CN115804450A - 一种富硒灵芝孢子粉深度加工工艺及其组合物、组合物的应用 - Google Patents
一种富硒灵芝孢子粉深度加工工艺及其组合物、组合物的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本申请属于食品营养科学技术领域，公开了一种富硒灵芝孢子粉深度加工工艺及其组合物、组合物的应用；一种富硒灵芝孢子粉组合物，包括以下质量份的原料：灵芝孢子油20‑40份、灵芝孢子粉提取物A 30‑40份以及灵芝孢子粉提取物B 30‑40份；本申请通过萃取、酶解、离心、超滤、纳滤、冷冻干燥等技术手段，可实现灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质、有机硒等营养物质得到充分释放和富集，提取率高，能够促进人体，特别是消化功能减退的老年群体对这些有效营养成分的吸收和利用。
Description
技术领域
本申请属于食品营养科学技术领域，涉及一种富硒灵芝孢子粉深度加工工艺及其组合物、组合物的应用。
背景技术
硒元素是一种人体必需的微量营养元素，生理功能作用巨大，如适量的硒补充有助于增强体内含硒酶（如谷胱甘肽过氧化酶等）的活性，清除过量自由基从而提高机体抗氧化能力，调节甲状腺代谢，提高机体免疫力，保护肝脏和胰腺细胞，预防和治疗心脑血管疾病及癌症等。1988年营养学会提出成人每天推荐补硒量为50-250微克，最高不可超过400微克。当然针对不同人群补硒量也是不同，需要根据医生或者营养师的推荐服用量服用，因为合适的补硒量才会达到一定的保健效果。科学、安全、高效、私人定制化精准补硒是补硒类保健品、药品的发展要求和趋势，一般遵循四个原则：1、缺多少补多少；2、定量补充；3、正确的服用方法；4、食补为主，药补为辅。研究表明，不同于有毒的无机硒，有机硒（如硒代蛋氨酸、硒代胱氨酸和硒代半胱氨酸等）是硒元素最具营养价值且更安全的一种存在形式。富硒灵芝孢子粉是一种高效、安全的营养补硒剂，富硒灵芝孢子粉中的硒含量达到20-150 mg/kg（即20-150ppm），在灵芝的生长过程中人为添加硒元素，硒元素能够与灵芝孢子粉中的蛋白质和多糖有机结合，形成富硒蛋白质和富硒多糖，被人体吸后能够增强人体的免疫力，提高人的生活质量。
灵芝孢子是灵芝发育后期弹射释放出来的种子，集中起来呈粉末状，通称灵芝孢子粉。灵芝孢子粉在增强人体免疫，抑制肿瘤的效果方面都远远超过其灵芝母体。除有机硒外，富硒灵芝孢子粉中还含有许多对人体具有重要生理作用的活性成分，如灵芝蛋白、灵芝多肽、灵芝多糖、氨基酸、脂肪酸、三萜类化合物、生物碱、甾醇类化合物、核苷类、常量和微量元素、多种维生素等。其中，灵芝多肽是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物，具备大多蛋白质所没有的生理调节功能，灵芝多肽具有保肝护肝等功效；灵芝多糖主要是指具有生理活性的单糖聚合体，灵芝多糖具有抗肿瘤及提高肌体免疫活性、清除自由基、抗衰老、抗血栓、抗凝血等作用，是灵芝具有扶正固本的主要有效成分，目前已分离出的灵芝多糖有200多种，其中大部分为β–葡聚糖，少数为α–葡聚糖，除一小部分小分子多糖外，大多不溶于高浓度酒精，在热水中溶解，大多存在于细胞内壁。通过萃取技术可以提取出灵芝孢子粉中的油性成分，俗称灵芝孢子油，为黄色透明液体，主要成份是饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸等，含有少量灵芝酸成分，有抗脑缺血/再灌注损伤、抗氧化清除自由基、软化血管、净化血管、调整血管压力等作用。
然而，富硒灵芝孢子粉具有一层难以被人体消化系统消化的坚硬外壁，主要成分是几丁质、纤维素，使人体的消化系统对富硒灵芝孢子粉的消化吸收不充分，造成有效成分的流失，为了促使富硒灵芝孢子粉中的有效成分溶出，科研人员提出了一些有效的破壁方法，例如现有技术中通过采用超音速气流微粉碎法，并制成了胶囊，每百克产品含灵芝多糖6.12g，蛋白质14.15g，比同类产品高36%以上，目前，市场上已经能够购得破壁后的富硒灵芝孢子粉。为了提高富硒灵芝孢子粉有效成分的含量，科研人员还提出了一些对破壁灵芝孢子粉的去壁精制工艺，进而有效提高人体对这些成分的吸收和利用率，例如现有技术中通过采用去壁方法，分别用乙醇溶液浸泡、水提等方式，实现了有效成分和壁壳的分离，提取物中灵芝多糖、灵芝多肽的含量相比于去壁之前均有所提高，但提取的效率并不高，原因是富硒灵芝孢子粉中的部分有效成分是以高分子的形式存在，如蛋白质和分子量较大的多糖，虽然含有亲水基团，但这些高分子在乙醇和水中的分散能力是非常有限的，此外部分有效成分通过共价键与外壁结合，去壁的同时也造成这部分有效成分的流失和浪费，经济效益不高。
因此，在富硒灵芝孢子粉深度加工领域，仍然迫切需要发展一种既有高提取效率、又能够对有效营养成分高效富集的加工方法。
发明内容
针对现有技术的不足，本申请提供了一种基于生物酶解原理从富硒灵芝孢子粉中提取有效成分的加工方法。本申请通过萃取、酶解、离心、超滤、纳滤、冷冻干燥等技术手段，可实现灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质、有机硒等营养物质得到充分释放和富集，提取率高，能够促进人体，特别是消化功能减退的老年群体对这些有效营养成分的吸收和利用。
本申请中灵芝氨基酸类物质包括灵芝多肽及氨基酸。
第一方面，本申请提供一种富硒灵芝孢子粉组合物，采用如下的技术方案：
一种富硒灵芝孢子粉组合物，包括以下质量份的原料：灵芝孢子油20-40份、富硒灵芝孢子粉提取物A 30-40份以及富硒灵芝孢子粉提取物B 30-40份。
优选的, 每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖3.5-12.0g、灵芝氨基酸类物质25.2-48.1g、有机硒6.1-12.5mg；每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖40.4-65.2g、灵芝氨基酸类物质8.3-19.2g、有机硒0.8-2.6mg。
其中，灵芝氨基酸类物质包括灵芝多肽及氨基酸。
通过采用上述技术方案，本申请得到一种具有高含量的灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质、有机硒的富硒灵芝孢子粉组合物。本申请中的富硒灵芝孢子粉组合物，其灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质、有机硒的含量和富集效果均优于市场同类产品，在保证功效的提前下，可减少人体每天所需的服用量和服用次数。
第二方面，本申请提供一种用于制备富硒灵芝孢子粉组合物的方法，采用如下的技术方案：
一种富硒灵芝孢子粉组合物的制备方法，步骤如下：
（1）利用6号溶剂油或正己烷或超临界CO2萃取出富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油，将萃取后的不溶物经离心、烘干后得到去油富硒灵芝孢子粉；
（2）对步骤（1）制备的去油富硒灵芝孢子粉进行酶解，具体方式为：向去油富硒灵芝孢子粉中加入纯水得到悬液，加入酶，并在适宜的温度和pH条件下进行第一次酶解，酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉酶解液；
