TWI296623B - - Google Patents

Description

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4 A 五、發明說明（1) 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種新穎的黃烧酮化合物，及含有黃烧 酮之抗氧化劑、抗菌劑、抗腫瘤劑、飲食品、化粧品、準 醫藥品及醫藥品。 【先前技術】 周知的黃烧酮化合物比如有尼姆非醇（nymphaeol) A、尼姆非醇B及尼姆非醇C等。關於該等周知的黃烷酮化 合物可參照’，Κ· Yakushijin，K· Shibayama，H. Murata and Η· Furukawa，蠟樹由來之新穎雙苯丙基黃烷酮（New prenyl flavanones from Hernand i a nymphaefolia(presl) Kubitzki), Heterocycles, 14, 397-402， 1980" 、”W· R· Philips, N. J· Baj· A· A· L· Gunatilaka and D· G· I· Kingston,構酸漿屬由來 之C -槐牛兒基化合物（C-Gernayl compounds from Mimulus Cleveland!i), J. Nat. Prod., 59, 495-497,1 996”、及” Μ· H· Tseng, C· H· Chou, Υ· M.

Chen and Y. H· Kuo,血桐落葉由來之具相剋作用之雙苯 丙基黃烧酮化合物（allelopathic prenylflavanones from the fallen leaves of Macaranga tanarius)， J. Nat· Prod, 64, 827-828，2001 ”。尼姆非醇 A 係從蝶樹 或構酸漿屬所單離。尼姆非醇B係從蠘樹單離。尼姆非醇 C係從蝶樹或血桐早離。但，至目前為止，該等黃烧酮化 合物所具有的生理活性幾乎都尚未被解明。 【發明内容】

五、發明說明（2) (發明之揭示） 本發明人等經過钫+ ^ 物所具有的生理活性，^九發現了周知的黃烷酮化合 現該新穎黃烷酮化合，且單離出新穎的黃烷酮化合物並發 該等發現，本發明之；：具=生理活性。本發明係基於 合物’其可適用於 口二”提供-種新穎的黃烷酮化 第二目的為提供一種或醫：品等各種用途。本發明之 或新穎黃貌_化合物二二==二物之用途，其係利用周知 為達成上述目/具有的有用生理活性。

所示之黃烷酮化合物。 本發明之另一個態樣

劑、抗菌劑、抗腫瘤劑 =3f士述頁烷酮之抗氧I 藥品。 飲食品、化粧品、準醫藥品及| 本發明之另一個態樣為 姆非醇β及尼姆非醇C4? 3有擇自尼姆非醇A、# 劑、抗菌劑、抗腫瘤劑二種黃烷酮化合物之抗氧化 藥品。 ㈠&食品、化粧品、準醫藥品及醫 1296623 五、發明說明（3) 【實施方式】 (據以發明實施之最佳形態） 以下，對本發明之第1實施形態加以說明。 第1實施形態之黃烷酮化合物為5, 7, 3,，4,-四羥基 -5’ -C -槐牛兒基黃烧酮 (5, 7, 3，4 -tetrahydroxy-5’ -C-geranylf lavanone(異尼 姆非醇-B))，係以構造式1

表示。

該黃烧酮化合物之分子 點為1 2 3〜1 2 6 °C (參照第3圖） 等由沖繩產的蜂蠟所單離之 黃烧酮化合物具有與聖草紛 5’位置上具有C-槐牛兒基， 性）為高。 式為C25H28 06 ’分子量424，融 。該黃烷酮化合物係本發明人 來自天然物的新穎化合物。該 類似之構造特徵，但因其在第 故較聖草酚之親油性（膜透過 該黃烧酮化合物具有斑取曾Λ t . u l草酚與α -生育醇 -tocopherol)同程度之高抗轰 物具有抑制乳癌細胞等癌細胞 ^ 2黃烷酮化合 嗯增殖之抗腫瘤作用。再者，

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1296623 五、發明說明（4) *---— 該黃烧_化合物具有誘導隨癌化而生之異常細胞 胞寿命之老化細胞等廢細胞除去之生理性細胞死1 】、、、田 凋零，apoptosis)之作用。又，該黃烷_化合物呈細胞 黃色葡萄球菌等革蘭氏陽性菌、桿菌屬等芽孢二對抗 用。 化_的抗菌作

第一實施形態之抗氧化劑係含有上述黃烷蜩化人 有效成分（抗氧化成分）。該抗氧化劑因可有效抑:匕為 氧化劣敗、香料之劣化、色素之分解、色素之褪色=之 製品之劣化（主要為氧化劣敗），故可利用為作為劣化f 劑添加於飲食品中。經由經口攝取含有上述抗氧化劑之 康食品等飲食品，上述黃烷酮化合物可消除活體内之活= 氧，並增強肝機能、降低乙醛毒性，發揮低密度膽固醇 (LDL)之抗氧化作用、乳癌細胞之增殖抑制作用、免疫 能改善等健康增進的效果。該抗氧化劑亦可利用為含於化 粧品或準醫藥品中，於此情形可發揮皮膚或口腔等之美 效果或防止老化等。 、

第1實施形態之抗菌劑係含有上述黃烷酮化合物為有 效成分。該抗菌劑比如可利用於添加於飲食品中以防止該 飲食品之腐敗。該抗菌劑亦可添加於醫藥品中，亦可作為 感染病治療藥或抗菌性化學療法藥等醫藥品利用。該抗菌 劑亦可添加於化粧品或準醫藥品中，於此情形可保持皮 膚、口腔、腋下等之清潔。 該抗菌劑當添加於飲食品、醫藥品、化粧品或準醫藥 品中時，該等製品中所含上述黃烷酮化合物之濃度較佳為

