TW517064B

TW517064B - Cyclic adhesion inhibitors

Info

Publication number: TW517064B
Application number: TW085111375A
Authority: TW
Inventors: Alfred Jonczyk; Simon Goodman; Beate Diefenbach; Arne Sutter; Gunter Holzemann
Original assignee: Merck Patent Gmbh
Priority date: 1995-09-15
Filing date: 1996-09-16
Publication date: 2003-01-11
Also published as: US6001961A; ID18770A; PL316071A1; CN1149588A; CA2185489A1; CA2185489C; EP0770622B1; RU2157379C2; KR100438244B1; NO963853L; SK116796A3; SK282391B6; CZ264396A3; JP2007186525A; DE59604363D1; EP0770622A2; EP0770622A3; AU6558096A; JPH09132593A; AR003574A1

Description

517064 Α7 Β7 五、發明説明（1 ) 本發明係關於新穎之以式I表示的環肽環一（nArg — nGly — nAsp — nD — nE) 其中， D和Ε 分別是 G l y •A 1 a 、β - -A 1 a 、A s n A S P 、 A s P (〇 R )' A r g 、C h a C y s 、 G 1 n 、G 1 u 、 Hi s ' I 1 e L e u 、 L y s 、L y s ( Ac) 、 L y s ( A c Ν Η 2 ) 、Lys (AcSH) 'Met 、 N a 1 、N 1 e 、0 r n 、P h e 、4 一 H a 1 -P h e 、h 0 m ο — P h e 、P h g P r 0 、P y a 、S e r 、T h r 、丁 i a、 T i c 、T r P 、T y r 或V a 1 ，其中的胺基酸殘基也可以經過衍生化， (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 R是具1 一 18個碳原子的烷基， Hal 是 F、Cl、Br、I， Ac是具1 一 10個碳原子的烷醯基、具7 - 11個碳原子的芳醯基或具8 - 1 2個碳原子的芳烷醯基， η 代表在相關的胺基酸殘基的α —胺基上沒有取代基或者是烷基R、苄基或具7 - 1 8個碳原子的芳院基，但至少有一個胺基酸殘基有一取代基η，含括光活性胺基本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210x297公釐）一 4 - 517064 A7 B7 五、發明説明（2 ) 酸的殘基和胺基酸衍生物，含括D和L形式，及其於生理上可被接受的鹽類。不具N-烷化反應之類似的化合物已由，如： EP 0 406 428 fP FEBS Lett. 2 9 1 ，5 0 — 5 4 ( 1 9 9 1 )得知。本發明的目的是要提出新穎之具有價值的化合物，特別是能夠用以製造藥品的化合物。訝異地發現到式I化合物及其鹽類具有非常有價值的性質。特別地，它們可作爲整合體抑制劑，它們特別可用以抑制泠3 —或冷5 —整合（integrin)受體與配體之間的作用。這些化合物在整合體 αvy33、αvi85和αIIy33的情況中特別具有活性，但亦與a v /3 i -、a v β —和受體有關聯。由，如：J.W.Smith等人，J.B.iol. Chem.. 2 6 5 ， 12267—12271 (1990)可證實這些作用。此外，亦具有抗發炎效果。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 血管整合體和細胞外的基質蛋白質之間的作用與血管形成之間的關係述於P. C. Brooks，R. A. Clark and D A. Cheresh * Sci ence 2 6 4 > 5 6 9 — 7 1 ( 1 9 9 4 )。藉由環肽抑制這些作用及與之有關之引發計畫中的細胞死亡的可能性述於P. C. Brooks， A. M. Montgomery ’ M. Rosenfeld，R. A. Reisfeld，T. Hu， G. Klier and D. A. Cheresh * Cell，7 9 ’ 1157 - 64 ( 1 9 9 4 )。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）_ 5 _ 517064 A7 ___B7 五、發明説明（3 ) 式I化合物阻斷整合受體和配體之間的作用，如：纖維素原與纖維素原受體之間的作用（糖蛋白），在避免因爲轉移而造成腫瘤細胞蔓延的情況中作爲GP I I b/ Ilia 的擷抗劑之用。此由下面的觀察得到證實。這些化合物能夠抑制金屬蛋白酶與整合體之間的結合，藉以避免細胞利用蛋白酶的酵素活性。它的一個例子是 P · C · Brooks 等人，Cel 1，85，6 8 3 - 6 9 3 ( 1 9 9 6 )中所述之利用環RGD肽來抑制金屬蛋白酶（ NMP— 2 )基質與受體αν々3之間的結合。腫瘤細胞與血小板之間的作用形成微血栓，將會導致腫瘤細胞由局部腫瘤蔓延至血管系統中。腫瘤細胞受惠於微血栓所提供的保護作用而不會被免疫系統中的細胞所指認出。微血栓會澱積於管壁上，使得腫瘤細胞進一步穿透組織。因爲微血栓的形成係以纖維素原在經活化的血小板上與纖維素原受體的結合爲媒介，所以可認定GPIIb / I I I a是有效的轉移抑制劑。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 在施用生物物質、植入物、導管或整律器的操作中，式I化合物也可以作爲抗微生物物質。此處，它們有抗敗血功用。其抗微生物活性的效用可由P. Valent in — Weigund 等人，Infection and Immunity，2 8 5 1 -2855(1988) 所述的方法得到證實。

因爲式I化合物構成纖維素原在血小板上與纖維素原受體結合的抑制劑，所以，如果它們以同位素或者以U V 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） "~~~"" 一 6 一 517064 A7 B7 五、發明説明（4 ) 偵測得到的基團作上標記，就可用於活體的血管系統中作爲擷抗劑之用，以定出血栓的位置。在製圖法中，可以偵測出腫瘤在有機體中的位置（腫瘤影像，PET)。在研究血小板在不同活化階段的代謝或者纖維素原受體在細胞外的訊號機構上，作爲纖維素原結合之抑制劑之用的式I化合物也是有效的助劑。與受體結合之後，所添加的標籤之能夠偵測得到的單元（如：生物素）使得吾等能夠研究該機構。因此，此化合物能夠抑制天然或合成配體與整合體（特別是石3、《7万5和“ a IIb石3，亦含括—、αν々6—和之間的結合。此外，他們有著優於目前已經知道的一或多肽鏈結之 Ν -烷化反應所引發之代謝穩定化和脂溶性的特性。經由減少可能的氫橋數（因爲Ν -烷基不是 C = 0的Η提供者）而改善透過膜的能力，因此可能使口服吸收率提高，使血漿蛋白質結合提高。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 肽鏈結的Ν -烷化反應提高化合物的抑制效用並提高抑制作用對於特定整合體的選擇性。此選擇性特別可能會受到Ν -烷基的位置和數目的影響。此化合物可以藥用活性原理施用於人體和動物用藥中，特別是用以預防和處理循環、栓塞、心梗塞、動脈硬化、發炎、中風、狹心症、腫瘤疾病、溶骨疾病（特別是骨脆弱）、血管形成和血管形成所導致的疾病（如：視網膜病）、痣變性、近視、眼部組織漿菌病、風濕、骨關節炎、青光眼、潰瘍性結腸炎、局部性迴腸炎、多處硬化、乾本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐1 ~ 一(一 517064 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（5 ) 癬血管成形術後再狹窄。在微生物感染和急性腎衰竭方面，此化合物另可用以改善和負載受創癒合情況。這些作用可由文獻所提出的方法得到證實，如：P. C Brooks 等人，Ce 1 1，79 ’ 1157 - 1 1 64 ( 1 9 9 4 )或 Science ， 264, 569 - 571 ( 1 9 9 4 )° 上文和下文中所提到的胺基酸殘基縮寫代表下列的胺基酸殘基z

