TW201808952A - 二氮呯酮衍生物及治療ｂ型肝炎感染之方法 - Google Patents

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Abstract

在本文中提供可用於治療有需要之對象的HBV感染之化合物，其醫藥組成物，及抑制、壓抑、或預防該對象之HBV感染的方法。

Description

二氮呯酮衍生物及治療B型肝炎感染之方法
本案提供可用於治療有需要之對象的HBV感染之化合物，其醫藥組成物，及抑制、壓抑、或預防該對象之HBV感染的方法。
【相關申請案之交互參照】
本申請案主張2016年6月29日申請之美國臨時專利申請案第62/356,489號之優先權；及2017年5月26日申請之美國臨時專利申請案第62/511,573號之優先權；其各者之完整內容以引用方式併入本文中。
慢性B型肝炎病毒(HBV)感染是一個重大的全球健康問題，影響超過5%的全球人口(全世界超過3億5千萬人，美國超過125萬人)。
儘管有預防性的HBV疫苗可用，但是治療選項不盡理想，而且在大部分發展中國家有持續的新感染比率，因此慢性HBV感染造成的負擔仍是全世界有待解決的重大醫療問題。現行治療無法提供冶癒效果，而且僅限於二類藥物(甲型干擾素及病毒聚合酶的核苷類似物/抑制劑)；抗藥性、低療效、及耐受性問題皆限制了這些藥物的作用。HBV低治癒率的原因至少部分是因為單一抗病毒藥物難以達成完全抑制病毒生產。然而，持續抑制HBV DNA可減緩肝臟疾病進展，並且有助於預防肝細胞癌。HBV感染病患的現行治療目標是減少 血清HBV DNA至低或無法被偵測到的水準，並且最終減少或預防肝硬化及肝細胞癌發生。
HBV殼體蛋白在病毒生命週期當中發揮必要功能。HBV殼體/核心蛋白形成介穩定狀態的病毒顆粒或蛋白質殼，以在細胞間繼代時保護病毒基因體，同時在病毒複製過程中扮演中心角色，包括基因體包殼、基因體複製、及病毒粒子形態發生及釋放。殼體結構也回應於環境提示而允許病毒進入後脫去包覆。已一致地發現殼體組裝及去組裝的適當時機、適當的殼體穩定性、及核心蛋白的功能對病毒感染力至關重要。
本領域需要可增加抑制病毒生產及可治療、改進、或預防HBV感染的治療劑。以單一療法或與其他HBV治療或輔助治療組合之方式投予該等治療劑至HBV感染病患，將導致顯著減輕病毒負擔、改善預後、減緩疾病進展並提高血清抗體轉換率。
在本文中提供可用於治療有需要之對象的HBV感染之化合物。
因此，在一態樣中，在本文中提供一種式I之化合物：
或其醫藥上可接受之鹽，其中 A係CH2或C=O；R1係H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C1-C6-烷基-OH、或C1-C6-鹵烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代；R3每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R4係選自(CRaRb)p-C1-C9-雜芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-環烷基、及(CRaRb)p-C2-C6-雜環烷基，其中雜芳基、芳基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代；R5係選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R6係選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C1-C6-烯基、及C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基；R7每次出現時係獨立地選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C(O)C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R8係選自H及C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；Ra每次出現時係獨立地選自H、-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；Rb每次出現時係獨立地選自H及C1-C6-烷基； m係0、1、2、3、或4；n係0、1、2、3、或4；p係0、1、2、3、或4；q係0或1；且線係指可選地雙鍵。
在一實施例中，在本文中提供一種式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中A係CH2或C=O；R1係H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C1-C6-烷基-OH、或C1-C6-鹵烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；R3每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R4係選自(CRaRb)p-C1-C9-雜芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-環烷基、及(CRaRb)p-C2-C6-雜環烷基，其中雜芳基、芳基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代；R5係選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R6係選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C1-C6-烯基、及C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基；R7每次出現時係獨立地選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH； R8係選自H及C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；Ra每次出現時係獨立地選自H、-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；Rb每次出現時係獨立地選自H及C1-C6-烷基；m係0、1、2、3、或4；n係0、1、2、3、或4；p係0、1、2、3、或4；q係0或1；且線係指可選地雙鍵。
在一實施例中，式I之化合物具有式II之結構： 或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，式I或式II之化合物具有式III之結構： 或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，在本文中提供一種式V之化合物： 或其醫藥上可接受之鹽，其中A係CH2或C=O；R1係H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C1-C6-烷基-OH、或C1-C6-鹵烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、及C0- C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代；R3每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R4係選自(CRaRb)p-C1-C9-雜芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-環烷基、及(CRaRb)p-C2-C6-雜環烷基，其中雜芳基、芳基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代；R5係選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R6係選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C1-C6-烯基、及C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基；R7每次出現時係獨立地選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C(O)C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R8係選自H及C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；Ra每次出現時係獨立地選自H、-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；Rb每次出現時係獨立地選自H及C1-C6-烷基；m係0、1、2、3、或4；n係0、1、2、3、或4；p係0、1、2、3、或4；且線係指可選地雙鍵。
在另一態樣中，在本文中提供一種醫藥組成物，其包含式I、II、III、IV、或V之化合物、或其醫藥上可接受之鹽、及醫藥上可接受之載劑。
在另一態樣中，在本文中提供一種醫藥組成物，其包含揭示化合物及醫藥上可接受之載劑。
在另一態樣中，在本文中提供一種在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的式I、II、III、IV、或V之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，在本文中提供一種在有需要之個體中抑制或減少含HBV DNA顆粒或含HBV RNA顆粒形成或存在之方法，其包含向該個體投予治療有效量的式I、II、III、IV、或V之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在一實施例中，在本文中提供之任何方法可進一步包含向該個體投予至少一種選自由HBV聚合酶抑制劑、免疫調節劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、殼體組裝調節劑、反轉錄酶抑制劑、親環素/TNF抑制劑、TLR促效劑、HBV疫苗、及其任何組合所組成之群組的額外治療劑。
圖1顯示中間物16之二對硝基-苯甲酸類似物(亦稱為化合物151)的X光晶體結構。
在本文中提供可用於治療及預防對象的HBV感染之化合物，例如式I、II、III、IV、或V之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在不受任何特定作用機制束縛下，認為這些化合物可調節或干擾HBV組裝及其他HBV複製或產製感染顆粒所需之HBV核心蛋白的功能。此外或可替代地，化合物可干擾HBV殼體組裝以誘導生產感染力或複製能力大幅降低的缺陷病毒顆粒。換言之，在本文中提供之化合物藉由調節(例如加速、延緩、抑制、擾亂、或減少)正 常病毒殼體組裝或去組裝、結合殼體、及/或改變細胞性多聚蛋白及前驅物代謝，可作為殼體組裝調節劑。調節可發生在殼體蛋白成熟時，或在病毒感染力期間。揭示化合物可用於調節HBV cccDNA活性或性質之方法中，或用於自感染細胞產製或釋放HBV RNA顆粒之方法中。
在一實施例中，本文所述之化合物適合單一療法，且對於自然或土生HBV毒株及對現行已知藥物有抗藥性之HBV毒株有效。在另一實施例中，本文所述之化合物適合組合療法。
定義
下列係說明本發明所使用的各種用語之定義。除非在特定情況中另外限定，不論個別或為較大群組中一部分，否則本專利說明書及申請專利範圍所有部分使用該用語時，該些定義均適用之。
除非另有定義，本文中所使用之所有技術與科學用語的意義，通常均與本發明所屬技術領域中具有通常知識者所一般理解的意義相同。通常，本文中所使用之命名及細胞培養、分子遺傳學、有機化學、及肽化學之實驗室程序皆為本發明所屬技術領域所廣為周知及普遍採用。
如本文中所使用，冠詞「一(a及an)」係指一個或超過一個(即至少一個)該冠詞之文法對象。舉例來說，「一元件」係指一個元件或超過一個元件。另外，用語「包括(including)」以及其他形式例如「include」、「includes」及「included」的使用係非限制性的。
如本文中所使用，用語「約(about)」將為所屬技術領域中具有通常知識者所了解，且將視其所使用的上下文有一些程度上的變化。如本文中所使用在指稱一可測量的值(諸如數量、持續時間及類似者)時，用語「約(about)」意欲涵蓋在指定值之±20%或±10%，包括±5%、±1%、及±0.1%內的變異，若此類變異為適合執行所揭示之方法者。
如本文中所使用，用語「殼體組裝調節劑(capsid assembly modulator)」係指干擾或加速或抑制或阻礙或延緩或減少或修改正常的殼體組裝(例如在成熟期間)或正常的殼體去組裝(例如在感染力期間)或擾亂殼體穩定性，藉此誘導異常殼體形態及功能的化合物。在一實施例中，殼體組裝調節劑加速殼體組裝或去組裝，藉此誘導異常的殼體形態。在另一實施例中，殼體組裝調節劑與主要殼體組裝蛋白(CA)交互作用(例如結合活性位點、結合異位位點、修改或阻礙摺疊及類似者)，藉此干擾殼體組裝或去組裝。在又一實施例中，殼體組裝調節劑造成CA結構或功能的擾亂(例如CA組裝、去組裝、與受質結合、摺疊成適當構形之能力、或類似者)，其減弱病毒感染力或對病毒具致死性。
如本文中所使用，用語「治療(treatment或treating)」定義為向病患(單獨或與另一種藥品組合)施用或投予治療劑，即揭示化合物，或向來自病患之單離組織或細胞系施用或投予治療劑(例如用於診斷或離體施用)，該病患具有HBV感染、HBV感染之症狀、或發生HBV感染之可能性，治療目的為治癒、痊癒、減輕、緩解、改變、醫治、改進、改善或影響HBV感染、HBV感染之症狀、或發生HBV感染之可能性。該等治療基於在藥物遺傳學領域獲得的知識，可特別量身訂做或修改。
如本文中所使用，用語「預防(prevent或prevention)」在先前若無發生病症或疾病的情況中，係指無病症或疾病的發生，或者若在已發生病症或疾病的情況中，係指無進一步的病症或疾病發生。也考慮的是預防一些或所有與該病症或疾病相關的症狀之能力。
如本文中所使用，用語「病患(patient)」、「個體(individual)」或「對象(subject)」係指人類或非人類哺乳動物。非人類哺乳動物包括例如牲畜及寵物，例如綿羊、牛、豬、犬、貓及鼠之哺乳動物。較佳地，病患、對象、或個體係人類。
如本文中所使用，用語「有效量(effective amount)」、「醫藥有效量(pharmaceutically effective amount)」及「治療有效量(therapeutically effective amount)」係指非毒性但足以提供期望生物結果之量的藥劑。該結果可以是減少或減輕疾病的徵兆、症狀或起因，或是任何其它期望的生物系統改變。在任何個體情況中的適當治療量可由所屬技術領域中具有通常知識者使用例行實驗來判定。
如本文中所使用，用語「醫藥上可接受(pharmaceutically acceptable)」係指不會廢除化合物的生物活性及性質，且係相對非毒性的材料，例如載劑或稀釋劑，即，該材料可經投予至個體而不造成非所欲的生物效應或與組成物中所包含的任何組分以有害的方式交互作用。
如本文中所使用，用語「醫藥上可接受之鹽(pharmaceutically acceptable salt)」係指揭示化合物的衍生物，其中母化合物經修飾，將現有的酸或鹼部份轉化成其鹽形式。醫藥上可接受之鹽的實例包括但不限於鹼性殘基諸如胺之礦物鹽或有機酸鹽；酸性殘基諸如羧酸之鹼金屬鹽或有機鹽；及類似者。本發明之醫藥上可接受之鹽包括自例如非毒性無機或有機酸形成之母化合物的習知非毒性鹽。本發明之醫藥上可接受之鹽可藉由習知化學方法自含有鹼性或酸性部份之母化合物合成。通常，該等鹽可藉由將這些化合物的游離酸或鹼形式與化學計量之量之合適的鹼或酸在水中或在有機溶劑中，或在該兩者的混合物中反應來製備；通常，會優先使用非水介質如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、或乙腈。合適鹽之列表可見Remington's Pharmaceutical Sciences,17th ed.,Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1985,p.1418及Journal of Pharmaceutical Science,66,2(1977)，其各者之全文以引用方式併入本文中。
如本文中所使用，用語「組成物(composition)」或「醫藥組成物(pharmaceutical composition)」係指至少一個可用於本發明中之化合物與醫藥上可接受之載劑之混合物。醫藥組成物有助於投予 化合物至病患或對象。多種投予化合物之技術存在於本領域，包括但不限於靜脈內、口服、氣霧、非經腸、經眼、經肺、及局部投予。
如本文中所使用，用語「醫藥上可接受之載劑(pharmaceutically acceptable carrier)」係指涉及在病患體內攜帶或運送可用於本發明中之化合物或攜帶或運送可用於本發明中之化合物至病患，以使其進行其所欲功能的醫藥上可接受之材料、組成物或載劑，例如液體或固體填料、安定劑、分散劑、懸浮劑、稀釋劑、賦形劑、增稠劑、溶劑、或包封材料。一般而言，該等建構體從身體的一個器官或部分，被攜帶或運送至身體的另一個器官或部分。各載劑在與配方之其他成分包括可用於本發明中之化合物可相容的意義上必須是「可接受的」，且對病患無害。可作為醫藥上可接受之載劑的材料之一些實例包括：糖，例如乳糖、葡萄糖及蔗糖；澱粉，例如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，例如鈉羧甲基纖維素、乙基纖維素及乙酸纖維素；粉末黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，例如可可脂及栓劑蠟；油，例如花生油、棉籽油、紅花子油、芝麻油、橄欖油、玉米油、及黃豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇、及聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯及月桂酸乙酯；洋菜；緩衝劑，例如氫氧化鎂及氫氧化鋁；表面活性劑；藻酸；無致熱原的水；等張鹽水；林格氏液；乙醇；磷酸鹽緩衝溶液；及藥品配方中採用的其他非毒性相容物質。
如本文中所使用，「醫藥上可接受之載劑(pharmaceutically acceptable carrier)」亦包括與可用於本發明中之化合物之活性相容且為病患生理上可接受之任何及所有包覆、抗菌及抗真菌劑、及吸收延緩劑、及類似物。補充性活性化合物亦可納入於組成物中。「醫藥上可接受之載劑(pharmaceutically acceptable carrier)」可進一步包括可用於本發明中之化合物之醫藥上可接受之鹽。其他可包括於實施本發明所使用之醫藥組成物中之額外成分為本領域所知且描述於例如Remington's Pharmaceutical Sciences(Genaro,Ed.,Mack Publishing Co.,1985,Easton,PA)，其以引用方式併入本文中。
如本文中所使用，用語「烷基(alkyl)」本身或作為另一取代基的一部分時，除非另外指明，否則係指具有指定碳原子數目之直鏈或支鏈烴(即，C0-C6-烷基係指無或具有一至六個碳原子之烷基)且包括直鏈及支鏈。實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、三級丁基、戊基、新戊基、及己基。C1-C6-烷基之其他實例包括乙基、甲基、異丙基、異丁基、正戊基、及正己基。
如本文中所使用，用語「烯基(alkenyl)」係指衍生自含有至少二個碳原子及至少一個碳-碳雙鍵之烴部份之單價基團。雙鍵可為或可不為連接至另一基團之點。烯基(例如，C2-C8-烯基)包括但不限於例如乙烯基、丙烯基、丙-1-烯-2-基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基、庚烯基、辛烯基、及類似物。
如本文中所使用，用語「鹵基(halo)」或「鹵素(halogen)」單獨或作為另一取代基的一部分時，除非另外指明，否則係指氟、氯、溴、或碘原子，較佳的是氟、氯、或溴，更佳的是氟或氯。
如本文中所使用，用語「鹵烷基(haloalkyl)」係指其中任一或多個烷基碳原子係經如上定義之鹵基取代之烷基自由基。鹵烷基包含單鹵烷基、二鹵烷基、及多鹵烷基自由基。用語「鹵烷基(haloalkyl)」包括但不限於氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、及五氟乙基。
如本文中所使用，用語「環烷基(cycloalkyl)」係指單環或多環非芳族自由基，其中形成環之原子(即骨架原子)中之每一者係碳原子。在一實施例中，環烷基係飽和或部分不飽和。在另一實施例中，環烷基係與芳環稠合。環烷基包括具有3至10個環原子之基團(C3-C10-環烷基)、具有3至8個環原子之基團(C3-C8-環烷基)、具有3至7個環原子之基團(C3-C7-環烷基)、及具有3至6個環原子之基團(C3-C6-環烷基)。單環環烷基包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、及環辛基。雙環環烷基包括但不限於四氫萘基、二氫茚基、及四氫并環戊二烯。多環環烷基包括金剛烷及降莰 烷。用語環烷基包括不飽和非芳族環狀基團，其包含至少一個碳碳雙鍵或一個碳碳參鍵。
如本文中所使用，用語「雜環烷基(heterocycloalkyl)」或「雜環基(heterocyclyl)」係指含有一至四個各自選自O、S、及N之環雜原子之雜脂環基團。在一實施例中，各雜環基之環系統中具有3至10個原子，唯該基團之環不包含二個相鄰O或S原子。雜環基取代基可替代地由碳原子數目來定義，例如，C2-C8-雜環基指示包含在雜環基中之碳原子的數目，不包括雜原子的數目。例如，C2-C8-雜環基將包括額外一至四個雜原子。較佳的是，雜環基具有少於三個雜原子。更佳的是，雜環基具有一至二個雜原子。在另一實施例中，雜環烷基係與芳環稠合。在一實施例中，氮及硫雜原子可選地經氧化，且氮原子可選地經季銨化。除非另外指明，雜環系統可在任何提供穩定結構之雜原子或碳原子處經連接。
3-員雜環基之實例包括且不限於吖。4-員雜環烷基之實例包括且不限於三亞甲亞胺及β內醯胺。5-員雜環基之實例包括且不限於吡咯啶、唑啶、及四氫噻唑二酮。6-員雜環烷基之實例包括且不限於哌啶、嗎啉、及哌。
雜環基之其他非限制性實例包括單環基團例如吖、氧、硫、三亞甲亞胺、氧呾、硫呾、吡咯啶、吡咯啉、吡唑啶、咪唑啉、二、環丁碸、2,3-二氫呋喃、2,5-二氫呋喃、四氫呋喃、四氫噻吩、哌啶、1,2,3,6-四氫吡啶、1,4-二氫吡啶、哌、嗎啉、硫代嗎啉、哌喃、2,3-二氫哌喃、四氫哌喃、1,4-二烷、1,3-二烷、升哌、升哌啶、1,3-二氧、4,7-二氫-1,3-二氧呯、及六亞甲基氧化物。
如本文中所使用，用語「芳族(aromatic)」係指具有一或多個多不飽和環且具有芳族性(即，具有(4n+2)個非定域π(pi)電子，其中n係整數)之碳環或雜環。
如本文中所使用，用語「芳基(aryl)」單獨採用或與其他用語組合採用時，除非另外指明，否則係指含有一或多個環(一般 為一、二、或三個環)之碳環芳族系統，其中該等環可以側接方式連接在一起，例如聯苯，或可經稠合，例如萘。芳基之實例包括苯基、蒽基、及萘基。較佳實例係苯基(例如，C6-芳基)及聯苯(例如，C12-芳基)。在一些實施例中，芳基具有六至十六個碳原子。在一些實施例中，芳基具有六至十二個碳原子(例如，C6-C12-芳基)。在一些實施例中，芳基具有六個碳原子(例如，C6-芳基)。
如本文中所使用，用語「雜芳基(heteroaryl)」或「雜芳族(heteroaromatic)」係指具有芳族性之雜環。雜芳基取代基可由碳原子數目來定義，例如，C1-C9-雜芳基指示包含在雜芳基中之碳原子的數目，不包括雜原子的數目。例如，C1-C9-雜芳基將包括額外一至四個雜原子。較佳的是，雜芳基具有少於三個雜原子。更佳的是，雜芳基具有一至二個雜原子。多環雜芳基可包括一或多個部分飽和的環。雜芳基之非限制性實例包括吡啶基、吡基、嘧啶基(包括例如，2-及4-嘧啶基)、嗒基、噻吩基、呋喃基、吡咯基(包括例如，2-吡咯基)、咪唑基、噻唑基、唑基、吡唑基(包括例如，3-及5-吡唑基)、異噻唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,3,4-三唑基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-二唑基、1,3,4-噻二唑基、及1,3,4-二唑基。
多環雜環及雜芳基之非限制性實例包括吲哚基(包括例如，3-、4-、5-、6-、及7-吲哚基)、吲哚啉基、喹啉基、四氫喹啉基、異喹啉基(包括例如，1-及5-異喹啉基)、1,2,3,4-四氫異喹啉基、啉基、喹啉基(包括例如，2-及5-喹啉基)、喹唑啉基、呔基、1,8-啶基、1,4-苯并二烷基、香豆素、二氫香豆素、1,5-啶基、苯并呋喃基(包括例如，3-、4-、5-、6-、及7-苯并呋喃基)、2,3-二氫苯并呋喃基、1,2-苯并異唑基、苯并噻吩基(包括例如，3-、4-、5-、6-、及7-苯并噻吩基)、苯并唑基、苯并噻唑基(包括例如，2-苯并噻唑基及5-苯并噻唑基)、嘌呤基、苯并咪唑基(包括例如，2-苯并咪唑基)、苯并三唑基、硫代黃嘌呤基、咔唑基、咔啉基、吖啶基、吡啶基、及喹啶基。
如本文中所使用，用語「經取代(substituted)」係指當取代基連接至另一基團時，原子或原子之群組替代氫。
如本文中所使用，用語「選自…(selected from…)」(例如，「R4係選自A、B及C」)被理解為等效於用語「選自由…所組成之群組(selected from the group consisting of…)」(例如，「R4係選自由A、B及C所組成之群組」)。
化合物
在本文中提供具有式I之結構之化合物： 或其醫藥上可接受之鹽。
在實施例中，A係CH2或C=O。在實施例中，A係CH2。在其他實施例中，A係C=O。
R1可係H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C1-C6-烷基-OH、或C1-C6-鹵烷基。在實施例中，R1係H。在實施例中，R1係C1-C6-烷基。在具體實施例中，R1係-CH3。在實施例中，R1係C1-C6-烯基。在實施例中，R1係C1-C6-烷基-OH。在實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基。
在實施例中，可能有0、1、2、3、或4個R2取代基：m係0、1、2、3、或4。
各R2可獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代。
在某些實施例中，m係0且無R2取代。在某些實施例中，m係1且有一個R2取代。在某些實施例中，m係2且有二個R2取代。在某些實施例中，m係3且有三個R2取代。在某些實施例中，m係4且有四個R2取代。
在某些實施例中，至少一個R2係-OH。在某些實施例中，至少一個R2係鹵基。在某些實施例中，至少一個R2係C1-C6-烷基。在某些實施例中，至少一個R2係C1-C6-伸烷基。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-OR6。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-N(R7)2。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-SR8。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-S(O)R8。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-S(O)2R8。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-C(O)OR9。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-OC(O)R9。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-OC(O)OR9。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。在某些實施例中，二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代。
在某些實施例中，R2係經1、2、或3個基團取代。R2每次以烷基、伸烷基、環烷基、或雜環烷基出現時，可選地可經-OH或鹵基取代。例如，R2可係烷基，且該烷基係經-OH取代；或R2可係烷基，且該烷基係經至少一個氟原子取代。在一具體實施例中，R2可係CH2OH。R2可係伸烷基，且該伸烷基係經-OH取代；或R2可係伸烷基，且該伸烷基係經至少一個氟原子取代。R2可係環烷基，且該環烷基係經-OH取代；或R2可係環烷基，且該環烷基係經至少一個氟原子取代。R2可係雜環烷基，且該雜環烷基係經-OH取代；或R2可係雜環烷基，且該雜環烷基係經至少一個氟原子取代。在某些實施例中，二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係經至少1個-OH取代。在某些實施例中，二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係經至少1個鹵素取代。
在某些實施例中，R2可係可選地經1、2、或3個鹵基取代之C1-C6-烷基。在某些實施例中，R2可係C0-C6-烷基-OR6，其中R6係C1-C6-鹵烷基。在某些實施例中，R2可係(CH2)1-2-O-C1-C3-烷基，其中C1-C3-烷基係可選地經1、2、或3個鹵基取代。在某些實施例中，m係1或2。
在實施例中，可能有0、1、2、3、或4個R3取代基：n係0、1、2、3、或4。在某些實施例中，n係0且無R3取代。在某些實施例中，n係1且有一個R3取代。在某些實施例中，n係2且有二個R3取代。在某些實施例中，n係3且有三個R3取代。在某些實施例中，n係4且有四個R3取代。
各R3可獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH。在某些實施例中，至少一個R3係-OH。在某些實施例中，至少一個R3係鹵基。在某些實施例中，至少一個R3係C1-C6-烷基。在某些實施例中，至少一個R3係C1-C6-鹵烷基。在某些實施例中，至少一個R3係-O-C1-C6-烷基。在某些實施例中，至少一個R3係C1-C6-烷基-OH。
R4係選自(CRaRb)p-C1-C9-雜芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-環烷基、及(CRaRb)p-C2-C6-雜環烷基，其中雜芳基、芳基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係(CRaRb)p-C1-C9-雜芳基，其可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係(CRaRb)p-C3-C7-環烷基，其可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係(CRaRb)p-C2-C6-雜環烷基，其可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係苯基或吡啶基，其中該苯基或吡啶基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基及C1-C6-鹵烷基的基團取代。在一具體實施例中，R4係苯基，其中該苯基係經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基及C1-C6-鹵烷基的基團取代。在另一具體實施例中，R4係吡啶基，其中該吡啶基係經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基及C1-C6-鹵烷基的基團取代。
R5可選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH。在一具體實施例中，R5係H。
R6可選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C1-C6-烯基、及C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基。在一具體實施例中，R6係選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基。
R7可獨立地選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C(O)C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH。在一具體實施例中，R7每次出現時係獨立地選自H及C1-C6-烷基。在另一實施例中，R7每次出現時係獨立地選自C1-C6-鹵烷基、及C(O)C1-C6-烷基。
R8可選自H及C1-C6-烷基。
R9可選自H及C1-C6-烷基。
Ra可獨立地選自H、-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH。
Rb可獨立地選自H及C1-C6-烷基。
m可係0、1、2、3、或4。
n可係0、1、2、3、或4。
p可係0、1、2、3、或4。
q可係0或1。
線係指可選地雙鍵。
在實施例中，A係CH2或C=O。在實施例中，A係CH2。在其他實施例中，A係C=O。
R1可係H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C1-C6-烷基-OH、或C1-C6-鹵烷基。在實施例中，R1係H。在實施例中，R1係C1-C6-烷基。在實施例中，R1係C1-C6-烯基。在實施例中，R1係C1-C6-烷基-OH。在實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基。
在實施例中，可能有0、1、2、3、或4個R2取代基：m係0、1、2、3、或4。
各R2可獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、或C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。在某些實施例中，m係0且無R2取代。在某些實施例中，m係1且有一個R2取代。在某些實施例中，m係2且有二 個R2取代。在某些實施例中，m係3且有三個R2取代。在某些實施例中，m係4且有四個R2取代。
在某些實施例中，至少一個R2係-OH。在某些實施例中，至少一個R2係鹵基。在某些實施例中，至少一個R2係C1-C6-烷基。在某些實施例中，至少一個R2係C1-C6-伸烷基。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-OR6。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-N(R7)2。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-SR8。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-S(O)R8。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-S(O)2R8。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-C(O)OR9。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-OC(O)R9。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-OC(O)OR9。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2。在某些實施例中，至少一個R2係C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。
在某些實施例中，R2係經1、2、或3個基團取代。R2每次以烷基、環烷基、或雜環烷基出現時，可選地可經-OH或鹵基取代。例如，R2可係烷基，且該烷基係經-OH取代；或R2可係烷基，且該烷基係經至少一個氟原子取代。R2可係環烷基，且該環烷基係經-OH取代；或R2可係環烷基，且該環烷基係經至少一個氟原子取代。R2可係雜環烷基，且該雜環烷基係經-OH取代；或R2可係雜環烷基，且該雜環烷基係經至少一個氟原子取代。
在實施例中，可能有0、1、2、3、或4個R3取代基：n係0、1、2、3、或4。在某些實施例中，n係0且無R3取代。在某些實施例中，n係1且有一個R3取代。在某些實施例中，n係2且有二個R3取代。在某些實施例中，n係3且有三個R3取代。在某些實施例中，n係4且有四個R3取代。
各R3可獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH。在某些實施例中，至少一個R3係-OH。在某些實施例中，至少一個R3係鹵基。在某些實施例中，至少一個R3係C1-C6-烷基。在某些實施例中，至少一個R3係C1-C6-鹵烷基。在某些實施例中，至少一個R3係-O-C1-C6-烷基。在某些實施例中，至少一個R3係C1-C6-烷基-OH。
R4係選自(CRaRb)p-C1-C9-雜芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-環烷基、及(CRaRb)p-C2-C6-雜環烷基，其中雜芳基、芳基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係(CRaRb)p-C1-C9-雜芳基，其可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係(CRaRb)p-C3-C7-環烷基，其可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係(CRaRb)p-C2-C6-雜環烷基，其可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代。在某些實施例中，R4係苯基或吡啶基，其中該苯基或吡啶基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基及C1-C6-鹵烷基的基團取代。在一具體實施例中，R4係苯基，其中該苯基係經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基及C1-C6-鹵烷基的基團取代。在另一具體實施例中，R4係吡啶基，其中該吡啶基係經1、 2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基及C1-C6-鹵烷基的基團取代。
R5可選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH。在一具體實施例中，R5係H。
R6可選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C1-C6-烯基、及C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基。在一具體實施例中，R6係選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基。
R7可獨立地選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH。在一具體實施例中，R7每次出現時係獨立地選自H及C1-C6-烷基。
R8可選自H及C1-C6-烷基。
R9可選自H及C1-C6-烷基。
Ra可獨立地選自H、-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH。
Rb可獨立地選自H及C1-C6-烷基。
m可係0、1、2、3、或4。
n可係0、1、2、3、或4。
p可係0、1、2、3、或4。
q可係0或1。
線係指可選地雙鍵。
在式I之化合物的一實施例中，A係C=O。
在式I之化合物的另一實施例中，A係CH2。在式I之化合物的一實施例中，q係1。
在式I之化合物的另一實施例中，R1係H、C1-C6-烷基、或C1-C6-鹵烷基。在一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基。在另一具體實施例中，R1係-CH3或-CH2CHF2。在一更具體實施例中，R1係-CH3。
在式I之化合物的另一實施例中，R4係苯基或吡啶基，其中該苯基或吡啶基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基及C1-C6-鹵烷基的基團取代，且R5係H。
在式I之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基；R2係C1-C6-烷基或C0-C6-烷基-OR6，其中烷基係經鹵基取代，且R6係H或C1-C6-鹵烷基；R3係C1-C6-烷基；R4係經1或2個各自獨立地選自鹵基及-CN的基團取代之苯基；R5係H；m係1；且n係1。
在式I之另一具體實施例中，R1係甲基；R2係-CH2F或CH2-O-CH2CHF2；R3係甲基；R4係經1或2個各自獨立地選自F及-CN的基團取代之苯基；R5係H；m係1；且n係1。
在式I之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2F，R4係苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基係經1至3個獨立地選自鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代，R5係H，且n係0。
在式I之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2OCH2CHF2，R4係苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基係經1至3個獨立地選自鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代，R5係H，n係1，且R3係C1-C6-烷基。
在另一實施例中，式I之化合物具有式II之結構： 或其醫藥上可接受之鹽。
在式II之化合物的一實施例中，R1係H、C1-C6-烷基、或C1-C6-鹵烷基。在一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基。在另一 具體實施例中，R1係-CH3或-CH2CHF2。在一更具體實施例中，R1係-CH3。
在式II之化合物的另一實施例中，R4係苯基或吡啶基，其中該苯基或吡啶基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基及C1-C6-鹵烷基的基團取代，且R5係H。
在另一實施例中，式I或式II之化合物具有式III之結構： 或其醫藥上可接受之鹽，其中m係0、1、或2。
在式III之化合物的一實施例中，R1係H、C1-C6-烷基、或C1-C6-鹵烷基。在一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基。在另一具體實施例中，R1係-CH3或-CH2CHF2。在一更具體實施例中，R1係-CH3。
在式III之化合物的另一實施例中，R4係苯基或吡啶基，其中該苯基或吡啶基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基及C1-C6-鹵烷基的基團取代，且R5係H。
在另一實施例中，在本文中提供具有式V之結構的化合物： 或其醫藥上可接受之鹽，其中A係CH2或C=O；R1係H、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C1-C6-烷基-OH、或C1-C6-鹵烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代；R3每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R4係選自(CRaRb)p-C1-C9-雜芳基、(CRaRb)p-C6-C12-芳基、(CRaRb)p-C3-C7-環烷基、及(CRaRb)p-C2-C6-雜環烷基，其中雜芳基、芳基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代； R5係選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R6係選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C1-C6-烯基、及C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基；R7每次出現時係獨立地選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C(O)C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R8係選自H及C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；Ra每次出現時係獨立地選自H、-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；Rb每次出現時係獨立地選自H及C1-C6-烷基；m係0、1、2、3、或4；n係0、1、2、3、或4；p係0、1、2、3、或4；且線係指可選地雙鍵。
在式V之化合物的一實施例中，A係C=O。在另一實施例中，R1係H或C1-C6-烷基。在另一實施例中，R1係-CH3。在一進一步實施例中，m係0。
在式V之化合物的另一實施例中，R4係(CRaRb)p-C1-C5-雜芳基或(CRaRb)p-C6-芳基，其中雜芳基及芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代；Ra係H或C1-C6-烷基；Rb係H或C1-C6-烷基；且p係0或1。
在式V之化合物的一進一步實施例中，A係C=O；R1係-CH3；R4係(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C1-C6-烷基的基團取代； R5係H；m係0；n係0；且p係0。
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的一實施例中，m係0、1、或2；且R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代。
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的一實施例中，m係1或2；且R2每次出現時係獨立地選自-CH2N(H)(C(O)-CH3)、-CH2N(H)CH2CHF2、CH2N(H)CH2CF3、或CH(OH)CH=CH2；或二個R2基團一起形成螺-環丁基，其經-OH取代。
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的一實施例中，m係0、1、或2；且R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代。
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的一實施例中，m係1或2；且 R2每次出現時係獨立地選自=CH2、-CH2OH、-OH、-F、-CH3、-CHF2、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CHF2、-NH2、-N(CH3)2、嗎啉基、三亞甲亞胺基、吡咯啶基、-SCH3、-S(O)CH3、-S(O)2CH3、-CH2C(O)OCH3、-CH2CH2OH、-C(O)OH、-C(O)OCH3、-C(O)OCH2CH3、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-C(OH)(CH3)2、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2CH3、及-CH(OH)-環丙基，其中嗎啉基、三亞甲亞胺基、及吡咯啶基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代。
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，m係0、1、或2；且R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-烯基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代。
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，m係1或2；且R2每次出現時係獨立地選自=CH2、-CH2OH、-OH、-F、-CH3、-CHF2、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CHF2、-NH2、-N(CH3)2、嗎啉基、三亞甲亞胺基、吡咯啶基、-SCH3、-S(O)CH3、-S(O)2CH3、-CH2C(O)OCH3、-CH2CH2OH、-C(O)OH、-C(O)OCH3、-C(O)OCH2CH3、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-C(OH)(CH3)2、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2CH3、及-CH(OH)-環丙基，其中嗎啉基、三亞甲亞胺基、及吡咯啶基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代。
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，n係0、1、或2；且R3每次出現時係選自-OH、鹵基及C1-C6-烷基。
在式V中任一者之化合物的一實施例中，n係0、1、或2；且R3每次出現時係選自-OH、鹵基及C1-C6-烷基。
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的一實施例中，R4係(CRaRb)p-C1-C5-雜芳基或(CRaRb)p-C6-芳基，其中雜芳基及芳基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代；Ra係H或C1-C6-烷基；Rb係H或C1-C6-烷基；且p係0或1。
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的一實施例中，R4係C1-C5-雜芳基或C6-芳基，其等之任一者係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代。
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的一進一步實施例中，R4係苯基或吡啶基，其等之任一者係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代。
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的一實施例中，R4係選自由下列所組成之群組：
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的另一實施例中，R4係選自由下列所組成之群組：
在式I、II、III、或V中任一者之化合物的另一實施例中，R4係
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，R4係(CRaRb)p-C1-C5-雜芳基或(CRaRb)p-C6-芳基，其中雜芳基及芳基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、-O-C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH的基團取代；Ra係H或C1-C6-烷基； Rb係H或C1-C6-烷基；且p係0或1。
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，R4係C1-C5-雜芳基或C6-芳基，其等之任一者係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代。
在式I、II、或III中任一者之化合物的一進一步實施例中，R4係苯基或吡啶基，其等之任一者係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自鹵基、-CN、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代。
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，R4係選自由下列所組成之群組：
在式I、II、或III中任一者之化合物的另一實施例中，R4係選自由下列所組成之群組：
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，R5係H或C1-C6-烷基。
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，R5係H。
在式V中任一者之化合物的一實施例中，R5係H或C1-C6-烷基。
在式V中任一者之化合物的一實施例中，R5係H。在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，A係C=O；R1係C1-C6-烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代；R4係(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C1-C6-烷基的基團取代；R5係H；R6係選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C1-C6-烯基、及C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基；R7每次出現時係獨立地選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C(O)C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R8係選自H及C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；m係0、1或2；n係0；p係0；且q係1。
在式I、II、或III中任一者之化合物的另一實施例中， A係C=O；R1係C1-C6-烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R2基團一起形成C3-C6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代；R4係(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C1-C6-烷基的基團取代；R5係H；R6係選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基；R7每次出現時係獨立地選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C(O)C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R8係C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；m係0、1或2；n係0；p係0；且q係1。
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，A係C=O；R1係C1-C6-烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基- OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；R4係(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C1-C6-烷基的基團取代；R5係H；R6係選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C1-C6-烯基、及C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基；R7每次出現時係獨立地選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R8係選自H及C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；m係0、1或2；n係0；p係0；且q係1。
在式I、II、或III中任一者之化合物的另一實施例中，A係C=O；R1係C1-C6-烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；R4係(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C1-C6-烷基的基團取代；R5係H；R6係選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基； R7每次出現時係獨立地選自H及C1-C6-烷基；R8係C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；m係0、1或2；n係0；p係0；且q係1。
在式I、II、或III中任一者之化合物的一實施例中，A係C=O；R1係C1-C6-烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；R4係(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C1-C6-烷基的基團取代；R5係H；R6係選自H、C1-C6-烷基、C1-C6-鹵烷基、C1-C6-烯基、及C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基；R7每次出現時係獨立地選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-烷基-OH；R8係選自H及C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；m係0、1或2；n係0；p係0；且 q係1。
在式I、II、或III中任一者之化合物的另一實施例中，A係C=O；R1係C1-C6-烷基；R2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、及C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2，其中烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；R4係(CRaRb)p-C6-C12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C1-C6-烷基的基團取代；R5係H；R6係選自H、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基；R7每次出現時係獨立地選自H及C1-C6-烷基；R8係C1-C6-烷基；R9係選自H及C1-C6-烷基；m係0、1或2；n係0；p係0；且q係1。
在另一實施例中，式III之化合物具有式IV之結構 其中m係1或2；且R2每次出現時係獨立地選自-CH2N(H)(C(O)-CH3)、-CH2N(H)CH2CHF2、-CH2N(H)CH2CF3、及-CH(OH)CH=CH2；或二個R2基團一起形成螺-環丁基，其經-OH取代。在另一實施例中，R2每次出現時係獨立地選自=CH2、-CH2OH、-OH、-F、-CH3、-CHF2、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CHF2、-NH2、-N(CH3)2、嗎啉基、三亞甲亞胺基、吡咯啶基、-SCH3、-S(O)CH3、-S(O)2CH3、-CH2C(O)OCH3、-CH2CH2OH、-C(O)OH、-C(O)OCH3、-C(O)OCH2CH3、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-C(OH)(CH3)2、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2CH3、及-CH(OH)-環丙基，其中嗎啉基、三亞甲亞胺基、及吡咯啶基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代。
在式IV之另一實施例中，m係1或2；且R2每次出現時係獨立地選自=CH2、-CH2OH、-OH、-F、-CH3、-CHF2、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CHF2、-NH2、-N(CH3)2、嗎啉基、三亞甲亞胺基、吡咯啶基、-SCH3、-S(O)CH3、-S(O)2CH3、-CH2C(O)OCH3、-CH2CH2OH、-C(O)OH、-C(O)OCH3、-C(O)OCH2CH3、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-C(OH)(CH3)2、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2CH3、及-CH(OH)-環丙基，其中嗎啉基、三亞甲亞胺基、及吡咯啶基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代。
在本文中提供根據下列實施例之化合物：在式I之一實施例中，A係C=O；R1係C1-C6-烷基；R4係經至少一個鹵基取代之(CRaRb)p-C6-C12-芳基；R5係H；n係0；p係0；m係1或2；且各R2係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜 環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、或C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。在該實施例中，若R2係烷基、伸烷基、環烷基、或雜環烷基，R2可經-OH或鹵基取代。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(C(O)CH3)，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(CH2CHF2)，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(CH2CHF2)，R4係經1至2個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(CH2CF3)，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(CH2CF3)，R4係經1至2個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH=CH2，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH=CH2，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH=CH2，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(CH2CHF2)，R4係經1至3個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(CH2CHF2)，R4係經1至3個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(CH2CHF2)，R4係經1至3個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(CH2CHF2)，R4係經1至3個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(H)(CH2CHF2)，R4係經1至2個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，二個R2基團一起形成螺-環丁基，其經-OH取代，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係2，且n係0。
在式I之一實施例中，A係C=O；R1係C1-C6-烷基；R4係經至少一個鹵基取代之(CRaRb)p-C6-C12-芳基；R5係H；n係0；p係0；m係1或2；且各R2係獨立地選自-OH、鹵基、C1-C6-烷基、C1-C6-伸烷基、C0-C6-烷基-C3-C6-環烷基、C0-C6-烷基-C2-C6-雜環烷基、C0-C6-烷基-OR6、C0-C6-烷基-N(R7)2、C0-C6-烷基-SR8、C0-C6-烷基-S(O)R8、C0-C6-烷基-S(O)2R8、C0-C6-烷基-C(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)R9、C0-C6-烷基-OC(O)OR9、C0-C6-烷基-OC(O)N(R7)2、 或C0-C6-烷基-C(O)N(R7)2。在該實施例中，若R2係烷基、環烷基、或雜環烷基，R2可經-OH或鹵基取代。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2-環丙基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R2係-CH2OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-N(H)(C1-C6-烷基)，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之又一實施例中，R1係C1-C6-烷基，一個R2係C1-C6-烷基且另一個R2係-C(O)OCH2CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係2，且n係0。
在式III之又一實施例中，R1係C1-C6-烷基，一個R2係C1-C6-烷基且另一個R2係-CH2OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係2，且n係0。
在式III之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係經二個氟基取代的C2-C6-雜環烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係C2-C6-雜環烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2-C2-C6-雜環烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係經二個氟基取代的-CH2-C2-C6-雜環烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2N(C1-C6-烷基)(C1-C6-烷基)，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2NH2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之又一實施例中，R1係C1-C6-烷基，一個R2係-CH2CHF2且另一個R2係-CH2OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係2，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH2CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH2F，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CHF2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式II之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-C(O)OCH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式II之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-C(O)N(C1-C6-烷基)(C1-C6-烷基)，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式II之又一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH2OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式II之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，一個R2係C1-C6-烷基且另一個R2係-CH2OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係2，且n係0。
在式II之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，一個R2係C1-C6-烷基且另一個R2係-C(O)OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係2，且n係0。
在式II之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-C(O)OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式II之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基；R2係C1-C6-烷基或C0-C6-烷基-OR6，其中烷基係經鹵基取代，且R6係H或C1-C6-鹵烷基；R3係C1-C6-烷基；R4係經1或2個各自獨立地選自鹵基及-CN的基團取代之苯基；R5係H；m係1；且n係1。
在式II之另一具體實施例中，R1係甲基；R2係-CH2F或CH2-O-CH2CHF2；R3係甲基；R4係經1或2個各自獨立地選自F及-CN的基團取代之苯基；R5係H；m係1；且n係1。
在式II之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2F，R4係苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基係經1至3個獨立地選自鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代，R5係H，且n係0。
在式II之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2OCH2CHF2，R4係苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基係經1至3個獨立地選自鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代，R5係H，n係1，且R3係C1-C6-烷基。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係經二個氟基取代的-CH2-C2-C6-雜環烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2NH2，R4係經1至2個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-N(H)(C1-C6-烷基)，R4係經1至2個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係經二個氟基取代的-CH2-C2-C6-雜環烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2NH2，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CHF2，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH3，R4係經1至3個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一進一步實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH3，R4係經1至3個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH3，R4係經1至3個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH3，R4係經1至3個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH3，R4係經1至3個氟基取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)CH2CH3，R4係經1至4個氟基取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基-OH，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至3個獨立地選自氟、溴、及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係0，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的吡啶，R5係H，m係0，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係0，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及Me基團取代的苯基，R5係H，m係0，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至3個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2之一例係甲基且R2之另一例係氟，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係2，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係甲基，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH2OH，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH2OH，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至3個獨立地選自氟及CF3的 基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH2OH，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至3個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH2OH，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH2OH，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH2OH，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至3個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH2OH，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至3個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R2係CH2OH，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH(OH)CH2CH3，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及 CF3的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH(OH)CH2CH3，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及CN的基團取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係CH(OH)CH2CH3，R3係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係1。在一更具體實施例中，R3係(R)-甲基。
在式III之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係氟，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係=CH2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2之一例係-OH且R2之另一例係-CH2OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係2，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，二個R2皆係氟，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係2，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係氟，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係氟，R4係經1至2個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係氟，R4係經1至2個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的吡啶基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係氟，R4係經1至2個獨立地選自氟及-CN的取代基取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係氟，R4係經1至2個獨立地選自氟及-CH3的取代基取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係氟，R4係經1至2個獨立地選自氟及-CF3的取代基取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係氟，R4係經1至3個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的吡啶基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係氟，R4係經1至3個獨立地選自氟及溴的鹵素原子取代的吡啶基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-OCH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-OCH2CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-OCH2CHF2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-NH2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-N(CH3)2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係嗎啉-1-基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係3,3-二氟三亞甲亞胺-1-基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係三亞甲亞胺-1-基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係吡咯啶-1-基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-SCH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-S(O)CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-S(O)2CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2C(O)OCH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2CH2OH，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-C(O)OCH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-C(OH)(CH3)2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-C(O)NHCH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-C(O)N(CH3)2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH(OH)-環丙基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CHF2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CHF2，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一實施例中，R1係C1-C6-鹵烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，且n係0。
在式I之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，n係0，且q係0。
在式II之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH3，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係1，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基；R2係C1-C6-烷基或C0-C6-烷基-OR6，其中烷基係經鹵基取代，且R6係H或C1-C6-鹵烷基；R3係C1-C6-烷基；R4係經1或2個各自獨立地選自鹵基及-CN的基團取代之苯基；R5係H；m係1；且n係1。
在式III之另一具體實施例中，R1係甲基；R2係-CH2F或CH2-O-CH2CHF2；R3係甲基；R4係經1或2個各自獨立地選自F及-CN的基團取代之苯基；R5係H；m係1；且n係1。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2F，R4係苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基係經1至3個獨立地選自鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代，R5係H，且n係0。
在式III之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2OCH2CHF2，R4係苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基係經1至3個獨立地選自鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代，R5係H，n係1，且R3係C1-C6-烷基。
在式V之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，且n係0。
在式V之一實施例中，R1係C1-C6-烷基，R4係經1至2個獨立地選自氟及氯的鹵素原子取代的苯基，R5係H，m係0，n係0，且係雙鍵。
在式V之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基；R2係C1-C6-烷基或C0-C6-烷基-OR6，其中烷基係經鹵基取代，且R6係H或C1-C6-鹵烷基；R3係C1-C6-烷基；R4係經1或2個各自獨立地選自鹵基及-CN的基團取代之苯基；R5係H；m係1；且n係1。
在式V之另一具體實施例中，R1係甲基；R2係-CH2F或CH2-O-CH2CHF2；R3係甲基；R4係經1或2個各自獨立地選自F及-CN的基團取代之苯基；R5係H；m係1；且n係1。
在式V之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2F，R4係苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基係經1至3個獨立地選自鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代，R5係H，且n係0。
在式V之另一具體實施例中，R1係C1-C6-烷基，R2係-CH2OCH2CHF2，R4係苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基係經1至3個獨立地選自鹵基、-CN、-SF5、C1-C6-烷基、及C1-C6-鹵烷基的基團取代，R5係H，n係1，且R3係C1-C6-烷基。
式I、II、III、及IV之某些實施例顯示於下表1。
揭示化合物。
在一實施例中，式I、II、III、及IV之化合物係選自：
式I、II、III、及IV之某些實施例顯示於下表2。
揭示化合物。
在一實施例中，式I、II、III、及IV之化合物係選自：
式I、II、III、及IV之某些實施例顯示於下表3。
揭示化合物。
在一實施例中，式I、II、III、及IV之化合物係選自：
式I、II、III、及IV之某些實施例顯示於下表4。
揭示化合物。
在一實施例中，式I、II、III、及IV之化合物係選自：
揭示化合物可具有一或多個立體中心，且各立體中心可獨立地以R或S組態存在。在一實施例中，本文所述之化合物係以光學活性或外消旋形式存在。應了解，本文所述之化合物涵蓋具有本文所述治療有用性質之外消旋、光學活性、區域位置異構及立體異構形式、或其組合。
光學活性形式係以任何合適方式製備，其非限制性實例包括以再結晶技術解析外消旋形式、自光學活性起始材料合成、掌性合成、或使用掌性固定相進行層析分離。在一實施例中，利用一或多種異構物之混合物作為本文所述之揭示化合物。在另一實施例中，本文所述之化合物包含一或多個掌性中心。這些化合物藉由任何方式製 備，包括立體選擇性合成、鏡像選擇性合成、或分離鏡像異構物或非鏡像異構物之混合物。化合物及其異構物可藉由任何方式解析，其非限制性實例包括化學方法、酶方法、分段結晶、蒸餾、及層析。
亦應當理解，具有相同分子式但其原子鍵結的本質或順序或其原子在空間中的排列有所不同的化合物被稱為「異構物(isomer)」。其等原子在空間中排列不同之異構物稱為「立體異構物(stereoisomer)」，例如非鏡像異構物、鏡像異構物、及限制構形異構物。
彼此非為鏡像的立體異構物稱為「非鏡像異構物(diastereomer)」，而彼此為不可重疊鏡像之立體異構物稱為「鏡像異構物(enantiomer)」。當化合物具有不對稱中心時，例如該中心係鍵結到四個不同基團，其可能有一對鏡像異構物。鏡像異構物可藉由其不對稱中心的絕對組態來表徵，其係由Cahn及Prelog的R及S順序法則來描述，或是由分子旋轉偏振光平面的方式來指定為右旋或左旋(即分別為(+)或(-)異構物)。掌性化合物可存在為個別的鏡像異構物或為彼等之混合物。含有相同比例之鏡像異構物的混合物稱為「外消旋混合物(racemic mixture)」。
除非另有說明，本說明書及申請專利範圍中對特定化合物之描述或命名係意欲包括兩種個別的鏡像異構物、及彼等之外消旋混合物或其他混合物。在本揭露內，出現於本文所述之任何結構中的碳、氧、或氮原子上的任何開放價均指示氫原子之存在。當結構中存在掌性中心，但該中心未顯示特定立體化學時，該結構涵括兩種分開或以混合物形式存在之鏡像異構物。用於判定立體化學及分離立體異構物的方法在本技術領域中為習知。
在實施例中，揭示化合物可存在為互變異構物。所有互變異構物皆包括在本文中呈現之化合物的範圍內。
本文所述之化合物亦包括同位素標記之化合物，其中一或多個原子係由具有相同原子數但原子量或質量數與在自然界中通常發現之原子質量或質量數不同之原子替代。適合納入本文所述之化合 物的同位素實例包括且不限於2H、3H、11C、13C、14C、36Cl、18F、123I、125I、13N、15N、15O、17O、18O、32P、及35S。在一實施例中，同位素標記之化合物可用於藥物或受質組織分布試驗。在另一實施例中，以較重同位素例如氘進行取代提供較高的代謝穩定性(例如，增加體內半衰期或減少劑量需求)。
在又一實施例中，以正電子發射同位素(例如11C、18F、15O及13N)進行取代可在正電子發射斷層攝影(PET)試驗用於檢測受質受體的佔據情形。同位素標記之化合物係藉由任何合適方法或藉由使用適當同位素標記之試劑代替原本採用之非標記試劑來製備。
在一實施例中，本文所述之化合物藉由其他方式標記，包括但不限於使用發色團或螢光部份、生物發光標記、或化學發光標記。
本文所述之化合物及具有不同取代基之其他相關化合物係使用本文所述及如下文獻中所述之技術及材料合成：例如，Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis,Volumes 1-17(John Wiley and Sons,1991)；Rodd's Chemistry of Carbon Compounds,Volumes 1-5 and Supplementals(Elsevier Science Publishers,1989)；Organic Reactions,Volumes 1-40(John Wiley and Sons,1991),Larock's Comprehensive Organic Transformations(VCH Publishers Inc.,1989),March,Advanced Organic Chemistry 4th Ed.,(Wiley 1992)；Carey and Sundberg,Advanced Organic Chemistry 4th Ed.,Vols.A and B(Plenum 2000,2001)，及Green and Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis 3rd Ed.,(Wiley 1999)(所有文獻中之該等揭露以引用方式併入本文中)。製備本文所述之化合物之一般方法係藉由使用適當試劑及條件來修改，以導入在本文提供之式中發現的各種部份。
本文所述之化合物係使用任何合適程序自可購自商業來源或使用本文所述之程序製備之化合物開始合成。
使用方法
在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
在本文中亦提供在有需要之個體中清除HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
在本文中提供在有需要之個體中減少與HBV感染相關之HBV病毒負荷之方法，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
另外，在本文中提供在有需要之個體中減少HBV感染復發之方法，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
在本文中提供在有需要之個體中抑制或減少含HBVDNA顆粒或含HBV RNA顆粒形成或存在之方法，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
在某些態樣中，本文所述之方法及/或組成物有效抑制或減少HBV相關顆粒在體外或體內(例如，在細胞、組織、器官(例如，肝臟)、有機體、或類似者中)之形成或存在。HBV相關顆粒可包含HBV DNA(即，線性及/或共價閉合環狀DNA(cccDNA))及/或HBV RNA(即，前基因體RNA及/或次基因體RNA)。因此，HBV相關顆粒包括含HBV DNA顆粒或含HBV RNA顆粒。
如本文中所使用，「HBV相關顆粒(HBV-asociated particle)」係指感染性HBV病毒粒子(即，丹恩顆粒(Dane particle))及非感染性HBV次病毒顆粒(即，HBV長條(HBV filament)及/或HBV球顆粒(HBV sphere))兩者。HBV病毒粒子包含外套膜(包括表面蛋白)、核殼體(nucleocapsid)(包含核心蛋白)、至少一個聚合酶蛋白、及HBV基因體。HBV長條及HBV球顆粒包含HBV表面蛋白，但缺乏核心蛋白、聚合酶及HBV基因體。HBV長條及HBV球顆粒亦統稱為表面抗原(HBsAg)顆粒。HBV球顆粒包含中型及小型HBV表面蛋白。HBV長條亦包括中型、小型及大型HBV表 面蛋白。HBV次病毒顆粒可包括非顆粒或分泌性HBeAg，其作為HBV活性複製之標誌。
在本文中提供在有需要之個體中減少HBV感染之不良生理影響之方法，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
在本文中亦提供在有需要之個體中減少、減緩、或抑制HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
在本文中提供在有需要之個體中誘導HBV感染之肝損傷逆轉之方法，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
在本文中提供在有需要之個體中減少HBV感染之長期抗病毒治療之生理影響之方法，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
在本文中提供在有需要之個體中預防性治療HBV感染之方法，其中該個體受潛在HBV感染之影響，其包含向該個體投予治療有效量的揭示化合物。
在一實施例中，個體對其他治療類別的HBV藥物(例如，HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、文獻描述的殼體組裝調節劑、具有不同或未知機制的抗病毒化合物、及類似物、或其組合)有抗性。在另一實施例中，相較於其他治療類別的HBV藥物減少HBV感染個體之病毒負荷的程度，揭示方法以較大程度或較快速度減少個體之病毒負荷。
在一實施例中，相較於單獨投予至少一種額外治療劑，投予揭示化合物或其醫藥上可接受之鹽允許在有需要之個體中，以低於達成預防性治療HBV感染的類似結果所需之劑量或頻率投予至少一種額外治療劑。
在一實施例中，相較於投予選自由HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、不同的殼體組裝調節劑、具有不同或未知機制的抗病毒化合物、及其任何組合所組成之群組的化合物，投予揭示化合物或其醫藥上可接受之鹽以較大程度或較快速度減少個體之病毒負荷。
在一實施例中，揭示方法減少HBV感染個體之HBV病毒負荷，因此允許使用較低劑量或組合療法的變化方案。
在一實施例中，相較於其他類別的HBV藥物，揭示方法造成較低HBV病毒突變或HBV病毒抗藥性發生率，藉此允許長期療法且最小化改變治療方案的需要。
在一實施例中，相較於投予選自由HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、不同的殼體組裝調節劑、具有不同或未知機制的抗病毒化合物、及其組合所組成之群組的化合物，投予本發明之化合物或其醫藥上可接受之鹽造成較低病毒突變或病毒抗藥性發生率。
在一實施例中，揭示方法增加血清抗體從HBV感染轉換到非HBV感染的比率或從可偵測到HBV病毒負荷到無法偵測到HBV病毒負荷的比率超過現行治療方案。如本文中所使用，「血清抗體轉換(seroconversion)」係指HBV抗體產生且變為可偵測得到的時期。
在一實施例中，揭示方法在有需要之個體中增加或正常化或恢復正常健康、誘發正常健康之完整復原、恢復預期壽命、或化解病毒感染。
在一實施例中，揭示方法消除或降低自HBV感染細胞釋放的HBV RNA顆粒數目，因此提高、延長、或增加揭示化合物的治療好處。
在一實施例中，揭示方法清除HBV感染個體的HBV，藉此排除長期或終生治療的需求、或縮短治療期、或允許減少其他抗病毒劑的劑量。
在另一實施例中，揭示方法進一步包含監測或偵測對象的HBV病毒負荷，且其中該方法係進行一段時間。
在一實施例中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的式I之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的式II之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的式III之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的式IV之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的式V之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的表1之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的表2之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的表3之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施例中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含向該個體投予治療有效量的表4之化合物、或其醫藥上可接受之鹽。
在本文提供之任何方法可進一步包含監測或偵測對象的HBV病毒負荷，其中該方法係進行一段時間包括直到HBV病毒無法被偵測到的時間。
組合療法
揭示化合物可用於與一或多種可用於治療HBV感染的額外化合物組合。這些額外化合物可包含其他揭示化合物及/或已知可治療、預防、或減少HBV感染之症狀或效應之化合物。該等化合物包括但不限於HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、文獻描述之殼體組裝調節劑、反轉錄酶抑制劑、免疫調節劑、TLR促效劑、及其他具有影響HBV生命週期或影響HBV感染後果之不同或未知機制的藥物。
在非限制性實例中，揭示化合物可與一或多種選自包含下列之群組的藥物(或其鹽)組合使用：HBV反轉錄酶抑制劑、及DNA及RNA聚合酶抑制劑包括但不限於拉米夫定(lamivudine)(3TC、Zeffix、Heptovir、Epivir、及Epivir-HBV)、恩替卡韋(entecavir)(Baraclude、Entavir)、阿德福韋酯(adefovir dipivoxil)(Hepsara、Preveon、bis-POM PMEA)、替諾福韋雙索酯富馬酸鹽(tenofovir disoproxil fumarate)(Viread、TDF或PMPA)；干擾素包括但不限於干擾素α(IFN-α)、干擾素β(IFN-β)、干擾素λ(IFN-λ)、及干擾素γ(IFN-γ)；病毒進入抑制劑；病毒成熟抑制劑；文獻描述之殼體組裝調節劑，例如但不限於BAY 41-4109；反轉錄酶抑制劑；免疫調節劑例如TLR促效劑；及具有不同或未知機制之藥物例如但不限於AT-61((E)-N-(1-氯-3-側氧基-1-苯基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)苯甲醯胺)、AT-130((E)-N-(1-溴-1-(2-甲氧基苯基)-3-側氧基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)-4-硝基苯甲醯胺)、及類似的類似物。
在一實施例中，額外治療劑係干擾素。用語「干擾素(interferon)」或「IFN」係指抑制病毒複製及細胞增生且調節免疫反應之高度同源、物種特異性蛋白質家族的任何成員。人類干擾素分成 三個類別：第I型包括干擾素-α(IFN-α)、干擾素-β(IFN-β)、及干擾素-ω(IFN-ω)，第II型包括干擾素-γ(IFN-γ)，及第III型包括干擾素-λ(IFN-λ)。已開發並有市售品之重組形式干擾素涵蓋於本文中所使用之用語「干擾素(interferon)」中。干擾素亞型，例如經化學修飾或突變之干擾素，亦涵蓋於本文中所使用之用語「干擾素(interferon)」中。化學修飾干擾素可包括聚乙二醇化干擾素及糖化干擾素。干擾素之實例亦包括但不限於干擾素-α-2a、干擾素-α-2b、干擾素-α-n1、干擾素-β-1a、干擾素-β-1b、干擾素-λ-1、干擾素-λ-2、及干擾素-λ-3。聚乙二醇化干擾素之實例包括聚乙二醇化干擾素-α-2a及聚乙二醇化干擾素α-2b。
因此，在一實施例中，式I、II、III、IV、或V之化合物可與選自由干擾素α(IFN-α)、干擾素β(IFN-β)、干擾素λ(IFN-λ)、及干擾素γ(IFN-γ)所組成之群組之干擾素組合投予。在一特定實施例中，干擾素係干擾素-α-2a、干擾素-α-2b、或干擾素-α-n1。在另一特定實施例中，干擾素-α-2a或干擾素-α-2b係經聚乙二醇化。在一較佳實施例中，干擾素-α-2a係聚乙二醇化干擾素-α-2a(PEGASYS)。在另一實施例中，額外治療劑係選自免疫調節劑或免疫刺激劑療法，其包括屬於干擾素類別之生物劑。
另外，額外治療劑可為具有不同或未知機制之藥劑，包括干擾HBV複製或持續存在所需之其他必要病毒蛋白質或宿主蛋白質之功能的藥劑。