1296623 五、發明說明（5) l〇PPm以上，更佳為2〇PPm以上，又更佳為30〜1 000Ppm，特 佳為50〜1 000ppm。黃烷酮化合物之濃度若不滿lOppm，無 法充分發揮抗菌作用，反之，若超過100Oppm，則不經、 濟。 第1 μ施形態之抗腫瘤劑係含有上述黃烷酮化合物為 有效成刀主要係利用為醫藥品。作用於癌細胞時較佳、為 設定抗腫瘤劑之投予量，以黃烷酮化合物之濃度為01 /、 Μ 1 OOmM，更佳為1〇〜ι〇〇〇#Μ。黃烷酮化合物之濃度若不 滿〇· 1 //Μ，則治療效果小，反之若超過1〇〇mM，則不經 濟。 ，抗腫瘤劑之投予量換算為黃烷酮化合物，若為成人 時，每日較佳為〇·5〜1〇g，又以2〜5g更佳。若每曰之黃烷 酮化合物投予量不滿〇.5g，無法充分發揮抗腫瘤作用、，反 之丄若超過10g，則不經濟。若為小孩時’每日之黃烷酮 化3物投予量較佳為成人之半量左右。 上述黃烷酮化合物當被包含在飲食品（健康食品）、化 =品、準醫藥品時’該等製品因可促進將隨癌化產生之異 胞生Γ生除去，故亦可作為發揮預防癌症效 =士：利用。該製品若為醫藥品時，製品中黃烷酮 物之=度以卜5〇%左右較佳，又以10〜30%左右更佳。 ρΓΛ施Λ:態古之飲食品係含有上述黃院嗣化合物。該 飲中亦可含有上述抗氧化劑或抗菌劑。由於飲食品中 所έ上述黃烧酮化合物之抗冑 、 活體内之活性氧並作為可’故該飲食品可消除 免揮各種增進健康效果的健康食 ΙΗι 第11頁 2188-6398-PF(N2).ptd 1296623 五、發明說明（6) 品。飲食品中之上述黃烷酮化合物尚可蕤ώμ栳用 以防止飲食品劣化並提高飲食品的伴：J由t =:: 用以防止飲食品腐敗並提高飲食品或错由抗痛作 長時間安定的維持飲食品的品質：：=。藉此’可以 化合物尚可藉由抗腫瘤作用以促=了中之上述黃院酮 或達到細胞壽命之老化細，^癌化而生之異常細胞 該飲合口亦M m 4 、、胞專廢細胞之生理性除去。故， 該飫二印亦可利用為可發揮高 該飲食品之攝取量換笪& 政果之健康食°口 時，每曰較佳為〇 = 更烷明化合物，若為成人 烧酮化合物攝取量不滿0'，5又以二2,更佳。若每曰之黃 化合物之抗氧化作用，反之，若可月;^有1發揮黃烧嗣 第1實施形態具有以下優點71°2，則不經濟。 5 7 3第\實施：Λ%”嗣化合物為上述以構造式1所示之 ，’7’3，，4 _四叙基_5，-C-栊牛兒基黃烷酮 (5,7,3 ，4，-tetrahydroxy-5, r 、 用、抗腫瘤作用等，可利用於:二有抗乳”用、抗菌作 途。特別是，該黃烷酮化合物雖d::等各種用 機能健康食品材料之點具有價：可壤為代表之多 酮化合物除可利用於與聖草η:…該黃烷 =r較聖草酴為高之各者== 合物因含有於先前作為健康舍σ 丹者該只烷酮化 攝取或經皮投予都沒有問題：材科之蜂蠟中，故以經口 2188-6398-PF(N2).ptd 第12頁 1296623 五、發明說明（7) 第1貫施形態之抗氧化劑係含且古# 烷酮化合物為有效成分。故，者八二抗虱化作用之黃 食品、化粧品或準醫藥品中日夺：二匕劑被添加於飲 保存性，且經口攝取或經皮投予：防=專之劣化以提高 健康之效果或防止老化的=予可在活體内發揮增進 乂人第1實施形態之抗菌劑係含有具高抗菌作用之黃烧酮 化曰物為有效成分。故，當將_ 、 仆Μ 口七唯殺皱口士士 肘該抗菌劑被添加於飲食品、 匕粧口口或準wU時，可防止該等之腐敗以提高保存 性、、，且經皮投予化粧品或準醫藥品時，可發揮高 # 或消臭效果。該抗菌劑亦可作為醫藥品使用。 第1實施形態之抗腫瘤劑係含有具高抗腫瘤作用之 烷酮化合物為有效成分。故，抗腫瘤劑可 、古 治療效果，且可期待其預防效果。 m网 第1實施形態之飲食品（飲料或食品）含有具有 作用、抗腫瘤作用、抗菌作用等之黃烷酮化合物。故，誃 飲艮ua不僅可防止該飲食品本身之劣化及腐敗且可 活體内發揮健康增進效果、老化防止效果、新陳代謝增 5，、，症預防效果等多方面且有用的效果。又，若‘飲 食如中黃烷酮化合物之含有量設定為較低時，可藉由 酮化合物之劣化防止作用或腐敗防止作用，而 僅提高保存性之飲食品。 也侍到 以下’對本發明之第2實施形態加以說明。 第2實施形態之黃烷酮化合物含有擇自尼姆非、 尼姆非醇—B、尼姆非醇-C至少一種。

1296623 " ----- 、發明說明（8) 烷 尼姆非醇-B為5, 7, 3,，4,〜 四羥基-2’ -C-桅牛兒基黃 'tetrahydroxy'2,、c-geranyl^^^

參 8〇〜83。^ J二卞TJ^2511!8。6 :分子量424，融點為 的蜂蠟所單離之來自天】物^醇—Β係本發明人等由沖繩產 有盥聖草胳麵/ ”、、的有機化合物。尼姆非醇-Β具 ::2酚類似之構造特徵，但因其在第2，位置上 ' 土，故較聖草酚之親油性（膜透過性）為高。 綱(：，非醇_”5,7,3，，4，_四經基_6+魏牛兒基黃烧 係以構造式3 trahydrQXy_6_C_geranylf laVan〇ne)，

第14頁 1296623 五、發明說明（9)

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172〜lH非ΓΑ之分子式為，分子量424，融點為 產的蜂㈣第5圖）°尼姆非醇’本發明人等由沖繩 呈古&蠟所早離之來自天然物的有機化合物。尼姆非醇一A r姑止構特徵，但因其在第6位置上具有 c-槐牛兒基故較聖草盼之親油性（膜透過性）為高。 尼姆非醇-(；為5,7,3’，4，-四經基〜6〜（3,，，3,,,-二 甲基烯丙基）-2’-C-槐牛兒基黃烧酮 (5;7,3*,4'-tetrahydroxy-6-(3-*,3-« jdimetylallyl) -1 - C-gerany 1 f lavanone)，係以構造式 4

1296623 五、發明說明

表

尼姆非醇-C之分子A ®) ^ ^ # #-c ^ (tmM1 來自天然物的有機化合物。 、、’蠟所單離之 之構造特徵，但因其在第6位置姆具有與聖草齡類似 烯丙基且在第2,位置且有c— # /^'/3 ，3 -二甲基 草酚、β被非妒Λ /、有c拢牛兒基，故尼姆非醇—c較聖 高。bW及尼姆非醇—6之親油性（膜透過性）為 與聖尼姆非醇-c任-者皆具有 作用。又7户此月，（α cop 〇1)同程度之高抗氧化 比 ，尼姆非醇—A、尼姆非醇-B及尼姆非醇-c任一者 ^ 有抑制乳癌細胞等癌細胞增殖之抗腫瘤作用。尼姆非 醇-A及尼姆非醇—c抗腫瘤作用較尼姆非醇-B為高。再者， 2姆非醇—A、尼姆非醇-B及尼姆非醇-C任一者皆具有誘導 隨癌化而生之異常細胞或達到細胞壽命之老化細胞等廢細 胞除去之生理性細胞死亡（細胞凋零，ap〇pt〇sis)之作 第16頁 2188-6398-PF(N2).ptd 1296623

