TWI308569B

TWI308569B - Bis-(n,n'-bis-(2-haloethyl)amino) phosphoramidates as antitumor agents

Info

Publication number: TWI308569B
Application number: TW090110381A
Authority: TW
Inventors: R Jason Herr; Robert T Lum; Steven R Schow; Fanying Meng; Michael R Kozlowski; Pavel Zhichkin
Original assignee: Telik Inc
Priority date: 2000-05-02
Filing date: 2001-05-01
Publication date: 2009-04-11
Also published as: PL358155A1; NZ522189A; KR100729980B1; ATE313549T1; HUP0300688A2; NO328854B1; EA200201154A1; DE60141181D1; DK1607399T3; DE60116081D1; JP2003531913A; EP1607399A2; EP1278759A1; HUP0300688A3; EP1607399B1; AU2001261153B2; IL152325A; CZ20023615A3; PT1607399E; EA006852B1

Description

A7 1308569 ___B7 _______ 五、發明說明（/ ) 本發明背景 (a )本發明領域本發明係有關於一種化學化合物，治療方法，藥學組成物，及它們的製備方法。更特而言之，該等化合物具有抗腫瘤活性或能夠修飾爲具有抗腫瘤活性。因此’本發明特別地係有關於該等化合物使用於治療腫瘤方法的用途，特別爲使用於治療癌症方法的用途’以及製備該等化合物的方法。 (b)相關技藝之敘述目前癌症的化學療法係對患者投予抗有絲分裂藥例如安瑞迷辛（adriamycin) ’長春新鹼（vincristine) ’喜思白汀 (cisplatin)，多索盧碧辛（doxorubicin)，道諾迷辛 (daunomycin)和氨甲蝶呤（methotrexate)，毒素藥例如白喉 (diphtheria)毒素，假單胞菌(pseudomonas)毒素和篤麻毒素 (ncin)，及抗腫瘤藥例如環磷醯胺和異磷醯胺。環磷醯胺是世界上最廣泛使用的抗癌症藥劑其中一種，且其係與多種其他藥物合併投予來治療廣泛多樣的血液和固體腫瘤。然而，環磷醯胺的幾個特徵會消減去它的臨床效能。例如，該藥物需要在肝中進行新陳代謝活化作用來產生可毒化癌細胞的新陳代謝產物。該藥物特別對膀胱有毒，而且它也顯示出烷化劑類型抗癌藥物的典型骨髓毒性。使用於治療癌症患者劑量中的環磷醯胺是對免疫系統的有效抑制劑，因而致使已受本身疾病消弱抗感染力的患者更形減低。最後’重複使用環磷醯胺通常會造成患者癌細胞抗藥性的產 3 ^紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公" (請先閱讀背面之主意事項再填寫本頁) 裝-----I--訂--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1308569 Α7 Β7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（>) 生，致使藥物無效。長期以來在文獻以及相關資料中即已知胺基磷酸酯衍生物可做爲病基化藥劑。已發現它們的其中一些有用於治療癌症（若欲瀏覽者可參見DeVita，『癌症治療原則』，於 Petersdorf及其硏究同仁於『內服藥學原則』（prindples 〇f Internal Medicine)第 ι〇版第 765_788 頁，McGraw_Hill，Νγ ，1983 )。環磷醯胺類似物亦已於文獻中廣知且已廣泛地衍生製備（環磷醯胺’默克索引，第11版第429-430頁， US5190929)。然而，對於雙_(Ν，ν'-雙-(2-氯乙基)胺基)胺基磷酸酯的參考資料相當少（DE 19524515，US 5306727，W0 9306120 ’ DE 3835772 ， GB 2207674 ， DE 3239858 ， ΕΡ 072531)。US 5556942揭示具下式之化合物，

其中Ζ爲溴，R爲氫，或R爲氯，其可做爲合成反應之中間物。發明槪要本發明的一個範圍係有關於一種新類型之胺基磷酸酯化合物，其以式I表示 4 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）裝--------訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1308569 A7 B7 五、發明說明（3 )

X

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製式I 其中： X爲鹵素原子； Q爲NH，〇，S〇2-〇-，或S ;及 R爲氫，低碳烷基，經取代之低碳烷基，芳基，R'CO- ’ R'SCb-，其中R'爲氫，低碳烷基，芳基，雜環；或 R-Q共同爲氯或磺酸酯或胺基甲酸酯基’ 或其藥學上可接受鹽^ 本發明的另一個範圍係有關於一種藥學組成物，其包含治療有效數量的式I化合物與至少一種藥學上可接受載體混合。明確而言，該組成物係設計來治療使用抗有絲分裂劑有效之癌症或其他疾病。本發明的進一步範圍係有關於一種治療哺乳動物中使用抗有絲分裂劑有效之癌症或其他疾病的方法，該方法包含將治療有效數量的式I化合物投予至該哺乳動物。' 本發明的另一個範圍係有關於一種製備式〗化合物之方法。口本發明詳細敘述定義： 5 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

