PL203535B1 - Koniugaty przeciwcia lo-barwnik, srodki farmaceutyczne je zawieraj ace i zastosowanie - Google Patents
Koniugaty przeciwcia lo-barwnik, srodki farmaceutyczne je zawieraj ace i zastosowanie Download PDFInfo
- Publication number
- PL203535B1 PL203535B1 PL354027A PL35402700A PL203535B1 PL 203535 B1 PL203535 B1 PL 203535B1 PL 354027 A PL354027 A PL 354027A PL 35402700 A PL35402700 A PL 35402700A PL 203535 B1 PL203535 B1 PL 203535B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- antibody
- dye
- periphery
- groups
- disease
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 33
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 33
- 230000003902 lesion Effects 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M thionine Chemical compound [Cl-].C1=CC(N)=CC2=[S+]C3=CC(N)=CC=C3N=C21 ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 4
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 3
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims description 2
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011593 sulfur Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 84
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 33
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 32
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 11
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- -1 cysteine amino acid Chemical class 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VGIRNWJSIRVFRT-UHFFFAOYSA-N 2',7'-difluorofluorescein Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(F)C(=O)C=C2OC2=CC(O)=C(F)C=C21 VGIRNWJSIRVFRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N isothiocyanate group Chemical group [N-]=C=S ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 2
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 2
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 2
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 2
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N coumarin Chemical compound C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 229960001483 eosin Drugs 0.000 description 2
- SEACYXSIPDVVMV-UHFFFAOYSA-L eosin Y Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C([O-])=C(Br)C=C21 SEACYXSIPDVVMV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 201000011066 hemangioma Diseases 0.000 description 2
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical class C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 1
- WJFKNYWRSNBZNX-UHFFFAOYSA-N 10H-phenothiazine Chemical compound C1=CC=C2NC3=CC=CC=C3SC2=C1 WJFKNYWRSNBZNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TZMSYXZUNZXBOL-UHFFFAOYSA-N 10H-phenoxazine Chemical compound C1=CC=C2NC3=CC=CC=C3OC2=C1 TZMSYXZUNZXBOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHIITNFQDPFSES-UHFFFAOYSA-N 25,26,27,28-tetrazahexacyclo[16.6.1.13,6.18,11.113,16.019,24]octacosa-1(25),2,4,6,8(27),9,11,13,15,17,19,21,23-tridecaene Chemical class N1C(C=C2C3=CC=CC=C3C(C=C3NC(=C4)C=C3)=N2)=CC=C1C=C1C=CC4=N1 MHIITNFQDPFSES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 6-carboxyfluorescein Chemical compound C12=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C2C11OC(=O)C2=CC=C(C(=O)O)C=C21 BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001519451 Abramis brama Species 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 229910052693 Europium Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010015866 Extravasation Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000034038 Pathologic Neovascularization Diseases 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 206010043276 Teratoma Diseases 0.000 description 1
- 229910052771 Terbium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000002826 coolant Substances 0.000 description 1
- 150000004696 coordination complex Chemical class 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 229960000956 coumarin Drugs 0.000 description 1
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 description 1
- GLNDAGDHSLMOKX-UHFFFAOYSA-N coumarin 120 Chemical class C1=C(N)C=CC2=C1OC(=O)C=C2C GLNDAGDHSLMOKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 201000003511 ectopic pregnancy Diseases 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IINNWAYUJNWZRM-UHFFFAOYSA-L erythrosin B Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(I)C(=O)C(I)=C2OC2=C(I)C([O-])=C(I)C=C21 IINNWAYUJNWZRM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940011411 erythrosine Drugs 0.000 description 1
- 239000004174 erythrosine Substances 0.000 description 1