（3）对步骤（2）所得富硒灵芝孢子粉酶解液进行分离和提纯，具体方式为：对富硒灵芝孢子粉酶解液进行高速离心处理，以实现溶液和固态不溶物的初步分离，将上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，以实现分子量较大的酶与分子量较小的灵芝多糖等酶解产物的分离，超滤后的滤液用盐酸或碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，滤液再经冷冻干燥得到富硒灵芝孢子粉提取物A；对A中的各营养成分进行定量分析；
（4）将步骤（3）中所得固态不溶物加水分散，加入酶，在适宜的温度和pH条件下进行第二次酶解；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉第二次酶解液；
（5）对步骤（4）所得富硒灵芝孢子粉第二次酶解液进行分离和提纯，具体方式为：对富硒灵芝孢子粉第二次酶解液进行高速离心处理，以实现溶液和固态不溶物的分离，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，以实现分子量较大的酶与分子量较小的灵芝多糖等酶解产物的分离，超滤后的滤液用盐酸或碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，滤液再经冷冻干燥得到富硒灵芝孢子粉提取物B；对富硒灵芝孢子粉提取物B中的各营养成分进行定量分析；
（6）将灵芝孢子油、富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B进行混合，得到富硒灵芝孢子粉组合物。
本申请公开了一种从富硒灵芝孢子粉中提取有效成分的方法，将有效营养成分和人体无法消化吸收的无效成分充分分离，能够充分提取出富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油、灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质、有机硒等营养物质，分别得到灵芝孢子油、富硒灵芝孢子粉提取物A以及富硒灵芝孢子粉提取物B，优化条件下，酶解产率高达30%以上。
经过本申请的富硒灵芝孢子粉加工工艺，制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物中，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖3.5-12.0g、灵芝氨基酸类物质25.2-48.1g、有机硒6.1-12.5mg；每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖40.4-65.2g、灵芝氨基酸类物质8.3-19.2g、有机硒0.8-2.6mg。
其中，灵芝氨基酸类物质包括灵芝多肽及氨基酸。
经检测，每一百克市售破壁灵芝孢子粉中含有灵芝多糖2.1g、蛋白质18.5g、有机硒0.01mg，每一百克市售破壁富硒灵芝孢子粉中含有灵芝多糖2.3g、蛋白质16.9g、有机硒2.5mg。本申请方法制备出的富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B中的灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质、有机硒的含量和富集效果均优于市场同类产品，在保证功效的提前下，可减少人体每天所需的服用量和服用次数。
本申请中通过对工艺的改进，尽可能将富硒灵芝孢子粉中的某一种活性成分较集中地分布在富硒灵芝孢子粉提取物A以及富硒灵芝孢子粉提取物B中，富硒灵芝孢子粉提取物A中灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）含量高，而富硒灵芝孢子粉提取物B中灵芝多糖的含量高，从而实现对富硒灵芝孢子粉中有效成分的分类提取，已方便后续针对不同人群需要设计出更为科学、合理的营养配方，制定私人定制式的营养补充方案。
优选的，本申请中通过在工艺中加入了一步用截留分子量为10kDa的超滤膜进行超滤以实现酶和酶解液的分离，大部分酶的分子量都在10kDa以上。
优选的，步骤（2）中加入的纯水的质量为去油富硒灵芝孢子粉质量的15-30倍。
优选的，步骤（2）中一次酶解时，酶的总加入量为去油富硒灵芝孢子粉质量的4%-6%，酶解时间为6-24h。
优选的，步骤（2）中所用的酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、纤维素酶、几丁质酶中至少一种。
优选的，步骤（5）中二次酶解时，酶的总加入量为固态不溶物质量的4%-6%，酶解时间为6-24h。
优选的，步骤（5）中所用的酶为纤维素酶、几丁质酶中的一种或两种。
本申请中通过两次酶解，尽可能将富硒灵芝孢子粉中的某一种活性成分较集中地分布在富硒灵芝孢子粉提取物A或者富硒灵芝孢子粉提取物B中；由于去油富硒灵芝孢子粉中蛋白含量较高，必须使用蛋白酶进行酶解，才能得到较高的蛋白酶解率，蛋白酶的使用是整个工艺的基础；另外，本申请中通过使用其他生物酶，比如纤维素酶、几丁质酶，对糖苷键进行酶解，以获得更高的酶解率和多糖提取量，本申请中通过多种酶联用的方式，保证了充分酶解，从而可以获得更高的酶解率。
第三方面，本申请提供一种富硒灵芝孢子粉组合物的精制工艺，采用如下的技术方案：
一种富硒灵芝孢子粉组合物的精制工艺，步骤如下：
（1）微囊化，在氮气氛围中，将阿拉伯胶和纯水按质量比1:（3-5）混合均匀，充分搅拌30min后，加入阿拉伯胶质量0.5-1倍的富硒灵芝孢子粉组合物，以12000-18000r/min的剪切速率高速剪切2-4min，得到水包油型乳液；
（2）将水包油型乳液通过高压均质机在900-1200MPa的压力下进行高压均质，时间3-5min，循环3-5次，得到高压均质乳液；
（3）将冻干保护剂和高压均质乳液按质量比1:（3-6）混合均匀，冷冻干燥36-48h，制得富硒灵芝孢子粉精制粉剂。
由于灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、有机硒三种营养物质在富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B的差异性分布，后期还能够根据使用人群的实际需要，对含有灵芝孢子油、富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B的富硒灵芝孢子粉组合物进行精制加工处理，并将富硒灵芝孢子粉组合物经过精制处理后，定量复配制备出易被人体吸收的精制粉剂、胶囊、片剂等方便携带的营养保健品，实现对各种营养成分的精准控制，以达到定制化、综合的保健功效。在减少富硒灵芝孢子粉服用量和次数的同时，提高人体对有效营养成分的吸收和利用效率，可推广使用。
第四方面，本申请提供一种药品或保健品，采用如下的技术方案：
一种药品或保健品，包括富硒灵芝孢子粉组合物。
一种药品或保健品，包括精制后的富硒灵芝孢子粉组合物。
其中，药品或保健品的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、糖浆剂、分散剂、膏剂。
通过采用上述技术方案，将富硒灵芝孢子粉组合物或精制后的富硒灵芝孢子粉组合物，制备出易被人体吸收的精制粉剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、糖浆剂、分散剂、膏剂等方便携带的营养保健品，实现对各种营养成分的精准控制，以达到定制化、综合的保健功效。在减少富硒灵芝孢子粉服用量和次数的同时，提高人体对有效营养成分的吸收和利用效率，可推广使用。