用。又，尼姆非醇且士心 菌、桿菌屬等芽孢菌：抗=色葡，菌等革蘭氏陽性 -C具有對抗大腸菌等尼姆；醇-A及尼姆非醇 ^ ^ 寸半蘭氏陰性菌的抗菌作用。 姆非醇—Β貝及施尼开二之醇抗化劑係含有擇自尼姆非醇-A、尼 ^ ^ ν Λ 有放抑制油脂之氧化劣敗、香料之 為氧化劣敗）/刀故Π·、*丨色素之褪色等各種製品之劣化（主要 中。經由經Π攝取含有上防止劑添加純食品

:、去Γ!、尼姆非醇一Β及尼姆非醇-c可消除活體内 固醇ni’之Λ強/貞能、$低乙酿毒十生’發揮低密度膽 口龄（LDL)之抗氧化作用、乳癌細胞之增殖抑制作用、 ί f Γ ί善等健Ϊ增進的效果。該抗氧化劑亦可利用為含 』匕粧品或準醫藥品中，於此情形可發揮皮膚或口腔等之 美白效果或防止老化等。

第2實施形態之抗菌劑係含有擇自尼姆非醇—a、尼姆 非醇-B及尼姆非醇-C至少一種為有效成分。該抗菌劑比如 可利用於添加於飲食品中以防止該飲食品之腐敗。該抗 劑亦可添加於醫藥品中，亦可作為感染病治療藥或^菌性 化學療法藥等醫藥品利用。該抗菌劑亦可添加於化粧品戈 準醫藥品中，於此情形可保持皮膚、口腔、腋下等之g 3 該抗菌劑當添加於飲食品、醫藥品、化粧品或準醫藥 品中時，該等製品中所含尼姆非醇一a、尼姆非醇一b及尼ς

1296623 五、發明說明（12) 非醇-c之濃度合計較佳為10ppm以上，更佳為15叩^以上， 又更佳為30〜l〇〇〇〇ppm，特佳為5〇〜1〇〇〇ppm。濃度合計若 不滿50Ppm，無法充分發揮抗菌作用，反之，若超過 1 OOOOppm，貝丨J不經濟° 第2實施形態之抗腫瘤劑係含有擇自尼姆非醇_a、 :ί 及尸：姆非醇—C至少一種為有效成/分，主要係利用 置，使尼姆非醇-A、尼姆非醇-Β及尼姆非醇：濃二+ 為〇. 1 "Μ〜lOOmM，更佳為1〇〜1〇〇〇 ς二°十 1 /^，則治療效果小，反 晨度σ计右不滿〇. 夂之右超過100mM，則不經濟。 該抗腫瘤劑之投予量換算為尼 及尼姆非醇-C，若A成人拄卜；P ^ A尼姆非醇-B 2〜5g更佳。若每= ϊ 1母曰較佳為0·5〜l〇g，又以 -C投予量不滿0.5g，】捏非醇-B及尼姆非醇 超，g，則不經濟。，若為小刀孩發時揮抗腫瘤作用，反之，若 尼姆非醇-B及尼姆非醇—c投、母日之尼姆非醇— A、 若擇自尼姆非m::車;，為成人之半量… 種被包含在飲食品(健康食品）、醇-c至少-等製品因可促進將隨癌化產生之^t醫樂品時，該 除去’故亦可作為發揮預防癌症效果廢細胞生理性 若為醫藥品時，製口由ρ4 ^文果之製品利用。該製品 醇-C之：農声人斗 °口中匕姆非醇—Α、尼姆非醇-Β及尼娌北 第2實施形態 之飲食品係含有擇自 尼姆非醇-A、尼姆

1296623 五、發明說明（13) f及尼姆非醇—C至少一種。該飲食品中亦可含有上述 抗f化劑或抗菌劑。由於飲食品中所含尼姆非醇—A、尼姆 非醇-B及尼姆非醇—C之抗氧化作用，故該飲食品可消除活 ，内之活性氧並作為可發揮各種增進健康效果的健康食 :μ飲食品中之尼姆非醇—A、尼姆非醇-B及尼姆非醇—C尚 在ψ!由t ^防止作用以防止飲食品劣化並提高飲食品的保 保存性:：ί抗菌作用以防止飲食品腐敗並提高飲食品的 Γ 0 . a * ，可以長時間安定的維持飲食品的品質。飲 艮品中之尼姆非醇-A、#嫉韭辟_β a。 貝飲 抗腫瘤作用以促進隨癌化= = = = 尚可藉由 之老化細胞等廢細胞之生理性達到細胞壽命 用為可發揮高健唐> % ’、文，該飲食品亦可利 ^I輝冋健康增進效果之健康食品。 尼姆非醇-;，2u异？尼姆非醇-a、尼姆非醇-b及 2,更佳。若每日之攝^量^較佳為U5]Gg，又以〇. 揮尼姆非醇-A、尼姆非J她〇5g ’可能無法有效發 反之，若超過10g，則及。匕姆非醇-c之抗氧化作用， Ϊ2姆實二^ 有抗氧化作用、抗菌作=非醇-C任—者皆因具 品或醫藥品等各種用 几瘤作用等，可利用於飲舍 之多方面作用，於Ϊ 化合物，但可同時發揎：” 材料之點二賈：可用於以蜂蠛為代表之多類 八有饧值，受到重視。又 f機靶健康食品 尼姆非醇'A、尼姆非 2188-6398.PF(N2).ptd 第19頁 1296623

醇-B及尼姆非醇一[ 可應用於利用親油 姆非醇-A、尼姆非 康食品材料之蜂蠛 題。 除可利用於與聖草 性較聖草酚為高之 醇—B及尼姆非醇-C 中，故以經口攝取 紛同樣用途以外，亦 各種用途中。再者尼 因含有於先前作為健 或經皮投予都沒有問 第2實施形態之抗氧化 尼姆非醇-A、尼姐非辟D 3有/、同抗虱化作用之擇自 分。故，當將計ϋ 姆非醇_c至少一種為有效治 荜品中時，丌^ Γ化劑被添加於飲食品、化粧品或準響

或經皮投予時，可在、、舌栌肉淼j k回保存性，且經口攝卑 化的效果。 在活體内發揮增進健康之效果或防止走 非醇A實尸菌劑含有具高抗菌作用之擇自尼姆 -、匕姆非醇-B及尼姆非醇_c至少一種為有效成分< j，备將該抗菌劑被添加於飲食品、化粧品或準醫藥品^ Γ淮^止該等之腐敗以提高保存性，且經皮投予化粧』 或準醫樂品時，可發揮高衛生效果或消臭效果。該抗 亦可作為醫藥品使用。 第2實施形態之抗腫瘤劑含有具高抗腫瘤作用之擇自

^姆非醇-A、尼姆非醇—B及尼姆非醇_c至少一種為有效成 分。故，抗腫瘤劑可發揮對癌症之高治療效果，且可期待 其預防效果。 第2實施形態之飲食品（飲料或食品）含有具有抗氧化 作用、抗腫瘤作用、抗菌作用等之擇自尼姆非醇—A、尼姆 非醇-B及尼姆非醇-C至少一種。故，該飲食品不僅可防止

