若由式(I)涵蓋且如下所述之化合物尚不為鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物，則本發明之化合物為式(I)化合物及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物、由式(I)涵蓋且具有下文所提及之化學式之化合物及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物、及由式(I)涵蓋且下文如實施例引用之化合物及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 根據本發明之化合物同樣為式(I)化合物之
N
-氧化物及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 在本發明之情形中之較佳
鹽
為本發明化合物之生理學上可接受之鹽。亦涵蓋本身不適於醫藥應用，但可用於例如本發明化合物之分離、純化或儲存的鹽。 本發明化合物之適合醫藥學上可接受之鹽可為例如在鏈或環中攜帶足夠鹼性之氮原子的本發明化合物之酸加成鹽，諸如無機酸或「無機酸」的酸加成鹽，諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、胺基磺酸、二硫酸、磷酸或硝酸，或與有機酸之酸加成鹽，諸如甲酸、乙酸、乙醯乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水楊酸、2-(4-羥苯甲醯基)苯甲酸、樟腦酸、肉桂酸、環戊丙酸、二葡萄糖酸、3-羥基-2-萘甲酸、菸鹼酸、雙羥萘酸、果膠酯酸、3-苯基丙酸、特戊酸、2-羥基乙磺酸、衣康酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙烷磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、甲烷磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟腦磺酸、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、蘋果酸、己二酸、海藻酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、D-葡萄糖酸、杏仁酸、抗壞血酸、葡糖庚酸、甘油磷酸、天冬胺酸、磺基柳酸或硫氰酸。 此外，足夠酸性之本發明化合物的另一適合醫藥學上可接受之鹽為鹼金屬鹽，例如鈉或鉀鹽；鹼土金屬鹽，例如鈣、鎂或鍶鹽；或鋁或鋅鹽；或衍生自氨或具有1至20個碳原子的有機一級、二級或三級胺之銨鹽，該胺諸如乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二異丙胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二環己胺、二甲胺基乙醇、二乙胺基乙醇、參(羥甲基)胺基甲烷、普魯卡因(procaine)、二苯甲基胺、
N
-甲基嗎啉、精胺酸、離胺酸、1,2-乙二胺、
N
-甲基哌啶、
N
-甲基還原葡糖胺、
N,N
-二甲基還原葡糖胺、
N
-乙基還原葡糖胺、1,6-己二胺、葡糖胺、肌胺酸、絲胺醇、2-胺基-1,3-丙二醇、3-胺基-1,2-丙二醇、4-胺基-1,2,3-丁三醇；或與具有1至20個碳原子的四級銨離子之鹽，該銨離子諸如四甲銨、四乙銨、四(正丙基)銨、四(正丁基)銨、
N
-苯甲基-
N,N,N
-三甲銨、膽鹼或苯甲烴銨。 熟習此項技術者將進一步瞭解所請求之化合物的酸加成鹽可能藉由化合物與適當無機酸或有機酸經許多已知方法中之任一者反應來製備。或者，酸性的本發明化合物之鹼金屬鹽及鹼土金屬鹽藉由使本發明化合物與適當鹼經多種已知方法反應而製備。 本發明包括本發明化合物之所有可能鹽，其為單一鹽或任何比率之該等鹽之任何混合物形式。 在本發明正文中，特定言之在實驗部分中，對於本發明之中間物及實例之合成，當以與對應鹼或酸形成之鹽形式提及化合物時，如藉由各別製備及/或純化方法獲得之該鹽形式的精確化學計量組成在大多數情況下為未知的。除非另外規定，否則關於鹽之化學名稱或結構式之後綴(諸如「鹽酸鹽」、「三氟乙酸鹽」、「鈉鹽」或「x HCl」、「x CF
3
COOH」、「x Na
+
」)意謂鹽形式，不規定該鹽形式之化學計量。此類似地適用於合成中間物或實例化合物或其鹽已藉由所述之製備及/或純化方法以溶劑合物，例如水合物形式獲得之情形。 在本發明之情形中之
溶劑合物
描述為藉由與溶劑分子配位而形成固態或液態複合物之本發明化合物之彼等形式。水合物為溶劑合物之特殊形式，其中與水進行配位。在本發明之情形中，較佳溶劑合物為水合物。 本發明化合物可視其結構而以不同立體異構形式存在，亦即呈構型異構體形式或視情況呈構形異構體(對映異構體及/或非對映異構體，包括在滯轉異構體之情況下之異構體)。本發明因此涵蓋對映異構體及非對映異構體及其各別混合物。有可能用已知方式分離立體異構均質組分與對映異構體及/或非對映異構體之此類混合物。較佳採用針對此目的之層析法，尤其非對掌性或對掌性分離相上之HPLC層析法。在羧酸作為中間物或最終產物之情況下，亦或可能使用對掌性胺鹼經非對映異構鹽分離。 在本發明的情形中，術語「對映異構純」理解為所討論之化合物關於對掌性中心之絕對構型的作用以超過95%，較佳超過98%之對映異構過量存在。本文藉由使用下式評估對掌性相上的HPLC分析層析圖來計算對映異構過量ee：
。 若本發明化合物可以互變異構形式出現，則本發明涵蓋所有互變異構形式。 本發明亦涵蓋本發明化合物之所有適合同位素變異體。根據本發明之化合物的同位素變體在本文理解為意謂本發明化合物內至少一個原子已換成例如具有相同原子數，但原子質量與自然界中通常或主要存在之原子的原子質量不同之原子的化合物。表述「非自然分數」可理解為此類同位素之分數高於其自然頻率。可在「Isotopic Compositions of the Elements 1997」, Pure Appl. Chem., 70(1), 217-235, 1998中發現與此相關採用的同位素之自然頻率。可併入本發明化合物中之同位素之實例為氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴及碘之彼等同位素，諸如
2
H (氘)、
3
H (氚)、
13
C、
14
C、
15
N、
17
O、
18
O、
32
P、
33
P、
33
S、
34
S、
35
S、
36
S、
18
F、
36
Cl、
82
Br、
123
I、
124
I、
129
I及
131
I。由於相對容易製備及檢測，根據本發明之化合物之特定同位素變體(尤其為已併入一或多種放射性同位素之彼等變體)可例如對於檢驗作用機制或體內之活性成分分佈有益，用
3
H或
14
C同位素標記之化合物尤其適於此目的。此外，同位素(例如氘)之併入可由於化合物之較高代謝穩定性而引起特定治療性優勢，例如體內半衰期之延長或所需活性劑量之降低；因此，本發明化合物之此類改良亦可組成本發明之較佳實施例。關於本文中所指定病症之治療及/或預防，通式(I)化合物之同位素變體較佳含有氘(「含氘之通式(I)化合物」)。已併入有一或多種放射性同位素(諸如
3
H或
14
C)之通式(I)化合物之同位素變體例如有益於藥劑及/或受質組織分佈研究。因為容易併入及檢測，此等同位素尤其較佳。可向通式(I)化合物中併入正電子發射同位素，諸如
18
F或
11
C。通式(I)化合物之此等同位素變體適用於活體內成像應用。含有氘及含有
13
C之通式(I)化合物在臨床前或臨床研究範疇內可用於質譜分析中(H. J. Leis等人,
Curr. Org. Chem.
,
1998
,
2
, 131)。本發明化合物之同位素變體可藉由熟習此項技術者已知之常用方法製備，例如藉由下文進一步描述的方法及實施例中所述的程序、藉由使用相應試劑及/或起始化合物之對應同位素修飾。 通式(I)化合物之同位素變體通常可藉由本文所述之流程及/或實例中所述的熟習此項技術者已知之方法，藉由用一種試劑之同位素變體、較佳含氘試劑置換該試劑來製備。根據所要氘化部位，在一些情況下，可將來自D
2
O之氘直接併入化合物中或併入適用於合成此類化合物之試劑中(Esaki等人,
Tetrahedron
,
2006
,
62
, 10954；Esaki等人,
Chem. Eur. J.
,
2007
,
13
, 4052)。適於將氘併入分子中之另一試劑為氘氣體。併入氘之快速途徑為烯鍵(H. J. Leis等人,
Curr. Org. Chem.
,
1998
,
2
, 131；J. R. Morandi等人,
J. Org. Chem.
,
1969
,
34
(
6
), 1889)及炔鍵(N. H. Khan,
J. Am. Chem. Soc.
,
1952
,
74
(
12
), 3018；S. Chandrasekhar等人,
Tetrahedron
,
2011
,
52
, 3865)之催化氘化。可以在氘氣存在下，使用金屬催化劑(亦即Pd、Pt及Rh)直接將含官能基之烴中之氫更換為氘(J. G. Atkinson等人, 美國專利3966781)。各種氘化試劑及合成單元可購自各公司，如C/D/N Isotopes, Quebec, Canada；Cambridge Isotope Laboratories Inc., Andover, MA, USA；及CombiPhos Catalysts, Inc., Princeton, NJ, USA。關於氘-氫交換之目先前技術的進一步資訊存在於例如Hanzlik等人,
J. Org. Chem., 1990
,
55
, 3992-3997；R. P. Hanzlik等人,
Biochem. Biophys. Res. Commun., 1989
,
160
, 844；P. J. Reider等人,
J. Org. Chem., 1987
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52
, 3326-3334；M. Jarman等人,
Carcinogenesis
,
1993
,
16
(4), 683-688；J. Atzrodt等人,
Angew. Chem., Int. Ed. 2007
,
46
, 7744；K. Matoishi等人,
2000
,
J. Chem. Soc, Chem. Commun.
, 1519−1520；K. Kassahun等人, WO 2012/112363中。 術語「含有氘之通式(I)化合物」定義為一或多個氫原子已置換為一或多個氘原子且通式(I)化合物中每個氘化位置中的氘頻率高於約0.015%之天然氘頻率的通式(I)化合物。更特定言之，在含有氘之通式(I)化合物中，通式(I)化合物中之每個氘化位置中的氘頻率高於此位置或此等位置中之10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%或80%，較佳高於90%、95%、96%或97%，甚至更佳高於98%或99%。顯而易知，每個氘化位置中的氘頻率與其他氘化位置中的氘頻率無關。 將一或多個氘原子選擇性併入通式(I)化合物中可改變分子之物理化學特性(例如酸性[A. Streitwieser等人, J. Am. Chem. Soc., 1963, 85, 2759；C. L. Perrin等人, J. Am. Chem. Soc., 2007, 129, 4490]、鹼性[C. L. Perrin等人, J. Am. Chem. Soc., 2003, 125, 15008；C. L. Perrin in Advances in Physical Organic Chemistry, 44, 144；C. L. Perrin等人, J. Am. Chem. Soc., 2005, 127, 9641]、親脂性[B. Testa等人, Int. J. Pharm., 1984, 19(3), 271])及/或代謝型態且可導致母體化合物與代謝物之比率或所形成之代謝物之量改變。此類改變可導致特定治療益處且因此在特定環境下較佳。在代謝物比率改變之情況下，代謝速率及代謝轉換速率降低已有報導(D. J. Kushner等人, Can. J. Physiol. Pharmacol., 1999, 77, 79；A. E. Mutlib等人, Toxicol. Appl. Pharmacol., 2000, 169, 102)。暴露於親本化合物及代謝物時的此等變化可對含氘之通式(I)化合物之藥效學、耐受性及功效具有重要結果。在一些情況下，氘取代減少或消除不合需要或毒性代謝物之形成且增強所要代謝物之形成((例如奈韋拉平(Nevirapine)：A. M. Sharma等人, Chem. Res. Toxicol., 2013, 26, 410；Uetrecht等人, Chemical Research in Toxicology, 2008, 21, 9, 1862；依法韋侖(Efavirenz)：A. E. Mutlib等人, Toxicol. Appl. Pharmacol., 2000, 169, 102)。在其他情況下，氘化之主要作用為降低全身清除率。因此，化合物之生物半衰期增加。可能臨床益處將包括維持與降低之峰值含量及增加之谷值含量類似的全身暴露之能力。視特定化合物之藥物動力學/藥效學關係而定，此可減少副作用及增強功效。茚地普隆(Indiplon) (A. J. Morales等人, 摘要285, The 15
th
North American Meeting of the International Society of Xenobiotics, San Diego, CA, 2008年10月12-16日)、ML-337 (C. J. Wenthur等人 J. Med. Chem., 2013, 56, 5208)及奧當卡替(Odanacatib) (K. Kassahun等人, WO2012/112363)為此氘化作用之實例。已報導其他案例，其中降低之代謝速率導致藥物暴露增加但不改變全身清除速率(例如Rofecoxib: F. Schneider等人, Arzneim. Forsch. Drug. Res., 2006, 56, 295；Telaprevir: F. Maltais等人, J. Med. Chem., 2009, 52, 7993)。展示此作用之氘化藥物可具有降低之給藥要求(例如，用於實現所要作用之劑量數降低或劑量降低)及/或可產生較低之代謝物負載。 通式(I)化合物可具有多個潛在的代謝攻擊位點。為使上述對物理化學特性及代謝型態之影響最佳化，可選擇具有某種模式之一或多個氘-氫交換的含氘之通式(I)化合物。特定言之，含氘之通式(I)化合物之氘原子連接至碳原子及/或位於通式(I)化合物之彼等位置處，該等位置為用於代謝諸如細胞色素P
450
之酶的攻擊位點。 在本發明之上下文中，除非另外規定，否則取代基如下定義：
烷基本身及烷氧基、烷磺醯基、烷基胺基羰氧基及烷氧羰基中之 「 Alk 」 及 「 烷基 」
是一般具有1至6個且較佳1至4個或1至3個碳原子的直鏈或分支鏈烷基，例如且較佳為甲基、乙基、正丙基、異丙基、第三丁基、異丁基(2-甲基丙-1-基)、正戊基及正己基。
烷氧基
例如且較佳為甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、第三丁氧基、正戊氧基及正己氧基。
烷基胺基羰氧基
為具有一個或兩個(獨立選擇之)烷基取代基的烷基胺基羰氧基。(C
1
-C
3
)-烷基胺基羰氧基為例如各烷基取代基中具有1至3個碳原子之單烷基胺基羰氧基及各烷基取代基中具有1至3個碳原子的二烷基胺基羰氧基。較佳實例包括：甲基胺基羰氧基、乙基胺基羰氧基、正丙基胺基羰氧基、異丙基胺基羰氧基、第三丁基胺基羰氧基、正戊基胺基羰氧基、正己基胺基羰氧基、
N,N
-二甲基胺基羰氧基、
N,N
-二乙基胺基羰氧基、
N
-乙基-N-甲基胺基羰氧基、
N
-甲基-N-正丙基胺基羰氧基、
N
-異丙基-N-正丙基胺基羰氧基、
N
-第三丁基-N-甲基胺基羰氧基、
N
-乙基-N-正戊基胺基羰氧基及
N
-正己基-N-甲基胺基羰氧基。 在本發明之情形中
烷磺醯基
為具有1至4個碳原子之直鏈或分支鏈烷基且經磺醯基附接。較佳實例包括：甲基磺醯基、乙基磺醯基、正丙基磺醯基、異丙磺醯基、正丁基磺醯基及第三丁基磺醯基。 例如且較佳的，
烷氧羰基
為甲氧羰基、乙氧羰基、正丙氧羰基、異丙氧羰基及第三丁氧羰基。 在本發明之情形中
碳環
為總共具有3至6個環原子的單環、多環或螺環，較佳單環或雙環飽和碳環。單環飽和碳環同義地稱為環烷基。實例包括：環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環戊烯基、環己烯基、環己二烯基、環庚烯基、環庚二烯基、螺[2.3]己基、螺[2.4]庚基、螺[2.5]辛基、雙環[1.1.1]戊基、雙環[2.2.1]庚基、雙環[2.2.2]辛基、三環[3.3.1.13,7]癸基。具有3至5個碳原子的單環環烷基是較佳的。較佳實例包括：環丙基、環丁基、環戊基、雙環[2.2.1]庚基及雙環[1.1.1]戊-1-基。
雜環基
為一般具有3至10個環原子及至多3個，較佳至多2個來自由N、O、S、SO及SO
2
組成之群的雜原子及/或雜基團的單環、多環或螺環，較佳地單環、雙環或螺環非芳族雜環基。出於本發明之目的，定義雙環雜環涵蓋雙環螺環雜環基。雜環基可為飽和或部分不飽和的。較佳為具有一個氮原子之4至6員單環飽和雜環基及具有來自由N及O組成之群的另一雜原子之彼等，及亦具有一個氮原子之6至7員雙環或螺環飽和雜環基。較佳實例包括：氮雜環丁烷基、吡咯啶基、哌啶基、哌嗪基、噁唑啶基、咪唑啶基、嗎啉基、四氫嘧啶基、氮雜雙環[3.1.0]己基、氮雜螺[2.4]庚基及2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基。
鹵素
表示氟、氯、溴及碘，較佳為氟或氯。 在基團之化學式中，R
1
、R
2
、Ar
1
或L
1
可表示符號#1標示之線的終點；*、**及***不表示碳原子或CH
2
基團但為到分別附接R
1
、R
2
、Ar
1
及L
1
之各別原子之鍵的部分。 除非另外規定，否則當本發明化合物中之基團經取代時，基團可經單取代或多取代。在本發明之情形中，所有出現超過一次之基團彼此獨立地定義。除非另外規定，否則當本發明化合物中之基團經取代時，基團可經單取代或多取代。經一個取代基或兩個相同或不同取代基取代為較佳的。 在本發明之上下文中，術語「治療」包括抑制、延遲、檢查、緩解、減弱、限制、減少、抑止、排斥或治癒疾病、病況、病症、損傷或健康問題，或該等病狀及/或該等病狀之症狀之發展、時程或進展。術語「療法」在此處理解為與術語「治療」同義。 在本發明之情形下，術語「預防」、「防治」及「防止」同義地使用且係指避免或減少感染、經歷、罹患或患有疾病、病況、病症、損傷或健康問題或此類病狀及/或此類病狀之症狀之發展或進展之風險。 疾病、病況、病症、損傷或健康問題之治療或預防可為部分或完全的。 在本發明之情形下較佳為式(I)化合物，其中 其中 X 表示氟、氯或溴， R
1
表示氫， 或 表示NR
4
R
5
， 其中 R
4
表示氫、甲基或乙基，以及 R
5
表示經氟至多四取代之(C
1
-C
3
)-烷基， 其中(C
1
-C
3
)-烷基可經羥基取代， 或 R
4
及R
5
與其所附接之氮原子一起形成飽和4至6員單環或6至9員雙環雜環，其可另外含有一個或兩個來自由N及O組成之群的相同或不同雜原子作為環成員， 其中該4至6員單環及該6至9員雙環雜環可各自經1至4個彼此獨立地選自由以下各項組成之群的取代基取代：(C
1
-C
4
)-烷基、二氟甲基、三氟甲基、羥基、側氧基、(C
1
-C
3
)-烷氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、(C
1
-C
3
)-烷氧羰基、(C
1
-C
3
)-烷基胺基羰氧基以及-OC(=O)R
15
，及另外經氟至多四取代， 其中(C
1
-C
4
)-烷基可經來自由羥基及(C
1
-C
3
)-烷氧基組成之群的相同或不同取代基單取代或二取代，及經氟至多四取代，且其中 R
15
表示(C
1
-C
4
)-烷基， R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
6A
表示氫或(C
1
-C
4
)-烷基， R
6B
表示甲基、乙基、異丙基、環丙基、單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，及 R
7
表示經氟至多五取代之(C
1
-C
4
)-烷基、經氟至多四取代之(C
3
-C
5
)-環烷基、甲氧基甲基或三氟甲氧基甲基， L
1
表示一鍵或式-CR
8A
R
8B
-之基團， 其中 R
8A
表示氫， R
8B
表示氫、甲基、三氟甲基、五氟乙基或三氟甲氧基甲基， Ar
2
表示苯基， 其中苯基可經來自由氟及氯組成之群的相同或不同取代基單取代至三取代， 或 表示5至7員雙環碳環或含有一個氮原子作為環成員的5或6員單環雜環， 其中該5至7員雙環碳環或該5或6員單環雜環可在各情況下經(C
1
-C
4
)-烷氧羰基取代且另外經氟至多四取代， Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， R
3A
表示氟、氯、三氟甲基或甲基， R
3B
表示氫或氟 以及 R
3C
表示氫、氟、氯或甲基， 或 表示經環碳原子附接之吡啶環， 其中該吡啶環可經氟、氯或氰基單取代或二取代， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 在本發明之情形中尤其較佳為式(I)化合物 其中 X 表示氟、氯或溴， R
1
表示NR
4
R
5
， 其中 R
4
表示甲基或乙基，及 R
5
表示甲基、2-羥乙基或2-羥丙基， 或 表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， R
10
表示氟、甲基、羥基、羥基甲基、甲氧羰基或乙醯氧基， p 表示數字0、1或2， 其中在取代基R
10
出現超過一次的情形中，其在各情況中之含義可相同或不同， Y
1
表示-NH-、-N(CH
3
)-或-O-， R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
6A
表示氫、甲基或乙基， R
6B
表示甲基、乙基、三氟甲基、異丙基或環丙基，及 R
7
表示甲基、乙基、二氟甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、五氟乙基、異丙基、異丁基、甲氧基甲基、三氟甲氧基甲基或環丙基， R
11
表示氫， R
12
表示甲氧羰基， R
13
表示氫或第三丁氧基羰基， L
1
表示一鍵或式-CR
8A
R
8B
-之基團， 其中 R
8A
表示氫， R
8B
表示氫、甲基或三氟甲基， Ar
2
表示苯基， 其中苯基可經來自由氟及氯組成之群的相同或不同取代基單取代至二取代， Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， R
3A
表示氟或氯， 及 R
3C
表示氫或氟， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 在本發明之情形下尤其極佳為式(I)化合物 其中 X 表示氟， R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， R
2
表示下式之基團
， 其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
7A
表示三氟甲基、乙基或環丙基， R
7B
表示甲基或乙基， R
7C
表示三氟甲基或五氟乙基， Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 在本發明之情形下尤其極佳為式(I)化合物 其中 X 表示氟， R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 X 表示氟， R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， R
10
表示氟、甲基、羥基、羥基甲基、甲氧羰基或乙醯氧基， p 表示數字0、1或2， 其中在取代基R
10
出現超過一次的情形中，其在各情況中之含義可相同或不同， R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明亦提供通式(I)化合物
， 其中 X 表示鹵素， R
1
表示氫 或 表示-NR
4
R
5
， 其中 R
4
表示氫、甲基、(C
2
-C
4
)-烷基或(C
3
-C
6
)-環烷基， 其中(C
2
-C
4
)-烷基可經羥基取代或經氟取代至多三次， 及 R
5
表示(C
1
-C
6
)-烷基、(C
3
-C
6
)-環烷基、3至6員飽和雜環基或(C
1
-C
4
)-烷基磺醯基， 其中(C
1
-C
6
)-烷基、(C
3
-C
6
)-環烷基及3至6員飽和雜環基可經來自由以下各項組成之群的相同或不同取代基取代至多三次：甲基、二氟甲基、三氟甲基、羥基、羥基羰基、側氧基、甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、氰基及另外經氟至多取代四次， 或 R
4
及R
5
與其所附接之氮原子一起形成飽和或部分不飽和3至6員單環或6至10員雙環雜環，其可另外含有一個或兩個來自由N、O、S、SO及/或SO
2
組成之群的相同或不同雜原子作為環成員， 其中3至6員單環及6至10員雙環雜環可各自經1至5個彼此獨立地選自由以下各項組成之群的取代基取代：(C
1
-C
4
)-烷基、二氟甲基、三氟甲基、羥基、羥基羰基、側氧基、(C
1
-C
3
)-烷氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、氰基、(C
1
-C
3
)-烷氧羰基、胺基羰基、單-(C
1
-C
3
)-烷基胺基羰氧基、-NHC(=O)R
14A
、-CH
2
NHC(=O)R
14B
、-OC(=O)R
15
及另外經氟至多四取代， 其中(C
1
-C
4
)-烷基可經來自由羥基及(C
1
-C
3
)-烷氧基組成之群的相同或不同取代基單取代或二取代，及經氟至多四取代， R
14A
及R
14B
彼此獨立地表示(C
1
-C
3
)-烷基或環丙基， 且其中 R
15
表示(C
1
-C
4
)-烷基， R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
6A
表示氫、甲基、乙基、正丙基、異丙基、第三丁基、異丁基、(2-甲基-丙-1-基)或環丙基， R
6B
表示氫、甲基、乙基、正丙基、異丙基、第三丁基、異丁基、(2-甲基-丙-1-基)、環丙基、單氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或三氟甲氧基甲基， R
7
表示(C
1
-C
6
)-烷基或(C
3
-C
5
)-環烷基，其經氟至多四取代， 其中(C
1
-C
6
)-烷基可經胺基、羥基、(C
1
-C
6
)-烷氧基取代及經氟至多五取代， 其中(C
1
-C
6
)-烷氧基可經氟至多五取代 L
1
表示一鍵或式-C(R
8A
R
8B
)-(C(R
9A
R
9B
))
m
-之基團， 其中 m 表示0或1， R
8A
表示氫或甲基， R
8B
表示氫、甲基、三氟甲基、五氟乙基或三氟甲氧基甲基， R
9A
及R
9B
彼此獨立地表示氫或甲基， Ar
2
表示苯基， 其中苯基可經來自由以下各項組成之群的相同或不同取代基單取代至三取代：氟、氯、(C
1
-C
3
)-烷基、二氟甲氧基甲基、三氟甲氧基甲基及/或三氟甲基， 或 表示可另外含有一個或兩個來自由N及/或S組成之群的相同或不同雜原子作為環成員的5至10員單環、雙環或三環碳環或雜環， 其中該5至10員單環、雙環或三環碳環或雜環可經來自由以下各項組成之群的相同或不同取代基至多三取代：(C
1
-C
3
)-烷基、三氟甲基、(C
1
-C
4
)-烷氧羰基及另外經氟至多四取代， Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， R
3A
表示氟、氯、三氟甲基或甲基， R
3B
表示氫或氟 以及 R
3C
表示氫、氟、氯或甲基， 或 表示經環碳原子附接之吡啶環， 其中該吡啶環可經氟、氯、氰基、甲基或三氟甲基單取代或二取代， 及其
N
-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物及鹽之溶劑合物。 在本發明之情形中較佳為式(I)化合物， 其中 X 表示氟， R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 在本發明之情形中較佳為式(I)化合物， 其中 X 表示氟， R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 X 表示氟或氯， 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 X 表示氟， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 X 表示氯， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 X 表示溴， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
1
表示NR
4
R
5
， 其中 R
4
表示甲基或乙基，及 R
5
表示甲基、2-羥乙基或2-羥丙基， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， R
10
表示氟、甲基、羥基、羥基甲基、甲氧羰基或乙醯氧基， p 表示數字0、1或2， 其中在取代基R
10
出現超過一次的情形中，其在各情況中之含義可相同或不同， Y
1
表示-NH-、-N(CH
3
)-或-O-， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
1
表示下式之反-(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
1
表示下式之順-(R,S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
1
表示經氮原子附接之下式之雜環
其中 ** 標記與分子其餘部分之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
6A
表示氫、甲基或乙基， R
6B
表示甲基、乙基、三氟甲基、異丙基或環丙基，及 R
7
表示甲基、乙基、二氟甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、五氟乙基、異丙基、異丁基、甲氧基甲基、三氟甲氧基甲基或環丙基， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
6A
表示氫、甲基或乙基， R
6B
表示甲基、乙基、三氟甲基、異丙基、第三丁基或環丙基，及 R
7
表示甲基、乙基、二氟甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、五氟乙基、異丙基、異丁基、甲氧基甲基、三氟甲氧基甲基或環丙基， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， L
1
表示一鍵或式-CR
8A
R
8B
-之基團， 其中 R
8A
表示氫， R
8B
表示氫、甲基或三氟甲基， Ar
2
表示下式之基團
其中 #
1
標記與分子其餘部分之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
, 其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
7A
表示三氟甲基、乙基或環丙基， R
7B
表示甲基或乙基， R
7C
表示三氟甲基或五氟乙基， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
7A
表示三氟甲基、乙基或環丙基， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
7B
表示甲基或乙基， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， R
7C
表示三氟甲基或五氟乙基， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之(2
S
)-1,1,1-三氟丁-2-基
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示下式之基團
其中 * 標記與醯胺部分之氮原子的連接點， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示3,3,4,4,4-五氟丁-2-基， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示1,1,1,2,2-五氟戊-3-基， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 R
2
表示1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基， 及其鹽、溶劑合物及鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 本發明之另一具體實施例涵蓋式(I)化合物，其中 Ar
1
表示下式之基團
其中 *** 標記連至氮原子之連接點， 及其N-氧化物、鹽、溶劑合物、該等N-氧化物之鹽及該等N-氧化物或鹽之溶劑合物。 基團之各別組合或較佳組合中規定之個別基團定義獨立於規定基團之各別組合亦按需要經其他組合之基團定義置換。 尤其極佳為上述較佳範圍及實施例中之兩者或更多者的組合。 規定為較佳，尤其較佳及尤其極佳之基團定義適用於式(I)化合物且相應地適用於全部中間物。 本發明另外提供一種用於製備根據本發明之式(I)化合物之方法，其特徵在於 [A] 式(II-A)化合物
其中X、R
2
及Ar
1
具有上文給出之含義， 及 Hal 表示氟、氯、溴或碘，較佳為氯， 與式(III)化合物
其中R
1
具有上文給出之含義且其中R
1
不表示氫， 反應獲得根據本發明之式(I-A)甲醯胺
其中X、R
1
、R
2
及Ar
1
具有上文給出之含義且其中R
1
不表示氫， 或 [B] 式(IV)化合物
其中X、R
1
及Ar
1
具有上文給出之含義， 與式(V)化合物
其中R
2
具有上文給出之含義， 反應獲得根據本發明之式(I)甲醯胺
其中X、R
1
、R
2
及Ar
1
具有上文給出之含義， 且適當時，因此獲得之式(I)化合物分離成其對映異構體及/或非對映異構體及/或用適當(i)溶劑及/或(ii)鹼或酸轉化成其溶劑合物、鹽及/或該等鹽之溶劑合物。 反應(II-A) + (III) → (I-A)可經親核取代反應進行或經過渡金屬介導之偶合反應進行。 親核取代反應較佳在鹼存在下進行。方法步驟(II-A) + (III) → (I-A)之適合鹼為慣用無機或有機鹼。此等較佳包括鹼金屬氫氧化物，例如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀；鹼金屬或鹼土金屬碳酸鹽，諸如碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸銫；鹼金屬醇鹽，諸如第三丁醇鋰、第三丁醇鈉或第三丁醇鉀；鹼金屬氫化物，諸如氫化鈉或氫化鉀；或有機胺，諸如
N,N
-二異丙基乙胺(DIPEA)、1,5-二氮雜雙環[4.3.0]壬-5-烯(DBN)及1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯(DBU)。較佳使用
N,N
-二異丙基乙胺(DIPEA)。反應一般在0℃至+100℃，較佳為+23℃至+80℃溫度範圍內進行。 用於方法步驟(II-A) + (III) → (I-A)之惰性溶劑例如為醚，諸如乙醚、二噁烷、四氫呋喃、二醇二甲醚或二乙二醇二甲醚；烴，諸如苯、甲苯、二甲苯、己烷、環己烷或礦物油餾份；鹵代烴，諸如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯或氯苯；或其他溶劑，諸如丙酮、乙酸乙酯、乙腈、吡啶、二甲亞碸、
N,N
-二甲基甲醯胺(DMF)、
N,N
'-二甲基丙烯基脲(DMPU)或
N
-甲基吡咯啶酮(NMP)。同樣可使用上述溶劑之混合物。較佳使用二甲基甲醯胺(DMF)或
N
-甲基吡咯啶酮(NMP)。 在一個較佳實施例中，用於方法步驟(II-A) + (III) → (I-A)之過渡金屬介導之偶合反應係在鈀催化劑存在下進行。適合鈀催化劑為例如乙酸鈀(II)、氯化鈀(II)、氯化雙(三苯膦)鈀(II)、氯化雙(乙腈)鈀(II)、肆(三苯膦)鈀(0)、雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)、參(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)或氯化[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]鈀(II)，視情況與適合膦配位體組合，例如三苯膦、三-第三丁基膦、2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯(X-Phos)、2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基聯苯(S-Phos)、1,2,3,4,5-稠五苯基-1'-(二第三丁基膦基)二茂鐵(Q-Phos)、4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(Xantphos)、2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯萘(BINAP)、2-二環己基膦基-2'-(
N,N
-二甲基胺基)聯苯或2-二-第三丁基膦基-2'-(
N,N
-二甲基胺基)聯苯。 鈀催化之偶合反應(II-A) + (III) → (I-A)一般在鹼存在下進行。適合鹼尤其為鹼金屬碳酸鹽，諸如碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸銫；鹼金屬磷酸鹽，諸如磷酸鈉或磷酸鉀；鹼金屬氟化物，諸如氟化鉀或氟化銫；或鹼金屬第三丁醇鹽，諸如第三丁醇鈉或第三丁醇鉀。反應在+80℃至+200℃，較佳+80℃至+150℃之溫度範圍內在例如甲苯、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、1,4-二噁烷、二甲亞碸(DMSO)、
N,N
-二甲基甲醯胺(DMF)、
N,N
-二甲基乙醯胺(DMA)或其混合物之惰性溶劑中進行，其中藉助於微波設備加熱可能適宜。 對於此偶合反應，較佳使用由乙酸鈀(II)、4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(Xantphos)及碳酸銫或碳酸鉀組成之催化劑/配位體/鹼系統，以及作為溶劑之1,4-二噁烷。 在另一較佳實施例中，偶合反應(II-A) + (III) → (I-A)亦可藉助於諸如銅(I)氧化物、溴化物或碘化物之銅(I)催化劑，在諸如反-
N,N'
-二甲基-1,2-環己二胺、8-羥基喹啉或1,10-啡啉之銅配位體及諸如碳酸鉀、碳酸銫或雙(四乙銨)碳酸鹽之無機或有機碳酸鹽鹼存在下進行。用於此反應之適合惰性溶劑特定言之為甲苯、二甲苯、1,4-二噁烷、乙腈、二甲亞碸(DMSO)、
N,N
-二甲基甲醯胺(DMF)或其混合物，視情況添加水。較佳使用由二甲基甲醯胺中的碘化銅(I)、反-
N,N
'-二甲基-1,2-環己二胺及碳酸鉀組成之系統。反應一般在+50℃至+200℃，較佳為+60℃至+150℃溫度範圍內進行。 偶合反應(IV) + (V) → (I) [醯胺形成]可藉助於縮合劑或活化劑藉由直接途徑或經可獲自(IV)之羰基氯、羧酸酯或羰基咪唑鎓的中間階段實現。 適用作縮合劑或活化劑者為例如碳二醯亞胺，諸如
N,N'
-二乙基-、
N,N'
-二丙基-、
N,N'
-二異丙基-、
N,N'
-二環己基碳化二亞胺(DCC)或N-(3-二甲胺基丙基)-
N'
-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)；光氣衍生物，諸如
N,N'
-羰基二咪唑(CDI)、氯甲酸異丙酯或氯甲酸異丁酯；1,2-噁唑鎓化合物，諸如2-乙基-5-苯基-1,2-噁唑鎓3-硫酸鹽或2-第三丁基-5-甲基異噁唑鎓過氯酸鹽；醯胺基化合物，諸如2-乙氧基-1-乙氧羰基-1,2-二氫喹啉；α-氯苯那敏，諸如1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺；1,3,5-三嗪衍生物，諸如4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎福啉鎓氯化物；磷化合物，諸如正丙烷膦酸酐(T3P，PPACA)、氰基膦酸二乙酯、疊氮磷酸二苯酯(DPPA)、雙(2-側氧基-3-噁唑啶基)磷醯氯、六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基參(二甲胺基)鏻或六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基參(N-吡咯啶基)鏻(PyBOP)；或
化合物，諸如四氟硼酸O-(苯并三唑-1-基)-
N,N,N',N'
-四甲基
(TBTU)、六氟磷酸O-(苯并三唑-1-基)-
N,N,N',N'
-四甲基
(HBTU)、四氟硼酸O-(1H-6-氯苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基
(TCTU)、六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-
N,N,N',N'
-四甲基
(HATU)或四氟硼酸2-(2-側氧基-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基
(TPTU)，視情況與另一助劑組合，諸如1-羥基苯并三唑(HOBt)或
N
-羥基丁二醯亞胺(HOSu)，及亦如鹼金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉或碳酸鉀，或三級胺鹼，諸如三乙胺、
N
-甲基嗎啉(NMM)、
N
-甲基哌啶(NMP)、
N,N
-二異丙基乙胺(DIPEA)、吡啶或4-
N,N
-二甲胺基吡啶(DMAP)。較佳使用之縮合劑或活化劑為六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-
N,N,N',N'
-四甲基
(HATU)與
N,N
-二異丙基乙胺(DIPEA)之組合，及亦正丙烷膦酸酐(T3P，PPACA)與
N,N
-二異丙基乙胺(DIPEA)之組合。 式(II-A)化合物可藉由使式(VI-A)之羧酸化合物
其中X、Hal及Ar
1
具有上文給出之含義， 與式(V)化合物
其中R
2
具有上文給出之含義， 反應獲得根據本發明之式(II-A)甲醯胺來製備
其中X、Hal、R
2
及Ar
1
具有上文給出之含義。 式(I-B)化合物可以類似於反應(VI-A) + (V) → (II-A)藉由使式(VI-B)之羧酸化合物
其中X及Ar
1
具有上文給出之含義， 與式(V)化合物
其中R
2
具有上文給出之含義， 反應獲得根據本發明之式(I-B)甲醯胺來製備
其中X、R
2
及Ar
1
具有上文給出之含義。 偶合反應(VI-A) + (V) → (II-A)或(VI-B) + (V) → (I-B) [醯胺形成]可藉助於縮合劑或活化劑藉由直接途徑或經可獲自(VI)之羰基氯、羧酸酯或羰基咪唑鎓的中間階段，類似於已針對反應(IV) + (V) → (I)所述之條件及試劑實現。若HATU在偶合反應中用作活化劑獲得(II-A)，則獲得通式(II-A)之個別定義之產物或與「HATU加合物」之混合物。在本文之情形中「HATU加合物」係指類鹵化物化合物，其中通式(II-A)中之Hal取代基置換為3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇基團，亦稱為1-羥基-7-氮雜苯并三唑。通式(II-A)之鹵素化合物與「HATU加合物」之此類混合物亦可類似於所述反應用作進一步反應(在(I)或(VIII)之後)之反應物。 在經可獲自(VI)之羰基氯或羰基咪唑之二階段反應方案之情形中，在慣用鹼，例如碳酸鈉或碳酸鉀、三乙胺、DIPEA、
N
-甲基嗎啉(NMM)、
N
-甲基哌啶(NMP)、吡啶、2,6-二甲基吡啶、4-
N,N
-二甲胺基吡啶(DMAP)、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯(DBU)、1,5-二氮雜雙環[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、甲醇鈉或甲醇鉀、乙醇鈉或乙醇鉀、第三丁醇鈉或第三丁醇鉀，或氫化鈉或氫化鉀存在下與胺組分(V)偶合。 羰基咪唑本身可藉由(VI)與N,N'-羰基二咪唑(CDI)在高溫(+60℃至+150℃)下，在諸如N,N-二甲基甲醯胺(DMF)之對應地相對高沸點溶劑中反應之已知方法獲得。以慣用方式，藉由在諸如二氯甲烷或THF之惰性溶劑中用亞硫醯二氯或乙二醯氯處理(VI)來製備羰基氯。 用於所提及之偶合反應的惰性溶劑根據所用方法為例如醚，諸如乙醚、二異丙基醚、甲基第三丁基醚、四氫呋喃、1,4-二噁烷、1,2-二甲氧基乙烷或雙(2-甲氧基乙基)醚；烴，諸如苯、甲苯、二甲苯、戊烷、己烷或環己烷；鹵代烴，諸如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯或氯苯；或極性非質子溶劑，諸如丙酮、甲基乙基酮、乙酸乙酯、乙腈、丁腈、吡啶、二甲亞碸(DMSO)、
N,N
-二甲基甲醯胺(DMF)、
N,N'
-二甲基丙烯脲(DMPU)或
N
-甲基吡咯啶酮(NMP)。亦可使用此類溶劑之混合物。較佳使用
N,N
-二甲基甲醯胺(DMF)及二氯甲烷(DCM)與三乙胺之組合。偶合一般在0℃至+130℃，較佳+20℃至+30℃溫度範圍內進行。 視其各別取代模式而定，式(IV-A)化合物可藉由以下方式製備 [C] 式(VII-A)化合物
其中X、Hal及Ar
1
具有上文給出之含義， 及 T 表示(C
1
-C
4
)-烷基或苯甲基 在第一步驟中與式(III)化合物
其中R
1
具有上文給出之含義且其中R
1
不表示氫， 反應獲得式(VIII-A)化合物
其中X、T、R
1
及Ar
1
具有上文給出之含義且其中R
1
不表示氫， 及視情況在第二步驟中，移除酯基T獲得根據本發明之式(IV-A)之羧酸
其中X、R
1
及Ar
1
具有上文給出之含義且其中R
1
不表示氫， 或 [D] 式(VI-A)化合物
其中X、Hal及Ar
1
具有上文給出之含義， 與式(III)化合物反應，
其中R
1
具有上文給出之含義且其中R
1
不表示氫， 獲得根據本發明之式(IV-A)之羧酸
其中X、R
1
及Ar
1
具有上文給出之含義且其中R
1
不表示氫。 反應(VII-A) + (III) → (VIII-A) [途徑C]或反應(VI-A) + (III) → (IV-A) [途徑D]可經類似於針對反應(II-A) + (III) → (I-A)所述之條件及試劑的親核取代反應或過渡金屬介導之偶合反應進行。 在一個較佳實施例中，反應根據途徑C，以在鹼(較佳使用
N,N
-二異丙基乙胺(DIPEA))存在下之親核取代反應形式進行。較佳使用二甲基甲醯胺(DMF)、
N
-甲基吡咯啶酮(NMP)或乙腈作為溶劑。 在一個較佳實施例中，反應根據途徑D以在適合鈀催化劑存在下的過渡金屬介導之偶合反應形式進行。較佳使用乙酸鈀(II)系統與4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(xantphos)、碳酸銫或碳酸鉀及1,4-二噁烷作為溶劑之組合。 藉由慣用方法，藉由用酸或鹼處理惰性溶劑中之酯，藉由隨後用酸處理將後一變體中最初形成之羧酸的鹽轉化成游離羧酸，進行方法步驟(VIII-A) → (IV-A)中之酯基T移除。在第三丁酯之情形中，酯裂解較佳使用酸實現。苯甲酯亦或可藉由在適合催化劑(例如鈀/活性碳)存在下氫化裂解(氫解)。 用於此等反應之適合溶劑為水及慣用於酯裂解之有機溶劑。此等尤其包括醇，諸如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或第三丁醇，醚，諸如乙醚、四氫呋喃、1,4-二噁烷或1,2-二甲氧基乙烷，或其他溶劑，諸如二氯甲烷、乙腈、
N,N
-二甲基甲醯胺或二甲亞碸。同等地可使用此等溶劑之混合物。在鹼性酯水解之情形中，較佳使用水與四氫呋喃之混合物。 用於水解反應之適合鹼為慣用無機鹼。此等尤其包括鹼金屬或鹼土金屬氫氧化物，例如氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋇，或鹼金屬或鹼土金屬碳酸鹽，諸如碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸鈣。 適於酯水解之酸一般為硫酸、氯化氫/鹽酸、溴化氫/氫溴酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸或三氟甲烷磺酸，或其混合物，視情況添加水。較佳使用水/四氫呋喃混合物中之鹽酸水溶液(18%)。 酯裂解通常在-20℃至+100℃，較佳23℃至+120℃之溫度範圍內進行。 視特定取代模式而定，式(VI-A)化合物及式(VIII-A)化合物可類似於已知方法(參見例如EP 0607825 A1，第25頁-第26頁)，使式(IX-A)之2,6-二氯菸鹼醯基丙烯酸酯衍生物
其中X、Hal及T具有上文給出之含義， 及 Y 表示離去基團，諸如二甲胺基、甲氧基或乙氧基，及 在第一階段，較佳在適合鹼存在下，與式(X)之胺基吡啶化合物反應
其中Ar
1
具有上文給出之含義 接著在第二步驟中，使其在適合鹼存在下反應獲得式(VII-A)酯化合物
其中X、Hal、Ar
1
及T具有上文給出之定義， 接著視情況在另一步驟中將酯化合物(VII)在水解條件下轉化成羧酸化合物(VI-A)
其中X、Hal及Ar
1
具有上文給出之含義， 在文獻中已知的反應條件下製備。 式(VI-B)化合物及式(VII-B)化合物可類似於反應(IX-A) + (X) → (VII-A) → (VI-A)，藉由類似於已知方法(參見例如EP 0607825 A1，第25頁-第26頁)，使式(IX)之2,6-二氯菸鹼醯胺丙烯酸酯衍生物
其中X及T具有上文給出之定義 及 Y 表示離去基團，諸如二甲胺基、甲氧基或乙氧基，及 在第一階段，較佳在適合鹼存在下，與式(X)之胺基吡啶化合物反應
其中Ar
1
具有上文給出之含義， 接著在第二步驟中，使其在適合鹼存在下反應獲得式(VII-B)酯化合物
其中X、Ar
1
及T具有上文給出之含義， 接著視情況在另一步驟中將酯化合物(VII)在水解條件下轉化成羧酸化合物(VI-B)
其中X及Ar
1
具有上文給出之含義， 在文獻中已知的反應條件下製備。 式(IX)化合物自文獻(參見例如EP 0607825 A1)已知或可類似於自文獻已知之方法製備。式(III)、(V)及(X)化合物市場有售或原樣描述於文獻中，或其可以熟習此項技術者顯而易知的方式，類似於文獻中公佈之方法製備。製備各別起始物質之許多具體方法及文獻資料亦可見於與製備起始化合物及中間物有關的章節中的實驗部分中。 可藉由熟習此項技術者熟悉的慣用方法分離本發明之式(I)化合物的立體異構體(對映異構體及/或非對映異構體)。較佳使用針對此目的之非對掌性或對掌性分離相上的層析方法。將本發明化合物分離成相應對映異構體及/或非對映異構體適當時亦可在中間物(II)、(IV)或(VIII)之初期進行，其接著根據上文所述之反應程序以分離形式進一步反應。對於中間物之立體異構體的此類分離，同樣較佳採用非對掌性或對掌性分離相上之層析方法。或者，亦可經式(IV)之羧酸的非對映異構鹽與對掌性胺鹼實現分離。 本發明化合物之製備可例如藉由以下反應流程說明：
流程 1 [a)：原甲酸三乙酯、乙酸酐；b)：DIPEA、DCM，接著K
2
CO
3
；c)：18%濃度之鹽酸、THF、水]。
流程 2 [a)：HATU、DIPEA、DMF或T3P、DIPEA、EtOAc；b)：Pd(OAc)
2
、xantphos、K
2
CO
3
、1,4-二噁烷；c)：DIPEA、DMF；d)：(COCl)
2
、催化劑DMF、THF；e)：NaH、DMF或三乙胺、DCM]。
流程 3 [a)：DIPEA、DMF；b)：LiOH水溶液、THF或18%濃度之鹽酸、THF、水；c)：HATU、DIPEA、DMF、RT]。
流程 4 [a)：Pd(OAc)
2
、xantphos、K
2
CO
3
、1,4-二噁烷；b) HATU、DIPEA、DMF；c) DIPEA、DMF；d) HATU、DIPEA、DMF]。
流程 5 [a)：原甲酸三乙酯、乙酸酐；b)：DIPEA、DCM，接著K
2
CO
3
；c)：LiOH水溶液、THF或18%濃度之鹽酸、THF、水；d)：HATU、DIPEA、DMF或T3P溶液、DIPEA、MeCN；e)：DIPEA、DMF；f)：NBS、催化劑AIBN、MeCN]。 其他本發明式(I)化合物適當時亦可藉由自藉由上述方法獲得之其他式(I)化合物或其前驅體開始，轉換個別基團或取代基之官能基(尤其在R
1
及R
2
下列出者)來製備。此等轉換藉由熟習此項技術者熟悉的慣用方法進行，且包括例如反應，如親核或親電子取代反應、過渡金屬介導之偶合反應、金屬有機基團(例如格林納化合物或鋰有機基團)之製備及加成反應、氧化及還原反應、氫化、鹵化(例如氟化、溴化)、脫鹵、胺化、烷基化及醯化、形成羧酸酯、甲醯胺及磺醯胺、酯裂解及水解，以及引入及移除暫時性保護基。 在另一態樣中，本發明係關於通式(II)之中間物
其中X、R
2
及Ar
1
具有上文針對式(I)化合物給出之含義 及 Hal 表示氟、氯、溴或碘，較佳為氯。 在另一態樣中，本發明係關於通式(IV)之中間物
其中X、R
1
及Ar
1
具有上文針對式(I)化合物給出之含義。 在另一態樣中，本發明係關於通式(II)化合物
其中X、R
2
及Ar
1
具有上文針對式(I)化合物給出之含義 及 Hal 表示氟、氯、溴或碘，較佳為氯。 或 通式(IV)化合物
其中X、R
1
及Ar
1
