TW200300676A

TW200300676A - Biotin intermediate and its production

Info

Publication number: TW200300676A
Application number: TW091135009A
Authority: TW
Inventors: Masahiko Seki; Toshiaki Shimizu; Shin-Ichi Yoshida; Masanori Hatsuda
Original assignee: Tanabe Seiyaku Co
Priority date: 2001-12-04
Filing date: 2002-12-03
Publication date: 2003-06-16
Also published as: KR100589550B1; EP2098528A2; US7335778B2; ES2330624T3; CN1564813A; JPWO2003048131A1; EP1462444B1; ATE443050T1; US20050038260A1; IL162002A0; US20080119655A1; KR20060029197A; TWI310311B; WO2003048131A1; US7799929B2; KR100592016B1; EP1462444A4; EP1462444A1; EP2098528A3; JP4046693B2

Description

200300676 A7 五、發明說明（1 ) 【發明所屬之技術領域】本發明係有關生物夸人上、，物索合成千間體及其製法及使用該中間體之生物素製法。【先前技·術】生物素係為可作為飼料添加物、醫藥品使用之維生素’其製法己知有例如使用下述式

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝經濟部智慧財產局員工消費合作社印製所丁之塞刀並米唾化合物作為合成中間體之製法（化學. 檢討（ChemicalReviews)，97 卷，6 號，口^”頁 ^”年特公昭49-3255 1號、特公昭53_27279號、特公平3_663 1 號、特公平5-9064號）等。但疋，§亥等公知之製法有該製造步驟長且該中途步| 需要煩雜之光學離析之缺點。本發明之目的係為提供於工業上有利於生物素製法c 【發明内容】本發明人等為了解決課題，經過不斷地深入研究之矣果發現於製造生物素，經由將化合物⑴及化合物（ΙΠ)或二 (咪唑烷基甲基）二硫化物化合物（IV)作為合成中間體之製法可製造便宜之上述噻吩並味唑化合物，在工業上為優走之製法，因而完成本發明。亦即，本發明係有關通式G) 3J4235 . .線· (I200300676 Α7 Β7 五、發明說明（2 0

SH (式中，R1及R2可為相同或不同之氫原子、於苯環上可具有取代基之节基、於苯環上，可具有取代基之二苯甲基或於苯環上可具有取代基之三苯曱基，R3為氰基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基羰基或可具有取代基之胺基曱醯基）所示化合物或其鹽之製法，其特徵為將通式（n-a)

a) (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽進行環轉化。又，本發明係有關通式 ο -------------^----------------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} I濟部智慧財產局員工消費合作社印製 r1、人』2

(式中，符號與上述者同意義）所示化合物之製法，其牯、城為、、生由上述方法製造通式（I) 本紙張尺度適用(cns)a4 297公釐） 2 314235 200300676 A7 五、發明說明（3 0 R1\人识2

(I) SH (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽，必Iv I日可進行水解，製造通式（I-a) Ο

rS\r2Cc〇2H a. (式中’付號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽，接荖恢者，將所獲得之化合物（I_a)進行環化及表異構化。本發明係有關通式（IV)

Rl、人 iv) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中，符號與上述者同意義）所7Γ化合物之製法，其特徵為將通式（Η)

II (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

X 297公釐） 314235 A7 五、發明說明（4 ) 一（式中，付號與上述者同意義）所不之化合物或其鹽進行環轉化及環化本發明係有關通式（111)

0 (式中，符號與上述者同意義）所示化合物之製法，其特徵為經由 0 上述方法將通式（IV-a: r1、又〆2 I V — a 一（式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽還原，必要時進行水解，製造通式（1_ -------------^--------^---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

I 一 a: (式中，符號與上述者同竟義 :=Γ物物，接著，將所獲得之化合物㈣壞化及表異構化。本發明係有關通式（III) 木紙張尺度侧中S财標準（CNS)A4規格⑵0 X 297公釐） 4 314235 200300676 A7 五、發明說明（ rWr2

〇

I i I (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物之製法，其特徵為將通式（II_b) 0. R1

R2 (I I - b) (式中，R31為缓基、烷氧基幾基、烧硫基幾基或可具有取代基之胺基甲料，其他符號與i述者同意義）所示之化合物或其鹽進行環轉化及環化。本發明係有關通式（6_a：)

VrRl S\^v>NHR2 CN (6-a) (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 裝訂· ，線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中，符號與上述者同意義）所示化合物或其鹽之製法，其特徵為將通式（5_a)

R1 CHO (5-a) (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽與通式（7) “氏張尺巧用 297公釐） 314235 5 200300676 A7 五、發明說明（6 R2- NH, ⑺ (式中，符號與上述者同意義）所不之化合物及氰化化合物進行反應本發明係有關通式（6_a) .R1 ^NHR2 CN (式中，符號與上述者同意義）所不化合物或其鹽之製法，其特徵為將

(6_a) 通式（4-a) bin (4-a) 一（式中，符號與上述者同意義）所不之化合物或其鹽氧化，製造通式（5-a)

%， CHO (5-a) -------------裝-------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經了濟部智財產局員工消費合作社印製 (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽，接著，將所獲得之化合物（5 通式（7) R2- NH^ ⑺ (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物及氰化化合物進行反應 t發明係有關通式nm

6 314235 III200300676 A7 五、發明說明（7 Ό (式中，符號與上述者同意義）所示化口物之製法’其特徵為經由上述之方法製造通 (6-a) ^ (6-a)

VrRl S\^v>NHR1 2

CN (式中，符號與上述者同意義）訂所不之化合物或其鹽，將所獲得之化合物造通式（II-c)

Q (I I -c)r conh2 一（式中，符號與上述者同意義）斤制化口物’接著’將戶斤獲得之化合物（II-c)進、R2 線

經 5 I化，製造通式（I-b) 智慧財產局丨 R 員1 R 行環轉〇 297公釐） 7 1 一 b) 2

SH (式中’付號與上述者同意義）本紙張尺㈣(eNs)A4 314235 200300676 B7 A7 五、f明說明（8 ) 所不之化合物或苴_ 造通式飞/、孤再將所獲得之化合物（Ι-b)水解，製 (式中，

R、叉π Τ—{(丨-a) (SH C〇2H 符號與上述者同意義）戶示之化合物或盆 — ^ ^ ^ 八孤接者，將所獲得之化合物（I-a)進行裱化及表異構化。；琨仃本發明係有關通式（VII) 0 HN人別

(VII)

、C02H 所示之化合物之製法，其特 (III) 徵為經由上述方法製造通式 ^--------訂--------- (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

0 R\K^2

(I (式中，符號與上述者同意義）所不之化合物’接著，將所獲得之化合物（III)與通式（V) XJZn- (CH2)4R4 (V) (式中’ χ】為鹵素原子，R4為酯化之羧基或醯胺化之本紙張尺度3用家標準疋NS)A4規格 314235 Β7 2UUJUU0/6 五、發明說明（9 羧基） ’ 所示之化合物推—c虚進仃反應，獲得通式（VI)

(VI) (式中，付號與上述者同意義）所示之化合物或1趟必要時進行水角/、：將所獲得之化合物(VI)還原午，更必要時將R1及/或R2轉化為氫原子 S月係有關通式（IV ) --------------裝— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Ryv2 IV) 一（式中，符號與上述者同意義） ^ ΟΛ|Λ m # χ 兀土甲土）一硫化物化合物或其鹽。本發明係有關通式（IX) a^T· •線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 R~ X- γ (IX) 一（式中’ X為辞或鎂，γ為碘原子、溴原子或氯原子斤厂、化口物之製法，其特徵為將通式（VH工）

R- I (VIII) 一」式中，尺為可具有取代基之烷基、可具有取代基之裒基可具有取代基之鏈烯基、含有1至4個選自氮子氧原子及硫原子等雜原子之雜環基（該雜環基亦可具本紙張尺度適(CNS)A4—⑵Q x 9 314235 200300676 A7

五、發明說明（]〇 ) 有取代基）或可具有取代基之芳基）所示之化合物與經氯原子、漠原子之鋅或鎂進行反應。本發明係有關通式（IX)R- X- Y (式中，符號與上述者同意義）所示化合物之製法，其特徵為將通式（VIII) R- I (式中，R與上述者同意義）所示之化合物在通式（X)Μ- Y 氯化氫或溴化氫處理 (IX) (VIII) (X) 經濟部智慧財產局員工消 f 合作社印製一(式中’ Μ為金屬原子，丫與上述者同意義）所不之鹽存在下與鋅或鎂進行反應。【實施方式】、本，明所使用或所獲得之化合物⑴可由將化合物（π a)進行環轉化製造。本反應可不存在氧之下，例如在氮_ 或風等氣流下實施。本反應可在適當之溶劑中或無溶劑實施。溶劑只要對反應無不良影響之溶劑即可，f適當使用N’N-一甲基曱醯胺、三曱亞楓、Ν，Ν·二甲基匕酿胺 Ν-甲基-2’略烷a同或該等之混合溶劑。本反應在代至 2〇〇C，尤其在8(Γ(：至10代進行最為適合。本發明所使用或所獲得之化合物⑴、化合物（Μ)、化合物(I-a’)、化合物(I_b) '化合物⑼、化合物⑴，”々合物（II-a)、化合物（II-b)、化合物（n-c)、化合物（III)、4 -------------^--------t---------^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙i尺度適用中國B標準（CNS)A4 g格⑵剛公爱 10 314235 200300676 A7 五、發明說明（1】) 合物（ΙΠ-a)、化合物（IV)、化合物（IV_a)、化合物㈣、化 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 合物（6)及化合物（“）之RlA R2、本發明所使用或所獲得之化合物⑺、化合物⑷、化合物（4_a)、化合物⑺及化八物（5-a)之W及化合物（7)之r2中节基之苯環上之取代基可選自如鹵素原+、烷基及烷氧基之基，二苯甲基之‘環上之取代基可選自相同或不同之函素原子、烧基⑽氧= 之基，三苯甲基之苯環上之取代基可選自相同或不同之齒素原子、烷基及烷氧基之基。上述之节基、二苯甲基或三苯甲基中於各苯環上亦可具有1至3個相同或不同之上述取代基。本發明所使用或所獲得之化合物（1)、化合物（π)、化合物（Π-a)、化合物（IV)及化合物（IV_a)i R3及化合物⑴一 b)之R31中，胺基甲醯基之取代基可列舉丨或2個相同或不同之烷基。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本赍明所使用或所獲得之化合物（〗）、化合物（〗_&)、化合物（I-a，）、化合物（I_b)、化合物（π)、化合物（lr)、化合物（n-a)、化合物（n-b)、化合物（II_c)、化合物（m)、化合物（III-a)、化合物（IV)、化合物（IV-a)、化合物（VI)、化合物（6)及化合物（6-a)以r】&r2共同為苄基、二苯甲基或三苯曱基之化合物較理想。其中又以R1及R2共同為苄基之化合物更理想。化合物、化合物、化合物（11_幻、化合物（IV)及化合物（IV-a)以R3為羧基、烷氧基羰基或胺基曱酸基之化合物為理想。本發明所使用或所獲得之化合物（IV)可由將化合物（π) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） 314235 200300676 A7 五、發明說明（】2 , 在驗存在下進行環轉化製造。驗可使用碳酸鹼金屬（碳酸鈉、碳酸鉀等）、碳酸氫驗金屬（¾酸氫鈉等）、有機酸驗金屬鹽（乙酸鈉等）、氫氧化 i双金屬（氫氧化鈉、氫氧化鉀等）、氫化鹼金屬（氫化鈉等）、鹼金屬醯胺（胺基化鈉、胺基化鋰等）、鹼金屬醇鹽（甲醇鈉等）、磷酸鹼金屬、鹼金屬（鈉等）或有機鹼（三乙胺、二異丙基乙胺、嗎啉、N-甲基嗎啉、吡啶、六氫吡啶、二甲基苯胺、二甲胺基吼咬等）。&中又以碳酸氫鈉、乙酸鈉更理想。對於化合物（11)之鹼使用量以0· 1莫耳當量至1〇〇莫耳當量，尤以1莫耳當量至3莫耳當量為佳。本反應可在適當之溶劑中或在無溶劑下實施。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可適當地使用队…二甲基甲醯胺、二甲亞楓、N，N•二甲基乙驢胺、n•甲基吼咯烷或該等之混合溶劑。本反應在〇<t至2〇〇它，尤其在 80C至100C進行最為適合。本發明所使用之化合物（IV)有基於不對稱碳之光學異構體存在，可為消旋體、光學異構體之任何一種，由=在光學上只有活性（+ )-生物素在生物學上具有活性，可有效率地導入（ + )-生物素，以在咪唑啉烷環之5位（―— 之結合位置）為R配置之光學活化劑為理想。本發明所使用或所獲得之化合物（Ιν)α以】及y共為节基、二苯甲基或三苯甲基’ R4為烷氧基幾基或烷、基胺基曱醯基之化合物為理想。其中又以R1及r2共同為苄本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公爱 314235 IIIIIII1III1I — · 11 - (請先閱讀背面之注音W事項再填寫本頁) 訂· 12 200300676 A7 _________ B7 五、發明說明（13 ) 基、二苯甲基或三苯甲基，R4為烷氧基羰基之化合物更理想。化合物（II)及化合物（π-a)可根據日本化學學會公報 (Bulletin of Chemical Society of japan)，37 卷，2 號，242-244 頁，1 964 年，分析化學（Analytical Biochemistry)，1 38 卷，449-450 頁，1984 年，雜環族化合物（heterocycies)，18 卷，259-2 63頁，1 982年等所揭示之公知製法或以該等公知製法為基準之製法製造’例如可以如下所述之方法製造。

