SK9292003A3 - Novel mixtures of microbial enzymes - Google Patents
Novel mixtures of microbial enzymes Download PDFInfo
- Publication number
- SK9292003A3 SK9292003A3 SK929-2003A SK9292003A SK9292003A3 SK 9292003 A3 SK9292003 A3 SK 9292003A3 SK 9292003 A SK9292003 A SK 9292003A SK 9292003 A3 SK9292003 A3 SK 9292003A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- lipase
- amylase
- units
- protease
- enzymes
- Prior art date
Links
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 70
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 70
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 51
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 title abstract description 14
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 claims abstract description 61
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 claims abstract description 61
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 claims abstract description 58
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 claims abstract description 51
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims abstract description 50
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims abstract description 50
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims abstract description 50
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims abstract description 50
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims abstract description 39
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims abstract description 38
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 13
- 241000981399 Aspergillus melleus Species 0.000 claims abstract description 9
- 241000303962 Rhizopus delemar Species 0.000 claims abstract description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 8
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 claims abstract description 7
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims abstract 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 42
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 claims description 26
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 16
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000008188 pellet Substances 0.000 claims description 11
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 claims description 6
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 claims description 5
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 claims description 5
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 claims description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 4
- 230000004203 pancreatic function Effects 0.000 claims description 4
- -1 sachets Substances 0.000 claims description 4
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 abstract description 11
- 208000035467 Pancreatic insufficiency Diseases 0.000 abstract description 3
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 abstract 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 60
- 229940040461 lipase Drugs 0.000 description 36
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 31
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 29
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 18
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 17
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 17
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 15
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 13
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 13
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 12
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 10
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 10
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 10
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 229940025131 amylases Drugs 0.000 description 7
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 7
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 7
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 6
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 6
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 6
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 6
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 5
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 4
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 4
- 229920001030 Polyethylene Glycol 4000 Polymers 0.000 description 4
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 235000019626 lipase activity Nutrition 0.000 description 4
- 230000002366 lipolytic effect Effects 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 4
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 4
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 4
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 3
- 235000019888 Vivapur Nutrition 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 2
- 241001631457 Cannula Species 0.000 description 2
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 2
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 2
- 102000019280 Pancreatic lipases Human genes 0.000 description 2
- 108050006759 Pancreatic lipases Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 230000003625 amylolytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 235000019784 crude fat Nutrition 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 2
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 210000000277 pancreatic duct Anatomy 0.000 description 2
- 229940116369 pancreatic lipase Drugs 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 108010079522 solysime Proteins 0.000 description 2
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 2
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 2
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000027205 Congenital disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 241000588264 Rhizopus javanicus Species 0.000 description 1
- 240000005384 Rhizopus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000013752 Rhizopus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 239000001785 acacia senegal l. willd gum Substances 0.000 description 1
- 208000037919 acquired disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 108010051873 alkaline protease Proteins 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 108010019077 beta-Amylase Proteins 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 1
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 238000005453 pelletization Methods 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000011253 protective coating Substances 0.000 description 1
- 239000011241 protective layer Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 208000037921 secondary disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 235000021195 test diet Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/465—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1), e.g. lipases, ribonucleases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1652—Polysaccharides, e.g. alginate, cellulose derivatives; Cyclodextrin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
Description
Oblasť techniky
Tento vynález sa týka nových zmesi enzýmov, ktoré sú tvorené určitými kombináciami mikrobiálnej lipázy, proteázy a amylázy. Ďalej sa tento vynález týka farmaceutických prípravkov obsahujúcich tieto zmesi mikrobiálnych enzýmov. Tieto nové farmaceutické prípravky sú vhodné najmä na liečenie a/alebo na prevenciu porúch trávenia u cicavcov a u ľudí, najmä na liečenie a/alebo prevenciu porúch trávenia súvisiacich s chronickou exokrínnou nedostatočnosťou funkcie slinivky brušnej.
Doterajší stav techniky
Poruchy trávenia u cicavcov a u ludi spočívajú väčšinou v nedostatku tráviacich enzýmov, najmä pri nedostatku endogénnej lipázy, ale tak isto pri nedostatku proteázy a/alebo amylázy. Príčinou tohto nedostatku tráviacich enzýmov je často nedostatočná funkcia slinivky brušnej, t.j. orgánu, ktorý produkuje väčšinu endogénnych tráviacich enzýmov a najdôležitejšie z týchto enzýmov. Patologická nedostatočná funkcia slinivky brušnej môže byť vrodené alebo získané ochorenie. Získaná chronická nedostatočná funkcia slinivky brušnej môže byť napríklad spôsobená alkoholizmom. Vrodená nedostatočná funkcia slinivky brušnej môže byť napríklad spôsobená vrodeným ochorením mukoviszidózou. Symptómy nedostatku tráviacich enzýmov môže byť ťažká podvýživa alebo nedostatočná výživa, ktoré môžu mať za následok zvýšenú náchylnosť k sekundárnym ochoreniam.
Ako vhodná terapia nedostatku endogénnych tráviacich enzýmov sa osvedčila substitúcia spolu pôsobiacimi exogénnymi tráviacimi enzýmami alebo zmesami tráviacich enzýmov. V súčasnosti sa na tieto účely najčastejšie používajú farmaceutické prípravky (preparáty) obsahujúce pankreatín slinivky ošípanéj (skrátené pankreatín). Tieto tráviace zmesi enzýmov, ktoré sú získavané zo sliniviek ošípaných, môžu byť vzhľadom na veľkú podobnosť v nich obsiahnutých enzýmov a sprievodných látok k latkám tvoriacim sekrét slinivky brušnej u človeka takmer ideálnym spôsobom používaný pre enzymatickú substitučnú terapiu u ľudí. Pretože niektoré časti pankreatínu - napríklad lipáza slinivky brušnej a amyláza slinivky brušnej sú citlivé na nízke hodnoty pH v oblasti pod pH 5, je potrebné, aby pankreatínové preparáty určené na perorálne aplikácie boli chránené proti denaturácii kyslým prostredím v žalúdku obalené ochrannými vrstvami odolnými voči pôsobeniu žalúdočných štiav. Tieto ochranné vrstvy spôsobujú, že zložky pankreatínu citlivé na kyseliny sú chránené pred nevratným rozkladom a uvoľňujú sa až po prejdení žalúdkom v hornej oblasti tenkého čreva, kde pH má zvyčajne vyššie nezávadné hodnoty približne medzi 5,5 až 8. Zároveň je horná oblasť tenkého čreva, napríklad dvanástorník, miestom, kde sa zvyčajne resorbuje hlavný podiel enzymaticky rozštiepených častí potravy.
Pretože pankreatín je prírodná látka, je na jeho prípravu v kvalitatívne jednotnej, vysoko hodnotnej forme, potrebné vynaložiť značné technické úsilie. Okrem toho môžu mať suroviny používané pre spracovanie na pankreatín pomerne kolísavú kvalitu.
Preto boli vykonané rôzne pokusy vyrobiť zmesi enzýmov, kroré by ako náhrada telu vlastných tráviacich enzýmov mali lepšie vlastnosti ako pankreatín.
Aby boli substitučné enzýmy vhodné ako náhrada ľudských tráviacich enzýmov, musia spĺňať celý rad požiadaviek (viď. napríklad publikácia G.Peschke: Active Components and Galenic Aspects of Enzýme Preparations v príručke Pancreatic Enzymys in Health and Disease, editor P. G. Lankisch, Springer Verlag Berlín, Heidelberg 1991, str. 55 až 64, ktorá je v ďalšom texte uvádzaná ako Peschke) . Je potrebné, aby tieto substitučné enzýmy boli, okrem iného, stále v prítomnosti pepsinu, ako aj iných, telu vlastných proteáz, ako sú proteázy produkované slinivkou brušnou. Tieto enzýmy majú tak isto zachovávať svoju aktivitu za prítomnosti telu vlastných žlčových solí.
