TWI247752B - Polysaccharide containing chitosan, manufacture and usage thereof - Google Patents

Description

1247752 玫、發明說明 [發明所屬之技術領域] 本發明係關於一種新穎之含有幾丁聚醣之多醣、其製 ^方去’及含有該多作為有效成分之醫藥組成物及食 品° [先前技術] 到目前為止，蟹或蝦等甲殼類之幾丁聚醣（以下稱為蟹 成丁 t酶）’其性質或製造方法已多有研究，而關於以菇類 為代表之植物性幾丁聚醣或其製造法，目前幾乎尚未見於 研究文獻。 ；雖然數個研究報告指出黑黴菌或水慨田一 _ _、 類可產生幾丁聚醣，然而該等菌類之培養困難，也含有 知毒性物質之可能性甚大，因此，菌類產生之幾丁聚醣 於人體之安全性會成為問題而無法使用於食品或醫藥品 另外’已知對腎臟病有效果之洋菇類（雙孢蘑菇； Agancus bisporus)之親水性溶劑萃取物（商品名食用蕈萃 取=(champignoon extract))中，含有微量幾了聚醣主要； 分葡糖胺’該微量葡糖胺所持有之生理學上意義並不清 楚。因此，到目前為止並幾乎未有自洋益類（雙抱磨卯 百之兹類積極製造含有幾丁聚醣之多醣之嘗試。 七士包含日本之亞洲地區，椎茸、香兹（Lentinus edodes 耳'卓益、玉葦、舞茸自古以來即作為優異之健康> =而活較：’其為醫食同源之基本食材。西方於十七1 紀開始’㈣類（食用蕈）(雙孢制）即廣泛地提供作為食 315570 5 1247752 用0 月羊姑類（mushr〇〇m)或食用蕈（champing〇〇n)本來 為全體兹類之總稱，狹義的係指17世紀巴黎近郊之洞穴中 所栽i口之雙孢蘑姑。為了避免混亂，I說明書中洋菇或食 用早％為雙孢蘑菇，指稱全部食用菇類時，以「菇」稱之。 、世界上雙孢蘑菇之年產量為240至3 20萬噸，全世界 栽培姑之30至38%中，美國佔了 9〇%栽培菇。歷史上植 物性幾丁質（chitin)，為鹼不溶性高分子物質，首先於1811 年由法國植物學者布拉康諾（Brac〇nn〇t)於菇類中萃取。 1 859年羅捷特（Rouget)將幾丁質於氫氧化鉀之濃溶液中加 熱，而發現可溶有機酸之物質，於1894年由H〇ppe_Seyl^ 將該物質命名為「幾丁聚醣」。 1999年至2000年俄國的研究人員由黑黴菌 (ASpergillus niger)分離出幾丁質·葡聚醣化合物。該幾丁 質·葡聚醣化合物含有15至2〇%之葡聚醣。由於其幾丁 貝與葡聚醣以堅固的共價鐽結合，因此只能以酵素處理法 完全分離。（請參見非專利文獻1及非專利文獻2) 1981年心田專人發表關於椎茸（Lentinus ed〇(jes)之驗 (24°/〇，5 C )不溶骨架葡聚醣之報告。由甲基化分析得知葡 聚醣部份之構造為高度分歧之具有β·〗/及04,3鍵結之糖 鏈。該葡聚醣係與幾丁質鍵結形成椎茸之内部骨架。（非專 利文獻3) 1994 年，Hartland 等人於酵母（Saccharomyces cerevisiae)之細胞壁中，發現鹼可溶性之（1-3)β葡聚糖係與 6 315570 1247752 幾丁質鍵結 4) 而形成驗W之（1_3)βΜ糖。（料利文獻 姑或黴菌類之細胞壁之構成成分雖 幾丁質，惟哕笪Μ相 U® I糖與 織化頻繫、ί 生長過程中多酶類之再構成或再組 =2:行。雙孢㈣之生長週期中，α與"冓造之比 =力:化。於增殖過程鲁4)，子實體等鲁6)之 —广？前該等含有幾丁質之益之骨架成分為化學性 :2田不’合於水、稀酸、鹼或有機溶劑’目而幾乎無法有 :々’。其理由之一為，菇所含之幾丁質幾乎不溶於全部 1、s: 5理學上也為不活化，而幾乎無法期待作為健康 食品或醫藥品之有用性。 以：自菇之糖類而言，由熱水萃取之椎茸之水溶性成 分之β «聚糖發現有免疫增強作肖，而可開發作為免疫增 強片I #纟冑近也期待以雙孢蘑菇解決化學光線，利根 (Lic_)公司首先發現該熱水萃取物有㈣作肖，而以除 臭劑商品化。 其他大部份之Μ，雲芝（ka請atake)、赤芝（Gan〇d_ luCidUm)、靈芝（Reishi)、巴西產的「雙孢磨蒜」等，目前 亦不過以其直接狀態，或極單純之其熱水萃取物及其凍結 乾燥物、提供作為健康食品。 非專利文獻1

Gamayurova et al. Synthesis of soluble derivatives of chitin-glucan complex. Chemistry and Computational 315570 7 1247752

Simulation. Butlerov Communicatios, 1999; No. 1. 非專利文獻2

Shabrukova et al. Study of the nature of chitin-glucan complex. Chemistry and Computational Simulation. Butlerov Communicatios, 2001; No. 4. 非專利文獻3

Shida et al. Structure of the alkali-insoluble skeltal glucan of Lentinus edodes. J-Biochem-Tokyo. 1981; 90(4):1093-1 100. 非專利文獻4

Hartland et al· The linkage of (l-3)-beta-glucan to chitin during cell wall assembry in Saccharomyces cerevisiae. Yeast. 1994; 10(12):1591-1599.

