TW434024B

TW434024B - Cosmetic composition containing a neuropeptide Y receptor antagonist

Info

Publication number: TW434024B
Application number: TW086114594A
Authority: TW
Inventors: Elisabeth Blanc-Ferras; Colombie Francoise Bono; Bernard Breda; Jean Courregelongue; Catherine Ducasse
Original assignee: Sanofi Synthelabo
Priority date: 1996-10-23
Filing date: 1997-10-06
Publication date: 2001-05-16
Also published as: JP3411463B2; US6114336A; DE69739002D1; US5827853A; ATE412399T1; ES2191154T3; EP1093803B1; ES2316403T3; CN1214780C; JPH10120551A; MX9700822A; ATE408396T1; EP0838217A3; US6313128B1; DE69718409T2; SI0838217T1; HUP9700410A2; FR2754709A1; MY117993A; HU9700410D0

Description

434024 經濟部中央橾準局員工消費合作社印f. A7 ________B7____ 五、發明説明（1 ) 本發明係關於含有神經胜肽Y受體拮抗劑之化妝品组合物。神經胜肽Y，以下簡稱爲"NP Y，·，爲一種涉及某些特定生玻學過程，且業經證實參典調節脂質分解之神經介質 (P.瓦雷特（Valet)與从.！.（：如.11^6811990,55,291-295 ) 。NPY受¾拮抗劑，以下稱之爲HNPY拮抗劑”雖業經描述做爲醫藥品，但其在治療任何一種疾病方面之功效，至今仍尚未被證實。現已發現，NPY拮抗劑可用於化释品组合物之製備。更特別地，業經發現，含有NPY-拮抗劑組成份之化妝品组合物可用於皮膚，做爲脂質分解/脂質生合成作用之調節劑，而不會千擾皮膚之正常自然功能。亦已發現，尤以含有ΝΡΥ-拮抗劑组成份，及α2-拮抗劑組成份之化妝品組合物爲特別有益。因此，根據一方面’本發明係關於含有至少·^種與適用於化妝品製備之賦形劑混合，之ΝΡΥ·拮抗劑組成份的化妝品组合物《該包含於化妝品組合物中之ΝΡΥ拮抗劑，可爲一#非肽類化合物、肽類、動物或植物來源之細胞或組織萃取物，或爲藉由微生物，例如細菌或眞菌發酵所得到之產物β 有利地，用於本發明化妝品组合物中之ΝΡΥ拮抗劑，爲以下所述之A' Β與C組者》 Α.選自以下所述⑴至（VIII)组之合成產物，爲有利之ΝΡΥ-括抗劑组成份β I.具式⑴之化合物 (讀先閲讀背面之注意事項一 <寫本頁〕裝. 訂本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公麓） 434024 A7 B7 五、發明説明（ 2 I' A^S〇2-N^C-C-N-C^CH ί Ο H C=0 chr-2 I R, N-Q,·--, c (!)

Ar2 _R, 其中經濟部中央標準局w Μ消费合作社印裝 -Ar!代表签基、苯基、峻，林基或異峻啦基’視需要經Cl、 F、（CrC4)烷基、（CrC4)娱*氧基、羥基或（Cl-C4)二烷胺基取代； -Αγ2代表苯基嘧吩基，視需要經Cl、F、（C1-C4)烷基、 (C1-C4)燒氧基或輕基取代： -Ri、R2與R*2各自獨立地代表氫、（C1_C4)烷基，或可供選擇地，R丨代表無，而N係接附於ΑΓ2上，且（視需要地）R2與ΪΤ2形成一個雙鍵，或者Rl或R2接附至Ar2上，且代表（Ci-C3)伸烷基； -R3與R4(爲相同或相異）代表氫、（Cl-C4)烷基，或與其所接附之氮原子形成一個選自吡咯啶、六氫吡啶與六氫吖庚因之飽和c5-c7雜環； -Zi代表視需要經（c5-c7)環烷基或苯基插入或取代之 (Ci-C12)伸烷基·， -Qi代表甲基、胺基、（CrC4)烷氧羰基胺基、（cvce 烷胺基、二（CrCU)烷胺基、吡咯女基、尖氫吡啶基、嗎福啉基、六氫吡呼基、（Ci-Cd烷基·4·六氫吡喑基、甲脒基、 (CrCe烷基甲跦基、胍基、（CrCe烷基胍基、吡啶基、咪 -5- 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4规格（210X297公釐） ----------¢— (請先聞讀背面t注意事^本黃訂 —線 Γ 4340 24 ^ at Β7 五、發明説明（) 3 咬基、遠峻基、4丨嗓基、幾基' (C1-C4)坑氧基、（c2-(：8) 烷氧羰基、N-[胺基（Ci-C：4)烷基l-N-Kq-CU)烷基]胺基、胺曱醯基或視需要經Cl、F、（C!-C4)烷基、（crc4)烷氧基或羥基取代之苯基； -Q2代表氫或（CrC4)烷基； -Ch代表氫或（C〗-C4)炫基’或者Qi與Q3鍵辦而形成一雜環，且共同代表（C2-C3)伸烷基，而Zi代表無，其呈純鏡像異構物或其以任何比例所成之混合物之形式，以及其與酸類所成之加成鹽類；其可根據歐洲專利EP 614,911案而製備得。 II -雷洛西芬（Raloxifen)類似物，特別是 a)具式（II)之化合物

其中 -A°爲·0-、-S(0)m-、-N(R〇6)-、-(CH2)2·或-CH=CH-; -Re6爲氫或（Ci，C6)烷基，且m爲0、1或2 ; -x°爲坡結或（Ci-C4)伸烷基； -Re2爲具下式之基團經濟部中央標準局員工消費合作.社印製本紙張尺度適用中固國家標车（CNS > A4規格（2丨〇χν2$7公釐) 經濟部中央標率局員工消費合作社印裝 4340 24 A7 B7 —~· ~·_ 一~, 五、發明説明（4 ) 其中尺。4與Rc5獨立地爲（CpC6)燒基’或與其所接附之氮原子構成一個選自六亞甲亞胺基、六氣"比味基、七亞甲亞胺基、4-甲基六氫*比淀基、咪咬啦基、峨啥咬基或嗎福淋基之雜環基租； -R。爲幾基、邊素、氫、（C3-C8)環燒基、（C2-C7)技醣氧基、（(^_(：6)烷氧基或苯基，該笨基視需要經一、二或三個選自（C〗-C4)烷基、（Cl-C4)烷氧基、硝基、氣基、氟基、三氟甲基、-OSOHCrCn))烷基或·0-<：(0)·ΝΗ·Ι^3之取代基取代； -Rl爲羥基、鹵素、氫、（C3.C8)環烷基、（C2-C7)烷醯氧基、（C!-C 6)坑氧基或苯基，對於該苯基而各’其可視需要經一、二或三個選自（C1-C4)烷基、（C1-C4)烷氧基、硝基、氯基、氟基、三氟甲基、-〇S〇2-(C!-Ci〇)娱*基或-0-C(0)-NH- Rc3之取代基取代；其中各R°3獨立地代表（Cl~c6)虎基、（C3-C8)環院基、未經取代或經取代之苯基，其中該取代基爲鹵素、（C!-C6)烷基；或（CrCd烷氧基；其限制條件爲，當X。爲鍵結且A。爲-S-時，則R。與R、均爲選自羥基、甲氧基及（c2-c7)烷醢氧基者；以及其鹽類或溶劑合物，其可根據W0 96/12489案而製備得，特別是選自下列之化合物：，3-(4-甲氧苯基）-4-[4-(2-吡咯啶-1-基乙氧基）苄醢基】-1,2-二氫茬，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閎讀背面之注意事項命从寫本頁) 言經濟部中央標準局員工消費合作社印製 434024 * A7 _ - B7 五、發明説明（5 ) • 3-苯基-4-[4-(2-吡咯啶-1-基乙氧基）芊珐基】·7-甲氧基- 1，2-二氫莕， • 3-(4-甲氧苯基）-4-[4-[2-(六氫响症-1-基）乙氧基]窄磁基}-1，2-—氨名， • 3-(4_羥苯基）-4·[4-[2-(吡咯啶-1-基）乙氧基]苄醯基]_ 1,2-二氫荅， • 3-(4 -甲氧笨基）-4-[4-[2-(ττ亞甲亞胺-1-基）已氧基]爷边基]-1,2-二氫莕， • 3-(4-甲氧苯基）-4-[4-[2-(六氫吡啶-1-基）乙氧基]芊醯基]-1，2-二氫蓁， • 3-(4-甲氧苯基）-4-[4·[2-(六氫p比淀-1-基）乙氧基]爷殖基] •7-甲氧基-Ι，2·二氫莕， • 3-(4-甲氧苯基）·4-[4-[2-(Ν-甲基-1-?比洛鍵）乙氧基]节磁基]-1,2-二氩莕， • 3-(4-甲氧苯基）-4-[4-(2-二甲胺基乙氧基）苄醯基]-1,2- 二氫苯， • 3-(4-甲氧苯基）-4-(4-二乙胺基乙氧基芊醢基）-1,2-二氫莕， • 3-(4·甲氧苯基）-4-(4-二異丙胺基乙氧基芊醯基）_1，2·二氫萘， .2-(4-羥苯基）_3-[4-[2-(六亞甲亞胺-1-基）乙氧基]苄醢基]-6-羥基苯并呋喃， • 2-(4-輕苯基六氮p比咬-1-基）乙氧基]爷成基】- 6-羥基苯幷呋喃，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4規格（2丨〇 X 297公嫠） (請先閲讀背面之注^h項各Α寫本頁) .裝· *?τ 434024 A7 B7 五、發明説明（6 ) 經濟部中央梯準局員工消費合作社印褽 .2-(4-羥苯基）-3-[4-[2-(吡咯啶基）乙氧基]苄醯基μ6-_ 羥基苯幷呋喃， • 2-(4.-羥苯基）-3-[4-[2-(Ν，Ν-二乙胺基）乙氧基]节醯基]_ 6-獲基苯并吱味， .2·(4-羥苯基）-3-[4-【2-(3^，1^-二異丙胺基）乙氧基]苄醢 .基]-6-兹基苯并ν炎咕， ’ 2-(4·羥苯基）-3_[442-(Ν，Ν-二甲胺基）乙氧基]窄醯基]_ 6-羥基苯幷呋喃， • 1-乙基-2-(4-甲氧苯基），3-[4-[2-(六氫吡啶-1-基）乙氧基]苄醢基】-6-羥基吲哚， • 2-(4·甲氧苯基）-3-[4-[2·(六亞甲亞胺-i_基）乙氧基]苄醢基]-6 -甲氧基笨并咳喃， • 2-(4-甲氧苯基）-3-[4-[2-(六氩吡啶-1_基）乙氧基]苄醢基]-6-甲氧基笨并咬喊，，2-(4-甲氧苯基）-3-[4-[2-(吡咯啶·1-基）乙氧基]苄醢基]· 6-甲氧基苯并呋喃， • 2_(4·甲氧苯基）-3-[4·[2-(Ν,Ν·二乙胺基）乙氧基]苄醯基J-6-甲氧基苯并呋喃， ‘ 2-(4-甲氧苯基）-3-[4-[2·(Ν，Ν-二異丙胺基）乙氧基]芊醢基]-6-甲氧基苯并呋喃， .2-(4-甲氧苯基>·3-[4-[2-(Ν，Ν-二甲胺基）乙氧基]芊醢基]-6-甲氧基苯并呋喃， • 1_乙基_2-(4-甲氧苯基）-3-[4-[2·(六氫吡啶-1-基）乙氧基]芊醯基】-6_甲氧基"5丨哚， 9 本紙張尺度適用中困國家揉準（CNS 規格（21〇XZ97公釐）背面之注項 D 寫本頁裝訂 ‘線 434024 A7 _ - B7 五、發明説明（7 ) • 2-(4-甲氧苯基）-3-[4-[3-(六亞甲亞胺-1-基）丙氧基]苄醯基]苯并[b]嘍吩， .2-(4-甲氧苯基）-3·[4-[2-(六亞甲亞胺-1-基）丙氧基]苄醯基】苯弁丨bj嘍吩， .2-(4·甲氧苯基）-3-[4-[3-(六氩吡啶-1·基）丙氧基]苄鏟基】苯并[b]嘍吩， • 2-(4-甲氧苯基）·344-[2·(吡咯啶-1-基）乙氧基]芊醯基] 苯并[bp塞吩， .2-(4_甲氧苯基）-3-[4‘[2-(N,N_二乙胺基）乙氧基]爷殖基]苯幷[b]嗱吩， .2-(4-甲氧苯基）-3-[4·[2-(Ν，Ν-二異丙胺基）乙氧基]竿殖基]苯并[b]喹吩， • 2-(4-甲氧苯基）_3_[4_【2-(Ν Ν-二甲胺基）乙氧基]竿醢基]苯弁[b]嘍吩，，2-(4·氣苯基）-3-[4·[2-(六亞甲亞胺-1-基）乙氧基]苄醯基1-6-羥基苯幷[b]嘍吩， .2·(4“羥苯基）-3·μ-[2-(六氫吡啶·1-基）乙氧基]芊醯基] 苯并[b]嘍吩， • 2-(4-羥苯基）_3-[4-[2-(毗咯啶-1-基）乙氧基】芊醢基]苯幷[b]嘍吩， • 2·(4·羥苯基）-3·[4-[2_( n，n-二乙胺基）乙氧基】窄醢基] 苯幷[b]嚷吩， ‘ 2-(4-羥笨基）-3-【4-[2-( N，N-二異丙胺基）乙氧基]苄贐基]苯弁ib]違吩， • 10- 本紙張尺度適用中因國家標準（CNS>A4规格（210X297公釐) <褚先閲讀背面之注意事項一ci»,寫本頁 .装· 訂經濟部中央樣準局負工消费合作社印製 4 3 40 24'? at B7 經濟部中央榇隼局ι工消费合作社印製五、發明説明（8 ) • 2-(4-羥苯基）-3-f4-[2-( N，N-二甲胺基）乙氧基]芊醯基] 苯弁[b]，塞吩， • 2-(4·氣苯基）-3-[4-[2-C吡咯啶基）乙氧基]苄醯基】苯并[b]遠吩1-氧化物， .2-(4-氣苯基）-3-[4-[2-(六氫吡啶·1·基）6氧基]芊醯基1 笨并[bh塞吩1-氧化物， • [6-(正·丁磺睡基）-2-[4-(正丁磺酿基）苯基】苯并[b]嘍吩 -3-基][4-[2·(1-六氫吡啶基）乙氧基】苯基]甲嗣， ‘ [6-(正-戊磺醢基）·2-[4-(正-戊磺醯基）苯基]苯并[b]，塞吩 -3-基][4-[2-(卜六氫吡啶基）乙氧基]苯基]甲酮， .[6-(正-己磺醯基）-2-[4-(正-己磺醢基）苯基]苯并[b]嘧吩 -3-基][4-[2-(1·六氫吡啶基）乙氧基]苯基]甲酮， .【6-(正·丁磺醢基)-2·[4-(正-丁磺醯基>苯基]苯幷[b]〃塞吩 -3·基][4-[2-(i·六氫吡啶基）丙氧基]苯基]甲鮰， • [6-(正-丁磺随基）-2·〖4-(正·丁磺醯基）苯基}笨并[b]嘧吩 -3·基][4-[2-(1·ν比略咬基）乙氣基]笨基]甲網， .[6-羥基·2·[4-(正·丁磺醯墓）苯基]苯并[b]嘍吩·3-基][4-[2」（1-六氳吡啶基）乙氧基】苯基]甲明， .[6-正-丁磺鏟基·2-[4-羥苯基]苯并[b]嘍吩-3-基][4-[2-(1-六氫吡啶基）乙氧基]苯基]甲酮， • [6-[N-(4-氣苯基）&甲醢基ϊ-2·[4·[Ν-(4-氣苯基）胺甲斑基]苯基】苯并[b〗，塞吩-3-基][4-[2-(1·六氫吡啶基）乙氧基]苯基】甲鲖， .[6·[Ν_(正-丁基）胺甲醯基]-2-[4-[N-(正-丁基）胺甲醢基] -11 - (请先閲讀背面之注意事項沪从寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐} A7 B7 434024 4 五、發明説明（） 9 苯基】苯并[b]嘍吩-3-基][4-[2-(1-六氫吡啶基）乙氧基] 苯基]甲酮， *【6-(N-甲基胺甲醯基）-2-[4-(N-甲基胺甲醯基）苯基]苯并 [bj4吩-3-基][4-[2-(1-六氫吡啶基）乙氧基]苯基】甲胡， • [6-(Ν-乙基胺甲醯基）-2-[4-(Ν-乙基胺甲醯基）笨基]苯并 [b]，塞吩-3-基][4-[2-(1-六氫吡啶基）乙氧基]苯基】甲酮， -[6-(N-異丙基胺甲醢基）-2-[4-(N-異丙基胺甲醯基）苯基] 苯幷[b]嘧吩-3-基][4-[2·(1-六氫毗啶基）乙氧基]笨基] 甲酮， • [6-(Ν-環己基胺甲醯基）-2-[4-(Ν-環己基胺甲醢基）苯基] 苯并[b]嘧吩-3-基][4-[2-(1-六氫吡啶基）乙氧基]苯基] 甲酮，以及其鹽類或溶劑合物。 (b)具式（III)之化合物 (III) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