Obvykle sa predpokladá, že náhrada v dôsledku choroby pri nedostatočnej miere produkovanej, telu vlastnej lipázy je najdôležitejšou súčasťou pri terapii nahradzujúcej ľudské tráviace enzýmy. Už dlhší čas je však známe, že náhrada súčasne v nedostatočnej miere produkovanej proteázy a zároveň aj amylázy má dodatočný priaznivý vplyv na stav chorých (viď. napríklad Peschke, str. 55; WO 96/38170, str. 6) . Farmaceutické prípravky na liečbu a/alebo prevenciu porúch trávenia u cicavcov a u ľudí by teda okrem lipolytickej aktivity mali tiež podstatnou mierou nahradzovať aj proteolytickú a amylolytickú aktivitu tela. Je dôležité, aby rôzne, vo farmaceutickom prípravku obsiahnuté substitučné enzýmy (lipáza, proteáza, amyláza) mohli dostatočnou mierou uplatniť svoju aktivitu na príslušnom mieste pôsobenia (čo je spravidla vrchná oblasť tenkého čreva).
Pretože pri fyziologických podmienkach pri príjme potravy alebo krátko po ňom je v ľudskom žalúdku, okrem iného, väčšinou vyššia hodnota pH, napríklad 4 až 5, ako v prázdnom žalúdku (pH asi 1 až 2), a pretože fyziologická hodnota pH v hornej časti tenkého čreva je obvykle 5,5 až 8, môžu sa za vhodnú náhradu ľudských tráviacich enzýmov považovať enzýmy, ktoré sú dostatočne stále voči pôsobeniu kyslého prostredia a ktoré majú dobrú aktivitu v kyslom prostredí v oblasti hodnôt pH v rozsahu 4 až 8.
V európskej patentovej prihláške EP A O 387 945 sú opísané prípravky, ktoré obsahujú okrem extraktu zo slinivky cicavcov obsahujú aj lipázu mikrobiálneho pôvodu. Vzhľadom na tou, že tieto prípravky však obsahujú aj istý podiel zvieracieho pankreatínu, nemôžu byť pripravované jednoduchým a štandardizovaným spôsobom pri stále rovnakej kvalite a v ľubovoľnom množstve.
V medzinárodnej patentovej prihláške WO 96/38170 sú opísané prípravky, ktoré obsahujú okrem iného amylázu stálu v kyslom prostredí získavanú z Aspergillus niger a prípadne lipázu stálu v kyslom prostredí získanú z Rhizopus javanicus, a ktoré sú vhodné na použitie ako prípravky podporujúce trávenie. Prípravky vhodné ako náhrada telu vlastnej proteolytickej aktivity však v tomto dokumente nie sú opísané. Namiesto toho je iba poukázané na skutočnosť, že existuje možnosť náhrady všetkých ostatných častí sekrétu ľudskej slinivky brušnej okrem lipázy a amyláza pankreatínom získavaným zo slinivky ošípané j . Z toho je zrejmé, že prípravky opísané v dokumente WO 96/38170 nie sú určené na úplnú náhradu telu vlastných tráviacich enzýmov, ani nie sú na tento cieľ vhodné.
V dizertačnej práci S. Schelera Multiple unitZubereitungen aus Aspergillus oryzae-Enzymen hoher Aktivität mi t optimierter digestiver Potenz, Universität ErlangenNurnberg, 1995, sú skúmané, do značnej miery z hľadiska problému galenických prípravkov, kombinácie priemyselne vyrábaných enzýmov, konkrétne lipázy získavanej z Rhizopus oryzae, proteázy získavanej z Aspergillus oryzae a amylázy získavanej z Aspergillus oryzae. Avšak napríklad v týchto prípravkoch používaná lipáza je nedostatočne stála oproti telu vlastnej proteáze produkovanej slinivkou brušnou.
Z toho čo bolo uvedené je zrejmé, že farmaceutické prípravky, ktoré sú určené na úplnú náhradu ľudských a cicavčích, telu vlastných tráviacich enzýmov, musia obsahovať substitučné enzýmy resp. zmesi substitučných enzýmov, starostlivo prispôsobené telesným podmienkam užívateľa.
Podstata vynálezu
Úlohou tohto vynálezu bolo preto poskytnúť vylepšené zmesi tráviacich enzýmov, ako aj farmaceutické prípravky obsahujúce tieto zmesi, vhodné na liečenie a/alebo prevenciu porúch trávenia ľudí a cicavcov, ktoré môžu nahradiť telu vlastné lipolytické, proteolytické a amylolytické enzymatické aktivity a ktoré pri vyššej špecifickej aktivite v nich obsiahnutých substitučných enzýmov dovoľujú aplikáciu relatívne nízkych dávok. Súčasne je úlohou tohto vynálezu, aby všetky substitučné enzýmy obsiahnuté v týchto zmesiach tráviacich enzýmov (lipáza, proteáza, amyláza) jednotlivo, tak aj vo forme ich vzájomných zmesí, spĺňali čo najlepšie všetky požiadavky, ktoré ľudí. Napríklad je dostatočne stále sú kladené na enzýmy používané pri liečbe potrebné, aby tieto v kyslom prostredí prostredí dostatočnú aktivitu pri pH mieste ich fyziologického pôsobenia, boli sa tieto substitučné enzýmy vlastnými účinnými látkami ako sú substitučné enzýmy boli a aby mali v kyslom obvyklom na príslušnom Ďalej dobre žlčové je potrebné, znášajú s soli alebo aby telu telu vlastné proteázy, napríklad pepsín alebo proteázy produkované slinivkou brušnou. Ďalšou úlohou tohto vynálezu bolo zvoliť pre cieľ tohto vynálezu také substitučné enzýmy, ktoré by bolo možné, Čo sa týka použitého výrobného postupu a množstva, získavať jednoducho štandardizovanou technológiou, v stálej kvalite a v ľubovoľnom množstve.
Táto úloha je riešená poskytnutím novej zmesi mikrobiálnych enzýmov, ktorá obsahuje
a) koncentrovanú lipázu z Rhizopus delemar,
- β -
b) neutrálnu proteázu z Aspergillus melleus a
c) amylázu z Aspergillus oryzae.
Zmesi mikrobiálnych enzýmov podľa tohto vynálezu môžu byť obsiahnuté spolu s obvyklými pomocnými prostriedkami a/alebo nosičmi v bežných farmaceutických prípravkoch. Tieto farmaceutické prípravky obsahujú ako účinné látky výhradne zmesi mikrobiálnych enzýmov podlá tohto vynálezu produkované určitými plesňami a sú vhodné ako úplná náhrada telu vlastných tráviacich ľudských a cicavčích enzýmov. Jednotlivé enzýmy obsiahnuté v zmesiach mikrobiálnych enzýmov podľa tohto vynálezu (lipáza, proteáza, amyláza) sa vyznačujú tým, že majú vo fyziologickej až patofyziologickej oblasti pH v zažívacom trakte (pH 4 až 8) a najmä pri podmienkach, ktoré sú v zažívacom trakte prítomné pri príjme potravy alebo krátko po ňom, dobrú odolnosť voči kyslosti a dobrú aktivitu. Príslušné farmaceutické prípravky sa okrem toho vyznačujú dobrou účinnosťou a dobrou znášanlivosťou.
Koncentrovaná lipáza získavaná z Rhizopus delemar má špecifickú aktivitu aspoň 1 800 000 jednotiek FlP/g (= medzinárodne štandardizované jednotky enzymatickej aktivity podľa predpisu Fôderation International Pharmaceutique, Belgicko) . Kmeň Rhizopus delemar je považovaný za podkmeň kmeňa Rhizopus oryzae. Lipázy produkované plesňami kmeňa Rhizopus delemar sú známymi látkami a môžu sa získavať napríklad známymi postupmi využívajúcimi kultiváciu zodpovedajúcej plesne. Postupy fermentácie týchto plesní a izolácia enzymatických produktu produkovaných týmito plesňami sú odborníkom v danej oblasti známe, a sú napríklad opísané v príslušných biotechnologických učebniciach (viď. napríklad B.H.Diekmann, H.Metz, Grundlagen und Praxis der Biotechnológie, Gustáv Fischer Verlag Stuttgart, New York 1991) alebo z príslušných odborných publikácií. Následne môžu byť izolované lipázy zbavené známymi spôsobmi sprievodných látok a obohatené resp. skoncentrované až na špecifickú aktivitu podľa tohto vynálezu. S výhodou môže byť použitá lipáza (č. EC®3.1.1.3) lipáza D Amano 2000®, (označovaná aj ako lipáza D2®) z Rhizopus delemar vyrábaná firmou Amano Pharmaceuticals, Japonsko. Táto lipáza vykazuje podobne ako prirodzené lipázy slinivky brušnej 1,3 stereošpecificitu vzhľadom ku glyceridom mastných kyselín. Špecifická aktivita je v závislosti od náboja v rozmedzí 1 800 000 jednotiek FlP/g až 2 250 000 jednotiek FlP/g. Lipáza D Amano 2000® sa vyznačuje vysokou stabilitou voči pôsobeniu proteázy obsiahnutej v pankreatíne. V dôsledku toho je laboratórne stanovená lipolytická aktivita lipázy D Amano 2000® po dvojhodinovom pôsobení proteázy z pankreatinu pri pH 6 až 8 ešte 55 % východzej aktivity. Laboratórne stanovená stabilita lipázy D Amano 2000® v oblasti pH 4 až 8 pri 37 °C bola po 120 minútach aspoň 70 % východzej aktivity.
