RU2797518C2 - Модуляторы пируваткиназы и их применение - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к области фармакологии и медицины и направлено на модуляцию активности M2-пируваткиназы (PKM2). Раскрывается применение соединения, выбранного из группы или фармацевтически приемлемая соль любого из вышеперечисленных соединений для лечения заболеваний ассоциированных с отклоняющейся от нормы активностью PKM2, причем заболевание выбрано из группы, состоящей из рака, ожирения, заболевания, связанного с диабетом, атеросклероза, заболевания коронарной артерии (CAD), синдрома Блума (BS) или аутоиммунного заболевания. Изобретение обеспечивает эффективное лечение заболеваний, ассоциированных с активностью PKM2. 20 з.п. ф-лы, 14 ил., 29 табл., 11 пр.

Description

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Настоящая заявка испрашивает преимущество приоритета согласно предварительным заявкам на патент США №№ 62/673526 и 62/673533, обе из которых поданы 18 мая 2018 г. Настоящая заявка также испрашивает преимущество приоритета согласно международной заявке на патент № PCT/CN2017/097496, поданной 15 августа 2017 г. Каждая из вышеуказанных приоритетных заявок включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Пируваткиназа (PK) - это метаболический фермент, под действием которого происходит превращение фосфоенолпирувата в пируват в процессе гликолиза. У млекопитающих существует четыре изоформы PK: L- и R-изоформы (с гена PKLR) экспрессируются в клетках печени и эритроцитах соответственно, а ген PKM кодирует два сплайс-варианта, M1-изоформу, которая экспрессируется в большинстве тканей взрослых людей, и M2-изоформу, которая экспрессируется в ходе эмбрионального развития и в некоторых тканях взрослых людей, включая клетки почек и гематопоэтические стволовые клетки. Многие опухолевые клетки также экспрессируют PKM2. Данная тетрамерная аллостерически регулируемая изоформа по своей природе сконструирована с возможностью понижать ее активность посредством посттрансляционной модификации, аллостерической модуляции с помощью низкомолекулярных лигандов, в том числе некоторых аминокислот, и посредством диссоциации субъединиц (в димерную форму), что приводит к частичному ингибированию гликолиза на последней стадии. В результате этого накапливаются промежуточные соединения более ранних стадий гликолитического пути в качестве анаболического источника углерода для синтеза липидов и нуклеиновых кислот, при этом повторное связывание PKM2 в активный тетрамер восстанавливает нормальное катаболическое состояние в качестве обратной связи после клеточного деления (Protein Sci. 2010 Nov; 19(11): 2031-2044). Модуляция (например, ингибирование или активация) PKM2 может быть эффективной в лечении ряда нарушений, например, рака, ожирения, заболеваний, связанных с диабетом (например, диабетической нефропатии (DN)), заболевания коронарной артерии (CAD), синдрома Блума (BS), аутоиммунных нарушений и заболеваний, зависимых от пролиферации (например, доброкачественной гиперплазии предстательной железы (BPH)).

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В данном документе описаны способы модуляции активности M2-пируваткиназы (PKM2) у субъекта, нуждающегося в этом, включающие введение эффективного количества соединения формул (I), (II), (III), (IV), (V-a), (V-b), (VI) или (IX) (обобщенно называемых в данном документе «формулы (I)-(IX)») или его фармацевтически приемлемой соли, или соединения формул (I’), (II’), (III’), (IV’), (V’) (обобщенно называемых в данном документе «формулы (I’)-(V’)» или его фармацевтически приемлемой соли, благодаря чему осуществляют регуляцию PKM2, ферментов дикого типа и/или мутантных ферментов (таких, как описанные в данном документе).

В одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает способ модуляции активности M2-пируваткиназы (PKM2) у субъекта, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли,

где Q, R¹, R², L¹, L² и Q определены в данном документе.

В одном варианте осуществления соединение или его фармацевтически приемлемая соль выбраны из соединений таблицы 1 и соединений, изображенных на фигурах 1A-1C, 2A-2C и 3.

Также предусмотрен способ модуляции активности M2-пируваткиназы (PKM2) у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение фармацевтической композиции, содержащей эффективное количество соединения формул (I)-(IX) или его фармацевтически приемлемой соли или соединения формул (I’)-(V’) или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель.

В другом варианте осуществления предусмотрен способ модуляции (например, повышения или снижения) уровня активности PKM2 у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества соединения, описанного в данном документе, субъекту. В некоторых вариантах осуществления соединение или композицию, описанные в данном документе, применяют для поддержания PKM2 в ее активной конформации или инициирования активности пируваткиназы в пролиферирующих клетках как средство для перенаправления метаболитов глюкозы в катаболические процессы вместо анаболических процессов в организме пациента. В конкретных вариантах осуществления предусмотрен способ повышения уровня (т. е. инициирования) активности PKM2 у субъекта. В конкретных вариантах осуществления предусмотрен способ снижения уровня активности PKM2 у субъекта.

В другом варианте осуществления предусмотрен способ модуляции (например, повышения или снижения) уровня глюкозы в плазме крови у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества соединения, описанного в данном документе, субъекту. В конкретных вариантах осуществления предусмотрен способ повышения уровня глюкозы в плазме крови у субъекта. В конкретных вариантах осуществления предусмотрен способ снижения уровня глюкозы в плазме крови у субъекта.

В другом варианте осуществления предусмотрен способ ингибирования пролиферации клеток у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества соединения, описанного в данном документе, субъекту. Например, с помощью данного способа можно ингибировать рост трансформированной клетки, например опухолевой клетки, или в целом ингибировать рост PKM2-зависимой клетки, которая подвергается аэробному гликолизу.

В другом варианте осуществления предусмотрен способ лечения субъекта, страдающего от заболевания или нарушения, ассоциированных с функционированием PKM2, или предрасположенного к ним, включающий введение эффективного количества соединения, описанного в данном документе, субъекту. В конкретном варианте осуществления способ дополнительно включает идентификацию или отбор субъекта, который будет получать пользу от модуляции (например, активации) PKM2 и/или уровня глюкозы в плазме крови. Например, пациента можно идентифицировать по уровню активности PKM2 в клетке пациента для лечения рака, ассоциированного с функционированием PKM2. В другом варианте осуществления выбранный пациент является субъектом, страдающим от нарушения или заболевания, идентифицированных в данном документе, например нарушения, характеризующегося нежелательным ростом или пролиферацией клеток, или восприимчивым к ним. В конкретных вариантах осуществления заболевание представляет собой неопластическое нарушение. В конкретных вариантах осуществления заболевание представляет собой рак, ожирение, заболевание, связанное с диабетом (например, диабетическая нефропатия (DN)), атеросклероз, рестеноз, заболевание коронарной артерии (CAD), синдром Блума (BS), доброкачественную гиперплазию предстательной железы (BPH) или аутоиммунное заболевание. В конкретных вариантах осуществления заболевание представляет собой рак. В конкретных вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание, связанное с диабетом. В конкретных вариантах осуществления заболевание, связанное с диабетом, представляет собой диабетическую нефропатию (DN). В некоторых вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание коронарной артерии (CAD).

В одном варианте осуществления предусмотрено применение соединения, описанного в данном документе, или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей их, в любом из способов по настоящему изобретению, описанных выше. В одном варианте осуществления предусмотрено соединение, описанное в данном документе, или его фармацевтически приемлемая соль, или фармацевтическая композиция, содержащая их, для применения в любом из способов по настоящему изобретению, описанных выше. В другом варианте осуществления предусмотрено применение соединения, описанного в данном документе, или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей их, для изготовления лекарственного препарата с помощью любого из описанных способов по настоящему изобретению.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На фигурах 1A-1C представлены перечни структур других иллюстративных соединений, применяемых в способах по настоящему изобретению.

На фигурах 2A-2C представлены перечни структур других иллюстративных соединений, применяемых в способах по настоящему изобретению.

На фигуре 3 представлен перечень структур других иллюстративных соединений, применяемых в способах по настоящему изобретению.

На фигуре 4 показан синтез иллюстративных промежуточных соединений, применяемых в примерах 1-10.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Особенности конструкции и расположение компонентов, изложенные в следующем описании или проиллюстрированные в графических материалах, не предназначены для ограничения. Варианты осуществления можно осуществлять на практике или выполнять различными способами. Фразы и термины, используемые в данном документе, предназначены для описания и не должны рассматриваться как ограничивающие.

Определения

Описанные в данном документе соединения, которые применяются в способах по настоящему изобретению, могут иметь один или более центров асимметрии, и, таким образом, могут существовать в различных стереоизомерных формах, например, как энантиомеры и/или диастереомеры. Например, описанные в данном документе соединения могут быть представлены в форме отдельного энантиомера, диастереомера или геометрического изомера или могут быть представлены в форме смеси стереоизомеров, включая рацемические смеси и смеси, обогащенные одним или более стереоизомерами. Изомеры можно выделять из смесей с помощью способов, известных специалистам в данной области техники, включая хиральную жидкостную хроматографию при высоком давлении (HPLC), а также образование и кристаллизацию хиральных солей; или предпочтительные изомеры можно получать с помощью вариантов асимметрического синтеза. См., например, Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981); Wilen et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); и Wilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972).

В одном варианте осуществления соединения, описанные в данном документе, могут также содержать одно или более изотопных замещений. Например, соединения, имеющие данные структуры, за исключением замены водорода дейтерием или тритием, замены ¹⁹F на ¹⁸F или замены ¹²C на ¹³C или ¹⁴C, находятся в пределах объема настоящего изобретения. Такие соединения применимы, например, в качестве аналитических инструментов или зондов в биологических анализах.

Описанные в данном документе соединения также могут быть представлены в нескольких таутомерных формах, в таких случаях прямо включены все таутомерные формы описанных в данном документе соединений, несмотря на то, что может быть представлена лишь одна таутомерная форма (например, алкилирование кольцевой системы может привести к алкилированию по нескольким сайтам; все продукты такой реакции прямо включены). Все такие изомерные формы таких соединений прямо включены. Если таутомер соединения является ароматическим, то данное соединение является ароматическим. Подобным образом, если таутомер заместителя является гетероарилом, то данный заместитель является гетероарилом.

Термин «алкил» относится к радикалу, представляющему собой насыщенную углеводородную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 10 атомов углерода («C_1-10алкил»). Примеры C_1-6алкильных групп включают метил (C₁), этил (C₂), пропил (C₃) (например, н-пропил, изопропил), бутил (C₄) (например, н-бутил, трет-бутил, втор-бутил, изобутил), пентил (C₅) (например, н-пентил, 3-пентанил, амил, неопентил, 3-метил-2-бутанил, третичный амил) и гексил (C₆) (например, н-гексил). Если не указано иное, то каждый вариант алкильной группы является независимо незамещенным («незамещенный алкил») или замещенным («замещенный алкил») одним или более заместителями (например, галогеном, таким как F). В конкретных вариантах осуществления алкильная группа представляет собой незамещенный -C_1-10алкил. В конкретных вариантах осуществления алкильная группа представляет собой замещенный -C_1-10алкил.

Термин «галогеналкил» относится к замещенной алкильной группе, где один или более атомов водорода независимо заменены на галоген, например, фтор, бром, хлор или йод, и включает алкильные фрагменты, в которых все атомы водорода были заменены на галоген (например, перфторалкил). В некоторых вариантах осуществления галогеналкильный фрагмент содержит от 1 до 8 атомов углерода («C_1-8галогеналкил»).

Термин «алкокси» или «алкоксил» относятся к -O-алкильному радикалу. Например, с содержанием от 1 до 6 атомов углерода.

Термин «арилокси» относится к -O-арильному радикалу. В некоторых вариантах осуществления арилоксильная группа представляет собой фенокси.

«Гидроксиалкил» или «гидроксилалкил» может включать алкильные структуры, которые замещены одной или более гидроксильными группами.

Термин «гетероалкил» относится к алкильной группе, которая дополнительно содержит по меньшей мере один гетероатом (например, 1, 2, 3 или 4 гетероатома), выбранный из кислорода, азота или серы, в пределах основной цепи (т.е. вставленный между смежными атомами углерода) и/или размещенный в одном или нескольких концевых положениях. В конкретных вариантах осуществления гетероалкильная группа относится к насыщенной группе, содержащей от 1 до 10 атомов углерода и 1 или более гетероатомов в пределах основной цепи («гетероC_1-10алкил»). Если не указано иное, то каждый вариант гетероалкильной группы является независимо незамещенным («незамещенный гетероалкил») или замещенным («замещенный гетероалкил») одним или более заместителями. В конкретных вариантах осуществления гетероалкильная группа представляет собой незамещенный гетероC_1-10алкил. В конкретных вариантах осуществления гетероалкильная группа представляет собой замещенный гетероC_1-10алкил.

Термин «алкенил» относится к радикалу, представляющему собой углеводородную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 2 до 10 атомов углерода и одну или более углерод-углеродных двойных связей (например, 1, 2, 3 или 4 двойные связи). Одна или несколько углерод-углеродных двойных связей могут быть внутренними (такими как у 2-бутенила) или концевыми (такими как у 1-бутенила). Примеры -C_2-4алкенильных групп включают этенил (C₂), 1-пропенил (C₃), 2-пропенил (C₃), 1-бутенил (C₄), 2-бутенил (C₄), бутадиенил (C₄) и т. п. Если не указано иное, то каждый вариант алкенильной группы является независимо незамещенным («незамещенный алкенил») или замещенным («замещенный алкенил») одним или более заместителями. В конкретных вариантах осуществления алкенильная группа представляет собой незамещенный -C_2-10алкенил. В конкретных вариантах осуществления алкенильная группа представляет собой замещенный -C_2-10алкенил. В алкенильной группе двойная связь C=C может представлять собой (E)- или (Z)-двойную связь.

Термин «алкинил» относится к радикалу, представляющему собой углеводородную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 2 до 10 атомов углерода и одну или более углерод-углеродных тройных связей (например, 1, 2, 3 или 4 тройных связей) («C_2-10алкинил»). Примеры алкинильной группы включают этинил (C₂), 1-пропинил (C₃), 2-пропинил (C₃), 1-бутинил (C₄), 2-бутинил (C₄), пентинил (C₅), гексинил (C₆), гептинил (C₇), октинил (C₈) и т. п. Если не указано иное, то каждый вариант алкинильной группы является независимо незамещенным («незамещенный алкинил») или замещенным («замещенный алкинил») одним или более заместителями. В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа представляет собой незамещенный -C_2-10алкинил. В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа представляет собой замещенный -C_2-10алкинил.

Термин «карбоциклил» или «карбоциклический» относится к радикалу, представляющему собой неароматическую моноциклическую, бициклическую, или трициклическую, или полициклическую углеводородную кольцевую систему, содержащую от 3 до 14 атомов углерода в кольце («C_3-14карбоциклил»), и ноль гетероатомов в неароматической кольцевой системе. Карбоциклильные группы включают полностью насыщенные кольцевые системы (например, циклоалкилы) и частично насыщенные кольцевые системы. В некоторых вариантах осуществления карбоциклильная группа содержит от 3 до 10 атомов углерода в кольце («C_3-10карбоциклил»).

Используемый в данном документе термин «циклоалкил» включает насыщенные циклические, бициклические, трициклические или полициклические углеводородные группы, содержащие от 3 до 14 атомов углерода, при этом состоящие из указанного числа колец и атомов углерода (например, моноциклический C₃-C₁₄, бициклический C₄-C₁₄, трициклический C₅-C₁₄ или полициклический C₆-C₁₄циклоалкил). В некоторых вариантах осуществления «циклоалкил» представляет собой моноциклический циклоалкил. Примеры моноциклических циклоалкильных групп включают циклопентил (C₅), циклогексил (C₅), циклопропил (C₃), циклобутил (C₄), циклогептил (C₇) и циклооктил (C₈). В некоторых вариантах осуществления «циклоалкил» представляет собой бициклический циклоалкил. Примеры бициклических циклоалкилов включают бицикло[1.1.0]бутан (C₄), бицикло[1.1.1]

пентан (C₅), спиро[2.2]пентан (C₅), бицикло[2.1.0]пентан (C₅), бицикло[2.1.1]гексан (C₆), бицикло[3.3.3]ундекан (C₁₁), декагидронафталин (C₁₀), бицикло[4.3.2]ундекан (C₁₁), спиро[5.5]ундекан (C₁₁) и бицикло[4.3.3]додекан (C₁₂). В некоторых вариантах осуществления «циклоалкил» представляет собой трициклический циклоалкил. Примеры трициклических циклоалкилов включают адамантин (C₁₂). Если не указано иное, то каждый вариант циклоалкильной группы является независимо незамещенным («незамещенный циклоалкил») или замещенным («замещенный циклоалкил») одним или более заместителями. В конкретных вариантах осуществления циклоалкильная группа представляет собой незамещенный C_3-14циклоалкил. В некоторых вариантах осуществления циклоалкильная группа представляет собой замещенный C_3-14циклоалкил.

Термин «гетероциклил» или «гетероциклический» относится к радикалу, представляющему собой 3-14-членную неароматическую кольцевую систему, содержащую атомы углерода в кольце и 1-4 гетероатома в кольце, где каждый гетероатом независимо выбран из азота, кислорода и серы («3-14-членный гетероциклил»). В гетероциклильных группах, которые содержат один или более атомов азота, точка присоединения может представлять собой атом углерода или азота, как позволяет валентность. Гетероциклильная группа может быть либо моноциклической («моноциклический гетероциклил»), либо полициклической (например, конденсированная, мостиковая или спирокольцевая система, такая как бициклическая система («бициклический гетероциклил») или трициклическая система («трициклический гетероциклил»)), а также может быть насыщенной или может содержать одну или более углерод-углеродных двойных или тройных связей. Гетероциклильные полициклические кольцевые системы могут включать один или более гетероатомов в одном или обоих кольцах. Термин «гетероциклил» также включает кольцевые системы, где гетероциклильное кольцо, определенное выше, является конденсированным с одной или более карбоциклильными группами, при этом точка присоединения находится либо на карбоциклильном, либо на гетероциклильном кольце, или кольцевые системы, где гетероциклильное кольцо, определенное выше, является конденсированным с одной или более арильными или гетероарильными группами, при этом точка присоединения находится на гетероциклильном кольце, и в таких случаях количество членов кольца продолжает обозначать количество членов кольца в гетероциклильной кольцевой системе. Если не указано иное, то каждый вариант гетероциклила является независимо незамещенным («незамещенный гетероциклил») или замещенным («замещенный гетероциклил») одним или более заместителями. В конкретных вариантах осуществления гетероциклильная группа представляет собой незамещенный 3-14-членный гетероциклил. В конкретных вариантах осуществления гетероциклильная группа представляет собой замещенный 3-14-членный гетероциклил. В некоторых вариантах осуществления гетероциклильная группа представляет собой 5-10-членную неароматическую кольцевую систему, содержащую атомы углерода в кольце и 1-4 гетероатома в кольце, при этом каждый гетероатом независимо выбран из азота, кислорода и серы («5-10-членный гетероциклил»).

Иллюстративные гетероциклильные группы включают азиридинил, оксиранил, тииранил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиофенил, дигидротиофенил, пирролидинил, дигидропирролил, пирролил-2,5-дион, диоксоланил, оксатиоланил, дитиоланил, триазолинил, оксадиазолинил, тиадиазолинил, пиперидинил, тетрагидропиранил, дигидропиридинил, тианил, пиперазинил, морфолинил, дитианил, диоксанил, триазинанил, азепанил, оксепанил, тиепанил, азоканил, оксеканил, тиоканил, индолинил, изоиндолинил, дигидробензофуранил, дигидробензотиенил, тетрагидробензотиенил, тетрагидробензoфуранил, тетрагидроиндолил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, декагидрохинолинил, декагидроизохинолинил, октагидрохроменил, октагидроизохроменил, декагидронафтиридинил, декагидро-1,8-нафтиридинил, октагидропирроло[3,2-b]пиррол, индолинил, фталимидил, нафталимидил, хроманил, хроменил, 1H-бензо[e][1,4]диазепинил, 1,4,5,7-тетрагидропирано[3,4-b]пирролил, 5,6-дигидро-4H-фуро[3,2-b]пирролил, 6,7-дигидро-5H-фуро[3,2-b]пиранил, 5,7-дигидро-4H-тиено[2,3-c]пиранил, 2,3-дигидро-1H-пирроло[2,3-b]пиридинил, 2,3-дигидрофуро[2,3-b]пиридинил, 4,5,6,7-тетрагидро-1H-пирроло[2,3-b]пиридинил, 4,5,6,7-тетрагидрофуро[3,2-c]пиридинил, 4,5,6,7-тетрагидротиено[3,2-b]пиридинил, 1,2,3,4-тетрагидро-1,6-нафтиридинил и т.п.

Термин «арил» относится к радикалу, представляющему собой моноциклическую или полициклическую (например, бициклическую или трициклическую) 4n+2 ароматическую кольцевую систему (например, содержащую 6, 10 или 14 π-электронов, делокализованных в циклической структуре), содержащую 6-14 атомов углерода в кольце и ноль гетероатомов, включенных в ароматическую кольцевую систему («C_6-14арил»). В некоторых вариантах осуществления арильная группа содержит 6 атомов углерода в кольце («C₆арил»; например, фенил). В некоторых вариантах осуществления арильная группа содержит 10 атомов углерода в кольце («C₁₀арил»; например, нафтил, такой как 1-нафтил и 2-нафтил). В некоторых вариантах осуществления арильная группа содержит 14 атомов углерода в кольце («C₁₄арил»; например, антрацил). Термин «арил» также включает кольцевые системы, где арильное кольцо, определенное выше, является конденсированным с одной или более карбоциклильными или гетероциклильными группами, при этом радикал или точка присоединения находятся на арильном кольце, и в таких случаях количество атомов углерода продолжает обозначать количество атомов углерода в арильной кольцевой системе. Если не указано иное, то каждый вариант арильной группы является независимо незамещенным («незамещенный арил») или замещенным («замещенный арил») одним или более заместителями. В конкретных вариантах осуществления арильная группа представляет собой незамещенный C_6-14арил. В конкретных вариантах осуществления арильная группа представляет собой замещенный C_6-14арил.

«Арилалкил» или «аралкил» представляет собой разновидность «алкила» и относится к алкильной группе, замещенной арильной группой, при этом точка присоединения находится на алкильном фрагменте. Примеры «арилалкила» или «аралкила» включают бензильную, 2-фенилэтильную, 3-фенилпропильную, 9-флуоренильную, бензгидрильную и тритильную группы.

Термин «гетероарил» относится к радикалу, представляющему собой 5-14-членную моноциклическую или полициклическую (например, бициклическую, трициклическую) 4n+2 ароматическую кольцевую систему (например, содержащую 6, 10 или 14 π-электронов, делокализованных в циклической структуре), содержащую атомы углерода в кольце и 1-4 гетероатома в кольце, включенные в ароматическую кольцевую систему, где каждый гетероатом независимо выбран из азота, кислорода и серы («5-14-членный гетероарил»). В некоторых вариантах осуществления гетероарил может представлять собой 5-8-членный моноциклический гетероарил, содержащий 1-4 гетероатома. В некоторых вариантах осуществления гетероарил может представлять собой 8-12-членный бициклический гетероарил, содержащий 1-6 гетероатомов. В некоторых вариантах осуществления гетероарил может представлять собой 11-14-членную трициклическую гетероарильную кольцевую систему, содержащую 1-9 гетероатомов. В гетероарильных группах, которые содержат один или более атомов азота, точка присоединения может представлять собой атом углерода или азота, как позволяет валентность. Гетероарильные полициклические кольцевые системы могут включать один или более гетероатомов в одном или обоих кольцах. Термин «гетероарил» включает кольцевые системы, где гетероарильное кольцо, определенное выше, является конденсированным с одной или более карбоциклильными или гетероциклильными группами, при этом точка присоединения находится на гетероарильном кольце, и в таких случаях количество членов кольца продолжает обозначать количество членов кольца в гетероарильной кольцевой системе. Термин «гетероарил» также включает кольцевые системы, где гетероарильное кольцо, определенное выше, является конденсированным с одной или более арильными группами, при этом точка присоединения находится либо на арильном, либо на гетероарильном кольце, и в таких случаях количество членов кольца обозначает количество членов кольца в конденсированной полициклической (арильной/гетероарильной) кольцевой системе. Полициклические гетероарильные группы, где одно кольцо не содержит гетероатом (например, индолил, хинолинил, карбазолил и т. п.), и точка присоединения может находиться либо на кольце, т. е. либо на кольце, несущем гетероатом (например, 2-индолил), либо на кольце, которое не содержит гетероатом (например, 5-индолил). В некоторых вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой моноциклическую 5-10-членную ароматическую кольцевую систему, содержащую атомы углерода в кольце и 1-4 гетероатома в кольце, предусмотренные в ароматической кольцевой системе, где каждый гетероатом независимо выбран из азота, кислорода и серы («5-10-членный моноциклический гетероарил»). В некоторых вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой бициклическую 8-12-членную ароматическую кольцевую систему, содержащую атомы углерода в кольце и 1-6 гетероатомов в кольце, предусмотренные в ароматической кольцевой системе, где каждый гетероатом независимо выбран из азота, кислорода и серы («8-12-членный бициклический гетероарил»). Если не указано иное, то каждый вариант гетероарильной группы является независимо незамещенным («незамещенный гетероарил») или замещенным («замещенный гетероарил») одним или более заместителями. В конкретных вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой незамещенный 5-14-членный гетероарил. В конкретных вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой замещенный 5-14-членный гетероарил. В конкретных вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой необязательно замещенный 5-членный моноциклический гетероарил. В конкретных вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой необязательно замещенный 6-членный моноциклический гетероарил.

Иллюстративные моноциклические гетероарильные группы включают пирролил, фуранил, тиофенил, имидазолил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, тетразолил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, триазинил, тетразинил, азепинил, оксепинил, тиепинил, индолил, изоиндолил, индазолил, бензотриазолил, бензотиофенил, изобензотиофенил, бензофуранил, бензоизофуранил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензизоксазолил, бензоксадиазолил, бензтиазолил, бензизотиазолил, бензтиадиазолил, индолизинил, пуринил, нафтиридинил, птеридинил, хинолинил, изохинолинил, циннолинил, хиноксалинил, фталазинил, хиназолинилфенантридинил, дибензофуранил, карбазолил, акридинил, фенотиазинил, феноксазинил и феназинил.

«Гетероаралкил» или «гетероарилалкил» относятся к алкильной группе, замещенной гетероарильной группой, при этом точка присоединения находится на алкильном фрагменте.

Термин «насыщенный» относится к фрагменту, который не содержит двойной или тройной связи, т. е. фрагмент содержит исключительно одинарные связи.

Добавление суффикса «-ен» к группе указывает на то, что группа является двухвалентным фрагментом, например, алкилен является двухвалентным фрагментом алкила, алкенилен является двухвалентным фрагментом алкенила, алкинилен является двухвалентным фрагментом алкинила, гетероалкилен является двухвалентным фрагментом гетероалкила, гетероалкенилен является двухвалентным фрагментом гетероалкенила, гетероалкинилен является двухвалентным фрагментом гетероалкинила, карбоциклилен является двухвалентным фрагментом карбоциклила, гетероциклилен является двухвалентным фрагментом гетероциклила, арилен является двухвалентным фрагментом арила и гетероарилен является двухвалентным фрагментом гетероарила.

Термин «необязательно замещенный» относится к тому, что может быть замещенным или незамещенным. В общем термин «замещенный» означает, что по меньшей мере один атом водорода, присутствующий в группе, заменен допустимым заместителем, например заместителем, который при замещении обеспечивает образование стабильного соединения, например соединения, которое самопроизвольно не подвергается такому преобразованию, как перегруппировка, замыкание цикла, элиминирование или другой реакции. Если не указано иное, то «замещенная» группа содержит заместитель (например, C_1-6алкил, галоген, нитро, циано, гидроксил, C_1-6галогеналкил, C_1-6галогеналкокси, C_1-6ацил, C_3-6циклоалкил, C_6-10арил, моноциклический или бициклический гетероарил и моноциклический или бициклический гетероциклил) в одном или более положениях группы, в которых возможно замещение, при этом, если в любой заданной структуре осуществляют замещение в более чем одном ее положении, то заместители являются либо одинаковыми, либо различными в каждом положении. Предусматривается, что термин «замещенный» включает замещение всеми допустимыми заместителями органических соединений и включает любые заместители, описанные в данном документе, которые обеспечивают образование стабильного соединения. Настоящим изобретением предусматриваются любая и все такие комбинации, с тем чтобы получить устойчивое соединение. В целях настоящего изобретения гетероатомы, такие как атомы азота, могут иметь заместители, представляющие собой водород, и/или любой подходящий заместитель, описанный в данном документе, который соответствует валентностям гетероатомов и обеспечивает образование стабильного фрагмента. Предполагается, что настоящее изобретение не должно ограничиваться каким-либо образом иллюстративными заместителями, описанными в данном документе.

Термин «галоген» или «галогенид» относится к фтору, хлору, брому или йоду.

Термин «ацил» относится к группе, имеющей общую формулу -C(=O)R^X1, -C(=O)OR^X1, -C(=O)-O-C(=O)R^X1, -C(=O)SR^X1, -C(=O)N(R^X1)₂, -C(=S)R^X1, -C(=S)N(R^X1)₂ и -C(=S)S(R^X1), -C(=NR^X1)R^X1, -C(=NR^X1)OR^X1, -C(=NR^X1)SR^X1, и -C(=NR^X1)N(R^X1)₂, где R^X1 представляет собой водород; галоген; замещенный или незамещенный гидроксил; замещенный или незамещенный тиол; замещенный или незамещенный амино; замещенный или незамещенный ацил, циклический или ациклический, замещенный или незамещенный, разветвленный или неразветвленный C_1-10алкил; циклический или ациклический, замещенный или незамещенный, разветвленный или неразветвленный C_2-10алкенил; замещенный или незамещенный C_2-10алкинил; замещенный или незамещенный C_6-12арил, замещенный или незамещенный гетероарил, если позволяет валентность. Иллюстративные ацильные группы включают альдегиды (-CHO), карбоновые кислоты (-CO₂H), кетоны, ацилгалогениды, сложные эфиры, амиды, имины, карбонаты, карбаматы и мочевины.

В конкретных вариантах осуществления заместитель, присутствующий при атоме азота, атоме кислорода или атоме серы, представляет собой защитную группу для атома азота, защитную группу для атома кислорода или защитную группу для атома серы соответственно. Защитные группы для атома азота, кислорода и серы хорошо известны из уровня техники и включают те из них, которые подробно описаны в документе Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P.G.M. Wuts, 3^-е издание, John Wiley & Sons, 1999 г., включенном в данный документ посредством ссылки.

Например, защитные группы для атома азота включают без ограничения формамид, ацетамид, хлорацетамид, трихлорацетамид, трифторацетамид, фенилацетамид, метилкарбамат, этилкарбамат, 9-флуоренилметилкарбамат (Fmoc), трет-бутилкарбамат (BOC или Boc), 1-адамантилкарбамат (Adoc), винилкарбамат (Voc), аллилкарбамат (Alloc), 2-(триметилсилил)этокси]метил (SEM), п-толуолсульфонамид (Ts), бензолсульфонамид, 2,3,6-триметил-4-метоксибензолсульфонамид (Mtr), 2,4,6-триметоксибензолсульфонамид (Mtb), производное фенотиазинил-(10)-ацила, производное N’-п-толуолсульфониламиноацила.

Иллюстративные защитные группы для атома кислорода и серы включают без ограничения метил, метоксиметил (MOM), метилтиометил (MTM), трет-бутилтиометил, (фенилдиметилсилил)метоксиметил (SMOM), бензилоксиметил (BOM), п-метоксибензилоксиметил (PMBM), (4-метоксифенокси)метил (p-AOM), тетрагидропиранил (THP), метансульфонат (мезилат), бензилсульфонат и тозилат (Ts).

Термин «уходящая группа» приводится в его обычном значении в области синтеза органических соединений и относится к атому или группе, которые могут быть вытеснены нуклеофилом. Примеры подходящих уходящих групп включают без ограничения галоген (такой как F, Cl, Br или I (йод)), алкоксикарбонилокси, арилоксикарбонилокси, алкансульфонилокси, аренсульфонилокси, алкилкарбонилокси (например, ацетокси), сложный эфир сульфоновой кислоты, такой как толуолсульфонат (тозилат, -OTs), метансульфонат (мезилат, -OMs), п-бромбензолсульфонилокси (брозилат, -OBs), -OS(=O)₂(CF₂)₃CF₃ (нонафлат, -ONf) или трифторметансульфонат (трифлат, -OTf).

Используемый в данном документе термин «соль» относится к любой и ко всем солям и охватывает фармацевтически приемлемые соли.

Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к таким солям, которые в пределах объема медицинского мнения являются подходящими для применения в контакте с тканями людей и низших животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и т.п., а также являются сопоставимыми с разумным соотношением пользы/риска. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны из уровня техники. Например, Berge с соавт. подробно описали фармацевтически приемлемые соли в документе J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, включенном в данный документ посредством ссылки. Фармацевтически приемлемые соли соединений по настоящему изобретению включают те из них, которые получены из подходящих неорганических и органических кислот и оснований. Примерами фармацевтически приемлемых, нетоксичных солей присоединения кислоты являются соли, образованные аминогруппами и неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлорная кислота, или органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или полученные с помощью других способов, известных из уровня техники, таких как ионный обмен. Другие фармацевтически приемлемые соли включают соли, представляющие собой адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, йодгидрат, 2-гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и т. п. Соли, полученные из подходящих оснований, включают соли щелочных металлов, щелочноземельных металлов, аммония и N⁺(C_1-4алкил)₄ ⁻. Типичные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния и т.п. Дополнительные фармацевтически приемлемые соли включают, если это целесообразно, нетоксичные катионы аммония, четвертичного аммония и аминов, при этом образованы с использованием таких противоионов, как ионы галогенида, гидроксида, карбоксилата, сульфата, фосфата, нитрата, низшего алкилсульфоната и арилсульфоната.

Термины «композиция» и «состав» применяют взаимозаменяемо.

Термин «субъект», в отношении которого предусмотрено введение, относится к человеку (т.е. мужчине или женщине любой возрастной группы, например, субъекту детского возраста (например, младенцу, ребенку или подростку) или субъекту, являющемуся взрослым человеком (например, молодому человеку, человеку средних лет или пожилому человеку)) или животному, отличному от человека. В конкретных вариантах осуществления животное, отличное от человека, представляет собой млекопитающее (например, примат (например, яванский макак или макак-резус)), коммерчески значимое млекопитающее (например, крупный рогатый скот, свинья, лошадь, овца, коза, кошка или собака) или птицу (например, коммерчески значимая птица, такая как курица, утка, гусь или индюк). В конкретных вариантах осуществления животное, отличное от человека, представляет собой рыбу, рептилию или земноводное. Животное, отличное от человека, может представлять собой особь мужского пола или особь женского пола на любой стадии развития. Животное, отличное от человека, может представлять собой трансгенное животное или генетически сконструированное животное. В конкретных вариантах осуществления субъект является пациентом. Термин «пациент» относится к субъекту, являющемуся человеком, нуждающимся в лечении заболевания. В конкретных вариантах осуществления термин «пациент» относится к взрослому человеку в возрасте старше 18 лет, нуждающемуся в лечении заболевания. В конкретных вариантах осуществления термин «пациент» относится к человеку, являющемуся ребенком в возрасте не старше 18 лет, нуждающемуся в лечении заболевания. В конкретных вариантах осуществления пациент не был подвержен регулярной процедуре переливания крови (например, подвергался не более 4 процедурам переливания крови за 12-месячный период). В конкретных вариантах осуществления пациент подвергался регулярной процедуре переливания крови (например, подвергался не менее 4 процедурам переливания крови за 12-месячный период).

Термин «вводить», «осуществлять введение» или «введение» относится к имплантации, обеспечению всасывания, проглатыванию, впрыскиванию, вдыханию или внедрению иным образом соединения, описанного в данном документе, или композиции на его основе в организм субъекта или на его тело.

Термины «лечение», «лечить» и «осуществлять лечение» относятся к реверсии, облегчению, задержке возникновения или подавлению прогрессирования заболевания, описанного в данном документе. В некоторых вариантах осуществления лечение может совершаться после развития или наблюдения одного или более признаков или симптомов заболевания (т.е. терапевтическое лечение). В других вариантах осуществления лечение может совершаться при отсутствии признаков или симптомов заболевания. Например, лечение может совершаться в отношении предрасположенного к заболеванию субъекта до проявления симптомов (т. е. профилактическое лечение) (например, с учетом анамнеза симптомов и/или с учетом воздействия патогена). Лечение можно также продолжать после устранения симптомов, например, для задержки или предотвращения повторного проявления симптомов. В некоторых вариантах осуществления лечение включает задержку возникновения по меньшей мере одного симптома нарушения в течение некоторого периода времени.

Термины «состояние», «заболевание» и «нарушение» применяют взаимозаменяемо.

«Эффективное количество» соединения, описанного в данном документе, относится к количеству, достаточному для обеспечения необходимого биологического ответа. Эффективное количество соединения, описанного в данном документе, может варьировать в зависимости от таких факторов, как необходимая биологическая конечная точка, фармакокинетика соединения, состояние, подлежащее лечению, способ введения, а также возраст и общее состояние здоровья субъекта. В некоторых вариантах осуществления эффективное количество представляет собой терапевтически эффективное количество. В конкретных вариантах осуществления эффективное количество должно обеспечивать ответ, определяемый уровнем гемоглобина у субъекта, в виде повышения концентрации Hb на ≥1,5 г/дл относительно исходного уровня. Исходная концентрация Hb у субъекта представляет собой среднее значение всех доступных значений концентрации Hb перед лечением с помощью соединения. В конкретных вариантах осуществления эффективное количество должно обеспечивать ответ, определяемый уровнем гемоглобина у субъекта, в виде повышения концентрации Hb на ≥1,0 г/дл относительно исходного уровня. В конкретных вариантах осуществления эффективное количество должно обеспечивать ответ, определяемый уровнем гемоглобина у субъекта, в виде повышения концентрации Hb на ≥2,0 г/дл относительно исходного уровня. В конкретных вариантах осуществления эффективное количество представляет собой количество соединения, описанного в данном документе, в однократной дозе. В конкретных вариантах осуществления эффективное количество представляет собой объединенные количества соединения, описанного в данном документе, в нескольких дозах.

«Терапевтически эффективное количество» соединения, описанного в данном документе, представляет собой количество, достаточное для обеспечения терапевтического преимущества в лечении состояния или для задержки или сведения к минимуму одного или более симптомов, ассоциированных с состоянием. Терапевтически эффективное количество соединения означает количество терапевтического средства, отдельно или в комбинации с другими видами терапии, которое обеспечивает терапевтическое преимущество в лечении состояния. Термин «терапевтически эффективное количество» может охватывать количество, которое улучшает в целом терапию, уменьшает или устраняет симптомы, признаки или причины состояния и/или повышает терапевтическую эффективность другого терапевтического средства. В конкретных вариантах осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для обеспечения измеряемой активации PKM2 дикого типа или ее мутантной формы. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для регулирования (например, снижения) уровня глюкозы в плазме крови у субъекта, нуждающегося в этом. В конкретных вариантах осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для обеспечения измеряемой эффективности для лечения пролиферативного заболевания (например, рака, аутоиммунного заболевания). В конкретных вариантах осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для обеспечения измеряемой эффективности для лечения и/или предупреждения заболевания, связанного с диабетом (например, DN). В конкретных вариантах осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для обеспечения измеряемой эффективности для лечения и предупреждения CAD.

Используемый в данном документе термин «активатор» означает средство, которое (в известной мере) повышает активность пируваткиназы (например, PKM2) или обуславливает повышение активности пируваткиназы (например, PKM2) до уровня, который превышает исходные уровни активности PKM2. Например, активатор может имитировать эффект, обусловленный природным лигандом (например, FBP). Эффект активатора, обусловленный соединением, предусмотренным в данном документе, может быть таким же, как эффект активации, обусловленный природным лигандом, или же большим, или меньшим по величине, но при этом обуславливается эффект такого же типа. Соединение, предусмотренное в данном документе, можно оценить для определения того, является ли оно активатором, путем измерения либо непосредственно, либо опосредованно, активности пируваткиназы при воздействии указанного соединения. Активность соединения, предусмотренного в данном документе, может быть измерена, например, по отношению к контрольному веществу. В некоторых случаях измеренная активность тестируемого соединения направлена на активацию PKM2. Активность PKM2 может быть измерена, например, путем контроля концентрации продукта, такого как ATP, или уровней кофактора, такого как NADH, что применяется в системе сопряженного ферментного анализа (см. PCT/US2010/040486).

Используемый в данном документе термин «ингибитор» означает средство, которое (в известной мере) замедляет, прекращает, понижает или инактивирует ферментативную активность пируваткиназы (например, PKM2) для понижения до уровня, который меньше исходных уровней активности пируваткиназы (например, PKM2).

Термин «ex vivo» в отношении способа, применяемого в данном документе, означает, что способ осуществляют вне организма. Например, клетка или ткань могут быть получены из организма, подлежащего приведению в контакт с одним или более соединениями, предусмотренными в данном документе, или их фармацевтически приемлемыми солями, или фармацевтическими композициями на их основе, необязательно при искусственно контролируемых условиях (например, температуре).

Термин « in vitro » в отношении способа, применяемого в данном документе, означает, что способ проводят вне организма и осуществляют в пределах искусственной среды. Например, клетка или ткань могут быть выделены из организма, подлежащего приведению в контакт с одним или более соединениями, предусмотренными в данном документе, или их фармацевтически приемлемыми солями, или фармацевтическими композициями на их основе, в содержимом искусственной среды (например, культуральной системе), а именно, в пробирке, в культуре, в колбе, в титрационном микропланшете, на чашке Петри и т.п.

Соединения

В данном документе описаны способы, относящиеся к соединениям и фармацевтическим композициям, которые модулируют PKM2, а также к применению таких соединений и фармацевтических композиций в данных способах. В частности, такие способы включают способ модуляции активности M2-пируваткиназы (PKM2) у субъекта, способ модуляции (например, повышения или снижения) уровня активности PKM2 у субъекта, нуждающегося в этом, способ модуляции (например, повышения или снижения) уровня глюкозы в плазме крови у субъекта, нуждающегося в этом, способ ингибирования пролиферации клеток (трансформированной клетки, например раковой клетки, или в целом ингибирование роста PKM2-зависимой клетки, которая подвергается аэробному гликолизу) у субъекта, нуждающегося в этом, способ лечения субъекта, страдающего от заболевания или нарушения, ассоциированного с функционированием PKM2, или предрасположенного к ним. В одном варианте осуществления соединения и композиции, описанные в данном документе, модулируют PKM2 посредством связывания в аллостерическом связывающем «кармане». В одном варианте осуществления соединения и композиции, описанные в данном документе, ингибируют PKM2. В одном варианте осуществления соединения и композиции, описанные в данном документе, активируют PKM2. В одном варианте осуществления соединение, описанное в данном документе, представляет собой соединение формул (I)-(IX), или соединение формул (I’)-(V’), или его фармацевтически приемлемую соль, или фармацевтическую композицию, содержащую соединение формул (I)-(IX), или соединение формул (I’)-(V’), или его фармацевтически приемлемую соль. В одном варианте осуществления соединение, применяемое в способах по настоящему изобретению, представляет собой соединение, описанное в международной заявке на патент № PCT/CN2017/09496 и предварительных заявках на патент США №№ 62/673533 и 62/673526, раскрытие каждой из которых включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В первом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ модуляции активности M2-пируваткиназы (PKM2) у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли,

где Q представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил;

R¹ представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный галогеналкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил, -OR^o1, -C(=O)R^c1 или защитную группу для атома азота;

L¹ представляет собой связь, необязательно замещенный алкилен, -O-, -S-, -S-CH₂-, -S(=O)CH₂-, -S(=O)₂CH₂-, -NR³-, -NR³C(=O)-, -C(=O)NR³-, --C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -NR³C(=O)O-, -OC(=O)NR³-, -NR³C(=O)NR³-, -OC(R⁴)₂-, -C(R⁴)₂O-, -NR³C(R⁴)₂-, -C(R⁴)₂NR³-, -S(=O)₂-, -S(=O)-, -S(=O)₂O-, -OS(=O)₂-, -S(=O)O-, -OS(=O)-, -S(=O)₂NR³-, -NR³S(=O)₂-, -S(=O)NR³-, -NR³S(=O)-, -NR³S(=O)₂O-, -OS(=O)₂NR³-, -NR³S(=O)O-, -OS(=O)NR³- или -S(=O)(=NR³)-, где точка присоединения к R² находится с левой стороны;

L² представляет собой связь, необязательно замещенный алкилен, -C(=O)-, -S(=O)₂- или -S(=O)-, где точка присоединения к Q находится с правой стороны;

R² представляет собой водород, галоген, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкокси, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил, или необязательно замещенный гетероарил, или защитную группу для атома азота, если L¹ представляет собой -NR³-, -NR³C(=O)-, -NR³C(=O)O-, -NR³C(R⁴)₂-, -NR³S(=O)₂-, -NR³S(=O)-, -NR³C(=O)NR³-, -NR³S(=O)₂O- или -NR³S(=O)O-, защитную группу для атома кислорода, если L¹ представляет собой -O-, -OC(=O)-, -OC(=O)NR³-, -OC(R⁴)₂-, -OS(=O)₂-, -OS(=O)₂NR³-, -OS(=O)NR³- или -OS(=O)-, или защитную группу для атома серы, если L¹ представляет собой -S-;

каждый вариант R³ независимо представляет собой водород, -OR^o2, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил или защитную группу для атома азота;

каждый вариант R^o1 и R^o2 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный алкил или защитную группу для атома кислорода;

каждый вариант R^c1 независимо представляет собой необязательно замещенный алкил или -N(R^cn)₂, где в каждом случае R^cn независимо представляет собой водород, -C_1-6алкил или защитную группу для атома азота; и

каждый вариант R⁴ независимо представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

Во втором варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ модуляции уровня глюкозы в плазме крови у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где формула (I) определена в первом варианте осуществления.

В третьем варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ ингибирования пролиферации клеток у субъекта, страдающего от заболевания или нарушения, ассоциированного с функционированием PKM2, или предрасположенного к ним, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где формула (I) определена в первом варианте осуществления.

В четвертом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ лечения заболевания, ассоциированного с отклоняющейся от нормы активностью PKM2, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где формула (I) определена в первом варианте осуществления.

В пятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с четвертым вариантом осуществления, описанным выше, где заболевание представляет собой пролиферативное заболевание.

В шестом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с четвертым вариантом осуществления, описанным выше, где заболевание представляет собой рак, ожирение, заболевание, связанное с диабетом (например, диабетическая нефропатия (DN)), атеросклероз, рестеноз, заболевание коронарной артерии (CAD), синдром Блума (BS), доброкачественную гиперплазию предстательной железы (BPH) или аутоиммунное заболевание.

В седьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ лечения гипергликемии у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где формула (I) определена в первом варианте осуществления.

В восьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ лечения заболевания, связанного с диабетом, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где формула (I) определена в первом варианте осуществления.

В девятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с восьмым вариантом осуществления, описанным выше, где заболевание, связанное с диабетом, представляет собой диабетическую нефропатию.

В десятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по девятый, описанных выше, где способ дополнительно включает идентификацию субъекта, который будет получать пользу от модуляции PKM2.

В одиннадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с первым вариантом осуществления, описанным выше, где модуляция представляет собой активацию.

В двенадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по одиннадцатый, описанных выше, где:

Q представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил, необязательно замещенный C₃-C₁₂циклоалкил, необязательно замещенный 3-14-членный гетероциклил, необязательно замещенный 6-14-членный арил или необязательно замещенный 5-14-членный гетероарил;

R¹ представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил, необязательно замещенный -C₁-C₆галогеналкил, необязательно замещенный -C₂-C₆алкенил, необязательно замещенный -C₂-C₆алкинил, необязательно замещенный C₃-C₁₂циклоалкил, необязательно замещенный 3-14-членный гетероциклил, необязательно замещенный 6-12-членный арил, -OR^o1, -C(=O)R^c1 или защитную группу для атома азота;

L¹ представляет собой связь, необязательно замещенный C_1-6алкилен, -O-, -S-, -S-CH₂-, -S(=O)CH₂-, -S(=O)₂CH₂-, -NR³-, -NR³C(=O)-, -C(=O)NR³-, --C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -NR³C(=O)O-, -OC(=O)NR³-, -NR³C(=O)NR³-, -OC(R⁴)₂-, -C(R⁴)₂O-, -NR³C(R⁴)₂-, -C(R⁴)₂NR³-, -S(=O)₂-, -S(=O)-, -S(=O)₂O-, -OS(=O)₂-, -S(=O)O-, -OS(=O)-, -S(=O)₂NR³-, -NR³S(=O)₂-, -S(=O)NR³-, -NR³S(=O)-, -NR³S(=O)₂O-, -OS(=O)₂NR³-, -NR³S(=O)O-, -OS(=O)NR³- или -S(=O)(=NR³)-, где точка присоединения к R² находится с левой стороны;

L² представляет собой связь, необязательно замещенный C₁-C₆алкилен, -C(=O)-, -S(=O)₂- или -S(=O)-, где точка присоединения к Q находится с правой стороны;

R² представляет собой водород, галоген, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил, необязательно замещенный -C₁-C₆алкокси, необязательно замещенный -C₃-C₁₂циклоалкил, необязательно замещенный 3-14-членный гетероциклил, необязательно замещенный -C₆-C₁₂арил, или необязательно замещенный 3-14-членный гетероарил, или защитную группу для атома азота, если L¹ представляет собой -NR³-, -NR³C(=O)-, -NR³C(=O)O-, -NR³C(R⁴)₂-, -NR³S(=O)₂-, -NR³S(=O)-, -NR³C(=O)NR³-, -NR³S(=O)₂O- или -NR³S(=O)O-, защитную группу для атома кислорода, если L¹ представляет собой -O-, -OC(=O)-, -OC(=O)NR³-, -OC(R⁴)₂-, -OS(=O)-, -OS(=O)₂-, -OS(=O)₂NR³-, -OS(=O)NR³- или -OS(=O)-, или защитную группу для атома серы, если L¹ представляет собой -S-;

каждый вариант R³ независимо представляет собой водород, -OR^o2, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил, необязательно замещенный -C₂-C₆алкенил, необязательно замещенный -C₂-C₆алкинил, необязательно замещенный C₃-C₁₂циклоалкил, необязательно замещенный C₃-C₁₂гетероциклил, необязательно замещенный C₆-C₁₂арил, необязательно замещенный C₅-C₁₂гетероарил или защитную группу для атома азота;

каждый вариант R^o1 и R^o2 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода;

каждый вариант R^c1 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или -N(R^cn)₂, где в каждом случае R^cn независимо представляет собой водород, -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота;

каждый вариант R⁴ независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил, необязательно замещенный -C₂-C₆алкенил, необязательно замещенный -C₂-C₆алкинил, необязательно замещенный C₃-C₁₂циклоалкил, необязательно замещенный 3-14-членный гетероциклил, необязательно замещенный C₆-C₁₂арил или необязательно замещенный 5-14-членный гетероарил.

В тринадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по двенадцатый, описанных выше, где:

Q представляет собой C₆-C₁₂арил, 5-6-членный моноциклический гетероарил или 8-12-членный бициклический гетероарил, каждый из которых замещен 0-3 вариантами R^c;

R¹ выбран из водорода, -C₁-C₆алкила, -C₁-C₆галогеналкила, моноциклического C₃-C₇циклоалкила и 3-14-членного гетероциклила, -OR^o1, -C(=O)R^c1 или защитной группы для атома азота; где каждый алкил, циклоалкил или гетероциклил замещен 0-3 вариантами R^d;

R² выбран из водорода, галогена, -C₁-C₆алкила, -C₁-C₆алкокси, моноциклического C₃-C₇циклоалкила, бициклического C₆-C₁₂циклоалкила, 3-14-членного гетероциклила, C₆-C₁₂арила, 5-6-членного моноциклического гетероарила, 8-12-членного бициклического гетероарила, где каждый алкил, циклоалкил, гетероциклил, арил и гетероарил замещен 0-3 вариантами R^e, или защитной группы для атома азота, если L¹ представляет собой -NR³-, -NR³C(=O)-, -NR³C(=O)O-, -NR³C(R⁴)₂-, -NR³S(=O)₂-, -NR³S(=O)-, -NR³C(=O)NR³-, -NR³S(=O)₂O- или -NR³S(=O)O-, защитной группы для атома кислорода, если L¹ представляет собой -O-, -OC(=O)-, -OC(=O)NR³-, -OC(R⁴)₂-, -OS(=O)-, -OS(=O)₂-, -OS(=O)₂NR³-, -OS(=O)NR³- или -OS(=O)-, или защитной группы для атома серы, если L¹ представляет собой -S-;

R³ выбран из водорода, -OR^o2, -C₁-C₆алкила, моноциклического C₃-C₇циклоалкила, бициклического C₆-C₁₂циклоалкила, 3-14-членного гетероциклила, C₆-C₁₂арила, 5-6-членного моноциклического гетероарила и 8-12-членного бициклического гетероарила, где каждый алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил замещен 0-3 вариантами R^f;

R⁴ выбран из водорода, -C₁-C₆алкила, моноциклического C₃-C₇циклоалкила и 3-14-членного гетероциклила, где каждый алкил, циклоалкил или гетероциклил замещен 0-1 вариантами R^g;

L¹ представляет собой связь, алкилен, замещенный 0-3 вариантами R^h, -O-, -S-, -S-CH₂-, -S(=O)CH₂-, -S(=O)₂CH₂-, -NR³-, -NR³C(=O)-, -C(=O)NR³-, --C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -NR³C(=O)O-, -OC(=O)NR³-, -NR³C(=O)NR³-, -OC(R⁴)₂-, -C(R⁴)₂O-, -NR³C(R⁴)₂-, -C(R⁴)₂NR³-, -S(=O)₂-, -S(=O)-, -S(=O)₂O-, -OS(=O)₂-, -S(=O)O-, -OS(=O)-, -S(=O)₂NR³-, -NR³S(=O)₂-, -S(=O)NR³-, -NR³S(=O)-, -NR³S(=O)₂O-, -OS(=O)₂NR³-, -NR³S(=O)O-, -OS(=O)NR³- или -S(=O)(=NR³)-, где точка присоединения к R² находится с левой стороны;

L² представляет собой связь, алкилен, замещенный 0-3 вариантами R^h, -C(=O)-, -S(=O)₂- или -S(=O)-, где точка присоединения к Q находится с правой стороны;

каждый R^c независимо выбран из галогена, -C₁-C₆алкила, -C₁-C₆галогеналкила, -C₁-C₆гидроксиалкила, -OH, -OC₁-C₆алкила, -C₁-C₆аминоалкила, -NH(C₁-C₆алкил), -N(C₁-C₆алкил)₂, -C(=O)OC₁-C₆алкила, -C(=O)OH, -C(=O)C₁-C₆алкила, -C(=O)NH₂, -C(=O)NH(C₁-C₆алкил), -C(=O)N(C₁-C₆алкил)₂, -NHC(=O)NH₂, -NHC(=O)NH(C₁-C₆алкил), -NH(C=O)N(C₁-C₆алкил)₂, -NHC(=O)(C₁-C₆алкил), -N(C₁-C₆алкил)C(=O)(C₁-C₆алкил), -S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NH(C₁-C₆алкил), -S(=O)₂N(C₁-C₆алкил)₂, -NHS(=O)₂(C₁-C₆алкил), -NH₂, -CN и -NO₂; или два варианта R^c, присоединенные к одному и тому же или смежному атомам углерода, взятые вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют циклоалкил или гетероциклилC(=O)OH;

каждый R^d независимо выбран из галогена, -C₁-C₆алкила, -OH, -OC₁-C₆алкила, -NH₂ и -CN;

каждый R^e независимо выбран из галогена, -C₁-C₆алкила, -C₁-C₆галогеналкила, -C₁-C₆гидроксиалкила, -OH, -OC₁-C₆алкила, -C₁-C₆аминоалкила, -NH(C₁-C₆алкил), -N(C₁-C₆алкил)₂, -C(=O)OC₁-C₆алкила, -C(=O)OH, -C(=O)C₁-C₆алкила, -C(=O)NH₂, -C(=O)NH(C₁-C₆алкил), -C(=O)N(C₁-C₆алкил)₂, -NHC(=O)NH₂, -NHC(=O)NH(C₁-C₆алкил), -NH(C=O)N(C₁-C₆алкил)₂, -NHC(=O)(C₁-C₆алкил), -N(C₁-C₆алкил)C(=O)(C₁-C₆алкил), -S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NH(C₁-C₆алкил), -S(=O)₂N(C₁-C₆алкил)₂, -NHS(=O)₂(C₁-C₆алкил), -NH₂, -CN и -NO₂; или два варианта R^e, присоединенные к одному и тому же или смежному атомам углерода, взятые вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют циклоалкил или гетероциклил;

каждый R^f независимо выбран из галогена, -C₁-C₆алкила, -C₁-C₆галогеналкила, -C₁-C₆алкокси, -OH, -NH₂, -CN и -NO₂;

каждый R^g независимо выбран из галогена, -C₁-C₆алкила, -C₁-C₆галогеналкила, -C₁-C₆алкокси, -OH, NH₂, -CN и NO₂, и

каждый R^h независимо выбран из галогена, -C₁-C₆алкила, -C₁-C₆галогеналкила, -C₁-C₆гидроксиалкила, -OH, -OC₁-C₆алкила, -C₁-C₆аминоалкила, -NH(C₁-C₆алкил), -N(C₁-C₆алкил)₂, -C(=O)OC₁-C₆алкила, -C(=O)OH, -C(=O)C₁-C₆алкила, -C(=O)NH₂, -C(=O)NH(C₁-C₆алкил), -C(=O)N(C₁-C₆алкил)₂, -NHC(=O)NH₂, -NHC(=O)NH(C₁-C₆алкил), -NH(C=O)N(C₁-C₆алкил)₂, -NHC(=O)(C₁-C₆алкил), -N(C₁-C₆алкил)C(=O)(C₁-C₆алкил), -S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NH(C₁-C₆алкил), -S(=O)₂N(C₁-C₆алкил)₂, -NHS(=O)₂(C₁-C₆алкил), -NH₂, -CN, и -NO₂, S(=O)₂арила, S(=O)₂гетероарила и =NOH, или два варианта R^h, присоединенные к одному и тому же или смежному атомам углерода, взятые вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют циклоалкил или гетероциклил.

В четырнадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по тринадцатый, описанных выше, где соединение представляет собой соединение, представленное формулой (II),

или его фармацевтически приемлемую соль; где:

каждый из R^a и R^b независимо представляет собой водород, галоген, -CN,-NO₂,-N₃, необязательно замещенный алкил, -OR^o3, -N(Rⁿ¹)₂, -C(=O)N(Rⁿ¹)₂ или -C(=O)R^c2, или R^a и R^b, взятые вместе с атомом углерода, могут образовывать необязательно замещенный циклоалкил или необязательно замещенный гетероциклил;

каждый вариант Rⁿ¹ независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота;

каждый вариант R^o3 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода; и

каждый вариант R^c2 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил;

при этом остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из первого по двенадцатый.

В пятнадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по тринадцатый, описанных выше, где L¹ представляет собой связь, необязательно замещенный -C_1-6алкилен, -C(=O)-, -S(=O)-, -S(=O)₂-, -NR³C(=O)- или -C(=O)NR³-; и где остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из первого по четырнадцатый.

В шестнадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по четырнадцатый, описанных выше, где L¹ представляет собой C_1-6алкилен, замещенный R^j и R^k;

при этом каждый вариант R^j и R^k независимо выбран из H, галогена, -CN, -OR^o7, -N(Rⁿ⁵)₂, -N(Rⁿ⁵)C(=O)R^c5, -C(=O)N(Rⁿ⁵)₂, -C(=O)R^c5, -C(=O)OR^o7, -SR^js, -S(=O)₂R^js или -S(=O)R^js, необязательно замещенного -C₁-C₆алкила; или R^j и R^k, взятые вместе с атомом углерода, могут образовывать C=O, C=NR^jn, необязательно замещенное моноциклическое C₃-C₆циклоалкильное кольцо или необязательно замещенное моноциклическое C₃-C₆гетероциклильное кольцо;

каждый из Rⁿ⁵ и R^jn независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил, -OR^o8 или защитную группу для атома азота;

каждый вариант R^o7 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода;

каждый вариант R^c5 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил; и

каждый вариант R^js независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил, необязательно замещенный C_6-12арил, необязательно замещенный гетероарил или защитную группу для атома серы; и

при этом остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из первого по пятнадцатый.

В семнадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по шестнадцатый, описанных выше, где соединение представлено формулой (I’),

или соответствующей ей фармацевтически приемлемой солью, где:

R¹ представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный галогеналкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил, -OR^o1, -C(=O)R^c1 или защитную группу для атома азота; где:

R^o1 представляет собой водород, необязательно замещенный алкил или защитную группу для атома кислорода;

R^c1 представляет собой необязательно замещенный алкил или -N(R^cn)₂, где каждый вариант R^cn независимо представляет собой водород, -C_1-6алкил или защитную группу для атома азота;

каждый из R² и Q независимо представляет собой необязательно замещенный 5- или 6-членный моноциклический гетероарил;

каждый из R^a и R^b независимо представляет собой водород, галоген, -CN, -NO₂, -N₃, необязательно замещенный алкил, -OR^o3, -N(Rⁿ¹)₂, -C(=O)N(Rⁿ¹)₂ или -C(=O)R^c2; или в качестве альтернативы R^a и R^b, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут образовывать необязательно замещенный циклоалкил или необязательно замещенный гетероциклил; где:

каждый вариант Rⁿ¹ независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота;

R^o3 представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода; и

R^c2 представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил; и

каждый из R^j и R^k независимо представляет собой водород, галоген, -CN, -OR^o7, -N(Rⁿ⁵)₂, -N(Rⁿ⁵)C(=O)R^c5, -C(=O)N(Rⁿ⁵)₂, -C(=O)R^c5, -C(=O)OR^o7, -SR^js, -S(=O)₂R^js, -S(=O)R^js или необязательно замещенный -C₁-C₆алкил; или в качестве альтернативы R^j и R^k, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут образовывать C=O, необязательно замещенное моноциклическое C₁-C₆циклоалкильное кольцо или необязательно замещенное моноциклическое C₃-C₆гетероциклильное кольцо; где:

каждый вариант Rⁿ⁵ независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил, -OR^o8 или защитную группу для атома азота, где R^o8 представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода;

каждый вариант R^o7 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода;

каждый вариант R^c5 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил; и

каждый вариант R^js независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил, необязательно замещенный C_6-12арил, необязательно замещенный гетероарил или защитную группу для атома серы.

В восемнадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с семнадцатым вариантом осуществления, как описано выше, где соединение представляет собой соединение, представленное формулой (I’), или его фармацевтически приемлемую соль, где 5- или 6-членный моноциклический гетероарил, представленный как R², является необязательно замещенным при каждом замещаемом атоме углерода в кольце с помощью R^p и необязательно замещенным при каждом замещаемом атоме азота в кольце с помощью Rⁿ⁶; где:

каждый вариант R^p независимо представляет собой водород, галоген, -CN, -NO₂, -N₃, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероарил, -OR^o6, -SR^s2, -N(Rⁿ³)₂, -C(=O)N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)C(=O)R^c4, -C(=O)R^c4, -C(=O)OR^o6, -OC(=O)R^c4, -S(=O)R^s2, -S(=O)₂R^s2, -S(=O)OR^o6, -OS(=O)R^c4, -S(=O)₂OR^o6, -OS(=O)₂R^c4, -S(=O)N(Rⁿ³)₂, -S(=O)₂N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)S(=O)R^s2, -N(Rⁿ³)S(=O)₂R^s2, -N(Rⁿ³)C(=O)OR^o6, -OC(=O)N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)C(=O)N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)S(=O)N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)S(=O)₂N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)S(=O)OR^o6, -N(Rⁿ³)S(=O)₂OR^o6, -OS(=O)N(Rⁿ³)₂ или -OS(=O)₂N(Rⁿ³)_2; или в качестве альтернативы два варианта R^p, присоединенные к одному и тому же или смежному атомам углерода, взятые вместе с атом(-ами) углерода, к которому(которым) они присоединены, могут образовывать необязательно замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил; где:

каждый вариант Rⁿ³ независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота;

каждый вариант R^o6 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода; и

каждый вариант R^c4 представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил;

каждый вариант R^s2 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома серы; и

Rⁿ⁶ представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота; и

при этом остальные переменные определены в семнадцатом варианте осуществления.

В девятнадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по восемнадцатый, описанных выше, где Q представляет собой необязательно замещенный 5-6-членный моноциклический гетероарил; и при этом остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из первого по восемнадцатый.

В двадцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по девятнадцатый варианты осуществления, описанные выше, где Q соответствует одной из следующих формул:

где:

каждый вариант Rⁿ независимо представляет собой водород, галоген, -CN, -NO₂, -N₃, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероарил, -OR^o4, -SR^s1, -N(Rⁿ²)₂, -C(=O)N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)C(=O)R^c3, -C(=O)R^c3, -C(=O)OR^o4, -OC(=O)R^c3, -S(=O)R^s1, -S(=O)₂R^s1, -S(=O)OR^o4, -OS(=O)R^c3, -S(=O)₂OR^o4, -OS(=O)₂R^c3, -S(=O)N(Rⁿ²)₂, -S(=O)₂N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)S(=O)R^s1, -N(Rⁿ²)S(=O)₂R^s1, -N(Rⁿ²)C(=O)OR^o4, -OC(=O)N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)C(=O)N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)S(=O)N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)S(=O)₂N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)S(=O)OR^o4, -N(Rⁿ²)S(=O)₂OR^o4, -OS(=O)N(Rⁿ²)₂ или -OS(=O)₂N(Rⁿ²)₂; или два варианта Rⁿ, присоединенные к одному и тому же или смежному атомам углерода, взятые вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют необязательно замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил; где:

каждый вариант Rⁿ² независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота;

каждый вариант R^o4 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода;

каждый вариант R^c3 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил;

каждый вариант R^s1 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома серы;

n равняется 0, 1, 2 или 3, как позволяет валентность; и

каждый из R^na, R^nb и R^nd независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота; и

при этом остальные переменные определены в любом из первого по девятнадцатый варианты осуществления.

В двадцать первом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцатый варианты осуществления, описанные выше, где 5- или 6-членный моноциклический гетероарил, представленный как Q, выбран из следующего:

; и

при этом остальные переменные определены в любом из первого по двадцатый варианты осуществления.

В двадцать втором варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать первый варианты осуществления, описанные выше, где 5- или 6-членный моноциклический гетероарил, представленный как Q, выбран из следующего:

; и

при этом остальные переменные определены в любом из первого по двадцать первый варианты осуществления.

В двадцать третьем варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать второй варианты осуществления, описанные выше, где 5- или 6-членный моноциклический гетероарил, представленный как Q, выбран из следующего:

и

и

при этом остальные переменные определены в любом из первого по двадцать второй варианты осуществления.

В двадцать четвертом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать третий варианты осуществления, описанные выше, где 5- или 6-членный моноциклический гетероарил, представленный как Q, представляет собой

и где остальные переменные определены в любом из первого по двадцать третий варианты осуществления.

В двадцать пятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по шестнадцатый варианты осуществления, описанные выше, где Q представляет собой необязательно замещенный 8-12-членный бициклический гетероарил или необязательно замещенный 8-12-членный бициклический гетероциклил; и где остальные переменные определены в любом из первого по шестнадцатый варианты осуществления.

В двадцать шестом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по шестнадцатый и двадцать пятого вариантов осуществления, описанных выше, где Q соответствует одной из следующих формул:

где

каждый вариант Rⁿ независимо выбран из водорода, галогена, -CN, -NO₂, -N₃, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероарила, -OR^o4, -SR^s1, -N(Rⁿ²)₂, -C(=O)N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)C(=O)R^c3, -C(=O)R^c3, -C(=O)OR^o4, -OC(=O)R^c3, -S(=O)R^s1, -S(=O)₂R^s1, -S(=O)OR^o4, -OS(=O)R^c3, -S(=O)₂OR^o4, -OS(=O)₂R^c3, -S(=O)N(Rⁿ²)₂, -S(=O)₂N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)S(=O)R^s1, -N(Rⁿ²)S(=O)₂R^s1, -N(Rⁿ²)C(=O)OR^o4, -OC(=O)N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)C(=O)N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)S(=O)N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)S(=O)₂N(Rⁿ²)₂, -N(Rⁿ²)S(=O)OR^o4, -N(Rⁿ²)S(=O)₂OR^o4, -OS(=O)N(Rⁿ²)₂, -OS(=O)₂N(Rⁿ²)₂, или два варианта Rⁿ, присоединенные к одному и тому же или смежному атомам углерода, взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют необязательно замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил;

каждый вариант R^na и R^nb независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота;

каждый вариант Rⁿ² независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота;

каждый вариант R^o4 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода;

каждый вариант R^c3 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил;

каждый вариант R^s1 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома серы;

n равняется 0, 1, 2 или 3, как позволяет валентность; и

где остальные переменные определены в любом из первого по шестнадцатый и двадцать пятого вариантов осуществления.

В двадцать седьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать шестой варианты осуществления, описанные выше, где R² выбран из водорода, гидроксила, галогена, -C₁-C₆алкила, -C₂-C₆алкенила, -C₂-C₆алкоксила, фенила, нафталинила, C_3-6циклоалкила, 5-членного гетероарила, 6-членного гетероарила, 8-членного бициклического гетероарила, 9-членного бициклического гетероарила, при этом каждый алкил, алкенил, фенил и гетероарил замещен 0-3 вариантами R^e; и где остальные переменные определены в любом из первого по двадцать шестой варианты осуществления.

В двадцать восьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать седьмой варианты осуществления, описанные выше, где R² соответствует одной из следующих формул:

где

каждый вариант R^p независимо выбран из водорода, галогена, -CN, -NO₂, -N₃, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероарила, -OR^o6, -SR^s2, -N(Rⁿ³)₂, -C(=O)N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)C(=O)R^c4, -C(=O)R^c4, -C(=O)OR^o6, -OC(=O)R^c4, -S(=O)R^s2, -S(=O)₂R^s2, -S(=O)OR^o6, -OS(=O)R^c4, -S(=O)₂OR^o6, -OS(=O)₂R^c4, -S(=O)N(Rⁿ³)₂, -S(=O)₂N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)S(=O)R^s2, -N(Rⁿ³)S(=O)₂R^s2, -N(Rⁿ³)C(=O)OR^o6, -OC(=O)N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)C(=O)N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)S(=O)N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)S(=O)₂N(Rⁿ³)₂, -N(Rⁿ³)S(=O)OR^o6, -N(Rⁿ³)S(=O)₂OR^o6, -OS(=O)N(Rⁿ³)₂, -OS(=O)₂N(Rⁿ³)₂, или два варианта R^p, присоединенные к одному и тому же или смежному атомам углерода, взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют необязательно замещенный циклоалкил или гетероциклоалкил;

каждый вариант Rⁿ³, R^nc и R^nd независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота;

каждый вариант R^o6 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома кислорода;

каждый вариант R^c4 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил;

каждый вариант R^s2 независимо представляет собой необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома серы;

p равняется 0, 1, 2 или 3, как позволяет валентность; и

где остальные переменные определены в любом из первого по двадцать седьмой варианты осуществления.

В двадцать девятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать восьмой варианты осуществления, описанные выше, где 5- или 6-членный моноциклический гетероарил, представленный как R², выбран из одного из следующего:

,

где:

каждый вариант R^nc и R^nd независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота;

p равняется 0, 1, 2, 3 или 4, как позволяет валентность;

где остальные переменные определены в любом из первого по двадцать восьмой варианты осуществления.

В тридцатом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать девятый варианты осуществления, описанные выше, где 5- или 6-членный моноциклический гетероарил, представленный как R², выбран из одного из следующего:

при этом остальные переменные определены в любом из первого по двадцать девятый варианты осуществления.

В тридцать первом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по тридцатый варианты осуществления, описанные выше, где R² выбран из одного из следующего:

и где остальные переменные определены в любом из первого по тридцатый варианты осуществления.

В тридцать втором варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из двадцать седьмого по тридцать первый вариант осуществления, описанные выше, где в каждом случае R^p независимо представляет собой водород, галоген, необязательно замещенный C_1-4алкил, -CN, -NO₂, -N₃, -OR^o4, -N(Rⁿ²)₂, -C(=O)N(Rⁿ²)₂, -C(=O)R^c3 или -C(=O)OR^o4; и где остальные переменные определены в любом из двадцать восьмого по тридцать первый варианты осуществления.

В тридцать третьем варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по шестнадцатый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (III),

или его фармацевтически приемлемую соль, где переменные определены в любом из первого по шестнадцатый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления.

В тридцать четвертом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать четвертый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (IV),

или его фармацевтически приемлемую соль, где переменные определены в любом из первого по двадцать четвертый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления.

В тридцать пятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать четвертый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (V-a),

или его фармацевтически приемлемую соль, где m равняется 0, 1 или 2; и остальные переменные определены в любом из первого по двадцать четвертый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления.

В тридцать шестом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать четвертый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (V-b),

или его фармацевтически приемлемую соль, где m равняется 0, 1 или 2; R^nc независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота; и где остальные переменные определены в любом из первого по двадцать четвертый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления.

В тридцать седьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по шестнадцатый и двадцать пятого по тридцать второй варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (VI),

или его фармацевтически приемлемую соль, где Rⁿ⁷ представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота; и где остальные переменные определены в любом из первого по шестнадцатый и двадцать пятого по тридцать второй варианты осуществления.

В тридцать восьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по двадцать четвертый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (IX),

или его фармацевтически приемлемую соль, где R^nc независимо представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота; и где остальные переменные определены в любом из первого по двадцать четвертый и двадцать седьмого по тридцать второй варианты осуществления.

В тридцать девятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по тридцать восьмой варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (II’),

или его фармацевтически приемлемую соль, где Rⁿ⁶ представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота; q равняется 0, 1, 2 или 3; и где остальные переменные определены в любом из первого по тридцать восьмой варианты осуществления. В качестве альтернативы переменные являются такими, как описано в любом из семнадцатого, восемнадцатого, двадцать девятого, тридцатого и тридцать первого вариантов осуществления.

В сороковом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по тридцать восьмой варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (III’),

или его фармацевтически приемлемую соль, где q равняется 0, 1, 2 или 3; и где остальные переменные определены в любом из первого по тридцать восьмой варианты осуществления.

В сорок первом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по тридцать восьмой варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (IV’),

или его фармацевтически приемлемую соль, где Rⁿ⁶ представляет собой водород, необязательно замещенный -C₁-C₆алкил или защитную группу для атома азота; q равняется 0, 1, 2 или 3; и где остальные переменные определены в любом из первого по тридцать восьмой варианты осуществления.

В сорок втором варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из первого по тридцать восьмой варианты осуществления, описанные выше, где соединение представляет собой соединение формулы (V’),

или его фармацевтически приемлемую соль, где q равняется 0, 1, 2 или 3; и где остальные переменные определены в любом из первого по тридцать восьмой варианты осуществления.

В сорок третьем варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из тридцать девятого по сорок второй варианты осуществления, описанные выше, где Rⁿ⁶ представляет собой водород или -C_1-4алкил; и где остальные переменные определены в любом из тридцать девятого по сорок второй варианты осуществления.

В сорок четвертом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из тридцать девятого по сорок второй вариантыв осуществления, описанные выше, где в каждом случае R^p независимо представляет собой водород, галоген, необязательно замещенный C_1-4алкил, -CN, -NO₂, -N₃, -OR^o4, -N(Rⁿ²)₂, -C(=O)N(Rⁿ²)₂, -C(=O)R^c3 или -C(=O)OR^o4; и где остальная часть переменных определена в любом из тридцать девятого по сорок второй варианты осуществления.

В сорок пятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из двадцать шестого по сорок второй варианты осуществления, описанные выше, где R^na представляет собой водород или -C_1-4алкил; и где остальные переменные определены в любом из двадцать шестого по сорок второй варианты осуществления.

В сорок шестом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из двадцатого по сорок пятый, описанных выше, где каждый вариант Rⁿ независимо представляет собой водород, галоген, необязательно замещенный C_1-4алкил, -CN, -NO₂, -N₃, -OR^o4, -N(Rⁿ²)₂, -C(=O)N(Rⁿ²)₂, -C(=O)R^c3 или -C(=O)OR^o4; и где остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из двадцатого по сорок пятый.

В сорок седьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по сорок шестой, описанных выше, где R¹ представляет собой водород или -C₁-C₄алкил; и где остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из первого по сорок шестой.

В сорок восьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из шестнадцатого по сорок седьмой, описанных выше, где каждый из R^j и R^k независимо представляет собой водород, галоген, -OR^o7 или -C₁-C₄алкил; или R^j и R^k объединены вместе с образованием =O; и где остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из шестнадцатого по сорок седьмой.

В сорок девятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из шестнадцатого по сорок восьмой, описанных выше, где каждый из R^j и R^k представляет собой водород; и где остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из шестнадцатого по сорок восьмой.

В пятидесятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из четырнадцатого по сорок девятый, описанных выше,

где каждый из R^a и R^b представляет собой водород; и где остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из четырнадцатого по сорок девятый.

В пятьдесят первом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из тридцать пятого по пятидесятый, описанных выше,

где q равняется 0 или 1; и где остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из тридцать пятого по пятидесятый.

В пятьдесят втором варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из двадцатого по пятьдесят первый, описанных выше, где n равняется 0 или 1; и где остальные переменные определены в любом из вариантов осуществления из двадцатого по пятьдесят первый.

В пятьдесят третьем варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из первого по пятьдесят второй, описанных выше, где соединение представляет собой соединение, выбранное из таблицы 1, или его фармацевтически приемлемую соль.

В пятьдесят четвертом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ модуляции активности M2-пируваткиназы (PKM2), включающий приведение в контакт PKM2 с эффективным количеством соединения, описанного в любом из вышеуказанных вариантов осуществления из первого по пятьдесят третий, или его фармацевтически приемлемой соли.

В пятьдесят пятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ ингибирования пролиферации клетки, экспрессирующей M2-пируваткиназу (PKM2), включающий приведение в контакт клетки с эффективным количеством соединения, описанного в любом из вышеуказанных вариантов осуществления из первого по пятьдесят третий, или его фармацевтически приемлемой соли.

В пятьдесят шестом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из пятьдесят четвертого и пятьдесят пятого вариантов осуществления, описанных выше, где способ является ex vivo способом.

В пятьдесят седьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из пятьдесят четвертого и пятьдесят пятого вариантов осуществления, описанных выше, где способ является in vitro способом.

В пятьдесят восьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из пятьдесят четвертого по пятьдесят седьмой, где с помощью способа ингибируют активность PKM2.

В пятьдесят девятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из пятьдесят четвертого по пятьдесят седьмой, где с помощью способа инициируют активность PKM2.

В шестидесятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из пятьдесят четвертого по пятьдесят девятый, где PKM2 экспрессируется в клетке, которая не является эритроцитом.

В шестьдесят первом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из пятьдесят четвертого по шестидесятый, где клетку выделяют или получают из организма субъекта, страдающего от заболевания или нарушения, ассоциированного с функционированием PKM2, или предрасположенного к ним.

В шестьдесят втором варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с шестьдесят первым вариантом осуществления, где заболевание или нарушение ассоциировано с отклоняющейся от нормы активностью PKM2.

В шестьдесят третьем варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с шестьдесят первым вариантом осуществления, где заболевание или нарушение представляет собой рак, ожирение, заболевание, связанное с диабетом (например, диабетическая нефропатия (DN)), атеросклероз, рестеноз, заболевание коронарной артерии (CAD), синдром Блума (BS), доброкачественную гиперплазию предстательной железы (BPH) или аутоиммунное заболевание.

В шестьдесят четвертом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с шестьдесят третьим вариантом осуществления, где заболевание, связанное с диабетом, представляет собой диабетическую нефропатию.

В шестьдесят пятом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из пятьдесят пятого по шестьдесят четвертый, где клетка представляет собой клетку, которая сверхэкспрессирует PKM2.

В шестьдесят шестом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из пятьдесят пятого по шестьдесят пятый, где клетка представляет собой клетку, которая сверхэкспрессирует PKM2, обладающую отклоняющейся от нормы активностью.

В шестьдесят седьмом варианте осуществления настоящего изобретения предусмотрен способ в соответствии с любым из вариантов осуществления из пятьдесят пятого по шестьдесят шестой, где клетка является раковой клеткой, клеткой поджелудочной железы, клеткой печени, нервной клеткой или клеткой почки.

В конкретных вариантах осуществления соединений формул (I)-(IX), (I’)-(V’) или их фармацевтически приемлемых солей каждый из R² и Q независимо представляет собой необязательно замещенный 5- или 6-членный моноциклический гетероарил. В конкретных вариантах осуществления соединений формул (I)-(IX), (I’)-(V’) или их фармацевтически приемлемых солей оба из R² и Q представляют собой необязательно замещенный 5- или 6-членный моноциклический гетероарил; и каждый из L¹ и L² независимо представляет собой необязательно замещенный C1-4алкилен. В конкретных вариантах осуществления R² и Q являются одинаковыми. В конкретных вариантах осуществления R² и Q являются различными.

В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные в данном документе, применимы в качестве активаторов PKM2, используемых в способах и композициях, описанных в данном документе, и при этом оказывают действие за счет одного или более из следующих механизмов или же обладают одним или более из следующих свойств:

a. соединение является аллостерическим активатором PKM2;

b. соединение модулирует (например, стабилизирует) связывание FBP в связывающем «кармане» PKM2;

c. соединение модулирует (например, способствует) высвобождение FBP из связывающего «кармана» PKM2;

d. соединение является модулятором (например, агонистом), например аналогом, FBP, например агонистом, который связывает PKM2 с более низкой, приблизительно такой же или более высокой аффинностью, чем FBP;

e. соединение модулирует (например, способствует) растворение тетрамерной PKM2;

f. соединение модулирует (например, способствует) сборку тетрамерной PKM2;

g. соединение модулирует (например, способствует) тетрамерную конформацию PKM2;

h. соединение модулирует (например, способствует) связывание фосфотирозинсодержащего полипептида с PKM2;

i. соединение модулирует (например, способствует) способность фосфотирозинсодержащего полипептида индуцировать высвобождение FBP из PKM2, например, путем индуцирования изменения конформации PKM2, например, в положении Lys 433, препятствуя, таким образом, высвобождению FBP;

j. модулирует склонность PKM2 подвергаться посттрансляционным модификациям (например, окислению по Cys358 или ацетилированию по Lys305), что влияет на активность фермента;

k. соединение связывается с Lys 433 или изменяет его положение относительно FBP-связывающего «кармана»;

l. соединение селективно модулирует (например, активирует) PKM2 в большей степени, чем по меньшей мере одну иную изоформу PK, например, оно являются селективным в отношении PKM2 в большей степени, нежели в отношении одной или более из PKR, PKM1 или PKL;

m. соединение обладает аффинностью к PKM2, которая больше его аффинности в отношении по меньшей мере одной иной изоформы PK, например, PKR, PKM1 или PKL.

Соединение, описанное в данном документе, можно тестировать в отношении его способности активировать PKM2. Для упрощения активационное действие таких соединений представлено как AC₅₀ в таблице 2. В таблице 2 соединение, описанное в данном документе, может характеризоваться AC50 PKM2 дикого типа. «A» относится к AC₅₀, составляющей менее 0.300 мкM; «B» относится к AC50, составляющей от 0,301 мкМ до 0,800 мкM и «C» относится к AC₅₀, составляющей более 0,800 мкM.

Таблица 1. Иллюстративные соединения в качестве модуляторов PKM2
Номер соед.	Соединение	Номер соед.	Соединение
1		6
2		7
3		8
4		9
5		10
11		12
13		14
15		16
17		18
19		20
21		22
23		24
25		26
27		28
29		30
31		32
33		34
35		36
37		38
39		40
41		42
43		44
45		46
47		48
49		50
51		52
53		54
55		56
57		58
59		60
61		62
63		64
65		66
67		68
69		70
71		72
73		74
75		76
77		78
79		80
81		82
83		84
85		86
87		88
89		90
91		92
93		94
95		96
97		98
99		100
101		102
103		104
105		106
107		108
109		110
111		112
113		114
115		116
117		118
119		120
121		122
123		124
125		126
127		128
129		130
131		132
133		134
135		136
137		138
139		140
141		142
143		144
145

Таблица 2. AC 50 иллюстративных соединений в отношении PKM2 дикого типа
№ соединения	AC 50 в отношении PKM2 WT	№ соединения	AC 50 в отношении PKM2 WT
1	A	74	A
2	A	75	A
3	B	76	A
4	B	77	A
5	C	78	A
6	B	79	C
7	C	80	A
8	A	81	C
9	B	82	B
10	A	83	A
11	A	84	A
12	C	85	A
13	B	86	A
14	C	87	A
15	C	88	A
16	B	89	A
17	C	90	A
18	C	91	A
19	C	92	A
20	C	93	A
21	A	94	A
22	C	95	C
23	B	96	A
24	C	97	C
25	C	98	B
26	B	99	A
27	B	100	A
28	A	101	A
29	B	102	B
30	A	103	A
31	A	104	A
32	A	105	A
33	C	106	C
34	C	107	A
35	C	108	A
36	B	109	A
37	C	110	A
38	A	111	A
39	A	112	A
40	C	113	A
41	B	114	C
42	C	115	A
43	A	116	C
44	C	117	C
45	B	118	B
46	A	119	B
47	C	120	C
48	C	121	B
49	B	122	A
50	C	123	A
51	A	124	B
52	C	125	C
53	C	126	A
54	A	127	B
55	C	128	A
56	C	129	A
57	C	130	C
58	C	131	B
59	C	132	A
60	C	133	C
61	C	134	A
62	C	135	A
63	A	136	B
64	C	137	B
65	A	138	C
66	A	139	C
67	C	140	C
68	A	141	C
69	A	142	C
70	A	143	C
71	C	144	C
72	A	145	C
73	A

В конкретных вариантах осуществления соединения формул (I)-(IX), (I’)-(V’) выбраны из любого из соединений, представленных в таблице 1 и в примерах. В конкретных вариантах осуществления соединения формул (I)-(IX), (I’)-(V’) отвечают одной из представленных ниже формул:

, где R^na, R^nc, R^o2 и R^o6 определены в данном документе, и R^ox представляет собой водород или защитную группу для атома кислорода. В конкретных вариантах осуществления R^na представляет собой защитную группу для атома азота (например, SEM или BOC). В конкретных вариантах осуществления R^nc представляет собой защитную группу для атома азота (например, SEM или BOC). В конкретных вариантах осуществления R^o2 представляет собой защитную группу для атома кислорода (например, THP). В конкретных вариантах осуществления R^o6 представляет собой защитную группу для атома кислорода (например, TBS). В конкретных вариантах осуществления R^ox представляет собой защитную группу для атома кислорода (например, THP).

Соединения, описанные в данном документе, можно получать с применением ряда методик синтеза, изложенных в примерах. Химические преобразования при синтезе и методики, касающиеся защитных групп (введение защитной группы и удаление защитной группы), применимые в синтезе соединений, описанных в данном документе, известны в данной области техники и включают, например, таковые, описанные в R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2^nd Ed., John Wiley and Sons (1991); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); и L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995), а также в их последующих изданиях.

Определенные соединения-активаторы, применимые как активаторы PKM2 дикого типа и/или мутантной формы, являются такими, которые демонстрируют специфичность в отношении фермента PKM2 (фермента дикого типа и/или мутантной формы) и его активацию в отсутствие FBP до такого уровня, который на 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 99 или 100% превышает уровень, достигнутый в присутствии FBP.

В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I) можно получить с применением способов, проиллюстрированных на схеме 1. Тиазолилальдегид формулы S1 вступает в реакцию с этилазидоацетатом в условиях нуклеофильного присоединения (например, основания) в подходящем растворителе (например, этаноле) с получением промежуточных соединений формулы S2. Гидроксильная группа формулы S2 может быть преобразована в уходящую группу и подвержена элиминированию с получением формулы S3. Замыкание цикла и последующая функционализация аминогруппы обеспечивают бициклическое соединение формулы S5, которое подвергается нуклеофильному замещению с помощью метантиолата натрия, а затем окислению с получением формулы S7. Дальнейшее замыкание цикла формулы S7 в присутствии гидразина с последующим нуклеофильным замещением с помощью LG¹-CH₂-Q¹ в присутствии основания обеспечивает промежуточные соединения формулы S9. Серосодержащая группа в формуле S9 может быть окислена до сульфинила или сульфонила с обеспечением формулы S10 или S11, что является основой для дополнительного нуклеофильного замещения с образованием общей формулы S12. Используемый в данном документе X¹ представляет собой уходящую группу, определенную в данном документе. В конкретных вариантах осуществления X¹ представляет собой галоген, алкансульфонилокси, аренсульфонилокси, диазоний, алкилдиазен, арилдиазен, алкилтриазен, арилтриазен, нитро, алкилнитрат, арилнитрат, алкилфосфат, арилфосфат, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, алкоксикарбонилокси, арилоксикарбонилокси аммиак, алкиламины, ариламины, гидроксильную группу, алкилоксигруппу, арилоксигруппу; LG¹ представляет собой уходящую группу, определенную в данном документе; Q¹ представляет собой необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил; и Nu¹ представляет собой нуклеофил, определенный в данном документе. Nu¹ соединения формулы S12 может быть дополнительно преобразован в другие функциональные группы с помощью стандартных химических превращений. R¹ определен в первом варианте осуществления.

В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I) можно получить с применением способов, проиллюстрированных на схеме 2. Подобно схеме 1 формулу S21 можно получить из тиазолальдегида формулы S13. Галогенирование формулы S21 дает формулу S22, которая может подвергаться реакции сочетания между органическими соединениями с помощью связи алкил-металл, алкенил-металл, алкинил-металл, арил-металл, гетероарил-металл, гетероциклил-металл или циклоалкил-металл с получением соединения формулы S23. Применяемый в данном документе X³ представляет собой галоген; R¹ определен в первом варианте осуществления настоящего изобретения; LG² представляет собой уходящую группу, определенную в данном документе; Q² представляет собой необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил; M¹ представляет собой металл (например, Li, Na, K, Mg, Zn, Sn, B, Pd, Si, Cu и т.п.), X⁴ представляет собой галоген, или сложный алкиловый эфир сульфоновой кислоты, или сложный ариловый эфир сульфоновой кислоты; R^r1 представляет собой необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил. В конкретных вариантах осуществления реакция сочетания между органическими соединениями представляет собой реакцию Негиши; X³ представляет собой I; и M¹ представляет собой Zn.

Соединения формулы S22 и S23 являются применимыми промежуточными соединениями для введения большего количества функциональных групп в положении X³ и/или R^r1 (схема 3). В конкретных вариантах осуществления соединение формулы 23-i может быть дополнительно окислено с образованием формулы S24. Благодаря реакции нуклеофильного присоединения между S24 и подходящим нуклеофилом образуется соединение S25. В другом варианте осуществления соединения формулы S22 можно подвергать реакции сочетания между винилом и металлом для введения винильной группы в тиазольное кольцо. Окисление винильной группы с последующим нуклеофильным присоединением обеспечивает соединение формулы S28. Применяемый в данном документе Nu² представляет собой нуклеофил.

Применяемый в данном документе R^r2 представляет собой необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил. Nu¹ и Q2 определены на схеме 2.

Используемый в данном документе термин «нуклеофил» представляет собой химическую частицу, которая является донором электронной пары электрофилу с образованием химической связи в зависимости от реакции. Все молекулы или ионы со свободной парой электронов или по меньшей мере одной пи-связью могут выступать в качестве нуклеофилов. Иллюстративные нуклеофилы содержат по меньшей мере одну группу, обладающую нуклеофильной функциональностью, например, альфа-углеродный атом (например, атом углерода, смежный с карбонильной, сульфонильной, сульфинильной, арильной группой или гетероарилом), тиольная группа, гидроксильная группа, первичная аминогруппа, вторичная аминогруппа, галогенид, цианид, азид, алкоксид, металл органического соединения или неорганическое основание.

В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I) можно получить с применением способов, проиллюстрированных на схеме 4. Нуклеофильное замещение формулы S30 с помощью вторичного циклического амина обеспечивает формулу S31. Реакции сочетания между органическими соединениями (например, реакция сочетания Сузуки, реакция сочетания, катализируемая Pd, и т.д.) на примере соединения S32 обеспечивают соединение формул S33(i)-(iii). Более того, сульфинильная группа формулы S34 может быть функционализирована с помощью карбамата аммония с получением имино-сульфанона формулы S35.

Применяемый в данном документе

представляет собой кольцо A с азотом в качестве атома кольца.

Применяемый в данном документе

представляет собой кольцо B с точкой присоединения при атоме углерода в кольце.

R¹ определен в первом варианте осуществления. Каждый вариант R³⁵, R³⁶ и R³⁷ независимо представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный гетероциклил или необязательно замещенный циклоалкил.

X⁴ представляет собой галоген или -OTf. M⁴ представляет собой металл органического соединения с подходящими лигандами при необходимости (органическими или неорганическими), как позволяет валентность. Приведенный в качестве примера M⁴ включает без ограничения Li, Sn, B (например, бороновые кислоты и сложные эфиры бороновой кислоты), Zn, Mg, Si, Pd и Cu органического соединения.

Способы лечения

В одном варианте осуществления предусмотрен способ лечения заболевания, болезненного состояния или нарушения, описанных в данном документе (например, лечение), включающий введение соединения, фармацевтически приемлемой соли соединения или фармацевтической композиции, содержащей соединение, описанное в данном документе (например, соединение формул (I)-(IX), (I’)-(V’) в примерах, и в таблице 1, и на фигурах 1A-1C, 2A-2C, 3).

Соединения и композиции, описанные в данном документе, можно вводить в клетки в культуре, например, in vitro или ex vivo, или субъекту, например, in vivo, для лечения и/или диагностики ряда нарушений, включая описанные в данном документе ниже.

Пролиферативное заболевание

В некоторых вариантах осуществления предусмотрен способ лечения пролиферативного заболевания, включающий введение субъекту соединения, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции на его основе, как описано в данном документе. Используемый в данном документе термин «пролиферативное заболевание» относится к заболеванию, возникающему вследствие патологического разрастания или распространения клеток за счет их размножения (Walker, Cambridge Dictionary of Biology; Cambridge University Press: Cambridge, UK, 1990). Пролиферативное заболевание может быть ассоциировано с: 1) патологической пролиферацией клеток, обычно находящихся в состоянии покоя; 2) патологической миграцией клеток из места их нормальной локализации (например, метастазирование неопластических клеток); 3) патологической экспрессией протеолитических ферментов, таких как матриксные металлопротеиназы (например, коллагенaзы, желатиназы и эластазы), или 4) патологическим ангиогенезом, как при пролиферативной ретинопатии и метастазировании опухоли. Иллюстративные пролиферативные заболевания включают виды рака (т.е. «злокачественные новообразования»), доброкачественные новообразования, ангиогенез, воспалительные заболевания и аутоиммунные заболевания. В некоторых вариантах осуществления пролиферативное заболевание представляет собой рак. В некоторых вариантах осуществления пролиферативное заболевание представляет собой аутоиммунное заболевание.

