CN106579455A - 一种灵芝片剂以及制备灵芝片剂的方法 - Google Patents
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Classifications
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- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
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- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
一种灵芝片剂以及制备灵芝片剂的方法，其中灵芝片剂包括主料和辅料。以重量份计，主料包括6‑9份灵芝多糖、1‑2份麦冬多糖、3‑4.5份百合多糖、1.5‑2.5份知母多糖以及1‑2份灵芝三萜。辅料包括6‑21份填充剂、0.04‑0.5份润滑剂、2‑20份湿润剂以及1‑5份粘合剂。通过灵芝多糖、麦冬多糖、百合多糖、知母多糖以及灵芝三萜之间的协同作用，能够效的清除羟基自由基、DPPH自由基以及ABTS自由基进而抗氧化防止衰老。同时抑制α‑葡萄糖苷酶活性，减少血液中葡萄糖的含量，进而能够降低血糖，预防高血糖的发生。
Description
技术领域
本发明涉及保健领域，且特别涉及一种灵芝片剂以及制备灵芝片剂的方法。
背景技术
血液中的葡萄糖称为血糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。其中，空腹血糖高于>6.0mmol/L且餐后血糖>7.8mmol/L时，即为高血糖。高血糖一方面会使血液粘稠度增加、另一方面会是血管变细、变脆、弹性降低。以致整个循环系统出现障碍，血流不畅、堵塞，甚至使人体的整个机体出现问题。血糖升高使神经细胞内的糖醇出现堆集，循环系统障碍使神经细胞得不到充足的血氧供应直接造成神经细胞的营养不良和障碍性改变。
灵芝在预防或者治疗慢性气管炎、支气管哮喘、冠心病、心律不齐、心绞痛和白细胞减少症等已取得良好的效果，但其在降血糖方面的预防、保健效果还不明确。灵芝作为降血糖的保健药品也未有报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种灵芝片剂，其能够有效的降低血糖值，能有效的预防高血糖的产生，进而预防糖尿病的发生。
本发明的另一目的在于提供一种制备灵芝片剂的方法，通过该方法能够快速制备得到灵芝片剂，同时该方法操作步骤简单，操作条件温和且易于实现，原料易得，具有较大的工业应用前景。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的：
本发明提出一种灵芝片剂，该灵芝片剂主料和辅料。以重量份计，其中，主料包括6-9份灵芝多糖、1-2份麦冬多糖、3-4.5份百合多糖、1.5-2.5份知母多糖以及1-2份灵芝三萜。辅料包括6-21份填充剂、0.04-0.5份润滑剂、2-20份湿润剂以及10-50粘合剂。
本发明提出一种制备灵芝片剂的方法，包括以下步骤将200-450份灵芝、14-40份麦冬、42-90份百合、21-50份知母混合并粉碎后，得到第一混合物。而后通过水提醇沉法处理上述第一混合物，得到第二混合物。将50-100份灵芝粉末与第一乙醇混合后，加热回流得到第三混合物，纯化第三混合物，得到第四混合物。将第二混合物与第四混合物混合。再加入辅料进行混合，得到第五混合物，对第五混合物压片。
本发明实施例的灵芝片剂的有益效果是：灵芝片剂能够有效的清除羟基自由基、DPPH自由基以及ABTS自由基，抗氧化防止人体衰老，间接的预防或者控制糖尿病发生。同时，其能有效地抑制α-葡萄糖苷酶活性，减少血液中葡萄糖的含量，进而能够降低血糖，预防高血糖的发生，进而预防糖尿病的发生。该灵芝片是一种良好的预防糖尿病以及抗衰老的保健品。通过本发明能够快速、便捷的制备该灵芝片剂。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
在本发明的描述中，需要说明的是，术语“第一”、“第二”等仅用于区分描述，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
下面对本发明实施例的灵芝片剂以及制备灵芝片剂的方法进行具体说明。