综上所述，本申请包括以下至少一种有益技术效果：
本申请中通过对富硒灵芝孢子粉加工工艺的改进，能够充分提取出富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油、灵芝氨基酸类物质、灵芝多糖、有机硒等营养物质，并且本申请中通过对富硒灵芝孢子粉加工工艺的改进，使酶解产率高达30%以上；
通过本申请的加工工艺制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物，其灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质、有机硒的含量较高，在保证功效的提前下，可减少人体每天所需的服用量和服用次数。
附图说明
图1为富硒灵芝孢子粉加工工艺流程图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例，对本申请作进一步的说明。
下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等，均可通过正规商业途径获得。在实施例和对比例中，若无特别说明，本申请中所用的原料均为市售的。
本申请中所用富硒灵芝孢子粉均为市售破壁富硒灵芝孢子粉(生产厂家为江苏泓寿生物工程有限公司，国食健字G20160346)。
下述实施例中所涉及的实验方法，检测方法等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规实验方法，检测方法等。实施例中，多糖测定采用（GB/T 15672-2009，食用菌中总糖含量的测定）；氨基酸类物质（包括氨基酸、多肽、蛋白质）的测定采用凯氏定氮法（GB5009.5-2016，食品中蛋白质的测定，第一法，凯氏定氮法）；总Se含量的测定采用（GB5009.268-2016，食品中多元素的测定，第一法，ICP-MS法）
实施例1：
一种富硒灵芝孢子粉组合物，包括以下质量份的原料：灵芝孢子油20份、富硒灵芝孢子粉提取物A 40份、富硒灵芝孢子粉提取物B 40份。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖12g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）48.1g，有机硒10.3mg。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖65.2g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）18.1g，有机硒1.5mg 。
实施例2：
一种富硒灵芝孢子粉组合物，包括以下质量份的原料：灵芝孢子油40份、富硒灵芝孢子粉提取物A 30份、富硒灵芝孢子粉提取物B 30份。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖3.6g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）34.7g，有机硒10.5mg。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖50.8g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）11.3g，有机硒1.6mg。
实施例3：
一种富硒灵芝孢子粉组合物，包括以下质量份的原料：灵芝孢子油30份、富硒灵芝孢子粉提取物A 35份、富硒灵芝孢子粉提取物B 35份。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖7.9g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）34.9g，有机硒10.1mg。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖59.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）17.2g，有机硒1.6mg。
实施例4：
一种富硒灵芝孢子粉组合物，包括以下质量份的原料：灵芝孢子油30份、富硒灵芝孢子粉提取物A 35份以及富硒灵芝孢子粉提取物B 35份。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖8.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）35.1g，有机硒12.5mg。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖49.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）8.3g，有机硒0.8mg。
实施例5：
一种富硒灵芝孢子粉组合物，包括以下质量份的原料：灵芝孢子油30份、富硒灵芝孢子粉提取物A 35份以及富硒灵芝孢子粉提取物B 35份。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖6.9g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）25.2g，有机硒6.1mg。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖47.8g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）19.2g，有机硒2.6mg。
实施例6：
一种富硒灵芝孢子粉组合物，包括以下质量份的原料：灵芝孢子油30份、富硒灵芝孢子粉提取物A 35份以及富硒灵芝孢子粉提取物B 35份。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖3.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）33.8g，有机硒10.2mg。
每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖40.4g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）17.3g，有机硒1.5mg。
实施例7：
实施例1的富硒灵芝孢子粉组合物，加工工艺的步骤如下：
（1）将200g富硒灵芝孢子粉与6号溶剂油400mL混合，得到悬浊液，超声处理10分钟，利用6号溶剂油萃取出富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油，不溶物经离心、烘干后得到去油富硒灵芝孢子粉130g以及灵芝孢子油40g。
（2）称取步骤（1）中制备的去油富硒灵芝孢子粉20g进行酶解，向去油富硒灵芝孢子粉中加入600mL的水，搅拌得到富硒灵芝孢子粉悬液，再加入胃蛋白酶0.4g，用浓度1M的盐酸调节pH至2.30，水浴37℃恒温条件下，酶解6h；再加入胰蛋白酶0.4g，用浓度为1M的氢氧化钠溶液调整富硒灵芝孢子粉悬液的pH至8.50，水浴50℃恒温条件下，酶解6h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉酶解混合液。