Na charakterizáciu koncentrovaných lipáz získaných z Rhizopus delemar je napríklad vhodný ich pH-profil. pH-profil lipázy D Amano 2000® je závislosť špecifickej aktivity na pH. Špecifické aktivity pri jednotlivých hodnotách pH sa stanovujú spôsobom podobným stanoveniu špecifickej aktivity v jednotkách FIP u mikrobiálnych lipáz. Dodatočne sa tak isto zistia pHprofily za prítomnosti rôznych koncentrácií žlčových solí.
a) príprava emulzie olivového oleja:
g arabskej gumy,
115 g olivového oleja a
400 ml vody sa počas 15 min. homogenizujú v mixéri.
b) príprava roztokov Galle-Dispert rôznych koncentrácií:
bez žlče: 120 ml vody
0,5 mmol/1 žlče: 120 ml vody + 200 mg Galle-Dispert (FIPStandard) mmol/1 žlče: 120 ml vody + 2 g Galle-Dispert mmol/1 žlče: 120 ml vody + 4 g Galle-Dispert
c) príprava emulzie substrátu:
- 8 zmieša sa
480 ml emulzie olivového oleje (viď. vyššie)
160 ml roztoku chloridu vápenatého (28,3 g CaCl2.2H2O v 11 vody) a
120 ml roztoku Galle-Dispert (viď. vyššie) požadovanej koncentrácie
d) príprava roztoku enzýmu:
mg lipázy D Amano 2000®” (špecifická aktivita 2 230 000 jednotiek FlP/g) sa rozpustí v 100 ml jednopercentného roztoku chloridu sodného. 1 ml tohto základného roztoku sa zriedi destilovanou vodou na 200 ml. Na ďalšie stanovenie sa použije vždy 1 ml tohto zriedeného základného roztoku (zodpovedajúceho 5,575 jednotiek FIP) .
Z vyššie uvedených emulzií substrátu, s určitými koncentráciami žlčových solí sa odoberú vzorky objemu 19 ml a ohrejú sa na 37 °C. V rôznych vzorkách emulzií substrátu sa potom pridaním 0,lM NaOH resp. IM HCI nastaví pH na hodnoty 3, 4, 5, 6, 7 a 8. K takto pripraveným vzorkám emulzií substrátu sa následne pridá vždy po 1 ml vyššie uvedených roztokov enzýmov (Poznámka: na stanovenie optimálnej rýchlosti titrácie sa vhodné množstvo lipázy obsiahnuté v roztoku enzýmov stanoví známym spôsobom pomocou zrieďovacieho radu). Potom sa pridávaním 0, IM NaOH uskutočňovaným počas 10 minút vykoná dotitrovanie na určitú hodnotu pH. Následne sa počas 30 sekúnd uskutoční titrácia do koncového bodu až na pH 9, aby sa dosiahla úplná disociácia uvolnených mastných kyselín. Celková spotreba 0, IM NaOH sa preráta na jednotky aktivity lipázy: jedna jednotka aktivity lipázy pritom zodpovedá spotrebe 1 pmol za minútu. Takto stanovené jednotky aktivity lipázy môžu byť podlá príslušnej hmotnosti použitého suchého enzýmu prerátané na jednotky/mg. pH-profily sa získajú tak, že stanovené hodnoty jednotky/mg pre každú zo skúmaných hodnôt pH sú v Tabulke 1 pre rôzne koncentrácie žlče, a tieto hodnoty sú graficky znázornené na obr. 1.
Tabuľka 1
| pH-profil | lipázy | D Amano | 2000® | ||
| PH | bez | žlče | 0,5 mmol/1 žlče | 5 mmcl/1 žlče | 10 mmol/1 žlče |
| 3 | 608 | 416 | 500 | 300 | |
| 4 | 936 | 972 | 1076 | 480 | |
| 5 | 1432 | 1342 | 960 | 1076 | |
| 6 | 1048 | 1570 | 1382 | 1220 | |
| “7 | 1024 | 2092 | 1832 | 988 | |
| 8 | 308 | 732 | 1104 | 64 | |
| 9 | 0 | n d | 200 | 0 |
Z takto určeného pH-profilu je možné stanoviť pH-optimum pre lipázu D Amano 2000® ako maximálnu hodnotu aktivity lipázy pri štandardnej koncentrácii žlčových soli 0,5 mmol/1 približne pri pH 7.
Neutrálna proteáza Aspergillus melleus vykazuje špecifickú aktivitu aspoň 7500 jednotiek FlP/g. pH-optimum je v tomto prípade medzi pH 6 až 8. Neutrálne proteázy plesní kmeňa Aspergillus melleus sú známe a môžu sa napríklad získať pomocou známych postupov pri použití kultivačných médií vhodných pre príslušný druh plesní. Postupy fermentácie plesní a izolácia enzymatických produktov vytváraných týmito plesňami sú odborníkom v danej oblasti známe, a sú opísané napríklad v príslušných učebniciach Biotechnológie (viď. napríklad H. Diekmann, H. Metz, Grundlagen. ur.d Praxis der Biotechnológie, Gustáv Fischer Verlag Stuttgart, New York 1991) alebo z príslušných odborných, publikácií. Následne sa môžu, v prípade potreby, tieto izolované proteázy známym spôsobom zbaviť znečisťujúcich látok a obohatiť, prípadne skoncentrovať,
- 10 aby sa dosiahli špecifické aktivity podía tohto vynálezu.
S výhodou sa môže použiť neutrálna proteáza Prozyme 6® (pripadne označovaná aj ako alkalická proteináza č. EC® 3.4.21.63) z Aspergillus melleus, vyrábaná japonskou firmou Amano Pharmaceuticals. Táto mikrobiálna proteáza hydrolyzuje
1,4-a-D-glukozidické väzby polysacharidu, ktorá obsahuje aspoň tri 1,4-oí-D-glukózovej jednotky a vykazuje špecifickú aktivitu asi 7800 jednotiek FlP/g. Laboratórnym stanovením pH-stability proteázy Prozyme 6® v oblasti pH 5 až 8 pri 37 °C bolo zistené, že po 120 minútach bola táto aktivita aspoň 60 % východzej aktivity.
Ako charakteristická veličina pre neutrálne proteázy získané z Aspergillus melleus je vhodný napríklad ich pHprofil. Preto bol stanovený pH-profil proteázy Prozyme 6® ako závislosť špecifickej aktivity tohto enzýmu na hodnote pH.
Pre tento ciel sa pripravujú rôzne roztoky substrátov podía predpisov metódy FIP na stanovenie aktivity proteáz vylučovaných slinivkou brušnou. Na rozdiel od predpisov FIP sa ako roztok substrátu použije namiesto kazeínu štvorpercentný roztok hemoglobínu. Následne sa na rozdiel od predpisu FIP v rôznych roztokoch substrátov pridaním zodpovedajúcich množstiev IM NaOH prípadne IM HC1 nastavia rôzne hodnoty pH, konkrétne 2, 3, 4, 5, 6, 7 a 8. K týmto roztokom substrátov sa pridajú vzorky Prozyme 6®.
Následne sa v týchto roztokoch substrátu s rozdielnymi hodnotami pH stanovia aktivity proteáz vo vzorkách Prozyme 6® použitím predpisov FIP opísaných vyššie. Enzymatické aktivity nájdené pre jednotlivé vzorky sa porovnajú s maximálnou hodnotou nájdenou v tomto nameranom rade (= 100 %). Hodnoty pH-profilu nájdené pre Prozyme 6® sú v Tabulke 2 graficky znázornené na cbr. 2. Je zrejmé, že Prozyme 6' je optimálne účinný vo fyziologickej oblasti pH.