本发明实施例提供的一种灵芝片剂，以重量份计，该灵芝片剂包括主料和辅料。其中，主料包括6-9份灵芝多糖、1-2份麦冬多糖、3-4.5份百合多糖、1.5-2.5份知母多糖以及1-2份灵芝三萜。优选地，主料包括7-8份灵芝多糖、1.5-2份麦冬多糖、3.5-4份百合多糖、1.5-2份知母多糖以及1-2份灵芝三萜。
通过上述比例制得的灵芝片剂能够良好的抑制α-葡萄糖苷酶的活性，减少葡萄糖苷键断裂的数量以及可能性，进而减少葡萄糖的产生，最终使得人体血液内的葡萄糖数量减少，进而降低血糖。同时，能够有效的提升羟基自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(即DPPH自由基)、ABTS自由基的清除率，进而起到抗氧化、防止衰老、预防糖尿病的发生。
灵芝多糖不溶于高浓度的酒精，微溶于低浓度的酒精及冷水，在热水中能全部溶解。灵芝多糖能提高机体免疫力，加速血液微循环，提高血液供氧能力，降低机体静止状态下的无效耗氧量，消除体内自由基。在本灵芝片剂中，灵芝多糖不仅发挥自身的清除自由基能力同时与麦冬多糖、百合多糖产生协同作用，提升清除自由的能力，同时，能够抑制抑制α-葡萄糖苷酶的活性。
麦冬多糖是麦冬的主要有效成分之一。麦冬多糖是由单糖组成糖苷键型多糖。麦冬多糖具有多种生理功效，在降血糖、免疫调节、抗心肌缺血、抗过敏和平喘等方面都具有药效作用。其降低血糖的方式与百合多糖不一致，因此在该灵芝片剂中麦冬多糖与百合多糖协同降低血糖，提升降血糖的功效。
百合多糖具有抗肿瘤、抗疲劳、清除自由基、调节免疫、降血糖、抗氧化、抑菌等药理作用。百合多糖能修复β-胰岛细胞，增强分泌胰岛素功能以及降低肾上腺皮质激素分泌，以及促进肝脏中血糖转化为糖元的联合作用，从而使血糖降低，能够有效预防甚至治疗糖尿病。百合多糖能够释放其羟基上的活泼氢，捕获自由基，从而阻断自由基的链式反应。
知母多糖是知母中的重要有效成分，是预防甚至是治疗糖尿病的常用药物。知母多糖能够抑制α-葡萄糖苷酶的活性，知母多糖能够促进横隔、脂肪组织对葡萄糖的摄取，使横隔中糖原含量增加，因此知母多糖在降低血糖的同时降低肝糖原的活性。知母多糖能够抑制红细胞自氧化，因此具有抗氧化作用。
三萜类化合物(灵芝酸)属于灵芝的二级代谢物。在灵芝生理生态和生活史研究中发现，菌丝体由一次菌丝、二次菌丝到三次菌丝后，才能纽结产生子实体。灵芝三萜在抗肿瘤、保肝、降血糖、降血脂、增强单核吞噬细胞系与NK细胞功能、增强体液免疫功能、抗放射、镇痛、镇静、抗衰老等方面显示出了较强的活性。
灵芝多糖、百合多糖、麦冬多糖、知母多糖以及灵芝三萜5种活性药物协同作用，不仅能发挥自身降血糖以及抗氧化的功效，同时，能够提升对方的能力，使得灵芝片剂具有更好的降血糖以及抗氧化的功效。
进一步地，辅料包括6-21份填充剂、0.04-0.5份润滑剂、2-20份湿润剂以及1-5份粘合剂。
通过上述份数的辅料发挥药效的活性物质能够与辅料充分混合，便于后续压片时分剂量。同时，片剂易于成型且成型效果好，活性物质在片剂中分布均匀。服用后片剂内的活性物质能够快速的被人体吸收。
填充剂加入物料中可以改善物料性能，或能增容、增重，降低物料的成本的固体物质。通常不含水、中性、不与物料组分起不良作用的有机物、无机物、金属或非金属粉末等均可作为填充剂。药用填充剂的主要作用是用来填充片剂的重量或体积，从而便于压片。
进一步地，填充剂为微晶纤维素、乳糖、糊精中的任意一种。其中，微晶纤维素(MCC)是纤维素部分水解而制得的聚合度较小的结晶性纤维素，具有良好的可压性，有较强的结合力，压成的片剂有较大的硬度。另外，片剂中含20％微晶纤维素时崩解较好。
乳糖是一种优良的片剂填充剂，由牛乳清中提取制得。常用含有一分子水的结晶乳糖(即α-含水乳糖)，无吸湿性，可压性好，性质稳定，与大多数药物不起化学反应，压成的药片光洁美观。
糊精是淀粉水解中间产物的总称，其化学式为(C6H10O5)n.xH20，其水溶物约为80％，在冷水中溶解较慢，较易溶于热水，不溶于乙醇。其具有较强的粘结性，很少单独大量使用糊精作为填充剂，常与糖粉、淀粉配合使用。
润滑剂是一个广义的概念，是助流剂、抗粘剂和(狭义)润滑剂的总称，其中：①助流剂是降低颗粒之间摩擦力从而改善粉末流动性的物质；②抗粘剂是防止原辅料粘着于冲头表面的物质；③(狭义)润滑剂是降低药片与冲模孔壁之间摩擦力的物质，这是真正意义上的润滑剂。本发明种的润滑剂为狭义的润滑剂，为了降低片剂与模具之间的摩擦力。
进一步地，润滑剂为硬脂酸镁、氢化植物油、聚乙二醇中的任意一种。其中，硬脂酸镁用量0.3％-1％为疏水性物质，用量过大片剂不易崩解或溶出，不宜用于乙酰水杨酸、某些抗生素及多数有机碱盐类的片剂。
