SK3972002A3 - Antibody dye conjugates and pharmaceutical composition containing the same - Google Patents

Antibody dye conjugates and pharmaceutical composition containing the same Download PDF

Info

Publication number
SK3972002A3
SK3972002A3 SK397-2002A SK3972002A SK3972002A3 SK 3972002 A3 SK3972002 A3 SK 3972002A3 SK 3972002 A SK3972002 A SK 3972002A SK 3972002 A3 SK3972002 A3 SK 3972002A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
dye
antibody
dyes
disease
group
Prior art date
Application number
SK397-2002A
Other languages
English (en)
Inventor
Michael Schirner
Kai Licha
Ludger Dinkelborg
Original Assignee
Schering Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=7924318&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=SK3972002(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Schering Ag filed Critical Schering Ag
Publication of SK3972002A3 publication Critical patent/SK3972002A3/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
    • A61K49/0058—Antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
    • A61K49/0032—Methine dyes, e.g. cyanine dyes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
    • A61K49/0039—Coumarin dyes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
    • A61K49/0041—Xanthene dyes, used in vivo, e.g. administered to a mice, e.g. rhodamines, rose Bengal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
    • A61K49/0041—Xanthene dyes, used in vivo, e.g. administered to a mice, e.g. rhodamines, rose Bengal
    • A61K49/0043—Fluorescein, used in vivo

