TW200529849A - Diaryl urea derivatives in the treatment of protein kinase dependent diseases - Google Patents

Diaryl urea derivatives in the treatment of protein kinase dependent diseases Download PDF

Info

Publication number
TW200529849A
TW200529849A TW093136547A TW93136547A TW200529849A TW 200529849 A TW200529849 A TW 200529849A TW 093136547 A TW093136547 A TW 093136547A TW 93136547 A TW93136547 A TW 93136547A TW 200529849 A TW200529849 A TW 200529849A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
phenyl
group
mmol
trifluoromethyl
doc
Prior art date
Application number
TW093136547A
Other languages
English (en)
Inventor
Guido Bold
Giorgio Caravatti
Andreas Floersheimer
Vito Guagnano
Patricia Imbach
Keiichi Masuya
Johannes Roesel
Andrea Vaupel
Carlos Garcia-Echeverria
Original Assignee
Novartis Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=34635447&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TW200529849(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from GB0327734A external-priority patent/GB0327734D0/en
Priority claimed from GB0417805A external-priority patent/GB0417805D0/en
Application filed by Novartis Ag filed Critical Novartis Ag
Publication of TW200529849A publication Critical patent/TW200529849A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/68—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D211/72—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C04—CEMENTS; CONCRETE; ARTIFICIAL STONE; CERAMICS; REFRACTORIES
    • C04B—LIME, MAGNESIA; SLAG; CEMENTS; COMPOSITIONS THEREOF, e.g. MORTARS, CONCRETE OR LIKE BUILDING MATERIALS; ARTIFICIAL STONE; CERAMICS; REFRACTORIES; TREATMENT OF NATURAL STONE
    • C04B35/00—Shaped ceramic products characterised by their composition; Ceramics compositions; Processing powders of inorganic compounds preparatory to the manufacturing of ceramic products
    • C04B35/622—Forming processes; Processing powders of inorganic compounds preparatory to the manufacturing of ceramic products
    • C04B35/626—Preparing or treating the powders individually or as batches ; preparing or treating macroscopic reinforcing agents for ceramic products, e.g. fibres; mechanical aspects section B
    • C04B35/63—Preparing or treating the powders individually or as batches ; preparing or treating macroscopic reinforcing agents for ceramic products, e.g. fibres; mechanical aspects section B using additives specially adapted for forming the products, e.g.. binder binders
    • C04B35/632—Organic additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/34—One oxygen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/47—One nitrogen atom and one oxygen or sulfur atom, e.g. cytosine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Ceramic Engineering (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Structural Engineering (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