其中R〇與R3〇獨立地代表H、CH3、-CCKCpCd烷基或者需要經取代之苯基，且R20代表峨洛咬基、六氫批淀基肩六亞甲亞胺基，或其醫藥上可接受之鹽類或溶劑合物，趋本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 434024 Α7 Β7 五、發明説明（10) 敘述於美國專利US 5,504,094案中之Ν|>γ拮抗劑，特別是其中R〇與R3〇皆爲氫且R2〇爲吩洛咬基之式（HI)化合物，以及其鹽類或溶劑合物。III -具式（IV)之苯基磺醯基喹啉類：

其中Riy爲視需要經取代之芳基，或者 -Rly爲-N〇2、-CH、-C02R3y，其中 R3y係 η、烷基或芳基、-S〇2R3y ’其中R3y係如上所定義者，或者爲 --S-R3y I ▼ 0 其中R3y係如上所定義，或者爲 R I cnno 經濟部中央橾準局員工消費合作社印製其中R3y係如上所定義， -R2y 爲-HN2、-0H或-SH，以及其鹽類，經敘述於美國專利US 5,552,411案中，特別是已知编號爲PD-160170之8-胺基-6-(2-異芮笨基磺殖基）-5-硝基喹啉，與已知编號爲pd-9262之8-胺基·6-(4-胺苯基 -13-

本紙張尺度逋用中國國家揉準（CNS ) Α4规格（210X297公釐） 434024 ^ at _ B7 五、發明説明（”）磺醯基）-5-硝基，奎啉，其經敘述於生物有機舆醫藥化學書 it (Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters) » 1996 » 6 » ;)_，1809-1814 » IV - 經敘述於醫藥化學期刊（J. Med. Chem.) 1993，3(5， 272-279，於歐洲藥理學期刊（Eur. J. Pharmacology) 1994，37，2242-2248，及於現今醫藥設計（Current Pharmaceutical Design) * 1995，i，295-304 中之爷過胺（Benextramine)及其類似物，特別是SC3 117、 SC3199、CC217與 CC2137。 V- 磷酸肌醇衍生物，特別是： a) 磷酸肌醇之特別異構物，尤其是D·中肌醇1，2,6-三磷酸鹽，中肌醇1,2,3-三磷酸鹽與L-中肌醇1，3,4-三磷酸鹽，其經敘述於WO 92/00079及美國專利US 5,128,332 案中，做爲NPY拮抗劑。 b) 呈酸性形式之單磷酸肌醇及其鹽類，特別是其鈉、鉀' 鈣或鋅鹽，其經敘述於W0 92/00744案中，做爲NPY拮抗劑。 VI- 具下式之化合物 ---------装— (請先閱讀背面之注意事項hC,寫本頁) Γ

434024 * A7 ---- - ^ B7五、發明説明（12 ) 中央標率局工消費合作杜其中： "ΑΓ'爲苯基、2-、3-或4-吡啶基、2-或3-嘧吩基、或爲4-或5-嘧啶基，各視需要經由素、羥基或具有丨至6個碳原子之直鏈或支鏈低碳數烷基鏈單-或二取代； • A’、W*、X’、Υ’與Τ·爲相同或相異，且代表氫、_素、經基或具有1至6個竣原子之直鏈或支鏈低碳數烷基鏈； -R' 1與R'2爲相.同或相異’且代表氫、或具有1至6.個碳原子之直鏈或支鏈低碳數抗基鏈； •尺'3與爲相同或相異，且代表氩或具有1至6個碳原子之直鍵或支鍵低碳數燒基鏈；且 -R，9代表氫、具有1至6個碳原子之直鏈或支鏈低碳數烷基鏈或苯基；以及其殲類’其可如WO 96/143 07中所述製備得，特別是 _ 1·氰基苯基六氫吡畊·卜基）環己烷， • 1-苯基·1-(4_苯基六氫吡畊-1-基）環己烷， .1-(3 -甲氧苯基）'"* 笨基六氫11比1^-1-基）環己烷’ • 1-(3-甲氣苯基喊咬基）六氫1^ -卜基]環己燒， .1-(3 -甲氧*苯基）-1·[4·(2-峨咬基）六氫咕基]環己 .1·(3·甲氧苯基）-1-[4-(2·氟苯基）六氫吡畊·卜基]環己烷， .1-(3 -甲氣寒基氣木基）六氮峨啡-I-基】環己烷， 15- h張尺度適用)则加潰菜) 請先閲讀背面之注意事項^¾寫_ 本頁) -裝訂線. Α7 Β7 434024 五、發明説明（13 ) ‘ 1-(3·超苯基）-1-(4 -苯基7T氮基）環己燒， ’ 1-(3,5-二甲氧苯基）-1-(4·苯基六氫吨p井-1·基）環己被ι，，1-(%乙氧苯基）-1二(4-苯基六氫吡畔-1-基）環己烷， • 1-+(3 -甲氧苯基）-1-(4-苯基六氫*比1^‘1-基）·4 -笨基環己炫·， -1-(3-正-丁氧苯基）-1-(4-象基六氩ρ比基）環己燒， • 1-(3-甲氧苯基）-1_(4-苯基六氫吡呼-1-基）-4-甲基環己烷二氫氯酸鹽，順式異構物與反式異構物， .1-(4-甲氧笨基）-1·(4-苯基六氫吡畊-1-基）環己烷， .1-(2-甲氧苯基）-1·(4·苯基六氫吡畊-1-基）環己烷， _ 1-(3,4-亞甲二氧苯基）-卜(4-苯基六氫吡畊-ΐ_基）環己烷， ‘ 1-(3-乙氧苯基>-1-(4-苯基六氫吡畊-1-基）-4-甲基環己烷，順式異構物與反式異構物， 1-(3-乙氧苯基）-1-(4-苯基六氫吡畊-1-基）·4-乙基環己烷，順式異構物與反式異構物， .1-(3-異丙氧苯基）-1-(4-苯基六氫吡呼-1-基）-4-甲基環己烷，順式異構物與反式異構物， • 1-(3·甲氧苯基）-1-(4-苯基六氫吡基）·3-甲基環己烷，順式異構物與反式異構物， • 1_(3_芊氧苯基）-1-(4·苯基六氫吡_-1-基）環己烷， • 4-(3-乙氧苯基）-1-(4-苯基六氩'ί比呌-1-基）四氫p底喃， • 4-(3-乙氧苯基）_卜(4-苯基六氫吡畊-I·基）四氫硫喊喃’ .1-(3-甲氧基甲氧苯基）-1·(4-苯基六氫吡畊-1-基）-4·甲 -16- 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS) Α4規格（210x297公釐） (請先閲讀背面之注意事項^4寫本頁) 装1 訂經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 ;434024 ^ A7 B7 五、發明説明（14 ) 基環己烷，順式異構物與反式異構物， • 1-(3-乙氧基甲氧苯基）·1-(4-苯基六氫吡啫-1-基）-4-甲基環己烷，順式異構物與反式異構物， • 1·(3-乙氧苯基）-1-(4-苯基六氫吡畊-1-基）-4-甲氧基環己烷，順式異構物與反式異構物。 VII-具下式之化合物

Ta.Z.NRV(R2aCR3a)-CO-Ya.(CH2)na-Ra (VI) 其中： -na 代表 0、1、2、3、4 或 5 ; -Ra代表氫原子或視需要經相同或相異選自氟、氣、澳或碘原子、氰基、烷基、苯基、羥基、烷氧基、二烷胺基烷氧基、羥苯基、苯烷氧基、烷羰基、胺基、烷胺基、二烷胺基、烷颯基胺基、烷羰基胺基、烷氧羰基胺基、烷氧羰基氧基、羧基、烷氧羰基、胺基羰基、烷胺基羰基、二烷胺基羰基、烷羰基氧基、烷颯基氧基、羥甲基、羥乙基、羥丙基、羥丁基、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟甲硫基、胺基烷基、烷胺基烷基、胺羰基胺基烷基、芊醯基胺基、烷酿基胺基烷基、烷氧羰基胺基烷基、苄氧羰基胺基烷基、胺基颯基、烷胺基颯基、二烷胺基颯基、胺基颯基胺基、烷胺基颯基胺基、二烷胺基颯基胺基、氰胺基、胺羰基胺基、烷胺幾基胺基、二烷胺羰基胺基、胺基颯基胺烷基、烷胺基颯基胺烷基、羧烷基、烷氧羰基烷基、胺羰基烷基、烷胺基羰基烷基、胺基砜基烷基、烷胺基諷基烷基、烷飆基、胺基颯氧基、烷胺基颯氧基、二烷胺基颯氧基或 -17- 本紙張尺度適用中國國家棣隼（CNS > Α4規格（2丨0X29?公釐〉 f請先閱讀背面之注意事項Η 裝-- π寫本頁} ，11 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 4 3 4 0 2 4 A7 -.B7 五、發明説明（15 ) 氰基脉基之取代基單-或二取代之苯基或莕基，爲經氯或秀原子二取代之胺苯基或胺莕基，其中該取代基可爲相同或相異，或爲經氣或溴原子，或經烷基或烷氧基二取代之羥采基或經莕基，其中該取代基可爲相同或相異，爲一苯基甲基，爲於燒基部分上經輕苯基，或經（2,2-二苯乙基）胺羰基胺苯基取代之胺羰基烷基，爲經由碳或氮原子接附之5-員雜芳基，該雜芳基包含一視需要經（Ci-CJ烷基或苯基取代之亞胺基，以及一個氧、硫或氮原子，或爲經由碳或氮原子接附之6-員雜芳基，該雜芳基包含一或二個氮原子，以及如上所定義之5-或之6-員雜芳環，其構成具有兩個該雜芳環之相鄰碳原子，及一個1，4-亞丁二烯基之雜芳族雙環系，又，所有上述之單-或雙環雜芳基可於碳骨架上經氟、氣或溴原子，經燒基、娱》氧基、經基、苯基、確基、氰基、羰基、烷氧羰基、胺基羰基、烷胺基羰基、二烷胺基羰基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、烷醯基、胺基颯基、烷胺基颯基或二烷胺基磡基單一取代，或者經氟、溴或氣原子，經甲基、甲氧基或羥基二取代，其中該取代.基可爲相同或相異，或爲經（1，5·二氫-2,4(3孖)-二氧咪嗖-3-基）烷基或經[1,2·二氩 -3,5(4/〇-二氧-3i/-l，2,4-三唑-4-基]烷基殘基取代之苯基，其中該咪唑或三唑部分係經1或2個苯基取代，或 -18- 本紙張尺ϋϊ用中國國家糅準（CNS > A4規格（210X297公釐) <請先Μ讀背面之注意事項r> 裝. 經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝 / 經濟部中央橾準扃貝工消费合作社印装 4 3 40 24 A? ____ - B7_ 五、發明説明（16 ) 當V代表氧原子時，則其爲具有4至8個碳原子，梘需要經巍基、胺基、烷胺基或二烷胺基取代之環烷基，其中上述之取代基不接附至該環烷基殘基之位置1上，爲1·ί[[5，11·二氫-6(6孖）氧吡啶幷[2,34][1，4】苯弁二吖庚因基]羰基]甲基】·4-六氫吡啶基，或爲3-羥基·丨·两炔_ 卜基’爲視需要於氮原子上經二苯基胺羰基取代之23_二氫-1"-異吲哚-2·基，或者當Ya爲氧原子或基團-NR4a-且表2至5之數字時，則其爲羥基， -R3爲氫原子、直鏈或支鏈（CrCi〇)烷基、具有3至7個竣原子之環烷基、視需要經羥基或羥烷基取代之苯基、或視需要於該苯基部分上經羥基或羥烷基取代之苯基甲基， -R2a爲於ω位置上經一受胺基保護基困保護之胺基或烷胺基取代，經二烷胺基、Ν-烷基苄胺基、胺羰基、胺羰基胺基、胺乙胺基、胺亞胺基甲基、胺基（羥亞胺基）曱基、胺基（烷氧亞胺基）甲基、胍基、肼基亞胺甲基、胺基（硝亞胺基）甲基、【胺基（硝亞胺基）甲]胺基、胺基（氰亞胺基）甲基、[胺基（氰亞胺基）甲]胺基、[(烷胺基）亞胺基甲]胺基、 {(烷胺基）(烷亞胺基)甲]胺基、[胺基（烷亞胺基）甲]胺基、 2-胺基咪唑_1_基、（5·胺基·4ΛΜ，2,4·三唑-3-基）胺基、（5· 胺基-4//-1,2,4-三唑-3-基）甲胺基、（3-胺基-1,2,4-哼二哇-5·基）胺基或（5-胺基-1，2,4-吟二唑-3-基）胺基取代，或經咪唑-4-基、咪唑-2-基、1-甲基咪唑·2·基、咪唑-2-基胺基、 -19- 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) Α4规潘（210Χ2Μ公釐） (請先閲讀背面之注意事項-)|-枝寫本頁) -裝. -訂. 經濟部中央橾準局員工消費合作社印裝 434024 A7 ____- B7 五 '發明説明（17 ) 咪峻-2·基甲胺基或（4,5·二氩-1/f-咪唑-2-基）胺基（視需要於碳上經一或二個甲基取代）取代的非支鏈（Cl_c5)烷基，或爲於芳環上視需It*經氰基、亞胺基甲胺基、氰亞胺基甲胺基、（甲胺基）次甲胺基、胺基亞胺甲基、胺基（羥亞胺基）甲基、胺基（烷氧亞胺基）甲基、肼基亞胺甲基、胺基（氰亞胺基）甲基或胍基，或經咪唑-2-基、1-甲基咪唑_2_基或4,5· 二氫-1仏咪嗖·2·基取代，而於芳環上視需要經一或二個甲基取代之苯基或苯甲基，其中’於以上對R2a定義所提及之胺基亞胺甲基、胺基（羥亞胺基）甲基與狐基中，一或多個與氮原子連接之氫原子 (各自獨立地〉可以烷基替代，或其中兩個與不同氮原子連接之氫原子可以具有2至4個碳原子之烷基橋鍵替代，且對於其而言，位於殘基R2a中之HN <、=或H2N基图的氫原子，可經具有2至7個碳原子之烷氧羰基，經其中烷基爲（：1-06之苯基烷氧羰基，經苯氧基羰基，經Rl5a_c〇-〇-(RltCRn^o-Co或經基取代，其中：烷基、（C3-C7)環烷基或其中烷基爲 CA之苯基或苯垸基， ♦ R16a與Rl7a(爲相同或相異）代表氫原子、（CrC6) k基或另供選擇地，Rl6a與111\代表（C3-C7)環烷基或苯烷基， ♦ R18a與R19a(爲相同或相異）代表ΐΐ原子、（(^-<：4) 燒基、竿基或苯基 -R3a爲氫原子、（CrC?)烷基或（C4-C7)環烷基， -20- 本紙張尺度適用中國國家標牵（ CNS > A4規格（210X297公釐) ~ (請先聞讀背面之注意事項&4寫本頁) -裝- -訂經濟部中央橾隼局員工消费合作社印製 434024 五、發明説明（伯） -Ta爲氫原子、苯基或經由碳或氮原子接附，且包含一視需要經烷基取代之氮、氧或硫原子，或包含一視需要經烷基取代之氮原子以及额外硫、氧或氮原子，之5-員雜芳基，或另供選擇迆，當Za代表鍵結時，則Ta爲適用於胺基之保護基，或爲殘基（TVl^UaHCHJ^^ T3aO-，其中： ♦ 丁\至丁38(相同或相異）爲苯基或經由碳原子接附之6“員雜芳基，其（視個案而定）包含一或二個氮原子，經由碳或氮原子接附，包含一楫需要經烷基取代之氮原子、氧或硫原子，或包含一視需要經烷基取代之氮原子以及額外氮、硫或氧原子之5-員雜芳基，其中於上述定義Ta殘基所提及之5-或6-員雜芳基的兩個相都碳原子之間，可形成一個1，4-亞丁二烯基；藉此而構成之雙環芳族或雜芳族環，亦可接附至該丨，4-亞丁二缔基之碳原子上，又，不僅苯基與5_或6-員雜芳基，尚且該雙環芳族或雜芳族環，可於碳骨架,上經氟、氣、溪或碘原子，或經氰基、羥基、苯基、胺基、二甲胺基、二乙胺基' N-乙基甲胺基、三氟甲基、三氟甲氧基、三氣甲硫基、乙鹹胺基、丙醯胺基、甲颯胺基、甲磁氧基、苯基、苯基甲氧基、2·苯基乙氧基、烷基或燒氧基單·或二取代，或經一個胺基或羥基及兩個氣或澳原子，或經一個羥基及兩—個烷基或烷氧基三取代’該取代基爲相同或相異，且上述所提及之烷基與乾氧基部分，包含1至4個碳原子、氫原子，（q-C 12)烷 _ ' -21 - 本紙張尺度剌中郎家縣（CNS )从胁（21GX297公 ----------_^— (請先閲讀背面之注意事項寫本頁) 訂 M340 2 4 經浒部中央標準局員工消费合作社印裝 A7 - B7 五、發明説明（19 ) 基*具有3至10個碳原子之環燒基，或具有6至12個妓原子之雙環烷基或三環烷基，或者 ♦ Tk與丁\共同代表直鏈之（C3-C7)伸烷基， ♦ Ua爲基圏> CH，其中該氩原子可以烷基、笨基、羥基、烷氧基、烷醯氧基、烷氧羰基或烷醭胺基置換，其中上述所提及之烷基或烷氧基包含（視個案而定）j 至3個碳原子，五上述所提及之娱;疏基可包含2或3個竣原子，或另供選擇地爲> CHCH2-基團或氮原子， ♦ m代表〇、1、2或3， ♦或另供選擇地Ta爲（1^1'切3)-(<^2)·其中 ♦ Tk、T2a、Ua&ma係如上所定義，惟該上述針對丁、與 T2a所提及之單-或雙環芳族或雜芳族環，係經由鍵結或經由-CH2-、-C(CH3)2-、-CH2CH2_、-(：11=(：^1-或 _ NHCO-〇橋鍵而相·連接， -Ya爲氡原子或基囷-NR4a其中R4a與上述對所述之定義相同，對於具尺1&至尺43之殘基，可能爲相同或相異，且 • za爲籍由-C0_、_CH2-、-SO-或-S02-基團所定義之單鍵，而（除非另行敘述）上述所提及之垸基或烷氧基部分，可包含1至3個碳原子，以及其經描述於W0 94/17035案丰之互變異構物、非鏡像異構物、鏡像異構物、混合物及鹽類。於此等化合物中，以 (请先聞讀背面之注^^項寫本頁) 裝. 訂 -22- 本纸張尺度適用中家標準（CNS )八槻格2丨OX297公嫠）經濟部中央橾準局貝工消費合作·社印嚷 434024 ί Α7 87 五、發明説明（20 ) ‘（R)-N2_(二苯乙醯基）-N-(苯基甲基）精胺醢胺， .(R)-N2-(二苯乙醯基）-Ν·[(4-甲基苯基）甲基]精胺醢胺’ .(R)-N-[2-(4-雍苯基）6 基】苯基〇氧基）-1//-"5丨哚·2_基]羰基]精胺醢胺， • Ν-[(4-胺羰基胺苯基）甲基1-Ν2-(二苯乙醯基）精胺醢胺， .(R)-N-[(4-羥苯基）甲基】-Ν2·[[5-(2-苯基乙氧基）4丑-嘀哚-2-基]羰基】精胺醯胺， .(R)-N2-(二苯乙醯基）-Ν-[(4-氟苯基）甲基]精胺醯胺， .(R)_N-[(4-溴苯基）甲基]·Ν2-(二苯乙醯基）精胺醯胺， • (R)-N2-(二苯乙醯基）-Ν-(2-苯基乙基）精胺醯胺， -Ν2-(α-環戊基苯乙鏟基）-ΙΗ(4-氟苯基）甲基]-D-精胺醯胺之具光學活性非鏡像異構物， .Ν-[[4-(二甲胺基）苯基]甲基]-Ν2-(二苯乙醯基）精胺醢胺， '(R)-N2-(二苯乙醯基）-Ν-[[4-(羥甲基）苯基]甲基]精胺醯胺， • (R)-N2·(二苯乙醢基）·Ν-[[4-(1-氧乙基）苯基]甲基]精胺醯胺， • (R)-N-[(4-氣苯基）甲基]-Ν2-(二苯乙磕基）精胺醯胺， .(R)-N2-(二苯乙醯基）-Ν-[[4-[(甲胺基羰基）胺基]苯基] 甲基]精胺醢胺， -(R)-N_[(4-胺基-3,5-二氣苯基）甲基]-Ν2-(二笨乙醯基）精胺醯胺， -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Α4規格（2丨ΟΧ297公釐） -裝-- {請先閲讀背面之注意事項t寫本頁) *ΤΓ，經濟部中央標準局員工消费合作社印掣 V \ 4 3 4024- A7 __ B7_五、發明説明（21 ) .(R)-N-[(4-胺基_3,5-二氣苯基）甲基]-N2-(3,3-二苯-1-氧丙基）精胺醯胺， .(R)-N-[(4·胺基-3,5-二氣苯基）甲基I-N2-(3,4-二氣-苄醯基）精胺醢胺， .N2-(二苯乙醢基）-Ν-[3-[1-[5，11-二氫-6(6/〇氧吡啶幷 [2,3-1)][1，4]苯并二吖庚因-5-基]-2-$乙基]-4-六氫吡啶基]丙基I精胺醯胺， • Ν2-(二苯乙醯基）-Ν-[(4-羥基-3·甲氧苯基）甲基]精胺醯胺， • Ν2-(二苯乙醢基）-Ν-[(3-羥基-4-甲氧笨基）甲基]精胺醯胺， .(R，S)-N-[(4-胺基-3,5-二溴苯基）甲基]胺基亞胺甲基）-Ν2-(3,4-二氯-苄醯基）賴胺醯胺， • Ν-[(3,5·二甲-4-羥苯基）甲基]-Ν2-(二苯乙醢基）精胺醯胺， ‘ 苯幷咪唑-5-基）甲基]-ΝΜ二苯乙醯基）精胺醯胺， .Ν2·(二苯乙酿基）-Ν·[(4-羥基·3-甲苯基）甲基]精胺醢胺， • Ν-[[4-(胺羰基）苯基]甲基]-Ν2-(二苯乙醯基）精胺醢胺， .(R，S)-N6-(胺基亞胺甲基）-Ν2-(二苯乙醯基>仏[(4_幾苯基）甲基]賴胺醢胺， .(R)-N-[(4-羥苯基）甲基〗-Ν2·(苯乙醯基）精胺醢胺， .Ν2-(二苯乙醢基）-Ν-[(1//-吲哚-5-基）曱基]精腠醢胺， "24 - 本紙張尺度適用中國國家樣準（CMS ) Α4規格（210^7公釐） (請先聞讀背面之注愈事項命填寫本頁) 飞裝· 訂 4 3 4024 * A7 B7 經濟部中央標準扃負工消費合作社印策五、發明説明（22 ) • (R)-N-[[4-(胺基颯基）苯基]甲基(二苯乙醯基）精胺醯胺， .(R)-N2-(二苯乙醯基）-Ν-[[4-(甲氧胺羰基）苯基]甲基] 精胺鏟胺， .(H)-N2-(二苯乙醸基）-Ν_[4-(吡啶基）甲基]精胺醯胺， •(11)-1^-[(4-胺基-3,5-二溴苯基）甲基]->12-(二苯乙酿基）精胺睦胺， • (R)-N2-(二苯乙醯基）-Ν-[(2-，塞吩基）甲基]-Ν2-(2-莕甲醯基）精胺醢胺， • (R)-N-[(4-胺基-3,5-二氣苯基）甲基]-Ν2·(2·莕甲醯基）精胺醯胺， .(R，S)-N5-(4,5-二氫-1//-咪唑-2-基）-Ν2-(二苯乙醯基）-Ν-[(4-羥苯基）甲基]烏胺醯胺， • (R，S)-N2·(二笨.乙醯基）-Ν·[(4-羥苯基）甲基]-Ν5-(1/ί-咪唑-2-基）烏胺醢胺， .(R)-N-[[3-[(l，2-二氬-3,5(4/〇二氧-1,2-二苯基·3//-1，2,4-三唑-4-基）甲基]苯基]-Ν2-(二苯乙醯基）精胺醯胺， .Ν2-(二苯乙醢基）-Ν-[(3-羥苯基）甲基]精胺醯胺， • {R)-N-[[3-[(4,5-二氫-2,4(3//)二氧-5,5-二苯基-3//-咪唑 • 3-基）甲基]苯基]甲基1-N2·(二苯乙醢基）精胺醯胺， • (R)_N2-(二苯乙酿基）-N-[(4-羥苯基）甲基]精胺嬝胺，已知编號爲BIBP3226， .N2-(二苯乙醯基）以-[2-(4-羥苯基）乙基]精胺孃胺， -25- 本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS)A4規格（2丨0X29?公釐) — ' (請先閱讀背面之注^^

