ методом саузерн-блоттинга проводят, чтобы подтвердить присутствие в растениях генной экспрессионной кассеты РТИ из бинарного вектора, используемого для трансформации растений. Однокопийные особи, содержащие все РТИ, выбирают для дальнейшей разработки.

Выделение ДНК: Общую геномную ДНК (гДНК) экстрагируют из лиофилизированной ткани листа с помощью растительного набора П№а§у® 96 Оадеп, Уа1епша, СА). Затем полученную гДНК разбавляют до 10 нг/мкл (канола) или 0,7 нг/мкл (АгаЫбор818) для анализа числа копий методами ПЦР и 1пуабег®.

Анализ 1пуабег®: Анализ числа копий селектируемого маркера ра! проводят методом 1пуабег® (ТЫгб \Уауе ТесЬпо1од1е8, Маб18оп, ^1). Геномную ДНК денатурируют при 95°С в течение 10 мин, охлаждают на льду и смешивают с основной смесью реагентов, содержащей олигонуклеотидные зонды, молекулы красителей, способные к резонансному переносу энергии флуоресценции (РКЕТ) и расщепляющий фермент, в соответствии с инструкцией производителя. Реакционные смеси содержат зонды в качестве внутренних стандартов генов. Ген 1-дезоксиксилулоза-5-фосфат редуктоизомеразы (ΌΧΚ1) используют в качестве внутреннего стандарта для генов АгаЫборЩ в реакциях анализа 1пуабег®, а ген белка из группы высокоподвижных белков (НМ0а) используют в качестве внутреннего стандарта для генов канолы в реакциях анализа 1пуабег®. Кроме того, планшеты содержат 1-копийные, 2-копийные и 4-копийные стандарты, а также контрольные образцы дикого типа и пустые лунки, не содержащие образец. Все реакционные смеси покрывают минеральным маслом и затем инкубируют в термоциклере при 63 °С в течение 1,5 ч. После инкубации реакционную смесь прочитывают на флюорометрическом планшет-ридере (8упег§у(ТМ) 2, ВюТек ЫЧгшпепК ХУиюоАк УТ). Результаты считывания собирают для обоих каналов РАМ (λ 485-528 нм) и КЕО (λ 560-620 нм). На основе полученных результатов для каждого образца определяют превышение нулевого уровня (т. е. фоновый уровень) во всех каналах путем деления исходного сигнала образца на исходный сигнал в лунке, не содержащей матрицы. С помощью полученных данных конструируют стандартную кривую и определяют наилучшее приближение методом линейнорегрессионного анализа. Используя параметры, идентифицированные на основе данного приближения, определяют кажущееся число копий для каждого образца.

Анализ ПЦ: Анализ ПЦР проводят с использованием праймеров, применяющихся для амплификации каждого элемента транскрипции в растениях. Указанные праймеры расположены в промоторе (фазеолина) и в 3'-ИТК (Фазеолина или ОКР23). Указанные одинаковые наборы праймеров используют для анализа ПЦР как канолы, так и АгаЫборхЫ Для ПЦР-анализа плазмид рЭАВ7319 и рЭАВ7324 используют праймеры МА8414 (8ЕО ГО N0: 18) и МА8415 (8ЕО ГО N0: 19), чтобы амплифицировать первый РТИ. Указанный РТИ содержит промотор фазеолина, функциональный эквивалент гена ацил-СоА дель- 27 029904

та-9-десатуразы АкрегдШик тби1апк (А1ГО9В8 ν3; 8ЕЦ ΙΌ ΝΟ: 49) и терминатор 3'ИТК фазеолина. Для ПЦР-амплификации второго РТИ из конструкции рЭАВ7319, используют праймеры МА8415 и МА8413 (8ЕЦ ГО ΝΟ: 20). Указанный РТИ содержит промотор фазеолина, функциональный эквивалент гена ацил-СоА дельта-9-десатуразы ЬерЮкрЬаейа побогит (^и^9^8-2 ν2; 8ЕЦ ГО ΝΟ: 17) и 3'ИТК ОКР23. Пары праймеров МА8415 и МА8413 также используют для амплификации второго РТИ плазмид, образованных в результате трансформации плазмидой рИАВ7324 (промотор фазеолина, ген ацил-СоА дельта9-десатуразы Небсогег^эа /еа ν2 (ΗζΌ9Όδ ν2; 8ЕЦ ΙΌ ΝΟ: 16) и 3'ИТК ΟΚΡ23). Кроме того, пары праймеров МА8415 и МА 8413 также используют для амплификации РТИ, входящих в состав конструкций рИАВ7321 и РИАВ7326.

Реакции ПЦР проводят в объеме 25 мкл, используя 20 нг геномной ДНК, 5 единиц Ех Тад (Такага), 1х буфер для реакции, 0,2 мкМ каждого бNТР и 0,8 мкМ каждого праймера. Реакции амплификации проводят в термоблоке ЭХА Епдше Те!габ® 2 (ВюКаб, Негси1ек, СА). Для праймеров МА8413 и МА8415 используют следующие условия реакций: 3 мин при 94°С; затем 35 циклов по 30 с при 94°С, 30 с при 63°С и 3 мин при 72°С; конечное удлинение проводят в течение 10 мин при 72°С. Для праймеров МА8414 и МА8415 используют такие же условия реакции с единственным отличием, заключающимся в том, что температуру уменьшают с 63°С до 60°С. Продукты реакции анализируют в 1% агарозном геле, окрашивают бромидом этидия и визуализируют на Се1-Иос™.

Анализ методом саузерн-блоттинга: Анализ методом саузерн-блоттинга используют для определения характера интеграции событий в каноле. С помощью указанных экспериментов получают данные, демонстрирующие интеграцию трансгена десатуразы в геном канолы и его целостность. Выбранное событие характеризуют как полноразмерное, простое событие интеграции, включающее в себя одну копию трансгена десатуразы из бинарного вектора, используемого для трансформации растения.

Детальный анализ методом саузерн-блоттинга проводят с использованием зондов, специфичных к генам десатуразы и дескриптивным ферментам рестрикции, которые способны расщеплять плазмиду в определенных участках. В результате указанного расщепления образуются способные к гибридизации фрагменты внутренней части плазмиды, или фрагменты, охватывающие соединение плазмиды с геномной ДНК канолы (бордюрные фрагменты). Размеры молекул, определенные методом саузернгидридизации для сочетания ферментов рестрикции и зондов, являются уникальными для каждого события. Указанные анализы также демонстрируют, что фрагмент плазмиды встраивается в геномную ДНК канолы без реаранжировки Т-цепочечной ДНК.

Чтобы провести анализ методом саузерн-блоттинга, 100 мг лиофилизованной ткани листьев канолы экстрагируют, используя набор Р1ап! Мии Κι! (Ц1адеп). Чтобы определить число копий, пять микрограмм (5 мкг) гДНК на образец расщепляют одновременно рестрикционными эндонуклеазами 8ре! и Рас1 (№ге Епд1апб Вю1аЪк, 1ркге1сН, МА) с получением фрагментов, содержащих представляющие интерес РТИ и/или селектируемый маркер (РАТ). Расщепленную ДНК анализируют на 0,8% агарозном геле.

Коротко говоря, после электрофоретического разделения и визуализации фрагментов ДНК гели подвергают депуринизации путем обработки 0,25Ν НС1 в течение примерно 20 мин, после чего их обрабатывают денатурирующим раствором в течение примерно 30 мин и затем нейтрализующим раствором в течение по меньшей мере 30 мин. В течение ночи проводят саузерн-перенос на нейлоновые мембраны (МйНроге, ВШейса, МА), используя капиллярную систему, содержащую 10х 88С. После переноса мембраны промывают раствором 2х 88С и затем присоединяют к ним ДНК путем сшивания под действием УФ. Данный способ позволяет получить саузерн-мембраны, готовые к гибридизации.

Получают зонды, ПЦР-фрагменты амплифицируют из плазмидной ДНК и очищают методом гельэкстракции, используя набор для гель-экстракции О1Ас|шск® (Ц1адеп). Для получения зонда БпВ9В8 используют праймеры агге008 (8ЕЦ ГО ΝΟ: 21) и агге009 (8ЕЦ ГО ΝΟ: 22). Для получения зонда ШЭ9 используют праймеры агге010 (8ЕЦ ГО ΝΟ: 23) и агге011 (8ЕЦ ГО ΝΟ: 24). Условия ПЦР для всех трех реакций включают в себя 35 циклов с температурой отжига 63°С и временем удлинения 1 мин. Фрагменты ПЦР метят ³²Р, используя набор для произвольного мечения праймеров Рпте-П®® КтТ (8!га!адепе, Ьа 1о11а, СА).

Стадию гибридизации проводят в течение ночи примерно при 65°С в гибридизационном термостате. Блоты нейлоновых мембран промывают, подвергают воздействию "рНокрНог ипаде ксгееп" в течение ночи и сканируют на сканере 8!огт™ 860 (Мо1еси1аг Иупатэск, 8иииуνаίе, СА).

Пример 9. Жирнокислотный состав семян трансгенного АгаЪ1борк1к, содержащего ацил-СоА дельта9-десатуразу

Растения АгаЫборык трансформируют векторами АдгоЪас!ейит, содержащими гены иГО9О8-2 ν2 (рИАВ7321; 81®) ГО ΝΟ: 61), I ΙζΙ)9Ι)8 ν2 (рИАВ7326; 81®) ΙΌ ΝΟ: 63) или Мд1)91)8 ν2 (рИАВ7330; 81®) ΙΌ ΝΟ: 65). Растения также трансформируют вектором, содержащим ген А1ГО9О8 (рИАВ7328; 8ЕЦ ГО ΝΟ: 64). Пустой вектор, содержащий только селектируемый маркерный ген ра! (рИАВ7331; 8ЕЦ ГО ΝΟ: 66), испоьзуют в качестве отрицательного контроля. Трансформации также проводят с использованием сочетания двух десатураз, стеароил-специфичной десатуразы (АпВ9В8) и пальмитоил-специфичной десатуразы, либо ЬпВ9В8-2 (рИАВ7319; 81®) ГО ΝΟ: 60), либо ΙΙζΙ)9Ι)8 (рБАВ7324; 81®) ГО ΝΟ: 62). Во

- 28 029904

всех случаях гены десатураз находятся под контролем семя-специфичного промотора РуРйаз (патент США 5504200). Совокупность семян Т₂ собирают с гербицид-устойчивых растений Τι, проверенных на содержание гена ра! путем анализа Шуабег® и РТИ десатуразы путем анализа методом ПЦР.

Образцы семян гомогенизируют в гептане, содержащем тригептадеканоин (Ии-СНек ргер, Е1уз1ап, ММ) в качестве заменителя, используя стальной шарик и шаровую мельницу. Перед гомогенизацией к образцу добавляют 0,25 М раствор свежеполученного МеС)№ (81§та) в МеОН. Реакцию проводят при умеренном нагревании (40°С) и постоянном встряхивании. Реакцию контролируют путем извлечения метилированного заменителя. Экстракцию РАМЕ повторяют три раза, после чего все гептановые слои объединяют перед анализом. Полноту экстракции подтверждают путем анализа присутствия РАМЕ в четвертом цикле экстракции/дериватизации. Полученные РАМЕ анализируют методом ОС-РГО, используя капиллярную колонку ВРХ 70, 8ОЕ (15 м х 0,25 мм х 0,25 мкм). Каждый РАМЕ идентифицируют по времени удерживания и количественно определяют путем введения стандартной смеси рапсового масла, Ма1геуа, ЬЬС (Р1еазап1 Оар, РА), в качестве калибровочного стандарта.

Анализ РАМЕ семян Т2 трансгенных особей демонстрирует, что экспрессия каждой десатуразы вносит значительный вклад в уменьшение общего содержания насыщенных жирных кислот в семенах, определяемое по среднему содержанию насыщенных жирных кислот в каждой группе особей. Табл. 10 и фиг. 19. В данной таблице и в нижеследующих таблицах значения, обозначенные разными буквами, различаются в значительной степени по результатам теста Тикеу-Кгатег Η8Ό, проводимого в пакете статистического программного обеспечения 1МР® (8А8 Ιηδ!ίίυ!β Ιη^, Сагу, ЫС). Сочетания АпВ9Э8 с ЬпВ9В8-2 или ΗζΌ9Ό8 дают самое низкое среднее значение общего содержания насыщенных жирных кислот.

Хотя все десатуразы снижают общее содержание насыщенных жирных кислот в семенах АгаЫборδίδ, они оказывают разное влияние на содержание пальмитиновой и стеариновой жирных кислот, в соответствии с прогнозами, сделанными на основе экспериментов с дрожжами. Табл. 11 и фиг. 20 показывают среднее содержание пальмитиновой кислоты в каждой группе особей. Табл. 12 и фиг. 21 показывают среднее содержание стеариновой кислоты в семенах Т2 каждой группы особей.

Таблица 11. Содержание пальмитиновой кислоты в семенах Т₂ АгаЫбор815

Ген					Среднее содержание пальмитиновой кислоты
Контроль	Α				7,72
Дикий тип	Α				7,54
Μςϋ9ϋ3 ν2		В			7,19
Αηϋ9ϋ3 ν3			С		б, 02
ЪпО9ОЗ-2 ν2			С		5, 98
Ηζϋ9Ο3 ν2				ϋ	5,57
Αηϋ9ϋ3 ν3 + ЪпО9ОЗ-2 ν2				ϋ	5,54
Αηϋ9ϋ3 ν3 + ΗζΏ9Ώ3 ν2				Ό	5,41

- 29 029904

Лп1)91)8 и \1μΙ)9Ι)8 оказывают более значительное влияние на содержание стеариновой кислоты. чем ЬпП9П8-2 и I ΙζΙ)9Ι)8. И наоборот. ЬпП9П8-2 и I ΙζΙ)9Ι)8 оказывают более значительное влияние на содержание пальмитиновой кислоты. чем АпП9П8 и Μ§Ό9Ό8. Сочетания десатураз оказывают более значительное влияние на обе жирные кислоты. Такие же результаты получают при анализе влияния десатураз на повышение в семенах содержания пальмитолеиновой кислоты. которая является первичным продуктом дельта-9-десатурации пальмитиновой кислоты. Табл. 13 и фиг. 22.

Таблица 13. Содержание пальмитолеиновой кислоты в семенах Т₂ АгаЫбор515

профиля жирных кислот у особей с самым низким общим содержанием насыщенных жирных кислот (среднее значение от пяти особей с самым низким содержанием насыщенных жирных кислот) приведено в табл. 14 наряду с жирнокислотным профилем семян растений дикого типа и растений. трансформированных контролем.

- 30 029904

Таблица 14. Жирнокислотный профиль трансгенных АгаЫбор515 Т₂, имеющих самое низкое общее содержание насыщенных жирных кислот. Стандартные отклонения приведены в скобках

	С14 : 0	С16: 0	С1б:1	С18 : 0	С18 : 1	Уасс. *
	0,08	7,54	0,31	2,94	14,91	1,47
Дикий тип	(0,02)	(0,41)	(0,05)	(0,19)	(1,44)	(0,10)
Контроль	0,08	7,72	0,32	2,96	14,20	1,46
(0,02)	(0,05)	(0,04)	(0,34)	(2,04)	(0,11)
	0,07	5,10	2,92	0,72	20,52	1,72
Αηϋ9ϋ5 ν3	(0,01)	(0,38)	(0,55)	(0,03)	(2,12)	(0,26)
	0,06	4,13	4,11	1,26	19,34	1,94
Ηζϋ9ϋ3ν2	(0,00)	(0,23)	(0,47)	(0,08)	(1,01)	(0,25)
	0,05	4,68	3,49	1,53	19,35	2,05
Ьпй9ОЗ-2 ν2	(0,00)	(0,30)	(0,69)	(0,12)	(0,81)	(0,21)
	0,08	6, 64	1,60	1,05	18,01	1,60
Μρϋ9ϋ3ν2	(0,02)	(0,26)	(0,54)	(0,20)	(1,86)	(0,16)
Αηϋ9ϋ3 ν3 +	0,06	4,41	3,71	0,97	19,60	2,03
Ьпй9ОЗ-2 ν2	(0,00)	(0,17)	(0,35)	(0,33)	(0,88)	(0,21)
Αηϋ9ϋ3ν3 +	0,08	4,86	4,09	1,01	18,10	2,03
Ηζϋ9ϋ3ν2	(0,02)	(0,35)	(0,65)	(0,22)	(2,40)	(0,31)

* Уасс. = цис-ваксеновая кислота (18:1 п-7)

	С18:2	С18 : 3	С20: 0	С20:1	С20:2	С22 : 0	С22 :1	С24 : 0
Дикий	28,72	17,85	2,06	20,11	1,78	0,34	1,68	0,21
тип	(0,97)	(0,81)	(0,16)	(0,90)	(0,15)	(0,10)	(0,19)	(0,10)
Контроль	29,28 (1,29)	18, 07 (1,35)	2,08 (0,16)	19,62 (1,23)	1,85 (0,17)	0,39 (0,13)	1,70 (0,04)	0,27 (0,14)
Αηϋ9ϋ3	29,64	17,59	0,44	18,26	1,42	0,24	1,26	0, 10
ν3	(1,34)	(1,28)	(0,04)	(0,83)	(0,15)	(0,16)	(0,09)	(0,05)
Ηζϋ9ϋ3ν2	29,31 (0,94)	17,26 (0,39)	0,81 (0,06)	18,39 (0,66)	1,47 (0,10)	0,18 (0,05)	1,50 (0,04)	0,23 (0,03)
ЬпБ9ОЗ-	27,72	17,46	1,00	19,33	1,45	0,32	1,48	0, 10
2ν2	(0,18)	(0,55)	(0,11)	(0,46)	(0,11)	(0,14)	(0,10)	(0,09)
МдО9ОЗ	29,76	17, 98	0,63	19,19	1,60	0,26	1,44	0, 16
ν2	(1,10)	(0,84)	(0,63)	(0,86)	(0,09)	(0,20)	(0,09)	(0,03)
Αηϋ9ϋ3ν3
+	29,17	18,84	0,59	17,65	1,40	0,39	1, 13	0,03
ЬпЭ9ОЗ-2	(0,31)	(0,41)	(0,27)	(0,23)	(0,04)	(0,03)	(0,06)	(0,02)
ν2
Αηϋ9Ο3ν3 I	29,28	18,83	0,65	17,88	1,55	0,20	1,33	0,11
Τ Ηζϋ9ϋ3ν2	(1,78)	(1,69)	(0,21)	(1,90)	(0,20)	(0,12)	(0,24)	(0,08)

Помимо уменьшения содержания насыщенных пальмитиновой и стеариновой жирных кислот и увеличения содержания мононенасыщенных жирных кислот (пальмитолеиновой и олеиновой), присутствие десатураз также приводит к уменьшению количества арахидиновой кислоты (С20:0) в семенах. Предположительно это обусловлено тем, что данная жирная кислота образуется в результате удлинения стеариновой и пальмитиновой кислот. Непосредственная десатурация С20:0 под действием введенных десатураз, по-видимому, отсутствует, поскольку не выявлено сопутствующее повышение содержания эйкозеновой кислоты (С20:1) в виде С20:1Д9.

Пример 10. Получение антитела против дельта-9-десатуразы

Диагностические средства, такие как антитела, нужны для характеристики экспрессии трансгенного белка дельта-9-десатуразы в растениях. Поскольку ацил-СоА дельта-9-десатуразы являются мембраносвязанными белками, трудно достичь рутинную сверхэкспрессию в ЕзсйепсЫа сой. Однако для получения антител можно осуществить сверхэкспрессию С-концевого фрагмента каждого белка дельта-9десатуразы, который не содержит никаких трансмембранных доменов белка.

Полимеразные цепные реакции: ПЦР-праймеры конструируют для амплификации эквивалентного С-концевого фрагмента каждой десатуразы. 3'-Праймер конструируют так, чтобы он кодировал фрагмент белка с С-концевым маркером 6х Ηϊδ. Чтобы облегчить клонирование, в состав 5'- и 3'-праймеров вводят участки рестрикции Же! и ВатН1 соответственно. Последовательности праймеров приведены в табл. 15.

- 31 029904

Ожидаемые продукты амплификации имеют размеры 659 п.о. для Γηϋ9Ό8-2, 683 п.о. для МдБ9П8 и 335 п.о. для Н/Б9П8. Реакции ПЦР проводят с использованием набора для ПЦР Такага Ех Тад™ (СЬйлсй, МоиШат У1еу, СА) в условиях, рекомендуемых поставщиком. Общий объем реакционной смеси ПЦР составляет 50 мкл. Каждая реакционная смесь содержит 200 нг плазмидной ДНК и 50 пмоль каждого праймера. ДНК денатурируют при 94°С в течение 1 мин, затем проводят 30 циклов, включающих в себя 94°С в течение 30 с, 60°С в течение 1 мин и 72°С в течение 30 с. Конечное удлинение проводят при 72°С в течение 10 мин. Каждый продукт ПЦР пропускают через две лунки на стерильном 0,75% агарозном геле, затем ДНК очищают в геле, используя вращающиеся колонки Мораде, и элюируют 15 мкл буфера ТЕ.

Таблица 15. Последовательности олигонуклеотидных праймеров, используемых для ПЦР-амплификации С-концевых фрагментов ΓηΏ9Ό8-2, МдВ9Б8 и Н/В9Б8__

Праймер	Последовательность	Назначение
Апб1ЬпО9О52Г	5Е<2 Ю N0:25 САТАТСТТССАССАСАСАСССАССССТССАСАС	Прямой праймер для С-концевого участка ЬпО9О52
Апб1ЬпО9О52КН	5Е<2 Ю N0:26 ССАТССССАСССАСАССССССТСААССААССТСТС	Обратный праймер для С-концевого участка ЬпО9О52
АпбгМдОЭОЗЕ	5Е<2 Ю N0:27 САТАТСТТССАССАТСССААСТСССССССТСАТСАС	Прямой праймер для С-концевого участка МдО9О5
АпбгМдОЭОЗКН	5Е<2 Ю N0:28 ССАТССССССССТСАССАСССССААСАСССТС	Обратный праймер для С-концевого участка МдО9О5
Αη6ίΗζϋ9Ο5Ε	5Е<2 Ю N0:29 САТАТСТАТСАСААСТССАТСААСССТТСС	Прямой праймер для С-концевого участка Ηζϋ9Ο5
Αη6ίΗζϋ9Ο5ΚΗ	5Е<2 Ю N0:30 ССАТССТССТСТТТАСССТТСАТССТААТСССТСС	Обратный праймер для С-концевого участка Ηζϋ9Ο5

ТОРО-клонирование: Очищенные С-концевые фрагменты подвергают ТА-клонированию в векторах ТОРО® рСК®2.1 (Iиν^ΐ^одеи, СагГЪаб, СА) и используют для трансформации клеток Е. соН Тор 10 в соответствии с инструкцией производителя (Iиν^ΐ^одеи). Отбирают трансформированные клетки и выделяют плазмидную ДНК, используя колонки Ж1с!ео8рт® (МасйегеуАаде1 ОтЪН & Со, Оигет Оета^). Три микролитра (3 мкл) ДНК расщепляют ферментами Ше1 и ВатН1 в общем объеме 20 мкл в течение 90 мин при 37°С, после чего продукты разделяют в 0,8% агарозном геле. В каждом случае наблюдают ген-специфический фрагмент (и полосу вектора ТОРО® размером 3,9 т.о.). Для каждого клонированного гена выбирают три положительных клона и проводят секвенирование, чтобы подтвердить, что амплифицированный фрагмент ПЦР не содержит ошибки. Все клоны МдБ9П8 содержат молчащую точечную мутацию в положении 45, указывающую либо на однонуклеотидный полиморфизм между опубликованной последовательностью и ПЦР-матрицей, либо на молчащую ошибку ПЦР. Поскольку мутация является молчащей, нет необходимости проводить коррекцию и клон выбирают для субклонирования.

Получение плазмид экспрессии С-концевого фрагмента дельта-9-десатураза: ПЦР-амплифицированные фрагменты гена, кодирующего дельта-9-десатуразу, расщепляют ферментами рестрикции Ше1 и ВатН1 и лигируют в соответствующие участки рестрикции экспрессионного вектора рЕТ30Ъ(+). Ста- 32 029904

дия клонирования завершается добавлением 15 С-концевых аминокислот. составляющих С-концевой маркер 6х Ηΐ8. облегчающий очистку полноразмерного белка. Предполагается. что указанные добавленные аминокислоты не влияют на экспрессию белка. Выбранные положительные клоны проверяют путем расщепления ферментом рестрикции и секвенирования.

Экспрессия С-концевых пептидных фрагментов дельта-9-десатуразы в Е. сой: Плазмиды экспрессии дельта-9-десатураза/рЕТ30Ъ(+) используют для трансформации клеток Е. сой ВЬ21 (ИЕ3) в соответствии с рекомендациями производителя (Хоуадеп. Маб18ои. XVI). Клетки помещают в планшеты ЬА. содержащие канамицин (50 мкг/мл) и глюкозу (1.25 М). Планшеты инкубируют в течение ночи при 37°С. С планшета соскабливают полную петлю клеток и инокулируют их в колбы объемом 500 мл. содержащие 250 мл ЬВ. канамицин (50 мкг/мл) и изопропил-Р-Э-тиогалактозидный (0.75 мМ) индуктор. Тестируют три индукционных состояния. Индуцирование культур проводят при разных температурах и в течение разных промежутков времени. а именно в течение ночи (~18 ч) при 28°С; в течение ночи при 16°С; или в течение 4 ч при 37°С. Клетки собирают путем центрифугирования в бутылках объемом 250 мл при 6000 об/мин в течение 15 мин и затем замораживают при -20°С.

Очистка С-концевых пептидных фрагментов дельта-9-десатуразы: Клеточные осадки. полученные из культур объемом 250 мл. оттаивают и ресуспендируют в 50 мл холодного забуференного фосфатом физиологического раствора (РВ8). содержащего 10% глицерина и 0.5 мл протеазо-ингибиторной смеси (81дта. 8ΐ. Ьош8. МО). с помощью ручного гомогенизатора. Клетки разрушают на льду в течение примерно 10 мин с помощью ультразвукового дезинтегратора Вгап8ои. модель 450 (ИапЪигу. СТ).

Внутриклеточные тельца осаждают центрифугированием при 10000 д в течение 15 мин и затем экстрагируют 2-3 раза РВ8. содержащим 0.5% тритона Х-100. пока концентрация белка в супернатанте. измеряемая с помощью анализа Брэдфорда. не достигнет фонового уровня. Выделенные внутриклеточные тельца солюбилизируют в растворе РВ8. содержащем 6 М мочевину и 5 мМ ЭТТ. при комнатной температуре и перемешивают в течение примерно 1 ч. Солюбилизированные белки отделяют от нерастворенных веществ путем центрифугирования при 30000 д в течение 15 мин. после чего оставшийся супернатант наносят на №-аффинную колонку объемом 5 мл (ОЕ Неаййсаге. НИгар Сйе1айид. Р18са1а\уау. N1). Гистидиновые маркеры С-концевых пептидов дельта-9-десатуразы связываются с металлсодержащей смолой и затем фрагменты элюируют в градиенте 50-200 мМ имидазола. используя Ак1а® Ехр1огег 100 (ОЕ Неаййсаге. Р18са1а\уау. N1). Фракции собирают (каждая объемом 3 мл) и элюированные пики анализируют методом 8И8-РАОЕ. Фракции. содержащие С-концевой пептид дельта-9-десатуразы. объединяют и концентрируют. используя устройство для фильтрования Атюои® ИЙга 10000 МХУС0 (Мййроге. Вй1ег1са. МА). до получения объема менее 5 мл. Затем образец белка наносят на колонку для гельфильтрации Н1 Ьоаб™ ХК16/60 8ирегбех™ 200 (ОЕ Неаййсаге. Р18са1а\уау. N1) и уравновешивают 6 М мочевиной в растворе. содержащем 20 мМ Тп8-НС1. 150 мМ №С1 и 1 мМ ИТТ. Пиковые фракции (каждая объемом 4 мл). содержащие чистый С-концевой пептид дельта-9-десатуразы. сохраняют (после проверки методом 8И8-РАОЕ и других биохимических характеристик) и используют для получения антител. Получают пептиды с ожидаемыми размерами 27 кДа для пептида ЕиИ9И8-2. 15 кДа для пептида Н/И9И8 и 28 кДа для пептида МдИ9И8. Условия нидукции позволяют получить количество белка. достаточное для визуализации путем окрашивания гелей 8И8-РАОЕ Кумасси синим.

Получение поликлональных антител: Кроличьи антитела против каждого из трех С-концевых пептидов дельта-9-десатуразы производит в соответствии с договором специальное учреждение (81га1едю Вю8о1ийои8. №\уагк. ИЕ). Следуя их стандартным процедурам. получают антисыворотку с высоким титром (определенным методом ЕЬ18А) против каждого из трех белковых фрагментов. Каждый очищенный С-концевой пептид дельта-9-десатуразы разбавляют буфером. содержащим 20 мМ Тп8-НС1. 150 мМ №С1. 1 мМ ИТТ и мочевину с конечной концентрацией 2-3 М. чтобы поддерживать белок в растворе. Примерно 10 мг белка отправляют в 81га1едю Вю8о1ийои8 для получения поликлонального антитела. Для каждого иммуногена берут двух кроликов и используют стандартные методы иммунизации (70 дней). Для получения эмульсии используют новый адъювант. называемый ТйегМах® Оо1б. Получение антител подтверждают путем титрования методом ЕЬ18А в процессе иммунизации и в конце процедуры. Антисыворотку получают в два разные момента времени; первый раз - через 2 месяца после начала стандартной процедуры. а второй - при обескровливании.

Чтобы выделить общую фракцию 1дО из кроличьей сыворотки. примерно 20-30 мл антисыворотки с высоким титром наносят на устойчивую к щелочи колонку с белком А объемом 5 мл (ОЕ Неаййсаге. ШТгар™ МаЪ8е1ес! 8иКе™. № по каталогу 11-0034-94). После стандартного промывания РВ8 связанные 1дО элюируют со смолы путем краткой обработки буфером. содержащим 0.1 М цитрата натрия и 0.3 М №С1. рН 3.3. и сразу нейтрализуют путем добавления к каждой фракции 1/10 объема буфера. содержащего 2 М ТГ18-НС1. рН 9. Аффинную колонку санируют путем обработки 0.5 N №0Н. следуя стандартной процедуре безразборной мойки оборудования (С1Р). чтобы избежать перекрестного загрязнения 1дО. Окончательно выделенные из каждого образца 1дО диализуют против 50 объемов РВ8 при 4°С в течение ночи. после чего методом Брэдфорда определяют концентрацию белка. используя ВСА в качестве стандарта (Р1егсе. № продукта 23208). Аликвоты объемом один мл переносят в отдельные пробирки и хранят

- 33 029904

при -80°С.

Полученные антитела представляют собой диагностические средства, используемые для измерения экспрессии белка десатуразы в трансгенном растительном материале. Антитела используют для разработки корреляций между фенотипом, соответствующим маслу с низким содержанием насыщенных жирных кислот, и уровнем экспрессии белков дельта-9-десатуразы.

Пример 11. Уровни белков ацил-СоА дельта-9-десатураза в семенах АгаЫборык Т₂

Полипептиды дельта-9-десатуразы детектируют в образцах зрелых трансгенных семян методом вестерн-блоттинга. Образцы для анализа получают путем размалывания сухих семян в молотильном барабане, содержащем шарики из нержавеющей стали К1есо™ (Сагаа МасЫпе, Уйайа, СА). Добавляют буфер для экстракции (50 мМ трис, 10 мМ БОТА, 2% δΌδ), после чего пробирки с образцами осторожно встряхивают в течение 30 мин. Образцы центрифугируют в течение 15 мин при 3000 гсГ. Затем супернатант собирают и используют для анализа. Количество общего растворимого белка в экстракте семян определяют методом Лоури (ВюКаб, Негси1ек, СА). Образцы, полученные в буфере для образцов Όϋδ (Ιιινίйодеп, Саг1кЪаб, СА), содержащем 40 мМ ОТТ, нормализуют до получения концентрации общего растворимого белка 1,55 мг/мл, чтобы достичь нормализованной нагрузки, составляющей 20 мкг общего растворимого белка на линию. Образцы подвергают электрофорезу в гелях, содержащих 4-12% бис-трис Дпуйгодеп), с последующим переносом на нитроцеллюлозные мембраны. Блоты блокируют блокирующим буфером и исследуют с применением антител против четырех разных полипептидов дельта-9десатуразы (Αη^9^δ, ^η^9^δ-2. Нζ^9^δ и Ι^Ό9Όδ) (см. пример 10).

Во всех случаях получают кроличьи поликлональные антитела против содержащего маркер НЫ очищенного С-концевого пептидного фрагмента отдельных десатураз, как описано выше. Очищенные Сконцевые фрагменты используют в качестве стандартных антигенов для количественного определения методом вестерн-блоттинга. Для детекции используют вторичные антитела против кроличьих иммуноглобулинов, содержащие флуоресцентную метку (козлиные антитела против кроличьих иммуноглобулинов АР 633; Шуйгодеп). Блоты визуализируют на флуоресцентном устройстве для визуализации Турйооп™ Тпо Р1ик (СИ Неаййсаге). Получают стандартные кривые, используя метод квадратичной аппроксимации, и количественно определяют уровень экспрессии, используя метод линейной регрессии.

Анализ экстрактов зрелых семян Т₂ особей АгаЫборык методом δΌδ-РАСВ и вестерн-блоттинга показывает наличие полос, соответствующих нужному размеру молекул, визуализированных с помощью специфической антисыворотки. Количественную оценку указанных полос проводят с использованием специфичных стандартных антигенов. Количественный анализ экстрактов семян Т₂ АгаЫборык методом вестерн-блоттинга с использованием подходящей антисыворотки показывает, что в зрелых семенах присутствует в среднем 63 нг ^η^9^δ-2/мг общего белка (об) (макс. 228 нг/мг об) и 34 нг Нζ^9^δ/мг об (макс. 100 нг/мг об). Что касается Ι^Ό9Όδ, в семенах Т₂ детектируют в среднем 58 нг/мг об (макс. 1179 нг/мг об). Что касается Λη^9^δ. в зрелых семенах Т₂ детектируют в среднем 625 нг/мг об (макс. 1,5 мкг/мг об). Таким образом, в трансгенных семенах уровень экспрессии пальмитоил-специфичных десатураз, ΕπΌ9Όδ-2 и Нζ^9^δ, в 10-18 раз меньше, чем уровень экспрессии Λη^9^δ. Следовательно, более высокие уровни экспрессии указанных десатураз могут привести к дополнительному снижению содержания насыщенных углеводородов, особенно пальмитиновой кислоты.

Пример 12. Экспрессия генов дельта-9-десатуразы в каноле

Ряд трансгенных особей канолы получают в результате трансформации, проведенной с использованием рЭАВ7321 (δΕΟ ΙΌ N0: 61) и рЭАВ7326 (δΕΟ ΙΌ N0: 63) (содержащих соответственно гены ΕπΌ9Όδ-2 и Нζ^9^δ, контролируемые семя-специфичным промотором РуРйак). Тридцать девять особей рОАВ7321, содержащих ген ^η^9^δ-2. идентифицируют путем ПЦР-анализа геномной ДНК и выращивают в теплице до получения семян Т₁. Подобным образом, идентифицируют 80 особей рОАВ7326, которые содержат ген Нζ^9^δ, и получают семена Т₁. Канолу также трансформируют плазмидой рОАВ7319 (δΕΟ ГО N0:60) или рОАВ7324 (δΕΟ ГО N0:62), которая содержит ген Αη^9^δ, соединенный с геном ΕπΌ9Όδ-2 или Нζ^9^δ, которые контролируются промотором РуРйак. Выбирают соответственно 44 и 76 особей, которые по данным анализа ПЦР содержат оба гена десатуразы, и выращивают их в теплице до получения семян Т1.

Анализ РΑМВ в образцах семян Т₁ особей, трансформированных рОАВ7321 (ΕπΌ9Όδ-2 ν2) или рОАВ-7326 (ΉζΌ9Όδ ν2), показывает отсутствие значительного уменьшения уровня насыщенных жирных кислот по сравнению с нетрансформированными растениями канолы, или растениями, трансформированными пустым контрольным вектором. Вестерн-блоттинг семян Т₁ показывает отсутствие детектируемых уровней белков дельта-9-десатуразы. Кроме того, в семенах Т₁ растений, трансформированных рОАВ7319 (Αη^9^δ ν3 и ΕπΌ9Όδ-2 ν2) или рОАВ7324 (Αη^9^δ ν3 и ΒζΌ9Όδ ν2), отсутствуют детектируемые уровни белка ΕπΌ9Όδ-2 или Нζ^9^δ, тогда как белок Λη^9^δ можнго легко детектировать. У данных особей наблюдается уменьшение содержания насыщенных жирных кислот по сравнению с контрольными растениями, однако оно связано с экспрессией Λη^9^δ.

Чтобы определить относительные уровни мРНК генов дельта-9-десатуразы, общую РНК экстрагируют из развивающихся семян особей канолы, трансформированных конструкциями, содержащими гены

- 34 029904

двух десатураз (рЭАВ7319 и рЭАВ7324). и анализируют методом количественной ПЦР в режиме реального времени. Семена собирают на сухом льду на 20. 25. 29. 32. 39 или 41 дни после опыления от нескольких растений канолы и хранят при -80°С. Общую РНК получают из 50 мг объединенных замороженных семян. используя набор для экстракции растительной РНК ККеазу® (О1адеп) в соответствии с рекомендациями производителя. Экстрагированную РНК используют в качестве матрицы для синтеза кДНК с использованием Зирегзспр!® III ΡΪΓδΐ 31гапй 3уп1Ье818 Зирепшх Гог цКТ-РСК (1пу11годеп) в соответствии с инструкциями производителя.

Анализы ОТ-ПЦР планируют против мишеней десатуразы с помощью центра по планированию анализов КосЬе (КосЬе Э1адпо811с8. ЫШапароИз. Ш). Праймеры. используемые в данном анализе. описаны в табл. 16. В плановых анализах используют РЛΜ-меченные зонды ϋΡΡ (КосЬе Этдпозксз). Реакции указанных анализов проводят с двойными повторами. в контрольном анализе используют актин канолы. меченный техасовым красным. синтезированный в ккедпией ЭКА ТесЬпо1од1е8.

Таблица 16. Детали количественного анализа ОТ-ПЦР

Реакции ОТ-ПЦР проводят в термоблоке для проведения реакций ПЦР в режиме реального времени к1дк1Сус1ег® 480П (КосЬе). Данные для анализов мишени ϋΡΡ собирают. используя фильтр эмиссии при 533 нм и сигнал возбуждения при 483 нм. Данные для контрольного анализа актина собирают. используя фильтр 610 нм и сигнал возбуждения при 558 нм. Значения времени цикла и отношения мишень к контролю рассчитывают автоматически. используя поток операций анализа "Айуапсей Ке1а11уе ОнапОЛсакоп" программного обеспечения РС480П. Относительное накопление транскриптов десатуразы в каждом образце рассчитывают. используя стандартный метод ΔΔΟ; (КосЬе).

Во всех образцах семян канолы. трансформированных рЭАВ7319 (АпП9П3 ν3 и РпЭ9Э3-2 ν2) и рЭАВ7324 (Лη^9^3 ν3 и ΙΙζΙ)9Ι)3 ν2). накопление транскриптов трансгенов Н2О9Э3 или РпЭ9э3-2 значительно ниже. чем накопление транскриптов трансгенов АпВ9ВЗ. Наблюдаемые различия в накоплении транскриптов варьируют от 3 до 20 раз. Фиг. 23. Таким образом. недостаточная экспрессия IΙζΙ)9Ι)3 и кпЭ9Э3-2 может объяснить невозможность детектировать полипептид и отсутствие фенотипа. связанного с данными генами.

Пример 13. Экспрессия РТИ дельта-9-десатуразы под управлением альтернативных промоторов

Путем применения других участков регуляции транскрипции для экспрессии генов. кодирующих белки кпГ)9Г)3-2.IΙζΙ)9Ι)3 и ΜμΙ)9Ι)3. можно дополнительно увеличить содержание указанных дельта-9десатураз в каноле. Идентификация и применение участков регуляции транскрипции. которые обеспечивают экспрессию на более ранних стадиях развития и в течение более длительных периодов времени. может привести к увеличению уровней гетерологичных дельта-9-десатураз в семенах канолы в результате стимуляции устойчивой семя-специфичной транскрипции гетерологичного гена на ранних стадиях развития семени. Примеры таких участков регуляции транскрипции включают в себя. без ограничения. промотор Р1КС33 (патент США 7253337) и промотор РАР 1 (патент США 6784342). Указанные промоторы используют по отдельности. или в сочетании. чтобы управлять экспрессией экспрессионных кассет кпГ)9Г)3-2. ΙΙζΙ)9Ι)3 и ΜμΙ)9Ι)3. например. путем их функционального соединения с такими генами. как описанные ранее в составе плазмид рЭАВ7319; рЭАВ7321; рЭАВ7324; рЭАВ7326; рЭАВ7328; и рЭАВ7330. Способы замены участков регуляции транскрипции в плазмиде хорошо известны в данной области. По существу. полинуклеотидный фрагмент. содержащий промотор ΡνΙΡκίδ удаляют из рЭАВ7319. рЭАВ7321. рЭАВ7324. рЭАВ7326. рЭАВ7328 или рЭАВ7330 (или из предшествующих плазмид. используемых для получения рЭАВ7319. рЭАВ7321. рЭАВ7324. рЭАВ7326. рЭАВ7328 или рЭАВ7330) и заменяют промоторным участком Р1КС33 или РАЕ 1. Новые плазмиды используют для

- 35 029904

стабильной трансформации растений канолы в соответствии со способами, описанными в предыдущих примерах. Трансгенные растения канолы выделяют и характеризуют на молекулярном уровне. Определяют накопление полученной дельта-9-десатуразы и идентифицируют растения канолы, стабильно экспрессирующие дельта-9-десатуразу.

Другие модификации участков регуляции транскрипции с целью повышенной экспрессии дельта-9десатуразы включают в себя замену существующей последовательности Ко/ак любой из последовательностей, описанных в табл. 17. Конструирование альтернативных последовательностей Козака и введение их выше участка начала считывания дельта-9-десатуразы осуществляют с помощью стандартных методов молекулярной биологии.

Синтетические полинуклеотидные фрагменты синтезируют и клонируют выше последовательности, кодирующей дельта-9-десатуразу, с помощью методов, известных в данной области. Окружение старт-кодона оказывает сильное влияние на уровень экспрессии трансгена. Модификация последовательности Козака с получением последовательностей, перечисленных в табл. 17, повышает уровень экспрессии гетерологичной дельта-9-десатуразы.

Таблица 17. Последовательности Козака, которые вводят выше гетерологичного гена дельта-9десатуразы, с целью увеличения экспрессии__

Последовательность Козака	ЗЕО Ю ΝΟ:	Последовательность
Козак #1	5Е<2 Ю N0 : 40	ССАТССААСААТС
Козак #2	5Е<2 Ю N0 : 41	АСААССАААААТС
Козак #3	5Е<2 Ю N0 : 42	АСААССААССТАССАТСС
Козак #4	5Е<2 Ю N0 : 43	АСААС СААААААТ С

Пример 14. Конструирование и синтез генов дельта-9-десатуразы НеНсоуегра /еа и ЬерФзрйаепа подогит

Чтобы достичь повышенных уровней экспрессии гетерологичных генов в растениях, модифицируют стратегию оптимизации кодонов, описанную в примере 2, и, используя новую схему конструирования, получают участки гетерологичных генов, кодирующие ΗζΠ9Ώ8 и ΕπΠ9Ώ8-2.

Выбор кодонов осуществляют с помощью таблицы, содержащей рассчитанные смещения кодонов в предполагаемом растении-хозяине, которым в данном случае является канола. При конструировании кодирующих участков с целью экспрессии в растении генов дельта-9-десатуразы, определяют кодоны, предпочитаемые растением в первую очередь ("первого выбора"), и используют их примерно в 95% случаев. Кодоны "второго выбора" используют экономно, с частотой примерно 5%. Соответственно, конструируют новую последовательность ДНК, которая кодирует аминокислотную последовательность дельта-9-десатуразы, где новая последовательность ДНК отличается от нативного гена дельта-9-десатуразы в результате замены кодонов на предпочитаемые растением в первую и вторую очередь для кодирования аминокислоты в каждом положении аминокислотной последовательности. Затем новую последовательность анализируют на наличие участков ферментативной рестрикции, которые могут создаваться в процессе модификаций. Идентифицированные участки ферментативной рестрикции затем удаляют путем замены существующих кодонов на предпочтительные кодоны первого или второго выбора. Также удаляют другие участки последовательности, которые могут влиять на транскрипцию или трансляцию представляющего интерес гена, особенно высокостабильные стержневые петлеобразные структуры.

Кодоны предпочтительных выборов (первого и второго выборов) определяют исходя из генетического кода канолы с использованием таблицы смещений кодонов, составленной из последовательностей канолы, кодирующих белки. В колонках таблиц 18 и 19, озаглавленных "% в нативном гене", приведены распределения (в % от использования всех кодонов для конкретной аминокислоты) синонимичных кодонов для каждой аминокислоты, обнаруженных в кодирующих участках Вгаззюа париз (канолы). Новые последовательности ДНК, которые кодируют, в основном, аминокислотные последовательности дельта9-десатураз М. дпзеа, Н. ζеа и Ь. ^догит, конструируют с целью оптимальной экспрессии в каноле, используя распределение предпочтительных кодонов первого и второго выборов, обнаруженных в генах канолы. Конструирование оптимизированных для растения последовательностей ДНК начинают с обратной трансляции белковых последовательностей 8ЕО ГО ΝΟ: 12 (М. дпзеа), 8ЕО ГО ΝΟ: 13 (Н. ζеа) и 8Ε^ ΙΌ ΝΟ:14 (Ь. подогит), используя полученную таблицу смещений кодонов. В колонках, озаглавленных "% в оптимизированном для растения гене", приведены предпочтительные кодоны и частота, с которой их включают в конструкцию гена дельта-9-десатуразы. 8Е9 ГО ΝΟ: 44 и 8Е9 ГО ΝΟ: 45 описывают новые канола-оптимизированные нуклеотидные последовательности десатураз ΕπΠ9Ώ8-2 и I ΙζΓ)9Γ)8 соответственно. Указанные новые канола-оптимизированные последовательности обозначают ЬпП9П8-2 ν3 и I ΙζΓ)9Γ)8 ν3.

- 36 029904

кодирующего десатуразу Н. /еа, с оптимизированной для растения версией

Таблица 18. Кодонный состав участков, кодирующих белок ΗζΠ9Ώ8. Сравнение нативного участка,

Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	%в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	%в оптимизированном для растения гене	Состав, рекомендуемый для оптимизированной для растения последовательности	Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	%в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	%в оптимизированном для растения гене	Состав, рекомендуемый для оптимизированной для растения последовательности
	ОСА	4	11,4	1	2,9	0,0		СТА	2	5,9	0	0,0	0,0
АЬА	ОСС	7	20,0	0	0,0	0,0		СТО	8	23,5	0	0,0	0,0
(А)	ОСО	8	22,9	0	0,0	0,0	ьЕи	СТО	14	41,2	0	0,0	0,0
	ост	16	45,7	34	97,1	100,0	(Ь)	СТТ	6	17,6	34	100,0	100,0
	АОА	1	7,7	0	0,0	0,0		ТТА	2	5,9	0	0,0	0,0
	АОО	5	38,5	13	100,0	100,0		ТТО	2	5,9	0	0,0	0,0
АРО (К)	СОА СОС ООО	2 5 0	15.4 38.5 0,0	0 0 0	0,0 0,0 0,0	0,0 0,0 0,0	ЬУ8 (К) МЕТ (М)	ААА ААО АТО	11 14 8	44,0 56,0 100	0 25 8	0,0 100,0 100	0,0 100,0 100,0
Α8Ν	сот ААС	0 13	0,0 72,2	0 18	0,0 100,0	0,0 100,0	РНЕ (Р)	ТТС ТТТ	20 4	83,3 16,7	24 0	100,0 0,0	100,0 0,0
(Ν)	ААТ	5	27,8	0	0,0	0,0		ССА	1	6,3	16	100,0	100,0
А8Р	ОАО	16	64,0	2	8,0	0,0	РРО (Р)	ССС	5	31,3	0	0,0	0,0
(О)	ОАТ	9	36,0	23	92,0	100,0		ССО	2	12,5	0	0,0	0,0
СУ8	ТОО	1	100,0	1	100,0	100,0		СОТ	8	50,0	0	0,0	0,0
(С)	ТОТ	0	0,0	0	0,0	0,0		АОС	2	12,5	0	0,0	0,0
	ТАА	1	100,0	0	0,0	0,0		АОТ	1	6,3	0	0,0	0,0
ΕΝϋ	ТАО	0	0,0	0	0,0	0,0	8ЕР (8)	ТСА	1	6,3	1	6,3	0,0
	ТОА	0	0,0	1	100,0	100,0	ТСС	6	37,5	0	0,0	0,0
сьи	САА	2	33,3	6	100,0	100,0		ТОО	3	18,8	0	0,0	0,0
(Ω)	ОАО	4	66,7	0	0,0	0,0		ТОТ	3	18,8	15	93,8	100,0
оьи	ОАА	7	63,6	0	0,0	0,0		АСА	3	16,7	0	0,0	0,0
(Е)16	ОАО	4	36,4	11	100,0	100,0	ТНР	АСС	7	38,9	18	100,0	100,0
	ООА	8	40,0	20	100,0	100,0	(Т)	АСО	4	22,2	0	0,0	0,0
ОЬУ	ООО	6	30,0	0	0,0	0,0		АСТ	4	22,2	0	0,0	0,0
(С)	ООО	2	10,0	0	0,0	0,0	ТРР (XV)	ТОО	14	100	14	100	0,0
	ООТ	4	20,0	0	0,0	0,0	ТУР	ТАС	12	80,0	15	100,0	100,0
Н18(Н)	САС	11	73,3	15	100,0	100,0	(Υ)	ТАТ	3	20,0	0	0,0	0,0
САТ	4	26,7	0	0,0	0,0		ОТА	0	0,0	0	0,0	0,0
	АТА	3	15,0	1	5,0	0,0	УАЬ	ОТО	5	26,3	0	0,0	0,0
ГОЕ (I)	АТС	10	50,0	19	95,0	100,0	(V)	ОТО	13	68,4	0	0,0	0,0
	АТТ	7	35,0	0	0,0	0,0		ОТТ	1	5,3	19	100,0	100,0
	Всего	165		165				Всего	189		189

- 37 029904

Таблица 19. Кодонный состав участков, кодирующих белок ΕηΌ9Ό8-2. Сравнение нативного участка, кодирующего десатуразу Ь. Шбогит, с оптимизированной .для растения .версией

Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	% в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	% в оптимизированном для растения гене	Состав, рекомендуемый для оптимизированной для растения последовательности	Аминокислота	Кодон	Число в нативном гене	%в нативном гене	Число в оптимизированном для растения гене	% в оптимизированном для растения гене	Состав, рекомендуемый для оптимизированной для растения последовательности
	ОСА	3	9,4	0	0,0	0,0		СТА	7	15,6	0	0,0	0,0
АЬА	ССС	9	28,1	0	0,0	0,0		СТС	14	31,1	0	0,0	0,0
(А)	ссс	12	37,5	0	0,0	0,0	ьЕи	СТС	7	15,6	0	0,0	0,0
	ост	8	25,0	32	100,0	100,0	(Ь)	СТТ	5	ПТ	45	100,0	100,0
	АСА	4	13,8	1	3,4	0,0		ТТА	3	6,7	0	0,0	0,0
	АСС	3	10,3	28	96,6	100,0		ТТС	9	20,0	0	0,0	0,0
	ССА	7	24,1	0	0,0	0,0	ЬУ8	ААА	9	45,0	0	0,0	0,0
АКС
(Ю	ССС	8	27,6	0	0,0	0,0	(К)	ААС	11	55,0	20	100,0	100,0
ССС	5	17,2	0	0,0	0,0	МЕТ	АТС	9	100	9	100	100,0
					(М)
	сст	2	6,9	0	0,0	0,0	РНЕ (Р)	ТТС	16	80,0	20	100,0	100,0
Α8Ν	ААС	6	50,0	12	100,0	100,0	ТТТ	4	20,0	0	0,0	0,0
(Ν)	ААТ	6	50,0	0	0,0	0,0	РКО	ССА	3	16,7	18	100,0	100,0
А8Р	САС	16	66,7	2	8,3	0,0	ССС	8	44,4	0	0,0	0,0
(Р)
(О)	САТ	8	33,3	22	91,7	100,0	ССС	2	П,1	0	0,0	0,0
СУ8	ТСС	4	80,0	5	100,0	100,0		ССТ	5	27,8	0	0,0	0,0
(С)	ТСТ	1	20,0	0	0,0	0,0		АСС	8	27,6	0	0,0	0,0
	ТАА	0	0,0	0	0,0	0,0		АСТ	6	20,7	0	0,0	0,0
ΕΝϋ	ТАС	1	100,0	0	0,0	0,0	ЗЕК (8)	ТСА	1	3,4	1	3,4	0,0
	ТСА	0	0,0	1	100,0	100,0	ТСС	6	20,7	0	0,0	0,0
ΟΚΝ	САА	10	55,6	18	100,0	100,0		ТСС	7	24,1	0	0,0	0,0
(Ω)	САС	8	44,4	0	0,0	0,0		ТСТ	1	3,4	28	96,6	100,0
сьи	САА	5	33,3	1	6,7	0,0		АСА	11	44,0	0	0,0	0,0
(Ε)16	САС	10	66,7	14	93,3	100,0	ТНК	АСС	5	20,0	25	100,0	100,0
	ССА	13	34,2	38	100,0	100,0	(Т)	АСС	7	28,0	0	0,0	0,0
	ССС	16	42,1	0	0,0	0,0		АСТ	2	8,0	0	0,0	0,0
СЬУ					ТКР
(С)	ССС	6	15,8	0	0,0	0,0	(XV)	ТСС	19	100	19	100	0,0
	ССТ	3	7,9	0	0,0	0,0	ТУК	ТАС	11	64,7	17	100,0	100,0
ΗΙδ(Η)	САС	12	66,7	18	100,0	100,0	(Υ)	ТАТ	6	35,3	0	0,0	0,0
САТ	6	33,3	0	0,0	0,0		СТА	6	17,6	0	0,0	0,0
	АТА	4	18,2	1	4,5	0,0	УАЬ	СТС	10	29,4	0	0,0	0,0
1ЬЕ (I)	АТС	9	40,9	21	95,5	100,0	(V)	СТС	12	35,3	0	0,0	0,0
	АТТ	9	40,9	0	0,0	0,0		СТТ	6	17,6	34	100,0	100,0
	Всего	214		214				Всего	236		236

Синтез фрагментов ДНК, содержащих ЗЕС) ΙΌ N0:44 и ЗЕС) ΙΌ N0:45, осуществляют РюоЗспр! и В1ие Нсгоп Вю1ссйпо1о§у. Затем синтетическую ДНК клонируют в векторах экспрессии и используют для трансформации канолы, в основном, по способам, описанным в предыдущих примерах.

Пример 15. Модификация Ν- и С-концов с целью увеличения накопления полипептидов ацил-СоА десатуразы в растениях

На накопление и стабильность мембраносвязанных белков в эндоплазматическом ретикулуме (ЕК) могут влиять мотивы и модификации на Ν- и С-концах аминокислотных последовательностей. Кау1б апб Носйз1газзег (2008) Ν!. Кеу. Мо1. Се11. Вю1. 9:679-90. В частности, показано, что Ν- и С-концевые мотивы и модификации модулируют накопление и стабильность липидных десатураз в грибках и растениях, а также в животных. МсСагШеу е! а1. (2004) РЕиН Д. 37: 156-73; νζΐΒυ! е! а1. (2000) Ргос. ΝΐΕ Асаб. Зсг и.З.А. 97: 8883-8.

Добавление эпитопного маркера Мус или гемагглютинина (НА) к Ν-концу ТАО2 или ТАО3 значительно увеличивает равновесный уровень данных ферментов в дрожжах. О^шп е! а1. (2 009) Арр1 МксгоЫо1 Β^οίесйпο1 83: 117-25. Соответственно, добавление указанных или подобных эпитопов к Ν-концу дельта-9-десатуразы настоящего изобретения применяется для увеличения экспрессии полипептида в растении. Полинуклеотидный линкер, который кодирует маркер Мус (ЗЕ^ ΙΌ ΝΟ: 46) или маркер НА (ЗЕ^ ΙΌ ΝΟ: 47), клонируют на 5'-конце последовательности, кодирующей дельта-9-десатуразу (например, ΗζΌ9Ό3, МдВ9ОЗ, АпВ9ОЗ, ΕηΌ9Ό3-1 и ΕηΌ9Ό3-2), в виде непрерывной открытой рамки считы- 38 029904

вания. Полученную кодирующую последовательность клонируют в растительной экспрессионной плазмиде с использованием стратегии клонирования, описанной в примере 3. Новую плазмиду используют для стабильной трансформации клетки, материала или ткани растения АгаЬЫор818 и/или канолы. Трансгенные растения регенерируют из трансформированных растительных клеток, материалов или тканей. Трансгенные растения выделяют и характеризуют на молекулярном уровне. Определяют накопление полученной дельта-9-десатуразы в семенах трансгенных растений и идентифицируют растения, стабильно экспрессирующие полипептид дельта-9-десатуразы.

Данные по экспрессии АпО9Э8 в АгаЬИорДх и каноле (примеры 11 и 12) свидетельствуют о значительно более высоком уровне экспрессии этого конкретного фермента десатуразы по сравнению с ШЭ9Э8 и ЬиО9П8-2. Таким образом, N и С-концы, находящиеся вне основного домена десатуразы (содержащего трансмембранные сегменты и консервативные каталитические остатки гистидина) АпП9П8, полностью или частично можно использовать для замены эквивалентных остатков в десатуразах с более низким уровнем экспрессии с целью его повышения. Соответственно, ^концевые остатки 1-68 и Сконцевые остатки 281-455 А1ГО9О8 (8ЕЦ ГО N0: 72 и 8ЕЦ ГО N0: 73 соответственно) полностью или частично используют для полной или частичной замены 68 ^концевых остатков (1-68) и 168 Сконцевых остатков (281-449) иГО9О8-2 (8ЕЦ ГО N0: 14) и/или 76 ^концевых остатков (1-76) и 60 Сконцевых остатков (293-353) НГО9О8 (8ЕЦ ГО N0: 13). Полученную кодирующую последовательность клонируют в растительной экспрессионной плазмиде с использованием стратегии клонирования, описанной в примере 3. Новую плазмиду используют для стабильной трансформации клетки, материала или ткани растения АгаЬЫор818 и/или канолы. Трансгенные растения регенерируют из трансформированных растительных клеток, материалов или тканей. Трансгенные растения выделяют и характеризуют на молекулярном уровне. Определяют накопление полученной дельта-9-десатуразы в семенах трансгенных растений и идентифицируют растения, стабильно экспрессирующие модифицированный полипептид НГО9О8 или модифицированный полипептид ЬпП9П8-2.

Пример 16. Модификации с целью повышения экспрессии мРНК ацил-СоА десатуразы в растениях

В данной области известно, что экспрессию мРНК можно повысить путем введения генетических элементов, стабилизирующих и повышающих накопление мРНК. Введение 5'- и 3'-нетранслируемых участков (например, последовательности 5'- и 3'-ИТК табака 08тойп (Ьш е! а1. (2003) №1. Вю1ес1то1. 21:1222-8) и последовательности вируса мозаичной болезни табака Ω (СаШе е! а1. (1987) №с1ею АсЫк Ке8. 15:8693-711)), или интронов (Коζ^е1 е! а1. (1996) Р1ап1 Мо1. Вю1. 32:393-405) в непосредственной близости от последовательности, кодирующей или ^0908-2, используют для повышения уровня

экспрессии трансгена по сравнению с экспрессией такой же кодирующей последовательности, не содержащей вышеуказанных генетических элементов. Добавление одного или нескольких из указанных генетических элементов в РТИ десатураз проводят с помощью известных в данной области способов. Полинуклеотидные фрагменты, содержащие 5'-нетранслируемый участок, 3'-нетранслируемый участок и/или интрон, добавляют в растительную экспрессионную плазмиду (такую как рОАВ7319, рОАВ7321, рОАВ7324, рОАВ7326, рОАВ7328, рОАВ7330 или предшествующие плазмиды, используемые для получения рОАВ7319, рОАВ7321, рОАВ7324, рОАВ7326, рОАВ7328 или рОАВ7330) с помощью стандартных методов клонирования. Новую плазмиду используют для стабильной трансформации клетки, материала или ткани растения АгаЬИорДх и/или канолы. Трансгенные растения регенерируют из трансформированных растительных клеток, материалов или тканей. Трансгенные растения выделяют и характеризуют на молекулярном уровне. Определяют накопление полученной дельта-9-десатуразы в семенах трансгенных растений и идентифицируют растения, стабильно экспрессирующие полипептид НГО9О8 или ^и^9^8-2.

Кроме того, в данной области известно, что гены дрожжевых десатураз, такие как 0ЬЕ1, являются в высокой степени регулируемыми. Делеция последовательностей, кодирующих трансмембранные участки, которые являются частью домена цитохрома Ь5, уменьшают стабильность транскрипта 0ЬЕ1. Vети1а е! а1. (2003) I. Вю1. С1ет. 278(46):45269-79. Присутствие указанных последовательностей в 0ЬЕ1 стабилизирует мРНК. Соответственно, введение последовательностей 0ЬЕ1, которые кодируют трансмембранный участок и домен цитохрома Ь5 в последовательность, кодирующую ΡπΌ9Ό8-2 или ШО9П8, используют для повышения стабильности транскрипта мРНК кодирующей последовательности, посредством этого повышения уровня экспрессии и последующего увеличения содержания полипептида иГО9О8-2 или НГО9О8. Химерную последовательность, кодирующую иГО9О8-2 или НГО9О8, которая содержит последовательности трансмембранного участка 0ЬЕ1 и домена цитохрома Ь5, конструируют с помощью известных в данной области методов. Полученную кодирующую последовательность включают в растительную экспрессионную плазмиду (например, по способам, описанным в предыдущих примерах) и используют для получения трансгенных растений путем АдгоЬасЮпит-опосредованной трансформации растений. Трансгенные растения выделяют и характеризуют. Определяют накопление полученной дельта-9-десатуразы в семенах трансгенных растений и идентифицируют растения, стабильно экспрессирующие дельта-9-десатуразу.

Пример 17. Применение альтернативного 3'-нетранслируемого терминаторного участка для стабильной экспрессии дельта-9-десатуразы в растении

- 39 029904

Вследствие ограниченного числа доступных 3'-ИТК-терминаторов, для терминации транскрипции обычно используют 3'-ИТК-терминатор 0КР 23 АдгоЪаскегшт (А1и0КР23 3'-ИТК). Недавно было показано, что другие 3'-ИТК-терминаторы более эффективно осуществляют терминацию транскрипционного прочтения в АгаЫ6ор818 кНайапа. Соответственно, 3'ИТК-терминатор фазеолина РЬазео1и8 уи1даг18 (8ЕО ГО N0: 69) используют в сочетании с промотором фазеолина РЬазео1и8 уи1даг18 для уменьшения транскрипционного прочтения вышестоящих генов, и посредством этого уменьшения транскрипционной интерференции.

3'ИТК-терминатор фазеолина РЬазео1и8 уи1даг18 (РуРЬаз 3'ИТК ν1) вводят в состав экспрессионной кассеты ЬпО9Э8-2 ν2 и в состав экспрессионной кассеты ΗζΌ9Ό8 ν2, ранее описанных в плазмидах рЭАВ7321 и рЭАВ7326. В соответствии со способами, хорошо известными специалистам в данной области, полинуклеотидный фрагмент, содержащий 3'ИТК Р\РНа8 ν1, помещают ниже гена ЬпО9Э8-2 ν2 с получением бинарной плазмиды, рЭАВ110110 (фиг. 4а; 8Е0 ГО N0: 74). Полинуклеотидный фрагмент, содержащий 3'ИТК Р\РНа8 ν1 также помещают ниже гена ΗζΌ9Ό8 ν2 с получением бинарной плазмиды рЭАВ110112 (фиг. 4Ъ; 8ЕС) ГО N0: 75).

Полученные бинарные плазмиды проверяют путем расщепления рестрикционными ферментами и секвенирования. Все новые плазмиды используют для стабильной трансформации клетки, материала или ткани растения АгаЫ6ор818 и/или канолы. Трансгенные растения регенерируют из трансформированных растительных клеток, материалов или тканей. Трансгенные растения выделяют и характеризуют на молекулярном уровне. Определяют накопление полученной дельта-9-десатуразы в семенах трансгенных растений и идентифицируют растения, стабильно экспрессирующие полипептид ΗζΌ9Ό8 или ЬпО9Э8-2.

