CN115669921A - 一种护肝保肾肉苁蓉酵素及其制备方法 - Google Patents
一种护肝保肾肉苁蓉酵素及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115669921A CN115669921A CN202210560483.5A CN202210560483A CN115669921A CN 115669921 A CN115669921 A CN 115669921A CN 202210560483 A CN202210560483 A CN 202210560483A CN 115669921 A CN115669921 A CN 115669921A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cistanche
- ferment
- enzyme
- fermentation
- kidney
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000005787 Cistanche Species 0.000 title claims abstract description 164
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 64
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 64
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 32
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 62
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 62
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims abstract description 45
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims abstract description 42
- 230000002633 protecting effect Effects 0.000 claims abstract description 41
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 claims abstract description 10
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 claims abstract description 10
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 claims abstract description 10
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 claims abstract description 10
- 241000191996 Pediococcus pentosaceus Species 0.000 claims abstract description 10
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 claims abstract description 10
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 229940001882 lactobacillus reuteri Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 61
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 44
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 23
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 22
- 241000336291 Cistanche deserticola Species 0.000 claims description 19
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 15
- 241000336315 Cistanche salsa Species 0.000 claims description 10
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 10
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 9
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 claims description 9
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 9
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 claims description 9
- 229940059442 hemicellulase Drugs 0.000 claims description 9
- 108010002430 hemicellulase Proteins 0.000 claims description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 7
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 claims description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 3
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- 238000004537 pulping Methods 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 2
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 27
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 27
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 description 16
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 description 7
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 6
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 5
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 4
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 4
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 4
- -1 polyphenol compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 210000004911 serous fluid Anatomy 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 3
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 235000019614 sour taste Nutrition 0.000 description 3
- 241001632080 Haloxylon Species 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002932 luster Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 2
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 2
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 244000271437 Bambusa arundinacea Species 0.000 description 1
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 241000871189 Chenopodiaceae Species 0.000 description 1
- 244000205754 Colocasia esculenta Species 0.000 description 1
- 235000006481 Colocasia esculenta Nutrition 0.000 description 1
- 240000007371 Cuscuta campestris Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 244000100897 Heracleum persicum Species 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 235000017784 Mespilus germanica Nutrition 0.000 description 1
- 244000182216 Mimusops elengi Species 0.000 description 1
- 235000000560 Mimusops elengi Nutrition 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000308150 Orobanchaceae Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 240000004371 Panax ginseng Species 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 235000010792 Phyllostachys aurea Nutrition 0.000 description 1