[發明内容] 本發明之目的在於提供新穎之含有幾丁聚醣之多 酿。 本發明之另一目的在於提供上述含有幾丁聚醣之多 酷之製造方法，特別是提供由供給大量食用之洋兹 (Agadcus bisporus)或椎茸為首之安全的菇類幾丁質，有效 率的大量製造含有幾丁聚醣之多醣之方法。 夕本發明之又另一目的在於提供上述含有幾丁聚畴之 夕醣之用途：特別是提供含有該多醣之醫藥品及食品。 本發明係如下述： 1·-種具有下列特性之含有幾丁聚膽之多醣，： 315570 8 1247752 (υ構成醣：由葡糖胺及葡萄糖所構成，其構成莫耳比 為1至5 ·· 5至1 ; viscometer) 以膠體過濾 (2)分子量：經以奥氏黏度計（〇stwald，s 測定之分子量為約5萬至4〇萬。又 層析法測定之分子量為約43至20萬 (3)構成單位··以幾丁聚醣部份及葡聚醣部份為主 成； W鍵結種類：含有β(1—4)鍵結及川―6)鍵結，而不 含β(1〜3)鍵結； ⑺酵素之分解性：於幾丁聚酶酶中分解為寡酿，而於 纖維素酶中不分解； ' (6) 蛋白質及還原性多醣··不含蛋白質及還原性多畴； (7) 呈色反應：碘-澱粉反應呈陰性； (8) 物質顏色：為無色（白色）； (9) 溶解性：溶解於5至質量％之醋酸1果酸、 或抗壞血酸之水溶液中，而不溶解於水、乙醇、 pH 1 0以上之驗性水溶液。 上述第！項之含有幾丁聚酿之多酿，其中，葡 匍糖胺之構成莫耳比為丨：1者。 ^ 3.如上述第i或2項之含有幾丁聚酶之多餹，其中， 聚醣之含量為18至72%者。 4 ·如上述第1至3項中任一 中，幾丁聚醣部份為葡糠胺 5·如上述第1至4項中任一 項之含有幾丁聚醣 之均聚物者。 項之含有幾丁聚醣 之多醣 之多醣 其 其 315570 9 1^47752 中’葡聚醣部份A a — 6絲 习為葡甸糖之均聚物者。 6· 一種上述第丨至 有 製造方法，复 _ 、中任一項之含有幾丁聚醣之多醣之 溶液中，經力㈣類置於25至5G f量％之苛性驗水 於有；^ 、处理後使固液分離，將所得之固形物溶解 有機酸水溶液中， 以上而生心中添加醇或苛性驗使成為ρΗ1〇 π冼该沉澱並乾燥之。

7 ·如上述第6項之人女脱 中，於苛性浐、3有成丁聚醣之多醣之製造方法，其 葡聚糖加熱處理前，類以纖維素酶或 =上述第64 7項之含有幾丁聚醣之多醣之製造方法， 該軸為雙孢隸（Agari⑽bisp〇rus)。 9.:種申請專利範圍第4 5項中任一項之含有幾丁聚酶 之夕醣之製造方法’其包含將菇類置於25至50質量％ 苛性驗水溶液中，經加熱處理後將黏度調整為3至20 mPa. “灸"吏固液分離並將所得之固形物清洗、乾燥。 10·如上述第9項之含有幾丁聚醣之多醣之製造方法，其 中，經加熱處理後於苛性驗水溶液中，添加水或酸而將 度調整為3至20 mPa · s者。 點 11 · -種醫藥組成物，其係含有如上述第1至5項中住—工 之含有幾丁聚醣之多醣作為有效成分者。 、 12·如上述第11項之醫藥組成物，其係用於生活習憤病 治療或預防者。 〈 13.一種食品，其係含有上述第丨至5項中任一項之含有幾 丁聚醣之多醣作為有效成分者。 ' 31557〇 10 1247752 本势明之含有幾丁聚醣之多 醣中常見之雜質蛋白質 & -由於不含有蟹幾丁聚 私放我拓t 、 3〜胺化合物等過敏泝物質 士 用於作為新穎之機能性食品 歌料“’有 起始原料之蟹幾丁聚醣中，且古组甲殼類’例如以蟹作為 之刺激味，而本發明含有幾;特有之異臭及令人不快 時會含有軸特有之良好 K •之多醣’以Μ類為原料 之刺激味。再者，本發明含王然沒有異臭或另人不快 ΛΙ3有幾丁聚醣之 * 以外含有約50%之多醣類， —，匍糖胺 μ , 」頂期有未見於蟹幾丁平ite 4 新類生理活性存在之可能性。 笙成丁來醣之 此外，與由瑕、蟹耸 问人女你 敗類所分離之幾丁聚醣不 — ^為其構成醣類幾乎全為 匍萄糖所成之多醣類·葡聚糖。 #、、、 [實施方式] 以下詳細說明本發明。 本公司以來自提供作為健康食品之雙孢蘑菇 (Agaricus bisporus)之食用蕈萃取物（champign〇〇n 灿叫 之成分，著眼於可溶於有機酸中而不溶於鹼之成分，嘗試 該物質之分析，發現具有與幾丁聚醣相近性質之多醣=存 在，而專心研究的結果，成功的由Agaricus bisp〇rus大量 的萃取幾丁聚醣。由Agaricus bisporus萃取之幾丁聚醣， 基本性質雖與由甲殼類所萃取之蟹幾丁聚醣類似，而就其 δ有葡聚酷式多醣類之點而言，係與僅由葡糖胺所構成之 單純岣聚物之蟹幾丁聚醣其成分不同，而確知為新穎物 質。 ' 315570 11 1247752 ‘ 稱之 以下說明書中’該新穎物質以「含有幾丁聚醣之多醣」 歷史上幾丁聚醋雖係由前述之「洋兹類」(mushr_) 中舍現，但其後之研究主 以蟹幾丁聚醣稱之。=幾甲；進行，幾丁聚醣亦可 继丁取，山 幾丁聚醋之定義而言，於蟹 膽中，幾乎為咖由N_乙醯葡糖胺而成之單純均 基_以上為去乙醯化者。然而，原本之 二醣之疋義’如前述—般，意指不溶於㈣之鹼，而 可/合於稀薄有機酸之多醣。 醣夕夕麻々 ^ ^義姑類之含有幾丁聚 •夕醣名正言順的為幾丁聚醣之家族成員。 本發明新穎之含有幾丁聚醣之多醣係由廣泛提供作 用^類所製造得之。含有幾丁聚醣之多醣於自然中 在’然而其大部份皆成為與葡聚酿堅固鍵:之 貝存在’而依照本發明開發之方法，首次了解 。 法。以下詳細說明本發明之含有幾丁聚膽之多膽之製造 -有含= = 原料’只要為含 人古# 、者白可使用並無特別限制，就所製得之 3有戌丁聚醣之多醣其令人不快的臭味及異 點而言，較佳者為植物性材料，特別是更;j少的觀 _者可舉例為雙孢㈣（__咖：^椎;類中， 姑玉蕈、舞茸、滑子菇等，特別較佳、 椎萆、冬兹、玉蕈等。 例為雙孢膚益、 使用兹類為原料時’可使用生蛘品或乾燥品，通常去 3】557〇 12 1247752 除其根部堅硬部份，且以水清洗而完全去除泥土等附著 物。如未能於此完全洗淨，則雜質會殘留於最終產品。將 $料於混合機或切片機中施以必要之粉碎或切片後，於高 農度之苛性鹼（caustic alkali)水溶液中，較佳為Μ至 =量°/。之苛性驗水溶液中’加熱處理。苛性鹼以苛性鈉、 苛性鉀為佳。相對於原料100質量份（乾燥質量），較佳為 添加40至50質量份之苛性鹼水溶液，較佳係於外至（π 。。’加熱處理2至30小時，更佳為於1〇〇su(rc，加孰 處理1至10小時。 … 又，因本發明使用苛性驗水溶液，故反應容器較佳係 使用竟器或硬質玻璃製品。加熱處理雖可於常壓、減壓或 加壓狀態進行，通常於常壓進行即足夠。 再者’加熱處理前，亦可先以纖維素酶、葡聚糖酶、 蛋白質酶㈣素處理，或絲處理。酵素處料 於25至40t下，於水令添加前述料〇 〇ι至〇1質量 處理2至24小時。藉由酵素處理，分解細胞壁或蛋白質， 而使含有幾丁聚醣之多醣之製造變得容易。再者，於冷凍 隻，束貝J組織（細胞壁）會破壞而使含有幾丁聚酶之多酿 之製造變得容易。特別是，藉由凌融處理或切片而碎片化， 或於混合機中粉碎等進行前處理時1類的纖維質解開， 使酵素處理（纖維素酶處理等）之效率變佳。 例如，經前處理之兹類10公斤懸浮於純水2〇 中。，添加纖維素酶約6克至6〇克，於机加熱2小時， 60 C U小時’再加熱使溫度上升至满騰為a。上述之 3J5570 13 1247752 * 纖維素酶可例舉例如來自黑黴菌（Aspergillus niger)者、來 自桿菌（Bacillus)屬者（鹼性纖維素酶）、來自木黴素 (Tricoderma reesei)者、來自關根桿菌（arthrobacter)者。 由乾熱而添加使苛性鈉或苛性鉀之最終濃度為5 0質 量％程度。此時，溫度上升至10〇t以上而直接繼續加熱 約2至4小時。加熱結束後將反應容器直接加蓋並放置隔