200529849 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於二芳基尿素衍生物之用於製造治療RET依 賴性病症、尤其RET依賴性腫瘤疾病之醫藥組合物的用 途。本發明進一步係關於新穎N-[4-(嘧啶_4_基氧基）-苯 基]-Ν’-苯基-脲衍生物及其在動物或人體之治療中、尤其 在蛋白質激酶依賴性疾病之治療中之用途，關於包含此等 新穎Ν-[4-(嘧啶-4-基氧基苯基]_Ν，-苯基-脲衍生物之醫藥 組合物，且關於此等新穎Ν-[4-(嘧啶-4-基氧基）-苯基]-Ν，-苯基-脲衍生物用於製備治療蛋白質激酶依賴性疾病、尤 其增生性疾病（諸如腫瘤疾病）之醫藥組合物的用途。 【先前技術】 蛋白質激酶（ΡΚ)為催化細胞蛋白質中特定絲胺酸、蘇胺 酸或酪胺酸殘基之磷酸化的酶。基質蛋白質之此等轉譯後 修飾充當調節細胞增生、活化及/或分化之分子開關。異 常或過量野生型或突變Ρκ活性係發現於諸多疾病病況中， 包括良性及惡悻增生性病症。在諸多狀況下，可藉由利用 ΡΚ抑制劑來治療例如增生性病症之疾病。 考慮到蛋白質激酶數量之大及增生性及其他ΡΚ相關聯 之疾病之多樣性，一直需要提供可用作ΡΚ抑制劑且從而可 用於此寻ΡΚ相關聯之疾病之治療的化合物。 【發明内容】 轉染期間重排（RET)之原癌基因被識別為多内分泌瘤形 成2型（MEN 2)之敏感基因，MEN 2是一種以骨髓甲狀腺癌 97470.doc 200529849 (MTC)為特徵之遺傳癌症症候群（參見Eng，J. Clin. Oncol.， 17，380-93，1999 ; Takahashi，Cytokine and Growth Factor Revs·，12，361-73，2001)。子型 RET/MEN2A 以細胞外區 域（例如C634R)中之突變為特徵，該突變可導致激酶之原 構性二聚及活化。較不普遍之子型RET/MEN2B以活化環 (M918T)中之突變為特徵，該突變可導致原構性活化及改 變之基質特異性。RET/MEN2B保持回應於其配位體，且 因此，GDNF家族親神經因子之時間及空間表現可進一步 影響MEN 2B患者之臨床表型（參見Jhiang，Oncogene， 19 ， 5590-7 ， 2000) 〇 乳頭狀甲狀腺癌（PTC)是最普通類型（85%)的甲狀腺惡性 腫瘤（Lorentz，World Journal of Surgery，18，547-50， 1994)。該腫瘤與RET原癌基因之體細胞突變相關聯，其係 藉由基因重排而活化（？&(^1^，*[.五11(1〇(^11.11^^81，23，328-38 ^ 2000 ； Tallini and Asa j Adv. Anat. Pathol. j 8 » 345-54 ^ 2001)。重排之原癌基因，PTC致癌基因（RET/PTC)，是原 RET之酪胺酸-激酶區域與其他基因融合之產物。三種最普 通之變體為RET/PTC1、RET/PTC2 及 RET/PTC3(Pacini ’ J· Endocrin. Invest·，23，328-38，2000 ; Tallini and Asa， Adv. Anat. Pathol.，8，345-54，2001)。在 RET/PTC1、 RET/PTC2及RET/PTC3中，酪胺酸-激酶區域分別與基因 H4、Rice及 ELE1 融合（Tallini and Asa，Adv· Anat· Pathol.，8， 345-54，2001)。因此，RET受體酪胺酸激酶之各種突變形 式是發展針對於癌症（尤其甲狀腺癌）之藥物的有吸引力之 97470.doc 200529849 目標。 亦發現RET及其各種突變形式在諸多不同腫瘤細胞株及 組織中以蛋白質及/或mRNA水平表現。因此，野生型及突 麦RET之抑制劑亦尤其適於治療其他ret依賴性癌症，諸 如結腸、肺、乳房及胰腺之RET依賴性癌症以及其他RET 依賴性固體腫瘤（solid tumour)及白血病。 目雨發現式I之化合物是野生型及/或突變RET之抑制 劑。因此，該等化合物可用於治療RET依賴性疾病，尤其 RET依賴性增生性疾病，特別是RET依賴性腫瘤疾病，諸 女、’Ό腸肺、乳房及胰腺之RET依賴性癌症以及其他ret 依賴性固體腫瘤及白血病，且尤其為RET依賴性甲狀腺 【實施方式】
之化合物 iCH2)p
或為低碳數伸烷基或為C3-C5伸 其中G不存在、 環烷基，且 Z為式la之原子團 97470.doc 200529849 )~^R2 (la) r3 或者G不存在’且Z為式lb之原子團
Rs R2 (lb) A為CH、N或N—0且〇,限制條件為 中不超過一個可為N— O ; η為1或2 ; m為0、1或2 ; P為0、2或3 ; r為0至5 ; 若P為0則UNR(其中汉為氣或有機部分），或若？為2或3 則X為氮，其與（CH2)P及以點（中斷）線代表之鍵（包括其所 結合之原子）共同形成一環， ^ 或者 入為CHK(其中K為低碳數烷基或氫）且p為雯， 限制條件為：若p為零，則以點線代表^不 1為0、S或ch2; γ2 為 Ο、S 或 NH ; 限制條件為：（Yl)n_(Y2)不包
c 匕栝 〇·〇、H ΝΗ-〇、J s 或 S-ο基團；Ri、r2、R3&r 5谷自獨立地為氯或無機启 97470.doc 200529849 機部分，或者其中任音^土 w兩者共同形成藉由氧原入 低碳數伸烷基-二氧橋， 、子而…0之 β且5亥寻部分中剩餘之一者Α翁 無機或有機部分； 孝為虱戈 4(若存在，即若r不為零）為無機 本發明進一步係闕於如 — ^ ^ ^ 、下文之貫例（實例1-70)中所揭示 之式ί之新穎N-【4-(嘧啶-4_其氫 撕甘士 疋4基乳基）-苯基州-苯基-脲衍生 物，其在下文中稱作”本發明 入仏+ # 不毛月之新穎化合物”。本發明之新 物尤其顯示對下列蛋白質路胺酸激酶中之一或多者 抑制！·生.C-Abl、Be卜Abl、受體赂胺酸激酶叩_3、 ㈣、血管内皮生長因子受體（VEGF_R)及加仰2)、尤且 「3、以及此等中之兩者或兩者以上之組合·本發明之新 貝化。物進-步亦適用於抑制非受體路胺酸激酶^，及/ 或適用於抑制該等酶（尤其Ber_Abl)之突變體，例如Giu255 ’離胺酸突變。馨於該等活性’本發明之新穎化合物可用 於治療尤其與此等類型激酶（尤其所提及之激酶）之異常或 過度活性相關聯之疾病。 ”另卜才曰出，否則上文及下文中所使用之通用術語在 此揭示内容中較佳具有下列含義： 在提及’’二芳基尿素衍生物用於製造用來治療RET依賴 :疾病之醫藥組合物的用途，，之處，A意為亦包括此等二 芳基尿素衍生物在治療RET依賴性疾病中之用途、在治療 RET依賴性疾病中使用該等二芳基尿素衍生物之方法及用 於…療RET依賴性疾病之包含此等二芳基尿素衍生物的醫 藥組合物。其進一步亦意為包括用於治療RET依賴性疾病 97470.doc 200529849 之二芳基尿素衍生物。 ^綴”低碳數”表示具有丨至高達（且包括）最多7個、尤其1 至南達（且包括）最多4個碳原子之原子團，所討論之原子團 為直鏈或具有單個或多個分支的支鏈。例如，低碳數燒基 為甲基、乙基、正丙基、第二丙基、正丁基、異丁基、第 一丁基、第三丁基、正戊基、正己基或正庚基。 在將複數形式用於化合物、鹽、醫藥組合物、疾病或類 似物之處此欲亦忍為單個化合物、鹽或其類似物。 齒（代）較佳為破、填、、氣或敦，尤其為敦、氣或漠。 鑒於二芳基尿素衍生物之游離形態與其鹽形態（包括彼 等在（例如）式I之化合物、互變異構體或互變異構混合物及 其鹽之純化或識別中可用作中間物之鹽）之間的緊密關 係上文及下文中對該等化合物（尤其對本發明之新穎化 合物）之任何參考，在合適且有利而若未提及時，應理解 為亦參考相應的該等化合物之互變異構體、該等化合物之 互變異構混合物、該等化合物之氺氧化物、或任意此等之 鹽。互變異構體可（例如）以其中胺基或羥基（各含至少一結 合氫）與藉由雙鍵而結合至相鄰原子之碳原子結合的狀況 而存在（例如酮-烯醇或亞胺-烯胺互變異構）。較佳之互變 異構體為其中R4為羥基且其他部分如式合物所界定的 化合物之吡啶_酮_基或嘧啶_酮-基形式。 在提及"化合物···、其互變異構體；或其鹽，，或類似術語 時，此意為”化合物…、其互變異構體，或該化合物或該 互變異構體之鹽，，。 97470.doc -11 - 200529849 視情況存在之式i化合物之不對稱碳原子可以（R)、（8)或 (R，s)組悲存在，較佳以組態存在。雙鍵或環上之 取代基可以順（=z-)或反（==E-)形態存在。因此，該等化合 物可作為異構體混合物或較佳作為純異構體存在。 鹽較佳為本發明之二芳基尿素衍生物、尤其本發明之新 穎化合物之醫藥學上可接受之鹽。 成鹽基團為具有鹼性或酸性特性之基團或原子團。具有 至少一鹼性基團或至少 一鹼性原子團（例如胺基、不形成
肽鍵或比啶原子團之第二胺基）之化合物可形成酸加成 鹽，例如與無機酸（諸如鹽酸、硫酸或磷酸），或與合適的 有機羧酸或磺酸，例如脂族單_或二-羧酸（諸如三氟乙酸、 乙酸、丙酸、乙醇酸、丁二酸、川貝丁稀二酸、反丁稀二 酸、羥基順丁稀二酸、蘋果酸、酒石酸、擰檬酸或草 酸），或胺基酸（諸如精胺酸或離胺酸），芳族羧酸（例如， 苯甲酉夂2_苯氧基笨甲酸、乙醯氧基·苯甲酸、水揚 酉夂、4-胺基水揚酸），#㈣旨㈣酸（諸如扁桃酸或肉桂
酸），雜芳族羧駿（諸如煙酸或異煙酸），脂族磺酸（諸如甲 >、-文乙〜I或2_羥基乙磺酸），或芳族磺酸（諸如苯磺 心、Γ·甲本續酸或酸）。當存在若干驗性基團時可 形成單-或多-酸加成鹽。 具有酸性基團m基或_基）之化合物可形成金屬或, 鹽，諸如驗金屬或驗土金屬鹽，例如納、鉀、鎮編 或與氨或合適有機胺（諸如第三單胺，例如三乙胺或三·( 羥基-乙基）-胺）或雜環鹼（例如N_乙基-哌啶或N，N，_二甲； 97470.doc -12- 200529849 哌嗪）形成之銨鹽。鹽的混合物也可以。 具有酸性及鹼性基團之化合物可形成内鹽。 為了分離或純化目的，以及在進—步用作中間物之化合 物的狀況下，亦可使用醫藥學上不可接受之鹽，例如苦味 酸鹽。然而，僅醫藥學上可桩為#包主綠 子上』接文之無毒鹽可用於治療目 的，且因此彼等鹽為較佳。 有機部分R較佳為未經取代或經取代之烷基、未經取代 或經取代之烯基、未經取代或經取代之快基、未經取代或 經取代之芳基、未經取代或經取代之雜環基、未經取代或φ 經取代之環烷基或未經取代或經取代之環烯基；較佳為未 經取代之烷基。 在用於部分（moiety)之處，”經取代”意為該相應部分中 之一或多個氫原子、特定言之高達5個、更特定言之高達 二個氫原子彼此獨立地經相應數目之取代基置換，該等取 代基較佳獨立地選擇由下列各基團組成之群：低碳數烷 基，例如甲基、乙基或丙基；鹵代低碳數烷基，例如三氟 甲基；c^-c^-芳基，尤其苯基或萘基（其中芳基， 尤其本基或奈基’為未經取代或經由一或多個、尤其高達 三個選自下列基團之部分所取代··鹵素、羧基、低碳數烷 氧羰基、羥基、低碳數烷氧基、苯基_低碳數烷氧基、低 碳數烷醯氧基、低碳數烷醯基、胺基、N_低碳數烷基胺 基、N，N-二-低碳數烷基胺基、N-苯基·低碳數烷基胺基、 N，N-雙（苯基-低碳數烷基）-胺基、低碳數烷醯基胺基、南 基、ii代低碳數院基（例如三氟曱基）、磺基、胺續醯基、 97470.doc -13- 200529849 胺甲驢基、N-低碳數烧基-胺甲酸基、N-(經基-低碳數燒 基）-胺甲隨基（諸如基乙基）-胺甲酸基）、氰基、氮 基-低奴數烧基及琐基）；C3-CiG -環烧基，尤其環丙基或環 己基；羥基-CyC8·環烷基，諸如羥基-環己基；具有5或6 個環原子及1至3個選自Ο、N及S之雜原子的雜環基，尤其 哌啶基（尤其哌啶-1-基）、哌嗪基（尤其哌嗪_丨_基）、嗎琳基 (尤其嗎琳-1 -基），♦基，低碳數烧氧基，例如甲氧基；鹵 代低碳數烷氧基，尤其2,2,2-三氟乙氧基；笨基-低碳數烷 氧基；胺基-低碳數烧氧基’諸如2 -胺基乙氧基；低碳數烧 醯氧基；羥基-低碳數烷基，諸如羥基甲基或2-經基乙基； 胺基；N-低碳數烧基胺基；N，N-二-低碳數烧基胺基；N-苯基-低碳數烷基胺基；N，N-雙（苯基-低碳數烷基）_胺基； 低碳數烷醯基胺基，尤其乙醯基胺基；苯甲醯基-胺基； 胺甲醯基-低碳數烷氧基；N-低碳數烷基胺甲醯基_低碳數 烷氧基或N，N-二-低碳數烷基·胺甲醯基-低碳數烷氧基；甲 脒基；N-羥基-甲脒基；胍基；胺基-低碳數烷基，諸如胺 基曱基或2-胺基乙基；甲脒基-低碳數烷基，諸如2-曱脒基 乙基；N-羥基甲脒基-低碳數烷基，諸如N-羥基-甲脒基-曱 基或-2-乙基；ii素，例如氟、氣、溴或破；竣基；低碳數 烷氧基羰基；苯基-、萘基-或苐基-低碳數烷氧基羰基，諸 如苄氧基羰基；低碳數烷醯基；磺基；低碳數烷磺醯基， 例如曱磺醯基（CH3-S(0)2_);膦醯基（-p(=o)(oh)2)、羥基-低碳數烷氧基磷醯基或二-低碳數烷氧基磷醯基；胺甲醯 基；單-或二·低碳數烷基胺甲醯基；單-或二-(羥基-低碳數 97470.doc •14- 200529849 烷基:胺甲醯基；胺磺醯基；單_或二_低碳數烷基胺基磺 鉍基，硝基；氰基-低碳數烷基，諸如氰基甲基，及氰 基。不用說’取代基僅位於其化學上可能的位置，熟習此 項技術者能夠輕易地確定（實驗上或理論上）哪些取代基為 可能而哪些為不可能。例如，具有游離氫之胺基或羥基若 連接至具有不飽和（例如烯性）鍵之碳原子則為不穩定。 烷基較佳具有高達20個、更佳高達12個碳原子，且為直 鏈或刀枝一或多次，較佳為低碳數烷基，尤其Cl 烷 基特別疋甲基、乙基或正丙基。燒基為未經取代或較佳 經獨立地選自前文於，，經取代，，下所提及之取代基中的一或 多個取代基所取代。未經取代之烧基（較佳低碳數烧基）尤 其較佳作為有機部分R。 在相應於經取代之院基之部分中，尤其較佳為經基-低 碳數院基（尤其2.絲乙基）及/或齒代低碳數貌基（尤其三 氟甲基或2,2,2-三氟乙基）。 稀基較佳為具有-或多個雙鍵之部分且較佳具有2至加 個、更佳高達，12個之碳原子；其為直鏈或分枝一或多次 (直至就碳原子數目而言為可能之所有分枝次數）。較佳^ CVCV稀基’尤其為c3_C4_婦基，諸如婦丙基或巴= ㈣⑽。縣可為未經取代或經取代，尤其為經二 "經取代"下所提及之取代基中之—或多個、更尤其； 個所取代。諸如胺基或羥基之取代基(具 、 較佳不結合至參與雙鍵之碳原子，且較佳㈣包括m 充分技之取代基。較佳為未經取代之縣（尤其 97470.doc -15- 200529849 基）。 块基較佳為具有一吱吝姻— ,次夕個二鍵之部分且較佳具有2至20 m圭高達u個碳原其為直鏈或分枝—或多次（直 ^叙原子數目而言為可能之所有分枝次數）。較佳為c2- 7-炔基’尤其為C3々炔基’諸如乙炔基或丙炔_2_基。 炔基可為未經取代或經取代，尤其經-或多個、更尤直娘 兩達三個前文於"經取代"下所提及之取代基取代。諸:胺 基或殘基之取代基（含㈣可離解氫）較衫結合至來斑三 鍵之碳原子，且較佳亦不包括其他非充分安定之取代基。 較佳為未經取代之炔基、特^言之為C2.CV烯基。 、芳基較佳，有不超過16個碳原子之環系統，較佳為單_ 一或二，且為未經取代或較佳為如上文"經取代"下所 ί定而經取代。芳基較佳選自苯基、萘基、節基、奠基及 恩基’且較佳在各種狀況下為未經取代，或為經下列各基 團取代之芳基：低碳數烧基（尤其甲基、乙基或正丙基）、齒 素(尤其氟、氯、漠或碘)、齒代低碳數烷基(尤其三氟甲 基）、、經基、低，碳數烧氧基（尤其甲氧基）、画代低碳數烧氧 基（尤其2,2,2·三I乙氧基）、胺基·低碳數烧氧基（尤其2_胺 土乙氧基）、低奴數烷基（尤其甲基或乙基）胺甲醯基、Ν_ (經基-低碳數院基）_胺甲醯基（尤其Ν-(2-經基乙基）·胺甲醯 土）及/或胺4醯基，尤其為相應經取代或未經取代之苯基。 雜％基較佳為鍵結環中不飽和、飽和或部分飽和之雜環 原子團，且較佳為單環或在本發明之廣泛態樣中為雙環或 三環；具有3至24個 '更佳4至16個環原子；其中在鍵結至 97470.doc -16- 200529849 式I之分子的原子團的環中至少一或多個、較佳一至四 個，尤其一或兩個碳環原子經選自由氮、氧及硫組成之群 的雜原子置換，該鍵結環較佳具有4至12個、尤其5至7個 環原子，雜芳基為未經取代或經獨立地選自上文於”經取 代π下界定之取代基所組成之群的一或多個、尤其1至3個 取代基取代，尤其為選自由下列各基團組成之群的雜芳 基·環氧乙烧基、氮唆基（azirinyl)、1，2-氧硫咮基、哺嗤 基、嗟吩基、呋喃基、四氫呋喃基、哌喃基、硫哌喃基、 嗟嗯基、異苯幷呋喃基、苯幷呋喃基、色烯基、2H-吡咯 基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯啶基、咪唑基、咪唑啶基、 本幷σ米17坐基、σ比嗤基、Π比σ秦基、。比嗤σ定基、旅喃基、嗟峻 基、異噻唑基、二噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡啶基、 吼嗪基、嘧啶基、哌啶基（尤其哌啶基）、哌嗪基（尤其 哌嗪· 1 -基）、噠嗪基、嗎啉基（m〇rph〇linyl)(尤其嗎啉代基 (morpholmo))、硫嗎啉基（尤其硫嗎啉代基沖i〇rn〇rph〇lin〇》、 吲嗪基、異吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、苯幷咪唑基、 香豆基（cumaryl，）、,嗤基、三σ坐基、四嗤基、嗓呤基、4H-喹嗪基、異喹啉基、喹啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉 基、十氫喹啉基、八氫異喹啉基、苯幷呋喃基、二苯幷呋 喃基、笨幷噻吩基、二苯幷噻吩基、呔嗪基、萘啶基、喹 噁啉基、喹唑啉基、喹唑啉基、啐喏啉基、喋啶基、噚唑 基、心噚啉基、啡啶基、吖啶基、呸啶基、啡啉基、呋吖 基.、啡嗪基、啡噻嗪基、啡噁嗪基、色烯基、異咣基及咣 基，忒等原子團中之每一者為未經取代或經獨立地選自由 97470.doc •17- 200529849 下歹J各基團所組成之群的一或兩個原子團取代··低碳數烷 基（尤其f基或第二丁基）、低碳數燒氧基（尤其尹氧基）及 齒基（尤其溪或氯）。較佳為未經取代之雜環基、尤其哌啶 基、哌嗪基、硫嗎啉代基或嗎啉代基。 環烷基較佳為CrCw環烷基，尤其為環丙基、二甲基環 丙基、環丁基、環戊基、環己基或環庚基，環烧基為未經 取代或經獨立地選自由上文於”經取代"下界定之取代基所 組成之群的一或多個、尤其丨至3個取代基取代。 %烯基較佳為CVCw環烯基，尤其為環戊烯基、環己烯籲 基或環庚烯基，環烯基為未經取代或經由獨立地選自由上 文於”經取代”下界定之取代基所組成之群的一或多個、尤 其1至3個取代基取代。 無機部分較佳為鹵素、羥基、胺基或硝基。 若P為2或3則存在藉由點（中斷）線代表之鍵及結合之 (CH2)P，或若p為零貝j其不存在。 有機部分較佳為未經取代或經取代之烷基、未經取代或 經取代之烯基，、未經取代或經取代之块基、未經取代或、經鲁 取代之方基、未經取代或經取代之雜環基、未經取代或經 取代之％烷基或者未經取代或經取代之環烯基、未經取代 或經取代之烷氧基、未經取代或經取代之烯氧基、未經取 代或經取代之炔氧基、未經取代或經取代之芳氧基、未經· 取代或經取代之雜環基氧基、未經取代或經取代之環烷氧 . 基或未經取代或經取代之環烯氧基、或未經取代或者經取 代之院基胺基、未經取代或經取代之烯基胺基、未經取代 97470.doc -18 - 200529849 或、、二取代之炔基胺基、未經取代或經取代之芳基胺基、未 、二取代或絰取代之雜環基胺基、未經取代或經取代之環烷 基胺基或未經取代或經取代之環烯基胺基。 有機部分較佳為烷基，尤其為低碳數烷基，諸如甲基、 乙基或丙基，_代低碳數烧基，例如三氟甲基；低碳數烧 氧基例如甲氧基；鹵代低碳數烧氧基，例如2,2,2-三氟 乙氧基；鹵素，諸如氯或溴；苯基；苯基胺基；羥基-苯 基-胺基，例如‘羥基苯基胺基；胺基-低碳數烷基-氧基苯 基胺基，例如[4-(2-胺基乙基）氧基]-苯基-胺基；胺甲醯基 苯基-胺基，例如4-胺磺醯基_苯基-胺基；[N_(羥基_低碳數 烷基）-胺甲fe基]-苯基-胺基，例如（ν·[4_(2^Ι基乙基）-胺 甲醯基]-苯基卜胺基；具有1或2個選自由Ν、〇及S組成之 群之雜原子的5或6員飽和雜環基，尤其為哌啶基（例如哌 啶-1-基）、哌嗪基（例如哌嗪―丨-基）、嗎啉基（例如嗎啉代 基）或進一步為硫嗎啉基（諸如硫嗎啉代基）。 驗f生有機部分為選自如本文所給出的且具有鹼（鹼性）特 性的有機部分.定義的部分。鹼性有機部分較佳為哌啶基 (尤其哌啶-1-基）、哌啶基_低碳數烷基（尤其哌啶基甲 基）、低碳數烷基-哌嗪基（尤其4-甲基-哌嗪j _基或4_乙基_ 哌嗪-1-基）或低碳數烷基_哌嗪基_低碳數烷基（尤其4_甲基_ 略嗔-1 -基甲基或4-乙基-旅唤-1 _基甲基）。 若Ri、R2及R;中之任意兩者共同形成藉由氧原子而結合 之低碳數伸烷基-二氧橋，則該橋較佳為藉由氧原子而結 合至鄰近碳原子之亞甲基二氧（O-CHrO)或伸乙基二氧（〇_ 97470.doc -19- 200529849 ch2-ch2-o)，且該等部分中剩餘之一者為氫或如前述之無 機或有機部分。 術語π治療酪胺酸蛋白質激酶依賴性疾病”指該等疾病、 尤其本文所提及之疾病的預防性或較佳治療性（包括減輕 及/或治癒）治療。 式I之化合物具有頗具價值之藥理學特性且可有效用於 治療RET依賴性疾病、尤其RET依賴性增生性疾病、特定 言之RET依賴性腫瘤疾病（諸如結腸、肺、乳房及胰腺之 RET依賴性癌症）以及其他RET依賴性固體腫瘤及白血病及 尤其RET依賴性甲狀腺癌。 RET激酶抑制測定如下： 選殖及表現：使用桿狀病毒施體載體PFB-GSTX3以產生 可表現人類RET-Men2A之細胞質激酶區域的胺基酸區658-1072(Swiss prot No_ Q9BTB0)的重組桿狀病毒，該細胞質 激酶區域對應於RET(wtRET)及RET-Men2B之野生型激酶 區域，RET-Men2B藉由於活化環M918T中活化突變而與 wtRET不同。wtRET之細胞質區域的編碼序歹4藉由來自 cDNA庫之PCR使用特定引子而得以放大。RET-Men2B係 藉由可引起M918T突變之部位導向突變而產生。藉由以 Sail及Kpnl消化，將放大之DNA片段及pFB-GSTX3載體製 成相容於接合。此等DNA片段之接合分別產生桿狀病毒施 體質體 pFB-GX3-RET-Men2A及 pFB-GX3-RET-Men2B。 病毒之生產：將含激酶區域之桿狀病毒施體質體轉染入 DHIOBac細胞株（GIBC0)，並將轉染細胞塗於選擇性瓊指 97470.doc -20- 200529849 平板上。未將融合序列插入病毒基因體（藉由細菌攜帶）之 群落是藍色的。挑出單獨的白色群落並藉由標準質體純化 程序自細菌分離病毒DNA(桿粒）。隨後在25 cm2燒瓶中使 用Cellfectin試劑以病毒DNA轉染Sf9細胞或Sf21細胞 (American Type Culture Collection) 〇
Sf9細胞中蛋白質表現··自轉染細胞培養物收集含病毒 之培養基並將其用於感染以增加其滴度。兩輪感染後所獲 得之含病毒培養基用於大範圍蛋白質表現。為了大範圍蛋 白質表現，以5χ107細胞/盤接種100 cm2圓形組織培養盤並 以1 mL含病毒培養基（約5 MOI)感染。3天後，自該盤刮下 細胞並以500 rpm離心5分鐘。將來自10-20個、100 cm2盤 之細胞小球重新懸浮於50 mL冰冷溶解緩衝液（25 mM參-HCn、pH 7.5、2 mM EDTA、1% NP-40、1 mM DTT、1 mM PMSF)。在冰上攪拌該等細胞15分鐘且隨後以5,000 rpm離心20分鐘。 GST標簽之蛋白質之純化：將離心之細胞溶胞物載至2 mL 谷胱甘肽-壤脂糖管柱（Pharmacia)並以10 mL之25 mM參-HCn、pH 7.5、2 mM EDTA、1 mM DTT、200 mM NaCl洗 滌3次。隨後藉由10次應用（每次1 mL)25 mM參-HC1、pH 7.5、10 mM 還原谷胱甘肽、100 mM NaCl、1 mM DTT、 10%甘油溶離該GST標簽之蛋白質並儲存於-70°C。 酶活性量測：藉由純化之GST-wtRET或GST-RET-Men2B 蛋白質之酪胺酸蛋白質激酶檢定在最終體積30 /xL、含15 ng GST-wtRET 或 GST-RET-Men2B蛋白質、20 mM 參-HCn、 97470.doc -21 - 200529849 pH 7·5、1 mM MnCl2、10 mM MgCl2、1 福 dtt、3 /ig/mL 聚（Glu，Tyr)4:l、1%DMS0、2·0 μΜ Ατρ(γ_[33ρ]- ‘ ATP 0·1 gCi)中進行。藉由量測33p自[γ33ρ]Ατρ至聚 · (Glu，Tyr) 4:1之併入’於存在或不存在抑制劑之狀況下檢 定活性。在96-孔盤中於周圍溫度下在前述條件下執行該 檢定15分鐘，且藉由加入20 125 mM EDTA而終止。隨 後’將40 反應混合物轉移至Imm〇bil〇n_pvDF膜 (Millipore)，在此之前先將其以曱醇浸泡5分鐘，以水沖 洗，隨後以0.5% HsPO4浸泡5分鐘並安裝於具有分離之真鲁 空源之真空歧管。在點樣所有樣品後，連接真空並以2〇() ML 0.5% H3P〇4沖洗各孔。移除膜且在授拌器上以丄〇% HJO4洗滌4次，以乙醇洗滌一次。在於周圍溫度下乾燥、 安裝於Packard TopCount 96_孔框且添加1〇叫/孔之
MiCroscint TM(Packard)後，對膜進行計數。藉由於4種濃 度（通常為0·01、0.1、1及10 μΜ)下一式兩份地對各化合物 之百分比抑制進行線性回歸分析，從而計算IC50值。一單 位之蛋白質激酶活性定義為：於3rc下每mg蛋白質每分鐘41 自[7 P] ATP向基質蛋白質轉移1 nmole 33P。本文之式I之 化合物顯示了 0.005與5 μΜ之範圍内、尤其介於〇〇1與1 之間的IC5〇值。 ” 右未另外陳述，隨後在與本發明之新穎化合物相關聯而 . 提及用途’’之處，如適當且有利，其包括本發明之任一或 · 夕個下列實施例，分別為：治療（尤其酪胺酸）蛋白質激酶 依賴性疾病中之用途，製備用於治療該等疾病之醫藥組合 97470.doc -22- 200529849 物的用途，本發明之新賴化合物在治療該等疾病中之使用 方法包合本發明之新穎化合物以用於治療該等疾病之醫 藥=物，以用於治療該等疾病之本發明之新賴化合物。 特疋s之，待治療且因此適合於本發明之新賴化合物之用 途的疾病係選自下列(尤其路胺酸)蛋白質激酶依賴性("依 賴性"亦意為”受支持”，而非僅僅"僅依賴性疾病，尤其 相應增生性疾病，更尤其依賴於e_AbhBcmFit_3、 而、VEGF_R及/或Tek(尤其Fh-3)活性之疾病，尤其下文 於該等特定蛋白質酪胺酸激酶下所提及之疾病。其他可受 到本發明之新穎化合物抑制之激酶包括血小板衍生之生長 因子受體（PDGF-R)、'纖維母細胞生長因子受體（fgf_r)、 類姨島素生長因子！受體（IGF_IR)、Eph受體（例如，尤其 受體），c_Kit、Met、cSrc Ra^ras。 本發明之新穎化合物具有頗具價值之藥理特性且可有效 用於/口療蛋白質激酶依賴性疾病、尤其蛋白質路胺酸激酶 依賴f生疾病，例如，作為治療增生性疾病之藥物。 本心明之新穎化合物作為^八^蛋白質酪胺酸激酶活性 抑制劑之功效可如下得以證實·· 在96孔盤中執行活體外酶檢定，其類似於如Geissler等 ^在Res· 1992 ; 52 : 4492-4498中所描述之過濾結 〇 ^疋，作如下修改。選殖c-Abl之His標簽之激酶區域並 表現於桿狀病毒/Sf9系統中，如Bhat等 人在 J. Biol. Chem· 二97 ; 272 : 1617(M6175中所描述。藉由於鈷金屬螯合劑 g柱上心後於陰離子交換管柱上之兩步程序純化p kD(c_ 97470.doc -23- 200529849
Abl激酶）蛋白質，產量為1-2 mg/L之Sf9細胞（Bhat等人， 引用文獻）。如在庫馬斯藍著色後藉由SDS-PAGE鑒定，c-Abl激酶之純度>90%。檢定含有（總體積30 /xL) : c-Abl激 酶（50 ng)，20 mM 參· HCn、pH 7.5，10 mM MgCl2，10 μΜ Na3V04，1 mM DTT及 0.06 gCi/檢定[γ 33P]-ATP(5 μΜ ATP)，在 1% DMSO 之存在下使用 30 /xg/mL 聚-Ala、Glu、 Lys、Tyr-6:2:5: l(Poly-AEKY，Sigma PI 152)。反應藉由加 入10 /xL 250 mM EDTA而終止且將30 /xL反應混合物轉移至 Immobilon-PVDF 膜（Millipore，Bedford，ΜΑ，USA)，在 此之前將其以甲醇浸泡5分鐘，以水沖洗，隨後以0.5% H3P〇4浸泡5分鐘並安裝於含分離之真空源之真空歧管。在 點樣所有樣品後，連接真空並以200 /xL 0.5% H3P〇4沖洗各 孔。移除膜且在攪拌器上以0.5% H3P〇4洗滌（4次）並以乙醇 洗務一次。在於周圍溫度下乾燥、安裝於Packard TopCount 96-孔框且添加 1〇 #L/ 孔之 Microscint TM (Packard)後，對膜進行計數。使用該測試系統，本發明之 新穎化合物顯示了在0.001與100 μΜ之範圍内、通常介於 0.05與5 μΜ之間的IC5〇值。 VEGF誘導之受體自體磷酸化之抑制可藉由於例如轉染 之CHO細胞之細胞中的進一步活體外實驗來證實，該等轉 染之CHO細胞永久地表現人類VEGF-R2受體（KDR)，將該 等細胞接種於6-孔細胞培養盤中之完全培養基中（含1 〇〇/0胎 牛血清=FCS)並在37°C於5% C02下培育直至其顯示約80% 之融合。隨後在培養基_(無FCS，含0.1%牛灰清白蛋白） 97470.doc -24- 200529849 稀釋待測試之化合物，並將其添加至該等細胞。（對照組 包含無測試化合物之培養基）。於3 7 °C培育兩小時後，添 加重組VEGF ;最終VEGF濃度為20 ng/ml。於37°C培育進 一步之5分鐘後，以冰冷PBS(磷酸鹽緩衝之生理食鹽水）洗 滌該等細胞兩次並立即將其溶解於每孔100 μΐ之溶解緩衝 液中。隨後離心該等溶胞物以移除細胞核，且使用商業蛋 白質檢定（BIORAD)測定清液之蛋白質濃度。隨後可立即 使用該等溶胞物或（若必要）儲存於-20°C。
執行夾層ELISA以量測VEGF-R2磷酸化：將VEGF-R2之 單株抗體（例如 Mab 1495.12.14;由 H· Towbin、Novartis 製 備，或於其相當之單株抗體）固定在黑色ELISA盤上（來自 Packard之OptiPlate™ HTRF-96)。隨後洗滌該等盤，且剩 餘游離蛋白質結合部位以含Tween 20®(聚環氧乙烷（20)山 梨糖醇酐單月桂酸酯，ICI/Uniquema)之磷酸鹽緩衝生理食 鹽水（PBST)中之 3% TopBlock®(Juro，目錄號TB232010)飽 和。隨後在該等盤中將該等細胞溶胞物（20 蛋白質每 孔）連同偶合有，鹼性磷酸酶之抗磷酪胺酸抗體（PY20 : AP， 來自Zymed)於4°C下培育隔夜。（該等盤經再次洗滌且）隨 後使用發光AP基質（CDP-Star，現成使用，含Emerald II ; Applied Biosystems)來證實抗填化酪氨酸抗體與俘獲之填 酸化受體的結合。在 Packard Top Count Microplate Scintillation Counter中量測發光。正控制（VEGF刺激）訊號 與負控制（無VEGF刺激）訊號之間的差值對應於VEGF誘導 之VEGF-R2磷酸化（=100%)。測試物質之活性計算為VEGF 97470.doc -25- 200529849 誘導之VEGF-R2磷酸化的百分比抑制，其中誘導最大抑制 之一半的物質濃度定義為IC5G(50%抑制之抑制量）。此處， 本發明之新穎化合物顯示了 0.0003至20 μΜ之範圍内、較 佳介於0.001與10 /χΜ之間的IC5〇值。 類似地，VEGF-R1抑制可展示如下：使用Flt-1 VEGF受 體酪胺酸激酶來進行該測試。詳細程序如下：將20 mM 參-HC1 pH 7.5、3 mM 二氣化錳（MnCl2)、3 mM 氣化鎂 (MgCl2)、10 mM釩酸鈉、0·25 mg/ml 聚乙二醇（PEG)20 000，1 mM二硫蘇糖醇及 3 /ig/ml 聚（Glu，Tyr)4:1 (Sigma， Buchs，瑞士）、8 μΜ [γ3Ρ]-ΑΤΡ(0·2 gCi)、1%二甲亞砜及 0 至100 μΜ待測試之本發明之新穎化合物中之30 μΐ激酶溶 液（10 ng Flt-1之激酶區域，Shibuya等人，Oncogene 之， 519-24(1990))於室溫一起培育10分鐘。隨後藉由加入10 μΐ 0·25 Μ四乙酸乙二胺（EDTA)pH 7終止該反應。使用多通道 分配器（LAB SYSTEMS，USA)，將20 μΐ之等分試樣應用 於 PVDF(=聚二氟乙烯）Immobilon Ρ 膜（Millipore，USA)， 通過Millipore微量滴定過濾歧管並連接至真空。完全除去 液體之後，該膜在含0.5%磷酸（H3P04)之浴中連續洗滌4次 且以乙酵洗)條一次，各自在搖動時培育10分鐘，隨後安裝 於 Hewlett Packard TopCount Manifold，且在添加 10 μΐ Microscint®(/3-閃燦計數液）之後量測其輻射。藉由對各化 合物在三個條件下（慣例上為0.01、0.1及1 μΜ)之百分比抑 制進行線性回歸分析來測定IC5G值。藉由本發明之新穎化 合物可得之IC5〇值在0.01至100 μΜ之範圍内，較佳在0.01 97470.doc -26- 200529849 至50 μΜ範圍内。 如下測定Flt-3激酶抑制劑：使用桿狀病毒施體載體 pFbacGOl(GIBCO)產生重組桿狀病毒，其表現人類Flt-3之 細胞質激酶區域的胺基酸區胺基酸563-993。藉由來自人 類c-DNA庫（Clontech)之PCR放大Flt-3之細胞質區域編碼序 列。藉由以BamHl及Hindlll消化，使得放大之DNA片段與 pFbacGOl載體相容於接合。該等DNA片段之接合產生桿狀 病毒施體質體pFbacG01-Flt-3。如下執行該等病毒之生 產、Sf9細胞中蛋白質之表現及GST融合蛋白質之純化： 病毒之產生：將含Flt-3激酶區域之桿狀病毒施體質體 (pFbacG01-Flt_3)轉染入 DHlOBac細胞株（GIBCO)，且將該 等經轉染之細胞裝在選擇性瓊指平板上。未將融合序列插 入病毒基因體（藉由細菌攜帶）之群落是藍色的。挑出單獨 的白色群落並藉由標準質體純化程序自該細菌分離病毒 DNA(桿粒）。隨後於燒瓶中使用cellfectin試劑以病毒DNA 轉染 Sf9 或 Sf21 細胞（American Type Culture Collection) 〇
Sf9細胞中蛋白質表現：自轉染之細胞培養物收集含病 毒之培養基並將其用來感染以增加其滴度。將兩輪感染後 所獲得之含病毒培養基用於大範圍蛋白質表現。為了大範 圍蛋白質表現，以5χ107細胞/盤接種100 cm2之圓形組織培 養盤並以1 mL含病毒培養基（約5 MOI)感染。3天後，自該 盤刮下細胞並以500 rpm離心5分鐘。將來自10-20個、100 cm2盤之細胞小球重新懸浮於50 mL冰冷溶解緩衝液（25 mM 參-HC1、pH 7.5，2 mM EDTA，1% NP-40，1 mM 97470.doc -27- 200529849 DTT，1 mM PMSF)。在冰上攪拌該等細胞15分鐘且隨後 以5,000 rpm離心20分鐘。 GST標簽之蛋白質之純化：將離心之細胞溶胞物載至2 mL谷胱甘肽-瓊脂糖管柱（Pharmacia)並以10 mL之25 mM 參-HCn、pH 7.5、2 mM EDTA、1 mM DTT、200 mM NaCl 洗滌3次。隨後藉由10次應用（每次1 mL)25 mM參-HC1、 pH 7·5、10 mM 還原谷胱甘肽、100 mM NaCl、1 mM DTT、10%甘油溶離GST標簽之蛋白質並儲存於-70°C。 酶活性之量測：在含200-1800 ng酶蛋白質（取決於特定 活性）、20 mM 參 _HC1、pH 7.6、3 mM MnCl2、3 mM MgCl2、1 mM DTT、10 μΜ Na3V04、3 /ig/mL 聚（Glu,Tyr) 4:1、1% DMSO、8.0 μΜ ATP 及 0.1 /xCi [γ33Ρ] ATP的 30 /xL之最終體積中執行純化之GST-Flt-3之酪胺酸蛋白質激 酶檢定。藉由量測”P自[γ33Ρ]ΑΤΡ至聚（Glu，Tyr)基質之併 入，在存在或不存在抑制劑之狀況下檢定其活性。該檢定 (30 μι)在96-孔盤中於周圍溫度下進行20分鐘，且藉由加 入20 /xL 125 mM EDTA終止。隨後將40 反應混合物轉移 至 Immobilon-PVDF 膜（Millipore，Bedford，MA，USA)， 在此之前將其以曱醇浸泡5分鐘，以水沖洗，隨後以0.5% H3P〇4浸泡5分鐘並安裝於含分離之真空源之真空歧管。點 樣所有樣品後，連接真空並以200 /xL 0.5% H3P〇4沖洗各 孔。移除膜且在攪拌器上以1.0% H3P〇4洗滌4次，以乙醇 洗丨條一次。在於周圍溫度下乾燥、安裝於Packard TopCount 96-孔框且添加1〇 叫/孔之Microscint 97470.doc •28- 200529849 TM(Packard)後對膜進行計數。藉由於4種濃度（通常為 0.01、0.1、1及10 μΜ)下一式兩份地對各化合物之百分比 抑制進行線性回歸分析，從而計算IC 5 〇值。一單位蛋白質 激酶活性定義為：於37°C下每mg蛋白質每分鐘自 [γ33Ρ]ΑΤΡ向基質蛋白質轉移1 nmole 33P。此處，本發明之 新穎化合物展示介於〇·〇〇5與20 μΜ之範圍内、較佳介於 0.01與10 μΜ之間的IC5〇值。
Flt-3依賴性Ba/F3細胞中增生之抑制： 該化合物穿透細胞膜及發揮抗增生效應之潛力在依賴突 變[ITD 或 D835Y ; Gilliland and Griffin，Blood，第 100 卷，No· 5，1532-42(2002)]Flt_3 受體激酶之 Ba/F3 細胞中 得以測定。 96-孔格式YO-PRO-1檢定之改質協定係基於表現原構性 活化Flt-3激酶之野生型IL-3 -依賴性造血細胞株Ba/F3 (DSMZ，Braunschweig，德國）及突變亞株 ITD_Ba/F3 或 D835Y-Ba/F3[Weisberg 等人，Cancer Cell 1(5) · 433-43(2002)]之使用。 在新鮮培養基中將ITD-FLT3-或D835Y-FLT3-BaF3細胞 稀釋至總濃度為3xl〇5個細胞/m卜且將50 μΐ等分試樣種入 96-孔盤中（1·5XI〇4個細胞/孔）。隨後，添加50 μΐ 2X化合物 溶液且培育細胞4 8小時。 最初於全部兩種細胞株上以1〇 μΜ，1 μΜ及0·1 μΜ之濃 度一式三份地測試化合物之抗增生及細胞凋零活性。始終 將單獨以DMSO處理（添加至最終濃度為〇·ι%)之細胞作對 97470.doc -29- 200529849 照物。此外，慣例地在僅含100 μΐ培養基而不含細胞之孔 中測定盤空白值。 ‘ 為進一步獲得化合物之概況，執行一開始於10 μΜ或3 μΜ " 相關之化合物的ED5G測定。自該等濃度，製備成階式的九 種稀溶液以分別達到2 nM及0.5 nM之最終濃度。 藉由YO-PRO-1檢定來評定抑制劑之活性，如前述於 [Idziorek 等人，J· Immunol. Methods ; 185 ·· 249-58 (1995)]。簡要地說，在48小時之處理期之後，將含100 mM檸檬酸鈉、pH 4.0、134 mM氯化鈉及12·5 μΜ YO- # PRO-1 染料（YO-PRO-1 碘化物，#Y3603 ，Molecular Probes)之溶液的25 μΐ等分試樣直接加入96-孔盤之孔中的 100 μΐ培養基中。此導致最終染料濃度為2.5 /χΜ。隨後在 周圍溫度下於黑暗中培育該盤10分鐘。YO-PRO-1藉由第 一量測評定染料至細胞中之吸收，使用Cytofluor II 96-孔 盤讀取器（PerSeptive Biosystems)，其具有下列設定：激發 (nm)485/20及發射（nm)530/25，增益75。該此第一次讀數 後，將由20 mM檸檬酸納、pH 4·0、26.8 mM氣化納、 _ 0.4% NP40、20 mM EDTA 及 20 mM 組成之 25 μΐ 溶解緩衝 液加入各孔。於室溫下60分鐘内完成細胞溶解，且結合至 DNA之YO-PRO-1總量藉由第二量測來測定，使用具有上 述相同設定之Cytofluor II 96-孔盤讀取器。使用該檢定， 产 本發明之新穎化合物呈現了於〇·1 nM至1 μΜ、尤其0.1 ηΜ · 至100 nM之範圍内的ED50值。
Tek激酶抑制可如下執行： 97470.doc -30- 200529849 使用桿狀病毒施體載體pFbacGOl來產生重組桿狀病毒， 其表現人類Tek之細胞質激酶區域的胺基酸區胺基酸773-1124，其N-端融合至GST。藉由EcoRI切除及接合至EcoRI 消化之 pFbacG01(FBG-Tie2/Tek)將 Tek 重新選殖入 pFbacGOl 轉移載體。如下執行該等病毒之生產、Sf9細胞中蛋白質 之表現及GST融合蛋白質之純化： 病毒之生產：將含有激酶區域之轉移載體轉染入 DHlOBac細胞株（GIBCO)，且將該等經轉染之細胞裝在選 擇性缓指平板上。未將融合序列插入病毒基因體（精由細 菌攜帶）之群落是藍色的。挑出單獨的白色群落並藉由標 準質體純化程序自該細菌分離病毒DNA(桿粒）。隨後在25 cm2燒瓶中使用Cellfectin試劑以病毒DNA轉染Sf9或Sf21細 胞（American Type Culture Collection) 〇
Sf9細胞中之蛋白質表現：自轉染之細胞培養物收集含 培養基之病毒並將其用於感染以增加其滴度。兩輪感染後 t 所獲得之含病毒培養基用於大範圍蛋白質表現。為了大範 圍蛋白質表現.，以5χ107細胞/盤接種100 cm2之圓形組織培 養盤並以1 mL含病毒培養基（約5 MOI)感染。3天後，自該 盤刮下細胞並以500 rpm離心5分鐘。將來自10-20個、100 cm2盤之細胞小球重新懸浮於50 mL冰冷溶解緩衝液（25 mM 參-HCH、pH 7·5、2 mM EDTA、1% NP-40、1 mM DTT、1 mM PMSF)。在冰上攪拌該等細胞15分鐘且隨後於5,000 rpm離心20分鐘。
GST標簽之蛋白質之純化：將離心之細胞溶胞物載至2 mL 97470.doc -31 - 200529849 谷胱甘肽-瓊脂糖管柱（Pharmacia)並以10 mL之25 mM參-HC卜 pH 7.5、2 mM EDTA、1 mM DTT、200 mM NaCl洗 滌3次。藉由l〇次應用（每次l mL)25 mM參-HC1、pH 7·5、 10 mM還原谷胱甘肽、100 mM NaCl、1 mM DTT、10%甘 油溶離GST標簽之蛋白質並儲存於-70°C。
激酶檢定··於含 15 mg/ml GST-Tek、20 mM 參-HC1、 pH 7.5、3 mM MnCl2、3 mM MgCl2、1 mM DTT、10 μΜ Na3V04、3.0 gg/mL 聚（Glu，Tyr)4:l、PEG 0·25 mM、1% DMSO、8.0 μΜ ATP、[γ33Ρ]ΑΤΡ(0·1 /xCi)之 30 /xL 總體積中 執行純化之GST-Tek蛋白質之酪胺酸蛋白質激酶檢定。在 存在或不存在抑制劑狀況下藉由量測33P自[γ33Ρ] ATP至聚 (Glu，Tyr)中之併入來檢定其活性。在96-孔盤中於周圍溫 度下進行該檢定（30 /XL) 10分鐘，且藉由添加20 125 mM EDTA而終止。隨後將40 jicL反應混合物轉移至Immobilon-PVDF膜（Millipore，Bedford，ΜΑ，USA)，自此之前將其 以曱醇浸泡5分鐘，以水沖洗，隨後以0.5% H3P〇4浸泡5分 鐘並安裝於含，分離之真空源之真空歧管。點樣所有樣品 後，連接真空並以200 /xL 0.5% H3P04沖洗各孔。移除膜且 在攪拌器上以1.0% H3P〇4洗滌4次，以乙醇洗滌一次。在 周圍溫度下乾燥、安裝於Packard Top Count 96-孔框且添加 10 /xL/孔之Microscint TM(Packard)後對膜進行計數。藉由 於4種濃度（通常為0.01、0.1、1及10 μΜ)下一式兩份地對 各化合物之百分比抑制進行線性回歸分析，從而計算1C 50 值。一單位蛋白質激酶活性定義為：於37°c下每mg蛋白質 97470.doc -32- 200529849 每分鐘自[γ33Ρ] ATP轉移至基質蛋白質1 nmole 33P。此處， 本發明之新穎化合物顯示了於0.001與5 μΜ之間、尤其0.01 與0.2 μΜ之間之範圍内的IC50值。
Bcr-Abl抑制可如下藉由俘獲ELISA測定：以p210 Bcr-Abl表現載體pGDp210Bcr/Abl(32D-bcr/abl)轉染之鼠科骨 髓祖細胞株32Dcl3係獲自J Griffin(Bazzoni等人，J. Clin Invest.趾，521-8(1996) ； Zhao 等人，Blood 90. 5 4687-9(1997))。該等細胞表現含原構性活性abl激酶及增生生長 因子-獨立性之融合bcr-abl蛋白質。該等細胞在RPMI 1640 (AMIMED ; cat # 1_41F01)、10%胎牛血清、2 mM穀醯胺 (Gibco)("完全培養基”）中膨脹，且藉由在冷凍劑（95%胎牛 血清、5%二甲亞颯（SIGMA，D-2650))中冷凍每小瓶2χ106 細胞之等分試樣來製備工作儲備。於融化後，將最大ΙΟ-ΐ 2繼代之 細胞用 於實驗 。來自 Upstate Bio technolo-gy 之抗 體抗-abl SH3區域目錄號（cat. #’’）06-466係用於ELISA。為 偵測bcr-abl磷酸化，使用了來自ZYMED的以鹼性磷酸酶 (PY10(AP))標簽之抗-磷酪胺酸抗體Ab PY20(目錄號03-7722)。作為對比及參照化合物，使用了呈甲磺酸（單甲磺 酸）鹽（STI571)形式之（Ν-{5-[4-(4-甲基-哌嗪幷-甲基）-苯甲 醯基醯胺基]-2-甲基苯基}-4-(3-u比啶基）-2-嘧啶-胺（作為 Novartis之 Gleevec® 或 Glivec® 而銷售）。於 DMSO 中製備 10 mM之儲備溶液，且儲存於-20°C。為了細胞檢定，將該儲 備溶液以兩個步驟稀釋於完全培養基中（1:100及1:10)以產 生10 μΜ之起始濃度，隨後在完全培養基中製備連續三倍 97470.doc -33- 200529849 稀釋。使用該程序不會遇到溶解性問題。類似地處理本發 明之新穎化合物之測試。為了該檢定，在96孔圓底組織培 養盤中每孔接種50 μΐ之200’000 32D-bcr/abl細胞。一式三 份地將50 μΐ每孔之連續三倍稀釋的測試化合物加入細胞 中。測試化合物之最終濃度介於5 μΜ下至0.01 μΜ之範圍 内。將未經處理之細胞用作對照物。將該化合物連同細胞 於37°C、5% C02下培育90分鐘，接著於1300 rpm (Beckman GPR離心機）離心該等組織培養盤並藉由小心吸 入來移除上清液，注意不要移走任何小球狀細胞。該等細 胞小球藉由加入150 μΐ溶解緩衝液（50 mM參/HC1、pH 7.4、150 mM氣化鈉、5 mM EDTA、1 mM EGTA、1%NP-40 (非離子型清潔劑，Roche Diagnostics GmbH， Mannheim，Germany)、2 mM 原飢酸納溶液、1 mM績 Si 氟化苯基甲酯、50 pg/ml抑肽酶及80 Mg/ml亮肽素）來溶 解，且立即用於ELISA或冷凍儲存於-20°C直至使用。將 抗-abl SH3區域抗體以每孔50 μΐ PBS中之200 ng塗佈至黑 色 ELISA盤（Packard HTRF-96黑盤；6005207)並於 4°C 下隔 夜。以含0.05% Tween 20(PBST)及 0.5% TopBlock(Juro， 目錄號TB 232010)之200 μΐ/孔PBS洗滌3次後，剩餘蛋白質 結合部位以200 μί/孔PBST、3% TopBlock於室溫下阻斷4 小時，接著以50 μΐ未處理或測試化合物處理之細胞之溶胞 物（每孔20 /xg總蛋白質）於4°C培育3-4小時。洗滌3次後， 加入於阻斷緩衝液中稀釋至0.5 jug/ml的50 μΐ/孔PY20 (AP) (Zymed)並培育隔夜（4°C )。對於所以培育步驟’該等盤以 97470.doc -34- 200529849 盤密封器（Costar，目錄號3095)覆蓋。最後，在添加90 μΐ/ 孔之含Emerald II之ΑΡ基質CPDStar RTU前，以洗滌緩衝 液洗滌該等盤另外三次並以以去離子水洗滌一次。現在以 Packard Top Seal™-A盤密封器（目錄號6005185)密封之盤 於室溫下在黑暗中培育45分鐘，且藉由以Packard Top Count Microplate Scintillation Counter(Top Count)量測每 秒計數（CPS)來量化發光。對於ELISA之最終優化版，將於 96孔組織盤中生長、處理並溶解之50 μΐ細胞溶胞物直接自 該等盤轉移至以來自Upstate之50 ng/孔兔多株ant-abl-SH3 區域AB 06-466預塗之ELISA盤。該抗磷酪胺酸AB PY20(AP)之濃度可降至0.2 /xg/ml。如上洗滌、阻斷且以發 光基質培育。如下達成量化：計算以未處理32D-bcr/abl細 胞獲得之ELISA讀出（CPS)與檢定背景（所有組份，但無細 胞溶胞物）之讀出之間的差值，並視為100%反射存在於該 等細胞中之原構性構酸化bcr-abl蛋白質。bcr-abl激酶活性 中該化合物之活性表現為bcr-abl磷酸化之百分比減少。 IC50之值自劑量回應曲線藉由繪圖内推法或外推法來測 定。此處，本發明之新穎化合物較佳顯示20 nM至200 μΜ 之範圍内的IC5〇值。 本發明之新穎化合物亦抑制涉及於藉由營養因子調節之 訊號傳輸的蛋白質絡胺酸激酶，例如src激酶家族之激酶 (例如尤其c-Src激酶）、自血小板衍生之生長因子（PDGF)受 體酪胺酸激酶家族之成員（諸如PDGF-R，c-Kit，VEGF-R 及/或FGF-R);該等激酶均在動物、尤其哺乳動物細胞（包 97470.doc -35- 200529849 括人類細胞）之生長調節及轉型中起作用。適當檢定 於 Andrejauskas_Buchdunger 等人，^ μ 田 乂 8(1992) 。 因此’本發明之新穎化合物可用於治療蛋白質激酶依賴 性疾病。蛋白質激酶依賴性疾病尤其為增生性疾病，較佳 為良性或尤其惡性腫瘤(例如腎、肝、腎上腺、膀胱、乳 房、月、卵巢、結腸、直腸、前列腺、胰腺、肺、陰道戋 甲狀腺之癌症、肉瘤、神經膠母細胞瘤及諸多頸部及頭部 腫瘤，以及白血病）。該等新穎化合物能夠使腫瘤衰退且 預防腫瘤轉移之形成及（亦及微）轉移之生長。此外其可用 於表皮超增生（例如牛皮癬）、前列腺增生及治療瘤形成， 尤其上皮性，例如乳腺癌。亦可在涉及若干或（尤其）個別 蛋白質酪胺酸激酶之免疫系統疾病之治療中使用本發明之 新穎化合物；此外，本發明之新穎化合物亦可用於治療其 中涉及藉由至少一種蛋白質酪胺酸激酶（尤其選自彼等特 定提及之蛋白質酪胺酸激酶）進行之訊號傳輸的中樞或周 邊神經系統疾病。 ρ21 ras致癌基因係人類固體癌發展及進展之主要成因者 且在30%之所有人類癌中變異。内因性GTPase活性（若在 ras突變癌細胞中減輕）調節對下游效應物（諸如raf激酶）之 原構性生長訊號。因此，對raf激酶訊號路徑之抑制可用來 抑制活性ras之效應。因而’可用作ras抑制劑之本發明之 新穎化合物尤其適於治療與ras過度表現或過度活性相關之 疾病。 97470.doc -36- 200529849 血官内皮生長因子受體-2(VEGF-R2，· KDR)選擇性表現 於第血s内皮且對於正常血管發展係必需的。為了生長 起、认最j尺寸，腫瘤必須產生新的血管供應。血管生成 (或新血管萌發）是固體腫瘤生長之中心過程。對於諸多癌 症腫瘤血s生成之程度是表示侵襲性疾病之負預兆指示 及癌轉移之增大之可能性。近來為瞭解與腫瘤相關血管生 成之刀子基礎而作出之努力已識別了若干潛在治療目標， 包括血管生成因子血管内皮生長因子受體（vegf)之受體酪 胺酸激酶（參見Zeng等人，j Bi〇1 Chem迦(35)，32714_ 32719(2001))。目此可用作KDR抑制劑之本發明之新顆化 曰物尤八適於/σ療與VEGF受體絡胺酸激酶過度表現相關 之疾病。在此等疾病中，尤為顯要的係視網膜病、年齡相 關斑點惡化、牛皮癬、血管母細胞瘤、血管瘤、動脈硬 化、發炎性疾病（諸如類風濕性或風濕性發炎性疾病），尤 其為關節[諸如風濕性關節炎，或其他慢性發炎性病 症，諸如慢性哮喘、動脈或移植後動脈硬化症、子宮内膜 異位，且尤其為贅生性疾病，例如所謂的固體腫瘤（尤其 為胃腸道、胰腺、乳房、胃、子宮頸、膀胱、腎、前列 腺、卵巢、子宮内膜、肺、腦部之癌症、黑素瘤、卡波西 氏肉瘤（Kaposi’s sarcoma)、頭部及頸部之鱗狀細胞癌、惡 性胸膜中等惡性腫瘤、淋巴瘤或多骨髓瘤）及液體腫瘤（例 如白jk病）。
Flt-3(類FMD酪胺酸激酶）尤其表現於造血祖細胞以及淋 巴及骨髓系列起源中。FU-3基因之異常表現已記載於成人 97470.doc -37- 200529849 及兒童白血病中，包括AML(急性骨髓性白血病）、伴三系 脊髓發育不良之AML(AML/TMDS)、ALL(急性淋巴細胞白 血病）、CML(慢性骨髓性白血病）及骨髓發育不良徵候群 (MDS)，該等疾病因而為待以本發明之新穎化合物治療之 較佳疾病。吾人在約25至30%之AML患者中發現Flt-3中活 化突變。因此有了 Flt-3在人類白血病中起作用之積累證 據，且可用作Flt-3抑制劑之本發明之新穎化合物尤其可用 於治療該類疾病（參見Tse等人，Leukemia 15(7)，1001-1010(2001) ; Tomoki等人，Cancer Chemother· Pharmacol. 48(Suppl. 1)，S27-S30(2001) ; Birkenkamp等人，Leukemia 15(12)，1923-1921(2001) ; Kelly等人，Neoplasia 99(1)，310-318(2002)) 〇 在慢性骨髓性白血病（CML)中，造血乾細胞（HSC)中相 互平衡染色體遷移產生BCR-ABL混合基因。後者編碼致癌 Bcr-Abl融合蛋白質。ABL編碼為緊密調節蛋白質酪胺酸激 酶（其在調節細胞增生、黏著及細胞凋零中起主要作用）， 而BCR-ABL融合基因編碼為原構性活化激酶，其變換HSC 以產生顯型，呈現擺脫調節之系增生、降低之黏附至骨髓 基質的能力及降低之對誘變刺激的細胞凋零響應，該等變 化使其能夠積聚逐漸增多之更加惡性的轉型。所得粒細胞 未能發展成為成熟淋巴細胞且被釋放入循環，導致成熟細 胞之缺乏及增加之易感染性。Bcr-Abl之ATP競爭性抑制劑 已有描述，其防止激酶活化促有絲分裂及抗細胞凋零路徑 (例如P-3激酶及STAT5)，導致BCR-ABL顯型細胞死亡且從 而提供對CML之有效治療。因此，可用作Bcr-Abl抑制劑 97470.doc •38· 200529849 之本發明之新穎化合物尤其適於治療與其過度表現相關之 疾病，尤其為白血病’諸如白血病’例如CML或ALL。 本發明之新穎化合物（就其作為PDGF受體抑制劑之活性 而言）亦尤其適於治療增生性疾病，尤其為小肺癌、動脈 硬化症、血栓症、牛皮癬、硬皮病或纖維症。 亦存在可證實於活體内之本發明之化合物之抗腫瘤活性 的實驗：測試了該活體内抗腫瘤活性，例如使用乳癌細胞 株，諸如人類雌激素依賴性乳癌MCF-7(ATCC : HTB22)或 ZR-75-l(ATCC : CRL1500)，或者雌激素依賴性乳癌MDA· MB468(ATCC : HTB132)或 MDA-MB231(ATCC : HTB26); 結腸癌細胞株，諸如結腸癌Colo 205(ATCC : CCL222); 成膠質細胞瘤細胞株，諸如成膠質細胞瘤U-87MG(ATCC : HTB14)或 U-373MG(ATCC : HTB17);肺癌細胞株，諸如 π 小細胞肺癌 ”NC1-H69(ATCC : ΗΤΒ119)或 NC1-H209(ATCC ·· HTB172)，或肺癌 NC1-H596(ATCC : HTB178);皮膚腫瘤 細胞株，諸如黑素瘤 Hs294T(ATCC : HTB140)或 A375(ATCC : CRL1619);來自生殖泌尿（genitourinry)系統之腫瘤細胞 株，諸如卵巢癌NIH-Ovcar3(ATCC : HTB161)，以及前列 腺癌 DU145(ATCC : HTB81)或 PC-3(ATCC : CRL1435)，或 膀胱癌T24(ATCC : HTB4);上皮癌，諸如上皮癌KB3 1 ; 或（尤其關於白血病）K562細胞（American Type Culture Collection，Mannassas，VA)或人類 CFU-G細胞（CFU-G表 示粒細胞群落成形單元，且其代表於血流或骨髓中循環之 早期但形成之粒細胞成形前驅體細胞），將其中之每一者 97470.doc -39- 200529849 移植入雌性或雄性Balb/c裸鼠。其他細胞株包括白血病細 胞株，諸如1^-562、31；?315、“£〇01、1^11812?、]^〇1^以-13、BaF3、CEM/0、JURKAT/0或 U87MG。 在將個別細胞（最少為100 ml磷酸鹽緩衝生理鹽水中之 2χ 106細胞）皮下注射至載體小鼠（例如每細胞株4-8隻小鼠） 後獲得腫瘤。在治療開始前，使所得腫瘤連續經過至少三 個隨後之移植。將腫瘤片段（各約25 mg)皮下注射至該等 動物之左腰，將規格13之Trocar針在Forene麻醉（Abbott， 瑞士）下用於移植。另外，向移植有雌激素依賴性腫瘤之 老鼠供應雌激素片粒（含適於藥用目的品質之1.0 cm管， Dow Chemicals，含 5 mg雌二酮，Sigma)。一旦腫瘤達到 100 mm3之平均尺寸，則按慣例開始治療（即於低或中間腫 瘤負擔）。藉由量測垂直直徑，每週一次、兩次或三次（取 決於細胞株之腫瘤生長）及最後一次治療後24小時測定腫 瘤生長。對於腫瘤來說，根據式LxDxp/6測定腫瘤體積（參 見 Evans，B.D.，Smith，I.E.，Shorthouse，A.J. and Millar， J.J·，Brit· J· Cancer，45 : 466-468，1982)。抗腫瘤活性表現為 T/C%(所治療動物腫瘤體積之平均增長除以對照動物腫瘤 體積之平均增長，再乘以1〇〇)。腫瘤衰退（％)代表與處理 開始時平均腫瘤體積相比最小之平均腫瘤體積）。殺死其 中腫瘤達到直徑大於1 · 5至2 cm3之各動物。藉由檢測以白 血病細胞株接種腫瘤之動物中外圍白血計數及脾及胸腺之 重量來評定白血病負擔。 投藥本發明之化合物或其鹽之例示性（但非限制性）排程 97470.doc -40- 200529849 為每曰投藥，較佳為1至3曰劑量，用於可能直至治癒該疾 病之長期投藥，或若僅達成了減輕治療則投藥所需要之時 期；或者，治療（例如）5天，及/或在第1、4及9天投藥，在 未治療一定時間後最終重複亦是可以的。 或者，亦可以一天治療數次（例如2至5次）或藉由連續投 藥（例如輸注）來治療，例如上一句話中所指示之時間點。 通常投藥為口服或非經腸，較佳口服。測試化合物較佳稀 釋於水或無菌0.9%生理食鹽水中。 若未另有說明，則所有人類腫瘤細胞株皆係獲自 American Type Culture Collection(ATCC ，Rockville， MD.，USA)，且若未另外指出，則在含相應添加劑之所提 及之培養基中培養（ATCC培養條件）。c-sis-及v-sis_轉化之 BALB/c 3T3細胞係獲自 Dr· C. Stiles(Dana Farber Cancer Institute，Boston，ΜΑ，USA)。該等細胞在”Dulbecco’s 改 質Eagle’s培養基’’（DMEM)中培養，θρ以10%牛血清及0.2 mg/ml濃度之黴素B或0.5 mg/ml濃度之G418補充。BALB/c AMuLV A.6R.1，細胞（ATCC)保存於DMEM，以10%牛血清補 充。 本發明之化合物的藥理學活性可（例如）基本上如下文描 述在臨床研究或測試程序中得以證實。 合適的臨床研究為（例如）對患有上述腫瘤疾病中一者之 患者的公開標簽非隨機化、劑量逐步增加之研究。對增生 疾病之有益效果可直接藉由該等研究之結果或藉由熟習此 項技術者已知之研究設計的變化來測定。治療功效可在該 97470.doc -41 - 200529849 等研究中測定，例如，在腫瘤狀況下於18或24週後藉由每 6週放射評估腫瘤，在白血病狀況下（例如）藉由測定異常白 血細胞計數’及藉由著色單核細胞及/或藉由測定最小剩 餘疾病（MRD)(例如藉由FACS-LPC MRD或PCR)。 或者，可使用安慰劑對照、雙盲研究以證明本發明之化 合物的益處。 可如WO 03/099771中所描述來製備式I之二芳基尿素衍 生物。本發明之新穎化合物較佳如下文"實例，，下描述而得 以製備。 根據本發明之較佳實施例： 在下列較佳實施例中，通用表達可藉由上文及下文提供 之相應更具體定義置才奐，從而得到本發明《更為較佳之實 施例。 在-較佳實施例中，本發明係、關於二芳基尿素衍生物用 於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物的用途 中該二芳基尿素衍生物為式I*之化合物/CH2)p 其