具有上文針對式(I)化合物給出之含義， 之用途，其用於製備如上文所定義之通式(I)化合物。 本發明化合物具有藥理學及藥物動力學活性的不可預見的適用範圍。 其因此適於用作用以治療及/或預防人類及動物中之疾病的藥劑。本發明化合物具有有價值的藥理學特性且可用於治療及/或預防人類及動物之病症。 本發明化合物為蕈毒鹼M2受體之正向別構調節劑且因此適於治療及/或預防病症及病理學過程，尤其心血管病症及/或腎病症，其中M2受體牽涉於自主神經系統調節異常或自主神經系統之交感部分活性與副交感部分活性之間的不平衡中。 本發明提供蕈毒鹼M2受體之正向別構調節劑。別構調節劑具有相較於習知正構配位體的獨特差異。當別構調節劑穩定高濃度之促效劑的結合時，其作用是自我限制的。此外，別構調節劑之作用可僅在內源性配位體存在下呈現。別構調節劑本身對受體活化不具有直接影響。此導致別構作用在空間及時間方面之特異性。別構及正構配位體在親和力及固有活性方面之相互影響(稱為協同性)由兩種配位體決定。在正向別構調節劑情況下，正構配位體之作用提高(正協同性)。因為別構配位體在正構配位體存在下調節受體構形之能力，其可引起藥理效應的微調。 在本發明之情形下，心血管系統之病症或心血管病症理解為意謂例如以下病症：急性及慢性心臟衰竭、動脈高血壓、冠心病、穩定型及不穩定型心絞痛、心肌缺血、心肌梗塞、休克、動脈粥樣硬化、心肥大、心臟纖維化、房性及室性心律不整、心動過速、一過性缺血發作、中風、子癇前症、發炎性心血管病症、周圍及心臟血管病症、周圍灌注異常、肺動脈高血壓、冠狀動脈及周圍動脈痙攣、血栓形成、血栓栓塞病症、水腫形成，例如肺水腫、大腦水腫、腎水腫或心臟衰竭相關之水腫，及再狹窄，諸如血栓溶解治療、經皮血管腔內血管成形術(PTA)、冠狀動脈腔內血管成形術(PTCA)、心臟移植及繞道手術之後，及微血管及大血管損傷(脈管炎)、再灌注損傷、動脈及靜脈血栓形成、微白蛋白尿、心肌功能障礙、內皮細胞功能不良、周圍及心臟血管病症、周圍灌注病症、心臟衰竭相關之水腫、血纖維蛋白原及低密度LDL含量升高以及纖維蛋白溶酶原活化因子/抑制因子1 (PAI 1)濃度升高。 在本發明之情形中，術語「心臟衰竭」亦包括更特定或相關類型之疾病，諸如急性失代償性心臟衰竭、右側心臟衰竭、左側心臟衰竭、全心衰竭、缺血性心肌病變、擴張型心肌病變、先天性心臟缺陷、心臟瓣膜缺損、與心臟瓣膜缺損有關之心臟衰竭、二尖瓣狹窄、二尖瓣功能障礙、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣膜關閉不全、三尖瓣狹窄、三尖瓣功能障礙、肺動脈瓣狹窄、肺動脈瓣關閉不全、合併之心臟瓣膜缺損、心肌發炎(心肌炎)、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病性心臟衰竭、酒精性心肌病變、心臟儲積症、射血分數保留的心力衰竭(HFpEF)、舒張性心臟衰竭及射血分數降低之心臟衰竭(HfrEF)、收縮性心臟衰竭。 在本發明之情形中，術語房性及室性心律不整亦包括更特定或相關類型之疾病，諸如：房顫、突發性房顫、持續性房顫(intermittierent atrial fibrillation)、永久性房顫、心房撲動、竇性心律不整、竇性心動過速、被動異位、主動異位、逸搏心臟收縮、期外收縮、衝動傳導異常、病態竇房結症候群、頸動脈竇過敏、心動過速、房室結折返性心動過速、房室折返性心動過速、WPW症候群(沃夫-帕金森-懷特(Wolff-Parkinson-White))、Mahaim心動過速、隱藏的附加傳導路徑、持續性交接區折返性心動過速、局灶性房性心動過速、異位性交界區心動過速、心房折返性心動過速、室性心動過速、心室撲動、室顫、心因性猝死。 在本發明之情形中，術語冠心病亦涵蓋更特定或相關類型之疾病，諸如：缺血性心臟病、穩定型心絞痛、急性冠狀動脈症候群、不穩定型心絞痛、NSTEMI (非ST段抬高心肌梗塞)、STEMI (ST段抬高心肌梗塞)、缺血性心肌損傷、心律功能障礙及心肌梗塞。 根據本發明之化合物進一步適於預防及/或治療多囊性腎病(PCKD)及不當ADH分泌症候群(SIADH)。 本發明化合物亦適於治療及/或預防腎病症，特定言之急性及慢性腎機能不全以及急性及慢性腎衰竭。 在本發明之情形中，術語「急性腎機能不全」涵蓋需要及不需要透析之腎病、腎衰竭及/或腎機能不全之急性表現，及亦潛在或相關腎病症，諸如腎臟低灌流、透析中低血壓、體積缺乏(例如脫水、失血)、休克、急性絲球體腎炎、溶血-尿毒症症候群(HUS)、血管崩塌(動脈或靜脈血栓形成或栓塞)、膽固醇栓塞、漿細胞瘤情形中之急性本-周氏腎病、急性囊泡上或囊泡下流出障礙，免疫腎病症，諸如腎移植排斥、免疫複合物誘發之腎病症、腎小管擴張、可藉由需要透析表徵之高磷酸鹽血症及/或急性腎病症，包括在部分切除腎臟之情形中，利尿引起之脫水、伴隨惡性高血壓之不可控血壓升高、尿道堵塞及感染及澱粉樣變性，及腎小球因素之全身性病症，諸如風濕-免疫全身病症，例如紅斑狼瘡、腎動脈血栓形成、腎靜脈血栓形成、止痛藥腎病變及腎小管酸中毒，及x射線造影劑及藥劑誘發之急性間質性腎病症。 在本發明之情形中，術語「慢性腎機能不全」涵蓋需要及不需要透析之腎病、腎衰竭及/或腎機能不全之慢性表現，及亦潛在或相關腎病症，諸如腎臟低灌流、透析中低血壓、阻塞性尿路病變、腎小球病變、腎小球及腎小管蛋白尿、腎水腫、血尿、原發性、繼發性及慢性腎小球腎炎、膜性及膜增生性腎小球腎炎、奧爾波特症候群(Alport syndrome)、腎小球硬化症、腎小管間質性病症、腎病(nephropathic disorder)，諸如原發性及先天性腎病、腎炎，免疫性腎病症，諸如腎臟移植排斥、免疫複合物誘發之腎病症、糖尿病性及非糖尿病性腎病變、腎盂腎炎、腎囊腫、腎硬化症、高血壓性腎硬化症及腎病症候群，其診斷特徵可為例如異常減少之肌酐及/或水分泌、異常升高之脲、氮、鉀及/或肌酐血液濃度、腎酶(例如麩胺醯基合成酶)活性改變、尿液滲透壓或尿量改變、升高之微量白蛋白尿、大量白蛋白尿、腎小球及小動脈損傷、腎小管擴張、高磷酸鹽血症及/或需要透析，及亦對於腎細胞癌，部分切除腎臟之後由利尿引起之脫水、伴隨惡性高血壓之不可控血壓升高、尿道堵塞及感染及澱粉樣變性，及腎小球因素之全身性病症，諸如風濕-免疫全身病症，例如紅斑狼瘡，及腎動脈狹窄、腎動脈血栓形成、腎靜脈血栓形成、止痛藥腎病變及腎小管酸中毒。另外，X射線造影劑及藥劑誘發之慢性間質性腎病症、代謝症候群及血脂異常。本發明亦涵蓋根據本發明之化合物的用途，其用於治療及/或預防腎機能不全後遺症，例如肺水腫、心臟衰竭、尿毒症、貧血、電解質紊亂(例如高鉀血症、低鈉血症)以及骨骼及碳水化合物代謝中的異常。 另外，根據本發明之化合物亦適於治療及/或預防肺動脈高血壓(PAH)及其他形式之肺高血壓(PH)、慢性阻塞性肺病(COPD)、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、急性肺損傷(ALI)、α-1-抗胰蛋白酶缺乏(AATD)、肺纖維化、肺氣腫(例如香菸煙霧引起之肺氣腫)、囊性纖維化(CF)、急性冠狀動脈症候群(ACS)、心肌發炎(心肌炎)及其他自體免疫心臟病症(心包炎、心內膜炎、瓣膜炎、主動脈炎、心肌病變)、心源性休克、動脈瘤、敗血症(SIRS)、多重器官衰竭(MODS、MOF)、腎臟發炎病症、慢性腸道病症(IBD、克羅恩氏病(Crohn's Disease)、UC)、胰臟炎、腹膜炎、類風濕性病症、發炎性皮膚病及發炎性眼病。 根據本發明之化合物亦可用於治療及/或預防具有間歇性或持續性特徵的不同嚴重程度之哮喘病症(頑固性哮喘、支氣管哮喘、過敏性哮喘、內源性哮喘、外源性哮喘、藥劑或粉塵誘發之哮喘)、各種形式之支氣管炎(慢性支氣管炎、傳染性支氣管炎、嗜酸粒細胞性支氣管炎)、閉塞性毛細支氣管炎、支氣管擴張、肺炎、特發性間質性肺炎、農夫肺(farmer's lung)及相關疾病、咳嗽及感冒(慢性發炎性咳嗽、醫原性咳嗽)、鼻黏膜發炎(包括藥劑相關之鼻炎、血管舒縮性鼻炎及季節性過敏性鼻炎，例如枯草熱)以及瘜肉。 本發明所述之化合物亦為用於控制中樞神經系統病症之活性化合物，其特徵為干擾NO/cGMP系統。特定言之，其適於improving perception, concentration, learning or memory after 認知障礙(如尤其與情境/疾病/症候群聯合發生者，諸如輕度認知障礙、年齡相關之學習及記憶障礙、血管性癡呆、顱腦外傷、中風、中風後發生之癡呆(中風後癡呆)、創傷後顱腦外傷、一般注意力障礙、有學習及記憶問題之兒童的注意力障礙、阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、路易體性癡呆(Lewy body dementia)、伴有額葉退化之癡呆，包括皮氏症候群(Pick's syndrome)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、進行性核麻痹、伴有皮質基底核退化之癡呆、肌萎縮性側索硬化(amyolateral sclerosis，ALS)、亨廷頓氏病(Huntington's disease)、脫髓鞘、多發性硬化症、丘腦退化、庫賈氏癡呆(Creutzfeld-Jacob dementia)、HIV癡呆、伴有癡呆之精神分裂症或柯薩可夫精神病(Korsakoff's psychosis)之後改善感知、注意力、學習或記憶。其亦適於治療及/或預防中樞神經系統病症，諸如焦慮狀態、緊張及抑鬱、躁鬱症、CNS相關之性功能障礙及睡眠紊亂，以及適於食物、刺激劑及成癮物質攝入的控制性病理學干擾。 此外，根據本發明之化合物亦適於治療及預防泌尿病症，諸如：尿失禁，特定言之壓力性尿失禁、急迫性尿失禁、反射性尿失禁及充溢性尿失禁、逼尿肌活動過度、神經性逼尿肌活動過度、特發性逼尿肌活動過度、良性前列腺增生(BPH症候群)、下尿路症狀(LUTS)。 根據本發明之化合物另外適於治療及/或預防胃腸病症，諸如食管病症、嘔吐、弛緩不能、胃食管反流疾病；胃病症，諸如胃炎；腸道病症，諸如腹瀉、便秘、同化不良症候群、膽汁酸缺乏症候群、克羅恩氏病(Crohn's disease)、潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis)、顯微鏡下結腸炎及大腸急躁症。 根據本發明之化合物另外適於治療及/或預防疼痛狀態，諸如月經失調、痛經、子宮內膜異位、早產、保胎。 因為其生物化學及藥理學特性之特徵，根據本發明之化合物亦尤其適於治療及/或預防心臟衰竭、冠心病、房性及室性心律不整、腎衰竭及腎病變。 本發明化合物另外可用於治療及/或預防原發性及繼發性雷諾氏現象(Raynaud's phenomenon)、微循環障礙、跛行、周圍及自主神經病變、糖尿病性神經病變、糖尿病性微血管病變、糖尿病性視網膜病變、糖尿病性肢體潰瘍、壞疽、CREST症候群、紅斑、甲真菌病、風濕病以及用於促進傷口癒合。 本發明化合物另外適於治療及/或預防眼科病症，例如青光眼、年齡相關之黃斑變性(AMD)、乾性(非滲出性) AMD、濕性(滲出性、新生血管性) AMD、脈絡膜新生血管(CNV)、糖尿病性視網膜病變、視網膜色素上皮(RPE)萎縮性改變、視網膜色素上皮肥大改變、黃斑水腫、糖尿病性黃斑水腫、視網膜靜脈栓塞、脈絡膜視網膜靜脈栓塞、視網膜靜脈栓塞引起之黃斑水腫、眼睛前部血管生成，例如在例如角膜炎、角膜移植或角膜成形術之後角膜血管生成、缺氧引起的角膜血管生成(大量配戴隱形眼鏡引起)、翼狀胬肉結膜、視網膜下水腫及視網膜內水腫。另外，本發明化合物適於治療及/或預防外傷性前房出血、眼眶周圍水腫、術後黏彈性固位或眼內發炎引起的眼內壓升高及高眼內壓。 此外，根據本發明之化合物適於治療及/或預防肝炎、贅瘤、骨質疏鬆症、青光眼及胃輕癱。 另外，本發明化合物亦適於控制大腦血流且為有效控制偏頭痛之試劑。其亦適於預防及控制腦梗塞(腦卒中)後遺症，諸如中風、大腦缺血及腦外傷。本發明化合物亦可用於控制疼痛、神經痛及耳鳴。 上述經充分表徵之人類疾病亦可以類似病因出現於其他哺乳動物中，且同樣可用本發明之化合物治療。 在本發明之上下文中，術語「治療」包括抑制、延遲、檢查、緩解、減弱、限制、減少、抑止、排斥或治癒疾病、病況、病症、損傷或健康問題，或該等病狀及/或該等病狀之症狀之發展、時程或進展。術語「療法」在此處理解為與術語「治療」同義。 在本發明之情形下，術語「預防」、「防治」及「防止」同義地使用且係指避免或減少感染、經歷、罹患或患有疾病、病況、病症、損傷或健康問題或此類病狀及/或此類病狀之症狀之發展或進展之風險。 疾病、病況、病症、損傷或健康問題之治療或預防可為部分或完全的。 本發明因此進一步提供本發明化合物用於治療及/或預防病症、尤其前述病症的用途。 本發明進一步提供本發明化合物之用途，其用於製造用以治療及/或預防病症、尤其前述病症之藥劑。 本發明進一步提供一種包含本發明化合物之藥劑，其用於治療及/或預防病症、尤其前述病症。 本發明進一步提供本發明化合物用於治療及/或預防病症、尤其前述病症的用途。 本發明進一步提供一種使用有效量的至少一種本發明化合物治療及/或預防病症、尤其前述病症之方法。 本發明進一步提供根據本發明之化合物，其用於治療及/或預防病症、尤其前述病症之方法中。 本發明化合物可單獨使用，或需要時與一或多種其他藥理學活性物質組合，其限制條件為此組合不會導致非所要及不可接受的副作用。本發明因此另外提供包含至少一種本發明化合物及一或多種其他藥物之藥劑，其尤其用於治療及/或預防上述病症。適於此目的之組合活性成分之較佳實例包括： · 低血壓藥物，例如且較佳來自以下之群：鈣拮抗劑、血管緊張素AII拮抗劑、ACE抑制劑、NEP抑制劑、血管肽酶抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α受體阻斷劑、β受體阻斷劑、鹽皮質激素受體拮抗劑及rho激酶抑制劑及利尿劑； · 抗心律不整藥，例如且較佳鈉通道阻斷劑、β受體阻斷劑、鉀通道阻斷劑、鈣拮抗劑，若為通道阻斷劑，則洋地黃，副交感神經阻斷藥(vagolytics)、擬交感神經藥及其他抗心律不整藥，諸如腺苷、腺苷受體促效劑及維那卡蘭(vernakalant)； · 具有正性肌力作用之化合物，例如強心苷(地高辛)、β-腎上腺素及多巴胺激導性促效劑，諸如異丙腎上腺素、腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺或多巴酚丁胺； · 血管加壓素受體拮抗劑，例如及較佳考尼伐坦(conivaptan)、托伐普坦(tolvaptan)、利希普坦(lixivaptan)、莫紮伐普坦(mozavaptan)、薩特普坦(satavaptan)、SR-121463、RWJ 676070或BAY 86-8050，及亦WO 2010/105770、WO2011/104322及WO 2016/071212中所述之化合物； · 利尿鈉肽，例如心房利尿鈉肽(ANP)、B型利尿鈉肽(BNP，奈西立肽)、C型利尿鈉肽(CNP)或利尿素； · 心肌肌球蛋白活化劑，例如歐米卡梅卡比(omecamtiv mecarbil，CK-1827452)； · 鈣敏化劑，例如左西孟旦(levosimendan)； · 調節心臟能量代謝之化合物，例如及較佳乙莫克舍(etomoxir)、二氯乙酸酯(dichloroacetate)、雷諾嗪(ranolazine)或曲美他嗪(trimetazidine)，完全或部分腺苷A1受體促效劑，諸如GS‐9667 (先前稱為CVT‐3619)、卡帕登松(capadenoson)、內拉登松(neladenoson)及BAY 1067197； · 調節心率之化合物，例如伊伐佈雷定(ivabradine)； · 抑制環單磷酸鳥苷(cGMP)及/或環單磷酸腺苷(cAMP)降解之化合物，例如磷酸二酯酶(PDE) 1、2、3、4及/或5之抑制劑，尤其PDE 5抑制劑，諸如西地那非(sildenafil)、伐地那非(vardenafil)及他達拉非(tadalafil)、烏地那非(udenafil)、得桑他非(desantafil)、阿伐那非(avanafil)、米羅那非(mirodenafil)、羅地那非(lodenafil)或PF-00489791； · 抗血栓劑，例如及較佳來自以下之群：血小板凝集抑制劑、抗凝劑或促纖維蛋白溶解物質； · 支氣管擴張劑，例如及較佳來自以下之群：β-腎上腺素激導性受體促效劑，尤其諸如沙丁胺醇、異丙基腎上腺素、間羥異丙腎上腺素、特布他林(terbutalin)、福莫特羅(formoterol)或沙美特羅(salmeterol)，或來自以下之群：抗膽鹼激導性劑，尤其諸如異丙托溴銨； · 消炎劑，例如及較佳來自以下之群：糖皮質激素，尤其諸如潑尼松(prednisone)、潑尼龍(prednisolone)、甲基潑尼龍、曲安西龍(triamcinolone)、地塞米松(dexamethasone)、倍氯米松(beclomethasone)、倍他米松(betamethasone)、氟尼縮松(flunisolide)、布地奈德(budesonide)或氟替卡松(fluticasone)，及亦非類固醇消炎藥(NSAID)，尤其諸如乙醯水楊酸(阿司匹林(Aspirin))、布洛芬(ibuprofen)及萘普生(naproxen)、5-胺基水楊酸衍生物、白三烯拮抗劑、TNF-α抑制劑及趨化因子受體拮抗劑，諸如CCR1、2及/或5抑制劑； · 脂質代謝修飾劑，例如及較佳來自以下之群：甲狀腺受體促效劑、膽固醇合成抑制劑(較佳實例為HMG-CoA還原酶抑制劑或角鯊烯合成抑制劑)、ACAT抑制劑、CETP抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α、PPAR-γ及/或PPAR-δ促效劑、膽固醇吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑、聚合膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑及脂蛋白(a)拮抗劑； · 抑制信號轉導級聯之化合物，例如及較佳來自激酶抑制劑之群，尤其來自酪胺酸激酶及/或絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑之群； · 抑制胞外基質降解及改變之化合物，例如及較佳基質金屬蛋白酶(MMP)之抑制劑，尤其凝乳酶、基質溶素、膠原酶、明膠酶及聚蛋白多糖酶之抑制劑(在此情形中尤其MMP-1、MMP-3、MMP-8、MMP-9、MMP-10、MMP-11及MMP-13)及金屬彈力酶(MMP-12)及嗜中性白血球彈性蛋白酶(HNE)，諸如西維來斯他(sivelestat)或DX-890； · 阻斷血清素與其受體結合之化合物，例如及較佳5-HT
2b
受體之拮抗劑； · 有機硝酸酯及NO供體，例如硝普鈉、硝化甘油、異山梨糖醇單硝酸酯、異山梨糖醇二硝酸酯、嗎多明或SIN-1及吸入之NO； · 可溶性鳥苷酸環化酶之非NO依賴性但血紅素依賴性刺激劑，尤其諸如WO 00/06568、WO 00/06569、WO 02/42301、WO 03/095451、WO 2011/147809、WO 2012/004258、WO 2012/028647及WO 2012/059549中所述之化合物； · 可溶性鳥苷酸環化酶之非NO及血紅素依賴性活化劑，尤其諸如WO 01/19355、WO 01/19776、WO 01/19778、WO 01/19780、WO 02/070462及WO 02/070510中所述之化合物； · 提高cGMP合成之化合物，例如sGC調節劑，諸如(例如且較佳)瑞司瓜特(riociguat)、西納斯瓜特(cinaciguat)、維瑞希瓜特(vericiguat)或BAY 1101042； · 前列環素類似物，例如且較佳伊洛前列素(iloprost)、貝前列素(beraprost)、曲前列環素(treprostinil)或依前列醇(epoprostenol)； · 抑制可溶性環氧化物水解酶(sEH)之化合物，例如
N,N'
-二環已基脲、12-(3-金剛烷-1-基脲基)十二烷酸或1-金剛烷-1-基-3-{5-[2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基]戊基}脲； · 調節葡萄糖代謝之活性化合物，例如胰島素、雙胍、噻唑啶二酮、磺醯脲、阿卡波糖(acarbose)、DPP4抑制劑、GLP-1類似物或SGLT-1抑制劑。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與激酶抑制劑組合使用，例如及較佳硼替佐米(bortezomib)、卡奈替尼(canertinib)、埃羅替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、伊馬替尼(imatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、來他替尼(lestaurtinib)、洛那法尼(lonafarnib)、尼達尼布(nintedanib)、達沙替尼(dasatinib)、尼羅替尼(nilotinib)、伯舒替尼(bosutinib)、阿西替尼(axitinib)、特拉替尼(telatinib)、伊馬替尼(imatinib)、布立尼布(brivanib)、帕佐泮尼(pazopanib)、培加替尼(pegaptinib)、培利替尼(pelitinib)、司馬沙尼(semaxanib)、索拉非尼(sorafenib)、瑞戈非尼(regorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、坦度替尼(tandutinib)、替吡法尼(tipifarnib)、凡塔藍尼(vatalanib)、法舒地爾(fasudil)、氯尼達明(lonidamine)、來氟米特(leflunomide)、BMS-3354825或Y-27632。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與血清素受體拮抗劑組合使用，例如及較佳PRX-08066。 抗血栓劑較佳理解為意謂來自以下之群的化合物：血小板凝集抑制劑、抗凝劑或促纖維蛋白溶解物質。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與血小板凝集抑制劑組合投與：例如及較佳阿司匹林(aspirin)、克羅匹多(clopidogrel)、噻氯匹定(ticlopidine)或雙嘧達莫(dipyridamole)。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與凝血酶抑制因子組合投與，例如且較佳達比加群(dabigatran)、希美加群(ximelagatran)、美拉加群(melagatran)、比伐盧定(bivalirudin)或克賽(clexane)。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明之化合物與GPIIb/IIIa拮抗劑組合投與，例如及較佳替羅非班(tirofiban)或阿昔單抗(abciximab)。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與Xa因子抑制因子組合投與，例如及較佳利伐沙班(rivaroxaban)、依度沙班(edoxaban，DU-176b)、阿派沙班(apixaban)、奧米沙班(otamixaban)、非地沙班(fidexaban)、雷紮沙班(razaxaban)、方達珀魯(fondaparinux)、艾卓肝素(idraparinux)、PMD-3112、Y
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-150、KFA-1982、EMD-503982、MC
N
-17、mLN-1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR-126512或SSR-128428。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與肝素或低分子量(LMW)肝素衍生物組合投與。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與維生素K拮抗劑組合投與，例如及較佳香豆素。 低血壓劑較佳理解為意謂來自以下之群的化合物：鈣拮抗劑、血管緊張素AII拮抗劑、ACE抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α受體阻斷劑、β受體阻斷劑、鹽皮質激素受體拮抗劑、rho激酶抑制劑及利尿劑。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與鈣拮抗劑組合投與，例如及較佳硝苯地平、氨氯地平、維拉帕米或地爾硫卓。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與α-1受體阻斷劑組合投與，例如及較佳哌唑嗪。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與β受體阻斷劑組合投與，例如及較佳普萘洛爾(propranolol)、阿替洛爾(atenolol)、噻嗎洛爾(timolol)、品多洛爾(pindolol)、阿普洛爾(alprenolol)、氧烯洛爾(oxprenolol)、噴布洛爾(penbutolol)、布拉洛爾(bupranolol)、美替洛爾(metipranolol)、納多洛爾(nadolol)、甲吲洛爾(mepindolol)、卡拉洛爾(carazalol)、索他洛爾(sotalol)、美托洛爾(metoprolol)、倍他洛爾(betaxolol)、塞利洛爾(celiprolol)、比索洛爾(bisoprolol)、卡替洛爾(carteolol)、艾司洛爾(esmolol)、拉貝洛爾(labetalol)、卡維地洛(carvedilol)、阿達洛爾(adaprolol)、蘭地洛爾(landiolol)、奈必洛爾(nebivolol)、依泮洛爾(epanolol)或布新洛爾(bucindolol)。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與血管緊張素AII拮抗劑組合投與，例如及較佳洛沙坦(losartan)、坎地沙坦(candesartan)、纈沙坦(valsartan)、替米沙坦(telmisartan)或恩布沙坦(embursatan)、依貝沙坦(irbesartan)、奧美沙坦(olmesartan)、依普羅沙坦(eprosartan)或阿齊沙坦(azilsartan)或雙重血管緊張素AII拮抗劑/NEP抑制劑，例如及較佳Entresto (LCZ696，纈沙坦(valsartan)/沙庫必曲(sacubitril))。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與ACE抑制劑組合投與，例如及較佳依那普利(enalapril)、卡托普利(captopril)、賴諾普利(lisinopril)、雷米普利(ramipril)、地拉普利(delapril)、福辛普利(fosinopril)、奎諾普利(quinopril)、培哚普利(perindopril)或群哚普利(trandopril)。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與內皮素拮抗劑組合投與，例如及較佳波生坦(bosentan)、達盧生坦(darusentan)、安立生坦(ambrisentan)、阿伏生坦(avosentan)、馬西替坦(macitentan)、阿曲生坦(atrasentan)或西他生坦(sitaxsentan)。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與TGFβ拮抗劑組合投與，例如及較佳吡非尼酮(pirfenidone)或福萊索單抗(fresolimumab)。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與TNFα拮抗劑組合投與，例如及較佳阿達木單抗(adalimumab)。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與腎素抑制劑組合投與，例如及較佳阿力克倫(aliskiren)、SPP-600或SPP-800。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與HIF-PH抑制劑組合投與，例如及較佳莫里達斯特(molidustat)或洛夏達斯特(roxadustat)。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與鹽皮質激素受體拮抗劑組合投與，例如及較佳螺內酯或依普利酮、芬利酮(finerenone)。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與rho激酶抑制劑組合投與，例如及較佳法舒地爾(fasudil)、Y-27632、SLx-2119、BF-66851、BF-66852、BF-66853、KI-23095、SB-772077、GSK-269962A或BA-1049。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與以下組合投與：利尿劑，例如呋塞米(furosemide)、托拉塞米(torasemide)、布美他尼(bumetanide)及吡咯他尼(piretanide)；留鉀利尿劑，例如胺氯吡脒(amiloride)及胺苯喋啶(triamterene)；醛固酮拮抗劑，例如螺內酯、坎利酸鉀及依普利酮；及亦噻嗪利尿劑，例如氫氯噻嗪、氯噻酮、希伯胺(xipamide)及吲達帕胺(indapamide)。 脂質代謝修飾劑較佳理解成意謂來自以下之群的化合物：CETP抑制劑、甲狀腺受體促效劑、膽固醇合成抑制劑(諸如HMG-CoA還原酶抑制劑或角鯊烯合成抑制劑)、ACAT抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α、PPAR-γ及/或PPAR-δ促效劑、膽固醇吸收抑制劑、聚合膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑及脂蛋白(a)拮抗劑。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與CETP抑制劑組合投與，例如及較佳托徹普(CP-529 414)、安特普、JJT-705或CETP疫苗(Avant)。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與甲狀腺受體促效劑組合投與，例如及較佳D-甲狀腺素、3,5,3'-三碘甲狀腺素(T3)、CGS 23425或阿昔替羅(axitirome)(CGS 26214)。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與來自士他汀類別之HMG -CoA還原酶抑制劑組合投與，例如及較佳洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、羅素他汀(rosuvastatin)或匹伐他汀(pitavastatin)。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與角鯊烯合成抑制劑組合投與，例如及較佳BMS-188494或TAK-475。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與ACAT抑制劑組合投與，例如及較佳阿伐麥布(avasimibe)、甲亞油醯胺、帕替麥布(pactimibe)、依魯麥布(eflucimibe)或SMP-797。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明之化合物與MTP抑制劑組合投與，例如及較佳英普他派(implitapide)、BMS-201038、R-103757或JTT-130。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與PPAR-γ促效劑組合投與，例如及較佳吡格列酮(pioglitazone)或羅格列酮(rosiglitazone)。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與PPAR-δ促效劑組合投與，例如及較佳GW 501516或BAY 68-5042。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與膽固醇吸收抑制劑組合投與，例如及較佳依澤替米貝(ezetimibe)、替奎安(tiqueside)或帕馬苷(pamaqueside)。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與脂肪酶抑制劑組合投與，例如及較佳羅氏鮮(orlistat)。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與聚合膽汁酸吸附劑組合投與，例如及較佳消膽胺(cholestyramine)、考來替潑(colestipol)、考來索凡(colesolvam)、考來斯塔吉(CholestaGel)或考來斯替米(colestimide)。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與膽汁酸再吸收抑制劑組合投與，例如及較佳ASBT (=IBAT)抑制劑，例如AZD-7806、S-8921、AK-105、BARI-1741、SC-435或SC-635。 在本發明之一個較佳實施例中，本發明化合物與脂蛋白(a)拮抗劑組合投與，例如及較佳吉姆卡本鈣(gemcabene calcium，CI-1027)或菸鹼酸。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與sGC調節劑組合投與，例如及較佳瑞司瓜特、西納斯瓜特、維瑞希瓜特或BAY 1101042。 在本發明之一個較佳實施例中，根據本發明之化合物與調節葡萄糖代謝之活性成分組合投與，例如及較佳胰島素、磺醯脲、阿卡波糖、DPP4抑制劑、GLP-1類似物或SGLT-1抑制劑。 尤其較佳為根據本發明之化合物與一或多種選自由以下各項組成之群的其他活性成分的組合：活性低血壓成分、活性抗心律不整成分、血管加壓素受體拮抗劑、PDE 5抑制劑、血小板凝集抑制劑、sGC活化劑及sGC刺激劑。 本發明進一步提供包含至少一種本發明化合物，典型地連同一或多種惰性、無毒、醫藥學上適合之賦形劑一起的藥劑，及其用於前述目的之用途。 本發明化合物可全身性及/或局部起作用。為此目的，其可以適合之方式投與，例如藉由經口、非經腸、經肺、經鼻、舌下、經舌、頰內、經直腸、經皮、透皮、經結膜或經耳途徑，或採取植入物或血管內支架形式。 本發明化合物可以適於此等投與途徑之投與形式投與。 適於經口投與之投與形式為根據先前技術操作且快速及/或以經調節方式釋放本發明化合物且含有呈結晶及/或非晶化及/或溶解形式之本發明化合物的彼等形式，例如錠劑(未包衣或包衣錠劑，例如包覆有控制本發明化合物之釋放的耐胃液或延遲溶解或不溶包衣)、在口腔中快速崩解之錠劑或膜/扁劑、膜/凍乾物、膠囊(例如硬明膠膠囊或軟明膠膠囊)、糖包衣錠劑、顆粒劑、丸劑、散劑、乳液、懸浮液、氣溶膠或溶液。 可繞過吸收步驟(例如靜脈內、動脈內、心臟內、脊椎內或腰內進行)或在包括吸收(例如吸入、肌肉內、皮下、皮內、經皮或腹膜內進行)之情況下實現非經腸投與。適於非經腸投與之投與形式包括呈溶液、懸浮液、乳液、凍乾物或無菌粉末形式之用於注射及輸注之製劑。 對於其他投與途徑，適合之實例為可吸入藥劑形式(包括粉末吸入劑、吸入噴霧劑、定量氣霧劑)、鼻滴劑、溶液或噴霧劑、錠劑、膜/扁劑或膠囊(用於經舌、舌下或頰內投與)、栓劑、耳或眼製劑、經陰道膠囊、水性懸浮液(洗劑、振盪混合物)、親脂性懸浮液、軟膏、乳膏、經皮治療系統(例如貼片)、乳狀物、糊劑、泡沫劑、噴灑散劑、植入物或支架。 較佳為經口及非經腸投與，尤其經口、靜脈內及肺內(吸入)投與。 本發明化合物可轉化為所提及之投與形式。此可由本身已知之方式藉由與惰性、無毒、醫藥學上適合之賦形劑混合而實現。此等賦形劑包括載劑(例如微晶纖維素、乳糖、甘露糖醇)、溶劑(例如液態聚乙二醇)、乳化劑及分散或濕潤劑(例如十二烷基硫酸鈉、聚氧脫水山梨糖醇油酸酯)、黏合劑(例如聚乙烯吡咯啶酮)、合成及天然聚合物(例如白蛋白)、穩定劑(例如抗氧化劑，例如抗壞血酸)、著色劑(例如無機顏料，例如氧化鐵)及調味劑及/或氣味矯正劑。 一般而言，已發現在非經腸投與之情況下，每公斤體重約0.001至1 mg，較佳每公斤體重約0.01至0.5 mg之投與量可有利地實現有效結果。在經口投與的情況下，劑量為每公斤體重約0.01至100 mg，較佳每公斤體重約0.01至20 mg，且最佳每公斤體重0.1至10 mg。 然而，在一些情況下，可能需要偏離所述量，尤其根據體重、投與途徑、對活性成分之個體反應、製劑性質及投與進行時間或間隔時間而變化。因此，在一些情況下可能足以使用少於前述最低量，而在其他情況下必須超過規定的上限。在較大量投與之情況下，將其分成一天中的若干個別劑量可為合理的。 以下實施例說明本發明。本發明不侷限於該等實例。
A. 實例 縮寫及首字母縮寫詞
：
HPLC 及 LC/MS 方法 ： 方法 1 ：
儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC系統；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 µ 50×1 mm；移動相A：1 l水 + 0.25 ml 99%濃度甲酸，移動相B：1 l乙腈 + 0.25 ml 99%濃度甲酸；梯度：0.0 min 90% A → 1.2 min 5% A → 2.0 min 5% A；烘箱：50℃；流動速率：0.40 ml/min；UV偵測：208-400 nm。
方法 2 ：
MS儀器：Waters (Micromass) QM；HPLC儀器：Agilent 1100系列；管柱：Agilent ZORBAX延長型C18 3.0×50mm 3.5微米；移動相A：1 l水 + 0.01 mol碳酸銨，移動相B：1 l乙腈；梯度：0.0 min 98% A → 0.2 min 98% A → 3.0 min 5% A → 4.5 min 5% A；烘箱：40℃；流動速率：1.75 ml/min；UV偵測：210 nm。
方法 3 ：
MS儀器類型：Thermo Scientific FT-MS；UHPLC+儀器類型：Thermo Scientific UltiMate 3000；管柱：Waters，HSST3，2.1×75 mm，C18 1.8 µm；移動相A：1 l水 + 0.01%甲酸；移動相B：1 l乙腈 + 0.01%甲酸；梯度：0.0 min 10% B → 2.5 min 95% B → 3.5 min 95% B；烘箱：50℃；流動速率：0.90 ml/min；UV偵測：210 nm/最佳積分路徑210-300 nm。
方法 4 ：
儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC系統；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 µ 50 × 1 mm；移動相A：1 l水 + 0.25 ml 99%濃度甲酸，移動相B：1 l乙腈 + 0.25 ml 99%濃度甲酸；梯度：0.0 min 95% A → 6.0 min 5% A → 7.5 min 5% A；烘箱：50℃；流動速率：0.35 ml/min；UV偵測：210 - 400 nm。
方法 5 ：
儀器：Agilent MS Quad 6150；HPLC：Agilent 1290；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 µ 50×2.1 mm；移動相A：1 l水 + 0.25 ml 99%濃度甲酸，移動相B：1 l乙腈 + 0.25 ml 99%濃度甲酸；梯度：0.0 min 90% A → 0.3 min 90% A → 1.7 min 5% A → 3.0 min 5% A；烘箱：50℃；流動速率：1.20 ml/min；UV偵測：205-305 nm。
方法 6 ：
儀器：Thermo DFS，Trace GC Ultra；管柱：Restek RTX-35，15 m × 200 µm × 0.33 µm；恆定氦氣流動速率：1.20 ml/min；烘箱：60℃；入口：220℃；梯度：60℃，30℃/min → 300℃(維持3.33 min)。
其他細節 ：
除非另外指明，否則以下測試及測試描述中之百分比為重量百分比；份為重量份。液體/液體溶液之溶劑比、稀釋比及濃度資料在各情況下以體積計。 在藉由溶離劑含有添加劑(例如三氟乙酸、甲酸或氨)的所述方法藉由製備型HPLC純化本發明化合物之情形中，若本發明化合物含有足夠鹼性或酸性官能基，則本發明化合物可以鹽形式獲得，例如三氟乙酸鹽、甲酸鹽或銨鹽形式。此類鹽可藉由熟習此項技術者已知的多種方法轉化成相應游離鹼或酸。 純度圖一般基於LC/MS層析圖中的相應峰整合，但亦可藉助於1H NMR頻譜另外測定。若未指示純度，則根據LC/MS層析圖中之自動峰整合，純度一般為100%，或純度尚未明確測定。 若指明純度＜100%，則以理論值的百分比計的所述產率一般根據純度進行校正。在含有溶劑或經溶劑污染之批次中，縮甲醛產率可為「＞100%」；在此等情形中，產率不根據溶劑或純度進行校正。 下文中1H NMR信號之聯合模式的描述在一些情形中直接根據ACD SpecManager (ACD/Labs Release 12.00, 產品型號12.5)之建議，且未必嚴格核對。除了此等
1
H NMR資料之外，可能存在額外加寬之信號-由於主導的分子動力學(特定言之在2.50-4.20 ppm範圍內)-此未單獨指明。在一些情形中，手動調整SpecManager之建議。手動調整或指派之描述一般基於所討論之信號的光學外觀且不必對應於嚴格的以物理方式校正之說明。大體而言，所陳述之化學位移係指所討論之信號的中心。在寬多重峰之情形中，給出間隔。溶劑或水遮蔽之信號試驗性地賦值或尚未列出。顯著加寬之信號-例如由分子部分快速旋轉或因為質子交換引起-同樣試驗性地賦值(通常稱為寬多重峰或寬單重峰)或未列出。 所選實例之
1
H NMR資料以
1
H NMR峰清單形式陳述。對於各信號峰，首先列出以ppm為單位之δ值，接著在圓括號中列出信號強度。列出不同信號峰的δ值/信號強度數值對，彼此以逗號隔開。實例之峰清單因此採取以下形式：δ
1
(強度
1
), δ
2
(強度
2
), ... , δ
i
(強度
i
), ... , δ
n
(強度
n
)。 尖銳信號之強度與所列印之NMR頻譜實例中之信號高度(以cm為單位)有關且顯示信號強度與其他信號相比之真實比率。在寬信號之情形中，信號及其相對強度之若干峰或中點可與頻譜中之最密集信號比較顯示。
1
H NMR峰之清單與習知
1
H NMR打印結果類似且因此通常含有習知NMR說明中所列之全部峰。另外，與習知
1
H NMR打印結果一樣，其可顯示溶劑信號、本發明同樣提供之目標化合物之立體異構體的信號及/或雜質的峰。目標化合物之立體異構體之峰及/或雜質峰通常平均具有比目標化合物(例如純度＞90%)之峰低的強度。此類立體異構體及/或雜質對於特定製備方法可為典型的。其峰因此可幫助參考「副產物指紋」鑑別吾人製備方法之重現。藉由已知方法(MestreC、ACD模擬或使用憑經驗評估之期望值)計算目標化合物之峰的專家可根據需要視情況使用其他強度過濾器分離目標化合物之峰。此分離將類似於習知
1
H NMR說明中所討論之峰挑選。以峰清單形式呈現NMR資料的詳細描述可見於出版物「Citation of NMR Peaklist Data within Patent Applications」(參見研究揭示內容資料庫(Research Disclosure Database)第605005期, 2014, 2014年8月1日，或http://www.researchdisclosure.com/searching-disclosures)。在研究揭示內容資料庫第605005期中所述之峰挑選途徑中，參數「最小高度(MinimumHeight)」可設為介於1%與4%之間。視化學結構之類型而定及/或視打算分析之化合物的濃度而定，將參數「最小高度」設為＜1%的值可能是明智的。 則熔點及熔點範圍(若陳述的話)未經校正。 製備在下文中未明確描述的所有反應物或試劑均市購自通常可獲得的來源。對於製備同樣地在下文中未描述且在商業上不可獲得或從通常不可取得的來源獲得之所有其他反應物或試劑而言，參考對其製備進行描述之公開文獻。
通用程序 GP1
將N,N-二異丙基乙胺(1.4-1.5當量，或2.4-3.0當量，當胺以鹽酸鹽形式使用時)及HATU (1.0-1.65當量)添加至相應羧酸(1當量)於DMF (0.08-0.12 M)中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物30分鐘。隨後，添加適當胺(1.04-1.5當量)且在室溫下進一步攪拌混合物0.15-2小時。接著藉由添加水及1 M鹽酸水溶液來終止反應。將沈澱物濾出，溶解於DCM中，經硫酸鎂乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。或者，酸化，隨後用乙酸乙酯萃取，經硫酸鎂或硫酸鈉乾燥經合併之有機相，過濾且在減壓下移除溶劑。接著藉由正相層析(矽膠，移動相：環己烷/乙酸乙酯混合物或二氯甲烷/甲醇混合物)或製備型RP-HPLC(水/乙腈梯度)純化粗產物。或者，反應混合物用極少乙腈、水及甲酸稀釋且獲得之粗溶液藉由RP-HPLC(水/乙腈梯度)純化。處理之其他替代方案(若進行的話)與對應實驗一起描述。
GP2
在減壓下在反應容器中烘烤碳酸鉀或碳酸銫(1.5-2.5當量)。容器冷卻至室溫且用氬氣浸沒。添加乙酸鈀(0.1-0.36當量)、9,9-二甲基-4,5-雙(二苯膦基)二苯并哌喃(Xantphos，0.18-0.36當量)及二噁烷(0.04-0.12 M)，且在室溫下在氬氣流中將懸浮液脫氣10分鐘。隨後，添加適當醯胺(1.0-10當量)及適當7-氯-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶(1.0當量)。在80-110℃下攪拌混合物1小時(或直至根據具有適當移動相混合物之分析型HPLC或薄層層析完全轉化)。接著將混合物冷卻至室溫且在減壓下移除全部揮發性組分，或者將反應混合物倒入水中，使用1 M鹽酸水溶液將pH調整至pH 1，用乙酸乙酯萃取混合物，經合併之有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。接著藉由正相層析(移動相：環己烷/乙酸乙酯混合物或二氯甲烷/甲醇混合物)或製備型RP-HPLC(水/乙腈梯度)純化粗產物。或者，反應混合物用極少乙腈、水及甲酸或TFA稀釋，且所獲得之粗溶液藉由RP-HPLC (水/乙腈梯度)純化。處理之其他替代方案(若以不同方式進行的話)與對應實驗一起描述。
GP3
將適當胺(1.2當量)及DIPEA (1.5-3.5當量)添加至適當7-氯-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶於DMF中(0.10-0.22 M)之溶液中。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。在水性處理及用適當有機溶劑萃取之後，隨後藉由正相層析法(移動相：環己烷/乙酸乙酯混合物或二氯甲烷/甲醇混合物)或製備型RP-HPLC (水/乙腈梯度)純化粗產物。或者，反應混合物用極少乙腈、水及甲酸稀釋且獲得之粗溶液藉由RP-HPLC(水/乙腈梯度)純化。處理之其他替代方案(若進行的話)與對應實驗一起描述。
起始化合物及中間物： 實例 1A
7-氯-1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯
將21.8 ml (125 mmol) DIPEA添加至6.00 g (17.8 mmol) 2-[(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)羰基]-3-乙氧基丙烯酸乙酯(US4840954 A，實例G，步驟1，第7頁中所述之製備)及3.23 g (24.9 mmol) 2,6-二氟苯胺於30 ml二氯甲烷中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物4小時。接著添加2.47 g (17.8 mmol)碳酸鉀，且在回流下加熱混合物隔夜。混合物用200 ml二氯甲烷稀釋且用150 ml 1 M鹽酸水溶液洗滌兩次。有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。混合物用80 ml第三丁基甲基醚稀釋且藉由抽吸濾出沈澱物，且用10 ml第三丁基甲基醚洗滌。由此獲得3.22 g (45%理論值，95.7%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.96 min; MS (ESIpos): m/z = 383 [M+H]+。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.95 (s, 1H), 8.57 (d, 1H), 7.80-7.71 (m, 1H), 7.50-7.43 (m, 2H), 4.25 (q, 2H), 1.26 (t, 3H)。
實例 2A
7-氯-1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
首先將3.22 g (8.41 mmol) 7-氯-1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯裝入25.2 ml水中，添加25.2 ml 36%濃度鹽酸水溶液及25.2 ml THF，且在110℃下攪拌混合物4小時。將反應混合物冷卻至室溫且藉由抽吸濾出沈澱物，用30 ml水洗滌兩次且在高度真空下乾燥。由此獲得4.1 g (定量，96.8%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.96 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 13.70 (s, 1H), 9.25 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 7.80-7.72 (m, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H)。
實例 3A
7-氯-1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-
N
-[(2
S
)-1,1,1-三氟丁-2-基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使1.00 g (2.82 mmol) 7-氯-1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與553 mg (3.38 mmol) (2S)-1,1,1-三氟丁-2-胺鹽酸鹽在1.29 g (3.38 mmol) HATU及1.96 ml (11.3 mmol) DIPEA存在下在20 ml DMF中反應。攪拌反應溶液1分鐘且添加至水、1 M鹽酸水溶液及乙酸乙酯的混合物中。分離各相且水相用50 ml乙酸乙酯萃取四次。經合併之有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。將粗產物溶解於少量乙酸乙酯中且藉由正相層析(環己烷/乙酸乙酯，5:1)純化。合併溶離份且在減壓下濃縮，且自乙腈凍乾殘餘物隔夜。由此獲得331 mg (25%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.32 min; MS (ESIpos): m/z = 464 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.84 (d, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.72 (d, 1H), 7.80-7.72 (m, 1H), 7.51-7.44 (m, 2H), 4.85-4.71 (m, 1H), 1.96-1.83 (m, 1H), 1.75-1.61 (m, 1H), 0.98 (t, 3H)。
實例 4A
7-氯-1-(2,4,6-三氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯
將43.5 ml (250 mmol) DIPEA添加至12.0 g (35.7 mmol) 2-[(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)羰基]-3-乙氧基丙烯酸乙酯(US4840954 A，實例G，步驟1，第7頁)及7.35 g (49.9 mmol) 2,4,6-三氟苯胺於60 ml二氯甲烷中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物4小時。隨後，添加4.93 g (35.7 mmol)碳酸鉀且在回流下加熱混合物隔夜。混合物接著用200 ml二氯甲烷稀釋且用150 ml 1 M鹽酸水溶液洗滌三次。有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。混合物用100 ml第三丁基甲基醚稀釋且藉由抽吸濾出沈澱物且用20 ml第三丁基甲基醚洗滌三次且在高度真空下乾燥。由此獲得8.80 g (58%理論值，94.6%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.01 min; MS (ESIpos): m/z = 401 [M+H]+。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.97 (s, 1H), 8.56 (d, 1H), 7.67-7.56 (m, 2H), 4.26 (q, 2H), 1.28 (t, 3H)。
實例 5A
7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
首先將8.80 g (21.9 mmol) 7-氯-1-(2,4,6-三氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯裝入66.2 ml水中，添加66.2 ml 36%濃度鹽酸水溶液及66.2 ml THF，且在110℃下攪拌混合物4小時。將反應混合物冷卻至室溫且藉由抽吸濾出沈澱物，用40 ml水洗滌四次且在高度真空下乾燥。由此獲得7.37 g (89%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.84 min; MS (ESIpos): m/z = 373 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 13.67 (s, 1H), 9.28 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 7.68-7.59 (m, 2H)。
實例 6A
7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
在室溫下，將5.89 ml (33.8 mmol) DIPEA添加至3.60 g (9.66 mmol) 7-氯-1-(2,4,6-三氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸及1.48 g (10.6 mmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽於50 ml DMF中之溶液中。在室溫下再攪拌混合物1小時。接著添加150 ml水及100 ml 1 M鹽酸水溶液，且藉由抽吸濾出所形成之沈澱物。沈澱物用水洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得3.96 g (93%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 440 [M+H]+。
1
H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 15.01 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.64-7.54 (m, 2H), 5.30-5.14 (m, 2H), 4.09-3.64 (m, 4H), 3.28-3.21 (m, 0.6H, 部分在水共振下), 3.15-3.01 (m, 1H)。
實例 7A
6-氟-7-[(4
S
)-4-羥基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
根據GP2，在90℃下，使100 mg (268 µmol) 7-氯-1-(2,4,6-三氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與32.6 mg (322 µmol) (4S)-4-羥基吡咯啶-2-酮在92.7 mg (671 µmol)碳酸鉀、6.0 mg (27 µmol)乙酸鈀及33 mg (54 µmol) Xantphos存在下在2.4 ml二噁烷中反應1小時。反應混合物用1 ml 1 M鹽酸水溶液及1 ml DMSO稀釋且藉由製備型HPLC (乙腈/具有甲酸之水，C18 RP-HPLC)直接純化。由此獲得61.7 mg (42%理論值，80%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.19 min; MS (ESIpos): m/z = 438 [M+H]
+
。
實例 8A
7-[(3
S
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
在室溫下，將280 µl (1.61 mmol) DIPEA添加至240 mg (644 µmol) 7-氯-1-(2,4,6-三氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸及73.0 mg (708 µmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇於3.3 ml DMF中之溶液中。在室溫下再攪拌混合物1小時。反應混合物用0.4 ml 1 M鹽酸水溶液及1 ml乙腈稀釋且藉由製備型HPLC (乙腈/具有甲酸之水，C18 RP-HPLC)直接純化。由此獲得232 mg (74%理論值，94.4%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.69 min; MS (ESIpos): m/z = 440 [M+H]+。
1
H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 15.01 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.64-7.55 (m, 2H), 5.33-5.10 (m, 2H), 4.10-3.63 (m, 4H), 3.29-3.20 (m, 0.8H, 部分在水共振下), 3.15-3.00 (m, 1H)。
實例 9A
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
在室溫下，將409 µl (2.35 mmol) DIPEA添加至250 mg (671 µmol) 7-氯-1-(2,4,6-三氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸及103 mg (738 µmol)順-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽於3.5 ml DMF中之溶液中。在室溫下再攪拌混合物1小時。反應混合物用7 ml 1 M鹽酸水溶液酸化，添加15 ml水且藉由抽吸濾出沈澱物。殘餘物用水洗滌且凍乾。由此獲得256 mg (86%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.71 min; MS (ESIpos): m/z = 440 [M+H]+。
1
H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 15.0 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.63-7.54 (m, 2H), 5.15-4.89 (m, 2H), 4.13-3.86 (m, 3H), 3.61 (br. s, 1H), 3.21 (br. s, 1H), 3.04 (br. s, 1H)。
實例 10A
6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(800 mg，2.15 mmol)裝入8 ml DMF中，添加(3S)-吡咯啶-3-醇(206 mg，2.36 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(1.3 ml，7.5 mmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。將反應混合物添加至水中，且添加1 M鹽酸及乙酸乙酯。移除有機相且用乙酸乙酯萃取水相三次。經合併之有機相經飽和氯化鈉溶液洗滌一次、經硫酸鈉乾燥且濃縮。產物與乙腈一起攪拌，濾出，用少量冷乙腈洗滌且乾燥。由此獲得770 mg (85%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.82 min; MS (ESIpos): m/z = 424 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.22), 0.008 (2.03), 1.909 (0.87), 2.074 (16.00), 3.222 (0.71), 3.875 (0.53), 4.309 (0.50), 5.024 (1.35), 7.565 (2.70), 7.586 (4.97), 7.608 (2.81), 8.037 (5.77), 8.068 (5.70), 9.043 (10.89), 15.025 (9.55)。
實例 11A
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-7-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使500 mg (1.34 mmol) 7-氯-1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與283 mg (1.61 mmol) (1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽在612 mg (1.61 mmol) HATU及935 µl (5.37 mmol) DIPEA存在下在10 ml DMF中反應。在室溫下攪拌反應溶液1小時且添加至水與乙酸乙酯之混合物。分離各相且水相用50 ml乙酸乙酯萃取四次。合併有機相，用50 ml緩衝液pH 7洗滌且用50 ml飽和氯化鈉水溶液洗滌兩次，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。將物質溶解於乙酸乙酯中且施用於矽膠且藉由正相層析(環己烷-乙酸乙酯梯度)純化。合併溶離份且在減壓下濃縮，且自乙腈凍乾殘餘物隔夜。由此獲得534 mg (66%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.21 min; MS (ESIpos): m/z = 594 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.01 (d, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.88 (d, 1H), 8.74 (dd, 1H), 8.63 (dd, 1H), 7.65 (dd, 1H), 7.05-6.97 (m, 2H), 4.42-4.37 (m, 1H), 1.28-1.17 (m, 1H), 0.71-0.51 (m, 3H), 0.36-0.28 (m, 1H)。
實例 12A
6-氟-4-側氧基-7-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使500 mg (1.34 mmol) 7-氯-1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與263 mg (1.61 mmol) (S)-1,1,1-三氟丁-2-胺鹽酸鹽在612 mg (1.61 mmol) HATU及935 µl (5.37 mmol) DIPEA存在下在9.5 ml DMF中反應。在室溫下攪拌反應溶液1小時且添加至水與乙酸乙酯之混合物。分離各相且水相用50 ml乙酸乙酯萃取四次。合併有機相，用50 ml緩衝液pH 7洗滌且用50 ml飽和氯化鈉水溶液洗滌兩次，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。將物質溶解於乙酸乙酯中且施用於矽膠且藉由正相層析(環己烷-乙酸乙酯梯度)純化。合併溶離份且在減壓下濃縮，且自乙腈凍乾殘餘物隔夜。由此獲得522 mg (66%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.19 min; MS (ESIpos): m/z = 582 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.85 (d, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.87 (d, 1H), 8.74 (dd, 1H), 8.63 (dd, 1H), 7.65 (dd, 1H), 7.06-6.96 (m, 2H), 4.81-4.66 (m, 1H), 1.94-1.81 (m, 1H), 1.73-1.59 (m, 1H), 0.96 (t, 3H).