裝-- "寫本頁) 訂 A7 B7 434 024 孓1·:-- 五、發明説明（23 ) • N2-(二苯乙醯基）-[(4，-羥-[1，1，_二苯基]_4•基）甲基]精胺醯胺， -(R)-N-([4-[(l，2-二氫-3,5(4/〇二氧-1，2·二苯基 _把_ 1，2,4-三唑-4-基）甲基]苯基]甲基]·ν2·(二苯乙醯基）精胺殖胺， Ν2-(二苯乙醢基）-N-[(4-甲氧装基）甲基]精胺醯胺， • N2-(二苯乙醯基）-Ν-[2·(4-甲氧苯基）乙基]精胺醯胺， Ν2-(二苯乙醯基）-N-[2_(3-甲氧苯基）乙基]精胺醢胺， • N2-(二苯乙醯基）_Ν_[(3·甲氧苯基）甲基】精胺醯胺， .(R,S)-3-[4-(胺基亞胺甲基）苯基]_ν2_(二苯乙醯基）_Ν· [(4-羥苯基）甲基]丙胺醯胺， • (R，S)-3-[3-(胺基亞胺甲基）苯基]-N2-(二苯乙醯基）-Ν· [(4-甲氧苯基）甲基]丙胺醯胺， • (R)-N2-[雙（心溴苯基）乙醯基μΝ·[(4-羥苯基）甲基]精胺醯胺， • (R)-N2-(二苯乙醯基）_ν_[(4·乙氧笨基）甲基]精胺醯胺， • (R)-N2·(二苯乙醢基）·Ν_[(4_羥苯基）甲基]甲基精胺醢胺， • (R，S)-N-[(4-胺基-3,5-二溴苯基）甲基】小[3-(胺基亞胺甲基）苯基]-N (二笨乙酸基）丙胺酿胺， • (R)-N-[(4-羥苯基）甲基]-N2-(2-莕甲醢基）精胺醢胺， • (R)-N2-(2,2-二苯-2-羥乙醯基）-N-[(4-羥苯基）甲基]*Ν- 甲基精胺醢胺， • (R,S)-N2-(二苯乙醯基）-N5-(m-咪唑-2-基甲氣本紙張尺度適用中國圉家標準（CNS ) Α4规格（210Χ297公釐） (诗先聞讀背面之注意事項^从寫本頁) .裝_ 、1Τ 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 434024* 五、發明説明（24 ) 苯基）甲基]烏胺醯胺* • (R，S)-3-[3-(胺基亞胺甲基）苯基]·Ν2-[[(二苯甲基）胺基] 羰基]-Ν-【(4-羥苯基）甲基]丙胺醢胺， • (R，S)-N2-(二苯乙趄基)_N5-(if咪唑-2-基）苯基甲基）鳥胺酿胺， • (R，S)-N-[(4-胺基-3,5-二氯笨基）甲基]-N2-(二苯 6 醯基）·Ν5-(1β-咪唑·2-基）烏胺醯胺， (R，S)-N“[(4-羥笨基）甲基咪唑-2-基）-ΝΜ2-莕甲醯基）烏胺醯胺， • (R，S)-N2-[[(二苯甲基）胺基]羰基【（扣羥苯基）甲基]- ν5-(ι//-咪唑-2-基）烏胺醯胺， .(R，S)-N-[(4-羥苯基）曱基]-N5-(m-咪唑-2-基）-ΝΜ[(2“ 莕）胺基】羰基]鳥胺醯胺， • (R，S)-N-[(4-羥苯基）甲基] N5-(l/f-咪唑-2-基）-Ν2- [(1,2S3,4-四氫喳啉-3-基）羰基】鳥胺醯胺， (R，S)-N-[(4-羥苯基）甲基卜Ν5·(1丑咪唑-2-基）-1^- [(1，2,3,4-四氫喹啉-2-基）羰基]烏胺醢胺， • (R)-N-[(4·胺基減基胺苯基）甲基]-Ν2-(二苯乙醯基>精胺瞌胺，經濟部中央標準局員工消费合作社印11 s. (請先閲讀背面之注意事項#城寫本育) • (R)-N-[(4-胺基苯基）甲基]-Ν2·(二苯乙醯基）精胺鏟胺， • (R)-N-[(6-喳啉基）甲基]-Ν2-(二苯乙醯基）精胺醢胺， .(R)-N2-[(3,4-二氣苯）己醢基】-Ν_·[(4-幾苯基）甲基】精胺醯胺， .(R)-N2-(二苯乙醢基）·Ν-[[4-(2-羥乙基）苯基]甲基]精胺 -27* 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 4 34 〇 2 A a?__B7 五、發明説明（25 ) 醢胺經濟部中央橾準局男工消费合作杜印策 • (R，S)-N5-(3~胺基-ί，2,4-哼二唑 _5-基）-N2-(二苯乙酶基）_ Ν-[(4-羥笨基）曱基]烏胺醢胺， • (R)-N2-[(9·苐基）幾基]·Ν-[(4_幾苯基）甲基]精胺醯胺， • (R，S)-6-(胺基亞胺甲基）·ν2-(二苯乙癌基幾笨基）甲基]正白胺醢胺， ‘（1^)-3【4-(4,5-二氫]//-咪唑_2_基）苯基】_1^2-(二苯乙酿基）-Ν-[(4·羥笨基）甲基]丙胺醢胺， • (R，S)-3-[3-(胺基亞胺甲基）苯基]·ν2·(二苯乙醯基 [(4-乙氧衆基氧苯基）曱基]丙胺酿胺， • (R，S)-N-[2，（1，2-二氫·Ι，2-二苯基-3,5(4/〇二氧-1，2,4-三唑-4·基）乙基]-N2-(二苯乙醢基）精胺醯胺， (R，S)-N2-(二苯乙醢基）-Ν-[(4-羥苯基）甲基]-2-甲基精胺醯胺， • (R，S)-N2-(二笨乙醯基）-Ν·[[4-(3-羥丙基）苯基]甲基]精胺醯胺， • (R)_N-[[4-[(4,5-二氫-5,5-二甲基-2,4(3/〇二氧-1好·咪唑 -3-基）甲基]笨基]甲基】_ν2-(二苯乙醯基）精胺醯胺，爲有利，五其中以ΒΙΒΡ3226爲較佳。 VIII-具下式之化合物 ΝΗ ΝΗ

ΝΗ /(CH:

(VII) (請先.M讀背**之注1^^寫本頁) •裝訂 -線- -28- 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) A4現格（210X297公釐） 134 0 2 4:^ A7 B7 五、發明説明（26 ) 其中R”係藉由下式定義·· R、 R-2 〉mCH2)n- 經濟部中央標準局負工消費合作社印裂其中尺”丨代表未經取代或經一或二個鹵素原子、或（Cl-C3) 烷基取代之苯基，或代表未經取代或經一或二個鹵素原子、（C丨-C3)烷基或（Ci-C；?)烷氧基取代之吡啶基， -R”2代表氫原子、（Cr*C3)烷基、視需要經一或二個鹵素原子，或經（CpCs)烷基，或經（Ci-C3)烷氧基取代之苯基、未經取代或經一或二個鹵素原子、或（Ci-Cd烷基或經 (crc3)烷氧基取代之苄基或雜芳基， -ηπ代表 1、2、3或 4，或者其中R"係藉由下式定義： 1 R%—C — Ζ·— (CH2)p-- R"5 其中R"3代表未經取代或經一或二個鹵素原子，經（C〗-C3) 烷基或（<：丨-(：3)蜣氧基取代之吡啶基，R"4代表氫原子或視需要經一或二個鹵素原子，或經（CrC3)烷基，或經（c〗-c3) 烷氧基取代之苯基，R"5代表氫原子或代•表甲基或羥基，且Z"代表單鍵、氧原子或硫原子，而p"代表1、2或3，m" 代表1、2或3，且R"〇代表氫原子或甲基，以及其醫藥上可接受之鹽類，彼等之NPY-拮抗劑功效係描迷於歐洲專 -29, 表紙張尺渡適用中®國家揉準（CNS ) A4规格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注fs 裝-- %寫本頁) <Tr .線 A7 4340 24 B7 -— — - ，一五、發明説明（27 ) 利 EP 448,765 案中 a 於此等化合物中，以該等其中m"爲3，R"0爲氫JL R" 爲2-(3-吡啶基-甲硫基）乙基、3，3-二笨基丙基、2-(2-毗峻胺基）乙基、2-(5-溴-3·甲基-2-吡啶胺基）乙基、2-(二苯基甲氧基）乙基、3-(3,5-二氟苯基）-3-(2-吡啶基）丙基、2-[N-(5-溴-3-甲基-2-吡啶基）-N-苯甲胺基]乙基、或2-(5-溴 -3-甲基-2-吡啶基）乙基之式（VII)化合物爲特別有利，而以 1-[3-(3,5-二氟苯基）-3-(2-吡啶基）]丙基-3-[4-(1/〇·咪唑基] 狐三氩氣酸鹽（He 90481)爲較佳。 ΪΧ -具下式之二氫吡啶類：先Μ讀背面之注意事·ί 裝-- 块寫本ί