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Oblasť techniky
Predkladaný vynález sa týka konjugátov protilátka-farbivo, ktoré sú určené na naviazanie na štruktúry novo tvorených ciev, a ich použitie na zobrazenie patologickej angiogenézy počas operácie.
Doterajší stav techniky
V dospelom organizme nedochádza až na zriedkavé výnimky (napríklad cyklus u pôrodu schopnej ženy) k novotvorbe ciev. Novotvorba ciev sa však pozorovala pri mnohých ochoreniach. Proces, pri ktorom sa novo tvoria cievy, ku ktorému tu dochádza, sa označuje ako angiogenéza, a predstavuje odpoveď na určité signály.
Angiogenéza je proces, ku ktorému prednostne dochádza v okrajových oblastiach ložiska ochorenia. Z centra ložiska ochorenia sa uvoľňujú faktory, ktoré difundujú k okrajovým oblastiam ložiska ochorenia. Tieto faktory sa označujú ako stimulátory angiogenézy. Pokial tieto stimulátory angiogenézy dosiahnu zdravé tkanivá v okrajových oblastiach ložiska ochorenia, stimulujú sa cievy, ktoré doteraz neboli zasiahnuté k vytváraniu cievnych púčikov. Cievy cievnych púčikov tvoria v okrajových oblastiach ložiska ochorenia novú kapilárnu sieť. Vďaka tomuto procesu možno vždy zaistiť zodpovedajúce zásobovanie ložiska ochorenia živinami. Ako obzvlášť významné sa ukázalo, že rast nádorov a ich metastáz závisí od schopnosti indukovať angiogenézu.
ložiskom ochorenia, vytvorené z'týchto
Štandardnou metódou liečenia lokalizovaných ložísk ochorení je dnes chirurgická liečba. Velký význam dosiahla pri liečení nádorov. Zistilo sa však, že aj napriek zdokonaleniu chirurgických techník je nutné počítať s určitým množstvom lokálnych recidív, pretože anatomické usporiadanie ľudského organizmu iba zriedka dovoľuje rozsiahle odstránenie ložiska ochorenia. Pri mnohých orgánov (napríklad pri mozgu) sa musí od rozsiahleho odstránenia až k dosiahnutiu zdravého tkaniva upustiť. Riziko porania zdravých orgánov totiž rastie s radikalitou chirurgického zákroku.
Histologické vyšetrenia okrajových oblastí nádoru po uskutočnenom chirurgickom odstránení nádoru však ukázali, že značný počet nádorov nie je možné úplne odstrániť a zvyšky nádoru zostávajú v tele. Vďaka týmto nádorovým zvyškom môže dôjsť k ďalšiemu rastu nádoru alebo k nádorovým metastázam. Spôsob, ktorý by počas chirurgického ošetrovania presne zobrazil hranice chorobného procesu oproti zdravému tkanivu, by dovolil úplne odstrániť ložisko ochorenia a do značnej miery ušetriť zdravé tkanivo.
Farbivá na zobrazenie ložísk ochorení sú už známe (Poon WS a kol., J Neurosurgery (1992) 76: 679-686, Haglund MM a kol., Neurosurgery (1996) 38: 308-317), Tieto farbivá sú priamo prijímané prednostne nádorovými bunkami alebo sa hromadia nešpecifický v extracelulárnom priestore nádorov. Pretože je mechanizmus hromadenia použitej látky preukázaný taktiež v zdravom tkanive, je špecifita a citlivosť tejto látky nízka.
Zlúčeniny, ktoré možno použiť na ohraničenie ložiska ochorenia počas operácie prostredníctvom selektívneho zobrazenia okrajových oblastí ložiska ochorenia, nie sú doteraz známe.
Angiogenéza prebieha prednostne v okrajových oblastiach ložiska ochorenia. Pomocou zobrazenia angiogenézy možno znázorniť hranice oproti zdravému tkanivu. Protilátky na detekciu angiogenézy v ložisku ochorenia sú už známe, a používajú sa na zobrazenie novo vytvorených ciev v histologických tkanivových rezoch, na preukázanie rozličných proteínov v ložisku ochorenia alebo ako nosná molekula na liečebné látky.
Protilátka v kombinácii s farbivami, tzv. konjugáty protilátka-farbivo, ktoré možno použiť na ohraničenie ložiska ochorenia počas operácie prostredníctvom selektívneho zobrazenia okrajových oblastí ložiska ochorenia, však nie je známa.
Podstata vynálezu
Úloha predkladaného vynálezu spočíva v poskytnutí konjugátov protilátka-farbivo na zobrazenie okrajov nádoru počas operácie. Protilátka konjugátu protilátka-farbivo podľa predkladaného vynálezu je určená na štruktúry, ktoré sú špecifické pre proces angiogenézy. Konjugáty protilátka-farbivo podlá predkladaného vynálezu zahŕňajú farbivá, ktoré svojím hromadením umožňujú optické zobrazenie. Pretože angiogenéza prebieha najsilnejšie v okrajových oblastiach ložiska ochorenia, dochádza tu k najsilnejšiemu optickému signálu. Konjugáty protilátka-farbivo podľa predkladaného vynálezu sú vhodné preto, že zobrazujú hranice okrajové oblasti, oproti zdravému diagnostiky počas operácie. Týmto umožňujú úplne odstrániť ložisko ochorenia a súčasne do značnej miery ušetriť zdravé tkanivá.
ložiska ochorenia, tzv. tkanivu pomocou optickej
Sú známe protilátky, ktoré sú určené proti molekulám, ktoré sú silno exprimované v angiogeneticky aktívnych tkanivách, a v priľahlých tkanivách sú exprimované iba na velmi nízkej úrovni (WO 96/01653).