- I I----—訂-----丨丨 i I 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1308569 A7 B7 五、發明說明（4) 於本文中所使用之專有名詞係基於對它們認知之意義且應爲熟於此藝者所完全了解。『鹵素』或『鹵』一詞意爲溴，碘，氟，或氯。『烷基』一詞，如用於『烷基』或『烷氧基』中者，意爲G-Cm單價的烴基部分且可爲線性，分枝或環狀。『低碳院基』一詞，如用於『低碳院基』，『鹵素-低碳垸基』，『芳基(低碳)烷基』或『雜芳基(低碳)烷基』中者，意爲具有由1至10個碳原子且僅含有碳和氫原子之完全飽和單價烴基’其可爲環狀，分枝或鏈基。該詞所例舉的基例如爲甲基’乙基，異丙基，丙基’丁基，異丁基，次丁基，三級丁基，戊基，己基，環戊基，環丙基甲基，環己基或環己基甲基。在本發明之上下文中，具有1至6個碳原子的低碳烷基爲較佳者。『經取代烷基或經取代低碳烷基』一詞分別爲烷基或低碳烷基’其典型地爲單-，二-或三取代且取代基部份例如爲芳基，經R1-取代之芳基，雜芳基，硝基，氰基，鹵素，-OR1，-SR1，-CXCOR1，-OCXCOR1，-C(〇)〇R丨，捕、，_ S〇2〇R ’ -OSChR1 ’ -SChNRS ’ -NRSChR1，-CONRS，或· NRCXC^R1，其中R1分別爲氫，低碳烷基，經r2_取代之低碳院基，芳基，經R2-取代之芳基，雜芳基，雜芳基(低碳) 院基’經R2·取代之芳基(低碳)院基，或芳基(低碳)院基，及每個R2分別爲羥基，鹵素，低碳烷氧基，氰基，硫基，硝基’低碳烷基，齒素-低碳烷基或胺基。經取代之烷基或經取代之低碳烷基係爲經一至三個取代基取代者且取代基 6 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) I --------訂·-------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1308569 B7 五、發明說明（匕）特別佳者係選自包含氰基，鹵素，低碳烷氧基，硫基，硝基，胺基，及羥基。『鹵素-低碳烷基』一詞意爲經一至三個鹵素基取代之低碳院基，及進一步例舉之基例如爲-CF3，-CH2CF3和-CH2CCI3。『芳基(低碳)烷基』一詞意爲經芳基取代的低碳烷基。『經取代之芳基(低碳)烷基』意爲在芳基部位或烷基部位或兩者之部位上具有一至三個取代基之芳基(低碳)烷基。『雜芳基(低碳)烷基』一詞意爲經雜芳基取代的低碳烷基。『經取代之雜芳基(低碳)烷基』意爲在雜芳基部位或烷基部位或兩者之部位上具有一至三個取代基之雜芳基(低碳)烷基。『低碳烷氧基』一詞意爲-OR3基，其中R3爲低碳烷基〇濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 『芳基』一詞’如用於『芳基』，『芳氧基』及『芳基 (低碳)烷基』中者’意爲衍生自含有6至20個環碳原子之芳香族烴’且具有單環（例如苯基），或二或多個縮合環，較佳爲2至3個縮合環（例如萘基），或藉由單一鍵相鍵結之二或多個芳香族環，較佳爲2至3個芳香族環（例姆苯）。該烷基較佳爲g-c16，及甚至更佳爲C6至Ci4。該芳基本身可經多個或單個取代基取代，且取代基部份例如爲院基，經取代之垸基，鹵素，氰基，硝基，-SRl，魏，， C(0)R » -〇C(0)R » -S〇2〇r> , ,〇s〇2Ri , .S〇2nr'2 ,. nrs〇2R| ’ ·(：(◦)⑽’撕…⑽R,2，或縱⑼R1，其中本紙張尺度翻巾國國家群（CNS)A4祕經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1308569 Λ7 B7 五、發明說明（士） R1分別爲氫，低碳烷基’經R2-取代之低碳烷基’芳基，經 R2-取代之芳基，雜芳基，雜芳基（低碳）烷基，芳基(低碳) 烷基，或經R2-取代之芳基(低碳)烷基’及每個R2分別爲羥基，鹵素，低碳烷氧基，氰基，硫基，硝基’低碳烷基，鹵素-低碳烷基或胺基。『雜芳基』一詞，如用於雜芳基及雜芳基(低碳)烷基中者，意爲衍生自含有5至14個環原子且其中之1至5個分別爲選自N，0或S雜原子之芳香族烴，且包括單環，縮合雜環，及縮合碳環與雜環芳香族環（例如_吩基，呋喃基，毗咯基，嘧啶基，異噁唑基，噁唑基，吲哚基，異苯並呋喃基，嘌呤基，異喹啉基，蝶啶基，咪唑基，〇比[]定基，吡唑基，毗嗪基，喹啉基等）。『經取代雜芳基』一詞可具有由一至三個取代基例如烷基，經R1取代之烷基，鹵素，氰基，硝基，-SR1，，-CXCOR1，-OCXCOR1，-SChOR丨，-OSChR1，-SCbNR、， -NRSChRi，-CCCOOR1 , -NR、，-CONRS，或-NRC^C^R1，其中R1分別爲氫，低碳烷基，經r2-取代之低碳烷基，芳基 ’經R2-取代之芳基，雜芳基，雜芳基(低碳)烷基，芳基(低碳)院基’或經R2-取代之芳基(低碳)烷基，及每個R2分別爲羥基，鹵素，低碳烷氧基，氰基，硫基，硝基，低碳烷基’鹵素-低碳烷基或胺基。除此之外，在雜芳基上的任何二個相鄰取代基可選擇性地共同形成低碳亞烷二氧基。在經取代雜芳基上的特別較佳取代基包括羥基，鹵素，低碳烷氧基，氰基，硫基’硝基，低碳烷基，鹵素_低碳烷基， 8 本紙張尺度剌中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱)' (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

