SK8512003A3 - Tetralone derivatives as antitumor agents

Info

Description

Claims

SK8512003A3

Publication number: SK8512003A3
Application number: SK851-2003A
Authority: SK
Inventors: Guy Georges; Adelbert Grossmann; Tim Sattelkau; Wolfgang Schaefer; Ulrich Tibes
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 2000-12-07
Filing date: 2001-12-06
Publication date: 2004-04-06
Also published as: NO20032531D0; NZ526051A; EP1349830A1; YU45803A; ECSP034642A; NO20032531L; AU1607402A; CN100340545C; HUP0400579A2; WO2002046144A1; US20020065282A1; BG107889A; JP4091431B2; MXPA03004947A; HRP20030451A2; CA2430355A1; KR20030077551A; MA26972A1; HK1060875A1; CZ20031833A3

Predkladaný vynález súvisí s hydroxamidmi (1-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2~yl)alkánovej kyseliny alebo ich farmaceutický prijateľnými soľami. Bolo zistené, že tieto zlúčeniny disponujú aktivitou proti proliferácii buniek, takou, ako protinádorová aktivita a sú čiže užitočné pri spôsoboch liečby človeka alebo zvieraťa. Vynález tiež súvisí s postupmi na výrobu týchto hydroxamidov (1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)alkánovej kyseliny pre farmaceutické zmesi, ktoré ich obsahujú, a s ich použitím pri výrobe liekov, používaných na vyvolanie účinku proti proliferácii buniek v teplokrvnom živočíchovi, takom, ako je človek.

Doterajší stav techniky

Transkripčná regulácia je v bunkovej diferenciácii, proliferácii a apoptóze hlavným procesom. Transkripčná aktivácia radu génov určuje osud bunky a z týchto dôvodov je transkripcia tesne regulovaná radom faktorov. Jedným z regulačných mechanizmov, zahrnutých v tomto postupe, je zmena v terciárnej štruktúre DNA, ktorá ovplyvňuje transkripciu pomocou zmeny prístupnosti transkripčných faktorov k ich cieľovým segmentom DNA. Nukleozomálna integrita je regulovaná stavom acetylácie histónov jadra. V hypoacetylovanom stave sú nukleozómy tesne stlačené a preto sú pre transkripciu nepermisívne. Na druhej strane, sú nukleozómy uvoľnené acetyláciou jadrových histónov, čo má za následok, že sa stávajú pre transkripciu permisívne. Stav acetylácie histónov je riadený rovnovážnym stavom aktivít histónacetyltransferázy (HAT) a históndeacetylázy (HDAC). Nedávno bolo zistené, že inhibítory HDAC zastavujú rast a apoptózu v niekoľkých typoch nádorových buniek, vrátane rakoviny hrubého čreva, lymfómu T-buniek a erytroleukemických buniek. Pretože je apoptóza kľúčový faktor pre vývoj nádoru, sú inhibítory

HDAC sľubnými činidlami pri liečbe nádoru, ako účinné induktory apoptózy.

V literatúre bolo opísaných niekoľko štruktúrnych tried inhibítorov HDAC a boli zhrnuté v prehľadovom článku Marks, P.M., et al., J. Natl. Cancer Inst. 15 (2000) 12101216. Zlúčeniny hydroxámovej kyseliny, ktoré majú HDAC inhibičnú aktivitu, sú tiež opísané v WO 98/55449 a US patente č. 5,369,108.

Bolo zistené, že hydroxamidy (1-oxo-l,2,3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)alkánovej kyseliny pôsobia proti proliferácii buniek, ktoré vyplývajú z ich HDAC inhibičnej aktivity. HDAC inhibičná aktivita niekoľkých hydroxamidov (1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)alkánovej kyseliny, opísaná v predkladanej aplikácii, je vyššia ako pri SAHA (suberoylanilid hydroxámová kyselina, o ktorej bolo ukázáné, že má HDAC inhibičnú aktivitu (US Patent č. 5,369,108)).

Podstata vynálezu

Predkladaný vynález súvisí s novými zlúčeninami všeobecného vzorca (I) a ich použitím ako protinádorových činidiel:

kde:

R¹ je vybraný z vodíka, (1-4C)alkylu, COOH, COO(1-4C)alkylu;

R², R³, R⁴, R⁵ sú nezávisle vybrané z vodíka, halogénového atómu, (1-4C)alkyl-, trifluórmetyl-, hydroxy-, (1—4C)— alkoxy-, aryloxy-, arylalkyloxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]amino-, piperidino, morfolino, pyrolidino, (1-4C)alkanoylamino-, alebo arylovej skupiny, alebo heteroarylovej skupiny, alebo R² a R³ spoločne alebo R³ a R⁴ spoločne alebo R⁴ a R⁵ spoločne môžu vytvárať (13C) alkyléndioxy kruh alebo R² a R³ spoločne alebo R³ a R⁴spoločne alebo R⁴ a R⁵ spoločne môžu vytvárať (3-5C)alkylénový reťazec;

Y je -CH2-CH2;

X je alkylénový reťazec 4 až 10 uhlíkových atómov, ktoré môžu byť saturované alebo nesaturované jednou alebo dvoma dvojnými väzbami alebo jednou alebo dvoma trojitými väzbami alebo jednou dvojnou a jednou trojitou väzbou a ktoré môžu byť rozvetvené alebo nerozvetvené alebo prerušené (3-7C)cykloalkýlovým kruhom.

Enantioméry zlúčenín vzorca (I), ich diastereoizoméry, racemáty a ich zmesi sú tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze, spolu so sólami zlúčenín vzorca (I) s farmaceutický prijateľnými kyselinami a zásadami.

Malo by byť takisto zrejmé, že môžu existovať určité deriváty vzorca (I)v solvátovaných a nesolvátovaných formách, takých, ako sú napríklad hydrátované formy. Malo by byť tiež zrejmé, že vynález zahŕňa všetky také solvátované formy, ktoré vykazujú protinádorovú aktivitu.

Prednostné zlúčeniny vzorca (I) sú tie, v ktorých R² a R⁵ je vodík. Osobitne prednostné zlúčeniny vzorca (I) sú tie, v ktorých tri z štyroch radikálov R², R³, R⁴ a R⁵ sú vodík.

Vhodnou skupinou pre substituent, keď je to atóm halogénu, je napríklad fluoro, chloro, bromo a j odo; keď je to (1-4C)alkyl je napríklad metyl, etyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, sek-butyl; keď je to (1-4C)alkoxy je napríklad metoxy, etoxy, propoxy, izopropoxy alebo butoxy, keď je to (1-4C)alkylamino je napríklad metylamino, etylamino alebo izopropylamino; keď je to di[(l-4C)alkylamino je napríklad dimetylamino, N-etyl-N-metylamino, dietylamino, N-metyl-N-propylamino alebo dipropylamino; keď je to (1-4C)alkanoylamino je napríklad formylamido, acetamido, propiónamido alebo butyramido; keď je to (1-3C)alkyléndioxy je napríklad metyléndioxy, etyléndioxy alebo propyléndioxy.

Arylová skupina je systém konjugovaného karbocyklického kruhu, napríklad fenyl, naftyl, výhodne fenyl, ktorý môže byť nesubstituovaný alebo substituovaný 1, 2 alebo 3 substituentmi, nezávisle vybranými z atómu halogénu, (1-4C)alkyl-, trifluórometyl-, hydroxy-, (1-4C)alkoxy-, arylalkyloxy-, aryloxy, (1-3C)alkylénedioxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]amino- alebo (1 — 4C) — alkanoylaminoskupiny, ako je definovaná hore.