Obzvlášť významné sú v konjugátoch protilátka-farbivo protilátky, ktoré sú určené proti receptorom na vaskulárne rastové faktory, receptorom na endotelových bunkách, na ktoré sa viažu zápalové mediätory, receptorom na endotelových bunkách, na ktoré sa viažu matrixové molekuly a matrixovým proteínom, ktoré sú exprimované špecificky pri cievnej novotvorbe (Brekken a kol.,
Cancer Res. (1998) 58: 1952-9 a Schold SC Jr. a kol., Invest. Radiol. (1993) 28: 488-96) .
Výhodné sú protilátky alebo fragmenty protilátok, ktoré sú určené proti matrixovému proteínu EDB-fibronektínu. EDB-fibronektín, taktiež známy ako onkofetálny fibronektín, je variant fibronektínu, ktorý sa špecificky tvorí okolo novo vytvorených ciev počas procesu angiogenézy. Výhoda protilátok proti EDB-fibronektínu spočíva obzvlášť v tom, že pri použití pri odstraňovaní ložiska ochorenia počas operácie nedochádza k novej tvorbe EDB-fibronektínu v zdravom tkanive. Takto zostáva počas chirurgického zákroku špecifita zachovaná. Protilátky proti receptorom na rastové faktory alebo zápalové mediátory na endotelových .bunkách, ktoré sú taktiež exprimované špecificky v okrajových oblastiach nádoru, sa však môžu počas chirurgického zákroku novo tvoriť taktiež v zdravom tkanive v blízkosti ložiska ochorenia.
Obzvlášť výhodnými sú v konjugátoch protilátka-farivo protilátky L19 a E8 proti EDB-fibronektínu (Vití F a kol., Cancer Res (1999) 59: 347-352). Tieto konjugáty protilátka-farbivo sú taktiež predmetom predkladaného vynálezu.
Známe protilátky sú konjugované s farbivami, ktorých hromadenie v tkanivách možno opticky detegovať, a ktoré umožňujú ohraničenie okrajových oblastí ložiska ochorenia počas operácie.
Výhoda konjugátov protilátka-farbivo podlá predkladaného vynálezu tak spočíva v tom, že ich možno použiť na selektívne fluorescentné zafarbenie tkanív v neoangiogenetickom štádiu. Toto fluorescentné zafarbenie je nádorovo špecifické a vysiela fluorescenčný signál, ktorý možno detegovať vo vysokom pomere signálu ku podkladu.
Známe sú taktiež konjugáty protilátka-farbivo pre fluorescentné zobrazenie na perkutánne, neinvazívne zobrazenie nádoru (Neri D a kol'., Náture Biotechnology (1997) 15: 1271-1275).
Doteraz neznáme sú konjugáty protilátka-farbivo, ktoré sa hromadia prednostne v okrajových oblastiach ložiska ochorenia.
Známe sú taktiež konjugáty protein-farbivo na zobrazenie nádoru počas operácie. Nevýhodou týchto konjugátov je to, že konjugáty prijímajú najmä hypoxické, ako aj metabolický nedostatočne zásobené, nádorové bunky. Pretože však sú tkanivá v okrajových oblastiach nádoru dobre vaskularizované a tým sú bunky dostatočne zásobené kyslíkom a živinami, nedosiahne sa dostatočné hromadenie známych konjugátov protein-farbivo.
Oproti tomu konjugáty protilátka-farbivo podlá predkladaného vynálezu sú do značnej miery nezávislé od metabolického stavu ložiska ochorenia.
Hoci možno optické detekcie hraníc ložiska ochorenia dosiahnuť rôznymi spôsobmi, sú všeobecne výhodné detekcie, u ktorých možno pomocou zodpovedajúceho budiaceho svetla vyvolať fluorescentné žiarenie špecifické pre dané farbivo. Podľa emisnej vlnovej dĺžky možno pritom fluorescenciu vizuálne zaznamenávať priamo makroskopický alebo mikroskopicky a prípadne súčasne zaznamenávať pomocou zobrazujúceho detekčného systému digitálne a zobrazovať na obrazovke.
Vizuálne zaznamenatelné je fluorescentné žiarenie spektrálnej oblasti 400 až 650 nm. Obzvlášť výhodná je vlnová dĺžka od 450 do 600 nm. Výhoda použitia viditeľnej oblasti svetla spočíva obzvlášť v tom, že je možné detegovať fluorescenciu pomocou nenákladného technického vybavenia. Budiace svetlo, ktoré sa vyrába pomocou vhodného laseru alebo laserových diód, sa zhromažďuje vo svetelnom vodiči a pomocou neho sa privádza do oblasti, ktorá sa má diagnostikovať. Uskutočnenie rozpoznania okrajov nádoru počas operácie sa dosiahne pomocou veľkoplošného ožarovania oblasti. Pomocou filtra (napríklad filtrových okuliarov, ktoré má nasadené vyšetrujúca osoba) sa odblokuje odrazené budiace svetlo a pozoruje sa iba fluorescencia špecifická pre farbivo (makroskopické pozorovanie). Alternatívne možno dosiahnuť detekciu fluorescencie pomocou operačného mikroskopu (mikroskopické pozorovanie). Kvôli malej hĺbke prieniku tohto svetla do tkaniva (niekolko málo milimetrov) možno týmto spôsobom detegovať povrchovo lokalizované novo vytvorené cievy.
Ďalšia výhoda spektrálnej oblasti viditeľného svetla spočíva v malej hĺbke prieniku do tkaniva a emisii z tkaniva. Vďaka tomu sa detegovatelný signál nenarúša signálmi z hlbších častí tkaniva a môže sa presne priradiť povrchovým viditeľným tkanivovým štruktúram.
Predmetom predkladaného vynálezu sú teda taktiež konjugáty protilátka-farbivo, ktorých farbivová zložka indukuje optický signál vo viditeľnej spektrálnej oblasti svetla.