I I I I I 1 I 訂----- I I I I % A7 B7 1308569 五、發明說明（7 ) 鹵素-低碳烷基，或胺基。 f請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁〕『雜環』一詞意爲衍生自含有5至14個環原子且其中之1至5個分別爲選自N，〇或S雜原子之芳香族經了且包括單環，縮合雜環’及縮合碳環與雜環芳香族環（例如噻吩基，呋喃基，姐略基，喃陡基，異螺嗤基，嗎，吲哚基，異苯並呋喃基，嘌呤基，異喹啉基，蝶D定基，咪唑基，吡啶基，吡唑基’吡嗪基，喹啉基等）。雜環可具有由一至三個取代基例如烷基，經R1取代之烷基，陶素了氰基，硝基，-SR1 ’ -OR1 ’ -C^C^R1，-OCCC^R1，-S〇2〇y -OSChRi，-SChNR、，-NRSChRi，_C(〇)〇Ri，-NR、，-C〇Nr1 ，或-NRQCOR1，其中R1分別爲氫，低碳烷基，經R2_取代之低碳烷基，芳基’經R2-取代之芳基，雜芳基，雜芳基' 低碳)烷基，芳基(低碳)烷基，或經R2-取代之芳基(低滕)产( 基，及每個R2分別爲羥基，鹵素，低碳烷氧基，顫其 ^ ，硫 %- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製基，硝基’低碳烷基，鹵素-低碳烷基或胺基。除此之外在雜芳基上的任何二個相鄰取代基可選擇性地共同形成低碳亞烷二氧基。在經取代雜芳基上的特別較佳取代基包括羥基，鹵素，低碳烷氧基，氰基，硫基，硝基，低碳烧基，鹵素-低碳烷基，鹵素-低碳烷基，或胺基。『酯基』一詞意爲R'C(〇)-〇，R'c〇-S-，磺酸酯，或胺基甲酸酯’其中R'爲氫，低碳烷基，芳基，或雜環。於本發明上下文中之『疾病』一詞意圖包含腫瘤，特別爲癌症，及使用抗有絲分裂劑有效之其他疾病，其非限制性地包括良性增殖，和由於致病因子，例如真菌和寄生 9 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱）經濟部智慧財產扃員工消費合作社印製 1308569 A7 B7 五、發明說明（δ ) 感染物，而致的感染。『藥學上可接受鹽』一詞意爲當所存有的酸性基，更明確地爲酸性質子，足以與無機或有機鹼反應時所形成之鹽類。酸性質子例如存在於:〇1^ ’ -SChOR1，或-CXCOOR1等基團之中。典型地，該母體化合物使用過量且含有適當陽離子之鹼性藥劑處理，例如氫氧化物，碳酸鹽或醇鹽。例如Na+，K+，Ca+及NH/的陽離子爲存在於藥學上可接受鹽中的陽離子例子。Na+鹽爲尤其有用者。因此，可接受的無機鹼可包括氫氧化鋁，氫氧化鈣，氫氧化鉀，碳酸鈉和氫氧化鈉。鹽類之製備亦可使用有機鹼，例如乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，N-甲基葡糖胺，乙醇胺，和三甲醇胺基甲院(tromethamine)。如果本發明化合物含有一個鹼基，則可製備出酸加成鹽。鹼基的例子爲-NRS基。該化合物酸加成鹽係得自母體化合物和過量的酸於適當溶劑中使用標準方法製備，其中酸，例如鹽酸，氫溴酸，硫酸（得到硫酸鹽和硫酸氫鹽）’硝酸，磷酸和相似者，和有機酸，例如乙酸’丙酸，羥基乙酸，丙酮酸，草酸，蘋果酸，丙二酸，琥珀酸，順丁烯二酸，反丁烯二酸，酒石酸，檸檬酸，苯甲酸，肉桂酸’扁桃酸，甲基磺酸，乙基磺酸，柳酸，P-甲苯磺酸，己酸，庚酸，環戊基丙酸，乳酸，0-(4-羥基苯甲醯基)苯甲酸，1，2-乙基二磺酸，2-羥基乙基磺酸，苯磺酸’ P-氯苯磺酸，2-萘磺酸，樟腦磺酸，4-甲基-二環[2.2.2] 辛-2-烯-1-羧酸’葡糖庚酸，葡糖酸，4,4'-亞甲基雙(3-羥基 -2-萘甲酸），3-苯基丙酸，三甲基乙酸，三級-丁基乙酸， 10 $紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱1 -----------_裝---- (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 訂--------- %- 1308569 A7 B7 五、發明說明（^ ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 月桂基硫酸，葡萄糖酸，榖胺酸，3-羥基-2-蔡甲酸，硬脂酸，己二烯二酸和相似者。『藥學上可接受鹽』一詞亦包括內鹽或兩性離子。如式I化合物同時含有酸性質子和鹼性質子則可形成兩性離子。『內鹽』或『兩性離子』之形成可利用由羧基中轉移一個質子至胺基中氮原子上的未共用電 -j—* 〇『立體異構物』一詞爲具有相同序列的共價鍵但在空間上原子的相對配置不同的化合物。『治療有效數量』一詞係爲當給藥給動物來治療疾病時足以使疾病之治療有效的數量。『抗有絲分裂』一詞係爲可干擾真核細胞核分裂的藥劑或試劑。『治療』或『處理』哺乳動物體內的疾病一詞包括： (1) 在哺乳動物感染疾病但該疾病之徵狀尙未開始或顯示時防止疾病在哺乳動物中發生， (2) 抑制疾病，也就是制止其發展，或 (3) 減輕疾病之徵狀，也就是造成疾病的消減。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本發明的某些化合物可含有一或多個掌性中心。在如此情況下’所有的立體異構物亦屬於本發明的範圍之內。因此，在本發明範圍內之化合物可理解係包括個別分離出的立體異構物和該等立體異構物的混合物。較佳具體實施你丨本發明的一個較佳具體實施例係爲式丨化合物，其中 X爲氯或溴。較佳者’ R-Q共同爲磺酸酯或胺基甲酸酯基 11 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） A7 1308569 _B7_ 五、發明說明（/Ο 。該酯基可爲乙酸酯，苯甲酸酯，對-溴苯磺酸酯，對-甲苯磺酸酯，甲基磺酸酯，胺基甲酸酯基，或相似者。本發明的另一個較佳具體實施例係爲式I化合物，其中R爲氫。在另一個較佳具體實施例中，R爲苯甲基。本發明的另一個較佳具體實施例係爲式I化合物，其中Q爲ΝΗ。在另一個較佳具體實施例中，Q爲氧。本發明的另一個較佳具體實施例係爲式I化合物，其中X爲氯。本發明的一個較佳具體實施例係爲式I化合物，其中X爲氯及R爲低碳烷基。本發明的一個較佳具體實施例係爲式I化合物，其中X爲氯及Q爲氧。最佳之式I 化合物爲其中X爲氯及R爲氫。在此類較佳化合物中，2-羥基乙基队队川^-肆(2-氯乙基)二胺基磷酸酯和2-氯乙基Ν，Ν，Ν'，Ν'-肆(2-氯乙基)二胺基磷酸酯爲特別佳者。本發明的另一個較佳具體實施例係爲式I化合物，其中R-Q共问爲氯。本發明的另一個較佳具體實施例係爲式I化合物，其中X爲氯，R-爲R'SCh-。在此類較佳化合物中，特別佳者爲 X爲氯，R爲R/S〇2-，其中V爲苯基 X爲氯，R爲R'SCh-，其中R'爲p-甲基苯基 X爲氯，R爲Rich-，其中ΙΓ爲P-硝基苯基 X爲氯，R爲！Γ S〇2-，其中爲P-溴苯基。最佳者爲Q 在最後四個組合中爲氧。最特別佳者爲化合物中其中X爲氯，Q爲0，R爲 12 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