Термины «новообразование» и «опухоль» используются в данном документе взаимозаменяемо и относятся к патологической массе ткани, при этом рост массы ткани превышает рост ткани в нормальном состоянии и не скоординирован с ним. Новообразование или опухоль могут быть «доброкачественными» или «злокачественными» в зависимости от следующих характеристик: степень клеточной дифференциации (включая морфологию и функциональные характеристики), скорость роста, местная инвазия и метастазирование. «Доброкачественное новообразование» обычно является хорошо дифференцированным, обладает характерным для него более медленным ростом, нежели злокачественное новообразование, и остается локализованным в месте возникновения. Кроме того, доброкачественное новообразование не обладает способностью к инфильтрации, инвазии или метастазированию в отдаленные участки. Иллюстративные доброкачественные новообразования включают без ограничения липому, хондрому, аденому, мягкую бородавку, сенильную ангиому, себорейный кератоз, виды лентиго и гиперплазию сальных желез. В некоторых случаях определенные «доброкачественные» опухоли могут в дальнейшем положить начало злокачественным новообразованиям, которые могут возникать в результате дополнительных генетических изменений в субпопуляции неопластических клеток опухоли, и такие опухоли называют «предраковыми новообразованиями». Иллюстративным предраковым новообразованием является тератома. Напротив, «злокачественное новообразование» обычно является слабодифференцированным (анаплазия) и обладает характерным для него быстрым ростом, сопровождающимся прогрессирующей инфильтрацией, инвазией и деструкцией окружающей ткани. Кроме того, злокачественное новообразование обычно обладает способностью к метастазированию в отдаленные участки. Термин «метастазирование», «метастатический» или «давать метастазы» относится к распространению или миграции раковых клеток от первичной или исходной опухоли к другому органу или ткани и оно, как правило, может быть идентифицировано по наличию «вторичной опухоли» или «вторичной клеточной массы» в виде ткани по типу первичной или исходной опухоли, а не по органу или ткани, в которых расположена вторичная (метастатическая) опухоль. Например, считается, что рак предстательной железы, который мигрирует к кости, представляет собой метастазируемый рак предстательной железы и предусматривает раковые клетки при раке предстательной железы, разросшиеся в костную ткань.

Термин «рак» относится к классу заболеваний, характеризующихся развитием патологических клеток, которые неконтролируемо пролиферируют и обладают способностью к инфильтрации и разрушению здоровых тканей организма. См., например, Stedman’s Medical Dictionary, 25^th ed.; Hensyl ed.; Williams & Wilkins: Philadelphia, 1990. Иллюстративные виды рака предусматривают солидные опухоли, опухоли мягких тканей и их метастазы. Раскрытые способы также применимы в лечении видов рака, которые не относятся к солидным. Иллюстративные солидные опухоли включают злокачественные опухоли (например, виды саркомы, виды аденокарциномы и карциномы) различных систем органов, такие как злокачественные опухоли легкого, молочной железы, лимфоидной ткани, желудочно-кишечного (например, толстой кишки) и мочеполового (например, опухоли почки, уротелиальные или тестикулярные опухоли) трактов, глотки, предстательной железы и яичника. Иллюстративные виды аденокарциномы включают виды колоректального рака, почечно-клеточный рак, рак печени, немелкоклеточный рак легкого и рак тонкой кишки. Другие иллюстративные виды рака включают: острый лимфобластный лейкоз у взрослых; острый лимфобластный лейкоз у детей; острый миелоидный лейкоз у взрослых; адренокортикальную карциному; адренокортикальную карциному у детей; СПИД-ассоциированную лимфому; СПИД-ассоциированные злокачественные опухоли; рак анального канала; астроцитому мозжечка у детей; астроцитому мозга у детей; рак желчных протоков, внепеченочный рак; рак мочевого пузыря; рак мочевого пузыря у детей; рак костей, остеосаркому/злокачественную фиброзную гистиоцитому; глиому ствола головного мозга у детей; опухоль головного мозга у взрослых; опухоль головного мозга, глиому ствола головного мозга у детей; опухоль головного мозга, астроцитому мозжечка у детей; опухоль головного мозга, мозжечковую астроцитому/злокачественную глиому у детей; опухоль головного мозга, эпендимому у детей; опухоль головного мозга, медуллобластому у детей; опухоль головного мозга, супратенториальные примитивные нейроэктодермальные опухоли у детей; опухоль головного мозга, глиому зрительного пути и гипоталамической области у детей; опухоль головного мозга у детей (иные виды); рак молочной железы; сочетание рака молочной железы и беременности; рак молочной железы у детей; рак груди у мужчин; бронхиальные аденому/карциноид у детей; карциноидную опухоль у детей; карциноидную опухоль желудочно-кишечного тракта; адренокортикальную карциному; карциному островковых клеток; карциному без известного первичного очага; первичную лимфому центральной нервной системы; астроцитому мозжечка у детей; астроцитому головного мозга/злокачественную глиому у детей; рак шейки матки; виды рака в детском возрасте; хронический лимфоцитарный лейкоз; хронический миелолейкоз; хронические миелопролиферативные нарушения; светлоклеточную саркому сухожильного влагалища; рак толстой кишки; колоректальный рак у детей; T-клеточную лимфому кожи; рак эндометрия; эпендимому у детей; эпителиальный рак яичника; рак пищевода; рак пищевода у детей; опухоли семейства Юинга; экстракарниальную герминогенную опухоль у детей; внегонадную герминогенную опухоль; рак внепеченочных желчных протоков; рак глаз, внутриглазную меланому; рак глаз, ретинобластому; рак желчного пузыря; рак желудка (желудочный рак); рак желудка (желудочный рак) у детей; карциноидную опухоль желудочно-кишечного тракта; внечерепную герминогенную опухоль у детей; внегонадную герминогенную опухоль; герминогенную опухоль яичника; гестационную трофобластическую опухоль; глиому ствола головного мозга у детей; глиому зрительного пути и гипоталамической области у детей; злокачественный ретикулоэндотелиоз; рак головы и шеи; гепатоцеллюлярный рак (печени) у взрослых (первичный); гепатоцеллюлярный рак (печени) у детей (первичный); лимфому Ходжкина у взрослых; лимфому Ходжкина у детей; лимфому Ходжкина в период беременности; гипофарингиальный рак; глиому гипоталамической области и зрительного пути у детей; внутриглазную меланому; карциному островковых клеток (эндокринной части поджелудочной железы); саркому Капоши; рак почки; рак гортани; рак гортани у детей; острый лимфобластный лейкоз у взрослых; острый лимфобластный лейкоз у детей; острый миелобластный лейкоз у взрослых; острый миелобластный лейкоз у детей; хронический лимфоцитарный лейкоз; хронический миелоидный лейкоз; лейкоз ворсистых клеток; рак губы и полости рта; рак печени у взрослых (первичный); рак печени у детей (первичный); немелкоклеточный рак легких; мелкоклеточный рак легких; острый лимфобластный лейкоз у взрослых; острый лимфобластный лейкоз у детей; хронический лимфоцитарный лейкоз; СПИД-ассоциированную лимфому; лимфому центральной нервной системы (первичную); Т-клеточную лимфому кожи; лимфому Ходжкина у взрослых; лимфому Ходжкина у детей; лимфому Ходжкина в период беременности; неходжкинскую лимфому у взрослых; неходжкинскую лимфому у детей; неходжкинскую лимфому в период беременности; первичную лимфому центральной нервной системы; макроглобулинемию Вальденстрема; рак груди у мужчин; злокачественную мезотелиому у взрослых; злокачественную мезотелиому у детей; злокачественную тимому; медуллобластому у детей; меланому; внутриглазную меланому; карциному Меркеля; злокачественную мезотелиому; метастатический плоскоклеточный рак шеи со скрытой первичной опухолью; синдром множественной эндокринной неоплазии у детей; множественную миелому/новообразование из плазматических клеток; грибовидный микоз; миелодиспластический синдром; хронический миелоидный лейкоз; острый миелоидный лейкоз у детей; множественную миелому; хронические миелопролиферативные нарушения; рак полости носа и околоносовых пазух; рак носоглотки; рак носоглотки у детей; нейробластому; неходжкинскую лимфому у взрослых; неходжкинскую лимфому у детей; неходжкинскую лимфому в период беременности; немелкоклеточный рак легкого; рак полости рта у детей; рак полости рта и губы; рак ротоглотки; остеосаркому/злокачественную фиброзную гистиоцитому кости; рак яичника у детей; эпителиальный рак яичника; герминогенную опухоль яичника; пограничную опухоль яичника; рак поджелудочной железы; рак поджелудочной железы у детей; рак островковых клеток поджелудочной железы; рак околоносовых пазух и полости носа; рак паращитовидной железы; рак полового члена; феохромоцитому; примитивные нейроэктодермальные опухоли шишковидного тела и супратенториальные опухоли у детей; опухоль гипофиза; новообразование из плазматических клеток/множественную миелому; плевролегочную бластому; сочетание беременности и рак молочной железы; сочетание беременности и лимфомы Ходжкина; сочетание беременности и неходжкинской лимфомы; первичную лимфому центральной нервной системы; первичный рак печени у взрослых; первичный рак печени у детей; рак предстательной железы; рак прямой кишки; почечно-клеточный рак (рак почки); почечно-клеточный рак у детей; переходноклеточный рак почечной лоханки и мочеточника; ретинобластому; рабдомиосаркому у детей; рак слюнной железы; рак слюнной железы у детей; саркому, принадлежавшую к опухолям семейства Юинга; саркому Капоши; саркому (остеосаркому)/злокачественную фиброзную гистиоцитому кости; саркому, рабдомиосаркому у детей; саркому мягких тканей у взрослых; саркому мягких тканей у детей; синдром Сезари; рак кожи; рак кожи у детей; рак кожи (меланому); карциному клеток Меркеля; мелкоклеточный рак легкого; рак тонкой кишки; саркому мягких тканей у взрослых; саркому мягких тканей у детей; метастатический плоскоклеточный рак шеи со скрытой первичной опухолью; рак желудка (желудочный рак); рак желудка (желудочный рак) у детей; супратенториальные примитивные нейроэктодермальные опухоли у детей; Т-клеточную лимфому кожи; рак яичка; тимому у детей; злокачественную тимому; рак щитовидной железы; рак щитовидной железы у детей; переходноклеточный рак почечной лоханки и мочеточника; гестационную трофобластическую опухоль; рак с неизвестным первичным очагом у детей; виды рака неизвестного происхождения у детей; переходноклеточный рак мочеточника и почечной лоханки; рак мочеиспускательного канала; саркому матки; рак влагалища; глиому зрительного пути и гипоталамической области у детей; рак наружных женских половых органов; макроглобулинемию Вальденстрема и опухоль Вильмса. Метастазы вышеуказанных видов рака также могут быть вылечены или предупреждены в соответствии со способами, описанными в данном документе.

Виды комбинированной терапии рака

В некоторых вариантах осуществления предусмотрен способ, дополнительно включающий применение одного или более дополнительных видов лечения рака. Иллюстративные виды лечения рака включают, например: химиотерапию, виды нацеленной терапии, такие как виды терапии антителами, иммунотерапия и гормональная терапия. Примеры каждого из этих видов лечения представлены ниже.

В некоторых вариантах осуществления соединение, описанное в данном документе, вводят вместе с одним или более средствами химиотерапии. Химиотерапия представляет собой вид лечения рака с помощью лекарственных средств, которые могут разрушать раковые клетки. «Химиотерапия» обычно относится к цитотоксическим лекарственным средствам, которые поражают быстро делящиеся клетки в целом, в отличие от нацеленной терапии. Химиотерапевтические лекарственные средства препятствуют делению клеток различными возможными способами, например, с помощью удвоения ДНК или разделения новообразованных хромосом. Большинство форм химиотерапии нацеливаются на все быстро делящиеся клетки и не являются специфичными в отношении раковых клеток, хотя некоторая степень специфичности может происходить из неспособности многих раковых клеток к репарации ДНК, тогда как нормальные клетки обычно могут это делать.

Примеры химиотерапевтических средств, применяемых при терапии рака, включают, например, антиметаболиты (например, фолиевую кислоту, пуриновые и пиримидиновые производные) и алкилирующие средства (например, азотистые иприты, нитрозомочевины, платину, алкилсульфонаты, гидразины, триазены, азиридины, веретенный яд, цитотоксические средства, ингибиторы топоизомеразы и др.). Иллюстративные средства включают акларубицин, актиномицин, алитретиноин, алтретамин, аминоптерин, аминолевулиновую кислоту, амрубицин, амсакрин, анагрелид, триоксид мышьяка, аспарагиназу, атрасентан, белотекан, бексаротен, бендамустин, блеомицин, бортезомиб, бусульфан, камптотецин, капецитабин, карбоплатин, карбоквон, кармофур, кармустин, целекоксиб, хлорамбуцил, хлорметин, цисплатин, кладрибин, клофарабин, кризантаспазу, циклофосфамид, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, даунорубицин, децитабин, демеколцин, доцетаксел, доксорубицин, эфапроксилар, элескломол, элзамитруцин, эноцитабин, эпирубицин, эстрамустин, этоглюцид, этопозид, флоксуридин, флударабин, фторурацил (5FU), фотемустин, гемцитабин, имплантаты Gliadel, гидроксикарбамид, гидроксимочевину, идарубицин, ифосфамид, иринотекан, ирофульвен, иксабепилон, ларотаксел, лейковорин, липосомальный доксорубицин, липосомальный даунорубицин, лонидамин, ломустин, лукантон, манносульфан, мазопрокол, мелфалан, меркаптопурин, месну, метотрексат, метиламинолевулинат, митобронитол, митогуазон, митотан, митомицин, митоксантрон, недаплатин, нимустин, облимерсен, омацетаксин, ортатаксел, оксалиплатин, паклитаксел, пэгаспаргаза, пеметрексед, пентостатин, пирарубицин, пиксантрон, пликамицин, порфимер натрия, преднимустин, прокарбазин, ралтитрексед, ранимустин, рубитекан, сапацитабин, семустин, ситимаген цераденовек, сатраплатин, стрептозоцин, талапорфин, тегафур-урацил, темопорфин, темозоломид, тенипозид, тезетаксел, тестолактон, тетранитрат, тиотепу, тиазофурин, тиогуанин, типифарниб, топотекан, трабектедин, триазихон, триэтиленмеламин, триплатин, третиноин, треосульфан, трофосфамид, урамустин, валрубицин, вертепорфин, винбластин, винкристин, виндезин, винфлунин, винорелбин, вориностат, зорубицин и другие цитостатические или цитотоксические средства, описанные в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления соединение, описанное в данном документе, вводят с одним или более средствами нацеленной терапии. Нацеленная терапия представляет собой применение средств, специфичных в отношении дерегулированных белков раковых клеток. Низкомолекулярные лекарственные средства для нацеленной терапии, как правило, представляют собой ингибиторы ферментативных доменов на мутировавших, сверхэкспрессированных или иным образом важных белках в раковой клетке. Известными примерами являются ингибиторы тирозинкиназы, такие как акситиниб, босутиниб, цедираниб, дазатиниб, эрлотиниб, иматиниб, гефитиниб, лапатиниб, лестауртиниб, нилотиниб, семаксаниб, сорафениб, сунитиниб и вандетаниб, а также ингибиторы циклин-зависимой киназы, такие как альвоцидиб и селициклиб. Терапия моноклональными антителами является другой стратегией, при которой терапевтическое средство представляет собой антитело, которое специфично связывается с белком на поверхности раковых клеток. Примеры включают антитело к HER2/neu - трастузумаб (Herceptin®), применяемое, как правило, при раке молочной железы, и антитело к CD20 - ритуксимаб и тозитумомаб, применяемые, как правило, при ряде B-клеточных злокачественных опухолей. Другие иллюстративные антитела включают цетуксимаб, панитумумаб, трастузумаб, алемтузумаб, бевацизумаб, эдреколомаб и гемтузумаб. Иллюстративные гибридные белки включают афлиберцепт и денилейкин-дифтитокс. В некоторых вариантах осуществления нацеленную терапию можно применять в комбинации с соединением, описанным в данном документе.

Нацеленная терапия может также подразумевать малые пептиды в качестве «наводящих устройств», которые могут связываться с рецепторами клеточной поверхности или измененным внеклеточным матриксом, окружающим опухоль. Радионуклиды, которые прикреплены к этим пептидам (например, RGD), в конечном итоге разрушают раковую клетку, если нуклид распадается вблизи клетки. Пример такой терапии включает BEXXAR®.

В некоторых вариантах осуществления соединение, описанное в данном документе, вводят вместе с одним или более средствами иммунотерапии. Иммунотерапия рака относится к разнообразному набору терапевтических стратегий, разработанных для индуцирования собственной иммунной системы пациента для борьбы с опухолью. Современные способы для вызова иммунного ответа против опухолей включают внутрипузырную BCG иммунотерапию для поверхностного рака мочевого пузыря и применение интерферонов и других цитокинов для индуцирования иммунного ответа у пациентов с почечноклеточным раком и меланомой.

Аллогенная трансплантация гематопоэтических стволовых клеток может считаться формой иммунотерапии, поскольку иммунные клетки донора зачастую будут атаковать опухоль в виде эффекта трансплантат-против-опухоли. В некоторых вариантах осуществления средства иммунотерапии можно применять в комбинации с соединением, описанным в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления соединение, описанное в данном документе, вводят вместе с одним или более средствами гормональной терапии. Рост некоторых видов рака можно ингибировать путем обеспечения или блокировки определенных гормонов. Типичные примеры гормон-чувствительных опухолей включают определенные типы рака молочной железы и предстательной железы. Удаление или блокировка эстрогена или тестостерона зачастую является важным дополнительным лечением. При определенных видах рака введение агонистов гормонов, таких как прогестогены, может быть благоприятным с терапевтической точки зрения. В некоторых вариантах осуществления средства гормональной терапии можно применять в комбинации с соединением, описанным в данном документе.

Ожирение и расстройства, связанные с содержанием жира в организме

В некоторых вариантах осуществления предусмотрен способ лечения или предупреждения ожирения у субъекта, являющегося человеком (например, ребенка или взрослого), путем введения субъекту, являющемуся человеком, эффективного количества соединения, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции на их основе, как описано в данном документе. «Ожирение» относится к состоянию, при котором субъект имеет индекс массы тела больше или равный 30. Многие соединения, описанные в данном документе, можно использовать для лечения или предупреждения состояния, сопровождающегося избыточной массой. «Избыточная масса» относится к состоянию, при котором субъект имеет индекс массы тела больше или равный 25,0. Индекс массы тела (BMI) и другие определения приведены в соответствии с «Клиническим руководством NIH по идентификации, оценке и лечению избыточной массы и ожирения у взрослых» (1998). Лечение можно проводить с помощью соединения в количестве, эффективном для изменения массы тела субъекта, например, на по меньшей мере 2, 5, 7, 10, 12, 15, 20, 25, 30, 25, 40, 45, 50 или 55%. Лечение можно проводить с помощью соединения в количестве, эффективном для снижения индекса массы тела субъекта, например, до значения менее 30, 28, 27, 25, 22, 20 или 18. Соединения можно применять для лечения или предупреждения отклоняющегося от нормы или неприемлемого увеличения массы тела, интенсивности метаболизма или отложения жира, например, анорексии, булимии, ожирения, диабета или гиперлипидемии (например, повышенного уровня триглицеридов и/или повышенного уровня холестерина), а также нарушений метаболизма жира или липидов.

Соединение или композицию, описанные в данном документе, можно вводить для лечения ожирения, ассоциированного с синдромом Прадера-Вилли (PWS). PWS является генетическим нарушением, ассоциированным с ожирением (например, морбидным ожирением).

Соединение или композицию, описанные в данном документе, можно применять для уменьшения содержания жира в организме, предупреждения повышенного содержания жира в организме, уменьшения уровня холестерина (например, общего содержания холестерина и/или соотношений общего содержания холестерина и холестерина HDL), и/или снижения аппетита у индивидуумов с PWS-ассоциированным ожирением, и/или ослабления сопутствующих заболеваний, таких как диабет, сердечно-сосудистое заболевание и инсульт.

Гипергликемия

Высокие уровни глюкозы индуцируют метаболические отклонения в метаболических путях глюкозы и индуцируют митохондриальную дисфункцию. Они также приводят к сверхобразованию активных форм кислорода (ROS). Повышенное содержание внутриклеточной глюкозы приводит к накоплению токсичных метаболитов глюкозы - сорбита, метилглиоксаля (MG) и диацилглицерина (DAG) - которые, как предполагается, способствуют микрососудистому осложнению, например DN. Было обнаружено, что низкомолекулярные активаторы PKM2 возвращают к прежнему состоянию индуцированное гипергликемией повышение уровня токсичных метаболитов глюкозы и митохондриальную дисфункцию (Nat Med. 2017, 23(6): 753-762; патент США № 9921221).

В конкретных вариантах осуществления, предоставленных в данном документе, предлагается способ лечения гипергликемии у субъекта, включающий введение терапевтический эффективного количества соединения, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции на их основе.

В конкретных вариантах осуществления, предоставленных в данном документе, предлагается способ лечения заболевания, связанного с диабетом, у субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции на их основе. Используемый в данном документе термин «заболевание, связанное с диабетом» относится к диабету и преддиабету, а также осложнениям диабета. Диабет относится к группе метаболических заболеваний, при которых человек имеет высокий уровень сахара в крови либо потому, что организм не продуцирует достаточное количество инсулина, либо потому что клетки не отвечают на продуцируемый инсулин. Данный высокий уровень сахара в крови приводит к классическим симптомам полиурии (частое мочеиспускание), полидипсии (повышенное чувство жажды) и полифагии (повышенное чувство голода). Существует несколько типов диабета. Диабет I типа возникает вследствие неспособности организма продуцировать инсулин и в настоящее время требует введения человеку инсулина или ношения инсулиновой помпы. Диабет II типа возникает вследствие инсулинорезистентности - состояния, при котором клетки не способны правильно использовать инсулин, причем иногда сочетается с абсолютным дефицитом инсулина. Гестационный диабет возникает, когда у беременных женщин без предварительного диагноза диабета возникает высокий уровень глюкозы в крови. Другие формы диабета включают врожденный диабет, который обусловлен генетическими нарушениями секреции инсулина, диабет, связанный с муковисцидозом, стероидный диабет, при котором индуцируются высокие дозы глюкокортикоидов, и несколько форм моногенного диабета, например, проявление диабета зрелого типа у молодых (например, MODY 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10). Преддиабет указывает на состояние, которое возникает в том случае, если уровни глюкозы в крови человека являются выше нормального уровня, но не достаточно высокими для диагноза «диабет». Все формы диабета повышают риск долговременных осложнений. Как правило, они развиваются спустя много лет, но могут быть первым симптомом у тех, у кого в остальном не подтвердили диагноз до этого времени. Большинство долговременных осложнений относятся к повреждению кровеносных сосудов. Иллюстративные диабетические осложнения включают сердечно-сосудистое заболевание, макрососудистые заболевания, такие как ишемическая болезнь сердца (ангина, инфаркт миокарда), инсульт и заболевание периферических сосудов, микрососудистые осложнения (например, повреждение мелких кровеносных сосудов), диабетическую ретинопатию (т.е. влияние диабета на образование кровеносных сосудов в сетчатке глаза), диабетическую нефропатию (т. е. влияние диабета на почки), диабетическую невропатию (например, влияние диабета на нервную систему, что чаще всего вызывает онемение, покалывание и боль стопы, а также повышает риск повреждения кожи вследствие измененной чувствительности), связанные с диабетом язвы стоп и синдром X. В конкретных вариантах осуществления «заболевание, связанное с диабетом» включает одно или более из выбранного из гипергликемии, гиперинсулинемии, диабета, инсулинорезистентности, нарушения метаболизма глюкозы, состояний, характеризующихся нарушением переносимости глюкозы (IGT), состояний, характеризующихся нарушением уровня глюкозы в плазме крови натощак, диабетической ретинопатии, диабетической нефропатии, гломерулосклероза, диабетической невропатии и синдрома X.

В конкретных вариантах осуществления соединение или композицию, описанные в данном документе, можно использовать для снижения у субъекта количества активных форм кислорода (ROS) и/или по меньшей мере одного из метаболитов глюкозы (например, сорбита, метилглиоксаля (MG) и диацилглицерина (DAG)).

В конкретных вариантах осуществления соединение или композицию, описанные в данном документе, можно применять для лечения микрососудистого осложнения.

В конкретных вариантах осуществления соединение или композицию, описанные в данном документе, можно применять для лечения DN. В конкретных вариантах осуществления лечение DN может включать ослабление любого симптома, ассоциированного с DN, включая без ограничения изменения аппетита, изменение качества сна, содержание белка в сыворотке крови, слабость и/или тошноту.

В конкретных вариантах осуществления способ дополнительно включает введение субъекту терапевтически эффективного количества одного или более вторичных средств, которые повышают уровень или активность одного или более DN-защитных факторов. Иллюстративные DN-защитные факторы включают без ограничения SOD1-супероксиддисмутазу; TPI1-изоформу 2 триозофосфатизомерaзы; SORD-сорбитолдегидрогеназу; ALDOA-альдолазу A, фруктозобисфосфат; GAPDH-глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу; PKM-изоферменты M1/M2 пируваткиназы; ENO1-альфа-енолазу; FGB-бета-цепь фибриногена; SELENBP1-селенсвязывающий белок 1; PEBP1-фосфатидилэтаноламинсвязывающий белок 1; CRYL1-гомолог лямбда-кристаллина (патент США № 9921221, который включен посредством ссылки во всей своей полноте). Вторичное средство может повышать уровень или активность защитного фактора или снижать уровень или активность фактора риска на по меньшей мере 50%, 100% (1-кратно), 1½-кратно, 2-кратно, 3-кратно, 4-кратно, 5-кратно, 10-кратно, 15-кратно, 20-кратно или больше. В конкретных вариантах осуществления предусмотрен способ, включающий приведение уровня или активности защитного фактора практически до его уровня или активности у субъекта, который защищен от развития микрососудистого осложнения. «Практически в пределах его уровня» относится к значению в пределах менее 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 100% от контрольного значения. Вторичное средство может представлять собой малую молекулу, белок, предусматривающий защитный фактор или его биологически активный вариант (например, фрагмент), или нуклеиновую кислоту, кодирующую белок, предусматривающий защитный фактор или его биологически активный вариант (например, фрагмент). Биологически активные варианты белков, представляющих собой защитные факторы, также включают полноразмерные незрелые и зрелые формы или их фрагменты, содержащие аминокислотную последовательность, которая отличается от встречающейся в природе последовательности или ее фрагмента на не более 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50 или 100 аминокислотных делеций, добавлений или замещений, таких как консервативные аминокислотные замещения. Биологически активные варианты белков, представляющих собой DN-защитные факторы, могут также включать варианты, которые на по меньшей мере 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 98% или 99% идентичны полноразмерному зрелому белку или белку-предшественнику PEBP1 человека (или другому биомаркеру, идентифицированному в данном описании) или его фрагменту.

В некоторых вариантах осуществления предложенный способ дополнительно включает отбор субъекта для лечения. Например, субъект может быть отобран, если у субъекта имеется DN или он подвержен риску ее развития, например, это субъект с диабетом, например диабетом 1 типа или 2 типа, или субъект, предрасположенный к диабету, например, у которого имеется метаболический синдром, инсулинорезистентность, гипергликемия, гиперлипидемия, или субъект с избыточной массой или ожирением, например имеющий BMI≥25. В некоторых случаях субъект может быть отобран, если у субъекта имеется диабет 1 типа или 2 типа или он подвержен риску их развития. В некоторых случаях субъект может быть отобран, если субъект принимает или будет принимать инсулин, например для лечения диабета.

Сердечно-сосудистое заболевание представляет собой хроническое воспалительное состояние. Повышенное потребление глюкозы и гликолитический поток способствуют образованию активных форм кислорода в митохондриях. ROS способствует димеризации PKM2 и облегчает ее ядерную транслокацию. Ядерная PKM2 функционирует как протеинкиназа и усиливает продуцирование IL-6 и IL-1β. Это приводит к системному воспалению и воспалению тканей. Было обнаружено, что ослабление гликолиза и усиление тетрамеризации PKM2 исправляет провоспалительный фенотип макрофагов, вызывающих заболевание коронарной артерии (CAD) (J. Exp. Med. 2016, 213(3): 337-354).

В конкретных вариантах осуществления, предоставленных в данном документе, предлагается способ лечения сердечно-сосудистого заболевания у субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции на их основе. Соединения или композиция, описанные в данном документе, могут снижать уровень глюкозы в плазме крови у субъекта. Термин «сердечно-сосудистое заболевание», определенный в данной заявке, включает без ограничения гипертензию, застойную сердечную недостаточность, диабет, гломерулосклероз, хроническую почечную недостаточность, ишемическую болезнь сердца, стенокардию, инфаркт миокарда, инсульт, сосудистый рестеноз, эндотелиальную дисфункцию, нарушенную податливость сосудов и застойную сердечную недостаточность. В конкретных вариантах осуществления сердечно-сосудистое заболевание представляет собой заболевание коронарной артерии (CAD). В конкретных вариантах осуществления соединение или композицию, описанные в данном документе, можно использовать для снижения количества активных форм кислорода (ROS) в митохондриях у субъекта.

В конкретных вариантах осуществления, предоставленных в данном документе, предлагается способ лечения аутоиммунного заболевания у субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции на их основе. Было обнаружено, что активация PKM2 ослабляла LPS-индуцированный провоспалительный фенотип макрофага M1 с обеспечением при этом признаков, типичных для макрофага M2. Кроме того, было обнаружено, что активация PKM2 за счет TEPP-46 in vivo ингибировала продуцирование LPS и IL-1β, и в то же время усиливала продуцирование IL-10(Cell Metab. 2015, 21(1): 65-80). Соответственно, активаторы PKM2 могут быть применимы для лечения аутоиммунных заболеваний посредством обеспечения продуцирования IL-1β и/или IL-10.

Термин «аутоиммунное заболевание» относится к заболеванию, возникающему вследствие ненадлежащего иммунного ответа организма субъекта на вещества и ткани, обычно присутствующие в организме. Иллюстративные аутоиммунные заболевания включают без ограничения гломерулонефрит, синдром Гудпасчера, некротический васкулит, лимфаденит, узелковый периартериит, системную красную волчанку, ревматоидный артрит, псориатический артрит, системную красную волчанку, псориаз, неспецифический язвенный колит, системный склероз, дерматомиозит/полимиозит, синдром антифосфолипидных антител, склеродермию, пузырчатку обыкновенную, ANCA-ассоциированный васкулит (например, гранулематоз Вегенера, микроскопический полиангиит), увеит, синдром Шегрена, болезнь Крона, синдром Рейтера, анкилозирующий спондилоартрит, болезнь Лайма, синдром Гийена-Барре, тиреоидит Хашимото и кардиомиопатию.

Композиции и пути введения

Композиции, установленные в данном документе, включают соединения, установленные в данном документе (например, соединение, описанное в данном документе), а также дополнительные терапевтические средства, в случае их наличия, в количествах, эффективных для обеспечения модуляции заболевания или симптомов заболевания, в том числе описываемых в данном документе.

Термин «фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество» относится к носителю или вспомогательному веществу, которое можно вводить пациенту, вместе с соединением, предусмотренным в данном документе, и которое не подавляет его фармакологическую активность и является нетоксичным при введении в дозах, достаточных для доставки терапевтического количества соединения.

Фармацевтически приемлемые носители, вспомогательные вещества и среды-носители, которые можно применять в фармацевтических композициях, предусмотренных в данном документе, включают без ограничения ионообменные смолы, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, самоэмульгирующиеся системы доставки лекарственного средства (SEDDS), такие как d-α-токоферол-полиэтиленгликоль 1000-сукцинат, поверхностно-активные вещества, применяемые в фармацевтических лекарственных формах, такие как виды Tween или другие аналогичные полимерные матрицы для доставки, сывороточные белки, такие как человеческий сывороточный альбумин, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота, сорбат калия, смеси неполных глицеридов насыщенных жирных кислот растительного происхождения, воду, соли или электролиты, такие как протаминсульфат, двузамещенный фосфорнокислый натрий, фосфорнокислый калий, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный диоксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленгликоль, карбоксиметилцеллюлозу натрия, полиакрилаты, воски, блок-сополимеры полиэтилена и полиоксипропилена, полиэтиленгликоль и ланолин. Циклодекстрины, такие как α-, β- и γ-циклодекстрин, или химически модифицированные производные, такие как гидроксиалкилциклодекстрины, в том числе 2- и 3-гидроксипропил-β-циклодекстрины, или другие солюбилизированные производные также можно успешно применять для улучшения доставки соединений формул, описанных в данном документе.

Фармацевтические композиции, предусмотренные в данном документе, можно вводить перорально, парентерально, путем ингаляционного распыления, путем местного нанесения, ректально, назально, буккально, вагинально или посредством имплантированного депо, предпочтительно, путем перорального введения или введения инъекцией. Фармацевтические композиции, предусмотренные в данном документе, могут содержать любые традиционные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, вспомогательные вещества или среды-носители. В некоторых случаях pH состава можно регулировать с помощью фармацевтически приемлемых кислот, оснований или буферов для улучшения стабильности составленного соединения или его формы доставки. Применяемый в данном документе термин «парентеральный» включает методики подкожной, внутрикожной, внутривенной, внутримышечной, интраартикулярной, внутриартериальной, внутрисуставной, внутригрудинной, интратекальной, внутриочаговой и внутричерепной инъекции или инфузии.

Фармацевтические композиции, предусмотренные в данном документе, можно вводить перорально в любой подходящей для перорального введения лекарственной форме, в том числе без ограничения в капсулах, таблетках, эмульсиях и водных суспензиях, дисперсиях и растворах. В случае таблеток для перорального применения обычно применяемые носители включают лактозу и кукурузный крахмал. Также, как правило, добавляют смазывающие средства, такие как стеарат магния. Для перорального введения в форме капсулы применимые разбавители включают лактозу и сухой кукурузный крахмал. Если водные суспензии и/или эмульсии вводят перорально, активный ингредиент может быть супендирован или растворен в масляной фазе, объединенной с эмульгирующими и/или суспендирующими средствами. При необходимости можно добавлять определенные подслащивающие, и/или ароматизирующие, и/или красящие средства.

Если композиции, предусмотренные в данном документе, содержат комбинацию соединения формул, описанных в данном документе, и одного или нескольких дополнительных терапевтических или профилактических средств, как соединение, так и дополнительное средство должны присутствовать при уровнях дозировки от приблизительно 1 до 100%, и более предпочтительно от приблизительно 5 до 95% дозировки, обычно вводимой при схеме монотерапии. Дополнительные средства можно вводить отдельно, как часть схемы с несколькими дозами, от соединений, предусмотренных в данном документе. Альтернативно, эти средства могут составлять часть единой лекарственной формы, смешанные вместе с соединениями, предусмотренными в данном документе, в единой композиции.

Соединения, описанные в данном документе, например, можно вводить путем инъекции, внутривенно, внутриартериально, субдермально, внутрибрюшинно, внутримышечно или подкожно; или перорально, трансбуккально, назально, трансмукозально, местно, в виде офтальмологического препарата или путем ингаляции, с дозировкой в диапазоне от приблизительно 0,5 до приблизительно 100 мг/кг массы тела, альтернативно, с дозировками от 1 мг до 1000 мг/доза, каждые 4-120 часов или согласно требованиям для конкретного лекарственного средства. Способы в данном документе подразумевают введение эффективного количества соединения или композиции соединения для достижения требуемого или заявленного эффекта. Как правило, фармацевтические композиции, предусмотренные в данном документе, будут вводиться от приблизительно 1 до приблизительно 6 раз в день, или, альтернативно, в виде длительной инфузии. Такое введение можно применять в качестве продолжительной или экстренной терапии. Количество активного ингредиента, который можно комбинировать с материалами носителя для получения одиночной лекарственной формы, будет варьировать в зависимости от реципиента, получающего лечение, и конкретного способа введения. Типичный препарат будет содержать от приблизительно 5% до приблизительно 95% активного соединения (вес./вес.). Альтернативно такие препараты содержат от приблизительно 20% до приблизительно 80% активного соединения.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Перечень сокращений

Cокр.	Полное название	Cокр.	Полное название
безводн.	безводный	водн.	водный
мин.	минута(-ы)	насыщ.	насыщенный
мл	миллилитр	ч.	часы
ммоль	миллимоль(-и)	моль	моль(-и)
MS	масс-спектрометрия	ЯМР	ядерный магнитный резонанс
TLC	тонкослойная хроматография	HPLC	высокоэффективная жидкостная хроматография
LCMS	жидкостная хроматография - масс-спектрометрия	CMBP	цианометилентрибутилфосфоран
DAST	диэтиламиносератрифторид	CHCl3	хлороформ
DCM	дихлорметан	DMF	диметилформамид
Et2O	диэтиловый эфир	EtOH	этиловый спирт
EtOAc	этилацетат	MeOH	метиловый спирт
MeCN	ацетонитрил	PE	петролейный эфир
THF	тетрагидрофуран	DMSO	диметилсульфоксид
AcOH	уксусная кислота	HCl	хлористоводородная кислота
H2SO4	серная кислота	NH4Cl	хлорид аммония
KOH	гидроксид калия	NaOH	гидроксид натрия
K2CO3	карбонат калия	Na2CO3	карбонат натрия
TFA	трифторуксусная кислота	Na2SO4	сульфат натрия
NaBH4	борогидрид натрия	NaHCO3	бикарбонат натрия
LiHMDS	гексаметилдисилиламид лития	NaBH4	борогидрид натрия
TEA	триэтиламин	Py или Pyr	пиридин
DMAP	4-(диметиламино)пиридин	DIPEA	N, N-диизопропилэтиламин
BINAP	2,2’бис(дифенилфосфанил) -1,1’-бинафтил	dppf	1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен
PEP	фосфо(енол)пировиноградная кислота	LDH	лактатдегидрогеназа
DTT	DL-дитиотреитол	BSA	бычий сывороточный альбумин
NADH	β-никотинамидадениндинуклеотид, восстановленный	SEM	2-(триметилсилил)этоксиметил
p-TsOH	п-толуолсульфоновая кислота	DCE	1,2-дихлорэтан
MTBE	метил-трет-бутиловый эфир

Общая экспериментальная часть

В следующих примерах химические реагенты приобретали у коммерческих поставщиков (таких как Alfa, Acros, Sigma Aldrich, TCI и Shanghai Chemical Reagent Company) и применяли без дополнительной очистки. Флэш-хроматографию проводили на Ez Purifier III через колонку с частицами силикагеля 200-300 меш. Планшеты для аналитической и препаративной тонкослойной хроматографии (TLC) представляли собой HSGF 254 (толщина 0,15-0,2 мм, Shanghai Anbang Company, Китай). Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) регистрировали с применением Brucker AMX-300 или AMX-400 ЯМР (Brucker, Швейцария). Химические сдвиги приведены в частях на миллион (ppm, δ) etero(ESI) с использованием масс-спектрометра Waters LCT TOF (Waters, США). HPLC-хроматограммы регистрировали на Agilent 1200 Liquid Chromatography (Agilent, США, колонка: Ultimate 4,6 м × 50 мм, 5 М, подвижная фаза A: 0,1% муравьиная кислота в воде; подвижная фаза B: ацетонитрил). Реакции под воздействием микроволнового излучения проводили в микроволновом синтезаторе Initiator 2.5 (Biotage, Швеция).

Условия HPLC, используемые в экспериментах, описанных в данном документе, являются следующими.

Способ 1

Прибор: Shimadzu LC-2010AHT.

Колонка: YMC-Triart C18, 50 × 4,6 мм, 5 мкм.

Подвижная фаза: растворитель A: H₂O/CH₃OH/TFA=90/10/0,1, растворитель B: H₂O/CH₃OH/TFA=90/10/0,1.

Скорость потока: 2,5 мл/мин.

Температура колонки: 35°C.

Длина волны: 220 нм/254 нм.

Способ 2

Прибор: Shimadzu LC-2010AHT.

Колонка: YMC-Triart C18, 50 × 4,6 мм, 5 мкм.

Подвижная фаза: растворитель A: H₂O/CH₃OH/TFA=90/10/0,1, растворитель B: H₂O/CH₃OH/TFA=90/10/0,1.

Скорость потока: 2,5 мл/мин.

Температура колонки: 35°C.

Длина волны: 220 нм/254 нм.

Условия препаративной HPLC, используемые в экспериментах, описанных в данном документе, являются следующими.

Прибор: Waters 2545B/2767.

Колонка: YMC-Triart C18, 50 × 4,6 мм, 5 мкм.

Подвижная фаза: растворитель A: H₂O (0,1% FA), растворитель B: CH₃OH или CH₃CN.

Скорость потока: 20 мл/мин.

Температура колонки: 35°C.

Длина волны: 220 нм/254 нм.

Пример 1.Получение соединений E1-vii по схеме E1

где R^e1 представляет собой необязательно замещенный алкил (например, C_1-3алкил); Q определен в любом из вариантов осуществления настоящего изобретения с первого по двадцать шестой; Q’ представляет собой дополнительно функционализированный Q, и X представляет собой уходящую группу (например, галоген, такой как Br или I; OMs или OTs). Тиазол-5-карбальдегид E1-i подвергается конденсации с 2-азидоацетатом с получением соединения формулы E1-ii. Соединение E1-ii подвергается циклизации в нагретом o-ксилоле с получением бициклической системы E1-iii с последующим метилированием аминогруппы и последующим окислением с получением соединения E1-iv. Соединение E1-iv вступает в реакцию с гидразином с последующей циклизацией с получением соединения E1-v. Соединение E1-v может вступать в реакцию с нуклеофилом, таким как X-CH₂-Q, с получением E1-vi, который может быть дополнительно функционализирован до E1-vii, содержащего Q’.

Пример 1A. Синтез 6-(3-метоксибензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. Этил-(Z)-2-азидо-3-(2-метилтиазол-5-ил)акрилат. К раствору NaOEt (803 мг, 11,79 ммоль) в EtOH (10 мл) от приблизительно -10°C до приблизительно -5°C добавляли по каплям раствор 2-метилтиазол-5-карбальдегида (500 мг, 3,93 ммоль) и этил-2-азидоацетата (1,53 г, 11,79 ммоль) в безводном EtOH (3 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение приблизительно 1 ч, при этом температуру поддерживали ниже 0°C, затем нагревали до к.т. и перемешивали в течение еще 2 ч. Полученную смесь выливали в насыщенный водный NH₄Cl (50 мл) при 0°C и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением необходимого продукта (500 мг), который непосредственно применяли на следующей стадии без какой-либо очистки. LCMS: масса/заряд 239 (M+H)⁺.

Стадия B. Этил-2-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат. Смесь этил-(Z)-2-азидо-3-(2-метилтиазол-5-ил)акрилата (500 мг, 2,1 ммоль) в o-ксилоле (5 мл) перемешивали при 140°C в течение 2 ч, затем охлаждали до к.т., а затем непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: пентан/EtOAc=6/1 с получением необходимого продукта (220 мг, выход 49,8%). LCMS: масса/заряд 211 (M+H)⁺.

Стадия C. Этил-2,4-диметил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат. К раствору этил-2-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (160 мг, 0,76 ммоль) в DMF (3 мл) при 0°C добавляли NaH (36,5 мг, 1,52 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 0,5 ч с последующим добавлением CH₃I (47 мкл, 0,76 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 0,5 ч, затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl при 0°C и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: пентан/этилацетат=6/1) с получением необходимого продукта (124 мг, выход 72,6%). LCMS: масса/заряд 225 (M+H)⁺.

Стадия D. Этил-6-формил-2,4-диметил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат. К смеси этил-2,4-диметил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (100 мг, 0,446 ммоль) в DMF (1 мл) ) при 0°C добавляли POCl₃ (122,5 мкл, 1,338 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 2 ч, затем выливали в насыщенный водный NaHCO₃ при 0°C и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: пентан/этилацетат=5/1) с получением необходимого продукта (57 мг, выход 50,7%). LCMS: масса/заряд 253 (M+H)⁺.

Стадия E. 2,4-Диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К смеси этил-6-формил-2,4-диметил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (57 мг, 0,226 ммоль) в 2-этоксиэтаноле (2 мл) добавляли N₂H₄.H₂O (53,7 мкл, 1,130 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 1 ч, затем выливали в H₂O и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: пентан/этилацетат=5/1) с получением необходимого продукта (49 мг, выход 98,4%). LCMS: масса/заряд 221 (M+H)⁺.