Heteroarylová skupina je buď systém 5 alebo 6 členného cyklického kruhu s jedným alebo dvoma heteroatómami, nezávisle vybranými z dusíka, kyslíka a síry, napríklad pyridinyl, tiofenyl, furyl alebo pyrolyl alebo anelovaný bicyklický konjugovaný kruhový systém ako indolyl-, chinolyl- alebo izochinolyl-, ktoré môžu byť nesubstituované alebo substituované 1, 2 alebo 3 substituentmi, nezávisle vybranými z atómu halogénu, (14C)alkyl-, trifluórmetyl-, hydroxy-, (1-4C)alkoxy-, arylalkyloxy-, aryloxy, (1-3C)alkyléndioxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]amino- alebo (1-4C)alkanoylaminoskupiny, ako je definované hore.

Prednostnou skupinou pre arylalkyloxy- radikál je benzyloxy.

Prednostný (3-7C)cykloalkylový kruh je cyklopropyl alebo cyklobutyl, kde kruh je k reťazci naviazaný spojením 1,1'·

Prednostnými skupinami pre reťazec X sú -(0¾) _n~ a -CH=CH- (0¾) n-2“, v ktorých n je celé číslo od 3 do 7, najvýhodnejšie od 4 do 6. Ďalšími prednostnými skupinami sú -(ΟΗ₂)η-ι-ΟΗ(ΟΗ₃)-, -(CH₂)_n-i-C(CH₃)2- alebo -(CH₂)_n_i-C-(-CH2.CH2-)-, v ktorých n je celé číslo od 3 do 7, najvýhodnejšie od 4 do 6.

Podlá ďalšieho aspektu vynálezu, je tu poskytnutá farmaceutická zmes, ktorá zahŕňa farmaceutický účinné množstvo jednej alebo viacerých zlúčenín vzorca (I)alebo ich farmaceutický prijateľnú soľ, ako bolo definované hore, v spojení s farmaceutický prijateľným rozpúšťadlom, excipientnou látkou alebo nosičom. Zmes môže byť vo forme vhodnej na orálne podávanie, napríklad ako tableta alebo kapsula, na parenterálne injektovanie (vrátane intravenózneho, subkutánneho, intramuskulárneho, intravaskulárneho alebo infúziou) ako sterilný roztok, suspenzia alebo emulzia, na topické podávanie ako masť alebo krém alebo na rektálne podávanie ako čapík. Hore uvedené zmesi môžu byť všeobecne pripravené použitím bežných excipientných látok.

Tieto farmaceutické zmesi môžu byť podávané orálne, napríklad vo forme tabliet, poťahovaných tabliet, tvrdých alebo mäkkých želatínových kapsúl, roztokov, emulzií alebo suspenzií. Môžu byť tiež podávané rektálne, napríklad vo forme čapíkov alebo parenterálne, napríklad vo forme roztokov na injektovanie.

Farmaceutické zmesi predkladaného vynálezu, zahŕňajúce zlúčeniny vzorca I, ich diastereoméry, racemáty a zmesi alebo ich soli, môžu byť vyrobené spôsobom, ktorý je v odbore známy, napr., bežnými postupmi miešania, zapuzdrovania, rozpúšťania, granulovania, emulgovania, zachytenia v matrici, poťahovania tabliet alebo lyofilizovania. Tieto farmaceutické preparáty môžu byť pripravené s terapeuticky inertnými, anorganickými alebo organickými nosičmi. Pre tablety, poťahované tablety, pastilky a tvrdé želatínové kapsuly môžu byť ako také nosiče, použité laktóza, kukuričný škrob alebo jeho deriváty, mastenec, stérická kyselina alebo jej soli. Vhodné nosiče pre mäkké želatínové kapsuly sú rastlinné oleje, vosky, tuky, polotuhý alebo pevný polyol. V závislosti od povahy aktívneho materiálu, nie sú všeobecne v prípade mäkkých želatínových kapsúl potrebné žiadne nosiče. Vhodné nosiče na výrobu roztokov a sirupov sú voda, polyoly, sacharóza, invertný cukor a glukóza. Vhodné nosiče na injektovanie sú voda, alkoholy, polyoly, glycerín, rastlinné oleje, fosfolipidy a surfaktanty. Vhodné nosiče pre čipky sú prirodzené alebo stužené oleje, vosky, tuky a polotekuté polyoly.

Farmaceutické prípravky môžu tiež obsahovať konzervačné činidlá, solubilizačné činidla, stabilizátory, zvlhčovadlá, emulgátory, sladidlá, látky zlepšujúce chuť, soli na zmenu osmotického tlaku, tlmivé roztoky, poťahovacie činidlá alebo antioxidanty. Môžu tiež obsahovať ďalšie terapeuticky významné látky, vrátane ďalších aktívnych zložiek, iných, ako tých podlá vzorca I.

Hydroxamid (1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)alkánovej kyseliny bude teplokrvnému živočíchovi zvyčajne podávaný v jednotkovej dávke v rozmedzí medzi

5-5000 mg na štvorcový meter telesnej plochy živočícha, tzn. približne 0,1-100 mg/kg a toto množstvo bežne poskytuje terapeuticky účinnú dávku. Jednotková dávkovacia forma, taká, ako tableta alebo kapsula, bude zvyčajne obsahovať napríklad 1-250 mg aktívnej zložky. Výhodne sa užíva denná dávka o rozmedzí 1-100 mg/kg. Denná dávka sa však bude nutne meniť, v závislosti od liečeného pacienta, konkrétneho spôsobu podávania a závažnosti liečeného ochorenia. Optimálna dávka môže byť stanovená praktickým lekárom, ktorý lieči konkrétneho pacienta.

Podlá ďalšieho aspektu predkladaného vynálezu je poskytnutý derivát hydroxamidu (1-oxo-l, 2,3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)alkánovej kyseliny vzorca I, ako je tu definované hore, na použitie pri spôsobe liečby ľudského alebo zvieracieho tela terapiou. My sme teraz zistili, že zlúčeniny predkladaného vynálezu vykazujú vlastnosti proti bunkovej proliferácii, vyplývajúce z ich históndeacetylázovej inhibičnej aktivity. Podľa toho, sú zlúčeniny predkladaného vynálezu užitočné pri spôsobe na liečbu proliferácie malígnych buniek. Podľa toho sa dá očakávať, že užitočné pri proliferačného pľúc, mechúru, prsníka, močového toho sa zlúčeniny liečbe účinku, čreva, očakáva, vykazovať malignít sarkómov predkladaného rakoviny predovšetkým konečníka, podžalúdkovej žľazy že vynálezu budú poskytnutím protipri liečbe rakoviny žalúdka, prostaty, a vaječníkov. Okrem derivát predkladaného proti radu leukémií, nádorov takých, ako tkanivách, ako je pečeň, aktivitu a pevných v takých vynálezu bude lýmfoidných rakoviny a obličky, prostata a podžalúdková žľaza.

Podľa tohto aspektu vynálezu je tu čiže poskytnuté použitie derivátu hydroxamidu(1-oxo-l, 2, 3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)alkánovej kyseliny vzorca (I) alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli, ako je tu definované na výrobu lieku na použitie pri tvorbe protiproliferačného účinku na bunky v teplokrvnom živočíchovi, takom, ako je človek.

Podlá ďalšieho rysu tohto aspektu vynálezu je poskytnutý spôsob na vytvorenie účinku proti bunkovej proliferácii v teplokrvnom živočíchovi, takom, ako je človek, ktorý potrebuje takú liečbu, ktorá zahŕňa podávanie účinného množstva hydroxamidového derivátu (1-oxo-1,2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-yl)alkánovej kyseliny tomuto živočíchovi, ako je tu definované hore.