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Эо\у Адгозиепсез ЬЬС Мег1о, Апп 0 СасНоПе. Эате11 ТНотрзоп, Магк А \Уа18к Тегепсе А

<120> УМЕНЬШЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ НАСЫЩЕННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ В СЕМЕНАХ РАСТЕНИЙ

<130> 2971-р10092.1И8

<150> И8 61/358,314

<151> 2010-06-24

<160> 78

<170> Ракепйп νе^8^οη 3.4

<210> 1

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Прямой праймер Мд6еЙа9Р

<400> 1

даадаайса кддсйсдкс аксйссксс дкдссддадк кддс 44

<210> 2

<211> 41

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Обратный праймер Мд96еЙаК

<400> 2

- 40 029904

с!сдадс!ад !!ад!сасдс ддсс!дадса сссддаасад д 41

<210> 3

<211> 1523

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> ПЦР-амплифицированный фрагмент МдЭ9Э5

<400> 3

даа!!са!дд с!!сд!са!с йсс!ссд!д ссддадйдд с!дссдссй ссс!да!ддс 60

ас!ассдас! !саадссса! даддаасасс аадддс!асд асд!садсаа дссдсаса!! 120

!ссдадасас с!а!дасас! саадаас!дд са!аадсасд !саас!ддс! саасассасс 180

!!са!с!!д! !!д!дсссс! ддс!дд!с!с а!а!ссас!! ас!ддд!ссс !с!дсад!дд 240

аадасддс!д !а!дддс!д! сд!с!ас!ас !!саасассд дсс!дддаа! !ас!дссдд! 300

аад!ддс!с! !даасааасд адс!аддссд ссдссс!д!а !ссаа!са!с !д!а!сса!с 360

сс!ада!дс! аас!адаааа с!!дсддд!! ассассдас! !!дддс!сас адс!сд!аса 420

аддсс!сдс! !ссдс!сааа а!с!асс!!д ссдссд!!дд сдс!дд!дсс д!сдадддс! 480

сса!сада!д д!дд!ссаас дд!сассдсд сасассассд а!асассда! ассдадаадд 540

асссс!ас!с ад!ссдсаад дд!с!сс!д! ас!сасаса! ддда!дда!д с!!с!даадс 600

адаассссаа даадсадддс сдсассдаса !сассдасс! даасдаддас сссд!!д!сд 660

!!!ддсадса ссдсаас!!с с!саад!д!д !!а!с!!са! ддссс!сд!с !!ссссасас 720

!!д!ддс!дд сс!!ддс!дд дд!дас!ас! ддддаддй! са!с!асдда дд!а!!с!дс 780

д!д!с!!с!! сд!ссадсад дссасс!!с! дсд!саас!с дс!!дсссас !ддс!сдд!д 840

ассадсс!!! сдасда!сдс аас!сдссдс д!да!сасд! са!сасадсс с!дд!сассс 900

!!ддададдд а!ассасаас !!ссассасд ад!!ссс!!с ддас!ассдс аасдс!а!!д 960

ад!дд!асса д!а!дасссс ассаад!дд! саа!с!дда! с!ддаадсад с!!дд!с!!д 1020

сссасаасс! даадсад!!с сдссаааасд ада!!дадаа дддасдсд!с садсадс!дс 1080

адаадаадс! сдассадаад сдсдссаадс !!да!!дддд !а!!ссс!!д дадсадс!!с 1140

ссд!!д!!ад с!ддда!дас !!!д!!дадс ад!ссаадаа сддаааддс! !дда!!дсад 1200

!!дссдд!д! са!ссасда! д!!дд!дас! !са!саадда ссассс!дд! ддсададс!с 1260

!са!саас!с ддсса!!ддс ааддасдсаа ссдсаа!с!! саасддсдд! дй!асаасс 1320

ас!ссаасдс сдс!сасаас с!дс!с!сда с!а!дсд!д! ддд!дййд сд!ддсддс! 1380

дсдадд!!да да!с!ддаад сдсдсссад! ссдаааасаа ддасд!с!са ассд!сд!!д 1440

айсйсддд !аассдса!с д!ссдсдсдд д!дддсаадс дассаадд!с д!ссадсс!д 1500

- 41 029904

11ссддд1дс !саддссдсд !да 1523

<210> 4

<211> 1428

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Не содержащий интронов клон МдЭ9Эк

<400> 4

а!ддсйсд! са!сйсс!с сд!дссддад !!ддс!дссд сс!!ссс!да !ддсас!асс 60

дасйсаадс сса!даддаа сассаадддс !асдасд!са дсаадссдса сай!ссдад 120

асасс!а!да сас!саадаа с!ддса!аад сасд!саас! ддс!саасас сассйса!с 180

йдй!д!дс ссс!ддс!дд !с!са!а!сс асйас!ддд !ссс!с!дса д!ддаадасд 240

дс!д!а!ддд с!д!сд!с!а с!ас!!саас ассддсс!дд даа!!ас!дс сддйассас 300

сдас!йддд с!сасадс!с д!асааддсс !сдсйссдс !саааа!с!а ссйдссдсс 360

д!!ддсдс!д д!дссд!сда дддс!сса!с ада!дд!дд! ссаасдд!са ссдсдсасас 420

сассда!аса ссда!ассда дааддасссс !ас!сад!сс дсааддд!с! сс!д!ас!са 480

саса!ддда! дда!дс!!с! даадсадаас сссаадаадс адддссдсас сдаса!сасс 540

дасс!даасд аддассссд! !д!сдй!дд садсассдса ас!!сс!саа д!д!дйа!с 600

йса!ддссс !сд!сйссс сасас!!д!д дс!ддссйд дс!дддд!да с!ас!дддда 660

ддй!са!с! асддадд!а! !с!дсд!д!с йсйсд!сс адсаддссас с!!с!дсд!с 720

аас!сдсйд сссас!ддс! сдд!дассад ссй!сдасд а!сдсаас!с дссдсд!да! 780

сасд!са!са садссс!дд! сассс!!дда даддда!асс асаас!!сса ссасдад!!с 840

сс!!сддас! ассдсаасдс !а!!дад!дд !ассад!а!д ассссассаа д!дд!саа!с 900

!дда!с!дда адсадс!!дд !с!!дсссас аасс!даадс ад!!ссдсса ааасдада!! 960

дадаадддас дсд!ссадса дс!дсадаад аадс!сдасс адаадсдсдс саадс!!да! 1020

!дддд!а!!с сс!!ддадса дс!!сссд!! д!!адс!ддд а!дас!!!д! !дадсад!сс 1080

аадаасддаа аддс!!дда! !дсад!!дсс дд!д!са!сс асда!д!!дд !дас!!са!с 1140

ааддассасс с!дд!ддсад адс!с!са!с аас!сддсса !!ддсаадда сдсаассдса 1200

а!с!!саасд дсдд!д!!!а саассас!сс аасдссдс!с асаасс!дс! с!сдас!а!д 1260

сд!д!ддд!д ййдсд!дд сддс!дсдад дйдада!с! ддаадсдсдс ссад!ссдаа 1320

аасааддасд !с!саассд! сдйдайс! !сддд!аасс дса!сд!ссд сдсддд!ддд 1380

саадсдасса адд!сд!сса дсс!д!!ссд дд!дс!садд ссдсд!да 1428

<210> 5

- 42 029904

<211> 1997

<212> ДНК

<213> ЬсрЮдэНаспа пойогит

<400> 5

сссдайса1 1аа1дсадс1 ддсасдасад дййссдас 1ддааадсдд дсад1дадсд 60

саасдсаай аа1д1дадй адс1сас1са йаддсассс саддсШас асШа1дс1 120

йсддсйд! а1дйд1д1д даайд1дад сдда1аасаа ййасасад дааасадс1а 180

1дасса1да1 1асдссаадс Кдааайаа ссс1сас1аа адддаасааа адс1ддадс1 240

ссассдсдд! ддсддссдс1 с1адаас1ад 1дда1ссссс дддс1дсадд аайсддсас 300

дад1а1дсс1 Кссассадд с1дйдс1дд са1дсаддсс айдассссд адй1д1саа 360

дсадссдй! ссйИддсда дсассйдда дсссаассдс аасйсаад! асда1сс1аа 420

даадссдсас айасадаса 1дссса1сас дсддйааас 1дд1ассадс а1д1саас1д 480

дсйаасдй айПсайа йддсд1дсс 1с1сдс1ддс (дсдйдссд ссйс!ддас 540

сссй1дсад (ддаадассд с1дсд1дддс 1дйай1ас 1айй1дда с1ддссйдд 600

(айассдсс дда1ассай дйй1дддс асасаадйа (асаасдссд дййссй! 660

даддаййд сйдссдссд йддсдсйд 1дс1д11дад ддйссайс дсйдйдад 720

ссд!дассас сдсдсссасс ассдс!асас сдасассаас ааддасссс! асад1дйсд 780

саадддсс11 с1с1асадсс а1с1сдда1д да1дд1са1д аадсадаасс ссаадсд1а1 840

сддссдсасс даса1сассд ас11даасда ддассссд11 д1сд1с1ддс адсасаадаа 900

с1аса1саад дссд1сд1са сса1дддс11 да1с111ссс 1с1дссд1сд ссдд1с1са1 960

д1ддддсда11дда1ддд1д дсйсай1а сдс1дд1ай с1ссд1а1с1 ййсдйса 1020

дсаддссасс 1й1дсдйа асйдсПдс йас1ддсй дд1дассадс ссйсдасда 1080

ссдсаасй! ссйд1дасс асдйайас сдсйПдй асййддад адддсйсса 1140

саасйссас сасдадйсс ссйсдас1а ссдсаасдсс айдад1ддс ассад1асда 1200

сссйссаад 1ддйсай1 ддс1д1ддад саадсйддс сйдссйса ассйаадса 1260

дйссдсйс аасдааайд адаадддйд (дйсадсад сйсадаада адайдасса 1320

даадсдсдсс аадсйдас! дддд1дйсс ййдассад с1дсс1дйа 1адаа1ддда 1380

сдасПИдй дадсаддсса адаасддссд 1дд1с1са1с дс1д1сдс1д д1дйдйса 1440

(дасдПасс дасПсайа асдадсассс сдд1ддсаад асдсйайа ададсддсд! 1500

1ддсаадда1 дссассдсса 1дНсаасдд сдд1д1с1ас Пссасйса асддадссса 1560

саассйсП Й1асса1да ддд11дд1д1 сайсдсдд! ддс1д1даад йдадай1д 1620

даадсдсдс! садсд1дада асаадда1д1 сдд1с1дд1с с1ддасдасд саддсаассс 1680

аайайадд дс1дд1аасс адайассаа ддйдсдсаа сссайсада д1дс1ад1дс 1740

- 43 029904

адса!ада!! дда!с!!са! с!!сасдадс да!д!а!ддс д!!!дд!!д! с!с!с!!сс! 1800

!ддсддасад ад!аа!а!!с аа!!!с!!ад сда!сд!!ад ааадса!са! дд!!асда!д 1860

с!сад!са!д !!ада!ддсд !а!д!!!д!а дсс!!сс!сд ад!да!!ддк !а!даааад! 1920

адсс!сасдд сс!адассаа даа!даааас а!!сасда!! !садаааааа аааааааааа 1980

ааас!сдадд дддддсс 1997

<210> 6

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Прямой праймер Ьпб9РАИ2Р

<400> 6

дда!сса!дд сддссйдда садса!!сса дадда!аад 39

<210> 7

<211> 38

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Обратный праймер Ьпб9РАИ2К

<400> 7

сса!дд!сад !!адс!асдс адссасадсс ссс!саас 38

<210> 8

<211> 1370

<212> ДНК

<213> ЬерЮкрНаепа побогит

<400> 8

дда!сса!дд сддсс!!дда садса!!сса дадда!аадд с!асс!сд!с дааа!сдас! 60

са!а!!саа! а!саадаад! аас!!!!сдд аас!дд!а!а адаада!ааа !!ддс!саас 120

асдасдс!дд !дд!дс!са! асссдс!с!! ддас!с!асс !аасасдсас сасдссас!! 180

асасдасс!а сдс!са!с!д д!ссд!сс!д !ас!ас!!с! дсасадс!!! сддса!саса 240

ддсдда!а!с а!сдас!а!д дад!са!сдс адс!ас!ссд с!сд!с!асс дс!асдс!!а 300

!!сс!адсс! !сасаддсдс сддадсса!с саадд!ад!д с!сда!дд!д дадсдсааа! 360

сассдсдссс ассассда!д дассдасаса а!дааддасс сс!ас!ссд! !а!дсдсддс 420

с!а!!а!!с! сдсаса!сдд а!дда!дд!а !!даасадсд ассссааад! саааддссда 480

асадасд!са д!да!с!сда садсдасссс д!сд!ад!с! ддсадсасаа дсас!асддс 540

аад!дсс!дс !д!!сдссдс д!дда!а!!с ссса!да!сд !адссддсс! сдда!дддда 600

- 44 029904

да!!дд!ддд даддсс!!д! с!асдссддс а!са!!сдад сд!д!!!сд! ссадсаддсд 660

аса!!!!дсд !даас!с!с! сдсдса!!дд а!сддсдадс адссд!!сда сдасадасдс 720

асдсс!сдад ассасд!!!! дасадсд!!д д!аасда!дд дадаадда!а !са!аас!!с 780

сассасдаа! !сссаадсда !!а!сдсаас дсда!са!с! дд!ассаа!а сдассс!асс 840

ааа!ддс!са !!!асс!с!! с!ссс!сддс ссс!!ссссс !сдса!ас!с дс!саааасс 900

!!ссдд!сса а!дада!!да аааадддсдд !!дсаасаас аасааааадс сс!ддасаад 960

аадсдс!сад дас!!да!!д дддсс!ассс с!с!!ссаас !ссс!д!са! а!сд!дддас 1020

дас!!ссаад сдсд!!дсаа адад!ссддс дада!дс!дд !!дс!д!сдс адд!д!да!! 1080

сасдасд!са дссад!!!а! !даада!сас сс!ддаддса ддад!!!да! !сддад!дсд 1140

д!дддсааад а!дддасадд да!д!!!аа! ддаддсд!а! а!дадсасад !аа!дсддсд 1200

са!аа!с!д! !д!сдасаа! даддд!ддда д!дс!!адад д!дддсадда дд!ддадд!д 1260

!ддаадаадс ададад!дда !д!!йаддд аададсдаса ййдадаса ддйасдсдд 1320

д!ддададд! !дд!!даддд ддс!д!ддс! дсд!адс!аа с!дасса!дд 1370

<210> 9

<211> 1428

<212> ДНК

<213> Мадпароййс дпзса

<400> 9

а!ддс!!сд! са!с!!сс!с сд!дссддад !!ддс!дссд сс!!ссс!да !ддсас!асс 60

дас!!саадс сса!даддаа сассаадддс !асдасд!са дсаадссдса са!!!ссдад 120

асасс!а!да сас!саадаа с!ддса!аад сасд!саас! ддс!саасас сасс!!са!с 180

!!д!!!д!дс ссс!ддс!дд !с!са!а!сс ас!!ас!ддд !ссс!с!дса д!ддаадасд 240

дс!д!а!ддд с!д!сд!с!а с!ас!!саас ассддсс!дд даа!!ас!дс сдд!!ассас 300

сдас!!!ддд с!сасадс!с д!асааддсс !сдс!!ссдс !саааа!с!а сс!!дссдсс 360

д!!ддсдс!д д!дссд!сда дддс!сса!с ада!дд!дд! ссаасдд!са ссдсдсасас 420

сассда!аса ссда!ассда дааддасссс !ас!сад!сс дсааддд!с! сс!д!ас!са 480

саса!ддда! дда!дс!!с! даадсадаас сссаадаадс адддссдсас сдаса!сасс 540

дасс!даасд аддассссд! !д!сд!!!дд садсассдса ас!!сс!саа д!д!д!!а!с 600

!!са!ддссс !сд!с!!ссс сасас!!д!д дс!ддсс!!д дс!дддд!да с!ас!дддда 660

дд!!!са!с! асддадд!а! !с!дсд!д!с !!с!!сд!сс адсаддссас с!!с!дсд!с 720

аас!сдс!!д сссас!ддс! сдд!дассад сс!!!сдасд а!сдсаас!с дссдсд!да! 780

сасд!са!са садссс!дд! сассс!!дда даддда!асс асаас!!сса ссасдад!!с 840

сс!!сддас! ассдсаасдс !а!!дад!дд !ассад!а!д ассссассаа д!дд!саа!с 900

- 45 029904

!дда!с!дда адсадс!!дд !с!!дсссас аасс!даадс ад!!ссдсса ааасдада!! 960

дадаадддас дсд!ссадса дс!дсадаад аадс!сдасс адаадсдсдс саадс!!да! 1020

!дддд!а!!с сс!!ддадса дс!!сссд!! д!!адс!ддд а!дас!!!д! !дадсад!сс 1080

аадаасддаа аддс!!дда! !дсад!!дсс дд!д!са!сс асда!д!!дд !дас!!са!с 1140

ааддассасс с!дд!ддсад адс!с!са!с аас!сддсса !!ддсаадда сдсаассдса 1200

а!с!!саасд дсдд!д!!!а саассас!сс аасдссдс!с асаасс!дс! с!сдас!а!д 1260

сд!д!ддд!д ййдсд!дд сддс!дсдад дйдада!с! ддаадсдсдс ссад!ссдаа 1320

аасааддасд !с!саассд! сд!!да!!с! !сддд!аасс дса!сд!ссд сдсддд!ддд 1380

саадсдасса адд!сд!сса дсс!д!!ссд дд!дс!садд ссдсд!да 1428

<210> 10

<211> 1062

<212> ДНК

<213> Нейсоуегра /еа

<400> 10

а!ддс!ссаа а!а!а!сдда дда!д!даас дддд!дс!с! !сдадад!да !дсадсдасд 60

ссддасс!дд сдс!д!ссас дссдсс!д!д садааддс!д асаасаддсс саадсаас!д 120

д!д!ддадда аса!ас!ас! д!!сдсд!а! с!!сас!!ад сддс!с!!!а сддадд!!а! 180

с!д!!сс!с! !с!садс!аа а!ддсадаса даса!а!!!д сс!аса!сс! д!а!д!да!с 240

!ссдддс!!д д!а!сасддс !ддадсаса! сдсс!д!ддд сссасаад!с с!асааадс! 300

ааа!ддсс!с !ссдад!!а! сс!дд!са!с !!!аасасад !ддса!!сса дда!дссдс! 360

а!ддас!ддд сдсдсдасса ссдса!дса! сасаад!ас! сддааассда !дс!да!сс! 420

са!аа!дсда сссдадда!! с!!с!!с!с! саса!!ддс! ддс!дс!!д! саддаааса! 480

сссдасс!!а аддадааддд саадддас!с даса!дадсд ас!!ас!!дс !дасссса!! 540

с!садд!!сс адаааааа!а с!асс!да!с с!да!дссс! !ддс!!дс!! сд!да!дсс! 600

ассд!да!!с с!д!д!ас!! с!дддд!даа асс!ддасса асдса!!с!! !д!ддсддсс 660

а!д!!ссдс! асдсд!!са! сс!ааа!д!д асд!ддс!сд !саас!с!дс сдс!сасаад 720

!ддддадаса адссс!асда саааадса!! аадсс!!ссд аааас!!д!с дд!сдсса!д 780

!!сдс!с!сд дадаадда!! ссасаас!ас сассасас!! !ссс!!ддда с!асаааас! 840

дс!дадс!дд дсаасаасаа ас!саас!!с ас!ассасс! !!а!!аас!! с!!сдс!ааа 900

а!!ддс!ддд с!!асдасс! даадасад!д !с!да!да!а !сд!саадаа саддд!даад 960

сдсас!дд!д асддс!ссса ссасс!д!дд ддс!ддддад асдаааа!са а!ссааадаа 1020

дааа!!да!д ссдс!а!сад аа!саа!сс! ааддасда!! аа 1062

- 46 029904

<210> 11

<211> 1350

<212> ДНК

<213> Ьер1о8рйаепа пойогит

<400> 11

а1ддсддсс1 1§§асадса1 1ссададда1 ааддс1асс1 с§1сдааа1с дас1са1ай 60

саайИсаад аад1аасШ 1сддаас1дд 1а!аадаада 1ааайддс1 саасасдасд 120

с!дд1дд1дс 1са1асссдс 1сйддас1с 1асс1аасас дсассасдсс асйасасда 180

сс1асдс1са 1с1д§1сс§1 сс1д1ас1ас йс1дсаса§ сШсддса! сасаддсдда 240

1а1са1сдас 1а1дда§1са 1сдсадс!ас 1ссдс1с§1с 1ассдс1ас§ сйайсс1а 300

дссйсасад дсдссддадс са1сса১1 а§1дс1сда1 дд!ддадсдс ааа!сассдс 360

дсссассасс да!ддассда сасаа!даад дасссс1ас1 ссдйа1дсд сддсс1айа 420

ййсдсаса 1сдда1дда! §§1айдаас адсдасссса аад!сааадд ссдаасадас 480

§1са§1да1с !сдасадсда ссссд1сд1а д1с1ддсадс асаадсас!а сддсаад!дс 540

с1дс1дйсд ссдсд1дда1 айсссса!д а1с§1адсс§ дсс1сдда1д дддадайдд 600

!ддддаддсс йд1с1асдс сддса!сай сдадсд1дй 1с§1ссадса ддсдасай! 660

1§с§1даас1 с!с!сдсдса йдда!сддс дадсадссд! !сдасдасад асдсасдсс! 720

сдадассасд ййдасадс дйдд!аасд а!дддадаад даййса1аа сйссассас 780

даайсссаа дсдайа!сд саасдсда!с а1с1д§1асс аа!асдассс 1ассааа1§§ 840

сйаШасс 1сйс1ссс1 сддссссйс сссс1сдса1 асйдсйаа аассйссдд 900

1ссаа!дада йдааааадд дсддйдсаа саасаасааа аадссс!дда саадаадсдс 960

1саддасй§ айддддсс! ассссйПс саас!ссс!д 1са1а1сд1д ддасдасйс 1020

саадсдсдй дсааадад!с сддсдада!д с!ддйдс1д 1сдс১1§1 дайсасдас 1080

д1садссад1 йайдаада 1сассс1дда ддсаддадй 1да11сддад 1дсдд1дддс 1140

ааада1ддда саддда1дй 1аа1ддаддс дйШйдадс асадйкйдс ддсдса1аа1 1200

с1д11д1сда саа1даддд1 дддад1дсй ададд1дддс аддадд1дда дд1д1ддаад 1260

аадсададад 1дда1дйй адддаададс даса1111да дасадд11ас дсддд1ддад 1320

аддйддйд адддддс1д1 ддс1дсд1ад 1350

<210> 12

<211> 475

<212> Белок

<213> Мадпароййе дп8еа

<400> 12

Ме1 А1а Зег Зег Зег Зег Зег Уа1 Рго О1и Беи А1а А1а А1а Р1е Рго

- 47 029904

1 5 10 15

Ак]} С1у ТНг ТНг Ак]} РНе Ьук Рго Ме1 Агд Акп ТНг Ьук С1у Туг А^ 20 25 30

Уа1 8ег Ьук Рго Шк Не 8ег С1и ТНг Рго Ме1 ТНг Ьеи Ьук Акп Тг]э 35 40 45

Шк Ьук Шк Уа1 Акп Тг]э Ьеи Акп ТНг ТНг РНе Не Ьеи РНе Уа1 Рго 50 55 60

Ьеи А1а С1у Ьеи Не 8ег ТНг Туг Тг]э Уа1 Рго Ьеи С1п Тг]э Ьук ТНг 65 70 75 80

А1а Уа1 Тдэ А1а Уа1 Уа1 Туг Туг РНе Акп ТНг С1у Ьеи С1у Не ТНг 85 90 95

А1а С1у Туг Шк Агд Ьеи Тг|э А1а Шк 8ег §ег Туг Ьук А1а 8ег Ьеи 100 105 110

Рго Ьеи Ьук Не Туг Ьеи А1а А1а Уа1 С1у А1а С1у А1а Уа1 С1и С1у 115 120 125

§ег Не Агд Тг]э Тг]э §ег Акп С1у Шк Агд А1а Шк Шк Агд Туг ТНг 130 135 140

Ак|э ТНг С1и Ьук Ак|э Рго Туг §ег Уа1 Агд Ьук С1у Ьеи Ьеи Туг §ег 145 150 155 160

Шк Ме1 С1у Тг|э Ме1 Ьеи Ьеи Ьук С1п Акп Рго Ьук Ьук С1п С1у Агд 165 170 175

ТНг Ак|э Не ТНг Ак|э Ьеи Акп С1и Ак|э Рго Уа1 Уа1 Уа1 Тг|э С1п Шк 180 185 190

Агд Акп РНе Ьеи Ьук Сук Уа1 Не РНе Ме1 А1а Ьеи Уа1 РНе Рго ТНг 195 200 205

Ьеи Уа1 А1а С1у Ьеи С1у Тдэ С1у Ак|э Туг Тг|э С1у С1у РНе Не Туг 210 215 220

С1у С1у Не Ьеи Агд Уа1 РНе РНе Уа1 С1п С1п А1а ТНг РНе Сук Уа1 225 230 235 240

Акп §ег Ьеи А1а Шк Тг|э Ьеи С1у Аф С1п Рго РНе Ак|э Ак|э Агд Акп 245 250 255

8ег Рго Агд Ак|э Шк Уа1 Не ТНг А1а Ьеи Уа1 ТНг Ьеи С1у С1и С1у 260 265 270

Туг Шк Акп РНе Шк Шк С1и РНе Рго 8ег А^ Туг Агд Акп А1а Не 275 280 285

С1и Тдэ Туг С1п Туг Ак|э Рго ТНг Ьук Тдэ §ег Не Тдэ Не Тдэ Ьук 290 295 300

С1п Ьеи С1у Ьеи А1а Шк Акп Ьеи Ьук С1п РНе Агд С1п Акп С1и Не 305 310 315 320

С1и Ьук С1у Агд Уа1 С1п С1п Ьеи С1п Ьук Ьук Ьеи Ак|э С1п Ьук Агд 325 330 335

- 48 029904

А1а Ьук Ьеи Акр Тгр С1у Не Рго Ьеи С1и С1п Ьеи Рго Vаί Vа1 8ег 340 345 350

Тгр Акр Акр РЬе Vаί С1и С1п 8ег Ьук Акп С1у Ьук А1а Тгр Не А1а 355 360 365

ν;·ι1 А1а С1у ν;·ι1 Не Шк Акр ν;·ι1 С1у Акр РЬе Не Ьук Акр Шк Рго 370 375 380

С1у С1у Агд А1а Ьеи Не Акп 8ег А1а Не С1у Ьук Акр А1а ТЬг А1а 385 390 395 400

Не РЬе Акп С1у С1у Vа1 Туг Акп Шк 8ег Акп А1а А1а Шк Акп Ьеи 405 410 415

Ьеи 8ег ТЬг Ме! Агд Vа1 С1у ν;·ι1 Ьеи Агд С1у С1у Сук С1и Vа1 С1и 420 425 430

Не Тгр Ьук Агд А1а С1п 8ег С1и Акп Ьук Акр ν;·ι1 8ег ТЬг Vа1 ν;·ι1 435 440 445

Акр 8ег 8ег С1у Акп Агд Не Vа1 Агд А1а С1у С1у С1п А1а ТЬг Ьук 450 455 460

ν;·ι1 Vа1 С1п Рго ν;·ι1 Рго С1у А1а С1п А1а А1а 465 470 475

<210> 13

<211> 353

<212> Белок

<213> ΗеЬсονе^ρа ζеа

<400> 13

Ме! А1а Рго Акп Не 8ег С1и Акр ν;·ι1 Акп С1у Vа1 Ьеи РЬе С1и 8ег 1 5 10 15

Акр А1а А1а ТЬг Рго Акр Ьеи А1а Ьеи 8ег ТЬг Рго Рго Vа1 С1п Ьук 20 25 30

А1а Акр Акп Агд Рго Ьук С1п Ьеи Vа1 Тгр Агд Акп Не Ьеи Ьеи РЬе 35 40 45

А1а Туг Ьеи Шк Ьеи А1а А1а Ьеи Туг С1у С1у Туг Ьеи РЬе Ьеи РЬе 50 55 60

8ег А1а Ьук Тгр С1п ТЬг Акр Не РЬе А1а Туг Не Ьеи Туг Vа1 Не 65 70 75 80

8ег С1у Ьеи С1у Не ТЬг А1а С1у А1а Шк Агд Ьеи Тгр А1а Шк Ьук 85 90 95

8ег Туг Ьук А1а Ьук Тгр Рго Ьеи Агд ν;·ι1 Не Ьеи Vа1 Не РЬе Акп 100 105 110

ТЬг Vа1 А1а РЬе С1п Акр А1а А1а Ме! Акр Тгр А1а Агд Акр Шк Агд 115 120 125

Ме! Шк Шк Ьук Туг 8ег С1и ТЬг Акр А1а Акр Рго Шк Акп А1а ТЬг

- 49 029904

130 135 140

Агд С1у Рйе Рйе Рйе δе^ Шк Не С1у Тгр Ьеи Ьеи Уа1 Агд Ьук Шк 145 150 155 160

Рго Акр Ьеи Ьук С1и Ьук С1у Ьук С1у Ьеи Акр Ме! δе^ Акр Ьеи Ьеи 165 170 175

А1а Акр Рго Не Ьеи Агд Рйе С1п Ьук Ьук Туг Туг Ьеи Не Ьеи Ме! 180 185 190

Рго Ьеи А1а Сук Рйе Уа1 Ме! Рго Тйг Уа1 Не Рго Уа1 Туг Рйе Тгр 195 200 205

С1у С1и ТЬг Тгр ТЬг Акп А1а Рйе Рйе Уа1 А1а А1а Ме! Рйе Агд Туг 210 215 220

А1а Рйе Не Ьеи Акп Уа1 Тйг Тгр Ьеи Уа1 Акп δе^ А1а А1а Шк Ьук 225 230 235 240

Тгр С1у Акр Ьук Рго Туг Акр Ьук δе^ Не Ьук Рго δе^ С1и Акп Ьеи 245 250 255

δе^ Уа1 А1а Ме! Рйе А1а Ьеи С1у С1и С1у Рйе Шк Акп Туг Шк Шк 260 265 270

ТЪг Рйе Рго Тгр Акр Туг Ьук Тйг А1а С1и Ьеи С1у Акп Акп Ьук Ьеи 275 280 285

Акп Рйе Тйг Тйг Тйг Рйе Не Акп Рйе Рйе А1а Ьук Не С1у Тгр А1а 290 295 300

Туг Акр Ьеи Ьук Тйг Уа1 δе^ Акр Акр Не Уа1 Ьук Акп Агд Уа1 Ьук 305 310 315 320

Агд ТЪг С1у Акр С1у δе^ Шк Шк Ьеи Тгр С1у Тгр С1у Акр С1и Акп 325 330 335

С1п δе^ Ьук С1и С1и Не Акр А1а А1а Не Агд Не Акп Рго Ьук Акр 340 345 350

Акр

<210> 14

<211> 449

<212> Белок

<213> ЬерЮкрйаепа побогит

<400> 14

Ме! А1а А1а Ьеи Акр δе^ Не Рго С1и Акр Ьук А1а ТЪг δе^ δе^ Ьук 1 5 10 15

δе^ ТЪг Шк Не С1п Туг С1п С1и Уа1 ТЪг Рйе Агд Акп Тгр Туг Ьук 20 25 30

Ьук Не Акп Тгр Ьеи Акп Тйг Тйг Ьеи Уа1 Уа1 Ьеи Не Рго А1а Ьеи 35 40 45

- 50 029904

О1у Ьеи Туг Ьеи Тйг Агд Тйг Тйг Рго Ьеи Тйг Агд Рго Тйг Ьеи 11е 50 55 60

Тгр 8ег Уа1 Ьеи Туг Туг Рйе Су8 Тйг А1а Рйе О1у 11е Тйг О1у О1у 65 70 75 80

Туг Н18 Агд Ьеи Тгр 8ег Н18 Агд 8ег Туг 8ег А1а Агд Ьеи Рго Ьеи 85 90 95

Агд Ьеи Рйе Ьеи А1а Рйе Тйг О1у А1а О1у А1а 11е О1и О1у 8ег А1а 100 105 110

Агд Тгр Тгр 8ег А1а А8и Н18 Агд А1а Н18 Н18 Агд Тгр Тйг А8р Тйг 115 120 125

Ме1 Ьу8 А8р Рго Туг 8ег Уа1 Ме1 Агд О1у Ьеи Ьеи Рйе 8ег Н18 11е 130 135 140

О1у Тгр Ме1 Уа1 Ьеи А8и 8ег А8р Рго Ьу8 Уа1 Ьу8 О1у Агд Тйг А8р 145 150 155 160

Уа1 8ег А8р Ьеи А8р 8ег А8р Рго Уа1 Уа1 Уа1 Тгр О1и Н18 Ьу8 Н18 165 170 175

Туг О1у Ьу8 Су8 Ьеи Ьеи Рйе А1а А1а Тгр 11е Рйе Рго Ме1 11е Уа1 180 185 190

А1а О1у Ьеи О1у Тгр О1у А8р Тгр Тгр О1у О1у Ьеи Уа1 Туг А1а О1у 195 200 205

11е 11е Агд А1а Су8 Рйе Уа1 О1и О1и А1а Тйг Рйе Су8 Уа1 А8и 8ег 210 215 220

Ьеи А1а Н18 Тгр 11е О1у О1и О1и Рго Рйе А8р А8р Агд Агд Тйг Рго 225 230 235 240

Агд А8р Н18 Уа1 Ьеи Тйг А1а Ьеи Уа1 Тйг Ме1 О1у О1и О1у Туг Н18 245 250 255

А8и Рйе Н18 Н18 О1и Рйе Рго 8ег А8р Туг Агд А8и А1а 11е 11е Тгр 260 265 270

Туг О1и Туг А8р Рго Тйг Ьу8 Тгр Ьеи 11е Туг Ьеи Рйе 8ег Ьеи О1у 275 280 285

Рго Рйе Рго Ьеи А1а Туг 8ег Ьеи Ьу8 Тйг Рйе Агд 8ег А8и О1и 11е 290 295 300

О1и Ьу8 О1у Агд Ьеи О1и О1и О1и О1и Ьу8 А1а Ьеи А8р Ьу8 Ьу8 Агд 305 310 315 320

8ег О1у Ьеи А8р Тгр О1у Ьеи Рго Ьеи Рйе О1и Ьеи Рго Уа1 11е 8ег 325 330 335

Тгр А8р А8р Рйе О1и А1а Агд Су8 Ьу8 О1и 8ег О1у О1и Ме1 Ьеи Уа1 340 345 350

А1а Уа1 А1а О1у Уа1 11е Н18 А8р Уа1 8ег О1и Рйе 11е О1и А8р Н18 355 360 365

Рго О1у О1у Агд 8ег Ьеи 11е Агд 8ег А1а Уа1 О1у Ьу8 А8р О1у Тйг 370 375 380

- 51 029904

С1у Ме! РНе Азп С1у С1у Уа1 Туг С1и Ηίδ 8ег Азп А1а А1а Ηίδ Азп 385 390 395 400

Ьеи Ьеи 8ег ТНг Ме! Агд Уа1 С1у Уа1 Ьеи Агд С1у С1у С1п С1и Уа1 405 410 415

С1и Уа1 Тгр Ьуз Ьуз С1п Агд Уа1 Азр Уа1 Ьеи С1у Ьуз 8ег Азр Не 420 425 430

Ьеи Агд С1п Уа1 ТНг Агд Уа1 С1и Агд Ьеи Уа1 С1и С1у А1а Уа1 А1а 435 440 445

А1а

<210> 15

<211> 1428

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Оптимизированная для канолы последовательность десатуразы

<400> 15

а!ддссадса д!!с!!саад !д!дссадаа с!!дссдсад с!!!ссс!да !дддасаасд 60

дас!!сааас сса!даддаа сассаааддс !а!да!д!с! ссааасс!са са!с!с!даа 120

асассда!да с!!!даадаа с!ддсасааа са!д!даас! ддс!саасас саса!!са!! 180

с!с!!!д!!с сас!ддс!дд д!!да!с!са асс!а!!ддд !!сс!с!!са а!ддаааас! 240

дсад!д!ддд сад!!д!д!а с!ас!!саас ас!ддас!!д дда!сас!дс !ддс!асса! 300

ада!!д!ддд саса!!сс!с !!асааддсс адс!!дсс!с !саааа!с!а сс!!дссдса 360

д!!дд!дс!д дадссд!!да адд!!сса!а ада!дд!дда дсаасддаса сададсаса! 420

сасада!аса садасасада дааада!сс! !ас!сад!да ддааддда!! дс!с!асадс 480

саса!ддд!! дда!дс!с!! даадсадаа! ссааадаадс аадддаддас ддаса!!ас! 540

да!с!даа!д аддасссад! !д!дд!с!дд сааса!адда ас!!!с!саа д!д!д!да!с 600

!!са!ддс!! !дд!с!!!сс сассс!!д!! дс!ддсс!дд да!ддддада с!ас!дддда 660

дд!!!са!с! а!ддаддда! с!!дадад!д !!с!!!д!!с адсаадссас с!!с!д!д!с 720

аас!сас!!д саса!!ддс! !дд!да!саа ссд!!!да!д асадааас!с !ссасд!дас 780

са!д!са!аа с!дс!с!!д! сасдс!ддд! дааддс!а!с асаас!!!са сса!дад!!! 840

ссд!садас! а!адааа!дс да!!дад!дд !а!сад!а!д ассссасдаа д!ддадса!! 900

!дда!!!дда адсаас!!дд ас!!дс!сас аа!с!саадс ад!!садаса даа!дада!а 960

дадаадддаа ддд!!сааса д!!дсадаад ааас!дда!с адаадададс дааас!!да! 1020

!ддддаа!ас сд!!ддааса ас!ссс!д!! д!д!с!!ддд а!дас!!!д! !даасад!са 1080

- 52 029904

аадаа1ддса аддса1дда1 1дс1дйдс1 дд1д1сайс асда1дйдд 1дас11са1с 1140

аадда1са1с с1дд1ддасд 1дс1с1са1с аас1с1дсда йддсааада 1дссасадсд 1200

а1с11саа1д дадд1д1с1а саа1сайса аа1дссдсас асаассйс! с1ссасса1д 1260

адддйдд1д 1сс1ссд1дд аддд1дсдаа АууауакП ддааасд1дс 1сааад1дад 1320

аасааада1д 1с1с1ас1д1 дд11да1ад1 1с1ддсаасс д1а11д1дад адс1дд1дда 1380

саадс1асса аад1ддйса дссад1ссс1 дд1дс1саад садсйда 1428

<210> 16

<211> 1062

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Оптимизированная для канолы последовательность десатуразы

<400> 16

а1ддс1ссса аса111с1да дда1д1саа1 дд1дйс111 йдад1сада 1дсддсаасс 60

сс1да111дд с1с1йссас ассасс1д1д сааааадс1д асаасадасс саадсаасй 120

д1д1ддадда асаййдс1 Шсдсйас йдсасс1сд садс1с1с1а сддаддс1а1 180

11дй1с1с1 1сад1дсааа а1ддсадасс дасаййсд сйасайс1 11а1д1са1с 240

1с1ддас1дд дда1аас1дс 1ддддсаса1 адас1с1ддд с1сасаад1с а1асааадсс 300

аад1ддссас 1сададйа1 ас1дд1са1с йсаасасдд 11дссй1са адасдс1дс1 360

а1ддайддд с1сд1дасса 1адаа1дса1 сасаад1аса дсдадассда сдсддассса 420

сасаа1дсаа сдададдШ сйсйс1с1 сасайддс1 ддсйсйд1 1аддаааса1 480

сс1да1с1да аадааааадд даадддас1с даса1дад1д а1с1ссйдс 1да1ссаа1а 540

с1ссдййс адаадаад1а с1а1с1да1с с1са1дсс1с 1ддсс1дШ 1д1да1дсса 600

ассд11а1сс сддШасй йддддадаа асйддасаа а1дсй1сй сд1ддсадсс 660

а1д11ссд11 а1дс111са1 сс1даа1д11 асс1дд11дд 1даас1с1дс сдсасасаад 720 1ддддадаса аассс1а1да саад1сса1с аадсс11ссд аааасс111с ад11дсда1д 780 111дс111дд дадаадда11 1сасаа11ас са1сасас11 11ссд1ддда с1асаадаса 840 дсададс11д дааасаасаа д11даас11с асаасаасд1 1са1саа111 с111дсдааа 900 а1сдд11ддд сс1а1да111 даадас1д1д ад1да1даса 11д1саадаа саддд1саад 960 адаас1ддсд а1ддаадсса 1са1с1с1дд ддс1дддд1д а1дадаа1са дадсааадаа 1020

дада1ада1д садсса11ад да1саассс1 ааадасда11 да 1062

<210> 17 <211> 1350 <212> ДНК

- 53 029904

<213> Искусственная

<220>

<223> Оптимизированная для канолы последовательность десатуразы

<400> 17

а!ддс!дсас !!да!адса! ссс!даддас ааадсаас!а дс!ссаад!с аасссаса!а 60

сад!ассаад адд!сасд!! !аддаас!дд !асаадаааа !саас!ддс! саасасдасс 120

с!!д!!д!сс !са!!сс!дс !с!!ддд!!д !ас!!дасда даассасасс !с!сассада 180

сс!ассс!са !!!дд!с!д! !с!с!ас!а! !!с!д!асад сд!!!ддса! сас!дд!ддс 240

!ассасадас !!!дд!ссса !адд!с!!ас ад!дсдадд! !дсса!!дад ас!с!!сс!д 300

дс!!!сас!д дадс!дд!дс да!ссаадд! !с!дсаада! дд!дд!садс саа!са!адд 360

дсаса!сасс д!!ддасдда сасса!даад дасссс!ас! с!д!да!дад аддас!дс!д 420

!!с!сссаса !адд!!дда! дд!!с!саас !с!да!ссаа адд!сааадд садаасада! 480

д!!!с!да!с !!дас!с!да !сссд!сд!! д!д!ддсаас асааасас!а !ддсаад!д! 540

!!дс!с!!!д ссдс!!дда! с!!!ссда!д а!ад!ддс!д ддс!ддд!!д дддада!!дд 600

!дддд!ддас !!д!с!а!дс !ддса!са!а сд!дсс!дс! !!д!!садса адссас!!!с 660

!д!д!саас! са!!ддсаса !!дда!адд! даасаассд! !!да!дасад асд!ас!сса 720

аддда!са!д !!с!дас!дс д!!дд!саса а!дддадаад да!ассасаа с!!ссасса! 780

дад!!!ссда д!дас!асад ааа!дсса!с а!!!дд!а!с ад!а!дассс !асааад!дд 840

с!са!с!а!с !с!!садс!! ддд!ссс!!с сса!!ддсс! ас!с!с!саа дасс!!ссд! 900

!ссаа!дада !!дадааадд ааддс!!сад саасадсааа аддс!с!!да саадаааада 960

ад!дд!с!!д а!!ддддас! !сс!с!с!!с садс!!ссад !да!с!са!д дда!дас!!! 1020

саадс!сд!! дсааадааад !ддадада!д с!!д!!дс!д !!дс!ддад! да!сса!да! 1080

д!с!сссад! !са!!даада !са!сс!дд! дддаддадсс !са!!адаад !дс!д!!ддд 1140

ааада!ддда с!ддса!д!! саа!дд!дда д!д!а!даас а!!сааасдс сдсасасаас 1200

!!дс!дадса саа!дадад! !ддад!с!!д ададд!ддас аадаад!дда дд!!!ддаад 1260

ааасададдд !дда!д!!с! !дддаад!са даса!!с!!с д!саад!дас ааддд!ддад 1320

сд!с!дд!дд ааддадс!д! !дсадсд!да 1350

<210> 18

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер МАЗ414

<400> 18

- 54 029904

(даадсайс са1аадссд1 сасд 24

<210> 19

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер МА8415

<400> 19

даааПа1са сдсйссдса сасд 24

<210> 20

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер МА8413

<400> 20

1дддс1даа11даадаса1д с1сс 24

<210> 21

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер агу008

<400> 21

асассШса ссадасс1ас сс1са 25

<210> 22

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер агу009

<400> 22

сасасаасда сдддайада д1 22

<210> 23

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер агу010

<400> 23

саад1са1ас ааадссаад! ддсс 24

- 55 029904

<210> 24

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер ато011

<400> 24

!аасддааса !ддс!дссас да 22

<210> 25

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер АпйЬпО9П82Р

<400> 25

са!а!д!!сд асдасадасд сасдсс!сда дас

33

<210> 26

<211> 35

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер АпйЬпО9П82Кй

<400> 26

дда!ссдсад ссасадсссс с!саассаас с!с!с

35

<210> 27

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер Ап1|МдО9О8Р

<400> 27

са!а!д!!сд асда!сдсаа с!сдссдсд! да!сас

36

<210> 28

<211> 32

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер АпйМдП9П8Кй

<400> 28

дда!ссдсдд сс!дадсасс сддаасаддс !д

<210> 29

32

- 56 029904

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер Αпί^Ηζ^9^δР

<400> 29

са1а1д1а1д асаад1сса1 саадссйсс 30

<210> 30

<211> 35

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер ΛηΙίΗζΩ90δΚΗ

<400> 30

88а1сс1сд1 с1йадддй да1сс1аа18 дс!дс 35

<210> 31

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Прямой праймер для мишени АпЭ9Э5 <400> 31

ддасйс!с! асШсасс! 1дда 24

<210> 32

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Обратный праймер для мишени АпЭ9Э5

<400> 32

1ссда1сс1с Шдддйс! 20

<210> 33

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Прямой праймер для мишени Ηζϋ9Όδ

<400> 33

дасссасаса а!дсаасд 18

<210> 34 <211> 21 <212> ДНК

- 57 029904

<213> Искусственная

<220>

<223> Обратный праймер для мишени Н/Э9О5

<400> 34

сс!аасаада адссадссаа ΐ 21

<210> 35

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Прямой праймер для мишени ЬпО9П5

<400> 35

дйс1дас1д сдйдд!сас 20

<210> 36

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Обратный праймер для мишени ЬпО9П5

<400> 36

сддааасЮа 1дд1ддаад1 20

<210> 37

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Прямой праймер для мишени Ас1т

<400> 37

с1ас1дд1а11д1дс1сдас ΐ 21

<210> 38

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Обратный праймер для мишени Ас1т

<400> 38

с1с1с1сдд1 дадааЮНс а! 22

<210> 39

<211> 22

<212> ДНК <213> Искусственная

- 58 029904

<220>

<223> Актиновый зонд

<400> 39

сасдсй-Исс 1ссд!с1сда 1с 22

<210> 40

<211> 13

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Последовательность Козака

<400> 40

дда!ссааса а!д 13

<210> 41

<211> 13

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Последовательность Козака

<400> 41

асаассаааа а!д 13

<210> 42

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Последовательность Козака

<400> 42

асаассаасс 1асса!дд 18

<210> 43

<211> 14

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Последовательность Козака

<400> 43

асаассаааа аа!д 14

<210> 44

<211> 1350 <212> ДНК <213> Искусственная

<220>

<223> Оптимизированная для канолы десатураза

- 59 029904

<400> 44

а!ддс!дс!с !!да!!с!а! сссададда! ааддс!асс! с!!с!аад!с !асссаса!с 60

саа!ассаад аад!!асс!! саддаас!дд !асаадаада !саас!ддс! !аасассасс 120

с!!д!!д!!с !!а!сссадс !с!!ддас!! !асс!!асса ддассасссс ас!!ассадд 180

ссаассс!!а !с!дд!с!д! !с!!!ас!ас !!с!дсассд с!!!сддаа! аассддадда 240

!ассасаддс !!!дд!с!са садд!с!!ас !с!дс!аддс !!ссас!!ад дс!!!!сс!! 300

дс!!!сассд дадс!ддадс !а!ссаадда !с!дс!ада! дд!дд!с!дс !аассасадд 360

дс!сассаса дд!ддассда !асса!даад дассса!ас! с!д!!а!дад дддас!!с!! 420

!!с!с!саса !сдда!дда! дд!!с!!аас !с!да!ссаа адд!!ааддд ааддассда! 480

д!!!с!да!с !!да!!с!да !ссад!!д!! д!!!ддсаас асаадсас!а сддааад!дс 540

с!!с!!!!сд с!дс!!дда! с!!сссаа!д а!сд!!дс!д дас!!дда!д дддада!!дд 600

!ддддаддас !!д!!!асдс !ддаа!са!с адддс!!дс! !сд!!сааса адс!асс!!с 660

!дсд!!аас! с!с!!дс!са с!дда!сдда дадсаасса! !сдасда!ад даддасссса 720

аддда!сасд !!с!!ассдс !с!!д!!асс а!дддададд да!ассасаа с!!ссассас 780

дад!!ссса! с!да!!асад даасдс!а!с а!с!дд!асс аа!асда!сс аассаад!дд 840

с!!а!с!асс !!!!с!с!с! !ддасса!!с ссас!!дс!! ас!с!с!!аа дасс!!садд 900

!с!аасдада !сдадааддд ааддс!!саа саасаасааа аддс!с!!да !аадаададд 960

!с!ддас!!д а!!ддддас! !ссас!!!!с саас!!ссад !!а!с!с!!д дда!да!!!с 1020

саадс!адд! дсааддад!с !ддадада!д с!!д!!дс!д !!дс!ддад! !а!ссасда! 1080

д!!!с!саа! !са!сдадда !сасссадда ддаадд!с!с !!а!садд!с !дс!д!!дда 1140

аадда!ддаа ссддаа!д!! саасддадда д!!!асдадс ас!с!аасдс !дс!сасаас 1200

с!!с!!!с!а сса!даддд! !ддад!!с!! аддддаддас аададд!!да дд!!!ддаад 1260

аадсаааддд !!да!д!!с! !ддааад!са да!а!сс!!а ддсаад!!ас саддд!!дад 1320

аддс!!д!!д адддадс!д! !дс!дс!!да 1350

<210> 45

<211> 1062

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Оптимизированная для канолы десатураза

<400> 45

а!ддс!ссаа аса!с!с!да дда!д!!аас ддад!!с!!! !сдад!с!да !дс!дс!асс 60

ссада!с!!д с!с!!!с!ас сссассад!! сааааддс!д а!аасаддсс ааадсаас!! 120

- 60 029904

д!!!ддадда аса!сс!!с! !!!сдс!!ас с!!сасс!!д с!дс!с!!!а сддадда!ас 180

с!!!!сс!!! !с!с!дс!аа д!ддсааасс да!а!с!!сд с!!аса!сс! !!асд!!а!с 240

!с!ддас!!д даа!аассдс !ддадсасас аддс!!!ддд с!сасаад!с !!асааддс! 300

аад!ддссас !!аддд!!а! сс!!д!!а!с !!саасассд !!дс!!!сса адасдс!дс! 360

а!дда!!ддд с!аддда!са садда!дсас сасаад!ас! с!дадассда сдс!да!сса 420

сасаасдс!а ссадддда!! с!!с!!с!с! саса!сдда! ддс!!с!!д! !аддаадсас 480

ссада!с!!а аддадааддд ааадддас!! да!а!д!с!д а!с!!с!!дс !да!ссаа!с 540

с!!адд!!сс аааадаад!а с!асс!!а!с с!!а!дссас !!дс!!дс!! сд!!а!дсса 600

ассд!!а!сс сад!!!ас!! с!ддддадад асс!ддасса асдс!!!с!! сд!!дс!дс! 660

а!д!!садд! асдс!!!са! сс!!аасд!! асс!ддс!!д !!аас!с!дс !дс!сасаад 720

!ддддада!а адсса!асда !аад!с!а!с аадсса!с!д адаасс!!!с !д!!дс!а!д 780

!!сдс!с!!д дададдда!! ссасаас!ас сассасасс! !ссса!ддда !!асаадасс 840

дс!дадс!!д дааасаасаа дс!!аас!!с ассассасс! !са!саас!! с!!сдс!аад 900

а!сдда!ддд с!!асда!с! !аадассд!! !с!да!да!а !сд!!аадаа саддд!!аад 960

аддассддад а!дда!саса ссасс!!!дд дда!ддддад а!дадаасса а!с!ааддад 1020

дада!сда!д с!дс!а!сад да!саассса аадда!да!! да 1062

<210> 46

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная

<220>

<223> маркер Мус

<400> 46

О1и О1п Ьуз Ьси 11с Зсг О1и О1и Азр Ьси

1 5 10

<210> 47

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная

<220>

<223> Гемагглютининовый маркер

<400> 47

Туг Рго Туг Азр Уа1 Рго Азр Туг А1а

1 5

<210> 48

- 61 029904

<211> 1368

<212> ДНК

<213> А8регдШи8 шбик-иъ

<400> 48

а1д1с1дс1с саассдс!да са1садддс1 адддс1ссад аддс1аадаа дд11саса1с 60

дс!да1ассд с!а!сааса§ дсасаайдд !асаадсас§ 1даас1ддс! саасд1сИс 120

с1са1са1сд даа1сссас1 с!асдда!дс айсаадсй 1с!дддйсс асйсаасй 180

аадассдс!а 1с1дддс1д1 да1с1ас1ас йсйсассд дасйддаа! сассдс!дда 240

!ассасаддс 1йдддс!са с!дс1сйас 1с1дс1ас1с йссасйад да1с1ддс11 300

дс1дс1д11д даддаддадс 1д11даддда 1с1а1сада1 дд1дддс1ад дда1сасадд 360

дс1са1са1а дд1асассда (ассдасаад дассса1ас1 с1д11аддаа дддас11с1с 420

1ас1с1сасс 11дда1дда1 дд1да1даад садаасссаа ададда1сдд ааддассдас 480

а1с1с1да1с 1саасдадда сссад11д11 д111ддсаас асаддаас1а сс1саадд11 540

д1д11сасса 1дддас11дс 1д11ссаа1д с11д11дс1д дас11дда1д дддада11дд 600

с11ддадда1 1сд1д1асдс 1ддаа1сс11 адда1с11с1 1сд11сааса адс1асс11с 660

1дсд1даас1 с1с11дс1са с1ддс11дда да1саасса1 1сда1да1ад даас1с1сс1 720

аддда1сасд 1да1сассдс 1с11д11асс с11ддададд да1ассасаа с11ссассас 780

дад11ссса1 с1дас1асад даасдс1а1с дад1ддсасс ад1асда1сс 1ассаад1дд 840

1с1а1с1ддд с11ддаадса ас11дда11д дс11асда1с 1саадаад11 садддс1аас 900

дада1сдада адддааддд1 1саасаас11 садаадаадс 11да1аддаа дадддс1ас1 960

сИдаПддд даассссас! 1да1саас11 ссад1да1дд аа1ддда1да с1асд11дад 1020

саадс1аада асддаадддд асйдйдс! а1сдс1ддад йдйсасда 1д11ассдас 1080

Пса1саадд а1сасссадд аддаааддс! а1да1с1с11 с1ддаа1сдд ааадда1дс1 1140

ассдс1а1д1 (саасддадд ад1д1ас1ас сасЫаасд садс1сасаа ссйсйадс 1200

асса1даддд 1дддад1да1 саддддадда 1дсдадд11д ада1с1ддаа дадддс1сад 1260

ааддадаасд Идаё1ас§11аддда1дда 1с1ддасааа ддд1да1сад ддс1ддадад 1320

саассаасса ада1сссада дссаа1ссса ассдс1да1д с1дс11да 1368

<210> 49

<211> 1368

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> АпЭ9Э8 ν3 молчащий мутант

<400> 49

а1д1с1дс1с саассдс1да са1садддс1 адддс1ссад аддс1аадаа дд11саса1с 60

- 62 029904

дс!да!ассд с!а!саасад дсасаа!!дд !асаадсасд !даас!ддс! саасд!с!!с 120

с!са!са!сд даа!сссас! с!асдда!дс а!ссаадс!! !с!ддд!!сс ас!!саас!с 180

аадассдс!а !с!дддс!д! да!с!ас!ас !!с!!сассд дас!!ддаа! сассдс!дда 240

!ассасаддс !!!дддс!са с!дс!са!ас !с!дс!ас!с !!ссас!!ад да!с!ддс!! 300

дс!дс!д!!д даддаддадс !дйдаддда !с!а!сада! дд!дддс!ад дда!сасадд 360

дс!са!са!а дд!асассда !ассдасаад дассса!ас! с!д!!аддаа дддас!!с!с 420

!ас!с!сасс !!дда!дда! дд!да!даад садаасссаа ададда!сдд ааддассдас 480

а!с!с!да!с !саасдадда сссад!!д!! д!!!ддсаас асаддаас!а сс!саадд!! 540

д!д!!сасса !дддас!!дс !д!!ссаа!д с!!д!!дс!д дас!!дда!д дддада!!дд 600

с!!ддадда! !сд!д!асдс !ддаа!сс!! адда!с!!с! !сд!!сааса адс!асс!!с 660

!дсд!даас! с!с!!дс!са с!ддс!!дда да!саасса! !сда!да!ад даас!с!сс! 720

аддда!сасд !да!сассдс !с!!д!!асс с!!ддададд да!ассасаа с!!ссассас 780

дад!!ссса! с!дас!асад даасдс!а!с дад!ддсасс ад!асда!сс !ассаад!дд 840

!с!а!с!ддд с!!ддаадса ас!!дда!!д дс!!асда!с !саадаад!! садддс!аас 900

дада!сдада адддааддд! !саасаас!! садаадаадс !!да!аддаа дадддс!ас! 960

с!!да!!ддд даассссас! !да!саас!! ссад!да!дд аа!ддда!да с!асд!!дад 1020

саадс!аада асддаадддд ас!!д!!дс! а!сдс!ддад !!д!!сасда !д!!ассдас 1080

!!са!саадд а!сасссадд аддаааддс! а!да!с!с!! с!ддаа!сдд ааадда!дс! 1140

ассдс!а!д! !саасддадд ад!д!ас!ас сас!с!аасд садс!сасаа сс!!с!!адс 1200

асса!даддд !дддад!да! саддддадда !дсдадд!!д ада!с!ддаа дадддс!сад 1260

ааддадаасд !!дад!асд! !аддда!дда !с!ддасааа ддд!да!сад ддс!ддадад 1320

саассаасса ада!сссада дссаа!ссса ассдс!да!д с!дс!!да 1368

<210> 50

<211> 455

<212> Белок

<213> АзрегдШиз т6и1апз

<400> 50

Ме! 8ег А1а Рго ТНг А1а Азр Не Агд А1а Агд А1а Рго С1и А1а Ьуз 1 5 10 15

Ьуз Уа1 Шз Не А1а Азр ТНг А1а Не Азп Агд Шз Азп Тгр Туг Ьуз 20 25 30

Шз Уа1 Азп Тгр Ьеи Азп Уа1 РНе Ьеи Не Не С1у Не Рго Ьеи Туг 35 40 45

- 63 029904

С1у Сук 11е С1п А1а РЬе Тгр Vа1 Рго Ьеи С1п Ьеи Ьук ТЬг А1а 11е 50 55 60

Тгр А1а ν;·ι1 11е Туг Туг РЬе РЬе ТЬг С1у Ьеи С1у 11е ТЬг А1а С1у 65 70 75 80

Туг Шк Агд Ьеи Тгр А1а Шк Сук 8ег Туг 8ег А1а ТЬг Ьеи Рго Ьеи 85 90 95

Агд 11е Тгр Ьеи А1а А1а Vа1 С1у С1у С1у А1а Vа1 С1и С1у 8ег 11е 100 105 110

Агд Тгр Тгр А1а Агд Акр Шк Агд А1а Шк Шк Агд Туг ТЬг Акр ТЬг 115 120 125

Акр Ьук Акр Рго Туг 8ег ν;·ι1 Агд Ьук С1у Ьеи Ьеи Туг 8ег Шк Ьеи 130 135 140

С1у Тгр Ме! ν;·ι1 Ме! Ьук С1п Акп Рго Ьук Агд 11е С1у Агд ТЬг Акр 145 150 155 160

11е 8ег Акр Ьеи Акп С1и Акр Рго ν;·ι1 ν;·ι1 Vа1 Тгр С1п Шк Агд Акп 165 170 175

Туг Ьеи Ьук Vа1 ν;·ι1 РЬе ТЬг Ме! С1у Ьеи А1а Vа1 Рго Ме! Ьеи ν;·ι1 180 185 190

А1а С1у Ьеи С1у Тгр С1у Акр Тгр Ьеи С1у С1у РЬе ν;·ι1 Туг А1а С1у 195 200 205

11е Ьеи Агд 11е РЬе РЬе ν;·ι1 С1п С1п А1а ТЬг РЬе Сук Vа1 Акп 8ег 210 215 220

Ьеи А1а Шк Тгр Ьеи С1у Акр С1п Рго РЬе Акр Акр Агд Акп 8ег Рго 225 230 235 240

Агд Акр Шк ν;·ι1 11е ТЬг А1а Ьеи Vа1 ТЬг Ьеи С1у С1и С1у Туг Шк 245 250 255

Акп РЬе Шк Шк С1и РЬе Рго 8ег Акр Туг Агд Акп А1а 11е С1и Тгр 260 265 270

Шк С1п Туг Акр Рго ТЬг Ьук Тгр 8ег 11е Тгр А1а Тгр Ьук С1п Ьеи 275 280 285

С1у Ьеи А1а Туг Акр Ьеи Ьук Ьук РЬе Агд А1а Акп С1и 11е С1и Ьук 290 295 300

С1у Агд ν;·ι1 С1п С1п Ьеи С1п Ьук Ьук Ьеи Акр Агд Ьук Агд А1а ТЬг 305 310 315 320