Стадия F. 6-(3-Метоксибензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К смеси 2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (49 мг, 0,223 ммоль) в DMF (1 мл) при 0°C добавляли t-BuOK (50,8 мг, 0,454 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 0,5 ч с последующим добавлением 1-(хлорметил)-3-метоксибензола (34,9 мг, 0,223 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч, затем выливали в насыщенный водный раствор NH₄Cl при 0°C и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: пентан/этилацетат=3/1) с получением необходимого продукта. LCMS: масса/заряд 341 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,56 (s, 1H), 7,23 (t, 1H), 6,92-6,72 (m, 3H), 5,32 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E1-4	6-(4-Метоксибензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: 341 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,54 (s, 1H), 7,29 (d, 2H), 6,88 (d, 2H), 5,27 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-5	6-(4-Фторбензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 329 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,56 (s, 1H), 7,38 (dd, 2H), 7,15 (t, 2H), 5,33 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-6	6-(3-Фторбензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 329 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,58 (s, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,12 (m, 3H), 5,37 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-7	6-(2-Фторбензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 329 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,58 (s, 1H), 7,43-7,30 (m, 1H), 7,25-7,06 (m, 3H), 5,41 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).
E1-8	Этил-3-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензоат	LCMS: масса/заряд 383 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO- d6) δ 8,59 (s, 1H), 8,00-7,83 (m, 2H), 7,54 (dd, 1H), 7,48 (m, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,48-4,16 (m, 5H), 2,85 (s, 3H), 1,30 (t, 3H).
E1-9	3-((2,4-Диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензойная кислота	LCMS: масса/заряд 355 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,60 (s, 1H), 8,0-7,87 (m, 2H), 755-7,40 (m, 2H), 5,40 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-10	2,4-Диметил-6-(3-нитробензил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 356 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,20 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,44 (t, 1H), 5,46 (S, 2H), 4,32 (s, 3H), 2,80 (s, 3H).
E1-11	2,4-Диметил-6-(4-нитробензил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 356 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,62 (s, 1H), 8,20 (d, 2H), 7,55 (d, 2H), 5,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).
E1-12	6-(2-Метоксибензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 341 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,58 (s, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,04 (d, 1H), 6,83 (d, 1H), 6,74 (d, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 2,87 (s, 3H).
E1-13	6-(3-Ацетилбензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 353 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,59 (s, 1H), 7,89 (d, 2H), 7,56 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 5,43 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,85 (s, 3H), 2,56 (s, 3H).
E1-14	2,4-Диметил-6-((1-метил-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 365 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,56 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,38-7,24 (m, 1H), 6,98 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,24 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).
E1-15	6-((1H-Индазол-5-ил)метил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 351 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,02 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,40 (d, 1H), 5,44 (s, 2H), 4,28 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).
E1-16	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2,4-диметил -4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 351 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,11 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,33-7,22 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-17	6-((1H-Индазол-7-ил)метил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 351 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,14 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,75-7,60 (m, 1H), 7,11-6,92 (m, 2H), 5,68 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-18	6-((1H-Индазол-6-ил)метил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 351 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 12,96 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,13 (d, 1H), 5,48 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).
E1-19	6-((1H-Бензо[d][1,2,3]триазол-6-ил)метил)-2,4 -диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 352 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) 16,0-15,55 (m, 1H), δ 8,59 (s, 1H), 8,08-7,31 (m, 3H), 5,53 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-20	6-((1H-Бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 351 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 12,37 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,54 (m, 2H), 7,23 (s, 1H), 5,45 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,87 (s, 3H).
E1-21	6-((1H-Индол-6-ил)метил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 350 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 11,01 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,30 (t, 1H), 7,03 (d, 1H), 6,37 (s, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,84 (s, 3H).
E1-22	2,4-Диметил-6-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 367 (M+H)+. 1H ЯМР (DMSO-d 6 ) δ: 10,57 (s, 1H), 10,52 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 6,94-6,95 (m, 2H), 6,85-6,87 (m, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-23	2,4-Диметил-6-((6-метилпиридин-2-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: 326 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,58 (s, 1H), 7,60 (t, 1H), 7,13 (d, 1H), 6,83 (d, 1H), 5,40 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,86 (s, 3H), 2,44 (s, 3H).
E1-24	6-((6-Метоксипиридин-2-ил)метил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: 342 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,59 (s, 1H), 7,65-7,58 (m, 1H), 6,69 (d, 1H), 6,61 (d, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).
E1-25	6-((6-Фторпиридин-2-ил)метил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: 330 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,58 (s, 1H), 7,96-7,88 (m, 1H), 7,13 (dd, 1H), 7,07 (dd, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).
E1-26	2,8-Диметил-6-(1H-пиразол-3-илметил)-6,8-дигидро-3-тиа-1,5,6,8-тетраазациклопента[a]инден-7-он	LC-MS: масса/заряд 301 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 12,70 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 6,18 (s, 1H), 5,38 (s, 2H), 4,32 (s, 3H), 2,91 (s, 3H).
E1-27	6-((1H-Пиразол-4-ил)метил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 301 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,59 (s, 1H), 7,70 (s, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,32 (s, 3H), 2,91 (s, 3H).
E1-28	6-((1H-Имидазол-4-ил)метил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 301 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ): 12,08 (brs, 1H), δ 8,51 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-29	6-(2-(2-Гидроксиэтокси)этил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 309(M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,54 (s, 1H), 4,32 (t, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,79 (t, 2H), 3,45 (s, 4H), 2,86 (s, 3H).
E1-30	6-(3-Гидроксипропил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 279 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,52 (s, 1H), 4,52 (t, 1H), 4,26 (s, 3H), 4,21 (t, 2H), 3,46 (dd, 2H), 2,85 (s, 3H), 1,92-1,82 (m, 2H).
E1-31	Этил-2-(2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)ацетат	LCMS: 307 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,63 (s, 1H), 5,00 (s, 2H), 4,40-4,12 (m, 5H), 2,92 (s, 3H), 1,35-1,21 (m, 3H).

Пример 1B. Синтез 1-(3-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)фенил)мочевины

Стадия A. 2,4-Диметил-6-(3-нитробензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,45 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли 1-(бромметил)-3-нитробензол (194 мг, 0,9 ммоль) и t-BuOK (76 мг, 0,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч, затем выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (100 мг, выход 62,5%). LCMS: масса/заряд 356 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-(3-Аминобензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2,4-диметил-6-(3-нитробензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,28 ммоль) в MeOH/THF (10 мл/10 мл) в атмосфере N₂ добавляли Pd/C (10%, 50 мг). Реакционную смесь перемешивали при 40°C в атмосфере H₂ в течение 12 ч, затем фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением требуемого соединения (80 мг, выход 88%). LCMS: масса/заряд 326 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,54 (s, 1H), 6,94 (t, 1H), 6,57-6,32 (m, 3H), 5,19 (s, 2H), 5,04 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).

Стадия C. 1-(3-((2,4-Диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)фенил)мочевина. К смеси 6-(3-аминобензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (65 мг, 0,2 ммоль) в HOAc (2 мл) добавляли KOCN (160 мг, в HOAc:H₂O=2 мл:4 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч., затем выливали в насыщенный водный NaHCO₃ и экстрагировали с помощью EtOAc. Органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением требуемого соединения (4 мг, выход 5%). LCMS: масса/заряд 369 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,60-8,50 (m, 2H), 7,39 (d, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,16 (t, 1H), 6,85 (d, 1H), 5,78 (s, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).

Пример 1C. Синтез 2,4-диметил-6-(3-(метиламино)бензил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. трет-Бутил-(3-((2,4-диметил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)фенил)карбамат. К смеси 6-(3-аминобензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (90 мг, 0,28 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) добавляли Boc₂O (73 мг, 0,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=3/1) с получением необходимого продукта (90 мг, выход 76,3%). LCMS: масса/заряд 426 (M+H)⁺.

Стадия B. трет-Бутил-(3-((2,4-диметил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)фенил)(метил)карбамат. К смеси трет-бутил-(3-((2,4-диметил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)фенил)карбамата (90 мг, 0,21 ммоль) в безводном DMF (5 мл) при 0°C добавляли NaH (13 мг, 0,32 ммоль, 60 вес. %). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. с последующим добавлением по каплям MeI. Полученную смесь перемешивали при 0-5°C в течение 3 ч, затем выливали в холодный насыщенный водный NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (70 мг, выход 75,2%). LCMS: масса/заряд 440 (M+H)⁺.

Стадия C. 2,4-Диметил-6-(3-(метиламино)бензил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К смеси трет-бутил-(3-((2,4-диметил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)фенил)(метил)карбамата (90 мг, 0,21 ммоль) в DCM (3 мл) добавляли TFA (1 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (25 мг, выход 46,4%). LCMS: масса/заряд 340 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,54 (s, 1H), 7,12 (t, 1H), 6,66-6,61 (m, 3H), 5,26 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,85 (s, 3H), 2,68 (d, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующего соединения с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E1-37	6-(4-Аминобензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 326 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,52 (s, 1H), 7,04 (d, 2H), 6,49 (d, 2H), 5,15 (s, 2H), 5,01 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
E1-38	2,4-Диметил-6-(4-(метиламино) бензил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 340 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,51 (s, 1H), 7,11 (d, 2H), 6,46 (d, 2H), 5,58 (d, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 2,84 (s, 3H), 2,62 (d, 3H).

Пример 1D. Синтез 6-(3-гидроксибензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло-[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

К смеси 6-(3-метоксибензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (53 мг, 0,16 ммоль) в DCM (4 мл) при 0°C добавляли BBr₃ (195 мг, 0,778 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем гасили с помощью MeOH. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (15,6 мг, выход 30,70%). LCMS: масса/заряд 327 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 9,34 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 7,12 (t, 1H), 6,78-6,56 (m, 3H), 5,26 (s, 2H), 4,278 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E1-40	6-(2-Гидроксибензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 327(M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 9,67 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 7,07 (d, 1H), 6,85-6,60 (m, 3H), 5,32 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,87 (s, 3H).
E1-41	6-(4-Гидроксибензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: 327(M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 9,36 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,17 (d, 2H), 6,70 (d, 2H), 5,22 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).

Пример 1E. Синтез 6-[3-(1-аминоэтил)бензил]-2,8-диметил-6,8-дигидро-3-тиа-1,5,6,8-тетраазациклопента[a]инден-7-она

К перемешиваемой смеси 6-(3-ацетилбензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,142 ммоль) в MeOH (4 мл) добавляли NH₄OAc (109 мг, 1,42 ммоль) и NaBH₃CN (18 мг, 0,284 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 35°C в течение 13 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (20 мг, выход 40,0%). LC-MS: масса/заряд 354 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,48 (s, 1H), 7,25 (dd, 3H), 7,12 (d, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,17 (s, 3H), 4,15-4,06 (m, 1H), 2,76 (s, 3H), 1,27 (d, 3H).

Пример 1F. Синтез 6-(3-(аминометил)бензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. 2-(3-(Бромметил)бензил)изоиндолин-1,3-дион. К перемешиваемой смеси 1,3-бис(бромметил)бензола (1,3 г, 4,96 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли калий-1,3-диоксоизоиндолин-2-ид (0,918 г, 4,96 ммоль) и K₂CO₃ (1,03 г, 7,44 моль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl (30 мл) и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=30/1) с получением необходимого продукта (1,1 г, выход 67,4%). LC-MS: масса/заряд 330 (M+H)⁺.

Стадия B. 2-(3-((2,4-Диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензил)изоиндолин-1,3-дион. К перемешиваемой смеси 2-(3-(бромметил)бензил)изоиндолин-1,3-диона (100 мг, 0,303 ммоль) в DMF (4 мл) добавляли 2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он (66,7 мг, 0,303 ммоль) и K₂CO₃ (83,6 мг, 0,606 моль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl (15 мл) и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/1) с получением необходимого продукта (80 мг, выход 56,3%). LC-MS: масса/заряд 470 (M+H)⁺.

Стадия C. 6-(3-(Аминометил)бензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К перемешиваемой смеси 2-(3-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензил)изоиндолин-1,3-диона (80 мг, 0,17 ммоль) в EtOH (5 мл) добавляли N₂H₄.H₂O (44 мг, 98 вес. %, 0,85 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 2 ч, затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl (15 мл) и экстрагировали с помощью DCM дважды. Органические слои промывали солевым раствором дважды, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (30 мг, выход 52,1%). LC-MS: масса/заряд 324 (M+H-NH₃)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,57 (s, 1H), 7,32 (m, 3H), 7,23 (d, 1H), 5,35 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,84 (s, 2H), 2,86 (s, 3H).

Пример 1G. Синтез 6-(4-(гидроксиметил)бензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. Метил-4-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензоат. К смеси 2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,4 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли K₂CO₃ (181 мг, 1,3 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 30 мин с последующим добавлением метил-4-(бромметил)бензоата (100 мг, 0,4 ммоль) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 18 ч, затем выливали в ледяную воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=от 50/1 до 10/1) с получением необходимого продукта (120 мг, 74,61%). LCMS: масса/заряд 369 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-(4-(гидроксиметил)бензил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 4-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензоата (100 мг, 0,3 ммоль) в THF (20 мл) при 0°C добавляли LAH (30 мг, 0,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в атмосфере N₂ в течение 30 мин, затем гасили с помощью NaSO₄-10H₂O и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (3 мг, 3,25%). LCMS: масса/заряд 341 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,12 (s, 1H), 7,36 (d, 2H), 7,25 (d, 2H), 5,37 (s, 2H), 4,59 (s, 2H), 4,31 (s, 3H), 2,80 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E1-45	6-(3-(Гидроксиметил)бензил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 341 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,22 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,40-7,29 (m, 3H), 5,47 (s, 2H), 4,69 (s, 2H), 4,39 (s, 3H), 2,90 (s, 3H).
E1-46	6-(2-Гидроксиэтил)-2,4-диметил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 265(M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,52 (s, 1H), 4,80 (t, 1H), 4,45-4,15 (m, 5H), 3,74 (q, 2H), 2,85 (s, 3H).

Пример 1H. Синтез 6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-2,4-диметил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A: 6-((6-((2,4-диметоксибензил)амино)пиридин-2-ил)метил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. Смесь 6-((6-фторпиридин-2-ил)метил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (40 мг, 0,12 ммоль) и (2,4-диметоксифенил)метанамина (102 мг, 0,6 ммоль) в NMP (1 мл) перемешивали при 140°C до завершения реакции. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (20 мг, выход 34,5%). LC-MS: 477(M+H)⁺.

Стадия B: 6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. Смесь 6-((6-((2,4-диметоксибензил)амино)пиридин-2-ил)метил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (20 мг, 0,042 ммоль) и TFA (45 мг, 0,42 ммоль) в DCM (1 мл) перемешивали при к.т. до завершения реакции. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (20 мг, выход 34,5%). LC-MS: 327(M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,55 (s, 1H), 7,26 (t, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,09 (d, 1H), 5,90 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).

Пример 1I. Синтез 6-(гидроксиметил)-2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Смесь 2,4-диметил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 0,14 ммоль), формальдегида (1,5 мл, 40 вес. %) и NH₃ (0,75 мл, 33 вес. %) в диоксане (2 мл) перемешивали при 50°C в течение 1 ч., затем выливали в воду и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (4,40 мг, выход 17%). LCMS: 251 (M+H). ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,55 (s, 1H), 6,63 (t, 1H), 5,44 (d, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).

Пример 2. Получение соединений формулы E2-vii по схеме E2

где Xa представляет собой уходящую группу (например, галоген, такой как Br или I; OMs или OTs); X_b представляет собой галоген (например, Cl, Br или I); n1 равняется 0 или 1; M представляет собой водород (например, для реакции Хека) или органический комплекс металла (например, борорганический комплекс, такой как комплекс с бороновой кислотой или пинаколато-борный комплекс; оловоорганический комплекс, такой как -Sn(Bu ^t )₃; цинкорганический комплекс, такой как -Zn(галоген)); при этом Q и R² определены в любом из вариантов осуществления настоящего изобретения с первого по двадцать шестой. В некоторых вариантах осуществления каждый из Q и R² независимо представляет собой необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный карбоцикл или необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный алкил. Аналогично синтезу соединений формулы E1-v в примере 1 соединение E2-iv можно синтезировать из тиазолальдегида E2-i с несколькими модификациями (например, с помощью реакции соединения E2-ii с MsCl с последующим элиминированием с получением соединения E2-iii; при этом может быть образована трициклическая система с помощью кат. AcOH в 2-метоксиэтаноле). Замещение и галогенирование (например, с помощью CBr₄ или Cl₃CCCl₃ в присутствии LiHMDS; или с помощью 1,2,3,4,5-пентафтор-6-йодбензола в присутствии t-BuOK и толуола) соединения E2-iv обеспечивают получение соединения E2-vi. Реакции сочетания соединения E2-vi с металлорганическим соединением в присутствии катализатора обеспечивают получение соединения E2-vii или E2-viii. Прямая нуклеофильная реакция E2-vi с нуклеофилом (Nu) может обеспечить образование соединения E2-ix.

Пример 2A. Синтез 2-(4-фторбензил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Этил-2-азидо-3-гидрокси-3-(тиазол-5-ил)пропаноат. Натрий (12,2 г, 0,531 моль) медленно добавляли при к.т. к перемешиваемому раствору сухого EtOH (300 мл). Реакционную смесь затем охлаждали до -20°C с последующим добавлением по каплям раствора этил-2-азидоацетата (68,5 г, 0,531 моль) и тиазол-5-карбальдегида (20,0 г, 0,177 моль) в безводном EtOH (100 мл) при сохранении температуры от -20°C до -15°C. После добавления реакционную смесь перемешивали при -20°C в течение дополнительного 1 ч и затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl (1 л). Полученную смесь насыщали с помощью NaCl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с применением (элюент: PE/EtOAc=6/1-5/1-1/1) с получением необходимого продукта (34 г) в виде бледного вещества. LCMS: масса/заряд= 243 (M+H)⁺.

Стадия B. Этил-(Z)-2-азидо-3-(тиазол-5-ил)акрилат. К перемешиваемой смеси этил-2-азидо-3-гидрокси-3-(тиазол-5-ил)пропаноата (103 г, 0,426 моль) в сухом DCM (1,5 л) при -35°C добавляли MsCl (146 г, 1,28 моль) с последующим добавлением по каплям TEA (301 г, 2,98 моль) с сохранением температуры от -35°C до -30°C. После добавления реакционную смесь перемешивали при -30°C в течение еще 15 мин, затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl (1,5 л). Полученную смесь насыщали с помощью NaCl и экстрагировали с помощью DCM дважды. Объединенные органические слои промывали последовательно водным HCl (1 М) и солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с применением (элюент: PE/EtOAc=5/1) с получением необходимого продукта (82,0 г, выход 86,3%). LCMS: масса/заряд= 225 (M+H)⁺.

Стадии C-E для синтеза этил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата, этил-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата и этил-6-формил-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата были аналогичными процедурам в примере 1A.

Стадия F. Этил-(E)-6-(гидразонометил)-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат. К перемешиваемой смеси N₂H₄.H₂O (2,0 г, 98%, 40 ммоль) в 2-метоксиэтаноле (50 мл) при к.т. добавляли этил-6-формил-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат (4,8 г, 20 ммоль) с последующим добавлением 20 капель AcOH. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение приблизительно 30 мин до тех пор, пока смесь не становилась прозрачной. Полученную смесь выливали в воду (100 мл) с перемешиванием и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением необходимого продукта, который применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: масса/заряд = 253 (M+H)⁺.

Стадия G. 4-Метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К перемешиваемой суспензии этил-(E)-6-(гидразонометил)-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (4,8 г, 0,19 моль) в 2-метоксиэтаноле (50 мл) при к.т. добавляли AcOH (20 капель). Реакционную суспензию перемешивали при 105°C в течение 3 ч и затем фильтровали. Осадок на фильтре промывали водой и высушивали под высоким вакуумом с получением первой партии необходимого продукта. Фильтрат разбавляли водой и экстрагировали с помощью DCM дважды. Органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением второй партии необходимого продукта. Две объединенные партии необходимого продукта (2,5 г) непосредственно применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: масса/заряд= 207 (M+H)⁺. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,68 (s, 1H), 9,35 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 4,30 (s, 3H).

Стадия H. 6-(3-Метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К перемешиваемой смеси 4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (2 г, 10,0 ммоль) и K₂CO₃ (2,7 г, 20 ммоль) в DMF (15 мл) добавляли 1-(хлорметил)-3-метоксибензол (2,3 г, 15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 3 ч, затем выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/1) с получением необходимого продукта (2 г, выход 67%). LCMS: масса/заряд = 327 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 9,36 (s, 1H), 8,64 (s, 1H), 7,24 (t, 1H), 6,88-6,80 (m, 3H), 5,33 (s, 2H), 4,31 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).

Стадия I. 2-Йод-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К перемешиваемой смеси 6-(3-метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (1 г, 3 ммоль) и t-BuOK (688 мг, 6 ммоль) в толуоле (30 мл) при к.т. добавляли 1,2,3,4,5-пентафтор-6-йодбензол (3,6 г, 12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 135°C в течение 4 ч (масляную баню предварительно нагревали) и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=6/1) с получением необходимого продукта (1 г, выход 72%). LCMS: масса/заряд = 453 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,61 (s, 1H), 7,23 (t, 1H), 6,88-6,80 (m, 3H), 5,31 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).

Стадия J. Бромид (4-фторбензил)цинка(II). В 25 мл трехгорлую круглодонную колбу добавляли порошок Zn (1300 мг, 20 ммоль). Смесь дегазировали под высоким вакуумом и обеспечивали обратную продувку с помощью N₂ три раза. Сухой THF (15 мл), TMSCl (108 мг, 1 ммоль) и 1,2-дибромэтан (186 мг, 1 ммоль) добавляли с помощью шприца при комнатной температуре. Суспензию нагревали до 65°C в течение 30 мин, затем охлаждали до 0°C с последующим добавлением по каплям 1-(бромметил)-4-фторбензола (1,89 г, 10 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 1,5 ч. Раствор супернатанта непосредственно применяли на следующей стадии.

Стадия K. 2-(4-Фторбензил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. В трехгорлую круглодонную колбу объемом 25 мл добавляли 2-йод-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он (100 мг, 0,22 ммоль) и Pd(PPh₃)₄ (25,4 мг, 10 моль%). Колбу дегазировали под высоким вакуумом и обеспечивали обратную продувку с помощью N₂ три раза. Раствор супернатанта бромида (4-фторбензил)цинка(II) (6 мл) добавляли в колбу с помощью шприца. Полученную смесь перемешивали в атмосфере N₂ при 65°C в течение 0,5 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (6 мг). LCMS: масса/заряд = 435 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,53 (s, 1H), 7,75-7,50 (m, 1H), 7,47 (s, 2H), 7,23 (s, 3H), 6,84 (s, 2H), 5,31 (s, 2H), 4,52 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы для аминогруппы и удаление защитной группы. Примеры защитной группы для аминогруппы включают без ограничения SEM. Удаление защитной группы SEM можно проводить в TFA и DCM.

№ соединения	Структура	Характеристика
E2-3	6-(3-Метоксибензил)-4-метил-2-(4-метилбензил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 431 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,52 (s, 1H), 7,29 (d, 2H), 7,23 (d, 1H), 7,18 (d, 2H), 6,84 (s, 2H), 6,82 (s, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,46 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).
E2-4	6-(3-Метоксибензил)-4-метил-2-(4-(трифторметил)бензил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин	LC-MS: масса/заряд 485 [M+1]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,55 (s, 1H), 7,75 (d, 2H), 7,65 (d, 2H), 7,22 (t, 1H), 6,84 (s, 2H), 6,82 (s, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).
E2-5	4-((6-(3-Метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)бензонитрил	LC-MS: масса/заряд 442 [M+1]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,56 (s, 1H), 7,85 (s, 2H), 7,63 (s, 2H), 7,23 (s, 1H), 6,84 (s, 3H), 5,31 (s, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).
E2-6	2-(4-Хлорбензил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 451 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,54 (s, 1H), 7,44 (s, 4H), 7,22 (t, 1H), 6,84-6,82 (m, 3H), 5,31 (s, 2H), 4,53 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).
E2-7	2-(Циклогексилметил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 423 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,55 (s, 1H), 7,23 (t, 1H), 6,84-6,82 (m, 3H), 5,32 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,02 (d, 2H), 1,76-1,59 (m, 5H), 1,25-1,00 (m, 6H).
E2-8	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд= 417 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,12 (s, 1H), δ 12,72 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,96 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E2-9	2-((1H-Пиразол-3-ил)метил)-6-((2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 435 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 12,77 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,78-6,65 (m, 3H), 6,26 (s, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 4,19 (s, 4H).
E2-10	2-((1H-Пиразол-3-ил)метил)-6-(4-метокси бензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 407 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,94 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,31 (d, 2H), 6,91 (d, 2H), 6,29 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,30 (s, 3H), 3,75 (s, 3H).
E2-11	2-((1H-Пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(хинолин-2-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 428 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): δ 12,78 (s, 1H), δ 8,58 (s, 1H), 8,31 (d, 1H), 7,94 (t, 2H), 7,71-7,50 (m, 3H), 7,28 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E2-12	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-((6-хлорпиридин-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 462 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,50 (d, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,91 (dd, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,26 (d, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,59 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E2-13	2-((1H-Пиразол-3-ил)метил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 407 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,79 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,23 (dd, 1H), 6,84-6,74 (m, 2H), 6,26 (d, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).
E2-14	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(3-(гидроксиметил)бензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он.	LCMS: масса/заряд 457 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,38-7,21 (m, 5H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 5,21 (t, 1H), 4,49 (d, 4H), 4,28 (s, 3H).
E2-15	3-((6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил) бензамид	LCMS: масса/заряд 470 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,57 (d, 1H), 7,47-7,43 (m, 2H), 7,37 (s, 1H), 7,28 (t, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E2-16	3-((6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)бензонитрил	LCMS: масса/заряд 452 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,78 (m, 2H), 7,60 (t, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (t, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,61 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E2-17	4-((6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил) бензонитрил	LCMS: масса/заряд 452 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,21 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,94 (d, 2H), 7,73 (d, 2H), 7,54 (m, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,04 (m, 1H), 5,75 (s, 2H), 4,74 (s, 2H), 3,05 (s, 3H).
E2-18	4-((6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)бензамид	LC-MS: масса/заряд 470 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,86 (d, 2H), 7,60-7,43 (m, 3H), 7,35 (s, 1H), 7,27 (d, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E2-19	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(3-гидрокси бензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 443 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 9,46 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,30-7,24 (m, 1H), 7,15 (t, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,83-6,77 (m, 2H), 6,68 (dd, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,41 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E2-20	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(4-гидроксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 443 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 9,43 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,30-7,25 (t, 1H), 7,20 (d, 2H), 6,95 (d, 1H), 6,76 (d, 2H), 5,65 (s, 2H), 4,37 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E2-21	6-(1H-Индазол-4-илметил)-8-метил-2-(3-метиламино-бензил)-6,8-дигидро-3-тиа-1,5,6,8-тетраазациклопента[a]инден-7-он	LC-MS: масса/заряд 456 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,10 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,27 (t, 1H), 7,12 (t, 1H), 6,94 (d, 1H), 6,67 (s, 2H), 6,58 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,38 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,68 (s, 3H).
E2-22	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(4-(метиламино)бензил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 456 (M+1)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,31-7,21 (m, 1H), 7,11 (d, 2H), 6,95 (d, 1H), 6,52 (d, 2H), 5,64 (s, 3H), 4,30 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,66 (d, 3H).
E2-23	2-Хлор-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 361 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,65 (s, 1H), 7,24 (t, 1H), 6,86-6,83 (m, 3H), 5,32 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).
E2-24	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-бензил-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 427 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,11 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,51-7,35 (m, 5H), 7,25-7,33 (m, 2H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).

Пример 2B. Синтез 2-бензил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Этил-2-бром-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат. К раствору этил-2-бром-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (1,1 г, 4 ммоль) в безводном DMF (10 мл) добавляли NaH (320 мг, 60% в масле, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 15 мин с последующим добавлением MeI (852 мг, 6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение еще 2 ч, затем гасили с помощью насыщенного водного NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали водой и солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/1) с получением необходимого продукта (950 мг, выход 82,2%). LCMS: масса/заряд 289 (M+H)⁺.

Стадия B. Этил-2-бензил-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат. К смеси этил-2-бром-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (720 мг, 2,5 ммоль) и Pd(PPh₃)₄ (145 мг, 0,125 ммоль) в сухом THF в атмосфере N₂ добавляли бромид бензилцинка (20 мл, 0,5 М). Реакционную смесь перемешивали при 65°C в течение 1 ч, затем гасили с помощью насыщенного водного NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=4/1) с получением необходимого продукта (600 мг, выход 80,0%). LCMS: масса/заряд 301 (M+H)⁺.

Стадия C. Этил-2-бензил-6-формил-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат. К раствору этил-2-бензил-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (600 мг, 2 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (6 мл) добавляли смесь оксихлорида фосфора (612 мг, 4 ммоль) и N-метил-N-фенилформамида (540 мг, 4 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи, затем охлаждали и выливали в ледяную воду, а затем экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=3/1) с получением необходимого продукта (140 мг) в виде желтого масла. LCMS: масса/заряд 329 (M+H)⁺.

Стадия D. 2-Бензил-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К раствору этил-2-бензил-6-формил-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (140 мг, неочищенное вещество) в 2-этоксиэтаноле (3 мл) добавляли гидразингидрат (0,5 мл, 98 вес. %). Реакционную смесь перемешивали при 110°C в течение 1 ч, затем охлаждали до к.т. Осадок собирали путем фильтрации и промывали с помощью MeOH с получением необходимого продукта (60 мг, выход 10,1% за 2 стадии). LCMS: масса/заряд 297 (M+H)⁺.

Стадия E. 2-Бензил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-бензил-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,169 ммоль) и NaHCO₃ (28 мг, 0,338 ммоль) в DMA (1 мл) в атмосфере N₂ добавляли 1-(хлорметил)-3-метоксибензол (40 мг, 0,254 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 120°C в течение 3 ч, затем гасили с помощью насыщенного водного NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (8 мг, выход 11,4%). LCMS: масса/заряд 417 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,53 (s, 1H), 7,36-7,43 (m, 4H), 7,30-7,32 (m, 1H), 7,20-7,25 (m, 1H), 6,82-6,85 (m, 3H), 5,31 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).

Пример 2C. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(1-фенилэтил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. 4-Метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он синтезировали с применением процедуры, аналогичной примеру 2A. LCMS: масса/заряд 467 (M+H)⁺.

Стадия B. 2-Йод-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он синтезировали с применением процедуры, аналогичной примеру 2A. LCMS: 593 (M+H)⁺.

Стадия C. 2-Бензил-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. Порошок цинка (1,3 г, 20 ммоль) суспендировали в безводном THF (5 мл) в атмосфере N₂ с последующим добавлением 1,2-дибромэтана (0,01 мл). Смесь нагревали при 65°C в течение 5 мин с последующим добавлением хлортриметилсилана (0,01 мл). Полученную смесь нагревали при 65°C в течение еще 15 мин, затем охлаждали до 0°C с последующим добавлением по каплям раствора (бромметил)бензола (1,7 г, 10 ммоль) в безводном THF (5 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при 65°C, затем охлаждали с получением бромида бензилцинка(II) (приблизительно 1 М в THF), который применяли непосредственно на следующей стадии. К смеси 2-йод-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (300 мг, 0,5 ммоль) в сухом THF (2 мл) в атмосфере N₂ добавляли последовательно Pd(PPh₃)₄ (58 мг, 0,05 ммоль) и вышеуказанный бромид бензилцинка(II) (5 мл, 1 М). Полученную смесь нагревали при 65°C в течение 1 ч., затем выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/2) с получением необходимого продукта (230 мг, выход 82,7%). LCMS: 557 (M+H)⁺.

Стадия D. 2-Бензоил-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-бензил-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,18 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли K₂CO₃ (74 мг, 0,53 ммоль). Смесь перемешивали при 50°C в атмосфере воздуха в течение 4 ч, затем выливали в воду. Осадок собирали путем фильтрации, промывали с помощью PE и высушивали под высоким вакуумом с получением необходимого продукта (100 мг, выход 98%). LCMS: 571 (M+H)⁺.

Стадия E. 2-(1-Гидрокси-1-фенилэтил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси бромметилмагния (0,6 мл, 1,5 М) в сухом THF (2 мл) на ледяной бане добавляли раствор 2-бензоил-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,175 ммоль) в сухом THF. Смесь перемешивали в течение 1 ч. и выливали в насыщенный водный NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (30 мг, выход 29,4%) в виде масла. LCMS: 587 (M+H)⁺.

Стадия F. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(1-фенилэтил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. Раствор 2-(1-гидрокси-1-фенилэтил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 0,05 ммоль) в смешанном растворе TFA/TES (2 мл/0,5 мл) перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (5 мг, выход 22,7%). LCMS: масса/заряд 441 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,11 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,46-7,41 (m, 3H), 7,37 (t, 2H), 7,28 (m, 2H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,71 (q, 1H), 4,28 (s, 3H), 1,78 (d, 3H).

Побочный продукт 4-метил-6-((1-метил-1H-индазол-4-ил)метил)-2-(1-фенилэтил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он также получали с помощью препаративной HPLC:

LCMS: масса/заряд 455 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,52 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,41 (d, 1H), 7,42-7,30 (m, 6H), 6,97 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,70 (q, 1H), 4,27 (s, 3H), 4,09 (s, 3H), 1,77 (d, 3H).

№ соединения	Структура	Характеристика
E2-34	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(1-(1H-пиразол-3-ил)этил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 431 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 12,71 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,28 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,72 (s, 1H), 4,30 (s, 3H), 1,76 (d, 3H).

Пример 2D. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(1-гидрокси-1-фенилэтил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-бензоил-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-бензоил-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (75 мг, 0,13 ммоль) в DCM (2 мл) добавляли TFA (2 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (30 мг, выход 52,6%). LCMS: 441 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(1-гидрокси-1-фенилэтил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси бромметилмагния (0,22 мл, 1,5 М) в сухом THF (1 мл) на ледяной бане добавляли раствор 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-бензоил-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 0,068 ммоль) в сухом THF. Смесь перемешивали в течение 30 мин., затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (8 мг, выход 25,8%). LCMS: 457 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,11 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,62 (d, 2H), 7,45 (d, 1H), 7,34 (t, 2H), 7,29-7,23 (m, 2H), 6,99-6,93 (m, 2H), 5,65 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,01 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов.

№ соединения	Структура	Характеристика
E2-36	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(1-гидрокси-1-(1H-пиразол-3-ил)этил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 447 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,97-6,86 (m, 2H), 6,22 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,23 (s, 3H), 2,00 (s, 3H).
E2-37	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(пиридин-2-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 444 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,53 (d, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,59 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,29 (d, 1H), 7,16 (d, 1H), 6,96 (d, 1H), 6,09 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,22 (s, 3H).
E2-38	2-(3-гидроксибензоил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 447 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,97 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 7,96 (d, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,44 (dd, 1H), 7,23 (dd, 1H), 7,17 (d, 1H), 6,90-6,83 (m, 3H), 5,35 (s, 2H), 4,37 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).

Пример 2E. Синтез 2-(гидрокси(фенил)метил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. 2-Бензоил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К раствору 2-бензил-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (40 мг, 0,135 ммоль) и K₂CO₃ (37 мг, 0,27 ммоль) в DMF (1 мл) добавляли 1-(хлорметил)-3-метоксибензол (31 мг, 0,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в атмосфере воздуха в течение ночи, затем выливали в воду. Осадок собирали путем фильтрации и промывали с помощью EtOAc с получением необходимого продукта (30 мг, выход 51,7%). LCMS: масса/заряд 431 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,76 (s, 1H), 8,46-8,49 (m, 2H), 7,78 (t, 1H), 7,66 (t, 2H), 7,25 (t, 1H), 6,84-6,89 (m, 3H), 5,36 (s, 2H), 4,37 (s, 3H), 3,73 (s, 3H).

Стадия B. 2-(Гидрокси(фенил)метил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-бензоил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (20 мг, 0,047 ммоль) в THF (1 мл) и MeOH (1 мл) добавляли NaBH₄ (3,5 мг, 0,093 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 15 мин, гасили с помощью воды и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (13 мг, выход 64,0%). LCMS: масса/заряд 433 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,58 (s, 1H), 7,49-7,53 (m, 2H), 7,36-7,40 (m, 2H), 7,28-7,33 (m, 1H), 7,20-7,25 (m, 1H), 7,07 (d, 1H), 6,82-6,85 (m, 3H), 6,08 (d, 1H), 5,31 (d, 2H), 4,21 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов.

№ соединения	Структура	Характеристика
E2-40	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 433 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 12,75 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,96 (d, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 6,09 (s, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,23 (s, 3H).

Пример 2F. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(фенил)

метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. 2-(Гидрокси(фенил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он синтезировали с применением процедуры, аналогичной примеру 2E. LCMS: масса/заряд 573 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(фенил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он синтезировали с помощью процедуры, аналогичной примеру 2D. LCMS: масса/заряд 443 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,12 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,56-7,42 (m, 3H), 7,37 (s, 2H), 7,28 (m, 2H), 7,07 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,08 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,21 (s, 3H).

Пример 2G. Синтез метил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксилата

К перемешиваемой смеси 2-йод-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (40 мг, 0,088 ммоль) в MeOH (5 мл) добавляли Et₃N (27 мг, 0,264 ммоль) и Pd(dppf)Cl₂ (6,5 мг, 0,009 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 85°C в атмосфере CO в течение 12 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (2 мг, выход 5,88%). LC-MS: масса/заряд 385 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,72 (s, 1H), 7,24 (t, 1H), 6,95-6,81 (m, 3 H), 5,34 (s, 2H), 4,29 (s, 3H), 3,99 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).

Подобную реакцию проводили с 2-хлор-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-оном, что обеспечивало образование 2-метокси-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она в качестве основного побочного продукта. LC-MS: масса/заряд 357 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,50 (s, 1H), 7,26-7,21 (m, 1H), 6,88-6,80 (m, 3H), 5,30 (s, 2H), 4,19 (brs, 6H), 3,72 (s, 3H).

Пример 2H. Синтез 2-(фтор(фенил)метил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

К раствору 2-(гидрокси(фенил)метил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (20 мг, 0,046 ммоль) в DCM (2 мл) при -78°C добавляли DAST (0,3 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (2,5 мг, выход 12,5%). LCMS: 435. (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,64 (s, 1H), 7,55-7,48 (m, 5H), 7,26-7,07 (m, 2H), 6,92-6,74 (m, 3H), 5,32 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).

Пример 2I. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(амино(фенил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. (Z)-2-((Гидроксиимино)(фенил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. Смесь 2-бензоил-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,175 ммоль) и NH₂OH.HCl (123 мг, 1,75 ммоль) в безводном MeOH (5 мл) перемешивали при 100°C в запаянной трубке в течение 12 ч. Затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl (20 мл) и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EA=2/1) с получением необходимого продукта (40 мг, выход 39,1%). LC-MS: масса/заряд 586 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(амино(фенил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К перемешиваемой смеси (Z)-2-((гидроксиимино)(фенил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (40 мг, 0,068 ммоль) в TFA (3 мл) добавляли Zn (44 мг, 0,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч, затем выливали в насыщенный водный NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (4,6 мг, выход 14,8%). LC-MS: масса/заряд 442 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,11 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,52-7,40 (m, 3H), 7,39-7,32 (m, 2H), 7,30-7,22 (m, 2H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 5,49 (s, 1H), 4,20 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов.

№ соединения	Структура	Характеристика
E2-46	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(амино(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд: 432 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ): δ 8,62 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,29 (t, H), 6,99 (d, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,28 (s, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).

Пример 2J. Синтез N-((6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)(1H-пиразол-3-ил)метил)ацетамида

Стадия A. N-((6-((1-Ацетил-1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)(1-ацетил-1H-пиразол-3-ил)метил)ацетамид. К перемешиваемой смеси 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(амино(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (20 мг, 0,046 ммоль) в DCM/MeCN (1 мл/1 мл) добавляли Et₃N (14 мг, 0,139 ммоль) и уксусный ангидрид (24 мг, 0,23 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 23°C в течение 1 ч, затем гасили с помощью воды и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта (30 мг), который непосредственно применяли на следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки. LCMS: масса/заряд 558 (M+H)⁺.

Стадия B. N-((6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)(1H-пиразол-3-ил)метил)ацетамид. К перемешиваемой смеси N-((6-((1-ацетил-1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)(1-ацетил-1H-пиразол-3-ил)метил)ацетамида (30 мг, 0,053 ммоль) в MeOH (3 мл) в атмосфере N₂ добавляли K₂CO₃ (22 мл, 0,16 ммоль). Смесь перемешивали при 23°C в течение 30 мин, затем гасили с помощью насыщенного водного NH₄Cl и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (2,0 мг, выход 9%). LC-MS: масса/заряд: 474 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ): δ 8,57 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,48-7,60 (d, 1H), 7,31-7,27 (t, 1H), 7,00-6,98 (d, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,28 (s, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,33 (s, 3H), 1,97 (s, 3H).

Пример 2K. Синтез 2-(дифтор(фенил)метил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. 6-(3-Метоксибензил)-4-метил-2-(2-фенил-1,3-дитиолан-2-ил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К смеси 2-бензоил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (86 мг, 0,2 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли p-TsOH (36 мг, 0,2 ммоль) и этан-1,2-дитиол (39 мг, 0,4 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C в течение 4 ч, затем выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=3/1) с получением необходимого продукта (80 мг, выход 80%). LCMS: масса/заряд 507 (M+H)⁺.

Стадия B. 2-(Дифтор(фенил)метил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К смеси 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-(2-фенил-1,3-дитиолан-2-ил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (65 мг, 0,13 ммоль) и NIS (небольшое количество) в DCM (5 мл) добавляли Py.HF (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в атмосфере N₂ в течение 2 ч, затем выливали в воду и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=3/1) с получением твердого вещества (50 мг, выход 76%). LCMS: масса/заряд 595 (M+H)⁺.

К смеси вышеуказанного твердого вещества (25 мг, 0,04 ммоль) в THF/MeOH (3 мл/2 мл) добавляли Pd/C (5 мг). Смесь перемешивали при к.т. в атмосфере H₂ в течение 40 мин, затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (7 мг, выход 36,8%). LCMS: 453 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,70 (s, 1H), 7,74-7,70 (m, 2H), 7,64-7,56 (m, 3H), 7,26-7,20 (m, 1H), 6,88-6,84 (m, 3H), 5,33 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).

Пример 2L. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(1-фенилциклопропил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. 4-Метил-2-(1-фенилциклопропил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-бензил-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (60 мг, 0,1 ммоль) в сухом DMF (2 мл) добавляли 1,2-дибромэтан (10 мкл, 0,1 ммоль) и TBAB (3 мг, 0,01 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин с последующим добавлением NaH (8 мг, 0,2 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч, затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (26 мг, выход 44,7%). LCMS: 583 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(1-фенилциклопропил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. Смесь 4-метил-2-(1-фенилциклопропил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (26 мг, 0,044 ммоль) в растворе HCl в диоксане (4 М, 2 мл) перемешивали при к.т. в течение 3 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (3 мг, выход 15%). LCMS: 453 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 13,11 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,59-7,52 (m, 2H), 7,50-7,38 (m, 4H), 7,32-7,23 (m, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,63 (s, 2H), 4,24 (s, 3H), 1,84-1,81 (m, 2H), 1,59-1,57 (m, 2H).

Пример 2M. Синтез 3-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензамида.

Стадия A. Синтез 3-((2-бром-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензонитрила. При -40^oC в атмосфере N₂ к смеси 3-((4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензонитрила (200 мг, 0,62 ммоль) и CBr₄ (1,03 г, 3,11 ммоль) в THF (15 мл) добавляли по каплям LiHMDS (1,24 мл, 1 М в THF). Реакционную смесь перемешивали при -40°C в течение 2 ч, гасили с помощью насыщ. NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 0~25% EtOAc в PE) с получением 3-((2-бром-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензонитрила (200 мг, выход 80,6%). LC-MS (ESI): масса/заряд 400 (M+H)⁺.

Стадия B. Синтез 3-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензонитрила. К смеси 3-((2-бром-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензонитрила (100 мг, 0,25 ммоль) и метилбороновой кислоты (45 мг, 0,75 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли Na₂CO₃ (53 мг, 0,5 ммоль) с последующим добавлением Pd₂(dba)₃ (23 мг, 0,025 ммоль) и Xantphos (14 мг, 0,025 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 15 ч. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат выпаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 3-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензонитрила (60 мг, выход 71,4%). LC-MS (ESI): масса/заряд 336 (M+H)⁺.

Стадия C. Синтез 3-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензамида. Раствор 3-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензонитрила (60 мг, 0,18 ммоль) в H₂SO₄ (1 мл) перемешивали при 30^oC в течение ночи. Реакционную смесь гасили с помощью насыщ. NaHCO₃ и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и выпаривали. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (10% MeOH в DCM) с получением 3-((2,4-диметил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пиррол[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензамида (10 мг, выход 15,7%). LC-MS (ESI): масса/заряд 354 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,59 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,77 (d, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,41 (t, 1H), 7,35 (s, 1H), 5,40 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,86 (s, 3H).

Пример 2N. Синтез 2-(2-(1H-пиразол-3-ил)этил)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. Синтез 3-йод-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразола. К смеси 3-йод-1H-пиразола (1 г, 5,16 ммоль) и p-TsOH (88 мг, 0,52 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли DHP (0,56 мл, 6,19 ммоль) и перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Реакционную смесь промывали с помощью насыщ. NaHCO₃ и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~10% EtOAc в PE) с получением 3-йод-1-(оксан-2-ил)-1H-пиразола (1,4 г). LC-MS (масса/заряд 279 (M+H)⁺.

Стадия B. Синтез (E)-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-3-(2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)винил)-1H-пиразола. В атмосфере азота к смеси 3-йод-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразола (150 мг, 0,54 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли 2-этенил-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (0,18 мл, 1,08 ммоль), Et₃N (0,37 мл, 2,7 ммоль) и Pd(PBu₃)₂ (14 мг, 0,03 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 3 ч. Смесь концентрировали и очищали с помощью препаративной TLC (35% EtOAc в PE) с получением 1-(оксан-2-ил)-3-[(E)-2-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)этенил]-1H-пиразола (60 мг, выход 37%). LC-MS (ESI): масса/заряд 305 (M+H)⁺.

Стадия C. Синтез 4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (500 мг, 2,42 ммоль) в DMF (15 мл) добавляли K₂CO₃ (335 мг, 2,42 ммоль). После перемешивания при 50°C в течение 30 мин добавляли раствор 3-(бромметил)-1-метил-1H-пиразола (636 мг, 3,64 ммоль) в DMF (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Суспензию выливали в насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой высушивали над безводн. Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~100 EtOAc в PE) с получением 4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (280 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 301 (M+H)⁺.

Стадия D. Синтез 2-йод-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (280 мг, 0,93 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли пентафторйодбензол (0,50 мл, 3,73 ммоль) и t-BuOK (209 мг, 1,86 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 135°C в течение 2 ч в атмосфере азота. Смесь охлаждали до к.т. и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0 ~100% EtOAc в PE) с получением 2-йод-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (300 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 427 (M+H)⁺.

Стадия E. Синтез (E)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(2-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразол-3-ил)винил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. В атмосфере азота к смеси 2-йод-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (300 мг, 0,71 ммоль) и (E)-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-3-(2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)винил)-1H-пиразола (300 мг, 0,99 ммоль) в DME (5 мл) и воде (1 мл) добавляли Na₂CO₃ (149 мг, 1,41 ммоль) и Pd(PPh₃)₂Cl₂ (49 мг, 0,071 ммоль). Смесь перемешивали при 80°C в течение 3 ч. Затем смесь охлаждали, разбавляли с помощью EtOAc, промывали с помощью воды и солевого раствора. Органический слой высушивали над безводн. Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0 ~ 100% EtOAc в PE) с получением (E)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(2-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразол-3-ил)винил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (170 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 477 (M+H)⁺.

Стадия F. Синтез 4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(2-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразол-3-ил)этил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси (E)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(2-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразол-3-ил)винил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (80 мг, 0,17 ммоль) в THF (3 мл) и MeOH (3 мл) добавляли Pd/C (10 мг). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере H₂ при к.т. в течение 6 ч. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (EtOAc) с получением 4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(2-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразол-3-ил)этил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (20 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 479 (M+H)⁺.

Стадия G. Синтез 2-(2-(1H-пиразол-3-ил)этил)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(2-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразол-3-ил)этил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (20 мг, 0,042 ммоль) в этаноле (2 мл) добавляли HCl (0,5 мл, 4 М в диоксане). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 30 мин. Реакционную смесь охлаждали и выливали в насыщ. NaHCO₃, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой высушивали над безводн. Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (10% MeOH в DCM) с получением 2-(2-(1H-пиразол-3-ил)этил)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (10 мг, выход 61%). LC-MS (ESI): масса/заряд 395 (M+H)⁺.¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,56 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,52 (s, 1H), 6,12 (d, 1H), 6,08 (d, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,48 (t, 2H), 3,13 (t, 2H).

E2-53

4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(2-(пиридин-3-ил)этил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он

LC-MS: масса/заряд 406 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,51 (s, 2H), 8,42 (s, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,43-7,26 (m, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,62-3,40 (m, 2H), 3,17 (t, 2H).

Пример 2O. Синтез 2-((1H-пиразол-5-ил)окси)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез этил-5-гидрокси-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбоксилата. К смеси (4-метоксибензил)гидразиндигидрохлорида (2,25 г, 10 ммоль) и K₂CO₃ (4,14 г, 30 ммоль) в метаноле (50 мл) и воде (10 мл) добавляли диэтил-2-(этоксиметилен)малонат (2,16 г, 10 ммоль). Смесь перемешивали при 80°C в течение 5 ч. Затем смесь гасили с помощью водн. NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Органические слои промывали с помощью солевого раствора, высушивали над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в PE) с получением 1,1 г этил-5-гидрокси-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбоксилата.

