TW202123956A - 植物發酵液用於製備降脂組合物的用途 - Google Patents
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Abstract
一種植物發酵液用於製備降脂的組合物之用途。其中，植物發酵液是由山槴子（Gardenia jasminoides
）及馬齒莧（Portulaca oleracea
）的水浸提液經酵母菌及乳酸桿菌初發酵後，並以醋酸菌次發酵而製得。
Description
本發明關於一種發酵液，特別是關於一種山槴子及馬齒莧發酵液用於製備降脂組合物的用途。
基於消費者對於人工合物或添加物的疑慮日益增加，故而有機及天然的飲食概念更為受到歡迎。生技公司及食品業者積極投入關於天然產物的相關產品之研發。
在各項對身體健康有助益的科學驗證基礎上，針對不同植物的活性成分分析及功效評估成為產品開發的重點項目。產品開發的項目是是藉由天然植物改善或提升身體機能，如減重、美白、腸胃保健、生酮飲食等。
其中，新陳代謝過低、體脂過高更是現代人常見的健康危害，而新陳代謝過低、體脂過高等可能進一步導致高血脂、脂肪肝、動脈硬化/或心肌無力等多種病變。
在一些實施例中，植物發酵液用於製備降脂的組合物之用途。其中，植物發酵液是由山槴子（Gardenia jasminoides
）及馬齒莧（Portulaca oleracea
）的水浸提液經酵母菌及乳酸桿菌初發酵後，並以醋酸菌次發酵而製得。
在一些實施例中，植物發酵液用於降低膽固醇。
在一些實施例中，植物發酵液用於降低低密度脂蛋白。
在一些實施例中，植物發酵液用於增加高密度脂蛋白。
在一些實施例中，植物發酵液用於減少體脂。
在一些實施例中，植物發酵液用於降低平滑肌細胞鈣離子沉積。
在一些實施例中，植物發酵液用於提升血管細胞粒腺體活性。
在一些實施例中，植物發酵液用於提升肢體末稍溫度。
在一些實施例中，植物發酵液的有效用量為10mL/day。
綜上所述，根據任一實施例的植物發酵液，其可以降低膽固醇及低密度脂蛋白，並且增加高密度脂蛋白，進而降低血液中血脂肪含量來達成降脂的用途。根據任一實施例的植物發酵液，其可以大幅減少平滑肌細胞鈣離子沉積的產生，故而提升心肌收縮力量並且避免血管阻塞，進而造成代謝率的提升來達到降脂的用途。根據任一實施例的植物發酵液，其可以提升血管細胞粒線體活性，故而提升血管效能，進而提升代謝率來達到降脂的用途。根據任一實施例的植物發酵液，其提升肢體末稍溫度，進而提升代謝率來達到降脂的用途。並且，根據任一實施例的植物發酵液，在每日服用植物發酵液10mL的情況下即能有效達到降脂用途。
在一些實施例中，植物發酵液是由山槴子及馬齒莧的水浸提液經酵母菌（Yeast
）及乳酸桿菌（Lactobacillus
）初發酵後，並以醋酸菌（Acetobacter aceti
）次發酵而製得。在一些實施例中，水浸提液是由山槴子原料、馬齒莧原料及水所製得。在一些實施例中，水浸提液是由山槴子原料、馬齒莧原料、水及葡萄糖所製得。
在一些實施例中，山槴子（Gardenia jasminoides
）植株是茜草科（Rubiaceae
）槴子屬（Gardenia
）的常綠灌木，別名木丹及鮮支。在一些實施例中，山槴子原料為山槴子果實。在一些實施例中，山槴子原料為山槴子去殼果實。在一些實施例中，山槴子原料為乾燥的山槴子果肉及種子。舉例而言，山槴子原料可以使用採購自中國（呂世宗）的山槴子去殼果實。
在一些實施例中，馬齒莧（Portulaca oleracea
）植株是馬齒莧科（Portulacaceae
）馬齒莧屬（Portulaca
）的草本植物，別名馬生菜、馬齒菜、馬屎莧及五行草。在一些實施例中，馬齒莧原料為馬齒莧全草。在一些實施例中，馬齒莧原料為馬齒莧莖及葉。在一些實施例中，馬齒莧原料為馬齒莧葉。舉例而言，馬齒莧原料可以使用採購自中國（呂世宗）的乾燥馬齒莧葉。