Ьеи Акр Тгр С1у ТЬг Рго Ьеи Акр С1п Ьеи Рго ν;·ι1 Ме! С1и Тгр Акр 325 330 335

Акр Туг ν;·ι1 С1и С1п А1а Ьук Акп С1у Агд С1у Ьеи Vа1 А1а 11е А1а 340 345 350

С1у ν;·ι1 Vа1 Шк Акр ν;·ι1 ТЬг Акр РЬе 11е Ьук Акр Шк Рго С1у С1у 355 360 365

Ьук А1а Ме! 11е 8ег 8ег С1у 11е С1у Ьук Акр А1а ТЬг А1а Ме! РЬе 370 375 380

- 64 029904

Акп С1у С1у Vа1 Туг Туг Шк 8ег Акп А1а А1а Шк Акп Ьеи Ьеи 8ег 385 390 395 400

ТЬг Ме! Агд ν;·ι1 С1у ν;·ι1 Не Агд С1у С1у Сук С1и Vа1 С1и Не Тгр 405 410 415

Ьук Агд А1а С1п Ьук С1и Акп ν;·ι1 С1и Туг Vа1 Агд Акр С1у 8ег С1у 420 425 430

С1п Агд ν;·ι1 Не Агд А1а С1у С1и С1п Рго ТЬг Ьук Не Рго С1и Рго 435 440 445

Не Рго ТЬг А1а Акр А1а А1а 450 455

<210> 51

<211> 455

<212> Белок

<213> АкрегдШик тби1апк

<400> 51

Ме! 8ег А1а Рго ТЬг А1а Акр Не Агд А1а Агд А1а Рго С1и А1а Ьук 1 5 10 15

Ьук ν;·ι1 Шк Не А1а Акр ТЬг А1а Не Акп Агд Шк Акп Тгр Туг Ьук 20 25 30

Шк Vа1 Акп Тгр Ьеи Акп Vа1 РЬе Ьеи Не Не С1у Не Рго Ьеи Туг 35 40 45

С1у Сук Не С1п А1а РЬе Тгр Vа1 Рго Ьеи С1п Ьеи Ьук ТЬг А1а Не 50 55 60

Тгр А1а ν;·ι1 Не Туг Туг РЬе РЬе ТЬг С1у Ьеи С1у Не ТЬг А1а С1у 65 70 75 80

Туг Шк Агд Ьеи Тгр А1а Шк Сук 8ег Туг 8ег А1а ТЬг Ьеи Рго Ьеи 85 90 95

Агд Не Тгр Ьеи А1а А1а Vа1 С1у С1у С1у А1а Vа1 С1и С1у 8ег Не 100 105 110

Агд Тгр Тгр А1а Агд Акр Шк Агд А1а Шк Шк Агд Туг ТЬг Акр ТЬг 115 120 125

Акр Ьук Акр Рго Туг 8ег ν;·ι1 Агд Ьук С1у Ьеи Ьеи Туг 8ег Шк Ьеи 130 135 140

С1у Тгр Ме! ν;·ι1 Ме! Ьук С1п Акп Рго Ьук Агд Не С1у Агд ТЬг Акр 145 150 155 160

Не 8ег Акр Ьеи Акп С1и Акр Рго ν;·ι1 ν;·ι1 Vа1 Тгр С1п Шк Агд Акп 165 170 175

Туг Ьеи Ьук Vа1 ν;·ι1 РЬе ТЬг Ме! С1у Ьеи А1а Vа1 Рго Ме! Ьеи ν;·ι1 180 185 190

А1а С1у Ьеи С1у Тгр С1у Акр Тгр Ьеи С1у С1у РЬе ν;·ι1 Туг А1а С1у

- 65 029904

195 200 205

11е Ьеи Агд 11е РЬе РЬе Уа1 01п 01п А1а ТЬг РЬе Сук Уа1 Акп 8ег 210 215 220

Ьеи А1а Ьеи Тгр Ьеи 01у Акр 01п Рго РЬе Акр Акр Агд Акп 8ег Рго 225 230 235 240

Агд Акр Шк Уа1 11е ТЬг А1а Ьеи Уа1 ТЬг Ьеи 01у 01и 01у Туг Шк 245 250 255

Акп РЬе Шк Шк 01и РЬе Рго 8ег Акр Туг Агд Акп А1а 11е 01и Тгр 260 265 270

Шк 01п Туг Акр Рго ТЬг Ьук Тгр 8ег 11е Тгр А1а Тгр Ьук 01п Ьеи 275 280 285

01у Ьеи А1а Туг Акр Ьеи Ьук Ьук РЬе Агд А1а Акп 01и 11е 01и Ьук 290 295 300

01у Агд Уа1 01п 01п Ьеи 01п Ьук Ьук Ьеи Акр Агд Ьук Агд А1а ТЬг 305 310 315 320

Ьеи Акр Тгр 01у ТЬг Рго Ьеи Акр 01п Ьеи Рго Уа1 Ме! 01и Тгр Акр 325 330 335

Акр Туг Уа1 01и 01п А1а Ьук Акп 01у Агд 01у Ьеи Уа1 А1а 11е А1а 340 345 350

01у Уа1 Уа1 Шк Акр Уа1 ТЬг Акр РЬе 11е Ьук Акр Шк Рго 01у 01у 355 360 365

Ьук А1а Ме! 11е 8ег 8ег 01у 11е 01у Ьук Акр А1а ТЬг А1а Ме! РЬе 370 375 380

Акп 01у 01у Уа1 Туг Туг Шк 8ег Акп А1а А1а Шк Акп Ьеи Ьеи 8ег 385 390 395 400

ТЬг Ме! Агд Уа1 01у Уа1 11е Агд 01у 01у Сук 01и Уа1 01и 11е Тгр 405 410 415

Ьук Агд А1а 01п Ьук 01и Акп Уа1 01и Туг Уа1 Агд Акр 01у 8ег 01у 420 425 430

01п Агд Уа1 11е Агд А1а 01у 01и 01п Рго ТЬг Ьук 11е Рго 01и Рго 435 440 445

11е Рго ТЬг А1а Акр А1а А1а 450 455

<210> 52

<211> 510

<212> Белок

<213> 8ассЬаготусек сегеуыае

<400> 52

Ме! Рго ТЬг 8ег 01у ТЬг ТЬг 11е 01и Ьеи 11е Акр Акр 01п РЬе Рго 1 5 10 15

Ьук Акр Акр 8ег А1а 8ег 8ег 01у 11е Уа1 Акр 01и Уа1 Акр Ьеи ТЬг

- 66 029904

20 25 30

О1и А1а Акп Не Беи А1а ТЬг О1у Беи Акп Бук Бук А1а Рго Агд Не 35 40 45

Уа1 Акп О1у РЬе О1у δе^ Беи Ме! О1у δе^ Бук О1и Ме! Уа1 δе^ Уа1 50 55 60

О1и РЬе Акр Бук Бук О1у Акп О1и Бук Бук δе^ Акп Беи Акр Агд Беи 65 70 75 80

Беи О1и Бук Акр Акп О1п О1и Бук О1и О1и А1а Бук ТЬг Бук Не Шк 85 90 95

Не δе^ О1и О1п Рго Тгр ТЬг Беи Акп Акп Тгр Шк О1п Шк Беи Акп 100 105 110

Тгр Беи Акп Ме! Уа1 Беи Уа1 Сук О1у Ме! Рго Ме! Не О1у Тгр Туг 115 120 125

РЬе А1а Беи δе^ О1у Бук Уа1 Рго Беи Шк Беи Акп Уа1 РЬе Беи РЬе 130 135 140

δе^ Уа1 РЬе Туг Туг А1а Уа1 О1у О1у Уа1 δе^ Не ТЬг А1а О1у Туг 145 150 155 160

Шк Агд Беи Тгр δе^ Шк Агд δе^ Туг δе^ А1а Шк Тгр Рго Беи Агд 165 170 175

Беи РЬе Туг А1а Не РЬе О1у Сук А1а δе^ Уа1 О1и О1у δе^ А1а Бук 180 185 190

Тгр Тгр О1у Шк δе^ Шк Агд Не Шк Шк Агд Туг ТЬг Акр ТЬг Беи 195 200 205

Агд Акр Рго Туг Акр А1а Агд Агд О1у Беи Тгр Туг δе^ Шк Ме! О1у 210 215 220

Тгр Ме! Беи Беи Бук Рго Акп Рго Бук Туг Бук А1а Агд А1а Акр Не 225 230 235 240

ТЬг Акр Ме! ТЬг Акр Акр Тгр ТЬг Не Агд РЬе О1п Шк Агд Шк Туг 245 250 255

Не Беи Беи Ме! Беи Беи ТЬг А1а РЬе Уа1 Не Рго ТЬг Беи Не Сук 260 265 270

О1у Туг РЬе РЬе Акп Акр Туг Ме! О1у О1у Беи Не Туг А1а О1у РЬе 275 280 285

Не Агд Уа1 РЬе Уа1 Не О1п О1п А1а ТЬг РЬе Сук Не Акп δе^ Ме! 290 295 300

А1а Шк Туг Не О1у ТЬг О1п Рго РЬе Акр Акр Агд Агд ТЬг Рго Агд 305 310 315 320

Акр Акп Тгр Не ТЬг А1а Не Уа1 ТЬг РЬе О1у О1и О1у Туг Шк Акп 325 330 335

РЬе Шк Шк О1и РЬе Рго ТЬг Акр Туг Агд Акп А1а Не Бук Тгр Туг 340 345 350

- 67 029904

О1и Туг Акр Рго Тйг Ьук Уа1 11е 11е Туг Ьеи Тйг 8ег Ьеи Уа1 О1у 355 360 365

Ьеи А1а Туг Акр Ьеи Ьук Ьук Рйе 8ег О1и Аки А1а 11е О1и О1и А1а 370 375 380

Ьеи 11е О1и О1и О1и О1и Ьук Ьук 11е Аки Ьук Ьук Ьук А1а Ьук 11е 385 390 395 400

Аки Тгр О1у Рго Уа1 Ьеи Тйг Акр Ьеи Рго Ме1 Тгр Акр Ьук О1и Тйг 405 410 415

Рйе Ьеи А1а Ьук 8ег Ьук О1и Аки Ьук О1у Ьеи Уа1 11е 11е 8ег О1у 420 425 430

11е Уа1 Шк Акр Уа1 8ег О1у Туг 11е 8ег О1и Шк Рго О1у О1у О1и 435 440 445

Тйг Ьеи 11е Ьук Тйг А1а Ьеи О1у Ьук Акр А1а Тйг Ьук А1а Рйе 8ег 450 455 460

О1у О1у Уа1 Туг Агд Шк 8ег Аки А1а А1а О1и Аки Уа1 Ьеи А1а Акр 465 470 475 480

Ме1 Агд Уа1 А1а Уа1 11е Ьук О1и 8ег Ьук Аки 8ег А1а 11е Агд Ме1 485 490 495

А1а 8ег Ьук Агд О1у О1и 11е Туг О1и Тйг О1у Ьук Рйе Рйе 500 505 510

<210> 53

<211> 13227

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рОАВ7309

<400> 53

ддас1ад1сс адаадд1аа11а1ссаада1 д1адса1саа даа1ссаа1д Шасдддаа 60

ааас1а1дда ад1айа1д1 аадс1садса адаадсада! саайИдсдд сасайИдса 120

ассйИдПс ааааа1даад аа1д1асада 1асаада1сс 1а1ас1дсса даа1асдаад 180

аадаа1асд1 адаааПдаа ааадаадаас саддсдаада ааадайсП даадасд1аа 240

дсас1дасда саасайдаа аадаадаада 1аадд1сдд1 даПд1дааа дадасйада 300

ддасасйд! аадд1ддааа а1д1аадддс ддааад1аас сШИсасаа аддайсйа 360

1сссссас1а сШИссШ ПИаПШс сд1д1саШ ПдсссПда дШ1сс1а1 420

йааддаасс аадПсддса Шд1даааа саадаааааа Шдд1д1аа дс1аППс1 480

Ндаад1ас1 даддйасаа сПсададаа аШд1аад1Пд1адд1ас садаШдда 540

(сссааасса 1д1с1ссдда даддадасса дПдадаПа ддссадс1ас адсадс1да1 600

- 68 029904

а!ддссдсдд !!!д!да!а! сд!!аасса! !аса!!дада сд!с!асад! даас!!!адд 660

асададссас ааасассаса адад!дда!! да!да!с!ад ададд!!дса ада!ада!ас 720

сс!!дд!!дд !!дс!дадд! !даддд!д!! д!ддс!дд!а !!дс!!асдс !дддссс!дд 780

ааддс!адда асдс!!асда !!ддасад!! дадад!ас!д !!!асд!д!с аса!аддса! 840

сааадд!!дд дсс!адда!с !аса!!д!ас асаса!!!дс !!аад!с!а! ддаддсдсаа 900

дд!!!!аад! с!д!дд!!дс !д!!а!аддс с!!ссааасд а!сса!с!д! !адд!!дса! 960

даддс!!!дд да!асасадс ссдддд!аса !!дсдсдсад с!дда!асаа дса!дд!дда 1020

!ддса!да!д !!дд!!!!!д дсаааддда! !!!дад!!дс садс!сс!сс ааддссад!! 1080

аддссад!!а сссааа!с!д ад!ад!!адс !!аа!сасс! ададс!сда! сддсддсаа! 1140

адс!!с!!ад сдсса!сссд дд!!да!сс! а!с!д!д!!д ааа!ад!!дс дд!дддсаад 1200

дс!с!с!!!с адааадасад дсддссааад даасссаадд !дадд!дддс !а!ддс!с!с 1260

ад!!сс!!д! ддаадсдс!! дд!с!аадд! дсададд!д! !адсддда!д аадсаааад! 1320

д!ссда!!д! аасаада!а! д!!да!сс!а сд!аадда!а !!ааад!а!д !а!!са!сас 1380

!аа!а!аа!с ад!д!а!!сс аа!а!д!ас! асда!!!сса а!д!с!!!а! !д!сдссд!а 1440

!д!аа!сддс д!сасаааа! аа!ссссдд! дас!!!с!!! !аа!ссадда !дааа!аа!а 1500

!д!!а!!а!а а!!!!!дсда !!!дд!ссд! !а!аддаа!! даад!д!дс! !дадд!сдд! 1560

сдссассас! ссса!!!са! аа!!!!аса! д!а!!!дааа аа!ааааа!! !а!дд!а!!с 1620

аа!!!аааса сд!а!ас!!д !ааадаа!да !а!с!!дааа дааа!а!ад! !!ааа!а!!! 1680

а!!да!аааа !аасаад!са дд!а!!а!ад !ссаадсааа ааса!ааа!! !а!!да!дса 1740

ад!!!ааа!! садааа!а!! !саа!аас!д а!!а!а!сад с!дд!аса!! дссд!ада!д 1800

ааадас!дад !дсда!а!!а !дд!д!аа!а са!аддаа!! сд!!!ааасд а!с!дсд!с! 1860

аа!!!!сдд! ссаас!!дса саддааадас д!сдассдсд д!адс!с!!д сссадсадас 1920

!дддс!!сса д!сс!!!сдс !сда!сддд! ссаа!д!!д! сс!садс!д! даассддаад 1980

сддасдасса асад!ддаад аас!дааадд аасдадссд! с!а!асс!!д а!да!сддсс 2040

!с!дд!даад дд!а!са!сд садссаадса адс!са!даа аддс!да!дд дддадд!д!а 2100

!аа!!а!дад дсссасддсд ддс!!а!!с! !!адддадда !с!а!с!сд! !дс!саад!д 2160

са!ддсдсаа адсад!!а!! ддад!дсдда !!!!сд!!дд са!а!!а!!с дссасдад!! 2220

адсадасдаа дадасс!!са !даасд!ддс сааддссада д!!аадсада !д!!асдссс 2280

!дс!дсаддс с!!!с!а!!а !ссаа!ад!! дд!!да!с!! !ддааададс с!сддс!дад 2340

дссса!ас!д ааадада!сд а!дда!а!сд а!а!дсса!д !!д!!!дс!а дссадаасса 2400

да!саса!сс да!а!дс!а! !дсадс!!да сдсада!а!д дадда!аад! !да!!са!дд 2460

- 69 029904

да!сдс!сад дад!адс!са !сса!дсасд ссдасаадаа садааайсс д!сдадйаа 2520

сдсадссдс! !асдасдда! !сдаадд!са 1ссайсдда а!д!айад1 йдсассадс 2580

!ссдсд!сас асс!д!сйс а!йдаа!аа да!дйадса айд!ййа дс!йд1сй 2640

дйд!ддсад ддсддсаад! дсйсадаса 1сайс1дй йсааайй а!дс!ддада 2700

асадсйсй аайссИд дааа!аа!ад ас!дсд!сй аааайсада 1д1с1дда1а 2760

1ада1а1да1 !д!аааа!аа сс!ай!аад 1д!са1йад ааса!аадй йа!даа1д! 2820

1с11ссаШ !сд!са!сда асдаа!аада д1ааа1асас сйййаас айасааа!а 2880

адйсйа!а сдйд!йа1 асассдддаа 1саШсса1 1аййсдсд саааад!сас 2940

дда!айсд! дааадсдаса !ааас!дсда ааШдсддд дад!д!сйд ад!йдсс1с 3000

даддс!адсд са1дсаса1а дасасасаса 1са1с1сай да!дсйдд! аа!аайд!с 3060

айадайд! ййа!дса1 ада1дсас1с дааа!садсс ааййадас аад!а!сааа 3120

сдда!д!дас йсад!аса! !ааааасд!с сдсаа!д!д! 1айаадйд !с!аадсд!с 3180

аа!йдай1 асаайдаа! а!а!сс!дсс ссадссадсс аасадс!сда Шасаайд 3240

аа!а!а1сс1 дссддссддс ссасдсд!д! сдаддаайс !да!с!ддсс сссаШдда 3300

сд!даа!д!а дасасд!сда аа!ааадай 1ссдаайад аа!аай1д! йайдсй! 3360

сдсс!а!ааа !асдасдда! сд1аа1йд! сдййа!са ааа!д!асй 1саййа1а 3420

а!аасдс!дс ддаса!с!ас айШдаа! !даааааааа йдд!аайа с!с1йс1й 3480

йс!сса1а! !дасса!са! ас!сайдс! да!сса!д!а даШсссдд аса!даадсс 3540

аШасаай даа!а!а!сс !дссдссдс! дссдсШдс асссдд!дда дсйдса!д! 3600

1ддй1с1ас дсадаас!да дссддйадд сада!аа1й ссайдадаа с!дадсса!д 3660

1дсассйсс ссссаасасд д!дадсдасд дддсаасдда д!да!ссаса 1дддасйй 3720

аааса!са!с сд!сдда!дд сдйдсдада даадсад!сд а!ссд!дада !садссдасд 3780

сассдддсад дсдсдсааса сда!сдсааа д!а1йдаас дсадд!асаа !сдадссдас 3840

дйсасдсдд аасдассаад саадсйддс 1дсса1йй дддд!даддс сдйсдсддс 3900

сдаддддсдс адсссс!ддд ддда!дддад дсссдсдйа дсдддссддд адддйсдад 3960

аадддддддс ассссссйс ддсд!дсдсд д!сасдсдса садддсдсад ссс!ддйаа 4020

ааасаадд!! 1а1ааа1ай ддШаааад саддйаааа дасаддйад сдд!ддссда 4080

аааасдддсд дааасссйд сааа!дс!дд аййс!дсс !д!ддасадс ссс!сааа!д 4140

!саа!адд!д сдсссс!са! с!д!садсас !с!дсссс!с аад!д!саад да!сдсдссс 4200

с!са!с1д1с ад!ад!сдсд сссс!саад! д!саа!ассд садддсасй а!ссссаддс 4260

йд!ссаса! са!с!д!ддд ааас!сдсд! аааа!саддс дййсдссд аШдсдадд 4320

- 70 029904

с!ддссадс! ссасд!сдсс ддссдааа!с дадсс!дссс с!са!с!д!с аасдссдсдс 4380

сддд!дад!с ддсссс!саа д!д!саасд! ссдсссс!са !с!д!сад!д адддссаад! 4440

!!!ссдсдад д!а!ссасаа сдссддсддс сдсдд!д!с! сдсасасддс !!сдасддсд 4500

!!!с!ддсдс д!!!дсаддд сса!адасдд ссдссадссс адсддсдадд дсаассадсс 4560

сдд!дадсд! сддаааддд! сдасдда!с! !!!ссдс!дс а!аассс!дс !!сдддд!са 4620

!!а!адсда! !!!!!сдд!а !а!сса!сс! !!!!сдсасд а!а!асадда !!!!дссааа 4680

ддд!!сд!д! адас!!!сс! !дд!д!а!сс аасддсд!са дссдддсадд а!адд!даад 4740

!аддсссасс сдсдадсддд !д!!сс!!с! !сас!д!ссс !!а!!сдсас с!ддсдд!дс 4800

!саасдддаа !сс!дс!с!д сдаддс!ддс сддс!ассдс сддсд!ааса да!дадддса 4860

адсдда!ддс !да!дааасс аадссаасса ддаадддсад сссасс!а!с аадд!д!ас! 4920

дсс!!ссада сдаасдаада дсда!!дадд ааааддсддс ддсддссддс а!дадсс!д! 4980

сддсс!асс! дс!ддссд!с ддссадддс! асаааа!сас дддсд!сд!д дас!а!дадс 5040

асд!ссдсда дс!ддсссдс а!саа!ддсд асс!дддссд сс!дддсддс с!дс!дааас 5100

!с!ддс!сас сдасдасссд сдсасддсдс ддйсдд!да !дссасда!с с!сдссс!дс 5160

!ддсдаада! сдаададаад саддасдадс !!ддсаадд! са!да!дддс д!дд!ссдсс 5220

сдадддсада дсса!дас!! !!!!адссдс !аааасддсс дддддд!дсд сд!да!!дсс 5280

аадсасд!сс сса!дсдс!с са!саадаад адсдас!!сд сддадс!дд! а!!сд!дсад 5340

ддсаада!!с ддаа!ассаа д!асдадаад дасддссада сдд!с!асдд дассдас!!с 5400

а!!дссда!а адд!дда!!а !с!ддасасс ааддсассад дсддд!сааа !саддаа!аа 5460

дддсаса!!д ссссддсд!д ад!сддддса а!сссдсаад даддд!даа! даа!сддасд 5520

!!!дассдда аддса!асад дсаадаас!д а!сдасдсдд дд!!!!ссдс сдадда!дсс 5580

дааасса!сд саадссдсас сд!са!дсд! дсдссссдсд ааасс!!сса д!ссд!сддс 5640

!сда!дд!сс адсаадс!ас ддссаада!с дадсдсдаса дсд!дсаас! ддс!ссссс! 5700

дссс!дсссд сдсса!сддс сдссд!ддад сд!!сдсд!с д!с!сдааса ддаддсддса 5760

дд!!!ддсда ад!сда!дас са!сдасасд сдаддаас!а !дасдассаа даадсдаааа 5820

ассдссддсд аддасс!ддс аааасадд!с адсдаддсса адсаддссдс д!!дс!дааа 5880

сасасдаадс адсада!саа ддааа!дсад с!!!сс!!д! !сда!а!!дс дссд!ддссд 5940

дасасда!дс дадсда!дсс ааасдасасд дсссдс!с!д ссс!д!!сас сасдсдсаас 6000

аадаааа!сс сдсдсдаддс дс!дсаааас аадд!са!!! !ссасд!саа сааддасд!д 6060

аада!сасс! асассддсд! сдадс!дсдд дссдасда!д асдаас!дд! д!ддсадсад 6120

д!д!!ддад! асдсдаадсд сасссс!а!с ддсдадссда !сасс!!сас д!!с!асдад 6180

- 71 029904

сШдссадд асс1дддс1д д1сда1саа1 ддссдд1а11 асасдааддс сдаддаа1дс 6240

с1д1сдсдсс (асаддсдас ддсда1дддс ИсасдЮсд ассдсдИдд дсасс1ддаа 6300

1сдд1д1сдс 1дс1дсассд сПссдсдЮ с1ддассд1д дсаадаааас д1сссд11дс 6360

садд1сс1да (сдасдадда аа1сд1сд1д с1дШдс1д дсдассас(а сасдаааНс 6420

а(а(дддада ад(ассдсаа дс1д1сдссд асддсссдас дда1д11сда с1аШсадс 6480

(сдсассддд адссд(ассс дс1саадс1д дааассПсс дсс1са1д1д сдда1сдда1 6540

!ссасссдсд 1даадаад1д дсдсдадсад д1сддсдаад сс1дсдаада дПдсдаддс 6600

адсддсс(дд (ддаасасдс с1ддд1саа1 да1дасс1дд 1дса11дсаа асдс1адддс 6660

с11д1дддд1 сад11ссддс 1ддддд11са дсадссадсд с111ас1ддс а111саддаа 6720

саадсдддса с1дс1сдасд сас11дс11с дс1сад1а1с дс1сдддасд сасддсдсдс 6780

1с1асдаас1 дссда1ааас ададда11аа аа11дасаа1 1д1да11аад дс1сада11с 6840

дасддс11дд адсддссдас д1дсадда11 1ссдсдада1 ссда11д1сд дссс1даада 6900

аадс1ссада да1д11сддд 1ссд111асд адсасдадда дааааадссс а1ддаддсд1 6960

1сдс1даасд д11дсдада1 дссд1ддса1 1сддсдсс1а са1сдасддс дада1са11д 7020

ддс1д1сдд1 с11сааасад даддасддсс ссааддасдс 1сасааддсд са1с1д1ссд 7080

дсдЦПсд! ддадсссдаа садсдаддсс дадддд1сдс сдд1а1дс1д с1дсдддсд1 7140

1дссддсддд 111а11дс1с д1да1да1сд 1ссдасада1 1ссаасддда а1с1дд1дда 7200

1дсдса1с11 са1сс1сддс дсас11аа1а 111сдс1а11 с1ддадс11д 11д111а111 7260

сдд1с1ассд сс1дссдддс дддд1сдсдд сдасдд1адд сдс1д1дсад ссдс1да1дд 7320

1сд1д11са1 с1с1дссдс1 с1дс1адд1а дсссда1асд а11да1ддсд д1сс1ддддд 7380

с1а111дсдд аас1дсдддс д1ддсдс1д1 1дд1д11дас ассааасдса дсдс1ада1с 7440

с1д1сддсд1 сдсадсдддс с1ддсддддд сдд111сса1 ддсд11сдда ассд1дс1да 7500

сссдсаад1д дсаасс1ссс д1дсс1с1дс 1сасс111ас сдсс1ддсаа с1ддсддссд 7560

даддас11с1 дс1сд11сса д1адс111ад 1д111да1сс дссаа1сссд а1дсс1асад 7620

даассаа1д1 1с1сддсс1д дсд1ддс1сд дсс1да1сдд адсддд111а асс1ас11сс 7680

111дд11ссд дддда1с1сд сдас1сдаас с1асад11д1 11сс11ас1д ддс111с1са 7740

дсссссдадс дс11ад1ддд аа111д1асс сс11а1сдаа ссдддадсас адда1дасдс 7800

с1аасаа11с а11саадссд асассдс11с дсддсдсддс 11аа11садд ад11аааса1 7860

са1дадддаа дсдд1да1сд ссдаад1а1с дас1саас1а 1сададд1ад 11ддсд1са1 7920

сдадсдсса1 с1сдаассда сд11дс1ддс сд1аса111д 1асддс1ссд сад1дда1дд 7980

сддсс1даад ссасасад1д а1а11да111 дс1дд11асд д1дассд1аа ддс11да1да 8040

- 72 029904

аасаасдсдд сдадс!!!да !саасдасс! !!!ддааас! !сддс!!ссс с!ддададад 8100

сдада!!с!с сдсдс!д!ад аад!сасса! !д!!д!дсас дасдаса!са !!ссд!ддсд 8160

!!а!ссадс! аадсдсдаас !дсаа!!!дд адаа!ддсад сдсаа!даса !!с!!дсадд 8220

!а!с!!сдад ссадссасда !сдаса!!да !с!ддс!а!с !!дс!дасаа аадсаадада 8280

аса!адсд!! дсс!!дд!ад д!ссадсддс ддаддаас!с !!!да!ссдд !!сс!дааса 8340

дда!с!а!!! даддсдс!аа а!дааасс!! аасдс!а!дд аас!сдссдс ссдас!дддс 8400

!ддсда!дад сдааа!д!ад !дс!!асд!! д!сссдса!! !дд!асадсд сад!аассдд 8460

саааа!сдсд ссдаадда!д !сдс!дссда с!дддсаа!д дадсдсс!дс сддсссад!а 8520

!садсссд!с а!ас!!даад с!аддсаддс !!а!с!!дда саадаада!с дс!!ддсс!с 8580

дсдсдсада! сад!!ддаад аа!!!д!!са с!асд!дааа ддсдада!са ссаадд!ад! 8640

сддсааа!аа !д!с!аасаа !!сд!!саад ссдасдссдс !!сдсддсдс ддс!!аас!с 8700

аадсд!!ада дадс!дддда адас!а!дсд сда!с!д!!д аадд!дд!!с !аадсс!сд! 8760

с!!дсда!дд са!!!сда!с са!!ссса!! ссдсдс!саа да!ддс!!сс сс!сддсад! 8820

!са!садддс !ааа!саа!с !адссдас!! д!ссдд!даа а!дддс!дса с!ссаасада 8880

аасаа!сааа саааса!аса садсдас!!а !!сасасдад с!сааа!!ас аасдд!а!а! 8940

а!сс!дссад !садса!са! сасассаааа д!!аддсссд аа!ад!!!да аа!!адааад 9000

с!сдсаа!!д адд!с!асад дссааа!!сд с!с!!адссд !асаа!а!!а с!сассдда! 9060

сс!аассдд! д!да!са!дд дссдсда!!а аааа!с!саа !!а!а!!!дд !с!аа!!!ад 9120

!!!дд!а!!д ад!аааасаа а!!сдаасса аассаааа!а !ааа!а!а!а д!!!!!а!а! 9180

а!а!дсс!!! аадас!!!!! а!адаа!!!! с!!!аааааа !а!с!адааа !а!!!дсдас 9240

!с!!с!ддса !д!аа!а!!! сд!!ааа!а! даад!дс!сс а!!!!!а!!а ас!!!ааа!а 9300

а!!дд!!д!а сда!сас!!! с!!а!саад! д!!ас!аааа !дсд!саа!с !с!!!д!!с! 9360

!сса!а!!са !а!д!саааа сс!а!саааа !!с!!а!а!а !с!!!!!сда а!!!даад!д 9420

ааа!!!сда! аа!!!аааа! !ааа!адаас а!а!са!!а! !!адд!а!са !а!!да!!!! 9480

!а!ас!!аа! !ас!ааа!!! дд!!аас!!! дааад!д!ас а!саасдааа аа!!ад!саа 9540

асдас!аааа !ааа!ааа!а !са!д!д!!а !!аадаааа! !с!сс!а!аа даа!а!!!!а 9600

а!ада!са!а !д!!!д!ааа ааааа!!аа! !!!!ас!аас аса!а!а!!! ас!!а!сааа 9660

аа!!!дасаа ад!аада!!а ааа!аа!а!! са!с!аасаа аааааааасс адаааа!дс! 9720

даааасссдд саааассдаа ссаа!ссааа ссда!а!ад! !дд!!!дд!! !да!!!!да! 9780

а!ааассдаа ссаас!сдд! сса!!!дсас ссс!аа!са! аа!адс!!!а а!а!!!саад 9840

а!а!!а!!аа д!!аасд!!д !саа!а!сс! ддааа!!!!д саааа!даа! саадсс!а!а 9900

- 73 029904

!ддс!д!аа! а!даа!!!аа аадсадс!сд а!д!дд!дд! аа!а!д!аа! !!ас!!да!! 9960

с!ааааааа! а!сссаад!а !!аа!аа!!! с!дс!аддаа даадд!!адс !асда!!!ас 10020

адсааадсса даа!асаа!д аасса!ааад !да!!даадс !сдааа!а!а сдааддааса 10080

аа!а!!!!!а аааааа!асд саа!дас!!д даасаааада аад!да!а!а !!!!!!д!!с 10140

!!ааасаадс а!сссс!с!а аадаа!ддса д!!!!сс!!! дса!д!аас! а!!а!дс!сс 10200

с!!сд!!аса аааа!!!!дд ас!ас!а!!д ддаас!!с!! с!даааа!ад !ддссассдс 10260

!!аа!!аадд сдсдсса!дс ссдддсаадс ддссдсасаа д!!!д!асаа аааадс!даа 10320

сдадааасд! аааа!да!а! ааа!а!саа! а!а!!ааа!! ада!!!!дса !аааааасад 10380

ас!аса!аа! ас!д!аааас асааса!а!с сад!сас!а! даа!саас!а с!!ада!дд! 10440

а!!ад!дасс !д!ад!сдас сдасадсс!! ссааа!д!!с !!сддд!да! дс!дссаас! 10500

!ад!сдассд асадсс!!сс ааа!д!!с!! с!сааасдда а!сд!сд!а! ссадсс!ас! 10560

сдс!а!!д!с с!саа!дссд !а!!ааа!са !ааааадааа !аадааааад адд!дсдадс 10620

с!с!!!!!!д !д!дасаааа !аааааса!с !асс!а!!са !а!асдс!ад !д!са!ад!с 10680

с!даааа!са !с!дса!саа даасаа!!!с асаас!с!!а !ас!!!!с!с !!асаад!сд 10740

!!сддс!!са !с!дда!!!! садсс!с!а! ас!!ас!ааа сд!да!ааад !!!с!д!аа! 10800

!!с!ас!д!а !сдасс!дса дас!ддс!д! д!а!ааддда дсс!даса!! !а!а!!сссс 10860

адааса!сад д!!аа!ддсд !!!!!да!д! са!!!!сдсд д!ддс!дада !садссас!! 10920

с!!ссссда! аасддадасс ддсасас!дд сса!а!сдд! дд!са!са!д сдссадс!!! 10980

са!ссссда! а!дсассасс ддд!ааад!! сасдддадас !!!а!с!дас адсадасд!д 11040

сас!ддссад дддда!сасс а!ссд!сдсс сдддсд!д!с аа!аа!а!са с!с!д!аса! 11100

ссасааасад асда!аасдд с!с!с!с!!! !а!адд!д!а аасс!!ааас !дса!!!сас 11160

садсссс!д! !с!сд!садс аааададссд !!са!!!саа !ааассдддс дасс!садсс 11220

а!ссс!!сс! да!!!!ссдс !!!ссадсд! !сддсасдса дасдасдддс !!са!!с!дс 11280

а!дд!!д!дс !!ассадасс ддада!а!!д аса!са!а!а !дсс!!дадс аас!да!адс 11340

!д!сдс!д!с аас!д!сас! д!аа!асдс! дс!!са!адс а!асс!с!!! !!даса!ас! 11400

!сддд!а!ас а!а!сад!а! а!а!!с!!а! ассдсааааа !садсдсдса аа!асдса!а 11460

с!д!!а!с!д дс!!!!ад!а адссдда!сс асдсддсд!! !асдсссссс с!дссас!са 11520

!сдсад!ас! д!!д!аа!!с а!!аадса!! с!дссдаса! ддаадсса!с асааасддса 11580

!да!даасс! даа!сдссад сддса!садс асс!!д!сдс с!!дсд!а!а а!а!!!дссс 11640

а!дд!даааа сдддддсдаа даад!!д!сс а!а!!ддсса сд!!!ааа!с аааас!дд!д 11700

ааас!сассс аддда!!ддс !дадасдааа ааса!а!!с! саа!ааассс !!!адддааа 11760

- 74 029904

!аддссадд! й1сассд!а асасдссаса 1сйдсдаа1 а1а!д1д1ад ааас!дссдд 11820

ааа1сд1сд1 дд1айсас! ссададсда! даааасдй! садй!дс!с а!ддаааасд 11880

д!д!аасаад дд!даасас! а1ссса1а1с ассадс!сас сд1сШса1 !дсса!асдд 11940

аайссдда! дадсайса! саддсдддса адаа!д!даа !аааддссдд а!аааасйд 12000

!дсйайй 1сй1асдд! сШааааад дссДаайй ссадс!даас дд1с!ддйа 12060

1адд!асай дадсаас!да с!дааа!дсс !саааа!дй сй1асда!д ссайддда! 12120

айИсаасдд 1дд1а1а1сс ад1дайШ йс!ссай1 1адсйссй адс!сс!даа 12180

аа1с1сда1а ас!саааааа 1асдсссдд! ад!да1сйа Шсайа!д д!дааадйд 12240

даасс!сйа сд!дссда!с аасд1с1са1 Шсдссааа адйддссса дддсйсссд 12300

д1а!саасад ддасассадд аШаШа! Юдсдаад! даЮйссд! сасадд!ай 12360

!айсддсдс ааад1дсд!с ддд1да1дс! дссаасйад 1сдас!асад д1сас1аа1а 12420

сса1с1аад1 адйдайса 1ад!дас1дд а!а!дйд1д ййасад!а йа1д!ад1с 12480

1дйййа! дсаааа1с1а аШааййа йда!аШа Рйсаййа сдШШсд! 12540

1садсШс11д1асааад1 ддйдсддсс дсйаайаа аШааайс аайаа!дса 12600

а!сйдаШ !саасаасда адд!аа!ддс д!аааадааа ааа1д1а1д1 1айд!айд 12660

а1сШса1д а!дйдаадс д1дсса1аа1 а1да1да1д1 а!аайаааа 1а11аас1д1 12720

сдсаййа! !дааа!ддса ШдйаШс аассайИс! йдайс1д! !аса!дасас 12780

дас!дсаада ад1ааа1аа1 адасдссдй дйааадаа! 1дс1а1са1а 1д1дсс1аас 12840

!ададддаа! йдадсд!са дасс!аа!са аа!айасаа аайИсйас 1с1д1сдсса 12900

дсаа!дд1д1 аа!садсдса дасааа!ддс д!ааада1сд сддааааасс !ссссдад!д 12960

дса!да1адс 1дсс1с1д1а йдс!даШ ад!садссй аШдасйа адддХдссс! 13020

сдйад!дас ааайдсШ сааддадаса дсса!дсссс асасШдй дааааасааа 13080

йдссШдд ддадасдд!а аадссадйд с1с11саа1а аддаа!д!сд аддаддсаа! 13140

д1аассдсс! с!дд1ад1ас асйс1с1аа 1ссааааа1с ааШд!ай саада!ассд 13200

саааааасй а!ддШааа ссс!дса 13227

<210> 54

<211> 10247

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рПАВ7318

<400> 54

сдсдссдасс садсШсй д!асааадй ддсайа!аа дааадсайд сйа!саай 60

- 75 029904

1дйдсаасд аасаддХсас 1а1сад1саа аа1аааа1са йаШдсса 1ссадс1да1 120

а1сссс1а1а д1дад1сд1а йаса1дд1с а1адс1дШ сс1ддсадс1 с1ддсссд1д 180

1с1саааа1с 1с1да1д11а сайдсасаа да1ааааа1а 1а1са1са1д аасаа1аааа 240

с1д1с1дс11 аса1ааасад 1аа1асаадд дд1дйа1да дсса1айса асдддааасд 300

1сдаддссдс дайааайс сааса1дда1 дс1даШа1 а1ддд1а1аа а1дддс1сдс 360

да1аа1д1сд ддсаайадд 1дсдасаа1с 1а1сдс11д1 а1дддаадсс сда!дсдсса 420

дадйдй1с 1даааса1дд сааадд1адс дйдссаа1д а1дйасада 1дада1дд1с 480

адас1ааас1 ддс1дасдда аШа1дсс1 сйссдасса 1саадсаШ 1а1ссд1ас1 540

сс1да1да1д са1дд11ас1 сассас!дсд а(ссссддаа ааасадсай ссаддХайа 600

даадааХаХс сХдайсадд 1даааа1ай дйдаХдсдс 1ддсад1д11 сс(дсдссдд 660

йдсайсда йсс1дШд 1аайд1сс1 Шаасадсд аХсдсдХай1сд1с1сдс1 720

саддсдсаа! сасдаа(даа (аасддШд дйда1дсда дХдаййда 1дасдадсд1 780

аа(ддс(ддс с1дйдааса адХсХддааа дааа(дса(а аасййдсс айсХсассд 840

дайсадХсд 1сас1са1дд 1даШс1са сйдаХаасс йаХййда сдаддддааа 900

йаа1аддй д1айда1д11ддасдад1с ддаа(сдсад ассда1асса ддаХсйдсс 960

а1сс1а1дда ас(дсс(сдд 1дадййс1 ссйсайас адааасддс! ййсааааа 1020

1а1дд1а11д а1аа1сс1да 1а1даа1ааа йдсадШс аШда1дс1 сда1дадШ 1080

Псйкйсад аайддйаа йддйд!аа сас(ддсада дсайасдсХ дасйдасдд 1140

дасддсдсаа дс(са(дасс ааааХсссй аасд1дадй асдсдХсдй ссас(дадсд 1200

(садассссд 1адаааада1 саааддаХсХ 1сйдада1с сХйййсХ дсдсд(аа(с 1260

1дс1дсйдс ааасаааааа ассассдс1а ссадсдд(дд ШдШдсс дда(саадад 1320

с(ассаас(с ШИссдаа дд(аас(ддс йсадсадад сдсада(асс ааа1ас1д1с 1380

сйс1ад1д1 адссд1адй аддссассас йсаадаасХ с(д(адсасс дсс(аса(ас 1440

с1сдс1с1дс 1аа1сс1дИ ассад(ддс( дс(дссад(д дсда(аад(с д1д1сйасс 1500

дддпддас! саадасдай диассдда! ааддсдсадс дд1сдддс1д аасддддддХ 1560

1сд1дсасас адсссадсй ддадсдаасд асс1асассд аас1дада1а сс1асадсд1 1620

дадсайдад ааадсдссас дсйсссдаа дддадааадд сддасадд1а 1ссдд1аадс 1680

ддсадддХсд даасаддада дсдсасдадд дадс11ссад ддддааасдс с1дд1а1с11 1740

1а1ад1сс1д ХсдддйХсд ссассХсХда сХХдадсдХс даХййдХд а1дс1сд1са 1800

ддддддсдда дссйИддаа ааасдссадс аасдсддсс! ййасддй сс1ддссШ 1860

1дс1ддсс11 йдс1саса1 дйсШсс! дсдйайсс сХдаХ1с1д1 дда1аассд1 1920

- 76 029904

айассдсс! Пдад1дадс 1да1ассдс1 сдссдсадсс даасдассда дсдсадсдад 1980

1сад1дадсд аддаадсдда ададсдссса а1асдсааас сдсс1с1ссс сдсдсд11дд 2040

ссдайсай аа1дсадс1д дсасдасадд Шсссдас! ддааадсддд сад1дадсдс 2100

аасдсаайа а1асдсд1ас сдс1адссад даададШд Шдааасдса ааааддсса! 2160

ссд1садда1 ддсс11с1дс 11ад111да1 дсс1ддсад1 11а1ддсддд сд1сс1дссс 2220

дссассс1сс дддссд11дс 11сасаасд1 1сааа1ссдс 1сссддсдда 111д1сс1ас 2280

1саддададс д11сассдас ааасаасада 1аааасдааа ддсссад1с1 1ссдас1дад 2340

сс111сд111 1а111да1дс с1ддсад11с сс1ас1с1сд сд11аасдс1 адса1дда1д 2400

1111сссад1 сасдасд11д 1аааасдасд дссад1с11а адс1сдддсс ссааа1аа1д 2460

а1111а1111 дас1да1ад1 дасс1д11сд 11дсаасааа 11да1дадса а1дс111111 2520

а1аа1дссаа с111д1асаа аааадсаддс 1ссдсддссд сас1адд111 ааас1с1ада 2580

адс1аддаа1 1сааасааад аадсда1сдс дсддссдсса 11д1ас1ссс ад1а1са11а 2640

1ад1дааад1 111ддс1с1с 1сдссдд1дд 111111асс1 с1а111ааад ддд1111сса 2700

сс1ааааа11 с1дд1а1са1 1с1сас111а с11д11ас11 1аа111с1са 1аа1с111дд 2760

11дааа11а1 сасдс11ссд сасасда1а1 ссс1асааа1 11а11а111д 11аааса111 2820

1сааассдса 1аааа1111а 1даад1сссд 1с1а1с111а а1д1ад1с1а аса1111са1 2880

а11дааа1а1 а1аа111ас1 1аа1111адс д11дд1адаа адса1аа1да 111а11с11а 2940

11с11с11са 1а1ааа1д11 1аа1а1асаа 1а1ааасааа 11с111асс1 1аадаадда1 3000

11ссса1111 а1а1111ааа аа1а1а111а 1сааа1а111 11саассасд 1ааа1с1са1 3060

аа1аа1аад11дШсаааа д1аа1аааа1 Паасйса! ааййШа Псдас1да1 3120

сйааадсаа сасссад1да сасаас1адс сайййй Шдаа1ааа аааайсаа! 3180

1а1са11д1а 11111111а1 асаа1даааа 111сассааа саа1да111д 1дд1а111с1 3240

даадсаад1с а1д11а1дса ааа11с1а1а а11ссса111 дасас1асдд аад1аас1да 3300

ада1с1дс11 11аса1дсда дасаса1с11 с1ааад1аа1 111аа1аа1а д11ас1а1а1 3360

1саада111с а1а1а1сааа 1ас1саа1а1 1ас11с1ааа ааа11аа11а да1а1аа11а 3420

ааа1а11ас1 11111аа111 1аад111аа1 1д11даа111 д1дас1а11д а111а11а11 3480

с1ас1а1д11 1ааа11д111 1а1ада1ад1 11ааад1ааа 1а1аад1аа1 д1ад1адад1 3540

д11адад1д1 1ассс1ааас са1ааас1а1 аада111а1д д1ддас1аа1 111са1а1а1 3600

11с11а11дс 1111асс111 1с11дд1а1д 1аад1ссд1а ас1ддаа11а с1д1ддд11д 3660

сса1дасас1 с1д1дд1с11 11дд11са1д са1дда1дс1 1дсдсаадаа ааадасааад 3720

аасааадааа ааадасаааа садададаса ааасдсаа1с асасаассаа с1сааа11ад 3780

- 77 029904

!сас!ддс!д а!саада!сд ссдсд!сса! д!а!д!с!аа а!дсса!дса аадсаасасд 3840

!дс!!ааса! дсасйкаа !ддс!сассс а!с!саассс асасасааас асайдссй 3900

!!!с!!са!с а!сассасаа ссасс!д!а! а!а!!са!!с !с!!ссдсса сс!саа!!!с 3960

!!сас!!саа сасасд!саа сс!дса!а!д сд!д!са!сс са!дсссааа !с!сса!дса 4020

!д!!ссаасс асс!!с!с!с !!а!а!аа!а сс!а!ааа!а сс!с!аа!а! сас!сас!!с 4080

!!!са!са!с са!сса!сса дад!ас!ас! ас!с!ас!ас !а!аа!ассс саасссаас! 4140

са!а!!саа! ас!ас!с!ад да!ссаасаа !д!с!дс!сс аассдс!дас а!садддс!а 4200

дддс!ссада ддс!аадаад д!!саса!сд с!да!ассдс !а!саасадд сасаа!!дд! 4260

асаадсасд! даас!ддс!с аасд!с!!сс !са!са!сдд аа!сссас!с !асдда!дса 4320

!ссаадсй! с!ддд!!сса сйсаас!са адассдс!а! с!дддс!д!д а!с!ас!ас! 4380

!с!!сассдд ас!!ддаа!с ассдс!дда! ассасаддс! !!дддс!сас !дс!са!ас! 4440

с!дс!ас!с! !ссас!!адд а!с!ддс!!д с!дс!д!!дд аддаддадс! д!!даддда! 4500

с!а!сада!д д!дддс!адд да!сасаддд с!са!са!ад д!асассда! ассдасаадд 4560

ассса!ас!с !д!!аддаад ддас!!с!с! ас!с!сасс! !дда!дда!д д!да!даадс 4620

адаасссааа дадда!сдда аддассдаса !с!с!да!с! саасдаддас ссад!!д!!д 4680

!!!ддсааса саддаас!ас с!саадд!!д !д!!сасса! дддас!!дс! д!!ссаа!дс 4740

!!д!!дс!дд ас!!дда!дд ддада!!ддс !!ддадда!! сд!д!асдс! ддаа!сс!!а 4800

дда!с!!с!! сд!!саасаа дс!асс!!с! дсд!даас!с !с!!дс!сас !ддс!!ддад 4860

а!саасса!! сда!да!адд аас!с!сс!а ддда!сасд! да!сассдс! с!!д!!ассс 4920

!!ддададдд а!ассасаас !!ссассасд ад!!ссса!с !дас!асадд аасдс!а!сд 4980

ад!ддсасса д!асда!сс! ассаад!дд! с!а!с!дддс !!ддаадсаа с!!дда!!дд 5040

сйасда!с! саадаад!!с адддс!аасд ада!сдадаа дддаадддй саасаасйс 5100

адаадаадс! !да!аддаад адддс!ас!с !!да!!дддд аассссас!! да!саас!!с 5160

сад!да!дда а!ддда!дас !асд!!дадс аадс!аадаа сддаадддда с!!д!!дс!а 5220

!сдс!ддад! !д!!сасда! д!!ассдас! !са!саадда !сасссадда ддаааддс!а 5280

!да!с!сйс !ддаа!сдда аадда!дс!а ссдск!дй саасддадда д!д!ас!асс 5340

ас!с!аасдс адс!сасаас с!!с!!адса сса!даддд! дддад!да!с аддддадда! 5400

дсдаддйда да!с!ддаад адддс!сада аддадаасд! !дад!асдй аддда!дда! 5460

с!ддасааад дд!да!садд дс!ддададс аассаассаа да!сссадад ссаа!сссаа 5520

ссдс!да!дс !дс!!дад!а д!!адс!!аа !сасс!адд! сассад!а!д аас!аааа!д 5580

са!д!адд!д !аададс!са !ддададса! ддаа!а!!д! а!ссдасса! д!аасад!а! 5640

- 78 029904

аа!аас!дад с!сса!с!са с!!с!!с!а! даа!ааасаа адда!д!!а! да!а!а!!аа 5700

сас!с!а!с! а!дсасс!!а !!д!!с!а!д а!ааа!!!сс !с!!а!!а!! а!ааа!са!с 5760

!даа!сд!да сддс!!а!дд аа!дс!!саа а!ад!асааа аасааа!д!д !ас!а!аада 5820

с!!!с!ааас аа!!с!аас! !!адса!!д! даасдадаса !аад!д!!аа даадаса!аа 5880

саа!!а!аа! ддаадаад!! !д!с!сса!! !а!а!а!!а! а!а!!ассса с!!а!д!а!! 5940

а!а!!адда! д!!ааддада са!аасаа!! а!ааададад аад!!!д!а! сса!!!а!а! 6000

а!!а!а!ас! ассса!!!а! а!а!!а!ас! !а!ссас!!а !!!аа!д!с! !!а!аадд!! 6060

!да!сса!да !а!!!с!аа! а!!!!ад!!д а!а!д!а!а! даааадд!ас !а!!!даас! 6120

с!с!!ас!с! д!а!ааадд! !дда!са!сс !!ааад!ддд !с!а!!!аа! !!!а!!дс!! 6180

с!!асада!а ааааааааа! !а!дад!!дд !!!да!аааа !а!!даадда !!!аааа!аа 6240

!аа!ааа!аа !ааа!ааса! а!аа!а!а!д !а!а!ааа!! !а!!а!аа!а !ааса!!!а! 6300

с!а!аааааа д!ааа!а!!д !са!ааа!с! а!асаа!сд! !!адсс!!дс !ддаасдаа! 6360

с!саа!!а!! !ааасдадад !аааса!а!! !дас!!!!!д д!!а!!!аас ааа!!а!!а! 6420

!!аасас!а! а!дааа!!!! !!!!!!!!а! садсааадаа !аааа!!ааа !!аадаадда 6480

саа!дд!д!с ссаа!сс!!а !асаассаас !!ссасаада аад!саад!с ададасааса 6540

аааааасаад саааддааа! !!!!!аа!!! дад!!д!с!! д!!!дс!дса !аа!!!а!дс 6600

ад!аааасас !асаса!аас сс!!!!адса д!ададсаа! дд!!дассд! д!дс!!адс! 6660

!с!!!!а!!! !а!!!!!!!а !садсааада а!ааа!аааа !аааа!дада сас!!саддд 6720

а!д!!!саас сс!!а!асаа аассссаааа асаад!!!сс !адсассс!а ссаасдаа!! 6780

сдсддссдс! !!сс!дса!д аса!сд!сс! дсададссаа дсдса!дс!! аа!!ааас!а 6840

д!с!сссад! а!са!!а!ад !дааад!!!! ддс!с!с!сд ссдд!дд!!! !!!асс!с!а 6900

!!!ааадддд !!!!ссасс! ааааа!!с!д д!а!са!!с! сас!!!ас!! д!!ас!!!аа 6960

!!!с!са!аа !с!!!дд!!д ааа!!а!сас дс!!ссдсас асда!а!ссс !асааа!!!а 7020

!!а!!!д!!а ааса!!!!са аассдса!аа аа!!!!а!да ад!сссд!с! а!с!!!аа!д 7080

!ад!с!ааса !!!!са!а!! дааа!а!а!а а!!!ас!!аа !!!!адсд!! дд!адааадс 7140

а!аа!да!!! а!!с!!а!!с !!с!!са!а! ааа!д!!!аа !а!асаа!а! ааасааа!!с 7200

!!!асс!!аа даадда!!!с сса!!!!а!а !!!!ааааа! а!а!!!а!са аа!а!!!!!с 7260

аассасд!аа а!с!са!аа! аа!аад!!д! !!саааад!а а!аааа!!!а ас!сса!аа! 7320

!!!!!!а!!с дас!да!с!! ааадсаасас ссад!дасас аас!адсса! !!!!!!с!!! 7380

даа!аааааа а!ссаа!!а! са!!д!а!!! !!!!!а!аса а!даааа!!! сассааасаа 7440

!да!!!д!дд !а!!!с!даа дсаад!са!д !!а!дсаааа !!с!а!аа!! ссса!!!дас 7500

- 79 029904

ас1асддаад 1аас1даада 1с1дс1111а са1дсдадас аса1с11с1а аад1аа1111 7560

аа1аа1ад11 ас1а1а11са ада111са1а 1а1сааа1ас 1саа1а11ас 11с1аааааа 7620

11аа11ада1 а1аа11аааа 1а11ас1111 11аа1111аа д111аа11д1 1даа111д1д 7680

ас1а11да11 1а11а11с1а с1а1д111аа а11д1111а1 ада1ад111а аад1ааа1а1 7740

аад1аа1д1а д1адад1д11 адад1д11ас сс1ааасса1 ааас1а1аад а111а1дд1д 7800

дас1аа1111 са1а1а111с 11а11дс111 1асс1111с1 1дд1а1д1аа д1ссд1аас1 7860 ддаа11ас1д 1ддд11дсса 1дасас1с1д 1дд1с1111д д11са1дса1 дда1с11дсд 7920 саадааааад асааадааса аадаааааад асаааасада дадасаааас дсаа1сасас 7980 аассаас1са аа11ад1сас 1ддс1да1са ада1сдссдс д1сса1д1а1 д1с1ааа1дс 8040

са1дсааадс аасасд1дс1 1ааса1дсас 111ааа1ддс 1сассса1с1 саасссасас 8100

асааасаса! 1цсс11111с 11са1са1са ссасаассас с1д1а1а1а11са11с1с11 8160

ссдссасс1с аа111с11са с11саасаса сд1саасс1д са1а1дсд1д 1са1ссса1д 8220

сссааа1с1с са1дса1д11 ссаассасс1 1с1с1с11а1 а1аа1асс1а 1ааа1асс1с 8280

1аа1а1сас1 сас11с111с а1са1сса1с са1ссадад1 ас1ас1ас1с 1ас1ас1а1а 8340

а1ассссаас ссаас1са1а 11саа1ас1а с1с1адд1ас сс1дсаддда 1ссаасаа1д 8400

дс1дсас11д а1адса1ссс 1даддасааа дсаас1адс1 ссаад1саас ссаса1асад 8460

1ассаададд 1сасд111ад даас1дд1ас аадаааа1са ас1ддс1саа сасдассс11 8520

д11д1сс1са 11сс1дс1с1 1ддд11д1ас 11дасдадаа ссасасс1с1 сассадасс1 8580

ассс1са111 дд1с1д11с1 с1ас1а111с 1д1асадсд1 11ддса1сас 1дд1ддс1ас 8640

сасадас111 дд1ссса1ад д1с11асад1 дсдадд11дс са11дадас1 с11сс1ддс1 8700

11сас1ддад с1дд1дсда1 ссаадд11с1 дсаада1дд1 дд1садссаа 1са1адддса 8760

са1сассд11 ддасддасас са1дааддас ссс1ас1с1д 1да1дададд ас1дс1д11с 8820

1сссаса1ад д11дда1дд1 1с1саас1с1 да1ссааадд 1саааддсад аасада1д11 8880 1с1да1с11д ас1с1да1сс сд1сд11д1д 1ддсаасаса аасас1а1дд саад1д111д 8940 с1с111дссд с11дда1с11 1ссда1да1а д1ддс1дддс 1ддд11дддд ада11дд1дд 9000 дд1ддас11д 1с1а1дс1дд са1са1асд1 дсс1дс111д 11садсаадс сас111с1д1 9060 д1саас1са1 1ддсаса11д да1адд1даа саассд111д а1дасадасд 1ас1ссаадд 9120 да!са!дйс !дас!дсдй дд!сасаа!д ддадаадда! ассасаас11 ссасса!дад 9180 111ссдад1д ас1асадааа 1дсса1са11 1дд1а1сад1 а1дассс1ас ааад1ддс1с 9240 а1с1а1с1с1 1садс11ддд 1ссс11ссса 11ддсс1ас1 с1с1саадас с11ссд11сс 9300