Стадия B. Синтез 5-гидрокси-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбоновой кислоты. К раствору этил-5-гидрокси-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбоксилата (800 мг, 2,9 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли раствор KOH (800 мг, 15 ммоль) в воде (10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем смесь концентрировали и остаток применяли непосредственно на следующей стадии. LC-MS (ESI): масса/заряд 249 (M+H)⁺.

Стадия C. Синтез 1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-5-ола. Смесь 5-гидрокси-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбоновой кислоты растворяли в 2 М HCl (50 мл), перемешивали при 60°C в течение 16 ч. Растворитель удаляли и остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением 120 мг 1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-5-ола. LC-MS (ESI): масса/заряд 205 (M+H)⁺.

Стадия D. Синтез трет-бутил-N-(трет-бутокси)карбонил(6-((2-((1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-5-ил)окси)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата. К раствору 1-[(4-метоксифенил)метил]-1H-пиразол-5-ола (60 мг, 0,29 ммоль) в DMF (8 мл) добавляли KOH (18 мг, 0,32 ммоль) при 5°C. Реакционную смесь перемешивали при 5°C в течение 30 мин, добавляли раствор трет-бутил-N-(трет-бутокси)карбонил(6-((2-бром-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата (174 мг, 0,29 ммоль) в DMF (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч и затем выливали в 1 М водную лимонную кислоту, экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и выпаривали. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (EA:PE=1:1) с получением 80 мг трет-бутил-N-(трет-бутокси)карбонил(6-((2-((1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-5-ил)окси)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата. LC-MS: масса/заряд 715 (M+H)⁺.

Стадия E. Синтез 2-((1H-пиразол-5-ил)окси)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. Раствор трет-бутил-N-(трет-бутокси)карбонил(6-((2-((1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-5-ил)окси)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата (60 мг, 0,08 ммоль) в TFA (2 мл) перемешивали при к.т. в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и очищали с помощью препаративной HPLC с получением 15 мг 2-((1H-пиразол-5-ил)окси)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 395 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,41 (s, 1H), 7,76-7,63 (m, 2H), 6,79 (d, 1H), 6,64 (d, 1H), 6,31 (d, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).

Пример 3. Получение соединений формулы E3-ii и производных по схеме E3

Соединение E3-ii может быть синтезировано путем реакции Стилле между соединением E3-i и трибутил(винил)станнаном. Реакция Хека с применением E3-ii в присутствии катализатора (например, палладиевого катализатора, такого как Pd(Pt-Bu3)2, DMF) с последующим восстановлением алкенильной группы может обеспечивать образование соединения E3-ix. В качестве альтернативы стандартная гидрогенизация соединения E3-ii обеспечивает образование соединения E3-iii. Гидроборирование соединения E3-ii с последующим окислением с помощью пербората натрия обеспечивает получение продукта E3-vii. Прямое окисление соединения E3-ii с помощью оксида осмия(VIII) и перйодата натрия обеспечивает получение альдегида E3-iv. Нуклеофильное добавление альдегида E3-iv обеспечивает получение продукта E3-v. Стандартное восстановление соединения E3-iv с помощью борогидрида натрия обеспечивает получение соединения E3-vi. Восстановительное аминирование соединения E3-iv обеспечивает получение соединения E3-viii. При этом Q и R² определены в любом из вариантов осуществления настоящего изобретения с первого по двадцать шестой. В некоторых вариантах осуществления каждый из Q и R² независимо представляет собой необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный карбоцикл или необязательно замещенный гетероциклил.

Пример 3A. Синтез 2-этил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. 6-(3-Метоксибензил)-4-метил-2-винил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-хлор-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (600 мг, 1,67 ммоль) и трибутил(винил)станнана (1 мл, 3,4 ммоль) в DMF (6 мл) добавляли Pd(PPh₃)₄. Смесь перемешивали при 100°C в течение ночи в атмосфере N₂, затем выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/2) с получением необходимого продукта (410 мг, выход 68%). LCMS: масса/заряд 353 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,61 (s, 1H), 7,23 (t, 1H), 7,10 (dd, 1H), 6,89-6,80 (m, 3H), 6,28 (d, 1H), 5,75 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).

Стадия B. 2-Этил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-винил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 0,88 ммоль) в MeOH (1 мл) и THF (1 мл) в атмосфере N₂ добавляли Pd/C (10 мг). Смесь перемешивали в атмосфере H₂ при к.т. в течение 1 ч, затем фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (5 мг, выход 16,7%).

LCMS: масса/заряд 355 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,56 (s, 1H), 7,23 (t, 1H), 6,89-6,78 (m, 3H), 5,32 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,17 (q, 2H), 1,38 (t, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов.

№ соединения	Структура	Характеристика
E3-2	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-винил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 363 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,13 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,31-7,27 (m, 1H), 7,14-7,07 (m, 1H), 6,98 (d, H), 6,28 (d1H), 5,76 (d, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,29 (s, 3H).

Пример 3B. Синтез 2-(гидроксиметил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. 6-(3-Метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегид. К смеси 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-винил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (410 мг, 1,16 ммоль) в диоксане (6 мл) и воде (2 мл) добавляли NaIO₄ (1 г, 4,6 ммоль), 2,6-диметилпиридин (0,27 мл, 2,32 ммоль) и OsO₄ (кат.). Смесь перемешивали при к.т. в течение 4 ч, затем гасили с помощью насыщенного водного Na₂S₂O₃ и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=1/1) с получением необходимого продукта (130 мг, выход 31,7%). LCMS: масса/заряд 387 (M+MeOH+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,08 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 7,24 (t, 1H), 6,88-6,83 (m, 3H), 5,34 (s, 2H), 4,34 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).

Стадия B. 2-(Гидроксиметил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 6-(3-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида (30 мг, 0,08 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли NaBH₄ (6 мг, 0,16 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 10 мин, затем выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (10 мг, выход 35,7%). LCMS: масса/заряд 357 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,59 (s, 1H), 7,23 (t, 1H), 6,86-6,82 (m, 3H), 6,34 (t, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,89 (d, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E3-4	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидроксиметил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 367 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,31-7,27 (m, 1H), 6,98-6,97 (m, 1H), 6,34 (t, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,89 (d, 2H), 4,27 (s, 3H).
E3-5	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(1-гидрокси этил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 381 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,13 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,30-7,26 (m, 1H), 6,97-6,95 (m, 1H), 6,42 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 5,10-5,07 (m, 1H), 4,26 (s, 3H), 1,53 (d, 3H).

Пример 3C: синтез 2-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. 2-(1-Гидроксиэтил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 6-(3-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида (100 мг, 0,28 ммоль) в THF (3 мл) при 0°C добавляли по каплям метилмагнийхлорид (0,19 мл, 0,56 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 10 мин, затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/2) с получением необходимого продукта (40 мг). LCMS: масса/заряд 371 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,58 (s, 1H), 7,24 (t, 1H), 6,97-6,77 (m, 3H), 6,41 (d, 1H), 5,40-5,23 (m, 2H), 5,18-5,02 (m, 1H), 4,26 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 1,55 (d, 3H).

Стадия B. 2-Ацетил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-(1-гидроксиэтил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 0,08 ммоль) в DCM (3 мл) добавляли оксид марганца(IV) (35 мг, 0,4 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч, затем фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением необходимого продукта (25 мг). LCMS: масса/заряд 369 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,83 (s, 1H), 7,35 (t, 1H), 6,99-6,94 (m, 3H), 5,45 (s, 2H), 4,45 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).

Стадия C. 2-(2-Гидроксипропан-2-ил)-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-ацетил-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (20 мг, 0,05 ммоль) в THF (1 мл) при 0°C добавляли по каплям метилмагнийхлорид (0,08 мл, 0,15 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 10, затем выливали в насыщенный водный NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (10 мг). LCMS: масса/заряд 385 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,58 (s, 1H), 7,24 (t, 1H), 6,89-6,81 (m, 3H), 6,28 (s, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 1,60 (s, 6H).

Пример 3D. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(2-гидроксиэтил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. 2-(2-Гидроксиэтил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К смеси 4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-2-винил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (100 мг, 0,20 ммоль) в THF (2 мл) при 0°C в атмосфере N₂ добавляли BH₃-THF (0,2 мл, 1 моль/л, 0,20 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем охлаждали до 0°C с последующим добавлением воды (1 мл) и NaBO₃.4H₂O (154 мг, 1,00 ммоль). Смесь медленно нагревали до к.т. и перемешивали при этой температуре в течение 3 ч. Полученную смесь выливали в насыщенный водный NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/1) с получением необходимого продукта (30 мг). LC-MS: масса/заряд 511 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(2-гидроксиэтил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он . К раствору 2 (30 мг, 0,18 ммоль) в DCM (3 мл) при 0°C добавляли по каплям TFA (1 мл). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (2,0 мг). LC-MS: масса/заряд 381 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 13,11 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,30-7,26 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 5,02-5,00 (m, 1H), 4,27 (s, 3H), 3,85-3,81 (m, 2H), 3,32-3,25 (m, 2H).

Пример 3E. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((метиламино)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. 4-Метил-2-((метиламино)метил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида (50 мг, 0,1 ммоль) в THF (10 мл) при 0°C добавляли по каплям MeNH₂ (30% в MeOH, 21 мг, 0,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч с последующим добавлением цианоборогидрида натрия (19 мг, 0,3 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи, затем гасили с помощью насыщенного водного NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (35 мг). LCMS: масса/заряд 511 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((метиламино)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 4-метил-((метиламино)метил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (35 мг, 0,07 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°C добавляли по каплям TFA (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (5 мг). LCMS: масса/заряд 380 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 13,13 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,16 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,31-7,25 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 4,09 (s, 2H), 2,40 (s, 3H).

Пример 3F. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(аминометил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. (E)-4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегидоксим. К смеси 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида (120 мг, 0,24 ммоль) в MeOH (10 мл) при 0°C добавляли гидроксиламингидрохлорид (50 мг, 0,73 ммоль) с последующим добавлением KOAc (71 мг, 0,73 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 8 ч, затем гасили с помощью насыщенного водного NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (90 мг). LCMS: масса/заряд 510 (M+H)⁺.

Стадия B. 2-(Аминометил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси (E)-4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегидоксима (90 мг, 0,18 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл) добавляли порошок Zn (58 мг, 0,88 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи, затем фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (70 мг). LCMS: масса/заряд 496 (M+H)⁺.

Стадия C. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(аминометил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он синтезировали с применением процедуры в примере 3D.LCMS: масса/заряд 366 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,13 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,33-7,20 (m, 1H), 6,97 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,24 (d, 3H), 4,17 (s, 2H).

Пример 3G. Синтез N-((6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)ацетамида

Стадия A. N-((4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)ацетамид. К смеси 2-(аминометил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (35 мг, 0,07 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°C добавляли уксусный ангидрид (22 мг, 0,21 ммоль) с последующим добавлением триэтиламина (22 мг, 0,21 ммоль) и DMAP (0,8 мг, 0,007 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем гасили с помощью воды и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (25 мг) в виде желтого масла. LCMS: масса/заряд 538 (M+H)⁺.

Стадия B. N-((4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)ацетамид синтезировали с применением процедуры в примере 3D. LCMS: масса/заряд 408 (M+H)⁺.¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,12 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,31-7,21 (m, 1H), 6,97 (d, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,31 (s, 3H), 1,93 (s, 3H).

Пример 3H. Синтез N-((6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)метансульфонамида

Стадия A. N-((4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)метансульфонамид. К смеси 2-(аминометил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,1 ммоль) в DCM (5 мл) при 0°C добавляли Et₃N (30,62 мг, 0,3 ммоль) с последующим добавлением MsCl (9,24 мг, 0,081 ммоль). Смесь перемешивали при 20°C в течение 2 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (20 мг).

Стадия B. N-((6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)метансульфонaмид синтезировали с применением процедуры в примере 3D. LCMS: масса/заряд 444 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,11 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,17 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,34-7,20 (m, 1H), 6,97 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,64 (d, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,04 (s, 3H).

Пример 3I. Синтез 2-(2-(1H-пиразол-3-ил)этил)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она.

Стадия A. Синтез трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({4-бром-7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамата. При -40°C в атмосфере N₂ к смеси трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамата (1,4 г, 2,73 ммоль) и CBr₄ (4,52 г, 13,65 ммоль) в THF (20 мл) добавляли по каплям LiHMDS (5,46 мл, 5,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -40°C в течение 30 мин, затем гасили с помощью воды (4 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, PE/EA=10:1~3:1) с получением 500 мг трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({4-бром-7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамата. LC-MS: масса/заряд 591 (M+H)⁺.

Стадия B. Синтез трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({4-винил-7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамата. К раствору трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({4-бром-7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамата (500 мг, 0,85 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли трибутил(этенил)станнан (536 мг, 1,69 ммоль) и DIPEA (327 мг, 2,53 ммоль) с последующим добавлением Pd(PPh₃)₄ (105 мг, 0,08 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере N₂ при 80°C в течение 3 ч, затем гасили с помощью H₂O и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, PE/EA=10:1~5:1) с получением 300 мг трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({4-винил-7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамата. LC-MS: масса/заряд 539 (M+H)⁺.

Стадия C. Синтез трет-бутил-(E)-3-(2-(6-((6-((трет-бутоксикарбонил)[(трет-бутокси)карбонил]амино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)винил)-1H-пиразол-1-карбоксилата. К раствору трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({4-винил-7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамата (300 мг, 0,56 ммоль) в DMF (4 мл) добавляли трет-бутил-3-йод-1H-пиразол-1-карбоксилат (180 мг, 0,61 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение ночи. После охлаждения до к.т. реакционную смесь гасили с помощью H₂O и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (PE/EA=1:1) с получением 200 мг трет-бутил-(E)-3-(2-(6-((6-((трет-бутоксикарбонил)[(трет-бутокси)карбонил]амино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)винил)-1H-пиразол-1-карбоксилата. LC-MS: масса/заряд 705 (M+H)⁺.

Стадия D. Синтез трет-бутил-3-(2-(6-((6-((трет-бутоксикарбонил)[(трет-бутокси)карбонил]амино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)этил)-1H-пиразол-1-карбоксилата. К раствору трет-бутил-(E)-3-(2-(6-((6-((трет-бутоксикарбонил)[(трет-бутокси)карбонил]амино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)винил)-1H-пиразол-1-карбоксилата (200 мг, 0,28 ммоль) в THF/MeOH (4 мл, 10:1) добавляли Pd/C (6 мг, 10 вес. %). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода при к.т. в течение 12 ч. Смесь фильтровали через подушку из целита и фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (PE/EA=1:1) с получением 100 мг трет-бутил-3-(2-(6-((6-((трет-бутоксикарбонил)[(трет-бутокси)карбонил]амино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)этил)-1H-пиразол-1-карбоксилата. LC-MS: масса/заряд 707 (M+H)⁺.

Стадия E. Синтез 2-(2-(1H-пиразол-3-ил)этил)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. При 0°C в атмосфере N₂ к смеси трет-бутил-3-(2-(6-((6-((трет-бутоксикарбонил)[(трет-бутокси)карбонил]амино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)этил)-1H-пиразол-1-карбоксилата (100 мг, 0,14 ммоль) в EtOH (2 мл) добавляли HCl (2 мл, 4 М в диоксане). После перемешивания при 80°C в течение 1 ч смесь выливали в насыщ. NaHCO₃, экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (DCM/MeOH=10:1) с получением 10 мг 2-(2-(1H-пиразол-3-ил)этил)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS: масса/заряд 407 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,52 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,60-7,10 (m, 2H), 6,30 (d, 1H), 6,18-6,02 (m, 2H), 5,90 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,61-3,41 (m, 2H), 3,19-3,12 (m, 2H).

Пример 4. Синтез соединений E4-vii и E4-viii

где Hal представляет собой галоген (например, Br или I); LG представляет собой уходящую группу (например, галоген, такой как Br или I; OMs или OTs); Q определен в любом из вариантов осуществления с первого по двадцать шестой; и Q' представляет собой дополнительно функционализированный Q (например, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный карбоцикл или необязательно замещенный гетероциклил). Реакция ароматического замещения соединения E4-i метантиолатом натрия обеспечивает получение соединения E4-ii, которое можно преобразовать в соединение E4-v с применением синтеза соединения E1-iii в E1-vi. Окисление соединения E4-v с помощью mCPBA обеспечивает получение соединения E4-vi и E4-vii соответственно. Соединение E4-viii может быть преобразовано из E4-v путем дополнительной функционализации Q в Q’.

Пример 4A. Синтез 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A: этил-4-метил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат. К смеси этил-2-бром-4-метил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (500,0 мг, 1,73 ммоль) в EtOH (10,0 мл) добавляли NaSMe (240,0 мг, 3,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 3 ч, затем гасили с помощью ледяной воды и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением необходимого продукта (460 мг), который непосредственно применяли на следующей стадии без какой-либо очистки. LC-MS: масса/заряд 257 (M+H)⁺.

Стадия B: этил-6-формил-4-метил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат. К раствору этил-4-метил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (460,0 мг, 1,8 ммоль) и N-метил-N-фенилформамида (490 мг, 3,6 ммоль) в DCE (10 мл) добавляли POCl₃ (550,0 мг, 3,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 130°C в течение 3 ч, затем гасили с помощью ледяной воды и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=8/1) с получением необходимого продукта (320,0 мг). LC-MS: масса/заряд 285 (M+H)⁺.

Стадия C: 4-метил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К раствору этил-6-формил-4-метил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (300,0 мг, 1,06 ммоль) в EtOH (5,0 мл) добавляли N₂H₄.H₂O (2 мл, 98 вес. %). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч, затем нагревали до 60°C в течение ночи, затем охлаждали. Твердое вещество собирали путем фильтрации и высушивали под высоким вакуумом с получением необходимого продукта (180,0 мг). LC-MS: масса/заряд 253 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 12,61 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 4,22 (s, 3H), 2,81 (s, 3H).

Стадия D: 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К раствору 4-метил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (180,0 мг, 0,7 ммоль) в DMF (5,0 мл) добавляли карбонат калия (200 мг, 1,4 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 1 ч. с последующим добавлением 1-(хлорметил)-3-метоксибензола (170 мг, 1,07 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 3 ч., затем гасили с помощью ледяной воды (100,0 мл) и экстрагировали с помощью DCM. (10,0 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/MeOH=10/1) с получением необходимого продукта (200,0 мг). LC-MS: масса/заряд 373 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,57 (s, 1H), 7,24 (t, 1H), 6,88-6,82 (m, 3H), 5,32 (s, 2H), 4,24 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 2,82 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E4-4	6-(Имидазо[1,2-a]пиримидин-2-илметил)-4-метил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 384 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,87 (dd, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,49 (dd, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,02 (dd, 1H), 5,49 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 2,82 (s, 3H).
E4-5	3-((4-Метил-2-(метилтио)-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)бензолсульфонамид	LCMS: масса/заряд 422 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,60 (s, 1H), 7,75-7,72 (m, 2H), 7,55-7,53 (m, 2H), 7,36 (s, 2H), 5,42 (s, 2H), 4,23 (s, 3H), 2,81 (s, 3H).
E4-6	4-((4-Метил-2-(метилтио)-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензолсульфонамид	LCMS: масса/заряд 422 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,59 (s, 1H), 7,77 (d, 2H), 7,46 (d, 2H), 7,31 (s, 2H), 5,41 (s, 2H), 4,23 (s, 3H), 2,82 (s, 3H).
E4-7	6-((2-Аминобензо[d]тиазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 415 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,59 (s, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,55 (d, 1H), 6,89 (t, 1H), 6,68 (d, 1H), 5,61 (s, 2H), 4,24 (s, 3H), 2,82 (s, 3H).
E4-8	6-(3-Метоксибензил)-4-метил-2-(фенилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 435 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,50 (s, 1H), 7,80 (dd, 2H), 7,61 (dd, 3H), 7,21 (d, 1H), 6,83 (d, 3H), 5,29 (s, 2H), 4,23 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).
E4-9	6-((2-(2,5-Диметил-1H-пиррол-1-ил)тиазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 443 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,13 (s, 1H), 7,05 (s, 1H), 5,77 (s, 2H), 5,32 (d, 2H), 4,31 (s, 3H), 2,74 (s, 3H), 2,10 (s, 6H).

Пример 4B. Синтез 4-метил-2-(метилтио)-6-((2-оксо-2,3-дигидропиримидин-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Смесь 6-((2-хлорпиримидин-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,132 ммоль) в HCl (10 мл) перемешивали при 100°C в течение 1 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (5,0 мг, выход 10,51%). LCMS: масса/заряд 361 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 11,82 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 6,14 (s, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,24 (s, 3H), 2,82 (s, 4H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов.

№ соединения	Структура	Характеристика
E4-11	4-Метил-2-(метилтио)-6-((2-оксо-1,2-дигидропиримидин-5-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: 361(M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 11,95 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,31 (s, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,23 (s, 3H), 2,81 (s, 3H).

Пример 4C. Синтез 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

К раствору 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (30,0 мг, 0,08 ммоль) в DCM (3,0 мл) при 0°C добавляли m-CPBA (14,0 мг, 0,08 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, затем гасили с помощью ледяной воды и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/MeOH=10/1) с получением необходимого продукта (15,0 мг). LC-MS: масса/заряд 389 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,74 (s, 1H), 7,25 (t, 1H), 6,86 (dd, 3H), 5,35 (s, 2H), 4,30 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,11 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E4-13	6-(3-Метоксибензил)-4-метил-2-(фенилсульфинил) -4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 451 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,67 (s, 1H), 7,90 (dd, 2H), 7,70-7,62 (m, 3H), 7,22 (t, 1H), 6,83 (d, 3H), 5,31 (s, 2H), 4,25 (s, 3H), 3,70 (s, 3H).
E4-14	6-(3-Ацетилбензил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 401 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,75 (s, 1H), 7,92-7,87 (m, 2H), 7,58-7,56 (m, 1H), 7,49 (t, 1H), 5,45 (s, 2H), 4,29 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 2,56 (s, 3H).
E4-15	6-(3-(1-Гидроксиэтил)бензил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 425 (M+Na)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,73 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,28-7,21 (m, 2H), 7,15-7,13 (m, 1H), 5,34 (s, 2H), 5,14 (d, 1H), 4,70-4,64 (m, 1H), 4,30 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 1,28 (d, 3H).
E4-16	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 399 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,14 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,47 (d, 1H), 7,29 (t, 1H), 6,98 (d, 1H), 5,68 (s, 2H), 4,31 (s, 3H), 3,11 (s, 3H).
E4-17	4-((4-Метил-2-(метилсульфинил)-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензонитрил	LC-MS: 384(M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,81 (s, 1H), 7,86 (d, 2H), 7,53 (d, 2H), 5,52 (d, 2H), 4,34 (s, 3H), 3,17 (s, 3H).
E4-18	4-Метил-2-(метилсульфинил)-6-(хинолин-2-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,78 (s, 1H), 8,32 (d, 1H), 7,94 (dd, 2H), 7,82-7,68 (m, 1H), 7,59 (dd, 1H), 7,33 (d, 1H), 5,75-5,56 (s, 2H), 4,30 (s, 3H), 3,12 (s, 3H).
E4-19	6-((2,3-Дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 417 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,71 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 6,80 (d, 1H), 5,24 (d, 2H), 4,30 (s, 3H), 4,20 (s, 4H), 3,11 (s, 3H).
E4-20	6-(2,3-Дигидро-1H-индол-4-илметил)-2-метансульфинил-8-метил-6,8-дигидро-3-тиа-1,5,6,8-тетраазациклопента[a]инден-7-он	LC-MS: масса/заряд 400 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,71 (s, 1H), 6,83 (dd, 1H), 6,38 (d, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,29 (s, 3H), 3,41 (t, 2H), 3,11 (s, 3H), 2,96 (t, 2H).
E4-21	2-Метансульфинил-8-метил-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-5-илметил)-6,8-дигидро-3-тиа-1,5,6,8-тетраазациклопента[a]инден-7-он	LC-MS: масса/заряд 414 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,73 (s, 1H), 7,03 (t, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,77 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,29 (s, 3H), 3,90 (s, 2H), 3,11 (s, 3H), 3,06 (t, 2H), 2,78 (t, 2H).

Пример 4D. Синтез 4-((4-метил-2-(метилсульфинил)-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензамида

Стадия A: 4-((4-метил-2-(метилтио)-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензамид. Смесь 4-((4-метил-2-(метилтио)-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензонитрила (50,0 мг, 0,13 ммоль) в H₂SO₄ (1,0 мл) перемешивали при 0°C в течение 1 ч, затем нейтрализовали с помощью насыщенного водного NaHCO₃ и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/MeOH=10/1) с получением необходимого продукта (20,0 мг). LC-MS: масса/заряд 386 (M+H)⁺.

Стадия B: 4-((4-метил-2-(метилсульфинил)-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензамид. К раствору 4-((4-метил-2-(метилтио)-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензамида (20,0 мг, 0,052 ммоль) в DCM (2,0 мл) при 0°C добавляли m-CPBA (10,0 мг, 0,052 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, затем гасили с помощью ледяной воды (10,0 мл) и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/MeOH=10/1) с получением необходимого продукта (5,0 мг). LC-MS: масса/заряд 402 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,75 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,82 (d, 2H), 7,38-7,33 (m, 3H), 5,42 (s, 2H), 4,29 (s, 3H), 3,11 (s, 3H).

Пример 4E. Синтез 6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)бензил)-4-метил-2-(метилсульфинил) -4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. 6-(3-(2-Гидроксипропан-2-ил)бензил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 6-(3-ацетилбензил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (120 мг, 0,31 ммоль) в сухом THF (5 мл) при 0°C добавляли по каплям метилмагнийхлорид (0,3 мл, 0,9 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин, затем выливали в насыщенный водн. NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (70 мг). LCMS: масса/заряд 401 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,56 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,23 (t, 1H), 7,09 (d, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,98 (s, 1H), 4,24 (s, 3H), 2,81 (s, 3H), 1,39 (s, 6H).

Стадия B. 6-(3-(2-Гидроксипропан-2-ил)бензил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)бензил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (46 мг, 0,115 ммоль) в DCM (3 мл) при 0°C добавляли m-CPBA (20 мг, 0,1 ммоль, 85% вес./вес.). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин, затем гасили с помощью насыщенного водн. Na₂S₂O₃ и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (10 мг). LCMS: масса/заряд 417 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,73 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,24 (t, 1H), 7,09 (d, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,98 (s, 1H), 4,30 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 1,39 (s, 6H).

Пример 4F. Синтез 6-((2-аминопиридин-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. 2-Бром-4-(бромметил)пиридин. Смесь 2-бром-4-метилпиридина (1 г, 5,81 ммоль), NBS (1,1 г, 6,39 ммоль) и каталитическое количество AIBN (100 мг) в CCl₄ (10 мл) перемешивали при 80°C в течение ночи. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=200/1) с получением необходимого продукта (500 мг).

Стадия B. 6-((2-Бромпиридин-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. Смесь 4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,40 ммоль) и K₂CO₃ (164 мг, 1,19 ммоль) в DMF (8 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч с последующим добавлением раствора 2-бром-4-(бромметил)пиридина (199 мг, 0,80 ммоль) в DMF (2 мл) и каталитического количества TBAB (13 мг). Смесь перемешивали при 60°C в течение ночи, затем гасили с помощью воды (20 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали с помощью насыщенного водного NH₄Cl, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=10/1) с получением необходимого продукта (150 мг). LCMS: масса/заряд 423 (M+H)⁺.

Стадия C. трет-Бутил-(4-((4-метил-2-(метилтио)-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамат. Смесь 6-((2-бромпиридин-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,24 ммоль), трет-бутил карбамата (83 мг, 0,71 ммоль), K₃PO₄ (201 мг, 0,95 ммоль), Pd₂(dba)₃ (18 мг, 0,02 ммоль) и Xantphos (11 мг, 0,02 ммоль) в диоксане (10 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота в течение ночи. Полученную смесь гасили с помощью воды и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=3/1) с получением необходимого продукта (100 мг). LCMS: масса/заряд 459 (M+H)⁺.

Стадия D-E: трет-бутил-(4-((4-метил-2-(метилсульфинил)-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамат синтезировали с применением процедуры, аналогичной примеру 4C, и 6-((2-аминопиридин-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он синтезировали с применением процедуры, аналогичной примеру 3G. LCMS: масса/заряд 375 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,67 (s, 1H), 7,73 (d, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,12 (s, 1H), 5,89 (s, 2H), 5,24-5,03 (m, 2H), 4,29 (s, 3H), 3,03 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E4-28	6-((2-Аминопиримидин-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 376 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,76 (s, 1H), 8,12 (d, 1H), 6,60 (s, 2H), 6,22 (d, 1H), 5,20 (t, 2H), 4,28 (s, 3H), 3,12 (s, 3H).
E4-29	6-((2-Аминопиримидин-5-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: 376(M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,70 (s, 1H), 8,29 (s, 2H), 6,66 (s, 2H), 5,16 (s, 2H), 4,28 (s, 3H), 3,10 (s, 3H).

Пример 4G. Синтез 6-((2-аминотиазол-5-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A-B. 2-Бром-5-(бромметил)тиазол и 6-((2-бромтиазол-5-ил)метил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он синтезировали аналогично примеру 4F.

Стадия C. 6-((2-((2,4-Диметоксибензил)амино)тиазол-5-ил)метил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. Смесь 6-((2-бромтиазол-5-ил)метил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (130 мг, 0,30 ммоль) и DIPEA (0,1 мл) в NMP (0,1 мл) и (2,4-диметоксифенил)метанамина (0,1 мл) перемешивали при 150°C в течение 4 ч. Затем реакционную смесь гасили водой (10 мл), экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюировали с помощью PE/EtOAc=5/1) с получением необходимого продукта (60 мг, выход 38,4%). LC-MS: масса/заряд 515 (M+H)⁺.

Стадия D. 6-((2-((2,4-Диметоксибензил)амино)тиазол-5-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 6-((2-((2,4-диметоксибензил)амино)тиазол-5-ил)метил)-4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,10 ммоль) в THF (3 мл) при 0°C добавляли оксон (61 мг, 0,10 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, затем гасили с помощью насыщенного водного раствора Na₂S₂O₃ (5 мл) и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением необходимого продукта (30 мг, выход 50,1%), который применяли непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. LC-MS: масса/заряд 531 (M+H)⁺.

Стадия E. 6-((2-Аминотиазол-5-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он синтезировали аналогично примеру 3G. LC-MS: масса/заряд 381 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,70 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,87 (s, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,29 (s, 3H), 3,11 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E4-34	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 381 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,69 (s, 1H), 6,92 (s, 2H), 6,21 (s, 1H), 5,26-5,05 (m, 2H), 4,30 (s, 3H), 3,11 (s, 3H).

Пример 4H. Синтез 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-(метилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

К раствору 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-(метилсульфинил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (30,0 мг, 0,08 ммоль) в DCM (3,0 мл) при 0°C добавляли m-CPBA (35,0 мг, 0,2 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч., затем гасили с помощью ледяной воды и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/MeOH=10/1) с получением необходимого продукта (10,0 мг, выход 32%). LC-MS: масса/заряд 405 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,78 (s, 1H), 7,24 (t, 1H), 6,92-6,82 (m, 3 H), 5,35 (s, 2H), 4,33 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,57 (s, 3H).

№ соединения	Структура	Характеристика
E4-36	6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-(фенилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 467 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,75 (s, 1H), 8,11 (d, 2H), 7,81 (dd, 1H), 7,73 (dd, 2H), 7,23 (s, 1H), 6,86-6,83 (m, 3H), 5,32 (s, 2H), 4,24 (s, 3H), 3,70 (s, 3H).
E4-37	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(метилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 415 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,13 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,31-7,25 (m, 1H), 6,99 (d, 1H), 5,69 (s, 2H), 4,34 (s, 3H), 3,56 (s, 3H).
E4-38	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(бензилсульфонил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 491 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,16 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,47 (d, 1H), 7,35-7,27 (m, 4H), 7,24 (d, 2H), 7,00 (d, 1H), 5,68 (s, 2H), 5,05 (s, 2H), 4,36 (s, 3H).

Пример 5. Синтез соединений формулы E5-ii и производных по схеме E5.

Схема E5

где Q определен в любом из вариантов осуществления настоящего изобретения с первого по двадцать шестой; Nu представляет собой нуклеофил (т.е. химическое вещество, которое отдает электронную пару электрофилу с образованием химической связи по отношению к реакции). Nu’ представляет собой необязательно замещенный алкоксил, необязательно замещенный тиол, необязательно замещенную аминогруппу или необязательно функционализированные углеродные нуклеофилы.

Пример 5A. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(бензилтио)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. 2-(Бензилтио)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К раствору фенилметантиола (91,21 мг, 734,32 мкмоль) в DCM (5 мл) при 0°C добавляли DIPEA (142,3 мг, 1,10 ммоль) и 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он (200 мг, 0,37 ммоль). Смесь перемешивали при 20°C в течение 1 ч, затем гасили с помощью воды и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/1-3/1) с получением необходимого продукта (200 мг). LCMS: масса/заряд 589 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(бензилтио)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. Смесь 2-(бензилтио)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 50,95 мкмоль) в DCM/TFA (об.:об. = 3:1) перемешивали при 20°C в течение 2 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (5 мг). LCMS: масса/заряд 459 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,11 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,49 (d, 2H), 7,45 (d, 1H), 7,34 (t, 2H), 7,28 (dd, 2H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,62 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).

Пример 5B. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-сульфонамида

Стадия A. 4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-сульфонамид. К раствору 2-(бензилтио)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,169 ммоль) в HOAc/H₂O (об.:об.= 1:1, 10 мл) добавляли NCS (45 мг, 0,34 ммоль). Смесь перемешивали при 40°C в течение 3 ч, затем охлаждали до 0°C с последующим медленным добавлением NH₃/THF (5 мл) до pH 9 при этой температуре. Полученную смесь перемешивали при 20°C в течение 0,5 ч, затем экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (элюент: PE/EtOAc=1/1) с получением необходимого продукта (20 мг). LCMS: масса/заряд 546 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-сульфонамид. Смесь 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-сульфонамида (20 мг, 36,65 мкмоль) в DCM/TFA (об./об.=3/1) перемешивали при 20°C в течение 2 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (1,7 мг). LCMS: масса/заряд 416 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,13 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 8,31 (brs, 2H), 8,17 (s, 1H), 7,47 (d, 1H), 7,36-7,20 (m, 1H), 6,99 (d, 1H), 5,68 (s, 2H), 4,30 (s, 3H).

№ соединения	Структура	Характеристика
E5-3	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-(бензиламино) -4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 442 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,10 (s, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,46-7,34 (m, 5H), 7,32-7,24 (m, 2H), 6,93 (d, 1H), 5,61 (s, 2H), 4,59 (d, 2H), 4,12 (d, 3H).
E5-4	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(фениламино)-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 428 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,11 (s, 1H), 10,81 (brs, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,75 (d, 2H), 7,45 (d, 1H), 7,38 (dd, 2H), 7,32-7,24 (m, 1H), 7,06 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,63 (s, 2H), 4,22 (s, 3H).
E5-5	N-(6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-(1H-пиразол-3-ил)ацетамид	LCMS: масса/заряд 460 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,12 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,22 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,22 (s, 3H), 3,84 (s, 2H).
E5-6	6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-2-карбонитрил	LC-MS: масса/заряд 362 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,14 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,34-7,22 (m, 1H), 6,98 (d, 1H), 5,70 (s, 2H), 4,32 (d, 3H).
E5-7	6-((2-Аминотиазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбонитрил	LCMS: масса/заряд 344 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,75 (s, 1H), 6,92 (s, 2H), 6,24 (s, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,31 (s, 3H).
E5-8	6-((6-Аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбонитрил	LCMS: масса/заряд 338 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,79 (s, 1H), 7,34-7,18 (m, 1H), 6,31 (d, 1H), 6,14 (d, 1H), 5,91 (s, 2H), 5,22 (s, 2H), 4,31 (s, 3H).

Пример 5C. Синтез диметил-2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)малоната

Стадия A. Диметил-2-(4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)малонат. К смеси t-BuOK (103 мг, 0,92 ммоль) и диметилмалоната (91 мг, 0,69 ммоль) в THF (5 мл) в атмосфере N₂ добавляли 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он (250 мг, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 16 ч, затем выливали в ледяную воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением необходимого продукта (100 мг, выход 36,48%). LC-MS: масса/заряд 597 (M+H)⁺.

Стадия B. 2-(6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)малонат синтезировали аналогично примеру 5A. LC-MS: масса/заряд 467 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,12 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,30-7,26 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,84 (s, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,77 (s, 6H).

Пример 5D. Синтез метил-2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)ацетата

Стадия A. Метил-2-(4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)ацетат . К раствору диметил-2-(4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)малоната (130 мг, 0,22 ммоль) в DMSO (2 мл) в атмосфере N₂ добавляли насыщенный водный LiCl (0,1 мл). Полученную смесь перемешивали при 130°C в течение 10 мин., затем выливали в ледяную воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Затем остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением необходимого продукта (100 мг). LC-MS: масса/заряд 539 (M+H)⁺.

Стадия B. Метил-2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)ацетат синтезировали как в примере 5A. LC-MS: масса/заряд 409 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,12 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,30-7,26 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,39 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,70 (s, 3H).

Пример 5E. Синтез 2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)ацетамида

Стадия A. 2-(4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)уксусная кислота. К смеси метил-2-(4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)ацетата (100 мг, 0,186 ммоль) в MeOH/H₂O (3 мл/1 мл) при 0°C в атмосфере N₂ добавляли LiOH (23 мг, 0,558 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток подкисляли водной HCl (1 М) и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток непосредственно применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. LC-MS: масса/заряд 525 (M+H)⁺.

Стадия B. 2-(4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)ацетамид. К смеси 2-(4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)уксусной кислоты (50 мг, 0,095 ммоль), EDCI (37 мг, 0,190 ммоль), HOBT (26 мг, 0,190 ммоль) и DIPEA (0,05 мл, 0,286 ммоль) в DCM (5 мл) при 0°C добавляли NH₄Cl (26 мг, 0,477 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч, затем выливали в ледяную воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением необходимого продукта (20 мг). LC-MS: масса/заряд 524 (M+H)⁺.

Стадия C. 2-(6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)ацетамид синтезировали с применением процедуры, как в примере 5A. LCMS: масса/заряд 394 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,12 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,33-7,22 (m, 2H), 6,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 4,07 (s, 2H).

Пример 5F. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксамида

Стадия A. 4-Метил-2-(метилтио)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (1 г, 3,96 ммоль) в DMF (25 мл) при 0° добавляли NaH (318 мг, 7,93 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин с последующим добавлением раствора 4-(бромметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазола (2 г, 5,94 ммоль) в DMF (10 мл) при 0°. Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем выливали в ледяную воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=от 50/1 до 10/1) с получением необходимого продукта (1,85 г). LCMS: масса/заряд 513 (M+H)⁺.

Стадия B. 4-Метил-2-(метилсульфонил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он.

К смеси 4-метил-2-(метилтио)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (700 мг, 1,37 ммоль) в DCM (20 мл) при 0° добавляли m-CPBA (831 мг, 4,01 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи, затем гасили с помощью насыщенного водного Na₂SO₃ и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением необходимого продукта (360 мг). LCMS: масса/заряд 545 (M+H)⁺.

Стадия C. 4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбонитрил. К смеси 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (300 мг, 0,552 ммоль) в DMF (10 мл) при 0° добавляли KCN (72 мг, 1,10 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч., затем гасили с помощью воды и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/1) с получением необходимого продукта (210 мг). LCMS: масса/заряд 492 (M+H)⁺.

Стадия D. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксамид. Смесь 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбонитрила (50 мг, 0,1 ммоль) в конц. H₂SO₄ (3 мл) перемешивали при к.т. в течение 12 ч, затем гасили с помощью насыщенного водного NaHCO₃ (водн.) и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (6 мг). LCMS: масса/заряд 380 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,12 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,33-7,23 (m, 1H), 6,98 (d, 1H), 5,68 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E5-13	6-((2-Аминотиазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксамид	LCMS: масса/заряд 362 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,65 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 6,92 (s, 2H), 6,22 (s, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).
E5-14	6-((6-Аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксамид	LCMS: масса/заряд 356 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,69 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,34-7,19 (m, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,12 (d, 1H), 5,91 (s, 2H), 5,21 (s, 2H), 4,32 (s, 3H).

Пример 5G. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-N-гидрокси-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксамида

Стадия A. Метил-4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксилат. К смеси 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбонитрила (100 мг, 0,20 ммоль) в MeOH (10 мл) при 0°C добавляли MeONa (110 мг, 0,61 ммоль, 30 вес. %). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1,5 ч, затем гасили с помощью насыщенного HCl (1 М) и экстрагировали с помощью DCM (30 мл). Объединенные органические слои высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением необходимого продукта (85 мг) в виде желтого масла, которое непосредственно применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: масса/заряд 525 (M+H)⁺.

Стадия B. 4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоновая кислота. К смеси метил-4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксилата (90 мг, 0,18 ммоль) в THF (10 мл) при 0°C добавляли раствор LiOH (12 мг, 0,48 ммоль) в H₂O (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи, затем медленно регулировали до pH 5 с помощью водной HCl (1 М) и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением необходимого продукта (70 мг, выход 84% неочищенного вещества) в виде белого масла, которое непосредственно применяли на следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки. LCMS: масса/заряд 511 (M+H)⁺.

Стадия C. 4-Метил-5-оксо-N-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксамид. К смеси 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоновой кислоты (70 мг, 0,14 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°C добавляли O-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)гидроксиламин (24 мг, 0,21 ммоль), EDCI (39 мг, 0,21 ммоль) и HOBT (28 мг, 0,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи, затем гасили с помощью воды и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (35 мг) в виде желтого масла. LCMS: масса/заряд 610 (M+H)⁺.

Стадия D. 6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-N-гидрокси-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбоксамид синтезировали с применением процедуры в примере 5A.LCMS: масса/заряд 396 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,12 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,31-7,25 (m, 1H), 6,97 (d, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,31 (s, 3H).

Пример 5H. Синтез 2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-фенилацетамида

Стадия A. 2-(4-Метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-фенилацетонитрил. К смеси 2-фенилацетонитрила (43 мг, 0,36 ммоль) в THF (3 мл) добавляли NaH (14 мг, 0,36 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин. с последующим добавлением 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (100 мг, 0,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение еще 3 ч, затем гасили с помощью воды и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=3/1) с получением продукта (63 мг, выход 59%). LCMS: 582 (M+H)⁺.

Стадия B. 2-(6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-фенилацетамид синтезировали аналогично примеру 5F. LCMS: масса/заряд 470 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 13,11 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,54-7,24 (m, 8H), 6,94 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 5,51 (s, 1H), 4,24 (s, 3H).

№ соединения	Структура	Характеристика
E5-17	2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-(1H-пиразол-3-ил)ацетамид	LCMS: 460 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 13,11 (s, 1H), 12,88 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,27 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,34 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 5,56 (s, 1H), 4,27 (s, 3H).

Пример 5I. Синтез 2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-гидрокси-2-фенилацетамида

Смесь 2-(4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-фенилацетонитрила (100 мг, 0,18 ммоль) в конц. H₂SO₄ (1 мл) перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем выливали в воду и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в MeOH (3 мл) с последующим добавлением NH₃.H₂O (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (2 мг). LCMS: 486 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 13,12 (s, 1H), 8,61 (s, 1H), 8,14 (s, 1H),7,71 (d, 2H), 7,64 (d, 2H), 7,52 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,40-7,24 (m, 4H), 6,95 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).

Пример 5J. Синтез метил-2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-фенилацетата

Стадия A. Метил-2-(4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-фенилацетат. К смеси метил-2-фенилацетата (43 мг, 0,29 ммоль) в THF (3 мл) добавляли NaH (11 мг, 0,29 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин. с последующим добавлением 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (82 мг, 0,15 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч, затем гасили с помощью воды и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=3/1) с получением необходимого продукта (20 мг). LCMS: 615 (M+H)⁺.

Стадия B. Метил-2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-фенилацетат. Смесь метил-2-(4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-фенилацетата (40 мг, 0,07 ммоль) в DCM/TFA (об.:об. = 1:1, 2 мл) перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем выливали в воду и экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (5 мг). LCMS: 485 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 13,11 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,54-7,50 (m, 2H), 7,46-7,36 (m, 4H), 7,30-7,24 (m, 1H), 6,94 (d, 1H), 5,87 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,73 (s, 3H).

Процедуру, изложенную выше, применяли для получения следующих соединений с использованием соответствующих исходных материалов.

№ соединения	Структура	Характеристика
E5-20	Метил-2-(6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-2-ил)-2-(1H-пиразол-3-ил)ацетат	LCMS: 475 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,48 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,40 (d, 1H), 7,23 (dd, 1H), 6,89 (d, 1H), 6,32 (d, 1H), 5,58 (s, 2H), 4,19 (s, 3H), 3,63 (s, 3H).

Пример 6. Синтез 6-(3-метоксибензил)-4-метил-2-(трифторметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

К перемешиваемой смеси 2-йод-6-(3-метоксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (90 мг, 0,2 ммоль) и CuI (кат.) в DMF (5 мл) добавляли метил-2,2-дифтор-2-(фторсульфонил)ацетат (58 мг, 0,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 70°C в течение 4 ч, затем выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE/EtOAc=5/1) с получением необходимого продукта (10 мг). LCMS: масса/заряд= 395 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆ ) δ 8,78 (s, 1H), 7,24 (t, 1H), 6,90-6,82 (m, 3H), 5,34 (s, 2H), 4,32 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).

Пример 7. Синтез соединений E7-v и E7-viii

Нуклеофильное ароматическое замещение между соединением E7-iii и соединением E7-i и/или соединением E7-ii обеспечивает получение промежуточного соединения E7-iv. Восстановление фенилсульфонильной группы соединения E7-iv обеспечивает получение промежуточного соединения E7-v. Применение стандартной реакции алкилирования E7-vi и основания (например, K2CO3, K3PO4, t-BuOK или Cs2CO3) обеспечивает получение соединения E7-viii, где X^a представляет собой уходящую группу, такую как Cl, Br, I, OMs, OTs; каждый из Ar₁ и Ar₂ независимо представляет собой необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный карбоцикл или необязательно замещенный гетероциклил; необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиларил, необязательно замещенный алкилгетероарил, необязательно замещенный алкиленил и необязательно замещенную алкинильную группу. Соединение E7-viii также может быть синтезировано из промежуточного соединения E7-v посредством реакции Мицунобу с применением цианометилентрибутилфосфорана (CMBP) в толуоле. В некоторых вариантах осуществления каждый из Ar1 и Ar2 независимо представляет собой необязательно замещенный гетероарил.

Пример 7A. Синтез 4-метил-2-(метилсульфинил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (промежуточные соединения E7-i)

К перемешиваемой суспензии 4-метил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (1,01 г, 4,0 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли 3-хлорпероксибензойную кислоту (0,77 г, 3,8 ммоль) при к.т. Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Затем смесь фильтровали, промывали с помощью EtOAc и растирали с MeOH с получением 4-метил-2-(метилсульфинил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (600 мг). LCMS: масса/заряд 269 (M+H)⁺.1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 8,64 (s, 1H), 4,28 (s, 3H), 3,11 (s, 3H).