NH 0,

C02H

(2) co2h R1 -< °>^Rl ⑴ co2h (3) V^Rl s\A^〇h

Q sU：

CHO (4) (5) R2—NH:⑺

Q .R1

S

H CN (6)

S

H N、 32 R2 R (ΙΓ) ------— — — — — — — · I---— II 訂 — — — — — — —-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製式中’ X為鹵素原子，R。2為魏基或胺基甲酸基，其他符號與上述者同意義由化合物（1)與氣甲酸苯酯（或氯甲酸烷基酯）製造化合物（2)之步驟可在驗存在下，在溶劑中或無溶劑中實施。可適當地使用氫氧化鹼金屬、碳酸鹼金屬、碳酸氫鹼金屬、鹼金屬醇鹽、有機鹼之鹼等。溶劑只要對反應無不良反應本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公t ) 13 314235 200300676 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 14' A7 五、發明說明（Μ ) 之溶劑即可，可列舉甲笨、茇、_ " ^ 本一甲本、四氫咲喃、1，4- 二嗔烧、二乙基乙醚、二氣甲燒、水等。本反應在_3〇〇c 至120°C，尤其在20ts 5〇t：進行最為適合。化合物（3)中R】具有氫原子以外之取代基之化合物可由心化口物（2)與R1- X2(r!之氯化物、漠化物等）在驗及 -甲亞楓等高極性溶劑存在下，在溶劑中或無溶劑中進行反應製造。可適當地使用氫氧化鹼金屬、碳酸鹼金屬、碳酸氫鹼金屬、鹼金屬醇鹽、有機鹼等之鹼。溶劑只要對反應播不良反應之溶劑即可，可列舉水、N，N_二曱基甲驢月女、N，N-一曱基乙醯胺、N-甲基-2-β比嘻烧g同、曱醇等。本反應在-2(TC至120。(：，尤其在15t;至4〇r進行最為適合。化合物（4)可由將化合物（3)在還原劑及酸或烷基化劑存在下，在溶劑中或無溶劑中進行反應製造。可適當地使用侧氣化鈉、石朋氫化經、氫化銘經、紅—紹（氫化雙（2 _甲氧基乙氧基）铭鈉）、乙石朋;)：完、棚、j：完曱基硫醇配位化合物等之還原劑。可適當地使用硫酸、氯化氫、路易士酸（三曱基矽烷氯、碘、氯、硼烷三氟醚配位化合物等）等之酸。可適當地使用二曱基硫酸、曱基碘、节基_化物等之烷基化劑。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉四氫呋喃、乙醇等。本反應在-3 0°C至120°C，尤其在〇。(：至 40°C進行最為適合。化合物（5)可由將化合物（4)在氧化劑存在下，在溶劑中或無溶劑中進行反應製造。可適當地使用（1)由二曱亞本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 314235 — — — — «— — 1— I -------— - ---— II (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 200300676 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 ----------B7__ 五、發明說明（〗5 ) 楓、三氧化硫吡啶錯鹽及胺（二異丙基乙胺、三乙胺等）組成者、（2)由二曱亞碉、草醯氯及胺（二異丙基乙胺、三乙胺等）組成者、（3)由二甲亞碾、氯及胺（二異丙基乙胺、三乙胺等）組成者、（4)次亞氯酸鹼、碳酸氫鈉、溴化鈉及4_ 經基四甲基六氫吡啶氧化物或該衍生物（4-胺基四曱基六氯吼咬氧化物、4·羧基四曱基六氫吡啶氧化物、扣氰基四曱基六氫吡啶氧化物等）組成者、（5)鉻酸及該鹽、（6)金屬催化劑（翻、鈀等）及氧、（7)過酸及過氧化物或（8)二曱亞楓、DCC(二環己基碳化二亞胺）、鹼（哏啶等）、酸（三氟乙酉文喊酸荨）（皮金格一莫法迪氧化劑。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉一甲亞碉、二氯曱烷、水、苯、曱苯等。本反應在_78亡至l〇〇°C，尤其在-78。(：至25°C進行最為適合。又，化合物（5)之製造亦可由將化合物（3)之羧基用亞硫醯氯、草醯氯等鹵素化後用金屬催化劑（鉑、鈀等）及气原子進行催化還原，可不經由化合物（4)。化合物（6)可在溶劑中或無溶劑中實施將化合物（5)與 R2—NH2進行反應之步驟及與氰化化合物進行反應之步驟製造。化合物（5)與R2 —NH2之反應較好在脫水劑（分^篩 4A、硫酸鎂、硫酸鈉等）存在下經由與氰化化合物進行反币應實施。氰化化合物可使用通常進行氰化時所使用之T化合物，可例舉如氫氰酸、氰化鹼金屬或有機氰化物等，其；又以使用氰化鹼金屬較理想。氰化鹼金屬化合物可列舉一化鋰、氰化鈉、氰化鉀等，有機氰化物可列牛氰一甲基矽烷本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 χ 297公釐） 3]4235 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁}

A 15 200300676 A7 五、發明說明（]6 ) 氰化物、三丁基錫氰化物、二甲基鋁氰化物、目乙基銨氰化物等。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉二氯甲烧、甲苯、乙腈、丙酮、乙酸乙醋、二乙基…四氣咲喃、^二口惡烧等。化合物（5)與R2-NH〆反應在_50 °〇至100°c ’尤其在代至2〇°C進行最為適合。又，與氰化化合物進行反應之步驟在_78。〇至1〇〇t，尤其在_2〇1 至20 °C進行最為適合。訂化口物（II )可使用化合物⑷，、經由如下所述之方法製造。R3為缓基之化合物（11)及R3I^基之化合物⑴_a)可將化合物（6)在酸或驗存在下，在溶劑中或無溶劑中進行反應製造。可適當地使用硫酸、鹽酸等之酸。可適當地使用氛氧化驗金屬、驗金屬醇鹽等之驗。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉二氯曱烷、水、四氫呋喃、線乙醇等。本反應在-30。(：至2〇〇它，尤其在〇。〇至1〇〇艽進行最為適合。鐵濟部智慧財產局員工湞費合作社印製 R3為胺基甲醯基之化合物（11)及為胺基曱酸基之化合物（Π-a)可將化合物（6)在酸存在下，在溶劑中或無溶劑中進行反應，再用鹼中和製造。可適當地使用過氧化氫、鹽酸、硫酸、磷酸、甲磺酸等之酸。可適當地使用氨、一曱月女、一曱月女、氫氧化納、碳酸氫納、碳酸納、氫氧化針、碳酸氫鉀、碳酸鉀、磷酸鉀、磷酸氫二鉀等之鹼。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉曱苯、二氯曱烧、四氫咲痛、Ν，Ν·二甲基曱醯胺、二甲亞楓、丨，心二噁烷、本紙張尺度過用τ國國豕ί示準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） 16 314235 200300676 A7 b/ 五、發明說明（17 ) 甲基乙基曱酮、丙酮、氯仿、1，2-二氣乙烷、二曱苯、三曱基苯、第三-丁基曱基乙醚等。本反應在〇°c至1〇0。〇，尤其在30°C至50°C進行最為適合。上述反應中以酸為過氧化氫水，驗為碳酸钟，溶劑為二甲亞楓之組合較理想。本發明所使用之化合物（1)、化合物（2)、化合物（3)、化合物（4)、化合物（5)、化合物（6)及化合物（11，）有基於不對稱妷之光學異構體存在，可為消旋體、光學異構體之任何種，由於在光學上只有活性（ + )_生物素在生物學上具有活性，經由本發明之方法可有效率地導入（+ )_生物素較好為以下之各光學活化劑。又，化合物（ΙΓ-a)之R3]、為羧基之化合物為化合物（n_c)。 … 2嗜先閱讀背*<>!*事項再填寫本頁) 裝 Ί^τ·

NH

co2h (1-a) Q

V-NH I』、 C02H 經濟部智慧財產局員工湞費合作社印製 (4-a)