аа1дада11д адаааддаад дс11садсаа садсаааадд с1с11дасаа даааадаад1 9360

- 80 029904

дд!с!!да!! ддддас!!сс !с!с!!ссад с!!ссад!да !с!са!ддда !дас!!!саа 9420

дс!сд!!дса аадааад!дд адада!дс!! д!!дс!д!!д с!ддад!да! сса!да!д!с 9480

!сссад!!са !!даада!са !сс!дд!ддд аддадсс!са !!адаад!дс !д!!дддааа 9540

да!дддас!д дса!д!!саа !дд!ддад!д !а!дааса!! сааасдссдс асасаас!!д 9600

с!дадсасаа !дадад!!дд ад!с!!дада дд!ддасаад аад!ддадд! !!ддаадааа 9660

сададдд!дд а!д!!с!!дд даад!садас а!!с!!сд!с аад!дасаад дд!ддадсд! 9720

с!дд!ддаад дадс!д!!дс адсд!да!да д!ад!!адс! !аа!сасс!а дадс!сдд!с 9780

асс!сдад!а !саааа!с!а !!!адааа!а сасаа!а!!! !д!!дсаддс !!дс!ддада 9840

а!сда!с!дс !а!са!аааа айасааааа аа!й!а!!1 дсс!саа!!а ййаддай 9900

дд!а!!аадд асдсйааа! 1а!йд!сдд д!сас!асдс а!са!!д!да !!дадаада! 9960

садсда!асд ааа!а!!сд! ад!ас!а!сд а!аа!!!а!! !даааа!!са !аадаааадс 10020

ааасд!!аса !даа!!да!д ааасаа!аса аадасада!а аадссасдса са!!!адда! 10080

а!!ддссдад а!!ас!даа! а!!дад!аад а!сасддаа! !!с!дасадд адса!д!с!! 10140

саа!!садсс сааа!ддсад !!дааа!ас! сааассдссс са!а!дсадд адсдда!са! 10200

!са!!д!!!д !!!дд!!дсс !!!дссааса !дддад!сса адд!!дд 10247

<210> 55

<211> 6058

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рИАВ7320

<400> 55

аа!!сдсддс сдс!!!сс!д са!даса!сд !сс!дсадад ссаадсдса! дс!!аа!!аа 60

ас!ад!с!сс сад!а!са!! а!ад!дааад !!!!ддс!с! с!сдссдд!д д!!!!!!асс 120

!с!а!!!ааа дддд!!!!сс асс!ааааа! !с!дд!а!са !!с!сас!!! ас!!д!!ас! 180

!!аа!!!с!с а!аа!с!!!д д!!дааа!!а !сасдс!!сс дсасасда!а !ссс!асааа 240

!!!а!!а!!! д!!аааса!! !!сааассдс а!аааа!!!! а!даад!ссс д!с!а!с!!! 300

аа!д!ад!с! ааса!!!!са !а!!дааа!а !а!аа!!!ас !!аа!!!!ад сд!!дд!ада 360

аадса!аа!д а!!!а!!с!! а!!с!!с!!с а!а!ааа!д! !!аа!а!аса а!а!ааасаа 420

а!!с!!!асс !!аадаадда !!!ссса!!! !а!а!!!!аа ааа!а!а!!! а!сааа!а!! 480

!!!саассас д!ааа!с!са !аа!аа!аад !!д!!!сааа ад!аа!аааа !!!аас!сса 540

!аа!!1!!1! а!!сдас!да !с!!ааадса асасссад!д асасаас!ад ссаШПП 600

с!!!даа!аа ааааа!ссаа !!а!са!!д! а!!!!!!!!а !асаа!дааа а!!!сассаа 660

- 81 029904

асаа!да!!! д!дд!а!!!с !даадсаад! са!д!!а!дс аааа!!с!а! аа!!ссса!! 720

!дасас!асд даад!аас!д аада!с!дс! !!!аса!дсд адасаса!с! !с!ааад!аа 780

!!!!аа!аа! ад!!ас!а!а !!саада!!! са!а!а!саа а!ас!саа!а !!ас!!с!аа 840

аааа!!аа!! ада!а!аа!! аааа!а!!ас !!!!!!аа!! !!аад!!!аа !!д!!даа!! 900

!д!дас!а!! да!!!а!!а! !с!ас!а!д! !!ааа!!д!! !!а!ада!ад !!!ааад!аа 960

а!а!аад!аа !д!ад!адад !д!!адад!д !!ассс!ааа сса!ааас!а !аада!!!а! 1020

дд!ддас!аа !!!!са!а!а !!!с!!а!!д с!!!!асс!! !!с!!дд!а! д!аад!ссд! 1080

аас!ддаа!! ас!д!ддд!! дсса!дасас !с!д!дд!с! !!!дд!!са! дса!дда!с! 1140

!дсдсаадаа ааадасааад аасааадааа ааадасаааа садададаса ааасдсаа!с 1200

асасаассаа с!сааа!!ад !сас!ддс!д а!саада!сд ссдсд!сса! д!а!д!с!аа 1260

а!дсса!дса аадсаасасд !дс!!ааса! дсас!!!ааа !ддс!сассс а!с!саассс 1320

асасасааас аса!!дсс!! !!!с!!са!с а!сассасаа ссасс!д!а! а!а!!са!!с 1380

!с!!ссдсса сс!саа!!!с !!сас!!саа сасасд!саа сс!дса!а!д сд!д!са!сс 1440

са!дсссааа !с!сса!дса !д!!ссаасс асс!!с!с!с !!а!а!аа!а сс!а!ааа!а 1500

сс!с!аа!а! сас!сас!!с !!!са!са!с са!сса!сса дад!ас!ас! ас!с!ас!ас 1560

!а!аа!ассс саасссаас! са!а!!саа! ас!ас!с!ад д!ассс!дса ддда!ссаас 1620

аа!ддс!дса с!!да!адса !ссс!дадда сааадсаас! адс!ссаад! саасссаса! 1680

асад!ассаа дадд!сасд! !!аддаас!д д!асаадааа а!саас!ддс !саасасдас 1740

сс!!д!!д!с с!са!!сс!д с!с!!ддд!! д!ас!!дасд адаассасас с!с!сассад 1800

асс!ассс!с а!!!дд!с!д !!с!с!ас!а !!!с!д!аса дсд!!!ддса !сас!дд!дд 1860

с!ассасада с!!!дд!ссс а!адд!с!!а сад!дсдадд !!дсса!!да дас!с!!сс! 1920

ддс!!!сас! ддадс!дд!д сда!ссаадд !!с!дсаада !дд!дд!сад ссаа!са!ад 1980

ддсаса!сас сд!!ддасдд асасса!даа ддасссс!ас !с!д!да!да даддас!дс! 2040

д!!с!сссас а!адд!!дда !дд!!с!саа с!с!да!сса аадд!сааад дсадаасада 2100

!д!!!с!да! с!!дас!с!д а!сссд!сд! !д!д!ддсаа сасааасас! а!ддсаад!д 2160

!!!дс!с!!! дссдс!!дда !с!!!ссда! да!ад!ддс! дддс!ддд!! ддддада!!д 2220

д!дддд!дда с!!д!с!а!д с!ддса!са! асд!дсс!дс !!!д!!садс аадссас!!! 2280

с!д!д!саас !са!!ддсас а!!дда!адд !даасаассд !!!да!даса дасд!ас!сс 2340

ааддда!са! д!!с!дас!д сд!!дд!сас аа!дддадаа дда!ассаса ас!!ссасса 2400

!дад!!!ссд ад!дас!аса дааа!дсса! са!!!дд!а! сад!а!дасс с!асааад!д 2460

дс!са!с!а! с!с!!садс! !ддд!ссс!! ссса!!ддсс !ас!с!с!са адасс!!ссд 2520

- 82 029904

!!ссаа!дад а!!дадааад дааддс!!са дсаасадсаа ааддс!с!!д асаадаааад 2580

аад!дд!с!! да!!ддддас !!сс!с!с!! ссадс!!сса д!да!с!са! ддда!дас!! 2640

!саадс!сд! !дсааадааа д!ддадада! дс!!д!!дс! д!!дс!ддад !да!сса!да 2700

!д!с!сссад !!са!!даад а!са!сс!дд !дддаддадс с!са!!адаа д!дс!д!!дд 2760

дааада!ддд ас!ддса!д! !саа!дд!дд ад!д!а!даа са!!сааасд ссдсасасаа 2820

с!!дс!дадс асаа!дадад !!ддад!с!! дададд!дда саадаад!дд адд!!!ддаа 2880

дааасададд д!дда!д!!с !!дддаад!с адаса!!с!! сд!саад!да сааддд!дда 2940

дсд!с!дд!д дааддадс!д !!дсадсд!д а!дад!ад!! адс!!аа!са сс!ададс!с 3000

дд!сасс!сд ад!а!саааа !с!а!!!ада аа!асасаа! а!!!!д!!дс аддс!!дс!д 3060

дадаа!сда! с!дс!а!са! ааааайаса аааааайй а!!!дсс!са айаййад 3120

дайдд1ай ааддасдс!! ааайа!йд !сддд!сас! асдса!са!! д!дайдада 3180

ада!садсда !асдааа!а! !сд!ад!ас! а!сда!аа!! !а!!!даааа !!са!аадаа 3240

аадсааасд! !аса!даа!! да!дааасаа !асааадаса да!ааадсса сдсаса!йа 3300

дда!а!!ддс сдадайас! даа!а!!дад !аада!сасд даай!с!да саддадса!д 3360

!с!!саа!!с адсссааа!д дсад!!дааа !ас!сааасс дсссса!а!д саддадсдда 3420

!са!!са!!д й!дй!дд! !дссй!дсс ааса!дддад !ссаадд!!д дсдсдссдас 3480

ссадс!!!с! !д!асааад! !ддса!!а!а адааадса!! дсйа!саа! йдйдсаас 3540

даасадд!са с!а!сад!са ааа!аааа!с а!!а!!!дсс а!ссадс!да !а!сссс!а! 3600

ад!дад!сд! а!!аса!дд! са!адс!д!! !сс!ддсадс !с!ддсссд! д!с!саааа! 3660

с!с!да!д!! асайдсаса ада!ааааа! а!а!са!са! даасаа!ааа ас!д!с!дс! 3720

!аса!аааса д!аа!асаад ддд!д!!а!д адсса!а!!с аасдддааас д!сдаддссд 3780

сда!!ааа!! ссааса!дда !дс!да!йа !а!ддд!а!а аа!дддс!сд сда!аа!д!с 3840

дддсаа!сад д!дсдасаа! с!а!сдсйд !а!дддаадс ссда!дсдсс адад!!д!й 3900

с!даааса!д дсааадд!ад сд!!дссаа! да!дйасад а!дада!дд! садас!ааас 3960

!ддс!дасдд аа!!!а!дсс !с!!ссдасс а!саадса!! !!а!ссд!ас !сс!да!да! 4020

дса!дд!!ас !сассас!дс да!ссссдда аааасадса! !ссадд!а!! адаадаа!а! 4080

сс!да!!сад д!даааа!а! !д!!да!дсд с!ддсад!д! !сс!дсдссд д!!дса!!сд 4140

а!!сс!д!!! д!аа!!д!сс !!!!аасадс да!сдсд!а! !!сд!с!сдс !саддсдсаа 4200

!сасдаа!да а!аасдд!!! дд!!да!дсд ад!да!!!!д а!дасдадсд !аа!ддс!дд 4260

сс!д!!даас аад!с!ддаа адааа!дса! ааасййдс сайс!сасс дда!!сад!с 4320

д!сас!са!д д!да!!!с!с ас!!да!аас с!!а!!!!!д асдаддддаа а!!аа!адд! 4380

- 83 029904

!д!а!!да!д !!ддасдад! сддаа!сдса дассда!асс адда!с!!дс са!сс!а!дд 4440

аас!дсс!сд д!дад!!!!с !сс!!са!!а садааасддс !!!!!саааа а!а!дд!а!! 4500

да!аа!сс!д а!а!даа!аа а!!дсад!!! са!!!да!дс !сда!дад!! !!!с!аа!са 4560

даа!!дд!!а а!!дд!!д!а асас!ддсад адса!!асдс !дас!!дасд ддасддсдса 4620

адс!са!дас саааа!ссс! !аасд!дад! !асдсд!сд! !ссас!дадс д!садасссс 4680

д!адаааада !сааадда!с !!с!!дада! сс!!!!!!!с !дсдсд!аа! с!дс!дс!!д 4740

сааасааааа аассассдс! ассадсдд!д д!!!д!!!дс сдда!саада дс!ассаас! 4800

с!!!!!ссда адд!аас!дд с!!садсада дсдсада!ас сааа!ас!д! сс!!с!ад!д 4860

!адссд!ад! !аддссасса с!!саадаас !с!д!адсас сдсс!аса!а сс!сдс!с!д 4920

с!аа!сс!д! !ассад!ддс !дс!дссад! ддсда!аад! сд!д!с!!ас сддд!!ддас 4980

!саадасда! ад!!ассдда !ааддсдсад сдд!сдддс! даасдддддд !!сд!дсаса 5040

садсссадс! !ддадсдаас дасс!асасс даас!дада! асс!асадсд !дадсайда 5100

дааадсдсса сдс!!сссда адддадааад дсддасадд! а!ссдд!аад сддсаддд!с 5160

ддаасаддад адсдсасдад ддадс!!сса дддддааасд сс!дд!а!с! !!а!ад!сс! 5220

д!сддд!йс дссасс!с!д асйдадсд! сда!ййд! да!дс!сд!с аддддддсдд 5280

адсс!а!дда аааасдссад саасдсддсс йй!асдд1 !сс!ддсс!! йдс!ддсс! 5340

!!!дс!саса !д!!с!!!сс !дсд!!а!сс сс!да!!с!д !дда!аассд !а!!ассдсс 5400

!!!дад!дад с!да!ассдс !сдссдсадс сдаасдассд адсдсадсда д!сад!дадс 5460

даддаадсдд аададсдссс аа!асдсааа ссдсс!с!сс ссдсдсд!!д дссда!!са! 5520

!аа!дсадс! ддсасдасад д!!!сссдас !ддааадсдд дсад!дадсд саасдсаа!! 5580

аа!асдсд!а ссдс!адсса ддаадад!!! д!адааасдс аааааддсса !ссд!садда 5640

!ддсс!!с!д с!!ад!!!да !дсс!ддсад !!!а!ддсдд дсд!сс!дсс сдссассс!с 5700

сдддссд!!д с!!сасаасд !!сааа!ссд с!сссддсдд а!!!д!сс!а с!саддадад 5760

сд!!сассда сааасаасад а!аааасдаа аддсссад!с !!ссдас!да дсс!!!сд!! 5820

!!а!!!да!д сс!ддсад!! ссс!ас!с!с дсд!!аасдс !адса!дда! д!!!!сссад 5880

!сасдасд!! д!аааасдас ддссад!с!! аадс!сдддс сссааа!аа! да!!!!а!!! 5940

!дас!да!ад !дасс!д!!с д!!дсаасаа а!!да!дадс аа!дс!!!!! !а!аа!дсса 6000

ас!!!д!аса ааааадсадд с!ссдсддсс дсас!адд!! !ааас!с!ад аадс!адд 6058

<210> 56

<211> 9956

<212> ДНК

<213> Искусственная

- 84 029904

<220>

<223> Плазмида рЭАВ7323

<400> 56

с!ад!с!ссс ад!а!са!!а !ад!дааад! !!!ддс!с!с !сдссдд!дд !!!!!!асс! 60

с!а!!!ааад ддд!!!!сса сс!ааааа!! с!дд!а!са! !с!сас!!!а с!!д!!ас!! 120

!аа!!!с!са !аа!с!!!дд !!дааа!!а! сасдс!!ссд сасасда!а! ссс!асааа! 180

!!а!!а!!!д !!аааса!!! !сааассдса !аааа!!!!а !даад!сссд !с!а!с!!!а 240

а!д!ад!с!а аса!!!!са! а!!дааа!а! а!аа!!!ас! !аа!!!!адс д!!дд!адаа 300

адса!аа!да !!!а!!с!!а !!с!!с!!са !а!ааа!д!! !аа!а!асаа !а!ааасааа 360

!!с!!!асс! !аадаадда! !!ссса!!!! а!а!!!!ааа аа!а!а!!!а !сааа!а!!! 420

!!саассасд !ааа!с!са! аа!аа!аад! !д!!!саааа д!аа!аааа! !!аас!сса! 480

аа!!!!!!!а !!сдас!да! с!!ааадсаа сасссад!да сасаас!адс са!!!!!!!с 540

!!!даа!ааа аааа!ссаа! !а!са!!д!а !!!!!!!!а! асаа!даааа !!!сассааа 600

саа!да!!!д !дд!а!!!с! даадсаад!с а!д!!а!дса ааа!!с!а!а а!!ссса!!! 660

дасас!асдд аад!аас!да ада!с!дс!! !!аса!дсда дасаса!с!! с!ааад!аа! 720

!!!аа!аа!а д!!ас!а!а! !саада!!!с а!а!а!сааа !ас!саа!а! !ас!!с!ааа 780

ааа!!аа!!а да!а!аа!!а ааа!а!!ас! !!!!!аа!!! !аад!!!аа! !д!!даа!!! 840

д!дас!а!!д а!!!а!!а!! с!ас!а!д!! !ааа!!д!!! !а!ада!ад! !!ааад!ааа 900

!а!аад!аа! д!ад!адад! д!!адад!д! !ассс!ааас са!ааас!а! аада!!!а!д 960

д!ддас!аа! !!!са!а!а! !!с!!а!!дс !!!!асс!!! !с!!дд!а!д !аад!ссд!а 1020

ас!ддаа!!а с!д!ддд!!д сса!дасас! с!д!дд!с!! !!дд!!са!д са!дда!с!! 1080

дсдсаадааа аадасааада асааадаааа аадасаааас адададасаа аасдсаа!са 1140

сасаассаас !сааа!!ад! сас!ддс!да !саада!сдс сдсд!сса!д !а!д!с!ааа 1200

!дсса!дсаа адсаасасд! дс!!ааса!д сас!!!ааа! ддс!сассса !с!саассса 1260

сасасаааса са!!дсс!!! !!с!!са!са !сассасаас сасс!д!а!а !а!!са!!с! 1320

с!!ссдссас с!саа!!!с! !сас!!саас асасд!саас с!дса!а!дс д!д!са!ссс 1380

а!дсссааа! с!сса!дса! д!!ссаасса сс!!с!с!с! !а!а!аа!ас с!а!ааа!ас 1440

с!с!аа!а!с ас!сас!!с! !!са!са!сс а!сса!ссад ад!ас!ас!а с!с!ас!ас! 1500

а!аа!асссс аасссаас!с а!а!!саа!а с!ас!с!адд !ассс!дсад дда!ссааса 1560

а!ддс!ссса аса!!!с!да дда!д!саа! дд!д!!с!!! !!дад!сада !дсддсаасс 1620

сс!да!!!дд с!с!!!ссас ассасс!д!д сааааадс!д асаасадасс саадсаас!! 1680

д!д!ддадда аса!!!!дс! !!!сдс!!ас !!дсасс!сд садс!с!с!а сддаддс!а! 1740

- 85 029904

ПдШс1с11сад1дсааа а1ддсадасс дасаПИсд сйасайс! Па1д1са1с 1800

1с1ддас1дд дда1аас1дс 1ддддсаса1 адас1с1ддд сйасаадй а1асааадсс 1860

аад1ддссас 1садад11а1 ас1дд1са1с йсаасасдд ПдссШса адасдс1дс1 1920

а1ддаПддд с1сд1дасса 1адаа1дса1 сасаад1аса дсдадассда сдсддассса 1980

сасаа1дсаа сдададд111 с11с11с1с1 саса11ддс1 ддс11с11д1 1аддаааса1 2040

сс1да1с1да аадааааадд даадддасй даса1дад1д аййсНдс 1да1ссаа1а 2100

сйсдННс адаадаад1а с1а1с1да1с с1са1дсс1с 1ддсс1дШ 1д1да1дсса 2160

ассд11а1сс сдд111ас11 11ддддадаа ас11ддасаа а1дс111с11 сд1ддсадсс 2220

а1д11ссд11 а1дс111са1 сс1даа1д11 асс1дд11дд 1даас1с1дс сдсасасаад 2280

1ддддадаса аассс1а1да саад1сса1с аадсс11ссд аааасс111с ад11дсда1д 2340

111дс111дд дадаадда11 1сасаа11ас са1сасас11 11ссд1ддда с1асаадаса 2400

дсададс11д дааасаасаа д11даас11с асаасаасд1 1са1саа111 с111дсдааа 2460

а1сдд11ддд сс1а1да111 даадас1д1д ад1да1даса 11д1саадаа саддд1саад 2520

адаас1ддсд а1ддаадсса 1са1с1с1дд ддс1дддд1д а1дадаа1са дадсааадаа 2580

дада1ада1д садсса11ад да1саассс1 ааадасда11 дад1ад11ад с11аа1сасс 2640

1ададс1сдд 1сасс1сдад 1а1саааа1с 1а111адааа 1асасаа1а1 111д11дсад 2700

дс11дс1дда даа1сда1с1 дс1а1са1аа ааа11асааа аааа1111а1 11дсс1саа1 2760

1а1111адда 11дд1а11аа ддасдс11аа а11а111д1с ддд1сас1ас дса1са11д1 2820

да11дадаад а1садсда1а сдааа1а11с д1ад1ас1а1 сда1аа111а 111даааа11 2880

са1аадаааа дсааасд11а са1даа11да 1дааасаа1а сааадасада 1ааадссасд 2940

саса111адд а1а11ддссд ада11ас1да а1а11дад1а ада1сасдда а111с1даса 3000

ддадса1д1с 11саа11сад сссааа1ддс ад11дааа1а с1сааассдс ссса1а1дса 3060

ддадсддай аПсаПдП 1дШддПд ссШдссаа са1дддад1с сааддПддс 3120

дсдссдассс адсШсПд (асааадПд дсаШИаад ааадсаПдс ШПсааШ 3180

д11дсаасда асадд1сас1 а1сад1сааа а1аааа1са1 1а111дсса1 ссадс1да1а 3240

1сссс1а1ад 1дад1сд1а1 1аса1дд1са 1адс1д111с с1ддсадс1с 1ддсссд1д1 3300

с1саааа1с1 с1да1д11ас а11дсасаад а1ааааа1а1 а1са1са1да асаа1аааас 3360

1д1с1дс11а са1ааасад1 аа1асааддд д1д11а1дад сса1а11саа сдддааасд1 3420

сдаддссдсд а11ааа11сс ааса1дда1д с1да111а1а 1ддд1а1ааа 1дддс1сдсд 3480

а1аа1д1сдд дсаа1садд1 дсдасаа1с1 а1сдс11д1а 1дддаадссс да1дсдссад 3540

ад11д111с1 даааса1ддс ааадд1адсд 11дссаа1да 1д11асада1 дада1дд1са 3600

- 86 029904

дас!ааас!д дс!дасддаа !йа!дсс!с йссдасса! саадса!!!! а!ссд!ас!с 3660

с!да!да!дс а!дд!!ас!с ассас!дсда !ссссддааа аасадса!!с садд!а!!ад 3720

аадаа!а!сс !да!!садд! даааа!а!!д !!да!дсдс! ддсад!д!!с с!дсдссдд! 3780

!дса!!сда! !сс!д!!!д! аа!!д!сс!! !!аасадсда !сдсд1а!й сд!с!сдс!с 3840

аддсдсаа!с асдаа!даа! аасддШдд !!да!дсдад !да!!!!да! дасдадсд!а 3900

а!ддс!ддсс !д!!даасаа д!с!ддааад ааа!дса!аа ас!!!!дсса !!с!сассдд 3960

а!!сад!сд! сас!са!дд! да!!!с!сас !!да!аасс! !а!!!!!дас даддддааа! 4020

!аа!адд!!д !а!!да!д!! ддасдад!сд даа!сдсада ссда!ассад да!с!!дсса 4080

!сс!а!ддаа с!дсс!сдд! дад!!!!с!с с!!са!!аса дааасддс!! !!!сааааа! 4140

а!дд!а!!да !аа!сс!да! а!даа!ааа! !дсад!!!са !!!да!дс!с да!дад!!!! 4200

!с!аа!сада а!!дд!!аа! !дд!!д!аас ас!ддсадад са!!асдс!д ас!!дасддд 4260

асддсдсаад с!са!дасса ааа!ссс!!а асд!дад!!а сдсд!сд!!с сас!дадсд! 4320

садассссд! адаааада!с ааадда!с!! с!!дада!сс !ШШс!д сдсд!аа!с! 4380

дс!дс!!дса аасааааааа ссассдс!ас садсдд!дд! !!д!!!дссд да!саададс 4440

!ассаас!с! !!!!ссдаад д!аас!ддс! !садсададс дсада!асса аа!ас!д!сс 4500

!!с!ад!д!а дссд!ад!!а ддссассас! !саадаас!с !д!адсассд сс!аса!асс 4560

!сдс!с!дс! аа!сс!д!!а ссад!ддс!д с!дссад!дд сда!аад!сд !д!с!!ассд 4620

дд!!ддас!с аадасда!ад !!ассдда!а аддсдсадсд д!сдддс!да асдддддд!! 4680

сд!дсасаса дсссадс!!д дадсдаасда сс!асассда ас!дада!ас с!асадсд!д 4740

адса!!дада аадсдссасд с!!сссдаад ддадаааддс ддасадд!а! ссдд!аадсд 4800

дсаддд!сдд аасаддадад сдсасдаддд адс!!ссадд дддааасдсс !дд!а!с!!! 4860

а!ад!сс!д! сддд!!!сдс сасс!с!дас !!дадсд!сд а!!!!!д!да !дс!сд!сад 4920

дддддсддад сс!а!ддааа аасдссадса асдсддсс!! !!!асдд!!с с!ддсс!!!! 4980

дс!ддсс!!! !дс!саса!д !!с!!!сс!д сд!!а!сссс !да!!с!д!д да!аассд!а 5040

йассдсс!! !дад!дадс! да!ассдс!с дссдсадссд аасдассдад сдсадсдад! 5100

сад!дадсда ддаадсддаа дадсдсссаа !асдсааасс дсс!с!сссс дсдсд!!ддс 5160

сда!!са!!а а!дсадс!дд сасдасадд! !!сссдас!д дааадсдддс ад!дадсдса 5220

асдсаа!!аа !асдсд!асс дс!адссадд аадад!!!д! адааасдсаа аааддсса!с 5280

сд!садда!д дсс!!с!дс! !адШда!д сс!ддсадй !а!ддсдддс д!сс!дсссд 5340

ссассс!ссд ддссд!!дс! !сасаасд!! сааа!ссдс! сссддсдда! !!д!сс!ас! 5400

саддададсд !!сассдаса аасаасада! аааасдааад дсссад!с!! ссдас!дадс 5460

- 87 029904

с!!!сд!!!! а!!!да!дсс !ддсад!!сс с!ас!с!сдс д!!аасдс!а дса!дда!д! 5520

!!!сссад!с асдасд!!д! аааасдасдд ссад!с!!аа дс!сдддссс сааа!аа!да 5580

!!!!а!!!!д ас!да!ад!д асс!д!!сд! !дсаасааа! !да!дадсаа !дс!!!!!!а 5640

!аа!дссаас !!!д!асааа ааадсаддс! ссдсддссдс ас!адд!!!а аас!с!адаа 5700

дс!аддаа!! сааасааада адсда!сдсд сддссдсса! !д!ас!ссса д!а!са!!а! 5760

ад!дааад!! !!ддс!с!с! сдссдд!дд! !!!!!асс!с !а!!!ааадд дд!!!!ссас 5820

с!ааааа!!с !дд!а!са!! с!сас!!!ас !!д!!ас!!! аа!!!с!са! аа!с!!!дд! 5880

!дааа!!а!с асдс!!ссдс асасда!а!с сс!асааа!! !а!!а!!!д! !аааса!!!! 5940

сааассдса! аааа!!!!а! даад!сссд! с!а!с!!!аа !д!ад!с!аа са!!!!са!а 6000

!!дааа!а!а !аа!!!ас!! аа!!!!адсд !!дд!адааа дса!аа!да! !!а!!с!!а! 6060

!с!!с!!са! а!ааа!д!!! аа!а!асаа! а!ааасааа! !с!!!асс!! аадаадда!! 6120

!ссса!!!!а !а!!!!аааа а!а!а!!!а! сааа!а!!!! !саассасд! ааа!с!са!а 6180

а!аа!аад!! д!!!саааад !аа!аааа!! !аас!сса!а а!!!!!!!а! !сдас!да!с 6240

йааадсаас асссад!дас асаас!адсс аййй!с! !!даа!аааа ааа!ссаа!! 6300

а!сайд!а! йй!йа!а саа!даааа! !!сассааас аа!да!йд! дд!а!йс!д 6360

аадсаад!са !д!!а!дсаа аа!!с!а!аа !!ссса!!!д асас!асдда ад!аас!даа 6420

да!с!дс!!! !аса!дсдад асаса!с!!с !ааад!аа!! !!аа!аа!ад !!ас!а!а!! 6480

саада!!!са !а!а!сааа! ас!саа!а!! ас!!с!аааа аа!!аа!!ад а!а!аа!!аа 6540

аа!а!!ас!! !!!!аа!!!! аад!!!аа!! д!!даа!!!д !дас!а!!да !!!а!!а!!с 6600

!ас!а!д!!! ааа!!д!!!! а!ада!ад!! !ааад!ааа! а!аад!аа!д !ад!адад!д 6660

!!адад!д!! ассс!ааасс а!ааас!а!а ада!!!а!дд !ддас!аа!! !!са!а!а!! 6720

!с!!а!!дс! !!!асс!!!! с!!дд!а!д! аад!ссд!аа с!ддаа!!ас !д!ддд!!дс 6780

са!дасас!с !д!дд!с!!! !дд!!са!дс а!дда!дс!! дсдсаадааа аадасааада 6840

асааадаааа аадасаааас адададасаа аасдсаа!са сасаассаас !сааа!!ад! 6900

сас!ддс!да !саада!сдс сдсд!сса!д !а!д!с!ааа !дсса!дсаа адсаасасд! 6960

дс!!ааса!д сас!!!ааа! ддс!сассса !с!саассса сасасаааса са!!дсс!!! 7020

!!с!!са!са !сассасаас сасс!д!а!а !а!!са!!с! с!!ссдссас с!саа!!!с! 7080

!сас!!саас асасд!саас с!дса!а!дс д!д!са!ссс а!дсссааа! с!сса!дса! 7140

д!!ссаасса сс!!с!с!с! !а!а!аа!ас с!а!ааа!ас с!с!аа!а!с ас!сас!!с! 7200

!!са!са!сс а!сса!ссад ад!ас!ас!а с!с!ас!ас! а!аа!асссс аасссаас!с 7260

а!а!!саа!а с!ас!с!адд а!ссаасаа! д!с!дс!сса ассдс!даса !садддс!ад 7320

- 88 029904

ддс1ссадад дс1аадаадд 11саса1сдс 1да1ассдс1 а1саасаддс асаа11дд1а 7380

саадсасд1д аас1ддс1са асд1с11сс1 са1са1сдда а1сссас1с1 асдда1дса1 7440

ссаадс111с 1ддд11ссас 11саас1саа дассдс1а1с 1дддс1д1да 1с1ас1ас11 7500

с11сассдда с11ддаа1са ссдс1дда1а ссасаддс11 1дддс1сас1 дс1са1ас1с 7560

1дс1ас1с11 ссас11адда 1с1ддс11дс 1дс1д11дда ддаддадс1д 11даддда1с 7620

1а1сада1дд 1дддс1аддд а1сасадддс 1са1са1адд 1асассда1а ссдасаадда 7680

ссса1ас1с1 д11аддаадд дас11с1с1а с1с1сасс11 дда1дда1дд 1да1даадса 7740

даасссааад адда1сддаа ддассдаса1 с1с1да1с1с аасдаддасс сад11д11д1 7800

11ддсаасас аддаас1асс 1саадд11д1 д11сасса1д ддас11дс1д 11ссаа1дс1 7860

1д11дс1дда с11дда1ддд дада11ддс1 1ддадда11с д1д1асдс1д даа1сс11ад 7920

да1с11с11с д11саасаад с1асс11с1д сд1даас1с1 с11дс1сас1 ддс11ддада 7980

1саасса11с да1да1адда ас1с1сс1ад дда1сасд1д а1сассдс1с 11д11ассс1 8040

1ддададдда 1ассасаас1 1ссассасда д11ссса1с1 дас1асадда асдс1а1сда 8100

д1ддсассад 1асда1сс1а ссаад1дд1с 1а1с1дддс1 1ддаадсаас 11дда11ддс 8160

11асда1с1с аадаад11са дддс1аасда да1сдадаад ддааддд11с аасаас11са 8220

даадаадс11 да1аддаада дддс1ас1с1 1да11дддда ассссас11д а1саас11сс 8280

ад1да1ддаа 1ддда1дас1 асд11дадса адс1аадаас ддааддддас 11д11дс1а1 8340

сдс1ддад11 д11сасда1д 11ассдас11 са1саадда1 сасссаддад даааддс1а1 8400

да1с1с11с1 ддаа1сддаа адда1дс1ас сдс1а1д11с аасддаддад 1д1ас1асса 8460

с1с1аасдса дс1сасаасс 11с11адсас са1даддд1д ддад1да1са ддддадда1д 8520

сдадд11дад а1с1ддаада дддс1садаа ддадаасд11 дад1асд11а ддда1дда1с 8580

1ддасааадд д1да1саддд с1ддададса ассаассаад а1сссададс саа1сссаас 8640

сдс1да1дс1 дс11дад1ад 11адс11аа1 сасс1адд1с ассад1а1да ас1аааа1дс 8700

а1д1адд1д1 аададс1са1 ддададса1д даа1а11д1а 1ссдасса1д 1аасад1а1а 8760

а1аас1дадс 1сса1с1сас 11с11с1а1д аа1ааасааа дда1д11а1д а1а1а11аас 8820

ас1с1а1с1а 1дсасс11а1 1д11с1а1да 1ааа111сс1 с11а11а11а 1ааа1са1с1 8880

даа1сд1дас ддс11а1дда а1дс11сааа 1ад1асаааа асааа1д1д1 ас1а1аадас 8940

111с1аааса а11с1аас11 1адса11д1д аасдадаса1 аад1д11аад аадаса1аас 9000

аа11а1аа1д даадаад111 д1с1сса111 а1а1а11а1а 1а11асссас 11а1д1а11а 9060

1а11адда1д 11ааддадас а1аасаа11а 1ааададада ад111д1а1с са111а1а1а 9120

11а1а1ас1а ссса111а1а 1а11а1ас11 а1ссас11а1 11аа1д1с11 1а1аадд111 9180

- 89 029904

да!сса!да! а!!!с!аа!а !!!!ад!!да !а!д!а!а!д аааадд!ас! а!!!даас!с 9240

!с!!ас!с!д !а!ааадд!! дда!са!сс! !ааад!ддд! с!а!!!аа!! !!а!!дс!!с 9300

!!асада!аа аааааааа!! а!дад!!дд! !!да!аааа! а!!даадда! !!аааа!аа! 9360

аа!ааа!аа! ааа!ааса!а !аа!а!а!д! а!а!ааа!!! а!!а!аа!а! ааса!!!а!с 9420

!а!аааааад !ааа!а!!д! са!ааа!с!а !асаа!сд!! !адсс!!дс! ддаасдаа!с 9480

!саа!!а!!! ааасдадад! аааса!а!!! дас!!!!!дд !!а!!!ааса аа!!а!!а!! 9540

!аасас!а!а !дааа!!!!! !!!!!!!а!с адсааадаа! аааа!!ааа! !аадааддас 9600

аа!дд!д!сс саа!сс!!а! асаассаас! !ссасаадаа ад!саад!са дадасаасаа 9660

ааааасаадс аааддааа!! !!!!аа!!!д ад!!д!с!!д !!!дс!дса! аа!!!а!дса 9720

д!аааасас! асаса!аасс с!!!!адсад !ададсаа!д д!!дассд!д !дс!!адс!! 9780

с!!!!а!!!! а!!!!!!!а! садсааадаа !ааа!аааа! аааа!дадас ас!!саддда 9840

!д!!!саасс с!!а!асааа ассссааааа саад!!!сс! адсассс!ас саасдаа!!с 9900

дсддссдс!! !сс!дса!да са!сд!сс!д сададссаад сдса!дс!!а а!!ааа 9956

<210> 57

<211> 5767

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рИАВ7325

<400> 57

аа!!сдсддс сдс!!!сс!д са!даса!сд !сс!дсадад ссаадсдса! дс!!аа!!аа 60

ас!ад!с!сс сад!а!са!! а!ад!дааад !!!!ддс!с! с!сдссдд!д д!!!!!!асс 120

!с!а!!!ааа дддд!!!!сс асс!ааааа! !с!дд!а!са !!с!сас!!! ас!!д!!ас! 180

!!аа!!!с!с а!аа!с!!!д д!!дааа!!а !сасдс!!сс дсасасда!а !ссс!асааа 240

!!!а!!а!!! д!!аааса!! !!сааассдс а!аааа!!!! а!даад!ссс д!с!а!с!!! 300

аа!д!ад!с! ааса!!!!са !а!!дааа!а !а!аа!!!ас !!аа!!!!ад сд!!дд!ада 360

аадса!аа!д а!!!а!!с!! а!!с!!с!!с а!а!ааа!д! !!аа!а!аса а!а!ааасаа 420

а!!с!!!асс !!аадаадда !!!ссса!!! !а!а!!!!аа ааа!а!а!!! а!сааа!а!! 480

!!!саассас д!ааа!с!са !аа!аа!аад !!д!!!сааа ад!аа!аааа !!!аас!сса 540

!аа!!!!!!! а!!сдас!да !с!!ааадса асасссад!д асасаас!ад сса!!!!!!! 600

с!!!даа!аа ааааа!ссаа !!а!са!!д! а!!!!!!!!а !асаа!дааа а!!!сассаа 660

асаа!да!!! д!дд!а!!!с !даадсаад! са!д!!а!дс аааа!!с!а! аа!!ссса!! 720

!дасас!асд даад!аас!д аада!с!дс! !!!аса!дсд адасаса!с! !с!ааад!аа 780

- 90 029904

!!!!аа!аа! ад!!ас!а!а !!саада!!! са!а!а!саа а!ас!саа!а !!ас!!с!аа 840

ааааккаакк адакакаакк аааакаккас ккккккаа!! ккаадкккаа !!д!!даа!! 900

!д!дас!а!! дакккакка! кскаскакд! ккаааккдк! ккакадакад кккааадкаа 960

акакаадкаа !д!ад!адад !д!!адад!д ккассскааа ссакаааска !аада!!ка! 1020

ддкддаскаа !!к!сакака ккксккаккд сккккасскк кксккддкак дкаадкссд! 1080

ааскддаакк аскдкдддкк дссакдасас кскдкддкск кккддкксак дсакддакск 1140

кдсдсаадаа ааадасааад аасааадааа ааадасаааа садададаса ааасдсаакс 1200

асасаассаа сксаааккад ксаскддскд аксаадаксд ссдсдкссак дкакдкскаа 1260

акдссакдса аадсаасасд кдсккааса! дсаскккааа кддсксассс аксксаассс 1320

асасасааас асаккдсс!! кккскксакс аксассасаа ссасскдка! а!а!!са!кс 1380

ксккссдсса ссксаакккс кксаскксаа сасасдксаа сскдсакакд сдкдксаксс 1440

сакдсссааа !с!сса!дса !д!!ссаасс асс!!с!с!с !ка!а!аака сскакааака 1500

сскскаака! сас!сас!!с !!кса!са!с сакссаксса дадкаскас! ас!с!ас!ас 1560

какаакассс саасссааск сакакксаак аскаскскад дкассскдса дддакссаас 1620

аакддскссс аасакккскд аддакдксаа кддкдккскк кккдадксад акдсддсаас 1680

ссскдакккд дсксккксса сассасскдк дсааааадск дасаасадас ссаадсааск 1740

!д!д!ддадд ааса!к!!дс кккксдскка сккдсасскс дсадскскс! асддаддска 1800

кккдкккскс кксадкдсаа аакддсадас сдасаккккс дсккасаккс кккакдксак 1860

с!с!ддас!д дддакааскд скддддсаса !адас!с!дд дсксасаад! сакасааадс 1920

саадкддсса сксададкка !ас!дд!са! скксаасасд дккдсскккс аадасдскдс 1980

какддаккдд дсксдкдасс акадаакдса ксасаадкас адсдадассд асдсддассс 2040

асасаакдса асдададдкк кскксккскс ксасаккддс кддскксккд ккаддаааса 2100

ксскдакскд ааадааааад ддаадддаск сдасакдадк дакскссккд скдакссаак 2160

аскссдкккк садаадаадк аскакскдак ссксакдсск скддсскдкк ккдкдакдсс 2220

аассдккакс ссддкккас! кккддддада аасккддаса аа!дс!к!с! ксдкддсадс 2280

сакдккссд! !а!дс!к!са !сс!даа!дк !асс!дд!кд д!даас!с!д ссдсасасаа 2340

дкддддадас ааассскакд асаадкссак саадсскксс даааассккк садккдсдак 2400

дкккдскккд ддадаадда! кксасаакка ссаксасас! !!!ссдкддд аскасаадас 2460

адсададскк ддааасааса адккдааскк сасаасаасд кксаксаакк кскккдсдаа 2520

ааксддккдд дсскакдакк кдаадаскдк дадкдакдас аккдксаада асадддксаа 2580

дадааскддс дакддаадсс аксакскскд дддскддддк дакдадаакс ададсааада 2640

- 91 029904

адада!ада! дсадссайа дда!саассс !ааадасда! 1дад1адйа дсйаа!сас 2700

с!ададс!сд д!сасс!сда дйИсаааа! с1аШадаа а1асасаа1а ййдйдса 2760

ддсйдс!дд адаа!сда!с 1дс1а1са1а аааайасаа аааааййа Шдсс1саа 2820

йаййадд айдд!айа аддасдсйа аайа!йд1 сддд!сас!а сдса!сайд 2880

1дайдадаа да!садсда! асдааа!ай сд!ад!ас!а 1сда1ааШ аШдаааа! 2940

1са1аадааа адсааасд!! аса!даайд а1дааасаа1 асааадасад а!ааадссас 3000

дсасаШад да!айддсс дадайас!д аа!айдад! аада!сасдд аа!йс1дас 3060

аддадса!д! сйсаайса дсссааа!дд садйдааа! ас!сааассд сссса!а!дс 3120

аддадсдда! сайсайд! йд!йддй дсс!йдсса аса!дддад! ссааддйдд 3180

сдсдссдасс садс!йсй д!асааадй ддсайа!аа дааадсайд сйа!саай 3240

1дйдсаасд аасадд!сас !а!сад!саа аа!аааа!са йа!йдсса !ссадс!да! 3300

а!сссс!а!а д!дад!сд!а йаса!дд!с а1адс1дй! сс!ддсадс! с!ддсссд!д 3360

!с!саааа!с 1с1да1дйа сайдсасаа да!ааааа!а 1а1са1са1д аасаа!аааа 3420

с!д!с1дсй аса!ааасад !аа!асаадд дд!дйа!да дсса!айса асдддааасд 3480

!сдаддссдс дайааайс сааса!дда! дс1да1йа! а!ддд!а!аа а!дддс!сдс 3540

да!аа!д!сд ддсаа!садд !дсдасаа!с 1а1сдсйд1 а!дддаадсс сда!дсдсса 3600

дадйд!йс !даааса!дд сааадд!адс дйдссаа!д а!дйасада !дада!дд!с 3660

адас!ааас! ддс!дасдда а1йа1дсс! сйссдасса 1саадсай1 1а1ссд1ас1 3720

сс!да!да!д са!ддйас! сассас!дсд а!ссссддаа ааасадсай ссадд!айа 3780

даадаа!а!с с!дайсадд 1даааа1ай дйда!дсдс 1ддсад1дй сс!дсдссдд 3840

йдсайсда йсс!д1йд 1аайд1сс1 1йаасадсд а!сдсд!ай 1сд1с1сдс1 3900

саддсдсаа! сасдаа!даа 1аасдд1йд дйда!дсда д!даййда !дасдадсд! 3960

аа!ддс!ддс с!дйдааса ад!с!ддааа дааа!дса!а аасййдсс айс!сассд 4020

дайсад!сд !сас!са!дд 1да1йс1са сйда!аасс йаШйда сдаддддааа 4080

йаа!аддй д!айда1д! !ддасдад!с ддаа!сдсад ассда!асса дда!сйдсс 4140

а!сс!а!дда ас!дсс!сдд 1дадййс1 ссйсайас адааасддс! ййсааааа 4200

1а1дд1айд а!аа!сс!да !а!даа!ааа йдсадШс а1йда1дс! сда1дадй! 4260

йс!аа!сад аайддйаа йддйд!аа сас!ддсада дсайасдс! дасйдасдд 4320

дасддсдсаа дс!са!дасс аааа!сссй аасд!дадй асдсд!сдй ссас!дадсд 4380

!садассссд !адаааада! сааадда!с! 1сйдада1с с1йййс1 дсдсд!аа!с 4440

1дс1дсйдс ааасаааааа ассассдс!а ссадсдд!дд 1йд1йдсс дда!саадад 4500

- 92 029904

с!ассаас!с !!!!!ссдаа дд!аас!ддс !!садсадад сдсада!асс ааа!ас!д!с 4560

с!!с!ад!д! адссд!ад!! аддссассас !!саадаас! с!д!адсасс дсс!аса!ас 4620

с!сдс!с!дс !аа!сс!д!! ассад!ддс! дс!дссад!д дсда!аад!с д!д!с!!асс 4680

ддд!!ддас! саадасда!а д!!ассдда! ааддсдсадс дд!сдддс!д аасдддддд! 4740

!сд!дсасас адсссадс!! ддадсдаасд асс!асассд аас!дада!а сс!асадсд! 4800

дадса!!дад ааадсдссас дс!!сссдаа дддадааадд сддасадд!а !ссдд!аадс 4860

ддсаддд!сд даасаддада дсдсасдадд дадс!!ссад ддддааасдс с!дд!а!с!! 4920

!а!ад!сс!д !сддд!!!сд ссасс!с!да с!!дадсд!с да!!!!!д!д а!дс!сд!са 4980

ддддддсдда дсс!а!ддаа ааасдссадс аасдсддсс! !!!!асдд!! сс!ддсс!!! 5040

!дс!ддссй !!дс!саса! д!!сй!сс! дсдйа!ссс с!да!!с!д! дда!аассд! 5100

айассдсс! йдад!дадс !да!ассдс! сдссдсадсс даасдассда дсдсадсдад 5160

!сад!дадсд аддаадсдда ададсдссса а!асдсааас сдсс!с!ссс сдсдсд!!дд 5220

ссда!!са!! аа!дсадс!д дсасдасадд !!!сссдас! ддааадсддд сад!дадсдс 5280

аасдсаа!!а а!асдсд!ас сдс!адссад даадад!!!д !адааасдса ааааддсса! 5340

ссд!садда! ддсс!!с!дс !!ад!!!да! дсс!ддсад! !!а!ддсддд сд!сс!дссс 5400

дссассс!сс дддссд!!дс !!сасаасд! !сааа!ссдс !сссддсдда !!!д!сс!ас 5460

!саддададс д!!сассдас ааасаасада !аааасдааа ддсссад!с! !ссдас!дад 5520

сс!!!сд!!! !а!!!да!дс с!ддсад!!с сс!ас!с!сд сд!!аасдс! адса!дда!д 5580

!!!!сссад! сасдасд!!д !аааасдасд дссад!с!!а адс!сдддсс ссааа!аа!д 5640

а!!!!а!!!! дас!да!ад! дасс!д!!сд !!дсаасааа !!да!дадса а!дс!!!!!! 5700

а!аа!дссаа с!!!д!асаа аааадсаддс !ссдсддссд сас!адд!!! ааас!с!ада 5760

адс!адд 5767

<210> 58

<211> 6109

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рПАВ7327

<400> 58

сдд!сасс!с дад!а!сааа а!с!а!!!ад ааа!асасаа !а!!!!д!!д саддс!!дс! 60

ддадаа!сда !с!дс!а!са !ааааа!!ас ааааааа!!! !а!!!дсс!с аа!!а!!!!а 120

дда!!дд!а! !ааддасдс! !ааа!!а!!! д!сддд!сас !асдса!са! !д!да!!дад 180

аада!садсд а!асдааа!а !!сд!ад!ас !а!сда!аа! !!а!!!дааа а!!са!аада 240

- 93 029904

ааадсааасд !!аса!даа! !да!даааса а!асааадас ада!ааадсс асдсаса!!! 300

адда!а!!дд ссдада!!ас !даа!а!!да д!аада!сас ддаа!!!с!д асаддадса! 360

д!с!!саа!! садсссааа! ддсад!!даа а!ас!сааас сдсссса!а! дсаддадсдд 420

а!са!!са!! д!!!д!!!дд !!дсс!!!дс сааса!ддда д!ссаадд!! ддсдсдссда 480

сссадс!!!с !!д!асааад !!ддса!!а! аадааадса! !дс!!а!саа !!!д!!дсаа 540

сдаасадд!с ас!а!сад!с аааа!аааа! са!!а!!!дс са!ссадс!д а!а!сссс!а 600

!ад!дад!сд !а!!аса!дд !са!адс!д! !!сс!ддсад с!с!ддсссд !д!с!саааа 660

!с!с!да!д! !аса!!дсас аада!ааааа !а!а!са!са !даасаа!аа аас!д!с!дс 720

!!аса!ааас ад!аа!асаа дддд!д!!а! дадсса!а!! саасдддааа сд!сдаддсс 780

дсда!!ааа! !ссааса!дд а!дс!да!!! а!а!ддд!а! ааа!дддс!с дсда!аа!д! 840

сдддсаа!са дд!дсдасаа !с!а!сдс!! д!а!дддаад сссда!дсдс садад!!д!! 900

!с!даааса! ддсааадд!а дсд!!дссаа !да!д!!аса да!дада!дд !садас!ааа 960

с!ддс!дасд даа!!!а!дс с!с!!ссдас са!саадса! !!!а!ссд!а с!сс!да!да 1020

!дса!дд!!а с!сассас!д сда!ссссдд ааааасадса !!ссадд!а! !адаадаа!а 1080

!сс!да!!са дд!даааа!а !!д!!да!дс дс!ддсад!д !!сс!дсдсс дд!!дса!!с 1140

да!!сс!д!! !д!аа!!д!с с!!!!аасад сда!сдсд!а !!!сд!с!сд с!саддсдса 1200

а!сасдаа!д аа!аасдд!! !дд!!да!дс дад!да!!!! да!дасдадс д!аа!ддс!д 1260

дсс!д!!даа саад!с!дда аадааа!дса 1ааас!!йд сса!!с!сас сдда!!сад! 1320

сд!сас!са! дд!да!!!с! сас!!да!аа сс!!а!Ш! дасдадддда аайаайдд 1380

!!д!а!!да! д!!ддасдад !сддаа!сдс адассда!ас садда!с!!д сса!сс!а!д 1440

даас!дсс!с дд!дад!!!! с!сс!!са!! асадааасдд сйШсааа аа!а!дд!а! 1500

!да!аа!сс! да!а!даа!а аа!!дсад!! !са!!!да!д с!сда!дад! !!1!с1аа!с 1560

адаа!!дд!! аа!!дд!!д! аасас!ддса дадса!!асд с!дас!!дас дддасддсдс 1620

аадс!са!да ссаааа!ссс !!аасд!дад !!асдсд!сд !!ссас!дад сд!садассс 1680

сд!адаааад а!сааадда! с!!с!!дада !сс!!!!!!! с!дсдсд!аа !с!дс!дс!! 1740

дсааасаааа ааассассдс !ассадсдд! дд!йд!1!д ссдда!саад адс!ассаас 1800

!с!Ш!ссд аадд!аас!д дс!!садсад адсдсада!а ссааа!ас!д !сс!!с!ад! 1860

д!адссд!ад !!аддссасс ас!!саадаа с!с!д!адса ссдсс!аса! асс!сдс!с! 1920

дс!аа!сс!д !!ассад!дд с!дс!дссад !ддсда!аад !сд!д!с!!а ссддд!!дда 1980

с!саадасда Идйассдд а!ааддсдса дсдд!сдддс !даасддддд д!!сд!дсас 2040

асадсссадс !!ддадсдаа сдасс!асас сдаас!дада !асс!асадс д!дадса!!д 2100

- 94 029904

адааадсдсс асдс11сссд аадддадааа ддсддасадд 1а1ссдд1аа дсддсаддд1 2160

сддаасадда дадсдсасда дддадс11сс адддддааас дсс1дд1а1с 111а1ад1сс 2220

1д1сддд111 сдссасс1с1 дас11дадсд 1сда11111д 1да1дс1сд1 саддддддсд 2280

дадсс1а1дд ааааасдсса дсаасдсддс с11111асдд 11сс1ддсс1 111дс1ддсс 2340

1111дс1сас а1д11с111с с1дсд11а1с ссс1да11с1 д1дда1аасс д1а11ассдс 2400

с111дад1да дс1да1ассд с1сдссдсад ссдаасдасс дадсдсадсд ад1сад1дад 2460

сдаддаадсд даададсдсс саа1асдсаа ассдсс1с1с сссдсдсд11 ддссда11са 2520

11аа1дсадс 1ддсасдаса дд111сссда с1ддааадсд ддсад1дадс дсаасдсаа1 2580

1аа1асдсд1 ассдс1адсс аддаадад11 1д1адааасд саааааддсс а1ссд1садд 2640

а1ддсс11с1 дс11ад111д а1дсс1ддса д111а1ддсд ддсд1сс1дс ссдссассс1 2700

ссдддссд11 дс11сасаас д11сааа1сс дс1сссддсд да111д1сс1 ас1саддада 2760

дсд11сассд асааасааса да1аааасда ааддсссад1 с11ссдас1д адсс111сд1 2820

111а111да1 дсс1ддсад1 1ссс1ас1с1 сдсд11аасд с1адса1дда 1д1111ссса 2880

д1сасдасд1 1д1аааасда сддссад1с1 1аадс1сддд ссссааа1аа 1да1111а11 2940

11дас1да1а д1дасс1д11 сд11дсааса аа11да1дад саа1дс1111 11а1аа1дсс 3000

аас111д1ас аааааадсад дс1ссдсддс сдсас1адд1 11ааас1с1а даадс1адда 3060

айсдсддсс дсШсс!дс а1даса1сд1 сс1дсададс саадсдса1д сйаайааа 3120

с1ад1с1ссс ад!а!сайа 1ад1дааад1 Й1ддс1с1с !сдссдд!дд йййасс! 3180

с1а111ааад ддд1111сса сс1ааааа11 с1дд1а1са1 1с1сас111а с11д11ас11 3240

1аа111с1са 1аа1с111дд 11дааа11а1 сасдс11ссд сасасда1а1 ссс1асааа1 3300

11а11а111д 11аааса111 1сааассдса 1аааа1111а 1даад1сссд 1с1а1с111а 3360

а1д1ад1с1а аса1111са1 а11дааа1а1 а1аа111ас1 1аа1111адс д11дд1адаа 3420

адса1аа1да 111а11с11а 11с11с11са 1а1ааа1д11 1аа1а1асаа 1а1ааасааа 3480

11с111асс1 1аадаадда1 11ссса1111 а1а1111ааа аа1а1а111а 1сааа1а111 3540

11саассасд 1ааа1с1са1 аа1аа1аад1 1д111саааа д1аа1аааа1 11аас1сса1 3600

аа1111111а 11сдас1да1 с11ааадсаа сасссад1да сасаас1адс са1111111с 3660

111даа1ааа аааа1ссаа1 1а1са11д1а 11111111а1 асаа1даааа 111сассааа 3720

саа1да111д 1дд1а111с1 даадсаад1с а1д11а1дса ааа11с1а1а а11ссса111 3780

дасас1асдд аад1аас1да ада1с1дс11 11аса1дсда дасаса1с11 с1ааад1аа1 3840

111аа1аа1а д11ас1а1а1 1саада111с а1а1а1сааа 1ас1саа1а1 1ас11с1ааа 3900

ааа11аа11а да1а1аа11а ааа1а11ас1 11111аа111 1аад111аа1 1д11даа111 3960

- 95 029904

д1дас!айд айкйай с1ас1а1д11 1ааайд1й 1а1ада1ад1 йааадкаа 4020

1а1аад1аа1 дкдкдад! дйадад!д1 1ассс1ааас са1ааас1а1 аадаййИд 4080

д1ддас1аа! Шса1а1а1 йсйайдс ййассй! ййддйИд 1аад1ссд1а 4140

ас!ддаайа с!д1дддйд сса1дасас1 с1д1ддйй йддйса!д са!ддайй 4200

дсдсаадааа аадасааада асааадаааа аадасаааас адададасаа аасдсаайа 4260

сасаассаас йааайад! сас1ддс1да 1саада1сдс сдсдйса1д 1а1дй1ааа 4320

1дсса1дсаа адсаасасд! дсйааса!д сасШааа! ддсйассса 1с1саассса 4380

сасасаааса сайдссй! йсйсайа (сассасаас сасс1д1а1а 1айса11с1 4440

сйссдссас сйаайй! (сасПсаас асасдйаас с1дса1а1дс д1д1са1ссс 4500

а1дсссааа1 с1сса1дса1 дйссаасса ссйс1с1с11а1а1аа1ас с1а1ааа1ас 4560

сййкйай асйасйс! йса1са1сс айсайсад ад1ас1ас1а сй1ас1ас1 4620

айкйасссс аасссаасй а1айсаа1а с1асй1адд 1ассс1дсад ддайсааса 4680

а1дй1дсй саассдс1да сайадддс! адддсйсад аддс(аадаа ддИсасай 4740

дс1да1ассд скйаасад дсасаайдд (асаадсасд 1даас1ддс1 саасдййс 4800

сйайайд даайссас! с1асдда1дс айсаадсй й1дддйсс асПсаасй 4860

аадассдск Й1дддс1д1 дай1ас1ас йсйсассд дасйддаа! сассдс1дда 4920

(ассасаддс Шдддсйа с1дсйа1ас 1с1дс1асй йссасйад дай1ддсй 4980

дсйсмпд даддаддадс 1дйдаддда 1с1а1сада1 дд!дддс!ад ддайасадд 5040

дсйайак дд(асассда (ассдасаад дассса1ас1 с!дйаддаа дддасПсй 5100

(асййасс Пдда1дда1 дд(да(даад садаасссаа ададдайдд ааддассдас 5160

а1с1с1да1с 1саасдадда сссад11д11 д111ддсаас асаддаас1а сс1саадд11 5220

д1д11сасса 1дддас11дс 1д11ссаа1д с11д11дс1д дас11дда1д дддада11дд 5280

с11ддадда1 1сд1д1асдс 1ддаа1сс11 адда1с11с1 1сд11сааса адс1асс11с 5340

1дсд1даас1 с1с11дс1са с1ддс11дда да1саасса1 1сда1да1ад даас1с1сс1 5400

аддда1сасд 1да1сассдс 1с11д11асс с11ддададд да1ассасаа с11ссассас 5460

дад11ссса1 с1дас1асад даасдс1а1с дад1ддсасс ад1асда1сс 1ассаад1дд 5520

1с1а1с1ддд с11ддаадса ас11дда11д дс11асда1с 1саадаад11 садддс1аас 5580

дада1сдада адддааддд1 1саасаас11 садаадаадс 11да1аддаа дадддс1ас1 5640

с11да11ддд даассссас1 1да1саас11 ссад1да1дд аа1ддда1да с1асд11дад 5700

саадс1аада асддаадддд ас11д11дс1 а1сдс1ддад 11д11сасда 1д11ассдас 5760

11са1саадд а1сасссадд аддаааддс1 а1да1с1с11 с1ддаа1сдд ааадда1дс1 5820

- 96 029904

ассдс!а!д! !саасддадд ад!д!ас!ас сас!с!аасд садс!сасаа сс!!с!!адс 5880

асса!даддд !дддад!да! саддддадда !дсдадд!!д ада!с!ддаа дадддс!сад 5940

ааддадаасд !!дад!асд! !аддда!дда !с!ддасааа ддд!да!сад ддс!ддадад 6000

саассаасса ада!сссада дссаа!ссса ассдс!да!д с!дс!!дад! ад!!адс!!а 6060

а!сасс!адд !сассад!а! даас!аааа! дса!д!адд! д!аададс! 6109

<210> 59

<211> 6136

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рОАВ7329

<400> 59

сдд!сасс!с дад!а!сааа а!с!а!!!ад ааа!асасаа !а!!!!д!!д саддс!!дс! 60

ддадаа!сда !с!дс!а!са !ааааа!!ас ааааааа!!! !а!!!дсс!с аа!!а!!!!а 120

дда!!дд!а! !ааддасдс! !ааа!!а!!! д!сддд!сас !асдса!са! !д!да!!дад 180

аада!садсд а!асдааа!а !!сд!ад!ас !а!сда!аа! !!а!!!дааа а!!са!аада 240

ааадсааасд !!аса!даа! !да!даааса а!асааадас ада!ааадсс асдсаса!!! 300

адда!а!!дд ссдада!!ас !даа!а!!да д!аада!сас ддаа!!!с!д асаддадса! 360

д!с!!саа!! садсссааа! ддсад!!даа а!ас!сааас сдсссса!а! дсаддадсдд 420

а!са!!са!! д!!!д!!!дд !!дсс!!!дс сааса!ддда д!ссаадд!! ддсдсдссда 480

сссадс!!!с !!д!асааад !!ддса!!а! аадааадса! !дс!!а!саа !!!д!!дсаа 540

сдаасадд!с ас!а!сад!с аааа!аааа! са!!а!!!дс са!ссадс!д а!а!сссс!а 600

!ад!дад!сд !а!!аса!дд !са!адс!д! !!сс!ддсад с!с!ддсссд !д!с!саааа 660

!с!с!да!д! !аса!!дсас аада!ааааа !а!а!са!са !даасаа!аа аас!д!с!дс 720

!!аса!ааас ад!аа!асаа дддд!д!!а! дадсса!а!! саасдддааа сд!сдаддсс 780

дсда!!ааа! !ссааса!дд а!дс!да!!! а!а!ддд!а! ааа!дддс!с дсда!аа!д! 840

сдддсаа!са дд!дсдасаа !с!а!сдс!! д!а!дддаад сссда!дсдс садад!!д!! 900

!с!даааса! ддсааадд!а дсд!!дссаа !да!д!!аса да!дада!дд !садас!ааа 960

с!ддс!дасд даа!!!а!дс с!с!!ссдас са!саадса! !!!а!ссд!а с!сс!да!да 1020

!дса!дд!!а с!сассас!д сда!ссссдд ааааасадса !!ссадд!а! !адаадаа!а 1080

!сс!да!!са дд!даааа!а !!д!!да!дс дс!ддсад!д !!сс!дсдсс дд!!дса!!с 1140

да!!сс!д!! !д!аа!!д!с с!!!!аасад сда!сдсд!а !!!сд!с!сд с!саддсдса 1200

а!сасдаа!д аа!аасдд!! !дд!!да!дс дад!да!!!! да!дасдадс д!аа!ддс!д 1260

- 97 029904

дсс!д!!даа саад!с!дда аадааа!дса !ааас!!!!д сса!!с!сас сдда!!сад! 1320

сд!сас!са! дд!да!!!с! сас!!да!аа сс!!а!!!!! дасдадддда аа!!аа!адд 1380

!!д!а!!да! д!!ддасдад !сддаа!сдс адассда!ас садда!с!!д сса!сс!а!д 1440

даас!дсс!с дд!дад!!!! с!сс!!са!! асадааасдд с!!!!!сааа аа!а!дд!а! 1500

!да!аа!сс! да!а!даа!а аа!!дсад!! !са!!!да!д с!сда!дад! !!!!с!аа!с 1560

адаа!!дд!! аа!!дд!!д! аасас!ддса дадса!!асд с!дас!!дас дддасддсдс 1620

аадс!са!да ссаааа!ссс !!аасд!дад !!асдсд!сд !!ссас!дад сд!садассс 1680

сд!адаааад а!сааадда! с!!с!!дада !сс!!!!!!! с!дсдсд!аа !с!дс!дс!! 1740

дсааасаааа ааассассдс !ассадсдд! дд!!!д!!!д ссдда!саад адс!ассаас 1800

!с!!!!!ссд аадд!аас!д дс!!садсад адсдсада!а ссааа!ас!д !сс!!с!ад! 1860

д!адссд!ад !!аддссасс ас!!саадаа с!с!д!адса ссдсс!аса! асс!сдс!с! 1920

дс!аа!сс!д !!ассад!дд с!дс!дссад !ддсда!аад !сд!д!с!!а ссддд!!дда 1980

с!саадасда !ад!!ассдд а!ааддсдса дсдд!сдддс !даасддддд д!!сд!дсас 2040

асадсссадс !!ддадсдаа сдасс!асас сдаас!дада !асс!асадс д!дадса!!д 2100

адааадсдсс асдс!!сссд аадддадааа ддсддасадд !а!ссдд!аа дсддсаддд! 2160

сддаасадда дадсдсасда дддадс!!сс адддддааас дсс!дд!а!с !!!а!ад!сс 2220

!д!сддд!!! сдссасс!с! дас!!дадсд !сда!!!!!д !да!дс!сд! саддддддсд 2280

дадсс!а!дд ааааасдсса дсаасдсддс с!!!!!асдд !!сс!ддсс! !!!дс!ддсс 2340

!!!!дс!сас а!д!!с!!!с с!дсд!!а!с ссс!да!!с! д!дда!аасс д!а!!ассдс 2400

с!!!дад!да дс!да!ассд с!сдссдсад ссдаасдасс дадсдсадсд ад!сад!дад 2460

сдаддаадсд даададсдсс саа!асдсаа ассдсс!с!с сссдсдсд!! ддссда!!са 2520

!!аа!дсадс !ддсасдаса дд!!!сссда с!ддааадсд ддсад!дадс дсаасдсаа! 2580

!аа!асдсд! ассдс!адсс аддаадад!! !д!адааасд саааааддсс а!ссд!садд 2640

а!ддсс!!с! дс!!ад!!!д а!дсс!ддса д!!!а!ддсд ддсд!сс!дс ссдссассс! 2700

ссдддссд!! дс!!сасаас д!!сааа!сс дс!сссддсд да!!!д!сс! ас!саддада 2760

дсд!!сассд асааасааса да!аааасда ааддсссад! с!!ссдас!д адсс!!!сд! 2820

!!!а!!!да! дсс!ддсад! !ссс!ас!с! сдсд!!аасд с!адса!дда !д!!!!ссса 2880

д!сасдасд! !д!аааасда сддссад!с! !аадс!сддд ссссааа!аа !да!!!!а!! 2940

!!дас!да!а д!дасс!д!! сд!!дсааса аа!!да!дад саа!дс!!!! !!а!аа!дсс 3000

аас!!!д!ас аааааадсад дс!ссдсддс сдсас!адд! !!ааас!с!а даадс!адда 3060

а!!сдсддсс дс!!!сс!дс а!даса!сд! сс!дсададс саадсдса!д сйаайааа 3120

- 98 029904

с1ад1с1ссс адПИсаНа 1ад1дааад1 Шддс1с1с 1сдссдд1дд ШШасс! 3180

с1а111ааад ддд1111сса сс1ааааа11 с1дд1а1са1 1с1сас111а с11д11ас11 3240

1аа111с1са 1аа1с111дд 11дааа11а1 сасдс11ссд сасасда1а1 ссс1асааа1 3300

11а11а111д 11аааса111 1сааассдса 1аааа1111а 1даад1сссд 1с1а1с111а 3360

а1д1ад1с1а аса1111са1 а11дааа1а1 а1аа111ас1 1аа1111адс д11дд1адаа 3420

адса1аа1да 111а11с11а 11с11с11са 1а1ааа1д11 1аа1а1асаа 1а1ааасааа 3480

11с111асс1 1аадаадда1 11ссса1111 а1а1111ааа аа1а1а111а 1сааа1а111 3540

11саассасд 1ааа1с1са1 аа1аа1аад1 1д111саааа д1аа1аааа1 11аас1сса1 3600

аа1111111а 11сдас1да1 с11ааадсаа сасссад1да сасаас1адс са1111111с 3660

111даа1ааа аааа1ссаа1 1а1са11д1а 11111111а1 асаа1даааа 111сассааа 3720

саа1да111д 1дд1а111с1 даадсаад1с а1д11а1дса ааа11с1а1а а11ссса111 3780

дасас1асдд аад1аас1да ада1с1дс11 11аса1дсда дасаса1с11 с1ааад1аа1 3840

111аа1аа1а д11ас1а1а1 1саада111с а1а1а1сааа 1ас1саа1а1 1ас11с1ааа 3900

ааа11аа11а да1а1аа11а ааа1а11ас1 11111аа111 1аад111аа1 1д11даа111 3960

д1дас1а11д а111а11а11 с1ас1а1д11 1ааа11д111 1а1ада1ад1 11ааад1ааа 4020

1а1аад1аа1 д1ад1адад1 д11адад1д1 1ассс1ааас са1ааас1а1 аада111а1д 4080

д1ддас1аа1 Шса1а1а1 йсйайдс ППассШ 1с11дд1а1д 1аад1ссд1а 4140

ас1ддаа11а с1д1ддд11д сса1дасас1 с1д1дд1с11 11дд11са1д са1дда1с11 4200

дсдсаадааа аадасааада асааадаааа аадасаааас адададасаа аасдсаа1са 4260

сасаассаас 1сааа11ад1 сас1ддс1да 1саада1сдс сдсд1сса1д 1а1д1с1ааа 4320

1дсса1дсаа адсаасасд1 дс11ааса1д сас111ааа1 ддс1сассса 1с1саассса 4380

сасасаааса са11дсс111 11с11са1са 1сассасаас сасс1д1а1а 1а11са11с1 4440

с11ссдссас с1саа111с1 1сас11саас асасд1саас с1дса1а1дс д1д1са1ссс 4500

а1дсссааа1 с1сса1дса1 д11ссаасса сс11с1с1с1 1а1а1аа1ас с1а1ааа1ас 4560

с1с1аа1а1с ас1сас11с1 11са1са1сс а1сса1ссад ад1ас1ас1а с1с1ас1ас1 4620

а1аа1асссс аасссаас1с а1а11саа1а с1ас1с1адд 1ассс1дсад дда1ссааса 4680

а1ддссадса д11с11саад 1д1дссадаа с11дссдсад с111ссс1да 1дддасаасд 4740

дас11сааас сса1даддаа сассаааддс 1а1да1д1с1 ссааасс1са са1с1с1даа 4800

асассда1да с111даадаа с1ддсасааа са1д1даас1 ддс1саасас саса11са11 4860

с1с111д11с сас1ддс1дд д11да1с1са асс1а11ддд 11сс1с11са а1ддаааас1 4920

дсад1д1ддд сад11д1д1а с1ас11саас ас1ддас11д дда1сас1дс 1ддс1асса1 4980

- 99 029904

ада11д1ддд саса11сс1с 11асааддсс адс11дсс1с 1саааа1с1а сс11дссдса 5040

дйдд1дс1д дадссдПда аддПсса1а ада1дд1дда дсаасддаса сададсаса1 5100

сасада1аса садасасада дааада1сс11ас1сад1да ддаадддай дс1с1асадс 5160

саса1ддд11 дда1дс1с11 даадсадаа1 ссааадаадс аадддаддас ддаса11ас1 5220

да1с1даа1д аддасссад1 1д1дд1с1дд сааса1адда ас111с1саа д1д1д1да1с 5280

11са1ддс11 1дд1с111сс сассс11д11 дс1ддсс1дд да1ддддада с1ас1дддда 5340

дд111са1с1 а1ддаддда1 с11дадад1д 11с111д11с адсаадссас с11с1д1д1с 5400

аас1сас11д саса11ддс1 1дд1да1саа ссд111да1д асадааас1с 1ссасд1дас 5460

са1д1са1аа с1дс1с11д1 сасдс1ддд1 дааддс1а1с асаас111са сса1дад111 5520

ссд1садас1 а1адааа1дс да11дад1дд 1а1сад1а1д ассссасдаа д1ддадса11 5580

1дда111дда адсаас11дд ас11дс1сас аа1с1саадс ад11садаса даа1дада1а 5640

дадаадддаа ддд11сааса д11дсадаад ааас1дда1с адаадададс дааас11да1 5700

1ддддаа1ас сд11ддааса ас1ссс1д11 д1д1с11ддд а1дас111д1 1даасад1са 5760

аадаа1ддса аддса1дда1 1дс1д11дс1 дд1д1са11с асда1д11дд 1дас11са1с 5820

аадда1са1с с1дд1ддасд 1дс1с1са1с аас1с1дсда 11ддсааада 1дссасадсд 5880

а1с11саа1д дадд1д1с1а саа1са11са аа1дссдсас асаасс11с1 с1ссасса1д 5940

аддд11дд1д 1сс1ссд1дд аддд1дсдаа д1ддада1а1 ддааасд1дс 1сааад1дад 6000

аасааада1д 1с1с1ас1д1 дд11да1ад1 1с1ддсаасс д1а11д1дад адс1дд1дда 6060

саадс1асса аад1ддПса дссад1ссс1 дд1дс1саад садсйда1д ад1адПадс 6120

11аа1сасс1 ададс1 6136

<210> 60

<211> 18713

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рОАВ7319

<400> 60

11д1асааад 1дд11дсддс сдс11аа11а аа111ааа11 саа11аа1дс аа1с11да11 60

йсаасаасд аадд1аа1дд сд1аааадаа аааа1д1а1д На11д1а11 да1сШса1 120

да1дйдаад сд1дсса1аа 1а1да1да1д ППааПааа а1аПаас1д 1сдсаШ1а 180

11дааа1ддс ас1д11а111 саасса1а1с 111да11с1д 11аса1даса сдас1дсаад 240

аад1ааа1аа 1адасдссд1 1д11ааадаа 11дс1а1са1 а1д1дсс1аа с1ададддаа 300

111дадсд1с адасс1аа1с ааа1а11аса ааа1а1с1са с1с1д1сдсс адсаа1дд1д 360

- 100 029904

1аа1садсдс адасааа1дд сд1ааада1с дсддааааас с1ссссдад1 ддса1да1ад 420

с1дсс1с1д1 а11дс1да11 1ад1садсс1 1а111дас11 ааддд1дссс 1сд11ад1да 480

сааа11дс11 1сааддадас адсса1дссс сасас111д1 1дааааасаа а11дсс111д 540

дддадасдд1 ааадссад11 дс1с11саа1 ааддаа1д1с даддаддсаа 1д1аассдсс 600

1с1дд1ад1а сас11с1с1а а1ссааааа1 саа111д1а1 1саада1асс дсаааааас1 660

1а1дд111аа ассс1дсадд ас1ад1ссад аадд1аа11а 1ссаада1д1 адса1саада 720

а1ссаа1д11 1асдддаааа ас1а1ддаад 1а11а1д1аа дс1садсаад аадсада1са 780

а1а1дсддса са1а1дсаас с1а1д11саа ааа1даадаа 1д1асада1а саада1сс1а 840

1ас1дссада а1асдаадаа даа1асд1ад ааа11даааа адаадаасса ддсдаадааа 900

адаа1с11да адасд1аадс ас1дасдаса асаа1даааа даадаада1а адд1сдд1да 960