Abu 4一胺基丁酸

Aha 6—胺基己酸

Ala 丙胺酸 A s η 天冬醯胺

Asp 天冬胺酸

Asp (OR) 天冬胺酸酯） A r g 精胺酸 C h a 3 —環己基丙胺酸 C i t 瓜胺酸 C y S 半脫胺酸

Dab 2，4 —二胺基丁酸

Dap 2，3—二胺基丙酸

Gin 谷胺醯胺 G 1 u 谷胺酸 G 1 y 甘胺酸

His 組胺酸本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）一 8 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 517064 A7 B7 五、發明説明（6 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 I 1 e 異亮氨酸 L e u 亮氨酸 L y s 賴氨酸 L y s ( A c ) Ν ε - -烷醯基賴氨酸 L y s ( A c N Η 2) Ν ε - -胺基院醯基賴氨酸 L y s ( A c S Η ) Ν ι ?-硫基院醯基賴氣酸 Μ e t 蛋氨酸 Ν a 1 3 — ( 2 — 棻基 )丙胺酸 Ν 1 e 正亮氨酸〇 r n 鳥氨酸 Ρ h e 苯基丙胺酸 4 — H a 1 — P h e 4 - -鹵苯基丙胺酸 Ρ h g 苯基甘胺酸 Ρ r 0 脯氨酸 Ρ y a 3 — ( 2 一吡啶基）丙胺酸 S a r 肌胺酸 ( Ν -甲基甘胺酸） S e r 絲胺酸 Τ i a 3 — ( 2 — 瞎嗯基）丙胺酸 Τ i c 四氫異喹啉一 3 一羧酸 Τ h r 蘇胺酸 Τ r P 色胺酸 Τ y r 酪胺酸 V a 1 纈氨酸此外，下列縮寫意義如下： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）_ 9 _ 517064 A7 B7 五、發明説明（7 ) BOC 特丁氧羰基 B z 1 笮基 DCCI 二環己基碳化二亞胺 DMF 二甲替甲醯胺 EDCI N —乙基—Ν’ 一（3 —二甲胺基丙基）碳化二亞胺氯化氫 E t 乙基

Fmoc 9—芴基甲氧羰基 HOBt 1—羥基苯並三唑

Me 甲基 M t r 4 一甲氧基一2，3 ，6 —三甲基苯磺醯基 N Μ 6 Ν —甲基化的α —胺基〇B u t 特丁酯 0 M e 甲酯〇 E t 乙酯 P0A 苯氧基乙醯基 1 P r 丙氧基乙醯基經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) η P r 正丙基 TBTU 2 —（1H —苯並三唑一 1—基）—1 ，1 ， 3，3—四甲基尿鏺四氟硼酸鹽 T F A 三氟醋酸。上述的胺基酸可以二或多種鏡相異構形式存在，因此，上文或下文中所提到之式I化合物之組份包括所有的這些形式及它們的混合物（如·· D L形式）。此胺基酸可以本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）一 1〇一 517064 A7 B7 五、發明説明（1 此形式作爲式 I化合物的構份，也可以以其帶有適當保護 I化合物的構份。發明亦含括這些肽的胺基酸殘基被完全或部基形式作爲式此外，本分衍生化者。所謂的A衍生化〃是 g的N —胍基醯基衍生物胺酸的Ν ε — 釀基.........等化者或側鏈另樣的衍途或作基酸殘定聚合劑（如本物或其，如，被胺基生物是爲抗體基或經物材料 :發光發明亦鹽類之烷醯基。此外作有標、羧基製備分之用）衍生化上的肽取代基係關於一之製、Ν ε ，此胺記的診或锍基子量較之重要的胺基，以製 )將官根據申法，其一胺基基酸殘斷用藥加以衍高的共的起始酸殘基造親和能基予請專利特徵在指所謂的a A s p的冷烷醯基和N 基可以是C 。亦含括其生化的式I 軛物（如：物。也可以的側鏈上的型管柱，或以衍生化。範圍第1項於使用溶劑前藥如一酯類、賴 ε -疏基院一 α -院基單元D和Ε 化合物，這用於免疫用使用某些胺官能基來固者以診斷助的式I化合分解劑或氫請先閲讀背面之注意 Φ 填寫本頁經濟部中央標準局員工消費合作社印製之者物或生，衍物性合匕匕匕勺 Awn /Ί 官 I 肽其式的對出樣劑釋這解中或物生衍性應反物肽生的衍I 性 I 能式官理其處自劑而化理環處以行於進在 Η ο I Ζ I Η 中其 ζ 是 D η I ρ s A η I y lx G n I g Γ A n 一尺 I張 -紙 I本準標家國 I國 I中用適 I釐公 7 9 2 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 五、發明説明（10 ) A7 __B7 據此 9 本發明特別係關於至少有一個基團具有 ,、丄 m ，述較佳意義的式 I 化合物 0 較佳的化合物可以次式 I a表示其與式 I 大致 :相同，只是 D 是D - -I )h ( ^ 、 P h ( 、D - ψ Γ : r p 、T ] r P D — T y r T y r D 一 h < o m o P h ( 3 " h 〇 m 0 P h e 、D — N a 1 \ N a ] ί ' D P h g P h g 或4 — Η a 1 — P he ( D 或 L 形式 )，而 E 是 V a 1 G l y A 1 a 、 L e i 1 、 I 1 e 或 N ] ί e ) c > 較佳的其他化合物可以次式I b 表示，，其與式 I 大致相同，只是 D 是 D — P h e ，而 E 是 G 1 y A 1 a V a 1 L e i 1 、 I 1 e 或 N ] .e )， 1 且胺基酸殘基 A r g :、G I y或A丨 s p 之一的 a — 胺基上有一個院基取代基 0 較佳的其他化合物可以次式I c 表示’ 與式 I 、式 I a 及I b 大致相同，只是胺基酸殘基 D或E 中的一者之 a — 胺基被烷基化〇此外 9 特別佳者是次式 I a 、 I b 和] [c 中所有在生理上可被接受的臨 τγπγ 類〇式I化合物及用以製造式I化合物的起始物係藉已知之