(2-a) S\^k^〇H

(ir-a) (式中，符號與上述者同意義） --線· 本紙張尺度—適用 χ 297公釐 3Η235 17 200300676 A7 B7 五、發明說明（18 ) 又，化合物（4)可根據雜環族化合物（heter〇cycles)，18 卷，259_263頁，1982年等所揭示之公知製法或以該等公知製法為基準之製法製造，例如可以如下所述之方法製造。

NHhs^A co2h

(1) Rx-X + (CCI30)2C0 ^ C.HsOH, s〇g2 yMM Sn^co2c2h5 (11)

Vn^r1s\A^〇h (4)

M濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中，符號與上述者同意義）化合物（11)可由將半胱胺酸與三光氣（或光氣、氣甲酉文笨S曰、氯甲酸：!：完基酯等）在鹼（氫氧化鹼金屬、碳酸驗金屬、碳酸氫驗金屬等）存在下，在溶劑中或無溶劑中進行反應，再在乙醇與活化劑（亞硫醯氯、硫酸、氯化氫、草酉进氯等）存在下進行反應製造。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉水、丨，‘二噁烷、四氫呋喃、二乙基乙醚等。本反應在-2(rc至1〇〇〇C，尤其在〇〇c至4〇〇c 進行最為適合。化合物（1 2)中R1具有氫原子以外之取代基之化合物可將化合物（11)與Ri 一 X2(Ri之氣化物、溴化物等）在鹼存在下，在溶劑中或無溶劑中進行反應製造。可適當地使用碳酸鹼金屬、氫鹼金屬、鹼金屬醯胺等之鹼。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉N，N•二甲基甲醯胺、丙酮、乙腈、四氫呋喃等。本反應在-201至l〇〇°C，尤本紙張尺度適用家標準（CI^)A4規格⑵G X 297公 18 314235 -----1 — ^-----1--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 200300676 A7 B7 五、發明說明（19 ) 其在15°C至35C進行最為適合。化合物（4)可將化合物（12)在還原劑存在下，在溶劑中或無/谷劑中進行反應製造。可適當地使用棚氫化鈉、石朋氫化鋰、氫化鋁鋰、紅一鋁（Red-A1)、二異丁基氫化鋁 (DIB AL)、棚鼠化飼、侧氣化辞之還原劑。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉乙醇、甲醇、水、二乙基乙醚、四氫呋喃、1，4-二噁烷等。本反應在-78°c至5〇 C ’尤其在- 20C至20C進行最為適合。化合物（5)可根據美國化學協會期刊 (J.Am_Chem_Soc.,)112 卷，7050-7051 頁，1990 年等所揭示之公知製法或以該等製法為基準之製法製造，例如可以如下所述之方法製造。

Vf1 — VRl Sn^C02H Sn-^C( COSC2H5

Vn^r1 Sn^CHO (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝訂： (3) (13) (5) --線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 19 (式中，符號與上述者同意義）化合物（1 3)可將化合物（3)及乙烷硫醇在活化劑存在下，在溶劑中或無溶劑中進行反應製造。可適當地使用二環己基碳化二亞胺（DCC)、EDC · HCl(143-(二甲胺基）丙基]-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽）、氯碳酸酯類、三聚異氰酉氯、羰基二咪唑（CDI)等之活化劑。本反應中若添加丨，4_ 一甲fe基吼°疋（DMAP)則可使反應迅速進行，較理想。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉乙腈、丙酮 314235 200300676 A7 ____________B7_________ 五、發明說明（2G ) 四氫呋喃、苯、甲苯等。本反應在乃0C至10(TC，尤其在〇C至20C進行最為適合。化合物（5)可將化合物（13)在還原劑存在下，在溶劑中 — 或無溶劑中進行反應製造。可適當地使用三乙基矽烷、三 • 氯石夕纟完、三苯矽烷等矽烷類等之還原劑。可適當地使用氫氧化把、鈀碳、鈀黑等鈀催化劑等之催化劑。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉三氯甲烷、丙酮、四氫卩夫喃等。本反應在-20°C至1 00°C，尤其在〇。〇至2(TC 進行最為適合。而且’最終目的物之生物素可經由將化合物（1)或化合物（Π-a)轉化為化合物（111)，接著，根據特開平8_23 1 553 號、特開2000-:19 1 665號、化學.檢討似咖㈤Reviews),97 卷，6號，1755-1 792頁，1997年等所揭示之公知製法或以該等公知製法為基準之製法製造，例如可以如下所述之方法製造。 --------------^--------^---------^ (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 鍾濟部智慧財產局員工消費合作社印製

20 314235 200300676 21 五、發明說明（

〇r^mA

r1、m 又 Μ-R2 SH ⑴

0

(III)

--------------裝 i· {請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) ;線_ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (VII) (式中’X1為鹵素原子鈐其甘从μ ，R為酯化之緩基或酿胺化^ 羧基，其他符號與上述者同音義）化合物（I)中R3為氰基玟乳基叛基、烷硫基羰基或可具有取代基之胺基甲隨基時，R3轉化為竣基（化合物^ a)):根據常法，例如泉屋信夫他著作之「肽合成之基礎及貫驗」（丸善（股）公司出版1 985年）或格林等（Greene)毒作之有機合成之保邊群」（Protective Groups in Organi 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 21 314235 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中^^TCNS)A4規:297公[ 22 200300676 五、發明說明（22 ,

Synthesis)」第2版（約輪·威立及山姆（J〇hn· WiUy· and ·

Sames)公司出版1991年）所揭示之方法或以該方法為基準之方法經由水解實施。具體而言，例如使用氫氧化鹼金屬、鹼金屬醇鹽等之鹼、無機酸（鹽酸、硫酸等）之酸經由水解可轉化為羧基。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉乙酸、水、乙醇、四氫咲喃、二氣甲院等。本水解反應在〇°C至200。(：，尤其在“它至8〇χ：進行最為適合。化合物（in)之製造可由將化合物（π-1))在氧不存在下例如在氮氣或氬等氣流下，在溶劑中或無溶劑下進行環轉化或環化，或是將化合物（I-a)或化合物（1¥^)在溶劑中或無溶劑下進行環化及表異構化。化合物（ΙΙ-b)之環轉化及環化步驟中所使用之溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉N，N-二甲基甲醯，、二甲亞楓、N，N-二甲基乙酸胺、N•甲基烷 _等。本反應在（TCS 2G()t:，尤其在贼至⑽。C進行隶為適合。本發明中化合物（I_a)或化合物（IV_a)之環化及表異構化包含從進行環化之表異構化步驟（經由化合物叫a)之 V知）及《進仃表異構化之環化步驟（經由化合物（H)之步驟）之任何一種步驟。 2 σ物(1-勾或化合物(IV_a)之環化步驟可在活化劑存在下實施製造。活化劑較好使用二環己基碳化二亞胺 ()EDC Ηα、二聚象酸氯。又，環化步驟必要時可在下述表異構化步驟所使用之驗存在下實施。表異構化 314235 --------------裝--------訂·--------線 (請先閱讀背面之注音W事項再填寫本頁) 200300676 A7 — B7 ------- 五、發明說明（23 ) 步驟更好在鹼存在下或不用添加物，σ 切 /、進仃加熱貫施。驗較好使用吡啶、DBU(1，8-二氮雜雙環[5 4 〇]十一烷基）、三乙胺等有機驗。又’表異構化步驟必要時可在酸（對_甲笨項酸、氣化氫等）存在下實施。環化及表異構化步驟所使用之溶劑只I對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉吡啶、甲苯、四氫呋喃、丙酮、乙腈、乙醇等。本反應在-20。(：至12(rc，尤其在^^至7〇 °c進行最為適合。化合物（VI)可由將化合物（111)及化合物（v)在催化劑存在下，在溶劑中或無溶劑中進行反應後經由水解製造。催化劑較好使用氫氧化把、把碳、氧化把、把黑、四三笨膦鈀、二氣雙二苯膦鈀等。水解反應可在水或酸（對-曱笨石頁酸、鹽酸、硫酸等）存在下實施。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉四氫呋喃、N,N_二曱基甲醯胺、甲苯等。本反應在-2(TC至20(rc，尤其在3(rc至5〇 °c進行最為適合。生物素（VII)之製造可由將化合物（VI)在溶劑中或無溶劑中還原後進行水解，化合物（VI)之R1及/或R2為氫原子以外之基時，經由將該R1及/或R2轉化為氫原子（保護基之脫保護反應）。還原反應較好在例如氫氧化把、纪碳、把黑、氣化纪、乙酸把、氧化把等催化劑存在下經由加氫實施。水解反應更好使用例如氫氧化鈉等驗實施。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可’可列舉甲醇、乙醇、四氫咲喃、水或該 --------------裳— (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁} Ί^τ· -線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公餐） 23 314235 200300676 A7 五、發明說明（24 ) 等之混合溶劑等。本反應在ot至200°C，尤其在50°C至 80 °C進行最為適合。 (請先閱讀背面之注音事項再填寫本頁) 化合物（VI)之Ri及/或R2為氫原子以外之基時，該R〗及/或R2轉化為氫原子之步驟（保護基之脫保護反應）可經由常法，根據格林等（Greene)著作之「有機合成之保護群」 (Protective Groups in Organic Synthesis)」第 2 版（約翰· 威立及山姆（John· Willy · and· Sames)公司出版1991年）所揭示之方法或以該方法為基準之方法進行。具體例較好用氫溴酸等鹵化氫酸處理或用三曱基苯及酸（曱磺酸、硫酸、乙酸等）處理實施。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可列舉水、苯、曱苯、二氯甲少完等。本反應在〇它至200°C，尤其在80它至1〇〇它進行最為適合。製造化合物（IX)之方法揭示於格利雅試劑手冊 (Handbook of Grignard Reagents)53 至 77 頁、1996 年，有機鋅之有機合成（〇rganozinc Reagents in 〇fganie

