TWI796353B - 丙酮酸激酶調節劑及其用途 - Google Patents

丙酮酸激酶調節劑及其用途 Download PDF

Info

Publication number
TWI796353B
TWI796353B TW107128431A TW107128431A TWI796353B TW I796353 B TWI796353 B TW I796353B TW 107128431 A TW107128431 A TW 107128431A TW 107128431 A TW107128431 A TW 107128431A TW I796353 B TWI796353 B TW I796353B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
optionally substituted
alkyl
methyl
instance
protecting group
Prior art date
Application number
TW107128431A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201919631A (zh
Inventor
吉爾費尼 席安茜塔
查里斯 孔
濤 劉
安尼 庫馬 佩德雅納
治華 隋
振偉 蔡
崔大為
季競競
Original Assignee
美商阿吉歐斯製藥公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 美商阿吉歐斯製藥公司 filed Critical 美商阿吉歐斯製藥公司
Publication of TW201919631A publication Critical patent/TW201919631A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI796353B publication Critical patent/TWI796353B/zh

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/36—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D513/14—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本文描述使用式(I)化合物調節受試者之PKM2活性的方法。此等化合物由式(I)表示：
Figure 107128431-A0101-11-0001-1
其中R1 、R2 、L1 及L2 如本文所定義。

Description

丙酮酸激酶調節劑及其用途
丙酮酸激酶(PK)為一種新陳代謝酶，其在糖酵解過程中將磷酸烯醇丙酮酸轉化成丙酮酸。哺乳動物中存在四種PK同功異型物：L及R同功異型物(來自PKLR基因)分別在肝臟及紅血球中表現，且PKM基因編碼兩種剪接變體，亦即在大多數成體組織中表現之M1同功異型物，以及在胚胎發育期間及在一些成體組織(包括腎臟及造血幹細胞)中表現之M2同功異型物。許多腫瘤細胞亦表現PKM2。此四聚體異位調節之同功異型物本質上經設計以經由翻譯後修飾、藉由小分子配體(包括一些胺基酸)之異位調節及藉由次單元解離(成二聚體形式)來下調其活性，從而導致在最後一步部分抑制糖酵解。此積聚上游糖酵解中間物作為合成脂質及核酸之合成代謝碳源，而PKM2重新締合成活性四聚體補充正常的分解代謝狀態，作為細胞分裂後之反饋(Protein Sci. 2010年11月; 19(11): 2031-2044)。PKM2之調節(例如抑制或活化)可有效治療多種病症，例如癌症、肥胖症、糖尿病性疾病(例如糖尿病性腎病變(DN))、冠狀動脈疾病(CAD)、布盧姆症候群(Bloom Syndrome，BS)、自體免疫病況及增殖依賴性疾病(例如良性前列腺增生(BPH))。
本文描述調節有需要之受試者之丙酮酸激酶M2 (PKM2)活性的方法，其包含投與有效量之調節PKM2野生型及/或突變型酶(諸如本文所述之彼等酶)之式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V-a)、(V-b)、(VI)或(IX) (在本文中統稱為「式(I)-(IX)」)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或式(I')、(II')、(III')、(IV')、(V') (在本文中統稱為式(I')-(V')」)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個實施例中，本發明提供調節受試者之丙酮酸激酶M2 (PKM2)活性的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽：
Figure 02_image006
其中Q、R1 、R2 、L1 、L2 及Q如本文所定義。
在一個實施例中，該化合物或其醫藥學上可接受之鹽係選自表1以及圖1A-1C、2A-2C及3之化合物。
亦提供調節有需要之受試者之丙酮酸激酶M2 (PKM2)活性的方法，其包含投與包含有效量之式(I)-(IX)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或式(I')-(V')之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組合物。
在另一個實施例中，提供調節(例如提高或降低)有需要之受試者之PKM2活性水準的方法，其包含向該受試者投與有效量之本文所述之化合物。在一些實施例中，本文所述之化合物或組合物用於維持PKM2之活性構形或活化增殖細胞中之丙酮酸激酶活性，作為將葡萄糖代謝物轉移至患者之分解代謝過程而非合成代謝過程的手段。在某些實施例中，所提供之方法提高受試者之PKM2活性水準(亦即活化)。在某些實施例中，所提供之方法降低受試者之PKM2活性水準。
在另一個實施例中，提供調節(例如增加或降低)有需要之受試者之血漿葡萄糖水準的方法，其包含向該受試者投與有效量之本文所述之化合物。在某些實施例中，所提供之方法增加受試者之血漿葡萄糖水準。在某些實施例中，所提供之方法降低受試者之血漿葡萄糖水準。
在另一個實施例中，提供抑制有需要之受試者之細胞增殖的方法，其包含向該受試者投與有效量之本文所述之化合物。例如，此方法可抑制轉型細胞(例如癌細胞)之生長，或一般抑制進行好氧糖酵解之PKM2依賴性細胞的生長。
在另一個實施例中，提供治療罹患或易患與PKM2功能相關之疾病或病症之受試者的方法，其包含向該受試者投與有效量之本文所述之化合物。在特定實施例中，該方法進一步包含鑑別或選擇將受益於PKM2及/或血漿葡萄糖之調節(例如活化)的受試者。例如，可基於患者細胞中之PKM2活性水準來鑑別患者，以治療與PKM2功能相關之癌症。在另一個實施例中，所選患者為罹患或易患本文鑑別之病症或疾病，例如由不需要的細胞生長或增殖表徵之病症的受試者。在某些實施例中，該疾病為贅生性病症。在某些實施例中，該疾病為癌症、肥胖症、糖尿病性疾病(例如糖尿病性腎病變(DN))、動脈粥樣硬化、再狹窄、冠狀動脈疾病(CAD)、布盧姆症候群(BS)、良性前列腺增生(BPH)或自體免疫疾病。在某些實施例中，該疾病為癌症。在某些實施例中，該疾病為糖尿病性疾病。在某些實施例中，該糖尿病性疾病為糖尿病性腎病變(DN)。在某些實施例中，該疾病為冠狀動脈疾病(CAD)。
在一個實施例中，提供本文所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或包含該化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物在上述本發明方法中之任一者中的用途。在一個實施例中，提供本文所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或包含該化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，用於上述本發明方法中之任一者中。在另一個實施例中，提供本文所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或包含該化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物的用途，其用於製造用於所述本發明方法中之任一者的藥劑。
相關申請案之交叉引用 本申請案主張2018年5月18日申請之美國臨時專利申請案第62/673,526號及第62/673,533號之優先權。本申請案亦主張2017年8月15日申請之國際專利申請案第PCT/CN2017/097496號之優先權。前述優先權申請案中之每一者以全文引用之方式併入本文中。
在以下描述中闡述或在圖式中示出之構造的細節及組件的佈置不意欲為限制性的。實施例可以各種方式實踐或實施。本文所用之措詞及術語係出於描述之目的且不應視為限制性的。
定義 本文所述之化合物，其用於本發明之方法中，可包含一或多個不對稱中心，且因此可以各種立體異構形式存在，例如對映異構體及/或非對映異構體。舉例而言，本文所述之化合物可呈個別對映異構體、非對映異構體或幾何異構體形式，或可呈立體異構體混合物形式，包括外消旋混合物及一或多種立體異構體增濃之混合物。異構體可藉由熟習此項技術者已知的方法自混合物中分離，包括對掌性高壓液相層析(HPLC)及對掌性鹽的形成及結晶；或較佳異構體可藉由不對稱合成來製備。參見例如Jacques等人, Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981)；Wilen等人, Tetrahedron 33:2725 (1977)；Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962)；及Wilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions 第268頁(E.L. Eliel編, Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972)。
在一個實施例中，本文所述之化合物亦可包含一或多種同位素取代。舉例而言，除用氘或氚置換氫、用18 F置換19 F或用13 C或14 C置換12 C之外，具有本發明結構之化合物均在本發明之範疇內。此類化合物可用作例如生物分析中之分析工具或探針。
本文所述之化合物亦可以多種互變異構形式表示，在此類情況下，明確包括本文所述之化合物的所有互變異構形式，即使僅可表示單個互變異構形式(例如環系統之烷基化可在多個位點導致烷基化；明確包括所有此類反應產物)。明確包括此類化合物之所有此類異構形式。若化合物之互變異構體為芳族，則此化合物為芳族。類似地，若取代基之互變異構體為雜芳基，則此取代基為雜芳基。
術語「烷基 」係指具有1至10個碳原子之直鏈或分支鏈飽和烴基的基團(「C1 - 10 烷基」)。C1 - 6 烷基之實例包括甲基(C1 )、乙基(C2 )、丙基(C3 ) (例如正丙基、異丙基)、丁基(C4 ) (例如正丁基、第三丁基、第二丁基、異丁基)、戊基(C5 ) (例如正戊基、3-戊基、戊基、新戊基、3-甲基-2-丁基、第三戊基)及己基(C6 ) (例如正己基)。除非另外說明，否則烷基之各實例獨立地為未經取代的(「未經取代之烷基」)或經一或多個取代基(例如鹵素，諸如F)取代的(「經取代之烷基」)。在某些實施例中，烷基為未經取代之-C1 - 10 烷基。在某些實施例中，烷基為經取代之-C1 - 10 烷基。
術語「鹵烷基 」係指經取代之烷基，其中一或多個氫原子獨立地經鹵素(例如氟、溴、氯或碘)置換，且包括其中所有氫已經鹵基置換之烷基部分(例如全氟烷基)。在一些實施例中，鹵烷基部分具有1至8個碳原子(「C1 - 8 鹵烷基」)。
術語「烷氧基 ( alkoxy / alkoxyl ) 」係指-O-烷基。例如具有1至6個碳原子。
術語「芳氧基 」係指-O-芳基。在一些實施例中，芳氧基為苯氧基。
「羥基烷基 」可包括經一或多個羥基取代之烷基結構。
術語「雜烷基 」係指烷基，其進一步包括至少一個在母鏈內(亦即插入在母鏈之相鄰碳原子之間)及/或置於母鏈之一或多個末端位置處的選自氧、氮或硫之雜原子(例如1、2、3或4個雜原子)。在某些實施例中，雜烷基係指在母鏈內具有1至10個碳原子及1或多個雜原子的飽和基團(「雜C1 - 10 烷基」)。除非另外規定，否則雜烷基之各實例獨立地未經取代(「未經取代之雜烷基」)或經一或多個取代基取代(「經取代之雜烷基」)。在某些實施例中，雜烷基為未經取代之雜C1 - 10 烷基。在某些實施例中，雜烷基為經取代之雜C1 - 10 烷基。
術語「烯基 」係指具有2至10個碳原子及一或多個碳-碳雙鍵(例如1、2、3或4個雙鍵)之直鏈或分支鏈烴基的基團。一或多個碳-碳雙鍵可為內部的(諸如在2-丁烯基中)或末端的(諸如在1-丁烯基中)。-C2 - 4 烯基之實例包括乙烯基(C2 )、1-丙烯基(C3 )、2-丙烯基(C3 )、1-丁烯基(C4 )、2-丁烯基(C4 )、丁二烯基(C4 )及其類似基團。除非另外說明，否則烯基之各實例獨立地為未經取代的(「未經取代之烯基」)或經一或多個取代基取代的(「經取代之烯基」)。在某些實施例中，烯基為未經取代之-C2 - 10 烯基。在某些實施例中，烯基為經取代之-C2 - 10 烯基。在烯基中，C=C雙鍵可為(E)-或(Z)-雙鍵。
術語「炔基 」係指具有2至10個碳原子及一或多個碳-碳參鍵(例如1、2、3或4個參鍵)之直鏈或分支鏈烴基的基團(「C2 - 10 炔基」)。炔基之實例包括乙炔基(C2 )、1-丙炔基(C3 )、2-丙炔基(C3 )、1-丁炔基(C4 )、2-丁炔基(C4 )、戊炔基(C5 )、己炔基(C6 )、庚炔基(C7 )、辛炔基(C8 )及其類似基團。除非另外說明，否則炔基之各實例獨立地為未經取代的(「未經取代之炔基」)或經一或多個取代基取代的(「經取代之炔基」)。在某些實施例中，炔基為未經取代之-C2 - 10 炔基。在某些實施例中，炔基為經取代之-C2 - 10 炔基。
術語「碳環基 」或「碳環 」係指在非芳族環系統中具有3至14個環碳原子(「C3 - 14 碳環基」)及零個雜原子之非芳族單環、雙環、三環或多環烴環系統的基團。碳環基包括完全飽和環系統(例如環烷基)及部分飽和環系統。在一些實施例中，碳環基具有3至10個環碳原子(「C3 - 10 碳環基」)。
如本文所用之術語「環烷基 」包括具有3至14個碳之飽和環狀、雙環、三環或多環烴基，其含有指定數目之環及碳原子(例如C3 -C14 單環、C4 -C14 雙環、C5 -C14 三環或C6 -C14 多環環烷基)。在一些實施例中，「環烷基」為單環環烷基。單環環烷基之實例包括環戊基(C5 )、環己基(C6 )、環丙基(C3 )、環丁基(C4 )、環庚基(C7 )及環辛基(C8 )。在一些實施例中，「環烷基」為雙環環烷基。雙環環烷基之實例包括雙環[1.1.0]丁烷(C4 )、雙環[1.1.1]戊烷(C5 )、螺[2.2]戊烷(C5 )、雙環[2.1.0]戊烷(C5 )、雙環[2.1.1]己烷(C6 )、雙環[3.3.3]十一烷(C11 )、十氫萘(C10 )、雙環[4.3.2]十一烷(C11 )、螺[5.5]十一烷(C11 )及雙環[4.3.3]十二烷(C12 )。在一些實施例中，「環烷基」為三環環烷基。三環環烷基之實例包括金剛烷(C12 )。除非另外說明，否則環烷基之各實例獨立地為未經取代的(「未經取代之環烷基」)或經一或多個取代基取代的(「經取代之環烷基」)。在某些實施例中，環烷基為未經取代之C3 - 14 環烷基。在某些實施例中，環烷基為經取代之C3 - 14 環烷基。
術語「雜環基 」或「雜環 」係指具有環碳原子及1至4個環雜原子之3員至14員非芳族環系統的基團，其中各雜原子獨立地選自氮、氧及硫(「3-14員雜環基」)。在含有一或多個氮原子之雜環基中，在價數允許時，連接點可為碳或氮原子。雜環基可為單環(「單環雜環基」)或多環(例如稠合、橋連或螺環系統，諸如雙環系統(「雙環雜環基」)或三環系統(「三環雜環基」))，且可為飽和的或可含有一或多個碳-碳雙鍵或參鍵。雜環基多環環系統可在一個或兩個環中包括一或多個雜原子。「雜環基」亦包括如上文所定義之雜環基環與一或多個碳環基稠合之環系統，其中連接點在碳環基或雜環基環上；或如上文所定義之雜環基環與一或多個芳基或雜芳基稠合之環系統，其中連接點在雜環基環上，且在此類情況下，環成員之數目繼續表示雜環基環系統中環成員之數目。除非另外說明，否則雜環基之各實例獨立地為未經取代的(「未經取代之雜環基」)或經一或多個取代基取代的(「經取代之雜環基」)。在某些實施例中，雜環基為未經取代之3-14員雜環基。在某些實施例中，雜環基為經取代之3-14員雜環基。在一些實施例中，雜環基為具有環碳原子及1-4個環雜原子之5-10員非芳族環系統，其中各雜原子獨立地選自氮、氧及硫(「5-10員雜環基」)。
例示性雜環基包括氮丙啶基、環氧乙烷基、硫雜環丙烷基、氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、二氫噻吩基、吡咯啶基、二氫吡咯基、吡咯基-2,5-啶、二氧雜環戊烷基、氧硫雜環戊烷基、二硫雜環戊烷基、三唑啉基、噁二唑啉基、噻二唑啉基、哌啶基、四氫哌喃基、二氫吡啶基、噻烷基、哌嗪基、嗎啉基、二噻烷基、二噁烷基、三氮雜環己烷基、氮雜環庚烷基、氧雜環庚烷基、硫雜環庚烷基、氮雜環辛烷基、氧雜環辛烷基、硫雜環辛烷基、吲哚啉基、異吲哚啉基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、四氫苯并噻吩基、四氫苯并呋喃基、四氫吲哚基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、十氫喹啉基、十氫異喹啉基、八氫𠳭烯基、八氫異𠳭烯基、十氫㖠啶基、十氫-1,8-㖠啶基、八氫吡咯并[3,2-b]吡咯、吲哚啉基、鄰苯二甲醯亞胺基、萘二甲醯亞胺基、𠳭烷基、𠳭烯基、1H-苯并[e][1,4]二氮呯基、1,4,5,7-四氫吡喃并[3,4-b]吡咯基、5,6-二氫-4H-呋喃并[3,2-b]吡咯基、6,7-二氫-5H-呋喃并[3,2-b]哌喃基、5,7-二氫-4H-噻吩并[2,3-c]哌喃基、2,3-二氫-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、2,3-二氫呋喃并[2,3-b]吡啶基、4,5,6,7-四氫-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、4,5,6,7-四氫呋喃并[3,2-c]吡啶基、4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-b]吡啶基、1,2,3,4-四氫-1,6-㖠啶基及其類似基團。
術語「芳基 」係指具有芳環系統中提供之6-14個環碳原子及零個雜原子之單環或多環(例如雙環或三環) 4n+2芳環系統(例如具有環狀陣列中共享之6、10或14個π電子)的基團(「C6 - 14 芳基」)。在一些實施例中，芳基具有6個環碳原子(「C6 芳基」；例如苯基)。在一些實施例中，芳基具有10個環碳原子(「C10 芳基」；例如萘基，諸如1-萘基及2-萘基)。在一些實施例中，芳基具有14個環碳原子(「C14 芳基」；例如蒽基)。「芳基」亦包括如上文所定義之芳基環與一或多個碳環基或雜環基稠合之環系統，其中連接基團或連接點在芳基環上，且在此類情況下，碳原子數繼續表示芳基環系統中之碳原子數。除非另外說明，否則芳基之各實例獨立地為未經取代的(「未經取代之芳基」)或經一或多個取代基取代的(「經取代之芳基」)。在某些實施例中，芳基為未經取代之C6 - 14 芳基。在某些實施例中，芳基為經取代之C6 - 14 芳基。
「芳基烷基 」或「芳烷基 」為「烷基」之子集且係指經芳基取代之烷基，其中連接點在烷基部分上。「芳基烷基」或「芳烷基」之實例包括苯甲基、2-苯乙基、3-苯丙基、9-茀基、二苯甲基及三苯甲基。
術語「雜芳基 」係指具有芳環系統中提供之環碳原子及1-4個環雜原子之5-14員單環或多環(例如雙環、三環) 4n+2芳環系統(例如具有環狀陣列中共享之6、10或14個π電子)的基團，其中各雜原子獨立地選自氮、氧及硫(「5-14員雜芳基」)。在一些實施例中，雜芳基可為含有1-4個雜原子之5-8員單環雜芳基。在一些實施例中，雜芳基可為具有1-6個雜原子之8-12員雙環雜芳基。在一些實施例中，雜芳基可為具有1-9個雜原子之11-14員三環雜芳基環系統。在含有一或多個氮原子之雜芳基中，在價數允許時，連接點可為碳或氮原子。雜芳基多環環系統可在一個或兩個環中包括一或多個雜原子。「雜芳基」包括如上文所定義之雜芳基環與一或多個碳環基或雜環基稠合之環系統，其中連接點在雜芳基環上，且在此類情況下，環成員之數目繼續表示雜芳基環系統中環成員之數目。「雜芳基」亦包括如上文所定義之雜芳基環與一或多個芳基稠合之環系統，其中連接點在芳基或雜芳基環上，且在此類情況下，環成員之數目表示稠合多環(芳基/雜芳基)環系統中環成員之數目。其中一個環不含雜原子之多環雜芳基(例如吲哚基、喹啉基、咔唑基及其類似基團)，連接點可在任一環上，亦即攜帶雜原子之環(例如2-吲哚基)或不含雜原子之環(例如5-吲哚基)。在一些實施例中，雜芳基為具有芳環系統中提供之環碳原子及1-4個環雜原子的單環5-10員芳環系統，其中各雜原子獨立地選自氮、氧及硫(「5-10員單環雜芳基」)。在一些實施例中，雜芳基為具有芳環系統中提供之環碳原子及1-6個環雜原子的雙環8-12員芳環系統，其中各雜原子獨立地選自氮、氧及硫(「8-12員雙環雜芳基」)。除非另外規定，否則雜芳基之各實例獨立地未經取代(「未經取代之雜芳基」)或經一或多個取代基取代(「經取代之雜芳基」)。在某些實施例中，雜芳基為未經取代之5-14員雜芳基。在某些實施例中，雜芳基為經取代之5-14員雜芳基。在某些實施例中，雜芳基為視情況經取代之5員單環雜芳基。在某些實施例中，雜芳基為視情況經取代之6員單環雜芳基。
例示性單環雜芳基包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、氮呯基、氧呯基、噻呯基、吲哚基、異吲哚基、吲唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、異苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并異呋喃基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并噻二唑基、吲哚嗪基、嘌呤基、㖠啶基、喋啶基、喹啉基、異喹啉基、㖕啉基、喹喏啉基、酞嗪基、喹唑啉基啡啶基、二苯并呋喃基、咔唑基、吖啶基、啡噻嗪基、啡噁嗪基及啡嗪基。
「雜芳烷基 」或「雜芳基烷基 」係指經雜芳基取代之烷基，其中連接點在烷基部分上。
術語「飽和 」係指不含雙鍵或參鍵之部分，亦即該部分僅含有單鍵。
基團前加上「伸」表示該基團為二價部分，例如伸烷基為烷基之二價部分，伸烯基為烯基之二價部分，伸炔基為炔基之二價部分，伸雜烷基為雜烷基之二價部分，伸雜烯基為雜烯基之二價部分，伸雜炔基為雜炔基之二價部分，伸碳環基為碳環基之二價部分，伸雜環基為雜環基之二價部分，伸芳基為芳基之二價部分且伸雜芳基為雜芳基之二價部分。
術語「視情況經取代 」係指經取代或未經取代的。一般而言，術語「經取代」意謂基團上存在的至少一個氫經可容許的取代基置換，該可容許的取代基為例如在取代後產生穩定化合物之取代基，該穩定化合物為例如不自發進行諸如藉由重排、環化、消除或其他反應之轉化的化合物。除非另外指明，否則「經取代」之基團在該基團之一或多個可取代位置處具有取代基(例如C1 - 6 烷基、鹵素、硝基、氰基、羥基、C1 - 6 鹵烷基、C1 - 6 鹵烷氧基、C1 - 6 醯基、C3 - 6 環烷基、C6 - 10 芳基、單環或雙環雜芳基，及單環或雙環雜環基)，且當任何給定結構中之多於一個位置經取代時，取代基在各位置處相同或不同。術語「經取代」預期包括經有機化合物之所有可容許的取代基取代，且包括導致形成穩定化合物之本文所述之任何取代基。本發明涵蓋任何及所有此類組合以得到穩定化合物。出於本發明之目的，雜原子諸如氮可具有氫取代基及/或如本文所述之任何適合之取代基，其滿足雜原子之價數且導致形成穩定部分。本發明不欲以任何方式受本文所述之例示性取代基限制。
術語「鹵基 」或「鹵素 」係指氟、氯、溴或碘。
術語「醯基 」係指具有通式-C(=O)RX1 、-C(=O)ORX1 、-C(=O)-O-C(=O)RX1 、-C(=O)SRX1 、-C(=O)N(RX1 )2 、-C(=S)RX1 、-C(=S)N(RX1 )2 及-C(=S)S(RX1 )、-C(=NRX1 )RX1 、-C(=NRX1 )ORX1 、-C(=NRX1 )SRX1 及-C(=NRX1 )N(RX1 )2 之基團，其中當價數允許時，RX1 為氫；鹵素；經取代或未經取代之羥基；經取代或未經取代之硫醇；經取代或未經取代之胺基；經取代或未經取代之醯基；環狀或非環狀、經取代或未經取代之分支鏈或未分支鏈C1 - 10 烷基；環狀或非環狀、經取代或未經取代之分支鏈或未分支鏈C2 - 10 烯基；經取代或未經取代之C2 - 10 炔基；經取代或未經取代之C6 - 12 芳基、經取代或未經取代之雜芳基。例示性醯基包括醛(-CHO)、羧酸(-CO2 H)、酮、醯基鹵、酯、醯胺、亞胺、碳酸酯、胺基甲酸酯及脲。
在某些實施例中，存在於氮原子上、氧原子上或硫原子上之取代基分別為氮保護基、氧保護基或硫保護基。氮、氧及硫保護基為此項技術中所熟知的且包括以引用的方式併入本文中之Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene及P. G. M. Wuts, 第3版, John Wiley & Sons, 1999中詳細描述之彼等保護基。
舉例而言，氮保護基包括但不限於甲醯胺、乙醯胺、氯乙醯胺、三氯乙醯胺、三氟乙醯胺、苯基乙醯胺、胺基甲酸甲酯、胺基甲酸乙酯、胺基甲酸9-茀基甲酯(Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯(BOC或Boc)、胺基甲酸1-金剛烷基酯(Adoc)、胺基甲酸乙烯酯(Voc)、胺基甲酸烯丙酯(Alloc)、2-(三甲基矽烷基)乙氧基]甲基(SEM)、對甲苯磺醯胺(Ts)、苯磺醯胺、2,3,6-三甲基-4-甲氧基苯磺醯胺(Mtr)、2,4,6-三甲氧基苯磺醯胺(Mtb)、啡噻嗪基-(10)-醯基衍生物、N'-對甲苯磺醯基胺醯基衍生物，
例示性氧及硫保護基包括但不限於甲基、甲氧基甲基(MOM)、甲硫基甲基(MTM)、第三丁基硫甲基、(苯基二甲基矽烷基)甲氧基甲基(SMOM)、苯甲氧基甲基(BOM)、對甲氧基苯甲氧基甲基(PMBM)、(4-甲氧基苯氧基)甲基(p-AOM)、四氫哌喃基(THP)、甲磺酸酯基、苯甲基磺酸酯基及甲苯磺酸酯基(Ts)。
術語「離去基 」在合成有機化學技術中具有其普通含義，且係指能夠由親核試劑置換之原子或基團。適合之離去基之實例包括但不限於鹵素(諸如F、Cl、Br或I (碘))、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、烷磺醯氧基、芳烴磺醯氧基、烷基-羰基氧基(例如乙醯氧基)、磺酸酯基，諸如甲苯磺酸酯基(-OTs)、甲磺酸酯基(-OMs)、對溴苯磺醯氧基(溴苯磺酸酯基，-OBs)、-OS(=O)2 (CF2 )3 CF3 (九氟丁磺酸酯基，-ONf)或三氟甲磺酸酯基(-OTf)。
如本文所用，術語「鹽 」係指任何及所有鹽，且涵蓋醫藥學上可接受之鹽。
術語「醫藥學上可接受之鹽 」係指在合理的醫學判斷範疇內適用於與人類及低等動物之組織接觸而無異常毒性、刺激、過敏反應及其類似情況且與合理的益處/風險比相稱的彼等鹽。醫藥學上可接受之鹽為此項技術中所熟知的。舉例而言，Berge等人在J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19中詳細描述醫藥學上可接受之鹽，該文獻以引用的方式併入本文中。本發明化合物之醫藥學上可接受之鹽包括衍生自適合的無機及有機酸及鹼之彼等鹽。醫藥學上可接受之無毒性酸加成鹽之實例為胺基與無機酸，諸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸及高氯酸，或與有機酸，諸如乙酸、草酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸形成之鹽，或藉由使用此項技術中已知之其他方法，諸如離子交換形成之鹽。其他醫藥學上可接受之鹽包括己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽及其類似鹽。衍生自適當鹼之鹽包括鹼金屬鹽、鹼土金屬鹽、銨鹽以及N+ (C1 - 4 烷基)4 - 鹽。代表性鹼金屬或鹼土金屬鹽包括鈉鹽、鋰鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽及其類似鹽。適當時，其他醫藥學上可接受之鹽包括使用相對離子諸如鹵離子、氫氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低碳烷基磺酸根及芳基磺酸根形成之無毒銨、四級銨及胺陽離子。
術語「組合物 」及「調配物 」可互換使用。
考慮投藥之「受試者 」係指人類(亦即任何年齡組之男性或女性，例如兒科受試者(例如嬰兒、兒童或青少年)或成人受試者(例如年輕人、中年人或老年人))或非人類動物。在某些實施例中，非人類動物為哺乳動物(例如靈長類動物(例如食蟹獼猴或恆河猴)、商業相關之哺乳動物(例如牛、豬、馬、綿羊、山羊、貓或狗)或鳥類(例如商業相關之鳥類，諸如雞、鴨、鵝或火雞))。在某些實施例中，非人類動物為魚類、爬行動物或兩棲動物。非人類動物可為處於任何發育階段之雄性或雌性。非人類動物可為轉殖基因動物或經基因工程改造之動物。在某些實施例中，受試者為患者。術語「患者」係指需要治療疾病之人類受試者。在某些實施例中，術語「患者」為需要治療疾病之18歲以上的人類成人。在某些實施例中，術語「患者」為需要治療疾病之不超過18歲的人類兒童。在某些實施例中，患者未定期輸血(例如在12個月期間具有不超過4次輸血事件)。在某些實施例中，患者定期輸血(例如在12個月期間具有至少4次輸血事件)。
術語「投與 」或「投藥 」係指在受試者體內或體表植入、吸收、攝取、注射、吸入或以其他方式引入本文所述之化合物或其組合物。
術語「治療 」係指逆轉、緩解本文所述之疾病、延緩其發作或抑制其進展。在一些實施例中，可在已出現或已觀察到疾病之一或多個病徵或症狀之後投與治療(亦即治療性治療)。在其他實施例中，可在無疾病之病徵或症狀的情況下投與治療。舉例而言，可在症狀發作之前向易感受試者投與治療(亦即預防性治療) (例如根據症狀之病史及/或根據暴露於病原體)。亦可在症狀已消退之後繼續治療，例如以延緩或預防復發。在某些實施例中，治療包括使病症之至少一種症狀的發作延緩一段時間。
術語「病況 」、「疾病 」及「病症 」可互換使用。
本文所述之化合物的「有效量 」係指足以引發所需生物反應的量。本文所述之化合物的有效量可視諸如所需生物端點、化合物之藥物動力學、所治療之病況、投藥模式以及受試者之年齡及健康狀況之因素而變化。在某些實施例中，有效量為治療有效量。在某些實施例中，有效量將產生使Hb濃度相對於基線增加≥1.5 g/dL之受試者的血紅素反應。受試者之基線Hb濃度為在用化合物處理之前所有可獲得之Hb濃度的平均值。在某些實施例中，有效量將產生使Hb濃度相對於基線增加≥1.0 g/dL之受試者的血紅素反應。在某些實施例中，有效量將產生使Hb濃度相對於基線增加≥2.0 g/dL之受試者的血紅素反應。在某些實施例中，有效量為單劑量中本文所述之化合物的量。在某些實施例中，有效量為多劑量中本文所述之化合物的組合量。
本文所述之化合物的「治療有效量 」為足以在病況之治療中提供治療益處或足以延緩或使與病況相關之一或多個症狀減至最少的量。化合物之治療有效量意謂單獨或與其他療法組合之治療劑的量，其在病況治療中提供治療益處。術語「治療有效量」可涵蓋改善整體療法，減少或避免病況之症狀、病徵或病因，及/或增強另一種治療劑之治療功效的量。在某些實施例中，治療有效量為足以引發野生型或突變型PKM2之可量測活化的量。在某些實施例中，治療有效量為足以調節(例如降低)有需要之受試者之血漿葡萄糖的量。在某些實施例中，治療有效量為足以引發治療增生性疾病(例如癌症、自體免疫疾病)之可量測功效的量。在某些實施例中，治療有效量為足以引發治療及/或預防糖尿病性疾病(例如DN)之可量測功效的量。在某些實施例中，治療有效量為足以引發治療及/預防CAD之可量測功效的量。
如本文所用之術語「活化劑 」意謂(可量測地)增加丙酮酸激酶(例如PKM2)之活性或使丙酮酸激酶(例如PKM2)活性水準增加至高於PKM2之基礎活性水準的藥劑。舉例而言，活化劑可模擬由天然配體(例如FBP)引起之效應。由本文提供之化合物引起的活化劑效應可與由天然配體引起之活化效應相同，或程度更大或更小，但引起相同類型的效應。本文提供之化合物可藉由直接或間接量測丙酮酸激酶在經受該化合物時之活性來評估，以確定其是否為活化劑。本文提供之化合物的活性可例如相對於對照物質進行量測。在一些情況下，測試化合物所量測之活性係用於活化PKM2。PKM2之活性可例如藉由監測產物(諸如ATP)之濃度或偶合酶分析系統中使用之輔因子(諸如NADH)的含量來量測(參見PCT/US2010/040486)。
如本文所用之術語「抑制劑 」意謂(可量測地)減緩、停止、降低或不活化丙酮酸激酶(例如PKM2)之酶活性以降低至低於丙酮酸酯激酶(例如PKM2)之基礎水準或活性之水準的藥劑。
涉及如本文所用之方法的術語「離體 」意謂該方法在生物體外進行。舉例而言，可自生物體提取細胞或組織以視情況在人工控制的條件(例如溫度)下，與本文所提供之一或多種化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物接觸。
涉及如本文所用之方法的術語「活體外 」意謂該方法在生物體外進行且包含在人造環境中。舉例而言，可自生物體提取細胞或組織以在包含的人造環境(例如培養系統)中，諸如在試管中、在培養物中、在燒瓶中、在微量滴定盤中、在皮氏培養皿上及其類似情況與本文所提供之一或多種化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物接觸。
化合物 本文描述與調節PKM2之化合物及醫藥組合物有關的方法，以及此等化合物及醫藥組合物用於此等方法之用途。具體而言，此等方法包括調節受試者之丙酮酸激酶M2 (PKM2)活性的方法、調節(例如提高或降低)有需要之受試者之PKM2活性水準的方法、調節(例如增加或降低)有需要之受試者之血漿葡萄糖水準的方法、抑制有需要之受試者之細胞增殖(轉型細胞，例如癌細胞，或一般抑制進行好氧糖酵解之PKM2依賴性細胞生長)的方法、治療罹患或易患與PKM2功能相關之疾病或病症之受試者的方法。在一個實施例中，本文所述之化合物及組合物藉由在異位結合袋中結合來調節PKM2。在一個實施例中，本文所述之化合物及組合物抑制PKM2。在一個實施例中，本文所述之化合物及組合物活化PKM2。在一個實施例中，本文所述之化合物為式(I)-(IX)之化合物或式(I')-(V')之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或包含式(I)-(IX)之化合物或式(I')-(V')之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物。在一個實施例中，本發明方法中所用之化合物為國際專利申請案第PCT/CN2017/09496號及美國臨時專利申請案第62/673,533號及第62/673,526號中所述之化合物，其各者之揭示內容以全文引用之方式併入本文中。
在本發明之第一實施例中，提供調節有需要之受試者之丙酮酸激酶M2 (PKM2)活性的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：
Figure 02_image008
Q為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基； R1 為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之鹵烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基、-ORo1 、-C(=O)Rc1 或氮保護基； L1 為鍵、視情況經取代之伸烷基、-O-、-S-、-S-CH2 -、-S(=O)CH2 -、-S(=O)2 CH2 -、-NR3 -、-NR3 C(=O)-、-C(=O)NR3 -、-C(=O)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-NR3 C(=O)O-、-OC(=O)NR3 -、-NR3 C(=O)NR3 -、-OC(R4 )2 -、-C(R4 )2 O-、-NR3 C(R4 )2 -、-C(R4 )2 NR3 -、-S(=O)2 -、-S(=O)-、-S(=O)2 O-、-OS(=O)2 -、-S(=O)O-、-OS(=O)-、-S(=O)2 NR3 -、-NR3 S(=O)2 -、-S(=O)NR3 -、-NR3 S(=O)-、-NR3 S(=O)2 O-、-OS(=O)2 NR3 -、-NR3 S(=O)O-、-OS(=O)NR3 -或-S(=O)(=NR3 )-，其中與R2 之連接點在左手側； L2 為鍵、視情況經取代之伸烷基、-C(=O)-、-S(=O)2 -或-S(=O)-，其中與Q之連接點在右手側； R2 為氫、鹵素、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烷氧基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基，或當L1 為-NR3 -、-NR3 C(=O)-、-NR3 C(=O)O-、-NR3 C(R4 )2 -、-NR3 S(=O)2 -、-NR3 S(=O)-、-NR3 C(=O)NR3 -、-NR3 S(=O)2 O-或-NR3 S(=O)O-時之氮保護基，當L1 為-O-、-OC(=O)-、-OC(=O)NR3 -、-OC(R4 )2 -、-OS(=O)2 -、-OS(=O)2 NR3 -、-OS(=O)NR3 -或-OS(=O)-時之氧保護基，或當L1 為-S-時之硫保護基； R3 之各實例獨立地為氫、-ORo2 、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基或氮保護基； Ro1 及Ro2 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之烷基或氧保護基； Rc1 之各實例獨立地為視情況經取代之烷基或-N(Rcn )2 ，其中Rcn 之各實例獨立地為氫、-C1 - 6 烷基或氮保護基；及 R4 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基。
在本發明之第二實施例中，提供調節有需要之受試者之血漿葡萄糖水準的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中式(I)如第一實施例中所定義。
在本發明之第三實施例中，提供抑制罹患或易患與PKM2功能相關之疾病或病症之受試者之細胞增殖的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中式(I)如第一實施例中所定義。
在本發明之第四實施例中，提供治療有需要之受試者之與異常PKM2活性相關之疾病的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中式(I)如第一實施例中所定義。
在本發明之第五實施例中，提供根據如上所述之第四實施例的方法，其中該疾病為增生性疾病。
在本發明之第六實施例中，提供根據如上所述之第四實施例的方法，其中該疾病為癌症、肥胖症、糖尿病性疾病(例如糖尿病性腎病變(DN))、動脈粥樣硬化、再狹窄、冠狀動脈疾病(CAD)、布盧姆症候群(BS)、良性前列腺增生(BPH)或自體免疫疾病。
在本發明之第七實施例中，提供治療有需要之受試者之高血糖症的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中式(I)如第一實施例中所定義。
在本發明之第八實施例中，提供治療有需要之受試者之糖尿病性疾病的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中式(I)如第一實施例中所定義。
在本發明之第九實施例中，提供根據如上所述之第八實施例的方法，其中該糖尿病性疾病為糖尿病性腎病變。
在本發明之第十實施例中，提供根據如上所述之第一至第九實施例中任一者之方法，其中該方法進一步包含鑑別將受益於PKM2調節之受試者。
在本發明之第十一實施例中，提供根據如上所述之第一實施例的方法，其中該調節為活化。
在本發明之第十二實施例中，提供根據如上所述之第一至第十一實施例中任一者之方法，其中： Q為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基、視情況經取代之C3 -C12 環烷基、視情況經取代之3員至14員雜環基、視情況經取代之6員至14員芳基或視情況經取代之5員至14員雜芳基； R1 為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基、視情況經取代之-C1 -C6 鹵烷基、視情況經取代之-C2 -C6 烯基、視情況經取代之-C2 -C6 炔基、視情況經取代之C3 -C12 環烷基、視情況經取代之3員至14員雜環基、視情況經取代之6員至12員芳基、-ORo1 、-C(=O)Rc1 或氮保護基； L1 為鍵、視情況經取代之C1 - 6 伸烷基、-O-、-S-、-S-CH2 -、-S(=O)CH2 -、-S(=O)2 CH2 -、-NR3 -、-NR3 C(=O)-、-C(=O)NR3 -、-C(=O)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-NR3 C(=O)O-、-OC(=O)NR3 -、-NR3 C(=O)NR3 -、-OC(R4 )2 -、-C(R4 )2 O-、-NR3 C(R4 )2 -、-C(R4 )2 NR3 -、-S(=O)2 -、-S(=O)-、-S(=O)2 O-、-OS(=O)2 -、-S(=O)O-、-OS(=O)-、-S(=O)2 NR3 -、-NR3 S(=O)2 -、-S(=O)NR3 -、-NR3 S(=O)-、-NR3 S(=O)2 O-、-OS(=O)2 NR3 -、-NR3 S(=O)O-、-OS(=O)NR3 -或-S(=O)(=NR3 )-，其中與R2 之連接點在左手側； L2 為鍵、視情況經取代之C1 -C6 伸烷基、-C(=O)-、-S(=O)2 -或-S(=O)-，其中與Q之連接點在右手側； R2 為氫、鹵素、視情況經取代之-C1 -C6 烷基、視情況經取代之-C1 -C6 烷氧基、視情況經取代之-C3 -C12 環烷基、視情況經取代之3員至14員雜環基、視情況經取代之-C6 -C12 芳基或視情況經取代之3員至14員雜芳基，或當L1 為-NR3 -、-NR3 C(=O)-、-NR3 C(=O)O-、-NR3 C(R4 )2 -、-NR3 S(=O)2 -、-NR3 S(=O)-、-NR3 C(=O)NR3 -、-NR3 S(=O)2 O-或-NR3 S(=O)O-時之氮保護基，當L1 為-O-、-OC(=O)-、-OC(=O)NR3 -、-OC(R4 )2 -、-OS(=O)-、-OS(=O)2 -、-OS(=O)2 NR3 -、-OS(=O)NR3 -或-OS(=O)-時之氧保護基，或當L1 為-S-時之硫保護基； R3 之各實例獨立地為氫、-ORo2 、視情況經取代之-C1 -C6 烷基、視情況經取代之-C2 -C6 烯基、視情況經取代之-C2 -C6 炔基、視情況經取代之C3 -C12 環烷基、視情況經取代之C3 -C12 雜環基、視情況經取代之C6 -C12 芳基、視情況經取代之C5 -C12 雜芳基或氮保護基； Ro1 及Ro2 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基； Rc1 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基或-N(Rcn )2 ，其中Rcn 之各實例獨立地為氫、-C1 -C6 烷基或氮保護基； R4 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基、視情況經取代之-C2 -C6 烯基、視情況經取代之-C2 -C6 炔基、視情況經取代之C3 -C12 環烷基、視情況經取代之3員至14員雜環基、視情況經取代之C6 -C12 芳基或視情況經取代之5員至14員雜芳基。
在本發明之第十三實施例中，提供根據如上所述之第一至第十二實施例中任一者之方法，其中： Q為C6 -C12 芳基、5員至6員單環雜芳基或8員至12員雙環雜芳基，其各者經Rc 取代0-3次； R1 係選自氫、-C1 -C6 烷基、-C1 -C6 鹵烷基、C3 -C7 單環環烷基及3員至14員雜環基、-ORo1 、-C(=O)Rc1 或氮保護基；其中各烷基、環烷基或雜環基經Rd 取代0-3次； R2 係選自氫、鹵素、-C1 -C6 烷基、-C1 -C6 烷氧基、C3 -C7 單環環烷基、C6 -C12 雙環環烷基、3員至14員雜環基、C6 -C12 芳基、5員至6員單環雜芳基、8員至12員雙環雜芳基，其中各烷基、環烷基、雜環基、芳基及雜芳基經Re 取代0-3次，或當L1 為-NR3 -、-NR3 C(=O)-、-NR3 C(=O)O-、-NR3 C(R4 )2 -、-NR3 S(=O)2 -、-NR3 S(=O)-、-NR3 C(=O)NR3 -、-NR3 S(=O)2 O-或-NR3 S(=O)O-時之氮保護基，當L1 為-O-、-OC(=O)-、-OC(=O)NR3 -、-OC(R4 )2 -、-OS(=O)-、-OS(=O)2 -、-OS(=O)2 NR3 -、-OS(=O)NR3 -或-OS(=O)-時之氧保護基，或當L1 為-S-時之硫保護基； R3 係選自氫、-ORo2 、-C1 -C6 烷基、C3 -C7 單環環烷基、C6 -C12 雙環環烷基、3員至14員雜環基、C6 -C12 芳基、5員至6員單環雜芳基及8員至12員雙環雜芳基，其中各烷基、環烷基、雜環烷基、芳基及雜芳基經Rf 取代0-3次； R4 係選自氫、-C1 -C6 烷基、C3 -C7 單環環烷基及3員至14員雜環基，其中各烷基、環烷基或雜環基經Rg 取代0-1次； L1 為鍵、經Rh 取代0-3次之伸烷基、-O-、-S-、-S-CH2 -、-S(=O)CH2 -、-S(=O)2 CH2 -、-NR3 -、-NR3 C(=O)-、-C(=O)NR3 -、-C(=O)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-NR3 C(=O)O-、-OC(=O)NR3 -、-NR3 C(=O)NR3 -、-OC(R4 )2 -、-C(R4 )2 O-、-NR3 C(R4 )2 -、-C(R4 )2 NR3 -、-S(=O)2 -、-S(=O)-、-S(=O)2 O-、-OS(=O)2 -、-S(=O)O-、-OS(=O)-、-S(=O)2 NR3 -、-NR3 S(=O)2 -、-S(=O)NR3 -、-NR3 S(=O)-、-NR3 S(=O)2 O-、-OS(=O)2 NR3 -、-NR3 S(=O)O-、-OS(=O)NR3 -或-S(=O)(=NR3 )-，其中與R2 之連接點在左手側； L2 為鍵、經Rh 取代0-3次之伸烷基、-C(=O)-、-S(=O)2 -或-S(=O)-，其中與Q之連接點在右手側； 各Rc 獨立地選自鹵基、-C1 -C6 烷基、-C1 -C6 鹵烷基、-C1 -C6 羥基烷基、-OH、-OC1 -C6 烷基、-C1 -C6 胺基烷基、-NH(C1 -C6 烷基)、-N(C1 -C6 烷基)2 、-C(=O)OC1 -C6 烷基、-C(=O)OH、-C(=O)C1 -C6 烷基、-C(=O)NH2 、-C(=O)NH(C1 -C6 烷基)、-C(=O)N(C1 -C6 烷基)2 、-NHC(=O)NH2 、-NHC(=O)NH(C1 -C6 烷基)、-NH(C=O)N(C1 -C6 烷基)2 、-NHC(=O)(C1 -C6 烷基)、-N(C1 -C6 烷基)C(=O)(C1 -C6 烷基)、-S(=O)2 NH2 、-S(=O)2 NH(C1 -C6 烷基)、-S(=O)2 N(C1 -C6 烷基)2 、-NHS(=O)2 (C1 -C6 烷基)、-NH2 、-CN及-NO2 ；或與相同或相鄰碳原子連接之Rc 的兩個實例與其所連接之碳原子一起形成環烷基或雜環基C(=O)OH； 各Rd 獨立地選自鹵基、-C1 -C6 烷基、-OH、-OC1 -C6 烷基、-NH2 及-CN； 各Re 獨立地選自鹵基、-C1 -C6 烷基、-C1 -C6 鹵烷基、-C1 -C6 羥基烷基、-OH、-OC1 -C6 烷基、-C1 -C6 胺基烷基、-NH(C1 -C6 烷基)、-N(C1 -C6 烷基)2 、-C(=O)OC1 -C6 烷基、-C(=O)OH、-C(=O)C1 -C6 烷基、-C(=O)NH2 、-C(=O)NH(C1 -C6 烷基)、-C(=O)N(C1 -C6 烷基)2 、-NHC(=O)NH2 、-NHC(=O)NH(C1 -C6 烷基)、-NH(C=O)N(C1 -C6 烷基)2 、-NHC(=O)(C1 -C6 烷基)、-N(C1 -C6 烷基)C(=O)(C1 -C6 烷基)、-S(=O)2 NH2 、-S(=O)2 NH(C1 -C6 烷基)、-S(=O)2 N(C1 -C6 烷基)2 、-NHS(=O)2 (C1 -C6 烷基)、-NH2 、-CN及-NO2 ；或與相同或相鄰碳原子連接之Re 的兩個實例與其所連接之碳原子一起形成環烷基或雜環基； 各Rf 獨立地選自鹵基、-C1 -C6 烷基、-C1 -C6 鹵烷基、-C1 -C6 烷氧基、-OH、-NH2 、-CN及-NO2 ； 各Rg 獨立地選自鹵基、-C1 -C6 烷基、-C1 -C6 鹵烷基、-C1 -C6 烷氧基、-OH、NH2 、-CN及NO2 及； 各Rh 獨立地選自鹵基、-C1 -C6 烷基、-C1 -C6 鹵烷基、-C1 -C6 羥基烷基、-OH、-OC1 -C6 烷基、-C1 -C6 胺基烷基、-NH(C1 -C6 烷基)、-N(C1 -C6 烷基)2 、-C(=O)OC1 -C6 烷基、-C(=O)OH、-C(=O)C1 -C6 烷基、-C(=O)NH2 、-C(=O)NH(C1 -C6 烷基)、-C(=O)N(C1 -C6 烷基)2 、-NHC(=O)NH2 、-NHC(=O)NH(C1 -C6 烷基)、-NH(C=O)N(C1 -C6 烷基)2 、-NHC(=O)(C1 -C6 烷基)、-N(C1 -C6 烷基)C(=O)(C1 -C6 烷基)、-S(=O)2 NH2 、-S(=O)2 NH(C1 -C6 烷基)、-S(=O)2 N(C1 -C6 烷基)2 、-NHS(=O)2 (C1 -C6 烷基)、-NH2 、-CN及-NO2 、S(=O)2 芳基、S(=O)2 雜芳基及=NOH，或與相同或相鄰碳原子連接之Rh 的兩個實例與其所連接之碳原子一起形成環烷基或雜環基。
在本發明之第十四實施例中，提供根據如上所述之第一至第十三實施例中任一者之方法，其中該化合物為由式(II)表示之化合物：
Figure 02_image010
或其醫藥學上可接受之鹽；其中： Ra 及Rb 各自獨立地為氫、鹵素、-CN、-NO2 、-N3 、視情況經取代之烷基、-ORo3 、-N(Rn1 )2 、-C(=O)N(Rn1 )2 或-C(=O)Rc2 ，或Ra 及Rb 可與碳原子一起形成視情況經取代之環烷基或視情況經取代之雜環基； Rn1 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基； Ro3 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基；及 Rc2 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基； 其中其餘變數如第一至第十二實施例中之任一者中所定義。 在本發明之第十五實施例中，提供根據如上所述之第一至第十三實施例中任一者之方法，其中L1 為鍵、視情況經取代之-C1 - 6 伸烷基、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2 -、-NR3 C(=O)-或-C(=O)NR3 -；且其中其餘變數如第一至第十四實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第十六實施例中，提供根據如上所述之第一至第十四實施例中任一者之方法，其中L1 為經Rj 及Rk 取代之C1 - 6 伸烷基； 其中Rj 及Rk 之各實例獨立地選自H、鹵素、-CN、-ORo7 、-N(Rn5 )2 、-N(Rn5 )C(=O)Rc5 、-C(=O)N(Rn5 )2 、-C(=O)Rc5 、-C(=O)ORo7 、-SRjs 、-S(=O)2 Rjs 或-S(=O)Rjs 、視情況經取代之-C1 -C6 烷基；或Rj 及Rk 可與碳原子一起形成C=O、C=NRjn 、視情況經取代之C3 -C6 單環環烷基環或視情況經取代之C3 -C6 單環雜環基環； Rn5 及Rjn 中之每一者獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基、-ORo8 或氮保護基； Ro7 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基； Rc5 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基；及 Rjs 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基、視情況經取代之C6 - 12 芳基、視情況經取代之雜芳基或硫保護基；及 其中其餘變數如第一至第十五實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第十七實施例中，提供根據如上所述之第一至第十六實施例中任一者之方法，其中該化合物由(I')表示：
Figure 02_image012
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R1 為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之鹵烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基、-ORo1 、-C(=O)Rc1 或氮保護基；其中： Ro1 為氫、視情況經取代之烷基或氧保護基； Rc1 為視情況經取代之烷基或-N(Rcn )2 ，其中Rcn 之各實例獨立地為氫、-C1 - 6 烷基或氮保護基； R2 及Q各自獨立地為視情況經取代之5員或6員單環雜芳基； Ra 及Rb 各自獨立地為氫、鹵素、-CN、-NO2 、-N3 、視情況經取代之烷基、-ORo3 、-N(Rn1 )2 、-C(=O)N(Rn1 )2 或-C(=O)Rc2 ；或Ra 及Rb 可與其所連接之碳原子一起形成視情況經取代之環烷基或視情況經取代之雜環基；其中： Rn1 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基； Ro3 為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基；及 Rc2 為視情況經取代之-C1 -C6 烷基；及 Rj 及Rk 各自獨立地為氫、鹵素、-CN、-ORo7 、-N(Rn5 )2 、-N(Rn5 )C(=O) Rc5 、-C(=O)N(Rn5 )2 、-C(=O)Rc5 、-C(=O)ORo7 、-SRjs 、-S(=O)2 Rjs 、-S(=O)Rjs 或視情況經取代之-C1 -C6 烷基；或Rj 及Rk 可與其所連接之碳原子一起形成C=O、視情況經取代之C1 -C6 單環環烷基環或視情況經取代之C3 -C6 單環雜環基環；其中： Rn5 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基、-ORo8 或氮保護基，其中Ro8 為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基； Ro7 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基； Rc5 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基；及 Rjs 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基、視情況經取代之C6 - 12 芳基、視情況經取代之雜芳基或硫保護基。
在本發明之第十八實施例中，提供根據如上所述之第十七實施例之方法，其中該化合物為由(I')表示之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中由R2 表示之5員或6員單環雜芳基視情況在各可取代之環碳原子處經Rp 取代且視情況在各可取代之環氮原子處經Rn6 取代；其中： Rp 之各實例獨立地為氫、鹵素、-CN、-NO2 、-N3 、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之雜芳基、-ORo6 、-SRs2 、-N(Rn3 )2 、-C(=O)N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )C(=O)Rc4 、-C(=O)Rc4 、-C(=O)ORo6 、-OC(=O)Rc4 、-S(=O)Rs2 、-S(=O)2 Rs2 、-S(=O)ORo6 、-OS(=O)Rc4 、-S(=O)2 ORo6 、-OS(=O)2 Rc4 、-S(=O)N(Rn3 )2 、-S(=O)2 N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )S(=O)Rs2 、-N(Rn3 )S(=O)2 Rs2 、-N(Rn3 )C(=O)ORo6 、-OC(=O)N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )C(=O)N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )S(=O)N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )S(=O)2 N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )S(=O)ORo6 、-N(Rn3 )S(=O)2 ORo6 、-OS(=O)N(Rn3 )2 或-OS(=O)2 N(Rn3 )2 ；或與相同或相鄰碳原子連接之Rp 的兩個實例可與其所連接之碳原子一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；其中： Rn3 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基； Ro6 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基；及 Rc4 之各實例為視情況經取代之-C1 -C6 烷基； Rs2 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基或硫保護基；及 Rn6 為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基；及 其中其餘變數如第十七實施例中所定義。
在本發明之第十九實施例中，提供根據如上所述之第一至第十八實施例中任一者之方法，其中Q為視情況經取代之5員至6員單環雜芳基；且其中其餘變數如第一至第十八實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十實施例中，提供根據如上所述之第一至第十九實施例中任一者之方法，其中Q具有下式中之一者：
Figure 02_image014
； 其中： Rn 之各實例獨立地為氫、鹵素、-CN、-NO2 、-N3 、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之雜芳基、-ORo4 、-SRs1 、-N(Rn2 )2 、-C(=O)N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )C(=O)Rc3 、-C(=O)Rc3 、-C(=O)ORo4 、-OC(=O)Rc3 、-S(=O)Rs1 、-S(=O)2 Rs1 、-S(=O)ORo4 、-OS(=O)Rc3 、-S(=O)2 ORo4 、-OS(=O)2 Rc3 、-S(=O)N(Rn2 )2 、-S(=O)2 N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )S(=O)Rs1 、-N(Rn2 )S(=O)2 Rs1 、-N(Rn2 )C(=O)ORo4 、-OC(=O)N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )C(=O)N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )S(=O)N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )S(=O)2 N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )S(=O)ORo4 、-N(Rn2 )S(=O)2 ORo4 、-OS(=O)N(Rn2 )2 或-OS(=O)2 N(Rn2 )2 ；或與相同或相鄰碳原子連接之Rn 的兩個實例與其所連接之碳原子一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；其中： Rn2 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基； Ro4 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基； Rc3 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基； Rs1 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基或硫保護基； 在價數允許時，n為0、1、2或3；及 Rna 、Rnb 及Rnd 中之每一者獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基；及 其中其餘變數如第一至第十九實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十一實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十實施例中任一者之方法，其中由Q表示之5員或6員單環雜芳基係選自以下：
Figure 02_image016
；及 其中其餘變數如第一至第二十實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十二實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十一實施例中任一者之方法，其中由Q表示之5員或6員單環雜芳基係選自以下：
Figure 02_image018
；及 其中其餘變數如第一至第二十一實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十三實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十二實施例中任一者之方法，其中由Q表示之5員或6員單環雜芳基係選自以下：
Figure 02_image020
；及 其中其餘變數如第一至第二十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十四實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十三實施例中任一者之方法，其中由Q表示之5員或6員單環雜芳基為
Figure 02_image022
；及其中其餘變數如第一至第二十三實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十五實施例中，提供根據如上所述之第一至第十六實施例中任一者之方法，其中Q為視情況經取代之8員至12員雙環雜芳基或視情況經取代之8員至12員雙環雜環基；且其中其餘變數如第一至第十六實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十六實施例中，提供根據如上所述之第一至第十六及第二十五實施例中任一者之方法，其中Q具有下式中之一者：
Figure 02_image024
Figure 02_image026
； 其中Rn 之各實例獨立地選自氫、鹵素、-CN、-NO2 、-N3 、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之雜芳基、-ORo4 、-SRs1 、-N(Rn2 )2 、-C(=O)N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )C(=O)Rc3 、-C(=O)Rc3 、-C(=O)ORo4 、-OC(=O)Rc3 、-S(=O)Rs1 、-S(=O)2 Rs1 、-S(=O)ORo4 、-OS(=O)Rc3 、-S(=O)2 ORo4 、-OS(=O)2 Rc3 、-S(=O)N(Rn2 )2 、-S(=O)2 N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )S(=O)Rs1 、-N(Rn2 )S(=O)2 Rs1 、-N(Rn2 )C(=O)ORo4 、-OC(=O)N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )C(=O)N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )S(=O)N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )S(=O)2 N(Rn2 )2 、-N(Rn2 )S(=O)ORo4 、-N(Rn2 )S(=O)2 ORo4 、-OS(=O)N(Rn2 )2 、-OS(=O)2 N(Rn2 )2 ，或與相同或相鄰碳原子連接之Rn 的兩個實例與其所連接之原子一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； Rna 及Rnb 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基； Rn2 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基； Ro4 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基； Rc3 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基； Rs1 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基或硫保護基； 在價數允許時，n為0、1、2或3；及 其中其餘變數如第一至第十六及第二十五實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十七實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十六實施例中任一者之方法，其中R2 係選自氫、羥基、鹵素、-C1 -C6 烷基、-C2 -C6 烯基、-C2 -C6 烷氧基、苯基、萘基、C3 - 6 環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、8員雙環雜芳基、9員雙環雜芳基，其中各烷基、烯基、苯基及雜芳基經Re 取代0-3次；且其中其餘變數如第一至第二十六實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十八實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十七實施例中任一者之方法，其中R2 具有下式中之一者：
Figure 02_image028
Figure 02_image030
Figure 02_image032
； 其中Rp 之實例獨立地選自氫、鹵素、-CN、-NO2 、-N3 、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之雜芳基、-ORo6 、-SRs2 、-N(Rn3 )2 、-C(=O)N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )C(=O)Rc4 、-C(=O)Rc4 、-C(=O)ORo6 、-OC(=O)Rc4 、-S(=O)Rs2 、-S(=O)2 Rs2 、-S(=O)ORo6 、-OS(=O)Rc4 、-S(=O)2 ORo6 、-OS(=O)2 Rc4 、-S(=O)N(Rn3 )2 、-S(=O)2 N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )S(=O)Rs2 、-N(Rn3 )S(=O)2 Rs2 、-N(Rn3 )C(=O)ORo6 、-OC(=O)N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )C(=O)N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )S(=O)N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )S(=O)2 N(Rn3 )2 、-N(Rn3 )S(=O)ORo6 、-N(Rn3 )S(=O)2 ORo6 、-OS(=O)N(Rn3 )2 、-OS(=O)2 N(Rn3 )2 ，或與相同或相鄰碳原子連接之Rp 的兩個實例與其所連接之原子一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基； Rn3 、Rnc 及Rnd 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基； Ro6 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氧保護基； Rc4 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基； Rs2 之各實例獨立地為視情況經取代之-C1 -C6 烷基或硫保護基； 在價數允許時，p為0、1、2或3；及 其中其餘變數如第一至第二十七實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第二十九實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十八實施例中任一者之方法，其中由R2 表示之5員或6員單環雜芳基係選自以下中之一者：
Figure 02_image034
Figure 02_image036
其中： Rnc 及Rnd 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基； 在價數允許時，p為0、1、2、3或4； 其中其餘變數如第一至第二十八實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十九實施例中任一者之方法，其中由R2 表示之5員或6員單環雜芳基係選自以下中之一者：
Figure 02_image038
Figure 02_image040
；其中其餘變數如第一至第二十九實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十一實施例中，提供根據如上所述之第一至第三十實施例中任一者之方法，其中R2 係選自以下中之一者：
Figure 02_image042
；及其中其餘變數如第一至第三十實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十二實施例中，提供根據如上所述之第二十七至第三十一實施例中任一者之方法，其中Rp 之各實例獨立地為氫、鹵素、視情況經取代之C1 - 4 烷基、-CN、-NO2 、-N3 、-ORo4 、-N(Rn2 )2 、-C(=O)N(Rn2 )2 、-C(=O)Rc3 或-C(=O)ORo4 ；且其中其餘變數如第二十八至第三十一實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十三實施例中，提供根據如上所述之第一至第十六及第二十七至第三十二實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(III)化合物：
Figure 02_image044
或其醫藥學上可接受之鹽，其中變數如第一至第十六及第二十七至第三十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十四實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十四及第二十七至第三十二實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(IV)化合物：
Figure 02_image046
； 或其醫藥學上可接受之鹽，其中變數如第一至第二十四及第二十七至第三十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十五實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十四及第二十七至第三十二實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(V-a)化合物：
Figure 02_image048
或其醫藥學上可接受之鹽，其中m為0、1或2；且其餘變數如第一至第二十四及第二十七至第三十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十六實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十四及第二十七至第三十二實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(V-b)化合物：
Figure 02_image050
， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中m為0、1或2；Rnc 獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基；且其中其餘變數如第一至第二十四及第二十七至第三十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十七實施例中，提供根據如上所述之第一至第十六及第二十五至第三十二實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(VI)化合物：
Figure 02_image052
或其醫藥學上可接受之鹽，其中Rn7 為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基；且其中其餘變數如第一至第十六及第二十五至第三十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十八實施例中，提供根據如上所述之第一至第二十四及第二十七至第三十二實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(IX)化合物：
Figure 02_image054
， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中Rnc 獨立地為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基；且其中其餘變數如第一至第二十四及第二十七至第三十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第三十九實施例中，提供根據如上所述之第一至第三十八實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(II')化合物：
Figure 02_image056
或其醫藥學上可接受之鹽，其中Rn6 為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基；q為0、1、2或3；且其中其餘變數如第一至第三十八實施例中之任一者中所定義。或者，變數如第十七、第十八、第二十九、第三十及第三十一實施例中之任一者中所述。
在本發明之第四十實施例中，提供根據如上所述之第一至第三十八實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(III')化合物：
Figure 02_image058
或其醫藥學上可接受之鹽，其中q為0、1、2或3；且其中其餘變數如第一至第三十八實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第四十一實施例中，提供根據如上所述之第一至第三十八實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(IV')化合物：
Figure 02_image060
或其醫藥學上可接受之鹽，其中Rn6 為氫、視情況經取代之-C1 -C6 烷基或氮保護基；q為0、1、2或3；且其中其餘變數如第一至第三十八實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第四十二實施例中，提供根據如上所述之第一至第三十八實施例中任一者之方法，其中該化合物為式(V')化合物：
Figure 02_image062