Пд1дааада даса1ададд асаса1д1аа дд1ддаааа1 д1аадддсдд ааад1аасс1 1020

1а1сасааад даа1с11а1с ссссас1ас11а1ссШ1а 1аШ11ссд 1д1саПШ 1080

дсссПдад! Шсс1а1а1 ааддаассаа дИсддсаИ 1д1дааааса адааааааН 1140

1дд1д1аадс 1аШ1сШ даад1ас1да дда1асаас11сададааа1 Пд1аадШ 1200

д1адд1асса да1с1дда1с ссааасса1д Ыссддада ддадассад! 1дада11адд 1260

ссадс1асад садс1да1а1 ддссдсддИ 1д1да1а1сд йаассайа саПдадасд 1320

1с1асад1да асШаддас ададссасаа асассасаад ад1ддаПда 1да1с1адад 1380

адд11дсаад а1ада1ассс йддйддй дс1дадд11д аддддйд ддс1дд1а11 1440

дсПасдс1д ддссс1ддаа ддсЫддаас дсПасдаП ддасадПда дад1ас1дП 1500

1асд1д1сас а1аддса1са ааддПдддс с1адда1с1а саПд1асас асаШдсП 1560

аад1с1а1дд аддсдсаадд ППаад1с1 д1ддПдс1д Па1аддсс11ссааасда1 1620

сса1с1дПа ддПдса1да ддсШддда (асасадссс ддддШсаП дсдсдсадс! 1680

дда1асаадс а1дд1дда1д дса1да1д11 ддйЮддс аааддда1111дад11дсса 1740

дс1сс1ссаа ддссадПад дссадйасс саааЫдад !адйадсй аа1сасс1ад 1800

адс1сда1сд дсддсаа1ад сНсПадсд сса1сссддд Пда1сс1а1 с1д1дНдаа 1860

аШдПдсдд (дддсааддс 1с1сШсад ааадасаддс ддссааадда асссаадд1д 1920

адд1дддс1а 1ддс1с1сад 11сс11д1дд аадсдс11дд 1с1аадд1дс ададд1д11а 1980

дсддда1даа дсаааад1д1 ссда11д1аа саада1а1д1 1да1сс1асд 1аадда1а11 2040

ааад1а1д1а Нса1сас1а а1а1аа1сад 1д1аПссаа 1а1д1ас1ас даШссаа! 2100

дШШаНд 1сдссд1а1д 1аа1сддсд1 сасаааа1аа 1ссссдд1да сШсййа 2160

а1ссадда1д ааа1аа1а1д 11а11а1аа1 1111дсда11 1дд1ссд11а 1аддаа11да 2220

- 101 029904

ад!д!дс!!д адд!сдд!сд ссассас!сс са!!!са!аа !!!!аса!д! а!!!дааааа 2280

!ааааа!!!а !дд!а!!саа !!!ааасасд !а!ас!!д!а аадаа!да!а !с!!дааада 2340

аа!а!ад!!! ааа!а!!!а! !да!аааа!а асаад!садд !а!!а!ад!с саадсааааа 2400

са!ааа!!!а !!да!дсаад !!!ааа!!са дааа!а!!!с аа!аас!да! !а!а!садс! 2460

дд!аса!!дс сд!ада!даа адас!дад!д сда!а!!а!д д!д!аа!аса !аддаа!!сд 2520

!!!ааасда! с!дсд!с!аа !!!!сдд!сс аас!!дсаса ддааадасд! сдассдсдд! 2580

адс!с!!дсс садсадас!д ддс!!ссад! сс!!!сдс!с да!сддд!сс аа!д!!д!сс 2640

!садс!д!да ассддаадсд дасдассаас ад!ддаадаа с!даааддаа сдадссд!с! 2700

а!асс!!да! да!сддсс!с !дд!дааддд !а!са!сдса дссаадсаад с!са!дааад 2760

дс!да!дддд дадд!д!а!а а!!а!даддс ссасддсддд с!!а!!с!!! адддадда!с 2820

!а!с!сд!!д с!саад!дса !ддсдсааад сад!!а!!дд ад!дсдда!! !!сд!!ддса 2880

!а!!а!!сдс сасдад!!ад садасдаада дасс!!са!д аасд!ддсса аддссадад! 2940

!аадсада!д !!асдссс!д с!дсаддсс! !!с!а!!а!с саа!ад!!дд !!да!с!!!д 3000

дааададсс! сддс!даддс сса!ас!даа адада!сда! дда!а!сда! а!дсса!д!! 3060

д!!!дс!адс садаассада !саса!ссда !а!дс!а!!д садс!!дасд сада!а!дда 3120

дда!аад!!д а!!са!ддда !сдс!садда д!адс!са!с са!дсасдсс дасаадааса 3180

дааайссд! сдадйаасд садссдсйа сдасдда!!с даадд!са!с сайсддаа! 3240

д!а!!ад!й дсассадс!с сдсд!сасас с!д!с!!са! йдаа!аада !дйадсаа! 3300

!д!ййадс !йд!с!!д! !д!ддсаддд сддсаад!дс !!садаса!с айс!д!й! 3360

сааа!!!!а! дс!ддадаас адс!!с!!аа !!сс!!!дда аа!аа!адас !дсд!с!!аа 3420

аа!!сада!д !с!дда!а!а да!а!да!!д !аааа!аасс !а!!!аад!д !са!!!адаа 3480

са!аад!й! а!даа!дйс !!ссай!!с д!са!сдаас даа!аадад! ааа!асасс! 3540

!ййааса! !асааа!аад !!сйа!асд !!д1йа!ас ассдддаа!с а!йссайа 3600

!!!!сдсдса ааад!сасдд а!а!!сд!да аадсдаса!а аас!дсдааа !!!дсдддда 3660

д!д!с!!дад !!!дсс!сда ддс!адсдса !дсаса!ада сасасаса!с а!с!са!!да 3720

!дс!!дд!аа !аа!!д!са! !ада!!д!!! !!а!дса!ад а!дсас!сда аа!садссаа 3780

ййадасаа д!а!сааасд да!д!дасй сад!асайа аааасд!ссд саа!д!дйа 3840

!!аадйд1с !аадсд!саа !йда!йас аа!!даа!а! а!сс!дсссс адссадссаа 3900

садс!сда!! !асаа!!даа 1а!а!сс!дс сддссддссс асдсд!д!сд аддаайс!д 3960

а!с!ддсссс са!!!ддасд !даа!д!ада сасд!сдааа !ааада!!!с сдаа!!адаа 4020

!аа!!!д!!! а!!дс!!!сд сс!а!ааа!а сдасдда!сд !аа!!!д!сд !!!!а!сааа 4080

- 102 029904

а!д!ас!!!с а!!!!а!аа! аасдс!дсдд аса!с!аса! !!!!даа!!д аааааааа!! 4140

дд!аа!!ас! с!!!с!!!!! с!сса!а!!д асса!са!ас !са!!дс!да !сса!д!ада 4200

!!!сссддас а!даадсса! !!асаа!!да а!а!а!сс!д ссдссдс!дс сдс!!!дсас 4260

ссдд!ддадс !!дса!д!!д д!!!с!асдс адаас!дадс сдд!!аддса да!аа!!!сс 4320

а!!дадаас! дадсса!д!д сасс!!сссс ссаасасдд! дадсдасддд дсаасддад! 4380

да!ссаса!д ддас!!!!аа аса!са!ссд !сдда!ддсд !!дсдадада адсад!сда! 4440

ссд!дада!с адссдасдса ссдддсаддс дсдсаасасд а!сдсааад! а!!!даасдс 4500

адд!асаа!с дадссдасд! !сасдсддаа сдассаадса адс!!ддс!д сса!!!!!дд 4560

дд!даддссд !!сдсддссд аддддсдсад сссс!ддддд да!дддаддс ссдсд!!адс 4620

дддссдддад дд!!сдадаа дддддддсас ссссс!!сдд сд!дсдсдд! сасдсдсаса 4680

дддсдсадсс с!дд!!аааа асаадд!!!а !ааа!а!!дд !!!аааадса дд!!аааада 4740

садд!!адсд д!ддссдааа аасдддсдда аассс!!дса аа!дс!дда! !!!с!дсс!д 4800

!ддасадссс с!сааа!д!с аа!адд!дсд сссс!са!с! д!садсас!с !дсссс!саа 4860

д!д!саадда !сдсдсссс! са!с!д!сад !ад!сдсдсс сс!саад!д! саа!ассдса 4920

дддсас!!а! ссссаддс!! д!ссаса!са !с!д!дддаа ас!сдсд!аа аа!саддсд! 4980

!!!сдссда! !!дсдаддс! ддссадс!сс асд!сдссдд ссдааа!сда дсс!дсссс! 5040

са!с!д!саа сдссдсдссд дд!дад!сдд сссс!саад! д!саасд!сс дсссс!са!с 5100

!д!сад!дад ддссаад!!! !ссдсдадд! а!ссасаасд ссддсддссд сдд!д!с!сд 5160

сасасддс!! сдасддсд!! !с!ддсдсд! !!дсадддсс а!адасддсс дссадсссад 5220

сддсдадддс аассадсссд д!дадсд!сд даааддд!сд асдда!с!!! !ссдс!дса! 5280

аассс!дс!! сдддд!сай а!адсда!!! Й!сдд1а1а !сса!сс!!! !!сдсасда! 5340

а!асадда!! !!дссааадд д!!сд!д!ад ас!!!сс!!д д!д!а!ссаа сддсд!садс 5400

сдддсадда! адд!даад!а ддсссасссд сдадсддд!д !!сс!!с!!с ас!д!ссс!! 5460

а!!сдсасс! ддсдд!дс!с аасдддаа!с с!дс!с!дсд аддс!ддссд дс!ассдссд 5520

дсд!аасада !дадддсаад сдда!ддс!д а!дааассаа дссаассадд аадддсадсс 5580

сасс!а!саа дд!д!ас!дс с!!ссадасд аасдаададс да!!даддаа ааддсддсдд 5640

сддссддса! дадсс!д!сд дсс!асс!дс !ддссд!сдд ссадддс!ас аааа!сасдд 5700

дсд!сд!дда с!а!дадсас д!ссдсдадс !ддсссдса! саа!ддсдас с!дддссдсс 5760

!дддсддсс! дс!дааас!с !ддс!сассд асдасссдсд сасддсдсдд !!сдд!да!д 5820

ссасда!сс! сдссс!дс!д дсдаада!сд аададаадса ддасдадс!! ддсаадд!са 5880

!да!дддсд! дд!ссдсссд адддсададс са!дас!!!! !!адссдс!а ааасддссдд 5940

- 103 029904

дддд1дсдсд 1да11дссаа дсасд1сссс а1дсдс1сса 1саадаадад сдас11сдсд 6000

дадс1дд1а1 1сд1дсаддд саада11сдд аа1ассаад1 асдадаадда сддссадасд 6060

д1с1асддда ссдасПса! 1дссда1аад д1дда11а1с (ддасассаа ддсассаддс 6120

дддйааай аддаа1аадд дсасаПдсс ссддсд1дад 1сддддсаа1 сссдсаадда 6180

ддд1даа1да а1сддасд11 1дассддаад дса1асаддс аадаас1да1 сдасдсдддд 6240

1111ссдссд адда1дссда аасса1сдса адссдсассд 1са1дсд1дс дссссдсдаа 6300

асс11ссад1 ссд1сддс1с да1дд1ссад саадс1асдд ссаада1сда дсдсдасадс 6360

д1дсаас1дд с1ссссс1дс сс1дсссдсд сса1сддссд ссд1ддадсд 11сдсд1сд1 6420

с1сдаасадд аддсддсадд 111ддсдаад 1сда1дасса 1сдасасдсд аддаас1а1д 6480

асдассаада адсдааааас сдссддсдад дасс1ддсаа аасадд1сад сдаддссаад 6540

саддссдсд1 1дс1даааса сасдаадсад сада1саадд ааа1дсадс1 11сс11д11с 6600

да1а11дсдс сд1ддссдда сасда1дсда дсда1дссаа асдасасддс ссдс1с1дсс 6660

с1д11сасса сдсдсаасаа даааа1сссд сдсдаддсдс 1дсаааасаа дд1са1111с 6720

сасд1сааса аддасд1даа да1сасс1ас ассддсд1сд адс1дсдддс сдасда1дас 6780

даас1дд1д1 ддсадсадд1 д11ддад1ас дсдаадсдса сссс1а1сдд сдадссда1с 6840

асс11сасд1 1с1асдадс1 11дссаддас с1дддс1дд1 сда1саа1дд ссдд1а11ас 6900

асдааддссд аддаа1дсс1 д1сдсдсс1а саддсдасдд сда1дддс11 сасд1ссдас 6960

сдсд11дддс асс1ддаа1с дд1д1сдс1д с1дсассдс1 1ссдсд1сс1 ддассд1ддс 7020

аадаааасд1 сссд11дсса дд1сс1да1с дасдаддааа 1сд1сд1дс1 д111дс1ддс 7080

дассасШса сдаааПса! а1дддадаад Шссдсаадс 1д1сдссдас ддсссдасдд 7140

а1д11сдас1 а111садс1с дсассдддад ссд1асссдс 1саадс1дда аасс11ссдс 7200

с1са1д1дсд да1сдда11с сасссдсд1д аадаад1ддс дсдадсадд1 сддсдаадсс 7260

1дсдаадад11дсдаддсад сддсс1дд1д даасасдсс1 ддд1саа1да 1дасс1дд1д 7320

са11дсааас дс1адддсс1 1д1дддд1са д11ссддс1д дддд11садс адссадсдс1 7380

11ас1ддса1 11саддааса адсдддсас1 дс1сдасдса с11дс11сдс 1сад1а1сдс 7440

1сдддасдса сддсдсдс1с 1асдаас1дс сда1ааасад адда11аааа 11дасаа11д 7500

1да11ааддс 1сада11сда сддс11ддад сддссдасд1 дсадда111с сдсдада1сс 7560

да11д1сддс сс1даадааа дс1ссадада 1д11сддд1с сд111асдад сасдаддада 7620

аааадссса1 ддаддсд11с дс1даасдд1 1дсдада1дс сд1ддса11с ддсдсс1аса 7680

1сдасддсда да1са11ддд с1д1сдд1с1 1сааасадда ддасддсссс ааддасдс1с 7740

асааддсдса 1с1д1ссддс д1111сд1дд адсссдааса дсдаддссда дддд1сдссд 7800

- 104 029904

д!а!дс!дс! дсдддсд!!д ссддсддд!! !а!!дс!сд! да!да!сд!с сдасада!!с 7860

саасдддаа! с!дд!дда!д сдса!с!!са !сс!сддсдс ас!!аа!а!! !сдс!а!!с! 7920

ддадс!!д!! д!!!а!!!сд д!с!ассдсс !дссдддсдд дд!сдсддсд асдд!аддсд 7980

с!д!дсадсс дс!да!дд!с д!д!!са!с! с!дссдс!с! дс!адд!адс ссда!асда! 8040

!да!ддсдд! сс!дддддс! ай!дсддаа с!дсдддсд! ддсдс!дйд д!д!!дасас 8100

сааасдсадс дс!ада!сс! д!сддсд!сд садсдддсс! ддсдддддсд д!йсса!дд 8160

сд!!сддаас сд!дс!дасс сдсаад!ддс аасс!сссд! дсс!с!дс!с асс!!!ассд 8220

сс!ддсаас! ддсддссдда ддас!!с!дс !сд!!ссад! адс!!!ад!д !!!да!ссдс 8280

саа!сссда! дсс!асадда ассаа!д!!с !сддсс!ддс д!ддс!сддс с!да!сддад 8340

сддд!!!аас с!ас!!сс!! !дд!!ссддд дда!с!сдсд ас!сдаасс! асад!!д!!! 8400

сс!!ас!ддд с!!!с!садс ссссдадсдс !!ад!дддаа !!!д!асссс !!а!сдаасс 8460

дддадсасад да!дасдсс! аасаа!!са! !саадссдас ассдс!!сдс ддсдсддс!! 8520

аа!!саддад !!аааса!са !дадддаадс дд!да!сдсс даад!а!сда с!саас!а!с 8580

ададд!ад!! ддсд!са!сд адсдсса!с! сдаассдасд !!дс!ддссд !аса!!!д!а 8640

сддс!ссдса д!дда!ддсд дсс!даадсс асасад!да! а!!да!!!дс !дд!!асдд! 8700

дассд!аадд с!!да!дааа саасдсддсд адс!!!да!с аасдасс!!! !ддааас!!с 8760

ддс!!сссс! ддадададсд ада!!с!ссд сдс!д!адаа д!сасса!!д !!д!дсасда 8820

сдаса!са!! ссд!ддсд!! а!ссадс!аа дсдсдаас!д саа!!!ддад аа!ддсадсд 8880

саа!даса!! с!!дсадд!а !с!!сдадсс адссасда!с даса!!да!с !ддс!а!с!! 8940

дс!дасаааа дсаададаас а!адсд!!дс с!!дд!адд! ссадсддсдд аддаас!с!! 9000

!да!ссдд!! сс!даасадд а!с!а!!!да ддсдс!ааа! дааасс!!аа сдс!а!ддаа 9060

с!сдссдссс дас!дддс!д дсда!дадсд ааа!д!ад!д с!!асд!!д! сссдса!!!д 9120

д!асадсдса д!аассддса ааа!сдсдсс даадда!д!с дс!дссдас! дддсаа!дда 9180

дсдсс!дссд дсссад!а!с адсссд!са! ас!!даадс! аддсаддс!! а!с!!ддаса 9240

адаада!сдс !!ддсс!сдс дсдсада!са д!!ддаадаа й!дйсас! асд!дааадд 9300

сдада!сасс аадд!ад!сд дсааа!аа!д !с!аасаа!! сд!!саадсс дасдссдс!! 9360

сдсддсдсдд с!!аас!саа дсд!!адада дс!ддддаад ас!а!дсдсд а!с!д!!даа 9420

дд!дд!!с!а адсс!сд!с! !дсда!ддса !!!сда!сса !!ссса!!сс дсдс!саада 9480

!ддс!!сссс !сддсад!!с а!садддс!а аа!саа!с!а дссдас!!д! ссдд!дааа! 9540

дддс!дсас! ссаасадааа саа!саааса ааса!асаса дсдас!!а!! сасасдадс! 9600

сааа!!асаа сдд!а!а!а! сс!дссад!с адса!са!са сассаааад! !аддсссдаа 9660

- 105 029904

!ад!!!дааа !!адааадс! сдсаа!!дад д!с!асаддс сааа!!сдс! с!!адссд!а 9720

саа!а!!ас! сассдда!сс !аассдд!д! да!са!дддс сдсда!!ааа аа!с!саа!! 9780

а!а!!!дд!с !аа!!!ад!! !дд!а!!дад !аааасааа! !сдаассааа ссаааа!а!а 9840

аа!а!а!ад! !!!!а!а!а! а!дсс!!!аа дас!!!!!а! адаа!!!!с! !!аааааа!а 9900

!с!адааа!а !!!дсдас!с !!с!ддса!д !аа!а!!!сд !!ааа!а!да ад!дс!сса! 9960

!!!!а!!аас !!!ааа!аа! !дд!!д!асд а!сас!!!с! !а!саад!д! !ас!аааа!д 10020

сд!саа!с!с !!!д!!с!!с са!а!!са!а !д!саааасс !а!саааа!! с!!а!а!а!с 10080

!!!!!сдаа! !!даад!даа а!!!сда!аа !!!аааа!!а аа!адааса! а!са!!а!!! 10140

адд!а!са!а !!да!!!!!а !ас!!аа!!а с!ааа!!!дд !!аас!!!да аад!д!аса! 10200

саасдааааа !!ад!сааас дас!аааа!а аа!ааа!а!с а!д!д!!а!! аадаааа!!с 10260

!сс!а!аада а!а!!!!аа! ада!са!а!д !!!д!ааааа ааа!!аа!!! !!ас!аасас 10320

а!а!а!!!ас !!а!сааааа !!!дасааад !аада!!ааа а!аа!а!!са !с!аасаааа 10380

аааааассад аааа!дс!да ааасссддса ааассдаасс аа!ссааасс да!а!ад!!д 10440

д!!!дд!!!д а!!!!да!а! ааассдаасс аас!сдд!сс а!!!дсассс с!аа!са!аа 10500

!адс!!!аа! а!!!саада! а!!а!!аад! !аасд!!д!с аа!а!сс!дд ааа!!!!дса 10560

ааа!даа!са адсс!а!а!д дс!д!аа!а! даа!!!аааа дсадс!сда! д!дд!дд!аа 10620

!а!д!аа!!! ас!!да!!с! ааааааа!а! сссаад!а!! аа!аа!!!с! дс!аддаада 10680

адд!!адс!а сда!!!асад сааадссада а!асаа!даа сса!ааад!д а!!даадс!с 10740

дааа!а!асд ааддаасааа !а!!!!!ааа аааа!асдса а!дас!!дда асаааадааа 10800

д!да!а!а!! !!!!д!!с!! ааасаадса! сссс!с!ааа даа!ддсад! !!!сс!!!дс 10860

а!д!аас!а! !а!дс!ссс! !сд!!асааа аа!!!!ддас !ас!а!!ддд аас!!с!!с! 10920

даааа!ад!д дссассдс!! аа!!ааддсд сдсса!дссс дддсаадсдд ссдсасаад! 10980

!!д!асаааа аадсаддс!с сдсддссдса с!адд!!!аа ас!с!адаад с!аддаа!!с 11040

ааасааадаа дсда!сдсдс ддссдсса!! д!ас!сссад !а!са!!а!а д!дааад!!! 11100

!ддс!с!с!с дссдд!дд!! !!!!асс!с! а!!!аааддд д!!!!ссасс !ааааа!!с! 11160

дд!а!са!!с !сас!!!ас! !д!!ас!!!а а!!!с!са!а а!с!!!дд!! дааа!!а!са 11220

сдс!!ссдса сасда!а!сс с!асааа!!! а!!а!!!д!! аааса!!!!с ааассдса!а 11280

ааа!!!!а!д аад!сссд!с !а!с!!!аа! д!ад!с!аас а!!!!са!а! !дааа!а!а! 11340

аа!!!ас!!а а!!!!адсд! !дд!адааад са!аа!да!! !а!!с!!а!! с!!с!!са!а 11400

!ааа!д!!!а а!а!асаа!а !ааасааа!! с!!!асс!!а адаадда!!! ссса!!!!а! 11460

а!!!!ааааа !а!а!!!а!с ааа!а!!!!! саассасд!а аа!с!са!аа !аа!аад!!д 11520

- 106 029904

1йсаааа§1 аа!аааай1 аас!сса!аа 1йййай сдас!да!с! !ааадсааса 11580

сссад!даса саас!адсса 1йййсй !даа!ааааа аа!ссаайа 1сайд1ай 11640

йййа!ас аа!даааай !сассаааса а!дай!д1д §1ай1с1да адсаад!са! 11700

дйа!дсааа айс!а1аа! 1ссса1йда сас!асддаа д!аас!даад а!с!дсйй 11760

аса!дсдада саса!сйс! ааад1аай! 1аа1аа1ад1 1ас1а1айс аадаШса! 11820

а!а1сааа!а с!саа!айа сйс!ааааа айаайада 1а1аайааа а1айасй! 11880

Шааййа адШаайд йдаа1йд! дас!айда! йайайс! ас!а1д1йа 11940

аайдййа 1ада1ад1й ааад!ааа!а 1аад1аа1д1 ад!адад!д! 1адад1дйа 12000

ссс!ааасса 1ааас1а1аа да1йа1дд! ддас1аай! 1са1а1а1й сйайдсй 12060

йассййс йдд!а1д1а ад!ссд!аас 1ддаайас1 д!дддйдсс а!дасас!с! 12120

§1дд1сйй ддйса!дса 1дда1дсйд сдсаадаааа адасааадаа сааадааааа 12180

адасааааса дададасааа асдсаа!сас асаассаас! сааайад!с ас!ддс!да! 12240

саада!сдсс дсд!сса!д! а1д1с1ааа! дсса!дсааа дсаасасд!д сйааса!дс 12300

асй!ааа1д дс!сассса! с!саасссас асасааасас айдссйй 1сйса1са1 12360

сассасаасс асс!д1а1а! айсайс!с йссдссасс 1саай1сй сасйсааса 12420

сасд!саасс 1дса1а1дсд !д!са!ссса !дсссааа!с !сса!дса!д йссаассас 12480

сйс!с!сй а!а1аа1асс 1а1ааа1асс 1с1аа1а1са с!сасйсй !са!са!сса 12540

!сса!ссада д!ас!ас1ас 1с1ас1ас1а !аа!асссса асссаас!са 1айсаа1ас 12600

1ас1с1адда !ссаасаа!д !с!дс!ссаа ссдс!даса! садддс!адд дс!ссададд 12660

с!аадаадд! !саса!сдс! да!ассдс!а !саасаддса саайдд!ас аадсасд!да 12720

ас!ддс!саа сд!сйсс!с а!са!сддаа !сссас!с!а сдда!дса!с саадсШс! 12780

дддйссас! !саас!саад ассдс!а!с! дддс!д!да! с!ас!асйс йсассддас 12840

йддаа!сас сдс!дда!ас сасаддсй! дддс!сас!д с!са1ас1с! дс!ас!сйс 12900

сасйадда! с!ддсйдс! дс!дйддад даддадс!д! !даддда!с! а!сада!дд! 12960

дддс!аддда !сасадддс! са!са1адд! асассда!ас сдасааддас сса!ас!с!д 13020

йаддааддд асйс!с!ас 1с1сассйд да!дда!дд! да!даадсад аасссааада 13080

дда!сддаад дассдаса!с 1с1да1с1са асдаддассс адйдйдй !ддсаасаса 13140

ддаас!асс! сааддйд!д йсасса!дд дасйдс!д! 1ссаа1дсй дйдс!ддас 13200

йдда!дддд адайддсй ддаддайсд !д!асдс!дд аа!ссйадд а!сйсйсд 13260

йсаасаадс 1ассйс1дс д!даас!с!с йдс!сас!д дсйддада! саассайсд 13320

а!да!аддаа с!с!сс!адд да!сасд!да !сассдс!с! 1дйасссй ддададдда! 13380

- 107 029904

ассасаас11 ссассасдад 11ссса1с1д ас1асаддаа сдс1а1сдад 1ддсассад1 13440

асда!сс!ас саадХддХс! а!с!дддсй ддаадсаас! {ддаПддс! {асдаШса 13500

адаадйсад ддс!аасдад а!сдадаадд даадддйса асаасйсад аадаадсйд 13560

а!аддаадад ддс!ас!сй дайддддаа ссссасйда 1саас11сса д!да1ддаа1: 13620

ддда!дас!а сдйдадсаа дс!аадаасд дааддддас! 1дйдс1:а1:с дс!ддадйд 13680

йсасда!д! !ассдасйс а!саадда!с асссаддадд аааддс!а!д а1с1с11с1д 13740

даа!сддааа дда!дс1асс дс1а!дйса асддаддад! д1ас!ассас 1с1аасдсад 13800

с1сасаасс1 !сйадсасс а!даддд!дд дад!да!сад дддадда!дс даддйдада 13860

!с!ддаадад ддс!садаад дадаасдйд ад!асдйад дда!дда!с! ддасаааддд 13920

!да!садддс 1ддададсаа ссаассаада !сссададсс аа1сссаасс дс!да!дс!д 13980

с11дад1ад1 1адс11аа1с асс1адд1са ссад1а1даа с1аааа1дса 1д1адд1д1а 14040

ададс1са1д дададса1дд аа1а11д1а1 ссдасса1д1 аасад1а1аа 1аас1дадс1 14100

сса1с1сас1 1с11с1а1да а1ааасааад да1д11а1да 1а1а11ааса с1с1а1с1а1 14160

дсасс11а11 д11с1а1да1 ааа111сс1с 11а11а11а1 ааа1са1с1д аа1сд1дасд 14220

дс11а1ддаа 1дс11сааа1 ад1асааааа сааа1д1д1а с1а1аадас1 11с1ааасаа 14280

11с1аас111 адсайд!да асдадаса1а ад!дйаада адаса!ааса айа1аа!дд 14340

аадаад111д 1с1сса111а 1а1а11а1а1 а11асссас1 1а1д1а11а1 а11адда1д1 14400

1ааддадаса 1аасаа11а1 ааадададаа д111д1а1сс а111а1а1а1 1а1а1ас1ас 14460

сса111а1а1 а11а1ас11а 1ссас11а11 1аа1д1с111 а1аадд111д а1сса1да1а 14520

1йс1аа1:а1: Шадйда! а!д1а1:а1:да ааадд!ас1а 111даас1с1 с11ас1с1д1 14580

а1ааадд11д да1са1сс11 ааад1ддд1с 1а111аа111 1а11дс11с1 1асада1ааа 14640

ааааааа11а 1дад11дд11 1да1аааа1а 11даадда11 1аааа1аа1а а1ааа1аа1а 14700

аа1ааса1а1 аа1а1а1д1а 1а1ааа111а 11а1аа1а1а аса111а1с1 а1аааааад1 14760

ааа1а11д1с а1ааа1с1а1 асаа1сд111 адсс11дс1д даасдаа1с1 саа11а111а 14820

аасдадад1а ааса1а111д ас11111дд1 1а111аасаа а11а11а111 аасас1а1а1 14880

дааа111111 111111а1са дсааадаа1а ааа11ааа11 аадааддаса а1дд1д1ссс 14940

аа1сс11а1а саассаасй ссасаадааа д!саад!сад адасаасааа аааасаадса 15000

ааддааай! ШааШда дйдХсйд! йдс!дса1а аШШдсад 1аааасас1а 15060

саса1аассс ййадсад! ададсаа!дд йдассд!д! дсйадсйс ййаййа 15120

1й1111а1с адсааадаа! ааа1аааа1а ааа1дадаса сйсаддда! дШсаассс 15180

11а1асаааа ссссааааас аад111сс1а дсассс1асс аасдаа11сд сддссдс111 15240

- 108 029904

сс1дса1дас а1сд1сс1дс ададссаадс дсйдсйаа Пааас1ад1 с1сссад1а1 15300

са11а1ад1д ааадППдд с1с1с1сдсс дд1ддПП1 1асс1с1аП(аааддддП 15360

йссассйаа аааПс1дд1 а1саПс1са сШасПд! 1асП1ааП1с1са1аа1с 15420

ШддПдаа аШПсасдс Пссдсасас да1а1ссс1а саааШаП аШдПааа 15480

саййсааа ссдсайаааа йИйдаад 1сссд1с1а1 сП1аа1д1а дШаасаН 15540

йсаййда айаПйаа! йасйаай йадсдйдд 1адааадса1 аа1даШа1 15600

йсйайсй сйсаПйаа а1дП1аа1а 1аса;й;йаа асааайсй (ассйаада 15660

аддаШссс аййайай НаааааПй аййайсааа 1аШИсаа ссасд1аа;й 15720

с1с;йаа1аа 1аадПдШ саааадйаай ааааШаас 1сса1а;йИ ййайсда 15780

с1д;йсйаа адсаасассс адйдасасаа с1адссаШ ййсййда айааааааай 15840

ссаайайса йдаййй Ш;йаса;й дааааййса ссааасаайд аШд1дд1а 15900

Шс1даадс аад1са1дП айдсаааай сПйаайсс саШдасас 1асддаад1а 15960

асйдаадайс йдсййййаса йдсдадасас айсййсйааа дйааййййаа йаайадййас 16020

йайаййсаад айййсайайа йсааайасйс аайаййасйй сйаааааайй ааййадайай 16080

аайаааайа йасййй ааййаад! йаайдйд ааШд1дас 1айдаШа 16140

йайсйсй а1дШаа;й 1дйИа1ад ШадШааа дйааайайаа д1аа1д1ад1 16200

адад1дйад ад1дйассс 1ааасса1аа асПйаада! Па1дд1дда сйааййса 16260

ПйаШсй айдсййа ссййсйд дПйд1аад1 ссд1аас1дд аайас1д1д 16320

ддйдссйд асас1с1д1д д1сШ1дд11с;йдс;йдд айНдсдса адааааадас 16380

ааадаасааа даааааадас аааасадада дасаааасдс аайсасасаа ссаасйсааа 16440

ййадйсасйд дсйдайсаад айсдссдсдй ссайдйайдй сйааайдсса йдсааадсаа 16500

сасд1дсПа асайдсасй 1ааа1ддс1с асссайсйса асссасасас ааасасаПд 16560

ссйййййсйй сайсайсасс асаассассй дйайайаййс аййсйсййсс дссассйсаа 16620

Шсйсасй йсаасасасд 1саасс1дса 1а1дсд1д1с айсссайдсс сааайсйсса 16680

йдсайдййсс аассассййс йсйсййайай аайассйайа аайассйсйа айайсасйса 16740

сййсйййсай сайссайсса йссададйас йасйасйсйа сйасйайаай ассссаассс 16800

аасйсайайй саайасйасй сйаддйассс йдсадддайс саасаайддс йдсасййдай 16860

адсайсссйд аддасааадс аасйадсйсс аадйсаассс асайасадйа ссаададдйс 16920

асдШадда ас1дд1асаа даааайсаас 1ддс1сааса сдасссПд! 1д1сс1саП 16980

ссйдсйсййд ддййдйасйй дасдадаасс асассйсйса ссадассйас ссйсайййдд 17040

йсйдййсйсй асйайййсйд йасадсдййй ддсайсасйд дйддсйасса садасйййдд 17100

- 109 029904

!ссса!адд! с!!асад!дс дадд!!дсса !!дадас!с! !сс!ддс!!! сас!ддадс! 17160

дд!дсда!сс аадд!!с!дс аада!дд!дд !садссаа!с а!адддсаса !сассд!!дд 17220

асддасасса !дааддассс с!ас!с!д!д а!дададдас !дс!д!!с!с ссаса!адд! 17280

!дда!дд!!с !саас!с!да !ссааадд!с аааддсадаа сада!д!!!с !да!с!!дас 17340

!с!да!сссд !сд!!д!д!д дсаасасааа сас!а!ддса ад!д!!!дс! с!!!дссдс! 17400

!дда!с!!!с сда!да!ад! ддс!дддс!д дд!!ддддад а!!дд!дддд !ддас!!д!с 17460

!а!дс!ддса !са!асд!дс с!дс!!!д!! садсаадсса с!!!с!д!д! саас!са!!д 17520

дсаса!!дда !адд!дааса ассд!!!да! дасадасд!а с!ссааддда !са!д!!с!д 17580

ас!дсд!!дд !сасаа!ддд адаадда!ас сасаас!!сс асса!дад!! !ссдад!дас 17640

!асадааа!д сса!са!!!д д!а!сад!а! дассс!асаа ад!ддс!са! с!а!с!с!!с 17700

адс!!ддд!с сс!!ссса!! ддсс!ас!с! с!саадасс! !ссд!!ссаа !дада!!дад 17760

аааддааддс !!садсааса дсааааддс! с!!дасаада ааадаад!дд !с!!да!!дд 17820

ддас!!сс!с !с!!ссадс! !ссад!да!с !са!ддда!д ас!!!саадс !сд!!дсааа 17880

дааад!ддад ада!дс!!д! !дс!д!!дс! ддад!да!сс а!да!д!с!с ссад!!са!! 17940

даада!са!с с!дд!дддад дадсс!са!! адаад!дс!д !!дддааада !дддас!ддс 18000

а!д!!саа!д д!ддад!д!а !дааса!!са аасдссдсас асаас!!дс! дадсасаа!д 18060

адад!!ддад !с!!дададд !ддасаадаа д!ддадд!й ддаадаааса даддд!дда! 18120

д!!с!!ддда ад!садаса! !с!!сд!саа д!дасааддд !ддадсд!с! дд!ддаадда 18180

дс!д!!дсад сд!да!дад! ад!!адс!!а а!сасс!ада дс!сдд!сас с!сдад!а!с 18240

аааа!с!а!! !адааа!аса саа!а!!!!д !!дсаддс!! дс!ддадаа! сда!с!дс!а 18300

!са!ааааа! !асааааааа !!!!а!!!дс с!саа!!а!! !!адда!!дд !а!!ааддас 18360

дс!!ааа!!а !!!д!сддд! сас!асдса! са!!д!да!! дадаада!са дсда!асдаа 18420

а!а!!сд!ад !ас!а!сда! аа!!!а!!!д аааа!!са!а адаааадсаа асд!!аса!д 18480

аа!!да!даа асаа!асааа дасада!ааа дссасдсаса !!!адда!а! !ддссдада! 18540

!ас!даа!а! !дад!аада! сасддаа!!! с!дасаддад са!д!с!!са а!!садссса 18600

аа!ддсад!! дааа!ас!са аассдсссса !а!дсаддад сдда!са!!с а!!д!!!д!! 18660

!дд!!дсс!! !дссааса!д ддад!ссаад д!!ддсдсдс сдасссадс! !!с 18713

<210> 61

<211> 14524

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рИАБ7321

- 110 029904

<400> 61

ккдкасааад кддккдсддс сдсккаакка аакккааакк сааккаакдс ааксккдакк 60

кксаасаасд ааддкаакдд сдкаааадаа аааакдкакд ккаккдкакк даксккксак 120

дакдккдаад сдкдссакаа какдакдакд какааккааа акаккааскд ксдсакккка 180

ккдааакддс аскдккаккк саассакакс кккдаккскд ккасакдаса сдаскдсаад 240

аадкааакаа кадасдссдк кдккааадаа ккдскаксак акдкдсскаа скададддаа 300

кккдадсдкс адасскаакс ааакаккаса ааакакскса скскдксдсс адсаакддкд 360

кааксадсдс адасааакдд сдкааадакс дсддааааас скссссдадк ддсакдакад 420

скдсскскдк аккдскдакк кадксадсск какккдаскк аадддкдссс ксдккадкда 480

саааккдскк ксааддадас адссакдссс сасаскккдк кдааааасаа аккдсскккд 540

дддадасддк ааадссадкк дскскксаак ааддаакдкс даддаддсаа кдкаассдсс 600

кскддкадка сасккскска акссааааак саакккдкак ксаадакасс дсааааааск 660

какддкккаа ассскдсадд аскадкссад ааддкаакка кссаадакдк адсаксаада 720

акссаакдкк касдддаааа аскакддаад каккакдкаа дсксадсаад аадсадакса 780

акакдсддса сакакдсаас скакдкксаа ааакдаадаа кдкасадака саадаксска 840

каскдссада акасдаадаа даакасдкад аааккдаааа адаадаасса ддсдаадааа 900

адааксккда адасдкаадс аскдасдаса асаакдаааа даадаадака аддксддкда 960

ккдкдааада дасакададд асасакдкаа ддкддаааак дкаадддсдд ааадкаасск 1020

каксасааад дааксккакс ссссаскаск каксскккка какккккссд кдксаккккк 1080

дсссккдадк ккксскакак ааддаассаа дкксддсакк кдкдааааса адаааааакк 1140

кддкдкаадс какккксккк даадкаскда ддакасааск ксададааак ккдкаадккк 1200

дкаддкасса дакскддакс ссааассакд кскссддада ддадассадк кдадаккадд 1260

ссадскасад садскдакак ддссдсддкк кдкдакаксд ккаассакка саккдадасд 1320

кскасадкда аскккаддас ададссасаа асассасаад адкддаккда кдакскадад 1380

аддккдсаад акадакассс ккддккддкк дскдаддккд адддкдккдк ддскддкакк 1440

дсккасдскд ддссскддаа ддскаддаас дсккасдакк ддасадккда дадкаскдкк 1500

касдкдксас акаддсакса ааддккдддс скаддакска саккдкасас асакккдскк 1560

аадкскакдд аддсдсаадд ккккаадкск дкддккдскд ккакаддсск кссааасдак 1620

ссакскдкка ддккдсакда ддскккддда касасадссс ддддкасакк дсдсдсадск 1680

ддакасаадс акддкддакд дсакдакдкк ддкккккддс ааадддаккк кдадккдсса 1740

дсксскссаа ддссадккад дссадккасс сааакскдад кадккадскк ааксасскад 1800

- 111 029904

адс!сда!сд дсддсаа!ад с!!с!!адсд сса!сссддд !!да!сс!а! с!д!д!!даа 1860

а!ад!!дсдд !дддсааддс !с!с!!!сад ааадасаддс ддссааадда асссаадд!д 1920

адд!дддс!а !ддс!с!сад !!сс!!д!дд аадсдс!!дд !с!аадд!дс ададд!д!!а 1980

дсддда!даа дсаааад!д! ссда!!д!аа саада!а!д! !да!сс!асд !аадда!а!! 2040

ааад!а!д!а !!са!сас!а а!а!аа!сад !д!а!!ссаа !а!д!ас!ас да!!!ссаа! 2100

д!с!!!а!!д !сдссд!а!д !аа!сддсд! сасаааа!аа !ссссдд!да с!!!с!!!!а 2160

а!ссадда!д ааа!аа!а!д !!а!!а!аа! !!!!дсда!! !дд!ссд!!а !аддаа!!да 2220

ад!д!дс!!д адд!сдд!сд ссассас!сс са!!!са!аа !!!!аса!д! а!!!дааааа 2280

!ааааа!!!а !дд!а!!саа !!!ааасасд !а!ас!!д!а аадаа!да!а !с!!дааада 2340

аа!а!ад!!! ааа!а!!!а! !да!аааа!а асаад!садд !а!!а!ад!с саадсааааа 2400

са!ааа!!!а !!да!дсаад !!!ааа!!са дааа!а!!!с аа!аас!да! !а!а!садс! 2460

дд!аса!!дс сд!ада!даа адас!дад!д сда!а!!а!д д!д!аа!аса !аддаа!!сд 2520

!!!ааасда! с!дсд!с!аа !!!!сдд!сс аас!!дсаса ддааадасд! сдассдсдд! 2580

адс!с!!дсс садсадас!д ддс!!ссад! сс!!!сдс!с да!сддд!сс аа!д!!д!сс 2640

!садс!д!да ассддаадсд дасдассаас ад!ддаадаа с!даааддаа сдадссд!с! 2700

а!асс!!да! да!сддсс!с !дд!дааддд !а!са!сдса дссаадсаад с!са!дааад 2760

дс!да!дддд дадд!д!а!а а!!а!даддс ссасддсддд с!!а!!с!!! адддадда!с 2820

!а!с!сд!!д с!саад!дса !ддсдсааад сад!!а!!дд ад!дсдда!! !!сд!!ддса 2880

!а!!а!!сдс сасдад!!ад садасдаада дасс!!са!д аасд!ддсса аддссадад! 2940

!аадсада!д !!асдссс!д с!дсаддсс! !!с!а!!а!с саа!ад!!дд !!да!с!!!д 3000

дааададсс! сддс!даддс сса!ас!даа адада!сда! дда!а!сда! а!дсса!д!! 3060

д!!!дс!адс садаассада !саса!ссда !а!дс!а!!д садс!!дасд сада!а!дда 3120

дда!аад!!д а!!са!ддда !сдс!садда д!адс!са!с са!дсасдсс дасаадааса 3180

дааайссд! сдадйаасд садссдсйа сдасдда!!с даадд!са!с сайсддаа! 3240

д!а!!ад!й дсассадс!с сдсд!сасас с!д!с!!са! йдаа!аада !дйадсаа! 3300

!д!ййадс !йд!с!!д! !д!ддсаддд сддсаад!дс !!садаса!с айс!дй!! 3360

сааа!!!!а! дс!ддадаас адс!!с!!аа !!сс!!!дда аа!аа!адас !дсд!с!!аа 3420

аа!!сада!д !с!дда!а!а да!а!да!!д !аааа!аасс !а!!!аад!д !са!!!адаа 3480

са!аад!й! а!даа!дйс !!сса!й!с д!са!сдаас даа!аадад! ааа!асасс! 3540

Шйааса! !асааа!аад !!с!!а!асд !!д1йа!ас ассдддаа!с а!йссайа 3600

!!!!сдсдса ааад!сасдд а!а!!сд!да аадсдаса!а аас!дсдааа !!!дсдддда 3660

- 112 029904

д1д1с11дад 111дсс1сда ддс1адсдса 1дсаса1ада сасасаса1с а1с1са11да 3720

1дс11дд1аа 1аа11д1са1 1ада11д111 11а1дса1ад а1дсас1сда аа1садссаа 3780

1111адасаа д1а1сааасд да1д1дас11 сад1аса11а аааасд1ссд саа1д1д11а 3840

11аад11д1с 1аадсд1саа 111да111ас аа11даа1а1 а1сс1дсссс адссадссаа 3900

садс1сда11 1асаа11даа 1а1а1сс1дс сддссддссс асдсд1д1сд аддаа11с1д 3960

а1с1ддсссс са111ддасд 1даа1д1ада сасд1сдааа 1ааада111с сдаа11адаа 4020

1аа111д111 а11дс111сд сс1а1ааа1а сдасдда1сд 1аа111д1сд 1111а1сааа 4080

а1д1асШс аШПИаа! аасдс1дсдд аса1с1аса1 ППдааПд аааааааай 4140

дд1аа11ас1 с111с11111 с1сса1а11д асса1са1ас 1са11дс1да 1сса1д1ада 4200

111сссддас а1даадсса1 11асаа11да а1а1а1сс1д ссдссдс1дс сдс111дсас 4260

ссдд1ддадс 11дса1д11д д111с1асдс адаас1дадс сдд11аддса да1аа111сс 4320

а11дадаас1 дадсса1д1д сасс11сссс ссаасасдд1 дадсдасддд дсаасддад1 4380

да1ссаса1д ддас1111аа аса1са1ссд 1сдда1ддсд 11дсдадада адсад1сда1 4440

ссд1дада1с адссдасдса ссдддсаддс дсдсаасасд а1сдсааад1 а111даасдс 4500

адд1асаа1с дадссдасд1 1сасдсддаа сдассаадса адс11ддс1д сса11111дд 4560

дд1даддссд 11сдсддссд аддддсдсад сссс1ддддд да1дддаддс ссдсд11адс 4620

дддссдддад дд11сдадаа дддддддсас ссссс11сдд сд1дсдсдд1 сасдсдсаса 4680

дддсдсадсс с1дд11аааа асаадд111а 1ааа1а11дд 111аааадса дд11аааада 4740

садд11адсд д1ддссдааа аасдддсдда аассс11дса аа1дс1дда1 111с1дсс1д 4800

1ддасадссс с1сааа1д1с аа1адд1дсд сссс1са1с1 д1садсас1с 1дсссс1саа 4860

д1д1саадда 1сдсдсссс1 са1с1д1сад 1ад1сдсдсс сс1саад1д1 саа1ассдса 4920

дддсас11а1 ссссаддс11 д1ссаса1са 1с1д1дддаа ас1сдсд1аа аа1саддсд1 4980

111сдссда1 11дсдаддс1 ддссадс1сс асд1сдссдд ссдааа1сда дсс1дсссс1 5040

са1с1д1саа сдссдсдссд дд1дад1сдд ссссйаад! д1саасд1сс дсссс1са1с 5100

1д1сад1дад ддссаадШ 1ссдсдадд1 айсасаасд ссддсддссд сдд1д1с1сд 5160

сасасддс11 сдасддсд11 1с1ддсдсд1 11дсадддсс а1адасддсс дссадсссад 5220

сддсдадддс аассадсссд д1дадсд1сд даааддд1сд асдда1с111 1ссдс1дса1 5280

аассс1дс11 сдддд1са11 а1адсда111 111сдд1а1а 1сса1сс111 11сдсасда1 5340

а1асадда11 11дссааадд д11сд1д1ад ас111сс11д д1д1а1ссаа сддсд1садс 5400

сдддсадда1 адд1даад1а ддсссасссд сдадсддд1д 11сс11с11с ас1д1ссс11 5460

а11сдсасс1 ддсдд1дс1с аасдддаа1с с1дс1с1дсд аддс1ддссд дс1ассдссд 5520

- 113 029904

дсд!аасада !дадддсаад сдда!ддс!д а!дааассаа дссаассадд аадддсадсс 5580

сасс!а!саа дд!д!ас!дс с!!ссадасд аасдаададс да!!даддаа ааддсддсдд 5640

сддссддса! дадсс!д!сд дсс!асс!дс !ддссд!сдд ссадддс!ас аааа!сасдд 5700

дсд!сд!дда с!а!дадсас д!ссдсдадс !ддсссдса! саа!ддсдас с!дддссдсс 5760

!дддсддсс! дс!дааас!с !ддс!сассд асдасссдсд сасддсдсдд !!сдд!да!д 5820

ссасда!сс! сдссс!дс!д дсдаада!сд аададаадса ддасдадс!! ддсаадд!са 5880

!да!дддсд! дд!ссдсссд адддсададс са!дас!!!! !!адссдс!а ааасддссдд 5940

дддд!дсдсд !да!!дссаа дсасд!сссс а!дсдс!сса !саадаадад сдас!!сдсд 6000

дадс!дд!а! !сд!дсаддд саада!!сдд аа!ассаад! асдадаадда сддссадасд 6060

д!с!асддда ссдас!!са! !дссда!аад д!дда!!а!с !ддасассаа ддсассаддс 6120

ддд!сааа!с аддаа!аадд дсаса!!дсс ссддсд!дад !сддддсаа! сссдсаадда 6180

ддд!даа!да а!сддасд!! !дассддаад дса!асаддс аадаас!да! сдасдсдддд 6240

!!!!ссдссд адда!дссда аасса!сдса адссдсассд !са!дсд!дс дссссдсдаа 6300

асс!!ссад! ссд!сддс!с да!дд!ссад саадс!асдд ссаада!сда дсдсдасадс 6360

д!дсаас!дд с!ссссс!дс сс!дсссдсд сса!сддссд ссд!ддадсд !!сдсд!сд! 6420

с!сдаасадд аддсддсадд !!!ддсдаад !сда!дасса !сдасасдсд аддаас!а!д 6480

асдассаада адсдааааас сдссддсдад дасс!ддсаа аасадд!сад сдаддссаад 6540

саддссдсд! !дс!даааса сасдаадсад сада!саадд ааа!дсадс! !!сс!!д!!с 6600

да!а!!дсдс сд!ддссдда сасда!дсда дсда!дссаа асдасасддс ссдс!с!дсс 6660

с!д!!сасса сдсдсаасаа даааа!сссд сдсдаддсдс !дсаааасаа дд!са!!!!с 6720

сасд!сааса аддасд!даа да!сасс!ас ассддсд!сд адс!дсдддс сдасда!дас 6780

даас!дд!д! ддсадсадд! д!!ддад!ас дсдаадсдса сссс!а!сдд сдадссда!с 6840

асс!!сасд! !с!асдадс! !!дссаддас с!дддс!дд! сда!саа!дд ссдд!а!!ас 6900

асдааддссд аддаа!дсс! д!сдсдсс!а саддсдасдд сда!дддс!! сасд!ссдас 6960

сдсд!!дддс асс!ддаа!с дд!д!сдс!д с!дсассдс! !ссдсд!сс! ддассд!ддс 7020

аадаааасд! сссд!!дсса дд!сс!да!с дасдаддааа !сд!сд!дс! д!!!дс!ддс 7080

дассас!аса сдааа!!са! а!дддадаад !ассдсаадс !д!сдссдас ддсссдасдд 7140

а!д!!сдас! а!!!садс!с дсассдддад ссд!асссдс !саадс!дда аасс!!ссдс 7200

с!са!д!дсд да!сдда!!с сасссдсд!д аадаад!ддс дсдадсадд! сддсдаадсс 7260

!дсдаадад! !дсдаддсад сддсс!дд!д даасасдсс! ддд!саа!да !дасс!дд!д 7320

са!!дсааас дс!адддсс! !д!дддд!са д!!ссддс!д дддд!!садс адссадсдс! 7380

- 114 029904

!!ас!ддса! !!саддааса адсдддсас! дс!сдасдса с!!дс!!сдс !сад!а!сдс 7440

!сдддасдса сддсдсдс!с !асдаас!дс сда!ааасад адда!!аааа !!дасаа!!д 7500

!да!!ааддс !сада!!сда сддс!!ддад сддссдасд! дсадда!!!с сдсдада!сс 7560

да!!д!сддс сс!даадааа дс!ссадада !д!!сддд!с сд!!!асдад сасдаддада 7620

аааадссса! ддаддсд!!с дс!даасдд! !дсдада!дс сд!ддса!!с ддсдсс!аса 7680

!сдасддсда да!са!!ддд с!д!сдд!с! !сааасадда ддасддсссс ааддасдс!с 7740

асааддсдса !с!д!ссддс д!!!!сд!дд адсссдааса дсдаддссда дддд!сдссд 7800

д!а!дс!дс! дсдддсд!!д ссддсддд!! !а!!дс!сд! да!да!сд!с сдасада!!с 7860

саасдддаа! с!дд!дда!д сдса!с!!са !сс!сддсдс ас!!аа!а!! !сдс!а!!с! 7920

ддадс!!д!! д!!!а!!!сд д!с!ассдсс !дссдддсдд дд!сдсддсд асдд!аддсд 7980

с!д!дсадсс дс!да!дд!с д!д!!са!с! с!дссдс!с! дс!адд!адс ссда!асда! 8040

!да!ддсдд! сс!дддддс! ай!дсддаа с!дсдддсд! ддсдс!дйд д!д!!дасас 8100

сааасдсадс дс!ада!сс! д!сддсд!сд садсдддсс! ддсдддддсд д!йсса!дд 8160

сд!!сддаас сд!дс!дасс сдсаад!ддс аасс!сссд! дсс!с!дс!с асс!!!ассд 8220

сс!ддсаас! ддсддссдда ддас!!с!дс !сд!!ссад! адс!!!ад!д !!!да!ссдс 8280

саа!сссда! дсс!асадда ассаа!д!!с !сддсс!ддс д!ддс!сддс с!да!сддад 8340

сддд!!!аас с!ас!!сс!! !дд!!ссддд дда!с!сдсд ас!сдаасс! асад!!д!!! 8400

сс!!ас!ддд с!!!с!садс ссссдадсдс !!ад!дддаа !!!д!асссс !!а!сдаасс 8460

дддадсасад да!дасдсс! аасаа!!са! !саадссдас ассдс!!сдс ддсдсддс!! 8520

аа!!саддад !!аааса!са !дадддаадс дд!да!сдсс даад!а!сда с!саас!а!с 8580

ададд!ад!! ддсд!са!сд адсдсса!с! сдаассдасд !!дс!ддссд !аса!!!д!а 8640

сддс!ссдса д!дда!ддсд дсс!даадсс асасад!да! а!!да!!!дс !дд!!асдд! 8700

дассд!аадд с!!да!дааа саасдсддсд адс!!!да!с аасдасс!!! !ддааас!!с 8760

ддс!!сссс! ддадададсд ада!!с!ссд сдс!д!адаа д!сасса!!д !!д!дсасда 8820

сдаса!са!! ссд!ддсд!! а!ссадс!аа дсдсдаас!д саа!!!ддад аа!ддсадсд 8880

саа!даса!! с!!дсадд!а !с!!сдадсс адссасда!с даса!!да!с !ддс!а!с!! 8940

дс!дасаааа дсаададаас а!адсд!!дс с!!дд!адд! ссадсддсдд аддаас!с!! 9000

!да!ссдд!! сс!даасадд а!с!а!!!да ддсдс!ааа! дааасс!!аа сдс!а!ддаа 9060

с!сдссдссс дас!дддс!д дсда!дадсд ааа!д!ад!д с!!асд!!д! сссдса!!!д 9120

д!асадсдса д!аассддса ааа!сдсдсс даадда!д!с дс!дссдас! дддсаа!дда 9180

дсдсс!дссд дсссад!а!с адсссд!са! ас!!даадс! аддсаддс!! а!с!!ддаса 9240

- 115 029904

адаада!сдс !!ддсс!сдс дсдсада!са д!!ддаадаа !!!д!!сас! асд!дааадд 9300

сдада!сасс аадд!ад!сд дсааа!аа!д !с!аасаа!! сд!!саадсс дасдссдс!! 9360

сдсддсдсдд с!!аас!саа дсдйадада дс!ддддаад ас!а!дсдсд а!с!д!!даа 9420

дд!дд!!с!а адсс!сд!с! !дсда!ддса !!!сда!сса !!ссса!!сс дсдс!саада 9480

!ддс!!сссс !сддсад!!с а!садддс!а аа!саа!с!а дссдас!!д! ссдд!дааа! 9540

дддс!дсас! ссаасадааа саа!саааса ааса!асаса дсдасйай сасасдадс! 9600

сааайасаа сдд!а!а!а! сс!дссад!с адса!са!са сассаааад! !аддсссдаа 9660

1адй!дааа Надааадс! сдсаа!!дад д!с!асаддс сааа!!сдс! с!!адссд!а 9720

саа!а!!ас! сассдда!сс !аассдд!д! да!са!дддс сдсдайааа аа!с!саай 9780

а!а!!!дд!с !аа!йад!1 !дд1айдад !аааасааа! !сдаассааа ссаааа!а!а 9840

аа!а!а1ад1 !!йа!а1а! а!дсс!йаа дас!ййа! адаа!!!!с! !!аааааа!а 9900

!с!адааа!а !!!дсдас!с !!с!ддса!д 1аа!а!йсд !1ааа!а!да ад!дс!сса! 9960

!!!!а!!аас !!!ааа!аа! !дд!!д!асд а!сас!!!с! !а!саад!д! !ас!аааа!д 10020

сд!саа!с!с !!!д!!с!!с са!а!!са!а !д!саааасс !а!саааа!! с!!а!а!а!с 10080

!!!!!сдаа! !!даад!даа а!!!сда!аа !!!аааа!!а аа!адааса! а!са!!а!!! 10140

адд!а!са!а !!да!!!!!а !ас!!аа!!а с!ааа!!!дд !!аас!!!да аад!д!аса! 10200

саасдааааа !!ад!сааас дас!аааа!а аа!ааа!а!с а!д!д!!а!! аадаааа!!с 10260

!сс!а!аада а!а!!!!аа! ада!са!а!д !!!д!ааааа ааа!1аа!й йас1аасас 10320

а!а!а!!!ас !!а!сааааа !!!дасааад 1аадайааа а!аа1айса !с!аасаааа 10380

аааааассад аааа!дс!да ааасссддса ааассдаасс аа!ссааасс да!а!ад!!д 10440

дй!дд!1!д а!!!!да!а! ааассдаасс аас!сдд!сс а!!!дсассс с!аа!са!аа 10500

1адс!1!аа! а!!!саада! айайаад! 1аасдйд!с аа!а!сс!дд ааа!!!!дса 10560

ааа!даа!са адсс!а!а!д дс!д!аа!а! даа!!!аааа дсадс!сда! д!дд!дд!аа 10620

!а!д!аа!!! ас!!да!!с! ааааааа!а! сссаад!а!! аа!аа!!!с! дс!аддаада 10680

адд!!адс!а сда!!!асад сааадссада а!асаа!даа сса!ааад!д а!!даадс!с 10740

дааа!а1асд ааддаасааа (айШааа аааа!асдса а!дас!!дда асаааадааа 10800

д!да!а!а!! !1!!д!!с!1 ааасаадса! сссс!с!ааа даа!ддсад! !1!сс!!1дс 10860

а!д1аас!а! !а!дс!ссс! !сд!!асааа аа!!!!ддас !ас!а!!ддд аас!!с!!с! 10920

даааа!ад!д дссассдс!! аа!!ааддсд сдсса!дссс дддсаадсдд ссдсасаад! 10980

!!д!асаааа аадсаддс!с сдсддссдса с!адд!!!аа ас!с!адаад с!аддаа!!с 11040

дсддссдс!! !сс!дса!да са!сд!сс!д сададссаад сдса!дс!!а а!!ааас!ад 11100

- 116 029904

ййссадй 1сайа1ад1 дааадййд дс1с1с1сдс сдд1ддйй ПассйПИ 11160

Пааадддд! ШссассШ аааайс1дд 1а1сайс1с асШасПд йасШаа1 11220

Пс1са1аа1 сШддйда аайайасд сПссдсаса сд;Пайсс1 асаааШа! 11280

1аП1дПаа асаййсаа ассдсайаа айИа1даа дйссдйй 1сШаа1д1 11340

адййаса! НйаПШд ааайШйаа П1асПаа1 ШадсдПд дйдааадса 11400

1аа1даШа йсйайс1 йПсаПИа аа1дШаа1 ;йаса;й;йа аасааайс! 11460

йассйаад ааддаШсс саНПаПП й1ааааа1а 1аШа1саа аПИИИса 11520

ассасдШаа 1с1са1аа1а ;йаадйдй йаааадйа 1ааааШаа сйсайаП 11580

ШИайсд ас1да1сПа аадсаасасс сад1дасаса асйдссаН ПШсШд 11640

аайаааааа 1ссааПа1с аПдПИШ ййа1асаа 1дааааШс ассааасаа! 11700

д;йИд1дд1 аШс1даад саад1са1д1ППдсаааа!йПИааПс ссаШдаса 11760

сйсддаад! аас1даада1 с1дсППас а1дсдадаса сайНсйа адйаПНа 11820

айкйадйа сПИаПсаа даШсаПП айааайс! сааПШас! 1с1аааааа1 11880

1аайад;йа 1ааПаааа1 айасйШ ШаННаад ШааПдП дааШд1да 11940

сПШдаШ айаПсШс ППдШааа йдййа1а дайдШаа адйааПИа 12000

ад1аа1д1ад 1адад1дПа дад1дПасс с1ааасс;йа аасППаада Ша1дд1дд 12060

асйаййс аПИаШс! ййдсйй ассййсй дд1а1д1аад 1ссд1аас1д 12120

дааПас1д1 дддНдсса! дасас1с1д1 ддйППдд Нса1дса1д дайПдсдс 12180

аадааааада сааадаасаа адаааааада саааасадад адасаааасд саайасаса 12240

ассаасйаа аНадйас! ддс1дайаа дайдссдсд 1сса1д1а1д Й1ааа1дсс 12300

а1дсааадса асасд1дсП ааса1дсас1 Пааа1ддс1 сасссайй аасссасаса 12360

сааасасай дссШНс! йайайас сасаассасс 1д1а1а1аП сайсййс 12420

сдссассйа айййсас йсаасасас дйаасс1дс а1а1дсд1д1 сайсса1дс 12480

ссаааййс ;йдс;йдйс саассассй сййНай 1аа1асс1а1 ааайссй! 12540

ааййасй асйсййа йайсайс айсададй с1ас1ас1с1 асйсййа 12600

йссссаасс саасйай! йаайсйс ййддйсс с!дсаддда! ссаасаа!дд 12660

с!дсасйда йдсайсс! даддасааад саасйдсй саадйаасс сасайсад! 12720

ассаададд! сасдШадд аас!дд!аса адаааайаа йддсйаас асдасссПд 12780

Ндйсйа! йс1дсйй дддПдйс! (дасдадаас сасассйй ассадассй 12840

сссйаШд дй1д1йй йсйШс! дйсадсдП 1ддсайас1 дд!ддс!асс 12900

асадасШд дйссайдд йНасад!д сдаддПдсс айдадасй йсс1ддсй 12960

- 117 029904

!сас!ддадс !дд!дсда!с саадд!!с!д саада!дд!д д!садссаа! са!адддсас 13020

а!сассдйд дасддасасс а!дааддасс сс!ас!с!д! да!дададда с!дс!д!!с! 13080

сссаса!адд йдда!ддй с!саас!с!д а!ссааадд! саааддсада асада!д!й 13140

с!да!с!!да с!с!да!ссс д!сдйд!д! ддсаасасаа асас!а!ддс аад!дй!дс 13200

!с!йдссдс йдда!с!й ссда!да!ад !ддс!дддс! дддйдддда да!!дд!ддд 13260

д!ддасйд! с!а!дс!ддс а!са!асд!д сс!дс!йд! !садсаадсс ас!йс!д!д 13320

!саас!сай ддсаса!!дд а!адд!даас аассдй!да !дасадасд! ас!ссааддд 13380

а!са!д!!с! дас!дсд!!д д!сасаа!дд дадаадда!а ссасаас!!с сасса!дад! 13440

йссдад!да с!асадааа! дсса!са!й дд!а!сад!а !дассс!аса аад!ддс!са 13500

!с!а!с!сй садсйддд! ссс!!ссса! !ддсс!ас!с !с!саадасс !!ссд!!сса 13560

а!дада!!да даааддаадд сйсадсаас адсааааддс !сйдасаад аааадаад!д 13620

д!с!!дайд дддас!!сс! с!с!!ссадс !!ссад!да! с!са!ддда! дасй!саад 13680

с!сд!!дсаа адааад!дда дада!дс!!д !!дс!д!!дс !ддад!да!с са!да!д!с! 13740

сссадйса! !даада!са! сс!дд!ддда ддадсс!са! !адаад!дс! дйдддааад 13800

а!дддас!дд са!д!!саа! дд!ддад!д! а!дааса!!с ааасдссдса сасаасйдс 13860

!дадсасаа! дададйдда д!с!!дадад д!ддасаада ад!ддаддй !ддаадааас 13920

ададдд!дда !дйс!!ддд аад!садаса йс!!сд!са ад!дасаадд д!ддадсд!с 13980

!дд!ддаадд адс!д!!дса дсд!да!дад !ад!!адс!! аа!сасс!ад адс!сдд!са 14040

сс!сдад!а! саааа!с!а! !!адааа!ас асаа!а!!!! д!!дсаддс! !дс!ддадаа 14100

!сда!с!дс! а!са!ааааа !!асаааааа а!!!!а!!!д сс!саа!!а! !!!адда!!д 14160

д!а!!аадда сдс!!ааа!! а!!!д!сддд !сас!асдса !са!!д!да! !дадаада!с 14220

адсда!асда аа1айсд!а д!ас!а!сда 1аа!йа!й даааа!!са! аадаааадса 14280

аасдйаса! даайда!да аасаа!асаа адасада!аа адссасдсас а!йадда!а 14340

!!ддссдада !!ас!даа!а !!дад!аада !сасддаа!! !с!дасадда дса!д!с!!с 14400

аа!!садссс ааа!ддсад! !дааа!ас!с ааассдсссс а!а!дсадда дсдда!са!! 14460

сайдй!д! !!дд!!дсс! йдссааса! дддад!ссаа ддйддсдсд ссдасссадс 14520

!!!с 14524

<210> 62

<211> 18422

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рОАВ7324

- 118 029904

<400> 62

11д1асааад 1дд11дсддс сдс11аа11а аа111ааа11 саа11аа1дс аа1с11да11 60

йсаасаасд аадд1аа1дд сд1аааадаа аааа1д1а1д йайд1ай да1сШса1 120

да1дйдаад сд1дсса1аа 1а1да1да1д ййаайааа а1а11аас1д йдсайИа 180

11дааа1ддс ас1д11а111 саасса1а1с 111да11с1д 11аса1даса сдас1дсаад 240

аад1ааа1аа 1адасдссд1 1д11ааадаа 11дс1а1са1 а1д1дсс1аа с1ададддаа 300

111дадсд1с адасс1аа1с ааа1а11аса ааа1а1с1са с1с1д1сдсс адсаа1дд1д 360

1аа1садсдс адасааа1дд сд1ааада1с дсддааааас с1ссссдад1 ддса1да1ад 420

с1дсс1с1д1 а11дс1да11 1ад1садсс1 1а111дас11 ааддд1дссс 1сд11ад1да 480

сааа11дс11 1сааддадас адсса1дссс сасас111д1 1дааааасаа а11дсс111д 540

дддадасдд1 ааадссад11 дс1с11саа1 ааддаа1д1с даддаддсаа 1д1аассдсс 600

1с1дд1ад1а сас11с1с1а а1ссааааа1 саа111д1а1 1саада1асс дсаааааас1 660

1а1дд111аа ассс1дсадд ас1ад1ссад аадд1аа11а 1ссаада1д1 адса1саада 720

а1ссаа1д11 1асдддаааа ас1а1ддаад 1а11а1д1аа дс1садсаад аадсада1са 780

а1а1дсддса са1а1дсаас с1а1д11саа ааа1даадаа 1д1асада1а саада1сс1а 840

1ас1дссада а1асдаадаа даа1асд1ад ааа11даааа адаадаасса ддсдаадааа 900

адаа1с11да адасд1аадс ас1дасдаса асаа1даааа даадаада1а адд1сдд1да 960

Пд1дааада даса1ададд асаса1д1аа дд1ддаааа1 д1аадддсдд ааад1аасс1 1020

ййсасааад дааййай ссссас1ас1 ПйссПйа 1айШссд 1д1са1ИИ 1080

дссс11дад1 Шсс1а1а1 ааддаассаа дйсддсай 1д1дааааса адаааааай 1140

1дд1д1аадс 1а1И1сШ даад1ас1да дда1асаас11сададааа1 Пд1аадШ 1200

д1адд1асса да1с1дда1с ссааасса1д 1с1ссддада ддадассад11дада11адд 1260

ссадс1асад садс1да1а1 ддссдсддй 1д1даййсд йаассайа саПдадасд 1320

1с1асад1да асШаддас ададссасаа асассасаад ад1ддаПда 1да1с1адад 1380

адд11дсаад а1ада1ассс йддйддй дс1дадд11д аддд£§И§1 ддйддай 1440

дсПасдс1д ддссс1ддаа ддс1аддаас дсПасдаП ддасадПда дад1ас1дП 1500

1асд1д1сас а1аддса1са ааддПдддс с1адда1с1а саПд1асас асаШдсП 1560

аадйПйдд аддсдсаадд ППаад1с1 д1ддПдс1д Па1аддсс11ссааасда1 1620

сса1с1дПа ддИдса1да ддсШддда (асасадссс дддд1асаП дсдсдсадс1 1680

дда1асаадс а1дд1дда1д дса1да1д11 ддйЮддс аааддда1111дад11дсса 1740

дсйсйсаа ддссадПад дссадИасс сааа1с1дад 1адИадсй аа1сасс1ад 1800

- 119 029904

адс!сда!сд дсддсаа!ад с!!с!!адсд сса!сссддд !!да!сс!а! с!д!д!!даа 1860

а!ад!!дсдд !дддсааддс !с!с!!!сад ааадасаддс ддссааадда асссаадд!д 1920

адд!дддс!а !ддс!с!сад !!сс!!д!дд аадсдс!!дд !с!аадд!дс ададд!дйа 1980

дсддда!даа дсаааад!д! ссда!!д!аа саада!а!д! !да!сс!асд !аадда!а!! 2040

ааад!а!д!а !!са!сас!а а!а!аа!сад !д!а!!ссаа !а!д!ас!ас да!!!ссаа! 2100

д!с!!!а!!д !сдссд!а!д !аа!сддсд! сасаааа!аа !ссссдд!да с!!!с!!!!а 2160

а!ссадда!д ааа!аа!а!д !!а!!а!аа! !!!!дсда!! !дд!ссд!!а !аддаа!!да 2220

ад!д!дс!!д адд!сдд!сд ссассас!сс са!!!са!аа !!!!аса!д! а!!!дааааа 2280

!ааааа!!!а !дд!а!!саа !!!ааасасд !а!ас!!д!а аадаа!да!а !с!!дааада 2340

аа!а!ад!!! ааа!а!!!а! !да!аааа!а асаад!садд !а!!а!ад!с саадсааааа 2400

са!ааа!!!а !!да!дсаад !!!ааа!!са дааа!а!!!с аа!аас!да! !а!а!садс! 2460

дд!аса!!дс сд!ада!даа адас!дад!д сда!а!!а!д д!д!аа!аса !аддаа!!сд 2520

Шааасда! с!дсд!с!аа !й!сдд!сс аас!!дсаса ддааадасд! сдассдсдд! 2580

адс!с!!дсс садсадас!д ддс!!ссад! сс!!!сдс!с да!сддд!сс аа!д!!д!сс 2640

!садс!д!да ассддаадсд дасдассаас ад!ддаадаа с!даааддаа сдадссд!с! 2700

а!асс!!да! да!сддсс!с !дд!дааддд !а!са!сдса дссаадсаад с!са!дааад 2760

дс!да!дддд дадд!д!а!а а!!а!даддс ссасддсддд с!!а!!с!!! адддадда!с 2820

!а!с!сд!!д с!саад!дса !ддсдсааад сад!!а!!дд ад!дсдда!! !!сд!!ддса 2880

!а!!а!!сдс сасдад!!ад садасдаада дасс!!са!д аасд!ддсса аддссадад! 2940

!аадсада!д !!асдссс!д с!дсаддсс! !!с!а!!а!с саа!адйдд йда!с!йд 3000

дааададсс! сддс!даддс сса!ас!даа адада!сда! дда!а!сда! а!дсса!д!! 3060

д!!!дс!адс садаассада !саса!ссда !а!дс!а!!д садс!!дасд сада!а!дда 3120

дда!аад!!д а!!са!ддда !сдс!садда д!адс!са!с са!дсасдсс дасаадааса 3180

дааайссд! сдадйаасд садссдсйа сдасдда!!с даадд!са!с сайсддаа! 3240

д!а!!ад!й дсассадс!с сдсд!сасас с!д!с!!са! йдаа!аада !дйадсаа! 3300

!д!ййадс !йд!с!!д! !д!ддсаддд сддсаад!дс !!садаса!с айс!д!й! 3360

сааа!!!!а! дс!ддадаас адс!!с!!аа !!сс!!!дда аа!аа!адас !дсд!с!!аа 3420

аа!!сада!д !с!дда!а!а да!а!да!!д !аааа!аасс !а!!!аад!д !са!!!адаа 3480

са!аад!й! а!даа!дйс !!ссай!!с д!са!сдаас даа!аадад! ааа!асасс! 3540

!ййааса! !асааа!аад !!сйа!асд !!д1йа!ас ассдддаа!с а!йссайа 3600

!!!!сдсдса ааад!сасдд а!а!!сд!да аадсдаса!а аас!дсдааа !!!дсдддда 3660

- 120 029904

д!д!с!!дад !!!дсс!сда ддс!адсдса !дсаса!ада сасасаса!с а!с!са!!да 3720

!дс!!дд!аа !аа!!д!са! !ада!!д!!! !!а!дса!ад а!дсас!сда аа!садссаа 3780

!!!!адасаа д!а!сааасд да!д!дас!! сад!аса!!а аааасд!ссд саа!д!д!!а 3840

!!аад!!д!с !аадсд!саа !!!да!!!ас аа!!даа!а! а!сс!дсссс адссадссаа 3900

садс!сда!! !асаа!!даа !а!а!сс!дс сддссддссс асдсд!д!сд аддаа!!с!д 3960

а!с!ддсссс са!!!ддасд !даа!д!ада сасд!сдааа !ааада!!!с сдаа!!адаа 4020

!аа!!!д!!! а!!дс!!!сд сс!а!ааа!а сдасдда!сд !аа!!!д!сд !!!!а!сааа 4080

а!д!ас!!!с а!!!!а!аа! аасдс!дсдд аса!с!аса! !!!!даа!!д аааааааа!! 4140

дд!аа!!ас! с!!!с!!!!! с!сса!а!!д асса!са!ас !са!!дс!да !сса!д!ада 4200