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ,Q -1〇 - 1----Ί.--： ^--裝------訂----- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 A7 B7 五、發明説明（11) 述於文獻（如：Houben — Weyl， Methoden der organschen Chemie 〔有機化學方法〕，Georg — Thieme 一 Verlag， Stuttgart中所述的標準程序）中的方法、於適用於該反應的反應狀況下製得。此處亦能使用替代法，但本文不擬對替代法作進一步的描述。必要時，起始物亦可於原處形成，因此不須自反應混合物中將它們分離出來，直接進行後續的程序而製得式I 化合物。利用溶劑分解反應（特別是水解反應）或者利用氫解反應，可自式I化合物的官能性衍生物中釋出式I化合物，藉此得到式I化合物。溶劑分解反應或氫解反應所用之較佳的起始物不是那些含有一或多個自由胺基和/或羥基者，而是含有受保護的胺基和/或羥基者，較佳者是有胺基保護基者而非有氫原子接在氮原子上者，如：那些與式I相符，但不含 NH2基團卻含有NHR /基團者（其中的R /是胺基保護基，如：Fmoc、B〇C或CBZ)。他種較佳的起始物是沒有羥基上的氫原子，但卻帶有羥基保護基者，如：那些與式I相符，但不含羥苯基卻含有0 —苯基者（其中的R 〃是羥基保護基）。起始物的分子中可以有二或多個相同或相異之受保護的胺基和/或羥基存在。如果所存在的保護基彼此相異，那麼，在許多情況下可選擇性地將它們移走。所謂的”胺基保護基”通常是指能夠使得胺基不參與本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ^ -14 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 517064 A7 B7 五、發明説明（12 ) 化學反應，但在分子的其他位置發生所欲的化學反應之後，可簡單地被移走的基團。這樣的基團基本上特別是未經取代或經取代的醯基、芳基、芳烷氧基甲基或芳烷基。既然在所欲的反應（或反應序列）之後要將胺基保護基移走，對其本質和大小沒有嚴格的要求；但以具1 - 2 0個碳原子爲佳，最好是具1 - 8個碳原子者。本發明及本化合物中所謂的A醯基"的範圍很廣。它包括衍生自脂族、芳脂族、芳族或雜環羧酸或磺酸之類的醯基，特別是衍生自烷氧羰基、芳氧羰基（特別是芳烷氧羰基）者。這些醯基的實例有烷醯基（如：乙醯基、丙醯基和丁醯基）、芳烷醯基（如：苯乙醯基）、芳醯基（如：苯甲醯基或甲苯醯基）、芳氧烷醯基（如：POA)、烷氧羰基（如：甲氧羰基、乙氧羰基、2，2，2 —三氯乙氧羰基、BOC和 2 -碘乙氧羰基）、芳烷氧羰基（如：CBZ ( a苯酯基〃）、4一甲氧基苯甲氧基氮基和Fmoc)、和芳基磺醯基（如：Mtr)。較佳的胺基保護基是BOC和 Mt r、CBZ、Fmo c、爷基和乙醯基。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 所謂的”羥基保護基”與習知者類似，是指能夠使得羥基不參與化學反應，但在分子的其他位置發生所欲的化學反應之後，可簡單地被移走的基團。這樣的基團基本上是上述之未經取代或經取代的芳基、芳烷基或醯基，也可以是烷基。既然在所欲的反應或反應序列之後要將羥基保護基移走，因爲對其本質和大小不必有嚴格的要求；但以具1 一 2 0個碳原子爲佳，最好是具1 一 1 0個碳原子者本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）一 _ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 A7 ____ _B7__ 五、發明説明（13 ) 。羥基保護基的實例包括笮基、對-硝基苯甲醯基、對-甲苯磺醯基和乙醯基，特別佳者是笮基和乙醯基。門冬酸和戊二酸中的COOH基最好是以其特丁酯形式（如：A sp(OBut))被保護起來。作爲起始物之式I化合物的官能性衍生物可以慣用的胺基酸和胜肽合成方法製得，這些方法描述於，如：前面所提到的標準方法和專利說明書中，例如使用 Merrifield 的固相方法（B·F.GysinandR·B· Merrifield, J. Am. Chem . Soc. · 9 4 ， 3102( 1 9 7 2 ) ) 〇式I化合物由其官能性衍生物釋出的實施方式視所用的保護基而定，所用的釋出劑如強酸（以TFA或過氯酸爲佳）或他種強烈的無機酸（如：氫氯酸或硫酸）、強烈的有機羧酸（如：三氯醋酸或磺酸（如：苯磺酸或對-甲苯磺酸）。也可以有他種惰性溶劑存在，但通常並無此必要。適當的惰性溶劑以有機酸（如醋酸之類的羧酸）、醚 (如：四氫呋喃或二噁烷）、醯胺（如：DMF)、鹵化烴（如：二氯甲烷）和醇（如：異丙醇、另丁醇或特丁醇 )爲佳，有時也可使用甲醇或乙醇及水。上述溶劑之混合物亦適用。使用TFA時，最好使用過量的TFA，且不使用其他溶劑；使用過氯酸時，最好是使用醋酸與7 0% 過氯酸的9 : 1混合物&裂解溫度以介於約〇至約5 0 °C 爲佳，最好是介於1 5和3 0 °C (室溫）之間。舉例言之，B0C、OBu t和Mt r以於0 — 30 本紙張尺度適用中國國家標準（〇奶）人4規格（210'乂297公釐）_16 — I,---Ί---： Ί--------IT-----Aw (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 517064 A7 B7 五、發明説明（14) °<：的溫度下，使用TFA的二氯甲烷溶液或濃度約3至 5N2HC 1的二噁烷溶液於1 5 — 30°C移除爲佳，於 1 5 — 30 °C的溫度下，使用之濃度約5至50%的二甲胺、二乙胺或哌啶的DMF溶液，可以移除F omc。也可利用氫解反應來將保護基（如：C B Z或笮基）移走，例如：在有觸媒（如：貴金屬觸媒（如：鈀），以載於載體（如：炭）上者爲佳）存在的情況下，使用氫來處理。此處，適當的溶劑爲前述者，特別的例子是醇（如 :甲醇或乙醇）醯胺（如：DMF)。此氫解反應通常是在溫度介於約0至1 0 〇°C、壓力介於約1至2 0 0巴的情況下實施，反應狀況以20 — 30 °C、1 一 10巴爲佳。舉例來說，CBZ基的氫解反應於20 - 30 °C的溫度下，在甲醇中使用5至1 0%P d — C或在水/DMF中使用P d — C和甲酸銨（代替Η 2 )實施比較有利。使式I I化合物於合成胜肽的條件下進行環化反應，亦通得到式I化合物’此反應條件述於，如：Houben— Weyl ，Methoden derorgan i schen Chemie，15/11， 1 一經濟部中央標準局員工消費合作社印製 8 0 6 ( 1 9 7 4 ) 〇此反應最好是在惰性溶劑（如：鹵化烴（如：二氯甲烷）、醚（如：四氫呋喃或二噁烷）、醯胺（如·· D M F 或二甲基乙醯胺）、爷（如：乙睛）或這些溶劑之混合物 )中，於約一 1 0至4 0 °C (以介〇於0 °C和3 0 °C爲佳 )的溫度下，在有脫水劑（如：碳化二亞胺（如： DCCI或EDCI)、丙磺酸酐（參考Angew. Chero 17 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210'〆29?公釐） 517064 A7 B7 五、發明説明（15 ) • ，92，129 (1980)、二苯基磷醯疊氮或2— 乙氧基一 N —乙氧幾基一 1 ，2 —二氫醒）存在的情況下實施。爲了要使分子間環化反應的趨勢優於分子內肽鍵結的趨勢，此程序可於稀釋溶液中實施。在反應中也可以使用這些物質之適當的反應性衍生物 (例如那些反應性基團立刻被保護基所阻礙者）來代替式 I I化合物。此胺基酸衍生物I I能夠以其活化酯類的形式被使用，這些活化酯類最好是藉著，如HOB t或N — 羥基丁二醯胺的加入而於原處形成者。式II起始物一般都是新穎的化合物。它們可藉已知的方法製得，如，藉上述用以合成胜肽及用以移除保護基的方法。通常是先製得其式爲-Z-OR〃之受到保護的五肽酯類（如：B0C - M—OMe或BOC— Μ -〇 E t )，先將它們水解成其式爲R’ 一 Z — OH (如： BOC — Z — OH)的酸，將酸中的保護基移走而得到式 Η — Z — OH (II)的自由肽。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 與式I相對應的環肽衍生物可用於目前已知的方法，如：胺類之烷化反應、羧酸的酯化反應或脂族碳原子上的親核性取代反應，這些反應述於有機教科書中，如：J. March， Adv. Org. Chem. ,John Wiely & Sons N. Y .( 1 9 8 5 )。使用酸可將式I的鹼轉化成相對應的酸加成鹽。特別適用於此反應中的酸是那些能夠形成生化上能夠接受的鹽 ( CNS ) A4^ ( 210X297^ ) ^ jo _ 517064 A7 ______B7 五、發明説明（16 ) 類者。例如，可使用的無機酸之實例有硫酸、硝酸、氫鹵酸（如：氫氯酸或氫溴酸）、磷酸（如：原磷酸、胺基磺酸）及有機酸，特別是脂族、脂環族、芳脂族、芳族或雜環單或多元竣酸、磺酸或硫酸，如：甲酸、乙酸、丙酸、戊酸、二乙基醋酸、丙二酸、丁二酸、庚二酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、苯甲酸、水楊酸、2 -或3 -苯基丙酸、檸檬酸、葡糖酸、抗壞血酸、檸康酸、異煙鹼酸、甲磺酸、乙磺酸、乙二磺酸、2 —羥基〜乙磺酸、苯磺酸、對一甲苯磺酸、棻單磺酸、棻二磺酸和月桂基磺酸。與生化上無法接受的酸所形成之鹽類（如：苦味酸鹽）可用以分離和/或純化式I化合物。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 或者，利用與鹼之反應，可將式I的酸轉化成其於生化上可被接受的鹼金屬鹽或銨鹽。此時，特別適當的鹽是鈉、鉀、鎂、鈣和銨鹽，也可以是經取代的銨鹽，如：二甲一、二乙一或二異丙銨鹽、單乙醇一、二乙醇一或三乙醇銨鹽、環己一和二環己銨鹽、二苯甲乙二銨鹽，也可以是與，如：N —甲基一 D— 1 —胺基一 1 一去氧山梨糖醇或與精氨酸或賴氨酸形成之鹽類。其劑量適當的此新穎的式I化合物及其於生化上可被接受的鹽類與一種以上的賦形劑或輔助劑可用以製造藥劑，必要時，其劑量適當的此新穎的式I化合物及其於生化上可被接受的鹽類與一種以上的賦形劑或輔助劑可與一或多種其他的活性物質用來製造藥劑。藉此而形成的配方可用來作爲人類用藥或動物用藥。適合用來作爲賦形劑的物本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）_ 19 _ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 A7 B7 五、發明説明（U ) 質爲適用於經腸（如：口服或直腸）、非經腸（如：靜脈注射）或局部（如：真皮、眼部或鼻部）施用或以吸入噴霧的形式施用之不與新穎的化合物發生作用之有機或無機物質，其實例爲水或等滲透壓鹽水溶液、低碳醇類、植物油、苯甲醇類、聚乙二醇類、三醋酸甘油酯類或它種脂肪酸甘油酯類、糊精、大豆卵磷脂、碳水化合物（如：乳糖或澱粉）、硬脂酸鎂、滑石、纖維素或凡士林。口服施用形式特別是錠劑、覆有膜的啶劑、膠囊、糖漿、液劑或滴液，比較特別的是以防胃液覆層包覆的錠劑和膠囊。栓劑可用於直腸式的施用方式；而非經腸的施用方式是使用溶液，以油狀溶液或水溶液爲佳，也可以是懸浮劑、乳劑或插入管。適用於局部施用的實例爲溶液（可以滴眼液形式使用）、懸浮劑、乳劑、油膏、軟膏或壓片。可將活性物質溶解或懸浮於推進氣體或推進氣體混合物（如：c 02 或氟氯化碳或適當的替代品）中而作爲吸入噴霧劑來使用。此處，活性物質以微粒形式被使用，可含有一或多種額外、生化上可接受的溶劑（如：乙醇）。可使用常用的吸入器來施用吸入用的溶液。亦可將此新穎的化合物予以低壓凍乾處理’可以所得到的低壓凍乾物來製造注射用藥。此處’注射劑可一次注入或連續灌輸（如：靜脈注射.、肌肉內注射、皮下注射或椎管內注射）。所提供的藥用配方可經過無菌處理和或可含有輔助劑，如：防腐劑、安定劑和/或潤濕劑、乳化劑、用以影響滲透壓的鹽類、緩衝物質、著色劑和/或香料。必要時，它們亦可含有一或多種本^張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4&格（210X297公釐）~~ -20 - -----Ί--rj--—— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂费經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 A7 B7___ 五、發明説明（18 ) 其他的活性物質，如：一或多種維生素。根據本發明之物質通常可藉與其他已知和常用的胜肽類似的方式施用，特別是藉與US - A — 4 4 7 2 3 0 5所述之化合物類似的方式施用，單次施用時，其劑量以介於約0 . 0 5和5 0 0毫克之間爲佳，最好是介於 0. 5和100毫克之間。每日的使用劑量已介於約 0. 01和2毫克/公斤體重之間爲佳。但每個特定的病患的特別劑量視多個因素而定，如視所用之特定化合物的效用、年齡、體重、一般的健康狀況、性別、食物療法、施用的時間、次數、排泄速率、併用的藥品及適應症的嚴重程度而定。最好是以非經腸方式施用。其A r g或DA r g被Ο r η或DO r η所替代的本發明之化合物因爲能夠藉由與胍的反應而將0 r η轉移至 A r g所以可作爲合成本發明之肽的先質。這些方法特別適合用來將UC或14C同位素引至肽中而形成具有放射活性標記的A r g肽。此外’此新穎的式I化合物可用來作爲製備親和性層析管柱（用以製備純淨的整合體）所用的整合配體。此處，此配體（即，式I的胜肽衍生物）以共價方式經由接合基團而偶合在聚合物載體上。適當的聚合物載體材料是固態聚合相（此固態聚合相在胜肽化學中已爲習知且以具親水性爲佳），其實例有交連的多糖（如：纖維素、Sepharose或Sephadex®、丙烯醯胺、以聚乙二醇爲基礎的聚合物或Tent akel®聚合物。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）21 - ' ' ----—Γ--7：--裝-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 517064 五、發明説明（19 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 適當之接在聚合物載體上的接合基團以具 2 — 1 2 個碳原子的線型伸院基鏈爲佳 > 它的 —. 端直接接在聚合物上 > 另 —" 端則帶有官能基 ( 如羥基胺基硫基、馬來醯亞胺或一 C 〇 0 Η ) 9 它適合用來與相對應的胜肽的 C — 或 N 一 Atil 端末部分相連接〇此處可以使胜肽直接接在聚合物的接合基團上 9 必要時 > 也可以使胜肽經由第二個接合基團接在聚合物的接合基團上〇也可以使含有具官能性側鏈之胺基酸殘基的胜肽經後者接在聚合物的另一個接合基團上〇此外對於本身是式 I 的胜肽的一部分的某些胺基酸殘基而 rrA 贅其側鏈可經過修飾使得它們可經由 S Η 0 Η N Η 2或（：◦ 0 Η基而用以與聚合物的接合基團來接合〇此處亦可使用不常用的胺基酸 > 如：苯環的 4 一位置上帶有锍基羥基胺基或羧烷鏈的苯基丙胺酸衍生物 f 其官能基位於鏈末〇其側鏈可直接用來作爲接合基團的胺基酸殘基之實例有 L y S 〇 r η A r g 、 D a b D a Ρ A S Ρ A S η G 1 U > G 1 η S e r Λ T h r 、 C y S C i t 或 Τ y r 0 N — 終端的接合基團之實例有 9 如 : 一 C 0 η 一 ~ C η Η 2 η — N Η 2 ’ • 一 - C 0 - -C η Η 2 η — 0 Η — C 0 — C ηΗ 2 η — S Η 或_ -C 0 - _ c n Η 2 η — C 0 0 Η 1 其中 η = 2 一 1 2 對於伸烷鏈的長度並沒有嚴格的限本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）_ 22 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 517064 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（2〇) 制；必要時，此鏈可完全或部分被如：適當的芳基或烷芳基所取代。可能的C -終端接合基團之實例有，如： — 〇 — C η Η 2 r 1 — S H、一 0 一 C ηΗ 2η- 0 Η、 —0 — C nH 2r N H 2 、 — 0 — CnH2n-COOH Ν Η — C nH 2r 1 — S H 、一 N η Η 2η- C Η — 0 Η 、 -NH— CnH2n-NH2 或一 NH— CnH2n—CO〇H ，其η和伸烷鏈皆如前段所述者。此Ν -和C -終端的接合基團亦可被用來作爲已經官能化的胺基酸側鏈之接合基團組份。此處，適當的胺基酸殘基之實例是 Lys (CO — CsHi。— ΝΗ2)、