（3）对步骤（2）所得富硒灵芝孢子粉酶解混合液进行分离和提纯：先对富硒灵芝孢子粉酶解液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝肽、氨基酸、灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的盐酸调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，得到固态不溶物15.5g，将除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物A 5.4g，对富硒灵芝孢子粉提取物A中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖12g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）48.1g，有机硒10.3mg。
（4）将步骤（3）中所得固态不溶物15.5g加水600mL进行分散，加入纤维素酶0.62g进行第二次酶解，用浓度1M盐酸调整混合液pH至6.00，水浴50℃恒温条件下，酶解时间6h，酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液。
（5）对步骤（4）所得富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液进行分离和提纯，先对第二次酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，除盐后的滤液经冷冻干燥，得到富硒灵芝孢子粉提取物B 1.6g，对富硒灵芝孢子粉提取物B中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖65.2g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）18.1g，有机硒1.5mg；根据富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B的质量总和，计算出酶解产率为35.0%。
（6）分别取灵芝孢子油20质量份、富硒灵芝孢子粉提取物A 40质量份、富硒灵芝孢子粉提取物B 40质量份，混合并充分搅拌后得到富硒灵芝孢子粉组合物。
实施例8：
实施例2的富硒灵芝孢子粉组合物，加工工艺的步骤如下：
（1）将200g富硒灵芝孢子粉与正己烷400mL混合，得到悬浊液，超声处理10分钟，利用正己烷萃取出富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油，不溶物经离心、烘干后得到去油富硒灵芝孢子粉132g以及灵芝孢子油42g。
（2）称取步骤（1）中制备的去油富硒灵芝孢子粉20g进行酶解，向去油富硒灵芝孢子粉中加入600mL的水，搅拌得到富硒灵芝孢子粉悬液，再加入胃蛋白酶0.6g，用浓度1M的盐酸调节pH至2.30，水浴37℃恒温条件下，酶解12h；再加入胰蛋白酶0.6g，用浓度为1M的氢氧化钠溶液调整富硒灵芝孢子粉悬液的pH至8.50，水浴50℃恒温条件下，酶解12h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉酶解混合液。
（3）对步骤（2）所得富硒灵芝孢子粉酶解混合液进行分离和提纯，先对酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝肽、氨基酸、灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的盐酸调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，得到固态不溶物15.0g，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物A 5.3g，对富硒灵芝孢子粉提取物A中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖3.6g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）34.7g，有机硒10.5mg。
（4）将步骤（3）中所得固态不溶物15g加水600mL进行分散，加入几丁质酶0.9g进行第二次酶解，用浓度1M盐酸调整混合液pH至6.00，水浴50℃恒温条件下，酶解时间12h。酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液。
（5）对步骤（4）所得富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液进行分离和提纯，先对第二次酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物B 1.3g，对富硒灵芝孢子粉提取物B中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖50.8g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）11.3g，有机硒1.6mg。根据富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B的质量总和，计算出酶解产率为33.0%。
（6）分别取灵芝孢子油40质量份、富硒灵芝孢子粉提取物A 30质量份、富硒灵芝孢子粉提取物B 30质量份，混合并充分搅拌后得到富硒灵芝孢子粉组合物。
实施例9：
实施例3的富硒灵芝孢子粉组合物，加工工艺的步骤如下：
（1）采用超临界萃取CO2流体对200g富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油进行提取，超临界萃取的压力为30MPa，温度为42℃，CO2流量为3.0L/min，萃取时间为6h；不溶物经离心、烘干后得到去油富硒灵芝孢子粉125g以及灵芝孢子油50g。
（2）称取步骤（1）中制备的去油富硒灵芝孢子粉20g进行酶解，向去油富硒灵芝孢子粉中加入600mL的水，搅拌得到富硒灵芝孢子粉悬液，再加入胃蛋白酶0.5g，用浓度1M的盐酸调节pH至2.30，水浴37℃恒温条件下，酶解9h；再加入碱性蛋白酶0.5g，用浓度为1M的氢氧化钠溶液调整富硒灵芝孢子粉悬液的pH至10.00，水浴55℃恒温条件下，酶解9h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉酶解混合液。
（3）对步骤（2）所得富硒灵芝孢子粉酶解混合液进行分离和提纯，先对酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝肽、氨基酸、灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的盐酸调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，得到固态不溶物15.4g，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物A 5.1g，对富硒灵芝孢子粉提取物A中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖7.9g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）34.9g，有机硒10.1mg。