在另一實施例中，額外治療劑係阻斷病毒進入或成熟、或靶向HBV聚合酶例如核苷或核苷酸或非核苷(酸)聚合酶抑制劑之抗病毒劑。在組合療法之一進一步實施例中，反轉錄酶抑制劑或DNA或RNA聚合酶抑制劑係齊多夫定(Zidovudine)、去羥肌苷(Didanosine)、紮西他濱(Zalcitabine)、ddA、司他夫定(Stavudine)、拉米夫定(Lamivudine)、阿巴卡韋(Abacavir)、恩曲他濱(Emtricitabine)、恩替卡韋(Entecavir)、阿立他濱(Apricitabine)、阿替韋拉平(Atevirapine)、利巴韋林(ribavirin)、阿昔洛維(acyclovir)、泛 昔洛韋(famciclovir)、伐昔洛韋(valacyclovir)、更昔洛韋(ganciclovir)、纈更昔洛韋(valganciclovir)、替諾福韋(Tenofovir)、阿德福韋(Adefovir)、PMPA、西多福韋(cidofovir)、依法韋侖(Efavirenz)、奈韋拉平(Nevirapine)、地拉韋啶(Delavirdine)、或依曲韋林(Etravirine)。
在一實施例中，額外治療劑係誘導自然、有限免疫反應導致誘導對抗非相關病毒之免疫反應的免疫調節劑。換言之，免疫調節劑可影響抗原呈現細胞成熟、T細胞增生及細胞介素釋放(例如，IL-12、IL-18、IFN-α、-β、及-γ及TNF-α等其他者)。
在一進一步實施例中，額外治療劑係TLR調節劑或TLR促效劑，例如TLR-7促效劑或TLR-9促效劑。在組合療法之進一步實施例中，TLR-7促效劑係選自由SM360320(9-苄基-8-羥基-2-(2-甲氧基-乙氧基)腺嘌呤)及AZD 8848(甲基[3-({[3-(6-胺基-2-丁氧基-8-側氧基-7,8-二氫-9H-嘌呤-9-基)丙基][3-(4-嗎啉基)丙基]胺基}甲基)苯基]乙酸酯)所組成之群組。
在本文提供之任何方法中，該方法可進一步包含向個體投予至少一種HBV疫苗、核苷HBV抑制劑、干擾素、或其任何組合。在一實施例中，HBV疫苗係RECOMBIVAX HB、ENGERIX-B、ELOVAC B、GENEVAC-B、或SHANVAC B之至少一者。
在一實施例中，本文所述之方法進一步包含投予至少一種選自由核苷酸/核苷類似物、進入抑制劑、融合抑制劑、及這些或其他抗病毒機制之任何組合所組成之群組的額外治療劑。
在另一態樣中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含藉由向該個體單獨投予治療有效量的揭示化合物或與反轉錄酶抑制劑組合投予；及進一步向該個體投予治療有效量的HBV疫苗，以減少HBV病毒負荷。反轉錄酶抑制劑可為齊多夫定(Zidovudine)、去羥肌苷(Didanosine)、紮西他濱(Zalcitabine)、ddA、司他夫定(Stavudine)、拉米夫定(Lamivudine)、阿巴卡韋(Abacavir)、恩曲他濱(Emtricitabine)、恩替卡韋(Entecavir)、阿立他 濱(Apricitabine)、阿替韋拉平(Atevirapine)、利巴韋林(ribavirin)、阿昔洛維(acyclovir)、泛昔洛韋(famciclovir)、伐昔洛韋(valacyclovir)、更昔洛韋(ganciclovir)、纈更昔洛韋(valganciclovir)、替諾福韋(Tenofovir)、阿德福韋(Adefovir)、PMPA、西多福韋(cidofovir)、依法韋侖(Efavirenz)、奈韋拉平(Nevirapine)、地拉韋啶(Delavirdine)、或依曲韋林(Etravirine)之至少一者。
在另一態樣中，在本文中提供在有需要之個體中治療HBV感染之方法，其包含藉由向該個體單獨投予治療有效量的揭示化合物或與靶向HBV核酸之反股寡核苷酸或RNA干擾劑組合投予；及進一步向該個體投予治療有效量的HBV疫苗，以減少HBV病毒負荷。反股寡核苷酸或RNA干擾劑與具有足夠互補性可靶向HBV核酸，以抑制病毒基因體複製、病毒RNAs轉錄、或病毒蛋白質轉譯。
在另一實施例中，揭示化合物及至少一種額外治療劑係共同調配。在又一實施例中，揭示化合物及至少一種額外治療劑係共同投予。對於本文所述之任何組合療法而言，協同效應可例如使用合適方法計算，例如Sigmoid-Emax方程式(Holford & Scheiner,19981,Clin.Pharmacokinet.6：429-453)、Loewe相加方程式(Loewe & Muischnek,1926,Arch.Exp.Pathol Pharmacol.114：313-326)及中效方程式(Chou & Talalay,1984,Adv.Enzyme Regul.22：27-55)。上述各方程式可應用於實驗數據產生對應圖形，以幫助評估藥物組合的效應。與上述方程式相關之對應圖形分別是濃度-效應曲線、等效線圖曲線及組合指數曲線。
在本文提供之投予組合療法的任何方法的一實施例中，該方法可進一步包含監測或偵測對象的HBV病毒負荷，其中該方法係進行一段時間包括直到HBV病毒無法被偵測到的時間。
投予/劑量/配方
在另一態樣中，在本文中提供包含至少一種揭示化合物或其醫藥上可接受之鹽與醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物。
在本發明之醫藥組成物中之活性成分的實際劑量水準可加以變化，以獲得對於特定病患、組成物及投予模式有效達成所欲治療反應而對病患不具毒性的活性成分之量。
具體而言，所選劑量水準將視多種因素而定，包括所採用之特定化合物的活性、投予時間、化合物排泄速率、治療持續時間、與化合物組合使用之其他藥物、化合物或材料、所治療之病患的年齡、性別、體重、病況、整體健康及先前醫學病史、及醫學領域中廣為周知之類似因素。
所屬技術領域中具有通常知識之醫師例如內科醫師或獸醫師可輕易決定並處方所需之醫藥組成物的有效量。舉例而言，內科醫師或獸醫師可從低於欲達所欲治療效果所需的揭示化合物劑量水準開始投予醫藥組成物，然後逐漸提高劑量直到達到所欲效果。
在具體實施例中，特別有利的是將化合物調配成劑量單位形式，以方便投予及統一劑量。本文中所使用之劑量單位形式係指適合作為單位劑量用於所欲治療病患之物理離散單位；各單位含有預定量之揭示化合物，該量經計算以與所需醫藥媒劑聯合產生所欲治療效果。本發明之劑量單位形式將取決並直接依賴於：(a)揭示化合物之獨特特徵及所欲達成之特定治療效果，及(b)複合/調配該用於治療病患之HBV感染之揭示化合物的固有技藝限制。
在一實施例中，本發明之組成物使用一或多種醫藥上可接受之賦形劑或載劑調配。在一實施例中，本發明之醫藥組成物包含治療有效量之揭示化合物及醫藥上可接受之載劑。
在一些實施例中，揭示化合物的劑量係自約1mg至約2,500mg。在一些實施例中，本文所述組成物所使用之揭示化合物的劑量係小於約10,000mg、或小於約8,000mg、或小於約6,000mg、或小於約5,000mg、或小於約3,000mg、或小於約2,000mg、或小於約1,000mg、或小於約500mg、或小於約200mg、或小於約50mg。類似地，在一些實施例中，本文所述之第二化合物(即另一種用於HBV治療之藥物)的劑量係小於約1,000mg、或小於約800mg、 或小於約600mg、或小於約500mg、或小於約400mg、或小於約300mg、或小於約200mg、或小於約100mg、或小於約50mg、或小於約40mg、或小於約30mg、或小於約25mg、或小於約20mg、或小於約15mg、或小於約10mg、或小於約5mg、或小於約2mg、或小於約1mg、或小於約0.5mg、及其任何及所有整個或部分增量。
在一實施例中，本發明係關於經包裝之醫藥組成物，其包含容器，該容器單獨盛裝治療有效量的揭示化合物、或盛裝治療有效量的揭示化合物與第二醫藥劑之組合；以及使用化合物治療、預防、或減少病患之一或多種HBV感染症狀之說明書。
本發明之任何組成物之投予途徑包括口服、經鼻、經直腸、陰道內、非經腸、經頰、舌下、或局部。本發明所使用之化合物可經調配用於藉由任何合適途徑投予，例如用於口服或非經腸，例如穿皮、穿黏膜(例如，舌下、經舌、(穿)頰、(穿)尿道、經陰道(例如，穿陰道及經陰道周圍)、經鼻(內)及(穿)直腸)、膀胱內、肺內、十二指腸內、胃內、鞘內、皮下、肌內、皮內、動脈內、靜脈內、支氣管內、吸入、及局部投予。
合適組成物及劑型包括例如，錠劑、膠囊、膠囊型錠劑、丸劑、凝膠蓋、口含錠、分散液、懸浮液、溶液、糖漿、顆粒劑、珠粒、穿皮貼劑、凝膠、粉劑、小丸、乳漿劑、菱形錠劑、乳霜、膏糊、硬膏劑、洗液、盤、栓劑、經鼻或口服投予之液體噴霧、吸入之乾粉或氣霧配方、膀胱內投予之組成物及配方、及類似物。應了解，可用於本發明之配方及組成物不限於本文所述之特定配方及組成物。
對於口服應用而言，特別合適者係錠劑、糖衣錠、液體、滴劑、栓劑、或膠囊、膠囊型錠劑及凝膠蓋。意圖用於口服使用之組成物可根據該領域已知之任何方法製備，且該等組成物可含有一或多種選自由適合製造錠劑之惰性、非毒性醫藥賦形劑所組成之群組之藥劑。該等賦形劑包括例如惰性稀釋劑例如乳糖；造粒及崩解劑例 如玉米澱粉；結合劑例如澱粉；及潤滑劑例如硬脂酸鎂。錠劑可為無包覆或可藉由已知技術包覆以求美觀或延緩活性成分之釋放。口服使用之配方亦可呈現為硬明膠膠囊，其中活性成分係與惰性稀釋劑混合。
對於非經腸投予而言，揭示化合物可調配用於注射或輸注，例如靜脈內、肌內或皮下注射或輸注，或用於以推注劑量或連續輸注投予。可使用在油性或水性媒劑中之懸浮液、溶液或乳液，其可選地含有其他調配劑例如懸浮、穩定或分散劑。
所屬技術領域中具有通常知識者將認可或僅使用例行實驗即可確定本文所述之特定程序、實施例、申請專利範圍及實例的許多等效物。該等等效物被認為係屬本發明之範圍內且包含在其隨附之申請專利範圍內。例如，應了解，利用該領域公認之替代物且僅使用例行實驗進行之反應條件的修改，包括但不限於反應時間、反應規模/體積、及實驗試劑例如溶劑、催化劑、壓力、大氣條件例如氮大氣、及還原/氧化劑，係屬本申請案之範圍內。
應了解，當在本文中提供數值及範圍時，這些數值及範圍所涵蓋之所有數值及範圍均應納入本發明之範圍內。另外，所有落於這些範圍內之數值以及數值範圍之上限或下限亦為本申請案所考慮。
下列實例進一步說明本發明之態樣。然而，彼等絕非在本文中闡述之本發明的教示或揭露之限制。
實例
現在將參照以下一般性製備的說明性合成方案和隨後的具體實例來描述可用於本發明之方法的例示性化合物。該領域之熟習技藝者將能夠瞭解，為獲得本文之各種化合物，可適當地選擇起始材料，使得透過反應方案將會帶有最終所欲取代基(在有或沒有適當的保護下)以產生所欲產物。或者，在最終所欲取代基的位置可能需要或希望採用合適基團，該合適基團可在整個反應方案中攜帶，並在適 當時經所欲取代基取代。除非另有指明，該變量係參考如上述式(I)之定義。反應可在介於熔點及溶劑之回流溫度間進行，較佳係介於0℃至溶劑之回流溫度間。可採用習知加熱法或微波加熱來使反應加熱。反應亦可在高於溶劑之正常回流溫度下於密封的壓力容器內進行。
本文中使用之簡稱與縮寫包括下列：
製備實例
現在將參照以下一般性製備的說明性合成方案和隨後的具體實例來描述可用於本發明之方法的例示性化合物。
根據方案1，將市售或合成可得的式(Xa)之化合物(其中Ra係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且PG係合適的氮保護基例如BOC、Bn、及類似物)利用烷化劑(例如乙基丙-2-烯酸酯、乙基2-(溴甲基)丙-2-烯酸酯及類似物)烷化，以提供式(XI)之化合物，其中Rb係可選地經CO2Et取代之C2-6伸烷基。將式(Xa)之化合物(其中Ra係CH3或CH2CHF2，且PG係BOC)在所屬技術領域中具有通常知識者已知之條件下烷化，例如，在鹼(例如NaH、Cs2CO3、K2CO3、及類似物)存在或不存在下，於合適溶劑(例如THF、DMF、及類似物)中與烷化劑(例如乙基2-(溴甲基)丙-2-烯酸酯及類似物)在自0℃至80℃之溫度範圍內反應12至24h，以提供式(XI)之化合物，其中Rb係CH2(C=CH2)CO2Et。在一替代方法中，式(Xb)之化合物首先在先前描述之條件下烷化，接著用合適的氮保護基保護，以提供式(XI)之化合物。例如，將式(Xb)之化合物(其中Ra係C1-6烷基)用烷化劑(例如5-亞甲基-1,3,2-二噻2-氧化物)於溶劑(例如THF及類似物)中在約50至80℃的溫度下烷化，接著用二-三級丁基二碳酸酯保護，提供式(XI)之化合物，其中Rb係CH2(C=CH2)CH2OH且PG係BOC。
採用所屬技術領域中具有通常知識者已知之條件，對氮保護基進行去保護，提供式(XII)之化合物。例如，將BOC保護基用酸(例如TFA、HCl、及類似物)於合適溶劑(例如DCM及類似物)中移除。
根據方案2，將市售或合成可得的式(XIII)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基)與式(XII)之化合物(其中Ra係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Rb係CH2CH2OH、CH(CH3)CH2CH2OH、CH(C=CH2)CO2Et、CH2CH(C=CH2)CH2OH、CH2CH2CH(OPG)CO2Me、CH2CH(CH2OH)CH(OTBDPS)CH=CH2、CH2C(CH2OH)(CH2CH(OBn)CH2)、CH2CH2CH(OH)CO2Me、CH2C(Me)2CH2OH、CH(CH2OTBS)(CH2OCH2CH=CH2)、及類似物)在醯胺鍵偶合條件下偶合，以提供式(XIV)之化合物。例如，將式(XIII)之酸性化合物與式(XII)之胺在脫水劑(例如HOBt/EDAC、CDI、PyBOP、HATU、HOAT、丙基膦酸酐(T3P))、適當選擇的鹼(例如DIPEA、TEA、及類似物)存在下於溶劑(例如甲苯、MeCN、EtOAc、DMF、THF、DCM、或彼等之混合物)中反應以提供式(XIV)之化合物。
將式(XIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，Ra係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Rb係CH(C=CH2)CO2Et)與鹼(例如DBU(1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯)於溶劑(例如ACN)中在約40至60℃之溫度下反應1至3h，提供式(XVa)之化合物。
將式(XIV)之化合物在光延(Mitsonobu)條件下環化，以提供式(XVb)(其中R4係H)、(XVc)、及(XVd)之化合物。例如，將式(XIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，Ra係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Rb係CH2CH2OH)與經三取代之磷烷(例如三苯基磷烷、三丁基磷烷、及類似物)及偶氮二羧酸酯(例如二乙基偶氮二羧酸酯(DEAD)、二異丙基偶氮二羧酸酯(DIAD)、及類似物)於合適溶劑(例如THF及類似物)中在自70至100℃之溫度範圍內反應10至16小時，以提供式(XVb)之化合物，其中R1及R3係C1-6烷基或C1-6鹵烷基。
將式(XIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，Ra係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Rb係CH2CH2CH(OH)CO2Me)與鹼(例如TEA)及碸基(例如MsCl)於溶劑(例如DCM)中在約0℃之溫 度下反應1至3h。隨後與鹼(例如NaH)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XVe)之化合物。
將式(XIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，Ra係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Rb係CH2C(CH2OH)(CH2CH(OBn)CH2))與鹼(例如TEA)及碸基(例如MsCl)於溶劑(例如DCM)中在約0℃之溫度下反應1至3h。隨後與鹼(例如NaH)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XVf)之化合物。
將式(XIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，Ra係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Rb係CH2CH(CH2OH)CH(OTBDPS)CH=CH2)與鹼(例如TEA)及碸基(例如MsCl)於溶劑(例如DCM)中在約0℃之溫度下反應1至3h。隨後與鹼(例如NaH)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XVg)之化合物。
將式(XIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，Ra係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Rb係CH2CH(C=CH2)CH2OH)與鹼(例如TEA)及碸基(例如MsCl)於溶劑(例如DCM)中在約0℃之溫度下反應1至3h。隨後與鹼(例如三級丁氧化鉀)於溶劑(例如DMF)中反應。隨後與還原劑(例如碳載鈀)在氫氣存在下於溶劑(例如甲醇)中在約30℃之溫度下反應約15至45分鐘，提供式(XVh)之化合物。
將式(XIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，Ra係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Rb係CH2C(Me)2CH2OH)與鹼(例如TEA)及碸基(例如MsCl)於溶劑(例如DCM)中在約0℃之溫度下反應1至3h。隨後與鹼(例如氫化鈉)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XVi)之化合物。
式(XVb)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且R4係CH2OH)係以三步驟製備。第一，將式(XIV)之化合物(其中Rb係CH(CH2OTBS)(CH2OCH2CH=CH2))使用合適試劑(例如TBAF)於溶劑(例如THF)中去保護，以提供式 (XIV)之化合物，其中Rb係CH(CH2OH)(CH2OCH2CH=CH2)。第二，在上述光延(Mitsonobu)條件下環化。第三，使用合適試劑(例如氧化鋨與過碘酸鈉且與NMO)於溶劑(例如THF)中將烯丙基移除，以提供式(XVb)之化合物，其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且R4係CH2OH。
將式(XVb)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且R4係CH2OH)與氟化試劑(例如DAST)於溶劑(例如DCM)中反應，以提供式(XVb)之化合物，其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且R4係CH2F。
將式(XVb)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且R4係CH2OH)與烷化試劑(例如CF2HCH2OTf)使用鹼(例如氫化鈉)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XVb)之化合物，其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且R4係CH2OCH2CHF2。
根據方案3，採用所屬技術領域中具有通常知識者已知之氧化條件，例如OsO4及NaIO4，將式(XVd)之化合物氧化。
將式(XVI)之化合物(其中R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基且R3係H或C1-6烷基)用還原劑(例如NaBH4及類似物)於合適溶劑(例如MeOH、THF、及類似物)中還原，以提供式(XVII)之化合物，其中R2係OH且m係1。
將式(XVII)之化合物(其中R2係OH且m係1)用烷化劑(例如C1-6烷基鹵化物或C1-6鹵烷基鹵化物及類似物)、鹼(例如NaH及類似物)於合適溶劑(例如THF、DMF、及類似物)中烷化，以提供式(XVII)之化合物，其中R2係OC1-6烷基或O-C1-6鹵烷基且m係1。
將式(XVII)之化合物(其中R2係OH且m係1)用氟化劑(例如，DAST、XtalFluor®、Deoxo-Fluor®、及類似物)於合適溶劑(例如DCM及類似物)中在自-78℃至50℃之溫度範圍內氟化2至16h，以提供式(XVII)之化合物，其中R2係F且m係1。
式(XVII)之化合物(其中R2係S-C1-6烷基且m係1)係以三步驟自式(XVII)之化合物(其中R2係OH且m係1)製備。在第一步驟中，將式(XVII)之化合物(其中R2係OH)用甲磺醯氯、鹼(例如TEA)於溶劑(例如DCM)中甲磺酸化，以提供式(XVII)之化合物，其中R2係O-SO2CH3。經甲磺酸化之式(XVII)之化合物與甲硫醇鈉於溶劑(例如DMF)中在自0℃至20℃之溫度範圍內之後續反應提供式(XVII)之化合物，其中R2係S(C=O)CH3。式(XVII)之化合物(其中R2係S(C=O)CH3)與鹼(例如K2CO3及類似物)及C1-6烷基鹵化物(例如MeI)之反應提供式(XVII)之化合物，其中R2係S-C1-6烷基。
將式(XVI)之羰基化合物(其中R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基且R3係H或C1-6烷基)用氟化劑(例如，DAST、XtalFluor®、Deoxo-Fluor®、及類似物)於合適溶劑(例如DCM及類似物)中在自-78℃至50℃之溫度範圍內氟化2至16h，以提供式(XVII)之化合物，其中R2係F且m係2。
將式(XVI)之羰基化合物(其中R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基且R3係H或C1-6烷基)與式N(C1-6烷基)1-2之烷基胺(例如NH(CH3)2)或可選地經取代之C2-C6-雜環烷基(例如嗎啉、三亞甲亞胺、二氟三亞甲亞胺、吡咯啶、及類似物)在還原胺化條件下反應，以提供式(XVII)之化合物，其中R2係可選地經取代之C2-C6-雜環烷基 或N(C1-6烷基)2。例如，將式(XVI)之羰基化合物(其中R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基且R3係H或C1-6烷基)與NH(CH3)2、還原劑(例如NaCNBH3、NaBH3、三乙醯氧基硼氫化鈉、及類似物)在脫水劑(例如分子篩)存在或不存在下，在HOAc或NaOAc存在或不存在下，於合適溶劑(例如DCM、THF、DCE、及類似物)中反應，提供式(XVI)之化合物，其中R2係N(CH3)2。
式(XVII)之化合物(其中R2係CH2CO2C1-6烷基)係以二步驟自式(XVI)之羰基化合物(其中R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基且R3係H或C1-6烷基)製備。在第一步驟中，將式(XVI)之羰基化合物與甲基2-二甲氧基磷醯乙酸酯、鹼(例如2-甲基丙-2-醇鉀)於溶劑(例如THF及類似物)在自0℃至20℃之溫度範圍內反應。在第二步驟中，烯烴在氫化條件(例如Pd/C及H2)於溶劑(例如EtOH、MeOH、及類似物)中之還原，提供式(XVII)之化合物，其中R2係CH2CO2CH3。
式(XVII)之化合物(其中R2係CH2N(C1-6烷基)1-2(例如NH(CH3)2)、CH2N(C1-6鹵烷基)1-2、或可選地經取代之CH2C2-C6-雜環烷基(例如嗎啉、三亞甲亞胺、二氟三亞甲亞胺、吡咯啶、及類似物)係以三步驟自式(XVI)之羰基化合物(其中R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基且R3係H或C1-6烷基)製備。在第一步驟中，將式(XVI)之羰基化合物與硼氫化試劑(例如威爾金森催化劑及兒茶酚硼烷)、鹼(例如氫氧化鈉)於溶劑(例如過氧化氫)中在自-30℃至20℃之溫度範圍內反應。在第二步驟中，將式(XVII)之化合物(其中R2係CH2OH)與甲磺醯氯、鹼(例如TEA)於溶劑(例如DCM)中甲磺酸化，以提供式(XVII)之化合物，其中R2係CH2O-SO2CH3。經甲磺酸化之式(XVII)之化合物與C2-C6-雜環烷基於溶劑(例如DMSO)中在自80℃至90℃之溫度範圍內之後續反應提供式(XVII)之化合物，其中R2係CH2N(C1-6烷基)1-2(例如NH(CH3)2)、CH2N(C1-6鹵烷基)1-2、或可選地經取代之CH2C2-C6-雜環烷基(例如嗎啉、三亞甲亞胺、二氟三亞甲亞胺、吡咯啶、及類似物)。
式(XVII)之化合物(其中R2係F及C1-6烷基且m係2)係自式(XVII)之化合物(其中R2係OH及C1-6烷基且m係2)用氟化劑(例如，DAST、XtalFluor®、Deoxo-Fluor®、及類似物)於合適溶劑(例如DCM及類似物)中在自-78℃至50℃之溫度範圍內製備2至16h，以提供式(XVII)之化合物，其中R2係F及C1-6烷基且m係2。
式(XVII)之化合物(其中R2係CH2N(C1-6鹵烷基)(COC1-6鹵烷基)且m係1)係自式(XVII)之化合物(其中R2係CH2N(C1-6鹵烷基)H)藉由與醯化試劑(例如三氟乙酸酐)、鹼(例如三乙胺)於溶劑(例如DCM)中在介於0℃至20℃之溫度範圍內反應2至4小時製備，以提供式(XVII)之化合物，其中R2係CH2N(C1-6鹵烷基)(COC1-6鹵烷基)且m係1。
根據方案4，將市售或合成可得的烷基鹵化物(其中X係鹵化物且G1係CH2C(CH2Cl)=CH2、CH2CH2CH2N(H)(Boc)、及 CH2CH2CH(NHCbz)CO2Me及類似物)與式(XVIII)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基)在偶合條件下偶合，以提供式(XIX)之化合物。例如，將式(XVIII)之化合物與烷基鹵化物、適當選擇的鹼(例如碳酸鉀及類似物)於溶劑(例如DMF或THF)中反應，以提供式(XIX)之化合物。
將式(XIX)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基)與一級C1-6烷基或C1-6鹵烷基胺(例如甲基胺)於溶劑(例如EtOH)中在約80℃之溫度下反應16h，以提供式(XVd)之化合物，其中R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基。
式(XXa)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，且R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基)係以三步驟製備。第一，使用合適條件(例如TFA於DCM中)，全面去保護式(XIX)之化合物之BOC保護基(其中G1係CH2CH2CH2N(H)(Boc))。第二，使用合適鹼(例如碳酸鉀)於溶劑(例如EtOH)中藉由形成醯胺鍵進行環化，並用boc酐再保護以形成式(XXa)之化合物，其中R1係H。第三，使用鹼(例如NaH)於溶劑(例如THF)中反應C1-6烷基或C1-6鹵烷基鹵化物，以提供式(XXa)之化合物，其中R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基。
式(XXb)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，且R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基)係以四步驟製備。第一，使用合適去保護條件(例如Pd/C在H2存在下於溶劑(例如MeOH)中)，去保護式(XIX)之化合物之Cbz保護基，其中G1係CH2CH2CH(NHCbz)CO2Me。第二，使用鹼(例如甲氧化鈉)及溶劑(例如甲醇)藉由形成醯胺鍵進行環化及後續水解。第三，使用鹼(例如NaH)、烷基鹵化物(例如碘甲烷)及溶劑(例如DMF)酯化羧酸。第四，使用鹼(例如NaH)於溶劑(例如THF)中反應C1-6烷基或C1-6鹵烷基鹵化物，以提供式(XXb)之化合物，其中R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基。
根據方案5，式(XXI)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係可選地經取代之芳基環)可以二步驟製備。例如，可使用合適條件(例如三氟乙酸於DCM中)移除式(XXIa)之化合物的保護基。所得產物接著可與芳基胺甲酸酯(例如N-芳基-苯基胺甲酸酯)、鹼(例如TEA)、及溶劑(例如DCM)反應以提供式(XXI)之化合物，其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係可選地經取代之芳基環。其中，式(XXIa)之化合物係式(XXb)、式(XVa)、或式(XVe)之化合物。
根據方案6，將式(XXI)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係4-氟-2-氯-苯)與格任亞(Grignard)試劑(例如甲基溴化鎂)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係可選地經取代之C1-6烷基，且m係1。
將式(XXI)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係4-氟-2-氯-苯)與式N(C1-6烷基)1-2 之烷基胺(例如NH(CH3)2)於溶劑(例如DMF)中與鹼(例如DIPEA)及偶合劑(例如HATU)反應，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係CON(C1-6烷基)1-2，且m係1。
式(XXII)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係4-氟-2-氯-苯，R2係CH(OH)C1-6烷基或CH(OH)C3-6環烷基，且m係1)係自式(XXI)之化合物以4步驟製備。第一，將式(XXI)之化合物使用鹼(例如氫氧化鈉)於溶劑(例如水、MeOH、或二者之混合物)中水解，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係COOH。第二，與烷基烷氧基醯胺(例如MeNHOMe)、偶合試劑(例如HATU)、鹼(例如DIPEA)及溶劑(例如DMF)反應，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係溫勒伯(Weinreb)醯胺。第三，與格任亞試劑(例如甲基溴化鎂、乙基溴化鎂、或環丙基溴化鎂)及溶劑(例如THF)反應，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係C=OMe。第四，與還原試劑(例如NaBH4)及溶劑(例如EtOH)反應，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係CH(OH)C1-6烷基或CH(OH)C3-6環烷基，且m係1。
式(XXII)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係4-氟-2-氯-苯，R2係CHF2，且m係1)係自式(XXI)之化合物以3步驟製備。第一，將式(XXI)之化合物使用還原試劑(例如LiAlH4)於溶劑(例如THF)中還原，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係CH2OH。第二，與氧化劑(例如DMP)於溶劑(例如DCM)中反應，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係CHO。第三，與氟化劑(例如DAST)於溶劑(例如DCM)中反應，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係CHF2，且m係1。
根據方案7，式(XXIII)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係可選地經取代之芳基環)可以二步驟製備。例如，可使用合適條件(例如三氟乙酸於DCM中)移除式(XXIIIa)之化合物的保護基。所得產物接著可與芳基胺甲酸酯(例如N-芳基-苯基胺甲酸酯)、鹼(例如TEA)、及溶劑(例如DCM)反應以提供式(XXIII)之化合物，其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係可選地經取代之芳基環。其中，式(XXIIIa)之化合物係如方案3所述製備。
根據方案8，將式(XXIII)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係4-氟-2-氯-苯)與氧化劑(例如(Bu3Sn)2O及溴化物或m-CPBA)於溶劑(例如DCM)中反應，以提供式(XXIV)之化合物，其中R2係磺酸酯或亞碸，且m係1。
根據方案9，式(XXV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係可選地經取代之芳基環)可以二步驟製備。例如，可使用合適條件(例如三氟乙酸於DCM中)移除式(XXVa)之化合物的保護基。所得產物接著可與芳基胺甲酸酯(例如N-芳基-苯基胺甲酸酯)、鹼(例如TEA)、及溶劑(例如DCM)反應以提供式(XXV)之化合物，其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係可選地經取代之芳基環。其中，式(XXVa)之化合物係如方案3所述製備。
根據方案10，式(XXIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係4-氟-2-氯-苯，R2係N(C1-6烷基)0-2，且m係1)係自式(XXV)之化合物以3步驟製備。第一，將式(XXV)之化合物(其中n係0)與磺化試劑(例如MSCl)使用鹼(例如TEA)於溶劑(例如DCM)中反應，以提供式(XXIV)之化合物，其中R2係OMs。第二，與親核疊氮化物(例如疊氮化鈉)於溶劑(例如DMF)中反應，以提供式(XXIV)之化合物，其中R2係 N3。第三，與還原劑(例如鋅/氯化銨或Pd/C及氫)於溶劑(例如MeOH、EtOH、水、或任一者之混合物)中反應，以提供式(XXII)之化合物，其中R2係N(C1-6烷基)0-2，且m係1。
式(XXIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且Ar係4-氟-2-氯-苯，R2係N(C1-6烷基)0-2，且m係1)係自式(XXV)之化合物以3步驟製備。第一，將式(XXV)之化合物(其中n係1)與磺化試劑(例如MSCl)使用鹼(例如TEA)於溶劑(例如DCM)中反應，以提供式(XXIV)之化合物，其中R2係CH2OMs。第二，與親核疊氮化物(例如疊氮化鈉)於溶劑(例如DMF)中反應，以提供式(XXIV)之化合物，其中R2係CH2N3。第三，與還原劑(例如鋅/氯化銨或Pd/C及氫)於溶劑(例如MeOH、EtOH、水、或任一者之混合物)中反應，以提供式(XXIV)之化合物，其中R2係CH2N(C1-6烷基)0-2，且m係1。
根據方案11，式(XXVIII)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基-OH)係自式(XXVII)之化合物以2步驟製備。第一，將式(XXVII)之化合物與烷化試劑與終端酯(例如BrCH2COOMe)使用鹼(例如NaH)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXVI)之化合物，其中R1係C1-C6烷基酯。第二，與格任亞試劑(例如甲基溴化鎂)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXVI)之化合物，其中R2係C1-C6烷基-OH。
式(XXVIII)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基-OH)係自式(XXVII)之化合物以2步驟製備。第一，將式(XXVII)之化合物與烷化試劑與終端酯(例如BrCH2COOMe)使用鹼 (例如NaH)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXVI)之化合物，其中R1係C1-C6烷基酯。第二，與還原試劑(例如LiAlH4)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXVI)之化合物，其中R2係C1-C6烷基-OH。
根據方案12，將式(XXIX)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，且R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基)與強鹼(例如LDA)、烷化劑(例如MeI或CHF2CH2OTf)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係C1-6烷基或C1-6鹵烷基及COO烷基，且m係2。
式(XXX)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，R2係CH(OH)Et，且m係1)係自式(XXIX)之化合物以5步驟製備。第一，將式(XXIX)之化合物使用合適條件(例如含NaOH之MeOH/水)水解，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係COOH。第二，與烷基烷氧基醯胺(例如MeNHOMe)、偶合試劑(例如HATU)、鹼(例如DIPEA)及溶劑(例如DMF)反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係溫勒伯(Weinreb)醯胺。第三，與格任亞試劑(例如乙烯基溴化鎂)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係C(O)CH=CH2。第四，與還原試劑(例如NaBH4/CeCl3)於溶劑(例如MeOH)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係CH(OH)CH=CH2。第五，與還原試劑(例如Pd/C)於溶劑(例如MeOH)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係CH(OH)CH2CH3，且m係1。
式(XXX)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，R2係CH(OH)C1-6烷基，且m係1)係自式(XXX)之化合物(其中R2係溫勒伯(Weinreb)醯胺)以2步驟製備。第一，與C1-6烷基格任亞試劑(例如正丙基溴化鎂)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係C(O)C1-6烷基。第二，與還原試劑(例如NaBH4)於溶劑(例如MeOH)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係CH(OH)C1-6烷基。
式(XXX)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，R2係CH(OH)CH2-環丙基，且m係1)係自式(XXX)之化合物(其中R2係溫勒伯(Weinreb)醯胺)以3步驟製備。第一，與格任亞試劑(例如烯丙基溴化鎂)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係C(O)CH2CH=CH2。第二，與還原試劑(例如NaBH4)於溶劑(例如MeOH)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係CH(OH)CH2CH=CH2。第三，與烷基鹵化物(例如ICH2Cl)、鋅酸鹽(例如二乙基鋅)於溶劑(例如DCM)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係CH(OH)CH2-環丙基。
式(XXX)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，R2係CH2OH及F，且m係2)係自式(XXIX)之化合物以2步驟製備。第一，與氟化試劑(例如NFSI)及LDA於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係C(O)C1-6烷基及F，且m係2。第二，與還原試劑(例如LiBH4)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係CH2OH及F，且m係2。
式(XXX)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，R2係CH2OC1-6鹵烷基，且m係1)係自式(XXX)之化合物(其中R2係溫勒伯(Weinreb)醯胺)以2步驟製備。第一，與還原劑(例如NaBH4)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係CH2OH。第二，與烷化試劑(例如 CHF2CH2OTf)使用合適鹼(例如NaH)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXX)之化合物，其中R2係CH2OC1-6鹵烷基。
根據方案13，將式(XXXI)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且R2係C1-6烷基或C1-6鹵烷基)與還原劑(例如LiBH4)於溶劑(例如THF)中反應，以提供式(XXXII)之化合物，其中R2係C1-6烷基或C1-6鹵烷基及CH2OH，且m係2。
將式(XXXI)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且R2係C1-6烷基或C1-6鹵烷基)使用合適條件(例如NaOH於MeOH/水中)水解，以提供式(XXXII)之化合物，其中R2係C1-6烷基或C1-6鹵烷基及COOH，且m係2。
根據方案13，將式(XVf)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，且R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基)與氟化劑(例如DAST)於 溶劑(例如DCM)中反應，以提供式(XXXV)之化合物，其中R4係F，且m係1。
式(XXXV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，且R1係C1-6烷基或C1-6鹵烷基，且R4係F及F，且m係2)係以三步驟製備。第一，將式(XVf)之化合物使用合適試劑(例如DMP)於溶劑(例如DCM)中氧化，以提供式(XXXV)之化合物，其中R4係=O。第二，與氟化劑(例如DAST)於溶劑(例如DCM)中反應，以提供式(XXXV)之化合物，其中R4係F及F，且m係2。
根據方案15，式(XXXIV)之化合物(其中R3係H或C1-6烷基，R1係如以上方案所述，R2係如以上方案所述，Ar係可選地經取代之芳基環，且m係0、1、或2)係以二步驟製備。第一，使用合適條件(例如三氟乙酸於DCM中)移除式(XXXIII)之化合物的Boc保護基。第二，與芳基胺甲酸酯(例如N-芳基-苯基胺甲酸酯)、鹼(例如TEA)、及溶劑(例如DCM)反應以提供式(XXXIV)之化合物，其中R3係H或C1-6烷基，R1係如上方案所述，R2係如上方案所述，Ar係可選地經取代之芳基環，且m係0、1、或2。
中間物1：三級丁基10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
方法A
步驟1：5-亞甲基-1,3,2-二噻2-氧化物。在2-亞甲基丙烷-1,3-二醇(5.00g,56.75mmol,4.63mL,1.00eq)於CCl4(50.00mL)中之溶液中，在0℃下在N2下添加SOCl2(10.13g,85.13mmol,6.18mL,1.50eq)於CCl4(10.00mL)中之溶液，並將混合物在0℃下攪拌45mins。將混合物在減壓下濃縮以提供呈黃色油狀物之5-亞甲基-1,3,2-二噻2-氧化物(6.90g，51.43mmol，90.63%產率)，其直接用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.36-5.39(m,2 H),5.16(s,2 H),4.22-4.28(m,2 H)。
步驟2：2-((甲基胺基)甲基)丙-2-烯-1-醇。將5-亞甲基-1,3,2-二噻2-氧化物(1.00g,7.45mmol,1.00eq)及甲胺(2M,11.18mL,3.00eq)於THF(2.00mL)中之溶液加熱至70℃達16h。TLC(DCM/MeOH=20/1)顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到一個具有較大極性的新的主要斑點。將混合物過濾並將濾液在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(750.00mg，7.41mmol，99.46%產率)，其直接用於下一步驟。
步驟3：三級丁基(2-(羥基甲基)烯丙基)(甲基)胺甲酸酯。在2-(甲基胺基甲基)丙-2-烯-1-醇(750.00mg,7.41mmol,1.00eq)於二烷(5.00mL)/H2O(5.00mL)中之溶液中，添加Boc2O(1.94g,8.89mmol,2.04mL,1.20eq)及NaHCO3(622.40mg,7.41mmol,,1.00eq)。將混合物在30℃下攪拌16h。將混合物用EA(50mL)稀釋並用鹽水(50mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並濃縮以給出黃色油狀物，其藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(710.00mg，3.53mmol，47.61%產率)。1H NMR(400MHz, CD3OD)δ 5.10(s,1 H),4.97(s,1 H),3.91-4.10(m,4 H),2.81(s,3 H),1.50(s,9 H)。
步驟4：2-((甲基胺基)甲基)丙-2-烯-1-醇鹽酸鹽。在三級丁基N-[2-(羥基甲基)烯丙基]-N-甲基-胺甲酸酯(710.00mg,3.53mmol,1.00eq)於二烷(3.00mL)中之溶液中添加HCl/二烷(4M,5.00mL,5.67eq)並將混合物在15℃下攪拌1h。TLC(PE/EtOAc=2/1)顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到一個具有較大極性的新的主要斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(480.00mg，3.49mmol，98.81%產率，HCl)，其直接用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 5.46(s,1 H),5.32(s,1 H),4.20(s,2 H),3.71(s,2 H),2.73(s,3 H)。
步驟5：三級丁基3-((2-(羥基甲基)烯丙基)(甲基)胺甲醯基)-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-羧酸酯。將5-三級丁氧基羰基-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(550.00mg,2.06mmol,1.00eq)、DIPEA(798.70mg,6.18mmol,1.08mL,3.00eq)、HATU(939.93mg,2.47mmol,1.20eq)與2-(甲基胺基甲基)丙-2-烯-1-醇(425.21mg,3.09mmol,1.50eq,HCl)於DMF(6.00mL)中之混合物加熱至80℃達16h。將混合物用EtOAc(80mL)稀釋並用鹽水(80mL *3)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以給出黃色油狀物。黃色油狀物藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(390.00mg，1.11mmol，54.03%產率)。LCMS：351[M+1]。
步驟6：三級丁基10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧酸酯。在三級丁基3-[2-(羥基甲基)烯丙基-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(200.00mg,570.76μmol,1.00eq)及三苯基磷烷(194.62mg,741.99μmol,1.30eq)於THF(3.00mL)中之溶液中，添加DIAD(150.04mg,741.99μmol,144.27μL,1.30eq)並將混合物在30℃下攪拌4h。將混合物用EtOAc(50mL)稀 釋並用HCl(1M,50mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出油狀物。油狀物藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物的不純產物(320.00mg，粗製，含有Ph3PO)。LCMS：355[M+23]。
方法B
步驟1：5-三級丁基3-乙基2-(2-(氯甲基)烯丙基)-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二羧酸酯。在3-氯-2-(氯甲基)丙-1-烯(7.62g,60.95mmol,7.05mL,3.00eq)於DMF(100.00mL)中之溶液中，添加5-三級丁基3-乙基2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(6.00g,20.32mmol,1.00eq)及K2CO3(3.65g,26.41mmol,1.30eq)。將混合物在25℃下攪拌6h，接著加熱至75℃達16h。TLC顯示起始材料消耗殆盡。將混合物用EtOAc(80mL)稀釋，用HCl(1M,80mL)及鹽水(80mL*2)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。油狀物藉由矽膠管柱純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(2.90g，7.55mmol，37.18%產率)。
步驟2：三級丁基10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧酸酯。將5-三級丁基3-乙基2-(2-(氯甲基)烯丙基)-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二羧酸酯(1.00g,2.61mmol,1.00eq)及甲胺(7.5M，40.00mL，33%純度，114.94eq)於EtOH(30.00mL)中之溶液在密封管中加熱至80℃達16h，將混合物在真空中濃縮，以給出黃色油狀物。黃色油狀物藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(560.00mg，1.68mmol，64.37%產率)。LCMS：333[M+1]。
中間物2：三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧酸酯。
在三級丁基10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(150.00mg,451.26μmol,1.00eq)於THF(3.00mL)及H2O(1.50mL)中之溶液中，在0℃下添加OsO4(5.74mg,22.56μmol,1.17μL,0.05eq)及NaIO4(386.08mg,1.81mmol,100.02μ μL,4.00eq)。將混合物在15℃下攪拌16hr。將混合物用EtOAc(40mL)稀釋並用鹽水(40mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。黃色油狀物藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(102.00mg，305.05μmol，67.60%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.01(s,2 H),4.67(s,2 H),4.05(s,2 H),3.73(s,2 H),3.20(s,3 H),2.76(s,2 H),1.49(s,9 H)。
中間物3：三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧酸酯。
在三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(60.00mg,179.44μmol,1.00eq)(60.00mg,179.44μmol,1.00eq)於MeOH(4.00mL)中之溶 液中，添加NaBH4(13.58mg,358.88μmol,2.00eq)。將混合物在15℃下攪拌1h。將混合物用鹽水(30mL)稀釋，以EtOAc(30mL *2)及DCM(30mL)萃取。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物(51.00mg，136.45μmol，76.04%產率，90%純度)，其直接用於下一步驟。LCMS：337[M+1]。
中間物4：三級丁基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
步驟1：5-三級丁基3-乙基2-(3-((三級丁氧基羰基)胺基)丙基)-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二羧酸酯。在O5-三級丁基O3-乙基2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(500.00mg,1.69mmol,1.00eq)於THF(5.00mL)中之溶液中，添加三級丁基N-(3-溴丙基)胺甲酸酯(482.91mg,2.03mmol,1.20eq)，隨後添加DBU(385.93mg,2.54mmol,382.11μ μL,1.50eq)。將混合物加熱至50℃達16hr。TLC(PE：EA=1：1)顯示起始材料已消耗，且出現二個主要斑點。以EtOAc(100mL*2)及H2O(50mL)萃取混合物。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由急速層析法(PE：EA=20%至50%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(400.00mg，875.06μmol，51.78%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=4.97(brs,1 H),4.49-4.65(m,4 H),4.34(q,J=7.0Hz,2 H),3.69(brs,2 H),3.08(d,J=5.9Hz,2 H),2.74(brs,2 H),1.99(quin,J=6.3Hz,2 H),1.49(s,9 H),1.44(s,9 H),1.39(t,J=7.2Hz,4 H)。
步驟2：乙基2-(3-胺基丙基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸酯。在O5-三級丁基O3-乙基2-[3-(三級丁氧基羰基胺基)丙基]-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(400.00mg,883.90μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(6.16g,54.02mmol,4.00mL,61.12eq)。將混合物在10℃下攪拌1hr。將混合物在真空中濃縮，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(430.00mg，粗製)。
步驟3：三級丁基11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在乙基2-(3-胺基丙基)-4,5,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸酯(400.00mg,832.71μmol,1.00eq)於EtOH(50.00mL)中之溶液中，添加K2CO3(460.35mg,3.33mmol,4.00eq)。將混合物在70至80℃下攪拌32hr。將混合物冷卻至10℃並添加Boc2O(363.48mg,1.67mmol,382.61μ μL,2.00eq)。將混合物在10℃下攪拌1hr。TLC(DCM：MeOH=10：1)顯示出現一個主要斑點。將混合物在真空中濃縮。以EtOAc(50mL*2)及H2O(20mL)萃取殘餘物。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由急速層析法(DCM：MeOH：0%至7%)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(155.00mg，505.94μmol，60.76%產率)。
步驟4：三級丁基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(100.00mg,326.41μmol,1.00eq)於THF(2.00mL)中之溶液中，添加NaH(19.58mg，489.61μmol，60%純度，1.50eq)。將混合物在0℃下攪拌30min。添加CH3I(69.50mg,489.61μmol,30.48μL,1.50eq)。將混合物在10℃下攪拌1hr。LCMS顯示偵測到一個具有所欲Ms的主要尖峰。將混合物倒入H2O(10mL)中並以EtOAc(10mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾。將濾液在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(90.00mg，粗製)。
中間物5：三級丁基11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
步驟1：5-三級丁基3-乙基2-[3-(三級丁氧基羰基胺基)丙基]-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。在O5-三級丁基O3-乙基2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(2.00g,6.77mmol,1.00eq)於THF(20.00mL)中之溶液中，添加三級丁基N-(3-溴丙基)胺甲酸酯(1.93g,8.12mmol,1.20eq)，隨後添加DBU(1.55g,10.16mmol,1.53mL,1.50eq)，將反應混合物在50℃下攪拌16小時。數個新的尖峰顯示在LCMS上且偵測到約30%的所欲產物。將反應混合物用EtOAc(150mL)稀釋並用水(50mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化，以提供呈白色固體之標題化合物(1.70g，3.76mmol，55.49%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=4.94(brs,1 H)4.54-4.85(m,4 H)4.30-4.35(m,2 H)3.67(br s,2 H)3.06-3.08(br d,J=5.90Hz,2 H)2.72(br s,2 H)1.94-2.01(m,J=6.43Hz,2 H)1.47(s,9 H)1.42(s,9 H)1.36-1.39(t,J=7.15Hz,3 H)。LCMS：453[M+1]。
步驟2：乙基2-(3-胺基丙基)-4,5,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸酯。在O5-三級丁基O3-乙基2-[3-(三級丁氧基羰基胺基)丙基]-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(1.70g,3.76mmol,1.00eq)於二烷(10.00mL)中之溶液中，添加HCl/二烷(4M,20.00mL,21.28eq)。將反應混合物在20℃下攪拌2小時。TLC顯示化合物3消耗殆盡，且偵測到一個具有較大極性的新的主要斑點。在旋轉蒸發器上移除溶劑，以提供呈白色固體之標題化合物(1.10g， 粗製)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=4.65-4.68(t,J=6.65Hz,2 H)4.38-4.44(m,4 H)3.53-3.56(t,J=6.27Hz,2 H)3.03-3.07(t,J=6.21Hz,2 H)2.94-2.98(br t,J=7.65Hz,2 H)2.17-2.24(m,2 H)1.39-1.42(t,J=7.09Hz,3 H)。
步驟3：三級丁基11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在乙基2-(3-胺基丙基)-4,5,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸酯(900.00mg,2.77mmol,1.00eq)於EtOH(10.00mL)中之溶液中，在N2下添加NaOMe(597.95mg,11.07mmol,4.00eq)。將反應混合物在20℃下攪拌3小時。LCMS顯示化合物4消耗殆盡。在旋轉蒸發器上移除溶劑。在殘餘物中添加THF(10.00mL)，隨後添加NaHCO3(697.44mg,8.30mmol,322.89μL,3.00eq)於H2O(2.00mL)中之溶液及(Boc)2O(905.94mg,4.15mmol,953.62μL,1.50eq)。將反應混合物在20℃下攪拌一小時。LCMS顯示偵測到一個具有所欲MS的主要尖峰。將反應混合物用EtOAc(50mL)稀釋並用水(30mL*2)洗滌，將有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化，以提供獲得呈白色固體之標題化合物(600.00mg，1.96mmol，70.70%產率)。LCMS：329[M+23]。
中間物6：三級丁基9-甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡 -2-羧酸酯。
步驟1：三級丁基3-[2-羥基乙基(甲基)胺甲醯基]-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在5-三級丁氧基羰基-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(1.00g,3.74mmol,1.00eq)與 2-(甲基胺基)乙醇(1.41g,18.71mmol,1.49mL,5.00eq)於DMF(5.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加HATU(2.13g,5.61mmol,1.50eq)及DIPEA(7.25g,56.12mmol,9.80mL,15.00eq)。將混合物在80℃下攪拌10小時。LCMS及TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(50mL)中。以乙酸乙酯(50mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(50mL * 2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯=1/1，二氯甲烷：甲醇=20：1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(750.00mg，2.31mmol，61.82%產率，100%純度)。LCMS：325[M+1]。
步驟2：三級丁基9-甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡-2-羧酸酯。在三級丁基3-[2-羥基乙基(甲基)胺甲醯基]-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(100.00mg,308.29μmol,1.00eq)於THF(3.00mL)中之混合物中，在N2下添加三丁基磷烷(81.09mg,400.78μmol,98.88μL,1.30eq)及DIAD(81.04mg,400.78μmol,77.92μL,1.30eq)。將混合物在80℃下攪拌4小時。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL * 2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(70.00mg，228.49μmol，74.12%產率)。LCMS：307[M+1]。
中間物7：3-(甲基胺基)丁-1-醇。
步驟1：N-(3-羥基-1-甲基-丙基)甲醯胺。在3-胺基丁-1-醇(5.00g,56.09mmol,1.00eq)及乙酸乙酯(9.88g,112.18mmol, 10.98mL,2.00eq)於EtOH(30.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加甲酸乙酯(9.88g,112.18mmol,10.98mL,2.00eq)。將混合物在80℃下攪拌12小時。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(6.00g，51.22mmol，91.31%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.17(s,1H),5.75-5.97(m,1H),4.13-4.43(m,1H),3.53-3.68(m,2H),3.27(br s,1H),1.74-1.97(m,1H),1.34-1.52(m,1H),1.15-1.31(m,3H)。
步驟2：3-(甲基胺基)丁-1-醇。在N-(3-羥基-1-甲基-丙基)甲醯胺(2.00g,17.07mmol,1.00eq)於THF(10.00mL)中之混合物中，在-10℃下在N2下一次性添加LiAlH4(1.30g,34.14mmol,2.00eq)。將混合物在-10℃下攪拌30min，接著加熱至20℃並攪拌12小時，接著加熱至80℃並攪拌3小時。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物用1.3mL的H2O淬熄，隨後用1.3mL的NaOH(15%)及3.9mL的H2O淬熄。將混合物以無水MgSO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(1.20g，11.63mmol，68.15%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 3.71-3.93(m,2 H),2.83(ddd,J=3.30,6.39,8.28Hz,1 H),2.43(s,3 H),1.66-1.74(m,1 H),1.53(s,1 H),1.15(d,J=6.36Hz,3 H)。
中間物8：三級丁基9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
步驟1：三級丁基3-[(3-羥基-1-甲基-丙基)-甲基-胺甲醯基]-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在5-三級丁氧基羰基-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(500.00mg,1.87mmol,1.00 eq)與3-(甲基胺基)丁-1-醇(中間物7，771.92mg，7.48mmol，4.00eq)於DMF(5.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加HATU(1.07g,2.81mmol,1.50eq)及DIPEA(3.63g,28.06mmol,4.90mL,15.00eq)。將混合物在80℃下攪拌10小時。LCMS及TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示偵測到所欲產物。將殘餘物倒入水(10mL)中。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL * 2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯=1/1，二氯甲烷：甲醇=20：1)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(300.00mg，510.74μmol，27.31%產率，60%純度)。LCMS：353[M+1]。
步驟2：三級丁基9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基3-[(3-羥基-1-甲基-丙基)-甲基-胺甲醯基]-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(300.00mg,851.23μmol,1.00eq)於THF(10.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加三丁基磷烷(223.89mg,1.11mmol,273.03μL,1.30eq)及DIAD(223.77mg,1.11mmol,215.16μL,1.30eq)。將混合物在80℃下攪拌12小時。LCMS及TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示偵測到所欲產物。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL * 2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(66.00mg，197.36μmol，23.19%產率)。LCMS：335[M+1]。
中間物9：2-三級丁基8-甲基8-甲氧基-9-甲基-10-側氧基-1,3,4,7-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡 -2,8-二羧酸酯。
步驟1：三級丁基3-[羥基(甲基)胺甲醯基]-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。將Na(7.78g,338.60mmol,8.02mL,10.00eq)在0℃下分批添加至MeOH(100.00mL)，並將混合物在15℃下在N2下攪拌0.5hr。接著將N-甲胲(8.48g,101.58mmol,3.00eq,HCl)添加至混合物，並將混合物在15℃下在N2下攪拌0.5hr。接著添加5-三級丁基3-乙基1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(中間物30，10.00g，33.86mmol，1.00eq)，將混合物在70℃下在N2大氣下攪拌16hr。TLC(PE/EA=1/1)顯示起始材料消耗殆盡，且主要偵測到一個新的斑點。將混合物倒入冰-水(300mL)中，並攪拌5min。接著將混合物濃縮以移除MeOH。將水相用HCl(1N,aq)調整至pH=6，接著以乙酸乙酯(100mL×3)萃取。將合併之有機相用鹽水(300mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物(8.00g，27.00mmol，79.73%產率)。LCMS：297[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=4.62(brs,2 H)3.70(t,J=5.52Hz,2 H)3.31-3.58(m,3 H)2.74(s,2 H)1.48(s,9 H)。
步驟2：三級丁基4-(羥基甲基)-2-甲基-1-側氧基-5,8,9,11-四氫-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]二氮呯-10-羧酸酯。將三級丁基3-[羥基(甲基)胺甲醯基]-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(8.00g,27.00mmol,1.00eq)、3-溴氧呾(4.07g,29.70mmol,1.10eq)、TBAI(997.22mg,2.70mmol,0.10eq)與Cs2CO3(13.19g,40.50mmol,1.50eq)於DMF(80.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在70℃下在N2大氣下攪拌3hr。TLC(DCM/MeOH=10/1)顯示起始材料消耗殆盡，且以標題化合物為主。 將混合物倒入水(200mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(100mL×3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(300mL×2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，PE/EA=100/1至1/2)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(4.50g，12.39mmol，45.88%產率，97%純度)。LCMS：353[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3CDCl3)δ=4.62(brs,2 H)4.53(brs,2 H)4.32-4.42(m,1 H)3.57-3.88(m,4 H)3.29(br.s.,3 H)2.68-2.79(m,2 H)1.41-1.53(m,9 H)。
步驟3：10-三級丁氧基羰基-2-甲基-1-側氧基-5,8,9,11-四氫-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]二氮呯-4-羧酸。在三級丁基4-(羥基甲基)-2-甲基-1-側氧基-5,8,9,11-四氫-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]二氮呯-10-羧酸酯(1.00g,2.84mmol,1.00eq)與NMO(2.50g,21.30mmol,2.25mL,7.50eq)於MeCN(30.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加TPAP(199.61mg,568.00μmol,0.20eq)。將混合物在0℃下攪拌2hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黑棕色固體之標題化合物(1.04g，粗製)。LCMS：367[M+1]。
步驟4：2-三級丁基8-甲基8-甲氧基-9-甲基-10-側氧基-1,3,4,7-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2,8-二羧酸酯。在10-三級丁氧基羰基-2-甲基-1-側氧基-5,8,9,11-四氫-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]二氮呯-4-羧酸(1.04g，粗製，2.84mmol，1.00eq)與K2CO3(1.18g,8.52mmol,3.00eq)於MeCN(20.00mL)中之混合物中，在25℃下在N2下一次性添加MeI(1.21g,8.52mmol,530.70μL,3.00eq)。將混合物在25℃下攪拌12小時。LCMS顯示反應未進行。回收起始材料：將反應混合物用HCl(1N,aq)中和至pH=3，接著以乙酸乙酯(20mL×2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並濃縮至乾。再次進行反應。在含回收的起始材料與K2CO3(1.18g,8.52mmol,3.00eq)之MeCN(20.00mL)中，在25℃下在N2下一次性添加MeI(1.21g,8.52mmol,530.70μL,3.00eq)。將混合物在25 ℃下攪拌12小時。LCMS及TLC(EA/PE=2/1)顯示反應已完成，偵測到50%的標題化合物。將殘餘物倒入水(20mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(20mL×2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(20mL×2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(PE/EA=10/1,2/1)純化為呈黃色油狀物之標題化合物(200.00mg，507.07μmol，17.85%產率，100%純度)。LCMS：395[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)4.64-4.80(m,3 H),4.51-4.62(m,1 H),3.88(s,3 H),3.60-3.79(m,2 H),3.38(s,3 H),3.05(s,3 H),2.78(br.s.,2 H),1.49(s,9 H)。
中間物10：甲基9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡 -8-羧酸酯
將2-三級丁基8-甲基8-甲氧基-9-甲基-10-側氧基-1,3,4,7-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2,8-二羧酸酯(20.00mg,50.71μmol,1.00eq)於HCl/二烷(4M,20.00mL,1577.60eq)中之混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物在真空中濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物的HCl鹽(15.15mg，50.71μmol，100.00%產率)。LCMS：263[M+1]。
中間物11：三級丁基8-[甲氧基(甲基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
在2-三級丁氧基羰基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸(500.00mg,1.37mmol,1.00eq)及N-甲氧基甲胺鹽酸鹽(534.52mg,5.48mmol,4.00eq)於THF(10.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加T3P(1.74g，2.74mmol，1.63mL，50%純度，2.00eq)及TEA(2.08g,20.55mmol,2.85mL,15.00eq)。將混合物在30℃下攪拌12小時。LCMS及TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(15mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(二氯甲烷：甲醇=50：1至20：1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(510.00mg，1.24mmol，90.45%產率，99%純度)。
LCMS[M+1]：408。
中間物12：三級丁基(3R)-3-甲基-11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
步驟1：5-三級丁基3-乙基(6R)-2-[3-(三級丁氧基羰基胺基)丙基]-6-甲基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。在 5-三級丁基3-乙基(6R)-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(4.50g,14.55mmol,1.00eq)於THF(50.00mL)中之溶液中，添加三級丁基N-(3-溴丙基)胺甲酸酯(4.16g,17.46mmol,1.20eq)，隨後添加DBU(3.32g,21.83mmol,3.29mL,1.50eq)。將混合物加熱至60℃達16hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示起始材料已消耗，且出現二個新的主要斑點。以EtOAc(200mL*2)及H2O(50mL)萃取混合物。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由急速層析法(PE：EtOAc=20%至50%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(4.50g，9.64mmol，66.29%產率)。
步驟2：乙基(6R)-2-(3-胺基丙基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸酯。將5-三級丁基3-乙基(6R)-2-[3-(三級丁氧基羰基胺基)丙基]-6-甲基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(4.50g,9.64mmol,1.00eq)溶解於HCl/二烷(4M,50.00mL,20.75eq)中。將混合物在20℃下攪拌2hr。LCMS顯示偵測到一個具有所欲Ms的主要尖峰。將混合物在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物的HCl鹽(3.30g，粗製)。
步驟3：三級丁基(3R)-3-甲基-11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在乙基(6R)-2-(3-胺基丙基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸酯(3.27g,9.64mmol,1.00eq)於MeOH(4.00mL)中之溶液中，添加CH3ONa(2.08g,38.55mmol,4.00eq)。將混合物在20℃下攪拌2hr。LCMS顯示偵測到一個具有所欲Ms的主要尖峰。將混合物在真空中濃縮。將殘餘物溶解於THF(8.00mL)及H2O(4.00mL)中。添加NaHCO3(1.62g,19.28mmol,749.76μL,2.00eq)及Boc2O(2.52g,11.57mmol,2.66mL,1.20eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示出現一個主要斑點。將混合物用飽和NH4Cl(100mL)稀釋，並以EtOAc(200mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法 (PE：EtOAc=50%至100%)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(2.40g，7.49mmol，77.71%產率)。
中間物13：2-(三級丁基)9-甲基11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯。
步驟1：3-胺基四氫呋喃-2-酮。在2-胺基-4-羥基-丁酸(5.50g,46.17mmol,1.00eq)於H2O(50.00mL)中之溶液中，添加HCl(12M,50.02mL,13.00eq)，將混合物在120℃下攪拌3hr。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應物已消耗。將混合物濃縮以給出殘餘物，大部分溶劑與乙醇共沸移除。在晶體形成後，將溶液在冰上冷卻。將所得固體過濾並用冷乙醇(20mL)潤洗三次。將濾液濃縮並冷卻，產生額外同絲胺酸內酯。將過程再重複2次，以提供呈白色固體之標題化合物的HCl鹽(4.20g，30.53mmol，66.13%產率)。1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ 4.52-4.63(m,1 H),4.32-4.49(m,2 H),2.68-2.84(m,1 H),2.31-2.46(m,1 H)。
步驟2：2-胺基-4-溴-丁酸。將3-胺基四氫呋喃-2-酮(4.00g,29.08mmol,1.00eq)於HBr(103.67g，615.00mmol，69.57mL，48%純度，21.15eq)中之混合物在100℃下攪拌6hr。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物過濾以給出固體，將其用甲基三級丁基醚(50mL)洗滌，以提供呈紅色固體之標題化合物(6.30g，23.96mmol，82.40%產率，HBr)。
步驟3：甲基2-胺基-4-溴-丁酸酯。在2-胺基-4-溴-丁酸(6.30g,23.96mmol,1.00eq,HBr)於MeOH(50.00mL)中之溶液中，在0℃下添加SOCl2(5.70g,47.92mmol,3.48mL,2.00eq)，將 混合物在20℃下攪拌12hr。TLC(石油醚：乙酸乙酯=1：1)顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以提供呈紅色固體之標題化合物(6.30g，22.75mmol，94.94%產率，HBr)。1H NMR(400MHz，氧化氘)δ 4.34(t,J=6.65Hz,1 H),3.84(s,3 H),3.54-3.68(m,2 H),2.58(qd,J=6.53,15.29Hz,1 H),2.29-2.47(m,1 H)。
步驟4：甲基2-(苄氧羰基胺基)-4-溴-丁酸酯。在甲基2-胺基-4-溴-丁酸酯(6.30g,22.75mmol,1.00eq,HBr)於H2O(50.00mL)中之溶液中，在0℃下添加NaHCO3(4.78g,56.87mmol,2.21mL,2.50eq)及CbzCl(4.66g,27.30mmol,3.88mL,1.20eq)，將混合物在20℃下攪拌16hr。TLC(石油醚：乙酸乙酯=1：1)顯示反應已完成。以乙酸乙酯(200mL*2)萃取混合物，將有機層用鹽水(50mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，並在真空中濃縮。將粗製物用石油醚(30mL)研磨，以提供呈白色固體之標題化合物(3.60g，10.79mmol，47.45%產率，99%純度)。
步驟5：5-三級丁基3-乙基2-[3-(苄氧羰基胺基)-4-甲氧基-4-側氧基-丁基]-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。在5-三級丁基3-乙基2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(3.60g,12.19mmol,1.00eq)及甲基2-(苄氧羰基胺基)-4-溴-丁酸酯(4.31g,13.04mmol,1.07eq)於THF(50.00mL)中之溶液中，添加DBU(5.57g,36.57mmol,5.51mL,3.00eq)，將混合物在20℃下攪拌16hr。TLC(石油醚：乙酸乙酯=1：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(20mL)中，以乙酸乙酯(20mL*2)萃取，將有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。粗製物藉由製備型TLC(石油醚：乙酸乙酯=1：1)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(3.60g，6.28mmol，51.52%產率，95%純度)。
步驟6：5-三級丁基3-乙基2-(3-胺基-4-甲氧基-4-側氧基-丁基)-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。在5-三級丁基3-乙基2-[3-(苄氧羰基胺基)-4-甲氧基-4-側氧基-丁基]-6,7-二氫- 4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(3.60g,6.61mmol,1.00eq)於MeOH(40.00mL)中之溶液中，添加Pd/C(700.00mg，6.61mmol，10%純度，1.00eq)。將混合物在H2(15Psi)下在20℃下攪拌2hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物過濾並在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(2.60g，6.33mmol，95.83%產率)。
步驟7：2-三級丁氧基羰基-11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸。在5-三級丁基3-乙基2-(3-胺基-4-甲氧基-4-側氧基-丁基)-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(2.60g,6.33mmol,1.00eq)於MeOH(3.00mL)中之溶液中，添加NaOMe(631.72mg,11.69mmol,3.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將溶劑蒸發以給出殘餘物，將其倒入HCl水溶液(0.5M,50mL)中，以DCM(30mL*4)萃取，將有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物(1.10g，3.14mmol，80.50%產率)。
步驟8：2-三級丁基9-甲基11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯。在2-三級丁氧基羰基-11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸(1.10g,3.14mmol,1.00eq)於DMF(20.00mL)中之溶液中，添加K2CO3(650.87mg,4.71mmol,1.50eq)及MeI(1.34g,9.42mmol,586.44μL,3.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物倒入水(100mL)中，以乙酸乙酯(50mL*2)萃取，將合併之有機層用鹽水(30mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(1.10g，3.02mmol，96.18%產率)。
中間物14：2-三級丁基8-乙基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯。
步驟1：乙基2-[[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]甲基]丙-2-烯酸酯。在三級丁基N-甲基胺甲酸酯(200.00mg,1.52mmol,1.00eq)於THF(5.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下添加NaH(91.20mg，2.28mmol，60%純度，1.50eq)達0.5hr，接著將乙基2-(溴甲基)丙-2-烯酸酯(352.10mg,1.82mmol,1.20eq)在0℃下逐滴添加至混合物，並將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌2hr。TLC(PE/EA=10/1)顯示起始材料消耗殆盡，且出現二個新的斑點。將混合物倒入冰-水(10mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(5mL×3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=100/1至5/1)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(112.00mg，460.34μmol，30.29%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.28(s,1 H),5.55(s,1 H),4.23(q,J=7.1Hz,2 H),4.07(br s,2 H),2.88(br s,3 H),1.45(br s,9 H),1.31(br s,3 H)。
步驟2：乙基2-(甲基胺基甲基)丙-2-烯酸酯。在乙基2-[[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]甲基]丙-2-烯酸酯(112.00mg,460.34μmol,1.00eq)於二烷(1.00mL)中之混合物中，添加HCl/二烷(4M,5.00mL,43.45eq)，接著將混合物在15℃下攪拌0.5小時。TLC(PE/EA=10/1)顯示起始材料消耗殆盡，且以一個新的斑點為主。將混合物在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(82.50mg，459.25μmol，99.76%產率，HCl，其直接用於下一步驟。
步驟3：三級丁基3-[2-乙氧基羰基烯丙基(甲基)胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。將5-三級丁氧基羰基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(80.00mg,299.31μmol,1.00 eq)、乙基2-(甲基胺基甲基)丙-2-烯酸酯(59.14mg,329.24μmol,1.10eq,HCl)、T3P(285.70mg,897.93μmol,267.01μL,3.00eq)及TEA(151.44mg,1.50mmol,207.45μL,5.00eq)於THF(3.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌16小時。TLC(DCM/MeOH=10/1)顯示起始材料消耗殆盡，且出現一個新的斑點。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(5mL×3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(46.00mg，105.49μmol，35.24%產率，90%純度)。LCMS：393[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.35(s,1 H),5.67(br s,1 H),4.63(s,4 H),4.18-4.30(m,2 H),3.71(br s,2 H),2.91-3.47(m,3 H),2.74(br t,J=5.4Hz,2 H),1.48(s,9 H),1.31(t,J=7.2Hz,3 H)。
步驟4：三級丁基8-乙基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯。將三級丁基3-[2-乙氧基羰基烯丙基(甲基)胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(36.00mg,91.73μmol,1.00eq)、DBU(6.98mg,45.87μmol,6.91μL,0.50eq)於MeCN(1.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在50℃下在N2大氣下攪拌2小時。TLC(DCM/MeOH=20/1)顯示起始材料消耗殆盡，且以標題化合物為主。將混合物倒入水(5mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(3mL×3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(5mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=20/1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(20.00mg，50.96μmol，55.56%產率)。LCMS：393[M+1]
中間物15：三級丁基(3R)-3,10-二甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯
步驟1：5-三級丁基3-乙基(6R)-2-[2-(氯甲基)烯丙基]-6-甲基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。在5-三級丁基3-乙基(6R)-6-甲基-1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(15.00g,48.49mmol,1.00eq)於DMF(4.00mL)中之溶液中，添加Cs2CO3(23.70g,72.73mmol,1.50eq)，隨後添加3-氯-2-(氯甲基)丙-1-烯(12.12g,96.97mmol,11.22mL,2.00eq)。將混合物加熱至50℃達16hr。TLC(PE：EtOAc=4：1)顯示出現四個斑點。將混合物用H2O(300mL)稀釋並以EtOAc(500mL*2)萃取。將合併之有機層用H2O(300mL*3)洗滌，以Na2SO4乾燥並過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由急速層析法(PE：EtOAc=0%至30%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(7.00g，17.59mmol，36.28%產率)。
步驟2：三級丁基(3R)-3,10-二甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯及副產物三級丁基(6R)-6-甲基-2-[2-(甲基胺基甲基)烯丙基]-3-(甲基胺甲醯基)-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在5-三級丁基3-乙基(6R)-2-[2-(氯甲基)烯丙基]-6-甲基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(7.00g,17.59mmol,1.00eq)於EtOH(28.00mL)中之溶液中，添加甲胺(54.63g，527.70mmol，120.00mL，30.00eq，30% EtOH溶液)。將混合物在密封管中加熱至80℃達16hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示起始材料消耗殆盡且主要形成二個新的斑點。將混合物濃縮並藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=10/1至1/1)純化，以提供呈黃色膠狀物之標題化合物(3.00g，6.36mmol，36.15%產率，80%純度)。
中間物16：三級丁基(3R)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
步驟1：三級丁基(3R)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯、三級丁基(3R)-8-羥基-3,8,10-三甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物17)、及三級丁基(3R)-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物18)。在三級丁基(3R)-3,10-二甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物15，3.20g，9.24mmol，1.00eq)於THF(50.00mL)中之溶液中，在0℃下在N2下添加BH3˙DMS(10M,3.70mL,4.00eq)。將混合物在20℃下攪拌2h。TLC(PE：EtOAc=1：2)顯示起始材料已消耗。在-30℃下逐滴添加NaOH(2.59g,64.68mmol,7.00eq)於H2O(10.00mL)中之溶液，接著緩慢添加H2O2(6.28g，55.44mmol，5.32mL，30%純度，6.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16h。LC-MS顯示仍有8%的三級丁基(3R)-3,10-二甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯，且偵測到約54%的三級丁基(3R)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯及約17%的三級丁基(3R)-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。以乙酸乙酯(30mL*3)及H2O(20mL)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(20mL*1)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘 餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=50/1至1/5，板1)純化，隨後進行製備型TLC，以提供呈灰白色膠狀物之三級丁基(3R)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(2.00g，5.48mmol，59.27%產率，99.8%純度)、呈灰白色膠狀物之三級丁基(3R)-8-羥基-3,8,10-三甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(150.00mg，382.78μmol，4.14%產率，93%純度)、及呈灰白色膠狀物之三級丁基(3R)-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(250.00mg，645.74μmol，6.99%產率，90%純度)。
中間物17：三級丁基(3R)-8-羥基-3,8,10-三甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
自中間物16單離呈灰白色之膠狀物(150.00mg，382.78μmol，4.14%產率，93%純度)。
中間物18：三級丁基(3R)-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
自中間物16單離呈灰白色之膠狀物(250.00mg，645.74μmol，6.99%產率，90%純度)。
中間物19：乙基2-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]丙-2-烯酸酯。