Liečba proti bunkovej proliferácii definovaná hore, môže byť aplikovaná ako jediná terapia alebo môže zahŕňať, okrem hydroxamidového derivátu vynálezu (1-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)alkánovej kyseliny, jeden alebo viac iných protinádorových látok, napríklad vybraných z inhibítorov mitózy, ako je napríklad vinblastin; alkylačných činidiel, napríklad cis-platin, karboplatin a cyklofosfamid; inhibítorov skladania mikrotubulov, ako paclitaxel alebo iné taxány; antimetabolitov, napríklad

5-fluóruracil, kapecitabin, alebo napríklad adriamycin a močovina, cytozinarabinozid interkalačných a hydroxyantibiotík, napríklad napríklad gemcitabin;

topoizomerázy, biologickej bleomycin; imunostimulantov, trastuzumab; inhibítorov syntézy DNA, napr. enzýmov, napríklad asparagináza; inhibítorov napríklad etoposid; modifikátorov odozvy, napríklad interferón; a antihormónov, antiestrogény, antiandrogénov, také ako tamoxifen alebo napríklad napríklad

-fluórfenylsulfonyl) -2-hydroxy-2-metyl-3 ' - (trif luórmetyl) takých ako (4'-kyano-3-(4propiónanilid alebo ďalších terapeutických činidiel a princípov, ako je opísané napríklad v Cancer: Principles & Practice of Oncology, Vincent T. DeVita, Jr., Samuel Hellmann, Steven A. Rosenberg; 5^th Ed., Lippincott-Raven Publishers (1997). Taká spojená liečba môže byť dosiahnutá spôsobom simultánneho, postupného alebo oddeleného dávkovania jednotlivých zložiek liečby. Podľa tohto aspektu vynálezu je poskytnutý zahŕňajúci hydroxamidový derivát farmaceutický produkt (1-oxo-l,2,3,4,-tetra9 hydronaftalen-2-yl)alkánovej kyseliny vzorca I, ako je tu definované hore a ďalšia protinádorová látka, ako je tu definované hore, na spojenú liečbu rakoviny.

Príklady fyziologicky prijateľných solí zlúčenín vzorca (I) sú soli s fyziologicky prijateľnými bázami. Tieto soli môžu byť, medzi inými, alkalické, alkalických zemín, amónium a alkylamóniové soli, napríklad sodíkové, draslíkové, vápnikové, tetrametylamóniové soli.

Oddelenie racemických zlúčenín na ich enantioméry môže byť vykonané chromatografiou v analytickom, semipreparatívnom alebo preparatívnom meradle, použitím vhodných opticky aktívnych stacionárnych fáz s vhodnými eluentmi. Vhodné opticky aktívne stacionárne fáze zahŕňajú, ale nie sú obmedzené na, oxid kremičitý (napr. ChiraSper™, Merck; Chiralpak™ OT/OP, Baker), estery celulózy alebo karbamáty (napr. Chiracel™ OB/OY, Baker) alebo iné (napr. Crownpak™, Daicel™ alebo Chiracel™ OJ-R, Baker). Môžu byť tiež aplikované ďalšie spôsoby na oddelenie enantiomérov, ako je tvorba diastereomérnych zlúčenín zo zlúčenín vzorca I, spolu s ďalšími opticky aktívnymi zlúčeninami, napr. kyselina gáforsulfónová alebo brucín a oddelenie týchto diastereomerických zlúčenín, nasledované uvoľnením opticky aktívneho činidla. Enantiomericky obohatené alebo čisté zlúčeniny vzorca (I) je tiež možné získať použitím opticky aktívnych východiskových materiálov.

Príprava zlúčenín vynálezu

Zlúčeniny vzorca (I) môžu byť pripravené známymi spôsobmi, ako je opísané v literatúre (napr., v štandardných učebniciach, takých, ako je Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Georg Thieme Verlag, Stuttgart; Organic Reactions, John Wiley & Sons, Inc., New York) a v referenciách citovaných v príkladoch a menovite za reakčných podmienok, ktoré sú známe a vhodné pre tieto reakcie. Môžu byť tiež použité známe varianty, ktoré tu nie sú detailnejšie uvedené. Zlúčeniny vzorca (I) môžu byť pripravené akýmkoľvek postupom, ktorý je známy tým, že je aplikovateľný na prípravu chemicky podobných zlúčenín. Okrem toho, môže byť zlúčenina vzorca (I) premenená známymi spôsobmi na inú zlúčeniny vzorca (I).

Také postupy, keď sú použité na prípravu hydroxamidového derivátu (1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)alkánovej kyseliny alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli, sú poskytnuté ako ďalší rys vynálezu a sú demonštrované nasledujúcimi charakteristickými príkladmi, v ktorých, pokiaľ to nie je uvedené inak, majú X, Y, R¹, R², R³, R⁴, R⁵ a n akýkoľvek význam definovaný hore. Nezbytný východiskový materiál môže byť získaný štandardnými postupmi organickej chémie. Príprava takých východiskových materiálov je opísaná v sprievodných neobmedzujúcich príkladoch. Nezbytné východiskové materiály sú alternatívne získateľné pomocou postupov, ktoré sú analogické postupom ukázaným, ktoré sú bežnou praxou organickej chémie.

(A) Jeden prednostný spôsob prípravy zlúčeniny vzorca (I) je odchránenie zlúčenín vzorca (II)

kde PG je vhodná chrániaca skupina a v ktorej má R¹, R², R³, R⁴, R⁵, X a Y hore uvedený zmysel.

Zlúčeniny vzorca (II) sú nové a sú zahrnuté v predkladanom vynáleze. - Vhodné PG chrániace skupiny sú napríklad benzyl-, p-metoxybenzyl-, terc-butyloxykarbonyl-, trityl- alebo silylové skupiny také, ako trimetylsilyl- alebo dimetyl-terc-butylsilylskupina. Reakčné podmienky na odchránenie závisia od typu chrániacej skupiny. Keď je chrániacou skupinou benzyl- alebo p-metoxybenzylskupina, je reakcia uskutočnená hydrogenolýzou v inertnom rozpúšťadle takom, ako je alkohol ako metanol alebo etanol, v prítomnosti ušľachtilého kovového katalyzátoru, takého, ako paládium alebo platina na vhodnom nosiči takom, ako je uhlík, bárium síran, alebo uhličitan bárnatý, pri teplote a tlaku okolia. Keď je chrániacou skupinou terc-butyloxykarbonyl- alebo tritylskupina, je reakcia vykonaná v prítomnosti kyselín pri teplote medzi -20°C až 60°C, výhodne medzi 0°C a okolitou teplotou. Kyselina môže byť roztok kyseliny chlorovodíkovej v inertnom rozpúšťadle, takom, ako je dietyléter alebo dioxán alebo trifluóroctová kyselina v dichlórmetáne. Keď je chrániacou skupinou silylskupina, taká, ako trimetylsilyl- alebo dimetyl-terc-butylsilylskupina, je reakcia výhodne vykonaná v prítomnosti zdroja fluoridu, takého, ako je fluorid sodný alebo fluorid tetrabutylamónny v inertnom rozpúšťadle, takom, ako je dichlórmetán.

Zlúčeniny vzorca (II), v ktorých R¹ je COOH, môžu byť pripravené zo zlúčenín vzorca (II), v ktorých R¹ je COO(1-4C)alkyl, hydrolýzou esterovej časti. Dosiahnutie tejto premeny vykonávaných reakcií závisí od typu (1-4C)alkylskupiny. Keď je (1-4C)alkylskupina metyl alebo etylskupina, je reakcia uskutočnená v prítomnosti bázy, napríklad hydroxidu lítneho, hydroxidu sodného alebo hydroxidu draselného v inertnom rozpúšťadle alebo nariedene napríklad v metanole alebo etanole alebo tetrahydrofuráne. Keď je (1-4C)alkylskupina terc-butyl skupina je reakcia vykonaná v prítomnosti kyseliny, napríklad roztoku kyseliny chlorovodíkovej v inertnom rozpúšťadle takom, ako je dietyléter alebo dioxán alebo kyseliny trifluóroctovej v dichlórmetáne.