- 235000012732 erythrosine Nutrition 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N europium atom Chemical compound [Eu] OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 230000036251 extravasation Effects 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 239000005550 inflammation mediator Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 150000002678 macrocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- DZVCFNFOPIZQKX-LTHRDKTGSA-M merocyanine Chemical compound [Na+].O=C1N(CCCC)C(=O)N(CCCC)C(=O)C1=C\C=C\C=C/1N(CCCS([O-])(=O)=O)C2=CC=CC=C2O\1 DZVCFNFOPIZQKX-LTHRDKTGSA-M 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000057 neoangiogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 229950000688 phenothiazine Drugs 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 239000011546 protein dye Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001022 rhodamine dye Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- GZCRRIHWUXGPOV-UHFFFAOYSA-N terbium atom Chemical compound [Tb] GZCRRIHWUXGPOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- RRBYUSWBLVXTQN-UHFFFAOYSA-N tricyclene Chemical compound C12CC3CC2C1(C)C3(C)C RRBYUSWBLVXTQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RRBYUSWBLVXTQN-VZCHMASFSA-N tricyclene Natural products C([C@@H]12)C3C[C@H]1C2(C)C3(C)C RRBYUSWBLVXTQN-VZCHMASFSA-N 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000006444 vascular growth Effects 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 230000007998 vessel formation Effects 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0032—Methine dyes, e.g. cyanine dyes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0039—Coumarin dyes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0041—Xanthene dyes, used in vivo, e.g. administered to a mice, e.g. rhodamines, rose Bengal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0041—Xanthene dyes, used in vivo, e.g. administered to a mice, e.g. rhodamines, rose Bengal
- A61K49/0043—Fluorescein, used in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
- A61K49/0058—Antibodies
Description
Opis wynalazku Wynalazek dotyczy koniugatów przeciwcia lo-barwnik, które wykazuj a zdolno sc do wi azania si e ze strukturami nowo utworzonych naczy n, srodków farmaceutycznych zawieraj acych koniugaty oraz ich zastosowania do wewn atrzoperacyjnego przedstawiania patologicznej angiogenezy. W dojrza lym organizmie, z ma lymi wyj atkami (np. w przypadku cyklu u kobiety zdolnej do ro- dzenia), nie obserwuje si e zjawiska tworzenia nowych naczy n. Tworzenie nowych naczy n obserwuje sie jednak w przypadku wielu schorze n. Proces tworzenia nowych naczy n okre sla si e mianem angio- genezy i wyst epuje on jako odpowied z na okre slone sygna ly. Angiogeneza jest procesem, który ma miejsce na obrze zach ogniska chorobowego. Z centrum ogniska chorobowego uwalniaj a si e czynniki, które dyfunduj a do obrze zy ogniska chorobowego. Czynniki te okre sla si e te z jako stymulatory angiogenezy. Gdy te stymulatory angiogenezy osi agn a zdrow a tkank e na obrze zach ogniska chorobowego, wówczas stymuluj a naczynia nie w laczone dotychczas do ogniska chorobowego do tworzenia nowych splotów naczy n. Naczynia wyrastaj ace z tych splotów naczy n tworz a now a sie c naczy n w losowatych na obrze zach ogniska chorobowego. W wyniku tego procesu mo ze zosta c zapewnione odpowiednie zaopatrzenie ogniska chorobowego w substancje od zywcze. Szczególnie wa zne okaza lo si e to dla nowotworów bo wzrost nowotworów i przerzuty nowotworu zale za od zdolno sci do wywo lywania an- giogenezy. Terapia chirurgiczna jest dzi s standardow a metod a leczenia zlokalizowanych ognisk chorobo- wych. Wielkie znaczenie uzyska la ona przy leczeniu nowotworów. Okaza lo si e jednak, ze pomimo ulepszonych technik chirurgicznych znaczna jest liczba miejscowych nawrotów, poniewa z warunki anatomiczne w organizmie ludzkim tylko z rzadka pozwalaj a na usuni ecie ca lego ogniska chorobowego. W wielu organach (np. w mózgu) nale zy zrezygnowa c z nadmiernego usuwania tkanki aby uzy- ska c tylko zdrow a tkank e. Ryzyko uszkodzenia zdrowych narz adów ro snie wraz z radykalno scia in- terwencji chirurgicznej. Badania histologiczne obszaru obrze za nowotworu po chirurgicznym usuni eciu nowotworu wy- kaza ly jednak, ze wielu nowotworów nie mo zna by lo w ca lo sci usun ac i pozosta lo sci nowotworu zo- stawa ly w organizmie. Z tych pozosta lo sci nowotworu mo ze nast api c dalszy wzrost nowotworu, a tak- ze przerzuty nowotworu. Sposób, który by wyra znie przedstawi l granic e procesu chorobowego wobec zdrowej tkanki podczas zabiegu chirurgicznego, pozwoli lby na ca lkowite usuni ecie ogniska chorobo- wego i znacz aco oszcz edzi c zdrow a tkank e. Barwniki do zaznaczania ognisk chorobowych s a ju z znane (Poon WS i inni, J Neurosurgery (1992) 76: 679-686, Haglund MM i inni, Neurosurgery (1996) 38: 308-317). S a one korzystnie bezpo- srednio pobierane przez komórki nowotworowe albo s a niespecyficznie wzbogacane w pozakomór- kowej przestrzeni nowotworów. Poniewa z mechanizm wzbogacania mo zna stwierdzi c tak ze w zdrowej tkance, specyficznosc i wra zliwo sc stosowanych substancji jest niska. Zwi azki, które mo zna by stosowa c do wewn atrzoperacyjnego odgraniczania ogniska chorobo- wego za pomoc a selektywnego