步驟1：三級丁基N-(2,2-二氟乙基)胺甲酸酯。在2,2-二氟乙胺(10.00g,123.37mmol,1.00eq)與Et3N(24.97g,246.74mmol,34.21mL,2.00eq)於DCM(100.00mL)中之混合物中，添加Boc2O(29.62g,135.71mmol,31.18mL,1.10eq)，並將混合物在25℃下攪拌16h。TLC顯示無起始材料，且偵測到一個具有較低極性的新的主要斑點。將混合物用DCM(150mL)稀釋並用鹽水(150mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱純化，以提供呈無色固體之標題化合物(17.90g，98.80mmol，80.08%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.55-6.02(m,1 H),4.58-4.88(m,1 H),3.26-3.58(m,2 H),1.38(s,9 H)。
步驟2：乙基2-[[三級丁氧基羰基(2,2-二氟乙基)胺基]甲基]丙-2-烯酸酯。在三級丁基N-(2,2-二氟乙基)胺甲酸酯(2.00g,11.04mmol,1.00eq)於THF(30.00mL)中之溶液中，在0℃下在N2下添加NaH(574.08mg，14.35mmol，60%純度，1.30eq)，隨後在0.5h後添加乙基2-(溴甲基)丙-2-烯酸酯(3.20g,16.56mmol,1.50eq)，並將混合物在25℃下攪拌16h。LCMS顯示主要偵測到所欲產物。將混合物用H2O(100mL)淬熄並以EtOAc(100mL)萃取。將有機相在真空中濃縮，其藉由矽膠管柱純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(2.30g，7.14mmol，64.64%產率，91%純度)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.30-6.32(m,1 H),5.70-6.15(m,1 H),5.30-5.60(m,1 H),4.14-4.27(m,4 H),3.55-3.59(m,2 H),1.44-1.48(m,9 H),1.28-1.34(m,3 H)。
步驟3：乙基2-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]丙-2-烯酸酯。將乙基2-[[三級丁氧基羰基(2,2-二氟乙基)胺基]甲基]丙-2-烯酸酯(600.00mg,2.05mmol,1.00eq)於HCl/二烷(4M,6.00mL,11.71eq)中之溶液在25℃下攪拌2h。TLC顯示無起始材料且偵測到一個新的主要斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈無色固體之標題化合物的HCl鹽(469.00mg，2.04mmol，99.62%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.08-10.26(m,1 H),6.60(m,1 H),6.31(m,2 H),4.24(m,2 H),3.91-4.01(m,2 H),3.28-3.45(m,2 H),1.28(t,J=7.2Hz,3H)。
中間物20：2-三級丁基8-乙基(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯。
步驟1：三級丁基(6R)-3-[2,2-二氟乙基(2-乙氧基羰基烯丙基)胺甲醯基]-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。將乙基2-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]丙-2-烯酸酯(中間物19，456.54mg，1.99mmol，1.40eq)、(6R)-5-三級丁氧基羰基-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(400.00mg,1.42mmol,1.00eq)、T3P(904.85mg,2.84mmol,845.66μL,2.00eq)與Et3N(719.42mg,7.11mmol,985.51μL,5.00eq)於THF(10.00mL)中之混合物加熱至70℃ 達16h。將混合物用EtOAc(60mL)稀釋並用HCl(1M,60mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(165.00mg，339.77μmol，23.93%產率，94%純度)。LCMS：457[M+1]。
步驟2：2-三級丁基8-乙基(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯。在三級丁基(6R)-3-[2,2-二氟乙基(2-乙氧基羰基烯丙基)胺甲醯基]-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(165.00mg,361.46μmol,1.00eq)於MeCN(6.00mL)中之溶液中，添加DBU(27.51mg,180.73μmol,27.24μL,0.50eq)，並將混合物加熱至50℃達2h。TLC顯示無起始材料及主要的所欲產物。將混合物用EtOAc(30mL)稀釋並用鹽水(30mL)洗滌。將有機相在真空中濃縮，其藉由製備型TLC純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(103.00mg，218.87μmol，60.55%產率，97%純度)。
LCMS：457[M+1]。
中間物21：(2S,3R)-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-((甲基胺基)甲基)戊-4-烯-1-醇。
步驟1：乙基3-[苄基(甲基)胺基]丙酸酯。在N-甲基-1-苯基-甲胺(50.00g,412.61mmol,53.19mL,1.00eq)於EtOH(200.00mL)中之溶液中，在N2下添加乙基丙-2-烯酸酯(49.57g,495.13mmol,53.88mL,1.20eq)，將反應混合物在20℃下攪拌16小時。TLC顯示N-甲基-1-苯基-甲胺消耗殆盡，且偵測到一個具有較低極性的新的主要斑點。將反應混合物在旋轉蒸發器上濃縮，以提供呈黃色油狀物之 標題化合物(87.00g，粗製)且直接用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.21-7.35(m,5 H),4.15(q,J=7.17Hz,2 H),3.52(s,2 H),2.72-2.80(m,2 H),2.48-2.56(m,2 H),2.22(s,3 H),1.26(t,J=7.15Hz,3 H)。
步驟2：乙基3-[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]丙酸酯。在乙基3-[苄基(甲基)胺基]丙酸酯(33.00g,149.12mmol,1.00eq)與(Boc)2O(32.55g,149.12mmol,34.26mL,1.00eq)於EtOH(200.00mL)中之混合物中，在N2下添加Pd/C(3.50g，10%純度)，將懸浮液在真空下除氣並以H2吹掃三次，將混合物在H2(50psi)下在40℃下攪拌16小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到一個具有較低極性的新的主要斑點。將反應混合物過濾，然後將濾液濃縮。殘餘物藉由急速矽膠層析法純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(24.00g，103.77mmol，69.59%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=4.12(q,J=7.15Hz,2 H),3.48(brs,2 H),2.85(s,3 H),2.52(t,J=6.78Hz,2 H),1.44(s,9 H),1.21-1.29(m,3 H)。
步驟3：乙基2-[[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]甲基]-3-羥基-戊-4-烯酸酯。在乙基3-[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]丙酸酯(25.00g,108.09mmol,1.00eq)於THF(200.00mL)中之溶液中，在-78℃下在N2下逐滴添加LDA(1M,162.14mL,1.50eq)，將反應混合物在-78℃下攪拌30分鐘，接著逐滴添加丙-2-烯醛(7.88g,140.52mmol,9.38mL,1.30eq)於THF(20.00mL)中之溶液，並將反應混合物在25℃下再攪拌2小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且形成多個新的斑點。將反應添加至NH4Cl之水溶液(200mL)，接著以乙酸乙酯(200mL*2)萃取，將合併之有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(18.00g，62.64mmol，57.95%產率)。
步驟4：乙基2-[[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]甲基]-3-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-戊-4-烯酸酯。在乙基2-[[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]甲基]-3-羥基-戊-4-烯酸酯(25.50g,88.74mmol,1.00eq) 於DCM(200.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加咪唑(6.65g,97.62mmol,1.10eq)、DMAP(1.08g,8.87mmol,0.10eq)、及TBDPSCl(26.83g,97.62mmol,25.08mL,1.10eq)。將混合物在30℃下攪拌12小時。TLC顯示仍有30%的起始材料。接著添加TBDPSCl(24.39g,88.74mmol,22.80mL,1.00eq)並在30℃下再攪拌12小時。TLC顯示反應已完成。將混合物倒入水(200mL)中。以DCM(100mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(100mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(49.00g，粗製)。
步驟5：三級丁基((2S,3S)-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-(羥基甲基)戊-4-烯-1-基)(甲基)胺甲酸酯及三級丁基((2S,3R)-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-(羥基甲基)戊-4-烯-1-基)(甲基)胺甲酸酯。在乙基2-[[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]甲基]-3-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-戊-4-烯酸酯(17.00g,32.33mmol,1.00eq)於THF(200.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加LiBH4(4.22g,193.98mmol,6.00eq)。將混合物在30℃下攪拌60小時。TLC顯示反應完成，且偵測到二個斑點。將混合物倒入水(300mL)中。以DCM(100mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(50mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化，以提供呈黃色油狀物之三級丁基((2S,3S)-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-(羥基甲基)戊-4-烯-1-基)(甲基)胺甲酸酯(3.88g，8.02mmol，24.81%產率)及呈黃色油狀物之三級丁基((2S,3R)-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-(羥基甲基)戊-4-烯-1-基)(甲基)胺甲酸酯(940.00mg，1.94mmol，6.01%產率)。
步驟6：(2S,3R)-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-((甲基胺基)甲基)戊-4-烯-1-醇。在三級丁基((2S,3R)-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-(羥基甲基)戊-4-烯-1-基)(甲基)胺甲酸酯(1.35g,2.79mmol,1.00eq)於DCM(10.00mL)中之溶液中，添加TFA(7.70g,67.53mmol,5,00mL,24.21eq)，將反應混合物在25℃下攪拌30分 鐘。TLC顯示起始材料消耗殆盡。將反應混合物在旋轉蒸發器上濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(1.35g，粗製，TFA)且直接用於下一步驟。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.62-7.71(m,4 H),7.36-7.48(m,6 H),5.83(ddd,J=7.34,10.30,17.33Hz,1 H),4.97-5.08(m,2H),4.22(dd,J=4.89,7.09Hz,1 H),3.82(dd,J=3.55,10.27Hz,1 H),3.60(t,J=9.90Hz,1 H),3.13-3.20(m,1 H),2.97-3.06(m,1 H),2.60(s,3 H),2.04-2.14(m,1 H),1.07(s,9 H)。
中間物22：三級丁基(8Z)-11-甲基-12-側氧基-3,4,7,10-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二吖 -2-羧酸酯。
步驟1：5-三級丁基3-乙基2-烯丙基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。在5-三級丁基O3-乙基2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(20.00g,67.72mmol,1.00eq)與3-溴丙-1-烯(12.29g,101.58mmol,1.50eq)於DMF(200.00mL)中之溶液中，添加Cs2CO3(55.16g,169.30mmol,2.50eq)。接著將混合物在25℃下攪拌16h。TLC(PE：EtOAc=3：1)顯示反應物5-三級丁基O3-乙基2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯消耗殆盡，且形成二個新的斑點。將混合物用100mL的水稀釋並以EtOAc(100mL*3)萃取。將有機相用鹽水(100mL*1)洗滌，並以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=50/1至3/1)純化，以提供獲得呈白色固體之標題化合物(13.50g，40.25mmol，59.44%產率)。
步驟2：2-烯丙基-5-三級丁氧基羰基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸。在5-三級丁基3-乙基2-烯丙基-6,7-二氫-4H- 吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(640.00mg,1.91mmol,1.00eq)於THF(20.00mL)及H2O(4.00mL)中之溶液中，在25℃下添加NaOH(152.65mg,3.82mmol,2.00eq)。接著將混合物再加熱至50℃達16h。TLC(EtOAc：MeOH=10：1)顯示仍有反應物5-三級丁基3-乙基2-烯丙基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯且形成一個新的斑點。接著添加2mL之MeOH，並仍將所得混合物在50℃下攪拌3h。TLC(EtOAc：MeOH=10：1)顯示反應物5-三級丁基3-乙基2-烯丙基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯消耗殆盡，且形成一個新的主要斑點。將混合物用30mL的水稀釋，並在真空中濃縮以移除有機溶劑。接著將水相之pH藉由添加HCl(3N)調整至5。以EtOAc(30mL*4)萃取水相，並將有機相用鹽水(30mL*1)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。獲得呈白色固體之標題化合物(590.00mg，粗製)。
步驟3：三級丁基2-烯丙基-3-[烯丙基(甲基)胺甲醯基]-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在2-烯丙基-5-三級丁氧基羰基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(590.00mg,1.92mmol,1.00eq)及N-甲基丙-2-烯-1-胺(204.79mg,2.88mmol,273.06μL,1.50eq)於DMF(10.00mL)中之溶液中，在25℃下邊攪拌邊添加PYBOP(1.10g,2.11mmol,1.10eq)、HOBt(285.33mg,2.11mmol,1.10eq)及DIPEA(1.49g,11.52mmol,2.01mL,6.00eq)達1h。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示反應物2-烯丙基-5-三級丁氧基羰基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸消耗殆盡，且形成一個新的斑點。LCMS顯示偵測到所欲產物。將混合物用30mL的水稀釋並以EtOAc(30mL*4)萃取。收集有機相並用鹽水(20mL*1)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=30/1至1/1)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(650.00mg，1.80mmol，93.76%產率)。
步驟4：三級丁基(8Z)-11-甲基-12-側氧基-3,4,7,10-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二吖-2-羧酸酯。在三級丁基2- 烯丙基-3-[烯丙基(甲基)胺甲醯基]-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(275.00mg,762.94μmol,1.00eq)於DCE(480.00mL)中之溶液中，在N2下一次性添加[1,3-雙(2,4,6-三甲基苯基)咪唑啶-2-亞基]-二氯-[(2-異丙氧基苯基)亞甲基]釕(95.61mg,152.59μmol,0.20eq)，接著將混合物在85℃下攪拌16h。TLC(PE：EtOAc=1：3)顯示仍有反應物5且形成二個新的斑點。將混合物在真空中濃縮。將600mg的殘餘物與二個平行批次合併並藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=50/1至1/3)純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(180.00mg，541.52μmol，35.49%產率)。
中間物23：三級丁基11-甲基-12-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二吖 -2-羧酸酯。
在三級丁基(8Z)-11-甲基-12-側氧基-3,4,7,10-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二吖-2-羧酸酯(中間物22，60.00mg，180.51μmol，1.00eq)於MeOH(5.00mL)中之溶液中，在N2下添加Pd/C(50.00mg，10.00μL，10%純度)。在真空下將懸浮液除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(15psi)下在25℃下攪拌2小時。TLC(PE：EtOAc=1：3)顯示反應物6消耗殆盡，且形成一個新的主要斑點。將混合物用10mL之MeOH稀釋，過濾並在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(61.00mg，粗製)，其不經進一步純化即直接使用。
中間物24：三級丁基3'-羥基-10-甲基-11-側氧基-螺[3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8,1'-環丁烷]-2-羧酸酯。
步驟1：[3-苄氧基-1-(羥基甲基)環丁基]甲醇。在LAH(1.55g,40.80mmol,2.50eq)於THF(50.00mL)中之懸浮液中，在-40℃下逐滴添加二乙基3-苄氧基環丁烷-1,1-二羧酸酯(5.00g,16.32mmol,1.00eq)於THF(20.00mL)中之溶液。將所得懸浮液在20℃下攪拌3hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料已消耗，且形成一個主要斑點。將混合物用THF(300mL)稀釋並用H2O(1.5mL)、15% NaOH(1.5mL)及H2O(4.5mL)淬熄，過濾。將濾液在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(3.30g，粗製)。
步驟2：2-(苄氧基)-6,8-二氧雜-7-硫螺[3.5]壬烷7-氧化物。在[3-苄氧基-1-(羥基甲基)環丁基1甲醇(3.30g,14.85mmol,1.00eq)於DCM(90.00mL)中之溶液中，添加TEA(3.31g,32.67mmol,4.53mL,2.20eq)，隨後在-10℃下添加SOCl2(2.12g,17.82mmol,1.29mL,1.20eq)。將混合物在0℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示起始材料已消耗，TLC(PE：EtOAc=10：1)顯示出現一個主要斑點。將混合物用H2O(50mL)稀釋並以DCM(100mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(PE：EtOAc=100：1)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(3.20g，11.93mmol，80.31%產率)。
步驟3：2-苄氧基-6,8-二氧雜-7硫螺[3.5]壬烷7,7-二氧化物。將2-苄氧基-6,8-二氧雜-7硫螺[3.5]壬烷7-氧化物(2.50g,9.32mmol,1.00eq)溶解於H2O(7.50mL)、MeCN(5.00mL)及CCl4(5.00mL)中。將RuCl3．H2O(210.04mg,931.69μmol,0.10eq)添加至混合 物，隨後添加NaIO4(3.99g,18.63mmol,1.03mL,2.00eq)。接著將反應混合物在20℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=5：1)顯示起始材料已消耗，且出現一個主要斑點。將混合物用飽和NaHCO3(80mL)稀釋，並以EtOAc(200mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由急速層析法(PE：EtOAc=10%至30%)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(2.40g，8.44mmol，90.57%產率)。
步驟4：[3-苄氧基-1-(甲基胺基甲基)環丁基]甲基氫硫酸酯。在2-苄氧基-6,8-二氧雜-7硫螺[3.5]壬烷7,7-二氧化物(1.00g,3.52mmol,1.00eq)於MeCN(2.00mL)中之溶液中，添加CH3NH2(2M於THF中，26.40mL，15.00eq)。將混合物加熱至65℃達16hr。在LCMS上顯示三個尖峰且偵測到40%所欲產物。將混合物在真空中濃縮，並將殘餘物用甲基三級丁基(50mL)洗滌，以提供呈白色固體之標題化合物(1.10g，粗製)。
步驟5：三級丁基N-[[3-苄氧基-1-(羥基甲基)環丁基]甲基]-N-甲基-胺甲酸酯。在[3-苄氧基-1-(甲基胺基甲基)環丁基]甲基氫硫酸酯(1.10g,3.49mmol,1.00eq)於THF(5.00mL)中之溶液中，添加H2SO4(68.42mg,697.57μmol,37.18μL,0.20eq)。將混合物加熱至50℃達6hr。LCMS顯示仍有起始材料。將混合物在70℃下再攪拌32hr。LCMS顯示仍有少許起始材料。將混合物之pH用飽和NaHCO3調整至11並添加Boc2O(761.22mg,3.49mmol,801.29μL,1.00eq)。將混合物在20℃下攪拌30min。TLC(PE：EtOAc=3：1)顯示出現二個主要斑點。將混合物用H2O(50mL)稀釋並以EtOAc(80mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由急速層析法(PE：EtOAc：0%至20%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(519.00mg，1.38mmol，39.46%產率，89%純度)。
步驟6：(3-(苄氧基)-1-((甲基胺基)甲基)環丁基)甲醇。在三級丁基N-[[3-苄氧基-1-(羥基甲基)環丁基]甲基]-N-甲基-胺甲酸酯 (519.00mg,1.55mmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.00mL)。將混合物在20℃下攪拌0.5hr。TLC(PE：EtOAc=5：1)顯示起始材料已消耗。將混合物在真空中濃縮，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(600.00mg，粗製，TFA)。
步驟7：三級丁基3-[[3-苄氧基-1-(羥基甲基環丁基]甲基-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在5-三級丁氧基羰基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(400.00mg,1.50mmol,1.00eq)及[3-苄氧基-1-(甲基胺甲基)環丁基]甲醇(524.01mg,1.50mmol,1.00eq,TFA)於DMF(5.00mL)中之溶液中，添加PYBOP(780.58mg,1.50mmol,1.00eq)、HOBt(202.68mg,1.50mmol,1.00eq)，隨後添加DIEA(969.30mg,7.50mmol,1.31mL,5.00eq)。將混合物在20℃下攪拌1hr。LCMS顯示偵測到一個具有所欲Ms的主要尖峰。以EtOAc(80mL*3)及H2O(50mL)萃取混合物。將合併之有機層用H2O(80mL*2)、1N HCl(50mL)及飽和NaHCO3(50mL)洗滌。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(PE：EtOAc=30%至50%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(300.00mg，433.36μmol，28.89%產率，70%純度)。
步驟8：三級丁基-3-[[3-苄氧基-1-(甲基磺醯基氧基-甲基)環丁基]甲基-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在三級丁基3-[[3-苄氧基-1-(羥基甲基)環丁基]甲基-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(200.00mg,288.90μmol,1.00eq)於DCM(1.00mL)中之溶液中，添加吡啶(114.26mg,1.44mmol,116.59μL,5.00eq)，隨後添加MsCl(49.64mg,433.35μmol,33.54μL,1.50eq)。將混合物在20℃下攪拌2hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示仍有起始材料，且出現二個新的主要斑點。添加另一批次MsCl(49.64mg,433.35μmol,33.54μL,1.50eq)，並將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示仍有少許起始材料，且出現二個新的主要斑點。以DCM(30mL*2)及H2O(20mL) 萃取混合物。將合併之有機層用飽和Cu2SO4(20mL*2)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=1：1)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(60.00mg，106.63μmol，36.91%產率)。
步驟9：三級丁基3'-苄氧基-10-甲基-11-側氧基-螺[3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8,1'-環丁烷]-2-羧酸酯。在三級丁基3-[[3-苄氧基-1-(甲基磺醯基氧基甲基)環丁基]甲基-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(60.00mg,106.63μmol,1.00eq)於THF(1.00mL)中之溶液中，在0℃下添加NaH(8.53mg，213.27μmol，60%純度，2.00eq)。將混合物在0℃下攪拌0.5hr。LCMS顯示仍有22%的起始材料。將混合物在20℃下再攪拌2hr。LCMS顯示偵測到一個具有所欲Ms的主要尖峰。將混合物用飽和NH4Cl(10mL)淬熄，並以EtOAc(10mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=1：1)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(27.00mg，57.87μmol，54.27%產率)。
步驟10：三級丁基3'-羥基-10-甲基-11-側氧基-螺[3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8,1'-環丁烷]-2-羧酸酯。在三級丁基3'-苄氧基-10-甲基-11-側氧基-螺[3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8,1'-環丁烷]-2-羧酸酯(27.00mg,57.87μmol,1.00eq)於MeOH(10.00mL)中之溶液中，在N2下添加Pd-C(10%,5mg)。在真空下將懸浮液除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(20psi)下在40℃下攪拌16小時。LCMS顯示偵測到一個具有所欲MS的主要尖峰。將混合物用MeOH(30mL)稀釋，過濾並在真空中濃縮，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(30.00mg，粗製)。
中間物25：甲基2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-4-(甲基胺基)丁酸酯。
步驟1：4-(三級丁氧基羰基胺基)-2-羥基-丁酸。在4-胺基-2-羥基-丁酸(10.00g,83.95mmol,1.00eq)於H2O(75.00mL)中之溶液中，添加K2CO3(11.60g,83.95mmol,1.00eq)，隨後在0℃下逐滴添加Boc2O(18.32g,83.95mmol,19.29mL,1.00eq)於二烷(50.00mL)中之溶液。將所得溶液在20℃下攪拌16hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示出現一個主要斑點。將混合物用H2O(80mL)稀釋，並用100ml DCM洗滌以移除殘留的Boc2O。將水層之pH用1N鹽酸調整至4至5，並以4×100mL的乙酸乙酯萃取所得溶液。將有機層合併並在真空下濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(16.00g，72.98mmol，86.94%產率)。
步驟2：甲基4-(三級丁氧基羰基胺基)-2-羥基-丁酸酯。在4-(三級丁氧基羰基胺基)-2-羥基-丁酸(5.00g,22.81mmol,1.00eq)於DMF(50.00mL)中之溶液中，在0℃下逐滴添加Cs2CO3(8.92g,27.37mmol,1.20eq)及CH3I(3.24g,22.81mmol,1.42mL,1.00eq)。將混合物在20℃下攪拌2hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示起始材料已消耗，且出現一個主要斑點。將混合物用H2O(100mL)稀釋並以EtOAc(200mL*2)萃取。將合併之有機層用H2O(200mL*2)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(PE：EtOAc=30%至50%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(5.50g，粗製)。
步驟3：甲基4-(三級丁氧基羰基胺基)-2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-丁酸酯。在甲基4-(三級丁氧基羰基胺基)-2-羥基-丁酸酯(5.00g,21.44mmol,1.00eq)於DCM(50.00mL)中之溶液中，添加咪唑(2.19g,32.16mmol,1.50eq)，隨後添加TBDPSCl(5.89g,21.44mmol,5.50mL,1.00eq)及DMAP(261.88mg,2.14mmol,0.10eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示仍有 起始材料，且TLC(PE：EtOAc=10：1)顯示出現二個主要斑點。將混合物用H2O(50mL)稀釋並以DCM(80mL*3)萃取。將合併之有機層用H2O(20mL*3)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由急速層析法(PE：EtOAc：0%至10%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(6.50g，13.78mmol，64.28%產率)。
步驟4：甲基4-[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]-2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-丁酸酯。在甲基4-(三級丁氧基羰基胺基)-2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-丁酸酯(4.40g,9.33mmol,1.00eq)於DMF(50.00mL)中之溶液中，添加Ag2O(10.81g,46.65mmol,5.00eq)，隨後添加CH3I(6.62g,46.65mmol,2.90mL,5.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。TLC(PE：EtOAc=10：1)顯示仍有起始材料，添加額外Ag2O(2.0g)及CH3I(3mL)，並將混合物在20℃下再攪拌120hr。TLC(PE：EtOAc=10：1)顯示仍有少許起始材料，且出現二個主要斑點。將混合物用EtOAc(200mL)稀釋並過濾。將濾液用H2O(100mL)稀釋，並分離出有機層。將有機層用H2O(200mL*2)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由急速層析法(PE：EtOAc：0%至10%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(3.20g，6.59mmol，70.62%產率)。
步驟5：甲基2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-4-(甲基胺基)丁酸酯。在甲基4-[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]-2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-丁酸酯(1.30g,2.68mmol,1.00eq)於DCM(10.00mL)中之溶液中，在0℃下添加TFA(5.00mL)。將混合物在20℃下攪拌2hr。TLC(PE：EtOAc=10：1)顯示起始材料已消耗。將混合物在真空中濃縮，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(2.80g，粗製，TFA)。
中間物26：2-(三級丁氧基羰基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸。
步驟1：三級丁基3-[[3-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-4-甲氧基-4-側氧基-丁基]-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在5-三級丁氧基羰基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(800.00mg,2.99mmol,1.00eq)及甲基2-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-4-(甲基胺基)丁酸酯(中間物25，2.99g，5.98mmol，2.00eq，TFA)於DMF(10.00mL)中之溶液中，添加PYBOP(1.71g,3.29mmol,1.10eq)、HOBt(444.41mg,3.29mmol,1.10eq)，隨後添加DIEA(1.93g,14.95mmol,2.61mL,5.00eq)。將混合物在20℃下攪拌2hr。LCMS顯示偵測到一個具有所欲MS的主要尖峰。以EtOAc(50mL*3)及H2O(50mL)萃取混合物。將合併之有機層用H2O(50mL*3)、1N HCl(50mL)及飽和NaHCO3(50mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(PE：EtOAc：20%至100%)再純化，以提供呈白色固體之標題化合物(1.60g，2.52mmol，84.29%產率)。
步驟2：三級丁基3-[(3-羥基-4-甲氧基-4-側氧基-丁基)-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在三級丁基3-[[3-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-4-甲氧基-4-側氧基-丁-基]-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(1.40g,2.21mmol,1.00eq)於THF(14.00mL)中之溶液中，添加TBAF(2M,2.21mL,2.00eq)。將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=1：2)顯示起始材料已消耗，且出現二個主要斑點。以DCM(50mL*2)及H2O(30mL)萃取混合物。將合併之有機層用H2O(30mL*2)、1N HCl(30mL)及飽和NaHCO3(30mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾。 將濾液在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(1.5g，粗製)。
步驟3：三級丁基3-[(4-甲氧基-3-甲基磺醯基氧基-4-側氧基-丁基)-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯及三級丁基3-[(4-甲氧基-3-甲基磺醯基氧基-4-側氧基-丁基)-甲基-胺甲醯基]-2-甲基磺醯基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在三級丁基3-[(3-羥基-4-甲氧基-4-側氧基-丁基)-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(150.00mg,378.37μmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，添加Py(29.93mg,378.37μmol,30.54μL,1.00eq)，隨後添加MsCl(43.34mg,378.37μmol,29.28μL,1.00eq)。將混合物在20℃下攪拌2hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示仍有起始材料，且出現二個新的斑點。添加額外MsCl(43.34mg,378.37μmol,29.28μL,1.00eq)並將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料已消耗，且出現二個新的斑點。以DCM(20mL*2)及H2O(20mL)萃取混合物。將合併之有機層用飽和Cu2SO4(10mL*2)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=0：1)純化，以提供呈白色固體之三級丁基3-[(4-甲氧基-3-甲基磺醯基氧基-4-側氧基-丁基)-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(20.00mg，42.15μmol，11.14%產率)及呈白色固體之三級丁基3-[(4-甲氧基-3-甲基磺醯基氧基-4-側氧基-丁基)-甲基-胺甲醯基]-2-甲基磺醯基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(150.00mg，271.43μmol，71.74%產率)。
步驟4：2-(三級丁氧基羰基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸。在三級丁基3-[(4-甲氧基-3-甲基磺醯基氧基-4-側氧基-丁基)-甲基-胺甲醯基]-2-甲基磺醯基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(150.00mg,271.43μmol,1.00eq)於THF(3.00mL)中之溶液中，添加NaH(21.71mg，542.87μmol，60%純度，2.00eq)。將混合物 在0℃下攪拌0.5hr。LCMS顯示起始材料及2-(三級丁氧基羰基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸在一個尖峰中。將混合物在20℃下再攪拌3hr。LCMS顯示仍有少許起始材料。添加額外NaH(21.71mg，542.87μmol，60%純度，2.00eq)，並將混合物在20℃下攪拌16h。LCMS顯示57%的2-(三級丁氧基羰基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸及22%的未知化合物。將混合物用H2O(5mL)稀釋並在真空中濃縮，以提供呈棕色油狀物之標題化合物的粗製混合物(116.00mg，粗製)。
中間物27：三級丁基8-(1-羥基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
在三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-丙-2-烯醯基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(3.70g,9.88mmol,1.00eq)於MeOH(100.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加CeCl3(4.87g,19.76mmol,1.24mL,2.00eq)。將混合物在0℃下攪拌15min，接著將NaBH4(1.50g,39.52mmol,4.00eq)添加至混合物。將混合物加熱至30℃並攪拌2小時。LCMS及TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(20mL)中並在減壓下濃縮。以乙酸乙酯(50mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(20mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(二氯甲烷：甲醇=100/1至20：1)純化， 以提供呈黃色固體之標題化合物(2.70g，6.74mmol，68.24%產率，94%純度)，其藉由SFC(分析方法：IC-3S_3_5_40_3ML，管柱：Chiralpak IC-3 100×4.6mm I.D.,3um，動相：甲醇(0.05% DEA)於CO2中自5%至40%，流速：3mL/min，波長：220nm；分離方法：儀器：SFC 80；管柱：IC-10um；動相：A為CO2且B為MeOH(0.1% NH3H2O)；梯度：B 35%；流速：60mL/min；背壓：100bar；管柱溫度：35℃；波長：220nm)分離，以給出四種異構物：三級丁基(S*)-8-((S*)-1-羥基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯：650mg，三級丁基(R*)-8-((S*)-1-羥基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯：640mg，三級丁基(S*)-8-((R*)-1-羥基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯：650mg，及三級丁基(R*)-8-((R*)-1-羥基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯：650mg。
*純的但未知之立體異構物。
中間物28：三級丁基8-(1-苄氧基-3-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
步驟1：三級丁基8-(1-苄氧基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-(1-羥基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡 啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物27，1.00g，2.66mmol，1.00eq)於THF(15.00mL)中之溶液中，添加NaH(425.60mg，10.64mmol，60%純度，4.00eq)。將混合物在0℃下攪拌30min，接著添加BnBr(682.41mg,3.99mmol,473.90μL,1.50eq)。將混合物在40℃下攪拌2hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料已消耗，且出現一個新的斑點。將混合物用H2O(50mL)淬熄並以EtOAc(30mL*3)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(PE：EtOAc=2：1至1：1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(700.00mg，1.47mmol，55.44%產率，98.3%純度)。
步驟2：三級丁基8-(1-苄氧基-3-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-(1-苄氧基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(350.00mg,750.16μmol,1.00eq)及氯銠三苯基磷烷(69.41mg,75.02μmol,0.10eq)於THF(8.00mL)中之溶液中，在0℃下添加1,3,2-苯并二氧雜硼呃(1M,3.75mL,5.00eq)。將混合物在10℃下攪拌3hr。在-3℃下逐滴添加NaOH(210.04mg,5.25mmol,7.00eq)於H2O(4.00mL)中之溶液。接著緩慢添加H2O2(2.38g，20.97mmol，2.02mL，30%純度，27.96eq)。將混合物在25℃下攪拌2hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料已消耗，且出現一個主要斑點。以DCM(90mL*3)及H2O(20mL)萃取混合物。將有機層用20% NaOH(80mL*2)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(PE：EtOAc：50%至100%接著EtOAc：MeOH：10%)純化，以提供呈棕色固體之標題化合物(272.00mg，516.40μmol，68.84%產率，92%純度)。
中間物29：外消旋三級丁基8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5- a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。
將三級丁基10-甲基-8-(甲基磺醯基氧基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(150.00mg,350.06μmol,1.00eq)、2,2-二氟乙胺(567.51mg,7.00mmol,20.00eq)於DMSO(5.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在88℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(20mL)中並以EtOAc(10mL*2)萃取。將合併之有機相用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=100/1至1：3)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(82.00mg，176.51μmol，50.42%產率，89%純度)。LCMS：414[M+1]。
中間物30：5-三級丁基3-乙基1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。
步驟1：三級丁基3-(2-乙氧基-2-側氧基-乙醯基)-4-側氧基-哌啶-1-羧酸酯。在LiHMDS(1M,652.44mL,1.30eq)中，在- 78℃下在N2下逐滴添加三級丁基4-側氧基哌啶-1-羧酸酯(100.00g,501.88mmol,1.00eq)於THF(1.00L)中之溶液。將反應混合物在-78℃下在N2下攪拌30分鐘。接著逐滴添加草酸二乙酯(95.35g,652.44mmol,1.30eq)。在添加後，將反應混合物在30分鐘的期間內升溫至15℃並在15℃下再攪拌2小時。TLC(PE/EA=3/1,Rf=0.2)顯示反應已完成。將反應用飽和NH4Cl水溶液(1.5L)淬熄，接著用稀鹽酸中和，以EtOAc(800mL×3)萃取水層。將合併之有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾且在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(165.00g，粗製)且直接用於下一步驟。
步驟2：5-三級丁基3-乙基1,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。將三級丁基3-(2-乙氧基-2-側氧基-乙醯基)-4-側氧基-哌啶-1-羧酸酯(165.00g，551.25mmol，1.00eq)與NH2NH2‧H2O(35.71g,606.37mmol,1.10eq)於AcOH(1.00L)中之混合物除氣並以N2吹掃3次。接著將混合物在80℃下在N2大氣下攪拌1小時。TLC(PE/EA=1/1,Rf=0.4)及LCMS顯示反應已完成。將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物溶解於EtOAc(800mL)中並用Na2CO3(1N,1.2L)洗滌。以乙酸乙酯(800mL×2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(1L×2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物(130.00g，440.19mmol，79.85%產率)。LCMS：296[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=4.57-4.65(m,2 H),4.36(d,J=7.03Hz,2 H),3.67-3.74(m,2 H),2.75(t,J=5.65Hz,2 H),1.49(s,9 H),1.36-1.40(m,3 H)。
化合物001：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：10-甲基-8-亞甲基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11(2H)-酮。在三級丁基10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物1，340.00mg，1.02mmol，1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，在N2下添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,26.48eq)並將混合物在15℃下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供標題化合物的TFA鹽(446.00mg，粗製)，其直接用於下一步驟。
步驟2：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將10-甲基-8-亞甲基-1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(446.00mg,515.16μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(260.65mg,2.58mmol,357.05μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(136.86mg,515.16μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之混合物在10℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。油狀物藉由矽膠管柱及製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(39.00mg，96.28μmol，18.69%產率，99.7%純度)。LCMS：404/406[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.60(dd,J=2.69,6.48Hz,1 H),7.18-7.23(m,1 H),7.03-7.11(m,1 H),6.55(s,1 H),5.18(d,J=10.39Hz,2 H),5.(02(s, 2H),4.70(s,2 H),3.98(s,2 H),3.87(t,J=5.75Hz,2 H),3.19(s,3 H),2.86(t,J=5.81Hz,2 H)。
化合物002：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
在N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(化合物001；50.00mg，123.81μmol，1.00eq)及氯銠三苯基磷烷(4.58mg,4.95μmol,0.04eq)於THF(3.00mL)中之溶液中，在0℃下在N2下添加1,3,2-苯并二氧雜硼呃(1M,371.43μL,3.00eq)。將混合物在0℃下攪拌3hr。TLC(DCM：MeOH=15：1)顯示起始材料幾乎消耗殆盡。在-30℃下逐滴添加NaOH(34.67mg,866.67μmol,7.00eq)於H2O(1.50mL)中之溶液。接著緩慢添加H2O2(393.01mg，3.47mmol，333.06μL，30%純度，28.00eq)。將混合物在10℃下攪拌16hr。LCMS顯示起始材料/所欲產物=1/3。將混合物用飽和NaHSO3(50mL)淬熄並以EtOAc(50mL)萃取。將有機相用NaOH(15%,30mL*3)及鹽水(30mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以給出棕色油狀物。油狀物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(10.00mg，23.49μmol，18.97%產 率，99.1%純度)。LCMS：422/424[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.14-7.24(m,1 H),7.00-7.11(m,1 H),6.52(s,1 H),4.67(s,2 H),4.41(dd,J=7.09,14.31Hz,1 H),4.20(dd,J=5.56,14.24Hz,1 H),3.77-3.94(m,2 H),3.62-3.77(m,2 H),3.43-3.54(m,1 H),3.32-3.43(m,1 H),3.19(s,3 H),2.84(t,J=5.75Hz,2 H),2.61-2.77(m,1 H),1.75(br.s,1 H)。
化合物003：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-羥基-8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：10-甲基-8-亞甲基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11(2H)-酮。在三級丁基10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物1，312.00mg，938.63μmol，1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在N2下添加TFA(4.62g,40.52mmol,3.00mL,43.17eq)並將混合物在15℃下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(325.00mg，粗製，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟2：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺。將10-甲基-8-亞甲基-1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(325.00mg,938.49μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(474.83mg,4.69mmol,650.45μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(249.33mg,938.49μmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之混合物在10℃下攪拌16h。LCMS顯示起始材料/所欲產物=2/1。將混合物再加熱至30℃達16h。LCMS顯示起始材料/所欲產物=1/2。將混合物再加熱至40℃達16h。TLC(DCM/MeOH=8/1)顯示起始材料消耗殆盡。將混合物用DCM(60mL)稀釋並用HCl(1M,60mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。油狀物藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(320.00mg，792.39μmol，84.43%產率)。LCMS：404/406[M+1]。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-羥基-8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(50.00mg,123.81μmol,1.00eq)於丙酮(3.00mL)及H2O(1.50mL)中之溶液中，在0℃下添加K2OsO4.2H2O(2.28mg,6.19μmol,0.05eq)及NMO(58.02mg,495.24μmol,52.27μL,4.00eq)。將混合物在10℃下攪拌16h。將混合物用飽和NaHSO3(40mL)淬熄並以EtOAc(40mL)萃取。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黑色油狀物。油狀物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(26.00mg，59.38μmol，47.96%產率，100%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.57(dd,J=2.69,6.48Hz,1 H),7.14-7.22(m,1 H),7.02-7.10(m,1 H),6.56(s,1 H),4.67(d,J=4.52Hz,2 H),4.31-4.41(m,1 H),4.18-4.29(m,1 H),3.84(d,J=7.95Hz,2 H),3.67-3.74(m,1 H),3.58-3.66(m,1 H),3.34-3.45(m,1 H), 3.26-3.34(m,1 H),3.22(s,3 H),3.02(br.s.,1 H),2.83(t,J=5.81Hz,2 H),2.32-2.50(m,1 H)。LCMS：438/440[M+1]。
化合物004：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：8-羥基-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物3，49.00mg，145.66μmol，1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,185.45eq)並將混合物在15℃下在N2下攪拌1h。LCMS顯示起始材料消耗殆盡。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之所欲產物(51.00mg，145.59μmol，99.95%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟2：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-羥基-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(51.00mg,145.59μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(73.66mg,727.95μmol,100.90μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(38.68mg,145.59μmol,1.00eq)於DCM(4.00mL) 中之混合物在10℃下攪拌16h。將混合物用DCM(40mL)稀釋並用HCl(1M,40mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。油狀物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(35.00mg，84.10μmol，57.77%產率，98%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.15-7.22(m,1 H),7.02-7.10(m,1 H),6.51(s,1 H),4.68(d,J=2.69Hz,2 H),4.53-4.64(m,2 H),4.26(d,J=9.17Hz,1 H),3.85(t,J=5.81Hz,2 H),3.59(dd,J=4.10,15.22Hz,1 H),3.35(dd,J=5.44,15.22Hz,1 H),3.22(s,3 H),2.85(t,J=5.75Hz,2 H),2.10(br.s.,1 H)。LCMS：408/410[M+1]。
化合物005：N-(3-氯-4-氟苯基)-8,8-二氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8,8-二氟-10-甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧酸酯。在三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物2，80.00mg，239.26μmol，1.00eq)於DCM(4.00mL)中之溶液中，在-30℃下添加DAST(115.70mg,717.78μmol,94.84μL,3.00eq)。將混合 物在15℃下攪拌16h。將混合物用鹽水(30mL)稀釋，以DCM(30mL*2)萃取。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。油狀物藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(60.00mg，153.21μmol，64.04%產率，91%純度)。LCMS：379[M+23]。
步驟2：8,8-二氟-10-甲基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11(2H)-酮。在三級丁基8,8-二氟-10-甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(60.00mg,168.36μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,160.45eq)並將混合物在15℃下在N2下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(62.00mg，150.70μmol，89.51%產率，90%純度，TFA)，其直接用於下一步驟。LCMS：257[M+1]。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8,8-二氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8,8-二氟-10-甲基-1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(62.00mg,167.45μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(84.72mg,837.23μmol,116.05μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(44.49mg,167.45μmol,1.00eq)於DCM(4.00mL)中之混合物在15℃下攪拌16h。將混合物用DCM(40mL)稀釋並用HCl(1M,40mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。油狀物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(37.00mg，86.31μmol，51.55%產率，99.8%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.57,6.48Hz,1 H),7.16-7.24(m,1 H),7.03-7.12(m,1 H),6.46(s,1 H),4.60-4.80(m,4 H),3.86(t,J=5.75Hz,2 H),3.72(t,J=12.29Hz,2 H),3.25(s,3 H),2.88(t,J=5.81Hz,2 H)。LCMS：428/430[M+1]。
化合物006：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-氟-10-甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧酸酯。在三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物3，80.00mg，237.82μmol，1.00eq)於DCM(4.00mL)中之溶液中，在-30℃下添加DAST(153.34mg,951.28μmol,125.69μL,4.00eq)。將混合物在15℃下攪拌16h。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到一個具有較低極性的新的主要斑點。將混合物用鹽水(30mL)稀釋，以DCM(30mL*2)萃取。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。油狀物藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(56.00mg，162.18μmol，68.20%產率，98%純度)。LCMS：361[M+23]。
步驟2：8-氟-10-甲基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11(2H)-酮。在三級丁基8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(56.00mg,165.49μmol,1.00eq)於DCM(1.00mL)中之溶液中，添加TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,81.61eq)並將混合物在15℃下在N2下攪拌1h。TLC顯示反應物消耗殆盡，且偵測到一個具有較大極性的新的主要斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之8-氟-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(59.00mg，150.73μmol，91.08%產率，90%純度，TFA)，其直接用於下一步驟。LCMS：239[M+1]。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-氟-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(59.00mg,167.48μmol,1.00eq,TFA)、 Et3N(84.74mg,837.40μmol,116.08μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(44.49mg,167.48μmol,1.00eq)於DCM(4.00mL)中之混合物在15℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(41.00mg，99.04μmol，59.14%產率，99%純度)。LCMS[M+1]：410。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=2.63,6.54Hz,1H),7.17-7.23(m,1H),7.02-7.10(m,1H),6.63(s,1H),4.64-4.85(m,2H),4.34-4.62(m,4H),3.95-4.08(m,1H),3.86(q,J=5.42Hz,2H),3.22(s,3H),2.87(br t,J=5.69Hz,2H)。
化合物007、008、009、010、011、012、及013係以類似於化合物006之方式製備。
化合物007：N-(3-溴-4-氟苯基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
LCMS[M+1]：454。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.71-7.73(m,1 H)7.27-7.29(m,1 H)7.04(t,J=8.4Hz,1 H)6.71(s,1 H)4.66-4.81(m,2 H)4.38-4.52(m,4 H)3.87-3.89(m,1 H)3.83-3.86(m,2 H)3.21(s,3 H)2.85-2.88(m,2 H)。
化合物008：N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
LCMS[M+1]：455。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.15(t,J=5.4Hz,1 H)8.06(d,J=5.6Hz,1 H)7.06-7.07(m,1 H)4.79-4.87(m,2 H)4.37-4.51(m,4 H)3.87-3.89(m,1 H)3.84-3.86(m,2 H)3.21(s,3 H)2.90(t,J=5.6Hz,2 H)。
化合物009：N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
LCMS[M+1]：401。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.77-7.80(m,1 H)7.61-7.62(m,1 H)7.13(t,J=8.6Hz,1 H)6.99(s,1 H)4.82(d,J=16Hz,1 H)4.68(d,J=15.6Hz,1 H)4.46-4.51(m,4 H)3.81-3.90(m,2 H)3.21(s,3 H)2.85-2.88(m,2 H)。
化合物010：8-氟-N-(4-氟-3-甲基苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
LCMS[M+1]：390。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.24-7.25(m,1 H)7.10-7.13(m,1 H)6.92(t,J=9.0Hz,1 H)4.67-4.80(m,2 H)4.38-4.52(m,4 H)3.86-3.87(m,1 H)3.84-3.85(m,1 H)3.21(s,3 H)2.85-2.88(m,2 H)2.25(s,3 H)。
化合物011：8-氟-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
LCMS[M+1]：444。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.68-7.70(m,1 H)7.59-7.61(m,1 H)7.13(t,J=9.4Hz,1 H)6.8(s,1 H)4.82(d,J=15.6Hz,1 H)4.70(d,J=16Hz,1 H)4.39-4.52(m,4 H)3.90-3.92(m,1 H)3.84-3.89(m,2 H)3.22(s,3 H)2.87(t,J=5.4Hz,2 H)。
化合物012：N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
LCMS[M+1]：428。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.17(t,J=8.0Hz,1 H)6.95(t,J=5.6Hz,1 H)6.6(s,1 H)4.75- 4.83(m,2 H)4.46-4.50(m,4 H)3.90-4.00(m,1 H)3.83-3.89(m,2 H)3.21(s,3 H)2.87-2.90(m,2 H)。
化合物013：N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
LCMS[M+1]：472。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.31(t,J=7.8Hz,1 H)6.91-6.96(m,1 H)6.61(s,1 H)4.71-4.83(m,2 H)4.46-4.51(m,4 H)3.87-3.88(m,1 H)3.84-3.86(m,2 H)3.21(s,3 H)2.88(t,J=5.6Hz,2 H)。
化合物014：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基3-[甲基-[2-(甲基磺醯基氧基甲基)烯丙基]胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在三級丁基3-[2-(羥基甲基)烯丙基-甲基-胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(100.00mg,285.38μmol,1.00eq)及Et3N(57.76mg,570.76μmol,79.12μL,2.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在0℃下在N2下添加MsCl(49.04mg,428.07μmol,33.14μL,1.50eq)於DCM(1.00mL)中之溶液，並將混合物再攪拌1h。將混合物用 EtOAc(40mL)稀釋並用鹽水(30mL*2)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供標題化合物(120.00mg，粗製)，其直接用於下一步驟。
步驟2：三級丁基8,10-二甲基-11-側氧基-3,4,10,11-四氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(9H)-羧酸酯及三級丁基8,10-二甲基-11-側氧基-3,4,10,11-四氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧酸酯。在三級丁基3-[甲基-[2-(甲基磺醯基氧基甲基)烯丙基]胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(40.00mg,93.35μmol,1.00eq)於DMF(2.00mL)中之溶液中，添加t-BuOK(15.71mg,140.03μmol,1.50eq)並將混合物在50℃下攪拌16h。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到一個具有較大極性的新的主要斑點。LCMS顯示二個具有所欲Ms的尖峰。將混合物用EtOAc(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出油狀物。油狀物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供三級丁基8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(8.00mg，24.07μmol，25.78%產率)(1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.89(s,1H),4.63-4.65(m,4H),3.70(s,2H),3.22(s,3H),2.73(s,2H),1.94(s,3H),1.48(s,9H))、及三級丁基8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,9-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(8.00mg，24.07μmol，25.78%產率)(8.00mg)(1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.91(s,1H),4.64-4.66(m,4H),3.72(s,2H),3.24(s,3H),2.75(s,2H),1.96(s,3H),1.49(s,9H))。
步驟3：三級丁基8,10-二甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧酸酯。在三級丁基8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,9-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(3.00mg,9.03μmol,0.11eq)、三級丁基8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(27.00mg,81.23μmol,1.00eq)於MeOH (5.00mL)中之混合物中，在N2下添加Pd/C(10.00mg,4.51μmol,0.10eq)。將懸浮液在真空下除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(50psi)下在25℃下攪拌16hr。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將反應混合物用DCM/MeOH=1/1(50mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮，以給出呈白色固體之標題化合物(15.00mg，44.86μmol，99.40%產率)，其直羧用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.61(br.s.,2H)4.37(dd,J=14.05,6.78Hz,1H)3.95(dd,J=13.99,5.58Hz,1H)3.60-3.81(m,2H)3.33-3.46(m,1H)3.17(s,3H)3.03-3.12(m,1H)2.75(br.s.,2H)2.52-2.66(m,1H)1.44-1.54(m,9H)1.10(d,J=6.78Hz,3H)。LCMS：335[M+1]。
步驟4：8,10-二甲基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11(2H)-酮。在三級丁基8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(38.00mg,113.63μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之混合物中，添加TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,118.86eq)，接著將混合物在10℃下攪拌1小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且出現一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮，以給出呈黃色油狀物之標題化合物的TFA鹽(39.58mg，113.63μmol，100.00%產率)，其直接用於下一步驟。
步驟5：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8,10-二甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(39.58mg,113.63μmol,1.00eq,TFA)、苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(45.28mg,170.45μmol,1.50eq)、TEA(23.00mg,227.26μmol,31.51μL,2.00eq)於DCM(3.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在30℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(5mL)中並攪拌5min。以DCM(3mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(5mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘 餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以給出呈白色固體之標題化合物(15.00mg，36.59μmol，32.20%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.56-7.61(m,1H)7.16-7.23(m,1H)7.01-7.09(m,1H)6.60(s,1H)4.67(s,2H)4.37-4.48(m,1H)3.99(dd,J=14.06,5.87Hz,1H)3.79-3.92(m,2H)3.39-3.47(m,1H)3.19(s,3H)3.13(s,1H)2.84(s,2H)2.57-2.69(m,1H)1.13(d,J=6.85Hz,3H)。LCMS：406[M+1]。
化合物015：N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。將三級丁基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物4，40.00mg，124.85μmol，1.00eq)溶解於TFA(2.46g,21.61mmol,1.60mL,173.09eq)中並在10℃下攪拌1hr。TLC(DCM：MeOH=10：1)顯示起始材料已消耗。將混合物在真空中濃縮。將殘餘物在真空中濃縮，以得到呈無色油狀物之10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮的TFA鹽(42.00mg，粗製)。
步驟2：N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在 10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(42.00mg,125.64μmol,1.00eq,TFA)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(33.38mg,125.64μmol,1.00eq)，隨後添加TEA(63.57mg,628.20μmol,87.08μL,5.00eq)。將混合物在10℃下攪拌16hr。LCMS顯示一個具有所欲Ms的主要尖峰。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(33.00mg，84.22μmol，67.03%產率，1.00%純度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.60(dd,J=2.6,6.7Hz,1 H),7.31(ddd,J=2.6,4.1,9.0Hz,1 H),7.11-7.19(m,1 H),4.70(s,2 H),4.37(t,J=7.0Hz,2 H),3.83(t,J=5.8Hz,2 H),3.45-3.53(m,2 H),3.17(s,3 H),2.82(t,J=5.8Hz,2 H),2.28-2.38(m,2 H)。
化合物016A：(S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-8-甲氧基-10-甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺。*純的但未知之立體化學E1。
步驟1：三級丁基8-甲氧基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物3，90.00mg，267.55μmol， 1.00eq)於THF(4.00mL)中之溶液中，在0℃下添加NaH(16.05mg，401.32μmol，60%純度，1.50eq)，隨後在0.5h後添加MeI(75.95mg,535.09μmol,33.31μL,2.00eq)。將混合物在15℃下攪拌1h。將混合物用鹽水(30mL)稀釋，以EtOAc(30mL,*2)萃取。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物，其藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(70.00mg，184.78μmol，69.07%產率，92.5%純度)。LCMS：373[M+23]。
步驟2：8-甲氧基-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-甲氧基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(70.00mg,199.77μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,135.22eq)並將混合物在15℃下在N2下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物的TFA鹽(72.00mg，177.87μmol，89.04%產率，90%純度)，其直接用於下一步驟。LCMS：251[M+1]。
步驟3：(S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-8-甲氧基-10-甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺。將8-甲氧基-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(77.00mg,211.35μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(106.93mg,1.06mmol,146.48μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(56.15mg,211.35μmol,1.00eq)於DCM(4.00mL)中之混合物在15℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL*2)稀釋並用HCl(1N,30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。油狀物藉由製備型HPLC(FA)純化，以得到48mg的所欲產物，其經由SFC(OD-3S_4_40_3ML，管柱：Chiralcel OD-3 100×4.6mm I.D.,3um，動相：40%異丙醇(0.05% DEA)於CO2中，流速：3mL/min，波長：220nm)解析並進一步藉由製備型HPLC(FA)純化，以得到二種鏡像異構物化合物016_E1(17.9mg)及化合物016_E2(15.4mg)。LCMS：422/424[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=2.63,6.54Hz,1H),7.16-7.23(m,1H),7.03-7.10(m,1H),6.55(s,1H),4.68(d,J=5.26Hz,2H),4.57(dd,J=6.24,14.43Hz,1H),4.29(dd,J=5.93,14.37Hz,1H),4.08(br t,J=5.01Hz,1H),3.86(q,J=5.75Hz,2H),3.40-3.58(m,5H),3.21(s,3H)。
化合物016B：(R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-8-甲氧基-10-甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺。*純的但未知之立體化學E2。
LCMS：422/424[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=2.63,6.54Hz,1H),7.16-7.23(m,1H),7.03-7.10(m,1H),6.55(s,1H),4.68(d,J=5.26Hz,2H),4.57(dd,J=6.24,14.43Hz,1H),4.29(dd,J=5.93,14.37Hz,1H),4.08(br t,J=5.01Hz,1H),3.86(q,J=5.75Hz,2H),3.40-3.58(m,5H),3.21(s,3H)。
化合物017：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-乙氧基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物016之方式，在步驟1中使用EtI代替MeI來製備；以給出黃色油狀物，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供成白色固體之標題化合物(76.90mg，168.13μmol，56.80%產率，95.3%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=2.64,6.52Hz,1 H),7.20(ddd,J=2.70,4.08,8.91Hz,1 H),7.02-7.10(m,1 H),6,60(s,1 H),4.62-4.76(m,2 H),4.57(dd,J=6.34,14.24Hz,1 H),4.21-4.34(m,1 H),4.12-4.21(m,1 H),3.86(t,J=6.27Hz,2 H),3.64(ddt,J=2.13,7.00,13.76Hz,2 H),3.47(dq,J=4.58,15.04Hz,2 H),3.21(s,3 H),2.85(q,J=5.48Hz,2 H),1.27(t,J=6.96Hz,3 H)。LCMS：436/438[M+1]。
化合物018：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物016之方式，在步驟1中使用2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯代替MeI來製備。
步驟1：三級丁基-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(100.00mg,297.27μmol,1.00eq)於THF(3.00mL)中之溶液中，在0℃下在N2下邊攪拌標添加NaH(35.67mg，891.82μmol，22.70μL，60%純度，3.00eq)達0.5h。接著添加含2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(2.97mmol,10.00eq)之DCM(7.4mL)。將混合物在15℃下攪拌2h。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且形成一個主要斑點。將混合物倒入10mL的冰水中並以EtOAc(10mL*3)。將有機層合併並以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。將所得殘餘物與另一批次反應混合物(50mg的起始材料)合併，藉由製備型TLC(PE：EtOAc=1：5)純化，以提供呈灰白色油狀物之標題化合物(140.00mg，349.63μmol，78.41%產率)。
步驟2：8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(140.00mg,349.63μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，在15℃下邊攪拌邊添加TFA(1.54g, 13.51mmol,1.00mL,38.63eq)達1h。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料消耗殆盡，且形成一個主要斑點。將混合物在真空中濃縮，以給出呈黃色油狀物之標題化合物的TFA鹽(200.00mg，粗製)且直接用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(144.86mg,349.62μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(102.17mg,384.59μmol,1.10eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TEA(283.03mg,2.80mmol,387.71μL,8.00eq)。將混合物邊攪拌邊加熱至15℃達16h。LCMS顯示反應物8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮消耗殆盡，且偵測到所欲產物。將混合物用DCM(10mL)稀釋並用HCl(l%,10mL*2)及鹽水(10mL*1)洗滌。將有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。所得殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以給出呈白色固體之標題化合物(93.60mg，189.64μmol，54.24%產率，95.6%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.56(br d,J=5.75Hz,1 H),7.14-7.21(m,1 H),6.97-7.09(m,1 H),6.66(br s,1 H),5.73-6.06(m,1 H),4.53-4.74(m,3 H),4.22-4.32(m,2 H),3.70-3.91(m,4 H),3.39-3.58(m,2 H),3.19(s,3 H),2.75-2.89(m,2 H)。LCMS[M+1]：472。
化合物019：8-胺基-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：[2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]甲烷磺酸酯。在N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(化合物004，200.00mg，490.40μmol，1.00eq)及TEA(297.74mg,2.94mmol,407.87μL,6.00eq)於DCM(5.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下添加MsCl(224.70mg,1.96mmol,151.83μL,4.00eq)，接著將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌16小時。將混合物倒入水(5mL)中並攪拌5min。以DCM(3mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(5mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(200.00mg，391.01μmol，79.73%產率，95%純度)，其直接用於下一步驟。LCMS：486/488[M+1]。
步驟2：8-疊氮基-N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在[2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]甲烷磺酸酯(120.00mg,246.95μmol,1.00eq)於DMF(2.00mL)中之溶液中，添加NaN3(32.11mg,493.91μmol,17.36μL,2.00eq)並將所得混合物加熱至65℃達32h。將混合物用EtOAc(20mL)稀釋並用鹽水(20mL*3)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供標題化合 物(106.00mg，粗製)，其直接用於下一步驟。LCMS：433/435[M+1]。
步驟3：8-胺基-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-疊氮基-N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(120.00mg,277.24μmol,1.00eq)、NH4Cl(37.07mg,693.10μmol,24.23μL,2.50eq)與Zn(27.19mg,415.86μmol,1.50eq)於H2O(500.00uL)/EtOH(5.00mL)中之混合物在30℃下攪拌16小時。將混合物過濾並將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈黃色之固體(59.40mg，144.54μmol，52.14%產率，99%純度)。LCMS：407/409[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.04(s,1 H),7.61(dd,J=2.64,6.53Hz,1 H),7.18-7.24(m,1 H),7.04-7.11(m,1 H),6.62(s,1 H),4.69(d,J=3.26Hz,2 H),4.54(dd,J=6.02,14.30Hz,1 H),4.12(dd,J=4.83,14.24Hz,1 H),3.77-3.92(m,3 H),3.54(dd,J=5.14,14.81Hz,1 H),3.11-3.27(m,4 H),2.86(t,J=5.83Hz,2 H)。