Použitie konjugátov protilátka-farbivo obsahujúcich farbivá, ktoré absorbujú v spektrálnej oblasti blízkej infračervenému svetlu (NIR; 600 až 900 nm) , oproti tomu umožňuje rozpoznanie cievnej novotvorby v hlbších vrstvách tkaniva (až 1 cm) , pretože je NIR-svetlo tkanivom slabo absorbované a tým sa dosiahne väčšia hĺbka prestupu tkanivom. Pozorovanie fluorescencie vizuálne nie je možné, možno ho dosiahnuť pomocou CCD-kamier (chargé coupled device-kamera, kamera s integrovaným obvodom s väzbou nábojom), ktoré sú umiestnené nad skúmanou oblasťou tkaniva. Je možná tak makroskopická, ako aj mikroskopická detekcia. Výhoda použitia farbív, ktoré absorbujú a fluoreskujú v spektrálnej oblasti NIR, v konjugátoch protilátka-farbivo sa prejaví v prípadoch, kde je potrebné hodnotiť prekryté oblasti (napríklad krvou).
Z fotofyzikálneho hľadiska sú pre konjugáty protilátka-farbivo vhodné tie farbivá, ktorých absorpčné maximum spadá do spektrálnej oblasti od 400 do 800 nm a aspoň jedno fluorescentné maximum spadá do oblasti 500 až 900 nm.
Rovnako sú predmetom predkladaného vynálezu konjugáty proti7 látka-farbivo, ktoré sa vyznačujú tým, že farbivo indukuje fluorescentný signál až po použití definovanej oblasti vlnových dĺžok viditeľného svetla alebo svetla blízkeho infračervenému.
Konjugáty protilátka-farbivo obsahujúce farbivá s vizuálne detegovatelnou fluorescenciou, možno napríklad zvoliť z nasledujúcich tried: fluoresceínové farbivá, fluoresceín-izotiokyanátové farbivá, karboxyfluoresceínové farbivá alebo kalceínové farbivá, tetrabrómfluoresceínové farbivá alebo eozínové farbivá, tetrajódfluoresceínové farbivá alebo erytrozínové farbivá, difluórfluoresceínové farbivá, ako napríklad farbivá Oregon Green® 488, Oregon Green® 500 alebo Oregon Green® 514, karboxyrodolové (Rhodol Green®) farbivá (US 5,227,487; US 5,442,045), karboxyrodamínové farbivá (napríklad Rhodamin Green® Dyes) (US 5,366,860), 4,4-difluór-4-bora-3a,4a-diaza-indacénové farbivá, ako napríklad Bodipy FL, Bodipy 493/503 alebo Bodipy 530/550 a ich deriváty (US 4,774,339, US 5,187,288,
US 5,433,896, US 5,451,663), cyanínové farbivá, cyanínové a merocyanínové farbivá, kumarínové farbivá, ako napríklad 7-amino-4~metylkumarínové farbivá, kovové komplexy kyseliny dietyléntriamín-pentaoctovej (DTPA) alebo tetraaza-macrozyclenu· (cyclen, pyclen) s terbiom alebo európiom alebo tetrapyrolové farbivá, najmä porfyrínové farbivá.
US 5,248,782, najmä karboKonjugáty protilátka-farbivo obsahujúce NIR-farbivá, možno napríklad zvoliť z nasledujúcich tried: polymetínové farbivá, ako dikarbocyanínové farbivá, trikarbocyanínové farbivá, merocyanínové farbivá, a oxonolové farbivá (WO 96/17628), rodamínové farbivá, fenoxazínové farbivá alebo fenotiazínové farbivá, tetrapyrolové farbivá, najmä benzporfyrínové farbivá, chorínové farbivá a ftalocyanínové farbivá.
Vhodné NIR-farbivá v konjugátoch protilátka-farbivo predstavujú cyanínové farbivá s absorpčnými maximami medzi 700 a
800 nm, najmä indodikarbocyanínové farbivá a indotrikarbocyanínové farbivá.
Všeobecne výhodné farbivá v konjugátoch protilátka-farbivo predstavujú farbivá z tried uvedených pred týmto, ktoré obsahujú jednu alebo viac karboxylových skupín, ktoré sa po aktivácii napoja na aminoskupiny protilátok alebo fragmentov protilátok. Výhodné sú taktiež tie deriváty, ktoré obsahujú maleimido-skupiny alebo brómalkylové skupiny, ak dochádza ku kovalentnej väzbe na sulfhydrylovú skupinu aminokyseliny cysteínu.
Ďalej sú výhodné farbivá, ktoré obsahujú izokyanátovú skupinu, ktorá takisto reaguje s aminoskupinami.
Okrem toho musia farbivá v konjugátoch protilátka-farbivo vykazovať vysokú fotostabilitu a nesmú pri ožarovaní svetlom blednúť, aby počas časového obdobia, pri ktorom sa uskutočňuje pozorovanie, zaručovali konštantný signál.
Predmetom predkladaného vynálezu sú teda taktiež konjugáty protilátka-farbivo, ktoré sa hromadia prednostne v okrajových oblastiach bunkových tkanív ložiska ochorenia, a tým sa stávajú okrajové oblasti ložiska ochorenia opticky zobraziteľné.
Predmetom predkladaného vynálezu sú najmä konjugáty protilátka-farbivo všeobecného vzorca I
B-(F)n (I), v ktorom
B znamená protilátku alebo fragment protilátky s vysokou väzbosťou na EDB-fibronektín,
F znamená farbivo z triedy kumarínových farbív, fluoresceínových farbív, karboxyfluoresceínových farbív, difluórfluoresceínových farbív, tetrabrómfluoresceínových farbív, tetrajódfluoresceínových farbív, rodamínových farbív, karboxyrodamínových farbív, karboxyrodolových farbív, 4,4-difluór-4-bora-3a,4a-diaza-indacénových farbív, polymetínových farbív alebo tetrapyrolových farbív, alebo komplexov terbia alebo európia a kyseliny dietyléntriamín-pentaoctovej (DTPA) alebo cyclénu, a jeho derivátov, a n znamená číslo od jednej do päť.
Obzvlášť výhodné, a tým sú taktiež predmetom predkladaného vynálezu, sú konjugáty protilátka-farbivo, v ktorých farbivo predstavuje cyanínové farbivo, merocyanínové farbivo, oxonolové farbivo, styrylové farbivo alebo squariliové farbivo.
Najmä sú výhodné, a tým sú taktiež predmetom predkladaného vynálezu, konjugáty protilátka-farbivo, v ktorých farbivo predstavuje cyanínové farbivo, najmä karbocyanín, dikarbocyanín alebo trikarbocyanín.