przedstawiania obrze zy ogniska chorobowego, nie s a dotychczas znane. Angiogeneza wyst epuje w szczególno sci na obrze zach ognisk chorobowych. Dzi eki uwidocz- nieniu angiogenezy mo zna przedstawi c granic e wzgl edem zdrowej tkanki. Znane s a ju z przeciwcia la s lu zace do stwierdzenia angiogenezy w ognisku chorobowym i stosuje si e je do ujawnienia nowo utworzonych naczy n w histologicznym wycinku tkanki, w celu wykazania obecno sci ró znych bia lek w ognisku chorobowym albo jako cz asteczki no snikowe dla substancji terapeutycznych. Nie s a jednak znane przeciwcia la w kombinacji z barwnikami, tak zwane koniugaty przeciwcia- lo-barwnik, które mo zna stosowa c do wewn atrzoperacyjnego odgraniczania ogniska chorobowego przez selektywne przedstawianie obrze zy ogniska chorobowego. Zadaniem wynalazku by lo wi ec znalezienie koniugatów przeciwcia lo-barwnik do wewn atrzope- racyjnego przedstawiania obrze zy nowotworów. Przeciwcia la w koniugatach przeciwcia lo-barwnik wed lug wynalazku s a ukierunkowane na struktury specyficzne dla procesu angiogenezy. Koniugaty przeciwcia lo-barwnik obejmuj a barwniki, które dzi eki ich wzbogaceniu umo zliwiaj a uwidocznienie ich optycznie. Poniewa z angiogeneza najsilniej wyst epuje na obrze zach ogniska cho- robowego, wyst epuje tu te z najwi ekszy sygna l optyczny. Koniugaty przeciwcia lo-barwnik wed lug wyna- lazku nadaj a si e w zwi azku z tym do przedstawiania granicy ogniska chorobowego, tak zwanego zakre-PL 203 535 B1 3 su obrze zy, wobec zdrowej tkanki drog a wewn atrzoperacyjnej diagnostyki optycznej. Dzi eki temu mo zli- we jest ca lkowite usuni ecie ogniska chorobowego przy daleko id acym oszcz edzaniu zdrowej tkanki. Znane s a przeciwcia la, które s a ukierunkowane przeciwko cz asteczkom, które s a silnie ekspo- nowane w tkance aktywnej angiogenetycznie, a w tkance przygranicznej tylko na bardzo niskim po- ziomie (WO 96/01653). Szczególnie interesuj ace w koniugatach przeciwcia lo-barwnik s a przeciwcia la, które s a ukierun- kowane do receptorów dla naczyniowych czynników wzrostu, receptorów na komórkach sródb lonka, z którymi wiaz a si e mediatory stanów zapalnych, receptorów na komórkach sródb lonka, z którymi wiaz a si e cz asteczki macierzy i bia lka macierzy, które s a specyficznie eksponowane podczas tworze- nia nowych naczy n (Brekken i inni, Cancer Res. (1998) 58: 1952-9 i Schold SC Jr i inni, Invest. Radiol. (1993) 28: 488-96). Korzystne s a przeciwcia la lub fragmenty przeciwcia l, które ukierunkowane sa przeciwko bia lku macierzowemu EDB-fibronektynie. EDB-fibronektyna (EDBFN), znana równie z jako fibronektyna on- kop lodowa, jest wariantem nak ladkowym fibronektyny, który tworzy si e specyficznie wokó l nowo utwo- rzonych naczy n krwiono snych w procesie angiogenezy. Szczególn a zalet a przeciwcia l przeciwko EDB-fibronektynie jest to, ze wskutek wewn atrzopera- cyjnego zranienia podczas usuwania ogniska chorobowego nie dochodzi do tworzenia nowej EDB- -fibronektyny w zdrowej tkance. Dzi eki temu utrzymuje si e specyficznosc podczas interwencji chirur- gicznej. Przeciwcia la przeciwko receptorom czynnika wzrostu albo mediatorom stanów zapalnych na komórce sródb lonka, które tak ze specyficznie s a eksponowane na obrze zach nowotworu, mog a jed- nak podczas interwencji chirurgicznej tworzy c si e na nowo równie z w zdrowej tkance w pobli zu ogni- ska chorobowego. Szczególnie korzystne w koniugacie przeciwcia lo-barwnik wed lug wynalazku s a przeciwcia la L19 i E8 przeciwko EDB-fibronektynie (Viti F i inni, Cancer Res. (1999) 59: 347-352). Takie koniugaty przeciwcia lo-barwnik s a równie z przedmiotem wynalazku. Znane przeciwcia la laczy si e z barwnikami, których wzbogacenie w tkance mo zna wykry c optycz- nie i które umo zliwiaj a wewn atrzoperacyjne odgraniczenie zakresu obrze za ogniska chorobowego. Zalet a koniugatów przeciwcia lo-barwnik wed lug wynalazku jest to, ze mo zna je stosowa c do se- lektywnego zabarwiania fluorescencyjnego tkanek w stadium neoangiogenetycznym. Zabarwianie fluorescencyjne jest specyficzne dla nowotworów i dostarcza sygna lu fluorescencyjnego, który mo zna wykry c przy wysokim stosunku sygna lu do pod lo za. Znane s a równie z koniugaty przeciwcia lo-barwnik dla odtwarzania obrazu fluorescencyjnego do celów przezskórnego, nie inwazyjnego przedstawiania nowotworów (Neri D i inni, Nature Biotechno- logy (1997) 15: 1271-1275). Nie s a jednak jeszcze znane koniugaty przeciwcia lo-barwnik, które ulegaj a wzbogaceniu, zw laszcza na obrze zu ogniska chorobowego. Znane s a te z koniugaty bia lko-barwnik do wewn atrzoperacyjnego przedstawiania nowotworu. Wad a tych koniugatów jest to, ze koniugaty te s a pobierane zw laszcza przez niedotlenione, jak i przez metabolicznie niedostatecznie zaopatrzone komórki nowotworowe. Poniewa z jednak tkanka na obrze zu nowotworów jest dobrze unaczyniona i w zwi azku z tym komórki s a wystarczaj aco zaopatrzo- ne