Zlúčeniny vzorca (II), v ktorých R¹ je H, môžu byť pripravené zo zlúčenín vzorca (II), v ktorých R¹ je COOH, pomocou tepelnej dekarboxylácie. To môže byť dosiahnuté zahrievaním v inertnom rozpúšťadle počas 1 až 48h, výhodne 5 až 9h pri teplote medzi 60 až 200 °C, výhodne medzi 80 až 120°C.

Zlúčeniny vzorca (II), v ktorých R¹ je (1-4C)alkyl alebo COO(1-4C)alkyl môžu byť získané reakciou zlúčeniny vzorca (III),

(III) v ktorej R², R³, R⁴, R⁵ a Y majú hore uvedený význam a G¹ je (1-4C)alkyl alebo COO(1-4C)alkyl, so zlúčeninou vzorca (IV)

A-X—PG

N—O /

^H (IV) kde A je a nahraditeľná skupina, PG má skôr definovaný význam a X má hore uvedený význam, v neprítomnosti alebo prítomnosti bázy.

Vhodná nahraditeľná skupina A je napríklad halogeno alebo sulfonyloxyskupina, napríklad chloro, bromo, metánsulfonyloxy alebo toluén-p-sulfonyloxyskupina. Vhodná báza je napríklad organická aminová báza, taká, ako napríklad pyridín, 2,6-lutidín, kolidín, 4-dimetylaminopyridín, trietylamín, morfolín, N-metylmorfolín alebo diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en alebo napríklad uhličitan alkalických kovov alebo kovov alkalických zemín alebo hydroxid, napríklad uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, hydroxid sodný alebo hydroxid draselný.

Reakcia je zvyčajne vykonaná v prítomnosti vhodného inertného rozpúšťadla alebo riedidla napríklad alkanolu alebo esteru takého, ako je metanol, etanol, izopropanol alebo etylacetát, halogénovaného rozpúšťadla takého, ako je metylénchlorid, chloroform alebo tetrachlórmetán, éteru takého, ako tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán, aromatického rozpúšťadla takého, ako toluén alebo dipolárneho aprotického rozpúšťadla takého ako je Ν,Ν-dimetylformamid, N,N-dimetylacetamid, N-etylpyrolidin-2-on alebo dimetylsulfoxid. Reakcia je vhodne uskutočnená pri teplote v rozmedzí napríklad 10 až 250°C, výhodne v rozmedzí 50-150°C.

Zlúčeniny vzorca (II), v ktorých R¹ je vodík, (1-4C)alkyl alebo COO(1-4C)alkyl môžu byť tiež získané reakciou zlúčeniny vzorca (V)

v ktorej R², R³, R⁴, R⁵, X a Y majú hore uvedený význam a G²je vodík, (1-4C)alkyl alebo COO(1-4C)alkyl so zlúčeninou vzorca (VI)

H2N ~ O \

PG (VI) kde PG je vhodná chrániaca skupina, ako je opísané hor. Táto reakcia typicky zahŕňa dvoj krokový postup v jednej nádobe. V prvom kroku sa aktivuje karboxylát vzorca (V). Táto reakcia je vykonávaná v inertnom rozpúšťadle alebo riedidle, napríklad v dichlórmetáne, dioxáne, alebo tetrahydrofuráne, v prítomnosti aktivačného činidla.

Vhodný reakčný derivát kyseliny je napríklad acylhalid napríklad acylchlorid vytvorený reakciou kyseliny a chloridu anorganickej kyseliny, napríklad napríklad tionylchloridu; zmesový anhydrid, anhydridom vytvoreným reakciou kyseliny a chlórmravčanu takého, ako chlórmravčan izobutylnatý; aktívny ester, napríklad ester vytvorený reakciou kyseliny a fenolu takého, ako pentafluórfenol; aktívny ester vytvorený reakciou kyseliny a N-hydroxybenzotriazolu; acylazid, napríklad azid vytvorený reakciou kyseliny a azidu takého, ako difenylfosforylazid; acylkyanid, napríklad kyanid vytvorený reakciou kyseliny a kyanidu takého, ako dietylfosforylkyanid; alebo produkt reakcie kyseliny a karboimidu, takého, ako dicyklohexylkarbodiimid alebo produkt reakcie kyseliny a bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosforylchloridu. Reakcia je vykonávaná medzi -30°C a 60°C, vhodne pri alebo pod 0°C. V druhom kroku je k roztoku pridaný hydroxylamín pri teplote použitej na aktiváciu a teplota je pomaly upravená na teplotu okolia. Tieto spôsoby sú dobre známe tým, ktorí sú orientovaný v odbore. Principiálne sú tiež aplikovateľné všetky spôsoby syntézy amidov, používané v peptidovej chémii, ako je opísané napr. v Methoden der organischen Chemie (Houben-Weyl) Vol. XV71 a XV/2.

Zlúčeniny vzorca (V) sú pripravené zo zlúčenín vzorca

(VII)	O
	R2 1
R3_X		G3 Q
	ÍJl	/C J-L x-^R6
		._γ ^ζ Χ O
	R5	(VII)
kde	X, Y,	R², R³, R⁴ a R⁵ majú význam definovaný tu	skôr a G³
je	vodík	alebo (1-4C)alkyl a R⁶ je alkylskupina,	napríklad

metyl, etyl alebo terc-butylskupina alebo benzylskupina, hydrolýzou. Podmienky, za ktorých je uskutočnená hydrolýza závisí od charakteru skupiny R⁶. Keď je R⁶ metyl alebo etylskupina, je reakcia vykonaná v prítomnosti bázy napríklad hydroxidu lítneho, hydroxidu sodného alebo hydroxidu draselného v inertnom rozpúšťadle alebo riedidle napríklad v metanole alebo etanole. Keď je R⁶ terc-butylskupina je reakcia vykonaná v prítomnosti kyseliny napríklad roztoku kyseliny chlorovodíkovej v inertnom rozpúšťadle, takom, ako je dietyléter alebo dioxán, alebo kyseliny trif luóroctove j v dichlórmetáne. Keď je R⁶benzylskupina je reakcia vykonaná hydrogenolýzou v prítomnosti ušlachtilého kovového katalyzátoru, takého, ako paládium alebo platina na vhodnom nosiči, takom, ako uhlík.

Zlúčeniny vzorca (VII) sú pripravené zo zlúčenín vzorca (VIII)

	R2	p
R3-	M		_ZG3
R4‘	ÁyÁ	f	ú
	R5
			(VIII)
v	ktorých	R²	, R³, R⁴, R⁵, Y a G³ majú význam definovaný tu

hore, reakciou so zlúčeninami vzorca (IX)

A—X ^O_R6 (IX) kde A, X a R⁵ majú hore definovaný význam, v neprítomnosti alebo prítomnosti vhodnej bázy. Vhodná báza je napríklad organická amínová báza taká, ako napríklad pyridín, 2,6lutidin, kolidín, 4-dimetylaminopyridín, trietylamin, morfolín, N-metylmorfolín alebo diazabicyklo [5.4.0]undec-7-en alebo napríklad uhličitan alebo hydroxid kovu alebo kovu alkalických zemín napríklad uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, hydroxid sodný alebo hydroxid draselný alebo hydrid napríklad hydrid sodný.

Reakcia je vhodne vykonaná v prítomnosti vhodného inertného rozpúšťadla alebo riedidla napríklad alkanolu alebo esteru, takého, ako metanol, etanol, izopropanol alebo etylacetát, halogénovaného rozpúšťadla takého, ako metylénchlorid, chloroform alebo tetrachlórmetán, éteru takého, ako tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán, aromatického rozpúšťadla takého, ako toluén alebo dipolárneho aprotického rozpúšťadla takého, ako N,N-dimetylformamid, N,N-dimetylacetamid, N-etylpyrolidin-2-on alebo dimetylsulfoxid. Reakcia je prakticky vykonaná pri teplote v rozmedzí napríklad 10 až 250°C, výhodne v rozmedzí 50-150°C.