Predkladaný vynález sa tak týka najmä takých konjugátov protilátka-farbivo, v ktorých farbivo — (F)n zo všeobecného vzorca I predstavuje cyanínové farbivo všeobecného vzorca II
(II),
R’ v ktorom
D znamená skupinu všeobecného vzorca III alebo IV
hviezdičkou pričom pozícia označená väzby so skupinou B, a znamená umiestnenie
B môže znamenať skupinu všeobecného vzorca V, VI, VII, VIII
R* « 1 H =YC^ alebo IX
R* < ^c—
I H =K
H C S=c^c^c\cOe\cH,)Z !— (CH,!
(V) (VI) (VII) (VIII) (ix), pričom
R a R môžu znamenať sulfoalkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, nasýtenú alebo nenasýtenú, rozvetvenú alebo lineárnu alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 50 uhlíkových atómov, ktorá môže byť prípadne substituovaná až 15 atómmi kyslíka, alebo/a až tromi karbonylovými skupinami, alebo/a až piatimi hydroxylovými skupinami,
R3 znamená skupinu -COOE1, skupinu -CONE1E2, skupinu -NHCOE1, skupinu -NHCONHE1, skupinu -ΝΕ’έ2, skupinu -OE1, skupinu -OSO3E1, -skupinu -SO3E1, skupinu -SO2NHE1 alebo skupinu -E1, pričom
E1 a E2 nezávisle jeden od druhého znamenajú atóm vodíka, sulfoalkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, nasýtenú alebo nenasýtenú, rozvetvenú alebo lineárnu alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 50 uhlíkových atómov, ktorá môže byť prípadne substituovaná až 15 atómmi kyslíka, alebo/a až tromi karbonylovými skupinami, alebo/a až piatimi hydroxylovými skupinami,
R4 znamená atóm vodíka alebo atóm fluóru, atóm chlóru, atóm brómu alebo atóm jódu, b znamená číslo 2 alebo 3,
X znamená atóm kyslíka, atóm síry alebo skupinu =Ο(ΟΗ3)2 alebo skupinu -(CH=CH)-, a
L znamená priamu väzbu alebo spojovací článok, ktorým môže byť priamy alebo rozvetvený uhlíkový reťazec obsahujúci až 20 atómov uhlíka, ktorý môže byť substituovaný jednou alebo viacerými hydroxylovými skupinami, karboxylovými skupinami, skupinami SO3, alebo/a môže byť prípadne raz alebo viackrát prerušený atómom kyslíka, atómom síry, skupinou -C0-, skupinou -CS-, skupinou -CONH-, skupinou -NHCO-, skupinou -NHCSNH-, skupinou -SO2, skupinou -P04 alebo skupinou -NHalebo arylovou skupinou.
Konjugáty protilátka-farbivo podľa predkladaného vynálezu možno použiť buď samotné alebo vo forme liečiva.
Na použitie ako liečivo sa konjugáty protilátka-farbivo upravujú do formy farmceutického prostriedku, ktorý okrem konjugátu protilátka-farbivo na enterálne alebo parenterálne podávanie obsahuje vhodné farmaceutické, organické alebo anorganické inertné nosné látky, ako napríklad vodu, želatínu, arabskú gumu, mliečny cukor, škroby, stearan horečnatý, mastenec, rastlinné oleje, polyalkylénglykoly atď. Farmaceutické prostriedky môžu byť v pevnej forme, ako napríklad vo forme tabliet, dražé, čapíkov, kapsúl, alebo v kvapalnej forme, ako napríklad vo forme roztokov, suspenzií alebo emulzií. Okrem toho prípadne obsahujú pomocné látky ako konzervačné činidlá, stabilizátory, zmáčadlá alebo emulgátory, soli na úpravu osmotického tlaku alebo pufry.
Na parenterálne podávanie sú vhodné injekčné roztoky alebo suspenzie, najmä vodné roztoky konjugátov protilátka-farbivo.
Ako nosné systémy možno použiť taktiež povrchovo aktívne pomocné látky ako soli žlčových kyselín alebo živočíšne alebo rastlinné fosfolipidy, avšak taktiež ich zmesi ako lipozómy alebo ich súčasti. Na orálne podávanie sú vhodné najmä tablety, dražé alebo kapsule s mastencovým alebo/a uhľovodíkovým nosičom alebo spojivom, ako napríklad laktózou, kukuričným škrobom alebo zemiakovým škrobom. Použiť možno taktiež kvapalné formy, ako napríklad šťavu, ktorá prípadne obsahuje sladidlo.
Dávkovanie konjugátov protilátka-farbivo sa môže meniť v závislosti od spôsobu podania, veku a hmotnosti pacienta, povahy a závažnosti liečeného ochorenia a podobných faktorov. Dávka konjugátov protilátka-farbivo použiteľná na rozpoznanie hraničných oblasti je 0,5 až 1000 mg, výhodne 50 až 200 mg, pričom túto dávku možno podávať naraz ako jednotlivú dávku alebo rozdelenú do dvoch alebo viacerých denných dávok.
Prípravky a spôsoby podávania opísané pred týmto sú taktiež predmetom predkladaného vynálezu.
Tým sa predkladaný vynález týka farmaceutických prostriedkov, ktoré obsahujú jeden alebo viac konjugátov protilátka-farbivo, na zobrazenie okrajových oblastí ložiska ochorenia počas operácie, pričom sa tieto farmaceutické prostriedky používajú buď samotné alebo v zmesi s vhodnými rozpúšťadlami, puframi alebo/a nosičmi.
Konjugáty protilátka-farbivo podľa predkladaného vynálezu možno použiť pri chirurgickom ošetrení ochorení súvisiacich s angiogenézou, ako napríklad zhubných nádorov a ich metastáz, nezhubných nádorov, prekanceróznych zmien tkanív, endometriózy, hemangiómov, mimomaternicových tehotenstiev.
