SK285313B6

SK285313B6 - Deriváty 11-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridecenónu, spôsob ich výroby a liečivo obsahujúce tieto deriváty

Info

Publication number: SK285313B6
Application number: SK150-99A
Authority: SK
Inventors: Daniel Jasserand; Ulf Preuschoff; Christian Eeckhout
Original assignee: Solvay Pharmaceuticals Gmbh
Priority date: 1998-02-13
Filing date: 1999-02-05
Publication date: 2006-10-05
Also published as: ES2355187T3; HUP9900263A2; KR19990072345A; HU9900263D0; DE19805822A1; CZ294879B6; IL128238A; ZA99678B; AR014320A1; AU748670B2; AU1643899A; PL331444A1; CA2260315C; TW579379B; HU222539B1; BR9900442A; NO310917B1; DZ2721A1; ATE486083T1; ID21968A

Abstract

Sú opísané deriváty so zmenšenými kruhmi N-desmetyl-N- izopropyl erytromycínu A s modifikovaným postranným reťazcom, ktoré majú gastrointestinálne účinné agonistické vlastnosti motilínu. Ďalej je opísaný spôsob ich výroby a liečivo s ich obsahom.

Description

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka nových derivátov (2R,3S,4S,5R,6R,10R,l lR)-3-[(2,6-dideoxy-3-C-metyl-3-O-metyl-a-L-ribohexopyranozyl)oxy]-5-[3,4,6-trideoxy-3-amino-[!-D-xylohexopyranozyl)oxy|-2,4,6,8,10-pentametyl-1 l-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridec-8-en-l-ónu, substituovaných na atóme dusíka, s motilin-agonistickými vlastnosťami a ich stabilných a fyziologicky prijateľných adičných soli s kyselinami, ako aj liečiva, obsahujúceho tieto zlúčeniny. Deriváty podľa vynálezu predstavujú cyklicky zmenšené -V-desmetyl-/V-izopropylové deriváty erytromycínu A s modifikovaným postranným reťazcom.

Doterajší stav techniky

Antibiotikum erytromycín A má, ako je známe, okrem svojich antibiotických účinkov, pre antibiotiká tiež nežiaduce gastrointestinálne vedľajšie účinky, okrem iného silný vzrast kontrakčnej aktivity v oblasti tráviaceho ústrojenstva so žalúdočnými a črevnými kŕčmi, nevoľnosťou, zvracaním a preháňaním.

Existovalo viacero pokusov modifikovať erytromycín A tak, aby sa získali deriváty, pri ktorých sa prakticky nevyskytuje žiadny antibiotický účinok, ale je zachovávaný účinok, ovplyvňujúci motilitu gastrointestinálneho traktu. Z patentovej prihlášky EP 0 550 895 sú známe deriváty Ndesmetyl-.V-izopropyl-erytromycinu A so zmenšenými kruhmi, s gastrointestinálne účinnými agonistickými vlastnosťami motilínu.

Ďalej sú známe z patentovej prihlášky EP-A 382 472 podobné deriváty erytromycínu so zmenšenými kruhmi, ktoré ale majú antibiotické účinky.

Podstata vynálezu

Predložený vynález si kladie za úlohu vyvinúť nové orálne účinné deriváty erytromycínu A so zmenšenými kruhmi bez antibiotického účinku a vlastnosťami so zlepšeným profilom, priaznivo ovplyvňujúcimi motilitu gastrointestinálneho traktu.

Zistilo sa, že nové A-desmetyl-A-izopropylové deriváty erytromycínu A so zmenšenými kruhmi, ktorých postranný reťazec bol oxidáciou modifikovaný v polohe 11 cyklického základného kruhu, nie sú antibiotický účinné, ale majú selektívne agonistické vlastnosti motilínu a priaznivým spôsobom stimulujú motilitu gastrointestinálneho traktu a prejavujú zosilňovacie účinky na tonus spodného pažerákového zvierača a na tonus žalúdka.

Na základe svojho účinného profilu sa látky podľa vynálezu hodia na liečenie porúch motility v gastrointestinálnom trakte a vyznačujú sa pritom dobrou znášanlivosťou a dobrou orálnou účinnosťou.