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該飲食品本身之劣化及腐敗 進效果、老化防止效果新陸：同時在活體内發揮健康增 果等多方面且有用的；果新，增進效果、癌症預防效 -A、尼姆非醇_8及尼：將飲食品中尼姆非醇 藉由尼姆非醇_A、尼姆〇含有量設定為較低時，可 用或腐拜防止作用，而容& _及尼姆非醇-c之劣化防止作 品。 作用而谷易地得到僅提高保存性之飲食 5卜下人舉/施例進一步具體說明本發明。 〈化合物之單離〉 將乙醇5〇〇ml加入沖繩產 分鐘超音波處理。 吟喂原體，中’並進订數 物，將得5丨丨夕—％'孤攪拌一晚後，以過濾除去殘留 39 73g。纟a卒取液藉由減壓濃縮得到乙醇萃取物 析】下ί:將前述乙醇萃取液用於以下條件之管柱層 ^ " )(11)之各提取溶劑得到11個提取部分。 e柱：玻璃管柱5.Ox 45cm 充填劑：矽膠約590cm3 提取溶劑（1)己烷 乙酸 (2)己烷 乙酸 (3)己烷 乙酸 (4)己烷 乙酸 (5)己烷 乙酸 (6 )己烧 乙酸 (Ό己烧 乙酸 (8)己烷 乙酸 乙酉旨= 9〇:l〇( 350ml) 乙酉旨= 8 0:20 ( 220ml) 乙酯 ”〇:3〇( 250ml) 乙酯=60:40(1000ml) 乙酉旨= 5 0:50 (200ml) 乙酉旨= 4〇:6〇(100ml) 乙 _=30:70(100ml) 乙酉旨= 2 0:80 ( 1 00ml)

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(9)己烷：乙酸乙酯=1〇:9〇(1〇〇1111) (1〇)乙酸乙酯（2〇〇ml) (Η)甲醇（ 700ml) 將所得到之各部分依以下HPLC條件1分析的結果，確 認以（4)之提取溶劑所提取之部分（第4部分）中含有4個主 要成分。 HPLC條件1 管柱：YMC-pack R&D 〇DS(4.6 x 250mm) 溶劑：A:水（2%乙酸）、β:乙腈（2%乙酸） 提取條件：〇〜60分鐘（梯度提取，α:β = 80:20 —Α:Β = 20·· 80) 流速：1毫升/分鐘 檢測：U V 2 8 0 n m 其次，使用第4部分依HPLC條件2進行提取及純化，離 析出化合物1(產量61· lmg)、化合物2(產量65· 7mg)、化合 物3(產量99· 8mg)。進一步，使用第4部分依HpLC條件3進 行提取及純化，離析出化合物4 (產量2〇. 〇mg)。 HPLC條件2 管柱：YMC-pack R&D ODS( 20 x 200_) 溶劑：水（0· 1%TFA):乙腈（0· 1%TFA) = 40:60 流速：9毫升/分鐘 檢測：UV280nm HPLC條件3

2188-6398-PF(N2).ptd 第22頁 1296623 五、發明說明（17) 管柱：YMC-pack R&D ODS( 20 x 200mm) 溶劑：水（0.1%TFA):乙腈（〇.l%TFA) = 20:80 流速：9毫升/分鐘 檢測：UV280nm 〈化合物1〜4之鑑定〉 以1 H-NMR、13C-NMR、MS、IR、UV光譜等解析上述化合 物1〜4之構造。 (化合物l:compound 1)

化合物1之物理化學特性如第1圖所示。依ESI-MS之測 定確認化合物1之分子量為424。由IR光譜顯示3420cm-1處 有經基、1680cm_1處有敌基存在。又，於UV光譜中顯示有 烷黃酮或烷黃醇之光譜特徵，故推定化合物1具有烷黃酮 骨架。由1 H-NMR光譜之積分值確認有28個質子，於13C_NMR 光譜之積分值觀測到有25根信號，由DEPT光譜，確認有3 個曱基、4個亞甲基、7個次甲基及11個4級碳原子。由以 上結果，推定化合物1之分子式為C25 H28 06。再者，由第2圖 所示關於HSQC光譜、U」!！ COSY、HMBC光譜、CD光譜之NMR 數據，鑑定化合物1為上述構造式2所示之尼姆非醇 -B(5，7，3’，4’ -tetrahydroxy-2’-C-geranylflavanone) 。本化合物由蠟樹析離已經有被報告過，但由蜂蠟離析則 是本研究為首度。 (化合物2:compound 2) 化合物2之物理化學特性如第3圖所示。依ESI-MS之測

2188-6398-PF(N2).ptd 第23頁 1296623 五、發明說明（18) 定確認化合物2之分子量為424。由IR光譜顯示3360cm-1處 有經基、1 680cm-1處有羧基存在。又，於uv光譜中顯示有 烧黃酮或烷黃醇之光譜特徵，故推定化合·物2具有烷黃酮 骨架。由1 H-NMR光譜之積分值確認有28個質子，於i3c-NMR 光譜之積分值觀測到有25根信號，由DEPT光譜，確認有3 個甲基、4個亞曱基、8個次曱基及11個4級碳原子。由以 上結果，推定化合物2之分子式為c25H28 06。再者，由第4圖 所示關於HSQC光譜、丨11」11 COSY、HMBC光譜、CD光譜之NMR 數據’鑑疋化合物2為上述構造式1所示之 5,7，3，4 -tetrahydroxy-5’-C-geranylflavanone。本化 合物為至今文獻未曾記載之新穎化合物。 (化合物3:compound 3) 化合物3之物理化學特性如第5圖所示。依ESI-MS之測 定確認化合物3之分子量為424。由IR光譜顯示3380CIT1處 有經基、1 680cm-1處有羧基存在。又，於uv光譜中顯示有 烧黃酮或烷黃醇之光譜特徵，故推定化合物3具有烷黃酮 骨架。由1 H-NMR光譜之積分值確認有28個質子，於13C-NMR 光譜之積分值觀測到有25根信號，由DEPT光譜，確認有3 個甲基、4個亞甲基、7個次甲基及11個4級碳原子。由以 上結果，推定化合物3之分子式為C25H28 06。再者，由第6圖 所示關於HSQC光譜、iH」H COSY、HMBC光譜、CD光譜之NMR 數據，鑑定化合物3為上述構造式3所示之尼姆非醇 -A(5,7,3’，4’-tetrahydroxy-6-C-geranylflavanone)。 本化合物由蠟樹及構酸漿屬析離已經有被報告過，但由蜂