Príprava zlúčenín vzorca (VII) zo zlúčenín vzorca (VIII) je tiež opísaná v Ugi, I., et al., Liebigs Ann. Chem. 641 (1961) 63-70.

(B) Ďalší prednostný spôsob na prípravu zlúčenín vzorca (I) je reakcia zlúčeniny vzorca (V) s hydroxylaminom.

Táto reakcia typicky zahŕňa dvoj krokový jednonádobkový postup. V prvom kroku sa aktivuje karboxylát vzorca (V). Táto reakce je realizovaná v inertnom rozpúšťadle alebo riedidle, napríklad v dichlórmetáne, dioxáne, alebo tetrahydrofuráne, v prítomnosti aktivačného činidla. Vhodný reakčný derivát kyseliny je napríklad acylhalid napríklad acylchlorid, vytvorený reakciou kyseliny a chloridu anorganickej kyseliny, napríklad tionylchloridu; zmesový anhydrid, napríklad anhydridom vytvoreným reakciou kyseliny a chlórmravčanu takého, ako chlórmravčan izobutylnatý; aktívny ester, napríklad ester vytvorený reakciou kyseliny a fenolu takého, ako pentafluórfenol; aktívny ester vytvorený reakciou kyseliny a N-hydroxybenzotriazolu; acylazid, napríklad azid vytvorený reakciou kyseliny a azidu takého, ako difenylfosforylazid; acylkyanid, napríklad kyanid vytvorený reakciou kyseliny a kyanidu takého, ako dietylfosforylkyanid; alebo produkt reakcie kyseliny a karboimidu, takého, ako dicyklohexylkarbodiimid alebo produkt reakcie kyseliny a bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosforylchloridu. Reakcia je realizovaná medzi -30 °C a 60°C, vhodne pri alebo pod 0°C. V druhom kroku je k roztoku pridaný hydroxylamín pri teplote použitej na aktiváciu a teplota je pomaly upravená na teplotu okolia. Tieto spôsoby sú dobre známe tým, ktorí sú orientovaní v odbore. Principiálne sú tiež aplikovateľné všetky spôsoby syntézy amidov, používané v peptidovej chémii, ako je opísané napr. v Methoden der organischen Chemie (Houben-Weyl) Voľ. XV71 a XV/2.

(C) vzorca (I)

Tretí prednostní spôsob na produkciu zlúčeniny zahŕňa reakciu zlúčenín vzorca (X)

R5 (X) kde X, Y, R², R³, R⁴ a R⁵ majú hore definovaný význam a G⁴ je vodík alebo a (1-4C)alkylskupina alebo COOt-butoxy a R⁷ je a (1-4C)alkylskupina, výhodne metyl alebo etylskupina, s hydroxylamínom v prítomnosti vhodnej bázy. Reakcia je vykonaná v inertnom rozpúšťadle alebo riedidle, takom, ako metanol alebo etanol pri teplotách medzi 0°C a 100°C, bežne pri alebo blízko okolitej teploty, a pri pH medzi 10 a 12. Vhodná báza je napríklad alkoholát, napríklad metylát sodný. Zlúčeniny vzorca (X) sú pripravené analogickým spôsobom, ako je ten, ktorý bol opísaný pre zlúčeniny vzorca (VII).

Vynález bude teraz doložený nasledujúcimi neobmedzujúcimi príkladmi, v ktorých, pokial tí) nie je uvedené inak:

(i) odparenie bolo vykonané na rotačnom odparovači vo vákuu a postupy rozpracovania boli vykonané po odstránení zvyškových pevných látok, tak, ako sušiace činidlá filtráciou;

(ii) operácie boli vykonávané pri okolitej teplote, čo je v rozmedzí 18-25°C a pod atmosférou inertného plynu, takého, ako je dusík;

(iii) kolónová chromatografia (rýchlym postupom) a vysokotlaková kvapalinová chromatografia (HPLC) boli vykonané na Merck Kieselgel oxide kremičitom alebo Merck Lichroprep™ RP-18 reverznej fáze oxidu kremičitého získanej z E. Merck, Darmstadt, Germany, (iv) výťažky sú dané iba na demonštráciu a nepredstavujú nutne dosiahnuteľné maximum;

(v) body topenia sú stanovené použitím prístroja bodu topenia Buchi 510.

(vi) štruktúry koncových produktov vzorca (I) boli potvrdené nukleárnou (všeobecne protónovou) magnetickou rezonanciou (NMR) a hmotove spektrálnymi technikami;

(vii) medziprodukty neboli všeobecne úplne charakterizované a čistota bola odhadnutá chromatografiou na tenkej vrstve (TLC);

(viii) boli použité nasledujúce skratky:

DMF, N,N-dimetylformamid;

DMSO, dimetylsulfoxid;

TF, tetrahydrofurán;

MeOH, metanol;

HCI, kyselina chlorovodíková;

NaH, hydrid sodný;

CH2CI2, dichlórmetán;

H2SO4, kyselina sírová; sat., saturovaný;

roz., roztok;

rt, laboratórna teplota

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Hydroxamid 5-(1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny (Id)

OH

K roztoku 5,0g (22,9 mmol) etylesteru 1-oxo-l,2,3,4tetxahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (la) (Pradeep,

K., and Saravanan, K., Tetrahedron 54 (1998) 2161-2168) a 5,79 g etyl-5-brómpentanoátu (27,7mmol) v 10 ml etanolu pri refluxu je pridaný čerstvo pripravený roztok 0,53 g sodíka v 15 ml etanolu. Po 10 h pri refluxe je pridané dostatočné množstvo vody, aby sa rozpustil precipitát. Rozpúšťadlo je odparené, zvyšok je rozpustený v roztoku 3,85 g KOH v 7 ml MeOH a 5 ml H2O a refluxovaný počas ďalších 10 h. Po ochladení je roztok naliaty do 25 ml ľadovo studenej 4N HC1 a extrahovaný CH2CI2. Po odparení rozpúšťadla zostáva zvyšok surovej 5-(1-oxo-l, 2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny (lb), ktorá je rozpustená v 100 ml MeOH. Je pridaných pár kvapiek H2SO4 a roztok je cez noc refluxovaný. Po prídavku roztoku uhličitanu sodného je odparené rozpúšťadlo a zvyšok je podrobený kolónovej chromatografii, za výťažku 1,9 g metyl-(5-(l-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)pentanoátu (lc). K roztoku 1,6 g (23 mmol) hydroxylamínhydrochloridu v 40 ml MeOH je pridaných 15 ml roztoku 0,8g (35 mmol) sodíka v 30 ml MeOH. K tomu je pridaný roztok 3,0 g (11,5 mmol) metyl-(5-(1-oxo-l,2,3,4tetrahydro-naftalen-2-yl)pentanoátu (lc) v 20 ml MeOH a potom je pridaných zostávajúcich 15 ml roztoku metylátu sodného. Po 6 h miešaní pri rt je odparené rozpúšťadlo, okyslené 2 N HC1 a extrahované CH2CI2. Zvyšok po odparení je purifikovaný kolónovou chromatografiou, s výťažkom 2,2 g zlúčeniny, uvedenej v nadpise, ako oleja, MS (APCI): 260,1 (M-l).

Príklad 2

Hydroxyamid 5-(6-metoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny (2d)

5-(6-metoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-

-yl)pentánová kyselina (2b) je pripravená z etylesteru

6-metoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (2a) (Basu, B., et al., Synth. Commun., 11, 10,

1981,

803-810) spôsobom analogickým tomu, ktorý bol opísaný pre 1b v príklade 1.

6,6 g (24,3mmol)

1b je rozpustených v

140 ml CH₂C1₂.