氢化植物油是一种润滑性能良好的润滑剂。应用时，将其溶于轻质液体石蜡或己烷中，然后将此溶液喷干颗粒上，以利于均匀分布。
聚乙二醇(PEG)为系列产品，产品无毒、无刺激性，味微苦，具有良好的水溶性，并与许多有机物组份有良好的相溶性，具有优良的润滑性。分子量200～600者常温下是液体。
湿润剂指可使物料润湿以产生足够强度的粘性以利于制成颗粒的液体。润湿剂本身无粘性或粘性不强，但可润湿片剂物料并诱发物料本身的粘性，使之能聚结成软材并制成颗粒。
进一步地，湿润剂为乙醇、淀粉浆、羟丙基纤维素中的任意一种。其中，乙醇的体积浓度为30-70％，在其作为湿润剂时，迅速与物料搅拌，搅拌均匀后立即制粒，以减少挥发。淀粉浆为常用的湿润剂，常用8％～15％的浓度，并以10％淀粉浆最为常用。淀粉糊化后有粘性因此其也常作为粘合剂。羟丙基纤维素(HPC)一种非离子型纤维素衍生物。热塑性、成膜性能、粘结性、乳胶稳定性及分散性均好，灰分极少。常温下难溶于苯和乙醚，溶于水、甲醇、乙醇、异丙醇等极性有机溶剂。
粘合剂是最重要的辅助材料之一。粘合剂是具有粘性的物质，借助其粘性能将两种分离的材料连接在一起。而药用粘合剂便是将物料与物料、以及物料与辅料紧密的粘合在一起，有利于软材的制备，便于后于片剂的成型，提升片剂的成型效果。
粘合剂为10％糊精浆溶液、15％明胶溶液、羧甲基纤维素钠溶液中的任意一种。其中糊精浆的浓度为10％的时候，其粘合能力强，同时具有一定的湿润效果，若是糊精浆的浓度过高，则可能与物料不能充分混合，进而导致物料之间的黏结力度不够，压片成型时片剂容易破裂，不能形成完成的片剂。
明胶没有固定的结构和相对分子量，由动物皮肤、骨、肌膜等结缔组织中的胶原部分降解而成为白色或淡黄色、半透明、微带光泽的薄片或粉粒。由于胶原具有较好的粘接作用，因此明胶也具有粘接作用。同时，采用15％的明胶是因为，明胶浓度过大时，明胶过于黏稠，不能与物料充分的混合，影响后续片剂成型效果。明胶浓度过低时，粘接能力不足，同样也影响后续片剂的成型效果。
羟丙基甲基纤维素(CMC-Na)是是葡萄糖聚合度为100～2000的纤维素衍生物，相对分子质量242.16。白色纤维状或颗粒状粉末。无臭，无味，无味，有吸湿性，不溶于有机溶剂，易于分散在水中成透明胶状溶液。其溶液的pH＝7时胶浆的粘度性能最佳。对热稳定，在20℃以下粘度迅速上升。
本发明还提供一种制备灵芝片剂的方法：
S1、将200-450份灵芝、14-40份麦冬、42-90份百合、21-50份知母混合并粉碎后，得到第一混合物；
灵芝、百合、麦冬、知母上述比例混合能够得到对应比例的灵芝多糖、麦冬多糖、百合多糖、知母多糖。将上述四种原料混合制备灵芝多糖、麦冬多糖、百合多糖、知母多糖减少了操作步骤，节约了操作时间，同时能够得到所需的物质。同时，通过前期单独提取可知200-450份灵芝体提取得到6-9份灵芝多糖，14-40份麦冬可提取得到1-2份麦冬多糖，42-90份百合科提取得到3-4.5份百合多糖，21-50份知母可提取得到12-25份知母多糖。上述4中物质之间不会发生化学反应，不会影响生成的物质的活性，生成的物质之间也不会与发生化学反应，保证了灵芝片剂的药效。共同混合提取时，上述4种原料不会影响对方的提取效果，提取效果与单独提取时一致。将上述4中原料粉碎有利于生成物质的制备，粉末通过40目筛，保证粉末的粗细度。增加了原料与提取溶剂的接触面积，便于后续活性物质从原料中溶解出来。本发明中，采用一般的中药粉碎机对上述4中原料进行粉碎即可。
S2、对第一混合物进行水提醇沉得到第二混合物；
S2.1、利用去离子水对第一混合物进行提取处理；
第一混合物中的需要提取的灵芝多糖、知母多糖、百合多糖、麦冬多糖均溶于热水，因此采用去离子水对第一混合物进行处理。上述4中多糖溶解在水中，进而将其从原料中提取出来。而去离子水，是将自来水中阴离子以及阳离子去除后得到的水溶液，采用该水溶液能够尽可能消除水中杂质对实验的影响，降低杂质对药物药效的影响。
优选地，采用的去离子水的量是第一混合物的6-10倍。同时，采用去离子水煎煮2次，煎煮温度为65℃-75℃，每次煎煮时间为1-2小时。提取时采用这样的比例能够将药物粉末完全的浸湿，有利于活性药物从药物粉末中溶解出来。同时，该温度能够使得活性药物完全溶出，而不会因为温度过高而导致活性药物变性，进而影响其药效。反复煎煮2次也是为了尽可能多的获取活性药物。两次煎煮的温度可以一致也可以不一致。