Пример 7B. Синтез 4-метил-2-(метилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло

[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (E7-ii)

В трехгорлую колбу, в которую был загружен 4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он (30 г, 0,119 моль, 1,0 экв.) в DCM (600 мл), добавляли m-CPBA (61,5 г, 3 экв.) при 20°C тремя порциями. Смесь перемешивали при 30^oC в течение ночи, с помощью LC-MS определяли 100% расход исходного материала. Смесь охлаждали до к.т., добавляли еще одну порцию m-CPBA (1,0 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение 2 ч, с помощью LC-MS определяли E7-ii (LCMS: масса/заряд 269 (M+H)⁺). Смесь охлаждали до к.т. и фильтровали. Осадок на фильтре суспендировали в MeOH (500 мл) и перемешивали при к.т. в течение 1 ч. Твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали этилацетатом, высушивали в вакууме с получением 28 г смеси 5% E7-i и 95% E7-ii. Смесь (28 г) суспендировали в DMSO (600 мл), нагревали до 120°C ~ 130°C с образованием прозрачного раствора. Затем охлаждали до к.т., твердое вещество осаждали. Смесь фильтровали и высушивали с получением 23 г чистого E5-1, LCMS: масса/заряд 285 (M+H)⁺. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ12,87 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 4,32 (s, 3H), 3,56 (s, 3H).

Пример 7C. Синтез 3-((фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразола

Метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-карбоксилат. При 0°C в атмосфере N₂ к перемешиваемому раствору метил-1H-пиразол-3-карбоксилата (90 г, 0,72 моль) в THF (1 л) добавляли NaH (20,7 г, 0,864 моль, 60%). Полученную смесь медленно нагревали до к.т. и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь затем охлаждали до 0^oC и добавляли по каплям SEMCl (151,5 мл, 0,842 моль). Перемешивание продолжали в течение еще 2 ч перед гашением с помощью насыщ. NH₄Cl и экстрагировали с помощью этилацетата (3 ×). Объединенные органические слои промывали солевым раствором и высушивали над Na₂SO₄. Растворители удаляли под вакуумом с получением неочищенного продукта 210 г, который применяли на следующей стадии без очистки.

(1-((2-(Триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метанол. При 0°C в атмосфере N₂ к суспензии LAH (16,9 г, 0,44 моль) в THF (760 мл) добавляли неочищенный метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-карбоксилат (76 г). Полученную смесь медленно нагревали до к.т. и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и последовательно добавляли H₂O (15,6 мл), 10% NaOH (15,6 мл), H₂O (15,6 мл). Полученную смесь фильтровали через подушку из целита и промывали с помощью MTBE (4 ×). Объединенные органические фракции высушивали над Na₂SO₄. Растворители удаляли при пониженном давлении с получением 69,4 г неочищенного продукта, который применяли на следующей стадии без очистки. LC-MS: масса/заряд 229 (M+H)⁺.

3-(Йодметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол. При 0°C в атмосфере N₂ к перемешиваемому раствору (1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метанола (61,5 г, теоретически 0,262 моль) в THF (310 мл) добавляли TEA (55,42 мл, 0,393 моль) с последующим добавлением MsCl (24 мл, 0,314 моль). Реакционную смесь нагревали до к.т. и перемешивали в течение 1 ч перед введением NaI (196,5 г, 1,31 моль в 310 мл DMF). Полученную смесь перемешивали в течение еще 1 ч и гасили с помощью ледяной воды, экстрагировали с помощью MTBE (3 ×). Объединенные органические слои промывали с помощью насыщ. Na₂S₂O₃ и солевого раствора, высушивали над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 77,5 г неочищенного продукта, применяемого на следующей стадии без очистки. LC-MS: масса/заряд 339 (M+H)⁺.

3-((Фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол. При 0°C в атмосфере N₂ к перемешиваемому раствору (1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метанола (77,5 г, теоретически 0,229 моль) в DMF (600 мл) добавляли бензолсульфинат натрия (53,5 г, 0,32 моль) и перемешивали в течение 1 ч при 0°C. После нагревания до к.т. реакционную смесь гасили ледяной водой и насыщ. Na₂S₂O₃, экстрагировали с помощью этилацетата (3 ×). Объединенные органические слои промывали последовательно с помощью насыщ. NaHCO₃ и солевого раствора, высушивали над Na₂SO₄. Растворители удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 20% ~ 70% этилацетат в петролейном эфире) с получением 56,7 г. LCMS: [M+H]⁺ 353. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 7,85-7,77 (m, 4H), 7,62 (dd, 2H), 6,19 (d, 1H), 5,35 (d, 2H), 4,70 (d, 2H), 3,44-3,38 (m, 2H), 0,88-0,77 (m, 2H), -0,01 (s, 9H).

Пример 7D. Синтез 4-метил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

4-Метил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-5-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К раствору 3-((фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразола (1,8 г, 5,1 ммоль) в сухом THF (30 мл) при -40°C добавляли по каплям LiHMDS (7,5 мл, 7,5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. с последующим добавлением суспензии 4-метил-2-(метилсульфинил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (580 мг, 2,7 ммоль) в сухом THF (30 мл) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при к.т. в течение еще 1 ч и выливали в ледяной насыщенный водный NH₄Cl (20 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали водой (60 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~2,5% метанол в дихлорметане) с получением необходимого продукта (800 мг). С помощью LC-MS (ESI) обнаружили: 557 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,03 (d, 1H), 7,84-7,78 (m, 3H), 7,67-7,59 (m, 2H), 6,94 (s, 1H), 6,72 (d, 1H), 5,48 (d, 2H), 4,29 (s, 3H), 3,56 (dd, 2H), 0,88 (dd, 2H), 0,00 (s, 9H).

4-Метил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-5-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 4-метил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-5-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (0,8 г, 1,41 ммоль) в THF (5 мл) и MeOH (10 мл) в атмосфере N₂ добавляли по каплям SmI₂ (0,1 М/THF, 45 мл) на ледяной бане. После перемешивания в течение 10 мин реакционную смесь гасили с помощью насыщенного водного NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали с помощью EAOAc (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали водой (60 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~3% метанол в дихлорметане) с получением необходимого продукта (310 мг). С помощью LC-MS) обнаружили: 417 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,31 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 6,39 (d, 1H), 5,49 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 4,43 (s, 3H), 3,62 (t, 2H), 0,95 (t, 2H), 0,0 (s, 9H).

Пример 7E. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-карбоксилат . К раствору метил-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-карбоксилата (900 мг, 5,1 ммоль) в сухом DMF (10 мл) добавляли порциями NaH (305 мг, 7,6 ммоль, 60%) при 0°C. Суспензию перемешивали в течение 15 мин. на ледяной бане перед введением по каплям (2-(хлорметокси)этил)триметилсилана (1,07 мл, 6,0 ммоль) и перемешивали в течение еще 1 ч при к.т. Затем смесь выливали в насыщ. NH₄Cl (водн.), экстрагировали с помощью этилацетата. Объединенные органические слои высушивали с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 0 ~ 30% этилацетат в петролейном эфире) с получением метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-карбоксилата (1,32 г). LCMS: масса/заряд 308 (M+H)⁺.

Стадия B. (1-((2-(Триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-ил)метанол . К раствору метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-карбоксилата (1 г, 3,2 ммоль) в сухом THF (10 мл) добавляли порциями LiHAl₄ (146 мг, 3,8 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение 30 мин. при 0°C. Затем суспензию выливали в насыщ. NH₄Cl (водн.), экстрагировали с помощью этилацетата (2 ×). Объединенные органические слои высушивали с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0 ~ 60% этилацетат в петролейном эфире) с получением (1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-ил)метанола (500 мг). LCMS: масса/заряд 280 (M+H)⁺.

Стадия C. 4-(Хлорметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин. К раствору (1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-ил)метанола (120 мг, 0,43 ммоль) в дихлорметане (2 мл) добавляли PPh₃ (225 мг, 0,86 ммоль). Смесь охлаждали до 0°C и добавляли NCS (114 мг, 0,86 ммоль). Суспензию нагревали до к.т. и перемешивали в течение еще 1 ч. Затем реакцию выливали в насыщ. NaHCO₃ (водн.). Водный раствор экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои высушивали с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~30% этилацетат в петролейном эфире) с получением 4-(хлорметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридина (70 мг) в виде масла. LCMS: масса/заряд 298 (M+H)⁺.

Стадия D. 4-Метил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси K₂CO₃ (41 мг, 0,3 ммоль) в безводном DMF (2 мл) добавляли 4-метил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он (41 мг, 0,1 ммоль) и перемешивали при 50°C в течение 30 мин. в атмосфере аргона. Добавляли раствор 4-(хлорметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридина (30 мг, 0,1 ммоль) в DMF (1 мл) и перемешивали в течение еще 4 ч. Суспензию охлаждали до к.т. и выливали в 0,5 н. HCl (водн.). Слои разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои высушивали с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением 4-метил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (40 мг, 60%). LCMS: масса/заряд 678 (M+H)⁺.

Стадия E. 2-((1H-Пиразол-3-ил)метил)-6-((1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он . Раствор 4-метил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 0,044 ммоль) в 35% TFA (1 мл, в дихлорметане) перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (3 мг). LCMS: масса/заряд 418 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,51 (s, 1H), 12,78 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,18 (d, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,43 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,78 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).

Пример 7F. Синтез 6-((1H-имидазол-2-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. 1-((2-(Триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазол-2-карбальдегид. Образец NaH промывали гексаном (2×10 мл) в атмосфере N₂. В колбу загружали сухой DMF (20 мл) и добавляли небольшими порциями 1H-имидазол-2-карбальдегид (500 мг, 5,2 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1,5 ч добавляли по каплям SEMCl (864 мг, 5,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин. Реакционную смесь выливали в воду, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над Na₂SO₄, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазол-2-карбальдегида (800 мг). LCMS: 227 (M+H)⁺.

Стадия B. (1-((2-(Триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазол-2-ил)метанол. К перемешиваемой смеси 1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазол-2-карбальдегида (1,6 г, 7 ммоль) в THF (20 мл) добавляли NaBH₄ (1,34 г, 35 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин. Реакционную смесь выливали в водн. NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над Na₂SO₄, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного (1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазол-2-ил)метанола (1,3 г).

Стадия C. 2-(Хлорметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазол. К перемешиваемой смеси (1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазол-2-ил)метанола (400 мг, 1,75 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли NCS (466 мг, 3,5 ммоль) и PPh₃ (920 мг, 3,5 ммоль) при к.т. Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью DCM. Смесь промывали водой, и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (PE: EtOAc=1: 1) с получением 2-(хлорметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазола. LCMS: 247 (M+H)⁺.К перемешиваемой смеси 4-метил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,12 ммоль) в сухом DMF (5 мл) добавляли K₂CO₃ (66 мг, 0,48 ммоль) при 60^oC в атмосфере N₂. Через 20 мин соединение E7-3 (60 мг, 0,24 ммоль) в сухом DMF (2 мл) добавляли при 60°C в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при 60^oC в течение 1,5 ч. в атмосфере N₂. Реакционную смесь охлаждали до к.т. и регулировали до pH= 5~6 с помощью 0,5 н. водн. HCl. Затем смесь экстрагировали с помощью EtOAc, промывали с помощью воды и солевого раствора. Органический слой высушивали над Na₂SO₄, концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью препаративной TLC (PE:EtOAc=1:1,5) с получением 4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазол-2-ил)метил)-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (25 мг). LCMS: 627 (M+H)⁺.Смесь 4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-имидазол-2-ил)метил)-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (25 мг, 0,04 ммоль) в DCM/TFA (2 мл/2 мл) перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (1,3 мг). LCMS: 367 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,51 (s, 1H), 7,66 (d, 1H), 6,9 (s, 2H), 6,27 (d, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).

Следующие соединения синтезировали в соответствии со схемой E7 и процедурой из примера 7C-7E с применением подходящего исходного материала.

№ соединения	Структура	Характеристика
E7-6	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(бензо[d][1,3]диоксол-5-илметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 421 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,77 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,89 (d, 1H), 6,86-6,80 (m, 2H), 6,26 (d, 1H), 5,97 (s, 2H), 5,24 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-7	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(бензо[d]тиазол-5-илметил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 434 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,81 (s, 1H), 9,38 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,48 (d, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,52 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-8	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2,2-диоксидо-1,3-дигидробензо[c][1,2,5] тиадиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 469 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,77 (s, 1H), 10,84 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,83-6,51 (m, 2H), 6,40 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-9	6-((1H-бензо[d]имидазол-4-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 417 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,76 (s, 1H), 12,51 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,08 (t, 1H), 6,70 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,71 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-10	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(изоиндолин-4-илметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,54 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,24-7,16 (m, 2H), 7,08 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 5H), 4,20 (s, 2H).
E7-11	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(3-ацетилбензил)-4-метил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 419 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,89-7,87 (m, 2H), 7,71 (s, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,51-7,47 (m, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,43 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,56 (s, 3H).
E7-12	6-(3-ацетилбензил)-2-(2-(3-ацетилфенил)-1-(1H-пиразол-3-ил)этил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 551 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,73 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,89-7,87 (m, 2H), 7,83 (s, 1H), 7,73-7,71 (m, 2H), 7,56-7,46 (m, 3H), 7,36-7,33 (m, 1H), 6,32 (d, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,99 (s, 1H), 4,27 (s, 3H), 3,67-3,59 (m, 2H), 2,56 (s, 3H), 2,49 (s, 3H).
E7-13	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(3-амино-4-гидроксибензил)-4-метил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 408 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,76 (s, 1H), 8,93 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 6,57 (d, 1H), 6,55 (d, 1H), 6,39 (dd, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,11 (s, 2H), 4,49 (br s, 4H), 4,27 (s, 3H).
E7-14	6-((1H-бензо[d][1,2,3]триазол-7-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS： 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,76 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,78 (d, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,36 (dd, 1H), 7,05 (d, 1H), 6,25 (d, 1H), 5,78 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,24 (s, 3H).
E7-15	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 433 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 10,69 (d, 2H), 8,55 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 6,84 (d, 2H), 6,73-6,59 (m, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,41 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-16	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1H-пиразолo[3,4-b]пиридин-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,52 (s, 1H), 12,77 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,50-8,46 (m, 1H), 8,15 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,14 (dd, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-17	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-бензил-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 377(M+1)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,35-7,22 (m, 5H), 6,26 (d, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-18	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1H-пиразолo[4,3-b]пиридин-5-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,29 (s, 1H), 12,8 (brs, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,96 (d, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,24 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,57 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-19	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(имидазо[1,2-a]пиримидин-2-илметил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,79 (s, 1H), 8,92 (dd, 1H), 8,61 (s, 1H), 8,55 (dd, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,08 (dd, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,55 (s, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,34 (s, 3H).
E7-20	6-((1H-индазол-3-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: ESI масса/заряд 417 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,91 (s, 1H), 12,77 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,73-7,70 (m, 2H), 7,48 (d, 1H), 7,30 (dd, 1H), 7,04 (t, 1H), 6,25 (d, 1H), 5,68 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-21	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((3-оксо-2,3-дигидро-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 433(M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 11,37 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,13 (d, 2H), 6,38-6,29 (m, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,79 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-22	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(3-гидроксибензил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 393 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6) δ 12,82 (s, 1H), 9,39 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,15(s, 1H), 6,92-6,55 (m, 3H), 6,31 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,53 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-23	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1H-пиразолo[4,3-b]пиридин-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6) δ 13,15 (s, 1H), 12,83 (s, 1H), 8,52(s, 2H), 8,02 (dd, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,40 (dd, 1H), 6,32 (d, 1H), 5,81 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).
E7-24	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразолo[4,3-b]пиридин-5-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 432 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6) δ 12,80 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 8,09 (d, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,29 (d, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,57 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 4,05 (s, 3H).
E7-25	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(нафталин-2-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 427 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6) δ 12,78 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,89-7,86 (m, 3H), 7,78 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,51-7,48 (m, 3H), 6,26 (d, 1H), 5,52 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-26	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-аминобензо[d]тиазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 449 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6) δ 12,79 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,63 (s, 2H), 7,54 (d, 1H), 6,89 (dd, 1H), 6,66 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,59 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-27	6-((1H-индол-4-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 416 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6) δ 12,77 (s, 1H), 11,13 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,32-7,28 (m, 2H), 7,00 (dd, 1H), 6,82 (d, 1H), 6,59 (s, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,58 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-28	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-6-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 417 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 11,59 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,89 (d, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 6,92 (d, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,51 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27(s, 3H).
E7-29	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((3H-имидазо[4,5-b]пиридин-5-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 13,04 (s, 1H), 12,77 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,44-8,28 (m, 1H), 8,07-7,88 (m, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,10 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,55 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-30	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((3-фтор-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-6-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 435 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,85 (s, 1H), 11,47 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,43 (t, 1H), 7,06 (d, 1H), 6,34 (d, 1H), 5,58 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).
E7-31	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2,3-дигидро-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-6-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 419 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,50 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,14 (d, 1H), 6,34 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 6,12 (d, 1H), 5,18 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,57 (m, 2H), 2,90 (t, 2H).
E7-32	5-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)оксазолo[4,5-b]пиридин-2(3H)-он	LC-MS: масса/заряд 435 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,88 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 6,94 (d, 1H), 6,35-6,29 (m, 2H), 5,32 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).
E7-33	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-6-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 433 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,84 (s, 1H), 11,01 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,53 (d, 1H), 6,76 (d, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,40 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,32 (s, 3H), 3,56 (s, 2H).
E7-34	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-хлор-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-6-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 451 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,87 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,02 (d, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,55 (s, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).
E7-35	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-фтор-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-6-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 435 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,68 (s, 1H), 6,97 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,90 (d, 1H), 5,49 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-36	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(циклогексилметил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 383 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,84 (d, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 4,47 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 4,00 (d, 2H), 1,96-1,83 (m, 1H), 1,76-1,40 (m, 6H), 1,33- 0,55 (m, 4H).
E7-37	6-бензил-2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 395 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,82 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,35-7,20 (m, 5H), 5,35 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-38	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 384 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 9,03 (d, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,42 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,48 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-39	6-((1,2,4-тиадиазол-5-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 385 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,79 (s, 1H), 8,84 (s, 1H), 8,64 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,84 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-40	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-аминотиазол-5-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 399 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 6,87 (br s, 2H), 6,27 (d, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-41	6-((1H-имидазол-4-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 367 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,48 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-42	6-((1H-пиразол-4-ил)метил)-2-((1H-пиразол-5-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 367 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,77 (brs, 2H), 8,49 (s, 1H), 7,72-7,35 (m, 3H), 6,25 (s,1H), 5,20 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-43	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(изотиазол-5-илметил)-4-метил-4H- тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 384 (M+1)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,77 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,46 (d, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,42 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-44	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-(гидроксиметил)тиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 414 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 6,15 (t, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,66 (d, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E7-45	4-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)тиазол-2-карбоксамид	LCMS: масса/заряд 427 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,70-7,60 (m, 2H), 6,27 (d, 1H), 5,50 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-46	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 368 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 14,89 (s, 1H), 12,78 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,95-7,54 (m, 2H), 6,26 (d, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-47	N-(6-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-5-фторпиридин-2-ил)ацетамид	LCMS: (ESI) масса/заряд 453 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,84 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,71 (s, 2H), 6,34 (s, 1H), 5,52 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 4,33 (s, 3H), 2,08 (s, 3H).
E7-48	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(тиазол-2-илметил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS： 384 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,64 (d, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-49	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-бромтиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 462, 464 (M, M+2H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 9,04 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,41 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E7-50	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-аминотиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 399 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,83(s, 2H), 5,27 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-51	4-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)тиазол-5-карбонитрил	LCMS: масса/заряд 409 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 9,36 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,61 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E7-52	4-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)тиазол-5-карбоксамид	LCMS: масса/заряд 427 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,75 (d, 2H), 6,26 (d, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E7-53	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((5-метилтиазол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 398 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,49 (s, 3H).
E7-54	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-(диметиламино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 421 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,39 (dd, 1H), 6,47 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 6,17 (d, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,47 (m, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,94 (s, 6H).
E7-55	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((5-(трифторметил) тиазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 452 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,85 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,57 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E7-56	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-хлортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,79 (s, 1H), 8,94 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-57	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-метокситиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS (ESI): масса/заряд 414 (M+H)+. 1H ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц), δ 8,45 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,93 (s, 3H).
E7-58	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS (ESI): масса/заряд 378 (M+H). 1H ЯМР (DMSO-d6, 400 МГц) δ 12,79 (s, 1H), 8,57 (d, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,48 (dd, 1H), 7,71 (ddd, 2H), 7,35 (ddd, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,38 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-59	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-амино-5-метоксипиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 423 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,91 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 6,17 (d, 1H), 5,68 (s, 2H), 5,16 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).
E7-60	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-амино-4-фторпиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 411 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,56 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 6,3-6,2 (m, 2H), 6,18 (d, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-61	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-хлор-5-метилпиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 426 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,56 (s, 1H), 7,73 (d, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,08 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,30 (s, 3H).
E7-62	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 385 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,83 (s, 1H), 12,68 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,64 (s, 2H), 6,26 (s, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,24 (s, 3H).
E7-63	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 394 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,79 (s, 1H), 11,74 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,30 (d, 1H), 6,83 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 6,09 (t, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-64	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-метоксипиридин-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 408 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,78 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,08 (dd, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,16 (d, 1H), 6,90 (dd, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,29 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,93 (s, 3H).
E7-65	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 385 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,88 (s, 1H), 12,61 (s, 1H), 8,61 (d, 1H), 7,78 (s, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,89 (d, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,54 (d, 2H), 4,34 (s, 3H).
E7-66	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-амино-5-метилпиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 407 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,84 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,18 (d, 1H), 6,33 (s, 1H), 6,15 (d, 1H), 5,75 (s, 2H), 5,25 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,33 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).
E7-67	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-метоксипиридин-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 408 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,87 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,27 (d, 1H), 7,84-7,72 (m, 2H), 6,86 (d, 1H), 6,34 (d, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,34 (s, 3H), 3,89 (s, 3H).
E7-68	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 394 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,77 (s, 1H), 11,53 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,47 (dd, 1H), 7,40 (d, 1H), 6,27 (dd, 2H), 5,07 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-69	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-метоксипиридин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 408 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,86 (s, 1H), 8,65 (d, 1H), 8,17 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 6,94-6,89 (m, 1H), 6,66 (s, 1H), 6,34 (d, 1H), 5,41 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,34 (s, 3H), 3,89 (s, 3H).
E7-70	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 394 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,57 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,23 (t, 1H), 6,27 (d, 1H), 6,07 (dd, 1H), 5,97 (s, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-71	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-амино-1H-имидазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 382 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,80 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 6,34 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,18 (s, 2H), 5,06 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-72	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-(гидроксиамино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 409 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,83 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,55-8,65 (m, 2H), 7,79 (s, 1H), 7,56 (t, 1H), 6,77 (d, 1H), 6,40 (d, 1H), 6,32 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,52 (s, 2H), 4,31 (s, 3H).
E7-73	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(изотиазол-3-илметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: ESI масса/заряд 384 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,01 (d, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,21 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,50 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-74	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-1,2,3-триазол-5-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: ESI масса/заряд 382 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,49 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 4,10 (s, 3H).
E7-75	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: ESI масса/заряд 382 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,38 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,99 (s, 3H).
E7-76	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: ESI масса/заряд 378 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,94 (s, 1H), 8,64 (s, 1H), 8,57 (d, 1H), 7,82 (m, 2H), 7,36 (m, 1H), 7,23 (d, 1H), 6,36 (d, 1H), 5,55 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 4,36 (s, 3H).
E7-77	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-хлор-1H-пиразол-5-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 401 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,96 (s, 1H), 12,77 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-78	3-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)-1H-пиразол-5-карбоксамид	LCMS: масса/заряд 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,34 (s, 1H), 12,81 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,70 (s, 2H), 7,26 (m, 1H), 6,64 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,35 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-79	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-амино-3-фторпиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS масса/заряд 411,0 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,79 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,29 (dd, 1H), 6,34 (dd, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,74 (s, 2H), 5,30 (s, 2H), 4,46 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-80	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((2-метил-2H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS масса/заряд 382,0 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,79 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,38 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 4,08 (s, 3H).
E7-81	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((3-фтор-6-(метиламино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS масса/заряд 425 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,77 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,31 (t, 1H), 6,33-6,26 (m, 3H), 5,34 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,48 (s, 3H).
E7-82	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-амино-5-фторпиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 411 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,59 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,29 (dd, 1H), 6,47-6,06 (m, 4H), 5,26 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,32 (s, 3H).
E7-83	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(пиридин-4-илметил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 378 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,84 (s, 1H), 8,64 (s, 1H), 8,57 (d, 1H), 8,55 (d, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,28 (d, 2H), 6,33 (d, 1H), 5,45 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,32 (s, 3H).
E7-84	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(тиазол-5-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 384 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,85 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,54 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,74 (s, 1H), 6,24 (s, 1H), 5,55 (s, 2H), 4,46 (s, 2H), 4,30 (s, 3H).
E7-85	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((6-метилпиридин-2-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 392 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,61 (dd, 1H), 7,14 (d, 1H), 6,81 (d, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,43 (s, 3H).
E7-86	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(изотиазол-4-илметил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 384 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,48 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,31 (s, 3H).
E7-87	6-((1H-1,2,4-триазол-3-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 368 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,85 (s, 1H), 12,78 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,49-8,21(m, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,41 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-88	6-((1,3,4-тиадиазол-2-ил)метил)-2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 385 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,79 (s, 1H), 9,57 (s, 1H), 8,61 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,80 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-89	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-бром-5-фторпиридин-2-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 476 (M+2H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 7,81 (dd, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,30 (dd, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,43 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-90	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-хлор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 401 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,01 (s, 1H), 12,95 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,68 (dd, 1H), 6,26 (d, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-91	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-фтор-1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 399 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,29 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,70 (s, 3H).
E7-92	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-хлор-1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 415 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,82 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 6,31 (s, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,53 (s, 2H), 4,31 (s, 3H), 3,79 (s, 3H).
E7-93	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-аминотиазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 399 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,79 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,91 (s, 2H), 6,27 (s, 1H), 6,18 (s, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-94	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-метоксипиридин-2-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: (ESI) масса/заряд 408 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,79 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,63 (dd, 1H), 6,68 (d, 1H), 6,60 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E7-95	3-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-1-метил-1H-пиразол-4-карбонитрил	LC-MS: масса/заряд 406 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,40 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,83 (s, 3H).
E7-96	3-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-1-метил-1H-пиразол-4-карбоксамид	LC-MS: масса/заряд 424 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,53 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,69 (s, 3H).
E7-97	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-амино-1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 396 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,51 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,61 (s, 3H).
E7-98	3-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-1H-пиразол-4-карбонитрил	LC-MS: масса/заряд 392 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 13,62 (s, 1H), 12,79 (s, 1H), 8,54 (m, 2H), 7,71 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,45 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-99	3-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-1H-пиразол-4-карбоксамид	LC-MS: масса/заряд 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,75 (s, 2H), 8,48 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,57 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-100	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-4-(трифторметил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 449 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,85 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,34 (d, 1H), 7,77 (s, 1H), 6,32 (s, 1H), 5,44 (d, 2H), 4,54 (s, 2H), 4,32 (s, 3H), 3,83 (s, 3H).
E7-101	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-метокси-1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 411 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,77 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,61 (s, 3H).
E7-102	2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((4-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 399 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,90-12,30 (m, 2H), 8,49 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 1,96 (s, 3H).
E7-103	2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(тиазол-4-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 402 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,80 (s, 1H), 9,04 (d, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,49-7,39 (m, 1H), 5,48 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-104	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1,4-диметил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 395 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,86 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 6,32 (s, 1H), 5,29 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,32 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 1,99 (s, 3H).
E7-105	6-((4-амино-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 400 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,53 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,23 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-106	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-(гидроксиметил)-1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 411 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,82 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,28 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,38 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,71 (s, 3H).
E7-107	4-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)оксазол-5-карбоксамид	LC-MS: масса/заряд 411 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,80 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,56 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-108	6-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)никотинoнитрил	LC-MS: масса/заряд 403 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,82 (s, 1H), 8,94 (d, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,26 (dd, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,42 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,55 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E7-109	6-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)никотинамид	LC-MS: масса/заряд 421 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,82 (s, 1H), 8,92 (d, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,14 (dd, 2H), 7,69 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,23 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,50 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-110	6-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиколинамид	LC-MS: масса/заряд 421 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 7,97-7,82 (m, 3H), 7,75-7,60 (m, 2H), 7,26 (dd, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,53 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-111	6-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиколинoнитрил	LC-MS: масса/заряд 403 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,64 (s, 1H), 8,12-7,98 (m, 2H), 7,74 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,57 (s, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,32 (s, 3H).
E7-112	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-аминотиазол-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 399 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,58 (s, 2H), 5,36 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-113	6-((6-амино-3-фторпиридин-2-ил)метил)-2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 429 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,84 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,29 (t, 1H), 6,34 (dd, 1H), 5,76 (s, 2H), 5,31 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,23 (s, 3H).
E7-114	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-гидрокси-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 383 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,85 (s, 1H), 12,10 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,34 (s, 3H).
E7-115	2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-метокси-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 415 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,76 (s, 1H), 12,13 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,63 (s, 3H).
E7-116	2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((5-метилтиазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 416 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,51 (s, 3H).
E7-117	2-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)тиазол-4-карбонитрил	LC-MS: масса/заряд 409 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,80 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,69 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-118	2-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)тиазол-4-карбоксамид	LC-MS: масса/заряд 427 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,63 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,76-7,63 (m, 2H), 7,57 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-119	6-((5-хлортиазол-4-ил)метил)-2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 436 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,83 (s, 1H), 8,94 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 5,43 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-120	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-аминооксазол-5-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 383 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,65 (s, 1H), 6,57 (s, 2H), 6,23 (d, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-121	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-4-(трифторметокси)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 465 (M+H). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E7-122	5-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)оксазол-2-карбоксамид	LC-MS: масса/заряд 411 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,48 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-123	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-фтортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 402 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 8,57 (d, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,38 (d, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-124	4-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-1H-имидазол-2-карбоксамид	LC-MS: масса/заряд 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,83 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,67 (s, 2H), 7,38 (s, 1H), 7,06 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-125	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-хлороксазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 402 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,23 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-126	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-хлортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,82 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,31 (d, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,54 (s, 2H), 4,31 (s, 3H).
E7-127	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1-амино-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 382 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,48 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,37 (d, 1H), 6,34 (d, 2H), 6,27 (d, 1H), 6,00 (d, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-128	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-(метоксиметил)-1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 425 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,28 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,29-4,25 (m, 5H), 3,73 (s, 3H), 3,11 (s, 3H).
E7-129	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-хлороксазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 402 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-130	2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((4-(трифторметокси)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 469 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 13,37-12,75 (m, 2H), 8,65-8,50 (m, 1H), 8,15-7,58 (m, 2H), 5,49-5,36 (m, 2H), 4,67-4,50 (m, 2H), 4,32 (s, 3H).
E7-131	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-аминооксазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 383 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,84 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,25 (s, 1H), 6,58 (s, 2H), 6,32 (d, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,54 (s, 2H), 4,32 (s, 3H).
E7-132	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-(аминометил)-1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,89 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,77-7,64 (m, 2H), 6,33 (d, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,33 (s, 3H), 3,96 (s, 2H), 3,82 (s, 3H).
E7-133	2-(3-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-1-метил-1H-пиразол-4-ил)ацетамид	LC-MS: масса/заряд 438 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,25 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 3,31 (s, 2H).
E7-134	4-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)-1H-имидазол-5-карбоксамид	LC-MS: масса/заряд 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 12,10 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,72 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,30 (s, 3H).
E7-135	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-фтортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 402 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,85 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,14 (s, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,36 (d, 2H), 4,53 (d, 2H), 4,33 (s, 3H).
E7-136	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((1-амино-1H-пиразол-5-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 382 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,80 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,16 (d, 1H), 6,30 (s, 2H), 6,27 (s, 1H), 5,88 (s, 1H), 5,41 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-137	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((5-оксо-4,5-дигидро-1H-1,2,4-триазол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 384 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 11,31 (s, 1H), 8,54 (d, 1H), 7,69 (s, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,17 (d, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-138	4-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)оксазол-2-карбоксамид	LC-MS: масса/заряд 411 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,25-8,12 (m, 2H), 7,84 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-139	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 383 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,36 (s, 2H), 7,67 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,31 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E7-140	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((5-амино-1H-имидазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 382 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,79 (s, 1H), 11,47 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E7-141	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-аминопиримидин-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 394 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,60 (s, 2H), 6,27 (d, 1H), 6,18 (d, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E7-142	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((4-аминопиримидин-2-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 394 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,84 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,77 (s, 1H), 6,86 (s, 2H), 6,44-6,16 (m, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,32 (s, 3H).

Пример 7F. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(2-(тиазол-4-ил)этил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез этил-2-(тиазол-4-ил)ацетата. К раствору этил-2-(2-аминотиазол-4-ил)ацетата (2 г, 10,7 ммоль) в THF (30 мл) добавляли t-BuONO (1,6 г, 16,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc, промывали с помощью воды и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄, концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 80-100% EtOAc в PE) с получением этил-2-(тиазол-4-ил)ацетата (400 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 172 (M+1)⁺.

Стадия B. Синтез 2-(тиазол-4-ил)этанола. К перемешиваемому раствору этил-2-(тиазол-4-ил)ацетата (400 мг, 2,3 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли DIBAL-H (4,7 мл, 7,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N₂ в течение 3 ч. Реакционную смесь гасили с помощью насыщ. NaHCO₃, экстрагировали с помощью DCM и органический слой промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄, концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 50-100% EtOAc в PE) с получением 2-(тиазол-4-ил)этанола (200 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 130 (M+1)⁺.

Стадия C. Синтез 4-метил-6-(2-(тиазол-4-ил)этил)-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (60 мг, 0,14 ммоль) и 2-(тиазол-4-ил)этанола (55 мг, 0,4 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли CMBP (104 мг, 0,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N₂ в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc, промывали с помощью воды и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄, концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 80-100% EtOAc в PE) с получением 60 мг 4-метил-6-(2-(тиазол-4-ил)этил)-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS: масса/заряд 528 (M+1)⁺.

Стадия D. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(2-(тиазол-4-ил)этил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 4-метил-6-(2-(тиазол-4-ил)этил)-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (60 мг, 0,1 ммоль) в DCM (1 мл) добавляли TFA (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь регулировали до pH=7,5 с помощью насыщ. NaHCO₃, экстрагировали с помощью DCM, промывали с помощью солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄, концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (10% MeOH в DCM) с получением 10 мг 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(2-(тиазол-4-ил)этил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS: масса/заряд 398 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,03 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 4,58-4,40 (m, 4H), 4,26 (s, 3H), 3,23 (t, 2H).

№ соединения	Структура	Характеристика
E7-144	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(2-(пиридин-3-ил)этил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 392 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,47 (s, 1H), 8,39 (dd, 2H), 7,79-7,47 (m, 2H), 7,28 (dd, 1H), 6,26 (d, 1H), 4,49 (s, 2H), 4,41 (t, 2H), 4,25 (s, 3H), 3,09 (t, 2H).
E7-145	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 395 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,77 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,54 (d, 1H), 6,26 (m, 1H), 6,04 (d, 1H), 4,48 (s, 2H), 4,43-4,31 (m, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,01-2,90 (m, 2H).
E7-146	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(2-(6-аминопиридин-2-ил)этил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 407 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,80 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,26 (t, 1H), 6,35 (d, 1H), 6,31-6,25 (m, 2H), 5,85 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,42 (t, 2H), 4,28 (s, 3H), 2,93 (t, 2H).

Пример 8. Синтез соединений E8-v, E8-vi и E8-viii

Соединение E8-i может быть преобразовано в промежуточное соединение E8-ii посредством либо реакции алкилирования, либо реакции Мицунобу, как в примере E7-v в E7-viii. Окисление E8-ii с помощью либо mCPBA, либо оксона обеспечивает образование соединений E8-v и E8-vi. Как соединение E8-v, так и соединение E8-vi также могут быть образованы из E8-i путем сначала окисления, затем алкилирования или реакции Мицунобу. При этом X^a представляет собой уходящую группу (например, Cl, Br, I, OMs, OTs); соединения E8-v и E8-vi могут быть преобразованы в промежуточное соединение E8-viii посредством реакции нуклеофильного ароматического замещения с соединением E8-vii с применением LiHMDS или t-BuOK в качестве основания. Соединение E8-xi может быть синтезировано из соединения E8-viii с применением либо SmI2, либо Zn в AcOH или TES с AlCl₃. Как используется в данном документе, R1 представляет собой необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный карбоцикл или необязательно замещенный гетероциклил; каждый из Ar1 и Ar2 независимо представляет собой необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный карбоцикл или необязательно замещенный гетероциклил; необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиларил, необязательно замещенный алкилгетероарил, необязательно замещенный алкиленил и необязательно замещенный алкинил. В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой необязательно замещенный C_1-6алкил (например, метил или этил). В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой C_1-6алкил; и каждый из Ar1 и Ar2 независимо представляет собой необязательно замещенный гетероарил.

Пример 8A. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((5-хлор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Этил-5-хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-карбоксилат. К перемешиваемой смеси этил-5-хлор-1H-пиразол-3-карбоксилата (100 мг, 0,575 ммоль) и TEA (0,24 мл, 1,44 ммоль) в сухом DCM (10 мл) добавляли TrtCl (192 мг, 0,689 ммоль) при к.т. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч и затем выливали в H₂O. Полученную смесь экстрагировали с помощью DCM. Органический слой промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0-4% этилацетат в петролейном эфире) с получением необходимого продукта (неочищенное вещество, 240 мг, 100%).

(5-Хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-ил)метанол. К перемешиваемой смеси этил-5-хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-карбоксилата (1,20 г, 2,88 ммоль) в сухом THF (10 мл) добавляли LAH (400 мг, 10,5 ммоль) при -30°C. Реакционную смесь перемешивали при -30°C в течение 0,5 ч. Na₂SO₄-10H₂O (2 г) медленно добавляли для гашения реакции. Полученную смесь разбавляли с помощью EtOAc и фильтровали через подушку из целита. Фильтрат концентрировали и остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 10% ~ 15% этилацетат в петролейном эфире) с получением необходимого продукта (540 мг).

(5-Хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-ил)метилметансульфонат. К перемешиваемой смеси (5-хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-ил)метанола (100 мг, 0,267 ммоль) и DIPEA (0,14 мл, 0,801 ммоль) в сухом DCM (10 мл) добавляли MsCl (46 мг, 0,401 ммоль) при 10°C. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч. Реакционную смесь гасили водой. Полученную смесь экстрагировали с помощью DCM (2X). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением необходимого продукта (неочищенное вещество, 150 мг) в виде липкого масла.

5-Хлор-3-((фенилсульфонил)метил)-1-тритил-1H-пиразол. К перемешиваемой смеси (5-хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-ил)метилметансульфоната (150 мг неочищенного вещества, 0,267 ммоль) в сухом DMF (10 мл) добавляли PhSO₂Na (100 мг, 0,610 ммоль) при к.т. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 20 ч. Реакционную смесь разбавляли водой. Полученную смесь экстрагировали с помощью EtOAc (2X). Органические слои промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (элюент: PE/EtOAc=3/1) с получением необходимого продукта (80 мг). LCMS: масса/заряд 521 (M+Na)⁺.

2-((5-Хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-ил)(фенилсульфонил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К смеси 5-хлор-3-((фенилсульфонил)метил)-1-тритил-1H-пиразола (100 мг, 0,2 ммоль) и 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,2 ммоль) в сухом THF (10 мл) добавляли по каплям LiHMDS (1 мл, 10 ммоль, 1 М в THF) при 10°C. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 10 мин и выливали в водный NH₄Cl. Последующую смесь экстрагировали с помощью EtOAc (2X). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~30% этилацетат в петролейном эфире) с получением необходимого продукта E8-3 (75 мг) в виде желтого масла. LCMS: масса/заряд 985 (M+Na)⁺.

2-((5-Хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси соединения E8-3 (75 мг, 0,0779 ммоль) в THF (5 мл) и MeOH (5 мл) при к.т. в атмосфере N₂ добавляли SmI₂ (5 мл, 0,1 М в THF). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 10 мин и затем гасили с помощью воды. Последующую смесь экстрагировали с помощью EtOAc (2X). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (PE/EtOAc=2/1) с получением 2-((5-хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг). LCMS: масса/заряд 845 (M+23)+.

6-((1H-Индазол-4-ил)метил)-2-((5-хлор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-((5-хлор-1-тритил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,0608 ммоль) в DCM (6 мл) при к.т. в атмосфере N₂ добавляли TFA (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч. Последующую смесь регулировали до pH=8 с помощью водного NaHCO₃, экстрагировали с помощью 80% DCM/iPrOH (2X). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC (C18, 0~50% ацетонитрил в H₂O с 0,1% муравьиной кислотой) с получением необходимого продукта (10 мг). LCMS: масса/заряд 451 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 13,10-13,2 (brs, 2H), 8,58 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,43-7,46 (m, 1H), 7,25-7,30 (m, 1H), 6,94-6,97 (m, 1H), 6,32 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).

Пример 8B. Синтез 2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез 4-метил-2-(метилтио)-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору NaH (130 мг, 3,2 ммоль) в DMF (4 мл) добавляли 4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он (270 мг, 1,1 ммоль) при 0°C в атмосфере N₂. Через 5 мин. смесь 1-(бромметил)-3-(трифторметокси)бензола (420 мг, 1,65 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли в реакционную смесь. Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили с помощью насыщенного NH₄Cl и экстрагировали с помощью EA. Органический слой промывали с помощью насыщенного NaCl (3 ×), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~30% этилацетат в петролейном эфире) с получением 4-метил-2-(метилтио)-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (420 мг). LCMS: 427 (M+H)⁺.

Стадия B. Синтез 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 4-метил-2-(метилтио)-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (420 мг, 0,99 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли mCPBA (520 мг, 3,0 ммоль) при 0°C в атмосфере N₂. Реакционную смесь продолжали перемешивать в течение ночи. Раствор гасили с помощью насыщенного Na₂S₂O₃ и экстрагировали с помощью DCM (3x). Объединенные органические слои высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% этилацетат в петролейном эфире) с получением 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (330 мг). LCMS: масса/заряд 459 (M+H)⁺.

Стадия C. Синтез 4-метил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (165 мг, 0,36 ммоль) и 4-((фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-1,2,3-триазола (50 мг, 0,54 ммоль) в сухом DMF (10 мл) добавляли Cs₂CO₃ (351 мг, 1,08 ммоль) при 65°C. Реакционную смесь перемешивали при 65°C в течение 2 ч и выливали в водный NH₄Cl. Полученную смесь экстрагировали с помощью EtOAc (2x). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~35% этилацетат в петролейном эфире) с получением необходимого продукта, представляющего собой 4-метил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он (E8-6) (200 мг). LCMS: масса/заряд 732 (M+H)⁺.

Стадия D. Синтез 2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-6-(3-(трифторметокси)бензил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. Аналогично примеру 8A проводили реакцию соединения E8-6 с SmI₂ с последующим удалением защитной группы с помощью TFA с получением необходимого продукта. LCMS: 462 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,52 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,46 (dd, 1H), 7,39-7,2 (m, 3H), 5,40 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).

Пример 8C. Синтез 2,6-бис((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A: 4-((фенилтио)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол. К раствору 4-(бромметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазола (340 мг, 1,0 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли бензолтиолат натрия (265 мг, 2 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем гасили с помощью ледяной воды (10,0 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×50,0 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта (370 мг), который непосредственно применяли на следующей стадии. LCMS: масса/заряд 371 (M+H)⁺.

Стадия B: 4-((фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол. К раствору 4-((фенилтио)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазола (370 мг) в THF (20 мл) при 0°C добавляли раствор оксона (2,15 г, 3,5 ммоль) в H₂O (20 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч, затем гасили с помощью ледяной воды (50 мл) и экстрагировали с помощью AcOEt (3×50,0 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: EA/PE=1/5) с получением необходимого продукта (300 мг). LCMS: масса/заряд 403 (M+H)⁺.

Стадия C: 4-метил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К раствору 4-((фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазола (163 мг, 0,40 ммоль, 2,2 экв.) в сухом THF (5 мл) при -40°C добавляли по каплям LiHMDS (0,46 мл, 0,46 ммоль, 2,5 экв.). Смесь перемешивали при данной температуре в течение 10 мин с последующим добавлением по каплям раствора 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,18 ммоль, 1,0 экв.) в сухом THF (3 мл) при -40°C. Смесь перемешивали при данной температуре в течение еще 30 мин до завершения реакции. Полученную смесь выливали в ледяной насыщенный водный NH₄Cl (20 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC с получением необходимого продукта (100 мг). LCMS: масса/заряд 867 (M+H)⁺.

Стадия D: 2,6-бис((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К раствору 4-метил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,06 ммоль, 1,0 экв.) в сухом DCE (2 мл) в атмосфере N₂ добавляли AlCl₃ (38 мг, 0,30 ммоль, 5,0 экв.) и TES (34 мг, 0,30 ммоль, 5,0 экв.). Смесь нагревали до 60°C в течение 30 мин._, затем охлаждали до к.т., выливали в воду (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM/MeOH (об.:об.=20:1, 3×10 мл). Объединенные органические слои высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (5 мг). LCMS: масса/заряд 467 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 13,15 (s, 1H), 13,10 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,49 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,38-7,30 (m, 1H), 7,29-7,21 (m, 1H), 7,14 (d, 1H), 6,93 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,84 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).

Пример 8D. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она и 6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-2-(1H-пиразол-3-карбонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. трет-Бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({4-метансульфонил-7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамат. Смесь 4-метил-2-(метилсульфонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (7,5 г, 26,4 ммоль) и K₃PO₄ (8,3 г, 39,3 ммоль) в безводном MeCN (300 мл) перемешивали при 70°C в течение 1 ч в атмосфере N₂. Затем добавляли раствор трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-(бромметил)пиридин-2-ил]карбамата (11,2 г, 29,0 ммоль) в MeCN (30 мл). После перемешивания при 70^oC в течение 2,5 ч. в атмосфере N₂ реакционную смесь гасили с помощью насыщ. NH₄Cl и экстрагировали с помощью EA (300 мл × 3). Объединенные органические слои промывали водой и солевым раствором, высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и органическую фазу концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% этилацетат в петролейном эфире) с получением трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({4-метансульфонил-7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамата (5,5 г).С помощью LC-MS (ESI) обнаружили: 591,1 (M+H)⁺.

Стадия B. трет-Бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамат. К перемешиваемой смеси 3-((фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразола (11,9 г, 33,8 ммоль) в безводном THF (200 мл) добавляли LiHMDS (50 мл, 1 М в THF) при -40°C в атмосфере аргона. Через 10 мин смесь нагревали до 10°C и перемешивали в течение 1 ч, затем добавляли трет-бутил-N-[(трет-бутокси)карбонил]-N-[6-({4-метансульфонил-7-метил-9-оксо-3-тиа-5,7,10,11-тетраазатрицикло[6.4.0.0{2,6}]додека-1(8),2(6),4,11-тетраен-10-ил}метил)пиридин-2-ил]карбамат (9,1 г, 15,4 ммоль в 35 мл THF). Реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение еще 30 мин. Реакционную смесь выливали в водн. NH₄Cl, экстрагировали с помощью EtOAc (200 мл × 3). Объединенные органические слои промывали с помощью воды и солевого раствора, высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% этилацетат в петролейном эфире) с получением трет-бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата (6,6 г). С помощью LC-MS (ESI) обнаружили: 763,2 (M+H)⁺.