化合物020：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(二甲基胺基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-(二甲基胺基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在N-甲基甲胺(87.79mg,1.08mmol,98.64μL,3.00eq,HCl)於THF(3.00mL)中之溶液中，添加AcONa(88.32mg,1.08mmol,3.00eq)、三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物2，120.00mg，358.88μmol，1.00eq)、四乙氧基鈦(245.59mg,1.08mmol,223.26μL,3.00eq)及CH3COOH(調整pH至6)，並將混合物在75℃下攪拌16h。在15℃下添加NaBH3CN(22.55mg,358.88μmol,1.00eq)，並將混合物再攪拌2h。將混合物用EtOAc(40mL)及鹽水(20mL)稀釋並過濾。將濾液用鹽水(40mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型TLC純化二次，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(43.00mg，100.56μmol，28.02%產率，85%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.50-4.60(m,2H),4.46-4.48(m,1H),4.25-4.30(m,1H),3.78-3.82(m,1H),3.52-3.56(m,2H),3.17-3.35(m,5H),2.70-2.80(m,2H),2.35(s,6H),1.49(s,9H)。LCMS：364[M+1]。
步驟2：8-(二甲基胺基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(二甲基胺基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(43.00mg,100.56μmol,1.00eq)於DCM(1.00mL)中之溶液中，添加TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,134.31eq)並將混合物在15℃下在N2下攪拌1h。TLC顯示反應物消耗殆盡，且偵測到一個具有較大極性的新的主要斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(38.00mg，粗製，TFA)，其直接用於下一步驟。LCMS：264[M+1]。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(二甲基胺基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5- a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-(二甲基胺基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(38.00mg,100.70μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(50.95mg,503.50μmol,69.79μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(26.75mg,100.70μmol,1.00eq)於DCM(4.00mL)中之混合物在15℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出黃色油狀物。油狀物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(33.00mg，75.12μmol，74.60%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.10(s,1H),7.60(dd,J=2.69,6.48Hz,1H),7.19-7.25(m,1H),7.02-7.11(m,1H),6.71(s,1H),4.53-4.80(m,3H),4.35(dd,J=6.30,14.86Hz,1H),3.80-3.93(m,2H),3.54-3.65(m,1H),3.38-3.50(m,2H),3.20(s,3H),2.85(t,J=5.75Hz,2H),2.42(s,6H)。LCMS：435/437[M+1]。
化合物021：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-嗎啉基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基10-甲基-8-嗎啉基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物2，150.00mg，448.60μmol，1.00eq)、嗎啉(78.16mg,897.20μmol,78.95μL,2.00eq)、CH3COOH(26.94mg,448.60μmol,25.66μL,1.00eq)及4A分子篩(250.00mg)於DCE(4.00mL)中之混合物在20℃下攪拌3h。添加NaBH3CN(140.95mg,2.24mmol,5.00eq)並將混合物在20℃下攪拌16h。將混合物用EtOAc(40mL)稀釋並用鹽水(30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出油狀物，其藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(72.00mg，174.01μmol，38.79%產率，98%純度)。LCMS：406[M+1]。
步驟2：10-甲基-8-嗎啉基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基10-甲基-8-嗎啉基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡h啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(78.00mg,192.36μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,140.43eq)並將混合物在15℃下在N2下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物的TFA鹽(80.00mg，190.75μmol，99.16%產率)，其直接用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-嗎啉基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將10-甲基-8-嗎啉基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(80.00mg,190.75μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(96.51mg,953.75μmol,132.21μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(55.74mg,209.83μmol,1.10eq)於DCM(5.00mL)中之混合物在25℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL*2)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。所得殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈 白色固體之標題化合物(53.00mg，116.02μmol，57.68%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.60(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.18-7.25(m,1 H),7.03-7.11(m,1 H),6.62(s,1 H),4.69(d,J=12.23Hz,2 H),4.58(dd,J=3.91,14.67Hz,1 H),4.36(dd,J=6.36,14.67Hz,1 H),3.78-3.96(m,2 H),3.73(br t,J=4.10Hz,4 H),3.55-3.65(m,1 H),3.39(br d,J=10.88Hz,2 H),3.20(s,3 H),2.86(t,J=5.75Hz,2 H),2.66-2.76(m,2 H),2.52-2.63(m,2 H)。LCMS：477/479[M+1]。
化合物022：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(3,3-二氟三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-(3,3-二氟三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將3,3-二氟三亞甲亞胺鹽酸鹽(116.22mg,897.20μmol,2.00eq)與NaOAc(73.60mg,897.20μmol,2.00eq)於DCE(4.00mL)中之混合物在25℃下攪拌0.5h，添加三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物2，150.00mg，448.60μmol，1.00eq)及4A分子篩(250.00 mg)，並將混合物攪拌3h。添加NaBH3CN(140.95mg,2.24mmol,5.00eq)並將混合物在25℃下攪拌16h。將混合物用EtOAc(40mL)稀釋並用鹽水(30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出油狀物，其藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(120,00mg，288.73μmol，64.36%產率，99%純度)。LCMS：412[M+1]。
步驟2：8-(3,3-二氟三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(3,3-二氟三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(80.00mg,194.43μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,138.93eq)並將混合物在15℃下在N2下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(82.00mg，192.78μmol，99.15%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(3,3-二氟三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][l,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-(3,3-二氟三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(82.00mg,192.78μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(97.54mg,963.91μmol,133.61μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯4-氟-苯基)胺甲酸酯(56.34mg,212.06μmol,1,10eq)於DCM(5.00mL)中之混合物在22℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL*2)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。所得殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(50.00mg，102.51μmol，53.17%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=2.64,6.53Hz,1 H),7.16-7.24(m,1 H),7.02-7.11(m,1 H),6.56(s,1 H),4.68(d,J=1.76Hz,2 H),4.40(dd,J=6.09,14.12Hz,1 H),4.13(dd,J=5.96,14.12Hz,1 H),3,82-3.93 (m,2 H),3.74(br d,J=4.89Hz,4 H),3.36-3.47(m,1 H),3.20(s,5 H),2.86(br d,J=5.02Hz,2 H),2.03(s,1 H)。LCMS：483/485[M+1]。
化合物023：8-(三亞甲亞胺-1-基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-(三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將三亞甲亞胺(51.23mg,897.20μmol,60.27μL,2.00eq)與NaOAc(73.60mg,897.20μmol,2.00eq)於DCE(4.00mL)中之混合物在25℃下攪拌0.5h，添加三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物2，150.00mg，448.60μmol，1.00eq)及4A分子篩(250.00mg)，並將混合物攪拌3h。添加NaBH3CN(140.95mg,2.24mmol,5.00eq)並將混合物在25℃下攪拌16h。將混合物用EtOAc(40mL)及鹽水(30mL)稀釋。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。所得油狀物藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色油狀物之標題化 合物(85.00mg，181.11μmol，40.37%產率，80%純度)。LCMS：398[M+23]。
步驟2：8-(三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(106.25mg,226.38μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,119.33eq)並將混合物在15℃下在N2下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(88.00mg，226.01μmol，99.83%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟3：8-(三亞甲亞胺-1-基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-(三亞甲亞胺-1-基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(88.00mg,226.01μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(114.35mg,1.13mmol,156.64μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(66.05mg,248.61μmol,1.10eq)於DCM(5.00mL)中之混合物在15℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL*2)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出殘餘物，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(52.80mg，118.15μmol，52.28%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.06(s,1H),7,60(dd,J=2.69,6.60Hz,1 H),7.17-7.25(m,1 H),7.03-7.11(m,1 H),6.64(s,1 H),4.68(s,2 H),4.34-4.45(m,1 H),4.20-4.33(m,1 H),3.76-3.96(m,2 H),3.53(br s,5 H),3.29(br s,2 H),3.19(s,3 H),2.80-2.89(m,2 H),2.26-2.30(m,2 H)。LCMS：447/449[M+1]。
化合物024：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(吡咯啶-1-基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯- 2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-吡咯啶-1-基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物2，150.00mg，448.60μmol，1.00eq)、吡咯啶(63.81mg,897.20μmol,75.07μL,2.00eq)、CH3COOH(26.94mg,448.60μmol,25.66μL,1.00eq)及4A分子篩(250.00mg,448.60μmol,1.00eq)於DCE(4.00mL)中之混合物在20℃下攪拌3h。添加NaBH3CN(140.95mg,2.24mmol,5.00eq)並將混合物在20℃下攪拌16h。將混合物用EtOAc(40mL)稀釋並用鹽水(60mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出油狀物，其藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(138.00mg，350.77μmol，78.19%產率，99%純度)。LCMS：390[M+1]。
步驟2：10-甲基-8-吡咯啶-1-基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-吡咯啶-1-基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(80.00mg,205.40μmol,1.00eq)於DCM(4.50mL)中之溶液中，添加TFA(6.93g,60.78mmol,4.50mL,295.90eq)並將混 合物在20℃下在N2下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(82.86mg，205.40μmol，100.00%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(吡咯啶-1-基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將10-甲基-8-吡咯啶-1-基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(82.86mg,205.40μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(103.92mg,1.03mmol,142.36μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(60.03mg,225.94μmol,1.10eq)於DCM(5.00mL)中之混合物在22℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL*2)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(21.65mg，46.50μmol，22.64%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.56-7.58(m,1 H),7.18-7.19(m,1 H),7.02-7.06(m,1 H),6.71(s,1 H),4.66-4.72(m,2 H),4.49-4.55(m,2 H),3.83-3.88(m,2 H),3.63-3.65(m,3 H),3.18(s,3 H),2.96-3.04(m,4 H),2.82-2.85(m,2 H),1.95-2.00(m,4 H)。LCMS：461/463[M+1]。
化合物025：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-(甲基硫基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：[2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]甲烷磺酸酯。在N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(化合物004，100.00mg，245.20μmol，1.00eq)、TEA(49.62mg,490.40μmol,67.97μL,2.00eq)於DCM(5.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下添加MsCl(42.13mg,367.80μmol,28.47μL,1.50eq)，接著將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌16hr。TLC顯示起始材料/所欲產物=1/3。接著將MsCl(14mg,122.6μmol,9.49μL,0.50eq)添加至混合物，將混合物在15℃下攪拌4hr，TLC顯示起始材料/所欲產物=1/3。將混合物在50℃下攪拌2hr，TLC顯示起始材料/所欲產物=1/3。將混合物倒入水(5mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(3mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(5mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(82.00mg，162.00μmol，66.07%產率，96%純度)。LCMS：486[M+1]
步驟2：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-(甲基硫基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在[2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]甲烷磺酸酯(50.00mg,102.90μmol,1.00eq)於DMF(2.00mL)中之混合物 中，在0℃下在N2下添加甲硫醇鈉(50.48mg,720.30μmol,45.89μL,7.00eq)，接著將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌2小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，所欲產物/副產物=1/1。將混合物倒入冰-水(10mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(5mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(18.00mg，40.28μmol，39.15%產率，98%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.6,6.5Hz,1 H),7.18(s,1 H),7.02-7.09(m,1 H),6.55(s,1 H),4.64-4.74(m,3 H),4.22-4.33(m,1 H),3.81-3.90(m,2 H),3.69(dd,J=4.5,14.8Hz,1 H),3.36-3.54(m,2 H),3.23(s,3 H),2.85(br d,J=4.6Hz,2 H),2.24(s,3 H)。LCMS：438/440[M+1]；且N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-3,4,10,11-四氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺作為副產物。
化合物026A：N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-甲基亞磺醯基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺：純的但未知之非鏡像異構物D1：
步驟1：三級丁基-10-甲基-8-甲基磺醯基氧基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。 在三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(220.00mg,654.00μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加甲磺醯氯(89.90mg,784.80μmol,60.74μL,1.20eq)。將混合物在10℃下攪拌4hr。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示混合物已完成。將混合物用水(20mL)淬熄，以乙酸乙酯(10mL*3)萃取，將有機層用鹽水洗滌(10mL)，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(200.00mg，482.53μmol，73.78%產率)。
步驟2：三級丁基-8-乙醯基氫硫基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基10-甲基-8-甲基磺醯基氧基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(220.00mg,530.79μmol,1.00eq)於DMF(2.00mL)中之溶液中，添加乙醯基氫硫基鉀(181.86mg,1.59mmol,3.00eq)。將混合物在80℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物藉由添加水(10mL)淬熄，並以乙酸乙酯(10mL*3)萃取。將有機層用水(10mL)及鹽水(10mL)洗滌，並以無水Na2SO4乾燥，在真空中濃縮，以給出殘餘物，其藉由製備型TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(170.00mg，396.46μmol，74.69%產率，92%純度)。
步驟3；三級丁基10-甲基-8-甲基氫硫基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-乙醯基氫硫基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(150.00mg,380.24μmol,1.00eq)於MeOH(2.00mL)中之溶液中，添加K2CO3(157.66mg,1.14mmol,3.00eq)。將混合物在15℃下攪拌15mins，同時添加MeI(59.37mg,418.26μmol,26.04μL,1.10eq)，將混合物在15℃下攪拌15mins。LCMS顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以給出殘餘物，將其用DCM(30mL)洗滌並過濾，將濾液在真空中濃縮，以提 供呈無色油狀物之標題化合物(132.00mg，356.58μmol，93.78%產率，99%純度)。
步驟4：10-甲基-8-甲基氫硫基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基10-甲基-8-甲基氫硫基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(150.00mg,409.30μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,66.00eq)，將混合物在15℃下攪拌30min。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(140.00mg，368.05μmol，89.92%產率，TFA)。
步驟5：N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-甲基氫硫基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在10-甲基-8-甲基氫硫基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(140.00mg,368.05μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(97.78mg,368.05μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TEA(93.11mg,920.13μmol,127.55μL,2.50eq)。將混合物在15℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物用水(10mL)淬熄，並以乙酸乙酯(30mL)萃取。將有機層用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(200.00mg，365.36μmol，99.27%產率，80%純度)。
步驟6：N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-甲基亞磺醯基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-甲基氫硫基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(100.00mg,228.35μmol,1.00eq)及(Bu3Sn)2O(204.18mg,342.53μmol,174.52μL,1.50eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加含Br2(54.74mg,342.53μmol,17.66μL,1.50eq)之DCM(500.00uL)達30min。將混合物在15℃下攪拌2hr。LCMS顯示仍有反應物，接著依 序添加另一批次的(Bu3Sn)2O(272.24mg,456.70μmol,232.69μL,2.00eq)及Br2(72.99mg,456.70μmol,23.54μL,2.00eq)。將混合物再攪拌2hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物用飽和KF(10mL)洗滌，將有機層在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化，以給出呈黃色油狀物之N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-甲基亞磺醯基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(50.00mg，106.85μmol，46.79%產率，97%純度)，其中35mg藉由SFC(管柱：AS(250mm*30mm,10um)；動相：[Neu-ETOH]；梯度時間(min)：5.5分鐘，80分鐘)分離，隨後進行製備型HPLC，以提供二種異構物化合物026 D1(尖峰1，14mg)及化合物026 D2(尖峰2，18mg)。化合物026 D1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.51,6.42Hz,1 H),7.15-7.24(m,1 H),7.01-7.11(m,1 H),6.64(s,1 H),4.18-4.83(m,4 H),3.64-4.05(m,4 H),3.44-3.58(m,1 H),3.23(d,J=13.94Hz,3 H),2.84(br d,J=4.77Hz,2 H),2.63-2.74(m,3 H)。
化合物026B：N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-甲基亞磺醯基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺：純的但未知之非鏡像異構物D2：
化合物026，D2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.57(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.17-7.24(m,1 H),7.01-7.10(m,1 H),6.70(s,1 H),4.18-4.87(m,4 H),3.64-4.02(m,4 H),3.42-3.60(m,1 H),3.23(d,J=13.82Hz,3 H),2.77-2.91(m,2 H),2.62-2.74(m,3 H)。
化合物027：N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-甲基磺醯基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
在N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-8-甲基氫硫基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(化合物26，步驟5之產物，50.00mg，114.18μmol，1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加m-CPBA(123.15mg，570.88μmol，80%純度，5.00eq)。將所得溶液在15℃下攪拌2hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物用水(10mL)淬熄，將有機層用飽和NaHCO3(10mL)及鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。混合物藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(17.00mg，35.81μmol，31.37%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.57(dd,J=2.70,6.46Hz,1 H),7.16-7.23(m,1 H),7.02-7.10(m,1 H),6.66(s,1 H),4.83-4.93(m,1 H),4.58-4.79(m, 3 H),3.74-3.98(m,5 H),3.22(s,3 H),2.95(s,3 H),2.84(t,J=5.83Hz,2 H)。LCMS：470/472[M+1]。
化合物028：甲基2-(2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-基)乙酸酯。
步驟1：三級丁基(8E)-8-(2-甲氧基-2-側氧基-亞乙基)-10-甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在甲基2-二甲氧基磷醯乙酸酯(162.85mg,894.22μmol,129.25μL,1.30eq)於THF(10.00mL)中之溶液中，在0℃下添加2-甲基丙-2-醇鉀(115.78mg,1.03mmol,1.50eq)達10min。接著在混合物中添加三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(230.00mg,687.86μmol,1.00eq)並將混合物在15℃下攪拌4h。將反應混合物用H2O(10mL)淬熄，用鹽水(40mL)稀釋並以EtOAc(30mL*2)萃取。將合併之有機相用鹽水(30mL*2)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(164.00mg，382.25μmol，55.57%產率，91%純度)。LCMS：391[M+1]。
步驟2：三級丁基8-(2-甲氧基-2-側氧基-乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(8E)-8-(2-甲氧基-2-側氧基-亞乙基)-10-甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(200mg,512.26μmol,1.00eq)於MeOH(10.00mL)中之溶液中，添加Pd/C(50.00mg，10%純度)並將混合物在15℃下在H2(15psi)下攪拌16h。將反應混合物過濾並將濾液在真空中濃縮，以提供呈油狀物之標題化合物(195.00mg，472.03μmol，92.15%產率，95%純度)，其直接用於下一步驟。LCMS：393[M+1]。
步驟3：甲基2-(10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基)乙酸酯。在三級丁基8-(2-甲氧基-2-側氧基-乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(195.00mg,496.88μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TFA(4.62g,40.52mmol,3.00mL,81.55eq)並將混合物在15℃下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供標題化合物(190.00mg，448.86μmol，90.34%產率，96%純度，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟4：甲基2-(2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-基)乙酸酯。將甲基2-(10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基)乙酸酯(195.00mg,479.87μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(242.79mg,2.40mmol,332.59μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(127.49mg,479.87μmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之混合物在15℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL*2)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化，以提供所欲產物(180mg，97%純度)，其中40mg進一步藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(35.7mg，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.57-7.59(m,1 H), 7.16-7.27(m,1 H),7.03-7.07(t,J=8.8Hz,1 H),6.56(s,1 H),4.66-4.67(m,2 H),4.45-4.47(m,1 H),4.12-4.15(m,1 H),3.84-3.86(m,2 H),3.74(s,3 H),3.46-3.48(m,1 H),3.18-3.26(m,4 H),2.95-3.05(m,1 H),2.82-2.85(m,2 H),2.39-2.51(m,2 H)。LCMS：464/466[M+1]。
化合物029：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(2-羥基乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
在甲基2-[2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]乙酸酯(化合物028，40.00mg，86.23μmol，1.00eq)於THF(3.00mL)中之溶液中，在0℃下添加LiBH4(5.63mg,258.69μmol,3.00eq)並將混合物在15℃下攪拌4h。將反應混合物在0℃下用H2O(20mL)淬熄，並以乙酸乙酯(20mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以給出殘餘物，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(18.50mg，42.02μmol，48.73%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CD3CN)δ 7.64-7.66(m,1 H),7.44(s,1 H),7.31-7.32(m,1 H),7.11-7.15(t,J=9.0 Hz,1 H),4.59(s,2 H),4.34-4.36(m,1 H),4.06-4.10(m,1 H),3.73-3.75(m,2 H),3.59-3.62(m,2 H),3.36-3.39(m,1 H),3.08-3.13(m,4 H),2.73-2.76(m,2 H),2.55-2.65(m,1 H),1.52-1.55(m,2 H)。LCMS：436/438[M+1]。
化合物030：乙基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9,10,11-八氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸酯。
步驟1：乙基2-[[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]甲基]丙-2-烯酸酯。在三級丁基N-甲基胺甲酸酯(200.00mg,1.52mmol,1.00eq)於THF(5.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下添加NaH(91.20mg，2.28mmol，60%純度，1.50eq)達0.5hr，接著將乙基2-(溴甲基)丙-2-烯酸酯(352.10mg,1.82mmol,1.20eq)在0℃下逐滴添加至混合物，並將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌2hr。TLC顯示起始材料消耗殆盡，出現二個新的斑點。將混合物倒入冰-水(10mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(5mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=100/1至5/1)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(112.00mg，460.34μmol，30.29% 產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.28(s,1 H),5.55(s,1 H),4.23(q,J=7.1Hz,2 H),4.07(br s,2 H),2.88(br s,3 H),1.45(br s,9 H),1.31(br s,3 H)。
步驟2：乙基2-(甲基胺基甲基)丙-2-烯酸酯。在乙基2-[[三級丁氧基羰基(甲基)胺基]甲基]丙-2-烯酸酯(112.00mg,460.34μmol,1.00eq)於二烷(1.00mL)中之混合物中，添加HCl/二烷(4M,5.00mL,43.45eq)，接著將混合物在15℃下攪拌0.5小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且以一個新的斑點為主。將混合物在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(82.50mg，459.25μmol，99.76%產率，HCl)，其直接用於下一步驟。
步驟3：三級丁基3-[2-乙氧基羰基烯丙基(甲基)胺甲醯基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。將5-三級丁氧基羰基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(80.00mg,299.31μmol,1.00eq)、乙基2-(甲基胺基甲基)丙-2-烯酸酯(59.14mg,329.24μmol,1.10eq,HCl)、T3P(285.70mg,897.93μmol,267.01μL,3.00eq)、TEA(151.44mg,1.50mmol,207.45μL,5.00eq)於THF(3.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌16小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且出現一個新的斑點。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(5mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(46.00mg，105.49μmol，35.24%產率，90%純度)。LCMS：393[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.35(s,1 H),5.67(br s,1 H),4.63(s,4 H),4.18-4.30(m,2 H),3.71(br s,2 H),2.91-3.47(m,3 H),2.74(br t,J=5.4Hz,2 H),1.48(s,9 H),1.31(t,J=7.2Hz,3 H)。
步驟4：2-三級丁基8-乙基10-甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,8(7H)-二羧酸酯。將三級丁基3-[2-乙氧基羰基烯丙基(甲基)胺甲醯 基]-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(36.00mg,91.73μmol,1.00eq)、DBU(6.98mg,45.87μmol,6.91μL,0.50eq)於MeCN(1.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在50℃下在N2大氣下攪拌2小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(5mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(3mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(5mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=20/1)純化，以給出呈白色固體之標題化合物(20.00mg，50.96μmol，55.56%產率)。LCMS：393[M+1]
步驟5：乙基10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9,10,11-八氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸酯。在2-三級丁基8-乙基10-甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,8(7H)-二羧酸酯(22.00mg,56.06μmol,1.00eq)於DCM(1.00mL)中之混合物中，添加TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,240.93eq)，接著將混合物在15℃下攪拌1小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，出現一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(22.70mg，55.86μmol，99.65%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟6：乙基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9,10,11-八氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸酯。將乙基10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9,10,11-八氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(22.00mg,54.14μmol,1.00eq,TFA)、苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(15.82mg,59.55μmol,1.10eq)與TEA(10.96mg,108.28μmol,15.01μL,2.00eq)於DCM(3.00mL)中之混合物除氣，並以N2吹掃3次，接著將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(5mL)中並攪拌5min。以DCM(3mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(5mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型 HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(15.00mg，32.01μmol，59.13%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.6,6.5Hz,1 H),7.16-7.22(m,1 H),7.02-7.09(m,1 H),6.58(s,1 H),4.50-4.76(m,4 H),4.27(d,J=7.1Hz,2 H),3.73-3.91(m,3 H),3.58-3.70(m,1 H),3.33-3.43(m,1 H),3.19(s,3 H),2.84(br d,J=5.4Hz,2 H),1.33(t,J=7.2Hz,3 H)。LCMS：464/466[M+1]。
化合物031：N2-(3-氯-4-氟苯基)-N8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,8-二羧醯胺。
步驟1：2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9,10,11-八氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸。在乙基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9,10,11-八氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(化合物030，80.00mg，172.45μmol，1.00eq)於MeOH(5.00mL)及H2O(1.00mL)中之混合物中，一次性添加NaOH(10.35mg,258.68μmol,1.50eq)。將混合物在30℃下攪拌12小時。LCMS顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮並用HCl(1N)調整至 pH=7。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化為呈白色固體之標題化合物(28.00mg，63.73μmol，36.96%產率，99.2%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.53-7.59(m,1 H),7.16-7.23(m,1 H),7.00-7.10(m,1 H),6.58-6.67(m,1 H),4.54-4.79(m,4 H),3.84(br t,J=5.81Hz,3 H),3.58-3.68(m,1 H),3.39-3.49(m,1 H),3.20(s,3 H),2.81-2.91(m,2 H)。LCMS：436/438[M+1]。
步驟2：N2-(3-氯-4-氟苯基)-N8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,8-二羧醯胺。在2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9,10,11-八氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸(70.00mg,160.61μmol,1.00eq)與甲胺(43.38mg,642.44μmol,4.00eq,HCl)於DMF(5.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加HATU(91.60mg,240.92μmol,1.50eq)及DIPEA(311.36mg,2.41mmol,420.76μL,15.00eq)。將混合物在30℃下攪拌12小時。LCMS顯示反應已完成，且偵測到所欲產物。將混合物倒入水(10mL)中，並以乙酸乙酯(10mL*2)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之N2-(3-氯-4-氟-苯基)-N8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧醯胺(25.00mg，53.02μmol，33.01%產率，95.2%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.54H-7.63(m,1 H),7.15-7.22(m,1 H),7.02-7.10(m,1 H),6.52-6.58(m,1 H),5.82-5.91(m,1 H),4.67(s,2 H),4.46-4.64(m,2 H),3.81-3.94(m,2 H),3.48-3.67(m,2 H),3.22(s,3 H),2.87(d,J=4.77Hz,5 H)。LCMS：449/451[M+1]。
化合物032：N2-(3-氯-4-氟苯基)-N8,N8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,8-二羧醯胺。
在2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9,10,11-八氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸(化合物030，步驟1之產物，70.00mg，160.61μmol，1.00eq)與N-甲基甲胺(65.48mg,803.05μmol,73.57μL,5.00eq,HCl)於DMF(5.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加HATU(91.60mg,240.92μmol,1.50eq)及DIPEA(311.36mg,2.41mmol,420.76μL,15.00eq)。將混合物在30℃下攪拌12小時。LCMS顯示反應已完成，且偵測到所欲產物。將殘餘物倒入水(10mL)中。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之N2-(3-氯-4-氟-苯基)-N8,N8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧醯胺(30.00mg，63.71μmol，39.67%產率，98.3%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.56-7.63(m,1 H),7.15-7.22(m,1 H),7.02-7.10(m,1 H),6.51-6.60(m,1 H),4.40-4.80(m,4 H),3.87(s,2 H),3.52-3.70(m,3 H),3.26(s,3 H),3.15(s,3 H),3.02(s,3 H),2.78-2.91(m,2 H)。LCMS：463/465[M+1]。
化合物033：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(2-羥基丙-2-基)-10-甲基-11-側氧基 -3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺。
在MeMgBr(3M,344.90μL,6.00eq)於THF(3.00mL)中之混合物中，在-40℃下在N2下一次性添加含乙基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(化合物030，80.00mg，172.45μmol，1.00eq)之THF(3.00mL)。將混合物在-40℃下攪拌30min，接著加熱至15℃並攪拌2小時。LCMS顯示反應已完成。將混合物倒入飽和NH4Cl(10mL)中並攪拌1min。以乙酸乙酯萃取(10mL*2)水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(45.00mg，98.91μmol，57.36%產率，98.89%純度)。LCMS：450/452[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=2.64,6.53Hz,1 H),7.17-7.22(m,1 H),7.05(t,J=8.78Hz,1 H),6.62(s,1 H),4.69-4.75(m,1 H),4.52-4.65(m,2 H),4.33(dd,J=7.22,14.62Hz,1 H),3.86(q,J=5.86Hz,2 H),3.43-3.58(m,2 H),3.19(s,3 H),2.83(t,J=5.77Hz,2 H),2.36-2.53(m,1 H),1.62(s,10 H),1.54(br s,1 H),1.31(d,J=8.66Hz,6 H)。
化合物034：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(1-羥基乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：N2-(3-氯-4-氟-苯基)-N8-甲氧基-N8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧醯胺。在2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸(化合物030，步驟1之產物，300.00mg，688.33μmol，1.00eq)與N-甲氧基甲胺鹽酸鹽(268.56mg,2.75mmol,4.00eq)於DMF(5.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加HATU(392.58mg,1.03mmol,1.50eq)及DIPEA(1.33g,10.32mmol,1.80mL,15.00eq)。將混合物在30℃下攪拌5小時。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(15mL)中，並以乙酸乙酯(20mL*2)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(二氯甲烷：甲醇=50：1，20：1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(310.00mg，586.47μmol，85.20%產率，90.6%純度)。LCMS：479/481[M+1]。
步驟2：8-乙醯基-N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在MeMgBr(3M,1.11mL,20.00eq)於THF(3.00mL)中之混合物 中，在0℃下在N2下逐滴添加含N2-(3-氯-4-氟-苯基)-N8-甲氧基-N8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧醯胺(80.00mg,167.05μmol,1.00eq)之THF(1.00mL)。將混合物加熱至30℃並攪拌14小時。TLC(乙酸乙酯：甲醇=20：1)顯示反應已完成。將混合物倒入飽和NH4Cl(20mL)中並以乙酸乙酯(15mL*2)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)萃取，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(乙酸乙酯：甲醇=20：1)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(25.00mg，54.16μmol，32.42%產率，94%純度)。LCMS：434/436[M+1]。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(1-羥基乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-乙醯基-N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(25.00mg,57.62μmol,1.00eq)於EtOH(3.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加NaBH4(3.27mg,86.43μmol,1.50eq)。將混合物在0℃下攪拌2小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(10mL)中，並以乙酸乙酯(10mL*2)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(15.00mg，34.31μmol，59.55%產率，99.7%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(d,J=6.43Hz,1 H),7.17-7.25(m,1 H),7.05(t,J=8.90Hz,1 H),6.60(br d,J=4.03Hz,1 H),4.56-4.73(m,2 H),4.31-4.44(m,1 H),4.10(dd,J=6.97,14.31Hz,1 H),3.88-3.92(m,1 H),3.77-3.88(m,1H),3.75-3.95(m,1 H),3.63(dd,J=6.05,14.73Hz,1 H),3.48(dd,J=5.14,14.92Hz,1 H),3.31-3.38(m,1 H),3.19(d,J=3.67Hz,3 H),2.84(t,J=5.75Hz,2 H),2.36-2.47(m,1 H),1.61(br s,12 H),1.31(dd,J=6.30,11.80Hz,3 H)。LCMS：436/438[M+1]。
化合物035：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-丙醯基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在溴(乙基)鎂(3M,1.39mL,20.00eq)於THF(3.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下逐滴添加含N2-(3-氯-4-氟-苯基)-N8-甲氧基-N8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧醯胺(化合物034，步驟1之產物，100.00mg，208.81μmol，1.00eq)之THF(2.00mL)。將混合物加熱至30℃並攪拌4小時。LCMS及TLC(乙酸乙酯：甲醇=20：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(乙酸乙酯：甲醇=20：1)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(30.00mg，66.98μmol，32.08%產率，100%純度)。LCMS：448/450[M+1]。
步驟2：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-8- 丙醯基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(30.00mg,66.98μmol,1.00eq)於EtOH(3.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加NaBH4(3.80mg,100.47μmol,1.50eq)。將混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(10mL)中。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(25.00mg，52.90μmol，78.98%產率，95.2%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=1.96,6.60Hz,1 H),7.17-7.25(m,1 H),7.05(t,J=8.80Hz,1 H),6.62(br d,J=3.79Hz,1 H),4.57-4.73(m,3 H),4.29-4.44(m,1 H),4.15(br d,J=7.09Hz,1 H),3.79-3.92(m,2 H),3.64(br dd,J=5.87,15.04Hz,1 H),3.48(br d,J=5.14Hz,1 H),3.37(d,J=7.46Hz,1 H),3.19(d,J=2.08Hz,3 H),2.84(br t,J=5.50Hz,2 H),2.43-2.53(m,1 H),1.85-1.99(m,1 H),1.40-1.57(m,2 H),0.99-1.07(m,3 H)。LCMS：450/452[M+1]。
化合物036：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(環丙基(羥基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(環丙烷羰基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在溴(環丙基)鎂(0.5M,7.52mL,15.00eq)於THF(3.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下逐滴添加含N2-(3-氯-4-氟-苯基)-N8-甲氧基-N8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,s-二羧醯胺(化合物034，步驟1之產物，120.00mg，250.57μmol，1.00eq)之THF(2.00mL)。將混合物加熱至15℃並攪拌14小時。LCMS及TLC(乙酸乙酯：甲醇=20：1)顯示起始材料：所欲產物=2：3。將混合物倒入1N HCl(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(乙酸乙酯：甲醇=20：1)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(50.00mg，101.11μmol，40.35%產率，93%純度)。LCMS：460/462[M+1]。
步驟2：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(環丙基(羥基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(環丙烷羰基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(50.00mg,108.72μmol,1.00eq)於EtOH(3.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加NaBH4(6.17mg,163.08μmol,1.50eq)。將混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(10mL)中，並以乙酸乙酯(10mL*2)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(46.00mg，98.29μmol，90.41%產率，98.7%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=2.32,6.48Hz,1bH),7.15-7.23(m,1 H),7.05(t,J=8.80Hz,1 H),6.61(br s,1 H),4.59-4.74(m,3 H),4.44-4.54(m,1 H),4.24-4.42(m,1 H),3.78-3.92(m,2 H),3.60-3.68(m,1 H),3.45-3.58(m,1 H),3.33-3.43(m,1 H), 3.19(d,J=5.50Hz,2 H),3.13-3.25(m,1 H),2.79-2.90(m,2 H),2.79-2.91(m,1 H),2.65(br d,J=6.97Hz,1 H),1.74-1.98(m,1 H),0.90-1.06(m,1 H),0.57-0.78(m,2 H),0.40-0.51(m,1 H),0.32(br dd,J=3.55,7.95Hz,2 H)。LCMS：462/464[M+1]。
化合物037：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(二氟甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在乙基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(化合物030，500.00mg，1.08mmol,1.00eq)於THF(5.00mL)中之混合物中，在-40℃下在N2下一次性添加LiAlH4(61.48mg,l,62mmol,1.50eq)。將混合物在-40℃下攪拌30min，接著加熱至0℃並攪拌2小時。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物倒入HCl(1N,10mL)中並攪拌1min。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取所得物。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(二氯甲烷：甲醇=100：1 至20：1)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(330.00mg，775.38μmol，71.79%產率，99.12%純度)。LCMS：422/424[M+1]。
步驟2：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-甲醯基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(50.00mg,118.53μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加Dess-Martin(75.41mg,177.79μmol,55.04μL,1.50eq)。將混合物在30℃下攪拌12小時。LCMS顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(乙酸乙酯)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(40.00mg，43.83μmol，36.97%產率，46%純度)。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(二氟甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-甲醯基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(40.00mg,95.27μmol,1.00eq)於DCM(4.00mL)中之混合物中，在-78℃下在N2下一次性添加DAST(76.78mg,476.35μmol,62.93μL,5.00eq)。將混合物在-78℃下攪拌2小時，接著加熱至20℃並攪拌12小時。LCMS顯示反應已完成。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以DCM(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(15.00mg，33.58μmol，35.24%產率，98.9%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.17-7.26(m,1 H),7.06(t,J=8.74Hz,1 H),6.57(br s,1 H),5.72-6.06(m,1 H),4.63-4.72(m,2H),4.52(dd,J=7.15,14.49Hz,1 H),4.40(dd,J=6.91,14.61Hz,1 H),3.85(q,J=5.42Hz,2 H),3.55(dq,J=5.81,15.39Hz,2 H), 3.19(s,3 H),2.80-2.97(m,3 H),1.60(br s,11 H)。LCMS：442/444[M+1]。
化合物038：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基10-(2,2-二氟乙基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物5，100.00mg，326.41μmol，1.00eq)於DMF(3.00mL)中之溶液中，在0℃下在N2下添加NaH(19.58mg，489.61μmol，60%純度，1.50eq)。在0℃下攪拌30分鐘後，添加2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(349.44mg,1.63mmol,5.00eq)。將反應混合物在15℃下攪拌一小時。LCMS顯示化合物5消耗殆盡且偵測到約65%的所欲化合物。將反應用水(30mL)淬熄，接著以EtOAc(50mL*3)萃取。將合併之有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化，以提供獲得呈黃色油狀物之標題化合物(64.00mg，172.79μmol，52.94%產率)。LCMS：371[M+1]。
步驟2：10-(2,2-二氟乙基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基10-(2,2-二氟乙基)- 11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(62.00mg,167.39μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,80.69eq)，將反應混合物在20℃下攪拌一小時。TLC顯示化合物6消耗殆盡，且偵測到一個具有較大極性的新的主要斑點。在旋轉蒸發器上移除溶劑，以提供獲得呈黃色油狀物之標題化合物(64.00mg，粗製，TFA)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在10-(2,2-二氟乙基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(64.00mg,166.54μmol,1.00eq,TFA)於DCM(5.00mL)中之混合物中，添加TEA(67.41mg,666.15μmol,92.34μL,4.00eq)，隨後添加苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(44.24mg,166.54μmol,1.00eq)，將反應混合物在20℃下攪拌16小時。LCMS顯示偵測到一個具有所欲MS的主要尖峰。以DCM(50mL*2)及水(30mL)萃取混合物，將有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供獲得呈白色固體之標題化合物(72.00mg，161.20μmol，96.79%產率，98.92%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.55-7.57(dd,J=6.48,2.69Hz,1 H)7.18-7.20(m,1 H)7.03-7.07(m,1 H)6.54(s,1 H)5.89-6.18(m,1 H)4.67(s,2 H)4.39-4.43(t,J=6.91Hz,2 H)3.83-3.92(m,4 H)3.57-3.61(t,J=6.24Hz,2 H)2.83-2.86(t,J=5.75Hz,2 H)2.32-2.38(m,J=6.57Hz,2 H)。LCMS：442/444[M+1]。
化合物039：N-(3-氯-4-氟苯基)-9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：9,10-二甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物8，66.00mg，197.36μmol，1.00eq)於DCM(2.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,68.44eq)。將混合物在15℃下攪拌2小時。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(68.74mg，197.35μmol，100.00%產率，TFA)。
步驟2：N-(3-氯-4-氟苯基)-9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在9,10-二甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-11-酮(68.74mg,197.35μmol,1.00eq,TFA)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(52.43mg,197.35μmol,1.00eq)於DCM(6.00mL)中之混合物中，在N2下添加TEA(199.70mg,1.97mmol,273.56μL,10.00eq)。將混合物在25℃下攪拌10小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(46.00mg，112.20μmol，56.85%產率，98.99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.57-7.61(m,1 H),7.16-7.22(m,1 H),7.01-7.09(m,1 H),6.52-6.59(m,1 H),4.71(s,2 H),4.44-4.54(m,1 H),4.31-4.43(m,1 H),3.84(s,3 H),3.14(s,3 H),2.79-2.89(m,2 H),2.36-2.51(m,1 H),2,11-2.27(m,1 H),1.35(d,J=6.97Hz,3 H)。LCMS：406/408[M+1]。
化合物040：甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡 -8-羧酸酯。
步驟1：甲基9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡-8-羧酸酯。將2-三級丁基8-甲基8-甲氧基-9-甲基-10-側氧基-1,3,4,7-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2,8-二羧酸酯(中間物9，20.00mg，50.71μmol，1.00eq)於HCl/二烷(4M,20.00mL,1577.60eq)中之混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物在真空中濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物(15.15mg，50.71μmol，100.00%產率，HCl)。LCMS：263[M+1]。
步驟2：甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡-8-羧酸酯。在甲基9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡-8-羧酸酯(15.15mg,50.71μmol,1.00eq,HCl)與苯基N-(3-氯-4- 氟-苯基)胺甲酸酯(13.47mg,50.71μmol,1.00eq)於DCM(4.00mL)中之混合物中，在N2下添加TEA(51.32mg,507.15μmol,70.30μL,10.00eq)。將混合物在25℃下攪拌10小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(15.00mg，32.43μmol，63.96%產率，93.5%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)8.20(s,1 H),7.56-7.63(m,1 H),7.14-7.24(m,1 H),7.02-7.12(m,1 H),6.55(s,1 H),4.93(s,2 H),3.95(s,3 H),3.92(s,1 H),3.75(s,3 H),2.97-3.05(m,1 H)。LCMS：434[M+1]。
化合物041：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-9-甲基-10-側氧基-3,4,9,10-四氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡 -2(1H)-羧醯胺。
在甲基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-9-甲基-10-側氧基-3,4-二氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡-8-羧酸酯(化合物040，30.00mg，69.15μmol，1.00eq)於THF(2.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加LiBH4(2.26mg,103.73μmol,1.50eq)。將混合物在0℃下攪拌1小時，接著加熱至20℃並攪拌2小時。LCMS顯示反應已完成。將反應用NH4Cl(5mL)淬熄。以乙酸乙酯 (10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(18.00mg，44.18μmol，63.89%產率，99.6%純度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)7.60(s,2 H),7.26-7.39(m,1 H),7,06-7.20(m,1 H),4.94(s,2 H),4.56(s,2 H),3.82-3.93(m,2 H),3.59(s,3 H),2.89-2.98(m,2 H)。LCMS：406[M+1]。
化合物042：2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡 -8-羧酸。
在甲基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-9-甲基-10-側氧基-3,4-二氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡-8-羧酸酯(化合物040，36.00mg，82.98μmol，1.00eq)於MeOH(4.00mL)及H2O(1.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加NaOH(6.64mg,165.96μmol,2.00eq)。將混合物在30℃下攪拌5小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物用1N HCl調整至pH=7並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(HCl)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(8.00mg，18.77μmol，22.62%產率，98.5%純度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)7.81-7.94(m,1 H),7.51-7.72(m,1 H),7.22-7.38(m,1 H),7.04 -7.19(m,1 H),4.94(s,2 H),3.82-3.91(m,2 H),3.67(s,3 H),2.89-3.01(m,2 H)。LCMS：420[M+1]。
化合物043：甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡 -8-羧酸酯。
步驟1：甲基9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-8-羧酸酯。在甲基9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4-四氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡-8-羧酸酯(中間物10，10.00mg，33.48μmol，1.00eq,HCl)於AcOH(2.00mL)中之溶液中，在N2下添加Pd/C(4.00mg,33.48μmol,1.00eq)。將懸浮液在真空下除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(50psi)下在40℃下攪拌12小時。LCMS顯示偵測到少許所欲產物。將反應混合物過濾並將濾液濃縮以提供呈黃色油狀物之標題化合物(10.86mg，粗製，HOAC)。LCMS：265[M+1]。
步驟2：甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡-8-羧酸酯。在甲基9-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-8-羧酸酯(15.57mg,41.16μmol,1.00eq,TFA)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(10.93mg,41.16μmol,1.00eq)於DCM (4.00mL)中之混合物中，在N2下添加TEA(41.65mg,411.58μmol,57.05μL,10.00eq)。將混合物在25℃下攪拌10小時。LCMS及TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(16.00mg，35.76μmol，86.87%產率，97.4%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)7.58-7.65(m,1 H),7.17-7.24(m,1 H),7.00-7.11(m,1 H),6.64-6.72(m,1 H),4.65-4.90(m,3 H),4.50-4.61(m,1 H),4.32-4.39(m,1 H),3.83-3.91(m,2 H),3.79(s,3 H),3.17(s,3 H),2.79-2.90(m,2 H)。LCMS：436[M+1]。
化合物044：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-9-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡 -2(1H)-羧醯胺。
在甲基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-9-甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-8-羧酸酯(化合物043，13.00mg，29.83μmol，1.00eq)於THF(2.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加LiBH4(3.25mg,149.14μmol,5.00eq)。將混合物在0℃下攪拌1小時，接著加熱至20℃並攪拌2小時。LCMS顯示反應已完成。將反應用NH4Cl(5mL)淬熄，以乙酸乙酯 (10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(9.00mg，21.94μmol，73.54%產率，99.4%純度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)7.55-7.62(m,1 H),7.26-7.33(m,1 H),7.08-7.19(m,1 H),4.75(d,J=2.32Hz,2 H),4.35-4.56(m,2 H),3.65-3.93(m,4 H),3.43-3.53(m,1 H),3.18(s,3 H),2.82(s,2 H)。LCMS：408[M+1]。
化合物045：N-(3-氯-4-氟苯基)-9-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡 -2(1H)-羧醯胺。
步驟1：9-甲基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡-10-酮。在三級丁基9-甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡-2-羧酸酯(中間物6，70.00mg，228.49μmol，1.00eq)於DCM(1.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,59.11eq)。將混合物在20℃下攪拌2小時。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(73.18mg，228.49μmol，100.00%產率，TFA)。
步驟2：N-(3-氯-4-氟苯基)-9-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡-2(1H)-羧醯胺。在9-甲基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]吡-10-酮(73.18 mg,228.49μmol,1.00eq,TFA)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(60.70mg,228.49μmol,1.00eq)於DCM(6.00mL)中之混合物中，在N2下添加TEA(231.21mg,2.28mmol,316.73μL,10.00eq)。將混合物在25℃下攪拌10小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(47.00mg，124.16μmol，54.34%產率，99.8%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.56-7.63(m,1 H),7.14-7.24(m,1 H),7.01-7.11(m,1 H),6.61(s,1 H),4.74(s,2 H),4.32-4.44(m,2 H),3.87(t,J=5.75Hz,2 H),3.74-3.81(m,2 H),3.14(s,3 H),2.86(t,J=5.75Hz,2 H)。LCMS：378/380[M+1]。
化合物046：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基1,3,4,7,8,9,10,11-八氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物5，180.00mg，587.54μmol，1.00eq)於甲苯(3.00mL)中之溶液中，添加Red-Al®(503.96mg，1.76mmol，503.96μL，70%純度，3.00eq)。將混合物在0℃下攪拌30min。每30分鐘添加額外 0.05mL的Red-Al®(鈉雙(2-甲氧基乙氧基)鋁二氫化物)溶液等分共四次。TLC(EA：MeOH=10：1)及LCMS顯示三級丁基11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯幾乎消耗殆盡，且出現60%的所欲產物。將混合物用40% NaOH(5mL)淬熄，用50mL的DCM：MeOH(10：1)稀釋並過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(EtOAc：MeOH，0%至10%)純化，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(100.00mg，249.68μmol，42.49%產率，73%純度)。
步驟2：三級丁基10-甲基-3,4,7,8,9,11-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基1,3,4,7,8,9,10,11-八氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(60.00mg,205.21μmol,1.00eq)及HCHO(166.55mg，2.05mmol，152.80μL，37%純度，10.00eq)於MeOH(5.00mL)中之溶液中，添加HOAc(1.23mg,20.52μmol,1.17μL,0.10eq)。將混合物在20℃下攪拌0.5hr。接著添加NaBH3CN(51.58mg,820.85μmol,4.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。TLC(EtOAc：MeOH=10：1)顯示出現一個主要斑點。將混合物在真空中濃縮。以EtOAc(20mL*2)及H2O(10mL)萃取殘餘物。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾。將濾液在真空中濃縮，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(62.00mg，粗製)。
步驟3：10-甲基-1,2,3,4,7,8,9,11-八氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-a][1,4]二氮呯。在三級丁基10-甲基-3,4,7,8,9,11-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(80.00mg,261.10μmol,1.00eq)於DCM(4.00mL)中之溶液中，添加TFA(6.16g,54.03mmol,4.00mL,206.92eq)。將混合物在20℃下攪拌2hr。TLC(EA：MeOH=10：1)顯示化合物3已消耗。將混合物在真空中濃縮，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(85.00mg，粗製，TFA)。
步驟4：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在10- 甲基-1,2,3,4,7,8,9,11-八氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-a][1,4]二氮呯(85.00mg,265.37μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(70.50mg,265.37μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TEA(134.26mg,1.33mmol,183.92μL,5.00eq)。將混合物加熱至20℃達16hr。LCMS顯示一個具有所欲Ms的主要尖峰。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，隨後進行製備型TLC(DCM：MeOH=10：1)及製備型HPLC(鹼)，以提供呈白色固體之標題化合物(15.00mg，39.58μmol，14.92%產率，99.7%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.46(dd,J=2.69,6.48Hz,1 H),7.07-7.16(m,1 H),6.90-7.02(m,1 H),6.34(s,1 H),4.41(s,2 H),4.15-4.25(m,2 H),3.67(t,J=5.81Hz,2 H),3.57(s,2 H),2.86-2.99(m,2 H),2.74(t,J=5.75Hz,2 H),2.30(s,3 H),1.82(br t,J=4.95Hz,2 H)。LCMS[M+1]：378。
化合物047：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(2-環丙基-1-羥基-乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：8-丁-3-烯醯基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在烯丙基(溴)鎂(1M,2.09mL,2.00eq)於THF(10.00mL)中之溶液中，在-30℃下在 10mins期間在N2下逐滴添加三級丁基8-[甲氧基(甲基)胺甲醯基1-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物11，500.00mg，1.04mmol，1.00eq)於THF(10.00mL)中之溶液並攪拌1小時。TLC顯示仍有約35%起始材料，接著將另一批次烯丙基(溴)鎂(1M,2.09mL,2.00eq)在-30℃下在10mins期間逐滴添加至混合物並攪拌1小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到一個新的斑點。將反應混合物在0℃下倒入1N HCl(50ml)中並攪拌10min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機層用鹽水(10mL*1)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物(170.00mg，粗製)，其不經進一步純化即用於下一步驟。
步驟2：三級丁基8-(1-羥基丁-3-烯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-丁-3-烯醯基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(300.00mg,772.28μmol,1.00eq)於MeOH(10.00mL)中之混合物中，在0℃下一次性添加NaBH4(58.43mg,1.54mmol,2.00eq)。將混合物在25℃下攪拌2小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且形成一個新的斑點。將反應混合物過濾並在真空中濃縮，接著用H2O(20mL)稀釋並以EtOAc(10*3mL)萃取。將合併之有機層用鹽水(15mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=1/1至0：1)純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(182.00mg，466.09μmol，60.35%產率)。
步驟3：三級丁基8-(2-環丙基-1-羥基-乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在ZnEt2(1M,1.23mL,12.00eq)於甲苯(8.00mL)中之攪拌懸浮液中，在-20℃下緩慢逐滴添加CH2ICl(438.60mg,2.49mmol,24.27eq)。將所得混合物攪拌1h並在-20℃下逐滴添加三級丁基8-(1-羥基丁-3-烯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡 唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(40.00mg,102.44μmol,1.00eq)於甲苯(2.00mL)中之溶液。將所得混合物在-20℃下攪拌12h。TLC顯示偵測到一個具有較大極性的新的主要斑點。LC-MS顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到一個具有所欲MS的主要尖峰。將反應冷卻至0℃並用NH4Cl飽和溶液(25mL)淬熄，並以EtOAc(2*20mL)萃取，以硫酸鈉乾燥並在減壓下蒸發。殘餘物藉由製備型TLC(SiO2，石油醚：乙酸乙酯=1：10)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(30.00mg，74.17μmol，72.40%產率)。
LCMS：405[M+1]。
步驟4：8-(2-環丙基-1-羥基-乙基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(2-環丙基-1-羥基-乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(30.00mg,74.17μmol,1.00eq)於DCM(8.00mL)中之溶液中，添加TFA(6.16g,54.03mmol,4.00mL,728.40eq)。將混合物在30℃下攪拌1h。TLC及LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到一個具有所欲MS的主要尖峰。將混合物在減壓下濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(50.00mg，粗製，TFA)。殘留物不經進一步純化即用於下一步驟。