-IT Γ 經濟部中央橾準扃負工消费合作杜印製其中 -R]x爲低碳數垸基； -R2X與R3X獨立地係選自氰基及低碳數烷基； -R4X係選自-CC^Rf、氰基及 0—N ~~k | n^chs R5x係選自氳、鹵素、羥基、低碳數烷基、低碳數烯線 '30- 本紙張尺度適用中國國家捸準（CNS ) A4規格（210x297公釐） 434024 ：7? 五、發明説明（28 ) 氧基與低碳數烷氧基； -BX爲-NH-或共償鍵； -nx代表2至5之整數；且 -Z X係選自：

經濟部中央橾準局負工消费合作社印^ 該實線或虚線代表單鍵或雙鍵，以及其敘述於美國專利US 5,554,621案中之加成鹽類或溶劑合物。 B.其他有利用地於本發明化妝品组合物中之NPY拮抗劑，爲該等選自下列組IX至ΧΠ者。 X-具下式之化合物

Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-*Cys-NH-(CH2)sC〇-Xxx2 -Arg-Cys-Tyr-Xxx3-Ala-Leu-Arg-His^Tyr-Xxx4 -Asn-Leu-Xxxs-Thr-Arg-Ile-Arg-Tyr-Tc (IX) 其中 -Xxx2與 Xxx3爲 Ser或 Ala，Xxx4與 Xxx5爲 Leu、ne、Met

Nle (正白胺酸）或Va卜 -Tc爲 OH、CKCrCe燒基、〜112或1^11((：1-〇：4)炫秦’

本紙張尺度逋用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210X297公嫠） ^ 4340 24 Α7 _ - — Β7 經濟部中央橾準局Λ工消費合作社印製五、發明説明（29 ) -s爲i至η之整數，以及其鹽類，敘述於歐洲專利ep 355,794中。於此等化合物中，以該等其中s爲7，Xxx# Ala，Χχχ3 爲Ser ’ Χχχ4與χΧΧ5皆爲ne，且Tc爲之式（IX)化合物及其鹽類爲有利。 XI -具下式之化合物 Zb· k5-Fk6-Gk7_D P-T.hr-BP'-Glu -ΒΡ··-Κ-ΝΗ2 (X) 其中k丨、k；2、k3、k4、ks、k6與k7代表零或1，其總數至少爲 1 ’ A爲 Phe或 Tyr: B爲 Pro、Ser' Ala、Gly、Abu、Cys、 Pro-Ser' Cys-Ser、Ala-Ser、Gly-Ser、Abu-Ser或 Pro-Ala， Abu爲2-胺基丁酸；BP、BP·與BP"爲具有鹼性側鏈之胺基酸；D爲 Pro或 Cys : E爲 NH-(CH2)t-CO，t爲 0-10 ; F爲 Cys、 Abu、Gly或 Ala : G爲 Ile-Asn、Leu-Asn、Val-Asn或 Asn ; DP爲由親脂性胺基酸所形成之二肽類殘基；K爲Phe或 Tyi· ; Zb爲氫、胺基保護基或爲芊基、（c2-C丨〇)醯基或（q-C5)烷基，且其中二個Cys殘基可經由二硫橋鍵鍵聯，以及其鹽類，敘述於德國專利DE3,939380 1 *。於此等化合物中，以該等其中BP爲Lys或Arg ; E爲 NH-(CH2)t-CO，其中 t爲 0-7: F爲 Cys或 Abu ; G爲 Ile-Asn 或 Asti : DP 爲 Leu-Ile ; BP，與 BP” 皆相同爲 Arg ; Zb爲氩、磁基或基囷 (CH^-CO- -32- (請先聞讀背面之注意事ΐ .裝-- 如寫本頁) 訂線本紙張Λ度適用中國國家標準（CNS > A4規格（210X297公釐） A7 B7 4340 24 五、發明説明（30 ) 而t·爲0、1或2,之式（X)化合物及其鹽類爲有利。尤以具下式之化合物 H-Tyr-Abu-Ser-Lys-Aoc-Abu-Ile-Asn-Leu*Ile-

Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (Χ·) 其中Aoc代表8·胺基辛酸，爲特別較佳》 XII-具下式之環狀或直鏈化合物 (Xxxa-Xxxb-Xxxc-Xxx<i-Xxxe-Xxxf-XXxg-XXXh.XXx..Xxxpn ^χΐ) 其中Xxxa、Xjcxb、Xxx^Xxxj係不存在，或另供選擇地， Xxxa爲卩丨或Cys ; Xxxb爲Cys、Pi或一或二個胺基酸；XxXc 爲 Pi、Cys、Ser、Thr、Ala或 Gly ; Χχχ^爲 Ri.、Cys、Ser、 Thr、Ala或 Gly : Xxx^ Leu、lie、Val 或 Nle ; Xxxf爲 Arg、 Lys或 His ; Xxxg爲 Arg、Lys、His、Val、Leu、lie 或 Nle ; Xxxh爲 Tyr、Phe、Trp、His、Lys或 Arg ; Xxxi 代表 NH2基困或酯基，或另供選擇地爲一或二個胺基酸：Xxxj爲Cys 或P2 ; Pi爲氳或基困P-CO，而P爲氫、糖苷基、核甞基或脂甞基自由基，或爲（Ci-C2〇)烷基，其視需要含有雙鍵及選II鹵素與基困NO?、NH2、〇H、磺酸基、磷醢基、羧基及烷基之取代基：P2爲基團NP12Pi3或OPi4,其中P12與Pi3 代表氫，或代表烷基、環烷基、N-糖甞基、N-脂甞基、芳烷基或芳棊，視t要經鹵素，或綠基團N〇2、NH2、OH、磺酸基、磷醢基、羧基或烷基取代；且Pl4代表氫，或代表烷基、環烷基、芳烷基、-0-‘苷基、N-脂苷基、芳烷基或芳基，視需要經鹵素，或經基團N〇2、NH2、OH、磺酸基、磷醯基、羧基或烷基取代，其限制條件爲 -33 - 本紙張尺度適用中國國家標半（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項Μ 装— π寫本頁) 訂經濟部中央樣準局貝工消费合作社印裝經濟部中央標準局負工消費合作社印袈 4.340 24 * a? __- B7___ 五、發明説明（31 ) - 當Xxxtj不存在，或代表Cys或？丨時，則Xxxa爲不存在， - 當Xxxd爲Cys或Pi時，則Xxxe爲不存在， - 當Xxxj爲NH2或酯類時，則Xxxj爲不存在。此等化合物經描述於WO 93/12139案中。於此等化合物中，以具下式之胜肽

Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-NH2 (ΧΓ) 已知其编號爲BRC 672，爲特別有利。 XIII -具下式之化合物 H-Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-

Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Xxxg-Ala-Arg-Tyr-Tyr- S er-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Ile-Thr-Arg-Xxx7-Xxxg-Ll-(CH2)2rP3 (XII) 其中 z爲 0、1 或 2，Xxx6爲 Met或 Leu : XXX7爲 GIu、（R)-Glu、 Pro或（R)-Pro ; Xxx7爲 Arg、（R)-A^rg或（R，S)-Arg : LI 爲 0 或NP1，或烷基；且P3爲 - 未經取代，或經一或二個F、Cl、Br、烷基、苯基、OH、 (苯基）烷氧基、烷羰基、nh2(視需要經一或二個烷基取代）、烷砜基、烷基-或烷氧羰胺基、COOH、烷氧羰基、NH2CO(視需要經一或二個烷基取代）、烷羰基氧基、烷礙基氧基、CH2OH、1·或2-羥乙基、（烷基）胺砜基、氰胺基、胺羰基胺基（視需要經一或二個烷基取代）或NH2C(=N.CN)取代之苯基或莕基； - 含有氧、硫或氮原子，一個亞胺基或含有氧、疏或氮原子之亞胺基的5-員芳族雜環； -34- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐> (請先閣讀背面之注意事項4-填寫本頁) :裝. 訂 ^ 4340 2 4 ^ A7 — B7 經濟却中央橾準局負工消费合作社印製五、發明説明（32 ) - 含有一或多個氮原子之6-員芳族雜環；對於該雜環而言，其可能經（CrCe)烷基，或經苯基烷基於C-取代，並視需要與苯稠合，且亦視需要經F、C1、Br、（CrCd 烷基、烷氧基、OH、笨基、N02、NH2(視需要經一或二個烷基或經一烷醢基取代）、CN、COOH、烷氧羰基、 NH2CO(視需要經一或二個烷基取代）、CH2F、CHF2、 CF3、烷醯基或NH2S02 (視需要經一或二個烷基取代），或經二個F、a、Br、甲基、甲氧基或0H取代； • 經（1，5-二氫-2,4(3/〇-二氧咪唑-3·基）烷基或經[1，2-二氫-3,5(4/〇-二氧-3//-1,2,4-三唑-4-基]烷基取代之苯基，其中該咪哇或三唑部分係經一或二個笨基取代：該烷基與烷氧基含有I至3個硖原子，以及其登類。此等化合物經描述於德國專利DE 4,31 1,756案中》 XIV -可根據W0 94/00486、日本專利JP 06-116284、日本專利JP 07-267988、德國專利DE 3,81 1,193、美國專利US 5,328,899及W0 95/00161製備得之NPY拮抗劑，例如化合物（ΧΙΠ) ί ~ | (XIII) CH3CO-D-Cys-Leu-lle-Thr*Arg-Cys*Arg*Tyr-NH2 ，其經描述於日本專利JP 06-116 284案中，及化合物（XIV) ife-Cys-Pro-Cys-Tyr-Arg-Leu-Arg-Tyf*NH2 ^χ[ν)I I ΙΙβΌν5-ΡΓ〇-0γ5-ΤγΓ-ΑΓ9-Ιβυ-ΑΓ9-Τ/Γ-ΝΗ2 -35- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ：297公釐） (請先聞讀背面之注意事¥ 裝-- „.^·寫本頁) ^Λίί·· 線· 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 4 340 24 a7 - B7 五、發明説明（33 ) « ，其經描述於WO 94/00486中。 C. 可藉由動物或植物來源之細胞或组織萃取作用獲得，或藉由微生物，尤其是細菌與眞菌（例如酵母菌）發酵所得到之NPY拮抗劑產物，特別是具有NPY拮抗劑活性之產物，爲有利地用於本發明化妝品组合物中之NPY拮抗劑组成份。此類中特別有利且甚至較佳之產物，爲以下所説明之 XV、XVI與XVII组產物。 XV -藉由自海綿Or/wa ip. G/^少（或Ge/Ζ/κί屬）之萃取作用而得，具有NPY拮抗劑活性之萃取物，特別是於天然產物期刊（J. Nat. Products)，1994，57，1294-1299與同前之 1995，58，8，1254-1260中所述之蚓哚化合物，或其混合物，更特別係 gelliusineA、gelliusineB、2-[5-趣基-3-(2-胺基乙基）]*ί丨哚-2-基-6-溴-3·片丨哚乙胺與2-[6-溴-3-(2-胺基乙基）]喵哚-2-基-6-溴-3-41哚乙胺，及其鹽類與混合物。 XVI -自曲霉屬菌株，例如黑曲霉（J rtig'ei*)之發酵作用而得，具有NPY拮抗劑活性之萃取物，特別是已知编號爲BMS-192548之化合物，其可藉由將黑曲霉 /iiger)WB 2346株之培養基質，如抗生素期刊 (J. Antibiotics)，1995，衫，/0，1055-1059中所述萃取而製備得，其具有式（XV)之結構 -36· 本紙張从家辟（⑽）一祕（2獻297公廣） (請先W讀背面之注意事項I填寫本頁) ..裝

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第86114594號專利申靖案中文說明書修正頁(89年；}月> 五、發明説明（34 )

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) XVII -具有NPY-拮抗劑活性之產物，特別是得自放線菌科菌株發酵作用之萃取物。更特別地，以得自具有特別有利做為NPY拮抗劑活性之新穎放線菌株的萃取物，為特別較佳之NPY拮抗劑組成份。自此菌株之發酵液汁，藉由將上清液過濾，視需要接著濃縮、純化與/或凍乾等步驟而得到具有Νργ受體拮抗劑活性之流份，此等流份全無遣傳毒性，且具有足以使其調配於本發明化妝品組合物中之移定性。發酵液汁之上清液，亦可以其原來之形式使用β 此等新穎萃取物，構成本發明之結果及特別有利之一面β 經濟部中夹樣準局貝工消费合作杜印衷根據本發明此特別層面，而生產具有NPY受體拮抗劑活性之生物禮’係一種已從採自上加俞河（Haute Garonne) (法國）畔草地樣本分離出之放線菌株，其亦已經保存於實驗室，編號為SEBR 2794。此微生物之樣本於1993 年7月13日’經寄存於巴斯特研究所之CNCM中，編號為I 13 32 ’並於1997年9月3曰寄存於食品工業發研究所，編號為 CCRC 910084 » 此微生物之生化特徵係經API 50 CH (特定用於糖類）、 API 50 AO (特定用於有機酸類）及API 50 AA (特定用於胺基酸類）等套组決定（API 50 CH購自BioMhieux，而其餘 -37- 本紙張尺度適用中國國家椹準（CNS ) A4C格（2丨0X297公釐） 434024 A7 B7 五、發明説明（35 ) 經濟部中央標羋局員工消費合作社印衆購自API研究實驗室〉》因此而決定爲，此微生物屬於轉撤菌科，鏈霉菌屬_ 少ces)-。此爲一種多形性、絲狀微生物。其於28°C下，於13?2培養基（瓊脂辑母麥芽抽出物）上生長良好，其營養菌絲體爲灰-粉紅色。此具有不使其與已經描述之種類相同之特性的生物，必須認定其爲新品種，且經命名爲鍵霉菌種（Sirepomyces jp.) SEBR 2794。該鏈霉菌種SEB3R 2*794 (經寄存於巴斯特研究所之CNCM中，编號爲I 1332 )及其具生產力之突變株，亦構成本發明之一標的。此新穎菌株係根據習用方法分離得，其包含將少量土壤懸浮於蒸餾水中，將該懸浮液稀釋成不同濃度，並將小體積之各稀釋液平塗伟於，舍有營養瓊脂培養基之培養孤表面上。經於28eC下培育數天之後，令該微生物生長，分別採收不同菌落，並於營養瓊脂上繼代培養，如此從其得到更豐富之培養純株0待於營養瓊脂培養基上培養，及經數次連續纊代培養後，而可能獲得有興趣菌株之豐富且純的培養物，製造母株之儲存批份〇，随後製得第一級與第二級接種批份。爲此目的，從培養m中營養瓊脂培養基上之培養物，製備得孢子懸浮液；此培養基含有及溫保護劑，使其可碟保孢子於冷凍保存期間具有良好存活能力。將所得之孢子懸浮液分裝於低溫儲存管中，將其保存於 (請先W讀背面之注^ ----裝 :項Γ 寫本頁) 訂 38- 經濟部中央揉準局負工消费合作杜印製 434024 A7 - B7____五、發明説明（36 ) •8(TC下；此等儲存管構成批份0。依照相同程序，惟從一個得自批份0之儲存管開始，製備得第一級接種批份。接著，仍根據相同程序，從第一級接種批份之一個低溫儲存管，製備得第二級接種批份。該等接種批份0、1與2之製造，確保長期可容易獲得該菌株，以友因此而保持其所希望之活性。用於製備具有N3PY受體拮抗劑法性之萃取物的方法，實質上包含將新穎菌株SEBR 2794，或其具生產力之突變株，於適宜之培養基上，及於適宜之培養條件下培養，並從發酵液汁萃取出於培養期間所產生之具活性流份；此具活性流份經發現存在上清液中》鏈霉菌種叩）SEBR 2794可藉由任一種需氧培養法培育》爲達此目的，使用各種習用於發酵工業之裝置。尤其，可能應用下述之方法而完成該項操作。從一管第二級接種批份之開始，將其接種於培養皿，經培養五天後，得到孢子之懸浮液。將此孢子懸浮液用於接種至經攪拌，含有適宜培養基之錐形燒瓶中。亦可將該經攪捭之燒瓶，直接以一管接種批份接種》可持續於經攪拌之燒瓶中培養二至七天，但時間以三至五天爲較佳。從第一階段及於燒瓶中培養開异，活性之產生係於上清液中觀察到，然而可能有利地完成兩個連續之培養階段：第一階段係使生物物質增殖，第二階段則用以生產。於後 -39- 本紙張尺度逋用中画國家標準（CNS ) Α4見格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項 --裝-- 寫本頁) M34 02 4 ^ a? ___ - B7 五、發明説明（37) 者之情形下’一或二天之時間即足以完成第一階段。

