TWI504598B

TWI504598B - 結晶性三肽環氧酮蛋白酶抑制劑

Info

Publication number: TWI504598B
Application number: TW099108136A
Authority: TW
Inventors: Pasit Phiasivongsa; Louis C Sehl
Original assignee: Onyx Therapeutics Inc
Priority date: 2009-03-20
Filing date: 2010-03-19
Publication date: 2015-10-21
Also published as: KR20110132577A; AU2010226410A1; ES2527619T3; GEP20156392B; US8822512B2; SA110310221B1; PE20120645A1; DOP2011000286A; SI2813241T1; EA201300860A1; CR20110491A; EP2813241A1; LT2813241T; WO2010108172A1; EA024672B1; TW201043623A; US20140024804A1; CN102428075A; RS53746B1; ME01277B

Description

結晶性三肽環氧酮蛋白酶抑制劑

本發明係有關結晶性三肽酮環氧化物化合物、其製備方法及相關醫藥組成物。

在真核生物中，蛋白質降解主要經由泛蛋白路徑媒介，其中針對破壞之蛋白質係接合於76胺基酸多肽泛蛋白。一旦對準，泛蛋白化蛋白質則充當26S蛋白酶體(一種多催化蛋白酶)之基質，該蛋白酶體經由其3種主要之蛋白分解活性的作用將蛋白質裂解成短肽。雖然在細胞內蛋白質轉換中具有一般功能，但是蛋白酶體媒介之降解亦在許多過程諸如主要組織相容複合體(MHC)第I類抗原呈現、細胞凋亡、細胞生長調節、NF-κ B活化、抗原處理及前發炎信號之轉導等中發揮關鍵作用。

20S蛋白酶體為由組織成4個環之28個子單元所構成之700kDa圓柱狀多催化性蛋白酶複合物。在酵母及其他真核生物中，7個不同的α子單元形成外環及7個不同的β子單元構成內環。α子單元用作19S(PA700)及11S(PA28)調節複合物之結合位置，以及藉由2個β子單元環形成之內部蛋白水解腔室之物理障壁。因此，在活體內，據信蛋白酶體以26S粒子(“26S蛋白酶體”)存在。活體內實驗已顯示：蛋白酶體之20S形式的抑制可易與26S蛋白酶體之抑制相關聯。在粒子形成期間β子單元之胺基-端前序列(prosequence)之裂解暴露胺基端蘇胺酸殘基，該等殘基用作催化親核試劑。負責蛋白酶體中之催化活性的子單元因此具有胺基端親核殘基，且這些子單元屬於N端親核試劑(Ntn)水解酶家族(其中親核N端殘基為例如Cys、Ser、Thr及其他親核部分)。此家族包括例如盤尼西林G醯酶(penicillin G acylase，PGA)、盤尼西林V醯酶(PVA)、麩胺醯胺PRPP醯胺基轉移酶(GAT)及細菌性糖基天門冬醯胺酶。除到處表現之β子單元外，高等脊椎動物亦具有3種干擾素-γ-可誘發之β子單元(LMP7、LMP2及MECL1)，其分別置換其正常相對物β₅ 、β₁ 及β₇ ，因此改變蛋白酶體之催化活性。經由使用不同肽基質，已就真核生物20S蛋白酶體界定出3種主要蛋白分解活性：類胰凝乳蛋白酶活性(CT-L)，其在大疏水性殘基後裂解；類胰蛋白酶活性(T-L)，其在鹼性殘基後裂解；及肽基麩胺醯基肽水解活性(PGPH)，其在酸性殘基後裂解。另外兩種較少表徵之活性亦已歸因於蛋白酶體：BrAAP活性，其在支鏈胺基酸後裂解；及SNAAP活性，其在小的中性胺基酸後裂解。主要的蛋白酶體蛋白分解活性似乎由不同催化位置促成，因為抑制劑、β子單元中之點突變及γ干擾素誘發的β子單元之交換將該等活性改變到各種程度。

需要用於製備和調配蛋白酶體抑制劑之改良組成物和方法。

本發明之一觀點係有關具有式(I)結構之結晶性化合物或其醫藥上可接受的鹽， X為O、NH或N-烷基，較佳為O；Y為N、S或C(R⁸ )₂ ，較佳為NH；Z為NH、N-烷基、O、S或C(R⁸ )₂ ，較佳為S；R¹ 、R² 和R³ 為氫；R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁷ 和R⁸ 係各自獨立地選自氫、C_1-6 烷基、C_1-6 羥烷基、C_1-6 烷氧基烷基、芳基和C_1-6 芳烷基，其各自視需要經選自烷基、醯胺、胺、羧酸或其醫藥上可接受的鹽、羧酯、硫醇和硫醚之基團取代，較佳為R⁴ 、R⁵ 和R⁶ 係獨立地選自C_1-6 硫醚、C_1-6 羥烷基和C_1-6 芳烷基和R⁷ 為C_1-6 烷基，更佳地，R⁴ 和R⁵ 為C_1-6 硫醚，和R⁷ 為C_1-6 烷基。

在某些具體實例中，本發明係有關具有式(I)結構之結晶性化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中X為O、NH或N-烷基，較佳為O；Y為NH、N-烷基、O、S或C(R⁸ )₂ ，較佳為NH；Z為NH、N-烷基、O、S或C(R⁸ )₂ ，較佳為S；R¹ 、R² 和R³ 為氫； R⁴ 、R⁵ 、R⁶ 、R⁷ 和R⁸ 係各自獨立地選自氫、C_1-6 烷基、C_1-6 羥烷基、C_1-6 烷氧基烷基、芳基和C_1-6 芳烷基，其各自視需要經選自烷基、醯胺、胺、羧酸或其醫藥上可接受的鹽、羧酯、硫醇和硫醚之基團取代，較佳地R⁴ 、R⁵ 和R⁶ 係獨立地選自C_1-6 硫醚、C_1-6 羥烷基和C_1-6 芳烷基和R⁷ 為C_1-6 烷基，更佳地，R⁴ 和R⁵ 為C_1-6 硫醚，和R⁷ 各自為C_1-6 烷基。

在某些具體實例中，本發明係有關一種式(II)之結晶性化合物

在某些具體實例中，本發明係有關一種用於製備式(I)或(II)之結晶性化合物的方法，其包含一或多個：(i)製備非晶形化合物，例如，根據美國專利申請案第11/595,804號；(ii)將該非晶形化合物溶解在有機溶劑中；(iii)使該溶液引起過飽和；(iv)分離該等晶體，例如，藉由過濾該等晶體、藉由從該等晶體傾析液體或藉由任何其他適當分離技術；和(v)洗滌該等晶體。在某些具體實例中，製備另外包含誘發結晶作用。在某些具體實例中，製備另外包含乾燥，較佳為在減壓下，諸如在真空壓力下。

在某些具體實例中，該非晶形化合物可被溶解在一種選自乙腈、乙酸乙酯、庚烷類、己烷類、乙酸異丙酯、甲醇、甲基乙基酮、四氫呋喃、甲苯和水或其任何組合之溶劑中。在某些具體實例中，式(II)之非晶形化合物可被溶解在一種選自乙腈、庚烷類、己烷類、甲醇、四氫呋喃和甲苯或其任何組合之有機溶劑中。在某些較佳具體實例中，該有機溶劑為甲苯、四氫呋喃或乙腈，較佳為乙腈或甲苯。

在某些具體實例中，使該溶液引起過飽和包含慢慢添加一種反溶劑，諸如水、庚烷類、己烷類或另一可與有機溶劑混溶之極性或非極性液體，使溶液冷卻(有或沒有將該溶液種晶)、減少溶液之體積，或其任何組合。在某些具體實例中，使該溶液引起過飽和包含添加反溶劑、將溶液冷卻至周圍溫度或更低、和減少溶液的體積，例如，藉由從溶液蒸發溶劑。在某些具體實例中，使溶液冷卻可為消極的(例如，使溶液靜置在周圍溫度下)或積極的(例如，在冰浴或冰庫中冷卻溶液)。

在某些具體實例中，該方法另外包含誘發沈澱或結晶。在某些具體實例中，誘發沈澱或結晶包含二次成核，其中成核在晶種或與環境(結晶器壁、攪拌葉輪、超音處理、等等)的相互作用存在下發生。

在某些具體實例中，洗滌該等晶體包含用選自反溶劑、乙腈、庚烷類、己烷類、甲醇、四氫呋喃、甲苯、水或其組合之液體洗滌。在某些具體實例中，該等晶體係用反溶劑和有機溶劑之組合洗滌。在某些具體實例中，反溶劑為水，而在其他具體實例中其為烷溶劑，諸如己烷或戊烷或芳族烴溶劑，諸如苯、甲苯或二甲苯。

在某些具體實例中，洗滌該等晶體包含用四氫呋喃和烷溶劑(諸如己烷類或庚烷類)之混合物或用乙腈和水之混合物洗滌式(II)之結晶性化合物。在某些具體實例中，洗滌該等晶體包含用甲苯洗滌式(II)之結晶性化合物。在較佳該類具體實例中，在洗滌之前將甲苯冷卻。

在某些具體實例中，式(II)之結晶性化合物實質上為純的。在某些具體實例中，式(II)之結晶性化合物的熔點在約135至約160℃，約140至約155℃，約145至約150℃或甚至約147至約149℃之範圍，例如，約149℃。

在某些具體實例中，式(II)之結晶性化合物的DSC在約147℃處具有尖銳吸熱最大值，其(例如)由於晶形之熔融及分解產生，如圖1中所示。

在某些具體實例中，式(II)結晶性化合物之X射線粉末圖為(θ-2θ°)：8.94；9.39；9.76；10.60；11.09；12.74；15.27；17.74；18.96；20.58；20.88；21.58；21.78；22.25；22.80；24.25；24.66；26.04；26.44；28.32；28.96；29.65；30.22；30.46；30.78；32.17；33.65；34.49；35.08；35.33；37.85；38.48，如圖2中所示。

在某些具體實例中，式(II)之結晶性化合物的TG溫度記錄圖顯示在25至125℃之溫度範圍內的0.0至0.3%之重量損失，如圖3中所示。

在某些具體實例中，式(II)之結晶性化合物未經溶劑化(例如，晶格不包含溶劑分子)。在某些替代具體實例中，式(II)之結晶性化合物係經溶劑化。

在某些具體實例中，本發明係有關一種用於製備式(II)結晶性化合物之方法，

其包含(i)使式(III)之化合物

其中X為任何的適當相對離子，與式(IV)之化合物在有機溶劑中反應；

(ii)製備式(II)之化合物在有機溶劑的溶液；(iii)使該溶液引起過飽和以允許晶體之形成；和(iv)分離該等晶體，例如藉由過濾晶體、藉由從晶體傾析液體或藉由任何其他適合的分離技術。

在某些具體實例中式(II)之化合物在製備於有機溶劑中的溶液之前不藉由層析法純化。

在某些具體實例中，製備另外包含誘發結晶。在某些具體實例中，製備另外包含洗滌該等晶體，例如，用溶劑或非溶劑流體。在某些具體實例中，製備另外包含乾燥，較佳為在減壓下，諸如在真空壓力下。