K tomuto roztoku sú postupne pridané 3,3 ml trietylamínu, 6,9 g bis-(2-oxo-

3-oxazolidinyl)-fosforylchloridu, 3,0 g O-benzylhydroxylamínu a ďalších 10,2 ml trietylamínu. Po miešaní cez noc je roztok premytý 2N HC1, potom sat. roz. NaCl a odparený. Po upravení dietyléterom je získaných 8,5 g benzyloxyamidu 5-(6-metoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-nafta len-2-yl)pentánovej kyseliny (2c), ako svetlé kryštály. Hydrogenácia 0,5 g 2c v metanole, s Pd/BaCO₃/Pb ako katalyzátoru, poskytla, po odparení a úprave dietyléterom, 0,3 g zlúčeniny z nadpisu, MP 118 - 120°C.

Enantioméry 2d boli oddelené semipreparatívnou HPLC, použitím Chiracel OJ-R a vody/metanolu, ako mobilnej fázy. Čistota bola stanovená analytickou HPLC (Chiracel OJ-R kolóna [15 cm, 4,6 mm, veikosť častice 5 μιη] použitím vody 35 : metanolu 65 v/v pri rýchlosti prietoku 0,6 ml/min, nastrieknutie 5 μΐ vzoriek). Retenčný čas a %ee každého enantioméru bol 17,53 min (91%ee) a 21,96 min (84%ee).

Príklad 3

Hydroxyamid 6-(6-chlór-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny (3c)

6-(6-Chlór-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánová kyselina (3b) je pripravená z etylesteru 6-chlórl-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (3a) (WO 98/54350) spôsobom analogickým tomu, ktorý je opísaný pre lb v príklade 1, použitím etyl-6-brómhexanoátu miesto etyl-6-brómhexanoátu. K 1,6 g 3b v 20 ml CH2CI2 je pridaných 3,7 ml trietylamínu a 1,5 g 9 g bis-(2-oxo-

3-oxazolidinyl) fosforylchloridu. Po 30 min miešania je pridaných 1,7 g O-tritylhydroxylamínu a miešanie pokračuje cez noc. Roztok je extrahovaný 2 N HCI a odparený za zisku 2,9 g oleja. Tento je opäť rozpustený v 20 ml CH2CI2 a 10 ml trifluóroctovej kyseline a miešaný počas 4 h. Po premytí vodou a odparení rozpúšťadla, je surový produkt podrobený kolónovej chromatografii, za výťažku 60 mg zlúčeniny, uvedenej v nadpise, ako oleja, MS (APCI): 308,1 (M-l).

Príklad 4

Hydroxyamid 6-(2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyselina (4c)

OH

K suspenzii 0,7 g NaH v 40 ml suchého TF sú pridané 4,0 g 2-metyl-l-tetralónu v 20 ml TF. Po 30 min miešania je pridaných 5,5 g etyl-6-brómhexanoátu v 10 ml TF a zmes je refluxovaná počas 6 h. Po odparení rozpúšťadla je zvyšok rozpustený v roztoku 4,16 g hydroxidu draselného v 50 ml MeOH a 20 ml H2O a zahriaty cez noc na reflux. Po odparení MeOH je vodná fáza extrahovaná etylacetátom, okyslená 2 N HCI a opäť extrahovaná etylacetátom. Tento druhý extrakt je odparený za zisku 4,2 g surovej 6-(2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny (4a). Spôsobom analogickým tomu, ktorý je opísaný na premenu 3b na 3c v príklade 3,4a je premenená na zlúčeninu, uvedenú v nadpise, 4c. 4c je olej MS (APCI): 288,1 (M-l).

Enantioméry 4c boli oddelené semipreparatívnou HPLC, použitím Chiracel OJ-R a vody/metanolu, ako mobilnej fázy. Čistota bola stanovená analytickou HPLC (Chiracel OJ-R kolóna [15 cm, 4,6 mm, veľkosť častice 5 μκι] použitím vody 40 : metanolu 60 v/v pri rýchlosti prietoku 0,6 ml/min, nastriekanie 10 μΐ vzoriek). Retenčný čas a %ee každého enantioméru bol 16,75min (100%ee) a 20,25min (87%ee).

Príklad 5

Hydroxyamid 6-(1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)-hexánovej kyseliny (5c)

OH

Hydroxyamid 6-(1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny (5a) je pripravený z etylesteru 1-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (la), spôsobom analogickým tomu, ktorý je opísaný na premenu 3a na 3c v príklade 3. Výťažok v poslednom kroku je 10%, MS (APCI): 274,1 (M-l).

Príklad 6

Hydroxyamid 5-(2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny (6b)

OH

K suspenzii 0,86 g NaH v 40 ml suchého TF je pridaných

5,0 g 2-metyl-l-tetralónu v 20 ml TF. Po 30 min miešania je pridaných 7,5 g etyl-5-brómpentanoátu v 20 ml TF a zmes je refluxovaná počas 6 h. Vychladená zmes je naliata do vody a extrahovaná etylacetátom. Extrakt je odparený za zisku surového etyl-5-(2-metyl-1-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentanoátu (6a), ktorý je purifikovaný kolónovou chromatografiou, za zisku 3,6 g čistého 6a. 6a je premenený na 6b spôsobom, analogickým tomu, ktorý bol opísaný na premenu lc na ld v príklade 1. 6b bol získaný ako olej, MS (APCI): 274,1 (M-l).

Enantioméry 6b boli oddelené semipreparatívnou HPLC, použitím Chiracel OJ-R a vody/metanolu, ako mobilnej fázy. Čistota bola stanovená analytickou HPLC (Chiracel OJ-R kolóna [15 cm, 4,6 mm, veľkosť častice 5 μπι] použitím vody 40 : metanolu 60 v/v pri rýchlosti prietoku 0,6 ml/min, nastriekanie 10 μΐ vzoriek). Retenčný čas a %ee každého enantioméru bol 11,48 min (100%ee) a 13.86min (95%ee).

Príklad 7

Hydroxyamid 6-(2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hex-5-enoovej kyseliny (7c)

OH

K 1,55 ml diizopropylamínu v 40 ml TF je pridaný roztok 4,36 ml n-butyllítia (2,5 M) v hexáne pri -78°C. Po 10 minútach je pridaných 1,63 g 2-metyl-l-tetralónu v 5 ml TF a roztok je miešaný počas 50 min. Potom je po kvapkách pridaných 1,60 g metylesteru 6-oxo-hexánovej kyseliny v 5 ml TF a miešanie pokračuje počas 15 min. Potom je odstránený ochladzovací kúpeľ a zmes je ponechaná, aby dosiahla rt. Je pridaný kone, roztok amóniumchloridu a extrahovaný etylacetátom. Zvyšok po odparení je purifikovaný kolónovou chromatografiou za zisku 0,8 g metylesteru 6-hydroxy-6-(2-metyl-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny (7a). 2,5 g tohto alkoholu 8a je rozpustených v 50 ml dichlórmetánu a je pridaných 2,27 ml trietylamínu. Po ochladení na 0°C, je po kvapkách pridaných 2,86 g anhydridu metánsulfónovej kyseliny v 20 ml dichlórmetánu. Potom, čo je pridávanie dokončené, je ochladzovací kúpeľ odstránený a miešanie pokračovalo cez noc. Roztok je premytý 2N HCI a vodou, oddelený, vysušený a odparený. Surový produkt 1,6 g 1, 8-diazabicyklo[5.4.0]undecen-7-en (DBU) je rozpustený v 60 ml toluénu a zahrievaný na refluxe počas 24 h. Zmes je naliata do 2N HCI a extrahovaná dichlórmetánom. Po odparení a kolónovej chromatografii je získaných 0,6 g metylesteru

6-(2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexénovej kyseliny (7b). 7b je premenený na 7c spôsobom analogickým tomu, ktorý je opísaný na premenu lc na ld v príklade 1. 7c bol získaný ako olej, MS (APCI): 286,1 (M-l).