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000007837 Vangueria infausta Nutrition 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000021022 fresh fruits Nutrition 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000010565 inoculated fermentation Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000013178 mathematical model Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 229940026314 red yeast rice Drugs 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000021391 short chain fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000005211 surface analysis Methods 0.000 description 1
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种保肝护肾肉苁蓉酵素及其制备方法,以肉苁蓉为原料,通过对肉苁蓉进行萃取,按照比例肉苁蓉片混合进行酶解,酶解结束后接种以罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌制备混合菌发酵,最终获得一种保肝护肾肉苁蓉酵素,该酵素通过酶解和发酵结合,不需要与水果或中药材复合发酵来改善风味,且制备工艺简单易操作,同时改善了肉苁蓉的风味与口感,富含超氧化物歧化酶且具有保肝护肾、疏通肠道、抗衰老抗氧化等功效,不仅开阔了肉苁蓉精深加工的途径,而且增加了酵素的品种,具有较好的市场价值和巨大的市场潜力。
Description
技术领域
本发明属于食品加工酵素技术领域,具体涉及一种保肝护肾肉苁蓉酵素及其制备方法。
背景技术
植物酵素通常以一种或多种新鲜的水果、蔬菜、谷类、菌菇类或其他药食两用草本类为发酵原料,通过微生物发酵后而得到的,富含多种营养生物活性物质,如酶、多酚类化合物、矿物质、有机酸等的功能性产品。酵素是公认的纯天然保健产品,酵素中微生物在发酵过程中不仅可产生多种功效酶、氨基酸、短链脂肪酸、醇类、酯类等次级代谢产物,还可能将发酵原材料的某些成分转化成高活性物质。通过有益微生物发酵产生的酵素中,超氧化物歧化酶(SOD)活性增多,具有较好的抗氧化能力。我国的果蔬加工都以加工果蔬汁饮料为主,现在逐渐开发新类型的果蔬酵素饮品,但是,国内的植物酵素产品种类相对单一且质量参差不齐,对于复杂的发酵过程及加工工艺的研究不够深入,如有关肉苁蓉酵素的研究报道较少。
肉苁蓉又被称为金笋、地精、寸芸、疆芸,是列当科多年寄生草本植物肉苁蓉的干燥肉质茎,多生于藜科Chenopodiaceae梭梭属Haloxylon植物梭梭(盐木)H.ammodendron和白梭梭H.persicum的根部,具有很强的抗旱、抗寒、耐盐碱特性,是我国有名的一种中药材,具有“沙漠人参”的美称。肉苁蓉入药始载于《神农本草经》,南北朝时期,现代的药理学证明,它含有多种药用成分,具有抗肝损伤、抗肿瘤、抗病毒、降血糖、抗凝血、抗氧化及免疫调节等多种生物活性,具有极高的药用价值。目前关于肉苁蓉的研究多集中于其有效化学成分的提取药理作用及其相关产品的开发应用。在新药、保健品、食品和饮品等领域中的开发、应用比较欠缺。目前已开发出流通于市场的产品有苁蓉酒、苁蓉养生液、养肾液、苁蓉口服液、苁蓉茶、苁蓉胶囊、苁蓉片、苁蓉颗粒和肉苁蓉煎丸等药品、保健品。肉苁蓉也常作为食品、保健品出现在人们的饮食中,较为常见的有肉苁蓉粥、苁蓉麻子仁膏、肉苁蓉酒、肉苁蓉枸杞酒和苁蓉菟丝酒等。因此对肉苁蓉进行更深入细致的研究,开发其药用保健价值,增加肉苁蓉产品价值,是肉苁蓉生产和研究机构迎来的新的机遇。
关于肉苁蓉酵素目前研究较少,中国专利CN104784261A记载了一种肉苁蓉酵素及其制备工艺,其采用肉苁蓉与谷物、蔬菜、水果、坚果等为原料,采用厌氧菌种、好氧菌种或厌氧与好氧菌种兼用发酵获得,酵素应用于口服液、片剂、胶囊和茶包具有明显改善免疫力和记忆力的功能,另外还有中国专利CN110250507A报道的一种肉苁蓉酵素为了提高肉苁蓉的利用率也是将肉苁蓉与水果、中草药混合后采用萃取结合发酵工艺制备,获得的酵素SOD活性为1100-1300U/g。中国专利CN109601799A报道了一种肉苁蓉酵素饮品的制备方法,接种根霉菌、红曲米菌种后密封发酵3-6个月得到饮品。
虽然均对肉苁蓉酵素进行了报道,为了提高肉苁蓉的利用率,均采用肉苁蓉与其他水果或者中药材结合的主原料,但采用的菌种复杂,由于液体深层发酵技术的关键在于培养基,需要考虑不同食用菌要用不同的培养基进行培养,另外还需考虑发酵及环境条件等,发酵控制环节多且复杂,不易控制。同时发酵阶段需要分阶段进行,第一阶段为好氧阶段,需控制无菌空气通气量,第二阶段为厌氧阶段,需关闭通气并控制发酵温度,造成其制备工艺复杂,增加污染杂菌的可能性,发酵周期长,制备成本增加。且现有专利和文献未见有以肉苁蓉为原料发酵保肝护肾肉苁蓉酵素的报道。
发明内容