进一步地，过滤上述药物与去离子水的混合溶液得到提取液，浓缩提取液得到浓缩液。过滤是将药渣与提取液进行固液分离，得到所需的提取液。由于提取液中含有大量的去离子水，而活性物质含量相对去离子水而言则较少，若直接采用提取液进行醇沉，所用乙醇量过大，将造成不必要的溶剂浪费。
因此，将提取液进行浓缩得到浓缩液。优选地，采用恒温旋转蒸发仪对提取液进行浓缩，同时，浓缩液的浓缩倍数是提取液的4-6倍。采用恒温旋转蒸发仪使得提取液被加热去除水进行浓缩时，受热均匀，且活性药物分布均匀，避免因为受热不均以及药物分布不均而导致部分药物溶出。该浓缩倍数能够在最大程度上减少乙醇的用量，又保证了活性物质溶解在水中而不会溶解出来。
S2.2、在上述浓缩液中加入第二乙醇进行醇沉；
利用灵芝多糖、百合多糖、麦冬多糖、知母多糖不溶解与高浓度乙醇的性质，将其从浓缩液中提取出来。优选地，所采用的第二乙醇的浓度为95-99％。该浓度范围内的第二乙醇能够将上述四种活性物质完全的从提取液中沉淀出来，若第二乙醇低于该浓度范围，上述四种活性物质则不能沉淀出来。
优选地，采用的第二乙醇的量为浓缩液的4-6倍。采用该倍数的第二乙醇能够将活性物质尽可能地沉淀出来，同时，此时所用的第二乙醇的量也是最少的。
进一步地，上述浓缩液与第二乙醇的混合溶液静置20-24小时后离心得到沉淀物。对混合溶液进行静置，使得活性物质进一步的溶出，同时使得溶出的活性物质尽可能的沉淀到底部。减少沉淀时间不充分，活性药物不能溶出而导致的药物活性降低的可能性。
利用离心进行固液分离，使得沉淀物尽可能的沉淀在离心管底部，达到较好的固液分离效果。优选地，离心的离心时间为5-8分钟，了；离心转速为3500-4500转/分钟。采用上例离心条件进行离心时，离心效果最佳。
S3、真空冷冻干燥上述沉淀物得到第二混合物；
采用真空冷冻干燥上述沉淀物直至恒重，将沉淀物内部以及表面覆盖的溶剂蒸发，降低后续制备片剂过程溶剂对活性以及片剂成型的影响。真空冷冻干燥避免了活性药物因为高温、高压等环境因素而变质。
S4、将50-100份灵芝粉末与第一乙醇混合，加热回流得到第三混合物，并纯化第三混合物得到第四混合物；
由于需要得到的灵芝三萜溶于乙醇，因此，利用乙醇对其进行提取。优选地，所采用的第一乙醇的浓度为93％-98％，第一乙醇的用量为灵芝粉末的10-30倍。该浓度的乙醇能够将灵芝三萜全部溶解出来。同时，通过加热回流，加快了灵芝三萜溶出的速度，节约了提取时间。采用上述第一乙醇与灵芝粉末的用量比，能够将灵芝粉末完全浸透，同时将灵芝三萜全部溶解出来。
进一步地，将第三混合物浓缩至无醇。由于灵芝中还有些许色素以及甾醇同样溶于乙醇，在第一乙醇回流时，这部分杂质也进入第三混合物中，因此，需要对第三混合物进行除杂。将第三混合物浓缩至无醇便于后续的纯化处理，减少纯化过程中，乙醇对灵芝三萜的溶解，提高纯化效果。
进一步地，将无醇的第三混合物通过大孔树脂，而后依次采用去离子水冲洗大孔树脂3-5次，第三乙醇冲洗大孔树脂3-5次。
大孔树脂可以吸附灵芝三萜以及部分色素，采用去离子水冲洗大孔树脂，将第三混合物中水溶性杂质冲洗下来，达到初步纯化。采用多次冲洗，是保证水溶性杂质被完全冲洗干净，不会有水溶性杂质的存在。此时，灵芝三萜仍被大孔树脂所吸附，而后采用第三乙醇冲洗，灵芝三萜溶于乙醇被冲洗下来，而色素依旧被大孔树脂所吸附不会被冲洗下来，进而达到纯化灵芝三萜的目的。优选地，采用的第三乙醇的浓度为95-99％。该浓度的第三乙醇能够尽可能多的将大孔树脂上的灵芝三萜溶解下来，得到尽可能多的灵芝三萜，进而减少乙醇的用量。
进一步地，浓缩第三乙醇冲洗大孔树脂得到的冲洗液并冷冻干燥得到第四混合物。浓缩第三乙醇的冲洗液，降低灵芝三萜的溶解性，进而使得其从冲洗液中溶解出来，得到灵芝三萜的固体。冷冻干燥去除灵芝三萜表面可能含有的乙醇，保证灵芝三萜的纯度，避免溶剂影响后续片剂成型。
S5、将50-70份第二混合物与10-20份第四混合物混合并研磨成细粉过80目筛；
首先将5中活性物质进行混合，保证了5种活性物质之间彼此混合均匀，保证了药物的保健效果。同时，保证了活性药物在每一片片剂中的含量均匀，且保证每片药物中含有相同的活性物质。
混合物再度研磨并通过80目筛保证粉末的细度，保证其能够成功压片成型，同时细粉也便于后续与辅料的混合。
进一步地，将上述药物细粉依次与填充剂、润湿剂、粘合剂混合得到软材。药物细粉首先与填充剂混合，增加了药物细粉的体积以及质量，便于后于与其他辅料的混合。而后与湿润剂混合，降低细粉与填充剂之间的摩擦力，使得二者混合更均匀同时能够贴合在一起。加入粘合剂将药物细粉与填充剂紧密的粘合在一起，便于后于压片成型。