Predložený vynález sa preto týka nových derivátov (2R,3S,4S,5R,6R,10R,l lR)-2,4,6,8,10-pentametyl-l 1-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1 ]tridec-8-en-1 -ónu všeobecného vzorca (1)

kde

R¹ znamená vodík alebo metyl,

R² vodík alebo nižší alkanoyl s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka a ich stabilných a fyziologicky prijateľných adičných solí s kyselinami.

Vhodné sú hlavne zlúčeniny vzorca (I), kde R¹ znamená metyl.

R² je výhodne vodík. Pokiaľ R² znamená nižší alkanoyl, uprednostňuje sa acetyl.

Zlúčeniny vzorca (I) sa môžu vyrobiť tak, že sa známym spôsobom v zlúčenine všeobecného vzorca (II),

kde R¹ a R² majú uvedený význam, prevedie 2',3'-dihydroxypent-2-ylový postranný reťazec v polohe 11 cyklického základného kruhu oxidačným glykolovým štiepením na acetylový postranný reťazec a prípadne sa do získanej zlúčeniny všeobecného vzorca (I). kde R¹ znamená vodík, zavedie metylový zvyšok alebo sa zo získanej zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde R¹znamená metyl, metylový zvyšok odštiepi, a prípadne sa voľné zlúčeniny všeobecného vzorca (I) prevedú na ich stabilné a fyziologicky prijateľné adičné soli s kyselinami alebo sa ich stabilné a fyziologicky prijateľné adičné soli s kyselinami prevedú na voľné zlúčeniny všeobecného vzorca (I).

Oxidačné glykolové štiepenie 2',3'-dihydroxypent-2-ylového postranného reťazca v polohe 11 cyklického základného kruhu zlúčenín vzorca (II) sa môže vykonať vhodnými oxidačnými prostriedkami napr. octanom olovičitým vo vhodných rozpúšťadlách, ktorými sú napríklad nepoláme alebo slabo poláme rozpúšťadlá ako je benzén, toluén alebo xylén. Reakcia môže prebiehať pri teplotách medzi 0 °C a 40 °C, výhodne pri izbovej teplote.

Získané zlúčeniny vzorca (I), kde R¹ znamená vodík, môžu byť v požadovanom prípade dodatočne alkylované známym spôsobom na zodpovedajúce zlúčeniny s N-metylom. Alkylácia môže prebiehať známym spôsobom reakciou s metylhalogenidom alebo ako reduktívna alkylácia reakciou s formaldehydom za redukčných podmienok a môže sa vykonať, napríklad v prítomnosti redukčného činidla, napríklad komplexnej bórohydridovej zlúčeniny ako

SK 285313 Β6 je kyanobórohydrid sodný, triacetoxybórohydridu sodného alebo bórohydridu sodného. Prípadne môže alkylácia prebiehať tiež reakciou s metylhalogenidom, hlavne metyljodidom alebo esterom metylsulfónovej kyseliny. Účelne sa môže alkylácia vykonávať za reakčných podmienok v inertnom rozpúšťadle. Na redukčnú alkyláciu sú vhodné ako rozpúšťadlá cyklické étery ako tetrahydrofurán (= THF) alebo dioxán, aromatické uhľovodíky ako toluén alebo nižšie alkoholy. Alkylácia môže prebiehať pri teplotách medzi izbovou teplotou a bodom varu rozpúšťadla. Pri alkylácii s metylderivátom, napríklad metylhalogenidom ako je metyljodid, sa pracuje účelne za prítomnosti zásady, ako napríklad uhličitanu alkalického kovu alebo terciámym organickým amínom.

Zo zlúčenín vzorca (I), kde R¹ znamená metyl, môže byť v žiaducom prípade dodatočne odštiepený metylový zvyšok. Demetylácia môže prebiehať známym spôsobom pôsobením halogénu, hlavne jódu alebo brómu v inertnom rozpúšťadle za prítomnosti vhodnej zásady. Ako zásady sú vhodné napríklad alkoholáty alkalických kovov a soli alkalických kovov slabých organických kyselín.