實例 13A
4-[6-{[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]胺甲醯基}-3-氟-5-側氧基-8-(2,4,6-三氟苯基)-5,8-二氫-1,8-萘啶-2-基]哌嗪-1-甲酸第三丁酯
首先將7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(60.0 mg，122 µmol)裝入1.2 ml乙腈中，添加哌嗪-1-甲酸第三丁酯(45.3 mg，243 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(74 µl，430 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。減壓濃縮反應溶液且未經進一步純化即可用於下一步驟。由此獲得113 mg目標化合物(定量產率，約69%純度)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.61 min; MS (ESIpos): m/z = 644 [M+H]
+ 實例 14A
(2S)-4-[6-{[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]胺甲醯基}-3-氟-5-側氧基-8-(2,4,6-三氟苯基)-5,8-二氫-1,8-萘啶-2-基]-2-甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯
首先將7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(60.0 mg, 122 µmol)裝入1.2 ml DMF中，添加(2S)-2-甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(34.1 mg，170 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(74 µl，430 µmol)且在室溫下攪拌混合物1小時。將反應溶液溶解於乙酸乙酯中且用半飽和氯化銨溶液萃取三次。經合併之水相用乙酸乙酯重新萃取一次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得82 mg目標化合物(91%理論值，純度90%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.64 min; MS (ESIpos): m/z = 658 [M+H]
+ 實例 15A
7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯
將21.8 ml (125 mmol) DIPEA添加至6.00 g (17.8 mmol) 2-[(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)羰基]-3-乙氧基丙烯酸乙酯(US4840954，1989，實例G，步驟1，第7頁)及3.25 g (25.0 mmol) 2-胺基-3,5-二氟吡啶於30 ml二氯甲烷中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物4小時。接著添加2.47 g (17.8 mmol，1當量)碳酸鉀，且在回流下加熱混合物隔夜。接著再添加一當量碳酸鉀，且在回流下再加熱混合物隔夜。接著再添加一當量碳酸鉀，且再於回流下繼續攪拌混合物3天。混合物用200 ml二氯甲烷稀釋且用200 ml 1 M鹽酸水溶液洗滌兩次。有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。混合物用80 ml第三丁基甲基醚稀釋且藉由抽吸濾出沈澱物，用10 ml第三丁基甲基醚洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得3.73 g (54%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.93 min; MS (ESIpos): m/z = 384 [M+H]+。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.92 (s, 1H), 8.66 (d, 1H), 8.56 (d, 1H), 8.44-8.37 (m, 1H), 4.26 (q, 2H), 1.28 (t, 3H)。
實例 16A
7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
首先將3.60 g (9.38 mmol)7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯裝入28.3 ml水中，添加28.3 ml 36%濃度鹽酸水溶液及28.3 ml THF，且在110℃下攪拌混合物4小時。隨後，在各情況下依次添加28.3 ml 36%濃度鹽酸水溶液兩次，且在110℃下攪拌混合物2天。將反應混合物冷卻至室溫且藉由抽吸濾出沈澱物，用水洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得3.25 g (96%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.90 min; MS (ESIpos): m/z = 356 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 13.71 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.68 (dd, 1H), 8.46-8.39 (m, 1H)。
實例 17A
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
在室溫下，將2.57 ml (14.8 mmol) DIPEA添加至1.50 g (4.22 mmol) 7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸及648 mg (4.64 mmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽於21 ml DMF中之溶液中。在室溫下再攪拌混合物2小時。混合物用1 M鹽酸水溶液酸化，接著用100 ml水及50 ml乙酸乙酯稀釋。分離各相且水相用50 ml乙酸乙酯萃取兩次。經合併之有機相用50 ml pH 7緩衝溶液洗滌兩次且用50 ml飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物與20 ml第三丁基甲基醚一起攪拌且傾析，且在高度真空下乾燥沈澱物。由此獲得1.41 g (78%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.07 min; MS (ESIpos): m/z = 423 [M+H]+。
1
H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 15.02 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.66-8.61 (m, 1H), 8.41-8.34 (m, 1H), 8.07 (d, 1H), 5.34-5.06 (m, 2H), 4.14-3.59 (m, 4H), 3.44-3.20 (m, 1H, 部分在水共振下), 3.19-3.01 (m, 1H)。
實例 18A
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
根據GP3，將81 mg (928 µmol) (S)-3-吡咯啶醇及0.514 ml (2.95 mmol) DIPEA添加至300 mg (843 µmol) 7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸於3.1 ml DMF中，且在室溫下攪拌混合物1小時。接著另外添加20 mg (232 µmol) (S)-3-吡咯啶醇，且在室溫下攪拌混合物1小時。反應混合物用水稀釋且藉由製備型HPLC (乙腈/具有甲酸之水，C18 RP-HPLC)直接純化。由此獲得244 mg (72%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.36 min; MS (ESIpos): m/z = 407 [M+H]
+
。
實例 19A
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-(3-羥基氮雜環丁烷-1-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
在室溫下，將857 µl (4.92 mmol) DIPEA添加至500 mg (1.41 mmol) 7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸及169 mg (1.55 mmol) 3-羥基氮雜環丁烷鹽酸鹽於7 ml DMF中之溶液中。在室溫下再攪拌混合物2.5小時。混合物用1 M鹽酸水溶液酸化，且用30 ml水及30 ml乙酸乙酯稀釋。藉由抽吸濾出沈澱物(第一產物部分)。分離各相且水相用15 ml乙酸乙酯萃取兩次。經合併之有機相用15 ml緩衝液pH 7洗滌兩次且用15 ml飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物與10 ml第三丁基甲基醚一起攪拌且傾析，且在高度真空下乾燥沈澱物(第二產物部分)。由此獲得476 mg (86%理論值，99%純)全部標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.35 min; MS (ESIpos): m/z = 393 [M+H]
+
。
1
H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 14.98 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.62 (d, 1H), 8.39-8.31 (m, 1H), 8.05 (d, 1H), 5.80 (d, 1H), 4.81-3.50 (m, 5H)。
實例 20A
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-(3-羥基-3-甲基氮雜環丁烷-1-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
在室溫下，將857 µl (4.92 mmol) DIPEA添加至500 mg (1.41 mmol) 7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸及191 mg (1.55 mmol) 3-甲基氮雜環丁烷-3-醇鹽酸鹽於7 ml DMF中之溶液中。在室溫下再攪拌混合物2小時。混合物用1 M鹽酸水溶液酸化，且用40 ml水稀釋，且藉由抽吸濾出沈澱物。沈澱物用5 ml水洗滌三次且在高度真空下乾燥。由此獲得534 mg (93%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.43 min; MS (ESIpos): m/z = 407 [M+H]
+
。
1
H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 14.98 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.62 (d, 1H), 8.39-8.32 (m, 1H), 8.06 (d, 1H), 5.72 (s, 1H), 4.48-3.49 (m, 4H), 1.38 (s, 3H)。
實例 21A
(2Z)-2-[(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)羰基]-3-乙氧基丙烯酸乙酯
首先將3-(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)-3-側氧基丙酸乙酯(19.5 g，69.6 mmol)及原甲酸三乙酯(23.1 ml，140 mmol)裝入乙酸酐(46 ml，490 mmol)中且在140℃下攪拌混合物隔夜。反應混合物接著減壓濃縮且在後續步驟中未經進一步處理即進一步反應。假設定量轉化。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.00 min; MS (ESIpos): m/z = 336 [M+H]
+ 實例 22A
7-氯-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯(滯轉異構體混合物)
在氬氣下，首先將(2Z)-2-[(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)羰基]-3-乙氧基丙烯酸乙酯(24.0 g，71.4 mmol)及2-氯-4,6-二氟苯胺(16.3 g，100 mmol)裝入120 ml二氯甲烷中，且在室溫下添加N,N-二異丙基乙胺(87 ml，500 mmol)。在室溫下攪拌反應溶液4小時。接著添加碳酸鉀(9.87 g，71.4 mmol)且在回流下攪拌混合物隔夜。冷卻反應混合物，用300 ml二氯甲烷稀釋且在各情況下用180 ml 1 M鹽酸洗滌三次。有機相經硫酸鈉乾燥、過濾且在減壓下濃縮。因此獲得之懸浮液在150 ml第三丁基甲基醚中攪拌。減壓濃縮所得溶液。所得粗產物藉由矽膠層析法(移動相:環己烷/乙酸乙酯10/1，接著5/1，接著2/1)純化。由此獲得13.75 g目標化合物(46%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.98 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]
+ 實例 23A
7-氯-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸 (滯轉異構體混合物)
將7-氯-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯(6.00 g，99%純，14.2 mmol)懸浮於43 ml THF中。添加水(43 ml)及濃鹽酸(43 ml)且在110℃浴槽溫度下攪拌混合物4小時。在減壓下移除大部分有機溶劑。向懸浮液添加20 ml水且濾出所形成之沈澱物。由此獲得5.12 g目標化合物(92%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.93 min; MS (ESIpos): m/z = 389 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.01), 0.008 (2.85), 2.327 (0.79), 2.671 (0.75), 7.752 (1.44), 7.758 (2.19), 7.774 (2.10), 7.782 (6.12), 7.794 (2.31), 7.805 (5.86), 7.816 (1.78), 8.760 (8.43), 8.778 (8.40), 9.250 (16.00), 13.654 (2.73)。
實例 24A
7-氯-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)
首先將7-氯-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(滯轉異構體混合物，1.50 g，3.85 mmol)裝入34 ml DMF中。添加HATU (1.47 g, 3.85 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(1.6 ml, 9.3 mmol)且在室溫下預攪拌混合物30分鐘。接著添加(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽(745 mg，4.24 mmol)且在室溫下攪拌混合物2分鐘。在未監測反應的情況下直接處理反應物。向混合物中添加340 ml水。濾出沈澱出的固體且在高度真空下乾燥。由此獲得2.13 g目標化合物(62%理論值，純度57%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.46 min; MS (ESIpos): m/z = 510 [M+H]
+ 實例 25A
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(滯轉異構體混合物)
在室溫下，將2.57 ml (14.8 mmol) DIPEA添加至500 mg (1.29 mmol) 7-氯-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(滯轉異構體混合物)及648 mg (4.64 mmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽於21 ml DMF中之溶液中。在室溫下再攪拌混合物12小時。將混合物攪拌至100 ml水中且藉由抽吸濾出沈澱物。沈澱物用水洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得463 mg (78%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.30 min; MS (ESIpos): m/z = 456 [M+H]+。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 15.04 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.80-7.69 (m, 1H),), 5.22 (br. s, 2H), 4.09-3.64 (m, 4H), 3.28-3.17 (m, 1H), 3.11-2.94 (m, 1H)。
實例 26A
1-(2,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
在室溫下，將1.72 ml (9.87 mmol) DIPEA添加至1.00 g (2.82 mmol) 7-氯-1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸及433 g (3.10 mmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽於15.4 ml DMF中之溶液中。在室溫下再攪拌混合物2小時。混合物接著用1 M鹽酸水溶液酸化，且用200 ml水及100 ml乙酸乙酯稀釋。分離各相且水相用50 ml乙酸乙酯萃取兩次。經合併之有機相用25 ml緩衝液pH 7洗滌兩次且用50 ml飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得1.03 g (87%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.19 min; MS (ESIpos): m/z = 422 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 15.04 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.78-7.68 (m, 1H),), 7.47-7.39 (m, 2H), 5.28-5.14 (m, 2H), 4.09-3.62 (m, 4H), 3.26-3.15 (m, 1H), 3.08-2.96 (m, 1H)。
實例 27A
(2Z)-3-乙氧基-2-[(2,5,6-三氯吡啶-3-基)羰基]丙烯酸乙酯
首先裝入3-側氧基-3-(2,5,6-三氯吡啶-3-基)丙酸乙酯(1.6 g，5.40 mmol)及(二乙氧基甲氧基)乙烷(1.80 ml，1.3 mmol)且添加乙酸酐(3.31 ml，35.1 mmol)。在140℃下攪拌混合物隔夜。濃縮混合物且未經任何進一步純化即進一步反應(假設100%轉化)。
實例 28A
6,7-二氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯
在氬氣下，首先將來自前驅體之(2Z)-3-乙氧基-2-[(2,5,6-三氯吡啶-3-基)羰基]丙烯酸乙酯(假設：1.90 g，5.39 mmol)及2,4,6-三氟苯胺(1.11 g，7.54 mmol)裝入50 ml二氯甲烷中。添加N,N-二異丙基乙胺(6.6 ml，38 mmol)且在室溫下再攪拌混合物4小時。接著添加碳酸鉀(745 mg，5.39 mmol)且在回流下攪拌混合物隔夜。反應混合物用120 ml二氯甲烷稀釋且用40 ml 1 M鹽酸洗滌兩次，乾燥且濃縮。殘餘物在矽膠(移動相環己烷/乙酸乙酯=4:1)上純化。濃縮含有產物之溶離份。由此獲得0.298 g (13%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 417 [M+H]
+
。
實例 29A
6,7-二氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
首先將292 mg 6,7-二氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯(700 µmol)裝入THF (4.0 ml，49 mmol)、乙醇(2.0 ml，34 mmol)及水(1.0 ml)中，且在室溫下用濃鹽酸(約2 ml)酸化，接著在110℃下攪拌4天。濾出沈澱物，用水洗滌且在高度真空下乾燥隔夜。由此獲得253 mg (90%理論值，97%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.99 min; MS (ESIpos): m/z = 389 [M+H]
+
。
實例 30A
6-氯-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
將253 mg 6,7-二氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(97%純，631 µmol)溶解於DMF (6.0 ml，78 mmol)中。添加(3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽(99.8 mg，97%純，694 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(384 µl，2.2 mmol)且在室溫下攪拌混合物1小時。混合物用20 ml水、5 ml 1N鹽酸及20 ml乙酸乙酯稀釋。分離有機相且用20 ml乙酸乙酯萃取水相三次。經合併之有機相用20 ml緩衝液 (pH 7)及20 ml飽和氯化鈉水溶液洗滌兩次，經硫酸鎂乾燥，過濾且濃縮。由此獲得172 mg (57%理論值，95%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.33 min; MS (ESIpos): m/z = 456 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.50), 0.008 (4.41), 0.146 (0.53), 1.157 (0.75), 1.175 (1.58), 1.193 (1.14), 1.211 (0.80), 1.229 (0.63), 1.263 (0.54), 1.988 (2.86), 2.327 (0.86), 2.366 (0.56), 2.670 (1.04), 2.710 (0.65), 2.731 (7.25), 2.891 (9.16), 3.940 (5.63), 4.003 (0.85), 4.021 (1.18), 4.038 (1.09), 4.056 (0.63), 4.176 (0.54), 4.194 (0.51), 5.210 (10.86), 5.216 (10.51), 5.754 (0.55), 7.582 (5.35), 7.604 (9.75), 7.626 (5.44), 7.952 (1.08), 8.314 (15.84), 9.065 (16.00), 14.776 (6.50)。
實例 31A
7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-羰基氯
向300 mg (805 µmol) 7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸於6 ml THF中之溶液中添加180 µl (2.40 mmol)亞硫醯二氯且在回流下進一步攪拌混合物3小時，接著在減壓下移除全部揮發性組分。粗產物未經進一步處理即用於下一步驟中(假設轉化係定量的)。
實例 32A
7-氯-
N
-(2,6-二氯苯基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
在室溫下，將340 µl (2.40 mmol)三乙胺及156 mg (963 µmol) 2,6-二氯苯胺添加至314 mg (803 µmol) 7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-羰基氯於20 ml二氯甲烷中之溶液中。混合物在室溫下攪拌30分鐘且在50℃下攪拌隔夜。濃縮反應混合物且溶解於二氯甲烷中，用1 M鹽酸水溶液洗滌兩次，經硫酸鎂乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得255 mg (61%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.28 min; MS (ESIpos): m/z = 516 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.50), -0.008 (5.02), 0.008 (4.03), 0.146 (0.49), 1.245 (0.63), 1.260 (0.75), 1.275 (0.44), 2.073 (11.19), 2.328 (0.67), 2.367 (0.63), 2.524 (2.42), 2.670 (0.76), 2.710 (0.70), 2.891 (0.41), 7.381 (3.22), 7.402 (6.06), 7.422 (4.60), 7.596 (16.00), 7.608 (4.71), 7.616 (13.09), 7.629 (7.60), 7.652 (4.03), 8.767 (6.42), 8.786 (6.40), 9.250 (10.90), 11.287 (9.23)。
實例 33A
2-[(2,5-二氯吡啶-3-基)羰基]-3-(二甲基胺基)丙烯酸乙酯
在室溫下，將1.34 ml (15.39 mmol)乙二醯氯及4滴DMF添加至2.0 g (10.42 mmol) 2,5-二氯菸鹼酸於27 ml二氯甲烷中，且在室溫下攪拌混合物1.5小時。接著濃縮澄清溶液，添加甲苯且再次濃縮混合物(兩次)。將所獲得之中間物溶解於67 ml甲苯中，且添加2.17 ml (15.60 mmol)三乙胺及1.94 g (13.54 mmol) (2E)-3-(二甲基胺基)丙烯酸乙酯。在90℃下攪拌混合物2.5小時，過濾且蒸發至乾燥。藉由矽膠層析法(溶劑：環己烷/乙酸乙酯=1:1)純化粗產物。由此獲得4.10 g (定量產率，約95%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.76 min; MS (ESIpos): m/z = 317 [M+H]
+ 實例 34A
6-氯-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯
將含770 µl (7.60 mmol) 2,4-二氟苯胺之3.8 ml THF添加至2.00 g (6.31 mmol) 2-[(2,5-二氯吡啶-3-基)羰基]-3-(二甲基胺基)丙烯酸乙酯於15 ml乙醇中之溶液中，且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。隨後，在減壓下移除溶劑，將殘餘物溶解於20 ml DMF中，且添加1.31 g (9.48 mmol)碳酸鉀。接著在100℃下攪拌懸浮液1小時，隨後冷卻至室溫且添加至50 ml水。濾出沈澱物且用水洗滌三次。由此獲得1.06 g(46%理論值，91%純)標題化合物，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]
+ 1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
): δ ppm = 8.80 (d, 1 H), 8.78 (s, 1 H), 8.59 (d, 1 H), 7.80 - 7.88 (m, 1 H), 7.57 - 7.65 (m, 1 H), 7.31 - 7.39 (m, 1 H), 4.24 (q, 2 H), 1.28 (t, 3 H)。
實例 35A
6-氯-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
將127 mg (3.02 mmol)單水合氫氧化鋰添加至1.10 g (3.02 mmol) 6-氯-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯於10 ml THF及3.6 ml水中之懸浮液中，且在室溫下攪拌反應混合物1小時。混合物接著用20 ml THF及20 ml水稀釋且使用1M鹽酸水溶液將pH調整至pH 1。添加乙酸乙酯且用乙酸乙酯萃取水相三次。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。由此獲得0.90 g (86%理論值，97%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.96 min; MS (ESIpos): m/z = 337 [M+H]
+ 1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
): δ ppm = 13.98 (br s, 1 H), 9.10 (s, 1 H), 8.95 (d, 1 H), 8.80 (d, 1 H), 7.80 - 7.89 (m, 1 H), 7.58 - 7.67 (m, 1 H), 7.26 - 7.47 (m, 1 H)。
實例 36A
6-氯-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-羰基氯
將58 µl (670 µmol)乙二醯氯及DMF (催化量)添加至150 mg (446 µmol) 6-氯-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸於3 ml THF中之溶液中。在室溫下攪拌反應混合物1小時且在回流下再攪拌一小時。隨後，在減壓下移除全部揮發性組分。粗產物未經進一步處理即用於下一步驟中(假設轉化係定量的)。
實例 37A
7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(100 mg，268 µmol)裝入2.5 ml乙腈中，且添加(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽(51.8 mg，295 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(190 µl，1.1 mmol)。接著添加T3P溶液(丙基膦酸環酐，乙酸乙酯中50%，190 µl，320 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。接著向反應混合物添加水且濾出沈澱之固體且在高度真空下乾燥。由此獲得145 mg目標化合物(定量產率)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.42 min; MS (ESIpos): m/z = 494 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.74), 0.146 (0.69), 0.335 (4.38), 0.348 (3.99), 0.359 (2.50), 0.567 (5.66), 0.579 (6.91), 0.590 (7.00), 0.624 (1.67), 0.651 (2.50), 0.670 (4.11), 0.687 (2.47), 1.224 (2.32), 1.237 (3.75), 1.245 (3.07), 1.257 (3.55), 1.268 (2.06), 2.328 (1.49), 2.366 (1.19), 2.669 (1.43), 2.710 (1.01), 4.370 (2.03), 4.391 (3.66), 4.411 (3.61), 4.433 (1.94), 5.754 (2.89), 7.602 (6.41), 7.624 (12.45), 7.647 (6.50), 8.709 (9.33), 8.728 (9.33), 9.157 (16.00), 9.972 (6.97), 9.996 (6.88)。
實例 38A N
-苯甲基-1,1,1,2,2-五氟丁-3-胺(外消旋物)
在0℃下，向2.00 g (12.2 mmol) 3,3,4,4,4-五氟丁-2-酮於10 ml二氯甲烷中之溶液中添加5.40 ml (18.3 mmol)四異丙醇鈦及2.66 ml (24.4 mmol)苯甲胺。在室溫下再攪拌混合物90分鐘，隨後再冷卻至0℃。隨後，添加2.14 g (34.1 mmol)氰基硼氫化鈉、36 ml甲醇及3Å分子篩。使混合物升溫至室溫且再攪拌2天。接著添加極少水及乙酸乙酯且過濾反應溶液。濾液用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次且用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。殘餘物藉助於正相層析(乙酸乙酯/環己烷1/20)純化兩次，且獲得1.65 g (48%理論值；91%純度)標題化合物。 LC-MS (方法6): R
t
= 2.17 min; MS (ESIpos): m/z = 254 [M+H]
+
。
1
H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.28-7.36 (m, 4H), 7.20-7.27 (m, 1H), 3.83 (dd, 1H), 3.72 (dd, 1H), 3.22-3.30 (m, 1H), 2.43-2.48 (m, 1H), 1.20 (d, 3H)。
實例 39A
1,1,1,2,2-五氟丁-3-胺鹽酸鹽(外消旋物)
向1.50 g (5.92 mmol) N-苯甲基-1,1,1,2,2-五氟戊-3-胺於27.4 ml甲醇中之溶液中添加150 mg鈀/木炭(10%)，且在標準壓力及室溫下實現氫化持續6小時。反應混合物接著經Millipore過濾器過濾且在減壓下移除溶劑。接著將含有餾出之溶劑的接收器轉移至燒瓶且與二噁烷中的4 N鹽酸水溶液摻合且再次濃縮。殘餘物與乙醚一起攪拌且藉由抽吸濾出沈澱物，且在高度真空下乾燥。由此獲得456 mg (39%理論值，100%純)標題化合物。
1
H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.21 (br. s, 3H), 4.40-4.29 (m, 1H), 1.41 (d, 3H)。
實例 40A N
-苯甲基-1,1,1,2,2-五氟戊-3-胺(外消旋物)
在0℃下，向2.00 g (11.4 mmol) 1,1,1,2,2-五氟戊-3-酮於10 ml二氯甲烷中之溶液中添加5.03 ml (17.0 mmol)四異丙醇鈦及2.48 ml (22.7 mmol)苯甲胺。在室溫下再攪拌混合物90分鐘，隨後再冷卻至0℃。隨後，添加2.00 g (31.8 mmol)氰基硼氫化鈉、36 ml甲醇及3Å分子篩。使混合物升溫至室溫且再攪拌2天。反應溶液接著與極少水及乙酸乙酯一起摻合且過濾。濾液用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次且用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。殘餘物藉助於正相層析(乙酸乙酯/環己烷1/20)純化，且獲得989 mg(25%理論值；76%純度)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.27 min; MS (ESIpos): m/z = 268 [M+H]
+ 1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.21-7.36 (m, 5H), 3.73-3.85 (m, 2H), 3.05-3.20 (m, 1H), 1.63-1.75 (m, 1H), 1.49-1.61 (m, 1H), 1.15-1.20 (m, 1H), 0.96 (t, 3H)。
實例 41A
1,1,1,2,2-五氟戊-3-胺鹽酸鹽(外消旋物)
將75 mg鈀/木炭(10%)添加至980 mg (2.75 mmol，75%純)來自實例40A之化合物於11.3 ml甲醇中之溶液中，且在大氣壓及室溫下氫化混合物6小時。反應混合物接著經Millipore過濾器過濾且在減壓下移除溶劑。接著將含有餾出之溶劑的接收器轉移至燒瓶，添加二噁烷中之4 M鹽酸水溶液且再次濃縮混合物。殘餘物與乙醚一起攪拌且藉由抽吸濾出沈澱物，且在高度真空下乾燥。由此獲得379 mg (65%理論值，100%純)標題化合物。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.97 (br. s, 3H), 4.16-4.28 (m, 1H), 1.67-1.94 (m, 2H), 1.05 (t, 3H)。
實例 41B
7-氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯
向12.1 g (38.0 mmol) 2-[(2,6-二氯吡啶-3-基)羰基]-3-乙氧基丙烯酸乙酯(CAS 157373-27-8)及7.83 g (53.2 mmol) 2,4,6-三氟苯胺於60.5 ml DCM中之溶液中添加46.4 ml (266 mmol) DIPEA，且在室溫下攪拌混合物4小時。隨後，添加5.26 g (38.0 mmol)碳酸鉀且在回流下加熱混合物隔夜。混合物用200 ml DCM稀釋且用150 ml 1 M鹽酸水溶液洗滌兩次。有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。所獲得之懸浮液與80 ml第三丁基甲基醚一起攪拌，且藉由抽吸濾出沈澱物，用10 ml第三丁基甲基醚洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得8.60 g (58%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.97 min; 383 [M+H]
+
。
實例 41C
7-氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
首先將8.60 g (22.5 mmol) 7-氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯(實例100A)裝入67.7 ml水中，添加67.7 ml 36%濃度鹽酸水溶液及67.7 ml THF，且在110℃下攪拌混合物4.5小時。將反應混合物冷卻至室溫。藉由抽吸濾出沈澱物，用水洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得7.87 g (98%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.95 min; MS (ESIpos): m/z = 355 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 13.83 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.78 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.67-7.59 (m, 2H)。
實例 42A
6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
在室溫下，將840 µl (4.80 mmol) DIPEA添加至600 mg (1.61 mmol) 7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸及200 µl (2.30 mmol)嗎啉於8.0 ml DMF中之溶液中。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙腈、極少水及甲酸稀釋且粗產物藉由製備型HPLC(管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得658 mg (97%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.76 min; MS (ESIpos): m/z = 424 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.48), 0.146 (0.51), 2.328 (0.72), 2.367 (0.64), 2.671 (0.77), 2.711 (0.64), 3.558 (12.72), 3.570 (14.98), 3.602 (16.00), 3.615 (13.62), 5.754 (1.56), 7.568 (4.70), 7.591 (8.79), 7.613 (4.66), 8.159 (7.09), 8.192 (7.01), 9.099 (13.11), 14.766 (1.97)。
實例 43A
7-氯-6-氟-
N
-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將3.8 ml (6.40 mmol) 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物(T3P，DMF中50%)逐滴添加至600 mg (1.61 mmol) 7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸、296 mg (1.77 mmol) 1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-胺及840 µl (4.80 mmol) DIPEA於14 ml乙酸乙酯中之溶液。在80℃下攪拌混合物隔夜。將反應混合物倒入水及乙酸乙酯中且分離各相。有機相用水洗滌，經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。將殘餘物溶解於極少乙腈中，經Millipore過濾器過濾且藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化三輪。由此獲得414 mg (49%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.47 min; MS (ESIpos): m/z = 522 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.77), -0.008 (7.00), 0.146 (0.77), 2.073 (0.49), 2.328 (0.60), 2.367 (0.60), 2.671 (0.69), 2.711 (0.60), 6.375 (0.60), 6.394 (1.45), 6.412 (2.11), 6.418 (2.09), 6.437 (2.25), 6.454 (1.48), 6.472 (0.55), 7.616 (5.90), 7.638 (11.25), 7.660 (5.93), 8.756 (9.74), 8.774 (9.85), 9.288 (16.00), 10.694 (6.45), 10.720 (6.28)。
實例 44A
7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-
N
-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將1.7 ml (2.80 mmol) 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物(T3P，乙酸乙酯中之50%)逐滴添加至250 mg (703 µmol) 7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸、129 mg (773 µmol) 1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-胺及370 µl (2.10 mmol) DIPEA於10 ml乙酸乙酯中之溶液中。在80℃下攪拌混合物隔夜。向反應混合物添加50 ml水。藉由抽吸濾出沈澱物，用水洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得259 mg (69%理論值，94%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.34 min; MS (ESIpos): m/z = 505 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.14), 0.146 (1.21), 0.931 (1.84), 0.949 (3.59), 0.967 (1.98), 1.175 (0.70), 1.243 (2.59), 1.260 (2.64), 1.273 (1.61), 1.298 (0.51), 1.487 (1.14), 1.496 (1.19), 1.668 (0.58), 1.988 (0.51), 2.328 (1.28), 2.366 (0.93), 2.670 (1.21), 2.710 (0.89), 6.406 (1.45), 6.424 (2.05), 6.448 (2.17), 6.467 (1.38), 8.399 (2.33), 8.405 (2.89), 8.426 (4.48), 8.443 (2.54), 8.449 (2.66), 8.615 (0.49), 8.682 (10.68), 8.688 (9.63), 8.753 (9.52), 8.772 (9.52), 8.922 (0.42), 9.184 (1.75), 9.217 (16.00), 9.284 (0.44), 10.705 (5.78), 10.731 (5.69)。
實例 45A
7-氯-4-側氧基-
N
-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
將1.6 ml (2.80 mmol) 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物(T3P，乙酸乙酯中50%)逐滴添加至250 mg (705 µmol) 7-氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸、166 mg (775 µmol) 1,1,1,2,2-五氟戊-3-胺鹽酸鹽(外消旋物)及490 µl (2.80 mmol) DIPEA於7.0 ml乙酸乙酯中之溶液中。在80℃下攪拌混合物隔夜。向反應混合物添加50 ml水。用乙酸乙酯萃取水相兩次。全部有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。由此獲得360 mg (89%理論值，90%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.45 min; MS (ESIpos): m/z = 514 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.93), -0.008 (7.96), 0.008 (8.00), 0.146 (0.79), 0.834 (0.71), 0.852 (1.07), 0.950 (1.23), 0.968 (0.79), 1.180 (0.89), 1.234 (2.12), 1.266 (0.69), 1.285 (0.99), 1.302 (0.54), 1.410 (15.56), 1.427 (15.60), 1.497 (0.62), 2.328 (1.15), 2.367 (0.93), 2.671 (1.07), 2.711 (0.83), 4.998 (0.77), 5.020 (1.35), 5.044 (1.59), 5.062 (1.61), 5.086 (1.31), 5.107 (0.69), 7.596 (6.17), 7.618 (11.61), 7.640 (6.35), 7.648 (2.20), 7.754 (0.50), 7.773 (12.55), 7.794 (13.00), 7.811 (1.47), 7.832 (1.53), 8.741 (12.74), 8.762 (12.37), 8.772 (1.71), 8.793 (1.37), 9.057 (0.40), 9.143 (16.00), 9.273 (1.69), 9.986 (6.15), 10.010 (5.94)。
實例 46A
7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP3，使360 mg (700 µmol) 7-氯-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺與81.9 mg (586 µmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽及430 µl (2.50 mmol) DIPEA於4 ml DMF中反應。添加1 N鹽酸水溶液且用乙酸乙酯萃取反應混合物。有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得242 mg (60%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.86 min; MS (ESIpos): m/z = 581 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.01), 0.946 (7.17), 0.965 (16.00), 0.983 (7.77), 1.618 (0.90), 1.636 (1.25), 1.644 (1.05), 1.652 (1.50), 1.662 (1.35), 1.671 (1.20), 1.679 (1.40), 1.697 (1.00), 1.920 (1.30), 2.073 (0.80), 2.329 (0.80), 2.368 (0.70), 2.524 (2.46), 2.671 (0.85), 2.711 (0.75), 3.055 (2.76), 3.087 (3.71), 3.239 (2.36), 3.262 (1.76), 3.353 (3.76), 3.606 (2.06), 3.627 (1.71), 3.929 (3.46), 4.050 (3.46), 4.826 (0.80), 4.850 (1.15), 4.876 (1.10), 4.902 (0.85), 5.144 (4.97), 5.152 (4.97), 5.235 (5.02), 5.244 (4.87), 6.770 (7.32), 6.792 (7.52), 7.544 (2.71), 7.566 (4.82), 7.584 (2.76), 8.268 (8.58), 8.290 (8.13), 8.815 (14.50), 10.470 (4.97), 10.495 (4.76)。
實例 47A
7-氯-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
將1.6 ml (2.80 mmol) 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物(T3P，乙酸乙酯中50%)逐滴添加至250 mg (705 µmol) 7-氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸、155 mg (775 µmol) 3,3,4,4,4-五氟丁-2-胺鹽酸鹽(外消旋物)及490 µl (2.80 mmol) DIPEA於7.0 ml乙酸乙酯中之溶液中。在80℃下繼續攪拌30分鐘。在減壓下移除溶劑且藉由製備型HPLC(管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得325 mg (83%理論值，90%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.37 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.17), -0.008 (16.00), 0.008 (8.86), 0.146 (1.23), 0.849 (0.84), 0.942 (1.10), 0.959 (0.65), 1.233 (1.59), 1.283 (0.62), 1.409 (11.07), 1.426 (10.77), 1.487 (0.55), 2.327 (1.53), 2.366 (1.43), 2.524 (9.70), 2.670 (1.62), 2.710 (1.46), 5.020 (0.94), 5.042 (1.20), 5.060 (1.20), 5.086 (1.01), 7.595 (4.38), 7.617 (8.11), 7.639 (4.35), 7.772 (8.18), 7.793 (8.31), 7.811 (0.97), 7.832 (1.04), 8.741 (8.18), 8.761 (7.89), 8.772 (1.07), 8.793 (0.88), 9.142 (10.90), 9.272 (1.14), 9.985 (4.28), 10.009 (4.19)。
實例 48A
7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP3，使325 mg (650 µmol) 7-氯-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)與76.1 mg (545 µmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽及400 µl (2.30 mmol) DIPEA在3.7 ml DMF中反應。添加1 N鹽酸水溶液且用乙酸乙酯萃取反應混合物。有機相經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得239 mg (65%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.76 min; MS (ESIpos): m/z = 567 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.388 (15.08), 1.401 (16.00), 2.672 (0.88), 3.053 (3.67), 3.086 (4.68), 3.601 (3.82), 3.929 (6.14), 4.052 (6.04), 5.005 (2.33), 5.146 (6.42), 5.237 (6.35), 6.768 (5.34), 6.790 (5.44), 7.564 (8.09), 8.261 (5.29), 8.283 (5.16), 8.808 (8.64), 10.549 (4.91), 10.573 (4.81)。
實例 49A
7-氯-4-側氧基-
N
-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將1.6 ml (2.80 mmol) 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物(T3P，乙酸乙酯中50%)逐滴添加至250 mg (705 µmol) 7-氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸、127 mg (775 µmol) 1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-胺鹽酸鹽及490 µl (2.80 mmol) DIPEA於7.0 ml乙酸乙酯中之溶液中。在80℃下攪拌混合物30分鐘。減壓移除溶劑且用50 ml水稀釋反應混合物。濾出形成之沈澱物，用水洗滌且乾燥。由此獲得297 mg (88%理論值，97%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.34 min; MS (ESIpos): m/z = 464 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.062 (0.91), -0.008 (0.99), 0.008 (1.16), 1.653 (16.00), 7.597 (1.19), 7.618 (2.22), 7.641 (1.22), 7.767 (2.50), 7.788 (2.63), 8.746 (2.59), 8.767 (2.51), 9.080 (3.17), 10.101 (2.55)。
實例 50A
7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP3，使297 mg (666 µmol) 7-氯-4-側氧基-N-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺與102 mg (733 µmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽及410 µl (2.30 mmol) DIPEA於6.0 ml DMF中反應。向反應混合物添加20 ml水及1 N鹽酸水溶液。濾出所形成之沈澱物，用水洗滌且乾燥。由此獲得272 mg (77%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.73 min; MS (ESIpos): m/z = 531 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.79), 0.008 (1.49), 1.634 (16.00), 2.073 (5.68), 3.052 (0.77), 3.083 (1.03), 3.226 (0.66), 3.235 (0.76), 3.257 (0.63), 3.268 (0.68), 3.348 (1.35), 3.593 (0.56), 3.603 (0.65), 3.621 (0.52), 3.630 (0.49), 3.923 (0.97), 4.046 (0.97), 6.759 (1.98), 6.782 (2.03), 7.545 (0.73), 7.567 (1.31), 7.585 (0.74), 8.266 (2.23), 8.289 (2.10), 8.739 (3.50), 10.653 (2.89)。
實例 51A
7-氯-
N
-[(1
S
)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將26 ml (45.0 mmol) 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物(T3P，乙酸乙酯中50%)逐滴添加至4.00 g (11.3 mmol) 7-氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸、2.18 g (12.4 mmol) (1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽及7.9 ml (45.0 mmol) DIPEA於110 ml乙酸乙酯中之溶液中。在80℃下繼續攪拌30分鐘。減壓移除溶劑且用150 ml水稀釋反應混合物。濾出沈澱物，用水洗滌且乾燥。由此獲得5.30 g (95%理論值，96%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.33 min; MS (ESIpos): m/z = 476 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.55), -0.062 (4.39), 0.008 (4.02), 0.146 (0.52), 0.322 (1.81), 0.335 (3.73), 0.348 (3.42), 0.361 (1.95), 0.370 (1.38), 0.566 (5.17), 0.580 (6.61), 0.589 (5.43), 0.609 (2.33), 0.623 (1.38), 0.645 (1.67), 0.652 (2.21), 0.666 (3.50), 0.679 (1.90), 0.688 (2.13), 0.694 (2.24), 0.716 (0.40), 0.850 (0.43), 0.934 (1.01), 1.157 (1.38), 1.175 (2.70), 1.193 (1.52), 1.202 (0.83), 1.215 (1.55), 1.223 (2.13), 1.235 (3.76), 1.244 (3.07), 1.256 (3.56), 1.265 (2.10), 1.275 (1.49), 1.282 (1.41), 1.300 (0.57), 1.486 (0.80), 1.989 (4.83), 2.329 (1.01), 2.367 (0.89), 2.524 (4.77), 2.671 (1.03), 2.711 (0.83), 4.003 (0.43), 4.021 (1.18), 4.039 (1.15), 4.056 (0.40), 4.243 (0.49), 4.261 (0.40), 4.341 (0.60), 4.361 (1.87), 4.382 (3.22), 4.403 (3.04), 4.424 (1.61), 4.444 (0.43), 7.594 (6.32), 7.617 (11.78), 7.639 (6.18), 7.699 (0.43), 7.776 (11.69), 7.797 (12.21), 8.748 (12.18), 8.769 (11.75), 8.940 (0.46), 9.126 (16.00), 10.025 (6.55), 10.049 (6.26)。
實例 52A N
-[(1
S
)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP3，使5.30 g (11.1 mmol) 7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺與1.87 g (13.4 mmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽及6.8 ml (39.0 mmol) DIPEA於50 ml DMF中反應。向反應混合物添加400 ml水及1 N鹽酸水溶液。濾出沈澱物，用水洗滌且乾燥。由此獲得5.47 g (91%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.71 min; MS (ESIpos): m/z = 543 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.74), -0.061 (4.97), -0.008 (6.91), 0.008 (5.18), 0.146 (0.66), 0.324 (1.75), 0.334 (2.68), 0.346 (2.68), 0.358 (2.07), 0.370 (1.01), 0.510 (1.88), 0.522 (2.81), 0.535 (2.49), 0.547 (2.58), 0.556 (2.24), 0.567 (2.75), 0.578 (2.32), 0.588 (2.16), 0.598 (1.73), 0.612 (1.10), 0.626 (1.37), 0.636 (1.52), 0.647 (2.47), 0.657 (2.16), 0.662 (2.11), 0.670 (2.03), 0.682 (1.01), 0.691 (0.72), 0.944 (1.48), 1.165 (0.82), 1.177 (1.44), 1.186 (1.99), 1.198 (3.15), 1.206 (2.49), 1.218 (3.32), 1.231 (2.32), 1.238 (1.99), 1.263 (1.33), 1.398 (0.59), 2.328 (0.85), 2.367 (0.78), 2.524 (2.62), 2.670 (0.80), 2.711 (0.68), 2.731 (3.21), 2.891 (3.89), 3.056 (3.25), 3.088 (4.25), 3.230 (2.62), 3.239 (2.98), 3.261 (2.35), 3.272 (2.32), 3.353 (4.10), 3.600 (2.37), 3.609 (2.71), 3.627 (2.20), 3.637 (1.99), 3.927 (3.89), 4.050 (3.89), 4.356 (1.39), 4.377 (2.41), 4.398 (2.39), 4.418 (1.25), 5.145 (3.74), 5.233 (3.53), 6.772 (8.20), 6.794 (8.43), 7.543 (3.17), 7.566 (5.60), 7.583 (3.19), 7.953 (0.51), 8.271 (9.72), 8.293 (9.13), 8.798 (16.00), 10.558 (5.71), 10.582 (5.45)。
實例 53A
1,1,1,2,2-五氟-N-[(1S)-1-苯基乙基]戊-3-亞胺
首先將1,1,1,2,2-五氟戊-3-酮(50.0 g，284 mmol)裝入2 l乙醚中且冷卻至0℃。接著快速添加(1S)-1-苯基乙胺(34.4 g，284 mmol)及三乙胺(79 ml，570 mmol)，且在0℃之內部溫度下，隨後緩慢地逐滴添加氯化鈦(IV) (甲苯中1 M，140 ml，140 mmol)。接著移除冰浴且使混合物升溫至室溫。隨後將反應混合物在回流下加熱1小時，接著在室溫下攪拌隔夜。向反應混合物添加矽藻石，攪拌混合物1小時，接著經矽藻石過濾且矽藻石用乙醚徹底洗滌。在20℃水浴溫度下濃縮濾液。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。由此獲得79 g (定量產率)標題化合物。
實例 54A
1,1,1,2,2-五氟-N-[(1S)-1-苯基乙基]戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構純)
首先將1,1,1,2,2-五氟-N-[(1S)-1-苯基乙基]戊-3-亞胺(79 g，283 mmol)裝入640 ml二氯甲烷中，接著添加130 ml DMF及分子篩3Å，且在室溫下攪拌混合物1小時。使反應混合物冷卻至-50℃，且緩慢逐滴添加三氯矽烷(86 mL，850 mmol)。30分鐘後且在-70℃至-50℃內部溫度下，混合物首先用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅，接著用固體碳酸氫鈉淬滅直至達到pH 7。添加二氯甲烷且分離各相。有機相經硫酸鈉乾燥，接著添加200 ml含鹽酸之乙醚(2 M溶液)且在減壓下濃縮粗產物。由此獲得48.6 g (54%理論值)標題化合物。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.82 (br. s, 1H), 7.26 -7.60 (m, 5H), 4.13 (br. s, 1H), 3.20 (br. s, 1H), 1.40-1.77 (m, 5H), 0.80 (t, 3H)。
實例 55A
1,1,1,2,2-五氟戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構純)
將48.6 g (153 mmol) 1,1,1,2,2-五氟-N-[(1S)-1-苯基乙基]戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構性純，來自實例54A)溶解於250 ml乙醇中，添加4.86 g 氫氧化鈀(II)(碳上20%)且接著在室溫及標準壓力下氫化混合物隔夜。濾出沈澱物且徹底洗滌，且小心地濃縮濾液。由此獲得31.7 g(97%理論值)標題化合物。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.16 (br. s, 3H), 4.12-4.28 (m, 1H), 3.47 (br. s, 1H), 1.69-1.96 (m, 2H), 1.06 (t, 3H)。
實例 56A
3,3,4,4,4-五氟-N-[(1S)-1-苯基乙基]丁-2-亞胺
首先將3,3,4,4,4-五氟丁-2-酮(200 g，1.23 mol)裝入6.4 l乙醚中且冷卻至-40℃。接著快速添加(1S)-1-苯基乙胺(160 ml 1.2 mol)及三乙胺(340 ml，2.5 mol)，且隨後在0℃內部溫度下緩慢地逐滴添加氯化鈦(IV) (甲苯中1 M，620 ml，620 mmol)。接著移除冰浴且使混合物升溫至室溫。隨後將反應混合物在回流下加熱1小時，接著在室溫下攪拌隔夜。向反應混合物添加矽藻土，攪拌混合物1小時，接著經矽藻土過濾且矽藻土用乙醚徹底洗滌。在25℃水浴溫度下濃縮濾液。將環己烷添加至殘餘物且殘餘物再次經矽藻土濾出且用環己烷洗滌。在25℃水浴溫度下濃縮濾液。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。由此獲得289 g (88%理論值)標題化合物。
實例 57A
3,3,4,4,4-五氟-N-[(1S)-1-苯基乙基]丁-2-胺鹽酸鹽(對映異構純)
首先將3,3,4,4,4-五氟-N-[(1S)-1-苯基乙基]丁-2-亞胺(239 g, 901 mmol)裝入1.9 l二氯甲烷中，接著添加420 ml DMF及分子篩3Å 且在室溫下攪拌混合物1小時。接著使反應混合物冷卻至-50℃，且緩慢逐滴添加三氯矽烷(270 mL，2.7 mmol)。30分鐘後且在-70℃至-50℃之內部溫度下，小心地用半濃縮氫氧化鈉溶液淬滅混合物直至達到pH 7。添加二氯甲烷且分離各相。有機相經硫酸鈉乾燥，接著添加2.2 l含鹽酸之乙醚(2 M溶液)且在減壓下濃縮粗產物。由此獲得192 g (70%理論值)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.22 min; MS (ESIpos): m/z = 268 [M-HCl+H]
+ 實例 58A
3,3,4,4,4-五氟丁-2-胺鹽酸鹽(對映異構純)
將192 g (632 mmol) 3,3,4,4,4-五氟-N-[(1S)-1-苯基乙基]丁-2-胺鹽酸鹽(對映異構純，來自實例57A)溶解於1.2 l乙醇中，添加19.2 g氫氧化鈀(II)(碳上20%)，接著在室溫及標準壓力下氫化混合物隔夜。濾出沈澱物且徹底洗滌，且小心地濃縮濾液。由此獲得117 g (93%理論值)標題化合物。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.29 (br. s, 3H), 4.22-4.44 (m, 1H), 1.42 (d, H)。
實例 59A
7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(200 mg，537 µmol)裝入1.3 ml乙腈中，且添加1,1,1,2,2-五氟戊-3-胺鹽酸鹽(外消旋物，138 mg，644 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(370 µl，2.1 mmol)，隨後380 µl (50%純，640 µmol) T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%)。攪拌反應溶液隔夜，接著添加至水。自乙腈釋放混合物且用二氯甲烷萃取三次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得282 mg目標化合物(97%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.53 min; MS (ESIpos): m/z = 532 [M+H]
+ 實例 60A
7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(5.00 g，13.4 mmol)裝入33 ml乙腈中。添加3.44 g (16.1 mmol) 1,1,1,2,2-五氟戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構純，來自實例55A)及N,N-二異丙基乙胺(9.3 ml，54 mmol)。接著添加T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%，9.5 ml，50%純，16 mmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。向反應溶液添加水。形成黏稠懸浮液。將其用稀鹽酸酸化且在室溫下攪拌1小時。濾出固體，接著用水洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得6.69 g目標化合物(84%理論值，純度90%)。 LC-MS (方法5): R
t
= 1.67 min; MS (ESIpos): m/z = 532 [M+H]
+ 實例 61A
4-[3-氟-5-側氧基-6-{[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]胺甲醯基}-8-(2,4,6-三氟苯基)-5,8-二氫-1,8-萘啶-2-基]-2-(羥基甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(非對映異構體混合物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(來自實例60A之對映異構性純，200 mg，90%純，338 µmol)裝入1.7 ml DMF，且在室溫下添加N,N-二異丙基乙胺(590 µl，3.4 mmol)及(2-(羥基甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(80.5 mg，372 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液1小時。反應溶液與水摻合且用乙酸乙酯萃取三次。經合併之有機相用水洗滌兩次，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析法(移動相：環己烷/乙酸乙酯=2/1)純化粗產物。由此獲得204 mg目標化合物(85%理論值，純度100%)，呈兩種非對映異構體之非對映異構體混合物形式。 LC-MS (方法5): R
t
= 1.62 min; MS (ESIpos): m/z = 712 [M+H]
+ 實例 62A
7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(200 mg，537 µmol)裝入1.3 ml乙腈中。添加1,1,1,2,2-五氟丁-3-胺鹽酸鹽(外消旋物，129 mg，644 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(370 µl，2.1 mmol)，隨後380 µl (50%純，640 µmol) T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%)。攪拌反應溶液隔夜。將反應溶液添加至水且沈澱。濾出固體且在高度真空下乾燥隔夜。由此獲得250 mg目標化合物(76%理論值，純度84%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.45 min; MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H]
+ 實例 63A
7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(1.50 g，4.03 mmol)裝入38 ml乙腈中。添加3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-胺鹽酸鹽(1.12 g，5.23 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(3.5 ml, 20 mmol)，隨後3.6 ml (50%純，6.0 mmol) T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。接著向反應溶液添加水。在減壓下，溶液幾乎完全脫除乙腈，且固體在蒸發時逐漸沈澱出來。用水洗滌所獲得之固體。在高度真空下乾燥固體。由此獲得1.96 g目標化合物(91%理論值，99%純)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.50 min; MS (ESIpos): m/z = 532 [M+H]
+ 實例 64A
(2Z)-2-[(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)羰基]-3-乙氧基丙烯酸乙酯
首先將3-(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)-3-側氧基丙酸乙酯(500 mg，1.79 mmol)及(二乙氧基甲氧基)乙烷(590 µl，3.6 mmol)裝入乙酸酐(1.2 ml，12 mmol)中且在140℃下攪拌隔夜。濃縮反應溶液且未經進一步純化即在下一步驟中進一步反應。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.01 min; MS (ESIpos): m/z = 336 [M+H]
+ 實例 65A
7-氯-6-氟-1-(4-氟-2,6-二甲基苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯
首先將(2Z)-2-[(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)羰基]-3-乙氧基丙烯酸乙酯(9.36 g，27.8 mmol)及4-氟-2,6-二甲基苯胺(4.65 g，33.4 mmol)裝入47 ml二氯甲烷中，且在室溫下添加N,N-二異丙基乙胺(34 ml，194.9 mmol) (放熱)。在室溫下攪拌反應溶液4小時。隨後，添加碳酸鉀(3.85 g，27.84 mmol)且在回流下攪拌混合物隔夜。接著冷卻反應混合物，用二氯甲烷稀釋且用1M鹽酸洗滌直至顏色改變。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮且在高度真空下乾燥。藉由矽膠層析法(移動相：環己烷/乙酸乙酯：5/1至環己烷/乙酸乙酯：3/1)純化粗產物。由此獲得6.47 g目標化合物(58%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.00 min; MS (ESIpos): m/z = 393 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.95), 0.008 (0.78), 1.254 (2.75), 1.271 (5.79), 1.289 (2.77), 1.975 (16.00), 2.523 (0.61), 4.205 (0.87), 4.222 (2.65), 4.240 (2.61), 4.258 (0.82), 5.754 (3.81), 7.188 (2.22), 7.211 (2.23), 8.543 (1.72), 8.561 (5.10)。
實例 66A
7-氯-6-氟-1-(4-氟-2,6-二甲基苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸
將7-氯-6-氟-1-(4-氟-2,6-二甲基苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯(6.47 g，99%純，16.3 mmol)懸浮於49 ml THF中。添加49 ml 水及49 ml濃鹽酸且在110℃浴槽溫度下攪拌混合物4小時。在減壓下移除大部分THF。用冰冷卻，向水相添加100 ml水。沈澱出固體。將其濾出且用水沖洗三次。由此獲得5.35 g目標化合物(89%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.03 min; MS (ESIpos): m/z = 365 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.957 (16.00), 1.975 (0.43), 7.195 (2.23), 7.218 (2.20), 8.775 (1.30), 8.794 (1.29), 8.871 (2.87)。
實例 67A
7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-1-(4-氟-2,6-二甲基苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-1-(4-氟-2,6-二甲基苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(1.00 g，2.74 mmol)裝入25.5 ml乙腈中，且添加(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽(530 mg，3.02 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(1.9 ml，11 mmol)，隨後1.9 ml (3.29 mmol) T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。添加更多(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽(144 mg，823 µmol)、0.32 ml (1.1 mmol) T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%)及N,N-二異丙基乙胺(0.48 ml，2.74 mmol)。在室溫下繼續攪拌反應溶液過週末。隨後將混合物脫除乙腈且用二氯甲烷萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在高度真空下乾燥。藉由管柱層析(矽膠，移動相：二氯甲烷/環己烷= 7.5/1)純化殘餘物。由此獲得1.05 g (99%純，78%理論值)目標化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.28 min; MS (ESIpos): m/z = 486 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.25), 0.339 (0.87), 0.353 (0.89), 0.364 (0.51), 0.554 (0.81), 0.567 (1.37), 0.582 (1.20), 0.601 (0.63), 0.610 (0.52), 0.651 (0.46), 0.666 (0.81), 0.671 (0.70), 0.684 (0.55), 1.219 (0.47), 1.231 (0.87), 1.240 (0.65), 1.251 (0.75), 1.264 (0.44), 1.957 (16.00), 4.361 (0.43), 4.382 (0.73), 4.402 (0.73), 4.422 (0.40), 5.754 (3.95), 7.193 (3.42), 7.216 (3.43), 8.709 (7.53), 8.726 (2.88), 10.138 (1.51), 10.162 (1.49)。
實例 68A
7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(500 mg，1.34 mmol)裝入5 ml乙腈中。添加3,3,4,4,4-五氟丁-2-胺鹽酸鹽(對映異構純) (321 mg，1.61 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(930 µl，5.4 mmol)。接著添加T3P溶液(乙酸乙酯中的50%丙烷膦酸酐溶液) (950 µl，50 %純，1.6 mmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。將反應溶液添加至水中。蒸發乙腈且殘餘物用二氯甲烷萃取三次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得785 mg (99%理論值，88%純)標題化合物。 LC-MS (方法5): R
t
= 1.60 min; MS (ESIpos): m/z = 518 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.04), -0.008 (8.48), 0.008 (8.27), 0.146 (1.00), 0.891 (0.71), 0.910 (0.58), 1.157 (2.01), 1.175 (4.01), 1.193 (2.59), 1.244 (2.51), 1.259 (2.92), 1.356 (0.67), 1.411 (14.66), 1.429 (14.62), 1.455 (0.92), 1.473 (0.84), 1.511 (2.26), 1.528 (2.21), 1.864 (0.50), 1.988 (6.56), 2.328 (1.46), 2.367 (1.80), 2.671 (1.50), 2.711 (1.75), 4.003 (0.58), 4.021 (1.50), 4.039 (1.55), 4.057 (0.54), 5.000 (0.71), 5.022 (1.34), 5.045 (1.59), 5.065 (1.55), 5.088 (1.25), 5.109 (0.67), 7.270 (0.58), 7.337 (0.71), 7.347 (0.71), 7.367 (1.21), 7.385 (1.13), 7.401 (1.50), 7.418 (0.84), 7.467 (0.75), 7.490 (0.58), 7.604 (6.02), 7.626 (11.07), 7.648 (5.81), 8.412 (0.50), 8.574 (0.46), 8.687 (0.92), 8.702 (10.11), 8.721 (9.78), 8.750 (0.50), 9.055 (1.21), 9.173 (16.00), 9.877 (0.46), 9.896 (0.50), 9.938 (5.89), 9.961 (5.68)。
實例 69A
(2R,3S)-3-羥基吡咯啶-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-乙酯
首先將(3S)-3-羥基-D-脯胺酸乙酯(1.13 g，7.08 mmol)裝入50 ml二氯甲烷中。添加三乙胺(3.0 ml，21 mmol) 及二碳酸二第三丁酯(1.8 ml，7.8 mmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌反應混合物。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中且用1M鹽酸洗滌兩次。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得1.3 g (57%理論值，80%純)標題化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.152 (0.77), 1.170 (1.65), 1.178 (1.69), 1.188 (0.96), 1.195 (3.23), 1.213 (1.56), 1.321 (16.00), 1.383 (8.03), 1.988 (0.75), 3.266 (0.62), 3.294 (0.42), 3.404 (0.44), 3.409 (0.43), 3.423 (0.42), 4.019 (0.41), 4.037 (0.44), 4.046 (0.70), 4.064 (0.85), 4.082 (0.46), 4.111 (0.57), 4.129 (0.54), 4.150 (1.28), 4.156 (0.42), 4.167 (1.45), 4.433 (0.46), 4.449 (0.53), 5.398 (1.16), 5.410 (1.11)。
實例 70A
(2S,3S)-3-羥基-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
在氬氣下，首先將(2R,3S)-3-羥基吡咯啶-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-乙酯(1.30 g，5.01 mmol)裝入20 ml THF中且冷卻至0℃。在0℃下添加硼氫化鋰(10 ml，2.0 M，20 mmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。將反應混合物冷卻至0℃且小心地添加飽和氯化銨水溶液。添加二氯甲烷且在Extrelut濾芯上分離混合物。有機相藉由蒸發濃縮且殘餘物在高度真空下乾燥。由此獲得506 mg (37%理論值，80%純)標題化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.391 (16.00), 1.409 (2.86), 1.860 (0.40), 3.601 (0.62), 3.608 (0.58), 3.615 (0.78), 3.629 (0.46), 3.633 (0.42)。
實例 71A
(2S,3S)-2-(羥基甲基)吡咯啶-3-醇鹽酸鹽
首先將(2R,3S)-3-羥基吡咯啶-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-乙酯(506 mg，1.95 mmol)裝入20 ml於二噁烷中之4N鹽酸水溶液中且在室溫下攪拌隔夜。反應混合物藉由蒸發濃縮且殘餘物在高度真空下乾燥。由此獲得380 mg (127%理論值，80%純)標題化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.17), -0.008 (10.39), 0.008 (8.46), 0.146 (1.12), 0.912 (0.42), 1.130 (0.62), 1.180 (0.99), 1.235 (1.17), 1.259 (1.59), 1.276 (1.51), 1.292 (1.07), 1.308 (0.84), 1.356 (3.67), 1.596 (1.31), 1.847 (3.37), 1.857 (3.45), 1.862 (3.72), 1.872 (5.90), 1.876 (5.04), 1.881 (5.11), 1.884 (4.79), 1.891 (4.81), 1.895 (5.01), 1.900 (4.59), 1.954 (1.36), 1.974 (3.15), 1.985 (4.12), 1.998 (5.48), 2.008 (7.59), 2.032 (4.96), 2.042 (3.97), 2.055 (1.89), 2.067 (1.84), 2.073 (2.08), 2.090 (0.97), 2.104 (1.54), 2.115 (2.06), 2.139 (1.81), 2.148 (1.44), 2.182 (0.84), 2.328 (1.96), 2.367 (1.04), 2.524 (1.24), 2.666 (1.02), 2.670 (1.44), 2.675 (0.99), 2.711 (0.45), 3.150 (3.84), 3.161 (5.23), 3.174 (6.15), 3.187 (6.55), 3.201 (5.83), 3.212 (6.23), 3.236 (5.95), 3.241 (5.93), 3.260 (3.82), 3.306 (6.40), 3.322 (7.64), 3.343 (6.05), 3.364 (2.90), 3.450 (8.83), 3.462 (8.88), 3.474 (8.33), 3.490 (7.32), 3.502 (6.38), 3.609 (10.64), 3.631 (10.54), 3.638 (14.78), 3.660 (13.59), 3.680 (3.32), 3.699 (3.27), 3.708 (2.68), 3.712 (3.00), 3.733 (11.88), 3.746 (12.38), 3.762 (9.30), 3.774 (9.13), 4.073 (4.22), 4.106 (5.66), 4.266 (4.34), 4.274 (4.49), 4.300 (16.00), 4.669 (2.95), 4.678 (4.94), 5.329 (0.72), 7.112 (1.49), 7.240 (1.56), 7.368 (1.41), 8.748 (2.90), 9.193 (1.39), 9.383 (1.81), 10.016 (0.45)。
實例 72A
3-(2,6-二氯吡啶-3-基)-3-側氧基丙酸乙酯
在氬氣下，首先裝入1500 ml THF且添加2,6-二氯菸鹼酸(200 g，1.04 mol)。每次添加極少4-二甲基胺基吡啶(63.6 g，521 mmol)及1,1'-羰基二咪唑(253 g，1.56 mol)(氣體逸出)。在室溫下攪拌混合物24小時。形成沈澱物(懸浮液1)。在另一燒瓶中，首先將3-乙氧基-3-側氧基丙酸鉀(266 g，1.56 mol)裝入1000 ml THF中，且添加氯化鎂(179 g，1.87 mol)。在50℃下攪拌懸浮液24小時(懸浮液2)。隨後向懸浮液1添加懸浮液2且在室溫下攪拌24小時。接著將混合物攪拌至5 l冰及約20 l水中且使用約500 ml鹽酸/水(1:1)調整至pH 4。隨後用乙酸乙酯萃取混合物兩次。有機相用10%濃度NaCl溶液洗滌。分離各相，經硫酸鎂乾燥，藉由蒸發濃縮且在高度真空下乾燥。由此獲得255 g目標化合物(93.5%理論值)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.89 min; MS (ESIpos): m/z = 261 [M+H]
+ 實例 73A
(2Z)-2-[(2,6-二氯吡啶-3-基)羰基]-3-乙氧基丙烯酸乙酯
首先裝入3-(2,6-二氯吡啶-3-基)-3-側氧基丙酸乙酯(4 g，15 mmol)及(二乙氧基甲氧基)乙烷(5 ml，30 mmol)且添加乙酸酐(11.7 ml，99 mmol)。在140℃下攪拌反應混合物24小時，且在冷卻後，藉由蒸發濃縮混合物。由此獲得5.3 g目標化合物(109%理論值)。
實例 74A
N-苯甲基-1,1-二環丙基甲烷亞胺
首先將二環丙基甲酮(13 ml，110 mmol)裝入430 ml乙醚中且冷卻至-40℃。接著快速添加1-苯基甲胺(12 ml，110 mmol)及三乙胺(32 ml，230 mmol)，且在0℃內部溫度下緩慢地逐滴添加氯化鈦(IV) (57 ml，57 mmol，甲苯中1 M)。接著移除冰浴且使混合物升溫至室溫。接著在回流下攪拌混合物1小時。在室溫下再攪拌混合物3小時。接著添加矽藻土，且攪拌混合物1小時。接著經矽藻土濾出混合物，用乙醚重複洗滌。在30℃浴槽溫度下，藉由蒸發小心地濃縮濾液。由此獲得18.86 g目標化合物(73%理論值，純度88%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.542 (1.44), 0.550 (3.04), 0.558 (4.43), 0.562 (2.41), 0.565 (2.73), 0.571 (3.30), 0.578 (5.02), 0.585 (2.16), 0.664 (2.05), 0.671 (4.51), 0.678 (3.98), 0.683 (5.39), 0.690 (3.22), 0.700 (1.42), 0.830 (0.46), 0.839 (1.51), 0.843 (2.02), 0.851 (8.62), 0.855 (8.05), 0.863 (8.85), 0.868 (9.08), 0.877 (5.06), 0.881 (2.92), 0.887 (7.68), 0.894 (1.79), 0.901 (0.41), 0.907 (0.50), 0.922 (0.49), 0.956 (1.93), 0.966 (4.42), 0.971 (4.39), 0.979 (4.47), 0.984 (4.15), 0.996 (1.28), 1.186 (0.70), 1.198 (1.38), 1.206 (1.44), 1.218 (2.55), 1.230 (1.31), 1.238 (1.20), 1.250 (0.55), 1.929 (0.78), 1.942 (1.59), 1.949 (1.59), 1.954 (0.98), 1.963 (3.02), 1.971 (0.92), 1.975 (1.51), 1.984 (1.44), 1.997 (0.66), 2.104 (0.65), 2.115 (1.21), 2.122 (1.09), 2.128 (0.77), 2.134 (2.24), 2.142 (0.78), 2.147 (1.20), 2.153 (1.01), 2.166 (0.60), 2.299 (7.88), 3.217 (0.51), 3.313 (4.75), 4.582 (16.00), 7.142 (0.84), 7.162 (1.77), 7.174 (1.38), 7.180 (2.56), 7.191 (2.64), 7.202 (1.07), 7.208 (1.78), 7.212 (1.21), 7.230 (1.81), 7.235 (0.73), 7.249 (2.09), 7.255 (1.43), 7.260 (2.42), 7.268 (1.78), 7.276 (10.04), 7.282 (12.94), 7.289 (1.48), 7.299 (6.19), 7.303 (2.61), 7.315 (0.93), 7.318 (1.58)。
實例 75A
N-苯甲基-1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽
首先將N-苯甲基-1,1-二環丙基甲烷亞胺(35.4 g，89%純度，158 mmol)裝入320 ml乙腈與70 ml DMF之混合物中且冷卻至0℃。在0℃下添加二氟化氫鉀(39.5 g，506 mmol)，且在0℃下向混合物添加TFA (22 ml，280 mmol)。接著逐滴添加三甲基(三氟甲基)矽烷(82 ml，550 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物4小時。將反應溶液冷卻至0℃，且添加二氟化氫鉀(9.26 g，119 mmol)及三甲基(三氟甲基)矽烷(18 ml，120 mmol)。在室溫下進一步攪拌反應溶液隔夜。添加二氟化氫鉀(9.26 g，119 mmol)、三氟乙酸(4.9 ml，63 mmol)及三甲基(三氟甲基)矽烷(12 ml，79 mmol)且在室溫下繼續攪拌3.5小時。接著添加三甲基(三氟甲基)矽烷(23 ml，160 mmol)且在60℃下攪拌混合物2.5小時。添加飽和碳酸氫鈉水溶液且用乙酸乙酯萃取混合物兩次。經合併之有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，經硫酸鈉乾燥且過濾。接著向濾液添加含4 M HCl之二噁烷(400 ml，1.6 mol)且在30℃水浴溫度下經旋轉式蒸發器濃縮混合物。殘餘物藉由急驟層析(環己烷/二氯甲烷20/1至環己烷/二氯甲烷10/1)純化。由此獲得10.64 g目標化合物(22%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.31 min; MS (ESIpos): m/z = 270 [M-HCl+H]