2188-6398-PF(N2).ptd 第24頁 1296623 五、發明說明（19) 蠟離析則是本研究為首度。 (化合物4:compound 4) 化合物4之物理化學特性如第7圖所示。依ESI—MS之測 定確認化合物4之分子量為492。由IR光譜顯示3400cm-1處 有羥基、1 640cm-1處有羧基存在。又，於uv光譜中顯示有 烷黃酮或烷黃醇之光譜特徵，故推定化合物4具有烷黃酮 骨架。由1 H-NMR光譜之積分值確認有36個質子，於13C-NMR 光譜之積分值推定有30個碳存在，由DEPT光譜，確認有5 個曱基、5個亞曱基、7個次甲基及1 3個4級碳原子。由以 上結果，推定化合物4之分子式為C3GH36 06。再者，由第8圖 所示關於HSQC光譜、W」!！ COSY、HMBC光譜、CD光譜之NMR 數據，鑑定化合物4為上述構造式4所示之尼姆非醇 -C(5,7,3’，4’ -tetrahydroxy-6-(3,，，，3，，，-dimetylally 1)-2’ -C-geranylf lavanone)。本化合物由蠟樹及血桐 (Macaranga tanarius)析離已經有被報告過，但由蜂蠟離 析則是本研究為首度。 〈蜂蠟中含有量之測定〉 依下述HPLC條件4分析沖繩產蜂蠟中所含上述化合物 卜4之含量。其結果，確認沖繩產蜂蠟原體1〇〇g中含有化 合物1 12.7g、化合物2 10.5g、化合物3 13.5g、化合物4 9· lg 〇 HPLC條件4 管柱：YMC-pack R&D 0DS(4.6 x 250mm) 溶劑：A:水（〇· 1%TFA)、B:乙腈（0· 1%TFA)

2188-6398-PF(N2).ptd 第25頁 1296623 五、發明說明（20) 提取條件：〇〜50分鐘（梯度提取，A:B = 65:35 A:B=0:100) 流速：1毫升/分鐘 檢測：UV280nm <DPPH自由基捕捉活性試驗>

DPPH(a，α-二苯基-/5-苦味肼基團，α， α -diphenyl - /3—pi cry lhydradil)為於517nm 具有極大吸收 之备、色女疋自由基’當得到氫時會變為無色之聯胺。利用 此呈色反應以測定化合物丨〜4等之自由基捕捉活性。亦 即’、藉由將化合物1〜4分別溶解於乙醇中以調製濃度2 5〆μ 之试樣溶液3ml。接著，於各試樣溶液中加入〇.5mM之DPPH 溶液（溶劑為乙醇）〇· 75ml並攪拌，於暗處反應時後， 於517nm測定吸光度。又，以BHT( 丁基羥基曱苯）、“ 一生 育醇及聖草酚取代化合物卜4以與上述同樣的步驟測定吸 光度。再者，以乙醇取代前述試樣溶液作為對照，以與上 述同樣的步驟測定吸光度。並且，依下述計算式1算出各 物質之自由基捕捉活性（％)。結果如下述表1所示。又，表 1所示之任一值皆為由3次試驗所得到值之平均值及標準偏

計算式1 自由基補捉活性=組之吸光度-言⑭液之吸无度 對照组之吸光度

2188-6398-PF(N2).ptd 第26頁 1296623 五、發明說明（21) 表1 試樣 DPPH自由基捕捉活性試驗 自由基捕捉活性0¼) P-胡蘿蔔素褪色試驗 抗氡化活性(％) 化合物1 55.35+0.43 85.54+2.24 化合物2 49.86+0.96 78.07+1.79 化合物3 64.00+0.58 60.62+1.16 化合物4 50.79+0.08 90.06+0.29 BHT 28.51+7.48 85.02+1.89 α-生育醇 58.87+1.24 93.00+0.73 聖草酚 58.82+1.12 81.47+2.48 由表1的結果可以了解，化合物1〜4任一者之自由基捕捉活 性皆較BHT為高，並具有與α -生育醇約同程度之自由基捕 捉活性。其中以化合物3之自由基捕捉活性最高，其活性 約與聖草齡同等。化合物1、3、4為已知的物質，但先前 未曾有關於該等化合物自由基捕捉活性之探討，該等化合 物具有非常向自由基捕捉活性係在本研究中首度解明。 〈石-胡蘿蔔素褪色試驗〉 冷-胡蘿萄素會因亞麻油酸自氧化所產生之亞麻油酸 過氧化物與沒-胡蘿_素之雙鍵反應而褪色。利用此現象 測定化合物1〜4等之抗氧化活性。即，首先混合2〇〇mg/mi 之Tween40氯仿溶液2ml、100mg/ml之亞麻油酸氯仿溶液〇· 4ml及0· lmg/ml之胡蘿葡素氯仿溶液3ml後，用氮氣除 去溶劑。接著，加入蒸顧水1 0 0 m 1藉由充分攪拌以得到乳 化物。於此乳化物3 m 1内加入乙醇使溶質完全溶解於溶劑 中。之後，藉由混合將化合物1〜4分別溶解於乙醇以調製

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之濃度1·2ηιΜ試樣溶液5〇以，以調製反應液（試樣反應 液）。。此時反應液中化合物卜4之濃度為2()/^。將反應液 於6 0 C /皿月6 0为鐘，對溫育前之反應液及溫育後之反應液 f定470nm之吸光度。又，以ΒΗΤ( 丁基羥基甲苯）、q 一生 二f及聖草酚取代化合物丨〜4以與上述同樣的步驟測定溫 育前後反應液之吸光度。再者，調配不含試樣溶液之反應 對照反應液）作為對照，以與上述同樣的步驟測定溫育 前後反應液之吸光度。並且，依下述計算式2算出各物質 之抗氧化活性（％)。結果如上表1所示。又，表1所示之任 一值皆為由3次試驗所得到值之平均值及標準偏差。 計算式2 抗氡化活性= 對照组之褪色速度一試樣溶液之褪色速度 ^照组之褪色速度 X 100 惟，計算式2中，對照組之褪色速度係將溫育前對照 反應液之吸光度除以溫育後對照反應液之吸光度，再除以 6 0所得到值之自然對數。又，試樣溶液之褪色速度係將溫 育前試樣反應液之吸光度除以溫育後試樣反應液之吸光 度，再除以6 0所得到值之自然對數。

由表1的結果，確認化合物2具有與BHT、α -生育醇及 聖草酚大致同等之高抗氧化活性。 由表1的結果確認化合物卜4任一者皆具有高抗氧化活 性，特別是化合物1、2、4具有與ΒΗΤ、α -生育醇及聖草 酚大致同等之高抗氧化活性。化合物1、3、4為已知的物