在某些具體實例中，X為選自下列之相對離子：氫溴酸根、氫氯酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、乙酸根、三氟乙酸根、檸檬酸根、甲烷磺酸根、戊酸根、油酸根、棕櫚酸根、硬脂酸根、月桂酸根、苯甲酸根、乳酸根、琥珀酸根、甲苯磺酸根、丙二酸根、順丁烯二酸根、反丁烯二酸根、琥珀酸根、酒石酸根、甲磺酸根、2-羥基乙烷磺酸根、等等。(參見例如Berge等人(1977)“Pharmaceutical Salts”，J. Pharm. Sci. 66：1-19)。在某些具體實例中，X選自三氟乙酸根、甲烷磺酸根、甲苯磺酸根、乙酸根、氯離子及溴離子，較佳為三氟乙酸根。

在某些具體實例中，該有機溶劑係選自乙腈、乙酸乙酯、庚烷類、己烷類、乙酸異丙酯、甲醇、甲基乙基酮、四氫呋喃、甲苯和水或其任何組合。在某些具體實例中，該式(II)之非晶形化合物可被溶解在選自一種乙腈、庚烷類、己烷類、甲醇、四氫呋喃和甲苯或其任何組合之有機溶劑中。在某些較佳具體實例中，該有機溶劑為甲苯、四氫呋喃或乙腈，較佳為乙腈或甲苯。

在某些具體實例中，製備另外包含洗滌式(II)之晶體。在某些具體實例中，洗滌該等晶體包含用一種選自反溶劑、乙腈、庚烷類、己烷類、甲醇、四氫呋喃、甲苯、水或其組合之液體洗滌。在某些具體實例中，該等晶體係用反溶劑和有機溶劑之組合洗滌。在某些具體實例中，該反溶劑為水，而在其他具體實例中反溶劑烷溶劑，諸如己烷或戊烷或芳族烴溶劑，諸如苯、甲苯或二甲苯。

在某些具體實例中，製備另外包含乾燥式(II)二者之晶體，較佳為在減壓下，諸如在真空壓力下。

在某些具體實例中，本發明係有關一種醫藥組成物，包含式(II)之結晶性化合物和醫藥上可接受的載體。在某些具體實例中，該醫藥組成物係選自錠劑、膠囊和注射劑。

結晶性三肽環氧酮類之用途

有序蛋白質降解對維持正常細胞功能而言為關鍵的，且蛋白酶體對蛋白質降解過程而言為必需的。蛋白酶體控制對正常及惡性細胞中之細胞週期進程及細胞凋亡為重要之蛋白質的含量；例如細胞週期素、半胱天冬酶(caspase)、BCL2及nF-kB(Kumatori等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA(1990)87：7071-7075；Almond等人，Leukemia(2002)16：433-443)。因此，視所涉細胞而定，可將抑制蛋白酶體活性理解為治療各種疾病狀態，諸如惡性、非惡性及自體免疫疾病之療法並不令人驚訝。

試管內及活體內模型皆已顯示惡性細胞通常對蛋白酶體抑制敏感。事實上，蛋白酶體抑制已確認為用於治療多發性骨髓瘤之治療性策略。此可部分歸因於高增生性惡性細胞對快速移除蛋白質之蛋白酶體系統的依賴性(Rolfe等人，J. Mol. Med.(1997)75：5-17；Adams，Nature(2004)4：349-360)。因此，本發明之某些具體實例係關於一種治療癌症之方法，其包含將有效量的本文中所揭示之蛋白酶體抑制劑化合物投與至需要該治療之個體。如使用在本文中，術語“癌症”包括但不限於血源性腫瘤及實體腫瘤。癌症係指血液、骨、器官、皮膚組織及血管系統之疾病，包括但不限於下列癌症：膀胱、血液、骨、腦、乳房、子宮頸、胸、結腸、子宮內膜、食道、眼睛、頭、腎、肝、肺、淋巴結、口腔、頸部、卵巢、胰臟、前列腺、直腸、腎臟、皮膚、胃、睪丸、咽喉及子宮。特定癌症包括但不限於白血病(急性淋巴細胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、毛細胞白血病)，成熟B細胞贅瘤(小淋巴細胞性淋巴瘤、B細胞前淋巴細胞白血病、淋巴漿細胞淋巴瘤(諸如瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症(Waldenstrm's macroglobulinemia))、脾邊緣區淋巴瘤、漿細胞骨髓瘤、漿細胞瘤、單株免疫球蛋白沈積疾病、重鏈疾病、結外邊緣區B細胞淋巴瘤(MALT淋巴瘤)、節邊緣區B細胞淋巴瘤(NMZL)、濾泡性淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、擴散性B細胞淋巴瘤、縱隔(胸腺)大B細胞淋巴瘤、血管內大B細胞淋巴瘤、原發性滲透性淋巴瘤及伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)/白血病)、成熟T細胞及天然殺手(NK)細胞贅瘤(T細胞前淋巴細胞白血病、T細胞大粒狀淋巴球性白血病、侵襲性NK細胞白血病、成年T細胞白血病/淋巴瘤、結外NK/T細胞淋巴瘤、腸病型T細胞淋巴瘤、肝脾T細胞淋巴瘤、母細胞NK細胞淋巴瘤、蕈樣真菌病(賽謝症候群(Sezary syndrome))、原發性皮膚退行性大細胞淋巴瘤、淋巴瘤樣丘疹病、血管免疫母細胞T細胞淋巴瘤、非特異性周邊T細胞淋巴瘤及退行性大細胞淋巴瘤)、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma)(結節性硬化、混合細胞病(celluarity)、淋巴細胞富集、淋巴細胞耗盡或未耗盡、結節性淋巴細胞-主型)、骨髓瘤(多發性骨髓瘤、惰性骨髓瘤(indolent myeloma)、冒烟性骨髓瘤(smoldering myeloma))、慢性骨髓增生性疾病、骨髓發育不良/脊髓增生性疾病、骨髓發育不良症候群、免疫缺陷相關淋巴增生性病症、組織細胞及樹突狀細胞贅瘤、肥大細胞增生症、軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewing sarcoma)、纖維肉瘤、惡性巨細胞瘤、骨髓瘤骨疾病、骨肉瘤、乳癌(激素依賴性、激素獨立性)、婦科癌症(子宮頸、子宮內膜、輸卵管、妊娠滋養層細胞疾病、卵巢、腹膜、子宮、陰道及陰門)、基底細胞癌(BCC)、鱗狀上皮細胞瘤(SCC)、惡性黑色素瘤、隆凸性皮膚纖維肉瘤、梅克爾細胞癌瘤(Merkel cell carcinoma)、卡堡氏肉瘤、星形細胞瘤、纖維性星形細胞瘤、胚胎發育不良性神經上皮腫瘤、寡樹突膠質瘤、室管膜瘤、多形性膠質母細胞瘤、混合性神經膠質瘤、寡星狀細胞瘤、神經管胚細胞瘤、視網膜胚細胞瘤、神經胚細胞瘤、胚細胞瘤、畸胎瘤、惡性間皮瘤(腹膜間皮瘤、心包膜性間皮瘤、胸膜間皮瘤)、胃-腸-胰或胃腸胰神經內分泌腫瘤(GEP-NET)、類癌瘤、胰腺內分泌腫瘤(PET)、結腸直腸腺癌、結腸直腸癌、侵襲性神經內分泌腫瘤、平滑肌肉瘤、粘液腺癌、戒指狀細胞腺癌(Signet Ring celladenocarcinoma)、肝細胞癌瘤、膽管細胞癌、肝母細胞瘤、血管瘤、肝腺瘤、局灶性結節性增生症(結節性再生增生症、錯構瘤)、非小細胞肺癌瘤(NSCLC)(鱗狀細胞肺癌、腺癌、大細胞肺癌瘤)、小細胞肺癌瘤、甲狀腺癌、前列腺癌(激素難治性、雄激素獨立性、雄激素依賴性、激素不敏感性)、腎細胞癌及軟組織肉瘤(纖維肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、皮膚纖維肉瘤、脂肪肉瘤、橫紋肌肉瘤平滑肌肉瘤、血管肉瘤、滑膜肉瘤、惡性周邊神經鞘腫瘤/神經纖維肉瘤、骨外骨肉瘤)。

許多造血及淋巴組織之腫瘤其特徵為細胞增殖或特定類型之細胞的增加。慢性骨髓增生性疾病(CMPD)為克隆造血幹細胞病症，其特徵為一或多個骨髓系之骨髓的增殖，在周邊血液中產生增加數量之粒細胞、紅血球及/或血小板。因而，蛋白酶體抑制劑用於治療該等疾病之用途是吸引人的且正被測驗(Cilloni等人，Haematologica(2007) 92：1124-1229)。CMPD可包括慢性骨髓性白血病、慢性嗜中性白血病、慢性嗜酸性白血病、真性紅細胞增多症、慢性特發性骨髓纖維化、基本血小板增多症及不可歸類的慢性骨髓增生性疾病(unclassifiable chronic myeloproliferative disease)。本發明之一觀點為治療CMPD之方法，其包含將有效量的本文中所揭示之蛋白酶體抑制劑化合物投與至需要該治療之個體。

骨髓發育不良/骨髓增生性疾病，諸如慢性骨髓單核細胞性白血病、非典型慢性骨髓白血病、青少年骨髓單核細胞性白血病及不可歸類的骨髓發育不良/骨髓增生性疾病之特徵為：由於一或多個骨髓系之增生的骨髓之細胞過多。用本文中所述之化合物或組成物抑制蛋白酶體可用以藉由提供需要該治療之個體有效量之化合物或組成物來治療該等骨髓發育不良/骨髓增生性疾病。

骨髓發育不良症候群(MDS)係指在一或多個主要骨髓細胞系中之發育不良及無效血細胞生成為特徵之造血幹細胞病症的群組。在這些血液學惡性腫瘤中用蛋白酶體抑制劑對準NF-kB可誘導細胞凋亡，從而殺死惡性細胞(Braun等人Cell Death and Differentiation(2006) 13：748-758)。本發明之另一具體實例為一種治療MDS之方法，其包含將有效量的本文中所揭示之化合物投與至需要該治療之個體。MDS包括難治性貧血、伴環形鐵粒幼細胞的難治性貧血(refractory anemia with ringed sideroblasts)、伴多系病態造血的難治性血細胞減少症(refractory cytopenia with multilineage dysplasia)、伴原始細胞增多的難治性貧血(refractory anemia with excess blasts)、不可歸類的脊髓發育不良症候群及與分離del(5q)染色體異常相關之脊髓發育不良症候群。