+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.25), 0.008 (1.56), 0.591 (10.11), 0.750 (13.34), 0.876 (1.90), 0.952 (1.06), 1.091 (6.01), 1.236 (1.18), 1.906 (0.42), 2.329 (0.82), 2.367 (0.46), 2.571 (0.49), 2.589 (0.63), 2.671 (0.80), 2.711 (0.55), 3.615 (0.68), 4.212 (4.68), 5.107 (0.66), 7.358 (13.21), 7.375 (16.00), 7.502 (7.66)。
實例 76A
1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽
在氬氣下，首先將N-苯甲基-1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽(10.6 g，34.8 mmol)裝入200 ml乙醇中，且添加含1 M鹽酸之乙醇(170 ml)及鈀/活性碳(3.70 g，10%純)。在大氣壓及室溫下氫化混合物60分鐘。混合物經矽藻土過濾，添加含4 M鹽酸之二噁烷(87 ml，350 mmol)且藉由在30℃水浴溫度下蒸發來濃縮混合物。向殘餘物添加乙醚，攪拌混合物10分鐘且濾出所獲得之固體。由此獲得6.39 g目標化合物(84%理論值)，其未經進一步純化即進一步反應。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.49 min; MS (ESIpos): m/z = 180 [M-HCl+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.489 (2.34), 0.502 (4.38), 0.512 (7.72), 0.524 (12.33), 0.535 (11.32), 0.546 (9.58), 0.557 (10.43), 0.569 (9.17), 0.581 (11.40), 0.591 (13.47), 0.603 (8.94), 0.614 (4.93), 0.626 (3.21), 0.778 (2.86), 0.791 (6.70), 0.803 (9.45), 0.815 (13.47), 0.827 (13.55), 0.838 (11.65), 0.850 (13.01), 0.862 (13.43), 0.874 (9.35), 0.886 (6.06), 0.899 (2.37), 1.056 (4.75), 1.070 (9.13), 1.078 (10.15), 1.091 (16.00), 1.099 (6.84), 1.105 (8.35), 1.113 (7.66), 1.126 (3.14), 8.942 (2.96)。
實例 77A
N-苯甲基-1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙-1-胺鹽酸鹽
在氬氣下，首先將N-苯甲基-1,1-二環丙基甲烷亞胺(4.00 g，20.1 mmol)裝入40 ml乙腈及8.9 ml DMF的混合物中且冷卻至0℃。在0℃下添加二氟化氫鉀(5.02 g，64.2 mmol)，且在0℃下向混合物添加TFA (2.8 ml，36 mmol)。接著逐滴添加三甲基(五氟乙基)矽烷(12 ml，70 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3天。在60℃下攪拌混合物7.5小時。添加20 ml乙腈及4.5 ml DMF且將混合物冷卻至0℃。在0℃下，添加二氟化氫鉀(1.88 g，24.1 mmol)、TFA (770 µl，10 mmol)及三甲基(五氟乙基)矽烷(5.3 ml，30 mmol)且在室溫下繼續攪拌隔夜。添加飽和碳酸氫鈉水溶液且用乙酸乙酯萃取混合物兩次。經合併之有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥且過濾。接著向濾液添加4 M含HCl之二噁烷(50 ml，200 mmol)且藉由蒸發濃縮混合物。殘餘物藉由矽膠層析(移動相：環己烷/二氯甲烷：20/1)純化。合併製造溶離份，添加4 M含HCl之二噁烷(50 ml，200 mmol)且藉由在30℃水浴溫度下蒸發來濃縮混合物。由此獲得2.14 g目標化合物(30%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.39 min; MS (ESIpos): m/z = 320 [M-HCl+H]
+
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.21), 0.331 (1.50), 0.354 (4.75), 0.365 (5.92), 0.376 (5.94), 0.385 (4.06), 0.397 (2.65), 0.450 (2.43), 0.461 (3.95), 0.470 (6.34), 0.482 (6.37), 0.491 (5.64), 0.502 (3.07), 0.515 (2.14), 0.648 (6.10), 0.659 (6.45), 0.668 (6.49), 0.680 (7.00), 0.690 (6.84), 0.703 (4.80), 0.909 (2.14), 0.930 (4.98), 0.944 (7.05), 0.957 (4.27), 0.978 (1.50), 2.329 (0.40), 3.568 (11.42), 4.046 (14.52), 7.064 (0.43), 7.098 (0.47), 7.128 (0.48), 7.194 (2.29), 7.212 (5.53), 7.229 (4.28), 7.279 (6.89), 7.298 (16.00), 7.316 (12.69), 7.331 (13.22), 7.349 (5.73)。
實例 78A
1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙-1-胺鹽酸鹽
在氬氣下，將90 ml乙醇、45 ml 含1M鹽酸之乙醇及964 mg (10%)鈀/活性碳添加至N-苯甲基-1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙-1-胺鹽酸鹽(3.22 g，9.06 mmol)。在大氣壓及室溫下氫化混合物45分鐘。混合物經矽藻土過濾，用乙醇充分洗滌，添加23 ml含4M鹽酸之二噁烷且藉由在30℃水浴溫度下蒸發濃縮混合物。向殘餘物添加乙醚，攪拌混合物10分鐘且濾出所獲得之固體。產物未經純化即進一步反應。由此獲得1.64 g目標化合物(68%理論值)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (1.30), -0.008 (13.14), 0.008 (11.58), 0.146 (1.12), 0.540 (12.55), 0.550 (12.29), 0.572 (11.02), 0.605 (12.52), 0.791 (12.35), 0.875 (10.67), 1.060 (4.89), 1.080 (11.64), 1.094 (16.00), 1.128 (3.30), 2.328 (2.12), 2.366 (0.80), 2.670 (2.12), 2.710 (0.65), 8.767 (1.97)。
實例 79A
N-[(E)-環丙基亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(對映異構體1)
在氬氣下，首先將(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(8.65 g，71.3 mmol)裝入430 ml二氯甲烷中且在室溫下添加環丙烷甲醛(11 ml，140 mmol)及無水硫酸銅(II) (34.2 g，214 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物經矽藻土過濾，用乙醚洗滌，且藉由蒸發濃縮濾液且在高度真空下乾燥。由此獲得15.3 g目標化合物(99%理論值，純度約80%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.73 min; MS (ESIpos): m/z = 174 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.952 (0.47), 0.958 (0.76), 0.964 (0.55), 0.967 (0.45), 0.970 (0.53), 1.041 (0.67), 1.055 (1.45), 1.061 (0.80), 1.068 (0.56), 1.070 (0.52), 1.082 (1.02), 1.092 (16.00), 5.751 (1.54), 7.389 (0.82), 7.409 (0.82)。
實例 80A
N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(非對映異構體1)
在手套工作箱中，首先在氬氣下一起裝入N-[(E)-環丙基亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(對映異構體1) (5.00 g，28.9 mmol)與氟化四甲銨(6.45 g，69.3 mmol)。14小時之後，自手套工作箱移除反應容器，添加110 ml THF且在-55℃下向混合物緩慢地添加三甲基(五氟乙基)矽烷(13 ml，72 mmol)溶解於170 ml THF中之溶液。添加結束之後，攪拌混合物30分鐘，且接著在-30℃下小心地添加50 ml飽和氯化銨水溶液及165 ml水。用第三丁基甲基醚萃取水相兩次。在各情況下經合併之有機相用水及飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。在矽膠(移動相：環己烷100%至環己烷/乙酸乙酯2/1)上純化粗產物。由此獲得4.9 g目標化合物(58%理論值，＞95%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.92 min; MS (ESIpos): m/z = 294 [M+H]
+ 實例 81A
1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙-1-胺鹽酸鹽(對映異構體1)
首先將N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(非對映異構體1) (4.10 g，14.0 mmol)裝入130 ml乙醚及25 ml甲醇中。接著在室溫下逐滴添加含2 N鹽酸之乙醚(130 ml，250 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2.5小時。在30℃水浴溫度下，反應混合物藉由蒸發實質上濃縮。殘餘物與10 ml乙腈一起攪拌，濾出且用幾滴乙腈洗滌。由此獲得2.1 g目標化合物(65%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.31 min; MS (ESIpos): m/z = 190 [M-HCl+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.543 (2.57), 0.556 (4.32), 0.569 (5.47), 0.584 (3.62), 0.604 (0.54), 0.669 (0.44), 0.685 (1.59), 0.699 (3.25), 0.718 (8.78), 0.733 (16.00), 0.748 (15.55), 0.759 (5.58), 0.767 (3.55), 1.019 (0.99), 1.038 (2.50), 1.045 (5.40), 1.050 (3.89), 1.064 (3.94), 1.077 (3.57), 1.103 (14.10), 1.270 (0.53), 2.330 (0.40), 2.363 (0.83), 3.167 (10.46), 3.671 (6.50), 3.685 (5.12), 3.697 (4.27), 3.712 (3.56), 3.723 (7.42), 3.739 (2.98), 3.751 (2.86), 3.765 (2.47), 4.059 (0.82), 9.207 (10.25)。
實例 82A
N-[(E)-環丙基亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(對映異構體2)
在氬氣下，首先將(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(13.0 g，107 mmol)裝入640 ml二氯甲烷中且在室溫下添加環丙烷甲醛(15.0 g，214 mmol)及無水硫酸銅(II) (51.2 g，321 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物經矽藻土過濾，用乙醚洗滌，且藉由蒸發濃縮濾液且在高度真空下乾燥。由此獲得18.9 g目標化合物(100%理論值，純度約98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.72 min; MS (ESIpos): m/z = 174 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.952 (0.48), 0.958 (0.77), 0.964 (0.57), 0.967 (0.47), 0.969 (0.54), 1.055 (0.76), 1.061 (0.80), 1.068 (0.57), 1.070 (0.53), 1.081 (1.07), 1.092 (16.00), 7.389 (0.83), 7.409 (0.82)。
實例 83A
N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(非對映異構體2)
在手套工作箱中，首先在氬氣下一起裝入N-[(E)-環丙基亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(對映異構體2) (5.10 g，98%純度，28.8 mmol)與氟化四甲銨(6.45 g，69.2 mmol)。14小時之後，自手套工作箱移除反應容器，添加110 ml THF且在-55℃下向混合物緩慢地添加三甲基(五氟乙基)矽烷(13 ml，72 mmol)溶解於170 ml THF中之溶液。添加結束之後，攪拌混合物30分鐘，接著在-30℃下小心地添加50 ml飽和氯化銨水溶液及165 ml水。用第三丁基甲基醚萃取水相兩次。在各情況下經合併之有機相用水及飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。在矽膠(移動相：環己烷100%至環己烷/乙酸乙酯2/1)上純化粗產物。由此獲得5.8 g目標化合物(69%理論值，＞95%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.92 min; MS (ESIpos): m/z = 294 [M+H]
+ 實例 84A
1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙-1-胺鹽酸鹽(對映異構體2)
首先將N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(非對映異構體2) (5.00 g，17.0 mmol)裝入150 ml乙醚及31 ml甲醇中。接著在室溫下逐滴添加含2 N鹽酸之乙醚(150 ml，2.0 M，300 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2.5小時。在30℃水浴溫度下，反應溶液藉由蒸發實質上濃縮。殘餘物與10 ml乙腈一起攪拌，濾出且用幾滴乙腈洗滌。由此獲得2.5 g目標化合物(64%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.33 min; MS (ESIpos): m/z = 190 [M-HCl+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.70), 0.008 (1.55), 0.549 (4.38), 0.565 (4.26), 0.574 (3.54), 0.586 (2.02), 0.688 (2.56), 0.706 (9.75), 0.723 (16.00), 0.743 (10.93), 0.765 (2.53), 0.783 (0.70), 1.014 (0.92), 1.029 (1.97), 1.046 (3.89), 1.058 (3.39), 1.072 (2.94), 1.086 (1.64), 1.103 (0.66), 2.329 (0.53), 2.671 (0.54), 3.669 (2.36), 3.683 (2.43), 3.695 (2.47), 3.710 (2.40), 3.722 (2.51), 3.737 (2.41), 3.748 (2.39), 3.763 (2.17), 9.063 (5.76)。
實例 85A
N-[(1E)-2,2-二甲基亞丙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(對映異構體1)
在氬氣下，首先將(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(15.0 g，124 mmol)裝入650 ml二氯甲烷中且在室溫下添加特戊醛(27 ml，250 mmol)及無水硫酸銅(II) (59.3 g，371 mmol)。在室溫下攪拌混合物4天。反應混合物經矽藻土過濾，用乙醚洗滌，且藉由蒸發濃縮濾液且在高度真空下乾燥。由此獲得22.7 g目標化合物(97%理論值)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.93 min; MS (ESIpos): m/z = 190 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.013 (0.56), 1.079 (2.03), 1.102 (15.53), 1.113 (1.97), 1.120 (16.00), 1.271 (1.00), 7.814 (1.55)。
實例 86A
2-甲基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]丙烷-2-亞磺醯胺(非對映異構體1)
在手套工作箱中，首先在氬氣下一起裝入N-[(1E)-2,2-二甲基亞丙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(對映異構體1) (3.50 g，18.5 mmol)與氟化四甲銨(4.13 g，44.4 mmol)。14小時後，自手套工作箱移除反應容器，添加56 ml THF且在-78℃下向混合物緩慢地添加三甲基(五氟乙基)矽烷(8.1 ml，46 mmol)溶解於82 ml THF中的溶液。在-78℃下攪拌反應混合物3.5小時。在約-50℃下，向反應溶液添加飽和氯化銨水溶液及水。用乙酸乙酯萃取水相兩次。在各情況下經合併之有機相用水及飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。藉由矽膠(移動相：環己烷，接著環己烷/乙酸乙酯：5/1)純化殘餘物。由此獲得4.25 g目標化合物(73%理論值，純度98%，＞95%)。 LC-MS (方法4): R
t
= 3.30 min; MS (ESIpos): m/z = 310 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.33), 0.008 (0.58), 1.054 (0.45), 1.058 (0.43), 1.104 (7.77), 1.106 (7.67), 1.178 (16.00), 1.201 (1.02), 2.519 (0.54), 2.524 (0.57), 5.114 (0.43), 5.137 (0.41)。
實例 87A
1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構體1)
首先將2-甲基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]丙烷-2-亞磺醯胺(非對映異構體1) (4.14 g，98%純度，13.1 mmol)裝入240 ml乙醚及48 ml甲醇中。接著添加含2 N鹽酸之乙醚(240 ml，480 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2.5小時。在35℃水浴溫度下，反應溶液藉由蒸發實質上濃縮。殘餘物與約5 ml乙醚一起攪拌且濾出，且乾燥殘餘物。添加20 ml 20%濃度氫氧化鉀溶液且用二氯甲烷萃取混合物三次。將含2 N鹽酸之乙醚添加至經合併之有機相且藉由在35℃浴槽溫度下蒸發來濃縮混合物且在高度真空下乾燥。由此獲得2.94 g目標化合物(89%理論值)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.81 min; MS (ESIpos): m/z = 206 [M-HCl+H]
+ 實例 88A
N-[(1E)-2,2-二甲基亞丙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(對映異構體2)
在氬氣下，首先將(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(15.0 g，124 mmol)裝入650 ml二氯甲烷中且在室溫下添加特戊醛(27 ml，250 mmol)及無水硫酸銅(II) (59.3 g，371 mmol)。在室溫下攪拌混合物4天。添加更多硫酸銅(24.7 g，155 mmol)且在室溫下繼續攪拌隔夜。反應混合物經矽藻土過濾，用乙醚洗滌，且藉由蒸發濃縮濾液且在高度真空下乾燥。由此獲得20.15 g目標化合物(86%理論值)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.94 min; MS (ESIpos): m/z = 190 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.078 (14.51), 1.102 (16.00), 1.113 (1.88), 1.120 (15.93), 1.270 (1.08), 5.290 (0.56), 7.814 (1.44)。
實例 89A
2-甲基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]丙烷-2-亞磺醯胺(非對映異構體2)
在氬氣下!為了乾燥，將燒瓶及氟化四甲銨置於手套工作箱中隔夜!首先在手套工作箱中在氬氣下裝入N-[(1E)-2,2-二甲基亞丙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(對映異構體2) (4.38 g，80%純度，18.5 mmol)以及氟化四甲銨(4.13 g，44.4 mmol)。14小時後，自手套工作箱移除反應容器，添加56 ml THF且在-78℃下向混合物緩慢地添加三甲基(五氟乙基)矽烷(8.1 ml，46 mmol)溶解於82 ml THF中的溶液。在-70℃下攪拌反應混合物3小時，接著緩慢解凍，在室溫下攪拌隔夜。小心地向反應溶液添加飽和氯化銨水溶液及水。用乙酸乙酯萃取水相兩次。在各情況下經合併之有機相用水及飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。在矽膠(移動相：100%環己烷，接著環己烷/乙酸乙酯：2/1)純化殘餘物。由此獲得3.81 g目標化合物(65%理論值，純度98%，＞90%)。 LC-MS (方法4): R
t
= 3.30 min; MS (ESIpos): m/z = 310 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.054 (0.40), 1.059 (0.42), 1.104 (7.59), 1.106 (7.75), 1.178 (16.00), 1.201 (1.05), 5.113 (0.42)。
實例 90A
1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構體2)
首先將2-甲基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]丙烷-2-亞磺醯胺(非對映異構體2) (3.73 g，12.0 mmol)裝入220 ml乙醚及44 ml甲醇中。接著添加含2 N鹽酸之乙醚(220 ml，440 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2.5小時。在35℃水浴溫度下，反應溶液藉由蒸發實質上濃縮。殘餘物與乙醚一起攪拌且在高度真空下乾燥。由此獲得2.48 g目標化合物(81%理論值，純度95%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.80 min; MS (ESIpos): m/z = 206 [M-HCl+H]
+ 實例 91A
7-氯-N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(300 mg，805 µmol)裝入7.5 ml乙腈中。添加1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙-1-胺鹽酸鹽(對映異構體1) (204 mg，98%純度，886 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(560 µl，3.2 mmol)。接著向混合物添加T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%；570 µl，970 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。向混合物添加水且濾出沈澱之固體，用水洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得439 mg目標化合物(99%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.53 min; MS (ESIpos): m/z = 544 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.22), -0.008 (9.36), 0.008 (8.14), 0.146 (0.95), 0.328 (1.83), 0.338 (2.78), 0.350 (2.78), 0.363 (2.07), 0.373 (1.05), 0.542 (2.14), 0.554 (3.12), 0.566 (2.71), 0.580 (2.58), 0.589 (2.34), 0.600 (2.68), 0.612 (2.54), 0.622 (2.10), 0.668 (1.29), 0.688 (2.51), 0.699 (2.31), 0.712 (2.14), 0.734 (0.81), 1.243 (0.85), 1.264 (1.76), 1.276 (2.64), 1.285 (2.07), 1.297 (2.58), 2.073 (0.58), 2.328 (1.53), 2.367 (1.05), 2.670 (1.56), 2.711 (0.88), 4.442 (0.68), 4.466 (1.63), 4.488 (2.00), 4.507 (2.03), 4.530 (1.63), 4.554 (0.64), 7.602 (5.39), 7.624 (10.27), 7.646 (5.42), 8.719 (9.63), 8.738 (9.63), 9.167 (16.00), 10.048 (5.32), 10.072 (5.32)。
實例 92A
7-氯-N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(300 mg，805 µmol)裝入7.5 ml乙腈中。添加1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙-1-胺鹽酸鹽(對映異構體2) (204 mg，98%純度，886 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(560 µl，3.2 mmol)。接著向混合物添加T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%；570 µl，970 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。向混合物添加水且濾出沈澱之固體，用水洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得422 mg目標化合物(96%理論值，純度100%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.52 min; MS (ESIpos): m/z = 544 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.93), -0.008 (7.99), 0.008 (6.97), 0.146 (0.89), 0.316 (0.84), 0.328 (2.12), 0.338 (3.25), 0.351 (3.23), 0.363 (2.48), 0.374 (1.19), 0.530 (0.88), 0.542 (2.44), 0.553 (3.54), 0.566 (3.10), 0.579 (2.86), 0.589 (2.57), 0.600 (3.16), 0.611 (2.79), 0.622 (2.43), 0.633 (2.04), 0.646 (1.15), 0.667 (1.46), 0.678 (1.71), 0.688 (2.81), 0.700 (2.63), 0.713 (2.41), 0.721 (1.24), 0.734 (0.78), 1.243 (0.60), 1.256 (1.20), 1.264 (1.77), 1.276 (2.90), 1.285 (2.34), 1.296 (2.85), 1.308 (1.57), 1.317 (1.00), 1.329 (0.42), 2.074 (2.03), 2.328 (0.75), 2.367 (0.58), 2.671 (0.77), 2.711 (0.55), 4.442 (0.77), 4.466 (1.97), 4.488 (2.26), 4.508 (2.30), 4.530 (1.93), 4.554 (0.71), 7.601 (5.75), 7.623 (11.11), 7.646 (5.82), 8.719 (9.38), 8.738 (9.40), 9.167 (16.00), 10.048 (6.22), 10.072 (6.09)。
實例 93A
7-氯-N-(1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(100 mg，268 µmol)、1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽(63.7 mg，295 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(160 µl，940 µmol)裝入2.4 ml乙酸乙酯中。添加T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%；630 µl，1.1 mmol)且在80℃下攪拌混合物2小時。添加水且用乙酸乙酯萃取混合物兩次。經合併之有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化。經合併之產物溶離份藉由蒸發來濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將經合併之有機相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得101 mg目標化合物(70%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.33 min; MS (ESIpos): m/z = 534 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.44), -0.008 (11.48), 0.008 (10.40), 0.146 (1.35), 0.486 (1.29), 0.499 (2.28), 0.509 (4.55), 0.521 (5.24), 0.532 (5.99), 0.544 (3.36), 0.554 (2.88), 0.578 (1.80), 0.589 (3.87), 0.603 (4.52), 0.610 (5.81), 0.625 (7.01), 0.636 (5.63), 0.646 (6.26), 0.658 (7.40), 0.671 (6.17), 0.683 (5.48), 0.697 (5.66), 0.707 (5.99), 0.720 (4.25), 0.730 (2.79), 0.744 (1.02), 1.234 (1.17), 1.527 (1.98), 1.541 (4.13), 1.548 (4.34), 1.563 (7.58), 1.577 (4.04), 1.584 (3.72), 1.597 (1.59), 2.323 (1.65), 2.328 (2.22), 2.366 (1.05), 2.523 (5.48), 2.665 (1.77), 2.670 (2.40), 2.710 (1.17), 5.754 (0.48), 7.599 (5.66), 7.621 (10.64), 7.643 (5.84), 8.754 (10.37), 8.773 (10.40), 9.117 (16.00), 9.409 (12.46)。
實例 94A
7-氯-N-(1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(140 mg，376 µmol)、1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙-1-胺鹽酸鹽(110 mg，413 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(230 µl，1.3 mmol)裝入乙酸乙酯中。添加T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%；890 µl，1.5 mmol)且在80℃下攪拌混合物2小時。添加水且用乙酸乙酯萃取混合物兩次。經合併之有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化。經合併之產物溶離份藉由蒸發來濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將經合併之有機相用二氯甲烷重新萃取。經合併之水相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得88 mg目標化合物(40%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.44 min; MS (ESIpos): m/z = 584 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.61), -0.008 (4.76), 0.008 (4.40), 0.146 (0.56), 0.489 (1.21), 0.501 (2.46), 0.511 (3.85), 0.524 (5.52), 0.537 (5.23), 0.546 (3.52), 0.559 (2.46), 0.597 (1.64), 0.609 (3.74), 0.624 (4.52), 0.631 (6.04), 0.645 (6.88), 0.657 (5.30), 0.668 (6.10), 0.681 (6.68), 0.695 (5.21), 0.708 (1.89), 0.737 (2.53), 0.751 (5.27), 0.763 (5.87), 0.774 (4.85), 0.786 (3.29), 0.800 (1.19), 1.233 (0.96), 1.589 (1.67), 1.604 (3.78), 1.611 (4.10), 1.625 (6.63), 1.639 (3.88), 1.660 (1.40), 2.328 (0.83), 2.367 (0.48), 2.671 (0.90), 2.710 (0.50), 5.755 (0.47), 7.597 (5.68), 7.619 (10.97), 7.641 (5.82), 8.759 (9.67), 8.778 (9.61), 9.126 (16.00), 9.386 (11.83)。
實例 95A
7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(300 mg，805 µmol)裝入7.5 ml乙腈中。添加1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構體1) (214 mg，100%純度，886 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(560 µl，3.2 mmol)。添加T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%；570 µl，970 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。向反應溶液添加更多1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構體1) (97 mg，403 µmol)且在室溫下攪拌混合物2天。向反應溶液添加更多1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構體1) (97 mg，403 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(280 µl, 1.6 mmol)及T3P溶液(丙烷磷酸環酐、乙酸乙酯中50%；285 µl，480 µmol)且在室溫下攪拌混合物2天。反應溶液用二氯甲烷稀釋且用水洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。藉由矽膠(移動相：環己烷/乙酸乙酯梯度:乙酸乙酯4%至32%)純化殘餘物。由此獲得318 mg目標化合物(71%理論值，純度100%)。 LC-MS (方法5): R
t
= 1.72 min; MS (ESIpos): m/z = 560 [M+H]
+ 實例 96A
7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(300 mg，805 µmol)裝入7.5 ml乙腈中。添加1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構體2) (214 mg，100%純度，886 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(560 µl，3.2 mmol)。添加T3P溶液(丙烷磷酸環酐，乙酸乙酯中50%；570 µl，970 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。向反應溶液添加更多1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構體2) (97 mg，403 µmol)且在室溫下攪拌混合物2天。向反應溶液添加更多1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-胺鹽酸鹽(對映異構體2) (97 mg，403 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(280 µl，1.6 mmol)及T3P溶液(丙烷磷酸環酐、乙酸乙酯中50%；285 µl，480 µmol)且在室溫下攪拌混合物2天。反應溶液用二氯甲烷稀釋且用水洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。藉由矽膠(移動相：環己烷/乙酸乙酯梯度:乙酸乙酯4%至32%)純化殘餘物。由此獲得373 mg目標化合物(82%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法5): R
t
= 1.73 min; MS (ESIpos): m/z = 560 [M+H]
+ 實例 97A
7-氯-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
將16.5 ml (28.2 mmol) 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物(T3P，乙酸乙酯中50%)逐滴添加至2.50 g (7.05 mmol) 7-氯-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸、1.55 g (7.75 mmol) 3,3,4,4,4-五氟丁-2-胺鹽酸鹽(對映異構純)及3.7 ml (21.1 mmol) DIPEA於70 ml乙酸乙酯中之溶液中。在80℃下攪拌混合物隔夜。藉由蒸發濃縮反應混合物且倒至水上。將沈澱物濾出，溶解於DCM中，經硫酸鈉乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。由此獲得3.35 g (95%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.34 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.92), 0.146 (0.85), 0.928 (1.24), 0.943 (1.22), 1.175 (0.71), 1.244 (1.98), 1.259 (2.16), 1.274 (1.27), 1.409 (15.77), 1.426 (16.00), 1.488 (0.94), 1.988 (1.17), 2.328 (1.68), 2.367 (1.01), 2.670 (1.82), 2.711 (1.04), 4.998 (0.81), 5.020 (1.36), 5.043 (1.68), 5.062 (1.73), 5.086 (1.43), 5.107 (0.78), 7.595 (5.78), 7.618 (11.30), 7.640 (5.82), 7.773 (10.54), 7.794 (11.10), 8.741 (11.23), 8.761 (10.77), 9.142 (15.95), 9.986 (6.05), 10.010 (5.92)。
實例 98A
7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
根據GP3，使5.00 g (10.0 mmol) 7-氯-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構性純)與1.36 g (11.0 mmol) (3S)-吡咯啶-3-醇鹽酸鹽及7.0 ml (40.0 mmol) N,N-二異丙基乙胺於37 ml二甲基甲醯胺中反應。將反應混合物傾至水上且用乙酸乙酯萃取三次。經合併之有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，經硫酸鈉乾燥且藉由蒸發濃縮。藉由正相層析法(環己烷/乙酸乙酯梯度)純化粗產物。由此獲得4.99 g (88%理論值，97%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 551 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.51), 0.147 (0.51), 1.157 (0.52), 1.175 (1.05), 1.193 (0.49), 1.385 (14.87), 1.402 (14.89), 1.788 (0.91), 1.921 (1.77), 1.989 (2.75), 2.329 (0.83), 2.367 (0.42), 2.671 (0.79), 2.711 (0.44), 3.051 (1.08), 3.083 (1.84), 3.163 (2.28), 3.185 (2.68), 3.518 (2.49), 3.534 (2.97), 4.021 (0.47), 4.039 (0.47), 4.270 (1.69), 4.387 (1.43), 4.961 (2.74), 4.984 (1.50), 5.007 (1.64), 5.052 (3.17), 6.744 (1.70), 6.773 (2.76), 6.798 (2.07), 7.530 (3.28), 7.553 (6.61), 7.575 (3.83), 8.265 (3.13), 8.286 (2.86), 8.805 (16.00), 10.551 (6.33), 10.575 (6.15)。
工作實例： 實例 1
1-(2,6-二氟苯基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-(4,4,4-三氟-2-甲基丁-2-基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使99.9 mg (237 µmol) 1-(2,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與40.1 mg (284 µmol) 4,4,4-三氟-2-甲基丁-2-胺在108 mg (284 µmol) HATU及103 µl (593 µmol) DIPEA存在下在2.4 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC [在UV max：265 nm下，管柱：Chromatorex C18，10 µm，125×30 mm，溶劑：乙腈/0.05%甲酸梯度(0至3 min 10%乙腈，至15 min 90%乙腈及另外3 min 90%乙腈)]直接純化反應混合物。合併產物溶離份，脫除溶劑且凍乾。由此獲得107 mg (82%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.76 min; MS (ESIpos): m/z = 545 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.10 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.77-7.66 (m, 1H), 7.47-7.36 (m, 2H), 5.18 (br. s, 2H), 4.09-3.51 (br. m, 4H), 3.27-2.86 (m, 4H)。
實例 2 N
-[(1
S
)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-1-(2,6-二氟苯基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使99.9 mg (237 µmol) 1-(2,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與49.9 mg (284 µmol) (1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽在108 mg (284 µmol) HATU及103 µl (593 µmol) DIPEA存在下在2.4 ml DMF中反應。接著藉由製備型HPLC[在UV max：265 nm下，管柱：Chromatorex C18，10 µm，125×30 mm，溶劑：乙腈/0.05%甲酸梯度(0至3 min 10%乙腈，至15 min 90%乙腈及另外3 min 90%乙腈)]直接純化反應混合物。合併產物溶離份，脫除溶劑且凍乾。由此獲得100 mg (77%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.77 min; MS (ESIpos): m/z = 543 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.49 (d, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.76-7.67 (m, 1H), 7.46-7.38 (m, 2H), 5.19 (br. s, 2H), 4.45-4.32 (m, 1H), 4.11-3.53 (br. m, 4H), 3.27-2.89 (m, 2H), 1.27-1.16 (m, 1H), 0.70-0.49 (m, 3H), 0.38-0.28 (m, 1H)。
實例 3
1-(2,6-二氟苯基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[(2
S
)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使100 mg (237 µmol) 1-(2,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與46.6 mg (285 µmol) (2S)-1,1,1-三氟丁-2-胺鹽酸鹽在108 mg (285 µmol) HATU及103 µl (593 µmol) DIPEA存在下在2.4 ml DMF中反應。反應混合物接著用2 ml鹽酸水溶液稀釋且藉由製備型HPLC [在UV max：265 nm下，管柱：Chromatorex C18，10 µm，125×30 mm，溶劑：乙腈/0.05%甲酸梯度(0至3 min 10%乙腈，至15 min 90%乙腈及另外3 min 90%乙腈)]純化。合併產物溶離份，脫除溶劑且凍乾。由此獲得32.7 mg (26%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.92 min; MS (ESIpos): m/z = 531 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.36 (d, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.77-7.67 (m, 1H), 7.47-7.38 (m, 2H), 5.19 (br. s, 2H), 4.81-4.67 (m, 1H), 4.10-3.56 (br. m, 4H), 3.27-2.90 (m, 2H), 1.94-1.82 (m, 1H), 1.71-1.58 (m, 1H), 0.97 (t, 1H)。
實例 4
1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-7-[(2-羥基乙基)(甲基)胺基]-4-側氧基-
N
-[(2
S
)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP3，使50.0 mg (108 µmol) 7-氯-1-(2,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺與8.91 mg (119 µmol) 2-(甲基胺基)乙醇在66 µl (0.38 mmol) DIPEA存在下在0.5 ml DMF中反應。混合物接著用乙腈、水及0.2 ml鹽酸水溶液稀釋，且藉由製備型HPLC(具有甲酸之乙腈/水，C18 RP-HPLC)純化粗溶液。合併產物溶離份，在減壓下濃縮，且自乙腈/水凍乾隔夜。由此獲得37.9 mg (70%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.97 min; MS (ESIpos): m/z = 503 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.33 (d, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.75-7.65 (m, 1H), 7.45-7.37 (m, 2H), 4.80-4.67 (m, 2H), 3.51-3.35 (m, 4H), 3.05 (s, 3H), 1.94-1.82 (m, 1H), 1.71-1.58 (m, 1H), 0.97 (t, 3H)。
實例 5 N
-(雙環[1.1.1]戊-1-基)-1-(2,6-二氟苯基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使100 mg (237 µmol) 1-(2,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與34.1 mg (285 µmol) 雙環[1.1.1]戊-1-胺鹽酸鹽在108 mg (285 µmol) HATU及103 µl (593 µmol) DIPEA存在下在2.4 ml DMF中反應。反應混合物接著用2 ml鹽酸水溶液稀釋且藉由製備型HPLC [在UV max：265 nm下，管柱：Chromatorex C18，10 µm，125×30 mm，溶劑：乙腈/0.05%甲酸梯度(0至3 min 10%乙腈，至15 min 90%乙腈及另外3 min 90%乙腈)]純化兩次。合併產物溶離份，脫除溶劑且凍乾。由此獲得3 mg (2%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.65 min; MS (ESIpos): m/z = 487 [M+H]
+
。
實例 6
7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[(2
S
)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP3，使417 mg (717 µmol) 6-氟-4-側氧基-7-(1-[1,2,3]三唑[4,5-b]吡啶-1-基氧基)-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺與120 mg (861 µmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽在437 µl (2.51 mmol) DIPEA存在下在7.25 ml DMF中反應。接著將反應溶液添加至80 ml水中且用2 ml 1M鹽酸水溶液酸化，且藉由抽吸濾出沈澱物，且用水洗滌。將殘餘物溶解於6 ml乙腈中且藉由製備型HPLC (具有甲酸之乙腈/水，C18 RP-HPLC)純化。合併產物溶離份且在減壓下濃縮，且自乙腈/水凍乾殘餘物隔夜。由此獲得296 mg (74%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.78 min; MS (ESIpos): m/z = 549 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.34 (d, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.62-7.53 (m, 2H), 5.20 (br. s, 2H), 4.82-4.67 (m, 1H), 4.13-3.54 (br. m, 4H), 3.28-2.95 (m, 2H), 1.94-1.81 (m, 1H), 1.72-1.57 (m, 1H), 0.97 (t, 1H)。
實例 7 N
-[(1
S
)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使1.00 g (2.28 mmol) 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與480 mg (2.73 mmol) (1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽在1.04 g (2.73 mmol) HATU及991 µl (5.69 mmol) DIPEA存在下在23 ml DMF中反應。混合物接著用1 M鹽酸水溶液酸化，且用200 ml水及100 ml乙酸乙酯稀釋。分離各相且水相用60 ml乙酸乙酯萃取兩次。經合併之有機相用50 ml緩衝液pH 7洗滌且用50 ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由正相層析(環己烷/乙酸乙酯)純化且合併溶離份，在減壓下濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此獲得1.05 g (83%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.81 min; MS (ESIpos): m/z = 561 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.48 (d, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.62-7.52 (m, 2H), 5.20 (br. s, 2H), 4.45-4.31 (m, 1H), 4.11-3.55 (br. m, 4H), 3.29-2.95 (m, 2H), 1.26-1.14 (m, 1H), 0.70-0.48 (m, 3H), 0.38-0.28 (m, 1H)。
實例 8
7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使2.77 g (6.31 mmol) 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與1.51 g (7.57 mmol) 3,3,4,4,4-五氟丁-2-胺鹽酸鹽(外消旋物)在2.88 g (7.57 mmol) HATU及3.84 ml (22.1 mmol) DIPEA存在下在30 ml DMF中反應。反應溶液隨後逐滴添加至3 ml 1M鹽酸水溶液及300 ml冰水的混合物中。濾出所形成之沈澱物，乾燥且藉由正相層析(環己烷/乙酸乙酯)純化。由此獲得2.40 g (65%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.84 min; MS (ESIpos): m/z = 585 [M+H]
+
。 2.40 g標題化合物(非對映異構體混合物)藉由對掌性SFC分離成非對映異構體(製備型SFC：管柱Daicel Chiralpak AD，5 µm，250×30 mm；移動相：85%二氧化碳，15%異丙醇；溫度：38℃；流動速率：130 ml/min；壓力：140巴；UV偵測：210 nm)分離。 由此獲得(在自管柱溶離之工序中) 1.15 g來自實例9之非對映異構體1 (99% de) R
t
= 3.23 min，1.09 g來自實例10之非對映異構體2 (94% de) R
t
= 4.79 min。 [分析型SFC：管柱Daicel Chiralpak AD-3，3 µm，100×4.6 mm；移動相：90%二氧化碳，10%異丙醇；溫度：60℃；流動速率：3.0 ml/min；壓力：130巴；UV偵測：220nm]。 藉由正相層析(環己烷/乙酸乙酯)再純化非對映異構體1。由此獲得903 mg (24%理論值，99%純度)來自實例9之化合物。 藉由正相層析(環己烷/乙酸乙酯)再純化非對映異構體2。由此獲得912 mg (25%理論值，99%純度)來自實例10之化合物。
實例 9
7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) LC-MS (方法3): R
t
= 1.84 min; MS (ESIpos): m/z = 585 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.46 (d, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.62-7.53 (m, 2H), 5.20 (br. s, 2H), 5.10-4.93 (m, 1H), 4.11-3.55 (br. m, 4H), 3.29-2.95 (m, 2H), 1.39 (d, 3H)。
實例 10
7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) LC-MS (方法3): R
t
= 1.84 min; MS (ESIpos): m/z = 585 [M+H]
+
。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.47 (d, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.62-7.54 (m, 2H), 5.20 (br. s, 2H), 5.10-4.93 (m, 1H), 4.11-3.57 (br. m, 4H), 3.29-2.96 (m, 2H), 1.39 (d, 3H)。 以下工作實例類似於實例8根據GP1製備：
實例 29
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-(2-甲基戊-3-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak OX-H，5 µm，250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：35℃，偵測：265 nm)將37 mg 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(2-甲基戊-3-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體1：13 mg (＞99% de) R
t
= 6.27 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak OX-H，1 ml/min；5 µm，250 × 4.6 mm；移動相：75%異己烷/25%異丙醇 + 0.2% DEA；偵測：265 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.80 min; MS (ESIpos): m/z = 523 [M+H]
+ 實例 30
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-(2-甲基戊-3-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak OX-H，5 µm，250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：35℃，偵測：265 nm)將37 mg 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(2-甲基戊-3-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體2：13 mg (＞99% de) R
t
= 7.35 min [分析型HPLC: 管柱Daicel
®
Chiralpak OX-H, 1 ml/min；5 µm，250 × 4.6 mm；移動相：75%異己烷/25%異丙醇 + 0.2% DEA；偵測：265 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.80 min; MS (ESIpos): m/z = 523 [M+H]
+ 實例 31
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2)-1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak ID，5 µm，250 × 20 mm；移動相：85%正庚烷/15%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：30℃，偵測：220 nm)將218 mg 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2)-1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體1：63.7 mg(99% de) R
t
= 5.50 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak ID，1 ml/min；5 µm，250 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%丙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.78 min; MS (ESIpos): m/z = 579 [M+H]
+ 實例 32
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2)-1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak ID，5 µm，250 × 20 mm；移動相：85%正庚烷/15%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：30℃，偵測：220 nm)將218 mg 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2)-1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體2：64.2 mg (97.6% de) R
t
= 6.23 min [分析型HPLC: 管柱Daicel
®
Chiralpak ID, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm; 移動相：80% 異己烷/20%丙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.78 min; MS (ESIpos): m/z = 579 [M+H]
+ 實例 33
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(3)-1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IA, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：85%正庚烷/15%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：30℃，偵測：220 nm)將292 mg 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(3)-1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體1：111.6 mg (＞99% de) R
t
= 6.10 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IA, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%異丙醇；偵測：265 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.93 min; MS (ESIpos): m/z = 599 [M+H]
+ 實例 34
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(3)-1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IA, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：85%正庚烷/15%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：30℃，偵測：220 nm)將292 mg 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(3)-1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體2：110.1 mg 99.5% de) R
t
= 6.76 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IA, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%異丙醇；偵測：265 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.93 min; MS (ESIpos): m/z = 599 [M+H]
+ 實例 35
(3R,4R)-乙酸1-[3-氟-5-側氧基-6-{[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]胺甲醯基}-8-(2,4,6-三氟苯基)-5,8-二氫-1,8-萘啶-2-基]-4-羥基吡咯啶-3-基酯
將(7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(60.0 mg，109 µmol)溶解於二氯甲烷(1.0 ml)中，且添加二甲基胺基吡啶(1.34 mg，10.9 µmol)。在0℃下，逐滴添加乙醯氯(5.4 µl，77 µmol)，且在室溫下攪拌混合物3小時。濃縮反應混合物且將殘餘物溶解於乙腈中且藉由製備型HPLC(具有甲酸之乙腈/水，C18 RP-HPLC)純化。合併產物溶離份，濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此獲得25.9 mg (39%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.07 min; MS (ESIpos): m/z = 591 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.90), -0.008 (7.72), 0.008 (6.90), 0.146 (0.88), 0.952 (2.34), 0.971 (5.26), 0.989 (2.57), 1.625 (0.47), 1.642 (0.53), 1.651 (0.53), 1.661 (0.51), 1.668 (0.53), 1.685 (0.41), 1.852 (0.41), 1.871 (0.49), 1.881 (0.58), 1.897 (0.45), 1.990 (16.00), 2.328 (0.68), 2.523 (1.81), 2.670 (0.68), 2.710 (0.41), 4.139 (0.45), 4.738 (0.51), 4.951 (0.41), 5.607 (0.94), 7.555 (1.38), 7.577 (2.51), 7.599 (1.40), 8.036 (2.20), 8.067 (2.20), 8.858 (5.18), 10.300 (1.75), 10.324 (1.68)。 以下反應類似於實例1根據GP1製備：
實例 45
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2)-3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IE, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇 + 0.2%二乙胺；流動速率15 ml/min；溫度：25℃，偵測：270 nm)將486 mg 1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2)-3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體1：172.5 mg (＞99% de) R
t
= 4.82 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IE, 1 ml/min；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%異丙醇 + 0.2%二乙胺；偵測：220 nm]。
實例 46
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2)-3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IE, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇 + 二乙胺；流動速率15 ml/min；溫度：25℃，偵測：270 nm)將486 mg 1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2)-3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體2：160.3 mg (＞99% de) R
t
= 7.11 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IE, 1 ml/min；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%異丙醇 + 0.2%二乙胺；偵測：220 nm]。
實例 47
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IG, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：75%正庚烷/25%異丙醇 + 0.2%二乙胺；流動速率15 ml/min；溫度：30℃，偵測：265 nm)將103 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體1：38 mg (＞99% de) R
t
= 4.71 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IG, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：70%異己烷/30%異丙醇+ 0.2% 二乙胺；偵測：265 nm]。
實例 48
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺 (滯轉異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IG, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：75%正庚烷/25%異丙醇 + 0.2%二乙胺；流動速率15 ml/min；溫度：30℃，偵測：265 nm)將103 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體2：40 mg (＞99% de) R
t
= 5.95 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IG, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：70%異己烷/30%異丙醇+ 0.2% 二乙胺；偵測：265 nm]。
實例 49
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱YMC Chiralart Amylose SA, 5 µm, 250 × 30 mm；移動相：80%正庚烷/20%異丙醇 + 0.2% 二乙胺；流動速率30 ml/min；溫度：30℃，偵測：265 nm)將119 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體1：26 mg (＞99% de) R
t
= 4.86 min [分析型HPLC：管柱YMC Chiralart Amylose SA, 1 ml/min；5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇 + 0.2%二乙胺；偵測：265 nm]。
實例 50
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱YMC Chiralart Amylose SA, 5 µm, 250 × 30 mm；移動相：80%正庚烷/20%異丙醇 + 0.2% 二乙胺；流動速率30 ml/min；溫度：30℃，偵測：265 nm)將119 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體2：25 mg (99% de) R
t
= 5.42 min [分析型HPLC：管柱YMC Chiralart Amylose SA, 1 ml/min；5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇 + 0.2%二乙胺；偵測：265 nm]。
實例 51
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%乙醇；流動速率25 ml/min；溫度：40℃，偵測：210 nm)將103 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體1：30 mg (99% de) R
t
= 6.04 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AI, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%乙醇；偵測：235 nm]。
實例 52
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%乙醇；流動速率25 ml/min；溫度：40℃，偵測：210 nm)將103 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體2：30 mg (89% de) R
t
= 7.33 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AI, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%乙醇；偵測：235 nm]。
實例 53
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-(3-羥基-3-甲基氮雜環丁烷-1-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將50 mg N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-7-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(84.3 µmol)溶解於DMF (980 µl)中。添加3-甲基氮雜環丁烷-3-醇鹽酸鹽(20.8 mg，169 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(51 µl，290 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。接著添加0.3 ml 1 N鹽酸及1 ml乙腈，且藉由製備型HPLC(具有甲酸之乙腈/水，C18 RP-HPLC)純化反應混合物。合併產物溶離份，濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此獲得36.2 mg (78%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 545 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.92), 0.008 (2.80), 0.314 (0.84), 0.325 (1.33), 0.337 (1.27), 0.349 (1.02), 0.360 (0.50), 0.512 (0.90), 0.522 (1.35), 0.535 (1.27), 0.545 (1.38), 0.564 (1.40), 0.574 (1.14), 0.585 (1.02), 0.594 (0.87), 0.608 (0.52), 0.625 (0.77), 0.634 (0.73), 0.645 (1.26), 0.656 (1.01), 0.667 (0.95), 1.177 (0.55), 1.185 (0.79), 1.198 (1.31), 1.206 (0.92), 1.218 (1.38), 1.230 (0.71), 1.382 (16.00), 2.328 (0.67), 2.367 (0.45), 2.670 (0.60), 2.711 (0.41), 3.896 (0.45), 4.350 (0.73), 4.372 (1.28), 4.394 (1.17), 4.413 (0.68), 5.673 (9.48), 7.535 (2.55), 7.557 (4.79), 7.579 (2.54), 8.000 (4.69), 8.028 (4.62), 8.835 (8.40), 10.440 (2.87), 10.464 (2.65)。
實例 54
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-(3-羥基氮雜環丁烷-1-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將50 mg N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-7-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(84.3 µmol)溶解於DMF (980 µl)中。添加氮雜環丁烷-3-醇鹽酸鹽(18.5 mg，169 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(51 µl，290 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。接著添加0.3 ml 1 N鹽酸及1 ml乙腈，且藉由製備型HPLC (具有甲酸之乙腈/水，C18 RP-HPLC)純化反應混合物。合併產物溶離份，濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此得到32.2 mg (71%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 531 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.55), -0.008 (6.99), 0.008 (4.19), 0.146 (0.49), 0.314 (2.27), 0.324 (3.51), 0.337 (3.32), 0.348 (2.57), 0.360 (1.23), 0.511 (2.49), 0.522 (3.55), 0.534 (3.29), 0.545 (3.63), 0.563 (3.70), 0.573 (2.93), 0.584 (2.64), 0.594 (2.21), 0.608 (1.40), 0.624 (1.96), 0.634 (1.95), 0.644 (3.27), 0.655 (2.74), 0.660 (2.57), 0.667 (2.47), 0.676 (1.25), 0.689 (0.81), 1.164 (0.76), 1.176 (1.47), 1.185 (2.06), 1.197 (3.32), 1.205 (2.49), 1.217 (3.15), 1.229 (1.72), 1.238 (1.19), 1.250 (0.49), 2.328 (0.85), 2.366 (0.70), 2.524 (4.17), 2.670 (0.85), 2.710 (0.57), 3.821 (1.08), 4.330 (1.23), 4.350 (2.42), 4.371 (3.53), 4.392 (3.34), 4.412 (1.87), 4.501 (0.94), 4.517 (2.23), 4.528 (3.61), 4.544 (3.31), 4.555 (1.74), 4.571 (0.57), 5.741 (9.80), 5.757 (9.35), 7.532 (5.86), 7.555 (10.75), 7.577 (5.65), 7.992 (9.11), 8.020 (8.88), 8.832 (16.00), 10.439 (6.76), 10.462 (6.37)。
實例 55
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-[(2-羥基乙基)(甲基)胺基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將80 mg N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-7-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(135 µmol)溶解於DMF (980 µl)中。添加2-(甲基胺基)乙醇(20.3 mg，270 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(82 µl, 470 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。接著添加0.2 ml 1 N鹽酸及2 ml乙腈，且藉由製備型HPLC (具有甲酸之乙腈/水，C18 RP-HPLC)純化反應混合物。合併產物溶離份，濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此獲得45.1 mg (62%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.09 min; MS (ESIpos): m/z = 533 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.80), -0.008 (7.20), 0.146 (0.77), 0.319 (1.97), 0.329 (3.20), 0.341 (3.09), 0.353 (2.45), 0.365 (1.17), 0.513 (2.13), 0.525 (3.31), 0.538 (2.91), 0.548 (3.25), 0.567 (3.33), 0.577 (2.75), 0.588 (2.40), 0.598 (2.05), 0.612 (1.25), 0.626 (1.68), 0.636 (1.63), 0.647 (2.93), 0.657 (2.53), 0.663 (2.40), 0.670 (2.37), 0.679 (1.15), 0.691 (0.80), 1.166 (0.59), 1.178 (1.23), 1.187 (1.81), 1.199 (3.04), 1.208 (2.21), 1.219 (2.99), 1.231 (1.63), 1.240 (1.12), 1.252 (0.48), 2.327 (1.49), 2.366 (1.23), 2.523 (5.39), 2.669 (1.60), 2.710 (1.20), 3.076 (9.76), 3.442 (6.83), 3.470 (5.87), 4.331 (0.40), 4.351 (1.63), 4.373 (2.85), 4.393 (2.80), 4.414 (1.49), 4.713 (2.96), 4.725 (6.51), 4.738 (3.01), 7.539 (5.52), 7.561 (10.56), 7.583 (5.60), 7.994 (9.63), 8.028 (9.44), 8.849 (16.00), 10.436 (6.37), 10.459 (6.16)。
實例 56
N-(二環丙基甲基)-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-(3-羥基-3-甲基氮雜環丁烷-1-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將50 mg 1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-(3-羥基-3-甲基氮雜環丁烷-1-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(123 µmol)溶解於DMF (980 µl)中。添加HATU (56.2 mg，148 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(54 µl，308 µmol)及1,1-二環丙基甲胺(15.1 mg，135 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。接著添加0.1 ml 1 M鹽酸及1 ml乙腈，且藉由製備型HPLC (具有甲酸之乙腈/水，C18 RP-HPLC)純化反應混合物。合併產物溶離份，濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此獲得48.7 mg (78%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 500 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.14), 0.008 (2.56), 0.300 (6.52), 0.387 (1.96), 0.397 (2.30), 0.416 (1.48), 0.455 (1.94), 0.475 (2.68), 1.031 (2.06), 1.044 (2.01), 1.382 (16.00), 2.323 (0.44), 2.328 (0.58), 2.524 (1.88), 2.670 (0.60), 3.235 (1.02), 3.254 (2.27), 3.276 (2.41), 3.928 (0.72), 5.676 (6.09), 7.985 (4.45), 8.014 (4.40), 8.292 (1.04), 8.298 (1.18), 8.316 (1.67), 8.319 (1.81), 8.337 (1.07), 8.343 (1.16), 8.591 (5.22), 8.597 (4.96), 8.753 (9.26), 9.856 (2.93), 9.878 (2.87)。
實例 57
6-氟-7-[(2S)-2-(羥基甲基)哌啶-1-基]-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將50 mg 6-氟-4-側氧基-7-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(86.0 µmol)溶解於DMF (980 µl)中。添加(2S)-哌啶-2-基甲醇(19.8 mg，172 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(52 µl，300 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。接著向反應混合物添加0.3 ml 1 M鹽酸及1 ml乙腈，且藉由製備型HPLC (具有甲酸之乙腈/水，C18 RP-HPLC)純化產物。合併產物溶離份，濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此得到37.3 mg (77%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.25 min; MS (ESIpos): m/z = 561 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.55), -0.008 (4.87), 0.008 (4.03), 0.146 (0.52), 0.948 (7.19), 0.967 (16.00), 0.985 (7.82), 1.344 (1.09), 1.376 (1.34), 1.471 (1.90), 1.530 (3.44), 1.549 (5.64), 1.577 (2.47), 1.606 (1.34), 1.624 (1.56), 1.631 (1.36), 1.641 (1.83), 1.649 (1.65), 1.659 (1.59), 1.666 (1.77), 1.684 (1.47), 1.703 (0.91), 1.723 (1.95), 1.740 (1.83), 1.832 (0.43), 1.851 (1.31), 1.861 (1.54), 1.869 (1.56), 1.879 (1.74), 1.886 (1.54), 1.896 (1.34), 1.905 (1.15), 1.914 (0.98), 2.367 (0.70), 2.519 (3.11), 2.524 (2.47), 2.711 (0.66), 2.925 (1.07), 2.955 (1.99), 2.988 (1.07), 3.479 (1.00), 3.495 (1.47), 3.506 (2.47), 3.520 (2.63), 3.536 (1.90), 3.559 (1.20), 3.574 (2.02), 3.588 (1.77), 3.616 (0.68), 3.855 (1.79), 3.888 (1.68), 4.288 (2.04), 4.662 (3.01), 4.676 (6.53), 4.689 (2.97), 4.737 (1.41), 4.758 (1.32), 7.531 (1.43), 7.535 (1.41), 7.550 (3.99), 7.555 (4.15), 7.573 (4.28), 7.578 (3.88), 7.597 (1.36), 8.001 (8.41), 8.036 (8.14), 8.869 (13.96), 10.274 (5.15), 10.298 (4.94)。
實例 58
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-[(2S)-2-(羥基甲基)哌啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
50 mg N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-7-(1H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-1-基oxy)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺 將50 mg N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-7-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(84.3 µmol)溶解於DMF (980 µl)中。添加(2S)-哌啶-2-基甲醇(19.4 mg，169 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(51 µl，290 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。接著向反應混合物添加0.3 ml 1 N鹽酸及1 ml乙腈，且藉由製備型HPLC (具有甲酸之乙腈/水，C18 RP-HPLC)純化產物。合併產物溶離份，濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此獲得36.5 mg (75%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 573 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.72), -0.008 (6.54), 0.008 (5.08), 0.147 (0.62), 0.318 (1.64), 0.330 (2.51), 0.342 (2.47), 0.353 (1.96), 0.516 (1.76), 0.528 (2.59), 0.539 (2.36), 0.550 (2.63), 0.568 (2.76), 0.579 (2.15), 0.589 (2.00), 0.599 (1.66), 0.613 (1.02), 0.628 (1.49), 0.637 (1.40), 0.648 (2.51), 0.659 (2.08), 0.664 (1.98), 0.670 (1.96), 1.189 (1.51), 1.201 (2.61), 1.209 (1.87), 1.221 (2.57), 1.233 (1.44), 1.377 (1.34), 1.472 (2.00), 1.532 (3.55), 1.551 (5.84), 1.577 (2.55), 1.723 (1.98), 1.740 (1.87), 2.328 (1.13), 2.367 (0.70), 2.524 (3.19), 2.670 (1.08), 2.711 (0.70), 2.924 (1.10), 2.954 (2.10), 2.987 (1.15), 3.479 (1.00), 3.495 (1.47), 3.506 (2.59), 3.520 (2.74), 3.536 (1.95), 3.574 (2.08), 3.587 (1.85), 3.859 (1.95), 3.892 (1.79), 4.286 (2.17), 4.352 (1.30), 4.373 (2.30), 4.394 (2.32), 4.414 (1.25), 4.662 (2.95), 4.675 (6.42), 4.688 (2.87), 7.533 (1.59), 7.547 (3.89), 7.553 (4.38), 7.569 (4.48), 7.576 (3.85), 7.590 (1.53), 8.006 (8.95), 8.041 (8.61), 8.860 (16.00), 10.414 (5.44), 10.437 (5.10)。
實例 59
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-[(4S)-4-羥基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使61.7 mg (80%純，113 µmol) 6-氟-7-[(4S)-4-羥基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與29.7 mg (1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽(169 µmol)在64.4 mg (169 µmol) HATU及98 µl (560 µmol) DIPEA存在下在3.0 ml DMF中反應。反應混合物接著用0.5 ml鹽酸水溶液稀釋且藉由製備型HPLC [在UV max：265 nm下，管柱：Chromatorex C18，10 µm，125×30 mm，溶劑：乙腈/0.05%甲酸梯度(0至3 min 10%乙腈，至15 min 90%乙腈及另外3 min 90%乙腈)]純化。合併產物溶離份，脫除溶劑且凍乾。由此獲得27.2 mg (43%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.80 min; MS (ESIpos): m/z = 559 [M+H]