2188-6398-PF(N2).ptd 第28頁 1296623 五、發明說明（23) ί化ίί前ίΐ有關於該等化合物抗氧化活性之探討，該 /Λ&η抗氧化活性係在本研究中首度解明。 〈乳癌細胞增殖抑制試驗> :培養乳癌細胞（MCF_7)時若添加具 用之雌二醇（17点-Estradiol)， 琨作 促進乳癌細胞之增殖1用此J 地的在短期間内 $各八中各播種2χ 103之乳癌細胞（MCF_7)，並於4小% 添加雌二醇及試樣溶液。對各、 樣溶液量為使雌二醇終濃度為〇·1ηΜ“= 液雌 更2換° 時間後（3日或5日）， =養基並添加培養基10%量之酵素溶液( 一8(cell count kit-8):和光）。协吐盖# τ 数當’、、 時後，以分光光度計測定波長45〇二(參：::C2小 吸光度以定量各部分中之活細胞數。…、· 63〇nm)之 又，培養5日之部分係於培養第3日更換谇 ㈣H«溶液繼續培養至第5日。培養；^U 部分係於播種細胞4小時後添加酵素溶液 j，0日之 持37 t 2小時後，測定吸光度。 、。蚕相内保 用聖卓酚取代化合物卜4，以盎卜、+、门從 吸光度，以定量各部>中之活細胞'數;4又同樣的步驟測定 醇及試樣者作為對照組1，以與上述’ M不添加雌工 度，以定量各部分中之活細胞數，並以、’驟測定吸光 龙以不添加試樣者作3

1296623 五、發明說明（24) 對照組2，以與上述同樣的步驟測定吸光度，以定量各部 分中之活細胞數。 表2表示以對照組1於第0日所定量之活細胞數定為1 時，上述各試驗中所定量之活細胞數的相對值。又，表2 所示之任一值皆為8個穴所得到值之平均值及標準偏差。 表2 試樣 活細胞數之相對值 培養苐0曰 培養苐3 3 培養第5 3 對照組1 1.00 土 0.07 2.45+0.12 3.29±0.08 對照組2 (O.lnM 雌二醇） 0.97+0.04 3.12+0.34 7.02+0.99 聖草酚 0.2μ,Μ 0.96+0.04 2·88±0·22 7.33±0.60 2μ,Μ 0.98+0.07 2.90+0.13 7.16±0.36 20μ,Μ 1.01±0.05 2.54±0.30 5.13±0.62 化合物1 0.2μ,Μ 0.98+0.04 2.86+0.14 7.26+0.48 2μ,Μ 0.99+0.05 2.58±0.11 6.01 土 0.25 20μ,Μ 1.01±0.05 2.22±0.19 4.17±0.50 化合物2 0.2μ,Μ 0.95 土 0.04 2.97土0.37 6.83+0.58 2μΜ 0.99±0.04 2.68 土 0.19 6.59+0.50 20\ιΜ 1·00±0.07 2.59±0.21 5.59+1.01 化合物3 0.2μΜ 0.99+0.05 2.94+0.20 6.99+0.66 2μ.Μ 1.01±0·05 2.53+0.30 5.38±0.44 20μΜ 0.96+0.04 1.21±0.22 0.89±0.12 化合物4 0.2μ,Μ 0.99 土 0.04 2.97+0.27 6.30+0.54 2μ,Μ 1.00±0.07 3.03±0.30 6.41±0.53 2〇ttM 0.98±0.04 1.27+0.20 1.01±0.12 表2的結果雖有若干差異，但可認為化合物卜4任一者皆具 有抑制乳癌細胞增殖的效果。又，可了解抑制乳癌細胞增

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殖=化合物卜4其效果依存於濃度。特別是添加化合物3、 果分被認為較對照組1之乳癌細胞增造的抑制效 果（對礼癌細胞之細胞毒性）為強。化合物丨、3、4 癌活性知的物質，作先俞去祕古關Μ 、 ^ 的祕“ * 纟曰有關於該等化合物抑制癌細 匕曰殖作用之探討’該等化合物具有非f高抗腫瘤活性係 在本研究中首度解明。 μ 〈使用乙醇萃取物之抗菌活性試驗〉 化合物卜4之抗菌活性評價係使用大腸桿菌（E c〇h， = 003366)作為革蘭氏陰性菌之指標菌，金黃色葡萄球菌

cst^hyi〇c〇ccus aerus，IF〇15〇35)作為革蘭氏陽性菌 之才曰私菌，仙人掌桿菌（Baci i lus cereus，if〇153〇5t)作 為對熱殺菌製程亦具有耐性之芽孢菌之指標菌，以分離自 劣敗罐頭之凝結芽孢桿菌（gacillus 作為罐頭 劣敗原因菌之指標菌。亦即，將蜂蠟原體之乙醇萃取物 (參照〈化合物之離析〉攔）溶解於70%乙醇後，將該萃取物 之濃度調配為〇ppm、12 5ppm、25ppm、5〇ppm、1〇〇ppm、

1 5 0pp^n ’ =製作標準瓊脂培養基。接著，將該標準瓊脂培 ，基，由高溫高壓滅菌釜殺菌以製作評價培養基。將上述 指標菌分別接種於該等評價培養基内並確認生長。其結 果’確認隨乙醇萃取物之濃度升高，對指標菌生長的阻礙 愈強。特別是’當乙醇萃取物之濃度為30ρριη以上或50ppm 以上時’從培養基上檢測不出任一者之指標菌。又，事先 已確認過70%乙醇對於各指標菌之生長幾乎沒有影響。 〈使用化合物1〜4之抗菌活性試驗〉

1296623 五、發明說明（26) 化合物卜4之抗菌活性評價係使用大腸桿菌（E. c〇1 土） 及腸炎沙門氏菌（Salmonella enteritidis)(JS en， NBRC3313)作為革蘭氏陰性菌之指標菌，金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aerus)(Sta·) 作為革蘭氏陽性菌之指 標菌，仙人掌桿菌（Bacillus cereus)(B.ce)作為芽孢菌 之指標菌。亦即，將化合物1〜4分別溶解於7 〇 %乙醇後，將 該化合物之濃度調配為〇ppm、5ppm、l〇ppm、i5ppm、 2 0ppm、5 0ppm，以製作標準瓊脂培養基。接著，將該標準 壤月曰培養基藉由局溫南壓滅菌蒼殺菌以製作評價典養美。 將上述指標菌分別接種於該等評價培養基内。將^菌二養 後，測定各培養皿内之菌數（CFU/培養皿）。其結果^示 於表3及表4。 '