（4）将步骤（3）中所得固态不溶物15.4g加水600mL进行分散，加入纤维素酶0.385g、几丁质酶0.385g进行第二次酶解，用浓度1M盐酸调整混合液pH至6.00，水浴50℃恒温条件下，酶解时间9h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液。
（5）对步骤（4）所得富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液进行分离和提纯，先对第二次酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物B 1.6g，对富硒灵芝孢子粉提取物B中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖59.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）17.2g，有机硒1.6mg。根据富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B的质量总和，计算出酶解产率为33.5%。
（6）分别取灵芝孢子油30质量份、富硒灵芝孢子粉提取物A 35质量份、富硒灵芝孢子粉提取物B 35质量份，混合并充分搅拌后得到富硒灵芝孢子粉组合物。
实施例10：
实施例4的富硒灵芝孢子粉组合物，加工工艺的步骤如下：
（1）采用超临界萃取CO2流体对200g富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油进行提取，超临界萃取的压力为30MPa，温度为42℃，CO2流量为3.0L/min，萃取时间为6h；不溶物经离心、烘干后得到去油富硒灵芝孢子粉125g以及灵芝孢子油50g。
（2）称步骤（1）中制备的去油富硒灵芝孢子粉20g进行酶解，向去油富硒灵芝孢子粉中加入600mL的水，搅拌得到富硒灵芝孢子粉悬液，加入胰蛋白酶0.5g，用浓度为1M的氢氧化钠溶液调整富硒灵芝孢子粉悬液的pH至8.50，水浴50℃恒温条件下，酶解9h；再加入碱性蛋白酶0.5g，用浓度为1M的氢氧化钠溶液调整富硒灵芝孢子粉悬液的pH至10.00，水浴55℃恒温条件下，酶解9h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉酶解混合液。
（3）对步骤（2）所得富硒灵芝孢子粉酶解混合液进行分离和提纯，先对酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝肽、氨基酸、灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的盐酸调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，得到固态不溶物15.8g，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物A 4.7g，对富硒灵芝孢子粉提取物A中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖8.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）35.1g，有机硒12.5mg。
（4）将步骤（3）中所得固态不溶物15.8g加水600mL进行分散，加入纤维素酶0.395g、几丁质酶0.395g进行第二次酶解，用浓度1M盐酸调整混合液pH至6.00，水浴50℃恒温条件下，酶解时间9h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液。
（5）对步骤（4）所得富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液进行分离和提纯，先对第二次酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物B 1.8g，对富硒灵芝孢子粉提取物B中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖49.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）8.3g，有机硒0.8mg；根据富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B的质量总和，计算出酶解产率为32.5%。
（6）分别取灵芝孢子油30质量份、富硒灵芝孢子粉提取物A 35质量份、富硒灵芝孢子粉提取物B 35质量份，混合并充分搅拌后得到富硒灵芝孢子粉组合物。
实施例11：
实施例5的富硒灵芝孢子粉组合物，加工工艺的步骤如下：
（1）采用超临界萃取CO2流体对200g富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油进行提取，超临界萃取的压力为30MPa，温度为42℃，CO2流量为3.0L/min，萃取时间为6h；不溶物经离心、烘干后得到去油富硒灵芝孢子粉125g以及灵芝孢子油50g。
（2）称步骤（1）中制备的去油富硒灵芝孢子粉20g进行酶解，向去油富硒灵芝孢子粉中加入600mL的水，搅拌得到富硒灵芝孢子粉悬液，加入胃蛋白酶0.5g，用浓度1M的盐酸调节pH至2.30，水浴37℃恒温条件下，酶解9h；再加入木瓜蛋白酶0.5g，用浓度为1M的碳酸氢钠溶液调整富硒灵芝孢子粉悬液的pH至6.00，水浴55℃恒温条件下，酶解9h。酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉酶解混合液。
（3）对步骤（2）所得富硒灵芝孢子粉酶解混合液进行分离和提纯，先对酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝肽、氨基酸、灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，得到固态不溶物17.0g，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物A 3.6g，对富硒灵芝孢子粉提取物A中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖6.9g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）25.2g，有机硒6.1mg。
（4）将步骤（3）中所得固态不溶物17.0g加水600mL进行分散，加入纤维素酶0.425g、几丁质酶0.425g进行第二次酶解，用浓度1M盐酸调整混合液pH至6.00，水浴50℃恒温条件下，酶解时间9h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液。