在一些實施例中，水浸提液是由重量比1-3：0.5-1.5：75-85的山槴子原料、馬齒莧原料及水所製得。在一些實施例中，水浸提液是由重量比2：1：80的山槴子原料、馬齒莧原料及水所製得。在一些實施例中，水浸提液是將山槴子原料、馬齒莧原料及水依據2：1：80的比例混合後進行持續60分鐘到70分鐘的高溫浸提（如，90±5℃）所製得。在一些實施例中，水浸提液是將山槴子原料、馬齒莧原料及水依據2：1：80的比例混合後進行持續60分鐘的高溫浸提（如，95℃）所製得。在一些實施例中，水浸提液的白利糖度（Brix°）大於或等於8。在一些實施例中，水浸提液是由山槴子原料、馬齒莧原料、水及葡萄糖所製得。其中，山槴子原料、馬齒莧原料及水的重量比為2：1：80，而葡萄糖的含量為相對於山槴子原料、馬齒莧原料及水的總重的10%（V/V）。在一些實施例中，水浸提液是將山槴子原料、馬齒莧原料及水依據2：1：80的比例混合後，再加入10%的葡萄糖，然後進行持續1小時的高溫浸提（如，95℃）所製得。
在一些實施例中，水浸提液不另濾除其內部的固形物（即山槴子原料/或馬齒莧原料）直接加入菌種進行發酵，以利用菌種進一步提取固形物中的活性成分，進而得到植物發酵液。
在一些實施例中，於高溫浸提後，將水浸提液降溫以供後續發酵程序使用。在一些實施例中，於高溫浸提後，將水浸提液降溫到35℃±2以供後續發酵程序使用。
在一些實施例中，水浸提液接種菌株之後進行發酵程序以製得植物發酵液，並且發酵程序分為初發酵程序及次發酵程序。首先，初發酵程序是在水浸提液內加入0.05wt%~0.15wt%的酵母菌以及0.025wt%~0.1wt%的乳酸菌並且於室溫下靜置發酵2天~5天以形成初發酵液。在一些實施例中，初發酵程序是在水浸提液內加入0.1wt%的酵母菌以及0.05wt%的乳酸菌並且於25℃到28℃下靜置發酵3天以形成初發酵液。
在一些實施例中，酵母菌可以是啤酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae
）。舉例來說，乳酸菌可為寄存於食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心（BCRC）且寄存編號BCRC 20271菌株啤酒酵母菌（且國際寄存編號ATCC26602）或其他市售啤酒酵母。
在一些實施例中，乳酸菌可以是胚芽乳酸菌（Lactobacillus plantarum）。舉例來說，乳酸菌可為寄存於食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心且寄存編號BCRC 910805菌株的TCI028菌株，並且此菌株亦寄存於德國國家菌種保藏中心（German Collection of Microorganisms and Cell Cultures，DSMZ）且其國際寄存編號為DSM33108。
接著，將初發酵程序中所製得的初發酵液進行次發酵程序。在一些實施例中，次發酵程序是在初發酵液內加入5wt%的醋酸菌靜置並檢測其白利糖度小於4，且其酸鹼值（pH值）為4.5±0.5時即完成發酵，形成植物發酵原液。在一些實施例中，次發酵程序是在初發酵液內加入5wt%的醋酸菌室溫下靜置發酵3天到6天以形成植物發酵原液在一些實施例中，次發酵程序是在初發酵液內加入5wt%的醋酸菌於25℃到28℃下靜置發酵4天以形成植物發酵原液。在一些實施例中，採用寄存編號BCRC11688(國際寄存ATCC15973)菌株的醋酸菌。