夜冷卻。為防止鹼吸收空氣中之二氧化碳氣體而劣化，因 此加蓋為必須的。藉由該加熱處理，使含有幾丁質之多驗 之胺基去乙醯化而生成具有具幾丁聚醣之多醣。 於鹼處理液上部表面生成之含有幾丁聚醣之多醣層 以不鏽鋼金屬網（100網眼）撈取。再者，以傾析法回收於底 部生成之沉澱。餘留之鹼液可直接再度於次一回之鹼處理 中使用。 -將所製得之混合物以離心分離、過遽、傾析等方法進 :a液刀離所付之固形物係含有幾丁聚醣之多醣為主成 〃體❿σ，將固形物亦即會有冑了聚醣之多醣 於2至1 〇倍量之衅 ^ ^ ^5 _ 、、屯水中，以漂白布等移出，以純水為洗液 π洗至接近中性為止。 1 又 為，此時所製得之粗f人有幾7 t使用為重要點。其原因 的吸收自來水等金屬：：！幾丁聚餹之多醣極容易有效率 it ^ ^ ^ 子寺不純物。再者，此時若不快速 進仃π洗處理會使黏度 ^ 黏度過度上升時，以 而後續處理步驟變得困難。 過渡'變為容易。等有機溶劑處理有效。該處理使 人將、'工水洗之袓製含有幾丁聚酿之多醣溶解於有 315570 14 1247752 機酸水溶液中。有機酸可例舉如醋一 ^ ± m ^ φ ' 頻果酸、抗壞血酸 寻有機酸之濃度較佳為1至2〇暂旦〇/

皙景〇/ ， 貝里/〇，更較佳為5至1 C 貝里/〇。浴解可於5至4〇〇c進 於宮、w 丁 l 至48小時，通常亦可 於至洫下放置隔夜。含有幾丁聚醣 ^ ¢1 r± v ^ 夕醣為南分子，因而 令解時必須有足夠時間。自溶解有 ^ VI V 有成丁聚醣之多聽溶 液以離心分離、過濾、傾析等去 性高，、Μ & ，、不/谷物。由於溶液之黏 f生问，過濾、傾析必須耗費時間故 # M離心分離較佳。 於所得清澈之含有幾丁聚醣 JLU 7 ^ > 夕聽，谷液中添加醇（例 乙％、甲醇）、丙S同、或苛性鹼（ 幾丁取締 ^ Λ ^ 1 J如可性鈉）沉澱使含有 t醣之多醣，並加以回收 100^^ 例如，相對於含有幾丁聚 雌之夕醣浴液100質量份添加苛 h、 納0 ·0 1至0 · 5質詈份， >儿搬含有幾丁聚醣之多醣。复 、 分離而回收純的含有幾丁聚醣之：心分離等進行固液 較容易且其操作容易，卞需要大曰^乙醇沉殿之過滤比 之多膽溶液至少需要2二：==對含有幾丁聚釀 所調製之含有幾丁聚畴之多醣；=:。再者，由乙醇 用幾丁聚醣於食品或醫藥品、化：的傾向。又’使 醇為溶劑並不適宜。 -專時，使用丙嗣或甲 因此一般固液分離步驟如杜总 办u ϋ佳係以鹼沉澱操作。本處理 y驟雖可反覆多次而去除雜質 敝 貝然而因含有幾丁聚醣之多 _对於雜質之吸附力高，以僻$ _ 為佳。 以避免不必要之複雜處理之方法 另外，欲製得大量冬古银丁 从 離h二… 《聚酶之多酶時，就固液分 方法而言，派4¾液之大吾施 八 大里離心分離不但危險，且相當困 315570 15 1247752 難。於該情況下，需要利用 才j用以下所况明之「不使用離心 離之方法」。 亦即，將經良好清味， 月先切片為Ϊ至3毫米厚之菇類、 切片椎耳、對半切之久從 ，卜' 丁卞v又冬姑、復水之乾燥雙孢蘑菇等，於复 中添加驗’例如50質量％，例如最終濃度為4〇“〇質量 %之苛性鈉。為使驗能良好溶解亦可添加極少量之蒸顧 水。而後於80至12〇〇c以1^，n士 ， 、 L以3至30小時，例如於！ 1(rc以上 2小時以上加熱後放置冷义 罝~部。於其中必要時添加等量以 上，較佳為3至4倍景夕7 1 Λ 里之蒸餾水，或10至20質量％之無 機酸（例如鹽酸、硫酸）或有機酸（例如醋酸、抗壞血酸、乳 酸），而調整黏度為3至2〇mPa. s，較佳為5至i〇mpa. s。於该狀態下靜置隔夜’必要時將pH調整為9至6 $， 較佳為7 °其次’以例如不鏽鋼製、漂白布或粗紗布 (cheesecloth)製之過濾器過濾。 由於此時黏性變高，之後的過濾處理步驟變為困難， 為使黏度不增加，添加蒸館水或無機·有機酸而調整極為 -重要。為此使用樣品之一部份進行預先測試為佳。添加無 饑酸或有機酸時，係添加至pH為9至6·5，較佳為7。 將所得之固形物再懸浮於蒸餾水中，輕輕攪拌下，將 pH調整為9至6·5，通常較佳為7。再次，過濾、或傾析後 添加蒸餾水並反覆上述操作至鹽分濃度及pH都充分降低 為止。最後以粗紗布過濾，施加壓力脫水，將固形物凍結 乾燥為乾燥品。 由所得粗製之含有幾丁聚醣之多醣所製得之含有幾 16 315570 1247752 丁聚醣之多醣，因操作量低，鹼度也低，而玎使用一般之 「使用離心分離之方法」。亦即，將粗製之含有幾丁聚醣之 多醣溶解於5至1 〇%醋酸中，充分攪拌後離心分離，以鹼 中和上清液後，再次離心分離，所製得之幾丁聚醣區分· 沉澱部份水洗之，再以漂白布或粗紗布過濾，壓搾使水分 減少後凍結乾燦而製得純化之含有幾丁聚醣之多醣。 本發明之含有幾丁聚醣之多醣中之幾丁聚醣之含量 會依照製造條件而改變’ 一般為5至8〇質量％，特別是1 5 至75質量％的範圍。 含有幾丁聚醣之多醣中之幾丁聚醣之含量可依以下 之方法進行測定。 將含有幾丁聚酷之多醣粉末精確秤量〇 5克，將其溶 解於5容量。/〇醋酸精確量1 〇〇克中。將該溶液1克精確置 於2〇〇毫升容量之三角燒瓶，加入去離子水30毫升後充分 均勻攪拌。加入2至3滴作為指示劑之〇· 1 〇/〇甲苯胺藍溶 浪，以N/400聚乙烯硫酸鉀溶液[(c2H3〇SK：)n、n=l500以 上]滴定。去乙醯化度（亦即幾丁聚醣含量=葡糖胺含量）以 下述式求得。 去乙醯化度=(X/1 61 )/[(X/l 61) + (Y/203)]X 100(〇/〇) X-(l/400)x (1/1000) χ fx Ι6ΐχ i,