Y2&R!_R5具有上文為式I A、A，、η、m、ρ、r、χ、Yi 所界定之含義； 或其互變異構體； 或其醫藥學上可接受之鹽。 97470.doc 200529849 在另一較佳實施例中，本發明係關於二芳基尿素衍生物 用於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物的用途， 其中该二芳基尿素衍生物為式I之化合物，其中 A為CH、N或Ν—Ο且A，為N或Ν—Ο，限制條件為A及A， 中不超過一個為N— 〇 ; η為1或2 ; m為0、1或2 ; P為〇、2或3 ; r為1至5 ; 若P為〇則X為NR(其中R為氫或有機部分）’或若1)為2或 3，則X為氮，其連同（CH2)p及以點（中斷）線代表之鍵（包括 其所結合之原子）一起形成一環， 限制條件為若X為NH，則R4(若Pi則獨立於其他）各自為 於上式1下所界定之部分但非藉由-C( = 〇)-、-C(NR)-或 _s(〇2)-橋結合至式I之其餘部分， 或者 X為CHK ’其中K為低碳數烧基或氫，且p為零， 限制條件為：若P為零，則以黠線代表之鍵不存在； γ為 〇、s或 ch2 ; γ2 為 Ο、s 或 NH ; 限制條件為（YiVCYQm不包括 〇_〇、S_S、NH_〇、Nh_s 或S-Ο基團； 、尺2、R3及Rs各自獨立地為氫或無機或有機部分，或 者Kh及I中任意兩者共同形成藉由氧原子而結合之低 97470.doc -43- 200529849
碳數伸烧基-二氧橋，且該等部分中剩餘之—者為氯或I 機或有機部分，限制條件為若〇不存在且2為式ia之原:· 團則Rl，R2及Rs不能全為氫，且進一步之限制條件為若.
Ri、R2及R3中之一者為鹵素或低碳數烷基-磺醯基，則其 他兩個不能全為氫； 、 1為無機或有機部分’限制條件為若福i4 〇，p為 〇’ r為1，X為nh，1為〇’ G不存在且2為式Ia之原子團， 則R4連同含A及A，之苯環不形成甲基吼口定基、2_經基比 啶_4-基或i-H-i氧基q，、二氫吡啶·心基；且 鲁 G及Z具有上文於式j下所給出之含義； 或其互變異構體； 或其醫藥學上可接受之鹽。 在進一步之較佳實施例中，本發明係關於二芳基尿素衍 生物用於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物的用 途，其中該二芳基尿素衍生物為式p之化合物，其中 A為CH、N或N-〇且A，為〇，限制條件為a及a, 中不超過一個為N—o; # η為1 ; m為〇 ; P為〇、2或3 ; r為1 ; 右P為0則X為NR(其中R為氫或低碳數垸基），或若p為2 · 或3,則X為氮，其連同（CH2)p及以點（中斷）線代表之鍵化 括其所結合之原子）一起形成一環，或 - 97470.doc -44 - 200529849 X為CH2且p為零， 限制條件為··若p為零，則以點線代表之鍵不存在，· Υι 為 0 或 CH2 ;
Ri、R2及R3各自獨立地為氫、低碳數烷基、鹵素（尤其 漠或氯）、鹵代低碳數烷基（尤其三氟甲基）、低碳數烷氧基 (尤其甲氧基）、鹵代低碳數烷氧基（尤其2,2,2•三氟乙氧 基）、苯基、哌啶基（尤其哌啶基）、哌嗪基（尤其哌嗪 基）、嗎啉基（尤其嗎啉）、硫嗎啉基（尤其硫嗎啉代基），或 其任意兩者共同形成藉由氧原子而結合之低碳數伸烷基_ 一氧橋，且該等部分中剩餘之一者為氫或提及基團之一， 限制條件為Ri、R2及Rs不能全為氫，且進一步限制條件 為若Ri、R2及R3中之一者為鹵素，則其他兩者不能全為 氫； R4為低碳數烷氧基（尤其甲氧基）、低碳數烷醯基胺基（尤 其乙醯基胺基）、羥基苯基胺基（尤其對-羥基苯基胺基）、 胺基-低碳數烧基-氧苯基-胺基（尤其4_[(2_胺基乙基）_氧苯 基]-胺基）、胺磺醯基苯基胺基（尤其4-胺磺醯基苯基胺 基）、胺甲醯基苯基胺基（尤其4-胺甲醯基苯基胺基）、[N_ (經基-低碳數烧基）-胺甲醯基]-笨基胺基（尤其[N-(2-羥基乙 基）-胺曱醯基]-苯基胺基），或鹵素（尤其氣）；且 R5為氫、低碳數烧基或鹵素，尤其為氫； 或其互變異構體； 或其醫藥學上可接受之鹽。 在進一步之尤其較佳實施例中，本發明係關於二芳基尿 97470.doc -45· 200529849 素衍生物用於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物 的用途’其中該二芳基尿素衍生物為式I之化合物，其中 G不存在’為低碳數伸烷基（尤其亞甲基或伸乙基），或 CrC5伸環烷基（尤其環丙烷），且2為式“之原子團，或者 G不存在且Z為式lb之基團； A為CH或N且A1為N或N—0 ; η為1 ; m為0或1 ; P為0、2或3 ; r為0或1 ; 若P為0則X為NR(其中R為氫或低碳數烷基），或若1)為2 或3，則X為氮，其連同（CH2)p及以點（中斷）線代表之鍵（包 括其所結合之原子）一起形成一環，或 X為CHK(其中K為氫）且p為零， 限制條件為：若p為零，則以點線代表之鍵不存在； Υι 為 Ο、S 或 CH2 ; 丫2 為 Ο ; 限制條件為（Yl)n_(Y2)m不包括0·0或s-Ο基團； R1、R2及R3各自獨立地為氫、低碳數烷基（尤其甲基、 乙基、正丙基、異丙基或第三丁基）、低碳數烯基（尤其異 丙烯基）、羥基·低碳數烷基（尤其羥基-丙基）、低碳數烷氧 基（尤其甲氧基）、論素（尤其氣或溴）、_代低碳數烷基（尤 其三氟甲基）、鹵代低碳數烷氧基（尤其三氟甲氧基或三氟 乙氧基）、胺基-低碳數烷基（尤其胺基甲基）、胺基-低碳數 97470.doc 200529849 烷氧基（尤其胺基乙氧基）、二低碳數烷基-胺基（尤其二乙 基胺基）、羥基-低碳數烷基-胺基（尤其羥基-丙基胺基）、 雙-(低碳數烷氧基-低碳數烷基）-胺基（尤其雙-(2-甲氧基-乙 ’ 基）_胺基）、二低碳數烷基-胺基-低碳數烷基（尤其二甲基胺 基曱基）、苯基、嗎琳基（尤其嗎琳-4-基）、派淀基（尤其吼 啶-1-基）、哌啶基-低碳數烷基（尤其哌啶-1-基甲基）、低碳 數烧基-旅唤基（尤其4-甲基-旅喚-1 -基或4-乙基-旅唤-1 -基）、低碳數烷基-哌嗪基-低碳數烷基（尤其4-甲基-哌嗓-1-基甲基或4-乙基-派嗪-1 -基甲基）、吼σ定基（尤其。比σ定_2_ _ 基），或低碳數烧基-味嗤基（尤其2-或4 -甲基-咪唾-1-基； 若r為1，則R4為低碳數烷基（尤其甲基、乙基或異丙 基）、羥基、胺基羰基、低碳數烷基-羰基（尤其甲基羰 基）、環己基、鹵素（尤其氯或氟）、鹵代低碳數烧基（尤其 三氟甲基）、低碳數烷氧基（尤其甲氧基）、胺基、低碳數烷 基-胺基（尤其甲基胺基、乙基胺基、異丙基胺基或第三丁 基胺基）、二-低碳數烷基-胺基（尤其二甲基胺基）、低碳數 | 烯基-胺基（尤其丙-2-烯基胺基或丁 -3-烯基胺基）、低碳數 烷基-羰基-胺基（尤其甲基羰基胺基）、氰基、疊氮基、羥 基-本基-胺基（尤其3 -或4-經基-苯基-胺基）、单或三-低碳 數烷氧基-笨基-胺基（尤其甲氧基-苯基-胺基或三甲氧基-苯 基-胺基）、低碳數烷氧基-鹵代苯基-胺基（尤其甲氧基-氟- ， 苯基-胺基）、苯基-低碳數烷基胺基（尤其苄基胺基）、（單或 · 二-低碳數烷氧基）-苯基-低碳數烷基胺基（尤其f氧基-苄基 胺基或二甲氧基-苄基胺基）、胺基磺醯基-苯基-低碳數烷 97470.doc -47- 200529849 基胺基（尤其胺基磺醯基-苄基胺基）、胺基-低碳數烷氧基-苯基-胺基（尤其胺基乙氧基-苯基-胺基）、低碳數烷基-胺 r 基-磺醯基-低碳數烷基-苯基胺基（尤其甲基胺基-磺醯基曱 基-苯基胺基）、低碳數烷基-哌嗪基-低碳數烷基胺基（尤其 — 4-曱基哌嗪-1-基-丙基胺基）、嗎啉基-低碳數烷基胺基（尤 其嗎啉-4-基-丙基胺基）、低碳數烷基-哌啶基-胺基（尤其1-曱基-哌啶-4-基胺基）、四唑基（尤其1H-四唑-5-基）、低碳 數烷基-四唑基（尤其低碳數烷基-四唑-5-基，諸如1-甲基-1H-四唑-5-基或2-甲基_2H-四唑-5-基），或（二-低碳數烷 籲 基）-胺基-低碳數烷基-四唑基（尤其（二-低碳數烷基）_胺基_ 低碳數烷基-四唑_5_基，諸如2-(3-二甲基胺基丙基）-2H-四 唑-5-基）；且
Rs最佳為氫，或低碳數烷基（尤其甲基），或鹵素（尤其 氣）； 或其互變異構體； 或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一尤其較佳實施例中，本發明係關於二芳基尿素衍鲁 生物用於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物的用 途’其中該二芳基尿素衍生物為式][之化合物，其中 八及八’均為Ν，η為1，m為0，p為〇或2，r為1，若p為〇則 X為NH，或若？為2則χ為氮，其連同（CH2)2及以點（中斷）線 · 代表之鍵（包括其所結合之原子）一起形成一環，Υι為〇，〇 · 不存在’ Z為式1a之原子團，Ri、R2及R3中之至少—者為 鹼性有機部分，h為胺基或低碳數烷基胺基，且為氫； · 97470.doc -48- 200529849 或其互變異構體； 或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一尤其較佳實施例中，本發明係關於二芳基尿素衍 生物用於衣造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物的用 迷，其中該二芳基尿素衍生物為式I*之化合物，其中 A為CH、N或N—〇且AntN，〇，限制條件為a及A, 中不超過一個為N— 〇 ; η為1 ; m為0 ; p為0、2或3 ; r為0、1或2 ; 若P為〇則X為NR(其中R為氫或低碳數烷基），或若1)為2 或3，則X為氮，其連同（CH2)p及以點（中斷）線代表之鍵（包 括其所結合之原子）一起形成一環，或者 X為CH2且p為零， 限制條件為··若p為零，則以點線代表之鍵不存在； Υι 為 Ο 或 CHZ ; 、R2及I各自獨立地為氫、低碳數烷基、鹵素（尤其 溴或氣）、鹵代低碳數烷基（尤其三氟甲基）、低碳數烷氧基 (尤其甲氧基）、函代低碳數烷氧基（尤其2,2,2-三氟乙氧 基）、苯基、哌啶基（尤其σ比啶基）、哌嗪基（尤其哌嗪-^ 基）、嗎啉基（尤其嗎啉）、硫嗎啉基（尤其硫嗎啉代基），或 者其中任思兩者共同形成藉由氧原子而結合之低碳數伸烧 基-二氧橋，且該等部分中剩餘之一者為氫或所提及基團 97470.doc -49- 200529849 中之一者， 1 若r不為零，則r4為低碳數烷基（尤其甲基或乙基）、低碳 數烧氧基（尤其甲氧基）、低碳數烷醯基胺基（尤其乙醯基胺 基）、羥基苯基胺基（尤其對-羥基苯基胺基）、胺基-低碳數 烧基-氧苯基-胺基（尤其4-[(2-胺基乙基）-氧苯基]-胺基）、 胺磺驢基苯基胺基（尤其4-胺磺醯基苯基胺基）、胺甲醯基 苯基胺基（尤其4-胺甲醯基苯基胺基）、[N_(羥基_低碳數烷 基）-胺甲酸基]-苯基胺基（尤其[Ν-(2-·基乙基）_胺甲醯基]_ 苯基胺基，鹵素（尤其氣），或羥基；且 R5為氲、低碳數烧基或鹵素，尤其為氫； 或其互變異構體； 或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一尤其較佳實施例中，本發明係關於二芳基尿素衍 生物用於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物的用 途，其中該二芳基尿素衍生物為式化合物，其中 G不存在、為低碳數伸烷基（尤其亞曱基或伸乙基），或 c3-c5伸環烧基·（尤其伸環丙基），且2為式ia之原 或 者 4 G不存在且z為式lb之原子團； A為CH或N且A1為N或; η為1 ; m為0或1 ; p為0、2或3 ; r為1 ; 97470.doc -50- 200529849 、右P為0則XgNR(其中R為氫或低碳數烷基），或若P為2 或3 ’則X為氮’其連同（CH2)p及以點（中斷）線代表之鍵（包 括其所結合之原子）一起形成一環，或 X為CHK(其中K為氫）且p為零， 限制條件為：若P為零，則以點線代表之鍵不存在； Υι 為 0、S 或 CH2 ; Y2 為 0 ; 限制條件為（Yi)n-(Y2)m不包括0-0或S-ο基團；
Ri、R2及R3各自獨立地為氫、低碳數烧基（尤其甲基、 乙基、正丙基、異丙基或第三丁基）、低碳數烯基（尤其異 丙烯基）、羥基-低碳數烷基（尤其羥基-丙基）、低碳數烷氧 基（尤其甲氧基）、_素（尤其氯或溴）、_代低碳數烧基（尤 其三I甲基）、鹵代低碳數烷氧基（尤其三氟甲氧基或三氟 乙氧基）、胺基-低碳數烷基（尤其胺基甲基）、胺基_低碳數 院氧基（尤其胺基乙氧基）、二低碳數烷基_胺基（尤其二乙 基胺基）、羥基-低碳數烷基-胺基（尤其羥基-丙基胺基）、 雙-(低碳數烷氧基·低碳數烷基）-胺基（尤其雙甲氧基-乙 基）-胺基）、二低碳數烷基-胺基-低碳數烷基（尤其二甲基胺 基甲基）、苯基、嗎琳基（尤其嗎琳-4-基）、派咬基（尤其^比 淀-1 -基）、派σ定基-低碳數烧基（尤其α辰σ定-基甲基）、低碳 數院基-σ辰嗓基（尤其4-甲基-旅嗓-1 -基或4-乙基-π辰喚_ 1 _ 基）、低碳數烷基-哌嗪基-低碳數烷基（尤其4-甲基-哌嗪-1-基甲基或4-乙基-旅唤-1 -基甲基）、σ比σ定基（尤其0比咬_2_ 基），或低碳數烧基-味°坐基（尤其2 -或4-甲基-咪σ坐-1_基）， 97470.doc -51 - 200529849 限制條件為若G不存在且2為式Ia之基團，則Ri、R2及^^ 不能全為氫，且進一步之限制條件為若Ri，R2及I中一 者為鹵素，那麼其他兩者不能全為氫； R4為低碳數烷基（尤其甲基、乙基或異丙基）、羥基、胺 基羰基、低碳數烷基-羰基（尤其甲基羰基）、環己基、鹵素 (尤其氯或氟）、i代低碳數烷基（尤其三氟甲基）、低碳數 烷氧基（尤其甲氧基）、胺基、低碳數烷基_胺基（尤其甲基 胺基、乙基胺基、異丙基胺基或第三丁基胺基）、二_低碳 數烧基-胺基（尤其一甲基胺基）、低碳數浠基-胺基（尤其丙_ 2- 烯基胺基或丁-3-烯基胺基）、低碳數烷基-羰基-胺基（尤 其甲基羰基胺基）、氰基、疊氮基、羥基-苯基-胺基（尤其 3- 或4-羥基-苯基-胺基）、單或三-低碳數烷氧基-苯基-胺基 (尤其曱氧基-苯基-胺基或三甲氧基-苯基-胺基）、低碳數烧 氧基-鹵代本基-胺基（尤其甲氧基-氣-苯基-胺基）、苯基_低 碳數烷基胺基（尤其苄基胺基）、（單或二-低碳數烷氧基）-苯 基-低碳數烷基胺基（尤其甲氧基-苄基胺基或二甲氧基-苄 基胺基）、胺基績醯基-苯基-低碳數烷基胺基（尤其胺基磺 醯基-苄基胺基）、胺基-低碳數烧氧基-苯基-胺基（尤其胺基 乙氧基-本基-胺基）、低礙數烧基-胺基-續酿基-低碳數烧 基-苯基胺基（尤其甲基胺基-磺醯基曱基-笨基胺基）、低碳 數烷基-哌嗪基-低碳數烷基胺基（尤其4-甲基哌嗪-1-基-丙 基胺基）、嗎啉基-低碳數烷基胺基（尤其嗎啉-4-基-丙基胺 基）、低碳數烷基-哌啶基-胺基（尤其1-甲基-哌啶-4-基胺 基）、四唑基（尤其1H-四唑-5_基）、低碳數烷基-四唑基（尤 97470.doc -52- 200529849 其低碳數烷基-四唑-5-基，諸如1-甲基-1H-四唑-5-基或2-甲基-2H-四唑-5-基），或（二-低碳數烷基）-胺基-低碳數烷 基-四唑基（尤其（二-低碳數烷基）-胺基-低碳數烷基·四唑-5- _ 基，諸如2-(3-二甲基胺基丙基）-2H-四唑-5-基），限制條件 - 為若η為1，m為0，p為〇，r為1，X為NH，Υι為Ο，G不存 ’ 在且2為式la之原子團，則R4連同含A及八’之苯環一起不形 成甲基°比淀基、2-經基-。比。定-4 -基或1-H-2 -氧基-1，2 -二氫 吡唆-4-基；且 R5最佳為氫，或低碳數烷基（尤其甲基），或鹵素（尤其 _ 氣）； 或其互變異構體； 或其醫藥學上可接受之鹽。 在一進一步之極佳實施例中，本發明係關於二芳基尿素 衍生物用於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物的 用迷’其中該二芳基尿素衍生物為式I之化合物，其中 A及A’均為n，n為1，，p為〇或2，^為i，若？為〇則 X為NH ’或若p為2則χ為i，其連同（eh)〗及以點（中斷）線φ 代表之鍵（包括其所結合之原子）一起形成一環，I為〇，〇 不存在’ z為式Ia之原子團，Ri、RjR3中至少_個為鹼 欧有枝°卩刀’反4為胺基或低碳數烧基胺基，且Rs為氯， 或其互變異構體； ‘ 或其醫藥學上可接受之鹽。 尤其較佳實施例中，本發明係關於二芳基尿素〜 生物用於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物的=. 97470.doc -53- 200529849 途’其中該二芳基尿素衍生物為式ι*之化合物，其令 A、A,、η、m、ρ、Υι、γ2、Ri、R2、尺3及尺4具有上文 於式I*下所給出之含義，且!《為！至5，若1)為〇則乂為1^11(其 令R為氫或有機部分），或若p為2或3則X為氮，其連同 (CH2)P及以點（中斷）線代表之鍵（包括其所結合之原子）一 起形成一環，或者 X為CH2且p為零， 且若p為零，則以點線代表之鍵不存在； 限制條件為若X為NH，則R4各自獨立地（若存在）為上文 於式I*下所界定之基團但不藉由<(=〇)·、_C(NR)-或 S(〇2)-橋而結合至式I*之其他部分，且取代基R1、心及仏 係達自下列部分，藉以關於其中環結合至式中之其他部 分（藉由NH-C(=0)_x_部分）的位置指出位置（〇=鄰，m=間， P=對）： 只要Ri不為氮：
Re對-低碳數烷基，尤其對-甲基、對-乙基、對_正_丙 基，間-邊代低碳數烷基，尤其間_三氟甲基；或苯 基，對-哌啶-1-基或對-哌嗪_1_基； 若Ri及R2兩者皆不為氫：
Re間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟曱基，且R2 =對_ 鹵基，尤其對-溴；
Rf間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基，且R2 =對-鹵代低碳數烷氧基，尤其對_(2,2,2-三氟乙氧基）；
Re間-鹵代低碳數烷基，尤其間_三氟甲基，且R2 =間_ 97470.doc -54- 200529849 低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基；
Rl=間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基，且r2 =對_ 苯基；
Ri=間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基，且r2 =對一 旅°定-1 -基或對-旅唤-1 -基；
Ri =間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基，且r2 =對_ N-嗎啉基或對硫嗎啉基；
Ri=間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基，且r2 =對-鹵 基’尤其對-漠' (非較佳）；
Re間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基，且r2 =對-鹵代 低碳數烷氧基，尤其對_2,2,2-三氟乙氧基；
Ri=間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基，且r2 =對-苯 基；或
Re間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基，且r2 =對-哌啶_ 1 -基或對-旅嗪-1 -基； 或者，若Ri，112及113不為氫··
Re間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基；r2 =間-低碳数 烷氧基，尤其間-甲氧基；且R3 =對-低碳數烷氧基， 尤其對-甲氧基；或
Re低碳數烷氧基，尤其甲氧基，且尺2且尺3共同形成低 碳數伸烷基-二氧基（尤其_0_CH2_CH2_0〇橋； 且R5為氫，低碳數烷基或鹵基，尤其氫；限制條件為若n 為1，m為ο，P為〇，r為1則X為NH且丫1為0，R4連同含A及 A之笨環一起不形成甲基吼σ定基，2·羥基-α比。定基或卜 97470.doc •55- 200529849 Η-〗-氧基-1，2-二氫吡啶_4_基； 或其互變異構體； 或其醫藥學上可接受之鹽。 在進一步尤其較佳實施例中，本發明係關於二芳基尿 素衍生物用於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物 的用途，其中該二芳基尿素衍生物為式p之化合物，其中 A為CH、N或N—〇且4贱.〇,限制條件為am 中不超過一個為〇 ; η為1 ; m為〇 ; P為〇、2或3 ; r為1或2 ; 右P為0則X為NR(其甲R為氫或低碳數貌基），或若 或3’則X為氮’其連同（CH2)p及以點（令斷）線代表之鍵（包 括其所結合之原子）一起形成一環，或者 X為CH2且p為零， 限制條件為，：若P為零，則以點線代表之鍵不存在； Y!為 0 或 CH2 ; R1、〜及〜選自下列基團，藉以關於其中環結合至式 中其他部分（藉由冊-C(哪χ_基團）之位置指出位置（〇 = 鄰，間，p=對）·· 只要心不為氫·· 對-正-丙 =對-低碳數烷基，尤其對·f基，對_乙基 基，° 97470.doc -56· 200529849 間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基；或 本基’對-略咬-1 -基或對-旅唤-1 -基， 若1^及112中之兩者皆不為氫： 間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基，且R2 =對-鹵基’尤其對- >臭；
Ri=間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基，且R2 =對-鹵代低碳數烷氧基，尤其對-(2,2,2-三氟乙氧基）； R1 =間-鹵代低碳數烧基’尤其間-三敗甲基’且R2 =間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基； Γ^ =間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基，且r2 =對-苯基， 間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基，且R2 =對-哌啶-1-基或對-哌嗪-1-基；
Re間-鹵代低碳數烷基，尤其間-三氟甲基，且R2 =對-N-嗎啉代基或對-N-硫嗎啉代基； 間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基，且R2 =對-鹵 基，尤其對-溴（非較佳）；
Rt=間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基，且R2 =對-鹵代 低碳數烷氧基，尤其對-2,2,2-三氟乙氧基；
Re間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基，且R2 =對-苯 基；或
Ri=間-低碳數烷氧基，尤其間-甲氧基，且R2 =對-哌啶-1 -基或對-娘嗓-1_基， 或者，若R!，112及113不為氫： 97470.doc -57- 200529849 R1 =間-低碳數烧氧基，尤其間-甲氧基；R2 =間-低碳數 烷氧基，尤其間-甲氧基；且==對-低碳數烷氧基， 尤其對-甲氧基；或 =低碳數烷氧基，尤其甲氧基，且R2且共同形成低 碳數伸烷基-二氧基（尤其-0-CH2-CH2-0-)橋； 且若r不為零，則R4為低碳數烷氧基（尤其甲氧基）、低碳 數烷醯基胺基（尤其乙醯基胺基）、羥基苯基胺基（尤其對_ 羥基笨基胺基）、胺基-低碳數烷基-氧基苯基-胺基（尤其4-[(2-胺基乙基）-氧基苯基]-胺基）、胺磺醯基苯基胺基（尤其 4-胺石黃醯基苯基胺基）、胺甲酸基苯基胺基、（尤其4_胺甲 酿基苯基胺基）、[N-(羥基-低碳數烷基）-胺甲醯基卜苯基胺 基（尤其[N-(2-羥基乙基）-胺甲醯基]-苯基胺基），或鹵素（尤 其氣）； 且R5為鹵素（尤其氣），低碳數烷基（尤其甲基），或較佳 為鐵4， 或其互變異構體； 或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一極佳實施例中，本發明係關於二芳基尿素衍生物 用於製造用以治療RET依賴性疾病之醫藥組合物的用途， 其中該二芳基尿素衍生物為選自WO 03/099771中實例的式 I之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽。 本發明最佳係關於本發明之新穎化合物，或其醫藥學上 可接受之鹽。 進一步較佳的為本發明之新穎化合物或其醫藥學上可接 97470.doc 200529849 文之鹽的用途，其中待治療之蛋白質激酶依賴性疾病為蛋 白質酪胺酸激酶依賴性疾病且尤其為增生性（較佳良性或 尤其惡性腫瘤），尤其為依賴下列蛋白質激酶中之任一者 或多者之疾病：c_Abl、Bcr-Abl H3、RET、、
Tek、PDGF-R、FGF_R、IGF_IR、Eph 受體（諸如尤其
EphB4 受體）、c_Kit、Met、c_Src、Raf 及 / 或咖，尤其 c·
Ab卜Bcr-Ab卜Fh-3、RET、VEGF礅及/或丁以、最尤其
Flt-3 〇 '、 醫樂組合物 本發明尤其亦係關於包含本發明之新穎化合物的醫藥組 合物’關⑨本發明之新穎化合物在治療性(於本發明之廣 泛態樣中亦為髓性）治療巾之用途，格療（尤其路胺酸) 蛋白質激酶依賴性疾病（尤其前述較佳疾病）之方法，關於 用於該用途之本發明之新穎化合物，且尤其用於該 等用途）之醫藥組合物之製備。 不贫明亦係關於活體内同
丨水付儿兩本發明之新穎化令 的本發明之新穎化合物的前藥。因此，若為適當並有辛 任何本發明之新賴化合物之參考應理解為亦指本發明之 穎化合物之相應前藥。 本發明之化合物可用於（例如）包含作為活性成份的 有效劑量之式!化合物或其醫藥學上可接受之鹽連同 有效量一或多種無機或有機、固 、 巧啊固體或液體醫藥學上可 之載劑混合之醫藥組合物的製備。 本發明亦係關於一種醫藥組合物 W 具適於投藥至溫 97470.doc -59- 200529849 物、尤其人類（或投華至自、、w 動物'尤其人類衍生之細 :二：见’例如淋巴細胞)，以治療或(於本發明之膚泛 Γ):棒預防）回應於對蛋白質激酶活性、尤其蛋白 貝路㈣激酶活性之抑制的疾病，尤其較佳適合本發明之 _化合物之用途的前述疾病中之—者，該醫藥組合物包 3-疋1的本發明之新穎化合物或其醫藥學上可接受之趟 (其可有效用於該抑制)連同至少一種醫藥學上 ； 劑。 职1 根據本發明之醫藥組合物為彼等用於經腸(諸如鼻部、 直腸或口腔）或非經腸（諸如肌肉内或靜脈内）投藥至溫血動 :(尤其人類)之醫藥組合物’其包含單獨或連同有效量醫 樂學上可接受之載劑的有效劑量之藥理學活性成份。有效 成份之劑量取決於溫血動物之種類、體重、年齡及個別條 件個別藥物動力學資料、待治療之疾病以及投藥模式。 本發明亦係關於治療對於（尤其酪胺酸）蛋白質激酶之抑 制有反應之疾病，尤其較佳適合本發明之新穎化合物之用 途的前述疾病中之一種；其包含尤其向由於所提及之疾病 而舄要治療之溫血動物（例如人類）投藥（針對於所提及之疾 病）預防性或尤其治療性有效劑量之本發明之新穎化合 物。 待向溫血動物（例如體重约7〇 kg之人類）投藥之式〗化人 物或其醫藥學上可接受之鹽的劑量較佳為每天每人約3 至約30 g，更佳為約1〇 mg至約15 g，最佳為約丨⑻至 約1000 mg，較佳將其分為1至3份可（例如）為相同量之單 97470.doc -60- 200529849 獨劑量。通常兒童接受成人劑量之一半。 。'^W ^合物包含約至約95%、較佳約20%至約 9〇/。之活性成份。根據本發明之醫藥組合物可為（例如）單 位劑型，諸如安溆、 女瓶小瓶、栓劑、糖衣藥丸、錠劑或膠曇 形式。 / 本發明之醫藥組合物以本身已知之方式製備，例如藉由 餐知/合解、；東乾、混合、粒化或調製程序。 、活性成份之溶液亦及懸浮液，卩尤其等張水溶液或懸浮 液疋一種所使用之較佳形式，可在使用前製造該等溶液或 懸浮液，例如包含單獨的活性成份或連同載劑（例如甘露 醇）的凍乾組合物之情況。該等醫藥組合物可經消毒及/或 可包含軾形劑，例如防腐劑、安定劑、濕潤及/或乳化 劑、增溶劑、調節滲透壓之鹽及/或緩衝劑，且其以本身 已知之方式製備，例如藉由習知溶解或凍乾程序。該等溶 液或懸浮液可包含黏度增加物質，諸如羧甲基纖維素鈉、 緩甲基纖維素、葡聚糖、聚乙稀σ比洛σ定酮或明膠。 油中之懸浮，液包含通常用於注射目的作為油組份之植 物、合成或半合成油。可作為此等而被提及之物質尤其為 液體脂肪酸酯’其含有作為酸組份之具有8至2 2個、尤其 1 2至22個碳原子之長鏈脂肪酸，例如月桂酸、十三燒酸、 肉豆蔻酸、十五烧酸、棕櫚酸、珍珠酸、硬脂酸、二十产 ®文、一十二烧酸或相應之不飽和酸，例如油酸、反油酸、 芥子酸、反芥酸或亞油酸，若需要可加入抗氧化劑，例如 維生素Ε、/5-胡蘿蔔素或3,5 -二-第三丁基經基甲苯。彼 97470.doc -61 - 200529849 等脂肪酸醋之醇組份具有最多6個碳原子且為單_ (例如單一、二或三H、含 尹工土 ^ 一 基）知，例如甲醇、乙醇、丙醇、 醇或戊醇或其異構體，但尤盆為- * 凡，、马一知及甘油。因此要 脂肪酸之下列實例：油酸乙醋、肉豆謹酸異㈣、標搁酸 異丙醋、"LabrafU M 2375’,（聚三油酸環氧乙烧甘油妒
Gauef—，巴黎），"Mlgly〇l812"(具有 Μ。長鍵:飽 和脂肪酸之甘油三酸酯，Δ r m x 9 Huls AG，德國），但尤其為植物 油’諸如棉軒油、杏仁油、撖視油、ϋ麻油、芝麻油、大 豆油且更尤其為花生油。 注射組合物係以慣例方式在無菌條件下製備；相同條件 亦應用於將該等組合物製成安瓶或小瓶及密封該等容器。 用於口服之醫藥組合物可藉由將活性成份與固體載劑組 合而獲得’若需要亦可粒化所得混合物且將該混合物(若 需要或必要’在加入適當賦形劑後）加工成旋劑、糖衣藥 丸心或膠囊。亦可將其併入塑料載劑，使活性成份可分散 或以量測量釋放。 合適載劑尤其為填充劑，諸如糖，例如乳糖、蔗糖、甘 露醇或山梨糖醇，纖維素製劑及/或磷酸鈣，例如磷酸三 鈣或磷酸氫鈣，及膠著劑，諸如使用（例如）玉米、小麥、 米或馬鈴薯澱粉之澱粉糊、明膠、黃耆膠、曱基纖維素、 羥丙基甲基纖維素、羧曱基纖維素鈉及/或聚乙烯。比咯啶 酮，及/或（若需要）分解劑，諸如前述澱粉，及/或羧甲基 澱粉、交聯聚乙烯吡咯啶_、瓊脂、褐藻酸或其鹽，諸如 褐澡酸鈉。賦形劑尤其為流動調節劑及潤滑劑，例如矽 97470.doc -62- 200529849 聚乙二r;:硬脂酸或其鹽，諸如硬脂酸鎂或鈣、及/或 二使：。為糖f藥丸心提供合適之(視•況腸溶性)塗 樹#、、、A L其浪縮糖溶液，該濃縮糖溶液可包含阿拉伯 1或二：、聚乙婦…酮、聚乙二醇及/或二氧化 淨二入r有機溶劑中之塗層溶液，或用於製備腸溶性 纖維素製劑之溶液，諸如鄰苯二甲酸乙基纖維 f之— w㈣基甲基纖維相。膠囊為由明膠製 付之乾填充膠囊或由明膠及增塑劑（諸如甘，山七f刹从> 製得之軟密封踉春, a2d(渚如甘油或山梨糖醇） ’ β。㈣乾填充㈣可包含顆粒形式之活 '=:含填充劑(諸如乳糖)、膠著劑(諸 =:(諸如滑石粉或硬脂酸鎂)，且若需要可含安定 i开囊中，活性成份較佳可溶解或懸浮於合適油性 二 肪油、石壤油或液體聚乙二醇，亦可加入 或抗菌劑。可將染料或顏料加入錢劑或糖衣藥 二塗層或膠囊外殼，例如用於識別目的或為了指示活性成 份之不同劑量。 式I之化合物.(尤其本發明之新賴化合物）亦可有利地與豆 他抗增生触合使用。該等抗增生劑包括（料限於）芳香 酶抑制劑、抗雌激辛、叔媸 …， 京拓撲異構扭1抑制劑、拓撲異㈣π 抑制劑、㈣活性劑、烧基化劑、組蛋白去乙醯酶抑制 劑、法呢基轉移酶抑制劑、cox，制劑、腑抑制劑、 m而抑制劑、抗腫瘤抗代謝物、始類化合物、降低蛋白 質激酶活性之化合物及進一步之抗灰管生成化合物、戈那 瑞林（go—11)激動劑、抗雄激素物質、苯胍麥、雙膦 97470.doc -63- 200529849 酸鹽、類固醇、抗增生抗體、17-(烯丙基胺基）-17-去甲氧 基膠達納黴素（17-AAG)及替莫唑胺（TEMODAL⑧）。 本文所使用之術語”芳香酶抑制劑”係關於抑制雌激素產 生（意即，分別將基質雄留烯二酮及睾丸激素轉化為雌激 素酮及雌二醇）之化合物。該術語包括（但不限於）類固醇， 尤其依西美坦（exemestane)及福美司坦（formestane)，及特 別是非類固醇，尤其胺魯米特（aminoglutethimide)、伏羅 唑（vorozole)、法屈唑（fadrozole)、安美達録；（anastrozole) 及（極尤其）來曲σ坐（letrozole)。依西美坦可投藥（例如）以其 銷售形式，例如在商標AROMASINTMT。福美司坦可以（例如） 其銷售形式投藥，例如在商標LENTARONTM下。法屈唑可（例 如）以其銷售形式投藥，例如在商標AFEMATMT。安美達錠可 (例如）以其銷售形式投藥，例如在商標ARIMIDEX™下。來曲 唑可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標FEMARATM4 FEMARTMT。胺魯米特可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商 標 ORIMETEW 〇 包含抗腫瘤劑（其為芳香酶抑制劑）的本發明之組合尤其 可用於治療激素受體陽性乳房腫瘤。 本文所使用之術語’’抗雌激素’’指於雌激素受體水平拮抗 雌激素效果的化合物。該術語包括（但不限於）它莫西芬 (tamoxifen)、氟維司君羊（fulvestrant)、拉樂西芬（raloxifene) 及鹽酸拉樂西芬（raloxifene hydrochloride)。它莫西芬可 (例如）以其銷售形式投藥，例如在商標NOLVADEX™下。 鹽酸拉樂西芬可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標 97470.doc -64- 200529849 EVISTA™下。氟維司群可如US 4,659,516中揭示來調配或 其可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標FASLODEXtm 下。 本文所使用之術語’’拓撲異構酶I抑制劑’’包括（但不限 於）拓撲替康（topotecan)、依立替康（irinotecan)、9-硝基坎 普特賽辛（9-nitrocamptothecin)及大分子坎普特赛辛共輛 ?1^11-166148(界〇 99/17804中之化合物入1)。依立替康可（例 如）以其銷售形式投藥，例如在商標CAMPTOSAR™下。拓 撲替康可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標 HYCAMTINTM 下。 本文所使用之術語”拓撲異構酶II抑制劑’’包括（但不限 於）小紅黴素阿黴素（包括微脂質調配物，例如 CAELYX™)、表柔比星（epirubicin)、黃膽素（idarubicin)及 奈莫柔比星（nemorubicin)、蒽酿（米托蒽§昆及洛索蒽酉昆 (losoxantrone))，以及鬼臼脂素（足葉乙甙及替尼泊甙）。足 葉乙甙可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標 ETOPOPHOST风下。替尼泊甙可（例如）以其銷售形式投藥， 例如在商標VM 26-BRISTOLTM下。阿黴素可（例如）以其銷 售形式投藥，例如在商標ADRIBLASTIN™下。表柔比星 可投藥（例如）以其銷售形式，例如在商標FARMORUBICIN ™下。黃膽素可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標 ZAVEDOSTMT。米托蒽醌可（例如）以其銷售形式投藥，例 如在商標NOVANTRON™下。 術語”微管活性劑”指微管安定及微管擾動劑，包括（但不 97470.doc -65- 200529849 限於）··紫杉烧（太平洋紫杉醇及歐洲紫杉醇）；長春蔓生物 驗’例如長春鹼（尤其長春鹼硫酸鹽）、長春新鹼（尤其長春 新鹼硫酸鹽）及長春瑞賓鹼；迪斯德莫來 (discodermolide);及埃坡黴素（epothilone)，諸如埃坡黴素 B及D。歐洲紫杉醇可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商 l TAX〇TERETMT。長春鹼硫酸鹽可（例如）以其銷售形式 投藥’例如在商標VINBLASTIN R.P.TM下。長春新鹼硫酸 鹽可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標FarmISTINtm 下。迪斯德莫來可如US 5,010,099中揭示來獲得。 本文所使用之術語”烷基化劑”包括（但不限於）環磷醯 胺、異磷醯胺及美法侖。環磷醯胺可（例如）以其銷售形式 投藥，例如在商標CYCL0STINTM下。異磷醯胺可（例如）以 其銷售形式投藥，例如在商標HOloxan™下。 術語”組蛋白去乙醯酶抑制劑"係關於抑制組蛋白去乙醯 ，擁有抗增生活性之化合物。此包括w〇 中所 :示之化合物，尤其Ν·經基冬[4.,乙基）[2_(iH1 哚_3-基）乙基;μ胺基]甲基]苯基]·2ε_2_丙醯胺、n_羥基-% [Η[[2-(2·甲基l朵_3_基[乙基]_胺基]甲基]苯基]. 2_丙酿胺及其醫藥學上 予上了接又之鹽。其進一步尤其包括皮 脂酿基醯基氧肟酸（SahA)。 術語"法呢基轉移酶抑制劑，，係關於抑制法呢基轉移酶且 擁有抗增生活性之化合物。 R :語”C〇X_2抑制劑’，係關於抑制環加氧酶2型酶(COX-2) 擁有抗增生活性之化合物，諸如賽利克西(一 b) 97470.doc 200529849 (Celebrex®)、羅非考昔（rofecoxib)(Vioxx®)及盧米羅可 (lumiracoxib)(COX189) 〇 術語"MMP抑制劑”係關於抑制基質金屬蛋白（MMP)且擁 有抗增生活性之化合物。 術語"mTOR抑制劑’’係關於抑制雷帕黴素之哺乳動物目 標（mTOR)且擁有抗增生活性之化合物，諸如西羅莫司 (Rapamune®)、依維莫司（Certican™)、CCI-779及 ABT578。 術語”抗腫瘤抗代謝物’’包括（但不限於）5-氟脲嘧啶、替 加氟、截瘤達、克拉屈濱、阿糖胞普、氟達拉賓構酸鹽、 氟尿嘧啶、吉西他濱、6-頸基嘌呤、羥基脲、甲胺蝶呤、 依達曲沙及該等化合物之鹽，此外以及ZD 1694(RALTITREXEDTM)、 LY231514(ALIMTA™)、LY264618(LOMOTREXOLTM)及 OGT719。 本文所使用之術語’’鉑類化合物”包括（但不限於）卡鉑、 順-鉑及奥赛力鉑。卡鉑可（例如）以其銷售形式投藥，例如 在商標CARBOPLAT ™下。奥赛力鉑可（例如）以其銷售形 式投藥，例如在商標ELOXATINTMT 〇 術語”降低蛋白質激酶活性之化合物及進一步之抗金管 生成化合物π包括（但不限於）降低（例如）血管内皮生長因子 (VEGF)、表皮生長因子（EGF)、c-Src、蛋白質激酶C、衍 生自血小盤之生長因子（PDGF)、Bcr-Abl、c-Kit、Flt-3、 類胰島素生長因子I受體（IGF-IR)及週期素依賴性激酶 (CDK)之活性的化合物，及具有除降低蛋白質激酶活性以 外作用之另外機制的抗血管生成化合物。 降低VEGF活性之化合物尤其為抑制VEGF受體（尤其 97470.doc -67· 200529849
VEGF受體之酿胺酸激酶活性）之化合物’及結合至VEGF 之化合物，且尤其為彼等化合物、蛋白質及單株抗體’其 一般且特定揭示於WO 98/35958(描述式I之化合物）、WO 00/09495、WO 00/27820、WO 00/59509、WO 98/11223、 WO 00/27819、WO 01/55114、WO 01/58899 及 EP 0 769 947 ; M. Prewett 等人於 Cancer Research ϋ(1999)5209-5218，F· Yuan 等人於 Proc· Natl· Acad. Sci. USA ’ vol· 93，pp. 14765-14770，December 1996 ’ Z. Zhu 等人於 Cancer Res· 58 ’ 1998 ’ 3209-3214 ’ 及 J· Mordenti 寻人於 Toxicologic Pathology，第 27卷，no· 1，pp 14-21，1999 中 所描述之彼等化合物；於WO 00/37502及WO 94/10202中 所描述之彼等化合物；M· S· O’Reilly等人，Cell 79， 1994，3 15-328所描述之Angiostatin™ ;以及Μ· S· O’Reilly 等人，Cell 88，1997，277-285 所描述之 Endostatin™;降 低EGF活性之化合物尤其為抑制EGF受體（尤其EGF受體之 酪胺酸激酶活性）之化合物，及結合至EGF之化合物，且尤 其為一般且特定揭示於下列專利案中之彼等化合物：WO 97/02266(描述式 IV 之化合物）、EP 0 564 409、WO 99/03854、EP 0 520 722、EP 0 566 226、EP 0 787 722、 EP 0 837 063、WO 98/10767、WO 97/30034、WO 97/49688、WO 97/38983 及（尤其）WO 96/33980 ; 降低c-Src活性之化合物包括（但不限於）如下文界定的抑 制c-Src蛋白質酷胺酸激酶活性之化合物及SH2相互作用抑 制劑，諸如彼等揭示於WO 97/07131及WO 97/08 193中之 97470.doc • 68 - 200529849 化合物； 抑制c-Src蛋白質酪胺酸激酶活性之化合物包括（但不限 於）屬於下列結構種類之化合物：σ比咯並嘧啶（尤其11比咯並 [2,3-d],咬）、嘌呤、0比σ坐並喊咬（尤其吼唾[3,4-(1]°密σ定）、 吡唑並嘧啶（尤其吡唑[3，4-d]嘧啶）及吡哆並嘧啶（尤其吡哆 並[2,3-d]嘧啶）。該術語較佳關於W0 96/10028、W0 97/28161、WO 97/32879及 WO 97/49706 中所揭示之彼等化 合物； 降低蛋白質激酶C活性之化合物尤其為彼等揭示於EP 0 296 110(醫藥製劑，描述於WO 00/48571)之星狀孢子素 (staurosporine)衍生物，該等化合物為蛋白質激酶C抑制 劑； 降低IGF-IR活性之化合物尤其為彼等揭示於WO 02/92599之化合物； 降低蛋白質激酶活性且亦可與本發明之化合物組合使用 的進一步特定之化合物為依麥替尼布（imatinib) (Gleevec®/GliveG®)、PKC412、IressaTM(ZD1839)、{6-[4-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基）-苯基]-7H-。比咯並[2,3-d]嘧啶4-基}-((R)-l-苯基-乙基）-胺（AEE788)及其醫藥學上可接受之鹽 (亦參見WO 03/13541)，1-(4-氣-苯胺基）-4-(4-吡啶基-甲 基）-呔嗪（PTK787)及其醫藥學上可接受之鹽（亦參見WO 98/35958)、ZD6474、GW2016、CHIR-200131、CEP-7055/CEP-5214、CP-547632、KRN-633及 SU5416 ; 具有除降低蛋白質激酶活性以外之作用的另外機制的抗 97470.doc -69- 200529849 血管生成化合物包括（但不限於）例如撒利多胺 (THALOMID)、賽利克西（Celebrex)及 ZD6126。 本文所使用之術語”戈那瑞林激動劑”包括（但不限於）阿 巴瑞克（abarelix)、戈舍瑞林（goserelin)及戈舍瑞林乙酸 酯。戈舍瑞林揭示於US 4，100,274中且可（例如）以其銷售 形式投藥，例如在商標ZOLADEX™下。阿巴瑞克可（例如） 如US 5,843,901中揭示來調配。 這裏使用之術語”抗雄激素物質”包括（但不限於）比卡魯 胺（bicalutamide)(CASODEXTM)，其可（例如）如 US 4,636,505 中揭示來調配。 術語”苯胍麥”係關於苯胍麥及其具有抗增生特性之衍生 物。 本文所使用之術語”雙膦酸鹽π包括（但不限於）依替酮酸 (etridonic acid)、氣膦酸、替魯羅酸（tiludronic acid)、帕 米膦酸（pamidronic acid)、阿侖膦酸（alendronic acid)、伊 班膦酸（ibandronic acid)、利塞膦酸（risedronic acid)及 σ坐來 膦酸（zoledonic· acid)。ff依替S同酸f’可（例如）以其銷售形式 投藥，例如在商標DIDRONEL™下。’’氣膦酸π可投藥（例 如）以其銷售形式投藥，例如在商標BONEFOS TM下。π替 魯羅酸π可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標 SKELIDtm^t。”帕米膦酸”可（例如）以其銷售形式投藥，例 如在商標AREDIA™下。π阿侖膦酸”可（例如）以其銷售形式 投藥，例如在商標FOSAMAX™下。，，伊班膦酸，，可（例如）以 其銷售形式投藥，例如在商標BONDRANATTMT。”利塞膦 97470.doc •70- 200529849 酸f’可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標ACTONEL™ 下。’’唑來膦酸”可（例如）以其銷售形式投藥，例如在商標 ZOMETA™ 下。 術語”類固醇”包括氫化可的松、地塞米松（Decadron®)、 曱基強的松龍及潑尼松龍。 本文所使用之術語π抗增生抗體”包括（但不限於）搓杜滋 美（Herceptin™)、搓杜滋美-DM1、埃羅替尼（Tarceva™)、 貝伐單抗（Avastin™)、利妥昔單抗（Rituxan®)、 PR064553(抗 CD40)及 2C4 抗體。 為治療急性骨髓白血病（AML)，可將式I之化合物，尤其 本發明之新穎化合物，與標準白血病療法組合使用，尤其 與用於治療AML之療法組合。特定言之，可將本發明之化 合物與（例如）法呢基轉移酶抑制劑及/或可用於治療AML之 其他藥物（諸如道諾黴素、阿黴素、Ara-C、VP-16、替尼 泊甙、米托蒽醌、黃膽素及PKC412)組合投藥。 藉由編碼號、種屬或商品名可識別之活性劑的結構可獲 自標準綱要”The Merck Index”之真實版本或其他資料庫， 例如 Patents International(例如 IMS World Publications) 〇 可與本發明之化合物組合使用之上述化合物可如此項技 術中（諸如上文引用文獻中）所描述來製備及投藥。 實例（”本發明之新穎化合物”）： 下列實例係用以說明本發明而非限制其範圍。 溫度以攝氏度量測。除非另有說明，否則反應發生在室 溫下。 97470.doc -71 - 200529849 指示各物質移動距離與溶離劑前端（eluent front)移動距 離之比率的Rf值在石夕膠薄層板（Merck，Darmstadt，德國） 上藉由薄層層析法使用各自指定之溶劑系統來測定。 縮寫詞：
Anal. 元素分析(對於指定原子，計算值與量測值之差值切.4%) aq 水性 brine NaCl於水中之飽和溶液 Boc 第三丁氧基羰基 Bu 丁基 cone. 濃縮 d 天 DIPE 二異丙鍵 DIPEA 二異丙基乙胺 DMAP 二甲基胺基吡啶 DME 1,2-二甲氧基乙烷 DMF 二甲基甲醯胺 DMSO-d6 • 全氘化二曱亞砜 equiv 當量 醚(ether) 二乙醚 EtOAc 乙酸乙酯 EtOH 乙醇 Ex. 實例 h 小時 HPLC 高壓液相層析法 97470.doc -72- 200529849
1 Me MeOH min m.p. MPLC MS NEt3 NMR Rr rt TBDMS tBu THF TFA TLC tRet 三碳醯氣(triphosgene) HPLC條件： t R e t ·系統 CH3CN (0.1% 公升 甲基 甲醇 分鐘 熔點 中壓液相層析法 -Combi Flash 系統：正相 Si〇2 -Gilson系統：逆相 NucleosilC18(H2〇/CH3CN +TFA) 通常在以NaHCCb中和後產物作為游離鹼而獲得 馨 質譜 三乙胺 核磁共振 前端比(TLC) 室溫 第三丁基-二甲基-矽烷基 第三丁基 四氫σ夫喃（自Na/二笨甲酮蒸館） 9 三氟乙酸 薄層層析法 保留時間(HPLC) 雙(三氣甲基)碳酸鹽 . A之保留時間[min]:線性梯度2〇_1〇〇% TFA)及水（〇.1%tfa)於 13 min 内 + 5 min 97470.doc -73- 200529849 100% CH3CN(0.1% TFA);於215 nm偵涓J，流速 1 ml/min， 於 25 或 30°C。管柱：Nucleosil 120-3 C18(125><3.0 mm) 〇
BtRet :系統B之保留時間··線性梯度20-100% CH3CN(0.1% TFA)及水（0.1% TFA)於7 min内；於215 nm偵測，流速1 ml/min，於 25 或 30°C。管柱：Nucleosil 100-3 C18 HD (125χ4·0 mm) 〇 etRet :系統C之保留時間[min]:線性梯度20-100% CH3CN (0.1% TFA)及水（0.1% TFA)於 7min 内 + 2 min 100% CH3CN(0.1% TFA);於215 nm偵測，流速 1 ml/min， 於 30°C。管柱：Nucleosil 100-3 C18 HD(125x4 mm)。
DtRet :系統D之保留時間[min]:線性梯度20-100% CH3CN (0.1% TFA)及水（0.1% TFA)於 5 min 内 + 1.5 min 100% CH3CN(0.1%TFA);於 215 nm偵測，流速 1 ml/min， 於 30°C。管柱：Nucleosil 100-3 C18 HD(7〇x4 mm)。 實例1 : N-[4-(6•氣-嘧啶-4·基氧基）-苯基-Nf-[3_(吖丁啶_1-基甲基）-5-三氟甲基-苯基卜脲
向N2氣氛下935 mg(3.78 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-苯 氧基）-嘧啶（步驟L3)於3 ml THF中之溶液添加溶解於20 ml 醚中之870 mg(3.78 mMol)3-(吖丁啶-1-基甲基）-5-三氟甲 基-苯胺（步驟1.6)。於室溫下攪拌3h小時後，將反應混合 97470.doc -74- 200529849 物在真空中部分濃縮，以醚稀釋，藉以使標題化合物結晶 且可濾出並以醚洗滌：MS : [M+l] + =478 ; A-NMRCCDCIJ : 8·58 (s，1H)，7.61 (s，1H)，7.46 (s，1H)，7.44(d，8.6 Hz，2H)，7·24 (s，1H)，7.12(d，8·6 Hz，2H)，6.93 (s，1H)，6.89 (s，1H)，6.81 (s， 1H)，3.59 (s，2H)，3.24(t，7.0 Hz，2x2H)，2.11(q，7·0 Hz，2H)。 起始物質如下製備： 步驟1.1: 4-氣-6-(4-硝基·苯氧基）-嘧啶 向溶解於6.5公升H20之214 g(5.35 Mol)NaOH冰冷卻溶 液添加744 g(5.35 Mol)4-硝基酚。隨後經60分鐘逐滴添加 797 g(5.35 Mol)4,6-二氯σ密咬於6.5公升丙酮中之溶液且於 65°C攪拌該混合物18 h。使反應混合物冷卻至10°C，將沉 澱之粗產物過濾出且以400 ml H20/丙酮1:1洗滌·· m.p.: 127_128〇C ; Anal. C10H6ClN3O3 ·· C、Η、N、C卜 Ο ; MS ·· [M] + =251 ; iH-NMR^DMSO-dd: 8.70 (s，1H，嘧啶基）， 8.34(d，9 Hz，2H，苯基），7.59 (s，1H，嘧啶基），7.57(d，9 Hz，2H，苯基）。 步驟1·2 : 4-(6“氣-嘧啶-4-基_氧基）-苯胺 於室溫下在33 g阮尼Ni之存在下氫化溶解於1〇公升 MeOH/THF 2:1 中之 1095 g(4.3 Mol)4-氣-6-(4-硝基-苯氧 基）-嘧啶4h。將反應溶液過濾並濃縮。自EtOAc結晶得到 標題化合物：Anal· C1()H8C1N30 : C、Η、N、C1、Ο ; MS ： [M+l]+=222 ； 1H-NMR(DMSO-d6) ： 8.60 (s，1H)， 7.12 (s，1H)，6.86(d，9 Hz，2H，苯基），6.57(d，9Hz，2H， 苯基），5.13 (s，2H，NH2)。 97470.doc -75- 200529849 步骤1·3 ·· 4•氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）_喊咬 衣置· 1 8公升反應容器，滴液漏斗及冷凝器。將n2氣氛 下以ίο公升甲苯稀釋之碳醯氣溶液（20〇/〇於甲苯中，143 公升；2.9 Mol)冷卻至約-20°C。隨後經30分鐘添加250 g(l · 12 Mol)4-(6-氣-嘧啶-4-基-氧基）-苯胺於4.4公升CH2C12 中之溶液。加熱所得懸浮液以蒸餾出約4·5公升溶劑。繼 續蒸館（沸點：11 〇 °c )，於反應容器中得到清液（=3公升）， 將其冷卻至室溫並在真空中濃縮。於〇 · 2 mbar蒸餘所得似 堰狀粗產物得到呈固體之標題化合物：m.p. : 1 〇3。〇。 步称1.4 : (3-硝基-5-三氟甲基-苯基）_(吖丁咬-1-基）_甲酮 於冰浴中在N2氣氛下，混合9.77 g(41.6 mMol)3-硝基-5-三氟甲基-苯甲酸（Lancaster)、150 ml CH2C12，數滴 DMF 及5.8 ml(67 mMol)草醯氣，且隨後於室溫下授拌17 h。在 真空中濃縮所得溶液。將剩餘物溶解於50 ml CH2C12&將 其逐滴添加至5·9 ml(87 mMol)吖丁啶於50 ml CH2C12中之 冰冷卻溶液。攪拌15 min後，以1 N HC1、Na2C03稀溶 液、水及塩水洗滌混合物。水層以EtOAc再次萃取兩次， 將組合之有機相乾燥（Na2S〇4)並濃縮。自己烷結晶得到標 題化合物；m.p· : 91°C ; MS : [M+l]+=275。 步稱1·5 : (3_胺基-5-三I甲基·苯基）_(σ丫丁咬-1-基）_甲嗣 在2 g阮尼鎳之存在下氫化200 ml乙醇中之10.39 g(37.9 mMol)(3-硝基-5-三氟甲基-苯基Η吖丁啶-1-基）-甲酮，通 過矽藻土過濾、部分濃縮濾液且以己烷稀釋得到晶體標題 化合物；m.p. : 154。(： ； MS : [M+l]+=245。 97470.doc -76- 200529849 步驟1·6 ·· 3-(吖丁啶-1·基甲基）-5-三氟甲基-苯胺 向冰浴中N2氣氛下75 ml THF中之8.62 g(35.3 mMol)(3-月女基二氟甲基-苯基）-(σ丫丁 σ定-1-基）-甲_逐滴添加15 ml THF 中之 1〇·6 ml(95% ; 106 mMol)BH3.Me2S。於室溫下擾 拌所得溶液2d且隨後於65 °C攪拌4 h。冷卻至室溫後，添 加50 ml HC1 conc./H20 1:1且於室溫下攪拌該混合物15 h且 隨後於65°C攪拌7 h。將混合物傾入EtOAc及10%之Na2C03 溶液，分離出水相並以EtOAc萃取兩次。將有機層以水及 塩水洗滌兩次，乾燥（Na2S04)並濃縮。管柱層析（Si〇2 ; EtOAc/EtOH 95:5 — EtOAc/EtOH/Et3N 95:5:1)得到晶體標 題化合物；m.p· 60-61°C ; MS : [M+l]+=231。 實例2 : N-[4-(6-甲基胺基-嘧啶-4·基氧基）-苯基】吖 丁咬-1-基甲基-5 _三氟甲基·苯基）-腺 N〇
^氣氛下於冰浴中攪拌3!!11於£1〇11中之]^：^112 3 3%溶液 中的 250 mg(0.52 mM〇l)N_[4-(6-氣-嘧啶-4-基氧基）-苯基]·
Nf-(3-吖丁啶-1-基甲基-5-三氟甲基·苯基）_脲4h。隨後將《1 g Si〇2加入該溶液且在真空中濃縮該混合物。將所得粉末 置於 MPLC 管柱（Si02)頂部並以 Me〇H(+l% NH3aq)/CH2Cl2 3:97— 1:9— 1:4溶離，得到晶體標題化合物·· MS : [m+1]+= 473 ； lH-NMR(CD30D + CDC13) ： 8.11 (s5 1H), 7.95 ( m， 97470.doc -77- 200529849 1H)，7.46 (s，1Η)，7·45 (d，7·4 Hz，2H)，7.17 (s，1H)，7.03 (d，7.4 Hz，2H)，5.59 (s，1H)，3.90 (s，2H)，3.63 (m，2x2H)， 2.81 (s，H3C)，2.30 (m，2H)。 實例3 : Ν·[4-(6-疊氮基嘧啶-4-基氧基）·苯基】吖丁 啶-1-基甲基_5_三氟甲基-苯基）_脲 N〇
於 40°C 下攪拌 300 mg(0.63 1111^〇1)1^[4_(6_氣-嘧啶-4-基氧 基）-苯基]-Ν’-(3-吖丁啶-卜基甲基-5-三氟甲基·苯基）·脲及 82 mg(1.26 mMol)NaN3 於 5 ml DMF 中之混合物 16 h，且於 6〇°C下攪拌5 h。將反應混合物傾入水中且以3份EtOAc萃 取。將有機層以水及塩水洗滌，乾燥（Na2S04)並濃縮。將 剩餘物再次溶解於20 ml THF中，過濾，且將濾液直接用 於實例4之氫化步驟。標題化合物可藉由於真空中濃縮濾 液來獲得：MS : [Μ+1Γ =485 ; i-NMRCCDCh) : 8.53 (s， 1H)，7.96 (s，1H)，7·94 (s，1H)，7.57 (s，1Η)，7·53 (s，1H)， 7.45 (d，8.6 Hz，2H)，7.17 (s，1H)，7.04 (d，8.6 Hz，2H)， 6.25 (s，1H)，3.58 (s，2H)，3.27 (t，7.0 Hz，2x2H)，2.11 ( q， 7.0 Hz，2H)。 實例4 : N_[4-(6-胺基-嘧啶基氧基）_苯基】-N，-(3-吖丁咬_ 1·基甲基_5_三氟甲基-苯基）-脲 97470.doc -78- 200529849 N0