或其醫藥學上可接受之鹽，其中q為0、1、2或3；且其中其餘變數如第一至第三十八實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第四十三實施例中，提供根據如上所述之第三十九至第四十二實施例中任一者之方法，其中Rn6 為氫或-C1 - 4 烷基；且其中其餘變數如第三十九至第四十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第四十四實施例中，提供根據如上所述之第三十九至第四十二實施例中任一者之方法，其中Rp 之各實例獨立地為氫、鹵素、視情況經取代之C1 - 4 烷基、-CN、-NO2 、-N3 、-ORo4 、-N(Rn2 )2 、-C(=O)N(Rn2 )2 、-C(=O)Rc3 或-C(=O)ORo4 ；且其中其餘變數如第三十九至第四十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第四十五實施例中，提供根據如上所述之第二十六至第四十二實施例中任一者之方法，其中Rna 為氫或-C1 - 4 烷基；且其中其餘變數如第二十六至第四十二實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第四十六實施例中，提供根據如上所述之第二十至第四十五實施例中任一者之方法，其中Rn 之各實例獨立地為氫、鹵素、視情況經取代之C1 - 4 烷基、-CN、-NO2 、-N3 、-ORo4 、-N(Rn2 )2 、-C(=O)N(Rn2 )2 、-C(=O)Rc3 或-C(=O)ORo4 ；且其中其餘變數如第二十至第四十五實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第四十七實施例中，提供根據如上所述之第一至第四十六實施例中任一者之方法，其中R1 為氫或-C1 -C4 烷基；且其中其餘變數如第一至第四十六實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第四十八實施例中，提供根據如上所述之第十六至第四十七實施例中任一者之方法，其中Rj 及Rk 各自獨立地為氫、鹵素、-ORo7 或-C1 -C4 烷基；或Rj 及Rk 連接在一起形成=O；且其中其餘變數如第十六至第四十七實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第四十九實施例中，提供根據如上所述之第十六至第四十八實施例中任一者之方法，其中Rj 及Rk 各自為氫；且其中其餘變數如第十六至第四十八實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第五十實施例中，提供根據如上所述之第十四至第四十九實施例中任一者之方法，其中Ra 及Rb 各自為氫；且其中其餘變數如第十四至第四十九實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第五十一實施例中，提供根據如上所述之第三十五至第五十實施例中任一者之方法，其中q為0或1；且其中其餘變數如第三十五至第五十實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第五十二實施例中，提供根據如上所述之第二十至第五十一實施例中任一者之方法，其中n為0或1；且其中其餘變數如第二十至第五十一實施例中之任一者中所定義。
在本發明之第五十三實施例中，提供根據如上所述之第一至第五十二實施例中任一者之方法，其中該化合物為選自表1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在本發明之第五十四實施例中，提供調節丙酮酸激酶M2 (PKM2)活性之方法，其包含使PKM2與有效量之如上文第一至第五十三實施例中之任一者中所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。
在本發明之第五十五實施例中，提供抑制表現丙酮酸激酶M2 (PKM2)之細胞增殖的方法，其包含使細胞與有效量之如上文第一至第五十三實施例中之任一者中所述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。
在本發明之第五十六實施例中，提供根據如上所述之第五十四及第五十五實施例中任一者之方法，其中該方法為離體方法。
在本發明之第五十七實施例中，提供根據如上所述之第五十四及第五十五實施例中任一者之方法，其中該方法為活體外方法。
在本發明之第五十八實施例中，提供根據第五十四至第五十七實施例中任一者之方法，其中該方法抑制PKM2活性。
在本發明之第五十九實施例中，提供根據第五十四至第五十七實施例中任一者之方法，其中該方法活化PKM2活性。
在本發明之第六十實施例中，提供根據第五十四至第五十九實施例中任一者之方法，其中PKM2在並非紅血球之細胞中表現。
在本發明之第六十一實施例中，提供根據第五十四至第六十實施例中任一者之方法，其中該細胞來源於或獲自罹患或易患與PKM2功能相關之疾病或病症的受試者。
在本發明之第六十二實施例中，提供根據第六十一實施例之方法，其中該疾病或病症與異常PKM2活性相關。
在本發明之第六十三實施例中，提供根據第六十一實施例之方法，其中該疾病或病症為癌症、肥胖症、糖尿病性疾病(例如糖尿病、糖尿病性腎病變(DN))、動脈粥樣硬化、再狹窄、冠狀動脈疾病(CAD)、布盧姆症候群(BS)、良性前列腺增生(BPH)或自體免疫疾病。
在本發明之第六十四實施例中，提供根據第六十三實施例之方法，其中該糖尿病性疾病為糖尿病性腎病變。
在本發明之第六十五實施例中，提供根據第五十五至第六十四實施例中任一者之方法，其中該細胞為過度表現PKM2之細胞。
在本發明之第六十六實施例中，提供根據第五十五至第六十五實施例中任一者之方法，其中該細胞為表現具有異常活性之PKM2的細胞。
在本發明之第六十七實施例中，提供根據第五十五至第六十六實施例中任一者之方法，其中該細胞為癌細胞、胰細胞、肝細胞、神經細胞或腎細胞。
在式(I)-(IX)、(I')-(V')之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的某些實施例中，R2 及Q各自獨立地為視情況經取代之5員或6員單環雜芳基。在式(I)-(IX)、(I')-(V')之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的某些實施例中，R2 及Q均為視情況經取代之5員或6員單環雜芳基；且L1 及L2 各自獨立地為視情況經取代之C1-4伸烷基。在某些實施例中，R2 及Q為相同的。在某些實施例中，R2 及Q為不同的。
在某些實施例中，本文所述之化合物可用作本文所述之方法及組合物中使用之PKM2活化劑，且藉由以下機制或特性中之一或多者起作用或具有以下機制或特性中之一或多者： a. 其為PKM2之異位活化劑； b. 其調節(例如穩定) FBP在PKM2結合袋中之結合； c. 其調節(例如促進) FBP自PKM2結合袋之釋放； d. 其為FBP之調節劑(例如促效劑)，例如類似物，例如以與FBP相比更低、大約相同或更高之親和力結合PKM2的促效劑； e. 其調節(例如促進)四聚體PKM2之溶解； f. 其調節(例如促進)四聚體PKM2之組裝； g. 其調節(例如穩定) PKM2之四聚體構形； h. 其調節(例如促進)含有磷酸酪胺酸之多肽與PKM2之結合； i. 其調節(例如促進)含有磷酸酪胺酸之多肽誘導FBP自PKM2釋放之能力，例如藉由誘導PKM2構形(例如在Lys 433之位置中)之改變，從而阻礙FBP之釋放； j. 調節PKM2進行影響酶活性之轉譯後修飾(例如在Cys358處之氧化或在Lys305上之乙醯化)之傾向。 k. 其結合於或改變Lys 433相對於FBP結合袋之位置； l. 其選擇性調節(例如活化) PKM2優於PK之至少一種其他同功異型物，例如其相對於PKR、PKM1或PKL中之一或多者對PKM2具有選擇性； m. 其對PKM2之親和力大於其對PK之至少一種其他同功異型物(例如PKR、PKM1或PKL)之親和力。
可測試本文所述之化合物活化PKM2之能力。為簡單起見，此等化合物之活化活性表示為表2中之AC50。在表2中，本文所述之化合物可具有野生型PKM2之AC50。「A」係指AC50小於0.300 μM；「B」係指AC50為0.301 μM至0.800 μM；且「C」係指AC50大於0.800 μM。表 1 . 作為 PKM2 調節劑之例示性化合物
Figure 02_image064
Figure 02_image066
Figure 02_image068
Figure 02_image070
Figure 02_image072
Figure 02_image074
Figure 02_image076
Figure 02_image078
Figure 02_image080
表 2 ： 例示性化合物對野生型 PKM2 之 AC50
Figure 107128431-A0304-0001
在某些實施例中，式(I)-(IX)、(I')-(V')之化合物係選自表1及實例中所列之化合物中之任一者。在某些實施例中，式(I)-(IX)、(I')-(V')之化合物具有以下任一者之式：
Figure 02_image082
Figure 02_image084
Figure 02_image086
Figure 02_image088
，其中Rna 、Rnc 、Ro2 及Ro6 如本文所定義，且Rox 為氫或氧保護基。在某些實施例中，Rna 為氮保護基(例如SEM或BOC)。在某些實施例中，Rnc 為氮保護基(例如SEM或BOC)。在某些實施例中，Ro2 為氧保護基(例如THP)。在某些實施例中，Ro6 為氧保護基(例如TBS)。在某些實施例中，Rox 為氧保護基(例如THP)。
本文所述之化合物可使用如實例中所闡述之各種合成技術製備。可用於合成本文所述之化合物的合成化學轉化及保護基方法(保護及去保護)為此項技術中已知的，且包括例如R. Larock,Comprehensive Organic Transformations , VCH Publishers (1989)；T.W. Greene及P.G.M. Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis , 第2版, John Wiley and Sons (1991)；L. Fieser及M. Fieser,Fieser and Fieser ' s Reagents for Organic Synthesis , John Wiley and Sons (1994)；及L. Paquette編,Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis , John Wiley and Sons (1995)及其後續版本中所述之彼等方法。
可用作PKM2野生型及/或突變型活化劑之某些活化劑化合物為表現出PKM2酶(野生型及/或突變型酶)在FBP不存在下之特異性及活化達到比在FBP存在下大10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、99或100%的水準的彼等活化劑化合物。
在一些實施例中，式(I )化合物可使用流程1中所示之方法製備。式S1之噻唑基醛與疊氮基乙酸乙酯在親核加成條件(例如鹼)下在適合溶劑(例如乙醇)中反應，得到式S2之中間物。式S2之羥基可轉化成離去基且進行消除，得到式S3。胺基之環化及後續官能化得到式S5之雙環化合物，其用甲硫醇鈉進行親核取代，隨後氧化，得到式S7。式S7在肼存在下進一步環化，隨後在鹼存在下用LG1 -CH2 -Q1 親核取代，得到式S9之中間物。式S9中之硫基可氧化成亞磺醯基或磺醯基，得到式S10或S11，其為進一步親核取代以產生通式S12之受質。如本文所用，X1 為如本文所定義之離去基。在某些實施例中，X1 為鹵素、烷磺醯氧基、芳烴磺醯氧基、重氮、烷基二氮烯、芳基二氮烯、烷基三氮烯、芳基三氮烯、硝基、硝酸烷基酯基、硝酸芳基酯基、磷酸烷基酯基、磷酸芳基酯基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳氧基羰基氧氨、烷基胺、芳基胺、羥基、烷氧基、芳氧基；LG1 為如本文所定義之離去基；Q1 為視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基；且Nu1 為如本文所定義之親核試劑。式S12化合物之Nu1 可藉由標準化學轉化進一步轉化成其他官能基。R1 如第一實施例中所定義。
流程 1
Figure 02_image090
流程 2
Figure 02_image092
在一些實施例中，式(I)化合物可使用流程2中所示之方法製備。與流程1類似，式S21可由式S13之噻唑醛來製備。式S21之鹵化產生式S22，其可與烷基金屬、烯基金屬、炔基金屬、芳基金屬、雜芳基金屬、雜環基金屬或環烷基金屬進行有機偶合反應，得到式S23化合物。如本文所用，X3 為鹵素；R1 如本發明之第一實施例中所定義；LG2 為如本文所定義之離去基；Q2 為視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基；M1 為金屬(例如Li、Na、K、Mg、Zn、Sn、B、Pd、Si、Cu等)，X4 為鹵素或烷基磺酸酯或芳基磺酸酯；Rr1 為視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基。在某些實施例中，有機偶合反應為根岸反應(Negishi reaction)；X3 為I；且M1 為Zn。
式S22及S23之化合物為在X3 及/或Rr1 位置處引入更多官能基之有用中間物(流程3)。在某些實施例中，式23-i之化合物可進一步氧化形成式S24。S24與適當親核試劑之親核加成產生S25之化合物。在另一個實施例中，式S22之化合物可與乙烯基金屬偶合以將乙烯基引入噻唑環。乙烯基氧化，隨後親核加成，得到式S28之化合物。如本文所用，Nu2 為親核試劑。
流程 3
Figure 02_image094
如本文所用，Rr2 為視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基。Nu1 及Q2 如流程2中所定義。
如本文所用，親核試劑為向親電子試劑提供電子對以形成與反應相關之化學鍵的化學物種。具有自由電子對或至少一個π鍵之所有分子或離子可充當親核試劑。例示性親核試劑包含至少一個具有親核官能性的基團，例如α碳(例如與羰基、磺醯基、亞磺醯基、芳基或雜芳基相鄰的碳)、硫醇基、羥基、一級胺基、二級胺基、鹵化物、氰化物、疊氮基、醇化物、有機金屬或無機鹼。
在一些實施例中，式(I )化合物可使用流程4中所示之方法製備。式S30用二級環胺親核取代得到式S31。化合物S32之有機偶合反應(例如鈴木偶合(Suzuki coupling)、Pd偶合等)提供式S33(i)-(iii)之化合物。另外，式S34之亞磺醯基可用胺基甲酸銨官能化，得到式S35之亞胺基-磺基肟。
流程 4
Figure 02_image096
如本文所用，
Figure 02_image098
表示具有氮作為環原子之環A。
如本文所用，
Figure 02_image100
表示在碳環原子上具有連接點之環B。
R1 如第一實施例中所定義。R35 、R36 及R37 之各實例獨立地為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜環基或視情況經取代之環烷基。
X4 為鹵素或-OTf。在價數允許時，M4 為若需要具有適當配體(有機或無機)之有機金屬。例示性M4 包括但不限於有機Li、Sn、B (例如
Figure 107128431-A0101-12-0030-1
酸及
Figure 107128431-A0101-12-0030-1
酸酯)、Zn、Mg、Si、Pd及Cu。
治療方法 在一個實施例中，提供用於治療如本文所述之疾病、病況或病症(例如治療)的方法，其包含投與化合物、化合物之醫藥學上可接受之鹽或包含本文所述之化合物(例如實例以及表1及圖1A-1C、2A-2C、3中之式(I)-(IX)、(I')-(V')之化合物)的醫藥組合物。
本文所述之化合物及組合物可投與例如活體外或離體培養之細胞，或例如活體內投與受試者，以治療及/或診斷多種病症，包括下文所述之彼等病症。
增生性疾病 在一些實施例中，提供治療增生性疾病之方法，其包含向受試者投與如本文所述之化合物、其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物。如此處所用，「增生性疾病」係指由於細胞增殖之異常生長或延伸而出現的疾病(Walker,Cambridge Dictionary of Biology ; Cambridge University Press: Cambridge, UK, 1990)。增生性疾病可能與以下相關：1)正常靜止細胞之病理性增殖；2)細胞自其正常位置之病理性遷移(例如贅生性細胞轉移)；3)蛋白水解酶諸如基質金屬蛋白酶(例如膠原酶、明膠酶及彈性蛋白酶)之病理性表現；或4)如增生性視網膜病變及腫瘤轉移中之病理性血管生成。例示性增生性疾病包括癌症(亦即「惡性贅瘤」)、良性贅瘤、血管生成、炎性疾病及自體免疫疾病。在某些實施例中，增生性疾病為癌症。在某些實施例中，增生性疾病為自體免疫疾病。
術語「贅瘤」及「腫瘤」在本文中可互換使用，且係指組織之異常腫塊，其中腫塊生長超越正常組織生長且與正常組織生長不協調。贅瘤或腫瘤可為「良性」或「惡性」，其視以下特徵而定：細胞分化程度(包括形態及功能)、生長速率、局部侵襲及轉移。「良性贅瘤」一般分化良好，具有比惡性贅瘤特徵性更慢的生長，且保持侷限於原發部位。另外，良性贅瘤不具有浸潤、侵襲或轉移至遠距離部位之能力。例示性良性贅瘤包括但不限於脂肪瘤、軟骨瘤、腺瘤、軟垂疣、老年性血管瘤、皮脂溢性角化症、雀斑及皮脂腺增生。在一些情況下，某些「良性」腫瘤後來可能會導致惡性贅瘤，其可能由腫瘤之贅生性細胞亞群中之其他遺傳變化引起，且此等腫瘤稱為「惡化前贅瘤」。例示性惡化前贅瘤為畸胎瘤。相反，「惡性贅瘤」一般分化不良(退行發育)且具有特徵性快速生長，伴隨著周圍組織的進行性浸潤、侵襲及破壞。此外，惡性贅瘤一般具有轉移至遠距離部位之能力。術語「轉移(metastasis)」、「轉移性(metastatic)」或「轉移(metastasize)」係指癌細胞自原發性或原始腫瘤擴散或遷移至另一個器官或組織，且通常可藉由具有原發性或原始腫瘤之組織類型而非繼發性(轉移性)腫瘤所位於之器官或組織之組織類型的「繼發性腫瘤」或「繼發性細胞腫塊」的存在來鑑別。舉例而言，已遷移至骨之前列腺癌稱為轉移性前列腺癌，且包括在骨組織中生長之癌性前列腺癌細胞。
術語「癌症」係指特徵在於出現不受控制地增殖且具有浸潤及破壞正常身體組織之能力的異常細胞的一類疾病。參見例如Stedman ' s Medical Dictionary , 第25版; Hensyl編; Williams & Wilkins: Philadelphia, 1990。例示性癌症包括實體腫瘤、軟組織腫瘤及其轉移。所揭示之方法亦可用於治療非實體癌症。例示性實體腫瘤包括各種器官系統之惡性腫瘤(例如肉瘤、腺癌及癌)，諸如肺、乳房、淋巴、胃腸道(例如結腸)及泌尿生殖道(例如腎、尿道上皮或睾丸腫瘤)、咽、前列腺及卵巢之彼等惡性腫瘤。例示性腺癌包括結腸直腸癌、腎細胞癌、肝癌、非小細胞肺癌及小腸癌。其他例示性癌症包括：成人急性淋巴母細胞白血病；兒童期急性淋巴母細胞白血病；成人急性骨髓白血病；腎上腺皮質癌；兒童期腎上腺皮質癌；AIDS相關淋巴瘤；AIDS相關惡性腫瘤；肛門癌；兒童期小腦星形細胞瘤；兒童期大腦星形細胞瘤；肝外膽管癌；膀胱癌；兒童期膀胱癌；骨癌、骨肉瘤/惡性纖維組織細胞瘤；兒童期腦幹神經膠質瘤；成人腦瘤；兒童期腦瘤，腦幹神經膠質瘤；兒童期腦瘤，小腦星形細胞瘤；兒童期腦瘤，大腦星形細胞瘤/惡性神經膠質瘤；兒童期腦瘤，室管膜瘤；兒童期腦瘤，神經管胚細胞瘤；兒童期腦瘤，幕上原始神經外胚層腫瘤；兒童期腦瘤，視覺通路及下丘腦神經膠質瘤；兒童期(其他)腦瘤；乳癌；乳癌及妊娠；兒童期乳癌；男性乳癌；兒童期支氣管腺瘤/類癌；兒童期類癌腫瘤；胃腸道類癌腫瘤；腎上腺皮質癌；胰島細胞癌；原發灶未知癌；原發性中樞神經系統淋巴瘤；兒童期小腦星形細胞瘤；兒童期大腦星形細胞瘤/惡性神經膠質瘤；子宮頸癌；兒童期癌症；慢性淋巴細胞白血病；慢性骨髓白血病；慢性骨髓增生病；肌腱鞘透明細胞肉瘤；結腸癌；兒童期結腸直腸癌；皮膚T細胞淋巴瘤；子宮內膜癌；兒童期室管膜瘤；卵巢上皮癌；食道癌；兒童期食道癌；尤文氏腫瘤家族(Ewing's Family of Tumors)；兒童期顱外生殖細胞腫瘤；性腺外生殖細胞腫瘤；肝外膽管癌；眼癌，眼內黑素瘤；眼癌，視網膜母細胞瘤；膽囊癌；胃癌；兒童期胃癌；胃腸道類癌腫瘤；兒童期顱外生殖細胞腫瘤；性腺外生殖細胞腫瘤；卵巢生殖細胞腫瘤；妊娠滋養細胞腫瘤；兒童期腦幹神經膠質瘤；兒童期視覺通路及下丘腦神經膠質瘤；毛細胞白血病；頭頸癌；成人(原發性)肝細胞(肝)癌；兒童期(原發性)肝細胞(肝)癌；成人霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's Lymphoma)；兒童期霍奇金氏淋巴瘤；妊娠期霍奇金氏淋巴瘤；下咽癌；兒童期下丘腦及視覺通路神經膠質瘤；眼內黑素瘤；胰島細胞癌(內分泌胰腺)；卡波西氏肉瘤(Kaposi's Sarcoma)；腎癌；喉癌；兒童期喉癌；成人急性淋巴母細胞白血病；兒童期急性淋巴母細胞白血病；成人急性骨髓白血病；兒童期急性骨髓白血病；慢性淋巴細胞白血病；慢性骨髓白血病；毛細胞白血病；唇及口腔癌；成人(原發性)肝癌；兒童期(原發性)肝癌；非小細胞肺癌；小細胞肺癌；成人急性淋巴母細胞白血病；兒童期急性淋巴母細胞白血病；慢性淋巴細胞白血病；助劑相關淋巴瘤；中樞神經系統(原發性)淋巴瘤；皮膚T細胞淋巴瘤；成人霍奇金氏淋巴瘤；兒童期霍奇金氏淋巴瘤；妊娠期霍奇金氏淋巴瘤；成人非霍奇金氏淋巴瘤；兒童期非霍奇金氏淋巴瘤；妊娠期非霍奇金氏淋巴瘤；原發性中樞神經系統淋巴瘤；瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血症；男性乳癌；成人惡性間皮瘤；兒童期惡性間皮瘤；惡性胸腺瘤；兒童期神經管胚細胞瘤；黑素瘤；眼內黑素瘤；梅克爾細胞癌(Merkel Cell Carcinoma)；惡性間皮瘤；原發灶不明轉移性鱗狀頸癌；兒童期多發性內分泌瘤症候群；多發性骨髓瘤/漿細胞瘤；蕈樣黴菌病；骨髓發育不良症候群；慢性骨髓性白血病；兒童期急性骨髓白血病；多發性骨髓瘤；慢性骨髓增生病；鼻腔及鼻竇癌；鼻咽癌；兒童期鼻咽癌；神經母細胞瘤；成人非霍奇金氏淋巴瘤；兒童期非霍奇金氏淋巴瘤；妊娠期非霍奇金氏淋巴瘤；非小細胞肺癌；兒童期口腔癌；口腔及唇癌；口咽癌；骨肉瘤/骨惡性纖維組織細胞瘤；兒童期卵巢癌；卵巢上皮癌；卵巢生殖細胞腫瘤；卵巢低惡性潛在腫瘤；胰臟癌；兒童期胰臟癌；胰島細胞胰臟癌；鼻副竇及鼻腔癌；甲狀旁腺癌；陰莖癌；嗜鉻細胞瘤；兒童期松果體及幕上原始神經外胚層腫瘤；垂體腫瘤；漿細胞瘤/多發性骨髓瘤；胸膜肺母細胞瘤；妊娠及乳癌；妊娠及霍奇金氏淋巴瘤；妊娠及非霍奇金氏淋巴瘤；原發性中樞神經系統淋巴瘤；成人原發性肝癌；兒童期原發性肝癌；前列腺癌；直腸癌；腎細胞(腎)癌；兒童期腎細胞癌；腎盂及輸尿管移行細胞癌；視網膜母細胞瘤；兒童期橫紋肌肉瘤；唾液腺癌；兒童期唾液腺癌；尤文氏腫瘤家族肉瘤；卡波西氏肉瘤；骨肉瘤/骨惡性纖維組織細胞瘤；兒童期橫紋肌肉瘤；成人軟組織肉瘤；兒童期軟組織肉瘤；塞紮里症候群(Sezary Syndrome)；皮膚癌；兒童期皮膚癌；皮膚癌(黑素瘤)；梅克爾細胞皮膚癌；小細胞肺癌；小腸癌；成人軟組織肉瘤；兒童期軟組織肉瘤；原發灶不明轉移性鱗狀頸癌；胃癌；兒童期胃癌；兒童期幕上原始神經外胚層腫瘤；皮膚T細胞淋巴瘤；睪丸癌；兒童期胸腺瘤；惡性胸腺瘤；甲狀腺癌；兒童期甲狀腺癌；腎盂及輸尿管移行細胞癌；妊娠滋養細胞腫瘤；原發灶未知的兒童期癌症；不常見兒童期癌症；輸尿管及腎盂移行細胞癌；尿道癌；子宮肉瘤；陰道癌；兒童期視覺通路及下丘腦神經膠質瘤；外陰癌；瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血症；及威爾姆斯氏腫瘤(Wilms' Tumor)。亦可根據本文所述之方法治療或預防前述癌症之轉移。
癌症組合療法 在一些實施例中，所提供之方法進一步包含投與一或多種額外癌症治療。例示性癌症治療包括例如：化學療法、靶向療法(諸如抗體療法)、免疫療法及激素療法。此等治療中之每一者的實例提供於下。
在一些實施例中，本文所述之化合物與一或多種化學療法一起投與。化學療法為用可破壞癌細胞之藥物治療癌症。與靶向療法相比，「化學療法」通常係指大體上影響快速分裂細胞之細胞毒性藥物。化學療法藥物以各種可能的方式干擾細胞分裂，例如干擾DNA複製或新形成之染色體分離。大多數形式的化學療法靶向所有快速分裂細胞且對癌細胞不具有特異性，儘管一定程度之特異性可能來自許多癌細胞不能修復DNA損傷，而正常細胞一般可以。
用於癌症療法之化學治療劑的實例包括例如抗代謝物(例如葉酸、嘌呤及嘧啶衍生物)及烷基化劑(例如氮芥、亞硝基脲、鉑、磺酸烷基酯、肼、三氮烯、氮丙啶、紡錘體毒素、細胞毒性劑、拓樸異構酶抑制劑及其他)。例示性藥劑包括阿柔比星(Aclarubicin)、放線菌素(Actinomycin)、阿里特汀(Alitretinon)、六甲蜜胺(Altretamine)、胺基喋呤(Aminopterin)、胺基乙醯丙酸(Aminolevulinic acid)、胺柔比星(Amrubicin)、安吖啶(Amsacrine)、阿那格雷(Anagrelide)、三氧化二砷、天冬醯胺酶、阿曲生坦(Atrasentan)、貝洛替康(Belotecan)、貝瑟羅汀(Bexarotene)、苯達莫司汀(endamustine)、博萊黴素(Bleomycin)、硼替佐米(Bortezomib)、白消安(Busulfan)、喜樹鹼(Camptothecin)、卡培他濱(Capecitabine)、卡鉑(Carboplatin)、卡波醌(Carboquone)、卡莫氟(Carmofur)、卡莫司汀(Carmustine)、塞內昔布(Celecoxib)、苯丁酸氮芥(Chlorambucil)、氮芥(Chlormethine)、順鉑(Cisplatin)、克拉屈濱(Cladribine)、氯法拉濱(Clofarabine)、克立他酶(Crisantaspase)、環磷醯胺(Cyclophosphamide)、阿糖胞苷(Cytarabine)、達卡巴嗪(Dacarbazine)、更生黴素(Dactinomycin)、道諾黴素(Daunorubicin)、地西他濱(Decitabine)、地美可辛(Demecolcine)、多西他賽(Docetaxel)、多柔比星(Doxorubicin)、乙丙昔羅(Efaproxiral)、艾利莫耳(Elesclomol)、依沙蘆星(Elsamitrucin)、依諾他濱(Enocitabine)、表柔比星(Epirubicin)、雌莫司汀(Estramustine)、依託格魯(Etoglucid)、依託泊苷(Etoposide)、氟尿苷(Floxuridine)、氟達拉濱(Fludarabine)、氟尿嘧啶(Fluorouracil，5FU)、福莫司汀(Fotemustine)、吉西他濱(Gemcitabine)、Gliadel植入物、羥基脲(Hydroxycarbamide)、羥基脲(Hydroxyurea)、伊達比星(Idarubicin)、異環磷醯胺(Ifosfamide)、伊立替康(Irinotecan)、伊洛福芬(Irofulven)、伊沙匹隆(Ixabepilone)、拉洛他賽(Larotaxel)、甲醯四氫葉酸(Leucovorin)、脂質體多柔比星(Liposomal doxorubicin)、脂質體道諾黴素(Liposomal daunorubicin)、氯尼達明(Lonidamine)、洛莫司汀(Lomustine)、硫蒽酮(Lucanthone)、甘露舒凡(Mannosulfan)、馬索羅酚(Masoprocol)、美法侖(Melphalan)、巰基嘌呤(Mercaptopurine)、美司鈉(Mesna)、甲胺喋呤(Methotrexate)、胺基乙醯丙酸甲酯、二溴甘露醇(Mitobronitol)、米托胍腙(Mitoguazone)、米托坦(Mitotane)、絲裂黴素(Mitomycin)、米托蒽醌(Mitoxantrone)、奈達鉑(Nedaplatin)、尼莫司汀(Nimustine)、奧利默森(Oblimersen)、奧馬他辛(Omacetaxine)、奧他賽(Ortataxel)、奧沙利鉑(Oxaliplatin)、太平洋紫杉醇(Paclitaxel)、培門冬酶(Pegaspargase)、培美曲塞(Pemetrexed)、噴司他丁(Pentostatin)、吡柔比星(Pirarubicin)、匹蒽醌(Pixantrone)、普卡黴素(Plicamycin)、卟吩姆鈉(Porfimer sodium)、潑尼氮芥(Prednimustine)、丙卡巴肼(Procarbazine)、雷替曲塞(Raltitrexed)、雷莫司汀(Ranimustine)、盧比替康(Rubitecan)、沙帕他濱(Sapacitabine)、司莫司汀(Semustine)、塞西馬集(Sitimagene ceradenovec)、沙鉑(Satraplatin)、鏈佐星(Streptozocin)、他拉泊芬(Talaporfin)、喃氟啶-尿嘧啶(Tegafur-uracil)、替莫泊芬(Temoporfin)、替莫唑胺(Temozolomide)、替尼泊苷(Teniposide)、替司他賽(Tesetaxel)、睾內酯(Testolactone)、四硝酸酯(Tetranitrate)、噻替派(Thiotepa)、噻唑呋林(Tiazofurin)、硫鳥嘌呤(Tioguanine)、替吡法尼(Tipifarnib)、拓朴替康(Topotecan)、曲貝替定(Trabectedin)、三亞胺醌(Triaziquone)、曲他胺(Triethylenemelamine)、特瑞鉑(Triplatin)、維甲酸(Tretinoin)、曲奧舒凡(Treosulfan)、曲磷胺(Trofosfamide)、烏拉莫司汀(Uramustine)、伐柔比星(Valrubicin)、維替泊芬(Verteporfin)、長春花鹼(Vinblastine)、長春新鹼(Vincristine)、長春地辛(Vindesine)、長春氟寧(Vinflunine)、長春瑞賓(Vinorelbine)、伏立諾他(Vorinostat)、左柔比星(Zorubicin)及本文所述之其他細胞抑制劑或細胞毒性劑。
在一些實施例中，本文所述之化合物與一或多種靶向療法一起投與。靶向療法構成對癌細胞之失調蛋白質具有特異性之藥劑的使用。小分子靶向療法藥物一般為癌細胞內突變、過度表現或其他關鍵蛋白質上之酶結構域的抑制劑。顯著實例為酪胺酸激酶抑制劑，諸如阿西替尼(Axitinib)、伯舒替尼(Bosutinib)、西地尼布(Cediranib)、達沙替尼(dasatinib)、埃羅替尼(erlotinib)、伊馬替尼(imatinib)、吉非替尼(gefitinib)、拉帕替尼(lapatinib)、來他替尼(Lestaurtinib)、尼羅替尼(Nilotinib)、司馬沙尼(Semaxanib)、索拉非尼(Sorafenib)、舒尼替尼(Sunitinib)、及凡德他尼(Vandetanib)；以及週期蛋白依賴型激酶抑制劑，諸如阿昔迪布(Alvocidib)及塞利希布(Seliciclib)。單株抗體療法為另一種策略，其中治療劑為特異性結合於癌細胞表面上之蛋白質的抗體。實例包括通常用於乳癌之抗HER2/neu抗體曲妥珠單抗(trastuzumab，HERCEPTIN®)，以及通常用於多種B細胞惡性腫瘤之抗CD20抗體利妥昔單抗(rituximab)及托西莫單抗(Tositumomab)。其他例示性抗體包括西妥昔單抗(Cetuximab)、帕尼單抗(Panitumumab)、曲妥珠單抗(Trastuzumab)、阿侖單抗(Alemtuzumab)、貝伐單抗(Bevacizumab)、依決洛單抗(Edrecolomab)及吉妥珠單抗(Gemtuzumab)。例示性融合蛋白包括阿柏西普(Aflibercept)及地尼白介素(Denileukin diftitox)。在一些實施例中，靶向療法可與本文所述之化合物組合使用。
靶向療法亦可涉及小肽作為「導向裝置」，其可結合於細胞表面受體或影響腫瘤周圍的細胞外基質。若核素在細胞附近衰變，則附著於此等肽(例如RGD)之放射性核素最終殺死癌細胞。此類療法之實例包括BEXXAR®。
在一些實施例中，本文所述之化合物與一或多種免疫療法一起投與。癌症免疫療法係指經設計以誘導患者自身免疫系統對抗腫瘤之一系列不同的治療策略。產生針對腫瘤之免疫反應的現代方法包括用於淺表膀胱癌之囊泡內BCG免疫療法，以及使用干擾素及其他細胞介素在腎細胞癌及黑素瘤患者中誘導免疫反應。
同種異體造血幹細胞移植可視為免疫療法之一種形式，因為供體之免疫細胞將通常以移植物抗腫瘤效應攻擊腫瘤。在一些實施例中，免疫療法藥劑可與本文所述之化合物組合使用。
在一些實施例中，本文所述之化合物與一或多種激素療法一起投與。藉由提供或阻斷某些激素可抑制一些癌症之生長。激素敏感性腫瘤之常見實例包括某些類型之乳癌及前列腺癌。移除或阻斷雌激素或睪固酮通常為一種重要的額外治療。在某些癌症中，投與激素促效劑(諸如孕激素)可為治療上有益的。在一些實施例中，激素療法藥劑可與本文所述之化合物組合使用。
肥胖症及脂肪病症 在一些實施例中，提供治療或預防人類受試者(例如兒童或成人)之肥胖症的方法，其係藉由向人類受試者投與有效量之如本文所述之化合物、其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物。「肥胖症」係指受試者之身體質量指數大於或等於30的病況。本文所述之許多化合物可用於治療或預防超重病況。「超重」係指受試者之身體質量指數大於或等於25.0的病況。身體質量指數(BMI)及其他定義係根據「NIH Clinical Guidelines on the Identification and Evaluation, and Treatment of Overweight and Obesity in Adults」(1998)。化合物可以有效改變受試者體重例如至少2、5、7、10、12、15、20、25、30、25、40、45、50或55%之量進行治療。化合物可以有效降低受試者之身體質量指數例如至小於30、28、27、25、22、20或18之量進行治療。化合物可用於治療或預防異常或不當的體重增加、代謝速率或脂肪沈積，例如厭食症、貪食症、肥胖症、糖尿病或高脂質血症(例如甘油三酯升高及/或膽固醇升高)，以及脂肪或脂質代謝病症。
可投與本文所述之化合物或組合物以治療與普拉德-威利症候群(Prader-Willi Syndrome，PWS)相關之肥胖症。PWS為與肥胖症相關之遺傳病症(例如病態肥胖)。
本文所述之化合物或組合物可用於降低體脂，預防體脂增加，降低膽固醇(例如總膽固醇及/或總膽固醇與HDL膽固醇之比率)，及/或降低患有PWS相關肥胖症之個體的食慾，及/或減少共患病，諸如糖尿病、心血管疾病及中風。
高血糖症 高葡萄糖水準誘導葡萄糖代謝途徑中之代謝異常且誘導粒線體功能障礙。此亦過度產生反應性氧物種(ROS)。細胞內葡萄糖升高導致毒性葡萄糖代謝物山梨糖醇、甲基乙二醛(MG)及二醯基甘油(DAG)之積累，其已提出造成微血管併發症，例如DN。發現小分子PKM2活化劑逆轉高血糖症誘導之毒性葡萄糖代謝物升高及粒線體功能障礙(Nat Med. 2017, 23(6): 753-762；美國專利第9921221號)。
在某些實施例中，本文提供治療受試者之高血糖症的方法，其包含投與治療有效量之化合物、其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物。
在某些實施例中，本文提供治療受試者之糖尿病性疾病的方法，其包含投與治療有效量之化合物、其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物。如本文所用之「糖尿病性疾病」係指糖尿病及前期糖尿病以及糖尿病的影響。糖尿病係指個人因為身體不能產生足夠的胰島素或因為細胞不對產生的胰島素起反應而具有高血糖的一組代謝疾病。此高血糖產生多尿(尿頻)、煩渴(口渴增加)及多食(饑餓感增加)的典型症狀。存在數種類型之糖尿病。I型糖尿病由身體無法產生胰島素引起，且目前需要個人注射胰島素或佩戴胰島素泵。II型糖尿病由胰島素抗性引起，亦即細胞無法恰當使用胰島素之病況，有時與絕對胰島素缺乏相結合。當沒有先前診斷為糖尿病之孕婦出現高血糖水準時，就會發生妊娠糖尿病。其他形式之糖尿病包括先天性糖尿病，其歸因於胰島素分泌之遺傳缺陷；囊腫性纖維化相關之糖尿病；由高劑量糖皮質激素誘導之類固醇糖尿病；及數種形式之單基因糖尿病，例如青年成熟期發病型糖尿病(例如MODY 1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)。前期糖尿病表示當個人血糖水準高於正常但不足以診斷糖尿病時發生的病況。所有形式之糖尿病均增加長期併發症之風險。此等併發症通常在多年後出現，但可能為在此之前未接受診斷之彼等患者的首發症狀。主要的長期併發症與血管損傷有關。例示性糖尿病影響包括心血管疾病；大血管疾病，諸如缺血性心臟病(心絞痛、心肌梗塞)、中風及外周血管疾病；微血管併發症(例如小血管損傷)；糖尿病性視網膜病變(亦即糖尿病對眼睛視網膜中之血管形成的影響)；糖尿病性腎病變(亦即糖尿病對腎臟的影響)；糖尿病性神經病變(例如糖尿病對神經系統的影響，最常引起腳部麻木、刺痛及疼痛以及增加因感覺改變所致的皮膚損傷的風險)；糖尿病性足潰瘍及症候群X。在某些實施例中，「糖尿病性疾病」包括選自高血糖症、高胰島素血症、糖尿病、胰島素抗性、葡萄糖代謝受損、葡萄糖耐量異常(IGT)之病況、空腹血漿葡萄糖受損之病況、糖尿病性視網膜病變、糖尿病性腎病變、腎小球硬化症、糖尿病性神經病變及症候群X中之一或多者。
在某些實施例中，本文所述之化合物或組合物可用於降低受試者之反應性氧物種(ROS)及/或葡萄糖代謝物(例如山梨糖醇、甲基乙二醛(MG)及二醯基甘油(DAG))中之至少一者。
在某些實施例中，本文所述之化合物或組合物可用於治療微血管併發症。
在某些實施例中，本文所述之化合物或組合物可用於治療DN。在某些實施例中，DN之治療可包括減輕與DN相關之任何症狀，包括但不限於食慾改變、睡眠改變、血清中之蛋白質、虛弱及/或噁心。
在某些實施例中，該方法進一步包含向受試者投與治療有效量之一或多種輔助藥劑，其增加DN保護因子中之一或多者的水準或活性。例示性DN保護因子包括但不限於SOD1——超氧化歧化酶；TPI1——磷酸丙糖異構酶同功異型物2；SORD——山梨糖醇去氫酶；ALDOA——醛縮酶A，果糖二磷酸；GAPDH——甘油醛-3-磷酸去氫酶；PKM——丙酮酸激酶同功酶M1/M2；ENO1——α-烯醇酶；FGB——纖維蛋白原β鏈；SELENBP1——硒結合蛋白1；PEBP1——磷脂醯乙醇胺結合蛋白1；CRYL1——λ晶狀體球蛋白同源物(美國專利第9921221號，其以全文引用的方式併入)。輔助藥劑可增加保護因子之水準或活性或降低風險因子之水準或活性至少50%、100% (1倍)、1½倍、2倍、3倍、4倍、5倍、10倍、15倍、20倍或更多。在某些實施例中，所提供之方法包含使保護因子之水準或活性基本上達到其在受保護以避免罹患微血管併發症之受試者中的水準或活性。「基本上在其水準內」係指在對照值之小於5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%內。輔助藥劑可為小分子、包含保護因子之蛋白質或其生物活性變體(例如片段)、或編碼包含保護因子之蛋白質或其生物活性變體(例如片段)的核酸。保護因子之蛋白質的生物活性變體亦包括全長未成熟及成熟形式或其片段，其包含與天然存在之序列或其片段由於至多1、2、3、4、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50或100個胺基酸缺失、添加或取代(諸如保守胺基酸取代)而不同的胺基酸序列。DN保護因子之蛋白質的生物活性變體亦可包括與全長成熟或前體人類PEBP1蛋白(或在本說明書中鑑別之其他生物標記物)或其片段至少70%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%一致的變體。
在一些實施例中，所提供之方法進一步包含選擇受試者進行治療。舉例而言，若受試者患有DN或處於罹患DN之風險下，則可選擇該受試者，例如患有糖尿病(例如1型或2型糖尿病)之受試者；或前期糖尿病受試者，例如患有代謝症候群、胰島素抗性、高血糖症、高脂質血症之受試者；或超重或肥胖(例如BMI≥25)之受試者。在一些情況下，若受試者患有1型及/或2型糖尿病或處於罹患1型及/或2型糖尿病之風險下，則可選擇該受試者。在一些情況下，若受試者正在服用或將服用胰島素例如以治療糖尿病，則可選擇該受試者。
心血管疾病為慢性發炎性病況。增加的葡萄糖攝取及糖酵解通量促進粒線體中之反應性氧物種。ROS促進PKM2之二聚化且使其能夠核易位。核PKM2充當蛋白激酶且促進IL-6及IL-1β產生。此導致全身及組織炎症。發現減少糖酵解及實施PKM2四聚化可糾正冠狀動脈疾病(CAD)巨噬細胞之促炎性表型(J. Exp. Med. 2016, 213(3): 337-354)。
在某些實施例中，本文提供治療受試者之心血管疾病的方法，其包含投與治療有效量之化合物、其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物。本文所述之化合物或組合物可降低受試者之血漿葡萄糖水準。如本申請中所定義之「心血管疾病」包含但不限於高血壓、充血性心臟衰竭、糖尿病、腎小球硬化症、慢性腎衰竭、冠心病、心絞痛、心肌梗塞、中風、血管再狹窄內皮細胞功能不良、血管順應性受損及充血性心臟衰竭。在某些實施例中，心血管疾病為冠狀動脈疾病(CAD)。在某些實施例中，本文所述之化合物或組合物可用於降低受試者粒線體中之反應性氧物種(ROS)
在某些實施例中，本文提供治療受試者之自體免疫疾病的方法，其包含投與治療性有效量之化合物、其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物。已發現PKM2之活化減弱LPS誘導之促炎性M1巨噬細胞表型，同時促進M2巨噬細胞典型的性狀。另外，已發現藉由TEPP-46活體內活化PKM2抑制LPS及IL-1β產生，同時促進IL-10產生。(Cell Metab. 2015, 21(1): 65-80) 因此，PKM2活化劑可用於藉由促進IL-1β及/或IL-10產生來治療自體免疫疾病。
「自體免疫疾病」係指由受試者身體對通常存在於體內之物質及組織的不當免疫反應引起的疾病。例示性自體免疫疾病包括但不限於絲球體腎炎、古巴士德氏症候群(Goodpasture's syndrome)、壞死性血管炎、淋巴腺炎、結節性動脈周圍炎、全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、牛皮癬性關節炎、全身性紅斑狼瘡、牛皮癬、潰瘍性結腸炎、系統性硬化症、皮肌炎/多發性肌炎、抗磷脂抗體症候群、硬皮病、尋常天疱瘡、ANCA相關血管炎(例如韋格納氏肉芽腫病(Wegener's granulomatosis)、顯微鏡下多血管炎)、葡萄膜炎、休格連氏症候群(Sjogren's syndrome)、克羅恩氏病(Crohn's disease)、萊特爾氏症候群(Reiter's syndrome)、僵直性脊椎炎、萊姆病(Lyme disease)、格－巴二氏症候群(Guillain-Barré syndrome)、橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto's thyroiditis)及心肌症。
組合物及投藥途徑 本文描述之組合物包括本文描述之化合物(例如本文所述之化合物)以及額外治療劑(若存在)，其量能有效實現疾病或疾病症狀(包括本文所述之彼等疾病或疾病症狀)的調節。
術語「醫藥學上可接受之載劑或佐劑」係指可與本文提供之化合物一起投與患者，且當以足以遞送治療量之化合物的劑量投與時，不破壞化合物之藥理學活性且無毒的載劑或佐劑。
可用於本文提供之醫藥組合物中的醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑包括但不限於離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、自乳化藥物遞送系統(SEDDS) (諸如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)、用於醫藥劑型中之界面活性劑(諸如Tweens或其他類似聚合物遞送基質)、血清蛋白(諸如人類血清白蛋白)、緩衝物質(諸如磷酸鹽)、甘胺酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸之偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質(諸如硫酸魚精蛋白)、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態二氧化矽、三矽酸鎂、聚乙烯吡咯啶酮、基於纖維素之物質、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇及羊毛脂。環糊精(諸如α-環糊精、β-環糊精及γ-環糊精)或經化學改質之衍生物(諸如羥烷基環糊精，包括2-及3-羥丙基-β-環糊精)或其他溶解的衍生物亦可有利地用於增強本文所述式之化合物的遞送。
本文提供之醫藥組合物可經口、非經腸、藉由吸入噴霧、局部、經直腸、經鼻、經頰、經陰道或經由植入式貯器投與，較佳藉由經口投與或藉由注射投與。本文提供之醫藥組合物可含有任何習知無毒的醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑。在一些情況下，可用醫藥學上可接受之酸、鹼或緩衝劑調節調配物之pH，以增強調配之化合物或其遞送形式的穩定性。如本文所用之術語非經腸包括皮下、皮內、靜脈內、肌肉內、關節內、動脈內、滑膜內、胸骨內、鞘內、病灶內及顱內注射或輸注技術。
本文提供之醫藥組合物可以任何經口可接受之劑型經口投與，包括但不限於膠囊、錠劑、乳液及水性懸浮液、分散液及溶液。在用於口服使用之錠劑的情況下，常用載劑包括乳糖及玉米澱粉。通常亦添加潤滑劑，諸如硬脂酸鎂。對於以膠囊形式經口投與，有用的稀釋劑包括乳糖及乾燥玉米澱粉。當經口投與水性懸浮液及/或乳液時，活性成分可懸浮或溶解於油相中，與乳化劑及/或懸浮劑組合。若需要，可添加某些甜味劑及/或調味劑及/或著色劑。
當本文提供之組合物包含本文所述式之化合物與一或多種額外治療劑或預防劑之組合時，化合物及額外藥劑應以通常在單一療法方案中投與之劑量的約1至100%且更佳約5至95%的劑量水準存在。額外藥劑可作為多劑量方案之一部分，與本文提供之化合物分開投與。或者，彼等藥劑可作為單一劑型之一部分，與本文提供之化合物一起混合在單一組合物中。
本文所述之化合物可例如藉由注射、靜脈內、動脈內、真皮下、腹膜內、肌肉內或皮下；或經口、經頰、經鼻、經黏膜、局部、以眼用製劑形式或藉由吸入投與，劑量範圍介於約0.5至約100 mg/kg體重，或者劑量為每4至120小時一劑1 mg至1000 mg，或根據特定藥物之要求。本文之方法涵蓋投與有效量之化合物或化合物組合物以實現所需或所述之效應。通常，本文提供之醫藥組合物將每天投與約1至約6次或者以連續輸注形式投與。此類投藥可用作慢性或急性療法。可與載劑材料組合產生單一劑型之活性成分之量將視所治療之主體及特定投藥模式而變化。典型的製劑將含有約5%至約95%活性化合物(w/w)。或者，此類製劑含有約20%至約80%活性化合物。
實驗 縮寫表：
Figure 107128431-A0304-0002
通用實驗 在以下實例中，化學試劑購自商業來源(諸如Alfa、Acros、Sigma Aldrich、TCI及Shanghai Chemical Reagent Company)，且未經進一步純化即使用。急驟層析在Ez Purifier III上經由具有200-300目矽膠粒子之管柱進行。分析型及製備型薄層層析盤(TLC)為HSGF 254 (0.15-0.2 mm厚，Shanghai Anbang Company, China)。使用Brucker AMX-300或AMX-400 NMR (Brucker, Switzerland)記錄核磁共振(NMR)譜。以來自Waters LCT TOF質譜儀(Waters, USA)之百萬分率(ppm，δ) etero(ESI)報告化學位移。在Agilent 1200液相層析(Agilent, USA，管柱：Ultimate 4.6 m × 50 mm，5 M，移動相A：0.1%甲酸+水；移動相B：乙腈)上記錄HPLC層析。在Initiator 2.5微波合成儀(Biotage, Sweden)上進行微波反應。
本文所述實驗中使用的HPLC條件如下： 方法 1 ： 儀器：Shimadzu LC-2010AHT 管柱：YMC-Triart C18, 50 × 4.6 mm, 5 mm 移動相： 溶劑A：H2 O/CH3 OH/TFA = 90/10/0.1， 溶劑B：H2 O/CH3 OH/TFA = 90/10/0.1 流速：2.5 mL/min 管柱溫度：35℃ 波長：220 nm/254 nm 方法 2 ： 儀器：Shimadzu LC-2010AHT 管柱：YMC-Triart C18, 50 × 4.6 mm, 5 mm 移動相： 溶劑A：H2 O/CH3 OH/TFA = 90/10/0.1， 溶劑B：H2 O/CH3 OH/TFA = 90/10/0.1 流速：2.5 mL/min 管柱溫度：35℃ 波長：220 nm/254 nm 本文所述實驗中使用的製備型HPLC條件如下： 儀器：Waters 2545B/2767 管柱：YMC-Triart C18, 50 × 4.6 mm, 5 mm 移動相： 溶劑A：H2 O (01.% FA)， 溶劑B：CH3 OH或CH3 CN 流速：20 mL/min 管柱溫度：35℃ 波長：220 nm/254 nm
實例 1. 用流程E1製備化合物E1-vii流程 E1
Figure 02_image102
其中Re1 為視情況經取代之烷基(例如C1 - 3 烷基)；Q如本發明之第一至第二十六實施例中之任一者中所定義；Q'為經進一步官能化之Q，且X為離去基(例如鹵素，諸如Br或I；OMs；或OTs)。噻唑5-甲醛E1-i與2-疊氮基乙酸酯進行縮合，得到式E1-ii之化合物。化合物E1-ii在加熱的鄰二甲苯中進行環化，得到E1-iii之雙環系統，接著胺基甲基化且隨後氧化，得到化合物E1-iv。化合物E1-iv與肼反應，隨後環化，得到化合物E1-v。化合物E1-v可與諸如X-CH2 -Q之親核試劑反應，得到E1-vi，其可進一步官能化為具有Q'之E1-vii。
實例 1A. 合成6-(3-甲氧基苯甲基)-2,4-二甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image104
步驟 A. (Z)-2- 疊氮基 -3-(2- 甲基噻唑 -5- 基 ) 丙烯酸乙酯 . 在約-10℃與約-5℃之間，向NaOEt (803 mg，11.79 mmol)於EtOH (10 mL)中之溶液中逐滴添加2-甲基噻唑-5-甲醛(500 mg，3.93mmol)及2-疊氮基乙酸乙酯(1.53 g，11.79 mmol)於無水EtOH (3 mL)中之溶液。當溫度維持在0℃以下時，反應混合物攪拌約1小時，隨後升溫至室溫且再攪拌2小時。將所得混合物在0℃下倒入飽和NH4 Cl水溶液(50 mL)中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到所需產物(500 mg)，其未經任何純化即直接用於下一步驟中。LCMS: m/z 239 (M+H)+ 。
步驟 B. 2- 甲基 -4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 . (Z)-2-疊氮基-3-(2-甲基噻唑-5-基)丙烯酸乙酯(500 mg，2.1 mmol)於鄰二甲苯(5 mL)中之混合物在140℃下攪拌2小時，隨後冷卻至室溫，且接著藉由矽膠管柱層析(溶離劑：戊烷/EtOAc = 6/1直接純化，得到所需產物(220 mg，49.8%產率)。LCMS: m/z 211(M+H)+ 。
步驟 C. 2,4- 二甲基 -4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 . 在0℃下，向2-甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(160 mg，0.76 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加NaH (36.5 mg，1.52 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌0.5小時，隨後添加CH3 I (47 μL，0.76 mmol)。所得混合物在室溫下攪拌0.5小時，隨後在0℃下倒入飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：戊烷/乙酸乙酯= 6/1)純化殘餘物，得到所需產物(124 mg，72.6%產率)。LCMS: m/z 225 (M+H)+ 。
步驟 D. 6- 甲醯基 -2,4- 二甲基 -4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 . 在0℃下，向2,4-二甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(100 mg，0.446 mmol)於DMF (1 mL))中之混合物中添加POCl3 (122.5 μL，1.338 mmol)。反應混合物在100℃下攪拌2小時，隨後在0℃下倒入飽和NaHCO3 水溶液中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：戊烷/乙酸乙酯= 5/1)純化殘餘物，得到所需產物(57 mg，50.7%產率)。LCMS: m/z 253 (M+H)+ 。
步驟 E. 2,4- 二甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向6-甲醯基-2,4-二甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(57 mg，0.226 mmol)於2-乙氧基乙醇(2 mL)中之混合物中添加N2 H4 .H2 O (53.7 μL，1.130 mmol)。反應混合物在100℃下攪拌1小時，隨後倒入H2 O中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：戊烷/乙酸乙酯= 5/1)純化殘餘物，得到所需產物(49 mg，98.4%產率)。LCMS: m/z 221 (M+H)+ 。
步驟 F. 6-(3- 甲氧基苯甲基 )-2,4- 二甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 在0℃下，向2,4-二甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(49 mg，0.223mmol)於DMF (1 mL)中之混合物中添加t-BuOK (50.8 mg，0.454 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌0.5小時，隨後添加1-(氯甲基)-3-甲氧基苯(34.9 mg，0.223 mmol)。所得混合物在室溫下攪拌1小時，隨後在0℃下倒入飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：戊烷/乙酸乙酯= 3/1)純化殘餘物，得到所需產物。LCMS: m/z 341 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.56 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.92 - 6.72 (m, 3H), 5.32 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 2.85 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0003
實例 1B. 合成1-(3-((2,4-二甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)苯基)脲
Figure 02_image162
步驟 A. 2,4- 二甲基 -6-(3- 硝基苯甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并 [2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.45 mmol)於DMF (5 mL)中之混合物中添加1-(溴甲基)-3-硝基苯(194 mg，0.9 mmol)及t-BuOK (76 mg，0.68 mmol)。將反應物在室溫下攪拌1小時，隨後倒入水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(100 mg，62.5%產率)。LCMS: m/z 356 (M+H)+ 。
步驟 B. 6-(3- 胺基苯甲基 )-2,4- 二甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在N2 下，向2,4-二甲基-6-(3-硝基苯甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.28 mmol)於MeOH/THF (10 mL/10 mL)中之混合物中添加Pd/C (10%，50 mg)。將反應混合物在40℃下在H2 下攪拌12小時，隨後經由矽藻土過濾。減壓濃縮濾液且藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需化合物(80 mg，88%產率)。LCMS: m/z 326 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.54 (s, 1H), 6.94 (t,, 1H), 6.57 - 6.32 (m, 3H), 5.19 (s, 2H), 5.04 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 2.85 (s, 3H)。
步驟 C. 1-(3-((2,4- 二甲基 -5- 側氧基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 苯基 ) 脲 . 向6-(3-胺基苯甲基)-2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(65 mg，0.2 mmol)於HOAc (2 mL)中之混合物中添加KOCN (160 mg，於HOAc:H2 O=2 mL:4 mL中)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，隨後倒入飽和NaHCO3 水溶液中且用EtOAc萃取。減壓濃縮有機層。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需化合物(4 mg，5%產率)。LCMS: m/z 369 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.60-8.50 (m, 2H), 7.39 (d, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.16 (t, 1H), 6.85 (d, 1H), 5.78 (s, 2H), 5.28 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 2.86 (s, 3H)。
實例 1C. 合成2,4-二甲基-6-(3-(甲胺基)苯甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image164
步驟 A. (3-((2,4- 二甲基 -5- 側氧基 -4,5- 二氫 -6H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6- 基 ) 甲基 ) 苯基 ) 胺基甲酸第三丁酯 向6-(3-胺基苯甲基)-2,4-二甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(90 mg，0.28 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之混合物中添加Boc2 O (73 mg，0.33 mmol)。將反應混合物在回流下攪拌隔夜，隨後減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 3/1)純化殘餘物，得到所需產物(90 mg，76.3%產率)。LCMS: m/z 426 (M+H)+ 。
步驟 B. (3-((2,4- 二甲基 -5- 側氧基 -4,5- 二氫 -6H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6- 基 ) 甲基 ) 苯基 )( 甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯 . 在0℃下，向(3-((2,4-二甲基-5-側氧基-4,5-二氫-6H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6-基)甲基)苯基)胺基甲酸第三丁酯(90 mg，0.21 mmol)於無水DMF (5 mL)中之混合物中添加NaH (13 mg，0.32 mmol，60%wt)。將混合物在0℃下攪拌1小時，隨後逐滴添加MeI。將所得混合物在0-5℃下攪拌3小時，隨後倒入冷的飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(70 mg，75.2%產率)。LCMS: m/z 440 (M+H)+ 。
步驟 C. 2,4- 二甲基 -6-(3-( 甲胺基 ) 苯甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向(3-((2,4-二甲基-5-側氧基-4,5-二氫-6H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪- 6-基)甲基)苯基)(甲基)胺基甲酸第三丁酯(90 mg，0.21 mmol)於DCM (3 mL)中之混合物中添加TFA (1 mL)。將混合物在室溫下攪拌2小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(25 mg，46.4%產率)。LCMS: m/z 340 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.54 (s, 1H), 7.12 (t, 1H), 6.66-6.61 (m, 3H), 5.26 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 2.85 (s, 3H), 2.68 (d, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0004
實例 1D. 合成6-(3-羥基苯甲基)-2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image170
在0℃下，向6-(3-甲氧基苯甲基)-2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(53 mg，0.16 mmol)於DCM (4 mL)中之混合物中添加BBr3 (195 mg，0.778 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時，隨後用MeOH淬滅。減壓濃縮所得混合物。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(15.6 mg，30.70%產率)。LCMS: m/z 327 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.34 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.12 (t, 1H), 6.78 - 6.56 (m, 3H), 5.26 (s, 2H), 4.278(s, 3H), 2.86 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0005
實例 1E. 合成6-[3-(1-胺基-乙基)-苯甲基]-2,8-二甲基-6,8-二氫-3-硫雜-1,5,6,8-四氮雜-環戊并[a]茚-7-酮
Figure 02_image176
向6-(3-乙醯基苯甲基)-2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.142 mmol)於MeOH (4 mL)中之攪拌混合物中添加NH4 OAc (109 mg，1.42 mmol)及NaBH3 CN (18 mg，0.284 mmol)。將反應混合物在35℃下攪拌13小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(20 mg，40.0%產率)。LC-MS: m/z 354 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.48 (s, 1H), 7.25 (dd, 3H), 7.12 (d, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.17 (s, 3H), 4.15 - 4.06 (m, 1H), 2.76 (s, 3H), 1.27 (d, 3H)。
實例 1F. 合成6-(3-(胺基甲基)苯甲基)-2,4-二甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image178
步驟 A. 2-(3-( 溴甲基 ) 苯甲基 ) 異吲哚啉 -1,3- 二酮 . 向1,3-雙(溴甲基)苯(1.3 g，4.96 mmol)於DMF (20 mL)中之攪拌混合物中添加1,3-二側氧基異吲哚啉-2-醯亞胺鉀(0.918 g，4.96 mmol)及K2 CO3 (1.03 g，7.44 mol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液(30 mL)中且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 30/1)純化殘餘物，得到所需產物(1.1 g，67.4%產率)。LC-MS: m/z 330 (M+H)+ 。
步驟 B. 2-(3-((2,4- 二甲基 -5- 側氧基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 苯甲基 ) 異吲哚啉 -1,3- 二酮 . 向2-(3-(溴甲基)苯甲基)異吲哚啉-1,3-二酮(100 mg，0.303 mmol)於DMF (4 mL)中之攪拌混合物中添加2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(66.7 mg，0.303 mmol)及K2 CO3 (83.6 mg，0.606 mol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液(15 mL)中且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/1)純化殘餘物，得到所需產物(80 mg，56.3%產率)。LC-MS: m/z 470 (M+H)+ 。
步驟 C. 6-(3-( 胺基甲基 ) 苯甲基 )-2,4- 二甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-(3-((2,4-二甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)苯甲基)異吲哚啉-1,3-二酮(80 mg，0.17 mmol)於EtOH (5 mL)中之攪拌混合物中添加N2 H4 .H2 O (44 mg，98%wt，0.85 mmol)。將反應混合物在100℃下攪拌2小時，隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液(15 mL)中且用DCM萃取兩次。有機層用鹽水洗滌兩次，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(30 mg，52.1%產率)。LC-MS: m/z 324 (M+H-NH3 )+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.57 (s, 1H), 7.32 (m, 3H), 7.23 (d, 1H), 5.35 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.84 (s, 2H), 2.86 (s, 3H)。
實例 1G. 合成6-(4-(羥甲基)苯甲基)-2,4-二甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image180
步驟 A. 4-((2,4- 二甲基 -5- 側氧基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 苯甲酸甲酯 . 向2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.4 mmol)於DMF (20 mL)中之混合物中添加K2 CO3 (181 mg，1.3 mmol)。將混合物在60℃下攪拌30分鐘，隨後在0℃下添加4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(100 mg，0.4 mmol)。將所得混合物在60℃下攪拌18小時，隨後倒入冰水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 50/1至10/1)純化殘餘物，得到所需產物(120 mg，74.61%)。LCMS: m/z 369 (M+H)+ 。
步驟 B. 6-(4-( 羥甲基 ) 苯甲基 )-2,4- 二甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向4-((2,4-二甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)苯甲酸酯(100 mg，0.3 mmol)於THF (20 mL)中之混合物中添加LAH (30 mg，0.8 mmol)。將反應物在0℃下在N2 下攪拌30分鐘，隨後用NaSO4 -10H2 O淬滅且過濾。減壓濃縮濾液。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(3 mg，3.25%)。LCMS: m/z 341 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.12 (s, 1H), 7.36 (d, 2H), 7.25 (d, 2H), 5.37 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 4.31 (s, 3H), 2.80 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0006
實例 1H. 合成6-((6-胺基吡啶-2-基)甲基)-2,4-二甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image186
步驟 A ： 6-((6-((2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-2,4- 二甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在140℃下攪拌6-((6-氟吡啶-2-基)甲基)-2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]-吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(40 mg，0.12 mmol)及(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(102 mg，0.6 mmol)於NMP (1 mL)中之混合物，直至完成。減壓濃縮所得混合物。藉由製備型TLC純化殘餘物，獲得所需產物(20 mg，34.5%產率)。LC-MS: 477(M+H)+ 。
步驟 B ： 6-((6- 胺基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-2,4- 二甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在室溫下攪拌6-((6-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)吡啶-2-基)甲基)-2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(20 mg，0.042 mmol)及TFA (45 mg，0.42 mmol)於DCM (1 mL)中之混合物，直至完成。減壓濃縮所得混合物。藉由製備型HPLC純化殘餘物，獲得所需產物(20 mg，34.5%產率)。LC-MS: 327(M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.55 (s, 1H), 7.26 (t, 1H), 6.30 (d, 1H), 6.09 (d, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 4.25 (s, 3H), 2.85 (s, 3H)。
實例 1I. 合成6-(羥甲基)-2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image188
在50℃下攪拌2,4-二甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，0.14 mmol)、甲醛(1.5 mL，40%wt)及NH3 (0.75 mL，33%wt)於二噁烷(2 mL)中之混合物1小時，隨後倒入水中且用DCM萃取。減壓濃縮有機層。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(4.40 mg，17%產率)。LCMS: 251 (M+H)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.55 (s, 1H), 6.63 (t, 1H), 5.44 (d, 2H), 4.27 (s, 3H), 2.85 (s, 3H)。
實例 2. 用流程E2製備式E2-vii之化合物流程 E2
Figure 02_image190
其中Xa為離去基(例如鹵素，諸如Br或I；OMs；或OTs)；Xb 為鹵素(例如Cl、Br或I)；n1為0或1；M為氫(例如用於赫克反應(Heck reaction))或有機金屬錯合物(例如有機硼錯合物，諸如
Figure 107128431-A0101-12-0030-1
酸或頻哪醇硼錯合物；有機錫錯合物，諸如-Sn(Bu t )3 ；有機鋅錯合物，諸如-Zn(鹵素))；Q及R2 如本發明之第一至第二十六實施例中之任一者中所定義。在某些實施例中，Q及R2 各自獨立地為視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之碳環或視情況經取代之雜環基、視情況經取代之烷基。與實例1中式E1-v之化合物的合成類似，化合物E2-iv可藉由若干修飾由噻唑醛E2-i合成(例如化合物E2-ii與MsCl反應，隨後消除得到化合物E2-iii；三環系統可用催化劑AcOH在2-甲氧基乙醇中形成)。化合物E2-iv之取代及鹵化(例如在LiHMDS存在下之CBr4 或Cl3 CCCl3 ；或在t-BuOK及甲苯存在下之1,2,3,4,5-五氟-6-碘苯)得到化合物E2-vi。化合物E2-vi與有機金屬在催化劑存在下之偶合反應產生化合物E2-vii或E2-viii。E2-vi與親核試劑(Nu)之直接親核反應可產生化合物E2-ix。
實例 2A .合成2-(4-氟苯甲基)-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image192
步驟 A. 2- 疊氮基 -3- 羥基 -3-( 噻唑 -5- 基 ) 丙酸乙酯 . 將鈉(12.2 g，0.531 mol)在室溫下緩慢添加至無水EtOH (300 mL)之攪拌溶液中。反應混合物隨後冷卻至-20℃，接著逐滴添加2-疊氮基乙酸乙酯(68.5 g，0.531 mol)及噻唑-5-甲醛(20.0 g，0.177 mol)於無水EtOH (100 mL)中之溶液，同時將溫度保持在-20℃至-15℃之間。在添加後，將反應混合物在-20℃下再攪拌1小時，且隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液(1L)中。所得混合物用NaCl飽和且用EtOAc萃取。合併之有機相用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析使用(溶離劑：PE/EtOAc= 6/1至5/1至1/1)純化殘餘物，得到呈淺色之所需產物(34 g)。LCMS: m/z= 243 (M+H)+ 。
步驟 B. (Z)-2- 疊氮基 -3-( 噻唑 -5- 基 ) 丙烯酸乙酯 . 在-35℃下，向2-疊氮基-3-羥基-3-(噻唑-5-基)丙酸乙酯(103 g，0.426 mol)於無水DCM (1.5 L)中之攪拌混合物中添加MsCl (146 g，1.28 mol)，隨後逐滴添加TEA (301 g，2.98 mol)，同時將溫度保持在-35℃至-30℃之間。在添加之後，將反應混合物在-30℃下再攪拌15分鐘，隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液(1.5 L)中。所得混合物用NaCl飽和且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層依次用HCl (1 M)水溶液及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析使用(溶離劑：PE/EtOAc= 5/1)純化殘餘物，得到所需產物(82.0 g，86.3%產率)。LCMS: m/z= 225 (M+H)+ 。
合成4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯、4-甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯及6-甲醯基-4-甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯之步驟 C-E 與實例1A中之程序類似。