於燒瓶U物上清液中所含之拮抗劑活性係以ID " ......一一----------------_____^ —........... ............ — .···. ·' (50%具抑制性稀释度，意指可以50%程度抑制配位體與其受趙結令之稀釋度）表示；亭ID〗〇通常介於ι/2〇〇與1/1000 之間。 ~ _____'丨 — NPY受體拮抗劑活性，係於燒瓶培養物之上清液中獲得，但爲得到較高活性，似乎有利地於發酵器中完成培養，然後從其萃取出上清液。將發酵器接種以，經一或二天-攪拌培養之燒瓶培養物。於發酵器中（視所使用之培養基而定），可於得自第一天培養之上清液中，觀察到拮抗劑活性，但爲獲得最適產量，有利地將培養期延長超遍三天。將SEBR 2 794於發酵器中培養，可對以下所述之培養條件，例如，pH値或通氣進行較佳調控。於發酵器上清液中所得之拮抗劑活性（濃縮前）可能有所差異，根據所應用之培養條件，其可於1/500之id50與 1/10000之id50間變化。經濟部中央標準局貝工消費合作社印製於發酵方法中所使用之培養基，必須含有至少一種可同化之碳源，一種可同化之氮源及礦物元素。可使用之可同化碳源爲碳水化合物如葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、糊精類、甘油、胺基酸與蛋白質ο亦可使用之可同化碳源爲醋酸、辛二酸、檸檬酸、丙酸、琥珀酸奐2-酮基戊二酸或特定之動物或植物油類。蛋白質、腺類與胺基酸爲最佳之可同化氮源》此等來源 -40- 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4规格（2丨0X297公爱）經濟部中央標準局負工消费合作社印装 ^ 4340 2^ Α7 --- ~ B7 五、發明説明（38 ) 包含，例如，酪蛋白、乳清蛋白、轂蛋白及其水解產物、魚粉、酵母抽出物與腺類β 生物物質之產量可’藉由（於培養斯間）添加一種及/ 或其他種此二類主要物質而增高。鉀、鈉、鐵、鎂、鈣與鏟鹽等，以及磷化合物如磷鰊鹽及痕量元素，爲添加至培養基中，以確保微生物生長，並使微生物細胞將碳與氮源同化之作用達最佳之礦物元素。雖然亦可使用於瓊脂培養基上之培養法，但爲使SEBr 2794源於含有此等組成份之培養基上生長，以其中使用液體培養基，於通氣下且伴随攪拌之培養方法爲有利。溫度、培育時間、通氣及培養基之pH値，必須爲使其能令所使用之微生物達到最高生長，及產生具有Νργ拮抗劑活性之萃取物的最大產量者，通常以經攪拌2至7天之培養爲有利〇培養基之pH値’較佳係維持於較中性値高或低，或爲非常弱鹼性値，而最適培養溫度爲介於約23°C至35°C之間，較佳之範囷係25*C至3 3 °C。該等培養條件，例如培養基之组合物與pH値、培育溫度'攪拌速率及發酵作用之通氣，可於廣泛範園内變化，且應明顯選擇使能巧得最佳可能結果者》爲能得到於培養期間，所產生—之NPY受體拮抗劑萃朱物，係於發酵液汁業經或未經冷凍之後，將上清液與菌絲體分離。對此項目的而言，可使用分離、離心、遽器恩捧 -41 - 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS) A4规格（210X297公釐） (諳先聞讀背面之注意事項务试寫本頁) 裝.

、1T v 4340 24 * A7 B7 -------：--------- 五、發明説明（39 ) 過濾或澄清過濾（換言之，即於過濾佐劑存在下之過濾作用）’或任何其他習用於，將胞外產物從發酵液汁萃取出之技術。用於化妝品用途之活性萃取物，係自所得之培養物上清液製備得。該上清液可藉由膜技術’或藉由任何其他有助於包裝，或使用該活性溶液之濃缩方法進行濃縮。因此可能獲得範圍從1/250至1/50,000之ID5〇値。不論其是否已經過濃縮，可將該上清液稀釋於各種不同’適於化妝品學用途之溶劑中。將藉此根據本發明此特殊層.面而得之萃取物，通過〇.2 微米濾器過濾，以去除所有痕量之殘餘生物物質，並確保微生物學上之純淨：然後將其無菌地包裝於滅菌瓶中，而獲得可用於化妝品學上之活性溶液。存於二醇類（較佳係丙二醇）中含有本發明ΝΡΥ-拮抗劑之液體，構成本發明另一非常有益之層面。若希望獲得粉末而非活性溶液，可簡便地將濾液凍乾。一項於等份試樣下完成之，ΝΡΥ受體拮抗劑活性分析，經濟部中央榡準局員工消費合作社印製使能夠許估該具活性溶液之活性，並檢測該方法之可再現性。對於上清液或/東乾物而言，本發明之萃取物可經由，根據習知用以純化，•生物分子”、燊合物、'蛋白物質等類之技街，例如，凝膠滲透層析術、超高速離心、吸附層析術、逆流層析術或電聚焦作用的方式，進行或多或少之純化作 ____ -42- 本紙張尺度適家標準（CNS > ( 2丨GX297公釐） " 4 34024 ‘ A7 B7 經濟部中央樣準局—工消費合作社印製五、發明説明（40 )用。從此新穎菌株所獲得之萃取物，具有非常有益之NPY受體拮抗劑活性。其對此等受體（Y1及Y2亞型）之強親和性，業已於犬類脂肪細胞中證實，此模式顯現與人類腊肪細胞具有高相似性。更特別地，脂肪細胞膜係從採自犬類之網膜脂肪组織獲得，基本上用於由托易斯（Taouis)等人於藥理學實驗治療法期刊（J. Pharmacol. Exp. Ther) (1987)，242，1041-1049所述之技術中。結合作用研究係根據已知之習用技術完成。尤其，將脂肪細胞膜（200微克 /毫升）於30 C下，於含有〇_08 nM經Bolton-Hunter試劑（愛默遜（Amersham) IM 170.2000 Ci/毫莫耳）標定之[125!】· NPY，的經緩衝結合作用培養基質（2〇 mM Krebs-Ringer Hepes溶液，ρΗ=7·4，1%小牛卑清白蛋白，0.25毫克/毫升桿菌肽）中，於有或無〇·3μΜ豬NPY存在下培育60分鐘。該培育係藉由使用哇特曼（Whatman) GF/C濾器過濾而終止，並以加瑪計數器估算由濾器所持有之放射活性。於0.3μΜ未經標定NPY存在下，所測量得之非特異性結合作用，代表總結合作用之25%«犬類脂肪細胞膜製劑帶有Υ1與Υ2受體，其可基於針對Υ2受體之ΝΡΥ片段（13-36) 的具選擇親和性而區分該二者。藉由將結合至脂肪細胞膜之[125η·Νργ，以劑量依賴型方式置換出而證實，根據本發明之萃取物對此組織之ΝΡΥ 受體具有良妤親和性，其視萃取物純化程度而定，且於直接自經凍乾發酵上清液獲得粗萃取物之個案中的IC50 (意 -43- (讀先閲讀背面之注意事項务填寫本頁) Λ 本紙張尺度適用中國國家揉隼（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐） ^ 434024 A7 經濟部中央標準局負工消费合作社印製五、發明説明（41 ) 指可抑制[〗25l】-NPY之專一性結合作用達50%程度之濃度）爲至少約10-2毫克/毫升。根據本發明此特殊層面之萃取物的NPY拮抗劑特質，係藉由於經分離器官上，且更特別係於大鼠β輸精管，櫈式中所進行之研究而證實得。萃取物展現出針對ΝΡΥ，於大鼠輸精管Υ2模式中之作用的拮抗剤特性，且其係根據經描述於調節性肽類（Regulatory Peptides) 1986，13 , 307-318 之程序進行研究。此活性係於分離自皮下脂肪组織之人類脂肪細胞上，藉由分析脂肪酸釋放至培養基之量，並將其與對照组（於無產物存在下培育〉進行比較而確定得。以此等萃取物存在丙二醇中，之50% (w/w)溶液爲特別較佳。此等溶液之無菌製備過程，使其能免除另溱加防腐劑。於根據本發明組合物之製備中，係將具有ΝΡγ受體拮抗劑活性之萃取物與水性或非水性溶劑，並與習知可適用於局部用途之稀釋劑，以及與該组合物本身之活悻成份混合。適宜之溶劑及/或稀釋劑係根據，其能夠將活性组成份從本發明萃取物，轉送至皮下脂防層中之能力而進行選擇。此等组合物通常含有選自，習用於欲使用在局部塗覆之組合物中，的成份之賦形劑或添‘劑，且其係根據所面臨特定調合物之需求而定。彼等可含有，例如，增稠劑、柔化劑、潤滑劑、安定劑、 -44 - 不紙張尺度適用中國國家標準（CMS ) a4規格（2丨0X297公釐）經濟部中央樣準局員工消费合作社印製 4340¾¾ at B7 五、發明説明（42 ) 防腐劑、消泡劑、界面活性劑、抗氧化劑、染料與/或色素、及香料。其亦可含有其他具有同類型功效之活性组成份，例如用以調控脂質分解/脂質生合成作用之產物，或可用於此類型組合物中之產物，例如膠原蛋白合成刺激劑、膠原蛋白酶或彈性蛋白酶抑制劑、及血管保護劑。根據本發明之較佳化联·品组合物，除了該Νργ拮抗劑之外，尚含有其本身亦可爲一種非狀類合成型化合物、肽類或爲藉由微生物，例如細菌或眞菌之發酵作用，或藉由動物^之細胞或組織的萃取作用物而得到之產物 <2_拮抗剤j 與該NPY拮抗劑，共同使用之額外组成份的α2-拮抗劑，爲以下所迷之I)與Ε類化合物。 D,選自以下所述XVIII至XXV組之合成型產物。 XVIII-經描述於比利時專利be 840,363案中之化合物，特別是 mirtazapine。 XIX -經描述於德國專利DE 2,60X407案中之化合物，特別是setiptiline及其結構上之類似物。 XX -經描述於美國專利US 4,337,260案中之化合物，特別是 mosapramine 〇 XXI -經描述於美國專利us 2,979,5 η案中之化合物，特別是 idazoxan β ΧΧΠ-經描迷於WO 92/13856案中之化合物，特別是5·嶁唑基-Ν,Ν-二甲基色胺類，包括CP 93393。 -45- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） {請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁)

4340 2 4 14594號專利申賴 T文說明書修正頁(的年:

發明说明（經濟部中央樣準扃wc工消费合作社印装宽 XXIII- 經描述於美國專利US 4,229,449案中之化合物’特別是reboxetine。 XXIV- 經描述於英國專利GB 2 157 63 1案中之化合物，特別是 fluparoxan。 XXV -經描述於英國專利GB 2，167,408案中之化合物，特別是 altipamezole。 E.藉由動物或植物來源之細胞或組織萃取作用獲得，或藉由微生物’尤其是細菌與真菌（例如酵母菌）發酵所得到之ct2-拮抗劑。此類產物（亦包括半合成性產物）之實例，為以下所說明之XXVI與XXVII组產物。 XXVI -得自麥角菌，具有α2-拮抗劑作用之萃取物，其組成份與半合成之化合物’特別是麥角溴煙酯Uiceg〇Hne)。 XXVII-具有針對α2受體之拮抗劑活性，尤其係得自地衣芽抱桿菌（Sizci/Zw //cr/ieni/orm⑷菌株發味作用之產物，特別是從菌株SEBR 2464發酵得者。此等產物’特別是屬於此組之萃取物，代表本發明另一特別層面。根據本發明此特別層面，而具有生產能力之生物禮，係一株業經分離出之地衣芽孢桿菌，其亦已經保存於實驗室’編號為SEBR 2464。此微生物之樣本於1996年8月22 曰’經寄存於巴斯特研究所之CNCM中，編號為並於1997年9月3日寄存於食品工業發展研究所編號為 CCRC 910083 » 此微生物之生化特徵，係經API 20B、API 50 、50 CH、50 AA、50 AO及 20E API等套组決定。此微生物為一種呈單一形狀’長度為2至微米，而 46 本纸張尺度暹用中困两家標準（CNS ) A4ft格< 210X297公釐） --------裳------訂-----(谦 ί請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁} 434 0 24 經濟部中央樣準局具工消費合作杜印製五、發明説明（44 ) 度爲0.5至1微米之可移動样形之細菌，各自分開或成短趣狀。如同大多數芽孢桿菌屬細菌，此微生物爲格蘭陽性，兼性厭氣性，過氧化氫蘇陽性，氧化蘇陰性，且於某些特定條件下具有產生孢子之特徵。其於pH5至7下，於介於15T至55°C之溫度下生長良好，而至於鹽度（NaCl)可高達7%。此菌株於實驗期間，係使用沙之管柱，根據習於該項技藝人士已知之習用微生物學技術，分離呈一種雜質β 於是，此特別菌株及其具生產力之突變株，構成本發明之另一標的。待於營養道脂培養基上培養，及經數次連續繼代培養後，而可能獲得有典趣菌株之豐富且純的培養物，以製造母株之错存批份〇，随後製得第一級與第二級接種批份。爲此目的，從培養中營養瓊脂培養基上之培養物，製備得孢子懸浮液；此培養基含有低溫保護劑，使其可確保孢子於冷凍保存期間具有良好存活能力。將所得之抱子懸浮液分裝於低溫儲存管中，將其保存於 -8(TC下；此等儲存管構成批份〇。依照相同程序，惟從一個得自批份〇之儲存管開始，製備得第一級接種批份。接著，仍根據相同程序，從第一級接種批份之一個低溫儲存管，製備得第二級接種批份β 該等接種批份〇、1與2之製造’確保長期可容易獲得該 -47- (請先W讀背面之注意事項再螇寫本頁) i -'9 本紙张尺度適用中國國家櫺準（CNS)A4規格（ 210X297公釐） 4 34 0 2 4 ^ Α7 __ Β7 五、發明説明（45 ) 菌株，以及因此而保持其所希望之活性。用於製備具有α2-受體拮抗劑活性之萃取物的方法，實質上包含將新穎菌株SEBR 2464，或其具生產力之突變株’於適宜之培養基上，及於適宜之培養條件下培養，並然後從培養上清液中萃取出具活性之流份。可將此上清液濃縮，直到獲得乾燥萃取物爲止。該地衣芽孢桿菌SEBR 2464可藉由任一種需氧培養法，並於各類型習用於發酵工業之裝置中培育。尤其，可能應用下述之方法而完成該項操作。從一管第二級接種批份之開始，將其接種於培養m，並' 經培養兩天後’將此等接種至經攪拌，含有適宜培養基之錐形燒瓶中。亦可將該經攪拌之燒瓶，直接以一管接種批份接種。於此情形下，培養時間將較用於相同培養基之時間長β 拮抗劑活性係於10至4小時8之内，於該等燒瓶培養物中獲得，視所使用之培養條件而有所不同。經濟部中央棹隼局貝工消费合作社印製該α2-受體拮抗劑活性，係自培養上清液中萃取得，萃取物之活性係以ID50 (50%具抑制性稀釋度）表示；一升培養物可能得到10毫升具有ID50値介於1/2500與1/10,000間之萃取物。受鳢拮抗劑活性，可由萃取燒瓶培養物之上清液而獲得’但爲得到較高活性，似乎肴利地於發酵器中完成培養，然後從其萃取出上清液。將發酵器接種以，經1-或2-天·攪拌培養之燒瓶培養物； -4β· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4规格（210Χ297公釐) 4 34024 A7 B7 五、發明説明（46 ) 對於培養物而言，以其未開始盖生跑子者爲較佳。於發酵器中（根據所使用之培養基），可於得自第一小時培養開始觀察到拮抗劑活性，但有利地等待到已達穩定生長階段時，始進行萃取作用。將SEBR 2464於發酵器中培養’可對以下所述之培養條件，例如，pH値與通氣進行較佳調控。於發酵器中所得本ct2-拮抗劑活性，可能有所差異，其視所應用之培養條件而定。從該上清液經萃取作用後，一升培養物可能得到毫升具有1〇50値介於1/3000與1/15,000間之萃取物。該培養基之特徵，係與上述用於菌株SEBR 2 794者相同。雖然亦可使用於瓊脂培養基上之培養法，但爲使菌株 SEBR 2464於含有此等组成份之培養基上生長，以其中使用液體培養基’於通氣下且伴随挽拌之培養方法爲有利。溫度、培育時間、通氣及培養基之pH値，必須爲使其能令所使用之微生物達到最高生長，及產生具有α2-受髏拮抗劑活性之萃取物的最大產量者。經濟部中央標準局貝工消費合作社印製通常以經攪拌且，通氣達約1〇小時至48小時之培養爲★ 利。培養基之pH値較佳，係維持於較中性値高或低，或爲非常弱撿性値，而最適培養溫度爲界於25*C至50。(：之問。該等培養條件，例如培養基之組合物與pH値、培育溫度、攪拌速率及發酵作用之通氣，可於廣泛範圍内變化， -49- 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) A4規格（210X297公釐) 4 340 2 4 A7 __- B7___ 五、發明説明（47 ) 且應明頻選擇使能獲得最佳可能結果者。製造具有高α2·受體拮抗劑活性之萃取物，需要數個萃取步驟。第一步驟包含將生物物質去除。對此項目的而言，可使用離心、切線微過濾、澄清過濾（亦即，於過濾佐劑存在