flu a^i 1^1 n In ^1·-1·--口，β i ί I n n I % 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1308569 A7 B7 五、發明說明（ii ) V SCb-，其中R'爲p-溴苯基。藥理學和用途式I化合物具有抗腫瘤活性或能被修飾成爲具有抗腫瘤活性。在這些化合物分子的2-鹵乙基，更明確地爲2-氯乙基部份，可直接地做爲DNA的烷基化劑，或可轉換爲口丫丙啶基。吖丙啶基形式是該分子之一種高度活性的形式且具有氮芥(nitrogen mustard)類別化合物所建議的機制。因此，這些化合物可有效地治療腫瘤和使用抗有絲分裂劑有效的其他疾病，例如良性增殖和由於致病因子而致的感染。這些化合物在肝中並不需要具有新陳代謝活性來獲得抗腫瘤活性，因此並不像環磷醯胺地具有相同的毒性成份。給藥和藥學組成物本發明化合物可經由任何的一般與可接受途徑，以治療有效數量給藥至接受治療之患者。給藥之途徑非限制性地包含經由注射給藥，包括靜脈內，腹膜內，肌肉內，和皮下注射，經黏膜或經皮輸送，經由局部施用，鼻噴霧，栓劑和相似者，或可使用口服給藥。治療有效數量可廣泛地改變且依據疾病的嚴重性，患者的年紀和相對性健康，所使用化合物的效價和其他因素而定。其通常爲大約每日每公斤體重使用1毫克（mg/Kg) 至每日1,000毫克/公斤體重的範圍，較佳之範圍爲大約1 至 100 mg/Kg/day。大體上，本發明化合物係以藥學組成物形式給藥，其係製成錠劑，藥九，囊，半固體，粉末，延遲釋出配製物 13 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝--------訂·！------· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1308569 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（Q ) ，溶液，懸浮液，甘香酏劑，或任何的其他適當組成物形式，及其組成通常爲式I化合物與至少一種藥學上可接受載體混合。可接受載體爲非毒性’幫助給藥’及對式I化合物之治療效益不具相反效應。這類賦形劑可爲任何的固體，液體或半固體。固態藥學賦形劑包含澱粉，纖維素，滑石，葡萄糖，乳糖，蔗糖，明膠，麥芽，米，麵粉，白堊，矽凝膠，硬脂酸鎂，硬脂酸鈉，單硬脂酸甘油酯，氯化鈉，無水之脫脂牛奶和相似者。液體和半固體賦形劑亦可選自水，乙醇 ’甘油，丙二醇和各種不同的油類，包括源自於石油，動物，蔬菜或合成的油類（例如花生油，大豆油，礦物油，芝麻油等）。較佳的液態載體，特別爲適用爲注射溶液者，包含水，鹽水，水性右旋糖和乙二醇。在組成物中的式I化合物數量可依據組成物種類，單位劑量大小，賦形劑種類和其他熟於藥學科學技藝者所習知之因素而廣泛地變化。大體上，最終組成物係包含化合物爲由 1%W/W 至 99%w/w，裒佳爲 1〇%w/w 至 9〇%w/w，最佳爲25%w/w至75%w/w ’其餘則爲一或多種賦形劑。該等藥學組成物係依據藥擧之習用技藝而製備。同樣爲本發明較佳具體鹫施例者爲一種藥學組成物，其包含治療有效數量之式I化合％ R-Q. 〇 II •P—N. 、x (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) I I I I — I 訂-- - -----