Tabulka 2 pH-profil Prozyme 6® v percentách aktivity pri optimálnom pH (=100%)
| PH | aktivita(%) |
| 2 | 1 |
| 3 | 0 |
| 4 | 63 |
| 5 | 67 |
| O | 77 |
| 7 | 77 |
| 8 | 100 |
Z takto zisteného pH-profilu je možné určiť, že optimálne pH pre Prozyme 6®, pri ktorom sa dosiahne maximálna hodnota aktivity proteázy, je asi 8.
Amyláza použitá pri postupoch podľa tohto vynálezu (č. EC® 3.21.1.1) získaná z Aspergillus orvzae je a-amyláza vykazujúca špecifickú aktivitu aspoň 40 000 jednotiek FlP/g (merané pri pH 5,8). Optimálne pH sú v rozsahu hodnôt pH medzi 4 až 6,5. Amylázy získavané z plesní kmeňa Aspergillus oryzae sú známe a môžu byť pripravované známymi postupmi použitím kultivačných médií vhodných na kultiváciu zodpovedajúcich plesní. Postup fermentácie týchto plesní a izolácia plesni produkujúcich tieto enzymatické látky sú odborníkom v danej oblasti známe, a sú opísané napríklad v príslušných učebniciach biotechnológií (viď. napríklad H. Diekmann, H. Metz, Grundlagen und Praxis der Biotechnológie, Gustáv Fischer Verlag Stuttgart, New York 1991) alebo v príslušných odborných publikáciách. Následne sa môžu v prípade potreby izolovať amylázy známym spôsobom, zbaviť doprovodných látok a obohatiť, prípadne skoncentrovať až na špecifické aktivity zodpovedajúce požiadavkám tohto vynálezu. S výhodou môžu byť použité amylázy Amylase Al® získavané z Aspergillus melleus japonskou firmou Amano Pharmaceuticals a amyláza Amylase EC® získavaná z Äspergillus melleus nemeckou firmou ExtraktChemie. Prednosť sa dáva amyláze Amylase Al® .
Mikrobiálna amyláza Amylase Al® vykazuje špecifickú aktivitu asi 52 000 jednotiek FlP/g (merané pri pH 5,8). Amyláza Amylase Al® vykazovala stabilitu v oblasti pH od 5 do 8 zodpovedajúcej aspoň 85 % východzej aktivity počas 120 minút pri 37 °C. Ďalšími laboratórnymi skúškami bola zistená dobrá odolnosť amylázy Amylase Al® proti vplyvu proteázy slinivky brušnej z pankreatínu (merané v oblasti pH 6 až 8), proti vplyvu Prozyme 6®” (merané v oblasti pH 4 až 8), ako aj proti vplyvu pepsínu.
Ako charakteristika amyláz získaných z Äspergillus oryzae je vhodný ich pH-profil. Preto sa stanovil pH-profil amylázy Amylase Al® ako závislosť jej špecifickej aktivity na pH.
Pre tento ciel sa pripravujú rôzne roztoky substrátov podía predpisu metódy FIP na stanovenie aktivity amylázy vylučovaných slinivkou brušnou. Na rozdiel od predpisov FIP sa v rôznych roztokoch substrátov pridaním zodpovedajúcich množstiev 5M NaOH prípadne 5M HC1 nastavia rôzne hodnoty pH, konkrétne 3,25; 4; 5; 6; 6,8 a 7,4. K týmto roztokom substrátov sa pridajú vzorky amylázy Amylase Al®.
Následne sa v týchto roztokoch substrátov s rozdielnymi hodnotami pH stanovia aktivity amylázy vo vzorkách amylázy Amylase Al® použitím vyššie uvedených predpisov FIP. Enzymatické aktivity nájdené pre jednotlivé vzorky sa porovnajú s maximálnou hodnotou nájdenou v tomto nameranom rade (=100%) . Hodnoty pH-profilu nájdené pre amylázy Amylase Al® sú v Tabulke 3 a graficky znázornené na obr. 3.
Tabulka 3 pH-profil'Amylase Al® v percentách aktivity pri optimálnom pH (=100%)
| PH | aktivita(% ) |
| 3,25 | 33 |
| 4 | 60 |
| 5 | 100 |
| 5,8 | 87 |
| 6 | 80 |
| 6,8 | 33 |
| 7,4 | 10 |
Z takto zisteného pH-profilu je možné určiť, že optimálne pH pre amylázy Amylase Al®, pri ktorom sa dosiahne maximálna hodnota aktivity proteázy, je približne 5.
Mikrobiálna amyláza Amylase EC® vykazuje špecifickú aktivitu asi 42 500 jednotiek FlP/g (merané pri pH 5,8). Okrem toho je možné preukázať aj nízke podiely β-amylázy. Optimum aktivity (merané vyššie uvedeným spôsobom pre amylázu Amylase Al®) je približne pri pH 5. Amyláza Amylase Al® vykazovala stabilitu v oblasti pH od 6 do 8 zodpovedajúcej aspoň 80 % východzej aktivity počas 120 min. pri 37 °C. Ďalšími laboratórnymi skúškami bola zistená dobrá odolnosť amylázy Amylase EC® proti vplyvu proteázy slinivky brušnej z pankreatínu (merané v oblasti pH 6 až 8), proti vplyvu Prozvme 6i’ (merané v oblasti pH 4 až 8) , ako aj proti vplyvu pepsínu.
Liekovými formami vhodnými pre farmaceutické prípravky podlá tohto vynálezu sú pevné perorálne dávkovatelné liekové formy, napríklad prášok, peletky alebo mikrosféry, ktoré je v prípade potreby možné lisovať do kapsuli alebo plniť do vrecúška. Do úvahy sú prípadne brané aj kvapalné farmaceutické prípravky ako sú suspenzie alebo roztoky.
Jednotlivé enzýmy, lipáza, proteáza a amyláza sa môžu použiť v zmesi, alebo aj jednotlivo, ako navzájom oddelené látky. Pokial jednotlivé enzýmy nie sú od seba oddelené, je vhodnejšia suchá lieková forma a/alebo skladovanie v suchom stave. Farmaceutické prípravky môžu ďalej obsahovať obvyklé pomocné látky a nosiče. Ako pomocné látky a/alebo nosiče sa používajú napríklad mikrokryštalické celulózy, polyetylénglykoly, napríklad PEG 4000, alebo nižšie alkoholy, najmä nerozvetvené alebo rozvetvené alkoholy Ci~C4 ako 2-propanol a tiež voda.
Substitučné enzýmy mikrobiálneho pôvodu podlá tohto vynálezu sa vyznačujú dobrou stálosťou v širokom rozsahu hodnôt pH a môžu sa preto bez ďalších úprav (ako je potiahnutie ochranným filmom) použiť priamo na prípravu farmaceutických prípravkov pre perorálnu aplikáciu. S týmto cieľom sa môžu jednotlivé substitučné enzýmy (lipáza, proteáza a amyláza) peletizovať v zmesi, alebo navzájom oddeliť. .Ak je to požadované, môžu sa tieto jednotlivé substitučné enzýmy obaliť vhodnými, z doterajšieho stavu techniky známymi ochrannými filmami odolnými voči pôsobeniu žalúdočných štiav. Pokial sa tieto ochranné filmy nemôžu použiť pre všetky substitučné enzýmy, je vhodné peletizovať jednotlivé druhy substitučných enzýmov oddelene a peletky sa potiahnú pri každom enzýme zvlášť. Vhodná je najmä oddelená peletizácia a potiahnutie filmom odolným voči pôsobeniu žalúdočných štiav u proteáz a/alebo lipáz. Ak sa to požaduje, je možné poťahovať filmom odolným voči pôsobeniu žalúdočných štiav tiež všetky tri enzýmy prítomné v zmesi enzýmov spoločne, alebo je možné poťahovať filmom odolným voči pôsobeniu žalúdočných štiav dva enzýmy a jeden enzým ponechať bez tohto ochranného povlaku.
Vysoké špecifické aktivity substitučných enzýmov podľa tohto vynálezu umožňujú použitie relatívne malých dávok, ktoré sa napriek tomu vyznačujú vyššou účinnosťou. Možná je na napríklad lieková forma na perorálne použitie, ktorou je kapsula veľkosti
0.