， I 下之過濾作用），或任何其他習用於將胞外產物從發酵液汁萃取出之技街。然後將此上清液與較佳地由聚苯乙烯-二乙烯基苯製成之樹脂，例如合成樹脂AmberlheXAD2樹脂（Rohm與Haas)，或CHP20P樹脂（三菱）接觸過夜。然後將已滿載之樹脂藉由迎頭過濾法分離，並將濾液去除0 將樹脂以不同溶劑進行數次連續萃取，以萃取出具有厭水特性之分子。於每次萃取之後，藉由過濾而將該樹脂與有機相分離。然後將各種不同之有機相（共同或分別地）於眞空下蒸發，直到獲得一或多種乾燥萃取物爲止。一項於各萃取物之等分試樣下，所完成之α2-受體拮抗剤活悻分析’使能夠許估該具活性溶液之活性，並檢測該方法之可再現性。經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝可將由此獲得之乾燥萃取物，吸收於各種一般用於化般品學之溶跗中》吸收濃度係經選擇使能夠完全將萃取物溶解，且適合後續使用者。爲將所有痕量之殘餘生物物質去除，並確保其微生物學上之安定性，將萃取物於〇2微来濾器上過濾， ________5σ· 本紙張尺度適用中關家鱗（CNS) Α4^ (210χ297ϋ) ~~ 434024 Α7 # A 7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（48 ) 並於無菌操作下分裝於滅菌燒瓶中。萃取物/ 抬抗劑.ΐ性係使霞·窗^普里歐.(Chapleo) CB等人於醫藥化學期刊(j Med. Chem·)，1983，25,823-831 所述之技街，於大鼠皮質中，以活體外置換α2-受體拮抗劑參考配位體：經氣化idazoxan之作用進行評估。將(x2-拮抗劑萃取物（含有30。/〇乾燥萃取物）導入含50/50 丙二醇/水混合物中，並根據本發明而製成較佳之稀釋。亦可使用甩於無菌製備此等溶液之稀釋液，使其可能免除添加防腐劑。於根據本發明组合物之製備中，係將具有α2-受體拮抗劑活性之萃取物與水性或非水性溶劑，並與習知可適用於局部用途之稀釋劑，以及與該组合物本身之活性成份混合°適宜之溶劑及/或稀釋劑係根據，其能夠將活性組成份從本發明萃取物，轉送至皮下脂肪層中之能力而進行選擇。此等組合物通常含有選自，習用於欲使用在局部塗覆之组合物中，的成份之賦形劑或添加劑，且其係根據所面臨特定調合物之需求而定0 彼等可含有，例如，增稠劑、柔化劑、潤滑劑、安定劑、防腐劑、消泡劑、界面活性劑、抗氧化劑、染料與/或色素、及香料。其亦可含有其他具有同類型功效之活性组成份，例如用以調控脂質分解/脂質生合成作用之產物，或可用於此類型组合物中之產物，例如膠原蛋白合成刺激劑、膠原蛋白 -51， (請先閲讀背面之注意事項t寫本頁} 裝冬紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) Α4規格（2丨0X297公疫 4 34 0 24 ^ Α7 Β7 五、發明説明（49 ) 畴或彈性蛋白畴抑余丨剤、及血管保護劑β 本發明之α2·拮抗劑萃取物，又於Ames試驗及DNA修補試驗中，經證實全無遺傳毒性。其穩定性適合其於化妝品組合物中之用途。本發明化品組合物含有，相對於组合物總重量之百分率爲0.00001%至5%之NPY拮抗劑，其與習用於製備欲塗覆於皮膚，之化妝品調合物的賦形劑混合a 該百分率可於上述反映，纽合物中所包括Νργ拮抗劑之實際功能的範圍内有所變化。較佳地，該ΝΡΥ拮抗劑组成份係以0.0001%至2%之百分率存在。該ΝΡΥ括抗劑組成份係有利地選自上述a、β與C類所包含之產物’而以C類之產物爲尤其有益β以屬於χν、XVI 及XVII组之成份爲較佳β 於根據本發明组合物之製備中，係將具有Νργ-拮抗劑组成份與水性或非水性溶劑，並與習知可適用於局部用途之稀釋劑’以及與該组合物本身之活性成份混合。適宜之溶劑及/或稀釋劑係根據，其能夠將該具Νργ拮抗劑活性之组成份’遞送至皮膚上之能力而進行選擇。經濟部中央橾準局貝工消費合作社印裝此等组合物通常含有選自，習用於欲使用在局部塗覆之组合物中，的成份之賦形劑或添加劑，且其係根據所面臨特定調合物之需求而定。彼等可含有例如，增稍劑、柔袍劑、澗滑剤、安定劑、防腐劑、消泡劑、界面活性劑、抗氧化劑、染料舆/或色素、及香料。 -52

5 1/ J Τ 5 I I 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 434024 ^ Α7 __ - Β7 五、發明説明（50 ) 當NPY-拮抗劑組成份爲，一.種動物或植物來源之細胞或組織萃取物’或爲藉由微生物，例如細菌或眞菌發酵所得到之產物（尤其是萃取物）時，則ΝΡΥ_拮抗劑组成份之總量通常爲之百分率爲〇_〇〇〇〇 l·%至5%，較佳地0.0001%至 2% (相對於組合物之總重量），該總量係相對於乾燥萃取物之重量而計算得。依較佳之層面，根據本發明之組合物包含藉由新穎菌株 SEBR 2794發酵而得之萃取物，其係以梘所使用萃取物之 ΝΡΥ受體拮抗剤活性程度而定，且因此取決於乾燥物質之濃度，及此物質之特真活性的比例使用（以重量/重量百分率爲基準）》所使用萃取物對ΝΡΥ受體之拮抗劑活性越高，則所需欲獲得所希望脂質分解功效之總重量越低，反之亦然。爲得到根據本發明之化妝品组合物，可方便地使用直接從發酵作用獲得’而未經任何純化步裸之粗萃.取物（經0.2 微米遽器過滅之上清液），其含量比率爲〇〇〇〇〇〗％至5%，有利地爲0.0001%至2%，較有利地爲0.01%至2% (以重量計），且較佳爲0.1%蓋2% (以重量計）。當然，此等重量百分率係以，所製備得萃取物之重量爲基礎而計算得。當本發明之組合物除了該ΝΡΥ拮抗劑组成份之外，尚含有α2-拮抗劑组成份時，則後者係以相對於該纟且合物總重量之0,00001%至5%，有利地爲0.0001%至2%，較有利地爲〇_〇〇1%至1% (以重量計），且較佳爲〇.01%至〇 5〇/〇的瓦分率存在。 -53- 本紙張Λ度適用中圉困家標準（CNS > Α4^格（210X297公釐） (諸先閔讀背面之注意事項^^寫本頁) 裝- 4 34 0 2d - A7 -B7 經濟部中央橾準局貝工消费合作社印製五、發明説明（51 ) 該百分率可於上述反映组合物中，所包括《2-拮抗劑之實際功能的範固内有所變化。該ct2-拮抗劑組成份係有利地，選自上述D與Ε類所包含之產物，而以E類之產物爲尤其有益》以屬於XX VII組之化合物爲較隹。當α2-拮抗劑组成份爲，一種動物或植物來源之細胞或組織萃取物，或爲藉由微生物，例如細菌或眞菌發酵所得到之產物時，則（Χ2-拮抗劑组成份之總量通常爲如上所指示者，而該總音係以乾燥萃取物之重量爲基礎而計算得。根據本發明之有利層面，該化妝品組合物含有ΝΡΥ·拮抗劑組成份與α2-拮抗劑组成份，該ΝΡΥ-拮抗劑组成份係選自上述A、B與C類，而該α2-拮抗劑组成份係選自上述D 與Ε類》根據特对有利之層面，本發明化妝品组合物含有選自該等屬於C類，尤其是屬於XV、XVI與XVII組者之ΝΡΥ·拮抗劑纽成份，及選自該等屬於Ε類，尤其是屬於XXVII组者之α2-拮抗劑組成份。根據較佳之層面，本發明係關於一種含有由選自上述 XVII组者之萃取物组成之ΝΡΥ-拮抗劑組成份，犮由選自上述XXVII组者之萃取物组成，之α2-拮抗劑组成份妁化妝品组合物。更特別地’根據本發明此較佳層'面之組合物，含有可藉由經寄存於巴斯特研究所之CNCM中，編號爲I 1332之鏈霉菌種ip) SEBR 2794，或其具生產力之突變 -54- 本紙張尺度適用中画國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ' (請先W讀背面之注意事項 11 1 了項寫本頁訂 ^ 43402¾ · A? B7 經濟部中央標準局員工消贤合作社印装五、發明説明（52 ) 株，的發酵作用而獲得之NPY-拮抗劑组成份，與藉由經寄存於巴斯特研究所之CNCM中》編號爲[-1778之地衣芽抵桿菌SEBR 2464，的發酵作用而獲得之(众2-拮抗组成份，以及一般用於此類型調合物之賦形劑，奸如ί等於上述所提及者》根據本發明之組合物形式可爲，一種其中該具有視需要穩定劑之組成物或组成份混合物，係與智用於化妝品组合物且與該等组成物相容之賦形劑，例如绵羊脂或植物、碟物或合成性油類混合的乳液。本發明組合物可呈存在適宜賦形劑，例如纖維素酯類或其他凝勝化劑，如丙埽酸衍生物中之凝膠形式，且其可含有存於溶解形式，或經懸浮呈微顆粒之活性要素。根據本發明之组合物亦可採用，其中係將组成份混合物溶解，或微分散化之洗液或溶液形式。因此，根據本發明之组合物形式，可爲存於含有水及一或多種可相容界面活性劑之溶液中的微分散液。該分教液具有微乳液性質，且具有實際上與眞實溶液相等之外觀。其亦可於使用之時始製備得。根據本發明组合物之有利形式，爲經由附著性支撑物（以下稱爲"貼布”）而局部施用之液體，此貼布使能控制活性组成份之擴散，而此擴散作用可藉由物理現象，例如放電微電流而活化° ' 本發明之化妝品组合物亦可含有，其他與NPY拮抗劑具有同類型功敫之活性組成份，例如用以調控脂質分解/脂 -55- (請先Μ讀背面之注意事項导敘寫本頁) Γ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4現格（2丨0X297公釐) 4 34 0 2 4 * A7 — B7 五、發明説明（53 ) 質生合成作用之產物，或可用於此類型组合物中之產物，例如膠原蛋白合成刺激劑、膝原蛋白酶或彈性蛋白蛛抑制劑、及血管保護劑。本發明之組合物具有良好穩定性，且可於〇eC至6〇eC 下，存放一段使用所需之時間，而不產生任何組成份沈積，或發生相之分離，且於使用此等组舍物時其活性不會減低。此等組合物之耐受性十分良好，其不具有光照毒性，且其用於長期塗覆於皮廣時，亦無副作用產生。以其各種不同表現形式存在之本發明組合物，可用於皮膚做爲脂質分解/脂質生合成作用調節劑。更特別地，其可用做爲用於痩身或皮脂溢-調節用途之化妝品產物，或做爲用於治療痤瘡之佐-劑。亦可將本發明之化妝品组合物與表皮，或與頭髮或皮毛系統接觸，以修飾其外觀並對其提供保護作用。經濟部中央榇準局員工消费合作社印製舉例而言，當將此等组合物與表皮接觸時，後者產生”健康”外觀，恰似其已暴露於空氣及/或陽光下，而不會親成褐色（若此係不希望的）。更特別地，本發明之化妝品组合物可使身體上與該组合物接觸之部位，由於其瘦身作用並保持其良好狀態之結果，而令皮膚消除其，，肥胖，外觀。從第一次施用之後，皮膚表面顯得平滑，且皮膚變得更結實更有彈性。於施用一個月之後，皇現出其痩身功效，w橘皮般”外觀明類地變淡，且身材變得更有型。當例如於特殊抗·皮脂溢治療處理後，將本發明之化妝 _____—^56- 本紙張用中目@家標準（) a規格（210X297公釐) ~~ ~~~—- 434024， A7 _ ’_- B7 五、發明説明（54 ) 品组合物與頭髮或皮毛系統接觸時，則該系统可維持於良好狀沉下。同樣地，本發明纽合物可使臉部皮膚保持於良好狀況下，同時亦使面皰之形成更加困難β 一種根據下述實施例12之痩身液，係對5〇位女杜自願者進行測試，技等使用該液趙一天兩次塗抹於大腿上，發現成果非常良好。描述於以下實施例13中之瘦身液，係於一項包括15〇位女性自願者，於對應安慰劑之雙盲條件下所完成之研究中進行測試。該項針對此痩身液與其安慰劑，於所使用和正常於兩大腿及從腰部至膝蓋之下肢上，重複塗抹持續6〇天之狀況類似的實驗條件下，所獲得結果之分析與比較，可證實該根據本發明之痩身液，相對於安慰劑具有明顯，且統計學上有意義的有益痩身功效。如實施例14中所述痩身液之功效與耐受性，係對超過 1000位女性進行測試》此等測驗藉由厘米回聲深度記錄測量及藉由雙聲子吸收測量之證明，顆示脂肪组織厚度減少、其彈性化與結實化之作用以及痩身功效〇經濟部中央樣準局員工消f合作社印製本發明之一目的亦在於一種化舨處理方法，其中係將存在適於化妝品用途之載雜中，具有化妝功效量之ΝΡΥ拮抗劑，與視需要地具有化妝功效量之拮抗劑，施用於表皮及/或頭髮或皮毛系統》最後，本發明之一標的爲ΝΡΥ拮抗劑用於，製造欲藉由、使面皰之形成困難，而將臉部皮膚保持於良好狀況下，之 -57- 本紙珉尺度適用中國國家標隼（CNS ) Α4規格（210X297公釐) 4 340241 A7 - B7 五、發明説明（55 ) 化壯品组合物的用途。本發明亦關於NPY拮抗劑用於，製造欲與頭髮或皮毛系統接觸，之化妝品组合物的用途。尤其，本發明亦關於NPY 拮抗劑用於，製造欲調控皮清脂質分解/脂質生合成作用之化妝品组合物的用途，該组合物亦含有ίχ2-拮抗劑组成份。以下所例舉之實施例係用以説明本發明，而非做限定用。實施例1 一種自菌株鍵霉菌種少ces v) SEBR 2794獲得之萃取物（參照上述XVII)的製備 1.1發酵作用將菌株鏈霉菌種SEBR 2794置於六種不同培養基中進行發酵。 1.1.1. (a)將該菌株於培養m中，以繼代培養基進行繁殖：葡萄糖 20克大豆抽出物Soyotim (Sio> 10克 CaC03 (OMYA) 3克 E類型瓊脂 20克蒸餾水，足量 1升經濟部中央揉隼局男工消費合作社印装然後將培養物於28°C下培育5天•再藉由將15毫升具有下列组合物之適當混合物加至各培養JDT中，而得到抱子懸浮液： -58- •本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4此格（210X297公釐）經濟部中央標革局員工消費合作社印製 434024 * A7 _ - _- B7 五、發明説明（56 )