LCMS：305[M+1]。
步驟5：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(2-環丙基-1-羥基-乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-(2-環丙基-1-羥基-乙基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(18.00mg,43.02μmol,1.00eq,TFA)及TEA(21.77mg,215.10μmol,29.82μL,5.00eq)於DCM(8.00mL)中之溶液中，在30℃下邊攪拌邊添加苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(13.71mg,51.62μmol,1.20eq)達1h。LCMS顯示所欲MS。將混合物在真空中直接蒸發並藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(2.49mg，5.23μmol，12.16%產率)。LCMS：476[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=2.57,6.60Hz,1H),7.15-7.25(m,1H),7.00-7.11(m,1 H),6.60(br d,J=4.40Hz,1H),4.61-4.72(m,2.5 H),4.38-4.39(m,1H),4.10-4.16(m,0.5 H),3.81-3.87(m,3H),3.48-3.62(m,1H),3.35-3.38(m,1H),3.18(s,3H),2.82-2.84(m,2H),2.51-2.53(m,1H),2.11-2.13(m,1H),1.35-1.42(m,2H),0.75-0.81(m,1H),0.53-0.61(m,2H),0.10-0.216(m,2H)。
化合物048：(3R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-甲基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(3R)-10-(2-甲氧基-2-側氧基-乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(3R)-3-甲基-11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物12，100.00mg，312.12μmol，1.00eq)於THF(5.00mL)中之溶液中，在0℃下在N2下邊攪拌邊添加NaH(24.97mg，624.24μmol，60%純度，2.00eq)達0.5h。接著隨後添加甲基2-溴乙酸酯(62.07mg,405.76μmol,38.32μL,1.30eq)。將混合物在20℃下攪拌2h。TLC(PE：EtOAc=1：3)顯示三級丁基(3R)-3-甲基-11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯消耗殆盡，且形成 一個新的主要斑點。將混合物用10mL的冰-水淬熄，並以EtOAc(20mL*3)萃取。將有機相用鹽水(15mL*1)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=1：3)純化，以獲得呈白色固體之標題化合物(116.00mg，280.29μmol，89.80%產率)。
步驟2：三級丁基(3R)-10-(2-羥基-2-甲基-丙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在MeMgBr(3M,1.02mL,10.00eq)於THF(5.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加三級丁基(3R)-10-(2-甲氧基-2-側氧基-乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(120.00mg,305.77μmol,1.00eq)於THF(3.00mL)中之溶液。TLC顯示三級丁基(3R)-10-(2-甲氧基-2-側氧基-乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯消耗殆盡，且形成一個新的斑點。將混合物在0℃下攪拌0.5h，接著升溫至20℃並攪拌2h。將混合物用飽和NH4Cl水溶液淬熄並以EtOAc(20mL*3)萃取。將有機相用鹽水(20mL*1)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC純化且進一步藉由製備型HPLC(FA)純化，以獲得呈灰白色油狀物之標題化合物(40mg，93%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=4.76-5.07(m,2 H),4.29-4.50(m,2 H),4.07-4.21(m,1 H),3.64-3.70(m,1 H),3.47-3.62(m,3 H),2.92(br dd,J=5.90,15.81Hz,1 H),2.56(br d,J=15.81Hz,2 H),2.25-2.42(m,2 H),2.15-2.23(m,1 H),1.47(s,9 H),1.28(d,J=4.64Hz,6 H),1.12(d,J=6.90Hz,3 H)。
步驟3：(3R)-10-(2-羥基-2-甲基-丙基)-3-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(3R)-10-(2-羥基-2-甲基-丙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(40.00mg,101.91μmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，在25℃下邊攪拌邊添 加TFA(770.00mg,6.75mmol,500.00μL,66.27eq)達1h。LCMS顯示三級丁基(3R)-10-(2-羥基-2-甲基-丙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯消耗殆盡，且偵測到所欲產物。將混合物在真空中直接蒸發。殘餘物不經純化且用於下一步驟。獲得呈黃色之油狀物(45.00mg，粗製，TFA)且用於下一步驟。
步驟4：(3R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-甲基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(3R)-10-(2-羥基-2-甲基-丙基)-3-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(45.00mg,116.73μmol,1.00eq,TFA)及TEA(67.23mg,664.38μmol,92.10μL,6.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，在25℃下邊攪拌邊添加苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(32.36mg,121.80μmol,1.10eq)達16h。LCMS顯示(3R)-10-(2-羥基-2-甲基-丙基)-3-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮消耗殆盡，且偵測到所欲產物。將混合物在真空中直接蒸發。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，隨後進行SFC(儀器：SFC 80；管柱：OD-10um，動相：A為CO2且B為MeOH(0.1%NH3H2O)；梯度：B 30%；流速：60mL/min；背壓：100bar；管柱溫度：35℃；波長：220nm)。獲得呈白色固體之標題化合物(19.00mg，40.54μmol，36.62%產率，99%純度)。
LCMS：464[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.60(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.18-7.25(m,1 H),7.00-7.09(m,1 H),6.61(s,1 H),5.14(quin,J=6.57Hz,1 H),4.79-4.81(d,J=15.53Hz,1 H),4.37-4.48(m,3 H),3.55-3.69(m,4 H),3.00-3.03(m,1 H),2.64-2.67(d,J=15.89Hz,1 H),2.32-2.48(m,2 H),1.32(s,6 H),1.18(d,J=6.85Hz,3 H)。
化合物049：(3R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2-羥基乙基)-3-甲基-11-側氧 基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(3R)-10-(2-羥基乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(3R)-10-(2-甲氧基-2-側氧基-乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(化合物048，步驟1之產物，50.00mg，127.40μmol，1.00eq)於THF(5.00mL)中之溶液中，在-78℃下在N2下邊攪拌邊添加LiAlH4(9.67mg,254.80μmol,2.00eq)。將混合物邊攪拌邊升溫至0℃達2h。TLC(PE：EtOAc=1：3)顯示三級丁基(3R)-10-(2-甲氧基-2-側氧基-乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯消耗殆盡，且形成一個新的主要斑點。LCMS顯示偵測到所欲產物。將混合物用20mL的水淬熄，並以EtOAc(20mL*3)萃取。將有機相用鹽水(20mL*1)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=1：3)純化。獲得呈淺黃色油狀物之標題化合物(35.00mg，96.04μmol，75.38%產率)。
步驟2：(3R)-10-(2-羥基乙基)-3-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(3R)-10-(2-羥基乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并 [2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(35.00mg,96.04μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在20℃下邊攪拌邊添加TFA(770.00mg,6.75mmol,500.00μL,70.32eq)達1h。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示三級丁基(3R)-10-(2-羥基乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯消耗殆盡，且形成一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(40.00mg，粗製，TFA)且直接用於下一步驟。
步驟3：(3R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2-羥基乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(3R)-10-(2-羥基乙基)-3-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(40.00mg,105.72μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(30.90mg,116.29μmol,1.10eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在20℃下邊攪拌邊添加TEA(32.09mg,317.17μmol,43.96μL,3.00eq)達16h。LCMS顯示反應物消耗殆盡及55%的所欲產物。將混合物在真空中濃縮，且殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化。獲得呈白色固體之標題化合物(17.50mg，38.14μmol，36.08%產率，95%純度)。
LCMS：436[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.60(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.18-7.25(m,1 H),7.00-7.09(m,1 H),6.61(s,1 H),5.12-5.15(m,1 H),4.09-4.85(m,1 H),4.37-4.48(m,3 H),3.89-3.92(m,2 H),3.76-3.78(m,2 H),3.54-3.56(m.,2H),3.00-3.04(m,1 H),2.65-2.69(m,1 H),2.34-2.37(m,2 H),1.17(d,J=6.85Hz,3 H)。
化合物050：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-(甲基胺基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基10-甲基-8-(甲基胺基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧酸酯(中間物2，300.00mg，897.21μmol，1.00eq)、甲胺(7.5M，239.26μL，2.00eq，EtOH溶液)、CH3COOH(53.88mg,897.21μmol,51.31μL,1.00eq)與4A分子篩(400.00mg)於DCE(8.00mL)中之混合物在20℃下攪拌16h。添加NaBH3CN(281.90mg,4.49mmol,5.00eq)並將混合物在20℃下攪拌3h。將混合物用EtOAc(40mL)稀釋並用鹽水(40mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(120.00mg，309.07μmol，34.45%產率，90%純度)。
LCMS：350[M+1]。
步驟2：三級丁基8-[烯丙基氧基羰基(甲基)胺基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基10-甲基-8-(甲基胺基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(116.00mg,314.80μmol,1.00eq)及NaHCO3(79.34mg,944.40μmol,36.73μL,3.00eq)於THF(4.00mL)及H2O(1.00mL)中之溶液中，添加烯丙基氯碳酸酯(49.33mg,409.24μmol,43.27μL,1.30eq)，並將混合物在20℃下攪拌16h。將混合物用EtOAc(40mL)稀釋並用HCl(1M,40 mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(99.00mg，228.37μmol，72.55%產率)。
步驟3：烯丙基N-甲基-N-(10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基)胺甲酸酯。在三級丁基8-[烯丙基氧基羰基(甲基)胺基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(108.00mg,249.13μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,108.43eq)並將混合物在25℃下在N2下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(111.00mg，248.09μmol，99.58%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟4：烯丙基N-[2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]-N-甲基-胺甲酸酯。將烯丙基N-甲基-N-(10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基)胺甲酸酯(111.00mg,248.09μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(125.52mg,1.24mmol,171.95μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(72.50mg,272.90μmol,1.10eq)於DCM(5.00mL)中之混合物在25℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL*2)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型TLC純化，以提供黃色之固體(108.00mg，213.89μmol，86.21%產率)。
LCMS：505/507[M+1]。
步驟5：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-(甲基胺基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將烯丙基N-[2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]-N-甲基-胺甲酸酯(98.00mg,194.08μmol,1.00eq)、1,3-二甲基六 氫嘧啶-2,4,6-三酮(151.52mg,970.41μmol,5.00eq)與Pd(PPh3)4(22.43mg,19.41μmol,0.10eq)於THF(3.00mL)中之混合物在25℃下攪拌16h。將混合物用EtOAc(30mL)稀釋並用鹽水(30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由矽膠管柱及製備型HPLC(HCl)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(55.00mg，119.06μmol，61.35%產率，99%純度，HCl)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 7.60(dd,J=2.57,6.72Hz,1 H),7.24-7.37(m,1 H),7.15(t,J=8.99Hz,1 H),4.76-4.88(m,2 H),4.55(s,2 H),4.25-4.36(m,1 H),3.86-3.97(m,1 H),3.71-3.82(m,1 H),3.23(s,5 H),2,83-2.89(m,1 H),2.82-2.83(m,1 H),2.77(s,3 H)。LCMS：421/423[M+1]。
化合物051：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-11-側氧基-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：5-三級丁基3-乙基2-[2-[(2,2,2-三氟乙基胺基)甲基]烯丙基]-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。將5-三級丁基3-乙基2-[2-(氯甲基)烯丙基]-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(500.00mg,1.30mmol,1.00eq)及2,2,2-三氟乙胺(3.86g,39.00mmol,3.06mL,30.00eq)於EtOH(50.00mL)中之溶液在90 ℃下攪拌32h。將混合物用EtOAc(120mL)稀釋並用飽和NaHCO3溶液(120mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(460.00mg，1.03mmol，79.26%產率)。
LCMS：447[M+1]。
步驟2：三級丁基8-亞甲基-11-側氧基-10-(2,2,2-三氟乙基)-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在5-三級丁基3-乙基2-[2-[(2,2,2-三氟乙基胺基)甲基]烯丙基]-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(460.00mg,1.03mmol,1.00eq)於甲苯(10.00mL)中之溶液中，在-30℃下添加Al(CH3)3(2M,2.06mL,4.00eq)並將混合物在60℃下攪拌16h。將混合物用H2O(10.00mL)淬熄。添加Na2CO3(109.20mg,1.03mmol,1.00eq)及Boc2O(269.84mg,1.24mmol,284.04μL,1.20eq)並將混合物在20℃下攪拌16h。將混合物用EtOAc(50mL)稀釋並用HCl(1M,50mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(390.00mg，974.05μmol，94.57%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.07(br d,J=4.16Hz,2 H),4.91(s,2 H),4.48-4.59(m,2 H),4.08-4.20(m,2 H),3.97-4.05(m,2 H),3.56-3.73(m,2 H),2.59-2.75(m,2 H),1.44-1.50(m,5 H),1.41(s,9 H)。LCMS：401[M+1]。
步驟3：三級丁基8-(羥基甲基)-11-側氧基-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-亞甲基-11-側氧基-10-(2,2,2-三氟乙基)-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(150.00mg,374.63μmol,1.00eq)於THF(3.00mL)中之溶液中，在0℃下添加BH3‧DMS(10M,149.85μL,4.00eq)並將混合物在20℃下攪拌16h。TLC顯示起始材料消耗殆盡。在-30℃下添加H2O2(297.30mg，2.62mmol，251.95μL，30%純度，7.00eq)及含NaOH(74.93mg,1.87mmol,5.00eq)之H2O(500.00uL)溶液，並將混合物在20℃下攪 拌2h。將混合物用EtOAc(40mL)稀釋並用飽和Na2SO3(30mL)、鹽水(30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(86.00mg，199.37μmol，53.22%產率，97%純度)。
LCMS：419[M+1]。
步驟4：8-(羥基甲基)-10-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(羥基甲基)-11-側氧基-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(106.00mg,253.34μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,106.63eq)並將混合物在25℃下在N2下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(109.00mg，252.13μmol，99.52%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟5：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-11-側氧基-10-(2,2,2-三氟乙基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-(羥基甲基)-10-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(109.00mg,252.13μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(127.56mg,1.26mmol,174.74μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(73.68mg,277.34μmol,1.10eq)於DCM(5.00mL)中之混合物在25℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(56.00mg，113.18μmol，44.89%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.17-7.24(m,1 H),7.03-7.12(m,1 H),6.56(s,1 H),4.76-4.92(m,1 H),4.65-4.72(m,2 H),4.30-4.49(m,2 H),3.78-3.95(m,2 H),3.63-3.76(m,3 H),3.46-3.61(m,2 H),2.82-2.92(m,2 H),2.71-2.81(m,1 H)。LCMS：490/492[M+1]。
化合物052：乙基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸酯。
步驟1：2-三級丁基8-乙基8,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯。在2-三級丁基8-乙基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯(中間物14，200.00mg，509.62μmol，1.00eq)於THF(6.00mL)中之溶液中，在-65℃下在N2下添加LDA(1M,1.53mL,3.00eq)，隨後在0.5h後添加MeI(217.01mg,1.53mmol,95.18μL,3.00eq)並將混合物在25℃下攪拌2h。將混合物用HCl(1M,40mL)淬熄並以EtOAc(40mL)萃取。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(140.00mg，309.99μmol，60.83%產率，90%純度)。LCMS：407[M+1]。
步驟2：乙基8,10-二甲基-11-側氧基-1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯。在2-三級丁基8-乙基8,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯(210.00mg,516.63μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TFA(4.62g,40.52mmol,3.00mL,78.43eq)並將混合物在25℃下在N2下攪拌1h。將混合物在真空中濃 縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(217.00mg，516.20μmol，99.92%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟3：乙基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-羧酸酯。將乙基8,10-二甲基-11-側氧基-1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(217.00mg,516.20μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(261.17mg,2.58mmol,357.77μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(150.85mg,567.82μmol,1.10eq)於DCM(7.00mL)中之混合物在25℃下攪拌16h。將混合物用DCM(30mL)稀釋並用HCl(1M,30mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(175.00mg，362.51μmol，70.23%產率，99%純度)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.69,6.48Hz,1 H),7.15-7.23(m,1 H),7.01-7.09(m,1 H),6.63(s,1 H),4.70(s,1 H),4.54-4.65(m,2 H),4.21-4.32(m,3 H),3.79-3.91(m,2 H),3.70-3.78(m,1 H),3.22(d,J=15.04Hz,1 H),3.17(s,3 H),2.79-2.88(m,2 H),1.31-1.36(m,6 H)。LCMS：478/480[M+1]。
化合物053：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-8,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
在乙基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-8,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(化合物052，60.00mg，125.54μmol，1.00eq)於THF(5.00mL)中之溶液中，在0℃下添加LiBH4(8.20mg,376.62μmol,3.00eq)並將混合物在25℃下攪拌2h。將混合物用H2O(30mL)淬熄並以EtOAc(30mL)萃取。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(34.00mg，77.22μmol，61.51%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.60(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.20(br d,J=1.34Hz,1 H),7.07(s,1 H),6.62(s,1 H),4.64-4.74(m,2 H),4.19(s,1 H),4.01(s,1 H),3.87(s,1 H),3.50-3.66(m,2 H),3.37(d,J=14.79Hz,1 H),3.22(s,3 H),3.03-3.11(m,1 H),2.85(s,1 H),1.88-1.97(m,1 H),1.16(s,3 H)。LCMS：436/438[M+1]。
化合物054：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在3,3-二氟吡咯啶(96.09mg,669.34μmol,1.49eq,HCl)於DCE(4.00mL)中之溶液中，添加NaOAc(73.60mg,897.20μmol,2.00eq)。在攪拌1hr後，添加三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(150.00mg,448.60μmol,1.00eq)及4A MS(300.00mg)。將混合物在20℃下攪拌4hr。添加NaBH3CN(112.76mg,1.79mmol,4.00eq)。接著將混合物在20℃下攪拌12hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物倒入飽和NH4Cl(20mL)中，以DCM(10mL*2)萃取。將有機層用鹽水(20mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮，以給出粗製物，其藉由製備型TLC(100%乙酸乙酯)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(120.00mg，282.04μmol，62.87%產率)。
LCMS：426[M+1]。
步驟2：8-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(90.00mg,211.53μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00 mL,127.70eq)。將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC顯示反應已完成。將混合物濃縮以提供呈無色油狀物之標題化合物(90.00mg，204.83μmol，96.83%產率，TFA)，其係直接使用。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(90.00mg,204.83μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(55.52mg,209.00μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TEA(62.18mg,614.50μmol,85.18μL,3.00eq)。將混合物在20℃下攪拌12h。LCMS顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮以給出粗製物，其藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(57.00mg，113.56μmol，55.44%產率，99%純度)。LCMS：497/499[M+1].1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.57,6.48Hz,1 H),7.15-7.22(m,1 H),6.99-7.09(m,1 H),6.58(s,1 H),4.67(s,2 H),4.31-4.46(m,2 H),3.79-3.98(m,2 H),3.44(d,J=5.38Hz,2 H),3.29-3.31(m,1 H),3.20(s,3 H),2.81-3.12(m,6 H),2.28-2.33(m,2 H)。
化合物05.5：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(哌啶-1-基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-(1-哌啶基)-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(120.00mg,358.88μmol,1.00eq)及哌啶(61.12mg,717.76μmol,71.07μL,2.00eq)於DCE(2.00mL)中之溶液中，添加HOAc(21.55mg,358.88μmol,20.52μL,1.00eq)、4A MS(300.00mg)，將混合物在20℃下攪拌3hr。添加NaBH3CN(112.76mg,1.79mmol,5.00eq)並將混合物在20℃下攪拌12hr。TLC顯示反應已完成。將混合物倒入飽和NH4Cl(20mL)中，以乙酸乙酯(15mL*2)萃取。將有機層用鹽水(20mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。粗製物藉由製備型TLC純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(50.00mg，111.52μmol，31.07%產率，90%純度)。
步驟2：10-甲基-8-(1-哌啶基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-(1-哌啶基)-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(50.00mg,123.91μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(14.13mg,123.91μmol,9.17μL,1.00eq)。將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC顯示反應已完成。將混合物在真空中濃 縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(50.00mg，119.78μmol，96.67%產率，TFA)，其不經純化即用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(哌啶-1-基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在10-甲基-8-(1-哌啶基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(50.00mg,119.78μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(31.82mg,119.78μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TEA(36.36mg,359.35μmol,49.81μL,3.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮以給出粗製物。粗製物藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(22.00mg，45.86μmol,38.28%產率，99%純度)。LCMS：475/477[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.13(s,1 H),7.58(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.17-7.24(m,1 H),7.05(t,J=8.80Hz,1 H),6.73(s,1 H),4.67-4.76(m,2 H),4.58-4.67(m,1 H),4.35(dd,J=6.54,15.34Hz,1 H),3.87-3.95(m,1 H),3.67-3.82(m,3 H),3.54-3.59(m,1 H),3.18(s,3 H),2.79-2.93(m,4 H),2.65-2.78(m,2 H),1.66-1.80(m,4 H),1.47-1.64(m,2 H)。
化合物056：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(4,4-二氟哌啶-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-(4,4-二氟-1-哌啶基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(150.00mg,448.60μmol,1.00eq)及4,4-二氟哌啶(108.68mg,897.22μmol,2.00eq)於DCE(2.00mL)中之溶液中，添加4A MS(300.00mg)及HOAc(26.94mg,448.60μmol,25.66μL,1.00eq)，將混合物在20℃下攪拌16hr。添加NaBH3CN(140.95mg,2.24mmol,5.00eq)。將混合物在20℃下攪拌3hr。TLC顯示反應已完成。將混合物倒入飽和NH4Cl(20mL)中，以乙酸乙酯(15mL*2)萃取，將有機層用鹽水(20mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。粗製物藉由製備型TLC純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(53.00mg，114.56μmol，25.54%產率，95%純度)。
步驟2：8-(4,4-二氟-1-哌啶基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(4,4-二氟-1-哌啶基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(53.00mg,120.59μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,224.01eq)，將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC顯示反應已完 成。將混合物在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(54.00mg，119.10μmol，98.76%產率，TFA)，其不經純化即用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(4,4-二氟哌啶-1-基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-(4,4-二氟-1-哌啶基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(54.00mg,119.10μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(31.64mg,119.10μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TEA(36.15mg,357.29μmol,49.53μL,3.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮。粗製物藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(24.00mg，45.09μmol，37.86%產率，96%純度)。LCMS：511/513[M+1]。1H NMR(4)00MHz,CDCl3H)δ 7.58(dd,J=2.64,6.53Hz,1 H),7.18-7.20(m,1 H),7.02-7.08(m,1 H),6.65(s,1 H),4.51-4.80(m,3 H),4.28-4.39(m,1 H),3.76-3.93(m,2 H),3.47-3.63(m,2 H),3.28-3.40(m,1 H),3.18(s,3 H),2.74-2.89(m,4 H),2.63-2.67(m,2 H),1.92-2.10(m,4 H)。
化合物057：甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-9-羧酸酯。
步驟1：2-三級丁基9-甲基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯及2-三級丁基9-甲基9,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯。在2-三級丁基9-甲基11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯(中間物13，1.10g，3.02mmol，1.00eq)於DMF(20.00mL)中之溶液中，在-30℃下添加NaH(144.90mg，3.62mmol，60%純度，1.20eq)，攪拌30min。添加MeI(557.01mg,3.93mmol,244.30μL,1.30eq)並將混合物在20℃下攪拌2hr。LCMS顯示反應物已消耗，且偵測到70%的2-三級丁基9-甲基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯及18%的2-三級丁基9-甲基9,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯。將混合物倒入水(100mL)中，以乙酸乙酯(50mL*3)萃取，將有機層用鹽水(50mL*3)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。粗製物藉由製備型HPLC純化，以提供呈無色油狀物之2-三級丁基9-甲基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯(680.00mg，1.80mmol，59.60%產率)及2-三級丁基9-甲基9,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯(120.00mg，305.77μmol，10.12%產率)。
步驟2：甲基-10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸酯。在2-三級丁基9-甲基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯(200.00mg,528.51μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TFA(4.62g,40.52mmol,3.00mL,76.67eq)。將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC(石油醚：乙酸乙酯=1：1)顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(200.00mg，509.77μmol，96.46%產率，TFA)。
步驟3：甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-9-羧酸酯。在甲基10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸酯(190.00mg,484.29μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(128.66mg,484.29μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TEA(98.01mg,968.57μmol,134.26μL,2.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物倒入水(20mL)中，以乙酸乙酯(20mL*2)萃取，將有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。粗製物藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(150.00mg，323.43μmol，66.79%產率，97%純度)。
LCMS：450/452[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.60(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.18-7.24(m,1 H),7.00-7.09(m,1 H),6.64(s,1 H),4.59-4.80(m,2 H),4.28-4.47(m,3 H),3.74-3.95(m,2 H),3.67(s,3 H),3.20(s,3 H),2.88-2.99(m,1 H),2.81(t,J=5.81Hz,2 H),2.49-2.65(m,1 H)。
化合物058：2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-9-羧酸。
在甲基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸酯(化合物057，30.00mg，66.69μmol，1.00eq)於MeOH(2.00mL)及H2O(2.00mL)中之溶液中，添加NaOH(8.00mg,200.07μmol,3.00eq)，將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物藉由HCl(1N)酸化至pH 4。殘餘物藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(24.00mg，54.52μmol，81.74%產率，99%純度)。LCMS：436/438[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 7.56-7.64(m,1 H),7.25-7.35(m,1 H),7.13(t,J=8.93Hz,1 H),4.60(br s,2 H),4.37(br d,J=5.01Hz,3 H),3.84-3.99(m,1 H),3.59-3.75(m,1 H),3.17(s,3 H),2.93(br d,J=14.43Hz,1 H),2.75(br t,J=5.32Hz,2 H),2.53(br dd,J=5.93,14.61Hz,1 H)。
化合物059：N2-(3-氯-4-氟苯基)-N9,N9,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,9-二羧醯胺。
在2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸(化合物058，100.00mg，229.44μmol，1.00eq)及Me2NH(187.09mg,2.29mmol,210.21μL,10.00eq,HCl)於DMF(3.00mL)中之溶液中，添加DIPEA(593.06mg,4.59mmol,801.43μL,20.00eq)及HATU(104.69mg,275.33μmol,1.20eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物倒入水(20mL)中，以乙酸乙酯(20mL*2)萃取，將有機層用鹽水(20mL*3)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(50.00mg，106.93μmol，46.61%產率，99%純度)。LCMS：463/465[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.60(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.18-7.25(m,1 H),7.04(t,J=8.80.Hz,1 H),6.77(s,1 H),4.75(q,J=15.89Hz,2 H),4.61(dd,J=4.52,7.58Hz,1 H),4.51(td,J=4.52,14.31Hz,1 H),4.18(ddd,J=4.71,10.33,14.55Hz,1 H),3.76-3.94(m,2 H),3.07(s,3 H),3.03(d,J=8.31Hz,6 H),2.75-2.84(m,2 H),2.50-2.64(m,2 H)。
化合物060：N-(3-氯-4-氟苯基)-9-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
在甲基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸酯(化合物057，100.00mg，222.29μmol，1.00eq)於THF(3.00mL)中之溶液中，在10℃下添加LiBH4(14.52mg,666.87μmol,3.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物倒入HCl水溶液(0.5M)中，以DCM(20mL*2)萃取，將有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。粗製物藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(43.00mg，100.91μmol，45.40%產率，99%純度)。LCMS：422/424[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.57(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.18-7.25(m,1 H),7.04(t,J=8.80Hz,1 H),6.90(s,1 H),4.66(s,2 H),4.32-4.52(m,2 H),3.90(td,J=5.61,13.36Hz,1 H),3.69-3.83(m,4 H),3.21(s,3 H),2.80(t,J=5.75Hz,2 H),2.21-2.57(m,3 H)。
化合物061：N-(3-氯-4-氟苯基)-9-(羥基甲基)-9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：2-三級丁基9-甲基9,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯。在甲基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-9,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸酯(100.00mg,285.41μmol,1.00eq)於DMF(3.00mL)中之溶液中，添加NaH(34.25mg，856.23μmol，60%純度，3.00eq)，攪拌30min，添加Mel(202.56mg,1.43mmol,88.84μL,5.00eq)並將混合物在20℃下攪拌2hr。LCMS顯示反應物已消耗，且偵測到主要產物。將混合物倒入水(10mL)中，以乙酸乙酯(10mL*2)萃取。將合併之有機層用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(120.00mg，粗製)。
步驟2：甲基9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-9-羧酸酯。在2-三級丁基9-甲基9,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,9-二羧酸酯(120.00mg,305.77μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TFA(4.62g,40.52mmol,3.00mL,132.52eq)。將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以給出呈無色油狀物之甲基9,10-二甲基-11-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸酯(120.00mg，295.30μmol，96,58%產率，TFA)，其不經純化即用於下一步驟。
步驟3：甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-9-羧酸酯。在甲基9,10-二甲基-11-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸酯(120.00mg,295.30μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(78.45mg,295.30μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TEA(365.00mg,3.61mmol,500.00μL,12.21eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。TLC顯示反應已完成。將反應混合物分配介於乙酸乙酯(20mL)與水(20mL)之間，並以乙酸乙酯(20mL*2)萃取，將有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。粗製物藉由製備型TLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(90.00mg，188.19μmol，63.73%產率，97%純度)。
步驟4：N-(3-氯-4-氟苯基)-9-(羥基甲基)-9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在甲基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-9,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸酯(45.00mg,97.01μmol,1.00eq)於THF(2.00mL)中之溶液中，在0℃下添加LiBH4(4.23mg,194.02μmol,2.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示仍有15%反應物，並添加LiBH4(4.23mg,194.02μmol,2.00eq)，將混合物在20℃下攪拌4hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物倒入HCl水溶液(0.5M)中，以DCM(20mL*2)萃取，將有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮。粗製物藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(22.00mg，49.46μmol，50.99%產率，98%純度)。LCMS：436/438[M+1]。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.57(dd,J=2.64,6.53Hz,1 H),7.22(ddd,J=2.76,4.08,8.97Hz,1 H),7.00-7.09(m,1 H),6.79(s,1 H),4.64-4.75(m,2 H),4.51-4.59(m,1 H),4.38-4.47(m,1 H),3.77-3.92(m,3 H),3.55(d,J=11.29Hz,1 H),3.12(s,3 H),2.80(t,J= 5.77Hz,2 H),2.49-2.63(m,1 H),2.27(ddd,J=2.38,8.28,15.56Hz,2 H),1.44(s,3 H)。
化合物062：2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-9,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-9-羧酸。
在甲基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-9,10-二甲基-11-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-9-羧酸酯(10.00mg,21.56μmol,1.00eq)於MeOH(1.00mL)及H2O(1.00mL)中之溶液中，添加NaOH(1.29mg,32.34μmol,1.50eq)。將混合物在20℃下攪拌16hrs。LCMS顯示仍有60%反應物，添加NaOH(2.59mg,64.67μmol,3.00eq)。將混合物加熱至40℃並在40℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將混合物藉由HCl(3M)酸化至pH 3。所得混合物藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(7.00mg，15.09μmol，70.01%產率，97%純度)。LCMS：450/452[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.45(dd,J=2.51,6.27Hz,1 H),7.11-7.20(m,1 H),7.01-7.08(m,1 H),6.80(br s,1 H),6.74-6.86(m,1 H),4.70-4.75(m,,1 H),4.21-4.45(m,3 H),3.93.396(m,1 H),3.56(br s,1 H),3.17(s,4 H),2.70-2.92(m,2 H),2.08-2.23(m,1 H),1.66(s,3 H)。
化合物063：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-(嗎啉基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在2-三級丁基8-乙基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯(中間物14，500.00mg，1.27mmol，1.00eq)於THF(10.00mL)中之混合物中，在-40℃下在N2下添加LiAlH4(96.39mg,2.54mmol,2.00eq)，接著將混合物在-40℃下在N2大氣下攪拌2hr。將混合物倒入冰-水(20mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(10mL*3)萃取水相。將合併之有機相用HCl(1N,20mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=100/1至1：2)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(120.00mg，342.46μmol，26.97%產率)。LCMS：351[M+1]。
步驟2：三級丁基10-甲基-8-(甲基磺醯基氧基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫 吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(100.00mg,285.38μmol,1.00eq)、TEA(144.39mg,1.43mmol,197.79μL,5.00eq)於DCM(3.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下添加MsCl(130.76mg,1.14mmol,88.35μL,4.00eq)，接著將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌2小時。LCMS及TLC顯示起始材料消耗殆盡，出現一個新的斑點。將混合物倒入冰-水(20mL)中並攪拌5min。以DCM(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(102.00mg，238.04μmol，83.41%產率)，其直接用於下一步驟。LCMS 429[M+1]。
步驟3：三級丁基10-甲基-8-(嗎啉基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將三級丁基10-甲基-8-(甲基磺醯基氧基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(100.00mg,233.37μmol,1.00eq)、嗎啉(203.31mg,2.33mmol,205.37μL,10.00eq)於DMSO(2.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在88℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並以EtOAc(5mL*3)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=20/1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(65.00mg，147.19μmol，63.07%產率，95%純度)。
LCMS：420[M+1]。
步驟4：10-甲基-8-(嗎啉基甲基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。將三級丁基10-甲基-8-(嗎啉基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(65.00mg,154.94μmol,1.00eq)、TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,87.17eq)於DCM(2.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌1小時。 TLC顯示起始材料消耗殆盡，出現一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(67.00mg，154.58μmol，99.77%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟5：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-8-(嗎啉基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將10-甲基-8-(嗎啉基甲基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(67.00mg,209.77μmol,1.00eq)、苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(66.88mg,251.72μmol,1.20eq)、TEA(42.45mg,419.54μmol,58.15μL,2.00eq)於DCM(5.00mL)中之混合物除氣，並以N2吹掃3次，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌5min。以DCM(5mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(60.00mg，120.99μmol，57.68%產率，99%純度)。LCMS：491/493[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.18-7.24(m,1 H),7.01-7.09(m,1 H),6.72(s,1 H),4.67(s,2 H),4.38-4.47(m,1 H),4.11-4.20(m,1 H),3.74-3.92(m,6 H),3.49(m,1 H),3.28(m,1 H),3.17(s,3 H),2.75-2.91(m,4 H),2.67(m,4 H),2.48-2.56(m,1 H)。
化合物064：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(哌啶-1-基甲基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物1，800.00mg，2.41mmol，1.00eq)、氯銠三苯基磷烷(89.19mg,96.40μmol,0.04eq)於THF(10.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下添加1,3,2-苯并二氧雜硼呃(1M,7.23mL,3.00eq)，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌3hr。TLC顯示起始材料消耗殆盡。在-30℃下逐滴添加氫氧化鈉(482.00mg,12.05mmol,5.00eq)於H2O(5.00mL)中之溶液，接著緩慢添加過氧化氫(1.91g，16.87mmol，1.62mL，30%純度，7.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。TLC顯示無起始材料，且以所欲產物為主。將混合物用NaHSO3(飽和，40mL)淬熄並以EtOAc(20mL)萃取。將有機相用NaOH(15%,40mL*3)及鹽水洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以給出棕色油狀物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=100/1至1/4)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(522.00mg，1.42mmol，58.72%產率，95%純度)。
LCMS：351[M+1]。
步驟2：三級丁基10-甲基-8-(甲基磺醯基氧基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧 酸酯。在三級丁基8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(500.00mg,1.43mmol,1.00eq)、TEA(723.51mg,7.15mmol,991.11μL,5.00eq)於DCM(10.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下添加MsCl(655.23mg,5.72mmol,442.72μL,4.00eq)，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌2小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，出現一個新的斑點。將混合物倒入冰-水(20mL)中並攪拌5min。以DCM(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(550.00mg，1.09mmol，76.29%產率，85%純度)。
LCMS：429[M+1]。
步驟3：三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-(1-哌啶基甲基)-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將三級丁基10-甲基-8-(甲基磺醯基氧基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(120.00mg,280.05μmol,1.00eq)、哌啶(238.46mg,2.80mmol,277.28μL,10.00eq)於DMSO(2.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在88℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中。以乙酸乙酯(5mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌、以無水Na2SO4乾燥、過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(60.00mg，143.70μmol，51.31%產率)。LCMS：418[M+1]
步驟4：10-甲基-8-(1-哌啶基甲基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-(1-哌啶基甲基)-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(54.00mg,129.33μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之混合物中，添加TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,104.43eq)，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌1小時。TLC顯 示起始材料消耗殆盡，出現一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(55.80mg，129.33μmol，100.00%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟5：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(哌啶-1-基甲基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將10-甲基-8-(1-哌啶基甲基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(55.80mg,129.33μmol,1.00eq,TFA)、苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(41.23mg,155.20μmol,1.20eq)、TEA(26.17mg,258.66μmol,35.85μL,2.00eq)於DCM(5.00mL)中之混合物除氣，並以N2吹掃3次，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌5min。以DCM(5mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(HCl)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(40.00mg，80.98μmol，62.62%產率，99%純度)。LCMS：489/491[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.60(m,1 H),7.18(m,1 H),7.02-7.10(m,1 H),6.60(br s,1 H),4.57-4.77(m,2 H),4.48(m,1 H),4.35(m,1 H),3.84(m,3 H),3.68(m,1 H),3.32-3.58(m,3 H),3.24(m,3 H),2.63-3.08(m,6 H),2.37(m,2 H),1.81-2.02(m,3 H),1.48(m,1 H)。
化合物065：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-((二甲基胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-[(二甲基胺基)甲基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將三級丁基10-甲基-8-(甲基磺醯基氧基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(化合物064，步驟2之產物，120.00mg，280.05μmol，1.00eq)、N-甲基甲胺(2M,1.40mL,10.00eq)於DMSO(5.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在88℃下在N2大氣下攪拌16小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並以EtOAc(5mL*3)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(65.00mg，165.31μmol，59.03%產率，96%純度)。LCMS：378[M+1]
步驟2：8-[(二甲基胺基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-[(二甲基胺基)甲基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(55.00mg,145.70μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之混合物中，添加TFA(1.69g,14.86mmol,1.10mL,101.97eq)，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌1小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，出現一個新的斑點。將混合物在真空中 濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(57.00mg，145.63μmol，99.96%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-((二甲基胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-[(二甲基胺基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(57.00mg,145.63μmol,1.00eq,TFA)、苯基N-(3-胺基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(43.03mg,174.76μmol,1..20eq)、TEA(29.47mg,291.27μmol,40.37μL,2.00eq)於DCM(5.00mL)中之混合物除氣，並以N2吹掃3次，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌5min。以DCM(5mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(HCl)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(59.00mg，130.11μmol，89.34%產率，99%純度)。LCMS：449/451[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.57-7.63(m,1 H),7.15-7.22(m,1 H),7.02-7.10(m,1 H),6.51-6.57(m,1 H),4.58-4.77(m,2 H),4.46-4.56(m,1 H),4.31(s,1 H),3.84-3.89(m,3 H),3.47-3.61(m,1 H),3.25(s,3 H),3.12-3.20(m,1 H),3.04(m,2 H),2.83-2.92(m,6 H),2.80-2.86(m,2 H)。
化合物066：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-((3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-[(3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將三級丁基10-甲基-8-(甲基磺醯基氧基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(化合物064，步驟2之產物，20.00mg,46.67μmol，1.00eq)、3,3-二氟吡咯啶(49.99mg,466.74μmol,10.00eq)於DMSO(1.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在88℃下在N2大氣下攪拌16hr。TLC顯示起始材料/所欲產物/副產物=3/2/1。接著將3,3-二氟吡咯啶(49.99mg,466.74μmol,10.00eq)添加至混合物，並將混合物在90℃下攪拌16hr。TLC顯示起始材料消耗殆盡，所欲產物/副產物=3/1。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(5mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(8.00mg'16.20μmol，34.71%產率，89%純度)。
LCMS：440[M+1]。
步驟2：8-[(3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-[(3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基]-10-甲基-11-側氧基- l,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(8.00mg,18.20μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之混合物中，添加TFA(821.32mg,7.20mmol,533.32μL,395.73eq)，接著將混合物在20℃下攪拌1小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且形成一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(8.25mg，18.20μmol，100.00%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-((3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-[(3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(8.25mg,18.20μmol,1.00eq,TFA)、苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(5.32mg,20.01μmol,1.10eq)、TEA(3.68mg,36.39μmol,5.04μL,2.00eq)於DCM(3.00mL)中之混合物除氣，並以N2吹掃3次，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並以DCM(5mL*2)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(HCl)純化，以提供呈淺黃色固體之標題化合物(8.50mg，16.47μmol，90.49%產率，99%純度)。LCMS：511/513[M+1]。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.58(dd,J=2.6,6.7Hz,1 H),7.31-7.25(m,1 H),7.14(s,1 H),4.68(d,J=3.0Hz,2 H),4.56-4.47(m,1 H),4.36-4.27(m,1 H),4.04-3.53(m,7 H),3.35(br s,3 H),3.19(d,J=1.6Hz,3 H),3.09-2.97(m,1 H),2.82(s,4 H)。
化合物067：N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
將8-[(3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(化合物066，步驟2之產物，62.00mg，136.74μmol，1.00eq，TFA)、Et3N(69.18mg,683.70μmol,94.77μL,5.00eq)與苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(42.04mg,164.09μmol,1.20eq)於DCM(6.00mL)中之混合物在30℃下攪拌2h。LCMS顯示起始材料消耗殆盡及主要的所欲產物。將混合物在真空中濃縮，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈黃色之固體(43.00mg，81.46μmol，59.57%產率，95%純度)。LCMS：502[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.78(m,1 H),7.60(m,1 H),7.13(t,J=8.74Hz,1 H),6.93(s,1 H),4.68(s,2 H),4.41(m,1 H),4.13(d,J=5.87Hz,1 H),3.87(m,2 H),3.46(m,1 H),3.26-3.37(m,1 H),3.18(s,3 H),2.93(m,2 H),2.73-2.87(m,4 H),2.56-2.66(m,1 H),2.47-2.55(m,2 H),2.30(m,2 H)。
化合物068：8-((3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
將8-[(3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(化合物066，步驟2之產物，62.00mg，136.74μmol，1.00eq，TFA)、Et3N(69.18mg,683.70μmol,94.77μL,5.00eq)與苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲酸酯(49.10mg,164.09μmol,1.20eq)於DCM(6.00mL)中之混合物在30℃下攪拌2h。LCMS顯示起始材料消耗殆盡及主要的所欲產物。將混合物在真空中濃縮，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(42.00mg，76.37μmol，55.85%產率，99%純度)。LCMS：545[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.70(m,1 H),7.57-7.64(m,1 H),7.11-7.16(m,1 H),6.83(s,1 H),4.71(s,2 H),4.42(m,1 H),4.13(m,1 H),3.89(m,2 H),3.42-3.54(m,1 H),3.27-3.39(m,1 H),3.19(s,3 H),2.95(m,2 H),2.86(m,4 H),2.58-2.69(m,1 H),2.49-2.56(m,2 H),2.32(m,2 H)。
化合物069：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(吡咯啶-1-基甲基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-(吡咯啶-1-基甲基)-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基10-甲基-8-(甲基磺醯基氧基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(化合物064，步驟2之產物，150.00mg，350.06μmol，1.00eq)於DMSO(3.00mL)中之溶液中，添加吡咯啶(248.96mg,3.50mmol,292.89μL,10.00eq)，將混合物在88℃下攪拌16h。將反應混合物用鹽水(40mL)稀釋並以EtOAc(30mL*2)萃取。將合併之有機物用H2O(60mL*3)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM：MeOH=10：1)純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(91.00mg，221.01μmol，63.13%產率，98%純度)，其直接用於下一步驟。
LCMS：404[M+1]。
步驟2：10-甲基-8-(吡咯啶-1-基甲基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-(吡咯啶-1-基甲基)-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(91.00mg,225.52μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.96g,34.76mmol,2.57mL,154.14eq)，將混合物在25℃下攪拌1h。將混合物直接蒸發，以提供 呈黃色油狀物之標題化合物(94.14mg，225.53μmol，100.00%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
LCMS：304[M+1]。
步驟3：N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(吡咯啶-1-基甲基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在10-甲基-8-(吡咯啶-1-基甲基)-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(94.14mg,225.53μmol,1.00eq,TFA)及Et3N(114.11mg,1.13mmol,156.31μL,5.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(59.92mg,225.53μmol,1.00eq)，將混合物在25℃下攪拌16h。將混合物在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(鹼)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(61.00mg，127.15μmol，56.38%產率，99%純度)。LCMS：475/477[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58-7.61(m,1 H),7.17-7.19(m,1 H),7.03-7.07(m,1 H),6.61(s,1 H),4.67(s,2 H),4.39-4.44(m,1 H),4.0-4.2(m,1 H),3.84-3.87(m,2 H),3.36-3.45(m,1 H),3.34-3.35(m,1 H),3.17(s,3 H),2.82-2.85(m,2 H),2.65-2.67(m,1 H),2.48-2.55(m,6 H),1.79(m,4 H)。
化合物070：8-(胺基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：8-(疊氮甲基)-N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在[2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]甲基甲烷磺酸酯(80.00mg,160.02μmol,1.00eq)於DMF(5.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下添加NaN3(20.81mg,320.04μmol,11.25μL,2.00eq)，接著將混合物在50℃下在N2大氣下攪拌16hr。LCMS顯示起始材料/所欲產物=1/8。接著將NaN3(20.81mg,320.04μmol,11.25μL,2.00eq)在0℃下在N2下添加至混合物，並將混合物在50℃下再攪拌16hr。將混合物用EtOAc(20mL)稀釋並用鹽水(20mL*3)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(50.00mg，111.89μmol，69.92%產率)，其直接用於下一步驟。
LCMS：447[M+1]。
步驟3：8-(胺甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-(疊氮甲基)-N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(40.00mg,89.51μmol,1.00eq).NH4Cl(14.36mg,268.53μmol,9.39μL,3.00eq)與Zn(11.71mg,179.02μmol,2.00eq)於EtOH(5.00mL)及H2O(500.00uL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在30℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消 耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物過濾並將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(32.00mg，74.51μmol，83.24%產率，98%純度)。
LCMS：421[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.57-7.62(m,1 H),7.17-7.23(m,1 H),7.05(s,1 H),6.60-6.64(m,1 H),4.67(d,J=2.51Hz,2 H),4.37-4.47(m,1 H),4.13-4.25(m,1 H),3.86(d,J=6.90Hz,2 H),3.44(d,J=5.40Hz,1 H),3.38(d,J=7.53Hz,1 H),3.19(s,3 H),2.83(d,J=5.65Hz,4 H),2.43-2.57(m,1 H)。
化合物071：(R)-N-(2-溴-5-氯-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a1[1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物072之方式，在步驟3中使用苯基(2-溴-5-氯-4-氟苯基)胺甲酸酯來製備。LCMS[M+1]：534/536。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.32(d,J=7.5Hz,1 H),7.35(d,J=8.0Hz,1 H),6.93-6.98(m,1 H),5.88-6.24(m,1 H),5.00-5.09(m,1 H),4.91(s,1 H),4.35-4.53(m,3 H),3.79-4.07(m,2 H),3.59(s,2 H),3.00-3.09(m,1 H),2.66-2.75(m,1 H),2,36(s,2 H),1.23(d,J=6.9Hz,3 H)。
化合物072：(3R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(3R)-3-甲基-11-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(700.00mg,2.18mmol,1.00eq)於DMF(7.00mL)中之溶液中，在-10℃下添加NaH(261.60mg，6.54mmol，60%純度，3.00eq)。將混合物在-10℃下攪拌30min。接著在-10℃下逐滴添加2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(1.40g,6.54mmol,3.00eq)於DMF(800.00uL)中之溶液。將混合物在0℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示出現一個主要斑點。將混合物添加至冰-水(50mL)中，並以EtOAc(50mL*3)萃取。將合併之有機層用H2O(50mL*3)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(PE：EtOAc=30%至50%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(800.00mg，2.08mmol，95.41%產率)。
步驟2：(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(350.00mg,910.46μmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，添加TFA(7.70g,67.53mmol,5.00mL,74.17eq)。將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示起始材料已消耗。將混合物在真空中濃縮，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(380.00mg，粗製，TFA)。
步驟3：(3R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(55.00mg,138.08μmol,1.00eq,TFA)及Et3N(69.86mg,690.40μmol,95.70μL,5.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(36.68mg,138.08μmol,1.00eq)。將混合物在25℃下攪拌16h。將混合物直接蒸發。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(31.70mg，69.33μmol，50.21%產率，99.7%純度)。LCMS[M+1]：456。
化合物073、074、075、076、077、078、及071係以類似於化合物072之方式製備。
化合物073：(R)-10-(2,2-二氟乙基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物072之方式，在步驟3中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)胺甲酸酯來製備。LCMS[M+1]：489。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.65-7.71(m,1 H),7,56-7.63(m,1 H),7.13(s,1 H),6.61(s,1 H),6.05(s,1 H),5.13(m,1 H),4.84(m,1 H),4.38-4.51(m,3 H),3.81-4.07(m,2 H),3.55-3.68(m,2 H),3.03(m,1 H),2.68(m,1 H),2.37(m,2 H),1.19(d,J=6.8Hz,3 H)。
化合物074：(R)-N-(3-溴-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物072之方式，在步驟3中使用苯基(3-溴-4-氟苯基)胺甲酸酯來製備。LCMS[M+1]：500/502。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.69-7.74(m,1 H),7.27-7.30(m,1 H),7.04(br d,J=2.4Hz,1 H),6.46-6.58(m,1 H),5.86-6.24(m,1 H),5.05-5.18(m,1 H),4.82(m,1 H),4.35-4.52(m,3 H),3.77- 4.08(m,2 H),3.59-3.61(m,2 H),2.93-3.09(m,1 H),2.69(s,1 H),2.36(m,2 H),1.18(dd,J=2.2,6.8Hz,3 H)。
化合物075：(R)-N-(2-溴-3-氟吡啶-4-基)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物072之方式，在步驟3中使用苯基(2-溴-3-氟吡啶-4-基)胺甲酸酯來製備。LCMS[M+1]：501。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.14-8.18(m,1 H),8.06(d,J=5.5Hz,1 H),6.96-7.07(m,1 H),5.87-6.23(m,1 H),5.00-5.10(m,1 H),4.85-4.96(m,1 H),4.35-4.56(m,3 H),3.77-4.09(m,2 H),3.58-3.63(m,2 H),2.99-3.10(m,1 H),2.66-2.77(m,1 H),2.31-2.44(m,2 H),1.23(d,J=6.9Hz,3 H)。
化合物076：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物072之方式，在步驟3中使用苯基(3-氰基-4-氟苯基)胺甲酸酯來製備。LCMS[M+1]：446。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.78(s,1 H),7.58-7.65(m,1 H),7.13(s,1 H),6.79-6.89(m,1 H),5.87-6.24(m,1 H),5.07-5.18(m,1 H),4.84-4.92(m,1 H),4.39-4.51(m,3 H),3.93(br s,2 H),3.57-3.68(m,2 H),2.96-3.08(m,1 H),2.66-2.77(m,1 H),2.32-2.44(m,2 H),1.19(d,J=6.9Hz,3 H)。
化合物077：(R)-10-(2,2-二氟乙基)-N-(4-氟-3-甲基苯基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物072之方式，在步驟3中使用苯基(4-氟-3-甲基苯基)胺甲酸酯來製備。LCMS[M+1]：435。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.24-7.27(m,1 H),7.08-7.16(m,1 H),6.88-6.97(m,1 H),6.46(s,1 H),6.05(s,1 H),5.12(s,1 H),4.83-4.89(m,1 H),4.35-4.50(m,3 H),3.80-4.05(m,2 H),3.52-3.69(m,2 H),2.98-3.07(m,1 H),2.62-2.70(m,1 H),2.36(s,2 H),2.25(d,J=1.5Hz,3 H),1.18(d,J=6.9Hz,3 H)。
化合物078：(R)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物072之方式，在步驟3中使用苯基(5-氯-2,4-二氟苯基)胺甲酸酯來製備。LCMS[M+1]：474。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=8.19(s,1 H),6.95(dd,J=8.5,10.6Hz,1 H),6.53-6.59(m,1 H),6.05(s,1 H),5.02-5.13(m,1 H),4.80-4.91(m,1 H),4.44(s,3 H),3.78-4.08(m,2 H),3.49-3.69(m,2 H),2.99-3.09(m,1 H),2.71(s,1 H),2.36(br s,2 H),1.21(d,J=6.8Hz,3 H)。