X (I)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 1308569 B7 五、發明說明（π ) 其中： X爲鹵素原子； Q爲NH，〇，S〇2-〇-，或S ;及 R爲氫，低碳烷基，經取代低碳烷基，芳基，R'CO-其中 R'爲氫，低碳烷基，芳基或雜環；或 R-Q共同爲鹵素或磺酸酯或胺基甲酸酯基，或其藥學上可接受鹽，及至少一種藥學上可接受載體。本發明進一步包括一種單獨使用一或多種式I化合物或其他藥理學試劑併用之藥學組成物給藥方法。本發明的較佳具體實施例包括一種倂用式治療，其中所使用之藥學組成物爲一或多種式I化合物與其他藥理學活性試劑倂用 ’該等藥理學活性試劑係選自包含抗生素，抗瘤劑，滅腫瘤劑’腫瘤靜止(tumorstatic)劑和相似者。此種倂用式治療的使用可由熟於此藝者依據一般藥學護理的可接受標準，以及基於一般的可接受臨床原則而簡易地施行。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -----------裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .% 本發明亦包括一種在哺乳動物體內的腫瘤且特別是癌症的治療方法，該方法包含給藥治療有效數羹之式丨化合物至所需之哺乳動物，

X

15 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1308569 A7 B7 五、發明說明（〆）其中： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) X爲鹵素原子； Q爲NH，〇，S〇2-〇-，或S ;及 R爲氫，低碳烷基，經取代低碳烷基，芳基，R'CO-其中 R'爲氫，低碳烷基，芳基或雜環；或 R-Q共同爲鹵素或磺酸酯或胺基甲酸酯基，或其藥學上可接受鹽。式I化合物的合成

X

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〆乂X (I) 式I化合物可依據上示之反應示意圖及下文之敘述而製備。 16 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1308569 A/ B7 五、發明說明（（r) 化合物B之製備可藉由三氯氧化磷與化合物A之雙 (2-鹵素乙基)胺鹵化物反應而得。反應混合物於惰性溶劑中反應。惰性溶劑可爲芳香族烴。將鹼加至反應混合物中，更佳者爲有機鹼如有機胺，最佳爲將三乙胺加至反應混合物內，然後該反應混合物在0-50°C下長時間地攪拌。將該混合物，通常爲懸浮液，加熱至〇-l〇〇°c且長時間地攪拌。然後冷卻混合物，使用吸收劑處理，例如碳粉，在室溫下攪拌及過濾。然後將溶劑移除而生成化合物B。接著將化合物B與化合物C反應。該反應係進行於極性溶劑中。將反應混合物攪拌/攪動然後冷卻。加入鹼性醇鹽至混合物，然後緩緩地加熱至0-50°C，及長時間地攪拌。將在水中之鹵化氫溶液，例如HC1，加至反應混合物中。收集有機部份，且水性部份使用與水不相混的非質子傳遞極性溶劑萃取（2 X 4 L)。與水不相混的非質子傳遞極性溶劑包括二氯甲烷，氯仿，和相似者。淸洗合倂的有機部份，及在減壓下移除溶劑。然後將所得到之該反應粗產物，式（I)化合物，淸洗且使用習用方式純化。更特而言之，化合物2 (參見下文之合成示意圖2) 之製備可藉由三氯氧化磷與1之雙(2-鹵素乙基)胺氫氯酸鹽反應而得。該反應混合物在例如甲苯，苯，二甲苯和相似者之溶劑中以適當之速率攪拌/攪動（而得到澄淸之溶液），及將三乙胺在超過5-30分鐘的期間加至反應混合物中。然後該反應混合物在室溫下長時間地攪拌。此混合物再加入額外量的雙(2-鹵素乙基)胺氫氯酸鹽和三乙胺。所得到之 17 本紙張尺用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） " - - ----- --------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂--------- % 1308569