（5）对步骤（4）所得富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液进行分离和提纯，先对第二次酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物B 1.8g，对富硒灵芝孢子粉提取物B中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖47.8g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）19.2g，有机硒2.6mg；根据富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B的质量总和，计算出酶解产率为27.0%。
（6）分别取灵芝孢子油30质量份、富硒灵芝孢子粉提取物A 35质量份、富硒灵芝孢子粉提取物B 35质量份，混合并充分搅拌后得到富硒灵芝孢子粉组合物。
实施例12：
实施例6的富硒灵芝孢子粉组合物，加工工艺的步骤如下：
（1）采用超临界萃取CO2流体对200g富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油进行提取，超临界萃取的压力为30MPa，温度为42℃，CO2流量为3.0L/min，萃取时间为6h；不溶物经离心、烘干后得到去油富硒灵芝孢子粉125g以及灵芝孢子油50g。
（2）称步骤（1）中制备的去油富硒灵芝孢子粉20g进行酶解，向去油富硒灵芝孢子粉中加入600mL的水，搅拌得到富硒灵芝孢子粉悬液，加入木瓜蛋白酶0.5g，调节pH至6.50，水浴55℃恒温条件下，酶解9h；再加入碱性蛋白酶0.5g，用浓度为1M的氢氧化钠溶液调整富硒灵芝孢子粉悬液的pH至10.00，水浴55℃恒温条件下，酶解9h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉酶解混合液。
（3）对步骤（2）所得富硒灵芝孢子粉酶解混合液进行分离和提纯，先对酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝肽、氨基酸、灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的盐酸调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，得到固态不溶物15.2g，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物A 5.0g，对富硒灵芝孢子粉提取物A中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖3.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）33.8g，有机硒10.2mg。
（4）将步骤（3）中所得固态不溶物15.2g加水600mL进行分散，加入纤维素酶0.38g、几丁质酶0.38g进行第二次酶解，用浓度1M盐酸调整混合液pH至6.00，水浴50℃恒温条件下，酶解时间9h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液。
（5）对步骤（4）所得富硒灵芝孢子粉第二次酶解混合液进行分离和提纯，先对第二次酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物B 1.4g，对富硒灵芝孢子粉提取物B中的各营养成分进行定量分析，每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖40.4g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）17.3g，有机硒1.5mg。根据富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B的质量总和，计算出酶解产率为32.0%。
（6）分别取灵芝孢子油30质量份、富硒灵芝孢子粉提取物A 35质量份、富硒灵芝孢子粉提取物B 35质量份，混合并充分搅拌后得到富硒灵芝孢子粉组合物。
实施例13：
实施例7制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物进行精制，精制工艺的步骤如下：
在氮气氛围中，将阿拉伯胶30g和纯水150g混合均匀，充分搅拌30min后，加入富硒灵芝孢子粉组合物15g，以12000r/min的剪切速率高速剪切2min，得到水包油型乳液；通过高压均质机在900MPa的压力下进行高压均质，时间3min，循环3次，得到高压均质乳液195g；将冻干保护剂32.5g和高压均质乳液195g混合均匀，冷冻干燥36h，得到富硒灵芝孢子粉精制粉剂，该粉剂在水中具有很好的分散性，可直接冲服。
实施例14：
实施例8制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物进行精制，精制工艺的步骤如下：
在氮气氛围中，将阿拉伯胶30g和纯水90g混合均匀，充分搅拌30min后，加入富硒灵芝孢子粉组合物30g，以18000r/min的剪切速率高速剪切4min，得到水包油型乳液，通过高压均质机在1200MPa的压力下进行高压均质，时间5min，循环5次，得到高压均质乳液150g，将冻干保护剂50g和高压均质乳液150g混合均匀，冷冻干燥48h，得到富硒灵芝孢子粉精制粉剂。
实施例15：
实施例9制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物进行精制，精制工艺的步骤如下：
在氮气氛围中，将阿拉伯胶30g和纯水120g混合均匀，充分搅拌30min后，加入富硒灵芝孢子粉组合物22.5g，以15000r/min的剪切速率高速剪切3min，得到水包油型乳液，通过高压均质机在1050MPa的压力下进行高压均质，时间4min，循环4次，得到高压均质乳液172.5g，将冻干保护剂43.1g和高压均质乳液172.5g混合均匀，冷冻干燥42h，得到富硒灵芝孢子粉精制粉剂。
实施例16：
实施例10制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物进行精制，精制工艺的步骤与实施例15相同。
实施例17：
实施例11制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物进行精制，精制工艺的步骤与实施例15相同。
实施例18：
实施例12制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物进行精制，精制工艺的步骤与实施例15相同。
实施例19：
将实施例14制备得到的富硒灵芝孢子粉精制粉剂进一步制成胶囊。
胶囊的具体步骤如下：向富硒灵芝孢子粉精制粉剂20g中加入润湿剂（质量分数为65%的食用酒精）13g，搅拌制软材，用颗粒机制粒，过筛（30目），制粒后的湿颗粒在烘箱中干燥，烘箱温度为55℃，烘干后进行γ-辐射灭菌，灭菌后颗粒取样作质检分析，质检合格后在胶囊车间灌胶囊，抛光后制得富硒灵芝孢子粉胶囊。
实施例20：
将实施例15制备得到的富硒灵芝孢子粉精制粉剂进一步制成崩解片。
崩解片的具体制备步骤如下：
步骤1：将15g富硒灵芝孢子粉精制粉剂与1g柠檬酸、1g维生素C、0.5g硬脂酸镁、3g滑石粉、40g山梨醇进行混合，混合后的粉末入搅拌机制粒混匀，再加入20g乳糖、20g甘露醇，搅拌混合均匀。
步骤2：将0.02g乙二胺四乙酸二钠、0.07g三氯蔗糖溶解于质量分数为70％醇水溶液，加入15mg亮蓝，进行粘合。