在一些實施例中，發酵程序所得的植物發酵原液即為植物發酵液。在另一些實施例中，發酵程序之後所得的植物發酵原液可以再進行下列至少一再處理程序：過濾程序、減壓濃縮程序、調味程序、填充程序及滅菌程序，以形成植物發酵液。於此，過濾程序、減壓濃縮程序、調味程序、填充程序或滅菌程序係用以延長植物發酵液的保存期限、口感並且避免變質。
在一些實施例中，過濾程序是將植物發酵原液以400目數（mesh）的網孔的濾網過濾以形成植物發酵液。於此，藉由適當目數的濾網將固形物去除。
在一些實施例中，減壓濃縮程序是將植物發酵原液在55℃到65℃下減壓濃縮以形成植物發酵液。舉例來說，減壓濃縮的溫度設定值為60℃。在一些實施例中，減壓濃縮的壓力設定值為150巴（Bar）。於此，透過減壓濃縮能去除植物發酵液內酒精成分，並且減少植物發酵液的存放體積。
在一些實施例中，調味程序是將植物發酵原液添加寡糖以形成植物發酵液。於此，寡糖係指由3~10個單醣分子聚合而成的低聚糖。在一些實施例中，寡糖可為果寡糖、半乳寡糖、木寡糖、異麥芽寡糖等等。在一實施例中，添加相對於植物發酵原液40%~70%的寡糖。在一實施例中，添加相對於植物發酵原液60%的寡糖。於此，添加寡糖是為調整植物發酵液的滲透壓，使植物發酵液內的水活性下降而避免其他微生物的滋長而影響植物發酵液的品質。
在一些實施例中，填充程序是將植物發酵液/或植物發酵原液分裝於適當尺吋的保存容器。在一些實施例中，填充程序是將植物發酵液/或植物發酵原液分裝於10mL的保存容器。
在一些實施例中，滅菌程序是將植物發酵液/或植物發酵原液加熱到95℃±5至少60分鐘。
在一些實施例中，植物發酵液用於降低膽固醇。在一些實施例中，植物發酵液用於降低低密度脂蛋白。在一些實施例中，植物發酵液用於增加高密度脂蛋白。在一些實施例中，植物發酵液用於減少體脂。
醫學界通常以檢測體脂、人體血液內的總膽固醇（Cholesterol）過高、低密度脂蛋白（LDL）過高或高密度脂蛋白（HDL）過低來作為健康狀態的指標，而且總膽固醇（Cholesterol）過高、低密度脂蛋白（LDL）過高或高密度脂蛋白過低都是已知導致高血脂症的原因之一。
在一些實施例中，植物發酵液用於降低平滑肌細胞鈣離子沉積。在一些實施例中，植物發酵液用於提升血管細胞粒腺體活性。在一些實施例中，植物發酵液用於提升肢體末稍溫度。
在一些實施例中，植物發酵液的有效用量為10mL/day。
綜上所述，根據任一實施例的植物發酵液，其可以降低膽固醇及低密度脂蛋白，並且增加高密度脂蛋白，進而降低血液中血脂肪含量來達成降脂的用途。根據任一實施例的植物發酵液，其可以大幅減少平滑肌細胞鈣離子沉積的產生，故而提升心肌收縮力量並且避免血管阻塞，進而造成代謝率的提升來達到降脂的用途。根據任一實施例的植物發酵液，其可以提升血管細胞粒線體活性，故而提升血管效能，進而提升代謝率來達到降脂的用途。根據任一實施例的植物發酵液，其提升肢體末稍溫度，進而提升代謝率來達到降脂的用途。並且，根據任一實施例的植物發酵液，在每日服用植物發酵液10mL的情況下即能有效達到降脂用途。於此，在一些實施例中，植物發酵液能用於製備降脂的組合物。
在一些實施例中，前述之任一組合物可為醫藥品。換言之，此醫藥品包含有效含量的植物發酵液。
在一些實施例中，前述之醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成適合於經腸道地、非經腸道地（parenterally）、口服的、或局部地（topically）投藥劑型。