针对现有肉苁蓉酵素制备工艺多与水果或中药材为主原料萃取发酵获得造成制备工艺复杂,制备菌种筛选困难等问题,需要考虑不同菌种采用不同的培养基进行培养,另外还需考虑发酵及环境条件等,发酵控制环节多且复杂,不易控制的现实情况,且未见有专利和文献报道有关肉苁蓉直接发酵制备保肝护肾肉苁蓉酵素的技术现状。本发明旨在于提供一种保肝护肾肉苁蓉酵素及其制备方法,以肉苁蓉为原料,不含任何添加剂,采用微生物发酵法生产SOD,发酵条件易于控制,且发酵周期短。SOD活性从最初的401.26U/mL提高到了625.03U/mL,对羟自由基的清除率达到65.02%,对超氧阴离子的清除率达到85.98%,DPPH自由基清除率达到93.68%,并且发酵改善了肉苁蓉的风味,发酵过程中有机酸的大量产生使肉苁蓉酵素具有特有的酸味,整体酸甜可口,感官评分从84.10±1.14提高到94.00±0.77,具有极高的食用和保健价值。因此肉苁蓉酵素将有巨大的市场潜力,并在一定程度上扩大肉苁蓉的应用范围,使肉苁蓉这一宝贵资源有更可观的发展前景。
为了达到上述目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供一种具有护肝保肾功效的肉苁蓉酵素,该酵素的制备方法具体包括如下步骤:
(1)分别将购买得到的罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌的冻干粉在无菌操作台上倒入装有无菌MRS液体培养基的锥形瓶中,封口放置到37℃恒温培养箱中活化24h~48h得到菌悬液,用血球计数板在显微镜下计数,菌悬液的菌密度约为108CFU/mL,之后继续培养2-3代用于发酵,将制得的相应菌悬液存放于4℃冷藏柜中备用。
(2)将经过挑选的肉苁蓉切片称重后清洗,按照体积比肉苁蓉:水=1:7~10的比例加水,煎煮30min~60min,待冷却后打浆,得到肉苁蓉浆液。
(3)取步骤(2)所得肉苁蓉浆液,加入肉苁蓉切片重量的0.4%~0.8%的果胶酶、0.2%~0.4%的纤维素酶和0.2%~0.4%的半纤维素酶充分搅拌,于50~60℃条件下酶解2h~3.5h。酶解反应结束后测定肉苁蓉酶解液的可溶性固形物含量;调整肉苁蓉酶解液的糖度,使糖白利度为9~13°Bx。
(4)将步骤(3)所得肉苁蓉酶解液于80~100℃灭酶灭菌10~15min后,冷却至室温待用。
(5)将步骤(1)得到的菌悬液分别按照一定体积比接种量为2*106~5*106CFU/mL,接种至步骤(4)灭菌后的肉苁蓉酶解液中进行发酵,发酵温度为30~37℃,发酵时间为12~36h,发酵结束后测定SOD活性,SOD酶活力不低于486U/mL。
(6)将步骤(5)所得肉苁蓉发酵液于18~25℃低温过滤后,经100~121℃杀菌20~30min灌装封口包装,低温储藏,得肉苁蓉酵素成品。
本发明提供保肝护肾肉苁蓉酵素的制备中,所述菌悬液为罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌的菌悬液按照体积比30%~34%、14%~18%、15%~19%、10%~14%、12%~16%、7%~11%混合获得,该菌悬液的活菌数≥108CFU/mL。
本发明提供保肝护肾肉苁蓉酵素的制备中,所述菌种的培养时间为36h,培养温度为37℃。
本发明提供保肝护肾肉苁蓉酵素的制备中,所述肉苁蓉与煎煮水的体积比为1:8,煎煮时间为40min。
本发明提供保肝护肾肉苁蓉酵素的制备中,所述酶为果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶,酶的添加量分别为肉苁蓉切片重量的0.6%、0.3%和0.3%,酶解时间为3.0h,酶解温度为55℃。
本发明提供保肝护肾肉苁蓉酵素的制备中,所述发酵温度为32℃,发酵时间为24h。
本发明提供保肝护肾肉苁蓉酵素的制备中,所述灭菌灭酶温度为90℃,灭菌灭酶时间为12min。
本发明同时提供一种肉苁蓉酵素在保肝护肾中的应用。
通过以上技术方案,本发明取得如下技术效果:
(1)本发明制得的肉苁蓉酵素,功能性成分含量较高,同时采用微生物生产法生产超氧化物歧化酶,SOD为625.03U/mL,改善了肉苁蓉的风味与口感,生成有机酸和芳香物质,感官评分为94.00±0.77分。同时,对羟自由基的清除率达到65.02%,对超氧阴离子的清除率达到85.98%,DPPH自由基清除率达到93.68%,相比未接种发酵时都有显著的提高。因为氧化应激是由自由基在体内产生的一种负面作用,也被认为是导致衰老和疾病的一个重要因素,所以本发明制得的肉苁蓉酵素在一定程度上兼有养心通脉、保肝护肾、疏通肠道、抗衰老抗氧化、调节免疫等功效。
(2)本发明提供的肉苁蓉酵素不需要与水果或中药材复合发酵来改善风味,且制备工艺简单易操作,同时改善了肉苁蓉的风味与口感,富含超氧化物歧化酶且具有保肝护肾、疏通肠道、抗衰老抗氧化等功效,不仅开阔了肉苁蓉精深加工的途径,而且增加了酵素的新品种,具有新产品的典型性特点。
(3)本发明采用的罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌尽管都是通过公众渠道购买获得,如采用这六种菌种常见的培养基应用本发明实施,需考虑肉苁蓉酵素的发酵及环境条件等,发酵控制环节多且复杂,不易控制的现实情况,制备的肉苁蓉酵素不能很好体现本发明制备的肉苁蓉酵素SOD含量,以及制备的肉苁蓉酵素对羟自由基的清除率达、对超氧阴离子的清除率及DPPH自由基清除率都不如采用本发明提供的统一制备方法获得效果好。
附图说明
图1为本发明肉苁蓉酵素水煎时间和酶解时间对肉苁蓉酵素SOD活性的影响图。
图2为本发明肉苁蓉酵素水煎时间和发酵时间对肉苁蓉酵素SOD活性的影响图。
图3为本发明肉苁蓉酵素酶解时间和发酵时间对肉苁蓉酵素SOD活性的影响图。
图4为本发明肉苁蓉酵素水煎时间和酶解时间对肉苁蓉酵素感官评分的影响图。
图5为本发明肉苁蓉酵素水煎时间和发酵时间对肉苁蓉酵素感官评分的影响图。