NaCl 1_________ 9.00 克 _ KC1 0.42 克一_ CaCl2 0_48 克―一 NaHC03 0.20 克一__ 甘油 150.00 克 3-[N-嗎福啉基]丙磺酸（MOPS) 3.00 克蒸餾水，足量 1升 Γ . —-^1裝 (請先閲讀背面之注意事項寫本頁) (b)將3毫升此懸浮液用於，接種至1〇〇毫井具有下列组合物之培養基中：葡萄糖 30克大豆抽出物Soy.otim (Sio) 15克胰化蛋白腺（Biokar) 2克酵母抽出物（Difco) 5克痕量元素容液 10毫升 CaC03 * 5.00克蒸餾水，足量 1升 pH= 7 而痕量元素溶液係由下列化合物组成· FeS04 · 7H2〇 1.00 克 MnS04 * 4H2〇 1.00 克 CuCL2 2H2〇 0:025 克 CaCl2 · 2H20 0.10克 H3BO3 0.56 克 -5 -59- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4规格（2!0X297公釐） Α7 434 0 24*_- B? 五、發明説明（57 ) (ΝΗ4)6Μο7〇24 * 4Η2〇克 ZnS04 * 7H2〇水，足量將培養物於28#C下，於500毫升錐形燒瓶中培育η小時，伴隨220次旋轉/分鐘之攪拌。該操作於結束時之ρΉ^ 爲 7.5。 1.1.2. (a) 根據於1.1.1. (a)中所指示之方法，從菌株SEBR 2794 製備得孢子懸浮液，且 (b) 將3毫升此懸浮液用於，接種至100毫升具有下列組合物之培養基中：葡‘萄糖 10克可溶性澱粉（Muck) 30克麥芽抽出物（Difco) 5克大豆抽出物Soyo.tim (Sio) 15克胰化蛋白腺USP (Biokar) 2克酵母抽出物（Difco) 5克痕量元素溶液（具有與 1.1.1.(b)相同之組合物） 10毫升 CaC03 1A---- 蒸餾水，足量 1升 pH = 7 __一— '—~1 將培養物如1.1.1.中所指示生長ο 1.1.3.重複如實施例l.h 1,輿1.1.2.中所述之程序，惟將 -60- _____ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X 297公釐）

(诗先聞讀背面之注意事項V •裝-- 5；寫本頁) 訂經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝 ^ 4340 2 4 A7 _ - . B7 五、發明説明（58 ) 步驟（b)之培養基改變如下: 甘油（Prolabo) 10 * 可溶性澱粉（Merck) -- 30 έ 大豆抽出物Soyotim (Sio) ---¾¾. 15去胰化蛋白腺USP (Biokar) r—------- 2 $ 酵母抽出物（Difco) -----Z.A* 痕量元素逵液（具有與實施例1相同之组合物） 10毫升 CaC03 ------- — 蒸餾水，足量 1弁 pH= 7 一· ----21— ---—- 將培養物如1.1·1.中所指示生長。 1.1.4. (a)將0‘5毫升包含於一管低溫儲存接種批份中之冷凍抱子懸浮液，接種至含有100毫升具有下列組合物之培養基的500毫升燒瓶中：酵母抽出物（Difco) 3克麥芽抽出物（Difco) 3克蛋白腺（Difco) 5克葡萄糖 10克蒸餾水，足量 _ 1‘升經濟部中央標準局員工消费合作社印製將培養物於28*C下生長72小時，伴隨220次旋轉/分鐘之攪拌。該操作於結束時，培養基之pH値接近於7.9» 1.1.5. -61 - 本纸張JUL適用中國國家標準（CNS ) ( 2丨0X297公釐） t 4340 2 4 -

7 7 A B 五、發明説明（5Θ ) (a) 該製鞋係根據於l.l.4.部分（a)中所指示之方法完成，惟製備得三瓶同樣於24小時培養期即停止之培養物。 (b) 將三瓶培養物组合，並用於接種至含有1〇升具有下列组合物之培養基的20升發酵器中: 酵母抽出物（I>ifco) 3克麥芽抽出物（Difco) 3克蛋白腺（Difco) 5克葡萄糖* 30克蒸餾水，足量 1升 (*):葡萄糖係經單獨減菌 1£寫本頁) -裝. 將培養物於28eC下生長至少72小時。通氣係設定於1 VVM (空氣體積/培養物體積.分鐘），並將攪拌速率調整至使能維持溶氧壓力接近20%者。pH値未經調整，而於7.2 至6.3之間自由變化。 1.1.6. (a)該製程係以與實施例1.1.5.中相同之方法完成，惟使用具有下列組合物之前培養基（燒瓶）：_ 訂經濟部中央標準局負工消費合作社印製酵母抽..出物（Difco) 15克/升葡萄糖 10克/升蒸餾水，足量 1升 (b)該製程係以與實施例1.1.5:中相同.之方法完成，惟使用具有下列组合物之培養基（發酵器} :_ 酵母抽出物（Difco) 30克/升葡萄糖、30克/升 -62- 準樣家國圉中用適度尺張紙本釐公 7 29 434024 A7 B7 五、發明説明（60 ) 消泡劑（Struk'tol) 1毫升蒸餾水，足量 1升經濟部中央標準局負工消費合作社印製將培養物於28°C下生長144小時。通氣係設定於1 VVM (空氣體積/培養物體積.分鐘），並將攪拌速率調整至使能維持溶氧壓力接近20 %者〇pH値未經控制，而於6.5至8之間自由變化6 1.2.萃取作用 1.2.1. 對1.5升根據實施例1.1.1.所得之液汁，完成萃取作用。將發酵液汁於13,000次旋轉/分鐘（27,500 g)下離心20分鐘，並於15克過濾佐劑存在下，置於濾器壓床上過濾。將所得之濾液直接凍乾，並將如此而得之乾燥殘餘物（i6.3 克），再溶解於80毫升水中（最終pH=8,4〇。此部份之50%具抑制性稀釋度（ID50)爲1/4500。 1.2.2. 對ί〇升根據實施例M.5.之程序而獲得，並預先經冷凍之培養物液汁，進行萃取作用。將液汁置於500毫升離心統中，於8000 Tpm (11，000 g) 下離心20分鐘，得到9升完全澄清之上清液。將等份樣本藉由Centripep濃縮器濃縮五次。此部份之50%具抑制性稀釋度等於1/10,000。 1-2.3. 對10升於與實施例1.1.5.所迷相同條件下而獲得，之預先經冷凍培養物液汁，進行萃取作用。分離作用係於Sharpies-型連續離心機上完成。將所得9升上清液通過0.2微米濾器過濾，以去除所有痕 -63- 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS > A4规格（2!〇><2奵公釐) ^ 4 3402 4 ^ A7 B7 五、發明説明（61 ) 量之殘餘生物物質。得到8.5升濾液。將等份樣本藉由Centripep濃縮器濃縮五次。此部份之50%具抑制性稀釋度爲ι/ΐ6,〇〇〇。 1.3. 藉由超過濾之濃縮 1.3·1. 於5 kD膜上之濃縮作用該製程係藉由將實施例1.2.1.之溶液，使用Amicon 5000 膜，於攪拌室中，於含有150 mM NaCI之磷酸鹽缓衝液 (pH=7.5)中進行超過濾而完成，得到具活性之保留物及完全不具活性之滲透物。 1.3.2. 於10 kD膜上之濃縮作用使用10 kD Amicon膜，將9升於實施例2.2.中所獲得之上清液濃缩。經由五倍率之濃縮，得到1.8升具有高出五倍活性之濃縮物（ID50= 10,0 0 0)，及完全不具活性之滲透物。 1.3.2. 於30 kD膜上之滾縮作用使用30 1^人11^<:〇11膜，將8.5升於實施例2.3.中所獲得之上清液濃縮。經由五倍率之濃縮，得到1 · 7升具有高出五倍活性之濃縮物（ID50= 1/10,0 0 0)，及含有非常弱活性（於 1/250下具有20%抑制性）之滲透物。 1.4. 純化作用經濟部中央標準局員工消費合作社印袈 1.4.1. 凝膠滲透層析術對得自1.2.1·之樣本進行使用各種凝膠：葡聚糖凝膠 Sephadex G 25、G 50、G 75與G 100之凝膠滲透層析街，得到如下所指之結果：活性係於排阻體積下，於Sephadex G 25與G 50上溶析 -64- 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4規格（2tOX297公着) ' ^ 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 4340 24 ^ a? ___B7五、發明説明（62 ) 出，且非常接近G75之排阻體積。於SephadexGlOO凝膠上，可將活性與具較高分子量（> 100 KD)之產物分離。於Superose 12分析型管柱（1 KD至1〇〇 KD分離範圍）上，活性分子顯示其滯留時間係介於，卵白蛋白之滯留時間 (44KD)與細胞色素之潍留時間（14.4KD)間》 1.4.2·於截止界限爲5000道耳頓之膜上進行之超過遽作用將100毫升培養物上清液（ID50 ; 1/3600)置於裝設有 Amicon 5000膜之經螘性攪拌小室中，於5倍體積之磷酸鹽緩衝液（pH=7.4) ’ 150 mM NaCl中進行透析，並以麼縮空氣加壓，使壓力達lxI〇5pa(i bar)。回收得100毫升已除去具低分子量分子之保留物（ιε>5〇 = 1/2500)，及500毫升具有可忽略活性之超濾液。 1·4‘3.於截止界限爲10,000道耳頓之膜上進行之超過濾作用將100毫升培養物上清液（Π)50= 1/3600)置於以壓縮空氣加壓至1 X pa (丨bar)，並裝設有Fiitr〇n 1〇{c膜之經磁性攪拌小室中，於7倍體積之20 mM磷酸鹽緩衝液 (pH=7.4)，150 mM NaCl 中進行透析》回收得100毫升具有ID5〇活性=1/1500 ,意指抑制NPY受體結合者，之保留物。將超濾液（700毫升）置於同類型，裝設有Amicon 1000膜之小室中再濃缩》 (請先閲讀背面之注意事項各竣寫本頁) •裝-

、1T Λ -65- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4规格（2丨0Χ297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印東 A7 B7 五、發明説明（63 ) 得到100毫升具有ID50値爲1/500之溶液。 1-4.4. 厭水性雜質之去除將1500毫升培養上清液，以1的克聚苯乙烯-二乙烯基苯樹脂（XAD2)，伴隨攪拌處理2小時。然後將樹瀹過濾，並以3(K)毫升甲醇清洗兩次，然後以300毫升丙阚清洗〇將组合得之甲醇舆丙網溶液於眞空下蒸發。將殘餘物吸收衿40 毫升甲醇中，而得不具有活性之溶液。將不含厭水性產物之水性溶液凍乾。將殘餘物吸收於80毫升水中，而得到具有ID50値爲 1/4500，意指抑制NPY受體結合者，之溶液。 1.4.5·藉由陽離子交換作用萃取活性分子將1500毫升培養上清液以1 N醋酸調整至pH 5，然後以 120克陽離子交換樹脂（Dowex5〇WX-4，ACO形式）處理。經攪拌一小時後，將樹脂過濾，然後以3〇〇毫升1N氨水進行解吸作用半小時。然後將此溶液凍乾β將所得到之殘餘轉吸收於40毫升水中，而得致_當以抑制ΝΡΥ受體結合之方式測量時，1〇50値爲1/36〇ίϊ^液。具有npy受體拮^亦可藉由將實施例 1_1_2、1.1.3、1.1.4與1.1.6之培養物液汁’根據描述於1.2.1 至I.2·3之萃取實施例進行萃取而獲得。實施例2 一種自菌株地衣芽絶桿菌办r/w⑷SEBR 2464獲得之萃取物（參照上述χχνίΐ)的製備 2.1發酵作用 -66- C請先聞讀背面之注意Ϋ項

Γ本頁) 訂本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐） 434024^ A7 A / _—_______- B7_ 五、發明説明（64 ) 將菌株地衣芽抵桿菌SEBR 2464置於4種不.同培養基中進行發酵。 2.1.1. (a)將該菌林於培養jnt中，以具有下列组合物之繼代培養基進行繁殖：細菌培養用胰化大豆液汁（Difco) 40克 MOPS 2克酵母抽出物（Difcc〇 5克 E類型瓊脂 20克蒸餾水，足量 1升 (請先閲讀背面之注意Ϋ項 I - - ; -I I ，項‘磕寫本頁)

，tT 經濟部中央標準局員工消費合作社印製然後將培養物於30*C下培育48小時。再藉由將15毫升具有下列組合物之適當維持培養基加至各培養m中，而得到孢子懸浮液： NaCl 9.00 克 KC1 0.42 克 CaCl2 0·48 克 NaHC03 0.20 克甘油 150.00克 MOPS 3.00 克蒸餾水，足量 1升〇5)將3毫升此懸浮液用於，接種至200毫升具有下列組合物之培養基中： _ 胰化蛋白腺USP (Difco) 2克大豆木瓜酵素化蛋白腺（Difco) 5克 -67- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ^ 434024 ^ A7 _____- B7 五、發明説明（65 )

NaCl 5杏蒸餾水，足量 -------- 1升 pH= 7 ^---— 將培養物於500毫升'錐形燒瓶中，於3〇 *c下位舍 i卜培育24小時，伴随260次旋轉/分鐘之攪拌。 2.1.2.將1.5毫升第二級接種批份中之冷凍孢子懸浮液用於，接種至含有100毫升具有下列组合物之培養基的5〇〇毫升燒瓶中：葡萄糖 30克* 酵母抽出物（Difco) 10克 MgS04 · 7H2〇 0.5克 KH2P〇4 1克痕量元素溶液 100¾ 并蒸餾水，足量 1升 f辞先閎靖背面之注意事項I壤寫本X ) 裝. -項4壤寫太訂經濟部中央橾準局貝工消費合作社印製 *葡萄糖係經單獨滅菌而痕量元素溶液係由下列化合物組成： FeS04* 7H20 1.00 克 M11SO4 * 4H2〇 1.00 克 : CuC12 · 2H2〇 0_025克 CaCl2 · 2H20 0.10克 __ H3BO3 . 0.5_6 克 _ (NH4)6Mo7〇24 · 4H20 0‘02 克 Z11SO4 · 7H20 0.20 克 — 水，足量 1升 -68- 本紙張Λ度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐) 葡萄糖. 30克酵母抽出物（Difco) 30克 MgS04· 7H2〇 0.5克 KH2P04 1克痕量元素溶液 10毫升蒸餾水，足量 1升經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝 M340 2 4 A7 ，B7 五、發明説明（66 ) 將培養物於30Ό下生長，伴随260次旋轉/分鐘之攪拌。經15小時後即停止培養。 2.1.3. 以如實施例2.1.2所述之方法，製備得300毫升存於經攪拌燒瓶中之培養物，並將此培養物用於接種至，含有10升具有相同组合物之培養基的2σ升發酵器中，於其中添加1毫升/升橡膝軟化劑struckto,l。將培養物於30’C下生長15小時，伴随260次旋轉/分鐘之攪拌及0.5 VVM之通氣。 2.1.4. (a)製備5瓶存於含有300毫升畀有下列組合物之培養基的1升經攪拌燒瓶中之培養物：痕量元素溶液具有與實施例2.1.2.相同之组合物。 (b)將該5瓶培養物於30Ό及於220 rpm下生長15小時，然後將其组合以接種至含有50升具有下列組合物之培養基的75升發酵器中：葡萄糖 30克酵母抽步物（Difco) 30克 MgS04 * 7H2〇 I克 -69- 本紙張尺度逋用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注^$^項#填寫本頁)