Pi.1 ___B7 五、發明說明（）懸浮液加熱至溶劑的迴流溫度且攪拌16-24小時。然後將混合物冷卻至室溫且以碳粉處理’在室溫下攪拌2小時，然後經由矽藻土墊真空過濾。接著溶劑利用迴轉式蒸餾器在減壓下（30毫米汞柱，在50°C之最終水浴溫度）移除而得到化合物2。因此製備而得之化合物2與化合物3反應。該反應係進行於溶劑中，例如四氫呋喃，二氧雜環己烷，第三丁基甲基醚和相似者。反應混合物以適當之速率攪拌/攪動（而得到澄淸之溶液），及該混合物利用冰/水浴冷卻至〇°C。於該冷卻之溶液中在超過20分鐘期間加入三級丁醇鉀（ 362克，3.22莫耳）。然後緩緩地將反應混合物加熱至室溫且長時間地攪拌（16-24小時）。在水中之氯化氫溶液在該階段加至反應混合物中。收集有機部份，且水性部份使用乙酸乙酯萃取（2 X 4 L)。使用飽和的氯化鈉水溶液（1 X 4 L)淸洗合倂的有機部份，及溶劑利用迴轉式蒸餾器在減壓下（30毫米汞柱真空，在50°C之最終水浴溫度）移除。然後將所得到之該反應粗產物，式（I)化合物，淸洗且使用習用方式純化。在此合成中，反應物，例如三氯氧化磷，化合物1和 3，均爲商用品且係得自例如Aldrich，Fluka和Alfa。 .在合成特定的式I化合物時，可導入保護基並且在最後移除。對於胺基，羥基，羧基的適當保護基已由Greene 及其硏究同仁述於『有機合成中的保護基』，第二版，約翰維斯父子(John Wiley and Sons)，紐約，1991。一些衍生物 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 .%_ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1308569 A7 ____B7 五、發明說明（π ) 需要進行醇的酯化作用，其可藉由本技藝中所習知之方法達到（例如參見Larock ’『理解有機性轉移』，出版，紐約，1989)。因此’製備式I化合物的方法包含一或多個下列步驟 (a)式(2)化合物

X 與式(3)化合物反應； (3) ;或 (b) 以本身習知之方式加工(elaborating)式I化合物之取代基；或 (c) 將其中R爲氫及Q爲氧之式I化合物轉變爲其中R-Q 爲酯基之式I化合物；或 (d) 式I化合物之自由鹼與酸反應而得到藥學上可接受加成鹽；或 (e) 式I化合物之酸加成鹽與鹼反應而形成相對應之自由鹼；或 (f) 將式I化合物之鹽轉變爲另一個式I化合物之藥學上 19 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝--------訂--------- % 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1308569 B7 五、發明說明（（》）可接受鹽；或 (g)分離出任何比例式I化合物之外消旋混合物而得到其立體異構物。實施例下列所示之實施例足以使熟於此藝者更淸楚地了解和操作本發明。但它們並不應視爲限制本發明範圍，而僅用爲說明及代表。在合成實施例中，薄層色層分析法之進行係使用1〃 X 3"具有螢光指示劑之Analtech GF 350矽膠片。TLC片的觀察係在碘蒸氣進行。質子和碳核磁共振光譜可得自Bruker AC 300 MHz核磁共振儀，其係使用四甲基矽烷爲內部參考。熔點之得到係使用電熱熔點儀器且未經校正。紅外線光譜之取得係利用KBr圓片且使用Perkin-Elmer Spectrum 1000 FT-紅外線分光光度計。質子光譜分析係利用直接注射方式進行於Shimadzu QP-5000 GC/質量光譜儀（CI，甲烷 )。熱分析進行於Mettler Toledo DSC 821差示掃描卡計。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝訂--------- ^. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1308569 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（I?) 實施例1製備化合物3 (示意豳2) 製備N.N.N'.N、键氡乙基）二胺基磷醯氢（2) 在一個電加熱包中的12-L三頸圓底瓶上裝置高架機械攪拌器，迴流冷凝管和加套氮入口/出口擴散器的2-L壓力均衡加入漏斗。於燒瓶內加入三氯氧化磷（258毫升， 2.77莫耳），雙(2-氯乙基)胺氫氯酸鹽（ 495克，2.77莫耳 )，1，和甲苯（5升）。攪拌器設定在適當速率下攪動（因而得到澄淸溶液），及將三乙胺（812毫升，5·82莫耳）在超過10分鐘期間加至反應混合物中。然後反應混合物在室溫下攪拌26小時。在超過10分鐘期間，於混合物中加入雙(2-氯乙基)胺氫氯酸鹽（ 505克，2.83莫耳）和三乙胺（ 830毫升，6.11莫耳）。黃褐色的懸浮液加熱至甲苯迴流（ ll〇°C )及攪拌22小時。然後將混合物冷卻至室溫且以碳粉（500克）處理，在室溫下攪拌2小時然後經由矽藻土墊（1公斤）真空過濾。溶劑利用迴轉式蒸發器於減壓（ 30毫米汞柱，在50°C之最終水浴溫度）移除而生成紅棕色油狀體之队队屮，1^-肆(2-氯乙基）二胺基磷醯氯，2(979 克，97%產率）。於TLC分析中顯示出一點(Rf=〇,71 ；乙酸乙酯:己烷 1:1)。質子NMR光譜與商業可用物質一致。窗施例2 製備2-羥某乙某N.N.N'.N'-撻，某)二胺某磷酸酯 3 在一個12-L三頸圓底瓶上裝置高架機械攪拌器.，溫 21 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公髮） · 丨| ------------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ^ « — — ——It. %- 1308569 五、發明說明（w) 度計和氮入口/出口擴散器。於燒瓶內加入N，N，N'，N'·肆 (2-氯乙基）二胺基磷醯氯(2) ( 979克，2.65莫耳），乙二醇 (1.5升，26.8莫耳），4，和四氫呋喃（3升）。擾拌器設定在適當速率下攪動（因而得到澄淸溶液），及利用冰/水浴使混合物冷卻至0。(：。於超過20分鐘期間將第三丁醇鉀 (362克，3.22莫耳)加至己冷卻之溶液中。然後反應混合物緩緩地溫熱至室溫且總共攪拌19小時。在超過10分鐘期間，將在水中之氫氯酸溶液（8升，1M)加至燒瓶內。收集有機部份，且水性部份使用乙酸乙酯萃取（2 x 4 L)。使用飽和的氯化鈉水溶液淸洗合倂的有機部份（1 X 4 L) ’及溶劑利用迴轉式蒸餾器在減壓下（30毫米汞柱真空’在50 。(：之最終水浴溫度）移除而得到紅棕色油狀體。然後將該粗有機產物溶解於溫的（40°C)甲基第三丁基醚（2升）並冷卻至室溫，總共攪拌14小時。所得到之泥狀物在0°C 下攪拌30分鐘，之後藉由真空過濾收集沈澱物並以冷的甲基第三丁基醚（1升）淸洗。合倂之濾液利用迴轉式蒸發器於減壓（30毫米汞柱真空，在50°C之最終水浴溫度）濃縮至體積爲500毫升，及在0°C下攪拌30分鐘。所得到之沈澱物藉由真空過濾收集並以冷的甲基第三丁基醚（ 200毫升）淸洗。然後將兩次的固態產物合倂且乾燥隔夜（30毫米汞柱，40 °C )而生成暗棕色粉末之2-羥基乙基 N,N，N'，N'-肆(2-氯乙基)二胺基磷酸酯，3 ( 526克，50%產率）。TLC分析中顯示出一點（Rf=0.62 ;甲醇:氯仿1:9)。熔點：76-78°C ; IR (KBr) 3372，2957，1459，1344，1206 22 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝--------訂--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1308569 A7 五、發明說明（ >丨），1098，1053，929 cm·1 ; Ms (CI，甲烷）m/z 391 (ΜίΓ )’ 353 ’ 339 ’ 248 ’ 106。熱分析（DSC)所顯示之二個放熱分解範圍爲164-179和。表1顯示依據相似方法製得之化合物