Synethesis)、18 至 67 頁、1996 年。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本發明與該等文獻所揭示之方法比較，可更有效率地製造化合物（IX)。化合物（IX)可由將辞或鎂懸濁於溶劑中，加入氯、溴、氯化氫或溴化氫後與化合物（VIII)進行反應製造。溶劑只要對反應無不良反應之溶劑即可，可使用例如四氫^喃、、甲苯、二乙基乙喊、二甲氧基乙烷、乙腈、认二過、燒等，亦可使用該等之混合溶劑。本反應在至^ °c ’尤其在5°c至80°C進行最為適合。 W氏張尺度剌中關家鮮（CNS)A4規格⑵ 314235 24 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 200300676 Α7 Β7 五、發明說明（25 ) R之烷基之取代基可列舉烷氧基羰基、烷氧基、烷氧基羰基鏈烯基、烷氧基羰基炔基、烷醯基、烷胺基羰基、炔基、氰基、烷氧基胺基甲醯基、烷基胺基曱醯基、二（烷醯基）胺基、鹵素原子、烷醯基羥基、苯硫基、苯氧硫基、苯氧基羥硫基、苯醯硫基、二（烷氧基）磷基、三曱基矽烷基、二（烷氧基）氧硼基、環烷基、含有1至4個選自氮原子、氧原子及硫原子等雜原子之雜環基（該雜環基亦可具有取代基）或可具有取代基之芳基。該等R之烷基之取代基較好使用烷氧基羰基、氰基或烷氧基烷基。具體而言較好使用R為4-烷氧基羰基丁基、4-氰丁基、4-烷氧基丁基或3-：)：完氧基丁基者。 R之烷基之取代基之雜環基可列舉飽和或不飽和之單環或二環雜芳環基，例如噻嗯基、呋喃基、四氫呋喃基、比喃基、吼17各基、味11坐基、吼σ坐基、異噻°坐基、異°惡ϋ坐基、吼啶基、吡哄基、嘧啶基、噠畊基、吡咯烷基、吡咯啉基、口米吐烧基、味嗤啉基、喵吐烧基、D[；t嗤啉基、哌σ定基、六氫吡畊基、嗎啉基、苯并噻嗯基、苯并呋喃基、異苯并咲喃基、色烯基、吲哚基、異吲哚基、吲唑基、嘌呤基、喹畊基、萘錠基、喹喔啉基、噌啉基、喹啉基、異喹啉基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、喹唑啉基、酞嗪基、苯并嗔唑啉基、苯并咪唑基、蝶啶基、吡啶嘧啶基、異色滿基、色滿基、D引D朵滿基、異卩引卩朵滿基、四鼠嗤琳基、四氣異嗤啉基、四氫喹喔琳基、二氫喹啉基等。該雜環基之取代基可列舉二烷胺基、烷氧基羰基、烷基或曱醯基。 --------------裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) · -線· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 25 314235 200300676 A7 B7 五、發明說明（26 ) R之:基之取代基之芳基可列舉苯基、萘基、蒽基等，較好使用苯基。又，該芳基之取代基可列舉烧氧基幾基、垸醯基、氰基、燒酸氧基、烧氧基、二（三甲基石夕烧基等。· R之二環基可列舉二環[2·2庚烧卞基、二環[41〇] 庚燒-7-基等。X，該二環基之取代基可列舉㈣胺基等。如R之鏈烯基之取代基可列舉環烷基、可具有取代基之芳基、烷醯氧基、烷醯基、烷基苯基亞楓基、苯基亞胺基、鹵完基等。該芳基可列舉苯基、蔡基、著基等，較好使用苯基。该芳基之取代基可列舉烷氧基羰基等。 R之芳基之取代基可列舉烷基、鹵代烷基、烷氧基羰基、烷醯基、二烷胺基羰基、氰基、函素原子等。該芳基可列舉苯基、萘基、蒽基等，較好使用苯基。消訂 R之含有1至4個選自氮原+、氧原子及硫原子之雜原子之雜環基可列舉飽和或不飽和之單環或二環雜芳環基，可列舉例如噻嗯基、咲喃基、四氯咲喃基、卩比喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、異噻唑基、異噁唑基、吡啶基、吡哄基、嘧啶基、噠畊基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌啶基、六氫吡哄基、嗎啉基、苯并噻嗯基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、色焊基问丨D木基、異问丨噪基、σ引唾基、嗓吟基、嗤哄基、奈錠基、喹喔啉基、噌啉基、喹啉基、異喹啉基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、喹唑啉基、酞嗪基、苯并噁唑啉基、苯并咪唑基、蝶啶基、吡啶嘧啶基、異色滿基、色滿基、本紙i尺度適用中關家標準（―格⑵0 χ 297公髮 26 3]4235 200300676 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（27 ) 弓丨D木滿基、異吲哚滿基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、四氯_屋啉基、一氫献嗪基等，其中，較好使用吼咬基、嚷 1基、咪唾基、噻唾基。該雜環式基之取代基可列舉烧基、烷氧基羰基、苯醯基、烷醯基或氰基等。本發明之方法中R較好為具有取代基之烧基，該烷 f之取代基較好使用烷氧基羰基、氰基或烷氧基。具體而 1，R較好為4_烷氧基羰基丁基、4_氰基丁基、4·烷氧基羰基或3-烧氧基丁基。4_院氧基幾基丁基可列舉4_乙氧基羰基丁基。本發明之方法中以尺為燒氧基叛院基、氰院基或烷氧基烧基，使㈣，在漠原子存在下進行反應較理想。化合物（IX)可由將辞或鎂懸濁於溶劑中，加入趟（幻後與化合物（VIII)進行反應製造。溶劑只要對反應^不良反應之溶劑即可，可使用四氫呋喃、甲苯、二乙基乙醚、 1，2_二甲氧基乙烷、乙腈、！，4•二噁烷等，亦可使用該等之混合溶劑。本反應在^(^(::至15(rc，尤其在5艺至 °C進行最為適合。鹽（X)之金屬原子（M)可列舉典型金屬或過渡金屬等。典型金屬可列舉鐘、納、钟、m 鋇、鋁、鋅、矽、錫等。過渡金屬可列舉鈦、鉻、鉬、鎢、錳、鐵、釕、鈷、铑、鎳、鈀、鉑、銅等。本發明所使用或所獲得之化合物（1)、化合物（i_a)、化合物（I-b)、化合物（II)、化合物（„，）、化合物（II_十化合物（ΙΙ-b)、化合物（ΙΙ-c)、化合物（111)、化合物（iii a)、化合物（IV)、化合物（iv_a)、化合物（VI)、化合物或化

27 314235 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 . •線- 200300676 A7 五、發明說明（28 合物（6-a)所示化合物之趟 & ^ J舉例如無機鹽（鹽酸鹽、磷 S夂I、氣溴酸鹽、硫酸越茸） ^ 瓜齩皿寻）或有機酸（乙酸鹽、甲酸鹽、丙酉夂I、s馬酸鹽、馬來酸_ — ^ 琥珀齩鹽、酒石酸鹽、檸才豕fed、頻果酸鹽、草孤本甲酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺 3夂I、甲苯石黃醯酸鹽等）a。 ^ ^ A ± J 又，本發明之化合物具有羧酉夂荨S夂性基時，本發明仆人4 ^ 月化口物亦可形成無機鹼（鈉鹽、鉀瓜寺驗金屬鹽’的鹽、鎂鹽等驗土類金屬鹽'銨鹽等）或有機鹼(三乙胺鹽、如賴胺酸鹽之胺基酸鹽等)之鹽。遊離體與鹽可經由公知之方法或以成万法為基準之方法互相轉化0 本說明書中烷基或烷氧基可列舉碳原子數丨至6之直 ^或支鏈基，尤其是碳原子數之直料支鏈基。烧酉监基、炫氧基魏基或烧硫基幾基可列舉碳原子數2至7之直鏈或支鏈基，尤其是碳原子數2至5之直鏈或支鍵基。齒素原子可列舉氟原子、氯原子、漠原子或碘原子。函代烷基可列舉三氟曱基等。【實施例】接著，根據實施例對本發明加以詳細說明，但是，本發明並不只限於該等實施例。貫方屯例 1 (1)在室溫下將（4R)-3-苄基-ζμ羥曱基噻唑烷_2-酮2〇公克溶解於二甲亞碾45毫升中，依順序加入吡啶丨·45毫升、三氟乙酸1.38毫升、乙酸乙酯30毫升。於乃它加入二環己基碳化二亞胺22.2公克及乙酸乙酯15毫升，於 IIIIIIIII — * 11 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 ▲ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐 28 314235 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 200300676 A7 _________B7 五、發明說明（29 ) ' "" ~" - 5〇。。攪拌3小時。於反應液中加入乙酸乙_ i⑻毫升，於 10。。以下攪拌30分鐘，將析出物濾'別。濾液用食鹽水（飽 ^良1水·水=1 : 1)洗淨，水層再用乙酸乙酿抽出。合併有機層，用食鹽水（飽和食鹽水：水=i : 〇洗淨，經由乾燥、濃縮，獲得（4R)_2_氧代节基噻唑烷羧醛。 (2)將實施例1-(1)所獲得之化合物溶解於二氯曱烷5〇毫升，於20。(：至25t：加入硫酸鎂5公克。於5χ：以下在溶液中加入苄胺4·89毫升，於“艺至25t：攪拌1小時3〇为知。將溶液冷卻至乃它後於^它至加入氰化鈉I” 公克及乙酸毫升之水溶液15毫升。接著，將溶液溫度經4小時昇溫至2〇它至25〇c後攪拌a小時。於溶液中加入二氯甲烷50毫升，用飽和碳酸氫鈉水溶液及水洗淨。將有機層乾燥、濃縮，獲得（4R)-4-[l-(N-苄胺基）-1·氰甲基]-3-节基噻唑烷-2_酮之順式體及反式體之混合物13 47 公克之淡黃色結晶。經由高速液體層析法（HPLC)分析混合物之光學純度，順式體：反式體=丨4 ·· 1。 (HPLC條件）柱：L·柱〇DS(4.6x 150毫米）[島津製作所製造]、移動層： 0.01M 磷酸二氫鉀（KH2P04)(pH = 3)/乙腈=50/50、流速·· 〇·5毫升/分、UV檢出：225nm、柱溫度：40°C。順式體：融點：124-125t： [a ]D25 : +46.1。（C= 1.0、氯仿）光學純度（HPLC) : 99% ee •-------------裝---I----訂---------線 (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 29 314235 200300676 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 五、發明說明（30 (HPLC條件）柱：奇拉謝AD-H(4.6x 250毫米）[大謝化學j | 个丄菜公司製造]、移動層：乙醇/正己烷=10/90、流速· n。 < · υ·8毫升/分、 UV檢出：225nm、柱溫度：40°C。反式體： MS · APCI(m/z) : 33 8[(M+H) + ]。 (3)將實施例1-(2)所獲得之化合物懸濁於 + _ 、T本3 0毫升中，於冰冷下加入水1.44毫升及濃硫酸14 δ· 1 Η ·»耄升，於 4〇°C攪拌24小時。於30°C以下依順序在溶液中加入水7 耄升、丙酮39毫升、水45毫升。接著，於4〇。〇以下，在溶液中加入濃氨水45毫升，於25°C攪拌30分鐘。滤、取析出結晶，依順序用丙酮、水、丙_洗淨，經由乾燥與得淡黃色結晶之（4R)-4-[(lR)-l-(N-节胺基胺基甲醯基曱基]-3-苄基噻唑烷-2-酮12.6公克。融點：194至195°C ESI · MS(m/z) : 356(M + +1) [a ]D20 : -3 8.8 ° (C 二 0.45、N，N-二曱基甲醯胺）實施例2 將（4R)-4-[( 1R) -1 - (N-苄胺基）-1-胺基曱酸基甲基]-3-苄基噻唑烷-2-酮100公克溶解於n，N-二曱基甲醯胺200 毫升，在氮氣氣流下於85°C攪拌5小時。於90°C至95°C 在溶液中滴下35%鹽酸200毫升，攪拌1小時15分鐘。再滴下35%鹽酸100毫升，攪拌2小時。接著，於85°C 滴下水200毫升。將溶液冰冷，濾取析出結晶，用水洗淨 ---------------------^---------^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（2〗0 X 297公爱） 30 314235 200300676 A7 五、發明說明（31 ) 後經由於50°C乾燥17小時獲得無色結晶之一苄基-2·氧代- 5-(疏基曱基）味唾燒魏酸93 · 1公克。