+ 實例 60
N-第三丁基-7-(二甲基胺基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(120 mg，322 µmol)裝入2.4 ml DMF中，添加HATU (147 mg，386 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(200 µl，1.1 mmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加2-甲基丙-2-胺(41 µl，390 µmol)且在室溫下攪拌混合物5分鐘。5分鐘後，向反應混合物添加水。使所得懸浮液靜置隔夜。第二天上午，形成可藉由抽吸過濾移除之固體。藉由管柱層析(矽膠；移動相：二氯甲烷/甲醇梯度：100/0至100/1)純化此殘餘物。由此獲得23 mg (理論值之16%)目標化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.32 min; MS (ESIpos): m/z = 437 [M+H]
+ 實例 61
7-(二甲基胺基)-6-氟-N-(2-甲基丁-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸 (120 mg, 322 µmol)裝入2.4 ml DMF中，添加HATU (147 mg，386 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(200 µl，1.1 mmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加2-甲基丁-2-胺(45 µl，390 µmol)且在室溫下攪拌混合物5分鐘。5分鐘後，向反應混合物添加水。使所得懸浮液靜置隔夜。第二天上午，形成可藉由抽吸過濾移除之固體。藉由管柱層析(矽膠；移動相：二氯甲烷/甲醇梯度：100/0至100/1)純化此殘餘物。由此獲得19 mg (理論值之13%)目標化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.42 min; MS (ESIpos): m/z = 451 [M+H]
+ 實例 62
7-(二甲基胺基)-6-氟-4-側氧基-N-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(120 mg，322 µmol)裝入2.4 ml DMF中，添加HATU (147 mg，386 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(200 µl，1.1 mmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-胺(49.1 mg，386 µmol)且在室溫下攪拌混合物5分鐘。5分鐘之後，向反應混合物添加水。使所得懸浮液靜置隔夜。第二天上午，形成可藉由抽吸過濾移除之固體。藉由管柱層析(矽膠；移動相：二氯甲烷/甲醇梯度：100/0至100/1)純化此殘餘物。由此獲得30 mg (理論值之19%)目標化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.42 min; MS (ESIpos): m/z = 491 [M+H]
+ 實例 63
7-(二甲基胺基)-6-氟-4-側氧基-N-(4,4,4-三氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(120 mg，322 µmol)裝入2.4 ml DMF中，添加HATU (147 mg，386 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(200 µl，1.1 mmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加4,4,4-三氟-2-甲基丁-2-胺鹽酸鹽(68.6 mg，386 µmol)且在室溫下攪拌混合物5分鐘。5分鐘之後，向反應混合物添加水。使所得懸浮液靜置隔夜。第二天上午，形成可藉由抽吸過濾移除之固體。藉由管柱層析(矽膠；移動相：二氯甲烷/甲醇梯度：100/0至100/1)純化此殘餘物。由此獲得24 mg (理論值之15%)目標化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.42 min; MS (ESIpos): m/z = 505 [M+H]
+ 實例 64
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-{[(2S)-2-羥基丙基](甲基)胺基}-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(60.0 mg，122 µmol)裝入1.2 ml DMF中，添加(2S)-1-(甲基胺基)丙-2-醇(21.7 mg，243 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(74 µl，430 µmol)，且在室溫下攪拌混合物2小時。添加乙腈/水且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。合併產物溶離份且在減壓下濃縮至乾燥。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液萃取兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取一次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得47 mg目標化合物(70%理論值)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.15 min; MS (ESIpos): m/z = 547 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.149 (0.68), -0.059 (5.17), -0.008 (4.04), 0.008 (3.41), 0.146 (0.41), 0.318 (1.61), 0.328 (2.49), 0.340 (2.44), 0.352 (1.95), 0.364 (0.96), 0.512 (1.71), 0.523 (2.54), 0.535 (2.29), 0.547 (2.57), 0.555 (1.96), 0.566 (2.64), 0.576 (2.19), 0.586 (1.99), 0.597 (1.62), 0.611 (1.01), 0.625 (1.41), 0.636 (1.41), 0.646 (2.39), 0.656 (2.07), 0.662 (2.01), 0.670 (2.00), 0.678 (1.03), 0.690 (0.76), 0.834 (7.90), 0.849 (7.89), 1.166 (0.69), 1.178 (1.23), 1.186 (1.66), 1.198 (2.72), 1.207 (1.98), 1.219 (2.71), 1.231 (1.99), 1.251 (0.59), 2.074 (0.65), 2.329 (0.46), 2.671 (0.42), 3.160 (4.79), 3.460 (2.29), 3.490 (1.88), 3.705 (1.53), 4.354 (1.31), 4.375 (2.27), 4.396 (2.20), 4.417 (1.17), 4.738 (5.75), 4.750 (5.64), 5.755 (2.37), 7.561 (3.16), 7.582 (5.63), 7.603 (3.10), 7.989 (8.41), 8.023 (8.17), 8.841 (16.00), 10.441 (5.22), 10.464 (5.04)。
實例 65
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[乙基(2-羥基丙基)胺基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
首先將7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(80.0 mg，162 µmol)裝入1.6 ml乙腈中，添加1-(乙基胺基)丙-2-醇(33.4 mg，324 µmol；外消旋物)及N,N-二異丙基乙胺(99 µl，570 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。接著在減壓下濃縮反應溶液。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中，且添加水。水相用1 M鹽酸酸化且萃取兩次。有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液萃取一次且用飽和氯化鈉水溶液萃取一次，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得76 mg目標化合物(82%理論值)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.23 min; MS (ESIpos): m/z = 561 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.149 (0.87), -0.008 (7.43), 0.008 (7.19), 0.146 (0.84), 0.329 (2.28), 0.342 (2.25), 0.514 (1.80), 0.525 (2.61), 0.549 (2.52), 0.568 (2.61), 0.577 (2.19), 0.588 (2.07), 0.626 (1.32), 0.647 (2.43), 0.851 (6.17), 1.013 (5.51), 1.157 (1.05), 1.175 (2.52), 1.185 (1.74), 1.197 (2.94), 1.206 (2.22), 1.217 (2.82), 1.238 (1.89), 1.988 (3.09), 2.328 (1.86), 2.367 (0.93), 2.670 (1.86), 2.711 (1.05), 3.061 (0.93), 3.418 (2.19), 3.455 (2.55), 3.575 (1.14), 3.710 (1.59), 4.021 (0.84), 4.039 (0.81), 4.350 (1.20), 4.370 (2.22), 4.391 (2.22), 4.412 (1.17), 4.736 (4.04), 4.748 (3.96), 7.566 (3.06), 7.588 (5.51), 7.607 (3.12), 7.996 (8.21), 8.031 (8.03), 8.843 (16.00), 10.439 (5.21), 10.463 (5.00)。
實例 66
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[乙基(2-羥基丙基)胺基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：25℃，偵測：210 nm)將69 mg N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[乙基(2-羥基丙基)胺基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體1：30 mg (＞99% de) R
t
= 1.37 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD, 1 ml/min；3 µm，50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%異丙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.25 min; MS (ESIpos): m/z = 561 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.008 (1.84), 0.008 (1.52), 0.321 (1.83), 0.331 (2.88), 0.343 (2.85), 0.355 (2.22), 0.367 (1.10), 0.503 (0.76), 0.515 (1.97), 0.526 (2.98), 0.539 (2.67), 0.550 (2.97), 0.557 (2.12), 0.568 (3.14), 0.578 (2.48), 0.589 (2.26), 0.599 (1.84), 0.613 (1.18), 0.627 (1.69), 0.637 (1.61), 0.648 (2.73), 0.659 (2.37), 0.664 (2.19), 0.670 (2.15), 0.680 (1.11), 0.684 (1.10), 0.692 (0.80), 0.852 (6.50), 0.863 (6.50), 1.012 (5.79), 1.165 (0.66), 1.177 (1.26), 1.185 (1.75), 1.198 (2.95), 1.206 (2.09), 1.218 (2.89), 1.230 (1.55), 1.238 (1.05), 1.250 (0.45), 2.328 (0.82), 2.333 (0.60), 2.367 (0.56), 2.519 (3.02), 2.524 (2.34), 2.666 (0.58), 2.670 (0.80), 2.675 (0.58), 2.710 (0.51), 3.075 (0.94), 3.419 (2.44), 3.454 (2.73), 3.578 (1.05), 3.708 (1.64), 4.347 (1.48), 4.368 (2.54), 4.389 (2.50), 4.410 (1.34), 4.735 (4.60), 4.747 (4.46), 7.566 (3.23), 7.587 (5.73), 7.606 (3.23), 7.996 (9.12), 8.031 (8.91), 8.843 (16.00), 10.440 (6.11), 10.463 (5.86)。
實例 67
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[乙基(2-羥基丙基)胺基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：25℃，偵測：210 nm)將69 mg N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[乙基(2-羥基丙基)胺基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體2：30 mg (＞99% de) R
t
= 2.31 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD, 1 ml/min；3 µm，50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%異丙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.25 min; MS (ESIpos): m/z = 561 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: 0.318 (1.80), 0.328 (2.83), 0.340 (2.58), 0.514 (1.98), 0.525 (3.01), 0.537 (2.55), 0.548 (2.78), 0.567 (2.79), 0.576 (2.35), 0.588 (2.12), 0.626 (1.52), 0.647 (2.48), 0.657 (2.17), 0.851 (6.26), 1.013 (5.57), 1.177 (1.33), 1.185 (1.71), 1.198 (2.72), 1.218 (2.67), 1.230 (1.43), 2.328 (1.15), 2.671 (1.04), 3.063 (1.04), 3.420 (2.39), 3.453 (2.67), 3.585 (1.11), 3.711 (1.63), 4.350 (1.49), 4.371 (2.39), 4.393 (2.19), 4.413 (1.31), 4.737 (4.38), 4.749 (4.05), 7.567 (3.32), 7.588 (5.50), 7.607 (2.95), 7.997 (7.99), 8.032 (7.81), 8.844 (16.00), 10.440 (5.11), 10.463 (5.00)。
實例 68
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺三氟乙酸酯(滯轉異構體混合物)
首先將7-氯-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物，純度57%，90.0 mg，176 µmol)裝入1.7 ml DMF中，添加乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:1) (46.7 mg，247 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(150 µl，880 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。添加乙腈/水且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。(溶離份1)。合併產物溶離份且在減壓下濃縮至乾燥。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液萃取兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取一次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得74 mg目標化合物(60%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.28 min; MS (ESIpos): m/z = 573 [M-TFA+H]
+
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: 0.006 (0.44), 0.313 (0.41), 0.322 (0.73), 0.331 (0.87), 0.341 (0.77), 0.350 (0.49), 0.524 (0.72), 0.536 (0.69), 0.544 (0.68), 0.552 (0.50), 0.561 (0.59), 0.571 (0.77), 0.580 (0.71), 0.587 (0.60), 0.597 (0.45), 0.635 (0.46), 0.644 (0.64), 0.652 (0.79), 0.663 (0.77), 0.672 (0.54), 1.188 (0.50), 1.197 (0.83), 1.205 (0.69), 1.213 (0.78), 1.222 (0.48), 2.073 (6.12), 2.519 (0.49), 4.339 (0.49), 4.355 (0.83), 4.372 (0.98), 4.388 (0.77), 4.649 (16.00), 7.680 (0.58), 7.686 (0.77), 7.699 (1.02), 7.704 (1.35), 7.718 (0.63), 7.724 (1.34), 7.745 (1.11), 7.999 (2.73), 8.022 (2.68), 8.777 (6.49), 10.453 (1.61), 10.471 (1.53)。
實例 69
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)
首先將1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺三氟乙酸酯(滯轉異構體混合物，70.0 mg，102 µmol)裝入三氟乙酸(640 µl，8.3 mmol)中，添加640 µl水及0.2 ml乙腈，且在室溫下攪拌混合物4天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。在減壓下濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取一次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得60 mg目標化合物(98%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.91 min; MS (ESIpos): m/z = 591 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.149 (0.88), -0.008 (7.82), 0.008 (6.52), 0.146 (0.86), 0.312 (0.99), 0.323 (1.77), 0.334 (2.13), 0.346 (1.93), 0.358 (1.22), 0.523 (1.69), 0.538 (1.80), 0.561 (1.93), 0.572 (2.02), 0.583 (1.74), 0.593 (1.49), 0.606 (1.08), 0.621 (0.83), 0.631 (1.13), 0.641 (1.55), 0.652 (1.82), 0.667 (1.60), 0.675 (1.19), 0.687 (0.69), 1.162 (0.44), 1.175 (0.80), 1.183 (1.16), 1.195 (1.99), 1.205 (1.55), 1.215 (1.96), 1.227 (1.22), 1.235 (1.13), 2.073 (0.77), 2.328 (1.16), 2.366 (0.80), 2.523 (4.37), 2.670 (1.30), 2.710 (0.94), 3.465 (15.72), 3.479 (16.00), 4.118 (0.91), 4.333 (0.66), 4.353 (1.33), 4.373 (1.77), 4.392 (1.35), 4.411 (0.64), 4.831 (5.11), 4.844 (12.10), 4.858 (5.06), 7.667 (1.27), 7.673 (1.82), 7.690 (2.10), 7.697 (3.45), 7.713 (3.43), 7.720 (3.87), 7.731 (2.57), 7.742 (1.71), 7.967 (6.38), 7.996 (6.33), 8.758 (14.51), 10.481 (4.03), 10.505 (3.90)。
實例 70
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺 (滯轉異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak OX-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%乙醇 + 0.2%二乙胺；流動速率20 ml/min；溫度：23℃，偵測：220 nm)將55 mg 7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。在30℃下濃縮產物溶離份。 滯轉異構體1：22 mg (＞99%立體化學純) R
t
= 4.16 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak OX, 1 ml/min；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：90%正己烷/20%乙醇 + 0.2% 二乙胺；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.90 min; MS (ESIpos): m/z = 591 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.149 (0.82), -0.008 (7.57), 0.008 (6.50), 0.146 (0.85), 0.312 (1.26), 0.322 (2.17), 0.335 (2.11), 0.346 (1.65), 0.358 (0.85), 0.508 (1.45), 0.519 (2.22), 0.531 (1.98), 0.543 (2.14), 0.561 (2.22), 0.571 (1.81), 0.582 (1.59), 0.593 (1.32), 0.606 (0.80), 0.621 (1.15), 0.631 (1.15), 0.642 (1.95), 0.652 (1.73), 0.664 (1.54), 1.099 (0.82), 1.118 (1.51), 1.135 (0.71), 1.182 (1.26), 1.194 (2.14), 1.202 (1.56), 1.214 (2.14), 1.226 (1.21), 1.234 (1.13), 2.327 (1.56), 2.366 (0.91), 2.523 (4.89), 2.670 (1.54), 2.710 (0.91), 2.820 (0.41), 3.465 (15.78), 3.479 (16.00), 4.131 (0.93), 4.348 (1.13), 4.370 (1.92), 4.392 (1.84), 4.411 (0.99), 4.831 (5.19), 4.844 (12.24), 4.857 (5.10), 7.666 (1.29), 7.673 (1.92), 7.690 (2.17), 7.697 (3.49), 7.713 (3.60), 7.720 (3.95), 7.731 (2.66), 7.967 (7.27), 7.996 (7.03), 8.758 (15.86), 10.482 (4.56), 10.506 (4.42)。
實例 71
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak OX-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%乙醇 + 0.2%二乙胺；流動速率20 ml/min；溫度：23℃，偵測：220 nm)將55 mg 7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。在30℃下濃縮產物溶離份。 滯轉異構體2：22 mg (＞98.5%立體化學純) R
t
= 6.25 min [分析型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak OX, 1 ml/min；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：90%正己烷/20%乙醇 + 0.2% 二乙胺；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.90 min; MS (ESIpos): m/z = 591 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.149 (0.93), -0.008 (8.98), 0.008 (6.74), 0.146 (0.86), 0.323 (1.38), 0.333 (2.14), 0.346 (2.11), 0.359 (1.59), 0.370 (0.79), 0.513 (1.52), 0.525 (2.14), 0.538 (1.90), 0.552 (1.76), 0.560 (1.66), 0.572 (2.11), 0.582 (1.80), 0.593 (1.66), 0.604 (1.35), 0.616 (0.90), 0.630 (1.00), 0.640 (1.17), 0.651 (1.83), 0.661 (1.73), 0.675 (1.62), 0.696 (0.55), 1.101 (1.42), 1.119 (2.80), 1.137 (1.35), 1.175 (0.90), 1.183 (1.31), 1.196 (2.18), 1.205 (1.56), 1.216 (2.11), 1.228 (1.24), 2.323 (1.42), 2.327 (1.83), 2.366 (1.52), 2.523 (5.46), 2.670 (1.73), 2.710 (1.35), 2.825 (0.59), 2.843 (0.59), 3.465 (15.86), 3.479 (16.00), 4.127 (0.90), 4.333 (1.14), 4.354 (1.90), 4.374 (1.87), 4.395 (1.00), 4.830 (5.36), 4.844 (12.75), 4.857 (5.22), 7.667 (1.24), 7.673 (1.90), 7.690 (2.14), 7.697 (3.46), 7.713 (3.52), 7.720 (3.84), 7.732 (2.63), 7.967 (7.02), 7.995 (6.88), 8.758 (15.14), 10.480 (4.53), 10.503 (4.32)。
實例 72
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-{[(2S)-2-羥基丙基](甲基)胺基}-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)
首先將7-氯-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物，純度57%，90.0 mg，176 µmol)裝入1.8 ml DMF中，添加(2S)-1-(甲基胺基)丙-2醇(31.4 mg，353 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(110 µl，620 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。將反應溶液添加至水中且攪拌所得固體約30分鐘，接著濾出，用水洗滌且在高度真空下乾燥。殘餘物藉由厚層層析(移動相：環己烷/乙酸乙酯=2:1)純化。由此獲得31 mg目標化合物(31%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.20 min; MS (ESIpos): m/z = 563 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.149 (0.69), -0.008 (7.05), 0.008 (5.36), 0.146 (0.72), 0.314 (1.84), 0.325 (3.49), 0.336 (4.05), 0.348 (3.84), 0.360 (2.56), 0.525 (3.62), 0.545 (3.56), 0.552 (3.49), 0.563 (3.49), 0.573 (4.02), 0.584 (3.59), 0.593 (3.12), 0.607 (2.03), 0.623 (1.53), 0.632 (2.09), 0.642 (2.90), 0.653 (3.59), 0.667 (3.34), 0.676 (2.68), 0.807 (11.54), 0.822 (7.64), 1.165 (0.78), 1.178 (1.59), 1.185 (2.34), 1.198 (4.02), 1.207 (2.99), 1.218 (3.84), 1.230 (2.12), 1.238 (1.43), 1.250 (0.65), 2.073 (0.53), 2.328 (1.72), 2.366 (1.03), 2.524 (4.96), 2.670 (1.81), 2.710 (1.06), 3.011 (1.40), 3.175 (6.49), 3.422 (2.50), 3.447 (2.50), 3.470 (1.72), 3.681 (2.50), 4.339 (1.31), 4.359 (2.68), 4.378 (3.27), 4.397 (2.46), 4.418 (1.09), 4.723 (5.02), 4.730 (6.80), 4.735 (5.99), 4.743 (5.68), 7.690 (1.28), 7.697 (2.00), 7.708 (2.56), 7.713 (2.50), 7.721 (4.05), 7.736 (6.83), 7.743 (5.74), 7.757 (6.11), 7.995 (13.35), 8.029 (13.13), 8.791 (14.07), 8.795 (16.00), 10.460 (7.42), 10.484 (7.14)。
實例 73
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-(2-甲基丁-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)
首先將1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(80.0 mg，176 µmol)裝入1.2 ml DMF中，添加HATU (80.1 mg，211 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(110 µl，610 µmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加2-甲基丁-2-胺(18.4 mg，211 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下非常實質地濃縮且用二氯甲烷萃取殘餘物兩次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得58 mg目標化合物(62%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.82 min; MS (ESIpos): m/z = 525 [M+H]
+ 實例 74
N-第三丁基-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)
首先將1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(100 mg，219 µmol)裝入3.1 ml DMF中，添加HATU (100 mg，263 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(130 µl，770 µmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加2-甲基丙-2-胺(19.3 mg，263 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下非常實質地濃縮且用二氯甲烷萃取殘餘物兩次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得86 mg目標化合物(76%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.71 min; MS (ESIpos): m/z = 511 [M+H]
+ 實例 75
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-(2-甲基丁-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(57.0 mg，135 µmol)裝入1.4 ml DMF中，添加HATU (61.6 mg，162 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(94 µl，540 µmol)且在室溫下攪拌混合物10分鐘。添加2-甲基丁-2-胺(24 µl，200 µmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下實質上濃縮且使用飽和碳酸氫鈉水溶液使殘餘物呈鹼性，且用二氯甲烷萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得55 mg目標化合物(82%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.63 min; MS (ESIpos): m/z = 492 [M+H]
+ 實例 76
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-(3-甲基戊-3-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(57.0 mg，135 µmol)裝入1.4 ml DMF中，添加HATU (61.6 mg，162 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(140 µl，810 µmol)且在室溫下攪拌混合物10分鐘。添加3-甲基戊-3-胺鹽酸鹽(27.9 mg，202 µmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下實質上濃縮且使用飽和碳酸氫鈉水溶液使殘餘物呈鹼性，且用二氯甲烷萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得51 mg目標化合物(74%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.74 min; MS (ESIpos): m/z = 506 [M+H]
+ 實例 77
7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-N-(3-乙基戊-3-基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(75.0 mg，81%純，138 µmol)裝入1.9 ml DMF中，添加3-乙基戊-3-胺(19.1 mg，166 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(84 µl，480 µmol)及HATU (63.1 mg，166 µmol)且在室溫下攪拌混合物4小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下實質上濃縮且使用飽和碳酸氫鈉水溶液使殘餘物水溶液呈鹼性且用二氯甲烷萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得59 mg目標化合物(78%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法5): R
t
= 1.41 min; MS (ESIpos): m/z = 537 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.008 (1.80), 0.008 (1.47), 0.768 (6.83), 0.786 (16.00), 0.805 (7.41), 1.699 (1.98), 1.718 (6.06), 1.736 (5.80), 1.755 (1.82), 2.328 (0.52), 2.366 (0.40), 2.670 (0.59), 4.030 (0.92), 4.991 (0.91), 7.545 (1.37), 7.567 (2.66), 7.589 (1.38), 7.979 (2.75), 8.011 (2.73), 8.667 (4.92), 9.612 (2.83)。
實例 78
7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-(3-甲基戊-3-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(75.0 mg，81%純，138 µmol)裝入1.9 ml DMF中，添加3-甲基戊-3-胺鹽酸鹽(22.8 mg，166 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(84 µl，480 µmol)及HATU (63.1 mg，166 µmol)且在室溫下攪拌混合物4小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下實質上濃縮且使用飽和碳酸氫鈉水溶液使殘餘物水溶液呈鹼性且用二氯甲烷萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得63 mg目標化合物(85%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法5): R
t
= 1.35 min; MS (ESIpos): m/z = 523 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.008 (1.46), 0.008 (1.29), 0.814 (6.64), 0.833 (15.52), 0.851 (7.27), 1.234 (0.50), 1.279 (16.00), 1.613 (0.42), 1.631 (1.48), 1.649 (1.89), 1.665 (2.44), 1.684 (1.96), 1.703 (0.49), 1.769 (0.57), 1.787 (2.03), 1.806 (2.32), 1.822 (1.86), 1.841 (1.35), 2.073 (8.37), 2.328 (0.49), 2.523 (1.67), 2.670 (0.52), 4.031 (1.20), 4.989 (1.19), 7.546 (1.83), 7.568 (3.46), 7.590 (1.84), 7.977 (3.61), 8.008 (3.53), 8.669 (6.19), 9.728 (3.98)。
實例 79
7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-(2-甲基丁-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(75.0 mg，81%純，138 µmol)裝入1.9 ml DMF中，添加2-甲基丁-2-胺(19 µl，170 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(84 µl，480 µmol)及HATU (63.1 mg，166 µmol)且在室溫下攪拌混合物4小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下實質上濃縮且使用飽和碳酸氫鈉水溶液使殘餘物水溶液呈鹼性且用二氯甲烷萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得63 mg目標化合物(88%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法5): R
t
= 1.29 min; MS (ESIpos): m/z = 509 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.008 (0.76), 0.008 (0.52), 0.848 (1.75), 0.867 (4.17), 0.885 (1.87), 1.341 (16.00), 1.703 (0.53), 1.722 (1.62), 1.740 (1.54), 1.759 (0.45), 2.073 (3.41), 2.518 (0.96), 2.523 (0.79), 4.032 (0.61), 4.989 (0.60), 5.754 (0.54), 7.547 (0.88), 7.569 (1.67), 7.591 (0.89), 7.970 (1.66), 8.001 (1.63), 8.673 (2.83), 9.810 (2.01)。
實例 80
N-第三丁基-7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(75.0 mg，81%純，138 µmol)裝入1.9 ml DMF中，添加2-甲基丙-2-胺(17 µl，170 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(84 µl，480 µmol)及HATU (63.1 mg，166 µmol)且在室溫下攪拌混合物過週末。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。在減壓下濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於二氯甲烷/極少甲醇中。有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取一次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得42 mg目標化合物(60%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.72 min; MS (ESIpos): m/z = 495 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: 0.008 (1.47), 1.388 (16.00), 2.073 (1.33), 4.028 (0.44), 4.989 (0.44), 7.547 (0.61), 7.569 (1.21), 7.591 (0.63), 7.957 (1.13), 7.989 (1.12), 8.679 (2.13), 9.865 (1.33)。
實例 81
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-7-(哌嗪-1-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將4-[6-{[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]胺甲醯基}-3-氟-5-側氧基-8-(2,4,6-三氟苯基)-5,8-二氫-1,8-萘啶-2-基]哌嗪-1-甲酸第三丁酯(113 mg，69%純，121 µmol)裝入0.72 ml二氯甲烷中，添加三氟乙酸(360 µl，4.7 mmol)且在室溫下攪拌混合物1小時。在減壓下濃縮反應溶液，添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之甲醇/水梯度)純化產物。實質上濃縮產物溶離份。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中且使用飽和碳酸氫鈉水溶液使水相呈鹼性。用乙酸乙酯萃取水相三次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗產物藉由厚層層析(移動相：二氯甲烷/2M氨之甲醇溶液=20/1)進一步純化。由此獲得43 mg目標化合物(65%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.36 min; MS (ESIpos): m/z = 544 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.149 (0.64), -0.008 (6.43), 0.008 (5.61), 0.146 (0.68), 0.319 (2.04), 0.329 (3.29), 0.342 (3.21), 0.353 (2.50), 0.365 (1.25), 0.504 (0.82), 0.516 (2.18), 0.528 (3.29), 0.541 (3.07), 0.550 (3.43), 0.568 (3.57), 0.578 (2.79), 0.589 (2.54), 0.599 (2.07), 0.613 (1.29), 0.628 (1.86), 0.638 (1.71), 0.648 (3.14), 0.659 (2.61), 0.665 (2.43), 0.671 (2.39), 0.680 (1.18), 0.693 (0.79), 1.170 (0.64), 1.182 (1.32), 1.190 (1.89), 1.202 (3.18), 1.211 (2.32), 1.223 (3.18), 1.235 (2.07), 1.243 (1.29), 1.256 (0.57), 2.073 (0.96), 2.328 (1.21), 2.367 (1.04), 2.524 (4.82), 2.663 (12.39), 2.675 (16.00), 2.687 (12.50), 2.710 (1.39), 3.440 (12.39), 3.452 (15.11), 3.464 (11.71), 4.333 (0.43), 4.353 (1.64), 4.374 (2.89), 4.395 (2.86), 4.415 (1.54), 5.754 (0.43), 7.555 (5.61), 7.577 (10.82), 7.599 (5.71), 8.060 (9.39), 8.094 (9.29), 8.876 (15.57), 10.387 (6.43), 10.411 (6.29)。
實例 82
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-[(3S)-3-甲基哌嗪-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將(2S)-4-[6-{[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]胺甲醯基}-3-氟-5-側氧基-8-(2,4,6-三氟苯基)-5,8-二氫-1,8-萘啶-2-基]-2-甲基哌嗪-1-甲酸第三丁酯(81.5 mg，90%純，112 µmol)裝入0.66 ml二氯甲烷中，添加三氟乙酸(330 µl，4.3 mmol)且在室溫下攪拌混合物1小時。反應溶液用二氯甲烷稀釋且用飽和氯化鈉水溶液洗滌三次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。實質上濃縮產物溶離份。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中且使用飽和碳酸氫鈉水溶液使水相呈鹼性。用乙酸乙酯萃取水相三次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗產物藉由厚層層析(移動相：二氯甲烷/2 N氨之甲醇溶液=20/1)進一步純化。由此獲得26.3 mg目標化合物(40%理論值，純度95%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.40 min; MS (ESIpos): m/z = 558 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.149 (0.92), -0.008 (8.28), 0.008 (6.83), 0.146 (0.92), 0.320 (1.78), 0.330 (2.85), 0.342 (2.76), 0.354 (2.17), 0.365 (1.07), 0.516 (1.90), 0.527 (2.85), 0.540 (2.64), 0.549 (2.97), 0.568 (3.09), 0.578 (2.40), 0.588 (2.20), 0.599 (1.81), 0.613 (1.10), 0.628 (1.60), 0.638 (1.54), 0.648 (2.73), 0.659 (2.29), 0.664 (2.11), 0.670 (2.11), 0.680 (1.10), 0.693 (0.80), 0.837 (15.47), 0.852 (16.00), 0.919 (0.53), 1.169 (0.62), 1.182 (1.22), 1.190 (1.75), 1.202 (2.82), 1.210 (2.08), 1.222 (2.82), 1.234 (1.99), 1.242 (1.16), 1.255 (0.53), 2.119 (0.42), 2.302 (2.94), 2.323 (1.22), 2.328 (1.34), 2.366 (0.74), 2.524 (4.36), 2.573 (3.06), 2.605 (1.51), 2.666 (0.95), 2.670 (1.28), 2.675 (0.92), 2.711 (0.74), 2.805 (2.64), 2.834 (2.05), 2.965 (1.40), 2.972 (1.57), 2.998 (2.52), 3.027 (1.57), 3.869 (3.06), 3.896 (3.06), 3.972 (2.43), 4.004 (2.29), 4.355 (1.45), 4.375 (2.52), 4.397 (2.49), 4.417 (1.37), 7.577 (4.93), 7.599 (9.26), 7.622 (4.96), 7.630 (1.75), 8.053 (8.55), 8.088 (8.37), 8.890 (14.58), 8.913 (0.50), 10.390 (5.67), 10.414 (5.34)。
實例 83
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(1.20 g，2.43 mmol)裝入23 ml DMF中，添加乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:1) (644 mg，3.40 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(2.1 ml，12 mmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。向反應溶液添加水且濾出所得沈澱之固體且在高度真空下乾燥。藉由矽膠層析法(移動相：100%二氯甲烷至二氯甲烷/甲醇=100/1)純化粗產物。由此獲得1.0 g目標化合物(73%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.20 min; MS (ESIpos): m/z = 557 [M+H]
+ 實例 84
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(65.0 mg，117 µmol)裝入三氟乙酸(730 µl，9.5 mmol)中，添加730 µl水及730 µl乙腈且在室溫下攪拌混合物兩天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。在減壓下濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得45 mg目標化合物(66%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.86 min; MS (ESIpos): m/z = 575 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.149 (0.42), -0.008 (3.70), 0.008 (3.30), 0.146 (0.41), 0.316 (1.31), 0.326 (2.15), 0.338 (2.07), 0.350 (1.69), 0.362 (0.80), 0.510 (1.45), 0.521 (2.09), 0.534 (1.89), 0.545 (2.18), 0.553 (1.61), 0.564 (2.23), 0.575 (1.72), 0.585 (1.64), 0.595 (1.33), 0.609 (0.83), 0.624 (1.13), 0.634 (1.13), 0.645 (1.97), 0.655 (1.70), 0.668 (1.59), 1.163 (0.46), 1.175 (0.92), 1.183 (1.27), 1.195 (2.15), 1.204 (1.50), 1.215 (2.10), 1.228 (1.24), 1.236 (1.21), 2.074 (10.78), 2.328 (0.75), 2.366 (0.47), 2.670 (0.66), 2.710 (0.41), 3.475 (15.83), 3.488 (16.00), 4.130 (0.94), 4.349 (1.22), 4.369 (1.91), 4.390 (1.84), 4.410 (0.97), 4.835 (5.32), 4.848 (12.45), 4.861 (5.07), 5.754 (4.77), 7.532 (3.99), 7.554 (7.54), 7.576 (3.92), 7.963 (6.93), 7.992 (6.79), 8.808 (12.92), 10.463 (4.45), 10.487 (4.20)。
實例 85
4-[({7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-基}羰基)胺基]-3,3-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(50.0 mg，73%純，83.1 µmol)裝入1.2 ml DMF中，添加HATU (37.9 mg，99.7 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(36 µl，210 µmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加4-胺基-3,3-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(23.6 mg，99.7 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下非常實質地濃縮且用二氯甲烷萃取殘餘物兩次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得48 mg目標化合物(87%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.81 min; MS (ESIpos): m/z = 658 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ [ppm]: -0.008 (0.48), 1.157 (0.55), 1.175 (1.10), 1.193 (0.55), 1.427 (16.00), 1.988 (2.06), 4.021 (0.59), 4.038 (0.53), 5.192 (0.56), 7.572 (0.73), 7.995 (0.80), 8.026 (0.78), 8.807 (1.58), 10.314 (0.54), 10.337 (0.51)。
實例 86
4-[({7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-基}羰基)胺基]雙環[2.2.1]庚烷-1-甲酸甲酯
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸 (50.0 mg, 98%純, 112 µmol)裝入1.6 ml DMF中，添加HATU (50.9 mg，134 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(49 µl，280 µmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加4-胺基雙環[2.2.1]庚烷-1-甲酸甲酯(22.6 mg，134 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下非常實質地濃縮且用二氯甲烷萃取殘餘物兩次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得52 mg目標化合物(78%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.68 min; MS (ESIpos): m/z = 591 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ [ppm]: -0.008 (0.56), 0.008 (0.54), 1.584 (6.18), 1.725 (0.82), 1.751 (1.60), 1.765 (1.06), 1.903 (0.99), 1.917 (1.54), 1.943 (0.96), 2.006 (0.84), 2.083 (0.44), 2.124 (3.16), 2.138 (3.63), 2.155 (4.94), 2.279 (1.00), 3.693 (16.00), 4.255 (2.00), 6.860 (1.01), 6.880 (1.82), 6.899 (1.04), 7.997 (1.62), 8.029 (1.61), 8.522 (3.08), 10.228 (2.05)。
實例 87
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-N-(3-乙基戊-3-基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(50.0 mg，73%純，83.1 µmol)裝入1.2 ml DMF中，添加HATU (37.9 mg，99.7 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(36 µl，210 µmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加3-乙基戊-3-胺(11.5 mg，99.7 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下非常實質地濃縮且用乙酸乙酯萃取殘餘物兩次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用乙酸乙酯重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得36 mg目標化合物(80%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.99 min; MS (ESIpos): m/z = 537 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.97), 0.008 (0.75), 0.770 (6.80), 0.789 (16.00), 0.807 (7.33), 1.702 (1.95), 1.720 (5.99), 1.739 (5.74), 1.757 (1.74), 2.524 (0.69), 3.918 (0.49), 5.191 (1.51), 7.549 (1.11), 7.571 (1.93), 7.592 (1.09), 7.991 (2.75), 8.023 (2.69), 8.671 (4.76), 9.621 (2.85)。
實例 88
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-(3-甲基戊-3-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(40.0 mg，73%純，66.5 µmol)裝入0.93 DMF中，添加HATU (30.3 mg，79.8 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(29 µl，170 µmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加3-甲基戊-3-胺鹽酸鹽(11.0 mg，79.8 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下非常實質地濃縮且用二氯甲烷萃取殘餘物兩次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得29 mg目標化合物(83%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.88 min; MS (ESIpos): m/z = 523 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.16), 0.817 (6.77), 0.835 (15.54), 0.854 (7.44), 1.282 (16.00), 1.616 (0.41), 1.634 (1.39), 1.652 (1.86), 1.668 (2.36), 1.687 (1.89), 1.705 (0.53), 1.773 (0.62), 1.791 (2.07), 1.809 (2.44), 1.826 (1.91), 1.844 (1.39), 3.908 (0.77), 5.190 (2.41), 7.550 (1.66), 7.572 (3.01), 7.593 (1.62), 7.990 (3.59), 8.022 (3.54), 8.673 (6.67), 9.737 (4.26)。
實例 89
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-(2-甲基丁-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(50.0 mg，73%純，83.1 µmol)裝入1.2 ml DMF中，添加HATU (37.9 mg，99.7 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(36 µl，210 µmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加2-甲基丁-2-胺(12 µl，100 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下非常實質地濃縮且用乙酸乙酯萃取殘餘物兩次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用乙酸乙酯重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得34 mg目標化合物(80%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.76 min; MS (ESIpos): m/z = 509 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.67), 0.851 (1.89), 0.869 (4.29), 0.888 (1.90), 1.343 (16.00), 1.706 (0.62), 1.724 (1.70), 1.743 (1.61), 1.761 (0.47), 3.909 (0.41), 5.186 (1.22), 7.551 (0.86), 7.573 (1.45), 7.593 (0.83), 7.982 (1.87), 8.014 (1.83), 8.676 (3.26), 9.818 (2.08)。
實例 90
N-第三丁基-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(60.0 mg，73%純，99.7 µmol)裝入1.4 ml DMF中，添加HATU (45.5 mg，120 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(43 µl，250 µmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加2-甲基丙-2-胺(8.75 mg，120 µmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份在減壓下非常實質地濃縮且用二氯甲烷萃取殘餘物兩次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得26 mg目標化合物(52%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.66 min; MS (ESIpos): m/z = 495 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.87), 1.245 (0.76), 1.260 (0.86), 1.275 (0.48), 1.390 (16.00), 5.185 (0.79), 7.551 (0.52), 7.573 (0.92), 7.594 (0.53), 7.970 (1.13), 8.002 (1.11), 8.682 (2.04), 9.872 (1.36)。
實例 91
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-(4,4,4-三氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使80.0 mg (182 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與45.3 mg (255 µmol) 4,4,4-三氟-2-甲基丁-2-胺鹽酸鹽在83.1 mg (219 µmol) HATU及95 µl (550 µmol) DIPEA存在下在730 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得88.9 mg(87%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.84 min; MS (ESIpos): m/z = 563 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.08 (s, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 7.98 (d, 1 H), 7.53 - 7.61 (m, 2 H), 4.87 - 5.10 (m, 2 H), 3.83 - 4.11 (m, 3 H), 3.48 - 3.69 (m, 1 H), 3.12 - 3.27 (m, 1 H), 2.87 - 3.09 (m, 3 H), 1.48 (s, 6 H)。
實例 92
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使150 mg (341 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與95.4 mg (478 µmol) 3,3,4,4,4-五氟丁-2-胺鹽酸鹽(外消旋物)在156 mg (410 µmol) HATU及180 µl (1.00 mmol) DIPEA存在下在1.4 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得149 mg (75%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.87 min; MS (ESIpos): m/z = 585 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.46 (d, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.61 (m, 2 H), 4.89 - 5.12 (m, 3 H), 3.85 - 4.12 (m, 3 H), 3.47 - 3.70 (m, 1 H), 2.91 - 3.28 (m, 2 H), 1.39 (d, 3 H)。 藉由對掌性HPLC將146 mg標題化合物(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體(製備型HPLC：管柱Daicel Chiralcel OX-H, 5 µm, 250×30 mm；移動相：80%正庚烷、20%乙醇；溫度：25℃；流動速率：40 ml/min；UV偵測：265 nm。) 由此獲得(在自管柱溶離之工序中)56.0 mg非對映異構體1 (99% de) R
t
= 6.40 min及55.8 mg 非對映異構體2 (98% de) R
t
= 8.57 min。 [分析型HPLC：管柱Daicel OX-3, 3 µm, 50×4.6 mm；移動相：80%異己烷，20%乙醇；UV偵測：220 nm]。 非對映異構體1另外藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化，獲得41.0 mg (21%理論值，100%純)來自實例93之標題化合物。 非對映異構體2另外藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化，獲得42.0 mg (21%理論值，100%純)來自實例94之標題化合物。
實例 93
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺 (非對映異構體1) LC-MS (方法3): R
t
= 1.89 min; MS (ESIpos): m/z = 585 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.46 (d, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.54 - 7.61 (m, 2 H), 4.91 - 5.10 (m, 3 H), 3.84 - 4.12 (m, 3 H), 3.43 - 3.67 (m, 1 H), 3.12 - 3.28 (m, 1 H), 2.88 - 3.11 (m, 1 H), 1.39 (d, 3 H).
實例 94
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) LC-MS (方法3): R
t
= 1.89 min; MS (ESIpos): m/z = 585 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.46 (d, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.54 - 7.61 (m, 2 H), 4.92 - 5.09 (m, 3 H), 3.85 - 4.11 (m, 3 H), 3.42 - 3.68 (m, 1 H), 3.12 - 3.28 (m, 1 H), 2.92 - 3.11 (m, 1 H), 1.39 (d, 3 H)。
實例 95
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使120 mg (273 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與74.0 mg (382 µmol) 1-(三氟甲氧基)丁-2-胺鹽酸鹽 (外消旋物)在125 mg (328 µmol) HATU及140 µl (820 µmol) DIPEA存在下在1.1 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得103 mg(65%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.99 min; MS (ESIpos): m/z = 579 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.99 (br d, 1 H), 8.76 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.61 (m, 2 H), 4.79 - 5.20 (m, 2 H), 4.11 - 4.23 (m, 3 H), 3.77 - 4.10 (m, 3 H), 3.43 - 3.74 (m, 1 H), 2.85 - 3.26 (m, 2 H), 1.52 - 1.73 (m, 2 H), 0.94 (t, 3 H)。 藉由對掌性HPLC將100 mg標題化合物(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體(製備型HPLC：管柱Chiralpak AD-H, 5 µm, 250×30 mm；移動相：80%正庚烷、20%乙醇；溫度：25℃；流動速率：40 ml/min；UV偵測：265 nm。) 由此獲得(在自管柱溶離之工序中) 23.6 mg非對映異構體1 (99% de) Rt = 10.77 min及13.5 mg (9%理論值，100%純)非對映異構體2 (98% de) Rt = 12.40 min。 [分析型HPLC：管柱Chiraltek AD-3, 3 µm；移動相：80%異己烷，20%乙醇；UV偵測：220 nm]。 非對映異構體1另外藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化，獲得4.30 mg (3%理論值，100%純)來自實例96之標題化合物。
實例 96
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) LC-MS (方法3): R
t
= 1.87 min; MS (ESIpos): m/z = 579 [M+H]
+
¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.98 (br d, 1 H), 8.76 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.54 - 7.60 (m, 2 H), 4.91 - 5.07 (m, 2 H), 4.13 - 4.22 (m, 3 H), 3.82 - 4.10 (m, 3 H), 3.44 - 3.66 (m, 1 H), 3.12 - 3.29 (m, 1 H), 2.93 - 3.11 (m, 1 H), 1.63 - 1.72 (m, 1 H), 1.53 - 1.63 (m, 1 H), 0.94 (t, 3 H)。
實例 97
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) LC-MS (方法3): R
t
= 1.87 min; MS (ESIpos): m/z = 579 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.99 (br d, 1 H), 8.76 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.61 (m, 2 H), 4.90 - 5.08 (m, 2 H), 4.13 - 4.23 (m, 3 H), 3.79 - 4.10 (m, 3 H), 3.45 - 3.69 (m, 1 H), 3.11 - 3.27 (m, 1 H), 2.86 - 3.11 (m, 1 H), 1.53 - 1.72 (m, 2 H), 0.94 (t, 3 H)。
實例 98
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[(2
S
)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使50.0 mg (114 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與26.1 mg (159 µmol) (2S)-1,1,1-三氟丁-2-胺鹽酸鹽在51.9 mg (137 µmol) HATU及59 µl (340 µmol) DIPEA存在下在460 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得47.2 mg (76%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.98 min; MS (ESIpos): m/z = 549 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.33 (d, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.54 - 7.61 (m, 2 H), 4.84 - 5.23 (m, 2 H), 4.67 - 4.83 (m, 1 H), 3.81 - 4.16 (m, 3 H), 3.42 - 3.70 (m, 2 H), 2.95 - 3.14 (m, 1 H), 1.83 - 1.93 (m, 1 H), 1.58 - 1.70 (m, 1 H), 0.97 (t, 3 H)。
實例 99
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-
N
-[(2
R
)-3-甲基丁-2-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1, 使50.0 mg (114 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與13.9 mg (159 µmol) (2R)-3-甲基丁-2-胺在51.9 mg (137 µmol) HATU及59 µl (340 µmol) DIPEA存在下在460 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得21.6 mg (37%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.74 min; MS (ESIpos): m/z = 509 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.87 (d, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.60 (m, 2 H), 4.88 - 5.10 (m, 2 H), 3.80 - 4.16 (m, 4 H), 3.47 - 3.72 (m, 1 H), 3.12 - 3.27 (m, 1 H), 2.88 - 3.11 (m, 1 H), 1.72 - 1.81 (m, 1 H), 1.10 (d, 3 H), 0.93 (d, 3 H), 0.91 (d, 3 H)。
實例 100
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-
N
-[(2
S
)-3-甲基丁-2-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1, 使50.0 mg (114 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與13.9 mg (159 µmol) (2S)-3-甲基丁-2-胺在51.9 mg (137 µmol) HATU及59 µl (340 µmol) DIPEA存在下在460 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得52.0 mg (90%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.74 min; MS (ESIpos): m/z = 509 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.87 (d, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 7.99 (d, 1 H), 7.53 - 7.60 (m, 2 H), 4.79 - 5.23 (m, 2 H), 3.81 - 4.10 (m, 4 H), 3.44 - 3.71 (m, 1 H), 2.86 - 3.23 (m, 2 H), 1.72 - 1.81 (m, 1 H), 1.10 (d, 3 H), 0.93 (br d, 3 H), 0.91 (br d, 3 H)。
實例 101 N
-[(1
S
)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1, 使50.0 mg (114 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與28.0 mg (159 µmol) (1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽在51.9 mg (137 µmol) HATU及59 µl (340 µmol) DIPEA存在下在460 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得36.9 (58%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.85 min; MS (ESIpos): m/z = 561 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.47 (d, 1 H), 8.83 (s, 1 H), 8.01 (d, 1 H), 7.53 - 7.61 (m, 2 H), 4.91 - 5.09 (m, 2 H), 4.33 - 4.43 (m, 1 H), 3.86 - 4.14 (m, 3 H), 3.39 - 3.67 (m, 1 H), 3.13 - 3.27 (m, 1 H), 2.92 - 3.12 (m, 1 H), 1.16 - 1.25 (m, 1 H), 0.50 - 0.69 (m, 3 H), 0.29 - 0.37 (m, 1 H)。
實例 102
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-
N
-[(2
S
)-1-甲氧基-3-甲基丁-2-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使30.0 mg (68.3 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與11.2 mg (95.6 µmol) (2S)-1-甲氧基-3-甲基丁-2-胺在31.2 mg (81.9 µmol) HATU及36 µl (200 µmol) DIPEA存在下在270 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得32.1 mg (87%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.64 min; MS (ESIpos): m/z = 539 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.93 (d, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.61 (m, 2 H), 4.82 - 5.15 (m, 2 H), 3.81 - 4.14 (m, 4 H), 3.50 - 3.73 (m, 1 H), 3.34 - 3.49 (m, 3 H), 3.13 - 3.24 (m, 1 H), 2.88 - 3.10 (m, 1 H), 1.87 - 1.97 (m, 1 H), 0.92 (d, 6 H)。
實例 103
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-N-(2,4-二甲基戊-3-基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使30.0 mg (68.3 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與11.0 mg (95.6 µmol) 2,4-二甲基戊-3-胺在31.2 mg (81.9 µmol) HATU及36 µl (200 µmol) DIPEA存在下在270 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得29.1 mg (79%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.94 min; MS (ESIpos): m/z = 537 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.76 (d, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.02 (d, 1 H), 7.53 - 7.60 (m, 2 H), 4.91 - 5.07 (m, 2 H), 3.80 - 4.15 (m, 3 H), 3.48 - 3.74 (m, 2 H), 2.89 - 3.28 (m, 2 H), 1.80 - 1.90 (m, 2 H), 0.88 (dd, 12 H)。
實例 104
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-
N
-[2-甲基戊-3-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使100 mg (228 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與32.2 mg (319 µmol) 2-甲基戊-3-胺在104 mg (273 µmol) HATU及120 µl (680 µmol) DIPEA存在下在920 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得68.5 mg (58%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.85 min; MS (ESIpos): m/z = 523 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.77 (d, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.61 (m, 2 H), 4.90 - 5.09 (m, 2 H), 3.86 - 4.16 (m, 3 H), 3.72 - 3.85 (m, 1 H), 3.41 - 3.69 (m, 1 H), 3.13 - 3.28 (m, 1 H), 2.90 - 3.12 (m, 1 H), 1.77 - 1.87 (m, 1 H), 1.51 - 1.62 (m, 1 H), 1.35 - 1.47 (m, 1 H), 0.84 - 0.92 (m, 9 H)。 藉由對掌性HPLC將65.0 mg標題化合物(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體(製備型HPLC：管柱Daicel Chiralcel OX-H, 5 µm, 250×20 mm；移動相：80%正庚烷、20%乙醇；溫度：23℃；流動速率：20 ml/min；UV偵測：220 nm。) 由此獲得(在自管柱溶離之工序中) 26.1 mg (22%理論值，100%純度)來自實例105之非對映異構體1 (99% de) Rt = 11.82 min及32.0 mg (27%理論值，100%純度)來自實例106之非對映異構體2 (99% de) Rt = 15.94 min。 [分析型HPLC：管柱Chiraltek OX-3, 3 µm；移動相：80%正庚烷，20%乙醇；UV偵測：220 nm]。
實例 105
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-
N
-[2-甲基戊-3-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) LC-MS (方法3): R
t
= 1.89 min; MS (ESIpos): m/z = 523 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.77 (d, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.60 (m, 2 H), 4.91 - 5.07 (m, 2 H), 3.85 - 4.15 (m, 3 H), 3.76 - 3.83 (m, 1 H), 3.43 - 3.64 (m, 1 H), 3.11 - 3.28 (m, 1 H), 2.92 - 3.10 (m, 1 H), 1.77 - 1.86 (m, 1 H), 1.51 - 1.61 (m, 1 H), 1.36 - 1.47 (m, 1 H), 0.84 - 0.92 (m, 9 H)。
實例 106
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-
N
-[2-甲基戊-3-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) LC-MS (方法3): R
t
= 1.89 min; MS (ESIpos): m/z = 523 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.77 (d, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.48 - 7.66 (m, 2 H), 4.88 - 5.11 (m, 2 H), 3.86 - 4.15 (m, 3 H), 3.76 - 3.83 (m, 1 H), 3.44 - 3.69 (m, 1 H), 3.13 - 3.29 (m, 1 H), 2.87 - 3.11 (m, 1 H), 1.76 - 1.86 (m, 1 H), 1.51 - 1.62 (m, 1 H), 1.29 - 1.47 (m, 1 H), 0.84 - 0.93 (m, 9 H)。
實例 107
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-(4,4,4-三氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使50.0 mg (118 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與23.1 mg (130 µmol) 4,4,4-三氟-2-甲基丁-2-胺鹽酸鹽在53.9 mg (142 µmol) HATU及82 µl (470 µmol) DIPEA存在下在750 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得51.0 mg (79%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.06 min; MS (ESIpos): m/z = 547 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.09 (s, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 7.98 (d, 1 H), 7.56 (t, 2 H), 4.95 - 5.04 (m, 1 H), 4.18 - 4.37 (m, 1 H), 3.34 - 4.01 (m, 3 H), 3.06 - 3.27 (m, 1 H), 2.95 (q, 2 H), 1.72 - 1.98 (m, 2 H), 1.48 (s, 6 H)。
實例 108 N
-[(1
S
)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使50.0 mg (118 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與22.8 mg (130 µmol) (1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽在53.9 mg (142 µmol) HATU及82 µl (470 µmol) DIPEA存在下在750 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得50.3 mg (78%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.07 min; MS (ESIpos): m/z = 545 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.48 (d, 1 H), 8.83 (s, 1 H), 8.01 (d, 1 H), 7.53 - 7.60 (m, 2 H), 4.97 - 5.04 (m, 1 H), 4.21 - 4.43 (m, 2 H), 3.34 - 4.03 (m, 3 H), 3.01 - 3.29 (m, 1 H), 1.74 - 1.98 (m, 2 H), 1.16 - 1.25 (m, 1 H), 0.50 - 0.69 (m, 3 H), 0.30 - 0.37 (m, 1 H)。
實例 109
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使100 mg (236 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與50.3 mg (260 µmol) 1-(三氟甲氧基)丁-2-胺鹽酸鹽(外消旋物)在108 mg (283 µmol) HATU及160 µl (940 µmol) DIPEA存在下在1.5 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得89.3 mg (67%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.08 min; MS (ESIpos): m/z = 563 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.00 (br d, 1 H), 8.75 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.56 (br t, 2 H), 4.95 - 5.04 (m, 1 H), 4.24 - 4.35 (m, 1 H), 4.12 - 4.24 (m, 3 H), 3.33 - 4.07 (m, 3 H), 3.02 - 3.29 (m, 1 H), 1.74 - 2.00 (m, 2 H), 1.55 - 1.73 (m, 2 H), 0.94 (t, 3 H)。 藉由對掌性HPLC將88.0 mg標題化合物(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體(製備型HPLC：管柱Daicel Chiralpak IE 5 µm 250×20 mm；移動相：85%正庚烷，15%乙醇 + 0.2% DEA；溫度：23℃；流動速率：20 ml/min；UV偵測：220 nm。) 由此獲得(在自管柱溶離之工序中) 22.6 mg (17%理論值，95%純度)來自實例110之非對映異構體1 (99% de) Rt = 11.90 min及24.7 mg (19%理論值，95%純度)來自實例111之非對映異構體2 (93% de) Rt = 13.32 min。 [分析型HPLC：管柱Daicel Chiralpak IE-3, 3 µm, 50×4.6 mm；移動相：90%正庚烷，10%乙醇 + 0.2% DEA；流動速率：1.0 ml/min；UV偵測：220nm]。
實例 110
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺 (非對映異構體1) LC-MS (方法3): R
t
= 2.08 min; MS (ESIpos): m/z = 563 [M+H]
+
¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.00 (d, 1 H), 8.75 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.56 (br t, 2 H), 4.96 - 5.03 (m, 1 H), 4.23 - 4.36 (m, 1 H), 4.13 - 4.22 (m, 3 H), 3.36 - 4.04 (m, 2 H), 2.96 - 3.29 (m, 1 H), 1.74 - 2.00 (m, 2 H), 1.54 - 1.73 (m, 2 H), 0.94 (t, 3 H)。
實例 111
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) LC-MS (方法3): R
t
= 2.08 min; MS (ESIpos): m/z = 563 [M+H]
+
¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.00 (d, 1 H), 8.75 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.59 (m, 2 H), 4.96 - 5.03 (m, 1 H), 4.23 - 4.35 (m, 1 H), 4.13 - 4.22 (m, 3 H), 3.33 - 4.01 (m, 3 H), 3.05 - 3.29 (m, 1 H), 1.73 - 1.99 (m, 2 H), 1.54 - 1.72 (m, 2 H), 0.94 (t, 3 H)。
實例 112
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使100 mg (236 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與51.9 mg (260 µmol) 3,3,4,4,4-五氟丁-2-胺鹽酸鹽(外消旋物)在108 mg (283 µmol) HATU及160 µl (940 µmol) DIPEA存在下在1.5 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得107 mg (80%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.10 min; MS (ESIpos): m/z = 569 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.47 (d, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.56 (t, 2 H), 4.95 - 5.08 (m, 2 H), 4.19 - 4.37 (m, 1 H), 3.34 - 4.06 (m, 3 H), 3.01 - 3.28 (m, 1 H), 1.73 - 1.98 (m, 2 H), 1.39 (d, 3 H)。 藉由對掌性SFC將105 mg標題化合物(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體(製備型SFC：管柱Chiralpak AD，250×20 mm；移動相：80%二氧化碳，20%異丙醇；溫度：40℃；流動速率：60 ml/min；UV偵測：210 nm。) 由此獲得(在自管柱溶離之工序中) 39.2 mg (29%理論值，100%純度)來自實例113之非對映異構體1 (99% de) Rt = 2.07 min及32.8 mg (25%理論值，100%純度)來自實例114之非對映異構體2 (99% de) Rt = 2.59 min。 [分析型SFC：管柱AD；移動相：80%二氧化碳，20%異丙醇；流動速率：3.0 ml/min；UV偵測：210 nm]。
實例 113
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) LC-MS (方法3): R
t
= 2.11 min; MS (ESIpos): m/z = 569 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.47 (d, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.57 (br t, 2 H), 4.95 - 5.08 (m, 2 H), 4.21 - 4.37 (m, 1 H), 3.36 - 4.05 (m, 3 H), 3.01 - 3.27 (m, 1 H), 1.72 - 1.98 (m, 2 H), 1.39 (d, 3 H)。
實例 114
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) LC-MS (方法3): R
t
= 2.11 min; MS (ESIpos): m/z = 569 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.47 (d, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.60 (m, 2 H), 4.96 - 5.07 (m, 2 H), 4.26 - 4.34 (m, 1 H), 3.34 - 3.98 (m, 3 H), 3.00 - 3.26 (m, 1 H), 1.70 - 2.01 (m, 2 H), 1.39 (d, 3 H)。
實例 115
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[(2
S
)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使50.0 mg (118 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與21.3 mg (130 µmol) (2S)-1,1,1-三氟丁-2-胺鹽酸鹽在53.9 mg (142 µmol) HATU及82 µl (470 µmol) DIPEA存在下在750 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得46.8 mg (74%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.05 min; MS (ESIpos): m/z = 533 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.34 (d, 1 H), 8.83 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.61 (m, 2 H), 4.96 - 5.05 (m, 1 H), 4.68 - 4.79 (m, 1 H), 4.19 - 4.39 (m, 1 H), 3.33 - 4.04 (m, 3 H), 3.02 - 3.28 (m, 1 H), 1.72 - 1.97 (m, 3 H), 1.58 - 1.70 (m, 1 H), 0.97 (t, 3 H)。
實例 116
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-
N
-[2-甲基戊-3-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使100 mg (236 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與35.8 mg (260 µmol) 2-甲基戊-3-胺鹽酸鹽(外消旋物)在108 mg (283 µmol) HATU及160 µl (940 µmol) DIPEA存在下在1.5 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得90.1 mg (75%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.10 min; MS (ESIpos): m/z = 507 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.78 (d, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.56 (br t, 2 H), 4.96 - 5.03 (m, 1 H), 4.20 - 4.38 (m, 1 H), 3.35 - 4.05 (m, 4 H), 3.01 - 3.30 (m, 1 H), 1.73 - 1.98 (m, 3 H), 1.51 - 1.62 (m, 1 H), 1.36 - 1.47 (m, 1 H), 0.84 - 0.92 (m, 9 H)。 藉由對掌性HPLC將99 mg標題化合物(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體(製備型HPLC：管柱Daicel Chiralpak AY-H 5 µm 250×20 mm；移動相：70%正庚烷，30%乙醇 + 0.2% DEA；溫度：60℃；流動速率：15 ml/min；UV偵測：260 nm。) 由此獲得(在自管柱溶離之工序中) 21.0 mg (17%理論值，100%純度)來自實例117之非對映異構體1 (97% de) Rt = 4.45 min及23.0 mg (19%理論值，100%純度)來自實例118之非對映異構體2 (76% de) Rt = 7.56 min。 [分析型HPLC：管柱Daicel Chiralpak AY-H 5 µm 250×4.6 mm；移動相：70%異己烷，30%乙醇 + 0.2% DEA；溫度：60℃；流動速率：1.0 ml/min；UV偵測：260 nm]。
實例 117
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-
N
-[2-甲基戊-3-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) LC-MS (方法3): R
t
= 2.10 min; MS (ESIpos): m/z = 507 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.78 (d, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.59 (m, 2 H), 4.98 - 5.01 (m, 1 H), 4.26 - 4.32 (m, 1 H), 3.36 - 4.10 (m, 4 H), 2.99 - 3.27 (m, 1 H), 1.76 - 1.94 (m, 3 H), 1.52 - 1.60 (m, 1 H), 1.37 - 1.45 (m, 1 H), 0.84 - 0.92 (m, 9 H)。
實例 118
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-
N
-[2-甲基戊-3-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) LC-MS (方法3): R
t
= 2.11 min; MS (ESIpos): m/z = 507 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.78 (d, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.53 - 7.60 (m, 2 H), 4.96 - 5.02 (m, 1 H), 4.24 - 4.34 (m, 1 H), 3.33 - 4.08 (m, 3 H), 3.07 - 3.29 (m, 1 H), 1.75 - 1.96 (m, 3 H), 1.51 - 1.63 (m, 1 H), 1.36 - 1.47 (m, 1 H), 0.83 - 0.92 (m, 9 H)。
實例 119
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-
N
-[(2
S
)-3-甲基丁-2-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據 GP1，使50.0 mg (118 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與11.3 mg (130 µmol) (2S)-3-甲基丁-2-胺在53.9 mg (142 µmol) HATU及62 µl (350 µmol) DIPEA存在下在750 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得45.2 mg (78%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.99 min; MS (ESIpos): m/z = 493 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.88 (d, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 7.99 (d, 1 H), 7.56 (br t, 2 H), 4.95 - 5.03 (m, 1 H), 4.19 - 4.37 (m, 1 H), 3.33 - 4.10 (m, 4 H), 3.01 - 3.26 (m, 1 H), 1.70 - 1.96 (m, 3 H), 1.10 (d, 3 H), 0.88 - 0.95 (m, 6 H)。
實例 120
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-
N
-[(2
R
)-3-甲基丁-2-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據 GP1，使50.0 mg (118 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與11.3 mg (130 µmol) (2R)-3-甲基丁-2-胺在53.9 mg (142 µmol) HATU及62 µl (350 µmol) DIPEA存在下在750 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得45.8 mg (79%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.99 min; MS (ESIpos): m/z = 493 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.88 (d, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 7.99 (d, 1 H), 7.56 (br t, 2 H), 4.96 - 5.03 (m, 1 H), 4.21 - 4.37 (m, 1 H), 3.36 - 4.11 (m, 4 H), 3.02 - 3.28 (m, 1 H), 1.71 - 1.97 (m, 3 H), 1.10 (d, 3 H), 0.88 - 0.96 (m, 6 H)。
實例 121
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-
N
-[(2
R
)-1-甲氧基-3-甲基丁-2-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據 GP1，使50.0 mg (118 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與20.0 mg (130 µmol) (2R)-1-甲氧基-3-甲基丁-2-胺鹽酸鹽在53.9 mg (142 µmol) HATU及62 µl (350 µmol) DIPEA存在下在750 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得45.5 mg (74%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.88 min; MS (ESIpos): m/z = 523 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.94 (d, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 7.52 - 7.60 (m, 2 H), 4.94 - 5.05 (m, 1 H), 4.29 (br s, 1 H), 3.96 - 4.03 (m, 1 H), 3.50 - 3.94 (m, 2 H), 3.34 - 3.49 (m, 3 H), 3.27 (s, 3 H), 2.90 - 3.24 (m, 1 H), 1.74 - 1.99 (m, 3 H), 0.92 (d, 6 H)。
實例 122 N
-(2,4-二甲基戊-3-基)-6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據 GP1，使50.0 mg (118 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與15.0 mg (130 µmol) 2,4-二甲基戊-3-胺在53.9 mg (142 µmol) HATU及62 µl (350 µmol) DIPEA存在下在750 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得50.7 mg (82%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.19 min; MS (ESIpos): m/z = 521 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.77 (d, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.01 (d, 1 H), 7.56 (br t, 2 H), 4.96 - 5.03 (m, 1 H), 4.21 - 4.36 (m, 1 H), 3.37 - 3.98 (m, 4 H), 3.01 - 3.27 (m, 1 H), 1.74 - 1.96 (m, 4 H), 0.88 (dd, 12 H)。
實例 123
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使100 mg (228 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與36.4 mg (250 µmol，97%純) 1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-胺(外消旋物)在104 mg (273 µmol) HATU及160 µl (910 µmol) DIPEA存在下在2.0 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得52.0 mg (41%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.94 min; MS (ESIpos): m/z = 563 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.53 (d, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.04 (d, 1 H), 7.58 (br t, 2 H), 4.92 - 5.08 (m, 2 H), 4.71 - 4.81 (m, 1 H), 3.86 - 4.12 (m, 3 H), 3.47 - 3.68 (m, 1 H), 2.88 - 3.25 (m, 2 H), 2.18 - 2.30 (m, 1 H), 1.02 (d, 3 H), 0.96 (d, 3 H)。
實例 124
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使50.0 mg (114 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與15.9 mg (125 µmol) 1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-胺在51.9 mg (137 µmol) HATU及59 µl (340 µmol) DIPEA存在下在1.0 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得45.0 mg (72%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.87 min; MS (ESIpos): m/z = 549 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.55 (s, 1 H), 8.77 (s, 1 H), 8.01 (d, 1 H), 7.54 - 7.61 (m, 2 H), 4.89 - 5.10 (m, 2 H), 3.79 - 4.14 (m, 3 H), 3.44 - 3.67 (m, 1 H), 3.12 - 3.28 (m, 1 H), 2.87 - 3.12 (m, 1 H), 1.63 (s, 6 H)。
實例 125
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使20.0 mg (47.2 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與6.60 mg (52.0 µmol) 1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-胺在21.6 mg (56.7 µmol) HATU及25 µl (140 µmol) DIPEA存在下在420 µl DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得18.0 mg (72%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.10 min; MS (ESIpos): m/z = 533 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.56 (s, 1 H), 8.77 (s, 1 H), 8.01 (d, 1 H), 7.53 - 7.61 (m, 2 H), 4.96 - 5.03 (m, 1 H), 4.20 - 4.35 (m, 1 H), 3.37 - 4.07 (m, 3 H), 2.98 - 3.26 (m, 1 H), 1.74 - 2.00 (m, 2 H), 1.63 (s, 6 H)。
實例 126
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使65.0 mg (154 µmol) 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與24.6 mg (169 µmol, 97%純) 1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-胺 (外消旋物)在70.1 mg (184 µmol) HATU及80 µl (460 µmol) DIPEA存在下在1.3 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得54.0 mg (64%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.16 min; MS (ESIpos): m/z = 547 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.54 (d, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.04 (d, 1 H), 7.54 - 7.60 (m, 2 H), 4.97 - 5.04 (m, 1 H), 4.71 - 4.82 (m, 1 H), 4.24 - 4.36 (m, 1 H), 3.33 - 4.10 (m, 3 H), 2.97 - 3.27 (m, 1 H), 2.20 - 2.28 (m, 1 H), 1.71 - 2.00 (m, 2 H), 1.03 (d, 3 H), 0.96 (d, 3 H)。
實例 127
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使100 mg (246 µmol) 1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與54.0 mg (271 µmol) 3,3,4,4,4-五氟丁-2-胺鹽酸鹽(外消旋物)在112 mg (295 µmol) HATU及170 µl (980 µmol) DIPEA存在下在2.2 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得100 mg (74%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.98 min; MS (ESIpos): m/z = 552 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.46 (d, 1 H), 8.83 (d, 1 H), 8.61 (d, 1 H), 8.30 - 8.37 (m, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 4.93 - 5.09 (m, 2 H), 4.20 - 4.39 (m, 1 H), 3.35 - 4.06 (m, 3 H), 3.01 - 3.28 (m, 1 H), 1.73 - 1.98 (m, 2 H), 1.39 (br d, 3 H)。 藉由對掌性HPLC將98.0 mg標題化合物(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體(製備型HPLC：管柱Daicel Chiralpak IE 5 µm 250×20 mm；移動相：70%正庚烷，30%乙醇 + 0.2% DEA；溫度：35℃；流動速率：15 ml/min；UV偵測：265 nm。) 由此獲得(在自管柱溶離之工序中)46.0 mg非對映異構體1 (99% de) R
t
= 8.64 min及47.0 mg 非對映異構體2 (99% de) R
t
= 12.08 min。 [分析型HPLC：管柱Daicel Chiralpak IE， 5 µm 250×4.6 mm；移動相：70%異己烷，30%乙醇 + 0.2% DEA；溫度：35℃；流動速率：1.0 ml/min；UV偵測：265 nm]。 非對映異構體1另外藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化，獲得40.0 mg (30%理論值，100%純)來自實例128之標題化合物。 非對映異構體2另外藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化，獲得42.0 mg (31%理論值，100%純)來自實例129之標題化合物。
實例 128
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺 (非對映異構體1) LC-MS (方法3): R
t
= 1.97 min; MS (ESIpos): m/z = 552 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.46 (d, 1 H), 8.83 (d, 1 H), 8.60 - 8.63 (m, 1 H), 8.31 - 8.37 (m, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 4.95 - 5.08 (m, 2 H), 4.22 - 4.36 (m, 1 H), 3.36 - 4.04 (m, 3 H), 2.95 - 3.27 (m, 1 H), 1.73 - 1.96 (m, 2 H), 1.39 (br d, 3 H)。
實例 129
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) LC-MS (方法3): R
t
= 1.97 min; MS (ESIpos): m/z = 552 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.46 (br d, 1 H), 8.83 (d, 1 H), 8.61 (d, 1 H), 8.30 - 8.38 (m, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 4.93 - 5.10 (m, 2 H), 4.22 - 4.37 (m, 1 H), 3.36 - 4.07 (m, 3 H), 2.96 - 3.29 (m, 1 H), 1.73 - 1.98 (m, 2 H), 1.39 (br d, 3 H)。
實例 130 N
-(2,6-二氯苯基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP3，使255 mg (494 µmol) 7-氯-N-(2,6-二氯苯基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺與75.8 mg (543 µmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽及300 µl (1.70 mmol) N,N-二異丙基乙胺在5 ml二甲基甲醯胺中反應。粗產物用極少乙腈稀釋且藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得216 mg (75%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.82 min; MS (ESIpos): m/z = 583 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.947 (0.79), 1.257 (3.15), 2.328 (0.67), 2.366 (0.53), 2.671 (0.73), 2.710 (0.55), 2.731 (4.61), 2.890 (5.57), 3.054 (1.06), 3.705 (0.95), 3.912 (1.83), 4.029 (1.36), 5.216 (3.69), 7.360 (2.39), 7.380 (4.91), 7.400 (3.33), 7.562 (3.25), 7.581 (16.00), 7.601 (11.10), 7.952 (0.78), 8.062 (4.69), 8.093 (4.59), 8.929 (8.31), 11.845 (8.05)。
實例 131 N
-[1-(2-氯苯基)-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使100 mg (228 µmol) 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與52.5 mg (250 µmol) 1-(2-氯苯基)-2,2,2-三氟乙胺 (外消旋物)在104 mg (273 µmol) HATU及120 µl (680 µmol) DIPEA存在下在1.4 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得104 mg (71%理論值，98%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.09 min; MS (ESIpos): m/z = 631 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.55), -0.008 (5.54), 0.146 (0.64), 2.074 (0.71), 2.329 (1.11), 2.367 (0.95), 2.671 (1.20), 2.711 (0.93), 3.064 (1.11), 3.696 (1.09), 3.897 (2.04), 4.021 (1.60), 5.203 (4.37), 6.404 (0.75), 6.423 (2.53), 6.445 (3.43), 6.465 (2.39), 7.484 (1.62), 7.499 (4.37), 7.503 (4.83), 7.517 (4.54), 7.522 (4.79), 7.533 (3.68), 7.551 (7.45), 7.566 (7.05), 7.589 (4.65), 7.607 (12.96), 7.627 (7.80), 8.050 (8.75), 8.082 (8.62), 8.861 (16.00), 11.447 (5.70), 11.470 (5.39)。
實例 132 N
-(2,6-二氯苯甲基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使100 mg (228 µmol) 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與44.1 mg (250 µmol) 1-(2,6-二氯苯基)甲胺在104 mg (273 µmol) HATU及120 µl (680 µmol) DIPEA存在下在1.4 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得121 mg (89%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.00 min; MS (ESIpos): m/z = 597 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.53), -0.008 (5.53), 0.008 (3.79), 0.146 (0.53), 2.367 (0.81), 2.519 (3.30), 2.524 (2.91), 2.711 (0.74), 3.046 (0.63), 3.671 (0.60), 3.903 (1.44), 4.809 (10.37), 4.823 (10.16), 5.181 (4.47), 7.379 (3.42), 7.398 (5.05), 7.401 (5.23), 7.420 (5.84), 7.525 (16.00), 7.545 (12.28), 7.569 (5.33), 7.591 (3.09), 7.953 (7.16), 7.985 (6.98), 8.782 (12.02), 10.219 (2.47), 10.232 (4.91), 10.245 (2.14)。
實例 133
6-氯-
N-
(2,6-二氯苯基)-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將79.4 mg (490 µmol) 2,6-二氯苯胺於1.0 ml DMF中之溶液添加至158 mg (446 µmol) 6-氯-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-羰基氯於1.0 ml DMF中之溶液，接著添加19.6 mg (490 µmol)氫化鈉(礦物油中60%)。接著在室溫下攪拌混合物2小時。藉由添加水、乙腈及甲酸來終止反應且粗產物藉由製備型HPLC(管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得36.0 mg (16%理論值，93%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.24 min; MS (ESIpos): m/z = 480 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 11.41 (s, 1 H), 9.02 (s, 1 H), 8.92 (d, 1 H), 8.81 (d, 1 H), 7.85 - 7.94 (m, 1 H), 7.57 - 7.67 (m, 3 H), 7.32 - 7.44 (m, 2 H)。
實例 134
6-氯-
N
-[1-(2-氯苯基)-2,2,2-三氟乙基]-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
根據GP1，使150 mg (446 µmol) 6-氯-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與140 mg (668 µmol) 1-(2-氯苯基)-2,2,2-三氟乙胺(外消旋物)在203 mg (535 µmol) HATU及230 µl (1.30 mmol) DIPEA存在下在1.5 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得197 mg (83%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.37 min; MS (ESIpos): m/z = 528 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 11.03 (d, 1 H), 8.96 (s, 1 H), 8.90 (d, 1 H), 8.80 (d, 1 H), 7.74 - 7.91 (m, 1 H), 7.48 - 7.67 (m, 5 H), 7.31 - 7.41 (m, 1 H), 6.43 - 6.53 (m, 1 H)。
實例 135
6-氯-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-
N
-[1-(三氟甲氧基)丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
根據GP1，使150 mg (446 µmol) 6-氯-1-(2,4-二氟苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與120 mg (668 µmol) 1-(三氟甲氧基)丙-2-胺鹽酸鹽(外消旋物)在203 mg (535 µmol) HATU及310 µl (1.80 mmol) DIPEA存在下在1.5 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得159 mg (77%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 462 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.69 (d, 1 H), 8.86 - 8.89 (m, 2 H), 8.73 (d, 1 H), 7.81 - 7.89 (m, 1 H), 7.62 (ddd, 1 H), 7.33 - 7.39 (m, 1 H), 4.33 - 4.42 (m, 1 H), 4.16 - 4.23 (m, 2 H), 1.27 (d, 3 H)。
實例 136
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
根據GP1，使200 mg (83%純，364 µmol) 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與58.3 mg (97%，401 µmol) 1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-胺在166 mg (437 µmol) HATU及190 µl (1.10 mmol) DIPEA存在下在3.2 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得210 mg (100%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.95 min; MS (ESIpos): m/z = 579 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.42), 0.008 (3.45), 0.146 (0.45), 0.953 (9.63), 0.962 (10.81), 0.969 (10.83), 0.979 (9.65), 1.019 (9.50), 1.025 (9.91), 1.036 (10.14), 1.042 (9.33), 2.224 (1.64), 2.234 (1.74), 2.241 (2.15), 2.251 (2.15), 2.267 (1.51), 2.285 (0.59), 2.328 (0.63), 2.367 (0.54), 2.524 (2.19), 2.670 (0.65), 2.711 (0.54), 2.732 (2.24), 2.891 (2.92), 3.015 (0.96), 3.225 (0.99), 3.687 (1.01), 3.893 (1.99), 4.013 (1.51), 4.747 (1.32), 4.769 (1.91), 4.789 (1.28), 5.201 (5.09), 5.754 (5.44), 7.688 (0.85), 7.695 (1.33), 7.710 (1.74), 7.719 (2.68), 7.728 (2.97), 7.734 (3.17), 7.742 (3.82), 7.751 (3.28), 7.765 (2.51), 8.041 (7.79), 8.073 (7.68), 8.802 (16.00), 10.536 (3.12), 10.545 (3.29), 10.561 (3.10), 10.569 (3.09)。
實例 137
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel Chiralcel OX-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%乙醇；流動速率15 ml/min；溫度：25℃, 偵測：210 nm)將52.0 mg 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體1：19.5 mg (＞99% ee) R
t
= 1.30 min [HPLC：管柱Daicel OX-3；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%乙醇；偵測：220 nm]。 非對映異構體1另外藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化，獲得14.0 mg (100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.96 min; MS (ESIpos): m/z = 563 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.79), -0.008 (7.62), 0.008 (5.42), 0.146 (0.71), 0.953 (15.75), 0.970 (16.00), 1.017 (13.54), 1.034 (13.74), 2.203 (0.62), 2.221 (1.58), 2.230 (1.66), 2.237 (2.09), 2.247 (2.12), 2.254 (1.55), 2.264 (1.47), 2.328 (1.13), 2.366 (1.21), 2.523 (4.06), 2.670 (1.19), 2.710 (1.24), 3.036 (0.62), 3.406 (0.90), 3.583 (0.68), 3.803 (0.45), 3.821 (0.45), 4.034 (2.34), 4.738 (1.24), 4.747 (1.35), 4.761 (1.83), 4.770 (1.89), 4.783 (1.30), 4.793 (1.19), 5.004 (2.00), 7.556 (3.89), 7.577 (7.37), 7.600 (3.87), 8.025 (7.37), 8.057 (7.37), 8.845 (13.43), 10.514 (4.94), 10.540 (4.77)。
實例 138
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel Chiralcel OX-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%乙醇；流動速率15 ml/min；溫度：25℃, 偵測：210 nm)將52.0 mg 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體2：21.5 mg (90.4% ee) R
t
= 1.77 min [HPLC：管柱Daicel OX-3；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%乙醇；偵測：220 nm]。 非對映異構體2另外藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化，獲得15.0 mg (100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.97 min; MS (ESIpos): m/z = 563 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.48), -0.008 (4.54), 0.008 (3.45), 0.146 (0.46), 0.930 (3.74), 0.949 (12.03), 0.953 (15.89), 0.970 (16.00), 1.017 (13.01), 1.034 (13.22), 2.204 (0.59), 2.221 (1.53), 2.231 (1.58), 2.238 (2.01), 2.248 (2.01), 2.255 (1.48), 2.264 (1.41), 2.281 (0.53), 2.328 (0.69), 2.367 (0.75), 2.451 (0.77), 2.468 (2.26), 2.524 (2.47), 2.671 (0.75), 2.711 (0.78), 3.023 (0.62), 3.594 (0.64), 3.951 (0.80), 4.039 (2.22), 4.738 (1.17), 4.747 (1.32), 4.761 (1.74), 4.771 (1.76), 4.784 (1.25), 4.793 (1.16), 5.006 (1.69), 7.556 (3.68), 7.578 (6.92), 7.600 (3.70), 8.026 (7.19), 8.057 (7.07), 8.266 (0.77), 8.846 (12.46), 10.515 (4.82), 10.540 (4.65)。
實例 139
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel Chiralpak IE, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：25℃，偵測：270 nm)將54.0 mg 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體1：21.5 mg (＞99% ee) R
t
= 2.20 min [HPLC：管柱Daicel IE-3；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%異丙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 547 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.42), -0.008 (3.86), 0.008 (3.14), 0.955 (15.68), 0.971 (16.00), 1.018 (13.42), 1.036 (13.72), 1.234 (0.52), 1.814 (0.98), 2.205 (0.64), 2.222 (1.58), 2.231 (1.64), 2.239 (2.10), 2.248 (2.10), 2.255 (1.60), 2.265 (1.50), 2.282 (0.54), 2.328 (0.88), 2.366 (0.72), 2.524 (2.80), 2.670 (0.94), 2.710 (0.76), 3.841 (0.46), 4.299 (1.22), 4.739 (1.24), 4.748 (1.36), 4.762 (1.78), 4.771 (1.82), 4.785 (1.30), 4.794 (1.20), 5.015 (1.18), 7.549 (2.90), 7.570 (5.35), 7.591 (3.08), 8.024 (7.85), 8.056 (7.69), 8.843 (13.18), 10.526 (4.95), 10.551 (4.79)。
實例 140
6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel Chiralpak IE, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：25℃，偵測：270 nm)將54.0 mg 6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-[1,1,1-三氟-3-甲基丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體2：19.5 mg (96.8% ee) R
t
= 3.41 min [HPLC：管柱Daicel IE-3；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%異丙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.14 min; MS (ESIpos): m/z = 547 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.57), 0.858 (0.51), 0.954 (15.74), 0.971 (16.00), 1.018 (13.62), 1.035 (13.86), 1.233 (0.75), 1.827 (1.03), 2.204 (0.66), 2.222 (1.61), 2.232 (1.70), 2.239 (2.10), 2.248 (2.14), 2.255 (1.59), 2.265 (1.52), 2.282 (0.58), 2.329 (0.88), 2.367 (0.58), 2.670 (0.86), 2.711 (0.56), 3.814 (0.49), 4.294 (1.27), 4.739 (1.29), 4.748 (1.37), 4.763 (1.82), 4.771 (1.85), 4.786 (1.26), 4.794 (1.24), 5.008 (2.70), 7.549 (4.18), 7.571 (7.89), 7.593 (4.22), 8.025 (7.63), 8.057 (7.57), 8.843 (13.71), 10.527 (4.93), 10.552 (4.78)。
實例 141
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-
N
-(1,1-二氟-2-甲基丙-2-基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)
根據GP1，使100 mg (83%純，182 µmol) 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與30.1 mg (97%純，200 µmol) 1,1-二氟-2-甲基丙-2-胺鹽酸鹽在83.1 mg (219 µmol) HATU及130 µl (730 µmol) DIPEA存在下在1.6 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得97.0 mg (97%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.80 min; MS (ESIpos): m/z = 547 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 10.25 (s, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 8.01 (d, 1 H), 7.68 - 7.79 (m, 2 H), 6.25 - 6.58 (m, 1 H), 5.19 (br s, 2 H), 3.79 - 4.06 (m, 3 H), 3.56 - 3.78 (m, 1 H), 3.12 - 3.28 (m, 1 H), 2.93 - 3.11 (m, 1 H), 1.43 (s, 6 H)。
實例 142
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-
N
-(1,1-二氟-2-甲基丙-2-基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel Chiralpak IA, 5 µm，250 × 20 mm；移動相：75%正庚烷/25%異丙醇 + 0.2% DEA；流動速率15 ml/min；溫度：35℃，偵測220 nm)將97.0 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-(1,1-二氟-2-甲基丙-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體1：34.4 mg (＞99% ee) R
t
= 9.05 min [HPLC：管柱Daicel Chiralpak IA, 1 ml/min；5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：80%正己烷/20%異丙醇 + 0.2% DEA；偵測：235 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.76 min; MS (ESIpos): m/z = 547 [M+H]
+ 1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
) δ ppm 10.25 (s, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 8.01 (d, 1 H), 7.68 - 7.77 (m, 2 H), 6.22 - 6.58 (m, 1 H), 5.19 (br s, 2 H), 3.79 - 4.08 (m, 3 H), 3.59 - 3.78 (m, 1 H), 3.15 - 3.28 (m, 1 H), 2.89 - 3.10 (m, 1 H), 1.44 (s, 6 H)。
實例 143
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-
N
-(1,1-二氟-2-甲基丙-2-基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺 (滯轉異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel Chiralpak IA, 5 µm，250 × 20 mm；移動相：75%正庚烷/25%異丙醇 + 0.2% DEA；流動速率15 ml/min；溫度：35℃，偵測220 nm)將97.0 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-N-(1,1-二氟-2-甲基丙-2-基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體2：5.50 mg (＞99% ee) R
t
= 13.64 min [HPLC：管柱Daicel Chiralpak IA, 1 ml/min；5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：80%正己烷/20%異丙醇 + 0.2% DEA；偵測：235 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.76 min; MS (ESIpos): m/z = 547 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 10.25 (s, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 8.01 (d, 1 H), 7.67 - 7.77 (m, 2 H), 6.25 - 6.58 (m, 1 H), 5.14 - 5.24 (m, 2 H), 3.78 - 4.08 (m, 3 H), 3.57 - 3.77 (m, 1 H), 3.12 - 3.27 (m, 1 H), 2.92 - 3.11 (m, 1 H), 1.43 (s, 6 H)。
實例 144
7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-
N
-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP3，使80.0 mg (153 µmol) 7-氯-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺與23.5 mg (169 µmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽及93 µl (540 µmol) DIPEA在1.5 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得88.0 mg (98%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.91 min; MS (ESIpos): m/z = 589 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.63), -0.008 (5.64), 0.008 (4.87), 0.146 (0.63), 2.073 (0.88), 2.328 (0.91), 2.367 (0.67), 2.670 (0.95), 2.711 (0.67), 3.081 (1.16), 3.708 (1.16), 3.903 (2.10), 4.025 (1.68), 5.208 (3.85), 6.280 (0.49), 6.297 (1.23), 6.316 (1.75), 6.340 (1.86), 6.358 (1.23), 7.569 (3.78), 7.590 (6.79), 7.611 (3.78), 8.033 (8.96), 8.065 (8.79), 8.969 (16.00), 11.296 (5.95), 11.321 (5.67)。
實例 145
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-
N
-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP3，使249 mg (493 µmol) 7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺與75.8 mg (543 µmol) (3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽及300 µl (1.70 mmol) DIPEA在5 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得197 mg (70%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.79 min; MS (ESIpos): m/z = 572 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.81), 0.146 (0.81), 0.950 (1.31), 0.966 (1.16), 2.327 (1.26), 2.367 (1.26), 2.670 (1.46), 2.710 (1.26), 3.060 (0.86), 3.717 (0.96), 3.905 (2.68), 4.017 (1.92), 5.118 (0.91), 5.207 (3.43), 6.309 (1.56), 6.328 (2.32), 6.351 (2.37), 6.369 (1.56), 8.034 (6.06), 8.066 (6.21), 8.340 (2.37), 8.346 (2.78), 8.367 (4.74), 8.384 (2.47), 8.390 (2.68), 8.633 (8.98), 8.933 (16.00), 11.291 (7.32), 11.317 (7.07)。
實例 146
6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
根據GP1，使100 mg (236 µmol) 6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與51.9 mg (260 µmol) 3,3,4,4,4-五氟丁-2-胺鹽酸鹽(外消旋物)在108 mg (283 µmol) HATU及120 µl (710 µmol) DIPEA存在下在2.3 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得86.0 mg (64%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.33 min; MS (ESIpos): m/z = 569 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.35), -0.008 (14.16), 0.008 (14.02), 0.146 (1.44), 1.389 (12.85), 1.407 (12.72), 1.988 (0.85), 2.327 (2.07), 2.366 (1.84), 2.523 (7.64), 2.670 (2.20), 2.710 (1.84), 3.506 (8.45), 3.517 (14.92), 3.529 (14.38), 3.596 (15.28), 3.608 (16.00), 3.619 (9.17), 3.741 (0.58), 4.038 (0.40), 5.015 (1.39), 5.034 (1.35), 7.550 (5.12), 7.572 (9.75), 7.594 (5.12), 8.103 (8.94), 8.137 (8.76), 8.711 (0.49), 8.907 (15.60), 10.344 (5.26), 10.368 (5.17)。
實例 147 N
-[(1
S
)-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使80.0 mg (189 µmol) 6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與36.5 mg (208 µmol) (1S)-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽在86.2 mg (227 µmol) HATU及99 µl (570 µmol) DIPEA存在下在1.8 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得91.9 mg (89%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.33 min; MS (ESIpos): m/z = 545 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.68), -0.008 (8.06), 0.008 (4.92), 0.146 (0.68), 0.320 (1.83), 0.330 (2.93), 0.343 (2.81), 0.354 (2.06), 0.366 (1.15), 0.508 (0.77), 0.521 (1.90), 0.532 (2.93), 0.545 (2.88), 0.551 (3.23), 0.570 (3.35), 0.579 (2.48), 0.590 (2.25), 0.600 (1.83), 0.614 (1.12), 0.630 (1.52), 0.640 (1.50), 0.650 (3.00), 0.660 (2.32), 0.667 (2.08), 0.672 (2.01), 0.686 (1.10), 0.694 (0.68), 1.172 (0.59), 1.185 (1.19), 1.193 (1.64), 1.205 (2.76), 1.214 (2.11), 1.225 (2.69), 1.237 (1.52), 1.246 (1.01), 1.258 (0.45), 2.073 (1.10), 2.328 (0.82), 2.367 (0.94), 2.524 (3.40), 2.670 (0.91), 2.710 (1.01), 3.509 (8.88), 3.520 (15.46), 3.532 (14.62), 3.549 (1.52), 3.600 (15.77), 3.612 (16.00), 3.622 (9.04), 4.353 (1.50), 4.374 (2.60), 4.396 (2.48), 4.415 (1.36), 7.550 (5.06), 7.573 (9.77), 7.595 (5.15), 7.603 (1.62), 8.112 (8.78), 8.146 (8.62), 8.896 (14.52), 10.361 (5.67), 10.384 (5.51)。
實例 148
6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-
N
-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
根據GP1，使100 mg (236 µmol) 6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與55.5 mg (260 µmol) 1,1,1,2,2-五氟戊-3-胺鹽酸鹽(外消旋物)在108 mg (283 µmol) HATU及120 µl (710 µmol) DIPEA存在下在2.3 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得108 mg (78%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.42 min; MS (ESIpos): m/z = 583 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.17), -0.008 (10.68), 0.008 (8.97), 0.146 (1.22), 0.943 (7.08), 0.962 (16.00), 0.980 (7.66), 1.157 (0.90), 1.175 (1.80), 1.193 (0.95), 1.234 (0.41), 1.624 (0.86), 1.642 (1.22), 1.650 (1.13), 1.659 (1.44), 1.669 (1.31), 1.677 (1.26), 1.685 (1.44), 1.703 (0.99), 1.907 (1.44), 1.988 (3.20), 2.328 (1.35), 2.366 (1.89), 2.523 (5.00), 2.670 (1.58), 2.710 (1.94), 3.508 (6.76), 3.519 (12.21), 3.531 (11.85), 3.547 (1.58), 3.597 (12.57), 3.610 (12.94), 3.620 (7.35), 4.021 (0.81), 4.038 (0.72), 4.831 (0.86), 4.857 (1.08), 4.883 (1.08), 4.907 (0.86), 7.551 (4.01), 7.573 (7.80), 7.595 (4.10), 8.113 (6.94), 8.147 (6.85), 8.914 (11.67), 10.266 (4.42), 10.291 (4.28)。
實例 149
6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-
N
-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使80.0 mg (189 µmol) 6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與34.0 mg (208 µmol) 1,1,1-2-甲基丙-2-胺鹽酸鹽在86.2 mg (227 µmol) HATU及99 µl (570 µmol) DIPEA存在下在1.8 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得87.6 mg (87%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.34 min; MS (ESIpos): m/z = 533 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.83), 0.008 (2.66), 1.636 (16.00), 2.073 (1.35), 2.670 (0.47), 2.710 (0.42), 3.504 (2.00), 3.514 (3.57), 3.526 (3.45), 3.596 (3.60), 3.609 (3.83), 3.619 (2.21), 7.552 (1.12), 7.574 (2.09), 7.596 (1.15), 8.115 (1.92), 8.149 (1.92), 8.840 (3.18), 10.452 (2.69)。
實例 150 N
-(1,1-二氟-2-甲基丙-2-基)-6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使80.0 mg (189 µmol) 6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與30.3 mg (208 µmol) 1,1-二氟-2-甲基丙-2-胺鹽酸鹽在86.2 mg (227 µmol) HATU及99 µl (570 µmol) DIPEA存在下在1.8 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得128 mg (定量，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.17 min; MS (ESIpos): m/z = 515 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.62), 1.439 (16.00), 2.073 (1.40), 2.328 (0.43), 2.670 (0.45), 3.500 (2.43), 3.510 (4.30), 3.522 (4.05), 3.595 (4.20), 3.607 (4.50), 3.618 (2.59), 6.277 (0.88), 6.419 (1.63), 6.562 (0.74), 7.550 (1.32), 7.572 (2.49), 7.594 (1.34), 8.095 (2.20), 8.129 (2.19), 8.817 (3.74), 10.135 (2.90)。
實例 151
6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-
N
-[(2
S
)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使80.0 mg (189 µmol) 6-氟-7-(嗎啉-4-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與34.0 mg (208 µmol) (2S)-1,1,1-三氟丁-2-胺鹽酸鹽在86.2 mg (227 µmol) HATU及99 µl (570 µmol) DIPEA存在下在1.8 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得83.0 mg (82%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.20 min; MS (ESIpos): m/z = 533 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.951 (7.27), 0.969 (16.00), 0.988 (7.90), 1.611 (1.05), 1.629 (1.46), 1.635 (1.29), 1.646 (1.77), 1.654 (1.58), 1.664 (1.52), 1.671 (1.69), 1.689 (1.27), 1.835 (0.42), 1.854 (1.32), 1.864 (1.52), 1.872 (1.57), 1.882 (1.75), 1.889 (1.54), 1.899 (1.38), 1.907 (1.15), 1.917 (0.96), 2.074 (0.67), 3.510 (8.13), 3.520 (14.34), 3.532 (13.50), 3.549 (1.33), 3.600 (14.03), 3.612 (14.78), 3.622 (8.39), 4.742 (1.52), 4.762 (1.43), 7.554 (4.14), 7.576 (8.01), 7.598 (4.19), 8.107 (6.29), 8.141 (6.26), 8.906 (11.53), 10.220 (4.83), 10.244 (4.71)。
實例 152
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[(2
S
)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使45.0 mg (111 µmol) 1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與19.9 mg (122 µmol) (2S)-1,1,1-三氟丁-2-胺鹽酸鹽在50.5 mg (133 µmol) HATU及77 µl (440 µmol) DIPEA存在下在1.0 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得42.0 mg(74%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.95 min; MS (ESIpos): m/z = 516 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.48), -0.008 (16.00), 0.008 (9.38), 0.146 (1.14), 0.959 (6.81), 0.975 (6.86), 0.992 (2.91), 1.637 (1.30), 1.883 (2.23), 2.328 (1.72), 2.523 (6.83), 2.670 (1.32), 3.342 (1.11), 4.303 (1.46), 4.741 (1.40), 4.995 (2.89), 5.004 (2.91), 7.988 (5.03), 8.020 (5.01), 8.315 (1.59), 8.321 (1.72), 8.342 (2.65), 8.365 (1.51), 8.617 (5.62), 8.837 (15.23), 10.328 (3.10), 10.353 (2.89)。
實例 153 N
-[(1
S
)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使45.0 mg (111 µmol) 1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與21.4 mg (122 µmol) (1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽在50.5 mg (133 µmol) HATU及77 µl (440 µmol) DIPEA存在下在1.0 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得45.0 mg (77%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.97 min; MS (ESIpos): m/z = 528 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.00), 0.008 (9.61), 0.147 (1.11), 0.339 (2.15), 0.537 (2.19), 1.200 (2.37), 1.220 (2.40), 1.894 (1.33), 2.073 (6.17), 2.328 (2.12), 2.523 (6.89), 2.670 (2.26), 2.710 (1.15), 4.295 (1.69), 4.394 (2.30), 4.412 (2.37), 4.994 (3.62), 7.994 (6.31), 8.026 (6.39), 8.318 (2.08), 8.339 (3.55), 8.356 (1.79), 8.611 (6.67), 8.828 (16.00), 10.464 (2.69), 10.481 (2.76)。
實例 154
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3
S
)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使45.0 mg (111 µmol) 1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與15.5 mg (122 µmol) 1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-胺在50.5 mg (133 µmol) HATU及58 µl (330 µmol) DIPEA存在下在1.0 ml DMF中反應。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化粗產物。由此獲得42.0 mg (74%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.94 min; MS (ESIpos): m/z = 516 [M+H]
+ 1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
) δ ppm: 10.56 (s, 1 H), 8.78 (s, 1 H), 8.61 (d, 1 H), 8.30 - 8.37 (m, 1 H), 8.01 (d, 1 H), 4.99 (br d, 1 H), 4.20 - 4.38 (m, 1 H), 3.35 - 4.05 (m, 1 H), 3.00 - 3.28 (m, 1 H), 1.72 - 1.97 (m, 2 H), 1.63 (s, 6 H)。
實例 155
7-[(3
R
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[(2
R
)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使30.0 mg (68.3 µmol) 7-[(3R,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與13.4 mg (81.9 µmol) (2R)-1,1,1-三氟丁-2-胺鹽酸鹽在31.2 mg (81.9 µmol) HATU及42 µl (240 µmol) DIPEA存在下在1.0 ml DMF中反應。向粗產物添加1 N鹽酸水溶液及乙腈，其接著藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得29.5 mg (78%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.84 min; MS (ESIpos): m/z = 549 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.76), 0.008 (1.54), 0.949 (7.24), 0.967 (16.00), 0.985 (7.83), 1.603 (1.05), 1.621 (1.44), 1.628 (1.26), 1.638 (1.72), 1.646 (1.56), 1.656 (1.48), 1.663 (1.68), 1.681 (1.24), 1.831 (0.43), 1.850 (1.28), 1.859 (1.50), 1.868 (1.50), 1.878 (1.72), 1.884 (1.52), 1.894 (1.32), 1.903 (1.14), 1.913 (0.97), 2.328 (0.55), 2.367 (0.41), 2.524 (1.78), 2.671 (0.57), 2.711 (0.41), 3.027 (0.59), 3.212 (0.67), 3.589 (0.59), 4.036 (2.41), 4.733 (1.44), 4.753 (1.34), 5.003 (2.13), 7.555 (3.93), 7.577 (7.42), 7.599 (3.91), 7.988 (7.40), 8.019 (7.36), 8.838 (12.76), 10.322 (5.21), 10.346 (4.97)。
實例 156
7-[(3
S
,4
S
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-
N
-[(2
R
)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP1，使30.0 mg (68.3 µmol) 7-[(3S,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸與13.4 mg (81.9 µmol) (2R)-1,1,1-三氟丁-2-胺鹽酸鹽在31.2 mg (81.9 µmol) HATU及42 µl (240 µmol) DIPEA存在下在690 µl DMF中反應。向粗產物添加1 N鹽酸水溶液及乙腈，其接著藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得30.6 mg(81%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.78 min; MS (ESIpos): m/z = 549 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.47), 0.146 (0.47), 0.951 (7.20), 0.969 (16.00), 0.987 (7.86), 1.604 (1.09), 1.622 (1.40), 1.639 (1.71), 1.647 (1.56), 1.664 (1.67), 1.683 (1.25), 1.851 (1.21), 1.860 (1.56), 1.868 (1.48), 1.879 (1.67), 1.896 (1.36), 1.913 (0.93), 2.328 (1.48), 2.366 (1.21), 2.523 (4.71), 2.669 (1.44), 2.710 (1.13), 3.070 (0.86), 3.698 (0.86), 3.906 (1.75), 4.735 (1.52), 5.203 (3.70), 7.559 (3.04), 7.579 (5.37), 7.599 (2.92), 7.999 (8.02), 8.031 (7.82), 8.840 (14.75), 10.329 (5.14), 10.353 (4.87)。
實例 157
6-溴-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
在室溫下，將160 mg (896 µmol) 1-溴吡咯啶-2,5-二酮(NBS)及10.0 mg (60.9 µmol) 2,2'-(E)-二氮烯-1,2-二基雙(2-甲基丙腈(AIBN)添加至242 mg (417 µmol) 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺於5.0 ml乙腈中之溶液中。在60℃下攪拌混合物1小時。冷卻反應混合物，濃縮至其一半體積(在減壓下)且藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得103 mg (37%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.08 min; MS (ESIpos): m/z = 659 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.81), -0.008 (6.76), 0.008 (6.78), 0.146 (0.81), 0.943 (7.54), 0.961 (16.00), 0.979 (8.14), 1.620 (1.01), 1.656 (1.75), 1.664 (1.68), 1.682 (1.66), 1.699 (1.15), 1.920 (1.87), 2.111 (0.55), 2.328 (1.01), 2.367 (0.85), 2.524 (3.23), 2.671 (1.01), 2.711 (0.76), 3.733 (1.22), 3.929 (8.99), 4.826 (1.18), 4.851 (1.54), 4.877 (1.54), 4.901 (1.13), 5.188 (2.81), 7.567 (3.67), 7.588 (6.46), 7.608 (3.46), 8.473 (13.99), 8.881 (15.40), 10.242 (5.19), 10.266 (5.10)。
實例 158
6-溴-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
在室溫下，將161 mg (907 µmol) 1-溴吡咯啶-2,5-二酮(NBS)及10.0 mg (60.9 µmol) AIBN添加至239 mg (422 µmol) 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺於7.1 ml乙腈中之溶液中。在60℃下攪拌混合物1小時。冷卻反應混合物，濃縮至其一半體積(在減壓下)且藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得175 mg (64%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.98 min; MS (ESIpos): m/z = 645 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.50), -0.008 (4.75), 0.146 (0.50), 1.386 (15.73), 1.404 (16.00), 2.074 (4.75), 2.329 (0.69), 2.367 (0.52), 2.671 (0.69), 2.711 (0.53), 3.421 (1.36), 3.734 (1.34), 3.930 (9.47), 4.966 (0.78), 4.986 (1.47), 5.008 (1.78), 5.028 (1.79), 5.052 (1.47), 5.073 (0.82), 5.185 (9.07), 7.565 (3.88), 7.586 (6.91), 7.607 (3.78), 8.453 (1.24), 8.462 (11.09), 8.466 (10.96), 8.876 (15.27), 9.513 (0.44), 9.518 (0.44), 10.318 (5.44), 10.342 (5.29)。
實例 159
6-溴-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-
N
-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
在室溫下，將196 mg (1.10 mmol) 1-溴吡咯啶-2,5-二酮(NBS)及10.0 mg (60.9 µmol) AIBN添加至272 mg (513 µmol) 7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺於8.0 ml乙腈中之溶液中。在60℃下攪拌混合物1小時。冷卻反應混合物，濃縮至其一半體積(在減壓下)且藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得128 mg (41%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.95 min; MS (ESIpos): m/z = 609 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.95), 0.008 (2.81), 1.632 (16.00), 2.523 (1.40), 3.928 (1.71), 5.176 (2.24), 5.184 (2.24), 7.567 (0.69), 7.587 (1.17), 7.607 (0.66), 8.463 (0.44), 8.473 (4.19), 8.807 (3.19), 10.425 (2.53)。
實例 160
6-溴-
N
-[(1
S
)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3
R
,4
R
)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
在室溫下，將39 mg (219 µmol) 1-溴吡咯啶-2,5-二酮(NBS)及3.00 mg (18.4 µmol) AIBN添加至100 mg (184 µmol) N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺於6.7 ml乙腈中之溶液中。在60℃下攪拌混合物4小時，接著添加另外15 mg (84.3 µmol) NBS且在60℃下攪拌溶液隔夜。冷卻反應混合物，濃縮至其一半體積(在減壓下)且藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得90.0 mg (79%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.02 min; MS (ESIpos): m/z = 621 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.342 (4.23), 0.556 (5.62), 0.660 (4.02), 1.219 (3.63), 3.424 (2.52), 3.736 (2.56), 3.933 (12.28), 4.382 (3.45), 5.188 (16.00), 7.587 (8.46), 8.473 (9.13), 8.863 (9.13), 10.338 (4.81), 10.361 (5.05)。
實例 161
6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物，282 mg，531 µmol)裝入3.6 ml DMF中，添加乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:1) (141 mg，743 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(560 µl，3.2 mmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。添加更多乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:1) (30.1 mg，159 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(93 µl，530 µmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。向混合物添加水且濾出沈澱之固體，接著在矽膠管柱(移動相：環己烷/乙酸乙酯=2/1)上純化。由此獲得199 mg目標化合物(62%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.35 min; MS (ESIpos): m/z = 595 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.56), 0.146 (0.63), 0.935 (3.05), 0.953 (6.63), 0.971 (3.23), 1.235 (0.77), 1.630 (0.56), 1.647 (0.70), 1.656 (0.65), 1.673 (0.63), 1.692 (0.45), 1.915 (0.59), 2.085 (0.97), 2.327 (0.90), 2.366 (1.04), 2.670 (0.99), 2.710 (1.06), 4.209 (0.47), 4.656 (16.00), 4.843 (0.56), 4.870 (0.50), 7.542 (1.67), 7.565 (3.27), 7.587 (1.69), 7.991 (2.57), 8.020 (2.57), 8.844 (4.63), 10.339 (1.90), 10.364 (1.85)。
實例 162
6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物，250 mg，482 µmol)裝入3.3 ml DMF中，添加乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:1) (128 mg，675 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(500 µl，2.9 mmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。添加更多乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:1) (27.4 mg，145 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(84 µl，480 µmol) ，且在室溫下攪拌混合物隔夜。向反應混合物添加水且濾出沈澱之固體。在矽膠管柱(移動相：環己烷/乙酸乙酯=2/1)上純化固體。由此獲得165 mg目標化合物(58%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.26 min; MS (ESIpos): m/z = 581 [M+H]
+
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.46), 0.008 (2.00), 1.379 (4.40), 1.397 (4.88), 2.524 (1.24), 2.670 (0.42), 4.654 (16.00), 5.001 (0.45), 5.022 (0.45), 7.541 (1.69), 7.563 (3.22), 7.586 (1.72), 7.982 (2.85), 8.011 (2.85), 8.838 (4.94), 10.417 (1.91), 10.441 (1.84)。
實例 163
6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(300 mg，564 µmol)裝入5.4 ml DMF中，添加乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:2) (97.6 mg，338 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(490 µl，2.8 mmol)，接著在室溫下攪拌混合物3小時。將反應溶液添加至水，形成精細沈澱物。水性懸浮液接著用1 N鹽酸酸化。沈澱物用水徹底洗滌且在高度真空下乾燥。由此獲得340 mg目標化合物(94%理論值，純度93%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.32 min; MS (ESIpos): m/z = 595 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.38), 0.008 (2.11), 1.674 (15.31), 2.328 (0.46), 2.524 (1.28), 2.670 (0.46), 4.653 (16.00), 7.541 (1.72), 7.563 (3.03), 7.585 (1.72), 8.001 (3.03), 8.030 (3.00), 8.774 (5.32), 10.529 (3.97)。
實例 164
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(30.0 mg，68.3 µmol)裝入0.47 ml DMF中。向溶液添加HATU (31.2 mg，81.9 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(59 µl，340 µmol)及3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-胺鹽酸鹽(1:1) (19.0 mg，88.8 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。接著添加水且用1 M鹽酸將混合物調整至約pH中性。濾出沈澱之固體，溶解於乙腈/水/TFA中且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化。在減壓下濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得31 mg目標化合物(75%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 599 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.680 (16.00), 3.903 (0.72), 4.012 (0.50), 5.198 (1.65), 7.555 (1.28), 7.576 (2.37), 7.597 (1.30), 8.014 (2.65), 8.045 (2.62), 8.778 (4.80), 10.565 (4.02)。
實例 165