步骤3：将步骤1制备得到的混合物、步骤2制备得到的混合物混合搅拌5分钟后，制成软材，过筛（24目）。烘干后，过筛（20目），得到整粒。以厚度7mm、硬度50N进行冲压浅凹片，制粒在GMP标准下冰冻关封，制成崩解片。
崩解片检验，使用崩解仪在37℃下进行溶出试验，结果为：0分钟溶出度0％；10分钟溶出度75％；20分钟溶出度100％，崩解速率快，崩解效果好。
实施例21：
将实施例17制备得到的富硒灵芝孢子粉精制粉剂进一步制成胶囊。
胶囊的具体步骤如下：向富硒灵芝孢子粉精制粉剂20g中加入润湿剂（质量分数为75%的食用酒精）15g，搅拌制软材，用颗粒机制粒，过筛（30目），制粒后的湿颗粒在烘箱中干燥，烘箱温度为55℃，烘干后进行γ-辐射灭菌，灭菌后颗粒取样作质检分析，质检合格后在胶囊车间灌胶囊，抛光后制得富硒灵芝孢子粉胶囊。
实施例22：
将实施例18制备得到的富硒灵芝孢子粉精制粉剂进一步制成崩解片。
崩解片的具体制备步骤如下：
步骤1：将20g富硒灵芝孢子粉精制粉剂与1g柠檬酸、1g维生素C、0.5g硬脂酸镁、3g滑石粉、40g山梨醇进行混合，混合后的粉末入搅拌机制粒混匀，再加入20g乳糖、20g甘露醇，搅拌混合均匀。
步骤2：将0.02g乙二胺四乙酸二钠、0.07g三氯蔗糖溶解于质量分数为70％醇水溶液，加入15mg亮蓝，进行粘合。
步骤3：将步骤1制备得到的混合物、步骤2制备得到的混合物混合搅拌5分钟后，制成软材，过筛（24目）。烘干后，过筛（20目），得到整粒。以厚度7mm、硬度50N进行冲压浅凹片，制粒在GMP标准下冰冻关封，制成崩解片。
崩解片检验，使用崩解仪在37℃下进行溶出试验，结果为：0分钟溶出度0％；10分钟溶出度70％；20分钟溶出度90％，30分钟溶出度100％崩解速率快，崩解效果好。
对比例：
为了了解不同生物酶的酶解效果和特点，对比例1-6分别用胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、纤维素酶、几丁质酶等单独作用于去油富硒灵芝孢子粉，考察了每一种酶对富硒灵芝孢子粉中灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、有机硒等有效成分的释放和富集效果。
对比例7-8针对市场上未经任何处理的普通破壁灵芝孢子粉和破壁富硒灵芝孢子粉中灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、有机硒的含量进行了分析检测，具体的实施步骤如下所述。
对比例1：
与实施例7的区别之处在于：酶解的步骤不同，并且本对比例中只进行一次酶解。
酶解的步骤如下：
（1）称取去油富硒灵芝孢子粉20g进行酶解，向去油富硒灵芝孢子粉中加入600mL的水，搅拌得到富硒灵芝孢子粉悬液，再加入胃蛋白酶1g，用浓度1M的盐酸调节pH至2.30，水浴37℃恒温条件下，酶解6h；酶解完毕，得到富硒灵芝孢子粉酶解混合液。
（2）对步骤（1）所得富硒灵芝孢子粉酶解混合液进行分离和提纯，先对酶解混合液进行高速离心处理，转移出上清液，上清液用截留分子量为1万的超滤膜进行超滤，分离出分子量小于1万的灵芝肽、氨基酸、灵芝多糖等酶解产物，超滤后的滤液用浓度为1M的碳酸氢钠溶液调整pH至中性后，再经纳滤除去酶解液中的盐分，除盐后的滤液经冷冻干燥后，得到富硒灵芝孢子粉提取物4.5g。
（3）对提取物中的各营养成分进行定量分析，每一百克提取物中含灵芝多糖3.3g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）24.8g，有机硒5.5mg。根据提取物质量计算出酶解产率为22.5%。
对比例2：
与对比例1的区别之处在于：所用的酶为木瓜蛋白酶，酶解时的温度为54℃，溶液pH为6.00，其他条件不变，并且本对比例中只进行一次酶解。
制备得到富硒灵芝孢子粉提取物2.8g；对提取物中的各营养成分进行定量分析，每一百克提取物中含灵芝多糖7.9g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）20.3g，有机硒3.9mg；根据提取物质量计算出酶解产率为14.0%。
对比例3：
与对比例1的区别之处在于：所用的酶为碱性蛋白酶，用量为1g，酶解时的温度为54℃，溶液的pH为10.00，酶解后用1M盐酸调整溶液pH至中性，其他条件不变，并且本对比例中只进行一次酶解。
制备得到富硒灵芝孢子粉提取物3.5g；对提取物中的各营养成分进行定量分析，每一百克提取物中含灵芝多糖8.7g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）26.3g，有机硒6.0mg；根据提取物质量计算出酶解产率为17.5%。
对比例4：
与对比例1的区别之处在于：所用的酶为胰蛋白酶，酶解时的温度为50℃，溶液的pH为8.50，酶解后用1M盐酸调整溶液pH至中性，其他条件不变，并且本对比例中只进行一次酶解。
制备得到富硒灵芝孢子粉提取物4.3g；对提取物中的各营养成分进行定量分析，每一百克提取物中含灵芝多糖7.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）30.2g，有机硒5.9mg；根据提取物质量计算出酶解产率为21.5%。
对比例5：
与对比例1的区别之处在于：所用的酶为纤维素酶，酶解时的温度为54℃，溶液的pH为6.00，其他条件不变，并且本对比例中只进行一次酶解。
制备得到富硒灵芝孢子粉提取物2.2g；对提取物中的各营养成分进行定量分析，每一百克提取物中含灵芝多糖10.5g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）24.6g，有机硒3.8mg；根据提取物质量计算出酶解产率为11.0%。
对比例6：
与对比例1的区别之处在于：所用的酶为几丁质酶，酶解时的温度为50℃，溶液的pH为6.00其他条件不变，并且本对比例中只进行一次酶解。
制备得到富硒灵芝孢子粉提取物1.9g。对提取物中的各营养成分进行定量分析，每一百克提取物中含灵芝多糖13.9g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）11.3g，有机硒3.3mg。根据提取物质量计算出酶解产率为9.5%。
对比例7：
普通破壁灵芝孢子粉（市售），生产厂家为江苏泓寿生物工程有限公司。
对普通破壁灵芝孢子粉中的各营养成分进行定量分析：每一百克普通破壁灵芝孢子粉中灵芝多糖2.1g，蛋白质18.5g，有机硒0.01mg。
对比例8：
破壁富硒灵芝孢子粉（市售），生产厂家为江苏泓寿生物工程有限公司。
对破壁富硒灵芝孢子粉中的各营养成分进行定量分析：每一百克破壁富硒灵芝孢子粉中灵芝多糖2.3g，蛋白质16.9g，有机硒2.5mg。