化合物079_D1：(3R,8R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-8-氟-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(3R)-8-氟-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(3R)-8-羥基-3,8,10-三甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物18，65.00mg，178.36μmol，1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，在-30℃下在N2下添加BAST(236.76mg,1.07mmol,234.42μL,6.00eq)，並將混合物在20℃下攪拌2小時。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示起始材料消耗殆盡，且形成二個新的主要斑點。將混合物用10mL稀釋並以DCM(15mL*3)萃取。將合併之有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。將二個批次之反應的合併殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=1：1)純化，以給出呈白色固體之標題化合物的二種非鏡像異構物D1：40.00mg，109.16μmol，30.60%產率；及D2：35.00mg，95.52μmol，26.78%產率。
步驟2：(3R)-8-氟-3,8,10-三甲基-1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮_D1。在三級丁基(3R)-8-氟-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D1(40.00mg,109.16μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在20℃下邊攪拌邊添加TFA(1.23g,10.80mmol,799.73μL,98.95eq)達1h。LC-MS顯示反應物起始材料消耗殆盡，且偵測到所欲產物。將混合物在真空中直接蒸發以提供呈黃色油狀物之標題化合物(45.00mg，粗製，TFA)。
另一種非鏡像異構物係藉由類似方法製備。
*純的但未知之非鏡像異構物D1。
步驟3：(3R,8R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-8-氟-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(3R)-8-氟-3,8,10-三甲基-1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮_D1(50.00mg,131.46μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(38.42mg,144.61μmol,1.10eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在20℃下添加TEA(106.42mg,1.05mmol,145.78μL,8.00eq)達16h。LC-MS顯示反應物消耗殆盡且偵測到所欲產物。將反應混合物在真空中濃縮。所得殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(33.00mg，75.36μmol，57.33%產率，100%純度)。
LCMS：438[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.58(dd,J=2.69,6.48Hz,1 H),7.14-7.22(m,1 H),7.00-7.10(m,1 H),6.52(s,1 H),5.10(m,1 H),4.78(d,J=15.65Hz,1 H),4.35-4.53(m,3 H),3.48(m,1 H),3.37-3.45(m,1 H),3.18-3.26(m,3 H),2.94-3.06(m,1 H),2.68(m,1 H),1.51-1.59(m,3 H),1.19(d,J=6.85Hz,3 H)。
079_D2係藉由類似方法製備。
化合物079_D2：(3R,8S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-8-氟-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4].二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物079 D1之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物D2。LCMS：438[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7).60(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.17-7.23(m,1 H),7.03-7.09(m,1 H),6.60(s,1 H),5.13(m,1 H),4.88(d,J=15.41Hz,1 H),4.34-4.54(m,3 H),3.47-3,58(m,1 H),3.35-3.46(m,1 H),3.22(s,3 H),3.03(m,1 H),2.66(m,1 H),1.55-1.62(m,3 H),1.18(d,J=6.85Hz,3 H)。
化合物080_D1：(3R,8S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-3,8,10-三甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺。
步驟1：(3R)-3,8,10-三甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(3R)-3,8,10-三甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物17，60.00mg，172.20μmol，1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在20℃下邊攪拌邊添加TFA(770.00mg,6.75mmol,500.00μL,39.22eq)達1h。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料消耗殆盡且形成一個主要斑點。將混合物濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(65.00mg，粗製，TFA)。
步驟2：(3R,8S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-3,8,10-三甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺；*純的但未知之非鏡像異構物D1。在(3R)-3,8,10-三甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(65.00mg,179.38μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(50.04mg,188.35μmol,1.05eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在20℃下添加TEA(145.22mg,1.44mmol,198.93μL,8.00eq)達16h。LCMS顯示反應物7消耗殆盡且偵測到所欲產物。將殘餘物直接蒸發。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，隨後進行SFC，以給出二種非鏡像異構物：呈白色固體之080_D1(15.50mg，36.92μmol，20.58%產率)及呈白色固體之080_D2(17.24mg，40.24μmol，22.43%產率，98%純度)。
SFC分離條件：儀器：SFC80；管柱：AD-10um；動相：A為CO2且B為EtOH(0.1%NH3H2O)；梯度：B 30%；流速：60mL/min；背壓：100bar；管柱溫度：35℃；波長：220nm。LCMS：420[M+1]。 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.61(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.17-7.23(m,1 H),7.02-7.08(m,1 H),6.61(s,1 H),5.14(m,1 H),4.81(d,J=15.28Hz,1 H),4.39-4.49(m,2 H),3.98-4.03(m,1 H),3.89-3.42(m,1 H),3.19(s,3 H),3.13-3.16(m,1 H),3.02-3.08(m,1 H),2.61-2.70(m,2 H),1.17(d,J=6.85Hz,3H),1.12(d,J=6.72Hz,3 H)。
化合物080_D2：(3R,8R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-3,8,10-三甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物080D1之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物D2。LCMS：420[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.61(dd,J=2.69,6.60Hz,1 H),7.16-7.23(m,1 H),7.01-7.08(m,1 H),6.59(s,1 H),5.14(m,1 H),4.81(d,J=15.41Hz,1 H),4.40-4.50(m,2 H),3.98(m,1 H),3.45-3.47(m,1 H),3.20(s,3 H),3.13-3.16(m,1 H),3.01-3.08(m,1 H),2.58-2.69(m,2 H),1.17(dd,J=6.91,12.78Hz,6 H)。
化合物081：(3R,8S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺。
步驟1：(3R,S*)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(3R)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物16，2.00g，4.72mmol，1.00eq)於MeOH(20.00mL)中之溶液 中，在25℃下邊攪拌邊添加HCl/MeOH(4M,10.00mL,8.47eq)達3h。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示反應物三級丁基(3R)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯消耗殆盡。將混合物在真空中濃縮。具有92%純度之殘餘物藉由SFC(分析條件：AD-3S_4_5_40_3ML；管柱：Chiralpak AD-3 100×4.6mmI.D.,3um；動相：異丙醇(0.05% DEA)於CO2中自5%至40%；流速：3mL/min，波長：220nm；分離條件：儀器：SFC 80；管柱：AD-5um，動相：A為CO2且B為IPA(0.1%NH3H2O)；梯度：B 25%；流速：55mL/min；背壓：100bar；管柱溫度：35；波長：220nm)解析，以給出呈白色固體之兩種非鏡像異構物：(3R,8S*)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(520mg)及(3R,8R*)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(670mg)。
步驟2：(3R,8S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H}羧醯胺。在(3R,8S*)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(40.00mg,151.33μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲酸酯(54.34mg,181.60μmol,1.20eq)及Et3N(76.57mg,756.65μmol,104.89μL,5.00eq)。將混合物在25℃下攪拌16h。將混合物在減壓下濃縮。所得殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色之固體(24.10mg，50.83μmol，33.59%產率，99%純度)。*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：470[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.70(m,1 H),7.55-7.64(m,1 H),7.12(t,J=9.35Hz,1 H),6.82(s,1 H),5.14-5.17(m,1 H),4.84-4.88(m,1 H),4.36-4.49(m,2 H),4.19-4.23(m,1 H),3.65-3.77(m,2 H),3.32-3.54(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.61-2.77(m,2 H),1.18(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物082、083、084、085、086、087、088、089、及090係以類似於化合物081之方式自對應非鏡像異構物製備。
化合物081_D2：(3R,8R*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-3,4,8,9,10,11-六氫-1H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2(7H)-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：470[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69-7.10(m,1 H),7.59-7.61(m,1 H),7.12(t,J=9.41Hz,1 H),6.77(s,1 H),5.15(t,J=6.53Hz,1 H),4.80-4.84(m,1 H),4.36-4.52(m,2 H),4.25-4.27(m,1 H),3.64-3.76(m,2 H),3.32-3.52(m,2 H),3.20(s,3 H),3.00-3.04(m,1 H),2.61-2.78(m,2 H),1.19(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物082_D1：(3R,8S*)-N-(2,4-二氟-5-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：488[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.38(t,J=7.97Hz,1 H),6.99(t,J=10.04Hz,1 H),6.66(br d,J=2.89Hz,1 H),5.10-5.30(m,1 H),4.84-4.88(m,1 H),4.39-4.52(m,2 H),4.16-4.20(m,1 H),3.67-3.77(m,2 H),3.33- 3.55(m,2 H),3.20(s,3 H),3.00-3.04(m,1 H),2.63-2.76(m,2 H),1.20(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物082_D2：(3R,8R*)-N-(2,4-二氟-5-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：488[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.38(t,J=8.03Hz,1 H),6.99(t,J=10.10Hz,1 H),6.63(s,1 H),5.08-5.12(m,1 H),4.81-4.85(m,1 H),4.52(d,J=15.56Hz,1 H),4.22-4.45(m,2 H),3.60-3.76(m,2 H),3.30-3.50(m,2 H),3.20(s,3 H),3.00-3.05(m,1 H),2.61-2.79(m,2 H),1.21(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物083_D1：(3R,8S*)-N-(2,4-二氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：488[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.17-8.23(m,1 H),6.98(t,J=9.16Hz,1 H),6.67(s,1 H),5.08-5.10(m,1 H),4.85-4.89(m,1 H),4.39-4.53(m,2 H),4.17-4.19(m,1 H),3.66-3.78(m,2 H),3.32-3.55(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,16.06Hz,1 H),2.63-2.76(m,2 H),1.20(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物083_D2：(3R,8R*)-N-(2,4-二氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：488[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.19-8.25(m,1 H),6.99(t,J=9.41Hz,1 H),6.61(s,1 H),5.06-5.09(m,1 H),4.83-4.86(m,1 H),4.49-4.51(m,1 H),4.22-4.44(m,2 H),3.62-3.74(m,2 H),3.31-3.50(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.64-2.77(m,2 H),1.21(d,J=6.85Hz,3 H)。
化合物084_D1：(3R,8S*)-N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：498/500[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.89-7.95(m,1 H),6.94(t,J=7.6Hz,1 H),6.58(s,1 H),5.08-5.10(m 1 H),4.85-4.88(m,1 H),4.38-4.53(m,2 H),4.14-4.18(m,1 H),3.66-3.79(m,2 H),3.32-3.56(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.61-2.76(m,2 H),1.20(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物084_D2：(3R,8R*)-N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：498/500[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.90-7.96(m,1 H),6.91-6.96(m,1 H),6.55(s,1 H),5.02-5.13(m,1 H),4.82-4.86(m,1 H),4.49-4.53(m,1 H),4.22-4.45(m,2 H),3.62-3.74(m,2 H),3.30-3.50(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.63-2.77(m,2 H),1.21(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物085_D1：(3R,8S*)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10- 二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：498/500[M+1]1H NMR(400MHz,CDC]3)δ 8.23-8.39(m,1 H),6.93(t,J=7.97Hz,1 H),6.57(s,1 H),5.09-5.11(m 1 H),4.82-4.86(m,1 H),4.37-4.52(m,2 H),4.17-4.19(m,1 H),3.64-3.80(m,2 H),3.33-3.54(m,2 H),3.20(s,3 H),2.98-3.02(m,1 H),2.63-2.77(m,2 H),1.20(d,J=6.78Hz,3 H)。
化合物085_D2：(3R,8R*)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：498/500[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25-8.37(m,1 H),6.91-6.95(m,1 H),6.55(s,1 H),5.09-5.11(m,1 H),4.79-4.83(m,1 H),4.48-4.52(m,1 H),4.20-4.44(m,2 H),3.63-3.73(m,2 H),3.29-3.51(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.62-2.77(m,2 H),1.20(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物086_D1：(3R,8S*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：480/482[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.73-7.75(m,1 H),7.24-7.27(m,1 H),6.95-7.09(m,1 H),6.65(s,1 H),5.06-5.20(m,1 H),4.83(d,J=15.18Hz,1 H),4.36-4.48(m,2 H),4.20-4.22(m,1 H),3.70-3.74(m,2 H),3.33-3.54(m,2 H),3.20(s,3 H),3.00-3.05(m,1 H),2.58-2.78(m,2 H),1.18(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物086_D2：(3R,8R*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：480/482[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.72-7.75(m,1 H),7.25-7.26(m,1 H),7.04(t,J=8.53Hz,1 H),6.61(s,1 H),5.13-5.15(m,1 H),4.78-4.81(m,1 H),4.37-4.51(m,2 H),4.24-4.27(m,1 H),3.62-3.75(m,2 H),3.30-3.50(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.04(m,1 H),2.59-2.79(m,2 H),1.18(d,J=6.78Hz,3 H)。
化合物087_D1：(3R,8S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：427[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.79-7.81(m,1 H),7.59-7.61(m,1 H),7.07-7.17(m,1 H),6.93(s,1 H),5.07-5.19(m,1 H),4.86(d,J=15.43Hz,1 H),4.36-4.49(m,2 H),4.19-4.24(m,1 H),3.66-3.80(m,2 H),3.30-3.55(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.58-2.76(m,2 H),1.18(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物087_D2：(3R,8R*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：427[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.78-7.80(m,1 H),7.59-7.62(m,1 H),7.13(t,J=8.68 Hz,1 H),6.88(s,1 H),5.13-5.15(m,1 H),4.80-4.85(m,1 H),4.37-4.53(m,2 H),4.22-4.25(m,1 H),3.62-3.76(m,2 H),3.31-3.53(m,2 H),3.20(s,3 H),3.00-3.03(m,1 H),2.62-2.76(m,2 H),1.19(d,J=6.97Hz,3 H)。
化合物088_D1：(3R,8S*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：445[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.23-8.29(m,1 H),7.01(t,J=7.97Hz,1 H),6.69(s,1 H),5.08(m,1 H),4.86-4.89(m,1 H),4.38-4.54(m,2 H),4.18-4.20(m,1 H),3.65-.78(m,2 H),3.33-3.55(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.06(m,1 H),2.62-2.78(m,2 H),1.21(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物088_D2：(3R,8R*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：445[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.24-8.30(m,1 H),6.99-7.27(m,1 H),6.63(s,1 H),5.07-5.09(m,1 H),4.82-4.86(m,1 H),4.50-4.54(m,1 H),4.20-4.45(m,2 H),3.64-3.75(m,2 H),3.31-3.52(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.61-2.76(m,2 H),1.21(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物089_D1：(3R,8S*)-N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：454/456[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.83-7.89(m,1 H),6.92-6.97(m,9.25Hz,1 H),6.58(s,1 H),5.08-5.10(m,1 H),4.85-4.89(m,1 H),4.39-4.54(m,2 H),4.17-4.19(m,1 H),3.64-3.78(m,2 H),3.33-3.56(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.61-2.76(m,2 H),1.20(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物089_D2：(3R,8R*)-N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：454/456[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.84-7.90(m,1 H),6.92-6.97(m,1 H),6.55(s,1 H),5.01-5.14(m,1 H),4.82-4.86(m,1 H),4.49-4.53(m,1 H),4.22-4.44(m,2 H),3.67-3.69(m,2 H),3.30-3.49(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.62-2.76(m,2 H),1.21(d,J=6.85Hz,3 H)。
化合物090_D1：(3R,8S*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：454/456[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.18(t,J=8.09Hz,1 H),6.92-6.97(m,1 H),6.58(s,1 H),5.08-5.10(m,1 H),4.83-4.87(m,1 H),4.38-4.54(m,2 H),4.17-4.19(m,1 H),3.65-3.79(m,2 H),3.32-3.57(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.04(m,1 H),2.61-2.74(m,2 H),1.20(d,J=6.78Hz,3 H)。
化合物090_D2：(3R,8R*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,10- 二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物081之方式製備，*純的但未知之非鏡像異構物。LCMS：454/456[M+1]1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.16-8.20(m,1 H),6.92-6.97(m,1 H),6.55(s,1 H),5.08-5.12m,1 H),4.80-4.84(m,1 H),4.48-4.52(m,1 H),4.22-4.43(m,2 H),3.60-3.75(m,2 H),3.30-3.50(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01-3.05(m,1 H),2.62-2.77(m,2 H),1.20(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物091：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(2,2-二氟乙基)-8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：2-三級丁基8-乙基8-(2,2-二氟乙基)-10-甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯。在2-三級丁基8-乙基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯(中間物14，400.00mg，1.02mmol，1.00eq)於THF(8.00mL)中之溶液中，在-65℃下在N2下添加LDA(1M,3.06mL,3.00eq)，隨後在0.5h後添加2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(1.09g,5.10mmol,5.00eq)，並將混合物在25℃下再攪拌5h。LCMS顯示約45%的所欲產物及多個尖 峰。將混合物與另一批次合併並用EtOAc(60mL)稀釋且用HCl(1M,60mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(185.00mg，405.28μmol，39.73%產率)。LCMS：457[M+1]。
步驟2：乙基8-(2,2-二氟乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯。在2-三級丁基8-乙基8-(2,2-二氟乙基)-10-甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯(215.00mg,471.00μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TFA(4.62g,40.52mmol,3.00mL,86.03eq)，並將混合物在25℃下在N2下攪拌1h。TLC顯示無起始材料，且偵測到一個新的主要斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(221.00mg，469.82μmol，99.75%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟3：乙基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-8-(2,2-二氟乙基)-10-甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯。將乙基8-(2,2-二氟乙基)-10-甲基-11-側氧基-1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(221.00mg,469.82μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(237.71mg,2.35mmol,325.63μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(137.30mg,516.80μmol,1.10eq)於DCM(10.00mL)中之混合物在25℃下攪拌16h。LCMS顯示起始材料消耗殆盡及主要的所欲產物。將混合物用DCM(40mL)稀釋並用HCl(1M,40mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(195.00mg，361.99μmol，77.05%產率，98%純度)。
LCMS：528[M+1]。
步驟4：N-(3-氯-4-氟苯基)-8-(2,2-二氟乙基)-8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在乙基2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯 基]-8-(2,2-二氟乙基)-10-甲基-11-側氧基-3,4,7,9-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(90.00mg,170.48μmol,1.00eq)於THF(5.00mL)中之溶液中，在0℃下添加LiBH4(11.14mg,511.44μmol,3.00eq)，並將混合物在25℃下攪拌2h。LCMS顯示起始材料已消耗且偵測到所欲產物。將混合物用H2O(30mL)淬熄並以EtOAc(30mL)萃取。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(50.00mg，101.87μmol，59.76%產率，99%純度)。LCMS：486[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58-7.61(m,1 H),7.21-7.28(m,1 H),7.05-7.09(t,J=8.8Hz,1 H),6.68(s,1 H),6.06-6.34(m,1 H),4.68-4.73(m,2 H),4.24-4.28(m,1 H),4.05-4.09(m,1 H),3.85-3.88(m,2 H),3.67-3.70(m,2 H),3.19-3.28(m,5 H),2.84-2.87(m,2 H),2.05-2.09(m,2 H)。
化合物092_D1：(3R,8R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-8-(羥基甲基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：乙基(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯。在2-三級丁基8-乙基(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基 -1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯(中間物20，130.00mg，284.79μmol，1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TFA(4.62g,40.52mmol,3.00mL,142.28eq)，並將混合物在25℃下在N2下攪拌1h。TLC顯示無起始材料，且偵測到一個新的主要斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(133.00mg，282.74μmol，99.28%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟2：乙基(16S)-12-氯-26-(2,2-二氟乙基)-11-氟-18,19-二側氧基-22,23,24,25,26-五氮雜五環二十二-1(11),2(12),9,13(22),14-戊烯-17-羧酸酯。將乙基(3R)-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(133.00mg,282.74μmol,1.00eq,TFA)、Et3N(143.05mg,1.41mmol,195.96μL,5.00eq)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(90.14mg,339.29μmol,1.20eq)於DCM(10.00mL)中之混合物在25℃下攪拌16h。TLC顯示起始材料消耗殆盡及主要的所欲產物。將混合物用DCM(40mL)稀釋並用HCl(1M,40mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由矽膠管柱純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(120.00mg，229.74μmol，81.26%產率，98%純度)。LCMS：528[M+1]。
步驟3：(3R,8R*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-8-(羥基甲基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺；*純的但未知之非鏡像異構物D1。在乙基(3R)-2-[(3-氯-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-(2,2-二氟乙基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸酯(30.00mg,56.83μmol,1.00eq)於THF(2.00mL)中之溶液中，在0℃下添加LiBH4(3.71mg,170.48μmol,3.00eq)，並將混合物在25℃下攪拌2h。LCMS顯示無起始材料及主要的所欲產物。將混合物用H2O(20mL)淬熄並以EtOAc(30mL)萃取。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。將殘餘物與另一批次 (EW645-046)合併，藉由製備型TLC純化，以給出10mg產物，其藉由SFC(「AD-3S_3_5_40_3ML，管柱：Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D.,3um，動相：甲醇(0.05% DEA)於CO2中自5%至40%，流速：3mL/min，波長：220nm」)解析，隨後進行製備型HPLC(FA)，以提供各24mg的標題化合物。
LCMS：486/488[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.60(m,1 H),7.18-7.25(m,1 H),7.02-7.11(m,1 H),6.59(s,1 H),5.91-6.28(m,1 H),5.13(m,1 H),4.87(m,1 H),4.12-4.48(m,3 H),3.43-3.81(m,4 H),3.03(m,1 H),2.58-2.80(m,1 H),1.18(m,3 H)。
化合物092_D2：(3R,8S*)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-(2,2-二氟乙基)-8-(羥基甲基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物092_D1之方式藉由類似方法合成製備。*純的但未知之非鏡像異構物D2。LCMS：486/488[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.59(m,1 H),7.17-7.25(m,1 H),7.04-7.12(m,1 H),6.51(s,1 H),5.90-6.29(m,1 H),5.10(s,1 H),4.79(m,1 H),4.19-4.54(m,4 H),3.42-3.76(m,5 H),2.99-3.09(m,1 H),2.71(s,2 H),1.21(m,3 H)。
化合物93：8-(胺基甲基)-N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：8-(羥基甲基-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(化合物064，步驟1之產物，200.00mg，570.76μmol，1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，在0℃下添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,47.33eq)。將混合物在25℃下攪拌1h。LCMS顯示反應物消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物在減壓下濃縮以提供呈黃色油狀物之標題化合物(207.00mg，568.18μmol，99.55%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟2：N-[4-氟-3-(三氟甲基)-苯基]-4-(羥基甲基)-2-甲基-1-側氧基-5,8,9,11-四氫-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]二氮呯-10-羧醯胺。在4-(羥基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]二氮呯-1-酮(100.00mg,273.01μmol,1.00eq,TFA)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲酸酯(98.03mg,327.61μmol,1.20eq)及Et3N(138.13mg,1.37mmol,189.22μL,5.00eq)。將混合物在25℃下攪拌16h。LCMS顯示反應物消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物用乙酸乙酯(30mL)稀釋，並以鹽水(30mL*3)萃取。將合併之有機層以Na2SO4 乾燥，過濾並在減壓下濃縮，其藉由製備型TLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(120.00mg，259.74μmol，95.14%產率，99%純度)。
步驟3：[2-[[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]甲基甲烷磺酸鹽。在N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(120.00mg,263.50μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，在0℃下添加TEA(133.32mg,1.32mmol,182.63μL,5.00eq)及MsCl(90.55mg,790.50μmol,61.18μL,3.00eq)。將混合物在25℃下攪拌2hr。TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(20mL)中，並以乙酸乙酯(20mL*2)萃取。將有機層用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥並在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(140.00mg，262.42μmol，99.59%產率)。
步驟4：8-(疊氮甲基)-N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在[2-[[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]甲基甲烷磺酸鹽(140.00mg,262.42μmol,1.00eq)於DMF(3.00mL)中之溶液中，在0℃下添加NaN3(68.24mg,1.05mmol,4.00eq)。將混合物在50℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將反應混合物添加水(20mL)淬熄，接著以乙酸乙酯(20mL * 3)萃取。將合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(120.00mg，249.78μmol，95.18%產率)。
步驟5：8-(胺甲基)-N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺及N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-8-(甲基胺基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯 胺：在8-(疊氮甲基)-N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(120.00mg,249.78μmol,1.00eq)於MeOH(5.00mL)中之溶液中，添加Pd/C(20.00mg，10%純度)。將混合物在H2(15Psi)下在25℃下攪拌3hr。TLC顯示反應物已消耗，LCMS顯示32%的化合物093及39%的化合物094(N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-8-(甲基胺基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺)。將混合物過濾並將濾液在真空中濃縮，其藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之化合物93：8-(胺甲基)-N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(20.00mg，41.81μmol，16.74%產率，95%純度)及呈白色固體之化合物94：N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-8-(甲基胺基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(9.00mg，18.25μmol，7.31%產率，95%純度)。LCMS：455[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69(dd,J=2.63,6.05Hz,1 H),7.56-7.63(m,1 H),7.12(t,J=9.41Hz,1 H),6.86(s,1 H),4.62-4.78(m,2 H),4.40-4.44(m,1 H),4.21-4.38(m,1 H),3.78-3.96(m,2 H),3.32-3.55(m,2 H),3.19(s,3 H),2.71-2.88(m,4 H),2.38-2.59(m,1 H)。
化合物94：N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-8-(甲基胺基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
LCMS：469[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69(dd,J=2.70,6.09Hz,1 H),7.56-7.64(m,1 H),7.11(t,J=9.35Hz,1 H),6.98(s,1 H),4.57-4.75(m,2 H),4.40-4.42(m,1 H),4.13-4.15(m,1 H),3.78-3.95(m,2 H),3.30-3.53(m,2 H),3.17(s,3 H),2.84(t,J=5.77Hz,2 H),2.53-2.75(m,3 H),2.46(s,3 H)。
化合物095：8-(胺基甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：N-(3-氰基-4-氟-苯基)-4-(羥基甲基)-2-甲基-1-側氧基-5,8,9,11-四氫-4H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]二氮呯- 10-羧醯胺。在4-(羥基甲基)-2-甲基-4,5,8,9,10,11-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-d][1,2,5]二氮呯-1-酮(化合物093，步驟1之產物，100.00mg，273.01μmol，1.00eq，TFA)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(83.94mg,327.61μmol,1.20eq)及Et3N(138.13mg,1.37mmol,189.22μL,5.00eq)。將混合物在25℃下攪拌16h。LCMS顯示反應物消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物用乙酸乙酯(30mL)稀釋，並以鹽水(30mL*3)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以給出殘餘物，其藉由製備型TLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(80.00mg，189.19μmol，69.30%產率，98%純度)。
步驟2：[2-[(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]甲基甲烷磺酸鹽。在N-(3-氰基-4-氟-苯基)-8-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(80.00mg,193.98μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TEA(98.14mg,969.90μmol,134.44μL,5.00eq)及MsCl(66.66mg,581.94μmol,45.04μL,3.00eq)。將混合物在20℃下攪拌4hr。TLC顯示反應物已消耗且偵測到一個新的斑點。將混合物倒入水(10mL)中，以乙酸乙酯(10mL*3)萃取，將有機層用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(95.00mg，193.68μmol，99.84%產率)。
步驟3：8-(疊氮甲基)-N-(3-氰基-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在[2-[(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基]甲基甲烷磺酸鹽(100.00mg,203.87μmol,1.00eq)於DMF(3.00mL)中之溶液中，在0℃下添加NaN3(53.01mg,815.48μmol,4.00eq)。將混合物在50℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應已完成。將反應混合物添加水(20mL)淬熄，並以乙酸乙酯(20mL * 3)萃取。將合併之有機層用鹽水 (20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(80.00mg，182.89μmol，89.71%產率)。
步驟4：8-(胺甲基)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-(疊氮甲基)-N-(3-氰基-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(80.00mg,182.89μmol,1.00eq)於EtOH(5.00mL)及H2O(500.00uL)中之混合物中，添加Zn(47.84mg,731.56μmol,4.00eq)及NH4Cl(58.70mg,1.10mmol,38.37μL,6.00eq)。將混合物在25℃下攪拌16hr。LCMS顯示反應物已消耗並偵測到所欲產物。將混合物過濾並將濾液藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色之固體(30.00mg，69.27μmol，37.88%產率，95%純度)。LCMS：412[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.78(dd,J=2.75,5.44Hz,1 H),7.60(ddd,J=2.87,4.52,9.11Hz,1 H),7.13(t,J=8.74Hz,1 H),6.93(s,1H),4.58-4.75(m,2 H),4.40-4.42(m,1 H),4.18-4.20(m,1 H),3.87(t,J=5.87Hz,2 H),3.31-3.53(m,2 H),3.13-3.26(m,3 H),2.72-2.89(m,4 H),2.39-2.57(m,1 H)。
化合物096_E1：(R*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：2-三級丁氧基羰基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸。在2-三級丁基8-乙基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯(中間物14，4.80g，12.23mmol，1.00eq)於MeOH(20.00mL)及H2O(4.00mL)中之混合物中，一次性添加NaOH(978.47mg,24.46mmol,2.00eq)。將混合物在30℃下攪拌5小時。LCMS及TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮以移除MeOH。將殘餘物倒入水(10mL)中並攪拌1min。將水相以DCM(30mL*2)萃取。將水相用1N HCl調整至pH=3，並以乙酸乙酯(30mL*2)萃取，將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(4.40g，12.07mmol，98.73%產率，100%純度)。LCMS[M+1]：365。
步驟2：三級丁基8-[甲氧基(甲基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在2-三級丁氧基羰基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-羧酸(500.00mg,1.37mmol,1.00eq)及N-甲氧基甲胺鹽酸鹽(534.52mg,5.48mmol,4.00eq)於THF(10.00mL)中之混合物中，在N2下一次性添加T3P(1.74g，2.74mmol，1.63mL，50%純度，2.00eq)及TEA(2.08g,20.55mmol,2.85mL,15.00eq)。將混合物在30℃下攪拌12小時。LCMS及TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(15mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(二氯甲烷：甲醇=50：1至20：1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(510.00mg，1.24mmol，90.45%產率，99%純度)。LCMS[M+1]：408。
步驟3：三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-丙-2-烯醯基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在乙烯基溴化鎂(1M,4.91mL,5.00eq)於THF(4.00mL)中之混合物中，在-30℃下在N2下逐滴添加含三級丁基8-[甲氧基(甲基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(400.00mg,981.69μmol,1.00eq)之THF(2.00mL)。將混合物加熱至0℃並攪拌1小時。LCMS及TLC(乙酸乙酯)顯示反應已完成，且偵測到所欲產物。將混合物倒入1N HCl(30mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物(288.00mg，769.17μmol，78.35%產率)。LCMS[M+1]：375。
步驟4：三級丁基8-(1-羥基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E1-E4。在三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-丙-2-烯醯基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(3.70g,9.88mmol,1.00eq)於MeOH(100.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加CeCl3(4.87g,19.76mmol,1.24mL,2.00eq)。將混合物在0℃下攪拌15min，接著將NaBH4(1.50g,39.52mmol,4.00eq)添加至混合物。將混合物加熱至30℃並攪拌2小時。LCMS及TLC(二氯甲烷：甲醇=10：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(20mL)中並在減壓下濃縮。以乙酸乙酯(50mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(20mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(二氯甲烷：甲醇=100/1至20：1)純化，以提供呈黃色固體之外消旋標題化合物(2.70g，6.74mmol，68.24%產率，94%純度)，其藉由SFC(分析方法：IC-3S_3_5_40_3ML，管柱：Chiralpak IC-3 100×4.6mm I.D.,3um，動相：甲醇(0.05% DEA)於CO2中自5%至40%，流速：3mL/min，波長：220nm，分離方法：儀器：SFC 80；管柱：IC-10um；動相：A為CO2且B為MeOH(0.1% NH3H2O)；梯度：B 35%；流速：60mL/min；背壓：100bar；管柱溫度：35℃；波長：220nm)分離，以給出四種異構物：E1：650mg，E2：640mg，E3：650mg及E4：650mg。
步驟5：三級丁基8-(1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E1。在三級丁基8-(1-羥基烯丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(550.00mg,1.46mmol,1.00eq)於MeOH(20.00mL)中之溶液中，在N2下添加Pd/C(100.00mg)。將懸浮液在真空下除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(15psi)下在30℃下攪拌5小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡。將反應混合物過濾並將濾液濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物(520.00mg，1.37mmol，94.11%產率)。LCMS[M+1]：379。
步驟6：8-(1-羥基丙基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮_E1。在三級丁基8-(1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(200.00mg,528.46μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之混合物中，在30℃下在N2下一次性添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,51.12eq)。將混合物在30℃下攪拌2小時。LCMS顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(207.00mg，527.56μmol，99.83%產率，TFA)。
步驟7：(R*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺*純的但未知之非鏡像異構物E1。在8-(1-羥基丙基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(50.00mg,127.43μmol,1.00eq,TFA)與苯基N-(5-氯-2,4-二氟-苯基)胺甲酸酯(46.99mg,165.66μmol,1.30eq)於DCM(6.00mL)中之混合物中，在N2下添加TEA(128.95mg,1.27mmol,176.64μL,10.00eq)。將混合物在25℃下攪拌10小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(10mL)中。以乙酸乙酯(10 mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(40.00mg，84.89μmol，66.62%產率，99.3%純度)。LCMS[M+1]：468 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.17(t,J=8.03Hz,1H),6.94(dd,J=8.47,10.60Hz,1H),6.59(d,J=2.89Hz,1H),4.70(s,2H),4.40-4.42(m,1H),4.13-4.16(m,1H),3.82-3.89(m,2H),3.64-3.66(m,2H),3.46-3.48(m,1H),3.19(s,3H),2.85(t,J=5.77Hz,2H),2.46-2.47(m,1H),1.70-1.77(m,1H),1.44-1.55(m,2H),1.04(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物096、097、098、099、100、101、102、103、104、及105係自對應之鏡像異構物經由類似方法分開製備。
化合物096_E2：(S*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-((R*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS[M+1]：468 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.18(t,J=8.03Hz,1H),6.96(dd,J=8.47,10.60Hz,1H),6.61(s,1H),4.71(s,2H),4.40-4.42(m,1H),4.14-4.16(m,1H),3.83-3.91(m,2H),3.62-3.69(m,2H),3.47-3.48(m,1H),3.20(s,3H),2.86(t,J=5.71Hz,2H),2.47-2.49(m,1H),1.71-1.79(m,1H),1.45-1.56(m,2H),1.05(t,J=7.34Hz,3H)。
化合物096_E3：(S*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10- 甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E3。
LCMS[M+1]：468 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.18(t,J=8.07Hz,1H),6.96(dd,J=8.50,10.45Hz,1H),6.63(br d,J=2.69Hz,1H),4.59-4.77(m,3H),4.32(m,1H),3.79-3.95(m,2H),3.49-3.56(m,1H),3.36-3.37(m,2H),3.20(s,3H),2.87(t,J=5.81Hz,2H),2.46-2.54(m,1H),1.90-2.20(m,1H),1.44-1.54(m,2H),1.03(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物096_E4：(R*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-((R*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E4。
LCMS[M+1]：468 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.18(t,J=8.07Hz,1H),6.96(dd,J=8.50,10.58Hz,1H),6.63(s,1H),4.59-4.77(m,3H),4.32(m,1H),3.79-3.95(m,2H),3.50-3.56(m,1H),3.36(m,2H),3.20(s,3H),2.87(t,J=5.81Hz,2H),2.46-2.54(m,1H),2.03(s,1H),1.75(br s,1H),1.66(m,19H),1.42-1.55(m,2H),1.03(t,J=7.34Hz,3H)。
化合物097_E1：(R*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS[M+1]：441。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.80(dd,J=2.76,5.52Hz,1H),7.60-7.63(m,1H),7.14(t,J=8.72Hz,1H),6.99-7.04(m,1H),4.64-4.75(m,2H),4.43(m,1H),4.15(m,1H),3.81-3.95(m,2H),3.66(m,2H),3.48(m,1H),3.21(s,3H),2.85(t, J=5.71Hz,2H),2.45-2.53(m,1H),1.79(m,1H),1.44-1.59(m,2H),1.05(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物097_E2：(S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((R*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS[M+1]：441。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.80(dd,J=2.76,5.40Hz,1H),7.60-7.63(m,1H),7.14(t,J=8.72Hz,1H),6.99(br s,1H),4.64-4.75(m,2H),4.43(dd,J=7.28,14.18Hz,1H),4.15(m,1H),3.81-3.95(m,2H),3.66(m,2H),3.48(m,14.87Hz,1H),3.21(s,3H),2.85(t,J=5.83Hz,2H),2.49(m,1H),1.79(br s,1H),1.60-1.71(m,18H),1.52(m,2H),1.05(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物097_E3：(S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E3。
LCMS[M+1]：441。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.79(dd,J=2.69,5.38Hz,1H),7.60-7.63(m,1H),7.14(t,J=8.68Hz,1H),7.04(s,1H),4.70-4.79(m,1H),4.59-4.69(m,2H),4.33(m,1H),3.81-3.95(m,2H),3.50-3.58(m,1H),3.38(m,2H),3.20(s,3H),2.85(t,J=5.81Hz,2H),2.51(m,1H),1.97-2.18(m,1H),1.46-1.57(m,1H),1.45-1.56(m,1H),1.04(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物097_E4：(R*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((R*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。*純的但未知之非鏡像異構物E4。
LCMS[M+1]：441。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.79(dd,J=2.75,5.44Hz,1H),7.61-7.63(m,1H),7.05-7.17(m,2H),4.71-4.79(m,1H),4.58-4.67(m,2H),4.33(m,1H),3.81-3.95(m,2H),3.51-3.57(m,1H),3.38(d,J=7.46Hz,2H),3.20(s,3H),2.85(t,J=5.81Hz,2H),2.47-2.55(m,1H),2.03(s,1H),1.62-1.74(m,1H),1.45-1.58(m,2H),1.04(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物098_E1：(R*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS[M+1]：459。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dt,J=5.84,9.13Hz,1H),7.01(ddd,J=1.76,7.97,9.47Hz,1H),6.73(d,J=2.26Hz,1H),4.72(d,J=3.51Hz,2H),4.41(m,1H),4.14(m,1H),3.78-3.95(m,2H),3.59-3.71(m,2H),3.46(m,1H),3.19(s,3H),2.85(t,J=5.71Hz,2H),2.40-2.54(m,1H),1.43-1.59(m,2H),1.03(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物098_E2：(S*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-8-((R*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS[M+1]：459 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dt,J=5.90,9.10Hz,1H),7.01(ddd,J=1.69,7.94,9.44Hz,1H),6.73(d,J=2.01Hz,1H),4.72(d,J=3.64Hz,2H),4.41(m,1H),4.14(m,1H),3.86(m,2H),3.57-3.71(m,2H),3.46(m,1H),3.19(s,3H),2.85(t,J=5.71Hz,2H),2.37-2.57(m,1H),1.51(dt,J=7.40,14.93Hz,2H),1.04(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物098_E3：(S*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E3。
LCMS[M+1]：459。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.26(dt,J=5.83,9.13Hz,1H),7.01(ddd,J=1.76,7.97,9.47Hz,1H),6.72(d,J=2.26Hz,1H),4.53-4.85(m,3H),4.31(m,1H),3.77-3.95(m,2H),3.52(m,1H),3.36(m,2H),3.19(s,3H),2.86(t,J=5.77Hz,2H),2.42-2.56(m,1H),1.44-1.58(m,2H),1.02(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物098_E4：(R*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-8-((R*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E4。
LCMS[M+1]：459。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.18-8.35(m,1H),7.02(ddd,J=1.76,8.03,9.54Hz,1H),6.65-6.80(m,1H),4.54-4.83(m,3H),4.20-4.37(m,1H),3.75-3.96(m,2H),3.47-3.59(m,1H),3.36(m,2H),3.19(s,3H),2.86(s,2H),2.41-2.58(m,1H),1.42-1.56(m,2H),1.02(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物099_E1：(R*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS[M+1]：484。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69(dd,J=2.63,6.05Hz,1H),7.59(td,J=3.38,9.02Hz,1H),7.12(t,J=9.35Hz,1H),6.87(s,1H),4.60-4.77(m,2H),4.41(m,1H),4.13(m,1H),3.78-3.96(m,2H),3.64(m,2H),3.47(m,1H),3.19(s,3H), 2.84(t,J=5.93Hz,2H),2.40-2.53(m,1H),1.72-1.82(m,1H),1.46-1.57(m,2H),1.04(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物099_E2：(S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((R*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS[M+1]：484。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69(dd,J=2.75,6.17Hz,1H),7.56-7.63(m,1H),7.12(t,J=9.35Hz,1H),6.87(s,1H),4.61-4.78(m,2H),4.41(m,1H),4.13(m,1H),3.79-3.96(m,2H),3.59-3.71(m,2H),3.47(m,1H),3.19(s,3H),2.84(t,J=5.93Hz,2H),2.38-2.54(m,1H),1.74(br dd,J=3.24,7.27Hz,1H),1.71-1.81(m,1H),1.51(dt,J=7.64,14.95Hz,2H),1.04(t,J=7.34Hz,3H)。
化合物099_E3：(S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E3。
LCMS[M+1]：484。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69(dd,J=2.57,5.87Hz,1H),7.55-7.62(m,1H),7.12(t,J=9.41Hz,1H),6.86(s,1H),4.55-4.80(m,3H),4.31(m,14.37Hz,1H),3.82-3.93(m,2H),3.48-3.57(m,1H),3.36(m,2H),3.19(s,3H),2.84(t,J=5,75Hz,2H),2.39-2.54(m,1H),1.95-2.10(m,1H),1.45-1.55(m,2H),1.02(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物099_E4：(R*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((R*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E4。
LCMS[M+1]：484。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.66-7.72(m,1H),7.55-7.63(m,1H),7.12(s,1H),6.86(s,1H),4.55-4.79(m,3H),4.24-4.37(m,1H),3.87(s,2H),3.47-3.59(m,1H),3.36(d,J=7.46Hz,2H),3.19(s,3H),2.80-2.89(m,2H),2.44-2.55(m,1H),1.99-2.13(m,1H),1.44-1.55(m,2H),1.02(t,J=7.40Hz,3H)。
化合物100_E1：(R*)-N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS[M+1]：468 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.86(dt,J=5.56,8.89Hz,1 H),6.90-7.00(m,1 H),6.60(br s,1 H),4.71(d,J=1.34Hz,2 H),4.41(m,1 H),4.13(m,1 H),3.80-3.92(m,2 H),3.56-3.70(m,2 H),3.46(m,1 H),3.19(s,3 H),2.85(t,J=5.62Hz,2H),2.40-2.52(m,1 H),1.44-1.57(m,2 H),1.04(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物101_E1：(R*)-N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS[M+1]：512。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.92(dt,J=5.62,8.93Hz,1 H),6.93(dt,J=2.08,8.62Hz,1 H),6.61(br s,1 H),4.67-4.76(m,2 H),4.41(m,1 H),4.13(m,1 H),3.80-3.89(m,1 H),3.58-3.70(m,2 H),3.46(m,1 H),3.19(s,3 H),2.85(t,J=5.81Hz,2 H),2.46(m,1H),1.44-1.57(m,2 H),1.03(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物102_E1：(R*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS[M+1]：494。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.72(dd,J=2.69,6.11Hz,1 H),7.24-7.27(m,1 H),7.03(t,J=8.56Hz,1 H),6.68(s,1 H),4.60-4.73(m,2 H),4.41(m,1 H),4.13(m,1 H),3.76-3.93(m,2 H),3.64(m,2 H),3.46(m,1 H),3.19(s,3 H),2.83(t,J=5.75Hz,2 H),2.41-2.52(m,1 H),1.76(m,1 H),1.43-1.57(m,2 H),1.04(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物103_E1：(R*)-N-(2,4-二氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS[M+1]：502。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.13-8.28(m,1 H),6.90-7.10(m,1 H),6.69(br s,1 H),4.63-4.80(m,2 H),4.05-4.47(m,2 H),3.86(m,2 H),3.64(m,2 H),3.39-3.50(m,1 H),3.19(s,3 H),2.85(br t,J=5.50Hz,2 H),2.40-2.52(m,1 H),1.44-1.55(m,2H),1.04(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物104_E1：(R*)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-N-(3,4,5-三氟苯基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS[M+1]：452。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.14(dd,J=6.09,9.60Hz,2 H),6.74-6.86(m,1 H),4.58-4.73(m,2H),4.41(m,1 H),4.13(m,1 H),3.76-3.93(m,2 H),3.64(m,2 H),3.46 (m,1 H),3.19(s,3 H),2.83(br t,J=5.65Hz,2 H),2.40-2.53(m,1 H),1.41-1.57(m,2 H),1.04(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物105_E1：(R*)-8-((S*)-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-N-(2,3,4,5-四氟苯基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS[M+1]：470。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.82(m,1 H),6.71(br s,1 H),4.70(d,J=2.57Hz,2 H),4.41(m,1 H),4.13(m,1 H),3.78-3.92(m,2 H),3.60-3.67(m,2 H),3.46(m,1 H),3.19(s,3 H),2.85(t,J=5.75Hz,2 H),2.40-2.52(m,1 H),1.42-1.57(m,2 H),1.03(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物106：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(1-羥基丁基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-丁醯基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在丙基溴化鎂(2M,490.85μL,2.00eq)於THF(3.00mL)中之混合物中，在-10℃下在N2下逐滴添加含三級丁基8-[甲氧基(甲基)胺甲醯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯- 2-羧酸酯(化合物096，步驟2之產物，200.00mg，490.85μmol，1.00eq)之THF(3.00mL)。將混合物加熱至0℃並攪拌1小時。LCMS顯示起始材料/所欲產物=1：2，接著在0℃下添加溴(丙基)鎂(2M,1.23mL,5.00eq)並攪拌1小時。TLC(乙酸乙酯)顯示反應已完成，且主要偵測到所欲產物。將混合物倒入1N HCl(50mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈黃色固體之標題化合物(170.00mg，217.68μmol，44.35%產率，50%純度)。LCMS[M+1]：391。
步驟2：三級丁基8-(1-羥基丁基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-丁醯基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(170.00mg,435.36μmol,1.00eq)於MeOH(5.00mL)中之混合物中，在-10℃下在N2下一次性添加NaBH4(32.94mg,870.72μmol,2.00eq)。將混合物在-10℃下攪拌30min，接著加熱至25℃並攪拌1小時。LCMS及TLC(石油醚：乙酸乙酯=0：1)顯示反應已完成。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(乙酸乙酯)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(75.00mg，185.36μmol，42.58%產率，97%純度)。
LCMS[M+1]：393。
步驟3：8-(1-羥基丁基)-10-甲基2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(1-羥基丁基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(75.00mg,191.09μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之混合物中，在30℃下在N2下一次性添加TFA(1.54g,13.51mmol,1.00mL,70.68eq)。將混合物在30℃下攪拌2小時。TLC(乙 酸乙酯)顯示反應已完成。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(77.66mg，191.09μmol，100.00%產率，TFA)。
步驟4：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(1-羥基丁基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-(1-羥基丁基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(77.66mg,191.09μmol,1.00eq,TFA)與苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(50.77mg,191.09μmol,1.00eq)於DCM(6.00mL)中之混合物中，在N2下添加TEA(193.37mg,1.91mmol,264.89μL,10.00eq)。將混合物在25℃下攪拌10小時。LCMS顯示反應已完成。將殘餘物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(49.00mg，105.62μmol，55.27%產率)。
LCMS[M+1]：464。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.60(dd,J=2.32,6.36Hz,1H),7.22(m,1H),7.01-7.11(m,1H),6.73(m,1H),4.54-4.78(m,3H),4.27-4.48(m,1H),4.26-4.50(m,1H),4.09-4.22(m,1H),3.81-3.95(m,2H),3.58-3.79(m,2H),3.43-3.51(m,1H),3.35-3.42(m,1H),3.20(s,3H),2.85(br t,J=5.01Hz,2H),2.41-2.53(m,1H),1.40-1.55(m,4H),0.99(q,J=7.05Hz,3H)。
化合物107_D1：(3R,8S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((R)-1-羥基丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物D1。
在(3R,8S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((R)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(化合物122_D1，45.00mg，90.82μmol，1.00eq)於MeOH(5.00mL)中之溶液中，在N2下 添加Pd/C(5.00mg，10%純度)，將懸浮液在真空下除氣並以H2吹掃三次，將混合物在H2(15psi)下在20℃下攪拌30分鐘。LCMS顯示偵測到一個具有所欲MS的主要尖峰。將反應混合物過濾，然後將濾液濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(44.00mg，86.68μmol，95.44%產率，98%純度)。LCMS(M+1)：498。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.69(dd,J=2.75,6.05Hz,1 H),7.55-7.62(m,1 H),7.13(t,J=9.41Hz,1 H),6.64(s,1 H),5.15(m,1 H),4.80(m,1 H),4.39-4.54(m,2 H),4.12(m,1 H),3.62-3.71(m,2 H),3.48(m,1 H),3.20(s,3 H),3.01(m,1 H),2.67(m,1 H),2.41-2.52(m,1 H),1.45-1.57(m,2 H),1.19(d,J=6.97Hz,3 H),1.05(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物107至109_D1及D2係以類似於化合物107之方式製備。
化合物107_D2：(3R,8R*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((R)-1-羥基丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物107_D1之方式，使用化合物122_D2來製備。
*純的但未知之非鏡像異構物D2。
LCMS(M+1)：498。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.70(dd,J=2.75,6.17Hz,1 H),7.55-7.62(m,1 H),7.13(t,J=9.35Hz,1 H),6.66(s,1 H),5.16(br t,J=6.36Hz,1 H),4.84(m,1 H),4.39-4.49(m,2 H),4.16(m,1 H),3.65(m,2 H),3.48(m,1 H),3.20(s,3 H),3.03(m,1 H),2.65(m,1 H),2.45-2.55(m,1 H),1.44-1.56(m,2 H),1.18(d,J=6.85Hz,3 H),1.04(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物108_D1：(3R,8S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((R)-1-羥基丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物107_D1之方式，使用化合物123_D1來製備。*純的但未知之非鏡像異構物D1。
LCMS(M+1)：455。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.79(dd,J=2.81,5.38Hz,1 H),7.59(m,1 H),7.13(t,J=8.74Hz,1 H),6.80(s,1 H),5.14(m,1 H),4.80(m,1 H),4.39-4.52(m,2 H),4.13(m,1 H),3.61-3.70(m,2 H),3.48(m,1 H),3.20(s,3 H),3.01(dd,J=5.81,15.83Hz,1 H),2.67(m,1 H),2.43-2.53(m,1 H),1.44-1.60(m,2 H),1.19(d,J=6.97Hz,3 H),1.04(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物108_D2：(3R,8R*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((R)-1-羥基丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡 唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物107_D1之方式，使用化合物123_D2來製備。*純的但未知之非鏡像異構物D2。
LCMS(M+1)：455。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.80(dd,J=2.81,5.50Hz,1 H),7.59(m,1 H),7.13(t,J=8.74Hz,1 H),6.82(s,1 H),5.09-5.20(m,1 H),4.84(m,1 H),4.39-4.48(m,2 H),4.15(m,1 H),3.65(m,2 H),3.48(m,1 H),3.20(s,3 H),3.02(m,1 H),2.65(m,1 H),2.45-2.55(m,1 H),1.43-1.60(m,2 H),1.18(d,J=6.85Hz,3 H),1.04(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物109_D1：(3R,8S*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-8-((R)-1-羥基丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物107_D1之方式，使用化合物124_D1來製備。*純的但未知之非鏡像異構物D1。
LCMS(M+1)：508/510。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.74(dd,J=2.70,6.09Hz,1 H),7.22-7.27(m,1 H),7.00-7.07(m,1 H),6.55(s,1 H),5.08-5.19(m,1 H),4.78(m,1 H),4.39-4.51(m,2 H),4.11(m,1 H),3.61-3.71(m,2 H),3.48(m,1 H),3.20(s,3 H),3.01(m,1 H),2.66(m,1 H),2.41-2.52(m,1 H),1.42-1.57(m,2 H),1.18(d,J=6.90Hz,3 H),1.05(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物109_D2：(3R,8R*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-8-((R)-1-羥基丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物107_D1之方式，使用化合物124_D2來製備。*純的但未知之非鏡像異構物D2。
LCMS(M+1)：508/510。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.75(dd,J=2.70,6.09Hz,1 H),7.25(m,1 H),7.04(t,J=8.53Hz, 1 H),6.61(s,1 H),5.15(m,1 H),4.82(d,J=15.43Hz,1 H),4.38-4.48(m,2 H),4.15(m,1 H),3.64(m,2 H),3.47(m,1 H),3.19(s,3 H),3.02(m,1 H),2.64(m,1 H),2.45-2.55(m,1 H),1.44-1.59(m,2 H),1.17(d,J=6.90Hz,3 H),1.04(t,J=7.40Hz,3 H)。
化合物110：N-(3-氯-4-氟苯基)-11-甲基-12-側氧基-3,4,7,8,9,10,11,12-八氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二吖 -2(1H)-羧醯胺
步驟1：11-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4[二吖-12-酮。在三級丁基11-甲基-12-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二吖-2-羧酸酯(中間物23，61.00mg，182.41μmol，1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，添加TFA(308.00mg,2.70mmol,200.00μL,14.81eq)，接著將混合物在25℃下攪拌1h。TLC(PE：EtOAc=1：3)顯示化合物7消耗殆盡，且形成一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(65.00mg，粗製，TFA)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟2：N-(3-氯-4-氟苯基)-11-甲基-12-側氧基-3,4,7,8,9,10,11,12-八氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二吖-2(1H)-羧醯胺。在11-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4[二吖-12-酮(65.00mg,186.61μmol,1.00eq,TFA)及苯 基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(54.53mg,205.27μmol,1.10eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TEA(151.06mg,1.49mmol,206.94μL,8.00eq)，接著將混合物在25℃下攪拌16h。LCMS顯示11-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4[二吖-12-酮消耗殆盡，且偵測到所欲產物。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(33.32mg，81.61μmol，43.73%產率，99.4%純度)。LCMS：406[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.58(dd,J=2.69,6.60Hz,1 H),7.16-7.22(m,1 H),7.02-7.09(m,1 H),6.55(s,1 H),4.60(s,2 H),4.29(br s,2 H),3.85(t,J=5.75Hz,2 H),3.31(br d,J=8.80Hz,2 H),3.14(s,3 H),2.84(t,J=5.81Hz,2 H),1.97(br s,2 H),1.86(br s,2 H)。
化合物111：(Z)-N-(3-氯-4-氟苯基)-11-甲基-12-側氧基-3,4,7,10,11,12-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二吖 -2(1H)-羧醯胺。
步驟1：(8Z)-11-甲基-1,2,3,4,7,10-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二吖-12-酮。在三級丁基(8Z)-11-甲基-12-側氧基-3,4,7,10-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二吖-2-羧酸酯(中間物22，50.00mg，150.42μmol，1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TFA(329.99mg,2.89mmol,214.28μL,19.24eq)，接 著將混合物在25℃下攪拌1h。TLC(PE：EtOAc=1：3)顯示反應物6消耗殆盡，且形成一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮。獲得呈黃色油狀物之標題化合物(55.00mg，粗製，TFA)。