Asp (1^1^-03116-（30011)或〇7 8(33?16 — nh2)，此接合基團一定接在側鏈的官能基上。用於親和性層析術的材料之製備係以胺基酸縮合反應慣用且已知的狀況下實施，所使用的狀況亦描述於與製造式I化合物有關的段落中。也可以使用環肽來固定聚合物材料上的肽，以製造親和型管柱，也可以用診斷助劑（如：螢光取代基）將化合物之經官能化的側鏈進一步地衍生化。此外，也可以將官能基（如：胺基、毓基或羧基）引至基團D和E的側鏈中，藉以製得與蛋白質或他種大分子量的物質之共軛物，以用於，如：免疫用途和/或用以製備抗體。上文和下文中所提到的溫度單位皆爲°(：。在下面的實本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T -23 - 517064 Α7 Β7 五、發明説明（21) 例中，〜常用的程序"是指：必要時加入水，將混合物予以中和，以乙醚或二氯甲烷萃取，使之呈相分離狀態，使有機相濾經硫酸鈉而加以乾燥、過濾、以蒸發法加以濃縮並在矽膠上層析和/或使其結晶以達純化的目的。R t = 以HP LC分離時的滯留時間（分鐘），此時所使用的管柱是 Lichrosorb® RP select B ( 7 微米）（2 5 Ο X 4毫米）管柱，沖提液A ·· TFA在水中形成之濃度爲〇· 3%的溶液；沖提液B:〇. 3 % TFA的2 -丙醇/水（8 : 2)溶液，在50分鐘內，以1毫升/分鐘的流速加入，梯度爲1 一 9 9%，於2 1 5 nm偵測。Μ + 係以快速原子轟撃（FAB )法所得到的質譜之分子峰。實例1 將0· 6克的H—NMe—Arg(Mtr)— 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