Aj táto lieková forma môže obsahovať 10 000 až 50 000 jednotiek FIP lipázy, 8000 jednotiek FIP amylázy a 200 jednotiek FIP proteázy. Účinným pomerom substitučných enzýmov lipázy, amylázy a proteázy je pomer týchto látok 50 až 500 jednotiek FIP : 40 až 120 jednotiek FIP : 1 jednotka FIP.
Vhodnosť farmaceutických prípravkov podľa tohto vynálezu na liečbu a/alebo prevenciu poruchy trávenia ľudí a cicavcov môže byť preukázaná pomocou v ďalej uvedenej skúšky trávenia tukov in vitro.
1. Odbúravanie tukov v skúšobnom krmive pre ošípané
Skúmaný bol vplyv zmesi mikrobiálnych enzýmov použitých v postupoch podľa tohto vynálezu na odbúravanie tuku v skúšobnom krmive pre ošípané obsahujúcom okrem tuku aj ďalšie zložky. Pridaním roztoku chloridu vápenatého, ktorý bol súčasťou použitého postupu, sa dosiahlo vyzrážanie uvoľnených mastných kyselín vo forme vápenatých mydiel.
A) Príprava skúšobného krmiva pre ošípané
64,8 g krmiva Altromin 9021® (výrobca Altromin GmbH, Nemecko, obsah tuku 2 až 3 %, v podstate pšeničný šrot),
3,85 g bielkovinovej zmesi So j amin®B (výrobca Lukas Meyer, Nemecko)
24,5 g arabskej gumy (výrobca Merck KGaA, Nemecko) a
26,7 g sójového oleja (výrobca Roth, Nemecko; hlavná tuková zložka; stredná molekulová hmotnosť - 932 g/mol) bolo zmiešaných s 265 ml prečistenej vody a takto získaná zmes bola následne homogenizovaná v kuchynskom mixéri počas 15 min. Do získaného homogenizátu sa pridal voda v takom množstve, aby celkový objem zmesi bol 450 ml.
B) Príprava roztoku prípravku Galle-Dispert
1,35 g prípravku Galle-Dispert (FlP-standard, aktivačná zmes
- 16 lipáz) sa rozpustí v 50 ml prečistenej vody.
C) Príprava roztokov enzýmov
1. Roztok lipázy
63,1 mg lipázy D Amano 2000®, výrobca Amano Pharmaceuticals, Japonsko (špecifická aktivita pri pH 7 sa rovná 1 888 137 jednotkám FlP/g) sa rozpustí v 10 ml prečistenej vody. Z tohto základného roztoku sa použije 250 μΐ na ďalej opísané merania.
2. Roztok proteázy
319 mg Prozyme 6®, výrobca Amano Pharmaceuticals, Japonsko
| (špecifická | aktivita | pri | pH 7,5 sa rovná 7 | 812 | jednotkám |
| FlP/g) sa | rozpustí | v | 10 ml prečistenej | vody. | Z tohto |
| základného | roztoku | sa | použije 250 μΐ na | ďalej | opísané |
| merania. | |||||
| 3. Roztok | amylázy |
595 mg amylázy Amylase EC*, výrobca Extrakt-Chemie, Nemecko (špecifická aktivita pri pH 5,8 sa rovná 13 466 jednotkám FlP/g) sa rozpusti v 10 ml prečistenej vody. Z tohto základného roztoku sa použije 1000 μΐ na ďalej opísané merania.
D) Príprava meracieho roztoku
15,5 ml vyššie uvedeného skúšobného krmiva pre ošípané sa zmieša s 2 ml skôr uvedeného roztoku prípravku Galle-Dispert a následne sa tromi skôr uvedenými roztokmi enzýmov C) 1 až C) 3 a takto získaný roztok sa doplní prečistenou vodou na celkový objem 29 ml.
E) Uskutočnenie merania
Pripravený merací roztok sa ohreje na 37 °C a titráciou po koncový bod IM NaOH sa pH nastaví na hodnotu 7. Bezprostredne po pridaní uvedených troch roztokov enzýmov sa začne s titráciou na konštantné pH, ktorá sa uskutočňuje počas 20 minút, pričom sa každých 10 sekúnd zaznamenáva spotreba IM NaOH.
Počas titrácie sa v dávkach po 50 pm postupne celkovo pridá ml 4Μ roztoku chloridu vápenatého takou rýchlosťou, že sa dosiahne maximálna reakčná rýchlosť.
F) Výsledok
Tuky (= triglyceridy mastných kyselín), obsiahnuté v skúšobnom krmive pre ošípané, boli po 20 minútach zhydrolyzované na 67 %. To zodpovedá viac než stopercentnému odbúravaniu 2-monoglyceridov mastných kyselín na fyziologické produkty (hodnoty vyššie ako 100 % sú spôsobené spontánnou premenou 2-mononoglyceridov mastných kyselín na 1- prípadne 3mononogly-ceridy mastných kyselín a nasledujúcim lipolytickým štiepením).
Dobrá tráviaca účinnosť tráviacej zmesi enzýmov podľa tohto vynálezu môže byť tak isto preukázaná skúškami in vitro na skúšobnej potrave s olivovým olejom.
Zvlášť dobrá účinnosť farmaceutických prípravkov na liečenie a/alebo prevenciu porúch trávenia u ľudí a cicavcov, najmä pri liečení porúch vznikajúcich v dôsledku nedostatočnej funkcii slinivky brušnej, môže byť tak isto preukázaná pokusmi na zvieratách in vivo, pričom týmito zvieratami môžu byť napríklad ošípané s nedostatočnou funkciou slinivky brušnej:
2. Skúmanie účinnosti zmesi enzýmov podľa tohto vynálezu in vivo na ošípaných s nedostatočnou funkciou slinivky brušnej
Pokusy boli uskutočňované na deviatich dospelých samiciach ošípanej Gottingen Miniaturschwein, Linie Ellegaard (telesná hmotnosť 33 až 40 kg), ktorým sa zaviedli ileocekálne obchvatné kanyly. Tieto obchvatné kanyly slúžili na chýmus zvierat. Týmto šiestim zvieratám (pokusné zvieratá) bol uzatvorený vývod slinivky brušnej. Ostatné tri zvieratá boli kontrolné zvieratá, s neporušeným vývodom slinivky brušnej. Skúška bola uskutočnená celkovo s tromi rôznymi dávkami enzymatickej zmesi podľa tohto vynálezu. Použité boli tieto dávky enzymatickej zmesi:
Dávka 1: 111 833 jednotiek FIP lipázy D Amano 2000® na kŕmnu dávku
1775 jednotiek FIP Prozyme 6® na 1 kŕmnu dávku
7 60 jednotiek FIP Amylase Al® na 1 kŕmnu dávku
Dávka 2: 223 665 jednotiek FIP lipázy D Amano 2000® na kŕmnu dávku
3551 jednotiek FIP Prozyme®0 na 1 kŕmnu dávku
179 520 jednotiek FIP Amylase Al® na 1 kŕmnu dávku
Dávka 3: 335 498 jednotiek FIP lipázy D Amano 2000® na kŕmnu dávku
5326 jednotiek FIP Prozyme 6® na 1 kŕmnu dávku
269 280 jednotiek FIP Amylase 1® na 1 kŕmnu dávku
Všetky zvieratá boli vždy počas 22 dní kŕmené dva razy denne kŕmnymi dávkami s celkovou hmotnosťou 250 g, pozostávajúcimi zo 170 g základnej kŕmnej zmesi pre nedorastené ošípané (Altromin®, výrobca firma Lukas Meyer; v podstate dva razy šrotovaná pšenica) , 10 g bielkovinného koncentrátu (Sojamin 90®, výrobca firma Lukas Meyer), 70 g sójového oleja (výrobca firma Roth) a 0,625 g Cr203 (neresorbovatelný marker, výrobca firma Roth), v zmesi s 1 1 vody. V zodpovedajúcich množstvách boli do krmiva skúšobných zvierat krátko pred kŕmením pridané jednotlivé enzýmy enzymatických zmesí podlá tohto vynálezu. Následne sa s piatimi pokusnými zvieratami uskutočnila séria pokusov, pri ktorých sa im do kŕmenia nepridávali žiadne enzýmy. Výsledky získané v tejto sérii pokusov boli použité ako nulové hodnoty. Vždy v 20. až 22. dni pokusu sa pokusným zvieratám odoberali počas 12 hodín vzorky chýmusu z obchvatných kanýl. V týchto vzorcoch sa meral obsah tuku a škrobu. Pokusy a ich vyhodnotenie sa uskutočnili známym spôsobom (viď. P.C.Gregory, R.Tabeling, J.Kamphues, Biology of the Pancreas in Growing Animals; Developments in Animal and Veterinary Sciences 2_8 (1999) 381-394, Eisevier,
Amsterdam; vydavateľ S.G.Pierzynowski a R.Zabielski).