肥大細胞增生症為肥大細胞之增生及其在一或多個器官系統中之後續積累。肥大細胞增生症包括但不限於皮膚肥大細胞增生症、無痛全身性肥大細胞增生症(ISM)、與克隆血液學非肥大細胞系疾病相關之全身性肥大細胞增生症(SM-AHNMD)、侵襲性全身性肥大細胞增生症(ASM)、肥大細胞白血病(MCL)、肥大細胞肉瘤(MCS)及真皮外肥大細胞瘤。本發明之另一具體實例為一種治療肥大細胞增生症之方法，其包含將投有效量之本文中揭示的化合物與至經診斷具有肥大細胞增生症之個體。

蛋白酶體調節NF-κB，其轉而調節涉及免疫及發炎反應之基因。例如，NF-κB為表現以下者所需：免疫球蛋白輕鏈κ基因、IL-2受體α-鏈基因、第I類主要組織相容複合體基因及編碼(例如)1L-2、IL-6、粒細胞集落刺激因子及IFN-β之許多細胞激素基因(Palombella等人，Cell(1994) 78：773-785)。因此，在某些具體實例中，本發明係關於影響IL-2、MHC-I、IL-6、TNFα、IFN-β或任何其他先前提及的蛋白質的表現程度之方法，各方法包含將有效量的本文中所揭示之化合物蛋白酶體抑制劑化合物或組成物投與至個體。在某些具體實例中，本發明包括一種治療哺乳動物的自體免疫疾病之方法，其包含投與治療有效量的本文中所述之化合物或組成物。本文中之“自體免疫疾病”為從個體本身組織產生且針對個體之本身組織的疾病或病症。自體免疫疾病或病症之例子包括但不限於發炎反應，諸如發炎皮膚疾病，包括牛皮癬及皮炎(例如異位性皮膚炎)；全身性硬皮病及硬化症；與發炎腸疾病相關之反應(諸如克羅恩氏病(Crohn's disease)及潰瘍性結腸炎)；呼吸窘迫症候群(包括成人呼吸窘迫症候群；ARDS)；皮炎；腦膜炎；腦炎；葡萄膜炎；結腸炎；血管球性腎炎；過敏性病狀，諸如濕疹及哮喘及涉及T細胞之滲入及慢性發炎反應之其他病狀；動脈粥樣硬化；白血球黏著缺陷；類風濕性關節炎；全身性紅斑狼瘡(SLE)；糖尿病(例如第I型糖尿病或胰島素依賴型糖尿病)；多發性硬化症；瑞諾症候群(Reynaud's syndrome)；自體免疫甲狀腺炎；過敏性腦脊髓炎；Sjorgen氏症候群；青少年發作糖尿病；及與由通常可見於肺結核、肉狀瘤病、多肌炎、肉芽腫病及血管炎中之細胞激素及T淋巴細胞媒介之急性及延遲過敏性相關的免疫反應；惡性貧血(阿狄森氏病(Addison's disease))；涉及白血球血球滲出之疾病；中樞神經系統(CNS)發炎病症；多器官損傷症候群；溶血性貧血(包括但不限於冷球蛋白血症(cryoglobinemia)或庫姆陽性貧血(Coombs positive anemia))；重症肌無力；抗原抗體複合體媒介之疾病；抗腎小球基底膜疾病；抗磷脂症候群；過敏性神經炎；格雷氏病(Graves' disease)；Lambert-Eaton重症肌無力症候群；大皰性類天疱瘡；天疱瘡；自體免疫多內分泌腺疾病；萊特爾氏病(Reiter's disease)；漸凍人症候群(stiff-man syndrome)；Beheet疾病；巨細胞性動脈炎；免疫複合體腎炎；IgA腎病變；IgM多發性神經病變；免疫血小板減少性紫癜(ITP)或自體免疫血小板減少。

經病毒感染之自體細胞的免疫系統篩已經歷致癌轉變或在其表面上呈現不熟悉肽。細胞內蛋白水解產生呈現T淋巴細胞之小肽以誘導MHC第I類媒介之免疫反應。因此，在某些具體實例中，本發明係關於一種使用化合物作為用於抑制或改變細胞中抗原呈現的免疫調節劑之方法，其包含將細胞暴露於(或投與至個體)本文中所述之化合物。特定具體實例包括一種治療移植物或移植相關疾病，諸如哺乳動物中之移植物對抗宿主疾病或宿主對抗移植物疾病之方法，其包含投與治療有效量的本文中所述之化合物。術語“移植物”如使用於本文中係指得自捐贈者以用於移植至接受者中之生物材料。移植物包括該等不同材料如例如分離的細胞，諸如胰島細胞；組織，諸如新生兒之羊膜、骨髓、造血前驅細胞，及眼睛組織，諸如角膜組織；及器官，諸如皮膚、心臟、肝、脾、胰、甲狀腺葉、肺、腎、管狀器官(例如，腸、血管或食道)。管狀器官可用於置換食道、血管或膽管之損壞部分。皮膚移植物不僅可用於灼傷，而且用作損壞腸之敷料或用於封閉某些缺陷，諸如膈膜疝氣。移植物可得自任何哺乳動物來源，包括人類，無論來自屍體還是活捐贈者。在一些情況下，捐贈者及接受者為相同哺乳動物。較佳地，移植物為骨髓或器官諸如心臟，且移植物之捐贈者及宿主匹配HLA第II級抗原。

組織細胞及樹突狀細胞贅瘤衍生自吞噬細胞及輔助細胞，其在將抗原處理及呈現於淋巴細胞中具有重要作用。已顯示耗盡樹突狀細胞中之蛋白酶體含量可改變其抗原誘導反應(Chapatte等人Cancer Res.(2006) 66：5461-5468)。因此，本發明之另一具體實例包含將有效量之本文中揭示的化合物或組成物投與至具有組織細胞或樹突狀細胞贅瘤之個體。組織細胞及樹突狀細胞贅瘤包括組織細胞肉瘤、蘭氏細胞組織細胞增多病(Langerhans cell histiocytosis)、蘭氏細胞肉瘤、交錯樹突狀細胞肉瘤/腫瘤、濾泡性樹突狀細胞肉瘤/腫瘤及非特異性樹突狀細胞肉瘤。

已顯示蛋白酶體之抑制有益於治療細胞類型正增生之疾病及免疫失調；因此，本發明之一具體實例包括治療與原發性免疫病症(PID)相關之淋巴增生性疾病(LPD)，其包含將有效量的所揭示之化合物投與至需要其之個體。與淋巴增生性失調之增加發病率相關的免疫缺陷(包括B細胞及T細胞贅瘤及淋巴瘤)的最常見臨床環境為原發性免疫缺陷症候群及其他原發性免疫失調、經人類免疫缺乏病毒(HIV)之感染、已接受實體器官或骨髓異源移植物之患者中的醫原性免疫抑制及與甲胺喋呤(methotrexate)治療相關之醫原性免疫抑制。通常與LPD相關(但不限於)之其他PID為共濟失調微血管擴張(AT)、威斯科特-奧爾德里奇二氏症候群(Wiskott-Aldrich syndrome，WAS)、普遍變異型免疫缺陷(CVID)、嚴重組合免疫缺陷(SCID)、X關聯性淋巴增生性疾病(XLP)、Nijmegen破壞症候群(NBS)、高IgM症候群及自體免疫淋巴增生性症候群(ALPS)。

本發明之另外具體實例係關於影響致癌蛋白的蛋白酶體依賴性調節之方法及治療或抑制癌症生長之方法，各方法包含將細胞(活體內，例如在個體中，或試管內)暴露於本文中所揭示之蛋白酶體抑制劑組成物。HPV-16及HPV-18衍生的E6蛋白質刺激粗製網狀紅血球溶胞物中之p53的ATP-及泛蛋白依賴性結合及降解。已顯示隱性致癌基因p53在具有突變熱分解E1之細胞系中，在非准許溫度下積聚。p53之高含量可導致細胞凋亡。藉由泛蛋白系統降解之原致癌蛋白之例子包括c-Mos、c-Fos及c-Jun。在某些具體實例中，本發明係關於一種用於治療p53相關細胞凋亡之方法，其包含將有效量的本文中所揭示之化合物蛋白酶體抑制劑組成物投與至個體。

本發明之另一觀點係關於本文中所揭示之蛋白酶體抑制劑組成物用於治療神經退化性疾病及病狀之用途，該等疾病及病狀包括但不限於：中風、神經系統之缺血性損傷、神經外傷(例如，衝擊腦損傷、脊髓損傷及神經系統之外傷損傷)、多發性硬化及其他免疫媒介之神經病變(例如，古立安-白瑞症候群(Guillain-Barre syndrome)及其變體、急性運動性軸索型神經病、急性發炎脫髓鞘多發性神經病及費希爾症候群(Fisher Syndrome))、HIV/AIDS癡呆複合症、axonomy、糖尿病性神經病變、帕金森氏疾病(Parkinson's disease)、亨丁頓氏疾病(Huntington's disease)、多發性硬化、細菌性、寄生蟲性、真菌性及病毒性腦膜炎、腦炎、血管性癡呆、多發性梗塞痴呆、路易體癡呆(Lewy body dementia)、額葉性癡呆諸如Pick氏疾病、皮質下癡呆(諸如亨丁頓氏或進行性核上麻痹)、皮層萎縮症候群(諸如原發性失語症)、代謝毒性癡呆(諸如慢性甲狀腺功能低下或B12缺陷)及藉由感染(諸如梅毒或慢性腦膜炎)引起之癡呆。

阿茲海默症(Alzheimer's disease)之特徵為β-澱粉狀蛋白(β-AP)在老年斑及大腦血管中之細胞外沈積。β-AP為得自澱粉狀蛋白質前驅物(APP)之39至42個胺基酸之肽片段。已知至少三種APP之同功異型物(695、751及770個胺基酸)。mRNA之替代剪接產生同功異型物；正常處理影響β-AP序列之一部分，從而防止β-AP之產生。據信藉由蛋白酶體對異常蛋白質處理有助於大量β-AP在阿茲海默氏腦中。大鼠中之APP處理酶包含約10個不同子單元(22 kDa-32k Da)。25 kDa子單元具有X-Gln-Asn-Pro-Met-X-Thr-Gly-Thr-Ser之N端序列，其與人類巨蛋白因子(macropain)之β子單元相同(Kojima,S.等人，Fed. Eur. Biochem. Soc.，(1992)304：57-60)。APP處理酶在Gln¹⁵ --Lys¹⁶ 鍵處裂解；在鈣離子存在下，該酶亦在Met^-1 --Asp¹ 鍵處裂解，且Asp¹ --Ala² 鍵結以釋放β-AP之細胞外域。

因此，本發明之一觀點係關於一種治療阿茲海默症之方法，其包含將有效量的本文中所揭示之化合物蛋白酶體抑制劑化合物或組成物投與至個體。該治療包括減少β-AP處理之速率、減少β-AP斑形成之速率、減少β-AP產生之速率及減少阿茲海默症之臨床徵象。