Zlúčeniny vzorca (I) môžu byť známym spôsobom z reakčnej zmesi izolované a čistené. Adičné soli s kyselinami môžu byť prevedené známym spôsobom na voľné zásady a tieto sa môžu v žiaducom prípade previesť známym spôsobom na stabilné a fyziologicky prijateľné adičné soli s kyselinami. Na zabránenie hydrolyzačných reakcií je účelné použiť na tvorbu solí iba ekvivalentné množstvo kyselín.

Ako stabilné a fyziologicky prijateľné adičné soli s kyselinami zlúčenín vzorca (I) sú vhodné napríklad ich soli s anorganickými kyselinami, napr. s kyselinou uhličitou, halogénvodíkovými kyselinami, hlavne s kyselinou chlorovodíkovou alebo organickými kyselinami, napríklad alifatickými mono- alebo dikarboxylovými kyselinami, ako je kyselina maleínová, fumarová, mliečna, vínna alebo octová.

Východiskové zlúčeniny vzorca (II), kde R² znamená vodík, sú známe z patentovej prihlášky EP-B 0550 895 a môžu byť vyrobené spôsobom, ktorý je v tomto spise opísaný.

Východiskové zlúčeniny vzorca (II), kde R² znamená nižší alkanoyl, môžu byť vyrobené tak, že zlúčeniny vzorca (11), kde R² znamená vodík, reagujú známym spôsobom s karboxylovými kyselinami všeobecného vzorca (III)

R²-COOH (III), kde R³ znamená nižší alkyl alebo s reakčnými derivátmi týchto kyselín.

Ako reakčné deriváty kyselín vzorca (III) prichádzajú do úvahy hlavne eventuálne zmesové anhydridy a halogenidy kyselín. Môžu byť použité napríklad chloridy alebo bromidy kyselín vzorca (III) s organickými sulfónovými kyselinami, napríklad s eventuálne nižšími alkánsulfónovými kyselinami, substituovanými halogénom, ako metánsulfónová kyselina alebo trifluórmetánsulfónová kyselina, alebo s benzénsulfónovými kyselinami, substituovanými nižším alkylom alebo halogénom, napríklad toluénsulfónovými alebo brómbenzénsulfónovými kyselinami. Reakcia môže prebiehať ako acylácia za reakčných podmienok v inertnom organickom rozpúšťadle pri teplotách medzi -20 °C a izbovou teplotou. Ako rozpúšťadlá sú vhodné nižšie dialkylketóny napríklad acetón, halogénované uhľovodíky ako dichlórmetán alebo aromatické uhľovodíky ako benzén či toluén, alebo cyklické étery ako THF alebo dioxán, či zmesi týchto rozpúšťadiel.

Acylácia môže byť účelne použitá hlavne, ak sa použije ako acylačné činidlo anhydrid alebo zmesový anhydrid ky selín všeobecného vzorca (III) so sulfónovou kyselinou za prítomnosti kyselinotvomých činidiel. Ako kyselinotvomé činidlá sú vhodné napríklad anorganické bázy, ako sú uhličitany alkalického kovu ako uhličitan draselný alebo organické bázy, rozpustné v reakčnej zmesi ako terciáme dusíkové bázy, napríklad terciáme amíny s nižším alkylom, pyridíny ako trietylamín, tripropylamín, Λ'-metylmorfolin, pyridín, 4-dimetylaminopyridín, 4-dietylaminopyridín alebo 4-pyrolidinopyridín.

Prípadne môže byť do získanej zlúčeniny vzorca (II), kde R¹ znamená vodík, zavedený metylový zvyšok R¹ alebo zo získanej zlúčeniny vzorca (II), kde R¹ znamená metyl, môže byť tento metylový zvyšok odštiepený. Tieto metylácie či demetylácie môžu prebiehať známym spôsobom, za podmienok, opísaných napríklad pre zavedenie metylovej skupiny do či jej odštiepenie z derivátov vzorca (I)·