Gly—Asp (OBut) - D — Phe - Va 1 — 〇Na 〔得自，如：Fmoc— NMe-Arg (Mt r )一 Gly— Asp (〇But) — D — Phe - Va 1 一 0 - Wa ng，一〇 - Wa ng是經修飾的 Merrifield技巧中所用的 4 一經基甲基一苯氧基甲基— 聚苯乙烯樹脂，以哌啶/DMF移除F om c基團，.以 T F A / CH2C12(1:1)的 15 毫升 DMF 溶液將樹脂移走]以8 5毫升二氯甲烷稀釋並添加5 0毫克 N a H C 03。在乾冰/丙酮混合物中冷卻之後，添加4 0微升二苯基磷醯基疊氮。於室溫下靜置1 6小時之後，本紙張尺度適用中國國家標準（〇灿）八4規格（21〇'/297公釐）_24 517064 A7 B7 五、發明説明（22 ) 濃縮此溶液。濃縮物經過膠體過濾（Sephadex G10管柱，沖提液是異丙烷/水8 : 2 )，然後以習用的方式以 HPLC純化。以TFA/H2〇（98 : 2)處理，得到環—NMe— Ar g — G 1 y - As p — D — Ph e — V a 1 ) ;RT=18. 1;FAB— MS(M + H): 5 8 9 ° 藉相對應的線型肽之環化反應及移除保護基，得到下列物種：環一（Arg — NMeGly — Asp — DPhe — V a 1 ) ； R T = 1 7 . 9; FAB-MS (M + H) : 589 ; (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 環

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T R 8 6 h p D e M N I p s A 9 I y 8 II 1±

\ly H + M rv s M- B A F 8 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -25 - 517064 A7 B7 五、發明説明（23 ) 環一（Arg — G1 y — Asp — DPhe — N M e V a 1 ) ;RT=19. 5; FAB-MS (M + H) : 589 ; NMeLys) ：RT=11. 1； FAB-MS (H + H) ： 6 1 8 ；環一（Arg — G1 y — Asp — DPhe — NMeLys (笮氧基羰基）x T F A = 2 3 . 4 ; FAB-MS (M + H) :752; 環一（NEtArg — Gly — Asp — DPhe — Va 1 ) ； FAB-MS (M+H) ·· 603 ; 環一（Arg — NEtGly — Asp — DPhe — V a 1 ) ； FAB-MS (M + H) : 603; 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 環一（Arg — Gly-NEtAsp — DPhe — V a 1 ) ;FAB - MS(M + H) ： 6 0 3 ；環一（Arg — Gly — Asp — NEtDPhe — V a 1 ) ； FAB-MS (M + H) :603; 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -Zb 517064 A7 B7 五、發明説明（24 ) 環一（Arg — G1 y — Asp — DPhe-N E t V a 1 ) ； FAB - MS (M + H) :603; 環一（Arg — Gly — Asp — DPhe (4—1) — N M e V a 1 ) ； R T = 2 3 . 5; FAB - MS (M + H) :715; 環一（NPrArg — Gly— Asp — DPhe — V a 1 ) ； FAB-MS (M + H) ： 6 1 7 ；環一（Arg — NPrGly— Asp — DPhe — V a 1 ) ； FAB-MS (M + H) :617; 環一(Arg — Gly-NPrAsp — DPhe — V a 1 ) ； FAB-MS (M + H) :617 ·，環一（Arg — Gly — Asp — NPrDPhe — 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) V a 1 ) ； FAB-MS (M + H) :617; 環一（Arg — Gly — Asp-DPhe — N P r V a 1 ) ； FAB-MS (M + H) ： 6 1 7 ；環一（NBz lArg - Gly-Asp-DPhe- V a 1 ) ； FAB-MS (M + H) :665; 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）_ 27 _ 517064 A7 B7 五、發明説明（環

a V

11 s z M B I N B - A gF Γ A

Θh P D I P S A-y --< G Η +Μ G- g r A /V I 環

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_ ) e H h + p M D ( I s PM s I A B I A y F II ·, G ) I 1 ga r V A 1 ( z 一 B 環N 6 I--1--—：—-裝-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂環

sa r V A 6 (M I N D

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H 8 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