纖維化為由成纖維母細胞之過度增生性生長所產生的纖維結締組織的過量及持續形成，且與TGF-β信號轉導途徑之活化有關。纖維化涉及細胞外基質之廣泛沈積，且可在事實上任何組織內部發生或跨越若干不同組織而發生。通常，在TGF-β刺激時活化標靶基因之轉錄的細胞內信號轉導蛋白質(Smad)的含量係藉由蛋白酶體活性來調節(Xu等人，2000)。然而，已在纖維化病狀(諸如囊腫性纖維化、注射纖維化、心內膜心肌纖維化、特發性肺纖維化、骨髓纖維化、腹膜後纖維化、進行性大塊纖維化、腎原性全身性纖維化)中觀察到TGF-β信號轉導組分之加速降解。常常與纖維化相關之其他病狀包括肝硬化、瀰漫性實質性肺疾病、輸精管切除術後疼痛症候群、結核病、鐮狀細胞性貧血及類風濕性關節炎。本發明之一具體實例為治療纖維化病狀或纖維化相關病狀之方法，其包含將有效量的本文中所揭示之組成物投與至需要該治療之個體。

灼傷受害者之治療常常受纖維化妨礙。因此，在某些具體實例中，本發明係關於將本發明抑制劑局部或全身性投與至個體以治療灼傷。外科手術後之創口閉合常常與毀容疤痕有關，其可藉由抑制纖維化來預防。因此，在某些具體實例中，本發明係關於一種用於預防或減少疤痕形成之方法。

脂多醣(LPS)誘導之細胞激素諸如TNFα的生產過剩被認為對與敗血性休克相關之過程來說至關重要。此外，普遍接受者為藉由LPS活化細胞之第一步驟為LPS結合至特異膜受體。20S蛋白酶體複合物之α-及β-子單元已確定為LPS-結合蛋白，其暗示：LPS-誘導之信號轉導可為治療或預防敗血症之重要治療性標靶(Qureshi，N.等人，J. Immun.(2003) 171：1515-1525)。因此，在某些具體實例中，蛋白酶體抑制劑組成物可用於抑制TNFα以預防及/或治療敗血性休克。

局部缺血及再灌注損傷產生低氧症，一種缺少到達身體組織之氧的病狀。此病狀引起Iκ-Bα之降解增加，藉此產生NF-κB之活化(Koong等人，1994)。已證明，產生低氧症之損傷的嚴重性可用投與蛋白酶體抑制劑來降低(Gao等人，2000；Bao等人，2001；Pye等人，2003)。因此，本發明之某些具體實例係關於一種治療缺血性病狀或再灌注損傷之方法，其包含將有效量的本文中所揭示之蛋白酶體抑制劑化合物投與至需要該治療之個體。該等病狀或損傷之例子包括但不限於急性冠心症(易損斑點)、動脈阻塞性疾病(心臟、大腦、周邊動脈及血管阻塞)、動脈粥樣硬化(冠狀動脈硬化、冠狀動脈疾病)、梗塞形成、心臟衰竭、胰炎、心肌肥大、狹窄及再狹窄。

NF-κB亦特異性結合於HIV-強化子/啟動子。當與mac239之Nef比較時，pbj14之HIV調節蛋白Nef不同在於控制蛋白激酶結合之區域中之2個胺基酸。據信蛋白激酶信號轉導IκB之磷酸化，經由泛蛋白-蛋白酶體路徑觸發IκB降解。降解後，NF-κB釋放至核中，因此增加HIV之轉錄(Cohen,J.，Science，(1995) 267：960)。在某些具體實例中，本發明係關於一種抑制或降低個體HIV感染之方法，或一種降低病毒基因表現量之方法，各方法包含將有效量的本文中所揭示之化合物蛋白酶體抑制劑化合物或組成物投與至個體。

病毒感染促成許多疾病之病理。心臟病狀諸如持續性心肌炎及擴張性心肌病變已與柯沙奇病毒B3(coxsackievirus B3)相關。在對經感染小鼠心臟進行比較全基因組微陣列分析時，特異性蛋白酶體子單元在發展慢性心肌炎之小鼠心臟中均勻上調(Szalay等人，Am J Pathol 168：1542-52，2006)。在病毒進入步驟中一些病毒利用泛蛋白-蛋白酶體系統，其中病毒自核內體釋放至細胞溶質中。小鼠肝炎病毒(MHV)屬於冠狀病毒科(Coronaviridae family)，其亦包括嚴重急性呼吸症候群(SARS)冠狀病毒。Yu及Lai(J Virol 79：644-648，2005)證明：用蛋白酶體抑制劑處理經MHV感染之細胞導致病毒複製降低，如與未經處理細胞之效價相比，其與降低之病毒效價有關。人類肝炎B病毒(HBV)，一種肝病毒科(Hepadnaviridae)病毒家族之成員，同樣需要病毒編碼之包膜蛋白質來繁殖。抑制蛋白酶體降解路徑引起所分泌包膜蛋白質之量的顯著減少(Simsek等人，J Virol 79：12914-12920，2005)。除HBV外，其他肝炎病毒(A、C、D及E)亦可將泛蛋白-蛋白酶體降解路徑於利用分泌、形態發生及發病機制。因此，在某些具體實例中，本發明係關於一種治療病毒感染諸如SARS或肝炎A、B、C、D及E之方法，其包含使細胞與有效量的本文中所揭示之化合物化合物或組成物接觸。

在某些具體實例中，所揭示之組成物可用於治療寄生感染，諸如藉由原蟲類寄生蟲引起之感染。這些寄生蟲之蛋白酶體被認為主要是涉及細胞分化及複製活性(Paugam等人，Trends Parasitol. 2003，19(2)：55-59)。此外，已顯示內阿米巴屬物種當暴露於蛋白酶體抑制劑時失去胞囊形成能力(Gonzales，等人，Arch. Med. Res，1997，28，Spec No：139-140)。在某些該等具體實例中，蛋白酶體抑制劑組成物之投與方案可用於治療人類的由選自下列寄生蟲之原蟲類寄生蟲引起之寄生感染：瘧原蟲種(Plasmodium sps.)(包括熱帶瘧原蟲(P. falciparum)、間日瘧原蟲(P. vivax)、三日瘧原蟲(P. malariae)及卵形瘧原蟲(P. ovale)，其引起瘧疾)、錐蟲種(Trypanosoma sps.)(包括引起卻格司氏病(Chagas' disease)之克氏錐蟲(T. cru z i)及引起非洲昏睡病之布氏錐蟲(T. brucei))、利什曼蟲種(Leishmania sps.)(包括亞馬遜利什曼原蟲(L. amazonesis)、杜什利什曼原蟲(L. donovani)、嬰兒利什曼原蟲(L. infantum)、墨西哥利什曼原蟲(L. mexicana)、等等)、肺炎肺囊蟲(Pneumocystis carinii)(已知引起AIDS及其他免疫抑制患者之肺炎的原蟲類)。在某些具體實例中，所揭示之蛋白酶體抑制劑組成物可用於治療寄生性弓蟲(Toxoplasma gondii)、溶組織內阿米巴(Entamoeba histolytica)、兩棲類內阿米巴(Entam oeba invadens)及梨形鞭毛蟲(Giardia lamblia)。在某些具體實例中，所揭示之蛋白酶體抑制劑組成物可用於治療動物及家畜中由選自下列之原蟲類寄生蟲引起之寄生感染：海爾瑪尼瘧原蟲(Plasmodium hermani)、隱胞子蟲種(Cryptosporidium sps.)、犬絛蟲(Echinococcus granulosus)、盲腸型球蟲(Eimeria tenella)、神經肉孢子蟲(Sarcocystis neurona)及粗厚神經胞子菌(Neurospora crassa)。在治療寄生疾病中用作蛋白酶體抑制劑之其他化合物描述於WO 98/10779中，其全文併入本文。

在某些具體實例中，蛋白酶體抑制劑組成物抑制寄生蟲中之蛋白酶體活性而無紅血球及白血球之恢復。在某些該等具體實例中，血細胞之長半衰期可提供關於預防重複暴露於寄生蟲之療法的延長保護。在某些具體實例中，蛋白酶體抑制劑組成物可提供關於預防未來感染之化學預防的延長保護。

原核生物具有相當於真核生物20S蛋白酶體粒子之粒子。雖然原核生物20S粒子之子單元組成比真核生物者更簡單，但是其具有以相似方式水解肽鍵之能力。例如，透過β子單元之N端上之蘇胺酸殘基發生對肽鍵之親核攻擊。因此，本發明之一具體實例係關於一種治療原核感染之方法，其包含將有效量的本文中所揭示之化合物蛋白酶體抑制劑化合物或組成物投與至個體。原核感染可包括由分枝桿菌(mycobacteria)(諸如肺結核、麻風或布魯里潰瘍(Buruli Ulcer))或古細菌(archaebacteria)引起之疾病。

亦已證明，結合於20S蛋白酶體之抑制劑刺激骨器官培養物中之骨形成。此外，當該等抑制劑已全身性投與至小鼠時，某些蛋白酶體抑制劑增加骨體積及骨形成速率超過70%(Garrett，I. R.等人，J. Clin. Invest.(2003) 111：1771-1782)，因此暗示泛蛋白-蛋白酶體機構調節成骨細胞分化及骨形成。因此，所揭示之蛋白酶體抑制劑化合物或組成物可使用於治療及/或預防與骨質流失相關之疾病，諸如骨質疏鬆症。

因此，在某些具體實例中，本發明係關於治療選自癌症、自體免疫疾病、移植物或移植相關病狀、神經退化性疾病、纖維化相關病狀、缺血性相關病狀、感染(病毒性、寄生性或原核性)及與骨質流失相關之疾病的疾病或病狀之方法，其包含投與本文中所揭示之化合物或組成物。

結晶性三肽環氧酮之投與

如此項技術中所熟知的，如本文中所述製備之化合物可視欲治療之病症及患者之年齡、病狀及體重而定以各種形式投與。

例如，在欲經口投與化合物時，化合物可調配為錠劑、膠囊、顆粒、粉末或糖漿；或對於非經腸投與，化合物可調配為注射劑(靜脈內、肌肉內或皮下)、滴劑輸注製劑或栓劑。對於藉由眼科黏膜路徑之應用，化合物可調配為滴眼劑或眼膏。這些調配物可藉由習知方式製備，且若需要，則活性成分可與任何習知添加劑或賦形劑諸如下列物質混合：黏合劑、崩解劑、潤滑劑、矯味劑、增溶劑、懸浮助劑、乳化劑、塗佈劑、環糊精及/或緩衝液。儘管劑量將視患者之症狀、年齡及體重、欲治療或預防之病症的性質及嚴重性、藥物之投與路徑及形式而改變，但是一般而言，對於成年人類患者，推薦從0.01至2000毫克化合物之每天劑量，且此可以單一劑量或以分開劑量來投與。可與載體材料組合以產生單一劑型之活性成分的量將通常為產生治療效果之化合物的量。