Príklad 8

Hydroxamid 5-(5-metoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny (8f)

Etylester 5-metoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (2,34g; 8a) (Genet, J.P., et al.,

Tetrahedron Lett. 35 (1994) 4559-4562) je upravený etyl-6-brómhexanoátom spôsobom analogickým tomu, ktorý je opísaný na premenu 3a v príklade 3. To malo za výsledok zmes 6—(5— -metoxy-1-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny (8b) a etylesteru 2-(5-karboxy-pentyl)-5-metoxy-l

-οχο-1,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (8c) v pomere približne 1:1. Táto zmes kyselina je upravená O-benzylhydroxylamínom podobným spôsobom, ktorý je opísaný na premenu 2b na 2c v príklade 2. Surový produkt je podrobený kolónovej chromatografii za zisku neoddeliteľnej zmesi etylesteru 2-(5-benzyloxykarbamoyl-pentyl)-5-metoxy-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (8d) a benzyloxyamidu 6-(5-metoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydronaftalen-2-yl)hexánovej kyseliny (8e). Táto zmes je hydrogenovaná v metanole s Pd/C/BaSO₄ ako katalyzátorom.

Výsledný surový produkt je purifikovaný LC/MS. Zber frakcií s hmotnosťou 305 poskytlo zlúčeninu uvedenú v nadpise, MS (APCI): 306,1 (M+l).

Príklad 9

Etylester 2-(5-hydroxykarbamoyl-pentyl)-5-metoxy-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (9a).

Z rovnakej LC/MS separácie, ktorá je opísaná v príklade 8, bola získaná frakcia s hmotnosťou 377, poskytujúca zlúčeninu, uvedenú v nadpise, MS (APCI): 378,3 (M+l). WO 02/46144

Príklad 10

Etylester 2-(7-hydroxykarbamoylheptyl)-5,7-dimetyl-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (lOd)

Ο.

Etylester 5, 7-dim.etyl-l-oxo-l, 2,3, 4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (10a) bol pripravený z 5,7-dimetyl-l-tetralónu bežným spôsobom. K roztoku 3,5 g 10a a

4,5 g metyl-8-bróm-oktanoátu v 30 ml etanolu za refluxu je pridaný čerstvo pripravený roztok 0,35 g sodíka v 15 ml etanolu. Po 15 h refluxu je etanol odparený a je pridaný dichlórmetán a voda. Po oddelení kolónovou chromatografiou sú získané 4,0 g žltého oleja. Tento zvyšok je rozpustený v roztoku 690 mg KOH v 10 ml vody a 10 ml MeOH a refluxovaný počas ďalších 13 h. Potom je ochladený roztok okyslený 2N HCI a extrahovaný CH2CI2. Po odparení zostal zvyšok surového etylesteru 2-(7-karboxy-heptyl)-5, 7-dimetyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (10b), ktorý je purifikovaný kolónovou chromatografiou, poskytujúcou

1,2 g 10b. 630 mg kyseliny 10b je rozpustených v 10 ml dietyléteru a je pridaných 0,3 ml N-metylmorfolínu a 0,33 ml izobutylchlórformiátu, a následne 270 mg O-benzylhydroxylamínu. Obvyklý pracovný postup poskytol 600 mg (71%) etylesteru 2-(7-benzyloxykarbamoyl-heptyl)-5,7-dimetyl-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny (10c). 10c je premenená na zlúčeninu, uvedenú v nadpise, spôsobom podobným tomu, ktorý je opísaný na premenu 2c na 2d v príklade 2. MS (APCI): 402,52 (M-l) .

Príklad 11

Spôsobom analogickým tomu, ktorý bol opísaný v príkladoch 1-10 a použitím známych spôsobov, opísaných v literatúre (napr. v štandardných pracích takých, ako je Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Georg Thieme Verlag, Stuttgart; Organic Reactions, John Wiley & Sons, Inc., New York) sú pripravené nasledujúce zlúčeniny:

a) hydroxyamid 5-(6,7-dimetoxy-l-oxo-l,2,3, 4-tetrahydronaftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

b) hydroxyamid 6-(6-dimetylarnino-2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-

-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

c) hydroxyamid 6-(6,7-dimetoxy-2-metyl-l-oxo-l, 2,3,4-

-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

d) hydroxyamid 5-(6,7-dimetoxy-2-metyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

e) hydroxyamid 6-(6-dietylamino-2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

f) hydroxyamid 6-(2-metyl-l-oxo-6-pyrolidin-l-yl-l,2,3, 4-

-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

g) hydroxyamid 6-(2-metyl-l-oxo-6-piperidin-l-yl-

-1,2,3, 4-te.trahydro-naftalen-2-yl) hexánovej kyseliny

h) hydroxyamid 6-(2-metyl-l-oxo-6-fenyl-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

i) hydroxyamid 6-(6-bróm-2-metyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

j) hydroxyamid 5-(7-metoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

k) hydroxyamid 5-(5-metoxy-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

l) hydroxyamid 5-(5,7-dimetyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

m) hydroxyamid 6-(2-metyl-l-oxo-6-pyridin-2-yl-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

n) hydroxyamid 6-(2-metyl-l-oxo-6-pyridin-3-yl-l,2,3,4-

-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

o) hydroxyamid 6-(2-metyl-l-oxo-6-pyridin-4-yl-l,2,3,4-

-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

p) hydroxyamid 5-(7-dimetylamino-l-oxo-l,2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

q) hydroxyamid 5-(7-amino-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-

-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

r) hydroxyamid 6-(2,6-dimetyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-

-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

s) hydroxyamid 5-(2-etyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-

-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

t) hydroxyamid 6-(2, 5,8-trimetyl~l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

u) hydroxyamid 5-(6,7-dimetoxy-l-oxo-l,2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

v) metylester 2-(4-hydroxykarbamoyl-butyl)-5,7-dimetyl-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny

w) metylester 2-(5-hydroxykarbamoyl-pentyl)-6-metyl-l-oxo-1,2,3, 4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny

x) 2-(4-hydroxykarbamoyl-butyl)-1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftaléh-2-karboxylová kyselina

y) hydroxyamid 5-(7-dimetylamino-2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)-2,2-dimetylpentánovej kyseliny

z) 2-metyl-5-(2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánová kyselina aa) hydroxyamid 1-[3-(2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl) -propyl] cyklopropánkarboxylovej kyseliny bb) hydroxyamid 5-(2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pent-4-enoovej kyseliny cc) hydroxyamid 6-(7-chlór-2-metyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny dd) etylester 2-(5-hydroxykarbamoyl-pentyl)-5, 7-dimetyl-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny

Príklad 12

Vyhodnotenie inhibičných vlastností zlúčenín vynálezu

Na meranie inhibičných vlastností zlúčenín podlá vynálezu bolo zavedené testovacie meranie použitím aminokumarínového derivátu omega-acetylovaného lyzínu ako substrátu pre enzým. Tento test je detailne opísaný v Hoffmann, K., et al., Nucleic Acid Research 27 (1999) 20572058). Použitím protokolu, opísaného v tejto publikácii, bol inhibičný účinok novej zlúčeniny stanovený pri koncentrácii 10 nM. Pozorovaná miera inhibície pre vybrané zlúčeniny je ukázaná v tabuľke 1:

Tabuľka 1:

V rovnakom teste vykazuje suberanilohydroxámová kyselina (SAHA) (referencia na strane 2) inhibičný účinok 42% pri 10 nM.

Príklad 13

Zloženie tablety

Položka	Zložky	mg/Tableta
1	Zlúčenina 2d	25	100
2	Bezvodá laktóza	73	35
3	Kroskarmelóza Povidon K30	6	8
4	Sodný	5	6
5	Stearát horečnatý	1	1
	Celková hmotnosť	140	150

Zlúčenina 2d je opísaná v príklade 2.