融點：159至160°C ESI · MS(m/z) : 357(M++1) [a ]D20 : +48.8 ° (C= 0.62、N，N-二甲基曱醯胺）實施例3 於rc，在OWRW，3-:节基·2_氧代_5·(疏基甲基）咪唑烷-4-羧酸30公克、吡啶22·7公克、三氟乙酸2.6毫升之氣仿240毫升溶液中，在30分鐘滴下二環己基碳化二亞胺1 7.4公克之氯仿溶液60毫升。將溶液進行回流$ 小時後減壓濃縮。用乙酸乙酿進行2次取代濃縮後於殘渣加入乙酸乙酯300毫升，於5(TC攪拌3〇分鐘。冷卻至25 °C後濾別不溶物。將濾液濃縮後加入甲醇85毫升，加熱溶解。將溶液冷卻後濾、取析出結晶，用冷曱醇洗淨。於 °C將析出結晶經由送風乾燥獲得無色結晶之（3 aS 6aR) 1，3-二τ基-六氫-4H-噻吩並[3,4-d]咪唑·2,4_二酮21·3公克。融點：122至123 °C [a ]j)25 · +90.5 (C = 1.0、氯仿）實施例4 在氣氣大氣下將辞粉3 0 · 4公克縣，仏# 凡心w蜀於四虱呋喃55毫升，加入三甲基矽烷氯3 · 5毫升，攪抹伐许1 5分鐘。於4〇t 加熱後開始滴下5-碘戊酸乙酯1 〇2 9八；t + • A克。滴下之同時於熱，維持在6〇°C至65。(：繼續滴下。湳π —μ ^ /同下完成後用四氫D夫表紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（2】0 X 297公釐） 314235 ---------------裳--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) . --線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 200300676 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 五、發明說明（32 ) 喃5宅升洗淨，浸潰於$。、、5 C之外浴，繼續拌之總時間：5〇分鐘），$攪拌（滴下與攪 )用南速液體層析法墟π < & L ☆ 乙酯消失後冷卻至23t。1 ^ 5-碘戊酸 L依次加入甲苯125 (3aS，6aR)-l，3-二罕其·丄， 0 毛升、土八噻吩並[3,4_ 酮52.5公克、1〇%氫氧化把碳【〇9公 ” _，4·一 N，N-二甲基甲酸胺u.5毫升，甲本5〇毫升、 “里。反應液用活性碳12公克及。鹽32·5公克過遽，用四氫呋喃200毫升洗淨。合 1幵4液及冼液，用2Μ鹽酸洗淨後進行水洗、濃縮。將濃縮殘渣溶解於甲苯390毫升，加入對-甲苯石黃酸.-水合物2·95公克，於抓至抑授拌1小時半。於⑽至价蒸德除去溶劑、約⑽毫升，殘渣依次用水、硫代硫酸鈉水溶液 '水洗淨，再進行濃縮，獲得油狀物之二节基_六氫_2_氧代_ 4H-噻吩並[3,4_d]咪唑-心基]戊酸乙酯60.6公克。實施例5 依次加入精製水400毫升、20%氫氧化鈀碳（50% 濕）12.85公克、（52)-5-[(3&8,6&11)-1，3-二苄基-六氫-2-氧代-4H-噻吩並[3,4-d]咪唑-4-基]戊酸乙酯249.5公克之甲醇900毫升溶液，用氫490kPa取代3次。再於6.5°C加入62 7kPa氫壓，用500rpm攪拌。由於加熱開始後5〇分鐘為 92.5°C、843kPa,4 小時後為 117°C、921kPa、11 小時後為116°C、853kPa，所以加入氫氣至882kPa。24小時後於11 51：、892kPa將反應液冷卻，用甲醇洗，過濾催化劑。將濾液濃縮，於殘渣中加入甲苯400毫升’於65 ^--------^---------^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 x 297公釐） 32 314235 200300676 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（33 c外浴進行3次取代濃縮。於上述殘渣加入甲醇12〇6毫升、水402毫升及氫氧化鈉53.3公克，於40t攪拌2小吩。於反應液中加入10%鹽酸水3〇〇公克，中和至pH為 7 ’加入活性碳6公克，於室溫攪拌40分鐘。反應液用活性碳6公克進行預塗助濾劑過濾。減壓蒸餾除去甲醇，加入乙k乙酉曰600 ¾升。加入鹽酸水、抽出（水層pH 為0·7) ’有機層用10%食鹽水洗淨。有機層用硫酸酐鎂乾無後過濾。將抽出液減壓濃縮，在乙酸乙酯不再飛濺下用三甲基苯1 70毫升進行2次取代濃縮，獲無色油狀物之 (3aS，4S，6aR)-l，3-二苄基-六氫-2-氧代-4Η-噻吩並[3,4-d]咪 ϋ坐-4-戊酸170.1公克。將（3&8,48加11)-1，3-二节基-六氫-2-氧代-4士噻吩並 [3，4-d]咪唑-4-戊酸3.0公克及48%氫溴酸24毫升之混合物表11 0 C至1 2 0 C進行加熱回流4 8小時。用曱苯1 〇毫升進行熱時抽出4次，除去节基溴。將水層濃縮，殘渣加入水1 5毫升及6M氫氧化鈉水溶液1丨·5毫升，接著滴丁乙氧基羰基氯3.36公克，將pH值保持在8至1 0，於室溫進行反應3小時後將反應液昇溫至70°C至8(^c，進行反應20小時（在此期間加入6M氫氧化鈉水溶液，將pH 值保持在12)。用16%鹽酸7毫升將pH值調整為7.4至 7.8 ’於90°C至95°C用活性碳1.0公克過濾。將濾液加熱至801至85°C，用16%鹽酸6毫升將pH值調整為1.8 至2 ·2，進行中和晶析。冷卻後濾取、水洗，於5〇t送風本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 33 314235 -------------裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) . •線- 200300676 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 ------------— B7 __ _ 五、發明說明（34 ) 乾燥，獲得無色結晶之（+ )_生物素138公克。實施例7 (1) 將（4叫31基_4·羥甲基噻唑烷_2_酮79 3公克經由與声、施4列1-(2)同樣處理，將所析出之結晶過遽後將渡液濃縮。殘渣用矽膠層析法（己烷：氯仿：乙酸乙酯 5.1)精製，獲知（411)-4-[(13)-1-(>1-苄胺基）-1-氰甲基]_3_ 苄基噻峻烧-2-g同9.3公克。融點：1 3 1至1 3 2 °C [a ]D23 ·· -174·7 ° (C = 1 .〇、氯仿） MS · APCI(m/z) ·· 338[(Μ+Η)+]。 (2) 將（4R)-4-[(lS)-l-(N-苄胺基）-1-氰甲基μ3·苄基噻 °坐少元-2-酮6.0公克經由與實施例1 _(3)同樣處理，獲得無色油狀之（411)-4-[(13)-1-(>^苄胺基）-1-胺基甲醯基甲基]_ 3-苄基噻唑烷-2-酮。接著將該油狀物溶解於乙酸乙酯，加入4Μ氯化氫-乙酸乙酯溶液6毫升，濾取析出結晶，獲得（4R)-4-[(l S) -1 -(Ν-苄胺基）-1_胺基甲酿基甲基]_3-节基噻唑烷-2-酮鹽酸鹽4·3公克。 ESI · MS(m/z) ： 356(M++ 1) [a ]D23 : -32.6。（C= 1.0、甲醇）。 (3) 將（41〇-4-[(18)-1-(]^节胺基）-1-胺基甲醯基甲基]-3 -苄基噻唑烷-2-酮鹽酸鹽0.541公克溶解於Ν，Ν-二甲基甲醯胺10毫升，在氮氣氣流下，於100°C攪拌3小時。於反應液中加入乙酸乙酯，用水、飽和食鹽水洗淨後乾燥、濃縮。殘渣用己烷使結晶化，獲得無色結晶之（3aS，6aR)- -I —--— — I -------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 34 314235 200300676 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（35 1，3 - 一下基·六氫- 4H-噻吩並[3,4*»dl 口来唾-2 4 ^ J本土二酮342毫克。光學純度（HPLC) ·· > 91% ee (HPLC條件）柱：奇拉謝AD(4.6x 250毫米）[大謝化學工業公司梦造]、移動層：乙醇/己烧=15/85、流速：〇·8毫升/分、=檢出：225nm、柱溫度：40°C。實施例8 ，將⑽、叫-^二节基·]·氧代_5韻基甲基）味。坐炫· 4-魏I 20公克溶解於氯仿16〇毫升，加入卩比啶6.2公克，在冰冷下，於1 5 C以下加入二環己基碳化二亞胺〗2 · 7公克之氣仿40毫升溶液。於室溫攪拌丨小時，在反應液中加入乙酸乙酯、過濾。濾液用2M鹽酸、水、飽和小蘇打水及飽和食鹽水洗淨。將有機層乾燥後濃縮。殘渣用乙酸乙酯再結晶化，獲得（3aR，6aR)-i，3-二苄基_六氫噻吩並[3,4-d]咪唑-2,4-二酮8.0公克。融點·· 11 5 至 11 6 °C [a ]d26 ·· +10.6。（C= 1·〇、氯仿）實施例9 將（3aR，6aR)-l，3-二 τ 基-六氫-4Η-噻吩並[3,4-d]咪。坐- 2，肛二酮1〇〇毫克溶解於氯仿丨毫升，加入吡啶〇·5毫升，於室溫攪拌23小時。反應液用2Μ鹽酸、水、飽和小蘇打水及飽和食鹽水洗淨。將有機層乾燥後濃縮。加入異丙醚，滅別所析出之結晶，獲得（3 aS56aR)-1，3 -二节基_六氫- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 35 314235 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝訂· · i線- 200300676

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（36 ) 4H-噻吩並[3,4-d]咪峻-2,4·二酮75.1毫克。