就治療功效而言，在給定患者中產生最有效結果之組成物的精確投與時間及/或量，將視特定化合物之活性、藥物動力學及生物可用性、患者之生理條件(包括年齡、性別、疾病類型及階段、一般身體狀況、對給定劑量之反應性及藥物類型)、投與路徑、等等而定。然而，上述準則可用作微調治療之基礎，例如，決定投與之最佳時間及/或量，其將僅僅需要由監視個體且調整劑量及/或時機組成之常規實驗。

詞組“醫藥上可接受的”在本文中用以指配位體、物質、組成物及/或劑型，其在可靠醫學判斷之範疇內適用於與人類及動物之組織接觸，而無過量毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症，且其與合理利益/風險比相匹配。

詞組“醫藥上可接受之載體”如使用於本文中表示醫藥上可接受之物質、組成物或媒液，諸如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或封裝物質。各載體按可與調配物之其他成分相容且對患者無害之意義必須為“可接受的”。可用作醫藥上可接受之載體的材料之一些例子包括：(1)糖，諸如乳糖、葡萄糖及蔗糖；(2)澱粉，諸如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉及經取代或未經取代β-環糊精；(3)纖維素及其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；(4)粉末黃蓍膠；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石；(8)賦形劑，諸如可可脂及栓劑蠟；(9)油，諸如花生油、棉子油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；(10)二醇類，諸如丙二醇；(11)多元醇類，諸如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇及聚乙二醇；(12)酯類，諸如油酸乙酯及月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩衝劑，諸如氫氧化鎂及氫氧化鋁；(15)褐藻酸；(16)無熱原質水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)磷酸鹽緩衝液；及(21)用於醫藥調配物中之其他無毒可相容材料。在某些具體實例中，本發明之醫藥組成物為非發熱性的，亦即，當投與至患者時，不誘導顯著之溫度升高。

術語“醫藥上可接受之鹽”係指抑制劑之相對無毒的無機及有機酸加成鹽類。這些鹽類可在抑制劑之最終分離及純化期間就地製備，或藉由分開地使呈其游鹼形式之純化抑制劑與適當有機或無機酸反應及分離如此所形成之鹽而製備。代表性鹽類包括氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、順丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘酸鹽(naphthylate)、甲磺酸鹽、葡糖庚酸鹽、乳糖酸鹽(lactobionate)、月桂基磺酸鹽類及胺基酸鹽類、等等。(參見(例如)，Berge等人(1977)“Pharmaceutical Salts”，J. Pharm. Sci. 66：1-19.)。

在其他情況下，可用於本發明方法中之抑制劑可包含一或多個酸性官能基且因此能夠與醫藥上可接受之鹼形成醫藥上可接受之鹽。術語“醫藥上可接受之鹽”在這些例子中係指抑制劑之相對無毒的無機及有機鹼加成鹽。這些鹽類同樣可在抑制劑之最終分離及純化期間就地製備，或藉由分離地使呈其游離酸形式之純化抑制劑與適當鹼(諸如醫藥上可接受之金屬陽離子之氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽、與氨或與醫藥上可接受之有機一級、二級或三級胺反應而製備。代表性鹼金屬或鹼土金屬鹽包括鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽及鋁鹽、等等。可用於形成鹼加成鹽之代表性有機胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌、等等(參見，例如，Berge等人，如上所述)。

潤濕劑、乳化劑及潤滑劑，諸如十二烷基硫酸鈉及硬脂酸鎂，以及著色劑、釋放劑、塗佈劑、甜味劑、調味劑及芳香劑、防腐劑及抗氧化劑亦可存在於組成物中。

醫藥上可接受之抗氧化劑[的例子包括：(1)水溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸、半胱胺酸鹽酸鹽、硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸鈉、等等；(2)油溶性抗氧化劑，諸如棕櫚酸抗壞血酸酯、丁基化羥基苯甲醚(BHA)、丁基化羥基甲苯(BHT)、卵磷脂、五倍子酸丙酯、α-生育酚、等等；及(3)金屬螯合劑，諸如檸檬酸、伸乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸、磷酸、等等。

適合於口服投與之調配物可於膠囊、藥包、丸劑、錠劑、口含劑(使用調味基質，通常為蔗糖及阿拉伯膠或黃蓍膠)、粉劑、顆粒之形式或呈在水性或非水性液體中之溶液或懸浮液，或水包油型或油包水型液體乳液，或呈酏劑或糖漿形式，或呈片劑(使用惰性基質，諸如明膠及甘油，或蔗糖及阿拉伯膠)及/或呈嗽口水、等等，各包含預定量之抑制劑作為活性成分。組成物亦可以大丸劑、舐劑或糊劑形式來投與。

在用於口服投與之固體劑型(膠囊、錠劑、丸劑、糖衣錠、粉劑、顆粒、等等)中，活性成分可與一或多種醫藥上可接受之載體，諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，及/或下列任何之一混合：(1)填充劑或增量劑，諸如澱粉、環糊精、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇及/或矽酸；(2)黏合劑，諸如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖及/或阿拉伯膠；(3)保濕劑，諸如甘油；(4)崩解劑，諸如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、褐藻酸、某些矽酸鹽及碳酸鈉；(5)溶液阻滯劑，諸如石蠟；(6)吸收加速劑，諸如四級銨化合物；(7)濕潤劑，諸如乙醯基醇及單硬脂酸甘油酯；(8)吸收劑，諸如高嶺土及膨潤土黏土；(9)潤滑劑，諸如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉及其混合物；及(10)著色劑。在膠囊、錠劑及丸劑情形下，醫藥組成物亦可包含緩衝劑。相似類型之固體組成物亦可用作使用賦形劑諸如乳糖以及高分子量聚乙二醇、等等之軟及硬填充明膠膠囊中的填充劑。在某些具體實例中，結晶性三肽環氧酮係以膠囊投與至哺乳動物。在另一具體實例中，該結晶性三肽環氧酮為式(I)之化合物。在更佳具體實例中，該結晶性三肽環氧酮為式(II)之化合物。

錠劑可視需要與一或多種輔助成分一起藉由壓縮或模製來製造。壓縮錠劑可使用黏合劑(例如明膠或羥丙基甲基纖維素)、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如，羥基乙酸澱粉鈉或交聯羧甲基纖維素鈉)、界面活性劑或分散劑製備。模製錠劑可藉由在適當機器中模製經惰性液體稀釋劑濕潤之粉末抑制劑的混合物來製造。

錠劑及其他固體劑型，諸如糖衣錠、膠囊、丸劑及顆粒可視需要被刻痕或製備具有塗層及殼，諸如腸溶塗層及醫藥調配技術中所熟知的其他塗層。其亦可經調配以便使用例如以改變比例來提供所要釋放概況之羥基丙基甲基纖維素、其他聚合物基質、脂質體及/或微球體來提供其中活性成分之緩慢或受控釋放。其可藉由例如經由細菌保留過濾器過濾，或藉由併入於可在使用之前即刻溶於滅菌水或一些其他滅菌可注射介質中之滅菌固體組成物的形式之滅菌劑來滅菌。這些組成物亦可視需要包含失透劑且可具有一種視需要以延遲方式將活性成分僅僅或優先釋放於胃腸道之某一部分中的組成。可使用之嵌入組成物的例子包括聚合物質及蠟。活性成分亦可呈微膠囊化形式，適當時，具有上述賦形劑中之一或多者。

用於口服投與之液體劑型包括醫藥上可接受之乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。除活性成分外，液體劑型可包含通常用於此項技術中之惰性稀釋劑，諸如水或其他溶劑、增溶劑及乳化劑，諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇；油類(尤其棉子油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)；甘油、四氫呋喃基醇、聚乙二醇類及脫水山梨糖醇之脂肪酸酯，及其混合物。

除惰性稀釋劑外，口服組成物亦可包括佐劑諸如濕潤劑、乳化劑及懸浮劑、甜味劑、調味劑、著色劑、香化劑及防腐劑。

除活性抑制劑外，懸浮液可包含懸浮劑，如例如乙氧基化異十八醇、聚氧化乙烯山梨糖醇及脫水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂及黃蓍膠及其混合物。

用於直腸或陰道投與之調配物可以栓劑形式存在，其可藉由將一或多種抑制劑與一或多種適當無刺激性賦形劑或載體混合來製備，該等賦形劑或載體包含例如可可脂、聚乙二醇、栓劑蠟或水楊酸酯，該栓劑在室溫下為固體，但在體溫下為液體且因此將在直腸或陰道腔中熔融且釋放活性劑。

適合於陰道投與之調配物亦包括子宮托、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧調配物，其包含該等此項技術中已知為適當的載體。

用於抑制劑之局部或經皮投與之劑型包括粉劑、噴霧、軟膏、糊劑、乳膏、洗液、凝膠、溶液、貼片及吸入劑。活性組分可在滅菌條件下與醫藥上可接受之載體混合，且與任何可能會需要之防腐劑、緩衝劑或推進劑混合。

除抑制劑外，軟膏、糊劑、乳膏及凝膠可包含賦形劑，諸如動物及植物脂肪、油、蠟、石蠟、澱粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、聚矽氧、膨潤土、矽酸、滑石及氧化鋅，或其混合物。

除抑制劑外，粉劑及噴霧可包含賦形劑，諸如乳糖、滑石、矽酸、氫氧化鋁、矽酸鈣及聚醯胺粉末，或該等物質之混合物。噴霧可另外包含習知推進劑，諸如氯氟烴及揮發性未經取代之烴，諸如丁烷及丙烷。

抑制劑或者可由噴霧劑來投與。此係藉由製備包含組成物之水性噴霧劑、脂質體製劑或固體顆粒來完成。可使用非水性(例如，氟碳化合物推進劑)懸浮液。音波噴霧器為較佳，因為其使藥劑暴露於剪切力減到最小，該暴露可產生化合物之降解。

通常，水性噴霧劑係藉由將藥劑之水溶液或懸浮液連同習知醫藥上可接受之載體及穩定劑一起調配而製得。載體及穩定劑隨特定組成物之要求而變，但通常包括非離子界面活性劑(Tweens、Pluronics、脫水山梨糖醇酯、卵磷脂、Cremophors)，醫藥上可接受之共溶劑諸如聚乙二醇、無害蛋白質像血清白蛋白、油酸、胺基酸諸如甘胺酸、緩衝劑、鹽、糖或糖醇。噴霧劑通常從等滲溶液製備。

經皮貼片具有將抑制劑提供身體受控遞送之額外優點。該等劑型可藉由將藥劑溶解或分散於適當介質中而製得。吸收增強劑亦可用以增加抑制劑跨越皮膚之通量。該通量之速率可藉由提供速率控制薄膜或將抑制劑分散於聚合物基質或凝膠中來控制。

適合於非經腸投與之本發明醫藥組成物包含一或多種抑制劑，其與一或多種下列物質組合：醫藥上可接受之滅菌水溶液或非水溶液、分散液、懸浮液或乳液，或可僅在使用之前復原成滅菌可注射溶液或分散液之滅菌粉末，其可包含抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑、使調配物與所欲接受者之血液等張之溶質或懸浮劑或稠化劑。