A H I +y M 1 ( G s I M g I r B A A Θ F M ; N ) ( u - e 環 L 環

e L G 6 M _ N B I A gF Γ A ) ( u

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6hp D _p s A 6M N I y ΊΧ G Ig Γ A 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）-28 - 517064 A7 B7 五、發明説明（26 )

Leu) ； FAB-MS (M + H) :603; 環一（Ar g — G 1 y — As p — NMeDPhe — Leu) ； FAB-MS (M + H) :603; 環一（Arg — G1 y — Asp — DPhe — NMeLeu) ； FAB-MS (M + H) ： 6 0 3 ；環一（NEtArg — Gly— Asp — DPhe — Leu) ； FAB-MS (M + H) ： 6 1 7 ；環-(Arg — NEtGly— Asp — DPhe-Leu) ； FAB-MS (M + H) :617; 環一(Arg-Gly — NEtAsp-DPhe — Leu) ； FAB-MS (M + H) :617; 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 環一（Arg — Gly — Asp — NEtDPhe — Leu) ； FAB-MS (M + H) ： 6 1 7 ；環一（Arg — G1 y — Asp — DPhe — NEtLeu) ； FAB-MS (M + H) ： 6 1 7 ；環一（NPrArg — Gly— Asp — DPhe — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）_ _ 517064 A7 B7 五、發明説明（27 )

Leu) ; FAB-MS (M + H) :631; 環一（Arg — NPrGl y — Asp — DPhe — Leu) ； FAB-MS (M + H) ： 6 3 1 ；環一（Arg — Gly — NPrAsp — DPhe — Leu) ； FAB-MS (M + H) :631; 環一（Arg — Gly — Asp — NPrDPhe —

Leu) ; FAB-MS (M + H) ： 6 3 1 ；環一（Arg — G1 y — Asp — DPhe — NPrLeu) ; FAB - MS (M + H) ： 6 3 1 ；環一（NBz lArg — Gly — Asp — DPhe —

Leu) ； FAB-MS (M + H) :679; 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 環一(Arg — NBz lGly-Asp — DPhe — Leu) ； FAB-MS (M + H) :679; 環一（Arg-Gly — NBz lAsp-DPhe — Leu) ； FAB-MS (M + H) :679; 環一（Arg — Gly — Asp — NBz lDPhe — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）_ _ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 A7 B7 五、發明説明（28 )

Leu) ;FAB - MS(M + H) :679; 環一（Arg — G1 y— Asp — DPhe — NBzlLeu) ; FAB-MS (M+H) :679 環一（NMeArg — Gly -Asp — DPhe — Ala)；環一（Arg — NMeGly—Asp — DPhe — Ala)；環一（Arg — G1 y — NMeAsp — DPhe — Ala); 環一（Arg — G1 y — Asp — NMeDPhe — Ala)；環一（Arg — G1 y — Asp-DPhe — N M e A 1 a ) ； R T = 1 6 . 2; FAB-MS (M + H) ： 561 ；環一（NEtArg — Gly—Asp-DPhe — Ala)；本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）_ 31 I. 「. I z 裝訂 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 517064

7 B 、—/ 9 2 (/.明説明發五環 e h p D I p s A I y II G t E N I g r a

環 A a

e h p D I p s A t E N I y lx G I g Γ A

e h p D t E N I p s A I y ΊΧ G I g r A ) ( a I 1 環 A 環

E N 6 h p D I p s A I y II G ; I ) ga Γ lx A A ( t (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂

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Θ h p D I p s A I V7- II G Γ p N I g Γ A # 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

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6 h p D I p s A Γ p N I y lx G I g Γ A a a

6 h p D Γ p N I p s A I y 11 G I g r A 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）_ 32 _ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 A7 B7 五、發明説明（30 ) 環一（八1*忌一〇1：7 —八3口一〇?110 — N P r A 1 a )；環一（NBz lArg — Gly — Asp — DPhe —

Ala); 環一（Arg — NBzlGly—Asp — DPhe-Ala)；環一（Arg — Gly — NBz lAsp — DPhe —

Ala)；環一（Arg — Gly—Asp — NBzlDPhe —

Ala); 環一（Arg — Gly — Asp — DPhe — N B z 1 A 1 a )；環一（NMeArg-Gly — Asp — DPhe — Gly)；環一（Arg — NMeGly — Asp — DPhe — Gly)；本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）_ 33 _ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) έ ，項再填、裝· 517064 A7 B7 五、發明説明（31 ) 環一（Arg — G1 y — NMeAsp — DPhe — G 1 y ); 環一（Ar g — G1 y— Asp — NMeDPhe — G 1 y )；環一（Arg — G1 y— Asp — DPhe — N M e G 1 y ) ； R T = 1 4 . 3; FAB— MS (M + H) : 547 ; 環一（DArg — Gly — Asp — DPhe — N M e V a 1 ) x TFA；RT=18. 7; FAB-MS (M + H) ： 589 ；環一（NEtArg — Gly— Asp-DPhe-

Ci 1 y ) ; 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 環一（Arg — NEtGly — Asp — DPhe — Gly)；環一（Ar g — G1 y — NEtAsp — DPhe — Gly)；環一（Arg — Gly—Asp — NEtDPhe — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）_ % _ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 A7 B7 五、發明説明（32 ) G 1 y )； N E t G 1 y )；環一（NPrArg — Gly— Asp — DPhe — G 1 y )；環一（Arg — NPrGly — Asp — DPhe — G 1 y )；環一（Arg — Gly — NPrAsp — DPhe — G 1 y )；環一(Arg-Gly-Asp - NPrDPhe — Gly)；環一（Ar g — G1 y— Asp — DPhe — NPrGly)；環一（NBz lArg-Gly — Asp — DPhe — Gly)；環一（Arg — NBz lGly — Asp — DPhe — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 A7 B7 五、發明説明（33 ) G 1 y )；環一（Arg — Gly — NBzlAsp — DPhe — G 1 y )；環一（Arg — Gly-Asp-NBz lDPhe — G 1 y )；環一（Arg — Gly—Asp — DPhe — N B z 1 G 1 y )；環一（NMeArg — Gly— Asp — Phg — Va 1 ); 環一（Arg — NMeGl y— Asp — Phg — Va 1 )；環一（Arg — G1 y— NMeAsp-Phg — Va 1 )；環一（Arg — Gly— Asp — NMePhg — Va 1 ); 環一（Arg — Gly — Asp — Phg — NMeVa 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂砉 -36 - 517064 A7 B7 五、發明説明（34 環