w tlen i substancje od zywcze, to w la snie wskutek tego nie udaje sie dostatecznie wzbogaci c zna- nych koniugatów bia lko-barwnik. Natomiast koniugaty przeciwcia lo-barwnik wed lug wynalazku s a w du zym stopniu niezale zne od stanu metabolicznego ogniska chorobowego. Przedmiotem wynalazku jest koniugat przeciwcia lo-barwnik o wzorze I, B-(F) n , w którym B oznacza przeciwcia lo albo fragment przeciwciala o wysokim stopniu wi azania z EDB-fibro- nektyn a, a F oznacza barwnik cyjaninowy charakteryzuj acy si e tym, ze ulega wzbogaceniu, zw laszcza w zakresie obrze za tkanki komórkowej ogniska chorobowego i w zwi azku z tym optycznie uwidacznia zakres obrze za ogniska chorobowego, a barwnik cyjaninowy ma wzór IIPL 203 535 B1 4 w którym D oznacza grup e o wzorze III albo IV przy czym pozycja zaznaczona gwiazdk a oznacza miejsce wi azania z reszt a B, a B oznacza grup e o wzorze V, VI, VII, VIII albo IX w których to wzorach R 1 i R 2 oznaczaj a grup e C 1 -C 4 -sulfoalkilow a, nasycony albo nienasycony, rozga leziony albo prosty lancuch C 1 -C 50 -alkilowy, który mo ze by c ewentualnie podstawiony przez 1 do 15 atomów tlenu i/lub przez 1 do 3 grup karbonylowych, i/lub przez 1 do 5 grup hydroksylowych, R 3 oznacza grup e -COOE 1 , -CONE 1 E 2 , -NHCOE 1 , -NHCONHE 1 , -NE 1 E 2 , -OE 1 , -OSO 3 E 1 , -SO 3 E 1 , -SO 2 NHE 1 albo -E 1 , przy czym E 1 i E 2 niezale znie od siebie oznaczaj a atom wodoru, grup e C 1 -C 4 -sulfoalkilow a, nasycon a albo nienasycon a, rozga lezion a albo prost a grup e C 1 -C 50 -alkilow a, która mo ze by c ewentualnie przerwana przez 1 do 15 atomów tlenu i/lub 1 do 3 grup karbonylowych, i/lub podstawiona przez 1 do 5 grup hydroksylowych, R 4 oznacza atom wodoru albo atom fluoru, chloru, bromu albo jodu, b oznacza 2 albo 3, X oznacza atom tlenu, siarki albo grup e =C(CH 3 ) 2 lub (CH=CH)-, Y oznacza grup e =C(CH 3 ) 2 lub -(CH=CH)-, a L oznacza bezpo srednie wi azanie albo grup e wiazac a, która stanowi prosty lub rozga leziony lancuch w eglowy zawieraj acy 1 do 20 atomów w egla, który mo ze by c podstawiony przez jedn a lub wi ecej grup -OH, -COOH, -SO 3 , i/lub mo ze by c ewentualnie jedno- lub wielokrotnie przerwany przez ugrupowania -O-, -S-, -CO-, -CS-, -CONH-, -NHCO-, -NHCSNH-, -SO 2 -, PO 4 - albo -NH-, albo przez pier scie n arylowy, n oznacza 1 do 5. Koniugat przeciwcia lo-barwnik charakteryzuje si e tym, ze barwnik indukuje sygna l optyczny w widzialnym zakresie widma swietlnego. Korzystnie, barwnik indukuje sygna l fluorescencyjny dopiero przy zastosowaniu okre slonego zakresu d lugo sci fal swiat la widzialnego lub zbli zonego do podczerwieni. Srodek farmaceutyczny, wed lug wynalazku, zawiera jeden lub wi ecej koniugatów przeciwcia lo- barwnik do wewn atrzoperacyjnego przedstawiania zakresu obrze zy ogniska chorobowego, korzystnie w mieszaninie z odpowiednimi rozpuszczalnikami, buforami i/lub no snikami. Zastosowanie koniugatu przeciwcia lo-barwnik do wytwarzania srodka leczniczego do we- wn atrzoperacyjnego przedstawiania ognisk chorobowych i do wytwarzania srodka leczniczego do wewn atrzoperacyjnego przedstawiania zakresu obrze zy ogniska chorobowego. Zastosowanie koniugatu przeciwcia lo-barwnik wed lug wynalazku do wytwarzania srodka leczni- czego do mikro- i makroskopowego, wewn atrzoperacyjnego przedstawiania zakresu obrze zy ogniska chorobowego. Cho c optyczne wykrywanie granic ogniska chorobowego mo ze nast epowa c w ró zny sposób, to na ogó l korzystne jest uchwycenie specyficznego dla barwnika promieniowania fluorescencyjnego wywo lywanego przez odpowiednie swiat lo wzbudzaj ace. W zale zno sci od d lugo sci fali emisji mo znaPL 203 535 B1 5 przy tym fluorescencj e bezpo srednio wykrywa c wizualnie makroskopowo lub mikroskopowo i ewentu- alnie mo zna przy tym równocze snie wyrysowywa c cyfrowo za pomoc a tworz acych obraz systemów wykrywania i przedstawia c na ekranie. Wizualnie wykrywalne jest promieniowanie fluorescencyjne w zakresie widma 400-650 nm. Szczególnie korzystna jest d lugo sc fali 450-600 nm. Szczególn a zalet a stosowania widzialnego za- kresu swiat la jest to, ze wykrywanie fluorescencji mo zliwe jest przy niewielkich nak ladach technicz- nych. Swiat lo wzbudzaj ace wytwarzane przez odpowiednie lasery lub diody laserowe wprowadza si e do swiat lowodu i poprzez niego doprowadza do obszaru, który ma by c zdiagnozowany. Przeprowa- dzanie wewn atrzoperacyjnego rozpoznania obrze za nowotworu zachodzi drog a napromieniowania obszaru cia la na du zej powierzchni. Za pomoc a filtru (np. okularów z filtrem, które zak lada badaj aca osoba) blokuje si e odbicie swiat la wzbudzaj acego i obserwuje si e tylko fluorescencj e specyficzn a dla barwnika (obserwacja makroskopowa). Mo zna te z wychwyci c fluorescencj e za pomoc a mikroskopu operacyjnego (obserwacja mikroskopowa). Wskutek niewielkiej gleboko sci wnikania promieniowania VIS do tkanki (kilka milimetrów) mo z- na