融點：122至123°C

[a ]D25 : +90.5。（Cs !·〇、氯仿）實施例1 0 於（411)-44(111)-1-(N-苄胺基）-卜胺基甲醯基甲基μ3-卡基嚷°坐烧-2 -酉同14公克之Ν，Ν-二曱基甲胺39毫升溶液中加入小蘇打3_96公克，於80至85°C攪拌17小時。將反應液減壓濃縮，於濃縮殘渣中加入甲醇40毫升及水 20毫升，於5°C以下攪拌1小時。濾取析出結晶，用曱醇 80毫升及水40毫升之混合液洗淨後經由於50°C送風乾燥 1 7小時獲得淡黃色結晶之（4 S，4 ’ S，5 R，5 ’ R) - 5，5 ’ -[二硫代雙 (甲叉）]雙（1，3-二苄基-2-氧代咪唑烷-4-羧醯胺）12.1 4公克。融點：208至211 °c ESI · MS(m/z) : 709(M++ 1) Μ U ]D20 : +5 5.4。（C= 〇·29、N，N-二曱基曱醯胺）。 , 實施例11 將（43,4,8,511，5，11)-5,5’-[二硫代雙（甲叉）]雙（153-二苄基-2-氧代咪唑烷羧醯胺）497毫克溶解於乙酸5毫升，加入鋅粉249毫克，於90°C攪拌1.5小時。於反應液中加入乙酸乙酯，用C鹽過濾。將濾液減壓濃縮後於殘渣加入乙及己烷。濾取析出結晶，用水及己烷洗淨後經由減壓乾燥獲得（411，511)-1，3-二节基-2-氧代-5-(皴基曱基）咪唑烧羧醯胺482毫克。請先閱讀背 Sr 之注意事項再填寫本頁 k 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 36 314235 200300676 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 37 A7 B7 五、發明說明（37 )

融點：119至122°C ESI · MS(m/z) ： 356(M++ 1) [a ]D20 : -1 ·2 ° (C = 0·3 3、N，N-二甲基甲醯胺）。實施例12 將實施例1 0所獲得之化合物1 2公克溶解於乙酸24 毫升，加入鋅粉7.2公克，於55至60。(：攪拌1小時。將反應液冷卻至20。(：後加入濃鹽酸72毫升，於80至9(TC 攪拌2小時。於反應液中加入水丨2〇毫升，於1小時内冷部至2 5 C後於5 °C以下攪拌1小時。濾取析出結晶後用水 95宅升洗淨’經由減壓乾燥，獲得無色結晶之（4R，5r)_ 13-二节基-2-氧代-5-(巯基甲基）咪唑烷羧酸11〇5公克。本品之物性值與實施例2者一致。實施例1 3 將（4R)_4-[UR)-1-(N-节胺基）-1-氰曱基]-3-节基噻唑烷-2-酮23.5公克溶解於二甲亞楓21〇毫升，加入碳酸鉀（微粉）1.35公克，再於⑽它至25。〇滴下3〇%過氧化氫水12 笔升後於室溫攪拌i小時。溶液再加入3〇%過氧化氫水12 笔升，於20 C攪拌1 3小時後於室溫加入水2丨〇毫升，攪拌J J日寸濾取所析出之結晶，用水及丙酮洗淨後，於5 〇 C纹由整晚送風乾燥，獲得無色粉末之心[(丨幻-丨-⑺一节胺基）-ι-胺基曱醯胺基甲基]1节基噻唑烧_2, 21·8公克。本品之物性值與實施例者一致。實施例1 4 ⑴將辞粉92·8公克懸濁於四氫呋喃18〇毫升及甲笨本張尺度適用中國國家標準格⑵〇 χ 297_^_----_ 314235 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

200300676 A7 -----B7 五、發明說明（38 ) 1 2 0宅升之混合液’於1 〇 °c至3 7 ，在1 5分鐘内加入漠 58公克後在15分鐘内將溶液昇溫至5〇〇c。於5〇°C至55 C ’在3.5小時内在溶液中滴下5-碘戊酸乙酯186·4公克。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) (2)將實施例14-(1)所獲得之溶液冷卻至3〇°C後依順序加入曱苯360毫升、^成以幻丄弘二苄基-六氫-化-噻吩並[3，4-d]咪唑-2,4-二酮176公克及鈀催化劑（德克薩公司製造；E 1002 NN/D 10%鈀）4.8公克之N，N-二甲基甲醯胺44毫升懸濁液，於28°C至40°C攪拌17小時。於10 °C至3 0°C在溶液中加入鹽酸（濃鹽酸157毫升+水184毫升），於20°C攪拌1小時。將溶液過濾後在4〇分鐘内將濾液昇溫至4 0。(：而分液。有機層依順序用水、碳酸氫鈉水溶液、亞硫酸納水溶液、水洗淨，濃縮。於殘潰加入甲笨，再進行濃縮。將殘渣溶解於甲醇67毫升後加入活性碳6.7公克，攪拌、過濾。殘渣用甲醇67毫升洗淨，合併濾液，供下述之步驟使用。將上述反應所獲得生成物之一部分皂化，作為（5Z)_ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 5-[(3aS，6aR)-l，3-二 τ 基-六氫-2-氧代-4H-噻吩並[3,4-d]口米唾-4-基]戊酸’於下述條件用HPLC定量，確認獲得上述反應所獲得之（52)-5-[(388,68以）-1，3-二苄基-六氫_2-氧代_ 4H-噻吩並[3,4-d]咪唑-4-基]戊酸乙酯220公克。 (HPLC條件）柱：L-柱ODS(4.6x 1 50毫米）（島津製作所製造）、移動層：乙腈/磷酸二氫鉀（pH = 3)= 40/60、流速：1〇毫升/分、uv 檢出：2 5 4 n m、柱溫度：4 0 °C。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 38 314235 200300676 五、發明說明（39 > (3)一於實施例14_(2)所獲得之甲醇溶液88毫升加入甲画予3 13元升水11 〇笔升、免催化劑（德克薩公司製造；e 1 % NN/W 5%鈀）9·06公券，*知广兄在虱壓9khPa、内溫1 i〇t：攪拌16 --------------裝--- (請先閱讀背面之注咅心事項再填寫本頁) 小時：將溶液冷卻後過濾催化劑，用甲醇35〇毫升洗淨。於濾液中加人氫氧化鈉水溶液（氫氧化納ΐ4·6公克+水55 毫升），於5 0 °C攪拌1」、R士 .. ^ 汊讦i小纷。於30t:以下，在溶液中加入 10%鹽酸至pH值為7後進行濃縮。於殘渣加入甲苯，再進行濃縮。將殘渣溶解於甲笨毫升後邊於抓加溫邊用10%鹽酸、水洗淨。有機層於下述條件用肌c定量，確認獲得上述反應所獲得之（3心，43,6&汉）_1，3_二苄基_ 六氫-2-氧代-4H-噻吩並[3,4_d]咪唑戊酸52公克。 (HPLC條件）柱：L-柱ODS(4.6x 15〇毫米）（島津製作所製造）、移動層：乙腈/磷酸二氫鉀（pH = 3)= 40/60、流速：ιο毫升/分、uv 檢出：25 4nm、柱溫度：4〇°C。 i線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (4)將實施例14-(3)所獲得之甲苯溶液濃縮後用三甲基苯取代濃縮。將殘渣溶解於三甲基笨166毫升，加入曱磺酸108毫升，於133。(：攪拌i小時。將溶液冷卻至8〇艽，加入乙酸15毫升，们(TC以下在該溶液滴下精製水购毫升。將溶液冰冷1小時後濾取所析出之結晶，用水及丙酮洗淨，經由減壓乾燥，獲得粗生物素7公克。將粗生物素24.6公克溶解於氫氧化鈉水溶液（氫氧化納4.42公克+水330毫升），於5(TC至6〇t用稀鹽酸將pH 值調整為8.5。於50°C至6(TC，在溶液中加入活性碳16 39 314235 200300676 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 40 A7 五、發明說明（仙 ) 公克’攪拌1 0分鐘後過濾。將濾液於90°C至95°c加熱，用濃鹽酸將溶液之pH值調整為1.8至2.2，進行中和晶析。於同溫度攪拌3 0分鐘，育晶。將溶液徐冷，冰冷後濾別所析出之結晶。將結晶於5〇t：經由整晚送風乾燥，獲得（ + )-生物素22·4公克。茶考例Ί (1)在冰冷下將L-半胱胺酸-鹽酸鹽·一水合物175 6 公克溶解於氫氧化鈉184.0公克之水0.88公升溶液中，在不超過30°C之範圍滴下氣甲酸苯酯313·2公克之甲笨〇·35公升溶液。於室溫攪拌2小時後靜置分液。水層用甲笨0.35公升洗淨、分液，將水層濃縮，獲得無色結晶之（4R)-2-氧代噻唑烷-4-羧酸139.84公克。

融點：168至170°C MS · APCI(m/z) : 148[(M+H) + ] [a]D25: -62.8° (C=l.〇、水）。 > (2)於冰冷下，在參考例ι_(1)所獲得之化合物ι·47公克依順序加入氫氧化鈉〇·6公克之水1·5毫升溶液及二甲亞楓4.4毫升。於室溫加入苄基氯2·3毫升，攪拌15小時。用稀鹽酸中和，用乙酸乙酯抽出。有機層用水、飽和食鹽水洗淨，用硫酸酐鎂乾燥後濾別不溶物，經由濃縮，獲得無色結晶之（4R)-2-氧代-3-苄基噻唑；):完-4-羧酸2.24公克。

融點：95至97°C MS · APCI(m/z) ·· 238[(M + H) + ] 314235 -------------Μ-----------------^ (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 200300676 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 五、發明說明（41 [a ]d25 : ·1〇2.2。（C= 1.0、氯仿）。 (3) 於室溫，在四氫呋喃32毫升加入硼氫化鈉1.53 公克，於1〇它冷卻。加入參考例κ(2)所獲得之化合物8·〇公克，再加入硫酸2·0公克之四氫呋喃2毫升溶液，於4〇 C至50 c搜拌3小時後將反應液冰冷，加入2Μ鹽酸至pH 值為1。將反應液用乙酸乙酯稀釋而分液。有機層用水洗，用硫酸軒鎂乾燥後減壓濃縮。殘渣用二異丙醚結晶化，獲知無色結晶之（4R)-3-苄基-4-羥甲基噻唑烷_2_酮6.82公克。

融點：87至90°C MS · APCI(m/z) ： 224[(M + H) + ] [a ]d25 ·· -26.7。（C= 1·0、曱醇）光學純度（HPLC): >99%ee (HPLC條件）柱·可拉謝AD (4· 6 x 250宅米）[大謝化學工業公司製造]、移動層：乙醇/己烷=10/90、流速：0.8毫升/分、1^檢出：225nm、柱溫度：40°C。 (4) 將參考例1-(3)所獲得之化合物1.〇公克溶解於二甲亞楓5.0毫升，於室溫滴下二異丙基乙胺195毫升。將反應混合物冰冷後於1 2t：至2(TC加入二旬儿# ‘ ^ v —虱化硫吡啶配鹽1.78公克，於同溫度攪拌30分鐘。於冰水毫升中加入反應液，用乙酸乙酯20毫升抽出。水恳$ r ^ κ層再用乙酸乙酯10毫升抽出。合併乙酸乙酿層，用10%檸樣酸1〇毫升洗淨2次後分別用水1 0毫升、飽和食鹽水丨〇毫升洗、爭本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（2〗0 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