步驟2：(Z)-N-(3-氯-4-氟苯基)-11-甲基-12-側氧基-3,4,7,10,11,12-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二吖-2(1H)-羧醯胺。在(8Z)-11-甲基-1,2,3,4,7,10-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二吖-12-酮(55.00mg,158.82μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(46.41mg,174.70μmol,1.10eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TEA(128.57mg,1.27mmol,176.12μL,8.00eq)，接著將混合物在25℃下攪拌16h。LCMS顯示(8Z)-11-甲基-1,2,3,4,7,10-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二吖-12-酮消耗殆盡，且偵測到所欲產物。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(25.57mg，62.68μmol，39.47%產率，99%純度)。LCMS：404[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.57(dd,J=2.63,6.54Hz,1 H),7.16-7.21(m,1 H),7.03-7.09(m,1 H),6.54(s,1 H),5.91-6.05(m,2 H),4.89(d,J=3.79Hz,2 H),4.61(s,2 H),3.85(t,J=5.87Hz,2 H),3.80(br d,J=5.38Hz,2 H),3.12(s,3 H),2.85(t,J=5.81Hz,2 H)。
化合物112：N-(3-氰基-4-氟苯基)-7-(3,3-二氟-1-羥基丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物116之方式，在步驟5中使用苯基(3-氰基-4-氟苯基)胺甲酸酯來製備。LCMS：477[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.79(dd,J=2.7,5.4Hz,1 H),7.60(br d,J=9.8Hz,1 H),7.15(t,J=8.6Hz,1 H),6.79(brs,1 H),5.92-6.28(m,1 H),4.58-4.80(m,3 H),4.22-4.49(m,2 H),4.13(brs,1H),3.84-3.95(m,3 H),3.63(m,1 H),3.29-3.50(m,2 H),3.21(d,J=2.6Hz,3 H),2.86(br t,J=5.5Hz,2 H),2.70(brs,1 H),2.56(brd,J=6.2Hz,1 H),2.25(brs,1 H),2.00-2.13(m,2 H)。
化合物113：2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸。
步驟1：甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸酯及2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸。在2-(三級丁氧基羰基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸(中間物26，116.00mg)於MeOH(2.00mL)中之溶液中，添加HCl/MeOH(4M,2.00mL)。將混合物在20℃下攪拌2hr。TLC(DCM：MeOH=10：1)顯示出現一個主要斑點。將混合物在真空中濃縮為呈棕色油狀物之殘餘物(96.00mg，粗製，HCl)。
步驟2：2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸。在甲基上述油狀物(95.00mg,301.81μmol,1.00eq,HCl)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(80.18mg,301.81μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TEA(152.70mg,1.51mmol,209.18μL,5.00eq)。將混合物在20℃下攪拌5hr。在LCMS上顯示數個尖峰，且偵測到24%的2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸及22%的甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸酯。以EtOAc(10mL*2)及H2O(10mL)萃取混合物。將合併之有機層用1N HCl(10mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=0：1)及製備型HPLC(FA)純化，以提供呈無色油狀物之甲基2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸酯(40.00mg，88.92μmol，29.46%產率)及呈白色固體之2-((3-氯-4-氟苯基)胺甲醯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并 [1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸(9.00mg，19.25μmol，6.38%產率，93.2%純度)。LCMS：436[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.61(dd,J=2.63,6.66Hz,1 H),7.26-7.38(m,1 H),7.06-7.20(m,1 H),5.32(br d,J=9.54Hz,1 H),4.65-4.73(m,1 H),4.54-4.80(m,1 H),4.69(brs,3 H),3.71-3.97(m,2 H),3.54-3.65(m,1 H),3.52-3.65(m,1 H),3.37-3.52(m,1 H),3.36-3.52(m,1 H),3.66(s,1 H),3.36-3.53(m,1 H),3.34-3.70(m,1 H),3.15(brs,1 H),3.08(s,2 H),2.98-3.00(m,1 H),2.90-2.99(m,1 H),2.89-2.99(m,1 H),2.89-2.99(m,1H),2.89-2.99(m,1 H),2.88-3.00(m,1 H),2.74-2.86(m,2 H),2.41-2.60(m,1 H),2.41-2.60(m,1 H)。
化合物114：N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
步驟1：甲基10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-7-羧酸酯。在2-(三級丁氧基羰基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-7-羧酸(中間物26，370.00mg，1.02mmol，1.00eq)於MeOH(10.00mL)中之溶液中，添加HCl/MeOH(4M,10.00mL,39.22eq)。將混合物加熱至45℃達1hr。TLC(DCM：MeOH=10：1)顯示起始材料已消耗，且出現一個主要斑點。將 混合物在真空中濃縮，以提供呈棕色固體之甲基10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-7-羧酸酯(340.00mg，粗製，HCl)。
步驟2：2-三級丁基7-甲基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,7-二羧酸酯。在甲基10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-7-羧酸酯(240.00mg,762.46μmol,1.00eq,HCl)於DCM(10.00mL)中之溶液中，添加TEA(385.77mg,3.81mmol,528.45μL,5.00eq)，隨後添加Boc2O(332.81mg,1.52mmol,350.33μL,2.00eq)。將混合物加熱至20℃達16hr。LCMS顯示偵測到一個具有所欲Ms的主要尖峰。以EtOAc(20mL*3)及H2O(10mL)萃取混合物。將合併之有機層用1N HCl(10mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(PE：EtOAc=70%至100%)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(160.00mg，422.81μmol，55.45%產率)。
步驟3：三級丁基7-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在2-三級丁基7-甲基10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2,7-二羧酸酯(60.00mg,158.55μmol,1.00eq)於THF(3.00mL)中之溶液中，在0℃下添加LiBH4(13.81mg,634.20μmol,4.00eq)。將混合物在25℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料已消耗，且形成三個新的斑點。LCMS顯示偵測到一個具有所欲Ms的主要尖峰。將混合物用飽和NH4Cl(20mL)淬熄，並以EtOAc(20mL*3)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(45.00mg，粗製)。
步驟5：N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在三級丁基7-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(60.00 mg,171.23μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TFA(4.62g,40.52mmol,3.00mL,236.64eq)。將混合物在25℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料已消耗。將混合物在真空中濃縮，以得到呈棕色油狀物之7-(羥基甲基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-11-酮(63.00mg，粗製，TFA)。
步驟6：N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(羥基甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在7-(羥基甲基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c][1,4]二氮呯-11-酮(62.00mg,170.18μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(45.21mg,170.18μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加TEA(86.10mg,850.90μmol,117.95μL,5.00eq)。將混合物在20℃下攪拌5hr。TLC(DCM：MeOH=10：1)顯示出現一個主要斑點。以EtOAc(10mL*2)及H2O(10mL)萃取混合物。將合併之有機層用1N HCl(10mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM：MeOH=10：1)純化，以得到40mg產物，其與另一批次(EW619-1536，15mg及80%純度)合併，以進一步藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(40.00mg，65.51μmol，38.50%產率，98.7%純度)。LCMS：422[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.60(dd,J=2.57,6.60Hz,1H),7.27-7.35(m,1 H),7.11-7.19(m,1 H),4.59-4.73(m,3 H),3.84-3.94(m,1 H),3.72-3.83(m,3 H),3.53-3.63(m,1 H),3.36-3.46(m,1 H),3.15(s,3 H),2.83(t,J=5.75Hz,2 H),2.40-2.52(m,1 H),2.23-2.35(m,1 H)。
化合物115：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(3-氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-(1-苄氧基-3-氟-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-(1-苄氧基-3-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物28,90.00mg，185.72μmol，1.00eq)於THF(1.00mL)中之溶液中，在-40℃下添加DAST(119.75mg,742.88μmol,98.16μL,4.00eq)。將混合物在-40℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=1：2)顯示起始材料已消耗，且出現一個主要斑點。以DCM(10mL*2)及H2O(10mL)萃取混合物。將合併之有機層用飽和NaHCO3(10mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=1：2)純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(55.00mg，91.56μmol，49.30%產率，81%純度)。
步驟2：三級丁基8-(3-氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-(1-苄氧基-3-氟-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(55.00mg,113.03μmol,1.00eq)於MeOH(10.00mL)中之溶液中，在N2下添加Pd/C(50.00mg)。在真空下將懸浮液除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(50Psi)下在30℃下攪拌32小時。LCMS顯示仍有70% 的起始材料，且偵測到13%的所欲產物。接著將混合物過濾，並在N2下添加Pd/C(50.00mg)至濾液。在真空下將懸浮液除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(50Psi)下在30℃下攪拌48小時。LCMS顯示仍有8%的起始材料，且偵測到70%的所欲產物。將混合物過濾並在真空中濃縮。獲得呈無色油狀物之標題化合物(45.00mg，粗製)。
步驟3：8-(3-氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(3-氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(45.00mg,113.50μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，在20℃下邊攪拌邊添加TFA(308.00mg,2.70mmol,200.00μL,23.80eq)達1h。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示反應物9消耗殆盡，且形成一個新的主要斑點。將混合物在真空中濃縮。獲得呈黃色油狀物之標題化合物(47.00mg，粗製，TFA)且用於下一步驟。
步驟4：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(3-氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-(3-氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(47.00mg,114.53μmol,1.00eq,TFA)及TEA(69.54mg,687.18μmol,95.26μL,6.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，在20℃下邊攪拌邊添加苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(30.43mg,114.53μmol,1.00eq)達16h。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到所欲產物。將混合物在真空中濃縮。所得殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(10.00mg，21.16μmol，18.47%產率，99%純度)。LCMS：468[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.59(dd,J=2.64,6.53Hz,1 H),7.15-7.22(m,1 H),7.03-7.09(m,1 H),6.56(s,1 H),4.71-4.84(m,1 H),4.61-4.71(m,3 H),4.39-4.61(m,1 H),4.15-4.39(m,1 H),3.99(br s,1 H),3.79-4.03(m,3 H),3.30-3.68(m,2 H),3.19(d,J=4.02Hz,3 H),2.84(t,J=5.65Hz,2 H),2.50-2.61(m,1 H),2.16-2.43(m,1 H),1.78-2.00(m,2 H)。
化合物116：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(3,3-二氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-(1-苄氧基-3-側氧基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-(1-苄氧基-3-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物28，200.00mg，412.72μmol，1.00eq)於DCM(4.00mL)中之溶液中，在0℃下添加Dess-Martin(525.15mg,1.24mmol,383.32μL,3.00eq)。將混合物在25℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料已消耗，且形成一個新的主要斑點。將反應混合物用DCM(50mL)稀釋並過濾。將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=0：1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(160.00mg，331.56μmol，80.34%產率)。
步驟2：三級丁基8-(1-苄氧基-3,3-二氟-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧 酸酯。在三級丁基8-(1-苄氧基-3-側氧基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(116.00mg,227.95μmol,1.00eq)於DCM(1.00mL)中之溶液中，在-40℃下添加DAST(146.97mg,911.80μmol,120.47μL,4.00eq)。將混合物在20℃下攪拌1hr。TLC(PE：EtOAc=1：1)顯示起始材料已消耗，且形成一個主要斑點。以DCM(10mL*2)及H2O(10mL)萃取混合物。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EtOAc=1：1)純化，以得到呈黃色油狀物之三級丁基8-(1-苄氧基-3,3-二氟-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(75.00mg，123.37μmol，54.12%產率，83%純度)。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(56.00mg，109.54μmol，69.09%產率，98.7%純度)。
步驟3：三級丁基8-(3,3-二氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-(1-苄氧基-3,3-二氟-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(50.00mg,99.09μmol,1.00eq)於MeOH(15.00mL)中之溶液中，在N2下添加Pd/C(10.00mg，99.09μmol，10%純度，1.00eq)及HOAc(595.06ug,9.91μmol,0.57μL,0.10eq)。在真空下將懸浮液除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(15psi)下在25℃下攪拌24小時。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示仍有起始材料，將混合物用MeOH(20mL)稀釋，過濾。在N2下添加Pd/C(20mg)至濾液。在真空下將懸浮液除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(40psi)下在30℃下攪拌20小時。LCMS顯示仍有起始材料及60%的所欲產物。將混合物在H2(45psi)下在30℃下再攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡。將混合物用MeOH(30mL)稀釋並過濾。將濾液在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(60.00mg，粗製)。
步驟4：8-(3,3-二氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-(3,3-二氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(60.00mg,144.77μmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，添加TFA(40.52mmol,3.00mL,279.89eq)。將混合物在20℃下攪拌0.5hr。TLC(PE：EtOAc=0：1)顯示起始材料已消耗。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(64.00mg，粗製，TFA)。
步驟5：N-(3-氯-4-氟-苯基)-8-(3,3-二氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-(3,3-二氟-1-羥基-丙基)-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(30.00mg,70.04μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(18.61mg,70.04μmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，添加TEA(35.44mg,350.20μmol,48.55μL,5.00eq)。將混合物在20℃下攪拌16hr。LCMS顯示偵測到一個具有所欲Ms的主要尖峰(254nm)。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(14.00mg，28.32μmol，40.44%產率，98.3%純度)。LCMS：486[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.79(dd,J=2.7,5.4Hz,1 H),7.60(br d,J=9.8Hz,1 H),7.15(t,J=8.6Hz,1 H),6.79(brs,1 H),5.92-6.28(m,1H),4.58-4.80(m,3 H),4.22-4.49(m,2 H),4.13(brs,1 H),3.84-3.95(m,3 H),3.63(m,1 H),3.29-3.50(m,2 H),3.21(d,J=2.6Hz,3 H),2.86(br t,J=5.5Hz,2 H),2.70(brs,1 H),2.56(br d,J=6.2Hz,1 H),2.25(brs,1 H),2.00-2.13(m,2 H)。
化合物117：8-(乙醯胺基甲基)-N-(3-氯-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
將8-(胺甲基)-N-(3-氯-4-氟-苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(化合物070，30.00mg，71.28μmol，1.00eq)、TEA(10.82mg,106.92μmol,14.82μL,1.50eq)與Ac2O(8.73mg,85.54μmol,8.01μL,1.20eq)於DCM(3.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在20℃下在N2大氣下攪拌1小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌5min。以DCM(5mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(HCl)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(25.00mg，53.47μmol，75.01%產率，99%純度)。LCMS：463/465[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.55-7.61(m,1 H),7.15-7.22(m,1 H),7.04-7.10(m,1 H),6.47(s,1 H),6.12-6.20(m,1 H),4.67(m,2 H),4.29-4.45(m,2 H),3.87(m,2 H),3.41(m,2 H),3.19(s,4 H),3.01-3.13(m,1 H),2.88(m,3 H),2.00(s,3 H)。
化合物118：N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：8-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物29，80.00mg，193.49μmol，1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中添加TFA(6.16g,54.03mmol,4.00mL,279.23eq)，接著將混合物在20℃下攪拌1小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且形成一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(104.75mg，193.48μmol，100.00%產率，2TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟2：N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(80.00mg,147.77μmol,1.00eq,2TFA)、苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(34.08mg,132.99μmol,0.90eq)、TEA(29.91mg,295.54μmol,40.97μL,2.00eq)於DCM(3.00mL)中之混合物除氣，並以N2吹掃3次，接著將混合物在30℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並以DCM(5mL)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL) 洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(HCl)純化，隨後進行製備型HPLC(鹼)，以提供呈白色固體之標題化合物(51.00mg，106.19μmol，71.86%產率，99%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.77(dd,J=2.75,5.44Hz,1 H),7.55-7.62(m,1 H),7.09-7.16(m,1 H),6.79(s,1 H),5.70-5.98(m,1 H),4.68(s,2 H),4.36-4.47(m,1 H),4.17(dd,J=5.62,14.31Hz,1 H),3.80-3.92(m,2 H),3.42-3.50(m,1 H),3.30-3.40(m,1 H),3.18(s,3 H),2.94-3.07(m,2 H),2.69-2.87(m,4 H),2.50-2.62(m,1 H),1.14-1.31(m,1 H)。
化合物118_E1：(R*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
步驟1：三級丁基8-[[三級丁氧基羰基(2,2-二氟乙基)胺基]甲基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將外消旋三級丁基8-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物29，1.60g，3.87mmol，1.00eq)、Boc2O(2.53g,11.61mmol,2.67mL,3.00eq)、TEA(1.37g,13.54mmol, 1.88mL,3.50eq)於DCM(20.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在30℃下在N2大氣下攪拌72小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且形成一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=100/1至1：1)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(1.88g，3.51mmol，90.81%產率，96%純度)，其藉由SFC(管柱：IC(250mm*30mm,10um)；動相：[0.1%NH3H2O IPA]；B%：40%-40%,4.7min；500minmin)分離，以給出各930mg的兩種鏡像異構物。
步驟2：8-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基8-[[三級丁氧基羰基(2,2-二氟乙基)胺基]甲基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(630.00mg,1.23mmol,1.00eq)於DCM(4.00mL)中之溶液中，在0℃下添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,21.96eq)。將混合物在25℃下攪拌1h。將混合物在減壓下濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(665.00mg，1.17mmol，94.87%產率，95%純度，2TFA)，粗製產物直接用於下一步驟。
步驟3：(R*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在8-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]-10-甲基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(52.00mg,96.05μmol,1.00eq,2TFA)於DCM(3.00mL)中之溶液中，添加苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(24.61mg,96.05μmol,1.00eq)及Et3N(48.60mg,480.25μmol,66.57μL,5.00eq)。將混合物在25℃下攪拌16h。將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物與EW5335-130合併，藉由製備型HPLC(HCl)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(37.50mg，71.05μmol，97%純度，HCl)。LCMS：476[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 7.81(dd,J=2.81,5.62Hz,1 H),7.69(m,1 H),7.27(t,J=8.99Hz,1 H),6.21- 6.52(m,1 H),4.69(s,2 H),4.52(m,1 H),4.33(m,1 H),3.73-3.94(m,2 H),3.53-3.72(m,3 H),3.09-3.26(m,5 H),2.97(br d,J=6.48Hz,1 H),2.77-2.88(m,2 H)。
118/119/127至125_E1、118/119/127至125_E2係以類似於化合物118之程序製備。
化合物118_E2：(S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
標題化合物係以類似於化合物118_E1之方式製備。*純的但未知之非鏡像異構物E2。LCMS：476[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.77(dd,J=2.76,5.40Hz,1 H),7.61(m,1 H),7.12(t,J=8.72Hz,1 H),7.06(s,1 H),5.65-6.01(m,1 H),4.61-4.74(m,2 H),4.40(m,1 H),4.17(m,1 H),3.86(t,J=5.83Hz,2 H),3.30-3.52(m,2 H),3.17(s,3 H),2.93-3.07(m,2 H),2.84(t,J=5.77Hz,2 H),2.67-2.79(m,2 H),2.50-2.61(m,1 H)。
化合物119：8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基8-[[2,2-二氟乙基-(2,2,2-三氟乙醯基)胺基]甲基]-10-甲基-1-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基8-[(2,2-二氟乙基胺基)甲基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(中間物29，89.00mg，215.26μmol，1.00eq)、TEA(43.56mg,430.52μmol,59.67μL,2.00eq)於DCM(5.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下逐滴添加(2,2,2-三氟乙醯基)2,2,2-三氟乙酸酯(67.82mg,322.89μmol,44.91μL,1.50eq)。接著將混合物在30℃下在N2大氣下攪拌1小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並以DCM(5mL*3)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(85.00mg，158.50μmol，73.63%產率，95%純度)。LCMS：509[M+1]。
步驟2：N-(2,2-二氟乙基)-2,2,2-三氟-N-[(10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基)甲基]乙醯胺。在三級丁基8-[[2,2-二氟乙基-(2,2,2-三氟乙醯基)胺基]甲基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(85.00mg,166.84μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(2.62g,22.96mmol,1.70mL,137.62eq)，接著將混合物在30℃下攪拌1小時。TLC顯示起始材料 消耗殆盡，出現一個新的斑點。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(87.00mg，166.23μmol，99.63%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟3：8-[[2,2-二氟乙基-(2,2,2-三氟乙醯基)胺基]甲基]-N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將N-(2,2-二氟乙基)-2,2,2-三氟-N-[(10-甲基-11-側氧基-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8-基)甲基]乙醯胺(85.00mg,162.41μmol,1.00eq,TFA)、苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲酸酯(58.31mg,194.89μmol,1.20eq)、TEA(82.17mg,812.03μmol,112.56μL,5.00eq)於DCM(5.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在30℃下在N2大氣下攪拌16小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌5min。以DCM(5mL*3)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE/EtOAc=0/1)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(74.00mg，115.61μmol，71.19%產率，96%純度)。
LCMS：614[M+1]。
步驟4：8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將8-[[2,2-二氟乙基-(2,2,2-三氟乙醯基)胺基]甲基]-N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧醯胺(74.00mg,120.43μmol,1.00eq)、K2CO3(49.93mg,361.29μmol,3.00eq)於MeOH(5.00mL)及H2O(1.00mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在50℃下在N2大氣下攪拌1小時。LCMS顯示起始材料消耗殆盡，且以所欲產物為主。將混合物倒入水(10mL)中並以DCM(5mL*3)萃取。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型 HPLC(鹼)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(32.00mg，59.25μmol，49.20%產率，96%純度)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.66-7.71(m,1 H),7.56-7.62(m,1 H),7.09-7.16(m,1 H),6.75-6.80(m,1 H),5.67-6.03(m,1 H),4.69(s,2 H),4.35-4.47(m,1 H),4.12-4.23(m,1 H),3.87(m,2 H),3.42-3.50(m,1 H),3.35-3.37(d,J=7.28Hz,1 H),3.18(s,3 H),2.95-3.06(m,2 H),2.68-2.88(m,4 H),2.50-2.62(m,1 H),1.11-1.34(m,1 H)。
化合物119_E1：(R*)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS：519[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.68(dd,J=2.70,6.09Hz,1 H),7.55-7.63(m,1 H),7.12(t,J=9.41Hz,1 H),6.87(s,1 H),5.67-6.01(m,1 H),4.69(d,J=1.51Hz,2 H),4.40(dd,J=6.78,14.31Hz,1 H),4.17(m,1 H),3.81-3.92(m,2 H),3.30-3.50(m,2 H),3.12-3.22(m,3 H),2.94-3.06(m,2 H),2.84(t,J=5.77Hz,2 H),2.67-2.80(m,2 H),2.50-2.63(m,1 H)。
化合物119_E2：(S*)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS：519[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.68(dd,J=2.70,6.09Hz,1 H),7.54-7.63(m,1 H),7.12(t,J=9.35Hz,1 H),6.78(s,1 H),5.66-6.02(m,1 H),4.64-4.75(m,2 H),4.41(m,1 H),4.17(m,1 H),3.79-3.93(m,2 H),3.29-3.50(m,2 H),3.18(s,3 H),3.01(m,2 H),2.84(t,J=5.77Hz,2H),2.68-2.80(m,2 H),2.50-2.61(m,1 H)。
化合物120：N-(3-氰基-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(((2,2,2-三氟乙基)胺基)甲基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-[(2,2,2-三氟乙基胺基)甲基]-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。將三級丁基10-甲基-8-(甲基磺醯基氧基甲基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(300.00mg,700.12μmol,1.00eq)與2,2,2-三氟乙胺(1.39g,14.00mmol,1.10mL,20.00eq)於DMSO(8.00mL)中之混合物於密封管中加熱至116℃達16h。LCMS顯示起始材料/所欲產物：約1/2。添加另一批次的2,2,2-三氟乙胺(1.39g,14.00mmol,1.10mL,20.00eq)並將混合物在密封管中再加熱至116℃達16h。LCMS顯示無起始材料及主要的所欲產物。將混合物用EtOAc(50mL)稀釋並用鹽水(50mL，三次)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，其藉由製備型TLC純化，以提供呈白色固體之標題化合物(164.00mg，372.51μmol，53.21%產率，98%純度)。LCMS：454[M+23]。
步驟2：10-甲基-8-[(2,2,2-三氟乙基胺基)甲基]-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基10-甲基-11-側氧基-8-[(2,2,2-三氟乙基胺基)甲基]- 1,3,4,7,8,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(174.00mg,403.29μmol,1.00eq)於DCM(2.00mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,66.98eq)，並將混合物在30℃下攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(228.00mg，407.59μmol，101.07%產率，2TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟3：N-(3-氰基-4-氟苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(((2,2,2-三氟乙基)胺基)甲基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。將10-甲基-8-[(2,2,2-三氟乙基胺基)甲基]-2,3,4,7,8,9-六氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-11-酮(114.00mg,203.80μmol,1.00eq,2TFA)、Et3N(123.74mg,1.22mmol,169.51μL,6.00eq)與苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(44.39mg,173.23μmol,0.85eq)於DCM(4.00mL)中之混合物在30℃下攪拌2h。LCMS顯示起始材料消耗殆盡及主要的所欲產物。將混合物在真空中濃縮，其藉由製備型HPLC(鹼)純化二次，以提供呈黃色固體之標題化合物(36.00mg，72.95μmol，35.80%產率)。
LCMS：494[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.79(m,1 H),7.60(m,1 H),7.15(t,J=8.8Hz,1 H),6.83(s,1 H),4.70(s,2 H),4.37-4.51(m,1 H),4.10-4.25(m,1 H),3.82-3.97(m,2 H),3.31-3.54(m,2 H),3.16-3.30(m,5 H),2.86(m,4 H),2.50-2.63(m,1 H),1.32-1.42(m,1 H)。
化合物121：N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-10-甲基-11-側氧基-8-(((2,2,2-三氟乙基)胺基)甲基)-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
標題化合物係以類似於化合物120之方式，在步驟3中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)胺甲酸酯來製備。LCMS：537[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.70(m,1 H),7.56-7.64(m,1 H),7.14(t,J=9.4Hz,1H),6.78(s,1 H),4.70(s,2 H),4.43(m,1 H),4.17(m,1 H),3.82-3.98(m,2 H),3.43-3.55(m,1 H),3.32-3.43(m,1 H),3.19(s,5 H),2.71-2.93(m,4 H),2.48-2.64(m,1 H),1.28-1.45(m,1 H)。
化合物122_D1：(3R,8S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((R*)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物D1。
步驟1：三級丁基(6R)-3-[[(2R,3S)-3-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-2-(羥基甲基)戊-4-烯基]-甲基-胺甲醯基]-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在(2S,3R)-3-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-2-(甲基胺基甲基)戊-4-烯-1-醇(中間物21，1.35g，2.71mmol，1.00eq，TFA)與(6R)-5-三級丁氧基羰基-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(763.17mg,2.71mmol,1.00eq)於DMF(8.00mL)中之混合物中，添加PYBOP(1.69g,3.26mmol,1.20eq)、HOBt(439.88mg,3.26mmol,1.20eq)及DIPEA(1.40g,10.85mmol,1.90mL,4.00eq)，將反應混合物在25℃下攪拌2小時。數個新的尖 峰顯示在LCMS上且偵測到約30%的所欲化合物。將反應混合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋並用水(80mL*2)洗滌，將有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化，以提供呈白色固體之標題化合物(1.00g，3.09mmol，57.04%產率)。
步驟2：三級丁基(R)-3-(((2S,3R)-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)戊-4-烯-1-基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在三級丁基(6R)-3-[[(2R,3S)-3-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-2-(羥基甲基)戊-4-烯基]-甲基胺甲醯基]-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(350.00mg,541.05μmol,1.00eq)與TEA(164.25mg,1.62mmol,225.00μL,3.00eq)於DCM(8.00mL)中之混合物中，在0℃下在N2下添加MsCl(185.93mg,1.62mmol,125.63μL,3.00eq)，將反應混合物在25℃下攪拌30分鐘。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到二個具有較低極性的新的主要斑點。將反應用水(20mL)淬熄，接著以DCM(50mL*2)萃取，將合併之有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(700.00mg，粗製)且直接用於下一步驟。
步驟3：三級丁基(3R,8S)-8-((R)-1-((三級丁基二苯基矽基)氧基)烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(6R)-3-[[(2R,3S)-3-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-2-(甲基磺醯基氧基甲基)戊-4-烯基]-甲基胺甲醯基]-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(700,00mg,965.54μmol,1.00eq)與三級丁基(6R)-3-[[(2R,3S)-3-[三級丁基(二苯基)矽基]氧基-2-(甲基磺醯基氧基甲基)戊-4-烯基]-甲基-胺甲醯基]-6-甲基-2-甲基磺醯基-6,7-二氫-4H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(965.54μmol,1.00eq)於DMF(5.00mL)中之混合物中，在N2下添加Cs2CO3(629.18mg,1.93mmol,2.00eq)及TBAI(35.66mg,96.55μmol,0.10eq)，將反應混合物在25℃下攪拌16小時。LCMS顯示偵測到一個具有所欲MS的主要尖峰。將反應混 合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋並用水(50mL*2)洗滌，將有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化，以提供呈白色固體之標題化合物(350.00mg，556.55μmol，57.64%產率)。
步驟4：三級丁基(3R,8S)-8-((R)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(3R,8S)-8-((R)-1-((三級丁基二苯基矽基)氧基)烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(700.00mg,1.11mmol,1.00eq)於THF(10.00mL)中之溶液中，添加TBAF(1M,2.22mL,2.00eq)，將反應混合物在25℃下攪拌一小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡，且偵測到一個具有較大極性的新的主要斑點。將反應混合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋並用水(50mL*2)洗滌，將有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化，以提供呈白色固體之標題化合物(375.00mg，931.55μmol，83.92%產率，97%純度)。
步驟5：三級丁基(3R,8S)-8-((R)-1-((三級丁基二苯基矽基)氧基)烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D1及D2。化合物三級丁基(3R,8S*)-8-((R*)-1-((三級丁基二苯基矽基)氧基)烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(500.00mg，97%純度)藉由SFC分離，以得到二種非鏡像異構物(D1：190mg及D2：190mg)。SFC分離條件：儀器：SFC 80；管柱：AD-10um；動相：A為CO2且B為MeOH(0.1% NH3H2O)；梯度：B 30%；流速：60mL/min；背壓：100bar；管柱溫度：35℃；波長：220nm。
D1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=5.85(ddd,J=7.15,10.16,17.19Hz,1 H),5.39(d,J=17.19Hz,1 H),5.28-5.34(m,1 H),4.78-5.08(m,2 H),4.33(dd,J=7.47,14.24Hz,1 H),4.09-4.22(m,2 H),4.02 (br dd,J=8.66,14.18Hz,1 H),3.56-3.64(m,1 H),3.46-3.55(m,1 H),3.19(s,3 H),2.91(br dd,J=5.77,15.69Hz,1 H),2.56(d,J=15.69Hz,1 H),2.42-2.52(m,1 H),1.48(s,9 H),1.13(d,J=7.03Hz,3 H)。
*純的但未知之非鏡像異構物D1。
D2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=5.87(ddd,J=7.09,10.23,17.19Hz,1 H),5.41(d,J=17.19Hz,1 H),5.32(d,J=10.29Hz,1 H),4.79-5.08(m,2 H),4.25-4.34(m,1 H),4.10-4.25(m,3 H),3.40-3.58(m,2 H),3.18(s,3 H),2.93(dd,J=5.83,15.75Hz,1 H),2.47-2.59(m,2 H),1.48(s,9 H),1.12(d,J=6.90Hz,3 H)。
*純的但未知之非鏡像異構物D2。
步驟6：(3R,8S*)-8-((R*)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_D1。在三級丁基(3R,8S*)-8-((R*)-1-((三級丁基二苯基矽基)氧基)烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D1(190.00mg,471.98μmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，添加TFA(2.99g,26.20mmol,1.94mL,55.52eq)，將反應混合物在25℃下攪拌一小時。TLC顯示起始材料消耗殆盡。將反應混合物在旋轉蒸發器上濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(190.00mg，粗製，TFA)且直接用於下一步驟。
*純的但未知之非鏡像異構物D1。
步驟7：D1：(3R,8S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((R*)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(3R,8S*)-8-((R*)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_D1(63.00mg,155.79μmol,1.00eq,TFA)於DCM(2.00mL)中之混合物中，添加TEA(63.06mg,623.16μmol,86.38μL,4.00eq)，隨後添加苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基) 苯基]胺甲酸酯(46.62mg,155.79μmol,1.00eq)，將反應混合物在25℃下攪拌4小時。LCMS顯示偵測到一個具有所欲MS的主要尖峰。在旋轉蒸發器上移除溶劑。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(56.00mg，111.89μmol，71.82%產率，99%純度)。LCMS(M+1)：496。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.69(dd,J=2.69,6.11Hz,1 H),7.56-7.61(m,1 H),7.13(t,J=9.35Hz,1 H),6.62(s,1 H),5.88(ddd,J=7.15,10.24,17.21Hz,1 H),5.42(d,J=17.12Hz,1 H),5.34(d,J=10.27Hz,1 H),5.15(t,J=6.42Hz,1 H),4.80(d,J=15.16Hz,1 H),4.50(d,J=15.28Hz,1 H),4.36(dd,J=7.46,14.43Hz,1 H),4.10-4.18(m,2 H),3.49-3.65(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01(dd,J=5.93,15.71Hz,1 H),2.67(d,J=16.14Hz,1 H),2.49-2.57(m,1 H),1.79(br s,1 H),1.19(d,J=6.85Hz,3 H)。
122至124_D1及D2係以類似於化合物122之方式製備。
化合物122_D2：(3R,8S*)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-((S*)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物D2。
LCMS(M+1)：496。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.70(dd,J=2.69,5.99Hz,1 H),7.56-7.62(m,1 H),7.13(t,J=9.41Hz,1 H),6.68(br s,1 H),5.88(ddd,J=7.09,10.21,17.18Hz,1 H),5.42(d,J=17.12Hz,1 H),5.34(d,J=10.27Hz,1 H),5.16(quin,J=6.39Hz,1 H),4.84(d,J=15.28Hz,1 H),4.46(d,J=15.16Hz,1 H),4.36(dd,J=7.27,14.37Hz,1 H),4.11-4.22(m,2 H),3.47-3.63(m,2 H),3.20(s,3 H),3.03(dd,J=6.05,15.96Hz,1 H),2.66(d,J=15.77Hz,1 H),2.51-2.61(m,1 H),1.83(br s,1 H),1.18(d,J=6.97Hz,3 H)。
化合物123_D1：(3R,8S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((R*)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物D1。
LCMS(M+1)：453。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.80(dd,J=2.75,5.44Hz,1 H),7.58(ddd,J=2.87,4.49,9.02Hz,1 H),7.13(t,J=8.68Hz,1 H),6.71(s,1 H),5.88(ddd,J=7.15,10.15,17.18Hz,1 H),5.42(d,J=17.12Hz,1 H),5.35(d,J=10.27Hz,1 H),5.14(quin,J=6.66Hz,1 H),4.80(d,J=15.41Hz,1 H),4.49(d,J=15.28Hz,1 H),4.36(dd,J=7.40,14.37Hz,1 H),4.12-4.19(m,2 H),3.49-3.65(m,2 H),3.20(s,3 H),3.01(dd,J=5.69,15.96Hz,1 H),2.67(d,J=15.77Hz,1 H),2.49-2.57(m,1 H),1.81(br s,1 H),1.19(d,J=6.97Hz,3 H)。
化合物123_D2：(3R,8S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((S*)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物D2。
LCMS(M+1)：453。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.80(dd,J=2.81,5.50Hz,1 H),7.58(ddd,J=2.87,4.55,9.08Hz,1 H),7.13(t,J=8.74Hz,1 H),6.74(s,1 H),5.88(ddd,J=7.03,10.18,17.15Hz,1 H),5.42(d,J=17.12Hz,1 H),5.34(d,J=10.27Hz,1 H),5.14(quin,J=6.30Hz,1 H),4.83(d,J=15.28Hz,1 H),4.45(d,J=15.28Hz,1 H),4.36(dd,J=7.27,14.37Hz,1 H),4.12-4.22(m,2 H),3.48-3.63(m,2 H),3.20(s,3 H),3.02(dd,J=5.81,15.71Hz,1 H),2.66(d,J=15.53Hz,1 H),2.52-2.60(m,1 H),1.82(br s,1 H),1.18(d,J=6.97Hz,3 H)。
化合物124_D1：(3R,8S*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-8-((R*)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物D1。
LCMS(M+1)：506/508。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.74(dd,J=2.63,6.05Hz,1 H),7.23-7.26(m,1 H),7.04(t,J=8.56Hz,1 H),6.52(s,1 H),5.87(ddd,J=7.15,10.24,17.21Hz,1 H),5.42(d,J=17.24Hz,1 H),5.34(d,J=10.39Hz,1 H),5.10-5.17(m,1 H),4.78(d,J=15.41Hz,1 H),4.48(d,J=15.16Hz,1 H),4.36(dd,J=7.46,14.31Hz,1 H),4.09-4.18(m,2 H),3.48-3.65(m,2 H),3.20(s,3 H),3.00(dd,J=5.75,15.53Hz,1 H),2.66(d,J=16.02Hz,1 H),2.48-2.57(m,1 H),1.79(br s,1 H),1.18(d,J=6.97Hz,3 H)。
化合物124_D2：(3R,8S*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-8-((S*)-1-羥基烯丙基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
*純的但未知之非鏡像異構物D2。
LCMS(M+1)：506/508。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.75(dd,J=2.69,6.11Hz,1 H),7.23-7.27(m,1 H),7.04(t,J=8.50Hz,1 H),6.53(s,1 H),5.88(ddd,J=7.03,10.15,17.18Hz,1 H),5.42(d,J=17.12Hz,1 H),5.34(d,J=10.27Hz,1 H),5.11-5.18(m,1 H),4.81(d,J=15.28Hz,1 H),4.45(d,J=15.16Hz,1 H),4.32-4.39(m,1 H),4.12-4.23(m,2 H),3.48-3.62(m,2 H),3.20(s,3 H),3.02(dd,J=5.87,15.89Hz,1 H),2.65(d,J=15.53Hz,1 H),2.51-2.60(m,1 H),1.81(br s,1 H),1.17(d,J=6.97Hz,3 H)。
化合物125_E1：(R*)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS：547/549[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.31(t,J=7.95Hz,1 H),6.93(m,1 H),6.58(br d,J=2.81Hz,1 H),5.67-6.02(m,1 H),4.70(s,2 H),4.12-4.45(m,2 H),3.74-3.94(m,2 H),3.28-3.50(m,2 H),3.18(s,3 H),2.93-3.06(m,2 H),2.85(t,J=5.75Hz,2 H),2.67-2.80(m,2 H),2.49-2.61(m,1 H)。
化合物125_E2：(S*)-N-(5-溴-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS：547/549[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.32(t,J=7.89Hz,1 H),6.93(dd,J=7.95,10.64Hz,1 H),6.57(br d,J=2.93Hz,1 H),5.67-6.02(m,1 H),4.70(s,2 H),4.14-4.45(m,2 H),3.76-3.93(m,2 H),3.28-3.49(m,2 H),3.18(s,3 H),2.93-3.08(m,1 H),2.91-3.00(m,1 H),2.85(t,J=5.81Hz,2 H),2.75(m,2 H),2.46-2.60(m,1 H)。
化合物126_E1：(R*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS：503/505[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.17(t,J=8.03Hz,1 H),6.94(m,1 H),6.59(br d,J=3.01Hz,1 H),5.65-6.02(m,1 H),4.70(s,2 H),4.40(m,1 H),4.17(m,1 H),3.76-3.93(m,2 H),3.28-3.50(m,2 H),3.18(s,3 H),2.93-3.08(m,2 H),2.85(t,J=5.77Hz,2 H),2.75(dq,J=7.47,11.94Hz,2 H),2.48-2.62(m,1 H)。
化合物126_E2：(S*)-N-(5-氯-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS：503/505[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.16(t,J=8.03Hz,1 H),6.94(dd,J=8.41,10.54Hz,1 H),6.61(br d,J=2.89Hz,1 H),5.67-6.02(m,1 H),4.70(s,2 H),4.40(m,1 H),4.17(m,1 H),3.77-3.94(m,2 H),3.28-3.50(m,2 H),3.17(s,3 H),2.92-3.06(m,2 H),2.85(t,J=5.77Hz,2 H),2.65-2.80(m,2 H),2.48-2.62(m,1 H)。
化合物127_E1：(R*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS：494[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.27(dt,J=5.77,9.16Hz,1 H),6.97-7.05(m,1 H),6.66(br d,J=2.51Hz,1 H),5.67-6.02(m,1 H),4.72(s,2 H),4.40(m,1 H),4.17(m,1 H),3.78-3.94(m,2 H),3.29-3.50(m,2 H),3.18(s,3 H),2.92-3.07(m,2 H),2.86(t,J=5.84Hz,2 H),2.67-2.80(m,2 H),2.50-2.62(m,1 H)。
化合物127_E2：(S*)-N-(3-氰基-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS：494[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 7.76(dt,J=5.99,8.93Hz,1 H),7.17-7.26(m,1 H),6.21-6.57(m,1 H),4.72(s,2 H),4.54(m,1 H),4.36(m,1 H),3.76-3.97(m,2H),3.54-3.74(m,3 H),3.08-3.27(m,5 H),3.00(br s,1 H),2.86(br t,J=5.56Hz,2 H)。
化合物128_E1：(R*)-N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS：503/505[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 7.34(dt,J=5.62,8.74Hz,1 H),7.08(dt,J=1.90,8.83Hz,1 H),6.21-6.54(m,1 H),4.63-4.77(m,2 H),4.53(m,1 H),4.34(m,1 H),3.75-3.95(m,2 H),3.53-3.72(m,3 H),3.08-3.27(m,5 H),2.98(br s,1 H),2.84(t,J=5.75Hz,2 H)。
化合物128_E2：(S*)-N-(3-氯-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS：503/505[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.86(dt,J=5.50,8.93Hz,1 H),6.90-7.00(m,1 H),6.62(br d,J=2.32Hz,1 H),5.66-6.01(m,1 H),4.71(s,2 H),4.40(dd,J=6.85,14.31Hz,1 H),4.17(m,1 H),3.74-3.94(m,2 H),3.26-3.49(m,2 H),3.06-3.22(m,3 H),2.91-3.05(m,2 H),2.85(t,J=5.75Hz,2 H),2.65-2.80(m,2 H),2.49-2.59(m,1 H)。
化合物129_E1：(R*)-N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS：547/549[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.93(dt,J=5.58,8.94Hz,1 H),6.94(m,1 H),6.59(d,J=2.76Hz,1 H),5.66-6.03(m,1 H),4.71(s,2 H),4.40(m,1 H),4.17(m,1 H),3.77-3.93(m,2 H),3.28-3.49(m,2 H),3.18(s,3 H),2.91-3.08(m,2 H),2.85(t,J=5.77Hz,2 H),2.75(m,2 H),2.49-2.61(m,1 H)。
化合物129_E2：(S*)-N-(3-溴-2,4-二氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS：547/549[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.00(s,1 H),7.93(dt,J=5.75,8.86Hz,1 H),6.89-7.00(m,1 H),6.58(br s,1 H),5.68-6.02(m,1 H),4.71(s,2 H),4.12-4.44(m,2 H),3.77-3.93(m,2 H),3.28-3.50(m,2 H),3.18(s,3 H),2.95-3.08(m,2 H),2.85(t,J=5.81Hz,2 H),2.70-2.82(m,2 H),2.51-2.63(m,1 H)。
化合物130_E1：(R*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS：529/531[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 7.68-7.75(m,1 H),7.33(m,1 H),7.11(t,J=8.74Hz,1 H),6.19-6.52(m,1 H),4.67(d,J=1.96Hz,2 H),4.51(m,1 H),4.33(mz,1 H),3.71-3.93(m,2 H),3.51-3.70(m,3 H),3.07-3.26(m,5 H),2.90-3.03(m,1 H),2.82(br t,J=5.62Hz,2 H)。
化合物130_E2：(S*)-N-(3-溴-4-氟苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS：529/531[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.01(s,1 H),7.72(dd,J=2.64,6.02Hz,1 H),7.23-7.26(m,1 H),7.00-7.07(m,1 H),6.52-6.64(m,1 H),6.58(s,1 H),5.66-6.05(m,1 H),4.67(s,2 H),4.41(m,1 H),4.18(dd,J=5.40,14.56Hz,1 H),3.77-3.93(m,2 H),3.26-3.51(m,2 H),3.18(s,3 H),2.94-3.09(m,2 H),2.84(t,J=5.71Hz,2H),2.65-2.80(m,2 H),2.52-2.63(m,1H)。
化合物131_E1：(R*)-N-(2,4-二氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E1。
LCMS：537[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 7.68(dt,J=5.62,8.68Hz,1 H),7.14(t,J=9.72Hz,1 H),6.19-6.52(m,1 H),4.70(d,J=2.32Hz,2 H),4.51(m,1 H),4.33(m,1 H),3.73-3.95(m,2 H),3.52-3.70(m,3 H),3.09-3.27(m,5 H),2.98(br s,1 H),2.83(br t,J=5.75Hz,2 H)。
化合物131_E2：(S*)-N-(2,4-二氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(((2,2-二氟乙基)胺基)甲基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺
*純的但未知之非鏡像異構物E2。
LCMS：537[M+1]。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.21(dt,J=5.46,8.94Hz,1 H),6.98(t,J=8.85Hz,1 H),6.65(br d,J=3.01Hz,1 H),5.66-6.01(m,1 H),4.72(s,2 H),4.40(m,1 H),4.17(m,1 H),3.77-3.95(m,2 H),3.29-3.49(m,2 H),3.18(s,3 H),3.00(m,2 H),2.86(t,J=5.71Hz,2 H),2.67-2.80(m,2 H),2.50-2.60(m,1 H)。
化合物132：N-(3-氯-4-氟苯基)-3-羥基-10'-甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧醯胺。
在3'-羥基-10-甲基-螺[1,2,3,4,7,9-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮呯-8,1'-環丁烷]-11-酮(中間物24，30.00mg，76.85μmol，1.00eq，TFA)於DCM(4.00mL)中之溶液中，添加TEA(38.88mg,384.25μmol,53.26μL,5.00eq)，隨後添加苯基N-(3-氯-4-氟-苯基)胺甲酸酯(20.42mg,76.85μmol,1.00eq)。將混合物在20℃下攪拌1hr。LCMS顯示偵測到一個具有所欲Ms的主要尖峰。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以 提供呈白色固體之標題化合物(24.00mg，53.58μmol，69.73%產率)。LCMS：448[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.60(dd,J=2.63,6.66Hz,1 H),7.27-7.33(m,1 H),7.09-7.18(m,1 H),4.68(s,2 H),4.34-4.42(m,1 H),4.32(s,2 H),3.83(t,J=5.81Hz,2 H),3.41(s,2 H),3.18(s,3 H),2.82(t,J=5.81Hz,2 H),2.38-2.49(m,2 H),1.87-1.98(m,2 H)。
化合物133_D1：(3R,8R*)-8-氟-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺_D1。
步驟1：2-(三級丁基)8-乙基(3R)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯。在LDA(1M,959.45μL,1.30eq)於THF(2.00mL)中之溶液中，在-78℃下添加2-(三級丁基)8-乙基(3R)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯(300.00mg,738.04μmol,1.00eq)於THF(2.00mL)中之溶液。將混合物在-78℃下攪拌30min。接著在-78℃下添加NFSI(279.28mg,885.65μmol,1.20eq)於THF(2.00mL)中之溶液。接著將混合物在-78℃下攪拌1hr。將反應混合物用飽和NH4Cl(10mL)淬熄並以EtOAc(80mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(PE：EA：30% 至50%)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(250.00mg，512.40μmol，69.43%產率，87%純度)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=4.72(dd,J=15.1,17.8Hz,1H),4.59-4.42(m,3H),4.33-4.21(m,2H),3.86-3.73(m,1H),3.70-3.49(m,3H),3.11(s,3H),2.69(br s,2H),1.41(s,9H),1.29(t,J=7.2Hz,3H)。
步驟2：三級丁基(3R)-8-氟-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D1及三級丁基(3R)-8-氟-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D2。在2-(三級丁基)8-乙基(3R)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2,8-二羧酸酯(230.00mg,541.85μmol,1.00eq)於THF(6.00mL)中之溶液中，在0℃下邊攪拌邊添加LiBH4(35.40mg,1.63mmol,3.00eq)達1h。將混合物倒入20mL的飽和NH4Cl中，並以EtOAc(20mL*3)萃取，接著將合併之有機相用鹽水(20mL*1)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。將殘餘物與30mg(試驗性反應)合併，並藉由製備型TLC(PE：EtOAc=1：2)純化，以獲得標題化合物的二種非鏡像異構物：呈無色油狀物之45mg的三級丁基(3R)-8-氟-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯及呈白色固體之120mg的三級丁基(3R)-8-氟-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D2。
步驟3：(3R)-8-氟-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_D1及(3R)-8-氟-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_D2。在三級丁基(3R)-8-氟-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(45.00 mg,117.67μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在15℃下邊攪拌邊添加TFA(462.00mg,4.05mmol,300.00μL,34.43eq)達1h。將混合物在真空中濃縮。殘餘物不經純化。獲得呈黃色油狀物之標題化合物(47.00mg，粗製，TFA)且直接用於下一步驟。
步驟4：(3R,8R*)-8-氟-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺_D1。在(3R)-8-氟-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_D1(47.00mg,118.59μmol,1.00eq,TFA)及苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲酸酯(35.48mg,118.59μmol,1.00eq)於DCM(5.00mL)中之溶液中，在20℃下邊攪拌邊添加TEA(72.00mg,711.54μmol,98.63μL,6.00eq)達2h。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以獲得呈白色固體之標題化合物(34.00mg，69.76μmol，58.82%產率)。LCMS：488[M+1]；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.67(dd,J=2.76,6.15Hz,1 H),7.54-7.62(m,1 H),7.13(t,J=9.35Hz,1 H),6.55(s,1 H),5.07-5.17(m,1 H),4.81(d,J=15.56Hz,1 H),4.39-4.58(m,3 H),3.75-3.97(m,2 H),3.63(d,J=5.90Hz,1 H),3.59(s,1 H),3.23(s,3 H),3.01(dd,J=5.83,16.12Hz,1 H),2.69(d,J=16.06Hz,1 H),2.01-2.12(m,1 H),1.20(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物133_D2：(3R,8S*)-8-氟-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺_D2。
標題化合物係以類似於化合物133_D1之方式製備。LCMS：488[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.70(dd,J=2.70,6.09Hz,1 H),7.56-7.64(m,1 H),7.27(s,3 H),7.13(t,J=9.35Hz,1 H),6.74(br s,1 H),5.10-5.20(m,1 H),4.89(d,J=15.56Hz,1 H),4.40-4.52(m,3 H),3.77-3.98(m,2 H),3.64(d,J=2.89Hz,1 H),3.60(s,1 H),3.22(s,3 H),3.03(dd,J=6.02,15.94Hz,1 H),2.67(d,J=16.19Hz,1 H),2.20(br s,1 H),1.18(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物134_D1：(3R,8R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(3R,8R)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(3R,8R)-8-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(400.00mg,901.56μmol,1eq)於THF(6mL)及MeOH(6mL)中之混合物中，在0℃下在N2下一次性添加NaBH4(68.21mg,1.80mmol,2eq)。將混合物在0℃下攪拌3小時。將混合物倒入水(10mL)中並攪拌1min。以DCM(20mL*2)萃取水相。將合併之有機層用鹽水(15mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(100至200篩目矽膠，二氯甲烷：甲醇=100/1，20/1)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(328mg，900.01μmol，99.83%產率，100%純度)。LCMS：365[M+1]。
步驟2：三級丁基(3R,8R)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(3R,8R)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(100.00mg,274.39μmol,1eq)於THF(1mL)中之混合物中，在-20℃下在N2下一次性添加NaH(21.95mg，548.79μmol，60%純度，2eq)。將混合物在-20℃下攪拌30min，接著將2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(176.25mg,823.18μmol,3eq)添加至混合物。將混合物在-20℃下攪拌2小時。將混合物倒入水(15mL)中並攪拌1min。以乙酸乙酯(25mL*2)萃取水相。將合併之有機層用鹽水(10mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(乙酸乙酯：石油醚=2/1)純化，以提供呈黃色固體之標題化合物(107mg，249.72μmol，91.01%產率，100%純度)。LCMS：429[M+1]。
步驟3：(3R,8R)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮 呯-11-酮。在三級丁基(3R,8R)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(160.00mg,373.42μmol,1.00eq)於DCM(2mL)中之溶液中，在N2下添加TFA(4.39g,38.48mmol,2.85mL,103.04eq)。將混合物在30℃下攪拌2小時。將混合物在真空中濃縮，以提供呈黃色油狀物之標題化合物(166mg，粗製)。
步驟4：(3R,8R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(3R,8R)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(61.61mg,187.62μmol,1eq,TFA)與苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(53.42mg,187.62μmol,1eq)於DCM(6.00mL)中之混合物中，在N2下添加TEA(189.85mg,1.88mmol,261.15μL,10.00eq)。將混合物在30℃下攪拌10小時。將殘餘物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機層用鹽水(5mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(76mg，152.63μmol，81.35%產率，98.5%純度)。LCMS：491[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.79(dd,J=2.81,5.50Hz,1 H),7.51-7.60(m,1 H),7.14(t,J=8.74Hz,1 H),6.60(s,1 H),5.72-6.08(m,1 H),5.08-5.19(m,1 H),4.80(d,J=15.41Hz,1 H),4.38-4.53(m,2 H),4.13(dd,J=6.97,14.31Hz,1 H),3.49-3.84(m,5 H),3.37(d,J=6.24Hz,1 H),3.18(s,3 H),3.00(d,J=5.99Hz,1 H),2.82(br d,J=6.36Hz,1 H),2.68(d,J=16.26Hz,1 H),1.19(d,J=6.97Hz,3 H)。
化合物135 D1：(3R,8R)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
在(3R,8R)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(61.61mg,187.62μmol,1eq,TFA)與苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲酸酯(56.14mg,187.62μmol,1eq)於DCM(6.00mL)中之混合物中，在N2下添加TEA(189.85mg,1.88mmol,261.15μL,10.00eq)。將混合物在30℃下攪拌10小時。將殘餘物倒入水(10mL)中並攪拌2min。以乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。將合併之有機層用鹽水(5mL*2)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(71mg，133.09 78 he t 1 24 17 15 26 21 6 1 90 74 70 77 69 13 1 18 17 17 6 1 81 86 83 74 85 90 10)。LCMS：534[M+1]1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.68(dd,J=2.75,6.17Hz,1 H),7.55-7.62(m,1 H),7.13(t,J=9.41Hz,1 H),6.55(s,1 H),5.72-6.08(m,1 H),5.15(t,J=6.30Hz,1 H),4.81(d,J=15.41Hz,1 H),4.40-4.53(m,2 H),4.12(dd,J=7.15,14.24Hz,1 H),3.49-3.82(m,5 H),3.35(dd,J=5.93,14.98Hz,1 H),3.02(dd,J=5.87,15.65Hz,1 H),2.75-2.87(m,1 H),2.67(d,J=15.89Hz,1 H),1.19(d,J=6.85Hz,3 H)。
化合物134 D2：(3R,8S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(3R,8S)-8-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(300mg,711.76μmol,1eq)於THF(6mL)及MeOH(6mL)中之溶液中，在0℃下添加NaBH4(53.85mg,1.42mmol,2eq)。將溶液在25℃下攪拌16hr。將溶液倒入水(30mL)中。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化。獲得呈黃色油狀物之標題化合物(230mg，602.71μmol，84.68%產率，95.5%純度)。LCMS：365[M+1]。
步驟2：三級丁基(3R,8S)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(230mg,631.11μmol,1eq)於THF(10mL)中之溶液中，在-20℃下添加NaH(50.49mg，1.26mmol， 60%純度，2eq)。將溶液在-20℃下攪拌30min。接著添加2,2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(405.38mg,1.89mmol,3eq)，將溶液在-15℃下攪拌2hr。將溶液倒入水(30mL)中。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(20mL*3)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由製備型TLC純化。獲得呈黃色油狀物之標題化合物(190mg，443.44μmol，70.26%產率)。
步驟3：(3R,8S)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(3R,8S)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(190mg,443.44μmol,1eq)於DCM(5mL)中之溶液中，添加TFA(7.70g,67.53mmol,5.00mL,152.29eq)。將溶液在25℃下攪拌30min。將溶液濃縮。獲得呈黃色油狀物之標題化合物(196mg，粗製，TFA)。
步驟4：(3R,8S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(3R,8S)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(98mg,221.53μmol,1eq,TFA)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TEA(67.25mg,664.59μmol,92.50μL,3eq)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(56.76mg,221.53μmol,1eq)。將溶液在25℃下攪拌16hr。添加TEA(67.25mg,664.59μmol,92.50μL,3eq)。將溶液在25℃下攪拌16hr。將溶液濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化。獲得呈白色固體之標題化合物(47.37mg，94.32μmol，42.58%產率，97.66%純度)。LCMS：491[M+1]；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.79(dd,J=2.81,5.38Hz,1H),7.60(ddd,J=2.87,4.55,9.08Hz,1H),7.13(t,J=8.68Hz,1H),6.86(s,1H),5.68-6.07(m,1H),5.13(quin,J=6.57Hz,1H),4.84(d,J=15.41Hz,1H),4.36-4.52(m,2H),4.15(dd,J=5.93,14.37Hz,1H), 3.48-3.83(m,5H),3.33(dd,J=7.09,15.04Hz,1H),3.18(s,3H),3.01(dd,J=5.75,16.02Hz,1H),2.82(td,J=6.40,12.75Hz,1H),2.66(d,J=15.89Hz,1H),1.18(d,J=6.85Hz,3H)。
化合物135_D2：(3R,8S)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
在(3R,8S)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(98mg,221.53μmol,1eq,TFA)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TEA(67.25mg,664.59μmol,92.50μL,3eq)及苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲酸酯(66.29mg,221.53μmol,1eq)。將溶液在25℃下攪拌16hr。添加TEA(67.25mg,664.59μmol,92.50μL,3eq)。將溶液在25℃下攪拌16hr。將溶液濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化。獲得呈白色固體之標題化合物(68.35mg，122.53μmol，55.31%產率，95.63%純度)。LCMS：534[M+1]；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.69(dd,J=2.63,6.05Hz,1H),7.54-7.64(m,1H),7.12(t,J=9.41Hz,1H),6.81(s,1H),5.70-6.08(m,1H),5.14(quin,J=6.42Hz,1H),4.84(d,J=15.41Hz,1H),4.33-4.53(m,2H),4.16(dd,J=5.75,14.31Hz,1H),3.43-3.88(m,5H),3.32(dd,J=7.27,14.98Hz, 1H),3.17(s,3H),3.02(dd,J=5.81,15.83Hz,1H),2.74-2.89(m,1H),2.66(d,J=15.77Hz,1H),1.17(d,J=6.97Hz,3H)。
化合物136：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8,8-二氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(R)-3,10-二甲基-8,11-二側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(R)-3,10-二甲基-8-亞甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(370.00mg,1.07mmol,1.00eq)於THF(10.00mL)及H2O(5.00mL)中之溶液中，在0℃下添加OsO4(27.20mg,107.00μmol,5.55μL,0.10eq)及NaIO4(686.59mg,3.21mmol,177.87μL,3.00eq)。將混合物在15℃下攪拌16hr。將混合物用EtOAc(60mL)稀釋並用飽和Na2SO3(60mL)洗滌。將有機相以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮以給出棕色油狀物。所得油狀物經由矽膠管柱(EA/PE=5/1)純化，以提供標題化合物(200.00mg，539.61μmol，50.43%產率，94%純度)。
步驟2：三級丁基(R)-8,8-二氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯- 2-羧酸酯。在三級丁基(R)-3,10-二甲基-8,11-二側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(80.00mg,229.62μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在-30℃下在N2下邊攪拌邊緩慢添加DAST(222.08mg,1.38mmol,182.03μL,6.00eq)。將混合物邊攪拌邊升溫至15℃達16h。將混合物用10mL的水淬熄並以DCM(15mL*3)萃取。將合併之有機層用鹽水(15mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化，以提供呈無色油狀物之標題化合物(40.00mg，97.19μmol，42.33%產率，90%純度)。