F F 在60 mg Pd/C 10%之存在下氫化n-[4-(6-疊氮基-嘧啶-4-基氧基）-苯基]-Ν^(3-σ丫丁咬-1-基甲基-5-三氣甲基-苯基）-脲（0.63 mMol)於20 ml THF中之溶液。過濾、出觸媒後，將 «1 g Si02加入濾液並在真空中濃縮混合物。將所得粉末置 於 MPLC 管柱（Si02)頂端並以 EtOH(+l% NEt3)/EtOAc 1:49 —4:46 ^ 1:4溶離，得到晶體標題化合物：MS ·· [M+l]+= 459 ； 1H-NMR(CD3OD) ： 8.08 (s, 1H)? 7.82 (s? 1H), 7.54 (s, 1H)，7.52 (d，9.0 Hz，2H)，7·24 (s，1H)，7.09 (d，9.0 Hz， 2H)，5.75 (s，1H)，3·68 (s，2H)，3·35 (t，7.2 Hz，2x2H)，2.16 (q，7·2 Hz，2H) 〇 實例5 : N-丨4-(6-氣-嘧啶-4-基氧基）-苯基】-N，-[3_(4-異丙基 哌嗪-1-基甲基）-5-三氟甲基-苯基卜脲
於N2氣氛下將溶解於3 ml THF中之i 〇〇 g(4() mM〇1)4_ 氯-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）_嘧啶（步驟u)逐滴添加至 1·31 g(4.3 mM〇l)3-(4-異丙基哌嗪-1-基甲基）_5_三氟甲基_ 苯胺（步驟5·3)於33 ml醚中之溶液。於室溫下攪拌处後， 97470.doc -79- 200529849 在真空中濃縮反應混合物。管柱層析; CF^Ch/MeOH 9:1 — 88:12 — 85:15)得到標題化合物： m.p. · l〇l°C ； MS ： [M+l]+-549 ； 1H-NMR(CDC13) ： 8.57 (s，1H)，7.64 (s，1H)，7.48 (s，1H), 7.47(d，9 Hz，2H)，7.28 (s，1H)，7.19 (m，1H)，7.13 (s，1H)，7.12 (d，9 Hz，2H)， 6·92 (s，1H)，3·49 (s，2H)，2·69 (sept，6·3 Hz，1H)，2·58 (m，4H)，2·52 (m，4H)，1.08 (d，6·3 Hz，6H)。 起始物質如下製備： 步称5·1 : (3-硝基-5-三氟甲基-苯基）-(4•異丙基旅唤-i-基）_ 甲酮 於冰浴中在N2氣氛下，混合9.00 g(38.3 mMol)3-硝基-5-三氟曱基-苯甲酸（Lancaster)、150 ml CH2C12、數滴 DMF 及5.3 ml(61 mMol)草醯氣，且隨後於室溫下攪拌4.5 h。在 真空中濃縮所得溶液。將剩餘物溶解於5〇 ml CH2C12且將 其逐滴添加至1〇·3 g(80 mMol)l-異丙基哌嗪於50 ml CH2C12中之冰冷卻溶液中。攪拌140 min後，以Na2C03稀 溶液、水及鹽水洗滌該混合物。以EtOAc再次萃取水層兩 次，將組合之有機相乾燥（Na2S04)並濃縮。自DIPE/己烷 結晶得到標題化合物：m.p· : 70-71°C ; MS ·· [M+1] + = 346 〇 步驟5·2 : (3•胺基_5_三氟甲基_苯基）-(私異丙基哌嗪_1β基）_ 甲酮 如步驟1.5中描述在2 g阮尼鎳之存在下氫化2〇〇 ml乙醇 中之9.2 g(27 mMol)(3-硝基-5-三氟曱基-苯基）-(4-異丙基 97470.doc -80- 200529849 哌嗪-1-基）-曱酮得到標題化合物：m.p. : 89-90°C ; MS : [M+l]+ =3 16 〇 步驟5·3 : 3·(4-異丙基哌嗪_1_基）-5-三氟甲基-苯胺 向N2氣氛下70 ml THF中之7.0 g(22 mMol)(3-胺基-5-三 氟甲基-苯基）-(4-異丙基哌嗪-1-基）-曱酮中逐滴添加67 ml (1M於THF中；67 mMol)BH3.THF。於室溫下攪拌所得溶 液18h，隨後添加1〇〇 ml HC1 conc./H20 1:1並於室溫下攪 拌該混合物5 h。以EtOAc萃取反應混合物，有機相以0· 1 N HC1洗條並丟棄。隨後向酸性水層添加250 ml飽和 Na2C03溶液，接著以3份EtOAc萃取。有機層以鹽水洗 滌，乾燥（Na2S〇4)並濃縮，得到呈油狀之標題化合物： MS : [M+l]+=302 ; iH-NMR(CDCl3) : ό·93 (s，1H)，6.82 (s， 1Η)，6·77 (s，1Η)，3.82 (s，Η2Ν)，3.45 (s，2Η)，2.67 (sept, 6.3 Hz，1H)，2.57 (m，4H)，2.51 (m，4H)，1.07 (d，6·3 Hz， 6H)。 實例6 : N-[4-(6-甲基胺基-吨咬冰基氧基）_苯基】丨344-異丙基旅嗪-1_基甲基）_5_三氟甲基_苯基】-脲
於A氣氛下，在冰浴中攪拌3 mlKEt〇H中之MeNH233% 溶液中的368 mg (0.67 mMol)N-[4-(6-氣-嘧啶基氧基）_ 苯基]-Ν’-[3-(4-異丙基哌嗪-丨·基甲基）-5-三氟甲基-苯基 97470.doc '81- 200529849 脲4.5 h。將混合物傾入EtOAc及NaHC03水溶液中，分離 出水相且以EtOAc萃取兩次。有機層以水及塩水洗條兩 次，乾燥（NazSO4)並濃縮。逆相層析法得到標題化合物： MS : [M+l] + =544 ; iH-NMR(CD3OD) ·· 8.15 (s，1H)，7.84 (s，1H)，7.66 (s，1H)，7.56(d，9 Hz，2H)，7·34 (s，1H)，7 13 (d，9Hz，2H)，5.72(s，lH)，3.63(s，2H)，2.87(s，H3C)，2 9- 2.5 (m，9H)，1.15 (d，6.7 Hz，6H)。 實例7 : N_[4_(6-疊氮基-嘧啶-4-基氧基）-苯基】_]^丨3-(4_異 丙基旅11 秦-1-基甲基）-5-三象甲基·苯基】·膝
N II N 於 80°C 攪拌 470 mg(0.86 11^〇1州-[4-(6-氣_。密咬 基氧 基）-苯基]-N’-[3-(4-異丙基旅嗓-1·基甲基）_5_三氟甲基-笨 基]-脲及111 mg(1.7 mMol)NaN3於7 ml DMF甲之混合物2 h。隨後使溶液在冰浴中冷卻並在強烈授拌下將其傾入$ 〇 ml水中。過濾所得懸浮液並以水洗滌得到標題化合物. MS ： [M+l]+=556 ； HPLC AtRet =11.2 〇 實例8 : N-[4-(6-胺基-喊咬-4·基氧基）-苯基卜n，-[3_(4_異丙 基哌嗪-1-基甲基）_5_三氟甲基·苯基】·脲 97470.doc -82- 200529849
F F οΛ 在 100 mg Pd/C 5%之存在下氫化 0.39 g(0.70 mMol)H；4_ (6 -豐氮基-0密°定-4 -基氧基）-苯基]-N’-[3-(4 -異丙基旅嗪 基甲基）-5-三氟曱基-苯基]-脈於20 ml THF中之溶液。過渡 出觸媒，在真空中濃縮濾液，將剩餘物再次溶解於 CHWh/MeOH並在添加《1 g Si〇2之後再次濃縮。將所得粉 末置於MPLC管柱（Si02)頂端並以EtOAc /EtOH (+1% NEt3)19:l—9:1—7:3溶離，自己烷結晶後得到標題化合 物：Anal. C26H3〇N7F302 · 0·8 Η20 · 〇·2 EtOAc : C、Η、 Ν ^ Η20 ； MS ： [M+l] + =530 ； lH-NMR(CD3〇D) ： 8.12 (s, 1Η)，7·86 (s，1Η)，7·63 (s，1Η)，7.57(d，8·6 Ηζ，2Η), 7·34 (s，1H), 7·13 (d，8.6 Hz, 2H), 5·79 (s，1H)，3.62 (s，2H)， 2.8-2.5(m，9H)，1.13(d，6·7 Hz, 6H) 〇 實例9 : N-[4-(6-氣-嘧啶·4-基氧基）-苯基卜N，-[3-(4-甲基哌 嗓_1_基甲基）-5-三敗甲基-苯基】·腺
類似於實例5將溶解於3 ml THF之1.00 g(4.0 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-笨氧基）-嘧啶（步驟1.3)及30 ml醚中之1·1 97470.doc -83- 200529849 g(4.0 mMol)3-(4-甲基哌嗪基甲基三氟甲基-苯胺（步 驟9.3)轉化為標題化合物：1^.:291-292。〇;八仙1· C24H24N6C1F302 · 〇·5 h2〇 ·· C、Η、N、Cl、F ; MS : [M+l] + = 521 〇 起始物質如下製備·· 步驟9·ί ·· (3-硝基_5_三氟甲基_苯基）_(‘甲基哌嗪-^基）-甲酮 類似於步驟5.1 ’以5.3 mi(6i mM〇i)草醯氯活化9.00 g(38.3 mMol)3-硝基_5_三氟甲基-苯甲酸並使其與8.9 ml(80 mMol) 1 -甲基哌嗪反應’得到呈油狀之標題化合物··〜、·· [M+l] + =318 ; HPLC AtRet =8·7。 步驟9·2 · (3-胺基-5-三氟甲基·苯基χ‘甲基哌嗪“-基卜甲酮 如步驟1.5中描述’在2 g阮尼鎳之存在下氫化2〇〇…乙 醇中之11·8 g(37 mMol)(3-硝基_5_三氟甲基-苯基甲基 派嗪-1-基）-甲酮得到標題化合物；m.p. : 114< 15。〇; MS : [M+l] + =288。 步驟9.3 : 3-(4•甲基哌嗪-1-基甲基）_5-三氟甲基-苯胺 類似於步驟.1.6，9.91 g(34.5mMol)(3-胺基-5-三氟甲基· 苯基）-(4-曱基哌嗪-1-基）·甲酮於9〇 mi THF中藉由 BH3-Me2S 還原為標題化合物：m.p. : 98-99〇C ； MS ： [M+l]+=274 ; W-NMR (CDC13) : 6.94 (s，1H)，6·82 (s，1H)， 6.78 (s，1H)，3.82 (s，H2N)，3.45 (s，2H)，2.48 (m，8H)，2.30 (s, H3C) 〇 可類似於本文所描述之程序來製備實例10-13之化合 物： 97470.doc -84- 200529849 實例10 : N_[4-(6-氣-嘧啶_4_基氧基）-苯基】-N’-(3-二乙基胺 基甲基-5-三氟甲基·苯基）-脲
類似於實例5，將溶解於2 ml THF中之171 mg(0.69 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1·3)及6 ml 醚中之170 mg(0.69 mMol)(3-二乙基胺基-甲基）-5-三氟甲 基-苯胺（步驟10.3)轉化為標題化合物。MS : [M+1] + =493·9 〇 起始物質如下製備： 步驟10.1 : (3•硝基-5-三氟甲基-苯基Η二乙基胺基）-甲酮 類似於步驟5·1，以1·7 ml(20.0 mMol)草醯氣活化2.40 g(10.0 mMol)3-硝基-5-三氟甲基-苯甲酸並使其與7.3 g(100 mMol)二乙基胺反應，得到呈油狀之標題化合物；ms : [M-l] = 290 ； lH-NMR(DMSO-d6) ： 8.79 (s, 1H), 8.41 (s， 1H)，8.21 (s，1H)，3·50 (q，2H)，3.21 (q，2H)，1·19 (t，3H)， 1.01 (t，3H) 〇 步驟10.2 : (3-胺基-5-三氟甲基-苯基）-(4-甲基哌嗪-1-基）-甲酮 如步驟1.5中描述，在140 mg Pd-C之存在下氫化5〇 ml乙 醇中之2.8 g(9.6 mMol)(3-硝基-5-三氟曱基-苯基 >(二乙基 胺基）-甲酮，得到呈黃色固體之標題化合物；MS : 97470.doc -85- 200529849 [M+l]+=261.lH-NMR(DMSO-d6) ： 6.89 (s，1H)，6.78 (s， 1H)，6.60 (s，1H)，5.79 (s，2H，NH2)，3.50-3.39 (m，2H)， 3·25-3·02 (m，2H)，1.21-0.99 (m，6H)。 步驟10.3 : 3-(二乙基胺基甲基）_5-三氟甲基·苯胺 類似於步驟 1.6， 15 ml THF 中之 1.04 g(4.0 mMol)(3-胺 基-5-三氣甲基-本基）-(4-甲基旅唤-l -基）-甲嗣藉由 BH3.Me2S 還原為標題化合物：]^3:[]^+1]+=247;111-NMR(DMSO-d6) ·· 6.87 (s，1H)，6.84 (s，1H)，6.81 (s，1H)， 5·60 (s，2H，NH2)，2.75-2.65 (m，4H)，1.28-1.08 (m，6H)。 實例11 ·· Ν-[4-(6·甲基胺基·嘧啶-4-基氧基）-苯基】-Nf-(3_二 乙基胺基甲基_5_三氟甲基·苯基）-脲
在N2氣氛下，於5°C下攪拌3 ml於EtOH中之MeNH2 3 3% 溶液中的250 mg(0.52 mMol)N-[4-(6-氣-嘧啶-4-基氧基）-苯 基]-N’-(3 -二乙基胺基甲基-5-三氟甲基-苯基）-腺2 h。在水 處理後，藉由急驟層析法（Si〇2，梯度CH2Cl2/MeOH 0-40%)純化粗產物，得到標題化合物：m.p. : 68-70°C ; MS ·· [M+l]+ =489 ; iH-NMR(DMSO_d6) : 9·21 (s，1H，NH)， 8·83 (s，1Η，ΝΗ)，8·09 (s，1Η)，7·85 (s，1Η)，7·45 (d，2Η)， 7.20 (s，1H)，7·05 (d，2H)，5·71 (s，1H)，3.56 (s，2H)，2·74 (s，3H)，2.50-2.32 (m，4H)，ΐ·〇ΐ-〇·95 (m，6H)。 97470.doc • 86 - 200529849 實例12 ·· N-[4-(6-疊氮基-嘧啶-4-基氧基）-苯基】-Nf-(3_二乙 基胺基甲基-5-三氟甲基-苯基）-脲
N II N 於 80°C 攪拌 218 mg(0.44 mMol)N_[4-(6-氣-嘧啶-4-基氧 基）-苯基]-N’-(3-二乙基胺基甲基-5-三氟甲基-苯基）-脲及 5 0 mg(0.7 mMol)NaN3於6 ml DMF中之混合物2 h。隨後將 反應混合物以乙酸乙酯稀釋且以鹽水洗滌。將有機層分 離，乾燥並濃縮，以得到粗產物，其藉由急驟層析法 (Si02，梯度CH2Cl2/MeOH0-40%)純化。MS : [M+l]+=501。 實例13 : Ν·[4-(6-胺基-嘧啶-4-基氧基）_苯基】_Ν’_(3·二乙基 胺基甲基-5-三氟甲基-苯基）·腺
在 20 mg Pd/C 5% 之存在下氫化 98 mg(0.17 mMol)N-[4-(6-疊氮基-。密σ定-4-基氧基）-苯基]-Nf-(3-二乙基胺基甲基- 5-三氟甲基-苯基）-脲於10 ml DME中之溶液。過濾出觸媒， 在真空中濃縮濾液，剩餘物藉由製備性TLC(Si02， CP^Ch/MeOH 9:1)純化，得至U票題化 #^:m.p.:63-65〇C. MS : [M+l]+ =475 〇 97470.doc -87- 200529849 實例14 : N-丨4-(6-氣·嘧啶·4-基氧基）_苯基】_N’_[4-(4•甲基 哌嗪-1_基甲基）-3-三氟甲基-苯基】·脲
向N2氣氛下溶解於3 ml THF中之687 mg(2.77 mMol)4- 氣- 6-(4 -異氰酸根基-苯氧基）-嘴唆（步驟1 ·3)冰冷卻溶液中 逐滴添加758 mg(2.77 mMol)4-(4-甲基旅嗓-1-基甲基）_3_三 敗甲基-苯胺（步驟14.4)於20 ml醚中之溶液。於室溫下授掉 3 h後’過滤所得懸浮液並以鍵洗條剩餘物，得到標題化 合物：MS : [M+l]+=521 ; W-NMRCCDCU) : 8·55 (s，1H) 7.67(d，8·6 Ηζ，1Η)，7.56 (d，8·6 Ηζ，1Η)，7·54 (s，1Η)，7·41 (d，9 Ηζ，2Η)，7·21 (s，1Η)，7·15 (s，1Η)，7·08 (d，9 Ηζ， 2Η)，6·91 (s，1Η)，3·58 (s，2Η)，2.48 (m，8Η)，2.30 (s， H3C)。 ’ 起始物質如下製備： 步碌14.1 : N-(4-甲基-3-三氟甲基-苯基）_2,2,2-三敗-乙醯胺 向N2氣氛下320 g(h827 Mol)5-胺基-2-曱基三i甲苯及 1.47公升（18.27 Mol)吡啶於4.5公升CHAU中之冰冷卻溶液 中逐滴添加284 ml(2.01 Mol)三氟乙酸酐。50 min後，以5 公升冰冷卻之2 N HC1稀釋該混合物。將有機相分離出並 以2公升冷2 N HC1洗滌兩次、隨後以1公升2 N HC1並最終 以2公升鹽水洗滌。水層以CHzCl2萃取兩次，將有機相乾 97470.doc -88- 200529849 餘（NazSO4)並部分濃縮。藉由添加己烧結晶得到標題化合 物·· m.p· : 72-73°C。 步驟14.2 : N_(4-溴甲基-3-三氟甲基·苯基)_2,2,2_三氟·乙醯胺 向A氣氛下60·9 g(224.6 mMol)N-(4-甲基-3-三敗甲基苯 基）-2,2,2-三氟-乙醯胺於830 ml乙酸正丁酯中之溶液添加 44 g(247 mMol)N-溴琥珀醯亞胺及830 mg(5 mMol)偶氮-異 丁腈。將該懸浮液加熱至60°C且隨後藉由Phil lips低電壓燈
(500 W ; 10500 lm)照射30 min，藉以將溫度升至7〇-75°C 並形成澄清棕色溶液。仍存在可偵測之剩餘離析物，因此 以3份添加另外22 g N-溴琥珀醯亞胺。共照射6 h後，將剩 餘固體過濾出並丟棄，且濃縮濾液。在2公升CH2C12與1公 升Ηβ之間分溶剩餘物，且水層以1公升CH2C12萃取。有機 相以1公升Ηβ、0.5公升鹽水洗滌4次，乾燥（Na2S04)並濃 縮。管柱層析（Si02 ;己烷/CH2C12 2:1 — 1:1)及自 CH2C12/ 己烷結晶得到標題化合物：m.p. : 119-120。〇。 步驟14.3 : 2,2,2_三氟_N-[4-(4_甲基·哌嗪-1-基甲基）_3_三 氟甲基-苯基】-·乙醯胺 向N2氣氛下1.9 ml(17.1 mMol)N-甲基哌嗪於50 ml乙腈 中之冰冷卻溶液經30 min逐滴添加2.00 g(5.71 mMol)N-(4-溴甲基_3_三氟曱基-笨基）_2,2,2-三氟-乙醯胺於50 ml乙腈 中之溶液。額外20 min後，在真空中濃縮反應混合物。所 得油以EtOAc及飽和NaHC03溶液/H20 1:1稀釋。將水層分 離出並以EtOAc萃取兩次。有機層以飽和NaHC03溶液/H20 1:1、水及鹽水洗滌，乾燥（Na2S〇4)，濃縮並直接用於步驟 97470.doc -89- 200529849 14·4 : MS ·· [M+l] + =370 ; HPLC AtRet=9.5。 步称14.4 : 4-(4 -甲基-派嗓-1_基甲基）-3-三氣甲基-苯胺 向 1.102 g(2,98 mMol)2,2,2-三氟-N-[4-(4-甲基-哌嗓-1-基 甲基）-3-三氟甲基·苯基]-乙醯胺於26 ml沸騰甲醇中之溶液 中逐滴添加14 ml之K2C〇3於水中之1 Μ溶液。搜拌ih後， 使反應混合物冷卻至室溫且以EtOAc及水稀釋。將水層分 離出並以EtOAc萃取兩次。有機相以水及鹽水洗滌，乾燥 (Na2S〇4)並濃縮’以付到標題化合物，其直接用於實例 14 ： MS ： [M+l] + =274 ; HPLC AtRet=5.4。 4-(4-甲基哌嗪-1·基甲基）-3_三氟甲基-苯胺之替代合 成： 步驟14.4.1 : 4_硝基-2-三氟甲基-苯甲酸[參見：j· Gen. Chem. USSR(Engl. Transl.)33( 1963) » 2957] 在&氣氛下，於冰浴中冷卻5〇 g(263 mMol)鄰-三氟甲 基-苯甲酸及307 ml HjO4 96%之機械攪拌混合物。隨後於 5-7°C經75 min逐滴添加105 ml HN〇3 100%。移去冰浴並於 室溫下持續攪拌2h。將反應混合物傾入1 ·9 kg冰中且攪拌 20 min。過濾該懸浮液，以100⑹冷水洗滌並乾燥（〇 2 mbar ’ 50 C )得到含有20%幾何異構物（regi〇_isomer)之粗標 題化合物。將該物質部分溶解於〇·4公升沸騰曱苯幷過 濾。將濾液濃縮至其體積一半，隨後添加〇· 1公升己烷。 隨著冷卻至室溫，標題化合物結晶且可過濾出：m.P.: 138-141〇C ； ^-NMRCCDCh) ： 8.71 (d? 2.3 Hz? 1H), 8.56 (dd，2.3 Hz，8·2 Hz，1H)，8.18 (d，8·2 Hz，1H)。 97470.doc * 90 - 200529849 步驟14·4·2 : (4-硝基_2_三氟甲基，苯基）-(4•甲基-旅嗪·l 基）-甲嗣 向N2氣氛下17.99 g(76.5 mMol)4-硝基-2-三氟甲基苯甲 酸、300 ml CH2C1A3 ml DMF之冰冷卻溶液逐滴添加12.3 ml(145 mMol)草醯氣。4.5 h後，在真空中濃縮所得溶液。 將剩餘物溶解於300 ml CH2C12並逐滴添加至17.8 ml(160 mMol)l-甲基哌嗪於120 ml CH2C12中之冰冷卻溶液。擾拌3 h後，該混合物以〇·5公升CH2C12稀釋，以3份Na2C03之10% 溶液、水及鹽水洗滌。將有機相乾燥（Na2S04)並濃縮，以 得到呈油狀之標題化合物：]^3:[^+1]+=318;111-NMR(CDC13) ： 8.62 (d, 2.3 Hz, 1H), 8.50 (dd, 2.3 Hz, 8.2 Hz，1H)，7.60 (d，8·2 Hz，1H)，3·90 (m，1H)，3.84 (m，1H)， 3.21 (t，5.1 Hz，2H)，2.53 (t，5·1 Hz，2H)，2.36 (s，3H)， 2.36(m? 2H) 〇 步驟14.4.3 : (4-胺基_2_三氟甲基·苯基）_(4-甲基·哌嗪-1-基）-甲酮 在4 g阮尼鎳之存在下氫化24 g(76 mMol)(4-硝基-2-三氟 甲基-苯基）-(4-曱基哌嗪-1-基）_甲酮於400 ml乙醇中之溶液 14h。過渡出觸媒並在真空中濃縮濾液。過濾5〇〇 ml沸騰 甲苯中之剩餘物，將濾液部分濃縮直至產物開始結晶。冷 卻至室溫並過濾得到標題化合物：ni. p. : 15 4 -1 5 6 °C ; MS : [M+l]+=288。 步驟14.4.4 : 4-(4-甲基哌嗪-l_基甲基）-3•三氟甲基-苯胺 向 N2 氣氛下 160 ml THF 中之 17.2 g(60 mMol)(4-胺基-2- 97470.doc -91 · 200529849 三氟曱基-苯基）-(4-甲基-哌嗪-1-基）_甲酮中經乃min添加 180 ml(lM 於 THF 中；180 mM〇l)BIVTHF。於室溫下搜掉 所得溶液18 h，隨後在冷卻下添加180 ml Hei ccmc/H2() 1:1且於室溫攪拌該混合物18 h。將反應混合物部分濃縮， 剩餘物以E t Ο A c卒取，分離之有機相以〇 · 1 n η C1洗務並丢 棄。Ρ过後將0.7公升飽和Na2C〇3溶液添加至該酸性水層（― pH 9-10)，接著以3份EtOAc萃取。有機相以鹽水洗滌，乾 燥（Na2S〇4)並濃縮。自、/弗騰甲苯結晶得到標題化合物： m.p. : 119_121〇C。 實例15 : ]\_[4-(6_氣_喊咬_4_基氧基）-苯基】_ν，·[4-(4_異丙 基旅嗓-1-基甲基）-3-三襄甲基-苯基]-腺
向N2氣氛下溶解於4 ml THF之1.251 g(5.05 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根‘基-苯氧基）-嘧啶（步驟丨.3)之冰冷卻溶液逐滴 添加1.5 22 g(5.05 mMol)4-(4-異丙基哌嗪-1-基甲基）-3-三氟 曱基-苯胺（步驟15.2)於25 ml醚中之溶液。攪拌2·5 h後， 以醚稀釋反應混合物，將固體過濾出並以醚洗滌。使粗產 物重新溶解於CH2Cl2/MeOH，在Si02上吸收，隨後將其置 於Si02層析管柱頂部。以CH2Cl2/MeOH/NH3aq 95:5:1溶離 得到標題化合物：Anal. C26H28N6C1F302 · 0.5 H20 : C、 Η ^ N > F ； MS ： [M + l]+=549 ； lH-NMR(CDCl3) : 8.56 (s? 97470.doc -92- 200529849 1H)，7.68(d，8 Ηζ，1Η)，7·57 (d，8 Hz，1H)，7.56 (s，1H)， 7·43 (d，9 Hz，2H)，7·11 (s，1H)，7。1〇 (d，9 Hz，2H)，7.05 (s， 1H)，6.92 (s，ih)，3 58 (s，2H)，2·67 (sept，6.3 Hz，1H)， 2.56 (m，4H)，2·51 (m，4h)，1.08 (d，6.3 Hz，6H)。 起始物質如下製傷： 步称15·1 · 2,2,2-三氟_n-[4-(4_異丙基_σ辰嗓-1-基甲基）-3- 三氟甲基·苯基卜乙醯胺 向A氣氛下3.46 g(27 mMol)N-異丙基哌嗪於70 ml乙腈 中之冰冷卻溶液中經35 min逐滴添加3.15 g(9.0 mMol)N- (4-溴甲基-3-三氟甲基_苯基）_2,2,2-三氟-乙醯胺（步驟14·2) 於70 ml乙腈中之溶液。額外5 min後，如步驟14.3中所描 述之處理程序得到呈油狀之標題化合物·· MS : [m+1]+= 398 ; HPLC AtRet==1(M。 步驟15·2 : 4-(4•異丙基哌嗪-1-基甲基）-3•三氟甲基-苯胺 向 3.58 g(9.〇 mM〇l)2,2,2-三氟-Ν-[4·(4-異丙基-哌嗪 _丨-基 甲基）-3-二氟甲基·苯基·乙醯胺於9〇 ml沸騰甲醇中之溶液 逐滴添加45 miiKWO3於水中之！ M溶液。攪拌11〇以打 後，將反應混合物冷卻至室溫且在真空中將其部分濃縮。 剩餘物以Et0Ac及水稀釋，將水層分離出並以Et〇Ac萃取 兩次。有機相以水及鹽水洗滌，乾燥（Na2S〇4)並部分濃 縮。以己烷稀釋時，標題化合物結晶且可藉由過濾來分 離·· m.p. ·· 117]19。(： ； MS : [M+l]+=：302。 實例w : N_[4普甲基胺基_峨啶冰基氧基）苯基】n (4-異丙基娘嗓小基甲基）_3_三氟甲基_苯基】腺三氣乙酸酯 97470.doc -93- 200529849
FF 在N2氣氛下，於冰浴中擾拌4mi於EtOH中之MeNH2 33% 溶液中的450 mg(0.82 mMol)N-[4-(6-氯-嘧啶_4_基氧基）-苯 基]-N’-[4_(4_異丙基略唤-1-基甲基）_3_三氟甲基-苯基卜脈3 h。將該混合物傾入EtOAc及NaHC03之1〇%溶液中，將水 相分離出且以EtOAc萃取兩次。有機層以水及塩水洗滌兩 次，乾燥（NajO4)並濃縮。逆相層析法得到標題化合物： MS ： [M+l]+=544 ； 'H-NMRCDMSO-d,) : 9.16 (s? HN), 9.04 (m，HN+)，8.93 (s，ΗΝ)，8·12 (m，1H)，7 95 (s, 1Η)，7·62 (2s，2H)，7.48 (d，9 Hz，2H)，7.33 (m，HNMe)，7·05 (d，9 Hz，2H)，5.73 (s，1H)，3.65 (s，2H)，3 47(% 1H)，3 39 (m， 2H)，3.00 (m，2H)，2.95 (m，2H)，2.76 (m，H3C)，2·39 (m, 2H), 1.26 (d, 7 Hz, 6H) 〇 實例17 : N_[4-(6-甲基胺基喷咬_4_基氧基）苯基卜 (4-異丙基-4-氧基-哌嗪-1-基甲基三氟曱基_苯基卜脲三 氟乙酸· 6旨
97470.doc -94- 200529849 可作為慢移動 在貫例16之反應混合物之逆相層析期間， 副產物而分離出標題化合物：MS : [M+1]+==56() ; 1h_nmr (DMSO-d6) : 11.48 (s，ΗΝ)，9·14 (s，HN)，8 92 (s，hn)， 8.11 (m，1H)，7.95 (s，1H)，7·63 (m，2H)，7.47(d，8 Hz，2H)， 7.30 (m，HNMe)，7·05 (d，8 Hz，2H)，5.73 (s，1H)，3·95 (sept，7 Hz，1H)，3.69 (s，2H)，3.60 (m，4H)，2.87 (m，2H)， 2·76 (m，H3C)，2.7 (m，2H)，1.35 (d，7 Hz，6H)。 實例18 : N-[4-(6-疊氮基-嘧啶-4-基氧基）_苯基】-Ν，-[4-(4-異丙基旅嗪-I基甲基）-3_三氟甲基-苯基】-脲
標題化合物係如實例7中所描述自647 mg(1.18 mMol)N-[4-(6-氣啶_4·基氧基）_苯基]_n，-[4-(心異丙基哌嗪基 籲 甲基）_3_三氟甲基-苯基]脲製備：MS : [Μ+1Γ =556 ; HPLC AtRet==lh4。 實例19 : N_[4-(6-胺基_嘲啶_4_基氧基）-苯基卜N，_[4_(4-異 丙基〇底噪-1·基甲基）_3_三氟甲基·苯基卜脲 97470.doc -95- 200529849
在 0.12 g Pd/C 10%(nEngelhard 4505，，）之存在下氫化 25 ml THF中之0·66以1·18 mMol)N-[4-(6·疊氮基-嘧啶-4-基氧 基）-苯基]-Ν·-[4-(4-異丙基哌嗪-i-基甲基三氟甲基-苯 基]-腺，過滤’濃縮濾液及層析[MPLC ·· CH2Cl2/MeOH (+1% NH3aq)199:l->93:7->82:18]得到標題化合物·· Anal. C26H30N7F3〇2 · 0.8 H20 : C、Η、N、F ; MS : [M+l]+=530 ; iH-NMR(CDCl3) : 8.25 (s，1H)，7·86 (s，1H) 7.65 (d，8.2 Hz，1H)，7.56 (m，3H)，7.25 (d，8 Hz，2H) 6 97 (d，8 Hz，2H)，5.64 (s，1H)，5.26 (s，H2N)，3·57 (s 迮） 2.64 (sept，6.7 Hz，1H)，2.53 (m，4H)，2·49 (m，4H) i 〇6(迓 6·7 Hz，6H)。 ’ 實例19-1及19-2之化合物可類似於本文所描述之σ ， 序製 備： 實例19-1 : N-[4-(6-胺基-嘧啶-4-基氧基笨基 H-哌嗪_1_基甲基）-5-三氟甲基_苯基卜脲
F F
97470.doc -96- 200529849 在 0.05 g Pd/C 10%("Engelhard 4505")之存在下氯化 ι〇 ml DME 中之 〇·33 g(0.68 mM〇l)N-[4-(6-疊氮基·嘧啶 _4·基 氧基）-苯基]-Ν，-[4-(4-苯曱醯氧基羰基哌嗪q•基甲基）_3_三 氟甲基-苯基]-脲，過濾，濃縮濾液且層析[ci 8 · CH3CN/H20 (+0.1%TFA)]得到標題化合物：mp : 153_ 155°C· MS : [M+l]+ =488 ; W-NMRPMSOO ·· 9 39 (s 1H)，9·17 (s，1H)，8·59 (s，2H，ΝΗ)，8·18 (s，iH)，7 98 (s， 1H)，7·59 (s，1H)，7.42(d，2H)，7·01 (d，2H) ; 5.62 (s，2H)， 3.17-3.08 (m，4H)，2.62-2.52(m，4H)。 起始物質如下製備： 步驟19-1.1 : 2,2,2-三氟_N-[4_(4-苯甲醯氧基羰基哌嗪 基甲基二氣甲基-苯基】-乙酿胺 向N2氣氣下1.57 g(7.1 mMol)N-苄基-1-派嗪緩酸酯於 ml EtOH中之溶液中經35 min逐滴添加i 〇 g(2 8 mM〇1)N-(4-溴甲基-3-二氟甲基-苯基）·2,2,2-三氟-乙醯胺（步驟14.2) 於5 ml EtOH中之溶液。在搜拌額外3〇 min且如步驟14.3中 所描述之處理，程序後，獲得呈油狀之標題化合物：MS : [M+l] +=491 ； lH.NMR(CDCl3) ： 8.15 (s? 1H? NH)? 7.81- 6·99 (m，3H)，7.39-7.28 (m，5H)，5.15 (s，2H)，3.59 (s，2H)， 3.52-3.43 (m，4H)，2.44-2.39 (m，4H)。 步驟19-1.2 : 4-(4_苯甲醯氧基羰基-哌嗪“·基甲基三氟 甲基-苯胺 向 1.31 g(2.67 mM〇l)2,2,2_ 三氟-N-[4-(4-苯甲醯氧基羰 基-旅嗓-卜基曱基）-3-三氟甲基-苯基]_乙醯胺於20 ml沸騰 97470.doc -97- 200529849 甲醇中之溶液中逐滴添加13 ml之K2C〇3於水中之1 ]V[溶 液。攪拌1 h後，將反應混合物冷卻至室溫且以Et〇Ac及水 稀釋。將水層分離出並以EtOAc萃取兩次。有機相以水及 鹽水洗滌，乾燥（NadCU)並濃縮，以得到標題化合物，其 直接用於步驟 19-1.3 : [M+l] +=3 94 ; iH-NMRCDMSOO : 7.39-7.21 (m，6H)，6.82 (s，1H)，6.75 (d，1H)，5.41 (s，2H)， 5·01 (s，2H)，3.40-3.29 (m，6H)，2·31-2·24 (m，4H)。 步称19-1.3 : N-[4-(6•氣-喊咬-4-基氧基）-苯基】_n，-[4-(4-苯 甲醯氧基羰基哌嗪-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯基卜脲 向N2氣氛下溶解於5 ml THF中之0.38 g(1.52 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-笨氧基）_嘧啶（步驟ι·3)冰冷卻溶液中逐滴 添加0·60 g(1.52 mMol)4-(4-苯甲醯氧基羰基哌嗪-丨·基甲 基）-3-三氟甲基-苯胺（步驟15.2)於15 ml醚中之溶液。搜拌 1 ·5 h後，以醚稀釋反應混合物，將固體過濾出並以醚洗 滌。將粗產物再次溶解於CH2Cl2/MeOH，在Si02上吸收， 隨後將其置於Si〇2層析管柱頂部。以cf^Ch/MeOH ;梯度 0-3% MeOH溶離得到標題化合物：MS : [Μ+1]+=642·7 ; 画R(CDC13): 8.59 (s，1Η)，7.62(d，1Η)，7.59-7.51(m， 2H)，7.41(d，2H)，7·35-7·30 (m，3H)，7.18 (s，1H)，7.15(d， 2H)，7.05 (s，1H)，6.90 (s，1H)，5.19 (s，2 H)，3.62 (s，2H)， 3·59-3·40 (m，4H)，2.51-2.38 (m，4H)。 步驟19-1.4 : N-[4-(6-疊氮基-嘧啶_4_基氧基）_苯基卜n，_[4_ (4-苯甲醯氧基羰基哌嗪_1β基甲基）_3_三氟甲基_苯基卜脲 標題化合物係如實例7中描述自3〇〇 mg(〇.46 mMol)N-[4- 97470.doc -98- 200529849 (6-氯-嘧啶-4-基氧基）-苯基]-N’-[4-(4-苯甲醯氧基羰基哌 嗪-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯基]-脲製備·· MS ·· [M+l]+= 648 ； ^-NMRCCDCh) · 8.58 (s5 1H)? 8.01 (s? 1H), 7.69-7.59 (m，3H)，7.41(d，1H)，7.39-7.35 (m，5H)，7.20 (s，1H)， 7.09(d，2H)，6.25(s，lH)，5.17(s，2H)，3.61(s，2H)，3.59-3·42 (m，4H)，2.43-2.38 (m，4H) 〇 實例19-2 : N-[4-(6-甲基胺基-嘧啶-4-基氧基）-苯基】 (4-H-哌嗪_1_基甲基）-5•三氟甲基-苯基】·脲
在 15 mg Pd/C 10%(’’Engelhard 4505”）之存在下氫化 5 ml MeOH中之88.0 mg(0.14 mMol)N-[4-(6-甲基胺基-嘧啶-4-基 氧基）-苯基]-N’-[4-(4-苯甲醯氧基羰基哌嗪基甲基）_3_三 氟甲基-苯基]-脲’過濾，濃縮濾液且層析[C18 : CH3CN/H2〇 (+〇·1°/〇 TFA)得到標題化合物：111.卩.：197-198〇C ； MS ： [M+l]+=502 ； 1H^NMR(DMSO-d6) :8·80 (s， 1H，NH)，8·52 (s，1H，NH)，8.06 (s，1H)，7.89 (s，1H)，7.63 (d，1H)，7.58 (d，1H)，7.49 (d，2H)，7.05 (d，2H)，5.79 (s， 1H)，3.18-3.09 (m，4H)，2.80 (s，3H)，2 69-2 59 (m，4H)。 起始物質如下製備： 步驟19_2·1 : N-[4-(6-甲基胺基·嘧啶基氧基卜苯基卜N，_ [4-(4-苯甲醯氧基羰基哌嗪_1β基曱基卜3-三氟甲基-苯基]一 97470.doc -99- 200529849 在A氣氛下’於冰浴中攪拌4 m^Et〇H中之MeNH2 33% 溶液中的122 mg(0.19 mMol)N-[4-(6-氯·。密啶-4-基氧基）-苯 基]_N’_[4-(4_苯甲醯氧基幾基』辰,秦小基甲基三氟甲基_ 苯基]-脲（實例20-1)2 h。將混合物傾入EtOAc^NaHC〇32 10%溶液中，將水相分離出並以Et〇Ac萃取兩次。將有機 層以水及塩水洗滌兩次，乾燥（NkSO4)並濃縮。急驟層析 法（Si02 ’ CH2Cl2/MeOH，梯度0-5% MeOH)得到標題化合 物：MS : [M+l]+=636 ; 1h_NMR(CDC13) : 8.21 (s，1H)， 7·61- 7.44 (m，3H)，7·39-7·31 (m，5H)，7.17-6.99 (m，3H)， 6.51(d，lH)，5.75(s，lH)，5.12(s，2H)，3.59(s，3H)，3.48-3.41 (m，4H)，2·91 (s，2H)，2·41-2·35 (m，4H)。 實例20 : N-[4-(6-氣-嘧啶_4_基氧基）-苯基卜N，_[4-(扣第三 丁基哌嗪·1-基甲基）_3•三氟甲基-苯基】-脲 十
類似於實例14製備。粗產物藉由急驟層析法（Si〇2， CH2Cl2/MeOH，梯度〇-l〇〇/〇MeOH)純化以得到呈黃色泡沐 之標題化合物。C27H3GClF3N6〇2 ; MS(ES+)，M+H = 563.6 ； 1H-NMR(300 MHz, CDC13) ： 8.59 (s5 1H), 7.62(d, 1H)，7.60-7.56 (m，2H)，7.42 (d，2H)，7.18-7.11 (m，3H)， 97470.doc -100- 200529849 7.02 (s，1Η)，3·79 (s，2H)，2.78-2.54 (m，4H)，2.51-2.40 (m， 4H)，1.04 (s，9H) 〇 起始物質如下製備： 步驟20·1 :雙_(2-氣-乙基）_胺基甲酸乙酯 根據文獻程序[J· Pharmaceutical. Sci. 61(1972)，1316] 自雙-(2-氣乙基）胺製備標題化合物。c7H13C12N〇2 ; MS(ES+)，M+H =216.4 ; W-NMR (300 MHz，CDC13): 4.19 (q，2H)，3.75-3.58 (m，8H)，1·14 (t，3H)。 步驟20·2 : 4_第三丁基-哌嗪·；!-羧酸乙酯 將步驟20.1之化合物（1〇 g，46 mmol)溶解於第三丁醇， 且隨後於室溫添加Nal(280 mg，1.8 mmol)及第三丁基胺 (5·12 g，70 mmol)。隨後在油浴中將黃色反應混合物加熱 至13 0 °C並授拌13小時。使其再次冷卻至室溫並添加 K2C03(6.9 g· 50 mmol)。隨後將反應曝露於微波輻射（13〇 °C /6 min)。藉由過濾收集產物，在EtOAc中吸收並藉由酸/ 鹼洗滌純化，以得到呈黃色油之標題化合物。（2.54 g，32 mmol ^ 26%) CHH22N202 ； MS(ES+) ^ M+H =215.5 ； NMR(300 MHz，CDC13) : 4·15 (q，2H)，3.51-3.40 (m，4H)， 2.58-2.41 (m，4Η)，1·12 (t，3H)，1.02 (s，9H)。 步驟2〇·3 : 1-第三丁基-哌嗪 使步驟20.2之化合物（1 g，4.6 mmol)溶解於乙醇（15 mL)。添加KOH(l .2 g，201 mmol)且將反應加熱至回流12 h。使其冷卻至室溫並在減壓下濃縮。剩餘物在EtO Ac中吸 收並以鹽水洗滌。有機相經Na2S04上乾燥，濃縮並在高真 97470.doc -101 - 200529849 空下乾燥，以付到呈黃色油之標題化合物。（546 mg，3.7 NMR (300 MHz，CDC13) ·· 2.91-2.84 (m，4H)，2.59-2.48 (m， 4H)，1.02 (s，9H) 〇 步驟20.4 : N-[4_(4_第三丁基-哌嗪-1_基甲基）-3-三氟甲基_ 苯基】_2,2,2_三氟-乙醯胺 於室溫下使步驟20.3之化合物（540 mg，3.8 mmol)溶解 於 EtOH(3mL)並添加 532 mg(1.5 mmol)N-(4-漠甲基-3-三氟 甲基-苯基）_2,2,2-三氟-乙醯胺（步驟14.2)。於周圍溫度下 攪拌該反應1.5 h直至完全。將其濃縮且剩餘粗產物藉由急 驟層析法（Si02 ; CH2Cl2/MeOH，梯度 0-8% MeOH)純化， 以得到呈黃色油之標題化合物（654 mg，1.5 mmol，42%)。 C18H23F6N30 ; MS(ES+)，Μ+Η =412·0。 步驟20·5 ·· 4-(4•第三丁基-哌嗪_1-基甲基）-3_三氟甲基-苯 基-胺 於室溫下使步驟20.4之化合物（650 mg，1.5 mmol)溶解 於MeOH(15mL·)並以K2C03(7.9 mL IN水溶液）處理。將反 應加熱回流1 h直至完全，冷卻回室溫並濃縮。剩餘油在 EtOAc中吸收並以鹽水洗滌。有機層經Na2S04上乾燥，過 濾並在減壓下濃縮。在高真空下乾燥得到呈黃色油之標題 化合物（496 mg，1.5 mmol)。C16H24F3N3 ; MS(ES + )，M+H = 316.1 ;咕-函11(300 MHz,CDC13) : 7.44 (d，1H)，6.91 (d， 1H)，6.79 (d，d，1H)，3.79 (bs，2H)，3.51 (s，2H)，2.67-2.59 (m，4H)，2.58-2.40 (m，4H)，1.01 (s，9H)。 97470.doc -102- 200529849 實例20-1至2〇-8之化合物可類似於本文所描述之程序製 備： 實例20-1 : N_[4_(6_氣-嘧啶-4_基氧基）-苯基】-n，_[4_(4_苯 甲醢氧基羰基-哌嗪-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯基】-脲 r°
類似於實例14自600 mg(1.5 Mmol)4_(4-胺基-2-三氟甲 基-苄基）-旅喚-1 -竣酸苄酯製備。粗產物藉由急驟層析法 (Si02，CH2Cl2/MeOH，梯度 0-10% MeOH)純化。 MS(ES+) ^ M+H =643 ； lH-NMR(300 MHz ^ CDC13) ： 8.57 (s，1H)，7.64(d，1H，J =8·2 Hz)，7.59-7.55 (m，2H)，7·43 (d， J =8.7 Hz)，7.36-7.32 (m，3H)，7.17 (s，1H)，7.08 (d，J =8.7 Hz)，7.04 (s，1H)，6.91 (s，1H)，5.17 (s，2H)，3.60 (s，2H)， 3.57-3.45 (m，4Ή)，2.49-2.33 (m，4H)。 起始物質如下製備： 步驟20_1·1 ; 4-【4-(2,2,2-三氟-乙醯基胺基）-2-三氟甲基-节 基】_哌嗪-1_羧酸苄酯 於室溫下以1.5 7 g(7.1 mMol)苄基-1-哌嗪-羧酸酯處理1〇 g(2.8 mMol)N-(4-溴甲基-3-三氟曱基-苯基）-2,2,2-三氟-乙 醯胺（步驟14·2)於15 ml EtOH中之溶液。於室溫下攪拌該 反應1 h。完全後將其濃縮且藉由急驟層析法（Si〇2， 97470.doc -103- 200529849 CH^Ch/MeOH，梯度0-10% MeOH)純化剩餘粗產物，以得 到呈黃色固體之標題化合物。1^斤3 + )，％+11=491;111- NMR(300 MHz，CDC13) : 8·19 (s，1H，ΝΗ)，7·9>7·89 (m， 3H)，7.40-7.38 (m，5H)，5.18(s，2H)，3.60(s，2H)，3.58-3·52 (m，4H)，2.49-2.38 (m，4H)。 步驟20-1.2 : 4-(4-胺基-2-三氟甲基-苄基）_哌嗪_i_羧酸苄 酯 於室溫下以13.4 ml K2C03之1M水溶液處理1.3 g(2.6 111]^〇1)4-[4-(2,2,2-三氟-乙醯基胺基）_2-三氟甲基-苄基]-哌 唤-1-羧酸苄自旨於20 ml MeOH中之溶液。隨後將反應加熱 回流並攪拌2 h。完全後，蒸餾出MeOH且以EtOAc(3x)萃 取剩餘水性懸浮液。組合之有機相在Na2S04上乾燥並在真 空中濃縮。獲得呈黃色固體之標題化合物。MS(ES+)， M+H =394 ； lH-NMR(300 MHz ^ DMSO-d6) ： 7.39-7.29(m5 6H)，6·82 (s，1H)，6.74 (d，1H) ; 5·41 (s，2H ; NH2)，5·02 (s，2H)，3.42 (s，2H)，3.40-3.31 (m，4H)，2.31-2.24(m， 4H)。 實例20_2 :〜[4-(6_氣-嘧啶_4_基氧基）-苯基】-Ν，_[4-(Ν，Ν· 二甲基胺基-甲基）-3-三氟甲基·苯基】·腺
類似於實例14自110 mg(0.5 mMol)4-(4-(N，N-二甲基胺 基-甲基）-3-三氟^甲基-苯基-胺及125 mg(0.5 mMol)4_氯- 6- 97470.doc 200529849 (4-異氰酸根基-苯氧基嘧啶（步驟13)開始製備。粗產物 藉由急驟層析法（Si02，CH2Cl2/MeOH，梯度 0-10% MeOH) 純化’以得到呈黃色泡沫之標題化合物。111.1).98-105。(：· MS(ES+)，m+H =466. iH-NMROOO MHz，DMSO_d6): 9.02(s，1H)，8.92(s，1H)，8.60(s，1H)，7.97(s，1H)，7.59-7·54 (m，2H)，7.49 (d，2H)，7.38 (s，1H)，7·12 (d，2H)，3·41 (s，2H)，2.19 (s，6H)。 起始物質如下製備： 步称20-2.1 : 4_(4-(N，N_二甲基胺基-甲基）-3·三氟甲基-苯 基-2,2,2_三氟·乙醯胺 於室溫下將501 mg(1.5 mmol)N-(4-溴甲基-3·三氟甲基-本基）-2,2,2-二敗-乙酿胺（步驟14.2)添加至二甲胺於EtOH (33%)中之5 ml溶液。於周圍溫度攪拌該反應〇·5 h直至完 全。將其濃縮且剩餘粗產物藉由急驟層析法（Si〇2 ; CH2Cl2/MeOH，梯度0-5% MeOH)純化，以得到呈黃色油 之標題化合物。MS(ES+)，M+H =315。 步驟20·2·2 : 4-(4-(N，N-二甲基胺基甲基三氟甲基苯 基-胺 於室溫下使步驟20-1.1之化合物（359 mg，1.2 mmol)溶 解於MeOH(12 mL)並以K2C03(6 mL之IN水溶液）處理。 將反應加熱回流1·5 h直至完全，冷卻回室溫並濃縮。剩餘 油在EtOAc中吸收並以鹽水洗滌。有機相在Na2S〇4上乾 燥’過濾並在減壓下濃縮。在高真空下乾燥得到呈黃色油 之標題化合物。M+H =2 1 9。 97470.doc -105- 200529849 實例20-3 : N-[4-(6-氣嘧啶-4-基氧基）苯基卜N，-[4-(N，N-二乙基胺基-甲基）-3•三氟甲基·苯基卜脲
類似於實例14自370 mg(1.5 mMol)4-(4-(N，N-二乙基胺 基-甲基）-3-三氟甲基·苯基-胺及371 mg(1.5 mMol)4-氣-6-(4_異氰酸根基-苯氧基）_嘧啶（步驟1.3)開始製備。粗產物 藉由急驟層析法（Si〇2，CH2Cl2/MeOH，梯度 0-10% MeOH) 純化，以得到標題化合物：MS(ES+)，M+H =494。 實例20_4 : N_[4-(6_氣-嘧啶_4_基氧基）-苯基】-川-[4_[(3_二 甲基胺基-丙基）_甲基-胺基-甲基]-3-三氟甲基-苯基卜脲
類似於實例14自600 mg(2.2 mMol)4-[(3·二甲基胺基-丙 基> 甲基-胺基-曱基]-3-三氟曱基-苯基-胺及539 mg(2.2 夂氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1·3)開始製 1有’以得到標題化合物：MS(ES+)，Μ+Η =523。 實例20-S : N-[4_(6_氣·嘧啶-4-基氧基）-苯基】-N，-[4-[(4-氱 基-节基胺基-甲基】-3-三氟甲基-苯基】·脲 97470.doc 200529849
類似於實例14自440 mg(l .4 mMol)4-[(4 -氰基-苄基）-胺 基-甲基]_3_三氟甲基-苯基-胺及375 mg(1.4 mMol)4-氯_6_ (4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1.3)開始製備，以得到 標題化合物：MS(ES+)，M+H =553。 實例2〇-6 : N-[4_(6-氣·嘧啶_4_基氧基）_苯基】-ν，-[4-(1·嗎 淋基）-3-三敗甲基-苯基】·腺
類似於實例14自260 mg(1.0 mMol)4-(嗎琳-4-基甲基）-3-三氟甲基-苯基胺及248 mg(l.〇 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根 基-苯氧基）-嘧啶（步驟1·3)開始製備，以得到標題化合物： MS(ES + )，Μ+Η =508。ifi-NlVIRpOO MHz，DMSO-d6): 8·82 (s，1H，NH)，8.79 (s，1H，ΝΗ), 8·69 (s，1H)，7·91 (s， 1H)，7.75-7.65(2xd，2H)，7.50(d，2H)，7.15 (d，2H)，7.12 (s， 1H)，3·74 (s，2H)，3.71-3.61(m，4H)，2.62-2.52(m，4H)。 實例20-7 : N-[4-(6-氣-响咬-4_基氧基）_苯基卜比洛 咬-1-基-胺基-甲基）-3-二敗甲基-苯基卜腺 97470.doc -107- 200529849
類似於實例1 4製備。 MS(ES+)，M+H =493. iH-NMR(300 MHz，CDC13) : 8.59 (s，1H)，7.71 (d，2H)，7.51-7.39 (m，3H)，7·17 (s，1H)，7.02 (d，2H)，6.93 (s，1H)，3·79 (s，2H)，2.62-2.58 (m，4H)，2.93 -2.72 (m，4H) 〇 實例 20-8 : N_[4_(6-氣-嘧啶-4-基氧基）_ 苯基]-N，-[4_(4-(4- 甲氧基苄基）-哌嗪-1_基甲基）-3-三氟甲基-苯基卜脲
類似於實例14自878 mg(2.3 mMol)4-[4_(4-甲氧基-节基> 哌嗪]-3-3三氟曱基-苯基胺及573 mg(2.3 mMol)4-氣_6-(4· 異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1.3)開始製備，以得到標題 化合物：MS(ES + )，M+H =628。iH-NMRpOO MHz， CDC13) : 8.59 (s，1H)，7.75(d，1H)，7.41(d，2H)，7.20(d， 2H)，7.17 (d，2H)，6·98 (s，1H)，6·83 (d，3H)，6·79 (s，1H)， 3.80 (s，3H)，3·59 (s，2H)，3·42 (s，2H)，2.58-2.37 (m，8 H)。 實例21 ·· N-[4-(6-氣-响咬_4-基氧基）_苯基]_n，_[4_(甲基-第三 97470.doc •108- 200529849 丁基-胺基-甲基）-3-三氟甲基-苯基卜脲
類似於實例14，使溶解於3 ml THF中之1.0 g(4.0 mM〇i) 4-氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1.3)與1·1 g(4.2 mMol)4-(甲基，2 丁基-胺基-甲基）-3-三氟甲基-苯胺（步驟 21.2)於30 ml醚中之溶液反應以生成標題化合物：Anal. C24H25N5C1F302 : C、Η、N、C卜 F ; MS : [M+l]+=508 ; 'H-NMRCCDCls) ： 8.61 (s, 1H), 7.94 (d? 8.2 Hz, 1H)? 7.63 (d，2 Hz，1H)，7.54 (dd，8 Hz，2 Hz，1H)，7.47 (d，9 Hz， 2H)，7.14 (d，9 Hz，2H)，6.95 (s，1H)，6.93 (s，1H)，6.91 (s， 1H)，3.69 (s，2H)，2.13 (s，H3C)，1.17 (s，第三丁基）。 起始物質如下製備： 步驟21·1 : 2,2,2·三氟-N-[4_(甲基，三丁基-胺基-甲基）_3_三 氟甲基-苯基卜乙醯胺 向N2氣氛下2.05 ml(17 mMol)甲基-第三丁基-胺於80 ml乙 腈中之冰冷卻溶液中經3〇 min逐滴添加2.0 g(5.7 mMol)N-(4_溴甲基-3-三氟甲基-苯基）_2,2,2-三氟-乙醯胺（步驟14·2) 於80 ml乙腈中之溶液。額外3〇 min後，如步驟14·3中所描 述之處理程序得到呈油狀之標題化合物：MS : [M+l] + = 357·，HPLCAtRet go·。。 步驟21·2 : 4-(甲基·第三丁基-胺基-甲基）-3_三氟甲基-苯胺 97470.doc -109- 200529849 如步驟15.2中所描述皂化2.55 g(7.2 mMol)2,2,2-三氟-N-[4-(甲基’ s 丁基-胺基-甲基）-3-三氟甲基-苯基l·乙醯胺得 到呈油狀之標題化合物：MS ·· [M+l] + =261 ; HPLC AtRet = 8·3 〇 實例22 : Ν-[4_(6_氣-嘧啶_4_基氧基）-苯基】-Nf-[4-(吖丁啶-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯基】·脲
類似於實例14，使溶解於2 ml THF中之431 mg(1.7 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1.3)與400 mg(1.7 mMol)4-(吖丁啶-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯胺（步驟 22.2)於10 ml醚中之溶液反應以生成標題化合物·· MS : [M+l]+=478 ； HPLC AtRet =11.3 〇 起始物質如下製備： 步驟22.1 : 2,2,2-三氟-N-[4-(吖丁唆基甲基）_3_三氟甲 基-苯基】-乙醯胺 向N2氣氛下1.74 ml(25.7 mMol)氮雜環丁二烯於1〇〇如乙 腈中之溶液中經65 min逐滴添加3·〇 g(8.5 mMol)N-(4·漠甲 基-3-三氟甲基-苯基）-2，2,2·三氟-乙醯胺（步驟μ.2)於loo ml乙腈中之溶液。額外75 min後，如步驟14.3中所描述之 處理程序得到呈油狀之標題化合物：MS : [M+1丨+=327 ; HPLC AtRet =9.1 〇 97470.doc -110- 200529849 步驟22·2 : 4-(吖丁啶-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯胺 如步驟15.2中所描述皂化2.67 g(8.2 mMol)2,2,2-三氟·Ν-[4-(吖丁啶-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯基]-乙醯胺得到呈油 狀之標題化合物：1^3:[]^+1]+=231;11^]^11(€0(：13)·· 7.37 (d，8.2 Hz，1H)，6.90 (d，2 Hz，1H)，6.79 (dd，8 Hz，2 Hz，1H)，3.75 (s，H2N)，3.64 (s，2H)，3.25 (t，6·8 Hz，4H)， 2.10 (quint，6·8 Hz，2H) 〇 實例23 : N-丨4-(6-氣-°¾咬-4-基氧基）-苯基】-N’-[4-(4,5-二甲 基咪唑-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯基卜脲
於N2氣氛下將238 mg(0.96 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1.3)及246 mg(0.91 mMol)4-(4,5-二甲基 咪唑-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯胺（步驟23.2)溶解於5 ml THF。15 min後，添加10 ml DIPE(沉澱形成）並持續攪拌2 h。過濾、並以DIP E洗丨條得到標題化合物：]^.0.:195- 196〇C ; Anal· C24H20N6ClF3O2 ·0·4 DIPE · 0.1 THF : C、 Η、Ν、Cl、F ; MS : [M+l]+=517 ; iH-NMRCCDCh) : 923 (s，1H)，8·99 (s，1H)，8.52 (s，1H)，8.46 (d，2 Hz，1H)，7.55 (d，9.0 Hz，2H)，7.45 (s，1H)，7·03 (d，9 Hz，2H)，6.83 (s， 1H)，6.34 (dd，8.6 Hz，2 Hz，1H)，6.12 (d，8.6 Hz，1H)，5.15 (s，2H)，2.20 (s，H3C)，2.02 (s，H3C) 〇 97470.doc -Ill - 200529849 起始物質如下製備： 步驟23.1 : 2,2,2_三氟_N_[4-(4,5_二甲基咪唑-i•基甲基）_3_ 二氣甲基-本基】-乙酿胺 向乂氣氛下ι·81 g(188 mM〇1)4,5_二甲基咪唑於7〇…乙 腈中之冰冷卻溶液中經3〇 min逐滴添加2.2 g(6 3 mM〇1)N_ (4-溴曱基-3-三氟甲基_苯基）-2,2,2_三氟_乙醯胺（步驟14·2) 於70 ml乙腈中之溶液。5 h後，過濾懸浮液且以CH3cN洗 務剩餘物，得到標題化合物（更多產物可如步驟14 3中所描 述藉由農縮及萃取而自濾液分離）：m p. : 238-239°C ; MS : [M+l]+=366 〇 步驟23·2 : 4-(4,5-二甲基咪唑-ΐ·基甲基三氟甲基·苯胺 如步驟15.2中所描述皂化2·67 g(7.3 mM〇l)2,2,2-三氟-Ν-[4-(4,5-二甲基咪唑基甲基）-3_三氟甲基_苯基]_乙醯胺， 藉由層析法（Si〇2 : EtOAc/Et3N 99:1—EtOAc/EtOH/Et3N 97:2:1)及自EtOAc結晶得到標題化合物：111.1).:185-186〇C ; MS : [M+l]+=270。 實例24 : N_[4-(6-氣-嘧啶-4_基氧基）-苯基】·Ν，-[4-(2-甲基 咪唑-1_基甲基）_3_三氟甲基·苯基卜脲