步驟 F. (E)-6-( 亞肼基甲基 )-4- 甲基 -4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 . 在室溫下，向N2 H4 .H2 O (2.0 g，98%，40 mmol)於2-甲氧基乙醇(50 mL)中之攪拌混合物中添加6-甲醯基-4-甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(4.8 g，20 mmol)，隨後添加20滴AcOH。將反應混合物在室溫下攪拌約30分鐘，直至混合物變澄清。將所得混合物在攪拌下倒入水(100 mL)中且用DCM萃取。合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到所需產物，其未經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS: m/z= 253 (M+H)+ 。
步驟 G. 4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 在室溫下，向(E )-6-(亞肼基甲基)-4-甲基-4H- 吡咯并[2,3-d]噻唑-5 -甲酸乙酯(4.8 g，0.19 mol)於2-甲氧基乙醇(50 mL)中之攪拌懸浮液中添加AcOH (20滴)。反應懸浮液在105℃下攪拌3小時且隨後過濾。濾餅用水洗滌且在高真空下乾燥，得到第一批所需產物。濾液用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到第二批所需產物。合併之兩批次所需產物(2.5 g)未經進一步純化即直接用於下一步驟中。LCMS: m/z= 207 (M+H)+ 。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.68(s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 4.30 (s, 3H) 步驟 H. 6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(2 g，10.0 mmol)及K2 CO3 (2.7 g，20 mmol)於DMF (15 mL)中之攪拌混合物中添加1-(氯甲基)-3-甲氧基苯(2.3 g，15 mmol)。將反應混合物在50℃下攪拌3小時，隨後倒入水中且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/1)純化殘餘物，得到所需產物(2 g，67%產率)。LCMS: m/z= 327 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.36 (s, 1H),8.64 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.88-6.80 (m, 3H), 5.33 (s, 2H),. 4.31 (s, 3H) 3.72 (s, 3H)。
步驟 I. 2- 碘 -6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 在室溫下，向6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(1 g，3 mmol)及t-BuOK (688 mg，6 mmol)於甲苯(30 mL)中之攪拌混合物中添加1,2,3,4,5-五氟-6-碘苯(3.6 g，12 mmol)。將反應混合物在135℃下攪拌4小時(預加熱油浴)且隨後減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 6/1)純化殘餘物，得到所需產物(1 g，72%產率)。LCMS: m/z= 453 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.61 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.88-6.80 (m, 3H), 5.31 (s, 2H),. 4.26 (s, 3H) 3.71 (s, 3H)。
步驟 J. 溴化 (4- 氟苯甲基 ) 鋅 (II). 向25 mL三頸圓底燒瓶中添加Zn粉(1300 mg，20 mmol)。將混合物在高真空下脫氣且用N2 反吹三次。在室溫下經由注射器添加無水THF (15 mL)、TMSCl (108 mg，1 mmol)及1,2-二溴乙烷(186 mg，1 mmol)。將懸浮液加熱至65℃持續30分鐘，隨後冷卻至0℃，接著逐滴添加1-(溴甲基)-4-氟苯(1.89 g，10 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌1.5小時。將清液層溶液直接用於下一步驟。
步驟 K. 2-(4- 氟苯甲基 )-6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向25 mL三頸圓底燒瓶中添加2-碘-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.22 mmol)及Pd(PPh3 )4 (25.4 mg，10 mol%)。將燒瓶在高真空下脫氣且用N2 反吹三次。溴化(4-氟苯甲基)鋅(II)之清液層溶液(6 mL)經由注射器添加至燒瓶。將所得混合物在N2 下在65℃下攪拌0.5小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(6 mg)。LCMS: m/z= 435 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.53 (s, 1H), 7.75-7.50 (m, 1H), 7.47 (s, 2H), 7.23 (s, 3H), 6.84 (s, 2H), 5.31 (s, 2H), 4.52 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.71 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。適當時可使用標準胺基保護及去保護。胺基保護基之實例包括但不限於SEM。SEM之去保護可在TFA及DCM中進行。
Figure 107128431-A0304-0007
實例 2B. 合成2-苯甲基-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image238
步驟 A. 2- 溴 -4- 甲基 -4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 向2-溴-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(1.1 g，4 mmol)於無水DMF (10 mL)中之溶液中添加NaH (320 mg，60%於油中，8 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15分鐘，隨後添加MeI (852 mg，6 mmol)。將所得混合物在室溫下再攪拌2小時，隨後用飽和NH4 Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取。將合併之有機層用水及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/1)純化殘餘物，得到所需產物(950 mg，82.2%產率)。LCMS: m/z 289 (M+H)+ 。
步驟 B. 2- 苯甲基 -4- 甲基 -4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 在N2 下，向2-溴-4-甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(720 mg，2.5 mmol)及Pd(PPh3 )4 (145 mg，0.125 mmol)於無水THF中之混合物中添加溴化苯甲基鋅(20 mL，0.5 M)。將反應混合物在65℃下攪拌1小時，隨後用飽和NH4 Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 4/1)純化殘餘物，得到所需產物(600 mg，80.0%產率)。LCMS: m/z 301 (M+H)+ 。
步驟 C. 2- 苯甲基 -6- 甲醯基 -4- 甲基 -4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 向2-苯甲基-4-甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(600 mg，2 mmol)於1,2-二氯乙烷(6 mL)中之溶液中添加氧氯化磷(612 mg，4 mmol)及N-甲基-N-苯基甲醯胺(540 mg，4 mmol)。將反應混合物回流隔夜，隨後冷卻且倒入冰水中，且隨後用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 3/1)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之所需產物(140 mg)。LCMS: m/z 329 (M+H)+ 。
步驟 D. 2- 苯甲基 -4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向2-苯甲基-6-甲醯基-4-甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(140 mg，粗物質)於2-乙氧基乙醇(3 mL)中之溶液中添加水合肼(0.5 mL，98%wt)。將反應混合物在110℃下攪拌1小時，隨後冷卻至室溫。藉由過濾收集沈澱物且用MeOH洗滌，得到所需產物(60 mg，經2個步驟之10.1%產率)。LCMS: m/z 297 (M+H)+ 。
步驟 E. 2- 苯甲基 -6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在N2 下，向2-苯甲基-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.169 mmol)及NaHCO3 (28 mg，0.338 mmol)於DMA (1 mL)中之混合物中添加1-(氯甲基)-3-甲氧基苯(40 mg，0.254 mmol)。將反應混合物在120℃下攪拌3小時，隨後用飽和NH4 Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取。減壓濃縮合併之有機層且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(8 mg，11.4%產率)。LCMS: m/z 417 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.53 (s, 1H), 7.36-7.43 (m, 4H), 7.30-7.32 (m, 1H), 7.20-7.25 (m, 1H), 6.82-6.85 (m, 3H), 5.31 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.71 (s, 3H)。
實例 2C. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-2-(1-苯基乙基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image240
步驟 A. 使用與實例2A類似的程序合成4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮。LCMS: m/z 467 (M+H)+ 。
步驟 B. 使用與實例2A類似的程序合成2-碘-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮。LCMS: 593 (M+H)+ 。
步驟 C. 2- 苯甲基 -4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在N2 下，將鋅粉(1.3 g，20 mmol)懸浮於無水THF (5 mL)中，隨後添加1,2-二溴乙烷(0.01 mL)。混合物在65℃下加熱5分鐘，隨後添加氯三甲基矽烷(0.01 mL)。所得混合物在65℃下再加熱15分鐘，隨後冷卻至0℃，接著逐滴添加(溴甲基)苯(1.7 g，10 mmol)於無水THF (5 mL)中之溶液。將所得混合物在65℃下攪拌1小時，隨後冷卻，得到溴化苯甲基鋅(II) (約1 M於THF中)，其直接用於下一步驟。在N2 下，向2-碘-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(300 mg，0.5 mmol)於無水THF (2 mL)中之混合物中依次添加Pd(PPh3 )4 (58 mg，0.05 mmol)及上述溴化苯甲基鋅(II) (5 ml，1 M)。所得混合物在65℃下加熱1小時，隨後倒入水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/2)純化殘餘物，得到所需產物(230 mg，82.7%產率)。LCMS: 557 (M+H)+ 。
步驟 D. 2- 苯甲醯基 -4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-苯甲基-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.18 mmol)於DMF (5 mL)中之混合物中添加K2 CO3 (74 mg，0.53 mmol)。將混合物在50℃下在空氣下攪拌4小時，隨後倒入水中。藉由過濾收集沈澱物，用PE洗滌且在高真空下乾燥，得到所需產物(100 mg，98%產率)。LCMS: 571 (M+H)+ 。
步驟 E. 2-(1- 羥基 -1- 苯基乙基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在冰浴下，向溴化甲基鎂(0.6 mL，1.5 M)於無水THF (2 mL)中之混合物中添加2-苯甲醯基-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.175 mmol)於無水THF中之溶液。將混合物攪拌1小時，倒入飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到呈油狀之所需產物(30 mg，29.4 %產率)。LCMS: 587 (M+H)+ 。
步驟 F. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-(1- 苯基乙基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在室溫下攪拌2-(1-羥基-1-苯基乙基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，0.05 mmol)於TFA/TES (2 mL/0.5 mL)之混合溶液中之溶液2小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(5 mg，22.7 %產率)。LCMS: m/z 441 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.11 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 3H), 7.37 (t, 2H), 7.28 (m, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.71 (q, 1H), 4.28 (s, 3H), 1.78 (d, 3H)。
亦藉由製備型HPLC獲得副產物4-甲基-6-((1-甲基-1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(1-苯基乙基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮：
Figure 02_image242
LCMS: m/z 455 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.52 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.42 - 7.30 (m, 6H), 6.97 (d, 1H), 5.64 (s, 2H), 4.70 (q, 1H), 4.27 (s, 3H), 4.09 (s, 3H), 1.77 (d, 3H)。
Figure 107128431-A0304-0008
實例 2D. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(1-羥基-1-苯基乙基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image246
步驟 A. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2- 苯甲醯基 -4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-苯甲醯基-4-甲基-6-((1 -((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(75 mg，0.13 mmol)於DCM (2 mL)中之混合物中添加TFA (2 mL)。將混合物在室溫下攪拌2小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(30 mg，52.6%產率)。LCMS: 441 (M+H)+ 。
步驟 B. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-(1- 羥基 -1- 苯基乙基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在冰浴下，向溴化甲基鎂(0.22 mL，1.5 M)於無水THF (1 mL)中之混合物中添加6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-苯甲醯基-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，0.068 mmol)於無水THF中之溶液。將混合物攪拌30分鐘，隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。減壓濃縮合併之有機層。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(8 mg，25.8 %產率)。LCMS: 457 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.11 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.62 (d, 2H), 7.45 (d, 1H), 7.34 (t, 2H), 7.29-7.23 (m, 2H), 6.99 - 6.93 (m, 2H), 5.65 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 2.01 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。
Figure 107128431-A0304-0009
實例 2E. 合成2-(羥基(苯基)甲基)-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image254
步驟 A. 2- 苯甲醯基 -6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-苯甲基-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(40 mg，0.135 mmol)及K2 CO3 (37 mg，0.27 mmol)於DMF (1 mL)中之溶液中添加1-(氯甲基)-3-甲氧基苯(31 mg，0.2 mmol)。將反應混合物在室溫下在空氣中攪拌隔夜，隨後倒入水中。藉由過濾收集沈澱物且用EtOAc洗滌，得到所需產物(30 mg，51.7%產率)。LCMS: m/z 431 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.76 (s, 1H), 8.46-8.49 (m, 2H), 7.78 (t, 1H), 7.66 (t, 2H), 7.25 (t, 1H), 6.84-6.89 (m, 3H), 5.36 (s, 2H), 4.37 (s, 3H), 3.73 (s, 3H)。
步驟 B. 2-( 羥基 ( 苯基 ) 甲基 )-6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-苯甲醯基-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(20 mg，0.047 mmol)於THF (1 mL)及MeOH (1 mL)中之混合物中添加NaBH4 (3.5 mg，0.093 mmol)。將混合物在室溫下攪拌15分鐘，用水淬滅且用EtOAc萃取。分離有機層且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(13 mg，64.0%產率)。LCMS: m/z 433 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.58 (s, 1H), 7.49-7.53 (m, 2H), 7.36-7.40 (m, 2H), 7.28-7.33 (m, 1H), 7.20-7.25 (m, 1H), 7.07 (d, 1H), 6.82-6.85 (m, 3H), 6.08 (d, 1H), 5.31 (d, 2H), 4.21 (s, 3H), 3.71 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。
Figure 107128431-A0304-0010
實例 2F. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(羥基(苯基)甲基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image258
步驟 A. 使用與實例2E類似的程序合成2-(羥基(苯基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LCMS: m/z 573 (M+H)+ 。
步驟 B. 使用與實例2D類似的程序合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(羥基(苯基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LCMS: m/z 443 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.12 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.56-7.42 (m, 3H), 7.37 (s, 2H), 7.28 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.21 (s, 3H)。
實例 2G . 合成6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲酸甲酯
Figure 02_image260
向2-碘-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(40 mg，0.088 mmol)於MeOH (5 mL)中之攪拌混合物中添加Et3 N (27 mg，0.264 mmol)及Pd(dppf)Cl2 (6.5 mg，0.009 mmol)。將反應混合物在85℃下在CO下攪拌12小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(2 mg，5.88%產率)。LC-MS: m/z 385 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.72 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.95 - 6.81 (m, 3H), 5.34 (s, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 3.72 (s, 3H)。
用2-氯-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮進行類似反應，其產生2-甲氧基-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮作為主要副產物。LC-MS: m/z 357 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.50 (s, 1H), 7.26-7.21 (m, 1H), 6.88 - 6.80 (m, 3H), 5.30 (s, 2H), 4.19 (brs, 6H), 3.72 (s, 3H)。
Figure 02_image262
實例 2H. 合成2-(氟(苯基)甲基)-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image264
在-78℃下，向2-(羥基(苯基)甲基)-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(20 mg，0.046 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中添加DAST (0.3 mL)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，隨後減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(2.5 mg，12.5%產率)。LCMS: 435. (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.64 (s, 1H), 7.55-7.48 (m, 5H), 7.26-7.07 (m, 2H), 6.92-6.74 (m, 3H), 5.32 (s, 2H), 4.25 (s, 3H), 3.71 (s, 3H)。
實例 2I. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(胺基(苯基)甲基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image266
步驟 A. (Z)-2-(( 羥亞胺基 )( 苯基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 2-苯甲醯基-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.175 mmol)及NH2 OH.HCl (123 mg，1.75 mmol)於無水MeOH (5 mL)中之混合物在100℃下在密封管中攪拌12小時。隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液(20 mL)中且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EA = 2/1)純化殘餘物，得到所需產物(40 mg，39.1%產率)。LC-MS: m/z 586 (M+H)+ 。
步驟 B. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 胺基 ( 苯基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向(Z)-2-((羥亞胺基)(苯基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(40 mg，0.068 mmol)於TFA (3 mL)中之攪拌混合物中添加Zn (44 mg，0.68 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌16小時，隨後倒入飽和NaHCO3 水溶液(20 mL)中且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(4.6 mg，14.8%產率)。LC-MS: m/z 442 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.11 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.52-7.40 (m, 3H), 7.39-7.32 (m, 2H), 7.30 - 7.22 (m, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 5.49 (s, 1H), 4.20 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。
Figure 107128431-A0304-0011
實例 2J. 合成N-((6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)(1H-吡唑-3-基)甲基)乙醯胺
Figure 02_image270
步驟 A. N-((6-((1- 乙醯基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 )(1- 乙醯基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺 . 向6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(胺基(1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(20 mg，0.046 mmol)於DCM/MeCN (1 mL/1 mL)中之攪拌混合物中添加Et3 N (14 mg，0.139 mmol)及乙酸酐(24 mg，0.23 mmol)。將所得混合物在23℃下攪拌1小時，隨後用水淬滅且用DCM萃取。合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到粗產物(30 mg)，其未經任何進一步純化即直接用於下一步驟中。LCMS: m/z 558 (M+H)+ 。
步驟 B. N-((6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 )(1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺 . 在N2 下，向N-((6-((1-乙醯基-1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)(1-乙醯基-1H-吡唑-3-基)甲基)乙醯胺(30 mg，0.053 mmol)於MeOH (3 mL)中之攪拌混合物中添加K2 CO3 (22 mL，0.16 mmol)。將混合物在23℃下攪拌30分鐘，隨後用飽和NH4 Cl水溶液淬滅且用DCM萃取。合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(2.0 mg，9%產率)。LC-MS: m/z: 474 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ 8.57 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.48-7.60 (d, 1H), 7.31-7.27 (t, 1H), 7.00-6.98 (d, 1H), 6.51 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.33 (s, 3H), 1.97 (s, 3H)。
實例 2K. 合成2-(二氟(苯基)甲基)-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image272
步驟 A. 6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -2-(2- 苯基 -1,3- 二硫雜環戊 -2- 基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向2-苯甲醯基-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(86 mg，0.2 mmol)於甲苯(3 mL)中之混合物中添加p-TsOH (36 mg，0.2 mmol)及乙烷-1,2-二硫醇(39 mg，0.4 mmol)。將混合物在110℃下攪拌4小時，隨後倒入水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 3/1)純化殘餘物，得到所需產物(80 mg，80%產率)。LCMS: m/z 507 (M+H)+ 。
步驟 B. 2-( 二氟 ( 苯基 ) 甲基 )-6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-(2-苯基-1,3-二硫雜環戊-2-基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(65 mg，0.13 mmol)及NIS (極少)於DCM (5 mL)中之混合物中添加Py.HF (1 mL)。將反應混合物在室溫下在N2 下攪拌2小時，隨後倒入水中且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 3/1)純化殘餘物，得到固體(50 mg，76%產率)。LCMS: m/z 595 (M+H)+ 。
向上述固體(25 mg，0.04 mmol)於THF/MeOH (3 mL/2 mL)中之混合物中添加Pd/C (5 mg)。將混合物在室溫下在H2 下攪拌40分鐘，隨後過濾。減壓濃縮濾液且藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(7 mg，36.8%產率)。LCMS: 453 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.70 (s, 1H), 7.74-7.70 (m, 2H), 7.64-7.56(m, 3H), 7.26-7.20 (m, 1H), 6.88-6.84 (m, 3H), 5.33 (s, 2H), 4.25 (s, 3H), 3.71 (s, 3H)。
實例 2L. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-2-(1-苯基環丙基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image274
步驟 A. 4- 甲基 -2-(1- 苯基環丙基 )-6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-苯甲基-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(60 mg，0.1 mmol)於無水DMF (2 mL)中之混合物中添加1,2-二溴乙烷(10 μL，0.1 mmol)及TBAB (3 mg，0.01 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，隨後添加NaH (8 mg，0.2 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時，隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。減壓濃縮合併之有機層。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(26 mg，44.7%產率)。LCMS: 583 (M+H)+ 。
步驟 B. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-(1- 苯基環丙基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 將4-甲基-2-(1-苯基環丙基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(26 mg，0.044 mmol)於HCl之二噁烷溶液(4M，2 mL)中之混合物在室溫下攪拌3小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(3 mg，15%產率)。LCMS: 453 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.11 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.59 - 7.52 (m, 2H), 7.50 - 7.38 (m, 4H), 7.32 - 7.23 (m, 1H), 6.95 (d, 1H), 5.63 (s, 2H), 4.24 (s, 3H), 1.84-1.81 (m, 2H), 1.59-1.57 (m, 2H)。
實例 2M. 合成 3-((2,4- 二甲基 -5- 側氧基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 苯甲醯胺 .
Figure 02_image276
步驟 A. 合成 3-((2- 溴 -4- 甲基 -5- 側氧基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 苯甲腈 在-40℃下在N2 氛圍下，向3-((4-甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)苯甲腈(200 mg，0.62 mmol)及CBr4 (1.03 g，3.11 mmol)於THF (15 mL)中之混合物中逐滴添加LiHMDS (1.24 mL，1 M於THF中)。將反應混合物在-40℃下攪拌2小時，藉由飽和NH4 Cl淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由管柱層析(矽膠，0~25% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到3-((2-溴-4-甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)苯甲腈(200 mg，80.6%產率)。LC-MS (ESI): m/z 400 (M+H)+ 。
步驟 B. 合成 3-((2,4- 二甲基 -5- 側氧基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 苯甲腈 向3-((2-溴-4-甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)苯甲腈(100 mg，0.25 mmol)及甲基
Figure 107128431-A0101-12-0030-1
酸(45 mg，0.75 mmol)於甲苯(2 mL)中之混合物中添加Na2 CO3 (53 mg，0.5 mmol)，隨後添加Pd2 (dba)3 (23 mg，0.025 mmol)及xantphos (14 mg，0.025 mmol)。將反應混合物在100℃下攪拌15小時。過濾反應混合物且蒸發濾液。藉由管柱層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到3-((2,4-二甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)苯甲腈(60 mg，71.4%產率)。LC-MS (ESI): m/z 336 (M+H)+ 。
步驟 C. 合成 3-((2,4- 二甲基 -5- 側氧基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 苯甲醯胺 將3-((2,4-二甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)苯甲腈(60 mg，0.18 mmol)於H2 SO4 (1 mL)中之溶液在30℃下攪拌隔夜。反應物藉由飽和NaHCO3 淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且蒸發。藉由製備型TLC (10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到3-((2,4-二甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)苯甲醯胺(10 mg，15.7%產率)。LC-MS (ESI): m/z 354 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.41 (t, 1H), 7.35 (s, 1H), 5.40 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 2.86 (s, 3H)。
實例 2N. 合成 2-(2-(1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-4- 甲基 -6-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮
Figure 02_image278
步驟 A. 合成 3- 碘 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H- 吡唑 向3-碘-1H-吡唑(1 g，5.16 mmol)及p-TsOH (88 mg，0.52 mmol)於DCM (15 mL)中之混合物中添加DHP (0.56 mL，6.19 mmol)且在室溫下攪拌2小時。反應混合物用飽和NaHCO3 及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 10% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到3-碘-1-(氧雜環己-2-基)-1H-吡唑(1.4 g)。LC-MS (m/z 279 (M+H)+ 。
步驟 B. 合成 (E)-1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-3-(2-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 乙烯基 )-1H- 吡唑 在氮氣下，向3-碘-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑(150 mg，0.54 mmol)於甲苯(3 mL)中之混合物中添加2-乙烯基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦(0.18 mL，1.08 mmol)、Et3 N (0.37 mL，2.7 mmol)及Pd(PBu3 )2 (14 mg，0.03 mmol)。將反應物在100℃下攪拌3小時。濃縮混合物且藉由製備型TLC (35% EtOAc/PE)純化，得到1-(氧雜環己-2-基)-3-[(E)-2-(四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)乙烯基]-1H-吡唑(60 mg，37%產率)。LC-MS (ESI): m/z 305 (M+H)+ 。
步驟 C. 合成 4- 甲基 -6-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(500 mg，2.42 mmol)於DMF (15 mL)中之混合物中添加K2 CO3 (335 mg，2.42 mmol)。在50℃下攪拌30分鐘後，添加3-(溴甲基)-1-甲基-1H-吡唑(636 mg，3.64 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液。將反應物在50℃下攪拌隔夜。將懸浮液倒入飽和NH4 Cl中，用EtOAc萃取。有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 100 EtOAc/PE)純化殘餘物，得到4-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(280 mg)。LC-MS (ESI): m/z 301 (M+H)+ 。
步驟 D. 合成 2- 碘 -4- 甲基 -6-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向4-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(280 mg，0.93 mmol)於甲苯(10 mL)中之混合物中添加五氟碘苯(0.50 mL，3.73 mmol)及t-BuOK (209 mg，1.86 mmol)。將反應物在135℃下在氮氣下攪拌2小時。將混合物冷卻至室溫且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 100% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到2-碘-4-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(300 mg)。LC-MS (ESI): m/z 427 (M+H)+ 。
步驟 E. 合成 (E)-4- 甲基 -6-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-(2-(1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙烯基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在氮氣下，向2-碘-4-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(300 mg，0.71 mmol)及(E)-1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)乙烯基)-1H-吡唑(300 mg，0.99 mmol)於DME (5 mL)及水(1 mL)中之混合物中添加Na2 CO3 (149 mg，1.41 mmol)及Pd(PPh3 )2 Cl2 (49 mg，0.071 mmol)。將混合物在80℃下攪拌3小時。隨後冷卻混合物，用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌。有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 100% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到(E)-4-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-2-(2-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)乙烯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(170 mg)。LC-MS (ESI): m/z 477 (M+H)+ 。
步驟 F. 合成 4- 甲基 -6-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-(2-(1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向(E)-4-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-2-(2-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)乙烯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(80 mg，0.17 mmol)於THF (3 mL)及MeOH (3 mL)中之混合物中添加Pd/C (10 mg)。將反應物在H2 下在室溫下攪拌6小時。過濾混合物且濃縮濾液。藉由製備型TLC (EtOAc)純化殘餘物，得到4-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-2-(2-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(20 mg)。LC-MS (ESI): m/z 479 (M+H)+ 。
步驟 G. 合成 2-(2-(1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-4- 甲基 -6-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向4-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-2-(2-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(20 mg，0.042 mmol)於乙醇(2 mL)中之混合物中添加HCl (0.5 mL，4 M於二噁烷中)。將反應混合物在50℃下攪拌30分鐘。將反應混合物冷卻且倒入飽和NaHCO3 中，用EtOAc萃取。有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由製備型TLC (10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到2-(2-(1H-吡唑-3-基)乙基)-4-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(10 mg，61%產率)。LC-MS (ESI): m/z 395 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.56 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.12 (d, 1H), 6.08 (d, 1H), 5.27 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.48 (t, 2H), 3.13 (t, 2H)。
Figure 107128431-A0304-0012
實例 2O. 合成 2-((1H- 吡唑 -5- 基 ) 氧基 )-6-((6- 胺基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image282
步驟 A. 合成 5- 羥基 -1-(4- 甲氧基苯甲基 )-1H- 吡唑 -4- 甲酸乙酯 向(4-甲氧基苯甲基)肼二鹽酸鹽(2.25 g，10 mmol)及K2 CO3 (4.14 g，30 mmol)於甲醇(50 mL)及水(10 mL)中之混合物中添加2-(乙氧基亞甲基)丙二酸二乙酯(2.16 g，10 mmol)。將混合物在80℃下攪拌5小時。隨後混合物用NH4 Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮。藉由管柱層析(矽膠，0~50% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到1.1 g 5-羥基-1-(4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯。
步驟 B. 合成 5- 羥基 -1-(4- 甲氧基苯甲基 )-1H- 吡唑 -4- 甲酸 向5-羥基-1-(4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(800 mg，2.9 mmol)於甲醇(10 mL)中之溶液中添加KOH (800 mg，15 mmol)於水(10 mL)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌16小時。隨後濃縮混合物且將殘餘物直接用於下一步驟中。LC-MS (ESI): m/z 249 (M+H)+ 。
步驟 C. 合成 1-(4- 甲氧基苯甲基 )-1H- 吡唑 -5- 醇 將5-羥基-1-(4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-甲酸溶解於2 M HCl (50 mL)中之混合物在60℃下攪拌16小時。移除溶劑且藉由製備型TLC純化殘餘物，得到120 mg 1-(4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-5-醇。LC-MS (ESI): m/z 205 (M+H)+ 。
步驟 D. 合成 N-( 第三丁氧基 ) 羰基 (6-((2-((1-(4- 甲氧基苯甲基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ) 氧基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯 在5℃下，向1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1H-吡唑-5-醇(60 mg，0.29 mmol)於DMF (8 mL)中之溶液中添加KOH (18 mg，0.32 mmol)。將反應混合物在5℃下攪拌30分鐘，添加N-(第三丁氧基)羰基(6-((2-溴-4-甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(174 mg，0.29 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液。將反應物在室溫下攪拌16小時且隨後倒入1 M檸檬酸水溶液中，用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且蒸發。藉由製備型TLC (EA:PE=1:1)純化殘餘物，得到80 mg N-(第三丁氧基)羰基(6-((2-((1-(4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-5-基)氧基)-4-甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯。LC-MS: m/z 715 (M+H)+ 。
步驟 E. 合成 2-((1H- 吡唑 -5- 基 ) 氧基 )-6-((6- 胺基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 將N-(第三丁氧基)羰基(6-((2-((1-(4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-5-基)氧基)-4-甲基-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(60 mg，0.08 mmol)於TFA (2 mL)中之溶液在室溫下攪拌隔夜。濃縮反應物且藉由製備型HPLC純化，得到15 mg 2-((1H-吡唑-5-基)氧基)-6-((6-胺基吡啶-2-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 395 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ 8.41 (s, 1H), 7.76 - 7.63 (m, 2H), 6.79 (d, 1H), 6.64 (d, 1H), 6.31 (d, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.26 (s, 3H)。
實例 3. 用流程E3製備式E3-ii化合物及衍生物流程 E3
Figure 02_image284
化合物E3-ii可藉由化合物E3-i與三丁基(乙烯基)錫烷之間的施蒂勒反應(Stille reaction)合成。E3-ii在催化劑(例如鈀催化劑，諸如Pd(Pt-Bu3)2、DMF)存在下進行赫克反應，隨後還原烯基可產生化合物E3-ix。或者，化合物E3-ii進行標準氫化產生化合物E3-iii。化合物E3-ii進行硼氫化，隨後用過硼酸鈉氧化產生產物E3-vii。化合物E3-ii用氧化鋨(VIII)及過碘酸鈉直接氧化得到醛E3-iv。醛E3-iv進行親核加成產生產物E3-v。化合物E3-iv用硼氫化鈉進行標準還原得到化合物E3-vi。化合物E3-iv進行還原胺化產生化合物E3-viii。其中Q及R2 如本發明之第一至第二十六實施例中之任一者中所定義。在某些實施例中，Q及R2 各自獨立地為視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之碳環或視情況經取代之雜環基。
實例 3A. 合成2-乙基-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image286
步驟 A. 6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -2- 乙烯基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-氯-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(600 mg，1.67 mmol)及三丁基(乙烯基)錫烷(1 mL，3.4 mmol)於DMF (6 mL)中之混合物中添加Pd(PPh3 )4 。將混合物在100℃下在N2 下攪拌隔夜，隨後倒入水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/2)純化殘餘物，得到所需產物(410 mg，68%產率)。LCMS: m/z 353 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 7.10 (dd, 1H), 6.89 - 6.80 (m, 3H), 6.28 (d, 1H), 5.75 (d,1H), 5.32 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.72 (s, 3H)。
步驟 B. 2- 乙基 -6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在N2 下，向6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-乙烯基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，0.88 mmol)於MeOH (1 mL)及THF (1 mL)中之混合物中添加Pd/C (10 mg)。將混合物在H2 下在室溫下攪拌1小時，隨後經由矽藻土過濾。減壓濃縮濾液且藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(5 mg，16.7%產率)。
LCMS: m/z 355 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.56 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.89 - 6.78 (m, 3H), 5.32 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.17 (q, 2H), 1.38 (t, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。
Figure 107128431-A0304-0013
實例 3B. 合成2-(羥甲基)-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image290
步驟 A. 6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲醛 . 向6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-乙烯基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(410 mg，1.16 mmol)於二噁烷(6 mL)及水(2 mL)中之混合物中添加NaIO4 (1 g，4.6 mmol)、2,6-二甲基吡啶(0.27 mL，2.32 mmol)及OsO4 (催化劑)。將混合物在室溫下攪拌4小時，隨後用飽和Na2 S2 O3 水溶液淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 1/1)純化殘餘物，得到所需產物(130 mg，31.7%產率)。LCMS: m/z 387 (M+MeOH+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.08 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.88-6.83 (m, 3H), 5.34 (s, 2H), 4.34 (s, 3H), 3.72 (s, 3H)。
步驟 B. 2-( 羥甲基 )-6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醛(30 mg，0.08 mmol)於甲醇(2 mL)中之混合物中添加NaBH4 (6 mg，0.16 mmol)。將混合物在室溫下攪拌10分鐘，隨後倒入水中且用EtOAc萃取。減壓濃縮有機層且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(10 mg，35.7%產率)。LCMS: m/z 357 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.59 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.86-6.82 (m, 3H), 6.34 (t, 1H), 5.32 (s, 2H), 4.89 (d, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0014
實例 3C ： 合成2-(2-羥基丙-2-基)-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image296
步驟 A. 2-(1- 羥乙基 )-6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醛(100 mg，0.28 mmol)於THF (3 mL)中之混合物中逐滴添加氯化甲基鎂(0.19 mL，0.56 mmol)。將混合物在室溫下攪拌10分鐘，隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/2)純化殘餘物，得到所需產物(40 mg)。LCMS: m/z 371 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.58 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.97 - 6.77 (m, 3H), 6.41 (d, 1H), 5.40 - 5.23 (m, 2H), 5.18 - 5.02 (m, 1H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 1.55 (d, 3H)。
步驟 B. 2- 乙醯基 -6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-(1-羥乙基)-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，0.08 mmol)於DCM (3 mL)中之混合物中添加氧化錳(IV) (35 mg，0.4 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時，隨後經由矽藻土過濾。減壓濃縮濾液，得到所需產物(25 mg)。LCMS: m/z 369 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.83 (s, 1H), 7.35 (t, 1H), 6.99-6.94 (m, 3H), 5.45 (s, 2H), 4.45 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.85 (s, 3H)。
步驟 C. 2-(2- 羥基丙 -2- 基 )-6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向2-乙醯基-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(20 mg，0.05 mmol)於THF (1 mL)中之混合物中逐滴添加氯化甲基鎂(0.08 mL，0.15 mmol)。將混合物在室溫下攪拌10分鐘，隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(10 mg)。LCMS: m/z 385(M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.58 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.89 - 6.81 (m, 3H), 6.28 (s, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 1.60 (s, 6H)。
實例 3D. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(2-羥乙基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image298
步驟 A. 2-(2- 羥乙基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 在0℃下在N2 下，向4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-2-乙烯基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(100 mg，0.20 mmol)於THF (2 mL)中之混合物中添加BH3 -THF (0.2 mL，1 mol/L，0.20 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時，隨後冷卻至0℃，接著添加水(1 mL)及NaBO3 .4H2 O (154 mg，1.00 mmol)。將混合物緩慢升溫至室溫且在該溫度下攪拌3小時。將所得混合物倒入飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/1)純化殘餘物，得到所需產物(30 mg)。LC-MS: m/z 511 (M+H)+ 。
步驟 B. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-(2- 羥乙基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 在0℃下，向2 (30 mg，0.18 mmol)於DCM (3 mL)中之溶液中逐滴添加TFA (1 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌16小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(2.0 mg)。LC-MS: m/z 381 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.11 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 5.02-5.00 (m, 1H), 4.27 (s, 3H), 3.85-3.81 (m, 2H), 3.32-3.25 (m, 2H)。
實例 3E. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-2-((甲胺基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image300
步驟 A. 4- 甲基 -2-(( 甲胺基 ) 甲基 )-6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H -吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醛(50 mg，0.1 mmol)於THF (10 mL)中之混合物中逐滴添加MeNH2 (30%於MeOH中，21 mg，0.2 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，隨後添加氰基硼氫化鈉(19 mg，0.3 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌隔夜，隨後用飽和NH4 Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(35 mg)。LCMS: m/z 511 (M+H)+ 。
步驟 B. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-(( 甲胺基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向4-甲基-((甲胺基)甲基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(35 mg，0.07 mmol)於DCM (10 mL)中之混合物中逐滴添加TFA (3 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(5 mg)。LCMS: m/z 380(M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.13 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 4.09 (s, 2H), 2.40 (s, 3H)。
實例 3F. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(胺基甲基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image302
步驟 A. (E)-4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲醛肟 . 在0℃下，向4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醛(120 mg，0.24 mmol)於MeOH (10 mL)中之混合物中添加羥胺鹽酸鹽(50 mg，0.73 mmol)，隨後添加KOAc (71 mg，0.73 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌8小時，隨後用飽和NH4 Cl水溶液淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(90 mg)。LCMS: m/z 510 (M+H)+ 。
步驟 B. 2-( 胺基甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向(E)-4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醛肟(90 mg，0.18 mmol)於乙酸(10 mL)中之混合物中添加Zn粉(58 mg，0.88 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，隨後經由矽藻土過濾。減壓濃縮濾液且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(70 mg)。LCMS: m/z 496 (M+H)+ 。
步驟 C. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 胺基甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 係使用實例3D中之程序合成。LCMS: m/z 366 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.13 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.33 - 7.20 (m, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.24 (d, 3H), 4.17 (s, 2H)。
實例 3G. 合成N-((6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6 -二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)甲基)乙醯胺
Figure 02_image304
步驟 A. N-((4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺 . 在0℃下，向2-(胺基甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(35 mg，0.07 mmol)於DCM (10 mL)中之混合物中添加乙酸酐(22 mg，0.21 mmol)，隨後添加三乙胺(22 mg，0.21 mmol)及DMAP (0.8 mg，0.007 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，隨後用水淬滅且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到呈黃色油狀之所需產物(25 mg)。LCMS: m/z 538 (M+H)+ 。
步驟 B. N-((4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺 係使用實例3D中之程序合成。LCMS: m/z 408 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.12 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.31 - 7.21 (m, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.31 (s, 3H), 1.93 (s, 3H)。
實例 3H. 合成N-((6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6 -二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)甲基)甲烷磺醯胺
Figure 02_image306
步驟 A. N-((4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4 - 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 甲基 ) 甲烷磺醯胺 . 在0℃下，向2-(胺基甲基)-4-甲基-6-((1-((2- (三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.1 mmol)於DCM (5 mL)中之混合物中添加Et3 N (30.62 mg，0.3 mmol)，隨後添加MsCl (9.24 mg，0.081 mmol)。將混合物在20℃下攪拌2小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(20 mg)。
步驟 B. N-((6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并 [5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)甲基)甲烷磺醯胺係使用實例3D中之程序合成。LCMS: m/z 444 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.11 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.17 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.34 - 7.20 (m, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.64 (d, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.04 (s, 3H)。