Стадия C. трет-Бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамат. Раствор трет-бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата (6,0 г, 7,86 ммоль) в EtOH/AcOH (35 мл/50 мл) нагревали до 50°C с энергичным перемешиванием в присутствии Zn (2,55 г, 117,9 ммоль) в течение 40 мин. Дополнительное количество цинка добавляли каждые 40 мин (2,55 г, дважды, при этом реакцию контролировали с помощью TLC/LC-MS, чтобы избежать получения побочного продукта и избыточного восстановленного продукта). Раствор фильтровали и осадок на фильтре промывали с помощью DCM. Фильтрат частично выпаривали, нейтрализовали с помощью насыщенного раствора NaHCO₃, высушивали над MgSO₄ и удаляли растворитель под вакуумом. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, DCM:MeOH=40:1) с получением трет-бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата (3,1 г).С помощью LC-MS (ESI) обнаружили: 623,3 (M+H)⁺.

Стадия D. 2-((1H-Пиразол-3-ил)метил)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси трет-бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата (3,0 г, 4,8 ммоль) в этаноле (30 мл) добавляли HCl (30 мл, 4 М в диоксане). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 40 мин. Реакционную смесь охлаждали до к.т., фильтровали и твердое вещество собирали, суспендировали в воде и нейтрализовали с помощью водного NaHCO₃ при 10°C. Фильтровали с получением требуемого соединения 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (1,5 г). С помощью LC-MS (ESI) обнаружили: 393,2 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ 12,78 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,25 (dd, 1H), 6,33-6,24 (m, 2H), 6,08 (d, 1H), 5,90 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).

Стадия E. Синтез трет-бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-карбонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата. К раствору трет-бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата (100 мг, 0,16 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли K₂CO₃ (88 мг, 0,64 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в течение 8 ч. Смесь выливали в воду, осадок собирали путем фильтрации и очищали с помощью препаративной TLC (2% MeOH в DCM) с получением трет-бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-карбонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата (20 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 637 (M+H)⁺.

Стадия F. Синтез 6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-2-(1H-пиразол-3-карбонил)-4H- тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору трет-бутил-(6-((4-метил-5-оксо-2-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-карбонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)пиридин-2-ил)карбамата (20 мг, 0,03 ммоль) в EtOH (1 мл) добавляли HCl (1 мл, 4 моль/л в диоксане). Смесь перемешивали при 80°C в течение 1 ч и охлаждали. Осадок собирали путем фильтрации и нейтрализовали с помощью насыщ. NaHCO_3, промывали с помощью воды и высушивали с получением 5 мг 6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-2-(1H-пиразол-3-карбонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 407 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ: 8,75 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,31-7,22 (m, 1H), 6,31 (d, 1H), 6,14 (d, 1H), 5,91 (s, 2H), 5,23 (s, 2H), 4,38 (s, 3H).

Пример 8E. Синтез 6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((6-(диметиламино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. (6-(Диметиламино)пиридин-2-ил)метанол. К раствору (6-хлорпиридин-2-ил)метанола (500 мг, 2,67 ммоль) в диметиламине в THF (35 мл) добавляли Pd(OAc)₂ (78 мг, 0,35 ммоль), Xantphos (170 мг, 0,29 ммоль) и т-BuONa (385 мг, 4,01 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~35% этилацетат в петролейном эфире) с получением (6-(диметиламино)пиридин-2-ил)метанола (180 мг). LCMS: 153 (M+H)⁺.

Стадия B. 6-(Хлорметил)-N, N-диметилпиридин-2-амин. К перемешиваемой смеси (6-(диметиламино)пиридин-2-ил)метанола (170 мг, 1,1 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли SOCl₂ (665 мг, 5,6 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч. Реакционную смесь регулировали до pH=7~8 с помощью водн. NaHCO₃. Затем смесь экстрагировали с помощью DCM, промывали с помощью воды и солевого раствора. Органический слой высушивали над Na₂SO₄, концентрировали при пониженном давлении с получением 6-(хлорметил)-N, N-диметилпиридин-2-амина (70 мг). LCMS: 171 (M+H)⁺.

Стадия C. N, N-Диметил-6-((фенилсульфонил)метил)пиридин-2-амин. К перемешиваемой смеси 6-(хлорметил)-N, N-диметилпиридин-2-амина (500 мг, 2,94 ммоль) в DMSO (10 мл) добавляли PhSO₂Na (1,44 г, 8,82 ммоль) при к.т. Смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью DCM. Смесь промывали водой и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~20% этилацетат в петролейном эфире) с получением N, N-диметил-6-((фенилсульфонил)метил)пиридин-2-амина (380 мг). LCMS: 277 (M+H)⁺.

Стадия D. 2-((6-(Диметиламино)пиридин-2-ил)(фенилсульфонил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К перемешиваемой смеси 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (180 мг, 0,36 ммоль), который синтезировали аналогично соединению E8-1 в примере 8A, в сухом THF (10 мл) добавляли N, N-диметил-6-((фенилсульфонил)метил)пиридин-2-амин (120 мг, 0,44 ммоль) и t-BuOK (122 мг, 1,1 ммоль) при 60^oC в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при 60^oC в течение 2 ч в атмосфере N₂. Затем смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc, промывали с помощью воды и солевого раствора. Органический слой высушивали над Na₂SO₄, концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью препаративной TLC (PE:EtOAc=1:1,5) с получением 2-((6-(диметиламино)пиридин-2-ил)(фенилсульфонил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг). LCMS: 691 (M+H)⁺.

Стадия E. 2-((6-(Диметиламино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. К смеси 2-((6-(диметиламино)пиридин-2-ил)(фенилсульфонил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,07 ммоль) в THF (5 мл) и MeOH (5 мл) при к.т. в атмосфере N₂ добавляли SmI₂ (5 мл, 0,1 М в THF) при -40°C. Реакционную смесь перемешивали при -40°C в течение 10 мин и затем гасили с помощью воды. Последующую смесь экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (PE/EtOAc=1/1,5) с получением необходимого продукта (10 мг). LCMS: масса/заряд 551 (M+H)⁺.

Стадия F. 6-((1H-Пиразол-3-ил)метил)-2-((6-(диметиламино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он. Смесь 2-((6-(диметиламино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (10 мг, 0,018 ммоль) в DCM/TFA (2 мл/2 мл) перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (1,4 мг). LCMS: 421 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,51 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,48 (dd, 1H), 6,64 (d, 1H), 6,54 (d, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,44 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,05 (s, 6H).

Следующие соединения синтезировали согласно схеме E8 и примеру 8C с применением подходящего исходного материала. При необходимости можно использовать введение стандартной защитной группы и удаление защитной группы.

№ соединения	Структура	Характеристика
E8-20	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(4-((фенилсульфонил)метил)-1H-имидазол-1-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 557 (M+H)+. 1H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,13 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,48 (d, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,91-7,72 (m, 4H), 7,63 (t, 2H), 7,47 (d, 1H), 7,36-7,22 (m, 1H), 6,98 (d, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,69(s, 2H), 4,49 (s, 3H).
E8-21	2-((1H-имидазол-4-ил)метил)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 417 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 12,01 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,27 (dd, 1H), 7,09 (s, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,39 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-22	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((2-аминотиазол-5-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 449 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,54 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,33-7,24 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,53 (s, 2H), 4,24 (s, 3H).
E8-23	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(оксазол-5-илметил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,14(s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,33-7,24 (m, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,72 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-24	3-((6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)бензолсульфонамид	LC-MS: масса/заряд 506 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,12 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,76 (d, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,58 (dd, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,38 (s, 2H), 7,30-7,25 (m, 1H), 6,95 (m, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,64 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-25	6-(1H-индазол-4-илметил)-2-(1H-индазол-6-илметил)-8-метил-6,8-дигидро-3-тиа-1,5,6,8-тетраазациклопента[a]инден-7-он	LC-MS: масса/заряд 467 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,13 (s, 1H), 13,09 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,30-7,25 (m, 1H), 7,14 (d, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,64 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E8-26	4-((6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)тиазол-5-карбоксамид	LCMS: масса/заряд 477 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,27 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,99 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-27	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((5-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 435 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 12,53 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (d, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,53 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-28	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 431 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,33 (m, 1H), 6,98 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 4,02 (s, 3H).
E8-29	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-индазол-5-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 431 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,72-7,64 (m, 2H), 7,58 (d, 1H), 7,43 (dd, 1H), 6,25 (d, 1H), 5,44 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 4,00 (s, 3H).
E8-30	2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-6-(4-(трифторметокси)бензил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 462 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 15,00 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,43 (d, 2H), 7,32 (d, 2H), 5,38 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-31	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-(индолин-4-илметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 418 (M+1)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,77 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,80 (dd, 1H), 6,37 (d, 1H), 6,32 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,49 (s, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,41 (t, 2H), 2,95 (t, 2H).
E8-32	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 435 (M+1)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,12 (s, 1H), 12,77 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,35-7,17 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-33	4-((6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил) тиазол-2-карбоксамид	LCMS: масса/заряд 477 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,18 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,38-7,26 (m, 1H), 7,03 (d, 1H), 5,72 (s, 2H), 4,79 (s, 2H), 4,34 (s, 3H).
E8-34	2-((1,3,4-оксадиазол-2-ил)метил)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 419 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,13 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,33-7,20 (m, 1H), 6,97 (d, 1H), 5,67 (s, 2H), 5,02 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-35	2-((1H-индазол-7-ил)метил)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 417 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,33 (s, 1H), 12,63 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,14 (t, 1H), 6,10 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,81 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E8-36	2-((1H-1,2,4-триазол-3-ил)метил)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,14 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,38-8,37 (m, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,31-7,27 (m, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,61 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E8-37	6-бензил-4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 388 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,61 (d, 1H), 8,59 (s, 1H), 7,89-7,83 (m, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,39-7,30 (m, 6H), 5,39 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 4,30 (s, 3H).
E8-38	2-((1H-бензо[d][1,2,3]триазол-4-ил)метил)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: 468 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,14 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,83 (d, 1H), 7,52-7,42 (m, 3H), 7,27 (dd, 1H), 6,94 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,95 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-39	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((2H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: 418 [M+1]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,13 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,34-7,23 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E8-40	6-бензил-4-метил-2-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: 394 [M+1]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,12 (d, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,35-7,22 (m, 5H), 5,35 (s, 2H), 4,70 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-41	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((5-бромтиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 512 (M+2H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 9,19 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (t, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-42	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((2-метоксипиридин-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 458 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,17-8,11 (m, 2H), 7,78 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,28 (d,1H), 7,02 (dd, 1H), 6,94 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,87 (s, 3H).
E8-43	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 444 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 11,76 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,57 (dd, 1H), 7,40 (d, 1H), 7,37(dd, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,95 (d,1H), 6,21 (t, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,24 (s, 3H), 4,22 (s, 2H).
E8-44	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d] имидазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он.	LCMS: масса/заряд 483 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,11 (s, 1H), 10,93 (s, 1H), 10,71 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,33-7,18 (m, 1H), 7,02-6,79 (m, 4H), 5,64 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,27 (s, 2H).
E8-45	2-((2H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-6-(2-фтор-3-(трифторметокси)бензил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 480 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,58 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,25 (d, 2H), 5,46 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-46	2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-6-бензил-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS масса/заряд 378 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,55 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,33-7,24 (m, 5H), 5,35 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-47	2-((1H-индазол-7-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS масса/заряд 431,0 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,33 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,17-7,10 (m, 1H), 6,06 (d, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,84 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,75 (s, 3H).
E8-48	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((1H-индазол-6-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 467 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,13 (s, 1H), 13,09 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,30-7,22 (m, 1H), 7,14 (d, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,64 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E8-49	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((1H-индазол-5-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 467 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,10 (s, 1H), 13,07 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,40-7,34 (m, 1H), 7,30-7,22 (m, 1H), 6,94 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,60 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E8-50	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((1H-индазол-7-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 467 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,33 (s, 1H), 13,11 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,13 (s, 2H), 7,74 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,13 (t, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,84 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E8-51	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((4-хлор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 451 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,20 (s, 1H), 13,14 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E8-52	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((6-метилпиридин-2-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 442 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,11 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,68 (dd, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,37-7,25 (m, 2H), 7,18 (d, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,61 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 2,47 (s, 3H).
E8-53	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 431 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,35-7,16 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 6,22 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,81 (s, 3H).
E8-54	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((5-(трифторметил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 485 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,77 (s, 1H), 13,11 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,35-7,13 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 6,71 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E8-55	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((4-(трифторметил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 485 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,58 (s, 1H), 13,11 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,27 (t, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-56	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(изоксазол-3-илметил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,98 (d, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,34 (dd, 1H), 7,02 (d, 1H), 6,71 (d, 1H), 5,72 (s, 2H), 4,74 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).
E8-57	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((2-аминотиазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 449 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD) δ 8,40 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,33 (dd, 1H), 7,11 (d, 1H), 6,46 (s, 1H), 5,74 (s, 2H), 4,58 (s, 3H), 4,33 (s, 2H).
E8-58	этил-4-((6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метил)тиазол-5-карбоксилат	LCMS: масса/заряд 506 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 9,31 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,35-7,16 (m, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 5,03 (s, 2H), 4,33 (q, 2H), 4,25 (s, 3H), 1,30 (t, 3H).
E8-59	4-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензонитрил	LCMS: масса/заряд 402 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,80 (d, 2H), 7,72 (s, 1H), 7,45 (d, 2H), 6,26 (s, 1H), 5,44 (s, 2H), 4,53 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-60	3-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензонитрил	LCMS: масса/заряд 402 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,79 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,78-7,57 (m, 4H), 7,54 (dd, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,41 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-61	4-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензамид	LCMS: масса/заряд 420 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,81 (d, 2H), 7,34 (d, 3H), 6,27 (d, 1H), 5,40 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-62	3-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензамид	LCMS: масса/заряд 420 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,78 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,85-7,60 (m, 3H), 7,51-7,27 (m, 3H), 6,26 (d, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-63	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((5-(гидроксиметил)тиазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 464 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,99 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,31 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,69 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,78 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-64	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((2-(гидроксиметил)тиазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 464 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 13,12 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,31 (dd, 1H), 6,96 (d, 1H), 6,07 (t, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,70 (d, 2H), 4,60 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-65	3-((4-метил-2-((1-метил-1H-пиразол-4-ил)метил)-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензамид	LCMS: масса/заряд 434 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8,55 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,81-7,74 (m, 2H), 7,73 (s, 1H), 7,45 (d, 2H), 7,39 (dd, 1H), 7,34 (s, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,33 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,82 (s, 3H).
E8-66	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 393 (M+H)+. 1H-ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,67 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 6,60 (d, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,42 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-67	2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-6-(тиазол-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 385 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,60 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-68	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-(оксазол-4-илметил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 368 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,79 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-69	2-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-6-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,03 (d, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,36 (t, 1H), 6,55 (d, 1H), 6,35 (d, 1H), 5,98 (s, 2H), 5,48 (s, 2H), 4,37 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-70	4-метил-6-(тиазол-2-илметил)-2-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 401 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,13 (d, 1H), 8,60 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-71	4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-6-(тиазол-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 395 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,60 (s, 1H), 8,57 (dd, 1H), 7,81 (td, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,36-7,30 (m, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,68 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-72	4-метил-2,6-бис(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 401 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,13 (d, 1H), 9,03 (d, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,44-7,41 (m, 1H), 5,48 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-73	2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-6-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 385 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,03 (d, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,42 (d, 1H), 5,48 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-74	4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 392 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,56 (d, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,81 (td, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,32 (dd, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E8-75	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 379 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,56 (d, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,84-7,78 (m, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,36-7,28 (m, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-76	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 378 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,63 (s, 1H), 8,57-8,55 (m, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,81 (dd, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,34-7,30 (m, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-77	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((2-(гидроксиметил)тиазол-4-ил)метил) -4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 414 (M+1)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,63 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 6,11 (s, 1H), 6,06 (t, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,70 (d, 2H), 4,60 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-78	2-((2-(гидроксиметил)тиазол-4-ил)метил)-4-метил-6-(тиазол-2- илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 431 (M+1)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,60 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,57 (s, 1H), 6,10-5,97 (m, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,70 (d, 2H), 4,61 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-79	2-((2-(гидроксиметил)тиазол-4-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H- пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 428 (M+1)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,49 (s, 1H), 7,62-7,58 (m, 2H), 6,07-6,03 (m, 2H), 5,26 (s, 2H), 4,70 (d, 2H), 4,60 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E8-80	6-((2H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-2-((2-(гидроксиметил)тиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 415 (M+1)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 14,77 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 6,05 (t, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,70 (d, 2H), 4,60 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-81	6-((2-аминотиазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 416 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,13 (d, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,03 (br s, 2H), 6,22 (s, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-82	2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 382 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,50 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,56 (d, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E8-83	2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 368 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 14,73 (s, 1H), 12,64 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-84	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-2-(тиазол-4-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 384,0 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,62 (s, 1H), 9,12 (d, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,11 (s, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,70 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-85	6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-2-((2-(гидроксиметил)тиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: 440,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,55 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,29-7,21 (m, 1H), 6,29 (d, 1H), 6,13-6,07 (m, 2H), 5,92 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,70 (d, 2H), 4,61 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-86	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-2-((2-амино-5-фтортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,53 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 6,92 (s, 2H), 5,43 (s, 2H), 4,27 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-87	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-2-((5-фтортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 403 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,70 (d, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,60 (d, 2H), 4,25 (s, 3H).
E8-88	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-2-(этокси(тиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 429 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,09 (d, 1H), 8,57 (s, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,73 (s, 1H), 6,12 (s, 1H), 5,54-5,34 (m, 2H), 4,23 (s, 3H), 3,76-3,61 (m, 2H), 1,20 (q, 3H).
E8-89	4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 398 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,12 (d, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,70 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E8-90	2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-6-((2-аминотиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 400 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,50 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 6,90 (s, 2H), 6,18 (s, 1H), 5,02 (s, 2H), 4,63 (s, 2H) 4,26 (s, 3H).
E8-91	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-2-((5-хлортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 419 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,09 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E8-92	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((5-хлортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,09 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-93	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS масса/заряд 386,0 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 14,82 (s, 1H), 12,82 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 5,47 (s, 2H), 4,54 (s, 2H), 4,31 (s, 3H).
E8-94	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((5-бромтиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 462 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,64(s, 1H), 9,19 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,26(s, 3H).
E8-95	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 394 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,77 (s, 1H), 11,71 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,25-6,05 (m, 2H), 5,75 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-96	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((2-амино-5-фтортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 417 (M+H)+. 1H ЯМР DMSO-d6, 400 МГц, δ 12,65 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 6,92 (s, 2H), 6,12 (d, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,26 (s, 5H).
E8-97	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((5-фтортиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 402 (M+H)+. 1H ЯМР DMSO-d6, 400 МГц, δ 12,70 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,60 (d, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-98	4-метил-2,6-бис(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 389 (M+H)+. 1H ЯМР DMSO-d6, 400 МГц, δ 8,61-8,54 (m, 2H), 8,51-8,46 (m, 1H), 7,82 (td, 1H), 7,73 (td, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,34 (ddd, 1H), 7,27 (dd, 1H), 7,14 (d, 1H), 5,46 (s, 2H), 4,69 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-99	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 385 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,13 (d, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,72 (d, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,70 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-100	2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 381 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,55 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E8-101	2-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 407 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,48 (s, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,35 (t, 1H), 6,55 (d, 1H), 6,35 (d, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,97 (s, 2H), 5,26 (s, 2H), 4,36 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E8-102	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 382 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 14,70 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,65 (d, 1H), 6,22 (d, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,81 (s, 3H).
E8-103	4-метил-2,6-бис((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 395 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,48 (s, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,55 (d, 1H), 6,22 (d, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 3,76 (s, 3H).
E8-104	2,6-бис((4-фтор-1H-пиразол-3-ил) метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 403 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,02-12,57 (m, 2H), 8,49 (s, 1H), 7,6-7,8 (m, 2H), 5,33 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E8-105	6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-2-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,13 (d, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,25 (t, 1H), 6,29 (d, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,92 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-106	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 385 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,77 (s, 1H), 12,62 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,87 (d, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,11 (s, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-107	6-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((5-метилтиазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 399 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,95 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 5,47 (s, 2H), 4,66 (s, 2H), 4,31 (s, 3H), 2,55 (s, 3H).
E8-108	6-((1H-пиразол-5-ил)метил)-4-метил-2-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 381 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,64 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 6,23 (d, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,82 (s, 2H).
E8-109	6-((1H-пиразол-5-ил)метил)-4-метил-2-((5-метилтиазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 398 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,63 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,61 (s, 2H), 4,26 (s, 3H) 2,50 (s, 3H перекрывается пиком DMSO-d6).
E8-110	2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 399 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,83 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,13 (s, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,54 (s, 2H), 4,34 (s, 3H), 3,81 (s, 3H).
E8-111	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((3-фтор -6-(метиламино)пиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 425 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 12,68 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,43 (t, 1H), 6,62 (d, 1H), 6,46 (dd, 1H), 6,16 (s, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,52 (s, 2H), 4,31 (s, 3H), 2,83 (d, 3H).
E8-112	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((6-амино-3-фторпиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 411 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,64 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,36 (t, 1H), 6,41 (dd, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,96 (s, 2H), 5,32 (s, 2H), 4,44 (d, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-113	6-((2-аминотиазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,52 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,83 (d, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,40-7,25 (m, 1H), 6,91 (s, 2H), 6,17 (s, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-114	4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-6-(тиазол-4-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 395 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,09 (d, 1H), 8,63 (m, 1H), 8,59 (s, 1H), 7,88 (m, 1H), 7,57 (d, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,39 (dd, 1H), 5,54 (s, 2H), 4,73 (s, 2H), 4,32 (s, 3H).
E8-115	2,6-бис((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 369 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,53 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 5,43 (s, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-116	6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 404 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,57 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,82 (dd, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,33 (dd, 1H), 7,27-7,22 (m, 1H), 6,29 (d, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,90 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,68 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-117	2-((1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил)-6-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 394 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,55 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,26 (dd, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,07 (d, 1H), 5,91 (s, 2H), 5,19 (s, 2H),4,64 (s, 2H), 4,26 (s, 3H)
E8-118	6-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 396 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,60 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,90-7,80 (m, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,49 (d, 1H), 7,31 (dd, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,65 (s, 2H), 4,24 (s, 3H).
E8-119	6-((4-хлор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 412 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,00 (s, 1H), 8,67 (d, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,82 (dd, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,33 (dd, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,26 (s, 3H.
E8-120	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((2-бром-5-метокситиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 492 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,64 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,11 (s, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,44 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,99 (s, 3H).
E8-121	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((5-метокситиазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 414 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,63 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 6,11 (d, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,97 (s, 3H).
E8-122	3-((2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-1-метил-1H-пиразол-4-карбоновая кислота	LC-MS: масса/заряд 425 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 9,12 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 6,25 (s, 1H), 5,59 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 4,31 (s, 3H), 3,81 (s, 3H).
E8-123	6-((4-хлор-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 419 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 13,28-12,57 (m, 2H), 8,49 (s, 1H), 7,90-7,50 (m, 2H), 5,34 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-124	3-((2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-1H-пиразол-4-карбоксамид	LC-MS: масса/заряд 428 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,89-12,76 (m, 2H), 8,49 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,57 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-125	2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-6-((2-метоксипиридин-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 426 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,80 (s, 1H), 8,57 (d, 1H), 8,08 (dd, 1H), 7,92 (d, 1H), 7,16 (d, 1H), 6,90 (dd, 1H), 5,29 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,92 (s, 3H).
E8-126	2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 412 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 12,78 (s, 1H), 11,71 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,30 (d, 1H), 6,82 (d, 1H), 6,08 (dd, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E8-127	3-((2-((4-фтор-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6(5H)-ил)метил)-1H-пиразол-4-карбонитрил	LC-MS: масса/заряд 410 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 13,63 (s, 1H), 12,81 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 5,45 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E8-128	N-(5-фтор-6-((4-метил-2-((1-метил-1H-пиразол-4-ил)метил)-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)пиридин-2-ил)ацетамид	LC-MS: масса/заряд 467 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: δ 10,35 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,70 (dd, 2H), 7,45 (s, 1H), 5,45 (s, 2H), 4,34 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 2,01 (s, 3H)
E8-129	4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(1H-пиразол-3-карбонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 395 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,85 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,38 (s, 1H), 6,12 (d, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,38 (s, 3H), 3,77 (s, 3H).

Пример 8F. Синтез 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (360 мг, 1,4 ммоль) и 2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этанола (300 мг, 2,4 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли CMBP (600 мг, 2,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N₂ в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc, промывали с помощью воды и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄, концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 80-100% EtOAc в петролейном эфире) с получением 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (500 мг).

LC-MS (ESI): масса/заряд 361 (M+1)⁺.

Стадия B. Синтез 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-(метилсульфонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (600 мг, 1,7 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли m-CPBA (1,01 г, 5,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc, промывали с помощью насыщ. NaHCO₃ и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄, концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 80-100% EtOAc в PE) с получением 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-(метилсульфонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (600 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 393 (M+1)⁺.

Стадия C. Синтез 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-((фенилсульфонил)(пиридин-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 3-((фенилсульфонил)метил)пиридина (300 мг, 1,3 ммоль) в THF (20 мл) добавляли LiHMDS (2 мл, 2,0 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания при комнатной температуре в атмосфере N₂ в течение 15 мин добавляли 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-(метилсульфонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он (300 мг, 0,8 ммоль) к реакционной смеси и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь гасили с помощью насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью EtOAc. Органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄, концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 80-100% EtOAc в петролейном эфире) с получением 110 мг 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-((фенилсульфонил)(пиридин-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS: масса/заряд 546 (M+1)⁺.

Стадия D. Синтез 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-((фенилсульфонил)(пиридин-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (110 мг, 0,2 ммоль) в THF (5 мл) и MeOH (5 мл) добавляли SmI₂ (5 мл, 0,1 М в THF) при к.т. Затем реакционную смесь перемешивали в атмосфере N₂ при к.т. в течение 10 мин. Реакционный раствор гасили водой, разбавляли с помощью EtOAc, промывали с помощью воды и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄, концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 80-100% EtOAc в петролейном эфире) с получением 6 мг 4-метил-6-(2-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)этил)-2-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 406 (M+1)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,66 (s, 1H), 8,52 (d, 2H), 7,84 (d, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,41 (dd, 1H), 6,04 (d, 1H), 4,58 (s, 2H), 4,48-4,30 (m, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,12-2,75 (m, 2H).

Пример 8G. Синтез 4-метил-6-(проп-2-ин-1-ил)-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-(проп-2-ин-1-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-2-(метилсульфонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (200 мг, 0,70 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли t-BuOK (157 мг, 1,4 ммоль) с последующим добавлением 3-бромпроп-1-ина (0,12 мл, 1,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Затем суспензию выливали в насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в PE) с получением 60 мг 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-(проп-2-ин-1-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 323 (M+H)⁺.

Стадия B. Синтез 4-метил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-6-(проп-2-ин-1-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-2-(метилсульфонил)-6-(проп-2-ин-1-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (60 мг, 0,18 ммоль) и 2-((фенилсульфонил)метил)пиридина (87 мг, 0,37 ммоль) в THF (5 мл) добавляли t-BuOK (63 мг, 0,57 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч в атмосфере азота реакционную смесь выливали в насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (элюент: 70% EtOAc в петролейном эфире) с получением 50 мг 4-метил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-6-(проп-2-ин-1-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 476 (M+H)⁺.

Стадия C. Синтез 4-метил-6-(проп-2-ин-1-ил)-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 4-метил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-6-(проп-2-ин-1-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,11 ммоль) в THF/MeOH (4 мл, 1:1) добавляли SmI₂ (4,2 мл, 0,1 М в THF) при -70°C в атмосфере азота. После перемешивания в течение 5 мин реакционную смесь гасили с помощью воды. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали с помощью насыщ. NH₄Cl. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением 5 мг 4-метил-6-(проп-2-ин-1-ил)-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS: масса/заряд 336 (M+H)⁺.¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,60-8,52 (m, 2H), 7,81 (td, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,33 (dd, 1H), 4,93 (d, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,27 (t, 1H).

Пример 8H. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-бензил-4-этил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. Синтез этил-4-этил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. К смеси этил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (500 мг, 2,06 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли K₂CO₃ (856 мг, 6,19 ммоль). После перемешивания при 70°C в течение 1,5 ч добавляли EtI (483 мг, 3,10 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в течение еще 1 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью H₂O и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенную органическую фазу выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~30% EtOAc в петролейном эфире) с получением этил-4-этил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (400 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 271 (M+1)⁺.

Стадия B. Синтез этил-4-этил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. Смесь POCl₃ (3,6 мл) и PhNMeCHO (5 мл) перемешивали при к.т. в течение 1 ч, затем добавляли к раствору этил-4-этил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (400 мг, 1,48 ммоль) в DCE (10 мл). После перемешивания при 100°C в течение 2 ч реакционную смесь разбавляли с помощью H₂O и экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические фазы высушивали над безводн. Na₂SO₄ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~30% EtOAc в PE) с получением этил-4-этил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (400 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 299 (M+1)⁺.

Стадия C. Синтез 6-бензил-4-этил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 4-этил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (400 мг, 1,34 ммоль) в AcOH (4 мл) добавляли бензилгидразиндигидрохлорид (260 мг, 1,34 ммоль) в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при 100°C в течение 3 ч. Реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 250 мг 6-бензил-4-этил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. LC-MS: масса/заряд 357 (M+1)⁺.

Стадия D. Синтез 6-бензил-4-этил-2-(метилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 6-бензил-4-этил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (250 мг, 0,70 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли mCPBA (657,5 мг, 3,8 ммоль) при 0°C. После перемешивания в течение 1,5 ч реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (10% MeOH в DCM) с получением 6-бензил-4-этил-2-(метилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (90 мг). LC-MS: масса/заряд 389 (M+1)⁺.

Стадия E. Синтез 6-бензил-4-этил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 6-бензил-4-этил-2-(метилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (90 мг, 0,23 ммоль) и 3-((фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразола (123 мг, 0,35 ммоль) в THF (3 мл) добавляли и KO ^t Bu (85 мг, 0,76 ммоль) в атмосфере N₂ при к.т. После перемешивания при к.т. в течение 30 мин реакционную смесь гасили с помощью насыщ. NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенную органическую фазу выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 6-бензил-4-этил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (140 мг, выход 92,2%). LC-MS: масса/заряд 661 (M+1)⁺.

Стадия F. Синтез 6-бензил-4-этил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 6-бензил-4-этил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (140 мг, 0,21 ммоль) в EtOH (2 мл) и DCE (1 мл) добавляли уксусную кислоту (0,2 мл, 2,8 ммоль) и цинк (360 мг, 5,5 ммоль). Смесь перемешивали при 80°C в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 30 мг 6-бензил-4-этил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 521 (M+1)⁺.

Стадия G. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-бензил-4-этил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 6-бензил-4-этил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (30 мг, 0,06 ммоль) в DCM (4 мл) добавляли TFA (4 мл). После перемешивания при к.т. в течение 1,5 ч реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (20% MeOH в DCM) с получением 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-бензил-4-этил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (5 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 391 (M+1)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,79 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,42-7,11 (m, 5H), 6,27 (d, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,78 (q, 2H), 4,48 (s, 2H), 1,44 (t, 3H).

Пример 8I. Синтез 6-бензил-4-фенил-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез этил-2-(метилтио)-4-фенил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. К раствору этил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (400 мг, 1,7 ммоль) и PhI (265 мг, 2,55 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли Cs₂CO₃ (1,1 г, 3,4 ммоль) с последующим добавлением CuI (65 мг, 0,34 ммоль) и (1R,2R)-N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамина (48 мг, 0,34 ммоль). Смесь перемешивали в атмосфере азота при 100°C в течение 7 ч. Смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~10% EtOAc в петролейном эфире) с получением этил-2-(метилтио)-4-фенил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (400 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 319 (M+1)⁺.

Стадия B. Синтез этил-6-формил-2-(метилтио)-4-фенил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. К раствору PhNMeCHO (1,5 мл) в DCE (5 мл) добавляли POCl₃ (1,2 мл, 12,5 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин. Затем этил-2-(метилтио)-4-фенил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилат (400 мг, 1,25 ммоль) добавляли к смеси, смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Смесь гасили с помощью насыщ. NaHCO₃ и экстрагировали с помощью DCM дважды. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением этил-6-формил-2-(метилтио)-4-фенил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (280 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 347 (M+1)⁺.

Стадия C. Синтез 6-бензил-2-(метилтио)-4-фенил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси этил-6-формил-2-(метилтио)-4-фенил-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (280 мг, 0,81 ммоль) в AcOH (6,0 мл) добавляли бензилгидразиндигидрохлорид (468 мг, 2,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Фильтрат выпаривали и очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~70% EtOAc в петролейном эфире) с получением 100 мг 6-бензил-2-(метилтио)-4-фенил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS: масса/заряд 405 (M+1)⁺.

Стадия D. Синтез 6-бензил-2-(метилсульфонил)-4-фенил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 6-бензил-2-(метилтио)-4-фенил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,25 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли mCPBA (151 мг, 0,75 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 4 ч. Смесь гасили с помощью водн. Na₂S₂O₃ и экстрагировали с помощью DCM дважды. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~100% EtOAc в петролейном эфире) с получением 6-бензил-2-(метилсульфонил)-4-фенил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (60 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 437 (M+1)⁺.

Стадия E. Синтез 6-бензил-4-фенил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 6-бензил-4-фенил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (60 мг, 0,14 ммоль) и 2-((фенилсульфонил)метил)пиридина (50 мг, 0,21 ммоль) в сухом DMF (5 мл) добавляли t-BuOK (31 мг, 0,28 ммоль) в атмосфере N₂. Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 1,5 ч. После охлаждения до к.т. смесь выливали в насыщ. NH₄Cl. Последующую смесь экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (петролейный эфир/EtOAc=1/4) с получением 40 мг 6-бензил-4-фенил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 590 (M+1)⁺.

Стадия F. Синтез 6-бензил-4-фенил-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 6-бензил-4-фенил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 0,05 ммоль) в THF (1,5 мл) и MeOH (1,5 мл) добавляли SmI₂ (2,5 мл, 0,1 М в THF) при -78°C в атмосфере N₂. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 10 мин, а затем гасили с помощью воды. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью HPLC с получением 6-бензил-4-фенил-2-(пиридин-2-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (5 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 450 (M+1)⁺.¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,67 (s, 1H), 8,56 (d, 1H), 7,82-7,76 (m, 1H), 7,59-7,45 (m, 6H), 7,34-7,23 (m, 6H), 5,32 (s, 2H), 4,63 (s, 2H).

Пример 8J. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дибензил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез этил-4-бензил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. К смеси этил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (300 мг, 1,1 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли K₂CO₃ (460 мг, 3,3 ммоль). После перемешивания при 70°C в течение 1,5 ч добавляли BnBr (0,2 мл, 1,6 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью H₂O и экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические фазы высушивали над безводн. Na₂SO₄ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~30% EtOAc в петролейном эфире) с получением этил-4-бензил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (370 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 361 (M+1)⁺.

Стадия B. Синтез 4,6-дибензил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси этил-4-бензил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (370 мг, 1,0 ммоль) в AcOH (4 мл) добавляли бензилгидразиндигидрохлорид (390 мг, 2,0 ммоль) в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при 100°C в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью H₂O и экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические фазы высушивали над безводн. Na₂SO₄ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 4,6-дибензил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (320 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 419 (M+1)⁺.

Стадия C. Синтез 4,6-дибензил-2-(метилсульфонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4,6-дибензил-2-(метилтио)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (320 мг, 0,76 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли mCPBA (657,5 мг, 3,2 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение 1,5 ч реакционную смесь гасили с помощью насыщ. Na₂S₂O₃, экстрагировали с помощью EtOAc. Органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (10% MeOH в DCM) с получением 4,6-дибензил-2-(метилсульфонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (170 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 451 (M+1)⁺.

Стадия D. Синтез 4,6-дибензил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4,6-дибензил-2-(метилсульфонил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (170 мг, 0,38 ммоль) и 3-((фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразола (160 мг, 0,46 ммоль) в THF (3 мл) добавляли KO ^t Bu (85 мг, 0,76 ммоль) в атмосфере N₂ при к.т. После перемешивания при к.т. в течение 3 ч реакционную смесь гасили с помощью насыщ. NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические фазы высушивали над безводн. Na₂SO₄ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 4,6-дибензил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (200 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 723 (M+1)⁺.

Стадия E. Синтез 4,6-дибензил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 6-((4-аминопиримидин-2-ил)метил)-4-метил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (200 мг, 0,28 ммоль) в EtOH (2 мл) и DCE (1 мл) добавляли уксусную кислоту (0,2 мл, 2,8 ммоль) и цинк (360 мг, 5,5 ммоль). После перемешивания при 100°C в течение 3 ч реакционную смесь фильтровали и фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 4,6-дибензил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (120 мг). LC-MS: масса/заряд 583 (M+1)⁺.

Стадия F. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дибензил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4,6-дибензил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (120 мг, 0,21 ммоль) в DCM (4 мл) добавляли TFA (4 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 1,5 ч. Реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (20% MeOH в DCM) с получением 9 мг 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дибензил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS: масса/заряд 453 (M+1)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ 12,78 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,42-7,04 (m, 10H), 6,25 (d, 1H), 5,98 (s, 2H), 5,37 (s, 2H), 4,48 (s, 2H).

Пример 8K. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-бензил-4-циклопропил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. Синтез этил-4-циклопропил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. К суспензии циклопропилбороновой кислоты (687 мг, 8 ммоль) и этил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (970 мг, 4 ммоль) в DCE (10 мл) добавляли Na₂CO₃ (848 мг, 8 ммоль) с последующим добавлением Cu(OAc)₂ (727 мг, 4 ммоль) и бипиридина (625 мг, 4 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в течение 2 ч в атмосфере воздуха. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили с помощью насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~30% EtOAc в петролейном эфире) с получением этил-4-циклопропил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (1,0 г, выход 88,5%). LC-MS (ESI): масса/заряд 283 (M+1)⁺.

Стадия B. Синтез этил-4-циклопропил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. Смесь POCl₃ (8,6 мл) и PhNMeCHO (12 мл) перемешивали при к.т. в течение 1 ч, затем добавляли раствор этил-4-циклопропил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (1,0 г, 3,54 ммоль) в DCE (10 мл). После перемешивания при 100°C в течение 2 ч реакционную смесь разбавляли с помощью H₂O и экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические фазы высушивали над безводн. Na₂SO₄ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~30% EtOAc в петролейном эфире) с получением этил-4-циклопропил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (620 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 311 (M+1)⁺.

Стадия C. Синтез 6-бензил-4-циклопропил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 4-этил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (620 мг, 2 ммоль) в AcOH (4 мл) добавляли бензилгидразиндигидрохлорид (390 мг, 2 ммоль) в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при 100°C в течение 3 ч. Реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 6-бензил-4-этил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (320 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 369 (M+1)⁺.

Стадия D. Синтез 6-бензил-4-циклопропил-2-(метилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 6-бензил-4-циклопропил-2-(метилтио)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (320 мг, 0,87 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли mCPBA (704 мг, 3,5 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение 1,5 ч реакционную смесь гасили с помощью насыщ. Na₂S₂O₃, экстрагировали с помощью EtOAc. Органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (10% MeOH в DCM) с получением 110 мг 6-бензил-4-циклопропил-2-(метилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. LC-MS: масса/заряд 401 (M+1)⁺.

Стадия E. Синтез 6-бензил-4-циклопропил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 6-бензил-4-этил-2-(метилсульфонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (110 мг, 0,27 ммоль) и 3-((фенилсульфонил)метил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразола (123 мг, 0,35 ммоль) в THF (3 мл) добавляли KO ^t Bu (85 мг, 0,76 ммоль) в атмосфере N₂ при к.т. Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Реакционную смесь гасили с помощью насыщ. NH₄Cl и экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенную органическую фазу выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 100 мг 6-бензил-4-циклопропил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. LC-MS: масса/заряд 673 (M+1)⁺.

Стадия F. Синтез 6-бензил-4-циклопропил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 6-бензил-4-циклопропил-2-((фенилсульфонил)(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (100 мг, 0,15 ммоль) в MeOH (3 мл) и THF (3 мл) добавляли SmI₂ (4,5 мл, 0,45 ммоль) при -60°C в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при -60°C в течение 10 мин, гасили с помощью H₂O и экстрагировали с помощью EtOAc дважды. Объединенные органические фазы высушивали над Na₂SO₄ и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением 40 мг 6-бензил-4-циклопропил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. LC-MS: масса/заряд 533 (M+1)⁺.

Стадия G. Синтез 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-бензил-4-циклопропил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси 6-бензил-4-циклопропил-2-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она (40 мг, 0,07 ммоль) в DCM (4 мл) добавляли TFA (4 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 1,5 ч. Реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (20% MeOH в DCM) с получением 5 мг 2-((1H-пиразол-3-ил)метил)-6-бензил-4-циклопропил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 403 (M+1)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,77 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,35-7,23 (m, 5H), 6,26 (d, 1H), 5,35 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 4,19 (tt, 1H), 1,40 (td, 2H), 1,15 (td, 2H).

Пример 8L. Синтез 4-метил-6-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(2-(пиридин-3-ил)этил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез этил-6-(гидроксиметил)-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. К раствору этил-6-формил-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (1,3 г, 4,8 ммоль) в MeOH (20 мл) добавляли NaBH₄ (274 мг, 7,2 ммоль) при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 20 мин реакционный раствор разбавляли с помощью EtOAc, промывали с помощью воды и солевого раствора, высушивали над Na₂SO₄, концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~10% MeOH в DCM) с получением этил-6-(гидроксиметил)-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (1 г).LC-MS (ESI): масса/заряд 273 (M+1)⁺.

Стадия B. Синтез этил-6-(гидроксиметил)-2-(метилтио)-4-(тиазол-2-ил)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. К раствору этил-6-(гидроксиметил)-2-(метилтио)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (1 г, 3,7 ммоль) и 2-бромтиазола (3 г, 18,4 ммоль) в диоксане (30 мл) добавляли Cs₂CO₃ (3 г, 9,2 ммоль) с последующим добавлением CuI (700 мг, 3,7 ммоль) и N¹,N²-диметилциклогексан-1,2-диамина (520 мг, 3,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N₂ в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали. Фильтрат разбавляли с помощью EtOAc, промывали с помощью воды и солевого раствора, высушивали над безводным Na₂SO₄, концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 30~50% EtOAc в петролейном эфире) с получением этил-6-(гидроксиметил)-2-(метилтио)-4-(тиазол-2-ил)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (1 г). LC-MS (ESI): масса/заряд 356 (M+1)⁺.

Стадия C. Синтез этил-6-формил-2-(метилтио)-4-(тиазол-2-ил)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата. К раствору этил-6-(гидроксиметил)-2-(метилтио)-4-(тиазол-2-ил)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (1 г, 2,8 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли реагент Десса-Мартина (1,3 г, 3,4 ммоль). После перемешивания при к.т. в течение 2 ч реакционный раствор разбавляли с помощью DCM, промывали с помощью насыщ. NaHCO₃ и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 20~30% EtOAc в петролейном эфире) с получением этил-6-формил-2-(метилтио)-4-(тиазол-2-ил)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (800 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 354 (M+1)⁺.

Стадия D. Синтез 6-бензил-2-(метилтио)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору этил-6-формил-2-(метилтио)-4-(тиазол-2-ил)-4H-пирроло[2,3-d]тиазол-5-карбоксилата (800 мг, 2,3 ммоль) в AcOH (10 мл) добавляли бензилгидразиндигидрохлорид (449 мг, 2,3 ммоль). После перемешивания при к.т. в течение 1 ч реакционную смесь нагревали до 100°C в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, нейтрализовали с помощью 1 М водн. NaOH, экстрагировали с помощью DCM. Органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~5% MeOH в DCM) с получением 6-бензил-2-(метилтио)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (300 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 412 (M+1)⁺.¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,72 (s, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,87 (d, 1H), 7,40-7,15 (m, 5H), 5,31 (s, 2H), 2,76 (s, 3H).

Стадия E. Синтез 6-бензил-2-(метилсульфонил)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 6-бензил-2-(метилтио)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (300 мг, 0,73 ммоль) в MeOH (5 мл) и THF (5 мл) добавляли раствор оксона (2,2 г, 3,6 ммоль) в H₂O (5 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью DCM, промывали с помощью насыщ. NaHCO₃ и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~5% MeOH в DCM) с получением 6-бензил-2-(метилсульфонил)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (260 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 444 (M+1)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆₎ δ 8,93 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,40-7,18 (m, 5H), 5,35 (s, 2H), 3,53 (s, 3H).

Стадия F. Синтез 6-бензил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К перемешиваемому раствору 2-((фенилсульфонил)метил)пиридина (120 мг, 0,51 ммоль) в THF (3 мл) добавляли LiHMDS (0,7 мл, 0,7 ммоль) при 0°C в атмосфере N₂. После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли раствор 6-бензил-2-(метилсульфонил)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (150 мг, 0,34 ммоль) в THF (3 мл). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч. Реакционную смесь гасили с помощью насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью DCM. Органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~5% MeOH в DCM) с получением 6-бензил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 597 (M+1)⁺.

Стадия G. Синтез 6-бензил-2-(пиридин-2-илметил)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 6-бензил-2-((фенилсульфонил)(пиридин-2-ил)метил)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,17 ммоль) в AcOH (5 мл) добавляли Zn (110 мг, 1,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 15 мин. Реакционную смесь разбавляли с помощью DCM, промывали с помощью насыщ. NaHCO₃ и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (65% EtOAc в петролейном эфире) с получением 5 мг 6-бензил-2-(пиридин-2-илметил)-4-(тиазол-2-ил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 457 (M+1)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,72 (s, 1H), 8,61 (d,1H), 7,98 (d, 1H), 7,92-7,84 (m, 2H), 7,55 (d, 1H), 7,41 (dd, 1H), 7,35-7,23 (m, 5H), 5,32 (s, 2H), 4,70 (s, 2H).

Пример 9. Синтез соединений E9-vi и E9-vii

Соединение E9-iv может быть синтезировано с помощью двух подходов: (i) и (ii) по схеме 9. Для способа (i) соединение E9-ii может быть синтезировано из соединения E9-i посредством реакции алкилирования, как показано в примере 7 или примере 8. Как используется в данном документе, X^a представляет собой уходящую группу (например, Br, I, OMs или OTs). Реакция формилирования соединения E9-ii с LiHMDS и DMF обеспечивает получение промежуточного соединения E9-iii. E9-iii вступает в реакцию с восстановителем (например, NaBH₄) с получением соединения E9-iv. В качестве альтернативы в подходе (ii) галогенирование соединения E9-i обеспечивает образование соединения E9-ix. Соединение E9-ix подвергается реакции Стилле, озонолизу и восстановлению с получением соединения E9-x. Соединение E9-x можно алкилировать с помощью E9-viii с получением соединения E9-iv. На схеме 9 (iii) соединение E9-iv подвергается галогенированию с получением промежуточного соединения E9-v (X^b представляет собой галоген, такой как Cl или Br). Катализируемая металлом (например, Pd или Cu) реакция сочетания E9-v с органическим оловом, бором, цинком или магнием обеспечивает получение соединения E9-vi. Как используется в данном документе, соединение E9-v также может вступать в реакцию с некоторыми нуклеофилами, такими как азот в гетероцикле, с получением продукта E9-vii. Как используется в данном документе, M представляет собой органический комплекс металла (например, борорганический комплекс, такой как комплекс с бороновой кислотой или пинаколато-борный комплекс, оловоорганический комплекс, такой как -Sn(Bu ^t )₃; цинкорганический комплекс, такой как -Zn(галоген)); при этом каждый из Ar₁ и Ar₂ независимо представляет собой необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный карбоцикл или необязательно замещенный гетероциклил. В некоторых вариантах осуществления каждый из Ar₁ и Ar₂ независимо представляет собой необязательно замещенный гетероарил.