优选地，药物细粉与填充剂混合比例为1:1-2.4:1，湿润剂的使用量为药物细粉与填充剂总量的20％-70％。采用上述比例制备软材保证软材的能够提升药物细粉与填充剂之间的均匀以及粘接程度，同时，保证后续压片成型的效果。
进一步地，上述软材通过16目筛并烘干。通过16目筛，保证了软材之间的颗粒得到均匀度，后续压片大小一致且能成功压片。烘干程度以后续压片，片剂不会散开为宜。烘干软材去除多余的乙醇，多余的乙醇会导致后续片剂过于松软不能很好的成型。乙醇过多时，压片过程中，模具与成型的片剂不易分离，容易粘接。
S6、烘干后的药物颗粒与润滑剂混合均匀得到第五混合物，并压片；
烘干后的颗粒与润滑剂混合，降低了颗粒之间的摩擦力，增加了颗粒的流动性，而又能降低甚至防止颗粒之间粘接。在第五混合物压片时，降低片剂与模具之间的摩擦力，便于片剂与模具分离，保证片剂的完整性。
本发明提供的一种灵芝片剂，利用灵芝多糖消除自由基、百合多糖修复β-胰岛细胞、知母多糖抑制α-葡萄糖苷酶的活性、麦冬多糖以及灵芝三萜的协同作用，共同降低体内血糖，同时能够抗氧化防止衰老并进一步的抑制血糖升高，进而起到保健作用。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种灵芝片剂，其主要包括主料和辅料，其中主料包括6g灵芝多糖，1.5g麦冬多糖，3g百合多糖、1.5g知母多糖以及1g灵芝三萜。辅料包括6g微晶纤维素、2.4g90％乙醇、1g糊精浆以及0.041g硬脂酸镁。
制备该灵芝片剂的方法如下：
300g灵芝、30g麦冬、60g百合、30g知母混合后粉碎通过40目筛得到第一混合物，第一混合物与2520ml去离子水混合并加热至65℃，煎煮2小时，过滤得到第一次提取的提取液。而后再加入2520ml去离子水加热至65℃，煎煮1小时，过滤得到第二次提取的提取液，混合上述两次提取液共3000ml。使用旋转蒸发仪浓缩滤液750ml，浓缩倍数为4倍。在浓缩液中加入96％的3375ml第二乙醇。静置22小时，后离心6分钟，转速为3500转/分钟，而后冷冻干燥至恒重得到第二混合物。
50g灵芝粉末与500ml95％第一乙醇加热回流，收集馏分300ml，旋转蒸发馏分至无醇状态并通过大孔树脂，而后使用250ml去离子水冲洗大孔树脂3次，再使用250ml95％第三乙醇冲洗大孔树脂3次，收集乙醇冲洗液。使用旋转蒸发仪浓缩乙醇冲洗液至恒重即灵芝三萜完全溶出，冷冻干燥得到第四混合物。
5g第二混合物与1g灵芝三萜混合并研磨至细粉，该细粉通过80目筛。该药物细粉与6g微晶纤维素混合，而后加入2.4g90％乙醇、以及1g糊精浆得到软材，该软材通过16目筛，并烘干。烘干后的药物粉末与0.041g硬脂酸镁混合后进行压片即得到灵芝片剂。
实施例2
本实施例提供一种灵芝片剂，其主要包括主料和辅料。其中，主料包括7g灵芝多糖，1g麦冬多糖，3.5g百合多糖、1.5g知母多糖以及1.5g灵芝三萜。辅料包括8.4g乳糖、4.3g羟丙基纤维素1.5g羧甲基纤维素钠溶液以及0.075g聚乙二醇。
本实施例提供制备灵芝片剂的方法与实施例1一致，仅仅是操作条件以及相关比例发生变化。所用灵芝、麦冬、百合、知母依次为280g、18g、63g、28g，所用去离子水的量为2723ml，煎煮时间为1.5小时，两次煎煮温度均为74℃。浓缩倍数为5倍，第二乙醇的浓度为99％，用量为浓缩液的6倍，静置时间为23小时，离心时间为7分钟，转速为4000转/分钟。
提取灵芝三萜是所用灵芝粉末为60g，第一乙醇的浓度为93％，第一乙醇用量为1200ml，纯化时所用去离子水冲洗4次，第三乙醇浓度为97％，并冲洗4次。
制备软材时，第二混合物用量为5.5g，灵芝三萜用量为1.5g。所用填充剂为8.4g乳糖，湿润剂为4.3g羟丙基纤维素，粘合剂为1.5g羧甲基纤维素钠溶液，润滑剂为0.075g聚乙二醇。
实施例3
本实施例提供一种灵芝片剂，其主要包括主料和辅料。其中，主料包括8g灵芝多糖，4.5g百合多糖，1.7g麦冬多糖，2.5g知母多糖以及2g灵芝三萜。辅料包括15.3g糊精、7.2g淀粉浆、2.5g15％明胶溶液以及0.11g氢化植物油。
本实施例提供制备灵芝片剂的方法与实施例1一致，仅仅是操作条件以及相关比例发生变化。所用灵芝、麦冬、百合、知母依次为267g、26g、75g、42g，所用去离子水的量为2976ml，两次煎煮时间均为2小时，两次煎煮温度均为65℃。浓缩倍数为6倍，第二乙醇的浓度为97％，用量为浓缩液的5倍，静置时间为24小时，离心时间为8分钟，转速为4500转/分钟。