Nové deriváty vzorca (I) a ich stabilné fyziologicky prijateľné adičné soli s kyselinami majú zaujímavé farmakologické vlastnosti, hlavne agonistické vlastnosti motilínu, stimulujúce motilitu gastrointestinálneho traktu. Pritom sa vyznačujú priaznivým účinným profilom s dobrou orálnou účinnosťou. Sú zbavené antibiotických účinkov a majú vysokú selektívnu afinitu k receptorom motilínu, zatiaľ čo v agonisticky účinnom dávkovom pásme motilínu neprejavujú prakticky žiadnu relevantnú afinitu k ostatným receptorom v gastrointestinálnom trakte, ako receptorom adrenalínu, acetylcholínu, histamínu, dopamínu alebo serotonínu. Zlúčeniny majú prekvapivo dobrú znášanlivosť pre pečeň a sú vhodné preto na použitie na dlhšie časové obdobie.

Aby sa zabezpečilo regulované trávenie prijatej potravy, pôsobí v zdravom stave autonómny nervový systém a hormóny gastrointestinálneho traktu, nielen priamo po požití potravy, ale aj tiež pri prázdnom gastrointestinálnom trakte. Motilín je známy gastrointestinálny peptidový hormón, ktorý stimuluje motilitu gastrointestinálneho traktu a indukuje koordinovanú motilitu v celom gastrointestinálnom trakte v hladnom stave, ako aj po požití potravy.

Zlúčeniny vzorca (I) prejavujú fyziologické účinky motilínu tým, že sa stávajú účinnými ako agonisty pre receptory motilínu. Zlúčeniny vzorca (I) sa tak prejavujú vynikajúcimi stimulujúcimi účinkami v tráviacom ústrojenstve a na spodnom pažerákovom zvierači. Predovšetkým spôsobujú urýchlenie vyprázdnenia žalúdka, zvýšenie žalúdočného tonusu a dlhotrvajúce zvýšenie pokoja tonusu pažerákového zvierača. Na základe svojho účinného profilu motilínu sú látky vhodné na liečenie chorých stavov, ktoré sú spojené s poruchami motility v gastrointestinálnom trakte alebo vracaním kaše potravy zo žalúdka do pažeráka. Zlúčeniny vzorca (I) sa doporučujú, napríklad pri gastroparitíde rôzneho pôvodu, poruchách tonusu žalúdka, poruchách vyprázdňovania žalúdka a gastroezofagálneho refluxu, dyspesii a pooperačných poruchách motility.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Gastrointestinálne účinné vlastnosti zlúčenín vzorca (I) sa dajú preukázať farmakologickými skúšobnými metódami v skúmavke i v živom tele:

Opis testovacích metód.

1. Stanovenie schopnosti skúšobných látok viazať receptory motilínu.

Afinita zlúčenín vzorca (I) k receptorom motilínu sa skúša v skúmavke na frakcii tkanivového homogenizátu z prepyrolitickej časti králičieho žalúdka. Stanovuje sa vytla čenie, rádioaktívne jódom označeného motilínu, z väzby motilín-receptor, skúšobnými látkami.

Štúdie väzby receptora sa vykonávajú podľa modifikácie metódy Bormana a kol. (Regulátory pcptidu 15 (1986), 143 - 153). Na prípravu motilínu, označeného jódom 125 sa motilín známym spôsobom enzymaticky jóduje, napr. analogicky k metóde, opísanej Bloomom a kol. (Scand. J. Gastroenterol. 11 (1986) 47 - 52), s použitím laktoperoxidázy.

Na získanie tkanivového homogenizátu z prepyrolytickej časti králičieho žalúdka, použitého v teste, sa prepyrolytická časť žalúdka, zbavená sliznice, rozdrví a homogenizuje v 10 násobnom objeme chladného homogenizačného ustojného roztoku (50 mM pufra tris-HCl, 250 mM sacharózy, 25 mM KC1, 10 mM MgCl₂, pH 7,4) s prídavkom inhibítorov (1 mM jódacetamidu, 1 pM pepstatínu, 0,1 mM metylsulfonylfluoridu, 0,1 g/1 inhibítora tripsínu, 0,25 g/1 bacitracínu), homogenizátorom, 15 s pri 1500 otáčkach za minútu. Homogenizát sa odstred’uje počas 15 minút po 1000 g, získaný zvyšok sa štyrikrát premýva homogenizačným tlmivým roztokom a nakoniec sa resuspenduje v 0,9 %-nom roztoku chloridu sodného (v objeme, zodpovedajúcemu päťnásobnému hmotnostnému množstvu prepyrolytickej časti žalúdka). Takto získaná tkanivová frakcia, ktorá sa označuje ako „surový membránový prípravok“, sa použije na skúšku.