1296623 五、發明說明（27) 表3

試樣濃度 菌數（CFIJ/培養如〇 革蘭氏R H生菌 革蘭氏陽性菌 芽孢菌 E.coli S.en Sta. B.ce Oppm >3000 >3000 470 13 化合物1 5ppm >3000 >3000 344 12 lOppm >3000 >3000 36 0 15ppm >3000 >3000 0 0 20ppm >3000 >3000 0 0 50ppm >3000 >3000 0 0 化合物2 5ppm >3000 >3000 395 17 lOppm >3000 >3000 108 0 15ppm >3000 >3000 22 0 20ppm >3000 >3000 0 0 50ppm >3000 >3000 0 0 IH· 第33頁 2188-6398-PF(N2).ptd 1296623 五、發明說明（28) 表4 試樣滾度 菌數（CFIJ/培養赋） 革蘭氏陰性菌 革蘭氏陽性菌 芽孢菌 E.coli S.en Sta. B.ce Oppm 5 221 202 183 化合物3 5ppm 3 296 22 4 lOppm 1 207 0 0 15ppm 0 116 0 0 20ppm 0 143 0 0 50ppm 0 43 0 0 化合物4 5ppm 6 249 26 16 lOppm 6 199 7 0 15ppm 9 225 10 0 20ppm 6 132 1 0 50ppm 0 65 0 0 由表3的結果可以了解，隨化合物1或化合物2濃度之升 面’對革蘭氏陽性菌及芽孢菌生長之阻礙愈強。又，亦可 了解’不論化合物1或化合物2之濃度，幾乎不會對ε· c〇 1 i 及s· en造成影響。又，從此結果可了解，當含有化合 或，合物2於飲食品、醫療品、化粧品或準醫藥品中作為 抗菌成分時’該等製品中化合物1或化合物2之濃度較佳為 lOppm以上’又以i5ppm以上更佳。 ^由表4的結果可以了解，化合物3及化合物4對所有的 指標菌皆有抗菌活性，特別對於E c〇li、sta•及B ce具有 高抗菌活性。又，從此結果可了解，若含有化合物3於飲 食品、醫療品、化粧品或準醫藥品中作為抗菌成分時，該

1296623 五、發明說明（29) 等製品中化合物3之濃度較佳為ι〇ρρπι以上，又以15ppm# 上更佳。又，從此結果可了解，若含有化合物4於飲食 品、醫療品、化粧品或準醫藥品中作為抗菌成分時，該等 了 2合Ϊ4先之^農破度^交二為1〇PPm以上，又以5〇PPm以上 乎沒有影響。 f於各指標菌之生長幾

2188-6398-PF(N2).ptd 第35頁 1296623 圖式簡單說明 · —— 第1圖為實施例之化合物1之化學物理特性敕王 第2圖表示實施例之化合物1之NMR數據表。 表 第3圖為實施例之化合物2之化學物理特性整理表。 第4圖表示實施例之化合物2之NMR數據表。 第5圖為實施例之化合物3之化學物理特性整理表。 第6圖表示實施例之化合物3之N M R數據表。 第7圖為實施例之化合物4之化學物理特性整理表。 第8圖表示實施例之化合物4之NMR數據表。

2188-6398-PF(N2).ptd 第36頁

Claims (1)

1296623 案號 93117690 六、申請專利範圍… 物， 特徵為以構造式：

1· 一種黃烧酮化合 表示 之 2 · —種抗氧化劑，牲~ 廿I- ,η几人从 為含有申請專利範圍第1項 更烧酮化合物。 3. 烷酮化合物 種抗菌劑，特徵為含有申請專 利範圍第1項之黃 之 4 · 一種抗腫瘤劑，姓~ 黃烷酮化合物。 特域為含有申請專利範圍第1項 5· 一種飲食品，特料劣 烧_化合物。 #為含有申請專利範圍第!項之黃 如丄請廿專㈣圍第5項之飲食品，，中該飲食品中 所“之則述頁烷酮化合物濃度為50卿以上。 7 .如义申明專利範圍第5項之飲食品，其中該飲食品中 所含有之岫述黃烷酮化合物濃度為5〇1〇〇〇〇ppm。 8. 一種化粧品’特徵為含有申請專利範圍第1項之黃 烷酮化合物。 特徵為含有申請專利範圍第1項 9 · 一種藥用化妝品， 之黃烧酮化合物。

2188-6398-PFl(N2).ptc 第37頁 案號 93117690 1296623 修正 曰 六、申請專利範圍 10· 一種用於抗氧化、技结々4工陆产 為含有*請專利範圍第i項之二或广Μ瘤之醫藥品，特徵 只之頁烷酮化合物。 11· 一種抗氧化劑，牲外&人> t (nymphae〇1-A)、尼姆非醇特„擇自尼姆非醇-A uy_ae〇1-C)至少一種：:B(:ymphaeol-B)及尼姆非醇-c 裡 < 頁烷酮化合物。 12· 一種抗菌劑，牿料&人丄 非醇-B及尼姆非醇-C至少一種:廿，自尼姆非醇_A、尼姆 13. -種抗腫瘤劑，特化合物。 姆非醇-B及尼姆非醇-C至少插3廿擇自尼姆非醇-A、尼 14. 一種飲食S，特頁烧嗣化合物。 非醇-B及尼姆非醇-C至少:自尼姆非醇-A、尼姆 1 5 .如申請專利範圍第j ::::合物。 中所含有之該黃，嗣化合物濃度為sV二上…^ 16·如申睛專利範圍第1 4項之飲今口 中所含有之該黃烷酮化合物濃、 i =，/、中該飲食品 17 你 ， 口物 /晨度為 30 〜10〇〇〇ρρπι 〇 17· 一種化粧品，特徵為含有擇自尼姆 非醇-B及尼姆非醇-C至少一 b姆非知—A、尼姆 w -種藥用化妝品，=合物。 尼姆非醇-B及尼姆非醇-c二種3 ”自尼姆非醇-A、 19.-種用於抗氧化；菌；；黃烧酮化合物。 為含有擇自尼姆非醇-A、尼^^腫瘤之醫藥品，特徵 種之黃烧酮化合物。尼姆非m尼姆㈣_c至少一 第38頁 2188-6398-PFl(N2).ptc 129觸 17690號中文圖式修正本 修正日期：96.8i〇