於化氣氛下將1.00 g(4.04 mMol)4-氣-6-(4_異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1.3)及1.03 g(4.04 mMol)4-(2-甲基咪"坐- 97470.doc -112- 200529849 1基甲基）-3-二氟甲基-笨胺（步驟24·2)溶解於4〇 THF。 在於室溫下攪拌4 h期Μ，形成懸浮液，且可過濾出標題 化合物· m.p· : 228°C ; Anal. C23H18N6C1F302 : C、Η、 N ^ Cl , MS ： [M+l] +=5〇3 ； lH-NMR(DMSO-d6) ： 9.15 (s5 1H), 8.93 (s，1H)，8·67 (s，1H)，8.14(d，2 Hz, 1H)，7.55(d， 9.0 Hz，2H)，7·54 (m，1H)，7·36 (s，1H)，7.19 (d，9 Hz，2H)， 7.〇8(s，1H)，6.84 (s，1H)，6.66(d，8.6 Hz，1H)，5.27 (s， 2H)，2.20 (s，H3C)。 起始物質如下製備·· 步驟24·1 : 2,2,2·三氟-N-[4_(2-甲基咪唑·基甲基）-3-三氟 甲基·苯基卜乙醯胺 向Ν2氣氛下ι·85 g(22 5 mM〇1)2-甲基咪唑於8〇 ml乙腈中 之冰冷卻溶液中經30 min逐滴添加2.64 g(7.5 mMol)N-(4- 溴甲基-3_三氟甲基-笨基）_2,2,2-三氟-乙醯胺（步驟ι4·2)於 8〇 ml乙腈中之溶液。於室溫下攪拌$ h時，形成溶液，隨 後將其在真空中濃縮。剩餘物以EtOAc及飽和NaHC03溶液 1:1稀釋·。將水層分離出並以Et〇Ac萃取兩次。有機 層以飽和NaHC03溶液/h2〇 1:1、水及鹽水洗滌，乾燥 (Na2S〇4)並濃縮。管柱層析（Si〇2: EtOAC/EtOH 19:1 — 9:1)得到標題化合物：mp· : 229-230°C ; MS : [M+l]+= 352 〇 步称24·2 : 4-(2-甲基咪唑_1_基甲基）_3_三氟甲基-苯胺 如步驟15.2中所描述皂化2.0 g(5.69 mMol)2,2,2-三氟-N-[4-(2-曱基咪唑-：μ基曱基三氟曱基-苯基]_乙醯胺，在 97470.doc 200529849 自EtOAc結晶後得到標題化合物：m p· : i46-147°c ; MS ·· [M+l] +=256。 實例25 : N_[4_(6_氣嘴啶-4-基氧基）_苯基】-N，-[4-(2,4-二甲 基咪唑-1-基甲基）_3_三氟甲基-苯基】·脲
可類似於實例23或24製備。 實例26 : N_[4-(6•氣·嘧啶-4-基氧基）_苯基】_N，-[4-(4•乙基 哌嗪-1-基甲基）-3-甲基-苯基】-脲
類似於實例14，使溶解於2 ml THF中之467 mg(1.88 mMol) 4-氣-6:(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟ι·3)與440 mg(1.88 mMol)4-(4-乙基哌嗪-1-基甲基）-3-甲基-苯胺（步驟 26·4)於8 ml醚中之懸浮液反應以得到標題化合物：MS : [M+l]+ =481 ； 1H-NMR(DMSO-d6) ： 8.77 (s5 1H)? 8.67 (s? 1H)，8·60 (s，1H)，7.53 (d，9.0 Hz，2H)，7.35 (d，〇·8 Hz， 1H)，7.21-7.27 (m，2H)，7.17 (d，9.0 Hz，2H)，7.10 (d，8.2 Hz，1H)，3.34 (s，2H)，2.36 (m，10H)，2.30 (s，H3C)，〇·98 (t， 7.2 Hz，H3C)。 97470.doc -114- 200529849 起始物質如下製備·· 步驟26.1 : 4•硝基-2-甲基-苯甲酸 於禮、封管中在150°C下加熱3.04 g(18.7 mMol)2-曱基-石肖 基苯甲腈[製備參見：J. Med· Chem. 44(2001)，3856]，26 ml HC1 cone·及26 ml乙酸之混合物8 h。過濾冷反應混合物 及以水洗滌得到標題化合物：m.p. : 151_155°C ; MS : [M-1]+ =1 80 〇 步驟26.2 : (4-硝基-2_甲基-苯基）-(4-乙基哌嗪-1·基）·甲酮 類似步驟5.1，以6.52 ml(77 mMol)草醯氯活化8.72 g(48.1 mMol)4-硝基-2-甲基·苯甲酸且使其與13.45 ml(106 mMol)l -乙基哌嗪反應，得到標題化合物：11^.:96-99°C ; MS : [M+1] +=278。 步驟26.3 : (4-胺基-2-甲基-苯基）-(4_乙基哌嗪_1·基）-曱酮 如步驟1·5中所描述在2 g阮尼鎳之存在下氫化200 ml乙 醇中之12.6 g(45.5 mMol)(4-硝基-2-甲基-苯基-(4-乙基哌 嗪-1-基）-甲酮，得到呈油狀之標題化合物：MS ·· [M+l]+=248。， 步驟26·4 : 4-(4-乙基哌嗪-1-基甲基）·3-甲基-苯胺 類似步驟 5·3，100 ml THF 中之 11.12 g(45 mMol)(4-胺 基-2-甲基-苯基）_(4_乙基哌嗪-1-基）·甲酮藉由135 ml BH3 (1M 於 THF 中）還原。層析法（Si02 ; CH2Cl2/MeOH/NH3aq 97:3:1)得到油狀標題化合物：乂8:|^+1]+=234;111-NMR(CDC13) : 7.04 (d，8·2 Hz，1H)，6.54 (d，2·4 Hz，1H)， 6·51 (dd，8 Hz，2.4 Hz，1H)，3.59 (s，H2N)，3.39 (s，2H)， 97470.doc -115- 200529849 2.5 (m，8H)，2.43 (q，7·2 Hz，2H)，2.31 (s，H3C)，1·11 (t，7·2 Hz，H3C) 〇 實例27 ·· N-[4-(6-氣-嘧啶-4-基氧基）-苯基】-N’_[4_(4_乙基 旅唤-1-基甲基）-苯基】-腺
於室溫下攪拌230 mg(0.93 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1.3)及200 mg(0.91 mMol)4-(4·乙基哌 嗪-1-基甲基）-苯胺於8 ml THF中之溶液40 min。藉由添加 «15 ml DIPE結晶，過濾及以DIPE洗滌得到標題化合物： m.p. : 203-204°C ; MS : [M+l]+ =467 ; W-NMRCCDCh): 8·62 (s，1H)，7.48(d，9·0 Hz，2H)，7.33(m，4H)，7.13(d，9.0 Hz，2H)，6.95 (s，1H)，6.88 (s，1H)，6.75 (s，1H)，3.52 (s， 2H)，2·53 (m，8H)，2.45 (q，7.0 Hz，2H)，1.12 (t，7·0 Hz， H3C) 〇 · 起始物質如下製備： 步驟27·1 : 4-(4-乙基哌嗪_1-基甲基苯胺 類似於步驟5.3，於65°C下，105 ml THF中之7.8 g(33.4 mMol)(4-胺基苯基）-(4-乙基ϋ底唤-1-基）_甲酮[如前述或j.
Pharmaceutical Sci. 57(1968)，2073 中描述而合成]藉由 1〇〇 ml BH3(1M 於 THF 中）而還原：1^:[^+1]+=220;1^1- NMR(CDC13) : 7.13 (d，8·2 Hz，2H)，6.68 (d，8·2 Hz，2H)， 97470.doc -116- 200529849 3.67 (s，Η2Ν)，3·47 (s，2H)，2.6(m，8H)，2.53 (q，7·3 Hz， 2H)，1·16 (t，7.3 Hz，H3C)。 實例28 : 1-(4_[1，4’】聯哌啶_1’_基-3_三氟甲基-苯基）_3·Η_ (6 ·氣-吨咬-4 -基氧基）_苯基】-腺
於室溫下攪拌248 mg(1.0 mMol)4-氯-6-(4-異氰酸根基-_ 苯氧基）-嘧啶（步驟1.3)及327 mg(1.0 mMol)4-[l，4，]聯哌啶-1’-基-3-三氟甲基-苯基胺（步驟28.2)於8 ml THF中之溶液30 min。藉由添加《15 ml DIPE結晶，過濾且以DIPE洗滌得到 標題化合物·· MS ·· [M+1] + =575 ; HPLC BtRet =2.06。 起始物質如下製備： 步驟28.1 · lf_(4_确基-2-三氣甲基-苯基）-[1，4，】聯旅淀 於室溫攪拌1·〇 mL(7.27 mMol)l-氟-4-硝基-2-三氟甲基-苯、1.47 g(8.73 mMol)[l，4，]聯哌啶及 1·51 g(10.9 mMol) φ K2C03於15ml DMF中之溶液17小時。在減壓下蒸發DMF 後，反應混合物以80 ml H20稀釋並以60 ml EtOAc萃取3 次。組合之有機相以30 ml H20及30 ml鹽水洗滌，乾燥 (MgS04)，減壓下濃縮且急驟層析（Si02 ; 4.0x24 cm， MeOH/CH2Cl2 1:19)，以得到呈油狀之標題化合物：1!!-NMR(400 MHz，CDC13) : 8.45 (dd，1H)，8.25 (dd，1H)，7.20 (dd，1H)，3·45 (m，2H)，2.88(m，2H)，2.58 (m，4H)，2·40 (m， - 97470.doc -117- 200529849 1Η)，1·60 (m，l〇H)。 步称28·2 : 4-[i，4，】聯哌啶q匕基_3_三氟甲基_苯基胺 如步驟L5中所描述在220 mg 10% Pd/C之存在下氫化25 ml乙醇中之2.14 g(5.99 mMol)l，-(4-硝基-2-三氟甲基-苯 基MMf]聯派啶，得到呈油狀之標題化合物：“3: [M+1 ] =328 〇 實例29 : 氣·嘧啶-4·基氧基）-苯基】-3·{4·[4-(2,2_二 甲基-丙基卜11 辰嗪小基甲基]-3-三氟甲基-苯基卜脲
於室溫下攪拌112 mg(0.45 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基啶（步驟 13)及15〇 mg(0.45 mMol)4-[4-(2,2_ 二甲 基-丙基）-旅嗪-1-基甲基]_弘三氟甲基-苯基胺（步驟29·4)於 8 ml THF中之溶液3〇 min。藉由添加wl5 ml dipe結晶，過 濾及以DIPE洗·滌得到標題化合物：ms : [M+l]+=578 ; g HPLC tRet =2.18 ； 1H-NMR(d6-DMSO) ： 9.00(bs, 1H)? 8.82 (bs，1H)，8.60 (s，ih)，7.94 (s，1H)，7.5 (m，4H)，7.30 (s， 1H)，7·!0 (m，2H)，3.46 (bs，2H)，2.45 (m，4H)，2.35 (m， 4H)，2·〇〇 (s，2H)，0.80 (s，9H)。 起始物質如下製備： 步驟29·1 : 3-[2-(2,2-二曱基-丙基胺基）_乙基】·噁唑啶_2·酮 於40C攪拌5 g(17.5 mMol)甲苯-4-磺酸2-(2-氧-噁唑啶- 97470.doc -118- 200529849 3-基）-乙酯、1.68 8(19.2 111]^〇1)2,2-二甲基-丙基胺及3.63 g(26.3 mMol)K2C03 於 35 ml MeCN 中之溶液 12 h。在減壓 下蒸發MeOH後，反應混合物以80 ml H20稀釋並以60 ml EtOAc萃取3次。組合之有機相以30 ml H20及30 ml鹽水洗 滌，乾燥（MgS04)且於減壓下濃縮，以得到呈油狀之標題 粗化合物·· MS ·· [M+l] +=201 ; iH-NMRCCDCh) : 4·30 (dd，2Η)，3.65 (dd，2Η)，3.35 (t，2Η)，2·80 (t，2Η)，2.35 (s， 2Η)，0·90 (s，9Η)。 步驟29·2 : 1-(2,2-二曱基-丙基）-哌嗪二氫溴酸鹽 根據文獻程序（Tetrahedron Letters，40，7331，1994)使 用3-[2-(2,2-二曱基-丙基胺基）-乙基]-噁唑啶-2-酮製備1-(2,2-二甲基·丙基）_哌嗪二氫溴酸鹽：MS : [M+1] +=157。 步驟29.3 : N-{4-[4-(2,2-二甲基-丙基）_哌嗪-1-基甲基]-3-三氟甲基-苯基卜2,2,2-三氟·乙醯胺 於室溫下攪拌溶解於10 ml DMF中之1.0 g(3.14 mMol)l-(2,2-二甲基-丙基）-〇辰嗓二氫漠酸鹽、440 mg(1.25 mMol) N-(4-、;臭曱基-3·-三I曱基-苯基）_2,2,2-三乙醯胺（步驟 14·2)及0.53 mL(3.77 mMol)三乙胺3h。在減壓下蒸發乙腈 後，使反應混合物以80 ml H2〇稀釋並以70 ml EtO Ac萃取3 次。組合之有機相以30 ml NaHC03溶液及30 ml鹽水洗滌 兩次，乾燥（MgSCU)，減壓下濃縮且急驟層析 (MeOH/CH2Cl2 1:19)，以得到黃色固體：MS : [M+l] + =426 ; HPLC BtRet =2.13。 步驟29·4 : 4-[4_(2,2·二甲基-丙基）_哌嗪-1_基甲基卜3·三氟 97470.doc -119- 200529849 曱基-苯胺 向 445 mg(1.04 mMol)N-{4-[4-(2,2-二甲基-丙基卜略 σ秦小 基甲基]-3-三氟甲基-苯基}-2,2,2-三氟-乙酿胺於i8 mi沸騰 甲醇中之溶液中逐滴添加5.2 ml之KAO3於水中之i 乂溶 液。攪拌1 h後，使反應混合物冷卻至室溫並以Et0Ac及水 稀釋。將水層分離出並以EtOAc萃取兩次。有機相以水及 鹽水洗(條，乾燥（Na2S〇4)並濃縮以得到標題化合物，其直 接用於實例 29 : MS ·· [M+l] +=330 ; HPLC DtRet=1.73。 實例30 : l-[4-(6-氣-喊唆-4-基氧基）-苯基】_3_{4-丨4-(2,2-二 甲基-丙基）-哌嗪-1-基】_3_三氟甲基-苯基卜脲
於室溫下攪拌141 mg(0.57 mMol)4-氣-6-(4_異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟 1·3)及 180 mg(0.57 mMol)4-[4-(2,2-二甲 基-丙基）-哌嗪-1-基]-3-三氟甲基-苯基胺（步驟30·2)於8 ml THF中之溶液30 min。藉由添加《15 ml DIPE結晶，過濾及 以DIPE洗滌得到標題化合物：MS : [M+1] + =563 HPLC 〇tRet =2.28 ° 起始物質如下製備： 步驟30.1 : 1_(2,2-二甲基-丙基）-4-(4•硝基-2-三氟甲基-苯 基）-旅唤 於室溫下攪拌0.36 mL(2.62 mMol)l-氟-4-硝基_2_三氟甲 基-苯、1·〇 g(3.14 mMol)l-(2,2-二曱基-丙基）-哌嗪二氫溴 97470.doc •120- 200529849 酸鹽及 1.08 g(7.86 mMol)K2C03 於 8 mi DMF 中之溶液 Π h。在減壓下蒸發DMF後’反應混合物以8〇 ml h2〇稀釋並 以60 ml EtOAc萃取3次。組合之有機相以3〇 mi h20及30 ml鹽水洗滌，乾燥（MgSCU)，減壓下濃縮且急驟層析 (Si02 ’ MeOH/CH2Cl2 1:19)，以得到呈油狀之標題化合 物：MS : [M+l]+ =346 ; HPLC DtRet =2.39 ; lH-NMR(3〇〇 MHz，CDC13) : 8·50 (dd，1H)，8.30 (dd，1H)，7.25 (dd，1H)， 3·15 (m，4H)，2.70 (m，4H)，2.10 (s，2H)，〇·90 (s，9H)。 步称30.2 ·· 4-[4_(2,2-二甲基-丙基）-旅嗓小基卜3_三氣甲基_ 苯基胺 如步驟1.5中所描述在40 mg 10% Pd/c之存在下氫化1〇 ml 乙醇中之 210 mg(〇.63 mM〇l)l-(2,2_二甲基·丙基）-4-(4- 石肖基-2-二氟曱基-苯基）-u辰唤得到呈油狀之標題化合物： MS ·· [M+1] +=316 〇 實例31 : 1_[4_(6_氣-喊啶_4_基氧基）_苯基】-3_[4-(1•甲基娘 咬·4_基曱氧基）_3_三氟甲基-苯基卜脲
於室溫下攪拌248 mg(1.00 mMol)4-氣-6·(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1·3)及288 mg(1.00 mMol)4-(l-甲基-哌 咬>4-基甲氧基）三氟甲基·苯基胺（步驟31.2)於8 ml THF 中之溶液30 min。藉由添加《15 ml DIPE結晶，過濾且以 DIPE洗滌得到標題化合物·· ms : [M+l]+=535 ; HPLC AtRet 97470.doc -121 - 200529849 = 1.98。 起始物質如下製備： 步称31.1 : 1-甲基-4-(4-確基-2-三氟甲基-苯氧基甲基）_旅咬 於60°C搜拌1.00 mL(7.27 mMol)l-氟_4_硝基-2-三默曱基-苯、1.88 g(14.5 mMol)(l -甲基-哌啶-4-基）_ 甲醇及 470 mg(l .45 mMol)四丁基溴化銨於6 ml甲苯及6 ml 25% KOHaq 中之溶液17 h。冷卻該溶液後，反應混合物以8〇 ml H20稀 釋並以60 ml EtOAc萃取3次。組合之有機相以30 ml NaHC03及30 ml鹽水洗條兩次，乾燥（MgS04)，減壓下濃 縮並急驟層析（MeOH/CH2Cl2 1:19)，以得到標題化合物： MS : [M+l]+=319 〇 步驟31·2 : 4-(1-甲基-哌啶-4_基甲氧基)-3•三氟甲基-苯基胺 如步驟1·5中所描述在190 mg 10% Pd/C之存在下氫化20 ml乙醇中之1·86 g(5.84 mMol)l_甲基-4-(4-硝基-2-三氟曱 基-苯氧基甲基）-哌啶得到呈油狀之標題化合物：MS : [M+l]+ =289。 實例32 : 1-[4-(6-氣-嘧啶-4_基氧基）_苯基】-3-[4-(l-甲基-哌 咬-4_基氧基）-3-三I甲基-苯基】-腺
I
於室溫下攪拌248 mg(1.00 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟1.3)及274 mg(1.00 ιηΜο1)4·(1-甲基-哌 97470.doc -122- 200529849 口疋-4-基氧基）-3-二氟甲基·苯基銨（步驟32·2)於8 ml THF中 之命液30 min。藉由添加45 ml dipe結晶，過濾且以 DIPE 洗 I 得到標題化合物·· ms : [m+i]+=522 ; HPLC AtRet=1.96。 起始物質如下製備： 步称32.1 ·· 1_甲基_4_(4_硝基_2_三氟甲基_苯氧基）_哌啶 於 60C攪拌 1·〇〇 mL(7.27 mMol)l_l_4-硝基-2-三氟甲基-苯、1.71 ml(14.5 mMol)l·甲基-哌啶醇及 47〇 mg(1 45 mMol)^化四丁基銨於6 ml甲苯及6 mi 25% KOHaq中之溶 液17 h。冷卻該溶液後，反應混合物以h2〇稀釋並以 60 ml EtOAc萃取3次。組合之有機相以30 ml NaHC03及30 ml鹽水洗條兩次，乾燥（MgS〇4)，減壓下濃縮並急驟層析 (MeOH/CH2Cl2 1:19)，以得到標題化合物：MS : [M+l]+= 305 〇 步驟32·2 : 4-(1-甲基-哌啶-4-基氧基）-3-三氟甲基·苯基銨 如步驟1.5中所描述在180 mg 10% Pd/C之存在下氫化20 ml乙醇中之1 74 g(5.72 mMo 1)1-甲基-4-(4-石肖基-2-三氣甲 基-苯氧基）-哌啶得到呈油狀之標題化合物：MS : [M+l] + =275 〇 實例33 : N_[4_(6_氣-嘧啶-4_基氧基）-苯基】-N，_{4-[2_(4_乙 基-旅°秦-1_基）_乙基卜3-三氟甲基-苯基}•腺 97470.doc -123 - 200529849
在氣氛下使370 mg( 1.49 mMol)4-氣- 6-(4_異氰酸根基_ 苯氧基）-嘧啶（步驟 1·3)及 450 mg(1.49 mMol)4_[2-(4-乙基- 哌嗪-1-基乙基]-3-三氟甲基-苯基胺（步驟33.3)溶解於1·4 ml THF及7·4 ml醚中並擾摔lh。濃縮及逆相層析法（Giison System)得到標題化合物：HPLC AtRet=ll.i ; Ms : + = 549 ； lH-NMR(CDCl3) ： 8.60 (s, 1H)? 7.58 (d, 1H), 7.57 (s，1H)，7·46 (d，9.0 Hz，2H)，7.30 (m，1H)，7.12 (m，4H)， 6.95 (s，1H)，2.94 (m，2H)，2.6 (m，12H)，I·" (t，7·2 Hz， H3C)。 起始物質如下製備： 步驟33·1 : 2-(4-硝基-2-三氟甲基-苯基）_1-(4•乙基 基）-乙嗣 向11.4 g(45.9 mMol)(4-硝基-2-三氟甲基-苯基兴乙酸於 200 ml Ci^Cl2及2 ml DMF中之冰冷卻溶液中逐滴添加7.36 ml(87.2 mMol)草醯氣。20 min後在真空中濃縮反應混合 物。剩餘物再次溶解於200 ml CH2C12且逐滴添加12.2 ml(96 mMol)N-乙基-哌嗪於80 ml CH2cl2中之溶液。i小時 後將該混合物以0.4公升Na2C03之10%溶液及〇.4公升 CHzCl2稀釋，將水層分離出並以ch2C12萃取兩次。以 Na2C03之10%溶液、水及鹽水洗條有機相兩次，乾燥 97470.doc -124- 200529849 (Na2S04)且濃縮得到標題化合物·· HPLC AtRet =9.2 ; MS : [M+l]+=346。 步琢33·2 : 2-(4-胺基-2_三氟甲基-苯基）-1_(4_乙基-α辰嗓 基）-乙綱 在2.46 g阮尼鎳（B113W Degussa)之存在下氫化245 ml乙 醇中之15.35 g(44.5 mM〇l)2_(4-硝基-2-三氟甲基_苯基） (4-乙基-旅唤-1-基）-乙酮。過遽，濃縮渡液且管柱層析法 (Si02 ; EtOAc/EtOH + 1% NH3aq 4:1)得到標題化合物： MS ： [M+l]+=316 ； Rf(EtOAc/EtOH + 1% NH3aq 4：i)： 0.11。 步縣33.3 : 4-[2-(4•乙基-旅嗓-1_基）-乙基】_3_三氟甲基-苯 基胺 向3.47 g(ll.〇 mM〇l)2-(4胺基-2-三氟曱基-苯基） 乙基-派嗪-1-基）-乙酮於35 ml THF中之溶液中經3〇 min逐 滴添加46.8~ml之BH3於THF中的1 Μ溶液。授拌20 h後，於 « 30 C下經20 min逐滴添加60 ml HC1 cone與水之1:1混合 物。於室溫下·撥拌該混合物16 h且隨後在真空中部分濃 縮。剩餘物以EtOAc萃取3次且有機層以0.1 N HC1洗滌且 隨後丟棄。藉由添加飽和Na2C03溶液使酸性水相呈鹼性並 以EtOAc萃取3次。有機層以鹽水洗滌，乾燥（Na2S〇4)並濃 縮。Combi 急驟層析法（CH2Cl2/MeOH + 1 %NH3aq 99:1 —95:5)得到標題化合物：MS·· [M+l] + =302。 實例34 :可類似所述程序製備下列化合物： 97470.doc •125- 200529849
97470.doc 126- 200529849
*) nh-ch3 n=n=n" nh2 9.3 12.2 9.1 251-252 236-237 512 524 498
CHNF
CHNF NH-CH3 n=n=n" nh2 NH-CH3 n=n==n' nh2 nh-ch3 n=n=n- nh2 NH-C2H5n_ nh-ch3 n=n=n' nh2 NH-CH3 n=n==n~ nh2 8.6 11.6 8.4 6.5 9.5 6.3 6.9 6.1 9.2 6.2 7.0 10.1 6.8 248-249 237 498 510 484
CHNF
CHN 222-223 476 488 462 490 462 474 448 496 508 482 97470.doc -127- 200529849 97470.doc j.1) j.2) j-3) k.1) k.2) k.3) Μ) l. 2) ί·3)m. 1)
NH-CH3 n=n=n~ nh2 nh-ch3 n=n=n" nh2 nh-ch3 n=n=n~ nh2 nh-ch3 n=n=n* nh2 nh-ch3 n=n==n" nh2 nh-ch3 NH2 128- 112 487 2.19s) 1.33s) 1.595) 2.31$) 2.33$) 2_35$) 2.04$) 1.67$) 2.14$) 1.42$) 2.42s) 1.95s) 56-58 473 89 89 135-137 85-86 85-87 76-78 104-107 153-155 515 489 461 473 447 489 501 475 533 530 518 548 560 534 200529849 p.1) P.2) ύ nh-ch3 n=n=n~ 1.91$) < 2.27$) 115-117 622 634 Ρ·3) X； F F nh2 1.89s) 608 q.1) Ok/〇Y〇 nh2 2.04s) 636 q-2) 0 n=n=n- 2.43$) 648 r.1) r.2) r.3) 广N〜 hn^O^<ff F F nh-ch3 n n=n=n" nh2 8.6 7.4 544 556 530 s.1) s.2) ryO F F n=n=n~ nh2 158-161 581 555 t.1) n=n=n~ 584 t.2) • y nh2 « 154-155 558 hn^〇Vf F ^ 129- 97470.doc 200529849
υ·1) F n=n=n~ 看 570 U.2) nh2 150-151 544 v.1) v.2) F n=n=n~ nh2 151-154 542 517 w.1) W.2) Φ n=n==n" nh2 147-149 528 502 ΗΝ 人 F x.1) n=n=n~ ***) 15.4 501 X.2) nh2 12.1 244-248 475 CHNF *)離析物A之合成見實例65。 **)類似於實例16分別自MeNH2、EtNH2於THF中在室溫下 4-10 d製備。 ***)離析物步驟69.1 $)DtRet。 實例35-44之化合物可類似於本文描述之程序製備： 實例35 : 3-{3-[4-(6_氣·嘧啶_4_基氧基）-苯基卜脲基}-5-三 氟甲基-苯曱醯胺 -130- 97470.doc 200529849
類似於貝例14 ’使溶解於2 ml THF中之250 mg(1.0 mMol) 4 -氣-6-(4-異氣酸根基_苯氧基）-11密11定（步驟13)與2〇4 mg(l ·0 mMol)(3-胺基_5-三氟甲基）_苯甲醯胺（步驟35.2)於6 ml醚中之洛液反應得到標題化合物：ms : 1 ] + =452 ; lH-NMR(DMSO-d6) ： 9.41 (s, 1H, NH), 9.05 (s, 1H? NH)? 8.62 (s, 1H), 8·16 (s，2H，NH2)，8.14 (s，1H)，8.02 (s，1H)， 7.81 (s，1H)，7.55-7.52(m，3H)，7.32 (s，1H)，7.17(d，2H)。 起始物質如下製備： 步驟35·1 : (3-硝基_5_三氟甲基）-苯甲醯胺 類似於步驟1.4自2.35 g(10.0 mmol)3-硝基-5_三氟甲基_ 苯甲酸（Lancaster)及20 ml NH3(25%水溶液）製備得到標題 化合物。MS : [M+l] + =233。 步驟35.2 : (3•胺基-5-三氟甲基）-苯甲醯胺 類似於步驟1.5自2.34 g(10 mmol)(3_硝基-5-三氟甲基）_ 苯曱隨胺藉由於250 mg Pd_C(10% Engelhardt 4505)上氫化 來製備。1^:[1^+1]+=205。111】以11(400]\«^，〇1^8〇- d6) : 7.99 (s，1H)，7.31 (s，1H)，7·19 (s，2H，NH2)5 6.89 (s， 1H)，5.78 (s，2H，NH2)。m.p· 94-98°C。 實例36: 3_{3-[4-(6-甲基胺基咬-4-基氧基）-笨基卜膝 基}-5-三敗甲基·笨甲醯胺 97470.doc -131 - 200529849 〇^nh2
F F 類似於實例 16 自 45 mg(0.1 mMol)3_ {3-[4-(6 -氯密咬-4-基氧基）-苯基]-脲基卜5-三氟甲基-苯甲醯胺及〇·8 ml甲胺 (33% 於 EtOH 中）製備。MS ·· [M+l]+=447. HPLC BtRet : 2·31 〇 實例37 ·· 3-{3-[4-(6-疊氮基-嘧啶_4-基氧基）-苯基】-脲基卜 5-三氟甲基-苯甲醯胺
標題化合物係如實例7中所描述自150 mg(0.33 mMol)3-{3-[4-(6-氣-嘧啶-4-基氧基）-苯基]-脲基卜5-三氟甲基-苯曱 醯胺製備，以得到標題化合物，其直接用於實例38中作起 始物質。MS ·· [M+l]+=459。 實例38 : 3-{3-[4-(6-胺基-嘧啶-4-基氧基）-苯基卜脲基卜5- 三氟甲基-苯甲醯胺
在 20 mg Pd/C l〇%(，，Engelhard 4505，，）之存在下氫化 10 ml DME 中之 〇·ΐ5 g(〇.33 mMol)3-{3-[4-(6-疊氮基-嘧啶-4- 97470.doc -132- 200529849 基氧基）-苯基]-脲基}-5_三氟甲基-苯甲醯胺，過濾，濃縮 濾液及層析法（製備性TLC : CHAh/MeOH 9:1)得到標題化 合物 MS : [M+l]+=433 ; h-NMiUDMSO-dd : 9.72 (s 1H NH)，9.43 (s，1H，NH)，8.18 (s，1H)，8·16 (s，1H)，8·〇6 (s， 2H)，7.78 (s，1H)，7.52 (d，2H)，7.05 (d，2H)，6·82 (s，2H， NH2)。 實例39 : N-[4-(6•甲基胺基-嘧啶-4-基氧基）-苯基】_N，_(3-甲 基胺基-5-三氟甲基-苯基）脲
實例40 : 3-{3-[4-(6-氣嘧啶-4-基氧基）-苯基卜脲基卜…甲 基-5_二氟甲基·苯甲酿胺
類似於實例14，使溶解於3 ml THF中之250 mg(1.5 mMol)4-氣-6-(4-異氰酸根基-苯氧基）-嘧啶（步驟ι·3)與218 mg(1.5 mMol)3-胺基-Ν-甲基-5-(三氟甲基）_苯甲醯胺（步驟 35.2)於6 ml醚中之溶液反應以得到標題化合物：MS ·· [M+l]+=466 ; HPLC BtRet : 2.31。 起始物質如下製備： 步驟40·1 : N-甲基（3-硝基-5-三氟甲基）_苯甲醯胺 97470.doc -133- 200529849 類似於步驟1.4自2.35 g(10.0 mmol)3-硝基-5-三氟甲基-苯曱酸（Lane as ter)及40 ml NH3 (40%水溶液）製備以得到標 題化合物。MS:[M-l]=247。1H-NMR(400 MHz，DMSO- d6) ·· 9.09(q，1H，NH)，8.89 (s，1H)，8.39 (s，1H)，8.38 (s， 1H)，2.81(d，3H)。 步驟40·2 : 3-胺基-N-甲基5-(三氟甲基）-苯甲醯胺 類似於步驟 1.5，在 240 mg Pd-C(10% Engelhardt 4505) 上氫化2·34 g(10 mmol)N-曱基（3-硝基-5-三氟甲基）-苯甲醯 胺來製備。1^:[]\/1+1]+=219。111^]^11(40〇]^1^，01^0- d6) : 8.41 (q，1H，NH)，7.24 (s，1H)，7.19 (s，1H)，6.98 (s， 1H)，3.41 (s，2H，ΝΗ2)，2·78 (d，3H)。 實例41 : 3_{3-[4-(6-甲基胺基·嘧啶基氧基苯基卜脲 基卜N-甲基-5-三氟甲基-苯甲醯胺
mMol)3-{3-[4-(6-氣-嘧啶-4-基-5-三氟甲基-苯甲醯胺及1.5 備。MS : [M+1] + =461。 :9.19 (s，1H，NH)，8.87 (s，1H， 類似於實例16自83 mg(〇.l8 基氧基）-苯基]-脲基甲基^ ml甲胺（33%於EtOH中）製備 s，1H)，8.03 (s，1H)，7.75 (s， ，7·07 (d，2H)，5.72 (s，1H)， NMR(4〇〇 MHz，DMSO-d6) : 9 顺)，8.65 (q，1H，ΝΗ)，8·13 (s 岡，7.5(d，2H)，7.26 (s，1H)， 3·59 (s，3H)，2.82(d，3H)。 97470.doc -134- 200529849 實例42 · 3-{3-[4-(6_叠氮基嘴咬_4基氧基广苯基】膝基卜 Ν-甲基-5-二氟甲基_苯甲酿胺
標題化合物係如實例7中所描述自300 mg(0.64 mMol)3-{3-[4-(6-氯“密K基氧基 > 苯基卜脲基卜n_甲基三氟甲 基-苯甲醯胺製備，以得到標題化合物，其直接用於實例 43中作為起始物質。ms: [m+ 1 ] + =473。 實例43 : 3-{3-[4-(6-胺基-嘧啶_4-基氧基）_苯基卜脲基卜N-甲基-5_三氟甲基·笨甲酿胺
在60 mg Pd/C 10%(”Engelhard 4505”）之存在下氫化 10 ml DME 中之 0:3 g(0.64 mM〇l)3-{3-[4-(6-疊氮基-嘧啶-心基 氧基）-本基]-脲基卜N-甲基-5-三氟曱基-苯甲酸胺，過渡並 濃縮濾液得到標題化合物：MS : [M+l]+ =447 ; iH-NMR (DMSO-d6) : 9·17 (s，1H，NH)，8.82 (s，1H，NH)，8.60(q， 1H，NH)，8.12 (s，1H)，8.03 (s，1H)，8.01 (s，1H)，7 73 (s， 1H)，7.50(d，2H)，7.05(d，2H)，6·80 (s，1H)，5.68 (s，1H)， 3.57 (s，3H)，2.80 (d，3H)。HPLC BtRet : 1.82。 實例44· N-[4-(6 -甲基胺基-响咬_4_基氧基）-苯基卜n，-(3-甲 97470.doc •135- 200529849 基胺基甲基_5_三氟甲基·苯基）-脲
可類似於本文所描述之化合物來合成。 實例45 : N-[4_(2_胺基-嘧啶-4-基氧基）-苯基】-N，-[4-(4-異 丙基哌嗪-1-基甲基）-3•三氟甲基-苯基】·脲
向N2氣氛下於冰浴中冷卻之98 mg(0.33 mMol)三破醯氣 於11 ml CH2C12中之溶液中逐滴添加5 ml CH2Cl2中之302 mg(l.〇〇 mMol)4-(4-異丙基哌嗪-1-基甲基）_3_三氟甲基-苯 胺（步驟15.2)及0.14 ml(1.0 mMol)NEt3。於冰浴中攪拌1〇 min且於室溫下攪拌30 min後，經5 min逐滴添加202 # mg(l ·〇 mMol)4-(4-胺基-苯氧基）_痛唉_2-基胺（步驟45.3)及 〇·14 ml(1.0 mMol)NEt3 於 5 ml CH2C12 中之懸浮液。室溫揽 拌15 min後，使反應混合物在真空中濃縮，剩餘物再次溶 解於CHAh/MeOH並在添加Si〇2後再次濃縮。將所得粉末 置於MPLC層析管柱頂部且標題化合物以ch2C12/甲醇（+1% , NH3 q) 19:1—9:1溶離且最終自二噁烧凍乾：a心· C26H30N7F3〇2 ·1·2 Η2Ο·0·1 C4H8〇2 : C、Η、N、F ; MS : 97470.doc -136- 1 200529849 [M+l]+=530 ,· ^-NMRCDMSO-d,) : 9.06 (s，HN)，8.86 (s，HN)，8.10 (d，5.5 Hz，1H)，7.98(d，2e3 Hz，1H)， 7·65 (d，8.6 Hz，1H)，7.59 (dd，8_6 Hz，2·3 Hz，1H)，7.50 (d，9.0 Hz，2H)，7.10 (d，9·0 Hz，2H)，6.62 (s，H2N)，6.09(d， 5.5，1H)，3.54 (s，2H)，2.67 (m，1H)，2.50 (m，4H)，2·41 (m， 4H)，0.99 (d，6·7 Hz，6H)。 起始物質如下製備： 步称45·1 · 2-氣-4-(4-破基-苯氧基咬 於Ot：將溶解於100 ml丙酮中之18 g(13〇 mM〇1)2，‘二氣隹 ϋίδσ定緩慢添加至 5.32 g(130 mMol)NaOH及 16·64 g(118.4 mMol)4-硝基酚於loo mi h20中之溶液。於8〇°C攪拌23 h 後’使反應混合物在減壓下濃縮，冷卻，且將沉澱之粗產 物過濾出’以HW洗滌並在真空中乾燥。藉由急驟層析法 (Si〇2 ; 4.5x46 cm，己烷 /EtOAc 2:1)執行純化：MS : [M+l]+=252 ； 1H-NMR(400 MHz > DMSO-d6) ： 8.67(d? 4.5 Hz，1H，嘧啶基），8.33(d，8·5 Hz，2H，苯基），7.56(d，8.5 _
Hz，2H，笨基），7.31 (d，4.5 Hz，1H，嘧啶基），Rf(己烷 /EtOAc =1:1) : 〇·38, HPLC BtRet : 5.97。 步驟45·2 : 4-(4-硝基-苯氧基）·嘧啶-2-基胺 於100°C下在高壓釜中（2 bar)攪拌溶解於100 ml EtOH及 100 ml含水NH3(25%)中之4 g(15.9 mMol)2-氯-4-(4-硝基-苯 · 氧基）-嘧啶2 h。在減壓下濃縮反應混合物後，使沉澱之產 物在MeOH中吸收且急驟層析（si〇2 ; 4.5x26 cm，EtOAc/ 己烷/NH3 50:50:1.5 «Μ00:50:1 ·5)，以得到呈白色固體之 97470.doc -137- 200529849 標題化合物：Rf(EtOAc/ 己烷 /NH3 : 100:50:1.5) ·· 0·10 ; MS : [M+l]+=233。 步驟45·3 : 4-(4_胺基-苯氧基）-嘧啶2_基胺 經4 h在500 mg阮尼Ni之存在下氫化溶解於50 ml MeOH 中之1·68 g(6.7 mMol)4-(4-硝基-苯氧基）-嘧啶-2_基胺。經 Hyflo過濾並以40 ml EtOH洗務兩次後，將反應溶液在減 壓下濃縮且急驟層析（Si02 ; 4.5x26 cm，EtOAc/己烷/NH3 100 : 50 : 1.5 — 200 : 50 : 1·5)，以得到呈米色固體之標 題化合物：Rf(EtOAc/ 己烷 /ΝΗ3 : 100:50:1.5) : 0.10 ; MS : [M+l]+=203。 實例46 ·· Ν_[4-(2-甲基胺基-嘧啶_4_基氧基）-苯基】-Ν，-[4-(4-異丙基旅嗓_1_基甲基）-3-三氣甲基-苯基】-腺
向A氣氛下^冰浴中冷卻之60 mg(0.20 mMol)三碳醯氣 於7 ml CH2C12中之溶液中逐滴添加3 ml CH2C12中之181 mg(0.60 mMol)4-(4-異丙基哌嗪-1-基甲基）_3_三氟甲基-苯 胺（步驟15.2)及83 μ1(0·6 mMol)NEt3。於冰浴中授拌1〇 min 且於室溫下攪拌30 min後，經5 min添加1 30 mg(〇.60 mM〇l)[4-(4-胺基-苯氧基）-嘧啶-2-基]-甲基-胺（步驟46·2)及 83 μ1(〇·6 mMol)NEt3於3 ml CH2C12中之懸浮液。於室溫 攪拌90 min後，將反應混合物在真空中濃縮，剩餘物再次 97470.doc -138- 200529849 溶解於C^Ch/MeOH並在添加SiCh後再次濃縮。將所得粉 末置於MPLC層析管柱頂部且標題化合物以ch2C12/甲醇 (+1% NH3aq)97:3— 93:7溶離：MS : [M+l]+=544 ; (CD30D/CDC13) : 7.99 (d，5 Hz，1H)，7.67 (d，2 Hz，1H)， 7.60(dd，8·6 Hz，2 Hz，1H)，7.55 (d，8·6 Hz，1H)，7.43 (d， 9.0 Hz，2H)，7.03 (d，9·0 Hz，2H)，5·96 (d，5 Hz，1H)，3.59 (s，2H)，2·99 (m，1H)，2.83 (s，H3C)，2·70 (m，4H)，2.58 (m，4H)，1.12 (d，6·3 Hz，6H)。 起始物質如下製備： 步驟46·1 :甲基-[4_(4_硝基-苯氧基）-嘧啶-2-基】_胺 於室溫下攪拌溶解於40 ml MeNH2(30%於EtOH中）中之2 g(7.95 mMol)2-氣-4·(4-硝基-苯氧基）-嘧啶50 min。蒸發溶 劑後，將粗產物急驟層析（Si02 ; 4.5x30 cm，己烷/EtOAc 1:1)以得到呈白色固體之標題化合物·· Rf(己烷/Et0Ac 2:1) ： 0.18 ； MS ： [M+l]+=247 ； 1H-NMR(400 MHz ^ CDC13) ： 8.33 (d, 8.5 Hz, 2H,苯基），8.24 (d/寬，1H，嘧 啶基），7.35 (d，8·5 Hz，2H，苯基），6·22 (d，6.0 Hz，1H， 嘧啶基），2.90 (s/寬，3H，CH3)。 步驟46.2 : [4-(4-胺基-苯氧基）-嘧啶-2-基】·甲基-胺 在阮尼Ni之存在下藉由氫化自甲基-[4-(4-硝基-苯氧基）-嘧啶-2-基]•胺製備標題化合物：Rf(己烷/EtOAc 1:1): 0.13 ； MS ： [M+l]+=217 ； lH-NMR(400 MHz ^ DMSO-d6)： 8.04 (s/寬，1H，嘧啶基），6.95 (s/寬，1H，HN)，6.76(d，8.5 Hz，2H，苯基），6.54(d，8·5 Hz，2H，苯基），5.90 (s/寬，1H， 97470.doc •139- 200529849 嘴啶基）5 5·00 (s，2H，NH2)，2.70 (s/寬，3H，CH3)。 實例47 ·· Ν-[4·(2-氣-响咬-4-基氧基）_苯基卜ν，·[4-(二甲基 胺基-甲基）_3_三氟甲基-苯基】·脲
自2-氯-4-(4-異氰酸根基·笨氧基）_嘧啶及4_(二甲基胺基_ 甲基）-3-三氟甲基-苯基胺製備標題化合物。 可類似於本文所描述之程序來製備實例48-5〇之化合 物： 實例48 : N_[4_(2-甲基胺基-嘧啶_4_基氧基）_苯基】-Ν，·[4-(4-二甲基胺基-甲基）-3·三氟甲基-苯基卜脲
根據實例45自101 mg(0.43 mMol)4-(N，N_二甲基胺基甲 基）-3-三氟甲基-苯胺（步驟 20.1-2)及 100 mg(0.43 mMol)[4-(4-胺基-苯氧基）-嘧啶-2-基]-甲基-胺（步驟46·2)製備。於室 溫下攪拌3h後，將反應混合物在真空中濃縮，剩餘物再次 溶解於CH2Cl2/MeOH且粗產物藉由製備性TLC (CH2Cl2/MeOH 9:1)純化以得到標題化合物MS : [M+l]+=461 ; HPLC BtRet : 2.03，Rf(CH2Cl2/Me〇H 9:1): 0.65。 實例49 : N-[4-(2-甲基胺基-嘧咬-4-基氧基）_苯基卜N，_[4- 97470.doc • 140- 200529849 (4-第二丁基哌嗪基_甲基卜3_三氟甲基苯基】脲
根據實例45自146 mg(0.43 mMol)4-(4-“丁基派嗪-1-基 甲基）-3-三氟甲基-苯基·胺（步驟20.5)及1〇〇 mg(0.43 mMol) [4-(4-胺基-苯氧基）_嘧啶_2_基]-甲基-胺（步驟46.2)製備， 且經 5 min添加 3 ml CH2C12 中之 83 μ1(0·6 mMol) NEt3。於 室溫攪拌0.5h後，藉由過濾分離沉澱之產物。MS : [M+1]+-558 ； m.p. 257-258〇C ^ 1H-NMR(400 MHz ^ DMSO-d6) : 9.60 (bs，1H，NH)，9.09 (s，1H，NH)，8.78 (s，1H，NH)， 8·1〇 (d，1H)，7.86 (s，1H)，7.69-7.55(m，2H)，7.48(d，2H)， 7.08 (d，2H)，6·50 (bs，1H，NH)，6.04 (d，1H)，3.70 (s，2H)， 3.49-3.37 (m，4H)，3.10-2.87 (m，4 H)，2.85 (s，3H)，1·37 (s，9H) 〇 實例50 : N-[4-(2-胺基-嘧啶-4_基氧基）-苯基卜N’-[4_(4_第 三丁基哌嗪基-甲基）-3-三氟甲基-苯基】·脲
根據實例 45 自 3 12 mg(0.98 mMol)4_(4·* - 丁基 _σ^ϋ秦 _ι_基 97470.doc • 141 - 200529849 甲基）-3-三氟曱基-苯基-胺（步驟20.5)及200 mg(〇.% mMol) 4-(4-胺基-苯氧基）-σ密咬-2-基胺（步驟45.3)製備。於室溫授 拌3 0 min後，沉殿之產物藉由過濾分離且以冷thf洗條， 並在真空中乾燥，以得到呈白色固體之標題化合物。 MS ： [M+l]+=548 ； lH-NMR(DMSO-d6) ： 9.41 (s, 1H, HN), 9.17 (s，1H，NH)，8.03 (d，1H)，7.97 (s，1H)，7·62-7·58 (m， 2H)，7.43(d，2H)，7.02 (d，2H)，6.59 (bs，2H)，6.01 (d，1H)， 3.62(s，2H)，3.49-3.39 (m，2H)，2.99-2_82(m54H)，2.61- 2·48 (m，2H)，1.17 (s，9H) 〇 如實例20，步驟1-5中所描述來製備起始物質（胺組份）： 實例S1 :可類似地製備下列化合物：
97470.doc -142- 200529849 97470.doc b.1)” b.2)2) c. 1)1) c.2f d.1)1)d.2f e.1) υ e.2f f.2)2) 24.2 24.2 26.4 26.4 27.1 27.1 65.3 65.3
HN
N NH2 nh-ch3 NH2 nh-ch3 NH2
NH-CH 3 8.5 8.9 6.3 6.8 484
CHN 216- 217 498 462 476
CHNF NH2 448
CHN
HN
Nxy NH-CH； 3 6.7 462 nh2 7.1 482
CHNCI ,N,
HN ▽ Cl NH-CH3 7.7 496 -143 - 200529849 g-υ” nh2 6.7 < 530 CHNF g.2)2) nh-ch3 544 h.1)1) 〇Y〇>^0 nh2 10.2 105 622 h.2)2) Ο F nh-ch3 υ類似於實例45製備；2)類似於實例46製備。 實例52 :類似於實例45製備下列化合物： Ιη, η η R2 之來源 HPLC Bw Rf MS [M+H】 a) 步驟14.4 ΗΝχχ;Ρ· F F 3.45 (MeOH/CH2CI2 10:90): 0.36 502 b) 可購得 ΗΝ"θγΡ F F 3.45 (EtOAc/hexan e 4:1): 0.19 390 c) 步驟52c.2 ΗΝ€ςΡΛ F F 4.04 (MeOH/CH2CI2 /NH312:87:1): 0.37 516 97470.doc 144- 200529849
步称52c.l : N_[4_(4_乙基-哌嗪-1_基甲基）_3_三氟甲基-苯 基】_2,2,2_三氟·乙醯胺 於室溫下攪拌溶解於55 ml乙腈中之2 g(57l mMol)N-(4-溪曱基-3-三氟甲基-苯基）-2,2,2-三氟-乙醯胺（步驟142)及 2·22 ml(17，14 m]V[〇l)N-乙基派嗪45 min。在減壓下蒸發乙 腈後’反應混合物以80 ml H2〇稀釋並以7〇 ml EtOAc萃取3 次。組合之有機相以30 ml NaHC〇3溶液及30爪丨鹽水洗滌 兩次’乾燥（MgS04)，於減壓下濃縮且急驟層析（Si〇2 ; 4·〇χ24 cm，MeOH/CHbCh 1:19)，以得到黃色固體： Rf(MeOH/CH2Cl2 1:4) ： 0.42 ； MS ： [M+l]+ =384 ； NMR(400 MHz，DMSO-d6) ·· 11.40 (s/寬，1H，NH)，8.02 (s， 1H)，7.90 (d，7.5 Hz，1H)，7.74 (d，7·5 Hz，1H)，3.56 (s，2H， CH2-芳基），2.30 (m，10H)，2.51 (t，7.5 Hz，3H，CH3)。 步驟52c.2 : 4_(4-乙基·哌嗪_1-基甲基）-3-三氟甲基-苯基胺 於7〇°C下在Ar氣氛下攪拌41 ml MeOH中之1.59g(4.1 mMol) N_[4-(4-乙基-哌嗪-1-基曱基）-3-三氟甲基-苯基]-2,2,2-三氟-乙醯胺及20.5 ml K2C03於水中之1M溶液1.5h。 在減壓下蒸發MeOH後，反應混合物以80 ml H20稀釋並以 60 ml EtOAc萃取3次。組合之有機相以30 ml H20及3 0 ml 97470.doc -145- 200529849 鹽水洗條’乾燥（MgS〇4)，於減壓下濃縮且急驟層析 (Si02 ; 4·〇χ24 cm，MeOH/CH2Cl2 1:19)，以得到呈黃色固 體之標題化合物·· Rf(MeOH/CH2Cl2 1:4) : 0.42 ; MS : [M+l]+=288 ； 1H-NMR(400 MHz ^ DMSO-d6) ： 7.24 (d, 7.5 Hz，1H)，6.81 (s，1H)，6·73 (d，7·5 Hz，1H)，5·41 (s，2H， CH2-芳基)，3·35 (m，2H，CH2-CH3)，2.30 (m，8H，哌嗪基)， 2·51 (t，6.5 Hz，3H，CH3)。 步驟52d.l : 3-吡啶_2_基-5_三氟甲基-苯基胺 標題化合物係根據[Lam F，Chan KS(1995)，Synthesis of acyclic dinucleating Schiff base-pyridine and Schiff base-phosphine ligands. Tetrahedron Lett ； 36(6) · 919-922] 之程序藉由於90°C在Ai:氣氛下攪拌溶解於10 ml THF中之 600 mg(2.44 mMol)3-胺基-5-三氟溴甲苯、1 g(2.69 mMol) 2-(三丁基錫烷基）-吡啶及285 mg肆（三苯基）膦Pd 7d來合 成。層析分離（Si02 ; 4·5χ19 cm，EtOAc/己烷 1:2— 2:3) 得到呈淡褐色固體之標題化合物：Rf(己烷/EtOAc 2:1): 0.17 ； MS ： [M+l]+=239 ； 1H-NMR(400 MHz ^ DMSO-d6)： 8.81(d，4.5 Hz，1H，吡啶基），7.88 (m，2H，吡啶基），7.53 (s，1H，苯基-CF3)，7·43 (s，1H，苯基-CF3)，7·37 (m，1H， 吡啶基），6.89 (s，1H，苯基-CF3)，5.73 (s，2H，NH2)。 實例53 :類似於實例46製備下列化合物： 97470.doc -146- 200529849 ΝγΝ ,ΝΗ Ο χ ^ ^ Η Η R2 X^"R1 HPLC Bw Rf MS [M+H] a) hn^^Yf F F 3.63 (MeOH/CH2CI2 1:9): 0.15 516 b)* ό N 3.76 (MeOH/CH2CI2 1:4): 0.15 502 c) F F 3.52 (MeOH/CH2CI2 1:9):0.10 530 dr r""N〆 3.76 (M'eOH/CH2CI2 1:9):0.15 502 *相應三氟甲基笨基胺建置組塊之合成分別描述於步驟 53b.3及 53d.l 下。 步驟53b.l : (3•溴-5-三氟甲基·苯基）_胺基甲酸第三丁酯 於60°C下攪拌25 g(104 mMol)3-溴-5-三氟甲基-苯胺、24 g(110 mMol)(Boc)20 及 1.2 g(10 mMol)DMAP 於 200 ml
MeCN中之溶液10 h。在減壓下蒸發溶劑後，將剩餘物急 驟層析（Si02;己烷/EtOAc 10:1)且從己烷結晶以得到呈白 色晶體之標題化合物：Rf(己烷/EtOAc 1:5) : 0.23 ; MS : 97470.doc -147- 200529849 [M+1 ]+ =34 1。 步驟53b.2 : [3-(4-甲基-哌嗪-1-基）-5-三氟甲基-苯基】-胺基 甲酸第三丁酯 於70°C在Ar氣氛下攪拌溶解於丨00 ml甲苯中之68 gp〇 mMol)(3-溴-5-三氟甲基-苯基）_胺基甲酸第三丁酯、26 ml(24 mMol)l-甲基-u辰嗪、2.7 g(28 mMol)NaOtBu、6 ml 三-第三丁基膦（10%於己烷中，3 mMol)及0.5 g(l niMol) 參-(二亞苄基丙酮）-二鈀6 h。反應溶液以200 ml EtOAc稀 釋並在Hyflo上過濾。以50 ml鹽水洗滌後，將濾液乾燥 (MgSCU)，減壓下濃縮並自Et0Ac/己烷再次沉澱以得到呈 褐色油之標題化合物：Rf(MeOH/CH2Cl2 1:5) : 〇·45 ; MS : [M+l]+=360。 步琢53b.3 · 3_(4_甲基-旅°秦-1_基）-5_三敗甲基·苯基胺 於60°C下攪拌溶解於60 ml之於2-丙醇中之2.5 N HC1中 的3.2g(8.9mMol)[3-(4-甲基-娘嗪-1-基）-5-三氟甲基-苯基卜 胺基甲酸第三丁酯歷經5 · 5小時。在減壓下蒸發溶劑後， 於200 ml EtOAc與100 ml NaHC03溶液之間分溶剩餘物。 有機相以50 ml鹽水洗滌，乾燥（MgS〇4)並蒸發溶劑，以得 到呈褐色油之標題化合物：MS : [M+l]+=260 ;
Rf(MeOH/CH2Cl2 1:5) · 0.18 ； 1N-NMR(400 MHz? DMSO-d6): 6·31 (s，1H)，6.27 (s，1H)，5·34 (s，1H)，3·32 (s/寬， 2H，NH2)，3.70/2.42 (m/m，4H/4H，CH2-哌嗪基），2.20 (s， 3H，CH3)。 步驟53d.l ·· 4-(4-甲基-哌嗪-1-基）-3-三氟甲基·苯基胺 97470.doc -148- 200529849 標題化合物係藉由自丨_溴-4-硝基-2-三氟甲基-苯與1-甲 基-派唤（140 C ’ 4小時）之親核取代反應及進一步藉由阮尼 錄將頌基官能經氫解還原為胺來合成· m p· : 121·123^ ;
Rf(MeOH/CH2Cl2=l：5) : 〇.l7 ; MS . [Μ+1]+=260 ； 'H- NMR(4GG MHz，DMSO_d6) : 7·21 (d，9 Hz，1H)，6.74(m， 2H)，5.35 (s/寬，2H，NH2)，2.70(m/寬，4H，CH2)，2.36 (s/寬， 4H，CH2)，2.18 (s，3H，CH3)。
實例54 : l-[4_(6-胺基-嘧啶_4_基氧基卜苯基卜3-[3-(卜甲基_ 咬啶-2-基）-5-三氟甲基-苯基卜脲
於〇°C下將252 mg(l mMol)3-(6-甲基-吡啶-2-基）-5-三氟 曱基-苯基胺（步驟54.2)及0.12 1111湘4於4.5 1111〇112(：12中之 溶液添加至溶解於9 ml CH2C12中之99 mg(0.33 mMol)三碳 醯氣中。於室溫攪拌15 min後，添加202 mg(l mMol)4-(4-胺基_苯氧基）-，嘧啶·6-基胺（步驟54·3)及0·12NEt3於4.5ml CHeh及0.5 ml DMF中之溶液。在室溫下攪拌該褐色溶液 3.5 h後，在減壓下蒸發溶劑且急驟層析（Si〇2 ; 2.5 xl8 cm，MeOH/CH2Cl2/NH3 5:95:0.5)以得到呈米色固體之標 題化合物：Rf(MeOH/CH2Cl2/NH3 5:95:0.5) : 〇·〇6 ; MS : [M+l]+ =481 ；，H-NMR(DMSO-d6) ： 9.21/8.83 (s/s ’ 1H/1H，脲），8·29 (s，1H，嘧啶基），8.06(m，2H，吡啶 基），7.93 (s，1H，苯基-CF3)，7.80 (s，1H，苯基-CF3)， 97470.doc -149- 200529849 7.79 (s，1H，苯基-CF3)，7.51(d，9·0 Hz，2H，苯基），7·26 (m，1H，吡啶基），7.06 (d，9·0 Hz，2H，苯基），6.77 (s， 2H，NH2)，5.66 (s，1H，嘧啶基），2.51 (s，3H，CH3)。 步驟54.1 : 6·甲基_2_(三丁基錫烷基）·吡啶 標題化合物係類似於Zhang等人（Synthetic
Communications 31(2001)，1129)之程序而合成。於-78〇C 下在Ar氣氛下向3.83 g(22.2 mMol)2-溴-6-曱基-吡啶於7 ml THF中之溶液緩慢添加13.9 ml nBuLi(1.6 N於己烷中；22.2 mMol)。於-78°C 下攪拌 1.5 h後，緩慢添加 6 ml(22.2 mMol) 三丁基錫烷基氣且於-78°C攪拌反應混合物額外30 min。過 濾反應混合物後，藉由急驟層析法（Si〇2 ; 5x16 cm， EtOAc/己烧 1:9)分離標題化合物：無色油：Rf(己烧 /EtOAc 3:2) ·· 0.42 ; MS : [M+l]+=380。 步驟54·2 ·· 3_(6_甲基比啶-2-基）-5_三氟甲基-苯基胺 於Ar氣氛下在140°C下在微波供箱（Emrys Optimizer， Personal Chemistry，瑞典）中之密封管中攪拌溶解於1 ·5 ml THF 之 1 g(4.19 mMol)3-胺基-5-三氟溴甲苯、1 g(2.60 mMol) 6-甲基-2-(三丁基錫烷基）-吡啶及30 mg肆（三苯基） 膦 Pd 1000秒。層析分離（Si〇2 ; 5χ 18 cm，EtOAc/己烧 1:9 —2:3)得到呈無色油之標題化合物：Rf(己烷/Et〇Ac 3:2): 0.42 ； MS ： [M+l]+ =253 ； 1H-NMR(400 MHz ^ DMSO-d6): 7.62(t，6·5 Hz，1H，吡啶基），7.74/7.70 (s/s，1H/1H， 苯基-CF3)，7.69 (d，6·5 Hz，1H，吡啶基），7.12 (d，6.5 Hz， 1H，α比啶基），6 91 (s，1H，苯基-Cf3)，3 95 (s/寬，2H， 97470.doc -150- 200529849 NH2)，2·63 (s，3H，CH3)。 步称54·3 · 4-(4-胺基-苯氧基）·吨咬基胺 於80 C在欲封管中授拌溶解於8〇 aq nh3(25%)及60 ml EtOH 中之 2.0 g(9.725 mMol)4-(6-氯“密啶-4-基-氧基）-苯 胺（步驟1.2)23 h。於40°C水浴中在減壓下蒸發溶劑後，剩 餘物經急驟層析（Si02，5.5x65 cm ; CH2Cl2/MeOH 9:1)以 得到呈白色固體之標題化合物：1^(0112(：12/]\^〇11=9:1): 0.37 ； MS ： [M+l]+ =203 ； 1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6)： 8.01 (s，1H，嘧啶基），6·74 (d，9 Hz，2H，苯基），6.70 (s， 2H，NH2)，6.57 (d，9Hz，2H，苯基），5.51 (s，1H，嘧啶基）， 5·〇3 (s，2H，NH2) 〇 實例55 :額外之化合物藉由類似於實例54之化合物之製備 的尿素之形成來合成： 97470.doc 151 - 200529849
R1，NH F R1/NH Rl 胺基來源 R2 胺基來源 r—-- HPLC Rf MS [Μ+1Γ a) u\ Ho^〇-/ 步驟 55a.1c* 4-甲基-σ辰唤 小基甲基 7步驟14.4 (NH3/MeOH/CH2CI2 0.5:10:90): 0.38 608 D) hoO- 7 步驟 55a· 1c* / /CH2—' 厂步驟55b.2 (N_eOH/CH2CI2 1:10:90): 0.30 539 c) CH3〜〇 / 步驟 55c. 1b Ό /步驟55c.2 6.64 (MeOH/CH2CI2 5:95): 0.24 581 1:10:90): 0.35