在一些實施例中，經腸道或口服的投藥劑型可為，但不限於，錠劑（tablet）、片劑（troche）、口含錠（lozenge）、丸劑（pill）、膠囊（capsule）、分散性粉末（dispersible powder）或細顆粒（granule）、溶液、懸浮液（suspension）、乳劑（emulsion）、糖漿（syrup）、酏劑（elixir）、濃漿（slurry）或類似之物。在一些實施例中，非經腸道地或局部地投藥劑型可為，但不限於，注射品（injection）、無菌的粉末（sterile powder）、外部製劑（external preparation）或類似之物。在一些實施例中，注射品的投藥方式可為皮下注射（subcutaneous injection）、表皮內注射（intraepidermal injection）、皮內注射（intradermal injection）或病灶內注射（intralesional injection）。
在一些實施例中，前述之醫藥品可包含被廣泛地使用於藥物製造技術之醫藥上可接受的載劑（pharmaceutically acceptable carrier）。在一些實施例中，醫藥上可接受的載劑可為下列載劑中一種或多種：溶劑（solvent）、緩衝液（buffer）、乳化劑（emulsifier）、懸浮劑（suspending agent）、分解劑（decomposer）、崩解劑（disintegrating agent）、分散劑（dispersing agent）、黏結劑（binding agent）、賦形劑（excipient）、安定劑（stabilizing agent）、螯合劑（chelating agent）、稀釋劑（diluent）、膠凝劑（gelling agent）、防腐劑（preservative）、潤濕劑（wetting agent）、潤滑劑（lubricant）、吸收延遲劑（absorption delaying agent）、脂質體（liposome）以及類似之物。關於選用之載劑的種類與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。在一些實施例中，作為醫藥上可接受的載劑的溶劑可為水、生理鹽水（normal saline）、磷酸鹽緩衝生理鹽水（phosphate buffered saline, PBS）、或含有醇的水性溶液（aqueous solution containing alcohol）。
在一些實施例中，前述之任一組合物可為食用產品（即食品組合物）。換言之，食用產品包含特定含量的植物發酵液。在一些實施例中，食用產品可為一般食品、保健食品、膳食補充品或食品添加物（food additive）。
在一些實施例中，前述之食用產品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成適合於口服的劑型。在一些實施例中，一般食品可為但不限於：飲料（beverages）、發酵食品（fermented foods）、烘培產品（bakery products）或調味料。
在一些實施例中，能藉由習知方法於原料製備時添加任一實施例的植物發酵液（即作為食品添加物），或是於食品的製作過程中添加任一實施例的植物發酵液（即作為食品添加物），而與任一種可食性材料配製成供人類與非人類動物攝食的食用產品。
例
1
：
植物發酵液的製備
首先，準備重量比為2：1：80的山槴子原料、馬齒莧原料及水。其中，山槴子原料使用採購自中國的山槴子的去殼果實，馬齒莧原料使用馬齒莧的葉子部分。
接著，將山槴子原料、馬齒莧原料及水混合並加入相對於山槴子原料、馬齒莧原料及水總重的10%的葡萄糖，以形成植物基液。於此，植物基液的白利糖度大於8。
將植物基液加熱至95℃，並於加熱環境達到95℃後持續加熱60分鐘，以得到水浸提液。並且，待水浸提液的溫度降溫至小於35℃後，即可作為後續發酵程序的培養液使用。