可用於本發明醫藥組成物中之適當水性及非水性載體之例子包括水、乙醇、多元醇(諸如甘油、丙二醇、聚乙二醇、等等)、及其適當混合物、植物油諸如橄欖油及可注射有機酯諸如油酸乙酯。例如，適當流動性可藉由使用塗層才料諸如卵磷脂、在分散液情形下藉由維持所需粒徑、及藉由使用界面活性劑來維持。

這些組成物亦可包含佐劑，諸如防腐劑、濕潤劑、乳化劑及分散劑。預防微生物之作用可藉由包含各種抗細菌及抗真菌劑(例如對羥基苯甲酸、氯丁醇、酚山梨酸、等等來確保。理想的亦可為在組成物中包括張力調節劑，諸如糖、氯化鈉、等等。另外，可注射醫藥形式之延長吸收可藉由包含延遲吸收之藥劑，諸如單硬脂酸鋁及明膠來產生。

在一些情況下，為了延長藥物之作用，理想的為減緩來自皮下或肌肉注射之藥物的吸收。例如，非經腸投與藥物形式之延遲吸收係藉由將藥物溶解或懸浮於油媒液中來完成。

可注射儲槽形式係藉由在生物可降解聚合物諸如聚乳酸交酯-聚乙交酯中形成抑制劑之微膠囊基質來製造。視藥物對聚合物之比率及所使用的特定聚合物之性質而定，可控制藥物釋放之速率。其他生物可降解聚合物之例子包括聚(原酸酯)及聚(酐)。儲槽可注射調配物亦藉由將藥物截留於可與身體組織相容之脂質體或微乳液中來製備。

藥劑之製劑可經口、非經腸、局部或經直腸給予。當然，其係藉由適合於各投與路徑之形式來給予。例如，其以錠劑或膠囊形式，藉由注射、吸入、洗眼劑、軟膏、栓劑、輸液來投與；藉由洗劑或軟膏來局部投與；及藉由栓劑經直腸投與。口服投與較佳。

“非經腸投與”及“非經腸投與”等詞如使用於本文中表示不為經腸及局部投與之投與模式，其通常藉由注射來投與且包括而不限於靜脈內、肌肉內、動脈內、鞘內、囊內、眼眶內、心內、真皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、包膜下、蛛網膜下、脊柱內及胸骨內注射及輸液。

“全身性投與”、“全身投與”、“周邊投與”及“周邊投與”等詞組如使用於本文中意表示不直接地進入中樞神經系統之配位體、藥物或其他物質之投與，以使其進入患者的系統且因此，進行代謝及其他類似過程，例如，皮下投與。

這些抑制劑可藉由任何適合投與路徑(包括口服、經鼻，例如，如藉由噴霧、直腸、陰道內、非經腸、腦池內及局部，如藉由粉劑、軟膏或滴劑，包括經頰及舌下)投與至人類及其他動物而用於療法。

不管所選擇之投與路徑，藉由熟習此項技術者已知之習知方法將可以適當水合物形式使用之本發明抑制劑及/或醫藥組成物係調配成醫藥上可接受之劑型。

本發明醫藥組成物中之活性成分的實際劑量含量可改變，以便獲得有效達到對特定患者、組成物及投藥模式而言所要治療反應而對患者無毒性之活性成分的量。

所揭示的化合物於醫藥上可接受之混合物中的濃度將視若干因素(包括欲投與之化合物的劑量、所使用化合物之藥物動力學特性及投與路徑)而改變。一般而言，本發明之組成物可以包含約0.1-10% w/v的本文中所揭示之化合物連同其他物質之用於非經腸投與的水溶液形式來提供。典型劑量範圍為每天從約0.01至約50毫克/公斤體重，以1-4次分開劑量來給予。各分開劑量可包含相同或不同之本發明化合物。劑量將為有效量，其視包括患者之總體健康狀況及所選擇之化合物的調配物及投與路徑之若干因素而定。

定義

術語“C_x-y 烷基”係指經取代或未經取代之飽和烴基，其包括鏈中包含x至y個碳之直鏈烷基及支鏈烷基。其中基團在未端位置之C₀ 烷基表示氫，若在內部則為鍵。術語“C_2-y 烯基”及“C_2-y 炔基”係指長度及可能取代與上文所述之烷基類似之經取代或未經取代不飽和脂族基團，但其分別包含至少一個雙鍵或參鍵。

術語“烷氧基”係指具有氧與其連接之烷基。代表性烷氧基基團包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、三級丁氧基等等。“醚”為藉由氧共價連接之二個烴。因此，使烷基成為醚之烷基的取代基為烷氧基或類似於烷氧基。

術語“C_1-6 烷氧基烷基”係指經烷氧基基團取代從而形成醚之C_1-6 烷基基團。

術語“C_1-6 芳烷基”如使用於本文中係指經芳基基團取代之C_1-6 烷基基團。

術語“胺”及“胺基”為此項技術公認的且係指未經取代及經取代之胺類及其鹽，例如，可以下列通式表示之部分：

其中R⁹ 、R¹⁰ 及R^10’ 各自獨立地表示氫、烷基、烯基、-(CH₂ )_m -R⁸ ，或R⁹ 及R¹⁰ 連同與其連接之N原子一起完成環結構中具有4至8個原子之雜環；R⁸ 表示芳基、環烷基、環烯基、雜環基或多環基；和m為零或1至8之整數。在較佳具體實例中，R⁹ 或R¹⁰ 僅一者可為羰基，例如，R⁹ 、R¹⁰ 及氮一起不形成醯亞胺。在甚至更佳具體實例中，R⁹ 及R¹⁰ (及視需要R^10’ )各自獨立地表示氫、烷基、烯基，或-(CH₂ )_m -R⁸ 。在某些具體實例中，胺基為鹼性的，表示質子化形式具有pK_a 7.00。

術語“醯胺”及“醯胺基”在此項技術中公認為經胺基取代之羰基且包括可以下列通式表示之部分：

其中R⁹ 、R¹⁰ 係如上文所定義。醯胺之較佳具體實例不包括可能不穩定之醯亞胺。

術語“芳基”如使用於本文中包括5-、6-及7-員經取代或未經取代單環芳族基，其中環之各原子為碳。芳基包括苯、萘、菲、酚、苯胺、等等。

術語“碳環”及“碳環基”如使用於本文中係指非芳族經取代或未經取代環，其中環之各原子為碳。

術語“羰基”為此項技術公認的且包括該等可以下列通式表示之部分

其中X為鍵或表示氧或硫，且R¹¹ 表示氫、烷基、烯基、-(CH₂ )_m -R⁸ 或醫藥上可接受之鹽，R^11’ 表示氫、烷基、烯基或-(CH₂ )_m -R⁸ ，其中m及R⁸ 係如上文所定義。在X為氧且R¹¹ 或R^11’ 不為氫之情形，該式表示“酯”。在X為氧且R¹¹ 為氫之情形，該式表示“羧酸”。

術語“雜芳基”包括經取代或未經取代之芳族5-至7-員環結構，更佳5-至6-員環，其環結構包括1至4個雜原子。雜芳基基團包括例如吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、異唑、唑、噻唑、三唑、吡唑、吡啶、吡、嗒及嘧啶、等等。

術語“雜原子”如使用於本文中表示不為碳或氫之任何元素的原子。較佳雜原子為氮、氧、磷及硫。

術語“雜環基”或“雜環基團”係指經取代或未經取代之非芳族3-至10-員環結構，更佳3-至7-員環，其環結構包括1至4個雜原子。雜環基包括例如四氫呋喃、哌啶、哌、吡咯啶、嗎啉、內酯、內醯胺、等等。

術語“C_1-6 雜環烷基”如使用於本文中係指經雜環基基團取代之C_1-6 烷基基團。

術語“C_1-6 羥烷基”係指經羥基基團取代之C_1-6 烷基基團。

如使用在本文中，術語“抑制劑”表示描述一種阻礙或減少酶之活性的化合物(例如，抑制標準螢光肽基質諸如suc-LLVY-AMC、Box-LLR-AMC和Z-LLE-AMC之分解蛋白裂解、抑制20S蛋白酶體之各種催化活性)。抑制劑可表現競爭性、反競爭性或非競爭性抑制。抑制劑可逆地或不可逆地結合，和因此該術語包括其為酶之自殺(suicide)基質的化合物。抑制劑可在酶之活性位置上或靠近酶之活位置修正一個或更多位置，或其在酶上之別處引起構形改變。

如使用在本文中，術語“口服生物可利用”表示描述一種以40毫克/公斤或更少，20毫克/公斤或更少或甚至10毫克/公斤或更少投與至老鼠之化合物，其中口服投與該類化合物1小時後顯示在血液中蛋白酶體CT-L活性之至少約50%，至少約75%或甚至至少約90%抑制。

如使用在本文中，術語“肽”不僅包括具有標準取代基之標準醯胺鏈接，且通常利用模擬肽、其他經修正之鏈接，非自然地發生於側鏈，和側鏈修正，如面詳細說明於下。

術語“多環基”或“多環”係指兩個或更多環(例如，環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜芳基及/或雜環基)，其中兩個或更多碳為二個鄰接環共有，例如，環為“稠環”。多環之各環可經取代或未經取代。

術語“蛋白酶體”如使用於本文中意欲包括免疫-及構成性蛋白酶體。

術語“實質上純的”如使用於本文中係指大於90%純之結晶性多形體，意謂包含小於10%之任何其他化合物，包括對應非晶形化合物。較佳地，結晶性多形體大於95%純，或甚至大於98%純。

術語“預防”為此項技術公認的，且當使用於相關病況時，諸如局部復發(例如，疼痛)、疾病諸如癌症、複雜症候群諸如心臟衰竭或任何其他的醫學病況，在該技術中被良好理解，且包括組成物之投與，相對於不接受組成物的個體，其減少個體中的醫學病況之癥狀的頻率或延遲個體中的醫學病況之癥狀的發作。因此，癌症之預防包括(例如)相對於未經治療對照組人口，在接受預防性治療之病人人口中減少可檢測的癌生長之數目，及/或在治療人口對未經治療對照組人口中，延遲可檢測的癌生長的外表，例如，以統計上及/或臨床上顯著量。感染之預防包括(例如)在治療人口對未經治療對照組人口中，減少感染的診斷數目，及/或在治療人口對未經治療對照組人口中，延遲感染癥狀的發作。疼痛之預防包括(例如)在治療人口對未經治療對照組人口中，減少個體所經歷之疼痛的大小或者延遲個體所經歷之痛覺。

術語“前驅藥”包含在生理條件下轉化成治療活性劑之化合物。製造前驅藥的常見方法欲包括選擇在生理條件下水解以顯示所要分子之部分。在其他具體實例中，該前驅藥被宿主動物的催化活性轉化。

術語“預防性或治療性”治療為此項技術公認的且包括將一種或更多本發明組成物投與至宿主。如果是在不要的病況(例如，宿人動物的疾病或其他不要的病況)的臨床顯示之前投與，則治療是預防性的，(也就是，其預防宿主發展不要的病況)，而如果其在不要的病況顯示之後被投與，則治療是治療性的，(也就是，意欲減少、改善或穩定已存在的不要的病況或副作用)。