结合实施例7-12以及对比例1-6可知，本实施例7中制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物，其灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、有机硒的含量均高于对比例1-6中灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、有机硒的含量；并且本申请中的实施例8-12中制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物，其灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、有机硒的含量均高于对比例1-6中灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、有机硒的含量；本实施例7-12制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物，其灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、有机硒的含量均高于市场上未经任何处理的普通破壁灵芝孢子粉（对比例7）和破壁富硒灵芝孢子粉（对比例8）；说明本申请中的通过对加工工艺的改进，可以将富硒灵芝孢子粉中的有效营养成分和人体无法消化吸收的无效成分充分分离，对富硒灵芝孢子粉中的灵芝孢子油、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、灵芝多糖、有机硒等营养成分起到优良的富集作用。
对比例1-6的酶解产率的产率为9.5%-22.5%，实施例7的酶解产率的产率为35%，对比例1-6的酶解产率的产率均低于实施例7；并且本申请中实施例8-12 的方法制备得到的富硒灵芝孢子粉组合物，其酶解产率的产率均高于对比例1-6的酶解产率，说明本申请中对富硒灵芝孢子粉进行深度加工，通过酶的联用，不仅能够有效提高酶解产率，同时也能保证几种营养成分具有较高的富集倍数。
因此，为了发挥出各种酶的性能和特点，以及方便后续将富硒孢子粉应用于保健类食品开发时所需进行的定量化配方设计，本申请中实施例7-12中，通过对酶的选择、使用顺序、工艺流程上予以合理设计，形成综合、高效的酶解策略，达到提高富硒灵芝孢子粉的酶解产率、有效成分含量和富集倍数的目标。
对比列9：
与实施例7的区别之处在于，所使用的富硒灵芝孢子粉为市售未破壁富硒灵芝孢子粉（购自于江苏泓寿生物工程有限公司）。
制备得到的提取物A、提取物B的质量分别为0.3g、0.1g，酶解产率仅为2.0%。
每一百克提取物A中，含灵芝多糖3.0g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）18.8g，有机硒2.5mg；每百克提取物B中，含灵芝多糖10.1g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）8.0g，有机硒0.7mg。
对比例10：
与实施例7的区别之处在于：所用的富硒灵芝孢子粉为市售未破壁富硒灵芝孢子粉（购自于江苏泓寿生物工程有限公司），并对市售未破壁富硒灵芝孢子粉先进行球磨超声的预处理。
球磨和超声的预处理步骤如下：将市售未破壁富硒灵芝孢子粉200g与水600mL混合后置于球磨罐中，球磨所用撞击球的材料为氧化锆，粒径约为2-3cm，球料比为5:1，球磨的速度为600r/min，时间为4h，得到富硒灵芝孢子粉悬液；将富硒灵芝孢子粉悬液转移至烧杯中，超声处理20min，超声的功率为500W。
制备得到的提取物A、提取物B的质量分别为2.3g、1.1g，酶解产率为17.0%。每一百克提取物A中，含灵芝多糖3.3g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）24.8g，有机硒4.3mg；每一百克提取物B中，含灵芝多糖30.3g，灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）8.2g，有机硒0.7mg。
将对比例9-10、实施例7的实验结果对比分析后发现，富硒灵芝孢子粉的存在状态对酶解产率有着较大的影响，同样的酶解工艺条件下，通过本申请的方法得到的破壁富硒灵芝孢子粉的酶解产率明显优于市售未破壁富硒灵芝孢子粉（对比例9）以及球磨超声处理的市售未破壁富硒灵芝孢子粉（对比例10）的酶解产率，并且本申请的方法得到的提取物中灵芝多糖、灵芝氨基酸类物质（灵芝多肽及氨基酸）、有机硒等有效成分的含量也更高，因此，本申请中通过选用破壁富硒灵芝孢子粉进行酶解和提取，可以将富硒灵芝孢子粉中的有效营养成分和人体无法消化吸收的无效成分充分分离，酶解产率高，富集效果好。
上述虽然结合实施例、对比例对本申请的具体实施方式进行了描述，但并非对本申请保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本申请的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本申请的保护范围以内。
Claims (10)
1.一种富硒灵芝孢子粉组合物，其特征在于，包括以下质量份的原料：灵芝孢子油20-40份、富硒灵芝孢子粉提取物A 30-40份以及富硒灵芝孢子粉提取物B 30-40份。
2.根据权利要求1所述的一种富硒灵芝孢子粉组合物，其特征在于：每一百克富硒灵芝孢子粉提取物A中含灵芝多糖3.5-12.0g、灵芝氨基酸类物质25.2-48.1g、有机硒6.1-12.5mg；每一百克富硒灵芝孢子粉提取物B中含灵芝多糖40.4-65.2g、灵芝氨基酸类物质8.3-19.2g、有机硒0.8-2.6mg。
3.一种用于制备权利要求1或2所述的富硒灵芝孢子粉组合物的方法，其特征在于，步骤如下：
将富硒灵芝孢子粉进行萃取，得到灵芝孢子油以及去油富硒灵芝孢子粉；
将去油富硒灵芝孢子粉进行一次酶解后、分离和提纯，得到固态不溶物以及富硒灵芝孢子粉提取物A；
将固态不溶物进行二次酶解后、分离和提纯，得到富硒灵芝孢子粉提取物B；
将灵芝孢子油、富硒灵芝孢子粉提取物A、富硒灵芝孢子粉提取物B进行混合，得到富硒灵芝孢子粉组合物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：一次酶解时，酶的总加入量为去油富硒灵芝孢子粉质量的4%-6%，酶解时间为6-24h；所用的酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、纤维素酶、几丁质酶中至少一种。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，二次酶解时，酶的总加入量为固态不溶物质量的4%-6%，酶解时间为6-24h；所用的酶为纤维素酶、几丁质酶中的一种或两种。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，分离和提纯的步骤如下：对酶解液进行离心、超滤、纳滤后，冷冻干燥，即可对酶解液进行分离和提纯。
7.一种富硒灵芝孢子粉组合物的精制工艺，其特征在于，步骤如下：
将阿拉伯胶与水混合后，加入权利要求1-6中任一项所述的富硒灵芝孢子粉组合物，混匀后得到水包油型乳液；
将水包油型乳液进行均质处理，得到均质乳液；
将均质乳液和冻干保护剂混合后，冷冻干燥，制得富硒灵芝孢子粉精制粉剂。
8.根据权利要求7所述的富硒灵芝孢子粉组合物的精制工艺，其特征在于：阿拉伯胶与水的质量比为1:（3-5）；阿拉伯胶与富硒灵芝孢子粉组合物的质量比为1:（0.5-1）；冻干保护剂与均质乳液的质量比1：（3-6）。
9.一种药品或保健品，其特征在于：包括权利要求1-6中任一项所述的富硒灵芝孢子粉组合物或权利要求7或8所述的精制后的富硒灵芝孢子粉组合物。
10.根据权利要求9所述的药品或保健品，其特征在于：药品或保健品的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、糖浆剂、分散剂、膏剂。
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