Predmetom predkladaného vynálezu je taktiež použitie konjugátov protilátka-farbivo a prostriedkov na zobrazenie ložísk ochorení počas operácie, najmä na mikroskopické a makroskopické zobrazenie okrajových oblastí ložiska ochorenia počas operácie, ako aj použitie konjugátov protilátka-farbivo na prípravu prostriedkov na chirurgické ošetrenie ochorení súvisiacich s angiogenézou, ako napríklad zhubných nádorov a ich metastáz, nezhubných nádorov, prekanceróznych zmien tkanív, endometriózy, hemangiómov a mimomaternicových tehotenstiev.
Nasledujúce príklady uskutočnenia vynálezu ilustrujú biologickú použiteľnosť konjugátov protilátka-farbivo pódia predkladaného vynálezu, bez toho, aby nejakým spôsobom obmedzovali rozsah predkladaného vynálezu.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Výroba farbiva
Výroba farbiva sa uskutočňuje spôsobmi, ktoré sú z literatúry známe. Vhodnými farbivami na výrobu konjugátov protilátka-farbivo sú farbivá obsahujúce karboxylové skupiny alebo izotiokyanátové skupiny pre kovalentnú väzbu s aminoskupinami protilátok. Obzvlášť výhodné sú na tento účel cyanínové farbivá (Mujumdar SR a kol. (1996) 7: 356-362; Flanagan JH a kol. (1997) 8: 751-756 a Lichá K a kol. (1996) Proc SPIE, zv. 2927, 192-198).
Farbivo .obsahujúce karboxylové skupiny sa najskôr o sebe známymi spôsobmi aktivuje prevedením na reaktívny ester (napríklad AZ-hydroxysukcínimidester) . Farbivo obsahujúce izokyanátové skupiny možno použiť priamo. Reaktívne deriváty potom reagujú v pufrovacom roztoku alebo zmesi organického rozpúšťadla (napríklad dimetylformamidu (DMF) alebo dimetylsulfoxidu (DMSO)) a pufrovacieho roztoku s protilátkou. Pri tomto sa použije trojaž stonásobný molárny nadbytok farbiva. Nezreagovaná časť sa po skončení reakcie oddelí ultrafiltrácíou alebo/a pomocou chromatografie .
Analogickým spôsobom sa vyrobí taktiež nasledujúce farbivo.
Príklad 1
ΛΖ-hydroxysukcínimidester kyseliny jbis-l,l'-(4-sulfobutyl)indokarbocyanín-5-karboxylovej
Výroba kyseliny bis-1,1'-(4-sulfobutyl)indokarbocyanín-5karboxylovej vychádza z 1-(4-sulfobutyl)-2,3,3-trimetyl-3H-indolenínu a 1-(4-sulfobutyl)-2,3,3-trimetyl-5-karboxy-3tf-indolenínu (Cytometry 10, 11-19, 1989, Talanta 39, 505-510, 1992) a uskutočňuje' sa spôsobmi známymi z literatúry. Na prevedenie na N-hydroxysukcínimid ester sa zmieša 0,1 mmol farbiva (67 mg v 10 ml DMF) s práve 0,5 mmol N-hydroxysukcínimidu a dicyklohexylkarbodiimidu (DCC) a mieša sa počas 24 hodín pri teplote miestnosti. Po pridaní 50 ml éteru sa vypadnutá pevná látka odfiltruje, znova sa dvakrát rozpustí v malom množstve DDF a zráža sa éterom a nakoniec sa suší vo vákuu (výťažok 89 %).
Výroba konjugátu protilátka-farbivo
Výroba bis-1,1(4-sulfobutyl)indokarbocyanínového konjugátu s protilátkou L 19
Protilátka L 19 (1 mg v 1 ml pufrovacieho roztoku octanu sodného (50 mmol, pH 8,2)) sa zmieša s ΛΖ-hydroxysukcínimidesterom (75 pmol roztoku 4 mg/ml v DMSO) a potom sa počas 2 hodín mieša pri teplote miestnosti. Vyčistenie sa dosiahne pomocou gélovej filtrácie cez PDlO-kartuše (Pharmacia) a nakoncentrovanie sa dosiahne pomocou skúmaviek Centricon-10 (Amicor.) , čím sa získa roztok s koncentráciou približne 1 mg/ml protilátky. Absorpčné maximum: 555 nm
Fluorescenčnémaximum: 582 nm
Príklad 2
Fluorescentné zobrazenie in vivo na holých myšiach trpiacich nádorom a mikroskopické ex vivo pozorovanie nádorového tkaniva
Zobrazovacie schopnosti zlúčenín podlá predkladaného vynálezu sa pozorovali in vivo po injekčnej aplikácii holým myšiam trpiacim nádorom. Na toto sa intravenózne podalo 0,1 pmol/kg až 2 pmol/kg tejto látky a potom sa počas časového obdobia od 0 do 48 hodín pozorovalo hromadenie v oblasti nádoru. Fluorescencia týchto látok sa indukovala pomocou ožiarenia zvierat svetlom zodpovedajúcej vlnovej dĺžky, ktoré sa vyrobilo laserom (diódový laser, pevný laser) ako monochromatické alebo sa vyfiltrovalo pomocou filtra z polychromatického žiarenia ortuťovej alebo xenónovej lampy. V prípade zlúčeniny opísanej v príklade 1 sa na indukciu vyžarovania u pokusných zvierat použilo svetlo vlnovej dĺžky 540 nm pochádzajúce z Nd:YAG lasera a fluorescentné žiarenie pri vlnovej dĺžke >580 nm sa detegovalo intenzifikovanou CCD-kamerou až do obdržania celotelového záznamu fluorescencie. Súčasne sa fluorescencia detegovala vizuálne a fotograficky. Z nádorového materiálu sa zhotovili rezy a tie sa preskúmali mikroskopicky (mikroskop Zeiss Axiovert s filtrovanou vložkou Cy3) .
Po injekcii 1 pmol/kg konjugátu protilátka-farbivo z príkladu 1 holým myšiam trpiacim F9-tetratokarcinómom sa po 4 hodinách v porovnaní s normálnym tkanivom detegoval zvýšený fluorescenčný signál na základe celotelového záznamu fluorescencie.
Po preparácii kože a najvrchnejších vrstiev nádorového tkaniva bolo možné fluorescenciu priradiť k okrajovým oblastiam nádoru. Pri mikroskopickom skúmaní nádorových rezov sa pozorovala zvýšená fluorescencia, ktorá bola v korelácii s krvnými cievami v okrajových oblastiach nádoru.