經濟部中央揉準局貝工消f合作社印製 4 340 2 4： a? B7 五、發明説明（67 ) KH2P〇4 2克痕量元素溶液 20毫升 strucktol 2毫升蒸餾水，足量 1升痕量元素溶液具有與實施例1.1.1·相同之组合物。將培養物於3(TC下生長，伴随〇.5 VVM之通氣及經調整以使能維持溶氧壓力接近20%之攪拌。於7小時培養期時，將濃缩葡萄糖溶液加入，以延長生長。於16小時後達生長停滯期時，即停止培養。 2.2萃取作用 2.2.1. 對12升2.1.1.所得之培養液汁，完成萃取作用。將液汁於13,000次旋轉/分鐘（27,500 g)下離心10分鐘，而得到11升上清液》將2.1公斤預先經甲醇與丙酮調整之合成樹脂Amberlite XAD2樹脂加入此等11升上清液中。將上清液/樹脂混合物共同於室溫下靜置過夜。然後將樹脂過濾出，並將結合於其上之產物，連續以兩次5升甲醇及以5升丙嗣溶析。經過濾後將有機相组合，並於眞空下蒸發至乾。該蒸發殘餘物（46克）即構成乾燥萃取物；將其再溶解於 100毫升丙二醇/水混合物（50/50)中。由此而得到之部份具有1〇50値=1/3000。 2.2.2. 對3.5升實施例2..1.3.所得之培養液汁，完成萃取作用》依照與實施例.2.. 2 1 ·所述相同之程序，惟所使用樹脂與 •70- 本紙張尺度適用中國闺家標準(CNS ) Α4規格（210X 297公趁了----- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁} •裝 Τ 434024 ^ A7 ------ B7 五、發明説明（68 ) 溶剤之總量，随欲處理上清液之體積而調整。得到11克乾燥萃取物，將其吸收於27毫升丙二醇/水混合物（50/50)中·» 由此而得到之溶液具有1£>5〇値=1/4〇〇〇 & 2.2.3·對50升實施例2.1.4·所得之培養液汁，完成萃取作用。使用切線微過濾系統（0.2微米），將生物物質分離。得到 46升滲透物，將其與9公斤經預先調整之合成樹脂 Amberlite XAD2樹脂於室溫下接觸過夜β 然後將滿載之樹脂過濾出，並將結合於其上之產物，以兩次23升甲醇及一次23升丙酮溶析。於每次溶析之間，藉由過濾作用將有機相與樹脂分離》然後將有機相组合，並於眞空下蒸發至乾》得到285克乾燥萃取物，將其以620克丙二醇/水混合物 (50/50)吸收。將所得之溶液通過0.2微米濾器過濾，且其具有ID5Q値= 1/8200 « 經濟部中央梯準局員工消费合作社印裝具有ct2·受體拮抗劑活性之溶液，亦可藉由將實施例 2.1.2之培養物液汁，根據實施例2.2.3.進行萃取而獲得。實施例3 製備下列用於以痩身凝膠形式，施用至皮膚之组·合物：聚幾乙缔CaTbopol 940 0.20 克聚乙二醉 3.00 克防腐劑 .......... 0.75 克 -71 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐) 4 2 ο 4 3 4 B7 五、發明説明（69 ) 吐溫（Tween) 20 0.50克三乙醇胺 0.25 克七葉皂甞 0.50 克咖啡因 0.50 克積雪草抽出物 3.00 克銀杏（白果）抽出物 3.00 克肉鹼 4.00 克實施例2.2.1.之萃取物 0.10 克實施例1.2.1.之乾燥萃取物 0.01 克去礦質水，足量 100.00克 ------^— J_裝-- {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

•1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製實施例4 製備下列可用以呈痩身乳液之凝膠形式，施用至皮膚之组合物·· 聚叛乙締Carbopol 940 0.300 克三乙醇胺 0,520 克七葉包甞 0.500 克鯨蠟醇 1.500 克液態脂肪酯類 8.500 克十六酸十六醋 2.000克植物甾醇 1.000 克 P0E鯨蠟醇 • 0.700 克矽酮油 2.500 克吐溫60 1.900克 -72- 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS) A4規格（210X297公釐） 34 0 2 4 ^ a? __ B7 五、發明説明（70 ) 去水山梨糖醇硬脂酸酯 1.400 克丙二醇 4.000克防腐劑 0.700 克脾臟抽出物 1.000克肉鹼 4.000克實施例2.2.1.之萃取物 0.0015克實施例1.3.1.之乾燥萃取物 0.0010克去礦質水，足量 100‘00 克實施例5 製備下列可用以瘦身微乳液之凝膠形式，施用至皮膚之 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央橾準局員工消費合作社印製组合物·- 咖#因 0.50 克七葉皂苷 0,50 克經乙氧基化之三酸甘油酯 25.70克脾臟抽出物 1.00 克肉鹼 4.00 克經乙氧基化之脂肪醇類 12.00克合成之三酸甘油酯類 7.00 克矽酮油 3.50 克脂肪酸酯 3.50 克防腐剤 - 0.75克實施例1.4.3.之乾燥萃取物 0.004克實施例2.2.1.之萃取物 0.15 克 -73- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4現格（2丨OX297公釐）經濟部中央標準局貝工消費合作社印裝 ^434'ϋ?；； ^ α7 Β7 五、發明説明（71 ) 去礦質水，足量 100.00克實施例6 製備下列用於以痩身微乳液之凝膠形式，施用至皮膚之組合物：咖*#因 1.00 克七葉皀甞 0.50 克經乙氧基化之三酸甘油酯 25.70克脾臟抽出物 1.00 克肉鹼 2.00 克經乙氧基化之脂肪醇類 12.00克合成之三酸甘油酯類 8.00 克矽酮油 3·50 克脂肪酸酯 3·50 克防腐劑 0.75 克實施例1.4.3.之乾燥萃取物 0.001 克去礦質水，足量 100.00克實施例7 聚幾乙缔Carbopol 940 0.20 克聚乙二醇 3.00 克防腐劑 0.75 克吐溫（Tween) 20 - ‘ 0.50 克三乙醇胺 0.25 克肉鹼 4.00 克 tun HHB Inf i (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

，1T -74- 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ^ 4 34 0 ? / A7 — B7 五、發明説明（72 ) 實施例1.2.1.之乾燥萃取物 0.10 克去礦質水，足量 100.00 克實施例8 痩身貼布黏著劑* 足量100克實施例1,3.2.之乾燥萃取物 0.020克實施例2.2.3.之萃取物 0.001 克 *該黏著劑可爲聚異丁烯，爲丙烯酸或矽嗣黏著劑，或爲任何其他生物可相容性黏著劑。實施例9 (锖先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) r r-裝. 乙醇 10.00 克 Carbomer 0.20 克 Glycereth-26 5.00 克氫氧化鈉 0.08 克丙基纖維素 0.10 克實施例1.3.2.之萃取物 0.02 克去礦質水，足量 100.00 克訂 - 經濟部中央揉準局員工消费合作社印装實施例10 醇性凝膠乙醇 40.00 克 Carbomer 0.50 克 Glycereth-26 5.00 克一氫氧化鈉 0.20 克 -75- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐） A7 4340 _ B7 五、發明説明（乃）丙基纖維素 0.10 克實施例1.3.2.之萃取物 0.02 克去礦質水，足量 100.00克實施例11 痩身凝膠/面霜硬脂酸甘油酯 0.300 克鯨蟻醇 5.00 克辛酸/己酸琥珀酸酯 6.00 克碎嗣油 2.00 克對羥苯甲酸酯類 0.30 克黃耆膠 0.40 克丁二醇 5.00 克苯氧乙醇 0-70 克聚甲烯丙酸甘油酯 3.00 克實施例1.3.2.之萃取物 0·02 克去礦質水，足量 100.00克 (请先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製實施例12.......、痩身巨型粒于農液 -..... 甘油 10.000 確物油 6.000 泛醇 1.000 烯丙酸共聚物 0.500 三乙醇胺 0.500 -76- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 4 3402 ^ A7 B7 五、發明説明（74 ) 對羥苯甲酸酯類 0.300 苯氧乙醇 0.700 實施例1.3.2.之萃取物 0.020 去硪質水，足量 100.00 克實施例13 痩身巨型粒子乳赢甘油 5.000 確物油 2.00 泛醇 0.500 烯丙酸共聚物 0.050 三乙醇胺 0.050 對羥苯甲酸酯類 0.300 笨氧乙醇 0.700 實施例1.3.2.之萃取物 0.020 實施例2.2.3.之萃取物 0.001 去礦質水，足量 100.00 克 (請先聞讀背面之注^κ項再填离本頁) 裝- 钉經濟部中央橾準局男工消費合作社印製實施例14至25 製備具有上述實施例6之組合物的痩身微乳液，其中實施例1.4.3.之乾燥萃取物，以下列化合物替代： 1·(2-[(Ν·(2-莕胺磺醢基）-5-甲氧基·2-峭哚基）羰醢胺基]-3-(4-(Ν-[4-(二甲胺基甲基)-順式-礞己基甲基]甲脒基）苯基）丙醯基）吡咯啶，Α類，I组（實施例14); 氫氣化3·(4-甲氧苯基）·4-[4-(2-吡咯啶-1-基乙氧基）字醯基]-1，2·二氫莕，Α類，Ila组（實施例15); -77 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2ΗΓΧ297公釐）

T 4 34024^ A7 ____ B7_ 五、發明説明（75) - 氫氣化2-(4-羥苯基）·3-[4-(2-吡咯啶-1-基乙氧基）苄醢基J苯并嘧吩，Α類，lib組（實施例16); -PD 160170，A類，III组（實施例 17); -SC 3117，A類，IV組（實施例 18): -D-中狐醇1，2,6-三_酸鹽，A類，Va组（實施例19); - 單磷酸肌醇，鋅鹽，A類，Vb組（實施例20); -1-(3-甲氧苯基）-卜(4-苯基六氫吡畊-1·基）環己烷，二氫氣酸鹽，A類，VI组（實施例21); BIBP 3226，A類，VII组（實施例 22); -He 90481，A類 ’ VIII組（實施例 23); -1，4·二氫-4-[3-[[[(3·[螺（茚-4，Γ-六氫吡啶-1-基）]丙基] 胺基]羰基]胺基]苯基二甲基-3，，5-吡啶二羧酸二甲酯，Α類，IX組（實施例24)。 (請先W讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央標準局貝工消費合作社印褽 -78- 本紙張尺度通用中國國家標準（CNS ) A4現格（2!0X297公釐）

Claims

4 5成專利申請案中文申請專利範園修正年2月） i r. ^ ιλ\ 丨· μ修$ 經濟部中央揉奉局貝工消费合作社印製六、申請專利範圍^ — ι· 一種局部施用之痩身組合物，其包含不為磷酸肌醇之神經胜肽γ受體拮抗劑及α2 -拮抗劑與化妝品上可接受賦形劑之組合。 2 .根據申請專利範圍第1項之痩.身组合物，其包含0.00001 %至5%之神經胜肽γ受體拮抗劑及 0.00001%至5%之<χ2-拮抗劑。 3 ·根據申請專利範園第1或2項之痩身組合物，其中神經胜肽 Υ受體拮抗劑係為鏈霉菌種 (Strepomyces sp) SEBR2794 菌株（CCRC 910084)及其具生產力之突變株發酵所得之產物。 4.根據申請專利範園第1或2項之痩身組合物，其中（x2 -拮抗劑係為地衣芽孢桿菌（Bacillus . · * licheniformis) SEBR 2464 菌株（CCRC 910083)及其具生產力之突變株發酵所得之產物。 5 .根據申請專利範園第1或2項之痩身組合物，其中神經胜肽 Y 受體拮抗劑係為鏈霉菌種 (Strepomyces sp) SEBR2794 菌株（CCRC 910084)發酵所得之產物，且α 2 -拮抗劑係為地衣芽孢桿菌 (Bacillus licheniformis) SEBR 2464 菌株（CCRC 910083) 發酵所得之產物。 6 .根據申請專利範圍第1或2項之痩身組合物，其進一步含有咖啡因及銀杏（白果）抽出物。 7.根據申請專利範圍第1項之痩身组合物’其進一步含有膠原蛋白合成刺激劑、膠原蛋白酶或本纸張尺度逋用中國國家揲準（CNS ) A4说格（21〇Χ297公釐） --------裝-- (請先閲讀背面之注$項再填寫本頁) 訂 A8 B8 C8 D8 434024 六、申請專利範圍彈性蛋白酶抑制劑、或血管保護劑。 8 .根據申請專利範圍第1或2項.之痩身組合物，其係施用至身體上選定之部位。 9. 根據申請專利範圍第1或2項之痩身組合物，其係施用於大腿上。 10. 根據申請專利範圍第1或2項之痩身组合物，其係施用於大腿上及從腰部至膝蓋之下肢上。 11. 根據申請專利範圍第1或2項之痩身組合物，其係用於控制皮膚脂質分解/脂質生合成作用。 12. 根據申請專利範圍第1或2項之痩身组合物，其係用於消除皮膚肥胖”橘皮般"外觀》 --------「装— (請先Μ讀背面之注意事項再填寫本頁) ,ιτ 經濟部中央標率局工消费合作社印製 -2- 本紙伕尺度逋用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 4 34-0 24 '

第86114594號專利申靖案中文說明書修正頁(89年；}月> 五、發明説明（34 )

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) XVII -具有NPY-拮抗劑活性之產物，特別是得自放線菌科菌株發酵作用之萃取物。更特別地，以得自具有特別有利做為NPY拮抗劑活性之新穎放線菌株的萃取物，為特別較佳之NPY拮抗劑組成份。自此菌株之發酵液汁，藉由將上清液過濾，視需要接著濃縮、純化與/或凍乾等步驟而得到具有Νργ受體拮抗劑活性之流份，此等流份全無遣傳毒性，且具有足以使其調配於本發明化妝品組合物中之移定性。發酵液汁之上清液，亦可以其原來之形式使用β 此等新穎萃取物，構成本發明之結果及特別有利之一面β 經濟部中夹樣準局貝工消费合作杜印衷根據本發明此特別層面，而生產具有NPY受體拮抗劑活性之生物禮’係一種已從採自上加俞河（Haute Garonne) (法國）畔草地樣本分離出之放線菌株，其亦已經保存於實驗室，編號為SEBR 2794。此微生物之樣本於1993 年7月13日’經寄存於巴斯特研究所之CNCM中，編號為I 13 32 ’並於1997年9月3曰寄存於食品工業發研究所，編號為 CCRC 910084 » 此微生物之生化特徵係經API 50 CH (特定用於糖類）、 API 50 AO (特定用於有機酸類）及API 50 AA (特定用於胺基酸類）等套组決定（API 50 CH購自BioMhieux，而其餘 -37- 本紙張尺度適用中國國家椹準（CNS ) A4C格（2丨0X297公釐） 4340 2 4 14594號專利申賴 T文說明書修正頁(的年:

發明说明（經濟部中央樣準扃wc工消费合作社印装宽 XXIII- 經描述於美國專利US 4,229,449案中之化合物’特別是reboxetine。 XXIV- 經描述於英國專利GB 2 157 63 1案中之化合物，特別是 fluparoxan。 XXV -經描述於英國專利GB 2，167,408案中之化合物，特別是 altipamezole。 E.藉由動物或植物來源之細胞或組織萃取作用獲得，或藉由微生物’尤其是細菌與真菌（例如酵母菌）發酵所得到之ct2-拮抗劑。此類產物（亦包括半合成性產物）之實例，為以下所說明之XXVI與XXVII组產物。 XXVI -得自麥角菌，具有α2-拮抗劑作用之萃取物，其組成份與半合成之化合物’特別是麥角溴煙酯Uiceg〇Hne)。 XXVII-具有針對α2受體之拮抗劑活性，尤其係得自地衣芽抱桿菌（Sizci/Zw //cr/ieni/orm⑷菌株發味作用之產物，特別是從菌株SEBR 2464發酵得者。此等產物’特別是屬於此組之萃取物，代表本發明另一特別層面。根據本發明此特別層面，而具有生產能力之生物禮，係一株業經分離出之地衣芽孢桿菌，其亦已經保存於實驗室’編號為SEBR 2464。此微生物之樣本於1996年8月22 曰’經寄存於巴斯特研究所之CNCM中，編號為並於1997年9月3日寄存於食品工業發展研究所編號為 CCRC 910083 » 此微生物之生化特徵，係經API 20B、API 50 、50 CH、50 AA、50 AO及 20E API等套组決定。此微生物為一種呈單一形狀’長度為2至微米，而 46 本纸張尺度暹用中困两家標準（CNS ) A4ft格< 210X297公釐） --------裳------訂-----(谦 ί請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁} 4 5成專利申請案中文申請專利範園修正年2月） i r. ^ ιλ\ 丨· μ修$ 經濟部中央揉奉局貝工消费合作社印製六、申請專利範圍^ — ι· 一種局部施用之痩身組合物，其包含不為磷酸肌醇之神經胜肽γ受體拮抗劑及α2 -拮抗劑與化妝品上可接受賦形劑之組合。 2 .根據申請專利範圍第1項之痩.身组合物，其包含0.00001 %至5%之神經胜肽γ受體拮抗劑及 0.00001%至5%之<χ2-拮抗劑。 3 ·根據申請專利範園第1或2項之痩身組合物，其中神經胜肽 Υ受體拮抗劑係為鏈霉菌種 (Strepomyces sp) SEBR2794 菌株（CCRC 910084)及其具生產力之突變株發酵所得之產物。 4.根據申請專利範園第1或2項之痩身組合物，其中（x2 -拮抗劑係為地衣芽孢桿菌（Bacillus . · * licheniformis) SEBR 2464 菌株（CCRC 910083)及其具生產力之突變株發酵所得之產物。 5 .根據申請專利範園第1或2項之痩身組合物，其中神經胜肽 Y 受體拮抗劑係為鏈霉菌種 (Strepomyces sp) SEBR2794 菌株（CCRC 910084)發酵所得之產物，且α 2 -拮抗劑係為地衣芽孢桿菌 (Bacillus licheniformis) SEBR 2464 菌株（CCRC 910083) 發酵所得之產物。 6 .根據申請專利範圍第1或2項之痩身組合物，其進一步含有咖啡因及銀杏（白果）抽出物。 7.根據申請專利範圍第1項之痩身组合物’其進一步含有膠原蛋白合成刺激劑、膠原蛋白酶或本纸張尺度逋用中國國家揲準（CNS ) A4说格（21〇Χ297公釐） --------裝-- (請先閲讀背面之注$項再填寫本頁) 訂