图6为本发明肉苁蓉酵素酶解时间和发酵时间对肉苁蓉酵素感官评分的影响图。
图7为不同浓度的肉苁蓉酵素对细胞存活率的影响图。
图8为不同浓度肉苁蓉酵素对酒精损伤细胞存活率的影响图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的优选实施方式。虽然以下描述了本发明的优选实施方式,然而行业内人士应该理解,本发明并不应局限于这里所阐述的实施方式,而且在不偏离本发明的中心和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
本发明采用的罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌都可通过公众渠道购买获得。
实施例1:保肝护肾肉苁蓉酵素的制备
本实施例提供一种保肝护肾肉苁蓉酵素通过如下的制备方法获得:
(1)分别将购买得到的罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌的冻干粉在无菌操作台上倒入装有无菌MRS液体培养基的锥形瓶中,封口放置到37℃恒温培养箱中活化24h~48h得到菌悬液,用血球计数板在显微镜下计数,菌悬液的菌密度约为108CFU/mL,之后继续培养2-3代用于发酵,将制得的相应菌悬液存放于4℃冷藏柜中备用。
(2)将经过挑选的肉苁蓉切片称重后清洗,按照体积比肉苁蓉:水=1:7~10的比例加水,煎煮30min~60min,待冷却后打浆,得到肉苁蓉浆液。
(3)取步骤(2)所得肉苁蓉浆液,加入肉苁蓉切片重量的0.4%~0.8%的果胶酶、0.2%~0.4%的纤维素酶和0.2%~0.4%的半纤维素酶充分搅拌,于50~60℃条件下酶解2h~3.5h。酶解反应结束后测定肉苁蓉酶解液的可溶性固形物含量;调整肉苁蓉酶解液的糖度,使糖白利度为9~13°Brix度(°Bx)。
(4)将步骤(3)所得肉苁蓉酶解液于80~100℃灭酶灭菌10~15min后,冷却至室温待用。
(5)将步骤(1)得到的菌悬液分别按照一定体积比接种量为2*106~5*106CFU/mL,接种至步骤(4)灭菌后的肉苁蓉酶解液中进行发酵,发酵温度为30~37℃,发酵时间为12~36h,发酵结束后测定SOD活性,SOD酶活力不低于486U/mL。
(6)将步骤(5)所得肉苁蓉发酵液于18~25℃低温过滤后,经100~121℃灭菌20~30min灌装封口包装,低温储藏,得肉苁蓉酵素成品。
菌悬液为罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌的菌悬液按照体积比30%~34%、14%~18%、15%~19%、10%~14%、12%~16%、7%~11%混合获得,该菌悬液的活菌数≥108CFU/mL。
实施例2:保肝护肾肉苁蓉酵素的制备
本实施例在实施例1的基础上,提供一种保肝护肾肉苁蓉酵素的制备方法,其中,肉苁蓉与煎煮水的体积比为1:8,煎煮时间为40min;果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶,酶的添加量分别为肉苁蓉切片重量的0.6%、0.3%和0.3%,酶解时间为3.0h,酶解温度为55℃,发酵温度为32℃,发酵时间为24h。
实施例3:保肝护肾肉苁蓉酵素的制备
本实施例在实施例1的基础上,提供一种保肝护肾肉苁蓉酵素的制备方法,其中,肉苁蓉与煎煮水的体积比为1:7,煎煮时间为30min;果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶,酶的添加量分别为肉苁蓉切片重量的0.4%、0.2%和0.2%,酶解时间为2.0h,酶解温度为50℃,发酵温度为30℃,发酵时间为12h。
实施例4:保肝护肾肉苁蓉酵素的制备
本实施例在实施例1的基础上,提供一种保肝护肾肉苁蓉酵素的制备方法,其中,肉苁蓉与煎煮水的体积比为1:10,煎煮时间为60min;果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶,酶的添加量分别为肉苁蓉切片重量的0.8%、0.4%和0.4%,酶解时间为3.5h,酶解温度为60℃,发酵温度为37℃,发酵时间为36h。
实施例5:保肝护肾肉苁蓉酵素的制备
本实施例在实施例1的基础上,提供一种保肝护肾肉苁蓉酵素的制备方法,其中,肉苁蓉与煎煮水的体积比为1:9,煎煮时间为50min;果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶,酶的添加量分别为肉苁蓉切片重量的0.5%、0.3%和0.3%,酶解时间为3.0h,酶解温度为55℃,发酵温度为35℃,发酵时间为26h。
实施例6:保肝护肾肉苁蓉酵素制备的优化
本实施例在实施例1-5的基础上,对本发明提供的工艺参数进行面相应分析,主要考察煎煮时间(A)、酶解时间(B)、发酵时间(C)对保肝护肾肉苁蓉酵素SOD活性(R1)、感官评分(R2)的影响,并建立制备工艺参数各因素与保肝护肾肉苁蓉酵素的品质指标的数学模型,响应面试验因素与水平件附表1,Box-bohnkeb试验设计与结果参见附表2及附图1至附图6所示。
表1:响应面试验因素水平表
组成 | 单位 | 最小值 | 最大值 |
煎煮时间(A) | min | 30 | 50 |
酶解时间(B) | h | 2.5 | 3.5 |
发酵时间(C) | h | 12 | 36 |
表2:Box-bohnken实验设计结果