!!!сссддас а!даадсса! !!асаа!!да а!а!а!сс!д ссдссдс!дс сдс!!!дсас 4260

ссдд!ддадс !!дса!д!!д д!!!с!асдс адаас!дадс сдд!!аддса да!аа!!!сс 4320

а!!дадаас! дадсса!д!д сасс!!сссс ссаасасдд! дадсдасддд дсаасддад! 4380

да!ссаса!д ддас!!!!аа аса!са!ссд !сдда!ддсд !!дсдадада адсад!сда! 4440

ссд!дада!с адссдасдса ссдддсаддс дсдсаасасд а!сдсааад! а!!!даасдс 4500

адд!асаа!с дадссдасд! !сасдсддаа сдассаадса адс!!ддс!д сса!!!!!дд 4560

дд!даддссд !!сдсддссд аддддсдсад сссс!ддддд да!дддаддс ссдсд!!адс 4620

дддссдддад дд!!сдадаа дддддддсас ссссс!!сдд сд!дсдсдд! сасдсдсаса 4680

дддсдсадсс с!дд!!аааа асаадд!!!а !ааа!а!!дд !!!аааадса дд!!аааада 4740

садд!!адсд д!ддссдааа аасдддсдда аассс!!дса аа!дс!дда! !!!с!дсс!д 4800

!ддасадссс с!сааа!д!с аа!адд!дсд сссс!са!с! д!садсас!с !дсссс!саа 4860

д!д!саадда !сдсдсссс! са!с!д!сад !ад!сдсдсс сс!саад!д! саа!ассдса 4920

дддсас!!а! ссссаддс!! д!ссаса!са !с!д!дддаа ас!сдсд!аа аа!саддсд! 4980

!!!сдссда! !!дсдаддс! ддссадс!сс асд!сдссдд ссдааа!сда дсс!дсссс! 5040

са!с!д!саа сдссдсдссд дд!дад!сдд сссс!саад! д!саасд!сс дсссс!са!с 5100

!д!сад!дад ддссаадй! !ссдсдадд! а!ссасаасд ссддсддссд сдд!д!с!сд 5160

сасасддс!! сдасддсд!! !с!ддсдсд! !!дсадддсс а!адасддсс дссадсссад 5220

сддсдадддс аассадсссд д!дадсд!сд даааддд!сд асдда!с!!! !ссдс!дса! 5280

аассс!дсй сдддд!сай а!адсда!!! !йсдд1а!а !сса!сс!й йсдсасда! 5340

а!асадда!! !!дссааадд д!!сд!д!ад ас!!!сс!!д д!д!а!ссаа сддсд!садс 5400

сдддсадда! адд!даад!а ддсссасссд сдадсддд!д !!сс!!с!!с ас!д!ссс!! 5460

а!!сдсасс! ддсдд!дс!с аасдддаа!с с!дс!с!дсд аддс!ддссд дс!ассдссд 5520

- 121 029904

дсдкаасада кдадддсаад сддакддскд акдааассаа дссаассадд аадддсадсс 5580

сасскаксаа ддкдкаскдс сккссадасд аасдаададс даккдаддаа ааддсддсдд 5640

сддссддсак дадсскдксд дсскасскдс кддссдксдд ссадддскас ааааксасдд 5700

дсдксдкдда скакдадсас дкссдсдадс кддсссдсак саакддсдас скдддссдсс 5760

кдддсддсск дскдаааскс кддсксассд асдасссдсд сасддсдсдд кксддкдакд 5820

ссасдаксск сдссскдскд дсдаадаксд аададаадса ддасдадскк ддсааддкса 5880

кдакдддсдк ддкссдсссд адддсададс сакдаскккк ккадссдска ааасддссдд 5940

ддддкдсдсд кдаккдссаа дсасдксссс акдсдсксса ксаадаадад сдаскксдсд 6000

дадскддкак ксдкдсаддд саадакксдд аакассаадк асдадаадда сддссадасд 6060

дкскасддда ссдаскксак кдссдакаад дкддаккакс кддасассаа ддсассаддс 6120

дддксааакс аддаакаадд дсасаккдсс ссддсдкдад ксддддсаак сссдсаадда 6180

дддкдаакда аксддасдкк кдассддаад дсакасаддс аадааскдак сдасдсдддд 6240

ккккссдссд аддакдссда аассаксдса адссдсассд ксакдсдкдс дссссдсдаа 6300

ассккссадк ссдксддскс дакддкссад саадскасдд ссаадаксда дсдсдасадс 6360

дкдсааскдд скссссскдс сскдсссдсд ссаксддссд ссдкддадсд кксдсдксдк 6420

сксдаасадд аддсддсадд кккддсдаад ксдакдасса ксдасасдсд аддааскакд 6480

асдассаада адсдааааас сдссддсдад дасскддсаа аасаддксад сдаддссаад 6540

саддссдсдк кдскдаааса сасдаадсад садаксаадд ааакдсадск ккссккдккс 6600

дакаккдсдс сдкддссдда сасдакдсда дсдакдссаа асдасасддс ссдскскдсс 6660

скдкксасса сдсдсаасаа дааааксссд сдсдаддсдс кдсаааасаа ддксаккккс 6720

сасдксааса аддасдкдаа даксасскас ассддсдксд адскдсдддс сдасдакдас 6780

дааскддкдк ддсадсаддк дккддадкас дсдаадсдса сссскаксдд сдадссдакс 6840

асскксасдк кскасдадск ккдссаддас скдддскддк сдаксаакдд ссддкаккас 6900

асдааддссд аддаакдсск дксдсдсска саддсдасдд сдакдддскк сасдкссдас 6960

сдсдккдддс асскддаакс ддкдксдскд скдсассдск кссдсдксск ддассдкддс 7020

аадаааасдк сссдккдсса ддксскдакс дасдаддааа ксдксдкдск дкккдскддс 7080

дассаскаса сдааакксак акдддадаад кассдсаадс кдксдссдас ддсссдасдд 7140

акдкксдаск аккксадскс дсассдддад ссдкасссдс ксаадскдда аассккссдс 7200

сксакдкдсд даксддаккс сасссдсдкд аадаадкддс дсдадсаддк сддсдаадсс 7260

кдсдаададк кдсдаддсад сддсскддкд даасасдсск дддксаакда кдасскддкд 7320

саккдсааас дскадддсск кдкддддкса дккссддскд ддддкксадс адссадсдск 7380

- 122 029904

!!ас!ддса! !!саддааса адсдддсас! дс!сдасдса с!!дс!!сдс !сад!а!сдс 7440

!сдддасдса сддсдсдс!с !асдаас!дс сда!ааасад адда!!аааа !!дасаа!!д 7500

!да!!ааддс !сада!!сда сддс!!ддад сддссдасд! дсадда!!!с сдсдада!сс 7560

да!!д!сддс сс!даадааа дс!ссадада !д!!сддд!с сд!!!асдад сасдаддада 7620

аааадссса! ддаддсд!!с дс!даасдд! !дсдада!дс сд!ддса!!с ддсдсс!аса 7680

!сдасддсда да!са!!ддд с!д!сдд!с! !сааасадда ддасддсссс ааддасдс!с 7740

асааддсдса !с!д!ссддс д!!!!сд!дд адсссдааса дсдаддссда дддд!сдссд 7800

д!а!дс!дс! дсдддсд!!д ссддсддд!! !а!!дс!сд! да!да!сд!с сдасада!!с 7860

саасдддаа! с!дд!дда!д сдса!с!!са !сс!сддсдс ас!!аа!а!! !сдс!а!!с! 7920

ддадсйд!! д!йай!сд д!с!ассдсс !дссдддсдд дд!сдсддсд асдд!аддсд 7980

с!д!дсадсс дс!да!дд!с д!д!!са!с! с!дссдс!с! дс!адд!адс ссда!асда! 8040

!да!ддсдд! сс!дддддс! ай!дсддаа с!дсдддсд! ддсдс!дйд д!д!!дасас 8100

сааасдсадс дс!ада!сс! д!сддсд!сд садсдддсс! ддсдддддсд д!йсса!дд 8160

сд!!сддаас сд!дс!дасс сдсаад!ддс аасс!сссд! дсс!с!дс!с асс!!!ассд 8220

сс!ддсаас! ддсддссдда ддас!!с!дс !сд!!ссад! адс!!!ад!д !!!да!ссдс 8280

саа!сссда! дсс!асадда ассаа!д!!с !сддсс!ддс д!ддс!сддс с!да!сддад 8340

сддд!!!аас с!ас!!сс!! !дд!!ссддд дда!с!сдсд ас!сдаасс! асад!!д!!! 8400

сс!!ас!ддд с!!!с!садс ссссдадсдс !!ад!дддаа !!!д!асссс !!а!сдаасс 8460

дддадсасад да!дасдсс! аасаа!!са! !саадссдас ассдс!!сдс ддсдсддс!! 8520

аа!!саддад !!аааса!са !дадддаадс дд!да!сдсс даад!а!сда с!саас!а!с 8580

ададд!ад!! ддсд!са!сд адсдсса!с! сдаассдасд !!дс!ддссд !аса!!!д!а 8640

сддс!ссдса д!дда!ддсд дсс!даадсс асасад!да! а!!да!!!дс !дд!!асдд! 8700

дассд!аадд с!!да!дааа саасдсддсд адс!!!да!с аасдасс!!! !ддааас!!с 8760

ддс!!сссс! ддадададсд ада!!с!ссд сдс!д!адаа д!сасса!!д !!д!дсасда 8820

сдаса!са!! ссд!ддсд!! а!ссадс!аа дсдсдаас!д саа!!!ддад аа!ддсадсд 8880

саа!даса!! с!!дсадд!а !с!!сдадсс адссасда!с даса!!да!с !ддс!а!с!! 8940

дс!дасаааа дсаададаас а!адсд!!дс с!!дд!адд! ссадсддсдд аддаас!с!! 9000

!да!ссдд!! сс!даасадд а!с!а!!!да ддсдс!ааа! дааасс!!аа сдс!а!ддаа 9060

с!сдссдссс дас!дддс!д дсда!дадсд ааа!д!ад!д с!!асд!!д! сссдса!!!д 9120

д!асадсдса д!аассддса ааа!сдсдсс даадда!д!с дс!дссдас! дддсаа!дда 9180

дсдсс!дссд дсссад!а!с адсссд!са! ас!!даадс! аддсаддс!! а!с!!ддаса 9240

- 123 029904

адаада!сдс !!ддсс!сдс дсдсада!са д!!ддаадаа Шдйсас! асд!дааадд 9300

сдада!сасс аадд!ад!сд дсааа!аа!д !с!аасаа!! сд!!саадсс дасдссдс!! 9360

сдсддсдсдд с!!аас!саа дсд!!адада дс!ддддаад ас!а!дсдсд а!с!д!!даа 9420

дд!дд!!с!а адсс!сд!с! !дсда!ддса !!!сда!сса !!ссса!!сс дсдс!саада 9480

!ддс!!сссс !сддсад!!с а!садддс!а аа!саа!с!а дссдас!!д! ссдд!дааа! 9540

дддс!дсас! ссаасадааа саа!саааса ааса!асаса дсдас!!а!! сасасдадс! 9600

сааа!!асаа сдд!а!а!а! сс!дссад!с адса!са!са сассаааад! !аддсссдаа 9660

!ад!!!дааа !!адааадс! сдсаа!!дад д!с!асаддс сааа!!сдс! с!!адссд!а 9720

саа!а!!ас! сассдда!сс !аассдд!д! да!са!дддс сдсда!!ааа аа!с!саа!! 9780

а!а!!!дд!с !аа!!!ад!! !дд!а!!дад !аааасааа! !сдаассааа ссаааа!а!а 9840

аа!а!а!ад! !!!!а!а!а! а!дсс!!!аа дас!!!!!а! адаа!!!!с! !!аааааа!а 9900

!с!адааа!а !!!дсдас!с !!с!ддса!д !аа!а!!!сд !!ааа!а!да ад!дс!сса! 9960

!!!!а!!аас !!!ааа!аа! !дд!!д!асд а!сас!!!с! !а!саад!д! !ас!аааа!д 10020

сд!саа!с!с !!!д!!с!!с са!а!!са!а !д!саааасс !а!саааа!! с!!а!а!а!с 10080

!!!!!сдаа! !!даад!даа а!!!сда!аа !!!аааа!!а аа!адааса! а!са!!а!!! 10140

адд!а!са!а !!да!!!!!а !ас!!аа!!а с!ааа!!!дд !!аас!!!да аад!д!аса! 10200

саасдааааа !!ад!сааас дас!аааа!а аа!ааа!а!с а!д!д!!а!! аадаааа!!с 10260

!сс!а!аада а!а!!!!аа! ада!са!а!д !!!д!ааааа ааайаа!!! йас!аасас 10320

а!а!а!!!ас !!а!сааааа Шдасааад 1аадайааа а!аа1айса !с!аасаааа 10380

аааааассад аааа!дс!да ааасссддса ааассдаасс аа!ссааасс да!а!ад!!д 10440

дШддШд а!!!!да!а! ааассдаасс аас!сдд!сс аШдсассс с!аа!са!аа 10500

1адсШаа! аШсаада! айайаад! 1аасдйд!с аа!а!сс!дд ааа!Шдса 10560

ааа!даа!са адсс!а!а!д дс!д!аа!а! даа!!!аааа дсадс!сда! д!дд!дд!аа 10620

!а!д!аа!!! ас!!да!!с! ааааааа!а! сссаад!а!! аа!аа!!!с! дс!аддаада 10680

адд!!адс!а сда!!!асад сааадссада а!асаа!даа сса!ааад!д а!!даадс!с 10740

дааа!а!асд ааддаасааа !а!!!!!ааа аааа!асдса а!дас!!дда асаааадааа 10800

д!да!а!а!! !!!!д!!с!! ааасаадса! сссс!с!ааа даа!ддсад! !!!сс!!!дс 10860

а!д!аас!а! !а!дс!ссс! !сд!!асааа ааШ!ддас !ас!а!!ддд аас!!с!!с! 10920

даааа!ад!д дссассдс!! аа!!ааддсд сдсса!дссс дддсаадсдд ссдсасаад! 10980

!!д!асаааа аадсаддс!с сдсддссдса с!адд!!!аа ас!с!адаад с!аддаа!!с 11040

ааасааадаа дсда!сдсдс ддссдсса!! д!ас!сссад !а!са!!а!а д!дааад!!! 11100

- 124 029904

1ддс1с1с1с дссдд1дд111Шасс1с1 аШаааддд дППссасс 1ааааа11с1 11160

ддПИсаПс 1сасШас11д11асШа аШс1са1а аЮШддП даааПайа 11220

сдсПссдса сасдаПИсс ЛасаааШ аПаШдП ааасаШЮ ааассдсаШ 11280

аааШПИд аад1сссд1с 1а1сШаа1 д1ад1с1аас аППсаПИ 1дааа1а1а1 11340

ааШасйа аШ1адсд1 1дд1адааад са1аа1да11 1айсйай сйсйса1а 11400

1ааа1дШа а1а1асаа1а 1ааасааай сШассйа адааддаШ сссаШПИ 11460

аййааааа 1а1аШа1с ааа1аШП саассасд1а аа1с1са1аа 1аа1аад11д 11520

111саааад1 аа1аааа111 аас1сса1аа 1111111а11 сдас1да1с1 1ааадсааса 11580

сссад1даса саас1адсса Шййсй 1даа1ааааа аайсааПа 1са11д1а11 11640

ШШа1ас аа1даааа11 Юассаааса а1даШд1д д1аШс1да адсаадйа! 11700

дШйдсааа ;Шс1а1аа1 ЮссаШда сас1асддаа д1аас1даад а1с1дсИИ 11760

аса1дсдада сасаЮПс! ааад1ааШ 1аа1аа1ад11ас1а1а11с аадаШса! 11820

а1а1сааа1а с1саа1а11а с11с1ааааа айаайада ПИааНааа аШйасШ 11880

Шааййа адШааПд ПдааШд! дасПШда! йайайй асПИдШа 11940

аайдййа 1ада1адШ ааад1ааа1а 1аад1аа1д1 ад1адад1д11адад1д11а 12000

ссс1ааасса 1ааас1а1аа да111а1дд1 ддас1аа111 1са1а1а111 с11а11дс11 12060

йассййс Пдд1а1д1а ад1ссд1аас 1ддаа11ас1 д1ддд11дсс а1дасас1с1 12120

д1дд1сШ1 дд11са1дса 1дда1дс11д сдсаадаааа адасааадаа сааадааааа 12180

адасааааса дададасааа асдсаайас асаассаас! саааПадЮ ас1ддс1да1 12240

саадайдсс дсд1сса1д1 а1д1с1ааа1 дсса1дсааа дсаасасд1д с11ааса1дс 12300

асШааа1д дсйассса! сйаасссас асасааасас айдссйй 1с11са1са1 12360

сассасаасс асс1д1а1а1 айсайс1с йссдссасс ЮааШсП сасйсааса 12420

сасдйаасс 1дса1а1дсд 1д1са1ссса 1дсссааа1с 1сса1дса1д йссаассас 12480

сПсЮЮП а1а1аа1асс 1а1ааа1асс 1с1аа1а1са сШасйсй 1са1са1сса 12540

1сса1ссада д1ас1ас1ас 1с1ас1ас1а 1аа1асссса асссаасйа 1а11саа1ас 12600

1ас1с1адда 1ссаасаа1д 1с1дс1ссаа ссдс1даса1 садддс1адд дсйсададд 12660

с1аадаадд11саса1сдс1 да1ассдс1а Юаасаддса саа11дд1ас аадсасд1да 12720

ас1ддс1саа сдЮПссй а1са1сддаа 1сссас1с1а сдда1дса1с саадсШс! 12780

дддПссас! 1саас1саад ассдсПИс! дддс1д1да1 с1ас1ас11с Псассддас 12840

ПддааЮас сдс1дда1ас сасаддсШ дддс1сас1д с1са1ас1с1 дс1ас1с11с 12900

сас11адда1 с1ддс11дс1 дс1д11ддад даддадс1д11даддда1с1 а1сада1дд1 12960

- 125 029904

дддс!аддда йасадддс! са1са!адд1 асассда!ас сдасааддас сса1ас1с1д 13020

йаддааддд асйс1с1ас 1с1сассйд да1дда1дд! да!даадсад аасссааада 13080

дда!сддаад дассдаса!с 1с1да1с1са асдаддассс адйдйдй !ддсаасаса 13140

ддаас!асс! сааддйд!д йсасса!дд дасйдс1д! 1ссаа1дсй дйдс!ддас 13200

йдда!дддд адайддсй ддаддайсд 1д1асдс1дд аа!ссйадд а!сйсйсд 13260

йсаасаадс !ассйс!дс д1даас1с1с йдс!сас1д дсйддада! саассайсд 13320

а!да1аддаа с!с1сс!адд да!сасд!да 1сассдс1с1 1дйасссй ддададдда! 13380

ассасаасй ссассасдад йссса!с!д ас!асаддаа сдс!а1сдад 1ддсассад1 13440

асда!сс!ас саадХддй! а!с!дддсй ддаадсаас! 1ддайддс! 1асда1с1са 13500

адаадйсад ддс!аасдад а!сдадаадд даадддйса асаасйсад аадаадсйд 13560

а!аддаадад ддс!ас!сй дайддддаа ссссасйда (саасйсса д1да1ддаа! 13620

ддда!дас!а сдйдадсаа дс!аадаасд дааддддас! 1дйдс!а1с дс!ддадйд 13680

йсасда!д1 1ассдасйс айааддай асссаддадд аааддс!а!д а1с1сйс1д 13740

даа!сддааа дда!дс!асс дс!а!дйса асддаддад! д1ас!ассас !с!аасдсад 13800

сйасаасс! ййадсасс а!даддд!дд дад!да1сад дддадда!дс даддйдада 13860

!с!ддаадад ддс!садаад дадаасдйд ад!асдйад дда!дда!с! ддасаааддд 13920

!да!садддс !ддададсаа ссаассаада !сссададсс аа!сссаасс дс!да!дс!д 13980

сйдад1ад1 1адсйаа!с асс!адд!са ссадйИдаа с!аааа!дса 1д!адд1д1а 14040

ададс!са!д дададса!дд аа1айд1а1 ссдасса1д! аасадйИаа 1аас1дадс1 14100

сса1с1сас11сйс1а1да а!ааасааад да!дйа!да йИайааса с1с1а1с1а1 14160

дсассйай дйсййдй аааШссй йайайа! ааа1са1с1д аа!сд1дасд 14220

дсйа!ддаа 1дсйсааа1 ад!асааааа сааа1д1д1а сййаадас! йс1ааасаа 14280

йс!аасй1 адсайд!да асдадаса!а ад!дйаада адаса!ааса айа!аа!дд 14340

аадаадШд 1с1ссаШа ййайайй айасссас! 1а1Ща11а1 айадда1д! 14400

!ааддадаса 1аасаайа1 ааадададаа дй1д!а1сс аШайИа! 1а1а1ас1ас 14460

ссаШайИ айа!асйа йсасйай 1аа1д1с1И а!ааддй1д а1сса1да1а 14520

Шс1аа1а1 Шадйда! а1д1а1а1да ааадд!ас!а Шдаас1с1 сйас1с1д1 14580

а!аааддйд да!са!ссй ааад!ддд1с 1аШааШ 1айдсйс! !асада!ааа 14640

ааааааайа 1дадйддй 1да1аааа1а йдааддай 1аааа1аа1а а1ааа1аа1а 14700

аа1ааса1а1 аа1а1а1Ща йИаааШа 11а1аа1а1а асаШай! а1аааааад1 14760

ааа!айдй а1ааа1с1а1 асаайдШ адссйдс!д даасдаай! саайаШа 14820

- 126 029904

аасдадад!а ааса!а!!!д ас!!!!!дд! !а!!!аасаа а!!а!!а!!! аасас!а!а! 14880

дааа!!!!!! !!!!!!а!са дсааадаа!а ааа!!ааа!! аадааддаса а!дд!д!ссс 14940

аа!сс!!а!а саассаас!! ссасаадааа д!саад!сад адасаасааа аааасаадса 15000

ааддааа!!! !!!аа!!!да д!!д!с!!д! !!дс!дса!а а!!!а!дсад !аааасас!а 15060

саса!аассс ййадсад! ададсаа!дд !!дассд!д! дсйадсйс ййаййа 15120

!йййа!с адсааадаа! ааа!аааа!а ааа!дадаса сйсаддда! дй!саассс 15180

!!а!асаааа ссссааааас аад!!!сс!а дсассс!асс аасдаа!!сд сддссдс!!! 15240

сс!дса!дас а!сд!сс!дс ададссаадс дса!дс!!аа йааас!ад! с!сссад!а! 15300

сайа!ад!д ааадййдд с!с!с!сдсс дд!ддйй! !асс!с!а!! !ааадддд!! 15360

йссасс!аа ааайс!дд! а!сайс!са с!йас!!д! !асй!аай !с!са!аа!с 15420

!йдд!!даа а!!а!сасдс йссдсасас да!а!ссс!а сааа!йай а!!!дйааа 15480

саййсааа ссдса!аааа ййа!даад !сссд!с!а! с!йаа!д!а д!с!аасай 15540

йса!айда аа!а!а!аа! йасйаай йадсдйдд !адааадса! аа!да!йа! 15600

!сйа!!сй с!!са!а!аа а!д!йаа!а !асаа!а!аа асааайсй !асс!!аада 15660

адда!!!ссс а!!!!а!а!! !!ааааа!а! а!!!а!сааа !а!!!!!саа ссасд!ааа! 15720

с!са!аа!аа !аадйдй! саааад!аа! аааа!йаас !сса!аай! ййайсда 15780

с!да!с!!аа адсаасассс ад!дасасаа с!адсса!й !!йс!йда а!ааааааа! 15840

ссаа!!а!са йд!айй! !йа!асаа! даааа!йса ссааасаа!д а!йд!дд!а 15900

й!с!даадс аад!са!дй а!дсаааа!! с!а!аа!!сс сай!дасас !асддаад!а 15960

ас!даада!с !дс!!!!аса !дсдадасас а!с!!с!ааа д!аа!!!!аа !аа!ад!!ас 16020

!а!а!!саад а!!!са!а!а !сааа!ас!с аа!а!!ас!! с!аааааа!! аа!!ада!а! 16080

аа!!аааа!а !!ас!!!!!! аа!!!!аад! !!аа!!д!!д аа!!!д!дас !а!!да!!!а 16140

!!а!!с!ас! а!д!!!ааа! !д!!!!а!ад а!ад!!!ааа д!ааа!а!аа д!аа!д!ад! 16200

адад!д!!ад ад!д!!ассс !ааасса!аа ас!а!аада! !!а!дд!дда с!аа!!!!са 16260

1;й;ййсй айдсййа ссййсйд д!а!д!аад! ссд!аас!дд аа!!ас!д!д 16320

дд!!дсса!д асас!с!д!д д!сййдд! !са!дса!дд а!сйдсдса адааааадас 16380

ааадаасааа даааааадас аааасадада дасаааасдс аа!сасасаа ссаас!сааа 16440

!!ад!сас!д дс!да!саад а!сдссдсд! сса!д!а!д! с!ааа!дсса !дсааадсаа 16500

сасд!дсйа аса!дсас!! !ааа!ддс!с ассса!с!са асссасасас ааасасайд 16560

сс!!!!!с!! са!са!сасс асаассасс! д!а!а!а!!с а!!с!с!!сс дссасс!саа 16620

!!!с!!сас! !саасасасд !саасс!дса !а!дсд!д!с а!ссса!дсс сааа!с!сса 16680

- 127 029904

!дса!д!!сс аассасс!!с !с!с!!а!а! аа!асс!а!а аа!асс!с!а а!а!сас!са 16740

с!!с!!!са! са!сса!сса !ссадад!ас !ас!ас!с!а с!ас!а!аа! ассссаассс 16800

аас!са!а!! саа!ас!ас! с!адд!ассс !дсаддда!с саасаа!ддс !сссааса!! 16860

!с!дадда!д !саа!дд!д! !с!!!!!дад !сада!дсдд саасссс!да !!!ддс!с!! 16920

!ссасассас с!д!дсаааа адс!дасаас адасссаадс аас!!д!д!д даддааса!! 16980

!!дс!!!!сд с!!ас!!дса сс!сдсадс! с!с!асддад дс!а!!!д!! !с!с!!сад! 17040

дсаааа!ддс адассдаса! !!!сдс!!ас а!!с!!!а!д !са!с!с!дд ас!дддда!а 17100

ас!дс!дддд саса!адас! с!дддс!сас аад!са!аса аадссаад!д дссас!сада 17160

д!!а!ас!дд !са!с!!саа сасдд!!дсс !!!саадасд с!дс!а!дда !!дддс!сд! 17220

дасса!адаа !дса!сасаа д!асадсдад ассдасдсдд асссасасаа !дсаасдада 17280

дд!!!с!!с! !с!с!саса! !ддс!ддс!! с!!д!!адда ааса!сс!да !с!дааадаа 17340

ааадддаадд дас!сдаса! дад!да!с!с с!!дс!да!с саа!ас!ссд !!!!садаад 17400

аад!ас!а!с !да!сс!са! дсс!с!ддсс !д!!!!д!да !дссаассд! !а!сссдд!! 17460

!ас!!!!ддд дадааас!!д дасааа!дс! !!с!!сд!дд садсса!д!! ссд!!а!дс! 17520

!!са!сс!да а!д!!асс!д д!!дд!даас !с!дссдсас асаад!дддд адасааассс 17580

!а!дасаад! сса!саадсс !!ссдаааас с!!!сад!!д сда!д!!!дс !!!дддадаа 17640

дда!!!саса а!!асса!са сас!!!!ссд !дддас!аса адасадсада дс!!ддааас 17700

аасаад!!да ас!!сасаас аасд!!са!с аа!!!с!!!д сдаааа!сдд !!дддсс!а! 17760

да!!!даада с!д!дад!да !даса!!д!с аадаасаддд !саададаас !ддсда!дда 17820

адсса!са!с !с!ддддс!д ддд!да!дад аа!сададса аадаадада! ада!дсадсс 17880

а!!адда!са ассс!ааада сда!!дад!а д!!адс!!аа !сасс!адад с!сдд!сасс 17940

!сдад!а!са ааа!с!а!!! адааа!асас аа!а!!!!д! !дсаддс!!д с!ддадаа!с 18000

да!с!дс!а! са!ааааа!! асааааааа! !!!а!!!дсс !саа!!а!!! !адда!!дд! 18060

айааддасд сйааайа! йд!сддд!с ас!асдса!с айд!дайд адаада!сад 18120

сда!асдааа !а!!сд!ад! ас!а!сда!а а!!!а!!!да ааа!!са!аа даааадсааа 18180

сд!!аса!да а!!да!дааа саа!асааад асада!ааад ссасдсаса! !!адда!а!! 18240

ддссдадай ас!даа!а!! дад!аада!с асддаай!с !дасаддадс а!д!с!!саа 18300

йсадсссаа а!ддсад!!д ааа!ас!саа ассдсссса! а!дсаддадс дда!сайса 18360

!!д!!!д!!! дд!!дсс!!! дссааса!дд дад!ссаадд !!ддсдсдсс дасссадс!! 18420

!с 18422

<210> 63

- 128 029904

<211> 14233

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рИАВ7326

<400> 63

йд!асааад 1ддйдсддс сдсйаайа ааШааай саайаа!дс аа!сйдай 60

йсаасаасд аад§1аа!дд сд!аааадаа аааа!д1а1д йайд!ай дайШса! 120

да!дйдаад сд!дсса!аа 1а1да1да1д 1а1аайааа а!айаас1д 1сдсаййа 180

йдааа!ддс ас!дйай1 саассаййс й1дайс!д йаса!даса сдас!дсаад 240

аад1ааа1аа !адасдссд! 1дйааадаа 11дс1а1са1 а1д1дсс1аа с!ададддаа 300

1йдадсд!с адасс1аа1с ааа!айаса ааа1а1с1са с1с1д1сдсс адсаа!дд!д 360

!аа!садсдс адасааа!дд сд!ааада!с дсддааааас с!ссссдад! ддса!да1ад 420

с1дсс1с1д1 айдс!дай 1ад1садсс1 1а1йдасй ааддд!дссс 1сдйад!да 480

сааайдсй !сааддадас адсса!дссс сасасШд! !дааааасаа айдссШд 540

дддадасдд! ааадссадй дс!сйсаа! ааддаа!д!с даддаддсаа !д!аассдсс 600

1с1дд1ад1а сасйсШа айсааааа! саай1д!а1 1саада1асс дсаааааас! 660

1а!ддй1аа ассс!дсадд ас!ад1ссад аадд!аайа 1ссаада1д1 адса!саада 720

а!ссаа!дй !асдддаааа ас!а1ддаад 1а11а1д1аа дс!садсаад аадсада!са 780

а!а1дсддса саййдсаас сййдйсаа ааа!даадаа 1д1асада1а саада1сс1а 840

1ас1дссада а!асдаадаа даа1асд1ад ааайдаааа адаадаасса ддсдаадааа 900

адааййда адасд!аадс ас!дасдаса асаа!даааа даадаада!а адд1сдд1да 960

йд!дааада даса!ададд асаса1д1аа дд1ддаааа1 д!аадддсдд ааад1аасс1 1020

ййсасааад дааййай ссссас1ас1 ййссййа ййййссд 1д1са1ИИ 1080

дсссйдад! Шсс1а1а1 ааддаассаа дйсддсай 1д1дааааса адаааааай 1140

1дд1д1аадс 1аййсй! даад1ас1да дда1асаас11сададааа1 йд1аадй1 1200

д1адд1асса да1с1дда1с ссааасса!д 1с1ссддада ддадассад! (дадайадд 1260

ссадс!асад садс1да1а1 ддссдсддй 1д1даййсд йаассайа сайдадасд 1320

1с1асад1да асШаддас ададссасаа асассасаад ад!ддайда 1да1с1адад 1380

аддйдсаад а!ада!ассс йддйддй дс!даддйд адддХдйд! ддс1ддйП1 1440

дсйасдс!д ддссс!ддаа ддс!аддаас дсйасдай ддасадйда дад1ас1дй 1500

1асд1д1сас а!аддса!са ааддйдддс с1адда1с1а сайд!асас асаШдсй 1560

аадйййдд аддсдсаадд ййаад1с! д1ддйдс1д 11а1аддсс11ссааасда1 1620

- 129 029904

сса!с!дйа ддйдса!да ддсШддда !асасадссс дддд!асай дсдсдсадс! 1680

дда!асаадс а!дд!дда!д дса!да!дй ддШйддс ааадддай! 1дадйдсса 1740

дс!сс!ссаа ддссадйад дссадйасс сааа!с!дад 1адйадсй аа!сасс!ад 1800

адс!сда!сд дсддсаа!ад сйсйадсд сса!сссддд йда!сс1а! с!д!дйдаа 1860

а!адйдсдд !дддсааддс 1с1с1йсад ааадасаддс ддссааадда асссаадд!д 1920

адд!дддс!а !ддс!с!сад йссйд!дд аадсдсйдд !с!аадд!дс ададд!дйа 1980

дсддда!даа дсаааад!д! ссдайд!аа саада!а!д! !да!сс!асд 1аадда1ай 2040

ааад!а!д!а йса!сас!а а!а!аа!сад 1д1айссаа 1а1д!ас1ас даШссаа! 2100

д!сй1айд !сдссд!а!д !аа!сддсд! сасаааа!аа !ссссдд!да сШсййа 2160

а!ссадда!д ааа!аа!а!д йайа!аа! ййдсдай 1дд1ссдйа 1аддаайда 2220

ад!д!дсйд адд!сдд!сд ссассас!сс са!йса1аа 1й1аса1д1 а!йдааааа 2280

1ааааай1а 1дд!айсаа Шааасасд 1а1асйд1а аадаа!да!а 1сйдааада 2340

аа!а1адй1 ааа!ай1а! !да!аааа!а асаад!садд 1айа1ад1с саадсааааа 2400

са!ааай1а йда!дсаад Шааайса дааа!а!йс аа!аас!да! 1а1а1садс1 2460

дд!асайдс сд!ада!даа адас!дад!д сда!айа!д д!д!аа!аса 1аддаайсд 2520

Шааасда! с!дсд!с!аа ййсдд!сс аасйдсаса ддааадасд! сдассдсдд! 2580

адс!сйдсс садсадас!д ддсйссад! сс!йсдс!с да!сддд!сс аа!дйд!сс 2640

!садс!д!да ассддаадсд дасдассаас ад!ддаадаа с!даааддаа сдадссд!с! 2700

а!ассйда! да!сддсс!с !дд!дааддд !а!са!сдса дссаадсаад с!са!дааад 2760

дс!да!дддд дадд!д!а!а айа!даддс ссасддсддд сйайсй! адддадда!с 2820

1а1с1сдйд с!саад!дса !ддсдсааад садйайдд ад!дсддай йсдйддса 2880

1айайсдс сасдадйад садасдаада дассйса!д аасд!ддсса аддссадад! 2940

!аадсада!д йасдссс!д с!дсаддсс! йс!айа!с саа!адйдд йда!с1йд 3000

дааададсс! сддс!даддс сса!ас!даа адада!сда! дда!а!сда! а!дсса!дй 3060

д!йдс!адс садаассада !саса!ссда 1а1дс1айд садсйдасд сада!а!дда 3120

дда!аадйд айса!ддда !сдс!садда д!адс!са!с са!дсасдсс дасаадааса 3180

дааайссд! сдадйаасд садссдсйа сдасддайс даадд!са!с сайсддаа! 3240

д!айад1й дсассадс!с сдсд!сасас с!д1сйса! йдаа!аада 1дйадсаа1 3300

1д1ййадс 1йд1сйд1 !д!ддсаддд сддсаад!дс йсадаса!с айс!дйй 3360

саааййа! дс!ддадаас адсйсйаа йсс!йдда аа!аа!адас 1дсд1сйаа 3420

аайсада!д 1с1дда1а1а да!а!дайд !аааа!аасс 1ай1аад1д 1сай1адаа 3480

- 130 029904

са!аад!!!! а!даа!д!!с !!сса!!!!с д!са!сдаас даа!аадад! ааа!асасс! 3540

й!йааса! !асааа!аад !!с!1а!асд !!д1!1а!ас ассдддаа!с а!йссайа 3600

!!!!сдсдса ааад!сасдд а!а!!сд!да аадсдаса!а аас!дсдааа !!!дсдддда 3660

д!д!с!!дад !!!дсс!сда ддс!адсдса !дсаса!ада сасасаса!с а!с!са!!да 3720

!дс!!дд!аа !аа!!д!са! !ада!!д!!! !!а!дса!ад а!дсас!сда аа!садссаа 3780

ййадасаа д!а!сааасд да!д!дасй сад!аса!!а аааасд!ссд саа!д!д!!а 3840

йаадйд!с !аадсд!саа !йда!йас аа!!даа!а! а!сс!дсссс адссадссаа 3900

садс!сда!! !асаа!!даа !а!а!сс!дс сддссддссс асдсд!д!сд аддаайс!д 3960

а!с!ддсссс са!!!ддасд !даа!д!ада сасд!сдааа !ааада!!!с сдаа!!адаа 4020

!аа!!!д!!! а!!дс!!!сд сс!а!ааа!а сдасдда!сд !аа!!!д!сд !!!!а!сааа 4080

а!д!ас!!!с а!!!!а!аа! аасдс!дсдд аса!с!аса! !!!!даа!!д аааааааа!! 4140

дд!аа!!ас! с!!!с!!!!! с!сса!а!!д асса!са!ас !са!!дс!да !сса!д!ада 4200

!!!сссддас а!даадсса! !!асаа!!да а!а!а!сс!д ссдссдс!дс сдс!!!дсас 4260

ссдд!ддадс !!дса!д!!д д!!!с!асдс адаас!дадс сдд!!аддса да!аа!!!сс 4320

а!!дадаас! дадсса!д!д сасс!!сссс ссаасасдд! дадсдасддд дсаасддад! 4380

да!ссаса!д ддас!!!!аа аса!са!ссд !сдда!ддсд !!дсдадада адсад!сда! 4440

ссд!дада!с адссдасдса ссдддсаддс дсдсаасасд а!сдсааад! а!!!даасдс 4500

адд!асаа!с дадссдасд! !сасдсддаа сдассаадса адс!!ддс!д сса!!!!!дд 4560

дд!даддссд !!сдсддссд аддддсдсад сссс!ддддд да!дддаддс ссдсд!!адс 4620

дддссдддад дд!!сдадаа дддддддсас ссссс!!сдд сд!дсдсдд! сасдсдсаса 4680

дддсдсадсс с!дд!!аааа асаадд!!!а !ааа!а!!дд !!!аааадса дд!!аааада 4740

садд!!адсд д!ддссдааа аасдддсдда аассс!!дса аа!дс!дда! !!!с!дсс!д 4800

!ддасадссс с!сааа!д!с аа!адд!дсд сссс!са!с! д!садсас!с !дсссс!саа 4860

д!д!саадда !сдсдсссс! са!с!д!сад !ад!сдсдсс сс!саад!д! саа!ассдса 4920

дддсас!!а! ссссаддс!! д!ссаса!са !с!д!дддаа ас!сдсд!аа аа!саддсд! 4980

!!!сдссда! !!дсдаддс! ддссадс!сс асд!сдссдд ссдааа!сда дсс!дсссс! 5040

са!с!д!саа сдссдсдссд дд!дад!сдд сссс!саад! д!саасд!сс дсссс!са!с 5100

!д!сад!дад ддссаадй! !ссдсдадд! а!ссасаасд ссддсддссд сдд!д!с!сд 5160

сасасддс!! сдасддсд!! !с!ддсдсд! !!дсадддсс а!адасддсс дссадсссад 5220

сддсдадддс аассадсссд д!дадсд!сд даааддд!сд асдда!с!!! !ссдс!дса! 5280

аассс!дсй сдддд!сай а!адсда!!! !йсдд1а!а !сса!сс!й !!сдсасда! 5340

- 131 029904

акасаддакк ккдссааадд дкксдкдкад аскккссккд дкдкакссаа сддсдксадс 5400

сдддсаддак аддкдаадка ддсссасссд сдадсдддкд кксскксккс аскдкссскк 5460

акксдсасск ддсддкдскс аасдддаакс скдскскдсд аддскддссд дскассдссд 5520

дсдкаасада кдадддсаад сддакддскд акдааассаа дссаассадд аадддсадсс 5580

сасскаксаа ддкдкаскдс сккссадасд аасдаададс даккдаддаа ааддсддсдд 5640

сддссддсак дадсскдксд дсскасскдс кддссдксдд ссадддскас ааааксасдд 5700

дсдксдкдда скакдадсас дкссдсдадс кддсссдсак саакддсдас скдддссдсс 5760

кдддсддсск дскдаааскс кддсксассд асдасссдсд сасддсдсдд кксддкдакд 5820

ссасдаксск сдссскдскд дсдаадаксд аададаадса ддасдадскк ддсааддкса 5880

кдакдддсдк ддкссдсссд адддсададс сакдаскккк ккадссдска ааасддссдд 5940

ддддкдсдсд кдаккдссаа дсасдксссс акдсдсксса ксаадаадад сдаскксдсд 6000

дадскддкак ксдкдсаддд саадакксдд аакассаадк асдадаадда сддссадасд 6060

дкскасддда ссдаскксак кдссдакаад дкддаккакс кддасассаа ддсассаддс 6120

дддксааакс аддаакаадд дсасаккдсс ссддсдкдад ксддддсаак сссдсаадда 6180

дддкдаакда аксддасдкк кдассддаад дсакасаддс аадааскдак сдасдсдддд 6240

ккккссдссд аддакдссда аассаксдса адссдсассд ксакдсдкдс дссссдсдаа 6300

ассккссадк ссдксддскс дакддкссад саадскасдд ссаадаксда дсдсдасадс 6360

дкдсааскдд скссссскдс сскдсссдсд ссаксддссд ссдкддадсд кксдсдксдк 6420

сксдаасадд аддсддсадд кккддсдаад ксдакдасса ксдасасдсд аддааскакд 6480

асдассаада адсдааааас сдссддсдад дасскддсаа аасаддксад сдаддссаад 6540

саддссдсдк кдскдаааса сасдаадсад садаксаадд ааакдсадск ккссккдккс 6600

дакаккдсдс сдкддссдда сасдакдсда дсдакдссаа асдасасддс ссдскскдсс 6660

скдкксасса сдсдсаасаа дааааксссд сдсдаддсдс кдсаааасаа ддксаккккс 6720

сасдксааса аддасдкдаа даксасскас ассддсдксд адскдсдддс сдасдакдас 6780

дааскддкдк ддсадсаддк дккддадкас дсдаадсдса сссскаксдд сдадссдакс 6840

асскксасдк кскасдадск ккдссаддас скдддскддк сдаксаакдд ссддкаккас 6900

асдааддссд аддаакдсск дксдсдсска саддсдасдд сдакдддскк сасдкссдас 6960

сдсдккдддс асскддаакс ддкдксдскд скдсассдск кссдсдксск ддассдкддс 7020

аадаааасдк сссдккдсса ддксскдакс дасдаддааа ксдксдкдск дкккдскддс 7080

дассаскаса сдааакксак акдддадаад кассдсаадс кдксдссдас ддсссдасдд 7140

акдкксдаск аккксадскс дсассдддад ссдкасссдс ксаадскдда аассккссдс 7200

- 132 029904

с1са1д1дсд да1сдда11с сасссдсд1д аадаад1ддс дсдадсадд! сддсдаадсс 7260

1дсдаадад1 1дсдаддсад сддсс1дд1д даасасдсс! ддд1саа1да 1дасс1дд1д 7320

сайдсааас дс1адддсс1 1д1дддд1са дйссддс1д ддддйсадс адссадсдс! 7380

йас1ддса1 йсаддааса адсдддсас! дс1сдасдса сйдсйсдс 1сад1а1сдс 7440

1сдддасдса сддсдсдс1с 1асдаас1дс сда1ааасад аддайаааа йдасаайд 7500

1да11ааддс 1садайсда сддсйддад сддссдасд! дсадда111с сдсдада1сс 7560

дайдХсддс сс1даадааа дс1ссадада 1дйсддд1с сдШасдад сасдаддада 7620

аааадссса! ддаддсдйс дс1даасдд1 1дсдада1дс сдХддсайс ддсдсс1аса 7680

1сдасддсда да1са11ддд с1д1сдд1с1 1сааасадда ддасддсссс ааддасдс1с 7740

асааддсдса 1с1д1ссддс дййсд1дд адсссдааса дсдаддссда дддд1сдссд 7800

д1а1дс1дс1 дсдддсдйд ссддсдддй 1а11дс1сд1 да1да1сд1с сдасадайс 7860

саасдддаа! с1дд1дда1д сдса1сйса 1сс1сддсдс ас11аа1а11 1сдс1а11с1 7920

ддадсйдй дШаШсд д1с1ассдсс 1дссдддсдд дд1сдсддсд асдд!аддсд 7980

с1д1дсадсс дс1да1дд1с д1д11са1с1 с1дссдс1с1 дс1адд1адс ссда1асда1 8040

1да1ддсдд1 сс1дддддс1 аШдсддаа с1дсдддсд1 ддсдс1дйд дХдйдасас 8100

сааасдсадс дс1ада1сс1 д1сддсд1сд садсдддсс! ддсдддддсд д1йсса1дд 8160

сд11сддаас сд1дс1дасс сдсаад1ддс аасс1сссд1 дсс1с1дс1с ассШассд 8220

сс1ддсаас1 ддсддссдда ддасйс1дс 1сдйссад1 адс1йад1д Й1да1ссдс 8280

саа1сссда1 дсс1асадда ассаа1д11с 1сддсс1ддс д1ддс1сддс с1да1сддад 8340

сдддШаас с1ас11ссй 1дд11ссддд дда1с1сдсд ас1сдаасс1 асадйдШ 8400

ссйас1ддд с1йс1садс ссссдадсдс 11ад1дддаа Й1д1асссс йа1сдаасс 8460

дддадсасад да1дасдсс1 аасаайса! 1саадссдас ассдсйсдс ддсдсддсй 8520

аайсаддад 11аааса1са 1дадддаадс дд1да1сдсс даад1а1сда с1саас1а1с 8580

ададд1ад11 ддсд1са1сд адсдсса1с1 сдаассдасд йдс1ддссд 1асай1д1а 8640

сддс1ссдса д1дда1ддсд дсс1даадсс асасад1да1 айда111дс 1дд11асдд1 8700

дассд1аадд с11да1дааа саасдсддсд адс111да1с аасдассШ 1ддааас11с 8760

ддсйсссс! ддадададсд ада11с1ссд сдс1д1адаа д1сасса11д йд1дсасда 8820

сдаса1са11 ссд1ддсд11 а1ссадс1аа дсдсдаас1д саа111ддад аа1ддсадсд 8880

саа1даса11 с11дсадд1а 1сйсдадсс адссасда1с даса11да1с 1ддс1а1сй 8940

дс1дасаааа дсаададаас а1адсд11дс сйдд1адд1 ссадсддсдд аддаас1с11 9000

1да1ссддй сс1даасадд а1с1а111да ддсдс1ааа1 дааассйаа сдс1а1ддаа 9060

- 133 029904

сХсдссдссс дасХдддсХд дсдаХдадсд аааХдХадХд сХХасдХХдХ сссдсаХХХд 9120

дХасадсдса д1аассддса аааХсдсдсс дааддаХдХс дсХдссдасХ дддсааХдда 9180

дсдсс1дссд дсссад1а1с адсссд1са1 ас11даадс1 аддсаддс11 а1с11ддаса 9240

адаада1сдс 11ддсс1сдс дсдсада1са д11ддаадаа 111д11сас1 асд1дааадд 9300

сдада1сасс аадд1ад1сд дсааа1аа1д 1с1аасаа11 сд11саадсс дасдссдс11 9360

сдсддсдсдд с11аас1саа дсд11адада дс1ддддаад ас1а1дсдсд а1с1д11даа 9420

дд1дд11с1а адсс1сд1с1 1дсда1ддса 111сда1сса 11ссса11сс дсдс1саада 9480

1ддс11сссс 1сддсад11с а1садддс1а аа1саа1с1а дссдас11д1 ссдд1дааа1 9540

дддс1дсас1 ссаасадааа саа1саааса ааса1асаса дсдас11а11 сасасдадс1 9600

сааа11асаа сдд1а1а1а1 сс1дссад1с адса1са1са сассаааад1 1аддсссдаа 9660

1ад111дааа 11адааадс1 сдсаа11дад д1с1асаддс сааа11сдс1 с11адссд1а 9720

саа1а11ас1 сассдда1сс 1аассдд1д1 да1са1дддс сдсда11ааа аа1с1саа11 9780

а1а111дд1с 1аа111ад11 1дд1а11дад 1аааасааа1 1сдаассааа ссаааа1а1а 9840

аа1а1а1ад1 1111а1а1а1 а1дсс111аа дас11111а1 адаа1111с1 11аааааа1а 9900

1с1адааа1а 111дсдас1с 11с1ддса1д 1аа1а111сд 11ааа1а1да ад1дс1сса1 9960

ХХХХаХХаас ХХ1аааХааХ ХддХХдХасд аХсасХХХсХ ХаХсаадХдХ1ас1аааа1д 10020

сдХсааХсХс ХХХдХХсХХс саййсаХа ХдХсаааасс ЕйсааааП сйа1а1а1с 10080

ХХХХХсдааХ ХХдаадХдаа аШсда1аа Шаааайа ааХадаасаХ аХсайаХй 10140

аддХаХсаХа ХХдаХййа йсйаайа с1аааШдд йаасХйда аадХдХасаХ 10200

саасдааааа ХХадХсааас дас1аааа1а ааХаааХаХс аХдХдХХаХХ аадаааайс 10260

ХссХаХаада аХаХХХХааХ адаХсаХаХд ХХХдХааааа ааайааХй Пас1аасас 10320

аХаХаХХХас ХХаХсааааа ХХХдасааад 1аада11ааа аШйаПса ХсХаасаааа 10380

аааааассад ааааХдсХда ааасссддса ааассдаасс ааХссааасс даХаХадХХд 10440

дХХХддйХд аХХХХдаХаХ ааассдаасс аасХсддХсс аХХХдсассс с1аа1са1аа 10500

1адс1Иаа1 аХХХсаадаХ айайаадХ ХаасдНдХс ааХаХссХдд аааййдса 10560

аааХдааХса адсс1а1а1д дсХд1ааХа1 дааХХХаааа дсадсХсдаХ дХдд1ддХаа 10620

1а1д1ааШ асйдайсХ аааааааХаХ сссаадХаХХ аа1ааШс1 дс1аддаада 10680

аддХХадсХа сдаХХХасад сааадссада аХасааХдаа сса1ааад1д аХХдаадсХс 10740

даааййасд ааддаасааа ХаХХХХХааа ааааХасдса аХдасХХдда асаааадааа 10800

дХдаХаХаХХ ХХХХдХХсй ааасаадсаХ ссссХсХааа дааХддсадХ ХХХссХХХдс 10860

аХдХаасХаХ ХаХдсХсссХ ХсдХХасааа ааХХХХддас ХасХаХХддд аасйсйсХ 10920

- 134 029904

даааа!ад!д дссассдс!! аа!!ааддсд сдсса!дссс дддсаадсдд ссдсасаад! 10980

!!д!асаааа аадсаддс!с сдсддссдса с!адд!!!аа ас!с!адаад с!аддаа!!с 11040

дсддссдс!! !сс!дса!да са!сд!сс!д сададссаад сдса!дс!!а а!!ааас!ад 11100

!с!сссад!а !са!!а!ад! дааад!!!!д дс!с!с!сдс сдд!дд!!!! !!асс!с!а! 11160

!!ааадддд! !!!ссасс!а аааа!!с!дд !а!са!!с!с ас!!!ас!!д !!ас!!!аа! 11220

!!с!са!аа! с!!!дд!!да аа!!а!сасд с!!ссдсаса сда!а!ссс! асааа!!!а! 11280

!а!!!д!!аа аса!!!!саа ассдса!ааа а!!!!а!даа д!сссд!с!а !с!!!аа!д! 11340

ад!с!ааса! !!!са!а!!д ааа!а!а!аа !!!ас!!аа! !!!адсд!!д д!адааадса 11400

!аа!да!!!а !!с!!а!!с! !с!!са!а!а аа!д!!!аа! а!асаа!а!а аасааа!!с! 11460

!!асс!!аад аадда!!!сс са!!!!а!а! !!!ааааа!а !а!!!а!саа а!а!!!!!са 11520

ассасд!ааа !с!са!аа!а а!аад!!д!! !саааад!аа !аааа!!!аа с!сса!аа!! 11580

!!!!!а!!сд ас!да!с!!а аадсаасасс сад!дасаса ас!адсса!! !!!!!с!!!д 11640

аа!ааааааа !ссаа!!а!с а!!д!а!!!! !!!!а!асаа !даааа!!!с ассааасаа! 11700

да!!!д!дд! а!!!с!даад саад!са!д! !а!дсаааа! !с!а!аа!!с сса!!!даса 11760

с!асддаад! аас!даада! с!дс!!!!ас а!дсдадаса са!с!!с!аа ад!аа!!!!а 11820

а!аа!ад!!а с!а!а!!саа да!!!са!а! а!сааа!ас! саа!а!!ас! !с!аааааа! 11880

!аа!!ада!а !аа!!аааа! а!!ас!!!!! !аа!!!!аад !!!аа!!д!! даа!!!д!да 11940

с!а!!да!!! а!!а!!с!ас !а!д!!!ааа !!д!!!!а!а да!ад!!!аа ад!ааа!а!а 12000

ад!аа!д!ад !адад!д!!а дад!д!!асс с!ааасса!а аас!а!аада !!!а!дд!дд 12060

ас!аа!!!!с а!а!а!!!с! !а!!дс!!!! асс!!!!с!! дд!а!д!аад !ссд!аас!д 12120

даа!!ас!д! ддд!!дсса! дасас!с!д! дд!с!!!!дд !!са!дса!д да!с!!дсдс 12180

аадааааада сааадаасаа адаааааада саааасадад адасаааасд саа!сасаса 12240

ассаас!саа а!!ад!сас! ддс!да!саа да!сдссдсд !сса!д!а!д !с!ааа!дсс 12300

а!дсааадса асасд!дс!! ааса!дсас! !!ааа!ддс! сассса!с!с аасссасаса 12360

сааасаса!! дсс!!!!!с! !са!са!сас сасаассасс !д!а!а!а!! са!!с!с!!с 12420

сдссасс!са а!!!с!!сас !!саасасас д!саасс!дс а!а!дсд!д! са!ссса!дс 12480

ссааа!с!сс а!дса!д!!с саассасс!! с!с!с!!а!а !аа!асс!а! ааа!асс!с! 12540

аа!а!сас!с ас!!с!!!са !са!сса!сс а!ссадад!а с!ас!ас!с! ас!ас!а!аа 12600

!ассссаасс саас!са!а! !саа!ас!ас !с!адд!асс с!дсаддда! ссаасаа!дд 12660

с!сссааса! !!с!дадда! д!саа!дд!д !!с!!!!!да д!сада!дсд дсаасссс!д 12720

а!!!ддс!с! !!ссасасса сс!д!дсааа аадс!дасаа садасссаад саас!!д!д! 12780

- 135 029904

ддаддааса1 111дс1111с дс11ас11дс асс1сдсадс 1с1с1асдда ддс1а111д1 12840

11с1с11сад 1дсаааа1дд садассдаса 1111сдс11а са11с111а1 д1са1с1с1д 12900

дас1дддда1 аас1дс1ддд дсаса1адас 1с1дддс1са саад1са1ас ааадссаад1 12960

ддссас1сад ад11а1ас1д д1са1с11са асасдд11дс с111саадас дс1дс1а1дд 13020

а11дддс1сд 1дасса1ада а1дса1саса ад1асадсда дассдасдсд дасссасаса 13080

а1дсаасдад аддШсйс 11с1с1саса йддс1ддс1 1сйдйадд аааса1сс1д 13140

аШдааада аааадддаад ддас!сдаса 1дад1да1с1 сс11дс1да1 ссаа1ас1сс 13200

дййсадаа даад1ас1а1 с1дйсс1са !дсс!с!ддс с!дййд!д а1дссаассд 13260

11а1сссдд1 йасййдд ддадааасй ддасааа!дс ШсйсдХд дсадсса!д! 13320

!ссдйа!дс 111са1сс1д аа1д11асс1 ддйдд!даа сШдссдса сасаад!ддд 13380

дадасааасс с!а!дасаад 1сса1саадс сйссдаааа ссШсадй дсда!дй1д 13440

сШдддада аддаШсас аа11асса1с асасййсс д!дддас!ас аадасадсад 13500

адсйддааа саасаадйд аасйсасаа саасдйса! сааШсШ дсдаааа!сд 13560

дйдддсс!а 1даШдаад ас!д!дад1д а1дасайд! саадаасадд д!саададаа 13620

с!ддсда!дд аадсса1са1 сШддддс! дддд!да!да даа!сададс ааадаадада 13680

1ада1дсадс сайадда!с аассс!ааад асдайдад! адйадсйа а&ассШда 13740

дс!сдд!сас с1сдад1а1с аааа1с1а111адааа1аса саа1аййд йдсаддсй 13800

дс1ддадаа1 сда1с1дс1а 1са1:ааааа1: 1асааааааа ййаШдс с1саа11а11 13860

йаддайдд 1айааддас дсйааайа Шд1сддд1 сас1асдса1 сайд1дай 13920

дадаада1са дсдаШсдаа а1айсд1ад 1ас1а1:сда1: ааШаШд аааа11са1а 13980

адаааадсаа асд11аса1д аа11да1даа асаа1асааа дасада1ааа дссасдсаса 14040

111адда1а1 1ддссдада1 1ас1даа1а1 1дад1аада1 сасддаа111 с1дасаддад 14100

са1д1с11са а11садссса аа1ддсад11 дааа1ас1са аассдсссса 1а1дсаддад 14160

сдда1са11с а11д111д11 1дд11дсс11 1дссааса1д ддад1ссаад д11ддсдсдс 14220

сдасссадШ йс 14233

<210> 64

<211> 14575

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рОЛВ7328

<400> 64

11д1асааад 1дд11дсддс сдс11аа11а аа111ааа11 саа11аа1дс аа1с11да11 60

- 136 029904

!!саасаасд аадд!аа!дд сд!аааадаа аааа!д!а!д !!а!!д!а!! да!с!!!са! 120

да!д!!даад сд!дсса!аа !а!да!да!д !а!аа!!ааа а!а!!аас!д !сдса!!!!а 180

!!дааа!ддс ас!д!!а!!! саасса!а!с !!!да!!с!д !!аса!даса сдас!дсаад 240

аад!ааа!аа !адасдссд! !д!!ааадаа !!дс!а!са! а!д!дсс!аа с!ададддаа 300

!!!дадсд!с адасс!аа!с ааа!а!!аса ааа!а!с!са с!с!д!сдсс адсаа!дд!д 360

!аа!садсдс адасааа!дд сд!ааада!с дсддааааас с!ссссдад! ддса!да!ад 420

с!дсс!с!д! а!!дс!да!! !ад!садсс! !а!!!дас!! ааддд!дссс !сд!!ад!да 480

сааа!!дс!! !сааддадас адсса!дссс сасас!!!д! !дааааасаа а!!дсс!!!д 540

дддадасдд! ааадссад!! дс!с!!саа! ааддаа!д!с даддаддсаа !д!аассдсс 600

!с!дд!ад!а сас!!с!с!а а!ссааааа! саа!!!д!а! !саада!асс дсаааааас! 660

!а!дд!!!аа ассс!дсадд ас!ад!ссад аадд!аа!!а !ссаада!д! адса!саада 720

а!ссаа!д!! !асдддаааа ас!а!ддаад !а!!а!д!аа дс!садсаад аадсада!са 780

а!а!дсддса са!а!дсаас с!а!д!!саа ааа!даадаа !д!асада!а саада!сс!а 840

!ас!дссада а!асдаадаа даа!асд!ад ааа!!даааа адаадаасса ддсдаадааа 900

адаа!с!!да адасд!аадс ас!дасдаса асаа!даааа даадаада!а адд!сдд!да 960

!!д!дааада даса!ададд асаса!д!аа дд!ддаааа! д!аадддсдд ааад!аасс! 1020

!а!сасааад даа!с!!а!с ссссас!ас! !а!сс!!!!а !а!!!!!ссд !д!са!!!!! 1080

дссс!!дад! !!!сс!а!а! ааддаассаа д!!сддса!! !д!дааааса адаааааа!! 1140

!дд!д!аадс !а!!!!с!!! даад!ас!да дда!асаас! !сададааа! !!д!аад!!! 1200

д!адд!асса да!с!дда!с ссааасса!д !с!ссддада ддадассад! !дада!!адд 1260

ссадс!асад садс!да!а! ддссдсдд!! !д!да!а!сд !!аасса!!а са!!дадасд 1320

!с!асад!да ас!!!аддас ададссасаа асассасаад ад!дда!!да !да!с!адад 1380

адд!!дсаад а!ада!ассс !!дд!!дд!! дс!дадд!!д аддд!д!!д! ддс!дд!а!! 1440

дс!!асдс!д ддссс!ддаа ддс!аддаас дс!!асда!! ддасад!!да дад!ас!д!! 1500

!асд!д!сас а!аддса!са аадд!!дддс с!адда!с!а са!!д!асас аса!!!дс!! 1560

аад!с!а!дд аддсдсаадд !!!!аад!с! д!дд!!дс!д !!а!аддсс! !ссааасда! 1620

сса!с!д!!а дд!!дса!да ддс!!!ддда !асасадссс дддд!аса!! дсдсдсадс! 1680

дда!асаадс а!дд!дда!д дса!да!д!! дд!!!!!ддс аааддда!!! !дад!!дсса 1740

дс!сс!ссаа ддссад!!ад дссад!!асс сааа!с!дад !ад!!адс!! аа!сасс!ад 1800

адс!сда!сд дсддсаа!ад с!!с!!адсд сса!сссддд !!да!сс!а! с!д!д!!даа 1860

а!ад!!дсдд !дддсааддс !с!с!!!сад ааадасаддс ддссааадда асссаадд!д 1920

- 137 029904

адд!дддс!а !ддс!с!сад !!сс!!д!дд аадсдс!!дд !с!аадд!дс ададд!д!!а 1980

дсддда!даа дсаааад!д! ссда!!д!аа саада!а!д! !да!сс!асд !аадда!а!! 2040

ааад!а!д!а !!са!сас!а а!а!аа!сад !д!а!!ссаа !а!д!ас!ас да!!!ссаа! 2100

д!с!!!а!!д !сдссд!а!д !аа!сддсд! сасаааа!аа !ссссдд!да с!!!с!!!!а 2160

а!ссадда!д ааа!аа!а!д !!а!!а!аа! !!!!дсда!! !дд!ссд!!а !аддаа!!да 2220

ад!д!дс!!д адд!сдд!сд ссассас!сс са!!!са!аа !!!!аса!д! а!!!дааааа 2280

!ааааа!!!а !дд!а!!саа !!!ааасасд !а!ас!!д!а аадаа!да!а !с!!дааада 2340

аа!а!ад!!! ааа!а!!!а! !да!аааа!а асаад!садд !а!!а!ад!с саадсааааа 2400

са!ааа!!!а !!да!дсаад !!!ааа!!са дааа!а!!!с аа!аас!да! !а!а!садс! 2460

дд!аса!!дс сд!ада!даа адас!дад!д сда!а!!а!д д!д!аа!аса !аддаа!!сд 2520

!!!ааасда! с!дсд!с!аа !!!!сдд!сс аас!!дсаса ддааадасд! сдассдсдд! 2580

адс!с!!дсс садсадас!д ддс!!ссад! сс!!!сдс!с да!сддд!сс аа!д!!д!сс 2640

!садс!д!да ассддаадсд дасдассаас ад!ддаадаа с!даааддаа сдадссд!с! 2700

а!асс!!да! да!сддсс!с !дд!дааддд !а!са!сдса дссаадсаад с!са!дааад 2760

дс!да!дддд дадд!д!а!а а!!а!даддс ссасддсддд с!!а!!с!!! адддадда!с 2820

!а!с!сд!!д с!саад!дса !ддсдсааад сад!!а!!дд ад!дсдда!! !!сд!!ддса 2880

!а!!а!!сдс сасдад!!ад садасдаада дасс!!са!д аасд!ддсса аддссадад! 2940

!аадсада!д !!асдссс!д с!дсаддсс! !!с!а!!а!с саа!ад!!дд !!да!с!!!д 3000

дааададсс! сддс!даддс сса!ас!даа адада!сда! дда!а!сда! а!дсса!д!! 3060

д!!!дс!адс садаассада !саса!ссда !а!дс!а!!д садс!!дасд сада!а!дда 3120

дда!аад!!д а!!са!ддда !сдс!садда д!адс!са!с са!дсасдсс дасаадааса 3180

дааайссд! сдадйаасд садссдсйа сдасдда!!с даадд!са!с сайсддаа! 3240

д!а!!ад!й дсассадс!с сдсд!сасас с!д!с!!са! йдаа!аада !дйадсаа! 3300

!д!ййадс !йд!с!!д! !д!ддсаддд сддсаад!дс !!садаса!с айс!д!й! 3360

сааа!!!!а! дс!ддадаас адс!!с!!аа !!сс!!!дда аа!аа!адас !дсд!с!!аа 3420

аа!!сада!д !с!дда!а!а да!а!да!!д !аааа!аасс !а!!!аад!д !са!!!адаа 3480

са!аад!й! а!даа!дйс !!сса!й!с д!са!сдаас даа!аадад! ааа!асасс! 3540

Шйааса! !асааа!аад !!с!!а!асд !!дШа!ас ассдддаа!с аШссайа 3600

!!!!сдсдса ааад!сасдд а!а!!сд!да аадсдаса!а аас!дсдааа !!!дсдддда 3660

д!д!с!!дад !!!дсс!сда ддс!адсдса !дсаса!ада сасасаса!с а!с!са!!да 3720

!дс!!дд!аа !аа!!д!са! !ада!!д!!! !!а!дса!ад а!дсас!сда аа!садссаа 3780

- 138 029904

ккккадасаа дкаксааасд дакдкдаскк садкасакка аааасдкссд саакдкдкка 3840

ккаадккдкс каадсдксаа кккдакккас ааккдаакак аксскдсссс адссадссаа 3900

садсксдакк касааккдаа какаксскдс сддссддссс асдсдкдксд аддааккскд 3960

акскддсссс сакккддасд кдаакдкада сасдксдааа кааадакккс сдааккадаа 4020

каакккдккк аккдсккксд сскакааака сдасддаксд каакккдксд ккккаксааа 4080

акдкаскккс аккккакаак аасдскдсдд асакскасак ккккдааккд аааааааакк 4140

ддкааккаск сккксккккк скссакаккд ассаксакас ксаккдскда кссакдкада 4200

ккксссддас акдаадссак ккасааккда акакаксскд ссдссдскдс сдскккдсас 4260

ссддкддадс ккдсакдккд дкккскасдс адааскдадс сддккаддса дакааккксс 4320

аккдадааск дадссакдкд сасскксссс ссаасасддк дадсдасддд дсаасддадк 4380

дакссасакд ддасккккаа асаксакссд ксддакддсд ккдсдадада адсадксдак 4440

ссдкдадакс адссдасдса ссдддсаддс дсдсаасасд аксдсааадк акккдаасдс 4500

аддкасаакс дадссдасдк ксасдсддаа сдассаадса адсккддскд ссакккккдд 4560

ддкдаддссд кксдсддссд аддддсдсад сссскддддд дакдддаддс ссдсдккадс 4620

дддссдддад ддкксдадаа дддддддсас ссссскксдд сдкдсдсддк сасдсдсаса 4680

дддсдсадсс скддккаааа асааддккка кааакаккдд кккаааадса ддккаааада 4740

саддккадсд дкддссдааа аасдддсдда аасссккдса аакдскддак кккскдсскд 4800

кддасадссс сксааакдкс аакаддкдсд ссссксакск дксадсаскс кдссссксаа 4860

дкдксаадда ксдсдсссск сакскдксад кадксдсдсс ссксаадкдк саакассдса 4920

дддсасккак ссссаддскк дкссасакса кскдкдддаа асксдсдкаа ааксаддсдк 4980

ккксдссдак ккдсдаддск ддссадсксс асдксдссдд ссдаааксда дсскдсссск 5040

сакскдксаа сдссдсдссд ддкдадксдд ссссксаадк дксаасдксс дссссксакс 5100

кдксадкдад ддссаадккк кссдсдаддк акссасаасд ссддсддссд сддкдксксд 5160

сасасддскк сдасддсдкк кскддсдсдк ккдсадддсс акадасддсс дссадсссад 5220

сддсдадддс аассадсссд дкдадсдксд дааадддксд асддаксккк кссдскдсак 5280

аассскдскк сддддксакк акадсдаккк ккксддкака кссакссккк кксдсасдак 5340

акасаддакк ккдссааадд дкксдкдкад аскккссккд дкдкакссаа сддсдксадс 5400

сдддсаддак аддкдаадка ддсссасссд сдадсдддкд кксскксккс аскдкссскк 5460

акксдсасск ддсддкдскс аасдддаакс скдскскдсд аддскддссд дскассдссд 5520

дсдкаасада кдадддсаад сддакддскд акдааассаа дссаассадд аадддсадсс 5580

сасскаксаа ддкдкаскдс сккссадасд аасдаададс даккдаддаа ааддсддсдд 5640

- 139 029904

сддссддса! дадсс!д!сд дсс!асс!дс !ддссд!сдд ссадддс!ас аааа!сасдд 5700

дсд!сд!дда с!а!дадсас д!ссдсдадс !ддсссдса! саа!ддсдас с!дддссдсс 5760

!дддсддсс! дс!дааас!с !ддс!сассд асдасссдсд сасддсдсдд !!сдд!да!д 5820

ссасда!сс! сдссс!дс!д дсдаада!сд аададаадса ддасдадс!! ддсаадд!са 5880

!да!дддсд! дд!ссдсссд адддсададс са!дас!!!! !!адссдс!а ааасддссдд 5940

дддд!дсдсд !да!!дссаа дсасд!сссс а!дсдс!сса !саадаадад сдас!!сдсд 6000

дадс!дд!а! !сд!дсаддд саада!!сдд аа!ассаад! асдадаадда сддссадасд 6060

д!с!асддда ссдас!!са! !дссда!аад д!дда!!а!с !ддасассаа ддсассаддс 6120

ддд!сааа!с аддаа!аадд дсаса!!дсс ссддсд!дад !сддддсаа! сссдсаадда 6180

ддд!даа!да а!сддасд!! !дассддаад дса!асаддс аадаас!да! сдасдсдддд 6240

!!!!ссдссд адда!дссда аасса!сдса адссдсассд !са!дсд!дс дссссдсдаа 6300

асс!!ссад! ссд!сддс!с да!дд!ссад саадс!асдд ссаада!сда дсдсдасадс 6360

д!дсаас!дд с!ссссс!дс сс!дсссдсд сса!сддссд ссд!ддадсд !!сдсд!сд! 6420

с!сдаасадд аддсддсадд !!!ддсдаад !сда!дасса !сдасасдсд аддаас!а!д 6480

асдассаада адсдааааас сдссддсдад дасс!ддсаа аасадд!сад сдаддссаад 6540

саддссдсд! !дс!даааса сасдаадсад сада!саадд ааа!дсадс! !!сс!!д!!с 6600

да!а!!дсдс сд!ддссдда сасда!дсда дсда!дссаа асдасасддс ссдс!с!дсс 6660

с!д!!сасса сдсдсаасаа даааа!сссд сдсдаддсдс !дсаааасаа дд!са!!!!с 6720

сасд!сааса аддасд!даа да!сасс!ас ассддсд!сд адс!дсдддс сдасда!дас 6780

даас!дд!д! ддсадсадд! д!!ддад!ас дсдаадсдса сссс!а!сдд сдадссда!с 6840

асс!!сасд! !с!асдадс! !!дссаддас с!дддс!дд! сда!саа!дд ссдд!а!!ас 6900

асдааддссд аддаа!дсс! д!сдсдсс!а саддсдасдд сда!дддс!! сасд!ссдас 6960

сдсд!!дддс асс!ддаа!с дд!д!сдс!д с!дсассдс! !ссдсд!сс! ддассд!ддс 7020

аадаааасд! сссд!!дсса дд!сс!да!с дасдаддааа !сд!сд!дс! д!!!дс!ддс 7080

дассас!аса сдааа!!са! а!дддадаад !ассдсаадс !д!сдссдас ддсссдасдд 7140

а!д!!сдас! а!!!садс!с дсассдддад ссд!асссдс !саадс!дда аасс!!ссдс 7200

с!са!д!дсд да!сдда!!с сасссдсд!д аадаад!ддс дсдадсадд! сддсдаадсс 7260

!дсдаадад! !дсдаддсад сддсс!дд!д даасасдсс! ддд!саа!да !дасс!дд!д 7320

са!!дсааас дс!адддсс! !д!дддд!са д!!ссддс!д дддд!!садс адссадсдс! 7380

!!ас!ддса! !!саддааса адсдддсас! дс!сдасдса с!!дс!!сдс !сад!а!сдс 7440

!сдддасдса сддсдсдс!с !асдаас!дс сда!ааасад адда!!аааа !!дасаа!!д 7500

- 140 029904

!да!!ааддс !сада!!сда сддс!!ддад сддссдасд! дсадда!!!с сдсдада!сс 7560

да!!д!сддс сс!даадааа дс!ссадада !д!!сддд!с сд!!!асдад сасдаддада 7620

аааадссса! ддаддсд!!с дс!даасдд! !дсдада!дс сд!ддса!!с ддсдсс!аса 7680

!сдасддсда да!са!!ддд с!д!сдд!с! !сааасадда ддасддсссс ааддасдс!с 7740

асааддсдса !с!д!ссддс д!!!!сд!дд адсссдааса дсдаддссда дддд!сдссд 7800

д!а!дс!дс! дсдддсд!!д ссддсддд!! !а!!дс!сд! да!да!сд!с сдасада!!с 7860

саасдддаа! с!дд!дда!д сдса!с!!са !сс!сддсдс ас!!аа!а!! !сдс!а!!с! 7920

ддадс!!д!! д!!!а!!!сд д!с!ассдсс !дссдддсдд дд!сдсддсд асдд!аддсд 7980