實例 3I. 合成 2-(2-(1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-6-((6- 胺基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image308
步驟 A. 合成 N-[( 第三丁氧基 ) 羰基 ]-N-[6-({4- 溴 -7- 甲基 -9- 側氧基 -3- 硫雜 -5,7,10,11- 四氮雜三環 [6.4.0.0{2,6}] 十二 -1(8),2(6),4,11- 四烯 -10- 基 } 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ] 胺基甲酸第三丁酯 在-40℃下在N2 氛圍下，向N-[(第三丁氧基)羰基]-N-[6-({7-甲基-9-側氧基-3-硫雜-5,7,10,11-四氮雜三環[6.4.0.0{2,6}]十二-1(8),2(6),4,11-四烯-10-基}甲基)吡啶-2-基]胺基甲酸第三丁酯(1.4 g，2.73 mmol)及CBr4 (4.52 g，13.65 mmol)於THF (20 mL)中之混合物中逐滴添加LiHMDS (5.46 mL，5.46 mmol)。將反應混合物在-40℃下攪拌30分鐘，隨後用水(4 mL)淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，PE/EA=10:1~3:1)純化殘餘物，得到500 mg N-[(第三丁氧基)羰基]-N-[6-({4-溴-7-甲基-9-側氧基-3-硫雜-5,7,10,11-四氮雜三環[6.4.0.0{2,6}]十二-1(8),2(6),4,11-四烯-10-基}甲基)吡啶-2-基]胺基甲酸第三丁酯。LC-MS: m/z 591 (M+H)+ 。
步驟 B. 合成 N-[( 第三丁氧基 ) 羰基 ]-N-[6-({4- 乙烯基 -7- 甲基 -9- 側氧基 -3- 硫雜 -5,7,10,11- 四氮雜三環 [6.4.0.0{2,6}] 十二 -1(8),2(6),4,11- 四烯 -10- 基 } 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ] 胺基甲酸第三丁酯 向N-[(第三丁氧基)羰基]-N-[6-({4-溴-7-甲基-9-側氧基-3-硫雜-5,7,10,11-四氮雜三環[6.4.0.0{2,6}]十二-1(8),2(6),4,11-四烯-10-基}甲基)吡啶-2-基]胺基甲酸第三丁酯(500 mg，0.85 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加三丁基(乙烯基)錫烷(536 mg，1.69 mmol)及DIPEA (327 mg，2.53 mmol)，隨後添加Pd(PPh3 )4 (105 mg，0.08 mmol)。反應混合物在N2 氛圍下在80℃下攪拌3小時，隨後藉由H2 O淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，PE/EA=10:1~5:1)純化殘餘物，得到300 mg N-[(第三丁氧基)羰基]-N-[6-({4-乙烯基-7-甲基-9-側氧基-3-硫雜-5,7,10,11-四氮雜三環[6.4.0.0{2,6}]十二-1(8),2(6),4,11-四烯-10-基}甲基)吡啶-2-基]胺基甲酸第三丁酯。LC-MS: m/z 539 (M+H)+ 。
步驟 C. 合成 (E)-3-(2-(6-((6-(( 第三丁氧基羰基 )[( 第三丁氧基 ) 羰基 ] 胺基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 乙烯基 )-1H- 吡唑 -1- 甲酸第三丁酯 向N-[(第三丁氧基)羰基]-N-[6-({4-乙烯基-7-甲基-9-側氧基-3-硫雜-5,7,10,11-四氮雜三環[6.4.0.0{2,6}]十二-1(8),2(6),4,11-四烯-10-基}甲基)吡啶-2-基]胺基甲酸第三丁酯(300 mg，0.56 mmol)於DMF(4 mL)中之溶液中添加3-碘-1H-吡唑-1-甲酸第三丁酯(180 mg，0.61 mmol)。將反應混合物在100℃下攪拌隔夜。在冷卻至室溫後，反應混合物藉由H2 O淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC (PE/EA=1:1)純化殘餘物，得到200 mg (E)-3-(2-(6-((6-((第三丁氧基羰基)[(第三丁氧基)羰基]胺基)吡啶-2-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙烯基)-1H-吡唑-1-甲酸第三丁酯。LC-MS: m/z 705 (M+H)+ 。
步驟 D. 合成 3-(2-(6-((6-(( 第三丁氧基羰基 )[( 第三丁氧基 ) 羰基 ] 胺基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 乙基 )-1H- 吡唑 -1- 甲酸第三丁酯 向(E)-3-(2-(6-((6-((第三丁氧基羰基)[(第三丁氧基)羰基]胺基)吡啶-2-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙烯基)-1H-吡唑-1-甲酸第三丁酯(200 mg，0.28 mmol)於THF/MeOH (4 mL，10:1)中之溶液中添加Pd/C (6 mg，10 % wt.)。將反應混合物在氫氣下在室溫下攪拌12小時。經由矽藻土墊過濾混合物且濃縮濾液。藉由製備型TLC (PE/EA=1:1)純化殘餘物，得到100 mg 3-(2-(6-((6-((第三丁氧基羰基)[(第三丁氧基)羰基]胺基)吡啶-2-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙基)-1H-吡唑-1-甲酸第三丁酯。LC-MS: m/z 707 (M+H)+ 。
步驟 E. 合成 2-(2-(1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-6-((6- 胺基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下在N2 氛圍下，向3-(2-(6-((6-((第三丁氧基羰基)[(第三丁氧基)羰基]胺基)吡啶-2-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙基)-1H-吡唑-1-甲酸第三丁酯(100 mg，0.14 mmol)於EtOH (2mL)中之混合物中添加HCl (2 mL，4 M於二噁烷中)。在80℃下攪拌1小時後，將混合物倒入飽和NaHCO3 中，用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC (DCM/MeOH=10:1)純化殘餘物，得到10 mg 2-(2-(1H-吡唑-3-基)乙基)-6-((6-胺基吡啶-2-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS: m/z 407 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.52 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.60 - 7.10 (m, 2H), 6.30 (d, 1H), 6.18 - 6.02 (m, 2H), 5.90 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.61 - 3.41 (m, 2H), 3.19 - 3.12 (m, 2H)。
實例 4. 合成化合物E4-vii及E4-viii流程 E4
Figure 02_image310
其中Hal為鹵素(例如Br或I)；LG為離去基(例如鹵素，諸如Br或I；OMs；或OTs)；Q如第一至第二十六實施例中之任一者中所定義；且Q'為經進一步官能化之Q(例如視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之碳環或視情況經取代之雜環基)。化合物E4-i與甲硫醇鈉之芳族取代反應提供化合物E4-ii，其可使用化合物E1-iii至E1-vi之合成轉化成化合物E4-v。化合物E4-v用mCPBA氧化分別產生化合物E4-vi及E4-vii。化合物E4-viii可藉由將Q進一步官能化至Q'而由E4-v轉化。
實例 4A. 合成6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-(甲硫基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image312
步驟 A ： 4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 . 向2-溴-4-甲基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(500.0 mg，1.73 mmol)於EtOH (10.0 mL)中之混合物中添加NaSMe (240.0 mg，3.5 mmol)。將反應混合物在25℃下攪拌3小時，隨後用冰水淬滅且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到所需產物(460 mg)，其未經任何純化即直接用於下一步驟中。LC-MS: m/z 257 (M+H)+ 。
步驟 B ： 6- 甲醯基 -4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 . 向4-甲基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(460.0 mg，1.8 mmol)及N-甲基-N-苯基甲醯胺(490 mg，3.6 mmol)於DCE (10 mL)中之溶液中添加POCl3 (550.0 mg，3.6 mmol)。將所得混合物在130℃下攪拌3小時，隨後用冰水淬滅且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 8/1)純化殘餘物，得到所需產物(320.0 mg)。LC-MS: m/z 285 (M+H)+ 。
步驟 C ： 4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向6-甲醯基-4-甲基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(300.0 mg，1.06 mmol)於EtOH (5.0 mL)中之溶液中添加N2 H4 .H2 O (2 mL，98%wt)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時，隨後加熱至60℃隔夜，接著冷卻。藉由過濾收集固體且在高真空下乾燥，得到所需產物(180.0 mg)。LC-MS: m/z 253 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 12.61 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 4.22 (s, 3H), 2.81 (s, 3H)。
步驟 D ： 6-(3- 甲氧基苯甲基 )-4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向4-甲基-2-(甲硫基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(180.0 mg，0.7 mmol)於DMF (5.0 mL)中之溶液中添加碳酸鉀(200 mg，1.4 mmol)。將混合物在60℃下攪拌1小時，隨後添加1-(氯甲基)-3-甲氧基苯(170 mg，1.07 mmol)。將所得混合物在60℃下攪拌3小時，隨後用冰水(100.0 mL)淬滅且用DCM (10.0 mL × 3)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：DCM/MeOH = 10/1)純化殘餘物，得到所需產物(200.0 mg)。LC-MS: m/z 373 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.57 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.88 - 6.82 (m, 3H), 5.32 (s, 2H), 4.24 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 2.82 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0015
實例 4B. 合成4-甲基-2-(甲硫基)-6-((2-側氧基-2,3-二氫嘧啶-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image326
將6-((2-氯嘧啶-4-基)甲基)-4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.132 mmol)於HCl (10 mL)中之混合物在100℃下攪拌1小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(5.0 mg，10.51 %產率)。LCMS: m/z 361 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.82 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 5.22 (s, 2H), 4.24 (s, 3H), 2.82 (s, 4H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。
Figure 107128431-A0304-0016
實例 4C. 合成6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image330
在0℃下，向6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-(甲硫基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(30.0 mg，0.08 mmol)於DCM (3.0 mL)中之溶液中添加m-CPBA (14.0 mg，0.08 mmol)。將所得混合物在0℃下攪拌1小時，隨後用冰水淬滅且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：DCM/MeOH = 10/1)純化殘餘物，得到所需產物(15.0 mg)。LC-MS: m/z 389(M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.74 (s, 1H), 7.25 (t, 1H), 6.86 (dd, 3H), 5.35 (s, 2H), 4.30 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.11 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0017
實例 4D. 合成4-((4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-5-側氧基-4,5-二氫-6H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6-基)甲基)苯甲醯胺
Figure 02_image350
步驟 A ： 4-((4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-5- 側氧基 -4,5- 二氫 -6H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6- 基 ) 甲基 ) 苯甲醯胺 . 將4-((4-甲基-2-(甲硫基)-5-側氧基-4,5-二氫-6H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6-基)甲基)苯甲腈(50.0 mg，0.13 mmol)於H2 SO4 (1.0 mL)中之混合物在0℃下攪拌1小時，隨後用飽和NaHCO3 水溶液中和且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：DCM/MeOH = 10/1)純化殘餘物，得到所需產物(20.0 mg)。LC-MS: m/z 386 (M+H)+ 。
步驟 B ： 4-((4- 甲基 -2-( 甲基亞磺醯基 )-5- 側氧基 -4,5- 二氫 -6H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6- 基 ) 甲基 ) 苯甲醯胺 . 在0℃下，向4-((4-甲基-2-(甲硫基)-5-側氧基-4,5-二氫-6H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6-基)甲基)苯甲醯胺(20.0 mg，0.052 mmol)於DCM (2.0 mL)中之溶液中添加m-CPBA (10.0 mg，0.052 mmol)。將所得混合物在0℃下攪拌1小時，隨後用冰水(10.0 mL)淬滅且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：DCM/MeOH = 10/1)純化殘餘物，得到所需產物(5.0 mg)。LC-MS: m/z 402(M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.75 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.82 (d, 2H), 7.38-7.33 (m, 3H), 5.42 (s, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.11 (s, 3H)。
實例 4E. 合成6-(3-(2-羥基丙-2-基)苯甲基)-4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image352
步驟 A. 6-(3-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 苯甲基 )-4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向6-(3-乙醯基苯甲基)-4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(120 mg，0.31 mmol)於無水THF (5 mL)中之混合物中逐滴添加氯化甲基鎂(0.3 mL，0.9 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，隨後倒入飽和NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。分離有機層且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(70 mg)。LCMS: m/z 401 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.56 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.23 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 5.33 (s, 2H), 4.98 (s, 1H), 4.24 (s, 3H), 2.81 (s, 3H), 1.39 (s, 6H)。
步驟 B. 6-(3-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 苯甲基 )-4- 甲基 -2-( 甲基亞磺醯基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向6-(3-(2-羥基丙-2-基)苯甲基)-4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(46 mg，0.115 mmol)於DCM (3 mL)中之混合物中添加m-CPBA (20 mg，0.1 mmol，85 % w/w)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，隨後用飽和Na2 S2 O3 水溶液淬滅且用DCM萃取。分離有機層且減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(10 mg)。LCMS: m/z 417 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.73 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.24 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.98 (s, 1H), 4.30 (s, 3H), 3.11 (s, 3H), 1.39 (s, 6H)。
實例 4F. 合成6-((2-胺基吡啶-4-基)甲基)-4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image354
步驟 A. 2- 溴 -4-( 溴甲基 ) 吡啶 . 2-溴-4-甲基吡啶(1 g，5.81 mmol)、NBS (1.1 g，6.39 mmol)及催化量之AIBN (100 mg)於CCl4 (10 mL)中之混合物在80℃下攪拌隔夜。減壓濃縮所得混合物且藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 200/1)純化殘餘物，得到所需產物(500 mg)。
步驟 B. 6-((2- 溴吡啶 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.40 mmol)及K2 CO3 (164 mg，1.19 mmol)於DMF (8 mL)中之混合物在60℃下攪拌2小時，隨後添加2-溴-4-(溴甲基)吡啶(199 mg，0.80 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液及催化量之TBAB (13 mg)。將混合物在60℃下攪拌隔夜，隨後用水(20 mL)淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用飽和NH4 Cl水溶液洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 10/1)純化殘餘物，得到所需產物(150 mg)。LCMS: m/z 423 (M+H)+ 。
步驟 C. (4-((4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-5- 側氧基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯 . 6-((2-溴吡啶-4-基)甲基)-4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.24 mmol)、胺基甲酸第三丁酯(83 mg，0.71 mmol)、K3 PO4 (201 mg，0.95 mmol)、Pd2 (dba)3 (18 mg，0.02 mmol)及Xantphos (11 mg，0.02 mmol)於二噁烷(10 mL)中之混合物在100℃下在氮氣下攪拌隔夜。所得混合物用水淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 3/1)純化殘餘物，得到所需產物(100 mg)。LCMS: m/z 459 (M+H)+ 。
步驟 D-E ： (4-((4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-5-側氧基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯係使用與實例4C類似的程序合成，且6-((2-胺基吡啶-4-基)甲基)-4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮係使用與實例3G類似的程序合成。LCMS: m/z 375 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.67 (s, 1H), 7.73 (d, 1H), 6.30 (d, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.89 (s, 2H), 5.24 - 5.03 (m, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.03 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0018
實例 4G. 合成6-((2-胺基噻唑-5-基)甲基)-4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮
Figure 02_image360
步驟 A-B. 與實例4F類似地合成2-溴-5-(溴甲基)噻唑及6-((2-溴噻唑-5-基)甲基)-4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。
步驟 C. 6-((2-((2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 噻唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 6-((2-溴噻唑-5-基)甲基)-4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(130 mg，0.30 mmol)及DIPEA (0.1 mL)於NMP (0.1 mL)及(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(0.1 mL)中之混合物在150℃下攪拌4小時。隨後反應混合物用水(10 mL)淬滅，用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(用PE/EtOAc = 5/1溶離)純化殘餘物，得到所需產物(60 mg，38.4%產率)。LC-MS: m/z 515 (M+H)+ 。
步驟 D. 6-((2-((2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 噻唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-( 甲基亞磺醯基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向6-((2-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)噻唑-5-基)甲基)-4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.10 mmol)於THF (3 mL)中之混合物中添加過硫酸氫鉀(61 mg，0.10 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1小時，隨後用飽和Na2 S2 O3 水溶液(5 mL)淬滅且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到所需產物(30 mg，50.1%產率)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟中。LC-MS: m/z 531 (M+H)+ 。
步驟 E. 與實例3G類似地合成6-((2-胺基噻唑-5-基)甲基)-4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-4H-噻唑并 [5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS: m/z 381 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.70 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.87 (s, 2H), 5.28 (s, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.11 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0019
實例 4H. 合成6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-(甲基磺醯基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image364
在0℃下，向6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(30.0 mg，0.08 mmol)於DCM (3.0 mL)中之溶液中添加m-CPBA (35.0 mg，0.2 mmol)。將所得混合物在0℃下攪拌1小時，隨後用冰水淬滅且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：DCM/MeOH = 10/1)純化殘餘物，得到所需產物(10.0 mg，32%產率)。LC-MS: m/z 405 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.78 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.92 - 6.82 (m, 3H), 5.35 (s, 2H), 4.33 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.57 (s, 3H)。
Figure 107128431-A0304-0020
實例 5. 用流程E5合成式E5-ii化合物及衍生物. 流程E5
Figure 02_image372
其中Q如本發明之第一至第二十六實施例中之任一者中所定義；Nu為親核試劑(亦即向親電子試劑提供電子對以形成與反應相關之化學鍵的化學物種)。Nu'為視情況經取代之烷氧基、視情況經取代之硫醇、視情況經取代之胺基或視情況經官能化之碳親核試劑。
實例 5A. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(苯甲硫基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image374
步驟 A. 2-( 苯甲硫基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向苯基甲硫醇(91.21 mg，734.32 μmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加DIPEA (142.3 mg，1.10 mmol)及4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-((1- ((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(200 mg，0.37 mmol)。將混合物在20℃下攪拌1小時，隨後用水淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/1至3/1)純化殘餘物，得到所需產物(200 mg)。LCMS: m/z 589 (M+H)+
步驟 B. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 苯甲硫基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 將2-(苯甲硫基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，50.95 μmol)於DCM/TFA (V:V = 3:1)中之混合物在20℃下攪拌2小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(5 mg)。LCMS: m/z 459 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.11 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.49 (d, 2H), 7.45 (d, 1H), 7.34 (t, 2H), 7.28 (dd, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.62 (s, 2H), 4.26 (s, 3H)。
實例 5B. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-磺醯胺
Figure 02_image376
步驟 A. 4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 磺醯胺 . 向2-(苯甲硫基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.169 mmol)於HOAc/H2 O (V:V= 1:1，10 mL)中之溶液中添加NCS (45 mg，0.34 mmol)。將混合物在40℃下攪拌3小時，隨後冷卻至0℃，接著在該溫度下緩慢添加NH3 /THF (5 mL)直至pH 9。將所得混合物在20℃下攪拌0.5小時，隨後用EtOAc萃取。減壓濃縮合併之有機層。藉由製備型TLC (溶離劑：PE/EtOAc = 1/1)純化殘餘物，得到所需產物(20 mg)。LCMS: m/z 546 (M+H)+ 。
步驟 B. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 磺醯胺 . 將4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-磺醯胺(20 mg，36.65 μmol)於DCM/TFA (V/V=3/1)中之混合物在20℃下攪拌2小時，隨後減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(1.7 mg)。LCMS: m/z 416 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.13 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.31 (brs, 2H), 8.17 (s, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.36 - 7.20 (m, 1H), 6.99 (d, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.30 (s, 3H)。
Figure 107128431-A0304-0021
實例 5C. 合成2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)丙二酸二甲酯
Figure 02_image390
步驟 A. 2-(4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 丙二酸二甲酯 . 在N2 下，向t-BuOK (103 mg，0.92 mmol)及丙二酸二甲酯(91 mg，0.69 mmol)於THF (5 mL)中之混合物中添加4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(250 mg，0.46 mmol)。將反應混合物在60℃下攪拌16小時，隨後倒入冰水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析純化殘餘物，得到所需產物(100 mg，36.48%產率)。LC-MS: m/z 597 (M+H)+ 。
步驟 B. 2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)丙二酸酯係與實例5A類似地合成。LC-MS: m/z 467 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.12 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.84 (s, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.77 (s, 6H)。
實例 5D. 合成2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙酸甲酯
Figure 02_image392
步驟 A. 2-(4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 乙酸甲酯 . 在N2 下，向2-(4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基) 乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)丙二酸二甲酯(130 mg，0.22 mmol)於DMSO (2 mL)中之溶液中添加飽和LiCl水溶液(0.1 mL)。將所得混合物在130℃下攪拌10分鐘，隨後倒入冰水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。隨後藉由矽膠管柱層析純化殘餘物，得到所需產物(100 mg)。LC-MS: m/z 539 (M+H)+ 。
步驟 B. 2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙酸甲酯係如實例5A中合成。LC-MS: m/z 409 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.12 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.39 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 3.70 (s, 3H)。
實例 5E. 合成2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙醯胺
Figure 02_image394
步驟 A. 2-(4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 乙酸 . 在0℃下在N2 下，向2-(4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙酸甲酯(100 mg，0.186 mmol)於MeOH/H2 O (3 mL/1 mL)中之混合物中添加LiOH (23 mg，0.558 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌16小時，隨後減壓濃縮。殘餘物用HCl水溶液(1 M)酸化且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。殘餘物未經進一步純化即直接用於下一步驟。LC-MS: m/z 525 (M+H)+ 。
步驟 B. 2-(4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 乙醯胺 . 在0℃下，向2-(4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙酸(50 mg，0.095 mmol)、EDCI (37 mg，0.190 mmol)、HOBT (26 mg，0.190 mmol)及DIPEA (0.05 mL，0.286 mmol)於DCM (5 mL)中之混合物中添加NH4 Cl (26 mg，0.477 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌16小時，隨後倒入冰水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析純化殘餘物，得到所需產物(20 mg)。LC-MS: m/z 524 (M+H)+ 。
步驟 C. 2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)乙醯胺係使用如實例5A中之程序合成。LCMS: m/z 394 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.12 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (s, 1H)，7.77 (s, 1H)，7.45 (d, 1H), 7.33-7.22 (m, 2H), 6.96 (d, 1H), 5.66 (s, 2H), 4.27 (s, 3H), 4.07 (s, 2H)。
實例 5F. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醯胺
Figure 02_image396
步驟 A. 4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(1 g，3.96 mmol)於DMF (25 mL)中之混合物中添加NaH (318 mg，7.93 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，隨後在0℃下添加4-(溴甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑(2 g，5.94 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌2小時，隨後倒入冰水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 50/1至10/1)純化殘餘物，得到所需產物(1.85 g)。LCMS: m/z 513 (M+H)+ 。
步驟 B. 4- 甲基 -2-( 甲基磺醯基 )-6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 .
在0℃下，向4-甲基-2-(甲硫基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(700 mg，1.37 mmol)於DCM (20 mL)中之混合物中添加m-CPBA (831 mg，4.01 mmol)。將混合物在室溫下攪拌隔夜，隨後藉由飽和Na2 SO3 水溶液淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析純化殘餘物，得到所需產物(360 mg)。LCMS: m/z 545 (M+H)+ 。
步驟 C. 4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲腈 . 在0℃下，向4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(300 mg，0.552 mmol)於DMF (10 mL)中之混合物中添加KCN(72 mg，1.10 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時，隨後用水淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/1)純化殘餘物，得到所需產物(210 mg)。LCMS: m/z 492 (M+H)+ 。
步驟 D. 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲醯胺 . 將4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲腈(50 mg，0.1 mmol)於濃H2 SO4 (3 mL)中之混合物在室溫下攪拌12小時，隨後用飽和NaHCO3 水溶液淬滅且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(6 mg)。LCMS: m/z 380 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.12 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.33 - 7.23 (m, 1H), 6.98 (d, 1H), 5.68 (s, 2H), 4.33 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure 107128431-A0304-0022
實例 5G. 合成6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-N-羥基-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醯胺
Figure 02_image402
步驟 A. 4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲酸甲酯 . 在0℃下，向4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲腈(100 mg，0.20 mmol)於MeOH (10 mL)中之混合物中添加MeONa (110 mg，0.61 mmol，30%wt)。將反應混合物在室溫下攪拌1.5小時，隨後用飽和HCl (1 M)淬滅且用DCM (30 mL)萃取。合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到呈黃色油狀之所需產物(85 mg)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟。LCMS: m/z 525 (M+H)+ 。
步驟 B. 4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲酸 . 在0℃下，向4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲酸甲酯(90 mg，0.18 mmol)於THF (10 mL)中之混合物中添加LiOH (12 mg，0.48 mmol)於H2 O (10 mL)中之溶液。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，隨後用HCl水溶液(1 M)緩慢調節至pH 5且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到呈白色油狀之所需產物(70 mg，84%粗物質產率)，其未經任何進一步純化即直接用於下一步驟中。LCMS: m/z 511 (M+H)+ 。
步驟 C. 4- 甲基 -5- 側氧基 -N-(( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 )-6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲醯胺 . 在0℃下，向4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲酸(70 mg，0.14 mmol)於DCM (10 mL)中之混合物中添加O-(四氫-2H-哌喃-2-基)羥胺(24 mg，0.21 mmol)、EDCI (39 mg，0.21 mmol)及HOBT (28 mg，0.21 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，隨後用水淬滅且用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到呈黃色油狀之所需產物(35 mg)。LCMS: m/z 610 (M+H)+ 。
步驟 D. 6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-N-羥基-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醯胺係使用實例5A中之程序合成。LCMS: m/z 396 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.12 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.31 (s, 3H)。
實例 5H. 合成2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)-2-苯基乙醯胺
Figure 02_image404
步驟 A. 2-(4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 )-2- 苯乙腈 . 向2-苯乙腈(43 mg，0.36 mmol)於THF (3 mL)中之混合物中添加NaH (14 mg，0.36 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，隨後添加4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(100 mg，0.18 mmol)。將反應混合物在室溫下再攪拌3小時，隨後用水淬滅且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 3/1)純化殘餘物，得到產物(63 mg，59%產率)。LCMS: 582 (M+H)+ 。
步驟 B. 2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)-2-苯基乙醯胺係與實例5F類似地合成。LCMS: m/z 470 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.11 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.13 (s, 1H) 8.01 (s, 1H),7.54-7.24 (m, 8H), 6.94 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 5.51 (s, 1H), 4.24 (s, 3H)。
Figure 107128431-A0304-0023
實例 5I. 合成2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)-2-羥基-2-苯基乙醯胺
Figure 02_image408
將2-(4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)-2-苯乙腈(100 mg，0.18 mmol)於濃H2 SO4 (1 mL)中之混合物在室溫下攪拌2小時，隨後倒入水中且用DCM萃取。減壓濃縮合併之有機層。將殘餘物溶解於MeOH (3 mL)中，隨後添加NH3 .H2 O (3 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，隨後在減壓下。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(2 mg)。LCMS: 486 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.12 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.14 (s, 1H),7.71 (d, 2H), 7.64 (d, 2H),7.52 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.40-7.24 (m, 4H), 6.95 (d, 1H), 5.66 (s, 2H) 4.27 (s, 3H)。
實例 5J. 合成2-(6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)-2-苯基乙酸甲酯
Figure 02_image410
步驟 A. 2-(4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 )-2- 苯基乙酸甲酯 . 向2-苯基乙酸甲酯(43 mg，0.29 mmol)於THF (3 mL)中之混合物中添加NaH (11 mg，0.29 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，隨後添加4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(82 mg，0.15 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌3小時，隨後用水淬滅且用EtOAc萃取。減壓濃縮合併之有機層。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 3/1)純化殘餘物，得到所需產物(20 mg)。LCMS: 615 (M+H)+ 。
步驟 B. 2-(6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 )-2- 苯基乙酸甲酯 . 將2-(4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)-2-苯基乙酸甲酯(40 mg，0.07 mmol)於DCM/TFA (V:V = 1:1，2 mL)中之混合物在室溫下攪拌2小時，隨後倒入水中且用DCM萃取。減壓濃縮合併之有機層。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(5 mg)。LCMS: 485 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.11 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.13 (s, 1H) 7.54-7.50 (m, 2H), 7.46-7.36 (m, 4H), 7.30-7.24 (m, 1H), 6.94 (d, 1H), 5.87 (s, 1H),5.65 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.73 (s, 3H)。
使用上述程序，使用適當起始物質來產生以下化合物。
Figure 107128431-A0304-0024
實例 6. 合成6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-(三氟甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image414
向2-碘-6-(3-甲氧基苯甲基)-4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(90 mg，0.2 mmol)及CuI (催化劑)於DMF (5 mL)中之攪拌混合物中添加2,2-二氟-2-(氟磺醯基)乙酸甲酯(58 mg，0.3 mmol)。將反應混合物在70℃下攪拌4小時，隨後倒入水中且用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：PE/EtOAc = 5/1)純化殘餘物，得到所需產物(10 mg)。LCMS: m/z= 395 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.78 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 6.90-6.82 (m, 3H), 5.34 (s, 2H), 4.32 (s, 3H) 3.72 (s, 3H)。
實例 7. 合成化合物 E7-v 及 E7-viii 流程E7
Figure 02_image416
化合物E7-iii與化合物E7-i及/或化合物E7-ii之間的親核芳族取代產生中間物E7-iv。化合物E7-iv之苯磺醯基還原得到中間物E7-v。使用E7-vi及鹼(例如K2 CO3 、K3 PO4 、t-BuOK或Cs2 CO3 )之標準烷基化反應產生化合物E7-viii，其中Xa 為離去基，諸如Cl、Br、I、OMs、OTs；Ar1 及Ar2 各自獨立地為視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之碳環或視情況經取代之雜環基；視情況經取代之烷基、視情況經取代之烷芳基、視情況經取代之烷基雜芳基、視情況經取代之烯基及視情況經取代之炔基。化合物E7-viii亦可使用氰基亞甲基三丁基磷烷(CMBP)在甲苯中經由光延反應(Mitsunobu reaction)由中間物E7-v合成。在某些實施例中，Ar1及Ar2各自獨立地為視情況經取代之雜芳基。
實例 7A. 合成 4- 甲基 -2-( 甲基亞磺醯基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 ( 中間物 E7-i)
Figure 02_image418
在室溫下，向4-甲基-2-(甲硫基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(1.01 g，4.0 mmol)於DCM (20 mL)中之攪拌懸浮液中添加3-氯-過氧苯甲酸(0.77 g，3.8 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。隨後過濾混合物，用EtOAc洗滌且用MeOH濕磨，得到4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(600 mg)。LCMS: m/z 269 (M+H)+ 。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.78(s, 1H), 8.64 (s, 1H), 4.28 (s, 3H), 3.11 (s, 3H)。
實例 7B. 合成 4- 甲基 -2-( 甲基磺醯基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 (E7-ii)
Figure 02_image420
在20℃下，將m-CPBA (61.5 g，3 eq)分三份添加至裝有含4-甲基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(30 g，0.119 mol，1.0 eq)之DCM (600 mL)的三頸燒瓶。將混合物在30℃下攪拌隔夜，LC-MS表明起始物質100%消耗。將混合物冷卻至室溫，再添加一份m-CPBA (1.0 eq)。將反應混合物在30℃下攪拌2小時，LC-MS指示E7-ii (LCMS: m/z 269 (M+H)+ )。將混合物冷卻至室溫且過濾。將濾餅懸浮於MeOH (500 mL)中且在室溫下攪拌1小時。藉由過濾收集固體，用乙酸乙酯洗滌，真空乾燥，得到28 g 5%之E7-i與95%之E7-ii之混合物。將混合物(28 g)懸浮於DMSO (600 mL)中，加熱至120℃ ~ 130℃以形成澄清溶液。隨後冷卻至室溫，沈澱固體。過濾混合物且乾燥，得到23 g純E5-1，LCMS: m/z 285 (M+H)+ 。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ12.87 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 4.32 (s, 3H), 3.56 (s, 3H)。
實例 7C. 合成3-((苯磺醯基)甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑
Figure 02_image422
1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯 在0℃下在N2 氛圍下，向1H-吡唑-3-甲酸甲酯(90 g，0.72 mol)於THF (1 L)中之攪拌溶液中添加NaH (20.7 g，0.864 mol，60 %)。將所得混合物緩慢升溫至室溫且攪拌1小時。隨後將反應混合物冷卻回至0℃且逐滴添加SEMCl (151.5 mL，0.842 mol)。再繼續攪拌2小時，隨後用飽和NH4 Cl淬滅且用乙酸乙酯萃取(3×)。合併之有機層用鹽水洗滌且經Na2 SO4 乾燥。真空移除溶劑，得到粗產物210 g，其未經純化即用於下一步驟中。
(1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲醇 在0℃下在N2 氛圍下，向LAH (16.9 g，0.44 mol)於THF (760 mL)中之懸浮液中添加粗製1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(76 g)。將所得混合物緩慢升溫至室溫且攪拌1小時。將反應混合物冷卻回至0℃且相繼添加H2 O (15.6 mL)、10 % NaOH (15.6 mL)、H2 O (15.6 mL)。所得混合物經由矽藻土墊過濾且用MTBE洗滌(4×)。合併之有機溶離份經Na2 SO4 乾燥。減壓移除溶劑，得到粗產物69.4 g，其未經純化即用於下一步驟中。LC-MS: m/z 229 (M+H)+ 。
3-( 碘甲基 )-1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 在0℃下在N2 氛圍下，向(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲醇(61.5 g，理論上0.262 mol)於THF (310 mL)中之攪拌溶液中添加TEA (55.42 mL，0.393 mol)，隨後添加MsCl (24 mL，0.314 mol)。將反應物升溫至室溫且攪拌1小時，隨後引入NaI (196.5 g，1.31 mol，於310 mL DMF中)。將所得混合物再攪拌1小時且用冰水淬滅，用MTBE萃取(3×)。合併之有機層用飽和Na2 S2 O3 及鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到77.5 g粗產物，其未經純化即用於下一步驟中。LC-MS: m/z 339 (M+H)+ 。
3-(( 苯磺醯基 ) 甲基 )-1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 在0℃下在N2 氛圍下，向(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲醇(77.5 g，理論上0.229 mol)於DMF (600 mL)中之攪拌溶液中添加苯亞磺酸鈉(53.5 g，0.32 mol)且在0℃下攪拌1小時。在升溫至室溫後，反應混合物用冰水及飽和Na2 S2 O3 淬滅，用乙酸乙酯萃取(3 x)。合併之有機層相繼用飽和NaHCO3 及鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥。真空移除溶劑且藉由急驟層析(矽膠，20 % ~ 70 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到56.7 g。LCMS: [M + H]+ 353。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7.85-7.77 (m, 4H), 7.62 (dd, 2H), 6.19 (d, 1H), 5.35 (d, 2H), 4.70 (d, 2H), 3.44-3.38 (m, 2H), 0.88-0.77 (m, 2H), -0.01 (s, 9H)。
實例 7D. 合成4-甲基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮
Figure 02_image424
4- 甲基 -2-(( 苯磺醯基 )(1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在-40℃下，向3-((苯磺醯基)甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(1.8 g，5.1 mmol)於無水THF (30 mL)中之溶液中逐滴添加LiHMDS (7.5 mL，7.5 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，隨後在室溫下添加4-甲基-2-(甲基亞磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(580 mg，2.7 mmol)於無水THF (30 mL)中之懸浮液。將混合物在室溫下再攪拌1小時，倒入冰冷卻之飽和NH4 Cl水溶液(20 mL)中且用EtOAc (3×100 mL)萃取。將合併之有機層用水(60 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 2.5 %甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到所需產物(800 mg)。LC-MS (ESI) 實驗值：557 (M+H)+ 。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.78 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.84-7.78 (m, 3H), 7.67-7.59 (m, 2H), 6.94 (s, 1H), 6.72 (d, 1H), 5.48 (d, 2H), 4.29 (s, 3H), 3.56 (dd, 2H), 0.88 (dd, 2H), 0.00 (s, 9H)。
4- 甲基 -2-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在N2 下，在冰浴下向4-甲基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(0.8 g，1.41 mmol)於THF (5 mL)及MeOH (10 mL)中之混合物中逐滴添加SmI2 (0.1M/THF，45 mL)。在攪拌10分鐘後，反應物用飽和NH4 Cl水溶液(50 mL)淬滅且用EAOAc (50 mL × 3)萃取。將合併之有機層用水(60 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 3 %甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物，得到所需產物(310 mg)。LC-MS)實驗值：417 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.31 (s, 1H), 7.60 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 5.49 (s, 2H), 4.58 (s, 2H), 4.43 (s, 3H), 3.62 (t, 2H), 0.95 (t, 2H), 0.0 (s, 9H)。
實例 7E. 合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-6-((1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image426
步驟 A. 1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 甲酸甲酯 . 在0℃下，向1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-甲酸甲酯(900 mg，5.1 mmol)於無水DMF (10 mL)中之溶液中逐份添加NaH (305 mg，7.6 mmol，60 %)。將懸浮液在冰浴下攪拌15分鐘，隨後逐滴引入(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(1.07 mL，6.0 mmol)且在室溫下再攪拌1小時。隨後將混合物倒入飽和NH4 Cl (aq.)中，用乙酸乙酯萃取。合併之有機層用無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 30 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-甲酸甲酯(1.32 g)。LCMS: m/z 308 (M+H)+ 。
步驟 B. (1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 基 ) 甲醇 . 在冰浴下，向1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-甲酸甲酯(1 g，3.2 mmol)於無水THF (10 mL)中之溶液中逐份添加LiHAl4 (146 mg，3.8 mmol)。將混合物在0℃下攪拌30分鐘。隨後將懸浮液倒入飽和NH4 Cl (aq.)中，用乙酸乙酯萃取(2×)。合併之有機層用無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 60 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-基)甲醇(500 mg)。LCMS: m/z 280 (M+H)+ 。
步驟 C. 4-( 氯甲基 )-1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 向(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-基)甲醇(120 mg，0.43 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液中添加PPh3 (225 mg，0.86 mmol)。將混合物冷卻至0℃且添加NCS (114 mg，0.86 mmol)。將懸浮液升溫至室溫且再攪拌1小時。隨後將反應物倒入飽和NaHCO3 (aq.)中。用二氯甲烷萃取水溶液。合併之有機層用無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 30 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈油狀之4-(氯甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(70 mg)。LCMS: m/z 298 (M+H)+ 。
步驟 D. 4- 甲基 -2-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向K2 CO3 (41 mg，0.3 mmol)於無水DMF (2 mL)中之混合物中添加4-甲基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(41 mg，0.1 mmol)且在氬氣下在50℃下攪拌30分鐘。添加4-(氯甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(30 mg，0.1 mmol)於DMF (1 mL)中之溶液且再攪拌4小時。將懸浮液冷卻至室溫且倒入0.5 N HCl (aq.)中。分離各層且用乙酸乙酯萃取水層。合併之有機層用無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到4-甲基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(40 mg，60 %)。LCMS: m/z 678 (M+H)+ 。
步驟 E. 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-6-((1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 將4-甲基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，0.044 mmol)於35% TFA (1 mL，於二氯甲烷中)中之溶液在室溫下攪拌隔夜。濃縮混合物且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到2-((1H-吡唑-3-基)甲基)-6-((1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(3 mg)。LCMS: m/z 418 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.51 (s, 1H), 12.78 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.43 (d, 1H), 6.27 (d, 1H), 5.78 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.25 (s, 3H)。
實例 7F. 合成 6-((1H- 咪唑 -2- 基 ) 甲基 )-2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image428
步驟 A. 1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 咪唑 -2- 甲醛： NaH之樣品在N2 下用己烷(2 × 10 mL)洗滌。燒瓶裝有無水DMF (20 mL)且以小份添加1H-咪唑-2-甲醛(500 mg，5.2 mmol)。在室溫下攪拌1.5小時後，逐滴添加SEMCl (864 mg，5.2 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。將反應混合物倒入水中，用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，減壓濃縮，得到粗製1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲醛(800 mg)。LCMS: 227 (M+H)+ 。
步驟 B. (1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 咪唑 -2- 基 ) 甲醇： 在0℃下，向1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲醛(1.6 g，7 mmol)於THF (20 mL)中之攪拌混合物中添加NaBH4 (1.34 g，35 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。將反應混合物倒入NH4 Cl水溶液中且用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，減壓濃縮，得到粗製(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲醇(1.3 g)。
步驟 C. 2-( 氯甲基 )-1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 咪唑： 在室溫下，向(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲醇(400 mg，1.75 mmol)於DCM (20 mL)中之攪拌混合物中添加NCS (466 mg，3.5 mmol)及PPh3 (920 mg，3.5 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入水中且用DCM萃取。用水洗滌混合物且減壓濃縮有機層。藉由製備型TLC (PE:EtOAc=1:1)純化殘餘物，得到2-(氯甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑。LCMS: 247 (M+H)+ 。在60℃下在N2 下，向4-甲基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.12 mmol)於無水DMF (5 mL)中之攪拌混合物中添加K2 CO3 (66 mg，0.48 mmol)。在20分鐘後，在60℃下在N2 下，添加含化合物E7 - 3 (60 mg，0.24 mmol)之無水DMF (2 mL)。在60℃下在N2 下攪拌混合物1.5小時。將反應混合物冷卻至室溫且用0.5N HCl水溶液調節至pH= 5~6。隨後用EtOAc萃取混合物，用水及鹽水洗滌。有機層經Na2 SO4 乾燥，減壓濃縮且藉由製備型TLC (PE:EtOAc=1:1.5)純化，得到4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基)-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(25 mg)。LCMS: 627 (M+H)+ 。將4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基)-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(25 mg，0.04 mmol)於DCM/TFA (2 mL/2 mL)中之混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(1.3 mg)。LCMS: 367 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 1H), 7.66 (d, 1H), 6.9 (s, 2H), 6.27 (d, 1H), 5.34 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.27 (s, 3H)。