41 314235 200300676

五、發明說明（42 , 用k 1酐鎂乾爍後減壓濃縮，獲得無色油狀物之（4R)_2- 濟部智慧財產局員工消費合作社印製 42 氧代-3-苄基噻ϋ坐烧-ζμ魏酸985.9毫克。 MS · APCI(m/z) : 222[(Μ+Η)+] 參考例2 將二曱亞楓2·34公克溶解於二氯甲烷22毫升，於-78 C加入草醯氯1.31毫升。於同溫度攪拌1〇分鐘後，於_6〇 C以下滴下參考例1-(3)所獲得化合物2.23公克之二氯甲烷11耄升溶液。於-78°C攪拌20分鐘後於-6〇°C以下滴下二乙fe 5 · 5 8宅升。於1 · 5小時將反應溫度昇温至j 〇 °c後於反應混合物中加入1 〇%檸檬酸水中而分液。有機層用飽和食鹽水洗淨，用硫酸酐鎂乾燥後減壓濃縮，獲得與參考例1-(4)相同之目的物2.2〇公克。本品物性值與參考例 1-(4)一致。參考例3 將氯532毫克溶解於二氯甲烷u毫升，於_2〇。(：至_1〇 C加入二曱亞楓0.73毫升。於同溫度攪拌1〇分鐘後於5 C滴下參考例1 -(3)所獲得化合物1 ·丨2公克之二氯甲垸5 5 毫升溶液。於-25 X：攪拌20分鐘後於_25艺至-ut滴下三乙月女2·79笔升。於-25 C攪拌1 0分鐘後於反應混合物中加入1 0%檸檬酸水中而分液。有機層用飽和食鹽水洗淨，用硫酸酐鎂乾燥後減壓濃縮，獲得與參考例1_(4)相同之目的物1 · 1 7公克。本品物性值與參考例丨_(4)者一致。參考例4 將參考例1-(3)所獲得之化合物447毫克、‘經基四本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 314235 -------------裝--------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 43 200300676 Α7 Β7 五、發明說明（43 ) ^ 曱基六氫吼咬氧化物6 · 9毫克及溴化鈉2 0 6毫克溶解於_ 氯曱烷6毫升及水1毫升之混合溶劑中，邊進行氮氣沸騰邊於冰冷下慢慢滴下次氣酸小蘇打水1.49公克、小蘇打 491毫升及水5毫升之混合物。攪拌1小時後進行分液，有機層分別用碘化鉀1 6毫克、1 0 %硫酸氫鉀水溶液及海波水洗淨。有機層用硫酸酐鎂乾燥後減壓濃縮，獲得與泉考例1-(4)相同之目的物147.5毫克。本品物性值與來考例1 - (4)者一致。參考例5 (1)在冰冷氮氣氣流下將L-半胱胺酸-鹽酸鹽·一水人物175.6公克溶解於氫氧化鈉180公克之水2公升溶液中。於25°C至29°C，在1小時30分鐘於該溶液中滴下三膦118.7公克之14-二噁烷700毫升溶液，再於同溫度攪摔3小時。於該反應混合物中加入濃鹽酸，調整為弱酸性後減壓蒸餾除去溶劑。於濃縮殘渣加入甲苯2〇〇毫升，再度進行減壓蒸鶴。於該濃縮殘〉查加入乙醇7⑼毫升後於冰冷下，在40分鐘加入氯化亞硫醯13丨公克，邊將溫度昇至室溫邊攪拌19小時。減壓蒸顧除去溶劑後將漠縮殘渣溶解於乙酸乙酯1公升，依順序用水7〇〇毫升、飽和小蘇 ^水300毫升、飽和食鹽水5〇〇毫升洗淨。用硫酸酐鎂乾燥後經由減壓蒸餾除去溶劑，獲得油狀物之氧代噻哇烷·4_羧酸乙酯162公克。 MS · APCI(m/z) ： 176[(M+H)+] [« ]d25 : _52·7。（C= 1 ·〇、氯仿）。本紙張X"度適用中國國家標準（CNS)A4規格⑵〇χ 297公爱 314235 --------------•裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 200300676 五、發明說明（44 ) ⑺將漠化納！.79公克，二甲基乙酿胺5 下§&氣1宅升於抑至⑽授拌15小時，獲得节於該溶液加入參考例5_(1)所獲得之化合物丨U八土 ’、、。二甲基乙醯胺2毫升及碳酸鉀hl公克，於23。:至：進行反應93小時後加入乙酸乙酯及1〇%檸檬酸層分離。有機層用水洗，用硫酸酐鎂乾燥後濃縮，芦^ 渣2.29公克。殘渣用石夕膠柱層析法（溶劑：正己燒乙于二乙酉旨=5: i)精製，獲得無色油狀物之（伙)_2_氧代|^ 噻唑烷-4-羧酸乙酯ι·67公克。下土 MS · APCI(m/z) ： 266[(M+H) + ] [a ]d24 : -96.6 ° (C = 1 ·〇、氣仿）。光學純度（HPLC) : 98.1%ee (HPLC條件）柱：奇拉謝OD(4.6x 250毫米）[大謝化學工業公司製造]、移動層：乙醇/己烷= 5/95、流速：0.8毫升/分、uv檢出： 22 5nm、柱溫度：40°C。參考例6 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製將（4R)-2-氧代-3-芣基噻唑烷羧酸乙酯28.4公克溶解於乙醇227毫升，加入硼氫化鈉2·26公克，於室溫攪拌15小時。再追加硼氫化鈉0 76公克，於室溫攪拌2小時。加入濃鹽酸，中和至pH值為6至7後將溶液濃縮。將濃縮殘渣溶解於乙酸乙酯，進行水洗3次，水層用乙酸乙酯逆抽出1次。合併乙酸乙酯層，用硫酸酐鎂乾燥後經由濃縮’獲得油狀殘渣22.6公克。於該殘渣加入異丙醚本紙張尺度適用中國國豕標準（CNS)A4規格（2〗0 X 297公釐） 44 314235 200300676 A7 五、發明說明（45 ) 使結晶化，再濾取後用異丙醚洗淨後經由減壓乾燥，獲得無色結晶之（4R)-3-苄基-4-羥甲基噻唑烷-2-酮18·4公克。本品之物性值與參考例1 _(3)者一致。參考例7 (1)將（4R)-2-氧代·3_节基噻唑烧_4_叛酸1〇公克溶解於乙腈2⑽毫升，於室溫下加入二環己基碳化二亞胺9·2 a克接著方、冰冷下在溶液中依順序加入乙硫醇3.3毫升、4-一甲妝基吡啶67〇毫升’於室溫攪拌2小時。過濾除去不溶物’減壓濃縮。殘渣用石夕膠柱層析法（溶劑：/ 己烷：乙酸乙酯=10: υ精製’獲得油狀物之(4SH·乙硫基羰基-3-苄基噻唑烷4_酮1〇·8公克瓜 MS · APCI(m/z) ·· 282[(Μ+Η)+] [a ]D25 : -110.8。（C= 1·〇4、氯仿）。 (2 )將參考例7 _ (1)所與得 ^ ; ^又侍之化合物〇·5公克溶解於二氯甲少元5.0宅升，在氮氣翕、六 L虱矾〃,L下加入氫氧化鈀284毫克。於室溫加入三乙基石夕烧〇 8 s古 fw . 笔升，於同溫度攪拌3小時. ^ ^ 娜土/辰‘，獲得油狀物之（4R)-2- 氧代-3 -节基噻唑烷-4羧醛〇 5八古老如夂全υ·5公克。本品之物性值與參考例1-(4)者一致。參考例1 所獲得之化合物35 34公克、三甲二=公克於内溫13Gt加熱。到達⑽ 乍為反應開始時間，於128c>c至古、* V* 1 3 3 C攪拌4小時，妳由同速液體層析法相單？基生 ^ |__I Α失。將反應液冷卻至本―尺度適用Tiiiij"(CNS)A4規袼 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁} .'裝 ----訂------ •線· 45 314235 200300676 曰曰 A7 B7 五、發明說明（46 ) 80 C ’加入乙酸30毫升，於甲磺酸層滴下精製水710毫升，將二曱基苯層分離，冰冷丨小時後濾取粗結晶，用水 2〇〇毫升’接著用曱醇洗淨至洗液之黑色消失。於5〇。〇送風乾燥整晚，獲得粗（ + )_生物素丨5·89公克。將所獲得之粗（ + )-生物素溶解於氫氧化鈉2·73公克之精製水160毫升水溶液，於9〇χ：至95χ：用稀鹽酸將ρΗ 值调整為7。於90 C至95°C在絲線中加入碳粉4公克，攪拌ίο分鐘後進行碳粉預塗助濾劑過濾。將濾液於9(rc 至95 C再加熱，再於絲線中加入碳粉4公克，攪拌1 〇分鐘後進行碳粉預塗助濾劑過濾。將濾液於8〇t：至85。〇再加熱，用濃鹽酸將pH值調整至18至2·2，進行中和社 -析出。於同溢度授拌丨小時，育晶。徐冷、冰冷後：結過濾。將結晶於50。(：進行送風乾燥整晚，獲得社晶之（ + l·生物素13.86公克。 ........ 【產業上之利用可能性】由於經由將本發明之化合物（IV)作為合成中間體之物素製法或經由將本發明之製法所製造之化合^ 合物⑷作為合成中間體之生物素製法比文獻上已知之：可便宜地製造生物素，所以為在工業上生物素之有利；本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格⑵G χ 2抑公餐 314235 請先閱讀背面裝訂

Claims

200300676

六、申請專利範圍 1 · 一種通式（I)

(式中R&R2為相同或不同之氫原子、於笨環 —可八有取代基之下基、於苯環上可具有取代基之二笨甲基或於苯環上可具有取代基之三苯甲基， R3為氰基、録、絲基隸、院硫絲基或可具有取代基之胺基甲醯基）所示化合物或其鹽之製法’其特徵為將通式（II_a)

a (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽進行環轉化。 2· —種通式（III) 0

(式中，R及R2為相同或不同之氫原子、於苯環上可具有取代基之节基、於苯環上可具有取代基之二私紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公f ) ^^—- 47 314235 ----訂---------· 200300676

申清專利範圍苯曱基或於笨環卜 3 上了具有取代基之三笨曱基，為氰基、缓基、烧氧基獄基、烧硫基Μ基或可〃有取代基之胺基甲醯基）口物之製法’其特徵為經由如申請專利範圍第 1項之方法製造通式G)

(I (式中，符號與上述者同意義）所不之化合物或其鹽，必要時進行水解製造通式（I-a)

• — a) co2h 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽，接著，將所獲得之化合物（I-a) 進行環化及表異構化。 3· —種通式（IV) rWr2