с!д!дсадсс дс!да!дд!с д!д!!са!с! с!дссдс!с! дс!адд!адс ссда!асда! 8040

!да!ддсдд! сс!дддддс! ай!дсддаа с!дсдддсд! ддсдс!дйд д!д!!дасас 8100

сааасдсадс дс!ада!сс! д!сддсд!сд садсдддсс! ддсдддддсд д!йсса!дд 8160

сд!!сддаас сд!дс!дасс сдсаад!ддс аасс!сссд! дсс!с!дс!с асс!!!ассд 8220

сс!ддсаас! ддсддссдда ддас!!с!дс !сд!!ссад! адс!!!ад!д !!!да!ссдс 8280

саа!сссда! дсс!асадда ассаа!д!!с !сддсс!ддс д!ддс!сддс с!да!сддад 8340

сддд!!!аас с!ас!!сс!! !дд!!ссддд дда!с!сдсд ас!сдаасс! асад!!д!!! 8400

сс!!ас!ддд с!!!с!садс ссссдадсдс !!ад!дддаа !!!д!асссс !!а!сдаасс 8460

дддадсасад да!дасдсс! аасаа!!са! !саадссдас ассдс!!сдс ддсдсддс!! 8520

аа!!саддад !!аааса!са !дадддаадс дд!да!сдсс даад!а!сда с!саас!а!с 8580

ададд!ад!! ддсд!са!сд адсдсса!с! сдаассдасд !!дс!ддссд !аса!!!д!а 8640

сддс!ссдса д!дда!ддсд дсс!даадсс асасад!да! а!!да!!!дс !дд!!асдд! 8700

дассд!аадд с!!да!дааа саасдсддсд адс!!!да!с аасдасс!!! !ддааас!!с 8760

ддс!!сссс! ддадададсд ада!!с!ссд сдс!д!адаа д!сасса!!д !!д!дсасда 8820

сдаса!са!! ссд!ддсд!! а!ссадс!аа дсдсдаас!д саа!!!ддад аа!ддсадсд 8880

саа!даса!! с!!дсадд!а !с!!сдадсс адссасда!с даса!!да!с !ддс!а!с!! 8940

дс!дасаааа дсаададаас а!адсд!!дс с!!дд!адд! ссадсддсдд аддаас!с!! 9000

!да!ссдд!! сс!даасадд а!с!а!!!да ддсдс!ааа! дааасс!!аа сдс!а!ддаа 9060

с!сдссдссс дас!дддс!д дсда!дадсд ааа!д!ад!д с!!асд!!д! сссдса!!!д 9120

д!асадсдса д!аассддса ааа!сдсдсс даадда!д!с дс!дссдас! дддсаа!дда 9180

дсдсс!дссд дсссад!а!с адсссд!са! ас!!даадс! аддсаддс!! а!с!!ддаса 9240

адаада!сдс !!ддсс!сдс дсдсада!са д!!ддаадаа й!дйсас! асд!дааадд 9300

сдада!сасс аадд!ад!сд дсааа!аа!д !с!аасаа!! сд!!саадсс дасдссдс!! 9360

- 141 029904

сдсддсдсдд с11аас1саа дсд11адада дс1ддддаад ас1а1дсдсд а1с1д11даа 9420

дд1дд11с1а адсс1сд1с1 1дсда1ддса 111сда1сса 11ссса11сс дсдс1саада 9480

1ддс11сссс 1сддсад11с а1садддс1а аа1саа1с1а дссдас11д1 ссдд1дааа1 9540

дддс1дсас1 ссаасадааа саа1саааса ааса1асаса дсдас11а11 сасасдадс1 9600

сааа11асаа сдд1а1а1а1 сс1дссад1с адса1са1са сассаааад1 1аддсссдаа 9660

1ад111дааа 11адааадс1 сдсаа11дад д1с1асаддс сааа11сдс1 с11адссд1а 9720

саа1а11ас1 сассдда1сс 1аассдд1д1 да1са1дддс сдсда11ааа аа1с1саа11 9780

а1а111дд1с 1аа111ад11 1дд1а11дад 1аааасааа1 1сдаассааа ссаааа1а1а 9840

аа1а1а1ад1 1111а1а1а1 а1дсс111аа дас11111а1 адаа1111с1 11аааааа1а 9900

1с1адааа1а 111дсдас1с 11с1ддса1д 1аа1а111сд 11ааа1а1да ад1дс1сса1 9960

ййайаас Шааайкй 1ддйд!асд айасШс! 1а1саад1д11ас1аааа1д 10020

сдйаайй Шдйсйс са1а11са1а 1д1саааасс ПйсааааП сйаПйай 10080

Шйсдаа! йдаад!даа аййдака Шаааайа аа1адааса1 айайай! 10140

аддкйак йдаШйа ксйаайа скааШдд йаасШда аад1д1аса1 10200

саасдааааа йадйааас дас1аааа1а аа1ааа1а1с а!д1дйай аадаааайс 10260

1сс1а1аада акййаа! адайайИд Шд!ааааа ааайааШ йаскасас 10320

айИаШас йайааааа Шдасааад кадайааа айкйаПса 1с1аасаааа 10380

аааааассад аааа!дс1да ааасссддса ааассдаасс аайсааасс даккдйд 10440

дШддШд аййдак! ааассдаасс аасйддйс аШдсассс с1аа1са1аа 10500

1адсШаа1 аШсаада! айайаад! касдйдй аа1а1сс1дд аааййдса 10560

ааа1даа1са адссПШИд дс1д1аа1а1 дааШаааа дсадсйда! д!дд!дд1аа 10620

1а1д1ааШ асйдайс! ааааааайИ сссаадкй аа1ааШс1 дскддаада 10680

аддйадск сдаШасад сааадссада а1асаа1даа сса1ааад!д айдаадсй 10740

дааакксд ааддаасааа 1айИ1ааа ааааксдса а!дасйдда асаааадааа 10800

д1да!а1ай ййдйсй ааасаадса! сссс1с1ааа даа1ддсад! ШссШдс 10860

а1д1аас1а1Пйдсйсс! йдйасааа ааййддас 1ас!айддд аасйсйс! 10920

даааа!ад1д дссассдсй аайааддсд сдсса1дссс дддсаадсдд ссдсасаад! 10980

йдксаааа аадсаддсй сдсддссдса скддШаа асйкдаад скддаайс 11040

дсддссдсй 1сс1дса1да са1сд1сс1д сададссаад сдса!дсйа айаааскд 11100

1с1сссад1а 1сайа1ад1 дааадййд дс1с1с1сдс сдд!ддйй ПассйПй 11160

йааадддд! Шссасск аааайс!дд Пйсайсй асШасйд йасШаа! 11220

- 142 029904

йс!са!аа! сШддйда аа!!а!сасд сйссдсаса сда!а!ссс! асааа!!!а! 11280

1а!йдйаа аса!!!!саа ассдса!ааа а!!!!а!даа д!сссд!с!а !с!йаа!д! 11340

ад!с!ааса! !!!са!а!!д ааа!а!а!аа !!!ас!!аа! !!!адсд!!д д!адааадса 11400

!аа!да!!!а !!с!!а!!с! !с!!са!а!а аа!д!!!аа! а!асаа!а!а аасааа!!с! 11460

йассйаад аадда!!!сс саШ1а(а1 !!!ааааа!а 1а!йа!саа а1аПШса 11520

ассасд!ааа !с!са!аа!а а!аад!!д!! !саааад!аа (ааааШаа с!сса!аа!! 11580

!!!!!а!!сд ас!да!с!!а аадсаасасс сад!дасаса ас!адсса!! !!!!!с!!!д 11640

аа!ааааааа !ссаа!!а!с а!!д!а!!!! !!!!а!асаа !даааа!!!с ассааасаа! 11700

да!!!д!дд! а!!!с!даад саад!са!д! !а!дсаааа! !с!а!аа!!с сса!!!даса 11760

с!асддаад! аас!даада! с!дс!Шас а!дсдадаса са!с!!с!аа ад1аа!!йа 11820

а!аа!ад!!а с!а!а!!саа да!йса!а! а!сааа!ас! саа!а!!ас! !с!аааааа! 11880

!аа!!ада!а !аа!!аааа! аПасШП !аа!Шаад !!1аа!!дй даа!!!д!да 11940

с!а!!да!!! а!!а!!с!ас !а!д!!!ааа !!д!!!!а!а да!ад!!!аа ад!ааа!а!а 12000

ад!аа!д!ад !адад!д!!а дад!д!!асс с!ааасса!а аас!а!аада !!!а!дд!дд 12060

ас!аа!!!!с а!а!а!!!с! !а!!дс!!!! асс!!!!с!! дд!а!д!аад !ссд!аас!д 12120

даа!!ас!д! ддд!!дсса! дасас!с!д! дд!с!!!!дд !!са!дса!д да!с!!дсдс 12180

аадааааада сааадаасаа адаааааада саааасадад адасаааасд саа!сасаса 12240

ассаас!саа а!!ад!сас! ддс!да!саа да!сдссдсд !сса!д!а!д !с!ааа!дсс 12300

а!дсааадса асасд!дс!! ааса!дсас! !!ааа!ддс! сассса!с!с аасссасаса 12360

сааасаса!! дсс!!!!!с! !са!са!сас сасаассасс !д!а!а!а!! са!!с!с!!с 12420

сдссасс!са а!!!с!!сас !!саасасас д!саасс!дс а!а!дсд!д! са!ссса!дс 12480

ссааа!с!сс а!дса!д!!с саассасс!! с!с!с!!а!а !аа!асс!а! ааа!асс!с! 12540

аа!а!сас!с ас!!с!!!са !са!сса!сс а!ссадад!а с!ас!ас!с! ас!ас!а!аа 12600

!ассссаасс саас!са!а! !саа!ас!ас !с!адд!асс с!дсаддда! ссаасаа!д! 12660

с!дс!ссаас сдс!даса!с адддс!аддд с!ссададдс !аадаадд!! саса!сдс!д 12720

а!ассдс!а! саасаддсас аа!!дд!аса адсасд!даа с!ддс!саас д!с!!сс!са 12780

!са!сддаа! сссас!с!ас дда!дса!сс аадс!!!с!д дд!!ссас!! саас!саада 12840

ссдс!а!с!д ддс!д!да!с !ас!ас!!с! !сассддас! !ддаа!сасс дс!дда!асс 12900

асаддс!!!д ддс!сас!дс !са!ас!с!д с1ас!сйсс ас!!адда!с !ддс!!дс!д 12960

с!д!!ддадд аддадс!дй даддда!с!а !сада!дд!д ддс!аддда! сасадддс!с 13020

а!са!адд!а сассда!асс дасааддасс са!ас!с!д! !аддааддда сйс!с!ас! 13080

- 143 029904

с1сасс11дд а1дда1дд1д а1даадсада асссааадад да1сддаадд ассдасаЫ 13140

с1да1с1саа сдаддассса дПдПдШ ддсаасасад даас1асс1с аадд11д1д1 13200

1сасса1ддд ас11дс1д11 ссаа1дс11д Пдс1ддас11дда1дддда даПддсПд 13260

даддаПсд! д1асдс1дда а1сс11адда 1с11с11сд11саасаадс1 асс11с1дсд 13320

1даас1с1с11дс1сас1дд с11ддада1с аассаПсда 1да1аддаас 1с1сс1аддд 13380

а1сасд1да1 сассдс1сП дПасссПд дададдда1а ссасаасПс сассасдад! 13440

1ссса1с1да сПюаддаас дсПИсдад! ддсассадП-ι сда1сс1асс аад1дд1с1а 13500

1с1дддсПд даадсаасП ддаПддсП асда1с1саа даадПсадд дс1аасдада 13560

(сдадааддд аадддПсаа саасПсада адаадсПда (аддаададд дс1ас1сПд 13620

аПддддаас сссасНда! саасПссад 1да1ддаа1д дда1дас1ас дПдадсаад 13680

с1аадаасдд ааддддасП дПдсПИсд с1ддадПд11сасда1дП ассдасПса 13740

1саадда1са сссаддадда ааддсППда 1с1сПс1дд аа1сддааад да1дс1ассд 13800

сПИдНсаа сддаддад1д 1ас1ассас1 с1аасдсадс (сасаассП сПадсасса 13860

(дадддддд ад1да1садд ддадда1дсд адд11дада1 с1ддаададд дс1садаадд 13920

адаасд11да д1асд11адд да1дда1с1д дасаааддд1 да1садддс1 ддададсаас 13980

саассаада! сссададсса а1сссаассд с1да1дс1дс Пдад1адП адсПаа1са 14040

сс1адд1сас садППдаас 1аааа1дса1 д1адд1д1аа дадс1сдд1с асс1сдад1а 14100

1саааа1с1а 1Падааа1а сасааПИН (дПдсаддс Пдс1ддада а1сда1с1дс 14160

1а1са1аааа айасааааа ааййаШ дсс1сааПа ППаддаП ддПШаадд 14220

асдсНааа! 1аШд1сдд д1сас1асдс а1саПд1да Пдадаада! садсдаПюд 14280

аааПШсд! ад1ас1а1сд а1аа1ПаП (дааааПса (аадаааадс ааасдйаса 14340

1дааПда1д ааасааПюа аадасада1а аадссасдса сай1а§да1 аПддссдад 14400

аПас1даа1 ;Шдад1аад а1сасддаа1 Пс1дасадд адса1д1сП сааПсадсс 14460

сааа1ддсад Пдааа1ас1 сааассдссс саПИдсадд адсдда1са11саПдП1д 14520

ШддПдсс Шдссааса 1дддад1сса аддПддсдс дссдасссад сй!с 14575

<210> 65

<211> 14602

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рОАВ7330

<400> 65

11д1асааад 1дд11дсддс сдс11аа11а аа111ааа11 саа11аа1дс аа1с11да11 60

- 144 029904

!!саасаасд аадд!аа!дд сд!аааадаа аааа!д!а!д !!а!!д!а!! да!с!!!са! 120

да!д!!даад сд!дсса!аа !а!да!да!д !а!аа!!ааа а!а!!аас!д !сдса!!!!а 180

!!дааа!ддс ас!д!!а!!! саасса!а!с !!!да!!с!д !!аса!даса сдас!дсаад 240

аад!ааа!аа !адасдссд! !д!!ааадаа !!дс!а!са! а!д!дсс!аа с!ададддаа 300

!!!дадсд!с адасс!аа!с ааа!а!!аса ааа!а!с!са с!с!д!сдсс адсаа!дд!д 360

!аа!садсдс адасааа!дд сд!ааада!с дсддааааас с!ссссдад! ддса!да!ад 420

с!дсс!с!д! а!!дс!да!! !ад!садсс! !а!!!дас!! ааддд!дссс !сд!!ад!да 480

сааа!!дс!! !сааддадас адсса!дссс сасас!!!д! !дааааасаа а!!дсс!!!д 540

дддадасдд! ааадссад!! дс!с!!саа! ааддаа!д!с даддаддсаа !д!аассдсс 600

!с!дд!ад!а сас!!с!с!а а!ссааааа! саа!!!д!а! !саада!асс дсаааааас! 660

!а!дд!!!аа ассс!дсадд ас!ад!ссад аадд!аа!!а !ссаада!д! адса!саада 720

а!ссаа!д!! !асдддаааа ас!а!ддаад !а!!а!д!аа дс!садсаад аадсада!са 780

а!а!дсддса са!а!дсаас с!а!д!!саа ааа!даадаа !д!асада!а саада!сс!а 840

!ас!дссада а!асдаадаа даа!асд!ад ааа!!даааа адаадаасса ддсдаадааа 900

адаа!с!!да адасд!аадс ас!дасдаса асаа!даааа даадаада!а адд!сдд!да 960

!!д!дааада даса!ададд асаса!д!аа дд!ддаааа! д!аадддсдд ааад!аасс! 1020

!а!сасааад даа!с!!а!с ссссас!ас! !а!сс!!!!а !а!!!!!ссд !д!са!!!!! 1080

дссс!!дад! !!!сс!а!а! ааддаассаа д!!сддса!! !д!дааааса адаааааа!! 1140

!дд!д!аадс !а!!!!с!!! даад!ас!да дда!асаас! !сададааа! !!д!аад!!! 1200

д!адд!асса да!с!дда!с ссааасса!д !с!ссддада ддадассад! !дада!!адд 1260

ссадс!асад садс!да!а! ддссдсдд!! !д!да!а!сд !!аасса!!а са!!дадасд 1320

!с!асад!да ас!!!аддас ададссасаа асассасаад ад!дда!!да !да!с!адад 1380

адд!!дсаад а!ада!ассс !!дд!!дд!! дс!дадд!!д аддд!д!!д! ддс!дд!а!! 1440

дс!!асдс!д ддссс!ддаа ддс!аддаас дс!!асда!! ддасад!!да дад!ас!д!! 1500

!асд!д!сас а!аддса!са аадд!!дддс с!адда!с!а са!!д!асас аса!!!дс!! 1560

аад!с!а!дд аддсдсаадд !!!!аад!с! д!дд!!дс!д !!а!аддсс! !ссааасда! 1620

сса!с!д!!а дд!!дса!да ддс!!!ддда !асасадссс дддд!аса!! дсдсдсадс! 1680

дда!асаадс а!дд!дда!д дса!да!д!! дд!!!!!ддс аааддда!!! !дад!!дсса 1740

дс!сс!ссаа ддссад!!ад дссад!!асс сааа!с!дад !ад!!адс!! аа!сасс!ад 1800

адс!сда!сд дсддсаа!ад с!!с!!адсд сса!сссддд !!да!сс!а! с!д!д!!даа 1860

а!ад!!дсдд !дддсааддс !с!с!!!сад ааадасаддс ддссааадда асссаадд!д 1920

- 145 029904

адд!дддс!а !ддс!с!сад !!сс!!д!дд аадсдс!!дд !с!аадд!дс ададд!д!!а 1980

дсддда!даа дсаааад!д! ссда!!д!аа саада!а!д! !да!сс!асд !аадда!а!! 2040

ааад!а!д!а !!са!сас!а а!а!аа!сад !д!а!!ссаа !а!д!ас!ас да!!!ссаа! 2100

д!с!!!а!!д !сдссд!а!д !аа!сддсд! сасаааа!аа !ссссдд!да с!!!с!!!!а 2160

а!ссадда!д ааа!аа!а!д !!а!!а!аа! !!!!дсда!! !дд!ссд!!а !аддаа!!да 2220

ад!д!дс!!д адд!сдд!сд ссассас!сс са!!!са!аа !!!!аса!д! а!!!дааааа 2280

!ааааа!!!а !дд!а!!саа !!!ааасасд !а!ас!!д!а аадаа!да!а !с!!дааада 2340

аа!а!ад!!! ааа!а!!!а! !да!аааа!а асаад!садд !а!!а!ад!с саадсааааа 2400

са!ааа!!!а !!да!дсаад !!!ааа!!са дааа!а!!!с аа!аас!да! !а!а!садс! 2460

дд!аса!!дс сд!ада!даа адас!дад!д сда!а!!а!д д!д!аа!аса !аддаа!!сд 2520

Юааасда! с!дсд!с!аа !!!!сдд!сс аас!!дсаса ддааадасд! сдассдсдд! 2580

адс!с!!дсс садсадас!д ддс!!ссад! сс!!!сдс!с да!сддд!сс аа!д!!д!сс 2640

!садс!д!да ассддаадсд дасдассаас ад!ддаадаа с!даааддаа сдадссд!с! 2700

а!асс!!да! да!сддсс!с !дд!дааддд !а!са!сдса дссаадсаад с!са!дааад 2760

дс!да!дддд дадд!д!а!а а!!а!даддс ссасддсддд с!!а!!с!!! адддадда!с 2820

!а!с!сд!!д с!саад!дса !ддсдсааад сад!!а!!дд ад!дсдда!! !!сд!!ддса 2880

!а!!а!!сдс сасдад!!ад садасдаада дасс!!са!д аасд!ддсса аддссадад! 2940

!аадсада!д !!асдссс!д с!дсаддсс! !!с!а!!а!с саакадйдд Пда!с!йд 3000

дааададсс! сддс!даддс сса!ас!даа адада!сда! дда!а!сда! а!дсса!д!! 3060

д!!!дс!адс садаассада !саса!ссда !а!дс!а!!д садс!!дасд сада!а!дда 3120

дда!аад!!д а!!са!ддда !сдс!садда д!адс!са!с са!дсасдсс дасаадааса 3180

дааайссд! сдадйаасд садссдсйа сдасдда!!с даадд!са!с сайсддаа! 3240

д!а!!ад!й дсассадс!с сдсд!сасас с!д!с!!са! йдаа!аада !дйадсаа! 3300

!д!ййадс !йд!с!!д! !д!ддсаддд сддсаад!дс !!садаса!с айс!д!й! 3360

сааа!!!!а! дс!ддадаас адс!!с!!аа !!сс!!!дда аа!аа!адас !дсд!с!!аа 3420

аа!!сада!д !с!дда!а!а да!а!да!!д !аааа!аасс !а!!!аад!д !са!!!адаа 3480

са!аад!й! а!даа!дйс !!сса!й!с д!са!сдаас даа!аадад! ааа!асасс! 3540

!ййааса! !асааа!аад !!с!!а!асд !!д1йа!ас ассдддаа!с а!йссайа 3600

!!!!сдсдса ааад!сасдд а!а!!сд!да аадсдаса!а аас!дсдааа !!!дсдддда 3660

д!д!с!!дад !!!дсс!сда ддс!адсдса !дсаса!ада сасасаса!с а!с!са!!да 3720

!дс!!дд!аа !аа!!д!са! !ада!!д!!! !!а!дса!ад а!дсас!сда аа!садссаа 3780

- 146 029904

!!!!адасаа д!а!сааасд да!д!дас!! сад!аса!!а аааасд!ссд саа!д!д!!а 3840

!!аад!!д!с !аадсд!саа !!!да!!!ас аа!!даа!а! а!сс!дсссс адссадссаа 3900

садс!сда!! !асаа!!даа !а!а!сс!дс сддссддссс асдсд!д!сд аддаа!!с!д 3960

а!с!ддсссс са!!!ддасд !даа!д!ада сасд!сдааа !ааада!!!с сдаа!!адаа 4020

!аа!!!д!!! а!!дс!!!сд сс!а!ааа!а сдасдда!сд !аа!!!д!сд !!!!а!сааа 4080

а!д!ас!!!с а!!!!а!аа! аасдс!дсдд аса!с!аса! !!!!даа!!д аааааааа!! 4140

дд!аа!!ас! с!!!с!!!!! с!сса!а!!д асса!са!ас !са!!дс!да !сса!д!ада 4200

!!!сссддас а!даадсса! !!асаа!!да а!а!а!сс!д ссдссдс!дс сдс!!!дсас 4260

ссдд!ддадс !!дса!д!!д д!!!с!асдс адаас!дадс сдд!!аддса да!аа!!!сс 4320

а!!дадаас! дадсса!д!д сасс!!сссс ссаасасдд! дадсдасддд дсаасддад! 4380

да!ссаса!д ддас!!!!аа аса!са!ссд !сдда!ддсд !!дсдадада адсад!сда! 4440

ссд!дада!с адссдасдса ссдддсаддс дсдсаасасд а!сдсааад! а!!!даасдс 4500

адд!асаа!с дадссдасд! !сасдсддаа сдассаадса адс!!ддс!д сса!!!!!дд 4560

дд!даддссд !!сдсддссд аддддсдсад сссс!ддддд да!дддаддс ссдсд!!адс 4620

дддссдддад дд!!сдадаа дддддддсас ссссс!!сдд сд!дсдсдд! сасдсдсаса 4680

дддсдсадсс с!дд!!аааа асаадд!!!а !ааа!а!!дд !!!аааадса дд!!аааада 4740

садд!!адсд д!ддссдааа аасдддсдда аассс!!дса аа!дс!дда! !!!с!дсс!д 4800

!ддасадссс с!сааа!д!с аа!адд!дсд сссс!са!с! д!садсас!с !дсссс!саа 4860

д!д!саадда !сдсдсссс! са!с!д!сад !ад!сдсдсс сс!саад!д! саа!ассдса 4920

дддсас!!а! ссссаддс!! д!ссаса!са !с!д!дддаа ас!сдсд!аа аа!саддсд! 4980

!!!сдссда! !!дсдаддс! ддссадс!сс асд!сдссдд ссдааа!сда дсс!дсссс! 5040

са!с!д!саа сдссдсдссд дд!дад!сдд сссс!саад! д!саасд!сс дсссс!са!с 5100

!д!сад!дад ддссаадй! !ссдсдадд! а!ссасаасд ссддсддссд сдд!д!с!сд 5160

сасасддс!! сдасддсд!! !с!ддсдсд! !!дсадддсс а!адасддсс дссадсссад 5220

сддсдадддс аассадсссд д!дадсд!сд даааддд!сд асдда!с!!! !ссдс!дса! 5280

аассс!дсй сдддд!сай а!адсда!!! Й!сдд1а1а !сса!сс!й !!сдсасда! 5340

а!асадда!! !!дссааадд д!!сд!д!ад ас!!!сс!!д д!д!а!ссаа сддсд!садс 5400

сдддсадда! адд!даад!а ддсссасссд сдадсддд!д !!сс!!с!!с ас!д!ссс!! 5460

а!!сдсасс! ддсдд!дс!с аасдддаа!с с!дс!с!дсд аддс!ддссд дс!ассдссд 5520

дсд!аасада !дадддсаад сдда!ддс!д а!дааассаа дссаассадд аадддсадсс 5580

сасс!а!саа дд!д!ас!дс с!!ссадасд аасдаададс да!!даддаа ааддсддсдд 5640

- 147 029904

сддссддса! дадсс!д!сд дсс!асс!дс !ддссд!сдд ссадддс!ас аааа!сасдд 5700

дсд!сд!дда с!а!дадсас д!ссдсдадс !ддсссдса! саа!ддсдас с!дддссдсс 5760

!дддсддсс! дс!дааас!с !ддс!сассд асдасссдсд сасддсдсдд !!сдд!да!д 5820

ссасда!сс! сдссс!дс!д дсдаада!сд аададаадса ддасдадс!! ддсаадд!са 5880

!да!дддсд! дд!ссдсссд адддсададс са!дас!!!! !!адссдс!а ааасддссдд 5940

дддд!дсдсд !да!!дссаа дсасд!сссс а!дсдс!сса !саадаадад сдас!!сдсд 6000

дадс!дд!а! !сд!дсаддд саада!!сдд аа!ассаад! асдадаадда сддссадасд 6060

д!с!асддда ссдас!!са! !дссда!аад д!дда!!а!с !ддасассаа ддсассаддс 6120

ддд!сааа!с аддаа!аадд дсаса!!дсс ссддсд!дад !сддддсаа! сссдсаадда 6180

ддд!даа!да а!сддасд!! !дассддаад дса!асаддс аадаас!да! сдасдсдддд 6240

!!!!ссдссд адда!дссда аасса!сдса адссдсассд !са!дсд!дс дссссдсдаа 6300

асс!!ссад! ссд!сддс!с да!дд!ссад саадс!асдд ссаада!сда дсдсдасадс 6360

д!дсаас!дд с!ссссс!дс сс!дсссдсд сса!сддссд ссд!ддадсд !!сдсд!сд! 6420

с!сдаасадд аддсддсадд !!!ддсдаад !сда!дасса !сдасасдсд аддаас!а!д 6480

асдассаада адсдааааас сдссддсдад дасс!ддсаа аасадд!сад сдаддссаад 6540

саддссдсд! !дс!даааса сасдаадсад сада!саадд ааа!дсадс! !!сс!!д!!с 6600

да!а!!дсдс сд!ддссдда сасда!дсда дсда!дссаа асдасасддс ссдс!с!дсс 6660

с!д!!сасса сдсдсаасаа даааа!сссд сдсдаддсдс !дсаааасаа дд!са!!!!с 6720

сасд!сааса аддасд!даа да!сасс!ас ассддсд!сд адс!дсдддс сдасда!дас 6780

даас!дд!д! ддсадсадд! д!!ддад!ас дсдаадсдса сссс!а!сдд сдадссда!с 6840

асс!!сасд! !с!асдадс! !!дссаддас с!дддс!дд! сда!саа!дд ссдд!а!!ас 6900

асдааддссд аддаа!дсс! д!сдсдсс!а саддсдасдд сда!дддс!! сасд!ссдас 6960

сдсд!!дддс асс!ддаа!с дд!д!сдс!д с!дсассдс! !ссдсд!сс! ддассд!ддс 7020

аадаааасд! сссд!!дсса дд!сс!да!с дасдаддааа !сд!сд!дс! д!!!дс!ддс 7080

дассас!аса сдааа!!са! а!дддадаад !ассдсаадс !д!сдссдас ддсссдасдд 7140

а!д!!сдас! а!!!садс!с дсассдддад ссд!асссдс !саадс!дда аасс!!ссдс 7200

с!са!д!дсд да!сдда!!с сасссдсд!д аадаад!ддс дсдадсадд! сддсдаадсс 7260

!дсдаадад! !дсдаддсад сддсс!дд!д даасасдсс! ддд!саа!да !дасс!дд!д 7320

са!!дсааас дс!адддсс! !д!дддд!са д!!ссддс!д дддд!!садс адссадсдс! 7380

!!ас!ддса! !!саддааса адсдддсас! дс!сдасдса с!!дс!!сдс !сад!а!сдс 7440

!сдддасдса сддсдсдс!с !асдаас!дс сда!ааасад адда!!аааа !!дасаа!!д 7500

- 148 029904

!дайааддс !садайсда сддсйддад сддссдасд! дсаддаШс сдсдада!сс 7560

дайд!сддс сс!даадааа дс!ссадада !дйсддд!с сдШасдад сасдаддада 7620

аааадссса! ддаддсдйс дс!даасдд! !дсдада!дс сд!ддсайс ддсдсс!аса 7680

!сдасддсда да!сайддд с1д1сдд1с! !сааасадда ддасддсссс ааддасдс!с 7740

асааддсдса 1с!д1ссддс дййсд1дд адсссдааса дсдаддссда дддд!сдссд 7800

д1а!дс1дс1 дсдддсдйд ссддсдддй 1айдс1сд! да!да!сд!с сдасадайс 7860

саасдддаа! с!дд1дда1д сдса!сйса !сс!сддсдс асйаа!ай 1сдс1айс! 7920

ддадсйдй дШаШсд д!с!ассдсс !дссдддсдд дд!сдсддсд асдд!аддсд 7980

с!д1дсадсс дс!да!дд!с д1дйса1с! с1дссдс1с! дс!адд!адс ссда1асда! 8040

1да!ддсдд1 сс!дддддс! аШдсддаа с!дсдддсд! ддсдс!дйд д!дйдасас 8100

сааасдсадс дс!ада!сс! д1сддсд!сд садсдддсс! ддсдддддсд дШсса!дд 8160

сдйсддаас сд!дс1дасс сдсаад!ддс аасс!сссд! дсс1с1дс1с ассШассд 8220

сс!ддсаас! ддсддссдда ддасйс!дс 1сдйссад! адсШад!д Шда!ссдс 8280

саайссдй дсс!асадда ассаа!дйс 1сддсс!ддс д!ддс!сддс с!да!сддад 8340

сдддШаас с!асйссй !ддйссддд дда!с!сдсд асКдаасс! асадйдШ 8400

ссйас!ддд сШс!садс ссссдадсдс йад!дддаа Шд!асссс йа!сдаасс 8460

дддадсасад да!дасдсс! аасаайса! !саадссдас ассдсйсдс ддсдсддсй 8520

аайсаддад йаааса!са !дадддаадс дд!да!сдсс даад!а1сда сйаасйИс 8580

ададд!адй ддсд!са1сд адсдссаЮ сдаассдасд йдс!ддссд 1асаШд1а 8640

сддс!ссдса д!дда!ддсд дсс!даадсс асасад!да! айдаШдс 1ддйасдд! 8700

дассд!аадд сйда!дааа саасдсддсд адсШда!с аасдассШ !ддааасйс 8760

ддсйсссс! ддадададсд адайс!ссд сдс!д!адаа д!сассайд йд!дсасда 8820

сдаса!сай ссд!ддсдй а!ссадс!аа дсдсдаас!д сааШддад аа!ддсадсд 8880

саа!дасай сйдсадд!а !сйсдадсс адссасда!с дасайда!с 1ддс!а!сй 8940

дс!дасаааа дсаададаас а!адсдйдс сйдд1адд! ссадсддсдд аддаас!сй 9000

1да!ссддй сс!даасадд а1с1аШда ддсдс!ааа! дааассйаа сдс!а1ддаа 9060

с!сдссдссс дас!дддс!д дсда!дадсд ааа!д1ад1д сйасдйд! сссдсаШд 9120

д!асадсдса д!аассддса ааа!сдсдсс даадда!д!с дйдссдас! дддсаа!дда 9180

дсдсс!дссд дсссад!а!с адсссд!са! асйдаадс! аддсаддсй а!сйддаса 9240

адаада!сдс йддсс!сдс дсдсада!са дйддаадаа Шдйсас! асд!дааадд 9300

сдада!сасс аадд!ад!сд дсааа!аа!д 1с1аасаай сдйсаадсс дасдссдсй 9360

- 149 029904

сдсддсдсдд с!!аас!саа дсд!!адада дс!ддддаад ас!а!дсдсд а!с!д!!даа 9420

дд!дд!!с!а адсс!сд!с! !дсда!ддса !!!сда!сса !!ссса!!сс дсдс!саада 9480

!ддс!!сссс !сддсад!!с а!садддс!а аа!саа!с!а дссдас!!д! ссдд!дааа! 9540

дддс!дсас! ссаасадааа саа!саааса ааса!асаса дсдас!!а!! сасасдадс! 9600

сааа!!асаа сдд!а!а!а! сс!дссад!с адса!са!са сассаааад! !аддсссдаа 9660

!ад!!!дааа !!адааадс! сдсаа!!дад д!с!асаддс сааа!!сдс! с!!адссд!а 9720

саа!а!!ас! сассдда!сс !аассдд!д! да!са!дддс сдсда!!ааа аа!с!саа!! 9780

а!а!!!дд!с !аа!!!ад!! !дд!а!!дад !аааасааа! !сдаассааа ссаааа!а!а 9840

аа!а!а!ад! !!!!а!а!а! а!дсс!!!аа дас!!!!!а! адаа!!!!с! !!аааааа!а 9900

!с!адааа!а !!!дсдас!с !!с!ддса!д !аа!а!!!сд !!ааа!а!да ад!дс!сса! 9960

!!!!а!!аас !!!ааа!аа! !дд!!д!асд а!сас!!!с! !а!саад!д! !ас!аааа!д 10020

сд!саа!с!с !!!д!!с!!с са!а!!са!а !д!саааасс !а!саааа!! с!!а!а!а!с 10080

!!!!!сдаа! !!даад!даа а!!!сда!аа !!!аааа!!а аа!адааса! а!са!!а!!! 10140

адд!а!са!а !!да!!!!!а !ас!!аа!!а с!ааа!!!дд !!аас!!!да аад!д!аса! 10200

саасдааааа !!ад!сааас дас!аааа!а аа!ааа!а!с а!д!д!!а!! аадаааа!!с 10260

!сс!а!аада а!а!!!!аа! ада!са!а!д !!!д!ааааа ааа!!аа!!! !!ас!аасас 10320

а!а!а!!!ас !!а!сааааа !!!дасааад !аада!!ааа а!аа!а!!са !с!аасаааа 10380

аааааассад аааа!дс!да ааасссддса ааассдаасс аа!ссааасс да!а!ад!!д 10440

д!!!дд!!!д а!!!!да!а! ааассдаасс аас!сдд!сс а!!!дсассс с!аа!са!аа 10500

!адс!!!аа! а!!!саада! а!!а!!аад! !аасд!!д!с аа!а!сс!дд ааа!!!!дса 10560

ааа!даа!са адсс!а!а!д дс!д!аа!а! даа!!!аааа дсадс!сда! д!дд!дд!аа 10620

!а!д!аа!!! ас!!да!!с! ааааааа!а! сссаад!а!! аа!аа!!!с! дс!аддаада 10680

адд!!адс!а сда!!!асад сааадссада а!асаа!даа сса!ааад!д а!!даадс!с 10740

дааа!а!асд ааддаасааа !а!!!!!ааа аааа!асдса а!дас!!дда асаааадааа 10800

д!да!а!а!! !!!!д!!с!! ааасаадса! сссс!с!ааа даа!ддсад! !!!сс!!!дс 10860

а!д!аас!а! !а!дс!ссс! !сд!!асааа аа!!!!ддас !ас!а!!ддд аас!!с!!с! 10920

даааа!ад!д дссассдс!! аа!!ааддсд сдсса!дссс дддсаадсдд ссдсасаад! 10980

!!д!асаааа аадсаддс!с сдсддссдса с!адд!!!аа ас!с!адаад с!аддаа!!с 11040

дсддссдс!! !сс!дса!да са!сд!сс!д сададссаад сдса!дс!!а а!!ааас!ад 11100

!с!сссад!а !са!!а!ад! дааад!!!!д дс!с!с!сдс сдд!дд!!!! !!асс!с!а! 11160

!!ааадддд! !!!ссасс!а аааа!!с!дд !а!са!!с!с ас!!!ас!!д !!ас!!!аа! 11220

- 150 029904

кксксакаак скккддккда ааккаксасд сккссдсаса сдакакссск асааакккак 11280

какккдккаа асакккксаа ассдсакааа аккккакдаа дксссдкска кскккаакдк 11340

адкскаасак ккксакаккд ааакакакаа кккасккаак кккадсдккд дкадааадса 11400

каакдаккка кксккаккск кскксакака аакдкккаак акасаакака аасаааккск 11460

ккассккаад ааддаккксс саккккакак кккааааака какккаксаа акакккккса 11520

ассасдкааа ксксакаака акаадккдкк ксаааадкаа каааакккаа скссакаакк 11580

кккккакксд аскдакскка аадсаасасс садкдасаса аскадссакк кккккскккд 11640

аакааааааа кссааккакс аккдкакккк ккккакасаа кдаааакккс ассааасаак 11700

дакккдкддк акккскдаад саадксакдк какдсаааак кскакааккс ссакккдаса 11760

скасддаадк ааскдаадак скдсккккас акдсдадаса саксккскаа адкаакккка 11820

акаакадкка скакакксаа даккксакак аксааакаск саакаккаск кскаааааак 11880

кааккадака кааккаааак аккасккккк кааккккаад кккааккдкк даакккдкда 11940

скаккдаккк аккаккскас какдкккааа ккдккккака дакадкккаа адкааакака 12000

адкаакдкад кададкдкка дадкдккасс скааассака ааскакаада кккакддкдд 12060

аскааккккс акакакккск каккдскккк ассккккскк ддкакдкаад кссдкааскд 12120

дааккаскдк дддккдссак дасаскскдк ддксккккдд кксакдсакд даксккдсдс 12180

аадааааада сааадаасаа адаааааада саааасадад адасаааасд сааксасаса 12240

ассаасксаа аккадксаск ддскдаксаа даксдссдсд кссакдкакд кскааакдсс 12300

акдсааадса асасдкдскк аасакдсаск ккааакддск сасссакскс аасссасаса 12360

сааасасакк дсскккккск ксаксаксас сасаассасс кдкакакакк сакксксккс 12420

сдссасскса акккскксас кксаасасас дксаасскдс акакдсдкдк саксссакдс 12480

ссаааксксс акдсакдккс саассасскк сксксккака каакасскак ааакасскск 12540

аакаксаскс асккскккса ксакссаксс акссададка скаскаскск аскаскакаа 12600

кассссаасс саасксакак ксаакаскас кскаддкасс скдсадддак ссаасаакдд 12660

ссадсадккс кксаадкдкд ссадаасккд ссдсадсккк ссскдакддд асаасддаск 12720

ксааасссак даддаасасс аааддскакд акдкскссаа ассксасакс кскдааасас 12780

сдакдасккк даадааскдд сасааасакд кдааскддск саасассаса кксаккскск 12840

ккдккссаск ддскдддккд аксксаасск аккдддкксс кскксаакдд ааааскдсад 12900

кдкдддсадк кдкдкаскас кксаасаскд дасккдддак саскдскддс кассакадак 12960

кдкдддсаса ккссксккас ааддссадск кдссксксаа аакскасскк дссдсадккд 13020

дкдскддадс сдккдааддк кссакаадак ддкддадсаа сддасасада дсасаксаса 13080

- 151 029904

да1асасада сасададааа да1ссйас1 сад1даддаа дддайдс1с (асадссаса 13140

1ддд11дда1 дс1сйдаад садаа1ссаа адаадсаадд даддасддас а11ас1да1с 13200

1даа1дадда сссадйд1д д1с1ддсаас а1аддаас111с1саад1д1 д1да1с11са 13260

1дёсИ1дд1 сЮсссасс с11д11дс1д дсс1ддда1д дддадас1ас 1ддддадд11 13320

1са1с1а1дд адддайПд адад1дйс1 ПдПсадса адссассПс 1д1д1саас1 13380

сасПдсаса ИддсПдд1 да1саассд1 Пда1дасад ааас1с1сса сд1дасса1д 13440

1са1аас1дс 1сПд1сасд с1ддд1даад дсйИсасаа сШсасса1 дадП1ссд1 13500

садасППад аа;ПдсдаП дад1дд1а1с адйИдассс сасдаад1дд адсаШдда 13560

Шддаадса асПддасП дс1сасаа1с 1саадсадП садасадаа1 дада1адада 13620

адддааддд11саасадИд садаадааас 1дда1садаа дададсдааа сПдаПддд 13680

даа1ассдП ддаасаас1с сс1д11д1д1 сПддда1да сШдПдаа сад1сааада 13740

а1ддсааддс ;ПддаПдс1 дПдс1дд1д 1саПсасда 1дПдд1дас Псайаадд 13800

а1са1сс1дд 1ддасд1дс1 с1са1саас1 с1дсдаПдд сааада1дсс асадсда1с1 13860

1саа1ддадд 1д1с1асаа1 саПсаа;Пд ссдсасасаа ссПс1с1сс асса1даддд 13920

Пдд1д1сс1 ссд1ддаддд 1дсдаад1дд адаПИддаа асд1дс1саа ад1дадааса 13980

аада1д1с1с 1ас1д1ддН да1адПс1д дсаассдйИ 1д1дададс1 дд1ддасаад 14040

с1ассааад1 ддПсадсса д1ссс1дд1д с1саадсадс Пда1дад1а дИадсПаа 14100

1сасс1адад с1сдд1сасс 1сдад1а1са ааа1с1аШ адааа1асас аа1аШ1д1 14160

1дсаддсПд с1ддадаа1с да1с1дс1а1 саШааааП асааааааа1 ШаШдсс 14220

1сааПаШ 1аддаИдд1 аПааддасд сПаааШП Пд1сддд1с ас1асдса1с 14280

аПд1даПд адаадайад сд;Пасдааа 1аПсд1ад1 ас1а1сда1а аШаШда 14340

аааПса1аа даааадсааа сдПас;Пда ;Шда1дааа саа1асааад асада1ааад 14400

ссасдсаса1 Падда1аП ддссдадаП ас1даа1аП дад1аада1с асддааШс 14460

1дасаддадс а1д1сПсаа Псадсссаа ШддсадПд ааа1ас1саа ассдсссс;П 14520

Щдсаддадс ддайаПса йдШдШ ддПдссШ дссааса1дд дадйсаадд 14580

11ддсдсдсс дасссадс11 1с 14602

<210> 66

<211> 10915

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида рОАВ7331

<400> 66

- 152 029904

!ааа!!!ааа !!саа!!аа! дсаа!с!!да !!!!саасаа сдаадд!аа! ддсд!аааад 60

аааааа!д!а !д!!а!!д!а !!да!с!!!с а!да!д!!да адсд!дсса! аа!а!да!да 120

!д!а!аа!!а ааа!а!!аас !д!сдса!!! !а!!дааа!д дсас!д!!а! !!саасса!а 180

!с!!!да!!с !д!!аса!да сасдас!дса адаад!ааа! аа!адасдсс д!!д!!ааад 240

аа!!дс!а!с а!а!д!дсс! аас!ададдд аа!!!дадсд !садасс!аа !сааа!а!!а 300

саааа!а!с! сас!с!д!сд ссадсаа!дд !д!аа!садс дсадасааа! ддсд!ааада 360

!сдсддаааа асс!ссссда д!ддса!да! адс!дсс!с! д!а!!дс!да !!!ад!садс 420

с!!а!!!дас !!ааддд!дс сс!сд!!ад! дасааа!!дс !!!сааддад асадсса!дс 480

сссасас!!! д!!дааааас ааа!!дсс!! !ддддадасд д!ааадссад !!дс!с!!са 540

а!ааддаа!д !сдаддаддс аа!д!аассд сс!с!дд!ад !асас!!с!с !аа!ссаааа 600

а!саа!!!д! а!!саада!а ссдсаааааа с!!а!дд!!! ааассс!дса ддас!ад!сс 660

адаадд!аа! !а!ссаада! д!адса!саа даа!ссаа!д !!!асдддаа ааас!а!дда 720

ад!а!!а!д! аадс!садса адаадсада! саа!а!дсдд саса!а!дса асс!а!д!!с 780

ааааа!даад аа!д!асада !асаада!сс !а!ас!дсса даа!асдаад аадаа!асд! 840

адааа!!даа ааадаадаас саддсдаада ааадаа!с!! даадасд!аа дсас!дасда 900

саасаа!даа аадаадаада !аадд!сдд! да!!д!дааа дадаса!ада ддасаса!д! 960

аадд!ддааа а!д!аадддс ддааад!аас с!!а!сасаа аддаа!с!!а !сссссас!а 1020

с!!а!сс!!! !а!а!!!!!с сд!д!са!!! !!дссс!!да д!!!!сс!а! а!ааддаасс 1080

аад!!сддса !!!д!даааа саадаааааа !!!дд!д!аа дс!а!!!!с! !!даад!ас! 1140

дадда!асаа с!!сададаа а!!!д!аад! !!д!адд!ас сада!с!дда !сссааасса 1200

!д!с!ссдда даддадасса д!!дада!!а ддссадс!ас адсадс!да! а!ддссдсдд 1260

!!!д!да!а! сд!!аасса! !аса!!дада сд!с!асад! даас!!!адд асададссас 1320

ааасассаса адад!дда!! да!да!с!ад ададд!!дса ада!ада!ас сс!!дд!!дд 1380

!!дс!дадд! !даддд!д!! д!ддс!дд!а !!дс!!асдс !дддссс!дд ааддс!адда 1440

асдс!!асда !!ддасад!! дадад!ас!д !!!асд!д!с аса!аддса! сааадд!!дд 1500

дсс!адда!с !аса!!д!ас асаса!!!дс !!аад!с!а! ддаддсдсаа дд!!!!аад! 1560

с!д!дд!!дс !д!!а!аддс с!!ссааасд а!сса!с!д! !адд!!дса! даддс!!!дд 1620

да!асасадс ссдддд!аса !!дсдсдсад с!дда!асаа дса!дд!дда !ддса!да!д 1680

!!дд!!!!!д дсаааддда! !!!дад!!дс садс!сс!сс ааддссад!! аддссад!!а 1740

сссааа!с!д ад!ад!!адс !!аа!сасс! ададс!сда! сддсддсаа! адс!!с!!ад 1800

сдсса!сссд дд!!да!сс! а!с!д!д!!д ааа!ад!!дс дд!дддсаад дс!с!с!!!с 1860

- 153 029904

адааадасад дсддссааад даасссаадд !дадд!дддс !а!ддс!с!с ад!!сс!!д! 1920

ддаадсдс!! дд!с!аадд! дсададд!д! !адсддда!д аадсаааад! д!ссда!!д! 1980

аасаада!а! д!!да!сс!а сд!аадда!а !!ааад!а!д !а!!са!сас !аа!а!аа!с 2040

ад!д!а!!сс аа!а!д!ас! асда!!!сса а!д!с!!!а! !д!сдссд!а !д!аа!сддс 2100

д!сасаааа! аа!ссссдд! дас!!!с!!! !аа!ссадда !дааа!аа!а !д!!а!!а!а 2160

а!!!!!дсда !!!дд!ссд! !а!аддаа!! даад!д!дс! !дадд!сдд! сдссассас! 2220

ссса!!!са! аа!!!!аса! д!а!!!дааа аа!ааааа!! !а!дд!а!!с аа!!!аааса 2280

сд!а!ас!!д !ааадаа!да !а!с!!дааа дааа!а!ад! !!ааа!а!!! а!!да!аааа 2340

!аасаад!са дд!а!!а!ад !ссаадсааа ааса!ааа!! !а!!да!дса ад!!!ааа!! 2400

садааа!а!! !саа!аас!д а!!а!а!сад с!дд!аса!! дссд!ада!д ааадас!дад 2460

!дсда!а!!а !дд!д!аа!а са!аддаа!! сд!!!ааасд а!с!дсд!с! аа!!!!сдд! 2520

ссаас!!дса саддааадас д!сдассдсд д!адс!с!!д сссадсадас !дддс!!сса 2580

д!сс!!!сдс !сда!сддд! ссаа!д!!д! сс!садс!д! даассддаад сддасдасса 2640

асад!ддаад аас!дааадд аасдадссд! с!а!асс!!д а!да!сддсс !с!дд!даад 2700

дд!а!са!сд садссаадса адс!са!даа аддс!да!дд дддадд!д!а !аа!!а!дад 2760

дсссасддсд ддс!!а!!с! !!адддадда !с!а!с!сд! !дс!саад!д са!ддсдсаа 2820

адсад!!а!! ддад!дсдда !!!!сд!!дд са!а!!а!!с дссасдад!! адсадасдаа 2880

дадасс!!са !даасд!ддс сааддссада д!!аадсада !д!!асдссс !дс!дсаддс 2940

с!!!с!а!!а !ссаа!ад!! дд!!да!с!! !ддааададс с!сддс!дад дссса!ас!д 3000

ааадада!сд а!дда!а!сд а!а!дсса!д !!д!!!дс!а дссадаасса да!саса!сс 3060

да!а!дс!а! !дсадс!!да сдсада!а!д дадда!аад! !да!!са!дд да!сдс!сад 3120

дад!адс!са !сса!дсасд ссдасаадаа садааайсс д!сдад!!аа сдсадссдс! 3180

!асдасдда! !сдаадд!са !сса!!сдда а!д!а!!ад! йдсассадс !ссдсд!сас 3240

асс!д!сйс а!йдаа!аа да!дйадса а!!д!ййа дс!!!д!с!! дйд!ддсад 3300

ддсддсаад! дсйсадаса !са!!с!д!! йсааайй а!дс!ддада асадсйс!! 3360

аа!!сс!!!д дааа!аа!ад ас!дсд!с!! аааа!!сада !д!с!дда!а !ада!а!да! 3420

!д!аааа!аа сс!ай!аад !д!са!!!ад ааса!аадй !!а!даа!д! !сйсса!й 3480

!сд!са!сда асдаа!аада д!ааа!асас с!!!!!!аас а!!асааа!а ад!!с!!а!а 3540

сдйдй!а! асассдддаа !са!йсса! !аййсдсд саааад!сас дда!а!!сд! 3600

дааадсдаса !ааас!дсда аа!!!дсддд дад!д!с!!д ад!!!дсс!с даддс!адсд 3660

са!дсаса!а дасасасаса !са!с!сай да!дсйдд! аа!аайд!с а!!ада!!д! 3720

- 154 029904

!!!!а!дса! ада!дсас!с дааа!садсс аа!!!!адас аад!а!сааа сдда!д!дас 3780

!!сад!аса! !ааааасд!с сдсаа!д!д! !а!!аад!!д !с!аадсд!с аа!!!да!!! 3840

асаа!!даа! а!а!сс!дсс ссадссадсс аасадс!сда !!!асаа!!д аа!а!а!сс! 3900

дссддссддс ссасдсд!д! сдаддаа!!с !да!с!ддсс ссса!!!дда сд!даа!д!а 3960

дасасд!сда аа!ааада!! !ссдаа!!ад аа!аа!!!д! !!а!!дс!!! сдсс!а!ааа 4020

!асдасдда! сд!аа!!!д! сд!!!!а!са ааа!д!ас!! !са!!!!а!а а!аасдс!дс 4080

ддаса!с!ас а!!!!!даа! !даааааааа !!дд!аа!!а с!с!!!с!!! !!с!сса!а! 4140

!дасса!са! ас!са!!дс! да!сса!д!а да!!!сссдд аса!даадсс а!!!асаа!! 4200

даа!а!а!сс !дссдссдс! дссдс!!!дс асссдд!дда дс!!дса!д! !дд!!!с!ас 4260

дсадаас!да дссдд!!адд сада!аа!!! сса!!дадаа с!дадсса!д !дсасс!!сс 4320

ссссаасасд д!дадсдасд дддсаасдда д!да!ссаса !дддас!!!! аааса!са!с 4380

сд!сдда!дд сд!!дсдада даадсад!сд а!ссд!дада !садссдасд сассдддсад 4440

дсдсдсааса сда!сдсааа д!а!!!даас дсадд!асаа !сдадссдас д!!сасдсдд 4500

аасдассаад саадс!!ддс !дсса!!!!! дддд!даддс сд!!сдсддс сдаддддсдс 4560

адсссс!ддд ддда!дддад дсссдсд!!а дсдддссддд аддд!!сдад аадддддддс 4620

асссссс!!с ддсд!дсдсд д!сасдсдса садддсдсад ссс!дд!!аа ааасаадд!! 4680

!а!ааа!а!! дд!!!аааад садд!!аааа дасадд!!ад сдд!ддссда аааасдддсд 4740

дааассс!!д сааа!дс!дд а!!!!с!дсс !д!ддасадс ссс!сааа!д !саа!адд!д 4800

сдсссс!са! с!д!садсас !с!дсссс!с аад!д!саад да!сдсдссс с!са!с!д!с 4860

ад!ад!сдсд сссс!саад! д!саа!ассд садддсас!! а!ссссаддс !!д!ссаса! 4920

са!с!д!ддд ааас!сдсд! аааа!саддс д!!!!сдссд а!!!дсдадд с!ддссадс! 4980

ссасд!сдсс ддссдааа!с дадсс!дссс с!са!с!д!с аасдссдсдс сддд!дад!с 5040

ддсссс!саа д!д!саасд! ссдсссс!са !с!д!сад!д адддссаад! !!!ссдсдад 5100

д!а!ссасаа сдссддсддс сдсдд!д!с! сдсасасддс !!сдасддсд !!!с!ддсдс 5160

д!!!дсаддд сса!адасдд ссдссадссс адсддсдадд дсаассадсс сдд!дадсд! 5220

сддаааддд! сдасдда!с! !йссдс!дс а!аассс!дс !!сдддд!са !!а!адсда! 5280

!!й!сдд!а !а!сса!сс! ййсдсасд а!а!асадда ййдссааа дддйсд!д! 5340

адас!!!сс! !дд!д!а!сс аасддсд!са дссдддсадд а!адд!даад !аддсссасс 5400

сдсдадсддд !д!!сс!!с! !сас!д!ссс !!а!!сдсас с!ддсдд!дс !саасдддаа 5460

!сс!дс!с!д сдаддс!ддс сддс!ассдс сддсд!ааса да!дадддса адсдда!ддс 5520

!да!дааасс аадссаасса ддаадддсад сссасс!а!с аадд!д!ас! дсс!!ссада 5580

- 155 029904

сдаасдаада дсда!!дадд ааааддсддс ддсддссддс а!дадсс!д! сддсс!асс! 5640

дс!ддссд!с ддссадддс! асаааа!сас дддсд!сд!д дас!а!дадс асд!ссдсда 5700

дс!ддсссдс а!саа!ддсд асс!дддссд сс!дддсддс с!дс!дааас !с!ддс!сас 5760

сдасдасссд сдсасддсдс дд!!сдд!да !дссасда!с с!сдссс!дс !ддсдаада! 5820

сдаададаад саддасдадс !!ддсаадд! са!да!дддс д!дд!ссдсс сдадддсада 5880

дсса!дас!! !!!!адссдс !аааасддсс дддддд!дсд сд!да!!дсс аадсасд!сс 5940

сса!дсдс!с са!саадаад адсдас!!сд сддадс!дд! а!!сд!дсад ддсаада!!с 6000

ддаа!ассаа д!асдадаад дасддссада сдд!с!асдд дассдас!!с а!!дссда!а 6060

адд!дда!!а !с!ддасасс ааддсассад дсддд!сааа !саддаа!аа дддсаса!!д 6120

ссссддсд!д ад!сддддса а!сссдсаад даддд!даа! даа!сддасд !!!дассдда 6180

аддса!асад дсаадаас!д а!сдасдсдд дд!!!!ссдс сдадда!дсс дааасса!сд 6240

саадссдсас сд!са!дсд! дсдссссдсд ааасс!!сса д!ссд!сддс !сда!дд!сс 6300

адсаадс!ас ддссаада!с дадсдсдаса дсд!дсаас! ддс!ссссс! дссс!дсссд 6360

сдсса!сддс сдссд!ддад сд!!сдсд!с д!с!сдааса ддаддсддса дд!!!ддсда 6420

ад!сда!дас са!сдасасд сдаддаас!а !дасдассаа даадсдаааа ассдссддсд 6480

аддасс!ддс аааасадд!с адсдаддсса адсаддссдс д!!дс!дааа сасасдаадс 6540

адсада!саа ддааа!дсад с!!!сс!!д! !сда!а!!дс дссд!ддссд дасасда!дс 6600

дадсда!дсс ааасдасасд дсссдс!с!д ссс!д!!сас сасдсдсаас аадаааа!сс 6660

сдсдсдаддс дс!дсаааас аадд!са!!! !ссасд!саа сааддасд!д аада!сасс! 6720

асассддсд! сдадс!дсдд дссдасда!д асдаас!дд! д!ддсадсад д!д!!ддад! 6780

асдсдаадсд сасссс!а!с ддсдадссда !сасс!!сас д!!с!асдад с!!!дссадд 6840

асс!дддс!д д!сда!саа! ддссдд!а!! асасдааддс сдаддаа!дс с!д!сдсдсс 6900

!асаддсдас ддсда!дддс !!сасд!ссд ассдсд!!дд дсасс!ддаа !сдд!д!сдс 6960

!дс!дсассд с!!ссдсд!с с!ддассд!д дсаадаааас д!сссд!!дс садд!сс!да 7020

!сдасдадда аа!сд!сд!д с!д!!!дс!д дсдассас!а сасдааа!!с а!а!дддада 7080

ад!ассдсаа дс!д!сдссд асддсссдас дда!д!!сда с!а!!!садс !сдсассддд 7140

адссд!ассс дс!саадс!д дааасс!!сс дсс!са!д!д сдда!сдда! !ссасссдсд 7200

!даадаад!д дсдсдадсад д!сддсдаад сс!дсдаада д!!дсдаддс адсддсс!дд 7260

!ддаасасдс с!ддд!саа! да!дасс!дд !дса!!дсаа асдс!адддс с!!д!дддд! 7320

сад!!ссддс !ддддд!!са дсадссадсд с!!!ас!ддс а!!!саддаа саадсдддса 7380

с!дс!сдасд сас!!дс!!с дс!сад!а!с дс!сдддасд сасддсдсдс !с!асдаас! 7440

- 156 029904

дссдаХааас ададдайаа аайдасааХ (дХдайаад дсХсадайс дасддсйдд 7500

адсддссдас дХдсаддай ХссдсдадаХ ссдайдХсд дсссХдаада аадсХссада 7560

даХдйсддд ХссдйХасд адсасдадда дааааадссс аХддаддсдХ ХсдсХдаасд 7620

дйдсдадаХ дссдХддсаХ ХсддсдссХа саХсдасддс дадаХсайд ддсХдХсдд! 7680

сйсааасад даддасддсс ссааддасдс Хсасааддсд саХсХдХссд дсдййсд! 7740

ддадсссдаа садсдаддсс дадддд!сдс сддХаХдсХд с!дсдддсд! Хдссддсддд 7800

йХайдсХс д!да!да!сд Хссдасада! Хссаасддда аХсХддХдда ХдсдсаХсй 7860

са!сс!сддс дсасйааХа ХйсдсХай сХддадсйд йдХйайХ сддХсХассд 7920

сс!дссдддс дддд!сдсдд сдасдд!адд сдс!д!дсад ссдс!да!дд ХсдХдйса! 7980

с!с!дссдс! с!дс!адд!а дсссда!асд айдаХддсд д!сс!ддддд сХаХйдсдд 8040

аас!дсдддс д!ддсдс!д! ХддХдйдас ассааасдса дсдсХадаХс сХдХсддсд! 8100

сдсадсдддс с!ддсддддд сддХйсса! ддсдйсдда ассдХдсХда сссдсаад!д 8160

дсаасс!ссс д!дсс!с!дс ХсассХйас сдсс!ддсаа с!ддсддссд даддасйс! 8220

дсХсдйсса дХадсХйад ХдХйдаХсс дссаа!сссд аХдссХасад даассаа!д! 8280

ХсХсддссХд дсд!ддс!сд дсс!да!сдд адсдддйХа ассХасйсс Хйддйссд 8340

дддда!с!сд сдас!сдаас сХасадйд! ХХссХХасХд ддсйХсХса дсссссдадс 8400

дсйадХддд ааХйдХасс ссйаХсдаа ссдддадсас адда!дасдс сХаасаайс 8460

айсаадссд асассдсйс дсддсдсддс йаайсадд адйаааса! са!дадддаа 8520

дсдд!да!сд ссдаадХаХс дас!саас!а ХсададдХад йддсдХса! сдадсдсса! 8580

с!сдаассда сдйдсХддс сдХасаХйд ХасддсХссд сад!дда!дд сддсс!даад 8640

ссасасад!д аХайдайХ дсХддйасд дХдассдХаа ддсйдаХда аасаасдсдд 8700

сдадсйХда Хсаасдасс! Хйддааас! Хсддсйссс с!ддададад сдадайсХс 8760

сдсдс!д!ад аад!сасса! ХдйдХдсас дасдаса!са йссдХддсд ХХаХссадс! 8820

аадсдсдаас ХдсаайХдд адаа!ддсад сдсаа!даса йсйдсадд ХаХсйсдад 8880

ссадссасда Хсдасайда 1с1ддс1а1с йдсХдасаа аадсаадада асаХадсдй 8940

дссйддХад д!ссадсддс ддаддаас!с ХйдаХссдд йссХдааса ддаХсХаХй 9000

даддсдс!аа аХдааассй аасдсХаХдд аас!сдссдс ссдас!дддс ХддсдаХдад 9060

сдаааХдХад Хдсйасдй дХсссдсай ХддХасадсд садХаассдд саааа!сдсд 9120

ссдаадда!д ХсдсХдссда с!дддсаа!д дадсдсс!дс сддсссадХа ХсадсссдХс 9180

аХасйдаад с!аддсаддс йаХсйдда саадаада!с дсйддссХс дсдсдсада! 9240

садйддаад ааХйдйса с!асд!дааа ддсдада!са ссааддХад! сддсааа!аа 9300

- 157 029904

йдйсйаасаа ййсдййсаад ссдасдссдс ййсдсддсдс ддсййаасйс аадсдййада 9360

дадсйдддда адасйайдсд сдайсйдййд ааддйддййс йаадссйсдй сййдсдайдд 9420

саШсдай сайсссай ссдсдсйаа дйддсПсс ссйддсад! 1са1садддс 9480

йааайсаайс йадссдасйй дйссддйдаа айдддсйдса сйссаасада аасаайсааа 9540

сааасайаса садсдасййа ййсасасдад сйсаааййас аасддйайай айссйдссад 9600

йсадсайсай сасассаааа дййаддсссд аайадйййда ааййадааад сйсдсааййд 9660

аддйсйасад дссаааййсд сйсййадссд йасаайаййа сйсассддай ссйаассддй 9720

дйдайсайдд дссдсдаййа аааайсйсаа ййайайййдд йсйаайййад йййддйаййд 9780

адйаааасаа аййсдаасса аассаааайа йааайайайа дйййййайай айайдссййй 9840

аадасййййй айадаайййй сйййаааааа йайсйадааа йайййдсдас йсййсйддса 9900

йдйаайаййй сдййааайай даадйдсйсс айййййаййа асйййааайа аййддййдйа 9960

сдайасШ сй;йсаад1 дйасйаааа 1дсд1саа1с 1сШдйс11сс;йайса 10020

йайдйсаааа ссйайсаааа ййсййайайа йсйййййсда айййдаадйд ааайййсдай 10080

ааШаааа! йааайадаас ;й;йсайа1 йаддйИса 1айдайй 1;йасйа;й 10140

йасйаааййй ддййаасййй дааадйдйас айсаасдааа ааййадйсаа асдасйаааа 10200

1аа;йаа;йа 1са1д1д11а йаадаааай 1с1сс1а1аа даайаййа ;йада1с;йа 10260

1д1Ид1ааа ааааайаай ййасйаас асаййайй асйайсааа ааййдасаа 10320

ад1аада11а ааайаайй сайсйаасаа аааааааасс адааа;йдс1 даааасссдд 10380

саааассдаа ссаайсааа ссдайИад! 1ддШддй 1даШ1да1 а1ааассдаа 10440

ссаасйдд! ссаШдсас сссйаайсай аа1адсШа аШШсаад айайайаа 10500

дИаасдПд 1саа1а1сс1 ддааайИд саааа1даа1 саадссПйа 1ддс1д1аа1 10560

а1дааШаа аадсадсйд ;йд1дд1дд1 аа1а1д1аа1 йасйдай с1ааааааа1 10620

айсссаадйа ййаайааййй сйдсйаддаа дааддййадс йасдайййас адсааадсса 10680

даайасаайд аассайааад йдаййдаадс йсдааайайа сдааддааса аайайййййа 10740

ааааайасд сайдасПд даасаааада аад1д;й;йа йййдйс йааасаадс 10800

айссссйсйа аадаайддса дййййссййй дсайдйаасй аййайдсйсс сййсдййаса 10860

ааааййййдд асйасйаййд ддаасййсйй сйдаааайад йддссассдс ййаай 10915

<210> 67

<211> 1448

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> РуРйак ν2 промотор

- 158 029904

<400> 67

с!сссад!а! са!!а!ад!д ааад!!!!дд с!с!с!сдсс дд!дд!!!!! !асс!с!а!! 60

!ааадддд!! !!ссасс!аа ааа!!с!дд! а!са!!с!са с!!!ас!!д! !ас!!!аа!! 120

!с!са!аа!с !!!дд!!даа а!!а!сасдс !!ссдсасас да!а!ссс!а сааа!!!а!! 180

а!!!д!!ааа са!!!!сааа ссдса!аааа !!!!а!даад !сссд!с!а! с!!!аа!д!а 240

д1с!ааса!! йса!айда аа!а!а1аа! йасйаай йадсдйдд !адааадса! 300

аа!да!!!а! !с!!а!!с!! с!!са!а!аа а!д!!!аа!а !асаа!а!аа асааа!!с!! 360

!асс!!аада адда!!!ссс а!!!!а!а!! !!ааааа!а! а!!!а!сааа !а!!!!!саа 420

ссасд!ааа! с!са!аа!аа !аад!!д!!! саааад!аа! аааа!!!аас !сса!аа!!! 480

!!!!а!!сда с!да!с!!аа адсаасассс ад!дасасаа с!адсса!!! !!!!с!!!да 540

а!ааааааа! ссаа!!а!са !!д!а!!!!! !!!а!асаа! даааа!!!са ссааасаа!д 600

а!!!д!дд!а !!!с!даадс аад!са!д!! а!дсаааа!! с!а!аа!!сс са!!!дасас 660

!асддаад!а ас!даада!с !дс!!!!аса !дсдадасас а!с!!с!ааа д!аа!!!!аа 720

!аа!ад!!ас !а!а!!саад а!!!са!а!а !сааа!ас!с аа!а!!ас!! с!аааааа!! 780

аа!!ада!а! аа!!аааа!а !!ас!!!!!! аа!!!!аад! !!аа!!д!!д аа!!!д!дас 840

!а!!да!!!а !!а!!с!ас! а!д!!!ааа! !д!!!!а!ад а!ад!!!ааа д!ааа!а!аа 900

д!аа!д!ад! адад!д!!ад ад!д!!ассс !ааасса!аа ас!а!аада! !!а!дд!дда 960

с!аа!!!!са !а!а!!!с!! а!!дс!!!!а сс!!!!с!!д д!а!д!аад! ссд!аас!дд 1020

аа!!ас!д!д дд!!дсса!д асас!с!д!д д!с!!!!дд! !са!дса!дд а!с!!дсдса 1080

адааааадас ааадаасааа даааааадас аааасадада дасаааасдс аа!сасасаа 1140

ссаас!сааа !!ад!сас!д дс!да!саад а!сдссдсд! сса!д!а!д! с!ааа!дсса 1200

!дсааадсаа сасд!дс!!а аса!дсас!! !ааа!ддс!с ассса!с!са асссасасас 1260

ааасаса!!д сс!!й!сй са!са!сасс асаассасс! д!а!а!а!!с а!!с!с!!сс 1320

дссасс!саа !!!сйсас! !саасасасд !саасс!дса !а!дсд!д!с а!ссса!дсс 1380

сааа!с!сса !дса!д!!сс аассасс!!с !с!с!!а!а! аа!асс!а!а аа!асс!с!а 1440

а!а!сас! 1448

<210> 68

<211> 85

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> РуРйак 5' ИТК

<400> 68

- 159 029904

сас!!с!!!с а!са!сса!с са!ссадад! ас!ас!ас!с !ас!ас!а!а а!ассссаас 60

ссаас!са!а !!саа!ас!а с!с!а 85

<210> 69

<211> 129

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> РуРЬак 3' ИТК ν1

<400> 69

ад!а!даас! аааа!дса!д !адд!д!аад адс!са!дда дадса!ддаа !а!!д!а!сс 60

дасса!д!аа сад!а!аа!а ас!дадс!сс а!с!сас!!с !!с!а!даа! ааасааадда 120

!д!!а!да! 129

<210> 70

<211> 1088

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> РуРНак 3' МАК ν2

<400> 70

а!а!!аасас !с!а!с!а!д сасс!!а!!д !!с!а!да!а аа!!!сс!с! !а!!а!!а!а 60

аа!са!с!да а!сд!дасдд с!!а!ддаа! дс!!сааа!а д!асааааас ааа!д!д!ас 120

!а!аадас!! !с!ааасаа! !с!аас!!!а дса!!д!даа сдадаса!аа д!д!!аадаа 180

даса!аасаа !!а!аа!дда адаад!!!д! с!сса!!!а! а!а!!а!а!а !!асссас!! 240

а!д!а!!а!а !!адда!д!! ааддадаса! аасаа!!а!а аадададаад !!!д!а!сса 300

!!!а!а!а!! а!а!ас!асс са!!!а!а!а !!а!ас!!а! ссас!!а!!! аа!д!с!!!а 360

!аадд!!!да !сса!да!а! !!с!аа!а!! !!ад!!да!а !д!а!а!даа аадд!ас!а! 420

!!даас!с!с !!ас!с!д!а !ааадд!!дд а!са!сс!!а аад!ддд!с! а!!!аа!!!! 480

а!!дс!!с!! асада!аааа аааааа!!а! дад!!дд!!! да!аааа!а! !даадда!!! 540

аааа!аа!аа !ааа!аа!аа а!ааса!а!а а!а!а!д!а! а!ааа!!!а! !а!аа!а!аа 600

са!!!а!с!а !аааааад!а аа!а!!д!са !ааа!с!а!а саа!сд!!!а дсс!!дс!дд 660

аасдаа!с!с аа!!а!!!аа асдадад!аа аса!а!!!да с!!!!!дд!! а!!!аасааа 720

!!а!!а!!!а асас!а!а!д ааа!!!!!!! !!!!!а!сад сааадаа!аа аа!!ааа!!а 780

адааддасаа !дд!д!ссса а!сс!!а!ас аассаас!!с сасаадааад !саад!сада 840

дасаасаааа ааасаадсаа аддааа!!!! !!аа!!!дад !!д!с!!д!! !дс!дса!аа 900

!!!а!дсад! аааасас!ас аса!аассс! !!!адсад!а дадсаа!дд! !дассд!д!д 960

- 160 029904

сккадсккск кккаккккак ккккккакса дсааадаака аакаааакаа аакдадасас 1020

кксадддакд ккксаассск какасаааас сссаааааса адккксскад сассскасса 1080

асдааккс 1088

<210> 71

<211> 457

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> АкиОРЬ 3' ИТК ν1

<400> 71

каксаааакс какккадааа касасаакак кккдккдсад дсккдскдда дааксдакск 60

дскаксакаа аааккасааа ааааккккак ккдссксаак каккккадда ккддкаккаа 120

ддасдсккаа аккакккдкс дддксаскас дсаксаккдк даккдадаад аксадсдака 180

сдааакаккс дкадкаскак сдакааккка кккдаааакк сакаадаааа дсааасдкка 240

сакдааккда кдааасаака сааадасада кааадссасд сасакккадд акаккддссд 300

адаккаскда акаккдадка адаксасдда акккскдаса ддадсакдкс кксаакксад 360

сссааакддс адккдааака сксааассдс сссакакдса ддадсддакс акксаккдкк 420

кдкккддккд сскккдссаа сакдддадкс сааддкк 457

<210> 72

<211> 68

<212> Белок

<213> Искусственная

<220>

<223> Ν- концевые остатки 1-68 АпЭ9Э8

<400> 72

Ме! 8ег А1а Рго ТЬг А1а Азр 11е Агд А1а Агд А1а Рго О1и А1а Ьуз 1 5 10 15

Ьуз Уа1 Ηΐ3 11е А1а Азр ТЬг А1а 11е Азп Агд Шз Азп Тгр Туг Ьуз 20 25 30

Шз Уа1 Азп Тгр Ьеи Азп Уа1 РЬе Ьеи 11е 11е О1у 11е Рго Ьеи Туг 35 40 45

О1у Суз 11е С1п А1а РЬе Тгр Уа1 Рго Ьеи С1п Ьеи Ьуз ТЬг А1а 11е 50 55 60

Тгр А1а Уа1 11е

65

<210> 73 <211> 175 <212> Белок

- 161 029904

<213> Искусственная

<220>

<223> С- концевые остатки 281-455 АиЭ9П§

<400> 73

8ег Не Тдэ А1а Тдэ Ьук С1п Ьеи С1у Ьеи А1а Туг Ак|э Ьеи Ьук Ьук 1 5 10 15

РНе Агд А1а Акп С1и Не С1и Ьук С1у Агд Уа1 С1п С1п Ьеи С1п Ьук 20 25 30

Ьук Ьеи Акэ Агд Ьук Агд А1а ТНг Ьеи Акэ Тдэ С1у ТНг Рго Ьеи Акэ 35 40 45