根據流程E7及實例7C-7E之程序，使用適當起始物質合成以下化合物。
Figure AA200-1
Figure AA200-2
Figure AA200-3
Figure AA200-4
Figure AA200-5
Figure AA200-6
Figure AA200-7
Figure AA200-8
Figure AA200-9
Figure AA200-10
Figure AA200-11
Figure AA200-12
Figure AA200-13
Figure AA200-14
Figure AA200-15
Figure AA200-16
Figure AA200-17
Figure AA200-18
Figure AA200-19
Figure AA200-20
Figure AA200-21
Figure AA200-22
Figure AA200-23
Figure AA200-24
Figure AA200-25
Figure AA200-26
Figure AA200-27
Figure AA200-28
Figure AA200-29
實例 7F. 合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-(2-( 噻唑 -4- 基 ) 乙基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image704
步驟 A. 合成 2-( 噻唑 -4- 基 ) 乙酸乙酯 向2-(2-胺基噻唑-4-基)乙酸乙酯(2 g，10.7 mmol)於THF (30 mL)中之溶液中添加t-BuONO (1.6 g，16.1 mmol)。將反應混合物在50℃下攪拌16小時。在冷卻至室溫後，將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，80-100% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到2-(噻唑-4-基)乙酸乙酯(400 mg)。LC-MS (ESI): m/z 172 (M+1)+ 。
步驟 B. 合成 2-( 噻唑 -4- 基 ) 乙醇 向2-(噻唑-4-基)乙酸乙酯(400 mg，2.3 mmol)於DCM (20 mL)中之攪拌溶液中添加DIBAL-H (4.7 mL，7.0 mmol)。將反應混合物在室溫下在N2 下攪拌3小時。將反應物用飽和NaHCO3 淬滅，用DCM萃取且將有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，50-100% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到2-(噻唑-4-基)乙醇(200 mg)。LC-MS (ESI): m/z 130 (M+1)+ 。
步驟 C. 合成 4- 甲基 -6-(2-( 噻唑 -4- 基 ) 乙基 )-2-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向4-甲基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(60 mg，0.14 mmol)及2-(噻唑-4-基)乙醇(55 mg，0.4 mmol)於甲苯(5 mL)中之混合物中添加CMBP (104 mg，0.4 mmol)。將反應混合物在110℃下在N2 下攪拌3小時。在冷卻至室溫後，將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，80-100% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到60 mg 4-甲基-6-(2-(噻唑-4-基)乙基)-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS: m/z 528 (M+1)+ 。
步驟 D. 合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-(2-( 噻唑 -4- 基 ) 乙基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向4-甲基-6-(2-(噻唑-4-基)乙基)-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(60 mg，0.1 mmol)於DCM (1 mL)中之溶液中添加TFA (0.5 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。反應混合物用飽和NaHCO3 調節至pH = 7.5，用DCM萃取，用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，真空濃縮。藉由製備型TLC (10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到10 mg 2-((1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-6-(2-(噻唑-4-基)乙基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS: m/z 398 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.03 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.58 - 4.40 (m, 4H), 4.26 (s, 3H), 3.23 (t,2H)。
Figure 107128431-A0304-0025
實例 8. 合成化合物 E8-v 、 E8-vi 及 E8-viii 流程E8
Figure 02_image712
Figure 02_image714
化合物E8-i可經由如實例E7-v至E7-viii中之烷基化或光延反應轉化成中間物E8-ii。用mCPBA或過硫酸氫鉀氧化E8-ii產生化合物E8-v及E8-vi。化合物E8-v及E8-vi亦可由E8-i藉由首先氧化隨後烷基化或光延反應而形成。其中Xa 為離去基(例如Cl、Br、I、OMs、OTs)；化合物E8-v及E8-vi可經由與化合物E8-vii之親核芳族取代反應，使用LiHMDS或t-BuOK作為鹼而轉化成中間物E8-viii。化合物E8-xi可由化合物E8-viii使用SmI2或含Zn之AcOH或TES與AlCl3 合成。如本文所用，R1為視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之碳環或視情況經取代之雜環基；Ar1及Ar2各自獨立地為視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之碳環或視情況經取代之雜環基；視情況經取代之烷基、視情況經取代之烷芳基、視情況經取代之烷基雜芳基、視情況經取代之烯基及視情況經取代之炔基。在某些實施例中，R1為視情況經取代之C1-6烷基(例如甲基或乙基)。在某些實施例中，R1為C1-6烷基；且Ar1及Ar2各自獨立地為視情況經取代之雜芳基
實例 8A. 合成 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-((5- 氯 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image716
5- 氯 -1- 三苯甲基 -1H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯： 在室溫下，向5-氯-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(100 mg，0.575 mmol)及TEA (0.24 mL，1.44 mmol)於無水DCM (10 mL)中之攪拌混合物中添加TrtCl (192 mg，0.689 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時且隨後倒入H2 O中。用DCM萃取所得混合物。有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0-4%乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到所需產物(粗物質，240 mg，100%)。
(5- 氯 -1- 三苯甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲醇： 在-30℃下，向5-氯-1-三苯甲基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(1.20 g，2.88 mmol)於無水THF (10 mL)中之攪拌混合物中添加LAH (400 mg, 10.5 mmol)。將反應混合物在-30℃下攪拌0.5小時。緩慢添加Na2 SO4 10H2 O (2 g)以淬滅反應物。所得混合物用EtOAc稀釋且經由矽藻土墊過濾。濃縮濾液且藉由急驟層析(矽膠，10 % ~ 15 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到所需產物(540 mg)。
甲磺酸 (5- 氯 -1- 三苯甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲酯： 在10℃下，向(5-氯-1-三苯甲基-1H-吡唑-3-基)甲醇(100 mg，0.267 mmol)及DIPEA (0.14 mL，0.801 mmol)於無水DCM (10 mL)中之攪拌混合物中添加MsCl (46 mg，0.401 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時。用水淬滅反應混合物。用DCM (2×)萃取所得混合物。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到呈黏性油狀之所需產物(粗物質，150 mg)。
5- 氯 -3-(( 苯磺醯基 ) 甲基 )-1- 三苯甲基 -1H- 吡唑： 在室溫下，向甲磺酸(5-氯-1-三苯甲基-1H-吡唑-3-基)甲酯(150 mg粗物質，0.267 mmol)於無水DMF (10 mL)中之攪拌混合物中添加PhSO2 Na (100 mg，0.610 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌20小時。用水稀釋反應混合物。用EtOAc (2×)萃取所得混合物。有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC (溶離劑：PE/EtOAc =3/1)純化殘餘物，得到所需產物(80 mg)。LCMS: m/z 521 (M+Na)+ 。
2-((5- 氯 -1- 三苯甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 )( 苯磺醯基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 ：在10℃下，向5-氯-3-((苯磺醯基)甲基)-1-三苯甲基-1H-吡唑(100 mg，0.2 mmol)及4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.2 mmol)於無水THF (10 mL)中之混合物中逐滴添加LiHMDS (1 mL，10 mmol，1M於THF中)。將反應混合物在室溫下攪拌10分鐘且倒入NH4 Cl水溶液中。用EtOAc (2×)萃取後續混合物。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 30 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到呈黃色油狀之所需產物E8 - 3 (75 mg)。LCMS: m/z 985 (M+Na)+ 。
2-((5- 氯 -1- 三苯甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在室溫下在N2 下，向化合物E8 - 3 (75 mg，0.0779 mmol)於THF (5 mL)及MeOH (5 mL)中之混合物中添加SmI2 (5 mL，0.1M於THF中)。將反應混合物在室溫下攪拌10分鐘且隨後用水淬滅。用EtOAc (2×)萃取後續混合物。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC (PE/EtOAc =2/1)純化殘餘物，得到2-((5-氯-1-三苯甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg)。LCMS: m/z 845 (M+23)+。
6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-((5- 氯 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在室溫下在N2 下，向2-((5-氯-1-三苯甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.0608 mmol)於DCM (6 mL)中之混合物中添加TFA (2 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時。後續混合物用NaHCO3 水溶液調節至pH=8，用80 % DCM/iPrOH (2×)萃取。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型HPLC (C18，0 ~ 50 %乙腈/含0.1%甲酸之H2 O)純化殘餘物，得到所需產物(10 mg)。LCMS: m/z 451 (M+H)+。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.10-13.2 (brs, 2H), 8.58 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.43-7.46 (m, 1H), 7.25-7.30 (m, 1H), 6.94-6.97 (m, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 4.27 (s, 3H)。
實例 8B. 合成 2-((1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-(3-( 三氟甲氧基 ) 苯甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image718
步驟 A. 合成 4- 甲基 -2-( 甲硫基 )-6-(3-( 三氟甲氧基 ) 苯甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下在N2 下，向NaH (130 mg，3.2 mmol)於DMF (4 mL)中之溶液中添加4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(270 mg，1.1 mmol)。在5分鐘後，將1-(溴甲基)-3-(三氟甲氧基)苯(420 mg，1.65 mmol)於DMF (2 mL)中之混合物添加至反應混合物中。將混合物在室溫下攪拌2小時。反應物用飽和NH4 Cl淬滅且用EA萃取。有機層用飽和NaCl (3×)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 30 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到4-甲基-2-(甲硫基)-6-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(420 mg)。LCMS: 427 (M+H)+
步驟 B. 合成 4- 甲基 -2-( 甲基磺醯基 )-6-(3-( 三氟甲氧基 ) 苯甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下在N2 下，向4-甲基-2-(甲硫基)-6-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(420 mg，0.99 mmol)於DCM (10 ml)中之溶液中添加mCPBA (520 mg，3.0 mmol)。將反應混合物繼續攪拌隔夜。溶液用飽和Na2 S2 O3 淬滅且用DCM (3×)萃取。合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 50 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(330 mg)。LCMS: m/z 459 (M+H)+ 。
步驟 C. 合成 4- 甲基 -2-(( 苯磺醯基 )(1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 甲基 )-6-(3-( 三氟甲氧基 ) 苯甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 在65℃下，向4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(165 mg，0.36 mmol)及4-((苯磺醯基)甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-1,2,3-三唑(50 mg，0.54 mmol)於無水DMF (10 mL)中之混合物中添加Cs2 CO3 (351 mg，1.08 mmol)。將反應混合物在65℃下攪拌2小時且倒入NH4 Cl水溶液中。用EtOAc (2×)萃取所得混合物。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 35 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到所需產物4-甲基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-6-(3-(三氟甲氧基)苯甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(E8-6) (200 mg)。LCMS: m/z 732 (M+H)+ 。
步驟 D. 合成 2-((1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-(3-( 三氟甲氧基 ) 苯甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 類似於實例8A，化合物E8-6與SmI2 反應，隨後用TFA去保護，得到所需產物。LCMS: 462 (M+H)+ 。1 HNMR (400 MHz, DMSO) δ 8.52 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.46 (dd, 1H), 7.39-7.2 (m, 3H), 5.40 (s, 2H), 4.63 (s, 2H), 4.26 (s, 3H)。
實例 8C. 合成 2,6- 雙 ((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image720
步驟 A ： 4-(( 苯硫基 ) 甲基 )-1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 . 向4-(溴甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑(340 mg，1.0 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加苯硫醇鈉(265 mg，2 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時，隨後用冰水(10.0 mL)淬滅且用EtOAc (3 × 50.0 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到粗產物(370 mg)，其直接用於下一步驟中。LCMS: m/z 371 (M+H)+ 。
步驟 B ： 4-(( 苯磺醯基 ) 甲基 )-1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 . 在0℃下，向4-((苯硫基)甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑(370 mg)於THF (20 mL)中之溶液中添加過硫酸氫鉀(2.15 g，3.5 mmol)於H2 O (20 mL)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌1小時，隨後用冰水(50 mL)淬滅且用AcOEt (3 × 50.0 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析(溶離劑：EA/PE=1/5)純化殘餘物，得到所需產物(300 mg)。LCMS: m/z 403 (M+H)+ 。
步驟 C ： 4- 甲基 -2-(( 苯磺醯基 )(1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在-40℃下，向4-((苯磺醯基)甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑(163 mg，0.40 mmol，2.2 eq)於無水THF (5 mL)中之溶液中逐滴添加LiHMDS (0.46 mL，0.46 mmol，2.5 eq)。將混合物在此溫度下攪拌10分鐘，隨後在-40℃下逐滴添加4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.18 mmol，1.0 eq)於無水THF (3 mL)中之溶液。將混合物在此溫度下再攪拌30分鐘直至完成。將所得混合物倒入冰的飽和NH4 Cl水溶液(20 mL)中且用EtOAc (3 × 10 mL)萃取。合併之有機層用水(20 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC純化殘餘物，得到所需產物(100 mg)。LCMS: m/z 867 (M+H)+ 。
步驟 D ： 2,6- 雙 ((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在N2 下，向4-甲基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.06 mmol，1.0 eq)於無水DCE (2 mL)中之溶液中添加AlCl3 (38 mg，0.30 mmol，5.0 eq)及TES (34 mg，0.30 mmol，5.0 eq)。將混合物加熱至60℃持續30分鐘，隨後冷卻至室溫，倒入水(10 mL)中且用DCM/MeOH (V:V=20:1，3 × 10 mL)萃取。合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(5 mg)。LCMS: m/z 467 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.15 (s, 1H), 13.10 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.38 - 7.30 (m, 1H), 7.29 - 7.21 (m, 1H), 7.14 (d, 1H), 6.93 (d, 1H), 5.64 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.28 (s, 3H)。
實例 8D. 合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-6-((6- 胺基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮及 6-((6- 胺基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-(1H- 吡唑 -3- 羰基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image722
步驟 A N-[( 第三丁氧基 ) 羰基 ]-N-[6-({4- 甲磺醯基 -7- 甲基 -9- 側氧基 -3- 硫雜 -5,7,10,11- 四氮雜三環 [6.4.0.0{2,6}] 十二 -1(8),2(6),4,11- 四烯 -10- 基 } 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ] 胺基甲酸第三丁酯 在N2 下，在70℃下攪拌4-甲基-2-(甲基磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(7.5 g，26.4 mmol)及K3 PO4 (8.3 g，39.3 mmol)於無水MeCN (300 mL)中之混合物1小時。隨後添加N-[(第三丁氧基)羰基]-N-[6-(溴甲基)吡啶-2-基]胺基甲酸第三丁酯(11.2 g，29.0 mmol)於MeCN (30 mL)中之溶液。在N2 下在70℃下攪拌2.5小時後，反應混合物用飽和NH4 Cl淬滅且用EA (300 mL × 3)萃取。將合併之有機層用水及鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮有機相。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 50 %乙酸乙酯/石油醚)純化粗產物，得到N-[(第三丁氧基)羰基]-N-[6-({4-甲磺醯基-7-甲基-9-側氧基-3-硫雜-5,7,10,11-四氮雜三環[6.4.0.0{2,6}]十二-1(8),2(6),4,11-四烯-10-基}甲基)吡啶-2-基]胺基甲酸第三丁酯(5.5 g)。LC-MS (ESI)實驗值：591.1 (M+H)+ 。
步驟 B. (6-((4- 甲基 -5- 側氧基 -2-(( 苯磺醯基 )(1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯 . 在-40℃下在氬氣下，向3-((苯磺醯基)甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(11.9 g，33.8 mmol)於無水THF (200 mL)中之攪拌混合物中添加LiHMDS (50 mL，1 M於THF中)。在10分鐘後，將混合物升溫至10℃且攪拌1小時，隨後添加N-[(第三丁氧基)羰基]-N-[6-({4-甲磺醯基-7-甲基-9-側氧基-3-硫雜-5,7,10,11-四氮雜三環[6.4.0.0{2,6}]十二-1(8),2(6),4,11-四烯-10-基}甲基)吡啶-2-基]胺基甲酸第三丁酯(9.1 g，15.4 mmol於35 mL THF中)。將反應物在10℃下再攪拌30分鐘。將反應混合物倒入NH4 Cl水溶液中，用EtOAc (200 mL × 3)萃取。將合併之有機層用水及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 50 %乙酸乙酯/石油醚)純化粗產物，得到(6-((4-甲基-5-側氧基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(6.6 g)。LC-MS (ESI)實驗值：763.2 (M+H)+ 。
步驟 C. (6-((4- 甲基 -5- 側氧基 -2-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯 在Zn (2.55 g，117.9 mmol)存在下，在劇烈攪拌下，將(6-((4-甲基-5-側氧基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(6.0 g，7.86 mmol)於EtOH/AcOH (35 mL/50 mL)中之溶液加熱至50℃持續40分鐘。每隔40分鐘再添加鋅(2.55 g，兩次，藉由TLC/LC-MS監測反應以避免副產物及過度還原之產物)。過濾溶液且用DCM洗滌濾餅。將濾液部分蒸發，用飽和NaHCO3 溶液中和，經MgSO4 乾燥且真空移除溶劑。藉由急驟層析(矽膠，DCM : MeOH= 40:1)純化粗產物，得到(6-((4-甲基-5-側氧基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(3.1 g)。LC-MS (ESI)實驗值：623.3 (M+H)+ 。
步驟 D. 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-6-((6- 胺基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向(6-((4-甲基-5-側氧基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(3.0 g，4.8 mmol)於乙醇(30 mL)中之混合物中添加HCl (30 mL，4 M於二噁烷中)。將反應混合物在80℃下攪拌40分鐘。將反應混合物冷卻至室溫，過濾且收集固體，懸浮於水中且在10℃下用NaHCO3 水溶液中和。過濾得到所需化合物2-((1H-吡唑-3-基)甲基)-6-((6-胺基吡啶-2-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(1.5 g)。LC-MS (ESI)實驗值：393.2 (M+H)+ 。1 HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.78 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.72(s, 1H), 7.25 (dd, 1H), 6.33 - 6.24 (m, 2H), 6.08 (d, 1H), 5.90 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 4.49 (s, 2H), 4.26 (s, 3H)。
步驟 E. 合成 (6-((4- 甲基 -5- 側氧基 -2-(1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 羰基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6(5H)- 基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯 向(6-((4-甲基-5-側氧基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(100 mg，0.16 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液中添加K2 CO3 (88 mg，0.64 mmol)。將混合物在70℃下攪拌8小時。將混合物倒入水中，藉由過濾收集沈澱物且藉由製備型TLC (2% MeOH/DCM)純化，得到(6-((4-甲基-5-側氧基-2-(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-羰基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(20 mg)。LC-MS (ESI): m/z 637 (M+H)+ 。
步驟 F. 合成 6-((6- 胺基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-(1H- 吡唑 -3- 羰基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向(6-((4-甲基-5-側氧基-2-(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-羰基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6(5H)-基)甲基)吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁酯(20 mg，0.03 mmol)於EtOH (1 mL)中之溶液中添加HCl (1 mL，4 mol/L於二噁烷中)。將混合物在80℃下攪拌1小時且冷卻。藉由過濾收集沈澱物且用飽和NaHCO3 中和，用水洗滌且乾燥，得到5 mg 6-((6-胺基吡啶-2-基)甲基)-4-甲基-2-(1H-吡唑-3-羰基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 407 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ: 8.75 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.31-7.22 (m, 1H), 6.31 (d, 1H), 6.14 (d, 1H), 5.91 (s, 2H), 5.23 (s, 2H), 4.38 (s, 3H)。
實例 8E. 合成 6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-((6-( 二甲基胺基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮
Figure 02_image724
步驟 A. (6-( 二甲基胺基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲醇 . 向(6-氯吡啶-2-基)甲醇(500 mg，2.67 mmol)於含二甲胺之THF (35 mL)中之溶液中添加Pd(OAc)2 (78 mg，0.35 mmol)、Xantphos (170 mg，0.29 mmol)及t -BuONa (385 mg，4.01 mmol)。將反應混合物在100℃下攪拌18小時。過濾反應混合物且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 35 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到(6-(二甲基胺基)吡啶-2-基)甲醇(180 mg)。LCMS: 153 (M+H)+ 。
步驟 B. 6-( 氯甲基 )-N,N- 二甲基吡啶 -2- 胺 . 在0℃下，向(6-(二甲基胺基)吡啶-2-基)甲醇(170 mg，1.1 mmol)於DCM (10 mL)中之攪拌混合物中添加SOCl2 (665 mg，5.6 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時。用NaHCO3 水溶液將反應混合物調節至pH= 7~8。隨後將混合物用DCM萃取，用水及鹽水洗滌。有機層經Na2 SO4 乾燥，減壓濃縮，得到6-(氯甲基)-N,N-二甲基吡啶-2-胺(70 mg)。LCMS: 171 (M+H)+ 。
步驟 C. N,N- 二甲基 -6-(( 苯磺醯基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 胺 . 在室溫下，向6-(氯甲基)-N,N-二甲基吡啶-2-胺(500 mg，2.94 mmol)於DMSO (10 mL)中之攪拌混合物中添加PhSO2 Na (1.44 g，8.82 mmol)。將混合物在室溫下攪拌18小時。將反應混合物倒入水中且用DCM萃取。用水洗滌混合物且減壓濃縮有機層。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 20 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到N,N-二甲基-6-((苯磺醯基)甲基)吡啶-2-胺(380 mg)。LCMS: 277 (M+H)+ 。
步驟 D. 2-((6-( 二甲基胺基 ) 吡啶 -2- 基 )( 苯磺醯基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在60℃下在N2 下，向4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(180 mg，0.36 mmol) (其與實例8A中化合物E8-1類似地合成)於無水THF (10 mL)中之攪拌混合物中添加N,N-二甲基-6-((苯磺醯基)甲基)吡啶-2-胺(120 mg，0.44 mmol)及t -BuOK (122 mg，1.1 mmol)。在60℃下在N2 下攪拌混合物2小時。隨後將混合物倒入水中且用EtOAc萃取，用水及鹽水洗滌。有機層經Na2 SO4 乾燥，減壓濃縮且藉由製備型TLC (PE: EtOAc=1: 1.5)純化，得到2-((6-(二甲基胺基)吡啶-2-基)(苯磺醯基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg)。LCMS: 691 (M+H)+ 。
步驟 E. 2-((6-( 二甲基胺基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在室溫下在N2 下，向2-((6-(二甲基胺基)吡啶-2-基)(苯磺醯基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.07 mmol)於THF (5 mL)及MeOH (5 mL)中之混合物中添加-40℃下之SmI2 (5 mL，0.1 M於THF中)。將反應混合物在-40℃下攪拌10分鐘且隨後用水淬滅。後續混合物用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC (PE/EtOAc =1/1.5)純化殘餘物，得到所需產物(10 mg)。LCMS: m/z 551 (M+H)+。
步驟 F. 6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-((6-( 二甲基胺基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在室溫下攪拌2-((6-(二甲基胺基)吡啶-2-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(10 mg，0.018 mmol)於DCM/TFA (2 mL/2 mL)中之混合物1小時。濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(1.4 mg)。LCMS: 421 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.51 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.48 (dd, 1H), 6.64 (d, 1H), 6.54 (d, 1H), 6.11 (d, 1H), 5.32 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.05 (s, 6H)。
根據流程E8及實例8C，使用適當起始物質合成以下化合物。必要時可使用標準保護及去保護。
Figure AA100-1
Figure AA100-2
Figure AA100-3
Figure AA100-4
Figure AA100-5
Figure AA100-6
Figure AA100-7
Figure AA100-8
Figure AA100-9
Figure AA100-10
Figure AA100-11
Figure AA100-12
Figure AA100-13
Figure AA100-14
Figure AA100-15
Figure AA100-16
Figure AA100-17
Figure AA100-18
Figure AA100-19
Figure AA100-20
Figure AA100-21
Figure AA100-22
Figure AA100-23
Figure AA100-24
Figure AA100-25
Figure AA100-26
實例 8F 合成 4- 甲基 -6-(2-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-2-( 吡啶 -3- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image946
步驟 A. 合成 4- 甲基 -6-(2-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-2-( 甲硫基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向4-甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(360 mg，1.4 mmol)及2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙醇(300 mg，2.4 mmol)於甲苯(10 mL)中之混合物中添加CMBP (600 mg，2.1 mmol)。將反應混合物在110℃下在N2 下攪拌3小時。在冷卻至室溫後，將反應混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，80-100% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到4-甲基-6-(2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(500 mg)。LC-MS (ESI): m/z 361 (M+1)+ 。
步驟 B. 合成 4- 甲基 -6-(2-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-2-( 甲基磺醯基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向4-甲基-6-(2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(600 mg，1.7 mmol)於DCM (20 mL)中之混合物中添加m-CPBA (1.01 g，5.0 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3 及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，80-100% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到4-甲基-6-(2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-(甲基磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(600 mg)。LC-MS (ESI): m/z 393 (M+1)+ 。
步驟 C. 合成 4- 甲基 -6-(2-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-2-(( 苯磺醯基 )( 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在室溫下，向3-((苯磺醯基)甲基)吡啶(300 mg，1.3 mmol)於THF (20 mL)中之混合物中添加LiHMDS (2 mL，2.0 mmol)。在室溫下在N2 下攪拌15分鐘後，將4-甲基-6-(2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-(甲基磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(300 mg，0.8 mmol)添加至反應混合物中，且將所得溶液在室溫下攪拌3小時。反應混合物用飽和NH4 Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，80-100% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到110 mg 4-甲基-6-(2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-((苯磺醯基)(吡啶-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS: m/z 546 (M+1)+ 。
步驟 D. 合成 4- 甲基 -6-(2-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-2-( 吡啶 -3- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在室溫下，向4-甲基-6-(2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-((苯磺醯基)(吡啶-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(110 mg，0.2 mmol)於THF (5 mL)及MeOH (5 mL)中之溶液中添加SmI2 (5 mL，0.1 M於THF中)。隨後將反應混合物在N2 下在室溫下攪拌10分鐘。反應溶液用水淬滅，用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，80-100% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到6 mg 4-甲基-6-(2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-(吡啶-3-基甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 406 (M+1)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (s, 1H), 8.52 (d,2H), 7.84 (d,1H), 7.54 (d,1H), 7.41 (dd, 1H), 6.04 (d, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.48 - 4.30 (m, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.12 - 2.75 (m, 2H)。
實例 8G 合成 4- 甲基 -6-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-2-( 吡啶 -2- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image948
步驟 A. 合成 4- 甲基 -2-( 甲基磺醯基 )-6-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向4-甲基-2-(甲基磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(200 mg，0.70 mmol)於DMF (5 mL)中之混合物中添加t -BuOK (157 mg，1.4 mmol)，隨後添加3-溴丙-1-炔(0.12 mL，1.4 mmol)。將反應物在室溫下攪拌15分鐘。隨後將懸浮液倒入飽和NH4 Cl中，用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0~50 % EtOAc/PE)純化殘餘物，得到60 mg 4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-(丙-2-炔-1-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 323 (M+H)+ 。
步驟 B. 合成 4- 甲基 -2-(( 苯磺醯基 )( 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-6-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向4-甲基-2-(甲基磺醯基)-6-(丙-2-炔-1-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(60 mg，0.18 mmol)及2-((苯磺醯基)甲基)吡啶(87 mg，0.37 mmol)於THF (5 mL)中之混合物中添加t-BuOK (63 mg，0.57 mmol)。在室溫下在氮氣下攪拌1小時後，將反應物倒入飽和NH4 Cl中，用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC (溶離劑：70% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到50 mg 4-甲基-2-((苯磺醯基)(吡啶-2-基)甲基)-6-(丙-2-炔-1-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 476 (M+H)+ 。
步驟 C. 合成 4- 甲基 -6-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-2-( 吡啶 -2- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在-70℃下在氮氣氛圍下，向4-甲基-2-((苯磺醯基)(吡啶-2-基)甲基)-6-(丙-2-炔-1-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.11 mmol)於THF / MeOH (4 mL，1:1)中之溶液中添加SmI2 (4.2 mL，0.1 M於THF中)。攪拌5分鐘後，用水淬滅反應物。混合物用EtOAc稀釋且用飽和NH4 Cl洗滌。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到5 mg 4-甲基-6-(丙-2-炔-1-基)-2-(吡啶-2-基甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS: m/z 336 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.60 - 8.52 (m, 2H), 7.81 (td, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.33 (dd, 1H), 4.93 (d, 2H), 4.67 (s, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.27 (t, 1H)。
實例 8H 合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-6- 苯甲基 -4- 乙基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮
Figure 02_image950
步驟 A .合成 4- 乙基 -2-( 甲硫基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 向2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(500 mg，2.06 mmol)於DMF (5 mL)中之混合物中添加K2 CO3 (856 mg，6.19 mmol)。在70℃下攪拌1.5小時後，添加EtI (483 mg，3.10 mmol)。將混合物在70℃下再攪拌1小時。反應混合物用H2 O稀釋且用EtOAc萃取。減壓蒸發合併之有機相。藉由急驟層析(矽膠，0~30% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到4-乙基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(400 mg)。LC-MS (ESI): m/z 271 (M+1)+ 。
步驟 B .合成 4- 乙基 -6- 甲醯基 -2-( 甲硫基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 將POCl3 (3.6 ml)及PhNMeCHO (5 mL)之混合物在室溫下攪拌1小時，隨後添加至4-乙基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(400 mg，1.48 mmol)於DCE (10 mL)中之溶液中。在100℃下攪拌2小時後，將反應混合物用H2 O稀釋且用EtOAc萃取兩次。合併之有機相經無水Na2 SO4 乾燥且減壓蒸發。藉由急驟層析(矽膠，0~30% EtOAc/PE)純化殘餘物，得到4-乙基-6-甲醯基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(400 mg)。LC-MS (ESI): m/z 299 (M+1)+ 。
步驟 C .合成 6- 苯甲基 -4- 乙基 -2-( 甲硫基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 在N2 下，向4-乙基-6-甲醯基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸酯(400 mg，1.34 mmol)於AcOH (4 mL)中之混合物中添加苯甲基肼二鹽酸鹽(260 mg，1.34 mmol)。將混合物在100℃下攪拌3小時。減壓蒸發反應混合物。藉由急驟層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到250 mg 6-苯甲基-4-乙基-2-(甲硫基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮。LC-MS: m/z 357 (M+1)+ 。
步驟 D .合成 6- 苯甲基 -4- 乙基 -2-( 甲基磺醯基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 在0℃下，向6-苯甲基-4-乙基-2-(甲硫基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(250 mg，0.70 mmol)於DCM (5 mL)中之混合物中添加m CPBA (657.5 mg，3.8 mmol)。攪拌1.5小時後，減壓蒸發反應混合物。藉由製備型TLC (10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到6-苯甲基-4-乙基-2-(甲基磺醯基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(90 mg)。LC-MS: m/z 389 (M+1)+ 。
步驟 E .合成 6- 苯甲基 -4- 乙基 -2-(( 苯磺醯基 )(1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 在N2 下在室溫下，向6-苯甲基-4-乙基-2-(甲基磺醯基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(90 mg，0.23 mmol)及3-((苯磺醯基)甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(123 mg，0.35 mmol)於THF (3 mL)中之混合物中添加KO t Bu (85 mg，0.76 mmol)。在室溫下攪拌30分鐘後，反應混合物用飽和NH4 Cl淬滅且用EtOAc萃取。減壓蒸發合併之有機相。藉由急驟層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到6-苯甲基-4-乙基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(140 mg，92.2%產率)。LC-MS: m/z 661 (M+1)+ 。
步驟 F .合成 6- 苯甲基 -4- 乙基 -2-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 向6-苯甲基-4-乙基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(140 mg，0.21 mmol)於EtOH (2 mL)及DCE (1 mL)中之混合物中添加乙酸(0.2 mL，2.8 mmol)及鋅(360 mg，5.5 mmol)。將混合物在80℃下攪拌3小時。過濾反應混合物且減壓蒸發濾液。藉由急驟層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到30 mg 6-苯甲基-4-乙基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮。LC-MS (ESI): m/z 521 (M+1)+ 。
步驟 G .合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-6- 苯甲基 -4- 乙基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 向6-苯甲基-4-乙基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(30 mg，0.06 mmol)於DCM (4 mL)中之混合物中添加TFA (4 mL)。在室溫下攪拌1.5小時後，減壓蒸發反應混合物。藉由製備型TLC (20% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到2-((1H-吡唑-3-基)甲基)-6-苯甲基-4-乙基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(5 mg)。LC-MS (ESI): m/z 391 (M+1)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.79 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.42 - 7.11 (m, 5H), 6.27 (d, 1H), 5.36 (s, 2H), 4.78 (q, 2H), 4.48 (s, 2H), 1.44 (t, 3H)。
實例 8I. 合成 6- 苯甲基 -4- 苯基 -2-( 吡啶 -2- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image952
步驟 A. 合成 2-( 甲硫基 )-4- 苯基 -4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 向2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(400 mg，1.7 mmol)及PhI (265 mg，2.55 mmol)於二噁烷(5 mL)中之溶液中添加Cs2 CO3 (1.1 g，3.4 mmol)，隨後添加CuI (65 mg，0.34 mmol)及(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺(48 mg，0.34 mmol)。將混合物在氮氣氛圍下在100℃下攪拌7小時。將混合物倒入水中且用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~10 % EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到2-(甲硫基)-4-苯基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(400 mg)。LC-MS (ESI): m/z 319 (M+1)+ 。
步驟 B. 合成 6- 甲醯基 -2-( 甲硫基 )-4- 苯基 -4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 在0℃下，向PhNMeCHO (1.5 mL)於DCE (5 mL)中之溶液中添加POCl3 (1.2 mL，12.5 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。隨後將2-(甲硫基)-4-苯基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(400 mg，1.25 mmol)添加至混合物中，將混合物在50℃下攪拌隔夜。混合物用飽和NaHCO3 淬滅且用DCM萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到6-甲醯基-2-(甲硫基)-4-苯基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(280 mg)。LC-MS (ESI): m/z 347 (M+1)+ 。
步驟 C. 合成 6- 苯甲基 -2-( 甲硫基 )-4- 苯基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向6-甲醯基-2-(甲硫基)-4-苯基-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(280 mg，0.81 mmol)於AcOH (6.0 mL)中之混合物中添加苯甲基肼二鹽酸鹽(468 mg，2.4 mmol)。將反應混合物在100℃下攪拌2小時。蒸發濾液且藉由急驟層析(矽膠，0~70% EtOAc/石油醚)純化，得到100 mg 6-苯甲基-2-(甲硫基)-4-苯基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS: m/z 405 (M+1)+ 。
步驟 D. 合成 6- 苯甲基 -2-( 甲基磺醯基 )-4- 苯基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向6-苯甲基-2-(甲硫基)-4-苯基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.25 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加m CPBA (151 mg，0.75 mmol)。將混合物在室溫下攪拌4小時。混合物用Na2 S2 O3 水溶液淬滅且用DCM萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~100% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到6-苯甲基-2-(甲基磺醯基)-4-苯基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(60 mg)。LC-MS (ESI): m/z 437 (M+1)+ 。
步驟 E. 合成 6- 苯甲基 -4- 苯基 -2-(( 苯磺醯基 )( 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在N2 下，向6-苯甲基-4-苯基-2-((苯磺醯基)(吡啶-2-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(60 mg，0.14 mmol)及2-((苯磺醯基)甲基)吡啶(50 mg，0.21 mmol)於無水DMF (5 mL)中之混合物中添加t-BuOK (31 mg，0.28 mmol)。將反應混合物在60℃下攪拌1.5小時。在冷卻至室溫後，將混合物倒入飽和NH4 Cl中。後續混合物用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由製備型TLC (石油醚/EtOAc =1/4)純化殘餘物，得到40 mg 6-苯甲基-4-苯基-2-((苯磺醯基)(吡啶-2-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 590 (M+1)+ 。
步驟 F. 合成 6- 苯甲基 -4- 苯基 -2-( 吡啶 -2- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在-78℃下在N2 下，向6-苯甲基-4-苯基-2-((苯磺醯基)(吡啶-2-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，0.05 mmol)於THF (1.5 mL)及MeOH (1.5 mL)中之混合物中添加SmI2 (2.5 mL，0.1 M於THF中)。將反應混合物在-78℃下攪拌10分鐘且隨後用水淬滅。混合物用EtOAc萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由HPLC純化殘餘物，得到6-苯甲基-4-苯基-2-(吡啶-2-基甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(5 mg)。LC-MS (ESI): m/z 450 (M+1)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.67 (s, 1H), 8.56 (d, 1H), 7.82-7.76 (m, 1H), 7.59-7.45 (m, 6H), 7.34-7.23 (m, 6H), 5.32 (s, 2H), 4.63 (s, 2H)。
實例 8J. 合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4,6- 二苯甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image954
步驟 A. 合成 4- 苯甲基 -6- 甲醯基 -2-( 甲硫基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 . 向6-甲醯基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(300 mg，1.1 mmol)於DMF (3 mL)中之混合物中添加K2 CO3 (460 mg，3.3 mmol)。在70℃下攪拌1.5小時後，添加BnBr (0.2 mL，1.6 mmol)。將混合物在70℃下攪拌1小時。反應混合物用H2 O稀釋且用EtOAc萃取兩次。合併之有機相經無水Na2 SO4 乾燥且減壓蒸發。藉由急驟層析(矽膠，0~30% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到4-苯甲基-6-甲醯基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(370 mg)。LC-MS (ESI): m/z 361 (M+1)+ 。
步驟 B. 合成 4,6- 二苯甲基 -2-( 甲硫基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在N2 下，向4-苯甲基-6-甲醯基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(370 mg，1.0 mmol)於AcOH (4 mL)中之混合物中添加苯甲基肼二鹽酸鹽(390 mg，2.0 mmol)。將混合物在100℃下攪拌3小時。反應混合物用H2 O稀釋且用EtOAc萃取兩次。合併之有機相經無水Na2 SO4 乾燥且減壓蒸發。藉由急驟層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到4,6-二苯甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(320 mg)。LC-MS (ESI): m/z 419 (M+1)+ 。
步驟 C. 合成 4,6- 二苯甲基 -2-( 甲基磺醯基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向4,6-二苯甲基-2-(甲硫基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(320 mg，0.76 mmol)於DCM (5 mL)中之混合物中添加m CPBA (657.5 mg，3.2 mmol)。在0℃下攪拌1.5小時後，反應混合物用飽和Na2 S2 O3 淬滅，用EtOAc萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓蒸發。藉由製備型TLC (10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到4,6-二苯甲基-2-(甲基磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(170 mg)。LC-MS (ESI): m/z 451 (M+1)+ 。
步驟 D. 合成 4,6- 二苯甲基 -2-(( 苯磺醯基 )(1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在N2 下在室溫下，向4,6-二苯甲基-2-(甲基磺醯基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(170 mg，0.38 mmol)及3-((苯磺醯基)甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(160 mg，0.46 mmol)於THF (3 mL)中之混合物中添加KO t Bu (85 mg，0.76 mmol)。在室溫下攪拌3小時後，反應混合物用飽和NH4 Cl淬滅且用EtOAc萃取兩次。合併之有機相經無水Na2 SO4 乾燥且減壓蒸發。藉由急驟層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到4,6-二苯甲基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(200 mg)。LC-MS (ESI): m/z 723 (M+1)+ 。
步驟 E. 合成 4,6- 二苯甲基 -2-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向6-((4-胺基嘧啶-2-基)甲基)-4-甲基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(200 mg，0.28 mmol)於EtOH (2 mL)及DCE (1 mL)中之混合物中添加乙酸(0.2 mL，2.8 mmol)及鋅(360 mg，5.5 mmol)。在100℃下攪拌3小時後，過濾反應混合物且減壓蒸發濾液。藉由急驟層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到4,6-二苯甲基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(120 mg)。LC-MS : m/z 583 (M+1)+ 。
步驟 F. 合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4,6- 二苯甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向4,6-二苯甲基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(120 mg，0.21 mmol)於DCM (4 mL)中之混合物中添加TFA (4 mL)。將混合物在室溫下攪拌1.5小時。減壓蒸發反應混合物。藉由製備型TLC (20% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到9 mg 2-((1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二苯甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS: m/z 453 (M+1)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.78 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.42 - 7.04 (m, 10H), 6.25 (d, 1H), 5.98 (s, 2H), 5.37 (s, 2H), 4.48 (s, 2H)。
實例 8K. 合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-6- 苯甲基 -4- 環丙基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮
Figure 02_image956
步驟 A. 合成 4- 環丙基 -2-( 甲硫基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 向環丙基
Figure 107128431-A0101-12-0030-1
酸(687 mg，8 mmol)及2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(970 mg，4 mmol)於DCE (10 mL)中之懸浮液中添加Na2 CO3 (848 mg，8 mmol)，隨後添加Cu(OAc)2 (727 mg，4 mmol)及聯吡啶(625 mg，4 mmol)。將混合物在70℃下在空氣下攪拌2小時。將所得混合物冷卻至室溫，且用飽和NH4 Cl淬滅，用DCM萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0~30% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到4-環丙基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(1.0 g，88.5%產率)。LC-MS (ESI): m/z 283 (M+1)+ 。
步驟 B. 合成 4- 環丙基 -6- 甲醯基 -2-( 甲硫基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 將POCl3 (8.6 mL)及PhNMeCHO (12 mL)之混合物在室溫下攪拌1小時，隨後添加至4-環丙基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(1.0 g，3.54 mmol)於DCE (10 mL)中之溶液中。在100℃下攪拌2小時後，將反應混合物用H2 O稀釋且用EtOAc萃取兩次。合併之有機相經無水Na2 SO4 乾燥且減壓蒸發。藉由急驟層析(矽膠，0~30% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到4-環丙基-6-甲醯基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(620 mg)。LC-MS (ESI): m/z 311 (M+1)+ 。
步驟 C. 合成 6- 苯甲基 -4- 環丙基 -2-( 甲硫基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 在N2 下，向4-乙基-6-甲醯基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸酯(620 mg，2 mmol)於AcOH (4 mL)中之混合物中添加苯甲基肼二鹽酸鹽(390 mg，2 mmol)。將混合物在100℃下攪拌3小時。減壓蒸發反應混合物。藉由急驟層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到6-苯甲基-4-乙基-2-(甲硫基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(320 mg)。LC-MS (ESI): m/z 369 (M+1)+ 。
步驟 D. 合成 6- 苯甲基 -4- 環丙基 -2-( 甲基磺醯基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 向6-苯甲基-4-環丙基-2-(甲硫基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(320 mg，0.87 mmol)於DCM (5 mL)中之混合物中添加m CPBA (704 mg，3.5 mmol)。在0℃下攪拌1.5小時後，反應混合物用飽和Na2 S2 O3 淬滅，用EtOAc萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且減壓蒸發。藉由製備型TLC (10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到110 mg 6-苯甲基-4-環丙基-2-(甲基磺醯基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮。LC-MS: m/z 401 (M+1)+ 。