提取灵芝三萜是所用灵芝粉末为60g，第一乙醇的浓度为97％，第一乙醇用量为1800ml，纯化时所用去离子水冲洗5次，第三乙醇浓度为99％，并冲洗5次。
制备软材时，第二混合物用量为7g，灵芝三萜用量为2g。所用填充剂为15.3g糊精，湿润剂为7.2g淀粉浆，粘合剂为2.5g15％明胶溶液，润滑剂为0.11g氢化植物油。
实施例4
本实施例提供一种灵芝片剂，其主要包括主料和辅料。其中，主料包括8.5g灵芝多糖，4g百合多糖，2g麦冬多糖，1.7g灵芝三萜以及2g知母多糖。辅料包括15.4g微晶纤维素、10.4ml40％乙醇、2g糊精浆溶液以及0.15g硬脂酸镁。
本实施例提供制备灵芝片剂的方法与实施例1一致，仅仅是操作条件以及相关比例发生变化。所用灵芝、麦冬、百合、知母依次为425g、40g、60g、35g，所用去离子水的量为4200ml，煎煮时间为2小时，两次煎煮温度均为72℃。浓缩倍数为5.5倍，第二乙醇的浓度为98％，用量为浓缩液的4.5倍，静置时间为20小时，离心时间为7分钟，转速为4200转/分钟。
提取灵芝三萜是所用灵芝粉末为70g，第一乙醇的浓度为98％，第一乙醇用量为1750ml，纯化时所用去离子水冲洗4次，第三乙醇浓度为96％，并冲洗4次。
制备软材时，第二混合物用量为6g，灵芝三萜用量为1.7g。所用填充剂为15.4g微晶纤维素，湿润剂为10.4ml40％乙醇，粘合剂为2g糊精浆溶液，润滑剂为0.15g硬脂酸镁。
实施例5
本实施例提供一种灵芝片剂，其主要包括主料和辅料。其中，主料包括9g灵芝多糖，3.7g百合多糖，1.3g麦冬多糖，1.9g灵芝三萜以及2.5g知母多糖。辅料包括20.2g乳糖、20ml60％乙醇、1.4g10％糊精浆溶液以及0.2g氢化植物油。
本实施例提供制备灵芝片剂的方法与实施例1一致，仅仅是操作条件以及相关比例发生变化。所用灵芝、麦冬、百合、知母依次为370g、35g、70g、36g，所用去离子水的量为4344ml，煎煮时间为1.75小时，两次煎煮温度均为68℃。浓缩倍数为4.5倍，第二乙醇的浓度为96％，用量为浓缩液的5.5倍，静置时间为23小时，离心时间为8分钟，转速为4400转/分钟。
提取灵芝三萜是所用灵芝粉末为65g，第一乙醇的浓度为94％，第一乙醇用量为975ml，纯化时所用去离子水冲洗3次，第三乙醇浓度为98％，并冲洗5次。
制备软材时，第二混合物用量为6.5g，灵芝三萜用量为1.9g。所用填充剂为20.2g乳糖，湿润剂为20ml60％乙醇，粘合剂为1.4g10％糊精浆溶液，润滑剂为0.2g氢化植物油。
实施例6
本实施例提供一种灵芝片剂，其主要包括主料和辅料。其中，主料包括8.3g灵芝多糖，4.2g百合多糖，1.6g麦冬多糖，1.3g灵芝三萜以及2.2g知母多糖。辅料包括12.2g糊精、10.1ml70％乙醇、4.5g15％明胶溶液以及0.4g硬脂酸镁。
本实施例提供制备灵芝片剂的方法与实施例1一致，仅仅是操作条件以及相关比例发生变化。所用灵芝、麦冬、百合、知母依次为420g、27g、52g、34g，所用去离子水的量为3731ml，煎煮时间为1.55小时，两次煎煮温度均为75℃。浓缩倍数为5.75倍，第二乙醇的浓度为95％，用量为浓缩液的6倍，静置时间为24小时，离心时间为5分钟，转速为4300转/分钟。
提取灵芝三萜是所用灵芝粉末为81g，第一乙醇的浓度为96％，第一乙醇用量为1377ml，纯化时所用去离子水冲洗3次，第三乙醇浓度为97％，并冲洗5次。
制备软材时，第二混合物用量为6.8g，灵芝三萜用量为1.3g。所用填充剂为12.2g糊精，湿润剂为10.1ml70％乙醇，粘合剂为4.5g15％明胶溶液，润滑剂为0.4g硬脂酸镁。
实施例7
本实施例提供一种灵芝片剂，其主要包括主料和辅料。其中，主料包括7.5g灵芝多糖，3.2g百合多糖，1.1g麦冬多糖，1.2g灵芝三萜以及1.7g知母多糖。辅料包括14.1g糊精、5.1g羟丙基纤维素、3g羧甲基纤维素钠溶液以及0.47g聚乙二醇。
本实施例提供制备灵芝片剂的方法与实施例1一致，仅仅是操作条件以及相关比例发生变化。所用灵芝、麦冬、百合、知母依次为320g、29g、67g、43g，所用去离子水的量为4131ml，煎煮时间为1.25小时，两次煎煮温度为70℃。浓缩倍数为4.4倍，第二乙醇的浓度为97％，用量为浓缩液的5.4倍，静置时间为20小时，离心时间为6分钟，转速为3700转/分钟。
提取灵芝三萜是所用灵芝粉末为83g，第一乙醇的浓度为98％，第一乙醇用量为1660ml，纯化时所用去离子水冲洗3次，第三乙醇浓度为96％，并冲洗4次。