- 19 Pri týchto in vivo pokusoch stanovená zdanlivá precekálna stráviteľnosť surového tuku, surových proteinov a škrobu je udaná v tabuľke 4 v percentách pôvodne absolútnych množstiev tuku, proteinov označené precekálna stráviteľnosť sú ktoré sa zvieraťom zjedených a škrobu. Hodnoty hodnoty zdanlivej precekálnej stráviteľnosti, ktoré sa odlišujú od skutočnej precekálnej stráviteľnosti tým, že môžu zahrnovať aj nizke endogénne podiely skúmaných látok, napríklad endogénnych proteinov. Hodnoty precekálnej stráviteľnosti sV sa určia pomocou ďalej uvedeného vzorca v chýrne pokusných zvierat postupom podľa Markera:
indikátora v potraveκ % výživné látky v chýrne Χχοθ) indikátora v chýrne % výživné látky v potrave
Tabuľka 4
Stanovenie precekálnej stráviteľnosti surových tukov, surových proteinov a škrobu in vivo
| pre· | cekálna stráviteľnosť | (%) | |
| Surový tuk | Surové proteiny | škrob | |
| nulové hodnoty | 29,0 + 9, g | 33,7 ± 5,2 | 63,8 + 6,7 |
| koncentrácia 1 | 43,5 ±9,9 | 56,3 + 4,5 | 71,9 + 9,3 |
| koncentrácia 2 | 52,1 + 3,3 | 64,0 ± 3,7 | 74,2 ±5,8 |
| koncentrácia 3 | 55,3 + 8,0 | 68,7 + 3,3 | 8 1,6 + 3,7 |
| kontrolný pokus | 97,6 ± 0,02 | 82,3 ± 1,5 | 96,9 + 0,5 |
| Všetky hodnoty v tabuľke | sú stredné . | hodnoty s udanou štandardnou cdchýl |
Z uvedených výsledkov pokusu je zrejmé, že podávanie enzymatickej zmesi podľa tohto vynálezu spôsobuje významné zlepšenie stráviteľnosti tuku, bielkovín a sacharidu u ošípaných s nedostatočnou funkciou slinivky brušnej a že toto zlepšenie je závislé na použitej dávke enzymatickej zmesi.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Zo 400 g lipázy D Amano 2000®, 400 g PEG 4000 a 1,200 g Vivapur® (= mikrokryštalická celulóza) sa po pridaní malého množstva 2-propanolu a vody pripravili známym spôsobom peletky priemeru 0,7 až 1,4 mm.
Zo 7,000 g Amylase Al®, 2,000 g PEG 4000 a 1,000 g
Vivapur® sa po pridaní malého množstva 2-propanolu a vody pripravili známym spôsobom peletky priemeru 0,7 až 1,7 mm.
Z 1,750 g Prozyme 6'*, 500 g PEG 4000 a 250 g Vivapur* sa po pridaní malého množstva 2-propanolu a vody pripravili známym spôsobom peletky priemeru 0,7 až 1,7 mm.
Tieto peletky boli plnené do želatínovej kapsule veľkosti 0 tak, že sa použilo 32 mg lipázových peletiek 325 mg amylázových peletiek a 40 mg proteázových peletiek. Takto získaná lieková forma mala tieto aktivity jednotlivých enzýmov na jednu kapsulu:
lipáza: 10 000 jednotiek FIP proteáza: 200 jednotiek FIP amyláza: 8000 jednotiek FIP
Claims (14)
1. Zmes enzýmov vyznačujúca sa tým, že obsahuj e
a) koncentrovanú lipázu z Rhizopus delemar,
b) neutrálnu proteázu z Aspergillus melleus a
c) amylázu z Aspergillus oryzae.
2. Zmes enzýmov podía nároku 1, vyznačujúca sa tým, že lipáza vykazuje špecifickú aktivitu aspoň
1 800 000 jednotiek FlP/g.
3. Zmes enzýmov podía nároku 1, vyznačujúca sa tým, že proteáza vykazuje špecifickú aktivitu aspoň 7500 jednotiek FlP/g.
4. Zmes enzýmov podía nároku 1, vyznačujúca sa tým, že pH-optimum proteázy je v rozmedzí hodnôt pH 6 až 8.
5. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje zmes enzýmov podía nároku 1 a obvyklé pomocné látky a/alebo nosiče.
6. Prípravok podía nároku 5, vyznačujúci sa tým, že týmto prípravkom, ktorý má formu práškov, peletiek, mikrosfér, kapsulí, vrecúšok, tabliet, je suspenzia alebo roztok.
7. Prípravok podía nároku 5, v y z n a č u j ú c i sa tým, že aspoň jeden z týchto enzýmov, ktorými sú lipáza, proteáza a amyláza, je samostatne peletizovaný.
8. Prípravok podía jedného z nárokov 5 až 7, vyznačujúci sa tým, že aspoň jeden z enzýmov, ktorými sú lipáza, proteáza a amyláza, je potiahnutý filmom odolným voči pôsobeniu žalúdočných štiav.
9. Prípravok podľa nároku 8, vyznačujúci sa tým, že proteáza a/alebo lipáza sa peletizujú jednotlivo a sú potiahnuté vrstvou odolnou voči pôsobeniu žalúdočných štiav.
10. Prípravok podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že pomer enzýmov lipáza : amyláza : proteáza je 50 až 500 jednotiek FIP : 40 až 120 jednotiek FIP : 1 jednotka FIP.
11. Prípravok podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že jedna dávka tohto prípravku obsahuje aspoň 10 000 jednotiek FIP lipázy, 8000 jednotiek FIP amylázy a 200 jednotiek FIP proteázy.
12. Použitie zmesi enzýmov podľa nároku 1 na prípravu liečiva na liečenie a/alebo prevenciu porúch trávenia u cicavcov a ľudí.
13. Použitie podľa nároku 12,vyznačujúce sa tým, že poruchy trávenia sú spôsobené nedostatočnou funkciou slinivky brušnej.
14. Použitie koncentrovanej lipázy z Rhizopus delemar, so špecifickou aktivitou aspoň 1 800 000 jednotiek FlP/g na prípravu liečiva na liečenie a/alebo prevenciu porúch trávenia u cicavcov a ľudí.