術語“經取代”係指具有置換主鏈之一或多個碳上之氫的取代基之部分。應瞭解，“取代”或“經取代”包括隱含限制條件，即該取代係根據經取代原子及取代基之所允許的價，且取代產生穩定化合物，例如，其不會自發地諸如藉由重排、環化、消除等等進行轉變。如使用在本文中，術語“經取代”考慮包括有機化合物之所有可允許的取代基。在一廣泛觀點中，可允許的取代基包括有機化合物之非環狀及環狀、支鏈及非支鏈的碳環及雜環、芳族及非芳族取代基。可允許的取代基對適當有機化合物而言可為一或多個且為相同或不同。為了本發明，雜原子諸如氮可具有氫取代基及/或本文中所述之有機化合物的任何可允許的取代基，其滿足雜原子之價數。取代基可包括例如鹵素、羥基、羰基(諸如羧基、烷氧羰基、甲醯基或醯基)、硫羰基(諸如硫酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷醯基、磷酸酯、膦酸酯、亞膦酸酯、胺基、醯胺基、脒、亞胺、氰基、硝基、疊氮基、硫氫基、烷硫基、硫酸酯、磺酸酯、胺磺醯基、磺醯胺基、磺醯基、雜環基、芳烷基或芳族或雜芳族部分。熟習此項技術者應瞭解：需要時，在烴鏈上取代之部分本身可經取代。

關於本發明治療方法之化合物的“治療有效量”係指當作為所要劑量方案之部分投與(至哺乳動物，較佳人類)時，根據用於欲治療之病症或病況或美容目的之臨床可接受標準，例如，在可適用於任何醫學治療之合理利益/風險比下，減輕症狀、改善病況或減緩疾病病況之發作的化合物於製劑中之量。

術語“硫醚”係指如上文所定義之烷基基團，其具有與其連接之硫部分。在較佳具體實例中，“硫醚”以-S-烷基表示。代表性硫醚基團包括甲硫基、乙硫基、等等。

如使用在本文中，術語“治療(treating)”或“治療(treatment)”包括以改善或穩定個體病況之方式逆轉、減少或停滯病況之症狀、臨床徵象及隱伏病理。

範例實施例1

化合物1的合成

(A)的合成

經30分鐘將氯甲酸苯甲酯(41克，240毫莫耳)在二氯甲烷(250毫升)中的溶液加至N-Boc絲胺酸(甲醚)(43.8克，200毫莫耳)、三乙胺(26.5克，260毫莫耳)和4-(二甲胺基)吡啶在二氯甲烷(1.2升)中的0℃溶液。在相同溫度下將所得混合物攪拌另3小時。添加飽和碳酸氫鈉水溶液(200毫升)及將有機層分離，用二氯甲烷(2×400毫升)萃取殘餘混合物。將合併之有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液(200毫升)和鹽水(200毫升)洗滌，經過硫酸鈉乾燥和通過Celite-545過濾。在減壓下移除溶劑並藉由急驟層析法(矽凝膠，己烷和乙酸乙酯)純化殘餘物。分離化合物(A)(54克)且以LC/MS示性(LRMS(MH)w/z：310.16)。

(B)的合成

經過10分鐘將三氟乙酸(200毫升)加至化合物(A)(54克)在二氯甲烷(200毫升)中的0℃溶液，且將所得混合物在相同溫度下攪拌另3小時。在減壓下移除溶劑並將殘餘物放置於高真空下過夜，產生化合物(B)之TFA鹽，其以LC/MS示性(LRMS(MH)m/z：210.11)。

(C)的合成

經過10分鐘將N,N-二乙基異丙胺(75克，600毫莫耳)在四氫呋喃(250毫升)中的溶液加至化合物(B)(43.8克，200毫莫耳)、N-Boc絲胺酸(甲醚)(36.7克，167毫莫耳)、HOBT(27克，200毫莫耳)和HBTU(71.4克，200毫莫耳)在四氫呋喃(1.2升)中的0℃溶液，及所得混合物之pH為~8。在室溫下將混合物攪拌另5小時。在減壓下於室溫移除大部分溶劑並用飽和碳酸氫鈉水溶液(400毫升)稀釋。然後其用乙酸乙酯(3×400毫升)萃取，用碳酸氫鈉(100毫升)和鹽水(100毫升)洗滌。將合併之有機層經過硫酸鈉乾燥和通過Celite-545過濾。在減壓下移除溶劑並藉由急驟層析法(矽凝膠，己烷和乙酸乙酯)純化殘餘物。分離化合物(C)(65克)並以LC/MS示性(LRMS(MH) w/z：411.21)。

(D)的合成

經過5分鐘將三氟乙酸(80毫升)加至化合物(C)(18克)在二氯甲烷(100毫升)中的0℃溶液，並在相同溫度下將所得混合物攪拌另3小時。在減壓下移除溶劑和將殘餘物放置於高真空下過夜，產生中間物(D)之TFA鹽，其以LC/MS示性(LRMS(MH) m/z：311.15)。

(E)的合成

經過10分鐘將氫氧化鈉水溶液(5N，50毫升)加至2-甲基-噻唑-5-甲酸乙酯(15克，88毫莫耳)在四氫呋喃(50毫升)中的0℃溶液，且在室溫下將所得溶液攪拌另2小時。其然後用鹽酸(2 N)酸化至pH=1並用四氫呋喃(3×100毫升)萃取。將合併之有機層用鹽水(30毫升)洗滌並經過硫酸鈉乾燥。在減壓下移除大部分溶劑且將殘餘物凍乾以產生化合物(E)(14克)。

(F)的合成

經5分鐘將N,N-二乙基異丙胺(~50克)在四氫呋喃(200毫升)中的溶液加至化合物(D)(41毫莫耳)與2-甲基-噻唑-5-羧酸(E)(6.0克，42毫莫耳)、HOBT(7.9克，50毫莫耳)和HBTU(18.0克，50毫莫耳)在四氫呋喃中(800毫升)的0℃溶液直到其pH到達約8.5。在相同溫度下將所得混合物攪拌過夜。其然後用飽和碳酸氫鈉水溶液(200毫升)停止反應，且在減壓下移除大部分溶劑。用乙酸乙酯(3×400毫升)萃取殘餘混合物。將合併之有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液(200毫升)和鹽水(100毫升)洗滌，經過硫酸鈉乾燥和通過Celite-545過濾。在減壓下移除溶劑和藉由急驟層析法(矽凝膠，具有2%甲醇之乙酸乙酯)純化殘餘物。分離化合物(F)(17.1克)且以LC/MS示性(LRMS(MH) m/z：436.15)。

(G)的合成

將10% Pd/C(3克)加至化合物(F)(17.1克，95毫莫耳)在甲醇(300毫升)中的溶液。使所得混合物在1大氣壓之氫下攪拌48小時。將混合物通過Celite 545過濾並用甲醇(~200毫升)洗滌濾餅。在減壓下濃縮有機層並放置在高真空下以產生化合物(G)，其以LC/MS示性(LRMS(MH) w/z：346.1)。

(H)的合成

將N-Boc苯丙胺酸-環氧酮(140毫克，0.46毫莫耳)用DCM(2毫升)稀釋並冷卻至0℃。將三氟乙酸(6毫升)加至此溶液。移除冷卻浴並將反應攪拌1小時，於此時TLC顯示起始原料完全消耗。在減壓下濃縮所得溶液且放置於高真空下以產生化合物(H)之TFA鹽。

化合物1的合成

將N,N-二乙基異丙胺(1毫升)逐滴加至上述化合物(H)(131毫克，0.38毫莫耳)和(J)(0.46毫莫耳)、HOBT(75毫克，0.48毫莫耳)和HBTU(171毫克，0.48毫莫耳)在四氫呋喃(20毫升)和N-二甲基甲醯胺(10毫升)中的0℃溶液。在相同溫度下將混合物攪拌另5小時。其然後用飽和碳酸氫鈉水溶液(20毫升)停止反應，和在減壓下移除大部分溶劑。然後將殘餘混合物用乙酸乙酯(3×40毫升)萃取。將合併之有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液(20毫升)和鹽水(10毫升)洗滌，經過硫酸鈉乾燥和通過Celite-545過濾。在減壓下移除溶劑且藉由HPLC(0.02M乙酸銨水溶液和乙腈(66/34)純化殘餘物以產生化合物1(92毫克)，將其凍乾並以LC/MS示性(LRMS(MH) m/z：533.2)。

實施例2

將非晶形化合物1(50毫克)溶解在乙腈(1毫升)中，然後加入去離子水(2毫升)，且然後藉由經過約1-2個星期慢慢地蒸發1毫升使溶液過飽和。將所得晶體過濾，用1毫升1：2乙腈-水洗滌，和在真空下乾燥12小時以提供具有148℃之熔點的化合物1之結晶性多形體(25毫克)。樣品的特性DSC曲線顯示於圖1，其係用TA儀器示差掃描熱卡計2920以10℃/分鐘的加熱速率記錄記錄。

實施例3

將非晶形化合物1(611毫克)溶解在在四氫呋喃(5毫升)中，接著加入己烷類(5毫升)且用如實施例2製備之結晶性多形體化合物1將溶液種晶，且經過約17小時慢慢地蒸發5毫升使溶液過飽和。將所得晶體過濾，用1毫升1：1四氫呋喃-己烷類洗滌，並在真空下乾燥12小時以提供具有147℃之熔點的化合物1之結晶性多形體(150毫克)。

實施例4

將非晶形化合物1(176毫克)溶解在四氫呋喃中(5毫升)中，然後加入甲苯(25毫升)。用如實施例2製備之結晶性多形體化合物1將溶液種晶，且經過約2天慢慢地蒸發20毫升使溶液過飽和。將所得晶體過濾，用15毫升甲苯洗滌，和在真空下乾燥12小時以提供具有149℃之熔點的化合物1之結晶性多形體(88毫克)。

實施例5

將非晶形化合物1(312毫克)溶解在甲苯(50毫升)中，加熱至約100℃以完全溶解，然後加入己烷類(50毫升)和用如實施例2製備之結晶性多形體化合物1將溶液種晶，且經過約2天慢慢地蒸發60毫升使溶液過飽和。將所得晶體過濾，用10毫升甲苯洗滌，和在真空下乾燥12小時以提供具有149℃之熔點的化合物1之結晶性多形體(156毫克)。

實施例6

將非晶形化合物1(1.4克)溶解在甲苯(25毫升)中，加熱至約50℃以完全溶解，然後藉由冷卻至22℃使過飽和且使化合物結晶12小時。將所得晶體過濾，用5毫升己烷類洗滌，並在真空下乾燥12小時以提供具有149℃之熔點的化合物1之結晶性多形體(0.94克)。