Y-0.5x (1/100)-X V =N/400聚乙烯硫酸钟溶液滴定值（毫升） f = N / 4 0 0聚乙缔硫酸卸溶液之力價 力價-f為1.005 315570 17 1247752 * 將式直接寫為 去乙醯化度=[203Χ/(203Χ+16 1Υ)]χ 1 〇〇(〇/〇) Χ=1·005χ 161χ ν (滴定值：毫升） Υ=5-Χ 純化之含有幾丁聚醣之多醣，必要時可於上述稀薄之 ‘ 有機酸，例如1至5%之醋酸、蘋果酸、抗壞血酸等中再 . 溶解，以鹼進行中和沉澱處理，反覆操作而純化。然而通 • f -次就足夠。將可溶性之純化之含有幾丁聚醣之多聽溶 解於有機酸中直接喷霧乾燥或凍結乾燥，會得到白色粉 末。該可溶性含有幾丁聚醣之多醣於純水中為瞬間溶解。 — 由鹼沉澱處理所製得之純含有幾丁聚醣之多醣係直接凍結 -乾燥，該物雖不溶於純水中，但可溶解於稀薄之有機酸， 例如於抗壞血酸或蘋果酸中使用。於鹽酸中難溶解。 盘幾丁聚醣之多醣的醫藥品戒舍品 本發明之含有幾丁聚醣之多醣有降低血壓、尿醣值、 血糖值、尿酸值、總膽固醇值、中性脂肪值之作用。因此， 本發明之含有幾丁聚醣之多醣具有大大改善高血壓症或糠 •尿病等生活習慣病、成人病之檢查數值改善效果，適合以 醫藥品或食品之型態使用。 本發明之含有幾丁聚醣之多醣以液劑型態使用時，含 有幾丁聚醣之多醣中必要時可配合苯甲酸鈉、對·羥基苯甲 酉文甲酯、脫氫醋酸鈉等保存劑，蘋果酸、抗壞血酸、擰檬 酸、醋酸等溶解補助劑，以及著色劑、香料、風味劑、葡 萄糖、甘露醇等甜味劑，再者必要時可添加蒸餾水、生理 18 315570 1247752 食鹽水等稀薄劑而製備醫藥品或食品。 合有幾丁聚釀之多醣作為有效成分之醫藥品，一般而 °可製備為錠劑、丸劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、栓劑 等口形製劑型悲。此時，該等醫藥製劑可使用一般使用之 填充劑、增量劑、結合劑、加濕劑、崩解劑、表面活性劑、 潤滑劑等稀薄劑或賦形劑而製備。 形成錠劑形態時，可廣泛使用該領域習知之載體，可 例舉例如乳糖、甘露糖醇、白糖、氯化鈉、葡萄糠、澱粉、 反酉文鈣、咼嶺土、結晶纖維素等賦形劑，蒸餾水、生理食 風水、單糖漿、葡萄糖液、澱粉液、明膠溶液、羧甲基纖 維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等結合劑，乾燥澱粉、褐 味酉欠鈉、洋菜粉末、碳酸氫納、碳酸飼、十二烧基硫酸納、 甘油單硬脂酸酯、澱粉、乳糖等崩解劑，白糖、甘油三硬 脂酸i旨、可可脂、氫化油等崩解抑制劑，醋酸、抗壞血酸、 頻果酸等溶解吸收促進劑，甘油、澱粉、乳糖、高嶺土、 皂土（bentonite)、膠態矽酸等吸附劑，純化滑石、硬脂酸 鹽、聚乙二醇等潤滑劑等。再者，於必要時，錠劑可製成 糖衣錠、明膠包覆錠、腸可溶包覆錠、膜包覆錠、或二重 錠、多層錠。 形成丸劑形態時，可廣泛使用該領域習知之載體，可 例舉例如葡萄糖、乳糖、甘露糖醇、澱粉、可可脂、硬化 :物油、高嶺土、滑石等賦形劑’阿拉伯膠粉末、明膠等 崩解劑。 形成栓劑形態時，可廣泛使用該領域習知之載體，可 315570 19 1247752 例舉例如可可脂、高級醇之酿類、明膠等。 要特士分之含有幾丁聚醣之多畴之含量並不需 質旦二 廣泛範圍内選擇’ -般製劑中為1至90 ’車:佳亦可含有10至70質量％者。 疾二：並無特別限定，可依照用法、病患年齡、性別、 有幾丁 -… 擇，對於每公斤體重投予含 旦，—K 夕醣0,1至10毫克，較佳為〇·5至5毫克之 I旦Γ11至4次分次經口投予。含有幾丁聚醣之多醣之 夕其會吸收、包合鐵份或維生素而導致鐵份或維 ,缺乏症，因此於前述範圍之投予量時因含有幾丁聚_ 之夕醣之含量較低，而不需要補充鐵份或維生素。 本發明之含有幾丁聚醣之多_食品並無特別限定，可 牛〇 士 ’可未增湯、飲料、果凍、軟糖等。該等食品中含 有幾丁聚醣之多醣之含量較佳為G.G1至5.G質量％，更佳 為0.02至1.0質量％，最佳為〇 〇5至〇 5質量％。 (實施例） 以下’以實施例更詳細說明本發明之含有幾丁聚醣之 夕酶之製造法’及含有幾丁聚醣之多醣之生化學性質。 製造例1(菇類幾丁質（chitin)之製造） 將雙孢蘑菇付著泥土之根部堅硬部份切除，秤量得 440克。於其中加入含有1 %蘋果酸、〇·丨❶抗壞血酸之水溶 液900毫升，分2次添加，以混合機攪勻3〇秒後將其於熱 水（100°C )熬煮並時時攪拌保温120分鐘。上述懸浮液之溫 度為約70°C至約85°C。其次將該懸浮液以2至3小時緩慢 20 315570 1247752 抽吸過濾（suction filtration)。將濾紙上殘留物以刮匙刮 取’殘餘物以純水清洗後回收。製得容量約600毫升之粗 幾丁質懸洋液。添加N_氯氧化鈉6〇0毫升至該懸浮液中， 於60 C下20分鐘，熱水加熱並抽吸過濾。同樣的於濾紙 上以純水、乙醇清洗。 將渡紙上殘留之含有幾丁聚醣之多醣懸浮於純水 1000笔升中。，亥含有益類幾丁質之多醣懸浮液以N_hc1 中和以4500rPm離心分離。將沉澱部份之菇類幾丁質區 分懸浮於990/〇乙醢由+ & ^ 田 G和中成為約1000毫升後，以2張濾紙重 且：濾。U乙醇5〇〇毫升清洗後，完全的抽吸。純化之含 有^ 丁聚醣之多醣區分之濕質量約為Η克。將其置於舖有 夕膠之乾:I?卞皿中’減壓乾燥製得純化之含有幾丁質之多醣 5.54 克。 夕/ 克新鮮雙孢蘑菇之乾燥·純化之含有幾丁質 收量為126〇克。經乾燥之含有幾丁質之多醣 /狀為烈餅狀，以错 制、生y 以鑷子就能簡單的解開、分割。 1 k例2(自含有菇類幾 * 醮） 、成丁貝之多醣製造含有幾丁聚醣之