pH-profil
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE10102495 | 2001-01-19 | ||
| DE10144711A DE10144711A1 (de) | 2001-01-19 | 2001-09-11 | Neue Gemische mikrobieller Enzyme |
| PCT/EP2002/000374 WO2002060474A2 (de) | 2001-01-19 | 2002-01-16 | Gemische von enzymen aus pilzen und deren verwendung zur behandlung der maldigestion |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK9292003A3 true SK9292003A3 (en) | 2003-12-02 |
Family
ID=26008287
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK929-2003A SK9292003A3 (en) | 2001-01-19 | 2002-01-16 | Novel mixtures of microbial enzymes |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20040057944A1 (sk) |
| EP (1) | EP1381386A2 (sk) |
| JP (1) | JP2004524838A (sk) |
| CN (1) | CN1236817C (sk) |
| AR (1) | AR032392A1 (sk) |
| BR (1) | BR0206521A (sk) |
| CA (1) | CA2434808A1 (sk) |
| CZ (1) | CZ20031900A3 (sk) |
| HU (1) | HUP0500560A3 (sk) |
| IL (1) | IL157004A0 (sk) |
| MX (1) | MXPA03005960A (sk) |
| NO (1) | NO20033261D0 (sk) |
| NZ (1) | NZ527148A (sk) |
| PL (1) | PL362646A1 (sk) |
| RU (1) | RU2003124078A (sk) |
| SK (1) | SK9292003A3 (sk) |
| WO (1) | WO2002060474A2 (sk) |
Families Citing this family (67)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6632429B1 (en) * | 1999-12-17 | 2003-10-14 | Joan M. Fallon | Methods for treating pervasive development disorders |
| US20010046493A1 (en) * | 2000-02-24 | 2001-11-29 | Alex Margolin | Lipase-containing composition and methods of use thereof |
| US20070053895A1 (en) * | 2000-08-14 | 2007-03-08 | Fallon Joan M | Method of treating and diagnosing parkinsons disease and related dysautonomic disorders |
| IT1319655B1 (it) | 2000-11-15 | 2003-10-23 | Eurand Int | Microsfere di enzimi pancreatici con elevata stabilita' e relativometodo di preparazione. |
| US8030002B2 (en) | 2000-11-16 | 2011-10-04 | Curemark Llc | Methods for diagnosing pervasive development disorders, dysautonomia and other neurological conditions |
| US8100844B2 (en) * | 2002-04-25 | 2012-01-24 | Ultraflex Systems, Inc. | Ambulating ankle and knee joints with bidirectional dampening and assistance using elastomeric restraint |
| CA2544156C (en) * | 2003-10-29 | 2012-07-10 | Altus Pharmaceuticals Inc. | Non-pancreatic proteases for controlling plasma cholecystokinin (cck) concentration and for treating pain |
| CA2560613C (en) | 2004-03-22 | 2015-11-24 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Oral pharmaceutical compositions of lipase-containing products, in particular of pancreatin, containing surfactants |
| WO2005115445A1 (en) | 2004-05-24 | 2005-12-08 | Novozymes A/S | Enzymes for pharmaceutical use |
| US20060198838A1 (en) * | 2004-09-28 | 2006-09-07 | Fallon Joan M | Combination enzyme for cystic fibrosis |
| US7718169B2 (en) * | 2004-10-14 | 2010-05-18 | Cystic Fibrosis Foundations Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for treating pancreatic insufficiency |
| EP1896057A2 (en) * | 2005-06-24 | 2008-03-12 | Novozymes A/S | Amylases for pharmaceutical use |
| BRPI0611936A2 (pt) * | 2005-06-24 | 2011-02-22 | Solvay Pharm Gmbh | protease, uso de uma protease, composição farmacêutica, e, método para o tratamento de doença |
| RU2007149045A (ru) * | 2005-06-24 | 2009-07-10 | Новозимс А/С (Dk) | Липазы для фармацевтического применения |
| WO2007014896A1 (en) * | 2005-07-29 | 2007-02-08 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Processes for the manufacture of sterilized pancreatin powder |
| US9198871B2 (en) | 2005-08-15 | 2015-12-01 | Abbott Products Gmbh | Delayed release pancreatin compositions |
| WO2007020260A2 (en) * | 2005-08-15 | 2007-02-22 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Pancreatin micropellet cores suitable for enteric coating |
| US11266607B2 (en) | 2005-08-15 | 2022-03-08 | AbbVie Pharmaceuticals GmbH | Process for the manufacture and use of pancreatin micropellet cores |
| US20080058282A1 (en) | 2005-08-30 | 2008-03-06 | Fallon Joan M | Use of lactulose in the treatment of autism |
| US20070116695A1 (en) * | 2005-09-21 | 2007-05-24 | Fallon Joan M | Pharmaceutical preparations for attention deficit disorder, attention deficit hyperactivity disorder and other associated disorders |
| US20100196344A1 (en) * | 2005-10-14 | 2010-08-05 | Cystic Fibrosis Foundation Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for treating pancreatic insufficiency |
| US8071089B2 (en) * | 2005-11-01 | 2011-12-06 | Bio-Cat, Inc. | Composition with a fungal (yeast) lipase and method for treating lipid malabsorption in cystic fibrosis as well as people suffering from pancreatic lipase insufficiency |
| US10072256B2 (en) | 2006-05-22 | 2018-09-11 | Abbott Products Gmbh | Process for separating and determining the viral load in a pancreatin sample |
| US20080081035A1 (en) * | 2006-10-03 | 2008-04-03 | National Enzyme Company | Therapeutic protease compositions |
| US7998476B2 (en) | 2006-11-22 | 2011-08-16 | Standard Biologics, Inc. | Method of treatment using Aspergillus oryzae protease |
| EP2455462B1 (en) | 2006-12-21 | 2016-03-16 | Novozymes A/S | Lipase variants for pharmaceutical use |
| US20080199448A1 (en) * | 2007-02-16 | 2008-08-21 | Ross Mairi R | Enzyme composition for improving food digestion |
| CA2677989C (en) * | 2007-02-20 | 2018-04-24 | Eurand Pharmaceuticals Limited | Stable digestive enzyme compositions |
| US20090068174A1 (en) * | 2007-09-12 | 2009-03-12 | Kansas University Medical Center Research Institute, Inc. | Therapeutic alkaline protease compositions and use in facilitating the transport of agents across the gastrointestinal mucosal lining |
| US20090130063A1 (en) * | 2007-11-15 | 2009-05-21 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Process for separating and determining the viral load in a pancreatin sample |
| US8455235B2 (en) | 2007-12-04 | 2013-06-04 | Novozymes A/S | Protease variants for pharmaceutical use |
| CA2711187A1 (en) * | 2008-01-03 | 2009-07-09 | George Shlieout | Pharmaceutical compositions comprising granules of purified microbial lipase and methods for preventing or treating digestive disorders |
| US10087493B2 (en) | 2008-03-07 | 2018-10-02 | Aptalis Pharma Canada Ulc | Method for detecting infectious parvovirus in pharmaceutical preparations |
| US8658163B2 (en) * | 2008-03-13 | 2014-02-25 | Curemark Llc | Compositions and use thereof for treating symptoms of preeclampsia |
| US8084025B2 (en) * | 2008-04-18 | 2011-12-27 | Curemark Llc | Method for the treatment of the symptoms of drug and alcohol addiction |
| US20090324730A1 (en) * | 2008-06-26 | 2009-12-31 | Fallon Joan M | Methods and compositions for the treatment of symptoms of complex regional pain syndrome |
| US9320780B2 (en) * | 2008-06-26 | 2016-04-26 | Curemark Llc | Methods and compositions for the treatment of symptoms of Williams Syndrome |
| PL2318035T3 (pl) * | 2008-07-01 | 2019-10-31 | Curemark Llc | Sposoby i kompozycje do leczenia objawów zaburzeń neurologicznych i zaburzeń zdrowia psychicznego |
| US10776453B2 (en) * | 2008-08-04 | 2020-09-15 | Galenagen, Llc | Systems and methods employing remote data gathering and monitoring for diagnosing, staging, and treatment of Parkinsons disease, movement and neurological disorders, and chronic pain |
| US20110171294A1 (en) * | 2008-09-30 | 2011-07-14 | Dsm Ip Assets B.V. | Enzyme composition and application thereof in the treatment of pancreatic insufficiency |
| US20100092447A1 (en) | 2008-10-03 | 2010-04-15 | Fallon Joan M | Methods and compositions for the treatment of symptoms of prion diseases |
| CN105031628B (zh) | 2009-01-06 | 2020-10-02 | 加尔纳根有限责任公司 | 治疗或预防大肠杆菌导致的经口感染的组合物和方法 |