wykrywa c zlokalizowane na powierzchni nowo utworzone naczynia. Kolejna zaleta zakresu widma swiat la widzialnego polega na niewielkiej g leboko sci wnikania do tkanki i emisji z tkanki. Dzi eki temu wykrywalny sygna l nie jest fa lszowany przez sygna ly z glebszych cz esci tkanki i mo ze by c dok ladnie przyporz adkowany powierzchniowo widocznym strukturom tkanki. Przedmiotem wynalazku s a wi ec te z koniugaty przeciwcia lo-barwnik, których barwniki wzbudza- ja sygna l optyczny w widzialnym zakresie widma swietlnego. Zastosowanie koniugatów przeciwcia lo-barwnik zawieraj acych barwniki, które poch laniaj a swia- t lo w zakresie widma zbli zonego do podczerwieni (NIR; 600-900 nm), umo zliwia natomiast wykrywanie nowo utworzonych naczy n w g lebszych warstwach tkanki (do 1 cm), poniewa z promieniowanie NIR jest s labiej absorbowane przez tkank e i w zwi azku z tym g lebiej wnika do tkanki. Obserwacja fluore- scencji nie jest mo zliwa wizualnie i mo ze nast epowa c przy u zyciu kamer CCD (charge coupled device - Kamera), które umieszcza si e nad badanym obszarem tkanki. Mo zna tu stosowa c zarówno wykry- wanie makroskopowe, jak i mikroskopowe. Korzysc stosowania w koniugatach przeciwcia lo-barwnik barwników, które poch laniaj a swiat lo i fluoryzuj a w zakresie widma NIR wyst epuje wtedy, gdy po zada- na jest ocena obszarów przykrytych (np. przez krew). Z fotofizycznego punktu widzenia dla koniugatów przeciwcia lo-barwnik nadaj a si e takie barwni- ki, które wykazuj a maksimum absorpcji w zakresie widma 400-800 nm i co najmniej maksimum fluore- scencji w zakresie 500-900 nm. Przedmiotem wynalazku s a równie z koniugaty przeciwcia lo-barwnik, które charakteryzuj a si e tym, ze barwnik indukuje sygna l fluorescencyjny dopiero przy zastosowaniu okre slonego zakresu d lu- go sci fali swiat la widzialnego lub zbli zonego do podczerwieni. Jako koniugaty przeciwcia lo-barwnik obejmuj ace barwniki o daj acej si e wizualnie wychwyci c fluorescencji wymienia si e na przyk lad barwniki z nast epuj acych klas: fluoresceina, izotiocyjanian flu- oresceiny, karboksyfluoresceina lub kalceina, tetrabromofluoresceina lub eozyna, tetrajodofluoresce- ina lub erytrozyna, difluorofluoresceina, jak np. Oregon Green™ 488, Oregon Green™ 500 lub Ore- gon Green™ 514, barwniki karboksyrodolowe (Rhodol Green™) (US 5 227 487; US 5 442 045), barw- niki karboksyrodaminowe (np. Rhodamine Green™ Dyes) (US 5 366 860), 4,4-difluoro-4-bora-3a,4a- -diaza-indaceny, jak np. Bodipy FL, Bodipy 493/503 lub Bodipy 530/550 oraz ich pochodne (US 4 774 339, US 5 187 288, US 5 248 782, US 5 433 896, US 5 451 663), barwniki cyjaninowe, zw lasz- cza karbocyjaniny i merocyjaniny, barwniki kumarynowe, takie jak np. 7-amino-4-metylokumaryna, zwi azki metalokompleksowe DTPA albo tetraazamakrocykli (cyklen, pyklen) z terbem lub europem albo barwniki tetrapirolowe, zw laszcza porfiryna. Jako koniugaty przeciwcia lo-barwnik obejmuj ace barwniki zbli zone do podczerwieni wymienia sie na przyk lad barwniki z nast epuj acych klas: barwniki polimetynowe, takie jak barwniki dikarbocyja- ninowe, trikarbocyjaninowe, merocyjaninowe i oksonolowe (WO 96/17628), barwniki rodaminowe, barwniki fenoksazynowe lub fenotiazynowe, barwniki tetrapirolowe, zw laszcza benzoporfiryn e, chory- n e i ftalocyjanin e. Korzystnymi barwnikami zbli zonymi do podczerwieni w koniugatach przeciwcia lo-barwnik s a barwniki cyjaninowe o maksimum absorpcji 700-800 nm, zw laszcza indodi- i indotrikarbocyjaniny. Generalnie korzystne w koniugatach przeciwcia lo-barwnik s a barwniki z wy zej wymienionych klas, które maj a jedn a lub wi ecej grup karboksylowych, które po chemicznym aktywowaniu ulegaj a sprz eganiu z grupami aminowymi przeciwcia l lub fragmentów przeciwcia l. Korzystne s a równie z takiePL 203 535 B1 6 pochodne, które zawieraj a reszty maleimidowe lub bromoalkilowe tak, ze zachodzi kowalencyjne sprz eganie z grup a sulfhydrylow a aminokwasu cysteiny. Ponadto korzystne s a barwniki zawieraj ace grupy izotiocyjanianowe, które równie z reaguj a z grupami aminowymi. Ponadto barwniki w koniugatach przeciwcia lo-barwnik musz a wykazywa c wysok a fotostabilno sc i nie mog a blakn ac przy napromieniowaniu swiat lem (Photobleaching), aby zapewnia c sta ly sygna l podczas bada n. Przedmiotem wynalazku s a wi ec koniugaty przeciwcia lo-barwnik, które korzystnie ulegaj a wzbogaceniu w zakresie obrze zy tkanki komórkowej ogniska chorobowego i w zwi azku z tym optycz- nie uwidoczniaj a zakres obrze za ogniska chorobowego. Koniugaty przeciwcia lo-barwnik wed lug wynalazku mo zna stosowa c jako srodki lecznicze same albo w preparatach. W przypadku stosowania koniugatów przeciwcia lo-barwnik jako srodków leczniczych koniugaty te mo zna przeprowadza c w posta c preparatu farmaceutycznego, który obok koniugatu przeciwcia lo- -barwnik zawiera nadaj ace si e do podawania dojelitowego lub pozajelitowego oboj etne no sniki