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-N-(2,3,3-三甲基丁-2-基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(60.0 mg，137 µmol)裝入0.93 ml DMF中。向溶液添加HATU (62.3 mg，164 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(71 µl，410 µmol)及2,3,3-三甲基丁-2-胺(20.5 mg，178 µmol)且在室溫下攪拌混合物2.5小時。接著添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應混合物。在減壓下濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得34 mg目標化合物(47%理論值，純度95%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 537 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.57), 1.039 (16.00), 1.411 (11.99), 7.551 (0.52), 7.573 (0.93), 7.594 (0.52), 8.034 (1.09), 8.066 (1.08), 8.678 (1.90), 10.097 (1.36)。
實例 166
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(100 mg，93%純，156 µmol)裝入1 ml乙腈中，添加1 ml水及1 ml三氟乙酸且在室溫下攪拌混合物2天。混合物藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化。在減壓下濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於二氯甲烷/極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得66 mg目標化合物(68%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.98 min; MS (ESIpos): m/z = 613 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.676 (16.00), 3.471 (7.03), 3.484 (7.17), 4.127 (0.45), 4.834 (2.20), 4.847 (5.01), 4.861 (2.14), 7.532 (1.56), 7.553 (2.96), 7.575 (1.60), 7.973 (2.48), 8.001 (2.43), 8.754 (4.63), 10.561 (3.80)。
實例 167
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(1S)-1-苯基乙基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(150 mg，341 µmol)裝入3.0 ml DMF中。向溶液添加HATU (156 mg，410 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(300 µl，1.7 mmol)及(1S)-1-苯基乙胺(53 µl，410 µmol)且在室溫下攪拌混合物2天。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。合併產物溶離份且自乙腈釋放，且使用飽和碳酸氫鈉水溶液使殘餘物呈鹼性且用二氯甲烷萃取三次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得159 mg目標化合物(84%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.74 min; MS (ESIpos): m/z = 543 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.38), 0.008 (1.36), 1.486 (14.29), 1.503 (14.41), 2.328 (0.50), 2.671 (0.55), 3.058 (0.57), 3.675 (0.57), 3.908 (1.33), 5.126 (0.59), 5.143 (2.31), 5.162 (3.54), 5.180 (4.40), 5.195 (4.16), 7.244 (1.38), 7.261 (3.28), 7.273 (1.45), 7.278 (2.64), 7.282 (1.66), 7.341 (3.02), 7.361 (8.77), 7.379 (16.00), 7.384 (11.89), 7.401 (3.16), 7.405 (1.95), 7.545 (3.57), 7.567 (6.49), 7.588 (3.54), 7.992 (6.78), 8.023 (6.63), 8.726 (12.10), 10.325 (4.28), 10.345 (4.11)。
實例 168
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
首先將6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物，165 mg，284 µmol)裝入1.8 ml三氟乙酸中，添加1.8 ml水及1.8 ml乙腈且在室溫下攪拌混合物2天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。在減壓下濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得140 mg目標化合物(82%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.91 min; MS (ESIpos): m/z = 599 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.50), -0.008 (4.12), 0.008 (3.62), 0.146 (0.50), 1.177 (0.47), 1.234 (1.73), 1.381 (9.75), 1.398 (9.79), 2.328 (0.67), 2.367 (0.63), 2.524 (2.11), 2.670 (0.78), 2.711 (0.73), 3.472 (15.61), 3.485 (16.00), 4.124 (0.93), 4.835 (4.98), 4.848 (11.73), 4.862 (4.96), 4.958 (0.48), 4.981 (0.84), 5.004 (0.99), 5.023 (1.01), 5.047 (0.86), 5.067 (0.48), 5.754 (2.05), 7.532 (3.90), 7.554 (7.40), 7.576 (3.99), 7.954 (6.69), 7.983 (6.62), 8.819 (12.01), 10.450 (4.38), 10.474 (4.27)。
實例 169
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體A) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇；流動速率：19 ml/min；溫度：25℃，偵測：240 nm)將69 mg 7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)分離成對映異構體。 對映異構體A：66 mg (＞99% ee) R
t
= 4.45 min [HPLC：管柱Daicel
®
Chiralcel OD-H, 1 ml/min; 5 µm，250 × 4.6 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇；偵測：240 nm]。
實例 170
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體B) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇；流動速率：19 ml/min；溫度：25℃，偵測：240 nm)將69 mg 7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)分離成對映異構體。 對映異構體B： 68 mg (＞99% ee) R
t
= 5.99 min [HPLC：管柱Daicel
®
Chiralcel OD-H, 1 ml/min; 5 µm，250 × 4.6 mm；移動相：70%正庚烷/30%異丙醇；偵測：240 nm]。
實例 171
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)
首先將6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物，199 mg，335 µmol)裝入2.1 ml三氟乙酸中，添加2.1 ml水及2.1 ml乙腈且在室溫下攪拌混合物2天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。在減壓下濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得168 mg目標化合物(81%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.98 min; MS (ESIpos): m/z = 613 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.65), 0.939 (6.29), 0.957 (14.00), 0.975 (6.81), 1.157 (2.65), 1.175 (5.29), 1.193 (2.72), 1.235 (0.88), 1.615 (0.76), 1.632 (1.09), 1.640 (0.98), 1.649 (1.31), 1.658 (1.20), 1.667 (1.11), 1.675 (1.24), 1.694 (0.90), 1.917 (1.16), 1.989 (9.69), 2.329 (0.43), 2.670 (0.50), 2.711 (0.40), 3.473 (15.68), 3.486 (16.00), 4.003 (0.99), 4.021 (2.61), 4.039 (2.63), 4.057 (1.15), 4.133 (0.97), 4.838 (5.71), 4.851 (12.52), 4.864 (5.69), 4.897 (0.77), 7.533 (3.62), 7.555 (6.94), 7.577 (3.68), 7.585 (1.23), 7.964 (5.89), 7.993 (5.83), 8.826 (10.47), 10.373 (4.13), 10.397 (3.99)。
實例 172
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺 (對映異構體A) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：90%正庚烷/10%乙醇；流動速率：19 ml/min；溫度：25℃，偵測：240 nm)將209 mg 7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)分離成對映異構體。 對映異構體A：84 mg (98.5% ee) R
t
= 14.72 min [HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 1 ml/min；5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：90%正庚烷/10%乙醇；偵測：240 nm]。
實例 173
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體B) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：90%正庚烷/10%乙醇；流動速率：19 ml/min；溫度：25℃，偵測：240 nm)將209 mg 7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(外消旋物)分離成對映異構體。 對映異構體B：75 mg (96.8% ee) R
t
= 17.24 min [HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak AD-H, 1 ml/min；5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：90%正庚烷/10%乙醇；偵測：240 nm]。
實例 174
6-氟-7-[3-(羥基甲基)哌嗪-1-基]-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
首先將4-[3-氟-5-側氧基-6-{[1,1,1,2,2-五氟戊-3-基]胺甲醯基}-8-(2,4,6-三氟苯基)-5,8-二氫-1,8-萘啶-2-基]-2-(羥基甲基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(非對映異構體混合物，204 mg，287 µmol)裝入1.6 ml二氯甲烷中，添加三氟乙酸(780 µl，10 mmol)且在室溫下攪拌混合物1.5小時。蒸發二氯甲烷且殘餘物藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化。濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於二氯甲烷/極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得63 mg呈兩種非對映異構體之非對映異構體混合物形式的目標化合物(48%理論值，純度96%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.55 min; MS (ESIpos): m/z = 612 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.55), -0.008 (4.61), 0.008 (4.48), 0.146 (0.55), 0.943 (7.10), 0.961 (16.00), 0.980 (7.69), 1.142 (0.40), 1.622 (0.93), 1.640 (1.25), 1.647 (1.10), 1.656 (1.48), 1.666 (1.36), 1.675 (1.28), 1.683 (1.48), 1.701 (1.02), 1.924 (1.29), 2.086 (2.96), 2.324 (2.65), 2.368 (0.70), 2.574 (3.33), 2.604 (1.48), 2.637 (2.57), 2.668 (3.19), 2.694 (1.65), 2.711 (0.60), 2.842 (2.77), 2.872 (2.22), 2.971 (1.32), 2.997 (2.27), 3.025 (1.22), 3.145 (1.00), 3.159 (1.89), 3.172 (2.80), 3.186 (3.63), 3.200 (1.94), 3.214 (2.01), 3.228 (3.54), 3.241 (2.90), 3.254 (1.74), 3.268 (1.00), 3.952 (2.22), 3.984 (2.08), 4.040 (2.55), 4.071 (2.43), 4.599 (3.14), 4.612 (6.76), 4.625 (3.03), 4.829 (0.86), 4.856 (1.10), 4.881 (1.12), 4.906 (0.83), 5.755 (1.89), 7.513 (1.39), 7.541 (4.86), 7.564 (4.85), 7.592 (1.36), 8.058 (7.61), 8.092 (7.46), 8.894 (13.63), 10.304 (4.75), 10.329 (4.58)。
實例 175
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-1-(4-氟-2,6-二甲基苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-1-(4-氟-2,6-二甲基苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(80.0 mg, 165 µmol)裝入1.6 ml DMF中，添加(3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽(25.3 mg，181 µmol)隨後N,N-二異丙基乙胺(0.17 ml，0.99 mmol)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。向反應溶液添加乙腈/水/TFA。濾出所形成之沈澱物且在高度真空下乾燥。由此獲得76 mg目標化合物(84%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.86 min; MS (ESIpos): m/z = 553 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.324 (0.76), 0.334 (1.15), 0.347 (1.18), 0.358 (0.93), 0.370 (0.45), 0.503 (0.84), 0.514 (1.21), 0.527 (1.01), 0.537 (0.84), 0.548 (0.87), 0.567 (1.07), 0.578 (1.01), 0.588 (0.93), 0.600 (0.76), 0.612 (0.48), 0.625 (0.56), 0.635 (0.65), 0.646 (1.01), 0.656 (0.98), 0.670 (0.90), 1.174 (0.48), 1.183 (0.70), 1.194 (1.18), 1.203 (0.87), 1.215 (1.12), 1.227 (0.67), 1.235 (0.59), 1.940 (16.00), 1.951 (15.83), 2.328 (0.42), 2.670 (0.45), 3.883 (0.67), 4.342 (0.62), 4.363 (1.04), 4.384 (1.04), 4.404 (0.56), 5.171 (2.64), 7.164 (4.63), 7.188 (4.66), 8.009 (3.34), 8.041 (3.28), 8.429 (7.55), 10.623 (2.41), 10.646 (2.30)。
實例 176
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-[2-(羥基甲基)-4-甲基哌嗪-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
首先將7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(100 mg，203 µmol)裝入2 ml DMF中，添加[4-甲基哌嗪-2-基]甲醇(30.5 mg，95%純，223 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(0.177 ml，1.01 mmol)且在室溫下攪拌混合物3小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。合併產物溶離份且脫除乙腈。使用飽和碳酸氫鈉水溶液使殘餘物呈鹼性且用二氯甲烷萃取三次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。溶離份藉由厚層層析(移動相：二氯甲烷/甲醇=10/1)重新純化。由此獲得48 mg呈兩種非對映異構體之非對映異構體混合物形式的目標化合物(39%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.38 min; MS (ESIpos): m/z = 588 [M+H]
+
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.007 (1.35), 0.006 (0.98), 0.335 (0.88), 0.340 (0.92), 0.345 (0.84), 0.350 (0.72), 0.519 (0.80), 0.529 (1.19), 0.539 (1.05), 0.547 (0.88), 0.555 (0.82), 0.571 (0.99), 0.579 (0.93), 0.588 (0.79), 0.597 (0.67), 0.633 (0.54), 0.642 (0.71), 0.650 (0.98), 0.654 (0.82), 0.659 (0.97), 0.662 (0.95), 0.670 (0.94), 0.676 (0.47), 0.679 (0.47), 1.188 (0.47), 1.195 (0.69), 1.204 (1.16), 1.211 (0.85), 1.220 (1.14), 1.230 (0.71), 1.236 (0.54), 1.837 (0.54), 1.844 (0.67), 1.861 (1.09), 1.867 (1.10), 1.884 (0.69), 1.891 (0.56), 1.989 (0.93), 1.996 (1.01), 2.012 (1.03), 2.019 (0.90), 2.113 (16.00), 2.516 (1.06), 2.520 (0.93), 2.524 (0.85), 2.697 (1.08), 2.719 (1.00), 2.830 (1.56), 2.853 (1.45), 3.028 (0.41), 3.051 (0.73), 3.076 (0.41), 3.594 (1.65), 3.606 (2.39), 3.618 (1.66), 3.784 (0.85), 3.811 (0.80), 4.261 (0.89), 4.359 (0.58), 4.376 (0.98), 4.393 (0.95), 4.409 (0.52), 4.700 (0.98), 4.710 (1.87), 4.720 (0.93), 7.518 (0.66), 7.541 (1.37), 7.552 (0.92), 7.564 (1.39), 7.586 (0.64), 8.032 (4.28), 8.060 (4.10), 8.869 (7.42), 10.394 (2.60), 10.413 (2.45)。
實例 177
N-[(1R)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-1-(4-氟-2,6-二甲基苯基)-7-[(4S)-4-羥基-2-側氧基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先裝入碳酸鉀(34.1 mg，0.28 mmol)且藉由加熱容器乾燥。在氬氣下，添加乙酸鈀(II) (4 mg, 0.02 mmol)及9,9-二甲基-4,5-雙(二苯膦基)二苯并哌喃(16 mg，0.03 mmol)，隨後脫氣之二噁烷(1.8 ml)。在室溫下攪拌混合物10分鐘。添加7-氯-N-[(1R)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-1-(4-氟-2,6-二甲基苯基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(80.0 mg，165 µmol)及(4S)-4-羥基吡咯啶-2-酮(20.0 mg，198 µmol)且在80℃下攪拌混合物隔夜。過濾反應溶液且添加乙腈/TFA/水，導致固體沈澱。反應溶液用二氯甲烷萃取兩次。在矽膠管柱(移動相：二氯甲烷/甲醇=30/1)上純化殘餘物。殘餘物脫除二氯甲烷且藉由厚層層析(移動相：二氯甲烷/甲醇=20/1)重新純化。由此獲得總計7 mg目標化合物(8%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.88 min; MS (ESIpos): m/z = 551 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.34), 0.008 (1.96), 0.348 (1.04), 0.361 (0.95), 0.372 (0.65), 0.383 (0.41), 0.541 (0.62), 0.553 (0.94), 0.569 (1.18), 0.586 (1.28), 0.596 (0.84), 0.607 (0.75), 0.617 (0.61), 0.644 (0.46), 0.653 (0.48), 0.664 (1.03), 0.674 (0.74), 0.681 (0.68), 1.141 (1.13), 1.207 (0.41), 1.216 (0.57), 1.228 (1.04), 1.236 (1.08), 1.248 (1.04), 1.260 (0.64), 1.268 (0.44), 1.948 (15.80), 1.952 (16.00), 2.117 (0.51), 2.278 (1.13), 2.326 (1.59), 2.523 (1.30), 2.808 (1.25), 2.824 (1.27), 2.852 (1.11), 2.868 (1.11), 3.338 (1.55), 3.704 (1.16), 3.717 (1.45), 3.731 (1.26), 3.744 (1.08), 4.358 (1.48), 4.379 (1.07), 4.399 (0.86), 4.420 (0.46), 5.318 (3.02), 5.327 (2.97), 7.181 (2.48), 7.204 (2.52), 8.530 (2.92), 8.554 (2.87), 8.690 (7.03), 10.281 (1.93), 10.304 (1.87)。
實例 178
7-[(3S,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
將7-[(3S,4S)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(30.0 mg，68.3 µmol)溶解於0.7 ml DMF中，添加HATU (31 mg，0.08 mmol)及DIPEA (42 µl，0.24 mmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加(S)-1,1,1-三氟-2-丁基胺鹽酸鹽(13.4 mg，81.9 µmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加0.5 ml 1 N鹽酸及1 ml乙腈且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：乙腈/水梯度)純化混合物。由此獲得24.3 mg (99%純，64%理論值)目標化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.78 min; MS (ESIpos): m/z = 549 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.33), 0.008 (2.22), 0.950 (7.18), 0.969 (16.00), 0.987 (7.85), 1.604 (1.08), 1.622 (1.42), 1.629 (1.29), 1.639 (1.73), 1.647 (1.54), 1.657 (1.50), 1.664 (1.69), 1.682 (1.29), 1.851 (1.31), 1.861 (1.48), 1.869 (1.52), 1.879 (1.73), 1.886 (1.50), 1.895 (1.33), 1.904 (1.12), 1.914 (0.95), 2.328 (0.76), 2.367 (0.82), 2.524 (3.03), 2.670 (0.85), 2.711 (0.87), 3.073 (0.80), 3.695 (0.85), 3.904 (1.80), 4.014 (1.23), 4.734 (1.42), 4.755 (1.35), 5.201 (4.80), 7.558 (3.87), 7.580 (6.82), 7.601 (3.79), 7.999 (7.53), 8.031 (7.41), 8.841 (12.89), 10.329 (5.19), 10.353 (5.00)。
實例 179
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-7-[3-(羥基甲基)-4-甲基哌嗪-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
首先將7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(100 mg，203 µmol)裝入2 ml DMF中，添加[1-甲基哌嗪-2-基]甲醇二鹽酸鹽(47.6 mg，95%純，223 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(0.25 ml，1.42 mmol)且在室溫下攪拌混合物3小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。合併產物溶離份且脫除乙腈。使用飽和碳酸氫鈉水溶液使殘餘物呈鹼性且用二氯甲烷萃取三次。經合併之有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。溶離份藉由厚層層析(移動相：二氯甲烷/甲醇=10/1)重新純化。由此獲得80 mg目標化合物(66%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.37 min; MS (ESIpos): m/z = 588 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.54), 0.008 (2.44), 0.320 (0.70), 0.330 (1.13), 0.343 (1.11), 0.354 (0.86), 0.366 (0.43), 0.517 (0.75), 0.528 (1.13), 0.541 (1.03), 0.550 (1.17), 0.569 (1.20), 0.579 (0.95), 0.589 (0.86), 0.600 (0.71), 0.614 (0.44), 0.629 (0.61), 0.638 (0.58), 0.649 (1.05), 0.659 (0.90), 0.665 (0.84), 0.671 (0.81), 0.685 (0.41), 1.183 (0.45), 1.191 (0.64), 1.203 (1.10), 1.212 (0.80), 1.223 (1.09), 1.235 (0.67), 1.244 (0.41), 1.932 (0.57), 1.940 (0.71), 1.948 (0.92), 1.957 (0.94), 1.965 (0.73), 1.973 (0.61), 2.079 (0.61), 2.101 (1.15), 2.108 (1.16), 2.130 (0.70), 2.137 (0.62), 2.179 (16.00), 2.524 (0.77), 2.697 (1.34), 2.727 (1.23), 2.849 (0.99), 2.874 (1.10), 2.882 (1.17), 2.907 (0.98), 3.107 (0.61), 3.134 (1.08), 3.162 (0.62), 3.212 (0.61), 3.228 (0.90), 3.241 (1.15), 3.254 (1.03), 3.270 (0.72), 3.481 (0.67), 3.492 (0.98), 3.504 (0.87), 3.520 (0.82), 3.531 (0.54), 3.949 (0.97), 3.978 (0.88), 4.146 (1.17), 4.179 (1.10), 4.355 (0.56), 4.376 (1.00), 4.397 (0.97), 4.417 (0.50), 4.505 (1.26), 4.518 (2.74), 4.531 (1.23), 7.499 (0.64), 7.528 (1.83), 7.540 (0.75), 7.551 (1.81), 7.580 (0.61), 8.071 (3.31), 8.105 (3.22), 8.876 (5.71), 10.386 (2.30), 10.410 (2.21)。
實例 180
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-(二甲基胺基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(250 mg，642 µmol)、1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-胺(118 mg，707 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(340 µl，1.9 mmol)裝入6.5 ml乙酸乙酯中，添加T3P溶液(2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物(1.5 ml，50%純，2.6 mmol)且在80℃下攪拌混合物隔夜。添加更多1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-胺(53.6 mg，321 µmol)、N,N-二異丙基乙胺(57 µl，0.32 mmol)及T3P溶液(2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物) (188 µl，50%純，325 µmol)且在80℃下攪拌混合物隔夜。向反應混合物添加更多1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-胺(60 mg，359 µmol)及T3P溶液(2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物) (750 µl，50%純度，1.3 mmol)且在80℃下繼續攪拌。將混合物添加至水及乙酸乙酯且分離各相。水相用乙酸乙酯重新萃取。經合併之有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且在旋轉式蒸發器上濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：乙腈/水+0.1%甲酸梯度)純化。合併含有產物之溶離份且凍乾。粗產物藉由製備型HPLC RP18管柱，移動相：乙腈/水+2%甲酸梯度)重新純化。由此獲得4 mg (100%純，1%理論值)目標化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.33 min; MS (ESIpos): m/z = 547 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (2.86), 2.328 (0.40), 2.367 (0.43), 3.019 (16.00), 3.023 (15.23), 6.302 (0.75), 6.320 (0.99), 6.345 (1.00), 6.363 (0.65), 7.699 (1.01), 7.706 (1.39), 7.722 (1.62), 7.729 (2.54), 7.745 (2.44), 7.752 (2.62), 7.762 (1.88), 7.773 (1.09), 8.037 (4.69), 8.071 (4.62), 8.948 (8.99), 11.276 (3.01), 11.301 (2.88)。
實例 181
7-(3,4-二羥基哌啶-1-基)-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(150 mg，290 µmol) (對映異構性純)裝入2.9 ml N,N-二甲基甲醯胺中，且添加反-哌啶-3,4-二醇鹽酸鹽(49.0 mg，319 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(230 µl，1.3 mmol)。在55℃下攪拌反應混合物8小時。冷卻反應混合物，用乙腈稀釋且藉由製備型RP-HPLC (管柱：Reprosil 125×30；10µ，流動速率：50 ml/min，乙腈/水，0.1%甲酸)純化。在減壓下藉由蒸發來濃縮溶劑且殘餘物在高度真空下乾燥。由此獲得105 mg (61%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.93 min; MS (ESIpos): m/z = 599 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.69), -0.008 (6.10), 0.008 (6.04), 0.146 (0.75), 1.230 (1.66), 1.389 (12.14), 1.406 (12.23), 1.771 (1.42), 1.782 (1.57), 1.791 (1.57), 1.814 (1.30), 2.329 (0.82), 2.367 (0.63), 2.671 (0.91), 2.711 (0.63), 3.292 (4.47), 3.350 (2.26), 3.367 (1.51), 3.447 (2.63), 3.530 (1.48), 3.549 (1.69), 3.773 (2.87), 3.806 (2.51), 4.892 (7.52), 4.901 (7.61), 4.970 (0.63), 4.999 (7.34), 5.010 (8.15), 5.034 (1.30), 5.058 (1.12), 7.554 (4.32), 7.576 (7.67), 7.597 (4.26), 8.022 (8.51), 8.057 (8.39), 8.889 (16.00), 10.392 (5.55), 10.416 (5.37)。
實例 182
7-(3,4-二羥基哌啶-1-基)-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IF, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/ 20%乙醇；流動速率15 ml/min；溫度：25℃，偵測：210 nm)將105 mg 7-(3,4-二羥基哌啶-1-基)-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體1：46.5 mg (＞99% de) R
t
= 1.411 min [HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IF-3, 1 ml/min；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/ 20%乙醇；偵測：220 nm]。 所獲得之材料藉由製備型HPLC (管柱：Reprosil 125×30; 10 µ，流動速率：50 ml/min，乙腈/水，0.1%甲酸)重新純化。在減壓下蒸發溶劑且在高度真空下乾燥殘餘物。由此獲得36 mg (21%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.92 min; MS (ESIpos): m/z = 599 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.88), -0.008 (7.15), 0.008 (7.01), 0.146 (0.88), 1.205 (1.69), 1.230 (1.76), 1.238 (1.66), 1.389 (13.36), 1.406 (13.46), 1.762 (1.52), 1.771 (1.66), 1.781 (1.80), 1.804 (1.52), 1.814 (1.37), 2.324 (0.74), 2.328 (1.02), 2.666 (0.81), 2.670 (1.13), 2.675 (0.85), 2.711 (0.39), 3.272 (4.09), 3.283 (4.58), 3.351 (2.54), 3.368 (1.73), 3.419 (1.06), 3.445 (3.03), 3.527 (1.62), 3.548 (1.80), 3.571 (1.27), 3.773 (3.07), 3.778 (3.24), 3.805 (2.85), 4.890 (8.88), 4.899 (8.92), 4.969 (0.70), 4.997 (9.23), 5.007 (9.73), 5.033 (1.41), 5.057 (1.16), 5.077 (0.60), 7.555 (4.44), 7.577 (7.72), 7.598 (4.37), 8.023 (9.59), 8.057 (9.41), 8.889 (16.00), 10.392 (6.13), 10.415 (5.89)。
實例 183
7-(3,4-二羥基哌啶-1-基)-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IF, 5 µm，250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%乙醇；流動速率15 ml/min；溫度：25℃，偵測：210 nm)將105 mg 7-(3,4-二羥基哌啶-1-基)-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)分離成非對映異構體。 非對映異構體2：46.7 mg (98.6% de) R
t
= 1.818 min [HPLC：管柱Daicel
®
Chiralpak IF-3, 1 ml/min；3 µm, 50 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/ 20%乙醇；偵測：220 nm]。 所獲得之材料藉由製備型HPLC (管柱：Reprosil 125×30; 10 µ，流動速率：50 ml/min，乙腈/水，0.1%甲酸)重新純化。在減壓下蒸發溶劑且在高度真空下乾燥殘餘物。由此獲得38 mg (22%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.00 min; MS (ESIpos): m/z = 599 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.53), -0.008 (4.75), 0.008 (4.93), 0.146 (0.53), 1.141 (1.14), 1.205 (1.62), 1.229 (1.72), 1.388 (13.04), 1.405 (13.14), 1.771 (1.42), 1.781 (1.62), 1.791 (1.77), 1.814 (1.42), 1.824 (1.34), 2.117 (0.53), 2.328 (1.19), 2.670 (1.21), 3.270 (3.77), 3.292 (4.95), 3.348 (2.43), 3.365 (1.69), 3.448 (2.91), 3.530 (1.54), 3.552 (1.79), 3.774 (3.24), 3.800 (2.86), 4.891 (8.24), 4.901 (8.32), 4.999 (8.47), 5.009 (9.30), 5.034 (1.34), 5.058 (1.19), 5.077 (0.66), 7.554 (4.73), 7.576 (8.44), 7.598 (4.65), 8.022 (9.48), 8.056 (9.15), 8.889 (16.00), 10.391 (5.79), 10.415 (5.69)。
實例 184
6-氟-7-[(2R)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(70.0 mg，135 µmol) (對映異構純)裝入1.4 ml N,N-二甲基甲醯胺，且添加(2R)-吡咯啶-2-基甲醇(15.0 mg，149 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(82 µl，470 µmol)。在55℃下攪拌反應混合物8小時。冷卻反應混合物，用乙腈稀釋且藉由製備型RP-HPLC (管柱：Reprosil 125×30；10µ，流動速率：50 ml/min，乙腈/水，0.1%甲酸)純化。在減壓下蒸發溶劑且在高度真空下乾燥殘餘物。由此獲得51 mg (65%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.17 min; MS (ESIpos): m/z = 583 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.44), 0.008 (3.51), 0.146 (0.41), 1.386 (13.38), 1.403 (13.45), 1.811 (3.37), 1.927 (3.17), 2.329 (0.89), 2.367 (0.93), 2.670 (0.96), 2.711 (0.96), 3.263 (2.00), 3.276 (3.17), 3.290 (3.65), 3.598 (0.62), 4.634 (0.62), 4.966 (0.65), 4.986 (1.17), 5.009 (1.38), 5.029 (1.34), 5.053 (1.17), 5.073 (0.62), 7.500 (1.51), 7.525 (6.09), 7.548 (6.23), 7.573 (1.62), 7.982 (8.77), 8.015 (8.57), 8.846 (16.00), 10.451 (5.85), 10.474 (5.68)。
實例 185
6-氟-7-[(2R)-2-(羥基甲基)哌啶-1-基]-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(70.0 mg，135 µmol) (對映異構純)裝入1.4 ml N,N-二甲基甲醯胺中，且添加(2R)-哌啶-2-基甲醇(17.1 mg，149 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(82 µl，470 µmol)。在55℃下攪拌反應混合物18小時。冷卻反應混合物，用乙腈稀釋且藉由製備型RP-HPLC (管柱：Reprosil 125×30；10µ，流動速率：50 ml/min，乙腈/水，0.1%甲酸)純化。在減壓下蒸發溶劑且在高度真空下乾燥殘餘物。由此獲得47 mg (58%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.22 min; MS (ESIpos): m/z = 597 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.42), -0.008 (3.95), 0.008 (4.02), 0.146 (0.46), 1.388 (14.45), 1.406 (14.10), 1.470 (2.22), 1.520 (3.70), 1.529 (4.02), 1.549 (6.66), 1.577 (2.64), 1.721 (2.29), 1.741 (2.15), 2.328 (1.06), 2.367 (1.02), 2.671 (1.02), 2.711 (0.99), 2.919 (1.27), 2.949 (2.36), 2.981 (1.27), 3.475 (1.13), 3.492 (1.83), 3.503 (2.85), 3.518 (3.10), 3.533 (2.15), 3.558 (1.37), 3.574 (2.36), 3.587 (2.04), 3.852 (2.15), 3.885 (1.97), 4.287 (2.43), 4.660 (3.42), 4.673 (7.47), 4.687 (3.31), 4.967 (0.63), 4.988 (1.16), 5.010 (1.34), 5.030 (1.37), 5.055 (1.16), 5.076 (0.67), 7.533 (1.73), 7.546 (4.16), 7.553 (4.83), 7.569 (4.83), 7.576 (4.30), 7.589 (1.69), 7.996 (9.37), 8.031 (9.13), 8.870 (16.00), 10.399 (5.92), 10.423 (5.67)。
實例 186
6-氟-7-[4-羥基-4-(羥基甲基)哌啶-1-基]-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(70.0 mg，135 µmol) (對映異構純)裝入1.4 ml N,N-二甲基甲醯胺，且添加4-(羥基甲基)哌啶-4-醇鹽酸鹽(24.9 mg，149 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(110 µl，610 µmol)。在55℃下攪拌反應混合物8小時。冷卻反應混合物，用乙腈稀釋且藉由製備型RP-HPLC (管柱：Reprosil 125×30；10µ，流動速率：50 ml/min，乙腈/水，0.1%甲酸)純化。在減壓下蒸發溶劑且在高度真空下乾燥殘餘物。由此獲得55 mg (66%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.99 min; MS (ESIpos): m/z = 613 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.92), -0.008 (8.27), 0.008 (7.14), 0.146 (0.92), 1.311 (4.72), 1.345 (6.17), 1.388 (13.79), 1.405 (13.76), 1.504 (2.72), 1.534 (4.37), 1.567 (2.07), 2.328 (1.00), 2.367 (1.00), 2.670 (1.00), 2.711 (0.89), 3.142 (11.28), 3.156 (11.34), 3.249 (2.98), 3.280 (5.93), 3.891 (4.66), 3.923 (4.28), 4.324 (14.08), 4.562 (3.31), 4.576 (7.56), 4.590 (3.25), 4.968 (0.65), 4.989 (1.15), 5.009 (1.39), 5.033 (1.45), 5.055 (1.18), 5.076 (0.65), 7.558 (5.37), 7.580 (10.13), 7.603 (5.34), 8.036 (9.12), 8.070 (8.86), 8.886 (16.00), 10.389 (6.11), 10.413 (5.85)。
實例 187
7-[4,4-雙(羥基甲基)哌啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(70.0 mg，135 µmol) (對映異構純)裝入1.4 ml N,N-二甲基甲醯胺中，且添加哌啶-4,4-二基二甲醇鹽酸鹽(27.0 mg，149 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(110 µl，610 µmol)。在55℃下攪拌反應混合物8小時。冷卻反應混合物，用乙腈稀釋且藉由製備型RP-HPLC (管柱：Reprosil 125×30；10µ，流動速率：50 ml/min，乙腈/水，0.1%甲酸)純化。在減壓下蒸發溶劑且在高度真空下乾燥殘餘物。由此獲得45 mg (53%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.02 min; MS (ESIpos): m/z = 626 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.58), 0.008 (4.01), 0.146 (0.58), 1.347 (6.26), 1.361 (7.91), 1.375 (6.74), 1.387 (9.36), 1.404 (8.55), 2.328 (0.61), 2.367 (0.68), 2.671 (0.66), 2.710 (0.68), 3.271 (14.94), 3.285 (16.00), 3.507 (5.81), 3.520 (7.20), 4.405 (4.49), 4.419 (9.86), 4.432 (4.11), 4.967 (0.48), 4.988 (0.76), 5.009 (0.91), 5.031 (0.89), 5.054 (0.76), 7.555 (3.37), 7.577 (6.24), 7.600 (3.27), 8.020 (5.48), 8.055 (5.27), 8.873 (9.38), 10.399 (3.85), 10.424 (3.63)。
實例 188
6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-7-[(2R)-2-(羥基甲基)哌啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(50.0 mg，95.8 µmol)裝入1 ml DMF中，添加(2R)-哌啶-2-基甲醇(12.1 mg，105 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(58 µl，340 µmol)且在55℃下攪拌混合物8小時。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。合併產物溶離份且藉由蒸發濃縮。由此獲得43 mg目標化合物(74%理論值，純度100%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.37 min; MS (ESIpos): m/z = 601 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.378 (1.60), 1.476 (2.24), 1.534 (3.84), 1.555 (6.73), 1.725 (2.33), 1.743 (2.24), 2.328 (1.90), 2.366 (0.52), 2.670 (2.12), 2.710 (0.80), 2.930 (1.23), 2.960 (2.27), 2.992 (1.32), 3.494 (1.75), 3.506 (2.83), 3.520 (3.01), 3.535 (1.97), 3.578 (2.30), 3.866 (2.09), 3.899 (1.97), 4.298 (2.43), 4.679 (2.73), 4.692 (5.59), 4.705 (2.76), 6.325 (1.75), 6.347 (1.84), 7.547 (1.75), 7.567 (4.82), 7.583 (4.88), 7.604 (1.81), 8.034 (8.97), 8.068 (8.60), 8.541 (0.64), 8.995 (16.00), 11.231 (5.71), 11.256 (5.44)。
實例 189
6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-7-[4-羥基-4-(羥基甲基)哌啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(50.0 mg，95.8 µmol)裝入1 ml DMF中，添加4-(羥基甲基)哌啶-4-醇鹽酸鹽(18.6 mg，95%純度，105 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(75 µl，430 µmol)且在55℃下攪拌混合物8小時。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。合併產物溶離份且藉由蒸發濃縮。由此獲得30 mg目標化合物(50%理論值，純度100%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.05 min; MS (ESIpos): m/z = 617 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.46), -0.008 (5.62), 0.008 (3.80), 0.146 (0.44), 1.320 (4.64), 1.353 (5.97), 1.505 (2.67), 1.515 (3.07), 1.538 (4.37), 1.546 (4.30), 1.570 (2.28), 1.580 (1.92), 2.329 (0.77), 2.671 (0.81), 3.146 (11.34), 3.160 (11.17), 3.262 (3.24), 3.291 (7.90), 3.569 (0.46), 3.907 (4.70), 3.940 (4.16), 4.332 (14.24), 4.565 (3.63), 4.579 (8.00), 4.593 (3.38), 6.307 (1.30), 6.331 (1.78), 6.348 (1.80), 6.367 (1.23), 7.573 (5.26), 7.595 (9.59), 7.617 (5.06), 8.073 (9.13), 8.107 (8.75), 9.009 (16.00), 11.219 (5.76), 11.244 (5.41)。
實例 190
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-7-[(2R)-2-(羥基甲基)哌啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(50.0 mg，99.1 µmol)裝入1 ml DMF中，添加(2R)-哌啶-2-基甲醇(12.6 mg，109 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(8.6 µl，50 µmol)且在55℃下攪拌混合物8小時。添加更多(2R)-哌啶-2-基甲醇(5.7 mg，50 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(8.6 µl，50 µmol)且在55℃下攪拌混合物。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。合併產物溶離份且藉由蒸發濃縮。由此獲得37 mg目標化合物(63%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.26 min; MS (ESIpos): m/z = 584 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.99), -0.008 (7.81), 0.008 (7.07), 0.146 (0.93), 1.339 (1.30), 1.525 (9.67), 1.545 (8.81), 1.616 (2.67), 1.647 (2.17), 1.745 (3.97), 2.328 (1.86), 2.367 (0.68), 2.670 (1.98), 2.711 (0.68), 2.921 (2.17), 2.954 (1.61), 3.002 (1.74), 3.031 (0.99), 3.473 (1.74), 3.489 (3.22), 3.500 (6.02), 3.515 (7.75), 3.529 (6.20), 3.581 (2.54), 3.859 (4.59), 3.892 (4.28), 4.286 (3.16), 4.660 (3.10), 4.697 (4.90), 6.300 (1.05), 6.317 (2.67), 6.335 (3.78), 6.360 (3.91), 6.378 (2.60), 6.397 (0.99), 8.037 (9.92), 8.071 (10.23), 8.339 (4.53), 8.357 (4.09), 8.629 (16.00), 8.635 (15.32), 8.956 (9.80), 11.224 (12.84), 11.250 (12.34)。
實例 191
7-[4,4-雙(羥基甲基)哌啶-1-基]-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(50.0 mg，95.8 µmol)裝入1 ml DMF中，添加哌啶-4,4-二基二甲醇鹽酸鹽(20.2 mg，95%純度，105 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(75 µl，430 µmol)且在55℃下攪拌混合物8小時。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。合併產物溶離份且藉由蒸發濃縮。由此獲得52 mg目標化合物(85%理論值，純度100%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.07 min; MS (ESIpos): m/z = 631 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.354 (7.76), 1.368 (10.28), 1.382 (8.05), 2.328 (1.17), 2.670 (1.30), 3.276 (15.51), 3.285 (16.00), 3.520 (7.34), 3.534 (9.74), 4.423 (5.58), 6.287 (0.42), 6.304 (1.10), 6.329 (1.52), 6.347 (1.61), 6.365 (1.05), 7.571 (4.40), 7.592 (8.22), 7.614 (4.45), 8.058 (7.63), 8.092 (7.49), 8.996 (13.58), 11.232 (5.36), 11.258 (5.09)。
實例 192
6-氟-7-[3-羥基-3-(羥基甲基)哌啶-1-基]-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(100 mg，94%純度，182 µmol) (對映異構純)裝入2 ml DMF中，添加3-(羥基甲基)哌啶-3-醇(26.2 mg，200 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(110 µl，640 µmol)且在室溫下攪拌混合物18小時。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化反應溶液。產物溶離份藉由蒸發來濃縮。由此獲得88 mg目標化合物(79%理論值，純度100%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.03 min; MS (ESIpos): m/z = 613 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.00), -0.008 (14.16), 0.008 (7.76), 0.146 (0.94), 1.273 (2.39), 1.387 (15.20), 1.404 (15.48), 1.599 (1.18), 1.628 (4.19), 1.655 (4.40), 2.328 (1.52), 2.670 (1.59), 2.901 (1.97), 3.105 (1.39), 3.132 (4.12), 3.149 (6.34), 3.164 (4.43), 3.177 (1.49), 3.192 (1.28), 3.770 (2.53), 3.803 (2.25), 3.834 (2.81), 3.868 (2.35), 4.241 (10.29), 4.655 (3.15), 4.669 (6.20), 4.683 (2.84), 4.988 (1.25), 5.013 (1.42), 5.032 (1.42), 5.056 (1.18), 7.556 (3.71), 7.566 (4.71), 7.579 (4.68), 7.598 (2.01), 7.971 (7.48), 8.005 (7.34), 8.875 (16.00), 10.424 (5.44), 10.447 (5.23)。
實例 193
6-氟-7-[(2S,3S)-3-羥基-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟-2-甲基丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(100 mg，188 µmol)裝入1.9 ml DMF中，添加(2S,3S)-2-(羥基甲基)吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(37.6 mg，244 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(150 µl，850 µmol)且在55℃下攪拌混合物12小時。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。合併產物溶離份且藉由蒸發濃縮。由此獲得93 mg目標化合物(81%理論值，純度100%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.08 min; MS (ESIpos): m/z = 613 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.03), 0.008 (2.80), 1.681 (16.00), 1.953 (1.23), 1.969 (1.25), 2.073 (0.51), 3.478 (1.10), 4.273 (0.92), 5.176 (1.16), 5.185 (1.14), 7.531 (1.06), 7.550 (1.89), 7.570 (1.10), 7.993 (2.68), 8.026 (2.62), 8.783 (5.55), 10.556 (4.22)。
實例 194
6-氟-7-[(2S,3S)-3-羥基-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(80.0 mg，155 µmol)裝入1.5 ml DMF中，添加(2S,3S)-2-(羥基甲基)吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(30.9 mg，201 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(120 µl，700 µmol)且在55℃下攪拌混合物12小時。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。經合併之產物藉由蒸發濃縮。由此獲得75 mg目標化合物(81%理論值，純度100%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.98 min; MS (ESIpos): m/z = 599 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.46), -0.008 (11.75), 0.008 (11.23), 0.146 (1.43), 1.386 (12.95), 1.403 (13.01), 1.953 (3.41), 1.970 (3.44), 2.328 (1.14), 2.367 (0.42), 2.670 (1.17), 2.711 (0.42), 3.481 (3.05), 4.272 (2.50), 4.964 (0.62), 4.986 (1.10), 5.006 (1.33), 5.028 (1.30), 5.051 (1.14), 5.072 (0.58), 5.185 (2.82), 7.531 (2.89), 7.552 (5.16), 7.569 (2.86), 7.976 (7.30), 8.008 (7.08), 8.032 (0.42), 8.848 (16.00), 10.446 (5.71), 10.470 (5.52)。
實例 195
7-[4,4-雙(羥基甲基)哌啶-1-基]-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(50.0 mg，99.1 µmol)裝入1 ml DMF中，添加哌啶-4,4-二基二甲醇鹽酸鹽(20.8 mg，95%純度，109 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(78 µl，450 µmol)且在55℃下攪拌混合物隔夜。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。合併產物溶離份且藉由蒸發濃縮。由此獲得36 mg目標化合物(59%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.96 min; MS (ESIpos): m/z = 614 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.364 (0.66), 1.378 (1.01), 1.393 (0.69), 3.278 (1.57), 3.291 (1.64), 3.312 (16.00), 3.529 (0.79), 4.413 (0.47), 4.427 (1.05), 4.440 (0.47), 8.061 (0.74), 8.095 (0.72), 8.636 (0.86), 8.642 (0.82), 8.958 (1.64), 11.226 (0.46), 11.251 (0.44)。
實例 196
6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(100 mg，100%純度，192 µmol)裝入2.1 ml DMF中，添加乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:2) (71.8 mg，249 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(120 µl, 670 µmol)且在55℃下攪拌混合物18小時。使反應溶液在室溫下靜置過週末。接著藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化混合物。合併產物溶離份且藉由蒸發濃縮。由此獲得89 mg目標化合物(79%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.31 min; MS (ESIpos): m/z = 585 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.33), 0.008 (2.26), 4.656 (16.00), 6.297 (0.41), 6.316 (0.57), 6.339 (0.61), 7.556 (1.64), 7.578 (2.94), 7.600 (1.63), 8.020 (2.85), 8.049 (2.83), 8.965 (4.77), 11.258 (1.92), 11.284 (1.84)。
實例 197
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-7-[(2R)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(50.0 mg，99.1 µmol)裝入1 ml DMF中，添加(2R)-吡咯啶-2-基甲醇(11 µl，99%純度，110 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(60 µl，350 µmol)且在55℃下攪拌混合物隔夜。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。合併產物溶離份，脫除溶劑且凍乾。由此獲得30 mg (52%理論值，98%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.17 min; MS (ESIpos): m/z = 570 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.37), 0.146 (1.76), 1.820 (7.75), 1.934 (7.70), 2.328 (2.31), 2.670 (2.69), 2.711 (0.66), 3.160 (2.09), 3.576 (1.54), 4.710 (1.43), 6.309 (2.91), 6.328 (4.23), 6.352 (4.40), 6.369 (2.97), 8.021 (10.28), 8.054 (10.17), 8.284 (2.97), 8.309 (3.30), 8.335 (3.68), 8.353 (1.87), 8.557 (1.87), 8.612 (16.00), 8.939 (11.22), 8.954 (9.68), 11.287 (12.70), 11.312 (12.10)。
實例 198
1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-7-[4-羥基-4-(羥基甲基)哌啶-1-基]-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-1-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(50.0 mg，99.1 µmol)裝入1 ml DMF中，添加4-(羥基甲基)哌啶-4-醇鹽酸鹽(19.2 mg，95%純度，109 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(78 µl，450 µmol)且在55℃下攪拌混合物隔夜。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。合併產物溶離份且脫除溶劑。殘餘物藉由矽膠層析(移動相：二氯甲烷至乙酸乙酯)純化。合併含有產物之溶離份，藉由蒸發濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此獲得22.3 mg (37%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.02 min; MS (ESIpos): m/z = 600 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.70), -0.008 (6.17), 0.008 (5.68), 0.146 (0.70), 1.235 (0.55), 1.284 (0.76), 1.298 (1.40), 1.312 (1.56), 1.347 (3.39), 1.383 (2.11), 1.491 (1.10), 1.524 (1.89), 1.543 (1.89), 1.566 (1.92), 1.598 (0.89), 2.041 (1.13), 2.328 (1.01), 2.366 (0.43), 2.670 (1.13), 2.710 (0.52), 3.147 (10.11), 3.162 (10.20), 3.233 (1.01), 3.266 (2.08), 3.912 (2.81), 4.329 (12.64), 4.564 (2.93), 4.578 (6.81), 4.592 (2.96), 6.318 (0.98), 6.343 (1.50), 6.360 (1.59), 6.379 (1.04), 8.076 (7.76), 8.110 (7.60), 8.354 (1.74), 8.360 (2.05), 8.382 (3.11), 8.399 (1.92), 8.405 (2.02), 8.638 (8.98), 8.645 (8.52), 8.969 (16.00), 11.212 (5.31), 11.238 (5.07)。
實例 199
6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-7-[(2R)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(50.0 mg，95.8 µmol)裝入1 ml DMF中，添加(2R)-吡咯啶-2-基甲醇(11 µl，99%純度，110 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(58 µl，340 µmol)且在55℃下攪拌混合物8小時。冷卻反應溶液且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)純化。合併產物溶離份且脫除溶劑。殘餘物藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)重新純化。合併產物溶離份且脫除溶劑。藉由矽膠層析(乙酸乙酯/環己烷梯度)純化殘餘物。藉由蒸發濃縮之後，殘餘物藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1%甲酸之乙腈/水梯度)重新純化。合併含有產物之溶離份，藉由蒸發濃縮且自乙腈/水凍乾隔夜。由此獲得14.2 mg (25%理論值，99%純)標題化合物。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.27 min; MS (ESIpos): m/z = 587 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.99), 0.146 (0.93), 1.821 (3.92), 1.933 (3.51), 2.328 (1.13), 2.367 (0.90), 2.670 (1.25), 2.711 (0.87), 3.346 (1.19), 3.603 (0.64), 4.641 (0.64), 6.299 (1.39), 6.317 (2.03), 6.341 (2.15), 6.360 (1.36), 7.518 (1.74), 7.540 (6.68), 7.563 (6.85), 7.587 (1.92), 8.020 (8.68), 8.052 (8.57), 8.974 (16.00), 11.291 (6.45), 11.316 (6.16)。
實例 200
6-氟-7-[6-羥基-1,4-二氮雜環庚烷-1-基]-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
首先將1,4-二氮雜環庚烷-6-醇二氫溴酸鹽(37.6 mg，135 µmol)裝入0.26 ml DMF及N,N-二異丙基乙胺(170 µl，970 µmol)中。將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純) (100 mg，193 µmol)溶解於0.79 ml DMF中且緩慢逐滴添加至第一混合物中且在室溫下攪拌隔夜。反應溶液用乙腈、水及TFA稀釋且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得37 mg目標化合物(32%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.43 min; MS (ESIpos): m/z = 598 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.01), -0.008 (8.78), 0.008 (8.35), 0.146 (1.01), 0.853 (0.86), 1.234 (1.21), 1.387 (11.18), 1.404 (11.23), 2.156 (0.61), 2.328 (1.59), 2.366 (0.56), 2.570 (3.81), 2.670 (4.29), 2.697 (1.59), 3.627 (1.89), 3.854 (1.84), 3.878 (1.67), 4.729 (1.49), 4.989 (0.98), 5.010 (1.09), 5.033 (1.14), 5.754 (11.43), 7.541 (3.56), 7.547 (3.63), 7.564 (4.21), 7.584 (1.51), 7.993 (7.97), 8.027 (7.80), 8.868 (16.00), 10.414 (4.90), 10.438 (4.79)。
實例 201
N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1)
首先將7-氯-N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1) (100 mg，184 µmol)裝入1 ml DMF中。添加(3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽(30.8 mg，221 µmol)，添加N,N-二異丙基乙胺(160 µl，920 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得103 mg目標化合物(90%理論值，純度98%)。 對映異構體1: ee ＞ 97%, R
t
= 7.703 min [分析型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IA, 5 µm, 250 × 4.6 mm; 1 ml/min，30℃；移動相：80%異己烷/20%乙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.06 min; MS (ESIpos): m/z = 611 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.56), -0.008 (4.36), 0.008 (4.16), 0.146 (0.52), 0.308 (0.79), 0.320 (1.84), 0.332 (2.92), 0.345 (3.15), 0.357 (2.45), 0.369 (1.11), 0.486 (0.86), 0.497 (2.37), 0.509 (3.34), 0.521 (2.94), 0.533 (2.22), 0.545 (1.02), 0.566 (1.01), 0.576 (1.14), 0.587 (2.39), 0.599 (2.71), 0.609 (2.26), 0.620 (1.96), 0.633 (1.13), 0.650 (1.29), 0.670 (2.35), 0.683 (2.68), 0.696 (2.09), 0.717 (0.67), 1.207 (0.50), 1.219 (1.14), 1.227 (1.75), 1.240 (2.91), 1.249 (2.16), 1.260 (2.69), 1.272 (1.47), 1.281 (0.95), 2.328 (0.94), 2.367 (0.61), 2.670 (0.98), 2.711 (0.58), 3.066 (1.02), 3.700 (1.05), 3.906 (2.19), 4.022 (1.54), 4.434 (0.67), 4.457 (1.66), 4.479 (2.15), 4.501 (2.09), 4.522 (1.69), 4.545 (0.63), 5.202 (4.77), 7.556 (3.48), 7.577 (6.29), 7.597 (3.48), 8.011 (9.15), 8.043 (8.99), 8.838 (16.00), 10.542 (6.29), 10.566 (6.04)。
實例 202
N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2)
首先將7-氯-N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2) (100 mg，184 µmol)裝入1 ml DMF中。添加(3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽(30.8 mg，221 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(160 µl，920 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得105 mg目標化合物(92%理論值，純度98%)。 對映異構體2: ee ＞ 96.5%。 R
t
= 6.54 min [分析型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IA, 5 µm, 250 × 4.6 mm；1 ml/min, 30℃；移動相：80%異己烷/20%乙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.06 min; MS (ESIpos): m/z = 611 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.68), 0.146 (0.64), 0.308 (0.75), 0.321 (1.88), 0.333 (2.90), 0.345 (3.19), 0.357 (2.48), 0.369 (1.09), 0.487 (0.83), 0.499 (2.31), 0.511 (3.27), 0.523 (2.86), 0.534 (2.19), 0.547 (1.02), 0.566 (0.95), 0.588 (2.37), 0.600 (2.70), 0.609 (2.25), 0.621 (1.97), 0.634 (1.13), 0.650 (1.24), 0.671 (2.36), 0.684 (2.66), 0.696 (2.08), 0.718 (0.67), 1.206 (0.50), 1.227 (1.70), 1.239 (2.83), 1.249 (2.23), 1.260 (2.64), 1.271 (1.51), 1.293 (0.42), 2.328 (0.94), 2.367 (0.42), 2.671 (0.99), 2.710 (0.41), 3.074 (1.03), 3.691 (1.09), 3.903 (2.19), 4.017 (1.59), 4.432 (0.64), 4.455 (1.67), 4.477 (2.14), 4.498 (2.12), 4.520 (1.69), 4.544 (0.63), 5.203 (5.43), 7.555 (4.56), 7.577 (8.29), 7.598 (4.45), 8.012 (8.76), 8.044 (8.61), 8.838 (16.00), 10.543 (6.02), 10.568 (5.80)。
實例 203
N-(1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-N-(1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(70.0 mg，131 µmol)裝入0.7 ml DMF中。添加(3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽(22.0 mg，157 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(110 µl，660 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得71 mg目標化合物(88%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.04 min; MS (ESIpos): m/z = 601 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.68), -0.008 (5.38), 0.008 (4.77), 0.146 (0.65), 0.458 (1.16), 0.469 (2.08), 0.481 (3.81), 0.493 (4.94), 0.505 (5.07), 0.516 (3.30), 0.527 (2.52), 0.552 (1.70), 0.564 (3.47), 0.578 (4.05), 0.586 (5.38), 0.600 (4.90), 0.608 (3.68), 0.622 (4.87), 0.633 (4.05), 0.645 (5.89), 0.658 (4.94), 0.672 (1.97), 0.685 (2.55), 0.699 (4.87), 0.710 (5.55), 0.723 (4.26), 0.733 (2.72), 0.747 (1.02), 1.175 (0.65), 1.518 (1.60), 1.533 (3.51), 1.540 (3.74), 1.553 (6.26), 1.567 (3.51), 1.574 (3.17), 1.589 (1.36), 1.988 (1.16), 2.086 (5.69), 2.328 (1.09), 2.367 (0.71), 2.670 (1.23), 2.711 (0.78), 3.072 (0.95), 3.684 (1.02), 3.901 (2.04), 4.021 (1.67), 5.198 (4.36), 5.754 (3.34), 7.553 (3.88), 7.575 (6.98), 7.595 (3.91), 8.034 (9.12), 8.066 (8.99), 8.776 (16.00), 9.878 (11.85)。
實例 204
N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1)
首先將7-氯-N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1) (150 mg，276 µmol)裝入1.5 ml DMF中，且在室溫下添加N,N-二異丙基乙胺(480 µl，2.8 mmol)及乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:2) (59.6 mg，207 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。由此獲得160 mg目標化合物(94%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 607 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.97), -0.008 (7.80), 0.146 (0.88), 0.310 (0.64), 0.323 (0.97), 0.335 (0.97), 0.346 (0.82), 0.493 (0.74), 0.504 (1.09), 0.517 (0.92), 0.528 (0.70), 0.580 (0.80), 0.593 (0.86), 0.680 (0.88), 1.222 (0.58), 1.234 (1.01), 1.254 (0.88), 2.073 (9.20), 2.327 (1.58), 2.366 (0.74), 2.670 (1.58), 2.710 (0.74), 4.272 (0.43), 4.446 (0.70), 4.468 (0.86), 4.489 (0.82), 4.511 (0.64), 4.655 (16.00), 7.541 (1.70), 7.563 (3.25), 7.585 (1.73), 7.999 (2.88), 8.027 (2.85), 8.833 (5.07), 10.507 (1.95), 10.531 (1.91)。
實例 205
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1)
首先將N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1) (150 mg，247 µmol)裝入三氟乙酸(1.5 ml，20 mmol)中，添加1.5 ml水及1.5 ml乙腈且在室溫下攪拌混合物2天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得總計115 mg目標化合物(73%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.99 min; MS (ESIpos): m/z = 625 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.47), 0.146 (0.44), 0.304 (0.53), 0.316 (1.31), 0.328 (2.04), 0.340 (2.20), 0.352 (1.72), 0.365 (0.74), 0.483 (0.59), 0.495 (1.58), 0.507 (2.26), 0.519 (1.97), 0.531 (1.51), 0.542 (0.72), 0.563 (0.67), 0.585 (1.65), 0.597 (1.87), 0.607 (1.59), 0.618 (1.38), 0.630 (0.76), 0.648 (0.85), 0.669 (1.65), 0.682 (1.90), 0.694 (1.43), 0.715 (0.46), 1.223 (1.12), 1.235 (1.99), 1.245 (1.56), 1.256 (1.80), 1.268 (1.01), 2.329 (0.50), 2.671 (0.54), 3.475 (15.57), 3.488 (16.00), 4.131 (1.02), 4.425 (0.49), 4.448 (1.17), 4.470 (1.51), 4.492 (1.47), 4.514 (1.19), 4.537 (0.49), 4.838 (4.89), 4.851 (11.09), 4.864 (4.84), 7.532 (3.57), 7.554 (6.85), 7.576 (3.60), 7.971 (5.68), 8.000 (5.62), 8.814 (10.62), 10.540 (4.12), 10.564 (3.97)。
實例 206
N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2)
首先將7-氯-N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2) (150 mg，276 µmol)裝入1.5 ml DMF中，且在室溫下添加N,N-二異丙基乙胺(480 µl，2.8 mmol)及乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:2) (59.6 mg，207 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。由此獲得155 mg目標化合物(91%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 607 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.311 (0.62), 0.323 (0.97), 0.335 (1.03), 0.347 (0.80), 0.494 (0.75), 0.505 (1.08), 0.517 (0.94), 0.529 (0.72), 0.580 (0.79), 0.592 (0.89), 0.601 (0.73), 0.613 (0.63), 0.646 (0.40), 0.667 (0.77), 0.680 (0.88), 0.692 (0.68), 1.222 (0.54), 1.234 (0.98), 1.245 (0.72), 1.255 (0.87), 1.267 (0.48), 2.073 (6.92), 4.423 (0.41), 4.447 (0.70), 4.468 (0.86), 4.490 (0.81), 4.512 (0.64), 4.656 (16.00), 7.541 (1.69), 7.563 (3.20), 7.585 (1.69), 7.999 (2.70), 8.028 (2.69), 8.833 (4.83), 10.508 (1.95), 10.532 (1.89)。
實例 207
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2)
首先將N-[1-環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基]-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2) (145 mg，239 µmol)裝入1.5 ml三氟乙酸中，添加1.5 ml水及1.5 ml乙腈且在室溫下攪拌混合物2天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得總計109 mg目標化合物(72%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.99 min; MS (ESIpos): m/z = 625 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.39), -0.008 (10.57), 0.008 (10.54), 0.146 (1.26), 0.315 (1.31), 0.327 (2.02), 0.339 (2.27), 0.351 (1.72), 0.364 (0.76), 0.494 (1.61), 0.506 (2.27), 0.518 (1.97), 0.530 (1.58), 0.562 (0.68), 0.585 (1.64), 0.597 (1.88), 0.606 (1.56), 0.616 (1.37), 0.630 (0.76), 0.648 (0.85), 0.668 (1.64), 0.681 (1.91), 0.693 (1.47), 1.222 (1.17), 1.235 (2.13), 1.244 (1.56), 1.255 (1.86), 1.267 (1.01), 2.328 (1.50), 2.367 (0.98), 2.670 (1.31), 2.710 (0.82), 3.473 (15.78), 3.486 (16.00), 4.138 (1.01), 4.424 (0.46), 4.448 (1.17), 4.470 (1.53), 4.492 (1.50), 4.512 (1.15), 4.536 (0.49), 4.836 (5.16), 4.850 (11.96), 4.863 (5.00), 7.531 (3.88), 7.553 (7.18), 7.575 (3.74), 7.970 (6.53), 7.999 (6.39), 8.813 (11.85), 10.539 (4.31), 10.563 (4.01)。
實例 208
N-(1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-N-(1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(65.0 mg，111 µmol)裝入0.61 ml DMF中。添加(3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽(18.6 mg，134 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(97 µl，560 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。反應溶液用乙酸乙酯稀釋，用水萃取兩次且用飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。殘餘物藉由厚層層析(移動相：二氯甲烷/甲醇=30/1)純化。由此獲得39 mg目標化合物(52%理論值，純度97%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.11 min; MS (ESIpos): m/z = 651 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (1.39), -0.008 (11.73), 0.146 (1.28), 0.458 (1.22), 0.481 (3.72), 0.494 (5.46), 0.507 (4.88), 0.516 (3.66), 0.530 (2.18), 0.573 (1.63), 0.585 (3.57), 0.607 (5.78), 0.621 (5.05), 0.642 (5.31), 0.653 (4.70), 0.665 (6.04), 0.678 (4.62), 0.746 (2.09), 0.759 (4.73), 0.771 (5.69), 0.782 (4.94), 0.795 (3.37), 1.236 (0.41), 1.583 (1.57), 1.603 (4.07), 1.618 (6.21), 1.633 (3.80), 1.652 (1.34), 2.328 (1.48), 2.367 (1.02), 2.670 (1.48), 2.711 (0.96), 2.731 (2.90), 2.891 (3.72), 3.069 (1.13), 3.692 (1.13), 3.902 (2.38), 4.017 (1.66), 5.202 (4.79), 7.551 (4.24), 7.573 (7.64), 7.594 (4.18), 7.952 (0.46), 8.036 (9.03), 8.068 (8.94), 8.781 (16.00), 9.849 (11.73)。