/步驟55c.2 *酚胺之OH-基團經TBDMS-保護。在尿素形成後，酚氧之 TBDMS保護之·基團藉由吡啶中hf(30%)而分裂。 步驟55a.la : 4-[6-(4-硝基-苯氧基）-嘧啶-4-基胺基_苯酚 於85°C下攪拌溶解於50 ml 2-丙醇中之3 g(11.9 mMol)4-氣-6-(4-硝基-苯氧基）·嘧啶（步驟、ι·95 g(17.9 mMol)4-胺基苯酚及3.04 ml(179 mMol)DIPEA 18 h。在減壓下濃縮 反應混合物後，產物沉澱為無色精細固體：Rf(EtOAc/己 烷 2:1) : 〇·48 ; MS : [M+l]+=245 ; iH-NMRHOO MHz， DMSO-d6) : 9·4〇/9·25 (s/s，2H，NH/OH)，8.28(d，7.5 Hz， 97470.doc -152- 200529849 2H，苯基-N〇2)，8.26 (s，1H，嘧啶基），7.40 (d，7.5 Hz，2H， 苯基-N02)，7.24 (d，8.0 Hz，2H，苯基-〇H)，6.77(d，8.0 ^^，211，苯基-011)，6.15(8，111，嘧啶基）。 步驟55a.lb : [4-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基）-苯基】_[6-(4-硝基-苯氧基）_嘧啶-4-基】-胺 攪拌溶解於 20 ml DMF 中之 1.5 g(4.63 mMol)4-[6-(4-硝 基-苯氧基）-嘧啶-4-基胺基]-苯酚、1.39 g(9.26 mMol)氯化 第三丁基-二甲基-矽烷基、1.29 ml(9.26 mMol)NEt3 3.5 h。在減壓下濃縮反應混合物並將其溶解於磷酸鹽緩衝液 (50ml，pH=7)後，產物藉由10 ml EtOAc萃取並藉由急驟 層析法（Si02 ; 3·〇χ 17 cm，EtOAc/ 己烧 1:1 — 4:1)純化， 以得到呈無色固體之標題化合物：]^3:[]^+1]+=：439;1：»- NMR (400 MHz，DMSO-d6) : 9.56 (s，1H，NH)，8.28 (m， 3H，嘧啶基，苯基-N〇2)，7.40 (m，4H，苯基_〇TBS，苯 基-Ν02)，6·81 (d，8·8 Hz，2H，苯基-OTBS)，6·20 (s， 1Η，嘧啶基），0.93 (s，9Η，TBS)，0.18 (s，6Η，TBS)。 步驟55a.lc : [6-(4-胺基-苯氧基）-嘧啶-4-基]-[4-(第三丁基 二甲基矽烷氧基）-苯基】-胺 經3 h於50 ml EtOH/THF(35/15)中在0.4 g阮尼Ni之存在 下氫化1.8 g(4.1 mMol)[4-(第三丁基-二甲基-矽烷氧基>苯 基]-[6-(4-硝基-苯氧基）-α密σ定-4-基]-胺且藉由急驟層析法 (Si02; 3·〇χ18 cm，EtOAc/己烷 1:1— 4:1)純化，以得到 呈無色固體之標題化合物：Rf(EtOAc/己烷=2:1) : 0.22 ; MS ： [M+l]+ =409 ； 1H-NMR(400 MHz » DMSO^d6) ： 9.22 97470.doc -153- 200529849 (s，1H，NH)，8.20 (s，1H，嘧啶基），7.37(d，8.8 Hz，2H，苯 基-OTBS)，6.77(d，8·8 Hz，2H，苯基-NH2)，6.70 (d，8·8 Hz， 2H，苯基-OTBS)，6.55 (8·8 Hz，2H，苯基-NH2)，5.79 (s， 1H，嘧啶基），5·02 (s，2H，NH2)，0·90 (s，9H，TBS)，0.12 (s，6H，TBS)。 步驟55b.2 : 4-二甲基胺基甲基-3-三氟甲基-苯基胺 於室溫下攪拌溶解於25 ml HNMe2(30%於EtOH中）之1.8 g(5 · 14 mMol)N-(4-漠甲基-3-三氟甲基-苯基）-2,2,2-三氟-乙 醯胺（步驟14.2)1 h且隨後（為皂化2,2,2-三氟-乙醯胺官能） 額外於50°C攪拌3 h。在減壓下蒸發溶劑後，剩餘物藉由急 驟層析法（Si02; 5.5x17 cm，丙酮/CH2C12/NH3 5:94:1 — 50:49:1)純化，以得到黃色油·· Rf(丙酮/ch2C12/NH3 50:49:1) ： 0.73. ； MS ： [M+l]+=219 ； lH-NMR (400 MHz ^ DMSO-d6) : 7.32 (d，8·5 Hz，1H)，6.88 (d，4·5 Hz，1H)，6.76 (d，8·5 Hz，1H)，5.44 (s，2H，CH2)，3·33 (s，2H，NH2)， 2.12 (s，6H，CH3) 〇 步驟55c.la : (3-曱氧基-苯基）·[Μ4•硝基-苯氧基）_嘧啶-心 基卜胺 使溶解於7·4 ml DIPEA及85 ml 2-丙醇之5 g(19.9 mMol)心氣_6_(4·硝基-苯氧基）-嘧啶（步驟1·1)及4.88 ml(43.8 mMol)間-甲氧基苯胺回流162 h。在於減壓下濃縮 反應混合物期間，剩餘物沉澱以得到呈白色晶體之標題化 合物’其經冷 MeOH 洗滌：1^:[1^+1]+=339;111- NMR(4GG MHz，DMSO〇 : 9.69 (s，1H，丽），8_4Q (s，1H， 97470.doc 200529849 嘧啶基），8.31(d，9·5 Hz，2H，苯基），7.44 (d，9·5 Hz，2H， 苯基），7·29 (s/寬，1H，MeO-苯基），7.23 (t，8·5 Hz，1H， MeO-苯基），7.16(d，8·5 Hz，1H，MeO-苯基），6.62(d/寬，8·5 Hz，1H，MeO-苯基），7.97 (s/寬，1H，嘧啶基），5.11 (s，2H， NH2)，3.74 (s，3H，CH3)。 步驟55c.lb : [6-(4-胺基-苯氧基）-嘧啶-4-基】_(3-甲氧基-苯 基）-胺 在阮尼Ni之存在下氫化溶解於160 ml MeOH/THF 2:1中 之5.4 g(16 mMol)(3_甲氧基-苯基M6-(4-硝基-苯氧基）-嘧 啶-4-基]-胺16h。在Hyflo上過濾反應懸浮液並濃縮反應混 合物後，標題化合物沉澱為白色晶體·· MS : [M+1]、 309 ； 1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6) · 9.47 (s5 1H，NH)， 8·36 (s，1H,嘧啶基），7.31 (s/寬，1H，MeO_ 苯基），7.19 (t， 8·5 Hz，1H，MeO-苯基），7·14 (d，8.5 Hz，1H，MeO-苯基）， 6.88 (d，9·5 Hz，2H，苯基），6.63 (d，9.5 Hz，2H，苯基）， 6.58 (d/寬，8·5 Hz，1H，MeO-苯基），7.97 (s/寬，1H，嘧啶 基），5.06 (s/寬，2H，NH2)，5·11 (s，2H，NH2)，3.73 (s，3H， CH3) ; HPLC BtRet : 3.82。 步驟55c.2 : 4-嗎啉-4-基-3-三氟甲基-苯基胺 標題化合物係藉由1-溴-4-硝基-2-三氟甲基-苯與嗎啉 (140°C，4 h)之親核取代反應及進一步藉由阮尼鎳將蛾基 官能氫解還原為胺來合成：m.P· : 149—151°c ; Rf(己烷 /EtOAc 1:1) : 0.30 ； MS · [M+l]+ =247.1, lH-NMR(400 MHz，DMSO-d6) : 7·22 (d，9 Hz，1H)，6.77 (m，2H)，5·37 (s/ 97470.doc -155- 200529849 寬，2H，NH2)，3.62 (m/寬，4H，CH2)，2.67(m，寬 4H， CH2)。 步称55d.la · 4-[6-(4-確基-苯氧基）-咳咬-4-基胺基】-環己醇 使溶解於0.5 ml DIPEA及30 ml 2-丙醇中之300 mg(1.19 mMol)4-氣-6-(4-硝基-苯氧基）-嘧啶（步驟lel)及184 mg(1.60 mMol)4-胺基·環己醇回流3h。在蒸發溶劑後，剩 餘物經兩次急驟層析（Si02 ; 2·5χ12 cm，己烷/EtOAc 1:1 —MeOH/EtOAc 5:95。Si02 ; 2x15 cm，5 — 10% MeOH於 CH2C12 中），以得到無色油：Rf(MeOH/CH2Cl2l:9) : 0.50 ; MS ： [M+l]+ =331, 1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6) ： 8.30 (d? 10.5 Hz, 2H5 苯基），8.14 (s/寬，1H，嘧啶基），7·43 (d，8.5 Hz，1H，NH)，7.38 (d，10·5 Hz，2H，苯基），5·95 (s/寬，1H， 嘧啶基），5.06 (s/寬，2H，NH2)，4.55 (d，4·5 Hz，1H，OH)， 3.76 (s/寬，1H，CH)，3·41 (m/寬，1H，CH)，1.92 -1·80 (m， 4H，CH2)，1.25 (m，4H，CH2)。 步驟55d.lb : 4-[6-(4-胺基-苯氧基）-嘧啶_4-基胺基】·環己 醇 在阮尼Ni之存在下經3 h氫化溶解於15 ml MeOH中之100 mg(0.30 mMol)4-[6-(4-硝基-苯氧基）-嘧啶-4-基胺基]-環己 醇。在經Hyflo過濾反應懸浮液並蒸發溶劑後，粗產物藉 由急驟層析法（Si02 ; 2x20 cm，丙酮/CH2C12/NH3 5··94··1 —50:49:1)純化，以得到呈黃色油之標題化合物：
Rf(MeOH/CH2Cl2/NEt3 15:84:1) ： 0.12 ； MS ： [M+l]+=301 ； h-NMRGOO MHz，DMSO-d6) : 8.09 (s，1H，嘧啶基），7.13 97470.doc -156- 200529849 (d，8.5 Hz，1H，NH)，6.76(d，9.5 Hz，2H，苯基），6·56 (d， 9·5 Hz, 2H，苯基），5.55 (s/寬，1H，嘧啶基），5 ·06 (s/寬， 2H，NH2)，4·56 (d，4.0 Hz，1H，OH)，3·64 (s/寬，1H，CH)， 3.38 (m/寬，1H，CH)，1.79 (m，4H，CH2)，1.23 (m，4H， CH2) 〇 實例56 可類似地製備下列化合物：
97470.doc 157- 200529849 R3
R1 R2 R3 a) H -N\_^ H b) Me Me H c) H r~\ CH2—N N— Ethyl / V_/ cf3 d) Me r~\ CH2—N N一 Ethyl / \_J cf3 e) H yNH ’ nh2 cf3 f) Me ,NH ’ nh2 cf3 g) H NH ’ nh2 H h) Me HH ’ nh2 H
實例57 : l-[4-(6-胺基-嘧啶-4-基氧基）_苯基]-3-(4-吡啶·2_ 基-3-三襄曱基-苯基）-腺 於一密封管中，在氬氣氛下將150 mg(0.320 mMol)l-[4-(6-胺基-嘧啶-4-基氧基）-苯基]-3-(4-溴-3-三氟甲基-苯基）- 97470.doc 158- 200529849 脲（步驟57·3)、590 mg(1.602 mMol)2-(三丁基錫烷基）_吡啶 及97 mg(0.084 mMol)肆（三苯基膦）-鈀懸浮於丨，4_二噁烷 中。於150°C攪拌2.5 h後，在減壓下移除溶劑。管柱層析 (Si02 ; CH2Cl2/MeOH 95:5)且自醚結晶得到呈白色粉末之 標題化合物·· 188-192°C ; Rf(CH2Cl2/MeOH 9:1) : 0.19 ; MS : [M+l]+=470 ; HPLC ctRet : =5.49 〇 起始物質如下製備： 步称57·1 · 1·(4_溪-3-三氣甲基-苯基）-3-[4_(6-氣-喊咬-4-基 氧基）-苯基卜脲 向Ν2氣氛下4.0 g(16.15 mMol)4-氣-6-(4·異氰酸根基-苯 氧基）-嘧啶（實例1 ;步驟1.3)於13 ml THF中之溶液中添加 溶解於85 ml醚中之3.88 g(16.15 mMol)4-溴三氟甲基-苯 胺。於室溫攪拌27 h後，將產物過濾出並以醚洗滌。乾燥 後，獲得標題化合物呈白色晶體：m.p. : 179-182。(3 ; Rf(EtOAc) ： 0.55 ； MS ： [M+l]+=489 ； HPLCctRet=7.46 〇 步称57·2 · l_[4-(6-養氣基-,咬-4 -基氧基）_苯基]-3_(4 -演_ 3_三氟甲基苯基）_脲 於50°C下攪拌4.13 g(8.47 mMol)l-(4-溴-3-三氟甲基-苯 基）-3_[4-(6-氣-喂σ定-4-基氧基）-苯基]-脈及1.1 g(i6.94 mMol) NaN3於65 ml DMF中之混合物19 h且於60°C下搜拌6 h。將反應混合物傾入150 mL水中並以EtOAc(3><350 mL)萃 取。有機層以水及鹽水洗滌，乾燥（Na2S04)並濃縮。粗產 物直接用於下列氫化步驟（步驟57.3)。Rf(Et〇Ac) : 0.58 ; MS : [M+l]+=494 ; HPLC ctRet =7·58。 97470.doc -159- 200529849 步驟57·3 : l-[4-(6-胺基·嘧啶-4_基氧基）_苯基】-3-(4-溴-3-三氟甲基·苯基）_脲 於室溫下經15 h在1 g阮尼Ni之存在下氫化溶解於80 mL EtOH 中之 4.1 g(8.3 mMol)l-[4-(6-疊氮基-嘧啶 _4-基氧基）-苯基]-3 -(4-漠…3 -三氟甲基-苯基）-脲。將反應混合物過渡並 濃縮。管柱層析（Si02 ; EtOAc)且自醚結晶得到標題化合 物·· m.p· : 186-188°C ; Rf(EtOAc) : 0.18 ; MS : [M+l] + =469 ; HPLC ctRet=5.49 〇 實例58 : l_[4-(6_胺基-嘧啶-4_基氧基）-苯基】-3_(4_吡啶-3_ 基三氟甲基-苯基）-膝 如實例57中所描述，標題化合物係使用三丁基 錫烧基）-吡啶製備：m.p· : 132-135°C ; MS : [M+1] + =467 ; HPLC ctRet =3.54。 實例59:l-[4_(6-胺基”嘧啶_4_基氧基）_苯基】_3-(4-吡啶_4_ 基-3-三氟甲基-苯基）脲 如實例57中所描述，標題化合物係使用三丁基 錫烧基）-吡啶製備：m.p· : 13i-i35°c ; MS : [M+1] + =467 ; HPLC ctRet =3.51 〇 實例60 ·· 1-[4-(6·胺基-嘧啶-4-基氧基）_苯基卜3-[4-(6-甲基- «比啶-2_基）-3-三氟甲基-苯基】-脲 如貫例57中所描述’標題化合物係使用2_甲基-6_三丁基 錫烧基比淀（步驟 54.1)製備：m.p· ·· i3〇_i33°C ; MS : [M+l]、481 ; HPLC ctRet =3.66。 實例61 : l-[4_(6-甲基胺基-嘧啶_4-基氧基分苯基卜3-(4-||比 97470.doc -160- 200529849 啶-2·基-3-三氟曱基_苯基）-脲 於一密封管中，在氬氣氛下將136 mg(0.282 mMol)l-(4-溴-3-三氟甲基-苯基）-3-[4·(6-甲基胺基-嘧啶-4-基氧基）-苯 基]-脲（步驟 61.1)、129 mg(0.35 mMol)2-(三丁基錫烷基）-吡啶及36 mg(0.031 mMol)肆（三苯基膦）-鈀懸浮於〇·5 mL THF中。反應混合物在微波烘箱（Emrys Optimizer)中於 140°C加熱85 min。過遽後，將母液蒸發並層析（Si〇2 ; CH2Cl2/MeOH 95:5)。藉由製備性 TLC(Si02 ; CH2Cl2/MeOH 9:1)，獲得呈白色粉末之標題化合物： m.p. ： 114-118°C ； Rf(CH2Cl2/ MeOH 9:1) ： 0.32 ； MS ： [M+l]+=481 ; HPLC ctRet =3.78。 起始物質如下製備： 步驟61·1 : 1-(4•溴-3-三氟甲基-苯基）-3-丨4-(6-甲基胺基-嘧 咬_4_基氧基）-苯基】-腺 使 3 g(6.15 mMol)l-(4-溴-3_三氟甲基-苯基）-3_[4-(6-氯-嘧啶-4-基氧基）-苯基]-脲（步驟57.1)溶解於35.51111：於£1〇11 中之MeNH2 33%溶液中且在冰浴中攪拌4h。在減壓下移除 溶劑後，將剩餘物層析（Si〇2 ; EtOAc)且自醚結晶得到呈 白色晶體之標題化合物：m.p. : 161_164°C ; Rf(EtOAc): 0.26 ; MS : [M+l] + =482 ; HPLC ctRet=5.64。 實例62 : l-[4_(6-甲基胺基-嘧啶_4_基氧基）_苯基卜3-(4-吡 咬_3·基-3-三氟甲基·苯基卜腺 如實例61中所描述，標題化合物係使用、（丨，^-三丁基 錫烷基）-°比°定製備：m.p· : 118 -123°C ; MS : [M+l] + 97470.doc -161 . 200529849 =481 ； HPLC ct 實例63 · l-[4-(6-甲基胺基_嘧啶-4_基氧基广苯基卜3-(4-e比 啶_4_基_3_三氟甲基-苯基）·脲 如貫例61中所描述，標題化合物係使用4-(丨，丨，丨_三丁基 錫烧基）_ σ比咬製備：m p. : m130〇c ; MS : [M+1] + =481 ; HPLC ctRet =3.64。 實例64 : 1_[4_(6_甲基胺基-嘧啶-4_基氧基）_苯基卜3-[4-(6-甲基比咬_2_基）-3-三氟甲基·苯基】_膝 如貫例61中所描述’標題化合物係使用2_甲基_6_三丁基 錫烧基吼咬（步驟54.1)製備：mep· : i〇6-1〇9°C ; MS : [M+l] + =495 ； HPLC ctRet =3.80 〇 實例65 : N-[4-(6-氣·嘧啶-4_基氧基）·苯基卜N，-[4气心乙基 旅嗪-1-基甲基）-3-氣-苯基】-脲
向N2氣氛下720 mg(2.8 mMol)4_(4_乙基哌嗓_1_基甲基）_ 3_氣-笨胺（步驟65.3)於30 ml THF中之溶液中添加71〇 mg(2.86 mMol)4 -氣- 6-(4-異氣酸根基-苯氧基）_。密。定（步驟 i·3) °攪拌18 h後，將反應混合物過濾，將濾液部分濃 細’且標題化合物藉由添加DIPE而結晶：MS ·· [M+1] + = 501 ； 1H-NMR(DMSO-d6) ： 8.91 (s5 1H)? 8.88 (s, iH), 97470.doc -162- 200529849 8.66 (s，1H)，7.72 (d，2 Ηζ，1Η)，7·54 (d，9 Hz，2H)，7·36 (d，8 Hz, 1H)，7.35 (s，1H)，7·28 (dd，8 Hz，2 Hz，1H)，7.18 (d，9 Hz，2H)，3.49 (s，2H)，2.43 (m，8H)，2·32 (q，7.1 Hz， 2H)，0.99 (t，7.1 Hz，H3C)。 起始物質如下製備： 步驟65·1 : (4-硝基-2-氣-苯基）-(4-乙基哌嗪-i-基）_甲酮 類似於步驟5.1，5·0 g(24.8 mMol)4-墙基—2-氣·苯甲酸以 6.0 ml(71 mMol)草醯氯活化且與6.6 ml(52 mMol)l-乙基派 嗪反應，得到標題化合物·· MS : [M+l]+=298 ; HPLC AtRet = 7.3。 步驟65·2 : (4-胺基-2-氣-苯基）-(4•乙基派唤-ΐ·基）_甲嗣 如步驟1.5中所描述在1·3 g阮尼鎳之存在下氫化130 ml 乙醇中之7.29 g(24.5 mMol)(4-硝基-2-氯-苯基）-(4-乙基哌 嗪-1-基）-甲酮，且自甲苯結晶得到標題化合物：m.p.: 123- 124〇C ; MS ·· [M+l] + =268。 步驟65·3 : 4-(4-乙基哌嗪-1-基甲基）-3•氣-苯胺 類似於步驟 5.3，60 ml THF 中之 5.06 g(18.9 mMol)(4-胺基-2-氣-苯基M4-乙基哌嗪-1-基）-甲酮經57 ml BH3(1M 於 THF 中）還原。層析法（Si02; CH2Cl2/MeOH/NH3aq 95:5:1 —80:20:1)得到標題化合物：1^:[1^+1]+=254;111-NMR(CDC13) · 7.21 (d? 8 Hz, 1H), 6.72 (d? 2.3 Hz, 1H)? 6.58 (dd，8 Hz，2.3 Hz，1H)，3.70 (s，H2N)，3·57 (s，2H)，2.6 (m，8H)，2.47 (q，7·2 Hz，2H)，1.13 (t，7.2 Hz，H3C)。 實例66 : l-[4-(2-胺基·嘧啶_4_基氧基）-苯基卜3_(4·哌嗪-1bb 97470.doc -163 - 200529849 基甲基-3-三氟甲基-苯基）_脲
在 20 mg Pd/C(10%; Engelhard 4505)之存在下氫化 6 ml 甲醇中之107 mg(0.172 mMol)4-(4-{3_[4-(2-胺基-嘧啶-4-基 氧基）-苯基]-脲基}-2-三氟甲基-苄基）_哌嗪羧酸苄酯（實 例 51.h.l)，過濾且 Combi Flash 層析法（CH2Cl2/MeOH + 1% NH3aq 95:5—4:1)得到標題化合物：Rf (cH2Cl2/MeOH/NH3aq 80:20:1) ： 0.10 ; HPLC AtRet =7.6 ； MS ： [M+l]+=488 ； NMR(CD3OD) : 8.09(d，5.9 Hz，1H)，7.90 (m，1H)，7.74 (d， 8·2 Hz，1H)，7·64 (d，8·2 Hz，1H)，7.53 (d，9.0 Hz，2H)， 7·12 (d，9·0 Hz，2H)，6.18 (d，5.9 Hz，1H)，3.63 (s，2H)， 2·88 (m，4H)，2.48 (m，4H)。 實例67 : 1-[4-(2_甲基胺基-嘧啶_4_基氧基）_苯基】-3-(4-哌 嗪-1-基甲基-3:三氟甲基-苯基）_脲
可類似於本文中所描述之程序製備。 實例68 : N_(6_{4_[3-(3_三氟甲基_苯基）-脲基卜苯氧基}-嘧 97470.doc -164- 200529849 啶-4-基）-乙醯胺
於55°C下在Ar氣氛下在THF(3 mL)中攪拌N-(4-(4-氣-嘧 啶-6-基）-氧苯基）-^-(3-三氟甲基-苯基）-脲（步驟68.1)(100 mg，0.245 mmol)、乙醯胺（40 mg，0.68 mmol)、Pd2(dba)3 [參-(二亞苄基丙酮）-二鈀（0)](6 mg)、4,5-雙（二苯甲膦）-9,9-二甲基 °惡嗯（dimethylxanthrene)(9 mg)及 Cs2C03 (160 mg)8h。過濾並蒸發溶劑後，產物藉由製備性薄層層析法 (4個20x20 cm板，丙酮/CH2C12 =3:7)分離：白色固體， M+H =431.9 > lH-NMR(400 MHz, DMSO-d6) ： 10.85 (s5 1H5 嘧啶基），9.03/8.84 (s/s，1H/1H，脲），8.45 (s，1H，NH)，7.98 (s，1H，嘧啶基），7.56(d，8·5 Hz，1H)，7.56 (d/s，9.0 Hz， 2H/1H)，7.29 (d，8·5 Hz，1H)，7.06 (d，9.0 Hz，2H)，2.09 (s, 3H，CH3)，Rf(丙酮/CH2C12 =3:7) : 0.34。 步驟68·1 N-(4-(4-氣嘧啶-6-基）-氧苯基）-n，_(3-三氟甲基苯 基）_脲
隔夜攪拌溶解於THF(3 ml)中之3-三氟甲基-苯基異氰酸 酯（412 mg，2.2 mmol)、（4-(6•氣-嘧啶-4-基-氧基）-苯胺（步 驟 68.2 ; 0.25 g，1.1 mmol)及咄啶（〇·ΐ8 mi)後，將反應溶 液在減壓下濃縮並急驟層析（矽膠，2.5x17 cm ;丙_ /CKbCh =5 : 95 — 1:9)，以得到呈無色固體之標題化合 97470.doc -165- 200529849 物：M+H =408.9/410.9，iH-NMRMOO MHz，DMSO-d6): 9.07 (s，1H，NH)，8.89 (s，1H，NH)，8·63 (d，2.0 Hz，1H，吡 啶基），8·01 (s，1H，3-CF3-苯基），7.57(d/寬，8·0 Hz，1H， CF3-苯基），7.52(d，9·5 Hz，2H，氧-苯基-胺基），7.50 (m， 1H，3_CF3-苯基），7.32(d，2.0 Hz，1H，吡啶基），7.29(d/寬， 8·0 Hz，1H，-CF3-苯基），7·15 (d，9·5 Hz，2H，氧-苯基-胺 基），（d，6·5 Hz，2H，吡啶基）；Rf(丙酮/CH2C12 =1:9): 0.54 ; m.p. =187.4-189.7°C。 起始物質如下製備： 步驟68·2 : (4-(6-氣_嘧啶_4-基_氧基）-苯胺 於40°C下在阮尼Ni(3 g)之存在下氫化溶解於MeOH(250 ml)中之4-氣-6-(4-硝基-苯氧基）-吡啶（步驟68·3 ; 3·6 g ; 14·3 mmol) 3d。將反應溶液過濾，在減壓下濃縮並自 EtOAc/己烷結晶以得到4-氣-6-(4-胺基-苯氧基）·嘧啶： M+H =222/224 ； !Η-ΝΜΚ(400 MHz, DMSO-d6) ： 8.62 (s? 1H，哌啶基），7.13 (s，1H，哌啶基），6·83 (d，9 Hz，2H，苯 基），6.56 (d，·9Ηζ，2H，苯基），5· 12 (s，2H，NH2) ; m.p· = 135.5-138.1〇C。 步驟68.3 ·· 4-氣-6-(4-硝基-苯氧基）-嘧啶 於60-65°C下攪拌溶解於H20/丙酮（80 ml; 1:1)中之4-确 基紛（2.8 g，20.1 mmol)、2,4-二氯-。密 σ定（3 g，20.1 mmol)、NaOH(0.8 g，20.1 mmol)l h。將反應溶液在減壓 下濃縮並急驟層析（矽膠，4.5x22 cm，EtOAc/己烷=1:4) 以得到呈無色固體之標題化合物：M+H =252/254 ;!H- 97470.doc -166- 200529849 NMR(400 MHz，DMSO-d6) : 8e67 (s，1H，嘧啶基），8.34(d， 9 Hz，2H，苯基），7.58(d，9Hz，2H，苯基），7.53 (s，1H，嘧 σ定基）；Rf(EtOAc/ 己烧=1:1) : 0.16 ; m.p. =125.4-126.6°C。 實例69 : N-(6-{4-[3_(4-嗎啉-4-基_3-三氟甲基-苯基）-脲 基】"本氧基}-喊咬_ 4 -基）-乙酿胺
氣-嘧啶-4-基氧基）-苯基]-3-(4-嗎啉-4-基-3-三氟甲基-苯 基）-脲（步驟69.1)製備：米色固體，M+H =516,9，HPLC [20 — 1〇〇% CH3CN(0.1% TFA)及 H2O(0.1% TFA)於 7 min 内且剩餘於 100 CH3CN(0.1% TFA)2 min] : tRet =7.72 min， Rf(MeOH/CH2Cl2 =1:9) : 0.42。 步驟69·1 : l-[4-(6-氣·嘧啶-4-基氧基）-苯基】-3-(4-嗎啉-4-基_3_三氟甲基-苯基）_脲 標題化合物係類似於實例1之化合物之合成自步驟55C-2 之化合物開始製備：白色固體，M-H =491.9，HPLC [20— 1〇〇% CH3CN(0.1% TFA)及 Η2Ο(0·1% TFA)於 7 min 内 且保持在 100 CH3CN(0.1% TFA)2 min] : tRet =7.52 min， Rf(MeOH/CH2Cl2 =3:97) : 0.17。 實例70 · 6-(4_{3_[4_(4 -乙基-旅嗓-1-基甲基）-3 -三襄甲基- 97470.doc •167· 200529849 苯基】_膝基}-苯氧基）-痛咬-4-基】·胺基甲酸甲g旨
於室溫下將溶解於10 ml CH2C12中之787 μ1(10.2 mMol) 氣甲酸甲酯緩慢添加至160 mg(0.31 mMol)l-[4-(6-胺基-嘧 °疋-4-基氧基）_苯基]-3-[4-(4-乙基旅嗪-1-基甲基）_3-三氟甲 基-苯基]-脲（步驟70.1)、5.6 m卜比啶及20 mg DMAP於16 ml CHzCh中之溶液。攪拌2 h後，過濾所得懸浮液，將濾液 以100 ml EtoAc稀釋，以H2〇及鹽水洗滌兩次。水層以 EtOAc萃取兩次，將有機相乾燥（Ν^δ〇4)並在減壓下濃 縮。CombiFlash 層析法（CH2Cl2/NH3aq/]Vie〇H 96:1:3 — 90:1:9)得到白色晶體·· mp : 191_193艺； C27H3()N7F3〇4 : C、Η、Ν ; MS ·· [Μ+1]+=574。 步驟70·1 : 1-[4-(6•胺基·嘧啶_‘基氧基）_苯基卜3-[4_(4•乙 基-旅嗪-1-基甲基）_3_三氟甲基_苯基】·脲 標題化合物類似於實例19之化合物之合成來製備：
Anal· C25H28N7F302. 〇·86 H20 : C、Η、Ν、F、Η2〇 · MS · [M+l]+=516 ； HPLC AtRet =8.0 〇 實例71 · 1-[4-(2·乙醯基胺基-嘧啶_4_基氧基）苯基】_3丨心 (4-甲基·哌嗪-1-基甲基）_3_三氟甲基_苯基卜脲 97470.doc -168- 200529849
F F ο
N^N ΎΝΗ ο 經2.5 h將溶解於 7 ml CH2C12 中之 119 μ1(1·67 mMol)乙醯 氣添加至250 mg(0.50 mMol)l-[4-(2-胺基-°密°定-4-基氧基）-苯基]_3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯基]-脲 (實例52a)及10 mg DMAP於6.5 ml。比啶中之溶液。攪拌另 -小時後，以200 ml水及250 ml EtOAc稀釋該混合物。經 分離之水層以EtO Ac再萃取兩次。有機相以水及鹽水洗 滌，乾燥（Na2S04)並在真空中濃縮。逆相層析法（Gilson System)得到標題化合物··丙酮/EtOH + 1% Et3N 95:5 — 4:1 ; MS : [M+l]+=544 ; Rf(丙酮/EtOH/Et3N 80:20:1): 0·11 ; HPLC AtRet =7·8。 實例72 ··可類似於所描述之程序製備下列化合物：
〜R3 HN ^ X Y R1 HPLC 'Ret [min】 m.p. [°C] MS [M+1]+ Anal. a) F F N CH ζ〇γΝΗ 0 14.2 533 CHN 97470.doc -169- 200529849
b) 6 F F CH N /0 丫 NH 0 9.0 560 CHNF c) r 〔N〕 N CH N /ΟγΝΗ 0 9.6 574 CHNF 實例73 ·· 3-[3-(4-{6-[4-(第三丁基-二甲基·矽烷氧基）_苯基 胺基]-。密17定-4-基氧基}-苯基）-脲基]-5-三氟甲基-本曱酿胺
標題化合物係類似於實例54之化合物之製備藉由自[6-(4-胺基-苯氧基）-嘧啶-4-基]-[4-(第三丁基-二甲基-矽烷氧 基）-苯基]-胺及3-胺基-5-三氟曱基-苯甲醯胺（步驟73.1)之 尿素形成來製備：MS : [M+l] + =639 ; Rf(MeOH/CH2Cl2 =1:9) ·· 0.49 〇 步驟73·1 : [6_(4_胺基·苯氧基）_嘧啶基】丨4 (第三丁基_ 二曱基-矽烷氧基）-苯基]-胺 如WO 2003/09977 i中所描述來製備標題化合物。 實例74 : 1-(3，-氣-2-三氣甲基.二苯基+基）邻-[2普二 曱基胺基丁基胺基)-嘧啶-4-基氧基卜2_甲基苯基卜脲 97470.doc -170- 200529849
將3’ -氯·2-二氟甲基-二苯基胺（48 mg，0· 1 8 mMol)及 DIPEA(67 叫，0.38 mmo卜 2.2 equiv)於 CH2C12(0.6 mL)中 之溶液逐滴添加至三碳醯氣（19 mg，0.07 mMol)於CH2C12 (0.6 mL)中之冷（0°C)溶液。隨後，將N-[4_(4-胺基-3-甲基-苯氧基）-嘧啶-2-基]-Ν·，Ν，-二甲基-丁烷-i，4-二胺（56 mg， 0·18 mMol)及 DIPEA(66 μί，0.38 mMol，2·2 equiv)於 CH2CI2 (1 · 1 mL)中之溶液添力口至反應混合物。使混合溫至 室溫，攪拌10 min並在真空中濃縮。MPLC (CH3CN/H20/TFA)純化粗物質獲得呈黃色固體之標題化合 物·· MS : 613.9 [M]+ ; HPLC DtRet=4.2。 步驟74·1 : N-[4-(4-胺基-3-甲基·苯氧基）-嘧啶-2-基卜 ]V，N’-二甲基-丁烷 _1，4_二胺
於100°C下攪拌[4-(2-氣-嘧啶-4-基氧基）-2-甲基-笨基胺 (808 mg，3.43 mMol)、4-二甲基胺基 丁基胺（438 mg， 3.77 mMol，1.1 equiv)及 K2C03(1.3 g ’ 9·26 mMol，2.7 equiv)於DMF(8 mL)中之混合物1 h。使反應混合冷卻至室 97470.doc -171 - 200529849 溫並經由玻璃燒結之漏斗過濾。濾液在真空中濃縮。藉由 石夕膠管柱層析法（CH2Cl2/MeOH，9:1 — CH2Cl2/MeOH + 1% NH/q，9:1)。純化粗物質提供呈黃色油之標題化合 物·· MS : 316.1 [M] + ； Rf =0.23(CH2Cl2/MeOH+l% NH3aq，4:1)。 步驟74·2 : [4-(2-氣_嘧啶-4-基氧基）-2-甲基-苯基胺
在氫氣氛下，於室溫下攪拌2-氣-4-(3-甲基-4-硝基-苯氧 基）-嘧啶（992 mg，3.73 mMol)及阮尼 Ni(700 mg)於 MeOH/THF(3:l，40 mL)中之混合物7 h。使反應混合物經 由矽藻土襯墊過濾且在真空中濃縮濾液以獲得呈黃色固體 之標題化合物：MS : 236.0 [Μ+1Γ ; HPLC DtRet =2·2。 步驟74·3 ·· 2-氣-4-(3-甲基-4-硝基-苯氧基）-嘧啶
將 2,4-二氣 口密咬（3.7 g，25.17 mMol，2 equiv)以一份添 加至4-硝基-間-甲酚（1.9 g，12.59 mMol)及粉末狀NaOH (0.605 g，15.11 mMol，1.2 equiv)於 DMF(25 mL)中之混合 物。於室溫下攪拌反應混合物lh，以H2〇(300 mL)稀釋並 以EtOAc(600 mL)萃取。使水層以NaCl飽和且以 CH2Cl2/MeOH(9:l，2x300 mL)萃取。將組合之有機相乾燥 (Na2S〇4)，過濾並丨農縮。所得黃色結晶物質藉由石夕膠管柱 97470.doc -172- 200529849 層析法（己烷—己烷/EtOAc，6:1，4:1)純化以提供呈白色 晶體之標題化合物· HPLC tRet =4.7 ; Rf=〇· 17(己烧 /EtOAc，3:1)。 步驟74·4 : 3▼氣-2_三氟甲基_二苯基-4-胺
於回流下攪拌5_胺基_2_三氟溴甲苯（5〇〇 mg , 2.1 鲁 mMol)、3-氣苯基硼酸（970 mg，6.2 mMol , 3 equiv)、 Pd(PPh3)4 (70 mg ’ 0·018 mMol，0.03 eqUiv)、Na2C03(於 H20 中之2 M溶液 ’ 5 mL，10 mMol，4·76 eqUiv)及甲苯（14 mL) 1 h。使反應混合冷卻至室溫並經由矽藻土襯墊過濾， 以CH2C12及H2〇洗滌濾餅。分離該等層且以ch2C12(2x60 mL)萃取水相。組合之有機相以鹽水洗滌，乾燥 (Na2S04) ’ 過濾並在真空中濃縮。mplc(CH3CN/H20/TFA) 純化粗物質獲得標題化合物：MS : 270.0 [M-2]- ; HPLC φ DtRet =4.9。 · 實例75 : 1-(3，_溴_2_三氟甲基二苯基_4_基卜3-{4-丨2-(4-二 甲基胺基-丁基胺基）_嘧啶_4_基氧基卜2-甲基-苯基卜脲
^題化合物係如實例74中對丨_(3，_氯三氟甲基-二苯 97470.doc -173- 200529849
基-4-基）-3-{4-[2-(4-二甲基胺基-丁基胺基）_嘧啶-4-基氧 基]-2-甲基-苯基}-脲所描述而製備，但使用3，_溴-2-三氟甲 基-二苯基-4-胺。標題化合物：MS : 658.8 [M+l]+ ; HPLC
DtRet =4.3 ; Rf =〇.47(CH2Cl2/MeOH，99:1)。
步驟75·1 ·· 3，-溴-2-三氟甲基·二苯基_4_胺 η2ν 標題化合物係如實例74(步驟74.4)中對1-(3，-氯-2-三氟甲 基-一苯基-4-基）-3-{4-[2-(4-二甲基胺基-丁基胺基）_嘧啶_ 4-基氧基>2-甲基-苯基卜脲所描述而製備，但使用3-溴苯 基觸酸。標題化合物：MS : 315·9 [Μ_1Γ ; HPLC DtRet =4.9;1^=〇.16(己烷/^0八(：，4:1)。 實例76 : 1-(4’_氣_2-三氟甲基-二苯基_4-基卜二 曱基胺基_丁基胺基）-嘧啶_4_基氧基卜2_甲基_苯基卜脲
標題化合物係如實例74中對1-(3,'氣三氟曱基_二苯 基-4-基）-3-{4-[2-(4-二曱基胺基，丁基胺基>嘧啶基氧 基]·2-曱基-笨基卜脲描述來製備，但使用4，_氯_2_三氟甲 基-二苯基-4-胺。標題化合物：MS : 612·9 [M]+ ; HpLC 97470.doc -174- 200529849
DtRet =4.3 ; Rf=0.13(CH2Cl2/MeOH + 1% NH3aq，9:1) 〇 步驟76·1 : 4▼-氣-2-三氟甲基-二苯基_4_胺
標題化合物係如實例74(步驟74·4)中對1_(3,'氣三氟曱 基-二苯基-4-基）-3- {4-[2-(4-二甲基胺基-丁基胺基）-17密咬_ 4 -基氧基]-2 -曱基-苯基}-脈所描述而製備，但使用氯苯 基棚酸。標題化合物：MS : 270.0 [M-2]· ; HPLC DtR t =4·9 〇 實例77 : 1-(4，-溴-2_三氟甲基_二苯基-心基）_3_{4-[2-⑷二 甲基胺基-丁基胺基）_嘧啶-4-基氧基】_2_甲基-苯基卜脲
標題化合物係如實例74中對1-(3，-氣-2-三氟甲基-二苯 基-4-基）-3-{4-[2-(4-二曱基胺基-丁基胺基 > 嘧啶基氧 基]-2-甲基-苯基卜脲所描述而製備，但使用溴-2-三氟甲 基-二苯基-4-胺。標題化合物：MS : 658.8 [M+l]+ ; HPLC
DtRet =4.4 ; Rf=0.07(CH2Cl2/MeOH + 1% NH3aq，9:1)。 步称77·1 : 4▼-溴_2_三氟曱基_二苯基-4_胺 97470.doc -175 - 200529849
標題化合物係如實 — 貝例74(步“ 74·4)中對1-(3丨氯-2-三氟f 基· 一本基-4_基）_3_{4 4-基氧基]I甲式苯美乂 一甲基私基-丁基胺基)« 土-本基卜脲所描述而製備 基《。標題化合物：一―二用：笨 =4.9;k〇.U(己貌/Et〇Ac，4:1)。 PLC ‘ 實例 78 ·· 1-(3，_氣_2_ = U Μ 氟甲基—-本基I基)_3-{4你⑷_ 甲基胺基·丁基胺基料基氧基】_2三氟甲基笨基^ m 〜w . 脲
HN 標題化合物係如實例74中對三氟甲基一# 基-4-基）-3-(4:1:2-(4-二甲基胺基-丁基胺基）·嘧啶_4_基= 基]-2-甲基-苯基卜脲描述來製備，但使用义⑷⑷胺武3 二氟甲基_苯氧基）_嘧啶-2-基]_N，，N，_二甲基·丁燒一 上，斗"二 胺。標題化合物：MS ·· 668.8 [M+1 疒；HPLC Dtn ^ J Ret =4.4 ;
Rf =0.01(CH2Cl2/MeOH + 1% NH3aq，9:1)。 步驟78·1 : N-[4_(4-胺基-3-三氟甲基_苯氧基）-嘧啶_2_基】 Nt，N，-二甲基丁烷-1,4-二胺 97470.doc -176· 200529849
nh2
標題化合物係如實例74(步驟74.丨）中對n_[4_(4_胺基_3_ 甲基-苯氧基定-2-&]_Ν，，Ν，·二甲基.丁烧•二胺所描 述而製備，但使用[4-(2_氯，基氧基）冬三氟甲基_苯 基胺。標題化合物：MS : 370.1 [M]+ ;肌c I =2.6 ;
Rf =0.14(CH2Cl2/MeOH + 1% NH3aq，4.1) 〇 步称78·2 : [4-(2·氣咬_4_基氧基）-2_三氟甲基_苯基胺
νη2 標題化合物係如實例74(步驟74·2)中對[4_(2_氯-嘧啶 基氧基）-2-甲基-苯基胺所描述而製備，但使用2_氣_4_(4_ 硝基-3-二氟甲基-苯氧基）_嘧啶。標題化合物·· MS : 288 〇 [M-1]· ; HPLC DtRet =4.6。 步驟78.3 : 2-氣-4_(4-硝基-3-三氟甲基_苯氧基）_嘧啶
F 標題化合物係如實例74(步驟74.3)中對2-氣-4-(3-甲基-4-硝基-苯氧基）-嘧啶所描述而製備，但使用扣硝基(三氟 曱基）-苯酚。於室溫下攪拌反應混合物3h。標題化合物： 97470.doc -177- 200529849 MS ： 317.9 [M-iy ; HPLC Dt 實例79 : 1_(3，-溴_2_ =务田 貫歹· W3’。’臭·2·三氟甲基-二苯基-4-基）-3]4·[2·(4·二 甲基胺基-丁基胺基咬I基氧基】I三氟甲基苯基卜腺
基）-3-{4-[2-(4-二甲基胺基，丁基胺基嘧啶_4•基氧基卜2_ 甲基-苯基卜脲所描述而製備，但使用Ν-[4_(4-胺基_3_三氟 甲基-苯氧基）-嘧啶-2_基]_Ν，，Ν，_二甲基-丁烷_丨，4_二胺（實 例78，步驟78.1)。標題化合物··⑽·· 712.7 [Μ+1] + ; HPLC tRet =4.5 ； Rf=〇.〇4(CH2Cl2/MeOH+l% NH3aq ^ 9:1)。 實例 80 · 1-(4’_氣_2_三氟甲基-二苯基-4-基）-3-{4-[2_(4_二 曱基胺基-丁基胺基）_嘧啶基氧基卜2-三氟甲基_苯基卜脲
標題化合物係如實例76對1-(4，-氣-2-三氟曱基_二苯基 基）-3-{4-[2-(4-二甲基胺基-丁基胺基）_。密啶_4_基氧基^2_ 甲基-苯基卜脲所描述而製備，但使用N_[4气4·胺基三氣 97470.doc -178- 200529849 甲基-苯氧基）-’咬_2_基]_^，^^，_二甲基-丁烷_1，4_二胺（實 例 78 ’ 步驟 78.1)。標題化合物：ms : 668.8 [M+l]+ ; xjdt η Ε)χ ^ - UPT Γ ^>4r _ >1 ^
甲基胺基-丁基胺基）_嘧啶_心基氧基】_2_三氟甲基-苯基卜脲 Br
標題化合物係如實例77對丨_(4，-溴_2_三氟甲基-二苯基_4_ 基）-3-{4-[2-(4-二甲基胺基-丁基胺基）_嘧啶_4_基氧基]_2_ 甲基-苯基卜脲所描述而製備，但使用N-[4-(4-胺基-3_三氟 曱基-苯氧基）-嘧啶-2-基；|-N，，N，-二甲基-丁烷-1，4-二胺（實 例 78，步驟 78.1)。標題化合物：Ms : 712.7 [M+1] + ; HPLC DtRet=4.5 ； Rf =0.07(CH2Cl2/MeOH+l% NH3aq ^ 9:1)。 · 實例 82 : l-(3，-氣-2_三氟甲基-二苯基-4_ 基）-3-{4_[2_(4_ 二 甲基胺基-丁基胺基）-嘧啶-4-基氧基卜苯基卜脲
97470.doc -179- 200529849 標題化合物係如實例74中對1 -(3，-氣_2-三氟甲基-二苯 基-4-基）-3-{4·〇(4-二甲基胺基-丁基胺基）_嘧啶基氧 基]-2-甲基-苯基卜脲所描述而製備，但使用n_[4_(4_胺基_ 苯氧基）-嘧啶-2·基]-N’，N，-二甲基-丁烷-丨，^二胺。標題化 合物：MS : 600.9 [M+l]+ ; HPLC DtRet=4.3 ; Rf=0.02 (CH2Cl2/MeOH+l0/〇 NH3aq，9:1) 〇 步驟82·1 : N_[4_(4_胺基-苯氧基v嘧啶·2-基卜N，，N，_二甲 基-丁烧_1，4-二胺
標題化合物係如實例74(步驟741)中對N_[4-(私胺基_3_ 甲基-苯氧基）-嘧啶基]-n，，N，-二甲基-丁烷_ι，4-二胺所描 述而製備，但使用4-(2-氣-嘧啶-4-基氧基）-苯基胺。標題 化合物· MS : 302.2 [M]+ ; Rf =〇.27(CH2Cl2/MeOH + 1% NH3aq，4:1) 〇 籲 步驟82·2 ·· 4_(2_氣-嘧啶_4_基氧基）_苯基胺
標題化合物係如實例74(步驟74·2)中對[4_(2_氯_嘧啶_4_ 基氧基）·2·曱基-笨基胺所描述而製備，但使用2'氣_4_⑷ 硝基-苯氧基）-嘧啶（實例45，步驟451)。標題化合物： MS · 223·9 [M+l] ; HPLC DtRet=i.6 ; Rf=0.62 (CH2Cl2/MeOH， 97470.doc -180- 200529849 95:5)。 實例83 : 1_(4，_氯_2_三氟甲基·二苯基-4_基）-3_{4-丨2-(4_二 甲基胺基_丁基胺基）-痛咬-4-基氧基】-苯基卜腺
標題化合物係如實例76對1-(4'-氣-2-三氟甲基-二苯基 基）-3-{4_[2-(4-二甲基胺基-丁基胺基）-喊n定-4-基氧基]_2- 甲基-笨基卜脲所描述而製備，但使用N-[4-(4-胺基-笨氧 基）-喊啶-2-基]-N，，N、二曱基-丁烷-l，4-二胺（實例82，步驟 82.1)。標題化合物·· MS ·· 598.9 [M]+ ; HPLC DtRet =4_3 ; Rf =0.10(CH2Cl2/MeOH + 1% NH3aq，9:1)。 實例84 : l-(4，-溴-2_三氟甲基·二苯基_4-基）_3_{4-[2_(心二 甲基胺基-丁基胺基）_嘧啶_4-基氧基卜苯基卜脲
標題化合物係如實例刀對1 -(4，-溴-2-三氟甲基-二苯基_4_ 基）-3-{4_[2-(4-二甲基胺基_丁基胺基）_嘧啶·‘基氧基 甲基苯基}-脲所描述而製備，但使用Ν-[4-(4-胺基_苯氧 基）-°密咬_2_&].Ν,，Ν,·二甲基二胺（實例82，步驟 97470.doc 181 - 200529849 82.1)。標題化合物：MS : 644.8 [M+l]+ ; HPLC DtRet =4·3 ; Rf =〇.l〇(CH2Cl2/MeOH + 1% NH3aq，9:1)。 實例85 : l-{4_[2-(3-甲氧基-苯基胺基v嘧啶基氧基-苯 基】-3_[4_(4-甲基·旅嗓_1_基甲基）冬三i ?基-苯基卜腺
標題化合物係如實例74中對氣冬三氟甲基·二苯 基-4-基）-3-{4-[2-(4-二甲基胺基·丁基胺基）_嘧啶基氧 基]-2-甲基-苯基卜脲所描述而製備，但使用[4·(4_胺基_3_ 甲基-笨氧基）-嘧啶-2·基]-(3-甲氧基-苯基 >胺及4_(4_甲基 哌嗪-1-基甲基）-3-三氟甲基_笨胺（實例14，步驟14.4)。標 題化合物·· MS ·· 622.0 [Μ+1Γ ; hPLc DtRet=3 5 ; Rf =〇 33 (CH2Cl2/MeOH + l0/〇 NH3aq , 9·ι)。 步称8S.1 : [4-(4-胺基_3_甲基_苯氧基）嘧啶_2_基】_(3_甲氧 基-苯基）-胺
在氧氣氛下，於室溫下攪拌（3-甲氧基-苯基）-[4-(3-甲基-4肖基-苯氧基）-σ密咬基p胺⑽〇mg，114mM〇1)及阮尼 97470.doc •182- 200529849
Ni(200 mg)於 MeOH/THF(3:l ’ 40 mL)中之混合物2 h。使 反應混合物經由矽藻土襯墊過濾且在真空中濃縮濾液以獲 得呈黃褐色固體之標題化合物·· MS : 323.1 [M+l]+ ; HPLC DtRet =2.6 〇 步驟85·2 ·· (3-甲氧基-苯基）_4-(3-甲基-4-硝基·笨氧基）_, 咬-2-基）-胺
於100°C下攪拌2-氣-4-(3-甲基-4-硝基-苯氧基嘧啶（實 例74，步驟74.3)(700 mg，2.63 mMol)、間-甲氧基苯胺 (35 7 mg，2.90 mMol，1.1 equiv)及 2-丙醇（10.5 mL)之混合 物1 h。使反應混合物冷卻至室溫，以H2O(90 mL)稀釋並 以CH2C12(350 mL)萃取。有機相以鹽水洗滌，乾燥 (Na2S04)，過濾並濃縮。標題化合物：MS : 353.3 [M+l]+ ; HPLC DtRer=4.6 ; Rf =0·08(己烷/EtOAc，3:1)。 實例86 : 1-2-甲基·4-{2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基）-苯基胺基卜 嘧啶-4_基氧基卜苯基）-3-(3-三氟甲基-苯基）-脲
標題化合物係如實例74中對1-(3’-氯-2-三氟甲基-二笨 97470.doc -183 - 200529849
二氟曱苯。標題化合物：Ms ·· 577.9 [M]+ ; HPLC DtRet=3.7 ; Rf =0.29(CH2Cl2/Me〇H，9:1)。 步驟86·1 : [4_(4_胺基_3-甲基_苯氧基）_嘧啶基卜[4(4甲 基-旅11 秦-1-基）-苯基】-胺
在氫氣氛下，於室溫下攪拌[4-(3-甲基-4-硝基-苯氧基）_ 嘧啶-2-基]-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基）_苯基]_胺（133 mg，0.32 mMol)及阮尼Ni(50 mg)於MeOH( 10 mL)中之混合物6 h。使 反應混合物經由矽藻土襯墊過濾且在真空中濃縮濾液以獲 得呈紅褐色固體之標題化合物：MS : 391.1 [M]+ ; HPLC 步称86.2 :丨4-(3-甲基-4_硝基·苯氧基）-嘧唆-2-基卜[4-(4-甲 基-旅嗓-1-基）-苯基】-胺
97470.doc -184- 200529849 於100°C下攪拌2_氣-4-(3-甲基-4-硝基-苯氧基）-嘧啶（實 例 74，步驟 74.3)(400 rag，1 ·5 1 mMol)、4-(4 -甲基-旅唤-1-基）-苯基胺（318 mg，1·66 mMo 卜 1.1 equiv)、4 N HC1(1.1 mL，4.08 mMol，2.7 equiv)及 2 -丙醇（6 mL)之混合物 1 h。 使反應混合物冷卻至室溫，以H2O(30 mL)稀釋並以CH2C12 (120 mL)萃取。有機相以鹽水洗滌，乾燥（Na2S04)，過濾 並濃縮。標題化合物：MS : 421.1 [M+l]+ ; HPLC DtRet =3·1 ; Rf =0.39(CH2Cl2/MeOH，9:1)。 實例87 : l-{4-[6-(5-氣-2-甲氧基·苯基胺基）_嘧啶-4-基氧 基】-苯基}-3-(4-嗎琳_4_基_3_三氣甲基-苯基）-腺
向1-[4-(6-氣-嘧啶-4-基氧基）-苯基]-3-(4-嗎啉-4-基-3-三 乱甲基-苯基）-腺（步驟69.1 )(34mg，68 μιηοΐ)於3 ml異丙 醇：二噁烷（1:1，v/v)中之溶液中添加5-氣-2-甲氧基-苯基 胺（54 mg，340 /xmol ; Fluka，Buchs，瑞士）及 HC1 conc.(5 /xl)。在微波烘箱（Emrys Optimizer，Personal Chemistry ; Uppsala ’瑞典）中加熱該混合物直至反應完全。反應混合 物以EtOAc(50 ml)稀釋並以〇·ΐ n NaOH(x2)及水〇2)萃 取。丟棄水相，且將有機相乾燥（Na2S〇4)，過濾並濃縮至 97470.doc -185- 200529849 乾燥。藉由於矽膠上層柝法· λ/Γ 竹古（CH2C12 · MeOH，98:2，ν/ν) 獲得標題化合物：MS : 9 . ^
〇15·2，616.4，617.4 ; HPLC tRetnew=8.67(新梯度：線性描♦，姐7 · 王梯度，經7 mm 之 MeCN/0.09% TFA&H2O/0.1% TFA 自 1:49$ 2 · μ主 1.0U 及 3 min 於 1:0，於 215 nm 偵測，流速 2.0 ml/min。其 ^ t 仙。官柱· Nucleosil Cl8-管柱 (25〇χ4·6 mm，5 μηι，100 入）。 如實例87中所描述使用合谪的欧少 。週的胺何生物來製備下列化合 物： 實例 化合物名稱 ES_MS (M+H)+ ~1 new tret [min] 88 1-{4_[6_(4-甲基-哌嗪_1_基)，σ定斗基氧基> (4-嗎啉-4·基-3-三氟甲基笨勘, 3 558.2 6.69 89 1-[4-(6一曱基胺基-嘴咬+基氧基苯基]_3·(^— 淋-4_基-3-三氟^甲基-苯基)-脈 503.3 7.14 90 Ν，Ν-一甲基-4-(6-{4-[3-(4-嗎啉_4_ 基-3-三氟甲 基)-脲基]-苯氧基}-咖定冰基胺基)_笨甲醯胺 622.4 7.68 91 1-{4-[6-(2-甲氧基-5-甲基-本基胺基)_痛淀冬基氧 基]-苯基}-3-(4-嗎琳-4-基-3-三氟甲基-苯基)-腺 595.6 8.17 92 1-{4-[6-(2-甲氧基-5_硝基-苯基胺基)-嘴唆冰基氧 基]-苯基卜3-(4-嗎啉-4-基-3-三氟曱基-苯基)-脲 626.5 8.50 93 1-{4-[6-(2,5-二甲氧基-苯基胺基)-嘧啶-4-基氧基]-苯 基}-3-(4-嗎淋4-基-3_三氟甲基-苯基)-脈 611.5 8.10 94 N，N-二乙基-4-甲氧基 _3-(6-{4-[3-(4-嗎啉-4-基-3-三 氟曱基-苯基)-脲基]-笨氧基}·♦定冰基胺基)·苯石黃 酋盛胺 716.4 8.39 95 1-{4-[6-(2-甲氧基-苯基胺基)_σ密淀冬基氧基]苯基}· 3-(4-嗎琳-4-基-3-三11甲基-苯基)_脲 581.3 7.91 實例96 : RET之蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制 如前述執行抑制測試。式I之一些化合物的IC5〇值在下表中 給出： 97470.doc -186- 200529849 化合物名稱 ic5〇 RET \m] 1-[4-(6-胺基-哺17定-4-基氧基)-苯基]-3-(3-σ丫丁σ定-1-基甲基-5-二 氟甲基-苯基)-脈 0.083 1-(3-二甲基胺基甲基-5-三氣甲基-苯基)-3-[4-(6-甲基胺基-^密 °定-4-基氧基)-苯基]-脈 0.11 1-[4-(2-胺基-。密唆-^·-基氧基)-苯基]-3-[4-(4-甲基-旅σ秦-1-基甲 基)-3-二氣甲基-苯基]-脈 0.18 1-[4-(6-胺基-。密12定-4-基氧基)-苯基]-3-[3-(4-甲基-旅唤-1-基甲 基)-5-二氟甲基-苯基]-脈 0.26 1-[4-(2-胺基-σ密咬-4-基乳基)-苯基]·3-[4-(4-乙基-旅唤_1_基甲 基)-3-三氟^甲基-苯基]-脈 0.31 1-[4-(4-乙基-旅唤-1-基甲基)-3-二氣甲基·苯基]-3-[4-(2-甲基胺 基-σ密σ定-4-基氧基)-苯基]-脈 0.35 1-[4-(2-胺基-0密唆-4-基氧基)-苯基]-3-[4-(4-異丙基-旅嗓-1-基 甲基)-3-三氟曱基-苯基]-脲 0.4 1-[4-(2-甲基胺基-嘧啶_4_基氧基)-苯基]-3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-三氟曱基-苯基]•脲 0.45 1-[4-(2-甲基胺基-定-4-基氧基)-苯基]-3-[3-(4-甲基-派唤-1-基)-5-三氟甲基-苯基]-脲 0.45 1-[4-(6-胺基-嘧啶-4-基氧基)_苯基]-3-[4-(4-異丙基-哌嗪小基 甲基)-3-三氣甲基-苯基]-脈 0.55 1-[4-(2-胺基-ϋ密咬-4-基氧基)-苯基]-3-[4-(4-第二丁基-旅17秦-1-基甲基)-3-三氟i甲基-苯基]-脈 0.56 1-[4-(4-乙基-旅嗓-l-基甲基)-3-二氣甲基-苯基]-3-[4-(6-甲基胺 基-响。定-4-基氧基)-苯基]-脈 0.58 1-[4-(6-甲基胺基-σ密咬-4-基氧基)-苯基]-3-[3-(4-曱基-旅°秦-1_ 基甲基)-5-三氟曱基-苯基]-脈 0.59 1-[4_(2-胺基嘧啶-4-基氧基)-苯基]-3_[4-(4,5-二甲基-咪唑_1_基 曱基)-3-三氟甲基-苯基]-脈 0.85 1-[3-(4-異丙基-旅嗓-l-基曱基)-5-三敗曱基-苯基]-3_[4-(6-曱基 胺基基氧基)-苯基]-脈 0.96 實例97 : Flt-3之蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制 如前述執行抑制測試。一些實例之化合物的IC5〇值在下表中 給出： 200529849 實例 序號 IC5〇 Flt-3 [μΜ] 實例 序號 IC5〇 Flt-3 _] 實例 序號 IC5〇 Flt-3 [/iM] 1 0.905 0.67 51a.l 0.085 2 1·2 34d.3 0.29 51a.2 0.12 4 0.153 34e.l 0.16 51b.l 0.13 5 0.54 34e.3 0.079 51b.2 0.17 6 0.4 34g.l 0.3 51d.l 0.091 8 0.51 34g.3 0.378 51d.2 0.135 9 0.32 34j.l 0.25 51e.l 0.25 11 0.23 34J.3 0.283 51e.2 0.91 13 0.34 34k. 1 0.13 52a 0.12 14 0.36 34k.3 0.1 52b 〇.〇s 15 0.6 341.1 0.62 52c 0.029 16 0.36 34m. 1 0.4 52d 0.26 17 0.94 34m.3 0.2 53b 0.12 19 0.25 34n.l 031 53d 〇 19 19-1 0.038 34n.3 0.2 55c 0.37 19-2 0.08 34p.l 0.59 55d 0.97 21 1.8 34s.2 0.24 57 0.118 23 1.3 34t.2 0.29 58 〇 12 24 0.17 34u.2 1.5 59 0.076 34a. 1 U 34w.2 0.14 60 〇 16 34a.3 0.83 38 0.354 61 0 49 34b. 1 0.36 41 0.42 62 〇 16 34b.3 0.37 43 0.16 63 〇 14 34c. 1 0.54 48 0.58 64 V· A 〇 34 34c.3 0.35 50 0.12 實例98 ·· F1t-3依賴性細胞增生之抑制 如前述執行抑制測試，使用野生型IL-3-依賴性造血細胞 株Ba/F3及突變亞株iTD_Ba/F3或D835Y-Ba/F3(表現原構性 活化Flt-3激酶）。一些實例之化合物的iCw值在下表中給 出： 賁例序號 Flt-3依賴性增生之抑制(ED5〇 [nM]) ITD突變 D835突變 53c 0.1 3.3 55a <0.5 <0.5 45 <0.2 0.5 46 <0.2 3.9 55b <0.5 <0.5 97470.doc -188- 200529849 49 〇el 11.7 53a <0。5 1.0 實例99:包含實例之化合物的錠劑 以下列組份、下列標準程序來製備包含100 mg實例1至 9 5中任一化合物以作為活性成份的錄:劑： 組份 活性成份 100 mg 結晶乳糖 240 mg Avicel 80 mg PVPPXL 20 mg Aerosil 2 mg 硬脂酸鎂 5 mg 447 mg 製造：將該活性成份與載劑物質混合物且藉由壓片機 (Korsch EKO，Stempeldurchmesser 10 mm)麼縮。
Avicel為微晶纖維素（FMC，Philadelphia，USA)。 PVPPXL為聚乙烯聚吡咯啶酮，交聯的（BASF，德國）。 Aerosil為二氧化石夕（Degussa，德國）。 實例100 :膠囊 包含下列組份（100 mg實例1至95中任一化合物作為活性 成份）之膠囊係.根據標準程序製備·· 組份 活性成份 100 mg Avicel 200 mg PVPPXL 15 mg Aerosil 2 mg 硬脂酸鎮 1.5 mg 318.5 mg 藉由混合該等組份並將其填充入硬明膠膠囊（尺寸1)來 製造。 97470.doc -189-