farma- ceutyczne, organiczne lub nieorganiczne, takie jak na przyk lad woda, zelatyna, guma arabska, cukier mlekowy, skrobia, stearynian magnezu, talk, oleje ro slinne, glikole polialkilenowe itp. Preparaty farmaceutyczne mog a wyst epowa c w postaci sta lej, na przyk lad jako tabletki, dra zet- ki, czopki, kapsu lki albo w postaci ciek lej, na przyk lad jako roztwory, zawiesiny lub emulsje. Preparaty te zawieraj a ewentualnie substancje pomocnicze, takie jak srodki konserwuj ace, srodki stabilizuj ace, srodki zwil zaj ace lub emulgatory, sole do zmiany ci snienia osmotycznego albo bufory. Do podawania pozajelitowego nadaj a si e roztwory lub zawiesiny do iniekcji, zw laszcza wodne roztwory koniugatów przeciwcia lo-barwnik. Jako uk lady no snikowe mo zna te z stosowa c substancje pomocnicze aktywne na granicy faz, takie jak sole kwasów zó lciowych albo zwierz ece lub ro slinne fosfolipidy, ale tak ze ich mieszaniny oraz liposomy lub ich sk ladniki. Do podawania doustnego stosuje si e w szczególno sci tabletki, dra zetki lub kapsu lki z dodat- kiem talku i/lub w eglowodorowych no sników albo srodków wi azacych, takich jak na przyk lad laktoza, skrobia kukurydziana lub ziemniaczana. Mo zna te z stosowa c podawanie w postaci ciek lej, jak na przyk lad w postaci soku, do którego dodaje si e ewentualnie substancj e s lodz ac a. Dawkowanie koniugatów przeciwcia lo-barwnik mo ze si e zmienia c w zale zno sci od sposobu po- dawania, wieku i wagi pacjenta, rodzaju i stopnia traktowanego schorzenia i od podobnych czynników. Stosowana dawka koniugatów przeciwcia lo-barwnik do rozpoznawania zakresu granicznego wynosi 0,5-1000 mg, korzystnie 50-200 mg, przy czym dawk e mo zna podawa c w postaci jednorazowej dawki jednostkowej albo podzielon a na 2 lub wi ecej dawek w ci agu dnia. Wy zej opisane preparaty i postacie do podawania s a równie z przedmiotem wynalazku. Tak wi ec wynalazek obejmuje te z srodki farmaceutyczne zawieraj ace jeden lub wi ecej koniuga- tów przeciwcia lo-barwnik do wewn atrzoperacyjnego przedstawiania zakresu obrze zy ogniska choro- bowego, przy czym srodki farmaceutyczne stosuje si e same albo w mieszaninie z odpowiednimi roz- puszczalnikami, buforami i/lub no snikami. Koniugaty przeciwcia lo-barwnik wed lug wynalazku stosuje si e w przypadku chirurgicznego trak- towania uzale znionych od angiogenezy w schorzeniach, takich jak nowotwory z lo sliwe i ich przerzuty, nowotwory lagodne, przedrakowe zmiany tkanki, endometrioza, naczyniaki krwiono sne, ci aza poza- maciczna. Równie z przedmiotem wynalazku jest zastosowanie koniugatów przeciwcia lo-barwnik i srodków do wewn atrzoperacyjnego przedstawiania ognisk chorobowych, zw laszcza do mikro- i makroskopo- wego, wewn atrzoperacyjnego przedstawiania zakresów obrze zy ogniska chorobowego, oraz zasto- sowanie koniugatów przeciwcia lo-barwnik do wytwarzania srodka do chirurgicznego traktowania scho- rze n uzale znionych od angiogenezy, takich jak nowotwory z lo sliwe i ich przerzuty, nowotwory lagod- ne, przedrakowe zmiany tkanki, endometrioza, naczyniaki krwiono sne i ci aza pozamaciczna. Wytwarzanie barwników Barwniki wytwarza si e metodami znanymi z literatury. Barwnikami odpowiednimi do wytwarza- nia koniugatów przeciwcia lo-barwnik s a barwniki zawieraj ace grupy karboksylowe lub izotiocyjaniano- we do kowalencyjnego sprz egania z grupami aminowymi przeciwcia la. Szczególnie korzystne s a tuPL 203 535 B1 7 barwniki cyjaninowe (Mujumdar SR i inni (1996) 7: 356-362; Flanagan JH i inni (1997) 8: 751-756 i Licha K i inni (1996) Proc SPIE tom 2927, 192-198). Barwniki z grupami karboksylowymi aktywuje si e najpierw drog a przeprowadzania w reaktywny ester (np. ester N-hydroksysukcynimidowy) wed lug znanych metod. Barwniki z grupami izotiocyjania- nowymi mo zna stosowa c bezpo srednio. Reaktywne pochodne poddaje si e nast epnie w roztworze buforowym albo w mieszaninach roz- puszczalników organicznych (np. dimetyloformamidu (DMF) albo sulfotlenku dimetylowego (DMSO)) i roztworu buforowego reakcji z przeciwcia lem. Stosuje si e przy tym 3-100-krotny molowy nadmiar barwnika. Cz esc nie przereagowan a usuwa si e po zako nczeniu reakcji drog a ultrafiltracji i/lub chroma- tografii. W analogiczny sposób wytwarza si e te z nast epuj acy barwnik. P r z y k l a d w y t w a r z a n i a 1 Ester N-hydroksysukcynimidowy kwasu bis-1,1'-(4-sulfobutylo)-indokarbocyjanino-5-karboksy- lowego Kwas bis-1,1'-(4-sulfobutylo)-indokarbocyjanino-5-karboksylowy wytwarza si e, wychodz ac z 1-(4- -sulfobutylo)-2,3,3-trimetylo-3H-indoleniny i 1-(4-sulfobutylo)-2,3,3-trimetylo-5-karboksy-3H-indoleniny (Cytometry 10, 11-19, 1989, Talanta 39, 505-510, 1992) wed lug metod znanych z literatury. W celu przeprowadzenia w ester N-hydroksysukcynimidowy 0,1 mmola barwnika (67 mg w 10 ml DMF) trak- tuje si e ka zdorazowo po 0,5 mmola N-hydroksysukcynimidu i dicykloheksylokarbodiimidu (DCC) i mie- sza si e w ci agu 24 godzin