實例 209
N-(1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙基)-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-N-(1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(110 mg，206 µmol)裝入1.1 ml DMF中，且在室溫下添加N,N-二異丙基乙胺(360 µl，2.1 mmol)及乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:2) (44.6 mg，155 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得103 mg目標化合物(83%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.24 min; MS (ESIpos): m/z = 597 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.008 (1.29), 0.467 (0.73), 0.477 (1.28), 0.489 (1.66), 0.501 (1.73), 0.512 (1.08), 0.523 (0.83), 0.549 (0.55), 0.561 (1.16), 0.575 (1.38), 0.583 (1.83), 0.597 (2.14), 0.612 (1.47), 0.621 (1.72), 0.635 (2.11), 0.648 (1.72), 0.661 (0.65), 0.674 (0.87), 0.688 (1.65), 0.699 (1.84), 0.711 (1.41), 0.723 (0.91), 1.157 (0.53), 1.175 (1.07), 1.193 (0.55), 1.234 (0.46), 1.511 (0.59), 1.526 (1.23), 1.533 (1.33), 1.547 (2.25), 1.561 (1.23), 1.568 (1.10), 1.582 (0.48), 1.989 (1.96), 4.021 (0.56), 4.039 (0.57), 4.653 (16.00), 7.540 (1.63), 7.562 (3.02), 7.584 (1.63), 8.022 (2.63), 8.052 (2.62), 8.774 (4.75), 9.847 (3.87)。
實例 210
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-N-(1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將N-(1,1-二環丙基-2,2,2-三氟乙基)-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(101 mg，169 µmol)裝入1.1 ml三氟乙酸中，添加1.1 ml水及1.1 ml乙腈且在室溫下攪拌混合物5天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得73 mg目標化合物(69%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.04 min; MS (ESIpos): m/z = 615 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.53), -0.008 (5.14), 0.008 (3.74), 0.146 (0.41), 0.477 (2.86), 0.490 (3.72), 0.501 (3.85), 0.523 (2.02), 0.549 (1.30), 0.560 (2.71), 0.575 (3.25), 0.583 (4.07), 0.597 (4.09), 0.617 (3.56), 0.638 (4.71), 0.651 (3.83), 0.664 (1.54), 0.679 (1.91), 0.693 (3.58), 0.704 (4.17), 0.716 (3.19), 0.727 (2.12), 1.233 (0.56), 1.398 (0.74), 1.513 (1.40), 1.528 (3.00), 1.535 (3.25), 1.549 (5.10), 1.563 (2.94), 1.570 (2.49), 1.584 (1.01), 2.073 (0.82), 2.328 (1.36), 2.366 (0.60), 2.670 (1.15), 2.710 (0.43), 3.472 (15.94), 3.485 (16.00), 4.119 (1.05), 4.834 (4.67), 4.847 (11.54), 4.861 (4.71), 7.530 (4.15), 7.551 (7.26), 7.573 (4.17), 7.992 (8.12), 8.021 (7.88), 8.752 (14.09), 9.875 (9.11)。
實例 211
N-(1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基)-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-氯-N-(1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(100 mg，171 µmol)裝入0.93 ml DMF中，且在室溫下添加N,N-二異丙基乙胺(300 µl，1.7 mmol)及乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:2) (37.0 mg，128 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得78 mg目標化合物(70%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.29 min; MS (ESIpos): m/z = 647 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.66), -0.023 (0.56), -0.008 (5.12), 0.008 (4.77), 0.146 (0.63), 0.476 (1.08), 0.489 (1.56), 0.503 (1.47), 0.524 (0.69), 0.569 (0.47), 0.581 (1.08), 0.603 (1.73), 0.617 (1.90), 0.628 (1.56), 0.640 (1.72), 0.654 (1.83), 0.666 (1.34), 0.733 (0.65), 0.747 (1.38), 0.759 (1.65), 0.769 (1.41), 0.783 (0.97), 1.175 (0.44), 1.234 (0.81), 1.575 (0.48), 1.596 (1.18), 1.611 (1.90), 1.625 (1.10), 1.988 (0.81), 2.328 (0.74), 2.366 (0.55), 2.523 (1.79), 2.665 (0.58), 2.670 (0.79), 2.710 (0.54), 4.653 (16.00), 7.538 (1.67), 7.559 (3.03), 7.581 (1.69), 8.025 (3.04), 8.054 (2.96), 8.777 (5.19), 9.818 (3.56)。
實例 212
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-N-(1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基)-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將N-(1,1-二環丙基-2,2,3,3,3-五氟丙基)-6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(75.0 mg，116 µmol)裝入0.73 ml三氟乙酸中，添加0.73 ml水及0.73 ml乙腈且在室溫下攪拌混合物5天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得44 mg目標化合物(56%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.16 min; MS (ESIpos): m/z = 665 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.150 (0.64), -0.008 (5.04), 0.008 (4.74), 0.146 (0.55), 0.491 (3.45), 0.504 (3.22), 0.526 (1.41), 0.582 (2.36), 0.604 (3.62), 0.618 (3.82), 0.645 (3.27), 0.658 (3.89), 0.671 (2.90), 0.752 (2.98), 0.764 (3.70), 0.776 (3.18), 1.235 (0.62), 1.599 (2.63), 1.614 (4.19), 1.627 (2.53), 2.328 (1.31), 2.368 (0.64), 2.670 (1.41), 2.710 (0.52), 3.471 (15.83), 3.484 (16.00), 4.132 (1.04), 4.835 (5.06), 4.849 (12.18), 4.862 (4.99), 7.528 (3.94), 7.551 (6.85), 7.572 (3.84), 7.995 (7.42), 8.024 (7.12), 8.757 (13.07), 9.846 (7.81)。
實例 213
6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1) (150 mg, 268 µmol)裝入1.5 ml DMF中，且在室溫下添加N,N-二異丙基乙胺(470 µl，2.7 mmol)及乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:2) (57.9 mg，201 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發濃縮。由此獲得123 mg目標化合物(72%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.31 min; MS (ESIpos): m/z = 623 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1.102 (16.00), 4.657 (10.77), 4.678 (0.51), 4.708 (0.42), 4.753 (0.44), 4.780 (0.42), 7.539 (1.26), 7.561 (2.36), 7.583 (1.24), 8.032 (2.26), 8.061 (2.18), 8.856 (4.05), 10.687 (1.25), 10.713 (1.19)。
實例 214
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1)
將1.6 ml乙腈、1.6 ml水及1.6 ml三氟乙酸添加至6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1) (120 mg，98%純度，189 µmol)中，且在室溫下攪拌混合物5天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)直接純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。由此獲得總計102 mg目標化合物(83%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.14 min; MS (ESIpos): m/z = 641 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.02), 0.008 (0.91), 1.104 (16.00), 2.328 (0.56), 2.670 (0.54), 3.472 (5.03), 3.486 (5.11), 4.680 (0.43), 4.707 (0.43), 4.754 (0.46), 4.780 (0.45), 4.839 (1.68), 4.853 (4.05), 4.866 (1.67), 7.530 (1.27), 7.552 (2.42), 7.574 (1.30), 8.004 (2.43), 8.033 (2.39), 8.837 (4.32), 10.716 (1.34), 10.742 (1.24)。
實例 215
6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2) (150 mg, 268 µmol)裝入1.5 ml DMF中，且在室溫下添加N,N-二異丙基乙胺(470 µl，2.7 mmol)及乙二酸2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(1:2) (57.9 mg，201 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液4小時。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。由此獲得122 mg目標化合物(72%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.31 min; MS (ESIpos): m/z = 623 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.66), 0.008 (0.52), 1.102 (16.00), 2.524 (0.75), 4.656 (10.99), 4.678 (0.52), 4.706 (0.46), 4.752 (0.45), 4.778 (0.43), 7.539 (1.20), 7.561 (2.29), 7.583 (1.22), 8.032 (2.18), 8.061 (2.14), 8.856 (3.81), 10.686 (1.28), 10.713 (1.22)。
實例 216
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2)
將1.6 ml乙腈、1.6 ml水及1.6 ml三氟乙酸添加至6-氟-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2) (120 mg，98%純度，189 µmol)中，且在室溫下攪拌混合物5天。藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)直接純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。由此獲得總計97 mg目標化合物(79%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.14 min; MS (ESIpos): m/z = 641 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.78), 0.008 (0.79), 1.105 (16.00), 3.473 (5.01), 3.486 (5.13), 4.681 (0.40), 4.707 (0.41), 4.754 (0.42), 4.781 (0.42), 4.839 (1.70), 4.853 (4.02), 4.866 (1.66), 7.530 (1.22), 7.552 (2.31), 7.574 (1.21), 8.004 (2.16), 8.033 (2.10), 8.838 (3.89), 10.716 (1.29), 10.742 (1.23)。
實例 217
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體1) (100 mg，179 µmol)裝入0.97 ml DMF中。添加(3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽(29.9 mg，214 µmol)及N,N-二異丙基乙胺 (160 µl，890 µmol)且在室溫下攪拌混合物4小時。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。在矽膠(移動相：等度：二氯甲烷/甲醇=50/1)上純化殘餘物。由此獲得69 mg目標化合物(60%理論值，純度98%)。 對映異構體1: de ＞ 88%。R
t
= 5.356 min [分析型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IA, 5 µm, 250 × 4.6 mm; 1 ml/min, 70℃；移動相：80%異己烷/ 20%乙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.12 min; MS (ESIpos): m/z = 627 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.17), 0.008 (0.96), 1.109 (16.00), 2.523 (0.73), 3.903 (0.47), 4.761 (0.41), 4.787 (0.41), 5.205 (0.97), 7.554 (0.90), 7.576 (1.58), 7.596 (0.88), 8.044 (2.11), 8.076 (2.07), 8.861 (3.54), 10.720 (1.27), 10.747 (1.22)。
實例 218
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-[1,1,1,2,2-五氟-4,4-二甲基戊-3-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構體2) (100 mg，179 µmol)裝入0.97 ml DMF中。添加(3R,4R)-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽(29.9 mg，214 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(160 µl，890 µmol)且在室溫下攪拌混合物4小時。添加水/乙腈/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷及極少甲醇中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。藉由矽膠(移動相：等度：二氯甲烷/甲醇=50/1)純化殘餘物。由此獲得72 mg目標化合物(63%理論值，純度98%)。 對映異構體2: de ＞ 88.5%。R
t
= 4.677 min [分析型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IA, 5 µm, 250 × 4.6 mm; 1 ml/min, 70℃；移動相：80%異己烷/ 20%乙醇；偵測：220 nm]。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.11 min; MS (ESIpos): m/z = 627 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.06), 0.008 (0.99), 1.109 (16.00), 2.074 (0.44), 2.523 (0.76), 3.912 (0.47), 4.713 (0.41), 4.760 (0.42), 4.788 (0.41), 5.208 (1.00), 7.554 (0.82), 7.575 (1.47), 7.595 (0.79), 8.044 (2.15), 8.076 (2.10), 8.861 (3.89), 10.720 (1.28), 10.746 (1.21)。
實例 219
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(100 mg，228 µmol)裝入1.0 ml DMF中，添加HATU (95.2 mg，250 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(160 µl，910 µmol)，且添加(2R)-1,1,1-三氟丙-2-胺(25 µl，250 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA的乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。由此獲得74 mg目標化合物(60%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.89 min; MS (ESIpos): m/z = 535 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (3.06), 0.008 (2.77), 1.365 (15.90), 1.383 (16.00), 2.328 (0.77), 2.366 (0.83), 2.670 (0.83), 2.710 (0.77), 3.068 (0.77), 3.690 (0.81), 3.899 (1.79), 4.009 (1.19), 4.861 (1.19), 4.881 (1.83), 4.902 (1.85), 4.921 (1.15), 4.939 (0.42), 5.196 (3.96), 7.556 (3.94), 7.578 (7.04), 7.599 (3.87), 7.988 (7.81), 8.020 (7.73), 8.837 (13.58), 10.382 (5.10), 10.405 (4.90)。
實例 220
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(2,2,2-三氟乙基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(80.0 mg，182 µmol)裝入1.4 ml DMF中，添加HATU (83.1 mg，219 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(140 µl，820 µmol)，且添加2,2,2-三氟乙胺(21.6 mg，219 µmol)。在室溫下攪拌反應混合物2小時。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。殘餘物藉由厚層層析(移動相：二氯甲烷/甲醇=10/1)純化。由此獲得34 mg目標化合物(35%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法1): R
t
= 0.83 min; MS (ESIpos): m/z = 521 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2.074 (1.03), 2.328 (0.64), 2.367 (0.59), 2.670 (0.55), 2.711 (0.56), 3.058 (0.83), 3.677 (0.89), 3.902 (1.78), 4.192 (1.23), 4.217 (3.82), 4.233 (4.22), 4.241 (3.96), 4.257 (3.78), 4.282 (1.17), 5.196 (5.02), 7.556 (3.74), 7.578 (6.60), 7.599 (3.65), 7.995 (8.81), 8.026 (8.46), 8.838 (16.00), 10.299 (2.67), 10.316 (5.50), 10.332 (2.37)。
實例 221
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(2,2,2-三氟乙基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)
首先將1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(滯轉異構體混合物) (326 mg，715 µmol)裝入3.1 ml DMF中，添加HATU (299 mg，787 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(500 µl，2.9 mmol)，且添加2,2,2-三氟乙胺(62 µl，790 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液3天。添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化反應溶液。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。由此獲得200 mg目標化合物(49%理論值，純度95%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.59 min; MS (ESIpos): m/z = 537 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.90), 0.008 (1.89), 2.073 (6.60), 2.328 (0.43), 2.366 (0.46), 2.670 (0.51), 2.710 (0.49), 3.014 (0.51), 3.228 (0.52), 3.692 (0.57), 3.897 (1.15), 4.011 (0.80), 4.192 (0.87), 4.216 (2.57), 4.233 (2.83), 4.241 (2.64), 4.257 (2.58), 4.282 (0.79), 5.196 (3.43), 5.754 (16.00), 7.685 (0.54), 7.692 (0.86), 7.702 (0.91), 7.708 (0.98), 7.716 (1.72), 7.725 (1.81), 7.731 (1.85), 7.738 (2.30), 7.748 (2.06), 7.762 (1.52), 7.998 (5.32), 8.030 (5.29), 8.788 (10.64), 10.315 (1.72), 10.331 (3.64), 10.347 (1.65)。
實例 222
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(2,2,2-三氟乙基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IA, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：75%正庚烷/25%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：40℃，偵測：220 nm)將197 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(2,2,2-三氟乙基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體1：84 mg (立體化學純度99%) R
t
= 10.527 min [分析型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IA, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相80%正庚烷/20%異丙醇 + 0.2% DEA；偵測：235 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.59 min; MS (ESIpos): m/z = 537 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.86), 0.008 (0.79), 2.073 (16.00), 2.328 (0.48), 2.670 (0.47), 3.896 (0.71), 4.192 (0.56), 4.216 (1.54), 4.233 (1.68), 4.241 (1.55), 4.257 (1.50), 4.282 (0.44), 5.195 (1.82), 7.685 (0.64), 7.691 (0.96), 7.708 (1.10), 7.715 (1.58), 7.738 (2.03), 7.763 (1.24), 7.999 (3.81), 8.030 (3.71), 8.788 (8.47), 10.315 (1.09), 10.332 (2.20), 10.348 (0.96)。
實例 223
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(2,2,2-三氟乙基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IA, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：75%正庚烷/25%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：40℃，偵測：220 nm)將197 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-(2,2,2-三氟乙基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體2：84 mg (立體化學純度99%) R
t
= 13.695 min [分析型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IA, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：80%正庚烷/20%異丙醇 + 0.2% DEA；偵測：235 nm]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.59 min; MS (ESIpos): m/z = 537 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (0.69), 2.073 (16.00), 2.328 (0.42), 2.670 (0.40), 3.902 (0.66), 4.192 (0.49), 4.216 (1.51), 4.233 (1.61), 4.241 (1.49), 4.257 (1.48), 4.281 (0.45), 5.196 (2.26), 7.695 (0.64), 7.702 (0.93), 7.717 (0.95), 7.725 (2.09), 7.730 (1.75), 7.740 (1.30), 7.751 (1.78), 7.761 (0.81), 7.998 (3.70), 8.030 (3.57), 8.789 (8.25), 10.315 (1.05), 10.331 (2.13), 10.347 (0.95)。
實例 224
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)
首先將1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(滯轉異構體混合物) (200 mg, 439 µmol)裝入1.9 ml DMF中，添加HATU (184 mg，483 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(310 µl，1.8 mmol)，且添加(2S)-1,1,1-三氟丙-2-胺(48 µl，480 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。添加水且簡單地攪拌反應溶液。濾出沈澱之固體且在高度真空下乾燥。由此獲得240 mg目標化合物(97%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.72 min; MS (ESIpos): m/z = 551 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.936 (16.00), 0.951 (15.00), 1.364 (9.71), 1.370 (9.62), 1.382 (9.80), 2.327 (1.73), 2.366 (1.96), 2.409 (2.10), 2.669 (1.69), 2.690 (5.70), 2.710 (1.60), 2.961 (1.78), 3.889 (1.73), 4.880 (2.05), 5.196 (4.88), 7.715 (2.23), 7.749 (3.69), 7.993 (7.79), 8.025 (7.52), 8.790 (11.94), 10.401 (4.06), 10.425 (4.33)。
實例 225
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel® Chiralcel OX-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：75%正庚烷/25%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：45℃，偵測：220 nm)將238 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體1：82 mg (立體化學純度＞99%) R
t
= 5.024 min [分析型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak OX-H, 1 ml/min；5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：75%異己烷/25% 2-丙醇；偵測：220 nm；30℃]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.71 min; MS (ESIpos): m/z = 551 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.60), 0.008 (2.07), 1.365 (15.87), 1.382 (16.00), 2.328 (0.50), 2.670 (0.58), 2.710 (0.44), 3.008 (0.82), 3.226 (0.85), 3.685 (0.85), 3.897 (1.62), 4.007 (1.21), 4.842 (0.45), 4.861 (1.19), 4.880 (1.79), 4.901 (1.84), 4.920 (1.18), 4.939 (0.42), 5.196 (4.26), 7.684 (1.46), 7.691 (2.04), 7.707 (2.51), 7.714 (3.53), 7.730 (1.57), 7.738 (4.02), 7.749 (2.24), 7.765 (2.80), 7.771 (1.97), 7.994 (7.83), 8.026 (7.66), 8.790 (15.94), 10.404 (5.16), 10.427 (4.94)。
實例 226
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel® Chiralcel OX-H, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：75%正庚烷/25%異丙醇；流動速率15 ml/min；溫度：45℃，偵測：220 nm)將238 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2S)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體2：97 mg (立體化學純度＞99%) R
t
= 5.970 min [分析型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak OX-H, 1 ml/min；5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：75%異己烷/25% 2-丙醇；偵測：220 nm；30℃]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.72 min; MS (ESIpos): m/z = 551 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.15), 0.008 (1.11), 1.371 (15.90), 1.388 (16.00), 3.040 (0.78), 3.214 (0.79), 3.687 (0.79), 3.892 (1.56), 4.007 (1.16), 4.842 (0.43), 4.861 (1.15), 4.881 (1.74), 4.901 (1.80), 4.920 (1.14), 4.938 (0.40), 5.197 (5.26), 7.696 (1.32), 7.703 (2.00), 7.719 (2.02), 7.726 (5.20), 7.740 (2.37), 7.750 (4.75), 7.761 (1.73), 7.993 (7.49), 8.025 (7.38), 8.788 (14.24), 10.401 (5.13), 10.425 (4.92)。
實例 227
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)
首先將1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(滯轉異構體混合物) (200 mg，439 µmol)裝入1.9 ml DMF中，添加HATU (184 mg，483 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(310 µl，1.8 mmol)，且添加(2R)-1,1,1-三氟丙-2-胺(48 µl，480 µmol)。在室溫下攪拌反應溶液隔夜。添加水且簡單地攪拌反應溶液。濾出沈澱之固體且在高度真空下乾燥。由此獲得237 mg目標化合物(96%理論值，純度98%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.72 min; MS (ESIpos): m/z = 551 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0.936 (16.00), 0.951 (14.58), 1.369 (6.83), 1.382 (6.68), 2.327 (0.76), 2.366 (0.73), 2.410 (2.10), 2.427 (2.17), 2.671 (0.62), 2.690 (1.63), 2.709 (0.51), 2.945 (1.23), 2.961 (1.57), 2.978 (1.45), 3.695 (0.70), 3.897 (1.41), 4.861 (0.87), 4.880 (1.32), 4.899 (1.29), 5.194 (3.33), 7.717 (1.99), 7.741 (2.83), 7.992 (3.63), 8.024 (3.64), 8.788 (6.15), 10.401 (2.85), 10.424 (2.73)。
實例 228
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體1) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IE, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%乙醇；流動速率15 ml/min；溫度：40℃，偵測：220 nm)將235 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體1:89.4 mg (立體化學純度＞99%) R
t
= 6.076 min [分析型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IE, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/20%乙醇；偵測：220 nm；溫度：30℃]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.73 min; MS (ESIpos): m/z = 551 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.70), 0.008 (1.45), 1.364 (14.98), 1.382 (15.05), 2.328 (0.41), 2.367 (0.45), 2.690 (1.41), 2.711 (0.46), 3.032 (0.73), 3.212 (0.75), 3.686 (0.73), 3.899 (1.50), 4.005 (1.04), 4.842 (0.41), 4.861 (1.09), 4.880 (1.66), 4.900 (1.68), 4.920 (1.05), 5.196 (4.33), 7.694 (1.34), 7.701 (2.01), 7.717 (2.15), 7.724 (4.15), 7.731 (3.32), 7.741 (2.73), 7.747 (3.08), 7.753 (3.30), 7.763 (1.74), 7.993 (7.70), 8.024 (7.55), 8.790 (16.00), 10.402 (4.83), 10.425 (4.63)。
實例 229
1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體2) 藉由對掌性HPLC (製備型HPLC：管柱Daicel® Chiralpak IE, 5 µm, 250 × 20 mm；移動相：80%正庚烷/20%乙醇；流動速率15 ml/min；溫度：40℃，偵測：220 nm)將235 mg 1-(2-氯-4,6-二氟苯基)-7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(滯轉異構體混合物)分離成滯轉異構體。 滯轉異構體2：95.7 mg (立體化學純度＞99%) R
t
= 7.196 min [分析型HPLC: 管柱Daicel® Chiralpak IE, 1 ml/min; 5 µm, 250 × 4.6 mm；移動相：80%異己烷/ 20%乙醇；偵測：220 nm；溫度：30℃]。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.73 min; MS (ESIpos): m/z = 551 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.62), 0.008 (1.41), 1.244 (0.79), 1.258 (0.97), 1.272 (0.54), 1.370 (15.93), 1.388 (16.00), 2.366 (0.45), 2.710 (0.46), 3.012 (0.80), 3.240 (0.83), 3.692 (0.82), 3.892 (1.67), 4.008 (1.18), 4.842 (0.44), 4.861 (1.18), 4.880 (1.76), 4.901 (1.80), 4.920 (1.17), 4.938 (0.42), 5.196 (3.63), 7.686 (1.44), 7.693 (2.00), 7.709 (2.44), 7.716 (3.55), 7.740 (4.63), 7.748 (2.20), 7.758 (2.62), 7.762 (2.72), 7.769 (1.86), 7.993 (7.82), 8.024 (7.71), 8.788 (15.55), 10.401 (5.16), 10.424 (4.94)。
實例 230
7-[3,3-雙(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
首先將6-氟-N-(1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-基)-7-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(88.0 mg，99%純度，149 µmol)裝入930 µl乙腈中，添加930 µl水及930 µl三氟乙酸，且在室溫下攪拌混合物18小時。藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化混合物。在減壓下濃縮產物溶離份且將殘餘物溶解於極少二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌三次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。由此獲得56.0 mg目標化合物(62%理論值，純度100%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.95 min; MS (ESIpos): m/z = 603 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.90), -0.008 (7.60), 0.008 (7.41), 0.146 (0.92), 1.157 (0.56), 1.175 (1.07), 1.193 (0.56), 1.989 (1.96), 2.328 (0.67), 2.367 (0.42), 2.671 (0.73), 2.711 (0.44), 3.475 (15.50), 3.489 (16.00), 4.021 (0.69), 4.039 (0.67), 4.142 (1.21), 4.842 (5.05), 4.855 (11.74), 4.868 (4.99), 6.294 (0.86), 6.312 (1.25), 6.336 (1.32), 6.354 (0.84), 7.546 (3.66), 7.568 (6.71), 7.590 (3.68), 7.991 (6.48), 8.020 (6.43), 8.945 (11.99), 11.295 (4.16), 11.320 (4.05)。
實例 231
N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-7-(吡咯啶-1-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺
根據GP3，使80.0 mg (162 µmol) 7-氯-N-[(1S)-1-環丙基-2,2,2-三氟乙基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺與27 µl (320 µmol)吡咯啶及110 µl (650 µmol) N,N-二異丙基乙胺在1.0 ml二甲基甲醯胺中反應。粗產物用極少乙腈稀釋且藉由製備型HPLC (管柱：乙腈/水/0.1%甲酸)純化。由此獲得51.1 mg (59%理論值，約96%純)標題化合物。 LC-MS (方法5): R
t
= 1.66 min; MS (ESIpos): m/z = 529 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.42), 0.146 (0.41), 0.319 (1.90), 0.329 (3.08), 0.342 (3.03), 0.353 (2.43), 0.365 (1.16), 0.500 (0.75), 0.512 (2.08), 0.523 (3.11), 0.536 (2.78), 0.547 (3.13), 0.555 (2.37), 0.566 (3.17), 0.576 (2.59), 0.587 (2.34), 0.597 (1.95), 0.611 (1.18), 0.626 (1.63), 0.636 (1.55), 0.647 (2.81), 0.657 (2.44), 0.663 (2.34), 0.670 (2.33), 0.682 (1.12), 0.691 (0.77), 1.166 (0.55), 1.178 (1.16), 1.187 (1.72), 1.198 (2.98), 1.208 (2.16), 1.219 (2.96), 1.231 (1.96), 1.239 (1.14), 1.252 (0.47), 1.840 (8.25), 2.329 (0.52), 2.671 (0.59), 4.334 (0.42), 4.353 (1.62), 4.374 (2.83), 4.396 (2.79), 4.416 (1.47), 7.536 (5.42), 7.558 (10.40), 7.580 (5.46), 7.975 (7.58), 8.007 (7.54), 8.821 (16.00), 10.476 (6.10), 10.500 (5.89)。
實例 232
6-溴-7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)
在室溫下，將3.47 g (19.5 mmol) 1-溴吡咯啶-2,5-二酮(NBS)及41.0 mg (250 µmol) 2,2'-(E)-二氮烯-1,2-二基雙(2-甲基丙腈) (AIBN)添加到4.99 g (9.07 mmol) 7-[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純)於120 ml乙腈中之溶液中。在60℃下攪拌混合物50分鐘。冷卻反應混合物，藉由蒸發濃縮到其初始體積的一半且倒入水及二氯甲烷上。分離各相且用DCM萃取水相兩次。經合併之有機相經飽和氯化鈉溶液洗滌一次、經硫酸鈉乾燥且濃縮。藉由正相層析法(環己烷/乙酸乙酯梯度)純化粗產物。由此得到2.75 g (48%理論值，100%純)標題化合物。 LC-MS (方法1): R
t
= 1.22 min; MS (ESIpos): m/z = 629 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (2.11), 0.008 (1.87), 1.386 (9.88), 1.403 (10.35), 1.793 (1.40), 1.849 (1.45), 1.861 (0.98), 1.872 (1.33), 2.074 (0.47), 2.328 (0.74), 2.670 (0.92), 3.461 (1.15), 3.580 (1.46), 4.271 (2.45), 4.980 (3.99), 4.987 (4.14), 5.029 (1.16), 5.052 (0.98), 7.550 (3.37), 7.573 (5.83), 7.594 (3.28), 8.456 (16.00), 8.871 (12.06), 10.322 (4.09), 10.346 (4.07)。
實例 233
7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-N-[3-甲基-1-(三氟甲氧基)丁-2-基]-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
首先將7-[(3R,4R)-3,4-二羥基吡咯啶-1-基]-6-氟-4-側氧基-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲酸(75.0 mg，171 µmol)裝入1.3 ml DMF中，添加HATU (77.9 mg，205 µmol)及N,N-二異丙基乙胺(130 µl，770 µmol)，且添加3-甲基-1-(三氟甲氧基)丁-2-胺鹽酸鹽(外消旋) (42.5 mg，205 µmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。添加乙酸乙酯且反應溶液用水萃取三次，且經合併之水相用乙酸乙酯重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。向殘餘物添加乙腈/水/TFA且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化混合物。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。由此獲得68.6 mg目標化合物(66%理論值，純度97%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.91 min; MS (ESIpos): m/z = 593 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.008 (1.44), 0.008 (1.38), 0.960 (15.75), 0.977 (16.00), 1.939 (0.91), 1.956 (1.47), 1.973 (1.41), 1.989 (0.85), 2.328 (0.46), 2.524 (1.29), 2.670 (0.53), 3.073 (0.42), 3.679 (0.45), 3.915 (0.96), 4.115 (0.89), 4.128 (1.21), 4.146 (2.56), 4.170 (3.20), 4.181 (1.89), 4.200 (2.19), 4.214 (2.11), 4.225 (1.36), 4.239 (0.74), 5.196 (2.32), 7.553 (1.98), 7.575 (3.41), 7.596 (1.90), 8.014 (4.52), 8.045 (4.46), 8.768 (7.51), 10.088 (2.55), 10.109 (2.43)。
實例 234
6-氟-7-(3-甲基-2,4-二側氧基-1,3,7-三氮雜螺[4.4]壬-7-基)-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺 (非對映異構體混合物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純) (30.0 mg，57.9 µmol)裝入0.32 ml DMF中。添加3-甲基-1,3,7-三氮螺[4.4]壬烷-2,4-二酮鹽酸鹽(外消旋) (14.3 mg，69.5 µmol)，添加N,N-二異丙基乙胺 (50 µl，290 µmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。反應溶液用乙腈/水/TFA稀釋且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。由此獲得35 mg目標化合物(90%理論值，純度97%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 2.01 min; MS (ESIpos): m/z = 651 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.149 (0.51), -0.008 (4.35), 0.146 (0.48), 1.387 (4.65), 1.404 (4.66), 2.054 (0.50), 2.247 (0.51), 2.328 (0.89), 2.670 (0.90), 2.839 (16.00), 4.989 (0.42), 5.012 (0.48), 5.030 (0.50), 5.053 (0.42), 5.754 (2.25), 7.540 (1.30), 7.562 (2.34), 7.583 (1.26), 8.057 (2.81), 8.089 (2.79), 8.645 (3.24), 8.862 (4.26), 10.407 (2.00), 10.431 (1.94)。
實例 235
7-(2,4-二側氧基-1,3,7-三氮雜螺[4.4]壬-7-基)-6-氟-4-側氧基-N-[3,3,4,4,4-五氟丁-2-基]-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(非對映異構體混合物)
首先將7-氯-6-氟-4-側氧基-N-(3,3,4,4,4-五氟丁-2-基)-1-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-甲醯胺(對映異構純) (75.0 mg，145 µmol)裝入0.79 ml DMF中。添加1,3,7-三氮螺[4.4]壬烷-2,4-二酮鹽酸鹽(外消旋) (33.3 mg，174 µmol)，添加N,N-二異丙基乙胺(130 µl，720 µmol)且在室溫下攪拌混合物2天。反應溶液用乙腈/水/TFA稀釋且藉由製備型HPLC (RP18管柱，移動相：添加0.1% TFA之乙腈/水梯度)純化。藉由蒸發來濃縮經合併之產物溶離份。將殘餘物溶解於二氯甲烷中且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。經合併之水相用二氯甲烷重新萃取兩次。經合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且藉由蒸發來濃縮。由此獲得81 mg目標化合物(87%理論值，純度99%)。 LC-MS (方法3): R
t
= 1.88 min; MS (ESIpos): m/z = 637 [M+H]
+
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0.064 (0.65), -0.008 (2.78), 0.008 (2.31), 1.235 (0.44), 1.387 (14.93), 1.404 (14.88), 2.063 (1.52), 2.236 (1.54), 2.324 (0.96), 2.328 (1.26), 2.367 (0.89), 2.523 (2.50), 2.670 (1.12), 2.675 (0.84), 2.710 (0.77), 3.589 (0.68), 4.967 (0.72), 4.989 (1.28), 5.012 (1.52), 5.031 (1.56), 5.056 (1.26), 5.075 (0.68), 7.545 (5.71), 7.567 (10.68), 7.589 (5.69), 8.053 (9.66), 8.085 (9.42), 8.390 (11.36), 8.865 (16.00), 10.409 (6.74), 10.433 (6.48), 10.876 (9.42)。
B. 評定藥理學功效
本發明化合物之藥理學活性可藉由熟習此項技術者已知的活體外及活體內研究證實。以下應用實例描述本發明化合物之生物學動作，但本發明不限於此等實例。
縮寫及首字母縮寫詞： B-1. 功能性 M2-GIRK1/4 活化測試
M2受體經單獨之正構促效劑活化及藉由正向別構調節劑(PAM)之正構誘導活化之別構強化可藉助於基於細胞之功能性GIRK1/4活性測試來測定。正構促效劑(內源性配位體：乙醯膽鹼)與M2受體之結合以有利於活性受體構形之平衡中的位移的方式導致受體活化或受體之構形變化。正構促效劑與M2受體之結合及因此其活化可由正向別構調節劑強化，正向別構調節劑不結合至促效劑之正構結合位點而是結合於獨立別構結合位點。 M2受體之構形中的促效劑誘發之改變導致Gαi蛋白質活化。Gα子單元之活化繼而導致解離且因此自Gα子單元釋放Gβγ子單元及獨立下游信號轉導級聯之活化。所釋放之雜二聚Gβγ複合物結合於GIRK1/4鉀通道且誘導配位體控制之通道活化或開放(Reuveny等人,
Nature
,
1994
年7月,
370
, 143-146)。在生理學條件下，結果則為鉀沿電化學梯度自細胞選擇性流出。正電荷之輸出導致跨膜電位降低且因此導致細胞超極化。超極化程度因此可視為M2受體活化之量度。 所用之測試細胞為重組CHO-DUKX細胞株，其已用編碼人類M2受體之cDNA及編碼GIRK1/4子單元之cDNA穩定轉染(CHO-DUKX-M2-GIRK)。跨膜電位或跨膜電位隨物質添加或M2活化之相對改變藉助於電壓敏感性染料(FLIPR Membrane Potential Assay Kit Blue，Molecular Devices # R8034)及使用專用螢光成像儀的細胞螢光量測來測定。
B-1.1. 測定測試物質之別構效能 (EC50 值 )
將測試物質以10 mM的濃度溶解於二甲亞碸(DMSO)中且針對10點劑量/活性分析以1:3.16之梯級用DMSO連續稀釋。根據所需測試濃度，將物質預先稀釋於加樣緩衝液(組成：0.6 ml FLIPR薄膜電位分析法套組藍(FLIPR Membrane Potential Assay Kit Blue) (10 mg/ml)、0.6 ml Brilliant Black (10 mg/ml)、2 mM CaCl
2
及2 mM KCl補足至50 ml.葡糖酸鈉台氏液(PAA, #T21-155))中。 將在MEM α培養基(補充有10% FCS、2% Glutamax、1 mg/ml慶大黴素(genticin))中培育之報導體細胞與2000個細胞(48小時之後量測)或4000個細胞(24小時之後量測)一起播種於µCLEAR/黑色格雷內爾細胞培養盤(black Greiner cell culture plate) (#781092)中每384孔的30 µl中且在37℃下培育24小時或48小時。播種培養基由MEM α培養基(補充有5% FCS、2% Glutamax，無慶大黴素)組成。 對於特定量測，移除培養基且在室溫下使細胞滿載電壓敏感性染料持續至少6分鐘(每384孔30 µl加樣緩衝液)。在第一量測中，此後測定靜止跨膜電位之螢光持續5秒時間段。此後，添加各情況下10 µl稀釋於加樣緩衝液中之測試物質，隨後以1秒增量進行第二量測以測定跨膜電位持續50秒時間段。最終，細胞與10 µl促效劑溶液(溶解於加樣緩衝液中之乙醯膽鹼)摻合。使用對應於EC
20
之濃度的乙醯膽鹼，EC
20
已在初步測試中測定。接著在第三量測中經60秒時間段監測M2介導之GIRK1/4活化或超極化。藉助於4參數對數功能(Hill功能)測定EC
50
值(測試化合物之別構效能之程度)及效率(在EC
20
乙醯膽鹼濃度下強化乙醯膽鹼作用之量度)。
B-1.2. 測定 正協同性 ( α 因子 )
將測試物質以10 mM濃度溶解於DMSO中且針對10點劑量/活性分析用DMSO以1:3.16梯級連續稀釋。根據所需測試濃度，物質預先稀釋於加樣緩衝液中(參見上文)。 將在MEM α培養基(補充有10% FCS、2% Glutamax、1 mg/ml慶大黴素(genticin))中培育之報導體細胞與2000個細胞(48小時之後量測)或4000個細胞(24小時之後量測)一起播種於µCLEAR/黑色格雷內爾細胞培養盤(black Greiner cell culture plate) (#781092)中的每384孔30 µl中且在37℃下培育24小時或48小時。播種培養基由MEM α培養基(補充有5% FCS、2% Glutamax，無慶大黴素)組成。 對於特定量測，移除培養基且在室溫下使細胞滿載電壓敏感性染料持續至少6分鐘(每384孔30 µl加樣緩衝液)。在第一量測中，此後以1秒增量測定靜止跨膜電位持續5秒時間段。此後，添加各情況下10 µl稀釋於加樣緩衝液中之測試物質，隨後以1秒增量進行第二量測以測定跨膜電位持續50秒時間段。 最終，細胞與10 µl促效劑溶液(溶解於加樣緩衝液中之乙醯膽鹼)摻合。然而與測試物質之EC
50
(參見B-1.1)測定相比，此並非使用一種乙醯膽鹼濃度實現；實際上，每種濃度之測試物質與乙醯膽鹼8點劑量-反應曲線組合。對於乙醯膽鹼連續稀釋，促效劑根據所需最終濃度在加樣緩衝液中連續預稀釋，使用梯級1:3.16以最大最終濃度3 µM開始。M2介導之GIRK1/4活化或超極化接著在第三量測中以1秒增量經60秒時間段監測。分析在增加濃度之測試物質存在下乙醯膽鹼劑量-反應曲線中之位移且藉助於GraphPad PRISM定量(別構EC
50
位移)。測定之α因子係別構作用之強度及方向的量度。α值＞ 1反映在別構物存在下EC
50
值之降低或促效劑(乙醯膽鹼)效能提高，且意謂正構物(乙醯膽鹼)與別構物(測試物質)之間的正協同性。正協同性為正向別構調節劑之特點。相對而言，α值＜1指示正構物與別構物之間的負協同性，且因此表徵負向別構調節劑。α值 = 1意謂正構與別構之間不存在協同性，意謂正構及別構對受體之結合親和力彼此不影響。α值之量值越大，正構與別構之間的協同程度越高。 針對個別工作實例，下表1列舉EC
50
及因此來自此分析之測得之效率值及α值(在一些情況下，為兩個或更多個個別測定之平均值)：
表 1 B-2. 藉助於 M2-G α 16 報導體細胞之功能性 Ca2+ 釋放測試
測試物質對M2受體的任何潛在地促效或潛在地別構作用可藉由功能性Ca
2+
釋放測試來測定。藉由結合正構促效劑(乙醯膽鹼)或具有促效作用之其他物質的M2受體之活化導致受體的構形變化，受體在內源性狀態時導致Gαi蛋白質活化。然而，M2受體與外源表現之混雜Gαq蛋白質Gα16偶合導致在M2受體活化之後的Gα16蛋白質活化，此經下游信號轉導級聯引起胞內Ca
2+
釋放。胞內Ca
2+
移動程度因此可視為M2受體活化之量度。 所用測試細胞為重組CHO細胞株，其已用編碼人類M2受體及Gα16蛋白質之cDNA及編碼線粒體表現之光蛋白clytin (mtClytin)的cDNA穩定轉染(CHO mtClytin Gα16 M2)。隨著物質添加或M2活化而變化之胞內Ca
2+
釋放的測定係藉助於Ca
2+
敏感性染料(Fluo-8)及使用FLIPR
TETRA
儀器(Molecular Devices)之細胞螢光量測來實現。
B-2.1. 促效作用分析法
將測試物質以10 mM濃度溶解於DMSO中且針對10點劑量/活性分析用DMSO以1:3.16梯級連續稀釋。根據所需測試濃度，物質在Fluo-8緩衝液(每100 ml之組成：500 µl丙磺舒、2 ml Brilliant Black (20 mg/ml)、440 µl Fluo-8、2 mM CaCl
2
補足至100 ml CAFTY台氏液(130 mM NaCl、5 mM KCl、20 mM HEPES、1 mM MgCl
2
、5 mM NaHCO
3
，pH 7.4))中預先稀釋。 將在MEM α培養基(補充有10% FCS、2% Glutamax)中培育之報導體細胞與3000個細胞一起播種於µCLEAR/黑色格雷內爾細胞培養盤(black Greiner cell culture plate) (#781092)中每384孔30 µl播種培養基中且在37℃下培育24小時。播種培養基由MEM α培養基(補充有5% FCS、2% Glutamax)組成。對於各別量測，移除培養基且在各情況下每384孔添加20 µl Fluo-8緩衝液之後，在37℃下在培育箱中培育細胞1小時。在各情況下每384孔添加10 µl預稀釋之測試物質之後，以1秒增量量測細胞螢光持續5分鐘時間段。M2受體經各別測試物質相對最大活化程度藉由根據對應於乙醯膽鹼之E
Max
濃度(3 µM)標準化測試信號來計算。
B-2.2. 測定正向別構調節劑作用
為了能夠測定測試物質相對於乙醯膽鹼介導之M2受體活化的正協同性，接著添加參考促效劑(乙醯膽鹼)進行完全劑量反應分析。為此目的，乙醯膽鹼以梯級1:3.16以1 µM最大最終濃度開始在Fluo-8緩衝液中連續稀釋。在各情況下每384孔添加10 µl促效劑溶液之後，再次以1秒增量量測細胞螢光持續5分鐘時間段。使用與剛才M2促效作用分析法相同之分析培養盤。分析在增加濃度之測試物質存在下乙醯膽鹼劑量-反應曲線中之位移且藉助於GraphPad PRISM定量(別構EC
50
位移)(參見上文)。
B-3. 關於人類蕈毒鹼乙醯膽鹼受體之選擇性測試
測試物質對其他人類蕈毒鹼乙醯膽鹼受體之任何潛在地促效作用或正向別構作用可在功能性Ca
2+
釋放測試(Eurofins；針對Mx受體之促效及別構模式的GPCRProfiler® Services；目錄號：HTS600GPCR)中測定。 所用測試細胞為用特定受體(ChemiScreen™ M1鈣最佳化之FLIPR細胞株，Eurofins；M1：HTS044C；ChemiScreen™鈣最佳化之穩定細胞株人類重組M2蕈毒鹼乙醯膽鹼受體，Eurofins；M2：HTS115C；ChemiScreen™人類重組M3蕈毒鹼乙醯膽鹼受體鈣最佳化之穩定細胞株，Eurofins；M3：HTS116C；ChemiScreen™人類重組M4蕈毒鹼乙醯膽鹼受體鈣最佳化之穩定細胞株，Eurofins；M4：HTS117C；ChemiScreen™ M5鈣最佳化之FLIPR細胞株，Eurofins；M5：HTS075C)轉染之Chem-1或Chem-4細胞株。使用FLIPR
TETRA
儀器(Molecular Devices)進行物質測試。
B-3.1. 促效作用分析法
為了測定測試物質之任何潛在促效作用，以最終測試濃度10 µM或1 µM添加各別測試物質。經180秒時間段量測Ca
2+
釋放或細胞螢光。用於根據受體活化標準化物質作用之陽性對照為對應於E
Max
值的乙醯膽鹼之濃度。 在促效作用分析法已結束之後，在25℃下培育分析培養盤7分鐘。培育期之後，啟動正向別構調節劑分析法。
B-3.2. 別構調節劑分析法
為了檢驗測試物質對其他人類蕈毒鹼乙醯膽鹼受體及M2受體本身之任何正或負別構作用，將每一個物質濃度與乙醯膽鹼8點劑量-反應曲線組合。繼而藉由量測細胞螢光持續180秒時間段再次追蹤促效劑溶液之添加。乙醯膽鹼劑量-反應曲線中的位移(乙醯膽鹼之EC
50
中的最大位移)藉助於GraphPad PRISM (S形劑量-反應(可變斜率) - EC
50
)分析及定量。最終，形成M2受體及M4受體之別構位移的商，其繼而用作各別選擇性之量度。
B-4. 活體外 M2 PAM Gi 分析法
為了表徵測試物質對人類M2受體之正向別構調節，對重組M2受體表達CHO細胞中毛喉素引起的cAMP升高的碳醯膽鹼誘導之抑制進行量測，此等在cAMP反應元件(CRE)控制下額外表達螢光素酶基因：在384孔多滴定培養盤(Greiner, TC Platte, 具有透明底部之黑色)之每孔中播種25 µl完全培養基(DMEM F12 PAN培養基、10% FCS、1.35 mM丙酮酸鈉、20 mM Hepes、4 mM Glutamax、2%碳酸氫鈉、1% Pen/Strep、1% 100x非必需氨基酸)中的3000個細胞且在37℃，5% CO
2
下培育24小時。在量測之前，培養基換成30 µl測試培養基(Optimem)且在37℃，5% CO
2
下培育10分鐘。根據劑量-反應曲線在DMSO中以多種濃度(起始濃度10 mM，稀釋係數3.16)製備測試物質且用無鈣台氏液、2 mM CaCl
2
、0.01% BSA 1:50倍預先稀釋。向細胞添加10 µl預先稀釋的物質溶液且在37℃，5% CO
2
下培育10分鐘。M2受體藉由添加10 µl在無鈣台氏液中多種濃度之碳醯膽鹼、2 mM CaCl
2
活化且在37℃，5% CO
2
下培育5分鐘。腺苷酸環化酶藉由添加10 µl在無鈣台氏液中的1 µM (最終濃度)毛喉素、2 mM CaCl
2
活化且在37℃，5% CO
2
下培育5個小時。在移除細胞上清液且添加20 µl Luci/Triton緩衝液(1:1)之後，在光度計中測定發光60秒。 無鈣台氏液：130 mM NaCl，5 mM KCl，20 mM HEPES，1 mM MgCl
2
，4.8 mM NaHCO
3
，pH 7.4 Luci/Triton緩衝液(1:1)：Luci緩衝液(20 mM麥黃酮，pH 7.8、2.67 mM硫酸鎂、0.1 mM EDTA、4 mM DTT、270 µM 輔酶A、470 µM D-螢光素、530 µM ATP)與triton緩衝液(25 mM Tris鹽酸水溶液，pH 7.8、25 mM Na
2
HPO
4
、2 mM二硫蘇糖醇、3% Triton X-100、10%丙三醇) 1:1混合。 藉助於4參數邏輯函數(希爾函數(Hill function))測定EC
50
值。
B-5. 人類 M2 及 M4 受體的競爭性 FRET 結合測試
藉助於基於FRET的結合分析(HTRF Tag-lite®結合分析法，Cisbio)測定測試物質與M2受體的直接結合以及在測試物質存在下天然促效劑乙醯膽鹼與M2受體的結合強化(提高親和力)(正向別構作用)。對於選擇性對照，類似地檢驗測試物質與結構上相關之M4受體的結合。HTRF Tag-lite®分析法為均質結合分析法且係基於螢光配位體(探針)及未經標記之測試物質與活細胞中表達之受體的競爭性結合。受體繼而經螢光供體染料(鋱穴狀化合物)衍生化，使得當探針與受體結合時供體染料之激發導致受體與探針(接受體)之間的FRET信號。所用之接受體探針為與HTRF螢光染料結合(紅色配位體；L0040RED)之替侖西平衍生物。探針因此結合M2及M4受體之保守正構結合位點。M2受體之別構結合位點已藉由x射線晶體分析法表徵且假設為在正構結合袋之正上方(Kruse等人,
Nature
,
2013
,
504
, 101-106)。未經標記之正構促效劑(乙醯膽鹼)與正構結合位點之結合及別構調節劑(測試物質)與別構結合位點之結合因此導致探針的濃度依賴性競爭替代且因此導致基於FRET之螢光信號降低。 全部結合測試均在384孔白色微量滴定盤(小體積)上以20 µl總體積進行。使用PHERAstar儀器(BMG Labtech)進行HTRF量測。對於蕈毒鹼M2或M4受體結合測試，使用已經供體螢光團(Lumi4Tb；CELLCUST)標記之SNAPed-M2表達細胞(C1TT1M2)或SNAPed-M4表達細胞(C1TT1M4)。細胞與接受體探針一起在物質或乙醯膽鹼存在下在Tag-lite結合緩衝液(LABMED)中培育。隨後，在665 nm及620 nm波長下量測螢光信號且測定HTRF商(665 nm處之信號/620 nm處之信號)。相對特異性信號藉由減去陰性對照(僅不具有探針之Tag-lite緩衝液)之HTRF商來測定。
B-5.1. 測試物質之結合
為了測定在無正構促效劑存在下測試物質與M2或M4受體之結合，在競爭性型式之M2-Tag-lite®或M4-Tag-lite®結合分析法中進行測試物質之劑量反應分析。將測試物質以10 mM濃度溶解於DMSO中且針對劑量反應分析用DMSO以1:3.16梯級連續稀釋。最大測試濃度對應於10 µM。相對於最高物質濃度下之最大及剩餘HTRF信號產生HTRF信號的大約一半最大降低的測試物質之莫耳濃度(結合之EC
50
)藉助於GraphPad PRISM (S形劑量反應)測定。同時，競爭作用之強度藉由計算最高物質濃度下特異性HTRF信號中的最大降低來測定(最大競爭%)。
B-5.2. 別構模式之測試物質的結合
為了檢驗測試化合物對M2受體之別構調節，首先，在對應於EC
20
值之濃度的乙醯膽鹼存在下在競爭性型式之M2-Tag-lite®或M4-Tag-lite®結合分析中對測試物質進行劑量反應分析，該乙醯膽鹼之濃度在獨立11點乙醯膽鹼劑量反應分析中測定(3 µM)。將測試物質以10 mM之濃度溶解於DMSO中且針對10點劑量/活性分析用DMSO以梯級1:3.16連續稀釋。最大測試濃度對應於10 µM。在對應於EC
20
值之濃度的乙醯膽鹼存在下相對於最高物質濃度下之最大及剩餘HTRF信號引起HTRF信號的大約一半最大降低的測試物質之莫耳濃度(結合之EC
50
)藉助於GraphPad PRISM (S形劑量反應)測定。同時，競爭作用之強度藉由計算最高物質濃度下特異性HTRF信號中的最大降低來測定(最大競爭%)。 另外，為了檢驗乙醯膽鹼與M2或M4受體之結合的強化，其次，在有或無1 µM或10 µM測試物質存在下在競爭性型式之M2-Tag-lite®或M4-Tag-lite®結合分析中進行乙醯膽鹼之11點劑量反應分析。藉助於GraphPad PRISM (S形劑量反應)分析及定量乙醯膽鹼劑量-反應曲線中之位移(乙醯膽鹼之EC
50
值之最大位移)。
B-6. 人類 M2 受體之放射性配位體結合分析
測試物質之別構作用機制可進一步詳細研究且藉由多種放射性配位體結合分析定量。別構體與M2受體之別構結合位點的結合導致在正協同性情況下M2受體之正構配位體的結合親和力提高。由正構體、別構體及M2受體組成之三元複合物中的別構體引起的正構配位體之結合親和力提高又是由於正構體之結合動力學的調節引起。別構體可改變正構體在M2受體處之締合及/或解離速率。在此情形下，解離速率之降低反映三元複合物穩定且因此伴隨正構配位體在平衡條件下之解離常數降低(Lazareno, Determination of Allosteric Interactions Using Radioligand-Binding Techniques in
Methods in Molecular Biology
,
第 259 卷
, Receptor Signal Transduction Protocols, 第2版; Kostenis and Mohr,
Trends Pharmacol. Sci. 1996
,
17(8)
, 280-283)。
B-6.1. 平衡條件下之 3 H- 氧化震顫素 M 放射性配位體結合分析
為了檢驗及定量測試物質對正構促效劑針對M2受體之結合親和力的影響，可進行平衡條件下之放射性配位體結合分析。在此情形下，在結合平衡中在不同濃度之
3
H-氧化震顫素M下研究放射性標記之M2受體促效劑
3
H-氧化震顫素M與M2受體之結合(Croy等人,
Mol. Pharmacol. 2014
,
86
, 106-115)。基於隨促效劑濃度變化的特異性結合於M2受體之放射性促效劑的量(以圖形方式表示為所謂的朗格繆爾等溫線(Langmuir isotherm))，首先可計算促效劑之平衡解離常數K
d
作為其針對M2受體之結合親和力的定量量度，以及其次在無或有不同濃度之測試物質(正向別構調節劑)存在下的放射性配位體(促效劑)之特異性結合位點的濃度或數目B
max
(Hulme及Trevethick,
Brit. J. Pharmacol. 2010
,
161
, 1219-1237)。 M2受體(Euroscreen，FAST-0261B)之放射性配位體結合分析藉助於
3
H標記之氧化震顫素M (NET671)作為促效劑進行。在96孔微量滴定盤(Master Block，Greiner，786201)上在結合緩衝液(磷酸鈉/磷酸鉀緩衝液，pH 7.4)中一式三份地進行促效劑與M2受體之結合。為此目的，M2膜提取物之各分析(20 µg蛋白質/96孔)與單獨的多種濃度之放射性標記之促效劑(0.2-100 nM)或在1 µM或10 µM測試物質或單獨結合緩衝液存在下在37℃下以0.1 mL總體積一起培育60分鐘。
3
H標記之氧化震顫素M與膜之非特異性結合藉由與200倍過量之N-甲基莨菪胺(NMS)共同培育來測定，N-甲基莨菪胺為M2受體之正構拮抗劑。為了停止結合反應，樣品接著在室溫下經預先用0.5%聚乙烯亞胺(PEI)溶液潤濕之GF/C過濾器(Perkin Elmer，6005174)過濾2小時。過濾器各自用0.5 mL冰冷之洗滌緩衝液(10 mM磷酸鈉/磷酸鉀緩衝液，pH 7.4)洗滌六次且每次分析添加50 µL Microscint 20閃爍溶液(Packard)。樣品接著在定軌振盪器上培育15分鐘，隨後藉助於TopCount
TM
儀器(1 min/孔)量測放射性。 將測試物質以10 mM濃度溶解於DMSO中且在DMSO中對應於最終測試濃度進一步稀釋以便獲得結合緩衝液中所用之DMSO溶液的100倍稀釋液。
3
H-氧化震顫素M針對M2受體之K
d
及B
max
藉助於「單位點」特異性結合模型測定(Croy等人,
Mol. Pharmacol. 2014
,
86
, 106-115)。
B-6.2. 平衡條件下之 3 H-NMS 競爭性放射性配位體結合分析
為了進一步檢驗及定量測試物質對正構促效劑針對M2受體之結合親和力的影響，亦進行平衡條件下之競爭性放射性配位體結合分析。在此情形下，拮抗放射性配位體
3
H-N-甲基莨菪胺(
3
H-NMS)與M2受體之結合在無或有多種濃度之未放射性標記之促效劑氧化震顫素M存在下測定(Croy等人,
Mol. Pharmacol. 2014
,
86
, 106-115；Schober等人,
Mol. Pharmacol. 2014
,
86
, 116-123)。放射性標記之探針(拮抗劑)及未標記之促效劑競爭結合於M2受體之正構結合位點。替換放射性標記之探針的能力因此用作促效劑針對受體之結合親和力的量度且可根據Cheng-Prusoff等式作為平衡抑制常數(K
i
)定量(Cheng及Prusoff,
Biochem. Pharmacol. 1973
,
22(23)
, 3099-3108)。為了進一步研究測試物質之別構作用，測定測試物質對氧化震顫素M之K
i
的影響。 針對M2受體(Euroscreen，FAST-0261B)之拮抗劑抑制結合分析在96孔微量滴定盤(Master Block，Greiner，786201)上在結合緩衝液(50 mM Tris緩衝液pH 7.4，1 mM EDTA，10 μg/ml皂素)中使用
3
H-NMS作為M2受體拮抗劑進行。為了調整結合平衡，M2膜提取物之各分析(20 µg蛋白質/ 96孔)與單獨的規定濃度之放射性標記之拮抗劑(0.5 nM)或在具有或不具有1 µM或10 µM測試物質的多種濃度之未標記促效劑(氧化震顫素M；0.001 nM至1 mM)或單獨結合緩衝液存在下在25℃下以0.1 mL總體積一起培育2小時。
3
H標記之NMS與膜的非特異性結合藉由與200倍過量之未放射性標記之乙醯膽鹼共同培育來測定。為了停止結合反應，樣品接著在室溫下經預先用0.5% PEI溶液潤濕的GF/C過濾器(Perkin Elmer，6005174)過濾2小時。過濾器各自用0.5 mL冰冷之洗滌緩衝液(10 mM磷酸鈉/磷酸鉀緩衝液，pH 7.4)洗滌六次且每次分析添加50 µL Microscint 20閃爍溶液(Packard)。樣品接著在定軌振盪器上培育15分鐘，隨後藉助於TopCount
TM
儀器(1 min/孔)量測放射性。 將測試物質以10 mM濃度溶解於DMSO中且在DMSO中對應於最終測試濃度進一步稀釋以便獲得結合緩衝液中所用之DMSO溶液的100倍稀釋液。 藉助於Cheng-Prusoff等式定量在有或無測試物質存在下之K
i
值(Cheng及Prusoff,
Biochem. Pharmacol. 1973
,
22(23)
, 3099-3108)。在此情形下，物質之IC
50
值根據四參數邏輯等式及在平衡條件下之放射性配位體結合分析中測定的NMS之K
d
來測定(Schober等人,
Mol. Pharmacol. 2014
,
86
, 116-123)。
B-6.3. 3 H- 氧化震顫素 M 解離動力學測試
藉助於動力學放射性配位體結合分析，可研究有或無測試物質存在下放射性標記之促效劑
3
H-氧化震顫素M針對M2受體之解離動力學。藉助於此，可測定測試物質之別構活性對M2促效劑之解離常數(k
off
速率)的影響且因此，可進一步表徵測試物質之別構機制(Lazareno, Determination of Allosteric Interactions Using Radioligand-Binding Techniques in
Methods in Molecular Biology
,
第 259 卷
, Receptor Signal Transduction Protocols, 第2版; Schrage等人,
Biochem. Pharmacol.
,
2014
,
90
, 307-319)。 M2受體(Euroscreen，FAST-0261B)之放射性配位體解離結合分析使用
3
H標記之氧化震顫素M (NET671)作為促效劑進行。在結合緩衝液(磷酸鈉/磷酸鉀緩衝液，pH 7.4)中在96孔微量滴定盤(Master Block, Greiner, 786201)上進行結合反應。為此目的，M2膜提取物之各分析(20 µg蛋白質/96孔)與單獨的規定濃度之放射性標記之促效劑(9.65 nM)或在1 µM或10 µM測試物質或單獨之結合緩衝液存在下在37℃下培育60分鐘。接著在多個時間點(每次分析一個時間點)添加200倍過量的NMS且在37℃下以0.1 mL總體積培育混合物。為了停止結合反應，樣品接著在室溫下經預先用0.5% PEI溶液潤濕的GF/C過濾器(Perkin Elmer，6005174)過濾2小時。過濾器各自用0.5 mL冰冷之洗滌緩衝液(10 mM磷酸鈉/磷酸鉀緩衝液，pH 7.4)洗滌六次且每次分析添加50 µL Microscint 20閃爍溶液(Packard)。樣品接著在藉助於TopCountTM儀器(1 min/孔)量測放射性之前在定軌振盪器上培育15分鐘。 將測試物質以10 mM之濃度溶解於DMSO中且對應於最終測試濃度在DMSO中進一步稀釋以便獲得用於結合緩衝液中之DMSO溶液的100倍稀釋液。 k
off
藉助於解離之「單相」指數衰變模型測定(Hulme及Trevethick,
Brit. J. Pharmacol. 2010
,
161
, 1219-1237；Kostenis及Mohr,
Trends Pharmacol. Sci. 1996
,
17(8)
, 280-283)。
B-6.4. 3 H-M2-PAM 結合測試
測試物質針對人類M2受體之結合親和力可使用放射性標記之測試物質作為探針直接測定。為此目的，正向別構測試物質藉由氚化放射性標記(
3
H-M2-PAM)。 使用平衡條件下之放射性配位體結合測試可首先測定正向別構測試物質(
3
H-M2-PAM)之平衡解離常數K
d
作為其針對M2受體之結合親和力的定量量度，且其次在無或有正構促效劑(乙醯膽鹼)存在下測定放射性配位體之特異性結合位點數目B
max
(Hulme及Trevethick,
Brit. J. Pharmacol. 2010
,
161
, 1219-1237；Schober等人,
Mol. Pharmacol. 2014
,
86
, 116-123)。對於
3
H-M2-PAM平衡結合測試，培育緩衝液(10 mM Tris/HCl pH 7.4、2 mM MgCl2、120 mM NaCl、蛋白酶抑制劑、0.3% BSA)中之M2受體細胞膜製劑(CHO-S/hM2，200 µg)與不同濃度之別構放射性配位體
3
H-M2-PAM (0.5 - 4000 nM)一起在無或有乙醯膽鹼(100 µM)存在下在4℃下培育1小時。藉由添加過量未放射性標記之別構配位體(M2-PAM) (10 µM)來測定非特異性結合。為了終止結合反應，樣品經Brandel過濾器系統過濾且用停止緩衝液(50 mM Tris/HCl pH 7.4、500 mM NaCl、0.3% BSA)洗滌。過濾器預先用0.3%濃度PEI溶液濕潤。別構放射性配位體之Kd及Bmax基於「單位點」特異性結合模型(GraphPad Prism)測定。 使用競爭性
3
H-M2-PAM結合測試，可測定未經標記之別構測試物質針對M2受體處放射性配位體
3
H-M2-PAM之結合位點的親和力。(Croy等人
.
,
Mol. Pharmacol. 2014
,
86
, 106-115；Schober等人,
Mol. Pharmacol. 2014
,
86
, 116-123)。放射性標記之探針
3
H-M2-PAM)及未經標記之別構測試物質競爭結合於M2受體之別構結合位點。替換放射性標記之探針的能力因此用作測試物質針對受體之別構結合親和力的量度且可根據Cheng-Prusoff等式作為平衡抑制常數(K
i
)定量(Cheng及Prusoff,
Biochem. Pharmacol. 1973
,
22(23)
, 3099-3108)。此處，放射性標記之別構探針之替換在有或無正構促效劑(乙醯膽鹼)存在下測定。類似於上述
3
H-M2-PAM結合測試，在平衡條件下進行
3
H-M2-PAM競爭結合測試。此處，包含M2受體之膜製劑與1 nM
3
H-M2-PAM及多種濃度的未經標記之測試物質一起在無或有乙醯膽鹼(100 µM)存在下培育。藉助於Cheng-Prusoff等式測定在有或無乙醯膽鹼存在下之K
i
值(Cheng及Prusoff,
Biochem. Pharmacol. 1973
,
22(23)
, 3099-3108)。
B-7. 大鼠原代心房心肌細胞中測試物質對乙醯膽鹼介導之 GIRK1/4 通道電流的作用
根據文獻中針對原生大鼠心房肌細胞中乙醯膽鹼誘導之GIRK1/4膜電流的電生理量測所述的膜片鉗方案進行物質測試(Cheng及Prusoff,
Biochem. Pharmacol. 1973
,
22(23)
, 3099-3108，參見例如Beckmann及Rinne等人,
Cell. Physiol. Biochem. 2008
,
21
, 259-268)。 GIRK1/4活性之乙醯膽鹼劑量-反應曲線最初在無測試物質存在下(DMSO對照)藉由灌注乙醯膽鹼濃度提高之測試溶液且量測所得膜電流來測定。針對既定ACh濃度量測膜電流或膜電流中的改變持續約10至20秒。施加DRC系列內最大ACh濃度之後，灌注阿托品溶液(10 μM)，隨後洗出物質溶液以確保M2選擇性及M2活化之可逆性。適當記錄膜電流之改變。此處，各乙醯膽鹼濃度的所量測之膜電流在各情況下根據最大乙醯膽鹼誘導之膜電流標準化(I/IMax)。乙醯膽鹼劑量-反應曲線在此情形下包含五種不同濃度(1 nM、10 nM、100 nM、1 μM、10 μM)。藉助於4參數邏輯函數(希爾函數)測定EC
50
值。 為了測定測試物質對M2受體之別構作用，在恆定濃度之各別測試物質(例如1 µM)存在下針對GIRK1/4膜電流測定乙醯膽鹼劑量-反應曲線。為此目的，在用測試物質預培育細胞約20秒且量測膜電流之後，灌注包含相同物質濃度及規定ACh濃度之測試溶液約10至20秒且量測膜電流。施加量測系列內之最大乙醯膽鹼濃度之後，繼而灌注具有阿托品之溶液(10 μM)來檢驗物質作用之M2選擇性。藉助於4參數邏輯函數(希爾函數)(參見上文)類似地測定在測試物質存在下之EC
50
值。 藉由無或有測試物質存在下乙醯膽鹼之EC
50
值中的改變測定及定量乙醯膽鹼劑量-反應曲線中的位移。
B-8. 測試物質對經分離之灌注大鼠心臟的作用
體重200-250 g之雄性威斯塔大鼠(Male Wistar rat)(品系：(HsdCpb:WU)用Narcoren (100 mg/kg)麻醉。打開胸部且接著暴露心臟，切除且藉由向主動脈中置入導管連接至Langendorff設備。在恆定流速下以9 ml/min向心臟逆向灌注Krebs-Henseleit緩衝溶液(用95% O
2
及5% CO
2
充氣，pH 7.4，35℃；具有以下組成，單位為mmol/l：NaCl 118；KCl 3；NaHCO
3
22；KH
2
PO
4
1.2；硫酸鎂1.2；CaCl
2
1.8；葡萄糖10；丙酮酸鈉2)。為了量測心臟之收縮性，將附接至PE管且用水填充的由薄塑膠膜製成之氣球經心臟之左心耳中之開口引入左心室。將氣球連接至壓力轉換器。經氣球體積將舒張期末壓調整至5-10 mmHg。藉由橋式放大器強化資料且使用LabChart軟體(ADInstruments)登記於電腦上。 為了研究測試物質之別構作用，藉由添加300 nmol/l測試物質灌注心臟。15分鐘之後，以增加濃度向灌注溶液累積添加碳醯膽鹼。由其引起之心率降低作為劑量-反應曲線與對用溶劑代替測試物質處理之心臟的作用進行比較。藉由GraphPad PRISM (S形劑量反應)分析及定量碳醯膽鹼劑量-反應曲線中的位移。
B-9. 測試物質對麻醉大鼠之心率的作用
來自育種機構Charles River的(WI) WU Br品系之雄性大鼠最初用4-5%異氟醚吸入麻醉約3分鐘。隨後，使用1.5%異氟醚吸入保持麻醉。為此目的，將麻醉動物固定在經加熱之操作板上。藉助於目測及趾間反射，檢驗麻醉深度。 為了施加測試物質，使用進入頸靜脈中之靜脈內途徑。接著縱向製造尾部至顱骨皮膚切口且切斷子宮頸肌肉組織及唾液腺。暴露右側頸總動脈且近端及遠端停滯血液供應。使用微型儀器，將TIP導管(1.2F)引入血管中以量測動脈壓及心率。 最初，在不添加物質之基礎狀態監測兩個參數10分鐘。將待研究之物質溶解於適合溶劑混合物中且隨後在各情形中藉由輸注泵經5分鐘以多種劑量經頸靜脈投與動物組。溶劑處理組用作相同實驗條件下之對照組。測定在物質添加情形下之動脈血壓及心率持續20分鐘。資料用PowerLab系統(ADinstruments)登記且使用LabChart程式(ADinstruments)評估。
B-10. 無線電量測清醒大鼠之血壓及心率
採用來自Data Sciences International DSI, USA之可商購的遙測系統進行下文所述的對清醒大鼠的量測。系統由3各主要組件組成：(1)可植入傳輸器(Physiotel®遙測傳輸器)，(2)接收器(Physiotel®接收器)，其經多工器(DSI資料交換矩陣)連接至(3)資料獲取電腦。遙測系統使得有可能在清醒動物通常棲息場所處持續記錄其血壓、心率及身體運動。 對體重＞200 g之成年雌性大鼠(Wistar Unilever/WU或Spontaneous Hypertensive大鼠/SHR)進行研究。在傳輸器佈植之後，實驗動物單獨圈養在III型Makrolon®籠中。其自由獲取標準飼料及水。藉由改變房間的照明設定測試實驗室中的日/夜節律。
傳輸器 佈 植 ：
在第一次實驗使用之前至少14天，所用遙測傳輸器(例如PA-C40 HD-S10, DSI)在無菌條件下以手術方式植入實驗動物體內。為了進行佈植，禁食動物用異氟醚(IsoFlo®, Abbott, 初始5%，維持2%)麻醉且在腹部大面積刮毛及消毒。沿腹白線打開腹腔之後，將系統之液體填充量測導管在顱骨方向插入至降主動脈中分叉點上方且用組織膠(Vetbond™, 3M)固定。發射器殼體腹膜內固定至腹壁肌肉，且傷口分層縫合。手術後，投與用於預防感染之抗生素(Ursocyclin® 10%，60 mg/kg皮下，0.06 ml/100 g體重，Serumwerk Bernburg AG, Germany)及鎮痛劑(Rimadyl®，4 mg/kg皮下，Pfizer, Germany)。
物質及溶液 ：
除非另外說明，否則待研究之物質在各情形中經口投與動物組(M=6)。根據2 ml/kg體重之投與量，將測試物質溶解於適合溶劑混合物中。溶劑處理動物組用作對照。
實驗概述 ：
針對24隻動物配置遙測量測系統。在系統中生活之配備工具之每一隻大鼠被分配獨立接收天線(RPC-1 Receiver，DSI)。植入之發送器可經安裝之磁力開關外部啟動且在實驗預運行期間切換成傳輸。發射之信號可藉由資料獲取系統(針對Windows之Dataquest™ A.R.T.，DSI或Ponemah，DSI)線上偵測且因此加工。在標準程序中，在各情況下量測以下各項持續10秒時間段：(1)收縮血壓(SBP)，(2)舒張血壓(DBP)，(3)平均動脈壓(MAP)，(4)心率(HR)及(5)活性(ACT)。投與後量測此等參數24小時。在電腦控制下以5分鐘間隔重複獲取量測值。用當前量測之大氣壓(Ambient Pressure Reference Monitor，APR-1，DSI)校正圖式中以絕對值形式獲得之源資料。
評估 ：
實驗結束之後，使用分析軟體(Dataquest™ A.R.T. 4.1 Analysis or Ponemah, DSI)分選所獲取之個別資料。物質施加之前的2小時時間點假設為空白值。藉由測定平均值(30分鐘平均值)經可預設時間段校正資料。
B-11. 測試物質對麻醉犬之心率的作用
體重介於20與30 kg之間的雄性或雌性雜交品種(Mongrels, Marshall BioResources, USA)用戊巴比妥(30 mg/kg靜脈內, Narcoren®, Merial, Germany)麻醉。泮庫氯銨(Pancuronium-Actavis®, Actavis, Germany, 1 mg/動物靜脈內)在此處另外用作肌肉弛緩劑。將犬插管且用氧氣-空氣混合物(40/60%)通風(約5-6L/min)。使用來自GE Healthcare (Avance)之通風裝置進行通風，其亦用作麻醉監測器(CO2分析器)。藉由恆定輸注戊巴比妥(50µg/kg/min)保持麻醉；芬太尼(10µg/kg/h)用作鎮痛劑。戊巴比妥之替代由使用異氟醚(1-2體積%)組成。 向犬提供以下： • 用於膀胱排空或量測尿流之膀胱導管 • 通向肢體之ECG (用於ECG量測) • 向股動脈中插入NaCl填充之Fluidmedic-PE-300環管。此連接至用於量測全身血壓之壓力感測器(Braun Melsungen, Melsungen, Germany) • 向股靜脈中插入NaCl填充之靜脈導管(Vygon, Germany)用於灌注測試物質或排出血液。 • 經左心房或流槽插入Millar Tip導管(Typ 350 PC, Millar Instruments, Houston, USA)用於量測併入至頸動脈中之心臟血液動力學 • 經頸靜脈向肺動脈中插入Swan-Ganz導管(CCOmbo 7.5F, Edwards, Irvine, USA)用於量測心輸出量、氧飽和度、肺動脈壓及中心靜脈壓。 • 向降主動脈提高超音波流量計探針(Transsonic Systems, Ithaka, USA)用於量測主動脈流 • 向左位冠狀主動脈提供超音波流量計探針(Transsonic Systems, Ithaka, USA)用於量測冠狀動脈流 • 向頭靜脈中佈置Braunüle用於輸注戊巴比妥、液體替代及用於排出血液(測定物質血漿含量或其他臨床血液值) • 向隱靜脈佈置Braunüle用於輸注芬太尼及物質施加 原始信號可能擴增(Gould Amplifier, Gould Instrument Systems, Valley View, USA)或Edwards Vigilance監測器(Edwards, Irvine, USA)且隨後饋送至Ponemah系統(DataSciences Inc, Minneapolis, USA)中以供評估。在整個實驗時程持續記錄信號，藉由此軟體進一步數位處理且經30秒取平均值。
B-12. 測試物質對健康清醒犬之心率及心率變化的作用
為了關於對心率、心率變化(HRV)及血壓之作用表徵測試物質，對健康雄性米格魯犬(Beagle dog)進行遙測量測。在異氟醚麻醉下，首先向動物中植入遙測發射器(型號L21，來自Data Sciences International, USA)。在左側開胸術之後，接著將壓力感測器置於主動脈及左心室中。為了記錄心電圖(ECG)，在心臟上放置其他電極。對於傷口癒合，接著將動物放回圍欄中進行抗生素(克林達黴素, Zoetis, Germany)及鎮痛劑(芬太尼, Janssen, Germany)恢復期治療。藉助於動物圍欄中安裝之天線，將血壓及ECG信號傳送至資料獲取電腦且藉由分析軟體(Ponemah, Data Sciences International, USA)評估。遙測系統使得有可能持續檢測清醒動物之血壓及ECG信號。在來自製造公司(Data Sciences International, USA)之文檔中可發現技術細節。 待研究之物質藉助於明膠膠囊在適合溶劑混合物中經口投與健康犬。媒劑處理動物組用作對照。遙測量測在物質投與之前開始且持續幾個小時的時間段進行記錄。時程藉助於GraphPadPrism軟體(GraphPad, USA)測定平均值來校正之資料以圖形方式呈現。為了分析HRV，對ECG資料進行頻域心率變化分析。為此目的，使用所記錄ECG之R-R間隔。自分析排除先前規定之0.2s-1.5s範圍以外的資料。排除之資料經藉由線性內插法獲得之值替代。此等資料藉由樣條內插轉化成等距間隔之支撐點。為了分析心率變化，資料以30秒梯級進一步細分成300秒長度之封包。對於各資料封包，計算傅里葉變換(Fourier transformation)。在三個頻帶(vlf=0.0033 - 0.04 1/s；lf=0.04 - 0.15 1/s；hf=0.15 - 0.5 1/s)中進一步計算功率。為了表徵測試物質，使用HRV分析之總功率(全部三個頻帶之總和)。