Na〇H 7jc溶液加至製造例丨所製造 ^tw ^ A 經乾燥純化之含有幾丁拼衣^1所h之雙孢〉 °C，睥日本與44_ 貝之多醣4.99克中而便懸浮。; L日守時攪拌下進杆 15八 。 …、处理2小時。離心分離（4500r] 刀’ 4 C，離心分離 該固形物主要為含有幾二 均相同)而回收固形 有成丁？κ醣之多醣。 於其中加入1()%^ _ Θ义水〉谷液1 〇〇〇毫升而均質化招 315570 21 1247752 直接於室溫靜置隔夜，含有幾丁聚醣之多醣會溶解。溶液 變黏稠，再次以離心分離回收上清區分。將沉澱區分再溶 解於10%醋酸水溶液中，㈣含有幾丁聚酿之多醣並加至 上清液中。將合併之上清液pH調整為1〇，離心分離，將 純水1〇〇〇毫升加至沉澱區分而懸浮之，離心分離，重複該 操作3次。第丨次清洗為p㈣，第2次清洗為pH7.5,第 3次清洗之最終pH為約6.5。 將沉澱移至濾紙上，於25t進行減壓乾燥4〇小時。 製得全體105 0毫克，葡糖胺含量為55%之含有幾丁 聚醣之多醣。 每1克含有幾丁質之多醣其含有幾丁聚醣之多醣之回 收量為210毫克。 該含有幾丁聚醣之多醣以下列條件加水分解，加水分 解物以下列薄層層析條件分析，測得葡糖胺與葡萄糖為約 3 : 1之比例。未測得除此以外之單糖類及半乳糖胺。以薄 層層析分析之葡糖胺量高於以聚乙烯硫酸法分析值的理由 為於4M-HC1中，100°C之加水分解條件下，與葡糖胺相較 之下葡萄糠生成量少，且會再加水分解等。 含有幾丁聚_之多醣之加水分解條件： 4M-HC1 中，100°C 下 3 小時 加水分解物之薄層層析條件·· 載體：Whatman 4860-820(厚度 250 微米） 展開溶劑：正·丁醇/吼啶/0.1M HC1(5 : 3 : 2) 於室溫展開2小時 315570 22 1247752 呈色試劑：二笨胺/苯胺/鱗酸 製k例3(自經切片之雙胞蘑菇製造含有幾丁聚醣之多醣） 將雙孢蘑菇之付著泥土之根部堅硬部份切除，秤量得 546克。以菜刀或食物調理機將其切片處理為約】毫米厚。 各將270克之切片置入2個1〇〇毫升燒杯中，各加入固體 =氧化納270克。靜置15純，雙胞磨益融化於驗中而容 量減少。將其併入1個燒杯中加熱熬煮。於90。(：至95°C邊 视拌下加熱約2小時後，放置冷卻至室溫。 漂浮之菇（主成分為含有幾丁聚醣之多醣）以弧狀撈 杓，小心地深入撈取，以80%乙醇清洗3次。使用約6〇〇 至800毫升乙醇，於1〇分鐘期間輕輕攪拌清洗。再以純水 1000毫升清洗2次，添加醋酸25毫升確認pH為中性後， 再添加1/10容量之醋酸，於室溫下放置隔夜溶解含有幾丁 聚醣之多醣。以粗紗布過濾，濾液以50%NaoH中和，沉 澱含有幾丁聚醣之多醣。 ^ 離心分離所生成之沉澱，於醋酸中溶解後於4它保存 晝夜（64小時），使含有幾丁聚醣之多醣溶解。將含有幾 聚醣之多醣之醋酸溶液（10%醋酸600毫升）離心分離回收 上清液（ΡΗ4·48)。沉澱區分以10%醋酸（pH2l8)5〇〇毫升月 次萃取並加至上清液中。將上清液合併並加以中和 (PH10)，生成之含有幾丁聚醣之多醣之沉澱以離心分離回 收。將沉澱溶解於1 〇%醋酸500毫升中，離心分離 。 上清液。再次以5〇%NaOH中和，生成之沉澱以離心分离^ 回收。 315570 23 1247752 . 將5 00毫升水加至沉澱使懸浮後離心分離，進行此操 作2次。製得褐色沉澱。將該沉澱以乾冰/丙酮凍結進行凍 結乾燥。凍結乾燥後之回收量為2702毫克。含有幾丁聚醣 _· 之多醣中之葡糖胺量為19.6%，每1〇〇克新鮮菇之含有幾 丁聚醣之多醣之回收量相當於495毫克。 、 製造例4及5 (殺菌釜處理及蘋果酸之添加效果） • 去除新鮮雙胞蘑菇之底部堅硬部份以水清洗後，於混 合機以3 0秒進行粉碎。將其分為兩份，其中一份添加純水 200毫升，另一份添加5%蘋果酸水溶液200毫升，於ι2〇 °C以殺菌釜處理30分鐘後，放置隔夜，以紗布過濾後懸浮 、於純水中使成為200毫升。 , 分別將Na0H200克加至其中，於120。(：以殺菌釜進行 加熱處理30分鐘。分別將純水約200毫升加至其中後離心 分離。回收含有幾丁聚醣之多醣沉澱並溶解於丨〇%醋酸 中。將該溶液離心分離所得之上清液以25%NaOH中和， 所生成之含有幾丁聚醣之多醣沉澱以離心分離。所製得之 — 含有幾丁聚醣之多醣沉澱再以離心分離法用純水5〇〇毫升 •清洗3次。進行3次純水清洗則pH約低至7·5左右。 /東結乾燥並測定回收量及葡糖胺之含量。回收量八別 為643亳克及713毫克，葡糖胺之含量分別為713%及 37.6%。 釜中進行者均為 又葡糖胺之含量為純水處理而於殺菌 最高數值。 製造例6(經纖維素酶前處理之含有幾丁聚醣之多釀之梦 315570 24 1247752 造） 此製造例係以新鮮雙孢蘑菇作為原料，進行纖維素 酶γ /辰鹼加熱處理，而得可溶於稀薄有機酸，而不溶於鹼 之含有幾丁聚醣之多醣。將其凍結乾燥後製得粉末約i ι 克。以下詳細說明之。 將雙胞蘑菇3 · 2公斤快速水洗，而完全去除附著之泥 ^。其次，切片為i毫米厚。將此切片懸浮於純水56〇() 耄升中添加1 2克纖維素酶（得自黑黴菌（Aspergillus niger) 者，食品用），於4〇°C加熱2小時，60°C加熱2小時，再 加熱使溫度上升至沸騰為止。 放冷後添加苛性鈉使最終濃度為5〇%。此時溫度上升 至11 0 C，原樣繼續加熱3小時。加熱結束後，直接加蓋 月f置3日。其次將驗處理液之上部表面出現之含有幾丁聚 醣之多醣層以不鏽鋼金屬網（1〇〇網眼）撈取。再傾析而回收 於底部生成之含有幾丁聚醣之多醣沉澱。 所製得之粗製含有幾丁聚醣之多醣1 5克以約300倍 篁之純水懸浮，以漂白布移除，以純水清洗至洗液大致中 性程度。經洗淨之粗製含有幾丁聚醣之多醣緩慢地於1至 2小時期間溶解於1 〇%醋酸。自溶解含有幾丁聚醣之多醣 浴液以離心分離去除不溶物。將ΙΟΝ-NaOH約500毫升加 至所製得之澄清含有幾丁聚醣之多醣溶液35〇〇毫升中，沉 殿含有幾丁聚醣之多醣後，回收之。沉澱以純水3公升清 洗’離心分離。將所得純化之含有幾丁聚醣之多醣凍結乾 燥而製得灰白色粉末10.8克。 25 315570 12477.52