步驟 E. 合成 6- 苯甲基 -4- 環丙基 -2-(( 苯磺醯基 )(1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 在N2 下在室溫下，向6-苯甲基-4-乙基-2-(甲基磺醯基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(110 mg，0.27 mmol)及3-((苯磺醯基)甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(123 mg，0.35 mmol)於THF (3 mL)中之混合物中添加KO t Bu (85 mg，0.76 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時。反應混合物用飽和NH4 Cl淬滅且用EtOAc萃取兩次。減壓蒸發合併之有機相。藉由急驟層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到100 mg 6-苯甲基-4-環丙基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮。LC-MS: m/z 673 (M+1)+ 。
步驟 F. 合成 6- 苯甲基 -4- 環丙基 -2-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 在-60℃下在N2 下，向6-苯甲基-4-環丙基-2-((苯磺醯基)(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(100 mg，0.15 mmol)於MeOH (3 mL)及THF(3 mL)中之混合物中添加SmI2 (4.5 ml，0.45 mmol)。將混合物在-60℃下攪拌10分鐘，用H2 O淬滅且用EtOAc萃取兩次。合併之有機相經Na2 SO4 乾燥且減壓蒸發。藉由急驟層析(矽膠，0~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到40 mg 6-苯甲基-4-環丙基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮。LC-MS: m/z 533 (M+1)+ 。
步驟 G. 合成 2-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-6- 苯甲基 -4- 環丙基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 向6-苯甲基-4-環丙基-2-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮(40 mg，0.07 mmol)於DCM (4 mL)中之混合物中添加TFA (4 mL)。將混合物在室溫下攪拌1.5小時。減壓蒸發反應混合物。藉由製備型TLC (20% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到5 mg 2-((1H-吡唑-3-基)甲基)-6-苯甲基-4-環丙基-4,6-二氫-5H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5-酮。LC-MS (ESI): m/z 403 (M+1)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.77 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.35 - 7.23 (m, 5H), 6.26 (d, 1H), 5.35 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 4.19 (tt, 1H), 1.40 (td, 2H), 1.15 (td, 2H)。
實例 8L. 合成 4- 甲基 -6-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-(2-( 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image958
步驟 A. 合成 6-( 羥甲基 )-2-( 甲硫基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 在0℃下，向6-甲醯基-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(1.3 g，4.8 mmol)於MeOH (20 mL)中之溶液中添加NaBH4 (274 mg，7.2 mmol)。在0℃下攪拌20分鐘後，反應溶液用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0~10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到6-(羥甲基)-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(1 g)。LC-MS (ESI): m/z 273(M+1)+ 。
步驟 B. 合成 6-( 羥甲基 )-2-( 甲硫基 )-4-( 噻唑 -2- 基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 向6-(羥甲基)-2-(甲硫基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(1 g，3.7 mmol)及2-溴噻唑(3 g，18.4 mmol)於二噁烷(30 mL)中之溶液中添加Cs2 CO3 (3 g，9.2 mmol)，隨後添加CuI (700 mg，3.7 mmol)及N1 ,N2 -二甲基環己烷-1,2-二胺(520 mg，3.7 mmol)。將反應混合物在110℃下在N2 氛圍下攪拌16小時。將反應混合物冷卻至室溫，過濾。濾液用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，濃縮。藉由急驟層析(矽膠，30~50% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到6-(羥甲基)-2-(甲硫基)-4-(噻唑-2-基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(1 g)。LC-MS (ESI): m/z 356(M+1)+ 。
步驟 C. 合成 6- 甲醯基 -2-( 甲硫基 )-4-( 噻唑 -2- 基 )-4H- 吡咯并 [2,3-d] 噻唑 -5- 甲酸乙酯 向6-(羥甲基)-2-(甲硫基)-4-(噻唑-2-基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(1 g，2.8 mmol)於DCM (20 mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁(Dess-martin) (1.3 g，3.4 mmol)。在室溫下攪拌2小時後，反應溶液用DCM稀釋，用飽和NaHCO3 及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，20~30% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到6-甲醯基-2-(甲硫基)-4-(噻唑-2-基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(800 mg)。LC-MS (ESI): m/z 354 (M+1)+ 。
步驟 D. 合成 6- 苯甲基 -2-( 甲硫基 )-4-( 噻唑 -2- 基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向6-甲醯基-2-(甲硫基)-4-(噻唑-2-基)-4H-吡咯并[2,3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(800 mg，2.3 mmol)於AcOH (10 mL)中之溶液中添加苯甲基肼二鹽酸鹽(449 mg，2.3 mmol)。在室溫下攪拌1小時後，將反應混合物加熱至100℃持續2小時。將反應混合物冷卻至0℃，用1 M NaOH水溶液中和，用DCM萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0~5% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到6-苯甲基-2-(甲硫基)-4-(噻唑-2-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(300 mg)。LC-MS (ESI): m/z 412 (M+1)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.40 - 7.15 (m, 5H), 5.31 (s, 2H), 2.76 (s, 3H)。
步驟 E. 合成 6- 苯甲基 -2-( 甲基磺醯基 )-4-( 噻唑 -2- 基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在0℃下，向6-苯甲基-2-(甲硫基)-4-(噻唑-2-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(300 mg，0.73 mmol)於MeOH (5 mL)及THF (5 mL)中之混合物中添加過硫酸氫鉀(2.2 g，3.6 mmol)於H2 O (5 mL)中之溶液。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應混合物用DCM稀釋，用飽和NaHCO3 及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0~5% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到6-苯甲基-2-(甲基磺醯基)-4-(噻唑-2-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(260 mg)。LC-MS (ESI): m/z 444 (M+1)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.93 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.40 - 7.18 (m, 5H), 5.35 (s, 2H), 3.53 (s, 3H)。
步驟 F. 合成 6- 苯甲基 -2-(( 苯磺醯基 )( 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-( 噻唑 -2- 基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在0℃下在N2 氛圍下，向2-((苯磺醯基)甲基)吡啶(120 mg，0.51 mmol)於THF (3 mL)中之攪拌溶液中添加LiHMDS (0.7 mL，0.7 mmol)。在0℃下攪拌30分鐘後，添加6-苯甲基-2-(甲基磺醯基)-4-(噻唑-2-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(150 mg，0.34 mmol)於THF (3 mL)中之溶液。將所得混合物在室溫下攪拌1小時。反應物用飽和NH4 Cl淬滅，用DCM萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0~5% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到6-苯甲基-2-((苯磺醯基)(吡啶-2-基)甲基)-4-(噻唑-2-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg)。LC-MS (ESI): m/z 597 (M+1)+ 。
步驟 G. 合成 6- 苯甲基 -2-( 吡啶 -2- 基甲基 )-4-( 噻唑 -2- 基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向6-苯甲基-2-((苯磺醯基)(吡啶-2-基)甲基)-4-(噻唑-2-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.17 mmol)於AcOH (5 mL)中之溶液中添加Zn (110 mg，1.7 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15分鐘。反應混合物用DCM稀釋，用飽和NaHCO3 及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且真空濃縮。藉由製備型TLC (65% EtOAc/石油醚)純化殘餘物，得到5 mg 6-苯甲基-2-(吡啶-2-基甲基)-4-(噻唑-2-基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 457 (M+1)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (s, 1H), 8.61 (d,1H), 7.98 (d, 1H), 7.92 - 7.84 (m, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.41 (dd, 1H), 7.35-7.23 (m, 5H), 5.32 (s, 2H), 4.70 (s, 2H)。
實例 9. 合成化合物 E9-vi 及 E9-vii 流程E9
Figure 02_image960
化合物E9-iv可藉由兩種方法合成，亦即流程9中之(i)及(ii)。對於方法(i)，化合物E9-ii可經由如實例7或實例8中所示之烷基化反應由化合物E9-i合成。如本文所用，Xa 為離去基(例如Br、I、OMs或OTs)。化合物E9-ii與LiHMDS及DMF之甲醯化反應提供中間物E9-iii。E9-iii與還原劑(例如NaBH4 )反應，得到化合物E9-iv。或者，在方法(ii)中，化合物E9-i之鹵化作用產生化合物E9-ix。化合物E9-ix經歷施蒂勒反應、臭氧分解及還原，得到化合物E9-x。化合物E9-x可用E9-viii烷基化，得到化合物E9-iv。在流程9 (iii)中，化合物E9-iv經歷鹵化，得到中間物E9-v (Xb 為鹵素，諸如Cl或Br)。金屬(例如Pd或Cu)催化之E9-v與有機錫、硼、鋅或鎂之偶合提供化合物E9-vi。如本文所用；化合物E9-v亦可與一些親核試劑(諸如雜環中之氮)反應，得到產物E9-vii。如本文所用，M為有機金屬錯合物(例如有機硼錯合物，諸如
Figure 107128431-A0101-12-0030-1
酸或頻哪醇硼錯合物；有機錫錯合物，諸如-Sn(Bu t )3 ；有機鋅錯合物，諸如-Zn(鹵素))；Ar1 及Ar2 各自獨立地為視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之碳環或視情況經取代之雜環基。在某些實施例中，Ar1 及Ar2 各自獨立地為視情況經取代之雜芳基。
實例 9A. 合成 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-( 噻唑 -4- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image962
步驟 A. 合成 4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲醛 . 在-78℃下，向4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(2.6 g，5.57 mmol，1 eq)於無水THF (30 mL)中之混合物中添加LiHMDS (1 M，11.14 mL，2.0 eq)。將混合物在-78℃下攪拌2小時。隨後將DMF (2.04 g，27.86 mmol，2.14 mL，5.0 eq)逐滴添加至上述混合物中。將混合物在-78℃下攪拌2小時。TLC (PE:EA=2:1，UV=254 nm)顯示形成一個主要的新斑點。將混合物倒入冷的飽和NH4 Cl (20 mL)中。隨後將混合物升溫至室溫。用EtOAc (40 mL × 3)萃取混合物。有機層用水(20 mL × 3)洗滌且真空濃縮，得到所需產物(2.6 g，粗物質)。LCMS: m/z 495.2 [M+H]+
步驟 B. 合成 2-( 羥甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向粗物質4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醛(1.0 g，2.02 mmol，1 eq)於THF (10 mL)及MeOH (10 mL)中之混合物中添加NaBH4 (152.97 mg，4.04 mmol，2 eq)。將混合物在30℃下攪拌14小時。TLC (DCM:MeOH=10:1，UV=254 nm)顯示起始物質完全消耗且形成一個主要的新斑點。藉由添加水(20 mL)淬滅反應物且用EtOAc (30 mL × 3)萃取。用鹽水(20 mL)洗滌合併之有機層。真空濃縮有機相。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；40 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，30 mL/min之0~5% MeOH/DCM溶離劑)純化殘餘物。真空濃縮溶離劑，得到所需產物(382 mg)。LCMS: m/z 497.1 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.61 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.05 (d,), 6.36 (t, 1H), 5.74 (s, 2H), 5.68 (s, 2H), 4.89 (d, 2H), 4.26 (s, 3H), 3.50 (t, 2H), 0.78 (t, 2H), -0.12 (s, 9H)。
步驟 C. 合成 2-( 氯甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-(羥甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(150.0 mg，302.02 umol，1 eq)及Et3 N (61.12 mg，604.04 umol，84.08 uL，2.0 eq)於DCM (5 mL)中之混合物中添加4-甲基苯磺醯氯(75.0 mg，393.40 umol，1.30 eq)。將混合物在30℃下攪拌5小時。TLC (PE:EA=4:1，UV=254 nm)顯示起始物質完全消耗。將水(10 mL)及DCM (20 mL)添加至混合物中。真空濃縮有機層，得到黃色膠狀物(0.1 g)。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；4 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，30 mL/min之0~20%乙酸乙酯/石油醚梯度溶離劑)純化殘餘物。真空濃縮所需溶離份，得到所需產物(40.0 mg，76.88 umol)。LCMS: m/z 515.1 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ ppm 8.27 (d, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.52 (d, 1 H), 7.39 (dd, 1 H), 7.25 (s, 1H), 5.76 (s, 2H), 5.72 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.40 (s, 3H), 3.50-3.57 (m, 2H), 0.84-0.90 (m, 2H), -0.09至-0.06 (m, 9H)。
步驟 D. 合成 4- 甲基 -2-( 噻唑 -4- 基甲基 )-6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向2-(氯甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.97 mmol)及4-(三丁基錫烷基)噻唑(114 mg，2.91 mmol)於甲苯(4 mL)中之溶液中添加Pd(PPh3 )4 (402 mg，2.91 mmol)。隨後混合物在MW反應器中在N2 下在120℃下加熱30分鐘。將溶液倒入水中且用EtOAc萃取，經無水Na2 SO4 乾燥。減壓濃縮有機層。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 50 %乙酸乙酯/石油醚)純化殘餘物，得到4-甲基-2-(噻唑-4-基甲基)-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(化合物E9-4) (30 mg)。LCMS: 564 (M+H)+ 。
步驟 E. 合成 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-( 噻唑 -4- 基甲基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 在室溫下在N2 下，向化合物E9-4 (30 mg，0.05 mmol)於DCM (3 mL)中之混合物中添加TFA (3 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時。減壓濃縮混合物。藉由製備型HPLC (C18，0 ~ 90 %乙腈/H2 O + 0.1%甲酸)純化殘餘物，得到所需產物(3.9 mg)。LCMS: 434 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.12 (s, 1H), 9.12 (d, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.35 - 7.24 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.70 (s, 2H), 4.27 (s, 3H)。
實例 9B. 合成 2-((1H- 咪唑 -1- 基 ) 甲基 )-6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮
Figure 02_image964
步驟 A. 合成 2-((1H- 咪唑 -1- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-(氯甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(25.0 mg，48.53 umol，1 eq)及KI (8.06 mg，48.53 umol，1 eq)於THF (0.3 mL)中之混合物中添加咪唑(33.04 mg，485.34 umol，10.0 eq)。將混合物升溫至60℃且在60℃下攪拌12小時。LCMS顯示生成所需產物且起始物質完全消耗。將反應混合物與另一批次(25 mg)合併。真空濃縮混合物，得到黃色粗製膠狀物(50.0 mg)。產物未經任何純化即用於下一步驟反應。LCMS: m/z 547.2 [M+H]+ 。
步驟 B. 合成 2-((1H- 咪唑 -1- 基 ) 甲基 )-6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-((1H-咪唑-1-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50.0 mg，64.02 umol，1 eq)於二噁烷(1 mL)中之溶液中添加HCl/二噁烷(4 M，2 mL，124.96 eq)及2滴水。將混合物在30℃下攪拌12小時。TLC (PE:EA=1:1，UV=254 nm)顯示起始物質完全消耗。真空濃縮混合物，得到黃色膠狀物(0.2 g)，其藉由製備型HPLC (鹼性)純化，得到標題產物(4.0 mg)。LCMS: m/z 417.0 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4 ) δ ppm 8.43 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.43-7.49(m, 1H), 7.29-7.36(m, 2H), 7.12(d, 1H), 7.04(s, H), 5.74(s, 2H), 5.73 (s, 2H), 4.34 (s, 3H)。
實例 9C. 合成 4- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基甲基 )-6-( 吡啶 -3- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image966
步驟 A. 合成 2-( 羥甲基 )-4- 甲基 -6-( 吡啶 -3- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在-78℃下，向4-甲基-6-(吡啶-3-基甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(640 mg，2.15 mmol)於THF (10 mL)中之混合物中添加LiHMDS (4.3 mL，1 M於THF中)。30分鐘後，將無水DMF (0.84 mL，10.8 mmol)添加至混合物中。在起始物質完全消耗後，添加NaBH4 (164 mg，4.3 mmol)於EtOH (4 mL)中之混合物且攪拌5分鐘。隨後將混合物倒入飽和NH4 Cl中，用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0~5% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到2-(羥甲基)-4-甲基-6-(吡啶-3-基甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(220 mg)。LC-MS (ESI): m/z 328 (M+H)+ 。
步驟 B. 合成 2-( 氯甲基 )-4- 甲基 -6-( 吡啶 -3- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向2-(羥甲基)-4-甲基-6-(吡啶-3-基甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(100 mg，0.31 mmol)於DCM (5 mL)中之混合物中添加Et3 N (0.43 mL，3.1 mmol)及MsCl (0.12 mL，1.5 mmol)。將反應物在室溫下攪拌6小時。隨後混合物用飽和NH4 Cl (aq.)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0~50 % EtOAc/PE)純化殘餘物，得到65 mg 2-(氯甲基)-4-甲基-6-(吡啶-3-基甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 346 (M+H)+ 。
步驟 C. 合成 4- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基甲基 )-6-( 吡啶 -3- 基甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在氮氣下，向2-(氯甲基)-4-甲基-6-(吡啶-3-基甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(50 mg，0.14 mmol)及2-(三丁基錫烷基)吡啶(0.14 mL，0.43 mmol)於甲苯(3 mL)中之混合物中添加Pd(PPh3 )4 (17 mg，0.014 mmol)。在100℃下攪拌反應混合物隔夜。隨後冷卻混合物，減壓濃縮且藉由製備型TLC (溶離劑：10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到2 mg 4-甲基-2-(吡啶-2-基甲基)-6-(吡啶-3-基甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 389 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (m, 3H), 8.48 (dd, 1H), 7.81 (td, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 2H), 5.38 (s, 2H), 4.67 (s, 2H), 4.25 (s, 3H)。
實例 9D. 合成 2-((1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮及 6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-((4H-1,2,4- 三唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image968
步驟 A. 合成 1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 甲醛 . 在-40℃下，向1H-吡唑-3-甲醛(10.0 g，104.07 mmol，1 eq)及DIPEA (33.63 g，260.18 mmol，45.32 mL，2.5 eq)於DCM (500 mL)中之懸浮液中逐滴添加2-(氯甲氧基)乙基-三甲基-矽烷(26.03 g，156.11 mmol，27.63 mL，1.5 eq)。隨後將反應混合物升溫至室溫且攪拌16小時。TLC (石油醚:EtOAc = 5:1)顯示起始物質完全消耗，且形成兩個新的斑點。真空濃縮反應混合物。將殘餘物與另2批次(各10.0 g)合併且藉由Combiflash (100%石油醚至40% EtOAc/石油醚)純化，得到所需產物60.0 g。(注意：比率~5/4之2種區位異構體之混合物)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ ppm 10.06 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.92 (d, 1H), 5.87 (s, 2H), 5.56 (s, 2H), 3.61-3.67 (m, 4H), 0.91-1.01 (m, 4H), -0.09-0.05 (m, 18H)。
步驟 B. 合成 (1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲醇 . 在0℃下，向1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-甲醛(30 g，132.54 mmol，1 eq，比率~5/4之2種區位異構體之混合物)於THF (200 mL)/MeOH (100 mL)中之溶液中逐份添加NaBH4 (7.52 g，198.81 mmol，1.50 eq)，將反應混合物在0℃至室溫下攪拌18小時。TLC (石油醚:EtOAc = 2:1)顯示起始物質完全消耗，且形成兩個新的斑點。真空濃縮溶劑。藉由Combiflash (100%石油醚至100%EtOAc)純化殘餘物，得到25 g所需產物。(注意：比率~3/2之2種區位異構體之混合物)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ ppm 7.55 (d, 1H), 7.47 (brs, 1H), 6.36 (d, 1H), 6.34 (d, 1H), 5.57 (s, 2H), 5.42 (s, 2H), 4.74-4.76 (m, 4H), 3.55-3.60 (m, 4H), 0.85-0.96 (m, 4H), 0.00-0.06 (m, 18H)。
步驟 C. 合成 3-( 溴甲基 )-1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 . 在0℃下，向(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲醇(23 g，100.72 mmol，1 eq，比率~3/2之2種區位異構體之混合物)及PPh3 (36.98 g，141.00 mmol，1.4 eq)於DCM (200 mL)中之溶液中添加CBr4 (46.76 g，141.00 mmol，1.4 eq)，且將反應混合物在0℃下攪拌3小時。TLC (石油醚:EtOAc = 5:1)顯示起始物質完全消耗，且形成新的斑點。真空濃縮反應混合物。殘餘物與另一批次(2.0 g)合併且藉由Combiflash (100%石油醚至50% EtOAc/石油醚)純化，得到所需產物22.0 g (75.53 mmol)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ ppm 7.51 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.50 (s, 2H), 3.52-3.57 (m, 2H), 0.86-0.96 (m, 2H), -0.03-0.02 (m, 9H)。
步驟 D. 合成 4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在N2 下，將4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(1.0 g，4.85 mmol，1 eq)、3-(溴甲基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(2.12 g，7.27 mmol，1.5 eq)、K3 PO4 (2.57 g，12.12 mmol，2.5 eq)及NaI (218.05 mg，1.45 mmol，0.3 eq)於DMF (15 mL)中之懸浮液在60℃下攪拌18小時。TLC (石油醚:EtOAc = 1:1)顯示起始物質完全消耗，且形成新的斑點。將反應混合物與另外3批次(各1.0 g)合併且倒入冰水(250 mL)中。用EtOAc (150 mL × 3)萃取混合物。將合併之有機層用水(120 mL × 2)、鹽水(120 mL)洗滌，且經Na2 SO4 乾燥。真空濃縮溶劑。藉由combiflash (100%石油醚至80% EtOA/石油醚)純化粗產物，得到所需產物(3.6 g)。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ ppm 8.91 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.36 (d, 1H), 5.51 (s, 2H), 5.40 (m, 2H), 4.45 (s, 3 H), 3.52-3.58 (m, 2H), 0.85-0.90 (m, 2H), -0.05 (s, 9H)。
步驟 E. 合成 4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲醛 . 在氬氣下，在-78℃下，向4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(1.7 g，4.09 mmol，1 eq)於THF (30 mL)中之溶液中緩慢添加LiHMDS (1.0 M，8.18 mL，2 eq)，將反應混合物在-70℃下攪拌1小時。隨後將DMF (1.49 g，20.45 mmol，1.57 mL，5 eq)於THF (3 mL)中之溶液逐滴添加至混合物中。將所得混合物在-70℃下攪拌1小時。TLC (石油醚:EtOAc = 1:1)顯示形成新的斑點。在0℃下，將反應混合物逐滴添加至NH4 Cl水溶液(50 mL)中，隨後用EtOAc (30 mL × 3)萃取混合物。合併之有機層用鹽水(40 mL)洗滌且經Na2 SO4 乾燥。真空移除溶劑，得到粗製所需產物(1.8 g)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟 F. 合成 2-( 羥甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醛(1.8 g，3.24 mmol，1 eq)於THF (20 mL) MeOH (10 mL)中之溶液中添加NaBH4 (245.08 mg，6.48 mmol，2 eq)，且在室溫下攪拌反應混合物18小時。TLC (石油醚:EtOAc = 1:2)顯示起始物質完全消耗，且形成新的斑點。真空濃縮反應混合物，藉由combiflash (100% DCM至5% MeOH/DCM)純化殘餘物。獲得所需產物(1.1 g)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.63 (s, 1H), 7.86 (d, 1H), 6.44 (t, 1H), 6.27 (d, 1H), 5.40-5.42 (m, 4H), 4.98 (d, 2H), 4.34 (s, 3H), 3.55-3.61 (m, 2H), 0.86-0.91 (m, 2H), 0.00 (s, 9H)。
步驟 G. 合成甲磺酸 (4- 甲基 -5- 側氧基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 基 ) 甲酯 . 在0℃下，向2-(羥甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(700 mg，1.57 mmol，1 eq)及Et3 N (317.21 mg，3.13 mmol，436.33 uL，2.0 eq)於DCM (15 mL)中之溶液中逐滴添加MsCl (269.32 mg，2.35 mmol，181.97 uL，1.5 eq)，且在室溫下攪拌反應混合物1小時。TLC (石油醚:EtOAc = 1:1)顯示起始物質完全消耗，且形成新的斑點。將反應混合物用EtOAc (80 mL)稀釋，用水(30 mL × 4)、鹽水(40 mL)洗滌且經Na2 SO4 乾燥。真空移除溶劑，得到粗產物(700 mg)。LCMS: (m/z 525.5(M+H)。
步驟 H. 合成 2-((1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮及 2-((4H-1,2,4- 三唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在N2 下，將甲磺酸(4-甲基-5-側氧基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-基)甲酯(150 mg，285.88 umol，1 eq)、1H-1,2,4-三唑(197.45 mg，2.86 mmol，10 eq)及CsF (86.85 mg，571.77 umol，21.08 uL，2 eq)於MeCN (8 mL)中之混合物在60℃下攪拌18小時。LCMS顯示起始物質完全消耗且形成兩個新的峰。真空濃縮反應混合物，且藉由Combiflash (100% DCM至8% MeOH/DCM)純化殘餘物。獲得產物2-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(55 mg)及2-((4H-1,2,4-三唑-4-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg)。
步驟 I. 合成 2-((1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(55 mg，110.52 umol，1 eq)及HCl/二噁烷(4 M，1 mL，36.19 eq)於DCM (3 mL)中之懸浮液中添加H2 O (1.99 mg，110.52 umol，0.05 mL，1 eq)，且在室溫下攪拌反應混合物18小時。LCMS顯示起始物質完全消耗，且發現84%的所需產物。真空濃縮反應混合物，且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(24.1 mg，65.60 umol，59.35%產率)。管柱：Xtimate C18 150*25mm*5um，移動相：[水(0.225%FA)-ACN]；B%：13%-43%，11.2min。LCMS: m/z 367.9(M+H)+ 1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4 ) δ ppm 8.72 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.52 (brs, 1H), 6.26 (d, 1H), 5.92 (s, 2H), 5.43 (s, 2H), 4.30 (s, 3H)。
步驟 J. 合成 6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-((4H-1,2,4- 三唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-((4H-1,2,4-三唑-4-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，60.28 umol，1 eq)及HCl/二噁烷(4 M，1 mL，66.35 eq)於DCM (3 mL)中之懸浮液中添加H2 O (50.00 mg，2.78 mmol，0.05 mL，46.04 eq)，且在室溫下攪拌反應混合物18小時。LCMS顯示起始物質完全消耗，且發現所需產物。真空濃縮反應混合物，且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(2.1 mg，5.72 umol)。管柱：Xtimate C18 150*25mm*5um；移動相：[水(0.225% FA)-ACN]；B%：13%-43%，11.2min。LCMS: m/z 368.0(M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4 ) δ ppm 8.74 (s, 2H), 8.38 (s, 1H), 7.52 (d, 1H), 6.26 (d, 1H), 5.84 (s, 2H), 5.44 (s, 2H), 4.31 (s, 3H)。
根據流程E9及實例9A-9B之程序，使用適當起始物質合成以下化合物。
Figure 107128431-A0304-0027
實例 9E 合成 2-((1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 甲基 )-6-((2- 胺基嘧啶 -4- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image1038
步驟 A. 合成2- 氯 -4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在-65℃下，向4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(3 g，14.5 mmol)於無水THF (80 mL)中之混合物中逐滴添加LiHMDS (30.5 mL)。在攪拌1小時後，添加六氯乙烷(1.8 mL，16 mmol)於無水THF (20 mL)中之溶液。反應混合物經3小時升溫至-20℃。隨後將混合物用飽和NH4 Cl淬滅且在室溫下攪拌20分鐘。藉由過濾收集沈澱物且用EtOAc洗滌，得到3.5 g 2-氯-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 241 (M+H)+ 。
步驟 B. 合成4-甲基-2-乙烯基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮 在氮氣下，向2-氯-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(1.5 g，6.2 mmol)及三丁基(乙烯基)錫烷(5.5 mL，18.7 mmol)於DMF (30 mL)中之混合物中添加Pd(PPh3 )4 (0.36 g，0.31 mmol)。將反應混合物在100℃下攪拌2小時。隨後冷卻混合物且用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 10% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到1.4 g 4-甲基-2-乙烯基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 233 (M+H)+ 。
步驟 C. 合成4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 甲醛 在-60℃下，用O3 淨化4-甲基-2-乙烯基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(500 mg，2.15 mmol)於DCM/MeCN (500 mL，1:1體積)中之混合物20分鐘。隨後反應物用二甲基碸淬滅且濃縮，得到500 mg 4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醛。LC-MS (ESI): m/z 235 (M+H)+ 。
步驟 D. 合成2-( 羥甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在0℃下，向4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-甲醛(500 mg，2.13 mmol)於EtOH (3 mL)中之混合物中添加NaBH4 (81 mg，2.13 mmol)。將反應物在室溫下攪拌5分鐘。隨後將混合物倒入飽和NH4 Cl中，用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 8% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到120 mg 2-(羥甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 237 (M+H)+ 。
步驟 E. 合成6-((2- 氯嘧啶 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 羥甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向2-(羥甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(200 mg，0.85 mmol)於DMF (8 mL)中之混合物中添加K2 CO3 (351 mg，2.54 mmol)。在60℃下攪拌30分鐘後，添加2-氯-4-(氯甲基)嘧啶(276 mg，1.7 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液。將反應混合物再攪拌4小時，倒入飽和NH4 Cl中，用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 8% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到160 mg 6-((2-氯嘧啶-4-基)甲基)-2-(羥甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 363 (M+H)+ 。
步驟 F. 合成6-((2-( 雙 (2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 嘧啶 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 羥甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 向6-((2-氯嘧啶-4-基)甲基)-2-(羥甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(160 mg，0.44 mmol)於MeCN (5 mL)中之混合物中添加雙(2,4-二甲氧基苯甲基)胺(280 mg，0.88 mmol)及AcOH (1滴)。將反應混合物在80℃下攪拌隔夜。蒸發反應混合物且藉由製備型TLC (溶離劑：5% MeOH/DCM)純化殘餘物，得到75 mg 6-((2-(雙(2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)嘧啶-4-基)甲基)-2-(羥甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 644 (M+H)+ 。
步驟 G. 合成6-((2-( 雙 (2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 嘧啶 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 氯甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 在0℃下，向6-((2-(雙(2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)嘧啶-4-基)甲基)-2-(羥甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(75 mg，0.12 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加Et3 N (0.16 mL，1.16 mmol)及MsCl (0.05 mL，0.58 mmol)。將混合物在室溫下攪拌隔夜。反應混合物用DCM稀釋，用飽和NH4 Cl及鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到70 mg粗產物6-((2-(雙(2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)嘧啶-4-基)甲基)-2-(氯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 662 (M+H)+ 。
步驟 H. 合成2-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-6-((2-(雙(2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)嘧啶-4-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮 將4H-1,2,4-三唑(39 mg，0.57 mmol)及K2 CO3 (78 mg，0.57 mmol)於DMF (3 mL)中之混合物在60℃下攪拌30分鐘。添加6-((2-(雙(2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)嘧啶-4-基)甲基)-2-(氯甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(75 mg，0.11 mmol)且再攪拌30分鐘。將懸浮液倒入飽和NH4 Cl中，用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。藉由急驟層析(矽膠，0 ~ 10% DCM/MeOH)純化殘餘物，得到60 mg 2-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-6-((2-(雙(2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)嘧啶-4-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 695 (M+H)+ 。
步驟 I . 合成2-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-6-((2-胺基嘧啶-4-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮 向2-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-6-((2-(雙(2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)嘧啶-4-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(30 mg，0.043 mmol)於EtOH (2 mL)中之混合物中添加HCl (0.5 mL，4 M於二噁烷中)。將反應混合物在80℃下攪拌隔夜。隨後冷卻混合物且倒入飽和NaHCO3 中，用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到8 mg 2-((1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基)-6-((2-胺基嘧啶-4-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。LC-MS (ESI): m/z 395 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.80 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.12-8.10 (m, 2H), 6.60 (s, 2H), 6.19 (d, 1H), 6.01 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 4.26 (s, 3H)。
Figure 107128431-A0304-0026
實例 10. 合成化合物 E10-ii 流程E10
Figure 02_image1044
如流程E10中所示，E10-i與醛在鹼(例如LiHMDS)存在下反應產生化合物E10-ii，其可用對掌性HPLC或SFC分離，得到兩種對映異構體。如本文所用，Ar1及Ar2各自獨立地為視情況經取代之烷基、視情況經取代之鹵烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基。
實例 10A. 合成 (S)-6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮及 (R)-6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮
Figure 02_image1046
步驟 A. 合成 2-( 羥基 (1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在氬氣下，在-78℃下，向4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(0.5 g，1.07 mmol，1 eq)於THF (15 mL)中之溶液中緩慢添加LiHMDS (1.0 M，2.14 mL，2.0 eq)，且將反應混合物在-78℃下攪拌1小時。隨後將1-(2-三甲基矽烷基乙氧基甲基)吡唑-3-甲醛(1.21 g，5.36 mmol，5 eq)於THF (2 mL)中之溶液逐滴添加至反應混合物中。將所得混合物在-78℃下攪拌1小時。TLC (石油醚:EtOAc = 2:1)顯示形成兩個新的斑點。反應混合物在-70℃下藉由NH4 Cl水溶液(15 mL)淬滅，且用水(20 mL)稀釋。混合物用EtOAc (20 mL × 3)萃取。合併之有機層用鹽水(20 mL)洗滌且經Na2 SO4 乾燥。真空濃縮溶劑。藉由Combiflash (100%石油醚至100% EtOAc)純化殘餘物，得到所需產物(70 mg，101.01 umol)。LCMS: m/z 693.2(M+H)+
步驟 B. 合成 6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在0℃下，向2-(羥基(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(0.04 g，57.72 umol，1 eq)於DCM (3 mL)中之溶液中添加TFA (65.82 mg，577.22 umol，42.74 uL，10 eq)，且在室溫下攪拌反應混合物36小時。LCMS顯示起始物質完全消耗，且形成57%的所需產物。真空濃縮反應混合物，且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(11 mg)。LCMS: m/z 432.9 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 13.10 (brs, 2H), 8.58 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.26 (dd, 1H), 6.93 (d, 2H), 6.19 (d, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.63 (s, 2H), 4.20 (s, 3H)。
步驟 C. 合成 (S)-6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮及 (R)-6-((1H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 藉由SFC分離化合物6-((1H-吲唑-4-基)甲基)-2-(羥基(1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。SFC條件：管柱為DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250mm*30mm，5um)；移動相：A：55% CO2；B：45% [含0.1% NH3 H2 O之EtOH]/min。SFC分離得到兩種對映異構體。一種對映異構體(2.6 mg)：LCMS: m/z 433.0 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.63 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.64 (brs, 1H), 7.47 (brd, 1H), 7.27-7.32 (m, 1H), 6.97 (brd, 1H), 6.22 (d, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.64 (s, 2H), 5.34 (brs, 1H), 4.24 (s, 3H)。及3.5 mg另一種對映異構體：LCMS: m/z 433.0 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.63 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.64 (brs, 1H), 7.48 (brd, 1H), 7.28-7.32 (m, 1H), 6.98 (brd, 1H), 6.23 (d, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.64 (s, 2H), 5.34 (brs, 1H), 4.25 (s, 3H)。
實例 10B. 合成 (R)-6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮及 (S)-6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮
Figure 02_image1048
步驟 A. 合成 2-( 羥基 (1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -6-((1-((2-( 三甲基矽烷基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 在氬氣下，在-78℃下，向4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(0.5 g，1.20 mmol，1 eq)於THF (10 mL)中之溶液中緩慢添加LiHMDS (1.0 M，2.41 mL，2 eq)，且將反應混合物在-70℃下攪拌1小時。隨後將1-(2-三甲基矽烷基乙氧基甲基)吡唑-3-甲醛(816.97 mg，3.61 mmol，3 eq)於THF (1 mL)中之溶液添加至反應混合物中。將所得混合物在-70℃下攪拌1小時。TLC (石油醚:EtOAc = 1:1)顯示形成兩個新的斑點。反應混合物在-70℃下藉由NH4 Cl水溶液(5 mL)淬滅，且隨後升溫至室溫。混合物用水(10 mL)稀釋，用EtOAc (8 mL × 3)萃取。合併之有機層用鹽水(10 mL)洗滌且經Na2 SO4 乾燥。真空濃縮溶劑。藉由Combiflash (100%石油醚至100% EtOAc)純化殘餘物，得到呈淺棕色膠狀之粗產物(130 mg)，其未經進一步純化即用於下一步驟。LCMS: m/z 643.2 [M+H]+
步驟 B. 合成 6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 向2-(羥基(1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-6-((1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮(0.13 g，202.20 umol，1 eq)於DCM (8 mL)中之溶液中添加TFA (4.62 g，40.52 mmol，3 mL，200.38 eq)，接著添加H2 O (500.00 mg，27.75 mmol，0.5 mL，137.26 eq)，隨後在室溫下攪拌反應混合物18小時，接著加熱至40℃持續18小時。LCMS顯示起始物質完全消耗。真空濃縮反應混合物，且藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到所需產物(20.5 mg)。LCMS: m/z 382.9 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 12.72 (brs, 1H), 12.61 (brs, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.56-7.62 (m, 2H), 6.82 (brs, 1H), 6.18 (d, 1H), 5.99-6.09 (m, 2H), 5.24-5.32 (m, 2H), 4.19 (s, 3H)。
步驟 C. 合成 (R)-6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮及 (S)-6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-( 羥基 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5(6H)- 酮 . 藉由SFC分離化合物6-((1H-吡唑-3-基)甲基)-2-(羥基(1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-5(6H)-酮。SFC條件：管柱為DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250mm*30mm，5um)；移動相：A：55% CO2；B：45% [含0.1% NH3 H2 O之EtOH]/min。SFC分離得到2-[(R)-羥基(1H-吡唑-3-基)甲基]-4-甲基-6-(1H-吡唑-3-基甲基)噻唑并[3,4]吡咯并[1,3-d]噠嗪-5-酮及2-[(S)-羥基(1H-吡唑-3-基)甲基]-4-甲基-6-(1H-吡唑-3-基甲基)噻唑并[3,4]吡咯并[1,3-d]噠嗪-5-酮。一種異構體(4.4 mg)：LCMS: m/z 383 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4 ) δ ppm 8.39 (s, 1H), 7.61 (brs, 1H), 7.55 (brs, 1H), 6.34 (brs, 1H), 6.25 (brs, 1H), 6.18 (brs, 1H), 5.44 (s, 2H), 4.29 (s, 3H)。另一種異構體(4.1 mg)：LCMS: m/z 383 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, 甲醇-d 4 ) δ ppm 8.40 (s, 1H), 7.59 (brs, 1H), 7.54 (brs, 1H), 6.34 (brs, 1H), 6.26 (brs, 1 H), 6.19 (brs, 1 H), 5.44 (s, 2H), 4.29 (s, 3H)。
實例 10C ：合成 6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-( 二氟 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮
Figure 02_image1050
步驟 A. 3-(6-((1-(N,N- 二甲基胺磺醯基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -5,6- 二氫 -4H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -2- 羰基 )-N,N- 二甲基 -1H- 吡唑 -1- 磺醯胺 . 向3-((2-((1-(N,N-二甲基胺磺醯基)-1H-吡唑-3-基)(羥基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-4,5-二氫-6H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6-基)甲基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺醯胺(50 mg，83.80 umol，類似於E10-1製得)於DCM (1.5 mL)中之混合物中添加MnO2 (72.85 mg，838.00 umol)，且將混合物在15℃下攪拌1.5小時。過濾反應混合物且減壓濃縮，得到粗產物(60 mg，粗物質)。LCMS: m/z 595.1 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.34 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.41 (d, 1H), 6.38 (d, 1H), 5.54 (s, 2H), 4.49 (s, 3H), 3.10 (s, 6H) 2.93 (s, 6H)。
步驟 B. 3-((2-((1-(N,N- 二甲基胺磺醯基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 二氟甲基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -4,5- 二氫 -6H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6- 基 ) 甲基 )-N,N- 二甲基 -1H- 吡唑 -1- 磺醯胺 . 向3-(6-((1-(N,N-二甲基胺磺醯基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-羰基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺醯胺(240 mg，403.60 umol)於DCE (4 mL)中之溶液中添加BAST (1.34 g，6.05 mmol，1.33 mL)，且將混合物在50℃下攪拌12小時。反應混合物用二氯甲烷(20 mL)稀釋且用飽和NaHCO3 (10 mL *2)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到粗產物(300 mg，粗物質)，其未經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS: m/z 617.1 (M+H)+ 。
步驟 C. 6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-2-( 二氟 (1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向3-((2-((1-(N,N-二甲基胺磺醯基)-1H-吡唑-3-基)二氟甲基)-4-甲基-5-側氧基-4,5-二氫-6H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6-基)甲基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺醯胺(240 mg，163.47 umol)於DCM (2 mL)中之混合物中添加TFA (2.07 g，18.15 mmol，1.34 mL)，且將混合物升溫至50℃持續5小時。減壓濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (管柱：Agela ASB 150*25mm*5um；移動相：[水(0.05%HCl)-ACN]；B%：30%-60%，8 min)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之所需產物(3.9 mg，5.45%產率，92%純度)。LCMS: m/z 403.1 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.67 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.16 (s, 1H), 5.36 (s, 2H), 4.28 (s, 3H)。
實例 10D ：合成 2-(1-(1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮
Figure 02_image1052
步驟 A ： 3-((2-(1-(1-(N,N- 二甲基胺磺醯基 )-1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 羥乙基 )-4- 甲基 -5- 側氧基 -4,5- 二氫 -6H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -6- 基 ) 甲基 )-N,N- 二甲基 -1H- 吡唑 -1- 磺醯胺 . 向3-(6-((1-(N,N-二甲基胺磺醯基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-羰基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺醯胺(160 mg，269.07 umol)於THF (3 mL)中之溶液中添加CH3MgBr (3 M，179.38 uL)，且在0℃下攪拌反應混合物3小時。在0℃下，將反應混合物倒入飽和NH4Cl (10 mL)中，用乙酸乙酯(20 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水(10 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；12 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，40 mL/min之0~90%乙酸乙酯/石油醚梯度溶離劑)純化殘餘物，得到所需產物(50 mg，81.87 umol)。LCMS: m/z 611.1 (M+H)+ 。
步驟 B ： 2-(1-(1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 在0℃下，向3-((2-(1-(1-(N,N-二甲基胺磺醯基)-1H-吡唑-3-基)-1-羥乙基)-4-甲基-5-側氧基-4,5-二氫-6H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-6-基)甲基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺醯胺(50 mg，81.87 umol)於DCE (0.5 mL)中之混合物中添加Et3SiH (19.04 mg，163.75 umol，26.15 uL)，隨後添加TFA (1.54 g，13.51 mmol，1 mL，164.96 eq)，且在0℃下攪拌1小時。再將混合物升溫至50℃持續1小時。減壓濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC (管柱：Agela ASB 150*25mm*5um；移動相：[水(0.05%HCl)-ACN]；B%：25%-55%，7 min)純化殘餘物，得到7.0 mg所需產物。LCMS: m/z 381.2 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ 8.46 (s, 1H), 8.15 (d, 2H), 6.78 (d, 1H), 6.74 (d, 1H), 5.60 (s, 2H), 5.00 (q, 1H), 4.33 (s, 3H), 1.94 (d, 3H)。
實例 10E ：合成 6-((1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 )-4- 甲基 -2-(1H- 吡唑 -3- 羰基 )-4,6- 二氫 -5H- 噻唑并 [5',4':4,5] 吡咯并 [2,3-d] 噠嗪 -5- 酮
Figure 02_image1054
步驟 A. 4- 甲基 -2-(1H- 吡唑 -3- 羰基 )-6-(1H- 吡唑 -3- 基甲基 ) 噻唑并 [3,4] 吡咯并 [1,3-d] 噠嗪 -5- 酮 . 向3-(6-((1-(N,N-二甲基胺磺醯基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H-噻唑并[5',4':4,5]吡咯并[2,3-d]噠嗪-2-羰基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺醯胺(50 mg，84.08 umol)於DCE (1.5 mL)中之溶液中添加TFA (2.31 g，20.26 mmol，1.5 mL)，且將反應混合物升溫至50℃持續12小時。真空濃縮反應混合物。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到6.0 mg所需產物。LCMS: m/z 381.1 (M+H)+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.72 (s, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.19 (d, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.38 (s, 3H)。
實例11. PKM2分析 程序：
稀釋PKM2酶儲備溶液以製備1.11×反應混合物 (無ADP)。首先向孔中添加1 µL測試化合物，隨後添加40 µL的1.11×反應混合物 (無ADP)且在室溫(25℃)下培育60分鐘。用10 µL ADP (0.4 mM最終濃度)引發反應，使最終反應混合物 達到1×，且以在室溫下340 nm波長處之吸光度變化量測反應進程。
測試化合物製備：在DMSO中以50×最終濃度製備測試化合物。進行1至3倍稀釋，獲得11個點(例如將50 μl的5000 µM化合物添加至100 μl 100% DMSO中以產生1667 µM，將此50 μl添加至100 μl DMSO中以產生556 µM，以此類推)。將化合物以1比50稀釋度(1 µL於50 µL中)添加至分析中以產生100 µM之最高濃度，不斷降低3倍，獲得11個點。
反應混合物： 含PKM2 (5 ng/孔，0.1 µg/ml)，ADP (0.4 mM)，PEP (0.11 mM)，NADH (180 µM)，LDH (0.005 U/µL，Sigma# L3888)，1 mM DTT，0.03% BSA之1×反應緩衝液
反應緩衝液 ：100 mM KCl，50 mM Tris pH 7.5，5 mM MgCl2 。
已如此描述若干實施例之若干態樣，應瞭解，熟習此項技術者將容易想到各種改變、修改及改良。此類改變、修改及改良意欲為本發明之一部分，且意欲在本發明之精神及範疇內。因此，前文描述及圖式僅作為實例。
圖1A-1C為本發明方法中所用之其他例示性化合物之結構的列表。 圖2A-2C為本發明方法中所用之其他例示性化合物之結構的列表。 圖3為本發明方法中所用之其他例示性化合物之結構的列表。 圖4展示實例1-10中所用之例示性中間物的合成。
Figure 107128431-A0101-11-0002-3