Na pokus väzby sa inkubuje 200 μί surovej membránovej frakcie (0,5 až 1 mg proteínu) v 400 μί tlmivého roztoku A (500 mM pufra tris-HCl, 1,5 % BSA, 10 mM MgCl₂, pH 8,0) sa 100 μί jódovaného motilínu v tlmivom roztoku B (10 mM pufra tris-HCl, 1 % BSA, pH 8), zriedené na (konečnú koncentráciu 50 pM), 60 min. pri 30 °C. Rekcia sa zastaví prídavkom 3,2 ml chladného tlmivého roztoku B a viazaný aj neviazaný motilín sa od seba oddelí odstrcdcním(1000 g, 15 minút) a zmeria sa v gama počítači. Štúdie sliznice sú vykonávané prídavkom zvyšujúceho sa množstva látky, ktorú je potrebné zmerať, do inkubačného média. Ako skúšobné roztoky látok sa použijú vodné roztoky, ktoré sa pripravia vhodným zriedením 60 χ 10'⁴ molárnych vhodných kmeňových roztokov. Skúšobné látky, ktoré sú vo vode ťažko rozpustné, sa rozpustia najprv v 60 % etanole a tento roztok sa zriedi takým množstvom vody, aby koncentrácia etanolu v roztoku, ktorý je potrebný skúšať, nepresiahla 1,6 % obj. Zo získaných nameraných dát sa určí ako IC₅₀ koncentrácia každej z meraných látok, ktorá spôsobí 50 % inhibície špecifickej väzby jódovaného motilínu na receptory motilínu. Z tejto sa potom vypočíta príslušná hodnota pIC₅o· Podľa predchádzajúcej metódy boli stanovené pre látky z príkladov 1 a 2 hodnoty uvedené v tabuľke 1. Uvedené čísla príkladov sa vzťahujú na príklady, opísané v nasledujúcom texte.

Tabuľka 1

Príklad č.	PIC₅₀
1	8,01
2	7,75

Stanovenie vplyvu látok na tonus žalúdka v živom tele.

Tonus žalúdka hrá dôležitú rolu pri vyprázdňovaní žalúdka. Zvýšený tonus žalúdka prispieva k jeho urýchlenému vyprázdňovaniu.

Vplyv látok na tonus žalúdka sa stanovuje na tonuse žalúdka psej rasy beagle pomocou barostatu, ktorý je spojený s plastovým vreckom v žalúdku psa a umožňuje meranie objemu a tlaku žalúdka psa. Barostatom sa stanoví ob jem žalúdka pri konštantnom tlaku v žalúdku alebo tlak žalúdka pri jeho konštantnom objeme. Pri zvýšenom tonuse žalúdka sa stanoví pri určitom tlaku znížený objem žalúdka a zvýšený tlak pri určitom objeme. V modeli, použitom na skúšanie látok, spôsobujúcich zvýšenie tonusu žalúdka sa zmeria pri konštantnom tlaku zmena žalúdka spôsobená látkami. Žalúdok pokusného zvieraťa sa relaxuje prijatím lipidov, t. j. tonus žalúdka klesne, čím sa príslušne zväčší objem žalúdka. Ako miera pre zvyšujúce sa pôsobenie látok na tonus žalúdka sa v % meria vznikajúca redukcia objemu žalúdka, zväčšeného prídavkom lipídu po prijatí látky, opätovným nárastom žalúdočného tonusu.