步驟3：(R)-8,8-二氟-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(R)-8,8-二氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(40.00mg,97.19μmol,1.00eq)於DCM(3.00mL)中之溶液中，在15℃下添加TFA(462.00mg,4.05mmol,300.00μL,41.69eq)，並將混合物攪拌2h。將混合物在真空中濃縮，以提供獲得呈黃色油狀物之標題化合物(40.00mg，粗製，TFA)，其不經純化即直接用於下一步驟。
步驟4：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8,8-二氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(R)-8,8-二氟-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(40.00mg,104.09μmol,1.00eq,TFA)於DCM(2.00mL)中之溶液中，在15℃下添加TEA(63.20mg,624.54μmol,86.58μL,6.00eq)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(32.00mg,124.91μmol,1.20eq)，接著將混合物攪拌16h。將混合物在真空中濃縮並藉由製備型HPLC(TFA)純化二次，以給出呈白色固體之標題化合物(18mg，39.96μmol，38.39%產率，96%純度)。LCMS：433[M+1]；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.76(dd,J=2.82,5.33Hz,1 H),7.60(m,1 H),7.15(t,J=8.72Hz,1 H),6.67(s,1 H),5.07-5.16(m,1 H),4.87 (d,J=15.69Hz,1 H),4.72(t,J=12.42Hz,2 H),4.47(d,J=15.69Hz,1 H),3.68-3.79(m,2 H),3.25(s,3 H),3.04(dd,J=5.58,16.12Hz,1 H),2.72(d,J=15.56Hz,1 H),1.20(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物137_D1：(3R,8R*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺_D1。
步驟1：三級丁基(3R)-8-羥基-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(R)-3,10-二甲基-8,11-二側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(120.00mg,344.43μmol,1.00eq)於MeOH(5.00mL)中之溶液中，在0℃下添加NaBH4(39.09mg,1.03mmol,3.00eq)，接著將混合物在N2大氣下邊攪拌邊升溫至15℃達1h。將混合物倒入冰-水(20mL)中並攪拌5min。以乙酸乙酯(10mL*3)萃取水相。將合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM：MeOH=10：1)純化，以給出呈無色油狀物之標題化合物(78.00mg，222.60μmol，64.63%產率)。
步驟2：三級丁基(3R)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯- 2-羧酸酯_D1及三級丁基(3R)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D2。在三級丁基(3R)-8-羥基-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(60.00mg,171.23μmol,1.00eq)於DCM(1.00mL)中之溶液中，在-30℃下逐滴添加DAST(82.80mg,513.68μmol,67.87μL,3.00eq)，接著將混合物邊攪拌邊升溫至15℃達1h。將混合物持續在15℃下再攪拌1h。將混合物用10mL的水淬熄並以DCM(15mL*3)萃取。將合併之有機層用鹽水(15mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM：MeOH=10：1)純化，隨後進行SFC(SFC分離條件：管柱：IC(250mm*30mm,10um)；動相：[0.1%NH3H2O MEOH]；B%：25%-25%,4.35min；90min)分離，以給出呈無色油狀物之二種非鏡像異構物：20mg的三級丁基(3R)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D1及18mg的三級丁基(3R)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D2。
步驟3：(3R)-8-氟-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_D1。在三級丁基(3R)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D1(20mg,56.75μmol,1eq)於DCM(1mL)中之溶液中，在15℃下逐滴添加TFA(307.99mg,2.70mmol,199.99μL,47.60eq)，並將混合物攪拌1h。將混合物在真空中濃縮，以給出呈黃色油狀物之標題化合物(20.79mg，粗製，TFA)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟4：(3R,8R*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺_D1。在(3R)-8-氟-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯- 11-酮_D1(20.79mg,56.75μmol,1eq,TFA)及TEA(34.46mg,340.52μmol,47.40μL,6eq)於DCM(1mL)中之溶液中，添加苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(18.91mg,73.78μmol,1.3eq)，並在15℃下攪拌16h。將混合物在真空中濃縮，並藉由製備型HPLC(FA)純化，以給出呈白色固體之標題化合物(7.5mg，18.03μmol，31.76%產率，99.6%純度)。LCMS：415[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.80(dd,J=2.82,5.46Hz,1 H),7.56(m,1 H),7.15(t,J=8.66Hz,1 H),6.58(s,1 H),5.11-5.19(m,1 H),4.83(d,J=15.69Hz,1 H),4.36-4.59(m,5 H),3.97-4.07(m,1 H),3.23(s,3 H),3.04(dd,J=6.21,16.00Hz,1 H),2.72(d,J=16.19Hz,1 H),1.19(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物137_D2：(3R,8S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺_D2。
標題化合物係以類似於化合物246三級丁基(3R)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D2之方式製備。LCMS：415[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.81(dd,J=2.76,5.40Hz,1 H),7.59(m,1H),7.27(s,2 H),7.15(t,J=8.72Hz,1 H),6.67(s,1 H),5.11-5.21(m,1 H),4.93(d,J=15.56Hz,1 H),4.36-4.64(m,5 H),3.95-4.09(m,1 H),3.23(s,3 H),3.06(dd,J=5.58,15.87Hz,1 H),2.70(d,J=15.81Hz,1 H),1.16(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物138：(3R,8R*)-8-氟-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(3R,8R)-8-羥基-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。三級丁基(5R)-11-羥基-5,13-二甲基-14-側氧基-4,8,9,13-四氮雜三環[7.5.0.02,7]十四-1,7-二烯-4-羧酸酯(674mg,1.92mmol,1eq)經由SFC分離，以給出呈白色固體之二種非鏡像異構物：三級丁基(3R,8R)-8-羥基-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D1(345mg，936.31μmol，95.1%純度，t=1.66min)及三級丁基(3R,8R)-8-羥基-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D2(310mg，874.94μmol，45.49%產率，98.9%純度，t=1.89min)。SFC分析條件：AD-3S_4_5_40_3ML，管柱：Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D.,3um；動相：異丙醇(0.05% DEA)於CO2中自5%至40%；流速：3mL/min， 波長：220nm。SFC分離條件：管柱：AD(250mm*30mm,10um)；動相：[0.1%NH3H2O IPA]；B%：20%-20%，2.3min；150min。
步驟2：三級丁基(3R,8S)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D1。在所得三級丁基(3R,8R)-8-羥基-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯D1(150.00mg,428.07μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，在-30℃下添加DAST(207.00mg,1.28mmol,169.67μL,3eq)。將混合物在-30℃下攪拌2hr。將混合物用H2O(20mL)稀釋並以DCM(20mL * 3)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(SiO2,EA：MeOH=10：1)純化，以提供呈黃色油狀物且藉由HPLC檢查之標題化合物(89mg，250.78μmol，58.58%產率，99.3%純度)。SFC(IC-3S_3_5_40_3ML，管柱：Chiralpak IC-3 100×4.6mm I.D.,3um，動相：甲醇(0.05% DEA)於CO2中自5%至40%，流速：3mL/min，波長：220nm)顯示所得產物對應第一非鏡像異構物D1。
步驟3：(3R,8S)-8-氟-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_D1。在三級丁基(3R,8S)-8-氟-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_D1(85.00mg,241.20μmol,1eq)於DCM(5mL)中之溶液中，添加TFA(770.00mg,6.75mmol,500.00μL,28.00eq)。將混合物在16℃下攪拌2hr。將混合物在減壓下濃縮，以給出呈黃色油狀物之標題化合物(89mg，粗製，TFA)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。
步驟4：(3R,8R*)-8-氟-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(3R,8S)-8-氟-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_D1(70mg,277.46μmol,1eq,TFA)於DCM(5mL)中之溶液 中，添加TEA(140.38mg,1.39mmol,193.10μL,5eq)及苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲酸酯(83.02mg,277.46μmol,1eq)。將混合物在16℃下攪拌10hr。將混合物在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以給出呈白色固體之標題化合物(54mg，118.06μmol，42.55%產率，100%純度)。LCMS：458[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.70(dd,J=2.64,6.15Hz,1H),7.55-7.62(m,1H),7.14(t,J=9.35Hz,1H),6.62(s,1H),5.17(quin,J=6.84Hz,1H),4.85(d,J=15.69Hz,1H),4.31-4.63(m,5H),3.93-4.10(m,1H),3.23(s,3H),3.05(dd,J=6.02,15.69Hz,1H),2.71(d,J=16.19Hz,1H),1.19(d,J=6.90Hz,3H)。
化合物139：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3,8,8,10-四甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：N-(3-羥基-2,2-二甲基丙基)甲醯胺。在3-胺基-2,2-二甲基-丙-1-醇(3.3g,31.99mmol,1eq)於EtOH(60mL)中之溶液中，添加HCOOEt(4.73g,63.98mmol,2eq)。將混合物在80℃下攪拌6hr。將混合物在真空中濃縮，以提供呈無色油狀物之標題化合物(4.1g，粗製)且直接用於下一步驟。
步驟2：2,2-二甲基-3-(甲基胺基)丙-1-醇。在N-(3-羥基-2,2-二甲基-丙基)甲醯胺(4g,30.49mmol,1eq)於THF(50mL)中之溶液中，在-40℃下分批添加LAH(1.50g,39.64mmol,1.3eq)。接 著將混合物加熱至20℃達16hr。將混合物用H2O(1.5mL)、15% NaOH(1.5mL)及H2O(3mL)淬熄。將混合物過濾並在真空中濃縮，以提供呈白色固體之標題化合物(3.5g，粗製)且直接用於下一步驟。
步驟3：三級丁基(R)-3-((3-羥基-2,2-二甲基丙基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-1,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在(R)-5-(三級丁氧基羰基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(1.5g,5.33mmol,1eq)及2,2-二甲基-3-(甲基胺基)丙-1-醇(812.34mg,6.93mmol,1.3eq)於吡啶(15mL)中之溶液中，添加EDCI(1.23g,6.40mmol,1.2eq)。將混合物加熱至40℃達16hr。以EA(100mL*3)及H2O(100mL)萃取混合物。將合併之有機層用1N HCl(60mL*3)洗滌，過濾，以Na2SO4乾燥，在真空中濃縮。殘餘物藉由急速矽膠層析法(PE：EA：50%至100%)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(1.0g，2.63mmol，49.29%產率)。
步驟4：三級丁基(R)-3-((2,2-二甲基-3-((甲基磺醯基)氧基)丙基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-1,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在三級丁基(R)-3-((3-羥基-2,2-二甲基丙基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-1,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(800mg,2.10mmol,1eq)於DCM(8mL)中之溶液中，添加DIEA(815.24mg,6.31mmol,1.10mL,3eq)，隨後在-10℃下緩慢添加MsCl(289.03mg,2.52mmol,195.29μL,1.2eq)。將混合物在10℃下攪拌10min。添加額外MsCl(240.85mg,2.10mmol,162.74μL,1eq)，並將混合物在10℃下攪拌10min。將混合物用H2O(20mL)稀釋並以DCM(20mL)萃取。將有機層用0.5N HCl(10mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以給出呈白色固體之標題化合物(1.0g，粗製)且直接用於下一步驟。
步驟5：三級丁基(R)-3,8,8,10-四甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基(R)-3-((2,2-二甲基-3-((甲基磺醯基)氧基)丙 基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-1,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(1.0g,1.86mmol,1eq)於THF(10mL)中之溶液中，在0℃下添加NaH(149.07mg，3.73mmol，60%純度，2eq)。將混合物在40℃下攪拌16hr。將混合物再加熱至40℃達32hr。添加額外NaH(111.79mg，2.80mmol，60%純度，1.5eq)並將混合物加熱至40℃達48hr。將混合物倒入水(10mL)中並以EA(30mL*3)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析法(PE：EA：30%至50%)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(670mg，1.85mmol，99.20%產率)。
步驟6：(R)-3,8,8,10-四甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(R)-3,8,8,10-四甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(160mg,441.42μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2mL,61.19eq)。將混合物在15℃下攪拌1hr。將混合物在真空中濃縮，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(172mg，粗製，TFA)且直接用於下一步驟。
步驟7：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3,8,8,10-四甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(R)-3,8,8,10-四甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(85mg,225.84μmol,1eq,TFA)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TEA(114.26mg,1.13mmol,157.17μL,5eq)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(57.87mg,225.84μmol,1eq)。將混合物在15℃下攪拌16hr。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以提供呈白色固體之標題化合物(51.44mg，118.04μmol，52.27%產率，97.4%純度)。
LCMS：425[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.81(dd,J=2.76,5.52Hz,1 H),7.53-7.61(m,1 H),7.15(t,J=8.72Hz,1 H), 6.57(s,1 H),5.14(br t,J=6.90Hz,1 H),4.81(d,J=15.43Hz,1 H),4.51(d,J=15.31Hz,1 H),4.04(s,2 H),3.22(s,3 H),3.00-3.17(m,3 H),2.70(d,J=15.94Hz,1 H),1.11-1.24(m,9 H)。
化合物140：(R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-3,8,8,10-四甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物139之方式，在步驟7中以苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)胺甲酸酯取代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯來製備。LCMS：468[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.70(dd,J=2.57,6.21Hz,1 H),7.56-7.63(m,1 H),7.15(t,J=9.35Hz,1 H),6.54(s,1 H),5.08-5.21(m,1 H),4.81(d,J=15.31Hz,1 H),4.52(d,J=15.18Hz,1 H),4.04(s,2 H),3.22(s,3 H),3.11-3.18(m,1 H),2.99-3.09(m,2 H),2.70(d,J=16.19Hz,1 H),1.11-1.23(m,9 H)。
化合物141：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-羥基-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(R)-3-(((3-(苄氧基)-1-(羥基甲基)環丁基)甲基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在[3-苄氧基-1-(甲基胺基甲基)環丁基]甲醇(1.6g,4.58mmol,1eq,TFA)與(R)-5-(三級丁氧基羰基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(1.03g,3.66mmol,0.8eq)於吡啶(10mL)中之混合物中，添加EDCI(1.05g,5.50mmol,1.2eq)，將反應混合物在40℃下攪拌16小時。將反應混合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋並用稀HCl(1N,80mL*3)洗滌，將有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法純化。獲得呈黃色固體之標題化合物(835mg，98%純度)。
步驟2：三級丁基(R)-3-(((3-(苄氧基)-1-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)環丁基)甲基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯及三級丁基(R)-3-(((3-(苄氧基)-1-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)環丁基)甲基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-2-(甲基磺醯基)-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在三級丁基(R)-3-(((3-(苄氧基)-1-(羥基甲基)環丁基)甲基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(612.24mg,1.20mmol,1.00eq)於DCM(6mL)中之溶液中，添加DIEA(466.56mg,3.61mmol,628.78μL,3eq)及MsCl(206.76mg,1.81mmol,139.71μL,1.5eq)。將混合物在20℃下攪拌2hr。添加額外MsCl(206.76mg,1.81mmol, 139.71μL,1.5eq)，並將混合物在20℃下攪拌1hr。以DCM(30mL*2)及H2O(20mL)萃取混合物。將合併之有機層用0.5N HCl(10mL)洗滌，以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。以提供呈棕色油狀物之標題化合物之混合物且直接用於下一步驟。
步驟3：三級丁基(R)-3-(苄氧基)-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯。在三級丁基(R)-3-(((3-(苄氧基)-1-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)環丁基)甲基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯及三級丁基(R)-3-(((3-(苄氧基)-1-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)環丁基)甲基)(甲基)胺甲醯基)-6-甲基-2-(甲基磺醯基)-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(900mg,1.46mmol,1eq)於THF(10mL)中之溶液中，在0℃下添加NaH(234.15mg，5.85mmol，60%純度，4eq)及NaI(43.87mg,292.68μmol,0.2eq)。將混合物在40℃下攪拌16hr。添加額外NaH(234.12mg，5.85mmol，60%純度，4eq)並將混合物在40℃下攪拌48hr。將混合物在40℃下攪拌16hr。將混合物與另一批次合併並用H2O(40mL)淬熄，並以EA(80mL*3)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。將所得殘餘物與另一批次粗製產物合併，並藉由管柱層析法(SiO2，PE：EA=30%至60%)純化，以給出呈無色油狀物之總計350mg的所欲產物。
步驟4：三級丁基(R)-3-羥基-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯。在三級丁基(R)-3-(苄氧基)-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯(350mg,728.26μmol,1.00eq)於MeOH(10.00mL)中之溶液中，在N2下添加Pd/C(50mg，728.26μmol，10%純度，1.00eq)。在真空下將懸浮液除氣並以H2吹掃數次。將混合物在H2(20psi)下在40℃下攪拌3小時。將混合物在H2(20psi)下在40℃下攪拌16小時。將混合物在H2(50psi)下 在25℃下攪拌16小時。將混合物用MeOH(80mL)稀釋，過濾並在真空中濃縮，以給出呈白色固體之標題化合物(290mg，粗製)，其直接用於下一步驟。
步驟5：(R)-3-羥基-3',10'-二甲基-1',2',3',4',9',10'-六氫-7'H,11'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-11'-酮。在三級丁基(R)-3-羥基-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯(55mg,140.85μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TFA(2.82g,24.76mmol,1.83mL,175.79eq)。將混合物在15℃下攪拌0.5hr。將混合物在真空中濃縮。獲得呈棕色油狀物之標題化合物(60mg，粗製，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟6：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-羥基-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧醯胺。在(R)-3-羥基-3',10'-二甲基-1',2',3',4',9',10'-六氫-7'H,11'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-11'-酮(58mg,143.43μmol,1eq,TFA)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(36.75mg,143.43μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TEA(72.57mg,717.14μmol,99.82μL,5eq)。將混合物在15℃下攪拌30min。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化。獲得呈白色固體之標題化合物(25.02mg，54.65μmol，38.11%產率，98.84%純度)。LCMS：453[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.82(dd,J=2.76,5.65Hz,1 H),7.70(ddd,J=2.76,4.74,9.19Hz,1 H),7.28(t,J=8.97Hz,1 H),4.94-5.04(m,2 H),4.31-4.41(m,4 H),3.43(s,2 H),3.19(s,3 H),3.01(dd,J=5.90,15.81Hz,1 H),2.67(d,J=15.94Hz,1 H),2.40-2.50(m,2 H),1.98(dd,J=7.84,12.11Hz,1 H),1.89(dd,J=7.15,12.67Hz,1 H),1.22(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物142：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-氟-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(R)-3-氟-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯。在三級丁基(R)-3-羥基-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯(70mg,179.27μmol,1eq)於DCM(1.5mL)中之溶液中，在-40℃下添加DAST(86.69mg,537.81μmol,71.06μL,3eq)。將混合物在0℃下攪拌1hr。將混合物與另一批次粗製反應合併。用H2O(30mL)稀釋並以DCM(20mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供獲得呈棕色油狀物之100mg的標題化合物。
步驟2：(R)-3-氟-3',10'-二甲基-1',2',3',4',9',10'-六氫-7'H,11'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-11'-酮。在三級丁基(R)-3-氟-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯(80mg,203.84μmol,1eq)於DCM(1.5mL)中之溶液中，添加TFA(3.50g,30.71mmol,2.27mL,150.68 eq)。將混合物在10℃下攪拌1hr。將混合物在真空中濃縮。獲得呈棕色油狀物之標題化合物(85mg，粗製，TFA)。
步驟3：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-氟-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧醯胺。在(R)-3-氟-3',10'-二甲基-1',2',3',4',9',10'-六氫-7'H,11'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-11'-酮(80mg,196.86μmol,1eq,TFA)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(50.44mg,196.86μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TEA(99.60mg,984.31μmol,137.01μL,5eq)。將混合物在15℃下攪拌30min。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(PE：EA=0：1)純化，進一步藉由製備型HPLC(FA)純化。獲得呈白色固體之標題化合物(16.53mg，35.97μmol，18.27%產率，98.9%純度)。LCMS：455[M+1]。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ=7.82(dd,J=2.76,5.65Hz,1H),7.70(ddd,J=2.76,4.71,9.10Hz,1 H),7.28(t,J=8.97Hz,1 H),5.21(quin,J=6.21Hz,1 H),5.05-5.24(m,1 H),5.04-5.12(m,1 H),4.93-5.04(m,2 H),4.41(d,J=2.01Hz,2 H),4.35(d,J=16.69Hz,1 H),3.44(s,2 H),3.21(s,3 H),3.01(dd,J=5.83,15.75Hz,1 H),2.66(d,J=15.81Hz,1 H),2.42-2.62(m,2 H),2.22-2.36(m,2 H),1.23(d,J=6.90Hz,3 H)。
化合物143：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3,3-二氟-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(R)-3',10'-二甲基-3,11'-二側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯。在三級丁基(R)-3-羥基-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯(130mg,332.93μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，添加DMP(282.42mg,665.86μmol,206.14μL,2eq)。將混合物在15℃下攪拌1hr。將混合物與另一批次合併，用DCM(30mL)稀釋並過濾，將濾液在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，PE：EA：2：1至1：2)純化，以給出呈白色固體之100mg的所欲產物。
步驟2：三級丁基(R)-3,3-二氟-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯。在三級丁基(R)-3',10'-二甲基-3,11'-二側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯(90mg,231.68μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，在-40℃下添加DAST(186.72mg,1.16mmol,153.05μL,5eq)。將混合物在0℃下攪拌1hr。將混合物與另一批次(EW619-1976)合併，用H2O(30mL)稀釋並以DCM(20mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。獲得呈棕色油狀物之100mg粗製產物，其直接用於下一步驟。
步驟3：(R)-3,3-二氟-3',10'-二甲基-1',2',3',4',9',10'-六氫-7'H,11'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-11'-酮。在三級丁基(R)-3,3-二氟-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧酸酯(100mg,243.63μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2mL,110.87eq)。將混合物在20℃下攪拌0.5hr。將混合物在真空中濃縮，以給出呈棕色油狀物之標題化合物(110mg，粗製，TFA)。
步驟4：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3,3-二氟-3',10'-二甲基-11'-側氧基-1',3',4',9',10',11'-六氫-2'H,7'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-2'-羧醯胺。在(R)-3,3-二氟-3',10'-二甲基-1',2',3',4',9',10'-六氫-7'H,11'H-螺[環丁烷-1,8'-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯]-11'-酮(100mg,322.23μmol,1eq,TFA)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(82.56mg,322.23μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TEA(163.03mg,1.61mmol,224.25μL,5eq)。將混合物在15℃下攪拌30min。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化。獲得呈白色固體之標題化合物(35.85mg，73.15μmol，22.70%產率，96.4%純度)。
LCMS：473[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.79(dd,J=2.75,5.44Hz,1 H),7.59(ddd,J=2.87,4.52,9.11Hz,1 H),7.15(t,J=8.74Hz,1 H),6.69(s,1 H),5.14(quin,J=6.51Hz,1 H),4.84(d,J=15.53Hz,1 H),4.41-4.52(m,3 H),3.46-3.58(m,2 H),3.24(s,3 H),3.03(dd,J=5.87,16.02Hz,1 H),2.51-2.78(m,5 H),1.20(d,J=6.97Hz,3 H)。
化合物144_E1：(S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺_E1。
步驟1：5-(三級丁基)3-乙基2-(2-(氯甲基)烯丙基)-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯。在5-(三級丁基)3-乙基2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(10g,33.86mmol,1eq)於DMF(130mL)中之溶液中，添加Cs2CO3(16.55g,50.79mmol,1.5eq)及3-氯-2-(氯甲基)丙-1-烯(21.16g,169.30mmol,19.59mL,5eq)。將溶液在50℃下攪拌3hr。將混合物用EtOAc(100mL)稀釋並過濾。將濾液倒入0.5N HCl(300mL)中。以乙酸乙酯(200mL*2)萃取溶液。將合併之有機層用鹽水(200mL*3)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化。獲得呈白色固體之標題化合物(5.3g，13.53mmol，39.96%產率，98%純度)。LCMS：384[M+1]。
步驟2：三級丁基10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在5-(三級丁基)3-乙基2-(2-(氯甲基)烯丙基)-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二羧酸酯(5.3g,13.81mmol,1eq)於EtOH(21mL)中之溶液中，添加MeNH2(42.88g，414.20mmol，30eq，30% MeNH2於EtOH中)。將混合物在密封管中加熱至80℃達16hr。將溶液濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化。獲得呈白色固體之標題化合物(2.6g，7.82mmol，56.65%產率)。LCMS：333[M+1]。
步驟3：三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基10-甲基-8-亞甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(1.2g, 3.61mmol,1eq)於THF(30mL)及H2O(15mL)中之溶液中，在0℃下添加OsO4(275.34mg,1.08mmol,56.19μL,0.3eq)及NaIO4(2.32g,10.83mmol,600.14μL,3eq)。將混合物在10℃下攪拌7hr。將溶液倒入冰飽和NaHSO3(100mL)中。以乙酸乙酯(50mL*2)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(50mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化。獲得呈白色固體之標題化合物(580mg，1.56mmol，43.21%產率，90%純度)。LCMS：353[M+19]。
步驟4：三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在三級丁基10-甲基-8,11-二側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(580mg,1.56mmol,1eq)於MeOH(15mL)中之溶液中，在0℃下添加NaBH4(107.62mg,2.84mmol,1.82eq)。將溶液在0℃下攪拌1hr。將溶液倒入水(30mL)中。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。獲得呈白色固體之標題化合物(550mg，粗製)。LCMS：337[M+1]。
步驟5：三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E1及三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E2。三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(580mg,1.53mmol)之消旋物經由SFC解析，以給出呈白色固體之兩種鏡像異構物：三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E1(200mg，558.29μmol，36.38%產率，93.9%純度，t=3.176min)及三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5- a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E2(250mg，684.48μmol，44.60%產率，92.1%純度，t=3.401min)。
SFC分析方法：IC-3S_4_5_40_3ML，管柱：Chiralpak IC-3 100×4.6mm I.D.,3um，動相：異丙醇(0.05% DEA)於CO2中自5%至40%，流速：3mL/min，波長：254nm。
SFC分離方法：管柱：IC(250mm*30mm,10um)；動相：[0.1%NH3H2O IPA]；B%：35%-35%，4.35min；100min。
步驟6：三級丁基(S)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E1。在三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E1(140.00mg,390.80μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，在-20℃下添加DAST(201.26mg,1.25mmol,164.97μL,3.19eq)。將溶液在0℃下攪拌0.5hr。將溶液倒入冰飽和NaHCO3(30mL)中。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由製備型TLC純化。獲得呈黃色油狀物之標題化合物(75mg，221.65μmol，56.72%產率)。
步驟7：(S)-8-氟-10-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_E1。在三級丁基(S)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E1(75.00mg,221.65μmol,1eq)於DCM(5mL)中之溶液中，添加TFA(7.70g,67.53mmol,5.00mL,304.68eq)。將溶液在25℃下攪拌0.5hr。將溶液濃縮。獲得呈黃色油狀物之標題化合物(80mg，粗製，TFA)。
步驟8：(S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺E1。在(S)-8-氟-10-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮_E1(78mg,1eq,TFA) 於DCM(5mL)中之溶液中，添加TEA(112.02mg,1.11mmol,154.09μL,5eq)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(56.73mg,221.40μmol,1eq)。將溶液在25℃下攪拌16hr。將溶液濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化。獲得呈白色固體之標題化合物(52.09mg，129.06μmol，99.2%純度)。LCMS：401[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.79(dd,J=2.76,5.52Hz,1H),7.59(ddd,J=2.76,4.52,9.03Hz,1H),7.14(t,J=8.66Hz,1H),6.78(s,1H),4.65-4.86(m,2H),4.35-4.63(m,1H),3.97-4.07(m,1H),3.79-3.95(m,2H),3.22(s,3H),2.88(br t,J=5.71Hz,2H)。
化合物144_E2：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-氟-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺E2。
標題化合物係以類似於化合物144_E1之方式，以三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E2取代三級丁基8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E1來製備。LCMS：401[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.78(dd,J=2.76,5.27Hz,1H),7.56-7.63(m,1H),7.14(t,J=8.72Hz,1H),6.81(s,1H),4.65-4.89(m,2H),4.32-4.62(m,4H),4.01(br dd,J=5.21,10.85Hz,1H),3.77-3.95(m,2H),3.22(s,3H),2.82-2.94(m,2H)。
化合物145_D1：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(R)-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯。在NaH(24.97mg，624.28μmol，60%純度，3eq)於THF(0.6mL)中之懸浮液中，在-40℃下添加三級丁基(R)-8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯_E1(70mg,208.09μmol,1eq)於THF(0.6mL)中之溶液，將混合物在-40℃下攪拌30min。接著在-40℃下逐滴添加2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(133.67mg,624.28μmol,3eq)於THF(0.4mL)中之溶液。將混合物在5℃下攪拌1hr。將混合物在0℃下用H2O(20mL)淬熄並以EA(30mL*2)萃取。將合併之有機層以Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以給出呈黃色油狀物之標題化合物(85mg，粗製)，其直接用於下一步驟。
步驟2：(R)-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(R)-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(120mg,299.69μmol,1eq)於DCM(2mL)中之溶液中，添加TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,90.13eq)。將混合物在15℃下 攪拌0.5hr。將混合物在真空中濃縮，以給出呈黃色油狀物之標題化合物(126mg，粗製，TFA)。
步驟3：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(R)-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(125mg,301.69μmol,1eq,TFA)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(77.30mg,301.69μmol,1eq)於DCM(5mL)中之溶液中，添加EA(152.64mg,1.51mmol,209.96μL,5eq)。將混合物在15℃下攪拌3hr。將混合物在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化，以給出獲得呈白色固體之標題化合物(65.88mg，140.76μmol，46.66%產率，98.8%純度)。LCMS：463[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.78(dd,J=2.76,5.40Hz,1 H),7.60(ddd,J=2.82,4.55,9.07Hz,1 H),7.15(t,J=8.72Hz,1 H),6.79(s,1 H),5.75-6.08(m,1 H),4.57-4.78(m,3 H),4.25-4.35(m,2 H),3.73-3.95(m,4 H),3.42-3.60(m,2 H),3.22(s,3 H),2.79-2.92(m,2 H)。
化合物145_D2：(S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(2,2-二氟乙氧基)-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
標題化合物係以類似於化合物145_D1之方式，以三級丁基(S)-8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯取代三級丁基(R)-8-羥基-10-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯來製備。LCMS：463[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ=7.78(dd,J=2.76,5.52Hz,1 H),7.60(ddd,J=2.76,4.58,9.10Hz,1 H),7.14(t,J=8.72Hz,1 H),6.84(s,1 H),5.75-6.10(m,1 H),4.55-4.77(m,3 H),4.25-4.36(m,2 H),3.72-3.95(m,4 H),3.43-3.61(m,2 H),3.22(s,3 H),2.79-2.93(m,2 H)。
化合物146：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
步驟1：(R)-3-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮。在三級丁基(R)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(140mg,436.97μmol,1eq)於DCM(10mL)中之溶液中，添加TFA(7.70g,67.53mmol,5mL,154.54eq)。將溶液在20℃下攪拌1hr。TLC(乙酸乙酯)顯示起始材料消耗殆盡。將溶液濃縮。獲得呈黃色油狀物之標題化合物(146mg，粗製，TFA)。
步驟2：(R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。在(R)-3-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(73mg,218.37μmol,1eq,TFA)於DCM(5mL)中之溶液中，添加TEA(66.29mg,655.11μmol,91.18μL,3eq)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(50.36mg,196.53μmol,0.9eq)。將溶液在20℃下攪拌16hr。將溶液濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化。獲得呈白色固體之標題化合物(55mg，143.11μmol，65.54%產率，99.5%純度)。LCMS：383[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.81(dd,J=2.76,5.52Hz,1H),7.63(ddd,J=2.89,4.55,9.13Hz,1H),7.12(t,J=8.78Hz,1H),7.02(s,1H),6.20(br s,1H),5.15(quin,J=6.40Hz,1H),4.88(d,J=15.94Hz,1H),4.42-4.55(m,3H),3.43-3.53(m,2H),3.02(dd,J=5.83,15.75Hz,1H),2.67(d,J=15.81Hz,1H),2.27-2.38(m,2H),1.17(d,J=6.90Hz,3H)。
化合物147：(R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧醯胺。
在(R)-3-甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(73mg,218.37μmol,1eq, TFA)於DCM(5mL)中之溶液中，添加TEA(66.29mg,655.11μmol,91.18μL,3eq)及苯基N-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]胺甲酸酯(58.81mg,196.53μmol,0.9eq)。將溶液在20℃下攪拌16hr。將溶液濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(FA)純化。獲得呈白色固體之標題化合物(47.8mg，112.02μmol，51.30%產率，99.69%純度)。LCMS：426[M+1]。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.71(dd,J=2.70,6.09Hz,1H),7.55-7.64(m,1H),7.12(t,J=9.47Hz,1H),6.87(s,1H),6.12(br s,1H),5.17(quin,J=6.40Hz,1H),4.88(d,J=15.81Hz,1H),4.43-4.56(m,3H),3.45-3.53(m,2H),3.03(dd,J=5.90,15.81Hz,1H),2.67(d,J=15.81Hz,1H),2.28-2.39(m,2H),1.17(d,J=6.90Hz,3H)。
化合物148：(3R,8S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡 -2(1H)-羧醯胺。
步驟1：(2S)-1-烯丙基氧基-3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-丙-2-醇。在(2R)-3-烯丙基氧基丙-1,2-二醇(8g,60.53mmol,1eq)及Imid(6.18g,90.80mmol,1.5eq)於DCM(50mL)中之溶液中，在0℃下邊攪拌邊逐滴添加TBSCl(9.12g,60.53mmol,7.42mL,1eq)達1h。將混合物用飽和NH4Cl水溶液(50mL*1)淬熄並以EtOAc(50mL*3)萃取。將有機層用鹽水(50mL*1)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙 酯=50/1至20/1)純化。獲得呈無色液體之標題化合物(12g，48.70mmol，80.45%產率)。
步驟2：[(1S)-1-(烯丙基氧基甲基)-2-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-乙基]甲烷磺酸鹽。在(2S)-1-烯丙基氧基-3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-丙-2-醇(12g,48.70mmol,1eq)及DIEA(18.88g,146.09mmol,25.45mL,3eq)於DCM(80mL)中之溶液中，在0℃下邊攪拌邊添加MsCl(8.37g,73.05mmol,5.65mL,1.5eq)達2h。將混合物用1N HCl水溶液(100mL*1)淬熄並以EtOAc(60mL*3)萃取。將有機層用鹽水(60mL*1)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以提供獲得呈黃色油狀物之標題化合物(15.9g，粗製)，其不經純化即直接用於下一步驟。
步驟3：(2R)-1-烯丙基氧基-3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-N-甲基-丙-2-胺。將[(1S)-1-(烯丙基氧基甲基)-2-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-乙基]甲烷磺酸鹽(15.9g,49.00mmol,1eq)與甲胺(49.00mmol，30%，50mL EtOH溶液)之混合物在80℃下攪拌32h。接著將混合物在80℃下再攪拌16h。將混合物在真空下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯=50/1至10/1)純化，以給出呈黃色油狀物之標題化合物(8.0g，30.83mmol，62.93%產率)。
步驟4：三級丁基(6R)-3-[[(1R)-1-(烯丙基氧基甲基)-2-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-乙基]-甲基-胺甲醯基]-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在(6R)-5-三級丁氧基羰基-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-3-羧酸(2g,7.11mmol,1eq)及(2R)-1-烯丙基氧基-3-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-N-甲基-丙-2-胺(2.21g,8.53mmol,1.2eq)於Py(15mL)中之溶液中，添加EDCI(1.64g,8.53mmol,1.2eq)。將溶液在40℃下攪拌16hr。將溶液用乙酸乙酯(100mL)稀釋。將有機相用1N HCl(100mL*3)及鹽水(80mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化，以給 出呈黃色固體之標題化合物(1.9g，3.63mmol，51.12%產率)。LCMS：523[M+1]。
步驟5：三級丁基(6R)-3-[[(1S)-1-(烯丙基氧基甲基)-2-羥基-乙基]-甲基-胺甲醯基]-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯。在三級丁基(6R)-3-[[(1R)-1-(烯丙基氧基甲基)-2-[三級丁基(二甲基)矽基]氧基-乙基]-甲基-胺甲醯基]-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(1.9g,3.63mmol,1eq)於THF(30mL)中之溶液中，添加TBAF(1M,4.36mL,1.2eq)。將溶液在25℃下攪拌0.5hr。將溶液倒入水(30mL)中。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(20mL*3)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化，以給出呈白色固體之標題化合物(1.23g，3.01mmol，82.84%產率)。
步驟6：三級丁基(3R,8S)-8-(烯丙基氧基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯。在三級丁基(6R)-3-[[(1S)-1-(烯丙基氧基甲基)-2-羥基-乙基]-甲基-胺甲醯基]-6-甲基-2,4,6,7-四氫吡唑并[4,3-c]吡啶-5-羧酸酯(1.13g,2.77mmol,1eq)於THF(60mL)中之溶液中，添加三丁基磷烷(1.68g,8.30mmol,2.05mL,3eq)。將溶液在25℃下攪拌15min。接著添加ADDP(2.09g,8.30mmol,3eq)。將溶液在70℃下攪拌16hr。將溶液用乙酸乙酯(50mL)稀釋。將有機相用1N HCl(30mL*3)及鹽水(50mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化，以給出呈白色固體之標題化合物(818mg，2.07mmol，74.97%產率，99%純度)。LCMS：391[M+1]。
步驟7：給出三級丁基(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯。將三級丁基(3R,8S)-8-(烯丙基氧基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯(900mg,2.30mmol,1eq)、OsO4(175.79mg,691.46μmol,35.88μL,0.3eq)、NaIO4(2.46g,11.52mmol,638.59μL,5eq)、及NMO(1.35g,11.52 mmol,1.22mL,5eq)於二烷(30mL)及H2O(10mL)中之溶液在60℃下攪拌16hr。將混合物倒入水(30mL)中。以EtOAc(30mL*2)萃取溶液。將合併之有機層用Na2S2O3(30mL)及鹽水(30mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由管柱層析法純化，以給出呈白色固體之所欲產物(600mg，1.67mmol，72.43%產率，97.5%純度)，其由SFC係86%de。產物藉由SFC(分析條件：OJ-3S_3_5_40_3ML；管柱：Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D.,3um，動相：甲醇(0.05% DEA)於CO2中自5%至40%流動；分離條件：管柱：OJ(250mm*30mm,5um)；動相：[0.1%NH3H2O MeOH]；B%：15%-15%，1.8min；90min)再純化，以給出呈白色固體之三級丁基(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯(410mg，1.17mmol，68.33%產率)。LCMS：351[M+1]。
步驟8：(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,9-二甲基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-10-酮。在三級丁基(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯(40mg,107.30μmol,1eq)於DCM(5mL)中之溶液中，添加TFA(7.70g,67.53mmol,5mL,629.35eq)。將溶液在20℃下攪拌0.5hr。將溶液濃縮，以提供獲得呈黃色油狀物之標題化合物(40mg，粗製，TFA)。
步驟9：(3R,8S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(羥基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡-2(1H)-羧醯胺。在(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,9-二甲基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-10-酮(39mg,1eq,TFA)於DCM(6mL)中之溶液中，添加TEA(45.98mg,454.39μmol,63.25μL,5eq)及苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(20.96mg,81.80μmol,0.9eq)。將溶液在20℃下攪拌16hr。將溶液濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC(管柱：Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um；動相： [水(0.225%FA)-ACN]；B%：18%-48%,10.5min)純化。獲得呈白色固體之標題化合物(27.27mg，65.40μmol，98.9%純度)。
LCMS：413[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.82(ddd,J=2.76,4.58,9.10Hz,1H),7.66(dd,J=2.64,5.40Hz,1H),7.18(t,J=8.78Hz,1H),6.89(s,1H),4.99-5.14(m,1H),4.45-4.54(m,1H),4.31-4.41(m,1H),4.03-4.26(m,3H),3.74-3.89(m,2H),3.26(s,3H),2.89(dd,J=5.65,15.69Hz,1H),2.61(d,J=15.81Hz,1H),1.04(d,J=6.90Hz,3H)。
化合物149：(3R,8S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(氟甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡 -2(1H)-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(3R,8S)-8-(氟甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯。在三級丁基(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯(120mg,342.45μmol,1eq)於DCM(6mL)中之溶液中，在0℃下添加DAST(165.60mg,1.03mmol,135.74μL,3eq)。將溶液在20℃下攪拌0.5hr。將溶液倒入飽和NaHCO3(30mL)中。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(SiO2，乙酸乙酯，Rf=0.51)純化，以給出呈白色固體之標題化合物(75mg，212.82μmol，49.72%產率)。
步驟2：(3R,8S)-8-(氟甲基)-3,9-二甲基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-10-酮。在三級丁基(3R,8S)-8-(氟甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯(70mg,198.64μmol,1eq)於DCM(5mL)中之溶液中，添加TFA(7.70g,67.53mmol,5mL,339.97eq)。將溶液在25℃下攪拌0.5hr。將溶液濃縮以給出呈黃色油狀物之標題化合物(73mg，粗製，TFA)。
步驟3：(3R,8S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-(氟甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡-2(1H)-羧醯胺。在(3R,8S)-8-(氟甲基)-3,9-二甲基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-10-酮(73mg,289.35μmol,1eq)於DCM(5mL)中之溶液中，添加苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(74.14mg,289.35μmol,1eq)及TEA(146.40mg,1.45mmol,201.37μL,5eq)。將溶液在25℃下攪拌16hr。LC-將混合物濃縮並藉由製備型HPLC純化，以給出呈白色固體之標題化合物(46.27mg，111.03μmol，38.37%產率，99.44%純度)。LCMS：415[M+1]。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.79(dd,J=2.69,5.38Hz,1H),7.62(m,1H),7.13(t,J=8.74Hz,1H),6.97(s,1H),5.15(m,1H),4.87(d,J=15.77Hz,1H),4.33-4.62(m,5H),3.94-4.09(m,1H),3.17-3.29(m,3H),3.03(dd,J=5.69,15.96Hz,1H),2.70(d,J=16.02Hz,1H),1.17(d,J=6.97Hz,3H)。
化合物150：(3R,8S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡 -2(1H)-羧醯胺。
步驟1：三級丁基(3R,8S)-8-(2,2-二氟乙氧基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯。在三級丁基(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯(100mg,285.38μmol,1eq)於THF(2mL)中之溶液中，在-20℃下添加NaH(22.83mg，570.76μmol，60%純度，2eq)。將溶液在-20℃下攪拌30min。接著添加2,2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(183.31mg,856.13μmol,3eq)，將溶液在25℃下攪拌2hr。將溶液倒入水(30mL)中。以乙酸乙酯(20mL*2)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(20mL*3)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並濃縮，以給出呈黃色油狀物之標題化合物(120mg，粗製)。
步驟2：(3R,8S)-8-(2,2-二氟乙氧基甲基)-3,9-二甲基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-10-酮。在三級丁基(3R,8S)-8-(2,2-二氟乙氧基甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8-四氫-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-2-羧酸酯(110mg,265.41μmol,1eq)於DCM(5mL)中之溶液中，添加TFA(7.70g,67.53mmol,5mL,254.43eq)。將溶液在25℃下攪拌0.5hr。將溶液濃縮以提供呈黃色油狀物之標題化合物(120mg，粗製，TFA)。
步驟3：(3R,8S)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-8-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-3,9-二甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a]吡-2(1H)-羧醯胺。在(3R,8S)-8-(2,2-二氟乙氧基甲基)-3,9-二甲基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-c]吡-10-酮(110 mg,349.95μmol,1eq)於DCM(5mL)中之溶液中，添加苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)胺甲酸酯(89.67mg,349.95μmol,1eq)及TEA(106.23mg,1.05mmol,146.13μL,3eq)。將溶液在25℃下攪拌16hr。將溶液濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化，以給出呈白色固體之標題化合物(80.53mg，165.22μmol，47.21%產率，97.75%純度)。LCMS：477[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 7.80(dd,J=2.51,5.14Hz,1H),7.54-7.69(m,1H),7.13(t,J=8.66Hz,1H),6.87(s,1H),5.60-6.01(m,1H),5.15(br t,J=6.21Hz,1H),4.85(br d,J=15.56Hz,1H),4.49-4.65(m,2H),4.33-4.47(m,1H),3.83-3.99(m,1H),3.46-3.80(m,4H),3.19(s,3H),3.03(br dd,J=5.52,15.81Hz,1H),2.71(br d,J=16.06Hz,1H),1.18(br d,J=6.90Hz,3H)。
化合物151：((3R,8S)-3,10-二甲基-2-(4-硝基苯甲醯基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-基)甲基4-硝基苯甲酸酯。
步驟1：(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮。將三級丁基(3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-2-羧酸酯(100.00mg,274.39μmol,1eq)與TFA(3.08g,27.01mmol,2.00mL,98.44eq)於DCM(4mL)中之混合物在15℃下在N2大氣下 攪拌1hr。將混合物在真空中濃縮，以給出呈黃色油狀物之標題化合物(103.8mg，274.35μmol，99.98%產率，TFA)，其直接用於下一步驟。
步驟2：((3R,8S)-3,10-二甲基-2-(4-硝基苯甲醯基)-11-側氧基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氫-2H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-8-基)甲基4-硝基苯甲酸酯。將((3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(103mg,272.24μmol,1eq,TFA)、4-硝基苯甲醯氯(325.33mg,1.75mmol,6.44eq)與TEA(220.38mg,2.18mmol,303.14μL,8eq)於DCM(6mL)中之混合物在15℃下在N2大氣下攪拌16hr。將MeOH(6mL)添加至混合物並攪拌30min。將混合物用冷的Na2CO3(aq.1N,20mL*3)洗滌。將有機相以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮，以給出呈黃色油狀物之標題化合物(180mg，粗製)。
將所得((3R,8S)-8-(羥基甲基)-3,10-二甲基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫-11H-吡啶并[4',3'：3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮呯-11-酮(180.00mg，粗製)與4-硝基苯甲醯氯(80.79mg,435.39μmol,1eq)、TEA(88.11mg,870.77μmol,121.20μL,2eq)、DMAP(2.66mg,21.77μmol,0.05eq)於DCM(5mL)中之混合物除氣並以N2吹掃3次，接著將混合物在15℃下在N2大氣下攪拌16hr。LCMS顯示主要形成所欲產物。將混合物倒入冰-水(10mL)中並攪拌1min。以DCM(20mL)萃取水相。將合併之有機相用鹽水(10mL)洗滌，以無水Na2SO4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化，以給出呈白色固體之標題化合物(85mg，146.57μmol，33.66%產率，97%純度)。LCMS：563[M+1]。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.32(br d,J=8.78Hz,4 H),8.19(d,J=8.78Hz,2 H),7.60(d,J=8.78Hz,2 H),5.43-5.71(m,1 H),4.15-4.59(m,6 H),2.94-3.53(m,7 H),2.56-2.82(m,1 H),1.23-1.35(m,3 H)。
實例1：HBV組裝測定
本發明之化合物對於HBV殼體組裝的干擾可使用基於螢光淬熄之體外組裝測定來測量，此測定係根據Zlotnick及同事(Nature Biotechnology 2006,24：358)所述之方法發展。在典型測定中，將突變HBV C150蛋白質(胺基酸1至150、C49A、C61A、C107A、150C)選殖至基於T7 RNA聚合酶之表現載體，在大腸桿菌(E.coli)中表現，並純化為均質的二聚體。將經純化的HBV核心蛋白去鹽，並用BODIPY-FL染料標記。
在一非限制性實施例中，在96孔板格式中進行組裝測定。在50mM Hepes緩衝液(pH 7.5)及150mM NaCl中進行組裝反應。將化合物與HBV CA蛋白質預培養15min，並藉由添加NaCl起始組裝反應。允許反應在室溫下持續1小時。記錄DMSO處理與化合物處理樣本之間的螢光變化，並分析組裝調節作用。
實例2：HBV複製抑制測定
在HBV感染或轉染細胞或穩定嵌入HBV之細胞例如HepG2.2.15細胞(Sells等人1987)中，判定揭示化合物對HBV複製的抑制。在此實例中，HepG2.2.15細胞係維持於含有10%胎牛血清(FBS)、遺傳黴素(Geneticin)、L-麩醯胺酸、青黴素及鏈黴素的細胞培養基中。將HepG2.2.15細胞以40,000細胞/孔之密度接種於96孔板，並用經連續稀釋之化合物(DMSO終濃度0.5%)單獨處理或與以西洋棋盤格式添加之藥物組合處理。使細胞與化合物培養三天，之後移除培養基，並添加含有化合物之新鮮培養基至細胞，並且再培養三天。在第6天，移除上清液，並在37℃下用DNA酶處理60分鐘，隨後在75℃下進行酶鈍化15分鐘。經包殼之HBV DNA自病毒粒子釋放，並藉由在含有2.5μg蛋白酶K之溶解緩衝劑(Affymetrix QS0010)中在50℃下培養40分鐘，以與HBV聚合酶共價聯結。藉由添加0.2M NaOH將HBV DNA變性，並使用分支DNA(BDNA)QuantiGene測定套組，根據製造商建議(Affymetrix)進行偵測。HBV DNA水準亦 使用qPCR定量，其係基於擴增QuickExtraction溶液(Epicentre Biotechnologies)萃取之經包殼HBV DNA，使用可雜交HBV DNA之HBV特異性PCR探針來擴增HBV DNA，並使用螢光標記探針定量。此外，與測試化合物單獨或組合培養之HepG2.2.15細胞的細胞存活性係使用CellTitre-Glo試劑根據製造商規程(Promega)判定。將來自僅含培養基之孔的平均背景信號自所有其他樣本扣除，並藉由正規化至來自0.5% DMSO處理之HepG2.2.15細胞的信號，使用方程式E1計算在各化合物濃度下的抑制百分比。
E1：抑制%=(DMSOave-Xi)/DMSOave×100%其中DMSOave係自DMSO對照處理孔計算的平均信號(0%抑制對照)，且Xi係自個別孔測量的信號。EC50值(達到50%抑制效應之有效濃度)藉由非線性擬合判定，其使用Graphpad Prism軟體(San Diego,CA)及方程式E2：E2：Y=Ymin+(Ymax-Ymin)/(1+10(LogEC50-X)×HillSlope)其中Y代表抑制百分比數值且X代表化合物濃度的對數。
將選定揭示化合物在如上述之HBV複製測定(BDNA測定)中分析，並在表6顯示這些活性化合物的代表性族群。表6顯示選定化合物族群藉由BDNA測定獲得之EC50值。在表6中，「A」代表1<EC50 100；「B」代表100<EC50 500；「C」代表500<EC50 1000；且「D」代表EC50>1000。
實例3：中間物16類似物之晶形
在本文中描述化合物151之晶形，其係中間物16之二對硝基-苯甲酸類似物。
X光晶體結構顯示於圖1。表7亦顯示此中間物的晶體數據及結構精修。
表8亦顯示中間物的原子座標(×104)及等效各向同性位移參數(A2×103)。
由此可見，中間物16類似物之立體組態係4S,9R。因此，得知衍生自中間物16之化合物的立體組態。
在本文中所引用之各個專利、專利申請案、及公開案之揭露內容其全文皆以引用方式併入本文中。
雖然本發明已參照特定實施例揭示，但顯而易見的是，本發明之其他實施例及變異可由所屬技術領域中具有通常知識者設計而不背離本發明之真實精神及範圍。隨附之申請專利範圍意圖被視為包括所有該等實施例及等效變異。

Claims (32)

  1. 一種式IA之化合物： 或其醫藥上可接受之鹽，其中A係CH 2或C=O；R 1係H、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-烯基、C 1-C 6-烷基-OH、或C 1-C 6-鹵烷基；R 2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-伸烷基、C 0-C 6-烷基-C 3-C 6-環烷基、C 0-C 6-烷基-C 2-C 6-雜環烷基、C 0-C 6-烷基-OR 6、C 0-C 6-烷基-N(R 7) 2、C 0-C 6-烷基-SR 8、C 0-C 6-烷基-S(O)R 8、C 0-C 6-烷基-S(O) 2R 8、C 0-C 6-烷基-C(O)OR 9、C 0-C 6-烷基-OC(O)R 9、C 0-C 6-烷基-OC(O)OR 9、C 0-C 6-烷基-OC(O)N(R 7) 2、及C 0-C 6-烷基-C(O)N(R 7) 2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R 2基團一起形成C 3-C 6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代；R 3每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、-O-C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH； R 4係選自(CR aR b) p-C 1-C 9-雜芳基、(CR aR b) p-C 6-C 12-芳基、(CR aR b) p-C 3-C 7-環烷基、及(CR aR b) p-C 2-C 6-雜環烷基，其中雜芳基、芳基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF 5、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、-O-C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH的基團取代；R 5係選自H、C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH；R 6係選自H、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、C 1-C 6-烯基、及C 0-C 6-烷基-C 3-C 6-環烷基；R 7每次出現時係獨立地選自H、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、C(O)C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH；R 8係選自H及C 1-C 6-烷基；R 9係選自H及C 1-C 6-烷基；R a每次出現時係獨立地選自H、-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、-O-C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH；R b每次出現時係獨立地選自H及C 1-C 6-烷基；m係0、1、2、3、或4；n係0、1、2、3、或4；p係0、1、2、3、或4；q係0或1；且 線係指可選地雙鍵。
  2. 如請求項1所述之化合物，其中A係C=O。
  3. 如請求項1或2所述之化合物，其中q係1。
  4. 如請求項1至3中任一項所述之化合物，其中R 1係H、C 1-C 6-烷基、或C 1-C 6-鹵烷基。
  5. 如請求項1至4中任一項所述之化合物，其中R 1係-CH 3、或-CH 2CHF 2。
  6. 如請求項1至5中任一項所述之化合物，其具有式II之結構： 或其醫藥上可接受之鹽。
  7. 如請求項1至6中任一項所述之化合物，其具有式III之結構： 或其醫藥上可接受之鹽，其中m係0、1、或2。
  8. 如請求項1至7中任一項所述之化合物，其中m係0、1或、2；且R 2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-烯基、C 0-C 6-烷基-OR 6、C 0-C 6-烷基-N(R 7) 2、C 0-C 6-烷基-C 3-C 6-環烷基、C 0-C 6-烷基-C 2-C 6-雜環烷基、C 0-C 6-烷基-SR 8、C 0-C 6-烷基-S(O)R 8、C 0-C 6-烷基-S(O) 2R 8、C 0-C 6-烷基-C(O)OR 9、及C 0-C 6-烷 基-C(O)N(R 7) 2，其中烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代。
  9. 如請求項1至8中任一項所述之化合物，其中m係1或2；且R 2每次出現時係獨立地選自=CH 2、-CH 2OH、-OH、-F、-CH 3、-CHF 2、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-OCH 2CHF 2、-NH 2、-N(CH 3) 2、嗎啉基、三亞甲亞胺基、吡咯啶基、-SCH 3、-S(O)CH 3、-S(O) 2CH 3、-CH 2C(O)OCH 3、-CH 2CH 2OH、-C(O)OH、-C(O)OCH 3、-C(O)OCH 2CH 3、-C(O)NHCH 3、-C(O)N(CH 3) 2、-C(OH)(CH 3) 2、-CH(OH)CH 3、-CH(OH)CH 2CH 3、及-CH(OH)-環丙基，其中嗎啉基、三亞甲亞胺基、及吡咯啶基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代。
  10. 如請求項1至9中任一項所述之化合物，其中n係0、1、或2；且R 3每次出現時係選自-OH、鹵基、及C 1-C 6-烷基。
  11. 如請求項1至10中任一項所述之化合物，其中R 4係(CR aR b) p-C 1-C 5-雜芳基或(CR aR b) p-C 6-芳基，其中雜芳基及芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF 5、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、-O-C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH的基團取代；R a係H或C 1-C 6-烷基；R b係H或C 1-C 6-烷基；且p係0或1。
  12. 如請求項1至11中任一項所述之化合物，其中R 4係C 1-C 5-雜芳基或C 6-芳基，其等之任一者係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-鹵烷基的基團取代。
  13. 如請求項1至12中任一項所述之化合物，其中R 4係苯基或吡啶基，其等之任一者係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-鹵烷基的基團取代。
  14. 如請求項1至13中任一項所述之化合物，其中R 4係選自由下列所組成之群組：
  15. 如請求項1至14中任一項所述之化合物，其中R 5係H或C 1-C 6-烷基。
  16. 如請求項1至15中任一項所述之化合物，其中R 5係H。
  17. 如請求項1至16中任一項所述之化合物，其中A係C=O；R 1係C 1-C 6-烷基；R 2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-伸烷基、C 0-C 6-烷基-C 3-C 6-環烷基、C 0-C 6-烷基-C 2-C 6-雜環烷基、C 0-C 6-烷基-OR 6、C 0-C 6-烷基-N(R 7) 2、C 0-C 6-烷基-SR 8、C 0-C 6-烷基-S(O)R 8、C 0-C 6-烷基-S(O) 2R 8、C 0-C 6-烷基-C(O)OR 9、及C 0-C 6-烷基-C(O)N(R 7) 2，其中烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；R 4係(CR aR b) p-C 6-C 12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C 1-C 6-烷基的基團取代；R 5係H；R 6係選自H、C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-鹵烷基；R 7每次出現時係獨立地選自H及C 1-C 6-烷基； R 8係C 1-C 6-烷基；R 9係選自H及C 1-C 6-烷基；m係0、1或2；n係0；p係0；且q係1。
  18. 如請求項1至17中任一項所述之化合物，其具有式IV之結構： 其中m係1或2；且R 2每次出現時係獨立地選自=CH 2、-CH 2OH、-OH、-F、-CH 3、-CHF 2、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-OCH 2CHF 2、-NH 2、-N(CH 3) 2、嗎啉基、三亞甲亞胺基、吡咯啶基、-SCH 3、-S(O)CH 3、-S(O) 2CH 3、-CH 2C(O)OCH 3、-CH 2CH 2OH、-C(O)OH、-C(O)OCH 3、-C(O)OCH 2CH 3、-C(O)NHCH 3、-C(O)N(CH 3) 2、-C(OH)(CH 3) 2、-CH(OH)CH 3、-CH(OH)CH 2CH 3、-CH(OH)-環丙基、-CH 2N(H)(C(O)-CH 3)、-CH 2N(H)CH 2CHF 2、-CH 2N(H)CH 2CF 3、-CH(OH)CH=CH 2、及螺-環丁基，其經-OH取代；其中嗎啉基、三亞甲亞胺基、及吡咯啶基係可選地經1或2個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代。
  19. 如請求項1所述之化合物，其中m係0、1、或2；且R 2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-伸 烷基、C 0-C 6-烷基-C 3-C 6-環烷基、C 0-C 6-烷基-C 2-C 6-雜環烷基、C 0-C 6-烷基-OR 6、C 0-C 6-烷基-N(R 7) 2、C 0-C 6-烷基-SR 8、C 0-C 6-烷基-S(O)R 8、C 0-C 6-烷基-S(O) 2R 8、C 0-C 6-烷基-C(O)OR 9、C 0-C 6-烷基-OC(O)R 9、C 0-C 6-烷基-OC(O)OR 9、C 0-C 6-烷基-OC(O)N(R 7) 2、及C 0-C 6-烷基-C(O)N(R 7) 2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R 2基團一起形成C 3-C 6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代。
  20. 如請求項1或請求項19所述之化合物，其中m係1或2；且R 2每次出現時係獨立地選自-CH 2N(H)(C(O)-CH 3)、-CH 2N(H)CH 2CHF 2、CH 2N(H)CH 2CF 3、CH(OH)CH=CH 2、及螺-環丁基，其經-OH取代。
  21. 如請求項1及19至20中任一項所述之化合物，其中A係C=O；R 1係C 1-C 6-烷基；R 2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-伸烷基、C 0-C 6-烷基-C 3-C 6-環烷基、C 0-C 6-烷基-C 2-C 6-雜環烷基、C 0-C 6-烷基-OR 6、C 0-C 6-烷基-N(R 7) 2、C 0-C 6-烷基-SR 8、C 0-C 6-烷基-S(O)R 8、C 0-C 6-烷基-S(O) 2R 8、C 0-C 6-烷基-C(O)OR 9、及C 0-C 6-烷基-C(O)N(R 7) 2，其中烷基、伸烷基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R 2基團一起形成C 3-C 6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代；R 4係(CR aR b) p-C 6-C 12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C 1-C 6-烷基的基團取代；R 5係H；R 6係選自H、C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-鹵烷基； R 7每次出現時係獨立地選自H、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、C(O)C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH；R 8係C 1-C 6-烷基；R 9係選自H及C 1-C 6-烷基；m係0、1或2；n係0；p係0；且q係1。
  22. 一種式V之化合物： 或其醫藥上可接受之鹽，其中A係CH 2或C=O；R 1係H、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-烯基、C 1-C 6-烷基-OH、或C 1-C 6-鹵烷基；R 2每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-伸烷基、C 0-C 6-烷基-C 3-C 6-環烷基、C 0-C 6-烷基-C 2-C 6-雜環烷基、C 0-C 6-烷基-OR 6、C 0-C 6-烷基-N(R 7) 2、C 0-C 6-烷基-SR 8、C 0-C 6-烷基-S(O)R 8、C 0-C 6-烷基-S(O) 2R 8、C 0-C 6-烷基-C(O)OR 9、C 0-C 6-烷基-OC(O)R 9、C 0-C 6-烷基-OC(O)OR 9、C 0-C 6-烷基-OC(O)N(R 7) 2、或C 0-C 6-烷基-C(O)N(R 7) 2，其中烷基、伸烷基、環 烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、或3個各自獨立地選自-OH及鹵基的基團取代；或二個R 2基團一起形成C 3-C 6螺環烷基，其中該環烷基係可選地經1、2、或3個各自個別地選自-OH及鹵基的基團取代；R 3每次出現時係獨立地選自-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、-O-C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH；R 4係選自(CR aR b) p-C 1-C 9-雜芳基、(CR aR b) p-C 6-C 12-芳基、(CR aR b) p-C 3-C 7-環烷基、及(CR aR b) p-C 2-C 6-雜環烷基，其中雜芳基、芳基、環烷基、及雜環烷基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF 5、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、-O-C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH的基團取代；R 5係選自H、C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH；R 6係選自H、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、C 1-C 6-烯基、及C 0-C 6-烷基-C 3-C 6-環烷基；R 7每次出現時係獨立地選自H、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、C(O)C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH；R 8係選自H及C 1-C 6-烷基；R 9係選自H及C 1-C 6-烷基；R a每次出現時係獨立地選自H、-OH、鹵基、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、-O-C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH；R b每次出現時係獨立地選自H及C 1-C 6-烷基；m係0、1、2、3、或4；n係0、1、2、3、或4；p係0、1、2、3、或4；且 線係指可選地雙鍵。
  23. 如請求項22所述之化合物，其中A係C=O。
  24. 如請求項22或23所述之化合物，其中R 1係H或C 1-C 6-烷基。
  25. 如請求項22至24中任一項所述之化合物，其中m係0。
  26. 如請求項22至25中任一項所述之化合物，其中R 4係(CR aR b) p-C 1- C 5-雜芳基或(CR aR b) p-C 6-芳基，其中雜芳基及芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自-OH、鹵基、-CN、-SF 5、C 1-C 6-烷基、C 1-C 6-鹵烷基、-O-C 1-C 6-烷基、及C 1-C 6-烷基-OH的基團取代；R a係H或C 1-C 6-烷基；R b係H或C 1-C 6-烷基；且p係0或1。
  27. 如請求項22至26中任一項所述之化合物，其中A係C=O；R 1係-CH 3；R 4係(CR aR b) p-C 6-C 12-芳基，其中芳基係可選地經1、2、3、或4個各自獨立地選自鹵基、-CN、及C 1-C 6-烷基的基團取代；R 5係H；m係0；n係0；且p係0。
  28. 一種醫藥組成物，其包含如請求項1至27中任一項所述之化合物及醫藥上可接受之載劑。
  29. 一種治療有效量的如請求項1至27中任一項所述之化合物之用途，其用於製備在有需要之個體中治療HBV感染之醫藥品。
  30. 一種治療有效量的如請求項1至27中任一項所述之化合物之用途，其用於製備在有需要之個體中抑制或減少含HBV DNA顆粒或含HBV RNA顆粒形成或存在之醫藥品。
  31. 如請求項29或30所述之用途，其中醫藥品進一步組合至少一種選自由HBV聚合酶抑制劑、免疫調節劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、殼體組裝調節劑、反轉錄酶抑制劑、親環素/TNF抑制劑、TLR促效劑、HBV疫苗、及其任何組合所組成之群組的額外治療劑向該個體投予。
  32. 一種製備如請求項1所述之化合物之方法。
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