Claims (13)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Konjugát protilátka-farbivo, ktorý sa hromadí prednostne v okrajových oblastiach bunkových tkanív ložiska ochorenia, a tým sa stávajú okrajové oblasti ložiska ochorenia opticky zobrazitelné, a ktorý predstavuje zlúčenina všeobecného vzorca I
    B-(F)n (I), v ktorom
    B znamená protilátku alebo fragment protilátky s vysokou väzbosťou na EDB-fibronektín,
    F znamená farbivo z triedy kumarínových farbív, fluoresceínových farbív, karboxyfluoresceínových farbív, difluórfluoresceínových farbív, tetrabrómfluoresceínových farbív, tetrajódfluoresceínových farbív, rodamínových farbív, karboxyrodamínových farbív, karboxyrodolových farbív, 4,4-difluór-4-bora-3a,4a-diaza-indacénových farbív, polymetínových farbív alebo tetrapyrolových farbív, alebo komplexov terbia alebo európia a kyseliny dietyléntriamín-pentaoctovej alebo cyclénu, a jeho derivátov, a n znamená číslo od jednej do päť.
  2. 2. Konjugát protilátka-farbivo podľa nároku 1, v ktorom farbivo predstavuje cyanínové farbivo, merocyanínové farbivo, oxonolové farbivo, styrylové farbivo alebo squariliové farbivo.
  3. 3. Konjugát protilátka-farbivo podľa nároku 1, v ktorom farbivo predstavuje cyanínové farbivo, ako karbocyanín, dikarbocyanín alebo trikarbocyanín.
  4. 4. Konjugát protilátka-farbivo podlá nárokov 1 až 3, v ktorom farbivo -(F)n zo všeobecného vzorca I predstavuje cyanínové farbivo všeobecného vzorca II D=Kn*i1 (II), v ktorom
    D znamená skupinu všeobecného vzorca III alebo IV (III) (IV) , pričom pozícia označená hviezdičkou znamená umiestnenie väzby so skupinou B, a môže znamenať skupinu všeobecného vzorca V, VI, VII, VIII alebo IX
    R4
    I
    R*
    I I H
    H H _4 Γ»
    R h | \
    (ch,;
    R4
    8 i {J =rvychiten,# (V) (VI) (VII) (VIII) (IX), pričom
    R1 a R2 môžu znamenať sulfoalkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, nasýtenú alebo nenasýtenú, rozvetvenú alebo lineárnu' alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 50 uhlíkových atómov, ktorá môže byť prípadne substituovaná až 15 atómmi kyslíka, alebo/a až tromi karbonylovými skupinami, alebo/a až piatimi hydroxylovými skupinami,
    R3 znamená skupinu -COOE1, skupinu -CONEXE2, skupinu -NHCOE1, skupinu -NHCONHE1, skupinu -NE1E2, skupinu -0E1, skupinu -OSO3E1, skupinu -SO3E1, skupinu -SO2NHE1 alebo skupinu -E1, pričom
    E1 a E2 nezávisle jeden od druhého znamenajú atóm vodíka, sulfoalkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, nasýtenú alebo nenasýtenú, rozvetvenú alebo lineárnu alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 50 uhlíkových atómov, ktorá môže byť prípadne, substituovaná až 15 atómmi kyslíka, alebo/a až tromi karbonylovými skupinami, alebo/a až piatimi hydroxylovými skupinami,
    R4 znamená atóm vodíka alebo atóm fluóru, atóm chlóru, atóm brómu alebo atóm jódu, b znamená číslo 2 alebo 3,
    X a Y znamená atóm kyslíka, atóm síry alebo skupinu =C(CH3)2 alebo skupinu -(CH=CH)-, a
    L znamená priamu väzbu alebo spojovací článok, ktorým môže byť priamy alebo rozvetvený uhlíkový reťazec obsahujúci až 20 atómov uhlíka, ktorý môže byť substituovaný jednou alebo viacerými hydroxylovými skupinami, karboxylovými skupinami, skupinami SO3, alebo/a môže byť prípadne raz alebo viackrát prerušený atómom kyslíka, atómom síry, skupinou -CO-, skupinou -CS-, skupinou -CONH-, skupinou -NHCO-, skupinou -NHCSNH-, skupinou -SO2, skupinou -PO4 alebo skupinou -NHalebo arylovou skupinou.
  5. 5. Konjugát protilátka-farbivo podľa nárokov 1 až 4, v ktorom sa ako protilátka použije protilátka L19 a E8.
  6. 6. Konjugát protilátka-farbivo podľa nárokov 1 až 5, v ktorom farbivo indukuje optický signál vo viditeľnej spektrálnej oblasti svetla.
  7. 7. Konjugát protilátka-farbivo podlá nárokov 1 až 5, v ktorom farbivo indukuje fluorescentný signál až pri použití definovanej oblasti vlnových dĺžok viditeľného svetla alebo svetla blízkeho infračervenému.
  8. 8. Framaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje jeden alebo viac konjugátov protilátka-farbivo podľa nárokov 1 až 7, na zobrazenie okrajových oblastí ložiska ochorenia počas operácie.
  9. 9. Framaceut ický prostriedok podľa nároku 8, vyznačujúci sa tým, že je vo forme zmesi s vhodnými rozpúšťadlami, puframi alebo/a nosičmi.
  10. 10. Použitie' konjugátu protilátka-farbivo a prostriedku podlá nárokov 1 až 9 na zobrazenie ložiska ochorenia počas operácie.
  11. 11. Použitie konjugátu protilátka-farbivo podľa nárokov 1 až 9 na zobrazenie okrajových oblastí ložiska ochorenia počas operácie.
  12. 12. Použitie konjugátu protilátka-farbivo podľa nárokov 1 až 9 na mikroskopické a makroskopické zobrazenie okrajových oblastí ložiska ochorenia počas operácie.
  13. 13. Použitie konjugátu protilátka-farbivo podľa nárokov 1 až 7 na prípravu prostriedku na chirurgické ošetrenie ochorení súvisiacich s angiogenézou, ako sú zhubné nádory a ich metastázy, nezhubné nádory, prekancerózne zmeny tkanív, endometrióza, hemangiómy a mimomaternicové tehotenstvo.
SK397-2002A 1999-09-24 2000-08-19 Antibody dye conjugates and pharmaceutical composition containing the same SK3972002A3 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19947559A DE19947559A1 (de) 1999-09-24 1999-09-24 Antikörper-Farbstoffkonjugate gegen Zielstrukturen der Angiogenese zur intraoperativen Tumorranddarstellung
PCT/EP2000/008121 WO2001023005A1 (de) 1999-09-24 2000-08-19 Antikörper-farbstoffkonjugate gegen zielstrukturen der angiogenese zur intraoperativen tumorranddarstellung