Пример 9A. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(тиазол-4-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида . К смеси 4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (2,6 г, 5,57 ммоль, 1 экв.) в сухом THF (30 мл) добавляли LiHMDS (1 М, 11,14 мл, 2,0 экв.) при -78°C. Смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч. Затем DMF (2,04 г, 27,86 ммоль, 2,14 мл, 5,0 экв.) добавляли по каплям к вышеописанной смеси. Смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч. TLC (PE:EA=2:1, УФ=254 нм) показала, что образовалось одно основное новое пятно. Смесь выливали в холодный насыщ. NH₄Cl (20 мл). Затем смесь нагревали до комнатной температуры. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (40 мл × 3). Органический слой промывали с помощью воды (20 мл x 3) и концентрировали in vacuo с получением необходимого продукта (2,6 г, неочищенное вещество). LCMS: масса/заряд 495,2 [M+H]⁺

Стадия B. Синтез 2-(гидроксиметил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси неочищенного 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида (1,0 г, 2,02 ммоль, 1 экв.) в THF (10 мл) и MeOH (10 мл) добавляли NaBH₄ (152,97 мг, 4,04 ммоль, 2 экв.). Смесь перемешивали при 30°C в течение 14 ч. TLC (DCM:MeOH=10:1, УФ=254 нм) показала, что исходный материал полностью израсходован и образовалось одно основное новое пятно. Реакционную смесь гасили с помощью добавления воды (20 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл × 3). Объединенные органические слои промывали с помощью солевого раствора (20 мл). Органическую фазу концентрировали in vacuo. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; колонка для флэш-хроматографии на диоксиде кремния SepaFlash®, 40 г, элюент 0~5% MeOH/DCM при 30 мл/мин). Элюент концентрировали in vacuo с получением необходимого продукта (382 мг). LCMS: масса/заряд 497,1 [M+H]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ ppm 8,61 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,66 (d, 1H), 7,38 (t, 1H), 7,05 (d,), 6,36 (t, 1H), 5,74 (s, 2H), 5,68 (s, 2H), 4,89 (d, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,50 (t, 2H), 0,78 (t, 2H), -0,12 (s, 9H).

Стадия C. Синтез 2-(хлорметил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 2-(гидроксиметил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (150,0 мг, 302,02 мкмоль, 1 экв.) и Et₃N (61,12 мг, 604,04 мкмоль, 84,08 мкл, 2,0 экв.) в DCM (5 мл) добавляли 4-метилбензолсульфонилхлорид (75,0 мг, 393,40 мкмоль, 1,30 экв.). Смесь перемешивали при 30°C в течение 5 ч. TLC (PE:EA=4:1, УФ=254 нм) показала, что исходный материал полностью израсходован. Воду (10 мл) и DCM (20 мл) добавляли к смеси. Органические слои концентрировали in vacuo с получением желтой смолы (0,1 г). Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; колонка для флэш-хроматографии на диоксиде кремния SepaFlash®, 4 г, элюент: градиент 0~20% этилацетат/петролейный эфир при 30 мл/мин.). Требуемую фракцию концентрировали in vacuo с получением необходимого продукта (40,0 мг, 76,88 мкмоль). LCMS: масса/заряд 515,1 [M+H]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ ppm 8,27 (d, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,52 (d, 1 H), 7,39 (dd, 1 H), 7,25 (s, 1H), 5,76 (s, 2H), 5,72 (s, 2H), 4,96 (s, 2H), 4,40 (s, 3H), 3,50-3,57 (m, 2H), 0,84-0,90 (m, 2H), от -0,09 до -0,06 (m, 9H).

Стадия D. Синтез 4-метил-2-(тиазол-4-илметил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К раствору 2-(хлорметил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,97 ммоль) и 4-(трибутилстаннил)тиазола (114 мг, 2,91 ммоль) в толуоле (4 мл) добавляли Pd(PPh₃)₄ (402 мг, 2,91 ммоль). Затем смесь нагревали в реакторе мегаваттного класса при 120°C в течение 30 мин в атмосфере N₂. Раствор выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc, высушивали над безводным Na₂SO₄. Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% этилацетат в петролейном эфире) с получением 4-метил-2-(тиазол-4-илметил)-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (соединения E9-4) (30 мг). LCMS: 564 (M+H)⁺.

Стадия E. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(тиазол-4-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она. К смеси соединения E9-4 (30 мг, 0,05 ммоль) в DCM (3 мл) при к.т. в атмосфере N₂ добавляли TFA (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC (C18, 0~90% ацетонитрил в H₂O с 0,1% муравьиной кислотой) с получением необходимого продукта (3,9 мг). LCMS: 434 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,12 (s, 1H), 9,12 (d, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,35-7,24 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,70 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).

Пример 9B. Синтез 2-((1H-имидазол-1-ил)метил)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. Синтез 2-((1H-имидазол-1-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 2-(хлорметил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (25,0 мг, 48,53 мкмоль, 1 экв.) и KI (8,06 мг, 48,53 мкмоль, 1 экв.) в THF (0,3 мл) добавляли имидазол (33,04 мг, 485,34 мкмоль, 10,0 экв.). Смесь нагревали до 60°C и перемешивали при 60°C в течение 12 ч. LCMS показала, что необходимый продукт образовался, и исходный материал полностью израсходован. Реакционную смесь объединяли с другой партией (25 мг). Смесь концентрировали in vacuo с получением желтой неочищенной смолы (50,0 мг). Продукт применяли для следующей стадии реакции без какой-либо очистки. LCMS: масса/заряд 547,2 [M+H]⁺.

Стадия B. Синтез 2-((1H-имидазол-1-ил)метил)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 2-((1H-имидазол-1-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50,0 мг, 64,02 мкмоль, 1 экв.) в диоксане (1 мл) добавляли HCl/диоксан (4 М, 2 мл, 124,96 экв.) и 2 капли воды. Смесь перемешивали при 30°C в течение 12 ч. TLC (PE:EA=1:1, УФ=254 нм) показала, что исходный материал полностью израсходован. Смесь концентрировали in vacuo с получением желтой смолы (0,2 г), которую очищали с помощью препаративной HPLC (основной) с получением указанного в заголовке продукта (4,0 мг). LCMS: масса/заряд 417,0 [M+H]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d ₄) δ ppm 8,43 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,43-7,49 (m, 1H), 7,29-7,36 (m, 2H), 7,12 (d, 1H), 7,04 (s, H), 5,74 (s, 2H), 5,73 (s, 2H), 4,34 (s, 3H).

Пример 9C. Синтез 4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез 2-(гидроксиметил)-4-метил-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. При -78^oC к смеси 4-метил-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (640 мг, 2,15 ммоль) в THF (10 мл) добавляли LiHMDS (4,3 мл, 1 М в THF). Через 30 мин в смесь добавляли сухой DMF (0,84 мл, 10,8 ммоль). После полного израсходования исходного материала добавляли смесь NaBH₄ (164 мг, 4,3 ммоль) в EtOH (4 мл) и перемешивали в течение 5 мин. Затем смесь выливали в насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~5% MeOH в DCM) с получением 2-(гидроксиметил)-4-метил-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (220 мг). LC-MS (ESI): масса/заряд 328 (M+H)⁺.

Стадия B. Синтез 2-(хлорметил)-4-метил-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 2-(гидроксиметил)-4-метил-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (100 мг, 0,31 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли Et₃N (0,43 мл, 3,1 ммоль) и MsCl (0,12 мл, 1,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Затем смесь промывали с помощью насыщ. NH₄Cl (водн.), высушивали над безводн. Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~50% EtOAc в PE) с получением 65 мг 2-(хлорметил)-4-метил-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 346 (M+H)⁺.

Стадия C. Синтез 4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. В атмосфере азота к смеси 2-(хлорметил)-4-метил-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (50 мг, 0,14 ммоль) и 2-(трибутилстаннил)пиридина (0,14 мл, 0,43 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли Pd(PPh₃)₄ (17 мг, 0,014 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение ночи. Затем смесь охлаждали, концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью препаративной TLC (элюент: 10% MeOH в DCM) с получением 2 мг 4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-6-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 389 (M+H)⁺.¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,56 (m, 3H), 8,48 (dd, 1H), 7,81 (td, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,37-7,30 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).

Пример 9D. Синтез 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она и 6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((4H-1,2,4-триазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез 1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-карбальдегида. К суспензии 1H-пиразол-3-карбальдегида (10,0 г, 104,07 ммоль, 1 экв.) и DIPEA (33,63 г, 260,18 ммоль, 45,32 мл, 2,5 экв.) в DCM (500 мл) добавляли по каплям 2-(хлорметокси)этилтриметилсилан (26,03 г, 156,11 ммоль, 27,63 мл, 1,5 экв.) при -40°C. Затем реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. TLC (петролейный эфир:EtOAc=5:1) показала, что исходный материал полностью израсходован и образовались два новых пятна. Реакционную смесь концентрировали in vacuo. Остаток объединяли с еще 2 партиями (10,0 г каждая) и очищали с помощью Combiflash (от 100% петролейного эфира до 40% EtOAc в петролейном эфире) с получением 60,0 г необходимого продукта. (Примечание: смесь 2 региоизомеров в соотношении ~5/4). ¹H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ ppm 10,06 (s, 1H), 10,00 (s, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,03 (d, 1H), 6,92 (d, 1H), 5,87 (s, 2H), 5,56 (s, 2H), 3,61-3,67 (m, 4H), 0,91-1,01 (m, 4H), -0,09-0,05 (m, 18H).

Стадия B. Синтез (1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метанола. К раствору 1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-карбальдегида (30 г, 132,54 ммоль, 1 экв., смесь 2 региоизомеров в соотношении ~5/4) в THF (200 мл)/MeOH (100 мл) добавляли порциями NaBH₄ (7,52 г, 198,81 ммоль, 1,50 экв.) при 0°C, реакционную смесь перемешивали при 0°C до комнатной температуры в течение 18 ч. TLC (петролейный эфир:EtOAc=2:1) показала, что исходные материалы полностью израсходованы и образовались два новых пятна. Растворитель концентрировали in vacuo. Остаток очищали с помощью Combiflash (от 100% петролейного эфира до 100% EtOAc) с получением 25 г необходимого продукта. (Примечание: смесь 2 региoизомеров в соотношении ~3/2). ¹H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ ppm 7,55 (d, 1H), 7,47 (brs, 1H), 6,36 (d, 1H), 6,34 (d, 1H), 5,57 (s, 2H), 5,42 (s, 2H), 4,74-4,76 (m, 4H), 3,55-3,60 (m, 4H), 0,85-0,96 (m, 4H), 0,00-0,06 (m, 18H).

Стадия C. Синтез 3-(бромметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразола. К раствору (1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метанола (23 г, 100,72 ммоль, 1 экв., смесь 2 региоизомеров в соотношении ~3/2) и PPh₃ (36,98 г, 141,00 ммоль, 1,4 экв.) в DCM (200 мл) добавляли CBr₄ (46,76 г, 141,00 ммоль, 1,4 экв.) при 0°C и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. TLC (петролейный эфир:EtOAc=5:1) показала, что исходные материалы полностью израсходованы и образовалось новое пятно. Реакционную смесь концентрировали in vacuo. Остаток объединяли с другой партией (2,0 г) и очищали с помощью Combiflash (от 100% петролейного эфира до 50% EtOAc в петролейном эфире) с получением необходимого продукта 22,0 г (75,53 ммоль). ¹H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ ppm 7,51 (d, 1H), 6,39 (d, 1H), 5,38 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 3,52-3,57 (m, 2H), 0,86-0,96 (m, 2H), -0,03-0,02 (m, 9H).

Стадия D. Синтез 4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. Суспензию 4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (1,0 г, 4,85 ммоль, 1 экв.), 3-(бромметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразола (2,12 г, 7,27 ммоль, 1,5 экв.), K₃PO₄ (2,57 г, 12,12 ммоль, 2,5 экв.) и NaI (218,05 мг, 1,45 ммоль, 0,3 экв.) в DMF (15 мл) перемешивали при 60°C в течение 18 ч в атмосфере N₂. TLC (петролейный эфир:EtOAc=1:1) показала, что исходный материал полностью израсходован и образовалось новое пятно. Реакционную смесь объединяли с еще 3 партиями (1,0 г каждая) и выливали в ледяную воду (250 мл). Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (150 мл x 3). Объединенные органические слои промывали водой (120 мл × 2), солевым раствором (120 мл) и высушивали над Na₂SO₄. Растворитель концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очищали с помощью Combiflash (от 100% петролейного эфира до 80% EtOA в петролейном эфире) с получением необходимого продукта (3,6 г). ¹H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ ppm 8,91 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 7,49 (d, 1H), 6,36 (d, 1H), 5,51 (s, 2H), 5,40 (m, 2H), 4,45 (s, 3 H), 3,52-3,58 (m, 2H), 0,85-0,90 (m, 2H), -0,05 (s, 9H).

Стадия E. Синтез 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида. В атмосфере аргона к раствору 4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)

метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (1,7 г, 4,09 ммоль, 1 экв.) в THF (30 мл) медленно добавляли LiHMDS (1,0 М, 8,18 мл, 2 экв.) при -78°C, реакционную смесь перемешивали при -70°C в течение 1 ч. Затем раствор DMF (1,49 г, 20,45 ммоль, 1,57 мл, 5 экв.) в THF (3 мл) добавляли по каплям к смеси. Полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 1 ч. TLC (петролейный эфир: EtOAc=1:1) показала, что образовалось новое пятно. Реакционную смесь по каплям добавляли к водн. NH₄Cl (50 мл) при 0°C, затем смесь экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл x 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (40 мл) и высушивали над Na₂SO₄. Растворитель удаляли in vacuo с получением неочищенного необходимого продукта (1,8 г), который применяли на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия F. Синтез 2-(гидроксиметил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида (1,8 г, 3,24 ммоль, 1 экв.) в THF (20 мл) MeOH (10 мл) добавляли NaBH₄ (245,08 мг, 6,48 ммоль, 2 экв.) при 0°C и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. TLC (петролейный эфир:EtOAc=1:2) показала, что исходный материал полностью израсходован и образовалось новое пятно. Реакционную смесь концентрировали in vacuo, остаток очищали с помощью Combiflash (от 100% DCM до 5% MeOH в DCM). Получали необходимый продукт (1,1 г). ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ ppm 8,63 (s, 1H), 7,86 (d, 1H), 6,44 (t, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,40-5,42 (m, 4H), 4,98 (d, 2H), 4,34 (s, 3H), 3,55-3,61 (m, 2H), 0,86-0,91 (m, 2H), 0,00 (s, 9H).

Стадия G. Синтез (4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метилметансульфоната. К раствору 2-(гидроксиметил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (700 мг, 1,57 ммоль, 1 экв.) и Et₃N (317,21 мг, 3,13 ммоль, 436,33 мкл, 2,0 экв.) в DCM (15 мл) добавляли по каплям MsCl (269,32 мг, 2,35 ммоль, 181,97 мкл, 1,5 экв.) при 0°C и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. TLC (петролейный эфир:EtOAc=1:1) показала, что исходный материал полностью израсходован и образовалось новое пятно. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc (80 мл) и промывали с помощью воды (30 мл x 4), солевого раствора (40 мл) и высушивали над Na₂SO₄. Растворитель удаляли in vacuo с получением неочищенного продукта (700 мг). LCMS: (масса/заряд 525,5 (M+H).

Стадия H. Синтез 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]

пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она и 2-((4H-1,2,4-триазол-4-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. Смесь (4-метил-5-оксо-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-ил)метилметансульфоната (150 мг, 285,88 мкмоль, 1 экв.), 1H-1,2,4-триазола (197,45 мг, 2,86 ммоль, 10 экв.) и CsF (86,85 мг, 571,77 мкмоль, 21,08 мкл, 2 экв.) в MeCN (8 мл) перемешивали при 60°C в атмосфере N₂ в течение 18 ч. LCMS показала, что исходный материал полностью израсходован и образовались два новых пика. Реакционную смесь концентрировали in vacuo и остаток очищали с помощью Combiflash (от 100% DCM до 8% MeOH в DCM). Получали продукт, представляющий собой 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он (55 мг) и 2-((4H-1,2,4-триазол-4-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он (30 мг).

Стадия I. Синтез 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К суспензии 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (55 мг, 110,52 мкмоль, 1 экв.) и HCl/диоксан (4 М, 1 мл, 36,19 экв.) в DCM (3 мл) добавляли H₂O (1,99 мг, 110,52 мкмоль, 0,05 мл, 1 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. LCMS показала, что исходный материал полностью израсходован, и обнаружили 84% необходимого продукта. Реакционную смесь концентрировали in vacuo и остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (24,1 мг, 65,60 мкмоль, выход 59,35%). Колонка: Xtimate C18 150*25 мм*5 мкм, подвижная фаза: [вода (0,225% FA)-ACN]; B%: 13%-43%, 11,2 мин. LCMS: масса/заряд 367,9 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d ₄) δ ppm 8,72 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,52 (brs, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,92 (s, 2H), 5,43 (s, 2H), 4,30 (s, 3H).

Стадия J. Синтез 6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((4H-1,2,4-триазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К суспензии 2-((4H-1,2,4-триазол-4-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 60,28 мкмоль, 1 экв.) и HCl/диоксан (4 М, 1 мл, 66,35 экв.) в DCM (3 мл) добавляли H₂O (50,00 мг, 2,78 ммоль, 0,05 мл, 46,04 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. LCMS показала, что исходный материал полностью израсходован, обнаружили необходимый продукт. Реакционную смесь концентрировали in vacuo и остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (2,1 мг, 5,72 мкмоль). Колонка: Xtimate C18 150*25 мм*5 мкм; подвижная фаза: [вода (0,225% FA)-ACN]; B%: 13%-43%,11,2 мин. LCMS: масса/заряд 368,0 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d ₄) δ ppm 8,74 (s, 2H), 8,38 (s, 1H), 7,52 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 5,84 (s, 2H), 5,44 (s, 2H), 4,31 (s, 3H).

Следующие соединения синтезировали в соответствии со схемой E9 и процедурой из примеров 9A-9B с применением подходящего исходного материала.

№ соединения	Структура	Характеристика
E9-14	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-4-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 428 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,55 (d, 2H), 8,13 (s, 1H),7,46 (s, 1H), 7,44-7,41 (m, 2H), 7,29-7,26 (m, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,58(s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E9-15	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(изоксазол-4-илметил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 418 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 13,12 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,40-7,21 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,44 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E9-16	2-(2-гидрокси-пиримидин-5-илметил)-6-(1H-индазол-4-илметил)-8-метил-6,8-дигидро-3-тиа-1,5,6,8-тетраазациклопента[a]инден-7-он	LC-MS: масса/заряд 445 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,12 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,35 (s, 2H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,32 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E9-17	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((2-метоксипиримидин-5-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 459 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,11 (s, 1H), 8,69 (s, 2H), 8,57 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,31-7,24 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,52 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 3,92 (s, 3H).
E9-18	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(изотиазол-5-илметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 434 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,13 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,52 (d, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,48-7,41 (m, 2H), 7,31-7,25 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 5,00 (s, 2H), 4,29 (s, 3H).
E9-19	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(тиазол-2-илметил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 434 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,11 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,81 (d, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,34-7,23 (m, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,99 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E9-20	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-3-илметил)-4H-тиазоло [5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: 428 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,65 (d, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,51 (dd, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,84 (d, 1H), 7,47-7,38 (m, 2H), 7,31-7,25 (m, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E9-21	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d] пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 444 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 11,52 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,30-7,25 (m, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,32 (s, 1H), 6,16 (d, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,35 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E9-22	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((1H-пиразол-4-ил)метил)-4-метил-4H -тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 417 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,12 (s, 1H), 12,82 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,36 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E9-23	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(тиазол-5-илметил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 434 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 13,12 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,32-7,22 (m, 1H), 6,96 (d,1H), 5,65 (s, 2H), 4,85 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E9-24	2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 418,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 8,18 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,11 (d, 1H), 6,94 (t, 1H), 6,76 (d, 1H), 5,53 (s, 2H), 5,38 (s, 2H), 4,03 (s, 3H).
E9-25	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((1H-пиразол-1-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: 417,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 10,19 (brs, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,62-7,67 (m, 2H), 7,40-7,44 (m, 1H), 7,38 (t, 1H), 7,26 (brd, 1H), 6,38-6,41 (m, 1H), 5,78 (s, 2H), 5,76 (s, 2H), 4,42 (s, 3H).
E9-26	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((4H-1,2,4-триазол-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 418,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ ppm 12,28 (brs, 1H), 8,27 (s, 2H), 7,97-8,08 (m, 2H), 7,23 (brd, 1H), 7,02-7,09 (m, 1H), 6,90 (brd, 1 H), 5,51 (s, 2H), 5,49 (s, 2H), 4,15 (s, 3H).
E9-27	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((6-аминопиридин-2-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 443 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6 ) δ 8,60 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,86 (t, 2H), 7,42 (d, 1H), 7,24-7,28 (m, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,83-6,89 (m, 2H), 5,63 (s, 2H), 4,68 (s, 2H), 4,24 (s, 3H).
E9-28	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((2-метоксипиридин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 458 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,15-8,12 (m, 2H), 7,45 (d, 1H), 7,30-7,25 (m, 1H), 7,01 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,86 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,52 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,84 (s, 3H).
E9-29	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: 428 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 8,56 (s, 2H), 8,14 (s, 1H), 7,83-7,79 (m, 1H), 7,51-7,44 (m, 2H), 7,35-7,23 (m, 2H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E9-30	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(пиридин-3-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 428 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,65 (d, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,51 (dd, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,84 (d, 1H), 7,49-7,35 (m, 2H), 7,30-7,19 (m, 1H), 6,95 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E9-31	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-(пиримидин-5-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 429 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,13 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 8,90 (s, 2H), 8,58 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,28 (t, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,62 (s, 2H), 4,25 (s, 3H).
E9-32	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((6-метоксипиридин-2-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 458 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,71 (dd, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,35-7,18 (m, 1H), 7,08 (d, 1H), 6,96 (d, 1H), 6,75 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,89 (s, 3H).
E9-33	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((6-метоксипиридин-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 458 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,24 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,75 (dd, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,27 (dd, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,83 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,85 (s, 3H).
E9-34	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-((1H-пиразол-4-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 417 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,12 (s, 1H), 12,82 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,45 (d, Гц, 1H), 7,28 (dd, 1H), 6,96 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,36 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).
E9-35	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 444 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 11,58 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,43-7,49 (m, 3H), 7,27 (t, 1H), 6,95 (d, 1H), 6,33 (d, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,25-4,27 (m, 5H).
E9-36	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5] пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 444 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 13,11 (s, 1H), 11,83 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,43 (m, 2H), 7,28 (dd, 1H), 6,96 (d, 1H), 6,28 (d, 2H), 5,65 (s, 2H), 4,39 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E9-37	6-((1H-индазол-4-ил)метил)-4-метил-2-((1-метил-1H-пиразол-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 431 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,56 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,49 (d, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,32 (dd, 1H), 6,98 (d, 1H), 6,29 (d, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,66 (s, 2H), 4,27 (s, 3H), 3,24 (s, 3H).
E9-38	3-((2-((1H-имидазол-1-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)бензамид	LC-MS: масса/заряд 420 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: δ 8,60 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,80-7,74 (m, 2H), 7,46-7,37 (m, 2H), 7,35 (s, 2H), 6,99 (s, 1H), 5,78 (s, 2H), 5,39 (s, 2H), 4,27 (s, 3H).
E9-39	6-аллил-4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 338 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,56 (d, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,81 (td, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,33 (dd, 1H), 5,99 (dq, 1H), 5,12 (ddd, 2H), 4,76 (d, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E9-40	4-метил-2-(пиридин-2-илметил)-6-((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LC-MS: масса/заряд 396 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,56 (d, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,81 (td, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,38-7,27 (m, 1H), 4,67 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 4,05 (d, 2H), 3,82 (d, 2H), 3,23 (d, 2H), 2,13 (d, 1H), 1,46 (d, 2H), 1,35-1,26 (m, 2H).
E9-41	2-((1H-пиразол-1-ил)метил)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 367,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d 4) δ ppm 8,39 (s, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,63 (d, 1H), 7,59 (brs, 1H), 6,43 (t, 1H), 6,29 (brs, 1H), 5,85 (s, 2H), 5,48 (s, 2H), 4,37 (s, 3H).
E9-42	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-2-((2-оксо-2,3-дигидро-1H-имидазол-1-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло [2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 383,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d 4) δ ppm 8,41 (s, 1H), 7,55-7,57 (m, 1H), 6,64 (d, 1H), 6,51 (d, 1H), 6,30 (s, 1H), 5,48 (s, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,37 (s, 3H).
E9-43	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-2-((3-нитро-1H-пиразол-1-ил)метил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он	LCMS: масса/заряд 412,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6) δ ppm 12,61 (brs, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,28 (d, 1H), 7,58 (brs, 1H), 7,13 (d, 1H), 6,08 (d, 1H), 6,03 (s, 2H), 5,30 (brs, 2H), 4,24 (s, 3H).
E9-44	6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-((3-амино-1H-пиразол-1-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 382,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d 4) δ ppm 8,35 (s, 1H), 7,53 (d, 2H), 6,26 (brs, 1H), 5,71 (d, 1H), 5,54 (s, 2H), 5,44 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).
E9-45	2-((1H-имидазол-1-ил)метил)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 366,9 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d 4) δ ppm 8,36 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,54 (brs, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 6,26 (s, 1H), 5,72 (s, 2H), 5,44 (s, 2H), 4,33 (s, 3H).
E9-46	2-((1H-1,2,3-триазол-1-ил)метил)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LCMS: масса/заряд 368 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d 6) δ ppm 8,53 (brs, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,58 (brs, 1H), 6,17 (s, 2H), 6,07 (brs, 1H), 5,29 (brs, 2H), 4,23 (s, 3H).
E9-47	N-(6-((2-((1H-имидазол-1-ил)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)-5-фторпиридин-2-ил)ацетамид	LC-MS: масса/заряд 453 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 10,36 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,07-7,84 (m, 2H), 7,70 (t, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,79 (s, 2H), 5,45 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 2,01 (s, 3H).

Пример 9E. Синтез 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-6-((2-аминопиримидин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез 2-хлор-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (3 г, 14,5 ммоль) в сухом THF (80 мл) добавляли по каплям LiHMDS (30,5 мл) при -65°C. После перемешивания в течение 1 ч добавляли раствор гексахлорэтана (1,8 мл, 16 ммоль) в сухом THF (20 мл). Температуру реакционной смеси повышали до -20°C в течение 3 ч. Затем смесь гасили с помощью насыщ. NH₄Cl и перемешивали при к.т. в течение 20 мин. Осадок собирали путем фильтрации и промывали с помощью EtOAc с получением 3,5 г 2-хлор-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 241 (M+H)⁺.

Стадия B. Синтез 4-метил-2-винил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. В атмосфере азота к смеси 2-хлор-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (1,5 г, 6,2 ммоль) и трибутил(этенил)станнана (5,5 мл,18,7 ммоль) в DMF (30 мл) добавляли Pd(PPh₃)₄ (0,36 г, 0,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Затем смесь охлаждали и разбавляли с помощью EtOAc, промывали водой и солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~10% MeOH в DCM) с получением 1,4 г 4-метил-2-винил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 233 (M+H)⁺.

Стадия C. Синтез 4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида. При -60^oC смесь 4-метил-2-винил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (500 мг, 2,15 ммоль) в DCM/MeCN (500 мл, объем 1:1) продували с помощью O₃ в течение 20 мин. Затем реакционную смесь гасили с помощью диметилсольфана и концентрировали с получением 500 мг 4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида. LC-MS (ESI): масса/заряд 235 (M+H)⁺.

Стадия D. Синтез 2-(гидроксиметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбальдегида (500 мг, 2,13 ммоль) в EtOH (3 мл) добавляли NaBH₄ (81 мг, 2,13 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Затем смесь выливали в насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0~8% MeOH в DCM) с получением 120 мг 2-(гидроксиметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она.LC-MS (ESI): масса/заряд 237 (M+H)⁺.

Стадия E. Синтез 6-((2-хлорпиримидин-4-ил)метил)-2-(гидроксиметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 2-(гидроксиметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (200 мг, 0,85 ммоль) в DMF (8 мл) добавляли K₂CO₃ (351 мг, 2,54 ммоль). После перемешивания при 60°C в течение 30 мин. добавляли раствор 2-хлор-4-(хлорметил)пиримидина (276 мг, 1,7 ммоль) в DMF (2 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение еще 4 ч, выливали в насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0 ~ 8% MeOH в DCM) с получением 160 мг 6-((2-хлорпиримидин-4-ил)метил)-2-(гидроксиметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она.LC-MS (ESI): масса/заряд 363 (M+H)⁺.

Стадия F. Синтез 6-((2-(бис(2,4-диметоксибензил)амино)пиримидин-4-ил)метил)-2-(гидроксиметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 6-((2-хлорпиримидин-4-ил)метил)-2-(гидроксиметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (160 мг, 0,44 ммоль) в MeCN (5 мл) добавляли бис(2,4-диметоксибензил)амин (280 мг, 0,88 ммоль) и AcOH (1 каплю). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение ночи. Реакционную смесь выпаривали и остаток очищали с помощью препаративной TLC (элюент: 5% MeOH в DCM) с получением 75 мг 6-((2-(бис(2,4-диметоксибензил)амино)пиримидин-4-ил)метил)-2-(гидроксиметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она.LC-MS (ESI): масса/заряд 644 (M+H)⁺.

Стадия G. Синтез 6-((2-(бис(2,4-диметоксибензил)амино)пиримидин-4-ил)метил)-2-(хлорметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. При 0°C к раствору 6-((2-(бис(2,4-диметоксибензил)амино)пиримидин-4-ил)метил)-2-(гидроксиметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (75 мг, 0,12 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли Et₃N (0,16 мл, 1,16 ммоль) и MsCl (0,05 мл, 0,58 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли с помощью DCM, промывали с помощью насыщ. NH₄Cl и солевого раствора, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали с получением 70 мг неочищенного продукта 6-((2-(бис(2,4-диметоксибензил)амино)пиримидин-4-ил)метил)-2-(хлорметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. LC-MS (ESI): масса/заряд 662 (M+H)⁺.

Стадия H. Синтез 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-6-((2-(бис(2,4-диметоксибензил)амино)пиримидин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. Смесь 4H-1,2,4-триазола (39 мг, 0,57 ммоль) и K₂CO₃ (78 мг, 0,57 ммоль) в DMF (3 мл) перемешивали при 60°C в течение 30 мин. Добавляли 6-((2-(бис(2,4-диметоксибензил)амино)пиримидин-4-ил)метил)-2-(хлорметил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он (75 мг, 0,11 ммоль) и перемешивали в течение еще 30 мин. Суспензию выливали в насыщ. NH₄Cl, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0 ~ 10% DCM в MeOH) с получением 60 мг 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-6-((2-(бис(2,4-диметоксибензил)амино)пиримидин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она.LC-MS (ESI): масса/заряд 695 (M+H)⁺.

Стадия I. Синтез 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-6-((2-аминопиримидин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К смеси 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-6-((2-(бис(2,4-диметоксибензил)амино)пиримидин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (30 мг, 0,043 ммоль) в EtOH (2 мл) добавляли HCl (0,5 мл, 4 М в диоксане). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение ночи. Затем смесь охлаждали и выливали в насыщ. NaHCO₃, экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над безводн. Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением 8 мг 2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-6-((2-аминопиримидин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она.LC-MS (ESI): масса/заряд 395 (M+H)⁺.¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,80 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,12-8,10 (m, 2H), 6,60 (s, 2H), 6,19 (d, 1H), 6,01 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).

№ соединения	Структура и химическое название	Характеристика
E9-53	2-((1H-имидазол-1-ил)метил)-6-((2-аминопиримидин-4-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 394 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,62 (s, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,61 (s, 2H), 6,18 (d, 1H), 5,79 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).
E9-54	2-((1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил)-4-метил-6-((5-оксо-4,5-дигидро-1H-1,2,4-триазол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-он	LC-MS: масса/заряд 385 (M+H)+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 11,32-11,28 (m, 2H), 8,80 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 6,01 (s, 2H), 5,14 (s, 2H), 4,26 (s, 3H).

Пример 10. Синтез соединения E10-ii

Схема E10

Как показано на схеме E10, реакция E10-i с альдегидом в присутствии основания (например, LiHMDS) обеспечивает образование соединения E10-ii, которое может быть разделено с помощью хиральной HPLC или SFC с получением двух энантиомеров. Как используется в данном документе, каждый из Ar1 и Ar2 независимо представляет собой необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный галогеналкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил.

Пример 10A. Синтез (S)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она и (R)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. Синтез 2-(гидрокси(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. В атмосфере аргона к раствору 4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (0,5 г, 1,07 ммоль, 1 экв.) в THF (15 мл) медленно добавляли LiHMDS (1,0 М, 2,14 мл, 2,0 экв.) при -78°C и реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч. Затем раствор 1-(2-триметилсилилэтоксиметил)пиразол-3-карбальдегида (1,21 г, 5,36 ммоль, 5 экв.) в THF (2 мл) добавляли по каплям к реакционной смеси. Полученную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч. TLC (петролейный эфир:EtOAc=2:1) показала, что образовались новые пятна. Реакционную смесь гасили с помощью водн. NH₄Cl (15 мл) при -70°C и разбавляли водой (20 мл). Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (20 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл) и высушивали над Na₂SO₄. Растворитель концентрировали in vacuo. Остаток очищали с помощью Combiflash (от 100% петролейного эфира до 100% EtOAc) с получением необходимого продукта (70 мг, 101,01 мкмоль). LCMS: масса/заряд 693,2 (M+H)⁺.

Стадия B. Синтез 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 2-(гидрокси(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-4-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (0,04 г, 57,72 мкмоль, 1 экв.) в DCM (3 мл) добавляли TFA (65,82 мг, 577,22 мкмоль, 42,74 мкл, 10 экв.) при 0°C и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 36 ч. LCMS показала, что исходный материал полностью израсходован и образовалось 57% необходимого продукта. Реакционную смесь концентрировали in vacuo и остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (11 мг). LCMS: масса/заряд 432,9 [M+H]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ ppm 13,10 (brs, 2H), 8,58 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,26 (dd, 1H), 6,93 (d, 2H), 6,19 (d, 1H), 6,07 (s, 1H), 5,63 (s, 2H), 4,20 (s, 3H).

Стадия C. Синтез (S)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она и (R)-6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. Соединение 6-((1H-индазол-4-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она отделяли с помощью SFC. Условия SFC: колонка представляет собой DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250 мм*30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: A: 55% CO2; B: 45% [0,1% NH₃H₂O в EtOH]/мин. Разделение с помощью SFC обеспечивало получение двух энантиомеров. Один энантиомер (2,6 мг): LCMS: масса/заряд 433,0 [M+H]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ ppm 8,63 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,64 (brs, 1H), 7,47 (brd, 1H), 7,27-7,32 (m, 1H), 6,97 (brd, 1H), 6,22 (d, 1H), 6,11 (s, 1H), 5,64 (s, 2H), 5,34 (brs, 1H), 4,24 (s, 3H). И 3,5 мг другого энантиомера: LCMS: масса/заряд 433,0 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ ppm 8,63 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,64 (brs, 1H), 7,48 (brd, 1H), 7,28-7,32 (m, 1H), 6,98 (brd, 1H), 6,23 (d, 1H), 6,11 (s, 1H), 5,64 (s, 2H), 5,34 (brs, 1H), 4,25 (s, 3H).

Пример 10B. Синтез (R)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она и (S)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она

Стадия A. Синтез 2-(гидрокси(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. В атмосфере аргона к раствору 4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (0,5 г, 1,20 ммоль, 1 экв.) в THF (10 мл) медленно добавляли LiHMDS (1,0 М, 2,41 мл, 2 экв.) при -78°C и реакционную смесь перемешивали при -70°C в течение 1 ч. Затем раствор 1-(2-триметилсилилэтоксиметил)пиразол-3-карбальдегида (816,97 мг, 3,61 ммоль, 3 экв.) в THF (1 мл) добавляли к реакционной смеси. Полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 1 ч. TLC (петролейный эфир:EtOAc=1:1) показала, что образовались два новых пятна. Реакционную смесь гасили с помощью водн. NH₄Cl (5 мл) при -70°C, а затем нагревали до комнатной температуры. Смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (8 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (10 мл) и высушивали над Na₂SO₄. Растворитель концентрировали in vacuo. Остаток очищали с помощью Combiflash (от 100% петролейного эфира до 100% EtOAc) с получением неочищенного продукта (130 мг) в виде бледно-коричневой смолы, которую применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: масса/заряд 643,2 [M+H]⁺.

Стадия B. Синтез 6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. К раствору 2-(гидрокси(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-6-((1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она (0,13 г, 202,20 мкмоль, 1 экв.) в DCM (8 мл) добавляли TFA (4,62 г, 40,52 ммоль, 3 мл, 200,38 экв.) с последующим добавлением H₂O (500,00 мг, 27,75 ммоль, 0,5 мл, 137,26 экв.), затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч, затем нагревали до 40°C в течение 18 ч. LCMS показала, что исходный материал полностью израсходован. Реакционную смесь концентрировали in vacuo и остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением необходимого продукта (20,5 мг). LCMS: масса/заряд 382,9 [M+H]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ ppm 12,72 (brs, 1H), 12,61 (brs, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,56-7,62 (m, 2H), 6,82 (brs, 1H), 6,18 (d, 1H), 5,99-6,09 (m, 2H), 5,24-5,32 (m, 2H), 4,19 (s, 3H).

Стадия C. Синтез (R)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она и (S)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она. Соединение 6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5(6H)-она разделяли с помощью SFC. Условия SFC: колонка представляет собой DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250 мм*30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: A: 55% CO₂; B: 45% [0,1% NH₃H₂O в EtOH]/мин. Разделение с помощью SFC обеспечивало получение 2-[(R)-гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил]-4-метил-6-(1H-пиразол-3-илметил)тиазоло[3,4]пирроло[1,3-d]пиридазин-5-она и 2-[(S)-гидрокси(1H-пиразол-3-ил)метил]-4-метил-6-(1H-пиразол-3-илметил)тиазоло[3,4]пирроло[1,3-d]пиридазин-5-она. Один изомер (4,4 мг): LCMS: масса/заряд 383 [M+H]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, метанол-d ₄) δ ppm 8,39 (s, 1H), 7,61 (brs, 1H), 7,55 (brs, 1H), 6,34 (brs, 1H), 6,25 (brs, 1H), 6,18 (brs, 1H), 5,44 (s, 2H), 4,29 (s, 3H). Другой изомер (4,1 мг):LCMS: масса/заряд 383 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d ₄) δ ppm 8,40 (s, 1H), 7,59 (brs, 1H), 7,54 (brs, 1H), 6,34 (brs, 1H), 6,26 (brs, 1 H), 6,19 (brs, 1 H), 5,44 (s, 2H), 4,29 (s, 3H).

Пример 10C: синтез 6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-2-(дифтор(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A. 3-(6-((1-(N, N-Диметилсульфамоил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбонил)-N, N-диметил-1H-пиразол-1-сульфонамид. К смеси 3-((2-((1-(N, N-диметилсульфамоил)-1H-пиразол-3-ил)(гидрокси)метил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)-N, N-диметил-1H-пиразол-1-сульфонамида (50 мг, 83,80 мкмоль, получено аналогично E10-1) в DCM (1,5 мл) добавляли MnO₂ (72,85 мг, 838,00 мкмоль) и смесь перемешивали при 15°C в течение 1,5 часа. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта (60 мг, неочищенное вещество). LCMS: масса/заряд 595,1 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,34 (s, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,41 (d, 1H), 6,38 (d, 1H), 5,54 (s, 2H), 4,49 (s, 3H), 3,10 (s, 6H) 2,93 (s, 6H).

Стадия B. 3-((2-((1-(N, N-Диметилсульфамоил)-1H-пиразол-3-ил)дифторметил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)-N, N-диметил-1H-пиразол-1-сульфонамид. К раствору 3-(6-((1-(N, N-диметилсульфамоил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбонил)-N, N-диметил-1H-пиразол-1-сульфонамида (240 мг, 403,60 мкмоль) в DCE (4 мл) добавляли BAST (1,34 г, 6,05 ммоль, 1,33 мл) и смесь перемешивали при 50°C в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл) и промывали с помощью насыщенного NaHCO₃ (10 мл *2), высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта (300 мг, неочищенное вещество), который применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: масса/заряд 617,1 (M+H)⁺.

Стадия C. 6-((1H-Пиразол-3-ил)метил)-2-(дифтор(1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К смеси 3-((2-((1-(N, N-диметилсульфамоил)-1H-пиразол-3-ил)дифторметил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)-N, N-диметил-1H-пиразол-1-сульфонамида (240 мг, 163,47 мкмоль) в DCM (2 мл) добавляли TFA (2,07 г, 18,15 ммоль, 1,34 мл) и смесь нагревали до 50°C в течение 5 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC (колонка: Agela ASB 150*25 мм*5 мкм; подвижная фаза: [вода (0,05% HCl)-ACN]; B%: 30%-60%, 8 мин.) с получением необходимого продукта (3,9 мг, выход 5,45%, чистота 92%) в виде белого твердого вещества. LCMS: масса/заряд 403,1 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ 8,67 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 6,16 (s, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,28 (s, 3H).

Пример 10D: синтез 2-(1-(1H-пиразол-3-ил)этил)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она

Стадия A: 3-((2-(1-(1-(N, N-диметилсульфамоил)-1H-пиразол-3-ил)-1-гидроксиэтил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)-N, N-диметил-1H-пиразол-1-сульфонамид. К раствору 3-(6-((1-(N, N-диметилсульфамоил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбонил)-N, N-диметил-1H-пиразол-1-сульфонамида (160 мг, 269,07 мкмоль) в THF (3 мл) добавляли CH₃MgBr (3 М, 179,38 мкл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 ч. Реакционную смесь выливали в насыщенный NH4Cl (10 мл) при 0°C, экстрагировали с помощью этилацетата (20 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (10 мл), высушивали над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; колонка для флэш-хроматографии на диоксиде кремния SepaFlash®, 12 г, элюент: градиент 0~90% этилацетат/петролейный эфир при 40 мл/мин) с получением необходимого продукта (50 мг, 81,87 мкмоль).LCMS: масса/заряд 611,1 (M+H)⁺.

Стадия B: 2-(1-(1H-пиразол-3-ил)этил)-6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-он. К смеси 3-((2-(1-(1-(N, N-диметилсульфамоил)-1H-пиразол-3-ил)-1-гидроксиэтил)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидро-6H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-6-ил)метил)-N, N-диметил-1H-пиразол-1-сульфонамида (50 мг, 81,87 мкмоль) в DCE (0,5 мл) добавляли Et3SiH (19,04 мг, 163,75 мкмоль, 26,15 мкл) при 0°C с последующим TFA (1,54 г, 13,51 ммоль, 1 мл, 164,96 экв.) и перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Смесь нагревали до 50°C в течение еще 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC (колонка: Agela ASB 150*25 мм*5 мкм; подвижная фаза: [вода (0,05% HCl)-ACN]; B%: 25%-55%, 7 мин.) с получением 7,0 мг необходимого продукта. LCMS: масса/заряд 381,2 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 8,46 (s, 1H), 8,15 (d, 2H), 6,78 (d, 1H), 6,74 (d, 1H), 5,60 (s, 2H), 5,00 (q, 1H), 4,33 (s, 3H), 1,94 (d, 3H).

Пример 10E: синтез 6-((1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-2-(1H-пиразол-3-карбонил)-4,6-дигидро-5H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-5-она.

Стадия A. 4-Метил-2-(1H-пиразол-3-карбонил)-6-(1H-пиразол-3-илметил)тиазоло[3,4]пирроло[1,3-d]пиридазин-5-он. К раствору 3-(6-((1-(N, N-диметилсульфамоил)-1H-пиразол-3-ил)метил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидро-4H-тиазоло[5',4':4,5]пирроло[2,3-d]пиридазин-2-карбонил)-N, N-диметил-1H-пиразол-1-сульфонамида (50 мг, 84,08 мкмоль) в DCE (1,5 мл) добавляли TFA (2,31 г, 20,26 ммоль, 1,5 мл) и реакционную смесь нагревали до 50°C в течение 12 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC с получением 6,0 мг необходимого продукта. LCMS: масса/заряд 381,1 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d ₆) δ 8,72 (s, 1H), 7,96 (d, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,49 (d, 1H), 6,19 (d, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,38 (s, 3H).

Пример 11. Анализ в отношении PKM2

Процедура

Исходный раствор фермента PKM2 разбавляли с получением 1,11x реакционной смеси (без ADP). Сначала 1 мкл тестируемого соединения добавляли в лунки, затем добавляли 40 мкл 1,11× реакционной смеси (без ADP) и инкубировали при комнатной температуре (25°C) в течение 60 мин. Реакцию инициировали с помощью 10 мкл ADP (0,4 мM конечная концентрация) с приведением конечной концентрации реакционной смеси до 1× и течение реакции измеряли как изменения поглощения при длине волны 340 нм при комнатной температуре.

Получение тестируемого соединения. Тестируемые соединения получали при конечной концентрации 50× в DMSO. Проводили разведения 1 к 3 для 11 точек (например, 50 мкл 5000 мкМ соединения добавляли к 100 мкл 100% DMSO с получением 1667 мкМ, 50 мкл полученного добавляли к 100 мкл DMSO с получением 556 мкМ и т.д.). Соединения добавляли для проведения анализа при разведении 1 к 50 (1 мкл в 50 мкл) с получением максимальной концентрации 100 мкМ, уменьшающейся в 3 раза для 11 точек.

Реакционная смесь : PKM2 (5 нг/лунка, 0,1 мкг/мл), ADP (0,4 мM), PEP (0,11 мM), NADH (180 мкM), LDH (0,005 ед./мкл, Sigma № L3888), 1 мM DTT, 0,03% BSA в 1× реакционном буфере.

Реакционный буфер : 100 мM KCl, 50 мM Tris, pH 7,5, 5 мM MgCl₂.

Из описанных таким образом некоторых аспектов некоторых вариантов осуществления следует понимать, что различные изменения, модификации и улучшения будут очевидны для специалистов в данной области техники. Предполагается, что такие изменения, модификации и улучшения являются частью настоящего изобретения, и предполагается, что они находятся в пределах сущности и объема настоящего изобретения. Соответственно, вышеуказанные описание и графические материалы приведены исключительно в качестве примера.

Claims (39)

1. Применение соединения, выбранного из любого из следующих соединений:

или фармацевтически приемлемая соль любого из вышеперечисленных соединений для лечения заболеваний ассоциированных с отклоняющейся от нормы активностью PKM2, причем заболевание выбрано из группы, состоящей из рака, ожирения, заболевания, связанного с диабетом, атеросклероза, заболевания коронарной артерии (CAD), синдрома Блума (BS) или аутоиммунного заболевания.

2. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

3. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

4. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

5. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

6. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

7. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

8. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

9. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

10. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

11. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

12. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

13. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

14. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

15. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

16. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

17. Применение по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, имеет следующую структурную формулу:

18. Применение по любому из пп. 1-17, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль предназначено для лечения рака.

19. Применение по любому из пп. 1-17, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль предназначено для лечения диабетической нефропатии.

20. Применение по любому из пп. 1-17, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль предназначено для лечения синдрома Блума.

21. Применение по любому из пп.1-17, где соединение предназначено для лечения аутоиммунного заболевания или его фармацевтически приемлемая соль.

Images