R-Q 化合物 R-Q X MW 5 0H ~~ Br 568 6 NH2 Cl 389 7 Cl 406 8 Br Cl 453 9 Cl Cl 408 10 Br Br 631 實施例3製備化合物11 (示意圖3) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝--------訂---I---- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

Cl TsCl

CI

Ts0〜〇TN〜a cr 、α %. 11 在THF/H2〇 ( 1 : 1)中之化合物3 ( 0.780克，2毫莫耳）和IN NaOH (2毫升）溶液中加入在THF中的p-甲苯磺醯氯（TsCl，0.40克，2.1毫莫耳）溶液。反應混合物於室溫下攪拌24小時。混合物以二氯甲烷稀釋，且以1N HC1淸洗。有機層以鹽水淸洗，經K2C〇3乾燥，並濃縮爲 23 1308569 a7 B7 五、發明說明（）黏性油狀體，化合物11 ( 1.04克，96% )。表2顯示依據相似方式製得之化合物

X

化合物 R Q X 12 Ac 〇 Cl 13 PhCO 0 Cl 14 Ph S〇2-0- Cl 15 p-BrPh S〇2-0- Cl 16 p-NChPh S〇2-0- Cl 17 Me 〇 Cl 18 苯甲基〇 Cl 19 苯甲基〇 Br 20 p-MePh S〇2-0- Br 21 Ac NH Cl 22 PhCO NH Cl 23 p-MePhS〇2 NH Cl (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝--------訂-------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製窗施例4細胞生存力 RPMI 8322人類黑色素瘤細胞（ATCC)之培養係在 37t於MEM中並補充10%胎兒牛血淸，1%L-谷胺酸酯，和0.1%良他黴素(gentamicin)。那些細胞在96井微價板中以2 X 106的密度板化。二十四小時之後，介質以相同的介質替換，於其中加入最終濃度爲1//Μ至10 mM之測試化合物，及1%DMS0。細胞在存有化合物下成長額外的4天。化合物的每種濃度測試三次。細胞生存力之測量係使用監測染料（CellTiter 96™，Prcmega)新陳代謝轉變的標準 24 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）五、發明說明（w) 分析。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1308569 B7 化合物 # M,50%細胞生存力 3 410 6 >500 9 490 15 >500 16 >500 23 >500 y施俐5在大鼠由之抗臛瘤效應 7週大之雌性NCr-nu無胸腺(athymic)裸鼠係購自查爾斯河(Charles River)實驗室（Raliegh，NC)且在進行實驗之前於實驗室中預先環境適應一星期。這些動物飼養於微隔離籠中，每籠有五隻，置於12小時之明/暗循環。這些動物偶爾攝取過濾的無菌水和無菌的齧齒動物食物。每曰觀察這些動物，及注意臨床徵照，例如腫瘤縮減。腫瘤模式。將三十至四十毫克的MX-1人類乳房腫瘤片斷利用12-量規套管針皮下移植於靠近大鼠右邊腋部區域，並令其成長。在未開始治療前，該腫瘤可達75-196毫克的重量（大小爲 75-196 mm3) 15 藥物治療。連續五天經腹膜內給藥化合物3，劑量爲55， 75，和100毫克/公斤/劑量。化合物3係每日配製且在5 %乙醇/45%丙二醇/50% PBS中之濃度爲1〇毫克/毫升。在配製後4小時之內將該劑量溶液給藥予大鼠。化合物之投予係依據精確的體重，注射體積爲〇.1毫升/10克體里。腫瘤測量。測量所成長的腫瘤，且這些動物在開始治療的第一天開始每星期稱重兩次。腫瘤體積可利用厚度測量（ 25 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) J'=°