丁聚醣之多醣製造例2至6之

丁平 〜ΰ里刿疋值，咸認於含有幾 Λ 之多醣時，係反應幾丁聚醣含量者。 =!7(不使用離心分離之「粗製之含有幾丁聚酶之多醣」 <衣造法） ,切！ί分洗淨，切片成1至3毫米厚之蒜類、切片椎茸、 二曰人ϋ燥之雙胞耗以復水物換算各為12〇公斤 添加約500公斤之Na〇H使最終濃度成為5〇%。

. 充分溶解後，添加1〇〇公斤之蒸館水。於％至HO 所：。加熱2小時以上後，置放冷卻隔夜。添加$倍量之2〇 貝里檸檬酸，於此狀態靜置隔夜。阳為8 〇。隔天，以 粗紗布製之過濾器過濾。 將所得之固形物再懸浮於蒸顧水1〇〇〇公升中，一邊_ j拌―邊將阳調整為7。再次過遽，添加蒸餘水，使鹽 刀展度及pH充分降低為止而重複上述操作3次。最後以 315570 26 1247752 粗紗布過渡，力口壓脫水，束結乾燥固形物而得約56公斤 乾纵原料為480公斤杈製之含有幾丁聚醣之多醣之 回收率為1.2%。 將粗製之含有幾丁聚酶之多醣5·6公斤溶解於10質量 %醋酸100公升中’充分㈣後離心分離，其上清液以苛 性鈉中和’離k分離，所得之幾丁聚醣區分沉澱部份以水 清洗，以粗紗布過滤'，壓#減少水分後柬結乾燥而製得含 有幾丁聚醣之多醣1.2公斤。 相對於原料，含有幾丁聚醣之多醣之回收率為 0.25%，又粗製之含有幾丁聚醣之多醣中有2〇%以上之含 有幾丁聚醣之多醣含於其内。 I造例8 製造例7中，鹼加熱處理後，除了添加2Q質量％乳酸 2000公升以取代5倍量之20質量％擰檬酸，並於該狀態 下靜置隔夜以外進行相同操作。得到同樣的結果。 食造例9 製造例7中，鹼加熱處理後，除了添加2〇質量％醋酸 2000公升以取代5倍量之20質量。/〇擰檬酸，並於此狀態 靜置隔夜外，進行相同操作。得到同樣的結果。 製劑例1 (包含含有幾丁聚醣之多醣之錠劑） 將蘋果酸1 〇克、抗壞血酸10克加至製造例6所製造 之含有幾丁聚醣之多醣10克中並溶解於1000毫升水中， 凍結乾燥而製造水溶性之幾丁聚醣。該幾丁聚醣具有於純 水中瞬間溶解之特性。於該凍結乾燥物1 〇克中加入甘露糖 315570 27 12477.52 醇20克、乳糖50克、聚葡萄糖2〇克後均勻混合，加入作 為黏著劑之砂糖脂肪酸酯2克作成錠劑。 邊鍵劑具有降低高血壓或糖尿病等生活習慣病，成人 病患者之血壓、尿糖值、血糖值、尿酸值、總膽固醇值、 中性脂肪值等之作用。 實施例1 (純化之含有幾丁聚醣之多醣之成分分析）