a V I g hp 一 p s A I y IX G I g r A t E N 環

a V I g hp I p s A 一 y Is G t E N I g r A 環

a V I g hp - p s A t E N - y lx G I g Γ A (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 環

a V I g hp t E N - p s A I y 1i G I g Γ A 環

a V t E N - g hp Ip s A I y ----X G - g Γ A 經濟部中央標準局員工消費合作社印製環環環

a V - g hp I p s A - y II G I g Γ A Γp N /IV

a V I g hp Ip s A I y 11 G Γp N - g Γ A

a V I g hp I p s A Γp N I y II G I g Γ A 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -37 - 517064 A7 B7 五、發明説明（35 ) )；環一（Arg — Gly — Asp — NPrPhg — Va 1 )；環一（Arg — Gly — Asp — Phg — NPrVa 1 )；環一（NBz lArg — Gly — Asp — Phg — V a 1 ); 環一（Arg — NBz lGly — Asp — Phg — V a 1 )；環一（Arg — Gly — NBz lAsp — Phg — V a 1 )；經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 環一（Arg — Gly — Asp — NBzlPhg — V a 1 )；環一（Arg — G1 y — Asp — Phg — N B z 1 V a 1 )；環一（NMeArg — Gly — Asp — 丁 rp — Va 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）〇〇，一一 517064 A7 B7 五、發明説明（36 環

a V I P r τ I p s A I y II G e M N I g Γ A 環

β V I p Γ T I p s A e M N I y 1i G I g Γ A 環

a V I p Γ T 6 M N - p s A I y II G I g Γ A ----—；--Τ'；--βΙ 裝-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 環

a V 6 M N I p Γ T I p s A - y 11 G I g Γ A 訂環

a V I p Γ T I p s A I y ΊΧ G I g Γ A t E N # 經濟部中央標準局員工消費合作社印製環環環

a V I p Γ T I p s A I y lx G t E N - g Γ A

a V - p Γ T - p s A t E N I y IX G I g Γ A

a V I p Γ T t E N I p s A - y IX G I g Γ A 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -39 - 517064 A7 B7 五、發明説明（37 ) 環

a V t E N - p Γ T I p s A I y G I g r A 環

a V I p r T - p s A I y IX G I g r A Γ p N 環

a V - p r T I p s A I y lx G r p N I g Γ A (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 環

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a V I p Γ T Γ p N - p s A 一 y lx G I g Γ A 經濟部中央標準局員工消費合作社印製環

a V Γ p N I p Γ T I p s A I y IX G I g Γ A p Γ T - p s A I y IX G I g Γ A II z B N I環

a V 環

p Γ T I D s A I y lx G IX z B N - g Γ A 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -40 - 517064 A7 B7 五、發明説明（38 ) V a 1 )；環一（Arg — Gly-NBz lAsp - Trp — V a 1 )；環—（Arg - Gly — Asp-NBziTrp- V a 1 )；環—（Arg - Gly - Asp — Trp -N B z 1 V a 1 ); 實例2 使 0. 28 克環一（Arg (Mtr) - Gly

Asp-NMePhe—Dval)〔得自實例1的環化反應〕於8· 4毫升TFA、1. 7毫升二氯甲院和 0 9毫升硫代酚中之溶液於室溫下靜置4小時，然後濃經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 縮，殘渣縮以水稀釋，然後冷凍乾燥。在Sephadex G10上進行膠體過濾程序（醋酸/水1 : 1)，以製備型 Η P L C於所指定的條件下純化，得到環一（a r g -Gly-Asp - NMePhe - DVal) ； F A B -MS ( M + H ) :589〇以類似的方式得到下列物種：製自環一（Arg (Mtr) - Gly-NMeAsp 一 D P h e — I 1 e )：本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A^^TTh^297公羞）-- -41 - 517064 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（39 ) 環一（Ar g — G 1 y — NMeAs p — DPhe — lie) ； FAB-MS (M + H) ： 6 0 3 ；製自環—（D — Arg (Mtr)— NMeGly — Asp (OBut) — DPhe— N1 e): 環一(D — Arg-NMeGly — Asp — DPhe-N 1 e )；製白環 — ( N M e A r g ( M t r )— G 1 y —D — A S P ( 〇 Ε t ) — D P h e -I 1 e ) ·· 環 — ( N Μ e A r g — G 1 y -D — As P — D Phe lie)；製自環—（NMeArg (Mtr)-Gly — Asp 一 Phe-DIle): D I 1 e )；製自環—（Arg (Mt r) — Gly — NMeAsp 一 Phe— DLeu): 環一（Arg — Gly — NMeAsp — Phe — DLeu); 製自環—（Arg (Mt r) —NMeGl y — Asp 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）_ 42; _ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