Claims (41)

  1. 一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用以製備用於調節丙酮酸激酶M2(PKM2)活性之藥物，其中：
    Figure 107128431-A0305-02-0319-1
     Q為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基；R1為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之鹵烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基、-ORo1、-C(=O)Rc1或氮保護基；L1為鍵、視情況經取代之C1-6伸烷基、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NR3C(=O)-或-C(=O)NR3-，其中與R2之連接點在左手側；L2為鍵、視情況經取代之伸烷基、-C(=O)-、-S(=O)2-或-S(=O)-，其中與Q之連接點在右手側；R2為氫、鹵素、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烷氧基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基，或當L1為-NR3C(=O)-時之氮保護基；R3之各實例獨立地為氫、-ORo2、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代 之雜環基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基或氮保護基；Ro1及Ro2之各實例獨立地為氫、視情況經取代之烷基或氧保護基；及Rc1之各實例獨立地為視情況經取代之烷基或-N(Rcn)2，其中Rcn之各實例獨立地為氫、-C1-6烷基或氮保護基。
  2. 一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用以製備用於調節血漿葡萄糖水準之藥物，其中式(I)如請求項1中所定義。
  3. 一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用以製備用於抑制罹患或易患與PKM2功能相關之疾病或病症之受試者之細胞增殖之藥物，其中式(I)如請求項1中所定義。
  4. 一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用以製備用於治療與異常PKM2活性相關之疾病之藥物，其中式(I)如請求項1中所定義。
  5. 如請求項4之用途，其中該疾病為增生性疾病。
  6. 如請求項4之用途，其中該疾病為癌症、肥胖症、糖尿病性疾病(例如糖尿病性腎病變(DN))、動脈粥樣硬化、再狹窄、冠狀動脈疾病(CAD)、布盧姆症候群(Bloom Syndrome，BS)、良性前列腺增生(BPH)或自體免疫疾病。
  7. 一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用以製備用於治療高血糖症之藥物，其中式(I)如請求項1中所定義。
  8. 一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用以製備用於治療糖尿病性疾病之藥物，其中式(I)如請求項1中所定義。
  9. 如請求項8之用途，其中該糖尿病性疾病為糖尿病性腎病變。
  10. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該藥物係透過包含鑑別將受益於PKM2調節之受試者的方法給藥。
  11. 如請求項1之用途，其中該調節為活化。
  12. 如請求項1至9中任一項之用途，其中：Q為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基、視情況經取代之C3-C12環烷基、視情況經取代之3員至14員雜環基、視情況經取代之6員至14員芳基或視情況經取代之5員至14員雜芳基；R1為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基、視情況經取代之-C1-C6鹵烷基、視情況經取代之-C2-C6烯基、視情況經取代之-C2-C6炔基、視情況經取代之C3-C12環烷基、視情況經取代之3員至14員雜環基、視情況經取代之6員至12員芳基、-ORo1、-C(=O)Rc1或氮保護基；L2為鍵、視情況經取代之C1-C6伸烷基、-C(=O)-、-S(=O)2-或-S(=O)-，其中與Q之連接點在右手側； R2為氫、鹵素、視情況經取代之-C1-C6烷基、視情況經取代之-C1-C6烷氧基、視情況經取代之-C3-C12環烷基、視情況經取代之3員至14員雜環基、視情況經取代之-C6-C12芳基或視情況經取代之3員至14員雜芳基，或當L1為-NR3C(=O)-時之氮保護基；R3之各實例獨立地為氫、-ORo2、視情況經取代之-C1-C6烷基、視情況經取代之-C2-C6烯基、視情況經取代之-C2-C6炔基、視情況經取代之C3-C12環烷基、視情況經取代之C3-C12雜環基、視情況經取代之C6-C12芳基、視情況經取代之C5-C12雜芳基或氮保護基；Ro1及Ro2之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氧保護基；及Rc1之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基或-N(Rcn)2，其中Rcn之各實例獨立地為氫、-C1-C6烷基或氮保護基。
  13. 如請求項1至9中任一項之用途，其中：Q為C6-C12芳基、5員至6員單環雜芳基或8員至12員雙環雜芳基，其各者經Rc取代0-3次；R1係選自氫、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵烷基、C3-C7單環環烷基及3員至14員雜環基、-ORo1、-C(=O)Rc1或氮保護基；其中各烷基、環烷基或雜環基經Rd取代0-3次；R2係選自氫、鹵素、-C1-C6烷基、-C1-C6烷氧基、C3-C7單環環烷基、C6-C12雙環環烷基、3員至14員雜環基、C6-C12芳基、5員至6員單環雜芳基、8員至12員雙環雜芳基，其中各烷基、環烷基、雜環基、芳基及雜芳基經Re取代0-3次，或當L1為-NR3C(=O)-時之氮保護基； R3係選自氫、-ORo2、-C1-C6烷基、C3-C7單環環烷基、C6-C12雙環環烷基、3員至14員雜環基、C6-C12芳基、5員至6員單環雜芳基及8員至12員雙環雜芳基，其中各烷基、環烷基、雜環烷基、芳基及雜芳基經Rf取代0-3次；L1為鍵、經Rh取代0-3次之伸烷基、-NR3C(=O)-、-C(=O)NR3-、-C(=O)-、-S(=O)2-、-S(=O)-，其中與R2之連接點在左手側；L2為鍵、經Rh取代0-3次之伸烷基、-C(=O)-、-S(=O)2-或-S(=O)-，其中與Q之連接點在右手側；各Rc獨立地選自鹵基、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵烷基、-C1-C6羥基烷基、-OH、-OC1-C6烷基、-C1-C6胺基烷基、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、-C(=O)OC1-C6烷基、-C(=O)OH、-C(=O)C1-C6烷基、-C(=O)NH2、-C(=O)NH(C1-C6烷基)、-C(=O)N(C1-C6烷基)2、-NHC(=O)NH2、-NHC(=O)NH(C1-C6烷基)、-NH(C=O)N(C1-C6烷基)2、-NHC(=O)(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)C(=O)(C1-C6烷基)、-S(=O)2NH2、-S(=O)2NH(C1-C6烷基)、-S(=O)2N(C1-C6烷基)2、-NHS(=O)2(C1-C6烷基)、-NH2、-CN及-NO2；或與相同或相鄰碳原子連接之Rc的兩個實例與其所連接之碳原子一起形成環烷基或雜環基C(=O)OH；各Rd獨立地選自鹵基、-C1-C6烷基、-OH、-OC1-C6烷基、-NH2及-CN；各Re獨立地選自鹵基、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵烷基、-C1-C6羥基烷基、-OH、-OC1-C6烷基、-C1-C6胺基烷基、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、-C(=O)OC1-C6烷基、-C(=O)OH、-C(=O)C1-C6烷基、- C(=O)NH2、-C(=O)NH(C1-C6烷基)、-C(=O)N(C1-C6烷基)2、-NHC(=O)NH2、-NHC(=O)NH(C1-C6烷基)、-NH(C=O)N(C1-C6烷基)2、-NHC(=O)(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)C(=O)(C1-C6烷基)、-S(=O)2NH2、-S(=O)2NH(C1-C6烷基)、-S(=O)2N(C1-C6烷基)2、-NHS(=O)2(C1-C6烷基)、-NH2、-CN及-NO2；或與相同或相鄰碳原子連接之Re的兩個實例與其所連接之碳原子一起形成環烷基或雜環基；各Rf獨立地選自鹵基、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵烷基、-C1-C6烷氧基、-OH、-NH2、-CN及-NO2；及各Rh獨立地選自鹵基、-C1-C6烷基、-C1-C6鹵烷基、-C1-C6羥基烷基、-OH、-OC1-C6烷基、-C1-C6胺基烷基、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、-C(=O)OC1-C6烷基、-C(=O)OH、-C(=O)C1-C6烷基、-C(=O)NH2、-C(=O)NH(C1-C6烷基)、-C(=O)N(C1-C6烷基)2、-NHC(=O)NH2、-NHC(=O)NH(C1-C6烷基)、-NH(C=O)N(C1-C6烷基)2、-NHC(=O)(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)C(=O)(C1-C6烷基)、-S(=O)2NH2、-S(=O)2NH(C1-C6烷基)、-S(=O)2N(C1-C6烷基)2、-NHS(=O)2(C1-C6烷基)、-NH2、-CN及-NO2、S(=O)2芳基、S(=O)2雜芳基及=NOH，或與相同或相鄰碳原子連接之Rh的兩個實例與其所連接之碳原子一起形成環烷基或雜環基。
  14. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物具有式(II)：
    Figure 107128431-A0305-02-0324-35
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中：Ra及Rb各自獨立地為氫、鹵素、-CN、-NO2、-N3、視情況經取代之烷基、-ORo3、-N(Rn1)2、-C(=O)N(Rn1)2或-C(=O)Rc2，或Ra及Rb可與碳原子一起形成視情況經取代之環烷基或視情況經取代之雜環基；Rn1之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基；Ro3之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氧保護基；及Rc2之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基。
  15. 如請求項1至9中任一項之用途，其中L1為經Rj及Rk取代之C1-6伸烷基；其中Rj及Rk之各實例獨立地選自H、鹵素、-CN、-ORo7、-N(Rn5)2、-N(Rn5)C(=O)Rc5、-C(=O)N(Rn5)2、-C(=O)Rc5、-C(=O)ORo7、-SRjs、-S(=O)2Rjs或-S(=O)Rjs、視情況經取代之-C1-C6烷基；或Rj及Rk可與碳原子一起形成C=O、C=NRjn、視情況經取代之C3-C6單環環烷基環或視情況經取代之C3-C6單環雜環基環；Rn5及Rjn中之每一者獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基、-ORo8或氮保護基；Ro7之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氧保護基；Rc5之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基；及Rjs之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基、視情況經取代之C6-12芳基、視情況經取代之雜芳基或硫保護基。
  16. 如請求項1至9中任一項之用途，其中Q為視情況經取代之5員至6員單環雜芳基。
  17. 如請求項1至9中任一項之用途，其中Q具有下式中之一者：
    Figure 107128431-A0305-02-0326-4
     其中：Rn之各實例獨立地為氫、鹵素、-CN、-NO2、-N3、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之雜芳基、-ORo4、-SRs1、-N(Rn2)2、-C(=O)N(Rn2)2、-N(Rn2)C(=O)Rc3、-C(=O)Rc3、-C(=O)ORo4、-OC(=O)Rc3、-S(=O)Rs1、-S(=O)2Rs1、-S(=O)ORo4、-OS(=O)Rc3、-S(=O)2ORo4、-OS(=O)2Rc3、-S(=O)N(Rn2)2、-S(=O)2N(Rn2)2、-N(Rn2)S(=O)Rs1、-N(Rn2)S(=O)2Rs1、-N(Rn2)C(=O)ORo4、-OC(=O)N(Rn2)2、-N(Rn2)C(=O)N(Rn2)2、-N(Rn2)S(=O)N(Rn2)2、- N(Rn2)S(=O)2N(Rn2)2、-N(Rn2)S(=O)ORo4、-N(Rn2)S(=O)2ORo4、-OS(=O)N(Rn2)2或-OS(=O)2N(Rn2)2；或連接同一或相鄰碳原子之Rn的兩個實例與其所連接之碳原子一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；其中：Rn2之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基；Ro4之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氧保護基；Rc3之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基；Rs1之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基或硫保護基；在價數允許時，n為0、1、2或3；及Rna、Rnb及Rnd中之每一者獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基。
  18. 如請求項1至9中任一項之用途，其中Q為視情況經取代之8員至12員雙環雜芳基或視情況經取代之8員至12員雙環雜環基。
  19. 如請求項1至9中任一項之用途，其中Q具有下式中之一者：
    Figure 107128431-A0305-02-0328-5
     其中Rn之各實例獨立地選自氫、鹵素、-CN、-NO2、-N3、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之雜芳基、-ORo4、-SRs1、-N(Rn2)2、-C(=O)N(Rn2)2、-N(Rn2)C(=O)Rc3、-C(=O)Rc3、-C(=O)ORo4、-OC(=O)Rc3、-S(=O)Rs1、-S(=O)2Rs1、-S(=O)ORo4、-OS(=O)Rc3、-S(=O)2ORo4、-OS(=O)2Rc3、-S(=O)N(Rn2)2、-S(=O)2N(Rn2)2、-N(Rn2)S(=O)Rs1、-N(Rn2)S(=O)2Rs1、-N(Rn2)C(=O)ORo4、-OC(=O)N(Rn2)2、-N(Rn2)C(=O)N(Rn2)2、-N(Rn2)S(=O)N(Rn2)2、-N(Rn2)S(=O)2N(Rn2)2、-N(Rn2)S(=O)ORo4、-N(Rn2)S(=O)2ORo4、-OS(=O)N(Rn2)2、-OS(=O)2N(Rn2)2，或與相同或相鄰碳原子連接之Rn的兩個實例與其所連接之原子一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；Rna及Rnb之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基；Rn2之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基；Ro4之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氧保護基；Rc3之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基；Rs1之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基或硫保護基；及在價數允許時，n為0、1、2或3。
  20. 如請求項1至9中任一項之用途，其中R2係選自氫、羥基、鹵素、-C1-C6烷基、-C2-C6烯基、-C2-C6烷氧基、苯基、萘基、C3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、8員雙環雜芳基、9員雙環雜芳基，其中各烷基、烯 基、苯基及雜芳基經Re取代0-3次。
  21. 如請求項1至9中任一項之用途，其中R2具有下式中之一者：
    Figure 107128431-A0305-02-0330-8
    Figure 107128431-A0305-02-0331-9
     其中Rp之實例獨立地選自氫、鹵素、-CN、-NO2、-N3、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、視情況經取代之 環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜環基、視情況經取代之雜芳基、-ORo6、-SRs2、-N(Rn3)2、-C(=O)N(Rn3)2、-N(Rn3)C(=O)Rc4、-C(=O)Rc4、-C(=O)ORo6、-OC(=O)Rc4、-S(=O)Rs2、-S(=O)2Rs2、-S(=O)ORo6、-OS(=O)Rc4、-S(=O)2ORo6、-OS(=O)2Rc4、-S(=O)N(Rn3)2、-S(=O)2N(Rn3)2、-N(Rn3)S(=O)Rs2、-N(Rn3)S(=O)2Rs2、-N(Rn3)C(=O)ORo6、-OC(=O)N(Rn3)2、-N(Rn3)C(=O)N(Rn3)2、-N(Rn3)S(=O)N(Rn3)2、-N(Rn3)S(=O)2N(Rn3)2、-N(Rn3)S(=O)ORo6、-N(Rn3)S(=O)2ORo6、-OS(=O)N(Rn3)2、-OS(=O)2N(Rn3)2，或連接同一或相鄰碳原子之Rp的兩個實例與其所連接之原子一起形成視情況經取代之環烷基或雜環烷基；Rn3、Rnc及Rnd之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基；Ro6之各實例獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氧保護基；Rc4之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基；Rs2之各實例獨立地為視情況經取代之-C1-C6烷基或硫保護基；及在價數允許時，p為0、1、2或3。
  22. 如請求項1至9中任一項之用途，其中R2係選自以下中之一者：
    Figure 107128431-A0305-02-0332-11
  23. 如請求項21之用途，其中Rp之各實例獨立地為氫、鹵素、視情況經取代之C1-4烷基、-CN、-NO2、-N3、-ORo4、-N(Rn2)2、-C(=O)N(Rn2)2、 -C(=O)Rc3或-C(=O)ORo4。
  24. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物具有式(III)：
    Figure 107128431-A0305-02-0333-13
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；且Rn及n如請求項17或請求項19中所定義。
  25. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物具有式(IV)：
    Figure 107128431-A0305-02-0333-15
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；且Rn及n如請求項17或請求項19中所定義。
  26. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物具有式(V-a)：
    Figure 107128431-A0305-02-0333-37
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；Rn如請求項17或請求項19中所定義；且m為0、1或2。
  27. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物具有式(V-b)：
    Figure 107128431-A0305-02-0334-17
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；Rn如請求項17或請求項19中所定義；m為0、1或2；且Rnc獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基。
  28. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物具有式(VI)：
    Figure 107128431-A0305-02-0334-18
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；Rn及n如請求項17或請求項19中所定義；且Rn7為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基。
  29. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物具有式(IX)：
    Figure 107128431-A0305-02-0334-19
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；Rn及n如請 求項17或請求項19中所定義；且Rnc獨立地為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基。
  30. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物由以下結構式表示：
    Figure 107128431-A0305-02-0335-20
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；Rj及Rk如請求項15中所定義；Rp如請求項21中所定義；且q為0、1、2或3。
  31. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物由以下結構式表示：
    Figure 107128431-A0305-02-0335-23
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；Rj及Rk如請求項15中所定義；Rp如請求項21中所定義；且q為0、1、2或3。
  32. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物由以下結構式表示：
    Figure 107128431-A0305-02-0335-26
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；Rj及Rk如請 求項15中所定義；Rp如請求項21中所定義；q為0、1、2或3；且Rn6為氫、視情況經取代之-C1-C6烷基或氮保護基。
  33. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物由以下結構式表示：
    Figure 107128431-A0305-02-0336-38
     或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ra及Rb如請求項14中所定義；Rj及Rk如請求項15中所定義；Rp如請求項21中所定義；且q為0、1、2或3。
  34. 如請求項19之用途，其中Rna為氫或-C1-4烷基。
  35. 如請求項17之用途，其中Rn之各實例獨立地為氫、鹵素、視情況經取代之C1-4烷基、-CN、-NO2、-N3、-ORo4、-N(Rn2)2、-C(=O)N(Rn2)2、-C(=O)Rc3或-C(=O)ORo4。
  36. 如請求項1至9中任一項之用途，其中R1為氫或-C1-C4烷基。
  37. 如請求項15之用途，其中Rj及Rk各自獨立地為氫、鹵素、-ORo7或-C1-C4烷基。
  38. 如請求項14之用途，其中Ra及Rb各自為氫。
  39. 如請求項30之用途，其中q為0或1。
  40. 如請求項17之用途，其中n為0或1。
  41. 如請求項1至9中任一項之用途，其中該化合物係選自以下所列之任一者：
    Figure 107128431-A0305-02-0337-40
    Figure 107128431-A0305-02-0338-28
    Figure 107128431-A0305-02-0339-29
    Figure 107128431-A0305-02-0340-30
    Figure 107128431-A0305-02-0341-31
    Figure 107128431-A0305-02-0342-32
    Figure 107128431-A0305-02-0343-33
    Figure 107128431-A0305-02-0344-34
     。
TW107128431A 2017-08-15 2018-08-15 丙酮酸激酶調節劑及其用途 TWI796353B (zh)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
WOPCT/CN2017/097496 2017-08-15
CN2017097496 2017-08-15
US201862673533P 2018-05-18 2018-05-18
US201862673526P 2018-05-18 2018-05-18
US62/673,533 2018-05-18
US62/673,526 2018-05-18