Claims (1)

  1. 200529849 十、申請專利範圍： 或其醫藥學上可接 之|藥組合物的用 一種式I之化合物、或其互變異構體、 受之鹽用於製造治療RET依賴性疾病 途： iCH2)p
    (r4)hTV^( a^a丨 其中G不存在、為低碳數伸烷基或Cyq伸環烧美，且z 為式la之原子團
    或者G不存在且z為式lb之原子團 〇b) r3 A為CH、N或N—〇且A’為N或Ν—Ο，限制條件為八及八，中 不超過一個可為Ν—0 ; η為1或2 ; m為〇、1或2 ; P為0、2或3 ; 97470.doc 200529849 Γ為0至5 ; 若Ρ為0則X為NR，其中R為氫或有 从忒有機部分，或若P為2或 3 ’則X為氮，其連同（Cpj )及 1 2知及以點（中斷）線代表之鍵（包 括其所結合之原子）一起形成一環， 或 X為CHK，其中κ為低碳數烷基或氫，且p為零， 限制條件為：·為零，則以點線代表之鍵不存在； Y為 〇、s 或 ch2 ; Y2 為 〇、s 或 NH ; 限制條件為（Yl)n-(Y2)m不包括 0-0、S-S、ΝΗ-0、NH-S 或S-0基團； Ri R2、化及汉5各自獨立地為氫或無機或有機部分，或 一 /、中任％、兩者共同形成藉由氧原子而結合之低碳數伸 烷基-二氧橋，且該等部分中剩餘之一者為氫或無機或有 機部分； 且R4(若存在，即若r不為零）為無機或有機部分。 士明长員1之.用途，其中該RET依賴性疾病為依賴性 腫瘤疾病。 3 · 士响求員2之用途，其中該RET依賴性腫瘤疾病係選自結 腸癌、肺癌、乳癌、胰腺癌及甲狀腺癌。 4·如明求項3之用途，其中該癌症為甲狀腺癌。 5· 一種比[^(嘧啶-4,基氧基）-笨基]_N、苯基-脲衍生物，其 係遠自由發明說明中所述實例1-67、68-70或71-95之化 合物或其鹽組成之群。 97470.doc 200529849 6. 一種醫藥組合物，其包含N-[4-(嘧啶_4_基氧基）_苯基]_ Ν’ -苯基·脲衍生物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上 可接受之載劑，該衍生物係選自由發明說明中所述實例 U7、68-70或71-95之化合物所組成之群。 7· 種選自由發明說明中所述實例1-67、68-70或71-95之 化合物所組成之群的Ν-[4-(嘧啶_4_基氧基）_苯基]-Ν，-苯 基-脲衍生物或其醫藥學上可接受之鹽，用於動物或人體 之治療，尤其用於蛋白質激酶依賴性疾病之治療。 8·如請求項7之化合物，其中該待治療之蛋白質激酶依賴 性疾病為蛋白質酪胺酸激酶依賴性疾病，尤其為依賴下 列蛋白質酪胺酸激酶中之任一種或多種的增生性疾病： 〇Ab 卜 Bcr-Abl、Flt_3、RET、VEGF韻 / 或 Tek，尤其 Flt-3 〇 9· 一種Ν-[4-(嘧啶-4-基氧基）-苯基]_Ν、苯基_脲衍生物或其 醫藥學上可接受之鹽用於治療蛋白質激酶依賴性疾病之 用返，该衍生物係選自由發明說明中所述實例卜、68 — 70或71-95之化合物所組成之群。 1〇· —種Ν-[4-(嘧啶-4-基氧基）-苯基]_Ν，-苯基_脲衍生物或其 醫藥學上可接受之鹽用於製備用以治療蛋白質激酶依賴 性疾病之醫藥組合物的用途，該衍生物係選自由發明說 明中所述實例1-67、68-70或71_95之化合物所組成之 群。 U.如請求項9或10之用途，其中該蛋白質激酶依賴性疾病 為蛋白質赂胺酸激酶依賴性疾病，尤其為依賴下列蛋白 97470.doc 200529849 貝路胺酸激酶中之任一種或多種之增生性疾病·· C-Abl、 Bcr-Ab卜 Flt-3、RET、VEGF-R及 /或 Tek，尤其 Flt-3。 12. —種治療對於（尤其酪胺酸）蛋白質激酶之抑制有反應的 疾病之方法，其包含向需要該治療之溫血動物，例如人 類，投藥預防性或尤其治療性有效劑量之N-[4-(嘧啶-4-基氧基）-苯基]-Ν’-苯基-脲衍生物或其醫藥學上可接受之 鹽，該衍生物係選自由發明說明中所述實例i-67、68-70 或71-95之化合物所組成之群。 97470.doc 200529849 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式 Α^Α1 iCH2)l (P ,)n J|^Y>(vM5 Υ Ο ΗΝ、〆 Ο) 97470.doc
TW093136547A 2003-11-28 2004-11-26 Diaryl urea derivatives in the treatment of protein kinase dependent diseases TW200529849A (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB0327734A GB0327734D0 (en) 2003-11-28 2003-11-28 Organic compounds
GB0417805A GB0417805D0 (en) 2004-08-10 2004-08-10 Organic compounds