化合物1—化學物理特性 外觀 分子式 ESI - MS (m/z) 正離子： 負離子： UV Am«H nm (ε) IR (KBr) cnf1 [q?]d4 (c 0.2, MeOH) [alo (c 0.2, CHCI3) MP 白色粉末 〇25Η28〇6 425.3 (M+H)+ 423.5 (Μ-ΗΓ 288.5 (19,674) 3420r 2960, 2920, 1680, 1600, 1160 -5.8° +20.0° 80〜83°C CD (MeOH) Θ/deg 8470 (330) -46997 (290)，12833 (255) 1296623 化合物1之NMR數據(化合物1溶於丙酮一 d6) Position 13C 1H 2 77.21 CH 5,62 (1Ht dd), ^=2.9, 11.8 Hz 3 43.26 ch2 2.66 (1HT dd)，ι/=2·9, 17.2 Hz 3.17 (1Ht dd), ^=11.8, 17.2 Hz 4 197.59 C 5 165.29 C 12.19 (-0H，s) 6 95.83 CH 5.96 (1Hf s) 7 167.27 C 8 96J9 CH 5.96 (1H,s) 9 164.65 C 10 103.12 C V 129.77 c 2， 127·71 c 3， 144.08 c 4， 145.56 c 5， 113.49 CH 6.82 (1H, d), J=8.3 Hz 6， 118.55 CH 6.96 (1HT d), t/=8.3 Hz Γ 25.15 CHZ 3-55 (2H, d), c/=6.3 Hz 2，’ 124.15 CH 5.18 (1H, tW=6.3 Hz 3，， 135.33 C 4，， 16.34 ch3 1.68 (3H, s) 5Π 40.37 ch2 1.97 (2H, t), J=6.2 Hz 6，， 27.34 ch2 2.05 (2H, m) Τ 125.02 CH 5.06 (1H, dt), J=1.9T 6,2 Hz 8，， 131.74 C 9，， 25-75 ch3 1.60 (3H, s) 10” 17.68 ch3 1.55 (3H, s) 第2圖 化合物2 —化學物理特性 外觀 黃色粉末 分子式 ESI-MS(m/z) 〇25"28〇6 正離子： 425.0 (M+H)+ 負離子： HRFAB-MS (m/z) 423.3 (Μ-ΗΓ calcd·: 425.1965(M+H)+ found: 425.1968(M+H)+ UV λ ma°H nm (E) 288.0(17,935) IR (KBr) cmH 3360, 2960t 2.920, 1680, 1600 1〇ίΐί〇5 (c 0.2, MeOH) -17.8° MP 123 〜126°C CD (MeOH) Θ/deg 11444 (332)，一30028 (292)，7139 (254) 1296623 第3匱 化合物2之NMR數據(化合物2溶於丙酮一d6) Position 13c iH 2 80,13 CH 5.35 (1H, ddX c/=2.9, 12.2 Hz 3 43.54 ch2 2.74 (1Hr dd), J=2.9, 17.1 Hz 3.12 (1H，dd), ^/=12-2. 17.1 Hz 4 197.19 C 5 165.24 C 12.17 (-OH，s) 6 95.81 CH 5.95 (1H, s) 7 167.28 C 8 96.74 CH 5.95 (1H, s) 9 164,31 C 10 103.22 C V 130.58 C 2， 112.07 CH 6,91 (1H, d), J=2.2 Hz 3， 145.26 C 4， 144.30 C 5， 129.02 C 6， 119.97 CH 6.81 (1H, dW=2.2 Hz Γ 28.83 ch2 3.38 (2Ht d)t J-ΙΆ Hz T 123.36 CH 5.38 (1H, m) 3?, 136.39 C 4f, 16.21 ch3 1.73 (3H, s) 5n 40.45 ch2 2.06 (2H, t), .7=7.5 Hz 6n 27.37 ch2 2.12 (2H, td), 7=6.8, 7.5 Hz T 125.07 CH 5.12 (1H, tq), J=1.5t 6.8 Hz 8η 131.70 C 9η 25,80 ch3 1.63 (3H, s) 10” 17.71 ch3 1·57 (3H, s) 1296623 第4匱 化合物3-化學物理特性 外觀 黃色粉末 分子式 ESHMS (m/z) ^25^28〇6 正離子： 425.1 (M+H)+ 負離子： 423.2 (M-H)~ UV λ ίίΐΞχΗ nm (ε ) 291.5 (16,833) IR (KBr) cm·1 3380, 2960, 2920, 1680, 1600, 1450 [α]ϋ3 (c 0.77, MeOH) -3.94° ia]o (c OX CHCI3) -6.5° MP 172〜175〇C CD (MeOH) Θ/deg 9773 (335)，-26940 (293), 3399 (255) 1296623 第5匱 化合物3之NMR數據(化合物3溶於丙酮—d6) Position 13α iH 2 79.85 CH 5*35 (1HT dd), J=3.0, 12.7 Hz 3 43.64 Ch，2 2 71 (1H, dd)f J=3.0( 17.1 Hz 3/12 (1H, dd), J=12.7, 17.1 Hz 4 197.26 C 5 162.24 C 12.46 (-OHfs) 6 108.99 C 7 164.76 C 8 95.27 CH 6*03 (1H, s) 9 161.91 C 10 103.09 C V 131.69 C 2r 114.67 CH 7·03 (1H，s) 3r 145.95 C 4， 146.28 C 5， 115.97 CH 6-86 (1H,s) 6T 119J8 CH 6*86 (1H, s) Γ 21.53 Ch*2 3·26 (2H, d), J=7.3 Hz 2’” 123.44 CH 5·26 (1H，td)，c/=1A7,3 Hz 3，， 134.96 C 4，， 16.18 Ch，3 1·76 (3HTs) 5，， 40.46 叫 1·95 (2H，t)，J=7.5 Hz 6Π 27.38 CH2 2·05 (2H, m) Τ 125.12 CH 5*08 (1H, tt)f 5.4 Hz 8η 131.54 C 9Π 25.77 CH3 1·62 (3H，s) 10Μ 17.66 CH3 1·56 (3H，s) 1296623 第6匱 化合物4 一化學物理特性 外觀 淡褐色膠狀 分子式 〇30日36〇6 FAB-MS (m/z) 正離子： 493.3 (M+H疒 UV A maxH nm (ε) IR (KBr) cmH 292.0 (20418) 3400, 2960, 2920, 1640, 1600 (c 0.2, MeOH) [at5 {〇 0.2, C.HCI3) CD (MeOH) Θ/deg +1.8° +26.5° 8810 (335), -30708 (293)f 10510 (257) 1296623 第7匱 1296623 化合物4之剛R數據(化合物4溶於丙酮一d6} Position 13C 1H 2 77.12 CH 5,59 (1Ή, dd), ^=2.7, 13.5 Hz 3 43.49 ch2 2.65 (1Hf dd). J=2.7, 17.2 Hz. 3,14 (1H, dd), J=13.5t 17.2 Hz 4 197.65 C 5 162.27 C 12.47 (-OH, s〉 6 108.96 C 7 164.74 C 8 95.29 CH 6.04 (1H, s) 9 162.27 C 10 103.01 C V 129.96 C 2, 127.59 C 3· 144.04 C 4， 145.49 C 5， 113.50 CH 6.82 (1H, d)，J=8.3 Hz 6， 118.51 CH 6.96 (1H, d), J=8.3 Hz 1，， 25.13 ch2 3.54 (2H, d)t J=6.5 Hz T 124.15 CH 5-18 (1H, t), J=6.5 Hz 3，’ 135.34 C 4，， 16.37 ch3 1.64 (3H, s) 5,r 40.36 ch2 1.97 (2H, t)f ^=7.0 Hz 6M 27.35 ch2 2.04 (2H, m) 7T, 125.02 CH 5.06 (1H, qt), 7.0 Hz 8η 131,72 C 9，， 25,84 ch3 1-69 (3H, s) 10” 17.67 ch3 1.55 (3Ht s) 1，，， 21.62 ch2 3.26 (2H, d), J=6.6 Hz 123.61 CH 5.24 (1H, qt)t 6.6 Hz 3”， 131.17 C — 4，" 25.75 ch3 1,61 (3Hf s) 5m 17.81 ch3 1.76 (3H, s) 第8圖