實施例7 化合物1的合成 (H)的合成

在3-頸圓底燒瓶中於惰性氛圍下將N-Boc苯丙胺酸-環氧酮(1.0當量)溶解在DCM(3升/公斤的N-Boc苯丙胺酸-環氧酮)中且溶液在冰沐浴中冷卻。然後，以內溫維持10℃以下之速率加入TFA(5.0當量)。然後將反應混合物加熱至約20℃並攪拌1至3小時。然後將MTBE(3.6升/公斤的N-Boc苯丙胺酸-環氧酮)至反應混合物，同時維持混合物溫度小於25℃。然後加入庚烷(26.4升/公斤的N-Boc苯丙胺酸-環氧酮)。將反應冷卻至介於-5和0℃之間經2至3小時以使化合物(H)結晶。過濾白色固體且用庚烷(3升/公斤的N-Boc苯丙胺酸-環氧酮)沖洗。白色固體然後在真空下於22℃經12小時。所得產率為86%，具有HPLC純度99.4%。

化合物1的合成

在惰性氛圍下將化合物(H)(1.2當量)、化合物(G)(1.0當量)、HBTU(1.2當量)、HOBT(1.2當量)和N-甲基吡咯啶酮(8升/公斤的化合物(G))加至乾燒瓶中，且在23℃下攪拌混合物至完全溶解。然後將反應冷卻至介於-5和0℃之間，和經過15分鐘添加二異丙基乙胺(2.1當量)，同時維持小於0℃之內反應溫度。然後在0℃下將反應混合物攪拌12小時。

藉由將反應混合物倒進8%碳酸氫鈉(40升/公斤的化合物(G))使粗製化合物1沈澱且於20至25℃下將粗製化合物1之懸浮液攪拌12小時，接著在0至5℃下攪拌1小時。過濾白色固體並用水(5升/公斤的化合物(G))沖洗。然後在20至25℃下將白色固體再成漿於水(15升/公斤)經3小時，過濾和用水(5升/公斤的化合物(G))和乙酸異丙酯(2x2升/公斤的化合物(G))沖洗。在真空下於45℃將白色固體乾燥至固定重量。粗製化合物1的產率為65%，具有97.2%之HPLC純度。

藉由在85℃下攪拌和加熱將粗製化合物1完全地溶解在乙酸異丙酯(20升/公斤的粗製化合物1)中。然後將溶液熱過濾以移除任何的粒狀物質及將溶液再加熱至85℃以提供透明溶液。在加入晶種之前使透明溶液以每小時10℃冷卻至65℃。使溶液以每小時10℃冷卻至20℃，當化合物1之實質上結晶發生時。將懸浮液在20℃下攪拌6小時，接著在0至5℃下攪拌最少2小時且過濾和用乙酸異丙酯(1升/公斤的粗製化合物1)沖洗。將純化之化合物1在真空下於45℃乾燥最少24小時至固定重量。化合物1的產率為87%，具有HPLC純度97.2%。

實施例8 化合物1的合成

在惰性氛圍下將化合物(H)(1.1當量)、化合物(G)(1.0當量)、HBTU(1.5當量)、HOBT(1.5當量)和DMF(8升/公斤的化合物(G))加至乾燒瓶中，且在23℃下攪拌混合物至完全溶解。然後將反應冷卻至介於-5和0℃之間，和經過15分鐘添加二異丙基乙胺(2.1當量)，同時維持小於0℃之內反應溫度。然後在0℃下將反應混合物攪拌3小時。

藉由添加預冷凍之飽和碳酸氫鈉(94升/公斤的化合物(G))將反應混合物停止反應，同時維持小於10℃之內溫。然後將內容物轉移至分液漏斗。將混合物用乙酸乙酯(24升/公斤的化合物(G))萃取，且將有機層用飽和碳酸氫鈉(12升/公斤的化合物(G))洗滌和用飽和氯化鈉(12升/公斤的化合物(G)洗滌。

在減壓下用小於30℃之浴溫將有機層濃縮至15升/公斤的化合物(G)，接著與乙酸異丙酯(2×24升/公斤的PR-022)共蒸餾。在加熱至60℃之前用乙酸異丙酯將終體積調整到82升/公斤的化合物(G)以獲得透明溶液。在加入晶種之前使透明溶液混合物冷卻至50℃。使溶液冷卻至20℃，當化合物1之實質上結晶發生時。在過濾之前於0℃下將懸浮液攪拌12小時並用乙酸異丙酯(2升/公斤的化合物1)沖洗。化合物1在真空下於20℃乾燥12小時至固定重量。化合物1的產率為48%，具有97.4%之HPLC純度。

相等物

熟習此項技術者應認知或能夠僅使用例行實驗來確定本文中所述之化合物及其使用方法之許多相等物。該等相等物被視為在本發明之範疇內且由下列申請專利範圍涵蓋。

所有上文所引用之參考文獻及公開案特此以引用之方式併入。

圖1顯示結晶性化合物1之DSC(差示掃描量熱法)溫度記錄圖。

圖2顯示結晶化合物1之XRPD(X射線粉末繞射)圖。

圖3顯示結晶性化合物1之TG溫度記錄圖。

圖4顯示非晶形化合物1之調整溫度記錄圖，可逆熱流(下)和非可逆熱流(上)。

圖5顯示根據實施例2(中)、實施例3(上)和實施例4(下)製備之結晶性化合物1的DSC溫度記錄圖之比較。

圖6顯示根據實施例1製備之非晶形化合物1的XRPD圖(下)，如相於根據實施例2(上)、實施例3(從下算第二)和實施例4(從上算第二)製備之非晶形化合物1的XRPD圖。

圖7顯示非晶形化合物1之TG溫度記錄圖。

Claims

一種具有式(II)結構之結晶性化合物，其中該結晶性化合物具有2 θ值8.94；9.39；9.76；10.60；11.09；12.74；15.27；17.74；18.96；20.58；20.88；21.58；21.78；22.25；22.80；24.25；24.66；26.04；26.44；28.32；28.96；29.65；30.22；30.46；30.78；32.17；33.65；34.49；35.08；35.33；37.85；及38.48。
如申請專利範圍第1項之結晶性化合物，其具有如圖1中所示之DSC溫度記錄圖。
如申請專利範圍第1項之結晶性化合物，其具有140至155℃之熔點。
如申請專利範圍第3項之結晶性化合物，其具有145至150℃之熔點。
如申請專利範圍第1項之結晶性化合物，其具有如圖2中所示之XRPD圖。
一種製備如申請申請專利範圍第1項之結晶性化合物之方法，其包含(i)製備該式(II)化合物於有機溶劑中之溶液；(ii)使該溶液引起過飽和以導致晶體之形成；和(iii)分離該等晶體。
如申請專利範圍第6項之方法，其中該有機溶劑係選自乙腈、乙酸乙酯、庚烷類、己烷類、乙酸異丙酯、甲醇、甲基乙基酮、四氫呋喃、甲苯和水或其任何組合。
如申請專利範圍第7項之方法，其中該有機溶劑係選自乙腈、庚烷類、己烷類、甲醇、四氫呋喃和甲苯。
如申請專利範圍第8項之方法，其中該有機溶劑係選自己烷類、四氫呋喃和甲苯。
如申請專利範圍第6項之方法，其中使該溶液引起過飽和包含添加反溶劑，使溶液冷卻，減少溶液之體積，或其任何組合。
如申請專利範圍第10項之方法，其中使該溶液引起過飽和包含添加反溶劑，將溶液冷卻至周圍溫度及減少溶液之體積。
如申請專利範圍第10項之方法，其中該反溶劑係選自己烷類、甲苯和水。
如申請專利範圍第10項之方法，其中體積減少係藉蒸發進行。
如申請專利範圍第6項之方法，另外包含將溶液種晶。
如申請專利範圍第14項之方法，另外包含洗滌該等晶體。
如申請專利範圍第15項之方法，其中該洗滌包含用選自反溶劑、乙腈、庚烷類、己烷類、甲醇、四氫呋喃、甲苯、水或其組合之液體洗滌。
如申請專利範圍第16項之方法，其中該洗滌包含用反溶劑與有機溶劑之組合來洗滌。
如申請專利範圍第17項之方法，其中該反溶劑為己烷類或庚烷類。
如申請專利範圍第6項之方法，其中該分離晶體包含過濾晶體。
如申請專利範圍第6項之方法，另外包含在減壓下乾燥晶體。
一種製備如申請申請專利範圍第1項之結晶性化合物之方法，其包含(i)使式(III)之化合物其中X為任何適當相對離子，與式(IV)之化合物在有機溶劑中反應以形成該式(II)化合物， (ii)製備該式(II)化合物在該有機溶劑中的溶液；(iii)使該溶液引起過飽和以使允許晶體之形成；和(iv)分離該等晶體以提供該式(II)之結晶性化合物。
一種醫藥組成物，其包含(a)醫藥上可接受之載劑及(b)如申請專利範圍第1-5項中任一項之結晶性化合物。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，以該組成物所投予之個體的重量計，其劑量範圍從0.01毫克/公斤至50毫克/公斤。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其中該組成物為經腸投予之組合物。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其中該組成物為經口投予之組合物。
如申請專利範圍第25項之醫藥組成物，其中該經口投予之組成物係選自由錠劑、膠囊、顆粒、粉末和糖漿組成之群。
如申請專利範圍第25項之醫藥組成物，其中該經口投予之組成物為錠劑。
如申請專利範圍第25項之醫藥組成物，其中該經口投予之組成物為膠囊。
如申請專利範圍第25項之醫藥組成物，其中該經口投予之組成物為顆粒。
如申請專利範圍第25項之醫藥組成物，其中該經口投予之組成物為粉末。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其中該結晶性化合物展示具有在147℃之吸熱峰值的特徵之差示掃描量熱法(DSC)溫度記錄圖。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其係用於治療癌症。
如申請專利範圍第32項之醫藥組成物，其中該癌症為膀胱、血液、骨、腦、乳房、子宮頸、胸、結腸、子宮內膜、食道、眼睛、頭、腎、肝、肺、淋巴結、口腔、頸部、卵巢、胰臟、前列腺、直腸、腎臟、皮膚、胃、睪丸、咽喉或子宮之癌症。
如申請專利範圍第32項之醫藥組成物，其中該癌症係選自由血液性癌症、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症(Waldenström's macroglobulinemia)、多發性骨髓瘤、擴散性B細胞淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、胰臟癌和肺癌組成之群。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其係用於治療白血病、急性淋巴細胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、毛細胞白血病、小淋巴細胞性淋巴瘤、淋巴漿細胞淋巴瘤、漿細胞骨髓瘤、漿細胞瘤或多發性骨髓瘤。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其係用於治療白血病、急性淋巴細胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)或慢性骨髓性白血病(CML)。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其係用於治療多發性骨髓瘤。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其係用於治療瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其中該式(II)結晶性化合物展示在25℃至125℃之溫度範圍內的0.0至0.3%之重量損失之溫度記錄圖分析。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其係用於治療骨髓發育不良症狀或骨髓增生性疾病。
如申請專利範圍第22項之醫藥組成物，其係用於治療血液學惡性腫瘤。