Látka príkladu 1 ukázala v tomto skúšobnom modeli v dobre prijateľnej dávke 2,15 pmol/kg, poskytnutej i. d., zníženie objemu žalúdka po prídavku lipidu o 59,5 %. Orálne podávanie predošlej uvedenej substancie v tej istej dávke 2,15 pmol/kg spôsobilo neobyčajne výrazné zníženie obsahu žalúdka, pričom bolo pomocou lipidu celkom zabránené indukovanej relaxácii objemu žalúdka. Tieto nálezy môžu byť hodnotené ako značné náznaky pre vysokú, hlavne vysokú orálnu biologickú disponovateľnosť substancií podľa vynálezu.

Stanovenie vplyvu látok v živom tele na tonus spodného pažerákového zvierača pri pokoji.

Toto stanovenie sa vykonáva na bdelých psoch rasy beagle na lačno, ktorým boli vložené pred začiatkom pokusu fistule do pažeráka a jemná rúrka do dvanástnika. Tlak spodného pažerákového zvierača sa meria pomocou perfundovaného systému katétra s bočným otvorom, ktorý je spojený so snímačom tlaku a záznamovým zariadením. Katéter sa vedie cez fistulu pažeráka do žalúdka a potom sa pomaly manuálne sťahuje späť (= tranzitná manometria). Pri stlačení časti katétra s postranným otvorom cez vysokotlakové pásmo spodného pažerákového zvierača sa registruje vrchol. Z tohto vrcholu sa potom stanoví tlak v mm Hg.

Týmto spôsobom sa najprv urči kontrolná hodnota východiskového tlaku pažerákového zvierača. Následne sa aplikuje skúšobná substancia a po 15 minútach sa meria tlak na spodnom pažerákovom zvierači v 2 minútových intervaloch počas 60 minút. Zvýšenie tlaku po dávke skúšobnej substancie sa vypočíta v porovnaní s východiskovým tlakom.

V tomto teste sa zvýšil východiskový tonus pažerákového zvierača dávkou 2,15 pmol/kg substancie príkladu 1 o 143 %. Tento účinok sa udržal počas celkového času testu 60 minút.

Na základe svojich účinkov v gastrointestinálnom trakte sú zlúčeniny vzorca (I) vhodné v gastroenterológii ako liečivá pre väčšie cicavce, hlavne človeka, na profylaxiu a liečenie porúch motility v gastrointestinálnom trakte.

Dávky, ktoré je potrebné použiť, môžu byť individuálne rôzne a môžu sa prirodzene meniť podľa druhu stavu, ktorý je potrebný liečiť a formy aplikácie. Napríklad parenterálne formulácie budú obsahovať všeobecne nižšie množstvo účinnej látky než orálne preparáty. Všeobecne sú však pre aplikácie u vyšších cicavcov, hlavne človeka, vhodné liekové formy s obsahom účinnej látky od 1 do 100 mg v jednotlivej dávke.

Ako liečivé látky môžu byť zlúčeniny vzorca (I) obsiahnuté s obvyklými farmaceutickými látkami v galenických prípravkoch, ako napr. tabletkách, kapsuliach, čapíkoch alebo roztokoch. Tieto galenické prípravky môžu byť vyrobené podľa známych metód, s použitím obvyklých pevných nosičov, ako napr. mliečneho cukru, škrobu a talku alebo kvapalných riedidiel, ako napr. vody, kvapalných tukov alebo kvapalných parafínov a s použitím farmaceu

SK 285313 Β6 ticky známych pomocných látok, napríklad rozvoľňovačov tabletiek, látok, sprostredkujúcich rozpúšťanie alebo konzervačných prostriedkov.

Nasledujúce príklady majú vynález bližšie objasniť, ale ich rozsah nie je žiadnym spôsobom obmedzený.

Príklad 1 [2R,3S,4S,5R,6R,10R,l lR]-3-[(2,6-Dideoxy-3-C-metyl-3-0-metyl-a-L-ribohexopyranozyl)-oxy]-5-[(3,4,6-trideoxy-3-(A/-metyl-7V-izopropylamino)-3-D-xylohexopyranozyl)oxy]-2,4,6,8,10-pentametyl-11-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridec-8-en-l-ónu (zlúčenina vzorca (I), R^l= metyl, R² = vodík)