根据响应面数据分析,本发明保肝护肾肉苁蓉酵素的最佳工艺条件为:煎煮时间为40min,酶解时间为3.0h,发酵时间为24h,在此工艺条件下得到的保肝护肾肉苁蓉酵素SOD活性最高,且感官评分最高。在验证试验中,选择工艺条件为煎煮时间为40min,酶解时间为3.0h,发酵时间为24h,得到的保肝护肾肉苁蓉酵素的SOD活性为625.03U/mL,感官评分为94.68,实测值与预估值基本一致,工艺模型具有较好的效果。
实施例7:保肝护肾肉苁蓉酵素的应用
本实施例在实施例1-6的基础上,对本发明提供的保肝护肾肉苁蓉酵素的性能进行了测试对比,主要考察本发明提供的肉苁蓉酵素体外护肝活性及其感官评价。
1.肉苁蓉酵素的体外护肝活性
(1)肉苁蓉酵素样品对WRL68肝细胞的细胞毒性试验
将对数期的WRL68肝细胞接种于96孔板(1×105cells/mL,每孔100μL),培养24h后,空白组每孔加入100μLPBS缓冲液,对照组每孔加入100μL培养基,实验组加入含有不同浓度(10-250mL/L)的肉苁蓉酵素的培养基,继续培养12h和24h。每组6个复孔,MTT法测定细胞存活率,具体测试结果参见附图7所示。
由附图7数据可知,同浓度的酵素样品对细胞均无明显的毒性作用,相反,均对细胞有一定的增殖作用,10mL/L和20mL/Lmg/g的浓度下,对细胞的增殖作用不大,40mL/L-100mL/L浓度时,细胞存活率逐渐增大,在一定浓度下,酵素样品对细胞的增殖作用可达到1.6倍。
(2)肉苁蓉酵素对酒精损伤肝细胞的修复作用
实验分为空白组、对照组、模型组和实验组,每组设6个复孔。空白组每孔只加入100μL培养基,对照组和模型组加入100μL密度为1×105cells/孔的细胞悬液。放置在培养箱中培养24h。待细胞贴壁后,吸去培养基,用PBS缓冲液清洗一遍,对照组每孔加入100μL培养基,损伤组和实验组每孔加入100μL含400mmol/L乙醇的培养基,培养24h后,对照组和损伤组的细胞更换新鲜培养基,实验组加入含肉苁蓉酵素不同浓度的培养基。再培养24小时后,按MTT法测定细胞存活率,测试数据详见附图8所示。
由附图8数据可知,模型组成活率为58.82%。当样品浓度为50~150mL/L时,与模型组相比,肉苁蓉酵素能显著提高肝细胞存活率(P<0.01)。但细胞存活率不表现出浓度依赖性。而当肉苁蓉酵素浓度达到150mL/L时,WRL68细胞存活率从120.35%下降到108.86%。这是因为样品在一定浓度时有利于肝细胞存活,但当浓度高到足以影响细胞微环境时,细胞存活率受到抑制。综上所述,肉苁蓉酵素样品浓度在50~150mL/L时,与模型组比较有显著差异,对酒精损失的肝细胞有一定的修复作用,表明肉苁蓉酵素具有体外肝保护作用。
(3)肉苁蓉酵素对损伤细胞的修复作用的机制研究
将细胞以2×106个/mL的密度接种于6孔板培养24h,培养24小时,细胞贴壁后按照试验2的方法处理细胞。培养结束后,用0.05%的胰蛋白酶-EDTA收集细胞,并在冷的PBS中用超声波细胞破碎机破碎成匀浆。收集细胞裂解液的上清液,用相应的试剂盒测定蛋白含量、MDA、SOD和GSH-Px的细胞内活性,具体数据参见附表3所示。
由表3数据可知,与阴性对照组相比,模型对照组中的SOD和GSH-Px活力显著降低,而MDA的含量显著上升;相比模型对照组,细胞经50-150mL/L的酵素样品处理后,能提高SOD、GSH-PX活力和降低MDA的含量。当样品的浓度达到100mL/L时,SOD和GSH-PX活力从模型组的(8.45±1.11)U/mgprot、(21.82±1.34)U/mgprot分别增加到(16.17±0.42)U/mgprot和(22.62±0.79)U/mgprot,而MDA含量从模型组的(1.19±0.15)nmol/mgprot降低到(0.72±0.05)nmol/mgprot。上述结果表明,肉苁蓉酵素是通过增加SOD、GSH-PX活力和降低MDA含量来修复乙醇诱导细胞的损伤。
表3:肉苁蓉酵素对乙醇诱导WRL68细胞损伤后SOD、MDA和GSH-Px活力的影响
2.肉苁蓉酵素的感官评价试验
选取上述实施例1中的肉苁蓉酵素和未接菌发酵的肉苁蓉原液进行感官评价,方法参照文献并稍作修改。感官评价小组由经过训练的10名成员组成,从气味、滋味、色泽和组织状态四个方面对肉苁蓉原液和肉苁蓉酵素进行感官评价,总分100分,评分标准见表4。
表4:感官评价表
感官评价结果如表5所示,肉苁蓉酵素的总评分为94.00±0.77,肉苁蓉原液的总评分为84.10±1.14,两者的色泽都均匀一致且自然明亮,无杂质沉淀,状态均匀。经过混菌发酵后,肉苁蓉酵素发酵风味纯正,有浓郁的芳香气味,口感酸甜适中,味道柔和协调,明显优于肉苁蓉原液。
表5:感官评价结果
气味 | 酸甜度 | 色泽 | 组织状态 | 总分 | |
肉苁蓉原液 | 15.78±1.55 | 30.11±1.05 | 14.33±0.70 | 23.78±0.74 | 84.10±1.14 |
肉苁蓉酵素 | 18.80±1.03 | 36.70±1.06 | 14.50±0.71 | 24.00±0.82 | 94.00±0.77 |
综上数据分析可知,本发明以肉苁蓉为原料,不含任何添加剂,采用微生物发酵法生产SOD,发酵条件易于控制,且发酵周期短。SOD活性从最初的401.26U/mL提高到了625.03U/mL,并且发酵改善了肉苁蓉酵素的风味,发酵过程中产生大量有机酸使肉苁蓉酵素具有特有的酸味,整体酸甜可口,感官评分从84.10±1.14提高到94.00±0.77,具有极高的食用和保健价值。因此肉苁蓉酵素将有巨大的市场潜力,并在一定程度上扩大肉苁蓉的应用范围,使肉苁蓉这一宝贵资源有更可观的发展前景。