於培養液中加入0.1wt%的啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）以及0.05wt%的胚芽乳酸菌（Lactobacillus plantarum），並靜置培養三天以形成初發酵液。於此，啤酒酵母是採用寄存編號BCRC20271的啤酒酵母，胚芽乳酸菌採用寄存編號BCRC 910805的TCI028菌株。
接著，在初發酵液內加入5wt%的醋酸菌靜置發酵四天以形成植物發酵原液。於此，醋酸菌是採用寄存編號BCRC11688的醋酸菌。植物發酵原液的白利糖度小於4，且其酸鹼值（pH值）為4.5±0.5。
將植物發酵原液以孔徑400目數的篩網進行過濾，將過濾後的植物發酵原液於60℃下及150巴下進行減壓濃縮程序，添加相對於植物發酵原液60%的異麥芽寡糖後以得到植物發酵液。
例
2
：血管細胞粒線體活性測試
粒線體（mitochondrion）是細胞內的一種胞器，其主要合成三磷酸腺苷（ATP）以為細胞能量的來源，當細胞內粒線體充足時通常代表細胞較為年輕有彈性，並且代表細胞的代謝率高。再，由於血管遍佈全身，因此以靜脈內皮細胞做為實驗細胞株進行血管健康及提升代謝率的試驗，以延伸提升基礎代謝及降脂之效。
2.1 材料、儀器及溶液配置
實驗細胞：人臍靜脈內皮細胞（Human umbilical vein endothelial cell，簡稱HUVEC細胞，寄存編號為BCRC H-UV001）。
培養基：採用EC培養基（品牌Gibco型號M200）並添加10%的低血清生長補充劑（LSGS）。
緩衝液：磷酸鹽緩衝生理鹽水（Phosphate buffered saline，簡稱為PBS，品牌Gibco）。
檢測儀器：流式細胞儀（品牌BD Accuri）。
檢測試劑：MitoScreen JC-1套組（MitoScreen JC-1 KIT，品牌BD™），其包括JC-1染劑（BD™,MitoScreen）及JC-1粒線體染劑（mitochondrial dye）。
2.2. 測試流程
在六孔板中各孔分別加入2mL上述培養基並接種1x105
的HUVEC細胞，並將細胞分為三組（即空白組、對照組及實驗組）。其中，空白組不添加任何測試樣本。對照組添加的測試樣本為例1的製備過程中所形成的水浸提液。實驗組添加的測試樣本為例1的所製得的植物發酵原液。於此，對照組及實驗組的培養基內的測試樣本濃度為0.0625%(v/v)。
於添加側樣本後，各組在37℃下培養24小時。於24小時後，各組移除培養基後以1x緩衝液沖洗二次，加入胰蛋白酶後以400xg離心5分鐘，去除上清液後以1mL的1xPBS沖洗後並以400xg離心5分鐘，再加入100µL的JC-1染劑在避光狀態下染色15分鐘，以1mL的緩衝液沖洗後並以400xg離心5分鐘，再次以1mL的清洗緩衝液沖洗後並以400xg離心5分鐘，加入500µL添加有2%FBS的1x緩衝液以懸浮細胞，然後採用流式細胞儀量測細胞的粒線體的膜電位，以得到粒線體活性數據。為避免實驗操作誤差，各組以相同步驟操作二次，取其平均值。並且，各組之間的統計學顯著差異是藉由學生t-試驗來統計分析，如圖1所示。在圖1中，「***」代表在與空白組比較下其p值小於0.001，而「**」代表在與控制組比較下其p值小於0.01。
2.3. 測試結果
由圖1可見，分析換算之後得到空白組相對粒線體活性為46.2%，對照組相對粒線體活性為55.4%，實驗相對粒線體活性為71.3%。基此可知，在相同的培養條件下，HUVEC細胞經過山槴子及馬齒莧的水浸提液處理過後，相對於未經任何處理的HUVEC細胞，其細胞內粒線體的活性可以提升9.2%。
更進一步地，HUVEC細胞經過山槴子及馬齒莧的植物發酵液處理過後，相對於未經任何處理的HUVEC細胞，其細胞內粒線體的活性可以提升25.1%。