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW200529849A true TW200529849A (en) 2005-09-16

Family

ID=34635447

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW093136547A TW200529849A (en) 2003-11-28 2004-11-26 Diaryl urea derivatives in the treatment of protein kinase dependent diseases

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20080312192A1 (zh)
EP (1) EP1689376A2 (zh)
JP (1) JP2007515400A (zh)
KR (1) KR20060110307A (zh)
AR (1) AR047496A1 (zh)
AU (2) AU2004292773A1 (zh)
BR (1) BRPI0416935A (zh)
CA (1) CA2546673A1 (zh)
PE (1) PE20051046A1 (zh)
RU (1) RU2006122853A (zh)
TW (1) TW200529849A (zh)
WO (1) WO2005051366A2 (zh)

Families Citing this family (77)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2282299T3 (es) 2000-10-20 2007-10-16 EISAI R&D MANAGEMENT CO., LTD. Compuestos aromaticos con anillos de nitrogeno como agentes anticancerigenos.
TWI329105B (en) 2002-02-01 2010-08-21 Rigel Pharmaceuticals Inc 2,4-pyrimidinediamine compounds and their uses
SG176311A1 (en) 2002-07-29 2011-12-29 Rigel Pharmaceuticals Methods of treating or preventing autoimmune diseases with 2,4-pyrimidinediamine compounds
JPWO2004080462A1 (ja) 2003-03-10 2006-06-08 エーザイ株式会社 ｃ−Ｋｉｔキナーゼ阻害剤
CN102358738A (zh) 2003-07-30 2012-02-22 里格尔药品股份有限公司 2,4-嘧啶二胺化合物及其预防和治疗自体免疫疾病的用途
CN100450998C (zh) 2003-11-11 2009-01-14 卫材R&D管理有限公司 脲衍生物的制备方法
TWI359812B (en) 2004-06-17 2012-03-11 Cytokinetics Inc Compounds, compositions and methods
AU2011253934C1 (en) * 2004-06-17 2013-08-22 Cytokinetics, Inc. Substituted urea derivatives for treating cardiac diseases
GB0512324D0 (en) * 2005-06-16 2005-07-27 Novartis Ag Organic compounds
JP4834553B2 (ja) 2004-09-17 2011-12-14 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 医薬組成物
CA2591948C (en) 2005-01-19 2013-11-12 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Prodrugs of 2,4-pyrimidinediamine compounds and their uses
ES2651349T3 (es) 2005-06-08 2018-01-25 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Composiciones y métodos para la inhibición de la ruta JAK
US20070203161A1 (en) 2006-02-24 2007-08-30 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of the jak pathway
JP4989476B2 (ja) 2005-08-02 2012-08-01 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 血管新生阻害物質の効果を検定する方法
TW200808321A (en) * 2005-12-15 2008-02-16 Cytokinetics Inc Certain chemical entities, compositions and methods
JP5178526B2 (ja) 2005-12-19 2013-04-10 サイトキネティクス・インコーポレーテッド 化合物、組成物および方法
WO2007071752A2 (en) 2005-12-21 2007-06-28 Novartis Ag Pyrimidinyl aryl urea derivatives being fgf inhibitors
TW200804349A (en) * 2005-12-23 2008-01-16 Kalypsys Inc Novel substituted pyrimidinyloxy ureas as inhibitors of protein kinases
PL1973545T3 (pl) 2005-12-23 2013-05-31 Ariad Pharma Inc Bicykliczne Związki Heteroarylowe
JP2009528295A (ja) 2006-02-24 2009-08-06 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ｊａｋ経路の阻害のための組成物および方法
GB0605120D0 (en) 2006-03-14 2006-04-26 Novartis Ag Organic Compounds
KR20090018104A (ko) 2006-05-08 2009-02-19 어리어드 파마슈티칼스, 인코포레이티드 아세틸렌계 헤테로아릴 화합물
RU2448708C3 (ru) * 2006-05-18 2017-09-28 Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. Противоопухолевое средство против рака щитовидной железы
WO2008021288A2 (en) * 2006-08-11 2008-02-21 Johns Hopkins University Consensus coding sequences of human breast and colorectal cancers
JP5368096B2 (ja) 2006-08-28 2013-12-18 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 未分化型胃癌に対する抗腫瘍剤
AU2013231117B2 (en) * 2006-12-14 2016-06-02 Janssen Pharmaceutica N.V. Process for the preparation of piperazinyl and diazepanyl benzamide derivatives
ES2351176T3 (es) 2006-12-22 2011-02-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Derivados de pirimidilo como inhibidores de proteína quinasa.
KR101445892B1 (ko) 2007-01-29 2014-09-29 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 미분화형 위암 치료용 조성물
GB0706932D0 (en) * 2007-04-10 2007-05-16 Univ London Pharmacy Ureylene derivatives
JP2010524885A (ja) 2007-04-17 2010-07-22 ノバルティス アーゲー がん治療剤としてのナフタレンカルボン酸アミドのエーテル
FR2921657A1 (fr) * 2007-09-28 2009-04-03 Sanofi Aventis Sa Derives de nicotinamide, leur preparation et leur application en therapeutique
US7989465B2 (en) * 2007-10-19 2011-08-02 Avila Therapeutics, Inc. 4,6-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
US7982036B2 (en) * 2007-10-19 2011-07-19 Avila Therapeutics, Inc. 4,6-disubstitued pyrimidines useful as kinase inhibitors
CA2704000C (en) 2007-11-09 2016-12-13 Eisai R&D Management Co., Ltd. Combination of anti-angiogenic substance and anti-tumor platinum complex
EP2070929A1 (en) 2007-12-11 2009-06-17 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Alkynylaryl compounds and salts thereof, pharmaceutical compositions comprising same, methods of preparing same and uses of same
BRPI0912539A2 (pt) * 2008-05-05 2015-10-13 Amgen Inc composto, composição farmacêutica , método para tratar uma doença, e, uso do composto.
FR2943669B1 (fr) * 2009-03-24 2011-05-06 Sanofi Aventis Derives de nicotinamide,leur preparation et leur application en therapeutique
CN101671301B (zh) * 2009-05-05 2014-02-26 江苏省药物研究所有限公司 杂环取代的二苯脲类衍生物及其用途
AR077468A1 (es) 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
KR102132405B1 (ko) 2010-05-20 2020-07-09 어레이 바이오파마 인크. Trk 키나제 저해제로서의 매크로시클릭 화합물
US9012458B2 (en) 2010-06-25 2015-04-21 Eisai R&D Management Co., Ltd. Antitumor agent using compounds having kinase inhibitory effect in combination
FR2965262A1 (fr) 2010-09-24 2012-03-30 Sanofi Aventis Derives de nicotinamide, leur preparation et leur application en therapeutique
FR2965263A1 (fr) 2010-09-24 2012-03-30 Sanofi Aventis Derives de thienopyridine nicotinamide, leur preparation et leur application en therapeutique
CA2828946C (en) 2011-04-18 2016-06-21 Eisai R&D Management Co., Ltd. Therapeutic agent for tumor
ES2841809T3 (es) 2011-06-03 2021-07-09 Eisai R&D Man Co Ltd Biomarcadores para pronosticar y evaluar el grado de respuesta de sujetos con cáncer de tiroides y de riñón a compuestos de lenvatinib
US8841301B2 (en) 2011-09-26 2014-09-23 Bristol-Myers Squibb Company Selective NR2B antagonists
CN103508961B (zh) * 2012-06-26 2015-07-22 中美冠科生物技术（太仓）有限公司 抗肿瘤药物
CA2815506C (en) 2012-12-12 2018-12-11 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of 3-(imidazo[1,2-b]pyridazin-3-ylethynyl)-4-methyl-n-{4-[(4-methylpiperazin-1-yl)methyl]-3-(trifluoromethyl)phenyl}benzamide mono hydrochloride
MX2015004979A (es) 2012-12-21 2015-07-17 Eisai R&D Man Co Ltd Forma amorfa de derivado de quinolina y metodo para su produccion.
EP2981526B1 (en) 2013-04-02 2021-11-03 Oxular Acquisitions Limited Intermediates useful in the preparation of naphthylurea derivatives useful as kinase inhibitors
AU2014266223B2 (en) 2013-05-14 2020-06-25 Eisai R&D Management Co., Ltd. Biomarkers for predicting and assessing responsiveness of endometrial cancer subjects to lenvatinib compounds
EP3083604A1 (en) * 2013-12-20 2016-10-26 Respivert Limited Urea derivatives useful as kinase inhibitors
ES2926687T3 (es) 2014-08-28 2022-10-27 Eisai R&D Man Co Ltd Derivado de quinolina muy puro y método para su producción
MA40774A (fr) * 2014-10-01 2017-08-08 Respivert Ltd Dérivés de diaryle-urée en tant qu'inhibiteurs de kinase p38
RS64122B1 (sr) 2014-11-16 2023-05-31 Array Biopharma Inc Kristalni oblik (s)-n-(5-((r)-2-(2,5-difluorofenil)-pirolidin-1-il)-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il)-3-hidroksipirolidin-1-karboksamid hidrogensulfata
HUE064614T2 (hu) 2015-02-25 2024-04-28 Eisai R&D Man Co Ltd Eljárás egy kinolin-származék keserû ízének elnyomására
KR102662228B1 (ko) 2015-03-04 2024-05-02 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 암을 치료하기 위한 pd-1 길항제 및 vegfr/fgfr/ret 티로신 키나제 억제제의 조합
AU2016279474B2 (en) 2015-06-16 2021-09-09 Eisai R&D Management Co., Ltd. Anticancer agent
LT3322706T (lt) 2015-07-16 2021-03-10 Array Biopharma, Inc. Pakeistieji pirazolo[1,5-a]piridino junginiai, kaip ret kinazės inhibitoriai
BR112018008357A2 (pt) 2015-10-26 2018-11-27 Array Biopharma Inc mutações de ponto em câncer resistente a inibidor de trk e métodos relacionados às mesmas
AU2017246554B2 (en) 2016-04-04 2022-08-18 Loxo Oncology, Inc. Liquid formulations of (S)-N-(5-((R)-2-(2,5-difluorophenyl)-pyrrolidin-1-yl)-pyrazolo(1,5-a)pyrimidin-3-yl)-3-hydroxypyrrolidine-1-carboxamide
US10045991B2 (en) 2016-04-04 2018-08-14 Loxo Oncology, Inc. Methods of treating pediatric cancers
WO2017176744A1 (en) 2016-04-04 2017-10-12 Loxo Oncology, Inc. Methods of treating pediatric cancers
HRP20230704T1 (hr) 2016-05-18 2023-10-27 Loxo Oncology, Inc. Priprava (s)-n-(5-((r)-2-(2,5-difluorfenil)pirolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il)-3-hidroksipirolidin-1-karboksamida
JOP20190077A1 (ar) 2016-10-10 2019-04-09 Array Biopharma Inc مركبات بيرازولو [1، 5-a]بيريدين بها استبدال كمثبطات كيناز ret
TWI704148B (zh) 2016-10-10 2020-09-11 美商亞雷生物製藥股份有限公司 作為ｒｅｔ激酶抑制劑之經取代吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
JOP20190092A1 (ar) 2016-10-26 2019-04-25 Array Biopharma Inc عملية لتحضير مركبات بيرازولو[1، 5-a]بيريميدين وأملاح منها
WO2018136663A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Array Biopharma, Inc. Ret inhibitors
CA3049136C (en) 2017-01-18 2022-06-14 Array Biopharma Inc. Substituted pyrazolo[1,5-a]pyrazine compounds as ret kinase inhibitors
JOP20190213A1 (ar) 2017-03-16 2019-09-16 Array Biopharma Inc مركبات حلقية ضخمة كمثبطات لكيناز ros1
TW202410896A (zh) 2017-10-10 2024-03-16 美商絡速藥業公司 6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈之調配物
TWI791053B (zh) 2017-10-10 2023-02-01 美商亞雷生物製藥股份有限公司 6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈之結晶形式及其醫藥組合物
EP3730483B1 (en) * 2017-12-21 2023-08-30 Hefei Institutes of Physical Science, Chinese Academy of Sciences Class of pyrimidine derivative kinase inhibitors
US11524963B2 (en) 2018-01-18 2022-12-13 Array Biopharma Inc. Substituted pyrazolo[3,4-d]pyrimidines as RET kinase inhibitors
JP6997876B2 (ja) 2018-01-18 2022-02-04 アレイ バイオファーマ インコーポレイテッド Ｒｅｔキナーゼ阻害剤としての置換ピラゾリル［４，３－ｃ］ピリジン化合物
JP7060694B2 (ja) 2018-01-18 2022-04-26 アレイ バイオファーマ インコーポレイテッド Ｒｅｔキナーゼ阻害剤としての置換ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン化合物
US11964988B2 (en) 2018-09-10 2024-04-23 Array Biopharma Inc. Fused heterocyclic compounds as RET kinase inhibitors

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU594098B2 (en) * 1985-12-11 1990-03-01 Ishihara Sangyo Kaisha Ltd. N-benzoyl urea compounds, antitumorous compositions containing them, and process for their preparation
DE1042305T1 (de) * 1997-12-22 2001-04-19 Bayer Ag HEMMUNG DER p38 KINASE UNTER VERWENDUNG VON SYMMETRISCHEN UND ASYMMETRISCHEN DIPHENYLHARNSTOFFEN
US7928239B2 (en) * 1999-01-13 2011-04-19 Bayer Healthcare Llc Inhibition of RAF kinase using quinolyl, isoquinolyl or pyridyl ureas
EP1140840B1 (en) * 1999-01-13 2006-03-22 Bayer Pharmaceuticals Corp. -g(v)-carboxyaryl substituted diphenyl ureas as raf kinase inhibitors
ES2282299T3 (es) * 2000-10-20 2007-10-16 EISAI R&D MANAGEMENT CO., LTD. Compuestos aromaticos con anillos de nitrogeno como agentes anticancerigenos.
JP2005531488A (ja) * 2001-10-09 2005-10-20 ザ・ユニバーシティ・オブ・シンシナティ 甲状腺癌を処置するためのｅｇｆ受容体阻害剤
AU2003209116A1 (en) * 2002-02-11 2003-09-04 Bayer Pharmaceuticals Corporation Aryl ureas with angiogenesis inhibiting activity
TW200406374A (en) * 2002-05-29 2004-05-01 Novartis Ag Diaryl urea derivatives useful for the treatment of protein kinase dependent diseases
PT1636585E (pt) * 2003-05-20 2008-03-27 Bayer Pharmaceuticals Corp Diarilureias com actividade inibidora de cinase
JP4777887B2 (ja) * 2003-07-23 2011-09-21 バイエル、ファーマシューテイカルズ、コーポレイション 病気および状態の処置および防止のためのフロロ置換オメガカルボキシアリールジフェニル尿素

Also Published As

Publication number Publication date
CA2546673A1 (en) 2005-06-09
JP2007515400A (ja) 2007-06-14
BRPI0416935A (pt) 2007-01-16
WO2005051366A3 (en) 2007-12-21
AU2009203096A1 (en) 2009-08-20
US20080312192A1 (en) 2008-12-18
EP1689376A2 (en) 2006-08-16
WO2005051366A2 (en) 2005-06-09
KR20060110307A (ko) 2006-10-24
AU2004292773A1 (en) 2005-06-09
AR047496A1 (es) 2006-01-25
PE20051046A1 (es) 2006-01-11
RU2006122853A (ru) 2008-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TW200529849A (en) Diaryl urea derivatives in the treatment of protein kinase dependent diseases
KR101036394B1 (ko) 단백질 키나아제 의존성 질환 치료에 유용한 디아릴우레아 유도체
US11905299B2 (en) Cot modulators and methods of use thereof
JP5153645B2 (ja) Ｆｇｆ阻害剤であるピリミジニルアリールウレア誘導体
CA2921410C (en) Quinazoline derivatives, compositions and their use as kinase inhibitors
JP6666263B2 (ja) グルタミナーゼの新規阻害剤
EP2091918B1 (en) Compounds and compositions as protein kinase inhibitors
EP2311807B1 (en) Compounds and composition as protein kinase inhibitors
JP2018520096A (ja) Ｅｂｎａ１阻害剤およびその使用方法
CN101291917A (zh) 治疗蛋白激酶依赖性疾病的二芳基脲衍生物
MXPA06006036A (en) Diaryl urea derivatives in the treatment of protein kinase dependent diseases
CN102317268A (zh) 作为激酶抑制剂的2-联苯基氨基-4-氨基嘧啶衍生物
JP2010031001A (ja) 複素環化合物、その製造法および用途