100 g [2R(2'R,3'R),3S,4S,5R,6R,10R,llR]-ll-(2',3'-dihydroxypent-2 '-yl)-3-[(2,6-dideoxy-3-C-metyl-3-O-metyl-a-L-ribohexopyranozyl)-oxy]-5-[3,4,6-trideoxy-3-(jV-metyl-/V-izopropylamino)-p-D-xylohexopyranozyl)oxyj2,4,6,8,10-pentametyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1 ]tridec-8 -en-1 -ónu (zlúčenina vzorca (II), R¹ = metyl, R² = vodík) sa pod dusíkovou atmosférou rozpustilo v 2 500 ml toluénu. K tejto predlohe sa pridalo 100 g octanu olovičitého a vzniknutá suspenzia sa miešala počas 5 hodín pri izbovej teplote. Následne sa reakčná zmes v uvedenom slede premyla nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a potom tak často premýva vodou až pokiaľ premývacia voda nereaguje neutrálne. Organická fáza sa sušila síranom sodným a za zníženého tlaku odparila. Chromatografia zvyšku na silikágeli (eluent. metyl-terc-butyléter = MTBE) poskytla 81,9 g titulnej zlúčeniny ako bieleho prášku, bod topenia = = 198 °C až 200 °C, optická otáčavosť [a]_D= -24,6° (c = = 1,0vCH₂C1₂).

1,1 g získanej zlúčeniny sa rozpustilo v 1 ml acetonitrilu. K tejto predlohe sa pridalo 0,17 g kyseliny malónovej a zahrievalo na 60 °C - 70 °C. Po rozpustení tuhých podielov sa pridalo 10 ml MTBE a pod refluxom zahrievalo 5 minút do varu. Následne sa pridalo znova 10 ml MTBE a zmes sa ponechala počas miešania ochladiť na izbovú teplotu. Vypadnuté kryštály sa odfiltrovali, dvakrát premyli 10 ml MTBE a sušili pri 60 °C vo vákuu. Získalo sa 1,2 g monomalonátu titulnej zlúčeniny, rozsah topenia 115,6 °C - 174 °C (neostré).

Príklad 2 (2R,3S,4S,5R,6R,10R,l lR)-3-[(2,6-Dideoxy-3-C-metyl-3-O-metyl-a-L-ribohexopyranozyl)-oxy]-5-[(3,4,6-trideoxy-2-0-acetyl-3-(N-metyl-N-izopropylamino)-p-D-xylohexopyranozyl)oxy]-2,4,6,8,10-pentametyl-11 -acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]tridec-8-en-l-ónu (zlúčenina vzorca (I), R¹ = metyl, R² = acctyl)

210 g východiskovej zlúčeniny z príkladu 1 (zlúčenina vzorca (II), R¹ = metyl, R² = vodík) sa rozpustilo pod dusíkovou atmosférou v 2,4 1 acetónu a pridalo sa 85,8 g uhličitanu draselného. K tejto predlohe sa pridalo 63,4 g anhydridu kyseliny octovej a získaná suspenzia sa miešala počas 20 hodín pri izbovej teplote. Následne sa reakčná zmes zaliala zmesou z 2 400 g ľadu a 1 000 ml vody a 30 minút miešala. Vodná fáza sa trikrát extrahovala etylesterom kyseliny octovej, organická fáza sa zahustila a prebytočné rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu. Prekryštalizovaním získaného surového produktu z n-pentánu sa získalo 200 g [2R(2'R,3'R),3S,4S,5R,6R,10R,l 1RJ-1 l-(2',3'-dihydroxypent-2'-yl)-3-[(2,6-dideoxy-3-C-metyl-3-O-metyl-a-L-ribohcxopyranozyl)oxy]-5-[3,4,6-trideoxy-2-O-acetyl-3-(N-metyl-N-izopropylaminoJ-p-D-xylohexopyranozyljoxy]2,4,6,8,10-pentametyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1 ] tridec-8

-en-1-ónu (zlúčenina vzorca (II), R¹ = metyl, R² = acetyl), bod topenia 128 °C -130 °C.

10,1 g predchádzajúceho získaného produktu sa spôsobom, opísaným v príklade 1, nechalo zreagovať s 9,1 g octanu olovičitého. Získalo sa 6,0 g titulnej zlúčeniny ako bielej tuhej látky, bod topenia = 164 °C, optická otáčavosť [a]_D20 = -23,2° (c = 1,0 v CH₂C1₂).