517064 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7五、發明説明（4〇 ) —Phe— DSer): 環一（Arg — NMeGly — Asρ — Phe — D S e r ); 製自環—（Arg (Mtr)— NMeGly — Asp —DNal — Leu): 環一（Arg — NMeGly— Asp — DNa 1 — Leu); 製自環—（NMeArg (Mtr)—Gly— Asp -N a 1 - D I 1 e ): 環一（NMeArg — Gly — Asp — Nal — D I 1 e )；製自環—（Arg(Mtr)-Gly—Asp — NMePhg-DVal): 環一（Arg — Gly— Asp -NMePhg-D V a 1 )；製自環一（Arg (Mt r) — Gly — NMeAsp -Trp-DVal): 環一（Arg — Gly-NMeAsp — Trp — D V a 1 )。 ^^1 ——.I m —ϋ -1^1 .0 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 # 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）_犯 517064 A7 B7 五、發明説明（41 ) 實例3 80 毫克環—（Arg — Gly— Asp — DPhe -N M e V a 1 ) 溶解於0. 01m HC1中5至6次，每次溶解操作之後加以凍乾。以Η P L C純化之後得到環一（Arg — Gly — Asp — DPhe — NMeVal)HCl； FAB-MS (M + H): 5 8 9 ° 以類似的方式得到下列物種= 製自環—（NMeArg — Gly— Asp — DPhe -V a 1 ): 環一（NMeArg — Gly—Asp — DPhe — V a 1 ) ： x H C 1 ；製自環-(Arg — NMeGly— Asp - DPhe -V a 1 ): 環一（Arg — NMeGly— Asp — DPhe— Va 1 ) x H C 1 ；經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) FAB— MS (M + H) : 589 ; 製自環—（Arg — Gly - NMeAsp — DPhe 一 V a 1 ): 環一（Arg — Gly — NMeAsp — DPhe — V a 1 ) x H C 1 ；本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）_ 44 _ 517064 A7 B7 五、發明説明（42 ) 製自環一（Arg — Gly— Asp-NMeDPhe -V a 1 )：環一（Arg — Gly — Asp — NMeDPhe — V a 1 ) x H C 1 ；類似地，以醋酸（AcOH)處理，由環_ (Arg 一 Gly — NMeAsp - DPhe— Val)得到環 —(Arg — Gly — NMeAsp — DPhe — Val)xAcOH；RT=15. 4 ; FAB— MS ( M + H ) : 5 8 9 0 類似地，以甲磺酸（Me SOH3)處理由環—（ Arg — Gly— Asp — DPhe— NMeVa 1 ) 得到環—（Arg — Gly— Asp — DPhe — NMeVa 1) xMeS03H；RT=17. 8 ； FAB — MS (M + H) : 589 0 實例4 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 欲製造親和相，0. 9克 N —馬來醯亞胺一（ CH2) — CO — NH — (CH2) 3 聚合物〔得自 N —馬來醯亞胺一（CH2) 5-（：0011與^121^ - (CH2) 3 聚合物之縮合反應]懸浮於10毫升PH7的0. 1M磷酸鈉緩衝溶液中，添加溫度爲4 °C之一當量的環一（ Arg — Gly-Asp — DPhe-NMeLys ( C〇（CH2)2SH)。此反應混合物於溫熱至室溫的同本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（ 210X297公釐）_ 45 - 517064 A7 B7 五、發明説明（43 ) ~ 時攪拌4小時，濾除固體殘渣並以緩衝溶液（ρ η 7 )清 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 洗兩次（每次1〇毫升），然後以水清洗三次（每次1〇毫升）。得到環〜（Arg — Gly — Asp — DPhe 一 NMe — Ly s (c〇 (CH2) 2S — 3 —（N —馬來醯亞胺一（CH2) 5 一 c〇NH -（CH2) 3 聚合物）） ο 實例5 類似於實例4，聚合物—0 -（CH2) 3 - ΝΗ2〔市售品〕和環一（Arg — Gly — Asp — NMe — DPhe-Lys (CO(CH2)4COOH)〔得自己二酸和環一（A r g — G 1 y - As p — NMe — DPh e - Ly s )於所述的條件下之縮合反應〕之縮合反應得到如下的聚合相：環—（Arg—G1y_Asp 一 NMe— DPhe - Lys — CO — (CH2)4-CO 一 NH —（CH2)3 — 0 —聚合物）。經濟部中央標準局員工消費合作社印製藉環（NMe— Ar g — G 1 y — As p — DPhe 一 Lys — （CO — （CH2)5-NH2))與 HO〇C 一 CH — O -聚合物之縮合反應得到環（NMe—A r g 一 G1 y-Asp — DPhe — Lys —（CO —（ CH2)5 - NH— CO - CH2— 0 —聚合物））。下面的實例係關於藥用製劑。實例A :注射瓶本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -46 - 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 517064 A7 _ _B7__ 五、發明説明（44 ) 以2 N鹽酸將1 〇 0克之以式I表示的環肽和5克磷酸氫二鈉在3升經過兩次蒸餾的水中之溶液調整至 p Η 6 . 5，進行無菌過濾，裝入注射瓶中，然後在無菌狀態下進行低壓凍乾處理，這些注射瓶在無菌狀態下包封。每個注射瓶中含有5毫克的活性物質。實例Β :栓劑 2 0克以式I表示的活性物質與1 0 0克大豆卵磷脂和1 4 0 0克椰子油熔解在一起，將此混合物倒入模具中並使其冷卻。每支栓劑中含有2 〇毫克的活性物質。實例C :溶液由1克以式I表示的活性物質、9. 38克

NaH2P〇22H2〇、28. 48 克 Na2HP04· 12H20和〇. 1克的苯甲醯氯和9 4 0毫升經過兩次蒸餾的水形成溶液。將此溶液的pH調整至6. 8,使之成爲1升溶液，並藉由照光來達到無菌的目的。此溶液可被用來作爲眼部的滴劑。實例D :軟膏 500毫克以式I表示的活性物質與99. 5克凡士林於防腐狀況下混合。實例E :錠劑本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

-47 - 517064 A7 _ ___B7__ 五、發明説明（45 ) 1 〇 0克以式I表示的活性物質、1公斤乳糖、 6 00克微晶化的纖維素、600克甘薯澱粉、100克聚乙烯吡咯啉酮、8 0克滑石和1 0克硬脂酸鎂之混合物以常用的方式壓製成錠，使得每錠中含有1 0毫克的活性物質。實例F :經包覆的錠劑以與實例E類似的方式製成錠，然後以常用的方式覆以包含蔗糖、甘薯澱粉、滑石、黃蓍膠和著色劑的覆層。實例G :膠囊以常用的方式將以式I表示的活性物胃填入硬膠囊中，使得每個膠囊中含有5毫克的活性物質。實-例Η :噴霧吸器經濟部中央標準局員工消費合作社印製將I，4克以式I表示的活性物質溶解於1 0升等滲透壓Na C 1溶液中，將此溶液裝入附有幫浦機械的市售噴霧罐中。此溶液可噴入口或鼻中。噴霧一次（約0.1 毫升）的劑量約0. 14毫克。一 48 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐）

Claims

Ζ 六、申請專利W 附件1 a : 第8 5 1 1 1 3 7 5號專利申請案中文申請專利範圍修正本民國90年3月修正 1 ·環一（Arg — Gly — Asp - DPhe -N M e V a 1 )；或其生理上可接受的鹽類。 2. —種用於製備如申請專利範圍第1項之化合物或其鹽類之一的方法，其特徵在於使用溶劑分解劑或氫解劑對其官能性衍生物之一進行處理而自其官能性衍生物中釋出；或者，在於以環化劑處理以下式I I的肽或此肽的反應性衍生物， Η — Z — Ο Η II 其中是 —Arg — Gly - Asp - DPhe — NMeVa 1 — ’一 G1 y — Asp — DPhe — NMeVa 1 — Arg —，一 Asp-DPhe - NMeVa 1 - Arg —G1 y — DPhe — NMeVa 1 — A r g — G 1 y— As p —，或 —NMeVa 1— Arg - Gly — Asp 一 DPhe— » ;和/或在於申請專利範圍第1項的鹼性或酸性化合物藉 --·----------------- —訂--------- 線% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經.濟.部智慧財產局員工消費合作社印製 V 上口一 5 V 3 〈 517064 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍由酸或鹼處理而轉化成其鹽類之一 β 3 . —種用於抑制整合素之藥學組成物，含有如申請專利範圍第1項之化合物或其生理上可接受的鹽類。 4.如申請專利範圍第1項之化合物或其生理上可接受的鹽類，係用作整合素抑制劑。 .--.------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐）一 2 - 517064 p%rn：G9^ 正年"補充附件3a :第85111375號專利再審查案中文補充藥理試驗報告受體抑制分析把取自足月胎盤之純化的人類整合素（integrin) %爲及吸附至微滴定井並用义爲與义爲生物素化互補配體-試管黏結素 (vitronectin，VN )在有漸增量的測試化合物下加以激發 (challenge )。方法：令生物素-配體以l/^αΓ1經塗覆之受體在有一系列稀釋EMD肽的情況下溫育，於30°CF3小時後利用抗生物素 -鹼性磷酸酯酶偵測法測量結合的配體。文献：Charo, I· F·，Nannizzi，L·，Smith，J.W.及0^1^11，0.八.，；1· Cell. Biol. Ill, 2795-2800(1990). 表I 生物素化配體結合至人類胎盤义戽及义爲之〇値（=測試化合物與標準化合物IC5。値之商値）序列 Q Q VN:a^ VM:aJ5 環 -(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) 0.3 0.1 標準環-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Val) 1.00(1.8nM) 1.00(266nM)