R3 I V) (式中’R1及R2為相同或不同之氫原子、於笨環 ‘紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） 48 314235 — — III — I III— ------I I « — — — — — — 1« (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 200300676 卫1

N> R2 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍上可具有取代基之节基、於苯環上可具有取代基之二苯甲基或於苯環上可具有取代基之三苯甲基， R3為氰基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基羰基或可具有取代基之胺基曱醯基）所示化合物之製法，其特徵為將通式（H) S (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽進行環轉化及環化 4· 一種通式（III) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中’R1及R2為相同或不同之氫原子、於苯上可具有取代基之节基、於苯環上可具有取代基之苯甲基或於苯環上可具有取代基之三苯甲基， R3為氰基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基羰基或具有取代基之胺基甲醯基）所示化合物之製法，其特徵為經由如申請專利範圍 3項之方法將通式（IV-a) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 49 314235 200300676 申睛專利範圍R、人 rR2 I V — a) (式中，符號與上述者同意義） ::之化合物或其鹽還原，必要時進行水解，製造通 ^ (I*a) Ο又 R2 1 一 a) (式中，符號與上述者同意義）所不之化合物或其鹽，接著，將所獲得之化合物⑴ 進行環化及表異構化。如申明專利範圍第！項至第4項任何一項之製法，其 :$ R1及R2為相同或不同之⑴氫原子、⑺苯環可 ^自_素原子、燒基及烧氧基之基取代之节基、⑺ 苯衣可纟工選自！|素原子、烷基及烷氧基之基取代之二苯甲基或（4)苯環可經選自鹵素原子、烧基及烧氧基之基取代之三笨甲基，、R3為U)氰基、（2)羧基、（3)烷氧基羰基、（4)烷硫基羰基或（5)可經烷基取之胺基甲醯基者。 6如申哨專利範圍第1項至第4項任何一項之製法，其訂線中，該R1及R2共同為节基丨本紙R度適用中國國^^ 甲基或三苯甲基，R: 50 314235 200300676 六、申請專利範圍為羧基、烷氧基羰基或胺基曱醯基者 7· 一種通式（III)

(式中’ R1及R2為相同或不同之氫原子、於苯環 j可具有減基之$&、於苯環上可具有取代基之二笨甲基或於苯環上可具有取代基之三苯甲基， R為羧·基、燒氧基羰基、烷硫基羰基或可具有取代基之胺基甲醯基）所不化合物之製法，其特徵為將通式（n_b)

I I 一 b) -----------·裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) . 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中’符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽進行環轉化及環化。 8.如申請專利範圍第7項之製法，其中，該ri及R2為相同或不同之（1)氩原子、（2)苯環可經選自鹵素原子、烧基及烷氧基之基取代之节基、（3)苯環可經選自鹵素原子、烷基及烷氧基之基取代之二苯甲基或（4)苯環可經選自鹵素原子、烧基及烧氧基之基取代之三苯曱基， R31為（1)羧基、（2)烷氧基羰基、（3)烷硫基羰基或（4)可本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 51 314235 200300676 A« B8 C8 D8 钊夂、申請專利範圍經烧基取代之胺基甲醯基者。 9.如申請專利範圍第7項之· 貝H法，其中，該R1及R2共同為T基、二笨曱基或审装 3 1 ^ 、，一本曱基，R31為羧基、烷氧基戴基或胺基甲酿基者。 10· —種通式（6-a)VtrRl Sn^A^NHR2 (6-a) CN (式中，R1為氫原子、於笨環上可具有取代基之苄基、於苯環上可具有取代基之二笨曱基或於苯環上可具有取代基之三苯甲基；R2為氫原子、於苯環上可具有取代基之节基、於苯環上可具有取代基之二苯曱基或於苯環上可具有取代基之三苯曱基）所示化合物或其鹽之製法，其特徵為將通式（5_a) ^Rl (5-a) --------------裝·-------訂----------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) CHO 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽與通式（7) R2-NH2 (7) (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物及氰化化合物進行反應 11 · 一種通式（6-a) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 52 314235 200300676 A8 B8 C8 D8 (6-a) 六、申請專利範圍 VrRl S、AyJ\IHR2 CN (式中’ R1為氫原子、於苯環上可具有取代基之苄基、於苯環上可具有取代基之二笨甲基或於苯環上可八有取代基之二苯甲基；R2為氫原子、於苯環上可具有取代基之节基、於苯環上可具有取代基之二苯曱基或於本環上可具有取代基之三苯甲基）所示化合物或其鹽之製法，其特徵為將通式（4_a) I----I --- (先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) bC!〇H (4-a) (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物或其鹽氧化，製造通式（5-a) HI (5-a) 訂· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中，符號與上述者同意義）所不之化合物或其鹽，接著，將所獲得之化合物（5_a) 與通式（7) R2 — NH' ⑺ (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物及氰化化合物進行反應本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 53 314235 200300676

六、申請專利範圍 12, 一種通式（111) “'Λ·上2

(式中R及R2為相同或不同之氫原子、於笨環亡可具有取代基之节基、於苯環上可具有取代基之二苯曱基或於苯環上可具有取代基之三苯曱基）所不化合物之製法，其特徵為經由如申請專利範圍第 10項或第11項之方法製造通式（6-a)WRl 5\^n^NHR2 (6-a) CN (式中，符號與上述者同意義）所不之化合物或其鹽，將所獲得之化合物（6-a)水解，製造通式（II-c) ----1II1---- ---I I---訂-----I I I » C請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 I-

一 c) (式中，符號與上述者同意義）所示之化合物，接著，將所獲得之化合物（11^)進行環轉化，製造通式（I-b) ^ 私紙張尺度適用^國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公髮） 314235 200300676

0^888 ABCD 六申請專利範圍 (I 一 b) (式中，符號與上述者同意義） k鈕所不之化合物或其鹽’再將所獲得之化合物(Lb) 水解，製造通式(I_a)

I 一a) C02H (式中，符號與上述者同意義）所不之化合物或其鹽，接著，將所獲得之化合物（I_a) 進行環化及表異構化。 13·如申請專利範圍第1〇項至第12項任何一項之製法，八中’邊R1及R2為相同或不同之（1)氫原子、（2)笨環可經選自齒素原子、烷基及烷氧基之基取代之节基、（3) 苯環可經選自函素原子、烷基及烷氧基之基取代之二苯曱基或（4)苯環可經選自鹵素原子、烷基及烧氧基之基取代之三苯曱基者。 1 4 ·如申請專利範圍第1 〇項至第12項任何一項之製法，其中，該R1及R2共同為苄基、二笨曱基或三苯曱基者。 15. —種通式（VII) ^^1. — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 55 314235 200300676 A8 B8 C8 D8

六、申請專利範圍 (V co2h 所示化合物之製法，其圍第2項、第4項、第7項或第；經由如申請專利範 (ΙΠ) … 12項之方法製造通式

(式中，R及R2為相同或不同之氮原子、於苯環上可具有取代基之苄基、於苯環上可具有取代基之二苯甲基或於苯環上可具有取代基之三苯曱基）所示之化合物，接著，將所獲得之化合物（πι)與通式（v) (V) : 參 ^---------^ t請先閱讀背面之注意事頊存填寫本頁) X^n- (CH2)4R4 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (式中，X1為豳素原子， R為醋化之缓基或醯胺化之竣基）所示之化合物進行反應，獲得通式（VI) 0 r1、A识2

(VI) (式中’符號與上述者同意義）本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 56 314235 I V) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 57 200300676 C8 D8

々、申請專利範圍所不之化合物或其鹽，接著，將所獲得之化合物（VI) 還原，必要時進行水解，更必要時將R1及/或R2轉化為氫原子。 16·如申請專利範圍第15項之製法，其中，該Ri及R2為相同或不同之（1)氫原子、（2)苯環可經選自_素原子、烷基及烷氧基之基取代之节基、（3)苯環可經選自_素原子、烷基及烷氧基之基取代之二苯甲基或（4)笨環可經選自！|素原子、烷基及烷氧基之基取代之三苯曱基， R4為（1)烧氧基羰基或（2)烷基胺基甲酿基者。 17·如申請專利範圍第15項之製法，其中，該R1及Μ共同為苄基、二苯甲基或三苯甲基，R4為烷氧基羰基者。 I8·一種二（咪唑烷基曱基）二硫化物化合物或其鹽，其特徵為該化合物係為通式（JY )所示， r1、n\，r2 (式中’R及R2為相同或不同之氫原子、於笨環上可具有取代基之节基、於苯環上可具有取代基之二笨曱基或於笨環上可具有取代基之三苯曱基，R3為氰基、羧基、烷氧基羰基、烷硫基羰基或可具有取代基之胺基甲醯基）。 19·如申請專利範圍第18項之化合物或其鹽，其中，該y 及R2為相同或不同之（1)氫原子、（2)苯環可經選自鹵 ¥紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（2w_x 297公爱） 314235 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁}

200300676 B8 C8 D8 申請專利範圍素原子、烷基及烷氧基之基取代之节基、（3)苯環可經選自南素原子、烷基及烷氧基之基取代之二苯曱基或（4) 笨環可經選自鹵素原子、烷基及烷氧基之基取代之三苯甲基，R3為（1)氰基、（2)羧基、（3)烷氧基羰基、（4) 烧硬基羰基或（5)可經烷基取代之胺基甲醯基者。申請專利範圍第18項之化合物或其鹽，其中，該Rl 及尺共同為苄基、二苯甲基或三苯甲基，R3為魏基、烧氧基羰基或胺基甲醯基者。 21· 一種通式（IX) 六 R- X- Y (IX) 子） (式中’ X為鋅或鎂’ γ為礙原子、漠原子或氯原經濟部智慧財產局員工消費合作社印製所示化合物之製法，其特徵為將通式（VIII) R-1 (VIII) (式中，R為可具有取代基之烷基、可具有取代基之二環基、可具有取代基之鏈烯基、含有1至4個選自氣原子、氧原子及硫原子等雜原子，可具有取代基之雜環基或可具有取代基之芳基）所不之化合物與經氣原子、溴原子、氣化氫或溴化氫處理之鋅或鎂進行反應。 22, 一種通式（Ιχ) (IX) „ I--------^---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 子） (式中，X為鋅或鎂，Y為碘原子、溴原子或氣原 ‘紙張^度適標準（CNS^^^ X 297公釐） 314235 58 200300676 A8 B8 CS D8 六、申請專利範圍所示化合物之製法，其特徵為將通式（VIII) R-I (VIII) (式中，R為可具有取代基之烷基、可具有取代基之二環基、可具有取代基之鏈烯基、含有1至4個選自氮原子、氧原子及硫原子等雜原子，可具有取代基之雜環基或可具有取代基之芳基）所示之化合物在通式（X) Μ- Y (X) (式中，Μ為金屬原子，Y與上述者同意義）所示之鹼存在下與鋅或鎂進行反應。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

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