對製造例6所製造之含有幾丁聚醣之多醣進行以下分 析。 以雙脲（Biuret)法確定蛋白質的存在，以蒽酮硫酸法確 定還原多醣的存在，而蛋白質及還原多醣之任一者均無法 檢出。 碘-澱粉反應為陰性，認定僅為幾丁聚醣本有之茶褐色 之呈色。 以聚乙烯硫酸法及埃爾森-摩根（Els〇n_M〇rgan，s procedure)胺基糖分析法定量含有幾丁聚醣之多醣中葡糖 胺之含量。得到相近之測定值。 進行B(l—3)葡聚醣之分析為檢測界限以下。 •再者’製造例6中使用乙醇取代苛性納以沉激 丁聚醣之多醣，具有相當之潮解性或吸濕性。 如製造例1之混合機粉碎處理時，多黯的部 性切短，幾丁聚酿部份的量增加，另外，如製造例3 片處理時，多醣之部份多，且獲得較接近 刀 丁聚糖部份的量多)之含有幾丁聚酿之多醋。、狀即幾 實施例2(市場常見菇類中之含有幾丁聚醣之多醣） 315570 28 1247752 以製造例2之方法，處理市場常見各種菇類而製得含 有幾丁聚醣之多醣。表2顯示新鮮菇每100克之含有幾丁 聚酶之多_含量（毫克）、含有幾丁聚醣之多醣中葡糖胺之 含量（質量。/〇)及含有幾丁聚醣之多醣之分子量。分子量係將 含有幾丁聚醣之多醣溶解於5%醋酸中而於室溫下靜置一 曰者（含有幾丁聚醣之多醣濃度0·05%)，使用奥式黏度計 (柴田263 0-1)測定。此處，分子量以下式計算。 L〇gM=(l〇g(l/C*ln(^ rel)) + 3.〇5/0.71 relj為自試驗結果所求得之相對黏 蘑菇 舞茸— 滑子益 鱈場蟹 "^有幾丁聚醣之歹 醣含量（毫克）(註1 217 "496 Τ39 ~19 5^2 葡糖胺之含量 約10克 。由乾物可得^ 丁聚醣。由舞茸或滑子益幾乎不能製得 聚醣之夕醣，咸認其原本幾 冬兹、雙胞隸及推I n 由該試驗結果， 為本發明之含有幾丁聚醣之多醣之製造原料。、口 實施例3(含有幾丁聚醣 將製造例3所製造 之多醣之成分分析） έ有成丁？κ醣之多醣及市售之蟹 315570 29 1247752 .幾丁聚醣，卩4M-HCW 100t：下加熱3小時，進行加水 分解。該加水分解物以矽膠薄層層析（Whatman)展開。 展開溶劑··丁醇/丙醇/鹽酸 糖類之呈色係使用苯胺試劑。 (請參見 Ghebregzabher，M.，Rufini，s，Sapia，G μ and ' lato, Μ· 1979; J. Chromatography，18(M.及 Zweig，G and ^ Sherma, J. (eds.) 1972; CRC Handbook of Chromatography, BP Vol. 1) 使用葡萄糖、半乳糖、半乳糖胺、葡糖胺及N_乙醯基 葡糖胺為對照，與本發明之含有幾丁聚醣之多醣及蟹幾丁 聚醣兩者之酸加水分解物同時展開。

蟹幾丁聚醣之酸加水分解物，得到葡糖胺及其雙體之 呈色點，含有幾丁聚醣之多醣之酸加水分解物，除了與蟹 幾丁聚醣之酸加水分解物有同樣之葡糖胺及其雙體之呈色 點外，另有葡萄糖之呈色點。葡糖胺雙體之量，蟹幾丁聚 醣之酸加水分解物及含有幾丁聚醣之多醣之酸加水分解 -物’均為葡糠胺單體量之約1 〇%。 相較於製造例2所製造之含有幾丁聚醣之多醣，製造 例3所製造之含有幾丁聚醣之多醣於葡萄糖之莫理施 • (Mollsch test)反應之呈色反應較強。該結果與葡糖胺之含 量數據一致。 再者，加水分解物中無法認定有由葡糖胺與葡萄糖所 成之雙糖存在，含有幾丁聚醣之多醣不具有葡糖胺與葡萄 糖之嵌合體（chimera)構造，而明白該雙糖之存在量極少。 315570 30 1247752 再者，可預想該等嵌合體構造之生合成過程極為複雜，而 推定該等構造存在的可能性低。 含有幾丁聚醣之多醣之幾丁聚醣部份為葡糖胺之均聚 物，^部份由含有幾丁聚醣之多醣之物性所支配。亦即， 含有幾丁聚醣之多醣具備有定義^，該部份為多_全體之 數们百刀比且與甲殼類之幾丁聚醣同樣含有約1 〇〇0/〇之 葡糖胺，可溶於稀薄之有機酸中，而不溶於鹼之幾丁聚醣 之性質。咸認此係因含有幾丁聚醣之多醣之葡聚醣部份之 親水性高，而擔任幾丁聚醣部份對於稀薄之有機酸之溶解 性。 實施例4(含有幾丁聚醣之多醣之分子量及吸收光譜） 裝U例3及6所製造之含有幾丁聚醣之多醮之分子量 依測定條件而變化，其結果示於下。 又，使用奥式黏度計測定2次。 表3 測定法 ^ 分子量 製造例3 製造例6 蟹幾丁聚si 膠體過溏層析法 — 約15萬 40萬 奥氏黏度計 6至13萬 14至28萬 40 至 58 < 膠體過濾層析法使用之膠體載體為Cellulofine GCL2000m(生化學工業公司製造商品名），溶劑為1〇%醋 酸。使用之分子量標記為鐵蛋白（ferritin; 44萬）、γ-球蛋 白（γ-globin; 16 萬）、血紅素（hemoglobin; 6.45 萬）、蛋白白 蛋白（albumin; 4·6 萬）、細胞色素 C(cytochrome C; 1.25 31 315570 1247752 萬）。製造例6之含有幾丁聚醣之多醣沒有單一波峰，分散 於5萬至40萬’中心分子量約1 5萬。蟹幾丁聚醣分散於 2萬至100萬中，中心分子量約40萬。