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201919631A TW201919631A (zh) 2019-06-01
TWI796353B true TWI796353B (zh) 2023-03-21

Family

ID=63524352

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW111135803A TWI823580B (zh) 2017-08-15 2018-08-15 用於治療血液病症之丙酮酸激酶活化劑
TW107128429A TWI790271B (zh) 2017-08-15 2018-08-15 用於治療血液病症之丙酮酸激酶活化劑
TW107128431A TWI796353B (zh) 2017-08-15 2018-08-15 丙酮酸激酶調節劑及其用途

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW111135803A TWI823580B (zh) 2017-08-15 2018-08-15 用於治療血液病症之丙酮酸激酶活化劑
TW107128429A TWI790271B (zh) 2017-08-15 2018-08-15 用於治療血液病症之丙酮酸激酶活化劑

Country Status (32)

Country Link
US (7) US11364240B2 (zh)
EP (4) EP3668513B1 (zh)
JP (4) JP7301040B2 (zh)
KR (2) KR102642408B1 (zh)
CN (3) CN111032045B (zh)
AU (4) AU2018316588B2 (zh)
BR (2) BR112020003254A2 (zh)
CA (2) CA3071993A1 (zh)
CL (1) CL2020000375A1 (zh)
CO (2) CO2020002959A2 (zh)
CR (1) CR20200123A (zh)
CY (1) CY1124953T1 (zh)
DK (2) DK3668513T3 (zh)
EC (1) ECSP20018487A (zh)
ES (3) ES2966825T3 (zh)
FI (1) FI3668512T3 (zh)
HR (2) HRP20230452T1 (zh)
HU (2) HUE061910T2 (zh)
IL (3) IL272599B (zh)
LT (2) LT3668513T (zh)
MD (1) MD3668513T2 (zh)
MX (2) MX2020001832A (zh)
PE (1) PE20200724A1 (zh)
PH (1) PH12020500343A1 (zh)
PL (2) PL3668512T3 (zh)
PT (2) PT3668512T (zh)
RS (2) RS62871B1 (zh)
SG (2) SG11202001262QA (zh)
SI (2) SI3668513T1 (zh)
TW (3) TWI823580B (zh)
UA (1) UA126292C2 (zh)
WO (3) WO2019035865A1 (zh)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ763766A (en) 2017-03-20 2023-07-28 Novo Nordisk Healthcare Ag Pyrrolopyrrole compositions as pyruvate kinase (pkr) activators
WO2019035865A1 (en) 2017-08-15 2019-02-21 Agios Pharmaceuticals Inc. MODULATORS OF PYRUVATE KINASE AND THEIR USE
EP3852791B1 (en) 2018-09-19 2024-07-03 Novo Nordisk Health Care AG Activating pyruvate kinase r
BR112021005188A2 (pt) 2018-09-19 2021-06-08 Forma Therapeutics, Inc. tratamento de anemia falciforme com um composto de ativação de piruvato cinase r
EP3924056A1 (en) * 2019-02-13 2021-12-22 Agios Pharmaceuticals, Inc. Thieno[3,2-b] pyrrole[3,2-d]pyridazinone derivatives and their use as pkm2 derivatives for the treatment of cancer, obesity and diabetes related disorders
CN114008147B (zh) * 2019-06-26 2023-05-02 日产化学株式会社 电荷传输性清漆
AU2021311597A1 (en) * 2020-07-21 2023-02-02 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for activating pyruvate kinase
CN112490502B (zh) * 2020-12-04 2022-01-21 广州天赐高新材料股份有限公司 一种电解液及锂二次电池
WO2022170200A1 (en) 2021-02-08 2022-08-11 Global Blood Therapeutics, Inc. 1-(2-sulfonyl-2,6-dihydropyrrolo[3,4-c]pyrazol-5(4h)-yl]-ethanone derivatives as pyruvate kinase (pkr) and pkm2 activators for the treatment of sickle cell disease
CA3231728A1 (en) * 2021-09-30 2023-04-06 Sitryx Therapeutics Limited Novel compounds
TW202329935A (zh) * 2021-11-16 2023-08-01 美商阿吉歐斯製藥公司 用於治療ｍｄｓ相關聯之貧血及其他病況之化合物

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012151448A1 (en) * 2011-05-03 2012-11-08 Agios Pharmaceuticals, Inc. Pyruvate kinase activators for use in therapy

Family Cites Families (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4405635A (en) 1979-06-18 1983-09-20 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. 4-Aroylimidazol-2-ones and their use as pharmaceuticals
US4883914A (en) 1987-08-17 1989-11-28 American Cyanamid Company Benzenesulfonyl carboxamide compounds useful as herbicidal agents
CN1193026C (zh) 1999-07-30 2005-03-16 艾博特股份有限两合公司 2－吡唑啉－5－酮
DK1214296T3 (da) 1999-09-04 2004-07-05 Astrazeneca Ab Substituerede N-phenyl-2-hydroxy-2-methyl-3,3,3-trifluorpropanamidderivater, der forhöjer pyruvatdehydrogenaseaktivitet
EP1972629A1 (en) * 2007-03-23 2008-09-24 Mutabilis SA New imidazolo-heteroaryl derivatives with antibacterial properties
FR2933983B1 (fr) * 2008-07-15 2010-08-27 Servier Lab Nouveaux derives tricycliques,leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
WO2010011772A2 (en) * 2008-07-23 2010-01-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Tri-cyclic pyrazolopyridine kinase inhibitors
WO2010025202A1 (en) * 2008-08-29 2010-03-04 Amgen Inc. PYRIDO[3,2-d]PYRIDAZINE-2(1H)-ONE COMPOUNDS AS P38 MODULATORS AND METHODS OF USE THEREOF
EP2344453B1 (en) 2008-10-09 2016-12-28 The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Activators of human pyruvate kinase
AU2010234526B2 (en) * 2009-04-06 2016-07-21 Agios Pharmaceuticals, Inc. Pyruvate kinase M2 modulators, therapeutic compositions and related methods of use
TWI598337B (zh) 2009-06-29 2017-09-11 阿吉歐斯製藥公司 治療化合物及組成物
US20130109672A1 (en) 2010-04-29 2013-05-02 The United States Of America,As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Service Activators of human pyruvate kinase
MX2013006342A (es) 2010-12-06 2013-08-26 Glaxo Group Ltd Compuestos de pirimidinona para usarse en el tratamiento de enfermedades o afecciones mediadas por fosfolipasa asociada con lipoproteinas a2 (lp-pla2).
TWI549947B (zh) 2010-12-29 2016-09-21 阿吉歐斯製藥公司 治療化合物及組成物
EP2704720B1 (en) 2011-05-03 2019-08-07 Agios Pharmaceuticals, Inc. Pyruvate kinase r activators for use in therapy
ES2829374T3 (es) 2011-05-03 2021-05-31 Agios Pharmaceuticals Inc Uso de activadores de piruvato quinasa para aumentar la vida útil de los glóbulos rojos de la sangre y tratar la anemia
KR101873543B1 (ko) * 2011-05-03 2018-07-02 아지오스 파마슈티컬스 아이엔씨. 치료에 사용하기 위한 피루베이트 키나아제 활성제
EP2734520B1 (en) * 2011-07-19 2016-09-14 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
WO2013056153A1 (en) * 2011-10-13 2013-04-18 Kung Charles Activators of pyruvate kinase m2 and methods of treating disease
US9921221B2 (en) 2012-07-26 2018-03-20 Joslin Diabetes Center, Inc. Predicting and treating diabetic complications
AU2013342203B2 (en) 2012-11-08 2017-11-23 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and compositions and their use as PKM2 modulators
JP2016506943A (ja) * 2013-01-30 2016-03-07 バイエル・ファルマ・アクティエンゲゼルシャフト Ｍｋｎｋ−１キナーゼ阻害剤としてのアミドイミダゾピリダジン類
US9783529B2 (en) 2013-03-13 2017-10-10 Flatley Discovery Lab, Llc Pyridazinone compounds and methods for the treatment of cystic fibrosis
WO2014139144A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and compositions
AR097543A1 (es) * 2013-09-06 2016-03-23 Lexicon Pharmaceuticals Inc COMPUESTOS BASADOS EN IMIDAZO[1,2-b]PIRIDAZINA, COMPOSICIONES QUE LOS COMPRENDEN Y SUS MÉTODOS DE USO
HRP20220195T1 (hr) 2017-07-07 2022-04-15 Inflazome Limited Novi spojevi sulfonamid karboksamida
AR112690A1 (es) 2017-08-15 2019-11-27 Agios Pharmaceuticals Inc Activadores de piruvato quinasas para usar en el tratamiento de trastornos en la sangre
WO2019035865A1 (en) 2017-08-15 2019-02-21 Agios Pharmaceuticals Inc. MODULATORS OF PYRUVATE KINASE AND THEIR USE
CN111818917A (zh) 2017-08-15 2020-10-23 艾伯维公司 大环mcl-1抑制剂和使用方法
JP2020531453A (ja) 2017-08-15 2020-11-05 インフレイゾーム リミテッド Ｎｌｒｐ３阻害剤としてのスルホニルウレアおよびスルホニルチオウレア
EP3924056A1 (en) * 2019-02-13 2021-12-22 Agios Pharmaceuticals, Inc. Thieno[3,2-b] pyrrole[3,2-d]pyridazinone derivatives and their use as pkm2 derivatives for the treatment of cancer, obesity and diabetes related disorders

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012151448A1 (en) * 2011-05-03 2012-11-08 Agios Pharmaceuticals, Inc. Pyruvate kinase activators for use in therapy

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Clin Cancer Res; 18(20) October 15, 2012，Mayumi Tamada1 , Makoto Suematsu2,4, and Hideyuki Saya ，Pyruvate Kinase M2: Multiple Faces for Conferring Benefits on Cancer Cells
EXPERT OPINION ON THERAPEUTIC PATENTS, vol. 28, no. 1，SEVKI ADEM ΕΤ AL: "Pyruvate kinase activators as a therapy target: a patent review 2011-2017";Clin Cancer Res; 18(20) October 15, 2012，Mayumi Tamada1 , Makoto Suematsu2,4, and Hideyuki Saya ，Pyruvate Kinase M2: Multiple Faces for Conferring Benefits on Cancer Cells *

Also Published As

Publication number Publication date
US20220395503A1 (en) 2022-12-15
MX2020001833A (es) 2020-07-22
AU2018316587A1 (en) 2020-02-20
US20210077490A1 (en) 2021-03-18
WO2019035865A1 (en) 2019-02-21
IL292530A (en) 2022-06-01
PL3668513T3 (pl) 2022-03-21
CL2020000375A1 (es) 2020-12-11
JP2020531443A (ja) 2020-11-05
IL272599B (en) 2022-08-01
US20200206225A1 (en) 2020-07-02
HUE057178T2 (hu) 2022-04-28
JP7530453B2 (ja) 2024-08-07
TWI790271B (zh) 2023-01-21
WO2019035864A1 (en) 2019-02-21
EP3668512A1 (en) 2020-06-24
EP3668512B1 (en) 2023-02-15
US11590132B2 (en) 2023-02-28
CR20200123A (es) 2020-06-29
KR20200054199A (ko) 2020-05-19
JP2020531432A (ja) 2020-11-05
EP4026838A1 (en) 2022-07-13
MX2020001832A (es) 2020-07-22
US11872225B2 (en) 2024-01-16
AU2018316587B2 (en) 2023-05-11
IL272599A (en) 2020-03-31
AU2018316588B2 (en) 2023-02-02
CY1124953T1 (el) 2023-01-05
US11464775B2 (en) 2022-10-11
IL292530B2 (en) 2023-06-01
ES2905100T3 (es) 2022-04-07
RU2020110573A (ru) 2021-09-16
CO2020002961A2 (es) 2020-04-13
PT3668512T (pt) 2023-05-22
RS62871B1 (sr) 2022-02-28
KR20230127364A (ko) 2023-08-31
US20210130371A1 (en) 2021-05-06
PT3668513T (pt) 2022-01-21
TWI823580B (zh) 2023-11-21
US11957680B2 (en) 2024-04-16
TW201920203A (zh) 2019-06-01
IL272597A (en) 2020-03-31
AU2024205818A1 (en) 2024-09-05
SI3668513T1 (sl) 2022-04-29
CA3072455A1 (en) 2019-02-21
ES2966825T3 (es) 2024-04-24
ES2944545T3 (es) 2023-06-22
PH12020500343A1 (en) 2021-02-08
FI3668512T3 (fi) 2023-05-12
BR112020003262A2 (pt) 2020-09-01
KR102642408B1 (ko) 2024-02-28
US20200207785A1 (en) 2020-07-02
RS64221B1 (sr) 2023-06-30
JP2023027276A (ja) 2023-03-01
US11040036B2 (en) 2021-06-22
ECSP20018487A (es) 2020-05-29
CO2020002959A2 (es) 2020-04-13
JP7275107B2 (ja) 2023-05-17
US20230226055A1 (en) 2023-07-20
WO2019035863A1 (en) 2019-02-21
EP3668513B1 (en) 2021-11-10
WO2019035863A8 (en) 2019-03-28
RU2020110573A3 (zh) 2021-12-24
CN111032045A (zh) 2020-04-17
AU2023202772A1 (en) 2023-05-18
CA3071993A1 (en) 2019-02-21
CN111032046A (zh) 2020-04-17
MD3668513T2 (ro) 2022-04-30
WO2019035865A8 (en) 2019-03-28
TW201919631A (zh) 2019-06-01
HUE061910T2 (hu) 2023-08-28
HRP20220039T1 (hr) 2022-04-15
EP3668881A1 (en) 2020-06-24
CN117186119A (zh) 2023-12-08
BR112020003254A2 (pt) 2020-10-27
WO2019035864A8 (en) 2019-03-28
DK3668513T3 (da) 2022-01-10
UA126292C2 (uk) 2022-09-14
US20220233541A1 (en) 2022-07-28
IL272597B (en) 2022-06-01
PL3668512T3 (pl) 2023-06-19
TW202323258A (zh) 2023-06-16
SG11202001353PA (en) 2020-03-30
US11364240B2 (en) 2022-06-21
SI3668512T1 (sl) 2023-06-30
SG11202001262QA (en) 2020-03-30
EP3668881B1 (en) 2023-10-04
LT3668512T (lt) 2023-06-12
KR20200054200A (ko) 2020-05-19
CN111032046B (zh) 2023-09-26
PE20200724A1 (es) 2020-07-21
DK3668512T3 (da) 2023-05-22
HRP20230452T1 (hr) 2023-07-21
LT3668513T (lt) 2022-03-25
JP2023052478A (ja) 2023-04-11
CN111032045B (zh) 2023-08-15
AU2018316588A1 (en) 2020-02-20
EP3668513A1 (en) 2020-06-24
AU2023202772B2 (en) 2024-05-16
JP7301040B2 (ja) 2023-06-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI796353B (zh) 丙酮酸激酶調節劑及其用途
RU2537945C2 (ru) Триазиновые, пиримидиновые и пиридиновые аналоги и их применение в качестве терапевтических агентов и диагностических проб
CN107108561B (zh) 用作irak抑制剂的杂芳基化合物及其用途
EP2763976B1 (en) 2-pyridyl carboxamide-containing spleen tyrosine kinase (syk) inhibitors
ES2649144T3 (es) Compuestos heteroaromáticos y su uso como ligandos de dopamina D1
US20220127267A1 (en) Thieno[3,2-b] pyrrole[3,2-d]pyridazinone derivatives and their use as pkm2 derivatives for the treatment of cancer, obesity and diabetes related disorders
CA2767097A1 (en) Pyrazolopyrimidine jak inhibitor compounds and methods
CN112236429A (zh) 用作ii型irak抑制剂的杂芳基化合物及其用途
WO2017046737A1 (en) 1-phenylpyrrolidin-2-one derivatives as perk inhibitors
JP2022510380A (ja) チロシンキナーゼ阻害剤、組成及びその方法
WO2011006066A1 (en) Cb receptor agonists
TW202325288A (zh) 新穎化合物
RU2797518C2 (ru) Модуляторы пируваткиназы и их применение