相對而言，HUVEC細胞經過山槴子及馬齒莧所製得的植物發酵液處理過後，相對於山槴子及馬齒莧所製得水浸提液處理的HUVEC細胞，其細胞內粒線體的活性可以提升15.9%。可知，發酵程序可以有效提升植物發酵液內的有效成分含量，使得粒線體活性更進一步的提升。
例
3
：血管平滑肌鈣化測試
本次測試使用β-甘油磷酸鹽（β-glycerophosphate，後續簡稱β-GP）模擬高磷血症的環境以誘導細胞產生鈣化現象，並觀察在不同濃度的β-GP下，植物發酵液是否能有效抑制鈣化的發生。
3-1. 材料及溶液配置
實驗細胞：人類主動脈平滑肌細胞（Human aortic/smooth muscle cells，簡稱VSMC細胞，採用寄存編號ATCC Cat. CRL1999的細胞株）
緩衝液：1x Dulbecco’s磷酸鹽緩衝生理鹽水，其為將採購自Gibco型號Cat.14200-75的1x DPBS用滅菌後的雙蒸水（ddH2
O）稀釋10倍。
1x胰蛋白酶：將採購自Gibco型號Cat.15400-054的10x胰蛋白酶稀釋用1xDPBS緩衝液稀釋10倍。
10莫耳濃度（M）磷酸酶抑製劑（β-glycerophosphate stock solution）：將2.1604g的β甘油磷酸鹽（β-glycerophosphate，β-GP，採購自Sigma，型號Cat. G9422）溶於1mL的1xDPBS緩衝液，達最終濃度為10M。
細胞培養液：將Dulbecco改良培養基（Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium，DMEM，購自Gibco，11965-092）添加額外成分使其含有10 vol% FBS（fetal bovine Serum，購自Gibco，10437-028）及1% 青黴素-鏈黴素（購自Gibco，Cat. 15140122）。
分化培養基：將10莫爾濃度磷酸酶抑製劑以細胞培養液進行稀釋，以分別形成含有0 mM、5 mM、10 mM及20 mM濃度β-GP的分化培養基。
10%的甲醛溶液：以滅菌後的雙蒸水將甲醛（formaldehyde，採購自景明，型號Cat.119690010）稀釋10倍。
茜素紅染劑：將0.2g的茜素紅（Alizarin red，採購自Sigma，型號Cat.G9422）溶於 10mL的雙蒸水，並且震盪均勻後備用。
3-2. 測試流程
首先進行細胞的初培育，在六孔板中各孔分別接種2x105
的HASMC細胞及2000µL細胞培養液，並在二氧化碳培養箱內培養24小時，並確認HASMC細胞貼附後再進行後續步驟。
接下來，依照下表1，將細胞分為八組並更換為實驗培基後在37℃下培養分化14天，其中每二天同樣依表1更換一次實驗培養基。其中四組的實驗培養基為不再添加測試樣本的分化培養基（即對照組），另外四組的實驗培養基為添加測試樣本的分化培養基，且其添加的測試樣本為例1的所製得的植物發酵原液（即實驗組）。於此，實驗組所添加的測試樣本濃度為0.25%(v/v)。
依照表1，實驗組及控制組再進一步依據β-GP的添加濃度分為第一對照組、第二對照組、第三對照組、及第四對照組，並且實驗組亦依據β-GP的添加濃度分為第一實驗組、第二實驗組、第三實驗組、及第四實驗組。
表1
| 測試組別 | 測試樣本 | β-GP濃度 |
| 第一對照組 | 無 | 0 mM |
| 第一實驗組 | 植物發酵液 | 0 mM |
| 第二對照組 | 無 | 5 mM |
| 第二實驗組 | 植物發酵液 | 5 mM |
| 第三對照組 | 無 | 10 mM |
| 第三實驗組 | 植物發酵液 | 10 mM |
| 第四對照組 | 無 | 20 mM |
| 第四實驗組 | 植物發酵液 | 20 mM |