另外，以奥式黏度計，使用〇·2Μ醋酸/O.lMNaCIMM 尿素為溶劑而求分子量，製造例3之含有幾丁聚醣之多醣 為6萬至13萬，製造例6之含有幾丁聚醣之多醣為μ萬 至28萬，蟹幾丁聚醣為40萬至58萬。此處分子量之計算， 係使用Mark-Houwink-櫻田公式[η] = κ · Ma計算。其中，[η] 為由忒驗結果求出之特性黏度，Κ及a值分別使用8·93χ 10-4 與 0.71。 * 氣造例2之含有幾丁聚醣之多醣於濃度為2mg/ml(5% - 醋酸）中測定紫外可見光吸收度。於230至239nm中有小 波峰。 乂本發明之含有幾丁聚醣之多醣以奥式黏度計測定之 分子量為約5萬至約40萬。 上述結果顯不，本發明之含有幾丁聚醣之多醣之葡聚 ^部份為具有複雜分歧構造之葡萄糖之均聚物。再者，葡 ^醣部份之親水性高，由未檢出葡聚醣，且無法以 纖維素酶分解，而推定葡聚醣部份之構造近似帶有多數 β( 1*^ 6)分歧之肝醣（glyc〇gen)或支鏈澱粉之 構造。 、；^例5 (含有幾丁聚醣之多醣之口感測試） ^將本發明製造例2之含有幾丁聚醣之多醣與市售之蟹 成丁來醣，分別供男女各5位共1 0位測試者試吃，每人 32 315570 1247752 50毫克。試吃者全體均感覺蟹幾丁聚餹之不快口感，而本 發明之含有幾丁聚醣之多酶，則全體回答為有良好口味而 全無不快味道。此顯示本發明之含右# T取締 办 〜S有成丁聚醣之多醣添加 於食品中不會損及口味。 實施例6(攝取含有幾丁聚醣之多餹之健康檢查數值之改善 效果） 將本發明製劑例i之含有幾丁聚餹之多酿製劑（每天 ⑽毫克）於6個月期間，、經口投予受試者（54歲男性），調 查各種檢查項目之改善效果。結果（含有幾丁聚釀之多聽之 經口投予前後之檢查數值之變化（54歲男性）示於表4。 表4

本發明之含有幾丁聚醣 予’於尿醣、血糖尿酸等注 正#值。總膽固醇、中性月| 亦顯著。 之多醣之長期（6個月）經口投 思項目有改善效果，數值回到 肪之降低，及血壓的降低作用 315570 33 1247752 · 本發明之含有幾丁聚醣之多醣製劑投予中，生活態度 或環境、體重並無變化，由確認健康檢查數值之改善，而 可謂本發明之含有幾丁聚醣之多醣對於高血壓或糖尿病等 生活習慣病、成人病的檢查數值具有大大改善的效果。 (產業上可利用性） 應用本發明之含有幾丁聚醣之多醣製造技術，可由迄 今被去棄之含有大量幾丁質（ehitin)之產業廢棄物，例如啤 酒酵母或抗生素產生後之放線菌等為微生物固形成分，或 兹類萃取物或各種果實或植物之殘渣，榖類之種皮等而製 造新穎之含有由植物性含量而來之幾Uku 性幾丁聚酷之多·，可期待利用作為醫藥或健 广性食品。當然，該等啤酒或乙醇製造工廠之 產業廢棄物含有大量胺基酸、核酸或蛋白 幾丁聚醣之多at之純化變複雜，@ 人 此3有 :多…料實際上係利用細昆合物聚醣 生產’冀望由此製造含有幾丁聚醣之多醣。由此^二人 .易的製得純度高之含有植物性幾丁聚畴之多膽此而可-輕 •本發明之幾丁聚醣之多酿之製造方 於含有幾丁質之所有穀物或植物成分：上可應用 高。 版之有用性極 315570 34

Claims (1)

1247752 第93104716號專利申請案 申請專利範圍修正本 (94年7月28曰 1. 一種含有幾丁聚醣（chitosan)之多醣，其係具有下列特 性： ' (1) 構成醣··由葡糖胺（gluc〇samine)及葡萄糖 (glucose)所構成，其構成莫耳比為1至5: 5至！； (2) 分子量··經奥氏黏度計（〇stwald，svisc〇ineter) 測定之分子量為5萬至40萬； (3) 構成單位；主要由幾丁聚醣部份及葡聚醣部份 構成； (4) 鍵結種類··含有万（1—4)鍵結及万（1 —6)鍵結， 而不含万（1^3)鍵結； (5) 酵素之分解性：於幾丁聚醣酶中分解為寡醣， 而於纖維素酶中不分解； (6) 蛋白質及還原性多醣：不含蛋白質及還原性多 醣； (7) 呈色反應·硬_殿粉反應呈陰性； (8) 物質顏色：為無色（白色）； 、（9)溶解性：溶解於5至1〇質量％之醋酸、蘋果酸 或抗k血酸之水溶液中，而不溶解於水、乙醇、工〇 以上之鹼性水溶液。 2· ”請專利範圍第！項之含有幾丁聚醣之多冑，其中， 葡萄糖與葡糖胺之構成莫耳比為丨：丨者。 (修正本）315570 1247752 3 ·如申請專利範圍第 歡丁取祕入 項之合有幾丁聚醣之多_ 成丁水醣之含量為18至72%者。 4·如申請專利範圍第丨 ^ , 有幾丁聚醣之多醣，其中， 歲丁4醣部份為葡糖胺之均聚物者。 5 ·如申請專利範圍第 _ 回弟1項之含有幾丁聚醣之多醣，其中， 6 匍聚醣部份為葡萄糖之均聚物者。 一種製造申請專利蘇圊坌 哥〜轭圍弟1至5項中任一項之含有幾丁 聚醣之多畴之方法’其包含將兹類置於25至50質量％ 之苛性驗水溶液中、加熱處理後、使固液分離、將所得 ^口七刀☆解於有機酸水溶液中、於其中添加醇或添加 苛！·生驗使成為pHl〇以上而生成沉殿、清洗該沉殿、乾 燥之。 ’申靖專利圍第6項之含有幾丁聚醣之多醣之製造 方法，其中，於苛性鹼水溶液中加熱處理前，係將菇類 以纖維素酶或葡聚糖酶進行前處理者。 8.如申仴專利範圍第6項之含有幾丁聚醣之多醣之製造 八中 °亥4類為至少一種由雙孢廢兹（Agaricus blSP〇rUS)、玉蕈、椎茸、冬益、舞茸及滑子蒜所成組群· 中選出者。 9· 一種製造申請專利範圍第1至5項中任一項之含有幾丁 聚醣之多醣之方法，其包含將益類置於25至50質量％ 之苛性鹼水溶液中、加熱處理後、將黏度調整為3至 20 mPa · s後、使固液分離、將所得之固形分清洗、乾 燥。 2 (修正本）315570 1247752 9項之含有幾丁聚醣之多醣之製造 3 至 20 mPa · s 者。 於苛性驗水溶液_、加熱處理後、添加水 1 Ο ·如申清專利範圍第 方法’其中，於苛 或I將點度調整為 靜用於生’舌習慣病之治療或預防之醫藥組成物，其係 ^有如申凊專利範圍第1至5項中任一項之含有幾丁聚 酶之多醣作為有效成分者。 •艮口口其係含有申清專利範圍第1至5項中任一項 之含有幾丁聚醣之多醣作為有效成分者。 3 (修正本）315570