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK3972002A3 true SK3972002A3 (en) 2002-09-10

Family

ID=7924318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK397-2002A SK3972002A3 (en) 1999-09-24 2000-08-19 Antibody dye conjugates and pharmaceutical composition containing the same

Country Status (23)

Country Link
EP (2) EP1214099A1 (sk)
JP (1) JP2003510294A (sk)
KR (2) KR100832937B1 (sk)
CN (1) CN1269530C (sk)
AU (1) AU779026B2 (sk)
BG (1) BG65682B1 (sk)
BR (1) BR0014192A (sk)
CA (1) CA2385593A1 (sk)
CZ (1) CZ2002991A3 (sk)
DE (1) DE19947559A1 (sk)
EE (1) EE05176B1 (sk)
HK (1) HK1050491A1 (sk)
HU (1) HUP0202625A2 (sk)
IL (2) IL148405A0 (sk)
MX (1) MXPA02002639A (sk)
NO (1) NO20021441L (sk)
NZ (1) NZ517944A (sk)
RO (1) RO121598B1 (sk)
RU (1) RU2002109237A (sk)
SK (1) SK3972002A3 (sk)
WO (1) WO2001023005A1 (sk)
YU (1) YU20702A (sk)
ZA (1) ZA200203225B (sk)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003524018A (ja) 2000-02-24 2003-08-12 アイトゲネーシシェ テクニシェ ホッホシューレ チューリッヒ フィブロネクチンのｅｄ‐ｂドメインに特異的な抗体、前記抗体を含む複合体、および血管形成を検出および治療するためのその使用
US6440389B1 (en) * 2000-07-19 2002-08-27 The General Hospital Corporation Fluorescent agents for real-time measurement of organ function
AT413487B (de) * 2002-08-12 2006-03-15 Igeneon Krebs Immuntherapie Verwendung von antikörpern gegen ein tumor-assoziiertes antigen
NO20034351D0 (no) * 2003-09-29 2003-09-29 Amersham Health As Optisk avbilding av endometrose
ATE374367T1 (de) * 2004-07-22 2007-10-15 Bayer Schering Pharma Ag Verwendung von cyanin-farbstoffen zur diagnose von krankheiten, welche mit angiogenese assoziert sind
EP1679082A1 (en) * 2005-01-07 2006-07-12 Schering AG Use of cyanine dyes for the diagnosis of proliferative diseases
US20120041305A1 (en) * 2009-04-21 2012-02-16 The University Of Utah Research Foundation Light-emitting dye for intraoperative imaging or sentinel lymph node biopsy
WO2018026965A1 (en) * 2016-08-02 2018-02-08 Isi Life Sciences, Inc. Compositions and methods for detecting cancer cells in a tissue sample

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4341223A (en) * 1981-02-04 1982-07-27 Lutz Lauralee A Fluoresceable composition and method of determining fluid flow
WO1996001653A1 (en) * 1994-07-11 1996-01-25 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for the specific coagulation of vasculature
TWI259837B (en) * 1998-05-11 2006-08-11 Eidgenossische Tech Hochscule Specific binding molecules for scintigraphy, conjugates containing them and therapeutic method for treatment of angiogenesis

Also Published As

Publication number Publication date
KR20070087232A (ko) 2007-08-27
HK1050491A1 (en) 2003-06-27
NO20021441D0 (no) 2002-03-22
WO2001023005A1 (de) 2001-04-05
DE19947559A1 (de) 2001-04-19
CN1269530C (zh) 2006-08-16
CA2385593A1 (en) 2001-04-05
NO20021441L (no) 2002-05-15
PL354027A1 (en) 2003-12-15
EE05176B1 (et) 2009-06-15
HUP0202625A2 (en) 2002-12-28
EE200200152A (et) 2003-04-15
RU2002109237A (ru) 2003-11-27
KR100832937B1 (ko) 2008-05-27
EP1532988A3 (de) 2008-09-17
EP1532988A2 (de) 2005-05-25
BG106528A (bg) 2002-12-29
BR0014192A (pt) 2002-05-21
BG65682B1 (bg) 2009-06-30
IL148405A (en) 2009-06-15
IL148405A0 (en) 2002-09-12
CN1376074A (zh) 2002-10-23
YU20702A (sh) 2005-06-10
MXPA02002639A (es) 2002-07-30
ZA200203225B (en) 2003-07-23
CZ2002991A3 (cs) 2002-06-12
AU779026B2 (en) 2005-01-06
JP2003510294A (ja) 2003-03-18
RO121598B1 (ro) 2007-12-28
AU6702600A (en) 2001-04-30
NZ517944A (en) 2004-06-25
KR20020039349A (ko) 2002-05-25
EP1214099A1 (de) 2002-06-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3836687B2 (ja) 生体内診断剤に適する化合物
DE60133626T2 (de) Hydrophile zyaninfarbstoffe
US7473415B2 (en) Near infrared fluorescent contrast agent and method for fluorescence imaging
US7947256B2 (en) Biocompatible fluorescent imaging agents
DE60106389T2 (de) Vielseitige hydrophile farbstoffe
JP2000095758A (ja) 近赤外蛍光造影剤および蛍光造影方法
US6423547B1 (en) Non-covalent bioconjugates useful for diagnosis and therapy
JP2010116413A (ja) 近赤外線を用いた診断法および治療のための酸不安定性で酵素的に分割可能な染料構造体
SK3972002A3 (en) Antibody dye conjugates and pharmaceutical composition containing the same
US6447749B1 (en) Perfluoro-alkyl containing dye molecules and galencial formulations
Krause Contrast Agents II: Optical, Ultrasound, X-Ray Imaging and Radiopharmaceutical Imaging
JP3507060B2 (ja) 近赤外蛍光造影剤及び蛍光イメージング
WO2005061456A1 (ja) 近赤外蛍光造影剤
Li Structural Optimization of Heptamethine Cyanine Dyes
TW202330498A (zh) 用於腫瘤偵測及手術指引之化合物及組合物
PL203535B1 (pl) Koniugaty przeciwcia lo-barwnik, srodki farmaceutyczne je zawieraj ace i zastosowanie
CZ20022092A3 (cs) Fluorescenční kontrastní činidlo vyzařující záření v blízké infračervené oblasti a použití tohoto činidla při fluorescenčním zobrazování

Legal Events

Date Code Title Description
FC9A Refused patent application