С1п Ьеи Рго Уа1 МеХ С1и Тдэ Акэ Акэ Туг Уа1 С1и С1п А1а Ьук Акп 50 55 60

С1у Агд С1у Ьеи Уа1 А1а Не А1а С1у Уа1 Уа1 Нэк Акэ Уа1 ТЬг Акэ 65 70 75 80

РНе Не Ьук Акэ Нэк Рго С1у С1у Ьук А1а МеХ Не 8ег §ег С1у Не 85 90 95

С1у Ьук Акэ А1а ТНг А1а МеХ РНе Акп С1у С1у Уа1 Туг Туг Нэк 8ег 100 105 110

Акп А1а А1а Нэк Акп Ьеи Ьеи 8ег ТНг МеХ Агд Уа1 С1у Уа1 Не Агд 115 120 125

С1у С1у Сук С1и Уа1 С1и Не Тдэ Ьук Агд А1а С1п Ьук С1и Акп Уа1 130 135 140

С1и Туг Уа1 Агд Акэ С1у 8ег С1у С1п Агд Уа1 Не Агд А1а С1у С1и 145 150 155 160

С1п Рго ТНг Ьук Не Рго С1и Рго Не Рго ТНг А1а Акэ А1а А1а 165 170 175

<210> 74

<211> 14103

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида ρ^ΛΒ110110

<400> 74

дХасаааааа дсаддсХХсХ адассХаддХ ддадХсаХса сдсадасХаХ сХсадсаХдХ 60

дсдХадсасд сддссдссХс ссадХаХсаХ ХаХадХдааа дХХХХддсХс ХсХсдссддХ 120

ддХХХХХХас сХсХаХХХаа аддддХХХХс сассХааааа ХХсХддХаХс аХХсХсасХХ 180

ХасХХдХХас ХХХааХХХсХ саХааХсХХХ ддХХдаааХХ аХсасдсХХс сдсасасдаХ 240

аХсссХасаа аХХХаХХаХХ ХдХХааасаХ ХХХсааассд саХааааХХХ ХаХдаадХсс 300

сдХсХаХсХХ ХааХдХадХс ХаасаХХХХс аХаХХдаааХ аХаХааХХХа сХХааХХХХа 360

- 162 029904

дсд11дд1ад ааадса1аа1 да111а11с1 1а11с11с11 са1а1ааа1д 111аа1а1ас 420

аа1а1аааса аа11с111ас с11аадаадд а111ссса11 11а1а1111а аааа1а1а11 480

1а1сааа1а1 1111саасса сд1ааа1с1с а1аа1аа1аа д11д111саа аад1аа1ааа 540

а111аас1сс а1аа111111 1а11сдас1д а1с11ааадс аасасссад1 дасасаас1а 600

дсса111111 1с111даа1а аааааа1сса а11а1са11д 1а11111111 а1асаа1даа 660

аа111сасса аасаа1да11 1д1дд1а111 с1даадсаад 1са1д11а1д саааа11с1а 720

1аа11ссса1 11дасас1ас ддаад1аас1 даада1с1дс 1111аса1дс дадасаса1с 780

11с1ааад1а а1111аа1аа 1ад11ас1а1 а11саада11 1са1а1а1са аа1ас1саа1 840

а11ас11с1а ааааа11аа1 1ада1а1аа1 1аааа1а11а с111111аа1 111аад111а 900

а11д11даа1 11д1дас1а1 1да111а11а 11с1ас1а1д 111ааа11д1 111а1ада1а 960

д111ааад1а аа1а1аад1а а1д1ад1ада д1д11адад1 д11ассс1аа асса1ааас1 1020

а1аада111а 1дд1ддас1а а1111са1а1 а111с11а11 дс1111асс1 111с11дд1а 1080

1д1аад1ссд 1аас1ддаа1 1ас1д1ддд1 1дсса1даса с1с1д1дд1с 1111дд11са 1140

1дса1дда1с 11дсдсаада аааадасааа даасааадаа аааадасааа асадададас 1200

аааасдсаа1 сасасаасса ас1сааа11а д1сас1ддс1 да1саада1с дссдсд1сса 1260

1д1а1д1с1а аа1дсса1дс ааадсаасас д1дс11ааса 1дсас111аа а1ддс1сасс 1320

са1с1саасс сасасасааа саса11дсс1 1111с11са1 са1сассаса ассасс1д1а 1380

1а1а11са11 с1с11ссдсс асс1саа111 с11сас11са асасасд1са асс1дса1а1 1440

дсд1д1са1с сса1дсссаа а1с1сса1дс а1д11ссаас сасс11с1с1 с11а1а1аа1 1500

асс1а1ааа1 асс1с1аа1а 1сас1сас11 с111са1са1 сса1сса1сс адад1ас1ас 1560

1ас1с1ас1а с1а1аа1асс ссаасссаас 1са1а11саа 1ас1ас1с1а дда1ссааса 1620

а1ддс1дсас 11да1адса1 ссс1даддас ааадсаас1а дс1ссаад1с аасссаса1а 1680

сад1ассаад адд1сасд11 1аддаас1дд 1асаадаааа 1саас1ддс1 саасасдасс 1740

с11д11д1сс 1са11сс1дс 1с11ддд11д 1ас11дасда даассасасс 1с1сассада 1800

сс1ассс1са 111дд1с1д1 1с1с1ас1а1 11с1д1асад сд111ддса1 сас1дд1ддс 1860

1ассасадас 111дд1ссса 1адд1с11ас ад1дсдадд1 1дсса11дад ас1с11сс1д 1920

дс111сас1д дадс1дд1дс да1ссаадд1 1с1дсаада1 дд1дд1садс саа1са1адд 1980

дсаса1сасс д11ддасдда сасса1даад дасссс1ас1 с1д1да1дад аддас1дс1д 2040

11с1сссаса 1адд11дда1 дд11с1саас 1с1да1ссаа адд1сааадд садаасада1 2100

д111с1да1с 11дас1с1да 1сссд1сд11 д1д1ддсаас асааасас1а 1ддсаад1д1 2160

11дс1с111д ссдс11дда1 с111ссда1д а1ад1ддс1д ддс1ддд11д дддада11дд 2220

- 163 029904

!дддд!ддас !!д!с!а!дс !ддса!са!а сд!дсс!дс! !!д!!садса адссас!!!с 2280

!д!д!саас! са!!ддсаса !!дда!адд! даасаассд! !!да!дасад асд!ас!сса 2340

аддда!са!д !!с!дас!дс д!!дд!саса а!дддадаад да!ассасаа с!!ссасса! 2400

дад!!!ссда д!дас!асад ааа!дсса!с а!!!дд!а!с ад!а!дассс !асааад!дд 2460

с!са!с!а!с !с!!садс!! ддд!ссс!!с сса!!ддсс! ас!с!с!саа дасс!!ссд! 2520

!ссаа!дада !!дадааадд ааддс!!сад саасадсааа аддс!с!!да саадаааада 2580

ад!дд!с!!д а!!ддддас! !сс!с!с!!с садс!!ссад !да!с!са!д дда!дас!!! 2640

саадс!сд!! дсааадааад !ддадада!д с!!д!!дс!д !!дс!ддад! да!сса!да! 2700

д!с!сссад! !са!!даада !са!сс!дд! дддаддадсс !са!!адаад !дс!д!!ддд 2760

ааада!ддда с!ддса!д!! саа!дд!дда д!д!а!даас а!!сааасдс сдсасасаас 2820

!!дс!дадса саа!дадад! !ддад!с!!д ададд!ддас аадаад!дда дд!!!ддаад 2880

ааасададдд !дда!д!!с! !дддаад!са даса!!с!!с д!саад!дас ааддд!ддад 2940

сд!с!дд!дд ааддадс!д! !дсадсд!да !дад!ад!!а дс!!аа!сас с!ададс!сд 3000

д!сассад!а !даас!аааа !дса!д!адд !д!аададс! са!ддададс а!ддаа!а!! 3060

д!а!ссдасс а!д!аасад! а!аа!аас!д адс!сса!с! сас!!с!!с! а!даа!ааас 3120

ааадда!д!! а!да!а!а!! аасас!с!а! с!а!дсасс! 1айд!!с1а !да1ааа!й 3180

сс!с!!а!!а !!а!ааа!са !с!даа!сд! дасддс!!а! ддаа!дс!!с ааа!ад!аса 3240

аааасааа!д !д!ас!а!аа дас!йс1аа асаайс1аа с!йадса!! д!даасдада 3300

са!аад!дй аадаадаса! аасаайШа а!ддаадаад !йд!с!сса !йа1а!а!! 3360

а!а!а!!асс сас!!а!д!а !!а!а!!адд а!д!!аадда даса!аасаа !!а!ааадад 3420

адаад!!!д! а!сса!!!а! а!а!!а!а!а с!ассса!!! а!а!а!!а!а с!!а!ссас! 3480

!а!йаа!д! с!йа!аадд !йда!сса! да!а!йс!а а!аййад! !да1а!д!а! 3540

а!даааадд! ас!а!йдаа с!с!сйас! с!д!а!ааад дйдда!са! ссйааад!д 3600

дд!с!а!!!а а!!!!а!!дс !!с!!асада !ааааааааа а!!а!дад!! дд!!!да!аа 3660

аа!айдаад да!йаааа! аа1аа!ааа! аа!ааа!аас айИааййа 1д1а1а1ааа 3720

!йайа!аа 1а1ааса!!! а!с!а!аааа аад!ааа!а! !д!са!ааа! с!а!асаа!с 3780

д!йадсс!! дс!ддаасда а!с!саайа Юааасдад ад!аааса!а !йдас!!й 3840

!ддйа!йа асааайа!! аЮаасас! а!а!дааа!! ййййй а!садсааад 3900

аа1аааайа аайаадаад дасаа!дд!д !сссаа!сс! !а!асаасса ас!!ссасаа 3960

дааад!саад !сададасаа саааааааса адсаааддаа а!!!!!!аа! !!дад!!д!с 4020

!!д!!!дс!д са!аа!!!а! дсад!аааас ас!асаса!а ассс!!!!ад сад!ададса 4080

- 164 029904

а1дд11дасс д1д1дс11ад сйсййа! 1йаййй 1а1садсааа даа1ааа1аа 4140

аа1аааа1да дасас11сад дда1д111са ассс11а1ас аааассссаа ааасаад111 4200

сс1адсассс 1ассаасдаа 11сдсддссд сйаайаад а1дад1да1а с1саддас1с 4260

аддас1сас1 с1дс1да1са с1ад1дс1ад сс1сдадд1с дассадс111 с11д1асааа 4320

д1ддйдсдд ссдсйаай ааа111ааа1 1саа11аа1д саа1сйда1 Шсаасаас 4380

даадд1аа1д дсд1аааада ааааа1д1а1 дйа11д1а1 1да1с1йса 1да1дйдаа 4440

дсд1дсса1а а1а1да1да1 д1а1аайаа аа1айаас1 д1сдсай11 а11дааа1дд 4500

сас1д11а11 1саасса1а1 с1йда11с1 дйаса1дас асдас1дсаа даад1ааа1а 4560

а1адасдссд 11д11ааада а11дс1а1са 1а1д1дсс1а ас1ададдда а1йдадсд1 4620

садасс1аа1 сааа1а11ас аааа1а1с1с ас1с1д1сдс садсаа1дд1 д1аа1садсд 4680

садасааа1д дсд1ааада1 сдсддааааа сс1ссссдад 1ддса1да1а дс1дсс1с1д 4740

1айдс1да1 11ад1садсс 11аШдас1 1ааддд1дсс с1сдйад1д асааайдс! 4800

йсааддада садсса1дсс ссасасШд 11даааааса аайдссШ ддддадасдд 4860

1ааадссад1 1дс1с11саа 1ааддаа1д1 сдаддаддса а1д1аассдс с1с1дд1ад1 4920

асасйс1с1 аа1ссааааа 1саа111д1а йсаада1ас сдсаааааас 11а1ддй1а 4980

аассс1дсад дас1ад1сса даадд1аай а1ссаада1д 1адса1саад аа1ссаа1д1 5040

йасдддааа аас1а1ддаа д1а11а1д1а адс1садсаа даадсада1с аа1а1дсддс 5100

аса1а1дсаа сс1а1д11са аааа1даада а1д1асада1 асаада1сс1 а1ас1дссад 5160

аа1асдаада адаа1асд1а дааайдааа аадаадаасс аддсдаадаа аадаа1сйд 5220

аадасд1аад сас1дасдас аасаа1дааа адаадаада! аадд1сдд1д а11д1дааад 5280

адаса1адад дасаса1д1а адд1ддаааа 1д1аадддсд дааад1аасс 11а1сасааа 5340

ддаа1с11а1 сссссас1ас 11а1ссйй а1айй1сс д1д1сайй 1дсссйдад 5400

ййсс1а1а 1ааддаасса ад11сддса1 11д1даааас аадаааааа! 11дд1д1аад 5460

с1аййс11 1даад1ас1д адда1асаас 11сададааа 111д1аадй 1д1адд1асс 5520

ада1с1дда1 сссааасса! д1с1ссддад аддадассад 11дада11ад дссадс1аса 5580

дсадс1да1а 1ддссдсдд1 йд1да1а1с дйаассай асайдадас д1с1асад1д 5640

аасШадда сададссаса аасассасаа дад1дда11д а1да1с1ада даддйдсаа 5700

да1ада1асс сйддйдд! 1дс1даддй даддд1д11д 1ддс1дд1а1 1дсйасдс1 5760

дддссс1дда аддс1аддаа сдс11асда1 1ддасад11д адад1ас1д1 йасд1д1са 5820

са1аддса1с аааддйддд сс1адда1с1 асайд1аса саса111дс1 1аад1с1а1д 5880

даддсдсаад дййаад1с 1д1ддйдс1 дйа1аддсс йссааасда 1сса1с1д11 5940

- 165 029904

адд!!дса!д аддс!!!ддд а!асасадсс сдддд!аса! !дсдсдсадс !дда!асаад 6000

са!дд!дда! ддса!да!д! !дд!!!!!дд саааддда!! !!дад!!дсс адс!сс!сса 6060

аддссад!!а ддссад!!ас ссааа!с!да д!ад!!адс! !аа!сасс!а дадс!сда!с 6120

ддсддсаа!а дс!!с!!адс дсса!сссдд д!!да!сс!а !с!д!д!!да аа!ад!!дсд 6180

д!дддсаадд с!с!с!!!са дааадасадд сддссааадд аасссаадд! дадд!дддс! 6240

а!ддс!с!са дйсс!!д!д даадсдсйд д!с!аадд!д сададд!д!! адсддда!да 6300

адсаааад!д !ссдайд!а асаада!а!д йда!сс!ас д!аадда!а! 1ааад!а!д1 6360

а!!са!сас! аа!а!аа!са д!д!а!!сса а!а!д!ас!а сда!!!ссаа !д!с!!!а!! 6420

д!сдссд!а! д!аа!сддсд !сасаааа!а а!ссссдд!д ас!!!с!!!! аа!ссадда! 6480

дааа!аа!а! дйайа!аа !ййдсда! !!дд!ссд!! а!аддаайд аад!д!дсй 6540

дадд!сдд!с дссассас!с сса!!!са!а а!!!!аса!д !а!!!даааа а!ааааа!!! 6600

а!дд!а!!са а!!!ааасас д!а!ас!!д! ааадаа!да! а!с!!дааад ааа!а!ад!! 6660

!ааа!а!!!а !!да!аааа! аасаад!сад д!а!!а!ад! ссаадсаааа аса!ааа!!! 6720

а!!да!дсаа д!йааайс адааа!а!й саа!аас!да йа!а!садс !дд!аса!!д 6780

ссд!ада!да аадас!дад! дсда!айа! дд!д!аа!ас а!аддаайс д!йааасда 6840

!с!дсд!с!а аййсдд!с саасйдсас аддааадасд !сдассдсдд !адс!с!!дс 6900

ссадсадас! дддс!!ссад !сс!!!сдс! сда!сддд!с саа!д!!д!с с!садс!д!д 6960

аассддаадс ддасдассаа сад!ддаада ас!дааадда асдадссд!с !а!асс!!да 7020

!да!сддсс! с!дд!даадд д!а!са!сдс адссаадсаа дс!са!дааа ддс!да!ддд 7080

ддадд!д!а! аа!!а!дадд сссасддсдд дс!!а!!с!! !адддадда! с!а!с!сд!! 7140

дс!саад!дс а!ддсдсааа дсад!!а!!д дад!дсдда! !!!сд!!ддс а!а!!а!!сд 7200

ссасдад!!а дсадасдаад адасс!!са! даасд!ддсс ааддссадад !!аадсада! 7260

дйасдссс! дс!дсаддсс !йс!а!!а! ссаа!ад!!д дйда!с!!! ддааададсс 7320

!сддс!дадд ссса!ас!да аадада!сда !дда!а!сда !а!дсса!д! !дй!дс!ад 7380

ссадаассад а!саса!ссд а!а!дс!а!! дсадс!!дас дсада!а!дд адда!аад!! 7440

дайса!ддд а!сдс!садд ад!адс!са! сса!дсасдс сдасаадаас адааа!!ссд 7500

!сдадйаас дсадссдс!! асдасдда!! сдаадд!са! сса!!сддаа !д!айадй 7560

!дсассадс! ссдсд!саса сс!д!с!!са !!!даа!аад а!д!!адсаа !!д!!!!!ад 7620

с!!!д!с!!д !!д!ддсадд дсддсаад!д с!!садаса! са!!с!д!!! !сааа!!!!а 7680

!дс!ддадаа садс!!с!!а а!!сс!!!дд ааа!аа!ада с!дсд!с!!а ааа!!сада! 7740

д!с!дда!а! ада!а!дай д!аааа!аас с!а!йаад! д!са!йада аса!аад!й 7800

- 166 029904

1а1даа1д11 с11сса1111 сд1са1сдаа сдаа1аадад 1ааа1асасс 111111ааса 7860

11асааа1аа д11с11а1ас д11д111а1а сассдддаа1 са111сса11 а1111сдсдс 7920

аааад1сасд да1а11сд1д ааадсдаса1 ааас1дсдаа а111дсдддд ад1д1с11да 7980

д111дсс1сд аддс1адсдс а1дсаса1ад асасасаса1 са1с1са11д а1дс11дд1а 8040

а1аа11д1са 11ада11д11 111а1дса1а да1дсас1сд ааа1садсса а1111адаса 8100

ад1а1сааас дда1д1дас1 1сад1аса11 ааааасд1сс дсаа1д1д11 а11аад11д1 8160

с1аадсд1са а111да111а саа11даа1а 1а1сс1дссс садссадсса асадс1сда1 8220

11асаа11да а1а1а1сс1д ссддссддсс сасдсд1д1с даддаа11с1 да1с1ддссс 8280

сса111ддас д1даа1д1ад асасд1сдаа а1ааада111 ссдаа11ада а1аа111д11 8340

1а11дс111с дсс1а1ааа1 асдасдда1с д1аа111д1с д1111а1саа аа1д1ас111 8400

са1111а1аа 1аасдс1дсд даса1с1аса 11111даа11 даааааааа1 1дд1аа11ас 8460

1с111с1111 1с1сса1а11 дасса1са1а с1са11дс1д а1сса1д1ад а111сссдда 8520

са1даадсса 111асаа11д аа1а1а1сс1 дссдссдс1д ссдс111дса сссдд1ддад 8580

с11дса1д11 дд111с1асд садаас1дад ссдд11аддс ада1аа111с са11дадаас 8640

1дадсса1д1 дсасс11ссс сссаасасдд 1дадсдасдд ддсаасддад 1да1ссаса1 8700

дддас1111а ааса1са1сс д1сдда1ддс д11дсдадад аадсад1сда 1ссд1дада1 8760

садссдасдс ассдддсадд сдсдсаасас да1сдсааад 1а111даасд садд1асаа1 8820

сдадссдасд 11сасдсдда асдассаадс аадс11ддс1 дсса11111д ддд1даддсс 8880

д11сдсддсс даддддсдса дсссс1дддд дда1дддадд сссдсд11ад сдддссддда 8940

ддд11сдада адддддддса сссссс11сд дсд1дсдсдд 1сасдсдсас адддсдсадс 9000

сс1дд11ааа аасаадд111 а1ааа1а11д д111аааадс адд11аааад асадд11адс 9060

дд1ддссдаа ааасдддсдд ааассс11дс ааа1дс1дда 1111с1дсс1 д1ддасадсс 9120

сс1сааа1д1 саа1адд1дс дсссс1са1с 1д1садсас1 с1дсссс1са ад1д1саадд 9180

а1сдсдсссс 1са1с1д1са д1ад1сдсдс ссс1саад1д 1саа1ассдс адддсас11а 9240

1ссссаддс1 1д1ссаса1с а1с1д1ддда аас1сдсд1а ааа1саддсд 1111сдссда 9300

111дсдаддс 1ддссадс1с сасд1сдссд дссдааа1сд адсс1дсссс 1са1с1д1са 9360

асдссдсдсс ддд1дад1сд дсссс1саад 1д1саасд1с сдсссс1са1 с1д1сад1да 9420

дддссаад11 11ссдсдадд 1а1ссасаас дссддсддсс дсдд1д1с1с дсасасддс1 9480

1сдасддсд1 11с1ддсдсд 111дсадддс са1адасддс сдссадссса дсддсдаддд 9540

саассадссс дд1дадсд1с ддаааддд1с дасдда1с11 11ссдс1дса 1аассс1дс1 9600

1сдддд1са1 1а1адсда11 1111сдд1а1 а1сса1сс11 111сдсасда 1а1асадда1 9660

- 167 029904

!!!дссааад дд!!сд!д!а дас!!!сс!! дд!д!а!сса асддсд!сад ссдддсадда 9720

!адд!даад! аддсссассс дсдадсддд! д!!сс!!с!! сас!д!ссс! !а!!сдсасс 9780

!ддсдд!дс! саасдддаа! сс!дс!с!дс даддс!ддсс ддс!ассдсс ддсд!аасад 9840

а!дадддсаа дсдда!ддс! да!дааасса адссаассад даадддсадс ссасс!а!са 9900

адд!д!ас!д сс!!ссадас даасдаадад сда!!дадда аааддсддсд дсддссддса 9960

!дадсс!д!с ддсс!асс!д с!ддссд!сд дссадддс!а саааа!сасд ддсд!сд!дд 10020

ас!а!дадса сд!ссдсдад с!ддсссдса !саа!ддсда сс!дддссдс с!дддсддсс 10080

!дс!дааас! с!ддс!сасс дасдасссдс дсасддсдсд д!!сдд!да! дссасда!сс 10140

!сдссс!дс! ддсдаада!с даададаадс аддасдадс! !ддсаадд!с а!да!дддсд 10200

!дд!ссдссс дадддсадад сса!дас!!! !!!адссдс! аааасддссд ддддд!дсдс 10260

д!да!!дсса адсасд!ссс са!дсдс!сс а!саадаада дсдас!!сдс ддадс!дд!а 10320

!!сд!дсадд дсаада!!сд даа!ассаад !асдадаадд асддссадас дд!с!асддд 10380

ассдас!!са !!дссда!аа дд!дда!!а! с!ддасасса аддсассадд сддд!сааа! 10440

саддаа!аад ддсаса!!дс сссддсд!да д!сддддсаа !сссдсаадд аддд!даа!д 10500

аа!сддасд! !!дассддаа ддса!асадд саадаас!да !сдасдсддд д!!!!ссдсс 10560

дадда!дссд ааасса!сдс аадссдсасс д!са!дсд!д сдссссдсда аасс!!ссад 10620

!ссд!сддс! сда!дд!сса дсаадс!асд дссаада!сд адсдсдасад сд!дсаас!д 10680

дс!ссссс!д ссс!дсссдс дсса!сддсс дссд!ддадс д!!сдсд!сд !с!сдаасад 10740

даддсддсад д!!!ддсдаа д!сда!дасс а!сдасасдс даддаас!а! дасдассаад 10800

аадсдааааа ссдссддсда ддасс!ддса ааасадд!са дсдаддссаа дсаддссдсд 10860

!!дс!дааас асасдаадса дсада!саад дааа!дсадс !!!сс!!д!! сда!а!!дсд 10920

ссд!ддссдд асасда!дсд адсда!дсса аасдасасдд сссдс!с!дс сс!д!!сасс 10980

асдсдсааса адаааа!ссс дсдсдаддсд с!дсааааса адд!са!!!! ссасд!саас 11040

ааддасд!да ада!сасс!а сассддсд!с дадс!дсддд ссдасда!да сдаас!дд!д 11100

!ддсадсадд !д!!ддад!а сдсдаадсдс асссс!а!сд дсдадссда! сасс!!сасд 11160

!!с!асдадс !!!дссадда сс!дддс!дд !сда!саа!д дссдд!а!!а сасдааддсс 11220

даддаа!дсс !д!сдсдсс! асаддсдасд дсда!дддс! !сасд!ссда ссдсд!!ддд 11280

сасс!ддаа! сдд!д!сдс! дс!дсассдс !!ссдсд!сс !ддассд!дд саадаааасд 11340

!сссд!!дсс адд!сс!да! сдасдаддаа а!сд!сд!дс !д!!!дс!дд сдассас!ас 11400

асдааа!!са !а!дддадаа д!ассдсаад с!д!сдссда сддсссдасд да!д!!сдас 11460

!а!!!садс! сдсассддда дссд!асссд с!саадс!дд ааасс!!ссд сс!са!д!дс 11520

- 168 029904

дда!сдда!! ссасссдсд! даадаад!дд сдсдадсадд !сддсдаадс с!дсдаадад 11580

!!дсдаддса дсддсс!дд! ддаасасдсс !ддд!саа!д а!дасс!дд! дса!!дсааа 11640

сдс!адддсс !!д!дддд!с ад!!ссддс! ддддд!!сад садссадсдс !!!ас!ддса 11700

!!!саддаас аадсдддсас !дс!сдасдс ас!!дс!!сд с!сад!а!сд с!сдддасдс 11760

асддсдсдс! с!асдаас!д ссда!аааса дадда!!ааа а!!дасаа!! д!да!!аадд 11820

с!садайсд асддсйдда дсддссдасд !дсадда!й ссдсдада!с сдайд!сдд 11880

ссс!даадаа адс!ссадад а!д!!сддд! ссд!!!асда дсасдаддад ааааадссса 11940

!ддаддсд!! сдс!даасдд !!дсдада!д ссд!ддса!! сддсдсс!ас а!сдасддсд 12000

ада!са!!дд дс!д!сдд!с !!сааасадд аддасддссс сааддасдс! сасааддсдс 12060

а!с!д!ссдд сд!!!!сд!д дадсссдаас адсдаддссд адддд!сдсс дд!а!дс!дс 12120

!дсдддсд!! дссддсддд! !!а!!дс!сд !да!да!сд! ссдасада!! ссаасдддаа 12180

!с!дд!дда! дсдса!с!!с а!сс!сддсд сас!!аа!а! !!сдс!а!!с !ддадс!!д! 12240

!д!йа!йс дд!с!ассдс с!дссдддсд ддд!сдсддс дасдд!аддс дс!д!дсадс 12300

сдс!да!дд! сд!д!!са!с !с!дссдс!с !дс!адд!ад сссда!асда !!да!ддсдд 12360

!сс!дддддс !а!!!дсдда ас!дсдддсд !ддсдс!д!! дд!д!!даса ссааасдсад 12420

сдс!ада!сс !д!сддсд!с дсадсдддсс !ддсдддддс ддй!сса!д дсд!!сддаа 12480

ссд!дс!дас ссдсаад!дд саасс!сссд !дсс!с!дс! сассШасс дсс!ддсаас 12540

!ддсддссдд аддас!!с!д с!сд!!ссад !адс!!!ад! д!!!да!ссд ссаа!сссда 12600

!дсс!асадд аассаа!д!! с!сддсс!дд сд!ддс!сдд сс!да!сдда дсддд!!!аа 12660

сс!ас!!сс! !!дд!!ссдд ддда!с!сдс дас!сдаасс !асад!!д!! !сс!!ас!дд 12720

дс!!!с!сад сссссдадсд с!!ад!ддда а!!!д!ассс с!!а!сдаас сдддадсаса 12780

дда!дасдсс !аасаа!!са !!саадссда сассдс!!сд сддсдсддс! !аа!!садда 12840

д!!аааса!с а!дадддаад сдд!да!сдс сдаад!а!сд ас!саас!а! сададд!ад! 12900

!ддсд!са!с дадсдсса!с !сдаассдас д!!дс!ддсс д!аса!!!д! асддс!ссдс 12960

ад!дда!ддс ддсс!даадс сасасад!да 1айда!йд с!ддйасдд !дассд!аад 13020

дсйда!даа асаасдсддс дадс!йда! саасдасс!! !!ддааас!! сддс!!сссс 13080

!ддадададс дада!!с!сс дсдс!д!ада ад!сассай дйд!дсасд асдаса!са! 13140

!ссд!ддсд! !а!ссадс!а адсдсдаас! дсаа!йдда даа!ддсадс дсаа!даса! 13200

!сйдсадд! а!с!!сдадс садссасда! сдасайда! с!ддс!а!с! !дс!дасааа 13260

адсаададаа са!адсд!!д ссйдд!адд !ссадсддсд даддаас!с! !!да!ссдд! 13320

!сс!даасад да!с!а!йд аддсдс!ааа !дааассйа асдс!а!дда ас!сдссдсс 13380

- 169 029904

сдас!дддс! ддсда!дадс дааа!д!ад! дс!!асд!!д !сссдса!!! дд!асадсдс 13440

ад!аассддс аааа!сдсдс сдаадда!д! сдс!дссдас !дддсаа!дд адсдсс!дсс 13500

ддсссад!а! садсссд!са !ас!!даадс !аддсаддс! !а!с!!ддас аадаада!сд 13560

с!!ддсс!сд сдсдсада!с ад!!ддаада а!!!д!!сас !асд!дааад дсдада!сас 13620

саадд!ад!с ддсааа!аа! д!с!аасаа! !сд!!саадс сдасдссдс! !сдсддсдсд 13680

дс!!аас!са адсд!!адад адс!ддддаа дас!а!дсдс да!с!д!!да адд!дд!!с! 13740

аадсс!сд!с !!дсда!ддс а!!!сда!сс а!!ссса!!с сдсдс!саад а!ддс!!ссс 13800

с!сддсад!! са!садддс! ааа!саа!с! адссдас!!д !ссдд!дааа !дддс!дсас 13860

!ссаасадаа асаа!сааас аааса!асас адсдас!!а! !сасасдадс !сааа!!аса 13920

асдд!а!а!а !сс!дссад! садса!са!с асассаааад !!аддсссда а!ад!!!даа 13980

а!!адааадс !сдсаа!!да дд!с!асадд ссааа!!сдс !с!!адссд! асаа!а!!ас 14040

!сассдда!с с!аассдд!! !аа!!ааддс дсдсса!дсс сдддсаадсд дссдсасаад 14100

!!! 14103

<210> 75

<211> 13812

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Плазмида ρΌΑΒ110112

<400> 75

с!!д!асааа д!дд!!дсдд ссдс!!аа!! ааа!!!ааа! !саа!!аа!д саа!с!!да! 60

!!!саасаас даадд!аа!д дсд!аааада ааааа!д!а! д!!а!!д!а! !да!с!!!са 120

!да!д!!даа дсд!дсса!а а!а!да!да! д!а!аа!!аа аа!а!!аас! д!сдса!!!! 180

а!!дааа!дд сас!д!!а!! !саасса!а! с!!!да!!с! д!!аса!дас асдас!дсаа 240

даад!ааа!а а!адасдссд !!д!!ааада а!!дс!а!са !а!д!дсс!а ас!ададдда 300

а!!!дадсд! садасс!аа! сааа!а!!ас аааа!а!с!с ас!с!д!сдс садсаа!дд! 360

д!аа!садсд садасааа!д дсд!ааада! сдсддааааа сс!ссссдад !ддса!да!а 420

дс!дсс!с!д !а!!дс!да! !!ад!садсс !!а!!!дас! !ааддд!дсс с!сд!!ад!д 480

асааа!!дс! !!сааддада садсса!дсс ссасас!!!д !!даааааса аа!!дсс!!! 540

ддддадасдд !ааадссад! !дс!с!!саа !ааддаа!д! сдаддаддса а!д!аассдс 600

с!с!дд!ад! асас!!с!с! аа!ссааааа !саа!!!д!а !!саада!ас сдсаааааас 660

!!а!дд!!!а аассс!дсад дас!ад!сса даадд!аа!! а!ссаада!д !адса!саад 720

аа!ссаа!д! !!асдддааа аас!а!ддаа д!а!!а!д!а адс!садсаа даадсада!с 780

- 170 029904

аакакдсддс асакакдсаа сскакдккса аааакдаада акдкасадак асаадаксск 840

акаскдссад аакасдаада адаакасдка даааккдааа аадаадаасс аддсдаадаа 900

аадааксккд аадасдкаад саскдасдас аасаакдааа адаадаадак ааддксддкд 960

аккдкдааад адасакадад дасасакдка аддкддаааа кдкаадддсд дааадкаасс 1020

ккаксасааа ддааксккак сссссаскас ккаксскккк акаккккксс дкдксакккк 1080

кдсссккдад кккксскака кааддаасса адкксддсак ккдкдаааас аадаааааак 1140

ккддкдкаад скаккккскк кдаадкаскд аддакасаас кксададааа кккдкаадкк 1200

кдкаддкасс адакскддак сссааассак дкскссддад аддадассад ккдадаккад 1260

дссадскаса дсадскдака кддссдсддк ккдкдакакс дккаассакк асаккдадас 1320

дкскасадкд ааскккадда сададссаса аасассасаа дадкддаккд акдакскада 1380

даддккдсаа дакадакасс сккддккддк кдскдаддкк дадддкдккд кддскддкак 1440

кдсккасдск дддссскдда аддскаддаа сдсккасдак кддасадккд ададкаскдк 1500

ккасдкдкса сакаддсакс аааддккддд сскаддакск асаккдкаса сасакккдск 1560

каадкскакд даддсдсаад дккккаадкс кдкддккдск дккакаддсс ккссааасда 1620

кссакскдкк аддккдсакд аддскккддд акасасадсс сддддкасак кдсдсдсадс 1680

кддакасаад сакддкддак ддсакдакдк кддкккккдд сааадддакк ккдадккдсс 1740

адскссксса аддссадкка ддссадккас ссааакскда дкадккадск кааксасска 1800

дадсксдакс ддсддсаака дскксккадс дссаксссдд дккдаксска кскдкдккда 1860

аакадккдсд дкдддсаадд скскскккса дааадасадд сддссааадд аасссааддк 1920

даддкдддск акддскскса дккссккдкд даадсдсккд дкскааддкд сададдкдкк 1980

адсдддакда адсаааадкд кссдаккдка асаадакакд ккдаксскас дкааддакак 2040

кааадкакдк акксаксаск аакакаакса дкдкакксса акакдкаска сдакккссаа 2100

кдкскккакк дксдссдкак дкааксддсд ксасаааака акссссддкд аскккскккк 2160

аакссаддак дааакаакак дккаккакаа кккккдсдак ккддкссдкк акаддааккд 2220

аадкдкдскк даддксддкс дссассаскс ссаккксака аккккасакд какккдаааа 2280

акаааааккк акддкаккса акккааасас дкакасккдк ааадаакдак аксккдааад 2340

ааакакадкк кааакаккка ккдакаааак аасаадксад дкаккакадк ссаадсаааа 2400

асакаааккк аккдакдсаа дкккаааккс адааакаккк саакааскда ккакаксадс 2460

кддкасаккд ссдкадакда аадаскдадк дсдакаккак ддкдкаакас акаддааккс 2520

дкккааасда кскдсдкска акккксддкс саасккдсас аддааадасд ксдассдсдд 2580

кадсксккдс ссадсадаск дддсккссад кссккксдск сдаксдддкс саакдккдкс 2640

- 171 029904

с1садс1д1д аассддаадс ддасдассаа сад1ддаада ас1дааадда асдадссд1с 2700

1а1асс11да 1да1сддсс1 с1дд1даадд д1а1са1сдс адссаадсаа дс1са1дааа 2760

ддс1да1ддд ддадд1д1а1 аа11а1дадд сссасддсдд дс11а11с11 1адддадда1 2820

с1а1с1сд11 дс1саад1дс а1ддсдсааа дсад11а11д дад1дсдда1 111сд11ддс 2880

а1а11а11сд ссасдад11а дсадасдаад адасс11са1 даасд1ддсс ааддссадад 2940

11аадсада1 д11асдссс1 дс1дсаддсс 111с1а11а1 ссаа1ад11д д11да1с111 3000

ддааададсс 1сддс1дадд ссса1ас1да аадада1сда 1дда1а1сда 1а1дсса1д1 3060

1д111дс1ад ссадаассад а1саса1ссд а1а1дс1а11 дсадс11дас дсада1а1дд 3120

адда1аад11 да11са1ддд а1сдс1садд ад1адс1са1 сса1дсасдс сдасаадаас 3180

адааа11ссд 1сдад11аас дсадссдс11 асдасдда11 сдаадд1са1 сса11сддаа 3240

1д1а11ад11 1дсассадс1 ссдсд1саса сс1д1с11са 111даа1аад а1д11адсаа 3300

11д11111ад с111д1с11д 11д1ддсадд дсддсаад1д с11садаса1 са11с1д111 3360

1сааа1111а 1дс1ддадаа садс11с11а а11сс111дд ааа1аа1ада с1дсд1с11а 3420

ааа11сада1 д1с1дда1а1 ада1а1да11 д1аааа1аас с1а111аад1 д1са111ада 3480

аса1аад111 1а1даа1д11 с11сса1111 сд1са1сдаа сдаа1аадад 1ааа1асасс 3540

111111ааса 11асааа1аа д11с11а1ас д11д111а1а сассдддаа1 са111сса11 3600

а1111сдсдс аааад1сасд да1а11сд1д ааадсдаса1 ааас1дсдаа а111дсдддд 3660

ад1д1с11да д111дсс1сд аддс1адсдс а1дсаса1ад асасасаса1 са1с1са11д 3720

а1дс11дд1а а1аа11д1са 11ада11д11 111а1дса1а да1дсас1сд ааа1садсса 3780

а1111адаса ад1а1сааас дда1д1дас1 1сад1аса11 ааааасд1сс дсаа1д1д11 3840

а11аад11д1 с1аадсд1са а111да111а саа11даа1а 1а1сс1дссс садссадсса 3900

асадс1сда1 11асаа11да а1а1а1сс1д ссддссддсс сасдсд1д1с даддаа11с1 3960

да1с1ддссс сса111ддас д1даа1д1ад асасд1сдаа а1ааада111 ссдаа11ада 4020

а1аа111д11 1а11дс111с дсс1а1ааа1 асдасдда1с д1аа111д1с д1111а1саа 4080

аа1д1ас111 са1111а1аа 1аасдс1дсд даса1с1аса 11111даа11 даааааааа1 4140

1дд1аа11ас 1с111с1111 1с1сса1а11 дасса1са1а с1са11дс1д а1сса1д1ад 4200

а111сссдда са1даадсса 111асаа11д аа1а1а1сс1 дссдссдс1д ссдс111дса 4260

сссдд1ддад с11дса1д11 дд111с1асд садаас1дад ссдд11аддс ада1аа111с 4320

са11дадаас 1дадсса1д1 дсасс11ссс сссаасасдд 1дадсдасдд ддсаасддад 4380

1да1ссаса1 дддас1111а ааса1са1сс д1сдда1ддс д11дсдадад аадсад1сда 4440

1ссд1дада1 садссдасдс ассдддсадд сдсдсаасас да1сдсааад 1а111даасд 4500

- 172 029904

саддХасааХ сдадссдасд ХХсасдсдда асдассаадс аадсХХддсХ дссаХХХХХд 4560

дддХдаддсс дХХсдсддсс даддддсдса дссссХдддд ддаХдддадд сссдсдХХад 4620

сдддссддда дддХХсдада адддддддса ссссссХХсд дсдХдсдсдд Хсасдсдсас 4680

адддсдсадс ссХддХХааа аасааддХХХ аХаааХаХХд дХХХаааадс аддХХаааад 4740

асаддХХадс ддХддссдаа ааасдддсдд ааасссХХдс аааХдсХдда ХХХХсХдссХ 4800

дХддасадсс ссХсаааХдХ сааХаддХдс дссссХсаХс ХдХсадсасХ сХдссссХса 4860

адХдХсаадд аХсдсдсссс ХсаХсХдХса дХадХсдсдс сссХсаадХд ХсааХассдс 4920

адддсасХХа ХссссаддсХ ХдХссасаХс аХсХдХддда аасХсдсдХа аааХсаддсд 4980

ХХХХсдссда ХХХдсдаддс ХддссадсХс сасдХсдссд дссдаааХсд адссХдсссс 5040

ХсаХсХдХса асдссдсдсс дддХдадХсд дссссХсаад ХдХсаасдХс сдссссХсаХ 5100

сХдХсадХда дддссаадХХ ХХссдсдадд ХаХссасаас дссддсддсс дсддХдХсХс 5160

дсасасддсХ ХсдасддсдХ ХХсХддсдсд ХХХдсадддс саХадасддс сдссадссса 5220

дсддсдаддд саассадссс ддХдадсдХс ддааадддХс дасддаХсХХ ХХссдсХдса 5280

ХаасссХдсХ ХсддддХсаХ ХаХадсдаХХ ХХХХсддХаХ аХссаХссХХ ХХХсдсасда 5340

ХаХасаддаХ ХХХдссааад ддХХсдХдХа дасХХХссХХ ддХдХаХсса асддсдХсад 5400

ссдддсадда ХаддХдаадХ аддсссассс дсдадсдддХ дХХссХХсХХ сасХдХсссХ 5460

ХаХХсдсасс ХддсддХдсХ саасдддааХ ссХдсХсХдс даддсХддсс ддсХассдсс 5520

ддсдХаасад аХдадддсаа дсддаХддсХ даХдааасса адссаассад даадддсадс 5580

ссассХаХса аддХдХасХд ссХХссадас даасдаадад сдаХХдадда аааддсддсд 5640

дсддссддса ХдадссХдХс ддссХассХд сХддссдХсд дссадддсХа сааааХсасд 5700

ддсдХсдХдд асХаХдадса сдХссдсдад сХддсссдса ХсааХддсда ссХдддссдс 5760

сХдддсддсс ХдсХдааасХ сХддсХсасс дасдасссдс дсасддсдсд дХХсддХдаХ 5820

дссасдаХсс ХсдсссХдсХ ддсдаадаХс даададаадс аддасдадсХ ХддсааддХс 5880

аХдаХдддсд ХддХссдссс дадддсадад ссаХдасХХХ ХХХадссдсХ аааасддссд 5940

дддддХдсдс дХдаХХдсса адсасдХссс саХдсдсХсс аХсаадаада дсдасХХсдс 6000

ддадсХддХа ХХсдХдсадд дсаадаХХсд дааХассаад Хасдадаадд асддссадас 6060

ддХсХасддд ассдасХХса ХХдссдаХаа ддХддаХХаХ сХддасасса аддсассадд 6120

сдддХсаааХ саддааХаад ддсасаХХдс сссддсдХда дХсддддсаа Хсссдсаадд 6180

адддХдааХд ааХсддасдХ ХХдассддаа ддсаХасадд саадаасХда Хсдасдсддд 6240

дХХХХссдсс даддаХдссд ааассаХсдс аадссдсасс дХсаХдсдХд сдссссдсда 6300

аассХХссад ХссдХсддсХ сдаХддХсса дсаадсХасд дссаадаХсд адсдсдасад 6360

- 173 029904

сд!дсаас!д дс!ссссс!д ссс!дсссдс дсса!сддсс дссд!ддадс дйсдсдйд 6420

!с!сдаасад даддсддсад дШддсдаа д!сда!дасс а!сдасасдс даддаас!а! 6480

дасдассаад аадсдааааа ссдссддсда ддасс!ддса ааасадд!са дсдаддссаа 6540

дсаддссдсд йдс!дааас асасдаадса дсада!саад дааа!дсадс Шссйдй 6600

сда!айдсд ссд!ддссдд асасда!дсд адсда!дсса аасдасасдд сссдсЮдс 6660

сс!дйсасс асдсдсааса адаааа!ссс дсдсдаддсд с!дсааааса аддйайй 6720

ссасд!саас ааддасд!да ада!сасс1а сассддсд!с дадс!дсддд ссдасда!да 6780

сдаас!дд!д !ддсадсадд 1дйддад1а сдсдаадсдс асссс!а!сд дсдадссда! 6840

сассйсасд йс!асдадс Шдссадда сс!дддс1дд 1сда!саа1д дссдд!айа 6900

сасдааддсс даддаа!дсс 1д1сдсдсс! асаддсдасд дсда!дддс! йасдйсда 6960

ссдсдйддд сасс1ддаа! сдд1д1сдс! дс!дсассдс йссдсдйс !ддассд!дд 7020

саадаааасд йссдйдсс адд1сс1да! сдасдаддаа а!сд!сд!дс 1дй1дс!дд 7080

сдассас!ас асдааайса !а!дддадаа д!ассдсаад с!д!сдссда сддсссдасд 7140

да!дйсдас 1ай1садс! сдсассддда дссд!асссд с!саадс!дд ааассйссд 7200

сс1са1д1дс ддайддай ссасссдсд! даадаад!дд сдсдадсадд !сддсдаадс 7260

с!дсдаадад йдсдаддса дсддсс!дд! ддаасасдсс 1ддд1саа1д а!дасс1дд1 7320

дсайдсааа сдс!адддсс йд!дддд1с адйссддс! дддддйсад садссадсдс 7380

Шас1ддса Шсаддаас аадсдддсас 1дс!сдасдс асйдсйсд сйадйИсд 7440

с!сдддасдс асддсдсдс! с!асдаас!д ссда!аааса даддайааа айдасаай 7500

д!дайаадд сйадайсд асддсйдда дсддссдасд 1дсадда1й ссдсдада!с 7560

сдайдйдд ссс!даадаа адс!ссадад а1дйсддд! ссдШасда дсасдаддад 7620

ааааадссса 1ддаддсдй сдс!даасдд йдсдада!д ссд!ддсай сддсдсс!ас 7680

а!сдасддсд адайайдд дс!д1сдд1с йсааасадд аддасддссс сааддасдс! 7740

сасааддсдс а1с1д1ссдд сдййсд!д дадсссдаас адсдаддссд адддд!сдсс 7800

дд!а1дс1дс 1дсдддсдй дссддсддд! йайдсйд 1да1да1сд1 ссдасадай 7860

ссаасдддаа 1с1дд1дда! дсдсаййс айсйддсд сасйаайй йсдс!айс 7920

1ддадс11д1 1д111а111с дд1с1ассдс с1дссдддсд ддд1сдсддс дасдд1аддс 7980

дс1д1дсадс сдс1да1дд1 сд1д11са1с 1с1дссдс1с 1дс1адд1ад сссда1асда 8040

йда!ддсдд !сс!дддддс ШШдсдда ас!дсдддсд 1ддсдс1дй дд!дйдаса 8100

ссааасдсад сдс!ада!сс 1д1сддсд1с дсадсдддсс !ддсдддддс дд!йсса!д 8160

дсд11сддаа ссд1дс1дас ссдсаад1дд саасс1сссд 1дсс1с1дс1 сасс111асс 8220

- 174 029904

дсс!ддсаас !ддсддссдд аддас!!с!д с!сд!!ссад !адс!!!ад! д!!!да!ссд 8280

ссаа!сссда !дсс!асадд аассаа!д!! с!сддсс!дд сд!ддс!сдд сс!да!сдда 8340

дсддд!!!аа сс!ас!!сс! !!дд!!ссдд ддда!с!сдс дас!сдаасс !асад!!д!! 8400

!сс!!ас!дд дс!!!с!сад сссссдадсд с!!ад!ддда а!!!д!ассс с!!а!сдаас 8460

сдддадсаса дда!дасдсс !аасаа!!са !!саадссда сассдс!!сд сддсдсддс! 8520

!аа!!садда д!!аааса!с а!дадддаад сдд!да!сдс сдаад!а!сд ас!саас!а! 8580

сададд!ад! !ддсд!са!с дадсдсса!с !сдаассдас д!!дс!ддсс д!аса!!!д! 8640

асддс!ссдс ад!дда!ддс ддсс!даадс сасасад!да !а!!да!!!д с!дд!!асдд 8700

!дассд!аад дс!!да!даа асаасдсддс дадс!!!да! саасдасс!! !!ддааас!! 8760

сддс!!сссс !ддадададс дада!!с!сс дсдс!д!ада ад!сасса!! д!!д!дсасд 8820

асдаса!са! !ссд!ддсд! !а!ссадс!а адсдсдаас! дсаа!!!дда даа!ддсадс 8880

дсаа!даса! !с!!дсадд! а!с!!сдадс садссасда! сдаса!!да! с!ддс!а!с! 8940

!дс!дасааа адсаададаа са!адсд!!д сс!!дд!адд !ссадсддсд даддаас!с! 9000

!!да!ссдд! !сс!даасад да!с!а!!!д аддсдс!ааа !дааасс!!а асдс!а!дда 9060

ас!сдссдсс сдас!дддс! ддсда!дадс дааа!д!ад! дс!!асд!!д !сссдса!!! 9120

дд!асадсдс ад!аассддс аааа!сдсдс сдаадда!д! сдс!дссдас !дддсаа!дд 9180

адсдсс!дсс ддсссад!а! садсссд!са !ас!!даадс !аддсаддс! !а!с!!ддас 9240

аадаада!сд с!!ддсс!сд сдсдсада!с ад!!ддаада а!!!д!!сас !асд!дааад 9300

дсдада!сас саадд!ад!с ддсааа!аа! д!с!аасаа! !сд!!саадс сдасдссдс! 9360

!сдсддсдсд дс!!аас!са адсд!!адад адс!ддддаа дас!а!дсдс да!с!д!!да 9420

адд!дд!!с! аадсс!сд!с !!дсда!ддс а!!!сда!сс а!!ссса!!с сдсдс!саад 9480

а!ддс!!ссс с!сддсад!! са!садддс! ааа!саа!с! адссдас!!д !ссдд!дааа 9540

!дддс!дсас !ссаасадаа асаа!сааас аааса!асас адсдас!!а! !сасасдадс 9600

!сааа!!аса асдд!а!а!а !сс!дссад! садса!са!с асассаааад !!аддсссда 9660

а!ад!!!даа а!!адааадс !сдсаа!!да дд!с!асадд ссааа!!сдс !с!!адссд! 9720

асаа!а!!ас !сассдда!с с!аассдд!! !аа!!ааддс дсдсса!дсс сдддсаадсд 9780

дссдсасаад !!!д!асааа ааадсаддс! !с!адасс!а дд!ддад!са !сасдсадас 9840

!а!с!садса !д!дсд!адс асдсддссдс с!сссад!а! са!!а!ад!д ааад!!!!дд 9900

с!с!с!сдсс дд!дд!!!!! !асс!с!а!! !ааадддд!! !!ссасс!аа ааа!!с!дд! 9960

а!са!!с!са с!!!ас!!д! !ас!!!аа!! !с!са!аа!с !!!дд!!даа а!!а!сасдс 10020

!!ссдсасас да!а!ссс!а сааа!!!а!! а!!!д!!ааа са!!!!сааа ссдса!аааа 10080

- 175 029904

ййа!даад йссдййй сШаа1д1а дййасай йса!айда аа1а1а1аа1 10140

йасйаай йадсдйдд 1адааадса1 аа1даШа1 1сйайсй сйсаййаа 10200

а1дШаа1а 1асаа1а1аа асааайсй 1ассйаада аддаШссс аййа!ай 10260

ПааааайИ аШайааа 1айШсаа ссасдйаа! с1са1аа1аа 1аадйд1й 10320

саааад1аа1 ааааШаас йсайаШ ййайсда с!да&йаа адсаасассс 10380

ад!дасасаа с1адссаШ ййсШда а1ааааааа1 ссаайайа йд1ай1й 10440

Ша1асаа1 дааааШса ссааасаа!д аШд1дд!а Шс1даадс аад!са1дй 10500

а!дсаааай сййаайсс саШдасас 1асддаад1а ас!даада!с 1дсййаса 10560

!дсдадасас аййсйаа д!ааййаа 1аа1адйас ййайсаад аййаййа 10620

1сааа1ас1с аа!айасй с!аааааай аайадайй аайаааа!а йасййй 10680

ааййаад! йаайдйд ааШд!дас 1айдаШа йайс1ас1 а1дШааа1 10740

1дййа!ад а1адШааа дйааййаа д1аа1д1ад1 адад!дйад ад!дйассс 10800

1ааасса1аа асййаада! йа!дд!дда с!ааййса ййаШсй айдсййа 10860

ссййсйд дййдйад! ссд!аас!дд аайас1д1д ддйдсса!д асас1с1д1д 10920

§1сййдд! йа1дса1дд а!сйдсдса адааааадас ааадаасааа даааааадас 10980

аааасадада дасаааасдс аа!сасасаа ссаас!сааа йад!сас1д дс!да1саад 11040

а!сдссдсд1 сса1дййд1 с1ааа1дсса !дсааадсаа сасд!дсйа аса!дсасй 11100

1ааа1ддс1с асссаййа асссасасас ааасасайд ссШйсй сайайасс 11160

асаассасс! дййаййс айс!сйсс дссасс!саа Шсйсас! !саасасасд 11220

1саасс1дса 1а1дсд1дй а!ссса!дсс саааййса 1дса!дйсс аассассйс 11280

йййайИ аайссййа аа1асс1с1а аййасйа сйсШса! сайсайса 11340

йсададйс 1ас1асй1а с1ас1а1аа1 ассссаассс аасйайй саа1ас1ас1 11400

сйддайса асаа!ддс!с ссаасайй 1дадда1дй аа!дд1дйс ШИдадй 11460

ада!дсддса асссс!дай 1ддсйШс сасассасс! д!дсааааад с!дасаасад 11520

асссаадсаа сйд!д1дда ддаасайй дсййсдс! 1асйдсасс йдсадсй! 11580

с!асддаддс 1аШдШс ййсад1дс аааа!ддсад ассдасаШ йдсйаса! 11640

йШа1дй айй1ддас !дддда!аас !дс!ддддса сайдасй! дддс!сасаа 11700

дйайсааа дссаад!ддс сасйадад! 1а1ас1ддй аййсааса сддйдссй 11760

йаадасдс! дс!а1ддай дддсйд1да сса!адаа1д сайасаад! асадсдадас 11820

сдасдсддас ссасасаа!д саасдададд йййсйс ййасайд дс1ддсйс1 11880

(дйаддааа сайс1дай !дааадаааа адддааддда сйдаса1да д1даййс1 11940

- 176 029904

!дс!да!сса а!ас!ссд!! !!садаадаа д!ас!а!с!д а!сс!са!дс с!с!ддсс!д 12000

!!!!д!да!д ссаассд!!а !сссдд!!!а с!!!!дддда дааас!!дда сааа!дс!!! 12060

с!!сд!ддса дсса!д!!сс д!!а!дс!!! са!сс!даа! д!!асс!дд! !дд!даас!с 12120

!дссдсасас аад!ддддад асааассс!а !дасаад!сс а!саадсс!! ссдаааасс! 12180

!!сад!!дсд а!д!!!дс!! !дддадаадд а!!!сасаа! !асса!саса с!!!!ссд!д 12240

ддас!асаад асадсададс !!ддааасаа саад!!даас !!сасаасаа сд!!са!саа 12300

!!!с!!!дсд аааа!сдд!! дддсс!а!да !!!даадас! д!дад!да!д аса!!д!саа 12360

даасаддд!с аададаас!д дсда!ддаад сса!са!с!с !ддддс!ддд д!да!дадаа 12420

!сададсааа даадада!ад а!дсадсса! !адда!саас сс!ааадасд а!!дад!ад! 12480

!адс!!аа!с асс!ададс! сдд!сассад !а!даас!аа аа!дса!д!а дд!д!аадад 12540

с!са!ддада дса!ддаа!а !!д!а!ссда сса!д!ааса д!а!аа!аас !дадс!сса! 12600

с!сас!!с!! с!а!даа!аа асааадда!д !!а!да!а!а !!аасас!с! а!с!а!дсас 12660

с!!а!!д!!с !а!да!ааа! !!сс!с!!а! !а!!а!ааа! са!с!даа!с д!дасддс!! 12720

а!ддаа!дс! !сааа!ад!а сааааасааа !д!д!ас!а! аадас!!!с! ааасаа!!с! 12780

аас!!!адса !!д!даасда даса!аад!д !!аадаадас а!аасаа!!а !аа!ддаада 12840

ад!!!д!с!с са!!!а!а!а !!а!а!а!!а сссас!!а!д !а!!а!а!!а дда!д!!аад 12900

дадаса!аас аа!!а!ааад ададаад!!! д!а!сса!!! а!а!а!!а!а !ас!ассса! 12960

!!а!а!а!!а !ас!!а!сса с!!а!!!аа! д!с!!!а!аа дд!!!да!сс а!да!а!!!с 13020

!аа!а!!!!а д!!да!а!д! а!а!даааад д!ас!а!!!д аас!с!с!!а с!с!д!а!аа 13080

адд!!дда!с а!сс!!ааад !ддд!с!а!! !аа!!!!а!! дс!!с!!аса да!ааааааа 13140

ааа!!а!дад !!дд!!!да! аааа!а!!да адда!!!ааа а!аа!аа!аа а!аа!ааа!а 13200

аса!а!аа!а !а!д!а!а!а аа!!!а!!а! аа!а!ааса! !!а!с!а!аа аааад!ааа! 13260

а!!д!са!аа а!с!а!асаа !сд!!!адсс !!дс!ддаас даа!с!саа! !а!!!ааасд 13320

адад!аааса !а!!!дас!! !!!дд!!а!! !аасааа!!а !!а!!!ааса с!а!а!дааа 13380

!!!!!!!!!! !!а!садсаа адаа!аааа! !ааа!!аада аддасаа!дд !д!сссаа!с 13440

с!!а!асаас саас!!ссас аадааад!са ад!сададас аасааааааа саадсааадд 13500

ааа!!!!!!а а!!!дад!!д !с!!д!!!дс !дса!аа!!! а!дсад!ааа асас!асаса 13560

!аассс!!!! адсад!адад саа!дд!!да ссд!д!дс!! адс!!с!!!! а!!!!а!!!! 13620

!!!а!садса аадаа!ааа! аааа!аааа! дадасас!!с аддда!д!!! саассс!!а! 13680

асаааасссс ааааасаад! !!сс!адсас сс!ассаасд аа!!сдсддс сдс!!аа!!а 13740

ада!дад!да !ас!саддас !саддас!са с!с!дс!да! сас!ад!дс! адсс!сдадд 13800

- 177 029904

1сдассадс1 11 13812

<210> 76

<211> 1434

<212> ДНК

<213> МадпароПНс дг^са

<400> 76

даа11са1дд с11сд1са1с 11сс1ссд1д ссддад11дд с1дссдсс11 ссс1да1ддс 60

асйссдас! йаадссса! даддаасасс аадддсйсд асдйадсаа дссдсасай 120

йсдадасас сПИдасас! саадаас!дд сайадсасд 1саас1ддс1 саасассасс 180

11са1с11д1 11д1дсссс1 ддс1дд1с1с а1а1ссас11 ас1ддд1ссс 1с1дсад1дд 240

аадасддс1д 1а1дддс1д1 сд1с1ас1ас 11саасассд дсс1дддаа1 1ас1дссдд1 300

1ассассдас 111дддс1са садс1сд1ас ааддсс1сдс 11ссдс1саа аа1с1асс11 360

дссдссд11д дсдс1дд1дс сд1сдадддс 1сса1сада1 дд1дд1ссаа сдд1сассдс 420

дсасассасс да1асассда 1ассдадаад дасссс1ас1 сад1ссдсаа ддд1с1сс1д 480

1ас1сасаса 1ддда1дда1 дс11с1даад садаасссса адаадсаддд ссдсассдас 540

а1сассдасс 1даасдадда ссссд11д1с д111ддсадс ассдсаас11 сс1саад1д1 600

д11а1с11са 1ддссс1сд1 с11ссссаса с11д1ддс1д дсс11ддс1д ддд1дас1ас 660

1ддддадд11 1са1с1асдд адд1а11с1д сд1д1с11с1 1сд1ссадса ддссасс11с 720

1дсд1саас1 сдс11дссса с1ддс1сдд1 дассадсс11 1сдасда1сд саас1сдссд 780

сд1да1сасд 1са1сасадс сс1дд1сасс с11ддададд да1ассасаа с11ссассас 840

дад11ссс11 сддас1ассд саасдс1а11 дад1дд1асс ад1а1дассс сассаад1дд 900

1саа1с1дда 1с1ддаадса дс11дд1с11 дсссасаасс 1даадсад11 ссдссаааас 960

дадайдада адддасдсд! ссадсадс!д садаадаадс йдассадаа дсдсдссаад 1020

сйдаПддд дййсссй ддадсадсП сссдйдйа дс!ддд;йда сШдПдад 1080

садйсаада асддаааддс ПддаПдса дПдссдд!д йайсасда 1дПдд1дас 1140

Псайаадд ассассс!дд 1ддсададс1 сйайаас! сддссаПдд сааддасдса 1200

ассдсаай! йаасддсдд 1д1Иасаас сасйсаасд ссдсйасаа сс!дс!с1сд 1260

ас1а1дсд1д 1ддд1дйй дсд1ддсддс 1дсдадд11д ада1с1ддаа дс§с§ссса§ 1320

йсдааааса аддасдйй аассдйдП дайсйсдд дйассдса! сдйсдсдсд 1380

дд1дддсаад сдассаадд1 сд1ссадсс1 д11ссддд1д с1саддссдс д1да 1434

<210> 77

<211> 212

<212> Белок

<213> БсрЮ^рНаспа пойогит

- 178 029904

<400> 77

Туг Туг РНе Сук ТНг А1а РНе С1у 11е ТНг С1у С1у Туг Ηίδ Агд Ьеи 1 5 10 15

Тгр §ег Ηίδ Агд §ег Туг §ег А1а Агд Ьеи Рго Ьеи Агд Ьеи РНе Ьеи 20 25 30

А1а РНе ТНг С1у А1а С1у А1а 11е С1п С1у 8ег А1а Агд Тгр Тгр §ег 35 40 45

А1а Акп Ηίδ Агд А1а Ηίδ Ηίδ Агд Тгр ТНг Акр ТНг Ме1 Ьук Акр Рго 50 55 60

Туг §ег Уа1 Ме1 Агд С1у Ьеи Ьеи РНе 8ег Ηίδ 11е С1у Тгр Ме1 Уа1 65 70 75 80

Ьеи Акп §ег Акр Рго Бук Уа1 Бук С1у Агд ТНг Акр Уа1 8ег Акр Ьеи 85 90 95

Акр 8ег Акр Рго Уа1 Уа1 Уа1 Тгр С1п Ηίδ Ьук Ηίδ Туг С1у Ьук Сук 100 105 110

Ьеи Ьеи РНе А1а А1а Тгр 11е РНе Рго Ме1 11е Уа1 А1а С1у Ьеи С1у 115 120 125

Тгр С1у Акр Тгр Тгр С1у С1у Ьеи Уа1 Туг А1а С1у 11е 11е Агд А1а 130 135 140

Сук РНе Уа1 С1п С1п А1а ТНг РНе Сук Уа1 Акп §ег Ьеи А1а Ηίδ Тгр 145 150 155 160

11е С1у С1и С1п Рго РНе Акр Акр Агд Агд ТНг Рго Агд Акр Ηίδ Уа1 165 170 175

Ьеи ТНг А1а Ьеи Уа1 ТНг Ме1 С1у С1и С1у Туг Ηίδ Акп РНе Ηίδ Ηίδ 180 185 190

С1и РНе Рго 8ег Акр Туг Агд Акп А1а 11е 11е Тгр Туг С1п Туг Акр 195 200 205

Рго ТНг Ьук Тгр 210

<210> 78

<211> 216

<212> Белок

<213> ИеПсоуепэа /еа

<400> 78

Ьеи Туг Уа1 11е 8ег С1у Ьеи С1у 11е ТНг А1а С1у А1а Ηίδ Агд Ьеи 1 5 10 15

Тгр А1а Ηίδ Ьук 8ег Туг Ьук А1а Ьук Тгр Рго Ьеи Агд Уа1 11е Ьеи 20 25 30

Уа1 11е РНе Акп ТНг Уа1 А1а РНе С1п Акр А1а А1а Ме1 Акр Тгр А1а 35 40 45

- 179 029904

Агд Акр Шк Агд Ме! Шк Шк Бук Туг 8ег 01и ТЬг Акр А1а Акр Рго 50 55 60

Ηίκ Акп А1а ТЬг Агд С1у РЬе РЬе РЬе 8ег Ηίκ 11е С1у Тгр Беи Беи 65 70 75 80

Уа1 Агд Бук Шк Рго Акр Беи Бук С1и Бук С1у Бук С1у Беи Акр Ме! 85 90 95

8ег Акр Беи Беи А1а Акр Рго 11е Беи Агд РЬе С1п Бук Бук Туг Туг 100 105 110

Беи 11е Беи Ме! Рго Беи А1а Сук РЬе Уа1 Ме! Рго ТЬг Уа1 11е Рго 115 120 125

Уа1 Туг РЬе Тгр С1у С1и ТЬг Тгр ТЬг Акп А1а РЬе РЬе Уа1 А1а А1а 130 135 140

Ме! РЬе Агд Туг А1а РЬе 11е Беи Акп Уа1 ТЬг Тгр Беи Уа1 Акп 8ег 145 150 155 160

А1а А1а Шк Бук Тгр С1у Акр Бук Рго Туг Акр Бук 8ег 11е Бук Рго 165 170 175

8ег С1и Акп Беи 8ег Уа1 А1а Ме! РЬе А1а Беи С1у С1и С1у РЬе Шк 180 185 190

Акп Туг Шк Шк ТЬг РЬе Рго Тгр Акр Туг Бук ТЬг А1а С1и Беи С1у 195 200 205

Акп Акп Бук Беи Акп РЬе ТЬг ТЬг 210 215

Claims (20)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, содержащая

   полинуклеотид, кодирующий фермент дельта-9-десатуразу, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕО ГО N0: 12, 8ЕО ГО N0: 13, 8ЕО ГО N0: 14, 8ЕО ГО N0: 50, 8ЕО ГО N0: 51, 8ЕО ГО N0: 52, 8ЕО ГО N0: 72 и 8ЕО ГО N0: 73; и

   гетерологичный регуляторный элемент, функционально связанный с указанным полинуклеотидом.
2. 2. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 60% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕО ГО N0: 3, 8ЕО ГО N0: 4, 8ЕО ГО N0: 5, 8ЕО ГО N0: 8, 8ЕО ГО N0: 9, 8ЕО ГО N0: 10, 8ЕО ГО N0: 11, 8ЕО ГО N0: 15, 8ЕО ГО N0: 16, 8ЕО ГО N0: 17, 8ЕО ГО N0: 44 и 8ЕО ГО N0: 45.
3. 3. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где указанный гетерологичный регуляторный элемент представляет собой промотор, который является функциональным в растительной клетке.
4. 4. Молекула нуклеиновой кислоты по п.3, где промотор выбран из группы, состоящей из промотора дельта-9-десатуразы 8ассЬаготусек сегетыае. 3'ИТК/терминатор дельта-9-десатуразы, промотора гена о1е1, промотора фазеолина, 5'-нетранслируемого участка фазеолина РЬакео1ик уи1дапк, 3'-нетранслируемого участка фазеолина РЬакео1ик уи1дапк, участка присоединения матрикса фазеолина РЬакео1ик уи1дат1к, 3'-нетранслируемого участка 0КР23 АдтоЪас!етшт !ите£ааепк, промотора вируса мозаики жилок маниоки, 3'-нетранслируемого участка 0КЕ1 АдтоЪас!етшт !ите£ас1епк, участка присоединения матрикса КВ7 Шсойапа !аЪасит, овердрайва, Т-цепочечных бордерных последовательностей, промотора Е1КС8.Б промотора РАЕ 1, 8ЕО ГО N0: 40, 8ЕО ГО N0: 41, 8ЕО ГО N0: 42, 8ЕО ГО N0: 43, "тега" Мус и "тега" гемагглютинина.
5. 5. Выделенный фермент дельта-9-десатураза, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8Е0 ГО N0: 13, 8ЕО ГО N0: 14, 8ЕО ГО N0: 51, 8ЕО ГО N0: 52, 8ЕО ГО N0: 72 и 8ЕО ГО N0: 73.
6. 6. Химерный полипептид дельта-9-десатуразы, содержащий 8Е0 ГО N0:72 и/или 73 и 8Е0 ГО N0: 77 или 78.

   - 180 029904
7. 7. Способ уменьшения количества насыщенных жирных кислот в клетке, включающий трансформацию клетки молекулой нуклеиновой кислоты по п.1, в результате которой в клетке экспрессируется внепластидная дельта-9-десатураза.
8. 8. Способ по п.7, где клетка представляет собой дрожжевую клетку.
9. 9. Способ по п.7, где клетка представляет собой растительную клетку.
10. 10. Способ по любому из пп.7-9, где дельта-9-десатураза содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 12, 8ЕС ГО N0: 13, 8ЕС ГО N0: 14, 8ЕС ГО N0: 50, 8ЕС ГО N0: 51, 8ЕС ГО N0: 52, 8ЕС ГО N0: 72 и 8ЕС ГО N0: 73.
11. 11. Способ по п.9, где растительную клетку получают из растения, относящегося к роду, выбранному из группы, состоящей из ЛгаЫбор515, Вогадо, Сапо1а, Кгсшик, ТйеоЬгота, 2еа, Ооккуршт, СгатЬе, Сирйеа, Ыпит, ЬекдиегеНа, Ытпаййек, Ыпо1а, Тгораео1ит, 0епо!йега, 01еа, Е1ае1к, ЛгасЫк, Карекееб, Саг!йатик, 01усше, 8о)а, НеНаЫйик, №сойаиа, Уегпоша, ТгШсит, Ногбеит, 0гу/а. Луепа, 8огдйит, 8еса1е и других членов Огаттеае.
12. 12. Трансгенное масличное растение, содержащее пониженные количества насыщенных жирных кислот по сравнению с растением дикого типа того же вида, где указанное трансгенное масличное растение содержит молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.
13. 13. Семя растения, которое экспрессирует внепластидную дельта-9-десатуразу, выбранную из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 13, 8ЕС ГО N0: 14, 8ЕС ГО N0: 51 и 81 У) ГО N0: 52.
14. 14. Семя трансгенной линии Вгаккюа парик, содержащее нуклеиновую кислоту, кодирующую фермент дельта-9-десатуразу, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8Е0 ГО N0: 13, 8Е0 ГО N0: 14, 8Е0 ГО N0: 51, 8Е0 ГО N0: 52, 8Е0 ГО N0: 72 и 8Е0 ГО N0: 73, где указанное семя имеет пониженные уровени пальмитиновой кислоты (16:0) по сравнению с изогенной версией трансгенной линии Вгаккюа парик.
15. 15. Способ получения генетически измененного растения, содержащего пониженные количества насыщенных жирных кислот по сравнению с растением дикого типа того же вида, включающий трансформацию растительного материала молекулой нуклеиновой кислоты по п.1 и культивирование трансформированного растительного материала с регенерацией растения.
16. 16. Способ по п.15, где растение относится к роду, выбранному из группы, состоящей из ЛгаЫбор8Ϊ8, Вогадо, Сапо1а, Кюшик, ТйеоЬгота, 2еа, Ооккуршт, СгатЬе, Сирйеа, Ыпит, Ьекдиеге11а, ЫтпаЫйек, Ыпо1а, Тгораео1ит, 0епо!йега, 01еа, Е1ае1к, ЛгасЫк, Карекееб, СаПйатик, 01усше, 8о.)а, НеНаЫйик, №соНапа, Уегпоша, Тгйюит, Ногбеит, 0гу/а, Луепа, 8огдйит, 8еса1е и других членов Огаттеае.
17. 17. Генетически измененное растение, содержащее пониженные количества насыщенных жирных кислот в растении по сравнению с растением дикого типа того же вида, полученное способом п.15.
18. 18. Растительный материал, полученный из растения по п.17.
19. 19. Растительный материал по п.18, где растительный материал представляет собой семя.
20. 20. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, содержащая полинуклеотид, кодирующий фермент дельта-9-десатуразу, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8Е0 ГО N0: 13, 8Е0 ГО N0: 14, 8Е0 ГО N0: 51, 8Е0 ГО N0: 52, 8Е0 ГО N0: 72 и 8Е0 ГО N0: 73; и гетерологичный промотор, функционально связанный с указанным полинуклеотидом, где указанный промотор является функциональным в растительной клетке.

    - 181 029904