Výrobný postup:

1. Miešaj položky 1,2 a 3 vo vhodnom mixéri počas 15 minút.

2. Granuluj práškovú zmes z kroku 1 20% roztokom Povidonu K30 (položka 4).

3. Vysuš granulát z kroku 2 pri 50° C.

4. Preveď granulát z kroku 3 cez vhodné mlecie zariadenie.

5. Pridaj položku 5 k namletému granulátu z kroku 4 a miešaj 3 minúty.

6. Stlač granulát z kroku 5 vo vhodnom lise.

Príklad 14

Zloženie kapsuly

Položka Zložka mg/kapsula

1	Zlúčenina 2d	50	100
2	Bezvodá laktóza	123	148
3	Kukuričný škrob	35	40
4	Mastenec	15	10
5	Stearát horečnatý	2	2
	Celková hmotnosť	225	300

plnenia

Výrobný postup:

1. Miešaj položky 1,2 a 3 vo vhodnom mixéri 15 minút.

Pridaj položky 4 & 5 a miešaj 3 minúty.

3. Naplň vhodnú kapsulu.

Zoznam citácií

Basu, B., et al., Synth. Commun., 11,10,1981, 803-810

Genet, J.P., et al., Tetrahedron Lett 35 (1994) 4559-4562

Cancer: Principles & Practice of Oncology, Vincent T.

DeVita, Jr., Samuel Hellmann, Steven A. Rosenberg; 5^th

Ed., Lippincott-Raven Publishers (1997)

Hoffmann, K., et al., Nucleic Acid Research 27 (1999) 20572058

Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Vol. XV/1 a XV/2

Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Georg Thieme Verlag, Stuttgart

Marks, P.M., et al., J. Nad. Cancer Inst. 15 (2000) 12101216

Organic Reactions, John Wiley & Sons, Inc., New York

Pradeep, K., a Saravanan, K., Tetrahedron 54 (1998) 21612168

Ugi, I., et al., Liebigs Ann. Chem. 641 (1961) 63-70

US Patent No. 5,369,108

WO 98/54350

WO 98/55449

Zlúčenina uvedená v názve v príklade č.

Inhibičný účinok

pri 10 mM v %

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Zlúčenina vzorca I

R2 I P R3^ 6 T R5 O)

R¹ je vybrané z vodíka, (1-4C)alkylu, COOH, COO(1-4C)~ alkylu;

R², R³, R⁴, R⁵ sú nezávisle vybrané z vodíka, halogénového atómu, (1-4C)alkyl-, trifluórmetyl-, hydroxy-, (1—4C)alkoxy-, aryloxy-, arylalkyloxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]amino-, piperidino, morfolino, pyrolidino, (1-4C)alkanoylamino-, alebo arylovej skupiny, alebo heteroarylové skupiny, alebo R² a R³ spoločne alebo R³a R⁴ spoločne alebo R⁴ a R⁵ spoločne môžu vytvárať (13C)alkyléndioxy kruh alebo R² a R³ spoločne alebo R³ a

R⁴ spoločne alebo R⁴ a R⁵ spoločne môžu vytvárať (3-5C)alkylénový reťazec;

Y je -CH₂-CH₂; X je alkylénový reťazec 4 až 10 uhlíkových atómov, ktoré môžu byť saturované alebo nesaturované j ednou alebo dvoma dvojnými väzbami alebo jednou alebo dvoma

trojitými väzbami alebo jednou dvojnou a jednou trojitou a ktoré môžu byť rozvetvené alebo nerozvetvené alebo prerušené (3-7C)cykloalkýlovým kruhom.

jej enantioméry, diastereoizoméry a racemáty, rovnako ako jej soli s farmaceutický prijateľnými kyselinami a zásadami.
2. Zlúčenina vzorca I, podľa nároku 1, kde R¹ je vodík alebo (1-4C) alkyl alebo COOR, v ktorom R je vodík alebo (1-4C)alkyl.
3. Zlúčenina vzorca I, podľa nároku 1, kde R², R³, R⁴ a R⁵sú nezávisle vodík alebo tri z nich sú vodík alebo R² a R⁵ sú vodík.

4. Zlúčenina vzorca (I) podľa nároku 1, kde X je -(CH₂)_n- alebo -CH=CH- (CH₂)_n_₂- , v ktorej n je celé čislo od 3 do 7. 5. Zlúčenina vzorca (I) podľa nároku 1, kde X je

-(CH₂)n-CH(CH₃)-, -(CH₂)_n-i, -C(CH₃)₂- alebo -(CH₂)_n-!C (“CH₂~CH₂-)v ktorej n je celé číslo od 3 do 7.
6. Zlúčenina vzorca (I) podľa nároku 1, vybraná zo skupiny, skladajúcej sa z

Hydroxamidu 5-(1-oxo-l, 2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

Hydroxyamidu 5-(6-metoxy-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

Hydroxyamidu 6-(6-chlór-l-oxo-l, 2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

Hydroxyamidu 6-(2-metyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

Hydroxyamidu 6-(1-oxo-l, 2,3, 4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

Hydroxyamidu 5-(2-metyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)pentánovej kyseliny

Hydroxyamidu 6-(2-metyl-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)-hex-5-enoovej kyseliny

Hydroxamidu 5-(5-metoxy-l-oxo-l, 2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny

Etylesteru 2- (5-hydroxykarbamoyl-pentyl)-5-metoxy-l-oxo-1,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny

Etylesteru 2-(7-hydroxykarbamoyl-heptyl)-5,7-dimetyl-1-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalén-2-karboxylovej kyseliny

Hydroxyamidu 6-(7-chloro-2-metyl-l-oxo-l,2,3,4-tetrahydro-naftalen-2-yl)hexánovej kyseliny
7. Postup výroby zlúčeniny vzorca.I kde:

R¹ je vybrané z vodíka, (1-4C)alkylu, COOH, COO(1-4C)~ alkylu;

R², R³, R⁴, R⁵ sú nezávisle vybrané z vodíka, halogénového atómu, (1-4C)alkyl-, trifluórmetyl-, hydroxy-, (1-4C)alkoxy-, aryloxy-, arylalkyloxy-, nitro-, amino-, (1-4C)alkylamino-, di[(1-4C)alkyl]amino-, piperidino, morfolino, pyrolidino, (1-4C)alkanoylamino-, alebo arylovej skupiny, alebo heteroarylovej skupiny, alebo R² a R³ spoločne alebo R³ a R⁴ spoločne alebo R⁴ a R⁵ spoločne môžu vytvárať (1-3C)alkyléndioxy kruh alebo R² a R³ spoločne alebo R³a R⁴ spoločne alebo R⁴ a R⁵ spoločne môžu vytvárať (35C)alkylénový reťazec;

Y je -CH₂-CH₂;

X je alkylénový reťazec 4 až 10 uhlíkových atómov, ktoré môžu byť saturované alebo nesaturované jednou alebo dvoma dvojnými väzbami alebo jednou alebo dvoma trojitými väzbami alebo jednou dvojnou a jednou trojitou a ktoré môžu byť rozvetvené alebo nerozvetvené alebo prerušené (3-7C) cykloalkýlovým kruhom.

jej enantiomérov, diastereoizomérov a racemátov, rovnako ako jej solí s farmaceutický prijateľnými kyselinami a zásadami zreagovaním zlúčeniny vzorca III

R1

R4

R5 (ΠΙ) kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵ a Y majú hore uvedený význam a zlúčeniny vzorca IV \ ,^PG

N-0 / H (IV) kde

A je nahraditelná skupina, PG je chrániaca skupina a X má hore uvedený význam.
8. Farmaceutická zmes obsahujúca ako aktívnu zložku zlúčeninu vzorca (I) podľa nárokov 1 až 6 v zmesi s farmaceutický prijateľným nosičom, excipientnými látkami alebo riedidlami.
9. Použitie zlúčeniny podlá nárokov 1 až 6 na prípravu lieku, ktorý má aktivitu ako inhibítor históndeacetylázy (HDAC).
10. Použitie zlúčeniny podľa nároku 9, ako induktoru apoptózy alebo inhibítoru bunkovej proliferácie.