於14天培養後，將各組的液體移除，然後以緩衝液沖洗一次。接下來，以10%的甲醛溶液固定HASMC細胞15分鐘。再次將各組的液體移除後，以雙蒸水沖洗一次。然後，加入茜素紅染劑進行染色5分鐘。再次將各組的液體移除後，以雙蒸水沖洗二次，並以顯微鏡觀察並拍照記錄如圖2所示。
3-3. 測試結果
請參閱圖2，第一對照組及第一實驗組中並未見明顯可視的鈣化區域，意即血管細胞都是健康正常的狀態。第二對照組中有局部小範圍可視的鈣化區域A，而第二實驗組中並未見明顯可視的鈣化區域，意即第二對照組已產生初步血管鈣化的病變前兆，而第二實驗組的血管細胞仍維持健康正常的狀態。
第三對照組中有局部大範圍可視的鈣化區域A，而第三實驗組中有局部小範圍可視的鈣化區域A，意即第三對照組已產生血管鈣化的病變，而第三實驗組的血管細胞僅是可見初步血管鈣化的病變前兆，並未產生病變。
第四對照組中有大範圍可視的鈣化區域A，可視的鈣化區域A幾乎佔據圖面的一半，意即第四對照組已產生血管鈣化的病變，而第四實驗組中仍維持有局部小範圍可視的鈣化區域A，意即第四對照組已產生嚴重的血管鈣化病變，而第四實驗組的血管細胞仍未產生病變。由此可知，植物發酵液對於動脈血管鈣化具有良好的抑制能力，即便在高濃度磷酸酶抑製劑所模擬的致病環境下，仍能有效維持血管細胞的健康狀態。也就是說，植物發酵液能有效維持血管的彈性，進行維持較佳的血液循環狀態，提升身體的新陳代謝。
例
4
：人體測試
4-1. 樣品製備
植物發酵液：採用例1所製備的植物發酵液。
4-2. 受試者：8位受試者（年齡介於40歲至65歲）。其中，各受試者在進行測試前至少具有收縮壓＞120mmHg 、舒張壓＞80 mmHg、及總膽固醇＞200 mg/dL其中一種症狀。意即，本次測試挑選中高年齡層，新陳代謝率較差，並且有高血脂相關症狀機率較高的受試者。
4-3. 測試項目：血液中總膽固醇含量、高密度脂蛋白含量、低密度脂蛋白含量、平均手指末稍溫度變化、體脂及身體質量指數（BMI）。其中，身體質量指數的計算方法是以體重（公斤）除以身高（公尺）的平方。
4-4. 測試方式：
令8位受試者每日飲用10mL植物發酵液，並連續飲用4周。於飲用前（即第0周，又稱對照組）及飲用4周後（即第4周，又稱為實驗組），分別抽取受試者的血液後，委託立人醫事檢驗所進行血液中總膽固醇含量、高密度脂蛋白含量及低密度脂蛋白含量的檢測，以攜帶型高精度紅外線熱顯像儀（Testo 875-1i(N)）分別量測受試者於飲用前、飲用後15分鐘及連續飲用4周後的雙手平均手指末稍溫度，並且以體脂計（廠牌：TANITA，產品：四肢與軀幹體組成計，型號BC-545F）測量此些受試者的體重及全身體脂率。其中，各組之間的統計學顯著差異是藉由學生t-試驗來統計分析。在如圖3到圖8中，「*」代表在與控制組比較下其p值小於0.05，即實驗組與對照組具有統計上的顯著差異。
4-5. 測試結果
請參閱圖3，經過四周的每日飲用植物發酵液後，8位受試者的平均膽固醇含量從225.8mg/dL（第0周）下降至214.9mg/dL（第4周），其平均總膽固醇的其前後差距達到4.8%。意即，每日飲用10mL植物發酵液可以有效降低總膽固醇。
請參閱圖4，經過四周的每日飲用植物發酵液後，8位受試者其血液中的平均高密度脂蛋白含量從56.5mg/dL（第0周）提升至60.2mg/dL（第4周），其前後差距達3.7mg/dL。意即，每日飲用10mL植物發酵液可以顯著增加血液中高密度脂蛋白。
請參閱圖5，經過四周的每日飲用植物發酵液後，8位受試者的平均低密度脂蛋白含量從154.9mg/dL（第0周）降低至140.9mg/dL（第4周），其前後差距達14mg/dL。意即，每日飲用10mL植物發酵液可以明顯降低血液中低密度脂蛋白濃度。
請參閱圖6，經過四周的每日飲用植物發酵液後，8位受試者的平均手指末稍溫度從31.7℃（第0周）提升至32.7℃（第4周），其前後差距達1.0℃。意即，每日飲用10mL植物發酵液可以明顯提升平均手指末稍溫度。