制备软材时，第二混合物用量为5.2g，灵芝三萜用量为1.2g。所用填充剂为14.1g糊精，湿润剂为5.1g羟丙基纤维素，粘合剂为3g羧甲基纤维素钠溶液，润滑剂为0.47g聚乙二醇。
实施例8
本实施例提供一种灵芝片剂，其主要包括主料和辅料。其中，主料包括6.5g灵芝多糖，4.7g百合多糖，1.9g麦冬多糖，1.1g灵芝三萜以及1.9g知母多糖。辅料包括9.4g微晶纤维素、10.1g淀粉浆、5g羧甲基纤维素钠溶液以及0.28g硬脂酸镁。
本实施例提供制备灵芝片剂的方法与实施例1一致，仅仅是操作条件以及相关比例发生变化。所用灵芝、麦冬、百合、知母依次为370g、39g、87g、46g，所用去离子水的量为5420ml，煎煮时间为1.45小时，两次煎煮温度为68℃。浓缩倍数为6倍，第二乙醇的浓度为95％，用量为浓缩液的4倍，静置时间为23小时，离心时间为7分钟，转速为3900转/分钟。
提取灵芝三萜是所用灵芝粉末为92g，第一乙醇的浓度为93％，第一乙醇用量为1600ml，纯化时所用去离子水冲洗4次，第三乙醇浓度为97％，并冲洗4次。
制备软材时，第二混合物用量为6.2g，灵芝三萜用量为1.1g。所用填充剂为9.4g微晶纤维素，湿润剂为10.1g淀粉浆，粘合剂为5g羧甲基纤维素钠溶液，润滑剂为0.28g硬脂酸镁。
对比例1
维生素E
对比例2
阿卡波糖
实验例1
羟基自由基清除率
原理为用Fenton反应法产生羟基自由基(·OH)。而后将实施例1-8以及对比例1分别加入其中，测试A510，判断其清除羟基自由基的能力。
试剂包括：A(9mmol/L FeSO4)、B(9mmol/L水杨酸-乙醇溶液)、C(8.8mmol/L H2O2)、D(不同浓度的实施例1-8以及对比例1的样液)、E(蒸馏水)。不同浓度样品(0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.8mg/mL、1mg/mL、2mg/mL)。
取若干支试管并按照顺序依次编号，按照表1添加试剂，先加A 1.00mL、B 2.00mL及D 2.00mL，最后以C 2.00mL启动反应，在室温下反应1h。以Vc为阳性对照，以同样的方法测定VC的清除率。测A510，其清除率如式下：
表1羟基自由基清除率添加试剂
计算结果见表2；
表2羟基自由基清除率
根据表2可知，整体实施例清除羟基自由基的效果均优于对比例1，并且随着实施例的浓度提升清除效果增加，但是当浓度达到0.2mg/ml后，浓度提升，自由基清除率变化不明显，因此，可推测在低浓度范围内，灵芝片剂已达到良好的清楚自由基效果。
对比例2
DPPH自由基的清除率
试剂的准备：A(0.1mmol/L DPPH溶液)、B(不同浓度的样液)、C(60％乙醇溶液)。不同浓度样品(0.5mg/mL、1mg/mL、2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL)。
取若干试管并按照顺序依次编号，各组按照表3所示分别添加试剂，将试管置于25℃恒温水浴锅中反应30min，由于DPPH见光易分解的性质，整个实验过程中一定要注意避光，水浴完成后测A517。以Vc为阳性对照进行比较。其清除率计算公式如下：
表3 DPPH自由基清除实验添加试剂
结果见表4；
表4 DPPH自由基清除率
根据表4可知，灵芝片剂对DPPH自由基的清除率优于维生素E，在较低浓度时，其清除效果以达到90％，同时，浓度增加，清除率开始缓慢增加而后基本无变化，表明灵芝片剂有良好的清除效果。
实验例3
ABTS自由基的清除率
试剂的准备：A(ABTS工作液)、B(不同浓度的样液)、C(蒸馏水)。不同浓度样品(0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.8mg/mL、1mg/mL、2mg/mL)。
取若干试管并按照顺序依次编号，各组按照表5所示分别添加试剂，室温下静置6min，其间一定要注意避光，测A734。以Vc为阳性对照。计算公式如下：
表5 ABTS自由基清除实验添加试剂
实验结果见表6；
表6 ABTS自由基的清除率
根据表6可知，灵芝片剂对ABTS自由基的清除率明显优于维生素E，在低浓度条件下，灵芝片剂已有较好的清除效果，维生素E的清除效果极低。虽然二者均为浓度增加，清除率提升，但灵芝片剂的提升效果更加明显且随后清除率基本达到100。
实验例4
α-葡萄糖苷酶抑制活性