w temperaturze pokojowej. Po dodaniu 50 ml eteru wytr acony osad ods a- cza si e, ponownie dwukrotnie rozpuszcza si e w niewielkiej ilo sci DDF i wytr aca eterem i na koniec suszy si e w pró zni (wydajno sc 89%). Wytwarzanie koniugatów przeciwcia lo-barwnik Wytwarzanie koniugatu bis-1,1'-(4-sulfobutylo)-indokarbocyjaniny z przeciwcia lem L19 Przeciwcia lo L19 (1 mg w 1 ml buforu z octanu sodu 50 mM, pH 8,2) traktuje si e estrem N-hy- droksysukcynimidowym (75 µmoli roztworu 4 mg/ml w DMSO) i miesza si e w ci agu 2 godzin w tempe- raturze pokojowej. Oczyszczanie prowadzi si e za pomoc a filtracji zelowej na wk ladkach PD10 (Phar- macia) i zateza si e przy u zyciu probówek Centricon 10 (Amicon), otrzymuj ac roztwór zawieraj acy oko- lo 1 mg/ml przeciwcia la. Maksimum absorpcji: 555 nm Maksimum fluorescencji: 582 nm Nast epuj acy przyk lad wyja snia biologiczne zastosowanie koniugatów przeciwcia lo-barwnik we- d lug wynalazku. P r z y k l a d z a s t o s o w a n i a 1 Przekazywanie obrazu fluorescencyjnego in vivo u nagich myszy z nowotworem i mikroskopo- we badanie ex vivo tkanki nowotworowej W la sciwo sci przekazywania obrazu zwi azków wed lug wynalazku bada si e in vivo po wstrzyk- ni eciu tych zwi azków nagim myszom z nowotworem. W tym celu podaje si e do zylnie 0,1 µmola/kg do 2 µmoli/kg badanej substancji i obserwuje si e wzbogacanie w rejonie nowotworu w ci agu 0-48 godzin. Fluorescencj e substancji indukuje si e drog a napromieniowania zwierz at swiat lem o odpowiedniej d lu- go sci fali, które uzyskuje si e monochromatycznie za pomoc a lasera (laser diodowy, laser krystaliczny) albo przy u zyciu filtru z emisji polichromatycznej lampy Hg lub Xe. W przypadku zwi azku opisanego w przyk ladzie wytwarzania 1 do wzbudzania w celu na swie- tlenia zwierz ecia do swiadczalnego stosuje si e uzyskane z lasera Nd:YAG swiat lo o d lugo sci fali 540 nm i wykrywa si e promieniowanie fluorescencyjne przy d lugo sci fali 580 nm za pomoc a zinten- syfikowanej kamery CCD i otrzymuje sie zdj ecia fluorescencyjne ca lego cia la. Fluorescencj e okre sla si e równocze snie wizualnie i fotograficznie. Z materia lu nowotworowego sporz adza si e wycinki i bada mikroskopowo (mikroskop Zeiss Axiovert z filtrem Cy3). Po wstrzykni eciu 1 µmola/kg podanego w przyk ladzie wytwarzania koniugatu przeciwcia lo- barwnik nagim myszom z potworniakiem z lo sliwym F9 mo zna by lo po up lywie 4 godzin wykry c pod- wy zszony sygna l fluorescencyjny w porównaniu z normaln a tkank a na podstawie zdj ec fluorescencyj- nych ca lego cia la. Po wypreparowaniu skóry i najwy zszych warstw tkanki nowotworu mo zna fluorescencj e przy- porz adkowa c zakresom obrze za nowotworu. Ocena mikroskopowa wycinków nowotworu wykazuje podwy zszon a fluorescencj e, która jest skorelowana z naczyniami krwiono snymi z obszaru obrze za nowotworu.PL 203 535 B1 8 PL PL
Claims (8)
1. Zastrze zenia patentowe 1. Koniugat przeciwcia lo-barwnik o wzorze I B-(F) n (I) w którym B oznacza przeciwcia lo albo fragment przeciwcia la o wysokim stopniu wi azania z EDB-fi- bronektyn a, a F oznacza barwnik cyjaninowy, znamienny tym, ze ulega wzbogaceniu zw laszcza w zakresie obrze za tkanki komórkowej ogniska chorobowego i w zwi azku z tym optycznie uwidacznia zakres obrze za ogniska chorobowego, a barw- nik cyjaninowy ma wzór II w którym D oznacza grup e o wzorze III albo IV przy czym pozycja zaznaczona gwiazdk a oznacza miejsce wi azania z reszt a B, a B oznacza grup e o wzorze V, VI, VII, VIII albo IX w których to wzorach R 1 i R 2 oznaczaj a grup e C 1 -C 4 -sulfoalkilow a, nasycony albo nienasycony, rozga leziony albo prosty lancuch C 1 -C 50 -alkilowy, który mo ze by c ewentualnie podstawiony przez 1 do 15 atomów tlenu i/lub przez 1 do 3 grup karbonylowych, i/lub przez 1 do 5 grup hydroksylowych, R 3 oznacza grup e -COOE 1 , -CONE 1 E 2 , -NHCOE 1 , -NHCONHE 1 , -NE 1 E 2 , -OE 1 , -OSO 3 E 1 , -SO 3 E 1 , -SO 2 NHE 1 albo -E 1 , przy czym E 1 i E 2 niezale znie od siebie oznaczaj a atom wodoru, grup e C 1 -C 4 -sulfoalkilow a, nasycon a albo nienasycon a, rozga lezion a albo prost a grup e C 1 -C 50 -alkilow a, która mo ze by c ewentualnie przerwana przez 1 do 15 atomów tlenu i/lub 1 do 3 grup karbonylowych, i/lub podstawiona przez 1 do 5 grup hydroksylowych, R 4 oznacza atom wodoru albo atom fluoru, chloru, bromu albo jodu, b oznacza 2 albo 3, X oznacza atom tlenu, siarki albo grup e =C(CH 3 ) 2 lub (CH=CH)-, Y oznacza grup e =C(CH 3 ) 2 lub -(CH=CH)-, a L oznacza bezpo srednie wi azanie albo grup e wiazac a, która stanowi prosty lub rozga leziony lancuch w eglowy zawieraj acy 1 do 20 atomów w egla, który mo ze by c podstawiony przez jedn a lubPL 203 535 B1 9 wi ecej grup -OH, -COOH, -SO 3 , i/lub mo ze by c ewentualnie jedno- lub wielokrotnie przerwany przez ugrupowania -O-, -S-, -CO-, -CS-, -CONH-, -NHCO-, -NHCSNH-, -SO 2 -, PO 4 - albo -NH-, albo przez pier scie n arylowy, n oznacza 1 do 5.