Príklad I

Kapsuly obsahujúce (2R,3S,4S,5R,6R,10R,11 R)-3-[(2,6-dideoxy-3-C-metyl-3 -0-metyl-a-L-ribohexopyranozyl)oxy] -5-((3,4,6-trideoxy-N-3-(N-metyl-N-izopropylamino)-p-D-xylohexopyranozyl)-oxy]-2,4,6,8,10-pentametyl-11 -acetyl- 12,13-dioxabicyklo[8.2.1 ]tridec-8-en-l-ónu.

Vyrobili sa kapsuly obsahujúce účinnú látku s použitím nasledujúcich pomocných a obsahových látok na 1 kapsulu: (2R,3 S,4S,5R,6R, 1 OR, 11 R)-3-[(2,6-dideoxy-3 -C-metyl-3 -O-metyI-a-L-ribohexopyranozyl)-oxy]-5-[(3,4,6-trideoxy-3-(N-metyl-AMzopropylamino)-P-D-xylohexopyranozyl)oxy]-2,4,6,8,10-pentametyl-11 -acetyl-12,13-dioxabicyklo [8.2.1]tridec-8-en-l-ónu 20 mg kukuričný škrob 60 mg mliečny cukor 301 mg etylester kyseliny octovej (=EE) q.s.

Účinná látka, kukuričný škrob a mliečny cukor sa pomocou EE spracovali na homogénnu pastovitú zmes. Pasta sa rozotrela a vzniknutý granulát sa umiestnil na vhodný plech a na účely odstránenia rozpúšťadla sušil pri 45 °C. Suchý granulát sa vniesol do drviča a v homogenizátore sa zmiešal s nasledujúcimi pomocnými látkami.

mastenec 5mg stearan horečnatý 5mg kukuričný škrob 9mg a potom sa plnil do kapsúl s obsahom 400 mg (= veľkosť kapsuly 0).

Claims

1. Deriváty (2R,3S,4S,5R,6R,10R,l lR)-2,4,6,8,10-pentametyl-1 l-acetyl-12,13-dioxabicyklo[8.2.1]trídec-8-en-l-ónu všeobecného vzorca (I) (I), kde

R¹ znamená vodík alebo metyl,

R² znamená vodík alebo nižší alkanoyl s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka a ich stabilné a fyziologicky znášanlivé adičné soli s kyselinami.

2. Deriváty podľa nároku 1, kde R¹ znamená metyl.

3. Deriváty podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 alebo 2, kde R² znamená vodík.

4. Liečivo, vyznačujúce sa tým, že obsahuje farmakologicky účinné množstvo derivátu podľa nároku 1 a obvyklé farmaceutické pomocné a nosné látky.

5. Spôsob výroby derivátov (2R,3S,4S,5R,6R,10R,1 lR)-2,4,6,8,10-pentametyl-l l-acetyl-12,13-dioxabicyklo-[8.2. l]tridec-8-en-l -ónu všeobecného vzorca (I), (1), kde

R¹ znamená vodík alebo metyl,

R² znamená vodík alebo alkanoyl s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka a ich stabilné a fyziologicky znášanlivé adičné soli s kyselinami, vyznačujúce sa tým, že v zlúčenine všeobecného vzorca (II) kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku 1, sa prevedie postranný reťazec 2’,3’-dihydroxypent-2’-yl v polohe 11 cyklického základného kruhu oxidačným glykolovým štiepením na acetylový postranný reťazec, a prípadne sa do získanej zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde R¹ znamená vodík, zavedie metylový zvyšok alebo sa zo získanej zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde R¹znamená metyl, metylový zvyšok odštiepi, a prípadne sa voľné zlúčeniny všeobecného vzorca (I) prevedú na ich stabilné a fyziologicky znášanlivé adičné soli s kyselinami alebo sa ich stabilné a fyziologicky znášanlivé adičné soli s kyselinami prevedú na voľné zlúčeniny všeobecného vzorca (I).