1308569 A7 87 五、發明說明（W) 釐米）來決定，及係使用橢圓球體的式子L X W2/2 = mm3 ，其中L和w爲每次測量所收集到的較大和較小尺寸。這個式子亦可用來計算腫瘤重量，其中假設單位密度爲1 mm3 = 1 mg 〇實驗期間爲在腫瘤植入之後共28天。任何動物的腫瘤達到4克重量時即在實驗終止之前犧牲。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂-------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制农 26 劑量 (mg/Kg) 非專一性死亡腫瘤消減無腫瘤雙倍大時天數部份消減完全消減 100 0/8 0 0 0/8 7.7 75 0/8 0 0 0/8 8.1 55 0/8 0 0 0/8 7.2 控制組PBS 0/8 6.6 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims

5 8 ο 3

4 :¾ 〇〇 8 99 ABCD

} I 纩夕於 I 六、中請專兩範圍 (灸_纟」1 1·一種以式I代表之化合物， R-Q* 其中： X爲氯或溴； Q爲〇或ΝΗ，及 R.爲氫；選擇性經一至三個氰基、鹵素、Cw烷氧基、硫基、硝基、胺基、或羥基取代之Cw烷基；或選擇性經一至三個鹵素、硝基或Cw烷基（選擇性經一至三個氰基、鹵素、C1.6院氧基、硫基、硝基、胺基 '或經基取代）之基團取代的苯基；或爲 R's〇2—，且R'爲選擇性經一至三個氰基、鹵素、c,.6烷氧基、硫基、硝基、胺基、或經基取代的C1 >6院基；或選擇性經一至三個鹵素、硝基、或Cw烷基（選擇性經一至三個氰基、鹵素、c,.6烷氧基、硫基、硝基、胺基、或羥基取代）之基團取代的苯基；或 R-Q —起爲氯，或其藥學上可接受的鹽。 2 ·根據申請專利圍第1項之化合物，其中X爲氯。 3 ·根據申請專利範圍第2項之化合物，其爲2-氯乙基-Ν,Ν，Ν' ,Ν'-肆(2-氯乙基)-二胺基磷酸酯。 4 ·根據申請專利範圍第1項之化合物， ] 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉A4規格(210 X 297公釐) ..........................裝..............訂................線 (請先閲讀背面之注意事項再塡窝本頁) .298895 ABCD 1308569 六、申請專利範圍其中： Q爲0或NH ;及 R爲氫；選擇性經一至三個氰基、鹵素、Cw烷氧基、硫基、硝基、胺基、或羥基取代之Cw烷基；或選擇性經一至三個鹵素、硝基或Cw烷基（選擇性經一至三個氰基、鹵素、C1.6院氧基、硫基、硝基、胺基、或經基取代）之基團取代的苯基；或爲 R'S〇2—，且R'爲選擇性經一至三個氰基、鹵素、Cw院氧基、硫基、硝基、胺基、或羥基取代的〇.6烷基；或選擇性經一至三個鹵素、硝基、或Cl.6烷基（選擇性經一至三個氰基、_素、Ci.4完氧基、硫基、硝基、胺基、或經基取代）之基團取代的苯基。 5 ·根據申請專利範圍第4項之化合物，其中X爲氯〇 6 ·根據申請專利圍第5項之化合物，其中Q爲氧。 7 ·根據申請專利圍第6項之化合物，其爲2-羥基乙基队队1^，1^'-肆(2-氯乙基)-二胺基磷酸酯。 8 ·根據申請專利範圍第6項之化合物，其中R爲 R ’ S〇2 —。 9 ·根據申請專利圍第8項之化合物，其爲： 2-(甲烷磺醯氧基）乙基N，N,N'，N'-肆（2-氯乙基）二胺基磷酸酯， 2-(苯磺醯氧基）乙基Ν,Ν,Ν',Ν'-肆(2-氯乙基）二胺基磷酸酯 ......................-!裝---------------1Τ——……I.....绫· (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1308569 六、申請專利範圍 2-((p-甲苯）磺醯氧基）乙基Ν,Ν,Ν' ,Ν'-肆(2-氯乙基）二胺基磷酸酯，. 2-((ρ-硝基苯）磺醯氧基）乙基Ν,Ν,Ν' ,Ν'-肆(2-氯乙基）二胺基磷酸酯，或 2-((ρ-溴苯）磺醯氧基）乙基Ν,Ν,Ν'，Ν'-肆(2-氯乙基）二胺基磷酸酯。 10 ·根據申請專利圍第9項之化合物’其爲2-((p-漠苯）磺醯氧基）乙基Ν,Ν,Ν'，N'-肆(2-氯乙基）-二胺基磷酸酯〇 11 .根據申請專利圍第1至1〇項中任一項之化合物，係用於製備治療腫瘤的藥劑。 12 · —種用於治療腫瘤之藥學組成物，其包含治療有效數量之如申請專利範圍第1至第10項中任一項之化合物，及至少一種藥學上可接受的載體。 13.—種根據申請專利範圍第1至10項中任一項之化合物的用途，係用於製備治療腫瘤的藥劑。本紙張尺度適用中國國家#準（CNSM4规格(2]0 X 297 ;釐） ---------------t----------------^ (請先閲讀背面之注意事項再頊寫本頁)