2. Koniugat przeciwcia lo-barwnik wed lug zastrz. 1, znamienny tym, ze barwnik indukuje sygna l optyczny w widzialnym zakresie widma swietlnego.
3. Koniugat przeciwcia lo-barwnik wed lug zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, ze barwnik indukuje sygna l fluorescencyjny dopiero przy zastosowaniu okre slonego zakresu d lugo sci fal swiat la widzialne- go lub zbli zonego do podczerwieni.
4. Srodek farmaceutyczny, znamienny tym, ze zawiera jeden lub wi ecej koniugatów przeciw- cia lo-barwnik z zastrz. 1, do wewn atrzoperacyjnego przedstawiania zakresu obrze zy ogniska choro- bowego.
5. Srodek farmaceutyczny wed lug zastrz. 4, w mieszaninie z odpowiednimi rozpuszczalnikami, buforami i/lub no snikami.
6. Zastosowanie koniugatu przeciwcia lo-barwnik z zastrz.1, do wytwarzania srodka leczniczego do wewn atrzoperacyjnego przedstawiania ognisk chorobowych.
7. Zastosowanie koniugatu przeciwcia lo-barwnik z zastrz. 1, do wytwarzania srodka leczniczego do wewn atrzoperacyjnego przedstawiania zakresu obrze zy ogniska chorobowego.
8. Zastosowanie koniugatu przeciwcia lo-barwnik z zastrz. 1, do wytwarzania srodka leczniczego do mikro- i makroskopowego, wewn atrzoperacyjnego przedstawiania zakresu obrze zy ogniska choro- bowego.PL 203 535 B1 10 Departament Wydawnictw UP RP Cena 2,00 z l. PL PL
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19947559A DE19947559A1 (de) | 1999-09-24 | 1999-09-24 | Antikörper-Farbstoffkonjugate gegen Zielstrukturen der Angiogenese zur intraoperativen Tumorranddarstellung |
| DE19947559.8 | 1999-09-24 | ||
| PCT/EP2000/008121 WO2001023005A1 (de) | 1999-09-24 | 2000-08-19 | Antikörper-farbstoffkonjugate gegen zielstrukturen der angiogenese zur intraoperativen tumorranddarstellung |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL354027A1 PL354027A1 (pl) | 2003-12-15 |
| PL203535B1 true PL203535B1 (pl) | 2009-10-30 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE60133626T2 (de) | Hydrophile zyaninfarbstoffe | |
| RU2350355C2 (ru) | Флюоресцентный контрастирующий агент ближней инфракрасной области спектра и способ флуоресцентной томографии | |
| ES2198446T3 (es) | Procedimiento para el diagnostico in vivo mediante radiacion de nir utilizando colorantes de cianina. | |
| ES2324198T3 (es) | Metodo para medir una funcion fisiologica con un colorante como acido poliacrilico de fluoresceina. | |
| US20070269373A1 (en) | Hydrophilic light absorbing compositions for determination of physiological function in critically ill patients | |
| AU2006340061A1 (en) | Process for using optical agents | |
| DE60106389T2 (de) | Vielseitige hydrophile farbstoffe | |
| NO328630B1 (no) | Naer infrarodt, fluorescerende kontrastmiddel og fluorescensavbildning | |
| US6447749B1 (en) | Perfluoro-alkyl containing dye molecules and galencial formulations | |
| AU779026B2 (en) | Antibody dye conjugates for binding to target structures of angiogenesis in order to intraoperatively depict tumor peripheries | |
| PL203535B1 (pl) | Koniugaty przeciwcia lo-barwnik, srodki farmaceutyczne je zawieraj ace i zastosowanie | |
| JP2007326789A (ja) | 内視鏡用組織蛍光染色剤組成物 | |
| JP3507060B2 (ja) | 近赤外蛍光造影剤及び蛍光イメージング | |
| WO2005061456A1 (ja) | 近赤外蛍光造影剤 | |
| TW202330498A (zh) | 用於腫瘤偵測及手術指引之化合物及組合物 | |
| Fiedler | The development of a far red to near infrared fluorescent probe for use in optical imaging | |
| DE19948650A1 (de) | Galenische Formulierungen |