其中，有三位受試者本身在第0周時其平均手指末稍溫度就僅有23.6℃，也就是說，這三位受試者的末稍血液循環較其他受試者更差，而這三位受試者在飲用一次10mL的植物發酵液經過15分鐘之後，就感受到手指末稍溫度有提升，並經量測後此三位試者的平均手指末稍溫度提升到25.9℃。而這三位受試者中又有其中一位，其飲用植物發酵液前手指末稍溫度為28.2℃，而飲用植物發酵液後15分鐘後手指末稍溫度上升為31.0℃，其前後差距更高達到2.8℃。意即於飲用10mL植物發酵液15分鐘後即可明顯提升手指末稍溫度。
請參閱圖7，經過四周的每日飲用植物發酵液後，8位受試者的平均體脂從34.0%（第0周）降低至31.3%（第4周），即平均體脂下降2.7%。意即，飲用有植物發酵液10mL/日可以顯著降低體脂。
請參閱圖8，經過四周的每日飲用植物發酵液後，8位受試者的平均身體質量指數從28.1 kg/m2
（第0周）降低至27.4 kg/m2
（第4周），即平均身體質量指數下降0.7kg/m2
。意即，飲用有植物發酵液10mL/日可以明顯降低平均身體質量指數。
由此可知，長期使用植物發酵液可改善體脂、降低血脂、降低BMI指數、提升手指末稍溫度等，即植物發酵液具明顯的降脂及/或提升新陳代謝之功效。
綜上所述，根據任一實施例的植物發酵液，其可以降低膽固醇及低密度脂蛋白，並且增加高密度脂蛋白，進而降低血液中血脂肪含量來達成降脂的用途。根據任一實施例的植物發酵液，其可以大幅減少平滑肌細胞鈣離子沉積的產生，故而提升心肌收縮力量並且避免血管阻塞，進而造成代謝率的提升來達到降脂的用途。根據任一實施例的植物發酵液，其可以提升血管細胞粒線體活性，故而提升血管效能，進而提升代謝率來達到降脂的用途。根據任一實施例的植物發酵液，其提升肢體末稍溫度，進而提升代謝率來達到降脂的用途。並且，根據任一實施例的植物發酵液，在每日服用植物發酵液10mL的情況下即能有效達到降脂用途。
雖然本發明的技術內容已經以較佳實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神所作些許之更動與潤飾，皆應涵蓋於本發明的範疇內，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
A:可視的鈣化區域
圖1是血管細胞粒線體活性實驗結果圖。
圖2是平滑肌細胞鈣離子沉積狀態結果圖。
圖3是人體實驗血液中膽固醇含量結果圖。
圖4是人體實驗血液中高密度脂蛋白含量結果圖。
圖5是人體實驗血液中低密度脂蛋白含量結果圖。
圖6是人體實驗四週後平均手指末稍溫度結果圖。
圖7是人體實驗體脂變化結果圖。
圖8是人體實驗平均身體質量指數變化結果圖。
Claims (9)
- 一種植物發酵汁液的用途，其是用於製備降脂的組合物，其中該植物發酵汁液由一山槴子及馬齒莧的水浸提液經酵母菌及乳酸桿菌初發酵後，並以醋酸菌次發酵而製得。
- 如請求項1所述的用途，其中該植物發酵汁液用以降低膽固醇。
- 如請求項1所述的用途，其中該植物發酵汁液用以降低低密度脂蛋白。
- 如請求項1所述的用途，其中該植物發酵汁液用以增加高密度脂蛋白。
- 如請求項1所述的用途，其中該植物發酵汁液用以減少體脂。
- 如請求項1所述的用途，其中該植物發酵汁液用以降低平滑肌細胞鈣離子沉積。
- 如請求項1所述的用途，其中該植物發酵汁液用以提升血管細胞粒腺體活性。
- 如請求項1所述的用途，其中該植物發酵汁液用以提升肢體末稍溫度。
- 如請求項1到8其中任一項所述的用途，其中該植物發酵汁液的有效用量為10mL/day。
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