上述实施例采用的罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌尽管都是通过公众渠道购买获得,如采用这六种菌种常见的培养基应用本发明实施,需考虑肉苁蓉酵素的发酵及环境条件等,发酵控制环节多且复杂,不易控制的现实情况,制备的肉苁蓉酵素不能很好体现本发明制备的肉苁蓉酵素SOD含量,以及制备的肉苁蓉酵素对羟自由基的清除率达、对超氧阴离子的清除率及DPPH自由基清除率都不如采用本发明提供的统一制备方法获得效果好。
上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所延伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。
Claims (8)
1.一种具有护肝保肾功效的肉苁蓉酵素,其特征在于,该酵素的制备方法具体包括如下步骤:
(1)分别将罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌的菌种冻干粉在无菌操作台上倒入装有无菌MRS液体培养基的锥形瓶中,封口放置到37℃恒温培养箱中活化24h~48h得到菌悬液,用血球计数板在显微镜下计数,菌悬液的菌密度约为108CFU/mL,之后继续培养2-3代用于发酵,将制得的相应菌悬液存放于4℃冷藏柜中备用;
(2)将经过挑选的肉苁蓉切片称重后清洗,按照体积比肉苁蓉:水=1:7~10的比例加水,煎煮30min~60min,待冷却后打浆,得到肉苁蓉浆液;
(3)取步骤(2)所得肉苁蓉浆液,加入肉苁蓉切片重量的0.4%~0.8%的果胶酶、0.2%~0.4%的纤维素酶和0.2%~0.4%的半纤维素酶充分搅拌,于50~60℃条件下酶解2h~3.5h,酶解反应结束后测定肉苁蓉酶解液的可溶性固形物含量;调整肉苁蓉酶解液的糖度,使糖白利度为9~13°Bx;
(4)将步骤(3)所得肉苁蓉酶解液于80~100℃灭酶灭菌10~15min后,冷却至室温待用;
(5)将步骤(1)得到的菌悬液分别按照一定体积比接种量为2*106~5*106CFU/mL,接种至步骤(4)灭菌后的肉苁蓉酶解液中进行发酵,发酵温度为30~37℃,发酵时间为12~36h,发酵结束后测定SOD活性,SOD酶活力不低于486U/mL;
(6)将步骤(5)所得肉苁蓉发酵液于18~25℃低温过滤后,经100~121℃灭菌20~30min灌装封口包装,低温储藏,得肉苁蓉酵素成品。
2.如权利要求1所述的一种保肝护肾肉苁蓉酵素,其特征在于,所述菌悬液为罗伊氏乳杆菌、戊糖片球菌、嗜热链球菌、动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌的菌悬液按照体积比30%~34%、14%~18%、15%~19%、10%~14%、12%~16%、7%~11%混合获得,该菌悬液的活菌数≥108CFU/mL。
3.如权利要求1所述的一种保肝护肾肉苁蓉酵素,其特征在于,所述菌种的培养时间为36h,培养温度为37℃。
4.如权利要求1所述的一种保肝护肾肉苁蓉酵素,其特征在于,所述肉苁蓉与煎煮水的体积比为1:8,煎煮时间为40min。
5.如权利要求1所述的一种保肝护肾肉苁蓉酵素,其特征在于,所述酶为果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶,酶的添加量分别为肉苁蓉切片重量的0.6%、0.3%和0.3%,酶解时间为3.0h,酶解温度为55℃。
6.如权利要求1所述的一种保肝护肾肉苁蓉酵素,其特征在于,所述发酵温度为32℃,发酵时间为24h。
7.如权利要求1所述的一种保肝护肾肉苁蓉酵素,其特征在于,所述灭菌灭酶温度为90℃,灭菌灭酶时间为12min。
8.如权利要求1所述的一种肉苁蓉酵素在保肝护肾中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210560483.5A CN115669921A (zh) | 2022-05-20 | 2022-05-20 | 一种护肝保肾肉苁蓉酵素及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210560483.5A CN115669921A (zh) | 2022-05-20 | 2022-05-20 | 一种护肝保肾肉苁蓉酵素及其制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN115669921A true CN115669921A (zh) | 2023-02-03 |
Family
ID=85060374
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202210560483.5A Pending CN115669921A (zh) | 2022-05-20 | 2022-05-20 | 一种护肝保肾肉苁蓉酵素及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN115669921A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116870053A (zh) * | 2023-06-20 | 2023-10-13 | 山东第一医科大学附属省立医院(山东省立医院) | 一种改善性功能的药物及其制备方法 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104784261A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-07-22 | 孟令刚 | 肉苁蓉酵素及其制备工艺 |