| KR20170005192A (ko) | 2009-01-06 | 2017-01-11 | 큐어론 엘엘씨 | 스타필로코쿠스 아우레우스 감염의 치료 또는 예방 및 표면 상의 스타필로코쿠스 아우레우스의 박멸 또는 감소를 위한 조성물 및 방법 |
| AU2015252099B2 (en) * | 2009-01-06 | 2017-08-10 | Galenagen, Llc | Compositions and methods for the treatment or prevention of staphylococcus aureus infections and for the eradication or reduction of staphylococcus aureus on surfaces |
| US9056050B2 (en) | 2009-04-13 | 2015-06-16 | Curemark Llc | Enzyme delivery systems and methods of preparation and use |
| WO2011050135A1 (en) | 2009-10-21 | 2011-04-28 | Curemark Llc | Methods and compositions for the prevention and treatment of influenza |
| RU2012142134A (ru) * | 2010-03-19 | 2014-04-27 | Апталис Фарма Кэнэда Инк. | Желудочно-резистентные ферментные фармацевтические композиции |
| MX348118B (es) | 2010-10-01 | 2017-05-26 | Aptalis Pharma Ltd | Formulaciones de pancrelipasa con recubrimiento enterico de baja potencia. |
| WO2012088303A2 (en) | 2010-12-22 | 2012-06-28 | Novozymes North America, Inc. | Processes for producing fermentation products |
| AU2012245287B2 (en) | 2011-04-21 | 2017-04-13 | Curemark, Llc | Compounds for the treatment of neuropsychiatric disorders |
| EP2987499B1 (en) | 2011-08-08 | 2019-05-08 | Allergan Pharmaceuticals International Limited | Method for dissolution testing of solid compositions containing digestive enzymes |
| EP2785847B1 (en) * | 2011-12-02 | 2017-07-26 | Novozymes A/S | Liquefaction process with selected alpha-amylases and proteases |
| US10350278B2 (en) | 2012-05-30 | 2019-07-16 | Curemark, Llc | Methods of treating Celiac disease |
| PL2897604T3 (pl) | 2012-09-19 | 2018-10-31 | Grespo Ab | Kompozycje do ulepszenia funkcji mózgu |
| AU2014229330B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-08-09 | Allergan Pharmaceuticals International Limited | Composition containing digestive enzymes and nutrients suitable for enteral administration |
| PL3013967T3 (pl) | 2013-06-24 | 2022-03-21 | Novozymes A/S | Sposoby odzyskiwania oleju z procesów wytwarzania produktów fermentacji i sposoby wytwarzania produktów fermentacji |
| US11939552B2 (en) | 2013-06-24 | 2024-03-26 | Novozymes A/S | Process of recovering oil |
| US10184121B2 (en) | 2013-06-28 | 2019-01-22 | Allergan Pharmaceuticals International Limited | Methods for removing viral contaminants from pancreatic extracts |
| KR20160055123A (ko) * | 2013-07-22 | 2016-05-17 | 앨러간 파마슈티컬스 인터내셔널 리미티드 | 고효능 판크레아틴 약학적 조성물 |
| RU2679832C2 (ru) | 2013-08-09 | 2019-02-13 | Аллерган Фармасьютикалз Интернэйшнл Лимитед | Композиция пищеварительных ферментов, подходящая для энтерального введения |
| ES2834483T3 (es) | 2013-11-05 | 2021-06-17 | Allergan Pharmaceuticals Int Ltd | Composiciones farmacéuticas de pancreatina de alta potencia |
| GB201501081D0 (en) | 2015-01-22 | 2015-03-11 | Cilian Ag | Use of enzymes with a wide pH activity range as medicaments for promoting digestion |
| WO2016126970A1 (en) | 2015-02-04 | 2016-08-11 | Abbvie Inc. | Pharmaceutical compositions and methods of use thereof to treat pancreatic enzyme insufficiency |
| WO2019060851A1 (en) * | 2017-09-24 | 2019-03-28 | Bio-Cat, Inc. | MIXTURES OF FUNGAL PROTEASE AND USES THEREOF |
| FR3079146B1 (fr) | 2018-03-23 | 2020-04-17 | Karim Ioualalen | Formulation gastroprotectrice de complexes d’enzymes permettant de restaurer la fonction digestive. |
| FR3111559A1 (fr) * | 2020-06-18 | 2021-12-24 | Azurrx Biopharma, Inc. | Formulations non porcines et leurs procédés |
| US11541009B2 (en) | 2020-09-10 | 2023-01-03 | Curemark, Llc | Methods of prophylaxis of coronavirus infection and treatment of coronaviruses |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1084431A (en) * | 1964-05-06 | 1967-09-20 | Analyses Et De Rech S Biolog M | Improvements in and relating to lipases |
| DE2638088C3 (de) * | 1976-08-24 | 1979-06-21 | Deutsche Gold- Und Silber-Scheideanstalt Vormals Roessler, 6000 Frankfurt | Verwendung von SuBmolkenpulver |
| JP3152958B2 (ja) * | 1991-06-14 | 2001-04-03 | 天野エンザイム株式会社 | 微生物起源リパーゼの安定化組成物及び安定化法 |
| DE4332985A1 (de) * | 1993-09-28 | 1995-03-30 | Konrad Peter Maria Dr Sommer | Arzneimittel zur Behandlung der Dysfunktion des exokrinen Pankreas |
| US5750104A (en) * | 1996-05-29 | 1998-05-12 | Digestive Care Inc. | High buffer-containing enteric coating digestive enzyme bile acid compositions and method of treating digestive disorders therewith |
| US6013680A (en) * | 1997-10-21 | 2000-01-11 | Amano Pharmaceutical Co., Ltd. | Digestive enzyme-containing medicament |
-
2002
- 2002-01-10 AR ARP020100070A patent/AR032392A1/es not_active Application Discontinuation
- 2002-01-16 RU RU2003124078/15A patent/RU2003124078A/ru not_active Application Discontinuation
- 2002-01-16 EP EP02716661A patent/EP1381386A2/de not_active Withdrawn
- 2002-01-16 WO PCT/EP2002/000374 patent/WO2002060474A2/de not_active Application Discontinuation
- 2002-01-16 BR BR0206521-5A patent/BR0206521A/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-01-16 CZ CZ20031900A patent/CZ20031900A3/cs unknown
- 2002-01-16 CA CA002434808A patent/CA2434808A1/en not_active Abandoned
- 2002-01-16 CN CNB028038894A patent/CN1236817C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-01-16 SK SK929-2003A patent/SK9292003A3/sk unknown
- 2002-01-16 MX MXPA03005960A patent/MXPA03005960A/es unknown
- 2002-01-16 PL PL02362646A patent/PL362646A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2002-01-16 IL IL15700402A patent/IL157004A0/xx unknown
- 2002-01-16 JP JP2002560665A patent/JP2004524838A/ja not_active Withdrawn
- 2002-01-16 NZ NZ527148A patent/NZ527148A/en unknown
- 2002-01-16 HU HU0500560A patent/HUP0500560A3/hu unknown
-
2003
- 2003-07-17 US US10/620,759 patent/US20040057944A1/en not_active Abandoned
- 2003-07-18 NO NO20033261A patent/NO20033261D0/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AR032392A1 (es) | 2003-11-05 |
| JP2004524838A (ja) | 2004-08-19 |
| US20040057944A1 (en) | 2004-03-25 |
| RU2003124078A (ru) | 2005-01-27 |
| CN1487837A (zh) | 2004-04-07 |
| NO20033261L (no) | 2003-07-18 |
| CZ20031900A3 (cs) | 2003-10-15 |
| WO2002060474A3 (de) | 2003-10-30 |
| NZ527148A (en) | 2005-01-28 |
| IL157004A0 (en) | 2004-02-08 |
| HUP0500560A3 (en) | 2006-06-28 |
| NO20033261D0 (no) | 2003-07-18 |
| CN1236817C (zh) | 2006-01-18 |
| MXPA03005960A (es) | 2003-09-05 |
| CA2434808A1 (en) | 2002-08-08 |
| EP1381386A2 (de) | 2004-01-21 |
| WO2002060474A2 (de) | 2002-08-08 |
| PL362646A1 (en) | 2004-11-02 |
| HUP0500560A2 (hu) | 2005-09-28 |
| BR0206521A (pt) | 2004-02-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SK9292003A3 (en) | Novel mixtures of microbial enzymes | |
| EP2455461B1 (en) | Lipase variants for pharmaceutical use | |
| US8071089B2 (en) | Composition with a fungal (yeast) lipase and method for treating lipid malabsorption in cystic fibrosis as well as people suffering from pancreatic lipase insufficiency | |
| RU2389504C2 (ru) | Ферменты для фармацевтического применения | |
| EP1261368B1 (en) | Crosslinked, non-fungal lipase-containing composition and methods of use thereof | |
| DE69634248T2 (de) | Zusammensetzungen zur verbesserung der verdaulichkeit und ausnutzung von nähestoffen | |
| CN1199694C (zh) | 复合脂质用作消化酶混合物药剂中的稳定化添加剂的用途 | |
| KR20140019292A (ko) | 장용 코팅된 저 강도 췌장 리파제 제제 | |
| JP2011041576A (ja) | 動物飼料用添加剤 | |
| AU2005259167B2 (en) | Diaminooxidase-containing pharmaceutical compositions | |
| US8455235B2 (en) | Protease variants for pharmaceutical use | |
| EP1330262A1 (de) | Verwendung von aus ciliaten gewonnenen enzymen als verdauungsfördernde arzneimittel | |
| DE10144711A1 (de) | Neue Gemische mikrobieller Enzyme |