试剂的准备：A(0.04U/Lα-葡萄糖苷酶)、B(0.5mmol/L PNPG)、C(pH 9.8Na2CO3溶液)、D不同浓度的样品。不同浓度的样品(0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.8mg/mL、1mg/mL、2mg/mL)。
取若干试管并按照顺序编号，将A 400μL、D 800μL在37℃的恒温水浴锅中反应15min后，加入B 400μL开始反应，置于37℃恒温水浴锅中反应30min，最后加入C 2mL终止反应，测A405，具体添加试剂量见表7。以对比例2阿卡波糖标准品为阳性对照。计算抑制率，计算公式如下：
表7葡萄糖苷酶抑制实验添加试剂
实验结果见表8：
表8α-葡萄糖苷酶的抑制率
根据表8可知，灵芝片剂能够抑制α-葡萄糖苷酶活性，且其效果明显优于阿卡波糖。在较低浓度的条件下，灵芝片剂便能良好的抑制α-葡萄糖苷酶活性，进而减少血液中血糖含量，进而降低血糖，起到保健作用。
综上所述，本发明实施例1-8灵芝片剂能够良好的清除羟基自由基、DPPH自由基以及ABTS自由基，起到抗氧化防止衰老的功能并间接的预防或者控制糖尿病发生。同时，其能有效地抑制α-葡萄糖苷酶活性，减少血液中葡萄糖的含量，进而能够降低血糖，预防高血糖的发生，进而预防糖尿病的发生。该灵芝片剂是一种良好的预防糖尿病以及抗衰老的保健品。通过本发明能够快速、便捷的制备该灵芝片剂。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
Claims (10)
1.一种灵芝片剂，其特征在于，所述灵芝片剂包括主料和辅料；以重量份计，所述主料包括6-9份灵芝多糖、1-2份麦冬多糖、3-4.5份百合多糖、1.5-2.5份知母多糖以及1-2份灵芝三萜；所述辅料包括6-21份填充剂、0.04-0.5份润滑剂、2-20份湿润剂以及1-5份粘合剂。
2.根据权利要求1所述的灵芝片剂，其特征在于，以重量份计，所述主料包括7-8份所述灵芝多糖、1.5-2份所述麦冬多糖、3.5-4份所述百合多糖、1.5-2份所述知母多糖以及1-2份所述灵芝三萜。
3.根据权利要求1所述的灵芝片剂，其特征在于，所述填充剂为微晶纤维素、乳糖、糊精中的任意一种；所述润滑剂为硬脂酸镁、氢化植物油、聚乙二醇中的任意一种；所述湿润剂为乙醇、淀粉浆、羟丙基纤维素中的任意一种；所述粘合剂为10％糊精浆溶液、15％明胶溶液、羧甲基纤维素钠溶液中的任意一种。
4.一种制备灵芝片剂的方法，其特征在于，以重量份计，包括以下步骤：将200-450份灵芝、14-40份麦冬、42-90份百合、21-50份知母混合并粉碎后，得到第一混合物；
通过水提醇沉法处理所述第一混合物，得到第二混合物；
将50-100份灵芝粉末与第一乙醇混合后，加热回流得到第三混合物，纯化所述第三混合物，得到第四混合物；
所述第四混合物与所述第二混合物混合后与辅料混合，得到第五混合物，对所述第五混合物压片。
5.根据权利要求4所述的制备灵芝片剂的方法，其特征在于，所述水提醇沉法是利用去离子水提取所述第一混合物得到提取液后，浓缩所述提取液得到浓缩液，所述去离子水的用量为所述第一混合物的6-10倍，所述浓缩液的浓缩倍数为所述提取液的4-6倍。
6.根据权利要求5所述的制备灵芝片剂的方法，其特征在于，利用第二乙醇醇沉所述浓缩液，离心干燥后得到所述第二混合物。
7.根据权利要求6所述的制备灵芝片剂的方法，其特征在于，醇沉所述浓缩液所用的所述第二乙醇的用量为所述浓缩液的4-6倍。
8.根据权利要求7所述的制备灵芝片剂的方法，其特征在于，纯化所述第三混合物是将所述第三混合物通过大孔树脂后，依次采用所述去离子水和第三乙醇分别冲洗所述大孔树脂，并浓缩所述第三乙醇冲洗所述大孔树脂得到的冲洗液。
9.根据权利要求4所述的制备灵芝片剂的方法，其特征在于，所述第一乙醇的用量为所述灵芝粉末的10-30倍。
10.根据权利要求4所述的制备灵芝片剂的方法，其特征在于，得到所述第五混合物的步骤是将所述第二混合物与所述第四混合物的混合物与填充剂以1:1-2.4:1的比例进行混合，而后加入润湿剂、粘合剂、润滑剂混合得到所述第五混合物。
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| CN102283995A (zh) * | 2011-07-07 | 2011-12-21 | 黑龙江久久药业有限责任公司 | 一种治疗糖尿病的中药制剂及其制备方法 |
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