CN104886254A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-09-09 | 孟令刚 | 一种含有肉苁蓉酵素的食品及其制备工艺 |
CN107397210A (zh) * | 2017-08-01 | 2017-11-28 | 张萌 | 缓解视力疲劳与体力疲劳的酵素及其制备方法 |
CN109463759A (zh) * | 2018-12-20 | 2019-03-15 | 周学义 | 一种肉苁蓉有效成分的提取及制品的生产方法 |
CN110250507A (zh) * | 2019-07-29 | 2019-09-20 | 晶叶(银川)生物科技有限公司 | 一种肉苁蓉酵素以及制备方法 |
CN113133954A (zh) * | 2020-01-20 | 2021-07-20 | 华熙生物科技股份有限公司 | 一种肉苁蓉发酵液及其制备方法和应用 |
-
2022
- 2022-05-20 CN CN202210560483.5A patent/CN115669921A/zh active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104784261A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-07-22 | 孟令刚 | 肉苁蓉酵素及其制备工艺 |
CN104886254A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-09-09 | 孟令刚 | 一种含有肉苁蓉酵素的食品及其制备工艺 |
CN107397210A (zh) * | 2017-08-01 | 2017-11-28 | 张萌 | 缓解视力疲劳与体力疲劳的酵素及其制备方法 |
CN109463759A (zh) * | 2018-12-20 | 2019-03-15 | 周学义 | 一种肉苁蓉有效成分的提取及制品的生产方法 |
CN110250507A (zh) * | 2019-07-29 | 2019-09-20 | 晶叶(银川)生物科技有限公司 | 一种肉苁蓉酵素以及制备方法 |
CN113133954A (zh) * | 2020-01-20 | 2021-07-20 | 华熙生物科技股份有限公司 | 一种肉苁蓉发酵液及其制备方法和应用 |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116870053A (zh) * | 2023-06-20 | 2023-10-13 | 山东第一医科大学附属省立医院(山东省立医院) | 一种改善性功能的药物及其制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109439489B (zh) | 一种火龙果果酒的制备方法 | |
CN104544086B (zh) | 一种可改善肠道菌群的保健食品及其制备方法 | |
CN110301565B (zh) | 一种发酵果蔬汁及其制备方法 | |
CN111165798A (zh) | 一种复合果蔬酵素的制备方法及复合果蔬酵素 | |
CN109554265A (zh) | 一种甜酒酿低醇饮料及其制备方法 | |
CN110250382A (zh) | 一种具有高抗氧化活性和高稳定性的发酵红枣汁的生产方法 | |
CN104862181A (zh) | 一种发酵型人工虫草山楂酒的制备方法 | |
CN106071524B (zh) | 一种具有营养保健作用的芦笋发酵饮品制备方法 | |
CN115669921A (zh) | 一种护肝保肾肉苁蓉酵素及其制备方法 | |
CN103005382B (zh) | 降胆固醇菌粉,含有该菌粉的降胆固醇复合调味酱及其应用 | |
CN110050922A (zh) | 一种制备天麻发酵饮品的方法 | |
CN112868963A (zh) | 一种人参酵素的制备方法与应用 | |
KR20110022280A (ko) | 유산균을 이용한 sac 고함량 마늘 발효물의 제조방법 | |
CN109247474B (zh) | 一株植物乳杆菌在制备乳酸菌玫瑰花发酵饮料中的应用 | |
CN116083312A (zh) | 一株高产β-葡萄糖苷酶的乳酸菌及其在发酵食品中的应用 | |
CN105661399A (zh) | 一种蓝莓复合粉及其制备方法 | |
CN108902601A (zh) | 一株荔枝内生乳酸菌及其发酵果汁饮料 | |
KR20160030754A (ko) | 유용미생물을 이용한 발효 커피 및 이의 제조 방법 | |
CN105176892B (zh) | 一株消化乳杆菌w369及其功能应用 | |
Ugale | Preparation of kombucha tea review on: Different kinds of microorganism’s used for development of the kombucha | |
CN110179031A (zh) | 酿酒酵母菌株以及起泡型苹果酵素饮料的生产方法 | |
CN115644332B (zh) | 一种刺梨薏仁米复合饮料及其制备方法 | |
CN109832620A (zh) | 一种紫苏发酵制品及其制备方法 | |
CN115044498B (zh) | 一株适于发酵红枣饮料的植物乳杆菌株及其应用 | |
CN111500642B (zh) | 一种蓝莓发酵产物及其制备方法和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |